(57)【要約】  それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌との関連が示されるＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療、及び／又は改善するための化合物、組成物、及び方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、    【化１】2019528290.tif 000058  ［式中、Ｒ１、Ｇ、Ｒ１０、及びＲ１１は、本明細書で定義される。］を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる、化合物、組成物、及び方法が開示される。
2019528290.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌との関連が示されるＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療及び／又は改善する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−ベンズアミド（化合物８０）、
【化１】
2019528290.tif 000057
又はその医薬的に許容される塩形態を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、いずれも本明細書に参照によって援用するところの２０１０年９月３０日出願の米国仮特許出願第６１／３８８，４５７号、２０１０年４月２８日出願の同第６１／３２９，０２３号、２０１０年２月１６日出願の同第６１／３０５，０８２号の利益を主張する、２０１１年２月１６日出願の国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０２５１０６号の国内段階である、米国特許第９，１０８，９４４号として付与された、２０１２年８月３０日出願の米国特許出願第１３／５７９，００９号を参照によって援用するものである。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、それを必要とする対象において、去勢抵抗性前立腺癌との関連が示されたＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療及び／又は改善するための、本明細書に定義される式（Ｉ）の化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
前立腺癌は、男性における最も一般的な非皮膚悪性腫瘍であり、西側諸国における男性の癌死因の第２位となっている（Ｊｅｍａｌ  Ａ，Ｓｉｅｇｅｌ  Ｒ，Ｘｕ  Ｊ，Ｗａｒｄ  Ｅ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  ２０１０；６０：２７７〜３００）。男性器である前立腺の発達は、アンドロゲン、ＡＲ、及びアンドロゲン依存性遺伝子の生成物により多大な調節を受けている。前立腺癌の進行の全段階を通じて、疾患はアンドロゲンに依存し続ける。ＡＲアンタゴニストなどの抗アンドロゲン剤は、アンドロゲンの作用に対する腫瘍の依存性を逆転させるために治療的に使用されている（Ｓｃｈｅｒ  Ｈ，Ｓａｗｙｅｒｓ  Ｃ．Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ，ｃａｓｔｒａｔｉｏｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ：ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ａｎｄｒｏｇｅｎ−ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ａｘｉｓ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ２００５；２３：８２５３〜８２６１；Ｔｒａｎ  Ｃ，Ｏｕｋ  Ｓ，Ｃｌｅｇｇ  Ｎ，Ｃｈｅｎ  Ｙ，Ｗａｔｓｏｎ  Ｐ，Ａｒｏｒａ  Ｖ，ｅｔ  ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  ｓｅｃｏｎｄ−ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｔｉａｎｄｒｏｇｅｎ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００９；３２４：７８７〜７９０；Ｓｃｈｅｒ  Ｈ，Ｆｉｚａｚｉ  Ｋ，Ｓａａｄ  Ｆ，Ｔａｐｌｉｎ  Ｍ，Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ  Ｃ，Ｍｉｌｌｅｒ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｗｉｔｈ  ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ  ｉｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ａｆｔｅｒ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１２；３６７：１１８７〜１１９７）。残念ながら、例えばＭＤＶ−３１００（エンザルタミド、Ｘｔａｎｄｉ（登録商標））のような効力の強い第２世代のＡＲアンタゴニストさえも、その有効性は、多くの患者において持続期間が短い。
【０００４】
ＡＲアンタゴニストは、腫瘍細胞シグナリングの主要な節点を標的とすることにより、患者治療を大きく変えた。けれども、様々な癌適応に対する他の分子標的癌治療と同じように、治療標的の変異による後天耐性が発生するのは、珍しいことではない。慢性骨髄性白血病患者のイマチニブ治療で、ＡＢＬキナーゼ変異により白血病細胞がイマチニブ耐性をもってしまうのは、そのよい例である。以来、変異を回避し、このような状況において活性を有するように複数の次世代ＡＢＬ阻害剤が開発されてきた（Ｇｏｒｒｅ  Ｍ，Ｍｏｈａｍｍｅｄ  Ｍ，Ｅｌｌｗｏｏｄ  Ｋ，Ｈｓｕ  Ｎ，Ｐａｑｕｅｔｔｅ  Ｒ，Ｒａｏ  Ｐ，Ｓａｗｙｅｒｓ  Ｃ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ＳＴＩ−５７１  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  ＢＣＲＡＢＬ  ｇｅｎｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｏｒ  ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００１；２９３：８７６〜８０；Ｏ’Ｈａｒｅ  Ｔ，Ｄｅｉｎｉｎｇｅｒ  ＭＷ，Ｅｉｄｅ  ＣＡ，Ｃｌａｃｋｓｏｎ  Ｔ，Ｄｒｕｋｅｒ  ＢＪ．Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ＢＣＲ−ＡＢＬ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  ｔｈｅｒａｐｙ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｌｅｕｋｅｍｉａ．Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２０１１．１７：２１２〜２１）。
【０００５】
重要なこととして、第２世代及び第３世代のＡＲ阻害薬の活性は、その疾患が、調節緩和されたドライバに対して「中毒状態」になっていることを示唆している。このことにより、別個の耐性状態において、同じドライバオンコジーンを標的とする逐次治療のパラダイムが生まれ、本明細書において、ＡＲと、ＡＲシグナリングの系統依存性とを標的とすることにつながっている。
【０００６】
受容体の乱雑化をもたらすＡＲ変異体と、これら抗アンドロゲン剤がアゴニスト作用を呈する能力は、少なくとも部分的にこの現象の要因となっているだろう。例えば、ヒドロキシフルタミド及びビカルタミドはそれぞれ、Ｔ８７７Ａ及びＷ７４１Ｌ／Ｗ７４１ＣのＡＲ変異体におけるＡＲアゴニストとして作用する。
【０００７】
ＡＲの過剰発現により去勢抵抗性が生じた前立腺癌細胞の状況では、例えばビカルタミドなどの特定の抗アンドロゲン化合物は、アンタゴニスト／アゴニストの混在プロファイルを有することが示されている（Ｔｒａｎ  Ｃ，Ｏｕｋ  Ｓ，Ｃｌｅｇｇ  Ｎ，Ｃｈｅｎ  Ｙ，Ｗａｔｓｏｎ  Ｐ，Ａｒｏｒａ  Ｖ，ｅｔ  ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  ｓｅｃｏｎｄ−ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｔｉａｎｄｒｏｇｅｎ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００９；３２４：７８７〜７９０）。このアゴニスト活性は、ＡＲアンタゴニストの投与を受けている男性の約３０％で治療を中止したときに血清ＰＳＡが減少する抗アンドロゲン離脱症候群と呼ばれる臨床所見を説明するのに役立つ。（Ｓｃｈｅｒ，Ｈ．Ｉ．ａｎｄ  Ｋｅｌｌｙ，Ｗ．Ｋ．，Ｊ  Ｕｒｏｌ  １９９３  Ｍａｒ；１４９（３）：６０７〜９）。抗アンドロゲン剤離脱後に前立腺特異抗原が減少する。これがフルタミド離脱症候群である。
【０００８】
数多くのエビデンスにより、去勢抵抗性前立腺癌（ＣＲＰＣ）はＡＲシグナル伝達の再活性化によってＡＲシグナル伝達に依存し続けることが示されている（Ｙｕａｎ  Ｘ，Ｂａｌｋ  Ｓ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｍｅｄｉａｔｉｎｇ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｒｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ａｆｔｅｒ  ｃａｓｔｒａｔｉｏｎ．Ｕｒｏｌ  Ｏｎｃｏｌ  ２００９；２７：３６〜４１；Ｌｉｎｊａ  Ｍ，Ｓａｖｉｎａｉｎｅｎ  Ｋ，Ｓａｒａｍａｋｉ  Ｏ，Ｔａｍｍｅｌａ  Ｔ，Ｖｅｓｓｅｌｌａ  Ｒ，Ｖｉｓａｋｏｒｐｉ  Ｔ．Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｇｅｎｅ  ｉｎ  ｈｏｒｍｏｎｅ−ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２００１，６１：３５５０〜５；Ｃｈｅｎ  Ｃ，Ｗｅｌｓｂｉｅ  Ｄ，Ｔｒａｎ  Ｃ，Ｂａｅｋ  Ｓ，Ｃｈｅｎ  Ｒ，Ｖｅｓｓｅｌｌａ  Ｒ，Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄ  Ｍ，Ｓａｗｙｅｒｓ  Ｃ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ  ｏｆ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ａｎｔｉａｎｄｒｏｇｅｎ  ｔｈｅｒａｐｙ．Ｎａｔ  Ｍｅｄ  ２００４，１０（１）：３３〜９）。ＡＲのリガンド結合ドメイン（ｌｉｇａｎｄ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｄｏｍａｉｎ、ＬＢＤ）における点突然変異は抵抗性の１０〜２０％を占め、抗アンドロゲン薬による受容体の阻害ではなく受容体活性化を特徴とする（Ｂｅｌｔｒａｎ  Ｈ，Ｙｅｌｅｎｓｋｙ  Ｒ，Ｆｒａｍｐｔｏｎ  Ｇ，Ｐａｒｋ  Ｋ，Ｄｏｗｎｉｎｇ  Ｓ，ＭａｃＤｏｎａｌｄ  Ｔ，ｅｔ  ａｌ．Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｎｅｘｔ−ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ  ｏｆ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔｓ  ａｎｄ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ．Ｅｕｒ  Ｕｒｏｌ  ２０１３；６３（５）：９２０〜６；Ｂｅｒｇｅｒａｔ  Ｊ，Ｃｅｒａｌｉｎｅ  Ｊ．Ｐｌｅｉｏｔｒｏｐｉｃ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｍｕｔａｎｔｓ  ｉｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．Ｈｕｍ  Ｍｕｔａｔ  ２００９；３０（２）：１４５〜５７）。これらの突然変異の多くはリガンド特異性の幅を広くし、一部のものはＡＲアンタゴニストを変異受容体のアゴニストに変換することにより抵抗性を与える（Ｖｅｌｄｓｃｈｏｌｔｅ  Ｊ，Ｒｉｓ−Ｓｔａｌｐｅｒｓ  Ｃ，Ｋｕｉｐｅｒ  ＧＧ，Ｊｅｎｓｔｅｒ  Ｇ，Ｂｅｒｒｅｖｏｅｔｓ  Ｃ，Ｃｌａａｓｓｅｎ  Ｅ，ｖａｎ  Ｒｏｏｉｊ  ＨＣ，Ｔｒａｐｍａｎ  Ｊ，Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ  ＡＯ，Ｍｕｌｄｅｒ  Ｅ．Ａ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｌｉｇａｎｄ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｄｏｍａｉｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ＬＮＣａＰ  ｃｅｌｌｓ  ａｆｆｅｃｔｓ  ｓｔｅｒｏｉｄ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ  ａｎｄ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ａｎｔｉ−ａｎｄｒｏｇｅｎｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．１９９０；１７３：５３４〜４０；Ｈａａｐａｌａ  Ｋ，Ｈｙｙｔｉｎｅｎ  Ｅ，Ｒｏｉｈａ  Ｍ，Ｌａｕｒｉｌａ  Ｍ，Ｒａｎｔａｌａ  Ｉ，Ｈｅｌｉｎ  Ｈ，Ｋｏｉｖｉｓｔｏ  Ｐ．Ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｒｅｌａｐｓｅｄ  ｄｕｒｉｎｇ  ａ  ｃｏｍｂｉｎｅｄ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｂｙ  ｏｒｃｈｉｅｃｔｏｍｙ  ａｎｄ  ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ．Ｌａｂ  Ｉｎｖｅｓｔ  ２００１；８１（１２）：１６４７〜１６５１；Ｈａｒａ  Ｔ，Ｍｉｙａｚａｋｉ  Ｊ，Ａｒａｋｉ  Ｈ，Ｙａｍａｏｋａ  Ｍ，Ｋａｎｚａｋｉ  Ｎ，Ｋｕｓａｋａ  Ｍ，Ｍｉｙａｍｏｔｏ  Ｍ．Ｎｏｖｅｌ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ａ  ｐｏｓｓｉｂｌｅ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ  ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２００３；６３（１）：１４９〜１５３）。
【０００９】
１つの突然変異、すなわちＡＲの８７６位のフェニルアラニンのロイシンへの変異（Ｆ８７６Ｌ）が、前臨床モデルにおいて、またＡＲＮ−５０９による治療を行っている患者においてＭＤＶ−３１００及びＡＲＮ−５０９に応答して生じることが近年示されている（Ｃｌｅｇｇ  Ｎ，Ｗｏｎｇｖｉｐａｔ  Ｊ，Ｊｏｓｅｐｈ  Ｊ，Ｔｒａｎ  Ｃ，Ｏｕｋ  Ｓ，Ｄｉｌｈａｓ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．ＡＲＮ−５０９：ａ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｔｉａｎｄｒｏｇｅｎ  ｆｏｒ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２０１２；７２（６）：１４９４〜５０３；Ｂａｌｂａｓ  Ｍ，Ｅｖａｎｓ  Ｍ，Ｈｏｓｆｉｅｌｄ  Ｄ，Ｗｏｎｇｖｉｐａｔ  Ｊ，Ａｒｏｒａ  Ｖ，Ｗａｔｓｏｎ  Ｐ，ｅｔ  ａｌ．Ｏｖｅｒｃｏｍｉｎｇ  ｍｕｔａｔｉｏｎ−ｂａｓｅｄ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ａｎｔｉａｎｄｒｏｇｅｎｓ  ｗｉｔｈ  ｒａｔｉｏｎａｌ  ｄｒｕｇ  ｄｅｓｉｇｎ．Ｅｌｉｆｅ  ２０１３．２：ｅ００４９９；Ｋｏｒｐａｌ  Ｍ，Ｋｏｒｎ  Ｊ，Ｇａｏ  Ｘ，Ｒａｋｉｅｃ  Ｄ，Ｒｕｄｄｙ  Ｄ，Ｄｏｓｈｉ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．Ａｎ  Ｆ８７６Ｌ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｃｏｎｆｅｒｓ  ｇｅｎｅｔｉｃ  ａｎｄ  ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ＭＤＶ３１００（ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ）．Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ  ２０１３；３９：１０３０〜１０４３；Ｊｏｓｅｐｈ  ＪＤ，Ｌｕ  Ｎ，Ｑｉａｎ  Ｊ，Ｓｅｎｓｉｎｔａｆｆａｒ  Ｊ，Ｓｈａｏ  Ｇ，Ｂｒｉｇｈａｍ  Ｄ，Ｍｏｏｎ  Ｍ，Ｍａｎｅｖａｌ  ＥＣ，Ｃｈｅｎ  Ｉ，Ｄａｒｉｍｏｎｔ  Ｂ，Ｈａｇｅｒ  ＪＨ．Ａ  ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  ｒｅｌｅｖａｎｔ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｃｏｎｆｅｒｓ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ｓｅｃｏｎｄ−ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｔｉａｎｄｒｏｇｅｎｓ  ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ  ａｎｄ  ＡＲＮ−５０９．Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ  ２０１３；３：１０２０〜１０２９）。
【００１０】
