【手続補正書】
【提出日】平成19年7月6日(2007.7.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  HER2/neuに特異的に結合してHER2/neu発現細胞の成長を阻害する、トランスジェニック非ヒト動物により産生される単離されるヒトモノクローナル抗体。
【請求項２】  前記抗体が、少なくとも約１０８Ｍ−１の平衡会合定数（Ka）でヒトHER2/neuに結合する、請求項１に記載のヒト抗体。
【請求項３】  前記抗体が、少なくとも約１０９Ｍ−１の平衡会合定数（Ka）でヒトHER2/neuに結合する、請求項１に記載のヒト抗体。
【請求項４】  前記抗体が腫瘍細胞成長を少なくとも約４０％、阻害する、請求項１に記載のヒト抗体。
【請求項５】  前記抗体が腫瘍細胞成長を少なくとも約６０％、阻害する、請求項１に記載のヒト抗体。
【請求項６】  前記抗体がEGFRに結合しない、請求項１に記載のヒト抗体。
【請求項７】  前記抗体Ｈ鎖がIgG1又はIgG3Ｈ鎖である、請求項１に記載のヒト抗体。
【請求項８】  それぞれSEQ ID NO:1及びSEQ ID NO:3、及び、それらの保存的配列改変体、に記載されたヌクレオチド配列を含むヒトIgGＨ鎖及びヒトカッパＬ鎖核酸に可変領域がコードされた、単離されたヒトモノクローナル抗体。
【請求項９】  それぞれSEQ ID NO:2及びSEQ ID NO:4に示されたアミノ酸配列、及び、それらの保存的配列改変体、を含むIgGＨ鎖及びカッパＬ鎖可変領域を有する単離されたヒトモノクローナル抗体。
【請求項１０】  それぞれSEQ ID NO:5及びSEQ ID NO:7、及び、それらの保存的配列改変体、に記載されたヌクレオチド配列を含むヒトIgGＨ鎖及びヒトカッパＬ鎖核酸に可変領域がコードされた、単離されたヒトモノクローナル抗体。
【請求項１１】  それぞれSEQ ID NO:6及びSEQ ID NO:8に示されたアミノ酸配列、及び、それらの保存的配列改変体、を含むIgGＨ鎖及びカッパＬ鎖可変領域を有する単離されたヒトモノクローナル抗体。
【請求項１２】  それぞれSEQ ID NO:9及びSEQ ID NO:11、及び、それらの保存的配列改変体、に記載されたヌクレオチド配列を含むヒトIgGＨ鎖及びヒトカッパＬ鎖核酸に可変領域がコードされた、単離されたヒトモノクローナル抗体。
【請求項１３】  それぞれSEQ ID NO:10及びSEQ ID NO:12に示されたアミノ酸配列、及び、それらの保存的配列改変体、を含むIgGＨ鎖及びカッパＬ鎖可変領域を有する単離されたヒトモノクローナル抗体。
【請求項１４】  前記抗体が、
ａ）少なくとも約１０８Ｍ−１の結合親和定数；
ｂ）少なくとも約１０４の会合定数（Kassoc）；
ｃ）HER2/neu発現細胞をオプソニン化する能力；又は
ｄ）インビトロで、約１０μｇ／ｍｌの濃度の時に、ヒトエフェクタ細胞の存在下でHER2/neu発現細胞の細胞溶解を媒介する能力
からなる群より選択される特徴の少なくとも一つを有する、請求項１に記載のヒト抗体。
【請求項１５】  前記HER2/neu発現抗体が腫瘍細胞である、請求項１に記載のヒト抗体。
【請求項１６】  前記HER2/neu発現細胞が、腺癌細胞、例えば唾液腺、胃及び腎臓、乳腺カルチノーマ細胞、肺癌細胞、扁平上皮癌細胞、及び卵巣癌細胞からなる群より選択される、請求項１５に記載のヒト抗体。
【請求項１７】  ヒトＨ鎖導入遺伝子及びヒトＬ鎖導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック非ヒト動物から得られたＢ細胞を不死化細胞に融合させて含有するハイブリドーマにより産生される、請求項１に記載のヒト抗体。
【請求項１８】  3.F2、2.E8、1.D2、1.B10及び3.B4からなる群より選択されるハイブリドーマにより産生される、単離されたヒトモノクローナル抗体。
【請求項１９】  ヒトエフェクタ細胞の存在下で、HER2/neuに特異的に結合して、HER2/neu発現細胞の細胞溶解を媒介する、単離されたヒトモノクローナル抗体であって、トランスジェニック非ヒト動物によって産生される、抗体。
【請求項２０】  インビトロで、IC50 が１×１０−７M以下のときに、 ヒトエフェクタ細胞によるHER2/neu発現細胞の細胞溶解を媒介できる、請求項８に記載の単離されたヒト抗体又はその抗原結合部分。
【請求項２１】  ヒトＨ鎖導入遺伝子及びヒトＬ鎖導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック非ヒト動物から得られたＢ細胞を不死化細胞に融合させて含むハイブリドーマであって、HER2/neuに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体を産生する、ハイブリドーマ。
【請求項２２】  それぞれSEQ ID NO:1及びSEQ ID NO:3、及び、それらの保存的配列改変体、に記載されたヌクレオチド配列を含むヒトIgGＨ鎖及びヒトカッパＬ鎖核酸に可変領域がコードされたヒトモノクローナル抗体を産生する、請求項２１に記載のハイブリドーマ。
