(57)【要約】  本発明は、被検体の関心領域（ＲＯＩ）において非侵襲性の低調波支援圧力推定（ＳＨＡＰＥ）を達成するために、微小気泡をベースとする超音波造影剤を用いる造影超音波の使用に関する。本発明の方法は、圧力推定のための非侵襲性の、直接的かつ正確な方法を提供する。
2019530557.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被検体の少なくとも１つの関心領域（ＲＯＩ）の圧力測定値を得るための方法であって、前記方法は、
前記被検体に診断上有効な量の微小気泡超音波造影剤（ＵＣＡ）を投与するステップと、
前記ＵＣＡが前記被検体に蓄積することを可能にするステップと、
前記被検体の前記ＲＯＩに超音波を送信するステップであって、前記超音波が広帯域波である、送信するステップと、
前記超音波に対する音響パワーを最適化するステップと、
前記ＲＯＩから、ステップ（ｉｉｉ）で送信された前記超音波を反射することによって生成された超音波エコーを受信し、これによって検出信号を取得するステップと、
前記検出信号に基づいて前記超音波エコーから低調波成分を抽出するステップと、
低調波信号振幅と周囲圧力との間の逆線形関係を使用して、前記圧力測定値を得るステップと、
を含む方法。
【請求項２】
前記被検体が哺乳動物である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記哺乳動物が人である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記投与するステップが静脈注射である、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記投与するステップが点滴である、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記投与するステップが生理食塩水との混注である、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記ＵＣＡが、それぞれが安定化シェルによって囲まれたガスを含む微小気泡を含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記ガスが前記被検体の血液と比較して、異なる圧縮率を有する、請求項１から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記ガスが低溶解度を示す高密度の高分子量ガスである、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記ガスがパーフルトレン、パーフルオロブタン（ＰＦＢ）、オクタフルオロプロパン、または六フッ化硫黄を含むグループから選択される、請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記安定化シェルがタンパク質、脂質、またはポリマーを含む、請求項７から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記安定化シェルがタンパク質を含む、請求項７から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記タンパク質がアルブミンである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記安定化シェルが脂質を含む、請求項７から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記脂質がリン脂質である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記リン脂質がフォスファチジルセリン（ＰＳ）である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記リン脂質が水素化卵フォスファチジルセリン（ＨＥＰＳ）である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記安定化シェルがポリマーを含む、請求項７から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ポリマーが乳酸（ＰＬＡ）および乳酸／グリコール酸（ＰＬＧＡ）を主成分とする脂肪族ポリエステルである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記ポリマーがアルギナートである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記超音波がガウス窓パルスである、請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記ガウス窓パルスがガウス窓矩形波、ガウス窓二項フィルタ処理矩形波、ガウス窓二項フィルタ処理矩形９０°シフト波を含むグループから選択される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記超音波がチャープ・パルスである、請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＲＯＩが前記被検体の門脈を含む、請求項１から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＲＯＩが前記被検体の肝静脈をさらに含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記ＲＯＩが前記被検体の心腔を含む、請求項１から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記心腔が心室である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記心室が左心室である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＲＯＩが前記被検体の病変組織を含む、請求項１から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記病変組織が悪性腫瘍またはアテローム硬化性プラークを含むグループのうちの１つである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＲＯＩが前記被検体の非病変組織をさらに含む、請求項２９または請求項３０のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１６年１０月１１日に申請された米国仮特許出願第６２／４０６，７９７号に対する優先権を主張するものであり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、国立衛生研究所によって授与されたＤＫ０９８５２６の下で政府の支援によってなされた。政府は、本発明において一定の権利を有する。
