(57)【要約】眼組織におけるメモリーTh17細胞の活性または数を減少させるため、ならびに眼の免疫炎症性疾患を処置および／もしくは予防するための方法ならびに組成物を記載する。2019505515.tif 000005
2019505515.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インターロイキン15 (IL-15) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物またはインターロイキン7 (IL-7) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む組成物を対象の眼に局所投与する段階を含む、眼の免疫炎症性障害を患う対象を処置する方法。
【請求項２】
IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む組成物を対象の眼に局所投与する段階を含む、請求項1記載の方法。
【請求項３】
IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む組成物を対象の眼に局所投与する段階を含む、請求項1記載の方法。
【請求項４】
IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物およびIL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む組成物を対象の眼に局所投与する段階を含む、請求項1記載の方法。
【請求項５】
眼の免疫炎症性障害を患う対象を処置することが、眼組織におけるTh17細胞の生存または増殖を阻害する段階を含む、請求項1記載の方法。
【請求項６】
眼の免疫炎症性障害が、ドライアイ疾患 (DED)、自己免疫性ぶどう膜炎、または眼移植片対宿主病を含む、請求項1記載の方法。
【請求項７】
IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物が、Th17細胞の細胞表面におけるIL-15シグナル伝達の開始を阻害する、請求項1記載の方法。
【請求項８】
IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物が、Th17細胞の細胞表面におけるIL-7シグナル伝達の開始を阻害する、請求項1記載の方法。
【請求項９】
IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物が、IL-15とのIL-15受容体 (IL-15R) の細胞外会合を阻害する、請求項1記載の方法。
【請求項１０】
IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物が、IL-7とのIL-7受容体 (IL-7R) の細胞外会合を阻害する、請求項1記載の方法。
【請求項１１】
IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物が、中和抗IL-15R抗体、低分子IL-15阻害剤、IL-15に結合する可溶性ペプチド、またはIL-15に結合する抗体を含む、請求項1記載の方法。
【請求項１２】
IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物が、中和抗IL-7R抗体、低分子IL-7阻害剤、IL-7に結合する可溶性ペプチド、またはIL-7に結合する抗体を含む、請求項1記載の方法。
【請求項１３】
対象が、眼の中に何かが入っているようなザラザラまたはゴロゴロした感じ、眼の乾燥、まぶたの重み、刺痛、痒み、焼けるような痛み、刺激、疼痛、発赤、炎症、眼脂、感情的にストレスを受けた場合に泣くことができないこと、眼精疲労、霧視、または過剰な流涙に苦しんでおり、方法が、眼の中に何かが入っているようなザラザラまたはゴロゴロした感じ、眼の乾燥、まぶたの重み、刺痛、痒み、焼けるような痛み、刺激、疼痛、発赤、炎症、眼脂、感情的にストレスを受けた場合に泣くことができないこと、眼精疲労、霧視、または過剰な流涙を阻害するか、またはその重症度を軽減する、請求項1記載の方法。
【請求項１４】
組成物が、固体、軟膏、ゲル、液剤、エアロゾル、ミスト、ポリマー、コンタクトレンズ、フィルム、乳剤、または懸濁剤の形態である、請求項1記載の方法。
【請求項１５】
組成物が局所的に投与される、請求項1記載の方法。
【請求項１６】
組成物の全身投与も、組成物の非眼組織への実質的浸透も含まない、請求項1記載の方法。
【請求項１７】
組成物が投与された後に、対象の眼内のメモリーTh17細胞の数が減少する、請求項1記載の方法。
【請求項１８】
組成物が、IL-17媒介性シグナル伝達の阻害剤をさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項１９】
阻害剤が、IL-17受容体へのIL-17の結合を阻害する、請求項18記載の方法。
【請求項２０】
組成物が、
(a) IL-15シグナル伝達を優先的に阻害し、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、L-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、IL-34、IL-35、IL-36、IL-37、IL-38、および／もしくはIFN-γ、またはそれらの受容体よりも、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、75、80、85、90、95、100%、または2倍、5倍、10倍、100倍、もしくは1000倍高い親和性で、IL-15またはIL-15Rに結合する化合物；または
(b) IL-7シグナル伝達を優先的に阻害し、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、IL-34、IL-35、IL-36、IL-37、IL-38、および／もしくはインターフェロンγ (IFN-γ)、またはそれらの受容体よりも、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、75、80、85、90、95、100%、または2倍、5倍、10倍、100倍、もしくは1000倍高い親和性で、IL-7またはIL-7Rに結合する化合物
を含む、請求項1記載の方法。
【請求項２１】
組成物が、
(a) IL-15シグナル伝達を優先的に阻害し、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、IL-34、IL-35、IL-36、IL-37、IL-38、および／またはIFN-γ媒介性シグナル伝達よりも、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、75、80、85、90、95、100%、または2倍、5倍、10倍、100倍、もしくは1000倍多く、IL-15媒介性シグナル伝達を阻害する化合物；または
(b) IL-7シグナル伝達を優先的に阻害し、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、IL-34、IL-35、IL-36、IL-37、IL-38、および／またはIFN-γ媒介性シグナル伝達よりも、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、75、80、85、90、95、100%、または2倍、5倍、10倍、100倍、もしくは1000倍多く、IL-7媒介性シグナル伝達を阻害する化合物
を含む、請求項1記載の方法。
【請求項２２】
眼の免疫炎症性障害の症状が、
(a) 組成物の投与の開始後、5、15、30、もしくは60分以内に；または
(b) 組成物の投与の開始後、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、もしくは14日以内に
軽減される、請求項1記載の方法。
【請求項２３】
組成物が、
(a) 1日に1、2、3、4、5、もしくは6回未満；
(b) 1週間に約1、2、3、4、5、6、もしくは7回；または
(c) 1日1回、
対象の眼に投与される、請求項1記載の方法。
【請求項２４】
組成物が対象によって投与される、請求項1記載の方法。
【請求項２５】
眼科的に許容される媒体中に、インターロイキン15 (IL-15) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物またはインターロイキン7 (IL-7) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む、組成物。
【請求項２６】
インターロイキン15 (IL-15) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物またはインターロイキン7 (IL-7) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む組成物を含むコンタクトレンズであって、該組成物が該レンズ内に組み入れられているか、または該レンズ上にコーティングされている、コンタクトレンズ。
【請求項２７】
ポリマーと、インターロイキン15 (IL-15) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物またはインターロイキン7 (IL-7) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む生物活性組成物とを含む、装置。
【請求項２８】
組成物の液滴を対象の眼に投与するのに適したディスペンサー内の、インターロイキン15 (IL-15) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物またはインターロイキン7 (IL-7) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物と、薬学的に許容される担体とを含む、点眼組成物。
【請求項２９】
約200〜約400ミリオスモル／キログラム（両端を含む）の容積オスモル濃度、および約6.5〜約7.5（両端を含む）のpHを有する、請求項28記載の点眼組成物。
【請求項３０】
IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物が、IL-7に結合する抗体である、請求項28記載の点眼組成物。
【請求項３１】
抗体が約0.5、0.75、1、1.25、1.5、2、3、4、5、または0.5〜5 mg/mlの濃度で存在する、請求項30記載の点眼組成物。
【請求項３２】
IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物が、IL-15に結合する抗体である、請求項28記載の点眼組成物。
【請求項３３】
抗体が約0.5、0.75、1、1.25、1.5、2、3、4、5、または0.5〜5 mg/mlの濃度で存在する、請求項32記載の点眼組成物。
【請求項３４】
IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物が、IL-7に結合する抗体を含む、請求項1記載の方法。
【請求項３５】
IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物が、IL-15に結合する抗体を含む、請求項1記載の方法。
【請求項３６】
眼組織におけるTh17細胞の生存または増殖を阻害する段階を含む、眼の免疫炎症性障害を処置する方法であって、該生存または増殖が、IL-15またはIL-7の阻害剤を対象に投与することによって阻害される、方法。
【請求項３７】
免疫炎症性障害がドライアイ疾患を含む、請求項36記載の方法。
【請求項３８】
インターロイキン15 (IL-15) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物またはインターロイキン7 (IL-7) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物をヒト対象の眼の表面に局所的に投与する段階を含む、請求項36記載の方法。
【請求項３９】
眼の免疫炎症性障害の処置において使用するための、IL-15またはIL-7の阻害剤を含む組成物。
【請求項４０】
眼の免疫炎症性障害の処置が、眼組織におけるTh17細胞の生存または増殖を阻害する段階を含む、請求項39記載の組成物。
【請求項４１】
眼の免疫炎症性障害がドライアイ疾患を含む、請求項39記載の組成物。
【請求項４２】
L-15の阻害剤が、IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含むか、またはIL-7の阻害剤が、IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む、請求項39記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連特許出願の相互参照
本出願は、2016年1月7日に出願された米国仮特許出願第62/275,946号の優先権および恩典を主張し、該仮特許出願は全体としてかつすべての目的のために参照により本明細書に組み入れられる。
【０００２】
連邦政府支援の研究に関する言明
本発明は、米国立衛生研究所により付与されたR01-EY20889の下で政府の支援を受けてなされたものである。米国政府は本発明において一定の権利を有する。
【０００３】
発明の分野
本発明は一般的に眼科学の分野に関する。
【０００４】
配列表の参照による組み入れ
2017年1月6日に作成され、84.9キロバイトの大きさである、36770-547001US_SEQUENCE_LISTING.txtと命名されたテキストファイルの内容は、全体として参照により本明細書に組み入れられる。
【背景技術】
【０００５】
背景
眼表面の炎症を特徴とするドライアイ疾患 (DED) は、依然として、患者が眼科の診察を受ける最多原因の一つである (Am J Ophthalmol. 2007; 143:409-15 (非特許文献1))。50歳を超えるおよそ500万人のアメリカ人がこれに罹患しており、さらに何百万人もの人々がドライアイの間欠的症状を経験している (Ocul Surf 2007; 5:93-107 (非特許文献2))。本疾患は、日常生活の動作に衰弱性の影響を及ぼす場合があり、現在の治療戦略は、人工涙液による症状緩和、ならびに非特異的な副腎皮質ステロイド療法および局所シクロスポリン［Restasis（登録商標）（シクロスポリン点眼エマルジョン）］に限定されている。しかしながら、副腎皮質ステロイドの長期使用は、眼圧上昇および白内障という視力を脅かす副作用によって制限されている (Curr Opin Ophthalmol 2000; 11:478-483 (非特許文献3))。加えて、Restasis（登録商標）に関して、焼けるような痛みおよび刺痛などの忍容性の問題が報告されている (Arch Ophthalmol 2009; 127:146-152 (非特許文献4))。
【０００６】
DED、自己免疫性ぶどう膜炎、および眼移植片対宿主病 (GVHD) などの眼の免疫炎症性疾患の根底にある免疫応答の特定の構成成分を標的とする新規な免疫調節性の処置方法および組成物の未だ対処されていない必要性が依然として残っている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Am J Ophthalmol. 2007; 143:409-15
【非特許文献２】Ocul Surf 2007; 5:93-107
【非特許文献３】Curr Opin Ophthalmol 2000; 11:478-483
【非特許文献４】Arch Ophthalmol 2009; 127:146-152
【発明の概要】
【０００８】
本主題は、メモリーTh17細胞媒介性の眼の免疫炎症性疾患を処置するための新規な治療アプローチを提供する。本主題の局面は、インターロイキン (IL)-7／IL-7受容体 (IL-7R) またはIL-15／IL-15受容体 (IL-15R) 阻害剤が投与される、メモリーTh17細胞媒介性の眼障害（例えば、DED）を処置するための方法および組成物を提供する。いくつかの態様では、IL-7／IL-7Rシグナリング阻害剤およびIL-15／IL-15R阻害剤が投与される。
【０００９】
眼の免疫炎症性障害を患う対象は、インターロイキン15 (IL-15) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物および／またはインターロイキン7 (IL-7) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を有する組成物を対象の眼に局所投与することによって処置され得る。様々な態様において、眼の免疫炎症性障害を処置することは、眼組織におけるTh17細胞の生存または増殖を阻害する段階を含む。眼の免疫炎症性障害の非限定的な例はDEDである。
【００１０】
本明細書で用いられる「IL-7シグナル伝達」、「IL-7シグナリング」、または「IL-7シグナリング経路」とは、IL-7が、IL-7 Rαおよび／または共通γ鎖／IL-2 Rγ（例えば、IL-7Rおよび／またはIL-2RG）を含む細胞表面受容体複合体に結合した場合に活性化される細胞内シグナリング経路を指す。IL-7シグナリングは、正常な免疫系機能の確立および維持に関与する。これは、マウスおよびヒトT細胞の発生および恒常的増殖、マウスB細胞の発生、ならびにCD4+およびCD8+メモリーT細胞の生成に必要である。本主題は任意の科学理論に限定されないが、T細胞の生存に対するIL-7の必要性は、抗アポトーシス性のBcl-2、Bcl-xL、およびMcl-1タンパク質の発現を誘導するその能力に一部起因している。加えて、IL-7は、TCRγ、TCRβ、および免疫グロブリン重鎖遺伝子座におけるV(D)J組換えの調節において役割を果たす。
