【手続補正書】
【提出日】平成19年7月31日(2007.7.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
［定義］
「容器」−カートン、カン、バイアル、チューブ、ボトル、またはジャーなど、その中で物質が保存または担持される、容器(貯蔵所)。
「心筋細胞様の」−心筋細胞に変換され得る細胞、または心筋細胞の様に機能できる細胞若しくは構成成分。
「ポリマー形成性」−単独または組合せてゼラチン様材料を形成できる、いずれかの薬剤または薬剤類。
「送達デバイス」−溶液、粉末、濃縮物、単一の試薬および／または複数の試薬を堆積させ得る、装置またはシステム。
「繊維芽細胞促進(pro-fibroblastic)」剤−繊維芽細胞の維持、繊維芽細胞の増殖の誘導、および／または繊維芽細胞の補充を行うことのできる１又は２以上の化合物。
「コンプライアンス」−血管または心腔が、圧力の変化に応答してその容積を変化させる能力は、重要な生理学的意味を有する。物理的に言えば、容積の変化（ΔＶ）と圧力の変化（ΔＰ）との間の関係がコンプライアンス（Ｃ）と称され、このときＣはΔＶ／ΔＰ（Ｃ＝ΔＶ／ΔＰ）である。従って、コンプライアンスは、与えられた圧力の変化が容積の変化を生じる容易さに関係する。生物組織において、ΔＶとΔＰとの間の関係は直線的ではない。コンプライアンスは、容積および圧力を関連付ける直線の傾斜であり、これは高い容積および圧力では減少する。これを考察するための別のやり方は、心腔または血管壁の「剛性」が、高い容積および圧力では増大するということである。コンプライアンスの変化は、心腔および血管における重要な生理学的作用を有する。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
上で述べた技術を使用して、造影剤補助(contrast-assisted)蛍光スコープのような画像診断療法が加えられてよく、これは、心臓病専門医が、心腔内におけるカテーテル先端または他の器具の配置を観察することを可能にする。造影剤補助蛍光スコープは、心腔の中に注射され得る造影剤を利用して、当該エリアがスコープによる検査下で観察されるので、当該領域は、トポグラフィーが更に容易に観察され、更に容易に治療され得る（米国特許第６，３８５，４７６号、および同第６，３６８，２８５号）。適切な撮像技術には、超音波撮像、光学的撮像、および磁気共鳴撮像、例えばエコー、ＥＣＧ、ＳＰＥＣＴ、ＭＲＩ、血管造影図が含まれるが、これらに限定されない。従って、心臓のマッピングは、以下の態様において提案する技術と組み合わせて使用し得る一つの技術である。一つの態様においては、エコー血管造影法が行われて、梗塞領域の存在および位置を確認してもよい。もう一つの態様においては、ＣＡＴ・Ｓｃａｎが行われて、ＭＩが起きたことおよび該梗塞領域の位置を確認してもよい。もう一つの態様においては、ＥＫＧが行なわれて、梗塞の発生および位置を特定してもよい。
もう一つの態様において、当該方法は、徐放性組成物の形態の治療剤を導入することを含んでよい。一以上の薬剤を徐放する好ましい期間は、１〜１２週間、好ましくは２〜８週間の期間である。徐放性薬剤を局部送達するための方法には、経皮デバイス、例えば心室内（冠血管）デバイスまたは血管内（冠血管および末梢血管）デバイスが含まれるが、これらに限定されない。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
オプソニン作用を阻害する第二の方法は、生体模倣的アプローチである。例えば、「糖衣」として知られている細胞膜の外側領域は、他の分子および細胞の非特異的付着を妨げるグリコシル化された分子が多数を占める。表面活性剤ポリマーは、可撓性ポリ（ビニルアミン）骨格と、該ポリマー骨格を基体に平行に横たえるように拘束するランダムなデキストランおよびアルカノイル（ヘキサノイルまたはラウロイル）側鎖からなっている。水和したデキストラン側鎖は水相の中に突出し、糖衣様の単層コーティングを形成するが、これは外来体の表面上への血漿タンパク質の沈着を抑制する。糖衣を模倣するために、糖衣様分子は、キャリア（たとえばナノ粒子またはミクロ粒子）をコーティングすることができ、またはキャリアを構成するポリマーの中にブレンドされて、治療剤をオプソニン化に対して抵抗性にすることができる。別の生体模倣的アプローチは、ホスホリルコリン又はホスファチジルコリンの合成疑似体で、キャリアをコーティングし、またはキャリアを構成するポリマー中にブレンドすることである。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
