【手続補正書】
【提出日】平成18年10月19日(2006.10.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（I）：
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Pro Xaa6 Xaa7 Pro Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Tyr Xaa21 Xaa22 Xaa23 Leu Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28 Xaa29 Xaa30 Xaa31 Thr Arg Gln Arg Xaa36
［式中、
Xaa1はTyr、Ala、Phe、Trp、あるいは無し；
Xaa2はPro、Gly、d-Ala、ホモ-Pro、ヒドロキシ-Pro、あるいは無し；
Xaa3はIle、Ala、ノル-Val、Val、Leu、Pro、Ser、Thr あるいは無し；
Xaa4はLys、Ala、Gly、Arg、d-Ala、ホモ-Lys、ホモ-Arg、Glu、Asp、あるいは無し；
Xaa6はGlu、Ala、Val、Asp、Asn、あるいはGln；
Xaa7はAla、Asn、His、Ser、あるいはTyr；
Xaa9はGly、Ala Ser、サルコシン、Pro、あるいはAib；
Xaa10はGlu、Ala、Asp、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa11はAsp、Ala、Glu、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa12はAla あるいはd-Ala；
Xaa13はSer、Ala、Thr、Pro、あるいはホモ-Ser；
Xaa14はPro、Ala、ホモ-Pro、ヒドロキシ-Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa15はGlu、Ala、Asp、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa16はGlu、Ala、Asp、Asn、あるいはGln；
Xaa17はLeu、Ala、Met、Trp、Ile、Val、あるいはノル-Val；
Xaa18はAsn、Asp、Ala、Glu、Gln、Ser、あるいはThr；
Xaa19はArg、Tyr、Lys、Ala、Gln、あるいはN(メチル)Ala；
Xaa21はTyr、Ala、Met、Phe、あるいはLeu；
Xaa22はAla、Ser、Thr、あるいはd-Ala；
Xaa23はSer、Ala、Asp、Thr、あるいはホモ-Ser；
Xaa25はArg、ホモ-Arg、Lys、ホモ-Lys、Orn、あるいはCit；
Xaa26はHis、Ala、Arg、ホモ-Arg、ホモ-Lys、Orn、あるいはCit；
Xaa27はTyr あるいはPhe；
Xaa28はLeu、Ile、Val、あるいはAla；
Xaa29はAsn あるいはGln；
Xaa30はLeu、Ala、ノル-Val、Val、Ile、あるいはMet； 
Xaa31はAla、Val、Ile、あるいはLeu； および
Xaa36はTyr、N(メチル)Tyr、His、Trp、あるいはPheであり；
但し、前記PPFポリペプチドは、ネイティブPPFポリペプチド、NPY(2-36)、NPY(4-36)、PYY(2-36)、PYY(4-36)、PP(2-36)、PP(4-36)、Ala1NPY、Ala3NPY、Ala4NPY、Ala6NPY、Ala7NPY、Tyr7pNPY、Ala9NPY、Ala10NPY、Ala11NPY、Ala13NPY、Gly14NPY、Ala15NPY、Ala16NPY、Ala17NPY、Ala19NPY、Lys19NPY、Ala21NPY、Ala22NPY、Lys25NPY、Ala26NPY、Phe27NPY、Ala28NPY、Gln29NPY、Ala30NPY、Ala31NPY、Phe36NPY、His36NPY、Leu3hPYY(3-36)、Val3hPYY(3-36)、Lys25hPYY(3-36)、Pro13Ala14hPYY、hPP(1-7)-pNPY、hPP(1-17)-pNPY、Tyr1NPY、Ala7NPY、あるいはhPP(19-23)-pNPYではない］
のアミノ酸配列を含むPPFポリペプチド。
【請求項２】
前記PPFポリペプチドが、Phe27hPYY(3-36)、Ile28hPYY(3-36)、Val28hPYY(3-36)、Gln29hPYY(3-36)、Val30hPYY(3-36)、Ile31hPYY(3-36)、Leu31hPYY(3-36)、Phe36hPYY(3-36)、Lys25Phe27hPYY(3-36)、Lys25Ile28hPYY(3-36)、Lys25Val28hPYY(3-36)、Lys25Gln29hPYY(3-36)、Lys25Val30hPYY(3-36)、Lys25Ile31hPYY(3-36)、Lys25Leu31hPYY(3-36)、Lys25Phe36hPYY(3-36)、Phe27Ile28hPYY(3-36)、Phe27Val28hPYY(3-36)、Phe27Gln29hPYY(3-36)、Phe27Val30hPYY(3-36)、Phe27Ile31hPYY(3-36)、Phe27Leu31hPYY(3-36)、Phe27Phe36hPYY(3-36)、Gln29Val30hPYY(3-36)、Gln29Ile31hPYY(3-36)、Gln29Leu31hPYY(3-36)、Gln29Phe36hPYY(3-36)、Val30Ile31hPYY(3-36)、Val30Leu31hPYY(3-36)、あるいはVal30Phe36hPYY(3-36)、またはLeu31Phe36hPYY(3-36)を含まないさらなる条件を持つ、請求項１記載のPPFポリペプチド。
【請求項３】
前記PPFポリペプチドがさらに１つあるいはそれ以上の挿入を含む、請求項１記載のPPFポリペプチド。
【請求項４】
前記１つあるいはそれ以上の挿入がさらに１つあるいはそれ以上のアミノ酸挿入を含む、請求項３記載のPPFポリペプチド。
【請求項５】
前記ポリペプチドがSEQ ID NO: 54ないしSEQ ID NO: 87よりなる群から選択された少なくとも１つのアミノ酸配列を含む、請求項３記載のPPFポリペプチド。
【請求項６】
前記１つあるいはそれ以上の挿入が、修飾アミノ酸、非天然アミノ酸および非アミノ酸よりなる群から選択された１つあるいはそれ以上の挿入を含む、請求項３記載のPPFポリペプチド。