【請求項２３】  それぞれSEQ ID NO:2及びSEQ ID NO:4に示されたアミノ酸配列、及び、それらの保存的配列改変体、を含むIgGＨ鎖及びカッパＬ鎖可変領域を有するヒトモノクローナル抗体を産生する、請求項２１に記載のハイブリドーマ。
【請求項２４】  それぞれSEQ ID NO:5及びSEQ ID NO:7、及び、それらの保存的配列改変体、に記載されたヌクレオチド配列を含むヒトIgGＨ鎖及びヒトカッパＬ鎖核酸に可変領域がコードされたヒトモノクローナル抗体を産生する、請求項２１に記載のハイブリドーマ。
【請求項２５】  それぞれSEQ ID NO:6及びSEQ ID NO:8に示されたアミノ酸配列、及び、それらの保存的配列改変体、を含むIgGＨ鎖及びカッパＬ鎖可変領域を有するヒトモノクローナル抗体を産生する、請求項２１に記載のハイブリドーマ。
【請求項２６】  それぞれSEQ ID NO:9及びSEQ ID NO:11、及び、それらの保存的配列改変体、に記載されたヌクレオチド配列を含むヒトIgGＨ鎖及びヒトカッパＬ鎖核酸に可変領域がコードされたヒトモノクローナル抗体を産生する、請求項２１に記載のハイブリドーマ。
【請求項２７】  それぞれSEQ ID NO:10及びSEQ ID NO:12に示されたアミノ酸配列、及び、それらの保存的配列改変体、を含むIgGＨ鎖及びカッパＬ鎖可変領域を有するヒトモノクローナル抗体を産生する、請求項２１に記載のハイブリドーマ。
【請求項２８】  3.F2、2.E8、1.D2、1.B10及び3.B4からなる群より選択される、請求項２１に記載のハイブリドーマ。
【請求項２９】  HER2/neuに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体を発現するトランスジェニック非ヒト動物であって、ヒトＨ鎖導入遺伝子及びヒトＬ鎖導入遺伝子を含むゲノムを有する、トランスジェニック非ヒト動物。
【請求項３０】  ヒトＨ鎖導入遺伝子及びヒトＬ鎖導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック非ヒト動物を、HER2/neu、又は、HER2/neuを発現する細胞、で、前記動物のＢ細胞により抗体が産生されるように、免疫化するステップと、
前記動物のＢ細胞を単離するステップと、
前記Ｂ細胞を骨髄腫細胞に融合して、HER2/neuに特異的なヒトモノクローナル抗体を分泌する不死のハイブリドーマ細胞を形成するステップと
を含む、HER2/neuに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体を作製する方法。
【請求項３１】  HER2/neuに特異的に結合する、ヒトモノクローナル抗体又はその抗原結合部分である、第一の結合特異性と、Fc受容体に対する第二の結合特異性とを含む、二重特異的分子。
【請求項３２】  前記Fc受容体がヒトFcγRI又はヒトFcα受容体である、請求項３１に記載の二重特異的分子。
【請求項３３】  前記Fc受容体のうちの、前記受容体の免疫グロブリン結合部位とは異なる部位に結合する、請求項３１に記載の二重特異的分子。
【請求項３４】  Fc受容体に結合する前記第二の結合特異性が、ヒトモノクローナル抗体又はその抗原結合部分である、請求項３１に記載の二重特異的分子。
【請求項３５】  一本鎖又はFab'融合タンパク質である、請求項３１に記載の二重特異的分子。
【請求項３６】  HER2/neuに特異的に結合する、ヒトモノクローナル抗体又はその抗原結合部分である、第一の結合特異性と、Fc受容体に対する第二の結合特異性と、HER2/heu以外の腫瘍抗原に対する第三の結合特異性とを含む、多重特異的分子。
【請求項３７】  前記第三の結合特異性がEGFである、請求項３６に記載の多重特異的分子。
【請求項３８】  HER2/neuに特異的に結合する単離されたヒトモノクローナル抗体又はその抗原結合部分と、薬学的に容認可能な担体とを含む、組成物であって、前記抗体が、トランスジェニック非ヒト動物によって産生される、組成物。
【請求項３９】  HER2/neuに結合する二つ以上の単離されたヒト抗体の組合せを含む組成物であって、前記抗体の各々が、HER2/neuの別個のエピトープに結合する、組成物。
【請求項４０】  化学療法薬をさらに含む、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４１】  HER2/neu発現細胞の成長が阻害されるよう、HER2/neuに特異的に結合する単離されたヒトモノクローナル抗体に、HER2/neu発現細胞を接触させるステップを含み、前記抗体がトランスジェニック非ヒト動物によって産生される、HER2/neu発現細胞の成長を阻害する方法。
【請求項４２】  HER2/neu発現細胞の細胞溶解が起きるよう、エフェクタ細胞の存在下で、HER2/neuに特異的に結合する単離されたヒトモノクローナル抗体に、HER2/neu発現細胞を接触させるステップを含み、前記抗体がトランスジェニック非ヒト動物によって産生される、HER2/neu発現細胞の細胞溶解を誘導する方法。
