【手続補正書】
【提出日】平成19年1月15日(2007.1.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
シンシチウム構造体へ、少なくとも一のペースメーカーイオンチャンネルを発現する細胞をデリバリーするための組成物であって、少なくとも一のペースメーカーイオンチャンネルのポリペプチドをコードする核酸が組み込まれた単離された間葉系幹細胞を含み、少なくとも一のペースメーカーイオンチャンネルをコードする前記核酸が発現される、組成物。
【請求項２】
前記核酸がHCNチャンネルをコードする、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記核酸がHCN1チャンネルをコードする、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記HCNチャンネルがHCN2である、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
前記HCNチャンネルがHCN4である、請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
前記核酸が、変異したHCNチャンネルをコードする、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記変異したHCNチャンネルがE324A-HCN2である、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記変異したHCNチャンネルがY331A-HCN2である、請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
前記変異したHCNチャンネルがY331A,E324A-HCN2である、請求項６に記載の組成物。
【請求項１０】
前記核酸がMiRP1およびHCNチャンネルをコードする、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記HCNチャンネルがHCN1である、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記HCNチャンネルがHCN2である、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１３】
前記HCNチャンネルがHCN4である、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１４】
前記核酸が、MiRP1および変異したHCNチャンネルをコードする、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１５】
前記変異したHCNチャンネルがE324A-HCN2である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記変異したHCNチャンネルがY331A-HCN2である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
前記変異したHCNチャンネルがY331A,E324A-HCN2である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１８】
間葉系幹細胞でイオンチャンネルをつくるのに充分な量でイオンチャンネルをコードする核酸が組み込まれた間葉系幹細胞を含む組成物。
【請求項１９】
前記核酸が、更にMiRP1をコードする、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記核酸がHCN1チャンネルをコードする、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２１】
前記イオンチャンネルがHCN2である、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２２】
前記イオンチャンネルがHCN4である、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２３】
前記核酸が、変異したHCNチャンネルをコードする、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２４】
前記変異したHCNチャンネルがE324A-HCN2である、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記変異したHCNチャンネルがY331A-HCN2である、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２６】
前記変異したHCNチャンネルがY331A,E324A-HCN2である、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２７】
シンシチウム構造体において少なくとも一の機能的なイオンチャンネルを発現させる方法であって、(a)請求項１に記載の組成物を調製すること；および(b)前記シンシチウム構造体に請求項１に記載の組成物を投与することを含む方法。
【請求項２８】
前記シンシチウム構造体が哺乳類の心臓である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記シンシチウム構造体が哺乳類の膀胱である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
前記シンシチウム構造体が動脈である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
前記シンシチウム構造体が小動脈である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