図７は、多成分系をフローチャートで示している。心筋梗塞の位置が突止められる(７２０)。次いで、先に説明した方法による最小侵襲法および／またはカテーテル送達を介して、当該成分が当該領域に送達される。アシロイル官能基（図６の成分２）のような電子不足の二重結合の存在下に、チオール官能基（図６の成分３）を添加すると、マイケル付加を起こすことが以前に開示された。塩基性条件下においてチオール官能基は非常に求核性であり、アクリロイル官能基をもった二重結合を迅速に（＜１０秒）形成する（図１０参照）。図６に示すように、梗塞の拡大および／または嵩高くなるのを防止して、心不全を導き得る心臓のリモデリングを防止するために、ゲルが形成されてよい。図７の７３０は、生分解性ゲルを含む第一の成分を示しており、また７４０は、組織の酸素添加を高める第二の成分としてフッ化化合物を伴ったゲルを示している。該ゲルは、三成分系によって形成される。第一の成分は、多官能性のスペーサ基を備えた、先に説明した生体適合性ポリマーを含んでいる(７３０)。第二の成分(７４０)は、二官能性または多官能性の過フッ化分子(８１０)を含んでいる。第三の成分(７５０)は、スペーサ基の一方の側には反応性官能基を備え、他方の末端には先に説明したペプチド配列のような細胞結合性ペプチド配列を備えたヘテロ官能性分子を含んでいる。ペプチド配列の一例としては、ＲＧＤ配列が挙げられる。図８は、図７の三成分系の一つの化合物(８３０)を形成するための、チオール化合物(８００)とアシロイル官能基(８２０)との反応を概略的な様式で示している。この三性分系は、薬剤の投与に先立って心臓のマッピングにより導かれ得るような、図６の方法について説明したのと同様の最小侵襲法により、梗塞領域に導入されてよい。この三成分系の例については、実施例の節において述べる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
もう一つの態様において、反応性の単一成分にはｐＨ感受性の成分が含まれる。該成分は、それが充分にプロトン付加されても液体状態のまま残り、ゲル化を防止する。もう一つの態様では、当該成分は、最初は低いｐＨ（例えばｐＨ３．０）に維持され、後で治療エリアに導入されて、環境の生理学的ｐＨに起因して当該成分のゲル化をもたらす。この一つの例が実施例３において議論される。幾つかの可能なカチオン材料は、低いｐＨにおいてプロトン付加されたままである以下のカチオン材料、即ち、ポリ（アリルアミン）、ＤＥＡＥ−デキストラン、エトキシ化ポリ（エチレンイミン）、およびポリ（リジン）のうちの一つであってよいが、これらに限定されない。他の例は、以下のアニオン材料、例えば、硫酸デキストラン、カルボキシメチルデキストラン、カルボキシメチルセルロース、ポリスチレンスルホナート、および硫酸コンドロイチンのうちの一つであってよいが、これらに限定されない。
加えて、これらミクロ粒子成分は何れも、１以上の造影剤および／または当該領域の治療のための適切な薬剤を伴ってよい。該造影剤または治療剤は、梗塞領域への導入に先立って、構造成分に結合されるか、またはその中に溶解される。補強成分に随伴してよいこれらの薬剤には、血管新生剤、ＡＣＥ阻害剤、アンジオテンシン受容体ブロッカー、ＳＲＣＡ（筋小胞体カルシウムポンプ）ポンプ増加剤、ホスホランバン阻害剤および抗アポトーシス薬が含まれるが、これらに限定されない。これらの薬剤は、小分子、ペプチド、タンパク質または遺伝子産物の形態であってよい。小分子は、補強成分の組織への接着を改善するために、場合により、溶液の成分に結合されても、溶液中に分散されても、または溶液中に溶解されてもよい。