(57)【要約】  インドールアミン２,３−ジオキシゲナーゼ(ＩＤＯ)の酵素活性を調節または阻害する化合物、該化合物を含む医薬組成物および本発明の化合物を使用して癌などの増殖性障害、ウイルス感染および／または炎症性障害を処置する方法が開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉまたは式II
【化１】
2019528301.tif 000093
〔式中、
ＸはＣＨまたはＮであり；
ＴはＣＨまたはＮであり；
Ｖは結合またはＯであり；
ＹはＣＨまたはＮであり；
Ｗは−ＣＨ−、−Ｃ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)−またはＮであり；
ｎは０、１、２、３または４であり；
Ｌは場合によりＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルケニルおよび−Ｃ１−Ｃ６アルクＯＣ１−Ｃ６アルキルから独立して選択される１、２または３置換基で置換されていてよいＣ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｚは結合、−ＮＨ−または−Ｎ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)であり；
Ｂはベンゾイミダゾリル、イミダゾピリジニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、トリアゾロピリジニル、ピラゾロピリジニル、キナゾリノニルおよびイミダゾピリダジニルから選択されるヘテロアリールであり、ここで、ヘテロアリールは場合によりハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、−ＣＮ、−ＯＣ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６ハロアルキル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１−Ｃ６アルキルおよびジオキソラニルから独立して選択される１個、２個、３個または４個のＲ２置換基で置換されていてよく；
Ｒ１はＨ、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルであり；
Ｒ１ＡはＨ、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルである。〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体、その互変異性体もしくはその溶媒和物。
【請求項２】
式Ｉの化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式IIの化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
ｎが２である、請求項１〜３の何れかに記載の化合物。
【請求項５】
Ｖが結合である、請求項１〜４の何れかに記載の化合物。
【請求項６】
ＶがＯである、請求項１〜４の何れかに記載の化合物。
【請求項７】
ＹがＣＨであり、ＷがＣＨである、請求項１〜６の何れかに記載の化合物。
【請求項８】
ＹがＮであり、ＷがＣＨである、請求項１〜６の何れかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｌが１個のＣ１−Ｃ６アルキルまたは１個のＣ１−Ｃ６アルクＯＣ１−Ｃ６アルキルで置換されているＣ１−Ｃ２アルキレンである、請求項１〜８の何れかに記載の化合物。
【請求項１０】
Ｚが結合である、請求項１〜９の何れかに記載の化合物。
【請求項１１】
Ｚが−ＮＨ−または−Ｎ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)である、請求項１〜９の何れかに記載の化合物。
【請求項１２】
Ｂが
【化２】
2019528301.tif 000094
であり、ここで、Ｂが場合により１個または２個のＲ２置換基で置換されていてよい、請求項１〜１１の何れかに記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ１がＨ、ＦまたはＣＦ３である、請求項１〜１２の何れかに記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１ＡがＨである、請求項１〜１３の何れかに記載の化合物。
【請求項１５】
次のものである、請求項１に記載の化合物：
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
６−フルオロ−４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(６−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノロン；
６−((Ｒ)−１−((１ｓ,４Ｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−５Ｈ−[１,３]ジオキソロ[４’,５’：４,５]ベンゾ[１,２−ｄ]イミダゾール；
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]ピリジン−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
６−クロロ−Ｎ−((Ｒ)−１−((１ｓ,４Ｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン；
Ｎ−((Ｒ)−１−((１ｓ,４Ｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−６−メトキシ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−アミン；
Ｎ−((Ｒ)−１−((１ｓ,４Ｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン；
６−クロロ−Ｎ−((Ｒ)−１−((１ｓ,４Ｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−アミン；
Ｎ−((Ｒ)−１−((１ｓ,４Ｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−アミン；
４−(((１ｒ,４ｒ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノロン；
４−(((１ｓ,４ｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノロン；
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノロン；
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−３−プロピル)シクロヘキシル)−６−(トリフルオロメチル)キノロン；
(±)−４−((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−２−メトキシエチル)シクロヘキシル)−６−(トリフルオロメチル)キノロン；
(±)−４−((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−２−メトキシエチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
(±)−４−(((ｔｒａｎｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)−３−プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノロン；
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
(±)−４−((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−(トリフルオロメチル)キノロン；
６−クロロ−２−(１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)−３−プロピル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール；
(±)−６−クロロ−２−(１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)−３−プロピル)−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン；
(±)−６−クロロ−２−(２−エトキシ−１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール；
４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−([１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
６−フルオロ−４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(イミダゾ[１,５−ａ]ピリジン−３−イル)エチル)シクロヘキシル)キノロン；
３−((Ｒ)−１−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)キナゾリン−４(３Ｈ)−オン；
６−クロロ−２−((Ｒ)−１−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)キナゾリン−４(３Ｈ)−オン；
６−フルオロ−４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(６−メチルイミダゾ[１,２−ｂ]ピリダジン−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノロン；
６−フルオロ−４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(イミダゾ[１,２−ｂ]ピリダジン−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノロン；
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)ブト−３−エン−１−イル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
(＋／−)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−３,３,３−トリフルオロプロピル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
(＋／−)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−１,８−ナフチリジン；
(４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−１,８−ナフチリジン；
(＋／−)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−６−クロロ−２−(１−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロピル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール；
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−１,８−ナフチリジン
(＋／−)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−６−クロロ−２−(１−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール；
６−クロロ−２−(１−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール；
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(５,６−ジフルオロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(４,５−ジフルオロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(６−クロロ−５−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
６−フルオロ−４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(４,５,６,７−テトラフルオロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノロン；
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(５,６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
６−フルオロ−４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(５−(トリフルオロメチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノロン；
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(７−クロロ−５−(トリフルオロメチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(５,７−ビス(トリフルオロメチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン；
６−フルオロ−４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(５−(トリフルオロメトキシ)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノロン；
２−((Ｒ)−１−((１ｓ,４Ｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−５−カルボニトリル；
メチル２−((Ｒ)−１−((１ｓ,４Ｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−５−カルボキシレート；
４−(((１ｓ,４ｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノロン；または
４−(((１ｓ,４ｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノロン；
またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体、その互変異性体もしくはその溶媒和物。
【請求項１６】
請求項１〜１５の何れかに記載の化合物および薬学的に許容される添加物を含む、医薬組成物。
【請求項１７】
ヤーボイ、オプジーボまたはキイトルーダまたはそれらの組み合わせをさらに含む、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
処置を必要とする対象における癌を処置する方法であって、該患者に治療有効量の請求項１〜１５の何れかに記載の化合物を投与することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年８月２６日出願の米国仮出願６２／３８０,０４２に基づく優先権を主張し、その全体を引用により本明細書に包含させる。
【０００２】
発明の分野
本発明は、一般にインドールアミン２,３−ジオキシゲナーゼ(ＩＤＯ)の酵素活性を調節または阻害する化合物、該化合物を含む医薬組成物ならびに本発明の化合物を使用する、癌などの増殖性障害、ウイルス感染および／または自己免疫疾患を処置する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
インドールアミン２,３−ジオキシゲナーゼ(ＩＤＯ；ＩＤＯ１としても知られる)は、免疫調節に役割を有するＩＦＮ−γ標的遺伝子である。ＩＤＯは酸化還元酵素であり、トリプトファンからＮ−ホルミル−キヌレニンへの変換における最初のかつ律速の段階を触媒する２つの酵素の一つである。それは免疫細胞、内皮細胞および線維芽細胞を含むいくつかの細胞集団に見られる４１kD単量体として存在する。ＩＤＯは種間で比較的よく保存されており、マウスとヒトはアミノ酸レベルで６３％配列同一性を共有する。結晶構造および部位特異的変異誘発から得られるデータは、基質結合および基質と鉄結合ジオキシゲナーゼの間の相関の両者が活性に必要であることを示す。ＩＤＯのホモログ(ＩＤＯ２)はＩＤＯと４４％アミノ酸配列相同性を共有することが同定されているが、その機能はＩＤＯと大きく異なる(例えば、Serafini, P. et al., Semin. Cancer Biol., 16(1): 53-65 (Feb. 2006)およびBall, H.J. et al., Gene, 396(1): 203-213 (Jul. 1, 2007)参照)。
【０００４】
ＩＤＯは免疫制御に大きな役割を有し、その免疫抑制機能はいくつかの様式で顕在化する。ＩＤＯが免疫をＴ細胞レベルで制御し、ＩＤＯとサイトカイン産生の間にネクサスが存在することは重要である。さらに、腫瘍は、しばしばＩＤＯの上方制御により免疫機能を操作する。それ故に、ＩＤＯの調節は、多数の疾患、障害および状態に治療的影響を有し得る。
【０００５】
病態生理学的関連がＩＤＯと癌の間に存在する。免疫恒常性の崩壊は本質的に腫瘍増殖および進行に関与し、腫瘍微小環境におけるＩＤＯ産生は、腫瘍増殖および転移を助けるように見える。さらに、ＩＤＯ活性レベルの増加は、種々の腫瘍と関係する(Brandacher, G. et al., Clin. Cancer Res., 12(4): 1144-1151 (Feb. 15, 2006))。
【０００６】
癌処置は、通常外科的切除とそれに続く化学療法および放射線療法を伴う。標準処置レジメンは、腫瘍細胞が一次腫瘍増殖を復活させることによる、そしてしばしばより重要なことに遠位転移を播種することによる、癌処置を本質的に回避する能力により、長期成功の程度は高度に多様となる。癌および癌関連疾患、障害および状態の処置の近年の進歩は、免疫療法をより古典的な化学療法および放射線療法に組み入れる組み合わせ治療の使用を含む。大部分のシナリオにおいて、免疫療法に関連する毒性は、腫瘍細胞の同定および排除に患者自身の免疫系を利用するため、古典的化学療法より低い。
【０００７】
癌に加えて、ＩＤＯは、数ある疾病状態の中で、免疫抑制、慢性感染および自己免疫疾患または障害(例えば、関節リウマチ)と関連付けられている。それ故に、ＩＤＯ活性阻害によるトリプトファン分解の抑制は、膨大な治療的価値を有する。さらに、ＩＤＯの阻害剤は、Ｔ細胞が妊娠、悪性腫瘍またはウイルス(例えば、ＨＩＶ)により抑制されているとき、Ｔ細胞活性化を増強するために使用できる。役割は十分に定義されていないが、ＩＤＯ阻害剤は、神経もしくは精神神経疾患または障害(例えば、うつ病)の患者の処置にも用途があり得る。
【０００８】
ＩＤＯの小分子阻害剤は、ＩＤＯ関連疾患の処置または予防のために開発されている。例えば、ＩＤＯ阻害剤１−メチル−ＤＬ−トリプトファン；ｐ−(３−ベンゾフラニル)−ＤＬ−アラニン；ｐ−[３−ベンゾ(ｂ)チエニル]−ＤＬ−アラニン；および６−ニトロ−Ｌ−トリプトファンは、トリプトファンおよびトリプトファン代謝物の局所細胞外濃度を変えることにより、Ｔ細胞介在免疫の調節に使用されている(ＷＯ９９／２９３１０)。ＩＤＯ阻害性活性を有する化合物は、ＰＣＴ公開ＷＯ２００４／０９４４０９にさらに記載されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
多種多様な疾患、障害および状態におけるインドールアミン２,３−ジオキシゲナーゼにより演じられる役割ならびに現在のＩＤＯ阻害剤の限界(例えば、有効性)を考慮するならば、新規ＩＤＯモジュレーターおよび組成物ならびにそれに関連する方法がなお必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
発明の要約
本発明は、式Ｉおよび式II
【化１】
2019528301.tif 000002
〔式中、ＸはＣＨまたはＮであり；ＴはＣＨまたはＮであり；Ｖは結合またはＯであり；ＹはＣＨまたはＮであり；Ｗは−ＣＨ−、−Ｃ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)−またはＮであり；ｎは０、１、２、３または４であり；Ｌは場合によりＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルケニルおよび−Ｃ１−Ｃ６アルクＯＣ１−Ｃ６アルキルから独立して選択される１、２または３置換基で置換されていてよいＣ１−Ｃ６アルキレンであり；Ｚは結合、−ＮＨ−または−Ｎ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)であり；Ｂはベンゾイミダゾリル、イミダゾピリジニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、トリアゾロピリジニル、ピラゾロピリジニル、キナゾリノニルまたはイミダゾピリダジニルであり、ここで、ヘテロアリールは場合によりハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、−ＣＮ、−ＯＣ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６ハロアルキル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１−Ｃ６アルキルおよびジオキソラニルからなる群から独立して選択される１個、２個、３個または４個のＲ２置換基で置換されていてよく；Ｒ１はＨ、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルであり；そしてＲ１ＡはＨ、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルである。〕
の化合物に関する。
【００１１】
また本発明の範囲内であるのは、Ｉおよび式IIの化合物の薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体および溶媒和物である。
【００１２】
本発明はまた１以上の式Ｉおよび／または式IIの化合物を含む医薬組成物にも関する。本発明はまた１以上の式Ｉおよび／または式IIの化合物を使用して癌を処置する方法にも関する。
【００１３】
発明の詳細な記載
本発明の化合物
本発明は、式Ｉおよび式IIの化合物に関する。
【化２】
2019528301.tif 000003
【００１４】
本発明によると、ＸはＣＨまたはＮである。ある実施態様において、ＸはＣＨである。他の実施態様において、ＸはＮである。
【００１５】
本発明によると、ＴはＣＨまたはＮである。ある態様において、ＴはＣＨである。他の態様において、ＴはＮである。
【００１６】
ある実施態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＣＨである。他の実施態様において、ＸはＮであり、ＴはＣＨである。他の実施態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＮである。他の実施態様において、ＸはＮであり、ＴはＮである。
【００１７】
本発明によると、Ｒ１はＨ、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルである。ある態様において、Ｒ１はＨである。ある態様において、Ｒ１はハロ(Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ)、好ましくはＦである。他の態様において、Ｒ１はＣ１−Ｃ６アルキル、例えば、メチル、エチル、イソプロピル、ブチルまたはｔ−ブチルである。ある態様において、Ｒ１は−ＯＣ１−Ｃ６アルキル、例えば、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、ブトキシである。さらに他の態様において、Ｒ１はＣ１−Ｃ６ハロアルキル、例えば、−ＣＦ３である。ある態様において、Ｒ１はハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルである。ある態様において、Ｒ１は−ＯＣ１−Ｃ６アルキルである。さらに他の態様において、Ｒ１はハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルである。他の態様において、Ｒ１はハロまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルである。
【００１８】
式Ｉの化合物を含む本発明のこれらの態様において、Ｒ１がハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルであるとき、Ｒ１は、好ましくはナフチル環またはキノリン環の４位炭素に位置する。式Ｉの化合物を含む本発明の他の態様において、Ｒ１がハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルであるとき、Ｒ１はナフチル環またはキノリン環の２位炭素に位置し得る。好ましくは、式Ｉの化合物を含む本発明のこれらの態様において、Ｒ１はナフチル環またはキノリン環の４位炭素のＦまたはＣＦ３である。
【００１９】
式IIの化合物を含む本発明のこれらの態様において、Ｒ１がハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルであるとき、Ｒ１は、好ましくはフェニル環またはピリジル環の２位炭素に位置する。式IIの化合物を含む本発明の他の態様において、Ｒ１がハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルであるとき、Ｒ１はフェニル環またはピリジル環の３位炭素に位置し得る。好ましくは、式IIの化合物を含む本発明のこれらの態様において、Ｒ１はフェニル環またはピリジル環の２位炭素のＦまたはＣＦ３である。
【００２０】
本発明によると、Ｒ１ＡはＨ、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６ハロアルキルである。好ましい態様において、Ｒ１ＡはＨである。ある態様において、Ｒ１Ａはハロ(Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ)である。他の好ましい態様において、Ｒ１ＡはＣ１−Ｃ６アルキル、例えば、メチル、エチル、イソプロピル、ブチルまたはｔ−ブチルである。ある態様において、Ｒ１Ａは−ＯＣ１−Ｃ６アルキル、例えば、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、ブトキシである。さらに他の態様において、Ｒ１ＡはＣ１−Ｃ６ハロアルキル、例えば、−ＣＦ３である。
【００２１】
本発明によると、ＹはＣＨまたはＮである。ある態様において、ＹはＣＨである。他の態様において、ＹはＮである。別の実施態様において、Ｙは−Ｃ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)、例えば、−Ｃ(ＣＨ３)−またはＣ(ＣＨ２ＣＨ３)である。
【００２２】
本発明によると、ＷはＣＨ、−Ｃ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)−またはＮである。ある態様において、ＷはＣＨである。他の態様において、Ｗは−Ｃ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)−、例えば、−Ｃ(ＣＨ３)−、−Ｃ(ＣＨ２ＣＨ３)−、−Ｃ(ｉ−プロピル)または−Ｃ(ブチル)−である。他の態様において、ＷはＮである。ある態様において、ＷはＣＨまたは−Ｃ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)−である。他の態様において、ＷはＣＨまたはＮである。さらに他の態様において、ＷはＮまたは−Ｃ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)−である。
【００２３】
ある態様において、ＹはＣＨであり、ＷはＣＨである。他の態様において、ＹはＣＨであり、ＷはＮである。他の態様において、ＹはＮであり、ＷはＣＨである。なおさらに他の態様において、ＹはＮであり、ＷはＮである。ある態様において、ＹはＣＨであり、ＷはＣ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)である。他の態様において、ＹはＮであり、ＷはＣ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)である。
【００２４】
本発明によると、ｎは０、１、２、３または４である。好ましい態様において、ｎは２である。他の態様において、ｎは０である。他の態様において、ｎは１である。さらに他の態様において、ｎは３である。なおさらに他の態様において、ｎは４である。ある態様において、ｎは０〜２または１〜２である。さらに他の態様において、ｎは１〜３である。
【００２５】
本発明によると、Ｌは非置換Ｃ１−Ｃ６アルキレン、例えば、非置換Ｃ１−Ｃ５アルキレン、Ｃ１−Ｃ４アルキレン、Ｃ１−Ｃ３アルキレン、Ｃ１−Ｃ２アルキレンまたはＣ１アルキレンである。他の態様において、Ｌは、Ｃ１−Ｃ６アルキル(例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチルまたはヘキシル)、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル(例えば、ＣＦ３)、Ｃ１−Ｃ６アルケニル(例えば、−ＣＨ＝ＣＨ２または−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２)および−Ｃ１−Ｃ６アルクＯＣ１−Ｃ６アルキルから独立して選択される１個、２個または３個、好ましくは１個または２個の置換基で置換されているＣ１−Ｃ６アルキレン、例えば、Ｃ１−Ｃ５アルキレン、Ｃ１−Ｃ４アルキレン、Ｃ１−Ｃ３アルキレン、Ｃ１−Ｃ２アルキレンまたはＣ１アルキレン、例えば、−Ｃ１−Ｃ５アルクＯＣ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルクＯＣ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ３アルクＯＣ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ２アルクＯＣ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１アルクＯＣ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルクＯＣ１−Ｃ５アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルクＯＣ１−Ｃ４アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルクＯＣ１−Ｃ３アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルクＯＣ１−Ｃ２アルキルまたは−Ｃ１−Ｃ６アルクＯＣ１アルキルである。好ましい態様において、Ｌは非置換Ｃ１アルキレンである。他の好ましい態様において、Ｌは１個または２個、好ましくは１個のＣ１−Ｃ６アルキル(例えば、メチルまたはエチル)置換基で置換されているＣ１アルキレンである。
【００２６】
本発明によると、Ｚは結合、−ＮＨ−または−Ｎ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)−である。ある態様において、Ｚは結合である。他の態様において、Ｚは−ＮＨ−である。さらに他の態様において、Ｚは−Ｎ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)−、例えば−Ｎ(ＣＨ３)−、−Ｎ(ＣＨ２ＣＨ３)−、−Ｎ(ｉ−プロピル)−および−Ｎ(ｔ−ブチル)−である。ある態様において、Ｚは−ＮＨ−または−Ｎ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)である。他の態様において、Ｚは結合または−ＮＨ−である。
【００２７】
本発明によると、Ｂは非置換または置換ヘテロアリール部分である。好ましい態様において、ヘテロアリールはベンゾイミダゾリル、イミダゾピリジニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、トリアゾロピリジニル、ピラゾロピリジニル、キナゾリノニルおよびイミダゾピリダジニルから選択される。ある態様において、Ｂは非置換または置換ベンゾイミダゾリルである。ある態様において、Ｂは非置換または置換イミダゾピリジニルである。ある態様において、Ｂは非置換または置換ベンゾチアゾリルである。ある態様において、Ｂは非置換または置換ベンゾオキサゾリルである。ある態様において、Ｂは非置換または置換トリアゾロピリジニルである。ある態様において、Ｂは非置換または置換ピラゾロピリジニルである。ある態様において、Ｂは非置換または置換キナゾリノニルである。ある態様において、Ｂは非置換または置換イミダゾピリダジニルである。ヘテロアリール部分は、該ヘテロアリール部分の任意の利用可能な炭素または窒素原子を介して式Ｉまたは式IIの化合物に結合し得る。好ましくは、ヘテロアリールは、利用可能な炭素原子を介して式Ｉまたは式IIの化合物に結合する。ヘテロアリールが置換されているこれらの実施態様において、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、−ＣＮ、−ＯＣ１−Ｃ６アルキル、−ＯＣ１−Ｃ６ハロアルキル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１−Ｃ６アルキルおよびジオキソラニルから独立して選択される１個、２個、３個または４個、好ましくは１個または２個のＲ２置換基で置換され得る。
好ましいベンゾイミダゾリル部分は
【化３】
2019528301.tif 000004
である。
好ましいイミダゾピリジニル部分は
【化４】
2019528301.tif 000005
を含む。
好ましいベンゾチアゾリル部分は
【化５】
2019528301.tif 000006
である。
好ましいベンゾオキサゾリル部分は
【化６】
2019528301.tif 000007
である。
好ましいトリアゾロピリジニル部分は
【化７】
2019528301.tif 000008
である。
好ましいピラゾロピリジニル部分は
【化８】
2019528301.tif 000009
である。
好ましいキナゾリノニル部分は
【化９】
2019528301.tif 000010
を含む。
好ましいイミダゾピリダジニル部分は
【化１０】
2019528301.tif 000011
を含む。
【００２８】
ある実施態様において、ヘテロアリールは、ハロ(例えば、Ｆ、ＣｌまたはＢｒ)である少なくとも１個または２個のＲ２で置換されている。ある実施態様において、ヘテロアリールは、Ｃ１−Ｃ６アルキル(例えば、メチル、エチル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチルなど)である少なくとも１個または２個のＲ２で置換されている。ある実施態様において、ヘテロアリールは、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル(例えば、ＣＦ３)である少なくとも１個または２個のＲ２で置換されている。ある実施態様において、ヘテロアリールは、−ＣＮである少なくとも１個または２個のＲ２で置換されている。ある実施態様において、ヘテロアリールは、−ＯＣ１−Ｃ６アルキル(例えば、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシなど)である少なくとも１個または２個のＲ２で置換されている。ある実施態様において、ヘテロアリールは、−ＯＣ１−Ｃ６ハロアルキル(例えば、−ＯＣＦ３)である少なくとも１個または２個のＲ２で置換されている。ある実施態様において、ヘテロアリールは、−ＣＯＯＨである少なくとも１個または２個のＲ２で置換されている。ある実施態様において、ヘテロアリールは、−ＣＯＯＣ１−Ｃ６アルキル(例えば、ＣＯＯＭｅ、−ＣＯＯＥｔなど)である少なくとも１個または２個のＲ２で置換されている。ある実施態様において、ヘテロアリールはジオキソラニルである１個のＲ２で置換されている。
【００２９】
本発明はまた式ＩおよびIIの薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体および溶媒和物も包含する。
【００３０】
式Ｉの下位式は、Ｖが結合であり、ＹがＣＨであり、ＷがＣＨであり、ｎが２であり、ＬがＣ１アルキレンであり、そしてＺが結合である式、例えば
【化１１】
2019528301.tif 000012
〔式中、ＸはＣＨであり、Ｒ４はＣ１−Ｃ２アルキルである。〕
を含む。式Ｉ−ＡおよびII−Ａの他の実施態様は、ＸはＮであり、Ｒ４はＣ１−Ｃ２アルキルであるものを含む。他の態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＣＨである。ある態様において、ＸはＮであり、ＴはＣＨである。他の態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＮである。他の態様において、ＸはＮであり、ＴはＮである。本発明はまた式Ｉ−ＡおよびII−Ａの薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体および溶媒和物も包含する。
【００３１】
式Ｉの下位式は、Ｖが結合であり、ＹがＮであり、ＷがＣＨであり、ｎが２であり、ＬがＣ１アルキレンであり、そしてＺが結合である式、例えば
【化１２】
2019528301.tif 000013
〔式中、ＸはＣＨであり、Ｒ４はＣ１−Ｃ２アルキルである。〕
を含む。式Ｉ−ＢおよびII−Ｂの他の実施態様は、ＸはＮであり、Ｒ４はＣ１−Ｃ２アルキルであるものを含む。他の態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＣＨである。ある態様において、ＸはＮであり、ＴはＣＨである。他の態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＮである。他の態様において、ＸはＮであり、ＴはＮである。本発明はまた式Ｉ−ＢおよびII−Ｂの薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体および溶媒和物も包含する。
【００３２】
式Ｉの下位式は、Ｖが結合であり、ＹがＣＨであり、ＷがＣＨであり、ｎが２であり、ＬがＣ１アルキレンであり、そしてＺがＮＨである式、例えば
【化１３】
2019528301.tif 000014
〔式中、ＸはＣＨであり、Ｒ４はＣ１−Ｃ２アルキルである。〕
を含む。式Ｉ−ＣおよびII−Ｃの他の実施態様は、ＸはＮであり、Ｒ４はＣ１−Ｃ２アルキルであるものを含む。他の態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＣＨである。ある態様において、ＸはＮであり、ＴはＣＨである。他の態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＮである。他の態様において、ＸはＮであり、ＴはＮである。本発明はまた式Ｉ−ＣおよびII−Ｃの薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体および溶媒和物も包含する。
【００３３】
式Ｉの下位式は、Ｖが結合であり、ＹがＮであり、ＷがＣＨであり、ｎが２であり、ＬがＣ１アルキレンであり、そしてＺがＮＨである式、例えば
【化１４】
2019528301.tif 000015
〔式中、ＸはＣＨであり、Ｒ４はＣ１−Ｃ２アルキルである。〕
を含む。式Ｉ−ＤおよびII−Ｄの他の実施態様は、ＸはＮであり、Ｒ４はＣ１−Ｃ２アルキルであるものを含む。他の態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＣＨである。ある態様において、ＸはＮであり、ＴはＣＨである。他の態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＮである。他の態様において、ＸはＮであり、ＴはＮである。本発明はまた式Ｉ−ＤおよびII−Ｄの薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体および溶媒和物も包含する。
【００３４】
式Ｉの下位式は、Ｖが−Ｏ−であり、ＹがＣＨであり、ＷがＣＨであり、ｎが２であり、ＬがＣ１アルキレンであり、そしてＺが結合である式、例えば
【化１５】
2019528301.tif 000016
〔式中、ＸはＣＨであり、Ｒ４はＣ１−Ｃ２アルキルである。〕
を含む。式Ｉ−ＥおよびII−Ｅの他の実施態様は、ＸはＮであり、Ｒ４はＣ１−Ｃ２アルキルであるものを含む。他の態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＣＨである。ある態様において、ＸはＮであり、ＴはＣＨである。他の態様において、ＸはＣＨであり、ＴはＮである。他の態様において、ＸはＮであり、ＴはＮである。本発明はまた式Ｉ−ＥおよびII−Ｅの薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体および溶媒和物も包含する。
【００３５】
他の実施態様において、本発明の化合物は、ヒトＩＤＯ  ＩＣ５０値＞５０nMを有する。他の実施態様において、本発明の化合物は、ヒトＩＤＯ  ＩＣ５０値≦５０nMを有する。他の実施態様において、本発明の化合物は、ヒトＩＤＯ  ＩＣ５０値＜５nMを有する。
【００３６】
本発明の他の実施態様
他の実施態様において、本発明は、１以上の本発明の化合物および／またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体、その互変異性体もしくはその溶媒和物を含む、組成物を提供する。
【００３７】
他の実施態様において、本発明は、薬学的に許容される担体ならびに本発明の化合物および／またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体、その互変異性体もしくはその溶媒和物の少なくとも一つを含む、医薬組成物を提供する。
【００３８】
他の実施態様において、本発明は、薬学的に許容される担体ならびに治療有効量の本発明の化合物および／またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体、その互変異性体もしくはその溶媒和物の少なくとも一つを含む、医薬組成物を提供する。
【００３９】
他の実施態様において、本発明は、本発明の化合物および／またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体、その互変異性体もしくはその溶媒和物を製造する方法を提供する。
【００４０】
他の実施態様において、本発明は、本発明の化合物および／またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体、その互変異性体もしくはその溶媒和物の製造のための中間体を提供する。
【００４１】
他の実施態様において、本発明は、種々のタイプの癌、ウイルス感染および／または自己免疫疾患を処置および／または予防する方法であって、このような処置および／または予防を必要とする患者に、治療有効量の１以上の本発明の化合物および／またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体またはその互変異性体を単独で、または、場合により、他の本発明の化合物および／または化学療法剤またはシグナル伝達因子阻害剤などの少なくとも一つの他のタイプの治療剤と組み合わせて投与することを含む、方法を提供する。
