【手続補正書】
【提出日】平成19年10月29日(2007.10.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
標的細胞を流体サンプルから単離するための装置であって、該装置は、以下：
内部表面および外部表面を有する容器；
１種以上の細胞接着分子に結合する非反応性のコア材料を含む細胞接着マトリックス
を備え；
ここで、該細胞接着マトリックスが、該容器の該内部表面を覆っている、装置。
【請求項２】
請求項１に記載の装置であって、ここで、前記細胞接着マトリックスの非反応性のコア材料が、以下：
ゼラチン、架橋ゼラチン、骨、ガラス、不活性ポリマー、およびデキストランからなる群より選択される、少なくとも一つの材料である、装置。
【請求項３】
請求項１に記載の装置であって、前記細胞接着マトリックスの細胞接着分子が、プロテオグリカン、フィブロネクチン、フィブリン、ヘパリン、ラミニン、テネイシン、ビトロネクチン、および／またはこれらのフラグメントからなる群より選択される、少なくとも一つの分子である、装置。
【請求項４】
請求項１に記載の装置であって、前記容器の内部表面が、前記細胞接着マトリックスで、少なくとも５％覆われている、装置。
【請求項５】
請求項１に記載の装置であって、前記標的細胞に対して親和性を有する少なくとも一つのリガンドをさらに含み、該リガンドは、該標的細胞に結合する場合に検出可能である、装置。
【請求項６】
請求項５に記載の装置であって、前記リガンドが蛍光標識されている、装置。
【請求項７】
請求項５に記載の装置であって、前記リガンドが前記細胞接着マトリックスへと組み込まれている、装置。
【請求項８】
請求項５に記載の装置であって、前記リガンドが、前記細胞接着マトリックスに結合する層中に見出される、装置。
【請求項９】
請求項１に記載の装置であって、前記細胞接着マトリックスに近接する細胞分離機構をさらに含み、該細胞分離機構は、前記標的細胞と該細胞接着マトリックスとの相互作用の前に該標的細胞を含有するサンプルから細胞を取り除くように、作動可能に構成される、装置。
【請求項１０】
請求項９に記載の装置であって、該細胞分離メカニズムが、フィルター、膜、メッシュ、物質勾配からなる群より選択される、少なくとも一つの機構である、装置。
【請求項１１】
請求項５に記載の装置であって、少なくとも１種のリガンドが、該リガンドと単離された標的細胞との相互作用の際に視覚的検出を可能にするように、作動可能に構成される、装置。
【請求項１２】
請求項１に記載の装置を使用する方法であって、該方法は、以下：
該装置において、前記流体サンプル中の細胞の混合物を前記細胞接着マトリックスに接触させる工程；
標的細胞を該細胞接着マトリックスから単離する工程；
を包含する、方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法であって、該方法は、未結合の細胞を前記細胞接着マトリックスから取り除く工程をさらに包含する、方法。
【請求項１４】
請求項１２に記載の方法であって、前記流体サンプルが、血液サンプルもしくは腹水サンプル、または生検サンプルもしくは擦過サンプルもしくは塗抹サンプルである、方法。
【請求項１５】
請求項１２に記載の方法であって、前記細胞混合物が、密度勾配遠心分離または赤血球溶解の後、血液サンプル由来の単核細胞を含む、方法。
【請求項１６】
請求項１２に記載の方法であって、ここで、前記標的細胞が、腫瘍細胞、内皮細胞または胎児細胞である、方法。
【請求項１７】
請求項１６に記載の方法であって、前記腫瘍細胞が、肺癌、膀胱癌、乳房組織の癌、卵巣癌、前立腺癌、膵臓癌、胸部の癌、皮膚癌、肝臓癌、胃癌、食道癌、頭部および頚部の癌、頚部癌、子宮癌、脳の癌、腎臓癌、甲状腺癌、結腸癌または直腸癌のうちの少なくとも一つの癌に由来する、方法。
【請求項１８】
請求項１２に記載の方法であって、前記標的細胞が内皮細胞または内皮前駆体細胞である、方法。
【請求項１９】
請求項１２の方法であって、前記標的細胞が妊娠雌から取得した胎児の細胞である、方法。
【請求項２０】
請求項１２の方法であって、前記細胞接着マトリックスがビーズを含む、方法。
【請求項２１】
請求項１２の方法であって、前記細胞マトリックスが蛍光標識された細胞接着マトリックス成分を含有する、方法。
【請求項２２】
請求項１２の方法であって、前記標的細胞が浸潤突起を含む、方法。