ＡＲ  Ｆ８７６Ｌは、ＭＤＶ−３１００及びＡＲＮ−５０９に対して抵抗性を付与する。包括的な生物学的研究により、この変異を有する前立腺癌細胞は、いずれかの化合物で治療された場合にも、成長し続けたことが示された。インビトロのレポーターアッセイにより抵抗性が確認され、両方の化合物のアゴニスト転換、及びＡＲ  Ｆ８７６Ｌを発現するよう遺伝子操作された腫瘍において、いずれの化合物も腫瘍の成長を制御しなかったことが示されている。更に、ＡＲ  Ｆ８７６Ｌ変異体は、ＡＲＮ−５０９治療を受けた進行性ＣＲＰＣ患者において検出されている。この変異は、評価対象となった長期的分析を受けた患者２９人のうち３人において、血漿ＤＮＡ中に検出された。この３人の患者は全員が、薬剤投与中に前立腺特異抗原（ＰＳＡ）が増加した（すなわち、疾患の進行を示す）１８人の中に含まれていた（Ｊｏｓｅｐｈ  ２０１３）。
【００１１】
ＭＤＶ−３１００に結合した野生型（ＷＴ）及びＦ８７６Ｌ変異ＡＲの構造モデリングにより、螺旋１１及び１２が特異的に置換されていることが示された。Ｆ８７６Ｌ変異体におけるＡＲのＬＢＤ内で、螺旋１２はＷＴ  ＡＲ内にあり、よってＭＤＶ−３１００により置換されておらず、これによってＭＤＶ３１００はアゴニストとして機能することができる。本明細書に記述される化合物は、第２世代化合物が活性をもたない場合にも、アンタゴニスト（第３世代）として作用するよう設計されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
したがって、本発明の目的は、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物を治療有効量用いて、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌との関連が示されるＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療及び／又は改善する方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌との関連が示されるＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療及び／又は改善する方法であって、それを必要とする対象に、治療的有効量の式（Ｉ）の化合物、
【００１４】
【化１】
2019528290.tif 000003
又はそのエナンチオマー、ジアステレオマー、若しくは医薬的に許容される塩形態を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる、方法を目的とし、
式中、
Ｒ１は、メチル、ジフルオロメチル、又はトリフルオロメチルであり；
Ｇは、非置換１Ｈ−インダゾール−５−イル、非置換イソキノリン−７−イル、非置換ピリジン−３−イル、非置換ナフチル、及びフェニル置換基ｇ１からなる群から選択され；
【００１５】
【化２】
2019528290.tif 000004
［式中、
Ｒ３は、水素、フルオロ、メチル、トリフルオロメトキシ、ヒドロキシメチル、フェニルオキシ、メトキシ、又はシアノから選択され；
Ｒ５は、Ｒ３及びＲ５のうちの少なくとも１個が水素であるような、水素、フルオロ、又はメトキシであり；
Ｒ４は、水素、シアノ、フルオロ、ヒドロキシ、メトキシ、メチル、トリフルオロメチル、メチルアミノスルホニル、トリフルオロメトキシ、ピロリジン−１−イルカルボニル、ピペラジン−１−イル、（４−メチル）ピペラジン−１−イル（Ｃ１〜３）アルキル、テトラヒドロピラン−４−イル、並びにｉ）〜ｖ）の置換基からなる群から選択される；
ｉ）−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＲＡ）；（式中、ＲＡは、水素；Ｃ１〜６アルキル；２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル；シクロペンチルメチル；３−ヒドロキシプロピル；シアノメチル；メトキシ（Ｃ２〜３）アルキル；３−（シクロペンチル（Ｎ−メチル）アミノ）プロピル；エトキシカルボニル（Ｃ１〜３）アルキル；３−（ピロリジン−１−イル）プロピル；モルホリン−４−イル（Ｃ２〜３）アルキル；４−メチルピペラジン−１−イル（Ｃ２〜３）アルキル；３−（２−オキソピロリジン−１−イル）プロピル；チエニルメチル；チアゾール−２−イル；２−メチルピラゾール−３−イル；フラニル（Ｃ０〜３）アルキル（当該フラニルは、所望により、メチル置換基で置換されていてもよい）；フェニル（Ｃ０〜３）アルキル（当該フェニルは、所望により、クロロ又はフルオロ置換基で置換されていてもよい）；ピリジニル（Ｃ０〜２）アルキル（当該ピリジニルは、所望により、メチル又はフルオロ置換基で置換されていてもよい）；ピラジン−２−イルメチル；（１−メチル）ピペリジン−４−イル；及びテトラヒドロピラン−４−イル（Ｃ０〜１）アルキル
から選択される置換基である）；
ｉｉ）
【００１６】
【化３】
2019528290.tif 000005
（式中、Ｗは、ＮＨ、Ｎ（メチル）、Ｎ（エチル）、Ｎ（２−ヒドロキシエチル）、Ｎ（ＳＯ２ＣＨ３）、Ｓ、Ｏ、又はＳＯ２から選択される）；
ｉｉｉ）−Ｏ（Ｃ２〜３）アルキル−Ｒｂ（式中、Ｒｂは、メトキシ、ピペラジン−１−イル、４−メチルピペラジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、ピリジン−２−イル、ピリミジン−２−イル、及びピロリジン−１−イルからなる群から選択される末端置換基である）；
ｉｖ）−ＯＲｃ（式中、Ｒｃは、フェニル、ピリジン−２−イル、ピリミジン−２−イル、ピリミジン−５−イル、又は
ピリミジン−４−イルである）；
及び
ｖ）ピリミジン−５−イル、フラニル、及びピリジン−３−イルからなる群から選択されるヘテロアリール（当該ピリジン−３−イルは、所望により、メチル又はフルオロ置換基で置換されていてもよく；当該フラニルは、所望により、メチル置換基で置換されていてもよい））；」〕
Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ、メチル置換基であるか；又はＲ１０とＲ１１は共にシクロブチル又はシクロペンチル環を形成する。
【００１７】
本発明は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、疾患、症候群、状態、又は障害を治療する及び／又は改善するための、本明細書に定義される式（Ｉ）の化合物の使用であって、当該疾患、症候群、状態、又は障害が、前立腺癌、去勢抵抗性前立腺癌、及び転移性去勢抵抗性前立腺癌など、１種以上のアンドロゲン受容体の拮抗作用によって影響を受ける、使用を目的とする。
【００１８】
また、本発明は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、疾患、症候群、状態、又は障害を治療する及び／又は改善するための、医薬的に許容される担体、医薬的に許容される賦形剤、及び／又は医薬的に許容される希釈剤、並びに式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩形態を含む、それらからなる、及び／又はそれらから本質的になる医薬組成物の使用であって、当該疾患、症候群、状態、又は障害が、前立腺癌、去勢抵抗性前立腺癌、及び転移性去勢抵抗性前立腺癌など、１種以上のアンドロゲン受容体の拮抗作用によって影響を受ける、使用を目的とする。
【００１９】
また、本発明は、医薬の調製における本明細書に記載される化合物のいずれかの使用であって、当該医薬が、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象における疾患、症候群、状態、又は障害を治療する及び／又は改善するために調製され、当該疾患、症候群、状態、又は障害が、前立腺癌、去勢抵抗性前立腺癌、及び転移性去勢抵抗性前立腺癌など、１種以上のアンドロゲン受容体の拮抗作用によって影響を受ける、使用を目的とする。
【００２０】
本発明の例示は、治療有効量の本発明に記載される化合物又は医薬組成物のいずれかを、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した対象に投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる、前立腺癌、去勢抵抗性前立腺癌、及び転移性去勢抵抗性前立腺癌からなる群から選択される１種以上のアンドロゲン受容体によって媒介される疾患、症候群、状態、又は障害を治療する方法である。
【００２１】
別の実施形態では、本発明は、前立腺癌、去勢抵抗性前立腺癌、及び転移性去勢抵抗性前立腺癌からなる群から選択される、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した患者における、１種以上のアンドロゲン受容体の拮抗作用によって影響を受ける疾患、症候群、状態、又は障害の治療及び／又は改善において使用するための式（Ｉ）の化合物を目的とする。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
置換基に関連して用いられる「独立して」という用語は、２個以上の置換基が存在し得る場合に、それらの置換基が互いに同じであっても異なってもよい状況を意味する。
【００２３】
単独で用いられるか又は置換基の一部として用いられるかによらず、「アルキル」という用語は、１〜８個の炭素原子を有する、直鎖状及び分岐鎖状の炭素鎖を意味する。したがって、指定された炭素原子の数（例えば、Ｃ１〜８）は、独立して、アルキル部分又はより大きなアルキル含有置換基のアルキル部の炭素原子数を意味する。複数のアルキル基を有する置換基、例えば、（Ｃ１〜６アルキル）２アミノ−において、ジアルキルアミノのＣ１〜６アルキル基は、同じであっても異なってもよい。
【００２４】
「アルコキシ」という用語は、「アルキル」という用語を上記で定義されるものとして−Ｏ−アルキル基を意味する。
【００２５】
「アルケニル」及び「アルキニル」という用語は、２〜８個の炭素原子数を有する、直鎖状及び分岐鎖状の炭素鎖を意味し、アルケニル鎖は、少なくとも１つの二重結合を含み、アルキニル鎖は、少なくとも１つの三重結合を含む。
【００２６】
「シクロアルキル」という用語は、飽和又は部分的に飽和の、単環式又は多環式の、３〜１４個の炭素原子の炭化水素環を意味する。このような環の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、及びアダマンチルが挙げられる。
【００２７】
「ヘテロシクリル」という用語は、少なくとも１つの炭素原子とＮ、Ｏ及びＳから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子とを含む３〜１０個の環員を有する非芳香族の単環又は二環系を意味する。ヘテロシクリルという用語の範囲には、１〜２員がＮである５〜７員の非芳香族環、又は０、１若しくは２員がＮであり、２員以下がＯ若しくはＳであり、少なくとも１員がＮ、Ｏ若しくはＳのいずれかでなければならない５〜７員の非芳香族環が含まれ、環は、所望により、０〜１個の不飽和結合を含んでいてよく、かつ、環が６又は７員である場合、所望により、２個以下の不飽和結合を含んでいてよい。ヘテロシクリルの環を構成する炭素原子は、完全に飽和していても部分的に飽和していてもよい。「ヘテロシクリル」という用語はまた、架橋されることで二環式環を形成する２個の５員の単環式ヘテロシクロアルキル基も含む。このような基は、完全に芳香族性とはみなされず、ヘテロアリール基とは称されない。ヘテロシクリルが二環式の場合、ヘテロシクリルの両環は、非芳香環であり、かつ、少なくとも一方の環はヘテロ原子の環員を含む。ヘテロシクリル基の例としては、限定するものではないが、ピロリニル（２Ｈ−ピロール、２−ピロリニル又は３−ピロリニルを含む）、ピロリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、及びピペラジニルが挙げられる。特に断らない限り、ヘテロシクリルは、そのペンダント基と、安定な構造をもたらす任意のヘテロ原子又は炭素原子で結合している。
【００２８】
「アリール」という用語は、６〜１０個の炭素員からなる、不飽和、芳香族性の単環又は二環式環を意味する。アリール環の例としては、フェニル及びナフタレニルが挙げられる。「ヘテロアリール」という用語は、炭素原子及びＮ、Ｏ及びＳからなる群から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含む５〜１０個の環員を有する芳香族性の単環式又は二環式の芳香環系を指す。ヘテロアリールという用語の範囲には、５又は６員の芳香環が含まれ、ただし環は炭素原子からなり、少なくとも１つのヘテロ原子の環員を有する。適切なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄が挙げられる。５員環の場合、ヘテロアリール環は、好ましくは、１員の窒素、酸素又は硫黄を含み、更に３個以下の更なる窒素を含む。６員環の場合、ヘテロアリール環は、好ましくは１〜３個の窒素原子を含む。６員環が３個の窒素原子を有する場合では、最大で２個の窒素原子が隣り合う。ヘテロアリール基の例としては、フリル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、インドリル、イソインドリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾトリアゾリル、キノリニル、イソキノリニル及びキナゾリニルが挙げられる。特に断らない限り、ヘテロアリールは、そのペンダント基と、安定な構造をもたらす任意のヘテロ原子又は炭素原子で結合している。
【００２９】
「ハロゲン」又は「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素原子を指す。
【００３０】
「カルボキシ」という用語は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ基を指す。
【００３１】
「ホルミル」という用語は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ基を指す。
【００３２】
「オキソ」又は「オキシド」という用語は、（＝Ｏ）基を指す。
【００３３】
「アルキル」若しくは「アリール」という用語又はこれらの接頭辞の語根のいずれかが、置換基の名称中に現れる場合（例えば、アリールアルキル、アルキルアミノ）、名称は、「アルキル」及び「アリール」について上記に与えられた限定を含むものとして解釈されるものとする。指定される炭素原子数（例えば、Ｃ１〜Ｃ６）は、アルキル部分、アリール部分、又は、アルキルがその接頭辞の語根として現れる、より大きな置換基のアルキル部分の炭素原子数を独立して指す。アルキル及びアルコキシ置換基について、指定される炭素原子数は、指定された所定の範囲内に含まれる全ての独立した構成員を含む。例えば、Ｃ１〜６アルキルには、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル及びヘキシルを個々に含むだけでなく、それらの下位の組み合わせ（例えば、Ｃ１〜２、Ｃ１〜３、Ｃ１〜４、Ｃ１〜５、Ｃ２〜６、Ｃ３〜６、Ｃ４〜６、Ｃ５〜６、Ｃ２〜５など）も含まれる。
【００３４】
一般的に、本開示全体で使用される標準的な命名法の規則の下では、指定される側鎖の末端部分が最初に記載され、続けて結合点の方向に隣接する官能基が記載される。したがって、例えば、「Ｃ１〜Ｃ６アルキルカルボニル」置換基は下式の基：
【００３５】
【化４】
2019528290.tif 000006
を意味する。
【００３６】
立体中心における「Ｒ」という標識は、当該技術分野で定義されているように、その立体中心が純粋にＲ配置であることを示す。同様に、「Ｓ」という標識は、立体中心が純粋にＳ配置であることを意味する。本明細書で使用する場合、立体中心における「＊Ｒ」又は「＊Ｓ」という表示は、その立体中心が純粋なものであるが、絶対配置は不明であることを示すのに使用される。本明細書で使用する場合、「ＲＳ」という標識は、Ｒ配置とＳ配置の混合物として存在する立体中心を意味する。
【００３７】
１個の立体中心を有する化合物であって、立体化学的結合の指定なしで図示されているものは、２つのエナンチオマーの混合物である。２個の立体中心を有する化合物であって、両方とも立体化学的結合の指定なしで図示されているものは、４つのジアステレオマーの混合物である。両方とも「ＲＳ」で標識された２個の立体中心を有する化合物であって、立体化学的結合の指定を付して図示されているものは、図示されている相対的な立体化学を有する２つのエナンチオマーの混合物である。両方とも「＊ＲＳ」で標識された２個の立体中心を有し、立体化学的結合の指定を付して図示されている化合物は、単一であるが不明な相対立体化学を有する２つのエナンチオマーの混合物である。
【００３８】
立体化学的結合の指定なしで図示されている標識されていない立体中心は、Ｒ配置とＳ配置との混合である。立体化学的結合の指定を付して図示されている標識されていない立体中心は、その相対的及び絶対的な立体化学は図示されたとおりのものである。
【００３９】
特に断らない限り、分子内の特定の位置における任意の置換基又はその変形物の定義は、その分子内の他の位置におけるその定義とは独立であることが意図されている。本発明の化合物における置換基及び置換パターンは、化学的に安定であり、かつ当技術分野において周知の技術及び本明細書で説明される方法により容易に合成できる化合物を提供するために、当業者が選択することができると理解される。
【００４０】
「対象」という用語は、治療、観察又は試験の対象となっている動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを指す。
【００４１】
「治療有効量」という用語は、治療される疾患、症候群、状態又は障害の症状の緩和若しくは部分的緩和を含む、研究者、獣医、医師、又は他の臨床専門家が得ようとする生物学的又は医薬的応答を組織系、動物又はヒトにおいて誘発する、本発明の化合物を含む活性化合物又は医薬品の量を指す。
【００４２】
「組成物」という用語は、時に治療有効量の特定の成分を含む医薬生成物、並びに特定の量の特定の成分の組み合わせから直接又は間接的にもたらされる任意の生成物を意味する。
【００４３】
本明細書で使用する場合、「アンドロゲン受容体」という用語は、野生型アンドロゲン受容体、並びに去勢抵抗性前立腺癌に関連するＡＲ変異受容体を含むことが意図されている。
【００４４】
「ＡＲ媒介性」という用語は、アンドロゲン受容体の欠乏時に起こり得るが、アンドロゲン受容体の存在時にも起こる可能性があるような、疾患、症候群、状態、又は障害を指す。好適な例としては、前立腺癌、去勢抵抗性前立腺癌、及び転移性去勢抵抗性前立腺癌が挙げられるがこれらに限定されない。
【００４５】