一つの態様は、接着過程を媒介する保存された領域を有するペプチドと結合させることである。ペプチドの保存された領域は、タンパク質ファミリーにおいて経時的に保存されてきた、特別な同定の機能を有するアミノ酸配列であってよい。もう一つの態様は、補強成分の存在下において、保存されたＲＧＤ（アルギニン（Ｒ）−グリシン（Ｇ）−アスパラギン（Ｄ））モチーフと結合された特定のペプチドの使用を含んでいる。更なる態様において、ＲＧＤモチーフペプチドは、フォンビルブラント因子、オステオポンチン、フィブロネクチン、フィブリノーゲン、ビトロネクチン、ラミニンおよびコラーゲンを含んでよい。一つの態様は、梗塞領域のリモデリングの間の薄化を最小限にしようとするものである。従って、ＭＩ後の梗塞領域を嵩高くし且つ補強することは、心室の形状を保存し得るであろう。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４９】
２．二成分系：  図１２の１２４０は、梗塞領域に適用する構造的補強ゲルを形成のための二成分系を示している。最初に、先に述べた撮像方法によって、梗塞領域が特定される(１３００)。図１３の１３３０／１３４０／１３５０／１３６０／１３７０／１３８０／１３９０は、梗塞領域において構造的補強ゲルを形成する図１３の二成分系(１３２０)を更に説明するフローチャートを示している。一つの例(１３３０)において、二つの成分は、生理学的ｐＨ付近で梗塞ゾーンにおいて混合される。生理学的ｐＨ付近において、成分１は主としてアニオン溶液であり、第二の成分は主としてカチオン溶液である。二つの成分が梗塞ゾーンにおいて一緒に混合されると、迅速且つ不可逆的にゲルが形成される。一つの態様において、二成分系は、図１３の１３３０に示すように、第一の成分としてのポリ（アクリル酸）および第二の成分としてのポリ（アリルアミン）を含んでよい。もう一つの態様において、二成分系は、二重注射ルーメンを備えたカテーテルによって送達され得る第一の成分としてポリ（アクリル酸）および第二の成分としてポリ（アリルアミン）を含んでよい。梗塞領域において構造的に補強するゲルを形成する他の二成分系は、第一の成分としてエラスチンおよび第二の成分としてリジルオキシダーゼ(１３４０)；第一の成分としてアルギン酸ナトリウムおよび第二の成分として塩化カルシウムの水性溶液(１３５０)；第一の成分としてトロポエラスチンおよびコラーゲン、並びに第二の成分として架橋剤リジルデヒドロゲナーゼを含んでもよく、またこの組合せに後でラミニン(１３９５)を加えてもよい。各成分の組成は、最終的な架橋系の機械的性質に依存するであろう。架橋するために使用されるグルタルアルデヒドおよび／または光活性化可能な架橋剤（例えば青色色素）のような、リジルデヒドロゲナーゼを置換でき又はその架橋能力を補完できる他の物質が使用されてもよいであろう。加えて、これらの二成分系は、ＡＶＩＴＥＮＥTM（ミクロフィブリルコラーゲン止血剤）、ＳＵＧＩＣＥＬ（吸収性止血剤、Johnson & Johnson）、ＧＥＬＦＯＡＭTM、ＦＬＯＳＥＡＬTM（Baxter, matrix hemostatic sealant with a granular physicalstructure and thrombin）、ＦＯＣＡＬ  ＳＥＡＬTM（Focal, Inc.）またはＦＩＢＲＩＮ  ＳＥＡＬTMのような、他の個々の系と組み合わされてもよい。ＦＬＯＳＥＡＬTMは、注射可能なコラーゲン由来の粒子および局所トロンビンを構成するゲルである。それは、血管シーリングを含む用途について認可されている。他の幾つかの可能なカチオン材料は、低いｐＨにおいてプロトン付加されたまま残る以下のカチオン材料、即ち、ポリ（アリルアミン）、ＤＥＡＥ−デキストラン、エトキシ化ポリ（エチレンイミン）、およびポリ（リジン）のうちの一つであってよいが、これらに限定されない。他の例は、以下のアニオン材料、例えば硫酸デキストラン、カルボキシメチルデキストラン、カルボキシメチルセルロース、ポリスチレンスルホナート、および硫酸コンドロイチンのうちの一つであってよいが、これらに限定されない。好ましい態様において、第一の材料がＤＥＡＥデキストランで、第二の材料がポリスチレンスルホナートであり得る。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