【００１１】
本明細書で用いられる「IL-15シグナル伝達」、「IL-15シグナリング」、または「IL-15シグナリング経路」とは、IL-15が、特有のIL-15 Rαサブユニット、IL-2/IL-15 Rβ、および／または共通γ鎖／IL-2 Rγサブユニットを含む細胞表面受容体複合体に結合した場合に活性化される細胞内シグナリング経路を指す。IL-15シグナリングは、正常な免疫系機能に関与する。本主題は任意の科学理論に限定されないが、これはT細胞増殖を刺激し、かつIL-2媒介性活性化によって誘導される細胞死を阻害する。加えて、IL-15は、ナチュラルキラー (NK) 細胞の発生、生存、および活性化、ナチュラルキラーT (NKT) 細胞および上皮内リンパ球の恒常性、ならびにナイーブおよびメモリーCD8+ T細胞の維持に必要である。
【００１２】
化合物は、種々の機構によっておよび細胞の異なる可能部位において、シグナル伝達を阻害し得る。例えば、IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物は、Th17細胞の細胞表面におけるIL-7シグナル伝達の開始を阻害し得、ならびに／または化合物は、IL-15シグナル伝達の開始およびTh17細胞の細胞表面を阻害し得る。ある特定の態様において、IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物は、IL-7とのまたはIL-7へのIL-7受容体 (IL-7R) の細胞外会合または結合を阻害し、および／またはIL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物は、IL-15とのまたはIL-15へのIL-15受容体 (IL-15R) の細胞外会合または結合を阻害する。
【００１３】
「阻害剤」、「リプレッサー」または「アンタゴニスト」または「下方制御剤」という用語は、対照と比較して検出可能な程度により低い発現または活性レベルをもたらす物質を互換的に指す。様々な態様において、阻害された発現または活性は、対照における発現または活性のレベルと比較して、約10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%、またはそれ以上、低下し得る。いくつかの態様において、阻害された発現または活性は、対照における発現または活性のレベルの約10%〜約25%、約10%〜約50%、約10%〜約75%、約1%〜約50%、約1%〜約25%、約25%〜約50%、50%〜約75%、または0.5%〜99%の間の任意の他の範囲であってよい。「阻害剤」は、例えば結合すること、刺激を部分的もしくは完全に遮断すること、活性化を減少させる、妨げる、もしくは遅延させること、またはタンパク質活性に必要なシグナル伝達、遺伝子発現、もしくは酵素活性を不活性化、減感、もしくは下方制御することにより、細胞機能（例えば、複製）を阻害する化合物である。阻害剤の非限定的な例には、RNA干渉誘導 (RNAi) 分子（例えば、siRNA、shRNA、miRNA、snoRNA)、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アプタマー（例えば、DNAアプタマーおよびRNAアプタマー）、低分子、またはポリペプチド（例えば、抗体、または受容体の細胞外ドメインもしくはそのリガンド結合部分などの可溶性ペプチド）が含まれる。
【００１４】
本主題の局面において有用な阻害剤の非限定的な例には、中和抗体、低分子、および可溶性ペプチドが含まれる。いくつかの態様において、IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物は、中和抗IL-7R抗体、低分子IL-7阻害剤、IL-7に結合する可溶性ペプチド、またはIL-7に結合する抗体を含む。様々な態様において、IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物は、中和抗IL-15R抗体、低分子IL-15阻害剤、IL-15に結合する可溶性ペプチド、またはIL-15に結合する抗体を含む。
【００１５】
眼の免疫炎症性疾患に苦しむ対象は、1つまたは複数の症状に苦しんでいる可能性がある。そのような症状の非限定的な例には、眼の中に何かが入っているような（例えば、対象本人によって報告される）ザラザラまたはゴロゴロした感じ、眼の乾燥、まぶたの重み、刺痛、痒み、焼けるような痛み、刺激、疼痛、発赤、炎症、眼脂、感情的にストレスを受けた場合に泣くことができないこと、眼精疲労、霧視、または過剰な流涙が含まれ、この場合、前記方法によって、眼の中に何かが入っているようなザラザラまたはゴロゴロした感じ、眼の乾燥、まぶたの重み、刺痛、痒み、焼けるような痛み、刺激、疼痛、発赤、炎症、眼脂、感情的にストレスを受けた場合に泣くことができないこと、眼精疲労、霧視、および過剰な流涙が阻害されるか、またはその重症度が軽減される。態様において、本明細書に記載される方法は、これらの症状のうちの1つまたは複数を有する対象を同定する段階を含み得る。
【００１６】
本主題の組成物は、種々の形態で製剤化され得る。様々な態様において、組成物は、固体、軟膏、ゲル、液剤、エアロゾル、ミスト、ポリマー、コンタクトレンズ、フィルム、乳剤、または懸濁剤の形態である。いくつかの態様において、組成物は局所的に投与される。好ましい態様において、処置は、組成物の全身投与も、組成物の非眼組織への実質的浸透も含まない。
【００１７】
ある特定の態様では、組成物が投与された後に、対象の眼内のメモリーTh17細胞の数が減少する。いくつかの態様において、対象の眼内のメモリーTh17細胞の数は、少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、もしくは100%、または1〜10、1〜25、10〜25、25〜50、10〜50、50〜75、もしくは50〜100%減少する。
【００１８】
本主題の局面はまた、IL-7阻害および／またはIL-15阻害とIL-17媒介性シグナル伝達の1つもしくは複数の阻害との組み合わせに関する。いくつかのIL-17阻害剤は、IL-17のIL-17受容体への結合を減少させるかまたは阻止する。
【００１９】
本主題の様々な実装は、IL-7またはIL-15媒介性シグナル伝達を特異的に阻止するかまたは減少させる阻害剤に関する。いくつかの態様において、IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物は、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、IL-34、IL-35、IL-36、IL-37、IL-38、および／もしくはインターフェロンγ (IFN-γ)、またはそれらの受容体よりも、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、75、80、85、90、95、100%、または2倍、5倍、10倍、100倍、もしくは1000倍高い親和性で、IL-7またはIL-7Rに結合する。ある特定の態様において、IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物は、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、L-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、IL-34、IL-35、IL-36、IL-37、IL-38、および／もしくはIFN-γ、またはそれらの受容体よりも、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、75、80、85、90、95、100%、または2倍、5倍、10倍、100倍、もしくは1000倍高い親和性で、IL-15またはIL-15Rと結合する。様々な態様において、IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物は、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、IL-34、IL-35、IL-36、IL-37、IL-38、および／またはIFN-γ媒介性シグナル伝達よりも、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、75、80、85、90、95、100%、または2倍、5倍、10倍、100倍、もしくは1000倍多く、IL-7媒介性シグナル伝達を阻害する。いくつかの態様において、IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物は、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、IL-34、IL-35、IL-36、IL-37、IL-38、および／またはIFN-γ媒介性シグナル伝達よりも、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、75、80、85、90、95、100%、または2倍、5倍、10倍、100倍、もしくは1000倍多く、IL-15媒介性シグナル伝達を阻害する。
【００２０】
本主題の様々な方法および組成物は、ヤヌスキナーゼ (Jak) 1、2、または3阻害剤を含まない。例えば、ロルキシチニブ (Roluxitinib)、レスタウルチニブ、トファシニチニブ (Tofacinitinib)、INCB-28050、CYT387、GLPG-0634、AZD1480、VX509、R348、TG101348、AC-430、R723、BMS911543、CEP33779、または任意の他のJak1、2、もしくは3阻害剤は、本発明の組成物または方法から除外され得る。Jak1、2、および3阻害剤は、本主題のある特定の態様における使用に適していない可能性がある。
【００２１】
いくつかの態様において、IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物またはIL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物は、単独療法として投与される。本明細書で用いられる場合、「単独療法」とは、DED、自己免疫性ぶどう膜炎、またはGVHDなどの疾患を処置するために使用される任意の他の療法を伴わずに、該疾患を処置するために施される療法を意味する。
【００２２】
本発明の局面はまた、眼科的に許容される媒体中に、インターロイキン7 (IL-7) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物またはインターロイキン15 (IL-15) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を有する組成物を提供する。
【００２３】
コンタクトレンズもまた提供される。様々な態様において、本主題のコンタクトレンズは、インターロイキン7 (IL-7) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物および／またはインターロイキン15 (IL-15) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む組成物を含み、この場合、該組成物はレンズ内に組み入れられるか、またはレンズ上にコーティングされる。
【００２４】
ポリマーと、インターロイキン7 (IL-7) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物および／またはインターロイキン15 (IL-15) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む生物活性組成物とを含む装置もまた提供される。
【００２５】
本主題の局面はまた、インターロイキン7 (IL-7) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物および／またはインターロイキン15 (IL-15) シグナル伝達を優先的に阻害する化合物と、薬学的に許容される担体とを有する点眼組成物を提供する。ある特定の態様において、点眼組成物は、該組成物の液滴を対象の眼に投与するのに適したディスペンサー内に存在する。いくつかの態様において、組成物は、約200〜約400ミリオスモル／キログラム（両端を含む）の容積オスモル濃度、および約6.5〜約7.5（両端を含む）のpHを有する。
【００２６】
本発明の局面は、IL-7とIL-7Rとの結合を阻害するかもしくは減少させるようにIL-7もしくはIL-7Rに結合する抗体、および／またはIL-15とIL-5Rとの結合を阻害するかもしくは減少させるようにIL-15もしくはIL-15Rに結合する抗体を含む組成物に関する。様々な態様において、抗体は、約0.01、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.75、1、1.25、1.5、2、3、4、5、6、7、8、9、10、0.01〜10、0.1〜2.5、0.5〜2.5、2.5〜5、または0.5〜5 mg/mlの濃度で存在する。いくつかの態様において、抗体の用量は、約0.5、1、5、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、0.5〜100、0.5〜50、50〜100、1〜10、1〜25、25〜50、または1〜50μgである。本発明の組成物は、例えばリン酸緩衝食塩水 (PBS) を含み得る。
【００２７】
本主題の様々な実装において、眼の免疫炎症性障害の症状は、阻害剤の投与後、約5、15、30、もしくは60分以内に；または1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、もしくは14日以内に軽減される。いくつかの態様において、組成物は、1日に1、2、3、4、5、もしくは6回未満、1週間に約1、2、3、4、5、6、もしくは7回；または1日1回、対象の眼に投与される。ある特定の態様において、組成物は対象によって（すなわち、自己投与）または医師によって投与される。本主題の局面は、眼の免疫炎症性障害を患う対象を処置するための方法を提供する。そのような方法は、インターロイキン7 (IL-7) 経路またはインターロイキン15 (IL-15) 経路の阻害剤の有効量を有する組成物を対象の眼に局所投与して、それによって対象を処置する段階を含む。
【００２８】
様々な態様において、方法は、(i) IL-7のIL-7受容体 (IL-7R) への結合を減少させる化合物；(ii) IL-7Rシグナリングを減少させる化合物；(iii) IL-7Rの形成を減少させる化合物；(iv) IL-7の発現を減少させる化合物；および／または (v) IL-7R内のポリペプチドの発現を減少させる化合物である、IL-7経路の阻害剤を投与する段階を含む。代替的にまたは追加的に、方法は、(i) IL-15のIL-15受容体 (IL-15R) への結合を減少させる化合物；(ii) IL-15Rシグナリングを減少させる化合物；(iii) IL-15Rの形成を減少させる化合物；(iv) IL-15の発現を減少させる化合物；および／または (v) IL-15R内のポリペプチドの発現を減少させる化合物である、IL-15経路の阻害剤を投与する段階を含む。
【００２９】
本明細書における主題の様々な実装は、メモリーTh17細胞媒介性の眼の免疫炎症性障害である眼の免疫炎症性障害の処置に関する。ある特定の態様において、Th17細胞媒介性の眼の免疫炎症性障害はドライアイ疾患 (DED) である。
【００３０】
IL-7経路は、多くの種類の阻害剤によって阻害され得る。ある特定の態様において、(i) IL-7のIL-7Rへの結合を減少させる化合物；(ii) IL-7Rシグナリングを減少させる化合物；(iii) IL-7Rの形成を減少させる化合物；(iv) IL-7の発現を減少させる化合物；および／または (v) IL-7R内のポリペプチドの発現を減少させる化合物は、低分子、抗体、抗体断片、ポリペプチド、DNAアプタマー、RNAアプタマー、またはオリゴヌクレオチドである。オリゴヌクレオチドの非限定的な例には、リボザイム、アンチセンスオリゴヌクレオチド、モルフォリノ、およびRNA干渉 (RNAi) 分子が含まれる。
【００３１】
IL-15経路もまた、多くの種類の阻害剤によって阻害され得る。様々な態様において、(i) IL-15のIL-15Rへの結合を減少させる化合物；(ii) IL-15Rシグナリングを減少させる化合物；(iii) IL-15Rの形成を減少させる化合物；(iv) IL-15の発現を減少させる化合物；および／または (v) IL-15R内のポリペプチドの発現を減少させる化合物は、低分子、抗体、抗体断片、ポリペプチド、DNAアプタマー、RNAアプタマー、またはオリゴヌクレオチドである。IL-7経路阻害剤と同様に、オリゴヌクレオチドの非限定的な例には、リボザイム、アンチセンスオリゴヌクレオチド、モルフォリノ、およびRNA干渉 (RNAi) 分子が含まれる。
【００３２】
