(57)【要約】  本開示は、血清鉄濃度の減少が有益であり得る各種状態の治療のための治療法におけるヘプシジンの使用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象において状態を治療する方法であって、ヘプシジン又はミニへプシジンを含む組成物を対象に投与することを含む方法。
【請求項２】
組成物を対象に投与することが、ヘプシジン又はミニへプシジン約10μg〜約1グラムを投与することを含む、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
組成物を対象に投与することが、ヘプシジン又はミニへプシジン約100μg〜約100mgを投与することを含む、請求項2に記載の方法。
【請求項４】
組成物を対象に投与することが、ヘプシジン又はミニへプシジン約200μg〜約50mgを投与することを含む、請求項3に記載の方法。
【請求項５】
組成物を対象に投与することが、ヘプシジン又はミニへプシジン約500μg〜約10mgを投与することを含む、請求項4に記載の方法。
【請求項６】
ヘプシジン又はミニへプシジンを含む組成物を対象に投与することが、ヘプシジン又はミニへプシジン約500μg、約600μg、約667μg、約700μg、約750μg、約800μg、約850μg、約900μg、約950μg、約1000μg、約1200μg、約1250μg、約1300μg、約1333μg、約1350μg、約1400μg、約1500μg、約1667μg、約1750μg、約1800μg、約2000μg、約2200μg、約2250μg、約2300μg、約2333μg、約2350μg、約2400μg、約2500μg、約2667μg、約2750μg、約2800μg、約3mg、約3.3mg、約3.5mg、約3.7mg、約4mg、約4.5mg、約5mg、約6mg、約7mg、約8mg、約9mg、又は約10mgを投与することを含む、請求項5に記載の方法。
【請求項７】
組成物を対象に投与することが、組成物のボーラスを投与することを含む、請求項1〜6の何れか1項に記載の方法。
【請求項８】
組成物を投与することが、組成物を少なくとも1カ月に1回投与することを含む、請求項1〜7の何れか1項に記載の方法。
【請求項９】
組成物を投与することが、組成物を少なくとも1週間に1回投与することを含む、請求項8に記載の方法。
【請求項１０】
組成物を投与することが、組成物を1週間に1回、2回、3回、4回、5回、6回、又は7回投与することを含む、請求項9に記載の方法。
【請求項１１】
組成物を投与することが、組成物を1週間に1回、2回、又は3回投与することを含む、請求項10に記載の方法。
【請求項１２】
ヘプシジン又はミニへプシジン約10μg〜約1グラムが、組成物が投与されるたびに投与される、請求項8〜11の何れか1項に記載の方法。
【請求項１３】
ヘプシジン又はミニへプシジン約100μg〜約100mgが、組成物が投与されるたびに投与される、請求項12に記載の方法。
【請求項１４】
ヘプシジン又はミニへプシジン約200μg〜約50mgが、組成物が投与されるたびに投与される、請求項13に記載の方法。
【請求項１５】
ヘプシジン又はミニへプシジン約500μg〜約10mgが、組成物が投与されるたびに投与される、請求項14に記載の方法。
【請求項１６】
ヘプシジン又はミニへプシジン約500μg、約600μg、約667μg、約700μg、約750μg、約800μg、約850μg、約900μg、約950μg、約1000μg、約1200μg、約1250μg、約1300μg、約1333μg、約1350μg、約1400μg、約1500μg、約1667μg、約1750μg、約1800μg、約2000μg、約2200μg、約2250μg、約2300μg、約2333μg、約2350μg、約2400μg、約2500μg、約2667μg、約2750μg、約2800μg、約3mg、約3.3mg、約3.5mg、約3.7mg、約4mg、約4.5mg、約5mg、約6mg、約7mg、約8mg、約9mg、又は約10mgが、組成物が投与されるたびに投与される、請求項15に記載の方法。
【請求項１７】
組成物が、皮下に、静脈内に、筋内に、鼻腔内に、吸入によって、経口的に、舌下に、口腔内頬側投与によって、局所的に、経皮的に、又は経粘膜的に投与される、請求項1〜16の何れか1項に記載の方法。
【請求項１８】
組成物が、注射によって投与される、請求項1〜17の何れか1項に記載の方法。
【請求項１９】
組成物が、静脈内に投与される、請求項17に記載の方法。
【請求項２０】
状態が、α-サラセミア、中間型サラセミア、β-サラセミア、ヘモクロマトーシス、鎌状赤血球症、不応性貧血、又は溶血性貧血である、請求項1〜19の何れか1項に記載の方法。
【請求項２１】
状態が貧血であり、貧血が、異常ヘモグロビン症、鉄芽球性貧血、骨髄異形成症候群(MDS)に伴う貧血、又は先天性貧血である、請求項20に記載の方法。
【請求項２２】
状態が、肝細胞癌、心筋症、又は糖尿病である、請求項1〜19の何れか1項に記載の方法。
【請求項２３】
状態が、ウイルス、細菌、真菌、又は原生生物感染である、請求項1〜19の何れか1項に記載の方法。
【請求項２４】
状態が細菌感染であり、細菌が、大腸菌(Escherichia coli)、ナイセリア・シネレア(Neisseria cinerea)、ナイセリア・ゴノレア(Neisseria gonorrhoeae)、表皮ブドウ球菌(Staphylococcus epidermidis)、黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、又はB群溶血性連鎖球菌(Streptococcus agalactiae)である、請求項23に記載の方法。
【請求項２５】
状態が真菌感染であり、真菌が、カンジダ・アルビカンス(Candida albicans)である、請求項23に記載の方法。
【請求項２６】
状態が原生生物感染であり、原生生物が、クルーズトリパノソーマ(Trypanosoma cruzi)、プラスモジウム属(Plasmodium)(例えば、熱帯熱マラリア原虫(P. falciparum)、三日熱マラリア原虫(P. vivax)、卵形マラリア原虫(P. ovale)、又は四日熱マラリア原虫(P. malariae))、ブルーストリパノソーマ(Trypanosoma brucei)(例えば、ガンビアトリパノソーマ(T. brucei gambiense)又はローデシアトリパノソーマ(T. brucei rhodesiense))、又はリーシュマニア属(Leishmania)である、請求項23に記載の方法。
【請求項２７】
状態が、シャーガス病、マラリア、アフリカ睡眠病、又はリーシュマニア症である、請求項1〜19、23及び26の何れか1項に記載の方法。
【請求項２８】
状態がウイルス感染であり、ウイルスが、B型肝炎、C型肝炎、又はデングウイルスである、請求項23に記載の方法。
【請求項２９】
状態が細菌感染であり、細菌感染が結核である、請求項23に記載の方法。
【請求項３０】
対象が哺乳動物である、請求項1〜29の何れか1項に記載の方法。
【請求項３１】
対象が、齧歯類、ウサギ類、ネコ、イヌ、ブタ、ヒツジ、ウシ、ウマ、又は霊長類である、請求項30に記載の方法。
【請求項３２】
対象がヒトである、請求項31に記載の方法。
【請求項３３】
対象が、組成物を投与する前に、約100ng/mL未満の血清ヘプシジン濃度を有する、請求項32に記載の方法。
【請求項３４】
対象が、組成物を投与する前に、50ng/mL未満の血清ヘプシジン濃度を有する、請求項33に記載の方法。
【請求項３５】
対象が、組成物を投与する前に、100ng/mLを上回る血清フェリチン濃度を有する、請求項32〜34の何れか1項に記載の方法。
【請求項３６】
対象が、組成物を投与する前に、1000ng/mLを上回る血清フェリチン濃度を有する、請求項35に記載の方法。
【請求項３７】
対象が、組成物を投与する前に、約40〜約50mg/kgの全身鉄含有量を有する、請求項32〜36の何れか1項に記載の方法。
【請求項３８】
対象が、組成物を投与する前に、50mg/kgを上回る全身鉄含有量を有する、請求項32〜36の何れか1項に記載の方法。
【請求項３９】
対象が、組成物を投与する前に、60mg/kgを上回る全身鉄含有量を有する、請求項38に記載の方法。
【請求項４０】
対象の血清鉄濃度が、組成物を投与する前に、少なくとも約100μg/dLである、請求項32〜39の何れか1項に記載の方法。
【請求項４１】
対象の血清鉄濃度が、組成物を投与する前に、少なくとも約200μg/dLである、請求項40に記載の方法。
【請求項４２】
対象のトランスフェリン飽和が、組成物を対象に投与する前に、約20%を上回る、請求項32〜41の何れか1項に記載の方法。
【請求項４３】
対象のトランスフェリン飽和が、組成物を対象に投与する前に、約50%を上回る、請求項42に記載の方法。
【請求項４４】
組成物が、ヘプシジンを含み、ヘプシジンが、配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、又は配列番号5に記載するアミノ酸配列を含む、請求項1〜43の何れか1項に記載の方法。
【請求項４５】
組成物が、ヘプシジンを含み、ヘプシジンが、配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、又は配列番号5に記載するアミノ酸配列と少なくとも90%配列相同性を有するアミノ酸配列を含む、請求項1〜43の何れか1項に記載の方法。
【請求項４６】
ヘプシジンが、配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、又は配列番号5における8つのシステインそれぞれを含む、請求項45に記載の方法。
【請求項４７】
配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、又は配列番号5における8つのシステインが、ヘプシジンにおいて4つのジスルフィド結合を形成する、請求項44又は46に記載の方法。
【請求項４８】
ヘプシジンが、配列番号1に記載するアミノ酸配列を含む、請求項44〜47の何れか1項に記載の方法。
【請求項４９】
組成物が、ヘプシジンを含み、ヘプシジンが、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、又は配列番号10に記載する配列を含む、請求項1〜43の何れか1項に記載の方法。
【請求項５０】
配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、又は配列番号10の8つのシステインが、ヘプシジンにおいて4つのジスルフィド結合を形成する、請求項49に記載の方法。
【請求項５１】
組成物が、ミニヘプシジンを含む、請求項1〜43の何れか1項に記載の方法。
【請求項５２】
状態が、マラリアである、請求項1〜19の何れか1項に記載の方法。
【請求項５３】
マラリアが、マラリアの薬剤耐性株である、請求項52に記載の方法。
【請求項５４】
ミニヘプシジン又はヘプシジンを含む組成物が、抗マラリア薬と共同して投与される、請求項52に記載の方法。
【請求項５５】
抗マラリア薬が、テトラサイクリン、プログアニル、クロルプログアニル、ピロナリジン、ルメファントリネル(lumefantrinel)、メフロキン、ダプソン、アトバコン、アルテスネート、及びアルテミシニンから選択される、請求項54に記載の方法。
【請求項５６】
対象が、G6PD欠損症を有する、請求項52に記載の方法。
【請求項５７】
マラリアを有する対象において薬剤耐性を防止する方法であって、抗マラリア薬及びヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物を対象に投与することを含む方法。
【請求項５８】
抗マラリア薬が、テトラサイクリン、プログアニル、クロルプログアニル、ピロナリジン、ルメファントリネル(lumefantrinel)、メフロキン、ダプソン、アトバコン、アルテスネート、及びアルテミシニンから選択される、請求項57に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、2016年1月8日に出願された米国仮出願番号第62/276,727号、2016年1月10日に出願された米国仮出願番号第62/276,922号、2016年1月26日に出願された米国仮出願番号第62/287,285号、2016年9月28日に出願された米国仮出願番号第62/400,795号、及び2016年12月19日に出願された米国仮出願番号第62/436,070号に対する優先権の有益性を主張し、それらはそれぞれ、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