【請求項４３】  HER2/neuに特異的に結合する単離されたヒトモノクローナル抗体を、HER2/neu関連疾患を処置する又は防止するのに有効量、被験体に投与するステップを含み、前記抗体がトランスジェニック非ヒト動物によって産生される、HER2/neuの異常な発現を特徴とする疾患を処置又は防止する方法。
【請求項４４】  前記ヒトモノクローナル抗体が、Fc受容体に対する結合特異性に共役されている、請求項４１乃至４３に記載の方法。
【請求項４５】  前記ヒトモノクローナル抗体が細胞毒に共役されている、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】  前記疾患が癌である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】  前記癌が、腺癌細胞、例えば唾液腺、胃及び腎臓、乳腺カルチノーマ細胞、肺癌細胞、扁平上皮癌細胞、及び卵巣癌細胞からなる群より選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】  試料中で、HER2/neu抗原又はHER2/neu発現細胞の存在を検出する方法であって、
前記試料、及び対照試料を、HER2/neuに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体に、前記抗体又はその部分とHER2/neuとの間の複合体形成が可能な条件下で、接触させるステップと、
複合体の形成を検出するステップと
を含み、前記試料及び対照試料を比較したときにその間にある複合体形成の差異が、前記試料中のHER2/neuの存在の指標である、方法。
【請求項４９】  HER2/neuに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体の可変領域をコードするヌクレオチド配列を含む核酸であって、前記ヌクレオチド配列が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9及びSEQ ID NO:11からなる群より選択される、核酸。
【請求項５０】  HER2/neuに特異的に結合するヒトモノクローナル抗体を、細胞毒剤に結合させて含むイムノトキシンであって、前記抗体がトランスジェニック非ヒト動物により産生される、イムノトキシン。
【請求項５１】
CDR1、CDR2、CDR3配列を含むヒト重鎖可変領域と、CDR1、CDR2、及びCDR3配列を含むヒト軽鎖可変領域とを含む、単離されたヒトモノクローナル抗体であって、
（ａ）前記ヒト重鎖可変領域CDR3配列が、SEQ ID NO:2のアミノ酸残基99-113、SEQ ID NO:6のアミノ酸残基99-111、SEQ ID NO:10のアミノ酸残基99-111、及びこれらの保存的改変から成る群より選択され、
（ｂ）前記ヒト軽鎖可変領域CDR3配列が、SEQ ID NO:4のアミノ酸残基89-97、SEQ ID NO:8のアミノ酸残基89-97、SEQ ID NO:12のアミノ酸残基89-98、及びこれらの保存的改変から成る群より選択される、
単離されたヒトモノクローナル抗体。
【請求項５２】
前記ヒト重鎖可変領域CDR2配列が、SEQ ID NO:2のアミノ酸残基50-66、SEQ ID NO:6のアミノ酸残基50-66、SEQ ID NO:10のアミノ酸残基50-66、及びこれらの保存的改変から成る群より選択され、そして前記ヒト軽鎖可変領域CDR2配列が、SEQ ID NO:4のアミノ酸残基50-56、SEQ ID NO:8のアミノ酸残基50-56、SEQ ID NO:12のアミノ酸残基50-56、及びこれらの保存的改変から成る群より選択される、請求項５１に記載のヒト抗体。
【請求項５３】
前記ヒト重鎖可変領域CDR1配列が、SEQ ID NO:2のアミノ酸残基31-35、SEQ ID NO:6のアミノ酸残基31-35、SEQ ID NO:10のアミノ酸残基31-35、及びこれらの保存的改変から成る群より選択され、そして前記ヒト軽鎖可変領域CDR1が、SEQ ID NO:4のアミノ酸残基24-34、SEQ ID NO:8のアミノ酸残基24-34、SEQ ID NO:12のアミノ酸残基24-34、及びこれらの保存的改変から成る群より選択される、請求項５２に記載のヒト抗体。
【請求項５４】
（ａ）ヒトVH3-33遺伝子の重鎖可変領域、及び
（ｂ）ヒトVκL6遺伝子の軽鎖可変領域
を含み、HER2/Neuに結合する、単離されたヒトモノクローナル抗体。
【請求項５５】
（ａ）ヒトVH3-23遺伝子の重鎖可変領域、及び
（ｂ）ヒトVκL15遺伝子の軽鎖可変領域
を含み、HER2/Neuに結合する、単離されたヒトモノクローナル抗体。
【請求項５６】
（ａ）ヒトVH3-33遺伝子の重鎖可変領域、及び
（ｂ）ヒトVκL15遺伝子の軽鎖可変領域
を含み、HER2/Neuに結合する、単離されたヒトモノクローナル抗体。