本主題の組成物および方法は、種々の症状に苦しむ対象を処置するのに有効である。いくつかの態様において、対象は、眼の中に何かが入っているようなザラザラまたはゴロゴロした感じ、眼の乾燥、まぶたの重み、刺痛、痒み、焼けるような痛み、刺激、疼痛、発赤、炎症、眼脂、感情的にストレスを受けた場合に泣くことができないこと、眼精疲労、霧視、または過剰な流涙に苦しんでおり、この場合、前記方法によって、眼の中に何かが入っているようなザラザラまたはゴロゴロした感じ、眼の乾燥、まぶたの重み、刺痛、痒み、焼けるような痛み、刺激、疼痛、発赤、炎症、眼脂、感情的にストレスを受けた場合に泣くことができないこと、眼精疲労、霧視、または過剰な流涙が阻害されるか、またはその重症度が軽減される。
【００３３】
ある特定の態様において、本主題の組成物は、固体、軟膏、ゲル、液剤、エアロゾル、ミスト、ポリマー、コンタクトレンズ、フィルム、乳剤、または懸濁剤の形態である。いくつかの態様において、組成物は局所的に投与される。例えば、いくつかの実装は、組成物の全身投与も、組成物の非眼組織への実質的浸透も含まない。
【００３４】
様々な態様において、Th17細胞の数または活性は、組成物が投与された後に変化する。例えば、対象の眼内のメモリーTh17細胞の数は、組成物が投与された後に減少する。
【００３５】
いくつかの態様において、組成物はIL-17経路の阻害剤をさらに含む。IL-17経路阻害剤の非限定的な例は、2011年5月5日に公開された米国特許出願公開番号US20110104236 A1に記載されており、その全内容は参照により本明細書に組み入れられる。例えば、IL-17経路阻害剤は、IL-17のIL-17受容体への結合を阻止し得るかまたは減少させ得る。様々な態様において、IL-17阻害剤は、低分子、抗体、抗体断片、ポリペプチド、DNAアプタマー、RNAアプタマー、またはオリゴヌクレオチドである。
【００３６】
本主題の様々な実装は、IL-7経路またはIL-15経路を特異的に標的とする阻害剤に関する。例えば、IL-7経路の阻害剤は、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、IL-34、IL-35、IL-36、IL-37、IL-38、および／もしくはインターフェロンγ (IFN-γ)、またはそれらの受容体よりも、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、75、80、85、90、95、100%、または2倍、5倍、10倍、100倍、もしくは1000倍高い親和性で、IL-7またはIL-7Rと結合し得る。加えて、IL-15経路の阻害剤は、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、L-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、IL-34、IL-35、IL-36、IL-37、IL-38、および／もしくはインターフェロンγ (IFN-γ)、またはそれらの受容体よりも、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、75、80、85、90、95、100%、または2倍、5倍、10倍、100倍、もしくは1000倍高い親和性で、IL-15またはIL-15と結合し得る。
【００３７】
本発明の局面はまた、インターロイキン7 (IL-7) 経路またはインターロイキン15 (IL-15) 経路の阻害剤の有効量を含む組成物を含むコンタクトレンズを提供し、この場合、該組成物は該レンズ内に組み入れられるか、または該レンズ上にコーティングされる。ポリマー、およびインターロイキン7 (IL-7) 経路またはインターロイキン15 (IL-15) 経路の阻害剤の有効量を有する生物活性組成物を含む装置もまた提供される。様々な態様において、装置は、眼組織内または眼組織上に組み入れるためのものである。例えば、装置は眼組織と接触し得る。ポリマー、およびインターロイキン7 (IL-7) 経路またはインターロイキン15 (IL-15) 経路の阻害剤の有効量を有する生物活性組成物を含む装置もまた提供される。ある特定の態様において、そのような装置は、眼組織または液体腔 (fluid cavity) 内に埋め込まれるかまたは注入される。本発明の局面はさらに、眼科的に許容される媒体中に、インターロイキン7 (IL-7) 経路またはインターロイキン15 (IL-15) 経路の阻害剤の有効量を有する組成物を提供する。
【００３８】
本主題の様々な局面は、インターロイキン7 (IL-7) 経路またはインターロイキン15 (IL-15) 経路の阻害剤の有効量、および薬学的に許容される担体を有する点眼組成物を提供する。好ましくは、そのような組成物は、該組成物の液滴を対象の眼に投与するのに適したディスペンサー内に存在する。いくつかの態様において、組成物は、約200〜約400ミリオスモル／キログラム（両端を含む）の容積オスモル濃度、および約6.5〜約7.5（両端を含む）のpHを有する。
【００３９】
ある特定の態様において、本主題の組成物は、IL-7および／もしくはIL-15に対する、ならびに／またはIL-7R形成および／もしくはIL-15R形成に対する、中和抗体または機能遮断抗体を含み得る。中和抗体または機能遮断抗体は、アフィニティー精製ポリクローナル抗体の再製剤化もしくはヒト化誘導体であってよく、または該抗体のエピトープに結合し得る。
【００４０】
眼の免疫炎症性疾患を阻害またはその重症度を軽減するための例示的な方法は、IL-7もしくはIL-15またはIL-7RもしくはIL-15Rの任意の構成成分をコードするポリヌクレオチドまたはポリペプチドの転写、転写物安定性、翻訳、修飾、局在化、分泌、または機能を阻害または改変するポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体、化合物、または低分子を含む組成物を対象の眼に局所投与することによって行われ得る。
【００４１】
ある特定の局面において、組成物は、IL-7RもしくはIL-15R、またはIL-7、IL-7R、IL-15、もしくはIL-15Rの任意の合成中間体もしくはサブユニットに結合するイントラボディを含み得る。本組成物は、代替的にまたは追加的に、IL-7と結合するIL-7Rの可溶性断片および／またはIL-15と結合するIL-15Rの可溶性断片を含み得る。
【００４２】
例示的なポリペプチドには、IL-7またはIL-15機能を破壊することができる融合タンパク質および／またはキメラタンパク質が含まれるが、これらに限定されない。
【００４３】
様々な態様において、組成物は、遺伝子発現を減少または停止させるために、リボザイム、アンチセンスオリゴヌクレオチド（モルフォリノなど）、マイクロRNA (miRNA)、低分子ヘアピンRNA (shRNA)、または低分子干渉RNA (siRNA) を含む。
【００４４】
いくつかの態様において、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rに対する機能遮断抗体は、モノクローナルまたはポリクローナルである。抗体には、IL-7、IL-15、IL-7受容体ポリペプチド、またはIL-15受容体ポリペプチド内の1つまたは複数の配列に結合する抗体が含まれる。ある特定の態様において、抗体はイントラボディである。いくつかの態様において、抗体は、一本鎖抗体、ヒト化抗体、組換え抗体、またはキメラ抗体を含む。
【００４５】
本主題の様々な実装において、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの阻害剤は、以下のうちの1つまたは複数を含む第2の組成物と同時にまたは連続して投与される：抗生物質、免疫抑制組成物、抗炎症組成物、増殖因子、ステロイド、ケモカイン、またはケモカイン受容体。
【００４６】
低分子は、2000ダルトン未満の質量の化合物である。低分子の分子量は、好ましくは1000ダルトン未満であり、より好ましくは600ダルトン未満であり、例えば化合物は、500ダルトン未満、400ダルトン未満、300ダルトン未満、200ダルトン未満、または100ダルトン未満である。低分子は、例えば有機または無機であってよい。例示的な有機低分子には、脂肪族炭化水素、アルコール、アルデヒド、ケトン、有機酸、エステル、単糖類および二糖類、芳香族炭化水素、アミノ酸、および脂質が含まれるが、これらに限定されない。例示的な無機低分子は、微量ミネラル、イオン、フリーラジカル、および代謝物を含む。あるいは、低分子阻害剤は、酵素の結合ポケットを満たすために、断片、または小部分、またはより長いアミノ酸鎖からなるように、合成により操作され得る。典型的に、低分子は1キロダルトン未満である。
【００４７】
ある特定の態様において、組成物は、IL-7またはIL-15機能の阻害剤と併用して用いられる1つまたは複数の抗生物質組成物を含む。抗生物質組成物およびIL-7またはIL-15阻害剤組成物は、同時にまたは連続して投与される。IL-7またはIL-15機能の阻害剤との併用療法のために用いられる例示的な抗生物質組成物には、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、テイコプラニン、バンコマイシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、クラリスロマイシン、ジリスロマイシン、エリスロマイシン、ロキシスロマイシン、トロレアンドマイシン、アモキシシリン、アンピシリン、アズロシリン、カルベニシリン、クロザシリン、ジクロキサシリン、フルコザシリン、メズロシリン、ナフシリン、ペニシリン、ピペラシリン、チカルシリン、バシトラシン、コリスチン、ポリミキシンB、シプロフロキサシン、エノキサシン、ガチフロキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、モキシフロキサシン、ノルフロキサシン、オフラザシン、トロバフロキサシン、マフェニド、スルファセタミド、スルファメチゾール、スルファサラジン、スルフイソキサゾール、テトラサイクリン、トリメトプリム、コトリモキサゾール、デメクロサイクリン、ソキシサイクリン、ミノサイクリン、ドキシサイクリン、オキシテトラサイクリン、またはテトラサイクリンが含まれるが、これらに限定されない。
【００４８】
いくつかの態様において、組成物は、第2の免疫抑制組成物と同時にまたは連続して投与される、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの阻害剤を含む。IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15R阻害剤を含む組成物は、例えば局所的にまたは眼内に投与され得る。第2の免疫抑制組成物は、局所的に、眼内に、または全身的に投与され得る。様々な態様において、免疫抑制化合物は、濃度0.05〜4.0% (mg/ml) のシクロスポリンAまたはその類似体を含み得る。代替的にまたは追加的に、免疫抑制組成物は、グルココルチコイド、細胞分裂阻害剤、アルキル化剤（ナイトロジェンマスタード／シクロホスファミド、ニトロソウレア、白金化合物）、代謝拮抗剤（メトトレキサート、任意の葉酸類似体、アザチオプリン、メルカプトプリン、任意のプリン類似体、任意のピリミジン類似体、タンパク質合成の任意の阻害剤）、細胞傷害性抗生物質（ダクチノマイシン、アントラサイクリン、マイトマイシンC、ブレオマイシン、ミスラマイシン）、ポリクローナル抗体（Atgam（登録商標）、Thympglobuline（登録商標）、抗リンパ球抗原または抗胸腺細胞抗原に対する任意の抗体）、モノクローナル抗体（OKT3（登録商標）、T細胞受容体に対する任意の抗体、IL-2に対する任意の抗体、バシリキシマブ／Simulect（登録商標）、デクリズマブ／Zenapax（登録商標）、タクロリムス／Prograf（商標）／FK506、シロリムス／Rapamune（商標）／ラパマイシン、インターフェロンβ、インターフェロンγ、オピオイド、TNFα結合タンパク質、ミコフェノール酸塩、またはFTY720を含み得る。
【００４９】
様々な態様において、本主題の組成物は、薬学的に適切な担体と共に局所的に投与される、IL-7、IL-15、IL-7R、またはIL-15Rと結合するかまたはその機能を改変するポリヌクレオチド、アプタマー、ポリペプチド、抗体もしくはその断片、または低分子を含む。ポリヌクレオチド組成物の送達法には、リポソーム、受容体媒介性送達系、裸のDNA、および中でもヘルペスウイルス、レトロウイルス、アデノウイルス、およびアデノ随伴ウイルスなどの操作されたウイルスベクターが含まれるが、これらに限定されない。ポリヌクレオチド組成物は、薬学的に許容される液体担体、例えば水性または部分的に水性である液体担体と共に局所的に投与され得る。ある特定の態様では、組成物内のポリヌクレオチド配列をリポソーム（例えば、陽イオンまたは陰イオンリポソーム）と会合させる。
【００５０】
短いDNA配列またはRNA配列を細胞に送達するために多数の方法が開発されている；例えば、ポリヌクレオチド分子を組織部位上に直接接触させることができ、または所望の細胞型を特異的に標的とするように改変ポリヌクレオチド分子を設計することができる（例えば、標的細胞表面上で発現される受容体もしくは抗原と特異的に結合するペプチドもしくは抗体に連結された配列）。
【００５１】
例示的なアプローチは、短いポリヌクレオチド配列が強力なポリメラーゼIIIまたはポリメラーゼIIプロモーターの制御下に配置される組換えDNA構築物を用いる。そのような構築物を用いることにより、本発明の核酸の内因性転写物と相補的塩基対を形成し、それによって内因性mRNA転写物の翻訳を妨げるポリヌクレオチドの十分量の転写が起こるようになる。本発明は、鋳型として相補鎖を用いる、短いポリヌクレオチドの構築を包含する。例えば、ベクターが細胞に取り込まれ、干渉RNAまたは二本鎖RNA分子の前駆体の転写を指示するように、ベクターをインビボで導入することができる。あるいは、短いポリヌクレオチド転写物の鋳型を、細胞型特異的プロモーターまたは他の調節エレメントの転写制御下に配置する。このようにして、局所的に投与された組成物が、意図された眼標的組織を超えて拡散してもまたは吸収されても、有害なまたは全身性の副作用は起こらない。ベクターは、それが転写されて所望のポリヌクレオチドを産生し得る限り、エピソームに留まるか、または染色体に組み入れられるようになる。
【００５２】
発現ベクターは、当技術分野において標準的な組換えDNA技術法によって構築される。ベクターは、哺乳動物細胞における複製および発現のために用いられる、プラスミド、ウイルス、または当技術分野において公知の他のものであってよい。短いポリヌクレオチドをコードする配列の発現は、哺乳動物細胞、好ましくはヒト細胞において作用することが当技術分野において公知である任意のプロモーターの制御下に配置することができる。プロモーターは誘導性または構成的である。例示的なプロモーターには、SV40初期プロモーター領域 (Bernoist et al., Nature 290:304, 1981)；ラウス肉腫ウイルスの3'長末端反復配列に含まれるプロモーター (Yamamoto et al., Cell, 22:787-797, 1988)；ヘルペスチミジンキナーゼプロモーター (Wagner et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78:1441, 1981)；またはメタロチオネイン遺伝子の調節配列 (Brinster et al., Nature, 296:39, 1988) が含まれるが、これらに限定されない。
【００５３】
いくつかの態様では、形質膜を介した輸送を可能にするために、ポリペプチド組成物を、単独でまたは受容体媒介性送達系と組み合わせて、リポソームと会合させる。ポリペプチド組成物は、例えば可溶性または膜結合型であってよい。例示的な受容体媒介性送達系は、C型肝炎ウイルス (HCV) 感染症およびHCV媒介性薬物送達法に関して観察されるように、低密度リポタンパク質 (LDL) 受容体 (LDLR) に対する、低密度または超低密度リポタンパク質を含む粒子または小胞の融合を伴う。
【００５４】
本主題の様々な実装は、IL-7、IL-15、IL-7R（もしくはそのサブユニット）、またはIL-15R（もしくはそのサブユニット）に対して産生または作製された1つまたは複数の細胞外抗体または細胞内抗体（イントラボディとも称される）を有する組成物を含む。細胞外抗体は、薬理学的に適切な水性または非水性担体と共に局所的に投与される。細胞内抗体をコードする配列は、ウイルスまたは哺乳動物発現ベクターにサブクローニングされ、形質膜を介した輸送を容易にするために親油性装置に充填され、薬理学的に適切な水性または非水性担体と共に眼組織に局所的に投与される。形質膜内部に入ると、宿主細胞機構がイントラボディのコードを転写、翻訳、およびプロセシングして、IL-7、IL-15、IL-7R（もしくはそのサブユニット）、またはIL-15R（もしくはそのサブユニット）に対する細胞内機能遮断抗体を生成する。分泌型分子の場合、細胞内抗体は、標的タンパク質の翻訳後修飾または分泌を妨げる。膜結合型分子の場合、細胞内抗体はまた、IL-7またはIL-15による受容体の会合または結合時の細胞内シグナリング事象を妨げる。
【００５５】
