(57)【要約】  本発明は、治療用タンパク質／ペプチドの注入中に人体への粒子の侵入を最小限にするために、薬剤投与機器にインラインフィルタを組み込むことに関する。粒子状物質は、非タンパク質性及び／又はタンパク質性及び／又はそれらの混合物であり得る。タンパク質凝集体（非晶質および線維）は、タンパク質性粒子を示すが、例えば、不溶な、又は沈殿した固体、繊維、ガラスフレーク、ゴム片、シリコーン油等の粒子は、非タンパク質性粒子を示す。注射製剤中の粒子状物質は、様々な規制及び公定限度内に制御されることを必要としてきたが、タンパク質性粒子は免疫原性のリスクを引き起こすことから、粒子状物質を最小限にする方法は、さらに有益である。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療用タンパク質又はペプチドの投与のためのシリンジであって、シリンジバレルと、ストッパと、プランジャと、インラインフィルタを有するニードルと、を備え、前記シリンジからの濾過後の治療用タンパク質又はペプチドは、実質的に直径が５μｍを超える粒子を含まない、治療用タンパク質又はペプチドの投与のためのシリンジ。
【請求項２】
前記シリンジからの濾過後の治療用タンパク質又はペプチドは、インラインフィルタを有しないシリンジと比べて、直径が２μｍの粒子を８５％〜９９％減少させる、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項３】
前記シリンジを通した濾過後の治療用タンパク質又はペプチドの濃度は、インラインフィルタを有しないシリンジと同様である、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項４】
前記インラインフィルタは、５００μｌ未満のホールドアップ容積を有する、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項５】
約６Ｎ未満の瞬発力及び滑動力を有する、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項６】
潤滑剤塗膜を有する又は有しない、ガラス製又はプラスチック製のシリンジである、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項７】
前記シリンジバレルは、単位当たり約１μｇ〜約８００μｇのシリコーン油の塗膜を有する、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項８】
前記シリンジバレルは、シリコーン油の塗膜以外の塗膜を有する、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項９】
前記インラインフィルタは、ポリエーテルスルホン又はポリ二フッ化ビニル又は改質セルロースで作られている、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項１０】
前記インラインフィルタは、約０．１μｍ〜１０．０μｍの孔径を有する、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項１１】
蒸気、エチレンオキシド又はγ線照射によって滅菌されている、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項１２】
約０．０５ｍｌ〜約５．０ｍｌの間の最大充填容積を有する、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項１３】
前記治療用タンパク質又は前記ペプチドは、合成、組み換え又は血漿由来の、モノクローナル抗体、融合タンパク質、Ｆａｂ、抗体薬剤複合体、二重特異性抗体、ｓｃＦｖを含む、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項１４】
前記治療用タンパク質又は前記ペプチドは、ＶＥＧＦ拮抗薬である、請求項１に記載のシリンジ。
【請求項１５】
前記ＶＥＧＦ拮抗薬は、眼疾患に使用される、ラニビズマブ又はアフリベルセプトである、請求項１４に記載のシリンジ。
【請求項１６】