鉄は、ほとんど全ての生物の成長及び生存に必要とされる必須要素である。哺乳動物では、鉄バランスは、食事に含まれる鉄の十二指腸吸収のレベルで主に調節される。吸収後、第二鉄は、循環中にアポトランスフェリンに負荷されて、赤血球前駆細胞を含む組織へ輸送され、それはそこで、トランスフェリン受容体媒介性エンドサイトーシスによって吸収される。網内系マクロファージは、老化赤血球のヘモグロビンの分解からの鉄の再利用において重要な役割を果たすのに対して、肝細胞は、フェリチンポリマーにおける生物の鉄貯蔵の大部分を含有する。
【０００３】
鉄欠乏の場合、同定された遺伝子欠損の病態生理学的結果は、それらが通常、鉄吸収の経路に直接関与するタンパク質の機能の損失をもたらすので十分理解されている。タンパク質として、鉄トランスポーターDMT(Nramp2又はDCT1とも呼ばれる)、フェロポーチン(IREG1又はMTP1とも呼ばれる)、及びフェロポーチンにカップリングされた銅オキシダーゼ、即ちセルロプラスミン及びヘファスチン(haephastin)が挙げられる。更に、遺伝的鉄過剰症に伴う幾つかの異常は、他のタンパク質の同定につながってきたが、これらのタンパク質の機能的役割は、依然としてあまり理解されていない。ヒトにおいて、遺伝性ヘモクロマトーシス(HH)は、食事に含まれる鉄の過吸収によって引き起こされる一般的な常染色体劣性遺伝子疾患であり、膵臓、肝臓、及び皮膚を含む血漿並びに臓器において鉄過剰症を引き起こして、鉄沈着によって引き起こされる損傷をもたらす。
【０００４】
ヘモクロマトーシスは通常、染色体6P上に位置するHLA関連ヘモクロマトーシス遺伝子(HFEと称される)における突然変異によって引き起こされ、症状のある患者のほとんどが、C282Y突然変異に関してホモ接合性である。更に、他の遺伝子座が、遺伝性ヘモクロマトーシスに関係している:7q上のトランスフェリン受容体2遺伝子(TFR2)におけるナンセンス突然変異は、2つのHH非HLA関連ファミリーにおいて報告されており、若年性ヘモクロマトーシスに関する遺伝子座が、最近、染色体アームlq(HFE2)にマッピングされている。最終的に、鉄吸収は、身体鉄貯蔵のレベル及び赤血球生成に必要とされる鉄の量に応答して調節されることが長い間知られてきたが、鉄吸収を調整するように腸細胞をプログラムするシグナルの分子的性質は、依然として未知である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本開示は、血清鉄濃度の減少が有益であり得る各種状態の治療に関する治療法におけるヘプシジン又はミニヘプシジンの使用に関する。幾つかの態様では、本発明は、対象において状態を治療する方法であって、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物を対象に投与することを含む方法に関する。幾つかの態様では、本発明は、対象において食事に含まれる鉄の吸収を減少させる方法であって、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物を対象に投与することを含む方法に関する。幾つかの態様では、本発明は、対象の血清鉄濃度を低減する方法であって、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物を対象に投与することを含む方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】鎌状赤血球症及び高いフェリチン血清ベースラインを有する2名の患者におけるベースラインでの、及びヘプシジン投与の8日後の血清フェリチンレベルの変化を示す。
【図２】鎌状赤血球症又は遺伝性ヘモクロマトーシス及び正常なフェリチン血清ベースラインを有する患者におけるベースラインでの、及びヘプシジン投与の8日後の血清フェリチンレベルの変化を示す。
【図３】鎌状赤血球症又は遺伝性ヘモクロマトーシスの何れかを有する5名の患者におけるベースラインでの、及びヘプシジン投与の8日後の血清フェリチンレベルの変化パーセントを示す。
【図４】鎌状赤血球症又は遺伝性ヘモクロマトーシスの何れかを有する5名の患者におけるベースラインでの血清トランスフェリン飽和(TSAT)レベル、及びヘプシジン投与の8日後のTSATのパーセントを示す。
【図５】鎌状赤血球症又は遺伝性ヘモクロマトーシスの何れかを有する5名の患者におけるベースラインと、ヘプシジン投与の8日後との間のTSATレベルの変化パーセントを示す。
【図６】ヘプシジン投与後の8日間にわたる幾つかの時点での鎌状赤血球症又は遺伝性ヘモクロマトーシスの何れかを有する5名の患者における個々の血清鉄レベルを示す。図6はまた、ヘプシジン1mgを付与した患者のコホート対ヘプシジン5mgを付与した患者の別々のコホートにおける平均血清鉄レベルを示す。
【図７】ヘプシジン投与後の8日間にわたる幾つかの時点での鎌状赤血球症又は遺伝性ヘモクロマトーシスの何れかを有する5名の患者における個々の血清鉄レベルの変化パーセントを示す。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
幾つかの態様では、本発明は、対象において状態を治療する方法であって、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物を対象に投与することを含む方法に関する。幾つかの態様では、本発明は、対象における血清鉄濃度を低減する方法であって、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物を対象に投与することを含む方法に関する。上記方法は、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物を1週間に1回、2回、又は3回投与することを含み得る。ヘプシジン又はミニヘプシジンを投与することは、皮下投与、例えば皮下注射を含み得る。或いは、ヘプシジン又はミニヘプシジンを投与することは、静脈内投与を含み得る。対象は、ヘモクロマトーシス、α-サラセミア、中間型サラセミア、β-サラセミア、鎌状赤血球症、不応性貧血、又は溶血性貧血を有し得る。
【０００８】
I.投与量
上記方法は、対象に、ヘプシジン又はミニへプシジン約10μg〜約1グラム、例えばヘプシジン又はミニへプシジン約100μg〜約100mg、約200μg〜約50mg、又は約500μg〜約10mg、約500μg〜約5mg、又は約500μg〜約2mgを投与することを含み得る。上記方法は、ヘプシジン又はミニへプシジン約100μg、約150μg、約200μg、約250μg、約300μg、約333μg、約400μg、約500μg、約600μg、約667μg、約700μg、約750μg、約800μg、約850μg、約900μg、約950μg、約1000μg、約1200μg、約1250μg、約1300μg、約1333μg、約1350μg、約1400μg、約1500μg、約1667μg、約1750μg、約1800μg、約2000μg、約2200μg、約2250μg、約2300μg、約2333μg、約2350μg、約2400μg、約2500μg、約2667μg、約2750μg、約2800μg、約3mg、約3.3mg、約3.5mg、約3.7mg、約4mg、約4.5mg、約5mg、約6mg、約7mg、約8mg、約9mg、又は約10mgを投与することを含み得る。
【０００９】
ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物を対象に投与することは、組成物のボーラスを投与することを含み得る。
【００１０】
上記方法は、組成物を対象に少なくとも1カ月に1回、例えば少なくとも1週間に1回投与することを含み得る。上記方法は、組成物を対象に1週間に1回、2回、3回、4回、5回、6回、又は7回投与することを含み得る。好ましい実施形態では、上記方法は、組成物を対象に1週間に1回、2回、又は3回投与することを含む。
【００１１】
上記方法は、組成物が投与されるたびに、ヘプシジン又はミニへプシジン約10μg〜約1グラム、例えばヘプシジン又はミニへプシジン約100μg〜約100mg、約200μg〜約50mg、約500μg〜約10mg、約500μg〜約5mg、又は約500μg〜約2mgを対象に投与することを含み得る。上記方法は、組成物が投与されるたびに、ヘプシジン又はミニへプシジン約100μg、約150μg、約200μg、約250μg、約300μg、約333μg、約400μg、約500μg、約600μg、約667μg、約700μg、約750μg、約800μg、約850μg、約900μg、約950μg、約1000μg、約1200μg、約1250μg、約1300μg、約1333μg、約1350μg、約1400μg、約1500μg、約1667μg、約1750μg、約1800μg、約2000μg、約2200μg、約2250μg、約2300μg、約2333μg、約2350μg、約2400μg、約2500μg、約2667μg、約2750μg、約2800μg、約3mg、約3.3mg、約3.5mg、約3.7mg、約4mg、約4.5mg、約5mg、約6mg、約7mg、約8mg、約9mg、又は約10mgを対象に投与することを含み得る。
【００１２】
動物データに基づいて、ヘプシジン約200mgの用量は、ヒトにおいて有害作用を引き起こし得る。したがって、好ましい実施形態では、約200mg未満のヘプシジン又はミニヘプシジンが、組成物が投与されるたびにヒト対象に投与される。幾つかの実施形態では、約150mg未満、例えば約100mg未満、約90mg未満、約80mg未満、約70mg未満、約60mg未満又は約50mg未満のヘプシジン又はミニヘプシジンが、組成物が投与されるたびにヒト対象に投与される。
【００１３】
驚くべきことに、ヘプシジンの用量は、ヘプシジン1mg及びヘプシジン5mgの用量でヒト対象において有効性を示す。この投与量での有効性は、マウス、ラット及びイヌにおける動物研究に基づいて予想されなかった。したがって、幾つかの実施形態では、10mg未満、例えば約9mg未満、約8mg未満、約7mg未満、約6mg未満、約5mg、約4mg未満、約3mg未満、約2mg未満、又は約1mg未満のヘプシジン又はミニヘプシジンが、組成物が投与されるたびにヒト対象に投与される。幾つかの実施形態では、ヘプシジン又はミニへプシジン約100μg〜約10mg、例えば約100μg〜約9mg、約100μg〜約8mg、約100μg〜約7mg、約100μg〜約6mg、約100μg〜約5mg、約100μg〜約4mg、約100μg〜約3mg、約100μg〜約2mg、又は約100μg〜約1mgが、組成物が投与されるたびにヒト対象に投与される。
【００１４】
II.適応症
状態は、α-サラセミア、中間型サラセミア、β-サラセミア、ヘモクロマトーシス、鎌状赤血球症、不応性貧血、又は溶血性貧血であり得る。状態は、ヘモクロマトーシスであってもよく、ヘモクロマトーシスは、遺伝性ヘモクロマトーシスであり得る。状態は、ヘモクロマトーシスであってもよく、ヘモクロマトーシスは、肝細胞癌、心筋症、又は糖尿病に伴い得る。状態は、貧血であってもよい。貧血は、例えば、異常ヘモグロビン症、鉄芽球性貧血、骨髄異形成症候群(MDS)に伴う貧血、又は先天性貧血であり得る。状態は、骨髄異形成症候群(MDS)であってもよい。状態は、異常ヘモグロビン症、鉄芽球性貧血、又は先天性貧血であり得る。幾つかの実施形態では、状態は、肝細胞癌、心筋症、又は糖尿病であり得る。
【００１５】
