【手続補正書】
【提出日】平成19年11月8日(2007.11.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
形質転換された宿主細胞であって、
ｉ）細胞増殖を阻害する染色体遺伝子；および
ｉｉ）アンチセンス配列をコードするプラスミド、
を含み、該プラスミドによってコードされるアンチセンス配列は、該染色体遺伝子の作用を阻害し、それによって細胞増殖を許容する、形質転換された宿主細胞。
【請求項２】
前記プラスミドは目的の遺伝子の挿入のためのクローニング部位を含む、請求項１に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項３】
前記プラスミドはさらに目的の遺伝子を含む、請求項１もしくは請求項２に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項４】
前記プラスミドによってコードされるアンチセンス配列は、前記染色体遺伝子に結合することによって該染色体遺伝子の作用を阻害する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項５】
前記プラスミドによってコードされるアンチセンス配列は、前記染色体遺伝子から転写されるｍＲＮＡに結合することによって該染色体遺伝子の作用を阻害する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項６】
調節配列が前記染色体遺伝子に作動的に連結される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項７】
前記プラスミドによってコードされるアンチセンス配列は、前記調節配列に結合することによって前記染色体遺伝子の作用を阻害する、請求項６に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項８】
前記プラスミドによってコードされるアンチセンス配列は、前記調節配列から転写されるｍＲＮＡに結合することによって前記染色体遺伝子の作用を阻害する、請求項６に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項９】
前記プラスミドによってコードされるアンチセンス配列は、該プラスミドの複製起点によってコードされる、請求項８に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項１０】
前記プラスミドによってコードされるアンチセンス配列は、ＲＮＡＩもしくはＲＮＡＩの一部であり、前記染色体遺伝子に作動的に連結される調節配列は、ＲＮＡＩＩもしくはＲＮＡＩＩの一部をコードする、請求項９に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項１１】
前記プラスミドによってコードされるアンチセンス配列は、ＲＮＡＩＩもしくはＲＮＡＩＩの一部であり、前記染色体遺伝子に作動的に連結される調節配列は、ＲＮＡＩもしくはＲＮＡＩの一部である、請求項１０に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項１２】
細胞増殖を阻害する染色体遺伝子を含む宿主細胞であって、該染色体遺伝子は、該染色体遺伝子の上流に位置する調節配列に作動的に連結されており、該調節配列は、ＲＮＡＩ遺伝子もしくはＲＮＡＩ遺伝子の一部、またはＲＮＡＩＩ遺伝子もしくはＲＮＡＩＩ遺伝子の一部をコードする、宿主細胞。
【請求項１３】
前記細胞はインビトロで培養中である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞、もしくは請求項１２に記載の宿主細胞。
【請求項１４】
原核細胞である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞、もしくは請求項１２および請求項１３に記載の宿主細胞。
【請求項１５】
細菌細胞である、請求項１４に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項１６】
前記細胞はグラム陰性細菌細胞である、請求項１５に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項１７】
前記細胞はＥ．ｃｏｌｉ細胞もしくはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ細胞である、請求項１６に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項１８】
前記細胞はグラム陽性細菌細胞である、請求項１５に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項１９】
前記細胞はＢａｃｉｌｌｕｓ細胞である、請求項１８に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項２０】
弱毒化された細胞である、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項２１】
前記細胞は真核細胞である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項２２】
前記細胞は酵母のような真菌である、請求項２１に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項２３】
前記細胞は植物細胞である、請求項２１に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項２４】
前記細胞は、哺乳類細胞もしくは昆虫細胞のような動物細胞である、請求項２１に記載の形質転換された宿主細胞。
【請求項２５】
前記染色体遺伝子はトキシン遺伝子である、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項２６】
前記トキシン遺伝子はｓａｃＢである、請求項２５に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項２７】
前記染色体遺伝子は、細胞増殖のために必須な第二の染色体遺伝子の発現を阻害するリプレッサータンパク質をコードする、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項２８】
前記第二の染色体遺伝子は、細胞増殖のために条件的に必須である、請求項２７に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項２９】
前記染色体遺伝子はリプレッサーｌａｃＩをコードし、前記第二の染色体遺伝子はｌａｃＩのオペレーターおよびプロモーターに作動的に連結される、請求項２７もしくは請求項２８に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項３０】
前記染色体遺伝子はｄａｐＤもしくはｆａｂＡである、請求項２７もしくは請求項２８に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項３１】
前記染色体遺伝子は、細胞増殖のために必須な第二の染色体遺伝子の発現を阻害するアンチセンス配列をコードする、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項３２】
前記染色体遺伝子によってコードされるアンチセンス配列は、前記第二の染色体遺伝子に結合することによって該第二の染色体遺伝子の発現を阻害する、請求項３１に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項３３】
前記染色体遺伝子によってコードされるアンチセンス配列は、前記第二の染色体遺伝子から転写されるｍＲＮＡに結合することによって該第二の染色体遺伝子の発現を阻害する、請求項３１に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項３４】
前記第二の染色体遺伝子は、細胞増殖のために条件的に必須である、請求項３１〜３３のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項３５】
前記第二の染色体遺伝子は、ｄａｐＤもしくはｆａｂＡである、請求項３１〜３３のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項３６】
前記染色体遺伝子もしくは前記調節配列−染色体遺伝子融合体は、構成的プロモーターの制御下にある、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項３７】
前記染色体遺伝子、もしくは前記調節配列−染色体遺伝子融合体は、誘導性プロモーターの制御下にある、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項３８】
インビトロで宿主細胞内にプラスミドを維持する方法であって、該方法は、請求項１〜１１のいずれか１項もしくは請求項１３〜３７のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞を、該細胞が増殖することを許容するために十分な条件下で培養する工程を包含する、方法。
【請求項３９】
プラスミドＤＮＡを産生する方法であって、該方法は、形質転換された宿主細胞を請求項３８に記載の方法に従って培養する工程、および該プラスミドＤＮＡを単離する工程を包含する、方法。
【請求項４０】
組換えタンパク質を産生する方法であって、該方法は、目的のタンパク質をコードするプラスミドを含む形質転換された宿主細胞を請求項３８に記載の方法に従って培養する工程、および該タンパク質を該細胞から単離する工程を包含する、方法。
【請求項４１】
薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞を、薬学的に受容可能な賦形剤、希釈剤、もしくは緩衝剤と共に含む、薬学的組成物。
【請求項４２】
治療用途のための、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞。
【請求項４３】
遺伝子送達もしくはタンパク質送達のための薬の製造における、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞もしくは宿主細胞の使用。
【請求項４４】
目的の遺伝子を患者に送達するための組成物であって、該組成物は、請求項３〜１１もしくは請求項１３〜３７のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞を含む、組成物。
【請求項４５】
レシピエント生物体内にプラスミドを維持するための組成物であって、該組成物は、請求項１〜１１もしくは請求項１３〜３７のいずれか１項に記載の形質転換された宿主細胞を含み、該形質転換された宿主細胞内の前記染色体遺伝子は、インビボでの細胞増殖のために必須である、組成物。