【手続補正書】
【提出日】平成19年5月7日(2007.5.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る発現ベクター。
【請求項２】  発現ベクターが、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る、前記発現ベクターを含んで成る形質転換された細胞。
【請求項３】  シグナル配列、抗原および細胞結合要素を含んで成る融合タンパク質。
【請求項４】  発現ベクターが、プロモーター配列をコードするポリヌクレオチド、分泌シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリアデニル化配列をコードするポリヌクレオチドを含んで成り、前記配列が操作可能に連結される、前記発現ベクターを含んで成るワクチン。
【請求項５】  抗原提示細胞が、請求項３記載の融合タンパク質でインビトロで形質導入される、前記抗原提示細胞を含んで成るワクチン。
【請求項６】  抗原提示細胞が、請求項１記載の発現ベクターでインビトロで形質導入される、前記抗原提示細胞を含んで成るワクチン。
【請求項７】  請求項３記載の融合タンパク質を含んで成るワクチン。
【請求項８】  少なくとも、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチドおよび細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドを含んで成る発現ベクター。
【請求項９】  発現ベクターを抗原提示細胞中に導入して、形質導入された抗原提示細胞を産生させること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；
前記形質導入された抗原提示細胞を、処理を受けたことのないＴ細胞もしくはプライミングされたＴ細胞と接触させること；ならびに
いずれかの処理を受けたことのないＴ細胞もしくはプライミングされたＴ細胞が前記形質導入された抗原提示細胞との接触に際して活性化されるかどうかを評価すること（ここで、前記Ｔ細胞の活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能な遺伝子もしくはそのフラグメントであることを示す）、
の段階を含んで成る、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能である最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードするポリヌクレオチド配列の同定方法。
【請求項１０】  発現ベクターを抗原提示細胞中に導入して、形質導入された抗原提示細胞を産生させること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；
前記形質導入された抗原提示細胞を、非経口経路を介して哺乳動物に投与すること；
脾細胞からＴ細胞を収集すること、および樹状細胞と共培養すること；ならびに
Ｔ細胞の活性化を評価すること（ここで、Ｔ細胞の前記活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能なポリヌクレオチド配列もしくはそのフラグメントであることを示す）、
の段階を含んで成る、インビボで免疫応答を導き出すことが可能である最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードするポリヌクレオチド配列の同定方法。
【請求項１１】  非経口経路を介して発現ベクターを哺乳動物に投与すること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；
脾細胞からＴ細胞を収集すること、および樹状細胞と共培養すること；ならびにＴ細胞の活性化を評価すること（ここで、Ｔ細胞の前記活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能なポリヌクレオチド配列もしくはそのフラグメントであることを示す）、
の段階を含んで成る、インビボで免疫応答を導き出すことが可能である最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードするポリヌクレオチド配列の同定方法。
【請求項１２】  抗原提示細胞中に発現ベクターを導入して形質導入された抗原提示細胞を産生させることにより前記抗原提示細胞を形質導入すること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；ならびに
抗原が細胞から分泌される条件下で前記ベクターを発現させて前記抗原を産生させること、
の段階を含んで成る、哺乳動物を免疫感作するためのワクチンの製造方法。
【請求項１３】  発現ベクターを抗原提示細胞中に導入して形質導入された抗原提示細胞を産生させることにより、前記抗原提示細胞を形質導入すること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；ならびに
融合タンパク質が細胞から分泌される条件下で前記ベクターを発現させて前記融合タンパク質を産生させること、
の段階を含んで成る、融合タンパク質の製造方法。
