【手続補正書】
【提出日】平成19年3月5日(2007.3.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  成熟脂肪細胞を実質上含まない哺乳類の脂肪由来の幹細胞。
【請求項２】  ＤＭＥＭ＋約１０％ウシ胎仔血清中で、分化させることなく少なくとも１５回継代して培養することができる、請求項１に記載の細胞。
【請求項３】  脂肪原性、軟骨原性、心臓原性、皮膚原性、造血性、血管原性、筋原性、腎原性、神経原性、神経痛原性、尿生殖器原性、骨原性、心膜原性、腹膜原性、胸膜原性、内臓原性、およびストロマ性の発生上の表現型からなる発生上の表現型の群から選択される２以上の発生上の表現型を有する、請求項２に記載の細胞。
【請求項４】  ヒトである、請求項１〜３のいずれかに記載の細胞。
【請求項５】  遺伝子学的に変更されている、請求項１〜４のいずれかに記載の細胞。
【請求項６】  細胞表面結合細胞内シグナル伝達部分を有する、請求項１〜５のいずれかに記載の細胞。
【請求項７】  ホルモンを分泌する、請求項１〜５のいずれかに記載の細胞。
【請求項８】  上記ホルモンがサイトカインおよび増殖因子からなるホルモンの群から選択される、請求項７に記載の細胞。
【請求項９】  請求項１〜８のいずれかに記載の細胞を含む定義づけられた細胞集団。
【請求項１０】  異種である、請求項９に記載の定義づけられた細胞集団。
【請求項１１】  神経幹細胞(NSC)、造血幹細胞(HPC)、胚幹細胞(ESC)およびそれらの混合物からなる細胞の群から選択される幹細胞をさらに含む(compressing)、請求項９または１０に記載の定義づけられた細胞集団。
【請求項１２】  請求項１〜８のいずれかの細胞から本質的になる、請求項９に記載の定義づけられた細胞集団。
【請求項１３】  実質上同種である、請求項９または１２に記載の定義づけられた細胞集団。
【請求項１４】  クローンである、請求項１３に記載の定義づけられた細胞集団。
【請求項１５】  集団がクローンであって、中胚葉幹細胞(MHC)、結合組織幹細胞(CTSC)、またはそれらの混合物から本質的になる定義づけられた細胞集団。
【請求項１６】  上記幹細胞が、脂肪原性、軟骨原性、心臓原性、皮膚原性、造血性、血管原性、筋原性、腎原性、神経原性、神経痛原性、尿生殖器原性、骨原性、心膜原性、腹膜原性、胸膜原性、内臓原性、およびストロマ性の発生上の表現型からなる発生上の表現型の群から選択される２以上の発生上の表現型を有する、請求項１５に記載の集団。
【請求項１７】  細胞を実質上含まない脂肪組織細胞外マトリックス材料を含む脂肪由来の格子。
【請求項１８】  ヒト蛋白、プロテオグリカン、糖蛋白、ヒアルロニン、またはフィブロネクチン分子を含む、請求項１７に記載の脂肪由来の格子。
【請求項１９】  I型、II型、III型、IV型、V型、VI型コラーゲンからなるコラーゲンの群から選択されるコラーゲンを含む、請求項１７または１８に記載の脂肪由来の格子。
【請求項２０】  ホルモンを含む請求項１７〜１９のいずれかに記載の脂肪由来の格子。
【請求項２１】  上記ホルモンがサイトカインおよび増殖因子からなるホルモンの群から選択される、請求項２０に記載の脂肪由来の格子。
【請求項２２】  実質上無水である、請求項１７〜２１のいずれかに記載の脂肪由来の格子。
【請求項２３】  凍結乾燥されてなる、請求項１７〜２２のいずれかに記載の脂肪由来の格子。
【請求項２４】  水和されてなる、請求項１７〜２１のいずれかに記載の脂肪由来の格子。
【請求項２５】  請求項１７〜２４のいずれかに記載の脂肪由来の格子と水和剤、細胞培養基質、細胞培養培地、抗生物質化合物、およびホルモンからなる構成要素の群から選択される１以上の構成要素とを含むキット。
【請求項２６】  細胞および請求項１７〜２４のいずれかに記載の脂肪由来の格子を含む組成物。
【請求項２７】  請求項１〜８のいずれかに記載の細胞および生物学的に適合した格子を含む組成物。
【請求項２８】  請求項９〜１６のいずれかに記載の集団および生物学的に適合した格子を含む組成物。