【００４２】
他の実施態様において、本発明は、治療に使用するための本発明の化合物および／またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体またはその互変異性体を提供する。
【００４３】
他の実施態様において、本発明は、治療において同時に、別々にまたは逐次的に使用するための、本発明の化合物および／またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体またはその互変異性体およびさらなる治療剤の組み合わせ製剤を提供する。
【００４４】
他の実施態様において、本発明は、ＩＤＯの酵素活性と関連する複数の疾患または障害の処置および／または予防において同時に、別々にまたは逐次的に使用するための、本発明の化合物および／またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体またはその互変異性体およびさらなる治療剤の組み合わせ製剤を提供する。
【００４５】
他の態様において、本発明は、ＩＤＯの酵素活性に対して感受性である医学的状態を有するまたはその素因がある患者を処置する方法を提供する。多数の医学的状態が処置され得る。該方法は、該患者に治療有効量のここに記載する化合物および／またはその薬学的に許容される塩、その立体異性体またはその互変異性体を投与することを含む。例えば、ここに記載する化合物を、ウイルス感染、増殖性疾患(例えば、癌)および自己免疫疾患の処置または予防に使用し得る。
【００４６】
治療応用
本発明の化合物および医薬組成物は、ＩＤＯの酵素活性に対して感受性であるあらゆる疾患または状態の処置または予防に有用である。これらは、ウイルスおよび他の感染(例えば、皮膚感染、ＧＩ感染、尿路感染、尿生殖器感染、全身感染)、増殖性疾患(例えば、癌)および自己免疫疾患(例えば、関節リウマチ、狼瘡)を含む。化合物および医薬組成物を、動物、好ましくは哺乳動物(例えば、家畜化動物、ネコ、イヌ、マウス、ラット)、より好ましくはヒトに投与し得る。患者に化合物または医薬組成物を送達するために任意の投与方法が使用され得る。ある実施態様において、化合物または医薬組成物は経口投与される。他の実施態様において、化合物または医薬組成物は非経腸投与される。
【００４７】
本発明の化合物は、酵素インドールアミン−２,３−ジオキシゲナーゼ(ＩＤＯ)の活性を調節できる。用語“調節する”は、酵素または受容体の活性を増加または減少させる能力をいうことを意図する。従って、本発明の化合物を、該酵素とここに記載する化合物または組成物の任意の１以上を接触させることによる、ＩＤＯを調節する方法に使用できる。ある実施態様において、本発明の化合物はＩＤＯの阻害剤として作用し得る。さらなる実施態様において、本発明の化合物を、調節(例えば、阻害)量の本発明の化合物の投与により、ＩＤＯの調節が必要である細胞または個体における該酵素の活性の調節に使用できる。
【００４８】
本発明の化合物は、酵素インドールアミン−２,３−ジオキシゲナーゼ(ＩＤＯ)の活性を阻害できる。例えば、本発明の化合物を、阻害量の本発明の化合物の投与により、ＩＤＯの調節を必要とする細胞または個体において該酵素の活性を阻害するために使用できる。
【００４９】
本発明は、さらに、組織、生存生物または細胞培養などのＩＤＯ発現細胞を含む系における、トリプトファンの分解を阻害する方法を提供する。ある実施態様において、本発明は、有効量のここに提供する化合物または組成物の投与により、哺乳動物における細胞外トリプトファンレベルを変える(例えば、増加させる)方法を提供する。トリプトファンレベルおよびトリプトファン分解を測定する方法は、当分野で慣用である。
【００５０】
本発明は、さらに、有効量のここに提供する化合物または組成物を患者に投与することによる、患者におけるＩＤＯ介在免疫抑制などの免疫抑制を阻止する方法を提供する。ＩＤＯ介在免疫抑制は、例えば、癌、腫瘍増殖、転移、ウイルス感染およびウイルス複製と関連している。
【００５１】
本発明は、さらに、個体(例えば、患者)におけるＩＤＯの異常活性および／または過発現を含む活性または発現と関係する疾患を処置する方法であって、このような処置を必要とする個体に治療有効量または用量の本発明の化合物またはその医薬組成物を投与することを含む、方法を提供する。疾患例は、ＩＤＯ酵素の過発現または異常活性などの発現または活性と直接的または間接的に関連するあらゆる疾患、障害または状態を含み得る。ＩＤＯ関連疾患は、酵素活性の調節により予防、軽減または治癒され得るあらゆる疾患、障害または状態も含み得る。ＩＤＯ関連疾患の例は、癌、ＨＩＶ感染およびＨＣＶ感染などのウイルス感染、うつ病、アルツハイマー病およびハンチントン病などの神経変性障害、外傷、加齢性白内障、臓器移植(例えば、臓器移植片拒絶)ならびに喘息、関節リウマチ、多発性硬化症、アレルギー性炎症、炎症性腸疾患、乾癬および全身性エリテマトーデスを含む自己免疫疾患を含む。
【００５２】
ここで使用する用語“細胞”は、インビトロ、エクスビボまたはインビボにある細胞をいうことを意図する。ある実施態様において、エクスビボ細胞は、哺乳動物などの生物から切除した組織サンプルの一部であり得る。ある実施態様において、インビトロ細胞は、細胞培養における培養であり得る。ある実施態様において、インビボ細胞は、哺乳動物などの生物中で生存している細胞である。
【００５３】
ここで使用する用語“接触”は、インビトロ系またはインビボ系において示す複数部分を一緒にすることをいう。例えば、ＩＤＯ酵素と本発明の化合物の“接触”は、本発明の化合物をＩＤＯを有するヒトなどの個体または患者に投与すること、ならびに、例えば、本発明の化合物をＩＤＯ酵素を含む細胞もしくは精製調製物を含むサンプルに導入することを含む。
【００５４】
用語“ＩＤＯ阻害剤”は、インドールアミン２,３−ジオキシゲナーゼ(ＩＤＯ)の活性を阻害し、それにより、ＩＤＯ介在免疫抑制を逆転させることができる薬剤をいう。ＩＤＯ阻害剤はＩＤＯ１および／またはＩＤＯ２(ＩＮＤＯＬ１)を阻害し得る。ＩＤＯ阻害剤は可逆性または不可逆性ＩＤＯ阻害剤であり得る。“可逆性ＩＤＯ阻害剤”は触媒部位または非触媒部位でＩＤＯ酵素活性を可逆性に阻害する化合物であり、“不可逆性ＩＤＯ阻害剤”は、ＩＤＯ酵素活性を不可逆性に破壊する化合物である。
【００５５】
本発明の化合物で処置し得る癌のタイプは、脳の癌、皮膚癌、膀胱癌、卵巣癌、乳癌、胃癌、膵臓癌、前立腺癌、結腸癌、血液癌、肺癌および骨の癌を含むが、これらに限定されない。このような癌タイプの例は、神経芽腫、直腸癌、結腸癌、家族性大腸腺腫症癌および遺伝性非ポリープ性結腸直腸癌などの腸管癌、食道癌、陰唇癌、喉頭癌、下咽頭癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、髄様甲状腺癌、乳頭様甲状腺癌、腎臓癌、腎実質癌、卵巣癌、子宮頸癌、子宮体癌、子宮内膜癌、絨毛癌、膵臓癌、前立腺癌、精巣癌、乳癌、泌尿器癌、黒色腫、神経膠芽腫、星状細胞腫、髄膜腫、髄芽腫および末梢神経外胚葉腫瘍などの脳腫瘍、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、急性リンパ性白血病(ＡＬＬ)、慢性リンパ性白血病(ＣＬＬ)、急性骨髄性白血病(ＡＭＬ)、慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)、成人Ｔ細胞白血病リンパ腫、汎発性大Ｂ細胞リンパ腫(ＤＬＢＣＬ)、肝細胞癌、胆嚢癌、気管支癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、頭蓋咽頭腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫および形質細胞腫を含む。
【００５６】
それ故に、他の実施態様によると、本発明は、本発明の化合物または組成物をそれを必要とする患者に提供することによる、自己免疫疾患を処置する方法を提供する。このような自己免疫疾患の例は、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、シャープ症候群、クレスト症候群(石灰沈着、レイノー症候群、食道運動不全、毛細血管拡張症)、皮膚筋炎、脈管炎(ウェゲナー病)およびシェーグレン症候群などの膠原病、グッドパスチャー症候群、急速に進行する糸球体腎炎および膜性増殖性糸球体腎炎II型などの腎疾患、Ｉ型糖尿病、自己免疫性多腺性内分泌不全症・カンジダ症・外胚葉ジストロフィー(ＡＰＥＣＥＤ)、自己免疫性副甲状腺機能亢進症、悪性貧血、性腺機能不全、特発性アジソン病、甲状腺機能亢進症、橋本甲状腺炎および原発性粘液水腫などの内分泌疾患、尋常性天疱瘡、類天疱瘡、妊娠性疱疹、表皮水疱症および重症型多型紅斑などの皮膚疾患、原発性胆汁性肝硬変、自己免疫性胆管炎、自己免疫性肝炎１型、自己免疫性肝炎２型、原発性硬化性胆管炎などの肝疾患、多発性硬化症、重症筋無力症、ランバート・イートン筋無力症候群、後天性神経性筋強直症、ギラン・バレー症候群(ミラー・フィッシャー症候群)、スティッフマン症候群、小脳変性、運動失調、眼球クローヌス、感覚性ニューロパチーおよびアカラシアなどの神経疾患、自己免疫性溶血性貧血、特発性血小板減少性紫斑病(ウェルホーフ病)などの血液疾患、ＡＩＤＳ、マラリアおよびシャーガス病などの自己免疫反応が関係する感染症を含むが、これらに限定されない。
【００５７】
例えば、抗ウイルス剤、化学療法剤または他の抗癌剤、免疫増強剤、免疫抑制剤、放射線、抗腫瘍および抗ウイルスワクチン、サイトカイン療法(例えば、ＩＬ−２およびＧＭ−ＣＳＦ)および／またはチロシンキナーゼ阻害剤などの１以上のさらなる薬剤または処置法を、ＩＤＯ関連疾患、障害または状態処置のために場合により本発明の化合物と組み合わせて使用し得る。これら薬剤を、本発明化合物と、単回投与量形態で組み合わせてよくまたはこれら薬剤を別の投与形態で同時にまたは逐次的に投与してよい。
【００５８】
適当な化学療法剤または他の抗癌剤は、例えば、アルキル化剤(ナイトロジェンマスタード、エチレンイミン誘導体、アルキルスルホネート、ニトロソウレアおよびトリアゼンを含むが、これらに限定されない)、例えばウラシルマスタード、クロルメチン、シクロホスファミド(シトキサン(登録商標))、イホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ピポブロマン、トリエチレン−メラミン、トリエチレンチオホスホラミン、ブスルファン、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン、ダカルバジンおよびテモゾロミドを含む。
【００５９】
黒色腫の処置において、本発明の化合物と組み合わせて使用するのに適する薬剤は、場合により、カルムスチン(ＢＣＮＵ)およびシスプラチンなどの他の化学療法薬物と組み合わせたダカルバジン(ＤＴＩＣ)；ＤＴＩＣ、ＢＣＮＵ、シスプラチンおよびタモキシフェンからなる“ダートマスレジメン”；シスプラチン、ビンブラスチンおよびＤＴＩＣ、テモゾロミドまたはヤーボイ(登録商標)の組み合わせを含む。本発明の化合物を、黒色腫の処置において、インターフェロンアルファ、インターロイキン２および腫瘍壊死因子(ＴＮＦ)などのサイトカインを含む免疫療法薬物とも組み合わせ得る。
【００６０】
黒色腫の処置において、本発明の化合物をワクチン療法とも組み合わせて使用し得る。抗黒色腫ワクチンは、ある意味で、ポリオ、麻疹および流行性耳下腺炎などのウイルスが原因の疾患の予防に使用される抗ウイルスワクチンに類似する。弱化黒色腫細胞または抗原と称される黒色腫細胞の一部を、黒色腫細胞を破壊する体の免疫系を刺激するために、患者に注射し得る。
【００６１】
腕または脚に限局する黒色腫はまた温熱単離四肢灌流療法を使用して、１以上の本発明の化合物を含む薬剤の組み合わせでも処置され得る。この処置プロトコールは、関連肢の循環を体の残りの部分から一過性に分離し、高用量の化学療法を該肢に影響を供給する動脈に注射し、そうしなければ重篤な副作用を引き起こす可能性がある用量に内臓を曝すことなく、腫瘍領域に高用量を提供する。通常流体を１０２〜１０４°Fに温める。メルファランは、この化学療法手順に最もしばしば使用される薬物である。これは、腫瘍壊死因子(ＴＮＦ)と称される他の薬物の投与でも行われ得る。
【００６２】
適当な化学療法剤または他の抗癌剤は、例えば、代謝拮抗剤(葉酸アンタゴニスト、ピリミジンアナログ、プリンアナログおよびアデノシンデアミナーゼ阻害剤を含むが、これらに限定されない)、例えばメトトレキサート、５−フルオロウラシル、フロクスウリジン、シタラビン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、フルダラビンホスフェート、ペントスタチンおよびゲムシタビンを含む。
【００６３】
適当な化学療法剤または他の抗癌剤は、さらに、例えば、ある種の天然物およびその誘導体(例えば、ビンカアルカロイド、抗腫瘍抗生物質、酵素、リンホカインおよびエピポドフィロトキシン)、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ａｒａ−Ｃ、パクリタキセル(タキソール)、ミトラマイシン、デオキシコホルマイシン、マイトマイシン−Ｃ、Ｌ−アスパラギナーゼ、インターフェロン(特にＩＦＮ−ａ)、エトポシドおよびテニポシドを含む。
【００６４】
他の細胞毒性剤は、ナベルビン、ＣＰＴ−１１、アナストロゾール、レトロゾール、カペシタビン、ラロキシフェンおよびドロロキシフェンを含む。
【００６５】
また適するのは、エピポドフィロトキシン；抗新生物酵素；トポイソメラーゼ阻害剤；プロカルバジン；ミトキサントロン；シスプラチンおよびカルボプラチンなどの白金配位化合物；生物学的応答修飾剤；増殖阻害剤；抗ホルモン治療剤；ロイコボリン；テガフール；および造血性増殖因子などの細胞毒性剤である。
【００６６】
他の抗癌剤は、トラスツズマブ(ハーセプチン(登録商標))、ＣＴＬＡ−４、４−１ＢＢおよびＰＤ−１に対する抗体またはサイトカイン(ＩＬ−１０またはＴＧＦ−β)に対する抗体などの抗体治療剤を含む。
【００６７】
他の抗癌剤はＣＣＲ２およびＣＣＲ４を含むケモカイン受容体に対するアンタゴニストなどの免疫細胞遊走を遮断するものも含む。
【００６８】
他の抗癌剤はまたアジュバントまたは養子Ｔ細胞移入などの免疫系を増強するものも含む。
【００６９】
抗癌ワクチンは、樹状細胞、合成ペプチド、ＤＮＡワクチンおよび組み換えウイルスを含む。
【００７０】
本発明の医薬組成物は、場合により少なくとも一つのシグナル伝達阻害剤(ＳＴＩ)を含み得る。“シグナル伝達阻害剤”は、癌細胞の通常の機能におけるシグナル伝達経路の１以上の重要な段階を選択的に阻害し、それによりアポトーシスに導く薬剤である。適当なＳＴＩは、(ｉ)例えば、ＳＴＩ  ５７１(グリベック(登録商標))などのｂｃｒ／ａｂｌキナーゼ阻害剤；(ii)例えば、キナーゼ阻害剤(イレッサ(登録商標)、ＳＳＩ−７７４)および抗体(Imclone: C225 [Goldstein et al., Clin. Cancer Res., 1: 1311-1318 (1995)]およびAbgenix: ABX-EGF)などの上皮細胞増殖因子(ＥＧＦ)受容体阻害剤；(iii)例えば、Ｌ−７４４,８３２(Kohl et al., Nat. Med., 1(8): 792-797 (1995))などのファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤(ＦＴＩ)などのｈｅｒ−２／ｎｅｕ受容体阻害剤；(iv)例えば、ラパマイシンなどのＡｋｔファミリーキナーゼＡｋｔ経路阻害剤(例えば、Sekulic et al., Cancer Res., 60: 3504-3513 (2000)参照)；(ｖ)例えば、フラボピリドールおよびＵＣＮ−Ｏ１などの細胞周期キナーゼ阻害剤(例えば、Sausville, Curr. Med. Chem. Anti-Canc. Agents, 3: 47-56 (2003)参照)；および(vi)例えば、ＬＹ２９４００２などのホスファチジルイノシトールキナーゼ阻害剤(例えば、Vlahos et al., J. Biol. Chem., 269: 5241-5248 (1994)参照)を含むが、これらに限定されない。あるいは、少なくとも一つのＳＴＩおよび少なくとも一つのＩＤＯ阻害剤は別の医薬組成物にあり得る。本発明の具体的実施態様において、少なくとも一つのＩＤＯ阻害剤および少なくとも一つのＳＴＩは、患者に同時にまたは逐次的に投与され得る。換言すると、少なくとも一つのＩＤＯ阻害剤を最初に投与してよく、少なくとも一つのＳＴＩを最初に投与してよくまたは少なくとも一つのＩＤＯ阻害剤および少なくとも一つのＳＴＩを同時に投与してよい。さらに、１を超えるＩＤＯ阻害剤および／またはＳＴＩを使用するとき、これら化合物を任意の順番で投与し得る。
【００７１】
本発明は、さらに、薬学的に許容される担体中に少なくとも一つのＩＤＯ阻害剤、場合により、少なくとも一つの化学療法薬物および場合により、少なくとも一つの抗ウイルス剤を含む、患者における慢性ウイルス感染を処置するための医薬組成物を提供する。医薬組成物は、少なくとも一つの確立されている(既知)ＩＤＯ阻害剤に加えて、本発明の少なくとも一つのＩＤＯ阻害剤を含み得る。具体的実施態様において、医薬組成物のＩＤＯ阻害剤の少なくとも一つは、式(Ｉ)および(II)の化合物からなる群から選択される。
【００７２】
また提供されるのは、有効量の上記医薬組成物の投与による、患者における慢性ウイルス感染を処置する方法である。
【００７３】
本発明の具体的実施態様において、少なくとも一つのＩＤＯ阻害剤および少なくとも一つの化学療法剤を患者に同時にまたは逐次的に投与し得る。換言すると、少なくとも一つのＩＤＯ阻害剤を最初に投与してよく、少なくとも一つの化学療法剤を最初に投与してよくまたは少なくとも一つのＩＤＯ阻害剤および少なくとも一つのＳＴＩを同時に投与してよい。さらに、１を超えるＩＤＯ阻害剤および／または化学療法剤を使用するとき、これら化合物を任意の順番で投与し得る。同様に、任意の抗ウイルス剤またはＳＴＩを、ＩＤＯ阻害剤の投与に対して任意の時点でまた投与し得る。
【００７４】
本組み合わせ処置を使用して処置し得る慢性ウイルス感染は、Ｃ型肝炎ウイルス(ＨＣＶ)、ヒト乳頭腫ウイルス(ＨＰＶ)、サイトメガロウイルス(ＣＭＶ)、単純ヘルペスウイルス(ＨＳＶ)、エプスタイン・バーウイルス(ＥＢＶ)、水痘・帯状疱疹ウイルス、コクサッキーウイルス、ヒト免疫不全ウイルス(ＨＩＶ)が原因の疾患を含むが、これらに限定されない。注意されるべきは、寄生虫感染症(例えば、マラリア)も、抗ウイルス剤の替わりに寄生虫感染状態を処置することで知られている化合物を場合により加えて、上記方法により処置され得る。
【００７５】
さらに他の実施態様において、本発明の少なくとも一つのＩＤＯ阻害剤を含む医薬組成物を、バルーン内視鏡またはステント留置後などにおける動脈性再狭窄を予防するために患者に投与し得る。特定の実施態様において、医薬組成物は、さらに少なくとも一つのタキサン(例えば、パクリタキセル(タキソール)；例えば、Scheller et al., Circulation, 110: 810-814 (2004)参照)を含む。
【００７６】
本発明の化合物と組み合わせた使用が企図される適当な抗ウイルス剤は、ヌクレオシドおよびヌクレオチド逆転写酵素阻害剤(ＮＲＴＩ)、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤(ＮＮＲＴＩ)、プロテアーゼ阻害剤および他の抗ウイルス薬物を含み得る。
【００７７】
適当なＮＲＴＩの例はジドブジン(ＡＺＴ)；ジダノシン(ｄｄｌ)；ザルシタビン(ｄｄＣ)；スタブジン(ｄ４Ｔ)；ラミブジン(３ＴＣ)；アバカビル(１５９２Ｕ８９)；アデフォビルジピボキシル[ビス(ＰＯＭ)−ＰＭＥＡ]；ロブカビル(ＢＭＳ−１８０１９４)；ＢＣＨ−Ｉ０６５２；エムトリシタビン[(−)−ＦＴＣ]；ベータ−Ｌ−ＦＤ４ベータ−Ｌ−Ｄ４Ｃとも称され、名称ベータ−Ｌ−２’,３’−ジデオキシ−５−フルオロ−シチジン)；ＤＡＰＤ、((−)−ベータ−Ｄ−２,６−ジアミノ−プリンジオキソラン)；およびロデノシン(ＦｄｄＡ)を含む。典型的な適当なＮＮＲＴＩは、ネビラピン(ＢＩ−ＲＧ−５８７)；デラビルジン(ＢＨＡＰ、Ｕ−９０１５２)；エファビレンツ(ＤＭＰ−２６６)；ＰＮＵ−１４２７２１；ＡＧ−１５４９；ＭＫＣ−４４２(１−(エトキシ−メチル)−５−(１−メチルエチル)−６−(フェニルメチル)−(２,４(１Ｈ,３Ｈ)−ピリミジンジオン)；および(＋)−カラノリドＡ(ＮSC−６７５４５１)およびＢを含む。典型的な適当なプロテアーゼ阻害剤は、サキナビル(Ｒｏ  ３１−８９５９)；リトナビル(ＡＢＴ−５３８)；インジナビル(ＭＫ−６３９)；ネルフィナビル(ＡＧ−１３４３)；アンプレナビル(１４１Ｗ９４)；ラシナビル(ＢＭＳ−２３４４７５)；ＤＭＰ−４５０；ＢＭＳ−２３２２６２３；ＡＢＴ−３７８；およびＡＧ−１５４９を含む。他の抗ウイルス剤は、ヒドロキシ尿素、リバビリン、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ペンタフシドおよびYissum Project No. 11607を含む。
【００７８】
腫瘍免疫療法剤との組み合わせ
さらに提供されるのは、式Ｉまたは式IIの化合物を１以上の腫瘍免疫療法剤と投与する、処置方法である。ここで使用する腫瘍免疫療法剤は、癌免疫療法剤としても知られ、対象における免疫応答の増強、刺激および／または上方制御に有効である。
【００７９】
ある態様において、式Ｉまたは式IIの化合物は、腫瘍免疫療法剤の投与前に逐次的に投与される。他の態様において、式Ｉまたは式IIの化合物は、腫瘍免疫療法剤と同時に投与される。さらに他の態様において、式Ｉまたは式IIの化合物は、腫瘍免疫療法剤の投与後に逐次的に投与される。
【００８０】
他の態様において、式Ｉまたは式IIの化合物は腫瘍免疫療法剤と共製剤化され得る。
【００８１】
腫瘍免疫療法剤は、例えば、小分子薬物、抗体または他の生物学的または小分子を含む。生物学的腫瘍免疫療法剤の例は、癌ワクチン、抗体およびサイトカインを含むが、これらに限定されない。ある態様において、抗体はモノクローナル抗体である。他の態様において、モノクローナル抗体はヒト化されているまたはヒトである。
【００８２】
ある態様において、腫瘍免疫療法剤は、Ｔ細胞の(ｉ)刺激(共刺激を含む)受容体のアゴニストまたは(ii)阻害(共阻害を含む)シグナルのアンタゴニストであり、この両者とも抗原特異的Ｔ細胞応答の増強に至る(免疫チェックポイントレギュレーターと称されることもある)。
【００８３】
刺激分子および阻害分子の一部は、免疫グロブリンスーパーファミリー(ＩｇＳＦ)のメンバーである。共刺激または共阻害受容体に結合する膜結合リガンドの一つの重要なファミリーは、Ｂ７−１、Ｂ７−２、Ｂ７−Ｈ１(ＰＤ−Ｌ１)、Ｂ７−ＤＣ(ＰＤ−Ｌ２)、Ｂ７−Ｈ２(ＩＣＯＳ−Ｌ)、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、Ｂ７−Ｈ５(VIＳＴＡ)およびＢ７−Ｈ６を含むＢ７ファミリーである。共刺激または共阻害受容体に結合する膜結合リガンドの他のファミリーは、ＣＤ４０およびＣＤ４０Ｌ、ＯＸ−４０、ＯＸ−４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ３０、ＣＤ３０Ｌ、４−１ＢＢＬ、ＣＤ１３７(４−１ＢＢ)、ＴＲＡＩＬ／Ａｐｏ２−Ｌ、ＴＲＡＩＬＲ１／ＤＲ４、ＴＲＡＩＬＲ２／ＤＲ５、ＴＲＡＩＬＲ３、ＴＲＡＩＬＲ４、ＯＰＧ、ＲＡＮＫ、ＲＡＮＫＬ、ＴＷＥＡＫＲ／Ｆｎ１４、ＴＷＥＡＫ、ＢＡＦＦＲ、ＥＤＡＲ、ＸＥＤＡＲ、ＴＡＣＩ、ＡＰＲＩＬ、ＢＣＭＡ、ＬＴβＲ、ＬＩＧＨＴ、ＤｃＲ３、ＨＶＥＭ、ＶＥＧＩ／ＴＬ１Ａ、ＴＲＡＭＰ／ＤＲ３、ＥＤＡＲ、ＥＤＡ１、ＸＥＤＡＲ、ＥＤＡ２、ＴＮＦＲ１、リンホトキシンα／ＴＮＦβ、ＴＮＦＲ２、ＴＮＦα、ＬＴβＲ、リンホトキシンα１β２、ＦＡＳ、ＦＡＳＬ、ＲＥＬＴ、ＤＲ６、ＴＲＯＹ、ＮＧＦＲを含む、同族ＴＮＦ受容体ファミリーメンバーに結合するＴＮＦファミリーの分子である。
【００８４】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、免疫応答刺激のために、Ｔ細胞活性化を阻害するサイトカイン(例えば、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、ＶＥＧＦおよび他の免疫抑制性サイトカイン)またはＴ細胞活性化を刺激するサイトカインである。
【００８５】
ある態様において、Ｔ細胞応答は、式Ｉまたは式IIの化合物と、(ｉ)ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ガレクチン９、ＣＥＡＣＡＭ−１、ＢＴＬＡ、ＣＤ６９、ガレクチン−１、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１１３、ＧＰＲ５６、VIＳＴＡ、２Ｂ４、ＣＤ４８、ＧＡＲＰ、ＰＤ１Ｈ、ＬＡＩＲ１、ＴＩＭ−１およびＴＩＭ−４などのＴ細胞活性化を阻害する(例えば、免疫チェックポイント阻害剤)タンパク質のアンタゴニストおよび(ii)Ｂ７−１、Ｂ７−２、ＣＤ２８、４−１ＢＢ(ＣＤ１３７)、４−１ＢＢＬ、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳ−Ｌ、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、ＧＩＴＲ、ＧＩＴＲＬ、ＣＤ７０、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＤＲ３およびＣＤ２８ＨなどのＴ細胞活性化を刺激するタンパク質のアゴニストの１以上の組み合わせにより刺激され得る。
【００８６】
癌の処置のために式Ｉまたは式IIの化合物と組み合わせ得る他の薬剤は、ＮＫ細胞の阻害性受容体のアンタゴニストまたはＮＫ細胞の活性化受容体のアゴニストを含む。例えば、式Ｉまたは式IIの化合物を、リリルマブなどのＫＩＲのアンタゴニストと組み合わせ得る。
【００８７】
組み合わせ治療のためのさらに他の薬剤は、ＲＧ７１５５(ＷＯ１１／７００２４、ＷＯ１１／１０７５５３、ＷＯ１１／１３１４０７、ＷＯ１３／８７６９９、ＷＯ１３／１１９７１６、ＷＯ１３／１３２０４４)またはＦＰＡ−００８(ＷＯ１１／１４０２４９、ＷＯ１３／１６９２６４、ＷＯ１４／０３６３５７)を含むＣＳＦ−１Ｒアンタゴニスト抗体などのＣＳＦ−１Ｒアンタゴニストを含むが、これらに限定されないマクロファージまたは単球を阻害または枯渇させる薬剤を含む。
【００８８】
他の態様において、式Ｉまたは式IIの化合物を、正の共刺激受容体をライゲートするアゴニスト剤、阻害受容体を介するシグナル伝達を減弱させる遮断剤、アンタゴニストおよび１以上の抗腫瘍Ｔ細胞の頻度を全身的に増加させる薬剤、腫瘍微小環境内の明確な免疫抑制経路に打ち勝つ薬剤(例えば、阻害性受容体結合(例えば、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１相互作用)遮断、Ｔｒｅｇ枯渇または阻害(例えば、抗ＣＤ２５モノクローナル抗体(例えば、ダクリズマブ)使用またはエクスビボ抗ＣＤ２５ビーズ枯渇による)、ＩＤＯなどの代謝酵素阻害またはＴ細胞アネルギーまたは消耗の回復／防止)および腫瘍部位での自然免疫活性化および／または炎症を誘発する薬剤の１以上と使用し得る。
【００８９】
ある態様において、腫瘍免疫療法剤は、アンタゴニストＣＴＬＡ−４抗体などのＣＴＬＡ−４アンタゴニストである。適当なＣＴＬＡ−４抗体は、例えば、ヤーボイ(登録商標)(イピリムマブ)またはトレメリムマブを含む。
【００９０】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、アンタゴニストＰＤ−１抗体などのＰＤ−１アンタゴニストである。適当なＰＤ−１抗体は、例えば、オプジーボ(登録商標)(ニボルマブ)、キイトルーダ(登録商標)(ペムブロリズマブ)またはＭＥジ−０６８０(ＡＭＰ−５１４；ＷＯ２０１２／１４５４９３)を含む。腫瘍免疫療法剤は、ピディリズマブ(ＣＴ−０１１)を含み得るが、そのＰＤ−１結合についての特異性は疑問がある。ＰＤ−１受容体を標的とする他のアプローチは、ＩｇＧ１のＦｃに融合したＰＤ−Ｌ２(Ｂ７−ＤＣ)の細胞外ドメインからなる、ＡＭＰ−２２４と称される組み換えタンパク質である。
【００９１】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、アンタゴニストＰＤ−Ｌ１抗体などのＰＤ−Ｌ１アンタゴニストである。適当なＰＤ−Ｌ１抗体は、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ(ＲＧ７４４６；ＷＯ２０１０／０７７６３４)、デュルバルマブ(ＭＥＤＩ４７３６)、ＢＭＳ−９３６５５９(ＷＯ２００７／００５８７４)およびＭＳＢ００１０７１８Ｃ(ＷＯ２０１３／７９１７４)を含む。
【００９２】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、アンタゴニストＬＡＧ−３抗体などのＬＡＧ−３アンタゴニストである。適当なＬＡＧ３抗体は、例えば、ＢＭＳ−９８６０１６(ＷＯ１０／１９５７０、ＷＯ１４／０８２１８)またはＩＭＰ−７３１またはＩＭＰ−３２１(ＷＯ０８／１３２６０１、ＷＯ０９／４４２７３)を含む。
【００９３】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、アゴニストＣＤ１３７抗体などのＣＤ１３７(４−１ＢＢ)アゴニストである。適当なＣＤ１３７抗体は、例えば、ウレルマブおよびＰＦ−０５０８２５６６(ＷＯ１２／３２４３３)を含む。
【００９４】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、アゴニストＧＩＴＲ抗体などのＧＩＴＲアゴニストである。適当なＧＩＴＲ抗体は、例えば、ＢＭＳ−９８６１５３、ＢＭＳ−９８６１５６、ＴＲＸ−５１８(ＷＯ０６／１０５０２１、ＷＯ０９／００９１１６)およびＭＫ−４１６６(ＷＯ１１／０２８６８３)を含む。
【００９５】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、ＩＤＯアンタゴニストである。適当なＩＤＯアンタゴニストは、例えば、ＩＮＣＢ−０２４３６０(ＷＯ２００６／１２２１５０、ＷＯ０７／７５５９８、ＷＯ０８／３６６５３、ＷＯ０８／３６６４２)、インドキシモドまたはＮＬＧ−９１９(ＷＯ０９／７３６２０、ＷＯ０９／１１５６６５２、ＷＯ１１／５６６５２、ＷＯ１２／１４２２３７)を含む。
【００９６】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、アゴニストＯＸ４０抗体などのＯＸ４０アゴニストである。適当なＯＸ４０抗体は、例えば、ＭＥジ−６３８３またはＭＥジ−６４６９を含む。
【００９７】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、アンタゴニストＯＸ４０抗体などのＯＸ４０Ｌアンタゴニストである。適当なＯＸ４０Ｌアンタゴニストは、例えば、ＲＧ−７８８８(ＷＯ０６／０２９８７９)を含む。
【００９８】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、アゴニストＣＤ４０抗体などのＣＤ４０アゴニストである。さらに他の実施態様において、腫瘍免疫療法剤は、アンタゴニストＣＤ４０抗体などのＣＤ４０アンタゴニストである。適当なＣＤ４０抗体は、例えば、ルカツムマブまたはダセツズマブを含む。
【００９９】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、アゴニストＣＤ２７抗体などのＣＤ２７アゴニストである。適当なＣＤ２７抗体は、例えば、バルリルマブを含む。
【０１００】
他の態様において、腫瘍免疫療法剤は、ＭＧＡ２７１(Ｂ７Ｈ３に対する)(ＷＯ１１／１０９４００)である。
【０１０１】
本発明はまた、例えば、ＩＤＯ関連疾患または障害、肥満、糖尿病およびここに言及する他の疾患の処置または予防に有用な医薬キットも含み、これは、治療有効量の本発明の化合物を含む医薬組成物を含む１以上の容器を含む。当業者には容易に明らかであるように、このようなキットは、所望により、例えば、１以上の薬学的に許容される担体の容器、さらなる容器などの、１以上の種々の慣用の医薬キット要素をさらに含み得る。投与すべき成分の量、投与のガイドラインおよび／または成分の混合のガイドラインを示す、添付文書またはラベルとしての指示もキットに包含され得る。
【０１０２】
組み合わせ治療は、各治療剤が異なる時点で投与されるこれら治療剤の逐次的様式での投与ならびにこれら治療剤または少なくともこれら治療剤の少なくとも二つが実質的の同時の様式での投与を包含することを意図する。実質的に同時の投与は、例えば、対象に各治療剤を固定比で含む単一投与量形態または各治療剤の複数の単一投与形態を投与することにより、達成され得る。各治療剤の逐次的または実質的に同時の投与は、経口経路、静脈内経路、筋肉内経路および粘膜組織を介する直接吸入を含むが、これらに限定されない任意の適当な経路により行われ得る。治療剤を同じ経路で投与しても、異なる経路で投与してもよい。例えば、選択下組み合わせの第一治療剤を静脈内注射により投与してよく、組み合わせの他の治療剤を経口で投与してよい。あるいは、例えば、全治療剤を経口で投与してよくまたは全治療剤を静脈内注射により投与してよい。組み合わせ治療はまた、他の生物学的活性成分および非薬物療法(例えば、手術または放射線処置)とさらに組み合わせた上記治療剤の投与も包含し得る。組み合わせ治療がさらに非薬物処置を含むとき、該非薬物処置は、治療剤と非薬物処置の組み合わせの共作用による有益な効果が達成される限り、任意の適当な時点で実施し得る。例えば、適切な場合、非薬物処置が治療剤の投与から、おそらく、数日または数週間時間的に離れていても、有益な効果がなお達成される。
【０１０３】
医薬組成物および投与
本発明はまた、１以上の薬学的に許容される担体(添加物)および／または希釈剤および場合により、１以上の上記治療剤と製剤化されている、治療有効量の１以上の式Ｉおよび／または式IIの化合物を含む、薬学的に許容される組成物も提供する。
【０１０４】
本発明の化合物は、ここに記載する使用の何れかのために、任意の適当な手段で、例えば、錠剤、カプセル(これらの各々は、徐放性または持続放出型製剤を含む)、丸剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンキ剤、懸濁液剤(ナノ懸濁液剤、マイクロ懸濁液剤、噴霧乾燥分散剤を含む)、シロップ剤およびエマルジョン剤など経口的に；舌下に；バッカルに；皮下、静脈内、筋肉内または胸骨内注射または点滴技術により非経腸的に(例えば、無菌注射可能水性または非水溶液または懸濁液として)；吸入スプレーによるなどの鼻粘膜への投与を含む経鼻的に；クリーム剤または軟膏剤の形態として局所的に；または坐薬の形態で直腸に投与できる。それらは単独で投与できるが、一般に、選択した投与経路および標準的製剤実務に基づき選択した医薬担体と共に投与される。
【０１０５】
用語“薬学的に許容される”は、妥当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー性応答または他の問題あるいは合併症を伴わず、合理的ベネフィット／リスク比において、ヒトおよび動物の組織と接触させる使用に適する、化合物、物質、組成物および／または投与形態をいうためにここで使用する。
【０１０６】
ここで使用される用語“薬学的に許容される担体”は、対象化合物の体のある臓器または部分から体の他の臓器または部分への運搬または輸送に関与する、液体または固体増量剤、希釈剤、添加物、製造補助(例えば、滑沢剤、タルク、マグネシウム、カルシウムまたはステアリン酸亜鉛またはステリン酸)または溶媒カプセル封入剤などの薬学的に許容される物質、組成物または媒体を意味する。各担体は、製剤の他の成分と適合性であり、患者に有害ではない点で、“許容される”ものでなければならない。
【０１０７】
用語“医薬組成物”は、少なくとも一つのさらなる薬学的に許容される担体と組み合わせて本発明の化合物を含む、組成物を意味する。“薬学的に許容される担体”は、投与および投与形態の性質により、適宜、希釈剤、防腐剤、充填剤、流動性制御剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、抗細菌剤、抗真菌剤、滑沢剤および分散剤などのアジュバント、添加物または媒体を含む、動物、特に、哺乳動物への生物学的活性剤の送達のために当分野で一般に許容される媒体をいう。
【０１０８】
薬学的に許容される担体は、十分に当分野の通常の技術の範囲内である多数の因子を考慮して製剤化される。これらは、製剤化する活性剤のタイプおよび性質；薬剤含有組成物を投与する対象；組成物の意図される投与経路；および処置する治療適応症を含むが、これらに限定されない。薬学的に許容される担体は、水性および非水性両方の液体媒体ならびに種々の固体および半固体投与形態を含む。このような担体は、活性剤に加えて多数の種々の成分および添加剤を含み得て、このようなさらなる成分は、当業者に周知の、例えば、活性剤の安定化剤、結合剤など、種々の理由で製剤に包含される。適当な薬学的に許容される担体および因子のその選択に関与する記載は、例えば、Allen, Jr., L.V. et al., Remington: The Science and Practice of Pharmacy (2 Volumes), 22nd Edition, Pharmaceutical Press (2012)などの多様な容易に入手可能な情報源に見ることができる。
【０１０９】
本発明の化合物の投与レジメンは、当然、特定の薬剤の薬力学的特徴およびその投与方式および経路；受け手の種、年齢、性別、健康状態、医学的状態および体重；症状の性質および程度；同時処置の種類；処置の頻度；投与経路、患者の腎機能および肝機能および所望の効果などの既知因子により変わる。
【０１１０】
一般的ガイダンスとして、各活性成分の１日経口用量は、記載した効果のために使用したとき、約０.００１〜約５０００mg／日、好ましくは約０.０１〜約１０００mg／日、最も好ましくは約０.１〜約２５０mg／日の範囲である。静脈内では、最も好ましい用量は低速点滴の間、約０.０１〜約１０mg／kg／分の範囲である。本発明の化合物は、１日１回用量で投与でき、または総１日用量を１日２回、３回または４回の分割用量で投与できる。
【０１１１】
化合物は、一般に、意図する投与形態、例えば、経口錠剤、カプセル剤、エリキシル剤およびシロップ剤に関連して適切に選択されているならびに慣用の薬務に一致する、適当な医薬希釈剤、添加物または担体(ここでは集合的に医薬担体と称する)と混合して投与される。
【０１１２】
投与に適する投与形態(医薬組成物)は、単位投与単位あたり約１mg〜約２０００mgの活性成分を含み得る。これらの医薬組成物において、活性成分は通常組成物の総重量に基づき、約０.１〜９５重量％の量で存在する。
【０１１３】
経口投与用の典型的カプセル剤は、本発明の化合物の少なくとも一つ(２５０mg)、ラクトース(７５mg)およびステアリン酸マグネシウム(１５mg)を含む。混合物を６０メッシュ篩を篩過させ、１号ゼラチンカプセルに充填する。
【０１１４】
典型的注射可能製剤は、本発明の化合物の少なくとも一つ(２５０mg)をバイアルに無菌的に入れ、無菌的に凍結乾燥し、密封することにより製造する。使用に際し、バイアルの内容物を２mLの生理食塩水と混合し、注射可能製剤を製造する。
【０１１５】
本発明は、その範囲内に、活性成分として治療有効量の本発明の化合物の少なくとも一つを、単独でまたは医薬担体と組み合わせて含む、医薬組成物を含む。場合により、本発明の化合物を単独で、本発明の他の化合物と組み合わせてまたは１以上の他の治療剤、例えば、抗癌剤もしくは他の薬学的活性物質と組み合わせて使用し得る。
【０１１６】
選択した投与経路に係わらず、適当な水和されている形態で使用し得る本発明の化合物および／または本発明の医薬組成物を、当業者に知られる慣用法により、薬学的に許容される投与形態に製剤化する。
【０１１７】
本発明の医薬組成物における活性成分の実際の投与量レベルは、特定の患者、組成物および投与方式について、患者に有毒とならずに、所望の治療効果を達成するのに有効である活性成分の量を得るように変化させ得る。
【０１１８】
選択する投与量レベルは、用いる本発明の特定の化合物またはそのエステル、塩もしくはアミドの活性、投与経路、投与時間、用いる本発明の特定の化合物の排泄または代謝速度、吸収の速度および程度、処置の期間、用いる特定の化合物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物および／または物質、処置する患者の年齢、性別、体重、状態、一般的健康状態および病歴および医薬分野で周知の類似の因子を含む多様な因子に依存する。
【０１１９】
通常の技術を有する医師または獣医師は、医薬組成物の必要な有効量を容易に決定し、処方できる。例えば、医師または獣医師は、医薬組成物において用いる本発明の化合物の用量を所望の治療効果の達成に必要であるより低いレベルで開始し、所望の効果が達成されるまで徐々に増量する。
【０１２０】
一般に、本発明の化合物の適当な１日用量は、治療効果を生じるために有効な最低用量である化合物の量である。このような有効用量は、一般に上記因子による。一般に、患者に対する本発明の化合物の経口、静脈内、脳室内および皮下用量は、約０.０１〜約５０mg／体重kg／日の範囲である。
【０１２１】
所望により、活性化合物の有効１日用量を、１日をとおして適当な間隔で別々に投与される２回、３回、４回、５回、６回またはそれ以上の分割用量として、場合により、単位投与形態で、投与され得る。本発明のある態様において、投与は１日１回投与である。
【０１２２】
本発明の化合物について単独で投与することは可能であるが、該化合物を医薬製剤(組成物)として投与するのが好ましい。
【０１２３】
定義
本明細書において特に断らない限り、単数表現での記載は、複数も含み得る。例えば、“ある”は、１または１以上をいい得る。
【０１２４】
特に断らない限り、原子価が充足されていない何れかのヘテロ原子は、原子価を充足させるのに十分な水素原子を有すると見なされる。
【０１２５】
本明細書および添付する特許請求の範囲をとおして、ある化学式または化学名は、その全ての立体および光学異性体ならびにラセミ体を、そのような異性体が存在するときは包含すべきである。特に断らない限り、全てのキラル(エナンチオマーおよびジアステレオマー)形態およびラセミ体形態は本発明の範囲内である。Ｃ＝Ｃ二重結合、Ｃ＝Ｎ二重結合、環系などの多くの幾何異性体も本化合物において存在でき、全てのこのような安定な異性体は本発明において意図される。本発明の化合物のｃｉｓ−およびｔｒａｎｓ−(またはＥ−およびＺ−)幾何異性体が挙げられ、異性体混合物としてまたは分離されている異性体形態として単離され得る。本化合物は光学活性形態またはラセミ体形態で単離され得る。光学活性形態は、ラセミ体の分割によりまたは光学活性出発物質からの合成により製造され得る。本発明の化合物の製造に使用される全ての方法およびそれにおいて製造される中間体は、本発明の一部と考えられる。エナンチオマーまたはジアステレオマー生成物が製造されるとき、それらは慣用の方法で、例えば、クロマトグラフィーまたは分別結晶により分離され得る。製造条件によって、本発明の最終産物は、遊離(中性)または塩形態で得られる。これらの最終産物の遊離形態および塩の何れも本発明の範囲内である。そのように望むのであれば、化合物のある形態を他の形態に変換し得る。遊離塩基または酸を塩に変換し得る；塩を遊離化合物または他の塩に変換し得る；本発明の化合物の異性体混合物を個々の異性体に分離し得る。本発明の化合物は、遊離形態でもその塩でも、水素原子が分子の他の部分に転位し、分子の原子間の化学結合が結果として再配置される、複数の互変異性形態で存在し得る。全ての互変異性形態が、それらが存在し得る限り、本発明に含まれることが理解されるべきである。
【０１２６】
明瞭化の目的でかつ当分野の標準的慣習に従い、記号
【化１６】
2019528301.tif 000017
は、式および表中で部分または置換基の構造のコア／核への結合点である結合を示すために使用する。
【０１２７】
さらに、明瞭化の目的で、置換基が２つの文字または記号の間ではないダッシュ(−)を有するとき、これは置換基の結合点を示すために使用する。例えば、−ＣＯＮＨ２は炭素原子を介して結合される。
【０１２８】
さらに、明瞭化の目的で、実線の最後に置換基が示されていないとき、これは、該結合に結合したメチル(ＣＨ３)基があることを示す。
