【誤訳訂正書】
【提出日】平成19年4月3日(2007.4.3)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】特許請求の範囲
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  一つもしくは複数の試料を分析するための方法であって、試料をセンサープラットホームの検知区域と接触させることを含むが、当該プラットホームは屈折率(ｎ１)を有する光透過性の基板を備え、薄い、非金属性の光透過性層をその基板の一つの表面上に形成し、当該層は (ｎ１)より大きい屈折率(ｎ2)を有し、一重もしくは多重の捕獲要素に対してそれぞれ、一重もしくは多重の検知区域または領域を規定する周期性の溝を備えた一重もしくは多重の波形構造をその中に組み込みんでいる当該プラットホームは、当該溝が、
a)当該プラットホーム上に入射するコヒーレント光を個別のビームもしくは回折オーダーに回折できるが、それらは干渉して透過ビームの減少および入射光の異常に高い反射をもたらし、それにより一重もしくは多重の検知区域の表面で増強したエバネッセント場を発生するか；または
b) 当該プラットホーム上に入射するコヒーレントな直線偏光を個別のビームもしくは回折オーダーに回折できるが、それらは干渉して透過ビームの殆んど全部の消滅および入射光の異常に高い反射をもたらし、それにより一重もしくは多重の検知区域の表面で増強したエバネッセント場を発生する、
のどちらかのように、形状化し、寸法化しかつ配向しているということを特徴とし、
さらに、エバネッセント共鳴をプラットホームの検知区域内で起こさせるように光ビームでそのプラットホームを照射することおよびその検知区域から発散する放射線を検出することを含む、方法。
【請求項２】  当該波形構造は、一もしくは多回折性である実質的に平行な周期性の溝を備え、溝は一重もしくは多重の検知区域または領域を表わす、請求項１記載の方法。
【請求項３】  請求項１もしくは請求項２記載の方法であって、
(a)この溝の深さは３ｎｍから光透過性の層の厚さまでの範囲にあり、
(b)この光透過性の層の厚さは３０から１０００ｎｍまでの範囲にあり、
(c)この波形構造の周期は２００から１０００ｎｍまでの範囲にあり、
(d)この光透過性の層の厚さに対する溝の深さの比率は０.０２から１までの範囲にあり、そして
(e)溝の周期に対する溝の幅の比率は０.２から０.８までの範囲にある、方法。
【請求項４】  プラットホームの基板を無機物質から形成する、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】  その基板を有機物質から形成する、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】  その基板をガラス、ＳｉＯ２、水晶もしくはＳｉから形成する、請求項４記載の方法。
【請求項７】  その基板をＰＰ、ＰＣ、ＰＭＭＡ、ＰＩ、ＰＳ、ＰＥ、ＰＥＴもしくはＰＵのような有機ポリマーから形成する、請求項５記載の方法。
【請求項８】  光透過性の層を無機物質から形成する、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項９】  光透過性の層を有機物質から形成する、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１０】  光透過性の層がＴａ２Ｏ５、ＴｉＯ２、Ｎｂ２Ｏ５、ＺｒＯ２、ＺｎＯもしくはＨｆＯ２のような金属酸化物である、請求項８記載の方法。
【請求項１１】  光透過性の層をポリアミド、ポリイミド、ＰＰ、ＰＳ、ＰＭＭＡ、ポリアクリル酸、ポリアクリルエーテル、ポリチオエーテルもしくはポリ(フェニレンスルフィド)およびそれらの誘導体から形成する、請求項９記載の方法。
【請求項１２】  回折溝の深さが３ｎｍから光透過性の層の厚さまで、好ましくは１０ｎｍから光透過性の層の厚さまでの範囲にある、請求項１もしくは請求項１に従属するときは請求項４〜１１のいずれか１項記載の方法。
【請求項１３】  光透過性の層の厚さは３０から１０００ｎｍまでの範囲にあり、回折溝の周期は２００から１０００ｎｍまでの範囲にあり、この光透過性の層の厚さに対するこの溝の深さの比率は０.０２から１までの範囲にあり、そして溝の周期に対する溝の幅の比率は０.２から０.８までの範囲にあって、極めて短い伝播距離をもたらす、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】  この溝が一般的に断面において長方形である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】  この溝が一般的に断面において正弦曲線状、台形波状、鋸歯断面状である、請求項１〜１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１６】  プラットホームは正方形もしくは長方形であり、そして溝はプラットホームに沿って直線的に伸展する、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】  プラットホームは円盤状であり、そして溝は円形もしくは線形である、請求項１〜１５のいずれか１項記載の方法。
【請求項１８】  溝を基板の表面上に形成する、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】  溝を光透過性の層の表面上に形成する、請求項１〜１７のいずれか１項記載の方法。
【請求項２０】  溝を基板の表面上および光透過性の層の表面上の両方に形成する、請求項１〜１７のいずれか１項記載の方法。
【請求項２１】  一つもしくはそれ以上の検知区域の波形表面を、ある特定の励起波長および／もしくは特定のタイプの偏光に対し最適化する、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】  一つもしくはそれ以上の検知区域の波形表面を、異なる波長および／もしくは偏光の配向に対し最適化する、請求項１〜２０のいずれか１項記載の方法。
【請求項２３】  光透過性の層の表面が一つもしくは複数の検知区域を含み、それもしくはそれらのおのおのが一つもしくは複数の捕獲要素を担う、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】  おのおのの捕獲要素は、親和性反応ができる個別のおよび／もしくは混合の捕獲分子を含む、請求項２３記載の方法。
【請求項２５】  捕獲要素を二次元アレーで配列する、請求項２３記載の方法。
【請求項２６】  プラットホームが、捕獲分子の固定化を可能にするために、光透過性の層の表面に固着した接着促進層を含む、請求項２３から請求項２５のいずれか１項記載の方法。
【請求項２７】  接着促進層は無機および／もしくは有機分子またはそれらの誘導体の一重および多重の層を含み、それらは、得られた接着促進層システムの全体的な機能的性質を操作するために、付加的な化学的、物理的、分光学的および／もしくは光物理的、光化学的／生物学的／生化学的性質を付与する、請求項２６記載の方法。
【請求項２８】  プラットホームを複数の検知区域もしくは領域とともに形成し、おのおのは試料の多色の励起および検出に適するそれ自身の回折溝もしくは多重の積層溝を有する、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】  プラットホーム上に固定化すべき捕獲要素もしくは分子の数は限定されることなく、遺伝子、ＤＮＡ配列、ＤＮＡモチーフ、ＤＮＡマイクロサテライト、単一ヌクレオチド多型、興味ある種もしくは生体のゲノムに寄与するタンパク質もしくは細胞断片、またはそれらの選択もしくは組み合わせの数に対応する、請求項１〜２３のいずれか記載の方法。
【請求項３０】  一つもしくは複数の捕獲要素または分子が次の一つもしくはそれ以上を含む、請求項２３〜２９のいずれか１項記載の方法：
ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド(およびそれらの化学的誘導体)
ＤＮＡ(二本鎖もしくは一本鎖)  ａ)直線型(およびそれらの化学的誘導体)、ｂ)環状型(例えば、プラスミド、コスミド、ＢＡＣ、ＹＡＣ)
全ＲＮＡ、メッセンジャーＲＮＡ、ｃＲＮＡ、ミトコンドリアＲＮＡ、人工ＲＮＡ、アプタマーＰＮＡ(ペプチド核酸)
ポリクローナル、モノクローナル、組み換え型の、改変した抗体、抗原、ハプテン、抗体ＦＡＢサブユニット(必要により修飾した)
タンパク質、修飾したタンパク質、酵素、酵素コファクターもしく阻害剤、タンパク質複合体、レクチン、ヒスチジン標識タンパク質、ヒスチジンタグ成分(ＨＩＳタグ)のためのキレーター、タグ付タンパク質、人工抗体、分子インプリント、プラスティボディー膜受容体、全細胞、細胞断片および細胞性下部構造、シナプス、アゴニスト／アンタゴニスト、細胞、細胞内小器官、例えばミクロソーム
ベンゾジアゼピンのような小分子
プロスタグランジン
抗生物質、薬剤、代謝物、薬剤代謝物
天然物
炭水化物および誘導体
天然および人工リガンド
ステロイド、ホルモン
ペプチド
生来もしくは人工ポリマー
分子プローブ
天然および人工受容体
そしてそれらの化学的誘導体
キレート試薬、クラウンエーテル、リガンド、超分子集合体
指示薬(ｐＨ、電位、膜電位、酸化還元電位)
組織試料(組織ミクロアレー)。
【請求項３１】  検査下の試料に蛍光を誘起する物質を加え、そして増強したエバネッセント場による試料の励起によって、当該試料に誘導された蛍光を検知することを含む、請求項１〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】  蛍光を誘起する物質がルミネセンスのマーカーを含む、請求項３１記載の方法。
【請求項３３】  ルミネセンスのマーカーは、４００ｎｍから１２００ｎｍまでの範囲にルミネセンスを有し、一つまたはそれ以上の親和性パートナーに付着するために官能基化もしくは修飾されている一つもしくは複数のルミネセンスの化合物を含み、以下の一つまたはそれ以上の誘導体を含む、請求項３２記載の方法：
ポリフェニルおよびヘテロ芳香族化合物、
スチルベン、
クマリン、
キサンテン染料、
メチン染料、
オキサジン染料、
ローダミン、
フルオレセイン、
クマリン、スチルベン
パイレン、ペリレン
シアニン、オキサシアニン、フタロシアニン、ポルフィリン、ナフタロシアニン、アゾベンゼン誘導体、ジスチリルビフェニル
遷移金属錯体、例えばポリピリジル／ルテニウム錯体、塩化トリス(２,２’−ビピリジル)ルテニウム、塩化トリス(１,１０−フェナンスロリン)ルテニウム、塩化トリス(４,７−ジフェニルー１,１０−フェナンスロリン)ルテニウムおよびポリピリジル／フェナジン／ルテニウムの錯体、オクタエチル−白金−ポルフィリン、ユーロピウムおよびテルビウム錯体
量子ドット粒子／ビーズもしくはそれらの誘導体。
【請求項３４】  以下のいずれか一つもしくはそれ以上において用いられるときの、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法：
−遺伝子発現
−ゲノム医学
−薬理ゲノム医学
−毒性ゲノム医学
−毒性プロテオミックス
−遺伝学
−薬理遺伝学
−毒性遺伝学
−エクソン／イントロン発現プロファイリング
−ヒト白血球抗体(ＨＬＡ)の判定
−スプライシング変異体の分析
−プロテオミックス(チップ上のタンパク質アッセイ)
−患者のモニタリング(薬物、代謝物およびマーカー)
−ポイントオブケア、「個人別医療」
−診断学
−プロテオミックス用のチップ上の二次ゲル
−ＳＮＰ(単一ヌクレオチド多形)、ミニシークエンシング
−高スループットスクリーニング
−コンビナトリアル化学
−タンパク質−タンパク質相互作用
−分子相互作用
−チップを用いたタンパク質−抗体およびペプチド相互作用
−緑色蛍光タンパク質(ＧＦＰ)
−ｉｎ−ｓｉｔｕハイブリダイゼーション
−共焦点顕微鏡法
−蛍光相関分光法
−従来の顕微鏡法
−ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ。
【請求項３５】  プラットホーム（当該プラットホームは屈折率(ｎ１)を有する光透過性の基板を備え、薄い、非金属性の光透過性層をその基板の一つの表面上に形成し、当該層は (ｎ１)より大きい屈折率(ｎ2)を有し、一重もしくは多重の捕獲要素に対してそれぞれ、一重もしくは多重の検知区域または領域を規定する周期性の溝を備えた一重もしくは多重の波形構造をその中に組み込みんでいる当該プラットホームは、当該溝が、
a)当該プラットホーム上に入射するコヒーレント光を個別のビームもしくは回折オーダーに回折できるが、それらは干渉して透過ビームの減少および入射光の異常に高い反射をもたらし、それにより一重もしくは多重の検知区域の表面で増強したエバネッセント場を発生するか；または
b) 当該プラットホーム上に入射するコヒーレントな直線偏光を個別のビームもしくは回折オーダーに回折できるが、それらは干渉して透過ビームの殆んど全部の消滅および入射光の異常に高い反射をもたらし、それにより一重もしくは多重の検知区域の表面で増強したエバネッセント場を発生する、
のどちらかのように、形状化し、寸法化しかつ配向しているということを特徴とする）、
光ビームを発生させて、それがエバネッセント共鳴をプラットホームで起こさせ、それによってプラットホームの検知区域中に増強した共鳴場を創成させる角度でプラットホーム上に入射させるように、ビームを方向付けする手段、ならびにプラットホームの検知区域上にもしくは近傍に固着する物質の特質を検出するための手段を備える、試料分析用の装置。
【請求項３６】  光発生の手段がコヒーレントレーザービームを放射するためのレーザーを含む、請求項３５記載の装置。
【請求項３７】  光発生の手段が、放電ランプおよびＨｇもしくはＸｅランプのような低圧ランプ、または光放射ダイオードを含む、請求項３５記載の装置。
【請求項３８】  角度θでプラットホームに入射するようにレーザービームを方向付けするための光学エレメントを含み、その角度θは式ｓｉｎθ＝ｎ−λ／Λによって定義され、そこではΛは回折溝の周期であり、λは入射光の波長であり、そしてｎは光透過性の層の有効屈折率である、請求項３６記載の装置。
【請求項３９】  検出手段をアレンジして、蛍光、燐光、化学ルミネセンスおよび電子ルミネセンスのようなルミネセンスを検出する、請求項３５〜３８のいずれか１項記載の装置。
【請求項４０】  検出手段をアレンジして、屈折率における付加的もしくは合同の変化を検出する、請求項３５〜３９のいずれか１項記載の装置。
【請求項４１】  入射ビームを配置して、全てもしくはおのおのの検知区域を照射する、請求項３５〜４０のいずれか１項記載の装置。
【請求項４２】  分析すべき検知区域の小さな副部位を照射するようにビームを配置し、そしてプラットホームの検知区域にわたって走査するために相対的移動を実行できるように、ビームおよびプラットホームを配置する、請求項３５〜４０のいずれか１項記載の装置。
【請求項４３】  試料を検知区域と接触させるために、プラットホームの検知区域とは反対に位置させるカートリッジを含む、請求項３５〜４２のいずれか１項記載の装置。
【請求項４４】  検査すべき複数の試料を含むためのミクロタイタータイプのデバイスを含む、請求項３５〜４２のいずれか１項記載の装置。
【請求項４５】  屈折率(ｎ１)を有する光透過性の基板、その基板の一つの表面上に形成した薄い、光透過性の層を備えているプラットホームであって、当該層は(ｎ１)より大きい屈折率(ｎ2)を有し、当該プラットホームはその光透過性の層の中に、実質的に全体のプラットホームに覆って一重の波形構造もしくはプラットホーム上に配置した別の多重の波形構造を組み込んでいて、当該構造は実質的に平行な周期性の溝を備えているが、それらは一もしくは多回折性であって、溝は一重もしくは多重の検知区域または領域を表わし、そこにおいては
(a)この溝の深さは３ｎｍから光透過性の層の厚さまでの範囲にあり、