「アンドロゲン依存性疾患」という用語は、アンドロゲン刺激の低減により利益が得られ得る任意の疾患を指し、アンドロゲン刺激に依存する病理学的状態を含む。「アンドロゲン依存性疾患」は、テストステロン又はその他の男性ホルモンの過剰な蓄積、アンドロゲンに対するアンドロゲン受容体の感受性増大、又はアンドロゲン刺激による転写の増大により、引き起こされる可能性がある。「アンドロゲン依存性疾患」の例としては、前立腺癌、並びに、例えば、座瘡、脂漏症、多毛症、脱毛症、及び化膿性汗腺炎などの疾患が挙げられる。
【００４６】
本明細書で使用するとき、用語「抗アンドロゲン剤」は、体内の正常な反応を示す組織に対するアンドロゲンの生物学的作用を、妨害、つまり阻害することができるホルモン受容体アンタゴニスト化合物の群を指す。いくつかの実施形態において、抗アンドロゲン剤は小分子である。いくつかの実施形態において、抗アンドロゲン剤はＡＲアンタゴニストである。いくつかの実施形態において、抗アンドロゲン剤はＡＲ完全アンタゴニストである。いくつかの実施形態において、抗アンドロゲン剤は第１世代抗アンドロゲン剤である。いくつかの実施形態において、抗アンドロゲン剤は第２世代抗アンドロゲン剤である。いくつかの実施形態において、抗アンドロゲン剤は第３世代抗アンドロゲン剤である。
【００４７】
本明細書で使用するとき、用語「ＡＲアンタゴニスト」又は「ＡＲ阻害薬」は互換的に使用され、ＡＲポリペプチドの少なくとも１つの活性を阻害する、つまり低下させる薬剤を指す。代表的なＡＲ活性としては、活性化補助因子結合、ＤＮＡ結合、リガンド結合、又は核移行が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４８】
本明細書で使用するとき、「完全アンタゴニスト」は、有効濃度において、ＡＲポリペプチドの活性を本質的に完全に阻害するアンタゴニストを指す。本明細書で使用するとき、「部分アンタゴニスト」は、ＡＲポリペプチドの活性を部分的に阻害可能であるが、最高濃度においても完全アンタゴニストではないアンタゴニストを指す。「本質的に完全に」とは、ＡＲポリペプチドの活性の少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又はそれ以上の阻害を意味する。
【００４９】
本明細書で使用するとき、「第１世代抗アンドロゲン剤」という用語は、野生型ＡＲポリペプチドに対してアンタゴニスト活性を呈する薬剤を指す。ただし、第１世代抗アンドロゲン剤は去勢抵抗性前立腺癌（ＣＲＰＣ）において潜在的にアゴニストとして作用し得るというという点で、第１世代抗アンドロゲン剤は第２世代抗アンドロゲン剤とは異なる。
【００５０】
例示的な第１世代抗アンドロゲン剤としては、フルタミド、ニルタミド、及びビカルタミドが挙げられるがこれらに限定されない。
【００５１】
本明細書で使用するとき、「第２世代抗アンドロゲン剤」という用語は、野生型ＡＲポリペプチドに対して完全アンタゴニスト活性を呈する薬剤を指す。第２世代抗アンドロゲン剤は、ＡＲの発現レベルが増加している細胞（例えば、去勢抵抗性前立腺癌（ＣＲＰＣ）など）において完全アンタゴニストとして作用するという点で、第２世代抗アンドロゲン剤は第１世代抗アンドロゲン剤とは異なる。例示的な第２世代抗アンドロゲン剤としては、４−［７−（６−シアノ−５−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）−８−オキソ−６−チオキソ−５，７−ジアザスピロ［３．４］オクト−５−ｙｌ］−２−フルオロ−Ｎメチルベンズアミド（ＡＲＮ−５０９としても知られる；ＣＡＳ番号９５６１０４−４０−８）；４−（３−（４−シアノ−３−（トリフルオロメチル）フェニル）−５，５−ジメチル−４−オキソ−２−チオキソイミダゾリジン−ｌ−イル）−２−フルオロ−Ｎ−メチルベンズアミド（ＭＤＶ３１００又はエンザルタミドとしても知られる；ＣＡＳ番号：９１５０８７−３３−１）及びＲＤ１６２（ＣＡＳ番号９１５０８７−２７−３）が挙げられる。いくつかの実施形態において、第２世代抗アンドロゲン剤は、ＡＲポリペプチドのリガンド結合部位で、又はその付近でＡＲポリペプチドに結合する。
【００５２】
本明細書で使用するとき、「第３世代抗アンドロゲン剤」という用語は、下記に述べるように、野生型ＡＲポリペプチドと、ＡＲポリペプチドのリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）内に生じる変異を備えたＡＲポリペプチドの変異型とに対する、完全アンタゴニスト活性を呈する薬剤を指す。第３世代抗アンドロゲン剤は、ＡＲの発現レベルが増加している細胞（例えば、去勢抵抗性前立腺癌（ＣＲＰＣ）など）において完全アンタゴニストとして作用するという点で、第３世代抗アンドロゲン剤は第１世代抗アンドロゲン剤との違いを維持している。
【００５３】
本明細書で使用するとき、用語「変異体」は、（基準に比べて）改変された核酸又はポリペプチド、あるいは、そのような改変された核酸又はポリペプチドを含むか若しくは発現している細胞又は生体を指す。
【００５４】
本明細書で使用される場合、特に断らない限り、（ＡＲの拮抗作用により影響を受けた疾患、症候群、状態又は障害に言及する場合の）「影響する」又は「影響される」という用語は、当該疾患、症候群、状態又は障害の１つ以上の症状又は所見の頻度及び／又は重症度の低下を含み、並びに／又は、当該疾患、症候群、状態若しくは障害の１つ以上の症状若しくは所見の進行の予防、又は、疾患、状態、症候群又は障害の進行の予防を含む。
【００５５】
本発明の化合物は、１つ又は２つ以上のＡＲ受容体の拮抗作用により影響される疾患、症候群、状態状又は障害を治療又は改善するための方法に有用である。このような方法は、このような治療、改善及び／又は予防を必要としている、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した動物、哺乳類、及びヒトを含む対象に、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、又はそのエナンチオマー、ジアステレオマー、溶媒和物、若しくは医薬的に許容される塩を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる。
【００５６】
本発明の一実施形態は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した動物、哺乳類、及びヒトを含む対象において、アンドロゲン受容体依存性又はアンドロゲン受容体媒介性の疾患又は状態を治療する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物を対象に投与することを含む方法を目的とする。
【００５７】
別の一実施形態において、アンドロゲン受容体依存性又はアンドロゲン受容体媒介性の疾患又は状態は、良性前立腺過形成、多毛症、座瘡、前立腺の腺腫及び新生物、アンドロゲン受容体を含む良性又は悪性腫瘍細胞、過剰多毛症、脂漏症、子宮内膜症、多嚢胞性卵巣症候群、アンドロゲン性脱毛症、性腺機能低下症、骨粗鬆症、精子形成の抑制、性欲、悪液質、食欲不振、加齢に伴うテストステロン量の減少に対するアンドロゲン補充、前立腺癌、乳癌、子宮体癌、子宮癌、のぼせ、及びケネディ病、筋委縮及び筋力低下、皮膚萎縮、骨量減少、貧血症、動脈硬化症、心血管疾患、エネルギーの減少、健康状態の損失、２型糖尿病、又は腹部脂肪蓄積から選択される。
【００５８】
具体的には、式（Ｉ）の化合物又はそのエナンチオマー、ジアステレオマー、溶媒和物若しくは医薬的に許容される塩形態は、例えば前立腺癌、去勢抵抗性前立腺癌、及び転移性去勢抵抗性前立腺癌などの、疾患、症候群、状態又は障害を治療する又は改善するのに有用である。
【００５９】
より具体的には、式（Ｉ）の化合物、又はそのエナンチオマー、ジアステレオマー、溶媒和物、若しくは医薬的に許容される塩は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した対象に、治療有効量の本明細書に定義される式（Ｉ）の化合物、又はそのエナンチオマー、ジアステレオマー、溶媒和物、若しくは医薬的に許容される塩形態を投与することを含む、前立腺癌、去勢抵抗性前立腺癌、及び転移性去勢抵抗性前立腺癌の治療又は改善に有用である。
【００６０】
一実施形態では、本発明は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌との関連が示されるＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療及び／又は改善する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、
【００６１】
【化５】
2019528290.tif 000007
又はそのエナンチオマー、ジアステレオマー、若しくは医薬的に許容される塩形態を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから実質的になる方法に関し、
式中、
ＡＡ）Ｒ１は、メチル又はトリフルオロメチルであり；
ＢＢ）Ｇは、非置換イソキノリン−７−イル、非置換ピリジン−３−イル、非置換ナフチル、及びフェニル置換基ｇ１からなる群から選択され；
【００６２】
【化６】
2019528290.tif 000008
［式中、
Ｒ３は、水素、フルオロ、メチル、フェニルオキシ、又はメトキシから選択され；
Ｒ５は、水素であり；
Ｒ４は、水素、ヒドロキシ、メトキシ、メチル、メチルアミノスルホニル、トリフルオロメトキシ、ピロリジン−１−イルカルボニル、ピペラジン−１−イル、（４−メチル）ピペラジン−１−イル（Ｃ１〜３）アルキル、並びにｉ）〜ｖ）の置換基からなる群から選択される；ｉ）−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＲＡ）；（式中、ＲＡは、Ｃ１〜６アルキル；２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル；シクロペンチルメチル；３−ヒドロキシプロピル；メトキシ（Ｃ２〜３）アルキル；３−（シクロペンチル（Ｎ−メチル）アミノ）プロピル；エトキシカルボニル（Ｃ１〜３）アルキル；モルホリン−４−イル（Ｃ２〜３）アルキル；３−（２−オキソピロリジン−１−イル）プロピル；チエニルメチル；チアゾール−２−イル；２−メチルピラゾール−３−イル；フラニル（Ｃ０〜３）アルキル（当該フラニルは、所望により、メチル置換基で置換されていてもよい）；フェニル（Ｃ０〜３）アルキル（当該フェニルは、所望により、クロロ又はフルオロ置換基で置換されていてもよい）；非置換ピリジニル（Ｃ０〜２）アルキル；ピラジン−２−イルメチル；及びテトラヒドロピラン−４−イル（Ｃ０〜１）アルキルからなる群から選択される置換基である）；
ｉｉ）
【００６３】
【化７】
2019528290.tif 000009
（式中、Ｗは、ＮＨ、Ｎ（メチル）、Ｎ（エチル）、Ｎ（２−ヒドロキシエチル）、Ｓ、又はＳＯ２から選択される）；
ｉｉｉ）−Ｏ（Ｃ２〜３）アルキル−Ｒｂ（式中、Ｒｂは、４−メチルピペラジン−１−イル、ピリミジン−２−イル、ピリジン−２−イル、及びピロリジン−１−イルからなる群から選択される末端置換基である）；
ｉｖ）−ＯＲｃ（式中、Ｒｃは、ピリミジン−４−イルである）；
及び
ｖ）フラニル及びピリジン３−イルからなる群から選択されるヘテロアリール（当該フラニルは、所望により、メチル置換基で置換されていてもよい）；〕
ＣＣ）Ｇは、非置換イソキノリン−７−イル、非置換ピリジン−３−イル、非置換ナフチル、及びフェニル置換基ｇ１からなる群から選択され；
【００６４】
【化８】
2019528290.tif 000010
［式中、
Ｒ３は、フルオロ、メチル、又はフェニルオキシから選択され；
Ｒ５は、水素であり；
Ｒ４は、メチル、メチルアミノスルホニル、トリフルオロメトキシ、ピペラジン−１−イル、（４−メチル）ピペラジン−１−イル（Ｃ１〜３）アルキル、並びにｉ）〜ｉｖ）の置換基からなる群から選択される；
ｉ）−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＲＡ）；（式中、ＲＡは、Ｃ１〜６アルキル；２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル；シクロペンチルメチル；３−ヒドロキシプロピル；メトキシ（Ｃ２〜３）アルキル；エトキシカルボニル（Ｃ１〜３）アルキル；モルホリン−４−イル（Ｃ２〜３）アルキル；３−（２−オキソピロリジン−１−イル）プロピル；チエニルメチル；２−メチルピラゾール−３−イル；フラニル（Ｃ０〜３）アルキル（当該フラニルは、所望により、メチル置換基で置換されていてもよい）；フェニル（Ｃ０〜３）アルキル（当該フェニルは、所望により、フルオロ置換基で置換されていてもよい）；非置換ピリジニル（Ｃ０〜２）アルキル；及びテトラヒドロピラン−４−イル（Ｃ０〜１）アルキル
からなる群から選択される置換基である）；
ｉｉ）
【００６５】
【化９】
2019528290.tif 000011
（式中、Ｗは、ＮＨ、Ｎ（メチル）、Ｓ、又はＳＯ２から選択される）；
ｉｉｉ）−Ｏ（Ｃ２〜３）アルキル−Ｒｂ（式中、Ｒｂは、４−メチルピペラジン−１−イル及びピリジン−２−イルからなる群から選択される末端置換基である）；
及び
ｉｖ）ピリジン−３−イル）；］
ＤＤ）Ｇは、非置換イソキノリン−７−イル、非置換ピリジン−３−イル、又はフェニル置換基ｇ１からなる群から選択され；
【００６６】
【化１０】
2019528290.tif 000012
［式中、
Ｒ３は、水素、フルオロ、又はメチルから選択され；
Ｒ５は、水素であり；
Ｒ４は、ピペラジン−１−イル、及びｉ）〜ｉｖ）の置換基からなる群から選択される；
ｉ）−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＲＡ）；（式中、ＲＡは、非置換ピリジニル（Ｃ０〜２）アルキル及びテトラヒドロピラン−４−イル（Ｃ０〜１）アルキルからなる群から選択される置換基である）；
ｉｉ）
【００６７】
【化１１】
2019528290.tif 000013
（式中、Ｗは、Ｎ（メチル）、Ｓ、又はＳＯ２から選択される）；
ｉｉｉ）−Ｏ（Ｃ２〜３）アルキル−Ｒｂ（式中、Ｒｂは、４−メチルピペラジン−１−イルである）；
及び
ｉｖ）ピリジン−３−イルであるヘテロアリール）；］
ＥＥ）Ｒ４は、２−（ピリジン−２−イル）エチルアミノカルボニル、２−（ピリジン−４−イル）エチルアミノカルボニル、テトラヒドロチオピラン−４−イルオキシ、メチルアミノカルボニル、（２−フルオロフェニル）アミノカルボニル、２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシ、ピペリジン−１−イル、（１，１−ジオキソチアン−４−イル）オキシ、（１−メチル−ピペリジン−４−イル）オキシ、テトラヒドロピラン−４−イルメチルアミノカルボニル、及びテトラヒドロピラン−４−イルアミノカルボニルからなる群から選択され；
ＦＦ）Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ、メチル置換基であるか；又はＲ１０及びＲ１１は、共にシクロブチル環を形成する；
並びに上記実施形態ＡＡ）〜ＦＦ）の任意の組み合わせであるが、ただし、同じ置換基の異なる実施形態を組み合わせた組み合わせは除外されるものと理解される。
【００６８】
一実施形態では、本発明は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌に関連するＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療する及び／又は改善する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、
【００６９】
【化１２】
2019528290.tif 000014
又はそのエナンチオマー、ジアステレオマー、若しくは医薬的に許容される塩形態を、投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる、方法を目的とし、
式中、
Ｒ１は、メチル、ジフルオロメチル、又はトリフルオロメチルであり；
Ｇは、非置換イソキノリン−７−イル、非置換ピリジン−３−イル、非置換ナフチル、及びフェニル置換基ｇ１からなる群から選択され；
【００７０】
【化１３】
2019528290.tif 000015
［式中、
Ｒ３は、水素、フルオロ、メチル、フェニルオキシ、又はメトキシから選択され；
Ｒ５は、水素であり；
Ｒ４は、水素、ヒドロキシ、メトキシ、メチル、メチルアミノスルホニル、トリフルオロメトキシ、ピロリジン−１−イルカルボニル、ピペラジン−１−イル、（４−メチル）ピペラジン−１−イル（Ｃ１〜３）アルキル、並びにｉ）〜ｖ）の置換基からなる群から選択される；
ｉ）−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＲＡ）；（式中、ＲＡは、Ｃ１〜６アルキル；２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル；シクロペンチルメチル；３−ヒドロキシプロピル；メトキシ（Ｃ２〜３）アルキル；３−（シクロペンチル（Ｎ−メチル）アミノ）プロピル；エトキシカルボニル（Ｃ１〜３）アルキル；モルホリン−４−イル（Ｃ２〜３）アルキル；３−（２−オキソピロリジン−１−イル）プロピル；チエニルメチル；チアゾール−２−イル；２−メチルピラゾール−３−イル；フラニル（Ｃ０〜３）アルキル（当該フラニルは、所望により、メチル置換基で置換されていてもよい）；フェニル（Ｃ０〜３）アルキル（当該フェニルは、所望により、クロロ又はフルオロ置換基で置換されていてもよい）；非置換ピリジニル（Ｃ０〜２）アルキル；ピラジン−２−イルメチル；及びテトラヒドロピラン−４−イル（Ｃ０〜１）アルキルからなる群から選択される置換基である）；
ｉｉ）
【００７１】
【化１４】
2019528290.tif 000016
（式中、Ｗは、ＮＨ、Ｎ（メチル）、Ｎ（エチル）、Ｎ（２−ヒドロキシエチル）、Ｓ、又はＳＯ２から選択される）；
ｉｉｉ）−Ｏ（Ｃ２〜３）アルキル−Ｒｂ（式中、Ｒｂは、４−メチルピペラジン−１−イル、ピリミジン−２−イル、ピリジン−２−イル、及びピロリジン−１−イルからなる群から選択される末端置換基である）；
ｉｖ）−ＯＲｃ（式中、Ｒｃは、ピリミジン−４−イルである）；
及び
ｖ）フラニル及びピリジン３−イルからなる群から選択されるヘテロアリール（当該フラニルは、所望により、メチル置換基で置換されていてもよい）；］
Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ、メチル置換基であるか；又はＲ１０とＲ１１は共にシクロブチル又はシクロペンチル環を形成する。
【００７２】
一実施形態では、本発明は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌に関連するＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療する及び／又は改善する方法であって、それを必要とする対象に、治療的に有効な量の式（Ｉ）の化合物、
