【手続補正書】
【提出日】平成19年7月10日(2007.7.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
３分節より多いゲノムvRNA分節をもつ分節化(−)鎖RNAウイルスの感染性ウイルス粒子を産生する方法であって：
培養細胞に、該細胞内で該ウイルスの完全なゲノムvRNA分節または該ウイルスの対応する完全なcDNAを発現する発現ベクターを導入することを含んでなり、ここで、該細胞は該ウイルスの増殖を支持し、かつ、該細胞は核タンパク質およびRNA依存性RNAポリメラーゼを提供し、それにより、該ウイルスのゲノムvRNA分節を含むRNP複合体が形成されて、ヘルパーウイルスの不在下で該感染性ウイルス粒子が該細胞により産生され、そして
該細胞はインターフェロン活性または応答に欠陥があるものである、
上記方法。
【請求項２】
前記細胞において、前記核タンパク質および前記RNA依存性RNAポリメラーゼサブユニットから選択される１種以上のタンパク質を発現させるために、１以上の別の発現ベクターを用いる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
１種以上の前記核タンパク質および前記RNA依存性RNAポリメラーゼサブユニットを発現することができる細胞系を用いる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記ウイルスがＡ、ＢまたはＣ型のインフルエンザウイルスである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記ウイルスが２種以上の親ウイルスに由来するvRNA分節をもつ再構築ウイルスである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記細胞がベロ細胞である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
請求項１において規定された前記発現ベクターが前記ウイルスのゲノムvRNA分節を発現する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
同一または異なる細胞を用いる１回以上の追加の細胞感染ステップにより、前記形成されたウイルス粒子を増幅することをさらに含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
感染性ウイルス粒子を単離することをさらに含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
ウイルスの弱毒化または不活化ステップをさらに含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
必要とされる全ての発現ベクターを、リポソームトランスフェクション試薬、リン酸カルシウム沈降またはエレクトロポーレーションを用いて、前記細胞中に共トランスフェクトする、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記発現ベクターがすべてプラスミドである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
請求項１において規定された前記発現ベクターが、前記ウイルスの各vRNA分節または対応するcRNAを発現させるための別個の発現ベクターから構成される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
各vRNA分節またはcRNAの発現が哺乳動物PolIプロモーターから誘導されたプロモーター配列の制御下にある、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記プロモーター配列が、対応する天然プロモーターのヌクレオチド-250から-1までからなるトランケートされたヒトPolIプロモーター配列またはその機能性誘導体である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記発現ベクター中の各vRNA分節またはcRNAのコード配列の後に前記各RNAの正しい3'末端を確実にするリボザイム配列または転写ターミネーターが続く、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記別の発現ベクターからの１種以上のウイルスタンパク質の発現が、ヒトアデノウイルス２型のスプライスされた三分節リーダー配列に連結されたアデノウイルス２主要後期プロモーターもしくはヒトサイトメガロウイルスの即時型プロモーターから選択される調節配列、または該調節配列の機能性誘導体の制御下にある、請求項２に記載の方法。
【請求項１８】
ワクチン組成物中に弱毒化または不活化ウイルスを組み入れることをさらに含む、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ウイルスが、該ウイルスに感染した標的細胞中で該ウイルスに対して異種の配列の発現を指令することができる少なくとも１つのvRNA分節を含む、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ウイルスに対して異種の配列が抗原ペプチドまたは抗原ポリペプチドをコードし、そして、前記方法が、該ウイルスをワクチン組成物中に組み入れることをさらに含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