状態は、ウイルス、細菌、真菌、又は原生生物感染であり得る。幾つかの実施形態では、状態は細菌感染であり、細菌は、大腸菌(Escherichia coli)、マイコバクテリウム属(Mycobacterium)(例えば、M.アフリカヌム(M. africanum)、M.アビウム(M. avium)、M.ツベルクローシス(M. tuberculosis)、M.ボビス(M. bovis)、M.カネッティ(M. canetti)、M.カンサシ(M. kansasii)、M.レプラ(M. leprae)、M.レプロマトーシス(M. lepromatosis)、又はM.ミクロチ(M. microti))、ナイセリア・シネレア(Neisseria cinerea)、ナイセリア・ゴノレア(Neisseria gonorrhoeae)、表皮ブドウ球菌(Staphylococcus epidermidis)、黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、又はB群溶血性連鎖球菌(Streptococcus agalactiae)である。幾つかの実施形態では、状態は真菌感染であり、真菌は、カンジダ・アルビカンス(Candida albicans)である。幾つかの実施形態では、状態は原生生物感染であり、原生生物が、クルーズトリパノソーマ(Trypanosoma cruzi)、プラスモジウム属(Plasmodium)(例えば、熱帯熱マラリア原虫(P. falciparum)、三日熱マラリア原虫(P. vivax)、卵形マラリア原虫(P. ovale)、又は四日熱マラリア原虫(P. malariae))、ブルーストリパノソーマ(Trypanosoma brucei)(例えば、ガンビアトリパノソーマ(T. brucei gambiense)又はローデシアトリパノソーマ(T. brucei rhodesiense))、又はリーシュマニア属(Leishmania)である。状態は、ウイルス、細菌、真菌、又は原生生物感染であってもよく、ウイルス、細菌、真菌、又は原生生物感染は、ウイルス、細菌、真菌、又は原生生物感染を治療するための1つ以上の作用物質に対して耐性であり得る。状態は細菌感染であってもよく、細菌感染は、結核であり得る。状態は、シャーガス病、マラリア、アフリカ睡眠病、又はリーシュマニア症であり得る。幾つかの実施形態では、状態はウイルス感染であり、ウイルスは、B型肝炎、C型肝炎、又はデングウイルスである。
【００１６】
上記方法は、4-アミノサリチル酸、アルデスルホン、アミカシン、アミチオゾン、ベダキリン、カプレオマイシン、クロファジミン、サイクロセリン、ダプソン、デラマニド、エタンブトール、フルオロキノロン、イソニアジド、カナマイシン、修飾ワクシニアAnkara 85A(MVA85A)、モリナミド、オフロキサシン、ピラジナミド、組換えカルメット・ゲラン菌(Bacillus Calmette-Guerin)30(rBCG30)、リファンピシン、リファタール、ストレプトマイシン、テリジドン、及び/又はチオアセタゾンの、対象への共同投与（conjoint administration）を含み得る。上記方法は、バロフロキサシン、シノキサシン、シプロフロキサシン、クリナフロキサシン、ダノフロキサシン、デラフロキサシン、ジフロキサシン、エノキサシン、エンロフロキサシン、フレロキサシン、第4世代、ガチフロキサシン、ゲミフロキサシン、グレパフロキサシン、イバフロキサシン、JNJ-Q2、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、マルボフロキサシン、モキシフロキサシン、ナジフロキサシン、ナリジクス酸、ネモノキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、オルビフロキサシン、オキソリニン酸、パズフロキサシン、ペフロキサシン、ピペミド酸、ピロミド酸、プルリフロキサシン、ロソクサシン、ルフロキサシン、サラフロキサシン、シタフロキサシン、スパルフロキサシン、テマフロキサシン、トスフロキサシン、及び/又はトロバフロキサシンの、対象への共同投与を含み得る。ある特定のそのような実施形態では、状態は、結核及び/又はマイコバクテリウム属感染であり得る。状態は結核であってもよく、結核は、薬剤耐性結核であり得る。状態は、結核であってもよく、結核は、多剤耐性結核(MDR-TB)、広範囲薬剤耐性結核(XDR-TB)、又は完全薬剤耐性(totally drug-resistant)結核(TDR-TB)であり得る。状態は結核であってもよく、結核は、薬剤耐性、多剤耐性、広範囲薬剤耐性、又は完全薬剤耐性でなくてもよい。状態は、結核及び/又はマイコバクテリウム属感染であってもよく、状態は、イソニアジド、エタンブトール、リファンピシン、ピラジナミド、オフロキサシン、1つ以上のフルオロキノロン、アミカシン、カナマイシン、及び/又はカプレオマイシンに対して耐性であり得る。
【００１７】
上記方法は、フルコナゾール、ケトコナゾール、ミコナゾール、及び/又はイトラコナゾールの、対象への共同投与を含み得る。ある特定のそのような実施形態では、状態は、シャーガス病及び/又はクルーズトリパノソーマ感染であってもよく、状態は、フルコナゾール、ケトコナゾール、ミコナゾール、及び/又はイトラコナゾールのうちの1つ以上に対して耐性であり得る。上記方法は、フルコナゾール、ベンズニダゾール、及び/又はアンホテリシンBの、対象への共同投与を含み得る。
【００１８】
状態はアフリカ睡眠病であってもよく、上記方法は、ヒ素剤(arsenical)及び/又はジアミジンを、対象へ共同して投与することを含み得る。状態は、アフリカ睡眠病及び/又はブルーストリパノソーマ感染であってもよく、状態は、ヒ素剤及び/又はジアミジンに対して耐性であり得る。
【００１９】
状態はリーシュマニア症であってもよく、上記方法は、五価アンチモンを、対象へ共同して投与することを含み得る。状態は、リーシュマニア症であってもよく、状態は、五価アンチモンに対して耐性であり得る。上記方法は、アンホテリシン、アンホテリシンB、五価アンチモン、ミルテホシン、パロモマイシン、及び/又はフルコナゾールを、対象へ共同して投与することを含み得る。
【００２０】
状態は、マラリアであってもよい。状態は、マラリアであってもよく、マラリアは、マラリアを治療するための1つ以上の作用物質に対して耐性であり得る。状態は、マラリアであってもよく、上記方法は、クロロキン、キニーネ、スルファドキシン-ピリメタミン、ハロファントリン、アトバコン、及び/又はメフロキンの、対象への共同投与を含み得る。状態は、マラリアであってもよく、マラリアは、クロロキン、キニーネ、スルファドキシン-ピリメタミン、ハロファントリン、アトバコン、及び/又はメフロキンのうちの1つ以上に対して耐性であり得る。状態は、多剤耐性熱帯熱マラリア感染であり得る。本明細書中に提供する方法は、対象におけるマラリアを、抗マラリア薬と組み合わせて、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物で治療することを含む。上記方法は、1つ以上の抗マラリア薬(例えば、テトラサイクリン、クアニン(quanine)様薬物、及びアルテメシニン(artemesinin)誘導体)の、対象への共同投与を含み得る。例示的な抗マラリア薬として、テトラサイクリン(例えば、テトラサイクリン又はテトラサイクリン誘導体)、プログアニル、クロルプログアニル、ピロナリジン、ルメファントリネル(lumefantrinel)、メフロキン、ダプソン、アトバコン、及び/又はアルテスネートが挙げられる。上記方法は、アルテミシニン又はアルテミシニン誘導体の、対象への共同投与を含み得る。上記方法は、アルテスネート、アルテミシニン、ジヒドロ-アルテミシニン、アルテリネート(artelinate)、アルテエーテル、及び/又はアルテムエーテルの、対象への共同投与を含み得る。
【００２１】
幾つかの態様では、マラリアは、マラリアの薬剤耐性株である。幾つかの態様では、本明細書中に提供する方法は、対象における鉄欠乏(depravation)を誘導する組成物(例えば、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物)及び抗マラリア薬(例えば、本明細書中に開示する抗マラリア薬)を対象に共同して投与することによって、対象における抗マラリア薬剤耐性を防止する方法である。上記方法は、アルテミシニン又はアルテミシニン誘導体の、対象への共同投与を含み得る。幾つかの態様では、本明細書中に提供する方法は、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物を、アルテミシニン又はアルテミシニン誘導体と共同して対象に投与することによって、対象におけるアルテミシニン又はアルテミシニン誘導体薬剤耐性を防止する方法である。幾つかの実施形態では、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物及び抗マラリア薬を対象に共同して投与することによって、対象における抗マラリア薬剤耐性を防止又は治療する方法が、本明細書中に提供される。
【００２２】
幾つかの態様では、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物を対象に投与することによって、対象におけるマラリアを治療する方法が、本明細書中に提供される。幾つかの実施形態では、対象は、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物の投与前に、抗マラリア薬(例えば、本明細書中に開示する抗マラリア薬)を用いてマラリアに関して治療されている。幾つかの実施形態では、対象は、抗マラリア薬物治療に応答して、有害な副作用を有する。幾つかの態様では、対象は、抗マラリア薬に不応性である。幾つかの態様では、対象は、抗マラリア薬に対して禁忌である。対象は、グルコース-6-リン酸脱水素酵素(G6PD)欠損症を有し得る。G6PD欠損症は、酸素を肺から組織へと身体全体にわたって運搬する赤血球に影響を及ぼすX染色体伝達障害である。罹患した患者において、グルコース-6-リン酸脱水素酵素の欠損は、赤血球を早熟に分解させる。赤血球のこの破壊は、溶血と呼ばれる。グルコース-6-リン酸脱水素酵素欠損症に伴う最も一般的な医学的問題は、溶血性貧血であり、それは、赤血球が、身体がそれを交換することができるよりも速く破壊される場合に起こる。グルコース-6-リン酸脱水素酵素欠損症を有する人々において、溶血性貧血は、ほとんどの場合、細菌若しくはウイルス感染によって、又はある特定の薬物(例えば、マラリアを治療するのに使用される薬物療法)によって誘発される。幾つかの態様では、対象がG6PD欠損症を有するかどうかを決定すること、及び対象がG6PD欠損症を有する場合、本明細書中に開示するヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物を対象に投与することによって、対象におけるマラリアを治療する方法が、本明細書中に提供される。上記組成物は、抗マラリア薬とともに共同して投与され得る。対象は、半定量的又は定量的分析によって、G6PD欠損症に関してスクリーニングされ得る。半定量的分析として、G6PD活性の結果として産生される補酵素産物の生成、例えばニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸(NADP)からのニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸(NADPH)の生成を検出する試験が挙げられる。この試験の一例は、蛍光スポット試験である。この試験は、NADPからのNADPHの生成を測定する。試験は、血液スポットが、紫外線下で蛍光を示すことができない場合に陽性である。スポット試験の変形は、裸眼検査による単純な色彩変化によって読み取ることができる試験を含む。例えば、メトヘモグロビン還元試験(MRT)によってNADPH濃度を間接的に決定することを含む他の半定量的方法を用いてもよい。この試験は、NADPH酸化後に産生されるメトヘモグロビンレベルを測定する。用いられ得る更に別の試験は、細胞化学的分類アッセイであり、それは、個々の赤血球のレベルでの古典的なメトヘモグロビン還元試験の蛍光定量的読取りを提供する。定量的試験として、分光光度的アッセイが挙げられ、ここで、NADPH生成の割合が、特異的な波長で分光光度的に測定される。G6PD欠損症に関する他の試験として、DNAベースの遺伝子型解析及び配列決定が挙げられる。状態は、鎌状赤血球症であり得る。幾つかの実施形態では、対象は、鎌状赤血球症又は鎌状赤血球貧血であると診断される。ヘプシジン又はミニヘプシジンは、全身鉄欠乏を誘導しないか、又は対象における既存���鉄欠乏を悪化させない用量で、対象に投与され得る。鉄欠乏は、無効の赤血球形成、低レベルの血清鉄、又は鉄結合能の減少の結果であり得る。当業者の医師又は獣医師は、必要とされる組成物(例えば、ヘプシジン又はミニヘプシジンを含む組成物)の有効量を容易に決定及び処方することができる。例えば、医師又は獣医師は、所望の治療効果を達成するために必要とされるレベルよりも低いレベルで、組成物において用いられる化合物の用量を処方及び/又は投与して、所望の効果が達成されるまで、投与量を徐々に増大することができる。
