【手続補正書】
【提出日】平成19年9月20日(2007.9.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌治療において同時にまたは逐次的に使用するための第一薬剤と第二薬剤との組合せ物であって、該第一薬剤は、１以上のDNA損傷剤を含み、該１以上のDNA損傷剤はトポイソメラーゼIインヒビター、トポイソメラーゼIIインヒビター、およびDNA結合剤からなる群から選択され、そして該第二薬剤は、EPHB3、WEE1、ELK1、STK6、BRCA1、BRCA2、BARD1、およびRAD51からなる群から選択される遺伝子の発現および／または該遺伝子によってコードされるタンパク質の活性を調節することができる、上記組合せ物。
【請求項２】
DNA損傷剤が、カンプトセシン、カンプトセシン類似体、レベッカマイシン（rebeccamycin）、レベッカマイシン類似体、PNU 166148、TAS-103、イントプリシン（intoplicine）、エクテナサイジン743、J-107088、およびピベンジモル（pibenzimol）からなる群から選択される化合物種に属する化合物であるトポイソメラーゼIインヒビターである、請求項１に記載の組合せ物。
【請求項３】
DNA損傷剤が、カンプトセシン、トポテカン、イリノテカン、およびベロテカンまたはそれらの類似体または誘導体からなる群から選択されるトポイソメラーゼIインヒビターである、請求項１に記載の組合せ物。
【請求項４】
DNA損傷剤が、アントラサイクリン抗生物質、エピポドフィロトキシン（epipodophyllotoxin）化合物、アントラキノン化合物、シプロフロキサシン、アクリジンカルボキサミド、アモナフィド、アントラピラゾール抗生物質、TAS-103、ホストリエシン、ラゾキサン、XK469R、XK469、クロロキノキサリンスルホンアミド、メルバロン（merbarone）、イントプリシン（intoplicine）、エルサミトルシン（elsamitrucin）、CI-921、ピラゾロアクリジン、エリプチニウム（elliptinium）、およびアムサクリンからなる群から選択される化合物種に属する化合物であるトポイソメラーゼIIインヒビターである、請求項１に記載の組合せ物。
【請求項５】
DNA損傷剤が、ドキソルビシン、リン酸エトポシド、テニポシド、およびソブゾキサン（sobuzoxane）またはそれらの類似体または誘導体からなる群から選択されるトポイソメラーゼIIインヒビターである、請求項１に記載の組合せ物。
【請求項６】
DNA損傷剤が、DNA溝結合剤、DNA架橋剤、インターカレート剤、およびDNAアダクツ形成剤からなる群から選択される化合物種に属する化合物であるDNA結合剤である、請求項１に記載の組合せ物。
【請求項７】
DNA損傷剤がシスプラチンである、請求項１に記載の組合せ物。
【請求項８】
第二薬剤が遺伝子またはタンパク質を標的とする化合物を含み、該化合物は、siRNA、shRNA、アンチセンス分子、リボザイム、三重らせんヌクレオチド、抗体、ペプチド、アプタマー、小有機分子、小無機分子からなる群から選択される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組合せ物。
【請求項９】
遺伝子がEPHB3であり、化合物がsiRNAであり、該siRNAが配列番号170、配列番号171、および配列番号172に記載されるsiRNAからなる群から選択される、請求項８に記載の組合せ物。
【請求項１０】
遺伝子がWEE1であり、化合物がsiRNAであり、該siRNAが配列番号101、配列番号102、および配列番号103に記載されるsiRNAからなる群から選択される、請求項８に記載の組合せ物。
【請求項１１】
遺伝子がELK1であり、化合物がsiRNAであり、該siRNAが配列番号152、配列番号153、および配列番号154に記載されるsiRNAからなる群から選択される、請求項８に記載の組合せ物。
【請求項１２】
遺伝子がSTK6であり、化合物がsiRNAであり、該siRNAが配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、および配列番号6に記載されるsiRNAからなる群から選択される、請求項８に記載の組合せ物。
【請求項１３】