【０１２９】
ここで使用する用語“アルキル”は、特定の炭素原子数を有する分岐鎖および直鎖飽和脂肪族炭化水素基の両方を含むことを意図する。例えば、“Ｃ１−Ｃ６アルキル”または“Ｃ１−６アルキル”は、１〜６炭素原子を有するアルキルを意味する。アルキル基の例は、メチル(Ｍｅ)、エチル(Ｅｔ)、プロピル(例えば、ｎ−プロピルおよびイソプロピル)、ブチル(例えば、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル)およびペンチル(例えば、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル)を含むが、これらに限定されない。用語“アルケニル”は、１以上の二重結合を有するアルキル基をいう。
【０１３０】
ここで使用する“アルキレン”(“アルク”とも称する)は、特定の炭素原子数を有するアルキレンを意味する。例えば、“Ｃ１−Ｃ６アルキレン”は、１〜６炭素原子を有するアルキレンをいう。アルキレン基の例は、メチレン(−ＣＨ２−)、エチレン(−ＣＨ２ＣＨ２−)などを含むが、これらに限定されない。
【０１３１】
ここで使用する“アリール”は、フェニル、ビフェニル、インダニル、１−ナフチル、２−ナフチルおよびテトラヒドロナフチルを含むが、これらに限定されない芳香環系をいう。
【０１３２】
“ハロ”または“ハロゲン”は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを含む。
【０１３３】
“ハロアルキル”は、１以上のハロゲンで置換されている、特定の炭素原子数を有する分岐鎖および直鎖飽和脂肪族炭化水素基の両方を含むことを意図する。ハロアルキルの例は、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、ペンタフルオロエチル、ペンタクロロエチル、２,２,２−トリフルオロエチル、ヘプタフルオロプロピルおよびヘプタクロロプロピルを含むが、これらに限定されない。ハロアルキルの例はまた、１以上のフッ素原子で置換されている特定の炭素原子数を有する分岐鎖および直鎖飽和脂肪族炭化水素基の両方を含むことを意図する、“フルオロアルキル”も含む。
【０１３４】
用語“シクロアルキル”は、環化アルキル基をいう。Ｃ３−６シクロアルキルは、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５およびＣ６シクロアルキル基を含むことを意図する。シクロアルキル基の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびノルボロニルを含むが、これらに限定されない。１−メチルシクロプロピルおよび２−メチルシクロプロピルなどの分岐シクロアルキル基は、“シクロアルキル”の定義に入る。用語“シクロアルケニル”は、環化アルケニル基をいう。Ｃ４−６シクロアルケニルは、Ｃ４、Ｃ５およびＣ６シクロアルケニル基を含むことを意図する。シクロアルケニル基の例は、シクロブテニル、シクロペンテニルおよびシクロヘキセニルを含むが、これらに限定されない。
【０１３５】
ここで使用する用語“ヘテロアリール”は、硫黄、酸素または窒素など少なくとも１個のヘテロ原子環員を含む、安定な単環式および多環式芳香族炭化水素を意味することを意図する。ヘテロアリール基は、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、フリル、キノリル、イソキノリル、チエニル、イミダゾリル、チアゾリル、インドリル、ピロリル、オキサゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンズチアゾリル、イソオキサゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、インダゾリル、１,２,４−チアジアゾリル、イソチアゾリル、プリニル、カルバゾリル、ベンゾイミダゾリル、インドリニル、ベンゾジオキソラニルおよびベンゾジオキサンを含むが、これらに限定されない。ヘテロアリール基は置換または非置換である。窒素原子は、置換または非置換である(すなわち、ＮまたはＮＲであって、ここで、Ｒは、定義されるならば、Ｈまたは他の置換基である)。窒素および硫黄ヘテロ原子は、場合により酸化されていてよい(すなわち、Ｎ→ＯおよびＳ(Ｏ)ｐであって、ここでｐは０、１または２である)。
【０１３６】
ここで使用する用語“置換”は、正常な原子価が維持され、置換が安定な化合物をもたらす限り、少なくとも１個の水素原子が非水素基に置き換わることを意味する。
【０１３７】
ここで使用する“薬学的に許容される塩”は、親化合物がその酸または塩基塩を製造するように修飾されている、開示化合物の誘導体をいう。薬学的に許容される塩の例は、アミンなどの塩基性基の無機または有機酸塩；およびカルボン酸などの酸性基のアルカリまたは有機塩を含むが、これらに限定されない。薬学的に許容される塩は、例えば、非毒性無機または有機酸から形成される、親化合物の慣用の非毒性塩または４級アンモニウム塩を含む。例えば、このような慣用の非毒性塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸および硝酸などの無機酸由来のもの；および酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸およびイセチオン酸などの有機酸から製造した塩を含む。
【０１３８】
本発明の薬学的に許容される塩は、慣用の化学法により、塩基性または酸性部分を含む親化合物から合成され得る。一般に、このような塩は遊離酸または塩基形態のこれらの化合物と、化学量論量の適切な塩基または酸を、水もしくは有機溶媒またはこれら二種の混合物中で反応させることにより製造でき；一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルなどの非水性媒体が好ましい。適当な塩の一覧は、Allen, Jr., L.V., ed., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22nd Edition, Pharmaceutical Press, London, UK (2012)に見ることができる。その記載は、引用により本明細書に包含させる。
【０１３９】
さらに、式Ｉおよび式IIの化合物は、プロドラッグを有し得る。インビボで変換して、生理活性剤(すなわち、式ＩまたはIIの化合物)を提供するあらゆる化合物は、本発明の範囲および精神内でプロドラッグである。種々の形態のプロドラッグが当分野で周知である。このようなプロドラッグ誘導体の例について
ａ)Bundgaard, H., ed., Design of Prodrugs, Elsevier (1985), and Widder, K. et al., eds., Methods in Enzymology, 112: 309-396, Academic Press (1985)；
ｂ)Bundgaard, H., Chapter 5: "Design and Application of Prodrugs", A Textbook of Drug Design and Development, pp. 113-191, Krogsgaard-Larsen, P. et al., eds., Harwood Academic Publishers (1991)；
ｃ)Bundgaard, H., Adv. Drug Deliv. Rev., 8: 1-38 (1992)；
ｄ)Nielsen, N.M. et al., J. Pharm. Sci., 77: 285 (1988)；
ｅ)Kakeya, N. et al., Chem. Pharm. Bull., 32: 692 (1984)；および
ｇ)Rautio, J., ed., Prodrugs and Targeted Delivery (Methods and Principles in Medicinal Chemistry), Vol. 47, Wiley-VCH (2011)
を参照のこと。
【０１４０】
カルボキシ基を含む化合物は、体内で加水分解して、式Ｉまたは式IIの化合物それ自体を酸性するプロドラッグとして働く生理学的に加水分解可能なエステルを形成し得る。このようなプロドラッグは、多くの場合加水分解が原則として消化酵素の影響下に生じるため、好ましくは経口投与する。エステルそれ自体が活性であるかまたは加水分解が血中で生じるとき、非経腸投与を使用し得る。式Ｉまたは式IIの化合物の生理学的に加水分解可能なエステルの例は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルベンジル、４−メトキシベンジル、インダニル、フタリル、メトキシメチル、Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキル(例えば、アセトキシメチル、ピバロイルオキシメチルまたはプロピオニルオキシメチル)、Ｃ１−６アルコキシカルボニルオキシ−Ｃ１−６アルキル(例えば、メトキシカルボニル−オキシメチルまたはエトキシカルボニルオキシメチル、グリシルオキシメチル、フェニルグリシルオキシメチル、(５−メチル−２−オキソ−１,３−ジオキソレン−４−イル)−メチル)および例えば、ペニシリンおよびセファロスポリン分野で使用される、他の周知の生理学的に加水分解可能なエステルを含む。このようなエステルは、当分野で知られる慣用の技法により製造され得る。
【０１４１】
プロドラッグの製造は当分野で周知であり、例えば、King, F.D., ed., Medicinal Chemistry: Principles and Practice, The Royal Society of Chemistry, Cambridge, UK (Second Edition, reproduced, 2006); Testa, B. et al., Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism. Chemistry, Biochemistry and Enzymology, VCHA and Wiley-VCH, Zurich, Switzerland (2003); Wermuth, C.G., ed., The Practice of Medicinal Chemistry, Third Edition, Academic Press, San Diego, CA (2008)に記載される。
【０１４２】
本発明は、本化合物に生じる全ての原子同位体を含むことを意図する。同位体は、同一原子番号を有するが、質量数が異なる原子を含む。一般的な例として、かつ限定せずに、水素の同位体は重水素およびトリチウムを含む。炭素の同位体は１３Ｃおよび１４Ｃを含む。同位体標識した本発明の化合物は、一般に、他の場合に用いた非標識反応材の替わりに、適切な同位体標識した反応材を使用して、当業者に知られる慣用の技法でまたは個々に記載したものに準ずる方法で製造され得る。
【０１４３】
用語“溶媒和物”は、本発明の化合物と、有機であれ無機であれ、１以上の溶媒分子の物理的会合を意味する。この物理的会合は、水素結合を含む。ある場合、例えば、１以上の溶媒分子が結晶固体の結晶格子内に組み込まれているとき、溶媒和物は単離可能である。溶媒和物中の溶媒分子は、規則的配置および／または秩序立てられていない配置で存在し得る。溶媒和物は、化学量論または非化学量論量の溶媒分子を含み得る。“溶媒和物”は、溶液相および単離可能溶媒和物の両方を包含する。溶媒和物の例は、水和物、エタノラート、メタノラートおよびイソプロパノラートを含むが、これらに限定されない。溶媒和の方法は当分野で一般に知られる。
【０１４４】
ここで使用する用語“患者”は、本発明の方法により処置される生物をいう。このような生物は、好ましくは、哺乳動物(例えば、マウス、サル、ウマ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコなど)を含むが、これらに限定されず、最も好ましくはヒトをいう。
【０１４５】
ここで使用する用語“有効量”は、例えば、研究者または臨床医により探索されている、組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を誘発する、薬物または薬剤、すなわち本発明の化合物の量を意味する。さらに、用語“治療有効量”は、そのような量を受けていない対応対象と比較して、疾患、障害または副作用の処置、治癒、予防または軽快の改善または疾患または障害の進行速度の減少をもたらすあらゆる量を意味する。有効量を１以上の投与、適用または用量で投与でき、特定の製剤または投与経路に限定することを意図しない。本用語はまた、その範囲内に、正常な生理機能の増強に有効な量も含む。
【０１４６】
ここで使用する用語“処置”は、状態、疾患、障害などの改善またはその症状の軽快をもたらす、あらゆる効果、例えば、低減、減少、調節、改善または排除を含む。
【０１４７】
ここで使用する用語“医薬組成物”は、組成物をインビボまたはエクスビボの診断または治療使用に特に適切する、活性剤と、不活性であれ活性であれ、担体との組み合わせをいう。
【０１４８】
治療使用のために、本発明の化合物の塩は、薬学的に許容されるとして企図される。しかしながら、酸および塩基の薬学的に許容されない塩も、例えば、薬学的に許容される化合物の製造または精製に、利用され得る。
【０１４９】
製造法
本発明の化合物は、当業者に知られる化学変換を利用して、次のスキームに記載するもののような方法により製造され得る。溶媒、温度、圧力および他の反応条件は、当業者により容易に選択され得る。出発物質は市販されているかまたは当業者により容易に製造される。これらのスキームは説明的であり、ここに開示する化合物の製造に当業者が使用し得る可能な技法を制限する意味はない。当業者には別の方法が明らかであり得る。さらに、合成における種々の工程を、別の順序または順番で実施し、所望の化合物を得ることができる。さらに、これらのスキームにおける別々の工程としての表示は、複数工程を同じ反応容器にはめ込むことによりまたは中間体の精製もしくは特徴付けをすることなく複数工程を実施することにより、直列的に実施することを排除しない。さらに、下記方法により製造される化合物の大部分を、当業者に周知の慣用の化学を使用してさらに修飾し得る。ここに引用する全ての文献を、その全体を引用により本明細書に包含させる。
【０１５０】
国際公報ＷＯ２０１６／０７３７３８、ＷＯ２０１６／０７３７７０およびＷＯ２０１６／０７３７７４も参照し得る。
【０１５１】
ここで使用するこれらの多くの化学変換への言及は、Smith, M.B. et al., March's Advanced Organic Chemistry Reactions, Mechanisms, and Structure, Fifth Edition, Wiley-Interscience, New York (2001)または合成有機化学の主題の他の標準テキストに見ることができる。ある変換は、反応性官能基が保護基でマスクされていることを必要とし得る。これらの基の導入、除去および反応条件に対する相対的感受性についての条件を説明する好都合な文献は、Greene, T.W. et al., Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley-Interscience, New York (1999)である。
【０１５２】
スキーム１〜７および９は、式Ｉの化合物の製造法を記載する。これらの方法はまたスキーム８に記載の式IIの化合物の製造にも適用され得る。
【０１５３】
【化１７】
2019528301.tif 000018
２,６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジンなどの有機塩基存在下でのケトン(III)のトリフルオロメタンスルホン酸無水物などの求電子トリフレート化剤での処理により、一般構造IVのビニルトリフラートが得られる。ケトンIIIについて、他の環式および非環式ケタール保護基を、上記エチレングリコールのケタールに加えて使用できる。あるいは、タイプIIIのケトンをＬｉＨＭＤＳのような強塩基で処理し、得られたリチウムエノラートをＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンアミドまたは他の求電子トリフレート化剤で処理できる。ビニルトリフラートIVのビニルボロン酸エステルＶへの変換は、宮浦により開発された標準法を使用して達成され得る(T. Ishiyama, M. Murata, N. Miyaura, J. Org. Chem., 1995, 60, 7508-7510)。Ｖなどのビニルボロン酸エステルは、アリールとビニルハライドおよびアリールとビニルトリフラートを含むが、これらに限定されない多様なカップリングパートナー、より具体的にVIなどのカップリングパートナーとの鈴木カップリングを実施できる。上記ピナコールボロン酸エステルに加えて、ボロン酸および他のホウ素誘導体も鈴木カップリングに用いられて成功している。鈴木カップリングの多くの変法が知られているが、一般に、炭酸カリウム水溶液などの塩基の存在下、ＤＭＦなどの溶媒中、Ｐｄ(ＰＰｈ３)４などの触媒と共に２つのカップリングパートナーを加熱することを含む。酢酸エチルなどの溶媒中、大気圧またはそれを超える圧の水素によるパラジウム炭素などの触媒存在下でのオレフィン中間体の還元により、VIIIなどの中間体を得る。ケタール加水分解を、ＴＨＦまたはアセトンなどの共溶媒の存在下、ＨＣｌなどの水性酸と、加熱しながらまたは加熱せずに撹拌することにより達成し得る。ケトンIXを、水素化ホウ素ナトリウムを含む種々の還元剤でアルコールに還元でき、得られたアルコールをピリジンなどの塩基の存在下、適切な親電子物質(この場合メシルクロライド)で処理して脱離基に変換し得る。メシレートＸを、次いで、脱プロトン化ジ−ｔｅｒｔ−ブチルマロネートを含む種々の求核試薬により置換できる。この場合、マロネートを水素化ナトリウムで脱プロトン化したが、他の塩基もこの脱プロトン化を達成できる。置換後、ｔｅｒｔ−ブチルエステルの加水分解を酢酸などの水性酸で実施でき、脱カルボキシル化が酸性条件下での加熱により起こり、カルボン酸XIなどが得られ得る。酸XIへのキラル補助剤の導入は、まずピバロイルクロライドなどのアシルクロライドで処理し、混合無水物を形成させ、続いてこれにエヴァンス・オキサゾリジノン(D. A. Evans, M. D. Ennis, D. J. Mathre; J. Am. Chem. Soc., 1982, 104, 1737-1739)などの脱プロトン化補助剤を加えることにより行い得る。ＮａＨＭＤＳなどの塩基でのキラルイミドXIIの脱プロトン化、続いて得られたエノラートの適当な親電子物質Ｒ２Ｘでの処理反応は、予測可能な制御および新形成キラル中心での高ジアステレオ選択性で進行し、物質XIIIを得ることができる。補助剤の開裂は、エヴァンス・オキサゾリジノンベースの補助剤の場合、過酸化水素の存在下または非存在下のＬｉＯＨなどの水性塩基での処理により達成され得る。中間体XIVへの種々の縮合ヘテロ環の導入について、スキーム９に述べる。
【０１５４】
【化１８】
2019528301.tif 000019
ピペリジン、ピペラジンおよびピロリジン由来エステルXVは、ＤＩＰＥＡなどの塩基を加えても加えなくても、ＳＮＡｒ反応を受け得る既知化合物である。得られたエステルXVIを、通常水性塩基または酸を用いる多様な条件下加水分解して、カルボン酸XVIIを得ることができる。中間体XVIIへの種々の縮合ヘテロ環の導入について、スキーム９に述べる。
【０１５５】
【化１９】
2019528301.tif 000020
中間体XIVの酸を、ジフェニルホスホリルアジド(ＤＰＰＡ)での処理し、続いて遮断および続く得られたイソシアネートのＬｉＯＨなどの塩基性水溶液での脱カルボキシル化により、アミンXVIIIに変換し得る。中間体XVIIへの種々の縮合ヘテロ環の導入についてI、スキーム９に述べる。
【０１５６】
【化２０】
2019528301.tif 000021
スキーム３と同様に、Ｗ＝−ＣＨ−または−Ｃ(Ｃ１−Ｃ６アルキル)−であるときの中間体XVIIもまたＤＰＰＡで処理し、続いて塩基性水溶液で処理して、アミンXIXを得ることができる。中間体XIXへの種々の縮合ヘテロ環の導入について、スキーム９に述べる。
【０１５７】
【化２１】
2019528301.tif 000022
ホスホノアセテートエステルのＴＨＦなどの溶媒中水素化ナトリウムなどの塩基、続いて一般構造IIIのケトンでの処理により、三(Ｒ２＝Ｈであるとき)または四置換オレフィンXXを得る。下記オレフィン化および変換の別法が知られ、当業者は、検討中の特定の基質に対する適用性に基づき選択する。オレフィンXXの還元は、１気圧またはそれ以上の水素ガス下、触媒、通常パラジウム炭素存在下、適当な溶媒中でオレフィン溶液を撹拌または振盪することにより達成される。ケタール基の加水分解により、一般構造XXIのケトンを得る。一般にこれは、ＴＨＦまたはアセトンなどの共溶媒存在下のＨＣｌなどの水性酸との加熱により達成される。上記環式エチレングリコールベースのケタールに加えて、他の環式および非環式ケタール保護基も用い得る。ケトンからトリフラートXXII、ボロン酸エステルXXIII、そして鈴木カップリング産物XXIVへの変換は、スキーム１に概説するとおり進み得る。鈴木カップリングXXIVを、先に記載した水素化条件下で還元でき、得られたエステルを、Ｒ’の性質によって塩基性または酸性水性媒体で処理して、酸XIVに加水分解できる。中間体XIVへの種々の縮合ヘテロ環の導入について、スキーム９に述べる。
【０１５８】
【化２２】
2019528301.tif 000023
ケトンXXIをエタノールなどの適当な溶媒中、いくつかの還元剤、好ましくは水素化ホウ素ナトリウムで還元して、XXVなどのアルコールを得ることができる。これらのアルコールは、スキーム２に記載したピペリジンおよびピペラジンに類似する方法で、またＤＭＦなどの適切な極性非プロトン性溶媒中、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどの塩基存在下、VIなどの基質とのＳＮＡｒ反応に付して、タイプXXVIのエーテルを得ることができる。これらのエーテルをスキーム１、３および５に記載する変換を使用して、式Ｉに記載する種々の構造に変化させ得る。種々の縮合ヘテロ環の導入については、スキーム９に述べる。
【０１５９】
【化２３】
2019528301.tif 000024
ピペリジノンXXVIIIは文献既知であり、スキーム５または６に記載する変換を使用して、直接結合またはエーテル結合した式Ｉの化合物に変化させ得る。種々の縮合ヘテロ環の導入については、スキーム９に述べる。
【０１６０】
【化２４】
2019528301.tif 000025
前記中間体を使用して(例えばＶ、XXIIIおよびXXV)、式IIの化合物を、カップリングパートナーおよびタイプXXIXの親電子物質を使用して合成して、オレフィンXXXまたはXXXIならびにエーテルXXXIIを得ることができる。これらは、また、スキーム１、５および６に概説した一連の反応を使用して、式IIの化合物に変化させ得る。縮合ヘテロ環の導入については、スキーム９に示す。
【０１６１】
【化２５】
2019528301.tif 000026
【化２６】
2019528301.tif 000027
タイプXXXIIIの後期中間体を、種々の縮合ヘテロ環式化合物式(Ｉ)に変化させることができ、これらの手順をまた式(II)の化合物に至る後期中間体にも適用できる。中間体XXXIIIをアシルクロライドに変換でき、タイプXXXIVの適切な求核試薬と反応させて、アミドXXXVを得る。アミドXXXVを酸性、活性化または脱水剤、好ましくはオキシ塩化リンで処理して、式(Ｉ)の化合物を得ることができる。中間体XXXIIIのアシルクロライドも２−ヒドロアジノ−ピリジンまたは２−メチルアミノ−ピリジンと反応させて、それぞれ中間体XXXVIまたはXXXVIIを得ることができる。これらをまた適当な酸性、活性化または脱水剤で処理して、式(Ｉ)の化合物を得ることができる。中間体XXXIIIのアシルクロライドがXXXVIIIなどのアミドとなるようにアントラニルアミドに捕捉されるならば、エタノールなどの共溶媒存在下の水酸化ナトリウムなどの水性塩基での処理は、同様に式(Ｉ)の化合物をもたらす。他の適用において、中間体XXXIIIのアシルクロライドをワインレブアミドに変換し、続いてメチルマグネシウムブロマイドで処理して、メチルケトンXXXIXを得ることができる。このメチルケトンを臭素化し、３−アミノ−ピリダジンで処理しても、式(Ｉ)の化合物を得ることができる。タイプXLのアミンが製造されるならば(スキーム３および４から得られるような)、それをＥＤＣＩおよびＨＯＢＴを含む種々のカップリング剤を使用して標準アミド結合形成条件下アントラニル酸とカップリングさせて、アミドXLIを得ることができる。このアミドを、加熱下に酸およびオルトホルメートで処理して、式(Ｉ)の化合物を得る。このアミンXLはまたジイソプロピルエチルアミンなどの塩基の存在下、ＮＭＰなどの適当な極性、非プロトン性溶媒の存在下にタイプXLIIの親電子物質とのＳＮＡＲ反応を十分に受けて、式(Ｉ)の化合物を得ることができる。最後に、中間体XXXIIIのアシルクロライドをアンモニアで捕捉し、続いてリチウムアルミニウムハイドライドなどの強還元剤で処理して、一級アミンXLIIIを得ることができる。このアミンも、ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基存在下、ＮＭＰなどの適当な極性、非プロトン性溶媒の存在下にタイプXLIIの親電子物質とのＳＮＡＲ反応を容易に受けて、式(Ｉ)の化合物を得ることができる。スキーム９はスキーム１〜８において得ることができる中間体から縮合ヘテロ環を生じる可能性のある変換の選択肢の小部分を単に表しているに過ぎないことは注意すべきである。スキーム９に記載した以外の多くの他の縮合ヘテロ環が、スキーム１〜８で得た中間体から得られる。
【実施例】
【０１６２】
次の実施例は、当業者に本発明をどのように製造し、使用するかについて完全な開示および記載を提供するために提示し、発明者が発明として認識する範囲を限定する意図も、下記実験が実施されているまたは実施し得る全ての実験であることを表す意図もない。現在形で記載する実験の記載は必ずしも実施していないが、ここに記載する性質のデータなどを作成するために実施し得ることが理解されるべきである。使用する数値(例えば、量、温度など)は正確を期するように努力しているが、ある程度の実験誤差があることは考慮されるべきである。
【０１６３】
特に断らない限り、部は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏度(℃)であり、圧力は大気圧または近大気圧である。次のものを含む標準的略語を使用する：wt＝野生型；bp＝塩基対；kb＝キロベース；nt＝ヌクレオチド；aa＝アミノ酸；ｓまたはsec＝秒；min＝分；ｈまたはhr＝時間；ng＝ナノグラム；μg＝マイクログラム；mg＝ミリグラム；ｇ＝グラム；kg＝キログラム；dlまたはdL＝デシリットル；μlまたはμL＝マイクロリットル；mlまたはmL＝ミリリットル；ｌまたはＬ＝リットル；μm＝マイクロモル；mM＝ミリモル；Ｍ＝モル；kDa＝キロダルトン；ｉ.ｍ.＝筋肉内；ｉ.ｐ.＝腹腔内；SCまたはSQ＝皮下；QD＝１日１回；BID＝１日２回；QW＝週１回；QM＝月１回；HPLC＝高速液体クロマトグラフィー；BW＝体重；Ｕ＝単位；ns＝統計的非有意；PBS＝リン酸緩衝化食塩水；IHC＝免疫組織化学；DMEM＝ダルベッコ改変イーグル培地；EDTA＝エチレンジアミン四酢酸。
【０１６４】
分析的ＨＰＬＣ／ＭＳを次の方法で実施した。
方法Ａ：次の方法を使用するWaters Acquity SDS：１.７分かけて２〜９８％溶媒Ｂの直線勾配；２２０nmでＵＶ可視化；カラム：BEH C18  ２.１mm×５０mm；１.７μm粒子(温度５０℃に加熱)；流速：０.８ml／分；移動相Ａ：１００％水、０.０５％ＴＦＡ；移動相Ｂ：１００％アセトニトリル、０.０５％ＴＦＡ。
方法Ｂ：カラム：Waters Acquity UPLC BEH C18、２.１×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分かけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分維持；流速：１.００ml／分；検出：２２０nmのＵＶ。
方法Ｃ：分取クロマトグラフィー条件：装置：Berger Prep SFC MGII(LVL-L4021 Lab)；カラム：Chiral IC  ２５×３cm  ＩＤ、５μm；流速：８５.０ml／分；移動相：７４／２６  ＣＯ２／ＭｅＯＨ；検出器波長：２２０nm。
方法Ｄ：分取クロマトグラフィー条件：装置：Berger Prep SFC MGII(LVL-L4021 Lab)；カラム：Chiral Phenomenex Cellulose-4  ２５×３cm  ＩＤ、５μm；流速：８５.０ml／分；移動相：７０／３０  ＣＯ２／ＭｅＯＨ；検出器波長：２２０nm。
方法Ｅ：分取クロマトグラフィー条件：装置：Berger Prep SFC MGII(LVL-L4021 Lab)；カラム：Chiral Phenomenex Cellulose-4  ２５×３cm  ＩＤ、５μm；流速：８５.０ml／分；移動相：７０／３０  ＣＯ２／ＭｅＯＨ  ｗ／０.１％ＤＥＡ；検出器波長：２２０nm。
方法Ｇ：Berger Prep SFC MGII(LVL-L4021 Lab)；カラム：Chiral AD  ２５×３cm、５μm；流速：８５.０ml／分；移動相：８０／２０  ＣＯ２／ＭｅＯＨ；検出器波長：２２０nm；サンプル調製および注入体積：４mL  ＭｅＯＨに溶解した５００μLの２１.３mg
方法Ｈ：Aurora analytical SFC(LVL-L4021 Lab)、カラム：Chiral AD  ２５０×４.６mm  ＩＤ、５μm；流速：２.０ml／分；移動相：８０／２０  ＣＯ２／ＭｅＯＨ
方法Ｉ：カラム：Chiralpak AD-H、３０×２５０mm、５ミクロン；流速：１００ml／分；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１２０バール；ＵＶ波長：２２０；移動相：７５％ＣＯ２／２５％イソプロパノール−０.１％ＤＥＡ(定組成)；注入：１２５０μLの１９mg／２mL  メタノール
方法Ｊ：カラム：Chiralpak AD-H、４.６×１００ｍ、５ミクロン(分析的)；流速：２ml／分；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１７００psi；ＵＶ波長：２２０nm；移動相：７５％ＣＯ２／２５％イソプロパノール−０.１％ＤＥＡ(定組成)
方法Ｋ：装置：Berger Prep SFC MGII(LVL-L4021 Lab)カラム；Phenomenex Cellulose-4  ２５×３cm、５μm流速：８５.０ml／分；移動相：８０／２０  ＣＯ２／ＭｅＯＨ／ＡＣＮ  ５０：５０；検出器波長：２２０nm；サンプル調製および注入体積：３mL  ＭｅＯＨに溶解した６.０mgの２０００μL
方法Ｌ：装置：Aurora analytical SFC(LVL-L4021 Lab)；カラム：Phenomenex Cellulose-4ｌ  ２５０×４.６mm  ＩＤ、５μm；流速：２.０ml／分；移動相：８０／２０  ＣＯ２／ＭｅＯＨ／ＣＡＮ  ５０：５０
方法Ｍ：カラム：Chiralpak AD、３０×２５０mm、５ミクロン；流速：１００ml／分；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１２０バール；ＵＶ波長：２２０nm；移動相：８０％ＣＯ２／２０％メタノール−０.１％ＤＥＡ(定組成)；注入：１２mg／３mL  メタノールの２１００μL
方法Ｎ：カラム：Chiralpak AD、４.６×１００ｍ、５ミクロン(分析的)；流速：２ml／分.；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１７００psi；ＵＶ波長：２２０nm；移動相：８０％ＣＯ２／２０％メタノール−０,１％ＤＥＡ(定組成)
方法Ｏ：カラム：Chiralcel OD、３０×２５０mm、５ミクロン；流速：１００ml／分；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１２０バール；ＵＶ波長：２２０nm；移動相：９０％ＣＯ２／１０％メタノール−０.１％ＤＥＡ(定組成)；注入：９.９mg／２.０mL  メタノールの５００μL
方法Ｐ：Chiralcel OD  ４.６×１００mm、５ミクロン(分析的)；流速：２ml／分.；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１７００psi；ＵＶ波長：２２０nm；移動相：９０％ＣＯ２／１０％メタノール−０.１％ＤＥＡ(定組成)
方法Ｑ：カラム：Chiralpak IC、２１×２５０mm、５ミクロン；流速：６０ml／分；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１２０バール；ＵＶ波長：２２０nm；移動相：７５％ＣＯ２／２５％イソプロパノール−０.１％ＤＥＡ(定組成)；注入：１９mg／３mL  メタノールの３５０μL
方法Ｒ：カラム：Chiralpak IC、４.６×１００mm、５ミクロン(分析的)；流速：２ml／分.；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１７００psi；ＵＶ波長：２２０nm；移動相：７５％ＣＯ２／２５％イソプロパノール−０.１％ＤＥＡ(定組成)
方法Ｓ：カラム：Chiralpak AD、３０×２５０mm、５ミクロン；流速：１００ml／分；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１２０バール；ＵＶ波長：２２０nm；移動相：８０％ＣＯ２／２０％イソプロパノール−０.１％ＤＥＡ(定組成)；注入：１５００μL  ｏｆ  １３mg／３mL  メタノール
方法Ｔ：カラム：Chiralpak AD、４.６×１００mm、５ミクロン(分析的)；流速：２ml／分.；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１７００psi；ＵＶ波長：２２０nm；移動相：８０％ＣＯ２／２０％イソプロパノール−０.１％ＤＥＡ(定組成)
方法Ｕ：カラム：Chiralpak AD、３０×２５０mm、５ミクロン；流速：１００ml／分；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１２０バール；ＵＶ波長：２２０nm；移動相：８５％ＣＯ２／１５％メタノール−０.１％ＤＥＡ(定組成)；注入：１１９mg／３mL  メタノールの５００μL
方法Ｖ：カラム：Chiralpak AD、４.６×１００mm、５ミクロン(分析的)；流速：２ml／分.；オーブン温度：４０℃；ＢＰＲ設定：１７００psi；ＵＶ波長：２２０nm；移動相：８５％ＣＯ２／１５％メタノール−０.１％ＤＥＡ(定組成)
【０１６５】
実施例１
４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
【化２７】
2019528301.tif 000028
実施例１：４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
【０１６６】
製造例１Ａ：
【化２８】
2019528301.tif 000029
撹拌中の１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−オン(３００ｇ、１９２０.８６mmol、１.０当量)およびＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド(８２３.４７ｇ、２３０５.０３mmol、１.２当量)のＭＴＢＥ(７.５Ｌ)溶液に、Ｎ２下、−７８℃で２.０Ｍ  ＮａＨＭＤＳのＴＨＦ溶液(１１５２.２mL、２３０５.０３mmol、１.２当量)を７０分かけて加え、混合物をさらに６０分撹拌した。反応混合物を室温に温め、ＴＬＣで出発物質の完全な消費が示されるまで一夜撹拌した。混合物をＫＨＳＯ４水溶液(１００ml)で反応停止させ、濾過して固体を除去し、濾液を完全に濃縮した。残留物に３Ｌ  ＭＴＢＥを加え、次いで５％ＮａＯＨ(１.５Ｌ×３)で洗浄した。有機相を濃縮して、粗製の製造例１Ａ化合物５６７ｇ(淡黄色油状物、収率１０２％)を得た。粗製物をさらに精製することなく次工程に直接使用できる。
製造例１Ａ：1H NMR(400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 5.65 (t, J = 4.0 Hz, 1H), 3.98 (d, J = 1.5 Hz, 4H), 2.53 (s,2H), 2.40 (s, 2H), 1.90 (t, J = 6.6 Hz, 2H)
【０１６７】
製造例１Ｂ：
【化２９】
2019528301.tif 000030
粗製製造例１Ａ化合物(６００ｇ、２.０８mol、１当量)、Ｂ２Ｐｉｎ２(６８７.１ｇ、２.７１mol、１.３当量)、ＫＯＡｃ(６１３ｇ、６.２４mol、３当量)、ＮａＢｒ(８６ｇ、０.８３３mol,０.４当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(７６ｇ、０.１mol、０.０５当量)のジオキサン(６.５Ｌ)中の混合物を、一夜加熱還流した。反応が完了したら、混合物を濃縮し、ＦＣＣ(２％→１０％→２０％ＥｔＯＡｃ／ＰＥ)で精製して、製造例１Ｂ化合物(３６９ｇ、６６％)を得た。
製造例１Ｂ：LC-MS: 267.1 (M+1)+, 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.46 (s, 1H), 3.98 (s, 4H), 2.37-2.35 (m, 4H), 1.74-1.60 (t, 2H), 1.24 (s, 12H)
【０１６８】
製造例１Ｃ：
【化３０】
2019528301.tif 000031
製造例１Ｂ化合物(３６８ｇ、１.３８mol、１.３当量)、４−クロロ−６−フルオロキノリン(１９５ｇ、１.０７mol、１当量)、Ｋ２ＣＯ３(４４５ｇ、３.２２mol、３当量)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(２５ｇ、２２mmol、０.０２当量)のジオキサン−水(３Ｌ、４：１)中の混合物を、一夜加熱還流した。溶液を濃縮し、ＥｔＯＡｃで抽出した。ＦＣＣ(３８％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル)での精製により、製造例１Ｃ化合物(２３６ｇ、７７％)を得た。
製造例１Ｃ：LC-MS: 286.1 (M+1)+, 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.80-8.29 (d, 1H), 8.11-8.07 (q, 1H), 7.63-7.61 (q, 1H), 7.47-7.46 (q, 1H), 7.26-7.22(m,1H), 5.75-5.74 (m, 1H), 4.08-4.05 (m, 4H), 2.63-2.59 (m, 2H),2.59-2.53(m,2H), 2.0-1.97(m,2H)
【０１６９】
製造例１Ｄ：
【化３１】
2019528301.tif 000032
製造例１Ｃ化合物(１２５ｇ、０.４４mol)のＩＰＡ(２Ｌ)溶液に、５５℃で１０％Ｐｄ／Ｃを加え、混合物をＨ２雰囲気下で一夜撹拌した。混合物を濾過し、濃縮して、粗製の製造例１Ｄ化合物(１３０ｇ)を得て、これを次工程で直接使用した。
【０１７０】
製造例１Ｅ：
【化３２】
2019528301.tif 000033
製造例１Ｄ化合物(１００ｇ、０.３４８mol)を、４Ｎ  ＨＣｌ(３００mL)のアセトン(１２００mL)溶液で４５℃で一夜処理した。混合物をＴＬＣでモニターした。次いで溶液を減圧下濃縮した。残留物を６Ｎ  ＮａＯＨでｐＨ９に調節し、混合物を酢酸エチルおよび水に分配した。有機層を塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、明黄色固体を得て、これを次いでヘキサンおよび酢酸エチル(２０％酢酸エチルから７０％酢酸エチル)を使用するシリカゲルカラムで精製して、製造例１Ｅ化合物を白色固体として得た(４７ｇ＋２０ｇ混合物、収率＞５５％)。
製造例１Ｅ：LC-MS: 244.0 (M+1)+, 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.84 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.16 (dd, J = 9.3, 5.7 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 10.3, 2.8 Hz, 1H), 7.52 (ddd, J = 9.2, 7.8, 2.7 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 3.69 (ddd, J = 12.1, 9.0, 3.3 Hz, 1H), 2.77-2.54 (m, 4H), 2.37 (ddd, J = 13.4, 5.9, 3.0 Hz, 2H), 2.04 (qd, J = 12.6, 5.3 Hz, 2H)
【０１７１】
製造例１Ｆ：
【化３３】
2019528301.tif 000034
製造例１Ｅ化合物(５７.８ｇ、２３７.８mmol)をＥｔＯＨ(２４０mL)に溶解し、０℃に冷却した。ＮａＢＨ４(９.９４ｇ、２６１.６mmol)を、温度を０〜１０℃の範囲内に維持しながら少しずつ加えた(発熱反応)。得られた懸濁液を２０分撹拌した。少量の反応混合物のＬＣ／ＭＳは、ケトンの消費を示した(m/z (M+H)+ = 244)。０℃でアセトン(５８mL)を１５分かけてゆっくり加えて、反応停止させた(発熱)。反応物を５００mLの飽和塩化アンモニウム水溶液および５００ｇの氷にゆっくり注加した。得られた水溶液をＥｔＯＡｃ(３×３００mL)で抽出し、合わせた有機フラクションを飽和塩化アンモニウム水溶液(２５０mL)および飽和水性塩化ナトリウム(２５０mL)で洗浄した。有機フラクションを無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下濃縮した。油状物を吸着するのに十分なシリカを加え、１０％ＭｅＯＨのＣＨ２Ｃｌ２溶液で希釈した。同様の量のシリカを、本物質の精製のためのシリカプラグとして使用した。シリカプラグを、ＵＶ活性物質がＴＬＣ(７：３  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、Ｒｆ＝０.４)でもはや検出されなくなるまで、１０％ＭｅＯＨのＣＨ２Ｃｌ２溶液で洗浄した。濾液を濃縮し、５００mLのトルエンに懸濁し、再び濃縮した。粗製の製造例１Ｆ化合物を黄色固体(５８.２ｇ)として単離し、それをさらに精製することなく次工程で使用した。
【０１７２】
製造例１Ｇ
【化３４】
2019528301.tif 000035
製造例１Ｆ化合物(５８.２ｇ、２３７.８mmol)に、ＭｅＣＮ(１２５mL)およびピリジン(３８.７mL、４８０mmol)を加え、反応混合物を氷／水浴を使用して５℃に冷却した。メタンスルホニルクロライド(２６.０mL、３３６mmol)を５℃で滴下し(発熱反応)、反応混合物を１時間、５℃で撹拌し、次いで室温にし、さらに１６時間撹拌し、その間に白色沈殿が形成した。不均一混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液(２００mL)を加えて反応停止させ、ＣＨ２Ｃｌ２(３×３００mL)で抽出した。合わせた有機フラクションを無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下濃縮した。過剰のピリジンをトルエン(３×３００mL)との共沸により除去した。粗製物を次のとおりＨ２Ｏ／ＭｅＯＨから再結晶した：１mL／mmolのＨ２Ｏを加え、スラリーを油浴中１２０℃で加熱した。ＭｅＯＨを、固体が溶解するまで加えた(約０.５Ｌ)。冷却後白色結晶を濾過により集めて、製造例１Ｇ化合物(５８.６ｇ、＞２０：１ｄｒ、２工程を通して７６％)を得た。m/z (M+H)+ = 324.1. 1H-NMR (400 MHz;CDCl3): δ 8.82 (dd, J = 4.6, 0.2 Hz, 1H), 8.15-8.11 (m, 1H), 7.64-7.61 (m, 1H), 7.52-7.46 (m, 1H), 7.25 (s, 1H), 4.78 (tt, J = 10.9, 5.2 Hz, 1H), 3.24-3.16 (m, 1H), 3.07 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.42-2.38 (m, 2H), 2.16-2.12 (m, 2H), 1.93-1.66 (m, 4H)
