【手続補正書】
【提出日】平成18年12月11日(2006.12.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
組織工学構築物であって、以下：
胚性幹細胞；
３次元細胞支持基質であって、該幹細胞によって生じた収縮力に抵抗性である其質；および
所定の細胞系列に沿って、または特定の細胞型への幹細胞分化を促進するために選択された、少なくとも１つの成長因子、
を含む、組織工学構築物。
【請求項２】
前記幹細胞が、哺乳動物胚性幹細胞である、請求項１に記載の組織工学構築物。
【請求項３】
前記細胞が、ヒト胚性幹細胞である、請求項２に記載の組織工学構築物。
【請求項４】
前記細胞支持基質が、ポリ（乳酸）−ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）混合物を含む、請求項１に記載の組織工学構築物。
【請求項５】
前記細胞支持基質が、ポリ（Ｌ−乳酸）およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）の５０／５０混合物を含む、請求項４に記載の組織工学構築物。
【請求項６】
前記胚性幹細胞によって生じた収縮力の下で、前記基質の断面積が５０％をこえて減少しない、請求項１に記載の組織工学構築物。
【請求項７】
前記胚性幹細胞によって生じた収縮力の下で、前記基質の断面積が４０％をこえて減少しない、請求項６に記載の組織工学構築物。
【請求項８】
前記胚性幹細胞によって生じた収縮力の下で、前記基質の断面積が３０％をこえて減少しない、請求項７に記載の組織工学構築物。
【請求項９】
前記胚性幹細胞によって生じた収縮力の下で、前記基質の断面積が２０％をこえて減少しない、請求項８に記載の組織工学構築物。
【請求項１０】
前記胚性幹細胞によって生じた収縮力の下で、前記基質の断面積が１０％をこえて減少しない、請求項９に記載の組織工学構築物。
【請求項１１】
前記胚性幹細胞によって生じた収縮力の下で、前記基質の断面積が１％をこえて減少しない、請求項１０に記載の組織工学構築物。
【請求項１２】
前記細胞支持基質が、細胞接着を促進する薬剤を含むコーティングをさらに有する、請求項１に記載の組織工学構築物。
【請求項１３】
細胞接着を促進する前記薬剤が、細胞接着を促進するフィブロネクチン、インテグリン、およびオリゴヌクレオチドから選択される、請求項１２に記載の組織工学構築物。
【請求項１４】
前記細胞支持基質が生分解性、または非生物分解性である、請求項１に記載の組織工学構築物。
【請求項１５】
前記細胞支持基質が、ＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＬＧＡ、ポリ（無水物）、ポリ（ヒドロキシ酸）、ポリ（オルトエステル）、ポリ（プロピルフメレート）、ポリ（カプロラクトン）、ポリアミド、ポリアミノ酸、ポリアセタール、生分解性ポリシアノアクリレート、生分解性ポリウレタン、多糖類、ポリピロール、ポリアニリン、ポリチオフェン、ポリスチレン、ポリエステル、非生物分解性ポリウレタン、ポリ尿素、ポリ（エチレン酢酸ビニル）、ポリプロピレン、ポリメタクリレート、ポリエチレン、ポリカーボネート、ポリ（エチレンオキシド）、上記のうちの任意のコポリマー、上記のうちの任意の付加物、および上記のうちの任意のポリマーの混合物、コポリマー、および相互の付加物から選択される、請求項１４に記載の組織工学構築物。
【請求項１６】
前記細胞支持基質内に配置された生体分子、低分子、または生理活性薬剤を１つ以上さらに含む、請求項１に記載の組織工学構築物。
【請求項１７】
前記細胞支持基質の内面および外面をコートするゲルをさらに含む、請求項１に記載の組織工学構築物。
【請求項１８】
前記ゲルが、コラーゲンゲル、アルギン酸塩、寒天、および成長因子低減ＭＡＴＲＩＧＥＬＴＭから選択される、請求項１７に記載の組織工学構築物。
【請求項１９】
前記ゲルが、ラミニン、フィブリン、フィブロネクチン、プロテオグリカン、糖タンパク質、グリコサミノグリカン、走化性薬剤、または成長因子の１つ以上をさらに含む、請求項１８に記載の組織工学構築物。
【請求項２０】
前記成長因子が、サイトカイン、エイコサノイド、および分化因子から選択される、請求項１に記載の組織工学構築物。
【請求項２１】
前記成長因子が、アクチビン−Ａ（ＡＣＴ）、レチノイン酸（ＲＡ）、上皮細胞成長因子、骨形態形成タンパク質、ＴＧＦ−β、肝細胞増殖因子、血小板由来成長因子、ＴＧＦ−α、ＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩ、造血成長因子、ヘパリン結合性増殖因子、ペプチド成長因子、エリスロポエチン、インターロイキン、腫瘍壊死因子、インターフェロン、コロニー刺激因子、繊維芽細胞成長因子、神経成長因子（ＮＧＦ）、および筋肉形態発生因子（ＭＭＦ）から選択される、請求項２０に記載の組織工学構築物。
【請求項２２】
前記細胞支持基質が、粒子、管、スポンジ、球、鎖、巻かれた鎖、毛細管網、フィルム、線維、メッシュ、およびシートから選択される形状を有する、請求項１に記載の組織工学構築物。
【請求項２３】
組織工学構築物であって、以下：
胚性幹細胞；
ポリ（Ｌ−乳酸）およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）の５０／５０混合物を含む３次元細胞支持基質；ならびに、
ＴＧＦ−β、
を含む、組織工学構築物。
【請求項２４】
組織工学構築物であって、以下：
胚性幹細胞；
ポリ（Ｌ−乳酸）およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）の５０／５０混合物を含む３次元細胞支持基質；ならびに、
アクチビンＡ、ＩＧＦ、および上記の任意の組み合わせのメンバー、
を含む、組織工学構築物。
【請求項２５】
組織工学構築物であって、以下：
胚性幹細胞；