【０００３】
本発明は、被検体の関心領域（ＲＯＩ）の圧力を測定する方法に関する。詳細には、本発明の方法は、微小気泡（ｍｉｃｒｏｂｕｂｂｌｅ）超音波造影剤（ＵＣＡ）と、圧力の変化に応答して微小気泡のサイズを著しく変化させることを可能にする圧縮特性と、を利用する造影超音波処置である。
【０００４】
微小気泡超音波造影剤（「ＵＣＡ」）は、比較的高い入射圧力（＞２００ｋＰａ）において超音波パルスによって引き起こされる圧力場内部で非線形に振動する、カプセル化された微小気泡である。これらの微小気泡内部のガスは、血液とは異なる圧縮率を有し、これにより両者間の音響インピーダンス不整合、および散乱の増加がもたらされ、それゆえに、微小気泡は、後方散乱された超音波信号を増強する（Ｓｔｒｉｄｅ＆Ｃｏｕｓｓｉｏｓ  ２０１０  Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｓ  Ｐａｒｔ  Ｈ−Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ；２２４（Ｈ２）：１７１−９１）。ＵＣＡの非線形振動は、インソネーション周波数の低調波（ｆ０／２）および２次高調波（２ｆ０）から、超高調波（３ｆ０／２）ならびにそれらの倍数までの広い周波数範囲にわたって生じる。これらの信号を用いて、低調波イメージング（ＳＨＩ）ならびに高調波および高次高調波イメージングなどの造影法特有のイメージングモードを生み出すことができる（Ｆｏｒｓｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００５  Ｉｅｅｅ  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ  ｏｎ  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ  Ｆｅｒｒｏｅｌｅｃｔｒｉｃｓ  ａｎｄ  Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  Ｃｏｎｔｒｏｌ；５２（４）：５８１−３）。超音波がｆ０で送信され、２ｆ０で受信される高調波イメージングは、組織が著しい高調波エネルギーを生成し、血液対組織のコントラストの低下につながるため、限られた帯域幅を提供する。ＳＨＩは、共振周波数の２倍で送信し、送信周波数の半分（すなわちｆ０／２）で受信する（Ｆｏｒｓｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．、前出；Ｓｈａｎｋａｒｅｔ  ａｌ．，１９９９  Ｊ  Ａｃｃｏｕｓｔｉｃａｌ  Ｓｏｃ  Ａｍ；１０６（４）：２１０４−１０）。周囲の組織は、使用される低電力レベルでは低調波応答を生成しないため、ＳＨＩは、優れた造影剤対組織比（ＣＴＲ）、すなわち、平均気泡と組織の信号振幅の比を有する。Ｄａｅｃｈｉｎらによってインビトロで２０ｄＢもの高いＣＴＲ値が報告されている（２０１５  Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ；４１（２）：４８６−９７）。
【０００５】
低調波支援圧力推定（ＳＨＡＰＥ）と呼ばれる新規の革新的な技法が提案された（Ｆｏｒｓｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．、前出；Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９  Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ；２５（２）：２７５−８３）。音圧の変化に応じて、微小気泡からの低調波信号生成には３つの段階、すなわち発生、成長、飽和があることが以前に確立されている（Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．、前出）。成長フェーズでは、低調波信号振幅は、圧力変化に対する最高の感度、および周囲圧力との逆線形関係を有する（Ｆｏｒｓｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．、前出；Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．、前出）。周囲圧力を推定するためにＳＨＡＰＥ処置で使用されるのは、この段階である。５つの異なる造影剤を比較するインビトロの研究は、ゾナゾイド（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、Ｏｓｌｏ  Ｎｏｒｗａｙ）がＳＨＡＰＥ用途に対して最も感度が高いことを示し、圧力を０から１８６ｍｍＨｇまで変化させたときに低調波振幅において最も高い較差を有し、相関係数（ｒ）が０．９９であった（Ｈａｌｌｄｏｒｓｄｏｔｔｉｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ  Ｉｍａｇｉｎｇ；３３（３）：１５３−１６４）。
【０００６】
周囲圧力を非侵襲的に推定するためにＳＨＡＰＥを使用することの実現可能性が確認された（Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．、前出；Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ  Ｉｍａｇｉｎｇ；２１（２）：７９−９４；Ｆｏｒｓｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０００  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ；３８（１−８）：９３−９８）。正方形包絡線入力パルスを使用して、圧力を−０．０７ｄＢ／ｍｍＨｇの勾配で０から１８６ｍｍＨｇまで変化させたときに、静止タンクで高い相関係数（ｒ＝−０．９８）が報告された（Ｈａｌｌｄｏｒｓｄｏｔｔｉｒ  ｅｔ  ａｌ．、前出）。別の研究は、イヌの門脈圧亢進症の予測においてゾナゾイドを用いたＳＨＡＰＥの有効性を解析し、絶対門脈圧と低調波信号振幅との間で−０．７１〜−０．７９のｒ値を示した（Ｄａｖｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２  Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ；３８（１０）：１７８４−１７９８）。慢性肝疾患を有する４５人の患者でのＳＨＡＰＥの予備的研究は、ＳＨＡＰＥが、門脈圧亢進症を有する患者と静脈瘤出血の危険性がある患者をふるい分けるための有用なツールになる可能性を示した。ＳＨＡＰＥ較差値と肝静脈圧較差（ＨＶＰＧ）値とが、ＨＶＰＧ＞１０ｍｍＨｇを有する被検体に対して０．８２、ＨＶＰＧ＞１２ｍｍＨｇを有する患者に対して０．９７の線形相関を示した（Ｅｉｓｅｎｂｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３  Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ；２６８（２）：５８１−５８８）。
