【手続補正書】
【提出日】平成18年12月15日(2006.12.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  ブタ異種移植片に対する寛容を改善するための組成物であって、以下：
ｉ）Ｔ細胞エピトープ；および
ｉｉ）Ｂ細胞エピトープであって、該Ｂ細胞エピトープは、異種移植片拒絶を媒介することに関与し、そしてブタポリペプチドの領域由来のブタポリペプチドであって、該ブタポリペプチドの領域は、等価なヒトポリペプチドの対応する領域に対する７５％未満の配列同一性を有する、ブタポリペプチドであることを特徴とする、Ｂ細胞エピトープ
を含む免疫原を含む、組成物。
【請求項２】  前記Ｂ細胞エピトープが、ＣＤ４０；ＣＤ８０；ＣＤ８６またはＶＣＡＭから選択される少なくとも１つのブタポリペプチド由来のペプチドである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】  前記ペプチドが、図２２に示される少なくとも１つのペプチドから選択される、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】  前記ペプチドが、図２４に示される少なくとも１つのペプチドから選択される、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項５】  前記ペプチドが、図１２に示される少なくとも１つのペプチドから選択される、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項６】  前記Ｔ細胞エピトープが、破傷風トキソイドポリペプチド由来である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】  免疫原を含む組成物であって、該免疫原は、Ｔ細胞エピトープおよびＢ細胞エピトープを有し、ここで、該Ｂ細胞エピトープは、ブタポリペプチドの領域由来であり、該ブタポリペプチドの領域は、等価なヒトポリペプチドの対応する領域に対する７５％未満の配列同一性を有する、免疫原であることを特徴とする、組成物。
【請求項８】  前記ブタポリペプチドが、異種移植片の血管内皮細胞によって発現される、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】  前記Ｂ細胞エピトープが、ＣＤ４０；ＣＤ８６；ＣＤ８０；ＶＣＡＭから選択される少なくとも１つのブタポリペプチド由来である、請求項７または８に記載の組成物。
【請求項１０】  前記Ｂ細胞エピトープが、図２２に示される少なくとも１つのペプチドから選択される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】  前記Ｂ細胞エピトープが、図２４に示される少なくとも１つのペプチドから選択される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１２】  前記Ｂ細胞エピトープが、図２６に示される少なくとも１つのペプチドから選択される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１３】  前記Ｂ細胞エピトープが、ＣＤ８６の細胞外ドメイン由来である、請求項９または１２に記載の組成物。
【請求項１４】  前記Ｔ細胞エピトープが、破傷風トキソイド由来である、請求項７〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】  前記組成物が、前記免疫原に対する免疫応答を増強し得るキャリアをさらに含む、請求項７〜１４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１６】  抗体、またはその有効な部分であって、該抗体は、ブタポリペプチドの領域に結合し得、該ブタポリペプチドの領域は、等価なヒトポリペプチドの対応する領域に対する７５％未満の配列同一性を有する、抗体であることを特徴とする、抗体、またはその有効な部分。
【請求項１７】  前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１６に記載の抗体。
【請求項１８】  前記抗体が、少なくとも１つの検出可能な標識で改変される、請求項１６または１７に記載の抗体。
【請求項１９】  試験されるべき異種移植片レシピエントからのサンプルにおける、異種移植片の哺乳動物レシピエントの免疫状態をモニターするためのキットであって、以下：
ｉ）請求項１６〜１８に記載の抗体；および
ｉｉ）異種移植片拒絶を媒介することに関与するブタポリペプチドの発現をモニターするための手段
を包含する、キット。
【請求項２０】  異種移植片を受ける前に哺乳動物を処置するためのキットであって、以下：
ｉ）請求項７〜１５に記載の組成物；
ｉｉ）該免疫原性組成物に対する該哺乳動物の免疫状態を評価するための手段；および
ｉｉｉ）レシピエント哺乳動物へ該異種移植片組織／器官を移植した後に、該異種移植片に対する拒絶応答をモニターするための手段
を包含する、方法。
【請求項２１】  前記異種移植片がブタ起源であり、そして前記哺乳動物がヒトである、請求項１９または２０に記載のキット。
【請求項２２】  前記異種移植片が、少なくとも１つの血管化された移植片および／または免疫原性ブタ細胞／組織である、請求項１９〜２１のいずれか１項に記載のキット。
【請求項２３】  前記異種移植片が膵島である、請求項１９〜２２のいずれか１項に記載のキット。
