【手続補正書】
【提出日】平成19年1月23日(2007.1.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）標的ＤＮＡを含んでなる第１のベクターを細胞に導入する工程、前記標的ＤＮＡは制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）対象の特定配列に隣接する染色体ＤＮＡに相同のＤＮＡおよび（２）前記標的ＤＮＡと染色体ＤＮＡとの間での組換えの際に対象の特定配列を修復するＤＮＡを含んでなる；ならびに
ｂ）第１のベクターに存在する制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼをコードする核酸を含んでなる第２のベクターを前記細胞に導入する工程、
を含む、細胞の染色体ＤＮＡにおける対象の特定配列の修復方法。
【請求項２】
前記標的ＤＮＡが２つの制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、一方の部位が前記標的ＤＮＡの５’末端にまたはその付近に存在し、かつ他方の部位が前記標的ＤＮＡの３’末端にまたはその付近に存在する、請求項１記載の方法。
【請求項３】
ａ）標的ＤＮＡを含んでなるベクターを細胞に導入する工程、前記標的ＤＮＡは制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）対象の特定配列に隣接する染色体ＤＮＡに相同のＤＮＡおよび（２）前記標的ＤＮＡと染色体ＤＮＡとの間での組換えの際に対象の特定配列を修復するＤＮＡを含んでなる；ならびに
ｂ）ベクターに存在する制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼを細胞に導入する工程、
を含む、細胞の染色体ＤＮＡにおける対象の特定配列の修復方法。
【請求項４】
（ａ）制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）対象の特定配列に隣接する染色体ＤＮＡに相同のＤＮＡおよび（２）標的ＤＮＡと染色体ＤＮＡとの間での組換えの際に対象の特定配列を修復するＤＮＡを含んでなる、標的ＤＮＡ；ならびに（ｂ）制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼをコードする核酸を含んでなるベクターを細胞に導入する工程を含む、細胞の染色体ＤＮＡにおける対象の特定配列の修復方法。
【請求項５】
対象の特定配列が変異である請求項１、３または４記載の方法。
【請求項６】
ａ）標的ＤＮＡを含んでなる第１のベクターを細胞に導入する工程、前記標的ＤＮＡは制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）改変対象の特定配列に相同のＤＮＡおよび（２）前記標的ＤＮＡと染色体ＤＮＡとの間での組換えの際に特定配列を改変するＤＮＡを含んでなる；ならびに
ｂ）第１のベクターに存在する制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼをコードする核酸を含んでなる第２のベクターを細胞に導入する工程、
を含む、細胞の染色体ＤＮＡにおける特定配列の改変方法。
【請求項７】
ａ）標的ＤＮＡを含んでなるベクターを細胞に導入する工程、前記標的ＤＮＡは制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）改変対象の特定配列に相同のＤＮＡおよび（２）前記標的ＤＮＡと染色体ＤＮＡとの間での組換えの際に特定配列を改変するＤＮＡを含んでなる；ならびに
ｂ）制限エンドヌクレアーゼによる、工程ａ）のベクターにおける制限エンドヌクレアーゼ部位の切断に適する条件下に、ベクターに存在する制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼを細胞に導入する工程、
を含む、細胞の染色体ＤＮＡにおける特定配列の改変方法。
【請求項８】
（ａ）制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）改変対象の特定配列に相同のＤＮＡおよび（２）標的ＤＮＡと染色体ＤＮＡとの間での組換えの際に特定配列の改変をもたらすＤＮＡを含んでなる、標的ＤＮＡ；ならびに（ｂ）制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼをコードする核酸を含んでなるベクターを細胞に導入する工程を含む、細胞の染色体ＤＮＡにおける特定配列の改変方法。
【請求項９】
ａ）標的ＤＮＡを含んでなる第１のベクターであって、前記標的ＤＮＡが制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）対象の特定配列に隣接する染色体ＤＮＡに相同のＤＮＡおよび（２）前記標的ＤＮＡと染色体ＤＮＡとの間での組換えの際に対象の特定配列を修復するＤＮＡを含んでなる第１のベクター；ならびに
