【手続補正書】
【提出日】平成19年7月30日(2007.7.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】オリゴヌクレオチドが付着したナノ粒子である、ナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体であって、該オリゴヌクレオチドが、ナノ粒子に結合可能な共有結合する環式ジスルフィド官能基を有する、共役体。
【請求項２】オリゴヌクレオチドが付着したナノ粒子である、ナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体であって、該オリゴヌクレオチドが、ナノ粒子に結合可能な共有結合するポリチオール官能基を有する、共役体。
【請求項３】オリゴヌクレオチドが付着したナノ粒子である、ナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体であって、該オリゴヌクレオチドが、ナノ粒子に結合可能な共有結合するジスルフィド官能基を有し、該オリゴヌクレオチドの少なくとも一部が、核酸または別のオリゴヌクレオチドの配列の少なくとも一部分に相補的な配列を有する、共役体。
【請求項４】オリゴヌクレオチドが付着したナノ粒子である、ナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体であって、該オリゴヌクレオチドが、ナノ粒子に結合可能な共有結合するポリチオール官能基を有し、該オリゴヌクレオチドの少なくとも一部が、核酸または別のオリゴヌクレオチドの配列の少なくとも一部分に相補的な配列を有する、共役体。
【請求項５】共役体が安定するのに十分な表面密度で前記オリゴヌクレオチドが存在する、請求項３または４に記載の共役体。
【請求項６】オリゴヌクレオチドが少なくとも１０ピコモル／ｃｍの表面密度でナノ粒子表面に存在する、請求項５に記載の共役体。
【請求項７】オリゴヌクレオチドが少なくとも１５ピコモル／ｃｍ２の表面密度でナノ粒子表面に存在する、請求項６に記載の共役体。
【請求項８】オリゴヌクレオチドが約１５ピコモル／ｃｍ２〜約４０ピコモル／ｃｍ２の表面密度でナノ粒子表面に存在する、請求項７に記載の共役体。
【請求項９】ナノ粒子が金属ナノ粒子か半導体ナノ粒子である、請求項３または４に記載の共役体。
【請求項１０】ナノ粒子が金ナノ粒子である、請求項９に記載の共役体。
【請求項１１】オリゴヌクレオチドが少なくとも１種類の認識オリゴヌクレオチドを含み、該認識部分が、核酸または別のオリゴヌクレオチドの配列の少なくとも一部分に相補的な配列を有する、請求項３または４に記載の共役体。
【請求項１２】各認識オリゴヌクレオチドがスペーサー部分と認識部分を有し、該スペーサー部分はナノ粒子に結合可能であるように設計されている、請求項１１に記載の共役体。
【請求項１３】スペーサー部分には、スペーサー部分をナノ粒子に結び付ける環式ジスルフィド官能基を有する部分が、共有結合によって結び付けられる、請求項１２に記載の共役体。
【請求項１４】スペーサー部分には、スペーサー部分をナノ粒子に結び付けるポリチオール官能基を有する部分が、共有結合によって結び付けられる、請求項１２に記載の共役体。
【請求項１５】スペーサー部分が少なくとも約１０ヌクレオチドを含む、請求項１０に記載の共役体。
【請求項１６】スペーサー部分が約１０〜約３０のヌクレオチドまで含む、請求項１５に記載の共役体。
【請求項１７】スペーサーのヌクレオチドの塩基が、すべてアデニン、すべてチミン、すべてシトシン、すべてウラシル、またはすべてグアニンである、請求項１６に記載の共役体。
【請求項１８】ある種類の希釈剤オリゴヌクレオチドをさらに含む、請求項３または４に記載の共役体。
【請求項１９】希釈剤オリゴヌクレオチドが、認識オリゴヌクレオチドのスペーサー部分に含まれるのとほぼ同じ数のヌクレオチドを含んでいる、請求項１８に記載のナノ粒子。
【請求項２０】希釈剤オリゴヌクレオチドの配列が認識オリゴヌクレオチドのスペーサー部分の配列と同じである、請求項１９に記載のナノ粒子。
【請求項２１】ナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体を生成するための、ナノ粒子へのオリゴヌクレオチドの結合方法であって、
ナノ粒子に結合可能な環式スルフィド官能基が共有結合されたオリゴヌクレオチドを提供するステップと、
少なくともオリゴヌクレオチドのうちの一部をナノ粒子と結合させてナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体を生成するのに有効な条件下で、オリゴヌクレオチドとナノ粒子を接触させるステップと、から成る方法。
