【誤訳訂正書】
【提出日】平成19年10月12日(2007.10.12)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
溶液を保持し、前記溶液を、アッセイの一部として固定化した生物学的材料と反応させるための生物学的アッセイデバイスであって、前記デバイスが、
一群のウェルが形成された固相プレートであって、前記一群のウェルはプレートを完全に貫通しており、前記ウェルの壁は実質的に液体不浸透性であるプレートと、
前記各ウェルの底部を閉じる微孔質材料と、
複数の前記ウェルの各々の微孔質底部の上面に結合している少なくとも１つの、実質的に半球形のポリマーのスポットであって、前記スポットが、ポリエチレングリコールまたはポリプロピレングリコールを含むイソシアネート官能性プレポリマーから形成された架橋ヒドロゲルポリマーを含み、前記ヒドロゲルが、前記ウェルに供給される水溶液によって接触可能となるように前記ポリマーの上または内部に固定されている生物学的材料を有し、前記の実質的に半球形のポリマーのスポットが、インキュベーションおよび／またはハイブリダイゼーションの後に、排出を行うことができる十分な部分を残した状態で、各ウェルの底部表面の一部分のみを覆うポリマーのスポットと
を含むことを特徴とするデバイス。
【請求項２】
前記微孔質材料はシートの形態であり、このシートは前記プレートの下面に融着され、前記ウェルの各々に整合する領域を除き、シート全体にわたってその材料を不透過性にすることを特徴とする請求項１に記載のデバイス。
【請求項３】
前記一群のウェルが規則的なアレイを形成するように配置され、かつ、前記複数のウェルの少なくとも一部が異なる生物学的材料を含み、かつ、前記生物学的材料が、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質または生細胞を含むことを特徴とする請求項１または２に記載のデバイス。
【請求項４】
前記微孔質材料が、疎水性であり、平均孔径が１μｍ以下である、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレンまたはポリエステルスルホンから形成される高分子膜を含み、前記微孔質とは、前記微孔質材料の下面に真空が適用されるまで前記ウェルに供給される水溶液がウェルに残留するようなものであり、前記プレートが、ポリカーボネート、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリエチレンまたはそれらの組合せから形成され、かつ、２ｍｍを超えない均一な厚さを有し、前記微孔質材料が、前記プレートの下面に融着され、前記ウェルと整合する領域を除きその材料全域を不浸透性にさせることを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載のデバイス。
【請求項５】
アッセイの一部としてテスト溶液に暴露される固定化した生物学的材料を保持するためのデバイスを作製する方法であって、前記方法が、
一群の孔が形成された平坦なプレートであって、前記孔は前記プレートを完全に貫通し、かつ、規則的なパターンで配置されているプレートを提供する工程、
前記プレートの下面に微孔質材料の疎水性膜のシートを結合させて各孔の底部を閉じ、それによって複数のマイクロウェルを作製する工程、
前記ウェルに供給される溶液が前記膜を通して拡散することを防ぐための防壁を形成するような方法で、各孔の周囲を囲む領域において前記膜のシートを前記プレートの下面に結合させる工程、および
前記ウェルの底部表面積の微小部分のみを覆い、ウェルの壁と接触しない半球形のスポットを重合し、そのようなスポットを形成するような方法で、少なくとも複数の前記ウェルの各々のほぼ中心において、膜の上部表面へ、少なくとも１つの微小滴の、イソシアネート官能性ヒドロゲル材料のプレポリマーを適用し、それによって前記膜の下面に真空を適用することで各ウェルの底部の疎水性膜を通して水溶液の排出が達成できる工程
を含むことを特徴とする方法。
【請求項６】
生物学的材料を、重合性微小液滴の一部として固定化するように、前記液滴と結合させることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記プレートの下面への前記微香性材料の疎水性膜のシートの結合が、前記各孔を囲む領域において前記プレートの下面に高分子膜のシートを超音波圧接することによって、前記プレートに高分子膜のシートを融着させることによって実施され、前記スポットが、各ウェルの底部表面積の５０％未満を覆い、イソシアネート官能性ヒドロゲルと、前記ウェルに供給される溶液に暴露されるような方法で前記ヒドロゲルに結合された生物学的材料との混合物を含むことを特徴とする請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
