【手続補正書】
【提出日】平成19年5月10日(2007.5.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１つもしくはそれ以上の培養スペースに固定化した哺乳動物細胞を培養するステップを含んで成る、免疫学的に活性な組織の細胞組織および免疫学的機能を模倣する哺乳動物細胞および／または組織を培養するための方法であって、
（ａ）少なくとも１つの無細胞供給液体または規定された気体混合物、および
（ｂ）前記固定化した哺乳動物細胞のものとは異なる細胞型の細胞を含有する少なくとも１つの移動相であって、前記細胞が調節特性を有するかまたは後に抗体を形成し得る、前記移動相、
を接触させる、方法。
【請求項２】
（ｉ）前記培養スペースが、好ましくは、ゲル、オープンポア発泡体類等などの多孔質材、織布もしくは不織布等から選択されるマトリクスを含んで成り、および／または
（ｉｉ）前記哺乳動物細胞がヒト細胞であり、中でも造血幹細胞、樹状細胞、単球、マクロファージもしくは他の一次または形質転換細胞が特に好ましく、および／または
（ｉｉｉ）前記無細胞供給液体が、細胞および／または組織に適合した栄養溶液であり、および／または
（ｉｖ）前記規定された気体混合物が、標準の空気飽和と比べて３７℃で８０−１００％の培養液量の酸化を確実にするように適合されており、好ましくは、前記規定された気体混合物が２０−９５％Ｏ2（ｖ／ｖ）を含有し、
（ｖ）移動相の細胞が、ＴおよびＢリンパ球等などの単核細胞であり、および／または
（ｖｉ）前記無細胞供給液体および前記移動相が連続的に変更しており、および／または
（ｖｉｉ）前記無細胞供給液体がさらに前記組織および／または細胞によって形成される代謝産物／細胞産物を除去するために役立ち、および／または
（ｖｉｉｉ）前記無細胞供給液体および前記移動相が異なる流量を有する、
請求項１に記載の方法。
【請求項３】
（ｉ）前記培養スペースのマトリクスが、前記移動相、前記マトリクス内の細胞の移動、および局所流勾配（微環境）の形成によって十分な流入を可能にする多孔性を有し、好ましくは、３０μｍより大きい多孔性を有し、および／または
（ｉｉ）無細胞供給液体または気体の投与および除去が、微多孔質膜を介して提供される、
請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記培養スペースにおいて培養された細胞が、自己組織化および濃度勾配の形成が可能である１つもしくはそれ以上の細胞集団から成る、請求項１〜３のいずれか一項以上に記載の方法。
【請求項５】
（ｉ）前記移動相が、培養系における全細胞と組織集団との間の臓器典型的相互作用が確保され（Ｔリンパ球および樹状細胞とともにＢリンパ球）、および／または前記移動相の亜集団、好ましくは、抗原特異的リンパ球が、好ましくは、抗原誘発胚中心の形成との、相互作用のために一時的に固定化されるようなやり方で前記培養スペースを流れ、および／または
（ｉｉ）流れの方向に対し横断する、または反対方向の細胞の移動が可能である、
請求項１に記載の方法。
【請求項６】
選択抗原（標的抗原）に対するヒト抗体およびヒト免疫担当細胞の選択的回収に適切である、請求項１〜５のいずれか一項以上に記載の方法。
【請求項７】
前記固定化細胞が標的抗原を提示する樹状細胞であり、および前記移動相中の前記細胞がＴリンパ球であって、かつ、Ｂリンパ球が続いてまたは同時に添加される、請求項１〜６のいずれか一項以上に記載の方法。
【請求項８】
前記抗原が微粒子に結合され、固定化細胞および移動細胞の共培養の前または間のいずれかに抗原提示細胞に与えられる、請求項６または７に記載の方法。
【請求項９】
細胞および／または組織を安定させるために適切な少なくとも１つの培養スペース（２）またはマトリクス（８）、および異なる流体を前記スペース（２）またはマトリクス（８）に送達する少なくとも２つの流体送達手段（１４、１６；２７、３８）を含んで成り、それによって少なくとも１つの無細胞供給流体または供給気体（４）、および少なくとも１つの移動細胞相（６）が供給される、細胞および／または組織を培養するためのデバイス。
