【誤訳訂正書】
【提出日】平成19年5月21日(2007.5.21)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体物質処理装置であって、
外部に対して少なくとも閉じることができ、かつ、前記生体物質を受けるための内部空間を含むチャンバーを少なくとも含み、
前記チャンバーは、前記チャンバーの前記内部空間に接触した状態で配置され、かつ、電場発生に供する電極を少なくとも１つ含み、
前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）は、前記電極（３、４、２８、２９、４７、４８、５４）に配置される少なくとも１つの開口部（８、３７、５３）を含む導入ライン（７、３６、４９、５０、５２、５６、６７、７６）を少なくとも一つ含み、溶液を受けるための少なくとも１つのリザーバー（９、３２）が、壁（１７）で形成され、前記リザーバーが、前記導入ライン（７、３６、４９、５０、５２、５６、６７、７６）を介して前記内部空間（２、２６、４６、５８、６６）に接続し、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）の前記内部空間（２、２６、４６、５８、６６）および前記リザーバー（９、３２）が、外部からの機械的な衝撃により壊すことができるように設計される分離ユニット（１１）により互いに分離する生体物質処理装置。
【請求項２】
前記導入ライン（７、３６、４９、５０、５２、５６、６７、７６）が、管状に設計される請求項１記載の装置。
【請求項３】
前記導入ライン（７、３６、４９、５０、５２、５６、６７、７６）の内径が、前記電極（３、４、２８、２９、４７、４８、５４）に向かって減少する請求項１または２記載の装置。
【請求項４】
前記分離ユニット（１１）が、バルブまたは圧力を加えることにより破壊できる脆い膜である請求項１、２または３記載の装置。
【請求項５】
前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）が、外部に対して少なくとも無菌密封される請求項１から４のいずれか一項に記載の装置。
【請求項６】
前記リザーバー（９、３２）を形成する前記壁（１７）が、弾性物質または可塑性物質を含む請求項１から５のいずれか一項に記載の装置。
【請求項７】
前記リザーバー（９、３２）が、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）と接続して１つの構成要素を構成するか、または、接続部材（３０、３１）を介して前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）と接続する請求項１から６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項８】
前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）および前記リザーバー（９、３２）が、外部に対して少なくとも無菌密封されるユニットを形成する請求項７記載の装置。
【請求項９】
前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）が、少なくとも一つの壁の領域（１３、２０）を含み、前記壁の領域が、セルフシールであり、かつ、貫通可能であり、または、接続部材（３０、３１）を含む少なくとも一つの導入口を備える壁の領域である請求項１から８のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１０】
前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）が、サーペント型または螺旋状を形成する請求項１から９のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１１】
前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）が、少なくとも１つの分割部材によって数個のサブユニットに分割されている請求項１から１０のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１２】
前記分割部材が、バルブまたはフィルター（５）を含む請求項１１記載の装置。
【請求項１３】
前記容器（１２、４０）は、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）の排出用開口部（５１）と少なくとも接続可能である請求項１から１２のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１４】
前記容器（１２、４０）が、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）と接続して１つの構成要素を形成するか、または、接続部材（３０、３１）を介して前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）と接続可能である請求項１３記載の装置。
【請求項１５】
区切部材（６１、６４）が、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）と前記容器（１２、４０）との間に配置される請求項１３又は１４記載の装置。
【請求項１６】
前記区切部材（６１、６４）が、バルブまたはフィルターである請求項１５記載の装置。
【請求項１７】
