(57)【要約】【課題】  アルコール性肝障害及び非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)の発症抑制作用及び治癒作用を有するイノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分として含むことを特徴とする肝障害の治療・予防方法、食品または飼料を提供するものである。本発明の肝治療剤は有効に肝障害、特に肝癌、肝硬変、肝炎、脂肪肝等を予防または治療する効果を有する。【解決手段】  上記の物質を有効成分とする組成物からなるアルコール性肝障害及びＮＡＳＨに対する発症抑制作用及び治癒作用を有することを特徴とする肝臓疾患予防・治療用飲食物或いは飼料である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分としていることを特徴とするアルコール性肝疾患と非アルコール性脂肪性肝炎の予防剤。
【請求項２】
イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分としていることを特徴とするアルコール性肝疾患とNASHの治療剤。
【請求項３】
イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分として混入した請求の範囲第１〜２項いずれかを目的とする飲食品または飼料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸、又はそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分としたアルコール性肝疾患と非アルコール性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis：NASH)の治療と予防に適用した医薬品、飲食品並びに飼料としての用途に関わる。
【背景技術】
【０００２】
近年わが国におけるアルコールの総消費量は著明な増加を示し、飲酒者の増加のみならず、成人１人当りのアルコール消費量も増加していると共に、アルコール性肝障害者の数も増加傾向にあり、アルコール性肝障害は現代日本の飲酒状況をみると生活習慣病と呼ぶにふさわしく、その中の重要な位置を占めていると考えられる。こうしたアルコール性肝障害の具体的症状としては、アルコール性脂肪肝、アルコール性肝炎、アルコール性肝線維症、アルコール性肝硬変、或いはアルコール性脂肪肝によって誘発するアルコール性高脂血症等を挙げることができる。
【０００３】
一方、昨今世界的に重要視され、近年に至ってアルコール性肝疾患と類似の病態が数多く報告されているNASHがある。これは通常の脂肪肝の経過中に原因不明の炎症が加わり肝機能が増悪し、飲酒もしないのにまるで大酒のみのような肝機能すなわちAST、ALT、γ−GTPの著増を示し、肝臓の組織もアルコール性肝障害に類似した像を呈する。NASHは、急増する肥満や糖尿病と密接に関連しており、欧米では以前より多く、我が国では比較的少ないとされてきたが、年々増加している。NASHになるとアルコール性肝障害と同様に肝臓の線維化が進み、肝硬変への進展をたどる。
【０００４】
米糠に含有されているフィチン酸(イノシトール六リン酸)およびイノシトールがこれらの疾患に対して予防、もしくは治療に有用と推測出来る報告は以下の通りである。即ち、フィチン酸がオロチン酸投与によるラットの肝臓への脂質の蓄積を抑制することが報告されている［J. Jpn. Soc. Nutr. Food Sci.、Ｖｏｌ．５０， ４（１９９７）］。また、ショ糖を主な炭水化物源にした餌でラットを飼育すると肝臓中に著しい脂肪の蓄積が見られるが、フィチン酸を同時に与えると脂肪の蓄積が著しく押さえられたと言う報告がある［Biosci. Biotech. Biochem., 59, 1159 (1995)］。特開平０１−２８７０３５号公報には、アルコールを投与したウサギにおいて、フィチン酸及びその塩が、血中のアルコールおよびアルデヒドの濃度を下げ、肝臓におけるアコールの代謝を促進することが示されている。また男性ボランティアが参加した実験において、フィチン酸及びその塩が、呼気中アルコール濃度の減少作用を有することが記載されている。一方、フィチン酸の構成成分であるイノシトールは、フィチン酸から製造されるが、イノシトールをコリンと同時にラットに投与すると、肝臓中の中性脂肪の蓄積が押さえられることが報告されている〔J. Nutrition, vol.110, 496 (1980)〕。また、ラット脂肪肝モデルで、イノシトール投与により、ラット肝臓の中性脂肪量の減少 ［Nutr. Res., Vol. 19, 9(1999)］ が確認されている。
【０００５】
しかしながら、フィチン酸は生物学的利用率が低いことから、大量に用いると、その金属キレート作用により微量金属の摂取が押さえられる可能性がある。フィチン酸は過剰な鉄とキレートを形成し、鉄存在下のヒドロキシラジカル生成反応を抑制することから ［Biochem. J. Vol. 294, Pt3. 1993］ 抗酸化剤として肝障害の抑制に関与すると考えられるが、一方で肝障害の治癒に必要な亜鉛の不足を生じることも懸念される。また、イノシトールを単独で大量に摂取すると、ヒトによっては緩下作用が見られるなどの問題点もある。これらの問題点に関してイノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分としていることを特徴とする単一物質、もしくは混合物は上記の懸念を解決出来ると考えられた。
