【手続補正書】
【提出日】平成18年12月6日(2006.12.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
脱ユビキチン化酵素は、ユビキチンのＣ−末端グリシンでペプチド結合を認識し、加水分解するシステインプロテアーゼである。脱ユビキチン化酵素(ＤＵＢ)の２種の異なるファミリーがある。第一の群は、約２５Kdの酵素であり、ヒトにおいてＵＣＨＬ１、ＵＣＨＬ３、Ｂａｐ１およびＵＣＨ３７が代表である。これらのタンパク質は、ペプチダーゼの分類のファミリーＣ１２に属する。第二のファミリーは、２種の相同な領域、おそらく触媒機構に関与する保存されたシステインを含む領域(システインボックス)と、二個の保存されたヒスチジン残基を含み、その一方がおそらくまた触媒機構に関与する領域(ヒスチジンボックス)を共有する、大タンパク質(８００から２０００残基)から成る。これらのタンパク質は最初に酵母で特徴付けされ、ＭＥＲＯＰＳのファミリーＣ１９に属し、ＵＳＰが代表である。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
さらに別の好ましい局面において、ヒトの扁桃体(amgdala)、脊髄または嗅球組織における、配列番号９のポリペプチド、そのフラグメント、誘導体または実質的に相同な配列の量を測定することを含み、ここで、扁桃体(amgdala)、脊髄および嗅球組織の量と比較して、上昇した量の該ポリペプチドの存在が、該ヒトが脳障害に罹患していることの診断である、ヒトにおける脳障害を診断する方法を提供する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
本発明の別の局面は、前記ポリペプチド、ポリペプチドフラグメント、誘導体、相同体、変異体および誘導体のフラグメント、ならびにこれらの相同体を製造する方法を提供する。本発明のこの局面の好ましい態様において、外部由来のユビキチン特異的ポリヌクレオチドを含む発現ベクターを、その中に組み入れられて有する宿主細胞を、宿主内でユビキチン特異的ポリペプチドを発現するのに充分な条件下で培養し、その後、発現されたポリペプチドを回収することを含む、前記ヒトポリペプチドを製造する方法を提供する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
本発明はまたアミノ酸配列の“誘導体”を含む。“誘導体”は、アミノ酸レベル(例えばある天然に存在するアミノ酸が合成アミノ酸置換基で置換されている相同な配列)または三次元レベル(例えば分子が該アミノ酸配列とほぼ同じ形および立体配置を有する)のいずれかで該アミノ酸配列と関連する配列である。故に誘導体は、変異体、模倣体、ミモトープ、類似体、単量体形および機能的等価体を含む。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６５】
本修飾は、どのようにタンパク質が製造されるかの関数であり得る。組み換えポリペプチドについては、例えば、修飾は宿主細胞翻訳後修飾能およびポリペプチドアミノ酸配列における修飾シグナルにより決定されるであろう。したがって、グリコシル化が望まれるとき、ポリペプチドはグリコシル化された宿主、一般的に真核細胞において発現されなければならない。昆虫細胞は、しばしば哺乳動物細胞と同じ翻訳後グリコシル化を行い、この理由のため、昆虫細胞発現系はまた、グリコシル化の天然のパターンを有する哺乳動物タンパク質の効率的な発現のために開発されている。同様の考えが他の修飾に当てはまる。同じタイプの修飾が、あるポリペプチドの数カ所で同じ程度または違う程度で存在し得る。また、あるポリペプチドは、１種類を超える修飾を含み得る。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７３】
本明細書で使用する“宿主細胞”は、例えば、エレクトロポレーション、リン酸カルシウム沈降、マイクロインジェクション、形質転換、ウイルス感染などの何らかの手段により細胞に挿入されている異種ＤＮＡを含む、原核または真核細胞を意味する。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８３】
昆虫系において、オートグラファ・カリフォルニカ核多角体病ウイルス(ＡｃＮＰＶ)は、外来遺伝子の発現のためのベクターとして使用できるいくつかの昆虫系の中の一つである。ウイルスはスポンドプテラ・フルギペルダ(Spodoptera frugiperda)細胞内で増殖する。異なって発現される遺伝子コード配列を、個々にウイルスの非必須領域(例えばポリヘドリン遺伝子)にコード化し、ＡｃＮＰＶプロモーター(例えばポリヘドリンプロモーター)の制御下に置き得る。異なって発現される遺伝子コード配列の挿入の成功は、ポリヘドリン遺伝子の不活性化および非閉鎖組み換えウイルス(すなわち、ポリヘドリン遺伝子によりコードされるタンパク質性被覆を欠くウイルス)をもたらす。これらの組み換えウイルスを、次いで、挿入遺伝子を発現するスポンドプテラ・フルギペルダ細胞に挿入する。(例えば、Smith et al., 1983, J. Virol. 46:584；Smith、米国特許４,２１５,０５１参照)。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８９】