【００２３】
III.対象
対象は、哺乳動物であり得る。対象は、齧歯類、ウサギ類、ネコ、イヌ、ブタ、ヒツジ、ウシ、ウマ、又は霊長類であり得る。好ましい実施形態では、対象はヒトである。対象は、雄又は雌であり得る。対象は、乳幼児、小児又は成体であり得る。
【００２４】
幾つかの実施形態では、対象の血清鉄濃度は、組成物を投与する前に、少なくとも約50μg/dL、例えば少なくとも約55μg/dL、少なくとも約60μg/dL、少なくとも約65μg/dL、少なくとも約70μg/dL、少なくとも約75μg/dL、少なくとも約80μg/dL、少なくとも約85μg/dL、少なくとも約90μg/dL、少なくとも約95μg/dL、少なくとも約100μg/dL、少なくとも約110μg/dL、少なくとも約120μg/dL、少なくとも約130μg/dL、少なくとも約140μg/dL、少なくとも約150μg/dL、少なくとも約160μg/dL、少なくとも約170μg/dL、少なくとも約175μg/dL、少なくとも約176μg/dL、少なくとも約177μg/dL、少なくとも約180μg/dL、少なくとも約190μg/dL、少なくとも約200μg/dL、少なくとも約210μg/dL、少なくとも約220μg/dL、少なくとも約230μg/dL、少なくとも約240μg/dL、少なくとも約250μg/dL、少なくとも約260μg/dL、少なくとも約270μg/dL、少なくとも約280μg/dL、少なくとも約290μg/dL、又は少なくとも約300μg/dLである。対象の血清鉄濃度は、組成物を投与する前に、約50μg/dL〜約500μg/dL、例えば約55μg/dL〜約500μg/dL、約60μg/dL〜約500μg/dL、約65μg/dL〜約500μg/dL、約70μg/dL〜約500μg/dL、約75μg/dL〜約500μg/dL、約80μg/dL〜約500μg/dL、約85μg/dL〜約500μg/dL、約90μg/dL〜約500μg/dL、約95μg/dL〜約500μg/dL、約100μg/dL〜約500μg/dL、約110μg/dL〜約500μg/dL、約120μg/dL〜約500μg/dL、約130μg/dL〜約500μg/dL、約140μg/dL〜約500μg/dL、約150μg/dL〜約500μg/dL、約160μg/dL〜約500μg/dL、約170μg/dL〜約500μg/dL、約175μg/dL〜約500μg/dL、約176μg/dL〜約500μg/dL、約177μg/dL〜約500μg/dL、約180μg/dL〜約500μg/dL、約190μg/dL〜約500μg/dL、約200μg/dL〜約500μg/dL、約210μg/dL〜約500μg/dL、約220μg/dL〜約500μg/dL、約230μg/dL〜約500μg/dL、約240μg/dL〜約500μg/dL、約250μg/dL〜約500μg/dL、約260μg/dL〜約500μg/dL、約270μg/dL〜約500μg/dL、約280μg/dL〜約500μg/dL、約290μg/dL〜約500μg/dL、又は約300μg/dL〜約500μg/dLであり得る。
【００２５】
好ましい実施形態では、組成物を対象に投与することは、対象の血清鉄濃度を減少させる。例えば、組成物を投与することは、対象の血清鉄濃度を、少なくとも約5μg/dL、少なくとも約10μg/dL、少なくとも約5μg/dL、少なくとも約20μg/dL、少なくとも約30μg/dL、少なくとも約40μg/dL、少なくとも約50μg/dL、少なくとも約60μg/dL、少なくとも約70μg/dL、少なくとも約80μg/dL、少なくとも約90μg/dL、又は少なくとも約100μg/dL分減少させる。組成物を投与することは、対象の血清鉄濃度を、少なくとも24時間減少させ得る。例えば、組成物を投与することは、対象の血清鉄濃度を、少なくとも24時間、少なくとも約5μg/dL分減少させ得る。組成物を投与することは、対象の血清鉄濃度を、少なくとも4時間、少なくとも6時間、又は少なくとも12時間、少なくとも約5μg/dL分減少させ得る。組成物を投与することは、対象の血清鉄濃度を、少なくとも1日間、少なくとも2日間、少なくとも3日間、少なくとも4日間、少なくとも5日間、少なくとも6日間、少なくとも7日間、又は少なくとも8日間、少なくとも約5μg/dL分減少させ得る。組成物を投与することは、対象の血清鉄濃度を、少なくとも約5%、例えば少なくとも約10%、少なくとも約15%、少なくとも約20%、少なくとも約25%、又は更には少なくとも約30%分減少させ得る。組成物を投与することは、対象の血清鉄濃度を、少なくとも4時間、少なくとも6時間、又は少なくとも12時間、少なくとも約5%分減少させ得る。組成物を投与することは、対象の血清鉄濃度を、少なくとも1日間、少なくとも2日間、少なくとも3日間、少なくとも4日間、少なくとも5日間、少なくとも6日間、少なくとも7日間、又は少なくとも8日間、少なくとも約5%分減少させ得る。
【００２６】
幾つかの実施形態では、対象は、組成物を投与する前に、約1000ng/mL未満、例えば約900ng/mL未満、約800ng/mL未満、約700ng/mL未満、約600ng/mL未満、約500ng/mL未満、約400ng/mL未満、約300ng/mL未満、約200ng/mL未満、約100ng/mL未満、約90ng/mL未満、約80ng/mL未満、約70ng/mL未満、約60ng/mL未満、約50ng/mL未満、約40ng/mL未満、約30ng/mL未満、約20ng/mL未満、又は約10ng/mL未満の血清ヘプシジン濃度を有する。対象は、組成物を投与する前に、約1ng/mL〜約1000ng/mL、例えば約1ng/mL〜約900ng/mL、約1ng/mL〜約800ng/mL、約1ng/mL〜約700ng/mL、約1ng/mL〜約600ng/mL、約1ng/mL〜約500ng/mL、約1ng/mL〜約400ng/mL、約1ng/mL〜約300ng/mL、約1ng/mL〜約200ng/mL、約1ng/mL〜約100ng/mL、約1ng/mL〜約90ng/mL、約1ng/mL〜約80ng/mL、約1ng/mL〜約70ng/mL、約1ng/mL〜約60ng/mL、約1ng/mL〜約50ng/mL、約1ng/mL〜約40ng/mL、約1ng/mL〜約30ng/mL、約1ng/mL〜約20ng/mL、又は約1ng/mL〜約10ng/mLの血清ヘプシジン濃度を有し得る。
【００２７】
幾つかの実施形態では、対象は、組成物を投与する前に、約10ng/mLを上回る、例えば約20ng/mLを上回る、約30ng/mLを上回る、約40ng/mLを上回る、約50ng/mLを上回る、約60ng/mLを上回る、約70ng/mLを上回る、約80ng/mLを上回る、約90ng/mLを上回る、約100ng/mLを上回る、約200ng/mLを上回る、約300ng/mLを上回る、約400ng/mLを上回る、約500ng/mLを上回る、約600ng/mLを上回る、約700ng/mLを上回る、約800ng/mLを上回る、約900ng/mLを上回る、約1000ng/mLを上回る、約2000ng/mLを上回る、約3000ng/mLを上回る、約4000ng/mLを上回る、約5000ng/mLを上回る、約6000ng/mLを上回る、約7000ng/mLを上回る、約8000ng/mLを上回る、約9000ng/mLを上回る、又は更には約10μg/mLを上回る血清フェリチン濃度を有する。対象は、組成物を投与する前に、約10ng/mL〜約100μg/mL、例えば約20ng/mL〜約100μg/mL、約30ng/mL〜約100μg/mL、約40ng/mL〜約100μg/mL、約50ng/mL〜約100μg/mL、約60ng/mL〜約100μg/mL、約70ng/mL〜約100μg/mL、約80ng/mL〜約100μg/mL、約90ng/mL〜約100μg/mL、約100ng/mL〜約100μg/mL、約200ng/mL〜約100μg/mL、約300ng/mL〜約100μg/mL、約400ng/mL〜約100μg/mL、約500ng/mL〜約100μg/mL、約600ng/mL〜約100μg/mL、約700ng/mL〜約100μg/mL、約800ng/mL〜約100μg/mL、約900ng/mL〜約100μg/mL、又は約1000ng/mL〜約100μg/mLの血清フェリチン濃度を有し得る。対象は、組成物を投与する前に、約10ng/mL〜約20μg/mL、例えば約20ng/mL〜約20μg/mL、約30ng/mL〜約20μg/mL、約40ng/mL〜約20μg/mL、約50ng/mL〜約20μg/mL、約60ng/mL〜約20μg/mL、約70ng/mL〜約20μg/mL、約80ng/mL〜約20μg/mL、約90ng/mL〜約20μg/mL、約100ng/mL〜約20μg/mL、約200ng/mL〜約20μg/mL、約300ng/mL〜約20μg/mL、約400ng/mL〜約20μg/mL、約500ng/mL〜約20μg/mL、約600ng/mL〜約20μg/mL、約700ng/mL〜約20μg/mL、約800ng/mL〜約20μg/mL、約900ng/mL〜約20μg/mL、又は約1000ng/mL〜約20μg/mLの血清フェリチン濃度を有し得る。
【００２８】
幾つかの実施形態では、対象は、組成物を投与する前に、約10μg/mL未満、例えば約1000ng/mL未満、約900ng/mL未満、約800ng/mL未満、約700ng/mL未満、約600ng/mL未満、約500ng/mL未満、約400ng/mL未満、約300ng/mL未満、約200ng/mL未満、約100ng/mL未満、約90ng/mL未満、約80ng/mL未満、約70ng/mL未満、約60ng/mL未満、約50ng/mL未満、約40ng/mL未満、約30ng/mL未満、約20ng/mL未満、又は約10ng/mL未満の血清フェリチン濃度を有する。対象は、組成物を投与する前に、約1ng/mL〜約1000ng/mL、例えば約1ng/mL〜約900ng/mL、約1ng/mL〜約800ng/mL、約1ng/mL〜約700ng/mL、約1ng/mL〜約600ng/mL、約1ng/mL〜約500ng/mL、約1ng/mL〜約400ng/mL、約1ng/mL〜約300ng/mL、約1ng/mL〜約200ng/mL、約1ng/mL〜約100ng/mL、約1ng/mL〜約90ng/mL、約1ng/mL〜約80ng/mL、約1ng/mL〜約70ng/mL、約1ng/mL〜約60ng/mL、約1ng/mL〜約50ng/mL、約1ng/mL〜約40ng/mL、約1ng/mL〜約30ng/mL、約1ng/mL〜約20ng/mL、又は約1ng/mL〜約10ng/mLの血清フェリチン濃度を有し得る。
【００２９】
幾つかの実施形態では、組成物を投与することは、対象の血清フェリチン濃度を減少させる。例えば、組成物を投与することは、対象の血清フェリチン濃度を、少なくとも約10ng/mL、少なくとも約20ng/mL、少なくとも約30ng/mL、少なくとも約40ng/mL、少なくとも約50ng/mL、少なくとも約60ng/mL、少なくとも約70ng/mL、少なくとも約80ng/mL、少なくとも約90ng/mL、又は少なくとも約100ng/mL分減少させ得る。
【００３０】
幾つかの実施形態では、対象は、組成物を投与する前に、約40〜約50mg/kgの全身鉄含有量を有する。対象は、組成物を投与する前に、約50mg/kgを上回る、例えば約55mg/kgを上回る、約60mg/kgを上回る、約65mg/kgを上回る、又は約70mg/kgを上回る全身鉄含有量を有し得る。
【００３１】
幾つかの実施形態では、対象は、組成物を投与する前に、約10%を上回る、例えば約15%を上回る、約20%を上回る、約25%を上回る、約30%を上回る、約35%を上回る、約40%を上回る、約45%を上回る、約50%を上回る、約55%を上回る、約60%を上回る、約65%を上回る、約70%を上回る、約75%を上回る、約80%を上回る、約85%を上回る、又は更には約90%を上回るトランスフェリン飽和パーセンテージを有する。対象は、組成物を投与する前に、約10%〜約99%、例えば約15%〜約99%、約20%〜約99%、約25%〜約99%、約30%〜約99%、約35%〜約99%、約40%〜約99%、約45%〜約99%、約50%〜約99%、約55%〜約99%、約60%〜約99%、約65%〜約99%、約70%〜約99%、約75%〜約99%、約80%〜約99%、又は約85%〜約99%のトランスフェリン飽和パーセンテージを有し得る。対象は、組成物を投与する前に、約10%〜約95%、例えば約15%〜約99%、約20%〜約95%、約25%〜約95%、約30%〜約95%、約35%〜約95%、約40%〜約95%、約45%〜約95%、約50%〜約95%、約55%〜約95%、約60%〜約95%、約65%〜約95%、約70%〜約95%、約75%〜約95%、約80%〜約95%、又は約85%〜約95%のトランスフェリン飽和パーセンテージを有し得る。