【請求項２９】  上記格子がポリマー材料を含む、請求項２７または２８に記載の組成物。
【請求項３０】  上記ポリマー材料がメッシュまたはスポンジとしてポリマー繊維から形成されるものである、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】  上記ポリマー材料が、グリコール酸、乳酸、フマル酸プロピル、カプロラクトン、ヒアルロナン、ヒアルロン酸およびそれらの組み合わせからなるモノマーの群から選択されるモノマーを含む、請求項２９または３０に記載の組成物。
【請求項３２】  上記ポリマー材料が、蛋白、多糖、ポリヒドロキシ酸、ポリオルトエステル、ポリ無水物、ポリホスファゼン、合成ポリマーまたはそれらの組み合わせを含む、請求項２９〜３１のいずれかに記載の組成物。
【請求項３３】  上記ポリマー材料が、細胞を内部に拡散させているポリマー懸濁液の架橋によって形成されるヒドロゲルである、請求項２９〜３２のいずれかに記載の組成物。
【請求項３４】  上記格子が、サイトカインおよび増殖因子からなるホルモンの群から選択されるホルモンをさらに含む、請求項２９〜３３のいずれかに記載の組成物。
【請求項３５】  上記格子が請求項１７〜２４のいずれかに記載の脂肪由来の格子である、請求項２９〜３４のいずれかに記載の組成物。
【請求項３６】  請求項１〜８のいずれかに記載の細胞を、導入遺伝子を包含する核酸を含む遺伝子導入ベクターに曝露することを含み、それによって該導入遺伝子が細胞内で発現されるような条件下で、該核酸が細胞内に導入される、遺伝子学的に変更された細胞を得る方法。
【請求項３７】  上記導入遺伝子が毒素に対する抵抗性を与える蛋白をコードする、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】  (a)遺伝子学的に変更された細胞を請求項３６または３７に従って得ること、および(b)動物に該細胞を導入し、そうして導入遺伝子をインビボで発現することを含む、動物に対する導入遺伝子の送達方法。
【請求項３９】  細胞が分化するのに十分な条件下で、形態発生培地中で細胞を培養することを含む、請求項１〜８のいずれかに記載の細胞を分化させる方法。
【請求項４０】  上記培地が、脂肪生成、軟骨発生、心臓発生、皮膚発生、胚性、胎児性、造血性、血管発生、筋発生、腎性、神経発生、神経痛発生、尿生殖器発生、骨発生、心膜発生、腹膜発生、胸膜発生、および内臓発生、またはストロマ発生培地である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】  上記形態発生培地が脂肪生成培地であり、かつ脂肪原性の分化を同定するために細胞をモニタリングする、請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４２】  上記形態発生培地が軟骨発生培地であり、かつ軟骨原性分化を同定するために細胞をモニタリングする、請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４３】  上記形態発生培地が胚性または胎児性培地であり、かつ胚性または胎児性の表現型を同定するために細胞をモニタリングする、請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４４】  上記形態発生培地が筋発生培地であり、かつ筋原性分化を同定するために細胞をモニタリングする、請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４５】  上記形態発生培地が骨発生培地であり、かつ骨原性分化を同定するために細胞をモニタリングする、請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４６】  上記形態発生培地がストロマ発生培地であり、かつストロマ性または造血性分化を同定するために細胞をモニタリングする、請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４７】  上記細胞がインビトロで分化する、請求項３９〜４６のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】  上記細胞がインビボで分化する、請求項３９〜４６のいずれかに記載の方法。