前記眼疾患は、加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）に起因する視覚障害、網膜静脈閉塞症（分枝ＲＶＯ又は中央ＲＶＯ）に続発する黄斑浮腫に起因する視覚障害、糖尿病黄斑浮腫患者の糖尿病網膜症又は病的近視に続発する脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に起因する視覚障害からなる群から選ばれる、請求項１５に記載の使用のためのシリンジ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬剤投与機器に１つ以上のインラインフィルタを組み込むこと、及びこのような治療用タンパク質／ペプチド薬剤の投与のために機器を使用することに関する。さらに、インラインフィルタの使用は、粒子状物質に関連する副作用、具体的に免疫原性の反応を最小限にするだろう。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質／ペプチド薬剤は、様々な疾患の治療において重要な役割を果たす。これらの治療用タンパク質／ペプチドのほとんどは、非経口経路を経由して送達される。よって、１つの重要な側面は、これらの薬剤が事実上少しの粒子状物質も含まないべきだということである。
【０００３】
非経口薬剤製品中の粒子状物質は、溶液に意図せず存在する、気泡以外の外部からの流動性がある不溶な粒子からなる。粒子状物質の典型的な発生源は、環境、包装材料、処方成分、有効主成分、製品包装の相互作用及び製造過程で発生した粒子である。タンパク質凝集体は、タンパク質性粒子を示すが、タンパク質製剤中の最も一般的にみられる非タンパク質性粒子は、シリコーン油、セルロース繊維、綿、ガラス微細フレーク、ゴム、プラスチック又は金属である。
【０００４】
クロマトグラフ法と濾過捕集法との組み合わせを用いることで、下流処理では粒子数を低く維持している。しかしながら、製剤及び充填工程中に、多数の機器操作は、追加の粒子の一因となり得るが、その粒子は、充填終了操作前に適切な最終濾過ステップによって再度制御することができる。しかしながら、多重ストレスの結果として、粒子状物質は、保存可能期間中に一次容器蓋及び薬剤製品から発生することがある。保存可能期間中に発生した粒子は、肉眼で見ることができないものから肉眼で見ることができる範囲にまで及ぶことがあり、従って異なる分析方法が推奨されてきた。
【０００５】
粒子状物質は、血流へと導入された場合、有害であり得る。いくつかの報告には、目のような器官、脳、肺、心臓、腎臓、脾臓、胃及び腸への悪影響が説明されている。これらの粒子は、細動脈及び毛細血管の機械的な閉塞、閉塞性のマイクロ血栓（occlusive micro-thrombi）及びその後の肉芽腫の発生を伴う血小板、好中球及び／又は内皮細胞の活性化の原因となることが報告されている。
【０００６】
非タンパク質性粒子とは異なり、タンパク質系粒子（凝集体）は、典型的には治療薬剤の生理学的な有効濃度を減少させる中和抗体の形成を引き起こし、アナフィラキシ又は血清病のような深刻なアレルギ反応を引き起こす、免疫原性の反応の原因となると考えられている。深刻な免疫原性の反応のよく報告される例は、抗エリスロポエチン抗体の形成の結果生じる赤芽球癆がある。タンパク質凝集体（粒子）は、Ｔ細胞による免疫反応の原因ともなり得る。Ｔ細胞は、微生物抗原の独特のエピトープ配列と同様である、凝集体の表面上の繰り返しパターンを識別する。
【０００７】
温度、ｐＨ、振動、せん断のような因子は、タンパク質凝集体の形成の主な原因であると考えられている。ガラス製のシリンジ、バイアル及びシリンジストッパ並びにストッパの材料に潤滑剤として使用されるシリコーン油も、タンパク質凝集体／粒子形成を誘発することが報告されている。また、不測の凍結融解や光への暴露のような因子もタンパク質性粒子発生の一因となり得る。予期しない組み合わせにおける上記の因子は、粒子発生を過剰にすることがある。
【０００８】
タンパク質工学及び製剤最適化は、凝集傾向を最小限にすることによってタンパク質の免疫原性を減少させるために採用されてきた。さらに、シリコーン油系粒子は、ガラス製のシリンジ上にシリコーン油を注入するために焼き付け工程（baked-on process）を利用すること、又はシリコーン油非含有のプラスチック製のシリンジを使用することによって制御することができる。しかしながら、このような取り組みが、タンパク質注射剤の充填及び保存可能期間の保管中にタンパク質及び非タンパク質系粒子の導入又は発生を完全に防止するかは不明である。
【０００９】
粒子に関連する負の側面を解消するために広く実施されている別の解決策は、より大きなボアを有するニードルでフィルタを使用することである。このようなニードルは、具体的にバイアルからの薬剤溶液の引き抜きに使用される。大きなボアを有するこれらの種類のニードルは、通常ブラントフィルタニードルと呼ばれ、市販されている。しかしながら、実際にはブラントニードルは、薬剤溶液を投与するより前に、投与ニードルと置き換える必要がある。投与よりも前にニードルを交換するこの行為は、汚染の可能性を増加させ、またこの方法を経済的に実行不可能にさせるこのような行為に起因して、ある量の薬剤が失われる。さらに、このような取り組みは、粒子汚染の可能性がより高いプレフィルドシリンジには不向きである。