【０００６】
【非特許文献１】J. Jpn. Soc. Nutr. Food Sci.、Vol.50,４(1997)
【非特許文献２】Biosci. Biotech. Biochem., 59, 1159 (1995)
【非特許文献３】J. Nutrition, Vol.110, 496 (1980)
【非特許文献４】Nutr. Res., Vol. 19, 9,(1999)
【非特許文献５】Biochem. J. Vol. 294, Pt3(1993)
【特許文献１】特開平01-287035号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明においていうアルコール性肝障害は、短期的にはアルコールの直接作用及びその代謝中間産物のアセトアルデヒドなどによるものとされている。これとは異なり、慢性的・長期的にアルコールを過剰摂取すると、肝臓における脂肪の合成促進が起こりアルコール性脂肪肝及びアルコール性高脂血症になる。脂肪酸のエチルエステル化が進行して、脂肪酸代謝が変調を来すと共に、同時に生成する酸素ラジカルの作用とも相まって、肝細胞の壊死・脱落をともなってグリソン鞘と中心静脈または肝静脈間に線維隔壁が出来、肉眼的に再生結節の形成が見られるようになる。これに伴い、肝小葉の構造が変わり、循環動態に異常を示し、びまん性の病変となり、さらに繊維化、肝硬変などの経過をたどる。従って、これらのアルコール性肝障害に対して望まれる予防、治療作用を持つ物質はアルコールの短期的摂取と長期的・慢性的な摂取による肝障害に対して有効な物質でなければならない。一方 NASHは、過食、肥満や糖尿病によって誘発される脂肪肝以降、アルコール性肝障害に類似した病体変化を示し、肝硬変、肝癌へと進行する。この場合、アルコールの長期的・慢性的な摂取による肝障害に対して有効な物質が有用であると考えられた。
【０００８】
特許文献１において、フィチン酸及び塩がアルコール投与時のウサギの血中アルコール濃度およアルコール摂取時のびヒト呼気中アルコール濃度をそれぞれ低下させる作用を有することが記載されているおり、短期的なアルコール性肝障害に有効であると考えられる。しかしながら、イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物が短期のアルコール性肝障害に対する発症抑制作用及び治癒作用を有するか否かについては示唆していない。
【０００９】
一方、イノシトールおよびフィチン酸が脂肪肝の進行を抑えるという報告がなされている。非特許文献１には、フィチン酸がオロチン酸誘発性肝障害に対する発症抑制作用を有することが記載されている。オロチン酸誘発性肝障害は、オロチン酸により肝臓での脂肪合成が促進され、さらに肝臓から血中への脂肪の移行が抑制され、それにより脂肪肝を誘発する肝障害であることが知られている。また、非特許文献２には、ショ糖を主な炭水化物源にした餌でラットを飼育すると肝臓中に著しい脂肪の蓄積が見られるが、フィチン酸を同時に与えると脂肪の蓄積が著しく押さえられたことが示されている。さらに非特許文献３では、コリンを除去した餌で飼育したラットでは、肝臓に脂肪が蓄積するが、イノシトールをコリンと同時に投与すると、肝臓中の中性脂肪の蓄積が押さえられることが報告されている。また、非特許文献４では、ラット脂肪肝モデルで、イノシトール投与によりラット肝臓の中性脂肪量の減少が記載されている。これらの結果はイノシトールおよびフィチン酸がアルコールの長期的・慢性的な摂取による肝障害、およびNASHに対して有効な物質であると考えられた。しかしながらこれらの報告には、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物が、慢性的・長期的なアルコール性肝障害、並びにNASHに対する発症抑制作用及び治癒作用を有するか否かについては示唆していない。
【００１０】
フィチン酸は生物学的利用率が低いことから、大量に用いると、その金属キレート作用により微量金属の摂取が押さえられる可能性がある。特に、亜鉛の吸収を妨げることは懸念される。一方、イノシトールを単独で大量に摂取すると、ヒトによっては緩下作用が見られるなどの問題点もある。
【００１１】
このような従来技術に鑑みて、本発明はイノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とするアルコール性肝障害或いはNASHに対する強力な発症抑制作用及び治癒作用を有する組成物を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸の混合物はフィチン酸の加熱加水分解、もしくはフィターゼ処理等によりにより容易に作成することが可能である。またそれらの塩の混合物は中和処理により容易に作成することが出来る。また高速液体クロマトグラフィーなどにより単体を調製することも容易である。
【００１３】
本発明者らは、イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分として用いて、そのアルコール性肝障害或いはNASHに対する発症抑制作用及び治癒作用の有無を実験を介して検討したところ、イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物がアルコール性肝障害或いはNASHに対する優れた発症抑制作用を有し且つアルコール性肝障害或いはNASHに対する優れた治癒作用を有することを見出した。