【００３２】
幾つかの実施形態では、組成物を投与することは、対象のトランスフェリン飽和パーセンテージを減少させる。例えば、組成物を対象に投与することは、対象のトランスフェリン飽和パーセンテージを、少なくとも約1%のトランスフェリン飽和、例えば少なくとも約2%のトランスフェリン飽和、少なくとも約3%のトランスフェリン飽和、少なくとも約4%のトランスフェリン飽和、少なくとも約5%のトランスフェリン飽和、少なくとも約6%のトランスフェリン飽和、少なくとも約7%のトランスフェリン飽和、少なくとも約8%のトランスフェリン飽和、少なくとも約9%のトランスフェリン飽和、少なくとも約10%のトランスフェリン飽和、少なくとも約11%のトランスフェリン飽和、少なくとも約12%のトランスフェリン飽和、少なくとも約13%のトランスフェリン飽和、少なくとも約14%のトランスフェリン飽和、少なくとも約15%のトランスフェリン飽和、少なくとも約16%のトランスフェリン飽和、少なくとも約17%のトランスフェリン飽和、少なくとも約18%のトランスフェリン飽和、少なくとも約19%のトランスフェリン飽和、少なくとも約20%のトランスフェリン飽和、少なくとも約25%のトランスフェリン飽和、少なくとも約30%のトランスフェリン飽和、少なくとも約35%のトランスフェリン飽和、少なくとも約40%のトランスフェリン飽和、少なくとも約45%のトランスフェリン飽和、又は少なくとも約50%のトランスフェリン飽和分減少させ得る。
【００３３】
IV.活性剤
ヘプシジンペプチドは、配列番号1に記載するアミノ酸配列を有する25アミノ酸ペプチドである。ヘプシジンペプチドは、より長いタンパク質の切断産物であり、細胞膜タンパク質フーリンは、細胞外ヘプシジン前駆体タンパク質を、ヘプシジンペプチドへ変換することができる。したがって、「ヘプシジン」という用語は、本明細書中で使用する場合、25アミノ酸よりも長いペプチド、例えば26〜100アミノ酸で構成されるペプチドを含む配列番号1に記載する配列を含むペプチドを指す。保存的アミノ酸置換、付加及び欠失は、ヘプシジンの機能に著しく影響を及ぼすことなく、配列番号1に対して成され得る。したがって、「ヘプシジン」という用語は、配列番号1に記載するアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、又は96%配列相同性を有するアミノ酸配列を含むペプチドを指し得る。配列相同性は、任意の適切な配列アラインメントプログラム、例えばProtein Blast (blastp)又はClustal(例えば、ClustalV、ClustalW、ClustalX、又はClustal Omega)を使用して、例えば、デフォルトパラメーター、例えばギャップオープニング及びギャップ伸長に関するデフォルト重量を使用して決定され得る。配列相同性は、配列同一性を指してもよい。「ヘプシジン」という用語は、配列番号1の1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、又は10個のアミノ酸が異なるアミノ酸で置換されることを除いて、配列番号1に記載する配列に同一であるアミノ酸配列を含むペプチドを指し得る。好ましい実施形態では、ヘプシジンは、システインが配列番号1において出現する位置それぞれで、システインを含む。
【００３４】
配列番号1
DTHFPICIFCCGCCHRSKCGMCCKT
【００３５】
N末端及びC末端残基は、その機能に著しく影響を及ぼすことなく、ヘプシジンペプチドから欠失され得る。したがって、幾つかの実施形態では、ヘプシジンは、配列番号2、配列番号3、若しくは配列番号4に記載する配列を含むペプチド、又は配列番号2、配列番号3、配列番号4、若しくは配列番号5に記載するアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、又は96%配列相同性を有するアミノ酸配列を含むペプチドを指す。ヘプシジンという用語は、配列番号2、配列番号3、配列番号4、若しくは配列番号5の1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、又は10個のアミノ酸が異なるアミノ酸で置換されることを除いて、配列番号2、配列番号3、配列番号4、若しくは配列番号5に記載する配列に同一であるアミノ酸配列を含むペプチドを指し得る。好ましい実施形態では、ヘプシジンは、システインが配列番号2、配列番号3、配列番号4、若しくは配列番号5において出現する位置それぞれで、システインを含む。
【００３６】
配列番号2
PICIFCCGCCHRSKCGMCCKT
【００３７】
配列番号3
PICIFCCGCCHRSKCGMCC
【００３８】
配列番号4
ICIFCCGCCHRSKCGMCCKT
【００３９】
配列番号5
CIFCCGCCHRSKCGMCC
【００４０】
幾つかの実施形態では、「ヘプシジン」という用語は、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、又は配列番号10に記載する配列に同一であるアミノ酸配列を含むペプチドを指す。配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、又は配列番号10において、「X」と標識されるアミノ酸は、天然に存在するアミノ酸及び天然に存在しないアミノ酸を含む任意のアミノ酸であり得る。幾つかの実施形態では、「X」と標識されるアミノ酸はそれぞれ、天然に存在するアミノ酸である。
【００４１】
配列番号6
XXHXPXCXXCCGCCHRSKCGMCCXX
【００４２】
配列番号7
PXCXXCCGCCHRSKCGMCCKX
【００４３】
配列番号8
PXCXXCCGCCHRSKCGMCC
【００４４】
配列番号9
XCXXCCGCCHRXXCGXCCKX
【００４５】
配列番号10
CXXCCGCCHRXXCGXCC
【００４６】
好ましい実施形態では、ヘプシジンは、フェロポーチン及び/又は鉄(例えば、鉄陽イオン)に特異的に結合する分子である。ヘプシジンは、1個、2個、3個、又は4個のジスルフィド結合を含み得る。好ましい実施形態では、ヘプシジンは、4個のジスルフィド結合を含む。好ましい実施形態では、4個のジスルフィド結合はそれぞれ、分子内ジスルフィド結合である。好ましい実施形態では、配列番号1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10の8個のシステインはそれぞれ、8個のシステインのうちの別の1個との4個の分子内ジスルフィド結合の1個に関与する。
【００４７】
好ましい実施形態では、ヘプシジンは、配列番号1に記載するアミノ酸配列を含む25アミノ酸長のペプチドの約10%〜1000%の活性を有し、即ち、ここで25アミノ酸長のペプチドは、天然ヒトヘプシジンに見出される4個の分子内ジスルフィド結合を含む。例えば、ヘプシジンは、配列番号1に記載するアミノ酸配列を含む25アミノ酸長のペプチド(即ち、ここで25アミノ酸長のペプチドは、天然ヒトヘプシジンに見出される4個の分子内ジスルフィド結合を含む)の約50%〜200%の活性、例えば約75%〜150%の活性、約80%〜120%の活性、約90%〜110%の活性、又は約95%〜105%の活性を有し得る。「活性」という用語は、ヘプシジンの、フェロポーチンに特異的に結合し、例えば、それにより細胞外間隙への細胞内鉄の輸送を阻害して、食事に含まれる鉄の吸収を阻害して、及び/又は血清鉄濃度を低減する能力を指し得る。活性は、ヘプシジンの、細胞外間隙への細胞内鉄の輸送を阻害する能力を指し得る。活性は、ヘプシジンの、食事に含まれる鉄の吸収を阻害する能力を指し得る。活性は、ヘプシジンの、in vivoで血清鉄濃度を低減する能力を指し得る。
【００４８】
幾つかの実施形態では、ミニヘプシジンは、ミニヘプシジン、修飾ヘプシジン又はヘプシジン模倣ペプチドを指し得る。本出願の目的で、ミニヘプシジン、修飾ヘプシジン、又はヘプシジン模倣ペプチドは、交換可能に使用され得る。ミニヘプシジン、修飾ヘプシジン、及びヘプシジン模倣ペプチドは、米国特許第9,315,545号、同第9,328,140号、及び同第8,435,941号に開示されており、それらはそれぞれ、特に、1つ以上の活性をヘプシジンと共有する化合物のそれらの開示のために参照により本明細書に組み込まれる。
【００４９】
ミニヘプシジンは、式Iの構造、又はその薬学的に許容される塩を有し得る:
【化１】
2019505517.tif 000002
【００５０】
(式中、
R1は、-S-Z1、-Z2、-SH、-(C=O)-Z3又は-S-C(=O)-Z3であり、
Z1は、置換又は無置換のC1〜C18アルキル又はC1〜C18アルケニルであり、C1〜C18アルキル又はC1〜C18アルケニルは、分岐状若しくは未分岐状であり、或いはZ1は、電子求引性又は電子供与性基であり、
Z2は、置換又は無置換のC1〜C18アルキル又はC1〜C18アルケニルであり、C1〜C18アルキル又はC1〜C18アルケニルは、分岐状若しくは未分岐状であり、或いはZ2は、電子求引性又は電子供与性基であり、
Z3は、置換又は無置換のC1〜C18アルキル又はC1〜C18アルケニルであり、C1〜C18アルキル又はC1〜C18アルケニルは、分岐状若しくは未分岐状であり、或いはZ3は、電子求引性又は電子供与性基である)。
【００５１】
ミニヘプシジンは、式II〜IVの何れか1つの構造、又はそれらの薬学的に許容される塩を有し得る:
【化２】
2019505517.tif 000003
2019505517.tif 000004
2019505517.tif 000005
【００５２】
ミニヘプシジンは、式Vの構造、又はその薬学的に許容される塩を有し得る:
【化３】
2019505517.tif 000006
(式中、
R1は、H、-S-Z1、-Z2、-SH、-(C=O)-Z3又は-S-C(=O)-Z3であり、
R2及びR3はそれぞれ独立して、場合により置換されるC4〜C7アルキルであり、
【化４】
2019505517.tif 000007
D-Arg、D-Ile、Leu、D-Leu、Thr、D-Thr、Lys、D-Lys、Val、D-Val、D-Nω,ω-ジメチルアルギニン、L-Nω,ω-ジメチルアルギニン、D-ホモアルギニン、L-ホモアルギニン、D-ノルアルギニン、L-ノルアルギニン、シトルリン、グアニジニウム基が修飾又は置換されている修飾Arg、ノルロイシン、ノルバリン、ベータホモ-Ile、1-アミノシクロヘキサン-1-カルボン酸、N-Me-Arg、N-Me-Ileであり、
R4は、Ida、Asp、アセチル-Asp、(メチルアミノ)ペンタン二酸、アセチル-Gly-Ida、又はアセチル-Gly-Asp又はpH4を超えるその負電荷を除去するそれらの誘導体であり、
R5は、CR6R7、アリール又はヘテロアリールであり、
Bは、存在しないか、又は5〜7員環を形成し、
qは、0〜6であり、ここでR5がアリール又はヘテロアリールである場合には、qは1であり、Bは存在せず、
Z1は、置換又は無置換のC1〜C18アルキルあり、C1〜C18アルキルは、分岐状若しくは未分岐状であり、
Z2は、置換又は無置換のC1〜C18アルキルであり、C1〜C18アルキルは、分岐状若しくは未分岐状であり、
Z3は、置換又は無置換のC1〜C18アルキルであり、C1〜C18アルキルは、分岐状若しくは未分岐状であり、
R6及びR7はそれぞれ独立して、H、ハロ、場合により置換されるC1〜C3アルキル、又はハロアルキルであるが、但し、R1がHである場合、化合物は、式XVIの構造を有さない)。
【００５３】
ミニヘプシジンは、式VI〜VIIIの何れか1つの構造、又はそれらの薬学的に許容される塩を有し得る:
【化５】
2019505517.tif 000008
2019505517.tif 000009
2019505517.tif 000010
(式中、可変体は、式Vに関して定義される)。
