【手続補正書】
【提出日】平成19年10月4日(2007.10.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  式
2003511405.tif 000001
［上記式中、
Ｒ1およびＲ2のそれぞれは約８〜約２４個の炭素原子を有するアルキルまたはアルケニル鎖であり、Ｒ1およびＲ2のそれぞれは独立して選択され、
ｎ＝０〜２０であり、
Ｌは（ｉ）−Ｘ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｙ−、（ｉｉ）−Ｘ−（Ｃ＝Ｏ）−、および（ｉｉｉ）−Ｘ−からなる群（ここで、ＸおよびＹは独立して酸素、ＮＨおよび直接結合から選択される。）から選択され、
ＺはｐＫが約７．４未満であり且つ約４．０より大きい弱塩基性残基である］
を有する脂質を含んでなるリポソーム組成物。
【請求項２】  ＸがＮＨであり且つＹが酸素である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】  Ｌがカルバメート結合、エステル結合、またはカーボネート結合である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】  ＬがＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】  Ｚがイミダゾールである、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】  脂質を約１〜約８０モルパーセント含んでなる、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】  Ｚが約５．０〜約６．５のｐＫ値を有する残基である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】  Ｒ1およびＲ2のそれぞれが約８〜約２４個の炭素原子を有する非分岐アルキルまたはアルケニル鎖である、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】  Ｒ1およびＲ2のそれぞれがＣ17Ｈ35である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】  ｎが１〜１０である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】  リポソームに閉じ込められた治療化合物をさらに含んでなる、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】  治療薬が核酸である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】  核酸がＤＮＡ、ＲＮＡおよびそれらの補体からなる群から選択される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】  リポソームをターゲット部位にターゲッティングするためのリガンドをさらに含んでなる、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】  リガンドが内皮腫瘍細胞に対する結合親和性を有し、これらの細胞によってインターナリゼーションされる、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】  リガンドがＥ−セレクチン、Ｈｅｒ−２およびＦＧＦからなる群から選択される、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】  リポソームが、親水性ポリマー鎖で誘導された小胞形成脂質約５〜約２０モルパーセントをさらに含んでなる、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】  親水性ポリマー鎖がポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】  式
2003511405.tif 000002
［上記式中、
Ｒ1およびＲ2のそれぞれは約８〜約２４個の炭素原子を有するアルキルまたはアルケニル鎖であり、Ｒ1およびＲ2のそれぞれは独立して選択され、
ｎ＝０〜２０であり、
Ｌは（ｉ）−Ｘ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｙ−、（ｉｉ）−Ｘ−（Ｃ＝Ｏ）−、および（ｉｉｉ）−Ｘ−からなる群（ここで、ＸおよびＹは独立して酸素、ＮＨおよび直接結合から選択される。）から選択され、
ＺはｐＫが約７．４未満であり且つ約４．０より大きい弱塩基性残基である］
を有する脂質。
【請求項２０】  ＸがＮＨであり、Ｙが酸素である、請求項１９に記載の脂質。
【請求項２１】  Ｌがカルバメート結合、エステル結合、またはカーボネート結合である、請求項１９に記載の脂質。
【請求項２２】  ＬがＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−である、請求項１９に記載の脂質。
【請求項２３】  Ｚがイミダゾールである、請求項２２に記載の脂質。
【請求項２４】  Ｚが約５．０〜約６．５のｐＫ値を有する残基である、請求項１９に記載の脂質。
【請求項２５】  Ｒ1およびＲ2のそれぞれが約８〜約２４個の炭素原子を有する非分岐アルキルまたはアルケニル鎖である、請求項１９に記載の脂質。
【請求項２６】  Ｒ1およびＲ2のそれぞれがＣ17Ｈ35である、請求項２３に記載の脂質。
【請求項２７】  ｎが１〜１０である、請求項１９に記載の脂質。
【請求項２８】  請求項１９に記載の脂質を含んでなるリポソーム。