【０１７３】
製造例１Ｈ：
【化３５】
2019528301.tif 000036
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルマロネート(３３.５mL、１５０mmol)を、水氷浴で冷却した、撹拌中のＮａＨ(６.０ｇ、油中６０％懸濁液、１５０mmol)の１,２−ジメトキシエタン(１００mL)懸濁液に、Ａｒ下滴下した。１０分撹拌後、製造例１Ｇ化合物(１６.２ｇ、５０mmol)を加え、反応物を８５℃で２０時間加熱した。この時間の後、酢酸(１００mL)を加え、反応フラスコにト字管を取り付け、温度を１３０℃に上げた。１,２−ジメトキシエタンを、蒸留物が酸性になるまで大気圧下で留去した(約１００mL)。ト字管を外し、還流凝縮器を接続し、水(２０mL)を加え、反応物を１３０℃で１２時間加熱した。反応物を減圧下濃縮し、２００ｇの氷および１００mLの飽和ＮａＯＡｃ水溶液に注加した。製造例１Ｈ化合物を濾過し、さらにディーン・スターク装置中トルエンと還流させることにより乾燥させて、白色固体として単離した(１１.０ｇ、７６％)。m/z (M+H)+ = 288.2. 1H-NMR (400 MHz;DMSO-d6): δ 12.05 (bs, 1H), 8.79 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.06 (dd, J = 9.2, 5.8 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 11.0, 2.8 Hz, 1H), 7.66-7.61 (m, 1H), 7.50 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 2.41 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.28-2.23 (m, 1H), 1.87-1.78 (m, 2H), 1.73-1.64 (m, 6H)
【０１７４】
製造例１Ｉ：
【化３６】
2019528301.tif 000037
製造例１Ｈ化合物(１.４ｇ、４.８mmol)のＴＨＦ(１５mL)溶液に、ＮＥｔ３(１.３mL、９.６mmol)を加えた。反応混合物を０℃に冷却し、トリメチルアセチルクロライド(０.７１３mL、５.８mmol)を滴下し、得られた溶液を３０分、０℃で撹拌した。別のフラスコで、(Ｒ)−４−フェニルオキサゾリジン−２−オン(３、１.０１ｇ、６.２４mmol)のＴＨＦ(４５mL)溶液を、０℃で１Ｍ  ＬｉＨＭＤＳのＴＨＦ溶液(６.２４mL、６.２４mmolの滴下)で処理し、０℃で撹拌した。リチアートをカニューレを介して最初のフラスコに加えた。反応混合物をｒｔに温め、３時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳは、出発カルボン酸の完全な消費と所望のイミドの形成を示した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液(５０mL)に注加し、層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ(３×５０mL)で抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン０〜１００％勾配を使用するシリカ上のクロマトグラフィーに付して、製造例１Ｉ化合物を白色泡状物として８３％収率で得た。m/z (M+H)+ = 433.3. 1H-NMR (400 MHz;CDCl3): δ 8.80 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.11 (dd, J = 9.1, 5.7 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 10.5, 2.5 Hz, 1H), 7.48-7.43 (m, 1H), 7.40-7.30 (m, 6H), 5.47-5.44 (m, 1H), 4.71 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 4.31-4.28 (m, 1H), 3.20-3.11 (m, 3H), 2.49-2.46 (m, 1H), 1.82-1.67 (m, 6H)
【０１７５】
製造例１Ｊ：
【化３７】
2019528301.tif 000038
製造例１Ｉ化合物(２１.６ｇ、５０mmol)の無水ＴＨＦ(２００mL)溶液を−４０℃に冷却し(アセトニトリル／ドライアイス浴を使用、いくぶん沈殿が生じる)、２Ｍ  ＮａＨＭＤＳのＴＨＦ溶液(３０mL、６０mmol)を５分かけて加えた(５〜８℃の温度上昇が観察されてた)。得られた黄色反応混合物を１０分撹拌し、均一となり、ＭｅＩ(１０.６ｇ、７５mmol)を２分かけて滴下した(１０℃の温度上昇が観察された)。反応混合物を１時間、−４０℃で撹拌し、ＬＣ／ＭＳは出発物質の完全な消費と所望のメチルイミドの形成を示した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液(４００mL)で急希釈し、二相混合物を１５分撹拌した。ｉＰｒＯＡｃ(１００mL)を加え、層を分離し、水層をｉＰｒＯＡｃ(３×５０mL)で抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。得られた残留物を４００mL熱アセトンに溶解することにより再結晶し、乳状溶液が形成されるまでＨ２Ｏを加え、その後加熱しながら再溶解させた(約３：１アセトン／Ｈ２Ｏ)。製造例１Ｊ化合物を白色針状物として得た(１５.０４ｇ、２回分、６８％)。m/z (M+H)+ = 447.3. 1H-NMR (400 MHz;CDCl3): δ 8.81 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.10 (dd, J = 9.2, 5.7 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 10.6, 2.7 Hz, 1H), 7.47-7.42 (m, 1H), 7.41-7.29 (m, 6H), 5.47 (dd, J = 8.8, 3.8 Hz, 1H), 4.69 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 4.38-4.30 (m, 1H), 4.26 (dd, J = 8.9, 3.9 Hz, 1H), 3.26-3.21 (m, 1H), 2.18-2.15 (m, 1H), 1.93-1.64 (m, 8H), 1.09 (d, J = 6.9 Hz, 3H)
【０１７６】
製造例１Ｋ：
【化３８】
2019528301.tif 000039
製造例１Ｊ化合物(８２.０ｇ、１８３.６mmol)のＴＨＦ(６１０mL)溶液に、０℃でＨ２Ｏ２水溶液(３５wt％、８２mL)およびＬｉＯＨ(７.０４ｇ、２９３.８mmol)のＨ２Ｏ(１８９mL)溶液を加えた。得られた反応混合物をｒｔにゆっくり温め、一夜撹拌した。反応物を０℃に冷却し、飽和重亜硫酸ナトリウム水溶液(２５０mL)を加えた。３０分撹拌後、ＴＨＦを減圧下除去した。酢酸(３４mL)、続いてＥｔＯＡｃ(３００mL)を加えた。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ(３×５００mL)で抽出した。合わせた有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。褐色粗製反応混合物をＭｅＣＮ(４００mL)に懸濁し、懸濁液を激しく撹拌しながら還流させた。ｒｔに冷却後、固形物を濾過により集め、さらなるＭｅＣＮで洗浄した。製造例１Ｋ化合物を白色固体として得た(４５.４ｇ、８２％)。m/z (M+H)+ = 302.2. 1H-NMR (400 MHz;DMSO-d6): δ 12.10 (s, 1H), 8.79 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.07 (dd, J = 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.97-7.94 (m, 1H), 7.67-7.62 (m, 1H), 7.49 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 3.41-3.36 (m, 1H), 2.73-2.65 (m, 1H), 1.83-1.61 (m, 9H), 1.08 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。０.７５ml／分流速で、キラルＨＰＬＣ、＞９９％ｅｅ(Chiralpak IC-3、３μM、４.６×２５０mm、１５分定組成７０％ヘプタン３０％ｉ−ＰｒＯＨで２３０nm検出)で所望のエナンチオマーは８.６分の保持時間を有し、不所望のエナンチオマーは９.５分に溶出した。
【０１７７】
実施例１：４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
製造例１Ｋ化合物(３０mg、０.１００mmol)をＴＨＦ(４９８μl)に溶解した。次いで、ヒューニッヒ塩基(４３.５μl、０.２４９mmol)、PYBROP(６９.６mg、０.１４９mmol)およびベンゼン−１,２−ジアミン(２１.５３mg、０.１９９mmol)を加えた。反応物を室温で２０時間撹拌し、７０℃で４時間加熱した。反応物を５：１  水／飽和ＮａＨＣＯ３で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。残留物を酢酸(４９８μl)に溶解し、１１０℃に加熱した。１時間、１１０℃後、反応物を水で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３で反応停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。
粗製残留物をトルエン(０.５mL)に溶解し、トシル酸(５当量)を加えた。反応物を一夜還流した。反応物を濃縮し、２mL  ＤＭＦに溶解し、濾過し、分取ＨＰＬＣで精製して、実施例１化合物(７.０mg、０.０１８mmol、１８％収率)を得た。LC-MS C24H24FN3の分析計算値 373.20, 実測値[M+H] 374.1 Tr = 1.736分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.91 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.13 (dd, J = 9.1, 5.7 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 7.81 (dd, J = 6.0, 3.1 Hz, 2H), 7.69-7.77 (m, 1H), 7.55 (dd, J = 6.1, 2.9 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.69-3.80 (m, 1H), 2.22 (br. s., 1H), 2.06 (br. s., 1H), 1.84-2.00 (m, 2H), 1.63-1.84 (m, 5H), 1.59 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 1.49 (d, J = 6.8 Hz, 3H)
【０１７８】
実施例２〜７
【化３９】
2019528301.tif 000040
実施例２〜７の化合物を、製造例１Ｋ化合物から実施例１に記載の方法および対応するフェニレンジアミンを使用して製造した。
【表１】
2019528301.tif 000041
【０１７９】
実施例８
６−クロロ−Ｎ−((Ｒ)−１−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン
【化４０】
2019528301.tif 000042
【０１８０】
製造例８Ａ：
【化４１】
2019528301.tif 000043
製造例１Ｋ化合物(２ｇ、６.６４mmol)をトルエン(２２.１２ml)に溶解し、アジドリン酸ジフェニル(２.００９ｇ、７.３０mmol)およびトリエチルアミン(１.１１０ml、７.９６mmol)を加えた。バイアルを密封し、７０℃に加熱した。２時間後、反応物を室温に冷却し、減圧下濃縮した。粗製残留物を４０mL  ＴＨＦに溶解し、４０mLの水および水酸化リチウム(１.５８９ｇ、６６.４mmol)を加えた。反応物を室温で１時間撹拌した。反応物を１Ｎ  ＨＣｌで酸性化し(白色沈殿形成)、ＥｔＯＡｃで抽出した。水性部分を１Ｎ  ＮａＯＨで塩基性化し(沈殿形成)、ＥｔＯＡｃで５回抽出した。塩基性抽出物を減圧下濃縮して、製造例８Ａ化合物(１.６８ｇ、６.１７mmol、９３％収率)を得た。LC-MS C17H21FN2の分析計算値 272.17, 実測値[M+H] 273.1 Tr = 0.50分(方法A). 1H NMR (400 Mhz, クロロホルム-d) δ: 8.80 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.11 (dd, J = 9.3, 5.7 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 10.6, 2.8 Hz, 1H), 7.46 (ddd, J = 9.2, 8.0, 2.8 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 3.27-3.37 (m, 1H), 3.13 (dq, J = 9.3, 6.3 Hz, 1H), 2.01-2.10 (m, 1H), 1.67-1.92 (m, 6H), 1.37-1.55 (m, 4H), 1.15 (d, J = 6.4 Hz, 3H)
【０１８１】
実施例８：６−クロロ−Ｎ−((Ｒ)−１−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)ベンゾ[ｄ]チアゾール−２−アミン
製造例８Ａ化合物(３４.８mg、０.０７７mmol、６９.７％収率)をＮＭＰ(１１０μl)およびＤＩＰＥＡ(５７.７μl、０.３３０mmol)に溶解した。２,６−ジクロロベンゾ[ｄ]チアゾール(４５.０mg、０.２２０mmol)を加え、反応物を密封し、１５０℃に加熱した。１時間後、反応物をＤＭＦで希釈し、濾過し、分取ＨＰＬＣで精製して、実施例８化合物(３４.８mg、０.０７７mmol、７０％収率)を得た。LC-MS C24H23ClFN3Sの分析計算値 439.13, 実測値[M+H] 440.1 Tr = 2.420分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.83 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.04-8.11 (m, 2H), 7.95 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.65 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.27 (br. s., 1H), 3.45 (br. s., 1H), 1.59-1.94 (m, 9H), 1.24 (d, J = 6.2 Hz, 3H)
【０１８２】
実施例９〜１２
【化４２】
2019528301.tif 000044
実施例９〜１２化合物を、製造例８Ａ化合物から、実施例８の方法および対応するヘテロアリールハライドを使用して、製造した。
【表２】
2019528301.tif 000045
【０１８３】
実施例１３
４−(((ｔｒａｎｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノリン
【化４３】
2019528301.tif 000046
【０１８４】
中間体１３Ａ：エチル２−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−イリデン)アセテート
ホスホノ酢酸トリエチル(２１.７９ml、１０９mmol)を、水素化ナトリウム(３.８４ｇ、９６mmol)のＴＨＦ(６４.０ml)懸濁液に０℃で加えた。反応物を室温で３０分撹拌した。３０分後、反応物を０℃に再冷却し、１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−オン(１０ｇ、６４.０mmol)の５mL  ＴＨＦ溶液を加えた。反応物を室温で３０分撹拌して、水で反応停止させた。混合物をＤＣＭで３回抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、中間体１３Ａ(１３.８８ｇ、６１.３mmol、９６％収率)を得た。ＴＬＣ：生成物は、アニスアルデヒドで紫色スポットとして染色された(１：１  Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ中Ｒｆ＝０.７５)。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ: 5.65 (s, 1H), 4.13 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.92-3.99 (m, 4H), 2.94-3.02 (m, 2H), 2.31-2.40 (m, 2H), 1.71-1.79 (m, 4H), 1.26 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０１８５】
中間体１３Ｂ：エチル２−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−イル)アセテート
中間体１３Ａ(１３.８８ｇ、６１.３mmol)をＥｔＯＡｃ(６１.３ml)に溶解し、窒素雰囲気下、湿１０％パラジウム炭素(１.３０６ｇ、１２.２７mmol)(５４％ｗ／ｗ含水)を含むParr水素化ボトルに入れた。反応ボトルをパージし、窒素気流で３回、次いで水素で戻し充填した。ボトルに水素を５０psiまで満たした後、ボトルをParrシェーカーに入れ、振盪した。４時間後、反応物を加圧セライトで濾過し、減圧下濃縮して、中間体１３Ｂ(１３.７８ｇ、６０.４mmol、９８％収率)を得た。LC-MS C12H20O4の分析計算値 228.14, 実測値[M+H] 299.1 Tr = 0.83分(方法A). 1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ: 4.11 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.88-3.95 (m, 4H), 2.21 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.83 (dqd, J = 11.0, 7.5, 3.5 Hz, 1H), 1.68-1.78 (m, 4H), 1.50-1.61 (m, 2H), 1.27-1.35 (m, 2H), 1.24 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０１８６】
中間体１３Ｃ：エチル２−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−イル)ブタノエート
ジイソプロピルアミン(２.３４７ml、１６.６３mmol)を乾燥ＴＨＦ(１５.９９ml)(Ｎ２雰囲気下)に溶解し、−７８℃に冷却した。ｎ−ＢｕＬｉ(６.１４ml、１５.３５mmol)(２.５Ｍのヘキサン溶液)を、−７８℃で約５分かけて加えた。４５分撹拌後、反応物を室温に１０分温め、−７８℃に戻した。次いで、１,３−ジメチルテトラヒドロピリミジン−２(１Ｈ)−オン(１.５４１ml、１２.７９mmol)、続いて中間体１３Ｂ(２.９２ｇ、１２.７９mmol)のＴＨＦ(１５.９９ml)溶液(約５分かけて滴下)を加えた。１時間後、ヨードエタン(１.１２５ml、１４.０７mmol)(非希釈)を約５分かけて滴下した。反応物を、さらに２時間、−７８℃で撹拌し、室温にゆっくり温めた。反応物を一夜、室温で撹拌した。１：１  水／塩水に注加することにより反応停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１３Ｃ(２.２７ｇ、８.８６mmol、６９％収率)を得た。ＴＬＣ：生成物は、アニスアルデヒドで紫色スポットとして染色された(１：１  Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ中Ｒｆ＝０.８０)。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ: 4.14 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 3.88-3.95 (m, 4H), 2.09 (td, J = 8.4, 5.6 Hz, 1H), 1.69-1.83 (m, 4H), 1.45-1.64 (m, 6H), 1.33-1.42 (m, 1H), 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.86 (t, J = 7.5 Hz, 3H)
【０１８７】
中間体１３Ｄ：エチル２−(４−オキソシクロヘキシル)ブタノエート
中間体１３Ｃ(２.００ｇ、７.８０mmol)をＴＨＦ(３９.０ml)に溶解し、１Ｍ  塩酸(３９.０ml)を加えた。反応物を室温で２時間撹拌した。反応物を減圧下濃縮し、水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１３Ｄ(１.４７ｇ、６.９２mmol、８９％収率)を得た。ＴＬＣ：生成物はアニスアルデヒドで微桃色に染色された(１：１  Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ中Ｒｆ＝０.６５)。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ: 4.15 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.25-2.42 (m, 4H), 2.18 (ddd, J = 9.3, 7.8, 5.2 Hz, 1H), 2.10 (ddt, J = 13.1, 6.2, 3.3 Hz, 1H), 1.90-2.03 (m, 2H), 1.56-1.70 (m, 2H), 1.38-1.56 (m, 2H), 1.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.89 (t, J = 7.4 Hz, 3H)
【０１８８】
中間体１３Ｅ：エチル−２−((ｔｒａｎｓ)−４−ヒドロキシシクロヘキシル)ブタノエート
中間体１３Ｄ(１.４７ｇ、６.９２mmol)をＥｔＯＨ(１３.８５ml)に溶解し、０℃に冷却した。ＮａＢＨ４(０.３１４ｇ、８.３１mmol)を加え、反応物を０℃で１時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１３Ｅ(１.２２ｇ、５.６９mmol、８２％収率)をｃｉｓ−異性体(１３８mg、０.６４４mmol、９.３０％収率)と共に得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ: 4.14 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 10.5 Hz, 1H), 1.92-2.08 (m, 2H), 1.80-1.89 (m, 1H), 1.63-1.70 (m, 1H), 1.52-1.62 (m, 4H), 1.37-1.52 (m, 2H), 1.26 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.95-1.17 (m, 2H), 0.87 (t, J = 7.4 Hz, 3H)
【０１８９】
中間体１３Ｆ：エチル２−((ｔｒａｎｓ)−４−(キノリン−４−イルオキシ)シクロヘキシル)ブタノエート
中間体１３Ｅ(１００mg、０.４６７mmol)をＤＭＳＯ(９３３μl)に溶解し、ＮａＨ(２２.４０mg、０.９３３mmol)を、室温で１分かけてゆっくり加えた。１時間後、４−ブロモキノリン(１１７mg、０.５６０mmol)を加え、反応物を８０℃で１６時間加熱した。塩化アンモニウムで反応停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１３Ｆ(８９mg、０.２６１mmol、５５.９％収率)を得た。LC-MS C21H27NO3の分析計算値 341.20, 実測値[M+H] 342.3 Tr = 0.84分(方法A)
【０１９０】
中間体１３Ｇ：２−((ｔｒａｎｓ)−４−(キノリン−４−イルオキシ)シクロヘキシル)ブタン酸
中間体１３Ｆ(６７mg、０.１９６mmol)をＴＨＦ(１５７μl)、水(１５７μl)およびＭｅＯＨ(７８μl)に溶解した。水酸化リチウム(４７.０mg、１.９６２mmol)を加え、反応物を６０℃で一夜撹拌した。反応物を減圧下濃縮し、水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。水層を酢酸で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出し、続いて７：３  クロロホルム：プロパノールで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮して、中間体１３Ｇ(５８mg、０.１８５mmol、９４％収率)を得た。物質をそのままその後使用した。LC-MS C19H23NO3の分析計算値 313.17, 実測値[M+H] 314.3 Tr = 0.69分(方法A)
【０１９１】
実施例１３：４−(((ｔｒａｎｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノリン
中間体１３Ｇ(５８mg、０.１８５mmol)を塩化チオニル(１３５μl、１.８５１mmol)に溶解し、ＤＭＦ(７.１７μl、０.０９３mmol)を加えた。反応物を室温で１時間撹拌した。次いで、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空においた。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(９２５μl)に溶解し、４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(５２.８mg、０.３７０mmol)のＡＣＮ(９２５μl)およびＴＥＡ(１２９μl、０.９２５mmol)溶液に、約−４５℃で加えた。反応物を室温に温めた。１５分後、反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。粗製残留物をトルエンに溶解し(９２５μl)およびトシル酸(１７６mg、０.９２５mmol)を加えた。反応物を１６時間還流した。反応物を濃縮し、２mL  ＤＭＦに溶解し、濾過し、分取ＨＰＬＣで精製して、実施例１３化合物(２４.１mg、０.０５３mmol、２９％)を得た。LC-MS C25H26ClN3Oの分析計算値 419.18, 実測値[M+H] 420.2 Tr = 0.68分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.62 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.70 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.42-7.63 (m, 4H), 7.15 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.53 (br. s., 1H), 2.66 (br. s., 1H), 2.19 (br. s., 1H), 2.11 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 1.96-2.07 (m, 1H), 1.69-1.89 (m, 3H), 1.32-1.55 (m, 3H), 1.19 (d, J = 11.4 Hz, 2H), 0.70 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０１９２】
実施例１３−１(エナンチオマー１)および実施例１３−２(エナンチオマー２)
エナンチオマー１：実施例１３−１、４−(((ｔｒａｎｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノリン(ホモキラル、立体化学未確定)
【化４４】
2019528301.tif 000047
【０１９３】
エナンチオマー２：実施例１３−２、４−(((ｔｒａｎｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノリン(ホモキラル、立体化学未確定)
【化４５】
2019528301.tif 000048
【０１９４】
実施例１３−１(エナンチオマー１)および実施例１３−２(エナンチオマー２)：ラセミサンプルのキラル分離(方法Ｃ)により、エナンチオマー１(Ｔｒ＝１２.０５２分(方法Ｄ))およびエナンチオマー２(Ｔｒ＝１４.２０６分(方法Ｄ))を得た。絶対立体化学は未確定。
【０１９５】
実施例１３−１、エナンチオマー１：MS (ES): m/z = 420.3 [M+H]+. Tr = 1.995分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.63 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.70 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.42-7.62 (m, 3H), 7.15 (br. s., 1H), 7.04 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 4.54 (br. s., 1H), 2.67 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 2.21 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.13 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 2.01 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 1.70-1.88 (m, 3H), 1.37-1.58 (m, 3H), 1.11-1.28 (m, 3H), 0.72 (t, J = 7.1 Hz, 3H)
【０１９６】
実施例１３−２、エナンチオマー２：MS (ES): m/z = 420.2 [M+H]+. Tr = 1.963分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.63 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.70 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.40-7.62 (m, 3H), 7.15 (br. s., 1H), 7.04 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 4.54 (br. s., 1H), 2.67 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 2.21 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 2.12 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.01 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 1.69-1.88 (m, 3H), 1.34-1.57 (m, 3H), 1.11-1.28 (m, 3H), 0.72 (t, J = 7.0 Hz, 3H)
【０１９７】
実施例１４：
４−(((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノリン
【化４６】
2019528301.tif 000049
【０１９８】
中間体１４Ａ：エチル２−((ｃｉｓ)−４−(キノリン−４−イルオキシ)シクロヘキシル)ブタノエート
中間体１３Ｅ(３００mg、１.４００mmol)をＴＨＦ(５６００μl)に溶解し、キノリン−４−オール(４４７mg、３.０８mmol)およびトリフェニルホスフィン(８０８mg、３.０８mmol)を加えた。溶液を氷浴で０℃に冷却した。ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(５９９μl、３.０８mmol)を加え、加え終わった後、反応物を室温で撹拌した。１６時間後、反応物を減圧下濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１４Ａ(４１１mg、０.７８２mmol、５５.９％収率)を得た。LC-MS C21H27NO3の分析計算値 341.20, 実測値[M+H] 342.3 Tr = 0.81分(方法A)
【０１９９】
中間体１４Ｂ：２−((ｃｉｓ)−４−(キノリン−４−イルオキシ)シクロヘキシル)ブタン酸
中間体１４Ａ(４１１mg、１.２０４mmol)をＴＨＦ(９６３μl)、水(９６３μl)およびＭｅＯＨ(４８１μl)に溶解した。水酸化リチウム(２８８mg、１２.０４mmol)を加え、反応物を６０℃で一夜撹拌した。１６時間後、水酸化リチウム(２８８mg、１２.０４mmol)を加え、反応物をさらに２４時間、６０℃で撹拌した。反応物を減圧下濃縮し、水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。水層をＡｃＯＨで処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。７：３  クロロホルム：プロパノールでさらに抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮して、中間体２５Ｂ(３１５mg、１.００５mmol、８４％収率)を得た。LC-MS C19H23NO3の分析計算値 313.17, 実測値[M+H] 314.3 Tr = 0.64分(方法A)
【０２００】
実施例１４：４−(((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノリン
中間体１４Ｂ(７５mg、０.２３９mmol)を塩化チオニル(１７５μl、２.３９３mmol)に溶解し、ＤＭＦ(９.２７μl、０.１２０mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空においた。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(１１９７μl)に溶解し、４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(６８.２mg、０.４７９mmol)のＡＣＮ(１１９７μl)およびＴＥＡ(１６７μl、１.１９７mmol)溶液に−４５℃で加えた。反応物を室温に温めた。１５分後、反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。粗製残留物をトルエンに溶解し(１１９７μl)およびトシル酸(２２８mg、１.１９７mmol)を加えた。反応物を１６時間還流した。それを濃縮し、２mL  ＤＭＦに溶解し、濾過し、分取ＨＰＬＣで精製して、実施例１４化合物(３４.９mg、０.０８０mmol、３３％)を得た。LC-MS C25H26ClNO3の分析計算値 419.18, 実測値[M+H] 420.2 Tr = 0.63分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.65 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.67 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.53 (br. s., 1H), 7.48 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.95 (br. s., 1H), 2.67-2.75 (m, 1H), 2.04 (d, J = 14.6 Hz, 1H), 1.98 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 1.77-1.87 (m, 3H), 1.51-1.77 (m, 3H), 1.24-1.51 (m, 3H), 0.73 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２０１】
実施例１５
実施例１５、エナンチオマー１−４
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
(全４異性体はホモキラル、絶対立体化学は未確定)
【化４７】
2019528301.tif 000050
【０２０２】
中間体１５Ａ：エチル２−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−イリデン)アセテート
３リットル、４首丸底フラスコに窒素雰囲気下、水素化ナトリウム(４６.１ｇ、１１５３mmol)を仕込んだ。それにＴＨＦ(１２００mL)を加え、０℃に冷却した。ホスホノ酢酸トリエチル(２５８ｇ、１１５３mmol)をそれに滴下した。反応物を０℃で３０分撹拌した。次いで、１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−オン(１５０ｇ、９６０mmol)を加え、混合物を０℃で２時間撹拌した。反応混合物を室温に温め、１６時間撹拌した。１６時間後、反応混合物を水(５００ml)で反応停止させ、混合物を減圧下濃縮した。残留物を酢酸エチル(３×１０００ml)で抽出した。合わせた有機層を水(５００ml)および塩水(５００ml)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗製物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中０〜３０％酢酸エチルを使用する７５０ｇカラム)で精製した。純粋フラクションを濃縮し、濃縮し、高真空ポンプで乾燥させて、中間体１Ａ(１３５ｇ、５９７mmol、６２％)を得た。1H NMR (クロロホルム-d, 400 MHz) δ: 5.48 (br. s., 1H), 4.10-4.17 (m, 2H), 3.96-4.01 (m, 4H), 3.00 (s, 2H), 2.23-2.33 (m, 4H), 1.75-1.83 (m, 2H), 1.26 (t, J = 7.1 Hz, 3H)
【０２０３】
中間体１５Ｂ：エチル２−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−イル)アセテート
５リットルオートクレーブに、中間体１Ａ(１３５ｇ、５９７mmol)および酢酸エチル(１５００mL)を仕込んだ。これにＰｄ／Ｃ(１５.８７ｇ、１４９mmol)を加え、反応物を窒素気流で５分フラッシュした。３kg／cm２  水素ガス圧下、室温で２時間撹拌した。２時間後、反応混合物をオートクレーブから取り出し、セライト床で濾過し、セライト床を酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮乾固して、中間体１Ｂ(１３５ｇ、５９１mmol、９１％)を得た。1H NMR (クロロホルム-d, 400 MHz) δ: 4.12 (q, J = 7.4 Hz, 2H), 3.92-3.94 (m, 4H), 2.22 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.83 (td, J = 7.2, 3.8 Hz, 1H), 1.69-1.78 (m, 4H), 1.51-1.60 (m, 2H), 1.28-1.36 (m, 2H), 1.23-1.27 (m, 3H)
【０２０４】
中間体１５Ｃ：エチル２−(４−オキソシクロヘキシル)アセテート
１０リットルリアクターに、中間体１Ｂ(６７.５ｇ、２９６mmol)のアセトン(５０００mL)溶液を仕込んだ。これにＨＣｌ(１Ｍ)(１１８３mL、１１８３mmol)を加え、反応物を２時間加熱還流した。２時間後、反応混合物を濃縮した。残留物を１０リットル分液漏斗に移し、酢酸エチル(３×１０００ml)で抽出した。合わせた有機層を水(１０００ml)および塩水(１０００ml)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下濃縮した。粗製物をシリカゲルフラッシュカラム(石油エーテル中０〜２０％酢酸エチルを使用する７５０ｇカラム)で精製して、中間体１Ｃ(４０ｇ、２１７mmol、７３％)を得た。1H NMR (クロロホルム-d, 400 MHz) d: 4.15 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.35-2.41 (m, 3H), 2.20-2.34 (m, 3H), 2.04-2.13 (m, 3H), 1.41-1.53 (m, 2H), 1.24-1.30 (t, 3H)
【０２０５】
中間体１５Ｄ：エチル２−(４−(((トリフルオロメチル)スルホニル)オキシ)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート
２リットル４首に、２,６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン(８４ｇ、４０７mmol)のジクロロメタン(５００mL)溶液を窒素気流下に仕込んだ。これにトリフルオロメタンスルホン酸無水物(５５.０mL、３２６mmol)を滴下した。次いで、エチル中間体１Ｃ(５０ｇ、２７１mmol)のジクロロメタン(５００mL)溶液をゆっくり加えた。加え終わった後、室温で一夜撹拌した。一夜撹拌後、反応混合物を１０００mlのジクロロメタンで希釈し、水(５００ml)、続いて炭酸ナトリウム(５００ml)および再び水(５００ml)で洗浄した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗製物をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中０〜１０％酢酸エチルを使用する７５０ｇカラム)で精製して、中間体１Ｄ(６５ｇ、２０６mmol、７６％)を得た。純粋フラクションを濃縮した。1H NMR (クロロホルム-d, 400 MHz) δ: 5.73 (dt, J = 4.9, 2.3 Hz, 1H), 4.15 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.28-2.52 (m, 5H), 2.07-2.21 (m, 1H), 1.89-2.00 (m, 2H), 1.54 (dt, J = 6.0, 3.5 Hz, 1H), 1.25-1.30 (t, 3H)
【０２０６】
