【手続補正書】
【提出日】平成19年3月29日(2007.3.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料において所望の細胞を濃縮し回収するネガティブ選択方法であって、
（１）所望でない細胞と赤血球とが免疫ロゼットを形成可能な条件下で、（ａ）少なくとも１種の、所望でない細胞上の抗原に結合する抗体と、それが直接または間接的に結合している（ｂ）少なくとも１種の、赤血球に結合する抗体、とを含む抗体組成物に試料を接触させる段階、および
（２）試料から免疫ロゼットを分離して所望の細胞が濃縮された試料を得る段階を含む方法。
【請求項２】  段階（２）において免疫ロゼットが密度分離によって分離される請求項１に記載の方法。
【請求項３】  段階（２）において免疫ロゼットが沈降によって分離される請求項１に記載の方法。
【請求項４】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３および／またはＣＤ５、（２）ＣＤ１９および／またはＣＤ２０および／またはＣＤ２１および／またはＣＤ２２および／またはＣＤ２４、ならびに（３）ＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１６に結合することのできる抗体を含む、単核細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項５】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６および／またはＣＤ８に結合することのできる抗体を含む請求項４に記載の方法。
【請求項６】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３および／または、ＣＤ４およびＣＤ８の両方、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１１ｂおよび／またはＣＤ１５、ならびに（３）ＣＤ３６および／またはＣＤ１４に結合することのできる抗体を含む、Ｂ細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項７】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項６に記載の方法。
【請求項８】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１１ｂおよび／またはＣＤ１５、（２）ＣＤ１９および／またはＣＤ２０および／またはＣＤ２１および／またはＣＤ２２および／またはＣＤ２４および／またはＩｇ、ならびに（３）ＣＤ３６および／またはＣＤ１４に結合することのできる抗体を含む、Ｔ細胞を濃縮および回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項９】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項８に記載の方法。
【請求項１０】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ８、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１１ｂおよび／またはＣＤ１５、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２０および／またはＣＤ２１および／またはＣＤ２２および／またはＣＤ２４および／またはＩｇ、ならびに（４）ＣＤ３６および／またはＣＤ１４に結合することのできる抗体を含む、ＣＤ４＋Ｔ細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項１１】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ４、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１１ｂおよび／またはＣＤ１５、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２０および／またはＣＤ２１および／またはＣＤ２２および／またはＣＤ２４および／またはＩｇ、ならびに（４）ＣＤ３６および／またはＣＤ１４に結合することのできる抗体を含む、ＣＤ８＋Ｔ細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項１３】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ３、（２）ＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１５、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２０および／またはＣＤ２１および／またはＣＤ２２および／またはＣＤ２４、ならびに（４）ＣＤ３６および／またはＣＤ１４に結合することのできる抗体を含む、ＮＫ細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項１５】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ４に結合することのできる抗体を含む請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ３、（２）ＣＤ２、（３）ＣＤ１４、（４）ＣＤ１５、（５）ＣＤ１６、（６）ＣＤ１９、（７）ＣＤ２４、（８）ＣＤ３４、（９）ＣＤ３６、（１０）ＣＤ５６、および（１１）ＣＤ４５ＲＡに結合することのできる抗体を含む、好塩基性細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項１７】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ３、（２）ＣＤ１４、（３）ＣＤ１６、（４）ＣＤ１９、（５）ＣＤ３４、（６）ＣＤ５６、および（７）ＣＤ６６ｂに結合することのできる抗体を含む、樹状細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項１８】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂ、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２４、ならびに（４）ＣＤ１４に結合することのできる抗体を含む、造血前駆細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項１９】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂ、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２４、（４）ＣＤ１４、（５）ＣＤ４５ＲＡ、（６）ＣＤ３３、ならびに（７）ＣＤ１０に結合することのできる抗体を含む、赤血球前駆細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項２１】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂ、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２４、ならびに（４）ＣＤ１４、（５）ＣＤ７１、ならびに（６）ＣＤ１０に結合することのできる抗体を含む、骨髄前駆細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項２３】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂ、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２４、ならびに（４）ＣＤ１４、（５）ＣＤ４５ＲＡ、ならびに（６）ＣＤ１０に結合することのできる抗体を含む、巨核球前駆細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項２５】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ４５、および（２）ＣＤ６６ｂに結合することのできる抗体を含む、非造血腫瘍細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項２７】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ２、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ３６、およびＣＤ３８に結合することのできる抗体を含む請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】  