【００１４】
本発明は、このような発見に基づいて完成に至ったものである。本発明の目的は、ノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物からなる、アルコール性肝障害或いはNASHに対して際立った発症抑制作用及び治癒作用を有する医薬品・食品・飼料組成物を提供することにある。
【発明の効果】
【００１５】
以下に本発明を完成するにあたり、本発明者らが行った実験について詳述する。本発明はこれらの実験において得られた知見に基づいて完成したものである。本発明者らは、上述したように、特許文献１において、フィチン酸及び塩がアルコール投与時のウサギの血中アルコール濃度およアルコール摂取時のびヒト呼気中アルコール濃度をそれぞれ低下させる作用を有することが記載されているおり、短期的なアルコール性肝障害に有効であると考えられる。しかしながら、イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物が短期のアルコール性肝障害に対する発症抑制作用及び治癒作用を有するか否かについて以下の実験を行い、鋭意検討した。
【００１６】
即ち、日本白色ウサギ3羽を24時間絶食させた後、アルコール1 g/ｋgを投与し、その後の用い、血中のアルコールの消長と同時に、アルコールからの代謝産物のアセトアルデヒド及びケトン体を測定した。さらに、同一のウサギにイノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物を4日間連続腹腔内投与（20 mg/ｋg）した。最終投与から24時間絶食させた後、アルコール1 g/ｋgを投与し、その後の血中のアルコールの消長（ベーリンガー・マンハイム社製  血中アルコールUVテスト[BMY]）と、アルコールからの代謝産物のアセトアルデヒド（ガスクロマトグラフィーで測定）及びケトン体（三和化学研究所製  ケトンテスト「三和」）を測定した。その結果、イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物を投与したウサギでは、血中のアルコール濃度と同アセトアルデヒド濃度が減少し、ケトン体の濃度が上昇していることが認められた。このことからイノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物が、短期的なアルコール性肝障害に有効であることが明らかになった。
【００１７】
非特許文献3にコリン欠乏食摂取のラットにおける脂肪肝に対して、イノシトールが発症抑制作用を有することが記載されていることに鑑みて、イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物が上記の誘発性脂肪肝モデルに対する発症抑制作用を有するか否かを明らかにするために、以下の実験を行い、鋭意検討した。
【００１８】
即ち、６週齢Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラット15匹を３群（1群5匹）に分け、それぞれにコリン欠乏−アミノ酸規定食（CDAA食）、CDAA食＋１％コリン、およびCDAA食＋１％イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物食（以下組成物食）を自由摂食させ、12時間明暗周期、23℃で2週間飼育した。飼育終了後、肝臓重量の測定、及びFolchらの方法［ J. Biol. Chem. Vol. 226, 1, 497 (1957) ］で肝臓中の中性脂質含量を測定した。血清中のアルカリフォスファターゼ（ALP）およびアラニントランスフェラーゼ（ALT）を測定した。その結果CDAA食群では肝臓の重量が16ｇに対して、CDAA食＋１％コリン群では肝臓の重量が9g、CDAA食＋１％組成物食群では肝臓の重量が13gであった。肝臓1g湿重量当りの中性脂質量はCDAA食群で350mg、CDAA食＋１％コリン群で25mg、CDAA食＋１％組成物食群で310mgであった。またALPはCDAA食群では380U/L、CDAA食＋１％コリン群では800U/L、およびCDAA食＋１％組成物食群では590U/Lであった。 ALTはCDAA食群では41U/L、CDAA食＋１％コリン群では520U/L、およびCDAA食＋１％組成物食群では480U/Lであった。以上のようにCDAA食で2週間飼育したラットは脂肪肝を呈したが、CDAA食＋１％組成物食群では脂肪肝が押さえられたと同時に、肝臓機能も改善が見られた。また、この期間中ラットに下痢などの副作用は認められなかった。以上のことから、アルコールによる長期的な肝障害、もしくはNASHに対して、イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物が有効であることを示している。
【００１９】
【非特許文献６】J. Biol. Chem. Vol. 226, 1, 497 (1957)
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