【０００７】
Ｂｉａｇｉら（２００６  Ｉｅｅｅ  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ  ｏｎ  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ  Ｆｅｒｒｏｅｌｅｃｔｒｉｃｓ  ａｎｄ  Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  Ｃｏｎｔｒｏｌ；５３（１１）：２１７４−２１８２）は、異なる形状のパルスに対するソノビューの低調波応答を調査した。彼らは、パルスの初期包絡線が低調波振幅に強い影響を及ぼすことを証明した。Ｚｈａｎｇら（２００７  Ｐｈｙｓ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ；５２（１８）：５５３１−５５４４）は、５ＭＨｚの中心周波数を有するチャープ励起が、カプセル化された微小気泡の低調波放射を増強することを示した。ＳｈｅｋｈａｒおよびＤｏｙｌｅｙによる別の研究（２０１２  Ｍｅｄ  Ｐｈｙｓ；３９（４）：２０４９−２０６０）は、血管内超音波イメージングのために矩形窓符号化チャープ励起を用いた。彼らは、より高い帯域幅を有するチャープ・パルスが狭帯域正弦波よりも５．７ｄＢ高い低調波対基本応答振幅比を与えると結論付けた。また、彼らは、広帯域のチャープ・パルスを用いてより高い軸方向分解能を達成した。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｓｔｒｉｄｅ＆Ｃｏｕｓｓｉｏｓ  ２０１０  Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｓ  Ｐａｒｔ  Ｈ−Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ；２２４（Ｈ２）：１７１−９１
【非特許文献２】Ｆｏｒｓｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００５  Ｉｅｅｅ  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ  ｏｎ  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ  Ｆｅｒｒｏｅｌｅｃｔｒｉｃｓ  ａｎｄ  Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  Ｃｏｎｔｒｏｌ；５２（４）：５８１−３
【非特許文献３】Ｓｈａｎｋａｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９  Ｊ  Ａｃｃｏｕｓｔｉｃａｌ  Ｓｏｃ  Ａｍ；１０６（４）：２１０４−１０
【非特許文献４】Ｄａｅｃｈｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５  Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ；４１（２）：４８６−９７
【非特許文献５】Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９  Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ；２５（２）：２７５−８３
【非特許文献６】Ｈａｌｌｄｏｒｓｄｏｔｔｉｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ  Ｉｍａｇｉｎｇ；３３（３）：１５３−１６４
【非特許文献７】Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ  Ｉｍａｇｉｎｇ；２１（２）  ：７９−９４
【非特許文献８】Ｆｏｒｓｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０００  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ；３８（１−８）：９３−９８
【非特許文献９】Ｄａｖｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２  Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ；３８（１０）：１７８４−１７９８
【非特許文献１０】Ｅｉｓｅｎｂｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３  Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ；２６８（２）：５８１−５８８
【非特許文献１１】Ｂｉａｇｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００６  Ｉｅｅｅ  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ  ｏｎ  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ  Ｆｅｒｒｏｅｌｅｃｔｒｉｃｓ  ａｎｄ  Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  Ｃｏｎｔｒｏｌ；５３（１１）：２１７４−２１８２
【非特許文献１２】Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００７  Ｐｈｙｓ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ；５２（１８）：５５３１−５５４４
【非特許文献１３】ＳｈｅｋｈａｒおよびＤｏｙｌｅｙ，２０１２  Ｍｅｄ  Ｐｈｙｓ；３９（４）：２０４９−２０６０