【請求項１４】  哺乳動物に投与する前にインビトロで融合タンパク質で形質導入された抗原提示細胞を投与することを含んで成る、融合タンパク質の投与方法。
【請求項１５】  細胞中に発現ベクターを導入すること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、細胞内タンパク質をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；ならびに
融合タンパク質が細胞から分泌される条件下で、前記ベクターを発現させて前記融合タンパク質を産生させること、
の段階を含んで成る、細胞内タンパク質の分泌方法。
【請求項１６】  発現ベクターを細胞中に導入すること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、膜タンパク質をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；ならびに
融合タンパク質が細胞から分泌される条件下で、前記ベクターを発現させて前記融合タンパク質を産生させること、
の段階を含んで成る、膜タンパク質の分泌方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２０６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２０６】
本発明の主要な特徴または態様は次のとおりである。
１．全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る発現ベクター。
２．前記ポリヌクレオチドプロモーター配列が、構成プロモーター、誘導可能なプロモーターおよび組織特異的プロモーターより成る群から選択される、態様１記載の発現ベクター。
３．前記構成プロモーターが、ＳＶ４０初期プロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルスプロモーター、ヒト免疫不全ウイルス末端反復配列プロモーター、モロニーウイルスプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン−バーウイルス前初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、ヒトアクチンプロモーター、ヒトミオシンプロモーター、ヒトヘモグロビンプロモーター、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターおよびヒト筋クレアチンプロモーターより成る群から選択される、態様２記載の発現ベクター。
４．前記誘導可能なプロモーターが、メタロチオネインプロモーター、糖質コルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーターおよびテトラサイクリンプロモーターより成る群から選択される、態様２記載の発現ベクター。
５．前記組織特異的プロモーターが、ＨＥＲ−２プロモーターおよびＰＳＡ関連プロモーターより成る群から選択される、請求項２記載の発現ベクター。
６．シグナル配列をコードする前記ポリヌクレオチドが、Ｂ型肝炎ウイルスＥ抗原シグナル配列、免疫グロブリン重鎖リーダー配列およびサイトカインリーダー配列より成る群から選択される、態様１記載の発現ベクター。
７．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが最低１個のエピトープのポリヌクレオチド配列を含んで成り、前記最低１個のエピトープが哺乳動物におけるＢ細胞応答を誘導する、態様１記載の発現ベクター。
８．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが最低１個のエピトープのポリヌクレオチド配列を含んで成り、前記最低１個のエピトープが哺乳動物におけるＣＤ４＋  Ｔ細胞応答を誘導する、態様１記載の発現ベクター。
９．  抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが最低１個のエピトープのポリヌクレオチド配列を含んで成り、前記最低１個のエピトープが哺乳動物におけるＣＤ８＋  Ｔ細胞応答を誘導する、態様１記載の発現ベクター。
１０．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが最低１個のエピトープのポリヌクレオチド配列を含んで成り、前記最低１個のエピトープが、前記抗原が導入される哺乳動物におけるＢ細胞応答、ＣＤ４＋  Ｔ細胞応答およびＣＤ８＋  Ｔ細胞応答を誘導する、態様１記載の発現ベクター。
１１．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが複数のエピトープのポリヌクレオチド配列を含んで成り、前記複数のエピトープが、前記抗原が誘導される哺乳動物におけるＢ細胞応答、ＣＤ４＋  Ｔ細胞応答およびＣＤ８＋  Ｔ細胞応答を誘導する、態様１記載の発現ベクター。
１２．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが、疾患と関連する最低１種のポリヌクレオチド配列から選択されるポリヌクレオチド配列であり、前記疾患が感染性疾患、癌および自己免疫疾患より成る群から選択される、態様１記載の発現ベクター。