【請求項７】
前記ポリペプチドが、SEQ ID NO: 131ないし132、150ないし156、160、180ないし186、207ないし210、219ないし220、252、265、275、281、286、287、289ないし293、および313よりなる群から選択された少なくとも１つのアミノ酸配列を含む、請求項６記載のPPFポリペプチド。
【請求項８】
前記ポリペプチドが１つあるいはそれ以上の水溶性ポリマーと結合される、請求項１記載のPPFポリペプチド。
【請求項９】
前記ポリマーがポリエチレングリコールおよび脂肪酸分子よりなる群から選択され、ここに前記ポリエチレングリコールおよび脂肪酸分子は、そのポリペプチドのN-あるいはC-末端、あるいはそのポリペプチド配列中のリジンあるいはセリンアミノ酸残基の側鎖に結合する請求項８記載のPPFポリペプチド。
【請求項１０】
前記ポリペプチドがSEQ ID NO: 187-197よりなる群から選択される、請求項９記載のPPFポリペプチド。
【請求項１１】
前記ポリペプチドが擬似体Ａ、擬似体Ｂ、Ala-(2-アミノイソ酪酸)およびAla-Proよりなる群から選択されるβ-ターン誘導性ジペプチドの挿入を含む、請求項１記載のPPFポリペプチド。
【請求項１２】
前記ポリペプチドがSEQ ID NO: 211ないし247よりなる群から選択される、請求項11記載のPPFポリペプチド。
【請求項１３】
前記ポリペプチドが、式II：
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Pro Xaa6 Xaa7 Pro Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Tyr Xaa21 Xaa22 Xaa23 Leu Arg Xaa26 Tyr Xaa28 Asn Xaa30
Xaa31 Thr Arg Gln Arg Xaa36
［式中、
Xaa1はTyr、Ala、Phe、Trp、あるいは無し； 
Xaa2はPro、Gly、d-Ala、ホモ-Pro、ヒドロキシ-Pro、あるいは無し；
Xaa3はIle、Ala、ノル-Val、Val、Leu、Pro、Ser、あるいはThr；
Xaa4はLys、Ala、Gly、Arg、d-Ala、ホモ-Lys、ホモ-Arg、Glu、あるいはAsp；
Xaa6はGlu、Ala、Val、Asp、Asn、あるいはGln；
Xaa7はAla、Asn、His、Ser、あるいはTyr；
Xaa9はGly、Ala Ser、サルコシン、Pro、あるいはAib；
Xaa10はGlu、Ala、Asp、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa11はAsp、Ala、Glu、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa12はAla あるいはd-Ala；
Xaa13はSer、Ala、Thr、あるいはホモ-Ser； 
Xaa14はPro、Ala、ホモ-Pro、ヒドロキシ-Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa15はGlu、Ala、Asp、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa16はGlu、Ala、Asp、Asn、あるいはGln；
Xaa17はLeu、Ala、Met、Trp、Ile、Val、あるいはノル-Val；
Xaa18はAsn、Asp、Ala、Glu、Gln、Ser あるいはThr；
Xaa19はArg、Tyr、Lys、Ala、Gln、あるいはN(メチル)Ala；
Xaa21はTyr、Ala、Met、Phe、あるいはLeu；
Xaa22はAla、Ser、Thr、あるいはd-Ala；
Xaa23はSer、Ala、Thr、あるいはホモ-Ser；
Xaa26はHisあるいはAla；
Xaa28はLeu、Ile、Val、あるいはAla；
Xaa30はLeu、Ala、ノル-Val、Val、Ile、あるいはMet； 
Xaa31はAla、Val、Ile、あるいはLeu； および
Xaa36はTyr、N(メチル)Tyr、His、Trp、あるいはPheであり；
ネイティブPPFポリペプチド、PYY(2-36)、PP(2-36)、Ala13NPY、Leu3hPYY(3-36)、Val3hPYY(3-36)、hPP(1-7)-pNPY、あるいはhPP(1-17)-pNPYでない］
のアミノ酸配列を含む、請求項１記載のPPFポリペプチド。
【請求項１４】
前記PPFポリペプチドがIle28hPYY(3-36)、Val28hPYY(3-36)、Val30hPYY(3-36)、Ile31hPYY(3-36)、Leu31hPYY(3-36)、Phe36hPYY(3-36)、Val30Ile31hPYY(3-36)、Val30Leu31hPYY(3-36)、Val30Phe36hPYY(3-36)、あるいはLeu31Phe36hPYY(3-36)を含まない条件を持つ、請求項13のPPFポリペプチド。
【請求項１５】
前記ポリペプチドが、式III：
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Pro Xaa6 Xaa7 Pro Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Tyr Xaa21 Xaa22 Xaa23 Leu Arg Xaa26 Tyr Xaa28 Asn Xaa30
Xaa31 Thr Arg Gln Arg Xaa36
［式中、
Xaa1はTyr、Phe、Trp、あるいは無し； 
Xaa2はPro、Gly、d-Ala、ホモ- Pro、ヒドロキシ-Pro、あるいは無し；
Xaa3はIle、Ala、ノル-Val、Val、Leu、Pro、Ser あるいはThr；
Xaa4はLys、Ala、Gly、Arg、d-Ala、ホモ-Lys、ホモ-Arg、Glu、あるいはAsp；
Xaa6はGlu、Ala、Val、Asp、Asn、あるいはGln；
Xaa7はAla、Asn、His、Ser、あるいはTyr；
Xaa9はGly、Ala Ser、サルコシン、Pro、あるいはAib；
Xaa10はGlu、Ala、Asp、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa11はAsp、Ala、Glu、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa12はAla あるいはd-Ala；