抗体（ａ）が、抗原（１）ＣＤ４５、および（２）ＣＤ６６ｂに結合することのできる抗体を含む、上皮腫瘍細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項２９】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ２、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ３６およびＣＤ３８に結合することのできる抗体を含む請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】  抗体（ａ）が、抗原ＣＤ６６ｂ、またはＣＤ６６ａｂｃｅに結合することのできる抗体を含む、顆粒細胞を含有する試料から単核細胞を濃縮し回収するための請求項１に記載の方法。
【請求項３１】  試料が保存された全血または臍帯血である請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】  試料中の顆粒細胞の密度が、新鮮血液からの顆粒細胞の密度よりも低い請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】  抗体組成物が、（ａ）所望でない細胞上の抗原に結合する抗体、（ｂ）赤血球に結合する抗体、ならびに（ｃ）（ａ）および（ｂ）で定義された抗体のＦｃ部分に結合する２種の抗体を含み、（ａ）および（ｂ）の抗体が同一の動物種の抗体であり、（ｃ）の抗体が（ａ）および（ｂ）の抗体と異なる動物種の抗体であるテトラマー抗体複合体を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３４】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料において単核細胞を濃縮し回収するための組成物であって、（ａ）抗原（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３および／またはＣＤ５、（２）ＣＤ１９および／またはＣＤ２０および／またはＣＤ２１および／またはＣＤ２２および／またはＣＤ２４、ならびに（３）ＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１６、に結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項３５】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６および／またはＣＤ８に結合することのできる抗体を含む請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料においてB細胞を濃縮し回収するための組成物であって、（ａ）抗原（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３および／または、ＣＤ４およびＣＤ８の両方、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１１ｂおよび／またはＣＤ１５、ならびに（３）ＣＤ３６および／またはＣＤ１４、に結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項３７】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料においてT細胞を濃縮し回収するための組成物であって、（ａ）抗原（１）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１１ｂおよび／またはＣＤ１５、（２）ＣＤ１９および／またはＣＤ２０および／またはＣＤ２１および／またはＣＤ２２および／またはＣＤ２４および／またはＩｇ、ならびに（３）ＣＤ３６および／またはＣＤ１４、に結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項３９】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項３８に記載の組成物。
【請求項４０】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料においてＣＤ４＋Ｔ細胞を濃縮し回収するための組成物（ａ）抗原（１）ＣＤ８、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１１ｂおよび／またはＣＤ１５、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２０および／またはＣＤ２１および／またはＣＤ２２および／またはＣＤ２４および／またはＩｇ、ならびに（４）ＣＤ３６および／またはＣＤ１４に結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項４１】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項４０に記載の組成物。
【請求項４２】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料においてCD8+T細胞を濃縮し回収するための組成物であって、（ａ）抗原、（１）ＣＤ４、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１１ｂおよび／またはＣＤ１５、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２０および／またはＣＤ２１および／またはＣＤ２２および／またはＣＤ２４および／またはＩｇ、ならびに（４）ＣＤ３６および／またはＣＤ１４に結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項４３】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項４２に記載の組成物。
【請求項４４】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料においてNK細胞を濃縮し回収するための組成物であって、（ａ）抗原、（１）ＣＤ３、（２）ＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ１５、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２０および／またはＣＤ２１および／またはＣＤ２２および／またはＣＤ２４、ならびに（４）ＣＤ３６および／またはＣＤ１４に結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項４５】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ４に結合することのできる抗体を含む請求項４４に記載の組成物。