【請求項４９】  (a) 請求項７または８に記載の細胞を、細胞がホルモンを培地中に分泌するのに十分な条件下、培地内で培養すること、および(b)該培地から該ホルモンを単離することを含む、ホルモンを生産する方法。
【請求項５０】  請求項７または８に記載の細胞を含有する、患者内の傷のふさがりを促進するための医薬組成物であって、該細胞がホルモンを生み出すのに十分な条件下、傷の近傍に導入され、それによって該ホルモンの存在が傷のふさがりを促進するものである、医薬組成物。
【請求項５１】  請求項７または８に記載の細胞を含有する、組織内の血管新生を促進するための医薬組成物であって、該細胞がホルモンを生み出すのに十分な条件下、組織に導入され、それによって該ホルモンの存在が組織内の血管新生を促進するものである、医薬組成物。
【請求項５２】  上記組織が動物内にある、請求項５１に記載の医薬組成物。
【請求項５３】  上記組織が移植片である、請求項５１または５２に記載の医薬組成物。
【請求項５４】  上記ホルモンが、ヒト成長因子、神経成長因子、血管および内皮細胞増殖因子ならびにTGFβスーパーファミリーのメンバーからなる増殖因子の群から選択される増殖因子である、請求項４９に記載の方法、または請求項５０〜５３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５５】  細胞が培地を条件付けるのに十分な条件下、請求項１〜７のいずれかに記載の細胞に培養培地を曝露することを含む、培養培地を条件付ける方法。
【請求項５６】  上記培地が、条件付けられた後に細胞から単離される、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】  上記細胞が請求項９〜１６のいずれかに記載の集団の内部にある、請求項３６〜４９、５４〜５６のいずれかに記載の方法、または請求項５０〜５４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５８】  請求項５５または５６に記載の方法に従って生産される条件培養培地。
【請求項５９】  請求項１〜７のいずれかに記載の細胞を実質上含まない、請求項５８に記載の条件培養培地。
【請求項６０】  幹細胞が生存を維持するための条件下、請求項５８または５９に記載の条件培地中で幹細胞を維持することを含む幹細胞を培養する方法。
【請求項６１】  幹細胞の拡大した集団を形成するための幹細胞の有糸分裂の連続ラウンドを許容することをさらに含む、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】  上記培地が請求項１〜７のいずれかに記載の脂肪由来の細胞を実質上含まない、請求項６０または６１に記載の方法。
【請求項６３】  上記培地が請求項１〜７のいずれかに記載の脂肪由来の細胞を含む、請求項６０〜６２のいずれかに記載の方法。
【請求項６４】  幹細胞および脂肪由来の細胞が接触している、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】  上記幹細胞が造血幹細胞である、請求項６０〜６４のいずれかに記載の方法。
【請求項６６】  請求項１８〜２６のいずれかに記載の組成物を、該組成物内で細胞が増殖しかつ分化して動物素材を形成するのに十分な条件下で維持することを含む動物素材の製造方法。
【請求項６７】  上記素材が、脂肪、軟骨、心臓、皮膚結合組織、血液組織、筋、腎、骨、胸膜の、および内臓の組織、およびそれらの組み合わせからなる組織の群から選択される組織型を含む、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】  上記素材が１以上の組織型を含む、請求項６６または６７に記載の方法。
