【手続補正書】
【提出日】平成18年12月13日(2006.12.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
鉄化合物に基づく酸性磁性粒子（ｐ）を含む組成物であって、前記酸性磁性粒子（ｐ）は、式Ｉ
Ｘ−Ｌ−ＣＨ（ＰＯ３Ｈ２）２  （Ｉ）
（式中：
・Ｌは、Ｘ基をｇｅｍ−ビスホスホネート基−ＣＨ（ＰＯ３Ｈ２）２に接続する有機基を表し；
・Ｘは、バイオベクターと反応可能な化学基を表し；前記粒子の前記Ｘ基のすべてまたはいくつかはバイオベクターに場合により結合されている）
の１つもしくはそれ以上のｇｅｍ−ビスホスホネート化合物によって錯体形成している、上記組成物。
【請求項２】
前記Ｘ基のすべてまたはいくつかはバイオベクターに結合されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
Ｌは、脂肪族；脂環式；芳香族；脂環−脂肪族；芳香族−脂肪族基（前記基は、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、アセトキシ、アミド基または塩素、ヨウ素もしくは臭素原子によって置換されることが場合により可能である）；あるいは基−Ｌ１−ＮＨＣＯ−Ｌ２（式中、Ｌ１およびＬ２は同一であるか、または異なるものであり、脂肪族；脂環式；芳香族；脂環−脂肪族もしくは芳香族−脂肪族基を表し、前記基は、メチル、ヒドロキシル、メトキシ、アセトキシ、アミド基または塩素、ヨウ素もしくは臭素原子によって置換されることが場合により可能である）から選択される、請求項１あるいは２に記載の組成物。
【請求項４】
Ｌは、場合により置換されるフェニレン基を表し、前記Ｘおよびｇｅｍ−ビスホスホネート基はオルト、メタまたはパラ位であることが可能である、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記基Ｌは脂肪族基を表す、請求項３に記載の組成物。
【請求項６】
前記基Ｌは基−（ＣＨ２）ｐ（式中、ｐは１〜５の整数である）を表す、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記基ＬはＬ１−ＣＯＮＨ−Ｌ２を表し、Ｌ１およびＬ２は請求項３に規定される通りである、請求項３に記載の組成物。
【請求項８】
Ｌは基−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯＮＨ−（ＣＨ２）ｎ（式中、ｍおよびｎは０〜５の整数を表す）を表す、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
Ｘは−ＣＯＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＣＳ、−ＮＨ−ＮＨ２、−ＣＨＯ、マレイミジル、アルキルピロカルボニル、アシルアジジル、イミノカルボネート、ビニルスルフリル、ピリジルジスルフリル、ハロアセチル、ジクロロトリアジニルおよびハロゲンから選択される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
Ｘは−ＣＯＯＨまたは−ＮＨ２を表す、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
式（Ｉ）の前記化合物のすべてまたはいくつかは、以下の式（Ｉａ）：
ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）２−ＣＨ（ＰＯ３Ｈ２）２  （Ｉａ）
を有する、請求項６あるいは１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記粒子（ｐ）は、平均して、それらのプロトン化された部位の少なくとも９０％において、式（Ｉ）の化合物によって錯体形成する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記プロトン化された部位は、異なる構造を有する式（Ｉ）の少なくとも２つのｇｅｍ−ビスホスホネート化合物によって錯体形成する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記プロトン化された部位は、同一な構造を有する式（Ｉ）の少なくとも２つの化合物によって錯体形成する、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記磁性粒子（ｐ）のすべてまたはいくつかは水酸化鉄、水酸化鉄水和物、フェライト、混合型鉄酸化物またはそれらの混合物よりなる、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記磁性粒子（ｐ）のすべてまたはいくつかはフェライトよりなる、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記フェライトはマグヘマイトもしくはマグネタイトまたはそれらの混合物である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記粒子（ｐ）は超常磁性である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
式（Ｉ）の化合物の前記Ｘ基の１〜７０％、好ましくは１〜５０％はバイオベクターに結合されている、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
式（Ｉ）の化合物の前記Ｘ基は少なくとも２つの異なるバイオベクターに結合されている、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