ポリ（Ｌ−乳酸）およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）の５０／５０混合物を含む３次元細胞支持基質；ならびに、
レチノイン酸、
を含む、組織工学構築物。
【請求項２６】
前記細胞支持基質が、フィブロネクチンまたは成長因子低減ＭＡＴＲＩＧＥＬＴＭの１つ以上をさらに含む、請求項２３、２４、または２５に記載の組織工学構築物。
【請求項２７】
組織発生を促進する方法であって、以下；
胚性幹細胞の集団を提供する工程；
ポリ（Ｌ−乳酸）およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）の５０／５０混合物を含む細胞支持基質上に胚性幹細胞を播種する工程；ならびに、
ＴＧＦ−βに胚性幹細胞を曝露する工程を包含し、
ここで、該細胞は、軟骨組織を産生する、方法。
【請求項２８】
組織発生を促進する方法であって、以下：
胚性幹細胞の集団を提供する工程；
ポリ（Ｌ−乳酸）およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）の５０／５０混合物を含む細胞支持基質上に胚性幹細胞を播種する工程；ならびに、
該胚性幹細胞を１つ以上のアクチビンＡおよびＩＧＦに曝露する工程を包含し、、
ここで、該細胞は、α胎児性タンパク質およびアルブミンを産生する、方法。
【請求項２９】
組織発生を促進する方法であって、以下：
胚性幹細胞の集団を提供する工程；
ポリ（Ｌ−乳酸）およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）の５０／５０混合物を含む細胞支持基質上に胚性幹細胞を播種する工程；ならびに、
該胚性幹細胞をレチノイン酸に曝露する工程を包含し、
ここで、該細胞は、神経組織構造を発生する、方法。
【請求項３０】
前記細胞支持基質が、１つ以上のフィブロネクチンまたは成長因子低減ＭＡＴＲＩＧＥＬＴＭをさらに含む、請求項２７、２８または２９に記載の方法。
【請求項３１】
曝露工程は、２週間インビトロで播種された細胞支持基質を培養する工程を包含し、前記方法は、播種された細胞支持基質を、動物に移植する工程をさらに包含する、請求項２７、２８または２９に記載の方法。
【請求項３２】
組織発生を促進する方法であって、以下：
胚性幹細胞の集団を提供する工程；
細胞支持基質上に該胚性幹細胞を播種する工程；
所定時間の間、成長因子の存在下で、該播種された細胞支持基質を培養する工程、および
動物に前記培養細胞支持基質を移植する工程、
を包含する、方法。
【請求項３３】
前記細胞支持基質が、ＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＬＧＡ、ポリ（無水物）、ポリ（ヒドロキシ酸）、ポリ（オルトエステル）、ポリ（プロピルフメレート）、ポリ（カプロラクトン）、ポリアミド、ポリアミノ酸、ポリアセタール、生分解性ポリシアノアクリレート、生分解性ポリウレタン、多糖類、ポリピロール、ポリアニリン、ポリチオフェン、ポリスチレン、ポリエステル、非生物分解性ポリウレタン、ポリ尿素、ポリ（エチレン酢酸ビニル）、ポリプロピレン、ポリメタクリレート、ポリエチレン、ポリカーボネート、ポリ（エチレンオキシド）、上記のうちの任意のコポリマー、上記のうちの任意の付加物、および上記のうちの任意のポリマーの混合物、コポリマー、および相互の付加物から選択される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記３次元細胞支持基質が、ポリ（Ｌ−乳酸）およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）の５０／５０混合物を含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
細胞接着を促進する薬剤で前記細胞支持基質をコーティングする工程をさらに包含する、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
細胞接着を促進する薬剤が、細胞接着を促進するフィブロネクチン、インテグリン、およびオリゴヌクレオチドから選択される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
請求項３２に記載の方法であって、ゲル内に前記胚性幹細胞を配置する工程をさらに包含し、前記細胞支持基質上に該胚性幹細胞を播種する工程が、該ゲルを該細胞支持基質の内面および外面上に配置する工程を包含する、方法。
【請求項３８】
前記ゲルが、コラーゲンゲル、アルギン酸塩、寒天、および成長因子低減ＭＡＴＲＩＧＥＬＴＭから選択される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記ゲルが、１つ以上のラミニン、フィブリン、フィブロネクチン、プロテオグリカン、糖タンパク質、グリコサミノグリカン、走化性薬剤、および成長因子をさらに含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項４０】
前記成長因子が、アクチビン−Ａ（ＡＣＴ）、レチノイン酸（ＲＡ）、上皮細胞成長因子、骨形態形成タンパク質、ＴＧＦ−β、肝細胞増殖因子、血小板由来成長因子、ＴＧＦ−α、ＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩ、造血成長因子、ヘパリン結合性増殖因子、ペプチド成長因子、エリスロポエチン、インターロイキン、腫瘍壊死因子、インターフェロン、コロニー刺激因子、繊維芽細胞成長因子、神経成長因子（ＮＧＦ）、および筋肉形態発生因子（ＭＭＦ）から選択される、請求項３２に記載の方法。
【請求項４１】
前記所定の期間が、２週間である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４２】
培養が、無血清培地中で行なわれる、請求項３２に記載の方法。