【請求項４６】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料において好塩基性細胞を濃縮し回収するための組成物であって、（ａ）抗原、（１）ＣＤ３、（２）ＣＤ２、（３）ＣＤ１４、（４）ＣＤ１５、（５）ＣＤ１６、（６）ＣＤ１９、（７）ＣＤ２４、（８）ＣＤ３４、（９）ＣＤ３６、（１０）ＣＤ５６、および（１１）ＣＤ４５ＲＡに結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項４７】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料において樹状細胞を濃縮し回収するための組成物（ａ）抗原、（１）ＣＤ３、（２）ＣＤ１４、（３）ＣＤ１６、（４）ＣＤ１９、（５）ＣＤ３４、（６）ＣＤ５６、および（７）ＣＤ６６ｂに結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項４８】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料において造血前駆細胞を濃縮し回収するための組成物であって、（ａ）抗原、（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂ、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２４、ならびに（４）ＣＤ１４に結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項４９】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項４８に記載の組成物。
【請求項５０】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料において赤血球前駆細胞を濃縮し回収するための組成物であって、（ａ）抗原、（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂ、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２４、（４）ＣＤ１４、（５）ＣＤ４５ＲＡ、（６）ＣＤ３３、ならびに（７）ＣＤ１０に結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項５１】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項５０に記載の組成物。
【請求項５２】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料において骨髄前駆細胞を濃縮し回収するための組成物であって、（ａ）抗原、（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂ、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２４、ならびに（４）ＣＤ１４、（５）ＣＤ７１、ならびに（６）ＣＤ１０に結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項５３】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項５２に記載の組成物。
【請求項５４】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料において巨核球前駆細胞を濃縮し回収するための組成物であって、（ａ）抗原、（１）ＣＤ２および／またはＣＤ３、（２）ＣＤ１６および／またはＣＤ６６ｂ、（３）ＣＤ１９および／またはＣＤ２４、ならびに（４）ＣＤ１４、（５）ＣＤ４５ＲＡ、ならびに（６）ＣＤ１０に結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項５５】  抗体（ａ）が、さらにＣＤ５６に結合することのできる抗体を含む請求項５４に記載の組成物。
【請求項５６】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料において非造血腫瘍細胞を濃縮し回収するための組成物であって、（ａ）抗原、（１）ＣＤ４５、および（２）ＣＤ６６ｂに結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項５７】  所望の細胞、赤血球、および所望でない細胞を含有する試料において上皮腫瘍細胞を濃縮し回収するための組成物であって、抗体（ａ）が、さらにＣＤ２、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ３６、およびＣＤ３８に結合することのできる抗体を含む請求項５６に記載の組成物。
【請求項５８】  （ａ）抗原、（１）ＣＤ４５、および（２）ＣＤ６６ｂに結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項５９】  顆粒細胞と赤血球を含有する試料において単核細胞を濃縮し回収するための組成物であって、抗体（ａ）が、さらにＣＤ２、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ３６、およびＣＤ３８に結合することのできる抗体を含む請求項５８に記載の組成物。
【請求項６０】  （ａ）抗原ＣＤ６６ｂ、またはＣＤ６６ａｂｃｅに結合することのできる複数の抗体、および（a）が直接的または間接的に連結されている（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含んでなる組成物。
【請求項６１】  有核細胞と赤血球を含む試料から有核細胞を分離する方法であって、
（１）（ａ）少なくとも１種の、分離されるべき有核細胞上の抗原に結合する抗体と、その抗体が直接または間接的に結合している（ｂ）赤血球に結合する少なくとも１種の抗体、とを含む抗体組成物に、有核細胞と赤血球とが免疫ロゼットを形成可能な条件下で試料を接触させる段階、および
（２）試料の残部と免疫ロゼットを分離する段階を含む方法。
【請求項６２】  抗体組成物が二価抗体を含み、有核細胞に結合する抗体が、赤血球に結合する抗体に直接結合している請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】  （ａ）有核細胞上の抗原に結合する抗体、（ｂ）赤血球に結合する抗体、ならびに（ｃ）（ａ）および（ｂ）で定義された抗体のＦｃ部分に結合する２種の抗体を含み、（ａ）および（ｂ）の抗体が同一の動物種の抗体であり、（ｃ）の抗体が（ａ）および（ｂ）の抗体と異なる動物種の抗体であるテトラマー抗体複合体を、抗体組成物が含む請求項６１に記載の方法。
【請求項６４】  有核細胞が、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、単核細胞、好塩基性細胞、プラスマ細胞、マスト細胞、造血前駆細胞、造血幹細胞、前駆細胞、および腫瘍細胞からなるグループから選択される請求項６１に記載の方法。
【請求項６５】  赤血球に結合する抗体が、抗グリコフォリンＡ抗体である請求項６１に記載の方法。
【請求項６６】  さらに（３）免疫ロゼット中の赤血球を溶解して細胞を単離することを含む請求項６１に記載の方法。
【請求項６７】  さらに（１）において赤血球の凝集を引き起こす化合物をくわえることを含む、請求項１記載の方法。
【請求項６８】  化合物がヘタスターチである、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】  さらに（２）において沈降試薬を加えることを含む、請求項３記載の方法。
【請求項７０】  沈降試薬がヒドロキシエチルスターチ、ゼラチン、あるいはメチルセルロースである、請求項６９記載の方法。
【請求項７１】  赤血球凝集を引き起こす化合物をさらにふくむ、請求項３４−６０のいずれかに記載の組成物。
【請求項７２】  化合物がヘタスターチである、請求項７１記載の組成物。
【請求項７３】  沈降試薬をさらに含む、請求項３４−６０のいずれかに記載の組成物。
【請求項７４】  沈降試薬がヒドロキシエチルスターチ、ゼラチン、あるいはメチルセルロースである、請求項７３記載の組成物。