単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ(Wigler, et al., 1977, Cell 11:223)、ヒポキサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ(Szybalska & Szybalski, 1962, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 48:2026)およびアデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ(Lowy, et al., 1980, Cell 22:817)遺伝子を含むが、これらに限定されない多くの選択系を、各々ｔｋ−、ｈｇｐｒｔ−またはａｐｒｔ−細胞で使用できる。また、代謝拮抗物質耐性も、メトトレキサートに耐性を付与するｄｈｆｒ遺伝子(Wigler, et al., 1980, Natl. Acad. Sci. USA 77:3567;O'Hare, et al., 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:1527)；ミコフェノール酸に耐性を付与するｇｐｔ遺伝子(Mulligan & Berg, 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:2072)；アミノグリコシドＧ−４１８に耐性を付与するｎｅｏ遺伝子(Colberre-Garapin, et al., 1981, J. Mol. Biol. 150:1)；およびヒグロマイシンに耐性を付与するｈｙｇｒｏ遺伝子(Santerre, et al., 1984, Gene 30:147)の選択の基礎として使用できる。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９１】
下記のようなアッセイ系の要素として使用するとき、異なって発現される遺伝子タンパク質を、異なって発現される遺伝子タンパク質と試験物質の間で形成される複合体の検出を容易にするように、直接または間接的に標識してよい。１２５Ｉのような放射性同位体；基質に暴露したときに検出可能な熱量測定シグナルまたは光を発生する酵素標識系；および蛍光標識を含むが、これらに限定されない様々な適当な標識系のいずれかを使用できる。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９９】
分子ライブラリーの合成法の例は当分野で、例えばDeWitt et al. (1993)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6909;Erb et al. (1994)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:11422;Zuckermann et al. (1994). J. Med. Chem. 37:2678;Cho et al. (1993)Science 261:1303;Carell et al. (1994)Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 33:2059;Carell et al. (1994)Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 33:2061;およびin Gallop et al. (1994)J. Med. Chem. 37:1233に見ることができる。化合物のライブラリーは溶液中(例えば、Houghten (1992)Biotechniques 13:412-421)、またはビーズ上(Lam (1991)Nature 354:82-84)、チップ(Fodor (1993)Nature 364:555-556)、細菌(Ladner  米国特許５,２２３,４０９)、胞子(Ladner  米国特許'４０９)、プラスミド(Cull et al. (1992)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:1865-1869)またはファージ上(ScottおよびSmith (1990)Science 249:386-390);(Devlin (1990)Science 249:404-406);(Cwirla et al. (1990)Proc. Natl. Acad. Sci. 97:6378-6382);(Felici (1991)J. Mol. Biol. 222:301-310);(Ladner supra)に提示できる。候補化合物は、例えば、１)Ｉｇ−テイルド融合ペプチドおよび無作為ペプチドライブラリー(例えば、Lam et al. (1991)Nature 354:82-84;Houghten et al. (1991)Nature 354:84-86参照)およびＤ−および／またはＬ−立体配置アミノ酸から成るコンビナトリアルケミストリー由来分子ライブラリーのメンバーを含む、可溶性ペプチドのようなペプチド；２)ホスホペプチド(例えば、無作為および部分的縮重、有向(directed)ホスホペプチドライブラリーのメンバー、例えば、Songyang et al. (1993)Cell 72:767-778参照)；３)抗体(例えば、ポリクローナル、モノクローナル、ヒト化、抗イディオタイプ、キメラ、および一本鎖抗体ならびに抗体のＦａｂ、Ｆ(ａｂ')２、Ｆａｂ発現ライブラリーフラグメントおよびエピトープ−結合フラグメント)；および４)小有機および無機分子(例えば、コンビナトリアルおよび天然産物ライブラリーから得た分子)を含む。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０６】