Xaa13はSer、Ala、Thr、Pro、あるいはホモ-Ser； 
Xaa14はPro、Ala、ホモ-Pro、ヒドロキシ-Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa15はGlu、Ala、Asp、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa16はGlu、Ala、Asp、Asn、あるいはGln；
Xaa17はLeu、Ala、Met、Trp、Ile、Val、あるいはノル-Val；
Xaa18はAsn、Asp、Ala、Glu、Gln、Ser あるいはThr；
Xaa19はArg、Tyr、Lys、Ala、Gln、あるいはN(メチル)Ala；
Xaa21はTyr、Ala、Met、Phe、あるいはLeu；
Xaa22はAla、Ser、Thr、あるいはd-Ala；
Xaa23はSer、Ala、Thr、あるいはホモ-Ser；
Xaa26はHis あるいはAla；
Xaa28はLeu、Ile、Val、あるいはAla；
Xaa30はLeu、Ala、ノル-Val、Val、Ile、あるいはMet； 
Xaa31はAla、Val、Ile、あるいはLeu； および
Xaa36はTyr、N(メチル)Tyr、His、Trp、あるいはPheであり；
但し、前記ポリペプチドは、NPY(2-36)、PYY(2-36)、PP(2-36)、Ala3NPY、Ala4NPY、Ala6NPY、Ala7NPY、Tyr7pNPY、Ala9NPY、Ala10NPY、Ala11NPY、Ala13NPY、Gly14NPY、Ala15NPY、Ala16NPY、Ala17NPY、Ala19NPY、Lys19NPY、Ala21NPY、Ala22NPY、Lys25NPY、Ala26NPY、Phe27NPY、Ala28NPY、Gln29NPY、Ala30NPY、Ala31NPY、Phe36NPY、His36NPY、Leu3hPYY(3-36)、Val3hPYY(3-36)、Lys25hPYY(3-36)、Pro13Ala14hPYY、Tyr1NPY、Ala7NPY、あるいはhPP(19-23)-pNPYでない］
のアミノ酸配列を含む、請求項１記載のPPFポリペプチド。
【請求項１６】
前記PPFポリペプチドが、Ile28hPYY(3-36)、Val28hPYY(3-36)、Val30hPYY(3-36)、Ile31hPYY(3-36)、Leu31hPYY(3-36)、Phe36hPYY(3-36)、Val30Ile31hPYY(3-36)、Val30Leu31hPYY(3-36)、Val30Phe36hPYY(3-36)、あるいはLeu31Phe36hPYY(3-36)を含まない条件を持つ、請求項15記載のPPFポリペプチド。
【請求項１７】
前記ポリペプチドが、式IV：
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Pro Xaa6 Xaa7 Pro Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Tyr Xaa21 Xaa22 Xaa23 Leu Arg Xaa26 Tyr Xaa28 Asn Xaa30
Xaa31 Thr Arg Gln Arg Xaa36
［式中、
Xaa1はTyr、Phe、Trp、あるいは無し； 
Xaa2はPro、Gly、d-Ala、ホモ-Pro、ヒドロキシ-Pro、あるいは無し；
Xaa3はIle、Ala、ノル-Val、Val、Leu、Pro、Ser あるいはThr；
Xaa4はLys、Ala、Gly、Arg、d-Ala、ホモ-Lys、ホモ-Arg、Glu、あるいはAsp；
Xaa6はGlu、Ala、Val、Asp、Asn、あるいはGln；
Xaa7はAla、Asn、His、Ser、あるいはTyr；
Xaa9はGly、Ala Ser、サルコシン、Pro、あるいはAib；
Xaa10はGlu、Ala、Asp、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa11はAsp、Ala、Glu、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa12はAla あるいはd-Ala；
Xaa13はSer、Ala、Thr、あるいはホモ-Ser； 
Xaa14はPro、Ala、ホモ-Pro、ヒドロキシPro、Aib、あるいはGly；
Xaa15はGlu、Ala、Asp、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa16はGlu、Ala、Asp、Asn、あるいはGln；
Xaa17はLeu、Ala、Met、Trp、Ile、Val、あるいはノル-Val；
Xaa18はAsn、Asp、Ala、Glu、Gln、Ser あるいはThr；
Xaa19はArg、Tyr、Lys、Ala、Gln、あるいはN(メチル)Ala；
Xaa21はTyr、Ala、Met、Phe、あるいはLeu；
Xaa22はAla、Ser、Thr、あるいはd-Ala；
Xaa23はSer、Ala、Thr、あるいはホモ-Ser；
Xaa26はHis あるいはAla；
Xaa28はLeu、Ile、Val、あるいはAla；
Xaa30はLeu、Ala、ノル-Val、Val、Ile、あるいはMet； 
Xaa31はAla、Val、Ile、あるいはLeu； および
Xaa36はTyr、N(メチル)Tyr、His、Trp、あるいはPheであり；
但し、前記ポリペプチドは、PYY(2-36)、Ala13NPY、Leu3hPYY(3-36)、あるいは Val3hPYY(3-36)ではない］
のアミノ酸配列を含む、請求項１記載のPPFポリペプチド。
【請求項１８】
前記PPFポリペプチドがIle28hPYY(3-36)、Val28hPYY(3-36)、Val30hPYY(3-36)、Ile31hPYY(3-36)、Leu31hPYY(3-36)、Phe36hPYY(3-36)、Val30Ile31hPYY(3-36)、Val30Leu31hPYY(3-36)、Val30Phe36hPYY(3-36)、あるいはLeu31Phe36hPYY(3-36)を含まないさらなる条件を持つ、請求項17記載のPPFポリペプチド。
【請求項１９】
前記ポリペプチドが、式V：
Xaa3 Xaa4 Pro Xaa6 Xaa7 Pro Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Tyr Xaa21 Xaa22 Xaa23 Leu Arg Xaa26 Tyr Xaa28 Asn Xaa30 Xaa31 Thr 
