【手続補正書】
【提出日】平成19年11月8日(2007.11.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１全正味電荷を帯びている気体封入マイクロベシクルおよびマイクロベシクルに会合している成分を含むアセンブリーであって、上記会合成分は第１全正味電荷と反対符号の第２全正味電荷を帯び、かつ生物学的適合性界面活性剤を含んでなり、かつ１００ｎｍ以下の直径を有することを特徴とするアセンブリー。
【請求項２】
会合成分が８０ｎｍ以下の直径を有する請求項１に記載のアセンブリー。
【請求項３】
会合成分が５０ｎｍ以下の直径を有する請求項１に記載のアセンブリー。
【請求項４】
会合成分が標的配位子、対生物活性剤、診断剤またはこれらの組合せを含有する請求項１に記載のアセンブリー。
【請求項５】
さらに、全正味電荷を帯び、かつ必要に応じて別の標的配位子、対生物活性剤、診断剤またはこれらの組合せを含有する第２成分を包含する請求項４に記載のアセンブリー。
【請求項６】
第２成分が、マイクロベシクルの電荷と同じ符号の全正味電荷を帯びている請求項５に記載のアセンブリー。
【請求項７】
生物学的適合性界面活性剤が両親媒性物質である請求項１に記載のアセンブリー。
【請求項８】
生物学的適合性界面活性剤が、（Ｃ２−Ｃ１０）有機酸、（Ｃ１２−Ｃ２４）脂肪族鎖を有する有機脂肪酸、その医薬的に許容しうる塩、ポリオキシエチレンとのそのエステル；ポリイオン性（アルカリ）塩；有機アミン；アミド；第四級アミン塩；アミノ酸；リン脂質；モノもしくはオリゴサッカリドと（Ｃ１２−Ｃ２４）有機脂肪酸のエステル；有機スルホネート；パーフルオロ有機酸；高分子界面活性物質；およびこれらの混合物の中から選ばれる請求項１に記載のアセンブリー。
【請求項９】
マイクロベシクルの１モル当りの電荷数と会合成分の１モル当りの電荷数の比が、約１０：１〜１：１０である請求項１に記載のアセンブリー。
【請求項１０】
上記比が約３：１以下である請求項９に記載のアセンブリー。
【請求項１１】
上記比が約２：１以下である請求項９に記載のアセンブリー。
【請求項１２】
マイクロベシクルが、両親媒性薄膜形成化合物を含むエンベロープで安定化したマイクロバブルまたは有形のエンベロープを有するマイクロバルーンである請求項１に記載のアセンブリー。
【請求項１３】
マイクロベシクルを安定化するエンベロープに含まれる両親媒性薄膜形成化合物が、リン脂質である請求項１２に記載のアセンブリー。
【請求項１４】
エンベロープが、正または負の正味電荷を帯びているリン脂質もしくは脂質を含む請求項１３に記載のアセンブリー。
【請求項１５】
リン脂質もしくは脂質が、ホスファチジルセリン誘導体、ホスファチジン酸誘導体、ホスファチジルグリセロール誘導体、ポリエチレングリコール修飾ホスファチジルエタノールアミン、エチルホスファチジルコリン誘導体およびそれぞれのリゾ体；コリン酸塩；デオキシコリン酸塩；グリココリン酸塩；その（Ｃ１２−Ｃ２４）脂肪酸塩；少なくとも１つの（Ｃ１０−Ｃ２０）アルキル鎖を有するアルキルアンモニウム塩；（Ｃ３−Ｃ６）アルキレン橋を介して窒素原子に結合した少なくとも１つの（Ｃ１０−Ｃ２０）アシル鎖を有する第三または第四級アンモニウム塩；およびこれらの混合物から選ばれる請求項１４に記載のアセンブリー。
【請求項１６】
マイクロバルーンの有形のエンベロープが、ポリマー物質、蛋白様物質、水不溶性脂質またはこれらの混合物を含む請求項１２に記載のアセンブリー。
【請求項１７】
マイクロバルーンの有形のエンベロープが、イオン性生分解性ポリマーを含む請求項１２または１３に記載のアセンブリー。