【００７３】
【化１５】
2019528290.tif 000017
又はそのエナンチオマー、ジアステレオマー、若しくは医薬的に許容される塩形態を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる、方法を目的とし、
式中、
Ｒ１は、メチル、ジフルオロメチル、又はトリフルオロメチルであり；
Ｇは、非置換イソキノリン−７−イル、非置換ピリジン−３−イル、非置換ナフチル、及びフェニル置換基ｇ１からなる群から選択され；
【００７４】
【化１６】
2019528290.tif 000018
［式中、
Ｒ３は、フルオロ、メチル、又はフェニルオキシから選択され；
Ｒ５は、水素であり；
Ｒ４は、メチル、メチルアミノスルホニル、トリフルオロメトキシ、ピペラジン−１−イル、（４−メチル）ピペラジン−１−イル（Ｃ１〜３）アルキル、並びにｉ）〜ｉｖ）の置換基からなる群から選択される；
ｉ）−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＲＡ）；（式中、ＲＡは、Ｃ１〜６アルキル；２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル；シクロペンチルメチル；３−ヒドロキシプロピル；メトキシ（Ｃ２〜３）アルキル；エトキシカルボニル（Ｃ１〜３）アルキル；モルホリン−４−イル（Ｃ２〜３）アルキル；３−（２−オキソピロリジン−１−イル）プロピル；チエニルメチル；２−メチルピラゾール−３−イル；フラニル（Ｃ０〜３）アルキル（当該フラニルは、所望により、メチル置換基で置換されていてもよい）；フェニル（Ｃ０〜３）アルキル（当該フェニルは、所望により、フルオロ置換基で置換されていてもよい）；非置換ピリジニル（Ｃ０〜２）アルキル；及びテトラヒドロピラン−４−イル（Ｃ０〜１）アルキル
からなる群から選択される置換基である）；
ｉｉ）
【００７５】
【化１７】
2019528290.tif 000019
（式中、Ｗは、ＮＨ、Ｎ（メチル）、Ｓ、又はＳＯ２から選択される）；
ｉｉｉ）−Ｏ（Ｃ２〜３）アルキル−Ｒｂ（式中、Ｒｂは、４−メチルピペラジン−１−イル及びピリジン−２−イルからなる群から選択される末端置換基である）；
及び
ｉｖ）ピリジン−３−イル）；］
Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ、メチル置換基であるか；又はＲ１０とＲ１１は共にシクロブチル又はシクロペンチル環を形成する。
【００７６】
一実施形態では、本発明は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌に関連するＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療する及び／又は改善する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、
【００７７】
【化１８】
2019528290.tif 000020
又はそのエナンチオマー、ジアステレオマー、若しくは医薬的に許容される塩形態を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる、方法を目的とし、
式中、
Ｒ１は、メチル又はトリフルオロメチルであり；
Ｇは、非置換イソキノリン−７−イル、非置換ピリジン−３−イル、及び置換基ｇ１からなる群から選択され；
【００７８】
【化１９】
2019528290.tif 000021
［式中、
Ｒ３は、水素、フルオロ、又はメチルから選択され；
Ｒ５は、水素であり；
Ｒ４は、ピペラジン−１−イル、及びｉ）〜ｉｖ）の置換基からなる群から選択される；
ｉ）−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＲＡ）；（式中、ＲＡは、非置換ピリジニル（Ｃ０〜２）アルキル及びテトラヒドロピラン−４−イル（Ｃ０〜１）アルキルからなる群から選択される置換基である）；
ｉｉ）
【００７９】
【化２０】
2019528290.tif 000022
（式中、Ｗは、Ｎ（メチル）、Ｓ、又はＳＯ２から選択される）；
ｉｉｉ）−Ｏ（Ｃ２〜３）アルキル−Ｒｂ（式中、Ｒｂは、４−メチルピペラジン−１−イルである）；
及び
ｉｖ）ピリジン−３−イル）；〕
Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ、メチル置換基であるか；又はＲ１０及びＲ１１は、共にシクロブチル環を形成する。
【００８０】
一実施形態では、本発明は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌に関連するＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療する及び／又は改善する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、
【００８１】
【化２１】
2019528290.tif 000023
又はそのエナンチオマー、ジアステレオマー、若しくは医薬的に許容される塩形態を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる、方法を目的とし、
式中、
Ｒ１は、メチル又はトリフルオロメチルであり；
Ｇは、非置換ピリジン３−イル、非置換イソキノリン−７−イル、及び置換基ｇ１からなる群から選択され；
【００８２】
【化２２】
2019528290.tif 000024
［式中、
Ｒ３は、水素、フルオロ、又はメチルから選択され；
Ｒ５は、水素であり；
Ｒ４は、２−（ピリジン−２−イル）エチルアミノカルボニル、２−（ピリジン−４−イル）エチルアミノカルボニル、テトラヒドロチオピラン−４−イルオキシ、メチルアミノカルボニル、（２−フルオロフェニル）アミノカルボニル、２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシ、ピペリジン−１−イル、（１，１−ジオキソチアン−４−イル）オキシ、（１−メチル−ピペリジン−４−イル）オキシ、テトラヒドロピラン−４−イルメチルアミノカルボニル、及びテトラヒドロピラン−４−イルアミノカルボニルからなる群から選択される）；〕
Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ、メチル置換基であるか；又はＲ１０及びＲ１１は、共にシクロブチル環を形成する。
【００８３】
本発明の更なる実施形態は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌に関連するＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療する及び／又は改善する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の、以下の表１のリストに例示される式（Ｉ）の化合物を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる、方法を目的とする。
【００８４】
【表１−１】
2019528290.tif 000025
【００８５】
【表１−２】
2019528290.tif 000026
【００８６】
【表１−３】
2019528290.tif 000027
【００８７】
【表１−４】
2019528290.tif 000028
【００８８】
【表１−５】
2019528290.tif 000029
【００８９】
【表１−６】
2019528290.tif 000030
【００９０】
【表１−７】
2019528290.tif 000031
【００９１】
【表１−８】
2019528290.tif 000032
【００９２】
【表１−９】
2019528290.tif 000033
【００９３】
【表１−１０】
2019528290.tif 000034
【００９４】
【表１−１１】
2019528290.tif 000035
【００９５】
【表１−１２】
2019528290.tif 000036
【００９６】
【表１−１３】
2019528290.tif 000037
【００９７】
【表１−１４】
2019528290.tif 000038
【００９８】
【表１−１５】
2019528290.tif 000039
【００９９】
【表１−１６】
2019528290.tif 000040
【０１００】
本発明の更なる実施形態は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌に関連するＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療及び／又は改善する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の式（Ｉ）の化合物：
【０１０１】
【化２３】
2019528290.tif 000041
すなわち、化合物１、５−［４，４−ジメチル−３−［４−［（１−メチル−４−ピペリジル）オキシ］フェニル］−５−オキソ−２−チオキソ−イミダゾリジン−１−イル］−３−メチル−ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物２、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−テトラヒドロピラン−４−イル−ベンズアミド；
化合物３、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（テトラヒドロピラン−４−イルメチル）ベンズアミド；
化合物４、３−メチル−５−［８−［４−［（１−メチル−４−ピペリジル）オキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物５、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−Ｎ，２−ジメチル−ベンズアミド；
化合物６、５−［８−［４−（１，１−ジオキソチアン−４−イル）オキシフェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−メチル−ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物７、５−［８−（７−イソキノリル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物８、５−［５−オキソ−８−（４−ピペラジン−１−イルフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル
化合物９、５−［５−オキソ−８−（３−ピリジル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１０、３−メチル−５−［８−［４−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１１、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（２−フルオロフェニル）ベンズアミド；
化合物１２、４−［３−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５，５−ジメチル−４−オキソ−２−チオキソ−イミダゾリジン−１−イル］−２−フルオロ−Ｎ−メチル−ベンズアミド；
化合物１３、３−メチル−５−［５−オキソ−８−（４−テトラヒドロチオピラン−４−イルオキシフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１４、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−［２−（４−ピリジル）エチル］ベンズアミド；
化合物１５、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−［２−（２−ピリジル）エチル］ベンズアミド；
化合物１６、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−メチル−ベンズアミド；
化合物１７、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）ベンズアミド；
化合物１８、５−［８−（２−ナフチル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１９、５−［４，４−ジメチル−３−［４−［（１−メチル−４−ピペリジル）オキシ］フェニル］−５−オキソ−２−チオキソ−イミダゾリジン−１−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物２０、５−［５−オキソ−８−（３−フェノキシフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物２１、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−Ｎ−（シクロペンチルメチル）−２−フルオロ−ベンズアミド；
化合物２２、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（２−モルホリノエチル）ベンズアミド；
化合物２３、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−イソプロピル−ベンズアミド；
化合物２４、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（３−メトキシプロピル）ベンズアミド；
化合物２５、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−Ｎ−メチル−ベンゼンスルホンアミド；
化合物２６、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−［（５−メチル−２−フリル）メチル］ベンズアミド；
化合物２７、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−イソペンチル−ベンズアミド；
化合物２８、５−［８−［３−フルオロ−４−［（１−メチル−４−ピペリジル）オキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物２９、３−メチル−５−［５−オキソ−８−（ｐ−トリル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物３０、５−［８−［４−［（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物３１、Ｎ−［（２−クロロフェニル）メチル］−４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−ベンズアミド；
化合物３２、５−［８−［３−フルオロ−４−［２−（２−ピリジル）エトキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−メチル−ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物３３、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（２−チエニルメチル）ベンズアミド；
化合物３４、５−［８−（１−ナフチル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物３５、５−［５−オキソ−８−［４−（４−ピペリジルオキシ）フェニル］−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物３６、Ｎ−ベンジル−４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−ベンズアミド；
化合物３７、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−［３−（２−オキソピロリジン−１−イル）プロピル］ベンズアミド；
化合物３８、５−［５−オキソ−７−チオキソ−８−［４−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物３９、４−［６−［６−シアノ−５−（ジフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−メチル−ベンズアミド；
化合物４０、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（３−ヒドロキシプロピル）ベンズアミド；
化合物４１、エチル２−［［４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−ベンゾイル］アミノ］アセテート；
化合物４２、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−フェネチル−ベンズアミド；
化合物４３、５−［８−［４−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロピル］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物４４、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（２−ピリジルメチル）ベンズアミド；
化合物４５、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（２−メチルピラゾール−３−イル）ベンズアミド；
化合物４６、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（２−メトキシエチル）ベンズアミド；
化合物４７、５−［８−（２−フルオロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物４８、５−［８−（４−ヒドロキシフェニル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−メチル−ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物４９、５−［８−［２−フルオロ−４−［（１−メチル−４−ピペリジル）オキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物５０、３−メチル−５−［８−［４−（５−メチル−２−フリル）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物５１、５−［８−［４−［［１−（２−ヒドロキシエチル）−４−ピペリジル］オキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物５２、５−［８−［３−フルオロ−４−（ピロリジン−１−カルボニル）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物５３、Ｎ−［（４−クロロフェニル）メチル］−４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−ベンズアミド；
