【手続補正書】
【提出日】平成18年12月1日(2006.12.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
a) 配列番号1の配列のヒトタンパク質、および配列番号1の全配列と少なくとも80%の同一性または少なくとも90%の類似性、好ましくは少なくとも90%の同一性または少なくとも95%の類似性を示す配列のタンパク質からなる群より選択される、ASAPとよばれるタンパク質
b) a)で規定されるタンパク質の少なくとも10個連続するアミノ酸のペプチド、
c) a)で規定されるタンパク質またはb)で規定されるペプチドを特異的に認識することができるモノクローナル抗体またはポリクローナル抗体、
d) a)で規定されるタンパク質またはb)で規定されるペプチドをエンコードするポリヌクレオチド、あるいは該ポリヌクレオチドに対してアンチセンスであるポリヌクレオチド、e) d)で規定されるポリヌクレオチドの少なくとも15個連続するヌクレオチドのポリヌクレオチド断片、または該断片に対してアンチセンスである断片、
f) d)で規定されるポリヌクレオチド、またはe)で規定される断片を含む発現ベクター、ならびに
g) d)で規定されるポリヌクレオチド、e)で規定される断片、またはf)で規定されるベクターで形質転換された宿主細胞
からなる群より選択される有効成分を含むことを特徴とする医薬品。
【請求項２】
前記ポリヌクレオチドまたは前記断片が、配列番号15〜30および45の配列、ならびに該配列に対してアンチセンスである配列からなる群より選択されることを特徴とする請求項1に記載の医薬品。
【請求項３】
前記タンパク質または前記ペプチドが、配列番号2〜14および46〜53の配列からなる群より選択されることを特徴とする請求項1に記載の医薬品。
【請求項４】
前記抗体が、配列番号1もしくは46の配列のタンパク質、または配列番号2〜14および47〜53の配列のペプチドの少なくとも1つを特異的に認識することを特徴とする請求項1に記載の医薬品。
【請求項５】
a)で規定されるASAPタンパク質、b)で規定されるペプチド、該タンパク質または該ペプチドをエンコードし、d)またはe)で規定されるポリヌクレオチドまたは断片、f)で規定される発現ベクター、およびg)で規定される宿主細胞からなる群より選択される請求項1で規定される有効成分の、有糸分裂抑制医薬品を製造するための使用。
【請求項６】
d)もしくはe)で規定されるアンチセンスポリヌクレオチドまたはアンチセンス断片、c)で規定される抗体、あるいは該アンチセンスポリヌクレオチドもしくは該アンチセンス断片を含み、f)で規定されるベクターからなる群より選択され、請求項1に規定されるポリヌクレオチドの発現またはASAPタンパク質を阻害することができる請求項1で規定される有効成分の、ASAPタンパク質の過剰発現に関連する、有糸分裂紡錘体機構における妨害および／または異常および頓挫性有糸分裂の誘導に関連する病理の治療を意図する医薬品を製造するための使用。
【請求項７】
請求項1で規定されるポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチド断片の、有糸分裂紡錘体機構における障害および／または細胞分裂異常に関連する病理の状態あるいは遺伝子疾患を診断するためのプローブとしての使用。
【請求項８】
前記プローブが、配列番号15、17〜44の配列、GenBankデータベースにおいて受理番号AK024730およびAK024812の下で記載される配列、および受理番号BU198882、BM693711、
【表１】
2006526387.tif 000001
BF889835、AU164011、AV656025、BF343454、AW262441、AW237952の下で記載されるEST、
ならびに該配列の少なくとも15個連続するヌクレオチドの断片からなる群より選択されることを特徴とする請求項7に記載の使用。
【請求項９】
請求項1または4で規定される抗体の、有糸分裂紡錘体機構における妨害および／または請求項1で規定されるタンパク質の過剰発現に関連する異常および頓挫性有糸分裂の誘導を示す細胞を検出および／または選択するための使用。
【請求項１０】
配列番号1の配列のヒトタンパク質または配列番号46の配列のマウスタンパク質であることを特徴とする、ASAPとよばれる単離タンパク質。
【請求項１１】
請求項10に記載のタンパク質の断片からなり、配列番号2〜配列番号14および47〜53の配列からなる群より選択されることを特徴とするペプチド。
【請求項１２】
微小管結合タンパク質またはMAPのうちで、請求項10に記載のタンパク質または請求項11に記載の1種以上のペプチドを、単一でかつ特異的に認識することを特徴とするモノクローナルまたはポリクローナル抗体。
【請求項１３】
- 請求項10に記載のヒトASAPタンパク質をエンコードする配列番号15の配列のcDNA、
- 請求項10に記載のマウスASAPタンパク質をエンコードする配列番号45の配列のcDNA、