【請求項１０】
（ｉ）前記培養スペース（２）がマトリクス（８）を含有し、および／または
（ｉｉ）液体流（４、６）が、前記培養スペース（２）または前記マトリクス（８）の周表面に沿った、前記培養スペース（２）または前記マトリクス（８）に接する細胞浸透表面（１０、１２）に沿って流れ、または前記マトリクス（８）を拡散もしくは流れ、および／または
（ｉｉｉ）前記液体流（４、６）を浸透ライン（１４、１６）を通じて前記培養スペース（２）または前記マトリクス（８）に供給することができ、前記浸透ラインの少なくとも１つが前記移動相に浸透性であり、および／または
（ｉｖ）前記少なくとも１つの供給液体（４）が、前記培養スペース（２）または前記マトリクス（８）を通じてまたはこれに沿って、浸透ライン（１４、１６）、特に毛細管等を通じて、供給されうることを特徴とする、
請求項９に記載のデバイス。
【請求項１１】
前記マトリクス（８）のホロースペースが、前記移動相の細胞の細胞径の少なくとも２倍の直径を有することを特徴とする、請求項１０に記載のデバイス。
【請求項１２】
前記マトリクス（８）が、好ましくは、約１〜１５ｍｍ、より好ましくは、約２〜１０ｍｍの厚さを有するシートであることを特徴とする請求項１０または１１に記載のデバイス。
【請求項１３】
（ｉ）前記少なくとも１つの移動細胞相（６）が横断流でマトリクス（８）を流れ、および／または
（ｉｉ）好ましくは水平であるマトリクス（８）が、それを通じて前記少なくとも１つの移動細胞相（６）が横断流で流れるホローチャンバー（２０ａ、２０ｂ）に維持されており、および／または
（ｉｉｉ）前記マトリクス（８）が、細胞浸透性の支持手段（１８ａ、１８ｂ）、特に、スクリーンによってその１つもしくは２つの側面上で支持されており、前記支持手段（１８ａ、１８ｂ）の孔サイズが、好ましくは、約３０〜１００μｍであり、および／または
（ｉｖ）前記移動相の流れが、外部灌流型流体工学（ポンピング）または重力流動（周期的回転）によって確立されることを特徴とする、
請求項１０〜１２に記載のデバイス。
【請求項１４】
前記少なくとも１つの供給液体（４）が、いくつかの多孔質ライン（１４）、特に、好ましくは、前記マトリクス（８）の内部で平行に走っている毛細管を通じて前記マトリクス（８）に供給されうるが、前記ライン（毛細管）の直径は、好ましくは、５０〜１５０μｍ、より好ましくは、約８０〜１２０μｍであり、前記ライン（１４）（毛細管）の多孔性が約３０〜５００ｋＤａであり、および／または、好ましくは、平行に走っている前記ライン（１４）（毛細管）の相互距離が、毛細管径の２〜１０倍、好ましくは、３〜５倍であることを特徴とする、請求項１０〜１３に記載のデバイス。
【請求項１５】
前記少なくとも１つの供給液体（４）の前記ライン（１４、１６）および前記移動細胞相のラインが前記培養スペース（２）またはマトリクス（８）の外側面に沿って提供されることを特徴とする、請求項１０〜１２のいずれかに記載のデバイス。
【請求項１６】
（ｉ）組織状培養に適切な微環境が、濃度勾配の形成およびこの相の最適な供給を、すなわち、前記マトリクス（８）に存在する固定細胞相を通じて少なくとも１つの細胞および組織集団の連続的または非連続的に方向づけられた制御可能な流れによって確保する前記マトリクス（８）内で形成されており、および／または
（ｉｉ）前記移動細胞相を再循環し、または残りの回路中で沈降なしに直接通過させることができ、および／または
（ｉｉｉ）抗原を必要に応じで前記培養スペース（２）に適用することができ、および／または
（ｉｖ）それによって細胞または産物の収穫が、好ましくは、機械的、動的、および／または酵素的機序によって実行されうる手段が提供され、および／または
（ｖ）請求項１〜８のいずれか一項に規定された方法を実行するのに適することを特徴とする、
請求項９〜１３のいずれか一項以上に記載のデバイス。
【請求項１７】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法によって得られる哺乳動物細胞または組織。