化合物５４、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（ピラジン−２−イルメチル）ベンズアミド；
化合物５５、５−［８−［３−フルオロ−４−（３−ピロリジン−１−イルプロポキシ）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物５６、５−［８−［３−フルオロ−４−（２−ピリミジン−２−イルエトキシ）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物５７、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（３−フェニルプロピル）ベンズアミド；
化合物５８、Ｎ−ブチル−４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−ベンズアミド；
化合物５９、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（２−チエニルメチル）ベンズアミド；
化合物６０、５−［８−［４−［［１−（２−ヒドロキシエチル）−４−ピペリジル］オキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−メチル−ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物６１、５−［８−［４−［（１−エチル−４−ピペリジル）オキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−メチル−ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物６２、３−メチル−５−［５−オキソ−８−（４−ピリミジン−４−イルオキシフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物６３、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−チアゾール−２−イル−ベンズアミド；
化合物６４、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−Ｎ−［３−［シクロペンチル（メチル）アミノ］プロピル］−２−フルオロ−ベンズアミド；
化合物６５、４−［７−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−６−オキソ−８−チオキソ−７，９−ジアザスピロ［４．４］ノナン−９−イル］−２−フルオロ−Ｎ−メチル−ベンズアミド；
化合物６６、５−［８−［３−フルオロ−４−（２−ピロリジン−１−イルエトキシ）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物６７、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（３−ピリジルメチル）ベンズアミド；
化合物６８、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−プロピル−ベンズアミド；
化合物６９、５−［８−（４−メトキシフェニル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−メチル−ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物７０、５−（５−オキソ−８−フェニル−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル）−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物７１、５−［５−オキソ−８−（４−ピリミジン−４−イルオキシフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物７２、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（３−モルホリノプロピル）ベンズアミド；
化合物７３、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−フェニル−ベンズアミド；
化合物７４、Ｎ−（４−クロロフェニル）−４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−ベンズアミド；
化合物７５、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（６−メチル−３−ピリジル）ベンズアミド；
化合物７６、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（２−フリルメチル）ベンズアミド；
化合物７７、５−［８−（４−ヒドロキシフェニル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物７８、Ｎ−（３−クロロフェニル）−４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−ベンズアミド；
化合物７９、５−［８−（３−シアノフェニル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物８０、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−ベンズアミド；
化合物８１、５−［８−［３−（ヒドロキシメチル）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物８２、エチル４−［［４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−ベンゾイル］アミノ］ブタノエート；
化合物８３、３−メチル−５−［５−オキソ−８−［４−（４−ピペリジルオキシ）フェニル］−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物８４、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（４−フルオロフェニル）ベンズアミド；
化合物８５、５−［８−［４−［（１−メチル−４−ピペリジル）オキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物８６、５−［８−［４−（２−フリル）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−メチル−ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物８７、３−メチル−５−［５−オキソ−８−（４−テトラヒドロピラン−４−イルオキシフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物８８、５−［５−オキソ−８−（４−ピリミジン−５−イルオキシフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物８９、５−［５−オキソ−８−（４−テトラヒドロピラン−４−イルフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物９０、５−［８−（３−フルオロフェニル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物９１、５−［８−［２−フルオロ−４−［２−（１−ピペリジル）エトキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物９２、５−［８−（１Ｈ−インダゾール−５−イル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物９３、３−メチル−５−［５−オキソ−８−（４−ピリミジン−５−イルフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物９４、５−［８−（４−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物９５、Ｎ−［（３−クロロフェニル）メチル］−４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−ベンズアミド；
化合物９６、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−［２−（３−ピリジル）エチル］ベンズアミド；
化合物９７、５−［５−オキソ−７−チオキソ−８−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物９８、５−［５−オキソ−７−チオキソ−８−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物９９、５−［５−オキソ−８−（４−フェノキシフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１００、５−［８−［３−フルオロ−４−（２−メトキシエトキシ）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−メチル−ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１０１、３−メチル−５−［５−オキソ−８−（４−テトラヒドロピラン−４−イルフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１０２、５−［８−（４−フルオロフェニル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１０３、５−［５−オキソ−８−［４−（２−ピリジルオキシ）フェニル］−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１０４、５−［８−［４−（５−フルオロ−３−ピリジル）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−メチル−ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１０５、５−［８−［３−フルオロ−４−（２−ピペラジン−１−イルエトキシ）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１０６、５−［８−（２，３−ジフルオロフェニル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１０７、５−［５−オキソ−８−（４−ピリミジン−２−イルオキシフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１０８、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロピル］ベンズアミド；
化合物１０９、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（１−メチル−４−ピペリジル）ベンズアミド；
化合物１１０、５−［４，４−ジメチル−５−オキソ−３−（ｐ−トリル）−２−チオキソ−イミダゾリジン−１−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１１１、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−プロパ−２−イニル−ベンズアミド；
化合物１１２、５−［５−オキソ−８−（４−テトラヒドロピラン−４−イルオキシフェニル）−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１１３、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（５−フルオロ−３−ピリジル）ベンズアミド；
化合物１１４、３−メチル−５−［８−［４−（５−メチル−３−ピリジル）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１１５、５−［８−（３−フルオロ−４−メチル−フェニル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１１６、５−［８−［３−フルオロ−４−［（１−メチル−４−ピペリジル）オキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−メチル−ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１１７、４−［６−（６−シアノ−５−メチル−３−ピリジル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−メトキシ−Ｎ−メチル−ベンズアミド；
化合物１１８、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−（３−ピロリジン−１−イルプロピル）ベンズアミド；
化合物１１９、３−メチル−５−［８−［４−（２−メチル−３−ピリジル）フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１２０、５−［８−（４−シアノフェニル）−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル；
化合物１２１、４−［６−［６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）−３−ピリジル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−８−イル］−２−フルオロ−Ｎ−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］ベンズアミド；
及び
化合物１２２、５−［８−［４−［（１−メチルスルホニル−４−ピペリジル）オキシ］フェニル］−５−オキソ−７−チオキソ−６，８−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル］−３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−カルボニトリル、からなる群から選択される式（Ｉ）の化合物、又はその医薬的に許容されるその塩形態を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから実質的になる方法に関する。
【０１０２】
医療において使用する場合、式（Ｉ）の化合物の塩とは、非毒性の「医薬的に許容される塩」を指す。しかし、他の塩が式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩形態の調製において有用である場合もある。式（Ｉ）の化合物の適切な医薬的に許容される塩としては、例えば、化合物の溶液を、塩酸、硫酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、炭酸又はリン酸のような医薬的に許容される酸の溶液と混合することにより形成され得る酸付加塩が挙げられる。更に、式（Ｉ）の化合物が酸性部分を有する場合、その適切な医薬的に許容される塩としては例えば、アルカリ金属塩（ナトリウム塩及びカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩又はマグネシウム塩）、及び適切な有機リガンドと形成される塩（例えば、第四級アンモニウム塩）を挙げることができる。すなわち、代表的な医薬的に許容される塩としては、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物塩、カルシウムエデト酸塩、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物塩、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、エシラート、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニレート、ヘキシルレゾルシネート、ハイドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエート、ヨウ化物塩、イソチオネート、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル臭化物塩、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、ムチン酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、パモン酸塩（エンボナート）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオジド、及び吉草酸塩が挙げられる。
【０１０３】
医薬的に許容される塩の調製において使用することができる代表的な酸及び塩基としては、酢酸、２，２−ジクロロ酢酸、アシル化アミノ酸、アジピン酸、アルギニン酸、アスコルビン酸、Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４−アセトアミド安息香酸、（＋）−樟脳酸、樟脳スルホン酸、（＋）−（１Ｓ）−カンファー−１０−スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ−グルコン酸、Ｄ−グルクロン酸、Ｌ−グルタミン酸、α−オキソ−グルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩化水素酸、（＋）−Ｌ−乳酸、（±）−ＤＬ−乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、（−）−Ｌ−リンゴ酸、マロン酸、（±）−ＤＬ−マンデル酸、メタンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、Ｌ−ピログルタミン酸、サリチル酸、４−アミノ−サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、（＋）−Ｌ−酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、及びウンデシレン酸を含む酸；並びにアンモニア、Ｌ−アルギニン、ベネタミン（benethamine）、ベンザチン、水酸化カルシウム、コリン、デアノール、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−（ジエチルアミノ）−エタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチル−グルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ−イミダゾール、Ｌ−リジン、水酸化マグネシウム、４−（２−ヒドロキシエチル）−モルホリン、ピペラジン、水酸化カリウム、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン、水酸化ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミン、及び水酸化亜鉛を含む塩基が挙げられる。
