【手続補正書】
【提出日】平成19年8月6日(2007.8.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトC5aRまたはヒト化C5aRをコードするポリヌクレオチドを含むトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項２】
ポリヌクレオチドが、配列番号:3に示される配列またはその対立遺伝子変種を含むヒトC5aRをコードする、請求項1記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項３】
ポリヌクレオチドが、配列番号:2に示される配列またはその対立遺伝子変種を含む、請求項1記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項４】
ポリヌクレオチドがヒト化C5aRをコードする、請求項1記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項５】
ヒト化C5aRが、少なくとも1つの細胞外または細胞内ドメインが対応のヒトC5aRドメインで置換された非ヒト哺乳動物に内在のC5aR配列を含む、請求項4記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項６】
ヒト化C5aRが、非ヒト哺乳動物に内在のC5aR配列の1つまたは複数の細胞内ドメインおよびヒトC5aRの1つまたは複数の細胞外ドメインを含む、請求項4記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項７】
ヒトまたはヒト化C5aRをコードするポリヌクレオチドを安定な組込型で含む体細胞および生殖系列細胞を有する、請求項1〜6のいずれか一項記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項８】
ヒトまたはヒト化C5aRについてホモ接合性である、請求項1〜7のいずれか一項記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項９】
トランスジェニック哺乳動物における内在性C5aRの発現が検出不可能であるかまたはわずかである、請求項1〜8のいずれか一項記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項１０】
標的相同組換えにより、内在性C5aRコード配列またはその断片が、対応のヒトC5aRコード配列またはその断片で置換されている、請求項9記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項１１】
ウシ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、ラクダ、ウマ、ネコ、イヌ、サル、ヒヒ、ウサギ、モルモット、ラット、ハムスター、およびマウスからなる群より選択される、請求項1〜7のいずれか一項記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項１２】
齧歯動物である、請求項1〜11のいずれか一項記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項１３】
マウスである、請求項1〜12のいずれか一項記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物。
【請求項１４】
ヒトC5aRまたはヒト化C5aRをコードするポリヌクレオチドを含む、請求項1〜13のいずれか一項記載のトランスジェニック非ヒト哺乳動物から得られる単離された細胞、細胞株、組織、または臓器。
【請求項１５】
化合物をC5aRシグナル伝達に関連する表現型に及ぼす影響について試験するためのトランスジェニック非ヒト哺乳動物を作製する方法であって、トランスジェニック非ヒト哺乳動物を作製するために、非ヒト哺乳動物のゲノムにヒトC5aR、ヒト化C5aR、またはヒトC5aRの断片をコードするポリヌクレオチド構築物を導入する段階を含む方法。
【請求項１６】
ポリヌクレオチド構築物がヒトC5aRをコードする、請求項15記載の方法。
【請求項１７】
ポリヌクレオチド構築物が、配列番号:3に示される配列またはその対立遺伝子変種を含むポリペプチドをコードする、請求項16記載の方法。
【請求項１８】
ポリヌクレオチド構築物が、配列番号:2に示される配列またはその対立遺伝子変種を含む、請求項16記載の方法。
【請求項１９】
ポリヌクレオチド構築物がヒト化C5aRをコードする、請求項15記載の方法。
【請求項２０】
ポリヌクレオチド構築物がヒトC5aRの断片をコードする、請求項15記載の方法。
【請求項２１】
断片がヒトC5aRの少なくとも1つのドメインまたはその一部を包含する、請求項20記載の方法。
【請求項２２】
断片がヒトC5aRの少なくとも1つの細胞外ドメインを包含する、請求項21記載の方法。
【請求項２３】
ポリヌクレオチド構築物が選択マーカーをさらに含む、請求項15〜22のいずれか一項記載の方法。
【請求項２４】
選択マーカーがPGK-neo遺伝子である、請求項23記載の方法。
【請求項２５】