【請求項１８】
マイクロバルーンの有形のエンベロープがさらに、正または負の正味電荷を帯びているリン脂質もしくは脂質を含有する請求項１３に記載のアセンブリー。
【請求項１９】
リン脂質もしくは脂質が、ホスファチジルセリン誘導体、ホスファチジン酸誘導体、ホスファチジルグリセロール誘導体、ポリエチレングリコール修飾ホスファチジルエタノールアミン、エチルホスファチジルコリン誘導体およびそれぞれのリゾ体；コリン酸塩；デオキシコリン酸塩；グリココリン酸塩；その（Ｃ１２−Ｃ２４）脂肪酸塩；少なくとも１つの（Ｃ１０−Ｃ２０）アルキル鎖を有するアルキルアンモニウム塩；（Ｃ３−Ｃ６）アルキレン橋を介して窒素原子に結合した少なくとも１つの（Ｃ１０−Ｃ２０）アシル鎖を有する第三または第四級アンモニウム塩；およびこれらの混合物から選ばれる請求項１８に記載のアセンブリー。
【請求項２０】
マイクロベシクルに会合している成分がミセルである請求項１乃至６のいずれか１に記載のアセンブリー。
【請求項２１】
ミセルが、ポリエチレングリコール修飾リン脂質；少なくとも１つの（Ｃ１０−Ｃ２０）アルキル鎖を有するアルキルアンモニウム塩；（Ｃ３−Ｃ６）アルキレン橋を介して窒素原子に結合した少なくとも１つの（Ｃ１０−Ｃ２０）アシル鎖を含む第三または第四アンモニウム塩；（Ｃ１２−Ｃ２４）脂肪酸塩：高分子界面活性物質：またはこれらの混合物を含む請求項２０に記載のアセンブリー。
【請求項２２】
ミセルが、ホスファチジルコリン，エチルホスファチジルコリン，ホスファチジルグリセロール，ホスファチジン酸，ホスファチジルエタノールアミン，ホスファチジルセリンまたはスフィンゴミエリンの（Ｃ１２−Ｃ２４）脂肪酸ジエステルを含む請求項２０に記載のアセンブリー。
【請求項２３】
ミセルが、正または負の正味電荷を帯びているリン脂質もしくは脂質、または高分子イオン性界面活性物質を含む請求項２０に記載のアセンブリー。
【請求項２４】
リン脂質もしくは脂質が、ホスファチジルセリン誘導体、ホスファチジン酸誘導体、ホスファチジルグリセロール誘導体、ポリエチレングリコール修飾ホスファチジルエタノールアミン、エチルホスファチジルコリン誘導体およびそれぞれのリゾ体；コリン酸塩；デオキシコリン酸塩；グリココリン酸塩；その（Ｃ１２−Ｃ２４）脂肪酸塩；少なくとも１つの（Ｃ１０−Ｃ２０）アルキル鎖を有するアルキルアンモニウム塩；（Ｃ３−Ｃ６）アルキレン橋を介して窒素原子に結合した少なくとも１つの（Ｃ１０−Ｃ２０）アシル鎖を有する第三または第四級アンモニウム塩；およびこれらの混合物から選ばれる請求項２３に記載のアセンブリー。
【請求項２５】
マイクロベシクルに会合している成分が、コロイドナノ粒子である請求項１に記載のアセンブリー。
【請求項２６】
マイクロベシクルに会合している成分が、固体のポリマーナノ粒子である請求項１に記載のアセンブリー。
【請求項２７】
請求項１乃至２６のいずれか１に記載のアセンブリーを含有する生理的に許容しうる液体の水性懸濁液。
【請求項２８】
該アセンブリーの医薬的に許容しうる担体の水性懸濁液が、該アセンブリーを形成する気体封入マイクロベシクルの同じ担体中の水性懸濁液のζ−電位に対し絶対値で少なくとも５０％減少のζ（ゼータ）−電位を示す請求項１乃至２６のいずれか１に記載のアセンブリー。
【請求項２９】
該ζ−電位が、絶対値で少なくとも７５％の減少である請求項２８に記載のアセンブリー。
【請求項３０】
該ζ−電位が、絶対値で約１００％以上の減少である請求項２８に記載のアセンブリー。
【請求項３１】