生物学的アッセイを実施する方法であって、前記方法が、
ａ）一群のウェルを有するプレートの形態をしたデバイスの複数のウェルにテスト溶液を導入するステップであって、微孔質材料が各ウェルの底部を閉じており、少なくとも１つのポリマーのスポットが前記複数のウェルの各々の微孔質底部の上面に結合しており、前記スポットが、前記ポリマーの上または内部に固定されている生物学的材料を有する架橋ヒドロゲルポリマーを含み、前記ウェルが排出を行うことができる十分な部分を残した状態で、各ウェルの底部表面の一部のみを覆うポリマースポットを含み、前記一群のウェルが規則的なアレイを形成するように配置され、前記複数のウェルの少なくとも一部が異なる生物学的材料を含み、前記微孔質材料が０．３〜１μｍの平均孔径を有し、前記微孔質とは、前記微孔質材料の下面に真空が適用されるまで前記ウェルに供給される水溶液がウェルに残留するようなものであるステップ、
ｂ）ハイブリダイゼーションおよび／または結合を行った後に、前記デバイスに真空を適用して前記ウェルから前記溶液を除去するステップ、
ｃ）前記各ウェルに光学的に活性な試薬を塗布するステップ、
ｄ）前記各ウェルからのアッセイの結果を光学的に検出するステップ
を含むことを特徴とする方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１０】
１つのさらに詳細な態様において、本発明は、溶液を保持し、アッセイの一部として、上記溶液と固定化した生物学的材料とを反応させるデバイスを提供する。このデバイスは、一群のウェルが固相プレートを完全に貫通するように形成され、前記ウェルの壁が実質的に液体不浸透性であるプレートと、前記ウェルのそれぞれの底部を閉じる微孔質材料と、複数の前記ウェルの各々の前記微孔質底面の上部表面に結合しているポリマーの少なくとも１つの実質的に半球のポリマースポットを含み、このスポットは、ポリエチレングリコールまたはポリプロピレングリコールを含むイソシアネート官能性プレポリマーから形成された架橋ヒドロゲルポリマーを含み、前記ヒドロゲルが、前記ウェルに供給される水溶液によって接触可能となるように前記ポリマーの上または内部に固定されている生物学的材料を有し、前記の実質的に半球形のポリマーのスポットが、インキュベーションおよび／またはハイブリダイゼーションの後に、排出を行うことができる十分な部分を残した状態で、各ウェルの底部表面の一部分のみを覆う。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１１】
別のさらに詳細な態様において、本発明は、生物学的アッセイを実施する方法を提供する。この方法は、プレートの形態をしたデバイスの複数のウェルにテスト溶液を導入する工程であって、このプレートが一群のウェルを有し、微孔質材料が前記ウェルの各々の底面を閉じており、少なくとも１つのポリマーのスポットが前記複数のウェルの各々の微孔質底面の上部表面に結合しており、このスポットが前記複数のウェルの各々の微孔質底部の上面に結合しており、前記スポットが、前記ポリマーの上または内部に固定されている生物学的材料を有する架橋したヒドロゲルポリマーを含み、前記ウェルが排出を行うことができる十分な部分を残した状態で、各ウェルの底部表面の一部のみを覆うポリマースポットを含み、前記一群のウェルが規則的なアレイを形成するように配置され、前記複数のウェルの少なくとも一部が異なる生物学的材料を含み、前記微孔質材料が０．３〜１μｍの平均孔径を有し、前記微孔質とは、前記微孔質材料の下面に真空が適用されるまで前記ウェルに供給される水溶液がウェルに残留するようなものである工程と、ハイブリダイゼーションおよび／または結合を行った後に、前記デバイスに真空を適用して前記ウェルから前記溶液を除去する工程と、各ウェルのアッセイの結果を光学的に検出する工程と、を含む。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１２】