【請求項２３】
請求項１２の方法であって、前記標的細胞が細胞接着レセプターのインテグリンを含む、方法。
【請求項２４】
開口部、底部、および周囲の側壁を有する容器であって、該容器は、該容器の内部表面上に細胞接着マトリックスの少なくとも一つの被覆層を含み、該被覆層は、流体が該容器の開口部の中に置かれた場合に流体サンプルによって接触されるように、作動可能に構成されている、容器。
【請求項２５】
請求項２４に記載の容器であって、該容器は、マイクロタイタープレート、顕微鏡スライドチャンバ、組織培養デバイス、細胞チャンバユニット、血液濾過ユニット、チューブ、瓶、またはこれらの組み合わせ、からなる群より選択される、容器。
【請求項２６】
請求項２１に記載されている、蛍光標識された細胞接着マトリックスであって、ここで、該マトリックスは、血液中の癌細胞を標識するために使用される、細胞接着マトリックス。
【請求項２７】
疾患の出生前診断を補助するための方法であって、該方法は、以下：
妊娠雌からの血液サンプルを、細胞接着マトリックスと接触させる工程、
該細胞接着マトリックスから胎児細胞を単離する工程、
該胎児細胞を培地中で培養する工程、および
遺伝的異常および染色体異常の存在に関して、該胎児細胞を試験する工程
を包含する、方法。
【請求項２８】
請求項２７に記載の方法であって、前記遺伝的異常および染色体異常が、ダウン症候群、マルファン症候群、テイサックス病、およびサラセミア、からなる群より選択される、方法。
【請求項２９】
請求項２７に記載の方法であって、前記細胞接着マトリックスが、多数の被覆されたビーズを含み、このビーズが、非反応性のコア材料を含有し、かつ該コア材料の周囲に細胞接着分子を含有する、方法。
【請求項３０】
請求項２９に記載されている細胞接着マトリックスであって、前記非反応性のコアが、コラーゲンマイクロビーズ、ゼラチンマイクロビーズおよびガラスマイクロビーズまたはこれらの組み合わせ、からなる群より選択される、少なくとも１種の材料である、細胞接着マトリックス。
【請求項３１】
請求項３０に記載の細胞接着マトリックスであって、前記コラーゲンが、蛍光染料で標識されている、細胞接着マトリックス。
【請求項３２】
癌のインビトロでの診断を補助するための方法であって、該方法は、以下：
患者から得られたサンプル流体を、血液由来の成分を含有する細胞接着マトリックスと接触させる工程、
該マトリックスに付着した転移性の腫瘍細胞を、該サンプルの流体中の細胞から単離する工程；
該マトリックスに付着した該転移性の腫瘍細胞を、所定の期間培養する工程；ならびに
該培養物における該転移性腫瘍細胞の顕微鏡分析およびフローサイトメトリー分析を行う工程
を包含する、方法。
【請求項３３】
請求項３２に記載の方法であって、該方法は、前記転移性の癌細胞の免疫組織化学を行い、前記サンプル流体中に存在する癌細胞の型を同定する工程、および／または該癌細胞を標識細胞接着マトリックスおよび核酸染料で染色して、該サンプル流体中に存在する癌細胞の型を同定する工程、をさらに包含する、方法。
【請求項３４】
請求項３２に記載の方法であって、該方法は、上皮腫瘍遺伝子マーカーのＤＮＡマイクロアレイ分析および／またはリアルタイムＰＣＲ定量を用いて、前記転移性腫瘍細胞を特徴付ける工程をさらに包含する、方法。
【請求項３５】
請求項３４に記載の方法であって、ここで、前記腫瘍遺伝子マーカーが、ＧＡ７３３−２、ＧＡ７３３−１、ＭＭＰ７、ムチン１、リポカリン２、サイトケラチン１８、Ｅ−カドヘリン−１、セプラーゼ、自家毒素、およびＣＸＣＲ４である、方法。
【請求項３６】
流体入口および流体出口を収納する濾過カセットであって、該濾過カセットは、
該流体入口に近接する前フィルター；
該流体出口に近接する後フィルター；および
細胞接着マトリックスを備えるフィルター区画であって、該フィルター区画は、該前フィルターと後フィルターとの間に配置されている、フィルター区画
を含む、濾過カセット。
【請求項３７】
請求項３６に記載の濾過カセットであって、前記前フィルターまたは前記後フィルターのうちの１つが、細胞接着マトリックスに結合している、濾過カセット。
【請求項３８】
流体サンプルから標的細胞を単離するための装置であって、該装置は、以下：
該流体サンプルを保持するように設計された内側表面と外側表面とを有する、容器
細胞接着マトリックスを有するカードに連結された蓋を備える、ディップスティック
を備える、装置。