【請求項２２】ナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体を生成するための、ナノ粒子へのオリゴヌクレオチドの結合方法であって、
ナノ粒子に結合可能なポリチオール官能基が共有結合されたオリゴヌクレオチドを提供するステップと、
少なくともオリゴヌクレオチドのうちの一部をナノ粒子と結合させてナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体を生成するのに有効な条件下で、オリゴヌクレオチドとナノ粒子を接触させるステップと、から成る方法。
【請求項２３】ナノ粒子が金属ナノ粒子か半導体ナノ粒子である、請求項２２または２３項に記載の方法。
【請求項２４】ナノ粒子が金ナノ粒子である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】オリゴヌクレオチドが少なくとも１種類の認識オリゴヌクレオチドを含み、各認識オリゴヌクレオチドがスペーサー部分と認識部分を有し、該スペーサー部分には、ナノ粒子に結合可能な官能基を有する部分が共有結合によって結び付けられている、請求項２１または２２に記載の方法。
【請求項２６】スペーサー部分が少なくとも約１０ヌクレオチドを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】スペーサー部分が約１０〜約３０のヌクレオチドを含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】スペーサーのヌクレオチドの塩基が、すべてアデニン、すべてチミン、すべてシトシン、すべてウラシル、またはすべてグアニンである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】オリゴヌクレオチドがある種類の希釈剤オリゴヌクレオチドをさらに含み、前記オリゴヌクレオチドと前記ナノ粒子を、前記オリゴヌクレオチドのうちの各種
類のオリゴヌクレオチドの少なくとも一部がナノ粒子と結合して、ナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体を生成するのに有効な条件下で接触させる、請求項２５に記載の方法。
【請求項３０】希釈剤オリゴヌクレオチドが、認識オリゴヌクレオチドのスペーサー部分に含まれるのとほぼ同じ数のヌクレオチドを含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】希釈剤オリゴヌクレオチドの配列が認識オリゴヌクレオチドのスペーサー部分の配列と同じである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】オリゴヌクレオチドが少なくとも２種類の認識オリゴヌクレオチドを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項３３】ナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体を生成するための、荷電ナノ粒子へのオリゴヌクレオチドの結合方法であって、
ナノ粒子に結合可能な環式ジスルフィド官能基が共有結合で結び付けられたオリゴヌクレオチドを提供するステップであって、該オリゴヌクレオチドが、
ある種類の認識オリゴヌクレオチドと、
ある種類の希釈剤オリゴヌクレオチドとを含むステップと、
前記オリゴヌクレオチドのうちの各種類のオリゴヌクレオチドの少なくとも一部がナノ粒子と結合するのに十分な期間、水中でオリゴヌクレオチドとナノ粒子を接触させるステップと、
前記水に少なくとも１つの塩を加えて塩溶液を作製するステップであって、該塩溶液のイオン強度は、ナノ粒子に対するオリゴヌクレオチドの静電引力または静電斥力、ならびに互いに対するオリゴヌクレオチドの静電斥力を少なくとも部分的に克服するのに十分な強度であるステップと、
前記オリゴヌクレオチドのうちの各種類のオリゴヌクレオチドのさらなるオリゴヌクレオチドがナノ粒子に結合して、ナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体を生成するのに十分な追加期間、塩溶液中でオリゴヌクレオチドとナノ粒子を接触させるステップと、から成る方法。
【請求項３４】ナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体を生成するための、荷電ナノ粒子への結合オリゴヌクレオチドの結合方法であって、
ナノ粒子に結合可能なポリチオール官能基が共有結合で結び付けられたオリゴヌクレオチドを提供するステップであって、該オリゴヌクレオチドが、