【００５４】
ミニヘプシジンは、式IXの構造、又はその薬学的に許容される塩を有し得る:
【化６】
2019505517.tif 000011
(式中、
R1は、H、-S-Z1、-Z2、-SH、-S-C(=O)-Z3又は-C(=O)-Z3であり、
R2及びR3はそれぞれ独立して、場合により置換されるC4〜C7アルキルであり、
【化７】
2019505517.tif 000012
D-Arg、D-Ile、Leu、D-Leu、Thr、D-Thr、Lys、D-Lys、Val、D-Val、D-Nω,ω-ジメチルアルギニン、L-Nω,ω-ジメチルアルギニン、D-ホモアルギニン、L-ホモアルギニン、D-ノルアルギニン、L-ノルアルギニン、シトルリン、グアニジニウム基が修飾又は置換されている修飾Arg、ノルロイシン、ノルバリン、ベータホモ-Ile、1-アミノシクロヘキサン-1-カルボン酸、N-Me-Arg、N-Me-Ileであり、
R4は、Ida、Asp、アセチル-Asp、(メチルアミノ)ペンタン二酸、アセチル-Gly-Ida、又はアセチル-Gly-Asp又はpH4を超えるその負電荷を除去するそれらの誘導体であり、
Bは、存在しないか、又は5〜7員環を形成し、
Z1は、置換又は無置換のC1〜C18アルキルであり、C1〜C18アルキルは、分岐状若しくは未分岐状であり、
Z2は、置換又は無置換のC1〜C18アルキルあり、C1〜C18アルキルは、分岐状若しくは未分岐状であり、
Z3は、置換又は無置換のC1〜C18アルキルであり、C1〜C18アルキルは、分岐状若しくは未分岐状であり、
但し、R1がHである場合、化合物は、式XVIの構造を有さない)。
【００５５】
ミニヘプシジンは、式Xの構造、又はその薬学的に許容される塩を有し得る:
【化８】
2019505517.tif 000013
(式中、可変体は、式IXに関して定義される)。
【００５６】
ミニヘプシジンは、式XIの構造、又はその薬学的に許容される塩を有し得る:
【化９】
2019505517.tif 000014
(式中、カルボニルは、Ca、Cb、又はCcにて6員環と、及び式IXに関して定義されるような可変体と結合を形成する)。
【００５７】
ミニヘプシジンは、式XIIの構造、又はその薬学的に許容される塩を有し得る:
【化１０】
2019505517.tif 000015
(式中、カルボニルは、Cd又はCeにて5員環と、及び式IXに関して定義されるような可変体と結合を形成する)。
【００５８】
ミニヘプシジンは、式XIIIの構造、又はその薬学的に許容される塩を有し得る:
【化１１】
2019505517.tif 000016
(式中、カルボニルからの結合は、Cf、Cg、Ch又はCiにて7員環と、及び式IXに関して定義されるような可変体と結合を形成する)。
【００５９】
ミニヘプシジンは、式XIVの構造、又はその薬学的に許容される塩を有し得る:
【化１２】
2019505517.tif 000017
【００６０】
ミニヘプシジンは、式XVの構造、又はその薬学的に許容される塩を有し得る:
【化１３】
2019505517.tif 000018
【００６１】
ミニヘプシジンは、式P1-P2-P3-P4-P5-P6-P7-P8-P9-P10若しくはP10-P9-P8-P7-P6-P5-P4-P3-P2-P1の構造、又はそれらの薬学的に許容される塩を有してもよく、式中、P1〜P10は、表1において定義する通りであり、X3は、アミノヘキサン酸-Ida(NH-PAL)-NH2であり、Idaは、イミノ二酢酸であり、Dpaは、3,3-ジフェニル-L-アラニンであり、bhProは、ベータ-ホモプロリンであり、Npcは、L-ニペコチン酸であり、isoNpcは、イソニペコチン酸であり、bAlaは、ベータ-アラニンである。
【００６２】
【表１】
2019505517.tif 000019
【００６３】
ミニヘプシジンは、式XVIの構造、又はその薬学的に許容される塩を有し得る:
【００６４】
【化１４】
2019505517.tif 000020
【００６５】
ミニヘプシジンは、式A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10、A10-A9-A8-A7-A6-A5-A4-A3-A2-A1の構造、又はそれらの薬学的に許容される塩を有してもよく、式中、
A1は、L-Asp、L-Glu、ピログルタミン酸、L-Gln、L-Asn、D-Asp、D-Glu、D-ピログルタミン酸、D-Gln、D-Asn、3-アミノペンタン二酸、2,2'-アザンジイル二酢酸、(メチルアミノ)ペンタン二酸、L-Ala、D-Ala、L-Cys、D-Cys、L-Phe、D-Phe、L-Asp、D-Asp、3,3-ジフェニル-L-アラニン、3,3-ジフェニル-D-アラニンであり、A1がL-Asp又はD-Aspである場合、A2は、L-Cys又はD-Cysであり、A1がL-Phe又はD-Pheである場合、N-末端は、ケノデオキシコール酸(chenodeoxvcholate)、ウルソデオキシコール酸(ursodeoxvcholate)、又はパルミトイルに連結されたPEG分子に場合により結合され、或いはA1が3,3-ジフェニル-L-アラニン又は3,3-ジフェニル-D-アラニンである場合、N-末端は、パルミトイルに結合され、
A2は、L-Thr、L-Ser、L-Val、L-Ala、D-Thr、D-Ser、D-Val、L-tert-ロイシン、イソニペコチン酸、L-α-シクロヘキシルグリシン、bhThr、(2S)-3-ヒドロキシ-2-(メチルアミノ)ブタン酸、D-Ala、L-Cys、D-Cys、L-Pro、D-Pro、又はGlyであり、
A3は、L-His、D-His、3,3-ジフェニル-L-アラニン、3,3-ジフェニル-D-アラニン、又は2-アミノインダンであり、
A4は、L-Phe、D-Phe、(S)-2-アミノ-4-フェニルブタン酸、3,3-ジフェニル-L-アラニン、L-ビフェニルアラニン、(1-ナフチル)-L-アラニン、(S)-3-アミノ-4,4-ジフェニルブタン酸、4-(アミノメチル)シクロヘキサンカルボン酸、(S)-2-アミノ-3-(ペルフルオロフェニル)プロパン酸、(S)-2-アミノ-4-フェニルブタン酸、(S)-2-アミノ-2-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)酢酸、又はシクロヘキシルアラニンであり、
A5は、L-Pro、D-Pro、オクタヒドロインドール-2-カルボン酸、L-β-ホモプロリン、(2S,4S)-4-フェニルピロリジン-2-カルボン酸、(2S,5R)-5-フェニルピロリジン-2-カルボン酸、又は(R)-2-メチルインドリンであり、
A6は、L-Ile、D-Ile、L-フェニルグリシン、L-α-シクロヘキシルグリシン、4-(アミノメチル)シクロヘキサンカルボン酸、(3R)-3-アミノ-4-メチルヘキサン酸、1-アミノシクロヘキサン-1-カルボン酸、又は(3R)-4-メチル-3-(メチルアミノ)ヘキサン酸であり、
A7は、L-Cys、D-Cys、S-t-ブチルチオ-L-システイン、L-ホモシステイン、L-ペニシラミン、又はD-ペニシラミンであり、
A8は、L-Ile、D-Ile、L-α-シクロヘキシルグリシン、3,3-ジフェニル-L-アラニン、(3R)-3-アミノ-4-メチルヘキサン酸、1-アミノシクロヘキサン-1-カルボン酸、又は(3R)-4-メチル-3-(メチルアミノ)ヘキサン酸であり、
A9は、L-Phe、L-Leu、L-Ile、L-Tyr、D-Phe、D-Leu、D-Ile、(S)-2-アミノ-3-(ペルフルオロフェニル)プロパン酸、N-メチル-フェニルアラニン、ベンジルアミド、(S)-2-アミノ-4-フェニルブタン酸、3,3-ジフェニル-L-アラニン、L-ビフェニルアラニン、(1-ナフチル)-L-アラニン、(S)-3-アミノ-4,4-ジフェニルブタン酸、シクロヘキシルアラニン、L-Asp、D-Asp、又はシステアミドであり、L-Phe又はD-Pheは、N末端でRAに場合により連結され、RAは、-CONH-CH2-CH2-S-、又はPro-Lys若しくはPro-Argに連結されたD-Pro、又はPro-Lys若しくはPro-Argに連結されたL-Proに連結されたL-β-ホモプロリン、又はL-β-ホモプロリン-Lys若しくはL-β-ホモプロリン-Argに連結されたD-Proであり、L-Asp又はD-Aspは、n末端でRBに場合により連結され、RBは、-(PEG 11)-GYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFL、又は-(PEG 11)-(Gly-Pro-ヒドロキシPro)10であり、(S)-2-アミノ-4-フェニルブタン酸は、RCに連結され、RCは、ProLys若しくProArgに連結されたD-Pro、又はL-β-ホモプロリン-Lys若しくはL-β-ホモプロリン-L-Argに連結されたD-Proであり、
A10は、L-Cys、L-Ser、L-Ala、D-Cys、D-Ser、又はD-Alaであり、
カルボキシ末端アミノ酸は、アミド又はカルボキシ形態で存在し、
少なくとも1つのスルフヒドリルアミノ酸は、配列中のアミノ酸の1つとして存在し、
A1、A2、A9、A10、又はそれらの組合せは、場合により存在しない)。
【００６６】
式A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10又はA10-A9-A8-A7-A6-A5-A4-A3-A2-A1のミニヘプシジンは、環状ペプチド又は鎖状ペプチドであり得る。
【００６７】
例えば、A1は、L-Aspであってもよく、A2は、L-Thであってもよく、A3は、L-Hisであってもよく、A4は、L-Pheであってもよく、A5は、L-Proであってもよく、A6は、L-Ileであってもよく、A7は、L-Cys、D-Cys、S-t-ブチルチオ-L-システイン、L-ホモシステイン、L-ペニシラミン、又はD-ペニシラミンであってもよく、A8は、L-Ileであってもよく、A9は、L-Pheであってもよく、A10は存在しなくてもよく、C-末端はアミド化されてもよい。或いは、A3は、L-Hisであってもよく、A4は、L-Pheであってもよく、A5は、L-Proであってもよく、A6は、L-Ileであってもよく、A7は、L-Cys、D-Cys、S-t-ブチルチオ-L-システイン、L-ホモシステイン、L-ペニシラミン、又はD-ペニシラミンであってもよく、A8は、L-Ileであってもよく、A1、A2、A9、及びA10は存在しなくてもよく、C-末端はアミド化されてもよい。或いは、A3は、L-Hisであってもよく、A4は、L-Pheであってもよく、A5は、L-Proであってもよく、A6は、L-Ileであってもよく、A7は、L-Cys、D-Cys、S-t-ブチルチオ-L-システイン、L-ホモシステイン、L-ペニシラミン、又はD-ペニシラミンであってもよく、A1、A2、A8、A9、及びA10は存在しなくてもよく、C-末端はアミド化されてもよい。
【００６８】
ミニヘプシジンは、アミノ酸配列HFPICI(配列番号11)、HFPICIF(配列番号12)、DTHFPICIDTHFPICIF(配列番号13)、DTHFPIAIFC(配列番号14)、DTHAPICIF(配列番号15)、DTHFPICIF(配列番号16)、又はCDTHFPICIF(配列番号17)を含み得る。ミニヘプシジンは、例えば、配列番号15に記載する配列を含んでもよく、ここで、システインは、S-tertブチルとジスルフィド結合を形成する。
【００６９】
ミニヘプシジンは、アミノ酸配列D-T-H-F-P-I-(L-ホモシステイン)-I-F、D-T-H-F-P-I-(L-ペニシラミン)-I-F、D-T-H-F-P-I-(D-ペニシラミン)-I-F、D-(L-tert-ロイシン)-H-(L-フェニルグリシン)-(オクタヒドロインドール-2-カルボン酸)-(L-α-シクロヘキシルグリシン)-C-(L-α-シクロヘキシルグリシン)-F、又はD-(L-tert-ロイシン)-H-P-(オクタヒドロインドール-2-カルボン酸)-(L-α-シクロヘキシルグリシン)-C-(L-α-シクロヘキシルグリシン)-Fを含み得る。
【００７０】