前記バイオベクターは、（場合により組換えもしくは変異された）タンパク質、糖タンパク質、レクチン、ビオチン、ビタミン、リン脂質、葉酸誘導体、抗体または抗体フラグメント、ペプチドおよびその誘導体、単糖または多糖、アビジン、ストレプトアビジン、受容体基質または阻害剤、ステロイドおよびその類似体、オリゴヌクレオチド、リボ核酸配列、デオキシリボ核酸配列、ホルモンまたはホルモン様物質、アミノ酸および誘導体、薬理学的活性を有する有機分子、アミノアルコール、インテグリン標的化剤およびＭＭＰ標的化剤から選択される、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２２】
前記バイオベクターはペプチド誘導体、好ましくはインテグリン標的化剤あるいはＭＭＰ標的化剤を表す、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記バイオベクターは抗葉酸または葉酸誘導体を表す、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２４】
前記バイオベクターはリン脂質誘導体、特にホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルイノシトールもしくはスフィンゴミエリンの誘導体またはセラミド誘導体を表す、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２５】
前記バイオベクターは（場合により組換えもしくは変異された）タンパク質を表す、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２６】
前記バイオベクターは、場合により官能化されている抗体または抗体フラグメントを表す、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２７】
前記バイオベクターは、場合により官能化されたファーマコフォアを表す、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２８】
前記バイオベクターは、式（ＩＩ）
【化１】
2006513198.tif 000001
（式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なるものであり、好ましくは６〜１０個のヒドロキシル基、あるいはＲ１および／またはＲ２が酸素原子によって中断される場合、４〜８個のヒドロキシル基によって置換される、２〜６個の炭素原子を含む脂肪族炭化水素鎖を表す）
のアミノアルコールから選択される、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２９】
前記バイオベクターはアミノポリエチレングリコールから選択される、請求項２１に記載の組成物。
【請求項３０】
Ｒ１は基−（ＣＨ２）−（ＣＨＯＨ）４−ＣＨ２ＯＨまたは−（ＣＨ２）−ＣＨＯＨ−ＣＨ２ＯＨを表し、Ｒ２は基−ＣＨ２−（ＣＨＯＨ）４−ＣＨ２ＯＨを表す、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３１】
−ＣＯＮＨ−、−ＣＯＯ−、−ＮＨＣＯ−、−ＯＣＯ、−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ−、−Ｃ−Ｓ−、−Ｎ−ＮＨ−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＨ−Ｎ−、−ＣＨ２−ＮＨ−、−Ｎ−ＣＨ２−、−Ｎ−ＣＳ−Ｎ−、−ＣＯ−ＣＨ２−Ｓ−、−Ｎ−ＣＯ−ＣＨ２−Ｓ−、−Ｎ−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ、−ＣＨ＝ＮＨ−ＮＨ−、−ＮＨ−ＮＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝Ｎ−Ｏ−または−Ｏ−Ｎ＝ＣＨ−、およびまた以下の式
【化２】
2006513198.tif 000002
のタイプの前記Ｘ基は、前記バイオベクターと共有結合を形成する、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３２】
錯体形成し、前記バイオベクターに結合された前記粒子は、５ｎｍ〜２００ｎｍの流体力学的直径を有する、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３３】
前記組成物における前記粒子（ｐ）の濃度は、金属イオンの全モル数で表現して２μｍｏｌＬ−１〜４ｍｏｌＬ−１である、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３４】
１つもしくはそれ以上の薬学的に許容可能なビヒクルおよび／または添加物を含む、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３５】
無菌的である、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
請求項１〜３５のいずれか一項に記載の組成物の調製方法であって、
（ｉ）鉄化合物に基づく酸性磁性粒子（ｐ）の酸性溶液を、十分量の請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物と接触させ、得られた錯体形成した粒子を回収すること；
適切である場合
（ｉｉ）前記磁性粒子（ｐ）の表面で錯体形成した式（Ｉ）の前記化合物の前記Ｘ基のすべてまたはいくつをバイオベクターと結合させること、
よりなる連続工程を含む、上記方法。
【請求項３７】
工程（ｉ）において使用される前記磁性粒子（ｐ）は：
ａ）酸性磁性流体のコロイド溶液を調製すること；
ｂ）工程ａ）において得られる溶液を硝酸溶液で処置すること；
ｃ）工程ｂ）において得られる凝集体を単離すること；および
ｄ）解膠を行うこと、
よりなる工程を含む方法に従って得られる、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
適切に許容可能なビヒクルと任意に組み合わされた請求項１〜３５のいずれか一項に記載の組成物を含む、磁気共鳴画像のための造影生成物。