図１３の１３７０は、もう一つの二成分系、ＤＯＰＡ（３，４−ジヒドロキシフェニル−Ｌ−アラニン）、即ち、伝導性条件(conductive condition)においてヒドロゲルを形成できる、筋肉接着性タンパク質の主要な原因成分の使用を示している。詳細に言えば、酸化プロセスがＤＯＰＡをｏ−キノンに変換した後に、スターブロックとして知られるＤＯＰＡ−ブロック−ＰＥＧがin situで架橋を受け、ヒドロゲルを形成する。この過程はin situで安定なヒドロゲルを形成する。図１３の１３８０は、構造的補強のために梗塞領域に注射される、アクリレートマクロマーおよびジチオール溶液の使用を含んでいる。これらの成分は、梗塞部位で混合されるときに架橋反応を受けて、ヒドロゲルの形成に導く。特定の態様は、先に述べた二重ルーメン針システムを介して梗塞ゾーンに導入される、第一の成分としてのＰＥＧトリアクリレートおよび第二の成分としてのＰＥＧチオールの使用を包含するものである。図１３の１３９０では、糊状成分系が用いられてよい。一つの態様は、梗塞ゾーンに導入され得る構造的補強剤としてのＧＲＦ糊の使用を含んでおり、これはゼラチン、レゾルシノールおよびホルムアルデヒド（ＧＲＦ）からなっている。これを達成するために、梗塞ゾーンにおいて成分の混合時に架橋を誘導するために、二成分系が使用されてよい。他の態様では、ＧＲＦと共に、ポリグルタミン酸、ポリリジンおよびＷＳＣ（水溶性カルボジイミド）からなる群より選択されるような構造的補強成分を加えてよい。
図１４は、構造的補強のための、梗塞領域への単一成分または二成分の導入および作用を示している。図１４は、先に述べた方法による心室(１４００)の梗塞領域(１４１０)の特定、およびその後に行われる損傷部位に対する別々の成分の複数回注射(１４２０)を示している。二成分系においては、二つの成分(１４３０／１４４０)が当該部位において相互に接触し、補強構造的足場を形成する(１４３０／１４４０)。図１５Ｂにおいては、単一の擬似塑性剤またはチキソトロピー剤が、多回注射(１４５０)により当該エリアに導入されて、壁(１４６０)を構造的に補強する。これらの薬剤は最終の形態で導入され、追加の薬剤を必要としない。図１４は、それぞれ異なる部位での多回注射による(１４０５／１４１５)、少なくとも一つの薬剤の添加(１４３０／１４４０／１４５０／１４８０)を示しており、前記薬剤は、構造的補強形態(１４５０／１４７０／１４９５)へ変換するために内因性成分または温度変化(１４６０／１４９０)を必要とする。該構造的補強剤は、先に述べた最小侵襲法を介して梗塞領域に局化在される。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
〔構造的補強のためのコラーゲン架橋剤〕
図１７は、心室の梗塞領域を構造的に補強する方法(１７１０)を記載したフローチャートを図示している。先に述べたように、薄化は、梗塞領域のリモデリングに続く事象のカスケードにおいて重要な因子である。薄化に寄与する一つの因子は、ＭＭＰ（マトリックスメタロプロテイナーゼ）によるコラーゲン分解および血行力学的ストレスに起因するコラーゲンヘリックスの滑りである。コラーゲンの滑りは、更なるリモデリングおよび遠隔ゾーンの肥厚をもたらす梗塞瘢痕の拡大を生じる。コラーゲンの滑りを防止するための先の発明は、縫合術を含む（Kelley et al., Circ., 1999 ; 99: 135-142）。この方法は、心外膜ポリマーメッシュを該領域に直接縫合することを含む。一つの態様によると、薬剤は、コラーゲン滑りを防止するように、最小侵襲法によって当該領域に導入されるであろう。一つの態様において、薬剤または分散液は複数回の注射によって梗塞ゾーンに導入され、次いで、該薬剤はコラーゲン瘢痕と反応してそれを架橋するであろう。これにより、局所壁に対して滑りの防止および強度をもたらす。一つの態様において、当該薬剤（上記で詳述したもの）は、開胸手術の間に最小侵襲法によって梗塞ゾーンに注射されてよい。もう一つの態様において、最小侵襲法は、剣状突起下（subxyphoid）注射および経皮注射を含んでよい。もう一つの態様において、梗塞ゾーン中への経皮的導入は、心室内ニードル、経血管針カテーテルおよび逆行性静脈灌流のうちの一つを含んでよい。