選択マーカーにloxP部位が隣接する、請求項23または請求項24記載の方法。
【請求項２６】
非ヒト哺乳動物の内在性C5aRを破壊する段階をさらに含む、請求項15〜20のいずれか一項記載の方法。
【請求項２７】
標的相同組換えにより、内在性C5aRコード配列またはその断片を対応のヒトC5aRコード配列またはその断片で置換する段階を含む、請求項15〜26のいずれか一項記載の方法。
【請求項２８】
候補化合物の少なくとも1つの薬物動態学的および/または薬力学的効果を評価する方法であって、請求項1〜13のいずれか一項記載のトランスジェニック哺乳動物またはそれから得られた単離された組織もしくは細胞に候補化合物を投与する段階、およびトランスジェニック哺乳動物において候補化合物の少なくとも1つの薬物動態学的および/または薬力学的効果を試験する段階を含む方法。
【請求項２９】
試験される少なくとも1つの薬物動態学的効果が、吸収パラメータ、分布パラメータ、代謝パラメータ、または排泄パラメータである、請求項28記載の方法。
【請求項３０】
試験される少なくとも1つの薬物動態学的効果が、分布容積、総クリアランス、タンパク質結合、組織結合、代謝クリアランス、腎クリアランス、肝クリアランス、胆汁クリアランス、腸管吸収、生物学的利用能、相対的生物学的利用能、固有クリアランス、平均滞留時間、最大代謝率、ミカエリスメンテン定数、組織と血液または組織と血漿間の分配係数、尿中未変化体排泄率、薬物の代謝産物への全身変換率、排出速度定数、半減期、または分泌クリアランスである、請求項28または請求項29記載の方法。
【請求項３１】
少なくとも1つの薬力学的効果がC5aRシグナル伝達に関連する表現型の調節である、請求項28記載の方法。
【請求項３２】
(i) C5aRシグナル伝達に関連する少なくとも1つの表現型が発現される条件下で、請求項1〜13のいずれか一項記載のトランスジェニック哺乳動物またはそれから得られた単離された組織もしくは細胞に候補化合物を投与する段階；および(ii) 化合物の投与後に少なくとも1つの表現型の発生をモニターする段階を含む、請求項31記載の方法。
【請求項３３】
(iii) 化合物を投与したトランスジェニック哺乳動物またはそれに由来する細胞における表現型の程度を、対照哺乳動物またはそれに由来する細胞と比較する段階をさらに含み、対照哺乳動物と比較した場合の表現型の性質または程度の任意の相違によって化合物がC5aR活性を調節する可能性が示される、請求項32記載の方法。
【請求項３４】
(i) C5aRシグナル伝達に関連する少なくとも1つの表現型が発現される条件下で、本発明のトランスジェニック哺乳動物またはそれから得られた単離された組織もしくは細胞に候補化合物を投与する段階；(ii) 化合物の投与後に少なくとも1つの表現型の発生をモニターする段階；および任意で(iii) 化合物を投与したトランスジェニック哺乳動物における表現型の程度を対照哺乳動物と比較する段階を含み、対照哺乳動物と比較した場合の表現型の性質または程度の任意の減少または阻害によって、化合物がC5aR活性を阻害または減少させる可能性が示される、請求項31記載の方法。
【請求項３５】
(i) C5aRシグナル伝達に関連する少なくとも1つの表現型が発現される条件下で、本発明のトランスジェニック哺乳動物またはそれから得られた単離された組織もしくは細胞に候補化合物を投与する段階；(ii) 化合物の投与後に表現型の発生をモニターする段階；および任意で(iii) 化合物を投与したトランスジェニック哺乳動物における表現型の程度を対照哺乳動物と比較する段階を含み、対照哺乳動物と比較した場合の表現型の性質または程度の任意の増強によって、化合物がC5aR活性を促進または増強する可能性が示される、請求項31記載の方法。
【請求項３６】
表現型がC5aRシグナル伝達によって悪化する病態である、請求項31〜35のいずれか一項記載の方法。
【請求項３７】
表現型が免疫複合体障害、炎症性もしくはアレルギー疾患、移植片拒絶、または癌である、請求項36記載の方法。
【請求項３８】
表現型がC5aRシグナル伝達の増加によって軽減または寛解する病態である、請求項31〜35のいずれか一項記載の方法。
【請求項３９】
表現型が免疫抑制である、請求項38記載の方法。
【請求項４０】
化合物が、以下を含むペプチド：C5aR機能を阻害し得る、減少させ得る、または抑制し得る、C5aRもしくはC5aに由来するペプチドまたはその他の非C5aRペプチド、C5aRドミナントネガティブ変異体；C5aRの非ペプチド阻害物質；C5aRに結合してC5aR機能を阻害する抗体または抗体断片；小有機分子、C5aRもしくはC5aに由来する該ペプチドまたはその他の非C5aRペプチド阻害物質をコードする核酸、C5aRコードmRNAに対するアンチセンス核酸、抗C5aRリボザイム、およびC5aR遺伝子発現を標的とする低分子干渉RNA（RNAi）からなる群より選択される、請求項28〜39のいずれか一項記載の方法。
【請求項４１】
核酸が、C5aRに由来するペプチドまたはその他の非C5aRペプチド阻害物質、C5aRコードmRNAに対するアンチセンス核酸、抗C5aRリボザイム、またはC5aR遺伝子発現を標的とする低分子干渉RNA（RNAi）をコードする、請求項40記載の方法。