【手続補正書】
【提出日】平成19年8月7日(2007.8.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  心肥大のインヒビターを同定するための方法であって、以下：
（ａ）ＨＤＡＣ４酵素またはＨＤＡＣ５酵素の供給源を提供する工程；
（ｂ）該酵素を候補物質と接触させる工程；
（ｃ）工程（ｂ）における該酵素機能を決定する工程；および
（ｄ）工程（ｃ）における該酵素機能を、該候補物質の非存在下における該酵素の酵素機能と比較する工程、
を含み、ここで、該候補物質の非存在下における酵素機能と比較した場合の、該候補物質の存在下における増加した酵素機能が、心肥大のインヒビターとして該候補物質を同定する、方法。
【請求項２】  前記酵素が精製ＨＤＡＣ４である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】  前記酵素が精製ＨＤＡＣ５である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】  前記酵素がＨＤＡＣ４およびＨＤＡＣ５の混合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】  前記混合物が心臓細胞中にある、請求項４に記載の方法。
【請求項６】  前記心臓細胞が実験動物中にある、請求項５に記載の方法。
【請求項７】  前記酵素機能が、インビトロ脱アセチル化反応によって決定される、請求項２に記載の方法。
【請求項８】  前記酵素機能が、インビトロ脱アセチル化反応によって決定される、請求項３に記載の方法。
【請求項９】  前記酵素機能が、前記細胞中のヒストンアセチル化状態によって決定される、請求項５に記載の方法。
【請求項１０】  前記酵素機能が、前記動物の前記心臓細胞中のヒストンアセチル化状態によって決定される、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】  心臓細胞中の遺伝子発現のモジュレーターを同定するための方法であって、以下：
（ａ）ＭＥＦ２のＨＤＡＣ結合領域を提供する工程；
（ｂ）該ＭＥＦ２のＨＤＡＣ結合領域をＨＤＡＣ４のＭＥＦ２結合領域またはＨＤＡＣ５のＭＥＦ２結合領域および候補物質と接触させる工程；
（ｃ）工程（ｂ）における該結合を決定する工程；ならびに
（ｄ）工程（ｃ）における該結合を、該候補物質の非存在下における該ＭＥＦ２のＨＤＡＣ結合領域とＨＤＡＣ４のＭＥＦ２結合領域またはＨＤＡＣ５のＭＥＦ２結合領域との結合と比較する工程、
を含み、ここで、該候補物質の存在下の結合と非存在下の結合との間の差異が、心臓遺伝子発現のモジュレーターとして該候補物質を同定する、方法。
【請求項１２】  前記ＭＥＦ２のＨＤＡＣ結合領域がＭＥＦ２の１〜８６を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】  前記ＭＥＦ２のＨＤＡＣ結合領域がＭＥＦ２の残基１〜１１７を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】  前記ＭＥＦ２のＨＤＡＣ結合領域がＭＥＦ２の全長を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】  前記ＨＤＡＣ４のＭＥＦ２結合領域または前記ＨＤＡＣ５のＭＥＦ２結合領域が、ＨＤＡＣ４の残基１６３〜１８０またはＨＤＡＣ５の残基１７５〜１９２を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】  前記ＨＤＡＣ４のＭＥＦ２結合領域または前記ＨＤＡＣ５のＭＥＦ２結合領域が、ＨＤＡＣの全長を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】  請求項１１に記載の方法であって、ここで、ＭＥＦ２のＨＤＡＣ結合領域およびＨＤＡＣ４のＭＥＦ２結合領域またはＨＤＡＣ５のＭＥＦ２結合領域が、個々に、クエンチ可能なマーカーおよびクエンチング因子を含む、方法。
【請求項１８】  請求項１４に記載の方法であって、ここで、ＨＤＡＣ４のＭＥＦ２結合領域またはＨＤＡＣ５のＭＥＦ２結合領域が、転写因子に融合され、そして該結合が、レポーター発現カセットの転写活性化によって測定される、方法。
【請求項１９】  請求項１８に記載の方法であって、ここで、前記レポーターカセットが、β−ガラクトシダーゼ、ｌａｃＺおよびＧＦＰルシフェラーゼからなる群から選択される検出可能なマーカーをコードする、方法。
【請求項２０】  動物における心肥大を処置するための組成物であって、該動物中の心臓組織への提供に適した少なくとも１つのＨＤＡＣ４またはＨＤＡＣ５を含む、組成物。
【請求項２１】  ＨＤＡＣ４およびＨＤＡＣ５の両方が含まれる、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】  請求項２０に記載の組成物であって、ここで、前記少なくとも１つのＨＤＡＣ４またはＨＤＡＣ５が、心臓組織において活性なプロモーターの制御下で、ＨＤＡＣ４またはＨＤＡＣ５をコードする発現カセットを前記心臓組織に転移させることによって提供される、組成物。
【請求項２３】  請求項２０に記載の組成物であって、前記発現カセットが、ウイルス発現ベクターであり、そして、該ウイルス発現ベクターを含むウイルス粒子を用いた前記心臓組織の感染によって転移が達成される、組成物。
【請求項２４】  前記ウイルス発現ベクターが、アデノウイルス、レトロウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルスおよびワクシニアウイルスから誘導される、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】  従来の冠状動脈性心疾患剤の処方物をさらに含む、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２６】  動物における心肥大を処置するための組成物であって、該動物への提供に適したＨＤＡＣ４アゴニストまたはＨＤＡＣ５アゴニストを含む、組成物。