(b)この光透過性の層の厚さは３０から１０００ｎｍまでの範囲にあり、
(c)この波形構造の周期は２００から１０００ｎｍまでの範囲にあり、
(d)この光透過性の層の厚さに対する溝の深さの比率は０.０２から１までの範囲にあり、そして
(e)溝の周期に対する溝の幅の比率は０.２から０.８までの範囲にある、プラットホーム。
【請求項４６】  屈折率(ｎ１)を有する光透過性の基板、その基板の一つの表面上に形成した薄い、光透過性の層を備えている試料分析用のプラットホームであって、当該層は (ｎ１)より大きい屈折率(ｎ2)を有し、当該プラットホームはその中に、それぞれの一重もしくは多重の捕獲要素に対して、一重もしくは多重の検知区域または領域を規定する周期性の溝を備えた一重もしくは多重の波形構造を組み込んでいて、当該溝は
a)当該プラットホーム上に入射するコヒーレント光を個別のビームもしくは回折オーダーに回折するが、それらは干渉して透過ビームの減少および入射光の異常に高い反射をもたらし、それにより一重もしくは多重の検知区域の表面で増強したエバネッセント場を発生するか；または
b) 当該プラットホーム上に入射するコヒーレントな直線偏光を個別のビームもしくは回折オーダーに回折するが、それらは干渉して透過ビームの殆んど全部の消滅および入射光の異常に高い反射をもたらし、それにより一重もしくは多重の検知区域の表面で増強したエバネッセント場を発生するかのどちらかのように、形状化し、寸法化しかつ配向しており、
そこでは回折溝の深さは、３ｎｍから光透過性の層の厚さまで、好ましくは１０ｎｍから光透過性の層の厚さまでの範囲にあり、この光透過性の層の厚さは３０から１０００ｎｍまでの範囲にあり、この波形構造の周期は２００から１０００ｎｍまでの範囲にあり、この光透過性の層の厚さに対するこの溝の深さの比率は０.０２から１までの範囲にあり、そして溝の周期に対する溝の幅の比率は０.２から０.８までの範囲にあって、極めて短い伝播距離をもたらす、プラットホーム。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００１】
この発明は試料分析の分野に一般的に関し、例えば、一般的にＤＮＡ、タンパク質および抗体のチップ技術として既知の親和性検知の分野において特定の、しかし独占的でない、応用性を有する。この発明の一つの態様は試料分析に使用し得るセンサープラットホームに関与する。この発明のもう一つの態様はセンサープラットホームを使用する装置に関与する。この発明のさらなる態様はそのプラットホームを使用する試料分析の方法に関与する。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１０】
平面導波路センサーと対照的に、本発明はルミネセンスの混信を全く示さないで、局所的光強度は良く規定されている。本発明は真の多重化を可能にする、即ち、変換器は積み重ね下部構造(平面導波路ではそうであるように)を全く必要としないで、万能のプラットホームとして見ることができるが、そこでは、要件次第で、認識要素のサイズおよび数は、チップ構造(波形区域および検知区域は、平面導波路ではそうであるように、分離されていない)における変更を必要としないで、技術的に可能な限定の中で変えることができる。加えて、この発明は、先行のエピ蛍光技法に比較して、約１００倍強いルミネセンス強度を送り出す。実験的なセットアップは非常に簡単で、入射光ビームの角度の簡単な調整を単に必要とするだけである。本発明で記述される変換器は、従来の蛍光顕微鏡、共焦点顕微鏡およびレーザースキャナーに容易に適応させることができる。さらに、広域共鳴幅(最大の全半値幅、ＦＷＨＭ、として定義する)および法線入射におけるかそれに近い共鳴位置を持つ変換器にとって、角度の調整は時代遅れである。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１３】
本発明の第二の態様に従えば、屈折率(ｎ１)を有する光透過性の基板、その基板の一つの表面上に形成した薄い、光透過性の層を備えているプラットホームが提供されるが、当該層は(ｎ１)より大きい屈折率(ｎ2)を有し、当該プラットホームはその光透過性の層の中に、実質的にプラットホーム全体を覆って一重の波形構造もしくはプラットホーム上に配置した別の多重の波形構造を組み込んでいて、当該構造は実質的に平行な周期性の溝を備えているが、それらは一もしくは多回折性であって、溝は一重もしくは多重の検知区域または領域を表わし、そこにおいては
(a)この溝の深さは３ｎｍから光透過性の層の厚さまでの範囲にあり、
(b)この光透過性の層の厚さは３０から１０００ｎｍまでの範囲にあり、
(c)この波形構造の周期は２００から１０００ｎｍまでの範囲にあり、
(d)この光透過性の層の厚さに対するこの溝の深さの比率は０.０２から１までの範囲にあり、そして
(e)溝の周期に対する溝の幅の比率は０.２から０.８までの範囲にある。この配置は、使用時に、溝が
a)当該プラットホーム上に入射するコヒーレント光を個別のビームもしくは回折オーダーに回折するが、それらは干渉して透過ビームの減少および入射光の異常に高い反射をもたらし、それにより一重もしくは多重の検知区域の表面で増強したエバネッセント場を発生するか；または
b) 当該プラットホーム上に入射するコヒーレントな直線偏光を個別のビームもしくは回折オーダーに回折するが、それらは干渉して透過ビームの殆んど全部の消滅および入射光の異常に高い反射をもたらし、それにより一重もしくは多重の検知区域の表面で増強したエバネッセント場を発生するかのどちらかのように、形状化し、寸法化しかつ配向している。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１７】
共鳴条件においては、個別のビームは、透過ビームが相殺され(破壊的干渉)かつ反射ビームが構築的に干渉して異常な高反射を発生させるような方式で、干渉する。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２３】
回折溝の深さは３ｎｍから光透過性の層の厚さまで、そして好ましくは１０ｎｍから光透過性の層の厚さまで、例えば３０ｎｍから光透過性の層の厚さまでの範囲にあればよい。光透過性の層の厚さは、３０から１０００ｎｍまで、例えば５０から３００ｎｍまで、好ましくは５０〜２００ｎｍの範囲にあればよく、波形構造の周期は、２００から１０００ｎｍまで、例えば２００から５００ｎｍまで、好ましくは２５０〜５００ｎｍの範囲にあればよく、光透過性の層の厚さに対する溝の深さの比率は、０.０２から１まで、例えば０.２５から１まで、好ましくは０.３から０.７までの範囲にあればよく、そして溝幅の溝周期(“負荷サイクル”)に対する比率は、０.２から０.８まで、例えば０.４から０.６までの範囲内にあればよい。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３１】
プラットホームは、捕獲分子の固定化を可能にするために、光透過性の層の表面に配置する接着促進層を含んでもよい。接着促進層はまた、さらにアッセイおよび検出効率を増加するための微小孔層(セラミックス、ガラス、Ｓｉ)または、捕獲要素の固定化および試料分析を行うための媒体として使用でき、それによってさらにアッセイおよび検出効率を増加させるか、もしくは、ゲル電気泳動という意味で、アナライト混合物の分離を可能にするゲル層を含んでもよい。プラットホームは複数の検知区域もしくは領域で形成してもよく、それぞれはそれ自体の回折溝を有する。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３３】
