【手続補正書】
【提出日】平成19年9月28日(2007.9.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  ａ）連結した
ｉ）アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）の５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、
ｉｉ）シス作用性の異種転写調節エレメントを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ｉｉｉ）ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメント
を含んでなる第一組換えＤＮＡ分子を含む第一組換えＡＡＶ、ならびに
ｂ）連結した
ｉ）ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、
ｉｉ）治療遺伝子産物のための完全なオープンリーディングフレームを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ｉｉｉ）ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメントを含んでなる第二組換えＤＮＡ分子を含む第二組換えＡＡＶ
を含んでなる、少なくとも２個の組換えＡＡＶを含んでなる組成物であって、
該２個の組換えＡＡＶの組換えＤＮＡ分子は、宿主細胞と接触した時に連結され、オープンリーディングフレームに対して５’にシス作用性の異種転写調節エレメントを有する分子を形成するものであり、
該シス作用性の異種転写調節エレメントは、連結後に、オープンリーディングフレームによりコードされた治療遺伝子産物の転写を調節するように第一組変えＤＮＡ中に配置されており、
該シス作用性の異種転写調節エレメントがエンハンサーである場合には、オープンリーディングフレームの転写はそのエンハンサーにより増強され、
該シス作用性の異種転写調節エレメントがプロモーターである場合には、オープンリーディングフレームの転写はそのプロモーターにおいて開始され、かつ、
第一組換えＤＮＡ分子はタンパック質をコードしていない、
上記組成物。
【請求項２】  送達ビヒクルをさらに含んでなる、請求項１記載の組成物。
【請求項３】  ビヒクルが薬剤的に許容できるキャリヤーである、請求項２記載の組成物。
【請求項４】  第一組換えＤＮＡ分子の第二ＤＮＡセグメントがエンハンサーを含んでなる、請求項１記載の組成物。
【請求項５】  第一組換えＤＮＡ分子の第ニＤＮＡセグメントが異種プロモーターを含んでなる、請求項１記載の組成物。
【請求項６】  第ニ組換えＤＮＡ分子の第ニＤＮＡセグメントが、オープンリーディングフレームを含むが、異種プロモーターは含まない、請求項１記載の組成物。
【請求項７】  第一組換えＤＮＡ分子の第ニ組換えＤＮＡセグメントが、異種プロモーターを含んでなる、請求項１記載の組成物。
【請求項８】  宿主細胞中で機能的なシス作用性の異種転写調節エレメントを少なくとも１つ含んでなる第一組換えアデノ随伴ウイルスベクターであって、宿主細胞中で該第一組換えアデノウイルスベクターと第二組換えアデノ随伴ウイルスベクターが連結された後に、シス作用性の異種転写調節エレメントが該宿主細胞において第ニ組換えアデノ随伴ウイルスベクターによりコードされた治療遺伝子産物のための完全なオープンリーディングフレームの転写を調節できるように該シス作用性の異種転写調節エレメントが該第一組換えアデノ随伴ウイルスベクター中に配置されており、かつ、該シス作用性の異種転写調節エレメントがプロモーターであり、そして該オープンリーディングフレームの転写が該プロモーターにおいて開始され、かつ、第一組換えアデノ随伴ウイルスベクターがタンパク質をコードしていない、上記第一組換えアデノ随伴ウイルスベクター。
【請求項９】  シス作用性の異種転写調節エレメントがエンハンサーである、請求項８記載のベクター。
【請求項１０】  請求項８記載のベクターを含んでなるプラスミド。
【請求項１１】  少なくとも２つの組換えＡＡＶと接触された宿主細胞であって、
第一組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）が、連結した
ｉ）ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、
ｉｉ）プロモーターを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ｉｉｉ）ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメント
を含んでなる第一組換えＤＮＡ分子を含んでなり、そして
第二ｒＡＡＶが、連結した
ｉ）ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、
ｉｉ）治療遺伝子産物のための完全なオープンリーディングフレームを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ｉｉｉ）ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメントを含む第二組換えＤＮＡ分子を含んでなり、ここで、
第一ｒＡＡＶにおけるプロモーターが第一ｒＡＡＶおよび第ニｒＡＡＶと接触された宿主細胞中で第ニｒＡＡＶにおける該オープンリーディングフレームによりコードされた治療遺伝子産物の転写発現を調節するものであり、そして第一ｒＡＡＶがタンパク質をコードしないものである、上記宿主細胞。
【請求項１２】  少なくとも２つのｒＡＡＶと宿主細胞を接触させることを含んでなる、宿主細胞に一つまたは複数の組換えＤＮＡを移送するための方法であって、
第一ｒＡＡＶが、連結した
ｉ）ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、