いくつかの態様において、本主題の組成物は、他の阻害エレメントと組み合わせて、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの阻害剤を含む。IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの阻害剤ならびに他の阻害エレメントは、同時にまたは連続して投与され得る。1つの態様において、組成物は、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15R機能の阻害剤、ならびに腫瘍壊死因子α (TNFα) の阻害剤を含む。TNFαの例示的な機能的遮断剤には、組換えおよび／または可溶性TNFα受容体、モノクローナル抗体、ならびに低分子阻害剤および／またはインバースアゴニストが含まれるが、これらに限定されない。1つまたは複数の市販のTNFα遮断剤が、ある特定の態様における局所的投与のために再製剤化される。再製剤化のために用いられる例示的な市販のTNFα遮断剤には、エタネルセプト／Embrel、インフリキシマブ／Remicade、およびアダリムマブ／Humiraが含まれるが、これらに限定されない。代替的にまたは追加的に、組成物は、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの阻害剤、ならびに1つまたは複数のインターロイキンサイトカインの阻害剤を含む。例示的なサイトカインには、IL-1、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-12、IL-18、およびIL-23が含まれるが、これらに限定されない。様々な態様において、組成物は、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの阻害剤、ならびにインターフェロン-γの阻害剤を含む。いくつかの態様において、組成物は、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの阻害剤、ならびに1つまたは複数のケモカインおよびそれらの受容体の阻害剤を含む。この態様の組成物によって含まれる例示的なケモカインおよび受容体には、ケモカイン（C-Cモチーフ）受容体1 (CCR1)、ケモカイン（C-Cモチーフ）受容体2 (CCR2)、ケモカイン（C-Cモチーフ）受容体5 (CCR5)、ケモカイン（C-Cモチーフ）受容体7 (CCR7)、およびケモカイン（C-X-Cモチーフ）受容体3 (CXCR3) が含まれるが、これらに限定されない。
【００５６】
組成物がIL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの阻害剤ならびに第2の組成物を含むいくつかの態様において、阻害剤：第2の組成物の各用量比は、1:10〜10:1（質量／重量）である。あるいは、比は、1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、または9:1である。
【００５７】
本主題の局面はまた、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの活性を阻害する組成物と、薬学的に適合するポリマーとからなるコンタクトレンズ装置に関する。ある特定の態様において、組成物はまた、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15R機能の阻害剤と、第2の組成物との組み合わせを含む。例えば、組成物は該レンズ内に組み入れられるか、または該レンズ上にコーティングされる。組成物は、コンタクトレンズポリマーによって化学的に結合されるかまたは物理的に捕捉される。コンタクトレンズは、例えば疎水性または親水性のいずれかであってよい。
【００５８】
本主題はまた、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの活性を阻害する組成物と、薬学的に適合するポリマーとからなる薬物送達装置を提供する。様々な態様において、この組成物はまた、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15R機能の阻害剤と、第2の組成物との組み合わせを含む。例えば、組成物は該ポリマー内に組み入れられるか、または該ポリマー上にコーティングされる。組成物は、ポリマーによって化学結合されるかまたは物理的に捕捉される。ポリマーは、例えば疎水性または親水性のいずれかであってよい。ポリマー装置は、多数の物理的配置を含む。ポリマー装置の物理的形態には、フィルム、足場、チャンバー、球、マイクロスフェア、ステント、または他の構造が含まれるが、これらに限定されない。ポリマー装置は、例えば内部および外部表面を有し得る。いくつかの態様において、装置は1つまたは複数の内部チャンバーを有する。これらのチャンバーは、1つまたは複数の組成物を含み得る。ある特定の態様において、装置は、1つまたは複数の化学的に区別可能な単量体のポリマーを含む。装置のサブユニットまたは単量体は、インビトロまたはインビボで重合する。
【００５９】
本主題の様々な実装は、ポリマーと、該ポリマー内または該ポリマー上に組み入れられた生物活性組成物とを含む装置を含み、この場合、該生物活性組成物は、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの活性を阻害し、かつ該装置は、眼表面組織、眼表面組織と接触している付属器組織、液体で満たされた眼腔もしくは付属器腔、または眼腔もしくは付属器腔に移植または注入される。
【００６０】
装置を形成する例示的な粘膜付着性の多価陰イオン性の天然または半合成ポリマーには、ポリガラクツロン酸、ヒアルロン酸、カルボキシメチルアミロース、カルボキシメチルキチン、コンドロイチン硫酸、ヘパリン硫酸、およびメソグリカンが含まれるが、これらに限定されない。様々な態様において、装置は、任意に全体または部分的に生体分解性であってよい生体適合性ポリマーマトリクックスを含む。ヒドロゲルは、適切なポリマーマトリックス材料の一例である。ヒドロゲルを形成し得る材料の例には、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、PLGAポリマー、アルギン酸塩およびアルギン酸塩誘導体、ゼラチン、コラーゲン、アガロース、天然および合成多糖類、ポリペプチドなどのポリアミノ酸、特にポリ(リジン)、ポリヒドロキシ酪酸およびポリ-ε-カプロラクトンなどのポリエステル、ポリ酸無水物；ポリホスファジン、ポリ(ビニルアルコール)、ポリ(アルキレンオキシド)、特にポリ(エチレンオキシド)、ポリ(アリルアミン) (PAM)、ポリ(アクリル酸塩)、ポリ(4-アミノメチルスチレン)などの改変スチレンポリマー、プルロニックポリオール、ポリオキサマー、ポリ(ウロン酸)、ポリ(ビニルピロリドン)、ならびにグラフトコポリマーを含む上記のコポリマーが含まれる。ある特定の態様において、足場は、これらに限定されないが、コラーゲン、フィブリン、ヒアルロン酸、アガロース、およびラミニンに富むゲルなどの、種々の合成ポリマーおよび天然に存在するポリマーから製作され得る。
【００６１】
ヒドロゲルのための1つの例示的な材料は、アルギン酸塩または改変アルギン酸塩材料である。アルギン酸塩分子は、比率およびポリマー鎖に沿った順次的分布の点で異なる、(1-4)結合β-D-マンヌロン酸（M単位）単量体およびαL-グルロン酸（G単位）単量体からなる。アルギン酸塩多糖類は、二価陽イオン（例えば、Ca2+、Mg2+、Ba2+）に対して強い親和性を有し、これらの分子に曝露された場合に安定したヒドロゲルを形成する多価電解質系である。Martinsen A., et al., Biotech. & Bioeng., 33 (1989) 79-89を参照されたい。
【００６２】
本主題のある特定の態様は、比較的低分子量の、好ましくは溶解後にヒトによる腎クリアランス閾値にあるサイズのアルギン酸塩または他の多糖類を利用する。ポリマー装置は局所的にまたは非常に浅い皮下に配置され、ポリマー装置によって化学的に結合されたもしくは物理的に捕捉された組成物または装置自体は、分解し、体内から除去されなければならない。生体分解性ポリマー装置に関して、アルギン酸塩または多糖類は、分子量1000〜80,000ダルトン、より好ましくは1000〜60,000ダルトン、特に好ましくは1000〜50,000ダルトンまで低減されることが好ましい。グルロン酸塩単位は、マンヌロン酸塩単位とは対照的に、二価陽イオンを介したイオン架橋のための部位を提供して、ポリマーをゲル化するため、高いグルロン酸塩含有量のアルギン酸塩材料を用いることもまた有用である。
【００６３】
内部および外部表面は、任意に細孔を含む。細孔は、対象に投与する前に作製されるか、または対象への投与時に表面を穿孔する細孔形成剤を装置内に含めることによって生じる。例示的な細孔形成剤には、無機塩および糖などの水溶性化合物が含まれるが、これらに限定されない。
【００６４】
様々な態様において、本主題の装置は、局所的に、結膜下に、または強膜外隙に、皮下に、または管内に投与される。いくつかの態様において、装置は、眼組織の表面上にまたは表面の直下に配置される。ある特定の態様において、装置は涙管または涙腺の内部に配置される。ポリマーに関するいくつかの実装において、ポリマー内またはポリマー上に組み入れられた組成物は、装置から放出されるかまたは拡散する。
【００６５】
本主題の局面は、可変の物理的および化学的形態を有する組成物に関する；しかしながら、様々な態様において、組成物は局所的に投与され、眼に直接接触する。組成物は、例えば、固体、ペースト剤、軟膏、ゲル、液剤、エアロゾル、ミスト、ポリマー、フィルム、乳剤、または懸濁剤として投与され得る。さらに、組成物は、コンタクトレンズまたは薬物送達装置内に組み入れられ得るか、またはそれらの上にコーティングされ得、そこから1つまたは複数の分子がレンズもしくは装置から拡散するか、または時間制御様式で放出される。そのような態様において、コンタクトレンズ組成物は眼表面上に留まるか（例えば、レンズが視力矯正のために必要である場合）、またはコンタクトレンズは、隣接する組織に組成物を同時に放出しながら時間の関数として溶解する。同様に、薬物送達装置は、様々な態様において任意に生体分解性または持続性である。
【００６６】
いくつかの態様において、本発明は、IL-7および／またはIL-15の転写、転写物安定性、翻訳、修飾、局在化、分泌、または受容体結合を阻害する手段を有する組成物を含む。ある特定の態様において、組成物は、IL-7もしくはIL-15 mRNA転写物またはIL-7もしくはIL-15ポリペプチドの1つまたは複数の領域に結合し得る。
【００６７】
様々な態様において、組成物は、IL-7の受容体の阻害剤またはインバースアゴニストを含む。IL-7Rは、インターロイキン7受容体α (CD127) および共通γ鎖受容体 (CD132) を含むヘテロ二量体である。いくつかの態様において、阻害剤は、アゴニストであるIL-7の機能を阻害するIL-7Rの結合パートナーもしくはリガンドとして、または受容体に対するその結合を阻止することによるインバースアゴニストとして定義される。IL-7の受容体のインバースアゴニストは、アゴニスト、例えばIL-7と同じIL-7R結合部位に結合するが、反対の薬理学的効果を発揮する分子である。いくつかの態様において、組成物は、IL-7R mRNAまたはポリペプチドの領域に結合するポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体、化合物、または低分子を含む。
【００６８】
ある特定の態様において、組成物は、IL-15の受容体の阻害剤またはインバースアゴニストを含む。IL-15Rは、IL-15Rα、IL-2/IL-15受容体β鎖 (CD122)、および共通γ鎖受容体 (CD132) を含むヘテロ三量体である。いくつかの態様において、阻害剤は、アゴニストであるIL-15の機能を阻害するIL-15Rの結合パートナーもしくはリガンドとして、または受容体に対するその結合を阻止することによるインバースアゴニストとして定義される。IL-15の受容体のインバースアゴニストは、アゴニスト、例えばIL-15と同じIL-15R結合部位に結合するが、反対の薬理学的効果を発揮する分子である。いくつかの態様において、組成物は、IL-15R mRNAまたはポリペプチドの領域に結合するポリヌクレオチド、ポリペプチド、抗体、化合物、または低分子を含む。
【００６９】
本主題の局面は、IL-7、IL-15、IL-7R、および／またはIL-15Rの活性を阻害する組成物を対象に投与する段階を含む、それを必要とする対象の眼組織、付属器組織、またはリンパ組織におけるTh17細胞存在量を減少させる方法を提供する。
【００７０】
様々な態様は、眼組織におけるTh17細胞の生存または増殖を阻害する段階を含む、眼の免疫炎症性障害を処置する方法に関し、この場合、生存または増殖は、IL-15またはIL-7の阻害剤を対象に投与することによって阻害される。非限定的な例において、免疫炎症性障害は、DED、自己免疫性ぶどう膜炎、または眼移植片対宿主病を含む。いくつかの態様において、本方法は、IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物またはIL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物をヒト対象の眼の表面に局所的に投与する段階を含む。
【００７１】
眼の免疫炎症性障害（例えば、DED、自己免疫性ぶどう膜炎、または眼移植片対宿主病）の処置において使用するためのIL-15またはIL-7の阻害剤を含む組成物が、本明細書中に含まれる。いくつかの態様において、眼の免疫炎症性障害の処置は、眼組織におけるTh17細胞の生存または増殖を阻害する段階を含む。いくつかの態様において、IL-15の阻害剤は、IL-15シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む。いくつかの態様において、IL-7の阻害剤は、IL-7シグナル伝達を優先的に阻害する化合物を含む。
【００７２】
本明細書において開示される各態様は、開示される他の態様のそれぞれに適用可能であると考えられる。したがって、本明細書に記載される様々な要素のすべての組み合わせが、本発明の範囲内にある。
【００７３】
本発明の他の特徴および利点は、以下のその好ましい態様の説明から、および特許請求の範囲から明らかになるであろう。特に定義されない限り、本明細書で用いられる専門用語および科学用語はすべて、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されている意味と同じ意味を有する。本発明の実施または試験において、本明細書に記載される方法および材料と類似または同等の方法および材料を用いることができるが、適切な方法および材料を以下に記載する。
【図面の簡単な説明】
【００７４】
【図１Ａ】図1A〜1Cは、慢性DEDマウスにおけるIL-7およびIL-15、ならびにメモリーTh17細胞におけるそれらの各受容体の発現増加を示すグラフである。（図1A）慢性DED (DED D28) において、流入領域リンパ節 (DLN) および結膜の両方におけるIL-7およびIL-15の発現増加が認められた。mRNA発現レベルは、未処置マウス (NL) に対して正規化した。*、p < 0.05。
【図１Ｂ】図1A〜1Cは、慢性DEDマウスにおけるIL-7およびIL-15、ならびにメモリーTh17細胞におけるそれらの各受容体の発現増加を示すグラフである。（図1B）慢性DEDにおいて、DLNにおけるIL-7およびIL-15の構成的に高いタンパク質発現、ならびに結膜における両タンパク質の増加が認められた。*、p < 0.05。
【図１Ｃ】図1A〜1Cは、慢性DEDマウスにおけるIL-7およびIL-15、ならびにメモリーTh17細胞におけるそれらの各受容体の発現増加を示すグラフである。（図1C）慢性DEDにおいて、エフェクターTh17細胞 (eTh17) と比較して、メモリーTh17細胞 (mTh17) におけるIL-7受容体およびIL-15受容体（IL-7RおよびIL-15R）の両方の上方制御が認められた。MFI：平均フルオレセイン強度。*、p < 0.05。
【図２】慢性DEDにおいて、IL-7受容体およびIL-15受容体の遮断がメモリーTh17細胞を阻害することを示すグラフである。抗IL-7R抗体および抗IL-15R抗体の存在下で培養した全DLN外植片は、アイソタイプIgG (IsoIgG) と共に培養したものと比較して、メモリーTh17細胞の頻度の>70%の低下を示した。
【図３】慢性DEDにおいて、IL-7およびIL15の遮断がメモリーTh17細胞を阻害することを示すグラフである。IL-7、IL-15、またはIL-7とIL-15の組み合わせの存在下で培養した全DLN外植片は、それぞれそれらの各々を中和した場合よりも有意により多くのメモリーTh17細胞を保護した。*、p < 0.05。
【図４】図4A〜4Cは、IL-7阻害およびIL-15阻害の非限定的な例を示す模式図である。（図4A）阻害剤の非存在下では、IL-7およびL-15はそれらの各受容体（それぞれIL-7RおよびIL-15R）と結合することができ、それによってシグナル伝達が生じる。（図4B）様々な態様では、IL-7またはIL-15と結合する阻害剤が受容体結合を阻止する。（図4C）ある特定の態様では、IL-7RまたはIL-15Rと結合する阻害剤が受容体結合を阻止する。
【図５Ａ】図5A〜5Bは、慢性DEDマウスにおいて、抗IL-7抗体または抗IL-15抗体によるインビボの局所的処置が、メモリーTh17細胞の枯渇を介して疾患重症度を有意に減少させたことを示すグラフである。（図5A）DEDをマウスで誘発させ、次いでこれらのマウスを局所的な抗IL-7、抗IL-15、またはアイソタイプIgG（対照群）点眼剤で14日間処置した。抗IL-7処置および抗IL-15処置はそれぞれ、疾患重症度を有意に減少させた。*、対照群と比較してD3、D10、およびD14においてp < 0.05。