この発明の第三の態様は、当該第一もしくは第二の態様に従うプラットホーム、光ビームを発生させて、それがエバネッセント共鳴をプラットホームで起こさせ、それによってプラットホームの検知区域中に増強したエバネッセント場を創成させる角度でプラットホーム上に入射させるように、ビームを方向付けする手段、ならびにプラットホームの検知区域に配置される物質の特質を検出するための手段を備えた試料分析用の装置を提供する。共鳴条件の創成に適する角度の範囲は、プラットホームへの入射光に対する全計の反射の角度によって限定される。好ましい角度は、４５°以下、例えば３０°もしくはそれ以下、例えば２０°から１０°もしくはそれ以下、例えば０.１°から９.９°である。角度は法線入射に等しいかおおよそ法線入射でよい。光を発生させる手段は、コヒーレントレーザービームを放射するためのレーザーを含んでもよい。他の適当な光源としては、そこで放射されたスペクトル線が、十分なコヒーレント長を有する放電ランプもしくは低圧ランプ、例えば、水銀もしくはキセノンランプ、および、発光ダイオード(ＬＥＤ)が挙げられる。装置はまた、それが角度θでプラットホームに入射するようにレーザービームを方向付けするための光学エレメント、および例えば、直線偏光の透過に適合したコヒーレントビームの偏向面を形作るためのエレメントを含んでもよい。角度θは式ｓｉｎθ＝ｎ−λ／Λによって定義され得るが、そこではΛは回折溝の周期であり、λは入射光の波長であり、そしてｎは光透過性の層の有効屈折率である。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３８】
マーカーとして用いるルミネセンス染料は、アナライト溶液中に存在するおよび／もしくはプラットホームに付着する一重もしくは多重の親和性結合パートナー(もしくは、それらの誘導体)に、化学的にもしくは物理的、例えば静電的に、結合し得る。親和性反応に関係する、ＤＮＡ、ＲＮＡ、糖類、タンパク質もしくはペプチドのような天然由来のオリゴマーもしくはポリマー、ならびに合成オリゴマーもしくはポリマーの場合には、インターカレーティング染料もまた適している。発光団は、ビオチン／アビジン結合のような生物的相互作用もしくはＨＩＳタグカップリングのような金属複合体形成を経て、アナライト溶液中に存在する親和性パートナーと付着し得る。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３９】
一重もしくは多重の親和性結合パートナーの存在を定量的に測定するために、アナライト溶液中に存在する親和性パートナーに、プラットホーム上に固定化された捕獲要素に、もしくはアナライト溶液中に存在する親和性パートナーおよびプラットホーム上に固定化された捕獲要素の両者に、一重もしくは多重のルミネセンスのマーカーを付着させてもよい。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４２】
以下の誘導体
ポリフェニルおよびヘテロ芳香族化合物、
スチルベン、
クマリン、
キサンテン染料、
メチン染料、
オキサジン染料、
ローダミン、
フルオレセイン、
クマリン、スチルベン
パイレン、ペリレン
シアニン、オキサシアニン、フタロシアニン、ポルフィリン、ナフタロシアニン、アゾベンゼン誘導体、ジスチリルビフェニル、
遷移金属錯体、例えば、ポリピリジル／ルテニウム錯体、塩化トリス(２,２’−ビピリジル)ルテニウム、塩化トリス(１,１０−フェナンスロリン)ルテニウム、塩化トリス(４,７−ジフェニルー１,１０−フェナンスロリン)ルテニウムおよびポリピリジル／フェナジン／ルテニウムの錯体、例えばオクタエチル−白金−ポルフィリン、ユーロピウムおよびテルビウム錯体のような、
４００ｎｍから１２００ｎｍの範囲のルミネセンスを有し、一つまたはそれ以上の親和性パートナーに付着するために官能化もしくは修飾されているルミネセンスの化合物は、ルミネセンスのマーカーとして使用し得る。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４５】
他の適当な染料としては、ＲＮＡもしくはＤＮＡ鎖に酵素的に組み込まれ得るデオキシヌクレオチド三リン酸(ｄＮＴＰ)によって修飾された染料が挙げられる。
さらに適当な染料としては、Quantum Dot ParticlesもしくはBeads(Quantum Dot Cooperation, Palo Alto, CA)もしくはそれらの誘導体または一つのかつ同一の規定された波長で励起し得る遷移金属錯体の誘導体および識別可能な波長においてルミネセンス放射を示す誘導体が挙げられる。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５０】
装置は、試料を検知区域と接触させるためにプラットホームの検知区域とは反対に位置させるカートリッジを含んでもよい。このカートリッジは、試料の作成、希釈、濃縮、混合、生物／化学反応、分離を小型化フォーマット(ＷＯ９７／０２３５７参照)で実行するために、さらなる手段を含んでもよい。この装置は、検査すべき複数の試料を含むためのミクロタイタータイプデバイスを含んでもよい。
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５２】
それぞれの検知区域もしくは領域がそこに一つ以上のタイプの捕獲要素もしくは分子を付着しているセンサープラットホームを提供することは、新規なかつ発明力のある概念であると信じられている。この概念は、プラットホームをエバネッセント共鳴モード、もしくは導波のようなより従来型のモードに設計されていようとなかろうと応用される。かくして、本発明の他の態様に従って、試料分析で用いるためのプラットホームが提供され、当該プラットホームは一つもしくはそれ以上の検知区域もしくは領域を有し、それぞれは、プラットホームがコヒーレント光で照射されるときに相互作用して親和性反応の指標を提供することができる一つもしくは複数の捕獲要素を受け取るためのものであり、そこではそれぞれの捕獲要素は二つもしくはそれ以上のタイプの捕獲分子を含む。
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５３】
ここで、この発明を添付の図面を特に引用して、単に例示の方法で記載する。この図面においては：
図１は、光学的パラメーターを分析するための品質制御装置および本発明に従ったプラットホームのエバネッセント共鳴条件の概略図である；
図２は、本発明に従ったセンサープラットホームの概略図である；
図３は、プラットホームとの関連においてエバネッセント場プロフィールを示す概略図である；
図４ａおよび４ｂは、チップカートリッジを示す概略図である；
図５は、本発明の一つの実施例におけるアレーレイアウトを示す；
図６は、本発明の一つの実施例に従って蛍光を測定するために用いるレイアウトを図式的に示す；
図７は、先行技法および本発明によって得られた結果の比較を示す。
図８は、プラットホームの別の形を図示する。
図９ａから９ｃは、実施例５に記載の共鳴条件下で本プラットホームを用いて、３０ｐｍのＰＭアナライト、再生、および３０ｐｍのＭＭアナライトのインキュベーションの後に得られた蛍光画像を示し、そして
図１０は、実施例６に記載のエピ蛍光および共鳴条件下で本プラットホームを用いて得られた蛍光画像およびデータを示す。
【誤訳訂正１６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５７】
装置はまた、プラットホーム(１０)を通じて伝播された光を検出できる検出器(２０)、その反射光を検出するためのＣＣＤカメラ(２１)およびデータ処理ユニット(２２)を含む。
【誤訳訂正１７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５８】
装置の使用では、高度に平行な、拡張した、コヒーレントな、直線偏光したレーザービーム(１６)を、プラットホーム(１０)の検知区域に入射させるようにし、そしてこのプラットホームを通じて透過した光を検出器(２０)により検知させ、反射光をＣＣＤカメラ(２１)によって記録する。拡張した励起ビームの直径は、プラットホーム(１０)のサイズを超えている。検出器(２０)がプラットホームを通じて透過する光を有効に検出しなくなるまで、ビームのプラットホームへの入射角度をプラットホームの回転によって調整する。これは、エバネッセント共鳴がプラットホームの検知区域で起こっている場所である、共鳴位置の存在を示す。この条件下で、カメラ(２１)によって記録された反射光の強度は最大値に達し、カメラからのデータが、処理のためにデータ処理ユニット(２２)によって取得される。