ｉｉ）プロモーターを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ｉｉｉ）ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメント
を含んでなる第一組換えＤＮＡ分子を含んでなり、そして
第二ｒＡＡＶが、連結した
ｉ）ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、
ｉｉ）治療遺伝子産物のための完全なオープンリーディングフレームを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ｉｉｉ）ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメント
を含んでなる第二ｒＤＮＡ分子を含んでなり、かつ、
第一ｒＤＮＡ分子がタンパク質をコードしていないものである、上記方法。
【請求項１３】  宿主細胞を請求項１記載の組成物と接触させることを含んでなる、宿主細胞内へのポリペプチドの移送および発現方法。
【請求項１４】  第一組換えＤＮＡ分子の第二ＤＮＡセグメントがプロモーターに操作可能に連結するオープンリーディングフレームの一部分を含んでなる、請求項１２または１３記載の方法。
【請求項１５】  第一組換えＤＮＡ分子がオープンリーディングフレームに対して３'のスプライス供与部位を含んでなる、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】  第二組換えＤＮＡ分子の第二ＤＮＡセグメントが、第一組換えＤＮＡ分子の第二ＤＮＡセグメントと一緒になって全長ポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームの残部を含んでなる、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】  第二組換えＤＮＡ分子の第二ＤＮＡセグメントが、オープンリーディングフレームの残部に対して５'のスプライス受容部位を含んでなる、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】  第一組換えＤＮＡ分子の第二ＤＮＡセグメントがエンハンサーを含んでなる、請求項１２または１３記載の方法。
【請求項１９】  第一組換えＤＮＡ分子の第二ＤＮＡセグメントがプロモーターを含んでなる、請求項１２または１３記載の方法。
【請求項２０】  第二組換えＤＮＡ分子の第二ＤＮＡセグメントが、オープンリーディングフレームの少なくとも一部分を含んでなる、請求項１８記載の方法。
【請求項２１】  第二組換えＤＮＡ分子の第二ＤＮＡセグメントが、オープンリーディングフレームの少なくとも一部分を含んでなる、請求項１９記載の方法。
【請求項２２】  第二組換えＤＮＡ分子の第二ＤＮＡセグメントが、オープンリーディングフレームに操作可能に連結するプロモーターをさらに含んでなる、請求項２０記載の方法。
【請求項２３】  第二組換えＤＮＡ分子の第二ＤＮＡセグメントが、オープンリーディングフレームに操作可能に連結するプロモーターをさらに含んでなる、請求項２１記載の方法。
【請求項２４】  ベクターの1つの第ニＤＮＡセグメントが異種転写調節エレメントを含んでなる、請求項1記載の組成物。
【請求項２５】  ベクターの１つの第二ＤＮＡセグメントが異種転写調節エレメントを含んでなる、請求項１２または１３記載の方法。
【請求項２６】  ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドセグメントを含む組換えＡＡＶを含んでなる宿主細胞を、ポリヌクレオチドの発現を増強する量で請求項８記載のベクターに相当する組換えＡＡＶをさらに含む組成物と接触させることを含んでなる宿主細胞におけるポリヌクレオチドの発現を増強するための方法。
【請求項２７】  請求項８記載のベクターに相当する組換えＡＡＶベクターを含む細胞を、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの発現を増強する量の該ポリヌクレオチドセグメントを含む組換えＡＡＶベクターをさらに含む組成物と接触させることを含んでなる宿主細胞におけるポリヌクレオチドの発現を増強するための方法。
【請求項２８】  宿主細胞を請求項８記載のベクターに相当する組換えＡＡＶベクターおよび該細胞内でポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの発現を増強する量の該ポリヌクレオチドセグメントを含むさらなる組換えＡＡＶベクターと接触させることを含んでなる宿主細胞におけるポリヌクレオチドの発現を増強するための方法。
【請求項２９】  請求項２６または２７記載の方法であって、該組成物が送達ビヒクルをさらに含んでなる、上記方法。
【請求項３０】  送達ビヒクルが薬剤的に許容できるキャリヤーである請求項２６、２７または２８記載の方法。
【請求項３１】  請求項８記載のベクターに相当する組換えＡＡＶ中の異種転写調節エレメントがプロもターである、請求項２６、２７または２８記載の方法。
【請求項３２】  宿主細胞における遺伝子産物の発現がスプライシングに依存しない、請求項８記載のベクター。
【請求項３３】  宿主細胞における遺伝子産物の発現がスプライシングに依存しない、請求項１記載の組成物。
【請求項３４】  連結した、ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、プロモーターを含む第二ＤＮＡセグメント、およびＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメントを含んでなる第一組換えＤＮＡ分子を含むが、タンパク質をコードしていない第一ｒＡＡＶ、ならびに
連結した、ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、治療遺伝子産物のための完全なオープンリーディングフレームを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメントを含んでなる第二組換えＤＮＡ分子を含んでなる第二ｒＡＡＶであって、かつ、