遺伝子がBRCA1であり、化合物がsiRNAであり、該siRNAが配列番号760、配列番号761、および配列番号762に記載されるsiRNAからなる群から選択される、請求項８に記載の組合せ物。
【請求項１４】
遺伝子がBRCA2であり、化合物がsiRNAであり、該siRNAが配列番号763、配列番号764、および配列番号765に記載されるsiRNAからなる群から選択される、請求項８に記載の組合せ物。
【請求項１５】
遺伝子がBARD1であり、化合物がsiRNAであり、該siRNAが配列番号1237、配列番号1238、および配列番号1239に記載されるsiRNAからなる群から選択される、請求項８に記載の組合せ物。
【請求項１６】
遺伝子がRAD51であり、化合物がsiRNAであり、該siRNAが配列番号1240、配列番号1241、および配列番号1242に記載されるsiRNAからなる群から選択される、請求項８に記載の組合せ物。
【請求項１７】
第二薬剤が、遺伝子を標的とする2、3、4、5、6、または10種類の異なるsiRNAを含む、請求項８に記載の組合せ物。
【請求項１８】
第二薬剤に含まれる異なるsiRNAの全siRNA濃度が、遺伝子をサイレンシングするのに好適な濃度であり、該好適な濃度が、さらに濃度を増加しても癌細胞中の該遺伝子のサイレンシングのレベルを実質的に増加することのない濃度である、請求項１７に記載の組合せ物。
【請求項１９】
最適濃度が、さらに濃度を増加してもサイレンシングのレベルを20％、10％または5％を超えて増加することのない濃度である、請求項１８に記載の組合せ物。
【請求項２０】
異なるsiRNAの各siRNA濃度がほぼ同じである、請求項１７または１８に記載の組合せ物。
【請求項２１】
異なるsiRNAはそれぞれの濃度が、50％、20％または10％未満だけ互いに異なる、請求項１７または１８に記載の組合せ物。
【請求項２２】
第二薬剤に含まれる異なるsiRNAのいずれも、該異なるsiRNAの全siRNA濃度の80％、50％、または20％を超える濃度ではない、請求項１７または１８に記載の組合せ物。
【請求項２３】
第二薬剤に含まれる異なるsiRNAの少なくとも1つのsiRNAが、該異なるsiRNAの全siRNA濃度の20％または50％を超える濃度である、請求項１７または１８に記載の組合せ物。
【請求項２４】
第二薬剤に含まれる異なるsiRNAの数および該異なるsiRNA中のそれぞれのsiRNAの濃度が、該第二薬剤が、標的としない遺伝子の10％未満、1％未満、0.1％未満、または0.01％未満のサイレンシングを引き起こすように選ばれる、請求項１７または１８に記載の組合せ物。
【請求項２５】
癌治療において同時にまたは逐次的に使用するための医薬の製造における請求項１〜２４のいずれか１項に記載の組合せ物の使用。
【請求項２６】
癌治療において同時にまたは逐次的に使用するための、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の組合せ物を１以上の容器中に含むキット。
【請求項２７】
哺乳動物の癌治療において同時にまたは逐次的に使用するための治療上十分な量の第一薬剤と治療上十分な量の第二薬剤との組合せ物であって、該第一薬剤は、STK6もしくはTPX2遺伝子の発現および／またはSTK6もしくはTPX2遺伝子がコードするタンパク質の活性を調節することができ、該第二薬剤は、KSP遺伝子の発現および／またはKSP遺伝子がコードするタンパク質の活性を調節することができる、上記組合せ物。
【請求項２８】
第一薬剤は、STK6もしくはTPX2遺伝子またはSTK6遺伝子もしくはTPX2遺伝子にコードされるタンパク質を標的とする化合物を含み、該化合物は、siRNA、shRNA、アンチセンス分子、リボザイム、三重らせんヌクレオチド、抗体、ペプチド、アプタマー、小有機分子、および小無機分子からなる群から選択される、請求項２７に記載の組合せ物。
【請求項２９】
哺乳動物はヒトであり、第一薬剤はSTK6遺伝子を標的とするsiRNAを含み、該siRNAは配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、および配列番号6に記載のsiRNAからなる群から選択される、請求項２８に記載の組合せ物。
【請求項３０】
