【手続補正書】
【提出日】平成19年8月17日(2007.8.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００２】
発明の背景
吸入性ＮＯは、上昇肺血圧および低酸素状態と関係する肺障害を処置するために使用される。本処置方法は、ヘモグロビンによる吸入性ＮＯの急速なトラッピングのために、潅流および局所効果によく適合した分布を提供する。さらに、本処置方法は、ガスの投与に慣れている麻酔医または救命救急内科医によって容易に実施され得る。副作用は、ＮＯ２または他の毒性ＮＯＸを生成するＮＯの酸素または反応性の酸素種類との反応を含み、その毒性は、炎症、気道過反応性、出血、臨床的改善の遅延、腎臓障害または死、および、例えば、メトヘモグロビンの形成によりその酸素送達機能を妨害するオキシヘモグロビンとの反応によって顕在化される。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
第１の態様である、ここでのある態様は、低酸素状態および／または肺の平滑筋収縮および／またはそのような障害を有する患者における肺の炎症と関係する肺障害を処置するための方法であり、当該方法は、当該患者の肺にガスとして治療有効量の化合物であって、ＮＯ基を有し、そして低酸素状態軽減効果および平滑筋収縮軽減効果および／または抗炎症性または炎症防御効果を有しており、当該ＮＯ基が当該化合物に結合され、したがってそれは、体温温度において酸素または反応性酸素種の存在下でＮＯ２またはＮＯＸを形成せず、または全身血圧への妥協（compromise）がない化合物を送達することを含む。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
ここで使用されている、用語「ＮＯＸ」は、ＮＯ、Ｎ２Ｏ３、Ｎ２Ｏ４、ＯＯＮＯ−、ＯＯＮＯおよびそれらの相互作用またはＮＯまたはＮＯ２とそれらの反応の任意の産物を意味する。
ここで使用されるように、用語「反応性酸素種」は、一重項酸素、スーパーオキシド、過酸化水素またはヒドロキシルラジカルである。
ここで使用されている、用語「低酸素状態」は、正常に比較した低血液酸素含量、すなわち室空気を呼吸しているヒトの動脈血における９５％より小さいヘモグロビン飽和および９０より小さいＰａＯ２を意味する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
図面の簡単な説明
図１は、３用量の亜硝酸エチルガスについての肺動脈圧力のグラフを示し、そして実施例Ｉの結果を示す。
図２は、３用量の亜硝酸エチルガスについての肺血管抵抗性のグラフを示し、そして実施例Ｉの結果を示す。
図３は、３用量の亜硝酸エチルガスについての肺動脈流のグラフを示し、そして実施例Ｉの結果を示す。
図４は、２用量の亜硝酸エチルガスについての心拍出力のグラフを示し、そして実施例Ｉの結果を示す。
図５は、３用量の亜硝酸エチルガスについての平均血圧のグラフを示し、そして実施例Ｉの結果を示す。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
ＡＲＤＳは血液中の低酸素含量と関係するＸ線診断可能病態（radiographic manifestation）であり、そして典型的にはまた上昇した肺圧を示す。酸素遊離ラジカル損傷が病理生理学的に寄与する。遊離のＮＯは、酸素遊離ラジカルと反応することによって損傷を悪化させ、反応の毒性産物（すなわちそれらは組織を損傷する）を形成するが、本発明で投与される化合物は酸素遊離ラジカルと反応しないので、この効果を有しない。吸入性ＮＯは罹病率および致死率の増加を来すことが示されている。この障害は低酸素状態と関係し、そしてそれは肺の平滑筋収縮と関係することが有り得る。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
さらに、亜硝酸エチルの投与は疾病において心拍出力の低下を阻止する。これはＮＯの投与では起こらない。
さらに、亜硝酸エチルの投与はヘモグロビンのシステインに結合するＮＯの濃度を上昇させる点でＮＯの投与よりもより優れている。
述べられたメカニズムに縛られないが、ニトロソグルタチオン負荷（それは気道内液中のニトロソグルタチオンの増加である）は、投与が停止された後のより低いレベルへのリバウンドがない酸素化、そして心拍出力の低下の阻止の原因であると考えられる。亜硝酸エチルの投与はグルタチオン負荷を生じ、一方ＮＯの投与はこれを生じない。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４４】
先に指摘したように、ガス形態の治療有効量のＮＯ含有化合物を、心臓障害を処置するためのここでの方法において投与する。これはアンギナに対しては胸部疼痛軽減有効量、心筋梗塞に対しては心不全解消有効量、心不全に対しては肺圧力減少および末梢血管抵抗減少有効量および高血圧に対しては血圧低下有効量である。もっとも有効な投与量は患者ごとに変化し、したがって各病例に複数の投与量を試み、それから最良の結果が達成された投与量を利用することが好ましい。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