【０１０４】
本発明の実施形態には、式（Ｉ）の化合物のプロドラッグが含まれる。一般的には、このようなプロドラッグは、インビボで必要な化合物に容易に変換可能な化合物の機能的誘導体である。したがって、本発明の治療又は予防の方法の実施形態において、「投与すること」という用語には、具体的に開示された化合物による、又は具体的には開示されていない場合もあるが患者への投与後にインビボで特定の化合物に変換される化合物による、記載された様々な疾患、状態、症候群及び障害の治療又は予防が包含される。適切なプロドラッグ誘導体の選択及び調製に関する通常の手順は、例えば、「Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」、Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５に記載されている。
【０１０５】
本発明の実施形態に基づく化合物が少なくとも１個のキラル中心を有する場合、それに応じて化合物はエナンチオマーとして存在し得る。化合物が２つ以上のキラル中心を有する場合、ジアステレオマーとして追加的に存在してもよい。かかる異性体及びその混合物は全て、本発明の範囲内に包含されると理解される。更に、化合物の結晶型の中には、多形として存在できるものもあり、それ自体本発明に含まれることが意図される。加えて、化合物の中には、水との溶媒和物（すなわち、水和物）又は一般的な有機溶媒との溶媒和物を形成できるものもあり、このような溶媒和物もまた、本発明の範囲に包含されることが意図される。当業者は、本明細書で用いる「化合物」という用語が、式（Ｉ）の化合物の溶媒和物を含むことを理解するであろう。
【０１０６】
本発明の特定の実施形態に基づく化合物の調製プロセスにより立体異性体の混合物を生じる場合、これらの異性体は、分取クロマトグラフィーなどの従来技術により分離することができる。化合物はラセミ体として調製されてもよく、又は個々のエナンチオマーをエナンチオ選択的な合成、又は分割のいずれかにより調製することもできる。化合物は、例えば、（−）−ジ−ｐ−トルオイル−ｄ−酒石酸及び／又は（＋）−ジ−ｐ−トルオイル−ｌ−酒石酸などの光学活性酸と塩を形成させた後に、分別結晶化を行い、遊離塩基を再生させることによりジアステレオマー対を形成させるなどの標準的技術により、それら化合物の成分であるエナンチオマーに分割することができる。化合物はまた、ジアステレオマーのエステル又はアミドを形成した後、クロマトグラフィー分離を行い、キラル補助基を除去することにより、分割することもできる。又は、化合物をキラルＨＰＬＣカラムを用いて分割してもよい。
【０１０７】
本発明の一実施形態は、式（Ｉ）の化合物の（＋）−エナンチオマーを含む、それからなる、及び／又はそれから本質的になる医薬組成物を含む組成物であって、当該化合物の（−）−異性体を実質的に含まない、組成物を目的とする。本文脈において、実質的に含まないとは、下式で算出される（−）−異性体が、約２５％未満、好ましくは約１０％、より好ましくは約５％、更により好ましくは約２％未満、及び更により好ましくは約１％未満であることを意味する。
【０１０８】
【数１】
2019528290.tif 000042
【０１０９】
本発明の別の実施形態は、式（Ｉ）の化合物の（−）−エナンチオマーを含む、それからなる、及びそれから本質的になる医薬組成物を含む組成物であって、当該化合物の（＋）−異性体を実質的に含まない、組成物である。本文脈において、実質的に含まないとは、下式で算出される（＋）−異性体が、約２５％未満、好ましくは約１０％未満、より好ましくは約５％未満、更により好ましくは約２％未満、更により好ましくは約１％未満であることを意味する。
【０１１０】
【数２】
2019528290.tif 000043
【０１１１】
本発明の種々の実施形態の化合物を調製するための任意のプロセスにおいて、関連する分子のいずれかにおける感受性基又は反応性基を保護することが必要及び／又は望ましい場合がある。これは、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，１９７３；Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９１；及びＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９９に記載されるもののような従来の保護基によって実現することができる。保護基は、その後の便利な段階において、当該技術分野で周知の方法を用いて除去することができる。
【０１１２】
本発明の実施形態の化合物（その医薬的に許容される塩及び医薬的に許容される溶媒和物を含む）は単独で投与することができるが、これらの化合物は、一般的には、意図された投与経路及び標準的な製薬学的又は獣医学的な慣行の観点から選ばれる、医薬的に許容される担体、医薬的に許容される賦形剤及び／又は医薬的に許容される希釈剤との混合物として投与される。したがって、本発明の特定の実施形態は、式（Ｉ）の化合物及び少なくとも１つの医薬的に許容される担体、医薬的に許容される賦形剤、及び／又は医薬的に許容される希釈剤を含む製薬学的及び獣医学的組成物を目的とする。
【０１１３】
一例として、本発明の実施形態の医薬組成物では、式（Ｉ）の化合物は、任意の適切な結合剤、潤滑剤、懸濁化剤、コーティング剤、可溶化剤、及びそれらの組み合わせと混合することができる。
【０１１４】
本発明の化合物を含む固体の経口投与形態、例えば、錠剤又はカプセルを、必要に応じて１回につき少なくとも１つの投与形態で投与することができる。持続放出性製剤で化合物を投与することも可能である。
【０１１５】
本発明の化合物を投与することができる更なる経口投与形態としては、エリキシル剤、液剤、シロップ剤、及び懸濁剤が挙げられ、それぞれ、所望により着香剤及び着色剤を含有する。
【０１１６】
あるいは、式（Ｉ）の化合物は、吸入（気管内又は経鼻的に）により、又は座薬若しくはペッサリーの形態で投与するができる。あるいは、式（Ｉ）の化合物は、ローション、溶液、クリーム、軟膏若しくは散布剤として局所的に塗布することもできる。例えば、式（Ｉ）の化合物は、ポリエチレングリコール又は流動パラフィンの水性エマルジョンを含む、それからなる、及び／又はそれから本質的になるクリームに添加することができる。式（Ｉ）の化合物は、クリームの約１重量％〜約１０重量％の濃度で、必要に応じて任意の安定剤及び保存剤と共にワックス又は軟パラフィン基剤を含む、それからなる、及び／又はそれから本質的になる軟膏に添加することもできる。投与の代替手段としては、皮膚又は経皮貼付剤を使用することによる経皮投与が挙げられる。
【０１１７】
本発明の医薬組成物（本発明の化合物単独と同様に）は、非経口的に、例えば、陰茎海綿体内、静脈内、筋肉内、皮下、皮内、又は髄腔内に注入することができる。この場合、組成物はまた、適切な担体、適切な賦形剤、及び適切な希釈剤のうちの少なくとも１つを含む。
【０１１８】
非経口投与について、本発明の医薬組成物は、例えば、溶液を血液と等張に保つうえで充分な塩及び単糖などの他の物質を含んでもよい滅菌水溶液の形態で最もよく使用される。
【０１１９】
口腔又は舌下投与では、本発明の医薬組成物を、従来法で製剤することができる錠剤又はトローチ剤の形態で投与することができる。
【０１２０】
更なる例として、活性成分として式（Ｉ）の化合物の少なくとも１つを含有する医薬組成物を、従来の製薬学的配合技術に従って、化合物と、医薬的に許容される担体、医薬的に許容される希釈剤、及び／又は医薬的に許容される賦形剤とを混合することによって調製することができる。担体、賦形剤、及び希釈剤は、所望の投与経路（例えば、経口、非経口など）に応じ、広範な形態を取ることができる。それゆえに、懸濁液、シロップ剤、エリキシル剤及び溶液などの液体経口製剤の場合、適切な担体、賦形剤及び希釈剤としては、水、グリコール、油、アルコール、着香剤、防腐剤、安定剤、着色剤及びこれらに類するものが挙げられる。散剤、カプセル剤及び錠剤などの固体経口製剤の場合、適切な担体、賦形剤及び希釈剤としては、デンプン、糖類、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤及びこれらに類するものが挙げられる。吸収及び崩壊の主要部位を調節するために、経口固体製剤を糖などの物質で任意にコーティングするか、又は腸溶性コーティングを施すことができる。非経口投与の場合、担体、賦形剤及び希釈剤は、通常、滅菌水を含み、組成物の溶解度及び保存性を高めるために他の成分を添加してもよい。注射用懸濁剤又は溶剤はまた、水性担体を、適切な添加剤、例えば、可溶化剤及び保存剤と共に使用して、調製することもできる。
【０１２１】
式（Ｉ）の化合物又はその医薬組成物の治療有効量としては、平均的な（７０ｋｇの）ヒトについて１日当たり約１〜約４回のレジメンで、約０．１ｍｇ〜約３０００ｍｇの用量範囲、又はこれに含まれる任意の特定の量若しくは範囲、具体的には、約１ｍｇ〜約１０００ｍｇ、又はこれに含まれる任意の特定の量若しくは範囲、あるいはより具体的には、約１０ｍｇ〜約５００ｍｇ、又はこれに含まれる任意の特定の量若しくは範囲の活性成分が挙げられるが、式（Ｉ）の化合物の治療有効量は、治療される疾患、症候群、状態、及び障害によって変動することが当業者には明らかである。
【０１２２】
経口投与では、医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物を約１．０、約１０、約５０、約１００、約１５０、約２００、約２５０、及び約５００ｍｇ含む錠剤の形態で提供されることが好ましい。
【０１２３】
有利な点として、式（Ｉ）の化合物は、１日量を１回で投与してもよく、１日当たりの総投与量を１日に２回、３回及び４回に分割して投与してもよい。
【０１２４】
式（Ｉ）の化合物の投与される最適投与量は容易に決定することができ、用いられる具体的な化合物、投与形態、製剤の強度、及び疾患、症候群、状態、又は障害の進行状態によって変動する。加えて、治療される具体的な対象に関連する要因、例えば、対象の性別、年齢、体重、食事及び投与タイミングにより、適切な治療レベル及び所望の治療効果を得るために用量を調節する必要が生じる。したがって、上記の投与量は平均的な場合の例である。当然、より高いか又はより低い用量範囲が有効である個々の例が存在することができ、これらも本発明の範囲内に含まれる。
【０１２５】
式（Ｉ）の化合物は、これを必要とする対象に式（Ｉ）の化合物を使用することが求められる場合には、上記の組成物及び投与レジメンのいずれかによって、又は当技術分野において確立されているそれらの組成物及び投与レジメンによって投与することができる。
【０１２６】
本発明の別の一実施形態において、本発明の方法による化合物及び組成物は、癌又は他の増殖性の疾患、障害又は状態を治療するために有効な、任意の量及び任意の投与経路を用いて投与することができる。いくつかの実施形態において、この、癌又は他の増殖性の疾患、障害又は状態は、前立腺癌である。
【０１２７】
いくつかの実施形態において、この、癌又は他の増殖性の疾患、障害又は状態は、去勢抵抗性前立腺癌（ＣＲＰＣ）である。いくつかの実施形態において、この、癌又は他の増殖性の疾患、障害又は状態は、ＡＲの変異を有する去勢抵抗性前立腺癌（ＣＲＰＣ）である。いくつかの実施形態において、このＡＲの変異は、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）８７６の変異である。
【０１２８】
いくつかの実施形態において、このＡＲの変異は、Ｐｈｅ８７６のロイシンへの変異である。いくつかの実施形態において、このＡＲの変異は、Ｐｈｅ８７６のイソロイシンへの変異である。いくつかの実施形態において、このＡＲの変異は、Ｐｈｅ８７６のバリンへの変異である。いくつかの実施形態において、このＡＲの変異は、Ｐｈｅ８７６のセリンへの変異である。いくつかの実施形態において、このＡＲの変異は、Ｐｈｅ８７６のシステインへの変異である。いくつかの実施形態において、このＡＲの変異は、Ｐｈｅ８７６のチロシンへの変異である。
【０１２９】
いくつかの実施形態において、この、癌又は他の増殖性の疾患、障害又は状態は、変異の結果としてＡＲ治療に抵抗性となっている前立腺癌である。
【０１３０】
いくつかの実施形態において、この、癌又は他の増殖性の疾患、障害又は状態は、エンザルタミド又はＡＲＮ−５０９を含むがこれらに限定されない、第２世代ＡＲアンタゴニストを用いた治療に対して抵抗性である、前立腺癌である。
【０１３１】
本発明は、ＡＲポリペプチドにおける変異によって、抗アンドロゲン剤に対する抵抗性をＡＲポリペプチドにもたらし得るか、又は抗アンドロゲン剤をアンドロゲンアゴニストへと転換し得ることの、認識を包含する。いくつかの実施形態において、本発明は、そのような変異の存在にもかかわらず、抗アンドロゲン性効果をもたらすために使用し得る化合物を提供する。
【０１３２】
本明細書に記述されるＡＲポリペプチドのアミノ酸配列は、野生型アミノ酸残基の少なくとも１つ（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、又はそれ以上）の付加、置換、又は欠損を含む変異ＡＲに存在することができ、あるいは、変異ＡＲポリペプチド変異体を生成するよう変性させることができる。
【０１３３】
いくつかの実施形態において、本明細書に記述されるＡＲポリペプチド変異体は、１つ又は２つ以上の抗アンドロゲン剤によるＡＲ活性の阻害の、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０〜１００％の喪失をもたらす。いくつかの実施形態において、本明細書に記述されるＡＲポリペプチド変異体は、抗アンドロゲン剤をアンドロゲン受容体アゴニストに転換する。
【０１３４】
ＡＲ変異体において変性され得る、具体的なアミノ酸残基は、非限定的に、例えば、ＡＲポリペプチドのＥ５６６、Ｅ５８９、Ｅ６６９、Ｃ６８７、Ａ７００、Ｎ７７２、Ｈ７７７、Ｃ７８５、Ｆ８７７、Ｋ９１１が挙げられる。これらのアミノ酸残基は、任意のアミノ酸又はアミノ酸類似体で置換され得る。例えば、列挙されている部位での置換は、任意の天然アミノ酸（例えば、アラニン、アスパラギン酸、アスパラギン、アルギニン、システイン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、ロイシン、バリン、イソロイシン、リシン、メチオニン、プロリン、トレオニン、セリン、フェニルアラニン、トリプトファン、又はチロシン）で置換され得る。特定の例において、アミノ酸置換は、Ｅ５６６Ｋ、Ｅ５８９Ｋ、Ｅ６６９Ｋ、Ｃ６８７Ｙ、Ａ７００Ｔ、Ｎ７７２Ｓ、Ｈ７７７Ｙ、Ｃ７８５Ｒ、Ｆ８７７Ｃ、Ｆ８７７Ｉ、Ｆ８７７Ｌ、Ｆ８７７Ｓ、Ｆ８７７Ｖ、Ｆ８７７Ｙ、及び／又はＫ９１１Ｅである。
【０１３５】
いくつかの実施形態において、本明細書に記述されるＡＲ変異体には、当該技術分野で従来より記述されているＡＲポリペプチドの追加の改変が含まれてよく、これには例えば、Ａ５９７Ｔ、Ｓ６４８Ｇ、Ｐ６８３Ｔ、Ｄ６９６Ｅ、Ｒ７２７Ｈ、Ｎ７２８Ｉ、Ｉ７３８Ｆ、Ｗ７４１Ｌ、Ｗ７４１Ｃ、Ｗ７４１Ｌ、Ｍ７４３Ｖ、Ｇ７５１Ｓ、Ａ８７１Ｖ、Ｈ８７４Ｙ、Ｔ８７８Ａ、Ｔ８７８Ｓ、及びＰ９１４Ｓが挙げられるがこれらに限定されない。
【０１３６】
いくつかの実施形態において、本発明の方法による化合物及び組成物は、骨の疾患、障害又は状態を治療するために有効な、任意の量及び任意の投与経路を用いて投与することができる。いくつかの実施形態において、この骨の疾患、障害又は状態は、骨粗鬆症である。
【０１３７】
本発明は、動物、哺乳類、及びヒトを含む対象における疾患、症候群、状態、又は障害を治療するための式（Ｉ）の化合物の使用であって、疾患、症候群、状態、又は障害がアンドロゲン受容体の拮抗作用によって影響を受け、対象が第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示し、疾患、症候群、状態、又は障害が、前立腺癌、去勢抵抗性前立腺癌、及び転移性去勢抵抗性前立腺癌からなる群から選択される、使用を目的とする。
【０１３８】
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物、又はその組成物は、ＡＲの別の調節因子、アゴニスト又はアンタゴニストと組み合わせて投与することができる。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物、又はその組成物は、１つ又は２つ以上の他の治療薬と組み合わせて投与することができる。
【０１３９】
いくつかの実施形態において、このＡＲ調節因子、アゴニスト又はアンタゴニストとしては、ゴナドトロピン放出ホルモンアゴニスト又はアンタゴニスト（例えばＬｕｐｒｏｎ、Ｚｏｌａｄｅｘ（Ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ）、Ｄｅｇａｒｅｌｉｘ、Ｏｚａｒｅｌｉｘ、ＡＢｔ−６２０（Ｅｌａｇｏｌｉｘ）、ＴＡＫ−３８５（Ｒｅｌｕｇｏｌｉｘ）、ＥＰ−１００又はＫＬＨ−２１０９）；非ステロイド系抗アンドロゲン剤、アミノグルテチミド、エンザルタミド、ビカルタミド、ニルタミド、フルタミド、ステロイド系抗アンドロゲン剤、フィナステリド、デュタステリド、ベクスロステリド、イゾンステリド、ツロステリド、エプリステリド、その他の５−αリダクターゼ阻害薬、３，３’−ジインドリルメタン（ＤＩＭ）、Ｎ−ブチルベンゼン−スルホンアミド（ＮＢＢＳ）；又は、ＣＹＰ１７阻害薬（例えば、酢酸アビラテロン、ＴＡＫ−７００（オルテロネル）、ＴＯＫ−００１（ガレテロン）又はＶＴ−４６４）が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１４０】
