【手続補正書】
【提出日】平成19年1月5日(2007.1.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  下記を含んでなる方法に従って同定される、テネイシンＣに対する核酸リガンド：
（ａ）核酸の候補混合物をテネイシンＣと接触させること、これは、その候補混合物に比べて、テネイシンＣとの親和性がより高い核酸を、その候補混合物の残りのものから分画するためであり；
（ｂ）その親和性のより高い核酸を、候補混合物の残りのものから分画すること；
（ｃ）テネイシンＣの核酸リガンドを同定するために、テネイシンＣに対する結合親和性及び結合特異性が比較的により高い核酸が濃縮された核酸混合物を得るために、その親和性のより高い核酸を増幅すること。
【請求項２】  前記の核酸の候補混合物が一本鎖の核酸を含んでなる、請求項１の核酸リガンド。
【請求項３】  前記の一本鎖の核酸がリボ核酸である、請求項２の核酸リガンド。
【請求項４】  前記の核酸の候補混合物が、2'-F（２’−フルオロ）修飾されたリボ核酸を含んでなる、請求項３の核酸リガンド。
【請求項５】  テネイシンＣに対する、精製且つ単離された天然に存在しない核酸リガンド。
【請求項６】  前記核酸リガンドが一本鎖である、請求項５の、精製且つ単離された天然に存在しない核酸リガンド。
【請求項７】  前記核酸リガンドがRNA である、請求項６の、精製且つ単離された天然に存在しない核酸リガンド。
【請求項８】  前記リガンドが２’−フルオロ（2'-F）修飾されたヌクレオチドを含んでなる、請求項７の、精製且つ単離された天然に存在しないＲＮＡリガンド。
【請求項９】  前記リガンドが、配列番号４〜６５に示した配列からなる群から選択される、請求項８の、精製且つ単離された天然に存在しないＲＮＡリガンド。
【請求項１０】  下記を含んでなる、テネイシンＣに対する核酸リガンドを同定する方法：
（ａ）核酸の候補混合物をテネイシンＣと接触させること、これは、その候補混合物に比べて、テネイシンＣとの親和性がより高い核酸を、その候補混合物の残りのものから分画するためであり；
（ｂ）その親和性のより高い核酸を、候補混合物の残りのものから分画すること；
（ｃ）テネイシンＣの核酸リガンドを同定するために、テネイシンＣに対する結合親和性及び結合特異性が比較的により高い核酸が濃縮された核酸混合物を得るために、その親和性のより高い核酸を増幅すること。
【請求項１１】  下記を更に含んでなる、請求項10の方法：
（ｄ）過程ａ）、ｂ）及びｃ）を繰り返すこと。
【請求項１２】  前記の核酸の候補混合物が一本鎖の核酸を含んでなる、請求項10の方法。
【請求項１３】  前記の一本鎖の核酸がリボ核酸である、請求項12の方法。
【請求項１４】  前記の核酸が2'-F（２’−フルオロ）修飾されたリボ核酸である、請求項13の方法。
【請求項１５】  テネイシンＣの核酸リガンド及びマーカーを含んでなる、インビボの診断に用いるための複合体。
【請求項１６】  前記のテネイシンＣの核酸リガンドが、下記：
（ａ）核酸の候補混合物をテネイシンＣと接触させること、これは、その候補混合物に比べて、テネイシンＣとの親和性がより高い核酸を、その候補混合物の残りのものから分画するためであり；
（ｂ）その親和性のより高い核酸を、候補混合物の残りのものから分画すること；
（ｃ）テネイシンＣの核酸リガンドを同定するために、テネイシンＣに対する結合親和性及び結合特異性が比較的により高い核酸が濃縮された核酸混合物を得るために、その親和性のより高い核酸を増幅すること
を含んでなる方法により同定されるものである、請求項15の複合体。
【請求項１７】  前記の核酸の候補混合物が一本鎖の核酸を含んでなる、請求項16の複合体。
【請求項１８】  前記の一本鎖の核酸がリボ核酸である、請求項17の複合体。
【請求項１９】  前記の核酸の候補混合物が2'-F（２’−フルオロ）修飾されたリボ核酸を含んでなる、請求項18の複合体。
【請求項２０】  前記マーカーが、放射性核種、フルオロフォア、磁気化合物、及びビオチンからなる群から選択される、請求項15の複合体。
【請求項２１】  前記の放射性核種が、テクネチウム−99m（Tc-99m)、Re-188、Cu-64、Cu-67、F-18、125I、131I、111In、32P、及び186Re からなる群から選択される、請求項20の複合体。
【請求項２２】  前記マーカーがテクネチウム−99m である、請求項21の複合体。
【請求項２３】  更にリンカーを含んでなる、請求項22の複合体。
【請求項２４】  前記リンカーが、下記構造：
【化１】
2003505111.tif 000001
を有する、請求項23の複合体。
【請求項２５】  前記複合体が
【化２】
2003505111.tif 000002