さらに別のさらに詳細な態様において、本発明は、固定化した生物学的材料を保持し、かつアッセイの一部として上記固定化した生物学的材料をテスト溶液に暴露するデバイスを作製する方法を提供する。上記方法は、平坦なプレートを提供する工程であって、このプレートにプレートを完全に貫通する一群の孔が形成され、この孔が規則的なパターンで配置されている工程と、前記プレートの下面に微孔質材料からなる疎水性膜のシートを結合させて各孔の底部を閉じ、それによって複数のマイクロウェルを作成する工程と、前記ウェルに供給される溶液が前記膜を通して拡散するのを防ぐための防壁を形成するような方法で、前記各孔の周囲を囲む領域において前記膜のシートを前記プレートの下面に結合させる工程と、前記ウェルの底面の表面積の微小部分のみを覆い、ウェルの壁と接触しない半球形のスポットを重合し、そのようなスポットを形成するような方法で、少なくとも複数の前記ウェルの各々のほぼ中心において、膜の上部表面へ、少なくとも１つの微小滴の、イソシアネート官能性ヒドロゲル材料のプレポリマーポリマーを適用し、それによって前記膜の下面に真空を適用することで各ウェルの底面の疎水性膜を通して水溶液の排出が達成される工程を含む。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２２】
膜１７の疎水性によってヒドロゲルの広がりが防止され、その結果ヒドロゲルは実質的な半球形を保持することになり、例えばウェルの底部表面の５０％未満といった小部分のみを覆う大きさとなって、水溶液がアッセイのためにウェルに供給された後に、この水溶液の排出を最終的に行える十分な表面積が残されることになる。結合／ハイブリダイゼーションが行われる（所望のターゲットが存在する場合に行われる）時間が経過した後、引き続いて膜の下面に真空を適用すると、溶液の排出が容易に促進される。この排出は、アッセイの対象となる溶液に少量の界面活性剤を含ませることによって、または結合／ハイブリダイゼーション時間が経過した後に少量の界面活性剤を添加することによって容易になる。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２３】
概して言えば、前述の特性を備えたマイクロウェルバイオチップ１１は、標準的なマイクロタイタープレートシステムに比べて幾つかの利点を有している。膜底部の画定された部分にヒドロゲルを戦略的に配置することと組み合わせて、多孔質底部を配置することによって、信頼性のある定量的結果を得ることを可能にしながら、試薬溶液の必要容量が低減される。例えば、３８４ウェルまたは１５３６ウェルのマイクロタイタープレートに通常使用される約１〜１０μｍであった試薬溶液の必要容量が、本発明のチップでは約０．５〜１μｍとなる。また、液体の移送が簡便に行われるようになり、その結果は、例えば標準的な蛍光バイオチップスキャナーによって光学的に容易に読み取り可能である。３次元網目構造のヒドロゲルの優れた結合性と安定性によって、多数のプローブを各ウェルに固定化することが可能であり、それによって、所望のレベルのプローブ結合を達成するために必要とされるウェルの表面積が低減される。さらに、デバイスは非常に理解しやすく容易に製造されるように設計されているため、製造コストの低減が可能であり、また小型であることによって保管や輸送も容易に行うことができる。本明細書で後述するプロトタイプは、標準的なスライドハンドリング装置と互換性があり、同時にマイクロタイタープレート用に開発された従来のディスペンシング・ハンドリング装置とも互換性がある。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２７】
（マイクロウェルタンパク質バイオチップでのプリンティングおよびハイブリダイジング
プリンティングのためのタンパク質生成）
抗トランスフェリン抗体のＨｙｐｏｌ（Ｈａｍｐｓｈｉｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ，Ｍａｓｓ．）混合液と、非特異的ＩｇＧのＨｙｐｏｌ溶液（ブランク対照）をプリントし、Ｃｙ３で標識したトランスフェリンでテストした。Ｈｙｐｏｌは、本用途に好適であると考えられるイソシアネートでキャップしたＰＥＧプレポリマーである。両サンプルとも、３．３重量％Ｈｙｐｏｌ溶液（１：３：３＝プレポリマー：アセトニトリル：ＮＭＰ）として調製したもので、５％トレハロース（タンパク質保存性糖（protein preservative suger））、１００ｍｇ／ｍｌＩｇＧ（タンパク質フィラー）、０．５％グリセリン（湿潤剤）および０．８ｍｇ／ｍｌ抗トランスフェリン抗体（陽性）または１ｍｇ／ｍｌウシＩｇＧ（陰性）のいずれかを含んでいた。