ｂ）第１のベクターに存在する制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼをコードする核酸を含んでなる第２のベクター
から選択される、その必要がある個体における遺伝病を治療または予防する方法に使用されるベクター。
【請求項１０】
第１のベクターがウイルスベクターである請求項９記載のベクター。
【請求項１１】
第２のベクターがウイルスベクターである請求項１０記載のベクター。
【請求項１２】
第１のベクターがプラスミドである請求項１０記載のベクター。
【請求項１３】
ａ）標的ＤＮＡを含んでなる第１のベクターを細胞に導入する工程、前記標的ＤＮＡは制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）対象の内因性遺伝子の標的部位に相同のＤＮＡおよび（２）前記標的ＤＮＡと対象の遺伝子との間での組換えの際に対象の遺伝子を転写減衰するＤＮＡを含んでなる；ならびに
ｂ）第１のベクターに存在する制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼをコードする核酸を含んでなる第２のベクターを細胞に導入する工程、
を含む、細胞における対象の内因性遺伝子の転写減衰方法。
【請求項１４】
ａ）標的ＤＮＡを含んでなるベクターを細胞に導入する工程、前記標的ＤＮＡは制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）対象の内因性遺伝子の標的部位に相同のＤＮＡおよび（２）前記標的ＤＮＡと対象の遺伝子との間での組換えの際に対象の遺伝子を転写減衰するＤＮＡを含んでなる；ならびに
ｂ）ベクターに存在する制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼを細胞に導入する工程、
を含む、細胞における対象の内因性遺伝子の転写減衰方法。
【請求項１５】
（ａ）制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）対象の内因性遺伝子の標的部位に相同のＤＮＡおよび（２）標的ＤＮＡと対象の遺伝子との間での組換えの際に対象の遺伝子を転写減衰するＤＮＡを含んでなる、標的ＤＮＡ；ならびに（ｂ）制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼをコードする核酸を含んでなるベクターを細胞に導入する工程を含む、細胞における対象の内因性遺伝子の転写減衰方法。
【請求項１６】
ａ）標的ＤＮＡを含んでなる第１のベクターを細胞に導入する工程、前記標的ＤＮＡは制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）標的部位に相同のＤＮＡおよび（２）染色体ＤＮＡへの導入対象の変異を含んでなる；ならびに
ｂ）第１のベクターに存在する制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼをコードする核酸を含んでなる第２のベクターを細胞に導入する工程、
を含む、細胞の染色体ＤＮＡの標的部位への変異の導入方法。
【請求項１７】
第１のベクターがウイルスベクターである請求項１、６、１３または１６いずれか記載の方法。
【請求項１８】
第２のベクターがウイルスベクターである請求項１、６、１３または１６いずれか記載の方法。
【請求項１９】
第１のベクターがプラスミドである請求項１、６、１３または１６いずれか記載の方法。
【請求項２０】
ａ）標的ＤＮＡを含んでなるベクターを細胞に導入する工程、前記標的ＤＮＡは制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）標的部位に相同のＤＮＡおよび（２）染色体ＤＮＡへの導入対象の変異を含んでなる；ならびに
ｂ）ベクターに存在する制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼを細胞に導入する工程、
を含む、細胞の染色体ＤＮＡの標的部位への変異の導入方法。
【請求項２１】
（ａ）制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接しており、かつ（１）標的部位に相同のＤＮＡおよび（２）染色体ＤＮＡへの導入対象の変異を含んでなる、標的ＤＮＡ；ならびに（ｂ）制限エンドヌクレアーゼ部位を切断する制限エンドヌクレアーゼをコードする核酸を含んでなるベクターを細胞に導入する工程を含む、細胞の染色体ＤＮＡの標的部位への変異の導入方法。
【請求項２２】
ベクターがウイルスベクターである請求項３、４、７、８、１４、１５、２０または２１いずれか記載の方法。
【請求項２３】
前記標的ＤＮＡが２つの制限エンドヌクレアーゼ部位に隣接する請求項３、４、６〜８または１３〜１６、２０または２１いずれか記載の方法。