他の例は、候補化合物をユビキチンプロテアーゼおよびポリユビキチンのサンプルに添加することを含む。ポリユビキチンと競合する化合物は、加水分解の量またはポリユビキチンのユビキチンプロテアーゼへの結合を減少させる。したがって、ユビキチンプロテアーゼと直接相互作用し、ポリユビキチンと競合する化合物が発見できる。このようなアッセイは、ユビキチン化基質タンパク質、ユビキチン化基質残存物、および転写制御因子のようなプロテアーゼと相互作用する細胞成分のような、ユビキチンプロテアーゼと相互作用する任意の他の成分を含み得る。無細胞薬剤スクリーニングアッセイを行うために、ユビキチンプロテアーゼもしくはフラグメント、またはその標的分子のいずれかを固定化し、一方または両方のタンパク質の非複合体形からの複合体の分離を促進し、ならびにアッセイの自動化に適応させることが望ましい。マトリックス上へのタンパク質の固定化の技術は、薬剤スクリーニングアッセイで使用できる。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１６】
本発明の好ましい局面において、ユビキチン特異的プロテアーゼが関与する疾患を診断する方法は、組織と、配列番号１、配列番号５または配列番号９のいずれかに記載のアミノ酸配列を含むポリペプチドに特異的に結合する抗体を接触させ、そして、該抗体と該組織中のポリペプチドの特異的結合を検出する段階を含む、検出段階を含み、ここで、ポリペプチドへの特異的結合の存在の検出が、配列番号１、配列番号５または配列番号９のいずれかのアミノ酸を含むポリペプチドの存在の指標である。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１９】
本発明のさらに別の態様において、診断する細胞は脳内のものであり、下記を含むが、これらに限定されない脳の疾患を含む：神経が関与する障害、および星状細胞、乏突起膠細胞、上衣細胞および小膠細胞のような膠細胞が関与する障害；脳浮腫、上昇した脳圧およびヘルニア形成、および水頭症；神経管欠損、前脳異常、後頭蓋窩異常および、脊髄空洞症および水脊髄症のような奇形ならびに発育疾患；出生児脳傷害；低血圧、低灌流、および低流状態−−全脳虚血および脳局所虚血−−局所的血液供給の閉塞による梗塞、脳内(実質内)出血、くも膜下出血および桑実状動脈瘤破裂を含む脳出血、ならびに、血管奇形、ラクナ梗塞、間隙出血および高血圧性脳症を含む高血圧性脳血管疾患を含む、低酸素、虚血および梗塞に関与するもののような脳血管疾患；急性化膿性(細菌性)髄膜炎および急性無菌性(ウイルス性)髄膜炎を含む急性髄膜炎、脳膿瘍、硬膜下蓄膿および硬膜外膿瘍を含む急性病巣化膿性感染、結核およびミコバクテリア症、神経梅毒および神経ボレリア症(ライム病)を含む慢性細菌性髄膜脳炎、節足動物媒介性(Ａｒｂｏ)ウイルス脳炎を含むウイルス髄膜脳炎、１型単純ヘルペスウイルス、２型単純ヘルペスウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス(帯状ヘルペス)、サイトメガロウイルス、灰白髄炎、狂犬病、ならびに、ＨＩＶ−１髄膜脳炎(亜急性脳炎)、空胞性脊髄症、ＡＩＤＳ−関連筋疾患、末梢ニューロパシーおよび子供のＡＩＤＳを含むヒト免疫不全ウイルス１、進行性多巣性白質脳症、亜急性硬化性全脳炎、真菌性髄膜脳炎、神経系の他の感染症のような感染；伝染性海綿状脳症(プリオン病)；多発性硬化症、多発性硬化症のバリアント、急性播種性脳脊髄炎および急性壊死性出血性脳脊髄炎、および脱髄を伴う他の疾患を含む、脱髄疾患；
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２１】
本発明は、また、乳癌のような、本明細書に記載のようにユビキチンプロテアーゼが発現される組織が関与する疾患を含むが、これらに限定されない、ユビキチン特異的プロテアーゼが介在する疾患をまたはその素因を診断するための標的を提供するための、本発明のポリペプチドの使用に関する。したがって、ユビキチンプロテアーゼの、細胞、組織または臓器における存在またはレベルを検出する方法を提供する。本方法は、生物学的サンプルと、ユビキチンプロテアーゼと相互作用できる化合物を、相互作用が検出できるように接触させることを含む。本ポリペプチドはまたこれらの成分が減少していることを特徴とする障害の処置にも有用である。故に、本プロテアーゼの活性の上昇または低下が処置に有益である。本ポリペプチドはまた過剰な基質または減少したレベルの基質により特徴付けられる疾患の診断のための標的の提供にも有用である。したがって、基質が過剰であるとき、プロテアーゼポリペプチドは診断アッセイを提供できる。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２３】