前記シンシチウム構造体が哺乳類の肝臓である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３３】
前記シンシチウム構造体が哺乳類の胃腸管である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３４】
前記シンシチウム構造体が、上皮組織に由来する腫瘍である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３５】
前記シンシチウム構造体が、平滑筋組織に由来する腫瘍である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３６】
シンシチウム構造体において機能的なイオンチャンネルを発現させる方法であって、(1)請求項１８に記載の組成物を調製すること；および(2)前記シンシチウム構造体に請求項１８に記載の組成物を部位特異的に導入することを含む方法。
【請求項３７】
前記シンシチウム構造体が哺乳類の心臓である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
哺乳類における心臓のリズム障害を治療する方法であって、前記障害が、伝導ブロック、完全房室ブロック、不完全房室ブロック、または洞房結節の機能不全の少なくとも一つであり、導入部位においてペースメーカーの電流の発現を増大させるのに充分な量の請求項１８に記載の組成物を前記哺乳類の心臓に部位特異的に導入し、それにより前記哺乳類におけるリズム障害を治療することを含む方法。
【請求項３９】
前記導入工程が、前記構造体への全身投与および注射から成る群より選択される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記組成物が、前記心臓の細胞への局所適用、注射またはカテーテル法により導入される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
哺乳類の心臓においてペースメーカーの電流を誘導する方法であって、前記心臓においてペースメーカーの電流を誘導するのに充分な量の請求項１８に記載の組成物を前記心臓に部位特異的に導入し、それにより前記心臓においてペースメーカーの電流を誘導することを含む方法。
【請求項４２】
被検体において心拍数を増大させる方法であって、前記被検体の心臓の細胞を、前記心臓の細胞の活性化の時定数を低下させるのに充分な量の請求項１８に記載の組成物と接触させ、それにより前記被検体において心拍数を増大させることを含む方法。
【請求項４３】
細胞においてペースメーカーの電流を誘導する方法であって、前記細胞を、前記細胞においてペースメーカーの電流を誘導するのに充分な量の請求項１８に記載の組成物と接触させ、それにより前記細胞においてペースメーカーの電流を誘導することを含む方法。
【請求項４４】
細胞の収縮を引き起こす方法であって、前記細胞を、前記細胞の収縮を引き起こすのに必要な電流を誘導するのに充分な量の請求項１８に記載の組成物と接触させ、それにより前記細胞の収縮を引き起こすことを含む方法。
【請求項４５】
細胞を活性化するのに必要な時間を短縮する方法であって、細胞を、前記細胞の活性化の時定数を低下させるのに充分な量の請求項１８に記載の組成物と接触させ、それにより前記細胞を活性化するのに必要な時間を短縮することを含む方法。
【請求項４６】
細胞の膜電位を変化させる方法であって、細胞を、前記細胞の膜電位を変化させるのに充分な量の請求項１８に記載の組成物と接触させ、それにより前記細胞の膜電位を変化させることを含む方法。
【請求項４７】
少なくとも一のペースメーカーイオンチャンネルのポリペプチドをコードする核酸で形質転換した単離された間葉系幹細胞から発達した心臓の筋細胞であって、少なくとも一のペースメーカーイオンチャンネルをコードする前記核酸が発現される、心臓の筋細胞。
【請求項４８】
前記核酸がHCN2チャンネルをコードする、請求項２７に記載の方法。
【請求項４９】
前記核酸がMiRP1およびHCN2チャンネルをコードする、請求項２７に記載の方法。
【請求項５０】
被検体の心臓においてペースメーカーの電流を誘導する方法であって、(a)請求項１に記載の組成物を調製すること；および(b)前記心臓に請求項１に記載の組成物を投与することを含み、前記間葉系幹細胞における前記ペースメーカーイオンチャンネルの発現が、前記心臓においてペースメーカーの電流を発生させる方法。
【請求項５１】
前記核酸がHCN2チャンネルをコードする、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記核酸がMiRP1およびHCN2チャンネルをコードする、請求項５０に記載の方法。
【請求項５３】
シンシチウム構造体へペースメーカーの電流をデリバリーするための組成物であって、シンシチウム構造体に部位特異的に導入されたときに、間葉系幹細胞でイオンチャンネルを発生させ、かつペースメーカーの電流をデリバリーするのに充分な量で、過分極活性化サイクリックヌクレオチドゲート２（hyperpolarization activated, cyclic nucleotide gated 2）（HCN2）イオンチャンネルをコードする核酸が組み込まれた間葉系幹細胞を含む、組成物。
【請求項５４】
哺乳類の心臓においてペースメーカーの電流を誘導する方法であって、前記心臓においてペースメーカーの電流を増大させるのに充分な量の請求項１８に記載の組成物を前記心臓に部位特異的に導入し、それにより前記心臓においてペースメーカーの電流を誘導することを含む方法。
【請求項５５】
細胞においてペースメーカーの電流を誘導する方法であって、前記細胞を、前記細胞においてペースメーカーの電流を増大させるのに充分な量の請求項１８に記載の組成物と接触させ、それにより前記細胞においてペースメーカーの電流を増大させることを含む方法。