ａ）第１成分として、第１全正味電荷を帯びている気体封入マイクロベシクル、もしくはその前駆体と、
ｂ）上記第１全正味電荷と反対符号の第２全正味電荷を帯び、上記マイクロベシクルに会合しうる第２成分、もしくはその前駆体
を別々に包含する製薬キットであって、上記成分は１００ｎｍ以下の直径を有することを特徴とする製薬キット。
【請求項３２】
さらに、医薬的に許容しうる液体担体を包含する請求項３１に記載の製薬キット。
【請求項３３】
第１および第２成分が、別々に凍結乾燥した調製品の形状にある請求項３２に記載の製薬キット。
【請求項３４】
ａ）第１成分として、第１全正味電荷を帯びている気体封入マイクロベシクル、もしくはその前駆体と、
ｂ）上記第１全正味電荷と反対符号の第２全正味電荷を帯び、上記マイクロベシクルに会合しうる第２成分、もしくはその前駆体
を含有する製薬キットであって、上記会合成分は生物学的適合性界面活性剤からなり、かつ１００ｎｍ以下の直径を有することを特徴とする製薬キット。
【請求項３５】
請求項１乃至２６のいずれか１に記載のアセンブリーを製造する方法であって、気体封入マイクロベシクルもしくはその前駆体を含有する調製品を、上記マイクロベシクルに会合すべき成分もしくはその前駆体を含有する調製品と混合することを特徴とするアセンブリーの製造法。
【請求項３６】
１）気体封入マイクロベシクルを含有する第１水性懸濁液を調製し；
２）上記気体封入マイクロベシクルに会合すべき成分を含有する第２水性懸濁液を調製し；次いで
３）該２つの懸濁液を混合して、該アセンブリーを含有する水性懸濁液を得る
ことを含んでなる請求項３５に記載の製造法。
【請求項３７】
１）気体封入マイクロベシクルを含有する第１水性懸濁液を調製し；
２）該第一懸濁液を凍結乾燥して、第１凍結乾燥物を得；
３）上記気体封入マイクロベシクルに会合すべき成分を含有する第２懸濁液を調製し；
４）該第２懸濁液を凍結乾燥して、第２凍結乾燥物を得；次いで
５）該第１および第２凍結乾燥物を気体の存在下、生理的に許容しうる水性担体で再組成して、該アセンブリーを含有する水性懸濁液を得る
ことを含んでなる請求項３５に記載の製造法。
【請求項３８】
工程５）が、
ａ）第２凍結乾燥物を生理的に許容しうる水性担体で再組成して、気体封入マイクロベシクルに会合すべき成分を含有する懸濁液を得；次いで
ｂ）第１凍結乾燥物を気体の存在下、該懸濁液で再組成する
工程を含む請求項３７に記載の製造法。
【請求項３９】
１）有機溶剤、リン脂質および分散保護剤を含有する水性エマルジョンを調製し；
２）気体封入マイクロベシクルに会合すべき成分を含有する水性懸濁液を調製し；
３）該水性懸濁液を上記水性エマルジョンと混合し；次いで
４）該混合物を凍結乾燥して水および有機溶剤を除去し、該アセンブリーを含有する凍結乾燥物を得る
ことを含む請求項３５に記載の製造法。
【請求項４０】
請求項６に記載のアセンブリーを製造する方法であって、請求項３５乃至３９のいずれか１に記載の製造法によって得られるアセンブリーに、気体封入マイクロベシクルの電荷と同じ符号の全正味電荷を帯びている第２成分を混合することを特徴とするアセンブリーの製造法。
【請求項４１】
医薬的に活性な配合物を製造するための、請求項１乃至２９のいずれか１に記載のアセンブリーの使用。
【請求項４２】
超音波診断イメージングの方法であって、請求項１乃至２６のいずれか１に記載のアセンブリーの水性懸濁液の造影増強量を投与することを含むイメージング法。
【請求項４３】
請求項１乃至２６のいずれか１に記載のアセンブリーのさらに対生物活性剤を含有する水性懸濁液の治療上有効量を投与することを含む治療処置の方法。