Arg Gln Arg Xaa36
［式中、
Xaa3はIle、Ala、Pro、Ser、Thr、あるいはノル-Val；
Xaa4はLys、Ala、Gly、Glu、Asp、d-Ala、ホモ-Lys、あるいはホモ-Arg；
Xaa6はGlu、Ala、Val、Asp、Asn、あるいはGln；
Xaa7はAla、Asn、His、Ser、Tyr；
Xaa9はGly、Ala、Ser、サルコシン、Pro、あるいはAib；
Xaa10はGlu、Ala、Asp、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa11はAsp、Ala、Glu、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa12はAla あるいはd-Ala；
Xaa13はSer、Ala、Thr、あるいはホモ-Ser；
Xaa14はPro、Ala、ホモ-Pro、ヒドロキシ-Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa15はGlu、Ala、Asp、Asn、Gln、Pro、Aib、あるいはGly；
Xaa16はGlu、Ala、Asp、Asn、あるいはGln；
Xaa17はLeu、Ala、Met、Trp、Ile、Val、あるいはノル-Val；
Xaa18はAsn、Asp、Ala、Glu、Gln、Ser あるいはThr；
Xaa19はArg、Tyr、Lys、Ala、Gln、あるいはN(メチル)Ala；
Xaa21はTyr、Ala、Met、Phe、あるいはLeu；
Xaa22はAla、Ser、Thr、あるいはd-Ala；
Xaa23はSer、Ala、Thr、あるいはホモ-Ser；
Xaa26はHis あるいはAla；
Xaa28はLeu あるいはAla；
Xaa30はLeu、Ala、ノル-Val、あるいはIle；
Xaa31はAla あるいはVal；および
Xaa36はTyr、N(メチル)Tyr、His、あるいはTrpであり；
但し、前記ポリペプチドはネイティブPPFポリペプチドではない］
のアミノ酸配列を含む、請求項１記載のPPFポリペプチド。
【請求項２０】
SEQ ID NO: 93、95ないし96、110、114ないし115、118、120、124ないし129、139ないし141、146ないし149、158、161ないし164、167ないし168、170ないし171、174ないし186、198ないしSEQ ID NO: 206、253ないし254、294、300ないし301およびSEQ ID NO: 314ないし317よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含むPPFポリペプチド。
【請求項２１】
SEQ ID NO: 7-29よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含むPPYポリペプチド。
【請求項２２】
代謝障害を治療または予防するのに治療上有効量の請求項１記載のPPFポリペプチドを含む代謝障害を治療または予防するための医薬組成物。
【請求項２３】
前記PPFポリペプチドがSEQ ID NO: 54 ないしSEQ ID NO: 87よりなる群から選択されたアミノ酸配列を含む、請求項２２記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記PPFポリペプチドが１つあるいはそれ以上の挿入を含む、請求項２２記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記１つあるいはそれ以上の挿入が、修飾アミノ酸、非天然アミノ酸および非アミノ酸よりなる群から選択された１つあるいはそれ以上の挿入を含む、請求項２４記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記PPFポリペプチドが、SEQ ID NO: 131ないし132、150ないし156、160、180ないし186、207ないし210、219ないし220、252、265、275、281、286、287、289ないし293、および313よりなる群から選択されたアミノ酸配列を含む、請求項２２記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記PPFポリペプチドが１つあるいはそれ以上の水溶性ポリマーと結合される、請求項２２記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記ポリマーがポリエチレングリコールおよび脂肪酸分子よりなる群から選択され、ここに前記ポリエチレングリコールおよび脂肪酸分子は、そのポリペプチドのN-またはC-末端、またはそのポリペプチド配列中のリジンあるいはセリンアミノ酸残基の側鎖に結合する請求項２７記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記PPFポリペプチドがSEQ ID NO: 187-197よりなる群から選択される、アミノ酸配列を含む、請求項２８記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記PPFポリペプチドが疑似体Ａ、疑似体Ｂ、Ala-(2-アミノイソ酪酸)およびAla-Proよりなる群から選択されるβターン誘導性ジペプチドの挿入を含む、請求項２２記載の医薬組成物。
【請求項３１】
前記PPFポリペプチドがSEQ ID NO: 211ないし247よりなる群から選択される、請求項３０記載の医薬組成物。
【請求項３２】
前記PPFポリペプチドが、SEQ ID NO: 93、95ないし96、110、114ないし115、118、120、124ないし129、139ないし141、146ないし149、158、161ないし164、167ないし168、170ないし171、174ないし186、198ないしSEQ ID NO: 206、253ないし254、294、300ないし301およびSEQ ID NO: 314ないし317よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含む請求項２２記載の医薬組成物。
【請求項３３】