哺乳動物はヒトであり、第一薬剤はTPX2遺伝子を標的とするsiRNAを含み、該siRNAは配列番号1237、配列番号1238、および配列番号1239に記載のsiRNAからなる群から選択される、請求項２８に記載の組合せ物。
【請求項３１】
第二薬剤が、KSP遺伝子を標的とするsiRNAである、請求項２７〜３０のいずれか1項に記載の組合せ物。
【請求項３２】
第二薬剤がKSPインヒビターである、請求項２７〜３０のいずれか１項に記載の組合せ物。
【請求項３３】
KSPインヒビターは、(1S)-1-{[(2S)-4-(2,5-ジフルオロフェニル)-2-フェニル-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル]カルボニル}-2-メチルプロピルアミンである、請求項３２に記載の組合せ物。
【請求項３４】
第一薬剤は、STK6またはTPX2遺伝子を標的とする2、3、4、5、6、または10種類の異なるsiRNAを含む、請求項２８に記載の組合せ物。
【請求項３５】
哺乳動物の癌治療において同時にまたは逐次的に使用するための医薬の製造における請求項２７〜３４のいずれか１項に記載の組合せ物の使用。
【請求項３６】
請求項３２または３３に記載の組合せ物を１以上の容器中に含むキット。
【請求項３７】
KSPインヒビターの増殖抑制効果に対する細胞の耐性を調節することができる薬剤をin vitroにて同定する方法であって、候補薬剤の存在下にてSTK6またはTPX2遺伝子を発現する細胞に対するKSPインヒビターの第一の増殖抑制効果を該候補薬剤の非存在下にてSTK6もしくはTPX2遺伝子を発現する細胞に対するKSPインヒビターの第二の増殖抑制効果と比較することを含み、該候補薬剤がSTK6もしくはTPX2遺伝子の発現および／またはSTK6もしくはTPX2遺伝子にコードされるタンパク質の活性をモジュレートすることができ、KSPインヒビターによる第一の増殖抑制効果と第二の増殖抑制効果に差があれば該候補薬剤は細胞のKSPインヒビターの増殖抑制効果に対する耐性を調節することができると同定すること、を含む、上記方法。
【請求項３８】
さらに、以下：
(a) STK6またはTPX2遺伝子を発現する第１の細胞をKSPインヒビターと候補薬剤の存在下にて接触させ、そして第１の増殖抑制効果を測定するステップ；および
(b) STK6またはTPX2遺伝子を発現する第２の細胞をKSPインヒビターと該薬剤の非存在下にて接触させ、そして第２の増殖抑制効果を測定するステップ；
を含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
DNA損傷剤の増殖抑制効果に対する細胞の感受性を調節することができる薬剤をin vitroにて同定する方法であって、候補薬剤の存在下における遺伝子を発現する細胞に対する該DNA損傷剤の第一の増殖抑制効果を、該候補薬剤の非存在下における該遺伝子を発現する細胞に対する該DNA損傷剤の第二の増殖抑制効果と比較することを含み、該候補薬剤は、EPHB3、WEE1、ELK1、STK6、BRCA1、BRCA2、BARD1、およびRAD51からなる群から選択される遺伝子の発現および／または該遺伝子がコードするタンパク質の活性をモジュレートすることができ、DNA損傷剤による第一の増殖抑制効果と第二の増殖抑制効果に差があれば、該候補薬剤を、DNA損傷剤の増殖抑制効果に対する細胞の感受性を調節することができると同定する、
ことを含む、上記方法。
【請求項４０】
さらに、以下：
(a)薬剤の存在下にて遺伝子を発現する第１の細胞をDNA損傷剤と接触させて第１の増殖抑制効果を測定するステップ；および
(b)薬剤の非存在下にて遺伝子を発現する第２の細胞をDNA損傷剤と接触させて第２の増殖抑制効果を測定するステップ；
含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
細胞が一次標的遺伝子を標的とするsiRNAを発現する、請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４２】
一次標的遺伝子がp53である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
哺乳動物がヒトである、請求項３５に記載の使用。