あるいは、本タンパク質を、対象においてインビボで、対象に標識抗−ユビキチンプロテアーゼ抗体を挿入することにより検出できる。例えば、抗体は、標準造影法でその存在および位置を確認できる放射活性マーカーで標識できる。特に有用なのは、対象において発現されるユビキチンプロテアーゼの対立変異体を検出する方法、およびサンプル中のユビキチンプロテアーゼのフラグメントを検出する方法である。本ユビキチンプロテアーゼポリペプチドはまた薬理ゲノム学的分析において有用である。薬理ゲノム学は、罹患している個体における変えられた薬物動態および異常な作用のための、薬剤に対する応答の臨床的に有意な遺伝性変異を扱う。例えば、Eichelbaum, M. (1996)Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 23(10-11):983-985およびLinder, M. W. (1997)Clin. Chem. 43(2):254-266参照。これらの変異の臨床的結果が、代謝における個体の変異のためにある個体における治療剤の重篤な毒性をもたらすか、またはある個体における薬剤の治療の不成功をもたらす。故に、個体の遺伝子型は、治療化合物が体内で作用する方法かまたは体が化合物を代謝する方法を決定し得る。さらに、薬剤代謝酵素の活性が、薬剤作用の強度および期間の両方に影響する。故に、個体の薬理ゲノム学は、個々の遺伝子型に基づいた、有効な化合物およびこのような化合物の予防的または治療的処置に有効な量の選択を可能にする。ある薬剤代謝酵素における遺伝子多型の発見が、なぜある患者が期待される薬剤の効果を得られないか、過剰な薬剤の効果を示すか、または標準的な薬剤投与量で重篤な毒性を経験するかの説明となっている。多型は拡張した新陳代謝の表現型および乏しい新陳代謝の表現型において示し得る。したがって、遺伝子多型は、一つの集団における１個またはそれ以上のユビキチンプロテアーゼ機能が、別の集団と異なっているものである、ユビキチンプロテアーゼの対立タンパク質変異体を導き得る。本ポリペプチドは、故に処置モダリティーに影響し得る遺伝的素因を確認するための標的を可能にする。故に、ユビキチン−ベースの処置において、多型は、多かれ少なかれ活性である触媒領域を発生し得る。したがって、多型を含む一定の集団内で治療効果を最大にするために用量を修飾する必要があろう。遺伝子型分類の代替として、特異的多型ポリペプチドを同定し得る。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２９】
特定の抗原に対する個体の同種集団であるモノクローナル抗体は、継代培養細胞系による抗体分子の産生を提供する任意の技術により得ることができる。これらは、Kohler and Milsteinのハイブリドーマ法(1975, Nature 256:495-497;および米国特許4,376,110)、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ法(Kosbor et al., 1983, Immunology Today 4:72;Cole et al., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80:2026-2030)、およびＥＢＶ−ハイブリドーマ法(Cole et al., 1985, Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc., pp. 77-96)を含む。このような抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、ＩｇＤおよびそれらのサブクラスのいずれかを含む、任意の免疫グロブリンクラスであり得る。本発明のｍＡｂを産生するハイブリドーマをインビトロまたはインビボで培養できる。高力価のｍＡｂｓのインビボでの産生により、それが現在好ましい製造法である。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３０】
加えて、適当な抗原特異性のマウス抗体分子由来の遺伝子と、適当な生物学的活性のヒト抗体分子由来の遺伝子のスプライシングによる、“キメラ抗体”(Morrison et al., 1984, Proc. Natl. Acad. Sci., 81:6851-6855;Neuberger et al., 1984, Nature, 312:604-608;Takeda et al., 1985, Nature, 314:452-454)の産生のために開発された方法を使用できる。キメラ抗体は、マウスｍＡｂ由来の可変領域または超可変領域と、ヒト免疫グロブリン定常領域を有するもののような、異なる部分が異なる動物種に由来する分子である。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３５】
例えば、典型的な前向きアッセイにおいて、非標識抗体を固体支持体上に固定化し、試験すべきサンプルをその結合した分子と接触させる。その後、適当なインキュベーション時間、抗体−抗原二重抗体の形成に充分な時間放置する。この時点で、検出可能なシグナルを誘発できるレポーター分子で標識した二次抗体を次いで添加し、インキュベートし、抗体−抗原−標識抗体の三重複合体の形成をさせるのに充分な時間取る。未反応物質をすべて洗い流し、抗原の存在をシグナルの観察により測定するか、既知量の抗原を含むコントロールサンプルとの比較により定量し得る。前向きアッセイの変法は、サンプルおよび抗体を、結合した抗体に同時に添加するものである同時アッセイ、または標識抗体と試験すべきサンプルを最初に合わせ、インキュベートし、非標識表面結合抗体に添加するものである逆向きアッセイを含む。これらの方法は当業者に既知であり、微細な変化の可能性は、容易に明らかとなろう。本明細書で使用する“サンドイッチアッセイ”は、基本的二方向の方法のすべての変法を含む。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４２】