前記PPFポリペプチドが、SEQ ID NO: 7ないし29よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項２２記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記代謝障害が肥満である請求項２２記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記代謝障害がインスリン抵抗性症候群（シンドロームX）である請求項２２記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記代謝障害が糖尿病である請求項２２記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
Y2 受容体は、ニューロペプチドY受容体のC-末端側の断片に対する親和性を持つことにより、薬理学的に、Y1と区別される。ニューロペプチドYの3-36断片やペプチドYYが改善された親和性および選択性を提供したものの、Y2受容体は、ニューロペプチドY(13-36)の親和性により最もよく区別される(Dumontら、Soc. for Neurosci. Abstracts 19:726 (1993)を参照)。Y1受容体およびY2受容体の両方を介するシグナル伝達は、アデニルシクラーゼの阻害と共役している。Y2受容体への結合は、N-タイプ・カルシウムチャンネルの選択的阻害により、シナプス内のカルシウムレベルを減少させることも見出された。さらに、Y2受容体は、Y1受容体のように、セカンドメッセンジャーと特殊な共役を示している(米国特許第6,355,478号明細書を参照)。Y2受容体は、海馬、黒質、視床、視床下部や脳幹などの脳の大部分に見られる。ヒト、マウス、サルおよびラットのY2受容体がクローン化されている(例えば、米国特許第6,420,532号明細書および6,355,478号明細書を参照)。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
PYYに選択性を示すもう１つの結合部位/受容体が存在し、PYY-選択性受容体と呼ばれ、それは、本明細書中でY7受容体として言及される。この受容体、あるいはこのクラスの受容体に対する異なる結合順位が報告されており、このファミリーにおいて一種以上の受容体の存在する可能性が示唆されている。ほとんどの場合、それは、PYYがNPYに比べて3-5倍強力であった受容体を述べるために適用されている。International Union of Pharmacologyは、NPY、PYYおよびPP受容体に関する命名法について、PYYとNPYの間に少なくとも20倍の効力の違いが観察されない限り、用語PYY-選択性受容体は使用されないということを勧告している(Michelら、Pharmacol. Rev. 50: 143-50 (1998))。しかしながら、本開示の目的から、Y7受容体あるいはPYY-選択性受容体に対する引用は、どの程度であれ、NPYを上回るPYYに対する選択性を持つ受容体を意味する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
肥満および関連疾患は、米国および世界中における公衆衛生の共通かつ重大な問題となっている。上半身肥満は、２型糖尿病の最も強力なリスクファクターであり、また心臓循環器疾患の大きなリスクファクターにもなっている。肥満は、高血圧、動脈硬化、鬱血性心臓麻痺、ストローク、胆嚢疾患、骨関節炎、睡眠無呼吸症、多房性卵巣症候群のような生殖器疾患、乳癌、前立腺癌、大腸癌、さらに全身麻酔による併発症の高発生率などを引き起こすリスクファクターと認識されている(例えば、Kopelman、Nature 404: 635-43 (2000)を参照)。それは寿命を縮め、上記の合併症、また感染症、静脈瘤、黒色表皮腫、湿疹、運動不耐、インスリン抵抗、高血圧、高コレステロール血症、胆石症、整形障害および血栓症などを引き起こす重大なリスクを持っている(Rissanenら、Br. Med. J. 301: 835-7 (1990))。また、肥満は、インスリン抵抗性症候群、あるいは「シンドローム X」と呼ばれる一連の症状に対するリスクファクターともなっている。最近の試算では、肥満および関連疾患に関する治療コストは、世界中のトータルで1,500億ドルにのぼる。肥満の病理は、多重ファクターによるものと信じられているが、基本的な問題は、肥満患者における栄養分利用率とエネルギー消費のバランスが、脂肪組織が過剰になるまで取れていないことである。現在、肥満は、治療に乏しく、慢性的で、本質的に手に負えない代謝疾患となっている。肥満の人の体重を減少させるために有用な治療薬があれば、肥満の人の健康に非常に大きな有益効果を持つであろう。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
また、本発明は、PPFポリペプチドの送達に有用な医薬的に許容される希釈剤、保存料、可溶化剤、乳化剤、アジュバントおよび/または担体と一緒に、治療的あるいは予防的有効量の少なくとも１つの本発明のPPFポリペプチド、またはその医薬上許容される塩を含む医薬組成物に関連する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
ある好ましい実施例において、理論により限定されることなしに、本発明の新規PPFポリペプチドのヒトへの末梢投与は、栄養素利用率を減少させるものと信じられ、それにより肥満および関連代謝状態あるいは疾患の治療および予防に有用である。そのように、本発明は、PPFポリペプチドの組成や栄養素利用率の減少から利益を得るかもしれない代謝状態あるいは疾患を治療および予防するためのその必要のある対象において栄養素利用率を減少させるためのそれらの使用方法を提供する。これらの方法は、例えば、肥満、２型に限らず非インスリン依存性糖尿病を含む糖尿病、摂食障害、インスリン耐性症候群、および心臓血管障害の治療に有用となりえる。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８４】
アミノ酸配列の挿入を含む好ましいPYYアナログポリペプチドは、天然のヒト PYY 全長に沿った各アミノ酸部位にアラニン置換を含んでいる。そのようなPYYアナログポリペプチドは 、PYY +(Ala)xを含み、その x は 1' から36 (SEQ ID NO:54-87) から選択されたものである。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１１】