【図５Ｂ】図5A〜5Bは、慢性DEDマウスにおいて、抗IL-7抗体または抗IL-15抗体によるインビボの局所的処置が、メモリーTh17細胞の枯渇を介して疾患重症度を有意に減少させたことを示すグラフである。（図5B）処置の終了時には、眼表面のメモリーTh17細胞は、抗IL-7処置または抗IL-15処置のいずれかによりほぼ完全に枯渇した。
【図６】局所的な抗IL-7抗体処置および抗IL-15抗体処置が、長期の治療効果を有することを示すグラフである。局所的な抗IL-7、抗IL-15、またはアイソタイプIgGで前もって処置した慢性DEDマウスを、さらなるいかなるAb処置も行わずに、乾燥環境ストレスによって8日間にわたり再誘発した。抗IL-7抗体および抗IL-15抗体による前処置群はいずれも、アイソタイプIgGと比較して有意に減少した疾患進行および重症度を示した。Δ上皮疾患スコア＝再誘発後の疾患スコア−再誘発前の疾患スコア *、p < 0.05。
【発明を実施するための形態】
【００７５】
詳細な説明
本明細書に記載される主題は、薬学的に許容される担体と組み合わせた、IL-7/IL-7Rおよび／またはIL-15/IL-15Rシグナリング阻害剤の眼への眼送達（例えば、局所的、結膜下、または硝子体内投与）を含む、DED、自己免疫性ぶどう膜炎、および眼GVHDを含むメモリーTh17細胞媒介性の眼障害を処置するための新規な方法を提供する。これは、現在の非特異的アプローチと比較して、眼の免疫炎症性疾患（例えば、DED、自己免疫性ぶどう膜炎、および眼GVHD）の処置への新規でかつ根本的に異なるアプローチである。DEDなどの眼の免疫炎症性疾患を処置するための現在のアプローチは、副作用を伴う、副腎皮質ステロイドなどの非特異的抗炎症剤の使用に依存している。
【００７６】
いずれの科学理論によっても縛られることは望まないが、DEDにおける持続的な眼表面炎症は、メモリーTヘルパー17 (Th17) 細胞によって媒介され、免疫記憶は慢性眼疾患の維持において中心的な役割を果たす (Mucosal Immunol 2014; 7:38-45)。メモリーTh17細胞の長期維持を調節する因子については、ほとんど知られていない。本主題の局面は、IL-7経路およびIL-15経路の阻害剤がDEDなどの眼の免疫炎症性疾患を処置するのに有用であるという驚くべき発見に関する。
【００７７】
IL-7/IL-7RまたはIL-15/IL-15Rシグナリング阻害剤の非限定的な例には、IL-7RまたはIL-15R媒介性シグナル伝達を妨げるまたは減少させる薬剤が含まれる。例えば、IL-7R媒介性シグナル伝達は、IL-7のIL-7Rへの結合を阻害することによって妨げるまたは減少させることができる。同様に、IL-15R媒介性シグナル伝達は、IL-15のIL15Rへの結合を阻害することによって減少させるまたは妨げることができる。そのような薬剤は、以下のものを含み得るが、それらに限定されない；中和抗IL-7R抗体およびその断片；抗IL-15R抗体およびその断片；IL-7RまたはIL-15Rの低分子阻害剤；抗IL-7融合タンパク質および抗IL-15融合タンパク質（IL-7RまたはIL-15Rの可溶型または断片など）などのタンパク質；抗IL-7抗体およびその断片；抗IL-15抗体およびその断片；ならびにIL-7、IL-7R、IL-15、またはIL-15Rに結合するアプタマー（例えば、DNAまたはRNAアプタマー）。様々な態様では、これらの薬剤のうちの1つ、2つ、3つ、4つ、またはそれ以上の組み合わせが投与される。
【００７８】
本主題の様々な態様において有用な阻害剤の非限定的な例には、ヒトIL-7モノクローナル抗体（Clone # MAB207、R&D Systems (Minneapolis, MN, USA)）；ヒトIL-7ポリクローナル抗体（Clone # AF-207、R&D Systems）；ヒトIL-7Rα (CD127) 抗体（Clone # MAB306、R&D Systems）；抗ヒトCD127（Clone # eBioRDR5、eBiosceience (San Diego, CA, USA)）；可溶性ヒトIL-7Rα (CD127)-Fcキメラ（Cat # 306-IR、R&D Systems）；ヒトIL-15モノクローナル抗体（Clone # MAB247、R&D Systems）；ヒトIL-15モノクローナル抗体（Clone # MAB647、R&D Systems）；ヒトIL-15Rα抗体（Clone # AF247、R&D Systems）；抗ヒトIL-15（Clone # ct2nu、eBiosceience）；抗ヒトCD215 (IL-15Rα)（Clone # eBioJM7A4、eBiosceience）；および可溶性ヒトIL-15Rα-Fcキメラ（Cat # 147-IR、R&D Systems）が含まれる。
【００７９】
様々な態様において、阻害剤は、IL-7RまたはIL-15Rタンパク質サブユニットの細胞外部分である。いくつかの態様において、細胞外部分は、抗体またはその断片に融合される。例えば、細胞外部分は、抗体（例えば、ヒトIgG1）のFcドメインに融合され得る。融合は、直接であってもよいし、または例えばIIEGRMD (SEQ ID NO: 37) もしくはIEGRDMD (SEQ ID NO: 38) などのポリペプチドリンカーを介してもよい。
【００８０】
可溶性ヒトIL-7Rα (CD127)-Fcキメラの非限定的な例は、R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) (Cat # 306-IR) から入手可能である。
2019505515.tif 000003
【００８１】
可溶性ヒトIL-15Rα-Fcキメラの非限定的な例は、R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) (Cat # 147-IR) から入手可能である。
2019505515.tif 000004
【００８２】
いずれの科学理論によっても縛られることは望まないが、本明細書における方法および組成物は、慢性の眼の免疫炎症性疾患（例えば、DED）におけるメモリーTh17応答を抑制することによって、慢性の眼の免疫炎症性疾患の1つまたは複数の症状を緩和する。
【００８３】
眼の免疫炎症性疾患
DEDは、最も頻繁に遭遇する眼の病的状態の1つであり、ドライアイ症候群と呼ばれることもある。眼科を受診する患者の25パーセントがドライアイの症状を報告し、ドライアイはますます大きな公衆衛生問題となっており、眼科医によって見られる最も一般的な状態の1つとなっている。DEDは、高度に蔓延している状態であり、成人集団の10〜20%が罹患していると推定される (Ocul Surf 2007; 5:75-92)。本疾患は、集団のおよそ8%が罹患している自己免疫疾患を有する患者において、高い有病率で認められる。現在のところ、局所シクロスポリン（DEDの処置に関して唯一FDAに認可された薬物）と共に、非特異的な抗炎症療法が、中等度から重度のDEDを処置するための支柱である。
【００８４】
DEDは、主要な眼の免疫炎症性疾患である。しかしながら、他の疾患も、本明細書に提供される方法および組成物を用いて処置され得る。例示的な企図される眼表面の炎症性疾患には、全層角膜移植（角膜移植）、角膜血管新生、アレルギー、結膜炎、および細菌性結膜炎が含まれるが、これらに限定されない。企図される障害は、自己免疫機序、骨髄移植、手術（一般的な眼の手術、角膜移植、屈折矯正手術、LASIK）、アレルギー、感染症、外傷、損傷、薬物使用、涙液膜異常、コンタクトレンズの使用、血管新生、腫瘍の形成または増殖、空中浮遊刺激物質または液体刺激物質への曝露、ホルモン変動、必須脂肪酸の欠乏、および遺伝的素因によって引き起こされ得る。
【００８５】
様々な態様において、眼の免疫炎症性疾患を患うまたはそれに苦しむ対象は、本発明の方法または組成物を用いて処置され得る。ある特定の態様において、疾患を「患う」、疾患に「苦しむ」、またはその処置を「必要とする」対象は、そのような疾患を有すると確定的に診断された対象であり得る。いくつかの態様において、疾患の防止的または予防的処置を必要とする対象は、そのような疾患を発症するリスクのある対象である。いくつかの態様において、対象は疾患と診断されていないが、疾患の1つまたは複数の症状を有する。
【００８６】
本明細書で用いられる場合、疾患に付随する「症状」は、疾患に付随する任意の臨床上または検査上の徴候を含み、対象が感じ得るまたは観察し得るものに限定されない。DED症状の非限定的な例には、疼痛（眼の刺痛または焼けるような痛みなど）；角膜上の潰瘍または瘢痕；乾燥した環境に対する許容度の低下；視力低下；眼の中に何かが入っているようなザラザラまたはゴロゴロした感じ；高度ドライアイ期間後の過剰な涙液のエピソード：眼からの粘質性眼脂；眼の発赤；霧視のエピソード；まぶたの重み；感情的にストレスを受けた場合に泣くことができないこと；コンタクトレンズの不快感；読書、コンピューターでの作業、または持続的な視覚的注意を必要とする任意の活動に対する許容度の低下；および眼精疲労が含まれる。自己免疫性ぶどう膜炎症状の非限定的な例には、眼の発赤；霧視；羞明；光に対する過敏症；不整な瞳孔；眼痛；視野内に黒い点が浮遊しているように見える飛蚊症；頭痛；毛様体血管の拡張；前房内の細胞およびフレアの存在；角膜後面沈着物（「KP」）；前房蓄膿；水晶体上の色素沈着；瞳孔拡張時の花型 (festooned) 瞳孔；busacca結節（虹彩の表面上に位置する炎症性小結節）；および癒着、光視症または点滅光が見えることが含まれる。眼GVHD症状の非限定的な例には、霧視；異物感；灼熱感；重度の光過敏症；慢性結膜炎（結膜炎）；ドライアイ；および眼痛が含まれる。態様において、本明細書に記載される方法は、これらの症状のうちの1つまたは複数を有する対象を同定する段階を含み得る。
【００８７】
疾患または状態を「処置する」（またはその処置）とは、たとえ根底にある病態生理が影響を受けないとしても、特定の疾患または状態の少なくとも1つの症状を寛解させることを含む。処置の有効性は、例えば標準と比較して、例えば処置前のパラメータの値または性質と比較したパラメータの値または性質（例えば、本人によって報告される疼痛レベル、乾燥に対する許容度、角膜上の潰瘍または瘢痕の数、および視力の性質）の改善として評価することができる。別の例として、処置の有効性は、例えば標準と比較して、例えば、処置を受けていないコホートにおける疾患の通常の時間経過と比較した、または疾患進行に関する過去のデータと比較した、疾患の進行の緩徐化として評価することができる。疾患を処置することはまた、その進行を緩徐化すること；および／または疾患を緩和すること、例えば疾患の退行を引き起こすことを含む。いくつかの態様では、症状の進行性悪化（例えば、強度の上昇）が緩徐化、軽減、または停止される。
【００８８】
疾患を「予防する」（またはその予防）とは、疾患にかかる可能性があるがまだそれに罹患していると診断されていない対象において、その疾患が起こるのを停止させることを含む。疾患を予防することはまた、疾患の発症を遅らせることを含む。予防の有効性は、例えば標準と比較して、例えば、処置を受けていないコホートにおける疾患の発症の通常の時間と比較した、または疾患発症に関する過去のデータと比較した、疾患の発症の遅延として評価することができる。
【００８９】
本明細書で用いられる場合、かつそれが用いられる文脈に依存して、「治療有効量」とは、障害または状態の症状を軽減し、排除し、処置し、予防し、または調節するのに有効である量を指す。「調節する」という用語は、本明細書に記載される疾患および状態の進行を遅らせ、中断し、抑止し、または停止させ得るすべての過程を指すことが意図されるが、疾患および状態の全症状の完全な排除を必ずしも示すとは限らず、予防的処置を含むことが意図される。
【００９０】
本主題の局面は、眼の免疫炎症性疾患を発症するリスクのある対象に、IL-7、IL-7R、IL-15、および／またはIL-15R阻害剤を投与することに関する。
【００９１】
ドライアイ疾患（DED）
DEDおよび関連疾患は、自己免疫および環境条件、ならびに瞬目率を減少させる何らかの活動によって引き起こされ得る。あるいは、DEDおよび関連疾患は、眼の不適切な潤滑をもたらす涙液産生の減少または涙液組成の変化によって引き起こされる。コンタクトレンズの使用、眼の手術、および眼の損傷は、DEDを誘導し得る。最後に、DEDは、加齢およびホルモン変化の結果として起こる場合が多い。
【００９２】
DEDは、不快感、視覚障害、および涙液膜の不安定性の症状を生じる涙液および眼表面の多因子障害であり、それによって眼表面に損傷が起こる可能性がある。これは、涙液膜の容積オスモル濃度の上昇および眼表面の炎症を伴う (Lemp MA. Report of the National Eye Institute/Industry Workshop on clinical trials in dry eyes. CLAO J 1995;21:221-2)。より詳細な定義に関しては、The definition and classification of dry eye disease: report of the Definition and Classification Subcommittee of the International Dry Eye WorkShop. Ocular Surface. 2007 Apr;5(2):75-92を参照されたく、その全内容は参照により本明細書に組み入れられる。治療法は、これらの兆候または症状のうちの少なくとも1つを阻害するか、またはその重症度を軽減する。
【００９３】
DEDの同義語および関連障害には、乾性角結膜炎 (KCS)、シェーグレン症候群 (SS)、シェーグレン症候群に関連する乾性角結膜炎、非シェーグレン症候群に関連する乾性角結膜炎、乾性角膜炎、乾燥症候群、眼球乾燥症、涙液膜障害、涙液産生の減少、水性涙液欠乏 (ATD)、マイボーム腺機能不全 (MGD)、および蒸発による喪失が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの態様において、対象は、乾燥感、引っかくような感覚、刺すような感覚、痒み感、灼熱感、または圧迫感、刺激、疼痛、発赤、炎症、眼脂、および過剰な流涙からなる群より選択される兆候または症状を検出することによって、DEDまたは関連障害を患っていると同定される。様々な態様において、対象は、その涙液組成が眼組織の適切な潤滑にとって不十分である場合に、DEDまたは関連障害を患っていると同定される。DEDの治療法は、DEDの兆候または症状のうちの少なくとも1つを阻害またはその重症度を軽減する。
【００９４】
DEDを発症するリスクのある対象には、抗ヒスタミン薬、鼻腔うっ血除去薬、精神安定薬、ある特定の血圧薬、パーキンソン病薬、経口避妊薬、および／または抗うつ薬を服用している対象；ドライアイを引き起こし得る、まぶた上またはまぶた周辺の皮膚疾患を有する対象；まぶたの腺の疾患（マイボーム腺機能不全など）を患っている対象；妊娠している対象；ホルモン補充療法（エストロゲンおよび／またはプロゲステロンなど）を受けている女性対象；LASIKとして公知の屈折矯正手術を受けた対象；まぶたを裏打ちし眼を覆う膜上に化学熱傷または熱傷を患った対象；アレルギーを患う対象；免疫系障害（シェーグレン症候群、ループス、または関節リウマチなど）を患う対象；眼感染症にかかった対象：化学的な煙霧またはタバコの煙などの刺激物質に対する眼の曝露を受けた対象；ならびに露出性角膜炎を有する対象が含まれる。 
【００９５】
自己免疫性ぶどう膜炎
Th17応答は、自己免疫性ぶどう膜炎において主要な病理発生上の役割を果たす。例えば、Yoshimura et al., (2009) Rheumatology (Oxford). 2009; 48:347-354を参照されたく、その全内容は参照により本明細書に組み入れられる。ぶどう膜炎は、眼の中間層であるぶどう膜の腫脹および刺激である。ぶどう膜は、網膜に血液供給の大部分を提供する。ぶどう膜炎は、関節リウマチまたは強直性脊椎炎を含む自己免疫障害により引き起こされ得る。ぶどう膜炎の最も一般的な形態は前部ぶどう膜炎である。これは眼の前部の炎症を伴う。これは、通常は眼の着色部分である虹彩のみを侵すという理由で、虹彩炎と称される場合が多い。炎症は自己免疫疾患と関連づけられ得る。この障害は一方の眼のみを侵し得る。これは若年層および中年層の人々において最も多く見られる。後部ぶどう膜炎はぶどう膜の後部を侵す。これは主に、眼の中間部にある血管と結合組織の層である脈絡膜に影響を及ぼす。この種類のぶどう膜炎は脈絡膜炎と称される。網膜も影響を受ける場合には、これは脈絡網膜炎と称される。自己免疫疾患を有する対象はこの状態を発症し得る。ぶどう膜炎の別の形態は毛様体扁平部炎である。この炎症は、眼の着色部分（虹彩）と脈絡膜との間の狭い領域（毛様体扁平部）を侵す。毛様体扁平部炎は、若年男性において起こる場合が最も多い。これは一般的に、任意の他の疾患と関連していない。しかしながら、これはクローン病および多発性硬化症と関連づけられ得る。
【００９６】
本明細書で用いられる場合、「自己免疫性ぶどう膜炎」とは、自己免疫障害によって引き起こされるかまたは自己免疫障害と関連しているぶどう膜炎を指す。
【００９７】
眼移植片対宿主病 (GVHD)