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、被検体の少なくとも１つの関心領域（ＲＯＩ）の圧力測定値を得る方法に関し、前記方法は、（ｉ）前記被検体に診断上有効な量の微小気泡超音波造影剤（ＵＣＡ）を投与するステップと、（ｉｉ）前記ＵＣＡが前記被検体に蓄積することを可能にするステップと、（ｉｉｉ）前記被検体の前記ＲＯＩに超音波を送信するステップであって、前記超音波が広帯域波である、ステップと、（ｉｖ）前記超音波に対する音響パワーを最適化するステップと、（ｖ）前記ＲＯＩから、ステップ（ｉｉｉ）で送信された超音波を反射することによって生成された超音波エコーを受信し、これによって検出信号を取得するステップと、（ｖｉ）検出信号に基づいて超音波エコーから低調波成分を抽出するステップと、（ｖｉｉ）低調波信号振幅と周囲圧力との間の逆線形関係を使用して、前記圧力測定値を得るステップと、を含む。
この特定の波形を使用する本発明の方法は、矩形波を使用した既存のＳＨＡＰＥ技法に対して驚くべき改善を提供し、インビボの圧力測定に対してＳＨＡＰＥをより敏感にするはずである。
【００１０】
さらなる方法は、哺乳動物の少なくとも１つの関心領域（ＲＯＩ）の圧力測定値を得る方法を対象とし、前記方法は、（ｉ）前記被検体に診断上有効な量の微小気泡超音波造影剤（ＵＣＡ）を静脈内に投与するステップと、（ｉｉ）前記ＵＣＡが前記被検体に蓄積することを可能にするステップと、（ｉｉｉ）ガウス窓二項フィルタ処理矩形波の形態の超音波を前記被検体の前記ＲＯＩに送信するステップであって、前記超音波が広帯域波である、ステップと、（ｉｖ）前記超音波に対する音響パワーを最適化するステップと、（ｖ）前記ＲＯＩから、ステップ（ｉｉｉ）で送信された超音波を反射することによって生成された超音波エコーを受信し、これによって検出信号を取得するステップと、（ｖｉ）検出信号に基づいて超音波エコーから低調波成分を抽出するステップと、（ｖｉｉ）低調波信号振幅と周囲圧力との間の逆線形関係を使用して、前記圧力測定値を得るステップと、を含む。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】ＳＨＩおよびＳＨＡＰＥ調査のために実施された波形設定である。
【００１２】
【図２】（ａ）は自動パワー最適化アルゴリズムを示す図であり、ＳＨＩの最高強度投影（ＭＩＰ）であり、正方形が門脈内部の選択されたＲＯＩを表す。（ｂ）は入射圧力を最大音圧の０％から１００％まで変化させた低調波信号の３段階、すなわち発生、成長、飽和を示す図である。（ｃ）は上図からマッピングされた低調波振幅の変化（ｙ軸）を示す図であり、最も高いピークによって表される点が最も高いＳＨＡＰＥ感度を有することが示されている。
【００１３】
【図３】インビトロの設定における８つのパルス包絡線すべてに対する平均低調波振幅対圧力を示す図である。
【００１４】
【図４】（ａ）はデュアルイメージングのＢモード（白黒）によるイメージングである。（ｂ）はデュアルイメージングのＳＨＩによるイメージングである。（ｃ）はＢモード像の最高輝度投影に対するＲＯＩ選択を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
請求項に係る発明の主題をより明確かつ簡潔に記載し指摘するために、本明細書および特許請求の範囲全体を通して使用される特定の用語に対する定義が本明細書において以下に提供される。特定の用語のいかなる例示も、本明細書においては非限定的な例と見なされるべきである。
【００１６】
実施例で使用される略語のリスト
ＤＩＣＯＭ  医用デジタル・イメージングおよび通信（ｄｉｇｉｔａｌ  ｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ）
ＭＩＰ  最大強度投影（ｍａｘｉｍｕｍ  ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ  ｐｒｏｊｅｃｔｉｏｎ）
ＲＦ  高周波
ＲＯＩ  関心領域
ＳＨＡＰＥ  低調波支援圧力推定
ＳＨＩ  低調波イメージング
【００１７】
用語「含んでいる」または「含む」は、本出願全体を通してそれらの従来の意味を有し、薬剤または組成物が、列挙された必須の特徴または成分を有していなければならないが、他の特徴または成分がさらに存在してもよいことを意味する。用語「含んでいる」は、好ましいサブセットとして「から本質的になる」を含み、これは、組成物が、他の特徴または成分が存在することなく列挙された成分を有することを意味する。
【００１８】
用語「関心領域」（ＲＯＩ）は、本発明の被検体内部の特定の解剖学的位置であると理解することができる。あるいは、本発明の方法が画像の生成を含むため、ＲＯＩは、所望の解剖学的位置を取り囲むデジタル画像上の領域と見なすことができる。
【００１９】
本発明の「被検体」は、任意の人または動物の被検体とすることができる。一実施形態において、本発明の被検体は、哺乳動物である。一実施形態において、前記被検体は、インビボの無傷の哺乳動物体である。別の実施形態では、本発明の被検体は、人である。
【００２０】
ＵＣＡを「投与する」ことは、好ましくは非経口的に行われる。一実施形態において、ＵＣＡは、静脈内に投与される。静脈内経路は、被検体の体全体を通してＵＣＡを送達する、効率的なやり方を表す。さらに、静脈内投与は、実質的な身体的介入または実質的な健康上のリスクを表すものではない。一実施形態において、ＵＣＡは、医薬組成物として投与される。
【００２１】
「微小気泡造影剤」（ＵＣＡ）は、超音波造影を増強するために使用される小さなガス気泡の懸濁液である。気泡（微小気泡と呼ばれる）のそれぞれは、シェル内に封入されたガスを含む。知られている市販のＵＣＡは、オプティゾンおよびゾナゾイド（両方ともＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅから）、ソノビューおよびルマソン（Ｂｒａｃｃｏから）、レボビスト（Ｓｃｈｅｒｉｎｇによる）、ならびにデフィニティおよびルミニティ（Ｌａｎｔｈｅｕｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｍａｇｉｎｇから）を含む。オプティゾンは、パーフルトレンを含有するタンパク質Ａタイプ微小球の微小球から構成されている。ゾナゾイドは、パーフルオロブタン・ガスを封入する外側脂質シェルを有する微小球から構成されている。デフィニティおよびルミニティは、パーフルトレンを封入する外側脂質シェルを有する微小球から構成されている。ソノビューおよびルマソンは、六フッ化硫黄ガスを封入する外側脂質シェルを有する微小球から構成されている。レボビストは、空気を取り囲むガラクトース／パルミチン酸シェルを有する。