【誤訳訂正１８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６３】
このことは、試料から創成され得るルミネセンス、例えば蛍光、の強度がまた１００倍増加することを意味する。プラットホームのこの機能は、光を回折する体積格子として働く回折構造の観点から、そして回折ビームが干渉して共鳴条件を創成し、そこでは最初の境界面から反射される光および層(３２)の上部表面であるトップ境界面から反射される光が構築的に干渉して反射最大値を生じるという観点から見ることができる。共鳴条件下では、レーザーエネルギーは、薄い層(３２)の厚さに実質的に閉じ込められ、それよって電場強度を増加させる。与えられたレーザー波長および波形構造の周期に対しては、共鳴は角度依存性である。角度依存性の共鳴は、典型的には、＞０.１°、好ましくは０.５°もしくはそれより大きい、例えば１.０°もしくはそれより大きい最大高の半値幅(ＦＷＨＭ)を有する。この共鳴幅は、溝の深さ、負荷サイクルおよび波形構造の形状に依存する。導波路回折格子のカップリング挙動と比較すると、記載した共鳴のＦＷＨＭは数桁のオーダーでより大きい。
【誤訳訂正１９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６６】
第一段階はプラットホームを清浄にし、プラットホーム表面から不純物を除去することである。クリーニング手順は、多くの手段、例えば紫外線クリーナーにより、プラズマクリーニングにより、もしくは酸、塩基、溶媒、ガスおよび液体のような物質を用いる化学的クリーニングによって達成することができる。
【誤訳訂正２０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７０】
炭化水素鎖を付与する官能化された有機分子を用いてプラットホームをより疎水性にすることができ、極性基を用いてプラットホームをより親水性にすることができ、または、イオン性基もしくは潜在的イオン性基を用いて電荷を導入することができる。例えば、ポリエチレングリコール(ＰＥＧ)もしくはその誘導体を用いてプラットホームを親水性にすることができるが、それはタンパク質のプラットホーム／表面への非特異的吸収を阻止する。
反応性もしくは光反応性の基をプラットホームの表面に付着させて、これをさらなる反応段階のためのアンカー基として役立たせてもよい。
【誤訳訂正２１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７２】
ＳＡＭをまた、他の捕獲分子、例えばＤＮＡ／ＲＮＡ／ＰＮＡ鎖、の固定化のために用いてもよい。この場合に、例えばアミン基もしくはエポキシ基で修飾された、両親媒性ホスフェート／ホスフェートもまた用いることができる。直接ＳＡＭに、例えば、アミンで修飾されたＳＡＭに、または、プラットホームをアミンの有機誘導体、例えば脂肪族アミンもしくは分岐脂肪族アミン、または芳香族もしくは非芳香族の環状構造を含むアミン、またはヘテロ原子を含むアミン、または官能基を含むアミン、またはそれらの組み合わせを含むアミン、またはいかなる他の有機、ヘテロ有機、および／もしくは無機分子(例えば、エポキシで修飾したＳＡＭ)と反応させた後に、のいずれかで捕獲分子をカップリングさせることができる。
【誤訳訂正２２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７３】
接着促進層は、表面特性、例えば、疎水性、接触角度、電荷密度を操作するために多重層からなってもよい。加えて、上述の方法のどれかによりプラットホームに付着した層は、次の、後続層のため、または捕獲分子もしくは誘導体化された捕獲分子のカップリングのためのいずれかに必要とされる化学的機能性を提供もしくは導入し得る。化学的リンカー分子もしくは光化学的リンカーの付着はまた、捕獲分子のプラットホームへの付着を可能にする中間層と見なし得る。
【誤訳訂正２３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７４】
異なる官能性をもつ層／分子とのこの制御された組み合わせは一般的に、超分子化学（J-M. Lehn, Supramolecular chemistry-Scope and perspective. Molecules, supermolecules, and molecular devices, (Nobel Lecture, 8. 12. 1987), Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 27, 89, 1988.）に帰するとされている。得られた超分子構造は、個別の層のために用いる個別の分子の官能性とは異なる官能性を提供する。本発明のためには、中間層はまた、捕獲分子もしくは修飾された捕獲分子がプラットホームに付着される以前に、Foersterエネルギー移動(ＦＲＥＴ)もしくは光誘導電子移動という意味でのエネルギードナーもしくはエネルギーアクセプター／失活剤または電位感受性発光団のいずれかとして用い得る発光団を、このような層システムに導入できる。
【誤訳訂正２４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７８】
接着促進はまた、プラットホームの表面上への微孔性の層もしくはゲルの固着によって達成することができて、この微孔性の層もしくはゲルは、捕獲要素の固着を助長し、必要とされるインキュベーション時間を短縮しかつ後の測定の感度を増強する。この微孔性の層は、ポリマー、モノマー、分子集成体および超分子集成体のような有機化合物から成り得るか、もしくはそれはガラス、水晶、セラミック、シリコンおよび半導体のような無機化合物から成り得る。
【誤訳訂正２５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７９】
接着促進層を、例えば、３−(グリシドオキシプロピル)トリメトキシシラン(ＧＯＰＴＳ)を使用するシラン化によって作成してもよい。この接着促進層は、表面性質を変えるため、さらに化学的に修飾してもよい。例えば、ＧＯＰＴＳ−シラン化プラットホームは、プラットホームの疎水性／親水性バランスを操作するために官能化された飽和もしくは不飽和有機化合物と反応させてもよく、そしてそれによってプラットホームの接触角を変える。
【誤訳訂正２６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８１】
捕獲もしくは認識要素の二次元アレーを、先にプラットホーム上に固着させた接着促進層の３−Ｄ表面上に形成する。このアレーの捕獲要素は種々の方式で固着し得る。捕獲要素を固着させるために用い得る技法としては、圧電性アクチュエーター、電磁アクチュエーター、圧力／ソレノイドバルブアクチュエーターもしくは他の力変換器を有するインクジェットプリンター；熱電アクチュエーターを使用するバブルジェットプリンター；もしくはレーザーアクチュエーター；リングピンプリンター；ピンツールスポッター；ＷＯ９０／０３３８２もしくはＷＯ９２／１００９２に記載のようなオンチップ合成；ＷＯ９８／２７４３０に記載のような超大規模の固定化ポリマー合成(ＶＬＳＩＰＳ)；接着促進層の表面に固定された特別デザインの光反応性基の光活性化／光脱保護；ミクロ接触印刷；ミクロ接触筆記ペン；製図ペンもしくは捕獲要素のパッド移動／刻印；例えばＰＤＭＳ(ポリジメトキシシラン)を用いてＰＭＭＡマスターのようなポリマーからの注型によって、または、微小機械的もしくは機械的手段によって、または捕獲要素の局所的配布のためのエッチング技法によってなされる、微小流体工学チャネルおよびフローセル；光アブレーションによる捕獲要素の構造化；または前述の技法の一つもしくは他の光固定化技法のどれかを使用する捕獲要素のゲルパッド上への固着が挙げられる。