【００１０】
ＵＳ２０１００１１１９６３には、加齢黄斑変性症の治療のためにラニビズマブを使用することが開示されている。
その開示では、薬剤引き抜きのためにフィルタニードルを使用することが説明されており、０．２３ｍｌのラニビズマブ投与溶液が５μｍのフィルタニードルを通して引き抜かれる。フィルタニードルは取り外され、３０ゲージ、１／２インチの精密グライドＲＴＭニードル（Precision Glide RTM needle）と置き換えられ、過剰なラニビズマブは排出され、それから薬剤は硝子体内に注入される。このような方法の１つの欠点は、バイアルからの引き抜きの間、投与溶液は濾過されるが、投与シリンジに使用されるシリコーンは細かくなり得、免疫原性のリスクを患者に引き起こし得る粒子数を増加させ得ることである。また、前述したように、このような行為は、汚染の可能性を増加させ、またこの方法を経済的に実行不可能にさせるこのような行為に起因してある量の薬剤が失われる。さらに、この取り組みは、粒子汚染の可能性がより高いプレフィルドシリンジには、不向きである。
【００１１】
ＵＳ２０１５０２５８２８０には、薬剤投与よりも前にシリンジに導入するためにフィルタを使用することが開示されている。その開示は、具体的に鎮痛薬の投与のためにフィルタを使用することに注目している。しかしながら、その開示は、合成鎮痛薬と比べてより汚染を起こしやすく、より高価なタンパク質／ペプチド薬剤の投与のためにフィルタを使用することについては言及されていない。
【００１２】
ＷＯ９８０８５６１には、液体医薬品を排出するために、シリンジのフィルタに組み込まれた無菌化された綿を使用することが開示されている。しかしながら、タンパク質／ペプチドと共に綿を使用することは、さらなるリスクを引き起こしかねず、吸収／吸着に起因して高価な治療用タンパク質の損失につながりかねず、よって経済的に実行可能になり得ない。
【００１３】
よって、患者への薬剤溶液の注入中に薬剤製品の無菌状態を脅かすことなく、粒子状物質を最小限にする有効な方法が不足している。タンパク質性及び／又は非タンパク質性粒子を最小限にするこのような方法の全ては、免疫原性に関連するリスクを減少させることができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】ＵＳ２０１００１１１９６３
【特許文献２】ＵＳ２０１５０２５８２８０
【特許文献３】ＷＯ９８０８５６１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明は、薬剤製品が、さらなる追加のステップを全く必要とせずに、濾過後に直接人体に投与されるように、粒子状物質を減少させるインラインフィルタを有する薬剤投与機器の使用を説明する。このようなインラインフィルタは、潜在的に人間に対して免疫原性であり得る粒子数を最小限にするだろう。本発明者らは、驚くべきことに、実際に、インラインフィルタの使用によって、潜在的に免疫原性であり得る粒子の数が減少することを見出した。よって、インラインフィルタを通して送達される薬剤の免疫原性の反応は、濾過されていない薬剤と比べて著しく低いだろう。最終的に、本発明のインラインフィルタを有するシリンジから薬剤溶液を注入するのに必要な力は、フィルタを有しないシリンジから注入するのに必要な力に匹敵する。したがって、本発明のインラインフィルタは、上に例示される全ての引き起こされる問題を解消し、タンパク質／ペプチド薬剤の投与のために好都合に使用することができる。
【００１６】
本発明の主要な目的は、治療用タンパク質／ペプチドの注入中に、人体への粒子の侵入を最小限にするために、薬剤投与機器にインラインフィルタを使用することである。インラインフィルタの使用は、粒子状物質に関連する副作用、具体的に免疫原性の反応を最小限にするだろう。
【００１７】
本発明の別の目的は、限定されないが、使い捨て可能なシリンジ、潤滑剤付きのシリンジ、プレフィルドシリンジ、自動注入器、プレフィルドペン及び他の送達機器を含む、薬剤投与機器にインラインフィルタを設けることである。
【００１８】
本発明のさらに別の目的は、薬剤の投与よりも前に、薬剤の免疫原性を減少させるために、薬剤投与機器にインラインフィルタを設けることである。