【００２２】
用語「超音波を送信する」は、典型的には、２〜２０ＭＨｚの範囲の周波数を有する波が生成されて、体内に送信されるプロセスを指す。超音波は、ＡＣを超音波に変換することができるトランスデューサによって生成される。当業者に知られているような典型的なトランスデューサは、圧電型トランスデューサまたは容量型トランスデューサのいずれかである。圧電性結晶は、電圧が印加されると、サイズおよび形状を変化させ、ＡＣ電圧が同じ周波数で圧電性結晶を振動させ、超音波を生成する。容量型トランスデューサは、導電性ダイアフラムとバッキングプレートとの間の静電場を使用する。
【００２３】
用語「超音波エコーを受信する」は、体に当たって、表面から反射されて戻ってくる送信超音波が「検出信号」としてトランスデューサによって捕捉されるプロセスを指す。
【００２４】
用語「低調波成分」は、ＵＣＡ内の微小気泡の特定の振動を指す。低調波（ならびに超高調波）からより高い調波までの可能な周波数放射の範囲にわたる多くの興味深い気泡振動がある（Ｌａｕｔｅｒｂｏｒｎ  １９７６  Ｊ  Ａｃｏｕｓｔ  Ｓｏｃ  Ａｍ；５９：２８３−２９３）。励起音響信号がある特定のしきい値レベルを超える場合にのみ、（例えば、Ｐｒｏｓｐｅｒｅｔｔｉ  １９７５  Ｊ  Ａｃｏｕｓｔ  Ｓｏｃ  Ａｍ；５７：８１０−８２１；Ｐｒｏｓｐｅｒｅｔｔｉ  １９９４  Ｊ  Ａｃｏｕｓｔ  Ｓｏｃ  Ａｍ；６１：１１−１６  およびＬｅｉｇｈｔｏｎ，Ｔ．Ｇ．，Ｔｈｅ  Ａｃｏｕｓｔｉｃ  Ｂｕｂｂｌｅ．Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ，Ｇｒｅａｔ  Ｂｒｉｔａｉｎ，１９９４に記載されているように）自由気泡の低調波振動が発生する。
【００２５】
低調波成分の信号振幅は、データにロジスティック曲線を適合させて、最適化されたパワーまたは最大のＳＨＡＰＥ感度の点として変曲点を選択するソフトウェアを使用して計算される。
【００２６】
低調波信号振幅と周囲圧力との間の「逆線形関係」は、得られた低調波信号振幅を当てはめた標準曲線の生成によって確立される。
【００２７】
上述したように、ＵＣＡは、インビボ・イメージングの分野でよく知られている。市販のＵＣＡは、典型的には、適切なガスまたはガス混合物が存在する状態で、膜形成材料を含有する液体を振盪または超音波処理することによって生成される。他のプロセスは、噴霧乾燥を含む。米国特許第５５５２１３３号は、コロイドミルを使用して、ガスを封入する熱変性可能なタンパク質を含む封入ガス微小球を作るための方法について記載している。熱変性可能なタンパク質の水溶液を、ガスと混ぜ合わせ、混合物に機械的剪断力を加えることによって混合して、ガス微小気泡の懸濁液を形成するものであり、タンパク質が変性して、ガス−溶液界面に堆積するようになる。国際公開第２０１４００１２９７号は、熱変性可能なタンパク質の水溶液をガスと混ぜ合わせて、これらを高い剪断力を使用して機械的に混合するプロセスを記載している。微小気泡を調製する場合、製品仕様に従って繰り返し製品を提供する堅牢なプロセスを有することが重要である。生成される微小気泡は、所望の微小気泡サイズ、例えば、２〜６μｍおよび３〜５μｍの範囲を含む、概ね１〜７μｍあたりの狭いサイズ分布を有するのが望ましい。７μｍを上回るような大きな微小気泡の割合は、最小限であって、十分に制限されるべきである。微小気泡のサイズは、ガス流量および液体流量を調整することによって精密に制御され得る。
【００２８】
一実施形態において、被検体の少なくとも１つの関心領域（ＲＯＩ）における圧力測定値を得るための方法が開示され、前記方法は、（ｉ）診断上有効な量の微小気泡超音波造影剤（ＵＣＡ）を前記被検体に投与するステップと、（ｉｉ）前記ＵＣＡが前記被検体に蓄積することを可能にするステップと、（ｉｉｉ）前記被検体の前記ＲＯＩに超音波を送信するステップであって、前記超音波が広帯域波である、ステップと、（ｉｖ）前記超音波の音響パワーを最適化するステップと、（ｖ）前記ＲＯＩから、ステップ（ｉｉｉ）で送信された超音波を反射することによって生成された超音波エコーを受信し、それによって検出信号を取得するステップと、（ｖｉ）検出信号に基づいて超音波エコーから低調波成分を抽出するステップと、（ｖｉｉ）低調波信号振幅と周囲圧力との間の逆線形関係を使用して、前記圧力測定値を得るステップと、を含む。
【００２９】
本発明の方法の一実施形態において、前記被検体は、哺乳動物である。
【００３０】
本発明の方法の一実施形態において、前記哺乳動物は、人である。
【００３１】
本発明の方法の一実施形態において、前記投与は、静脈注射である。
【００３２】
本発明の方法の一実施形態において、投与は、点滴である。例えば、ＵＣＡのバイアルを生理食塩水に溶解し、規定の速度で患者に滴下することができ、例えば、５０ｍＬの生理食塩水にデフィニティのバイアルを溶解して、これを滴下する。
【００３３】
本発明の方法の一実施形態において、前記投与は、生理食塩水との混注である。非限定的な例示的な混注は、約１００〜２００ｍＬ／時の生理食塩水＋０．１０〜０．２０ｍＬ／時のＵＣＡ、または１００〜１５０ｍＬ／時の生理食塩水＋０．１５〜０．２０ｍＬ／時のＵＣＡであってもよく、例えば、ゾナゾイドについては、非限定的な点滴は、０．１８ｍＬ／時のゾナゾイドと併せた１２０ｍＬ／時の生理食塩水であってもよい。
【００３４】
本発明の方法の一実施形態において、前記ＵＣＡは、それぞれが安定化シェルによって囲まれたガスを含む微小気泡を含む。
【００３５】
本発明の方法の一実施形態において、前記ガスは、前記被検体の血液と比較して異なる圧縮率を有する。
【００３６】
本発明の方法の一実施形態において、前記ガスは、低溶解度を示す高密度の高分子量ガスである。
【００３７】
本発明の方法の一実施形態において、前記ガスは、パーフルトレン、パーフルオロブタン（ＰＦＢ）、オクタフルオロプロパン、または六フッ化硫黄を含むグループから選択される。
【００３８】
本発明の方法の一実施形態において、前記安定化シェルは、タンパク質、脂質、またはポリマーを含む。
【００３９】
本発明の方法の一実施形態において、前記安定化シェルは、タンパク質を含む。
【００４０】
本発明の方法の一実施形態において、前記タンパク質は、アルブミンである。
【００４１】
本発明の方法の一実施形態において、前記安定化シェルは、脂質を含む。
【００４２】
本発明の方法の一実施形態において、前記脂質は、リン脂質である。
【００４３】
本発明の方法の一実施形態において、前記リン脂質は、フォスファチジルセリン（ＰＳ）である。
【００４４】
本発明の方法の一実施形態において、前記リン脂質は、水素化卵フォスファチジルセリン（ＨＥＰＳ）である。