請求項１または６において規定された改変された細胞。
【請求項２２】
請求項２１に記載の改変された細胞を培養することを含む、分節化(−)鎖ウイルスの感染性ウイルス粒子の産生方法。
【請求項２３】
培養細胞において、分節化(−)鎖ウイルスの感染性ウイルス粒子を作製する方法であって：
第１の集団の細胞を用意することを含んでなり、ここで、該細胞は該ウイルスの増殖を支持する能力があり、かつ、(a)該ウイルスのゲノムvRNAと、(b) 核タンパク質およびRNA依存性RNAポリメラーゼと、を提供するよう改変されており、それにより、該ゲノムvRNAを含むRNP複合体が形成されて該感染性ウイルス粒子が組み立てられ、該ゲノムvRNAは該細胞内で哺乳動物PolIプロモーターまたはその機能性誘導体の制御下に、ヘルパーウイルスの不在下で直接発現され、そして
該細胞はインターフェロン活性または応答に欠陥があるものである、
上記方法。
【請求項２４】
同一のまたは異なる細胞を用いる１回以上の追加の細胞感染ステップにより組み立てられた前記ウイルス粒子を増幅することをさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
感染性ウイルス粒子を単離することをさらに含む、請求項２３または２４に記載の方法。
【請求項２６】
ウイルスの弱毒化または不活化ステップをさらに含む、請求項２３〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
ワクチン組成物中に弱毒化ウイルス粒子または不活化ウイルス粒子を組み入れることをさらに含む、請求項２３〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記ウイルスが、該ウイルスに感染した標的細胞中で該ウイルスに対して異種の配列の発現を指令することができる少なくとも１つのvRNA分節を含み、そして、前記方法が、該ウイルスを、適宜に弱毒化または不活化した後で、製薬上許容される担体または希釈剤と共に医薬組成物中に組み入れることをさらに含む、請求項２３〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記細胞がベロ細胞である、請求項２３〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
請求項２３または２９において規定された改変された細胞。
【請求項３１】
請求項３０に記載の改変された細胞を培養することを含む、分節化(−)鎖ウイルスの感染性ウイルス粒子の産生方法。
【請求項３２】
増幅に使用される細胞がMDBK細胞またはMDCK細胞である、請求項８〜１６および１８〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
増幅に使用される細胞がMDBK細胞またはMDCK細胞である、請求項２４〜２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
ワクチンとして使用されるウイルス粒子のin vitro産生のための、請求項１〜１７、２２〜２６、２９または３１〜３３のいずれか１項に記載の方法により産生されたウイルス粒子の使用。
【請求項３５】
ウイルス粒子の産生に使用される細胞のin vitro感染のための、請求項１〜１７、２２〜２６、２９または３１〜３３のいずれか１項に記載の方法により産生されたウイルス粒子の使用。
【請求項３６】
ワクチンのin vitro調製のための、請求項１〜１７、２２〜２６、２９または３１〜３３のいずれか１項に記載の方法により産生されたウイルス粒子の使用。
【請求項３７】
前記in vitro産生、感染または調製が孵化鶏卵内で起こる、請求項３４、３５または３６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３８】
前記細胞が核タンパク質をもたらすことができるように改変されたものである、請求項１〜２０、２２〜２９または３１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
産生された該ウイルス粒子を、ワクチンとして使用されるウイルス粒子の産生のために使用することをさらに含む、請求項１〜１７、２２〜２６、２９、３１〜３３、３６または３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
前記ウイルスがＡ、ＢまたはＣ型のインフルエンザウイルスである、請求項３４または３５に記載の使用。
【請求項４１】
請求項１〜１７、２２〜２６、２９または３１〜３３のいずれか１項に記載の方法により産生されたウイルス粒子。
【請求項４２】
請求項３４、３５または３６のいずれか１項に記載の使用により産生されたウイルス粒子。
【請求項４３】
請求項４０に記載の使用により産生されたウイルス粒子。
【請求項４４】
インフルエンザ感染に対するワクチン接種のための医薬の製剤化における、請求項４１に記載のウイルス粒子の使用。
【請求項４５】
インフルエンザ感染に対するワクチン接種のための医薬の製剤化における、請求項４２に記載のウイルス粒子の使用。
【請求項４６】
インフルエンザ感染に対するワクチン接種のための医薬の製剤化における、請求項４３に記載のウイルス粒子の使用。
【請求項４７】
請求項３４に記載の方法により産生されたワクチン。
【請求項４８】
請求項３５に記載の方法により産生されたワクチン。
【請求項４９】
請求項３６に記載の方法により産生されたワクチン。