そのようなポリマー結合体や小分子置換修飾は、PPFキメラポリペプチド配列中のN-またはC-末端、あるいはアミノ酸残基の側鎖において単独で施してもよい。または、PPFキメラポリペプチドの配列に沿って、複数の誘導化部位が存在してもよい。１つあるいはそれ以上のリジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、あるいはシステインによる置換は、さらなる誘導化部位を与えることができる (例えば、米国特許第5,824,784号 および 5,824,778号 を参照)。好ましくは、そのPYYアナログポリペプチドは、１、２、あるいは３つのポリマー分子と結合させることができる。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２８】
本発明の化合物は、例えば、感染性下痢(例えば、ウイルス性または細菌性)、炎症性下痢、短腸症候群あるいはイレオストミーのような外科的処置後に典型的に起こる下痢など、腸内の吸収減少や過剰な電解質および水分の分泌と関連する胃腸疾患の如何なる合併症(例えば、Harrison’s principles of Internal Medicine、McGraw Hill Inc.、New York、12th ed.を参照)に対する治療あるいは予防に使用されることができる。感染性下痢の例として、限定はしないが、急性ウイルス性下痢、急性細菌性下痢(例えば、サルモネラ、カンピロバクターおよびクロストリヂウム)または原生動物感染による下痢あるいは旅行者下痢症(例えば、ノロウイルスあるいはロタウイルス)などが含まれる。炎症性下痢の例としては、限定はしないが、吸収不良症候群、熱帯性下痢、慢性膵炎、クローン病、下痢および過敏性腸症候群が含まれる。本発明のペプチドが、例えば、手術後あるいはコレラのような胃腸疾患が関わる緊急あるいは生命を脅かす状態を治療あるいは予防できることが見出されている。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３２】
本発明の化合物はまた、膵臓癌の治療あるいは予防 (例えば、膵臓癌の増殖阻害) にも利用できる。本発明の方法には、癌細胞の増殖を減少させることも含まれる。本発明により治療されるであろう良性型の膵臓癌には、漿液性嚢胞腺腫、微嚢胞性腫瘍および固形嚢胞性腫瘍が含まれる。本法はまた、膵管、膵腺房、あるいは膵島由来の上皮性悪性腫瘍などの悪性膵臓癌細胞の増殖抑制に対しても効果的である。米国特許第5,574,010号 (その全体が参照として取り込まれる)には、抗増殖活性を試験する典型的なアッセイ法例が記載されている。例えば、その5,574,010 号特許には、PANC-1 および MiaPaCa-2がAmerican Type Culture Collection、ATCC (Rockville, Md.) のような供給元より商業的に入手可能なヒト膵臓腺癌細胞の二細胞株であることが記載されている。これら二種の癌細胞は、10% 牛胎児血清、29.2 mg/L グルタミン、25 μg ゲンタマイシン、5 ml ペニシリン、ストレプトマイシン、およびファンギゾン溶液 (JRH Biosciences, Lenexa, Kans.)を添加したRPMI-1640 培地で、NAPCO ウォータジャケット付 CO2培養器中で37℃にて培養した。全ての細胞系は、週に1-2 回、コンフルエントな単層となった時、0.25%トリプシン (Clonetics, San Diego, Calif.) で培養容器より剥離回収した。細胞は、4℃、500 g で7 分間の遠心分離で沈殿させ、トリプシンを含まない強化RPMI-1640培地に懸濁した。細胞をトリパンブルー処理し、血球計算板にて生存細胞数を数えた。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４０】
または、本発明のPPFポリペプチドは、当前記技術分野で周知の遺伝子組換え技術 (例えば、Sambrookら、Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2d ed., Cold Spring Harbor (1989を参照) により生産してもよい。遺伝子組換え技術により生産されたこれらのPYYアナログポリペプチドは、ポリヌクレオチドから発現されることができる。当前記技術に熟練した人は、コドン利用度の縮重を考慮して、DNAおよびRNAを含む、そのようなPYYアナログポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが野生型PYY cDNA から得られることを理解するであろう。これらのポリヌクレオチド配列は、微生物宿主における転写やmRNAへの翻訳を促進するコドンを含めることができる。そのような製造配列は、当前記技術分野において周知の方法により容易に構築されることができる。例えば、WO 83/04053を参照。前記ポリヌクレオチドはまた、任意的にN-末端メチオニン残基をコードできる。本発明に有用な非ペプチド化合物は、当前記技術分野で周知の方法により調製できる。例えば、含リン酸アミノ酸およびそのようなアミノ酸を含むペプチドは、当前記技術分野において周知の方法を利用して調製できる(例えば、Bartlett and Landen, Bioorg. Chem. 14: 356-77 (1986) を参照)。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４３】
本発明はまた、本発明のPPF ポリペプチドの組換えDNA 生産の工程も提供する。提供される工程は、そのようなPPF ポリペプチドをコードする核酸を含む宿主細胞からのPPF ポリペプチド生産工程で、以下が含まれる：(a) そのようなPPF ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む前記宿主細胞をそのDNA 分子の発現を促進する条件下で培養すること；および (b) そのようなPPF ポリペプチドを取得すること。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７１】
従来の媒体あるいは物質因子とその活性成分が配合不和でない限り、治療組成におけるその使用が期待される。補助的な活性成分はまた、その組成に含ませることができる。いくつかの実施例において、PPF ポリペプチドと他のアミリン、アミリン類縁アゴニスト、CCKあるいはCCKアゴニスト、またはレプチンやレプチンアゴニスト、エクセンジンあるいはその類縁アゴニスト、およびカンナビノイド CB1 受容体拮抗剤、β-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ-1 阻害剤などの食物摂取抑制剤、血漿グルコース低下、あるいは脂質変換剤、肥満治療のために販売されたシブトラミンを単独あるいは同時に投与する溶剤として提供することは便利なものとなるであろう。その他の実施例においては、前記PPF ポリペプチドとは別々に追加的な製剤因子を投与することがより有効であるかもしれない。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８１】