【００４５】
本発明の方法の一実施形態において、前記安定化シェルは、ポリマーを含む。
【００４６】
本発明の方法の一実施形態において、前記ポリマーは、乳酸（ＰＬＡ）および乳酸／グリコール酸（ＰＬＧＡ）を主成分とする脂肪族ポリエステルである。
【００４７】
本発明の方法の一実施形態において、前記ポリマーは、アルギナートである。
【００４８】
本発明の方法の一実施形態において、前記ＵＣＡは、ゾナゾイドである。
【００４９】
本発明の方法の一実施形態において、前記ＵＣＡは、ソノビューである。
【００５０】
本発明の方法の一実施形態において、前記超音波は、ガウス窓パルスである。
【００５１】
本発明の方法の一実施形態において、前記ガウス窓パルスは、ガウス窓矩形波、ガウス窓二項フィルタ処理矩形波、ガウス窓二項フィルタ処理矩形９０°シフト波を含むグループから選択される。
【００５２】
本発明の方法の一実施形態において、前記超音波は、チャープ・パルスである。前記チャープ・パルスは、チャープアップまたはチャープダウン・パルスとすることができる。
【００５３】
本発明の方法は、被検体の体内のいくつかの異なるＲＯＩに適用されてもよく、心臓におけるような絶対測定（すなわち、左心室もしくは右心室の血圧測定）、較差／差分測定、例えば、門脈対肝静脈または病変組織対健常組織を得るために適用されてもよい。
【００５４】
本発明の方法の一実施形態において、前記ＲＯＩは、前記被検体の門脈を含む。
【００５５】
本発明の方法の一実施形態において、前記ＲＯＩは、前記被検体の門脈および肝静脈を含む。
【００５６】
本発明の方法の一実施形態において、前記ＲＯＩは、前記被検体の心腔を含む。
【００５７】
本発明の方法の一実施形態において、前記心腔は、心室である。
【００５８】
本発明の方法の一実施形態において、前記心室は、左心室である。
【００５９】
本発明の方法の一実施形態において、前記ＲＯＩは、前記被検体の病変組織を含む。
【００６０】
本発明の方法の一実施形態において、前記病変組織は、悪性腫瘍またはアテローム硬化性プラークを含むグループのうちの１つである。
【００６１】
本発明の方法の一実施形態において、前記ＲＯＩは、前記被検体の非病変組織をさらに含む。
【００６２】
ＵＣＡは、ボーラスまたは点滴のいずれかによって投与することができる。非限定的な例として、ゾナゾイドについては、成人に対する通常の用量は、１回の投与で体重１ｋｇあたり０．０１５ｍｌである（ゾナゾイド添付文書参照、２０１４  ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ３．ｇｅｈｅａｌｔｈｃａｒｅ．ｃｏ．ｋｒ／ｋｏ−ｋｒ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ｃａｔｅｇｏｒｉｅｓ／ｃｏｎｔｒａｓｔ＿ｍｅｄｉａ／ｓｏｎａｚｏｉｄから入手可能）。
【００６３】
下記の実験例では、異なる包絡線を有する８つの波形が、ＳＨＡＰＥ研究が最も感度が高くなる音響パワーに関して最適化された。ＳＨＡＰＥを使用して、門脈圧の変化の検出に対して最高感度を達成する波形を選択するために、３匹のイヌで、最初はインビトロで、次いでインビボで、４つの入力送信サイクルを用いて研究を行った。４Ｃ曲線アレイを有するＬｏｇｉｑ９スキャナ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、Ｗａｕｋｅｓｈａ、ＷＩ、ＵＳＡ）を用いて、２．５ＭＨｚの高周波（ＲＦ）データを取得した。スキャンは、４ＭＨｚのＢモード・イメージングおよび２．５ＭＨｚで送信し１．２５ＭＨｚで受信するＳＨＩ造影モードによるデュアル・イメージングモードで行われた。本研究では、パーフルオロブタンの脂質安定化ガス充填気泡であるゾナゾイド（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、Ｏｓｌｏ、Ｎｏｒｗａｙ）を造影剤として使用した。圧力の増加とともに低調波振幅が直線的に減少することが、インビトロのすべての波形について観察された（ｒは−０．７７〜−０．９３；ｐ＜０．００１）。インビトロおよびインビボの両方の結果において、狭帯域パルスと比較して、広帯域パルスについてはＳＨＡＰＥ較差と変化する圧力との有意により高い相関があった。最高の相関は、ガウス窓二項フィルタ処理矩形波で達成され、−０．９５のｒ値であった。
【００６４】
本明細書は、最良の形態を含む本発明を開示するために、また、任意の装置またはシステムを製造および使用することならびに任意の組み込まれた方法を実行することを含む、任意の当業者が本発明を実施することを可能にするために、例を使用する。本発明の特許可能な範囲は、特許請求の範囲によって規定され、当業者が想到する他の例を含むことができる。そのような他の例は、特許請求の範囲の文字通りの文言と相違しない構造的要素を有する場合、または特許請求の範囲の文字通りの文言との実質的な差異を有しない等価な構造的要素を含む場合、特許請求の範囲の範囲内にあることが意図されている。本文中で言及された特許および特許出願はすべて、あたかもそれらが個々に組み込まれているかのように、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００６５】
下記の例は、ＳＨＡＰＥで使用するための様々な波形を評価するために行われたインビトロおよびインビボの実験に関する。
【００６６】
材料および方法
【００６７】
本研究では、ＳＨＩおよびＳＨＡＰＥのための一組の８つのパルス波形がテストされた。波形は、それらの包絡線およびアルファベット順のネーミングとともに、図１に示されている。矩形波は、本発明者らによって行われた以前の研究すべてにおいて使用された電流パルスであり、波形Ａとして示されている。４Ｃ曲線アレイを有するＬｏｇｉｑ９スキャナ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、Ｗａｕｋｅｓｈａ、ＷＩ、ＵＳＡ）を用いて、１２Ｈｚのフレームレートで、焦点ゾーン深度（９ｃｍ）で高周波（ＲＦ）データを取得した。スキャンは、本発明者らの以前のＳＨＡＰＥ研究（Ｈａｌｌｄｏｒｓｄｏｔｔｉｒ  ｅｔ  ａｌ．