第一ｒＡＡＶにおけるプロモーターが第一ｒＡＡＶおよび第二ｒＡＡＶと接触された宿主細胞において該オープンリーディングフレームによりコードされた遺伝子産物の転写発現を調節するもの。
【請求項３５】  連結した、ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、プロモーターを含む第二ＤＮＡセグメント、およびＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメントを含んでなる第一組換えＤＮＡ分子を含むが、タンパク質をコードしていない第一ｒＡＡＶ、ならびに
連結した、ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、治療遺伝子産物のための完全なオープンリーディングフレームを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメントを含んでなる第二組換えＤＮＡ分子を含む第二ｒＡＡＶであって、かつ、
第二ｒＡＡＶが該オープンリーディングフレーム対して５’の異種プロモーターを含んでいないもの。
【請求項３６】  第一ｒＡＡＶの第二ＤＮＡセグメントがエンハンサーをさらに含んでなる請求項３４記載の第一ｒＡＡＶ。
【請求項３７】  連結した、ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、プロモーターを含む第二ＤＮＡセグメント、およびＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメントを含んでなる第一組換えＤＮＡ分子を含むが、タンパク質をコードしていない第一ｒＡＡＶ、ならびに
連結した、ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、治療遺伝子産物のための完全なオープンリーディングフレームを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメントを含んでなる第二組換えＤＮＡ分子を含む第二ｒＡＡＶ
を含んでなる組成物であって、かつ、
第一ｒＡＡＶにおけるプロモーターが第一ｒＡＡＶおよび第二ｒＡＡＶと接触された宿主細胞において該オープンリーディングフレームによりコードされた遺伝子産物の転写発現を調節する、上記組成物。
【請求項３８】  薬剤的に許容できるキャリヤーをさらに含んでなる、請求項３７記載の組成物。
【請求項３９】  第一ｒＡＡＶの第二ＤＮＡセグメントがエンハンサーをさらに含んでなる請求項３５記載の第一ｒＡＡＶ。
【請求項４０】  連結した、ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、プロモーターを含む第二ＤＮＡセグメント、およびＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメントを含んでなる第一組換えＤＮＡ分子を含むが、タンパク質をコードしていない第一ｒＡＡＶ、ならびに
連結した、ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント、治療遺伝子産物のための完全なオープンリーディングフレームを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメントを含んでなる第二組換えＤＮＡ分子を含む第二ｒＡＡＶを含んでなる組成物であって、かつ、
第二ｒＡＡＶが該オープンリーディングフレームに対して５’の異種プロモーターを含んでいない、上記組成物。
【請求項４１】  薬剤的に許容できるキャリヤーをさらに含んでなる、請求項４０記載の組成物。
【請求項４２】  少なくとも２つのｒＡＡＶと接触された宿主細胞であって、
第一ｒＡＡＶが、連結した、
ｉ）ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント；
ｉｉ）プロモーターを含む第二ＤＮＡセグメント；および
ｉｉｉ）ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメント
を含んでなる第一組換えＤＮＡ分子を含み、そして
第二ｒＡＡＶが、連結した、
ｉ）ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント；
ｉｉ）治療遺伝子産物のための完全なオープンリーディングフレームを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ｉｉｉ）ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメントを含んでなる第二組換えＤＮＡ分子を含んでなるが、
ここで、第二ｒＡＡＶが該オープンリーディングフレームに対して５’の異種プロモーターを含んでおらず、そして第一ｒＡＡＶがタンパク質をコードしていない、上記宿主細胞。
【請求項４３】  宿主細胞と少なくとも２つのｒＡＡＶを接触させることを含んでなる宿主細胞に組換えＤＮＡを移入するための方法であって、
第一ｒＡＡＶが、連結した、
ｉ）ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント；
ｉｉ）プロモーターを含む第二ＤＮＡセグメント；および
ｉｉｉ）ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメント
を含んでなる第一組換えＤＮＡ分子をみ、そして
第二ｒＡＡＶが、連結した、
ｉ）ＡＡＶの５'−逆方向末端反復を含む第一ＤＮＡセグメント；
ｉｉ）治療遺伝子産物のための完全なオープンリーディングフレームを含む第二ＤＮＡセグメント、および
ｉｉｉ）ＡＡＶの３'−逆方向末端反復を含む第三ＤＮＡセグメント
を含んでなる第二組換えＤＮＡ分子を含んでなり、
ここで、第一ｒＡＡＶにおけるプロモーターが、第一ｒＡＡＶおよび第二ｒＡＡＶと接触された宿主細胞において該オープンリーディングフレームによりコードされた遺伝子産物の転写発現を調節し、そして第一ｒＡＡＶがタンパク質をコードしていない、上記方法。