造影剤または治療剤は、梗塞エリアに導入されるに先立って、構造成分に結合されても、または構造成分中に溶解されてもよい。該薬剤については詳述した。
幾つかの可能な架橋剤が図１８に示されており、コラーゲンの滑りを防ぐ（１７３０）ための可能な薬剤(１７２０)を示している。梗塞領域に注射されたこの薬剤は、多官能性であってよい（ヘテロポリマーまたはホモポリマー）。架橋剤のもう一つの重要な特徴は、コラーゲン（Ｉ型およびＩＩＩ型）のアミノ酸の側鎖に架橋する該架橋剤の能力である。一つの態様において、当該薬剤は、生体適合性の水混和性溶媒に可溶であって、心筋中に存在する水溶液により分散系から抽出されることができる。これは、該架橋剤が梗塞領域の中に沈殿することを可能にし、当該エリア外への架橋剤の移動を最小化する。もう一つの態様において、架橋剤の存在下で使用される前記生体適合性の溶媒は、ジグライムおよびジメチルイソソルビドであってよい。コラーゲンは、多数のリジン残基およびヒドロキシプロリン残基でできており、これら残基は、それぞれ一級アミン基およびヒドロキシル基の反応性側鎖基を有している。以下の例において、架橋剤はこれら側鎖基の少なくとも一つと反応する。図１８の１８１０は、コラーゲンを架橋するために、ポリエポキシ官能樹脂を使用する方法を記載したフローチャートを示している。一つの態様では、ポリエポキシ官能樹脂が梗塞領域に導入されてよい。もう一つの態様では、ポリエポキシ官能樹脂は、ビスフェノールＡエポキシ（Shell 828）、エポキシ−ノボラック樹脂（Ciba1138 及び1139, Dow 431）、グリシジルメタクリレートのホモポリマー（ＧＭＡ）、またはＧＭＡと他のアクリレートとの共重合体を含んでよい。もう一つの態様において、ポリエポキシ官能樹脂は多官能性エポキシドを含んでよい。もう一つの態様において、ポリエポキシ官能樹脂はアクリレートを含んでよい。後の樹脂、即ち、多官能性エポキシドおよびアクリレートは、八つのエポキシドまたはアクリレート官能基をもったキュービックシリコーン（silsesquioxanes）に基づくものである。もう一つの態様において、該ポリエポキシ官能樹脂は、四官能性エポキシドシリコーンを含んでよい。もう一つの態様において、該ポリエポキシ官能樹脂は、二官能性エポキシドシリコーンを含んでよい。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６３】
〔梗塞領域で使用される、マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤〕
ＭＩ外傷が生じた後に、マクロファージが梗塞領域に浸潤する傾向がある。該マクロファージは、マトリックスメタロプロテイナーゼ類（ＭＭＰ）を放出する。亜鉛含有エンドプロテイナーゼファミリーのメンバーとして、ＭＭＰは構造的類似性を有するが、各々の酵素は異なる細胞によって産生された異なる基質特異性を有しており、また異なる誘導能を有している。これらの酵素は、当該梗塞ゾーンにおいて破壊を起こさせる。ＭＭＰによって破壊される一つの重要な構造的成分は、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）である。ＥＣＭは細胞を取囲んで支持する複雑な構造的実体であり、哺乳類組織内に見られる。ＥＣＭは、結合組織と称されることが多い。ＥＣＭは、三つの主要な分類の生体分子で構成される：即ち、構造タンパク質、例えば、コラーゲンおよびエラスチン；特殊化されたタンパク質、例えばフィブリン、フィブロネクチン、およびラミニン；およびプロテオグリカンである。これらはタンパク質コアで構成されており、これに、グリコサミノグリカン類（ＧＡＧ）と称するＥＣＭの極めて複雑な高分子量成分を形成する長鎖の反復二糖類単位が結合されている。コラーゲンはＥＣＭの主要な成分であり、ＭＭＰは、ＥＣＭ分解を誘導してコラーゲン沈着を生じさせる。