活性成分に加えて、これらの医薬組成物は、活性化合物の製剤への加工を容易にし、かつ、薬学的に使用できる、賦形剤および助剤を含む適当な薬学的に−許容される担体を含み得る。製剤および投与のための技術のさらなる詳細は、Remington's Pharmaceutical Sciences(Maack Publishing Co., Easton, Pa.)の最新版に見ることができる。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４３】
経口投与用医薬組成物は、経口投与に適した用量で、当分野で既知の薬学的に許容される担体を使用して製剤できる。このような担体は、医薬組成物の、患者が摂取するための錠剤、ピル、糖衣錠、カプセル、内服液、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などへの製剤を可能にする。
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４６】
経口で使用できる医薬製剤は、ゼラチン製の押し込み式カプセルならびに、ゼラチンおよびグリセロールまたはソルビトールのようなコーティングから成る軟、密封カプセルを含み得る。押し込み式カプセルは、ラクトースまたはデンプンのような増量剤または結合剤、タルクまたはステアリン酸マグネシウムのような滑剤および、所望により安定化剤と混合された活性成分を含み得る。軟カプセルにおいて、活性化合物は、安定化剤と共にまたは無しで、脂肪油、液体、または液体ポリエチレングリコールのような適当な液体に溶解または懸濁しててよい。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４７】
非経腸投与に適当な医薬製剤は、水溶液、好ましくはハンクス溶液、リンゲル溶液、または生理食塩水(physiologically buffered saline)に製剤できる。水性注射懸濁液は、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトール、またはデキストランのような、懸濁液の粘度を増加させる物質を含み得る。さらに、活性化合物の懸濁液は、適当な油性注射懸濁液として製剤できる。適当な親油性溶媒または媒体は、ゴマ油のような脂肪油、またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセライドのような合成脂肪酸エステル、またはリポソームを含む。非脂質ポリカチオン性アミノポリマーもまた送達に使用できる。所望により、本懸濁液はまた適当な高濃縮溶液の製造を可能にするための化合物の溶解性を上昇させる安定化剤または薬剤を含み得る。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５３】
任意の化合物について、治療に有効な用量を、最初に、例えば新生物細胞の、細胞培養アッセイで、または、動物モデル、通常マウス、ウサギ、イヌまたはブタのいずれかで概算する。動物モデルはまた適当な濃度範囲および投与経路の決定にも使用できる。このような情報を次いでヒトでの有用な投与量および投与の経路の決定に使用できる。
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５４】
治療的有効量は、症状または状態を軽減する、活性成分、そのフラグメント、ユビキチン特異的プロテアーゼの抗体、アゴニスト、アンタゴニストまたは阻害剤の量を意味する。治療効果および毒性、例えば、ＥＤ５０(集団の５０％に治療に有効な量)およびＬＤ５０(集団の５０％に致死的な量)は、細胞培養または実験動物における標準的薬学的方法により決定できる。毒性と治療効果の間の用量比が治療指数であり、これは比率ＬＤ５０／ＥＤ５０として示すことができる。大きな治療指数を示す医薬組成物が好ましい。細胞培養アッセイおよび動物試験から得たデータを、ヒト使用のための用量の範囲の計算に使用する。このような組成物に包含される投与量は、好ましくは、毒性がほんのわずかか、毒性なく、ＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内である。投与量はこの範囲内で用いる投与形態、患者の感受性および投与経路に依存して変化する。
【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５６】
通常の投与量は、０.１から１００,０００マイクログラム、約１ｇまでの総投与量の範囲で、投与経路に依存して変化し得る。特定の投与量および送達法に関する指針が文献に記載され、当分野の実施者には一般に利用可能である。当分野の当業者は、タンパク質またはそれらの阻害剤と異なる製剤をヌクレオチドについて用いるであろう。同様に、ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの送達は、特定の細胞、状態、位置などに特異的であろう。タンパク質の経口投与に適当な医薬製剤は、例えば、米国特許５,００８,１１４；５,５０５,９６２；５,６４１,５１５；５,６８１,８１１；５,７００,４８６；５,７６６,６３３；５,７９２,４５１；５,８５３,７４８；５,９７２,３８７；５,９７６,５６９；および６,０５１,５６１に記載されている。