【請求項３９】
磁気共鳴画像に有用な造影生成物の製造のための請求項１〜３５のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【請求項４０】
核医学に有用な造影生成物の製造のための請求項１〜３５のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【請求項４１】
前記バイオベクターは、循環器系疾患、癌もしくは免疫および変性疾患などの病理の診断またはモニタリングに有用な造影生成物の製造のための生物学的受容体に特異的なリガンドである、請求項２〜３５のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【請求項４２】
前記バイオベクターは、混合物内における前記バイオベクターに対する標的を有する組成物と前記標的を有さない組成物とをインビトロで識別および／または分別するための、生物学的受容体に特異的なリガンドである、請求項２〜３５のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【請求項４３】
前記磁性粒子（ｐ）の前記バイオベクターは、薬理学的および／または細胞障害性特性を有し、前記バイオベクターは、標的化された領域における高周波電界の作用下で遊離させることが可能である、請求項２〜３５のいずれか１項に記載のバイオベクターに結合された磁性粒子の使用。
【請求項４４】
前記バイオベクターは、病理学的領域の温熱療法による処置のための生物学的受容体に特異的なリガンドである、請求項２〜３５のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【請求項４５】
細胞を標識するための、特に幹細胞を標識するための請求項２〜３５のいずれか１項に記載の組成物の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
これらの組成物では、粒子に対する化合物（Ｉ）の錯体形成の割合は７０％より高く、好ましくは、８０、９０、９５％より高く、本説明における表現「錯体形成の割合」は、好ましくは、酸性磁性粒子（ｐ）上に存在するプロトン化された部位の量に関連する式（Ｉ）の化合物の量を指す。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６４】
１つの特に好適な実施態様に従えば、Ｌは、置換または非置換脂肪族基、より好ましくは、基−（ＣＨ２）ｐ−（式中、ｐは１〜５の整数である）を表す。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６５】
別の好適な実施態様に従えば、Ｌは、基Ｌ１−ＣＯＮＨ−Ｌ２、より好ましくは、基−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−（式中、ｎおよびｍは０〜５の整数を表す）を表す。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８４】
従って、ベクトル化された粒子は、以下のように記載される：
（分岐）ｒ−酸性粒子  （ＩＩＩ）
（式中、ｒは、粒子あたりのグラフトされた分岐の数を表し、分岐は：
［（（バイオベクター）−Ｌ３）ｓ−Ｌ−ＣＨ（ＰＯ３Ｈ２）２］により規定され、Ｌ３は、場合により、ホモ二官能またはヘテロ二官能試薬を介して、式（Ｉ）の化合物のＸ基およびバイオベクターの結合から生じる上記で規定された共有結合であり；ｓは、Ｘ基あたりの結合したバイオベクターの数を表し、特に、１、２または３に等しくあり得る）。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８６】
多くの受容体／リガンドアフィニティー対が存在し、規定された本発明は、当業者によって、抗体／抗原、レクチン／多糖、ビオチン／アビジンまたは核酸（＋および−鎖）対などの標的受容体とのアフィニティー対を形成することが可能な多様なリガンドに容易に適用することができ、リガンドは、共有結合を介して、式（Ｉ）の化合物のＸ末端に対して直接的に、または二官能試薬を介して間接的に、のいずれかで結合することができることが理解される。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９８】
アミノポリエチレングリコールのうち、同一または異なるＲ１およびＲ２がＨ、アルキル基または式−ＣＨ２−（ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２）ｋ−ＣＨ２ＯＲ３（式中、ｋは２〜１００の範囲である）のポリエチレングリコール鎖を表し、Ｒ３はＨ、アルキルまたは−（ＣＯ）アルキから選択される式（ＩＩ）の化合物が特に好適であり、用語「アルキル」または「アルキ」は、鎖中に約１〜６個の炭素原子を有する線状または分岐脂肪族炭化水素基を示す。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１５】