ある種類の認識オリゴヌクレオチド、
ある種類の希釈剤オリゴヌクレオチドとを含むステップと、
前記オリゴヌクレオチドのうちの各種類のオリゴヌクレオチドの少なくとも一部がナノ粒子と結合するのに十分な期間、水中でオリゴヌクレオチドとナノ粒子を接触させるステップと、
前記水に少なくとも１つの塩を加えて塩溶液を作製するステップであって、該塩溶液のイオン強度は、ナノ粒子に対するオリゴヌクレオチドの静電引力または静電斥力、ならびに互いに対するオリゴヌクレオチドの静電斥力を少なくとも部分的に克服するのに十分な強度であるステップと、
前記オリゴヌクレオチドのうちの各種類のオリゴヌクレオチドのさらなるオリゴヌクレオチドがナノ粒子に結合して、ナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体を生成するのに十分な追加期間、塩溶液中でオリゴヌクレオチドとナノ粒子を接触させるステップと、から成る方法。
【請求項３５】ナノ粒子が金属ナノ粒子か半導体ナノ粒子である、請求項３３または３４に記載の方法。
【請求項３６】ナノ粒子が金ナノ粒子である請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】すべての塩が１回の追加で水に加えられる、請求項３３または３４に記載の方法。
【請求項３８】塩が時間の経過と共に徐々に加えられる、請求項３３または３４に記載の方法。
【請求項３９】前記塩は、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、塩化カリウム、アン
モニア、塩化物、ナトリウム、酢酸塩、酢酸アンモニウム、これらの塩の２以上の組合せ、リン酸緩衝液中のこれらの塩の１つ、および、リン酸緩衝液中のこれらの塩の２以上の組合せから成る群から選択される、請求項３３または３４に記載の方法。
【請求項４０】前記塩がリン酸緩衝液中の塩化ナトリウムである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】少なくとも１０ピコモル／ｃｍ２の表面密度でナノ粒子表面に存在するオリゴヌクレオチドを有するナノ粒子−オリゴヌクレオチド共役体が生成される、請求項３３または３４に記載の方法。
【請求項４２】オリゴヌクレオチドが少なくとも１５ピコモル／ｃｍ２の表面密度でナノ粒子表面に存在する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】オリゴヌクレオチドが約１５ピコモル／ｃｍ２〜約４０ピコモル／ｃｍ２の表面密度でナノ粒子表面に存在する、オリゴヌクレオチドが上に存在する請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】各認識オリゴヌクレオチドがスペーサー部分と認識部分を有し、スペーサー部分にはナノ粒子に結合可能な環式ジスルフィド官能基を有する部分が付着されている、請求項３３に記載の方法。
【請求項４５】各認識オリゴヌクレオチドがスペーサー部分と認識部分を有し、スペーサー部分にはナノ粒子に結合可能なポリチオール官能基を有する部分が付着されている、請求項３４に記載の方法。
【請求項４６】スペーサー部分が少なくとも約１０ヌクレオチドを含む、請求項４４または４５に記載の方法。
【請求項４７】スペーサー部分約１０〜約３０のヌクレオチドを含む、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】スペーサーのヌクレオチドの塩基が、すべてアデニン、すべてチミン、すべてシトシン、すべてウラシル、またはすべてグアニンである、請求項４４または４５に記載の方法。
【請求項４９】希釈剤オリゴヌクレオチドが、認識オリゴヌクレオチドのスペーサー部分に含まれるのとほぼ同じ数のヌクレオチドを含む、請求項４４または４５に記載の方法。
【請求項５０】希釈剤オリゴヌクレオチドの配列が認識オリゴヌクレオチドのスペーサー部分の配列と同じである、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】オリゴヌクレオチドが少なくとも２種類の認識オリゴヌクレオチドを含む、請求項４４または４５に記載の方法。
【請求項５２】ナノ粒子に結合可能な、共有結合した環式ジスルフィド官能基を有するオリゴヌクレオチド。
【請求項５３】ナノ粒子に結合可能な、共有結合したポリチオール官能基を有するオリゴヌクレオチド。
【請求項５４】オリゴヌクレオチドと環式ジスルフィド官能基の間に大きな疎水基が位置する、請求項１、３、１３、１４、２１、３３および５２に記載の組成物。