中間体１５Ｅ：エチル２−(４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３−ジオキソラン−２−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート
２リットル、４首丸底フラスコに、中間体１Ｄ(１２０ｇ、３７９mmol)、ビス(ピナコラト)ジボロン(１０６ｇ、４１７mmol)および酢酸カリウム(１１２ｇ、１１３８mmol)の１,４−ジオキサン(１２００mL)溶液を窒素気流下仕込んだ。窒素ガスを、反応混合物内部に１０分間吹き込んだ。次いで、１,１’−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン−パラジウム(II)ジクロライドジクロロメタン錯体(１５.４９ｇ、１８.９７mmol)を加え、窒素ガスをさらに５分パージした。反応物を８０℃で１６時間、窒素雰囲気下加熱した。粗製物を石油エーテル中０〜１０％酢酸エチルを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１Ｅ(５６ｇ、１９０mmol、５０％)を得た。1H NMR (クロロホルム-d, 400 MHz) δ: 6.46-6.55 (m, 1H), 4.12 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.99-2.35 (m, 6H), 1.68-1.87 (m, 2H), 1.17-1.34 (m, 16H)
【０２０７】
中間体１５Ｆ：エチル２−(４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート
中間体１５Ｅ(５ｇ、１７.００mmol)をジオキサン(２８.３ml)および水(７.０８ml)に溶解した。４−クロロ−６−フルオロキノリン(２.５７ｇ、１４.１５mmol)、続いて炭酸カリウム(５.８７ｇ、４２.５mmol)を加えた。混合物を窒素ガスで５分バブリングし、Ｐｄ(Ｐｈ３Ｐ)４(０.３２７ｇ、０.２８３mmol)を加えた。その後、反応物を窒素ガスでさらに５分バブリングし、密封し、１００℃で１６時間加熱した。反応物を減圧下濃縮し、カラムクロマトグラフィーで直接精製して、中間体１５Ｆ(４.２２ｇ、１３.４７mmol、９５％収率)を得た。LC-MS C19H20FNO2の分析計算値 313.15, 実測値[M+H] 314.1 Tr = 0.75分(方法A)
【０２０８】
中間体１５Ｇ：エチル２−(４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)アセテート(ｃｉｓおよびｔｒａｎｓジアステレオマー混合物)
中間体１５Ｆ(４.２２ｇ、１３.４７mmol)をメタノール(６７.３ml)に溶解し、ギ酸アンモニウム(４.２５ｇ、６７.３mmol)を加えた。容器に還流凝縮器を取り付け、排気し、３回窒素気流でフラッシュした。次いで、パラジウム炭素(０.１４３ｇ、１.３４７mmol)(湿、デグサタイプ)を加え、反応物を１時間加熱還流した。反応物を冷却し、減圧下濃縮し、ジクロロメタンで希釈した。固形物を濾別し、濾液を濃縮して、粗製中間体１５Ｇ(４.２０ｇ、１３.３２mmol、９９％収率)を、ｃｉｓおよびｔｒａｎｓジアステレオマーの約２：１混合物として得た。LC-MS C19H22FNO2の分析計算値 315.16, 実測値[M+H] 316.2 Tr = 0.76分(方法A)
【０２０９】
中間体１５Ｈ：エチル２−(４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)ブタノエート(４ジアステレオマー混合物)
ＴＨＦ(６mL)を含むフラスコに、リチウムジイソプロピルアミド(２.０ＭのＴＨＦ溶液)(３.１７mL、６.３４mmol)を−７８℃で加え、続いて１,３−ジメチルテトラヒドロピリミジン−２(１Ｈ)−オン(０.５７３mL、４.７６mmol)および中間体１５Ｇ(１.０ｇ、３.１７mmol)のＴＨＦ(１０mL)溶液を−７８℃で滴下した。得られた混合物は褐色に変わり、−７８℃で１時間撹拌し、次いでヨードエタン(０.５０７mL、６.３４mmol)(非希釈)をゆっくり加えた。反応混合物を氷浴温度で１時間撹拌し、続いて一夜室温に温めた。１６時間後、水に注加することにより反応停止させ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１５Ｈ(０.８１ｇ、２.３６mmol、７４％収率)を得た。LC-MS C21H26FNO2の分析計算値 343.20, 実測値[M+H] 344.3 Tr = 0.86分(方法A)
【０２１０】
中間体１５Ｉ：２−(４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)ブタン酸(４ジアステレオマー混合物)
中間体１５Ｈ(０.８１ｇ、２.３５９mmol)のテトラヒドロフラン(４mL)およびメタノール(７mL)溶液に、２Ｍ  水酸化リチウム(７.０８mL、１４.１５mmol)の水(４mL)溶液をゆっくり加えた。反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物にさらに２Ｍ  水酸化リチウム(７.０８mL、１４.１５mmol)を加え、得られた反応混合物を７０℃で７２時間加熱した。反応混合物を冷却し、混合物に酢酸エチルを加えた。水層を分離し、水層に１Ｎ  ＨＣｌ溶液を加えて、ｐＨを５〜６に調節した。得られた混合物を水およびＣＨＣｌ３：２−プロパノール(２：１)で希釈した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。濾液を減圧下濃縮して、中間体１５Ｉ(０.６４ｇ、２.０２９mmol、８６％収率)を白色固体として得た。LC-MS C19H22FNO2の分析計算値 315.16, 実測値[M+H] 316.3 Tr = 0.72分(方法A)
【０２１１】
実施例１５：４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
中間体１５Ｉ(７６mg、０.２４１mmol)を塩化チオニル(１７６μl、２.４１０mmol)に溶解し、ＤＭＦ(９.３３μl、０.１２０mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空においた。１５分後、粗製アシルクロライドをアセトニトリル(１２０５μl)に溶解し、４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(６８.７mg、０.４８２mmol)のアセトニトリル(１２０５μl)およびトリエチルアミン(１６８μl、１.２０５mmol)溶液に−４５℃で加えた。反応物を室温に温めた。３０分後、反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。
得られた粗製残留物をトルエン(１２０５μl)に溶解し、トシル酸(２２９mg、１.２０５mmol)を加えた。反応物を１６時間加熱還流した。反応物を濃縮し、２mL  ＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、実施例１５化合物を４異性体混合物(２１mg、０.０５１mmol、２１％)として得た。LC-MS C25H25ClFN3の分析計算値 421.17, 実測値[M+H] 422.2 Tr = 0.73分(方法A)
【０２１２】
エナンチオマー１〜４
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
(全４異性体はホモキラル、絶対立体化学は未確定)
【化４８】
2019528301.tif 000051
実施例１５、エナンチオマー１、エナンチオマー２、エナンチオマー３およびエナンチオマー４：ラセミサンプルのキラル分離(方法Ｇ)により、実施例１５−１、エナンチオマー１(Ｔｒ＝４.９０５分(方法Ｈ))および実施例１５−２、エナンチオマー２(Ｔｒ＝７.４８３分)および実施例１５−３、エナンチオマー３(Ｔｒ＝９.２５６分(方法Ｈ))および実施例１５−４、エナンチオマー４(Ｔｒ＝１１.８８４分(方法Ｈ))を得た(絶対立体化学は未確定)。
【０２１３】
実施例５１−１、エナンチオマー１：MS (ES): m/z = 422.1 [M+H]+. Tr = 2.044分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.85 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 8.09 (dd, J = 9.1, 5.9 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.62-7.69 (m, 1H), 7.56-7.62 (m, 2H), 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.32-3.45 (m, 1H), 3.24 (td, J = 10.9, 3.2 Hz, 1H), 2.18 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 1.99-2.07 (m, 1H), 1.58-1.99 (m, 7H), 1.52 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 1.05 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 0.69 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２１４】
実施例１５−２、エナンチオマー２：MS (ES): m/z = 422.2 [M+H]+. Tr = 2.022分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.77 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.05 (dd, J = 9.1, 5.8 Hz, 1H), 7.92 (dd, J = 10.9, 2.1 Hz, 1H), 7.63 (td, J = 8.6, 2.4 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.22 (t, J = 11.5 Hz, 1H), 2.64-2.71 (m, 1H), 2.05 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 1.74-1.96 (m, 5H), 1.40-1.60 (m, 3H), 1.27-1.38 (m, 2H), 0.73 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２１５】
実施例１５−３、エナンチオマー３：MS (ES): m/z = 422.3 [M+H]+. Tr = 2.075分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.83 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 8.08 (dd, J = 8.9, 5.9 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.64 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.40-7.59 (m, J = 4.2 Hz, 3H), 7.14 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.14-3.24 (m, 1H), 2.17 (br. s., 1H), 2.02 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 1.55-1.97 (m, 7H), 1.51 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 1.06 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 0.68 (t, J = 7.1 Hz, 3H)
【０２１６】
実施例１５−４、エナンチオマー４：MS (ES): m/z = 422.1 [M+H]+. Tr = 2.022分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.77 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.05 (dd, J = 9.0, 5.8 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 7.37-7.67 (m, 4H), 7.09-7.20 (m, 1H), 3.17-3.25 (m, 1H), 2.68 (br. s., 1H), 1.99-2.10 (m, 1H), 1.72-1.97 (m, 5H), 1.40-1.61 (m, 3H), 1.24-1.40 (m, 2H), 0.73 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２１７】
実施例１６
ジアステレオマー１および２
(±)−４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノリン
(各ｃｉｓ−またはｔｒａｎｓ−ジアステレオマーはラセミ体である；ｃｉｓ−およびｔｒａｎｓ−は任意に割り当てた)
【化４９】
2019528301.tif 000052
【０２１８】
中間体１６Ａ：エチル２−(４−(キノリン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート
中間体１５Ｅ(６.２２ｇ、２１.１５mmol)をジオキサン(３８.５ml)および水(９.６１ml)に溶解した。４−ブロモキノリン(４ｇ、１９.２３mmol)、続いて炭酸カリウム(７.９７ｇ、５７.７mmol)を加えた。混合物を窒素ガスで５分バブリングし、Ｐｄ(Ｐｈ３Ｐ)４(０.４４４ｇ、０.３８５mmol)を加えた。加えた後、反応物を排気し、窒素ガスで３回戻し充填し、密封し、１００℃で１６時間加熱した。反応物を減圧下濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで直接精製して、中間体１６Ａ(３.２９ｇ、１１.１４mmol、５７.９％収率)を得た。LC-MS C19H21NO2の分析計算値 295.16, 実測値[M+H] 296.2, Tr = 0.71分(方法A)
【０２１９】
中間体１６Ｂ：エチル２−(４−(キノリン−４−イル)シクロヘキシル)アセテート
中間体１６Ａ(３.２９ｇ、１１.１４mmol)をメタノール(５５.７ml)に溶解し、ギ酸アンモニウム(３.５１ｇ、５５.７mmol)を加えた。容器に還流凝縮器を取り付け、排気し、窒素ガスで３回フラッシュした。次いで、パラジウム炭素(０.１１９ｇ、１.１１４mmol)(湿５１重量％、デグサタイプ)を加え、反応物を１時間加熱還流した。反応物を冷却し、減圧下濃縮し、ジクロロメタンで希釈した。固形物を濾別し、濾液を濃縮して、粗製中間体１６Ｂ(２.９９ｇ、１０.０５mmol、９０％収率)を得た。LC-MS C19H23NO2の分析計算値 297.17, 実測値[M+H] 298.2, Tr = 0.71分(方法A)
【０２２０】
中間体１６Ｃ：エチル２−(４−(キノリン−４−イル)シクロヘキシル)プロパノエート
ジイソプロピルアミン(３.１２ml、２２.１２mmol)を、窒素雰囲気下乾燥ＴＨＦ(１２.５７ml)に溶解し、−７８℃に冷却した。ｎＢｕＬｉ(８.４５ml、２１.１１mmol)(２.５Ｍのヘキサン溶液)を、−７８℃で約５分かけて加えた。３０分撹拌後、反応物を室温に１０分温め、−７８℃に戻した。次いで、１,３−ジメチルテトラヒドロピリミジン−２(１Ｈ)−オン(１.２１１ml、１０.０５mmol)、続いて中間体１６Ｂ(２.９９ｇ、１０.０５mmol)のＴＨＦ(１２.５７ml)溶液を加えた(約５分かけて−７８℃で滴下)(反応物は橙色に変わる)。１０分後、ヨードメタン(１.５６５ml、２５.１mmol)(非希釈)を加えた。１時間後加え終わり、反応物を室温に温め、一夜、室温で撹拌した。塩化アンモニウム(飽和水溶液)および水で反応停止させた。次いで酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１６Ｃ(２.４２ｇ、５.４４mmol、５４.１％収率)を得て、これは少量の１６Ｂが混入していた。さらに精製することなく進めた。LC-MS C20H25NO2の分析計算値 311.19, 実測値[M+H] 312.2, Tr = 0.74分(方法A)
【０２２１】
中間体１６Ｄ：２−(４−(キノリン−４−イル)シクロヘキシル)プロパン酸
中間体１６Ｃ(２.４２ｇ、７.７７mmol)をＴＨＦ(６.２２ml)、水(６.２２ml)およびＭｅＯＨ(３.１１ml)に溶解した。水酸化リチウム(１.８６１ｇ、７８mmol)を加え、反応物を室温で２時間撹拌した。次いで５０℃で一夜撹拌した。１６時間後、反応物を減圧下濃縮し、水で希釈し、ＡｃＯＨで処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。水層を７：３  クロロホルム：プロパノールで再び抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮し、一夜真空に置いて(残存ＡｃＯＨ除去のため)、中間体１６Ｄ(２.１０ｇ、７.４１mmol、９５％収率)を得た。LC-MS C18H21NO2の分析計算値 283.16, 実測値[M+H] 284.2, Tr = 0.60分(方法A)
【０２２２】
実施例１６
ジアステレオマー１および２
(±)−４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノリン(各ｃｉｓ−またはｔｒａｎｓ−ジアステレオマーはラセミ体である；ｃｉｓ−およびｔｒａｎｓ−は任意に割り当てた)
中間体１６Ｄ(１００mg、０.３５３mmol)を塩化チオニル(２５８μl、３.５３mmol)に溶解し、ＤＭＦ(１３.６６μl、０.１７６mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、真空ラインに置いて、過剰の溶媒および反応材を除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをアセトニトリル(１７６５μl)に溶解し、４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(１０１mg、０.７０６mmol)のアセトニトリル(１７６５μl)およびトリエチルアミン(２４６μl、１.７６５mmol)溶液に０℃で加えた。反応物を室温に温め、室温で一夜撹拌した。１６時間後、反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をトルエンに溶解し(１７６５μl)、そしてトシル酸(３３６mg、１.７６５mmol)を加えた。反応物を１６時間還流した。１６時間後、反応物を濃縮し、２mL  ＤＭＦに溶解し、濾過し、少量の物質をＨＰＬＣで精製して、実施例１６  ジアステレオマー１および２を得た。
【０２２３】
実施例１６−１、ジアステレオマー１：LC-MS C24H24ClN3の分析計算値 389.17, 実測値[M+H] 390.3, Tr = 1.841分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.79 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.72 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.59 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.42-7.55 (m, 1H), 7.38 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.10-7.19 (m, 1H), 3.32 (br. s., 1H), 2.91 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 1.96 (t, J = 12.0 Hz, 2H), 1.76-1.92 (m, 3H), 1.46-1.63 (m, 3H), 1.29-1.43 (m, 4H)
【０２２４】
実施例１６−２、ジアステレオマー２：LC-MS C24H24ClN3の分析計算値 389.17, 実測値[M+H] 390.2, Tr = 1.872分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.86 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.74 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.61 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 4.3 Hz, 2H), 7.49 (br. s., 1H), 7.14 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.32-3.52 (m, 1H), 2.12 (br. s., 1H), 2.04 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 1.65-1.98 (m, 5H), 1.50-1.65 (m, 2H), 1.33 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.15 (d, J = 12.6 Hz, 1H)
【０２２５】
実施例１７
ジアステレオマー１および２
(±)−４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−３−プロピル)シクロヘキシル)−６−(トリフルオロメチル)キノリン
(相対立体化学は未確定)
【化５０】
2019528301.tif 000053
【０２２６】
中間体１７Ａ：エチル２−(４−(６−(トリフルオロメチル)キノリン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート
４−クロロ−６−(トリフルオロメチル)キノリン(２.０５ｇ、８.８５mmol)および中間体１５Ｅ(３.１２ｇ、１０.６２mmol)の１,４−ジオキサン(３５mL)溶液に、炭酸カリウム(３.６７ｇ、２６.６mmol)および水(７mL)を加えた。反応混合物を窒素気流で３分パージし、続いてＰｄ(Ｐｈ３Ｐ)４(０.４０９ｇ、０.３５４mmol)を加えた。得られた混合物を再び窒素気流でパージし、密封し、窒素雰囲気下、１００℃で１６時間加熱した。反応混合物を冷却し、酢酸エチルおよび飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で希釈した。有機層を分離し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１７Ａ(３.０ｇ、８.２６mmol、９３％)を得た。LC-MS C20H20F3NO2の分析計算値 363.15, 実測値[M+H] 364.5, Tr = 0.97分(方法A)
【０２２７】
中間体１７Ｂ：エチル２−(４−(６−(トリフルオロメチル)キノリン−４−イル)シクロヘキシル)アセテート
中間体１７Ａ(３.０ｇ、８.２６mmol)を、ＭｅＯＨ(５０mL)中のギ酸アンモニウム(２.０８２ｇ、３３.０mmol)の混合物に加え、この混合物を窒素気流で３分パージし、続いて１０％パラジウム炭素(０.８７９ｇ、０.４１３mmol)(湿、デグサタイプ)を加えた。得られた混合物を８５℃で２時間還流した。反応混合物を冷却し、ジクロロメタンで希釈した。反応混合物をセライトで濾過し、フィルターケーキをジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下濃縮した。残留物を酢酸エチルで抽出し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液、塩水で連続的に洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾液を減圧下濃縮して、中間体１７Ｂ(２.６ｇ、７.１２mmol、８６％)をｃｉｓ−およびｔｒａｎｓ−ジアステレオマーの混合物として得た。LC-MS C20H22F3NO2の分析計算値 365.16, 実測値[M+H] 366.2, Tr = 0.94分(方法A)
【０２２８】
中間体１７Ｃ：エチル２−(４−(６−(トリフルオロメチル)キノリン−４−イル)シクロヘキシル)ブタノエート
ＴＨＦ(１５mL)を含むフラスコに、リチウムジイソプロピルアミド(２.０ＭのＴＨＦ溶液)(７.６５mL、１５.３０mmol)を−７８℃で加え、続いて１,３−ジメチルテトラヒドロピリミジン−２(１Ｈ)−オン(１.２８７mL、１０.６７mmol)およびエチル２−(４−(６−(トリフルオロメチル)キノリン−４−イル)シクロヘキシル)アセテート(２.６ｇ、７.１２mmol)のＴＨＦ(１０mL)溶液を−７８℃で滴下した。得られた混合物は褐色に変わり、−７８℃で１時間撹拌し、次いでヨードエタン(１.１３８mL、１４.２３mmol)をゆっくり加えた。反応混合物を室温に温め、３時間撹拌した。水に注加することにより反応停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。得られた物質をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１７Ｃ(１.１ｇ、２.７７mmol、３９％)を得た。LC-MS C22H26F3NO2の分析計算値 393.19, 実測値[M+H] 394.3, Tr = 0.97分(方法A)
【０２２９】
中間体１７Ｄ：２−(４−(６−(トリフルオロメチル)キノリン−４−イル)シクロヘキシル)ブタン酸
中間体１７Ｃ(１.１ｇ、２.８０mmol)のＴＨＦ(２０mL)およびＭｅＯＨ(８mL)の混合物に、水酸化リチウム(２.０Ｍ溶液)(１３.９８mL、２８.０mmol)を加えた。得られた混合物を６５℃で７２時間加熱した。反応混合物を冷却し、水で希釈した。混合物に１Ｎ  ＨＣｌ溶液を加えて、ｐＨを約５に調節した。白色固体がｐＨ５〜６で析出した。得られた混合物を酢酸エチルで２回抽出した。有機層を分離し、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。濾液を減圧下濃縮して、中間体１７Ｄ(０.９３ｇ、２.５５mmol、９１％)を淡黄色固体として得た。LC-MS C20H22F3NO2の分析計算値 365.16, 実測値[M+H] 366.3, Tr = 0.97分(方法A)
【０２３０】
実施例１７：エナンチオマー１および２
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−３−プロピル)シクロヘキシル)−６−(トリフルオロメチル)キノリン
(両異性体ともシクロヘキシル環でｃｉｓ−またはｔｒａｎｓ−立体化学を有するラセミ体、絶対立体化学は未確定)
中間体１７Ｄ(４０mg、０.１０９mmol)を塩化チオニル(８０μl、１.０９５mmol)に溶解し、ＤＭＦ(４.２４μl、０.０５５mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空において、過剰の塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(５４７μl)に溶解し、４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(３１.２mg、０.２１９mmol)のＡＣＮ(５４７μl)およびＴＥＡ(７６μl、０.５４７mmol)溶液に０℃で加えた。反応物を室温に温め、一夜撹拌した。１６時間後、反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をトルエンに溶解し(５４７μl)、そしてトシル酸(１０４mg、０.５４７mmol)を加えた。反応物を１６時間還流した。反応物を濃縮し、２mL  ＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、実施例１７のｃｉｓ−およびｔｒａｎｓ−化合物を得た。
【０２３１】
実施例１７−１、ジアステレオマー１：(５.６mg、０.０１２mmol、１１％)  LC-MS C26H25ClF3N3の分析計算値 471.17, 実測値[M+H] 472.1, Tr = 2.178分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.98 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.22 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.79 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 3.43-3.53 (m, 1H), 3.02 (br. s., 1H), 1.79-2.11 (m, 6H), 1.46-1.68 (m, 3H), 1.29-1.44 (m, 2H), 0.79 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２３２】
実施例１７−２、ジアステレオマー２：(１６.６mg、０.０３５mmol、３２％)  LC-MS C26H25ClF3N3の分析計算値 471.17, 実測値[M+H] 472.4, Tr = 2.206分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.04 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.25 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.46-7.56 (m, 1H), 3.45-3.73 (m, 2H), 2.28 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 2.07 (d, J = 12.1 Hz, 2H), 1.67-2.00 (m, 6H), 1.56 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 1.03 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 0.75 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２３３】
実施例１８
(±)−４−((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−２−メトキシエチル)シクロヘキシル)−６−(トリフルオロメチル)キノリン
【化５１】
2019528301.tif 000054
中間体１８Ａ：エチル３−メトキシ−２−((ｃｉｓ)−４−(６−(トリフルオロメチル)キノリン−４−イル)シクロヘキシル)プロパノエート
ＴＨＦ(１０mL)を含むフラスコに、リチウムジイソプロピルアミド(１.５Ｍヘキサン溶液)(３.６５mL、５.４７mmol)を−７８℃で加え、続いて１,３−ジメチルテトラヒドロピリミジン−２(１Ｈ)−オン(０.３９６mL、３.２８mmol)および中間体１７Ｂ(０.８ｇ、２.１８９mmol)のＴＨＦ(５mL)溶液を−７８℃で滴下した。得られた混合物は褐色に変わり、−７８℃で１時間撹拌し、次いでクロロメチルメチルエーテル(０.２４９mL、３.２８mmol)(非希釈)をゆっくり加えた。反応混合物を−７８℃で２時間撹拌し、次いで浴を除き、２０時間、室温で撹拌した。２０時間後、反応混合物を水で反応停止させ、得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下濃縮した。残留物をＤＣＭに溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１８Ａ(０.３９ｇ、０.９５２mmol、４４％)を得た。LC-MS C22H26F3NO3の分析計算値 409.19, 実測値[M+H] 410.2, Tr = 0.91分(方法A)
【０２３４】
中間体１８Ｂ：３−メトキシ−２−((ｃｉｓ)−４−(６−(トリフルオロメチル)キノリン−４−イル)シクロヘキシル)プロパン酸
中間体１８Ａ(０.４９ｇ、１.１９７mmol)のＴＨＦ(６mL)およびＭｅＯＨ(６mL)溶液に、水酸化リチウム(２.０Ｍ溶液)(７.１８mL、１４.３６mmol)を加えた。反応混合物を７０℃で５時間加熱した。反応混合物を冷却し、混合物に水および１Ｎ  ＨＣｌを加えてｐＨを約６に調節し、２mLの酢酸を加えてｐＨを約４に調節した。白色固体が析出し、得られた懸濁液を酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下濃縮し、粗製生成物をＨＰＬＣで精製して、中間体１８Ｂ(０.３８ｇ、０.９９６mmol、８３％)黄色固体として得た。LC-MS C20H22F3NO3の分析計算値 381.13, 実測値[M+H] 382.2, Tr = 0.74分(方法A)
【０２３５】
実施例１８：(±)−４−((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−２−メトキシエチル)シクロヘキシル)−６−(トリフルオロメチル)キノリン
中間体１８Ｂ(２７mg、０.０７１mmol)を塩化チオニル(５１.７μl、０.７０８mmol)に溶解し、ＤＭＦ(２.７４μl、０.０３５mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空において、さらなる塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(１７７μl)に溶解し、４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(２０.１９mg、０.１４２mmol)のＡＣＮ(１７７μl)およびＴＥＡ(４９.３μl、０.３５４mmol)溶液に０℃で加えた。反応物を室温に温めた。１時間後、ＬＣＭＳは、所望の中間体のＭ＋１のピークへの変換を示した。反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製中間体をＰＯＣｌ３(３３０μl、３.５４mmol)に溶解し、９０℃で１時間加熱した。１Ｎ  ＮａＯＨをゆっくり加えて反応停止させ、ｐＨ約１０まで塩基性化した。得られた水性懸濁液をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製生成物をＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、実施例１８化合物(８.４mg、０.０１７mmol、２４％収率)を得た。LC-MS C26H25ClF3N3Oの分析計算値 487.16, 実測値[M+H] 488.1, Tr = 0.86分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 12.38-12.48 (m, 1H), 9.04 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.23 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.41-7.62 (m, 2H), 7.14 (ddd, J = 10.8, 8.8, 1.7 Hz, 1H), 3.71-3.80 (m, 2H), 3.56-3.65 (m, 2H), 3.35 (br. s., 1H), 3.20 (s, 3H), 2.25 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 1.72-2.03 (m, 5H), 1.64 (t, J = 13.1 Hz, 1H), 1.54 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 1.10 (d, J = 13.1 Hz, 1H)
【０２３６】
実施例１９
(±)−４−((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−２−メトキシエチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
【化５２】
2019528301.tif 000055
【０２３７】
中間体１９Ａ：エチル２−(４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)−３−メトキシプロパノエート
ＴＨＦ(８mL)を含むフラスコに、リチウムジイソプロピルアミド(１.５Ｍヘキサン溶液)(４.８９mL、７.３４mmol)を−７８℃で加え、続いて１,３−ジメチルテトラヒドロピリミジン−２(１Ｈ)−オン(０.５３９mL、４.４７mmol)および中間体１５Ｇ(１.０ｇ、３.１９mmol)のＴＨＦ(３mL)溶液を−７８℃で滴下した。得られた混合物は緑色に変わり、−７８℃で１時間撹拌した。次いで、クロロメチルメチルエーテル(０.３８８mL、５.１１mmol)(非希釈)をゆっくり加えた。反応混合物を−７８℃で０.５時間撹拌し、次いで約−２０℃で４時間温め、次いで室温で一夜温めた。反応混合物を水で反応停止させ、得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下濃縮した。残留物をＤＣＭに溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体１９Ａ(０.８０ｇ、２.２４mmol、７０％)を得た。LC-MS C21H24FNO3の分析計算値 357.17, 実測値[M+H] 358.2, Tr = 0.78分(方法A)
【０２３８】
中間体１９Ｂ：エチル２−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)−３−メトキシプロパノエート
中間体１９Ａ(１.０８ｇ、３.０２mmol)のメタノール(２０mL)溶液に、１０％パラジウム炭素(０.６４３ｇ、０.３０２mmol)を加えた。反応混合物を排気し、次いで水素で満たし、再び排気し、再び水素で戻し充填した。反応物を水素バルーンを使用して、水素下、室温で一夜撹拌した。反応混合物をセライトパッドで濾過し、パッドを酢酸エチルおよびＭｅＯＨで洗浄した。濾液を減圧下濃縮した。残留物を超臨界流体クロマトグラフィーで精製して、ｃｉｓ−およびｔｒａｎｓ−ジアステレオマーを分離して、中間体１９Ｂ(０.４４ｇ、１.２２４mmol、４１％収率)を得た。LC-MS C21H26FNO3の分析計算値 359.19, 実測値[M+H] 360.2, Tr = 0.74分(方法A)
【０２３９】
中間体１９Ｃ：２−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)−３−メトキシプロパン酸
中間体１９Ｂ(０.４４ｇ、１.２２４mmol)のＴＨＦ(５mL)およびＭｅＯＨ(５mL)溶液に、水酸化リチウム(２.０Ｍ溶液)(３.６７mL、７.３４mmol)を加えた。反応混合物を室温で一夜撹拌した。約１６時間後、反応混合物にさらにＭｅＯＨ(５mL)、ＴＨＦ(２mL)および水酸化リチウム(２.０Ｍ溶液)(３.６７mL、７.３４mmol)(４mL)を加え、反応混合物を６５℃で６時間加熱し、次いで４０℃で２日撹拌した。反応混合物を冷却し、水で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ溶液を加えて、ｐＨを４〜５に調節した。得られた混合物を酢酸エチルで２回抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下濃縮して、褐色油状物を得た。粗製残留物をＨＰＬＣで精製して、中間体１９Ｃ(０.３８、１.１５mmol、９４％収率)を得た。LC-MS C19H22FNO3の分析計算値 331.16, 実測値[M+H] 332.2, Tr = 0.62分(方法A)
【０２４０】
実施例１９：(±)−４−((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−２−メトキシエチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
中間体１９Ｃ(３５mg、０.１０６mmol)を塩化チオニル(７７μl、１.０５６mmol)に溶解し、ＤＭＦ(４.０９μl、０.０５３mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空に置いて、さらなる塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(２６４μl)に溶解し、４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(３０.１mg、０.２１１mmol)のＡＣＮ(２６４μl)およびＴＥＡ(７３.６μl、０.５２８mmol)溶液に０℃で加えた。反応物を室温に温めた。１時間後、反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製中間体をＰＯＣｌ３(４９２μl、５.２８mmol)に溶解し、９０℃で１時間加熱した。１Ｎ  ＮａＯＨをゆっくり加えて反応停止させ、ｐＨ約１０まで塩基性化した。得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、実施例１９化合物(１０.６mg、０.０２４mmol、２２％)を得た。LC-MS C25H25ClFN3Oの分析計算値 437.17, 実測値[M+H] 438.1, Tr = 0.75分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.86 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.09 (dd, J = 9.2, 5.8 Hz, 1H), 7.97 (dd, J = 10.9, 2.4 Hz, 1H), 7.66 (td, J = 8.6, 2.7 Hz, 1H), 7.40-7.61 (m, 3H), 7.14 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 3.71-3.79 (m, 2H), 3.59 (br. s., 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.20 (s, 3H), 2.20-2.30 (m, 1H), 1.69-2.02 (m, 5H), 1.62 (t, J = 13.2 Hz, 1H), 1.53 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 1.09 (d, J = 13.3 Hz, 1H)
【０２４１】
実施例２０
(±)−４−(((ｔｒａｎｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)−３−プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノリン
【化５３】
2019528301.tif 000056
実施例２０：(±)−４−(((ｔｒａｎｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)−３−プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノリン
中間体１３Ｇ(９２mg、０.２９４mmol)を塩化チオニル(２１４μl、２.９４mmol)に溶解し、ＤＭＦ(１１.３７μl、０.１４７mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空において、さらなる塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(７３４μl)に溶解し、５−クロロピリジン−２,３−ジアミン(８４mg、０.５８７mmol)のＡＣＮ(７３４μl)およびＴＥＡ(２０５μl、１.４６８mmol)溶液に０℃で加えた。反応物を室温に温めた。３０分後、反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製中間体を三塩化リン(４５０mg、２.９４mmol)に溶解し、９０℃に加熱した。２時間後、１Ｎ  ＮａＯＨをゆっくり加えて反応停止させ、ｐＨ約１０まで塩基性化した。得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製物を２mL  ＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、ラセミ実施例２０化合物(１８.９mg、０.０４４mmol、１５％収率)を得た。LC-MS C24H25ClN4Oの分析計算値 420.17, 実測値[M+H] 421.1, Tr = 0.69分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.62 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.27 (br. s., 1H), 8.09 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.04 (br. s., 1H), 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.70 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 4.54 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 3.58 (br. s., 1H), 2.65-2.71 (m, 1H), 2.21 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 2.11 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 1.97-2.06 (m, 1H), 1.72-1.90 (m, 3H), 1.35-1.57 (m, 3H), 1.13-1.28 (m, 2H), 0.71 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２４２】
エナンチオマー１およびエナンチオマー２
エナンチオマー１：実施例２０−１、４−(((ｔｒａｎｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)−３−プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノリン(ホモキラル、絶対立体化学は未確定)
【化５４】
2019528301.tif 000057
エナンチオマー２：実施例２０−２、４−(((ｔｒａｎｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)−３−プロピル)シクロヘキシル)オキシ)キノリン(ホモキラル、絶対立体化学は未確定)
【化５５】
2019528301.tif 000058
【０２４３】
実施例２０−１、エナンチオマー１および実施例２０−２、エナンチオマー２：ラセミサンプルのキラル分離(方法Ｉ)により、実施例２０−１、エナンチオマー１  Ｔｒ＝５.９７４分(方法Ｊ)および実施例２０−２、エナンチオマー２  Ｔｒ＝９.６００分(方法Ｊ)  絶対立体化学は未確定
【０２４４】
実施例２０−１、エナンチオマー１：MS (ES): m/z = 421.0 [M+H]+. Tr = 1.797分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.62 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.20-8.35 (m, 1H), 7.95-8.13 (m, 2H), 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.70 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.51 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 4.54 (br. s., 1H), 3.65 (br. s., 1H), 2.68 (br. s., 1H), 2.21 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.11 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 2.02 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 1.72-1.92 (m, 3H), 1.35-1.55 (m, 3H), 1.09-1.27 (m, 2H), 0.70 (t, J = 7.1 Hz, 3H)
【０２４５】
実施例２０−２、エナンチオマー２：MS (ES): m/z = 421.3 [M+H]+. Tr = 1.814分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.62 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.21-8.33 (m, 1H), 7.95-8.12 (m, 2H), 7.89 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.70 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 4.54 (br. s., 1H), 3.65 (br. s., 1H), 2.68 (br. s., 1H), 2.20 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 2.11 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.02 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 1.74-1.94 (m, 3H), 1.33-1.56 (m, 3H), 1.11-1.28 (m, 2H), 0.70 (t, J = 7.0 Hz, 3H)
【０２４６】
実施例２１
異性体１−４
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
(全４異性体はホモキラル、絶対立体化学は未確定)
【化５６】
2019528301.tif 000059
【０２４７】
実施例２１：異性体１−４
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
(全４異性体はホモキラル、絶対立体化学は未確定)
中間体１５Ｉ(８１mg、０.２５７mmol)を塩化チオニル(１８７μl、２.５７mmol)に溶解し、ＤＭＦ(９.９４μl、０.１２８mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空において、さらなる塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(６４２μl)に溶解し、５−クロロピリジン−２,３−ジアミン(７３.７mg、０.５１４mmol)のＡＣＮ(６４２μl)およびＴＥＡ(１７９μl、１.２８４mmol)溶液に０℃で加えた。反応物を室温に温めた。３０分後、反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。得られた粗製中間体を三塩化リン(３９４mg、２.５７mmol)に溶解し、９０℃に加熱した。１時間後、１Ｎ  ＮａＯＨをゆっくり加えて反応停止させ、ｐＨ約１０まで塩基性化した。得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製物を２mL  ＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製してｃｉｓおよびｔｒａｎｓジアステレオマーを分離し、キラルＳＦＣで各々をエナンチオマー対に分離して、４ホモキラル生成物を得た(相対的および絶対立体化学は未確定)。
【０２４８】
異性体１−４
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
(全４異性体はホモキラル、絶対立体化学は未確定)
【化５７】
2019528301.tif 000060
【０２４９】
実施例２１−１、エナンチオマー１および実施例２１−２、エナンチオマー２：ラセミサンプルのキラル分離(方法Ｋ)により、実施例２１−１、エナンチオマー１(Ｔｒ＝１３.０３８分(方法Ｌ))および実施例２１−２、エナンチオマー２(Ｔｒ＝１９.０２２分(方法Ｌ))を得た(相対的および絶対立体化学は未確定)。
【０２５０】
実施例２１−３、エナンチオマー３および実施例２１−４、エナンチオマー：ラセミサンプルのキラル分離(方法Ｍ)により、実施例２１−３、エナンチオマー３(Ｔｒ＝３.１７７分(方法Ｎ))および実施例２１−４、エナンチオマー４(Ｔｒ＝８.２８９分(方法Ｎ))を得た(相対的および絶対立体化学は未確定)。
【０２５１】
実施例２１−１、エナンチオマー１：MS (ES): m/z = 423.0 [M+H]+. Tr = 1.862分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.84 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 8.26 (br. s., 1H), 8.08 (dd, J = 9.0, 6.0 Hz, 1H), 8.04 (br. s., 1H), 7.94 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.60-7.68 (m, 1H), 7.56 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 3.60 (br. s., 1H), 3.38 (br. s., 1H), 3.23 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 2.20 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 2.03 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.57-1.98 (m, 7H), 1.52 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 1.07 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 0.69 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２５２】
実施例２１−２、エナンチオマー２：MS (ES): m/z = 423.2 [M+H]+. Tr = 1.824分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.83 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 8.25 (br. s., 1H), 8.07 (dd, J = 9.2, 5.8 Hz, 1H), 8.02 (br. s., 1H), 7.89-7.97 (m, 1H), 7.60-7.67 (m, 1H), 7.56 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 3.60 (br. s., 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.17-3.27 (m, 1H), 2.19 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 2.02 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.56-1.96 (m, 7H), 1.51 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 1.06 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 0.69 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２５３】
実施例２１−３、エナンチオマー３：MS (ES): m/z = 423.2 [M+H]+. Tr = 1.804分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.78 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.26 (br. s., 1H), 8.06 (dd, J = 9.0, 6.0 Hz, 2H), 7.88-7.96 (m, 1H), 7.58-7.67 (m, 1H), 7.41 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 3.40 (br. s., 1H), 3.23 (br. s., 1H), 2.71 (br. s., 1H), 2.06 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 1.77-1.97 (m, 5H), 1.42-1.61 (m, 3H), 1.28-1.42 (m, 2H), 0.75 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２５４】
実施例２１−４、エナンチオマー４：MS (ES): m/z = 423.0 [M+H]+. Tr = 1.825分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.26-8.40 (m, 1H), 7.87-8.22 (m, 4H), 7.70 (br. s., 1H), 7.54 (br. s., 1H), 3.26 (br. s., 1H), 2.72 (s, 1H), 2.04 (br. s., 1H), 1.74-1.96 (m, 5H), 1.43-1.64 (m, 3H), 1.35 (br. s., 2H), 0.74 (br. s., 3H)
【０２５５】
実施例２２
(±)−４−((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−(トリフルオロメチル)キノリン
【化５８】
2019528301.tif 000061
実施例２２：(±)−４−((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−(トリフルオロメチル)キノリン
中間体１７(４０mg、０.１０９mmol)を塩化チオニル(８０μl、１.０９５mmol)に溶解し、ＤＭＦ(４.２４μl、０.０５５mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空において、さらなる塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(５４７μl)に溶解し、５−クロロピリジン−２,３−ジアミン(３１.４mg、０.２１９mmol)のＡＣＮ(５４７μl)およびＴＥＡ(７６μl、０.５４７mmol)溶液に０℃で加えた。反応物を室温に温めた。１時間後、反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をＰＯＣｌ３(１０２μl、１.０９５mmol)に溶解し、９０℃で１時間加熱した。反応物を冷(氷上)１Ｎ  ＮａＯＨで急冷し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗製残留物をＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、実施例２２化合物を得た。LC-MS C25H24ClF3N4の分析計算値 472.16, 実測値[M+H] 473.1, Tr = 0.85分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.04 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.56 (br. s., 1H), 8.16-8.35 (m, 2H), 7.93-8.14 (m, 2H), 7.71 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 3.60 (br. s., 1H), 3.36 (br. s., 1H), 3.17-3.28 (m, 1H), 2.20 (br. s., 1H), 2.04 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 1.20-1.98 (m, 8H), 1.08 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 0.71 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２５６】
実施例２２、エナンチオマー１および２
４−((ｃｉｓ)−４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン−２−イル)プロピル)シクロヘキシル)−６−(トリフルオロメチル)キノリン
(ホモキラル、絶対立体化学は未確定)
【化５９】
2019528301.tif 000062
実施例２２−１、エナンチオマー１および実施例２２−２、エナンチオマー２：ラセミサンプルのキラル分離(方法Ｏ)により、実施例２１−１、エナンチオマー１(Ｔｒ＝５.９０５分(方法Ｐ))および実施例２２−２、エナンチオマー２(Ｔｒ＝６.８９６分(方法Ｐ))を得た(絶対立体化学は未確定)。
【０２５７】
実施例２２−１、エナンチオマー１：MS (ES): m/z = 472.9 [M+H]+. Tr = 2.079分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.03 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.20-8.30 (m, 2H), 8.04 (br. s., 1H), 7.99 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 3.60 (br. s., 1H), 3.44 (br. s., 1H), 3.24 (br. s., 1H), 2.20 (br. s., 1H), 2.04 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 1.60-1.98 (m, 7H), 1.54 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 1.09 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 0.71 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２５８】
実施例２２−２、エナンチオマー２：MS (ES): m/z = 473.3 [M+H]+. Tr = 2.079分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.03 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.20-8.29 (m, 2H), 8.04 (br. s., 1H), 7.99 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 3.59 (br. s., 1H), 3.24 (br. s., 1H), 2.21 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 2.04 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 1.61-1.99 (m, 8H), 1.54 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 1.08 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 0.71 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２５９】
実施例２３
エナンチオマー１および２
６−クロロ−２−(１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)−３−プロピル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール
(ホモキラル、絶対立体化学は未確定)
【化６０】
2019528301.tif 000063
中間体２３Ａ：エチル２−(４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート
中間体１５Ｅ(９.９０ｇ、３３.７mmol)のジオキサン(１９５mL)溶液を含む密封可能反応フラスコに、４−ブロモ−２−フルオロ−３−メチルピリジン(６.２１ｇ、３２.７mmol)、水(６５.０mL)およびＮａ２ＣＯ３(１３.８６ｇ、１３１mmol)を加えた。混合物をアルゴンで１０〜１５分脱気後、Ｐｄ(Ｐｈ３Ｐ)４(１.８８８ｇ、１.６３４mmol)を加え、フラスコを密封し、混合物を１００℃で２４時間加熱し、次いでｒｔにゆっくり冷却した。反応物をＥｔＯＡｃおよび水で希釈し、加えて超音波処理して固形物を破壊し、次いで分液漏斗に移した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃでさらに１回抽出した。有機層を合わせ、塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮して、暗褐色残留物を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィーでの精製により、中間体２３Ａ(７.２３ｇ、２６.１mmol、８０％収率)を得た。LC-MS C16H20FNO2の分析計算値 277.15, 実測値[M+H] 278.2, Tr = 1.04分(方法A)
【０２６０】
中間体２３Ｂ：エチル２−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)アセテート
中間体２３Ａ(７.２２８５ｇ、２６.１mmol)のメタノール(１００mL)中の均一混合物を含む還流凝縮器を備えた丸底フラスコに、ギ酸アンモニウム(８.２２ｇ、１３０mmol)を加えた。得られた混合物をアルゴンで５〜１０分通気し、排気し、次いで窒素気流(×３)でパージした。この混合物にパラジウム炭素(１０％Ｐｄ／Ｃ、湿デグサタイプ)(２.７７ｇ、２.６１mmol)を加え、反応物を加熱還流した(浴温度約７０℃)。３時間加熱し、次いで室温にゆっくり冷却した。撹拌棒を除き、反応物を濃縮して揮発物を除去し、次いでＤＣＭで処理し、セライトパッドで濾過し、それをＤＣＭで徹底的に濯いだ。合わせた濾液を減圧下濃縮して、不透明残留物を得た。残留物を元の反応条件に再び付した[メタノール(１００mL)、ギ酸アンモニウム(８.２２ｇ、１３０mmol)；排気、次いで窒素気流でのパージ×３；パラジウム炭素(１０％Ｐｄ／Ｃ、湿デグサタイプ)(２.７７ｇ、２.６１mmol)；加熱還流]。４時間後、反応物をｒｔに冷却した。撹拌棒を除き、反応物を濃縮して揮発物を除去し、次いでＤＣＭで処理し、セライトパッドで濾過し、それをＤＣＭで徹底的に濯いだ。合わせた濾液を減圧下濃縮して、透明油状物を得た。この残留物を超臨界流体クロマトグラフィーで精製して、ｃｉｓおよびｔｒａｎｓジアステレオマーを分離して、中間体２３Ｂ(２.１８ｇ、７.８０mmol、３０％)を得た。LC-MS C16H22FNO2の分析計算値 279.35, 実測値[M+H] 280.2, Tr = 1.02分(方法A)
【０２６１】
中間体２３Ｃ：エチル２−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)ブタノエート
ＴＨＦ(１５mL)を含むフラスコに、リチウムジイソプロピルアミド(１.５Ｍのシクロヘキサン溶液)(１１.０３mL、１６.５４mmol)およびＤＭＰＵ(１.３６０mL、１１.２８mmol)を−７８℃で加え、続いて中間体２３Ｂ(２.１ｇ、７.５２mmol)のＴＨＦ(８mL)溶液を−７８℃で滴下した。得られた橙色溶液混合物を−７８℃で１時間撹拌し、次いでヨードエタン(０.９６９mL、１２.０３mmol)を加えた。反応混合物を−７８℃で撹拌し、次いで室温に徐々に温め、４時間撹拌した。反応混合物は濁った黄色になった。反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応停止させた。得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。濾液を減圧下濃縮した。残留物をＤＣＭに溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体２３Ｃ(１.３１ｇ、４.２６mmol、５７％)を得た。LC-MS C18H26FNO2の分析計算値 307.20, 実測値[M+H] 308.2, Tr = 1.08分(方法A)
【０２６２】
中間体２３Ｄ：２−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)ブタン酸
中間体２３Ｃ(０.９ｇ、２.９３mmol)のＴＨＦ(１０mL)およびＭｅＯＨ(６mL)の反応混合物に、水酸化リチウム(２Ｍ水溶液)(１４.６４mL、２９.３mmol)を加えた。反応混合物を７０℃で一夜加熱した。一夜後、反応混合物に、さらに２Ｍ  水酸化リチウム溶液(１４.６４mL、２９.３mmol)(４mL)およびＭｅＯＨ(６mL)(４mL)を加えた。反応混合物を７０℃でさらに２０時間、加熱した。反応混合物を冷却し、反応混合物に２mLの酢酸をｐＨ＝５まで加えた。得られた混合物を酢酸エチルで２回抽出し、有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下濃縮した。残留物をＨＰＬＣで精製して、中間体２３Ｄ(４２５mg、１.５１mmol、５１％収率)を得た。LC-MS C16H22FNO2の分析計算値 279.16, 実測値[M+H] 280.1, Tr = 0.89分(方法A)
【０２６３】
実施例２３、エナンチオマー１および２：６−クロロ−２−(１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)−３−プロピル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール(ホモキラル、絶対立体化学は未確定)
中間体２３Ｄ(３４mg、０.１２２mmol)を塩化チオニル(８９μl、１.２１７mmol)に溶解し、ＤＭＦ(４.７１μl、０.０６１mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空において、残留塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(６０９μl)に溶解し、４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(３４.７mg、０.２４３mmol)のＡＣＮ(６０９μl)およびＴＥＡ(８５μl、０.６０９mmol)溶液に０℃で加えた。反応物を室温に温めた。一夜後、反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をＰＯＣｌ３(１１３μl、１.２１７mmol)に溶解した。反応物を９０℃に加熱した。１時間後、１Ｎ  ＮａＯＨで反応停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗製残留物をＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、ラセミ実施例２３を得た。この物質をキラルＳＦＣでさらに精製して、下記エナンチオマー１および２を得た
【０２６４】
実施例２３、エナンチオマー１および２
６−クロロ−２−(１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)−３−プロピル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール
(ホモキラル、絶対立体化学は未確定)
【化６１】
2019528301.tif 000064
実施例２３−１、エナンチオマー１および実施例２３−２、エナンチオマー２：ラセミサンプルのキラル分離(方法Ｑ)により、実施例２３−１、エナンチオマー１(Ｔｒ＝３.９４４分(方法Ｒ))および実施例２３−３、エナンチオマー２(Ｔｒ＝４.６８１分(方法Ｒ))を得た(絶対立体化学は未確定)。
【０２６５】
実施例２３−１、エナンチオマー１：MS (ES): m/z = 386.0 [M+H]+. Tr = 2.051分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.02 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.41-7.60 (m, 2H), 7.33 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.09-7.17 (m, 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.17 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.84 (br. s., 1H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.02 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.89 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 1.52-1.78 (m, 5H), 1.45 (br. s., 1H), 1.35 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 1.02 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 0.68 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２６６】
実施例２３−２、エナンチオマー２：MS (ES): m/z = 386.2[M+H]+. Tr = 2.055分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.02 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.41-7.61 (m, 2H), 7.33 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.13 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.17 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 2.84 (br. s., 1H), 2.17 (s, 3H), 2.13 (br. s., 1H), 2.02 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.90 (br. s., 1H), 1.52-1.75 (m, 5H), 1.45 (br. s., 1H), 1.35 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 1.02 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 0.68 (t, J = 7.1 Hz, 3H)
【０２６７】
実施例２４
(±)−６−クロロ−２−(１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)−３−プロピル)−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン
【化６２】
2019528301.tif 000065
【０２６８】
実施例２４：(±)−６−クロロ−２−(１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)−３−プロピル)−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン
実施例２４化合物を、５−クロロピリジン−２,３−ジアミンを使用した以外、中間体２３Ｄから実施例２３を製造するのに使用した方法に従い、合成した。LC-MS C21H24ClFの分析計算値 386.17, 実測値[M+H] 387.1, Tr = 0.85分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.26 (br. s., 1H), 7.97-8.11 (m, J = 5.2 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 3.15-3.29 (m, 1H), 2.80-2.90 (m, 1H), 2.10-2.21 (m, 4H), 2.02 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 1.92 (br. s., 1H), 1.54-1.80 (m, 5H), 1.48 (t, J = 13.3 Hz, 1H), 1.37 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 1.04 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 0.71 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２６９】
実施例２４、エナンチオマー１および２
６−クロロ−２−(１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)−３−プロピル)−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン
(ホモキラル、絶対立体化学は未確定)
【化６３】
2019528301.tif 000066
【０２７０】
実施例２４−１、エナンチオマー１および実施例２４−２、エナンチオマー２：ラセミサンプルのキラル分離(方法Ｓ)により、実施例２４−１、エナンチオマー１(Ｔｒ＝２.３７５分(方法Ｔ))および実施例２４−２、エナンチオマー２(Ｔｒ＝３.７０１分(方法Ｔ))を得た(絶対立体化学は未確定)。
【０２７１】
実施例２４−１、エナンチオマー１：MS (ES): m/z = 387.0 [M+H]+. Tr = 1.847分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.20-8.33 (m, 1H), 7.95-8.08 (m, 2H), 7.32 (br. s., 1H), 3.21 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 2.80-2.88 (m, 1H), 2.16 (s, 4H), 1.97-2.07 (m, 1H), 1.90 (s, 1H), 1.52-1.77 (m, 5H), 1.47 (t, J = 13.4 Hz, 1H), 1.35 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.01 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 0.68 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【０２７２】
実施例２４−２、エナンチオマー２：MS (ES): m/z = 387.0 [M+H]+. Tr = 1.862分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.20-8.32 (m, 1H), 7.96-8.08 (m, 2H), 7.32 (br. s., 1H), 3.17-3.27 (m, J = 12.8 Hz, 1H), 2.79-2.89 (m, 1H), 2.16 (s, 4H), 1.95-2.08 (m, 1H), 1.90 (br. s., 1H), 1.52-1.77 (m, 5H), 1.42-1.52 (m, 1H), 1.35 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 1.01 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 0.68 (t, J = 7.0 Hz, 3H)
【０２７３】
実施例２５
(±)−６−クロロ−２−(２−エトキシ−１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール
【化６４】
2019528301.tif 000067
中間体２５Ａ：エチル３−エトキシ−２−(４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)プロパノエート
ＴＨＦ(１５mL)を含むフラスコに、リチウムジイソプロピルアミン(１.５Ｍのシクロヘキサン溶液)(１６.６６mL、２４.９９mmol)を−７８℃で加えた。加え終わった後、ＤＭＰＵ(２.１５２mL、１７.８５mmol)、続いて中間体２３Ａ(３.３ｇ、１１.９０mmol)のＴＨＦ(８mL)溶液を−７８℃で滴下した。得られた混合物を−７８℃で１.５時間撹拌し、次いでクロロメチルエチルエーテル(２.２２８mL、２３.８０mmol)を加えた。反応混合物を−７８℃で撹拌し、次いで室温に徐々に温め、３時間撹拌した。この間、褐色粘性固体が形成した。３時間後、反応混合物は透明橙色溶液に変化した。反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応停止させ、得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下濃縮した。残留物をＤＣＭに溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体２５Ａ(１.８ｇ、５.３７mmol、４５％収率)を得た。LC-MS C19H26FNO3の分析計算値 335.19, 実測値[M+H] 336.3, Tr = 1.06分(方法A)
【０２７４】
中間体２５Ｂ：エチル３−エトキシ−２−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロパノエート
中間体２５Ａ(１.８ｇ、５.３７mmol)のＭｅＯＨ(４０mL)溶液を含む丸底フラスコを排気し、窒素気流下、ギ酸アンモニウム(１.６９２ｇ、２６.８mmol)およびパラジウム炭素(１０wt％、湿デグサタイプ)(０.５７１ｇ、０.５３７mmol)(湿)を室温で加えた。得られた混合物を８０℃で５時間加熱した。反応混合物を冷却し、減圧下濃縮し、ＤＣＭに溶解した。反応混合物をセライトパッドで濾過し、ＤＣＭで濯いだ。濾液を減圧下濃縮し、ｃｉｓおよびｔｒａｎｓジアステレオマーをＳＦＣで精製して、ｃｉｓ中間体２５Ｂ(ＮＭＲにより確認)(０.７６ｇ、２.２５mmol、４２％収率)を得た。LC-MS C19H28FNO3の分析計算値 337.21, 実測値[M+H] 338.2, Tr = 1.04分(方法A)
【０２７５】
中間体２５Ｃ：３−エトキシ−２−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロパン酸
中間体２５Ｂ(０.７２ｇ、２.１３４mmol)のＴＨＦ(１０mL)およびＭｅＯＨ(４mL)溶液に、ＬｉＯＨ(２Ｍ溶液)(１０.６７mL、２１.３４mmol)を加えた。得られた混合物を４５℃で５.５時間加熱した。反応混合物を冷却し、この反応混合物に１Ｎ  ＨＣｌ溶液を加えて、ｐＨを約５にした。白色固体が析出した。得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下濃縮した。粗製生成物をＨＰＬＣで精製して、中間体２５Ｃ(０.６０ｇ、１.９４mmol、９１％収率)を得た。LC-MS C17H24FNO3の分析計算値 309.17, 実測値[M+H] 310.2, Tr = 0.86分(方法A)
【０２７６】
実施例２５：(±)−６−クロロ−２−(２−エトキシ−１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール
中間体２５Ｃ(６２mg、０.２００mmol)を塩化チオニル(１４６μl、２.００４mmol)に溶解し、ＤＭＦ(７.７６μl、０.１００mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空において、残留塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(５０１μl)に溶解し、４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(５７.１mg、０.４０１mmol)のＡＣＮ(５０１μl)およびＴＥＡ(１４０μl、１.００２mmol)溶液に０℃で加えた。反応物を室温に温めた。１５分後、反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製中間体を三塩化リン(３０７mg、２.００４mmol)に溶解し、９０℃に加熱した。２時間後、１Ｎ  ＮａＯＨをゆっくり加えて反応停止させ、ｐＨ約１０まで塩基性化した。得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製物  ２mL  ＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、ラセミ実施例２５化合物(２０.５mg、０.０４８mmol、２４％収率)を得た。LC-MS C23H27ClFN3Oの分析計算値 415.18, 実測値[M+H] 416.2, Tr = 0.81分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.02 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.56 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.79 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.58-3.67 (m, 1H), 3.34 (dd, J = 9.5, 7.0 Hz, 1H), 2.85 (br. s., 1H), 2.13-2.26 (m, 4H), 1.97 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.55-1.80 (m, 4H), 1.48 (t, J = 13.4 Hz, 1H), 1.37 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 0.94-1.07 (m, 4H)
【０２７７】
実施例２５、エナンチオマー１および２