である、ただし全てのＡが2'-OMeとして修飾され、指示したもの以外の全てのＧが2'-OMeとして修飾され、全てのＣが2'-Fとして修飾され、そして全てのＵが2'-Fとして修飾されている、請求項24の複合体。
【請求項２６】  下記を含んでなる、テネイシンＣの核酸リガンド及びマーカーを含んでなる複合体を調製する方法：
（ａ）核酸の候補混合物をテネイシンＣと接触させること、これは、その候補混合物に比べて、テネイシンＣとの親和性がより高い核酸を、その候補混合物の残りのものから分画するためであり；
（ｂ）その親和性のより高い核酸を、候補混合物の残りのものから分画すること；
（ｃ）テネイシンＣに対する結合親和性及び結合特異性が比較的により高い核酸が濃縮された核酸混合物を得るために、その親和性のより高い核酸を増幅すること；及び
（ｄ）同定されたテネイシンＣの核酸リガンドをマーカーに共有結合すること。
【請求項２７】  前記マーカーが、放射性核種、フルオロフォア、磁気化合物、及びビオチンからなる群から選択される、請求項26の方法。
【請求項２８】  前記の放射性核種が、Tc-99m、Re-188、Cu-64、Cu-67、F-18、125I、131I、111In、32P、及び186Re からなる群から選択される、請求項27の方法。
【請求項２９】  前記マーカーがTc-99mである、請求項28の方法。
【請求項３０】  更にリンカーを含んでなる、請求項29の方法。
【請求項３１】  前記リンカーが、下記構造：
【化３】
2003505111.tif 000003
を有する、請求項30の方法。
【請求項３２】  前記複合体が
【化４】
2003505111.tif 000004
である、ただし全てのＡが2'-OMeとして修飾され、指示したもの以外の全てのＧが2'-OMeとして修飾され、全てのＣが2'-Fとして修飾され、そして全てのＵが2'-Fとして修飾されている、請求項31の方法。
【請求項３３】  テネイシンＣを発現している疾患の存在を、その疾患を有しうる生物学的組織において検出するための、下記：
（ａ）核酸の候補混合物から、テネイシンＣのリガンドである核酸リガンドを同定すること、ただし、
（ｉ）核酸の候補混合物をテネイシンＣと接触させること、これは、その候補混合物に比べて、テネイシンＣとの親和性がより高い核酸を、その候補混合物の残りのものから分画するためであり；
（ii）その親和性のより高い核酸を、候補混合物の残りのものから分画すること；
（iii)テネイシンＣに対する結合親和性及び結合特異性が比較的により高い核酸の混合物を得るために、その親和性のより高い核酸を増幅すること、
を含んでなる方法により、テネイシンＣの核酸リガンドを同定すること；及び
（ｂ）マーカーと核酸リガンドとの複合体を形成するために、過程(iii）で同定した核酸リガンドに、インビボ診断に用いることのできるマーカーを付着させること；
（ｃ）腫瘍を有しうる組織を、そのマーカー−核酸リガンド複合体に露出すること；
（ｄ）その組織において、そのマーカー−核酸リガンド複合体の存在を検出すること
を含んでなる方法であって、
当該検出によって得られる結果が、テネイシンＣを発現する疾患を同定するために用いられる、前記方法。
【請求項３４】  前記のマーカー−核酸リガンド複合体が更にリンカーを含んでなる、請求項33の方法。
【請求項３５】  前記マーカーが、放射性核種、フルオロフォア、磁気化合物、及びビオチンからなる群から選択される、請求項34の方法。
【請求項３６】  前記の放射性核種が、Tc-99m、Re-188、Cu-64、Cu-67、F-18、125I、131I、111In、32P、及び186Re からなる群から選択される、請求項35の方法。
【請求項３７】  前記マーカーがテクネチウム−99m である、請求項36の方法。
【請求項３８】  前記リンカーが、
【化５】
2003505111.tif 000005
である、請求項37の方法。
【請求項３９】  前記マーカー−核酸リガンド複合体が
【化６】
2003505111.tif 000006
である、ただし全てのＡが2'-OMeとして修飾され、指示したもの以外の全てのＧが2'-OMeとして修飾され、全てのＣが2'-Fとして修飾され、そして全てのＵが2'-Fとして修飾されている、請求項38の方法。
【請求項４０】  前記複合体に、治療剤又は診断剤を付着することを更に含んでなる、請求項33の方法。
【請求項４１】  前記疾患が、ガン、乾癬及びアテローム性動脈硬化症からなる群から選択される、請求項33の方法。
【請求項４２】  前記疾患がガンである、請求項41の方法。
【請求項４３】  テネイシンＣを発現している疾患を治療するための、テネイシンＣの核酸リガンドが治療剤に共有結合された複合体であって、患者に投与される、前記複合体。