【００１９】
本発明のさらに別の目的は、人体に免疫原性のリスクを引き起こす可能性がある粒子を最小限にするために、薬剤投与機器にインラインフィルタを設けることである。
【００２０】
本発明のさらに別の目的は、人体に免疫原性のリスクを引き起こす可能性がある粒子を、滑動力又は瞬発力を過度に増加させることなしに、最小限にするために薬剤投与機器にインラインフィルタを設けることである。
【００２１】
本発明のさらに別の目的は、タンパク結合がゼロか、又は実質的に少ない、インラインフィルタを薬剤投与機器に設けることである。
【００２２】
本発明の原理よれば、液体を注入しながら、濾過することによって汚染を最小限にするだけでなく、本発明は、引き抜きステップと注入ステップとの間でニードルを置き換える必要性を排除する。結果として、使用者は、本発明のインラインフィルタを有する薬剤投与機器の使用によって、必ず操作的なステップをほとんど採用しないか、むしろ操作的なステップを全く採用しない。
【００２３】
概して、本発明のインラインフィルタの使用は、製剤の無菌状態を脅かすことなく、及びさらに人体への粒子の侵入に関連するリスクを減少させて、タンパク質／ペプチド治療薬の投与のための簡易手法を提供する。
【００２４】
本発明の１つ以上の実施形態の詳細は、以下の説明に記述されている。本発明の他の特徴、目的及び利点は特許請求の範囲を含む以下の説明から明らかになるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】シリンジ及びその部品の側面図を示す図である。
【図２】インラインシリンジフィルタのホールドアップ容積を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本発明は、以下に例示的に説明されるように、本明細書に具体的に開示されていない任意の１つ又は複数の要素、１つ又は複数の限定がなくても適切に実施することができる。
【００２７】
当業者であれば、単なる日常の実験を用いて、本明細書に説明された特定の実施形態と同等である多くのものを認識するか、又は確認することができるだろう。本発明の範囲は、説明に限定されることを意図するものではなく、むしろ添付の特許請求の範囲に記述されている通りである。
【００２８】
インラインフィルタは、治療用タンパク質の濾過後に、その後の粒子投入量の減少の原因となる。このような粒子の減少は、メンブレンフィルタの分画（孔径）によって決まるだろう。インラインフィルタの面積は、滑動力にほとんど影響することなしに粒子を減少させるほどに小さくあるべきである。理想的なフィルタは、ホールドアップ容積が低く、かつ粒子（タンパク質性及び非タンパク質性）を最大限に保持しつつ、凝集しないタンパク質の損失を最小限にするはずである。
【００２９】
「約」又は「およそ」という用語は、値がどのように測定又は決定されるかに部分的に依存する、当業者によって決定されるような特定の値に対する許容誤差範囲内、例えば測定システムの限界を意味し得る。例えば、「約」は、当技術分野の慣例に従って、１以上の標準偏差以内であることを意味し得る。代替的には、「約」は、所与の値の最大２０％、最大１０％、最大５％、又は最大１％までの範囲を意味し得る。
【００３０】
実質的に、非含有は、当該粒子を５％未満、特に１％未満、例えば０．５％未満、例えば０．１％未満含有することを含み得る。「投与」は、当技術分野で認識される任意の適切な手段による送達というその通常の慣習的な意味が与えられている。投与の典型的な形態は、経口送達、肛門送達、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、腫瘍内、硝子体内及び注入の他の形態を含む直接穿刺又は注入、ミクロスフェア又はビーズ等の固体状態キャリアを含まない、目、耳、鼻、口、肛門又は尿道口へのゲル又は流体塗布、及び挿管を含む。好ましい投与の様式は、シリンジによる注入であり、典型的にはニードルベアリングシリンジ（needle-bearing syringe）である。
【００３１】
「治療」または「治療すること」という用語は、必要としている対象への病的状態の発症を阻害、減少又は回復させる量の化合物の投与を含む。
【００３２】