ＭＭＰの阻害剤が存在し(１９７０)、これら阻害剤の幾つかは組織特異的である。ＭＭＰの急性薬理学的阻害、または幾つかの場合にはＭＭＰ−９の欠乏、左心室拡張が、マウスの梗塞心臓において減衰されることが以前に立証されている（Creemers, E.et. al. "Matrix Metalloproteinase Inhibition After Myocardial Infarction", A New Approach to Prevent Heart Failure? Circ Res. Vol 89 No. 5,2315-2326, 1994）。このＭＭＰの阻害剤は、メタロプロテイナーゼの組織阻害剤（ＴＩＭＰ）と称される。合成形のＭＭＰＩ、例えばＢＢ−９４、ＡＧ３３４０、Ｒｏ３２−３５５ｂ、およびＧＭ６００１も存在する。ＭＭＰＩは、壁の薄化を減少させることによって左心室におけるリモデリングを低減することが、以前に示された。これらの実験は、ウサギに対して行われた。加えて、この研究は、ＭＭＰＩが心内膜下における新血管新生を減少するのではなく、増大させることをも示した（Lindsey et. al. "Selective matrix metalloproteinase inhibitors reduce left ventricle remodeling but does not inhibit angiogenesis aftermyocardial infarction, "Circulation 2002 Feb. 12; 105 (6): 753-8）。一つの態様において、ＭＭＰＩは、繊維芽細胞の移動およびコラーゲンの沈着を低減することにより、リモデリングプロセスを遅延させ、またＥＣＭ分解を防止し、白血球流入を減少させ、壁ストレスを低減するために、梗塞領域に導入されてよい。一つの実施例において、ＭＭＰＩは、記載した構造的補強剤の何れかを梗塞領域に導入することと組合せて、梗塞領域に導入されてもよく、ＴＩＭＰを含んでもよく、これにはＴＩＭＰ−１、ＴＩＭＰ−２、ＴＩＰＭ−３およびＴＩＭＰ−４が含まれるがこれらに限定されない。もう一つの態様においては、組換えＴＩＭＰの外因性の投与により、天然に存在するＭＭＰＳの阻害剤が増大されてもよい。もう一つの態様において、ＭＭＰＩは、記載した構造的補強剤の何れかを梗塞領域に導入すると共に梗塞領域に導入される、合成的に誘導されたＭＭＰＩを含んでもよい。梗塞領域に導入される合成的��誘導されたＭＭＰＩを含んでもよい。ＭＭＰＩの梗塞ゾーンへの導入は、幾つかの異なる方法で達成されてよい。重要なことは、これらＭＭＰＩ剤の導入が、最小侵襲技術によって達成されることである。一つの態様において、ＭＭＰＩ剤は、ＥＣＭ分解を防止するために最小侵襲法によって当該領域に導入されるであろう。薬剤または懸濁液は、一つの態様においては、梗塞領域への多回注射によって導入されるであろう。これはＥＣＭ分解の防止、および局所壁に対する増大した強度をもたらす。一つの態様において、ＭＭＰＩ剤は、最小侵襲法を介して、開胸手術の際に梗塞ゾーンに注入してよい。もう一つの態様において、この最小侵襲法は、剣状突起下（subxyphoid）的および経皮的注射のうちの一つを含んでよい。もう一つの態様において、梗塞ゾーンへの経皮的導入は、心室内ニードル、経血管カテーテルおよび逆行性静脈灌流のうちの一つを含んでよい。加えて、ＭＭＰＩ剤は、懸濁液または、例えば図６の三成分系において詳述したミクロ粒子に導入された、徐放処方を介して導入されてよい。一つの態様において、ＭＭＰＩの導入は、コラーゲンの滑りを防止する何れかの架橋事象後に行ってもよい。もう一つの態様において、架橋剤は、ＭＭＰＩの導入の前に、ターゲッティングされる梗塞エリアから除去されてもよい。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７２】