ミニヘプシジンは、アミノ酸配列FICIPFHTD(配列番号18)、FICIPFH(配列番号19)、R2-FICIPFHTD(配列番号20)、R3-FICIPFHTD(配列番号21)、FICIPFHTD-R6(配列番号22)、R4-FICIPFHTD(配列番号23)、又はR5-FICIPFHTD(配列番号24)を含んでもよく、ここでアミノ酸はそれぞれ、Dアミノ酸であり、R1は、CONH2-CH2-CH2-Sであり、R2は、ケノデオキシコール酸-(PEG 11)-であり、R3は、ウルソデオキシコール酸-(PEG 11)-であり、R4は、パルミトイル-(PEG 11)-であり、R5は、2(パルミトイル)-ジアミノプロピオン酸-(PEG 11)-であり、R6は、(PEG 11)-GYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFLであり、R6のアミノ酸はそれぞれ、Lアミノ酸である。
【００７１】
ミニヘプシジンは、アミノ酸配列D-T-H-((S)-2-アミノ-4-フェニルブタン酸)-P-I-C-I-F、D-T-H-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-P-I-C-I-F、D-T-H-(L-ビフェニルアラニン)-P-I-C-I-F、D-T-H-((1-ナフチル)-L-アラニン)-P-I-C-I-F、D-T-H-((S)-3-アミノ-4,4-ジフェニルブタン酸)-P-I-C-I-F、D-T-H-F-P-I-C-I-((S)-2-アミノ-4-フェニルブタン酸)、D-T-H-F-P-I-C-I-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)、D-T-H-F-P-I-C-I-(L-ビフェニルアラニン)、D-T-H-F-P-I-C-I-((1-ナフチル)-L-アラニン)、D-T-H-F-P-I-C-I-((S)-3-アミノ-4,4-ジフェニルブタン酸)、D-T-H-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-P-I-C-I-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)、D-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-P-I-C-I-F、D-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-P-I-C-I-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)、D-T-H-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-P-R-C-R-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)、D-T-H-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-(オクタヒドロインドール-2-カルボン酸)-I-C-I-F、D-T-H-(3,3-ジフェニルL-アラニン)-(オクタヒドロインドール-2-カルボン酸)-I-C-I-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)、又はD-T-H-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-P-C-C-C-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)を含み得る。
【００７２】
ミニヘプシジンは、アミノ酸配列D-T-H-F-P-I-C-I-F-R8、D-T-H-F-P-I-C-I-F-R9、D-T-H-F-P-I-C-I-F-R10、D-T-H-F-P-I-C-I-F-R11、D-T-H-F-P-I-C-I-F-R12、D-T-H-F-P-I-C-I-F-R13、D-T-H-F-P-I-C-I-((S)-2-アミノ-4-フェニルブタン酸)-R8、D-T-H-F-P-I-C-I-((S)-2-アミノ-4-フェニルブタン酸)-R9、D-T-H-F-P-I-C-I-((S)-2-アミノ-4-フェニルブタン酸)-R12、又はD-T-H-F-P-I-C-I-((S)-2-アミノ-4-フェニルブタン酸)-R13を含んでもよく、ここでR8は、D-Pro-L-Pro-L-Lysであり、R9は、D-Pro-L-Pro-L-Argであり、R10は、(L-β-ホモプロリン)-L-Pro-L-Lysであり、R11は、(L-β-ホモプロリン)-L-Pro-L-Argであり、R12は、D-Pro-(L-β-ホモプロリン)-L-Lysであり、R13は、D-Pro-(L-β-ホモプロリン)-L-Argである。
【００７３】
ミニヘプシジンは、アミノ酸配列D-T-H-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-P-(D)R-C-(D)R-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)を含み得る。
【００７４】
ミニヘプシジンは、アミノ酸配列C-(イソニペコチン酸)-(3,3-ジフェニル-D-アラニン)-(4-(アミノメチル)シクロヘキサンカルボン酸)-R-(4-(アミノメチル)シクロヘキサンカルボン酸)-(イソニペコチン酸)-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-システアミドを含み得る。ミニヘプシジンは、アミノ酸配列C-P-(3,3-ジフェニル-D-アラニン)-(4-(アミノメチル)シクロヘキサンカルボン酸)-R-(4-(アミノメチル)シクロヘキサンカルボン酸)-(イソニペコチン酸)-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-システアミドを含み得る。ミニヘプシジンは、アミノ酸配列C-(D)P-(3,3-ジフェニル-D-アラニン)-(4-(アミノメチル)シクロヘキサンカルボン酸)-R-(4-(アミノメチル)シクロヘキサンカルボン酸)-(イソニペコチン酸)-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-システアミドを含み得る。ミニヘプシジンは、アミノ酸配列C-G-(3,3-ジフェニル-D-アラニン)-(4-(アミノメチル)シクロヘキサンカルボン酸)-R-(4-(アミノメチル)シクロヘキサンカルボン酸)-(イソニペコチン酸)-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-システアミドを含み得る。
【００７５】
ミニヘプシジンは、アミノ酸配列(2,2'-アザンジイル二酢酸)-Thr-His-(3,3-ジフェニル-L-アラニン)-(L-β-ホモプロリン)-Arg-Cys-Arg-((S)-2-アミノ-4-フェニルブタン酸)-(アミノヘキサン酸)-(側鎖にパルミチルアミンアミドを有する2,2'-アザンジイル二酢酸)を含んでもよく、それは、米国特許第9,328,140号に記載されている(例えば、'140特許の配列番号94、参照により本明細書に組み込まれる)。
【００７６】
幾つかの実施形態では、ミニヘプシジンは、配列番号1に記載するアミノ酸配列を含む25アミノ酸長のペプチドの約10%〜1000%の活性を有する。例えば、ミニヘプシジンは、配列番号1に記載するアミノ酸配列を含む25アミノ酸長のペプチドの約50%〜約200%の活性、例えば約75%〜約150%の活性、約80%〜約120%の活性、約90%〜約110%の活性、又は約95%〜約105%の活性を有し得る。「活性」という用語は、ミニヘプシジンの、フェロポーチンに特異的に結合し、例えば、それにより細胞外間隙への細胞内鉄の輸送を阻害して、食事に含まれる鉄の吸収を阻害して、及び/又は血清鉄濃度を低減する能力を指し得る。活性は、ミニヘプシジンの、細胞外間隙への細胞内鉄の輸送を阻害する能力を指し得る。活性は、ミニヘプシジンの、食事に含まれる鉄の吸収を阻害する能力を指し得る。活性は、ミニヘプシジンの、in vivoで血清鉄濃度を低減する能力を指し得る。
【００７７】
V.投与経路
本発明の組成物は、様々な従来の様式で投与することができる。幾つかの態様では、本発明の組成物は、非経口投与に適している。これらの組成物は、例えば、腹腔内に、静脈内に、腎臓内に、又は髄腔内に投与され得る。幾つかの態様では、本発明の組成物は、静脈内に注射される。当業者は、本発明の治療上有効な物質製剤又は組成物を投与する方法が、要因、例えば治療中の患者の年齢、体重及び健康状態、並びに治療中の疾患又は状態に依存することを理解するだろう。したがって、当業者は、個々の場合に応じて、患者にとって最適な投与方法を選択することが可能である。
【００７８】
組成物は、局所的に、経腸的に、又は非経口的に投与され得る。組成物は、皮下に、静脈内に、筋内に、鼻腔内に、吸入によって、経口的に、舌下に、口腔内頬側投与によって、局所的に、経皮的に、又は経粘膜的に投与され得る。組成物は、注射によって投与され得る。好ましい実施形態では、組成物は、皮下注射によって、経口的に、鼻腔内に、吸入によって、又は静脈内に投与される。ある特定の好ましい実施形態では、組成物は、皮下注射によって投与される。
【００７９】
本明細書全体にわたって、「を含む」又は変形、例えば「を含む(単数形)」又は「を含んでいる」という単語は、規定の整数(又は構成要素)又は整数(又は構成要素)の群を含むが、任意の他の整数(又は構成要素)又は整数(又は構成要素)の群の排除ではないことを含蓄することが理解されよう。単数形「ａ」「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに他の状況を指示しない限りは、複数形を含む。「を含む」という用語は、「を含むが、これに限定されない」ことを意味するのに使用される。「を含む」及び「を含むが、これに限定されない」は、交換可能に使用される。「患者」及び「個体」という用語は、交換可能に使用され、ヒト又は非ヒト動物の何れかを指す。これらの用語は、哺乳動物、例えばヒト、霊長類、家畜動物(例えば、ウシ、ブタ)、ペット(例えば、イヌ、ネコ)及び齧歯類(例えば、マウス、ウサギ及びラット)を含む。
【００８０】
「約」及び「およそ」は概して、測定の性質又は精度を考慮して、測定される量に関して許容される誤差の度合いを意味する。通常、例示的な誤差の度合いは、所定の値又は値の範囲の20%以内、好ましくは10%以内、より好ましくは5%以内である。或いは、また特に生物系において、「約」及び「およそ」という用語は、所与の値の1桁分以内、好ましくは5倍以内、より好ましくは2倍以内である値を意味し得る。本明細書中に付与される数量は、別記されない限り概算であり、「約」又は「およそ」という用語が、明確に規定されない場合には推測することができることを意味する。
【００８１】
本明細書中で使用する場合、「投与すること」という用語は、医薬品又は組成物を対象に供給することを意味し、医療従事者によって投与すること及び自己投与を含むが、これらに限定されない。例えば、そのような作用物質は、ヘプシジン又はヘプシジン類似体であり得る。
【００８２】
本明細書中で使用する場合、「薬学的に許容される」という語句は、妥当な医学的判断の範囲内で、合理的な損益比に見合う、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症を伴わない、人間及び動物の組織と接触した使用に適している作用物質、化合物、材料、組成物、及び/又は投薬形態を指す。
【００８３】
「薬学的に許容される担体」という語句は、本明細書中で使用する場合、薬学的に許容される材料、組成物又はビヒクル、例えば液体又は固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒又は封入材料を意味する。担体はそれぞれ、製剤の他の成分と適合性があり、且つ患者に有害ではないという意味で、「許容可能」でなくてはならない。薬学的に許容される担体として機能し得る材料の幾つかの例として、(1)糖、例えば乳糖、ブドウ糖及びショ糖、(2)デンプン、例えばコーンスターチ及びジャガイモデンプン、(3)セルロース及びその誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース及び酢酸セルロース、(4)トラガカント末(powdered tragacanth)、(5)麦芽、(6)ゼラチン、(7)タルク、(8)賦形剤、例えばココアバター及び坐剤用ワックス、(9)油、例えば落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油及び大豆油、(10)グリコール、例えばプロピレングリコール、(11)ポリオール、例えばグリセリン、ソルビトール、マンニトール及びポリエチレングリコール、(12)エステル、例えばオレイン酸エチル及びラウリン酸エチル、(13)寒天、(14)緩衝剤、例えば水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウム、(15)アルギン酸、(16)パイロジェンフリーな水、(17)等張食塩水、(18)リンゲル液、(19)エチルアルコール、(20)pH緩衝溶液、(21)ポリエステル、ポリカーボネート及び/又はポリ酸無水物、及び(22)医薬製剤で用いられる他の無毒性適合性物質が挙げられる。