本発明の更なる実施形態は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌に関連するＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療する及び／又は改善するための、式（Ｉ）の化合物と酢酸アビラテロンとを含む、これらからなる、及び／又はこれらから本質的になる医薬組成物の使用であって、それを必要とする対象に、治療有効量の当該医薬組成物を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる、使用を目的とする。
【０１４１】
本発明の更なる実施形態は、それを必要とする、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した、その必要のある哺乳類及び／又はヒトを含む対象において、去勢抵抗性前立腺癌に関連するＡＲ変異受容体に関連する疾患、症候群、障害、又は状態を治療する及び／又は改善するための、式（Ｉ）の化合物と、酢酸アビラテロンと、所望によりプレドニン又はデキサメタゾンとを含む、それらからなる、及び／又はそれらから本質的になる医薬組成物の使用であって、それを必要とする対象に、治療有効量の当該医薬組成物を投与することを含む、投与することからなる、及び／又は投与することから本質的になる、使用を目的とする。
【０１４２】
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物、又はその医薬組成物は、ＰＩ３Ｋ経路阻害薬と組み合わせて投与することができる。
【０１４３】
いくつかの実施形態において、このＰＩ３Ｋ経路阻害薬（ＰＩ３Ｋ、ＴＯＲＣ又はデュアルＰＩ３Ｋ／ＴＯＲＣ阻害薬）には、エベロリムス、ＢＥＺ−２３５、ＢＫＭ１２０、ＢＧＴ２２６、ＢＹＬ−７１９、ＧＤＣ００６８、ＧＤＣ−０９８０、ＧＤＣ０９４１、ＧＤＣ００３２、ＭＫ−２２０６、ＯＳＩ−０２７、ＣＣ−２２３、ＡＺＤ８０５５、ＳＡＲ２４５４０８、ＳＡＲ２４５４０９、ＰＦ０４６９１５０２、ＷＹＥ１２５１３２、ＧＳＫ２１２６４５８、ＧＳＫ−２６３６７７１、ＢＡＹ８０６９４６、ＰＦ−０５２１２３８４、ＳＦ１１２６、ＰＸ８６６、ＡＭＧ３１９、ＺＳＴＫ４７４、ＣａｌｌＯｌ、ＰＷＴ３３５９７、ＬＹ−３１７６１５（塩酸エンザスタウリン）、ＣＵ−９０６、又はＣＵＤＣ−９０７が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１４４】
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物、又はその組成物は、放射線治療と組み合わせて投与することができる。用語「放射線治療」又は「電離放射線」には、全ての形態の放射線が含まれ、これにはα線、β線、及びγ線並びに紫外線が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１４５】
いくつかの実施形態において、放射線治療には、腫瘍又は体腔内に直接挿入される放射性インプラント（内部放射線治療のタイプには、小線源治療、組織内照射、及び腔内照射がある）、放射性医薬品（例えばＡｌｐｈａｒａｄｉｎ（塩化ラジウム２２３）、１７７Ｌｕ−Ｊ５９１  ＰＳＭＡ複合体）、又は体外放射線治療（陽子線照射を含む）が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１４６】
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物、又はその医薬組成物は、免疫療法と組み合わせて投与することができる。
【０１４７】
いくつかの実施形態において、免疫療法には、Ｐｒｏｖｅｎｇｅ、Ｐｒｏｓｔｖａｃ、イピリムマブ、ＣＴＬＡ−４阻害薬、又はＰＤ−１阻害薬が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１４８】
具体的実施例
本発明の化合物８０は、本明細書に参照によって援用するところの２０１０年２月１６日出願の米国仮特許出願第６１／３０５，０８２号の利益を主張する、２０１５年８月１８日に付与された、発明の名称が「Ａｎｄｒｏｇｅｎ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」である米国特許第９，１０８，９４４号に見ることができる。
【実施例】
【０１４９】
（実施例１）
４−（７−（６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）−８−オキソ−６−チオキソ−５，７−ジアザスピロ［３．４］オクタン−５−イル）−２−フルオロベンズアミド、化合物８０
【０１５０】
【化２４】
2019528290.tif 000044
【０１５１】
化合物８０の以下の調製法は、最初に米国特許第９，１０８，９４４号の実施例３４、化合物２３１として開示されたものである（コラム２４５）。
【０１５２】
４−（７−（６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）−８−オキソ−６−チオキソ−５，７−ジアザスピロ［３．４］オクタン−５−イル）−２−フルオロ安息香酸（５００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）をＤＣＭに懸濁した懸濁液をＤＭＦ（触媒量、０．１ｍＬ）に加えた後、塩化オキザリル（０．１４ｍＬ、１．６１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で４時間攪拌した後、真空下で濃縮して黄色残渣を生成し、これを高真空ポンプで更に乾燥した。アンモニア（０．５Ｍジオキサン溶液、４０ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を残渣に直接加え、混合物を室温で一晩攪拌した。ＭｅＯＨを加え、混合物をシリカゲル上に吸収させ、フラッシュクロマトグラフィー（５０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して不純な所望の精製物を得て、これを逆相ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水：ＴＦＡ）により再精製した。所望の化合物を含む画分を加え合わせ、アセトニトリルを真空下で除去し、残った水層を炭酸水素ナトリウムの飽和溶液で処理した。水層をＤＣＭ（３ｘ）で抽出し、有機層を加え合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥状態にまで蒸発させて１００ｍｇの４−（７−（６−シアノ−５−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）−８−オキソ−６−チオキソ−５，７−ジアザスピロ［３．４］オクタン−５−イル）−２−フルオロベンズアミドを白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）９．２１（ｓ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），７．９５（ｓ，１Ｈ），７．８７（ｔ，１Ｈ），７．８０（ｓ，１Ｈ），７．４６（ｄｄ，１Ｈ），７．３７（ｄｄ，１Ｈ），２．６９−２．６２（ｍ，２Ｈ），２．５５−２．４７（ｍ，２Ｈ），２．００（ｍ，１Ｈ），１．５８（ｍ，１Ｈ）。
【０１５３】
生物学的実施例
「生物学的サンプル」という用語は、本明細書で使用するとき、限定するものではないが、細胞培養物又はその抽出物；哺乳動物から得られた生検材料又はその抽出物；及び血液、唾液、尿、糞便、精液、涙、若しくは他の体液又はこれらの抽出物を含む。
【０１５４】
生物学的サンプルにおける受容体の拮抗作用は、当業者には周知の様々な目的に有用である。そのような目的の例としては、バイオアッセイ、遺伝子発現研究、及び生物学的標的同定が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１５５】
本発明の特定の実施形態は、第１又は第２世代のＡＲアンタゴニストに対して抵抗性を示した、このような治療を必要としている患者又は対象においてＡＲを拮抗させることによる治療方法であって、本発明の式（Ｉ）の化合物又は当該化合物を含む組成物を当該患者に投与する工程を含む、方法を目的とする。
【０１５６】
ＡＲのアンタゴニストとしての式（Ｉ）の化合物の活性、又は、ＡＲ媒介性疾患、障害又は状態の治療のための活性は、インビトロ又はインビボで検定することができる。本発明の化合物の有効性のインビボ評価は、ＡＲ媒介性疾患、障害又は状態の動物モデル、例えば、齧歯類又は霊長類モデルを使用して行うことができる。このインビボ評価は更に、アンドロゲン依存性臓器発達（ハーシュバ−ガー）アッセイとして、又は腫瘍異種移植モデルとして、定義することができる。細胞ベースのアッセイは、例えば、野生型又は変異ＡＲのいずれかを発現している組織から単離した細胞株を使用して実施することができる。加えて、生化学的又はメカニズムに基づくアッセイ（例えば、精製タンパク質を用いた転写アッセイ、ノーザンブロット、ＲＴ−ＰＣＲなど）を実施することができる。
【０１５７】
インビトロアッセイには、細胞形態、タンパク質発現、及び／若しくは細胞毒性、酵素阻害活性の測定、並びに／又は、本発明の化合物による細胞治療の後に起こる機能的結果を測定するアッセイが挙げられる。代替的又は付加的なインビトロアッセイを使用して、細胞内でタンパク質又は核酸分子に結合する阻害薬の能力を定量することができる。
【０１５８】
阻害薬の結合は、結合前の阻害薬に放射線標識付けを行うこと、阻害薬／標的分子複合体を単離すること、及び、放射線標識結合の量を決定することによって、測定することができる。代替的に又は付加的に、阻害薬の結合は、既知の放射性リガンドに結合している精製タンパク質又は核酸と共に新規阻害薬をインキュベーションする、競合実験を行うことにより、決定することができる。ＡＲのアンタゴニストとして、本発明の式（Ｉ）の化合物を検定するための、例示的なシステムの詳細条件は、下記の「生物学的実施例」に記載されている。
【０１５９】
そのようなアッセイは、例示にすぎず、本発明の範囲を限定することは意図されない。当業者であれば、従来のアッセイを改変して、本明細書に記述される化合物及び／又は組成物の活性を比較評価するか又は別の方法で特徴付けるために採用可能な同等のアッセイ又は他のアッセイを開発できることが理解されよう。
【０１６０】
インビトロアッセイ
生物学的実施例１
ＡＲ、ＧＲ及びＥＲに対する化合物の放射性リガンド結合
下記に詳しく示すように、細胞抽出物及びリガンドを用いて、放射性リガンド結合アッセイが実施された。完全な方法は、引用文献に記載されている。Ｋｄ値は、非特異的インキュベーション検出方法により決定された。
【０１６１】
レセプター
ＧＲ（ヒト）（アゴニスト放射性リガンド）ＩＭ−９細胞（細胞質ゾル）
［３Ｈ］デキサメタゾン１．５ｎＭ  １．５ｎＭトリアムシノロン（１０μＭ）６時間４℃シンチレーション計数
（Ｃｌａｒｋ，Ａ．Ｆｅｔａｌ．（１９９６）Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．，３７：８０５〜８１３）。
【０１６２】
ＥＲ（非選択的）（ヒト）（アゴニスト放射性リガンド）ＭＣＦ−７細胞（細胞質ゾル）
［３Ｈ］エストラジオール０．４ｎＭ  ０．２ｎＭ  １７−β−エストラジオール（６μＭ）２０時間４℃シンチレーション計数
（Ｐａｒｋｅｒ，Ｇ．Ｊ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｊ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｓｃｒｅｅｎ．，５：７７〜８８）。
【０１６３】
ＡＲ（ヒト）（アゴニスト放射性リガンド）ＬＮＣａＰ細胞（細胞質ゾル）
［３Ｈ］メチルトリエノロン１ｎＭ  ０．８ｎＭミボレロン（１μＭ）２４時間４℃シンチレーション計数。
Ｚａｖａ，Ｄ．Ｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９７９）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１０４：１００７〜１０１２。
【０１６４】
結果は、対照特異的結合の測定された特異的結合×１００の対照特異的結合のパーセンテージとして、及び、化合物の存在下で得られた対照特異的結合１００−（測定された特異的結合×１００）の対照特異的結合の阻害パーセンテージとして、表される。
【０１６５】
ＩＣ５０値（対照特異的結合の半数阻害を引き起こす濃度）及びヒル係数（ｎＨ）は、ヒルの式曲線フィッティングを用いて、平均複製値と共に生成された競合曲線の非線形回帰分析により決定された。
Ｙ＝Ｄ＋［Ａ−Ｄ］
１＋（Ｃ／Ｃ５０）ｎＨ
式中、Ｙ＝特異的結合、Ａ＝曲線の左漸近線、Ｄ＝曲線の右漸近線、Ｃ＝化合物の濃度、Ｃ５０＝ＩＣ５０、ｎＨ＝傾き因子である。この分析は、Ｃｅｒｅｐ（Ｈｉｌｌ  ｓｏｆｔｗａｒｅ）で開発されたソフトウェアを用いて実行され、市販のソフトウェアＳｉｇｍａＰｌｏｔ（登録商標）４．０  ｆｏｒ  Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）（（著作権）１９９７年ＳＰＳＳ  Ｉｎｃ．）により生成されたデータと比較して検証した。
【０１６６】
阻害定数（Ｋｉ）は、チェン＝プルソフ式を用いて計算された：
Ｋｉ＝ＩＣ５０（１＋Ｌ／ＫＤ）
式中、Ｌ＝アッセイ中の放射性リガンドの濃度、ＫＤ＝受容体に対する放射性リガンドの親和性、である。スキャッチャードプロットを使用してＫＤが決定される。得られたデータを表２に示す。
【０１６７】
【表２】
2019528290.tif 000045
【０１６８】
放射性リガンド結合阻害と親和性の計算は、ＡＲ、ＧＲ及びＥＲについてそれぞれ、［３Ｈ］−メチルトリエノロン、［３Ｈ］−デキサメタゾン及び［３Ｈ］−エストラジオールを用いて決定された。ＥＲについては、阻害又は親和性を測定することは不可能だったため、データは示されていない。
ＡＲ＝アンドロゲン受容体、ＥＲ＝エストロゲン受容体、ＧＲ＝グルココルチコイド受容体
【０１６９】
生物学的実施例２：
ＡＲ（ＷＴ又はＦ８７６Ｌ）レポーターアッセイの拮抗作用
ＬＮＣａＰ  ＡＲ（ｃｓ）及びＬＮＣａＰ  Ｆ８７６Ｌルシフェラーゼ細胞株を、Ａｎｄｒｏｇｅｎ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｌｅｍｅｎｔ  Ｆｉｒｅｆｌｙ  Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅレンチウイルスコンストラクトを製造者の指示（Ｑｉａｇｅｎ社）にしたがってＭＯＩ（多重感染度）５０で各細胞株に形質導入することによって作製した（細胞株作製の説明については、Ｊｏｓｅｐｈ  ＪＤ，Ｌｕ  Ｎ，Ｑｉａｎ  Ｊ，Ｓｅｎｓｉｎｔａｆｆａｒ  Ｊ，Ｓｈａｏ  Ｇ，Ｂｒｉｇｈａｍ  Ｄ，Ｍｏｏｎ  Ｍ，Ｍａｎｅｖａｌ  ＥＣ，Ｃｈｅｎ  Ｉ，Ｄａｒｉｍｏｎｔ  Ｂ，Ｈａｇｅｒ  ＪＨ．Ａ  ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  ｒｅｌｅｖａｎｔ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｃｏｎｆｅｒｓ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ｓｅｃｏｎｄ−ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｔｉａｎｄｒｏｇｅｎｓ  ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ  ａｎｄ  ＡＲＮ−５０９．Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ  ２０１３；３：１０２０〜１０２９を参照）。安定的なプールされた集団細胞株を、１：１０，０００ｖ／ｖでプロマイシン（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）選択を用いて作製した。下記のプロトコルを両方の細胞株に使用し、本発明の式（Ｉ）の化合物の試験にも使用した。
【０１７０】
ＬＮＣａＰ細胞は約８０％コンフルエントまで増殖させ、培地を除去し、細胞をハンクス平衡塩類溶液ですすいでから、０．０５％トリプシンＥＤＴＡでプレートから分離した。細胞を持ち上げ、完全ＣＳＳ（活性炭処理済み血清）培地中でトリプシンを無効化した。ＣＳＳを細胞で２４時間維持した後アッセイを行った。そのとき、５，０００細胞／２０μＬをＧｒｅｉｎｅｒ  ３８４ウェルＷｈｉｔｅ／Ｗｈｉｔｅ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｔｒｅａｔｅｄ  Ｐｌａｔｅｓに播種し、３７℃、５％ＣＯ２で更に１〜２時間インキュベートした後、１０μＬの４×試験化合物（本明細書に記載の化合物）又はアッセイ対照を添加した（全て１０％ＣＳＳを含有する完全培地で希釈）。次いで、１０μＬの４×Ｒ−１８８１アゴニストチャレンジ（アンタゴニストアッセイ）又はバッファ（アゴニストアッセイ）を更に添加した（全て１０％ＣＳＳを含有する完全培地で希釈）。アゴニストチャレンジは、ＷＴアッセイでは４００ｐＭ、Ｆ８７６Ｌアッセイでは６００ｐＭであった。細胞及び本明細書の化合物を含むプレートを更に２０〜２４時間、３７°℃、５％ＣＯ２でインキュベートしてから、４０μＬ／ウェルのＳｔｅａｄｙ−Ｇｌｏ  Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅアッセイシステム試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ＃  Ｅ２５２０）を加えた。１時間後、ＢＭＧ  Ｐｈｅｒａｓｔａｒでプレートのルミネセンスを読み取った。
【０１７１】
アゴニストチャレンジ：Ｒ−１８８１（メトリボロン）−アゴニスト
アンタゴニスト対照（低対照）：５−（５−（４−（（１−メチルピペリジン−４−イル）オキシ）フェニル）−８−オキソ−６−チオキソ−５，７−ジアザスピロ［３．４］オクタン−７−イル）−３−（トリフルオロメチル）ピコリノニトリル（国際公開第２０１１／１０３２０２号、実施例１９、化合物１２９、ＣＡＳ＃１３３２３９０−０６−３）。
【０１７２】
計算及び式：
ＲＬＵ結果をＰｈｅｒａｓｔａｒから回収し、データ計算に直接使用した。
【０１７３】
アッセイで計算された最大パーセンテージ及び阻害：
阻害率（％）：
（１−（サンプルＲＬＵ−平均低対照ＲＬＵ［１０μＭアンタゴニスト対照］）／（平均高対照ＲＬＵ［４００ｐＭ  Ｒ−１８８１］−平均低対照ＲＬＵ［１０μＭアンタゴニスト対照］））＊１００。
【０１７４】
１μＭ  Ｒ−１８８１アゴニスト最大（％）：
（（サンプルＲＬＵ−平均低対照ＲＬＵ［ＤＭＳＯ／緩衝液］）／（平均高対照ＲＬＵ［１μＭ  Ｒ−１８８１］−平均低対照ＲＬＵ［ＤＭＳＯ／緩衝液］））＊１００。
【０１７５】
ＥＣ／ＩＣ５０の計算は、算出されたＲＬＵデータ及びデータフィッティングマクロを用いて達成された。
【０１７６】
データは、下記の式で最小二乗法を使用してフィッティングした。