６−クロロ−２−(２−エトキシ−１−((ｃｉｓ)−４−(２−フルオロ−３−メチルピリジン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール
(ホモキラル、絶対立体化学は未確定)
【化６５】
2019528301.tif 000068
【０２７８】
実施例２５−１、エナンチオマー１および実施例２５−２、エナンチオマー２：ラセミサンプルのキラル分離(方法Ｕ)により、実施例２５−１、エナンチオマー１(Ｔｒ＝３.７８３分(方法Ｖ))および実施例２５−２、エナンチオマー２(Ｔｒ＝６.９８９分(方法Ｖ))を得た(絶対立体化学は未確定)。
【０２７９】
実施例２５−１、エナンチオマー１：MS (ES): m/z = 416.0 [M+H]+. Tr = 2.066分(方法B). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.01 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.40-7.62 (m, 2H), 7.32 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 3.76 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.38-3.46 (m, 1H), 3.27-3.38 (m, 1H), 2.83 (br. s., 1H), 2.16 (s, 4H), 1.91-2.03 (m, 1H), 1.52-1.78 (m, 4H), 1.45 (t, J = 13.1 Hz, 1H), 1.35 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 0.92-1.05 (m, 4H)
【０２８０】
実施例２５−２、エナンチオマー２：MS (ES): m/z = 416.0 [M+H]+. Tr = 2.066分(方法B). 1H NMR (500 Mhz, DMSO-d6) δ: 8.01 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.38-7.60 (m, 2H), 7.32 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 3.76 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 3.39-3.48 (m, 1H), 3.28-3.38 (m, 1H), 2.83 (br. s., 1H), 2.16 (s, 4H), 1.96 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 1.52-1.74 (m, 4H), 1.45 (t, J = 13.3 Hz, 1H), 1.35 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 0.89-1.09 (m, 4H)
【０２８１】
実施例２６
４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−([１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
【化６６】
2019528301.tif 000069
中間体２６Ａ：(Ｒ)−２−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)−Ｎ’−(ピリジン−２−イル)プロパンヒドラジド
製造例１Ｋ化合物(５０mg、０.１６６mmol)を塩化チオニル(６０.５μl、０.８３０mmol)に溶解し、ＤＭＦ(６.４２μl、０.０８３mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空において、過剰の塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(１６５９μl)に溶解し、２−ヒドラジニルピリジン(３６.２mg、０.３３２mmol)のＡＣＮ(１６５９μl)およびＴＥＡ(１１６μl、０.８３０mmol)溶液に０℃で加えた。それを室温で１６時間撹拌した。１６時間後、反応物を減圧下濃縮した。粗製残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体２６Ａ(５４mg、０.１３８mmol、８３％収率)を得た。LC-MS C23H25FN4Oの分析計算値 392.20, 実測値[M+H] 393.2, Tr = 0.61分(方法A)
【０２８２】
実施例２６：４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−([１,２,４]トリアゾロ[４,３−ａ]ピリジン−３−イル)エチル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
中間体２６Ａ(５４mg、０.１３８mmol)を、密封バイアル中、ＰＯＣｌ３(２７５μl)に溶解し、１００℃に加熱した。９０分後、反応物を冷却し、氷上で注意深く反応停止させた。得られた混合物を１Ｎ  ＮａＯＨでｐＨ約１０にし、ｉＰｒＯＨ／ＣＨＣｌ３(３／７比)で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。得られた残留物をＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、実施例２６化合物(６.９mg、０.０１８mmol、１３％収率)を得た。LC-MS C23H23FN4の分析計算値 374.19, 実測値[M+H] 375.2, Tr = 0.60分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.82 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.67 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 8.07 (dd, J = 9.0, 5.8 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 10.9, 2.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.59-7.67 (m, 2H), 7.29-7.37 (m, 1H), 6.98 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 3.87 (dd, J = 10.6, 7.0 Hz, 1H), 3.39 (br. s., 1H), 2.41 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 2.05 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 1.82-1.97 (m, 2H), 1.59-1.82 (m, 3H), 1.53 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 1.34 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.10 (d, J = 11.3 Hz, 1H)
【０２８３】
実施例２７
６−フルオロ−４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(イミダゾ[１,５−ａ]ピリジン−３−イル)エチル)シクロヘキシル)キノリン
【化６７】
2019528301.tif 000070
中間体２７Ａ：(Ｒ)−２−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)−Ｎ−(ピリジン−２−イルメチル)プロパンアミド
製造例１Ｋ化合物(５０mg、０.１６６mmol)を塩化チオニル(６０.５μl、０.８３０mmol)に溶解し、ＤＭＦ(６.４２μl、０.０８３mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空において、過剰の塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(１６５９μl)に溶解し、ピリジン−２−イルメタンアミン(３５.９mg、０.３３２mmol)のＡＣＮ(１６５９μl)およびＴＥＡ(１１６μl、０.８３０mmol)溶液に０℃で加えた。３０分後、反応物を減圧下濃縮した。得られた粗製残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体２７Ａ(６４mg、０.１６３mmol、９９％収率)を得た。LC-MS C24H26FN3Oの分析計算値 391.21, 実測値[M+H] 392.2, Tr = 0.61分(方法A)
【０２８４】
実施例２７：６−フルオロ−４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(イミダゾ[１,５−ａ]ピリジン−３−イル)エチル)シクロヘキシル)キノリン
中間体２７Ａ(５４mg、０.１３８mmol)をｐｏｌｙリン酸(２７６μl)に溶解し、１２０℃に加熱した。１６時間加熱した。反応物を冷却し、注意深く水で希釈した。１Ｎ  ＮａＯＨで塩基性にし、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、実施例２７化合物(２１.４mg、０.０５７mmol、４２％収率)を得た。LC-MS C24H24FN3の分析計算値 373.20, 実測値[M+H] 374.2, Tr = 0.60分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.84 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 8.07 (dd, J = 9.0, 6.0 Hz, 1H), 7.90-7.97 (m, 1H), 7.60-7.69 (m, 2H), 7.47 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.64-6.70 (m, 1H), 6.57-6.64 (m, 1H), 3.77 (dd, J = 10.5, 6.9 Hz, 1H), 3.37 (br. s., 1H), 2.35 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 2.03 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 1.81-1.99 (m, 2H), 1.55-1.76 (m, 3H), 1.52 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 1.27 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.07 (d, J = 12.5 Hz, 1H)
【０２８５】
実施例２８
３−((Ｒ)−１−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)キナゾリン−４(３Ｈ)−オン
【化６８】
2019528301.tif 000071
中間体２８Ａ：(Ｒ)−１−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エタン−１−アミン
製造例１Ｋ化合物(２ｇ、６.６４mmol)をトルエン(２２.１２ml)に溶解し、アジドリン酸ジフェニル(２.００９ｇ、７.３０mmol)およびトリエチルアミン(１.１１０ml、７.９６mmol)を加えた。バイアルを密封し、７０℃に加熱した。２時間後、反応物を室温に冷却し、減圧下濃縮した。粗製残留物を４０mL  ＴＨＦに溶解し、４０mLの水および水酸化リチウム(１.５８９ｇ、６６.４mmol)を加えた。反応物を室温で１時間撹拌した。反応物を１Ｎ  ＨＣｌで酸性化し(白色沈殿形成)、ＥｔＯＡｃで抽出した。水性部分を１Ｎ  ＮａＯＨで塩基性化し(沈殿形成)、ＥｔＯＡｃで５回抽出した。塩基性抽出物を減圧下濃縮して、中間体２８Ａ(１.６８ｇ、６.１７mmol、９３％収率)を得た。LC-MS C17H21FN2の分析計算値 272.17, 実測値[M+H] 273.1 Tr = 0.50分(方法A). 1H NMR (400 Mhz, クロロホルム-d) δ: 8.80 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.11 (dd, J = 9.3, 5.7 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 10.6, 2.8 Hz, 1H), 7.46 (ddd, J = 9.2, 8.0, 2.8 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 3.27-3.37 (m, 1H), 3.13 (dq, J = 9.3, 6.3 Hz, 1H), 2.01-2.10 (m, 1H), 1.67-1.92 (m, 6H), 1.37-1.55 (m, 4H), 1.15 (d, J = 6.4 Hz, 3H)
【０２８６】
中間体２８Ｂ：２−アミノ−Ｎ−((Ｒ)−１−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)ベンズアミド
中間体２８Ａ(５０mg、０.１８４mmol)をＤＭＦ(１８３６μl)に溶解し、ＨＯＢＴ(３６.５mg、０.２３９mmol)、ＥＤＣ(４５.８mg、０.２３９mmol)、２−アミノ安息香酸(５０.４mg、０.３６７mmol)およびＴＥＡ(１２８μl、０.９１８mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。３日後、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、５：１  水：飽和重炭酸ナトリウム水溶液で抽出した。有機抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体２８Ｂ(５７mg、０.１４６mmol、７９％収率)を得た。LC-MS C24H26FN3Oの分析計算値 391.21, 実測値[M+H] 392.2 Tr = 0.72分(方法A)
【０２８７】
実施例２８：３−((Ｒ)−１−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)キナゾリン−４(３Ｈ)−オン
中間体２８Ｂ(５７mg、０.１４６mmol)を、加圧バイアル中、ＤＭＳＯ(７２８μl)に溶解した。トシル酸(４１.５mg、０.２１８mmol)およびオルトギ酸トリエチル(３６.４μl、０.２１８mmol)を加え、反応物を５０℃で１時間加熱した。反応物を７０℃でさらに２時間加熱した。反応物を冷却し、オルトギ酸トリエチル(３６.４μl、０.２１８mmol)を加え、反応物を、さらに１時間、７０℃で撹拌した。反応物を１mLのＤＭＳＯでさらに希釈し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、実施例２８化合物(３０mg、０.０７３mmol、５０％収率)を得た。LC-MS C25H24FN3Oの分析計算値 401.19, 実測値[M+H] 402.2 Tr = 0.74分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.86 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.17 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 8.09 (dd, J = 9.3, 6.0 Hz, 1H), 7.97 (dd, J = 10.8, 2.6 Hz, 1H), 7.78-7.86 (m, 1H), 7.61-7.72 (m, 2H), 7.47-7.59 (m, 2H), 3.32-3.46 (m, 1H), 1.90-2.04 (m, 3H), 1.72-1.90 (m, 4H), 1.66 (t, J = 13.1 Hz, 1H), 1.56 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 1.50 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.25 (d, J = 13.4 Hz, 1H)
【０２８８】
実施例２９
６−クロロ−２−((Ｒ)−１−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)キナゾリン−４(３Ｈ)−オン
【化６９】
2019528301.tif 000072
中間体２９Ａ：５−クロロ−２−((Ｒ)−２−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)プロパン−アミド)ベンズアミド
製造例１Ｋ化合物(５０mg、０.１６６mmol)を塩化チオニル(６０.５μl、０.８３０mmol)に溶解し、ＤＭＦ(６.４２μl、０.０８３mmol)を加えた。反応物を室温で撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空において、過剰の塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(１６５９μl)に溶解し、２−アミノ−５−クロロベンズアミド(２８.３mg、０.１６６mmol)のＡＣＮ(１６５９μl)およびＴＥＡ(１１６μl、０.８３０mmol)溶液に０℃で加えた。１時間後、反応物を減圧下濃縮した。粗製残留物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮して、粗製中間体２９Ａ(７５mg、０.１６６mmol、１００％収率)を得た。さらに精製することなく、そのまま次工程で使用した。LC-MS C25H25ClFN3O2の分析計算値 453.16, 実測値[M+H] 454.1 Tr = 0.80分(方法A)
【０２８９】
実施例２９：６−クロロ−２−((Ｒ)−１−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)キナゾリン−４(３Ｈ)−オン
粗製中間体２９Ａ(６９mg、０.１５２mmol)を、バイアル中ＥｔＯＨ(７６０μl)に溶解した。ＮａＯＨ(１２２mg、３.０４mmol)を水(７６０μl)に溶解し、得られた溶液をエタノール溶液に加えた。バイアルを密封し、１００℃で１時間加熱した。反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、実施例２９化合物(３.４mg、０.００８mmol、５％収率)を得た。LC-MS C25H23ClFN3Oの分析計算値 435.15, 実測値[M+H] 436.1 Tr = 0.82分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.85 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.08 (dd, J = 9.2, 5.8 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 7.60-7.69 (m, 2H), 7.58 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 3.39 (br. s., 1H), 3.16 (dd, J = 10.7, 6.7 Hz, 1H), 2.20 (br. s., 1H), 1.77-2.04 (m, 4H), 1.70 (br. s., 3H), 1.57 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 1.35 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 1.27 (d, J = 6.7 Hz, 3H)
【０２９０】
実施例３０
６−フルオロ−４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(６−メチルイミダゾ[１,２−ｂ]ピリダジン−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノリン
【化７０】
2019528301.tif 000073
中間体３０Ａ：(Ｒ)−２−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルプロパンアミド
製造例１Ｋ化合物(５００mg、１.６５９mmol)を塩化チオニル(０.６０５ml、８.３０mmol)に溶解し、ＤＭＦ(０.０６４ml、０.８３０mmol)を加えた。反応物をｒｔで撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空において、過剰の塩化チオニルを除去した。１５分後、粗製アシルクロライドをＡＣＮ(１６.６００ml)に溶解し、Ｎ,Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩(３２４mg、３.３２mmol)のＡＣＮ(１６.６００ml)およびＴＥＡ(１.１５６ml、８.３０mmol)溶液に０℃で加えた。３０分後、反応物を減圧下濃縮した。得られた粗製残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体３０Ａ(４８７mg、１.４１４mmol、８５％収率)を得た。LC-MS C20H25FN2O2の分析計算値 344.19, 実測値[M+H] 345.3 Tr = 0.68分(方法A)
【０２９１】
中間体３０Ｂ：(Ｒ)−３−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)ブタン−２−オン
中間体３０Ａ(４７８mg、１.３８８mmol)を、窒素雰囲気下、乾燥ＴＨＦ(２７７６μl)に溶解し、氷浴で０℃に冷却した。メチルマグネシウムブロマイド(３Ｍのエーテル溶液)(１.０mL、３.００mmol)を滴下し、反応物を０℃で撹拌した。１時間後、さらに０.５当量のＭｅＭｇＢｒを加えた。さらに１時間後、１Ｍ  ＨＣｌを加えて反応停止させ、１Ｎ  ＮａＯＨで塩基性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。粗製残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、中間体３０Ｂ(３５６mg、１.１８９mmol、８６％収率)を得た。LC-MS C19H22FNOの分析計算値 299.17, 実測値[M+H] 300.2 Tr = 0.71分(方法A)
【０２９２】
中間体３０Ｃ：(Ｒ)−１−ブロモ−３−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)ブタン−２−オン
ジイソプロピルアミン(２０３μl、１.４２７mmol)の乾燥ＴＨＦ(１１８９μl)溶液を−７８℃に冷却した。ｎ−ＢｕＬｉ(５７１μl、１.４２７mmol)(２.５Ｍのヘキサン溶液)を滴下した。１５分後、中間体３０Ｂ(３５６mg、１.１８９mmol)を加え、反応物を−７８℃で４０分撹拌した。ＴＭＳ−Ｃｌ(２７４μl、２.１４０mmol)を５分かけて滴下し、反応物をさらに１時間、−７８℃で撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３(５０mL)に注加し、ＥｔＯＡｃ(１００mL)で抽出した。抽出物を乾燥させ(Ｎａ２ＳＯ４)、減圧下濃縮した。得られた残留物を窒素雰囲気下、無水ＴＨＦ(１２mL)に溶解し、０℃に冷却した。重炭酸ナトリウム(１２５mg、１.４８６mmol)、続いてＮＢＳ(２１２mg、１.１８９mmol)を加え、反応物を０℃で９０分撹拌した。ＮａＨＣＯ３で反応停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮して、褐色油状物を得て、これは約２０％中間体３０Ｃ(ＬＣＭＳによる)であるが、大部分出発物質であった。この粗製混合物は(３６３mg、０.９６mmol、８１％)であった。粗製物を直接その後使用した。LC-MS C19H21BrFNOの分析計算値 377.08, 実測値[M+H] 378.0 Tr = 0.78分(方法A)
【０２９３】
実施例３０：６−フルオロ−４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(６−メチルイミダゾ[１,２−ｂ]ピリダジン−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノリン
粗製中間体３０Ｃ(６０mg、０.１５９mmol)を、加圧バイアル中ＥｔＯＨに溶解し、６−メチルピリダジン−３−アミン(２２.５０mg、０.２０６mmol)を加えた。反応物を密封し、８０℃で１時間撹拌した。１時間後、反応物を減圧下濃縮し、ＤＭＦに溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、実施例３０化合物(４.０mg、７％収率)を得た。LC-MS C24H25FN4の分析計算値 388.21, 実測値[M+H] 389.1 Tr = 0.64分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.92 (br. s., 1H), 8.43 (s, 1H), 8.22 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 8.09-8.17 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.68-7.77 (m, 2H), 7.55 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 3.45 (m., 1H), 2.60 (s, 3H), 2.05 (br. s., 2H), 1.69-1.94 (m, 5H), 1.64 (t, J = 13.1 Hz, 1H), 1.56 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 1.27-1.37 (m, 4H)
【０２９４】
実施例３１
６−フルオロ−４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(イミダゾ[１,２−ｂ]ピリダジン−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノリン
【化７１】
2019528301.tif 000074
実施例３１：６−フルオロ−４−((ｃｉｓ)−４−((Ｒ)−１−(イミダゾ[１,２−ｂ]ピリダジン−２−イル)エチル)シクロヘキシル)キノリン
実施例３１化合物を、中間体３０Ｃおよびピリダジン−３−アミンから、実施例３０の製造に準ずる方法を使用して、製造した。LC-MS C23H23FN4の分析計算値 374.19, 実測値[M+H] 375.1 Tr = 0.63分(方法A). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.83 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.08 (dd, J = 9.2, 5.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.95 (dd, J = 11.0, 2.4 Hz, 1H), 7.65 (td, J = 8.6, 2.6 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.14 (dd, J = 9.2, 4.6 Hz, 1H), 3.46 (m., 1H), 1.99-2.10 (m, 2H), 1.68-1.95 (m, 5H), 1.50-1.62 (m, 2H), 1.26-1.36 (m, 4H)
【０２９５】
実施例３２
４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)ブト−３−エン−１−イル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
【化７２】
2019528301.tif 000075
中間体３２Ａ：(Ｒ)−３−((Ｒ)−２−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)ペント−４−エノイル)−４−フェニルオキサゾリジン−２−オン
【化７３】
2019528301.tif 000076
製造例１Ｊ化合物(５０mg、０.１１６mmol、docket 12547の参考例４０)のＴＨＦ(２mL)溶液に、−４０℃でＮａＨＭＤＳ(１ＭのＴＨＦ溶液)(０.１３９mL、０.１３９mmol)を滴下した。混合物を−４０℃〜−３０℃で１５分撹拌した。次いで、３−ブロモプロプ−１−エン(２８.０mg、０.２３１mmol)のＴＨＦ(０.５mL)溶液を滴下した。反応物を−２０℃で１６時間撹拌した。−２０℃で飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液に注加することにより、反応停止させた。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗製物を得た。この粗製物にＭｅＯＨを加え、濾過して、固形物を除いた。濾液を、分取ＨＰＬＣ(PhenLuna  ５μ  ３０×１００mm、４０ml／分流速で１０分かけて２０％Ｂ〜１００％Ｂの勾配、１００％Ｂに５分維持(Ａ：水／ＭｅＯＨ(９０：１０)中０.１％ＴＦＡ、Ｂ：水／ＭｅＯＨ(１０：９０)中０.１％ＴＦＡ)、２５４nmでモニタリング)で精製した。生成物含有フラクション(ｔｒ＝９.４２８分)を合わせた。濃縮後、中間体３２Ａ(２５mg、０.０５２mmol、４４.８％収率)を白色固体として得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 9.12 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 9.3, 5.0 Hz, 1H), 8.01-7.89 (m, 2H), 7.89-7.75 (m, 1H), 7.47-7.31 (m, 5H), 5.62-5.45 (m, 2H), 4.84-4.76 (m, 1H), 4.76-4.68 (m, 1H), 4.68-4.52 (m, 1H), 4.36 (dd, J = 9.0, 3.9 Hz, 1H), 3.55-3.33 (m, 1H), 2.49-2.35 (m, 1H), 2.33-2.21 (m, 2H), 2.12-1.97 (m, 2H), 1.93-1.65 (m, 6H)LC-MS: M+H = 473.3 (tr = 0.90分)(方法A)
【０２９６】
中間体３２Ｂ：(Ｒ)−２−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)ペント−４−エンエン酸
【化７４】
2019528301.tif 000077
中間体３２Ａ(２５０mg、０.５２９mmol)のＴＨＦ(２mL)溶液に、０℃で２.０  ＭＬｉＯＨのＨ２Ｏ(０.４７６mL、０.９５２mmol)、続いて３０％Ｈ２Ｏ２(０.３６０mL、３.１７mmol)を加えた。反応物を０℃で１０分撹拌した。次いで、ＲＴに温め、ＲＴで１６時間撹拌した。０℃で飽和Ｎａ２ＳＯ３の添加により、注意深く反応停止させた。１Ｎ  ＨＣｌでｐＨを５〜６に調節し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗製物を分取ＨＰＬＣ(PhenLuna  ５μ  ３０×１００mm、４０ml／分流速で１０分かけて２０％Ｂ〜１００％Ｂの勾配、１００％Ｂに５分維持(Ａ：水／ＭｅＯＨ(９０：１０)中０.１％ＴＦＡ、Ｂ：水／ＭｅＯＨ(１０：９０)中０.１％ＴＦＡ)２５４nmでモニタリング)で精製した。３２Ｂ(７８mg、０.２３６mmol、４４.６％収率)を白色固体として得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ 9.22 (br. s., 1H), 8.63 (dd, J = 9.0, 5.0 Hz, 1H), 7.98-7.75 (m, 4H), 5.85 (dd, J = 16.9, 9.7 Hz, 1H), 5.25-5.03 (m, 2H), 3.50 (br. s., 1H), 2.89-2.75 (m, 1H), 2.54-2.32 (m, 2H), 2.16 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 2.06 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 2.01-1.71 (m, 6H)LC-MS: M+H = 328 (tr = 0.69分)(方法A)
【０２９７】
中間体３２Ｃ：(Ｒ)−Ｎ−(２−アミノ−４−クロロフェニル)−２−((ｃｉｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)ペント−４−エンアミド
【化７５】
2019528301.tif 000078
中間体３２Ｂ(１０mg、０.０３１mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(０.５mL)溶液に、ＲＴで塩化オキサリル(１５.５１mg、０.１２２mmol)を滴下し、続いて１滴のＤＭＦを加えた。反応物をＲＴで２時間撹拌した。溶媒を除去し、残留物を真空ポンプ下、２時間乾燥させた。この(Ｒ)−２−((１ｓ,４Ｓ)−４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)ペント−４−エノイルクロライド(１１mg、０.０３２mmol)のＴＨＦ(０.５mL)溶液に、ＲＴで４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(９.０７mg、０.０６４mmol)、続いてヒューニッヒ塩基(０.０１７mL、０.０９５mmol)を加えた。反応物をＲＴで３時間撹拌した。ＬＣＭＳは、ＳＭの消費と、所望のｒｔ＝０.７６分でＭ＋１のピークを示した。反応物をＭｅＯＨで希釈し、分取ＨＰＬＣ(PhenLuna  ５μ  ３０×１００mm、４０ml／分流速で１０分かけて２０％Ｂ〜１００％Ｂの勾配、１００％Ｂに５分維持(Ａ：水／ＭｅＯＨ(９０：１０)中０.１％ＴＦＡ、Ｂ：水／ＭｅＯＨ(１０：９０)中０.１％ＴＦＡ)２５４nmでモニタリング)で精製した。中間体３２Ｃ(１１mg、０.０１５mmol、４８.４％収率)を淡褐色固体として得た。LC-MS: M+H = 452.3 (tr = 0.80分)(方法A)
【０２９８】
実施例３２：４−((１Ｓ,４ｓ)−４−((Ｒ)−１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)ブト−３−エン−１−イル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
３２Ｃ(１０mg、０.０２２mmol)のトルエン(０.５mL)溶液に、ＲＴで、ｐ−トルエンスルホン酸(１９.０５mg、０.１１１mmol)を加えた。反応物を１１５℃で１６時間撹拌した。１６時間後のＬＣＭＳは、出発物質消費と、所望のＭ＋１の新規ピークを示した。反応物を濃縮し、２mL  ＭｅＯＨに溶解し、濾過し、単一化合物精製に供した。粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、実施例３２化合物(３.２mg、０.００７３mmol、３３％)を得た。1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.87 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.09 (dd, J = 9.0, 5.9 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.72-7.64 (m, 1H), 7.63-7.52 (m, 2H), 7.49 (br. s., 1H), 7.15 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.75-5.55 (m, 2H), 3.96 (t, J = 10.1 Hz, 1H), 2.30 (br. s., 1H), 2.01-1.90 (m, 1H), 1.86 (br. s., 1H), 1.84-1.72 (m, 3H), 1.72-1.59 (m, 4H), 1.54 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 1.15 (d, J = 11.5 Hz, 1H);LC-MS: M+H = 434.3 (tr = 1.34分)(方法B)
【０２９９】
実施例３３
(±)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−３,３,３−トリフルオロプロピル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
【化７６】
2019528301.tif 000079
製造例３３Ａ：Ｅ)−エチル４,４,４−トリフルオロ−２−(４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)ブト−２−エノエート
中間体１５Ｆ(０.５００ｇ、１.５９６mmol)およびＤＭＰＵ(０.１９２ml、１.５９６mmol)のＴＨＦ(１０.６４ml)溶液を、−７８℃に冷却した。この溶液にＫＨＭＤＳ(１ＭのＴＨＦ溶液)(３.３５ml、３.３５mmol)を加えた。１.７５時間後、２,２,２−トリフルオロエチルトリフルオロメタンスルホネート(０.４６３ml、３.３５mmol)を滴下した。反応物をアルミホイルで包み、−７８℃で３.５時間撹拌し、次いでｒｔに一夜温めた。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応停止させ、ＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離した。水相をＥｔＯＡｃ(２×)で抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、橙色残留物を得た。粗製物のISCO機器(４０ｇカラム、４０ml／分、２１分かけてヘキサン中０〜５０％ＥｔＯＡｃ、ｔｒ＝１４分)を使用するシリカゲルクロマトグラフィーでの精製により、(Ｅ)−エチル４,４,４−トリフルオロ−２−(４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)ブト−２−エノエート(０.１０９ｇ、０.２６３mmol、１６.５０％収率)を無色残留物として得た。
ESI MS(M+H)+ = 394.1. HPLCピークtr = 0.93分. HPLC条件: A
【０３００】
製造例３３Ｂ：エチル４,４,４−トリフルオロ−２−(４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)ブタノエート
中間体３３Ａ(０.１０９ｇ、０.２７７mmol)のＭｅＯＨ(１.３８５ml)溶液に、ギ酸アンモニウム(０.０８７ｇ、１.３８５mmol)、続いてＰｄ／Ｃ(７.９６mg、０.０７５mmol)を加えた。反応物を７０℃で１時間加熱した。反応物をセライトで濾過し、フィルターケーキをＭｅＯＨで洗浄し、濾液を濃縮した。粗製物をＭｅＯＨに再溶解し、ギ酸アンモニウム(０.０８７ｇ、１.３８５mmol)およびＰｄ／Ｃ(７.９６mg、０.０７５mmol)を加えた。反応物を７０℃で２.５時間加熱した。反応物をセライトで濾過し、フィルターケーキをＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。濾液を濃縮した。粗製物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液(１×)で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、表題化合物を無色残留物として得た。ESI MS(M+H)+ = 398.3. HPLCピークtr = 0.85分. HPLC条件: 方法A
【０３０１】
製造例３３Ｃ：４,４,４−トリフルオロ−２−(４−(６−フルオロキノリン−４−イル)シクロヘキシル)ブタン酸
中間体３３Ｂ(０.０３３６ｇ、０.０８５mmol)のＴＨＦ(０.０６８ml)、ＭｅＯＨ(０.０３４ml)および水(０.０６８ml)溶液に、水酸化リチウム(０.０２０ｇ、０.８４５mmol)を加えた。反応物を８０℃で１時間加熱し、次いでｒｔに冷却した。反応物を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ７に調節し、次いでＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離した。水相をＥｔＯＡｃ(５×)で抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、表題化合物を無色残留物として得た。ESI MS(M+H)+ = 370.2. HPLCピークtr = 0.71分. HPLC条件: 方法A
【０３０２】
実施例３３：(±)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)−３,３,３−トリフルオロプロピル)シクロヘキシル)−６−フルオロキノリン
中間体３３Ｃ(０.０２１６ｇ、０.０５８mmol)を塩化チオニル(０.０４３ml、０.５８５mmol)に溶解し、ＤＭＦ(２.２６４μl、０.０２９mmol)を加えた。反応物をｒｔで撹拌した。１時間後、反応物を濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空においた。粗製アシルクロライドをアセトニトリル(０.２９２ml)に溶解し、溶液を０℃に冷却し、次いで４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(０.０１７ｇ、０.１１７mmol)およびトリエチルアミン(０.０４１ml、０.２９２mmol)を加えた。反応物をｒｔに温めた。反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ(３×)で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色残留物を得た。粗製物をトルエン(０.２９２ml)に溶解し、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物(０.０５６ｇ、０.２９２mmol)を加えた。反応物を１１０℃で一夜加熱し、次いでｒｔに冷却した。溶媒を蒸発させ、粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：３０分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。物質をさらに次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；勾配：２５分かけて１８〜４３％Ｂ、次いで４３％Ｂに２分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、表題化合物を４異性体混合物(８.５mg、２９％)として得た。ESI MS(M+H)+ = 476.2. HPLCピークtr = 2.062分. 純度 = 96%. HPLC条件: 方法B
【０３０３】
実施例３４
(±)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−１,８−ナフチリジン
【化７７】
2019528301.tif 000080
製造例３４Ａ：２−(４−(１,８−ナフチリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロパン酸