、前出；Ｄａｖｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２  Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、前出；Ｄａｖｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１  Ｉｅｅｅ  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ  ｏｎ  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ  Ｆｅｒｒｏｅｌｅｃｔｒｉｃｓ  ａｎｄ  Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  Ｃｏｎｔｒｏｌ；５８（１）：２０５６−２０６６；Ｄａｖｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ：Ｈｅａｒｔ  ａｎｄ  Ｃｉｒｃｕｌａｔｏｒｙ  Ｐｈｙｓｉｏｌ；３０３（１）：Ｈ１２６−Ｈ１３２；Ｄａｖｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２  Ｊａｃｃ：Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｉｍａｇｉｎｇ；５（１）：８７−９２；Ｄａｖｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２  Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ；６２（５）：４１９−４２６；Ｅｉｓｅｎｂｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ；５１（８）：８９０−８９７）に基づいて、４ＭＨｚで動作するＢモードおよび２．５ＭＨｚで４サイクルパルスを送信し１．２５ＭＨｚで受信する造影ＳＨＩによるデュアル・イメージングモードで行われた。
【００６８】
各取得からのデータは、専用のソフトウェア（ＧＥ  Ｇｌｏｂａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｎｉｓｋａｙｕｎａ  ＮＹ、ＵＳＡ）を用いて抽出されたＤＩＣＯＭファイルおよびＲＦデータとして保存された。抽出されたデータは、Ｂモードおよび低調波ＲＦデータの両方を与え、後者は、１．２５ＭＨｚの中心周波数および０．５０ＭＨｚの帯域幅を有するＤＣフィルタ処理されたＢモード・データである。
【００６９】
さらに、０〜１００％の入射音圧を、標準的な水浴手法を使用して、較正された０．５ｍｍニードルハイドロホン（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ａｃｏｕｓｔｉｃｓ、Ｄｏｒｃｈｅｓｔｅｒ、Ｄｏｒｓｅｔ、ＵＫ；２．５ＭＨｚで３３７ｍＶ／ＭＰａの感度）を用いて、４Ｃトランスデューサの焦点においてインビトロで測定した。測定された最大の入射音圧は、ピーク・トゥ・ピークで１．０〜１．６ＭＰａの範囲にあった。
【００７０】
インビトロの実験設定
【００７１】
２．２５Ｌの水タンクを使用して、１０ｍｍＨｇから４０ｍｍＨｇまで変化する静水圧での造影信号を測定した。水タンクは、薄いプラスチック（厚さ：１．５ｍｍ；Ｈａｌｌｄｏｒｓｄｏｔｔｉｒ  ｅｔ  ａｌ．、前出）から作られた音響窓も備えていた。内部の圧力は、タンクの後壁の特定の入り口を通して空気を注入することによって変えることができ、圧力計（ＯＭＥＧＡ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ社、Ｓｔａｍｆｏｒｄ、ＣＴ、モデルＤＰＧ１０００Ｂ−０５Ｇ）によってモニタされた。タンクの頂部の入り口は、微小気泡を注入し、圧力計を配置するために構築された。生理食塩水（ＩｓｏｔｏｎＩＩ；Ｃｏｕｌｔｅｒ、Ｍｉａｍｉ、ＦＬ）中に造影剤を０．２ｍＬ／Ｌの用量で注入した後、スキャナを用いて、各圧力値に対して（３回繰り返して）個々の波形それぞれに関連付けられた最適化された音響パワーでＲＦデータを取得した。混合物は、磁気撹拌機によって均質に保たれた。すべてのデータは、３回繰り返して取得された。
【００７２】
インビボの実験設定
【００７３】
動物研究はすべて、本発明者らの大学の動物実験委員会によって承認され、ＮＩＨによって提供されたガイドラインに従って行われた。合計３匹のイヌを２４時間断食させて、門脈の流れを減らし、したがって、実験のばらつきを減らした（Ｗｙｌｉｅ  ａｎｄ  Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ−Ｄａｖｉｄｓｏｎ  ２００４「Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ：Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ」；Ａｒｎｏｌｄ，Ｌｏｎｄｏｎ：Ｈｅａｌｙ＆Ｋｎｉｇｈｔ，Ｅｄｓ．）。イヌは、標準的な技法を使用して、全処置中に麻酔下に置かれた。イヌは、正常な体温を維持するために加温ブランケット上に置かれた。トランスデューサとの音響インタフェースを改善するために、これらイヌの腹部を剃毛してジェルで覆った。
【００７４】
正中腹部切開を行い主門脈へのアクセスを提供した。造影剤注入のために１８ゲージのカテーテルを前肢静脈に留置した。圧力カテーテル（Ｍｉｌｌａｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社、Ｈｏｕｓｔｏｎ、ＴＸ、ＵＳＡ）を、トランスデューサ制御ユニット（ＴＣＢ５００、Ｍｉｌｌａｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を介してデジタル・オシロスコープ（Ｍｏｄｅｌ９３５０ＡＭ、ＬｅＣｒｏｙ、Ｃｈｅｓｔｎｕｔ  Ｒｉｄｇｅ、ＮＹ、ＵＳＡ）に接続し、次に、ＳＨＡＰＥ研究と同時に圧力測定値を取得するために脾静脈を通して主門脈内へ前進させた。４Ｃプローブを門脈上に経皮的に留置した。１０年を超える経験を有する超音波検査者がすべてのスキャンを行った。超音波検査者および医師は、標準的なグレイスケール・イメージングを使用して、門脈内の圧力カテーテルの存在および門脈の開存性を確認した。
【００７５】
以前の経験に基づいて、生理食塩水（１２０ｍｌ／時）および０．１８ｍＬ／ｋｇ／時のゾナゾイドの静脈内混注が用いられた（Ｅｉｓｅｎｂｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３、前出；Ｈａｌｐｅｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２  Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ；２２２（２）：３６１−３６６）。すべてのデータは、門脈内のゾナゾイド微小気泡の視覚的な検証の後に収集された。
【００７６】