眼GVHD患者の涙液中のIL-17レベルの上昇が認められている。例えば、Kang et al., (2011) J Korean Med Sci, 26: 938-944を参照されたく、その全内容は参照により本明細書に組み入れられる。眼移植片対宿主病 (GVHD) は、同種血液幹細胞移植を受けた患者において起こる。それは急性または慢性GVHDを有する患者で起こり得るが、慢性型の患者においてより一般的である。慢性GVHD患者のおよそ40〜90%が眼症状を発症する。眼の徴候には、中等度から重度の乾性角結膜炎、両側性辺縁角膜炎、前部ぶどう膜炎、角膜潰瘍、または血管新生が含まれ得る
【００９８】
メモリーTh17細胞
Tリンパ球は、細胞性免疫において中心的役割を果たす循環小型白血球細胞である。Tヘルパー細胞 (Th) は、表面マーカータンパク質である表面抗原分類4 (CD4) を発現する、Tリンパ球の1つのサブグループである。メモリーTh17細胞は、インターロイキン-17 (IL-17) を産生する、最近同定されたTヘルパー細胞集団である。メモリーTh17細胞は、本明細書において「Th17細胞」と称され得る。
【００９９】
ヒトIL-7、IL-15、IL-7R、およびIL-15R
IL-7のアミノ酸配列は、UniProtデータベースアクセッション番号P13232により公的データベースにおいて利用可能であり、SEQ ID NO: 1（アイソフォーム1に相当）、SEQ ID NO: 2（アイソフォーム2に相当）、およびSEQ ID NO: 3（アイソフォーム3に相当）、およびSEQ ID NO: 36（アイソフォーム4に相当）として本明細書において記述される。IL-7のアミノ酸配列をコードするmRNA配列は、米国立バイオテクノロジー情報センター (National Center for Biotechnology Information (NCBI)) アクセッション番号NM_000880により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 4（アイソフォーム1に相当）として本明細書において記述され；NCBIアクセッション番号NM_001199886により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 5（アイソフォーム2に相当）として本明細書において記述され；NCBIアクセッション番号NM_001199887により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 6（アイソフォーム3に相当）として本明細書において記述され；およびNCBIアクセッション番号NM_001199888により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 7（アイソフォーム4に相当）として本明細書において記述される。アクセッション番号P13232に関するUniProtデータベース登録は、全体として参照により本明細書に組み入れられる。
【０１００】
インターロイキン7受容体α (CD127) のアミノ酸配列は、UniProtデータベースアクセッション番号P16871により公的データベースにおいて利用可能であり、SEQ ID NO: 8（アイソフォーム1に相当）、SEQ ID NO: 9（アイソフォーム3に相当）、SEQ ID NO: 10（アイソフォーム4に相当）、およびSEQ ID NO: 11（アイソフォーム2に相当）として本明細書において記述される。インターロイキン7受容体α (CD127) のアミノ酸配列をコードするmRNA配列は、NCBIアクセッション番号NM_002185により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 12（全アイソフォーム）として本明細書において記述される。アクセッション番号P16871に関するUniProtデータベース登録は、全体として参照により本明細書に組み入れられる。
【０１０１】
共通γ鎖受容体 (CD132) のアミノ酸配列は、UniProtデータベースアクセッション番号P31785により公的データベースにおいて利用可能であり、SEQ ID NO: 13（アイソフォーム1に相当）およびSEQ ID NO: 14（アイソフォーム2に相当）として本明細書において記述される。共通γ鎖受容体 (CD132) アミノ酸配列をコードするmRNA配列は、NCBIアクセッション番号NM_000206により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 15（アイソフォーム1に相当）として本明細書において記述される。アクセッション番号P31785に関するUniProtデータベース登録は、全体として参照により本明細書に組み入れられる。
【０１０２】
IL-15のアミノ酸配列は、UniProtデータベースアクセッション番号P40933により公的データベースにおいて利用可能であり、SEQ ID NO: 16（アイソフォームIL15-S48AA)に相当）およびSEQ ID NO: 17（アイソフォームIL15-S21AAに相当）として本明細書において記述される。IL-15のアミノ酸配列をコードするmRNA配列は、NCBIアクセッション番号NM_000585により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 18（アイソフォームIL15-S48AA)に相当）として本明細書において記述され；およびNCBIアクセッション番号NM_172175により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 19（アイソフォームIL15-S21AAに相当）として本明細書において記述される。アクセッション番号P40933に関するUniProtデータベース登録は、全体として参照により本明細書に組み入れられる。
【０１０３】
IL-2/IL-15受容体β鎖 (CD122) のアミノ酸配列は、UniProtデータベースアクセッション番号P14784により公的データベースにおいて利用可能であり、SEQ ID NO: 20として本明細書において記述される。IL-2/IL-15受容体β鎖 (CD122) のアミノ酸配列をコードするmRNA配列は、NCBIアクセッション番号NM_000878により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 21として本明細書において記述される。アクセッション番号P14784に関するUniProtデータベース登録は、全体として参照により本明細書に組み入れられる。
【０１０４】
IL-15Rαのアミノ酸配列は、UniProtデータベースアクセッション番号Q13261により公的データベースにおいて利用可能であり、SEQ ID NO: 22（アイソフォーム1に相当）、SEQ ID NO: 23（アイソフォーム2に相当）、SEQ ID NO: 24（アイソフォーム3に相当）、SEQ ID NO: 25（アイソフォーム4に相当）、SEQ ID NO: 26（アイソフォーム5に相当）、SEQ ID NO: 27（アイソフォーム6に相当）、SEQ ID NO: 28（アイソフォーム7に相当）、SEQ ID NO: 29（アイソフォーム8に相当）、およびSEQ ID NO: 30（アイソフォーム9に相当）として本明細書において記述される。IL-15Rαのアミノ酸配列をコードするmRNA配列は、NCBIアクセッション番号NM_002189により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 31（アイソフォーム1に相当）として本明細書において記述され；NCBIアクセッション番号NM_172200により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 32（アイソフォーム2に相当）として本明細書において記述され；NCBIアクセッション番号NM_001243539により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 33（アイソフォーム9に相当）として本明細書において記述され；およびNCBIアクセッション番号NM_001256765により公的データベースにおいて利用可能であり、その配列はSEQ ID NO: 34（アイソフォーム4に相当）として本明細書において記述される。アクセッション番号Q13261に関するUniProtデータベース登録は、全体として参照により本明細書に組み入れられる。
【０１０５】
インターロイキン7受容体α (CD127) のアイソフォーム1に関して、アミノ酸の位置がSEQ ID NO: 8のように番号付けられる場合、シグナルペプチドはアミノ酸1〜20位を含むと予測され、細胞外ドメインはアミノ酸21〜239を含むと予測され、膜貫通ドメインは240〜264を含むと予測され、および細胞質ドメインはアミノ酸265〜459を含むと予測される。
【０１０６】
共通γ鎖受容体 (CD132) のアイソフォーム1に関して、アミノ酸の位置がSEQ ID NO: 13のように番号付けられる場合、シグナルペプチドはアミノ酸1〜22位を含むと予測され、細胞外ドメインはアミノ酸23〜262を含むと予測され、膜貫通ドメインは263〜283を含むと予測され、および細胞質ドメインはアミノ酸284〜369を含むと予測される。
【０１０７】
IL-2/IL-15受容体β鎖 (CD122) に関して、アミノ酸の位置がSEQ ID NO: 20のように番号付けられる場合、シグナルペプチドはアミノ酸1〜26位を含むと予測され、細胞外ドメインはアミノ酸27〜240を含むと予測され、膜貫通ドメインは241〜265を含むと予測され、および細胞質ドメインはアミノ酸266〜551を含むと予測される。
【０１０８】
IL-15Rαのアイソフォーム1に関して、アミノ酸の位置がSEQ ID NO: 22のように番号付けられる場合、シグナルペプチドはアミノ酸1〜30位を含むと予測され、細胞外ドメインはアミノ酸31〜205を含むと予測され、膜貫通ドメインは206〜228を含むと予測され、および細胞質ドメインはアミノ酸229〜267を含むと予測される。
【０１０９】
IL-7受容体複合体およびIL-15受容体複合体内のタンパク質の細胞外ドメインは公知である。例えば、インターロイキン7受容体α (CD127) の細胞外ドメインは、SEQ ID NO: 8のアミノ酸1〜239または21〜239を含んでよく；共通γ鎖受容体 (CD132) の細胞外ドメインは、SEQ ID NO: 13のアミノ酸1〜262または23〜262を含んでよく；IL-15Rαの細胞外ドメインは、SEQ ID NO: 22のアミノ酸1〜205または31〜205を含んでよく；およびIL-2/IL-15受容体β鎖 (CD122) の細胞外ドメインは、SEQ ID NO: 20のアミノ酸1〜240または27〜240を含んでよい。ある特定の態様において、IL-7伝達の阻害剤は、インターロイキン7受容体α (CD127) または共通γ鎖受容体 (CD132) 内のタンパク質の細胞外ドメインを含む可溶性化合物を含む。いくつかの態様において、IL-15伝達の阻害剤は、IL-15Rα、IL-2/IL-15受容体β鎖 (CD122)、または共通γ鎖受容体 (CD132) の細胞外ドメインを含む可溶性化合物を含む。様々な態様において、細胞外ドメインは、細胞外ドメイン、および抗体Fcドメインまたはその一部などのポリペプチドを含むキメラまたは融合タンパク質の一部である。
【０１１０】
抗体
「抗体」という用語は最も広い意味で用いられ、具体的には、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、一価抗体、多価抗体、ならびに所望の生物学的活性を示す限りは抗体断片（例えば、Fabおよび／または単一アーム抗体）を包含する。
【０１１１】
「抗体断片」とは、インタクトな抗体が結合する抗原に結合するインタクトな抗体の一部を含む、インタクトな抗体以外の分子を指す。抗体断片の例には、Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2；ダイアボディ、直鎖状抗体；一本鎖抗体分子（例えば、scFv）；および抗体断片から形成される多重特異性抗体が含まれるが、これらに限定されない。
【０１１２】
「全長抗体」、「インタクトな抗体」、および「全抗体」という用語は、本明細書において互換的に用いられて、天然抗体構造と実質的に同様の構造を有するか、またはFc領域を含む重鎖を有する抗体を指す。
【０１１３】
「Fv」断片は、完全な抗原認識および結合部位を含む抗体断片である。この領域は、例えばscFvにおいて実際は共有結合性であり得る、密接に結合した1つの重鎖可変ドメインと1つの軽鎖可変ドメインとの二量体からなる。各可変ドメインの3つの超可変領域 (HVR) が相互作用して、VH-VL二量体の表面上で抗原結合部位を規定するのは、この立体配置においてである。6つのHVRまたはそのサブセットが一緒になって、抗体に抗原結合特異性を付与する。しかしながら、単一の可変ドメイン（または抗原に特異的な3つのHVRのみを含むFvの半分）でさえ、一般的には結合部位全体よりも低い親和性ではあるものの、抗原を認識し抗原と結合する能力を有する。
【０１１４】
「Fab」断片は、軽鎖の可変および定常ドメイン、ならびに重鎖の可変ドメインおよび第1定常ドメイン (CHI) を含む。F(ab')2抗体断片は、一般にFab断片のカルボキシ末端の近傍でそれらの間のヒンジシステインによって共有結合されている、一対のFab断片を含む。抗体断片のその他の化学的結合もまた、当技術分野において公知である。
【０１１５】
「一本鎖Fv」または「scFv」抗体断片は、抗体のVHドメインおよびVLドメインを含み、これらのドメインは単一ポリペプチド鎖中に存在する。一般的に、Fvポリペプチドは、VHドメインとVLドメインとの間に、scFvが抗原結合にとって望ましい構造を形成できるようにするポリペプチドリンカーをさらに含む。scFvの総説については、Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, Vol 113, Rosenburg and Moore eds. Springer-Verlag, New York, pp. 269-31S (1994) を参照されたい。
【０１１６】
「ダイアボディ」という用語は、2つの抗原結合部位を有する小さな抗体断片を指し、この断片は、同一ポリペプチド鎖において軽鎖可変ドメイン (VL) に結合している重鎖可変ドメイン (VH) を含む (VHおよびVL)。同一鎖上の2つのドメイン間の対形成を可能にするには短すぎるリンカーを使用することにより、ドメインは別の鎖の相補的ドメインとの対形成が強いられ、2つの抗原結合部位を創出する。ダイアボディは、例えば、BP 404,097；WO 93/11161；およびHollinger et al., Proc . Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444-6448 (1993) においてより詳細に記載されている。
【０１１７】
「直鎖状抗体」という表現は、Zapata et al., Protein Eng., 8 (10) : 1057-1062 (1995) に記載されている抗体を指す。簡潔に説明すると、これらの抗体は、相補的な軽鎖ポリペプチドと共に一対の抗原結合領域を形成する一対のタンデムFdセグメント (V.sub.H-C.sub.H1-V.sub.H-C.sub.H1) を含む。直鎖状抗体は、二重特異性または単一特異性であってよい。
【０１１８】
本明細書で用いられる「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、集団を構成する個々の抗体は、例えば天然に存在する変異を含むかまたはモノクローナル抗体調製物の生成中に生じる、通常少量で存在する潜在的な変種抗体を除いて、同一でありかつ／または同じエピトープと結合する。典型的に、異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対するものである。したがって、「モノクローナル」という修飾語は、抗体の実質的に均一な集団から得られたという抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の生成を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、使用されるモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法（例えば、Kohler and Milstein, Nature 256:495-97 (1975)；Kozbor et al., Immunol. Today 4:72 (1983)；Cole et al., in Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc. 77-96 (1985) を参照されたい）、組換えDNA法（例えば、米国特許第4,816,567号を参照されたい）、ファージディスプレイ法（例えば、Clackson et al., Nature 352:624-28 (1991)、およびMarks et al., J. Mol . Biol. 222 (3) :581-97 (1991) を参照されたい）、ならびにヒト免疫グロブリン遺伝子座のすべてまたは一部を含むトランスジェニック動物を利用する方法を含むがこれらに限定されない種々の技法によって作製され得、モノクローナル抗体を作製するためのこのような方法およびその他の例示的な方法は、本明細書において記載される。