【請求項２９】  請求項２６に記載の脂質を含んでなるリポソーム。
【請求項３０】
式
2003511405.tif 000003
［上記式中、
Ｒ1およびＲ2のそれぞれは約８〜約２４個の炭素原子を有するアルキルまたはアルケニル鎖であり、Ｒ1およびＲ2のそれぞれは独立して選択され、
ｎ＝０〜２０であり、
Ｌは（ｉ）−Ｘ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｙ−、（ｉｉ）−Ｘ−（Ｃ＝Ｏ）−、および（ｉｉｉ）−Ｘ−からなる群（ここで、ＸおよびＹは独立して酸素、ＮＨおよび直接結合から選択される。）から選択され、
ＺはｐＫが約７．４未満であり且つ約４．０より大きい弱塩基性残基である］
を有する脂質を含んでなるリポソームを調製し、
該リポソームを患者に投与する
ことを含んでなる、治療薬を患者に送達する方法。
【請求項３１】  調製が核酸をリポソームに閉じ込めることを含んでなる、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】  核酸がＤＮＡ、ＲＮＡ、またはそれらの補体である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】  調製がタンパク質またはタンパク質断片をリポソームに閉じ込めることをさらに含んでなる、請求項３０に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
一態様では、本発明は、式
2003511405.tif 000004
［上記式中、
Ｒ1およびＲ2のそれぞれは約８〜約２４個の炭素原子を有するアルキルまたはアルケニル鎖であり、
ｎ＝１〜２０であり、
Ｌは（ｉ）−Ｘ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｙ−、（ｉｉ）−Ｘ−（Ｃ＝Ｏ）−、および（ｉｉｉ）−Ｘ−（ここで、ＸおよびＹは独立して酸素、ＮＨおよび直接結合から選択される。）からなる群から選択される、
ＺはｐＫが約７．４未満であり且つ約４．０より大きい弱塩基性残基である］
を有する脂質を含んでなるリポソーム組成物を包含する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
ＩＩ．カチオン性−中性脂質
一態様では、本発明は、下記に示される構造：
2003511405.tif 000005
［式中、
Ｒ1およびＲ2のそれぞれは約８〜約２４個の炭素原子を有するアルキルまたはアルケニル鎖であり、
ｎ＝１〜２０であり、好ましい態様では１〜１０であり、
Ｌは（ｉ）−Ｘ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｙ−、（ｉｉ）−Ｘ−（Ｃ＝Ｏ）−、および（ｉｉｉ）−Ｘ−（ここで、ＸおよびＹは独立して酸素、ＮＨおよび直接結合から選択される。）からなる群から選択され、
ＺはｐＫが約７．４未満であり且つ約４．０より大きい弱塩基性残基である］
を有する脂質を包含する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
本発明の脂質は、Ｚ残基と脂質の尾部を連結する中性結合Ｌを含む。結合Ｌは様々なものであることができるが、一態様では、カルバメート、エステル、アミド、カーボネート、尿素、アミン、およびエーテルから選択される。好ましく調製された脂質では、カルバメート結合が用いられ、ここでＬは−Ｘ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｙ−であり、ＸはＮＨであり且つＹは酸素である。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３０】
本明細書の案内および例を考慮すれば、他の結合を有する脂質の他の合成は、当業者であれば容易に行うことができる。他の結合としては、例えば、エーテル（Ｌ＝Ｏ−ＣＨ2−）およびエステル結合（Ｌ＝−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−）、並びに尿素、アミド、およびアミン結合（すなわち、Ｌ＝−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−、または−ＮＨ−）が含まれる。ケト結合（但し、Ｘは直接結合である）を調製することもできる。図２Ａ〜２Ｂは、それぞれアミン結合した脂質（図２Ａ）およびＮＨ−を含む結合を有する脂質（図２Ｂ）の調製を示している。図２Ａでは、ヒスタミンの末端アミンを塩化グリシジルと反応させ、生成するエポキシドを加水分解し、生成するジオールをアシル化する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
図２Ｂでは、ＮＨ−を含む結合を有する脂質を、例えば、ヒスタミンをグリセリン酸アセトニド（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−カルボン酸）または四炭素同族体である２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−酢酸の活性化誘導体と反応させることによって調製する。ジオールを、次に脱保護して、アシル化する。
【手続補正７】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図２】
2003511405.tif 000006
2003511405.tif 000007
【手続補正８】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図３】
2003511405.tif 000008