【０１７７】
【数３】
2019528290.tif 000046
式中、
Ｙ［低化合物］＝不活性な化合物のＹ値
Ｙ［高化合物］＝完全活性の化合物作動因子のＹ値
Ｈｉｌｌ＝ヒル係数
ＥＣ／ＩＣ５０＝５０％効果時の化合物濃度
【０１７８】
得られたデータを表３に示す。
【０１７９】
【表３−１】
2019528290.tif 000047
【０１８０】
【表３−２】
2019528290.tif 000048
【０１８１】
【表３−３】
2019528290.tif 000049
【０１８２】
本明細書で使用するとき：
ｐＩＣ５０は、−Ｌｏｇ１０（ＩＣ５０［モル濃度］）として定義される。
ｐＥＣ５０は、−Ｌｏｇ１０（ＥＣ５０［モル濃度］）として定義される。
ＭＡＸ  ％Ｉｎｈは、試験濃度範囲で化合物に関して観察されたＲ１８８１対照応答の最大阻害％として定義される。
ＭＡＸ  ％Ｓｔｉｍは、試験濃度範囲で化合物に関して観察された最大刺激％（アゴニスト応答）として定義される。
ＬＮＣａＰ−ＡＲ−ｗｔ  ＡＮＴは、アンタゴニストモードにおいて、アンドロゲン応答要素ホタルルシフェラーゼレンチウィルス構造と共に安定的にトランスフェクトされたＬＮＣａＰ細胞と、野生型アンドロゲン受容体（ＡＲ−ｗｔ）を用いたレポーターアッセイを指す。
ＬＮＣａＰ−ＡＲ−ｗｔ  ＡＧは、アゴニストモードにおいて、アンドロゲン応答要素ホタルルシフェラーゼレンチウィルス構造と共に安定的にトランスフェクトされたＬＮＣａＰ細胞と、野生型アンドロゲン受容体（ＡＲ−ｗｔ）を用いたレポーターアッセイを指す。
ＬＮＣａＰ−ＡＲ−Ｆ８７６Ｌ  ＡＮＴは、アンタゴニストモードにおいて、アンドロゲン応答要素ホタルルシフェラーゼレンチウィルス構造と共に安定的にトランスフェクトされたＬＮＣａＰ細胞と、Ｆ８７６Ｌ変異アンドロゲン受容体（ＡＲ−Ｆ８７６Ｌ）を用いたレポーターアッセイを指す。
ＬＮＣａＰ−ＡＲ−Ｆ８７６Ｌ  ＡＧは、アゴニストモードにおいて、アンドロゲン応答要素ホタルルシフェラーゼレンチウィルス構造と共に安定的にトランスフェクトされたＬＮＣａＰ細胞と、Ｆ８７６Ｌ変異アンドロゲン受容体（ＡＲ−Ｆ８７６Ｌ）を用いたレポーターアッセイを指す。
【０１８３】
生物学的実施例３
ＡＲ  Ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｗｅｓｔｅｒｎアッセイ
ポリ−ｄ−リジンでコーティングしたプレートで、ＬＮＣａＰ細胞（８，０００個／ウェル）をＲＰＭＩ培地（１０％活性炭デキストラン処理済み血清を含む）に播種する。２４時間後、細胞を、３０μＭ〜０．０００３μＭの化合物で処理する。化合物添加から２０時間後、細胞を２０分間固定した（ＰＢＳ中３０％ホルムアルデヒド溶液）。細胞をＰＢＳ  ０．１％Ｔｒｉｔｏｎで透過処理し（５０μＬ／ウェル、５分間ずつ３回）、ＬｉＣｏｒ遮断緩衝液で遮断する（５０μＬ／ウェル、９０分間）。次に、ウサギＩｇＧアンドロゲン受容体抗体（ＡＲ−Ｎ２０、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）をＬｉＣｏｒ遮断緩衝液／０．１％  Ｔｗｅｅｎ−２０で１：１０００に希釈したものを加えて、ウェルを４℃で一晩インキュベートする。ウェルを０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０／ＰＢＳ（５０μＬ／ウェル、５分間ずつ）で洗い、０．２％Ｔｗｅｅｎ−２０／０．０１％ＳＤＳ／ＬｉＣｏｒブロッキングバッファで希釈したヤギ抗ウサギＩＲＤｙｅ（商標）８００ＣＷ（１：１０００）及びＤＲＡＱ５  ＤＮＡ色素（５ｍＭ原液を１：１０，００００）中で暗所でインキュベートする（９０分間）。細胞を０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０／ＰＢＳで洗う（５０μＬ／ウェル、各５分間）。洗浄緩衝液を除去し、ＬｉＣｏｒ  Ｏｄｙｓｓｅｙを用いてプレートを読み取った。
【０１８４】
生物学的実施例４
ＬＮＣａＰ  ＡＲ局在アッセイ
１日目にＬＮＣａＰ細胞をプレートに播種し、３７℃で一晩インキュベートした後、２０μＬの予め希釈しておいた化合物又はＤＭＳＯ（基礎、溶媒対照）を添加する。３７℃で１〜２時間プレートをインキュベートした後、２０μＬのリガンド溶液（アンタゴニストモード、高対照）又はＣＳＳ培地（アゴニストモード、非刺激対照）を添加し、＋／−２４時間細胞をインキュベートする。
【０１８５】
細胞を１４０μＬの１０％ホルムアルデヒド（最終５％）で固定し、プレートをＲＴで１５〜２０分間インキュベートする。１００μＬの１００％氷冷メタノール（−２０℃で保存）を添加して細胞を透過処理し、抗体の染色プロトコルを開始し、イメージングのためにプレートを調製する。間接免疫蛍光アッセイを使用して染色を実施する：ＡＲについては、一次抗体は特異的マウス抗ＡＲ抗体（ａｂ４９４５０、Ａｂｃａｍ）であり、続いて、ａｌｅｘａ  ４８８フルオロフォアを担持している二次ヤギ抗マウス抗体である；ＰＳＡについては、一次抗体は特異的ウサギ抗ＰＳＡ抗体（５３６５Ｓ、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、続いて、ａｌｅｘａ  ５６８フルオロフォアを担持している二次ヤギ抗ウサギ抗体である。細胞を、核についてはＨｏｅｃｈｓｔ、細胞質染色については細胞質染色で対比染色する。プレートを洗浄し、更に処理するまで４℃においてＰＢＳ中で維持する。
【０１８６】
Ｏｐｅｒａ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）において２０×Ｗレンズを使用してプレートを撮影し、続いて、このアッセイから報告されたデータを導き出すために以下の計算を適用する。
ＬＣ＝低対照値の中央値＝最小移行
＝ＣＳＳ培地中の細胞（０，５％ＤＭＳＯ）、及び最小移行を示す
ＨＣ＝高対照値の中央値＝最大移行
＝１ｎＭのＲ１８８１リガンドを含有するＣＳＳ培地中の細胞（０，５％ＤＭＳＯ）
効果％＝（サンプル−ＬＣ）／（ＨＣ−ＬＣ）×１００
対照％＝高対照の％＝（サンプル／ＨＣ）×１００
【０１８７】
いくつかの特徴が計算されるが、以下を含む。
Ｒａｔｉｏ＿Ｎｕｃ２Ｃｅｌｌ＿ＡＲ＿ＴｏｔａｌＩｎｔＢＣ．ｍｅｄｉａｎ：単一細胞レベルにおける「合計核ＡＲ強度」／「合計細胞ＡＲ強度」として計算される核中の合計ＡＲの％、次いで、ウェルの特徴として報告された全細胞の中央値［効果％］
Ｃｅｌｌ＿ＡＲ＿ＭｅａｎＩｎｔＢＣ．ｍｅｄｉａｎ：細胞全体におけるＡＲレベル［効果％］
Ｃｙｔｏ＿ＡＲ＿ｍｅａｎＩｎｔＢＣ．ｍｅｄｉａｎ細胞質におけるＡＲレベル［効果％］
Ｎｕｃ＿ＡＲ＿ＭｅａｎＩｎｔＢＣ．ｍｅｄｉａｎ：核におけるＡＲレベル［効果％］
Ｃｅｌｌ＿Ｒｐｔ＿ＭｅａｎＩｎｔＢＣ．ｍｅｄｉａｎ：細胞全体におけるＰＳＡレベル［効果％］
ＣｅｌｌＣｏｕｎｔ＿ＡｌｌＤｅｔｅｃｔｅｄ：細胞数
【０１８８】
生物学的実施例５
前立腺癌細胞生存アッセイ−ＶＣａＰ
ＶＣａＰ細胞を、１０％活性炭処理済み血清を含むフェノールレッド無添加ＤＭＥＭ中、細胞１２５，０００個／ｍＬの濃度で、透明な底の黒色３８４ウェルプレートに、計数して播種した。ウェル当たり１６μＬの懸濁液を加え、４８時間インキュベートして、細胞を付着させた。４８時間後、各化合物の１２点片対数段階希釈を１６μＬずつ細胞に加え、最終濃度を１００μＭ〜０．０００３μＭとした。式（Ｉ）の化合物を、３０ｐＭ  Ｒ１８８１を用いて、アンタゴニストモードでも実施した。これは、化合物８μＬを細胞に加え、次いで８μＬのＲ１８８１を加えた。３７℃でのインキュベーションを５日間行った後、１６μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を細胞に加え、Ｅｎｖｉｓｉｏｎを使って各ウェルの相対発光単位（ＲＬＵ）を測定した。刺激（％）と阻害（％）を各サンプルについて測定し、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いてプロットした。得られたデータを表５に示す。
【０１８９】
【表４】
2019528290.tif 000050
【０１９０】
生物学的実施例６
ＬＮＣａＰ増殖アッセイ
ＬＮＣａＰ細胞をＴ１５０フラスコ中においてＲＰＭＩ  １０％ＦＢＳで拡散させた。０．２５％トリプシンで細胞を剥がし、完全培地で洗い、遠心分離し（３００ｇ、３分間）、上澄み液を吸引した。細胞を、１％活性炭処理済み血清（ＣＳＳ）を含むＲＰＭＩフェノールレッド無添加培地に再懸濁させ、ＶｉＣＥＬＬ（Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いて計数した。白色の光学用底３８４ウェルプレートの各ウェルに細胞７５００個を加え、２日間３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートした。５０ｍＭストック溶液を使ってＲＰＭＩ  ＣＳＳで化合物希釈を調製し、各セルに、単独で（アゴニストモード）、又は０．１ｎＭ  Ｒ１８８１と組み合わせて（アンタゴニストモード）、加えた。プレートを４日間インキュベートした後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙキット試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を加えた。プレートを３０００ｒｐｍの振盪器に１０分間かけて、次いで、ルミネセンスアッセイのデフォルト設定を使ってＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。データを分析し、０．１ｎＭ  Ｒ１８８１刺激に正規化して、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍでプロットした。得られたデータを表６に示す。
【０１９１】
【表５】
2019528290.tif 000051
【０１９２】
生物学的実施例７
ルシフェラーゼ転写レポーターアッセイ（ＷＴ及び変異ＡＲ）
ＨｅｐＧ２細胞を、１０％ＦＢＳを加えたＥＭＥＭ中に維持した。トランスフェクトを行う１日前に、培地を、１０％ＣＳＳを含むＥＭＥＭに変えた。１２０μＬ  Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、３０μｇ変異ｃＤＮＡ（発現ベクター）（試験した変異ｃＤＮＡはＬ７０１Ｈ、Ｔ８７７Ａ、Ｗ７４１Ｃ、及びＨ８７４Ｙであった）、４０μｇ  ４Ｘ  ＡＲＥ−ルシフェラーゼ（レポーターベクター）のＯｐｔｉＭＥＭ中溶液を用いて、Ｔ−１５０フラスコを一時的にトランスフェクトし、フラスコを一晩インキュベートした。次に細胞をトリプシン処理し、計数し、細胞５００，０００個／ｍＬで再懸濁させた。アゴニストモードについては、式（Ｉ）の化合物を段階希釈し、１ウェル当たり化合物５０μＬを加える。各ウェルに５０μＬの細胞を加え、４８時間インキュベートする。アンタゴニストモードについては、最終濃度９０ｐＭのＲ１８８１を希釈した化合物に加え、４８時間インキュベートする。次に、ＳｔｅａｄｙＧｌｏを用いてプレートにアッセイを行い、Ｅｎｖｉｓｉｏｎで読み取った。刺激％及び阻害％を測定し、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いて分析する。得られたデータを表７に示す。
【０１９３】
【表６】
2019528290.tif 000052
【０１９４】
レポーターアッセイに使用したＡＲ  ｃＤＮＡそれぞれについてのアンタゴニズム（ＩＣ５０）値が要約されている。ＮＴは未試験であり、＊は不完全阻害（そうでなければ１００％）を意味する。
【０１９５】
Ｒ１８８１により誘発されたアンドロゲン受容体活性（ｎ≧３）の活性に対して、全ての値が計算されている。
【０１９６】
生物学的実施例８
ＡＲ−ＶＰ１６  ＤＮＡ結合アッセイ
ＨｅｐＧ２細胞を、１０％ＦＢＳを加えたＥＭＥＭ中に維持した。トランスフェクトを行う１日前に、培地を、１０％ＣＳＳを含むＥＭＥＭに変えた。１２０μＬ  Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、２４．５μｇ  ＡＲ−ＶＰ１６又はＦ８７６Ｌ−ＶＰ１６（発現ベクター）、４９μｇ  ４Ｘ  ＡＲＥ−ルシフェラーゼ（レポーターベクター）のＯｐｔｉＭＥＭ中溶液を用いて、Ｔ−１５０フラスコを一時的にトランスフェクトし、フラスコを一晩インキュベートした。次に細胞をトリプシン処理し、計数し、細胞５００，０００個／ｍＬで再懸濁させた。アゴニストモードについては、化合物を段階希釈し、ウェル当たり化合物５０μＬを加えた。各ウェルに５０μＬの細胞を加え、４８時間インキュベートした。アンタゴニストモードについては、最終濃度９０ｐＭ（ＶＰ１６  ＡＲ）又は１ｎＭ（ＶＰ１６  Ｆ８７６Ｌ）のＲ１８８１をプレートに加え、４８時間インキュベートした。次に、ＳｔｅａｄｙＧｌｏを用いてプレートにアッセイを行い、Ｅｎｖｉｓｉｏｎで読み取った。刺激（％）と阻害（％）を測定し、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いて分析した。得られたデータを表８に示す。
【０１９７】
【表７】
2019528290.tif 000053
【０１９８】
生物学的実施例９
ＧＡＢＡゲートＣｌチャネルアンタゴニスト放射性リガンド結合アッセイ
ＧＡＢＡゲートＣｌチャネルアッセイは、下記の方法に従い、ＣＥＲＥＰで実施された。大脳皮質の膜ホモジネート（タンパク質１２０μｇ）を、５０ｍＭ  Ｎａ２ＨＰＯ４／ＫＨ２ＰＯ４（ｐＨ７．４）及び５００ｍＭ  ＮａＣｌを含む緩衝液中、３ｎＭ［３５Ｓ］−ＴＢＰＳと共に、試験化合物なしで又は試験化合物の存在下で、１２０分間２２℃でインキュベートした。２０μＭピクロトキシンの存在下で、非特異的結合を測定した。インキュベーションの後、サンプルを、０．３％ＰＥＩで予備浸漬したガラスファイバーフィルター（ＧＦ／Ｂ、Ｐａｃａｒｄ）を通して真空下で急速濾過し、９６サンプル細胞ハーベスター（Ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ、Ｐａｃｋａｒｄ）を使って、氷冷５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌで数回すすいだ。フィルターを乾燥させてから、シンチレーションカウンター（Ｔｏｐｃｏｕｎｔ、Ｐａｃｋａｒｄ）でシンチレーションカクテル（Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ  ０、Ｐａｃｋａｒｄ）を用いて放射能を計測した。結果は、対照の放射性リガンド特異結合の阻害％として表される。標準参照化合物はピクロトキシンである。これはいくつかの濃度で各実験において試験され、競合曲線を得て、ここからＩＣ５０が計算された。このアッセイでは、本明細書に開示される下記の代表的な化合物について、ＧＡＢＡゲートＣｌチャネル結合アッセイにおいて１０μＭ単一点濃度で活性が記録された。得られたデータを表９に示す。
【０１９９】
【表８】
2019528290.tif 000054
【０２００】
インビボアッセイ
生物学的実施例Ｖ１
ハーシュバーガーアッセイ
アンドロゲン依存性シグナリングについてインビボでのＡＲアンタゴニストの効果が、ハーシュバーガーアッセイを用いて評価された。このアッセイでは、思春期前後に去勢されたオスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに、テストステロン（プロピオン酸テストステロン０．４ｍｇ／ｋｇ）の存在下で本明細書に記述されるＡＲアンタゴニストを投与し、アンドロゲン依存性臓器の重量を測定した。投与量は１０日間継続され、最後の投与から２４時間後に測定が行われた。ＡＲの拮抗作用の度合と、その結果の臓器成長の阻害が、去勢対照との比較により評価された。式（Ｉ）の化合物を１日１回経口投与し、エンドポイント評価は、次の５つのアンドロゲン感受性臓器（ＡＳＯ）の重量変化によって行われた：対のカウパー腺（ＣＧ）、精嚢（液及び凝固腺を含む）（ＳＶＣＧ）、陰茎亀頭（ＧＰ）、腹側前立腺（ＶＰ）、及び肛門挙筋−球海綿体筋複合体（ＬＡＢＣ）。アッセイガイドラインに従い、抗アンドロゲン剤として分類される化合物としては、５つのＡＳＯ臓器のうち２つが統計学的に有意に抑制されていることが必要である（分析はｔ検定及びマン−ホイットニー検定により行った）。
【０２０１】
本明細書に定義される化合物を指定の用量（ｍｇ／ｋｇ）で、そして、陽性対照であるフルタミド（ＦＴ）を３ｍｇ／ｋｇで投与した。全ての化合物がプロピオン酸テストステロン（ＴＰ、０．４ｍｇ／ｋｇ）と同時投与された。プロピオン酸テストステロンはまた、未処理対照として、単独でも投与された（完全なアンドロゲン遮断のため、去勢のみのラットが対照として用いられた）。５つの臓器のうち少なくとも２つで達成された、ＡＳＯにおける統計学的に有意な変化は、活性化合物であることを示した。化合物４３の投与により、５つ全ての臓器において、ＴＰ対照に比べ、ＡＳＯが有意に減少した（ｐ≦０．０５）。精嚢及び凝固腺（Seminal Vesicle and Coagulating Glands、ＳＶＣＧ）と腹側前立腺（Ventral Prostate、ＶＰ）の成長阻害のデータを、全ての試験について報告した（平均臓器重量（ＴＰ対照に対する％）±ＳＤ（ｎ＝６））。得られたデータを表１０に示す。
【０２０２】
【表９】
2019528290.tif 000055
【０２０３】
生物学的実施例Ｖ２
去勢抵抗性前立腺癌異種移植試験
去勢した生後６〜７週のオスＳＣＩＤ無毛非近交系マウス（ＳＨＯ、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を、異種移植試験の宿主系として使用した。ＬＮＣａＰ  ＳＲα  Ｆ８７６Ｌ腫瘍を宿主マウスにおいて確立し、本明細書に定義される化合物の抗腫瘍活性を測定した。腫瘍が１００〜２００ｍｍ３に達したら投与を開始し、動物を各試群に無作為化した（溶媒（ＨＰ−β−ＣＤ）、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、又は５０ｍｇ／ｋｇ化合物）。化合物を２８日間１日１回経口投与し、体重測定と共に腫瘍サイズを１週間に２回測定した。試験の終了時に、初期腫瘍体積及び最終腫瘍体積測定を使用してＴＧＩを計算した。ＴＧＩ：１００−（処理／対照＊１００）。試験終了時に腫瘍を採取し、更なる分析のために保存した。得られたデータを表１１に示す。
【０２０４】
【表１０】
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【０２０５】
上記の明細書は、説明を目的として与えられる実施例と共に本発明の原理を教示するものであるが、本発明の実施には、以下の特許請求の範囲及びその均等物の範囲内に含まれる全ての通常の変形例、適合例及び／又は改変例が包含される点は理解されるであろう。
【国際調査報告】
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