【０１１９】
「キメラ」抗体という用語は、重鎖および／または軽鎖の一部が特定の供給源または種に由来し、重鎖および／または軽鎖の残りの部分が異なる供給源または種に由来する抗体を指す。
【０１２０】
「ヒト化抗体」とは、非ヒトHVR由来のアミノ酸残基およびヒトFR由来のアミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。ある特定の態様において、ヒト化抗体は少なくとも1つ、典型的には2つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、可変ドメインでは、HVR (例えば、CDR) のすべてまたは実質的にすべてが非ヒト抗体のものに相当し、FRのすべてまたは実質的にすべてがヒト抗体のものに相当する。ヒト化抗体は任意に、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部を含み得る。抗体、例えば非ヒト抗体の「ヒト化型」とは、ヒト化操作を受けた抗体を指す。
【０１２１】
「ヒト抗体」とは、ヒトもしくはヒト細胞によって産生されるか、またはヒト抗体レパートリーもしくは他のヒト抗体コード配列を利用する非ヒト供給源に由来する抗体のアミノ酸配列に相当するアミノ酸配列を有する抗体である。ヒト抗体のこの定義は、具体的には非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を除外する。
【０１２２】
アンチセンスオリゴヌクレオチド
アンチセンスオリゴヌクレオチドは、特定のDNA配列またはRNA配列に相補的なヌクレオチド配列である。相補的ヌクレオチドは、細胞内に導入されると、細胞によって産生された天然配列と結合して複合体を形成し、転写または翻訳のいずれかを阻止する。好ましくは、アンチセンスオリゴヌクレオチドは少なくとも11ヌクレオチド長であるが、少なくとも12、15、20、25、30、35、40、45、もしくは50、またはそれ以上のヌクレオチド長であってもよい。より長い配列を使用することもできる。アンチセンスオリゴヌクレオチド分子を直接投与するか、またはDNA構築物中に提供し細胞内に導入して、細胞内のIL-7、IL-15、CD132、CD127、CD122、またはIL-15Rα遺伝子産物のレベルを低下させることができる。
【０１２３】
いくつかの態様において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、または両者の組み合わせであってよい。様々な態様では、オリゴヌクレオチドを修飾して、インビボでのオリゴヌクレオチドの半減期を延長することができる。オリゴヌクレオチドは、アルキルホスホネート、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、アルキルホスホノチオエート、アルキルホスホネート、ホスホロアミデート、リン酸エステル、カルバメート、アセトアミデート、カルボキシメチルエステル、カルボネート、およびリン酸トリエステルなどの非リン酸ジエステルヌクレオチド間結合を用いて、1つのヌクレオチドの5'末端を別のヌクレオチドの3'末端と共有結合させることにより、手動でまたは自動合成機によって合成することができる。
【０１２４】
遺伝子発現の改変は、遺伝子の制御領域、5'領域、または調節領域と二重鎖を形成するアンチセンスオリゴヌクレオチドを設計することによって、得ることができる。例えば開始部位から-10位〜+10位といった転写開始部位に由来するオリゴヌクレオチドが、様々な態様において用いられる。同様に、「三重らせん」塩基対合の方法論を用いて、阻害を達成することができる。三重らせん対合は、ポリメラーゼ、転写因子、またはシャペロンの結合に十分なだけ二重らせんが開く能力を阻害するため、有用である。三重鎖DNAを使用する治療的進歩は、文献に記載されている (Nicholls et al., 1993, J Immunol Meth 165:81-91)。アンチセンスオリゴヌクレオチドはまた、転写物がリボソームに結合するのを妨げることによって、mRNAの翻訳を阻止するように設計することもできる。
【０１２５】
アンチセンスオリゴヌクレオチドとIL-7、IL-15、CD132、CD127、CD122、またはIL-15Rαポリヌクレオチドの相補配列との間の複合体形成の成功には、正確な相補性は必要ではない。例えばIL-7、IL-15、CD132、CD127、CD122、またはIL-15Rαポリヌクレオチドに対して正確に相補的である2、3、4、もしくは5、またはそれ以上のひと続きの連続したヌクレオチドを含み、その各々が、隣接するIL-7、IL-15、CD132、CD127、CD122、またはIL-15Rαヌクレオチドと相補的ではないひと続きの連続したヌクレオチドによって分離されているアンチセンスオリゴヌクレオチドは、それぞれIL-7、IL-15、CD132、CD127、CD122、またはIL-15Rα mRNAに対して十分な標的特異性を提供し得る。好ましくは、相補的な連続ヌクレオチドのひと続きはそれぞれ、少なくとも4、5、6、7、もしくは8、またはそれ以上のヌクレオチド長である。非相補的な介在配列は、好ましくは1、2、3、または4ヌクレオチド長である。当業者は、アンチセンス‐センス対の算出された融点を容易に使用して、特定のアンチセンスオリゴヌクレオチドと特定のIL-7、IL-15、CD132、CD127、CD122、またはIL-15Rαポリヌクレオチド配列との間で許容されるミスマッチの程度を決定することができる。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、IL-7、IL-15、CD132、CD127、CD122、またはIL-15Rαポリヌクレオチドとハイブリダイズする能力に影響を及ぼすことなく修飾することができる。これらの修飾は、アンチセンス分子の内部または一端もしくは両端に存在してよい。例えば、ヌクレオシド間のリン酸結合は、アミノ基と末端リボースとの間に、様々な数の炭素残基を有するコレステリルまたはジアミン部分を付加することによって、修飾することができる。修飾された塩基および／または糖、例えばリボースの代わりのアラビノース、または3'ヒドロキシ基もしくは5'リン酸基が置換されている3',5'-置換オリゴヌクレオチドなどもまた、修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドにおいて用いることができる。これらの修飾オリゴヌクレオチドは、当技術分野において周知の方法によって調製することができる。いくつかの態様において、アンチセンスオリゴヌクレオチドはホスホロジアミデートモルフォリノオリゴマー（本明細書において「PMO」または「モルフォリノ」とも称される）である。
【０１２６】
リボザイム
リボザイムは、触媒活性を有するRNA分子である (Uhlmann et al., 1987, Tetrahedron. Lett. 215, 3539-3542)。当技術分野で公知のように、リボザイムを使用して、RNA配列を切断することにより遺伝子機能を阻害することができる。リボザイム作用の機構は、相補的標的RNAに対するリボザイム分子の配列特異的ハイブリダイゼーションと、それに続くヌクレオチド鎖切断を伴う。例として、特異的ヌクレオチド配列のヌクレオチド鎖切断を特異的かつ効率的に触媒し得る、操作されたハンマーヘッドモチーフリボザイム分子が含まれる。ポリヌクレオチドのコード配列を用いて、ポリヌクレオチドから転写されたrnRNAに特異的に結合するリボザイムを作製することができる。トランスにある他のRNA分子を高度に配列特異的な様式で切断し得るリボザイムを設計し構築する方法が、当技術分野において開発され記載されている。例えば、リボザイムの切断活性は、リボザイム中に別個の「ハイブリダイゼーション」領域を設計することによって、特定のRNAを標的とすることができる。ハイブリダイゼーション領域は、標的RNAと相補的な配列を含み、したがって標的RNAと特異的にハイブリダイズする。
【０１２７】
RNA標的内の特異的リボザイム切断部位は、以下の配列：GUA、GUU、およびGUCを含むリボザイム切断部位について標的分子をスキャンすることによって、同定することができる。同定されたら、切断部位を含む標的RNAの領域に対応する15〜20リボヌクレオチドの短いRNA配列を、標的を操作不能にし得る二次構造的特徴について評価することができる。候補RNA標的の適合性はまた、リボヌクレアーゼ保護アッセイを用いて、相補的オリゴヌクレオチドとのハイブリダイゼーションの利用可能性を試験することにより、評価することもできる。本明細書に記載されるヌクレオチド配列（例えば、SEQ ID NO 4〜7、12、15、18、19、21、および31〜34）に示されるヌクレオチド配列およびそれらの相補体は、適切なハイブリダイゼーション領域配列の供給源を提供する。より長い相補配列を用いて、標的に対するハイブリダイゼーション配列の親和性を増大させることができる。リボザイムのハイブリダイゼーション領域と切断領域は、相補領域を介して標的RNAにハイブリダイズした際にリボザイムの触媒領域が標的を切断できるように、一体的に関連し得る。
【０１２８】
リボザイムは、DNA構築物の一部として細胞に導入することができる。マイクロインジェクション、リポソーム媒介性トランスフェクション、エレクトロポレーション、またはリン酸カルシウム沈殿などの機械的方法を用いて、IL-7、IL-15、CD132、CD127、CD122、またはIL-15Rα発現を減少させることが望ましい細胞にリボザイム含有DNA構築物を導入することができる。あるいは、当技術分野で公知のように、細胞がDNA構築物を安定して保持することが望ましい場合には、構築物をプラスミド上に供給し、別個のエレメントとして維持するか、または細胞のゲノム中に組み込むことができる。リボザイムをコードするDNA構築物は、細胞内でのリボザイムの転写を制御するための、プロモーターエレメント、エンハンサーまたはVASエレメント、および転写ターミネーターシグナルなどの転写調節エレメントを含み得る (U.S. 5,641,673)。リボザイムはまた、付加的なレベルの調節を提供するように操作することもでき、その結果、リボザイムと標的遺伝子の両方が細胞内で誘導された場合にのみmRNAの破壊が起こる。
【０１２９】
RNA干渉
本明細書で用いられる場合、「RNA干渉」化合物とは、文脈に応じて、IL-7、IL-15、CD132、CD127、CD122、またはIL-15Rα発現のRNA干渉または「RNAi」を誘導することができる化合物を指す。RNAiはmRNA分解を伴うが、この干渉の根底にある生化学的機構の多くは不明である。RNAiの使用は、Fire et al., 1998、Carthew et al., 2001、およびElbashir et al., 2001に記載されており、その内容は参照により本明細書に組み入れられる。
【０１３０】
単離されたRNA分子はRNAiを媒介し得る。すなわち、本発明の単離されたRNA分子は、標的遺伝子とも称される遺伝子の転写産物であるmRNAの分解を媒介するか、または発現を阻止する。便宜上、そのようなmRNAは本明細書において、分解されるmRNAとも称され得る。RNA、RNA分子、RNAセグメント、およびRNA断片という用語は互換的に用いられて、RNA干渉を媒介するRNAを指す。これらの用語は、二本鎖RNA、低分子干渉RNA (siRNA)、ヘアピンRNA、一本鎖RNA、単離されたRNA（部分精製されたRNA、本質的に純粋なRNA、合成RNA、組換えによって生成されたRNA）、ならびに1つまたは複数のヌクレオチドの付加、欠失、置換、および／または改変により、天然に存在するRNAとは異なる改変されたRNAを含む。そのような改変は、RNAの末端または内部などへの（RNAの1つまたは複数のヌクレオチドにおける）非ヌクレオチド材料の付加を含み得る。本発明のRNA分子中のヌクレオチドはまた、天然には存在しないヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドを含む非標準的なヌクレオチドを含み得る。まとめると、そのような改変されたRNAi分子はすべて、類似体、または天然に存在するRNAの類似体と称される。本発明のRNAは、RNAiを媒介する能力を有するという点で天然RNAに十分に類似していることのみを必要とする。
【０１３１】
本明細書で用いられる場合、「RNAiを媒介する」という語句は、RNAiの機構または工程により影響を受けることになるmRNA分子を識別する能力を指し示す。RNAiを媒介するRNAは、機構を誘導して特定のmRNAを分解させるか、またはさもなければ標的タンパク質の発現を減少させるように、RNAi機構と相互作用する。1つの態様において、本発明は、その配列が対応する特定のmRNAの切断を指示するRNA分子に関する。配列の完全な一致が存在する必要はないが、その一致は、RNAが標的mRNAの切断または発現の阻止によってRNAi阻害を指示できるのに十分でなければならない。
【０１３２】
上記したように、本発明のRNA分子は一般に、RNA部分およびいくつかの付加的な部分、例えばデオキシリボヌクレオチド部分を含む。RNA分子中のヌクレオチドの総数は、RNAiの有効な媒介物であるためには、よりも少ないことが適切である。好ましいRNA分子において、ヌクレオチドの数は16〜29個、より好ましくは18〜23個、および最も好ましくは21〜23個である。
【０１３３】
アプタマー
本明細書で用いられる場合、「アプタマー」または「アプタマー配列」という用語は、その特徴的なヌクレオチド配列が固有の三次元構造への分子の折りたたみを決定する一本鎖核酸（RNAまたはDNA）を指すことが意図される。15〜120ヌクレオチドを含むアプタマーを、オリゴヌクレオチドのランダム化プール（1014〜1015個の分子）からインビトロで選択することができる。タンパク質およびペプチドを含むあらかじめ選択された標的に高い親和性および特異性で結合するアプタマーを、当技術分野で公知の方法を用いて設計および／または選択することができる。例えば、Cox, J. C.; Ellington, A. D. (2001) Bioorganic & Medicinal Chemistry 9 (10): 2525-2531；Cox, J. C.; Hayhurst, A.; Hesselberth, J.; Bayer, T. S.; Georgiou, G.; Ellington, A. D. (2002) Nucleic Acids Research 30 (20): e108.；およびNeves, M.A.D.; O. Reinstein; M.Saad; P.E. Johnson (2010) Biophys Chem 153 (1): 9-16を参照されたく、それら各々の全内容は参照により本明細書に組み入れられる。
【０１３４】
薬学的製剤および眼への送達
IL-7/IL-7R経路およびIL-15/IL-17R経路に拮抗するための投与量、製剤、投与体積、投与計画、および方法は、変動し得る。したがって、最小および最大有効投与量は、投与方法によって変動する。
【０１３５】
本発明の様々な態様において、IL-7、IL-7R、IL-15、および／またはIL-15R阻害剤を含む組成物は、1回のみまたは複数回投与することができる。例えば、IL-7、IL-7R、IL-15、および／またはIL-15R阻害剤は、本明細書に開示される方法を用いて、1日、1週間、1ヵ月、または1年に少なくとも約1回、2回、3回、4回、5回、6回、または7回投与することができる。いくつかの態様において、IL-7、IL-7R、IL-15、および／またはIL-15R阻害剤を含む組成物は、1ヵ月に1回投与される。ある特定の態様において、組成物は硝子体内注射によって1ヵ月に1回投与される。点眼剤を含む態様などの様々な態様において、組成物は自己投与される。
【０１３６】
好ましい製剤は、固体、ペースト剤、軟膏、ゲル、液剤、エアロゾル、ミスト、ポリマー、コンタクトレンズ、フィルム、乳剤、または懸濁剤の形態である。製剤は局所的に投与され、例えば組成物は眼に送達されて眼に直接接触する。組成物は、0.01〜50%（重量／体積）の濃度で存在する。例えば、阻害組成物は、1%（重量／体積）、10%（重量／体積）、20%（重量／体積）、25%（重量／体積）、30%（重量／体積））、40%（重量／体積）、50%（重量／体積）、またはそれらの間の任意のパーセント点の濃度で存在する。本方法は、組成物の全身投与も、組成物の非眼組織への計画的な実質的浸透も伴わない。
【０１３７】
任意に、組成物は薬学的に許容される担体をさらに含む。例示的な薬学的担体には、生理学的に許容される塩、カーボポールを有するポロキサマー類似体、カーボポール／ヒドロキシプロピルメチルセルロース (HPMC)、カーボポール-メチルセルロース、粘液溶解剤、カルボキシメチルセルロース (CMC)、ヒアルロン酸、シクロデキストリン、および石油からなる群より選択される化合物が含まれるが、これらに限定されない。1つの態様において、粘液溶解剤はN-アセチルシステインである。
【０１３８】
眼の免疫炎症性疾患の処置のために、IL-7、IL-7R、IL-15、および／またはIL-15R阻害剤（例えば、IL-7、IL-7R、IL-15、および／またはIL-15R阻害剤を含む薬学的組成物）を、例えば、局所点眼剤、眼周囲注射（例えば、テノン嚢下）、眼内注射、硝子体内注射、球後注射、網膜内注射、結膜下注射として、またはイオン導入、もしくは薬物を能動的もしくは受動的に送達し得る眼周囲装置を用いて、局所投与することができる。