プラグのサイズおよび形状は、状況に応じて変化してよい。例えば、先に述べたポリマープラグは機械加工、射出成形、押出し成形または溶液キャスト成形してよい。一つの態様において、カテーテル装置による送達を容易にするために、プラグの形状は細長く且つ薄くてよい。これらのプラグはまた、プラグが心室の損傷部位に導入されたときに、それが当該部位から滑落するのを防止するように、顎部または側方突起を有してよい。他の態様において、該プラグはネジまたは螺旋に類似した形状に作製されてよい。一つの態様において、該プラグはポリマー材料であってよい。他の態様において、該プラグはＳＳアンカーを備えたポリマー材料、例えば、プラグを問題の部位の中に埋設するために、アンカーを有するステンレススチール帯を備えたプラグであってよい。プラグのサイズもまた変化してよい。一つの態様において、該プラグの直径は約０．１ｍｍ〜約５ｍｍであってよい。他の態様において、該プラグの直径は約０．２ｍｍ〜約３ｍｍであってよい。他の態様において、該プラグの長さは約１ｍｍ〜約２０ｍｍであってよい。他の態様において、該プラグの長さは約２ｍｍ〜約１２ｍｍであってよい。プラグのサイズおよび形状に加えて、心室内の領域に供給されるプラグの数もまた、患者の損傷および症状の範囲に応じて変化してよい。一つの態様において、当該領域に供給されるプラグの数は、約１〜約２００であってよい。他の態様において、当該領域に供給されるプラグの数は、約５〜約５０であってよい。更なる態様において、当該領域に供給されるプラグの数は約２〜約２０であってよい。
好ましい態様において、該プラグは、加工された生体適合性の生体材料であってよい。この生体材料は、細胞を損傷領域に補充して、当該部位に追加の強度を与えるために適している。生体材料の一つの例は、ＳＩＳと称される、ブタ由来の小腸粘膜下組織である。この操作された生体材料は、ＤｅＰｕｙ・ＩｎｃおよびＣｏｏｋ・Ｇｒｏｕｐから供給され得る。それはステンレススチールの中に収納した状態で入手可能である。ＳＩＳは、細胞除去された本来の構成の細胞外マトリックス（ＥＣＭ）を含む、完全な小腸粘膜下組織である。それはまた、外マトリックスに付着した重要な内因性成長因子を含んでいる。ＳＩＳは、ＳＩＳに付着する多能性骨髄由来の幹細胞を補充し、治癒を誘導することが以前に示されている。ＳＩＳは、以前に、回旋腱板損傷、糖尿病性足潰瘍、および股関節を修復するために使用された。ＳＩＳは、約３〜４月の期間の後に再吸収することが示されている。再吸収の後、治癒した生存組織が該マトリックスを置換する。一つの態様において、ＳＩＳの小ディスクが心室内の領域（例えば梗塞領域）に共有されてよい。該ＳＩＳディスクは、損傷した心筋の中へ同様の細胞補充を提供する。これら細胞は、次いで生存可能な筋肉組織に変形し、収縮性の心筋細胞を形成する。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７６】
（実施例４）
スプラグ・ドウリー系ラットを、開胸手術、ＬＡＤ上での結紮により梗塞させた。瘢痕形成させるために７日間生存させ、次いで屠殺した。心臓を除去し、氷冷したＰＢＳ中にパッキングした。
１ｃｃのシリンジ（３０ゲージニードル）によって、心臓の梗塞領域に注射した。該梗塞領域において以下のポリマーを使用した。
１．ＰＬＧＡ（ポリ酪酸−コ−グリコール酸ポリマー、Birmingham Polymers）、ジグライム中の２０％溶液、１％脂肪ブラウンＲＲ（Fat Brown RR）を含む。梗塞壁の中に注射された。組織は直ちに膨潤し、次いで該溶液は梗塞領域内で沈殿する。
２．ポリ（メタクリル酸ブチル−コ−メタクリル酸メチル）、Ｍｒ＝  １００，０００ダルトン（Aldrich）、ジグライム中の２０％溶液、１％脂肪ブラウンＲＲ（Fat Brown RR）を含む。梗塞壁の中に注射した。組織は直ちに膨潤し、次いで溶液は梗塞領域内で沈殿する。
３．ポリアリルアミン（Aldrich）１０％溶液の３．１グラムアリコートを、水中の３５％ポリ（アクリル酸）０．７グラムと混合した。加えて、該溶液に１％トルイジン青を加えた。この組成物を梗塞壁に注射した。組織は直ちに膨潤し、溶液は沈殿を生じる。
組織切片（１０μmにスライスされたもの）は、染色されたポリマーが、梗塞領域における梗塞組織内で沈殿したことを示した。
限定としてでなく一例として、以下の添付図面の各図において、当該方法および組成物を例示する。