先に指摘したように、ガス形態の治療有効量のＮＯ含有化合物を、血液障害を処置するためのここでの方法において投与する。これは赤血球細胞形状の復帰、および／または鎌状細胞疾病および凝固溶解について赤血球細胞機能復帰有効量、および／またはクロッティング障害について凝固形成防止量である。もっとも有効な投与量は患者ごとに変化し、したがって各病例に複数の投与量を試み、それから最良の結果が達成された投与量を利用することが好ましい。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６７】
投与は好ましくは輸液によって実施される。
我々は、ここで体の外部においてニトロシル化されたヘモグロビンで負荷された赤血球細胞であるここでの態様を示す。これらは第４態様の第３事例において記載したように容易に作成される。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７０】
気管切開手術の後、ハロタンを中止し、補助性ベンチレーションを開始し、そして４５分ごとに臭化パンクロニウム（０．１ｍｇ／ｋｇ）を使用して麻痺を取得した。さらにフェンタニール（５−１０μｇ／ｋｇ）の用量を必要に応じてボーラス投与した。左開鏡術によって、６−または８−ｍｍ超音波フロープローブ（Transonic Inc., Rochester,New York）を、心拍出力の測定のために肺動脈の周りに位置させ、そして４−ないし６−ｍｍプローブを動脈管の周りに位置させた。肺動脈圧力（ＰＡＰ）の継続的測定のために２２−ゲージカテーテルを肺動脈の根に、財布糸縫合（purse string suture）を経由して挿入した。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８５】
実施例ＩＩＩ
６０歳の男性癌患者は、化学療法後、ＡＲＤＳと一致したエックス線撮影的変化を発生する。この患者のＰａＯ２は１００％  酸素であるにもかかわらず５０ｍｍＨｇに低下し、そして右心カテーテル法によれば正常の左心室拡張終期圧力を現す。この患者に４０ｐｐｍ  吸入性亜硝酸エチルを投与する。ＰａＯ２は７０ｍｍＨｇに増加する。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１５】
実施例ＸＶＩ
赤血球細胞を、３７℃、１５分間で、１：５０の亜硝酸エチルのヘモグロビンに対するモル率で、種々の濃度の亜硝酸エチルを含有する亜硝酸エチルのアルコール溶液とインキュベーションする。結果は平衡状態でニトロシル化されたヘモグロビンおよびニトロシル化されたグルタチオンで負荷された赤血球細胞であり、そして約１０μＭ  Ｓ−ニトロシル化されたヘモグロビンを含んでいる。
得られた赤血球細胞は、例えば、鎌状細胞疾病または虚血性障害、例えば、アンギナを処置するために有用である。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１６】
実施例ＸＶＩＩ
実施例ＸＩＶにおけるような新生仔ブタに吸入性ガス状薬物を投与する。５分後、気道内液をサンプリングし、そしてニトロソグルタチオン（ＧＳＮＯ）について、Gaston, B., et al., PNAS, Vol. 90, 10957-10961(1993)に記載された方法によって検定する。スクリーニングは、亜硝酸エチルおよび亜硝酸アミル（しかしＮＯではない）が気道内液におけるＧＳＮＯを、ベースラインと比較して５０％より大きく増加させることを示す。
別形
上記の変形は当業者にとって自明である。したがって本発明の範囲は請求の範囲によって定義される。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】図面の簡単な説明
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図面の簡単な説明】
【図１】  図１は、３用量の亜硝酸エチルガスについての肺動脈圧力のグラフを示し、そして実施例Ｉの結果を示す。
【図２】  図２は、３用量の亜硝酸エチルガスについての肺血管抵抗性のグラフを示し、そして実施例Ｉの結果を示す。
【図３】  図３は、３用量の亜硝酸エチルガスについての肺動脈流のグラフを示し、そして実施例Ｉの結果を示す。
【図４】  図４は、２用量の亜硝酸エチルガスについての心拍出力のグラフを示し、そして実施例Ｉの結果を示す。
【図５】  図５は、３用量の亜硝酸エチルガスについての平均血圧のグラフを示し、そして実施例Ｉの結果を示す。
【図６】  図６は、３用量の亜硝酸エチルガスについての心拍数（heart rate）のグラフを示し、そして実施例Ｉの結果を示す。
【図７】  図７は、７５ｐｐｍでの実施例Ｉのベンチレーションシステムを経由して送達された亜硝酸エチルガスにおけるガスクロマトグラフィー／マススペクトル分析結果を示す。
【図８】  図８は、無処置での、亜硝酸エチル（ＥｔOＮＯ）での処置での、ポストＥｔＯＮＯ処置、ＮＯでの処置での、そしてポストＮＯ処置のＰａＯ２（すなわちＰａＯ２）レベルのグラフを示し、そして実施例ＸＩＩの結果を示す。
【図９】  図９は、無処置での、亜硝酸エチル（ＥｔＯＮＯ）での処置での、ポストＥｔＯＮＯ処置、ＮＯでの処置での、そしてポストＮＯ処置の心拍出力の変化のグラフを示し、そして実施例ＸＩＩの結果を示す。
【図１０】  図１０は、吸入性ＮＯに対する吸入性ＥｔＮＯ（亜硝酸エチル）のｐｐｍでの気道ＳＮＯ（ニトロソグルタチオン）における増加倍数のグラフを示し、そして実施例ＸＩＶの結果を示す。
【図１１】  図１１Ａ、１１Ｂ、１１Ｃおよび１１Ｄは、時間に対する張力（tension）のグラフであり、そして実施例ＸＶの結果を示す。