１つの実施例において、医薬製剤が非経口的に投与される場合、その組成は、0.1 μg/kg から 100 mg/kg 体重/日、好ましくは1 μg/kg から 50 mg/kg 体重/日の範囲の量の PPF ポリペプチドがデリバーされるフォーミュレーションである。典型的な一日量は、低用量限界が 2、5、 10、20、 40、 60 、あるいは 80 mg/kg 体重/日から高用量限界が80、100、150、200、あるいは250 mg/kg 体重/日でよい。非経口投与は、最初の投与に続き、薬物の医薬的に効果的な血中濃度を維持するための継続的な投与により行うことができる。当業者は、優良な医療行為および個人の患者の臨床症状によって決定されるように、効果的な用量および投与計画を容易に最適化するであろう。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８５】
本発明に対する理解を補助するために、以下の実施例を含める。本発明に関する実験は、当然、本発明を特別に限定するものように解釈されるべきではなく、当業者の範囲内であろう、現在知られているあるいは今後開発されるような本発明の修正・変更は、本明細書および以下の請求項に述べられるように、本発明の範囲内に入るものとみなされる。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９５】
実施例 3. 高脂肪食を与えられた (食餌誘導肥満あるいは DIO) C57ML/6 マウスおよび高脂肪食を与えられた HSD ラットにおいて体重の増加を抑制するPPF ポリペプチド
マウス：C57BL/6 マウス (オス、実験開始時に4 週齢) に、高脂肪食 (HF、脂肪由来カロリー 58%)あるいは低脂肪食 (LF、脂肪由来カロリー 11%) を与える。四週間後、予め決定された量のPPF ポリペプチドを二週間継続して皮下投与する浸透ポンプ (Alzet # 2002) をそれぞれのマウスに移植する。体重および食餌摂取量を一週間毎に測定する (Surwit ら、Metabolism-Clinical and Experimental, 44: 645-51, 1995)。試験化合物の効果は、処置グループあたり少なくとも 14 匹のマウスにおける %体重変化の平均値 +/- 標準偏差 (即ち、実験開始時の体重からの % 変化) として表示される (p<0.05 分散分析、ダネット検定、 Prism v. 2.01, GraphPad Software Inc., San Diego, California)。
ラット：処置前夜、高脂肪食 (脂肪由来カロリー 45%)を摂取しているSprague-Dawley（登録商標）ラット (オス、平均体重 415 g) を、24 時間の食餌摂取が均等な二群に分けた。試験当夜、消灯直前 (1800 時間) に、各々の動物に、ビヒクル (10% DMSO)あるいは化合物 (1 mg/kg) を腹腔内注射し、個々のラットを独立したDietPro 自動給餌ケージに移した。各ケージには、コンピュータと連結した体重計上に食餌受け、および水の入った容器を設置した。その後24 時間、一時間毎に食餌摂取量を記録した。これらの動物は、連続六日間の注射を施した。体重量は毎晩測定した。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９７】
実施例４．血圧を低下させるPPFポリペプチド
22.8±0.8 ℃、12時間間照明のもとに飼育される Harlan Sprague Dawleyラット(オス)を用いて、PPFポリペプチドの循環器系に及ぼす効果をテレメトリにより調べた。実験は照明時間内に実施された。テレメトリは、意識のある、非麻酔下、ストレスのない状態のラットにおける動脈血圧、心拍および動脈dP/dtを含むリアルタイム血液動態をラットに埋め込んだラジオトランスミッターを経由して測定することを可能にする。本実施例において、ラットには、ビヒクル、10nmol/kg PYY、10nmol/kg PYY(3-36)あるいは10nmol/kgのPPFポリペプチド数種がリモート静注された。リモート静脈投与は、留置血管アクセスポートにより行った(Access Technologies (Stokie, IL)。ポートは、肩甲骨間の皮下筋上に固定される。カテーテルは、頚静脈に装着される。データは、注入の後、60分まで集められた。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９９】
実施例５．PYYおよびPYYアゴニストの抗分泌効果
胃酸分泌
Harlan Sprague Dawleyラット(オス)は、22.8±0.8 ℃、12時間照明のもとに飼育された。実験は照明時間内に実施された。ラット餌(Teklad LM485, Madison, WI)を与えた動物は、実験前20時間、絶食させた。実験開始まで、その動物には水は自由なだけ与えた。
そのラット(11-16週齢、体重291-365グラム)に胃孔(David Osborn作製(Department of Biology, UCLA))を外科的に装着させた。一夜絶食させたラットの体重を量った後、それらの胃孔を開け、胃の中まで伸張するPE250チューブをその中に装着させた屈曲性のタイゴンチューブ(3/8 X 1/16インチ)と接続させた。生理食塩水を細いPE250チューブから注入し、タイゴンチューブからの流出液を採取した。胃孔を通した適切な流れおよび胃を空にすることを確実にするために、流出が容易かつ流出液が清明になるまで、〜５mlの生理食塩水(室温)で胃は数回洗浄された。胃酸分泌は、５mlの生理食塩水(pH 7.0)を注入に続き３mlの空気を送入することにより流出液を採取して10分間隔で測定された。pHメータ(ベックマンモデル番号PHI34、Fullerton, CA)を用いて、各３mlの胃酸を0.01Nの水酸化ナトリウムでpH７に調整した。採取総量に対して補正した、各調整に必要とされる塩基の量は、各サンプル中の酸のモル数を計算するために利用された。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２０１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２０１】