「１回投与機器（dose administration device）」は、タンパク質／ペプチド治療薬等の物質を動物又はヒト患者等の対象に提供するための機器である。１回投与機器は、一般にタンパク質／ペプチド等の物質を収容でき、また物質を排出する能力を提供する。本発明は、一般に、流体流れを患者に投与しながら、それからあらゆる微細粒子を取り除くためのインラインフィルタとしたシリンジに具現化されている。他の１回投与機器は、限定されないが、少なくとも１つのチャンバを備えるシリンジと、少なくとも１つのチャンバを備える注入モジュールと、を含む。好ましい実施形態では、薬剤投与機器は、限定されないが、使い捨て可能なシリンジ、プレフィルドシリンジ、自動注入器、プレフィルドペン及び他の送達機器を備える。
【００３３】
「プレフィルドシリンジ」は、薬剤製造会社によって充填状態で供給されるシリンジであり、すなわち、シリンジが購入され、投与の準備ができているときに、測定量の投与されるべき薬剤が既にシリンジに存在する。特に、薬剤を含有する医薬品組成物は、組成物を収容できるバイアルから空のシリンジを使用することによって引き抜かれる必要はない。
【００３４】
「粒子」は、非タンパク質性及び／又はタンパク質性及び／又はそれらの混合物であり得る粒子状物質として定義され得る。タンパク質凝集体（非晶質および線維）は、タンパク質性粒子を示すが、例えば、不溶な、又は沈殿した固体、繊維、ガラスフレーク、ゴム片、シリコーン油等の粒子は、非タンパク質性粒子を示す。
【００３５】
前述の実施形態のインラインフィルタは、任意の適切な形態で、好ましくはメンブレンの形態で、又は微細孔中空繊維として、最も好ましくはデプスフィルタ又はナブ（nubs）の形態であり得る。
【００３６】
全ての前述の実施形態におけるインラインフィルタは、限定されないが、酢酸セルロース、セルロース混合エステル（アセテート及びニトレート）、再生セルロース、ガラス製マイクロファイバ，ナイロン、ポリイミド６、ポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリ四フッ化エチレン（ＰＴＦＥ）、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）又はペルフルオロポリエーテル（ＰＦＰＥ）等の任意の適切な材料で形成され得る。フィルタの他の構成部品もまた、先行技術で知られたもの等の任意の適切な材料で形成され得る。
【００３７】
インラインフィルタは、限定されないが、３０ゲージ×１／２インチ、２７、３１、３２、３３又は３４ゲージニードルを含むニードルサイズで使用され得る。
【００３８】
本発明のインラインフィルタは、限定されないが、０．１〜１０．０μｍの範囲の孔径を有する。
【００３９】
シリンジは、好ましくは０．０５ｍｌ〜１．５ｍｌ、最も好ましくは０．２ｍｌ〜１．０ｍｌの公称充填量、すなわちシリンジによって最大限に取り込むことができる容積を有する。
【００４０】
当業者は、典型的には、シリンジ、ニードル内のデッドスペース及びシリンジの注入の準備中の損失に起因する薬剤製品のホールドアップ容積があることを認識している。よって、シリンジは、通常、送達可能容積よりも大きい製品容積で充填される。
【００４１】
上述したインラインフィルタは、好ましくはその製造中にシリンジに挿入され、よって既知の方法によって現場で滅菌され得る。しかしながら、いくつかの状況では、その後の調整のためにフィルタを別々に供給することが適切な場合がある。
【００４２】
本発明のインラインフィルタは、任意の医薬品分子及び／又はバイオテクノロジ分子と共に使用され得、好ましくは、限定されないが、Ｆｃ融合タンパク質、モノクローナル抗体、Ｆａｂフラグメント、成長因子から構成される治療用タンパク質／ペプチドのために、最も好ましくはＶＥＧＦ拮抗薬のために使用され得る。
【００４３】
「ＶＥＧＦ拮抗薬」という用語は、具体的にＶＥＧＦと相互作用し、１つ以上のその生物学的活性、例えばその細胞分裂活性、血管形成活性及び／又は血管透過活性を抑制する分子を呼ぶ。それは、抗VEGF抗体及びその抗原結合フラグメントと、非抗体VEGF拮抗薬との両方を含むことを意図している。
【００４４】
「抗ＶＥＧＦ抗体」という用語は、具体的にＶＥＧＦに結合し、１つ以上のその生物学的活性、例えばその細胞分裂活性、血管形成活性及び／又は血管透過活性を抑制する、Ｆａｂ又はｓｃＦＶフラグメント等の抗体又は抗体フラグメントを呼ぶ。抗ＶＥＧＦ抗体は、例えば、細胞受容体へのＶＥＧＦの結合を妨げることによって、細胞受容体へのＶＥＧＦ結合後の血管内皮細胞活性化を妨げることによって、又はＶＥＧＦによって活性化された細胞を死滅させることによって機能する。 抗ＶＥＧＦ抗体は、例えば、抗体Ａ４．６．１、ベバシズマブ、ラニビズマブ、Ｇ６、Ｂ２０、２Ｃ３、及び、例えば、ＷＯ９８／４５３３１、ＵＳ２００３／０１９０３１７、ＵＳ６５８２９５９、ＵＳ６７０３０２０、ＷＯ９８／４５３３２、ＷＯ９６／３００４６、ＷＯ９４／１０２０２、ＷＯ２００５／０４４８５３、ＥＰ０６６６８６８、ＷＯ２００９／１５５７２４、及びポプコフらのＪ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．の２００４年２８８巻１４９〜６４頁で説明された他のものを含む。