エチル２−(４−(１,８−ナフチリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロパノエート(０.２０２ｇ、０.６４７mmol)のＴＨＦ(０.５１７ml)、ＭｅＯＨ(０.２５９ml)および水(０.５１７ml)溶液に、水酸化リチウム(０.１５５ｇ、６.４７mmol)を加えた。反応物を８０℃で１時間加熱し、次いでｒｔに冷却した。反応物を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ７に調節し、次いでＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離した。水相をＥｔＯＡｃ(５×)で抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、表題化合物を黄色泡状物として得た。ESI MS(M+H)+ = 285.1. HPLCピークtr = 0.56分. HPLC条件: A
【０３０４】
実施例３４：(＋／−)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−１,８−ナフチリジン
２−(４−(１,８−ナフチリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロパン酸(０.１３５６ｇ、０.４７７mmol)を塩化チオニル(０.３４８ml、４.７７mmol)に溶解し、ＤＭＦ(０.０１８ml、０.２３８mmol)を加えた。反応物をｒｔで撹拌した。１時間後、反応物を濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空においた。粗製アシルクロライドをアセトニトリル(２.３８４ml)に溶解し、溶液を０℃に冷却し、次いで４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(０.１３６ｇ、０.９５４mmol)およびトリエチルアミン(０.３３２ml、２.３８４mmol)を加えた。反応物をｒｔに温めた。反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ(３×)で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色残留物を得た。粗製物をトルエンに溶解し(２.３８４ml)およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物(０.４５４ｇ、２.３８４mmol)を加えた。反応物を１１０℃で３加熱し、次いでｒｔに冷却した。粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２５分かけて２０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。物質をさらに次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；勾配：１９分かけて０〜２５％Ｂ、次いで１００％Ｂに４分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、表題化合物(２２.５mg、１２％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 391.2. HPLCピークtr = 1.679分. 純度 = 100%. HPLC条件: 方法B
【０３０５】
実施例３５
(４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−１,８−ナフチリジン、ホモキラル、絶対および相対立体化学は未確定
【化７８】
2019528301.tif 000081
約２１.２mgのジアステレオマーおよびラセミ混合物を分割した。異性体混合物を次の条件の分取ＳＦＣで精製した：カラム：WhelkO1-Kromasil、２５×３cm  ＩＤ、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＤＥＡ含有８０／２０  ＣＯ２／ＭｅＯＨ；検出器波長：２２０nm；流速：８５ml／分。フラクション(“ピーク１”  ｔｒ＝２８.０７８分、“ピーク２”  ｔｒ＝２９.４４８分；分析条件：カラム：WhelkO1-Kromasil、２５０×４.６mm  ＩＤ、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＤＥＡ含有８０／２０  ＣＯ２／ＭｅＯＨ；流速：２.０ml／分)を、ＭｅＯＨ中に集めた。ピーク１およびピーク２の立体異性純度は、分取ＳＦＣクロマトグラムに基づき９８％より高いと推定されている。各エナンチオマーを分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。
【０３０６】
実施例３５−１、最初に溶出する異性体：粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２５分かけて２０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、異性体１(１.７mg、１％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 391.1. HPLCピークtr = 1.595分. 純度 = 95%. HPLC条件: B. 絶対立体化学は未確定
【０３０７】
実施例３５−２、二番目に溶出する異性体：粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２５分かけて２０〜７０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、異性体２(１.８mg、１％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 391.2. HPLCピークtr = 1.696分. 純度 = 99%. HPLC条件: B. 絶対立体化学は未確定
【０３０８】
実施例３６
(＋／−)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−６−クロロ−２−(１−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロピル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール
【化７９】
2019528301.tif 000082
【０３０９】
製造例３６Ａ：エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート
４−ブロモ−２−(トリフルオロメチル)ピリジン(１.１７０ml、８.８５mmol)、中間体１５Ｅ(２.６８ｇ、９.１２mmol)、Ｎａ２ＣＯ３(３.７５ｇ、３５.４mmol)およびＰｄ(Ｐｈ３Ｐ)４(０.５１１ｇ、０.４４２mmol)のジオキサン(８２ml)および水(２７.３ml)中の混合物を、１００℃で一夜加熱した。反応物を水で反応停止させ、ＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離した。水相をＥｔＯＡｃ(３×)で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色残留物を得た。粗製物のISCO機器(８０ｇカラム、６０ml／分、１６.５分かけてヘキサン中０〜２０％ＥｔＯＡｃ、ｔｒ＝１１分)を使用するシリカゲルクロマトグラフィーでの精製により、エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート(２.３３６ｇ、７.４６mmol、８４％収率)を無色残留物として得た。ESI MS(M+H)+ = 314.1. HPLCピークtr = 1.05分. HPLC条件: 方法A
【０３１０】
製造例３６Ｂ：エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)ブタノエート
エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート(２.１９１ｇ、６.９９mmol)およびＤＭＰＵ(０.８４３ml、６.９９mmol)のＴＨＦ(４６.６ml)溶液を、−７８℃に冷却した。この溶液に、ＫＨＭＤＳ(１ＭのＴＨＦ溶液)(１４.６９ml、１４.６９mmol)を加えた。１時間後、エチルアイオダイド(１.１８７ml、１４.６９mmol)を滴下した。反応物をアルミホイルで包み、−７８℃で３.５時間撹拌し、次いでｒｔに一夜温めた。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応停止させ、ＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離した。水相をＥｔＯＡｃ(２×)で抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、橙色残留物。粗製物のISCO機器(８０ｇカラム、６０ml／分、１９分かけてヘキサン中０〜１８％ＥｔＯＡｃ、ｔｒ＝１４分)を使用するシリカゲルクロマトグラフィーでの精製により、エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)ブタノエート(０.８３６ｇ、２.４４８mmol、３５％収率)を無色残留物として得た。ESI MS(M+H)+ = 342.2. HPLCピークtr = 1.14分. HPLC条件: A
【０３１１】
製造例３６Ｃ：エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)ブタノエート
エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)ブタノエート(０.８８４ｇ、２.５９mmol)のＭｅＯＨ(１２.９５ml)溶液に、ギ酸アンモニウム(０.８１６ｇ、１２.９５mmol)、続いてＰｄ／Ｃ(０.０７４ｇ、０.６９９mmol)を加えた。反応物を７０℃で１時間加熱した。反応物をセライトで濾過し、フィルターケーキをＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。濾液を濃縮した。粗製物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液(１×)で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、表題化合物を無色残留物として得た。ESI MS(M+H)+ = 344.3. HPLCピークtr = 1.12分. HPLC条件: A
【０３１２】
製造例３６Ｄ：２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)ブタン酸
エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)ブタノエート(０.７２９ｇ、２.１２３mmol)のＴＨＦ(４.２５ml)、ＭｅＯＨ(２.１２３ml)および水(４.２５ml)溶液に、水酸化リチウム(０.７６３ｇ、３１.８mmol)を加えた。反応物を８０℃で一夜加熱し、次いでｒｔに冷却した。さらにＬｉＯＨ(０.３８１mg、１５.９mmol)を加え、反応物を再び一夜加熱した。反応物を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ７に調節し、次いでＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離した。水相をＥｔＯＡｃ(５×)で抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、表題化合物を黄色残留物として得た。ESI MS(M+H)+ = 316.4. HPLCピークtr = 0.95分. HPLC条件: A
【０３１３】
実施例３６：(＋／−)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−６−クロロ−２−(１−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロピル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール
２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)ブタン酸(０.１０８６ｇ、０.３４４mmol)を塩化チオニル(０.２５１ml、３.４４mmol)に溶解し、ＤＭＦ(０.０１３ml、０.１７２mmol)を加えた。反応物をｒｔで撹拌した。１時間後、反応物を濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空においた。粗製アシルクロライドをアセトニトリル(１.７２２ml)に溶解し、溶液を０℃に冷却し、次いで４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(０.０９８ｇ、０.６８９mmol)およびトリエチルアミン(０.２４０ml、１.７２２mmol)を加えた。反応物をｒｔに温めた。反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ(３×)で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色残留物を得た。粗製物をトルエンに溶解し(１.７２２ml)およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物(０.３２８ｇ、１.７２２mmol)を加えた。反応物を１１０℃で８加熱し、次いでｒｔに冷却した。溶媒を蒸発させ、粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、表題化合物(６６.５mg、９９％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 422.2. HPLCピークtr = 2.077分. 純度 = 99%. HPLC条件: 方法B
【０３１４】
実施例３７
４−(４−(１−(６−クロロ−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール−２−イル)エチル)シクロヘキシル)−１,８−ナフチリジン、ホモキラル、絶対および相対立体配置未確定
【化８０】
2019528301.tif 000083
約６８.４mgのジアステレオマーおよびラセミ混合物を分割した。異性体混合物を次の条件の分取ＳＦＣで精製した：カラム：Chiral AD、２５×３cm  ＩＤ、５μm粒子；移動相Ａ：８８／１２  ＣＯ２／ＭｅＯＨ；検出器波長：２２０nm；流速：８５ml／分。フラクション(“ピーク１”  ｔｒ＝４.２０５分、“ピーク２”  ｔｒ＝４.６７７分、“ピーク３”  ｔｒ＝５.７９２分、“ピーク４”  ｔｒ＝６.８４８分；分析条件：カラム：Chiral AD、２５０×４.６mm  ＩＤ、５μm粒子；移動相Ａ：８５／１５  ＣＯ２／ＭｅＯＨ；流速：２.０ml／分)を、ＭｅＯＨ中に集めた。各ピークの立体異性純度は、分取ＳＦＣクロマトグラムに基づき、９６％を超えると推定されている。各エナンチオマーを分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した：
【０３１５】
実施例３７−１、最初に溶出する異性体：粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、異性体１(４.１mg、３％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 422.2. HPLCピークtr = 2.162分. 純度 = 98%. HPLC条件: B. 絶対立体化学は未確定
【０３１６】
実施例３７−２、二番目に溶出する異性体：粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、異性体２(３.５mg、３％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 422.2. HPLCピークtr = 2.164分. 純度 = 99%. HPLC条件: B. 絶対立体化学は未確定
【０３１７】
実施例３７−３、三番目に溶出する異性体：粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、異性体３(２４.１mg、１６％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 422.2. HPLCピークtr = 2.160分. 純度 = 97%. HPLC条件: B. 絶対立体化学は未確定
【０３１８】
実施例３７−４、四番目に溶出する異性体：粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、異性体４(２５.８mg、１７％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 422.2. HPLCピークtr = 2.161分. 純度 = 94%. HPLC条件: B. 絶対立体化学は未確定
【０３１９】
実施例３８
(±)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−６−クロロ−２−(１−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール
【化８１】
2019528301.tif 000084
【０３２０】
製造例３８Ａ：エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート
４−ブロモ−２−(トリフルオロメチル)ピリジン(１.５mL、１１.３５mmol)、エチル２−(４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート(３.４４ｇ、１１.６９mmol)、Ｎａ２ＣＯ３(４.８１ｇ、４５.４mmol)およびＰｄ(Ｐｈ３Ｐ)４(０.６５６ｇ、０.５６７mmol)のジオキサン(１０５mL)および水(３５.０mL)の混合物を１００℃で一夜加熱した。反応物を水で反応停止させ、ＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離した。水相をＥｔＯＡｃ(３×)で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色残留物を得た。粗製物のISCO機器(８０ｇカラム、６０ml／分、２７分かけてヘキサン中０〜４５％ＥｔＯＡｃ、ｔｒ＝１５、２３分)を使用するシリカゲルクロマトグラフィーでの精製により、エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート(２.７４７７ｇ、８.３３mmol、７３.４％収率)を無色残留物として得た。ESI MS(M+H)+ = 314.1. HPLCピークtr = 1.03分. HPLC条件: A
【０３２１】
製造例３８Ｂ：エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)プロパノエート
エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)アセテート(２.７４７７ｇ、８.７７mmol)およびＤＭＰＵ(１.０５７ml、８.７７mmol)のＴＨＦ(５８.５ml)溶液を、−７８℃に冷却した。この溶液に、ＫＨＭＤＳ(１ＭのＴＨＦ溶液)(１８.４２ml、１８.４２mmol)を加えた。４５分後、ヨウ化メチル(１.１５２ml、１８.４２mmol)を滴下した。反応物をアルミホイルで包み、−７８℃で３.５時間撹拌し、次いでｒｔに温めた。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応停止させ、ＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離した。水相をＥｔＯＡｃ(２×)で抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、橙色残留物。粗製物のISCO機器(８０ｇカラム、６０ml／分、１９分かけてヘキサン中０〜２５％ＥｔＯＡｃ、ｔｒ＝１０分)を使用するシリカゲルクロマトグラフィーでの精製により、エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)プロパノエート(２.１１６ｇ、５.８２mmol、６６.３％収率)を無色残留物として得た。ESI MS(M+H)+ = 329.2. HPLCピークtr = 1.10分. HPLC条件: 方法A
【０３２２】
製造例３８Ｃ：エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロパノエート
エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシ−３−エン−１−イル)プロパノエート(２.１１６ｇ、６.４６mmol)のＭｅＯＨ(３２.３ml)溶液に、ギ酸アンモニウム(２.０３８ｇ、３２.３mmol)、続いてＰｄ／Ｃ(０.１８６ｇ、１.７４５mmol)を加えた。反応物を７０℃で１時間加熱した。反応物をセライトで濾過し、フィルターケーキをＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。濾液を濃縮した。粗製物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液(１×)で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、表題化合物を無色残留物として得た。ESI MS(M+H)+ = 330.2. HPLCピークtr = 1.08分. HPLC条件: 方法A
【０３２３】
製造例３８Ｄ：２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロパン酸
エチル２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロパノエート(２.０１７７ｇ、６.１３mmol)のＴＨＦ(４.９０ml)、ＭｅＯＨ(２.４５０ml)および水(４.９０ml)溶液に、水酸化リチウム(１.４６７ｇ、６１.３mmol)を加えた。反応物を８０℃で１時間加熱し、次いでｒｔに冷却した。反応物を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ７に調節し、次いでＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離した。水相をＥｔＯＡｃ(５×)で抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、表題化合物を白色泡状物として得た。ESI MS(M+H)+ = 302.1. HPLCピークtr = 0.90分. HPLC条件: 方法A
【０３２４】
実施例３８：(＋／−)−Ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ−６−クロロ−２−(１−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール
２−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)プロパン酸(０.１００ｇ、０.３３２mmol)を塩化チオニル(０.２４２mL、３.３２mmol)に溶解し、ＤＭＦ(０.０１３ml、０.１６６mmol)を加えた。反応物をｒｔで撹拌した。１時間後、反応物を濃縮し、トルエンに溶解し、再び濃縮し、高真空においた。粗製アシルクロライドをアセトニトリル(１.６５９mL)に溶解し、溶液を０℃に冷却し、次いで４−クロロベンゼン−１,２−ジアミン(０.０９５ｇ、０.６６４mmol)およびトリエチルアミン(０.２３１mL、１.６５９mmol)を加えた。反応物をｒｔに温めた。反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ(３×)で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色残留物を得た。粗製物をトルエンに溶解し(１.６５９ml)およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物(０.３１６ｇ、１.６５９mmol)を加えた。反応物を１１０℃で８加熱し、次いでｒｔに冷却した。溶媒を蒸発させ、粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２５分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、表題化合物(３９.６mg、２８％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 408.1. HPLCピークtr = 1.984分. 純度 = 97%. HPLC条件: B
【０３２５】
実施例３９
６−クロロ−２−(１−(４−(２−(トリフルオロメチル)ピリジン−４−イル)シクロヘキシル)エチル)−１Ｈ−ベンゾ[ｄ]イミダゾール
(ホモキラル、絶対および相対立体化学未確定)
【化８２】
2019528301.tif 000085
約４１mgのジアステレオマーおよびラセミ混合物を分割した。異性体混合物を次の条件の分取ＳＦＣで精製した：カラム：Whelk-O R,R Kromasil、２５×３cm  ＩＤ、５μm粒子；移動相Ａ：０.１％ＤＥＡ含有８５／１５  ＣＯ２／ＭｅＯＨ；検出器波長：２２０nm；流速：８５ml／分。フラクション(“ピーク１”  ｔｒ＝９.８８分、“ピーク２”  ｔｒ＝１１.５５分、“ピーク３”  ｔｒ＝１２.９９分)を、ＭｅＯＨ中に集めた。各エナンチオマーを分取ＬＣ／ＭＳでさらに精製した。
【０３２６】
実施例３９−１、最初に溶出する異性体：粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２５分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、異性体１(１.３mg、１％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 408.2. HPLCピークtr = 1.977分. 純度 = 100%. HPLC条件: B. 絶対立体化学は未確定
【０３２７】
実施例３９−２、二番目に溶出する異性体：粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２５分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、異性体２(１３.９mg、１０％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 408.2. HPLCピークtr = 2.119分. 純度 = 100%. HPLC条件: B. 絶対立体化学は未確定
【０３２８】
実施例３９−３、三番目に溶出する異性体：粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ：９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２５分かけて４０〜８０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分維持；流速：２０ml／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させて、異性体３(１１.３mg、８％)を得た。ESI MS(M+H)+ = 407.9. HPLCピークtr = 2.119分. 純度 = 99%. HPLC条件: B. 絶対立体化学は未確定
【０３２９】
実施例４０〜５２
ここに記載する方法を使用して、次のようなさらなる化合物を製造できる。
【表３】
2019528301.tif 000086
【表４】
2019528301.tif 000087
【０３３０】
【表５】
2019528301.tif 000088
【表６】
2019528301.tif 000089
【０３３１】
材料および方法
次の一般的材料および方法は、記載されている場面で使用したか、または記載した実施例で使用し得る。
分子生物学の標準的方法は以下の科学文献に記載されている(例えば、Sambrook et al., Molecular Cloning, Third Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (2001)；および細菌細胞におけるクローニングおよびＤＮＡ変異誘発(Vol. 1)、哺乳動物細胞および酵母におけるクローニング(Vol. 2)、糖複合体およびタンパク質発現(Vol. 3)ならびにバイオインフォマティクス(Vol. 4)を記載するAusubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, Vols. 1-4, John Wiley and Sons, Inc. New York, NY (2001)参照)。
【０３３２】
科学文献には、免疫沈降、クロマトグラフィー、電気泳動、遠心分離および結晶化、ならびに化学分析、化学修飾、翻訳後修飾、融合タンパク質の産生およびタンパク質の糖鎖付加を含むタンパク質精製の方法が記載されている(例えば、Coligan et al., Current Protocols in Protein Science, Vols. 1-2, John Wiley and Sons, Inc., NY (2000)参照)。
【０３３３】
例えば、抗原性フラグメント、リーダー配列、タンパク質折りたたみ、機能的ドメイン、糖鎖付加部位および配列アラインメントを決定するためのソフトウェアパッケージおよびデータベースは入手可能である(例えば、GCG(登録商標)Wisconsin Package (Accelrys, Inc., San Diego, CA)；およびDeCypher(登録商標)(TimeLogic Corp., Crystal Bay, NV)参照)。
【０３３４】
ここに記載する化合物の評価の基礎として役立ち得るアッセイおよび他の実験技術は科学文献に豊富に記載されている。
【０３３５】
ＩＤＯ酵素アッセイおよびキヌレニン(ＫＹＮ)の細胞産生は、Sarkar, S.A. et al., Diabetes, 56: 72-79 (2007)に記載される。簡潔には、特記しない限り、全ての化学物質はSigma-Aldrich(St. Louis, MO)から購入できる。１,０００個のヒト島群を１mL培地中、サイトカインと２４時間培養し、５分、８００×ｇの遠心分離により回収し、プロテアーゼ阻害剤含有１５０μL  ＰＢＳ中、超音波処理し得る(セット２；Calbiochem, EMD Biosciences, San Diego, CA)。超音波処理物を１０分、１０,０００×ｇで遠心分離し、上清を、トリプリケートで、４０μl  サンプルと等量の４０mmol／Ｌ  アスコルビン酸(ｐＨ７.０に中和)、１００μmol／Ｌ  メチレンブルー、２００μｇ／mL  カタラーゼおよび４００μmol／ｌ  Ｌ−Ｔｒｐを含む１００mmol／Ｌ  リン酸カリウム緩衝液、ｐＨ６.５を３０分、３７℃でインキュベートすることによりアッセイし得る。アッセイを１６μL  ３０％(ｗ／ｖ)  トリクロロ酢酸(ＴＣＡ)を加えて停止させ、さらに６０℃で１５分インキュベートして、Ｎ−ホルミルキヌレニンをＫＹＮに加水分解し得る。混合物を次いで１２,０００rpmで１５分遠心分離でき、ＫＹＮを、９６ウェルマイクロタイタープレート中、等量の上清と２％(ｗ／ｖ)  エールリッヒ試薬を氷酢酸中で混合し、４８０nmの吸光度をＬ−ＫＹＮを標準として使用して読むことにより定量し得る。島サンプルのタンパク質を、５９５nmでのBio-Radタンパク質アッセイにより定量し得る。島培養上清におけるＬ−ＫＹＮの検出のために、タンパク質を５％(ｗ／ｖ)  ＴＣＡで沈殿させ、１２,０００rpmで１５分遠心分離し、上清中のＫＹＮを、上記のとおりエールリッヒ試薬で検出し得る。ＩＬ−４(１０μｇ／mL；５００〜２,０００単位／mL)および１−α−メチルＴｒｐ(１−ＭＴ；４０μmol／Ｌ)を記載するとおり、インキュベーション培地に加え得る。このアッセイはまた細胞ベースのアッセイの形に基づいてもよく、ＵＶ／Ｖｉｓ検出の代替としてＬＣＭＳ／ＭＳで定量し得る。
【０３３６】
ウェスタンブロット分析。２４時間、マイアミ培地でサイトカイン存在下インキュベートした１,０００〜１,２００島の群を、上記のとおりＰＢＳ中に採取し、超音波処理でき、５０μｇタンパク質サンプルを１０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルで電気泳動し得る。ヒト−ＩＤＯプラスミド(３μｇ)または空ベクター細胞でトランスフェクトしたＣＯＳ７細胞(０.６×１０６細胞／６０mm３ペトリ皿)を、それぞれ陽性および陰性対照として使用し得る。タンパク質を、電気泳動により半乾燥方法でポリビニリジンフルオライド膜に移し、５％(ｗ／ｖ)脱脂粉乳でＴｒｉｓ緩衝化食塩水および０.１％Ｔｗｅｅｎ中１時間遮断し、一夜、抗ヒトマウスＩＤＯ抗体(１：５００；Chemicon, Temecula, CA)、ホスホ−ＳＴＡＴ１α  ｐ９１およびＳＴＡＴ１α  ｐ９１(１：５００；Zymed, San Francisco, CA)とインキュベートし得る。抗マウスホースラディッシュペルオキシダーゼ標識二次抗体(Jackson Immunolabs, West Grove, PA)と１時間インキュベーション後、免疫反応性タンパク質をECL PLUS(登録商標)ウェスタンブロッティング検出試薬(Amersham BioSciences, Buckinghamshire, U.K.)で可視化し得る。
【０３３７】
ＩＤＯの免疫組織化学的検出。島を、ＰＢＳ中４％パラホルムアルデヒド(Invitrogen)で１時間固定し、溶融１０％ブタヒフゼラチンブロックに固定化し(３７℃)、最適切断温度化合物に包埋し得る。島組織に対する免疫蛍光染色を、膵臓・十二指腸ホメオボックス１(ＰＤＸ１)およびＩＤＯに対して生じさせた抗体で染色した７μm切片で実施し得る。抗原検索を、９７℃で、１０mmol／ｌ  Ｔｒｉｓおよび１mmol／ｌ  ＥＤＴＡ(ｐＨ９.０)を含む緩衝液中、３０分、水浴で実施し得る。切片を、ＰＢＳ中５％正常ヤギ血清で１時間遮断し得る。次いで、組織を、加湿チャンバー中、一夜、室温でマウスモノクローナル抗ヒトＩＤＯ抗体(１：２０；Chemicon)およびヤギポリクローナル抗ヒトＰＤＸ１抗体(１：２,０００；Dr. Chris Wright, School of Medicine, Vanderbilt, TNに依頼できる)と反応させ得る。二次抗体抗ヤギ(Ｃｙ３で標識)および抗マウス(Ｃｙ２で標識)をJackson Immunolabsから購入でき、１：２００濃度で使用し得る。核をHoechst 33258(Molecular Probes, Eugene, OR)で染色し得る。オリンパスＤＳＵ(スピニングディスク共焦点)および浜松ORCA IIER単色ＣＣＤカメラを備えたオリンパス１Ｘ８１倒立電動顕微鏡からIntelligent Imaging Systemソフトウェアにより画像を取得できる。
【０３３８】
本発明のＩＤＯ阻害剤を評価する別の手段はＷＯ２０１０／０２３３１６６に記載され、以下に要約する。
【０３３９】
生化学アッセイ。ヒトおよびマウス両者のＩＤＯについてのｃＤＮＡクローンは単離され、配列決定により確認されており、市販されている。生化学的試験のためにＩＤＯを調製するために、Ｃ末端ＨｉｓタグＩＤＯタンパク質を、ＩＰＴＧ誘導型ｐＥＴ５ａベクター系を使用して大腸菌で産生させ、ニッケルカラムで単離し得る。一部精製したタンパク質の収量を、ゲル電気泳動により確認でき、濃度をタンパク質標準との比較により推定する。ＩＤＯ酵素活性をアッセイするために、キヌレニン産生のための９６ウェルプレート分光学的定量法を、公開されている手順により実施し得る(例えば、Littlejohn, T.K. et al., Prot. Exp. Purif., 19: 22-29 (2000)参照)。ＩＤＯ阻害性活性スクリーニングのために、化合物を、１００μL  反応体積中の５０ngのＩＤＯ酵素に対して、例えば、２００μMの単一濃度で、トリプトファンを、例えば、０μM、２μM、２０μMおよび２００μMの漸増濃度で加えて、評価し得る。キヌレニン産生を１時間目に測定し得る。
【０３４０】
細胞ベースのアッセイ。ＣＯＳ−１細胞を、製造業者が推奨するとおり、リポフェクタミン２０００(Invitrogen)を使用してＩＤＯ  ｃＤＮＡを発現するＣＭＶプロモーター駆動プラスミドに一過性にトランスフェクトし得る。細胞のコンパニオンセットを、ＴＤＯ発現プラスミドで一過性にトランスフェクトし得る。トランスフェクション４８時間後、細胞を、６×１０４細胞／ウェルで９６ウェル形式に割り当て得る。翌日、ウェルを洗浄してよく、２０μｇ／mL  トリプトファンを含む新規媒体(無フェノールレッド)を阻害剤と共に加え得る。酵素アッセイについて先に記載のとおり、５時間で反応を停止させ、上清を採り、キヌレニンについて分光光度的にアッセイし得る。ＩＤＯ活性の最初の確認を得るために、化合物を、例えば、１００μMの単一濃度で評価し得る。選択した化合物について、より詳細な用量漸増プロファイルを集め得る。
【０３４１】
薬力学および薬物動態評価。薬力学アッセイは、キヌレニンおよびトリプトファンの両方の血清レベルの測定に基づき得て、キヌレニン／トリプトファン比の計算は、ベースライントリプトファンレベルと無関係のＩＤＯ活性の推定値を提供する。血清トリプトファンおよびキヌレニンレベルをＨＰＬＣにより決定でき、血清化合物レベルはまた場合により同一ＨＰＬＣランで決定し得る。
【０３４２】
化合物を、最初にマウスをＬＰＳで負荷し、次いで血清キヌレニンレベルがプラトーになった時点で化合物のボーラス用量を投与することにより評価し得る。キヌレニンプールが、１０分未満の活性半減期で急速に入れ替わるため、既存のキヌレニンは、ＩＤＯ阻害剤がキヌレニン産生に対して有する影響を過度にマスクすることは予測されない。各実験は、非ＬＰＳ暴露マウス(他のマウスの比較対照となるベースラインキヌレニンレベルを決定するため)および媒体単独を投与されているＬＰＳ暴露マウスのセット(ＩＤＯ活性化の陽性対照を提供するため)を含み得る。各化合物を、最初にマウスにおいて少なくとも１００mg／kgの範囲の高ｉ.ｐ.ボーラス用量で評価し得る。キヌレニンおよびトリプトファンレベルのＨＰＬＣ分析(薬力学分析)ならびに化合物レベル(薬物動態分析)のために、規定した間隔で採血し得る(例えば、化合物投与５分、１５分、３０分、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間および２４時間後、５０μL  サンプル)。薬物動態データから、達成される化合物のピーク血清濃度を決定し、クリアランス速度を推定できる。種々の時点でキヌレニン／トリプトファン比に対して血清中の化合物レベルを比較することにより、インビボでのＩＤＯ阻害の有効ＩＣ５０がおおまかに推定され得る。有効性を示す化合物を評価して、ピーク濃度で１００％ＩＤＯ阻害を達成する最大用量を決定し得る。
【０３４３】
生物学的活性の評価
実施例化合物を、ＩＤＯ活性阻害について試験した。実験法および結果を下に提供する。
ＨＥＫ２９３細胞を、ヒトＩＤＯ１  ｃＤＮＡ(NM 002164.2)を担持するｐＣＤＮＡベースの哺乳動物発現ベクターでエレクトロポレーションによりトランスフェクトした。２週間、１mg／ml  Ｇ４１８含有培地(１０％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ)で培養した。ＩＤＯ阻害アッセイのためにヒトＩＤＯ１タンパク質を安定に発現するＨＥＫ２９３細胞のクローンを選択し、増殖させた。
【０３４４】
ヒトＩＤＯ１／ＨＥＫ２９３細胞を、３８４ウェル黒色壁透明底組織培養プレート(Matrix Technologies LLC)で、１０％ＦＢＳ含有無ＲＰＭＩ／フェノールレッド培地中、１０,０００細胞／５０μL／ウェルで播種した。１００nLの一定濃度の化合物をＥＣＨＯ液体ハンドリングシステムを使用して各ウェルに加えた。細胞を、２０時間、５％ＣＯ２の３７℃インキュベーターでインキュベートした。
【０３４５】
化合物処理を、最終濃度０.２％でトリクロロ酢酸(Sigma-Aldrich)を加えて、停止させた。細胞プレートをさらに５０℃で３０分インキュベートした。新規透明底３８４ウェルプレートで、等量の上清(２０μL)および０.２％(ｗ／ｖ)  エールリッヒ試薬(４−ジメチルアミノベンズアルデヒド、Sigma-Aldrich)を氷酢酸中混合した。このプレートを室温で３０分インキュベートした。４９０nmでの吸光度を、Envisionプレートリーダーで測定した。
【０３４６】
０％阻害を、５００nMの対照標準処理のカウントを１００％阻害および化合物ではないが、ＤＭＳＯで処理したカウントを０％阻害として使用して、計算した。
【０３４７】
ＨｅＬａ細胞ベースのインドールアミン２,３−ジオキシゲナーゼ(ＩＤＯ)アッセイにおける阻害剤活性の評価
ＨｅＬａ(ATCC(登録商標)CCL-2)細胞をＡＴＣＣ(登録商標)から得て、４.５ｇ／Ｌ  グルコース、４.５ｇ／Ｌ  Ｌ−グルタミンおよび４.５ｇ／Ｌ  ピルビン酸ナトリウム(#10-013-CV, Corning)、２mM  Ｌ−アラニル−Ｌ−グルタミンジペプチド(#35050-061、Gibco)、１００Ｕ／mL  ペニシリン、１００μｇ／mL  ストレプトマイシン(#SV30010、HyClone)および１０％ウシ胎児血清(#SH30071.03, HyClone)添加ダルベッコ改変イーグル培地で培養した。細胞を、加湿インキュベーターで、３７℃で５％ＣＯ２中、インキュベートした。
【０３４８】
ＩＤＯ活性を、次のとおりキヌレニン産生の関数として評価した：ＨｅＬａ細胞を、９６ウェル培養プレートに５,０００細胞／ウェルの密度で播種し、一夜平衡化させた。２４時間後、培地を吸引し、最終濃度２５ng／mLでＩＦＮγ(#285-IF/CF, R&D Systems)を含む培地と置き換えた。各試験化合物の連続希釈を、総体積２００μLの培養培地で細胞に加えた。さらに４８時間インキュベーション後、１７０μLの上清を、新しい９６ウェルプレートの各ウェルに移した。１２.１μLの６.１Ｎ  トリクロロ酢酸(#T0699、Sigma-Aldrich)を各ウェルに加え、混合し、続いて６５℃で２０分インキュベートして、インドールアミン２,３−ジオキシゲナーゼの生成物であるＮ−ホルミルキヌレニンをキヌレニンに加水分解させた。反応混合物を１０分、５００×ｇで遠心分離して、沈殿を沈降させた。１００μLの上清を、新しい９６ウェルプレートの各ウェルに移した。１００μlの２％(ｗ／ｖ)  ｐ−ジメチルアミノベンズアルデヒド(#15647-7、Sigma-Aldrich)の酢酸(#A6283、Sigma-Aldrich)溶液を各ウェルに加え、混合し、室温で２０分インキュベートした。キヌレニン濃度を４８０nmでの吸光度の測定により決定し、SPECTRAMAX(登録商標)M2eマイクロプレートリーダー(Molecular Devices)を使用して、Ｌ−キヌレニン(#K8625、Sigma-Aldrich)標準曲線に対して検量した。各阻害剤濃度の活性パーセントを決定し、ＩＣ５０値を非線形回帰を使用して評価した。
【０３４９】
ここに記載する化合物の活性を図１に提供し、ここで、効力レベルを次のとおり提供する：(効力：ＩＤＯ  ＩＣ５０：Ａ＜０.１μm；Ｂ＜１μm；Ｃ＜１０μm)。
【０３５０】
ここに記載する化合物の活性を下に示し、ここで、効力レベルを次のとおりに示す：(効力：ＩＤＯ  ＩＣ５０：Ａ＜０.０５μm；Ｂ＜０.２５μm；Ｃ  ＜２μm)
【０３５１】
ＩＤＯアッセイの結果を、下表に示す。
【表７】
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【表８】
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【表９】
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【国際調査報告】
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