前記容器（１２、４０）が、少なくとも１つの壁の領域（２０）を有し、前記壁の領域が、セルフシールであり、かつ、貫通できる壁の領域であるか、または、接続部材（３０、３１）を含む少なくとも一つの導入口を備える壁の領域である請求項１３から１６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１８】
前記容器（１２、４０）が、シリンジまたは輸液ポットである請求項１３から１７のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１９】
前記容器（１２、４０）および前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）が、外部に対して無菌密封されるユニットを形成する請求項１３から１８のいずれか一項に記載の装置。
【請求項２０】
セルフシールされ、かつ、貫通できる前記壁の領域（１２、４０）が、合成物質を含む請求項９から１９のいずれか一項に記載の装置。
【請求項２１】
前記壁の領域（１３、２０）が、ポリシロキサン、エラストマーまたはゴムを含む請求項２０記載の装置。
【請求項２２】
前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）が、前記内部空間（２、２６、４６、５８、６６）と接触して配置され、２つの向かい合って配列する電極（３、４、２８、２９、４７、４８、５４）を含むか、または、さらなる電極（３、４、２８、２９、４７、４８、５４）を、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）の内部空間（２、２６、４６、５８、６６）に導入できる請求項１から２１のいずれか一項に記載の装置。
【請求項２３】
前記電極（３、４、２８、２９、４７、４８、５４）または前記複数の電極（３、４、２８、２９、４７、４８、５４）が、導電性合成物質を含む請求項１から２２のいずれか一項に記載の装置。
【請求項２４】
前記電極（３、４、２８、２９、４７、４８、５４）または前記複数の電極（３、４、２８、２９、４７、４８、５４）が、導電性物質をドープしたプラスチック物質を含む請求項２３記載の装置。
【請求項２５】
生体物質処理方法であって、
前記生体物質を、外部に対して少なくとも閉じることができ、かつ、前記チャンバーの内部空間に接触した状態で配置され、電場発生に供する電極を少なくとも一つ含むチャンバーの内部空間に導入し、
前記生体物質を導入後、前記電極と前記チャンバーの内部空間に接触するさらなる電極とに電圧を印加することにより、前記内部空間に前記電場を発生させ、
前記電場を発生させた後、前記生体物質を、溶液によって、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）の内部空間（２、２６、４６、５８、６６）からほとんど完全に洗い流し、
前記溶液を、前記溶液を含むリザーバー（９、３２）から、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）の導入ライン（７、３６、４９、５０、５２、５６、６７、７６）を介して、少なくとも１つの電極（３、４、２８、２９、４７、４８、５４）に沿って導入し、
前記リザーバー（９、３２）は、前記導入ライン（７、３６、４９、５０、５２、５６、６７、７６）を介して前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）に接続されたリザーバーであって、
前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）の前記内部空間（２、２６、４６、５８、６６）を前記リザーバー（９、３２）から分離する分離ユニット（１１）を、外部からの機械的な衝撃により開く生体物質処理方法。
【請求項２６】
前記溶液を、加圧下で、前記電極（３、４、２８、２９、４７、４８、５４）に沿って導入する請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
前記溶液を、陰極に沿って導入する請求項２５または２６記載の方法。
【請求項２８】
前記生体物質を、セルフシールであり、かつ、貫通可能である壁の領域（１３、２０）を通じて、シリンジにより、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）の内部空間（２、２６、４６、５８、６６）内に導入する請求項２５、２６または２７記載の方法。
【請求項２９】
前記分離ユニット（１１）が、少なくとも一方向における外部からの機械的な衝撃により開くことができるバルブであるか、または、前記分離ユニット（１１）が、外部からの圧力によって破壊できる脆い膜である請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
前記生体物質および前記溶液を、それぞれ、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）の排出用開口部（５１）に少なくとも接続可能な容器（１２、４０）に導入する請求項２５から２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記溶液を含むリザーバー（９、３２）が、弾性または変形可能な壁（１７）によって少なくとも部分的に形成され、前記壁（１７）に外部から圧力を加える請求項２５から３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記生体物質を、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）と前記容器（１２、４０）との間に配置される区切部材（６１、６４）を通じて前記容器（１２、４０）内に洗い流す請求項２５から３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記区切部材（６１、６４）が、バルブまたはフィルター（５）である請求項３２記載の方法。