音響パワーは、本発明者らのグループ（Ｄａｖｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２  Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、前出）によって以前に開発されたアルゴリズムを使用して、８つの波形のそれぞれに対して独立に最適化された。造影画像において、門脈内部のＲＯＩが選択され、自動パワー制御アルゴリズムを開始して、変化する深さおよび減衰を考慮して最大のＳＨＡＰＥ感度に対する最適音響出力パワーを決定した。簡単に言えば、自動プログラムは、すべての音響出力レベルについてデータを取得し、抽出された低調波振幅が音響出力の関数としてプロットされる。ロジスティック曲線をデータに適合させ、変曲点が最大のＳＨＡＰＥ感度の点であることが示されているため、変曲点を最適化されたパワーとして選択する（Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９  Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、前出）。そのような１つの曲線が図２に示されている。
【００７７】
肝臓微小循環系の塞栓症による門脈圧亢進症の誘発前後に、シネループを６秒間、３回繰り返して収集した。これは、４〜５ｍＬの生理食塩水と混合した約５ｍＬのジェルフォーム（Ｅｔｈｉｃｏｎ、Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ、ＮＪ）（１０〜３０ｍｍＨｇの圧力値となる）を主門脈内に注入することによって行われた。
【００７８】
データ処理および解析
【００７９】
各取得からのＲＦデータは、上述したような専用のソフトウェア（ＧＥ  Ｇｌｏｂａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）を使用して抽出された。超音波検査者によって事前に識別された門脈内部の領域は、（ＲＦデータからの再生像から編集された）Ｂモード像の最大強度投影（ＭＩＰ）上で選択され、６秒間の取得（約２７〜３０フレーム）全体を通して固定された。低調波振幅は、１．２５ＭＨｚ付近で０．５ＭＨｚの帯域幅で計算された。相関係数および回帰直線の勾配を計算して、最高の感度を有する波形、および圧力との相関についてチェックした。負の勾配が最も大きく、低調波振幅と圧力との間の相関係数（ｒ）が大きく負である波形が、臨床試験においてさらに使用するために選択された。すべての統計解析は、Ｍａｔｌａｂ  ２０１４ｂ（Ｔｈｅ  ＭａｔｈＷｏｒｋｓ社、Ｎａｔｉｃｋ、ＭＡ、ＵＳＡ）を用いて行われた。また、波形は、広帯域（波形Ｂ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＨ）と狭帯域（波形Ａ、ＣおよびＤ）の２つのグループに分けられ、一方のグループがもう一方のグループよりも性能が良好であったかどうかを判定するために解析された。
【００８０】
結果
【００８１】
インビトロ
【００８２】
インビトロのタンク・データは、結果として低調波振幅変化と静水圧との間に−０．７７〜−０．９５の範囲にある相関値をもたらした。低調波振幅のすべての変化は、圧力の増加とともに統計的に有意であった（ｐ＜０．００１）。図３は、インビトロの設定において圧力を増加させるとともに、低調波振幅が低下することを示す。８つの波形すべてについて、相関係数および低調波振幅と圧力変化との間の勾配に対する値が、以下の表１に提示されている。
【００８３】
表１：インビトロの８つの波形すべて（Ａ〜Ｈ）に対する勾配（低調波振幅と周囲圧力間）およびｒ値
【表１】
2019530557.tif 000003
【００８４】
インビボ
【００８５】
１番目のイヌでは、８つの波形すべてにわたって、正常ベースライン圧は、９．９±０．０ｍｍＨｇであり、この圧は、高血圧症の誘発後に３９．２±０．４ｍｍＨｇに増加した。２番目のイヌについては、ベースライン圧は、９．４±０．０ｍｍＨｇであり、この圧は、ジェルフォーム注入後に２０．０±０．８ｍｍＨｇに上昇した。３番目のイヌについては、ベースライン圧は、１１．２±０．８ｍｍＨｇであり、この圧は、高血圧症の誘発後に３４．８±１．６ｍｍＨｇに増加した。
【００８６】
図４は、門脈および圧力カテーテルを強調するＢモード画像およびＳＨＩ画像を、そのＭＩＰ投影上のＲＯＩ選択と共に示している。１．２５ＭＨｚ付近の０．５ＭＨｚ帯域幅におけるすべてのフレームにわたる平均的な信号は、低調波信号を与えた。３番目のイヌの全体的な低調波振幅は、他の２匹の場合よりもはるかに低く（約１２ｄＢ）、妥当な圧力推定値を生成するにはノイズフロアに近すぎた。これは、薬剤の不適切な再構成に起因する可能性がある。それゆえに、３番目のイヌからのデータは、除外されなければならない。他の２匹のイヌは、インビトロで得られたものに非常に類似した結果を生成した。１番目のイヌでは、高血圧症前の平均最大低調波振幅は、６１．１±２．００ｄＢであり、これは、波形Ｅに対するジェルフォーム注入後に４７．７±３．９５ｄＢに低下した。２番目のイヌにおいて波形Ｅに対する低調波振幅が、高血圧症の誘発後に、５８．１±１．１４ｄＢの平均最大低調波振幅から４４．８±１．４３ｄＢに同様に低下することが観察された。ジェルフォーム注入後の低調波振幅の低下は、残りの２匹のイヌについて８つの波形すべてに対して統計的に有意であることが分かった（ｐ＜０．０１）。
【００８７】
１番目のイヌについては、広帯域波形のグループに対する相関係数は、−０．８０であり、これは、−０．６３の相関係数を有する狭帯域波形よりもはるかに良好であった。同様の結果が第２のイヌについても見られ、広帯域のグループが、−０．３２のｒ値を有する狭帯域グループと比較して、−０．８３のはるかに良好な相関を有していた（ｐ＜０．０５）。広帯域グループ内で他の波形よりもはるかに良好な波形はなかった（ｐ＞０．０５）。
【００８８】
しかしながら、１番目のイヌでは、広帯域グループ内では、波形Ｅは、−０．９５のｒ値で−０．４４ｄＢ／ｍｍＨｇの最も高い較差を有していた。波形ＧおよびＨは、他の波形と比較してより緩い勾配を有し、Ｇは、−０．７２の最も低い相関を有していた。値は、以下の表２に与えられている。
【００８９】
表２：両方のイヌについて８つの波形すべて（Ａ〜Ｈ）に対する勾配（低調波振幅と周囲圧力間）およびｒ値
【表２】
2019530557.tif 000004
【図１】
2019530557.tif 000005
【図２】
2019530557.tif 000006
【図３】
2019530557.tif 000007
【図４】
2019530557.tif 000008
【国際調査報告】
2019530557.tif 000009
2019530557.tif 000010