本発明は上記目的を達成するものであり、アルコール性肝障害或いはNASHに対して強力な発症抑制作用及び治癒作用を有する組成物を提供する。即ち、イノシトール、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質を有効成分とする組成物からなる、アルコール性肝障害或いはNASHに対して際立った発症抑制作用及び治癒作用を有する組成物を提供する。また、本発明は、該組成物からなる医薬・食品・飼料を提供する。
【００２１】
以下に、本発明の好ましい態様について述べるが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２２】
本発明のアルコール性肝臓疾患及びNASH予防剤及び治療剤は、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質からなるものであり、これら全てを混合していても良いし、フィチン酸や遊離のリン酸が含有していても問題ない。
【００２３】
更に、イノシトール一リン酸、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸、イノシトール四リン酸、イノシトール五リン酸及びそれらの塩から選択された少なくとも1種類の物質含有量が、ヒトに投与する場合、症状、剤形等に依存して異なるが、一般的には成人に対し900mg/kg/日まで摂取可能で、好ましくは550mg/kg/日が好ましい。
【００２４】
本発明イノシトールリン酸類及びそれらの塩は無臭であり、経口的に投与しやすいため希釈することなくそのまま使用することもできるが、使用形態に応じて更に水等の溶媒で希釈したり、料理などに混和したり、或いは粉末、顆粒、タブレット、カプセルといった状態で投与することができ、薬剤、食品、飼料等の利用目的の相違により適宜選択される。
【００２５】
本発明のイノシトールリン酸類及びそれらの塩は、安全性が高いという特徴を持つ。さらに、本発明のイノシトールリン酸類及びそれらの塩は、製剤化においても非常に長期的にも安定である。
【００２６】
加え、これら肝障害がもたらす黄疸、肝腫大、腹水、脾腫、浮腫、肝性、昏睡、局所痛、胃腸症状、全身倦怠感等を改善させることも可能である。
【００２７】
本発明のアルコール性肝臓疾患及びNASHの予防剤及び治療剤は、粉末でも良く、製剤化したものでもよいが、連続投与可能な形状が好ましい。
【実施例】
【００２８】
以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例によって何ら限定されるものではない。
【００２９】
（製造例1〜4）  (製剤用組成物)
次の各種製剤用組成物を調施した。
製剤用組成物A：
本発明品 (イノシトール5%、イノシトール一リン酸10%、イノシトール二リン酸10%、イノシトール三リン酸25%、イノシトール四リン酸30%、イノシトール五リン酸20%)を700mg採取し、これに賦形剤として乳糖を添加して乾燥させ、全量を1000mgになした粉状物。
製剤用組成物B：
本発明品 (イノシトール5%、イノシトール一リン酸10%、イノシトール二リン酸10%、イノシトール三リン酸25%、イノシトール四リン酸30%、イノシトール五リン酸20%)を800mg採取し、これに賦形剤として乳糖を添加して乾燥させ、全量を1000mgになした粉状物。
製剤用組成物C：
本発明品 (イノシトール5%、イノシトール一リン酸10%、イノシトール二リン酸10%、イノシトール三リン酸25%、イノシトール四リン酸30%、イノシトール五リン酸20%)を700mg採取し、これに溶媒として精製水を添加して全量を1000mgになした溶液。
製剤用組成物D：
本発明品 (イノシトール5%、イノシトール一リン酸10%、イノシトール二リン酸10%、イノシトール三リン酸25%、イノシトール四リン酸30%、イノシトール五リン酸20%)を800mg採取し、これに溶媒として精製水を添加して全量を1000mgになした溶液。
【００３０】
(製造例5)
下記の原料を混合してチューブ食品タイプアルコール性肝臓疾患及びNASHの予防作用を製造した。
チューブ食品
製剤用組成物A：10g
ソフトマーガリン：70g
【００３１】
（製造例6）
下記の処方で通常の方法で打錠し、300mg/錠の錠剤タイプアルコール性肝臓疾患及びNASHの予防作用を製造した。
錠剤
製剤用組成物A：270mg
ステアリン酸マグネシウム：30mg
【００３２】
（製造例7）
下記の原料を飴製造の常法により混合してアルコール性肝臓疾患及びNASHの予防作用を有するグミを製造した。
グミ
製剤用組成物A：7g
水飴：10g
ゼラチン：15g
フレーバー：微量
着色料：微量
精製水：63g
【００３３】
（製造例8）
下記の原料を飴製造の常法により混合してアルコール性肝臓疾患及びNASHの予防作用を有する飴を製造した。
キャンディ
製剤用組成物B：500mg
ショ糖：2400
水飴：1100
香料：微量
精製水：700
【００３４】
（製造例9）
下記の原料をチューイングガム製造の常法により混合してアルコール性肝臓疾患及びNASHの予防作用を有するチューイングガムを製造した。
チューイングガム
製剤用組成物C：0.6g
ショ糖：1g
水飴：0.5g
ガムベース：0.6g
グルコース：0.3ｇ
香料：微量
【００３５】
（製造例10）
下記の原料をドリンク製造の常法により混合してアルコール性肝臓疾患及びNASHの予防作用を有するドリンク剤を製造した。
ドリンク剤
製剤用組成物C：1.0g
ショ糖：2.0g
フィチン酸：適量
香料：微量
精製水：27mL