より正確には、血栓に関して、活性型血小板上のＧｐＩＩｂ／ＩＩＩａ糖タンパク質の改善が実証されている。血小板は、アテローム性動脈硬化症および血栓症の方法において中軸的役割を果たす骨髄巨核球の無核フラグメントである。最も一般的に使用される従来の抗血小板医薬製品は、アスピリン、チクロピジンおよびクロピドグレルである。血小板凝集を生じる分子機構に関する知識から、血小板受容体フィブリノゲン、インテグリンＧｐＩＩｂ／ＩＩＩａに対して指向された新規のファミリーの分子を開発することが可能である。上記のアンタゴニストと比較した主要な利点は、血小板の活性化の経路には依存せずに、血小板活性化の最終工程が遮断されることである。血小板−血小板相互作用は血栓の形成に極めて重要であるため、（血小板の間で架橋を形成する）フィブリノゲンのＧｐＩＩｂ／ＩＩＩａ複合体への結合は止血および血栓症において重要な事象である。血小板が活性化される場合、血小板膜の表面にあるＧｐＩＩｂ／ＩＩＩａ糖タンパク質受容体は、それらの空間的コンホメーションの修飾を経験し、次いで、血漿に可溶なフィブリノゲンの分子、およびカルシウムに結合することができる。フィブリノゲンは、血球が捕らえられるネットワークを形成するＣａ２＋−フィブリノゲン結合を介して、血小板の間で連結される。トロンビンは、フィブリノゲンをフィブリンに変換することによって、この網の網の目を締め付ける。この凝集は、損傷を受けた領域の血栓の形成をもたらす。従って、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体上のリガンド相互作用部位を同定するために、多くの研究が行われている。ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ複合体は、血小板における重要な膜結合へテロ二量体糖タンパク質複合体（血小板あたり約５００００コピー）である。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１８】
ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ複合体は、血小板へのフィブロネクチン、フィブリノゲン、フォン・ヴィレブランド因子およびビトロネクチンの結合を阻害するこの配列を認識する。これらのすべてのリガンドは少なくとも１つのＲＧＤ配列を含有する一方；フィブリノゲンは半分子当たりそれらの２つを含有する。血漿におけるその高濃度のため、インビボで、フィブリノゲンは主要なリガンドである。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２２】
Ｂ）腫瘍学分野
本発明によって得られる特異的画像化は、１つの実施態様に従えば、既知の技術では得られない新血管形成、腫瘍細胞の特異的標的化または細胞外マトリクスの変更を入手、標識することを目的とする。腫瘍の発達に関連する多様な生物学的系（または機構）は、本発明に従う造影または治療薬剤の好適な標的である：葉酸受容体に結合することが可能な化合物に関与する系、ＭＭＰに関与する系、血管形成に関与する成長因子に関与する系が該当する。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３２】
所定の内皮増殖因子は腫瘍特異的であることが示されている。管内壁を構成する内皮細胞は、正常な成体において増殖する天然の傾向を示さない。一方、病理学的状況では、例えば、腫瘍の発達または転移の形成中に、酸素および栄養供給の必要性が、局所への誘引によって、増加するように変化する。従って、腫瘍は、それらの利益のために、新たな管ネットワークを誘導する（血管形成として既知の方法）。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３３】
血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）は、強力かつ選択的な血管形成増殖因子である。該因子は、大きなＲＴＫ（チロシン−キナーゼ受容体）ファミリーに属する細胞外膜上の少なくとも３つの受容体：ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）、ＶＥＧＦＲ−２（Ｆｌｋ−１／ＫＤＲ）およびＮＰ−１を刺激することによって、作用する。ＶＥＧＦ受容体は大きなＲＴＫ（チロシンキナーゼ受容体）ファミリーに属する。インテグリンファミリーのこれらのタンパク質は、リガンド、膜貫通ドメインおよびチロシンキナーゼ活性を担持する細胞質領域を有する。ＶＥＧＦＲの場合、キナーゼドメインは、それぞれの受容体に特異的な短い配列によって中断される。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６４】
２）血管形成阻害剤、特に臨床治験または既に市販されている阻害剤、具体的には：
・ＳＵ１０１、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＺＤ４１９０、ＰＴＫ７８７、ＺＫ２２５８４６、アザ環式化合物などのＦＧＦＲまたはＶＥＧＦＲ受容体に関与する血管形成阻害剤（国際公開第００／２４４１５６号パンフレット、国際公開第０２／０５９１１０号パンフレット）；
・ＢＢ２５−１６（マリマスタット）、ＡＧ３３４０（プリノマスタット）、ソリマスタット、ＢＡＹ１２−９５６６、ＢＭＳ２７５２９１、メタスタット、ネオバスタットなどのＭＭＰに関与する血管形成阻害剤；
・ＳＭ２５６、ＳＧ５４５、ＥＣ−ＥＣＭ遮断付着分子などのインテグリンに関与する血管形成阻害剤（ＥＭＤ  １２１−９７４、またはバイタクシン）；
・カルボキシアミドトリアゾール、ＴＮＰ４７０、スクアラミン、ＺＤ０１０１などの抗血管形成作用のより間接的な機構を伴う医薬製品；
・書面国際公開第９９／４０９４７号パンフレットに記載の阻害剤、ＫＤＲ受容体に対する結合に極めて選択的なモノクローナル抗体、ソマトスタチン類似体（国際公開第９４／００４８９号パンフレット）、セレクチン結合ペプチド（国際公開第９４／０５２６９号パンフレット）、増殖因子（ＶＥＧＦ、ＥＧＦ、ＰＤＧＦ、ＴＮＦ、ＭＣＳＦ、インターロイキン）；Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９９９，２０に記載のＶＥＧＦ標的化バイオベクター；
・書面国際公開第０２／０６６５１２号パンフレットの阻害ペプチド。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３６２】
鉄力価＝０．２７９Ｍ／Ｌ  ＰＣＳサイズ＝４０．３ｎｍ  ポリσ＝０．１９
Ｆｅ＝６３．９％質量／質量
Ｐ＝１．３８％質量／質量
Ｃ＝１．０７％質量／質量
グラフト化の程度［化合物Ａ／Ｆｅ］＝１．９５％モル／モル