図10に図示するように、胃酸産生量は、ペンタガストリンの注射後20、30、および40分ポイントの平均として算出された、ペンタガストリンによる分泌に対する％として表示されている。ペンタガストリンに応答して、胃酸分泌は、ベースライン9.3±5.8μmol/10分から注射後40分の62.8±3.8μmol/10分まで6.8倍に上昇した(平均値：P<0.01)。ペンタガストリン投与後40分に投与したPYY(3-36)は、用量依存的にかつ著しく胃酸産生を阻害した。PYY(3-36)10μgおよび100μgの用量で、酸分泌は、それぞれ74.7±7.2％および84.7±9.7％まで減少した(P<0.01、P<0.01およびP<0.01；ｔテスト、PYY(3-36)投与後20分)(図11-17中のｔ=60分を参照)。PYY(3-36)によるペンタガストリン刺激による酸分泌阻害の用量応答性を図11に示す。PYY(3-36)の制酸効果に対するED50は、11.31μg/kg±0.054 logユニットであった。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２０２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２０２】
胃排出
胃排出に及ぼすPYY(3-36)の効果を測定するために、最後野の真空吸引破壊(APx)を持ち、意識のある非絶食Harlan Sprague Dawleyラット(オス)およびシャムオペレーションラットを用いた。実験は、手術後少なくとも２週間後(体重426±8グラム)および３週間後(544±9グラム)に再度行った。ラットは、無作為に処理グループ群に帰属された。全ラットは、22.7℃、12時間照明サイクルで飼育され(実験は、照明時に実施)、餌および水は任意に与えられた(飼料LM-485 Teklad, Madison, Wisconsin, USA)。
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２０５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２０５】
非手術ラット群において、PYY(3-36)は、放射活性の出現を用量依存的に阻害した(30μg/kg、90μg/kg、300μg/kg PYY[336]のそれぞれに対して10.5±1.5、7.26±1.52および3.20±1.21 cpm/μL/分；P<0.0001、分散分析(ANOVA)；図12)。シャムオペレーション群では、PYY(3-36)の10μg(n=4)および30μg(n=3)の投与はまた、生理食塩水投与コントロール群(n=5)と比べて、用量依存的に放射活性の出現を遅延させた(それぞれ11.89±3.23、9.88±2.45、18.94±3.23 cpm/μL/分；P<0.05)。シャム群におけるPYYの最大効果は、非手術群以下のED50で、非手術ラット群よりも低かった(43.77から10.20 μg/kg PYY [3-36]まで減少)。真空吸引破壊(APx)ラット群では、胃排出は、シャムオペレーション群あるいは非手術群と比べて遅かったが(9.38±3.25 cpm/μL/分；P<0.05、0.05)、PYY(3-36)の投与によっては変化しなかった。回帰分析でも用量依存性は確認されなかった。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２０７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２０７】
胆嚢排出
胆嚢排出に及ぼすPYY(3-36)の効果を調べるために、８週齢NIH SWISSマウス(オス)を22.8±0.8度、12時間照明サイクル、そして任意に標準食餌(Teklad LM7012, Madison, WI)および水へのアクセスが可能な条件で飼育した。マウスは、実験前3時間絶食させた。t=0において、PYY(3-36)、CCK-8あるいは生理食塩水を意識のあるマウスに筋注した。30分後、マウスは頸椎脱臼により安死させ、中位開腹により胆嚢を取り出して秤量した。
処理群：
グループA：生理食塩水 100μl        t=0    筋注  n=14
グループB：PYY(3-36) 1μg/kg        t=0    筋注  n=6
グループC：PYY(3-36) 10μg/kg        t=0    筋注  n=10 
グループD：PYY(3-36) 100μg/kg        t=0    筋注  n=8
グループE：CCK-8 1μg/kg          t=0  筋注  n=3
グループF：CCK-8 10μg/kg          t=0    筋注  n=3
グループG：PYY(3-36) 10μg/kg + CCK-8 1μg/kg    t=0    筋注  n=4
グループH：PYY(3-36) 10μg/kg + CCK-8 10μg/kg  t=0  筋注  n=4
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２０８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２０８】
結果は、図18および19に図示した。PYY(3-36)は、9.94μg/kg ± 0.24 logユニットのED50で、基底胆嚢排出を用量依存的に阻害した。最大用量(グループD)は、生理食塩水投与コントロール群(グループA)に比べて胆嚢重量を168％まで増加させた(P<0.005)。PYY(3-36)はCCK-8に刺激される胆嚢排出には影響を及ぼさなかった。その結果は、PYY(3-36)による阻害がCCK-依存的な経路を介していないことを示している。外因的なCCKに応答する胆嚢排出はPYY(3-36)に影響されなかった。同様の結果が意識のあるイヌにおけるPYY(3-36)で得られた；400 ng/kgボーラス投与 + 800 pmol/kg/時間の注入は、CCK-8で刺激される胆嚢収縮を阻害しなかった。
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２１０】
実施例６．PYYおよびPYYアゴニストの胃保護効果
Harlan Sprague Dawleyラット(オス)を22.8±0.8度、12時間照明サイクル、そして任意に標準げっ歯類用食餌(Teklad LM485, Madison, WI)および水へのアクセスが可能な条件で飼育した。ラット(200-220グラム)は実験前20時間絶食させた。