【００４５】
好ましくは、本発明の医薬品組成物に存在している、抗ＶＥＧＦ抗体又はその抗原結合フラグメントは、ラニビズマブ又はベバシズマブ又はアフリベルセプトである。最も好ましくは、それは、ラニビズマブ又はその抗原結合フラグメントである。
【００４６】
本発明のインラインフィルタは、好ましくは限定されないが、眼疾患を有する患者、好ましくは、加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）に起因する視覚障害、網膜静脈閉塞症（分枝ＲＶＯ又は中央ＲＶＯ）に続発する黄斑浮腫に起因する視覚障害、糖尿病黄斑浮腫患者の糖尿病網膜症、又は病的近視に続発する脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）に起因する視覚障害からなる群から選ばれる眼疾患を有する患者へのＶＥＧＦ拮抗薬の投与のために使用される。
【００４７】
本発明のインラインフィルタを有するシリンジは、低い粒子数を製剤に提供する。従来の手段によって決定される、濾過後における含有製剤中の肉眼で見ることができる粒子の量の減少率は、最も好ましくは１００％である。本発明のインラインフィルタの使用による、肉眼で見ることができない粒子（２〜５０μｍ）の量の減少率は、好ましくは９９％〜１００％の範囲、より好ましくは６０％〜７０％の範囲、最も好ましくは８５％〜９５％の範囲である。本発明のインラインフィルタによって、０．２〜５０μｍの大きさの粒子の数の減少率は、好ましくは５０％〜７０％の範囲内、最も好ましくは８０％〜９５％の範囲となる。
【００４８】
本発明のインラインフィルタを有するシリンジは、さらに優れた滑動挙動を有する。特に、瞬発力、すなわちプランジャの移動を開始するのに必要な力は、１５Ｎ未満又は１２Ｎ未満、好ましくは１０Ｎ未満又は９Ｎ未満、より好ましくは６Ｎ未満、最も好ましくは５Ｎ未満である。
【００４９】
さらに、滑動力、すなわち液体組成物を排出するための、プランジャのシリンジバレルに沿う移動を維持するのに必要な力は、１５Ｎ未満、好ましくは１２Ｎ未満、より好ましくは１０Ｎ未満、最も好ましくは７Ｎ未満である。特に好ましい実施形態では、瞬発力と滑動力との間に有意な差はない。
【００５０】
本発明のインラインフィルタは、タンパク結合が非常に少ないか、又はゼロである。結合は、濾材又は他のフィルタ成分に対する親和性を有するタンパク質／ペプチド製剤の性質として定義することができる。従来の方法によって測定された、本発明のインラインフィルタに結合したタンパク質の量は、好ましくは０．１％であり、最も好ましくはインラインフィルタへのタンパク結合はゼロである。
【００５１】
さらに、本発明のインラインフィルタは、ゼロ又は最小限の抽出物及び溶出物（leachables）を有する。抽出物は、促進条件下で、潜在的にフィルタ又は機器の成分から薬剤製品に抽出されるであろう、有機及び無機の両方の化学物質として定義される。溶出物は、薬剤製品の保存可能期間を経て、容器閉鎖システム又は機器又はフィルタの成分から薬剤製品に移った有機及び無機の両方の化学物質である。本発明の文脈において、最小限は、様々な規制及び公定限度内であることとして定義され得る。
【００５２】
本発明は、限定ではなく例示を目的として好ましい実施形態に関して説明されており、それらの同等な構造を含むことが意図されており、そのいくつかはこの説明を読むときに明らかになり、その他はいくつかの研究の後にのみ明らかになるだろう。
【実施例】
【００５３】
実施例１：インラインフィルタを有するニードルを使用する、全粒子数の減少の比較
【００５４】
ラニビズマブは、ＶＥＧＦに結合し、ＶＥＧＦの同源受容体との相互作用を防止する。ラニビズマブは、黄斑変性症を治療するために硝子体内注射用に設計されたＦａｂフラグメントである。タンパク質性粒子を発生させるために、製剤バッファ中のラニビズマブ薬剤物質を紫外線に３時間曝し、異なるレベルのシリコーン油でコーティングされた異なる型のプレフィルドシリンジ（ＰＦＳ）に充填した。室温で一晩培養した後、ＰＦＳ内容物をクラス１００の環境でインライン濾過により、又はインライン濾過をせずに手で空けた。光オブスキュレーション（Light obscuration）（ＬＯ）分光法を使用して粒子数を測定した。比較の目的で、我々は、２つのＰＦＳの異なる型、及び、３つインラインフィルタの異なる型を使用し、そのうち１つのフィルタは、ニードルを有するインライン（フィルタを内蔵したニードル）とした。
