【手続補正書】
【提出日】平成19年3月7日(2007.3.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含む、線虫類抽出抗凝血タンパク質(NAP)薬物物質を製造するためのプロセス:
(a)rNAPc2およびrNAPc2/プロリンからなる群より選択されるNAPをコードする、メタン資化性酵母宿主細胞を提供する工程；
(b)細胞を所望の細胞密度まで増殖させる工程を含む発酵プロセスにおいて該酵母宿主細胞を発酵させる工程；
(c)該発酵した酵母宿主細胞および細胞片からNAPを分離して、回収したNAP調製物を産生する工程を含む回収プロセスにおける、該発酵した酵母宿主細胞からNAPを回収する工程；ならびに
(d)疎水性相互作用クロマトグラフィーを実施する工程を含む精製プロセスにおいて、該回収したNAP調製物からNAP薬物物質を精製する工程。
【請求項２】
精製プロセスが、精製したNAP物質を最終薬物製剤（drug formulation）に導入する工程をさらに含む、請求項1記載のプロセス。
【請求項３】
NAP薬物製品（drug product）を産生するために最終薬物製剤における充填プロセスを実施する工程をさらに含む、請求項2記載のプロセス。
【請求項４】
NAPがrNAPc2/プロリンである、請求項1記載のプロセス。
【請求項５】
NAPがrNAPc2/プロリンである、請求項2記載のプロセス。
【請求項６】
宿主がピチア-パストリス(Pichia pastoris)である、請求項1記載のプロセス。
【請求項７】
発酵プロセスが、宿主細胞を望ましい細胞密度まで増殖させる種発酵プロセスおよびNAPを望ましい力価まで産生する産生発酵プロセスを含む、請求項1記載のプロセス。
【請求項８】
産生発酵プロセスが、グリセロール回分発酵、グリセロール流加発酵、メタノール適応発酵、およびメタノール誘導発酵を経時的順序で含む、請求項7記載のプロセス。
【請求項９】
メタノール適応発酵およびメタノール誘導発酵の間に、発酵のpH範囲を約2.9±0.1pH単位に制御する工程をさらに含む、請求項8記載のプロセス。
【請求項１０】
発酵の温度を制御する工程をさらに含む、請求項8記載のプロセス。
【請求項１１】
発酵のメタノール適応期の温度を、最初の約4時間、約28±2℃に維持し、メタノール適応期の残りの時間、約25±1℃に維持する工程を含む、請求項10記載のプロセス。
【請求項１２】
産生発酵が約7日間まで行われ、この間、NAP力価が増加し続ける、請求項8記載のプロセス。
【請求項１３】
回収プロセスが流動床イオン交換クロマトグラフィーを含む、請求項1記載のプロセス。
【請求項１４】
流動床イオン交換クロマトグラフィーがStreamline SP XLイオン交換樹脂流動床クロマトグラフィーを含む、請求項13記載のプロセス。
【請求項１５】
精製プロセスが、疎水性相互作用クロマトグラフィーからNAP画分を収集する工程、NAP画分の少なくとも1回の限外濾過/ダイアフィルトレーション(UF/DF)を実施してNAP溶液を提供する工程、NAP溶液のイオン交換クロマトグラフィーを実施する工程、およびイオン交換クロマトグラフィーからのNAP画分を収集する工程を含む、請求項1記載のプロセス。
【請求項１６】
イオン交換クロマトグラフィーからのNAP画分がNAP薬物物質を含む、請求項15記載のプロセス。
【請求項１７】
疎水性相互作用クロマトグラフィーが、pH約3.0±0.1でSource 15PHE疎水性相互作用クロマトグラフィー媒体を使用する工程を含む、請求項15記載のプロセス。
【請求項１８】
イオン交換クロマトグラフィーが、Source 15Qイオンクロマトグラフィー媒体を使用する工程を含む、請求項15記載のプロセス。
【請求項１９】
イオン交換クロマトグラフィーからの画分の少なくとも1回の最終UF/DFを実施する工程をさらに含む、請求項15記載のプロセス。
【請求項２０】
UF/DFが、NAP薬物物質を、NAP薬物製品を生成するための最終薬物製剤緩衝液に交換する、請求項19記載のプロセス。
【請求項２１】