【誤訳訂正２７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８２】
プラットホーム上に固着され得る捕獲もしくは認識要素は多種多様である。一般的に述べると、用いられる捕獲分子は親和性反応ができなければならない。本発明で用い得る認識もしくは捕獲分子の例は以下のとおりである：
ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド(およびそれらの化学的誘導体)
ＤＮＡ(二本鎖もしくは一本鎖)  ａ)直線型(およびそれらの化学的誘導体)、ｂ)環状型(例えば、プラスミド、コスミド、ＢＡＣ、ＡＣ)
全ＲＮＡ、メッセンジャーＲＮＡ、ｃＲＮＡ、ミトコンドリアＲＮＡ、人工ＲＮＡ、アプタマーＰＮＡ(ペプチド核酸)
ポリクローナル、モノクローナル、組み換え型の、改変した抗体、抗原、ハプテン、抗体ＦＡＢサブユニット(必要により修飾した)
タンパク質、修飾したタンパク質、酵素、酵素コファクターもしく阻害剤、タンパク質複合体、レクチン、ヒスチジン標識タンパク質、ヒスチジンタグ成分(ＨＩＳタグ)のためのキレーター、タグ付タンパク質、人工抗体、分子インプリント、プラスティボディー膜受容体、全細胞、細胞断片および細胞性下部構造、シナプス、アゴニスト／アンタゴニスト、細胞、細胞内小器官、例えばミクロソーム
ベンゾジアゼピンのような小分子
プロスタグランジン
抗生物質、薬剤、代謝物、薬剤代謝物
天然物
炭水化物および誘導体
天然および人工リガンド
ステロイド、ホルモン
ペプチド
生来もしくは人工ポリマー
分子プローブ
天然および人工受容体
そしてそれらの化学的誘導体
キレート試薬、クラウンエーテル、リガンド、超分子集合体
指示薬(ｐＨ、電位、膜電位、酸化還元電位)
組織試料(組織ミクロアレー)
【誤訳訂正２８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８３】
捕獲分子の活性もしくは密度は数多くの方式で最適化することができる。その上に固着した捕獲要素を持つプラットホームは、印刷した場所を再水和させるために、規定の期間の間、飽和水蒸気雰囲気中でインキュベートし得る。これは、捕獲分子の密度を最適化する、即ち、単位区域あたりの利用可能な結合部位を増加させる。引き続いて、インキュベートしたチップは、規定の期間の間、例えば、ｃＤＮＡの捕獲分子については８０℃で１分間、焼付けし得る。このプラットホームは少量の純水または何らかの他の適当な液体もしくは溶液で湿らすことにより洗浄し、捕獲要素が過剰の非結合材料により相互汚染されることを避け得る。これらの操作の後に、ここで作成したプラットホームは使用するまでデシケーター中に保存し得る。チップを使用する前に、乾燥した捕獲要素を再活性化／再水和し、さらに過剰の非結合捕獲要素／緩衝液の残渣を除去するために、０.１から１０ｍｌのハイブリダイゼーション緩衝液もしくは他の適当な溶液／液体で追加的な洗浄をする操作が必要であるかもしれない。ＤＮＡ捕獲分子の場合には、この洗浄操作は、５０および８５℃の間の温度で実施するときに、最も効果的であると見出されている。
【誤訳訂正２９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８８】
図６に示すような配置は、全部のルミネセンス、例えば、蛍光、全体のプラットホームの画像、を測定の間に部品を移動させる必要なく、一回のショットで捕獲する。そのような非走査性のデバイスは非常に簡単で安価であり得て、そしてポイントオブケアの応用もしくはポータブルシステムに特に適している。もう一つの典型的な配置は、光学エレメントを使ってコヒーレントレーザー光をマイクロメートルの寸法にまで閉じ込めることにより焦点における電界を増加させ、そして一つもしくは複数の検知区域を走査する。
【誤訳訂正３０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８９】
広範囲の種類の試料を本技法により分析できることは高く評価されるであろう。一般的に、試料は分析すべき全体の溶液として採取され、そしてこれは検知すべき一つもしくは多くの物質を含む。試料は、精製しかつ処理をした組織の溶液でもよく、もしくは臨床目的の試料を含むバイオプシーおよび診断研究開発から得られる他の材料でもよい。試料はまた、卵黄のような生体媒質、血液、血清および尿のような体液もしくはそれらの成分であってもよい。その試料はまた、土壌もしくは植物部分のような天然もしくは合成媒体からの表面水、溶液または抽出液、生物学的プロセスからの液体または合成的液体であってもよい。
【誤訳訂正３１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９０】
測定を行うためには、図面の図４ａおよび４ｂに示されたタイプの試料セルの中に試料を導入してもよい。このセルは、ＰＭＭＡのようなポリマーから作ったハウジング(４１)を備えている。このポリマーは、プラットホームの寸法に対応する寸法を持つ中心コンパートメント(４４)を規定するように機械加工されている。このコンパートメント(４４)の中にさらにくぼみを形成して、Ｏ−リング(４７)により端の周りでシールしたチャンバー(４６)を規定する。チャンバー(４６)はトップおよび底で開放している。分析すべき溶液は、フローライン(４５)を通じてＯ−リング(４７)内でチャンバー(４６)に導入し得る。フローライン(４５)内の流れはバルブ(４３)により制御することができる。セルはカバー(４９)を含むが、これはハウジング(４１)を覆って置かれかつそれに固定してセルのトップを閉鎖することができる。このカバー(４９)は窓(５０)を含むが、これはコンパートメント(４６)の真上に置かれ、それにより放射線がカバーを通してセル(４６)中に通過することを可能にする。
【誤訳訂正３２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９４】
プラットホームはまた、個別のマイクロタイターウェル中に一重もしくは多重のアッセイを実施するために、マイクロタイタータイプのプレート／デバイスに適合させることができる。これは、各々のマイクロタイタープレートの寸法に無関係に、全てのプレートタイプ：９６，３８４，１５３６もしくはそれ以上の数のウェルに対して達成できる。
【誤訳訂正３３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９９】
共鳴効果の特性化のために、平行ビーム(ＴＥ偏光)の強度を４ｍｍの直径区域に対して１００μＷに調節する(パワーメーターNewport NRC 1835)。プラットホームの法線および入射ビームの間の角度を異常反射(共鳴条件)の中心位置から１から２度回転させる。中心位置は２.５°にある。それから、プラットホームを５／１０００°刻みで回転させて(Newport NRCコントローラーPM 500)、透過ビームのパワーの変化を追跡する。共鳴角においては、元来の透過ビームの１％以下(＜１μＷ)が検出器に到達する。入射レーザービームのパワーは全て反射される(正反射性の反射ビーム：おおよそ１００％)。
【誤訳訂正３４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０４】
共鳴効果の特性化のために、平行ビーム(ＴＥ偏光)の強度を４ｍｍの直径区域に対して６００μＷに調節する(パワーメーターNewport NRC 1835)。プラットホームの法線および入射ビームの間の角度を法線入射から４度回転させる。それから、プラットホームを５／１０００°刻みで回転させて(Newport NRCコントローラーPM 500)、透過ビームのパワーの変化を追跡する。共鳴角においては、元来の透過ビームの０.５％以下(＜３μＷ)が検出器に到達する。入射レーザービームのパワーは全て反射される(正反射性の反射ビーム：おおよそ１００％)。
【誤訳訂正３５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０５】