１３．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが、感染性疾患か
らの最低１種のポリヌクレオチド配列から選択されるポリヌクレオチド配列であり、前記感染性疾患が、ウイルス、細菌、真菌および原生動物より成る群から選択される病原性微生物により引き起こされる、態様１２記載の発現ベクター。
１４．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが、ウイルス遺伝子からの最低１種のポリヌクレオチド配列から選択されるポリヌクレオチド配列であり、前記ウイルス遺伝子が、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、パピローマウイルスおよびヘルペスウイルスより成る群から選択される、態様１３記載の発現ベクター。
１５．前記Ｂ型肝炎ウイルスが、Ｂ型肝炎ウイルスｅ抗原もしくはＢ型肝炎ウイルスコア抗原である、態様１４記載の発現ベクター。
１６．前記ヒト免疫不全ウイルスがｇｐ１６０もしくはｇｐ１２０である、態様１４記載の発現ベクター。
１７．前記パピローマウイルスがパピローマウイルスＥ７もしくはパピローマウイルスＥ６である、態様１４記載の発現ベクター。
１８．前記ヘルペスウイルスが、単純疱疹ウイルスタイプ１、単純疱疹ウイルスタイプ２、エプスタイン−バーウイルス、サイトメガロウイルス、ヒトヘルペスウイルス６、ヒトヘルペスウイルス７およびヒトヘルペスウイルス８より成る群から選択される、態様１４記載の発現ベクター。
１９．疾患が、乳癌、子宮頸部癌、黒色腫、腎癌および前立腺癌より成る群から選択される、請求項１２記載の発現ベクター。
２０．抗原の配列をコードする前記ポリヌクレオチドが、チロシナーゼ、ＭＡＲＴ、ｔｒｐ、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−２、ＭＡＧＥ−３、ｇｐ１００、ＨＥＲ−２、ＲａｓおよびＰＳＡをコードするポリヌクレオチド配列より成る群から選択されるポリヌクレオチド配列である、請求項１記載の発現ベクター。
２１．疾患が、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、乾癬およびクローン病より成る群から選択される、請求項１２記載の発現ベクター。
２２．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが、Ｆｃ抗体フラグメントもしくはインターロイキンをコードする、請求項１記載の発現ベクター。
２３．ポリヌクレオチド配列がインターロイキン５をコードする、態様２２記載の発現ベクター。
２４．細胞結合要素をコードする前記ポリヌクレオチドが、細胞表面受容体に結合するリガンドのポリヌクレオチド配列である、態様１記載の発現ベクター。
２５．リガンドの前記ポリヌクレオチド配列が、Ｆｃフラグメント、トキシン細胞結合ドメイン、サイトカイン、小ペプチドおよび抗体をコードするポリヌクレオチド配列より成る群から選択される、態様２４記載の発現ベクター。
２６．前記ポリヌクレオチド配列がシュードモナス属の外毒素の細胞結合ドメインをコードする、態様２５記載の発現ベクター。
２７．前記ポリヌクレオチド配列がインターロイキン５もしくはインターロイキン６をコードする、態様２５記載の発現ベクター。
２８．細胞結合要素をコードする前記ポリヌクレオチドが、同種ポリヌクレオチド配列もしくは異種ポリヌクレオチド配列である、態様１記載の発現ベクター。
２９．細胞結合要素をコードする前記ポリヌクレオチドが同種のＦｃフラグメントである、態様２８記載の発現ベクター。
３０．細胞結合要素をコードする前記ポリヌクレオチドが異種のＦｃフラグメントである、態様２８記載の発現ベクター。
３１．前記発現ベクターが、細胞のゲノム中への前記発現ベクターの組込みを助長する組込みシグナル配列をさらに含んで成る、態様１記載の発現ベクター。
３２．組込みシグナル配列が、ウイルスの末端反復配列もしくはアデノ随伴ウイルスのＩＴＲ配列である、態様３１記載の発現ベクター。
３３．ベクターが、ウイルスベクター、細菌ベクターおよび哺乳動物ベクターより成る群から選択される、態様１記載の発現ベクター。
３４．発現ベクターが、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る、前記発現ベクターを含んで成る形質転換された細胞。
３５．前記細胞が原核生物もしくは真核生物である、態様３４記載の細胞。
３６．前記真核生物細胞が、酵母、昆虫および哺乳動物より成る真核生物細胞の群から選択される、態様３５記載の細胞。
３７．シグナル配列、抗原および細胞結合要素を含んで成る融合タンパク質。
３８．発現ベクターが、プロモーター配列をコードするポリヌクレオチド、分泌シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリアデニル化配列をコードするポリヌクレオチドを含んで成り、前記配列が操作可能に連結される、前記発現ベクターを含んで成るワクチン。
３９．抗原提示細胞が、態様３７記載の融合タンパク質でイン
ビトロで形質導入される、前記抗原提示細胞を含んで成るワクチン。
４０．抗原提示細胞が、態様１記載の発現ベクターでインビトロで形質導入される、前記抗原提示細胞を含んで成るワクチン。