【請求項６９】  上記素材が少なくとも動物器官の一部分を含む、請求項６６〜６８のいずれかに記載の方法。
【請求項７０】  上記素材が少なくとも動物四肢の一部分を含む、請求項６６〜６８のいずれかに記載の方法。
【請求項７１】  上記組成物がインビトロで維持される、請求項６６〜７０のいずれかに記載の方法。
【請求項７２】  上記組成物が動物内に導入されかつインビボで維持される、請求項６６〜７０のいずれかに記載の方法。
【請求項７３】  請求項１〜７のいずれかに記載の細胞を含む移植片。
【請求項７４】  請求項８〜１３のいずれかに記載の集団を含む移植片。
【請求項７５】  請求項１４〜１６のいずれかに記載の脂肪由来の格子を含む移植片。
【請求項７６】  請求項１７〜２６のいずれかに記載の組成物を含む移植片。
【請求項７７】  脂肪組織を患者から単離する手段および幹細胞を脂肪組織の残留物から単離する手段を含む、脂肪組織から幹細胞を単離するためのキット。
【請求項７８】  幹細胞を分化させるための培地をさらに含む、請求項７７に記載のキット。
【請求項７９】  上記培地が、脂肪生成、軟骨発生、心臓発生、皮膚発生、胚性、胎児性、造血性、血管発生、筋発生、腎性、神経発生、神経痛発生、尿生殖器発生、骨発生、心膜発生、腹膜発生、胸膜発生、および内臓発生、またはストロマ発生の培地からなる培地の群から選択される、請求項７８に記載のキット。
【請求項８０】  ＤＭＥＭ＋約１０％ウシ胎仔血清中で、分化させることなく培養することができ、かつ脂肪原性、軟骨原性、心臓原性、皮膚原性、造血性、血管原性、筋原性、腎原性、神経原性、神経痛原性、尿生殖器原性、骨原性、心膜原性、腹膜原性、胸膜原性、内臓原性、およびストロマ性の発生上の表現型からなる発生上の表現型の群から選択される２以上の発生上の表現型を有する、成熟脂肪細胞を実質上含まない哺乳類の脂肪由来の幹細胞。
【請求項８１】  幹細胞を単離するための、脂肪吸引の溶出液である脂肪組織の使用。
【請求項８２】  脂肪吸引の溶出液が、ヒトから得られるものである、請求項８１に記載の使用。
【請求項８３】  脂肪吸引法により得られる溶出液から１以上の幹細胞を分離することを含む、脂肪吸引の溶出液から１以上の幹細胞を単離する方法。
【請求項８４】  幹細胞を培養することをさらに含む、請求項８３記載の方法。
【請求項８５】  幹細胞が分化することなく少なくとも１０回継代して培養される、請求項８４記載の方法。
【請求項８６】  幹細胞がＤＭＥＭ＋約５〜１５％血清中で培養される、請求項８４または８５記載の方法。
【請求項８７】  さらに幹細胞を遺伝学的に変更することを含む、請求項８３〜８６のいずれかに記載の方法。
【請求項８８】  さらに幹細胞をクローン増殖させることを含む、請求項８３〜８７のいずれかに記載の方法。
【請求項８９】  幹細胞を分化させることをさらに含む、請求項８３〜８８のいずれかに記載の方法。
【請求項９０】  上記幹細胞を１以上の前駆細胞型に分化させることをさらに含む、請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】  １以上の前駆細胞型が、前脂肪細胞、前筋細胞、および前骨細胞からなる前駆細胞型の群から選択される、請求項９０に記載の方法。
【請求項９２】  上記幹細胞が１以上の成熟細胞型へ分化する、請求項８９に記載の方法。
【請求項９３】  １以上の細胞型が、脂肪細胞、軟骨細胞、皮膚の結合組織細胞、血管細胞組織、筋細胞、骨細胞、ニューロン、神経グリア(neralglia)、尿生殖器細胞、胸膜のおよび腹膜の細胞、内臓の細胞、中胚葉腺状細胞、ならびにストロマ細胞からなる細胞型の群から選択される、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】  上記脂肪吸引溶出液がヒトから得られるものである、請求項８３〜９３のいずれかに記載の方法。
【請求項９５】  請求項８３〜９４のいずれかに記載の方法によって単離された幹細胞。