【００５５】
結果：インラインフィルタを有する、及びインラインフィルタを有しない（濾過しない）ニードルを取り付けた後、ＰＦＳからの内容物を、層流フード内（クラス１００ワークステーション）の清潔な容器に空けた。排出された液体を、ＬＯを使用して粒子数について測定した。濾過しない条件で観測された全粒子数を１００％として、全粒子数の相対的な減少を、使用した異なるフィルタに対して算出した。表１に示した結果は、３つのフィルタ全てにおいて２μｍを超える大きさの全粒子数が著しく減少することを示す。しかしながら、粒子数の減少率は、ＰＦＳの型によっても決まる。よって、ＰＦＳとフィルタとの最適な組み合わせの開発は、全粒子数を低く維持するために重要である。
【００５６】
【表１】
2019528912.tif 000003
【００５７】
実施例２：シリコーン油滴を取り除く際のインラインシリンジフィルタの有効性の評価
【００５８】
シリコーン油粒子を捕捉するインラインシリンジフィルタの有効性は、２００μｇ／ｍｌのシリコーン油エマルションチャレンジ試験（challenge test）で試験される。この調査では、ラニビズマブ製剤バッファ中で２００μｇ／ｍｌのシリコーン油エマルションを調製し、そのうちの１ｍｌを１ｍｌのツベルクリンシリンジで吸引した。シリンジを０．４５μｍの分画インラインＰＶＤＦ／ＰＥＳシリンジフィルタに取り付け、内容物を清潔なエッペンドルフチューブに空けた。シリコーン油エマルション（ＳＯＥ）及びインラインシリンジフィルタを通した試料を、マイクロフローイメージング（MicroFlow Imaging）（ＭＦＩ）によって肉眼で見ることができない粒子状物質について分析した。
【００５９】
この調査では、累積サイズビン（cumulative size bins）の粒子濃度は、５μｍ以上、１０μｍ以上、２５μｍ以上、及び５０μｍ以上が報告されている。
【００６０】
結果：０．４５μｍのＰＶＤＦインラインシリンジフィルタが効果的にシリコーン油粒子を捕捉し、２００μｇ／ｍｌのシリコーン油エマルションを含有する元の試料に存在しているシリコーン油粒子を著しく減少させることが観測された。同様の観測は、０．４５μｍのＰＥＳインラインシリンジフィルタで濾過されたシリコーン油エマルション試料で観測された。肉眼で見ることができない粒子数の著しい減少は、５μｍ以上、１０μｍ以上、２５μｍ以上、及び５０μｍ以上の累積サイズビンで観測された。
【００６１】
【表２】
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【００６２】
実施例３：肉眼で見ることができないラニビズマブ凝集体を取り除く際のインラインシリンジフィルタの有効性の評価
【００６３】
この調査では、肉眼で見ることができないラニビズマブ凝集体を捕捉する際の０．４５μｍの分画インラインＰＶＤＦインラインシリンジフィルタの有効性を評価した。肉眼で見ることができない凝集体を発生させるために、ラニビズマブ薬剤製品（バイアル中０．２３ｍｌ）を７０℃で６時間培養した。その後、３つのバイアルの内容物をプールし、シリコン処理をしたプレフィラブルシリンジに吸引した。次いで、インラインシリンジフィルタは、３０Ｇ×１／２”のニードルに接続し、内容物を清潔なエッペンドルフチューブに空けた。コントロールの（control）ストレスを受けていないラニビズマブ薬剤製品に加えて凝集ラニビズマブ試料及び濾過した凝集ラニビズマブ試料を、ＭＦＩによって粒子状物質について試験した。
【００６４】
結果：０．４５μｍＰＶＤＦインラインシリンジフィルタは、肉眼で見ることができない粒子の濃度を５μｍ以上、１０μｍ以上、及び２５μｍ以上の累積サイズビンで著しく減少させたことが観測された。熱ストレスを受けたラニビズマブ試料で観測された５０μｍ以上の肉眼で見ることができない粒子を、ストレスを受けていないラニビズマブコントロールと比較した。
【００６５】
【表３】
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【００６６】
実施例４：肉眼で見ることができない凝集体及びシリコーン油滴を含有するラニビズマブから取り除く際のインラインシリンジフィルタの有効性の評価
【００６７】