- 配列番号16の配列を有し、ヒトasap遺伝子に対応する29800ヌクレオチドのゲノムDNA断片、および
- 上記のポリヌクレオチドに相補的であり、センスまたはアンチセンスであり得るポリヌクレオチド
からなる群より選択されることを特徴とする単離ポリヌクレオチド。
【請求項１４】
配列番号17〜30の配列のプローブからなる群より選択されることを特徴とする請求項13に記載のポリヌクレオチドの断片。
【請求項１５】
配列番号31〜43の配列からなる群より選択されることを特徴とする、請求項1で規定されるポリヌクレオチドを増幅するためのプライマー。
【請求項１６】
請求項13に記載のポリヌクレオチド、または請求項14に記載の断片からなる挿入断片を含むことを特徴とするクローニングおよび／または発現ベクター。
【請求項１７】
請求項13に記載のポリヌクレオチド、請求項14に記載の断片または請求項16に記載のベクターで形質転換されたことを特徴とする宿主細胞。
【請求項１８】
その全てまたは一部の細胞が、少なくとも1つの請求項13に記載のポリヌクレオチド、1つの請求項14に記載の断片、1つの請求項16に記載のベクターを遊離または組み込まれた形で含むことを特徴とするヒト以外のトランスジェニック生物。
【請求項１９】
細胞が、機能しないかもしくは突然変異を含有する請求項13に記載のポリヌクレオチドまたは請求項14に記載の断片を含むことを特徴とする、請求項18に記載のヒト以外のトランスジェニック動物。
【請求項２０】
請求項1で規定されるASAPタンパク質をエンコードする遺伝子の転写プロフィールの変更を、少なくとも以下の工程：
- いずれの適切な手段により、生体試料から全RNAを得ることからなる第一工程、
- 該RNAを、予め標識された請求項7、8または14のいずれか1つで規定されるプローブと、該RNAとプローブとの間のハイブリダイゼーションのための通常の条件下に接触させることからなる第二工程、および
- いずれの適切な手段により、形成されたハイブリッドを明らかにすることからなる第三工程により測定することを含むことを特徴とする、有糸分裂紡錘体機構における妨害および／または細胞分裂異常に関連する病理の状態を検出する方法。
【請求項２１】
第二工程が、請求項15に記載のプライマーの対を用いて行われる逆転写および／または転写産物の増幅からなる工程であり、第三工程が、いずれの適切な手段により、増幅された核酸を明らかにすることからなる工程である請求項20に記載の方法。
【請求項２２】
遺伝子の転写レベルを、予め選択した対照との比較により評価することからなる工程も含むことを特徴とする請求項20および21のいずれか1つに記載の方法。
【請求項２３】
請求項1で規定されるASAPタンパク質をエンコードする遺伝子の機能的変更を、少なくとも次の工程：
- いずれの適切な手段により、生体試料からDNAを得ることからなる第一工程、
- 該DNAを、予め標識された請求項7、8または14のいずれか1つで規定されるプローブと、該DNAとプローブとの間のハイブリダイゼーションのための通常の条件下に接触させることからなる第二工程、および
- いずれの適切な手段により、形成されたハイブリッドを明らかにすることからなる第三工程
により証明することを含むことを特徴とする、有糸分裂紡錘体機構における妨害および／または細胞分裂異常に関連する遺伝子疾患を検出する方法。
【請求項２４】
第二工程が、請求項15に記載のプライマーの対を用いて行われる増幅工程であり、第三工程が、いずれの適切な手段により、形成された増幅核酸を明らかにすることからなる工程である請求項23に記載の方法。
【請求項２５】
証明された核酸を単離して配列決定することからなる工程も含むことを特徴とする請求項22および23のいずれか1つに記載の方法。
【請求項２６】
- 細胞を、細胞内の媒体を接触可能にするためのいずれの適切な手段により適切に処理することからなる第一工程、
- 得られた細胞内の媒体を、請求項1、4または11のいずれか1つで規定される抗体と接触させることからなる第二工程、
- いずれの適切な手段により、形成されたASAPタンパク質-抗体複合体を証明および測定することからなる第三工程、ならびに
- 遺伝子の転写レベルを、形成されたASAPタンパク質-抗体複合体のレベルの、予め選択した対照の生体試料のレベルとの比較により評価することからなる第四工程
を含む、インビトロで、癌細胞の増殖能または攻撃性を評価する方法。
【請求項２７】
請求項1で規定されるタンパク質の活性を調節(活性化または阻害)することができる物質をスクリーニングする、
- 第一工程において、請求項1で規定されるタンパク質を発現する生体試料の細胞を、試験される物質と接触させ、
- 第二工程において、該物質の、有糸分裂紡錘体機構または異常および頓挫性有糸分裂の誘導に対する影響を、いずれの適切な手段により測定し、かつ
-第三工程において、該活性を調節することができる物質を選択する
ことを特徴とする方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】中心体結合タンパク質およびその適用