【請求項２７】  前記アゴニストがＨＤＡＣ４合成またはＨＤＡＣ５合成を増加させる、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】  前記アゴニストがＨＤＡＣ４安定性またはＨＤＡＣ５安定性を増加させる、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２９】  前記アゴニストがＨＤＡＣ４活性またはＨＤＡＣ５活性を増加させる、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３０】  従来の冠状動脈性心疾患剤の処方物をさらに含む、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３１】  ＨＤＡＣ４またはＨＤＡＣ５の１つ以上の機能的対立遺伝子を欠く、非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項３２】  前記動物がＨＤＡＣ４およびＨＤＡＣ５の全ての機能的対立遺伝子を欠く、請求項３１に記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項３３】  前記非ヒト動物が、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジ、ヤギおよびウシからなる群より選択される、請求項３１に記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項３４】  ＭＥＦ２調節プロモーターの制御下で検出可能なマーカー遺伝子をさらに含む、請求項３１に記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項３５】  前記ＭＥＦ２調節プロモーターがＮＧＦＩ−Ｂプロモーターである、請求項３４に記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項３６】  前記検出可能なマーカー遺伝子が、β−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼおよびＧＦＰルシフェラーゼからなる群より選択される、請求項３４に記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項３７】  ＨＤＡＣリン酸化のモジュレーターを同定するための方法であって、以下：
（ａ）ＨＤＡＣのリン酸化を支持する条件下において、該ＨＤＡＣの供給源を提供する工程；
（ｂ）該ＨＤＡＣを候補物質と接触させる工程；
（ｃ）該ＨＤＡＣ中の１つ以上のセリン残基のリン酸化状態を決定する工程；および
（ｄ）工程（ｃ）のＨＤＡＣのリン酸化状態を、候補物質の存在下でのＨＤＡＣと比較する工程、
を包含し、ここで、該候補物質の非存在下での酵素機能と比較した場合の、該候補物質の存在下での該ＨＤＡＣのリン酸化状態における変化が、ＨＤＡＣリン酸化のモジュレーターとして該候補物質を同定する、方法。
【請求項３８】  前記ＨＤＡＣがＨＤＡＣ５である、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】  前記セリン残基が、２５９、４９８および６６１からなる群より選択される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】  前記セリン残基が２５９である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】  前記セリン残基が４９８である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】  前記セリン残基が６６１である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４３】  前記リン酸化状態が、前記ＨＤＡＣの１４−３−３への結合によって決定される、請求項３７に記載の方法。
【請求項４４】  請求項４３に記載の方法であって、ここで、ＨＤＡＣの１４−３−３への結合は、ＨＤＡＣのＧＡＬ４融合および１４−３−３のＧＡＬ４融合がマーカー遺伝子の転写を開始する能力によって決定される、方法。
【請求項４５】  前記マーカー遺伝子が、β−ガラクトシダーゼ、緑色蛍光タンパク質またはルシフェラーゼである、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】  前記ＨＤＡＣが宿主細胞中に位置する、請求項３７に記載の方法。
【請求項４７】  前記宿主細胞が酵母細胞である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】  前記リン酸化状態がＨＤＡＣの細胞下局在を決定することによって決定される、請求項３７に記載の方法。
【請求項４９】  動物における心肥大を処置するための組成物であって、動物への提供に適したＨＤＡＣリン酸化のインヒビターを含む、組成物。
【請求項５０】  前記動物がヒトである、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５１】  前記インヒビターがＣａｍキナーゼのインヒビターである、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５２】  前記ＣａｍキナーゼのインヒビターがＫＮ６２である、請求項５１に記載の組成物。
【請求項５３】  動物への提供に適した第２の薬学的組成物をさらに含む、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５４】  請求項５３に記載の組成物であって、ここで、前記第２の薬剤が、「βブロッカー」、抗高血圧剤、強心剤、抗血栓剤、血管拡張剤、ホルモンアンタゴニスト、エンドセリンアンタゴニスト、サイトカインインヒビター／サイトカインブロッカー、カルシウムチャネルブロッカー、ホスホジエステラーゼインヒビターおよびアンギオテンシン２型アンタゴニストからなる群より選択される、組成物。
【請求項５５】  前記ＨＤＡＣがＨＤＡＣ４である、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５６】  前記ＨＤＡＣがＨＤＡＣ５である、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５７】  動物への提供に適した第２の薬剤をさらに含む、請求項２６に記載の組成物。
【請求項５８】  ＨＤＡＣ４が含まれる、請求項２６に記載の組成物。
【請求項５９】  ＨＤＡＣ５が含まれる、請求項２６に記載の組成物。
【請求項６０】  前記動物がヒトである、請求項２６に記載の組成物。