この調査では、肉眼で見ることができないラニビズマブ凝集体及びシリコーン油滴を捕捉する際のいずれの０．４５μｍの分画インラインＰＶＤＦインラインシリンジフィルタの有効性を評価した。ラニビズマブ薬剤製品（バイアル中０．２３ｍｌ）を、肉眼で見ることができない凝集体を発生させるために７０℃で６時間培養した。その後、３つのバイアルの内容物をプールし、試料中のシリコーン油の最終的な濃度が１００μｇ／ｍｌとなるようにシリコーン油エマルションを混ぜた。およそ５００μＬのこの試料を、シリコン処理をしたプレフィラブルシリンジに吸引した。次いで、インラインシリンジフィルタを、３０Ｇ×１／２”ニードルに接続し、内容物を清潔なエッペンドルフチューブに空けた。シリコーン油を含有する凝集ラニビズマブ試料及び濾過したラニビズマブ試料を、ＭＦＩによって粒子状物質について試験した。
【００６８】
結果：０．４５μｍの分画フィルタは、肉眼で見ることができないラニビズマブ凝集体及びシリコーン油を捕捉することの両方に効果的であることが観測された。肉眼で見ることができない粒子の減少は、５μｍ以上、１０μｍ以上、２５μｍ以上、及び５０μｍ以上の累積サイズビンで観測された。
【００６９】
【表４】
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【００７０】
実施例５：ラニビズマブのインラインシリンジフィルタへの吸収の評価
【００７１】
この調査では、高濃度から低濃度までの４つのラニビズマブの濃度として、１０ｍｇ／ｍｌ、５ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌ及び０．６ｍｇ／ｍｌを分析のために選択した。その後、０．１６３ｍｌのラニビズマブを、０．４５μｍインラインシリンジフィルタに取り付けられたプレフィラブルシリンジに吸引し、内容物を清潔な遠心分離管に空けた。コントロールとして、０．１６３ｍｌのラニビズマブをプレフィラブルシリンジに吸引し、内容物を遠心分離管に空けた。遠心分離管中のラニビズマブ試料の濃度を、次の値が１．８と仮定して決定した。コントロール中及び濾過した試料中のラニビズマブ濃度を比較した。
【数１】
2019528912.tif 000007
【００７２】
結果：分析結果を図２に示す。概して、ラニビズマブコントロール及びフィルタを通過した試料の濃度は、同等のままであり、インラインフィルタへの吸収に起因するラニビズマブの極端な損失は観測されなかった。
【００７３】
実施例６：インラインシリンジフィルタのホールドアップ容積の決定
【００７４】
インラインシリンジフィルタのホールドアップ容積を、重量法によって決定した。まず、インラインシリンジフィルタの乾燥重量を、分析天秤で測定する。０．５ｍｌのラニビズマブ製剤バッファをプレフィラブルシリンジに吸引した。製剤バッファで充填されるシリンジを、０．４５μｍ又は０．２μｍのいずれかのインラインシリンジフィルタに接続し、内容物を空けた。次いで、インラインシリンジフィルタを取り外し、濡れフィルタの重量を測定した。シリンジフィルタ内のバッファの容積を、次式から決定した。
【００７５】
【数２】
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【００７６】
結果：インラインシリンジフィルタの平均ホールドアップ容積は、０．４５μｍのＰＶＤＦフィルタの場合、およそ６２μｌであり、０．２μｍのＰＶＤＦフィルタの場合、およそ７１μｌであった。概して、インラインフィルタ内の溶液のホールドアップ容積は、フィルタをより小さいホールドアップ容積で設計することにより最小限にすることができ、又は死容積は、過充填により補償することができることを見出した。
【００７７】
【表５】
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【００７８】
実施例７：インラインシリンジフィルタを有する、及び有しないシリンジの瞬発力及び滑動力の決定
【００７９】
瞬発力及び滑動力を決定するために、Ｎｅｘｙｇｅｎ  Ｐｌｕｓ  ３．０ソフトウェアによって操作される万能試験機を使用した。シリンジを０．５ｍｌのラニビズマブ製剤バッファで充填した。３セットの試料を調査した。
【００８０】
結果：シリンジの内容物を空けるのに必要な力は、０．４５μｍのフィルタで許容範囲内である、５Ｎ〜６Ｎの間に及んだ。
【００８１】
【表６】
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【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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