プラットホーム１に比べてより深い溝に従ってプラットホーム２の共鳴幅が広がることにより、＋１および−１の回折オーダーの共鳴カーブが重復して、正確に法線入射に位置する単一の、極度に広い共鳴を創成する。異常反射に対する共鳴の最大の全半値幅(ＦＷＨＭ)は我々の場合４.２°である。全部の変換器の表面(１８ｍｍ×１８ｍｍ)上での反射の均一性は９５％より良い。
【誤訳訂正３６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０８】
ｃ）検出のセットアップ
用いた検出のセットアップを図６に図式的に示している。励起レーザー(６１)(ＨｅＮｅレーザー、６３３ｎｍ、１.３ｍＷ)および２０×ビームエキスパンダー(６４)を角度計(６３)上に一緒に取り付けた(６２)。ダイクロイックミラー(６８)を使って、拡張したレーザービームをプラットホーム(６７)に向けて当てた。レーザービームに対する回転中心はプラットホーム(６７)の金属酸化物層の平面に置かれる。プラットホームの表面から発光した蛍光をダイクロイックミラー(６８)を経由して集めた。もう一つの蛍光フィルター(６５)を用いて蛍光(６９)を励起光から分離した。Nikon Noctレンズ(絞り数値１.２)を装備し冷却したＣＣＤ(Astrocam EEV 30/11)カメラ(６６)を用いて表面プラットホームからの蛍光画像を測定した。角度計を使うと、プラットホームの表面法線を基準として、入射する拡張したレーザービームの角度の調整が可能になる。エバネッセント共鳴条件下(即ち、入射する拡張したレーザービームを、プラットホームを通して透過した光が最小値を示す角度に調整した)において蛍光画像を撮影した。
【誤訳訂正３７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０９】
ｄ）チップカートリッジ
プラットホームを特別にデザインしたカートリッジ(４1) に取り付けたが、これはＰＭＭＡポリマーから作られ図４に図式的に示している。くぼみ(４４)はこの寸法(１８×１８×０.７ｍｍ３)を持ち、インキュベーションチャンバー(４６)は０.２ｍｍの深さであった。インキュベーションチャンバー中の溶液は、ＰＭＭＡ中に穴をあけた直径０.５ｍｍのフローチャネル(４５)を経由して交換した。カートリッジの内容物は入口／出口(４２)を経由して交換した。プラットホームは、検知区域をインキュベーションチャンバーに向けて、カートリッジ中の対応するくぼみに置いた。カバー(４９)を固定してプラットホームをシーリングに押し付けた。カバーに機械工作／超精密機械加工した窓(５０)は、励起光によるイルミネーションおよびプラットホーム表面の蛍光画像の捕捉を可能にした。カートリッジのバルブからバルブまでの容積は約１４μLであった。
【誤訳訂正３８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１６】
３．増強した増幅を例示する実施例
丁度上述した実施例に従って、プラットホームを作成し、処置した。試料のインキュベーションに続いて、２枚の画像を図６を基準として上述したＣＤＤカメラの検出セットアップをもって撮影した。最初の画像はエバネッセント共鳴の条件に調整することなくエピ蛍光モードで撮影した(図７ａ、「エピ蛍光」)。第二の画像はエバネッセント共鳴条件下に撮影した(図７ｂ、「ＥＲ増強」)、即ち、入射レーザービームの角度を、チップを通る透過光が最小値を示すまで、表面法線を基準として調整した。画像のプロフィール(正味のシグナル)は、ＥＲ増強で測定した強度が従来のエピ蛍光で得た強度より約1００倍強いことを示している。
【誤訳訂正３９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１９】
ｂ．捕獲要素の固定化
二つの異なるアミノ−修飾オリゴヌクレオチド(捕獲プローブ)をシラン化プラットホーム上に碁盤縞様レイアウト(５×５＝２５スポット)で印刷した。ＧＭＰ  ４１７リングピンアレーヤーを印刷に用いた(Genetic Microsystems, Boston, MA)。捕獲分子として使用したオリゴヌクレオチドの濃度は１００ｎｍｏｌ／ｍｌであった。スポットの直径は１２５マイクロメートルで中心から中心の距離は５００マイクロメートルであった。二つのオリゴヌクレオチドはｃＰＭ(「捕獲完全マッチ」)およびｃＭＭ(「捕獲ミスマッチ」)と呼ばれ、一つの塩基においてのみ異なっている：
ｃＰＭ：３’ＣＡＣＡＡＴＴＣＣＡＣＡ５’−ＮＨ２
ｃＭＭ：３’ＣＡＣＡＡＣＴＣＣＡＣＡ５’−ＮＨ２
ｃＰＭおよびｃＭＭは５’端にあるアミノ基で標識化されたが、これによりオリゴヌクレオチドがエポキシ−官能化プラットホームに共有結合することができる。この寸法(１８×１８ｍｍ２)でプラットホームの中心にアレーを印刷した。引き続いて、プラットホームを飽和水蒸気雰囲気で密閉容器中で一夜インキュベートした。翌日、チップを乾燥し、５０％尿素水溶液で洗浄した。別法として、ウシ血清アルブミン水溶液(ＢＳＡ、１ｍｇ／ｍｌ)を用いた。ブロッキング後、チップを脱イオン水で洗い流して、窒素気流で乾燥した。
【誤訳訂正４０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１２３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１２３】
ｆ．アッセイ処理
プラットホームを最初にハイブリダイゼーション緩衝液(ＨＢ)１ｍｌで二回、洗浄の間を１分間遅らせて、洗浄した。引き続いて、ＰＭアナライト溶液(３０ｐＭ)約１５マイクロリットルをフローカートリッジ中へ注入した。３０分間のインキュベーション後、プラットホームを１ｍｌのＨＢで洗浄し、そして蛍光画像(図９ａ、「ＰＭ」)をチップの共鳴位置で撮影した。引き続いて、２×１ｍｌの５０％尿素水溶液を、注入の間を２分間遅らせて、注入することにより、結合した蛍光標識オリゴヌクレオチドを除去した(剥ぎ取った)。さらに２分後、２×１ｍｌのＨＢを注入の間を２分間遅らせて、注入することによりチップを洗浄し、そして蛍光画像(図９ｂ、「再生」)をチップの共鳴位置で撮影した。最後に、おおよそ１５マイクロメートルのＭＭアナライト溶液(３０ｐＭ)をフローカートリッジ中へ注入した。３０分間のインキュベーション後、プラットホームを１ｍｌのＨＢで洗浄し、そして蛍光画像(図９ｃ、「ＭＭ」)をチップの共鳴位置で撮影した。全ての工程は室温で実施した。
【誤訳訂正４１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１２６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１２６】
５．抗体免疫アッセイの実施例
一次抗体はセンサープラットホームの表面上で空間的に離されて固定化される(例えば、碁盤縞パターン)。検出すべき抗原およびルミネセンスで標識した二次抗体の結合(検出すべき個別の抗原の二次エピトープの検出に用いる)は、先ず、異なる濃度で種々の抗原を含むアナライトと共に、それからルミネセンスで標識した二次抗体と共に、連続的インキュベーションにより達成される。
【誤訳訂正４２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１２８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１２８】
表面に結合したルミネセンスで標識した免疫複合体をＥＲセットアップで定量化した。(適当な緩衝液、ＰＢＳ、で前洗浄および、必要により、後洗浄)。
【誤訳訂正４３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３０】
ｂ．捕獲要素の固定化