【００８４】
本明細書中で使用する場合、状態(例えば、鉄過剰症)を「防止する」治療薬は、障害又は状態の発症に先立って、統計学的試料に投与される場合に、未治療の対照試料に対して治療した試料において、障害又は状態の発生を低減するか、或いは未治療の対照試料に対して、障害若しくは状態の1つ以上の症状の発症を遅延するか、又はその重症度を低減する化合物を指す。
【００８５】
ある特定の実施形態では、本発明の作用物質は、単独で、又は別のタイプの治療剤と共同して投与され得る。本明細書中で使用する場合、「共同投与（conjoint administration）」という語句は、第2の作用物質が投与される間、すでに投与された治療剤が、依然として身体中で有効である(例えば、2つの作用物質が、対象において同時に有効であり、それは、2つの作用物質の相乗効果を含み得る)ような、2つ以上の異なる治療剤の投与の任意の形態を指す。例えば、異なる治療剤は、同じ製剤中で、又は別々の製剤中で、同時に又は順次、投与することができる。ある特定の実施形態では、異なる治療剤は、互いに約1時間、約12時間、約24時間、約36時間、約48時間、約72時間、又は約1週間以内に投与され得る。したがって、そのような治療を受ける対象は、異なる治療剤の複合効果から恩恵を受けることができる。
【００８６】
「治療上有効量」及び「有効量」という語句は、本明細書中で使用する場合、合理的な損益比で、対象における細胞の少なくとも亜集団において望ましい治療効果をもたらすのに有効である作用物質の量を意味する。
【００８７】
対象における疾患「を治療すること」又は疾患を有する対象「を治療すること」は、疾患の少なくとも1つの症状を減少させるか、又は悪化するのを防ぐように、対象を医薬治療に付すこと、例えば、薬物の投与を指す。
【００８８】
ここで、本発明は、一般的に記載されており、本発明は、下記実施例を参照することによってより容易に理解され、それらは、単に本発明のある特定の態様及び実施形態の説明の目的で含まれ、且つ本発明を限定すると意図されない。
【実施例】
【００８９】
[実施例1]
研究は、マウスにおける血清鉄レベルに対するヘプシジンの皮下用量の効果を評価するように設計した(n=6〜7/群)。皮下に注射する場合、50μg用量のヘプシジンは、投薬の4時間後(ビヒクルと比較して平均40%減少、p<0.05)、及び投薬の24時間後(ビヒクルと比較して平均15%減少、p<0.05)に、血清鉄レベルの有意な減少を示した。
【００９０】
[実施例2]
研究は、マウスにおける皮下に送達されるヘプシジン50、100及び200μgの用量並びに血清鉄レベルに対するそれらの効果を評価するように設計した(n=7/群)。3つ全ての用量が、ビヒクルと比較して、投薬の4時間後に、血清鉄レベルの有意な減少を示した(p<0.01)。逆に、50μg及び100μg用量は、投薬の24時間後にビヒクルと比較して上昇した(p<0.01)。血清鉄のレベルの上昇は、ヘプシジンのクリアランスに対する系の反応に起因し得る。1匹のマウスが、採血の4時間後に死亡した。死亡率は、採血のストレスに関連する可能性が高かった。血清鉄レベルは、投薬の72時間後に正規化した。
【００９１】
[実施例3]
研究は、正常ラットにおける皮下に送達されるヘプシジン1、5、10及び50mgの用量並びに血清鉄レベルに対するそれらの効果を評価するように設計した(n=7/群)。血清鉄レベルの有意な減少が、全ての用量レベルで観察され、50mgで投薬した動物は、72時間で依然として効果を示した。Tmax及びCmaxは、全ての用量群に関して投与の1〜2時間後に達したが、高用量と中用量との間の取込みは、これらの時点で非常に類似していた。無気力状態は、この研究ではどの用量レベルでも観察されなかった。最低血清鉄濃度は、3つ全ての用量に関して、投薬の4時間後に観察された。5mg用量において、血清鉄レベルは、投薬の48時間後に投薬前レベルに戻った。10mg及び50mg用量群では、血清鉄レベルは、増加し続けたが、投薬の72時間後に投薬前レベルに戻らなかった。
【００９２】
[実施例4]
ヘプシジンは、ラット及びイヌにおいて、2つの拡張させた急性研究において評価した。これらの研究を行って、無毒性量(no-observed adverse effect level)(NOAEL)を決定した。NOAELは、各種臨床観察及び病理組織学的観察に起因して、イヌにおいて5mg/kg/日であると決定された。
【００９３】
研究は、スプラーグドーリーラットにSC送達されるヘプシジン5、25及び50mgの用量(それぞれ、0.8、4、8mg/kgのヒト等価用量)を評価するように設計した(n=9/性別/群)。全ての用量が、ビヒクル及びそれらの投与前レベルと比較した場合に、平均血清鉄レベルを有意に減少させた。最低血清鉄レベルは、3つ全ての用量に関して、4時間後に観察された。予期せぬ有害効果は、この研究では観察されなかった。ヘプシジンに関連する変化は、食品消費及び体重増加における有害でない用量非依存的な低減、及び注射部位での硬化に限定された。ヘプシジンの投与を用いた場合に予想されるように、観察される生物学的効果は、網状赤血球及び鉄濃度の用量依存的な可逆的減少、並びに不飽和鉄結合能の増加を含んでいた。平均して、雌ラット血清鉄レベルは、より高いと観察されたが、ヘプシジンの毒物動態学的(TK)効果は、両方の性別に関して同等であった。結果により、ヘプシジンが、どの主要臓器に対しても予期せぬ生理学的変化を伴わずに、スプラーグドーリーラットにおいて、有意に血清鉄レベルを減少させることが可能であることが実証される。臨床病理学及び鉄関連の変化は、ヘプシジンの予想される薬理学と一致した。これらの結果に基づいて、NOAELは、50mg/kg/日であると決定された。
【００９４】
研究は、単回皮下用量でイヌに送達されるヘプシジン5、25及び50mgの用量(それぞれ、0.8、4、及び8mg/kgのヒト等価用量)を評価するように設計した(n=6/性別/群)。投与部位における厚みの増加は、50mg/kgでは4日目に、及び25mg/kg以上では15日目に観察された。4日目の顕微鏡的見解は、25mg/kg以上で雄及び雌における投与部位において、混合細胞浸潤で構成されたのに対して、15日目には、投与部位での顕微鏡的見解は、5mg/kg以上で雄及び雌における混合細胞浸潤、25mg/kg以上で雄における及び5mg/kg以上で雌における線維症、並びに50mg/kgで雄における及び25mg/kg以上で雌における嚢胞腔(cystic space)を含んだ。これらの結果に基づいて、NOAELは、5mg/kg/日であるとみなされた。実験により、25mg/kg/日以上の用量群において最大4日目に好中球及びフィブリノーゲンレベルの一時的な増加が示された。これらの血液化学分析物は、一時的に増加したが、それらは、重症であるとはみなされず、NOAEL用量は、この研究の終わりには5mg/kg/日であると決定された。他の有害な反応は下記の通りである:猫背、軟便、「厚い」の肉眼的病理学の見解、及び皮下線維症、混合細胞浸潤及び回復期に存在する嚢胞。
【００９５】
[実施例5]
ヘプシジン投与は、高いベースラインフェリチンを有する鎌状赤血球患者において、フェリチン血液レベルを低下させた。ヘプシジンの1ミリグラムボーラスを、鎌状赤血球症を有する2名の男性患者(患者1001及び1002)に皮下的に投与した。血清フェリチン濃度は、ベースラインで、及びヘプシジンの投与の8日後に測定した。フェリチン血液レベルは、両方の患者においてヘプシジン投与の8日後により低かった(図1)。患者1001及び1002に関するフェリチン血液レベルの変化パーセントは、それぞれ-45%及び-61%であった(図3)。
【００９６】
【表２】
2019505517.tif 000021
【００９７】
ヘプシジンを、正常なベースライン血清フェリチン濃度を有する3名の遺伝性ヘモクロマトーシス患者に投与した。遺伝性ヘモクロマトーシス患者1003に、ヘプシジン1mgを投与したのに対して、2名の他の患者(2001及び2002)には、ヘプシジン5mgを投与した。フェリチン血液レベルは、ヘプシジン投与の8日後に、患者全てにおいて測定した(図2)。患者1003、2001、及び2002間でのフェリチン血液レベルの変化パーセントは、それぞれ、25%、-19%、及び18%であった(図3)。
【００９８】
[実施例6]
トランスフェリン飽和(TSAT)は、実施例1に記載する患者において測定した。TSATは、鉄によって占有されるトランスフェリンの鉄結合部位のパーセントを示し、TSATを、血液障害及び疾患の診断並びにモニタリングにおける重要なツールにしている。ヘプシジン1ミリグラムボーラスを、鎌状赤血球症患者1001及び1002並びに遺伝性ヘモクロマトーシス患者1003に投与したのに対して、患者2001及び2002には、それぞれヘプシジン5mgを投与した。TSATレベルは、ヘプシジン投与の8日後に測定した。患者は全て、8日目にTSATのパーセント減少を示した(図4及び図5)。
【００９９】
【表３】
2019505517.tif 000022
【０１００】
[実施例7]
血清鉄レベルを、鎌状赤血球症患者及び遺伝性ヘモクロマトーシス患者を有する6名の患者において、ヘプシジンの投与後に測定した。血清鉄レベルは、ヘプシジン投与前に(ベースライン)並びにヘプシジンの投与後2時間、4時間、8時間、24時間、48時間、及び168時間(8日目)で測定した。患者を2つのコホートに分割して、コホート1には、ヘプシジン1mgを投与して、コホート2には、ヘプシジン5mgを投与した。コホート1には、鎌状赤血球患者1001及び1002並びに遺伝性ヘモクロマトーシス患者1003が含まれていたのに対して、コホート2には、遺伝性ヘモクロマトーシス患者2001、2002及び2004が含まれていた。個々の患者に関する血清鉄濃度の変化パーセント及び両方のコホートに関する平均変化パーセントを、図6及び図7に示す。平均して、ヘプシジン投与は、両方のコホートにおいて8日間にわたって血清鉄濃度を、35〜40%分減少させた。
【０１０１】
【表４】
2019505517.tif 000023
【０１０２】
【表５】
2019505517.tif 000024
【０１０３】
参照による組込み
本明細書中で言及する刊行物及び特許は全て、個々の刊行物又は特許が、具体的に且つ独立して参照により組み込まれるように示されたかのように、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。矛盾の場合、その具体的な定義を含む本明細書が支配する。患者の問題の具体的な態様が議論されてきたが、上記明細書は、説明であり、限定的ではない。多くの変動が、本明細書及び併記の特許請求の範囲に目を通すと当業者に明らかとなる。本発明の全範囲は、等価体のそれらの全範囲と併せて特許請求の範囲を、またそのような変動と併せて明細書を参照することによって決定されるべきである。
【図１】
2019505517.tif 000025
【図２】
2019505517.tif 000026
【図３】
2019505517.tif 000027
【図４】
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【図５】
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【図６】
2019505517.tif 000030
【図７】
2019505517.tif 000031
【配列表】
2019505517000001.app
【国際調査報告】
2019505517.tif 000032
2019505517.tif 000033
2019505517.tif 000034
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