【請求項３４】
前記処理された生体物質を、セルフシールであり、かつ、貫通可能である壁の領域（１３、２０）を通じて前記容器（１２、４０）から除去する請求項２９から３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記生体物質が、前記電場の発生によって生物活性分子を転移させるか、又は、前記電場の発生によって生物活性分子を融合させた生体細胞、細胞誘導体、細胞よりも小さい粒子（ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ  ｐａｒｔｉｃｌｅ）又は小胞を含む請求項２５から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記生体分子を加える前に、前記生物活性分子を緩衝液に溶解させ、前記チャンバー（１、２５、４５、５５、６５、７５）の前記内部空間（２、２６、４６、５８、６６）に導入する請求項３５記載の方法。
【請求項３７】
前記生体細胞への前記生物活性分子の転移を、１２０Ａ/ｃｍ2以下の電流密度により実施するか、または、２〜１０ｋＶ＊ｃｍ-1の電界強度、かつ、１０〜２００μｓの持続時間を有する電圧パルスにより実施する請求項３５または３６記載の方法。
【請求項３８】
前記生体細胞への前記生物活性分子の転移を、継続的な前記電圧パルスに続いて、２〜１４Ａ/ｃｍ2の電流密度、および、１〜１００ｍｓの持続時間を有する電流によって実施する請求項３７記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００３】
また、強い電場、すなわち、高電流密度を有するショートパルスを一時的に印加することにより、細胞、細胞誘導体、細胞よりも小さい粒子（ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ  ｐａｒｔｉｃｌｅ）および／または小胞を融合できる。このいわゆるエレクトロフュージョンの間、まず、例えば、前記細胞の膜を、不均一な交流電場により密接に接触させる。次に、電場パルスの印加により、前記膜部分の相互作用を誘導し、最終的には細胞融合を誘導する。なお、類似の装置、例えば、エレクトロポレーションに使用する装置は、エレクトロフュージョンに使用できる。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００５】
例えば、電場における細胞処理用チャンバーとしては、生体細胞を含む懸濁液を受けるための内部空間を含み、少なくとも２つの電極が、それぞれ、前記内部空間に突き出るチャンバーが知られている（例えば、特許文献１参照）。通常、これらの電極は、前記電極間に電場を発生させるために電圧を印加する役割を果たし、前記細胞を前記電場にさらす。前記チャンバーが細胞融合に供するとしても、細胞への核酸の転移、すなわち、いわゆるエレクトロポレーションに使用してもよい。前記チャンバーの内部空間は、全ての面が密封されており、前記内部空間を囲む壁面の1つの領域は、針またはカニューレによって穴をあけることができる。すなわち、前記壁の領域は、穴をあけることができるアセチルセルロース製の薄膜を部分的に含んでいてもよい。前記細胞懸濁液を前記チャンバー内に注ぎ、この貫通可能な薄膜を通じてそこから除去できる。これは、無菌状態下で前記細胞の処理ができることから、有利である。しかしながら、前記細胞の処理後、前記チャンバーを、付随的、かつ、不十分にしか洗い流すことができないため、処理された細胞の大部分が、前記チャンバーの内部空間に常にとどまっていることになる。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１９】
本発明の特に有利な形態において、少なくとも一つの壁の領域を有するチャンバーを提供し、前記壁の領域は、セルフシールであって、かつ、穴をあける（好ましくはカニューレによって）ことができ、および/または、接続部材、好ましくはルアーロックを含む少なくとも一つの導入ラインを備える。例えば、細胞またはその他の生体物質の懸濁液を、無菌状態下で、このような壁の領域または特別な接続部材を通じて、前記チャンバーの内部空間に導入できる。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２３】
本発明の有利な形態において、前記容器は、セルフシールであり、かつ、穴をあけることが（好ましくは、カヌーレにより）できる壁の領域を少なくとも１つ含む。また、前記容器は、接続部材、好ましくはルアーロックを含む少なくとも１つの排出口を備えていてもよい。双方の形態は、前記容器から処理された生体物質の容易かつ無菌除去を可能にする。また、前記容器は、例えば、シリンジまたは輸液ポットであってもよく、例えば、臨床分野において、処理された生体物質を治療するヒトに直接投与できる。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２５】
前記チャンバーおよび/または前記容器の壁の領域であって、セルフシールであり、かつ、穴をあけることができる壁の領域は、合成物質、例えば、ポリシロキサン、エラストマーまたはゴム、若しくはプラスチック製の薄膜を含む。前記薄膜は、例えば、アセチルセルロース製であってもよい。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３２】