充填プロセスが最終薬物製剤中のNAP薬物物質をバルク濾過する工程を含む、請求項3記載のプロセス。
【請求項２２】
剤形の状態にあるNAP薬物物質を分配してNAP薬物製品を産生する充填工程をさらに含む、請求項21記載のプロセス。
【請求項２３】
充填プロセスがNAP薬物製品を凍結乾燥する工程をさらに含む、請求項22記載のプロセス。
【請求項２４】
以下を含む、rNAPc2/プロリン薬物物質を製造するためのプロセス:
(a)rNAPc2/プロリンをコードするピチア-パストリス宿主細胞を提供する工程；
(b)宿主細胞を望ましい細胞密度まで増殖させる種発酵、ならびにグリセロール回分発酵、グリセロール流加発酵、メタノール適応発酵、およびメタノール誘導発酵を経時的順序で含む約7日間までの産生発酵プロセスを含む、発酵プロセスにおける、該宿主細胞を発酵させる工程；
(c)rNAPc2/プロリンを細胞および細胞片から分離する、イオン交換流動床クロマトグラフィーを含む回収プロセスにおける、該発酵した宿主細胞からrNAPc2/プロリンを回収する工程；ならびに
(d)疎水性相互作用クロマトグラフィー媒体を用いた疎水性相互作用クロマトグラフィーを実施する工程、rNAPc2/プロリン画分を該疎水性相互作用クロマトグラフィーから収集する工程、rNAPc2/プロリン画分の少なくとも1回の限外濾過/ダイアフィルトレーション(UF/DF)を実施してrNAPc2/プロリン溶液を提供する工程、rNAPc2/プロリン溶液のイオン交換クロマトグラフィーを実施する工程、およびイオン交換クロマトグラフィーからrNAPc2/プロリン薬物物質を含むrNAPc2/プロリン画分を収集する工程、を含む精製プロセスにおいて、分離したrNAPc2/プロリンからrNAPc2/プロリン薬物物質を精製する工程。
【請求項２５】
発酵の温度を制御する工程をさらに含む、請求項24記載のプロセス。
【請求項２６】
メタノール適応発酵の温度を、最初の約4時間、約28±2℃に維持し、メタノール適応発酵の残りの時間、約25±1℃に維持する工程を含む、請求項25記載のプロセス。
【請求項２７】
メタノール適応発酵およびメタノール誘導発酵の間、pHを約2.9±0.1に維持する工程を含む、請求項24記載のプロセス。
【請求項２８】
イオン交換クロマトグラフィーがpH約3.2±0.2でのStreamline SP XLイオン交換樹脂流動床クロマトグラフィーを実施する工程を含む、請求項24記載のプロセス。
【請求項２９】
疎水性相互作用クロマトグラフィーがpH約3.0±0.1でのSource 15PHE疎水性相互作用クロマトグラフィーを実施する工程を含む、請求項24記載のプロセス。
【請求項３０】
イオン交換クロマトグラフィーがSource 15Qイオンクロマトグラフィーを使用する工程を含む、請求項24記載のプロセス。
【請求項３１】
イオン交換クロマトグラフィーからの画分の少なくとも1回の最終UF/DFを実施する工程をさらに含む、請求項24記載のプロセス。
【請求項３２】
以下をさらに含む、請求項24記載のプロセス：
(i)精製したrNAPc2/プロリン薬物物質を最終薬物製剤に導入する工程、(ii)最終薬物製剤中のrNAPc2/プロリン薬物物質のバルク濾過を含む充填プロセスを実施する工程、および(iii)剤形の状態にあるrNAPc2/プロリンを容器に分配してrNAPc2/プロリン液体薬物製品を生成する工程を含む充填工程を実施する工程。
【請求項３３】
容器中のrNAPc2/プロリン液体薬物製品を凍結乾燥する工程をさらに含む、請求項32記載のプロセス。
【請求項３４】
請求項1のプロセスによって製造された、NAP薬物物質。
【請求項３５】
NAPがrNAPc2/プロリンである、請求項34記載のNAP薬物物質。
【請求項３６】
請求項2記載のプロセスによって製造された、NAP薬物製品。
【請求項３７】
請求項24記載のプロセスによって産生された、rNAPc2/プロリン薬物物質。
【請求項３８】
請求項32記載のプロセスによって産生された、rNAPc2/プロリン液体薬物製品。
【請求項３９】
請求項33記載のプロセスによって産生された、rNAPc2/プロリン凍結乾燥薬物製品。