【０１３９】
局所的投与に適合化された薬学的製剤は、水溶液、軟膏、クリーム、懸濁剤、ローション剤、散剤、溶液、ペースト剤、ゲル、噴霧剤、エアロゾル、リポソーム、マイクロカプセル、マイクロスフェア、または油として製剤化され得る。
【０１４０】
眼への局所的投与に適合化された薬学的製剤には、IL-7、IL-7R、IL-15、および／またはIL-15R阻害剤が、適切な担体、特に水性溶媒に溶解または懸濁されている点眼剤が含まれる。眼に投与される製剤は、眼科的に適合するpHおよび重量オスモル濃度を有する。「眼科的に許容される媒体」という用語は、眼部組織と生理学的に適合する生理学的特性（例えば、pHおよび／または重量オスモル濃度）を有する薬学的組成物を意味する。
【０１４１】
いくつかの態様において、本発明の眼科用組成物は、約200〜約400ミリオスモル／キログラム水（「mOsm/kg」）の重量オスモル濃度および生理学的に適合するpHを有する滅菌水溶液として製剤化される。溶液の重量オスモル濃度は、無機塩（例えば、NaCl）、有機塩（例えば、クエン酸ナトリウム）、多価アルコール（例えば、プロピレングリコールもしくはソルビトール）、またはそれらの組み合わせなどの従来の薬剤によって調整することができる。
【０１４２】
様々な態様において、本発明の眼科用製剤は、液体、固体、または半固体の剤形であってよい。本発明の眼科用製剤は、最終的な剤形に応じて、眼科的に許容される適切な賦形剤を含み得る。いくつかの態様において、眼科用製剤は、生理学的に許容可能なpH範囲を維持するように製剤化される。ある特定の態様において、眼科用製剤のpH範囲は約5〜約9の範囲内である。いくつかの態様において、眼科用製剤のpH範囲は約6〜約8の範囲内であるか、または約6.5、約7、もしくは約7.5である。
【０１４３】
いくつかの態様において、組成物は、点眼剤の形態で提示され得る水溶液などの水溶液の形態である。適切なディスペンサーを用いて、1滴、2滴、3滴、4滴、または5滴などの所定数の液滴を眼に投与することによって、活性薬剤の所望の投与量を計量することができる。
【０１４４】
酢酸、ホウ酸、クエン酸、乳酸、リン酸、および塩酸などの酸；水酸化ナトリウム、リン酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、および乳酸ナトリウムなどの塩基；ならびにクエン酸塩／デキストロース、炭酸水素ナトリウム、および塩化アンモニウムなどの緩衝剤を含む、1種または複数種の眼科的に許容されるpH調整剤および／または緩衝剤を、本発明の組成物中に含めることができる。そのような酸、塩基、および緩衝剤は、組成物のpHを眼科的に許容される範囲内に維持するのに必要とされる量で含めることができる。1種または複数種の眼科的に許容される塩は、組成物の重量オスモル濃度を眼科的に許容される範囲にするのに十分な量で組成物中に含めることができる。そのような塩には、ナトリウム、カリウム、またはアンモニウム陽イオン、および塩素、クエン酸、アスコルビン酸、ホウ酸、リン酸、重炭酸、硫酸、チオ硫酸、または亜硫酸水素陰イオンを有するものが含まれる。
【０１４５】
眼送達のための薬学的組成物には、インサイチューでゲル化可能な水性組成物もまた含まれる。そのような組成物は、眼または涙液と接触した際にゲル化を促進するのに有効な濃度のゲル化剤を含む。適切なゲル化剤には、熱硬化性ポリマーが含まれるが、これに限定されない。本明細書で用いられる「インサイチューでゲル化可能な」という用語は、眼または涙液と接触した際にゲルを形成する低粘度の液体のみならず、眼に投与された際に実質的上昇した粘度またはゲル硬化度を示す半流動性ゲルおよび揺変性ゲルなどの、より粘稠な液体もまた含む。例えば、Ludwig, Adv. Drug Deliv. Rev. 3; 57:1595-639 (2005) を参照されたく、その全内容は参照により本明細書に組み入れられる。
【０１４６】
コンタクトレンズによる薬物送達
本発明は、コンタクトレンズ、および炎症性インターロイキン1サイトカインの活性を阻害する組成物を含む。例えば、組成物は、レンズ内に組み入れられるか、またはレンズ上にコーティングされる。組成物は、コンタクトレンズポリマーによって化学的に結合されるかまたは物理的に捕捉される。あるいは、着色添加剤の強度の変化によって、ポリマー内に結合または捕捉されたままである治療薬組成物の量または用量の変化が示されるように、治療薬組成物と同じ速度で放出される着色添加剤が、ポリマー組成物によって化学的に結合されるかまたは物理的に捕捉される。代替的にまたは追加的に、紫外線 (UV) 吸収剤が、コンタクトレンズポリマー内に化学的に結合されるかまたは物理的に捕捉される。コンタクトレンズは、疎水性または親水性のいずれかである。
【０１４７】
本発明の組成物を送達するための手段を有する疎水性レンズを製作するために用いられる例示的な材料には、アメフォコンA、アムシルフォコンA、アキラフォコンA、アルフォコンA、カブフォコンA、カブフォコンB、カルボシルフォコンA、クリルフォコンA、クリルフォコンB、ジメフォコンA、エンフルフォコンA、エンフロフォコンB、エリフォコンA、フルロフォコンA、フルシルフォコンA、フルシルフォコンB、フルシルフォコンC、フルシルフォコンD、フルシルフォコンE、ヘキサフォコンA、ホフォコンA、ヒブフォコンA、イタビスフルオロフォコンA、イタフルオロフォコンA、イタフォコンA、イタフォコンB、コルフォコンA、コルフォコンB、コルフォコンC、コルフォコンD、ロチフォコンA、ロチフォコンB、ロチフォコンC、メラフォコンA、ミガフォコンA、ネフォコンA、ネフォコンB、ネフォコンC、オンシフォコンA、オプリフォコンA、オキシフルフロコンA、パフルフォコンB、パフルフォコンC、パフルフォコンD、パフルフォコンE、パフルフォコンF、パシフォコンA、パシフォコンB、パシフォコンC、パシフォコンD、パシフォコンE、ペムフォコンA、ポロフォコンA、ポロフォコンB、ロフルフォコンA、ロフルフォコンB、ロフルフォコンC、ロフルフォコンD、ロフルフォコンE、ロシルフォコンA、サタフォコンA、シフルフォコンA、シラフォコンA、ステラフォコンA、スルフォコンA、スルフォコンB、テラフォコンA、チシルフォコンA、トロフォコンA、トリフォコンA、ユニフォコンA、ビナフォコンA、およびウィロフォコンAが含まれるが、これらに限定されない。
【０１４８】
本発明の組成物を送達するための手段を有する親水性レンズを製造するために用いられる例示的な材料には、アバフィルコンA、アコフィルコンA、アコフィルコンB、アクアフィルコンA、アロフィルコンA、アルファフィルコンA、アムフィルコンA、アスチフィルコンA、アトラフィルコンA、バラフィルコンA、ビスフィルコンA、ブフィルコンA、コムフィルコンA、クロフィルコンA、シクロフィルコンA、ダルフィルコンA、デルタフィルコンA、デルタフィルコンB、ジメフィルコンA、ドロクスフィルコンA、エラストフィルコンA、イプシルフィルコンA、エステリフィルコンA、エタフィルコンA、フォコフィルコンA、ガリフィルコンA、ゲンフィルコンA、ゴバフィルコンA、ヘフィルコンA、ヘフィルコンB、ヘフィルコンC、ヒラフィルコンA、ヒラフィルコンB、ヒオキシフィルコンA、ヒオキシフィルコンB、ヒオキシフィルコンC、ヒドロフィルコンA、レネフィルコンA、リクリフィルコンA、リクリフィルコンB、リドフィルコンA、リドフィルコンB、ロトラフィルコンA、ロトラフィルコンB、マフィルコンA、メサフィルコンA、メタフィルコンB、ミパフィルコンA、ネルフィルコンA、ネトラフィルコンA、オクフィルコンA、オクフィルコンB、C、オクフィルコンD、オクフィルコンE、オフィルコンA、オマフィルコンA、オキシフィルコンA、ペンタフィルコンA、ペルフィルコンA、ペバフィルコンA、フェムフィルコンA、ポリマコン、セノフィルコンA、シラフィルコンA、シロキシフィルコンA、スルフィルコンA、テフィルコンA、テトラフィルコンA、トリフィルコンA、ビフィルコンA、ビフィルコンB、およびキシロフィルコンAが含まれるが、これらに限定されない。
【０１４９】
一般的定義
別途具体的に定義されない限り、本明細書で用いられる専門用語および科学用語はすべて、当技術分野（例えば、細胞培養、分子遺伝学、および生化学）の当業者によって一般に理解されている意味と同じ意味を有すると見なされるものとする。
【０１５０】
本明細書で用いられる場合、数値または範囲の文脈における「約」という用語は、文脈がより限定された範囲を必要としない限り、列挙または特許請求されている数値または範囲の±10%を意味する。
【０１５１】
上記の説明および特許請求の範囲において、「〜のうちの少なくとも1つ」または「〜のうちの1つもしくは複数」などの語句が、要素または特徴の一連のリストの前に現れる場合がある。「および／または」という用語が、2つまたはそれ以上の要素または特徴のリストの中に現れる場合もある。それが用いられる文脈と暗示的または明示的に別途矛盾しない限り、そのような語句は、リストに挙げられた要素もしくは特徴のいずれかを個別に、または列挙された要素もしくは特徴のいずれかを、列挙された他の要素もしくは特徴のいずれかと組み合わせて意味することが意図される。例えば、「AおよびBのうちの少なくとも1つ」、「AおよびBのうちの1つまたは複数」、ならびに「Aおよび／またはB」という語句はそれぞれ、「Aのみ、Bのみ、またはAおよびB共に」を意味することが意図される。3つまたはそれ以上の品目を含むリストについても、同様の解釈が意図される。例えば、「A、B、およびCのうちの少なくとも1つ」、「A、B、およびCのうちの1つまたは複数」、ならびに「A、B、および／またはC」という語句はそれぞれ、「Aのみ、Bのみ、Cのみ、AおよびB共に、AおよびC共に、BおよびC共に、またはAおよびBおよびC共に」を意味することが意図される。加えて、上記および特許請求の範囲における「〜に基づく」という用語の使用は、列挙されていない特徴または要素も許容されるように、「〜に少なくとも部分的に基づく」を意味することが意図される。
【０１５２】
パラメータ範囲が提供される場合、その範囲内のすべての整数およびその10分の1もまた本発明によって提供されることが理解される。例えば、「0.2〜5 mg」は、5.0 mgを含むそれ以下の0.2 mg、0.3 mg、0.4 mg、0.5 mg、0.6 mg等の開示である。
【０１５３】
「含む (comprising)」という移行語は、「含む (including)」、「含む (containing)」、または「〜を特徴とする」と同義であり、包括的または非限定的であり、列挙されていな付加的な要素も方法段階も除外しない。対照的に、「〜からなる」という移行句は、特許請求の範囲に明記されていない一切の要素、段階、または成分を除外する。「〜から本質的になる」という移行句は、特許請求の範囲の範囲を、明記されている材料または段階ならびに特許請求される本発明の「基本的かつ新規な特徴に著しく影響を及ぼさないもの」に限定する。
【０１５４】
本発明のより完全な理解を容易にするために、実施例を以下に提供する。以下の実施例は、本発明の構成および実施の例示的な様式を説明する。しかしながら、同様の結果を得るために代替的な方法も利用され得るため、本発明の範囲は、説明目的のためだけであるこれら実施例に開示される特定の態様に限定されない。
【実施例】
【０１５５】
実施例1：DEDメモリーTh17細胞の維持に及ぼすIL-7/1L-7Rシグナリング阻害およびIL-15/1L-15Rシグナリング阻害の効果
本研究の目的は、DEDにおけるメモリーTh17細胞媒介性の眼表面炎症の減少または除去が、IL-7/1L-7RシグナリングおよびIL-15/1L-15Rシグナリングの局所的遮断を介してメモリーTh17細胞の生存を妨げることによって達成され得ることを示すことであった。以下に記載されるように実験を実施した。
【０１５６】
マウスを、制御された環境チャンバーを用いて乾燥ストレスに14日間曝露し、次いで標準環境においてさらに14日間飼育した場合に、慢性DEDが発症する。眼表面および流入領域リンパ節 (DLN) の両方で、IL-7およびIL-15の発現レベルが上昇する（図1A）。加えて、慢性DED由来のメモリーTh17細胞もまた、IL-7RおよびIL-15Rの両方の有意な上方制御を示す（図1B）。
【０１５７】
次に、インビトロ培養系を用いて、DEDメモリーTh17細胞の維持に及ぼすIL-7/IL-7Rシグナリング遮断およびIL-15/IL-15Rシグナリング遮断の効果を調べた。慢性DEDから全DLNを単離し、72時間培養した。最初に、サイトカイン受容体を標的とする抗体を試験した。抗IL-7R抗体および抗IL-15R抗体を外植片培養物に添加した後、回収されたメモリーTh17細胞の頻度は>70%低下した（図2）。その後、周囲のサイトカイン環境の改変がメモリーTh17細胞の維持に及ぼす効果を検討した。具体的には、DLN外植片培養物に以下の様々な因子を補充した：IL-7、IL-15、IL-7とIL-15の組み合わせ、抗IL-7抗体、抗IL-15抗体、抗IL-7抗体と抗IL-15抗体の組み合わせ、または対照IgG。IL-7、IL-15、またはIL-7とIL-15の組み合わせが存在すると、抗IL-7、抗IL-15、または抗IL-7抗体と抗IL-15抗体の組み合わせが存在する場合よりも回収されたメモリーTh17細胞の頻度が有意により高くなった(p < 0.05)（図3）。
【０１５８】
これらの知見から、IL-7およびIL-15の両方が、DEDにおいてメモリーTh17細胞を維持することが実証される。本明細書において記載されるように、IL-7シグナリングおよび／またはIL-15シグナリングを減少させることは、DEDを処置するための有用でかつ特異的な治療アプローチである。
【０１５９】
実施例2：IL-7阻害剤およびIL-15阻害剤による局所的処置はDED重症度を軽減する
慢性DEDマウスにおいて、抗IL-7抗体または抗IL-15抗体によるインビボの局所的処置は、疾患重症度を有意に減少させ、メモリーTh17細胞を枯渇させた。DEDをマウスで誘発させ、これらのマウスを局所的な抗IL-7、抗IL-15、またはアイソタイプIgG（対照群）点眼剤で14日間処置した。抗IL-7処置および抗IL-15処置はいずれも、対照群と比較して疾患重症度を有意に減少させた（図5A）。処置の終了時には、眼表面のメモリーTh17細胞は、抗IL-7処置および抗IL-15処置の各々によりほぼ完全に枯渇した（図5B）。
【０１６０】
本研究では、抗IL-7抗体として、マウスIL-7ポリクローナル抗体を10μgの用量で1日に3回 (1mg/ml) 使用した（Clone # AB-407、R&D Systems、Minneapolis, MN, USA）。この抗体は、製造業者 (R&D Systems) によって凍結乾燥形態で提供され、これを滅菌リン酸緩衝食塩水 (PBS) で再構成した。
【０１６１】
本研究では、抗IL-15抗体として、抗マウスIL-15抗体を10μgの用量で1日に3回 (1mg/ml) 使用した（Clone # AIO.3、eBioscience、San Diego, CA, USA）。この抗体は、製造業者 (eBioscience) によってアジド不含水性緩衝液として提供された。
【０１６２】
アイソタイプIgGは、ポリクローナルヤギIgG（Catalog # ab37373、Abcam、Cambridge, MA, USA）である。これは、10μgの用量で1日に3回 (1mg/ml) 投与した。この抗体は、製造業者 (Abcam) によってホウ酸緩衝食塩水として提供された。
【０１６３】
角膜フルオレセイン染色を、DED重症度の臨床評価ツールとして使用した。フルオレセイン（Sigma-Aldrich、St. Louis, MO, USA；1μl 2.5%）をマウスの外側結膜嚢に適用し、3分後に角膜をコバルトブルー光下にて細隙灯生体顕微鏡で調べた。角膜の5つの領域‐中心、上方、下方、鼻側、および側頭側の各々について、0〜3の標準的な米国立眼科研究所 (National Eye Institute) 等級づけシステムを用いて、点状染色を盲検様式で記録した。 (CLAO J. 1995; 21:221-32)。
【０１６４】
他の態様
本発明をその詳細な説明と共に記載してきたが、前述の説明は例示を意図するものであって、本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲の範囲によって定義される。他の局面、利点、および変更は、以下の特許請求の範囲の範囲内である。
【０１６５】
本明細書において参照された特許および科学文献は、当業者に利用可能な知識を確立する。本明細書において引用された米国特許および公表または非公表の米国特許出願はすべて、参照により組み入れられる。本明細書において引用された公表された外国の特許および特許出願はすべて、参照により本明細書に組み入れられる。本明細書において引用されたアクセッション番号によって示されるGenbankおよびNCBI提出物は、参照により本明細書に組み入れられる。本明細書において引用された他の公表された参考文献、文書、原稿、および科学論文はすべて、参照により本明細書に組み入れられる。
【０１６６】
本発明をその好ましい態様に関して詳細に示し説明してきたが、添付の特許請求の範囲によって包含される本発明の範囲から逸脱することなく、形式および詳細の様々な変更がその中でなされ得ることが、当業者によって理解されるであろう。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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