前記方法のさらなる形態において、前記生体物質を、セルフシールであり、かつ、穴をあけることができる壁の領域を通じて、シリンジ等により、前記チャンバーの前記内部空間に導入する。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３７】
特に臨床分野において、セルフシールであり、かつ、穴をあけることができる壁の領域を通じて、シリンジ等を用いて、前記容器から、処理された生体物質を除去する点で有効である。この結果、必須の無菌性が得られ、加えて、前記処理された物質の簡単かつ直接使用を確実にする。
前記方法のさらなる形態において、前記生体物質は、生物活性分子、好ましくは、核酸を、前記電場の発生によって転移させるか、または、前記電場の発生によって融合させる生体細胞、好ましくは真核細胞、細胞誘導体、細胞よりも小さい粒子（ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ  ｐａｒｔｉｃｌｅ）または小胞を含む。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４４】
図１ｂには、図１ａに示した本発明の装置の横方向からの斜視図を示し、前記装置は、図１ａに対して９０°回転させたものである。この図において、前記電極３は、前記内部空間２の底部領域を覆う。この図から、チャンバー１が、電極３、４の直近に位置する開口部８を有する導入ライン７を含むことが分かる。チャンバー１は、リザーバー９に連結して１つの構成要素を形成する。前記リザーバー９は、前記チャンバー１の内部空間２を洗い流すための溶液１０を含む。前記チャンバー１および前記リザーバー９は、分離ユニット１１によって互いに分離する。この分離ユニット１１は、例えば、バルブ状のロック、脆い膜であってもよい。加えて、前記チャンバー１は、容器１２に連結して１つの構成要素を形成する。前記容器１２は、前記フィルター５によって前記チャンバー１の内部空間２から分離する。前記容器１２および前記リザーバー９は、外部に対して無菌密封され、かつ、耐水性であるチャンバー１と互いにユニットを形成する。前記チャンバー１２は、さらに、穴をあけることができる壁の領域１３を含み、そこを通じて、シリンジ１５のカニューレ１４を、内部空間２に挿入してもよい。前記シリンジ１５は、例えば、生体細胞の懸濁液１６を含んでいてもよく、前記カニューレ１４を通して内部空間２に注入できる。矢印２２の方向に圧力を加えることにより、前記細胞の懸濁液を前記内部空間２に圧入し、その後の電気処理に利用できる。前記細胞は、例えば、遺伝子治療のための適当なＤＮＡでトランスフェクトさせるべき患者から採取した一次細胞であってもよい。ついで、前記電極３、４に電圧を印加することにより、前記内部空間２内に適当な電場を発生させ、前記細胞、特に前記核に直接ＤＮＡを効果的に転移できる。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４６】
図１ｄには、図１ｂに示す本発明の装置であって、前記チャンバー１の内部空間２の溶液１０により洗い流した後の装置を示す。前記装置を１８０°回転させ、前記処理された細胞を含む溶液１０は、フィルター５を通して容器１２に到達できる。この状態を図１ｅに示す。あるいは、洗い流す前に、本発明の装置をすでに１８０°回転させていてもよい。この場合、まず、重力とは反対に前記チャンバー１の内部空間２を押すために、若干高い圧力を溶液１０に加えなければならない。前記フィルター５を用いて、より大きな分子を、前記内部空間２に保持することで、前記処理された細胞の懸濁液への摂動の影響を回避できる。チャンバー１としては、また、容器１２が、貫通可能な壁の領域２０を有し、前記壁の領域を通じて、前記細胞の懸濁液を、シリンジ２１により前記容器１２外に除去できる。したがって、漏斗形状の容器１２が効果的である。なぜならば、近い将来堆積する細胞を、底部領域に集め、濃縮物として回収できるからである。その結果、処理された細胞の滅菌懸濁液を、早く、濃縮され、簡単な方法で、患者に投与できる。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５５】
１    チャンバー
２    内部空間
３    電極
４    電極
５    フィルター
６    緩衝液
７    導入ライン
８    開口部
９    リザーバー
１０  溶液
１１  分離ユニット
１２  容器
１３  壁の領域
１４  カニューレ
１５  シリンジ
１６  懸濁液
１７  壁面
１８  矢印
１９  チャンバーの壁
２０  壁の領域
２１  シリンジ
２２  矢印
２５  チャンバー
２６  内部空間
２７  懸濁液
２８  電極
２９  電極
３０  接続部材
３１  接続部材
３２  リザーバー
３３  カニューレ
３４  くぼみ
３５  溶液
３６  導入ライン
３７  開口部
３８  表面
３９  チャンバーの壁
４０  容器
４１  カニューレ
４２  くぼみ
４５  チャンバー
４６  内部空間
４７  電極
４８  電極
４９  導入ライン
５０  導入ライン
５１  排出用開口部
５２  導入ライン
５３  開口部
５４  電極
５５  チャンバー
５６  導入ライン
５７  ドレイン
５８  内部空間
５９  排水用チャネル
６０  ドレインパイプライン
６１  区切部材
６２  チャネル
６３  チャネル
６４  区切部材
６５  チャンバー
６６  内部空間
６７  導入ライン
６８  ドレインパイプライン
７５  チャンバー
７６  導入ライン
７７  ドレインパイプライン