【手続補正書】
【提出日】平成19年6月8日(2007.6.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＵがＴに置換されている、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０から成る群から選択された配列内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子を哺乳動物細胞に投与することを含む、哺乳動物細胞中でＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害するための方法。
【請求項２】
配列番号１〜配列番号１０のうちの２つ以上の中から少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含むエフェクタ分子が同じ細胞に投与されることをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記投与が、ＵがＴに置換されている、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０から成る群から選択された配列内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子の前記哺乳動物細胞での産生を可能にする能力をもつ発現構築物を含む１つ以上の発現ベクターを提供することによって達成される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記１つ以上の発現ベクターがさらに、Ｔ７ポリメラーゼプロモータ、ＳＰ６ポリメラーゼプロモータ及びＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモータから選択されたプロモータを含み、前記プロモータが前記少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列に作動可能に連結されている、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ＵがＴに置換されている、配列番号１１及び配列番号１２から成る群から選択された配列内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子を哺乳動物細胞に投与することを含む、哺乳動物細胞中でＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害するための方法。
【請求項６】
配列番号１１及び配列番号１２のうちの２つ以上の中から少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含むエフェクタ分子が同じ細胞に投与されることをさらに含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記投与が、ＵがＴに置換されている、配列番号１１及び配列番号１２から成る群から選択された配列内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子の前記哺乳動物細胞での産生を可能にする能力をもつ発現構築物を含む１つ以上の発現ベクターを提供することによって達成される、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記１つ以上の発現ベクターがさらに、Ｔ７ポリメラーゼプロモータ、ＳＰ６ポリメラーゼプロモータ及びＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモータから選択されたプロモータを含み、前記プロモータが前記少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列に作動可能に連結されている、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ＵがＴに置換されている、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０から成る群から選択された配列内の第１の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子及び、ＵがＴに置換されている、配列番号１１及び配列番号１２から成る群から選択された配列内の第２の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子を、哺乳動物細胞に投与することを含む、哺乳動物細胞中でＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列及びＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の両方の発現を阻害するための方法。
【請求項１０】
配列番号１〜配列番号１２のうちの３つ以上の中から少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含むエフェクタ分子が前記同じ細胞に投与されることをさらに含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記投与が、ＵがＴに置換されている、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０から成る群から選択された配列内の第１の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子及び、ＵがＴに置換されている、配列番号１１及び配列番号１２から成る群から選択された配列内の第２の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子の、前記哺乳動物細胞での産生を可能にする能力をもつ発現構築物を含む１つ以上の発現ベクターを提供することによって達成される、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記１つ以上の発現ベクターがさらに、Ｔ７ポリメラーゼプロモータ、ＳＰ６ポリメラーゼプロモータ及びＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモータから選択された第１のプロモータ（前記第１のプロモータは前記第１の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列に作動可能に連結されている）及び、Ｔ７ポリメラーゼプロモータ、ＳＰ６ポリメラーゼプロモータ及びＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモータの中から選択された第２のプロモータ（前記第２のプロモータは前記第２の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列に作動可能に連結されている）を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記哺乳動物細胞がヒト細胞である、請求項１、５又は９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ＵがＴに置換されている、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０から成る群から選択された配列内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子を含む、インビボにて哺乳動物細胞中でＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害するための組成物。
【請求項１５】
配列番号１〜配列番号１０のうちの２つ以上の中から少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含むエフェクタ分子が前記組成物中に存在していることをさらに含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
ＵがＴに置換されている、配列番号１１及び配列番号１２から成る群から選択された配列内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子を含む、インビボにて哺乳動物細胞中でＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害するための組成物。
【請求項１７】
配列番号１１〜配列番号１２のうちの２つ以上の中から少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含むエフェクタ分子が存在していることをさらに含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
ＵがＴに置換されている、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０から成る群から選択された配列内の第１の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子及び、ＵがＴに置換されている、配列番号１１及び配列番号１２から成る群から選択された配列内の第２の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子を含む、単一の哺乳動物細胞中、インビボにてＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列及びＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の両方の発現を阻害するための組成物。
【請求項１９】
配列番号１〜配列番号１２のうちの３つ以上の配列内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含むエフェクタ分子が前記組成物中に存在していることをさらに含む、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記哺乳動物細胞がヒト細胞である、請求項１４、１６又は１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
ａ）配列番号１、
ｂ）配列番号２、
ｃ）配列番号３、
ｄ）配列番号４、
ｅ）配列番号５、
ｆ）配列番号６、
ｇ）配列番号７、
ｈ）配列番号８、
ｉ）配列番号９、
ｊ）配列番号１０、
ｋ）（ａ）〜（ｊ）の相補配列、及び
ｌ）（ａ）〜（ｋ）の混合物、
から成る群から選択された配列内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む、哺乳動物細胞内のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害するための組成物。
【請求項２２】
ａ）配列番号１１、
ｂ）配列番号１２、
ｃ）（ａ）又は（ｂ）の相補配列、及び
ｄ）（ａ）〜（ｃ）の混合物、
から成る群から選択された配列内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む、哺乳動物細胞内のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害するための組成物。
【請求項２３】
ａ）配列番号１、
ｂ）配列番号２、
ｃ）配列番号３、
ｄ）配列番号４、
ｅ）配列番号５、
ｆ）配列番号６、
ｇ）配列番号７、
ｈ）配列番号８、
ｉ）配列番号９、
ｊ）配列番号１０、
ｋ）配列番号１１、
ｌ）配列番号１２、
ｍ）（ａ）〜（ｌ）の配列の相補配列、及び
ｎ）（ａ）〜（ｍ）の混合物、
から成る群から選択された配列内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む、同じ哺乳動物細胞内のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列及びＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害するための組成物であって、群（ａ）〜（ｊ）からの少なくとも１つと群（ｋ）及び（ｌ）からの１つを含む組成物。
【請求項２４】
前記少なくとも１９個の隣接のヌクレオチド配列がＤＮＡを含み、前記哺乳動物細胞がヒト細胞である、請求項２１、２２又は２３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２５】
前記少なくとも１９個の隣接のヌクレオチド配列がＲＮＡを含み、前記哺乳動物細胞がヒト細胞であり、さらにＵがＴに置換されている、請求項２１、２２又は２３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２６】
配列番号１４〜配列番号２６から選択された配列を含むポリヌクレオチド配列。
【請求項２７】
配列番号１４〜配列番号２６から選択された配列のヌクレオチド１〜１９、１〜２０、１〜２１、２〜２０、２〜２１又は３〜２１を含むポリヌクレオチド配列。
【請求項２８】
配列番号２７〜配列番号４４から選択された配列内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド配列。
【請求項２９】
ＵがＴに置換されている、配列番号２７内の少なくとも１９個の隣接塩基対のヌクレオチド配列を含む２本鎖ＲＮＡエフェクタ分子を含む、哺乳動物細胞内のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害するための組成物。
【請求項３０】
請求項１４、１６、１８、２１、２２、２３又は２９のいずれか一項に記載の組成物を含む発現構築物。
【請求項３１】
請求項３０に記載の発現構築物を含む哺乳動物細胞。