【手続補正書】
【提出日】平成18年12月20日(2006.12.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
各目的遺伝子がプロヌクレオチド配列に操作可能に結合され、
２つ以上の目的遺伝子が多量体タンパク質をコードし、
２つ以上の目的遺伝子および２つ以上のプロヌクレオチド配列がトランスポザーゼ挿入配列で隣接され、
２つ以上の目的遺伝子のそれぞれが同じであるかまたは異なる、
２つ以上の目的遺伝子および２つ以上のプロヌクレオチド配列を含む組換えＤＮＡ構築物を含む、単離されたポリヌクレオチド。
【請求項２】
前記２つ以上のプロヌクレオチド配列の最も５’側のプロヌクレオチド配列が、プレプロヌクレオチド配列の一部である、請求項１に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３】
第一の目的遺伝子が抗体の重鎖をコードし、かつ第二の目的遺伝子が抗体の軽鎖をコードする、請求項１又は２に記載のポリヌクレオチド。
【請求項４】
個体において多量体タンパク質を生産する方法であって、２つ以上の目的遺伝子を含むポリヌクレオチドを前記個体に投与することを含み、各目的遺伝子が前記多量体タンパク質の一部をコードし、各目的遺伝子がプロヌクレオチド配列に操作可能に結合され、かつ２つ以上の目的遺伝子のそれぞれが同じであっても異なっていてもよい、前記方法。
【請求項５】
前記多量体タンパク質が会合した多量体タンパク質である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記多量体タンパク質が多価多量体タンパク質である、請求項４又は５に記載の方法。
【請求項７】
前記２つ以上のプロ配列の最も５’側のプロヌクレオチド配列が、プレプロヌクレオチド配列の一部である、請求項４〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記ポリヌクレオチドが、プレプロヌクレオチド配列；第一の目的遺伝子；プロヌクレ
オチド配列；および第二の目的遺伝子、の順に配置された２つの目的遺伝子および２つのプロヌクレオチド配列を含む、請求項４〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
第一の目的遺伝子が抗体の重鎖をコードし、かつ第二の目的遺伝子が抗体の軽鎖をコードする、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
個体において多量体タンパク質を生産する方法であって、２つ以上の目的遺伝子を含むポリヌクレオチドを個体に投与することを含み、各目的遺伝子が前記多量体タンパク質の一部をコードし、かつ各目的遺伝子が切断部位をコードする遺伝子に操作可能に結合されている、前記方法。
【請求項１１】
トランスポゾン系ベクターが前記ポリヌクレオチドを含み、さらに第一のプロモータに操作可能に結合されたトランスポザーゼ遺伝子を含み、
ａ）前記第一のプロモータの核酸配列の３’末端がＫｏｚａｋ配列を含み、前記Ｋｏｚａｋ配列がトランスポザーゼ遺伝子の第一のコドンを少なくとも含むように位置し、
ｂ）前記２つ以上の目的遺伝子が、それぞれ１つ以上の別のプロモータに操作可能に結合され、そして
ｃ）前記２つ以上の目的遺伝子およびそれらの操作可能に結合されたプロモータが、トランスポザーゼ遺伝子によりコードされたトランスポザーゼにより認識されるトランスポザーゼ挿入配列で隣接されている、
請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
トランスポゾン系ベクターが前記ポリヌクレオチドを含み、さらに第一のプロモータおよび鳥類に最適化されたポリＡ配列に操作可能に結合されたトランスポザーゼ遺伝子を含み、
ａ）前記２つ以上の目的遺伝子が、それぞれ１つ以上の別のプロモータに操作可能に結合され、そして
ｂ）前記２つ以上の目的遺伝子およびそれらの操作可能に結合されたプロモータが、トランスポザーゼ遺伝子によりコードされたトランスポザーゼにより認識されるトランスポザーゼ挿入配列で隣接されている、
請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記多量体タンパク質が会合した多量体タンパク質である、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記多量体タンパク質が多価多量体タンパク質である、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記ポリヌクレオチドがさらに、切断部位を含む、請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の前記単離されたポリヌクレオチドで形質転換された、非ヒト動物。
【請求項１７】
前記非ヒト動物が鳥である、請求項１６に記載の非ヒト動物。
【請求項１８】
請求項１７に記載の鳥により生産される卵。
【請求項１９】
前記卵が、前記単離されたポリヌクレオチドによりコードされる多量体タンパク質を含む、請求項１８に記載の卵。
【請求項２０】
前記非ヒト動物が哺乳動物である、請求項１６に記載の非ヒト動物。
【請求項２１】
請求項２０に記載の哺乳動物により生産される乳であって、前記単離されたポリヌクレオチドによりコードされる多量体タンパク質を含む、前記乳。
【請求項２２】
ａ）許容可能な担体中に請求項１に記載の前記ポリヌクレオチドを含む組成物を、卵を産む動物に投与し、そして
ｂ）前記１つ以上の目的遺伝子を多量体タンパク質として発現させること、
を含む、多量体タンパク質を生産する方法。
【請求項２３】
ａ）前記卵を産む動物から卵を集め、
ｂ）前記多量体タンパク質を含有する卵白または卵黄を回収し、そして
ｃ）前記多量体タンパク質を精製すること、
をさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記卵を産む動物が鳥である、請求項２２又は２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記単離されたポリヌクレオチドが、トランスポザーゼ挿入配列を認識するトランスポザーゼ遺伝子をコードする核酸配列を含むベクターを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項２６】
トランスポザーゼ遺伝子をコードする前記核酸配列が第一のプロモータに操作可能に結合され、前記２つ以上の目的遺伝子が１つ以上の別のプロモータに操作可能に結合され、そして、前記２つ以上の目的遺伝子および操作可能に結合された前記プロモータがトランスポザーゼ挿入配列で隣接されている、
請求項２５に記載のポリヌクレオチド。
【請求項２７】
前記第一のプロモータの核酸配列の３’末端がＫｏｚａｋ配列を含み、そして、前記Ｋｏｚａｋ配列がトランスポザーゼ遺伝子の第一のコドンを少なくとも含むように位置している、
請求項２６に記載のポリヌクレオチド。
【請求項２８】
トランスポザーゼ遺伝子の最初の２０コドンの少なくとも一つが、コドンによりコードされているアミノ酸を変えることなく、コドンの第三塩基のヌクレオチドをアデニンまたはチミンに変更することで改変されている、
請求項２５〜２７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項２９】
前記２つ以上の目的遺伝子の少なくとも一つが、第一プロモータと異なる第二プロモータに操作可能に結合された、
請求項２５〜２８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３０】
前記第二プロモータが、オボアルブミンプロモータまたはビテロゲニンプロモータである、請求項２９に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３１】
前記トランスポザーゼ遺伝子に操作可能に結合されている少なくとも一つのポリＡ配列をさらに含む、請求項２５〜３０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３２】
前記２つ以上の目的遺伝子の少なくとも一つに操作可能に結合されている少なくとも一つのエンハンサーをさらに含む、請求項２５〜３１のいずれか一項に記載のポリヌクレオ
チド。
【請求項３３】
前記少なくとも一つのエンハンサーがオボアルブミンエンハンサーを含む、請求項３２に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３４】
前記２つ以上の目的遺伝子の少なくとも一つに操作可能に結合されている少なくとも一つの卵指示配列をさらに含む、請求項２５〜３３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３５】
少なくとも一つの切断部位をコードするヌクレオチド配列をさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドであって、前記少なくとも一つの切断部位をコードするヌクレオチド配列が第一および第二の目的遺伝子の間に位置する、前記ポリヌクレオチド。