【請求項２４】  試験されるべき異種移植片レシピエントからのサンプルにおいて異種移植片の哺乳動物レシピエントの免疫状態をモニターするための、請求項１６〜１８に記載の抗体を含む組成物であって、ここで異種移植片拒絶を媒介することに関与するブタポリペプチドの発現をモニターすることができる、組成物。
【請求項２５】  異種移植片を受ける前に哺乳動物を処置するための、請求項７〜１５に記載の組成物を含む組成物であって、ここで該免疫原性組成物に対する該哺乳動物の免疫状態を評価することができ、レシピエント哺乳動物へ該異種移植片組織／器官を移植した後に、該異種移植片に対する拒絶応答をモニターすることができる、組成物。
【請求項２６】  前記異種移植片がブタ起源であり、そして前記哺乳動物がヒトである、請求項２４または２５に記載の組成物。
【請求項２７】  前記異種移植片が、少なくとも１つの血管化された移植片および／または免疫原性ブタ細胞／組織である、請求項２４〜２６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２８】  前記異種移植片が膵島である、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】図面の簡単な説明
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１ａは、直接的異物認識の模式図であり、そして図１ｂは、間接的異物認識の模式図である。
【図２】
図２は、ブタＣＤ８６核酸配列を示す。
【図３】
図３は、ＰＣＲ増幅の前にブタｍＲＮＡの逆転写によって得られたブタＣＤ８６  ｃＤＮＡ配列を示す。
【図４】
図４は、公開されたブタＣＤ８６配列との、図２中のｃＤＮＡのヌクレオチド配列の比較を示す。
【図５】
図５は、公開されたマウスおよびヒトのＣＤ８６配列との、図２中のｃＤＮＡ配列の比較を示す。
【図６】
図６は、ブタ、ヒトおよびマウスのアミノ酸配列と比較した、図２中のｃＤＮＡの翻訳アミノ酸配列を示す。
【図７】
図７は、ヒトおよびマウスのＢ７．１核酸配列に対するブタＢ７．１オリゴヌクレオチドプライマーの位置を示す。
【図８ａ】
図８ａは、ヒト、マウスおよびブタのＣＤ４０核酸配列の比較を示し；図８ｂは、ヒト、マウスおよびウシのＣＤ４０アミノ酸配列の比較を示す。
【図８ｂ】
図８ａは、ヒト、マウスおよびブタのＣＤ４０核酸配列の比較を示し；図８ｂは、ヒト、マウスおよびウシのＣＤ４０アミノ酸配列の比較を示す。
【図９】
図９は、ブタＣＤ８６（Ｂ７．２）をコードするベクターでのトランスフェクション後の、ＣＤ８６（Ｂ７．２）の発現のＦＡＣＳ分析を示す。
【図１０】
図１０は、ブタＣＤ８６（Ｂ７．２）をコードするベクターで一過性トランスフェクトされた細胞による、ＣＤ８６（Ｂ７．２）の発現のＦＡＣＳ分析を示す。
【図１１】
図１１は、ブタＣＤ８６（Ｂ７．２）でトランスフェクトされた細胞のフローサイトメトリー分析を示す。
【図１２】
図１２は、ブタＣＤ８６（Ｂ７．２）配列中のＣＤ８６（Ｂ７．２）由来の９つのペプチドの位置を示す。
【図１３】
図１３は、オボアルブミン全体またはオボアルブミンペプチドＯｖａ323〜339に対するＴ細胞増殖応答の比較を示す。
【図１４ａ】
図１４ａは、ペプチドＥＬＩＳＡによる、Ｂ７．２特異的ペプチド血清またはオボアルブミンコントロール血清の示差的結合を示す。
【図１４ｂ】
図１４ｂは、ペプチド４または６で免疫されたマウス血清による、Ｂ７．２由来のペプチド４および６のインビトロでの認識を示す。
【図１５ａ】
図１５は、ペプチドＥＬＩＳＡによる、Ｂ７．２ペプチド血清およびコントロールｏｖａペプチド血清のインビトロでの認識を示す。
【図１５ｂ】
図１５ｂは、ペプチド４および６血清による、直接のマウス抗ブタＴ細胞応答の阻害を示し、これはまた、マウスＣＤ８６による同時刺激の阻害が存在しないこと示す。
【図１６】
図１６は、ペプチドＥＬＩＳＡによる、Ｂ７．２由来のペプチド４血清またはｏｖａコントロールペプチド血清の示差的結合を示す。
【図１７ａ】
図１７ａは、ペプチド４由来の血清またはコントロールｏｖａペプチド血清で染色した後の、ブタＣＤ８６でトランスフェクトされたＰ８１５細胞のフローサイトメトリー分析を示す。
【図１７ｂ】
図１７ｂは、ペプチド４またはペプチド６に由来するマウス血清からの血清で染色した後の、ブタＣＤ８６でトランスフェクトされたＰ８１５細胞またはマウスＣＤ８６でトランスフェクトされたＣＨＯ細胞のＦＡＣＳ分析を示す。
【図１８】
図１８は、大きな白いブタから単離されたブタ膵島の調製を示す。
【図１９】
図１９は、キメラペプチド免疫および移植プロトコルの模式図である。
【図２０】
図２０は、抗ブタＣＤ８６抗血清が、移殖されたブタ膵島の生存を延長することを示す。
【図２１】
図２１は、ブタとヒトのＣＤ４０のアミノ酸配列の比較である（下線の配列が、表１にて同定されるペプチドである）。
【図２２】
図２２は、ブタＣＤ４０の翻訳アミノ酸配列である（下線の配列が、表１にて同定されるペプチドである）。
【図２３】
図２３は、ブタとヒトのＶＣＡＭのアミノ酸配列の比較である（下線の配列が、表２にて同定されるペプチドである）。
【図２４】
図２４は、ブタＶＣＡＭの翻訳アミノ酸配列である（下線の配列が、表２にて同定されるペプチドである）。
【図２５】
図２５は、ブタとヒトのＣＤ８６のアミノ酸配列の比較である（下線の配列が、表３にて同定されるペプチドである）。
【図２６】
図２６は、ブタＣＤ８６の翻訳アミノ酸配列である（下線の配列が、表３にて同定されるペプチドである）。