二つの異なるモノクローナル抗体、抗−ヒト絨毛性ゴナドトリピン(抗−ｈＣＧ)および抗−インターロイキン６(抗−ＩＬ６)、を飽和水蒸気雰囲気で疎水性プラットホーム上に碁盤縞様レイアウト(４×４アレー、それぞれの抗体について８スポット)で印刷した。捕獲抗体溶液の濃度は、それぞれ、４００および１００マイクログラム／ｍｌであった。インクジェットプリンターを印刷に用いた(Microdrop, Norderstedt, Germany)。スポットの直径は１５０マイクロメートルで中心から中心の距離は３２０マイクロメートルであった。印刷したアレーを密閉容器中で２時間の間、飽和水蒸気雰囲気でインキュベートした。引き続いて、チップを乾燥し、１０％のウシ血清アルブミン(ＢＳＡ)、５％の蔗糖および０.０２％のアジ化ナトリウムを含むリン酸塩で緩衝化した生理食塩水１０ｍｌで洗い流した。この洗浄工程は、ＢＳＡの吸着によりチップの疎水性表面をブロックし、そして、捕獲要素が固定化されてしまった後では、表面をさらに親水性にした。その結果、このブロッキング操作は、増加したバックグラウンド蛍光をひき起こすかもしれない、タンパク質のプラットホームへの非特異的結合を防止した。ブロッキング後、チップを脱イオン水で洗い流して、窒素気流で乾燥した。プラットホームは使用するまで冷蔵庫中に保存した。
【誤訳訂正４４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３３】
ｅ．アナライト／試料
三つのアナライト溶液を作成した：
Ｉ）５００ｎｇ／ｍｌのＣｙ−５標識ＩＬ６を含む溶液、抗原
ＩＩ）５０ｎｇ／ｍｌのＣｙ−５標識ヒト絨毛性ゴナドトリピン(ｈＣＧ)を含む溶液、抗原
ＩＩＩ）５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ６および１００ｎｇ／ｍｌのＣｙ−５で標識したポリクローナル抗ＩＬ６抗体を含む前インキュベートした混合物(１時間)。
１％のＢＳＡを含むＰＢＳ、ｐＨ７.０をアナライト用の溶媒として用いた。
【誤訳訂正４５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３４】
ｆ．アッセイ処理
プラットホームをカートリッジ中へ取り付けて、１ｍｌの１％ＢＳＡを含むＰＢＳ、ｐＨ７.０で洗浄することにより、三つのプラットホーム(６ｂ．項で記載のような)をアナライトのインキュベーション(ｅ．項参照)用に作成した。引き続いて、約１５マイクロリットルのアナライト溶液、Ｉ)、ＩＩ)およびＩＩＩ)、をフローカートリッジ中へ注入した。インキュベーション時間はＩ)およびＩＩ)に対してそれぞれ２時間であった。アナライトＩＩＩ) に対しては、インキュベーション時間は１２時間であった。アナライトのインキュベーションの後、プラットホームを１ｍｌの１％ＢＳＡを含むＰＢＳ、ｐＨ７.０で洗浄した。蛍光画像は、全チップからはオフ−共鳴条件下(エピ蛍光、共鳴角から約７°離して)で、それぞれのチップについては共鳴条件下(共鳴、入射光は法線を基準として約２.５°)で、撮影した。得られた画像およびデータを図１０に示す。
全ての工程は室温で実施した。
【誤訳訂正４６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３７】
横列のＩ)の結果については、シグナル強度はプラットホームのエピ蛍光モードにおける４６カウントから共鳴モードにおける１１００カウントへ増加する。これは、スポット平均値に関して約２４倍の増強に相当する。シグナル／ノイズ比は７.０(エピ蛍光)から６９.２(共鳴)へ改善し、１０倍に相当する。
【誤訳訂正４７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３８】
横列のＩＩ)の結果については、シグナル強度はプラットホームのエピ蛍光モードにおける３２カウントから共鳴モードにおける６４６カウントへ増加する。これは、スポット平均値に関して約２０倍の増強に相当する。シグナル／ノイズ比は５.０(エピ蛍光)から７５.１(共鳴)へ改善し、１５倍に相当する。
【誤訳訂正４８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３９】
横列のＩＩＩ)の結果については、シグナル強度はプラットホームのエピ蛍光モードにおける２５カウントから共鳴モードにおける２９６カウントへ増加する。これは、スポット平均値に関して約１２倍の増強に相当する。シグナル／ノイズ比は３.８(エピ蛍光)から４４.１(共鳴)へ改善し、１２倍に相当する。
【誤訳訂正４９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１４２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１４２】
上述の説明においては、検知領域の全部の区域が照射される。また、末端の捕獲要素が順番に励起されるように、非拡張焦点ビームを持つレーザーを使用して、検知領域を走査することも可能である。この配置は、ＣＣＤカメラより安価な光検出器、例えば光増幅器、の使用を可能にし、もしくはアバランシェフォトダイオードを使用することができる。また、この配置は、レーザーエネルギーがさらに閉じ込められる事実により、感度をさらに増強するであろう。
【誤訳訂正５０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１４５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１４５】
本発明に従うプラットホームは多くの応用に使用することができるが、その内の下記のものは非限定的リストである。
−遺伝子発現
−ゲノム医学
−薬理ゲノム医学
−毒性ゲノム医学
−毒性プロテオミックス
−遺伝学
−薬理遺伝学
−毒性遺伝学
−エクソン／イントロン発現プロファイリング
−ヒト白血球抗体(ＨＬＡ)の判定
−スプライシング変異体の分析
−プロテオミックス(チップ上のタンパク質アッセイ)
−患者のモニタリング(薬物、代謝物およびマーカー)
−ポイントオブケア、「個人別医療」
−診断学
−プロテオミックス用のチップ上の二次ゲルもしくは一般的な二次分離
−ＳＮＰ(単一ヌクレオチド多形)、ミニシークエンシング
−高スループットスクリーニング
−コンビナトリアル化学
−タンパク質−タンパク質相互作用
−分子相互作用
−チップを用いたタンパク質−抗体およびペプチド相互作用
−緑色蛍光タンパク質(ＧＦＰ)
−ｉｎ−ｓｉｔｕハイブリダイゼーション
−共焦点顕微鏡法
−蛍光相関分光法
−従来の顕微鏡法
−ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ
【誤訳訂正５１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図面の簡単な説明
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図面の簡単な説明】
【図１】  光学的パラメーターを分析するための品質制御装置および本発明に従ったプラットホームのエバネッセント共鳴条件の概略図である。
【図２】  本発明に従ったセンサープラットホームの概略図である。
【図３】  プラットホームとの関連においてエバネッセント場プロフィールを示す概略図である。
【図４ａ】  チップカートリッジを示す概略図である。
【図４ｂ】  チップカートリッジを示す概略図である。
【図５】  本発明の一つの実施例におけるアレーレイアウトを示す。
【図６】  本発明の一つの実施例に従って蛍光を測定するために用いるレイアウトを図式的に示す。
【図７】  先行技法および本発明によって得られた結果の比較を示す。
【図８】  プラットホームの別の形を図示する。
【図９ａ】  実施例５に記載の共鳴条件下で本プラットホームを用いて、３０ｐｍのＰＭアナライトのインキュベーションの後に得られた蛍光画像を示す。
【図９ｂ】  実施例５に記載の共鳴条件下で本プラットホームを用いて、再生のインキュベーションの後に得られた蛍光画像を示す。
【図９ｃ】  実施例５に記載の共鳴条件下で本プラットホームを用いて、３０ｐｍのＭＭアナライトのインキュベーションの後に得られた蛍光画像を示す。
【図１０】  実施例６に記載のエピ蛍光および共鳴条件下で本プラットホームを用いて得られた蛍光画像およびデータを示す。