４１．態様３７記載の融合タンパク質を含んで成るワクチン。
４２．少なくとも、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチドおよび細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドを含んで成る発現ベクター。
４３．発現ベクターを細胞中に導入すること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、前記抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；ならびに前記抗原が細胞から分泌される条件下で前記ベクターを発現させて前記抗原を産生させることであって；前記分泌された抗原は細胞中にエンドサイトーシスされ；前記エンドサイトーシスされた抗原が細胞の内側でプロセシングされ；そして前記プロセシングされた抗原が細胞表面タンパク質に提示されて、Ｔ細胞に媒介される免疫応答を導き出す、の段階を含んで成る、抗原に対し向けられる免疫応答を導き出す方法。
４４．プロセシングされた抗原が、ＭＨＣ−Ｉ、ＭＨＣ−ＩＩもしくはＢ細胞受容体より成る群から選択される細胞表面タンパク質に提示される、態様４３記載の方法。
４５．抗原が第一の細胞により分泌されかつ第二の細胞によりインターナリゼーションされる、態様４３記載の方法。
４６第一の細胞および第二の細胞が抗原提示細胞である、態様４５記載の方法。
４７．第一の細胞が非抗原提示細胞でありかつ第二の細胞が抗原提示細胞である、態様４５記載の方法。
４８．第一の細胞が筋細胞である、態様４７記載の方法。
４９．請求項１記載の発現ベクターを、非経口経路を介して哺乳動物に直接投与する段階を含んで成る、抗原に対し向けられる免疫応答を導き出す方法。
５０．前記ポリヌクレオチドプロモーター配列が、構成プロモーター、誘導可能なプロモーターおよび組織特異的プロモーターより成る群から選択される、態様４３記載の方法。
５１．前記構成プロモーターが、ＳＶ４０初期プロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルスプロモーター、ヒト免疫不全ウイルス末端反復配列プロモーター、モロニーウイルスプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン−バーウイルス前初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、ヒトアクチンプロモーター、ヒトミオシンプロモーター、ヒトヘモグロビンプロモーター、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターおよびヒト筋クレアチンプロモーターより成る群から選択される、態様５０記載の方法。
５２．前記誘導可能なプロモーターが、メタロチオネインプロモーター、糖質コルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーターおよびテトラサイクリンプロモーターより成る群から選択される、態様５０記載の方法。
５３．前記組織特異的プロモーターが、ＨＥＲ−２プロモーターおよびＰＳＡ関連プロモーターより成る群から選択される、態様５０記載の方法。
５４．シグナル配列をコードする前記ポリヌクレオチドが、Ｂ型肝炎ウイルスｅ抗原シグナル配列、免疫グロブリン重鎖リーダー配列およびサイトカインリーダー配列より成る群から選択される、態様４３記載の方法。
５５．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが、疾患と関連する最低１種のポリヌクレオチド配列から選択されるポリヌクレオチド配列であり、前記疾患が感染性疾患、癌および自己免疫疾患より成る群から選択される、態様４３記載の方法。
５６．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが、感染性疾患からの最低１種のポリヌクレオチド配列から選択されるポリヌクレオチド配列であり、前記感染性疾患が、ウイルス、細菌、真菌および原生動物より成る群から選択される病原性微生物により引き起こされる、態様５５記載の方法。
５７．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが、ウイルス遺伝子からの最低１種のポリヌクレオチド配列から選択されるポリヌクレオチド配列であり、前記ウイルス遺伝子が、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、パピローマウイルスおよびヘルペスウイルスより成る群から選択される、態様５６記載の方法。
５８．前記Ｂ型肝炎ウイルスが、Ｂ型肝炎ウイルスｅ抗原もしくはＢ型肝炎ウイルスコア抗原である、態様５７記載の方法。
５９．前記ヒト免疫不全ウイルスがｇｐ１６０もしくはｇｐ１２０である、態様５７記載の方法。
６０．前記パピローマウイルスがパピローマウイルスＥ７もしくはパピローマウイルスＥ６である、態様５７記載の方法。
６１．前記ヘルペスウイルスが、単純疱疹ウイルスタイプ１、単純疱疹ウイルスタイプ２、エプスタイン−バーウイルス、サイトメガロウイルス、ヒトヘルペスウイルス６、ヒトヘルペスウイルス７およびヒトヘルペスウイルス８より成る群から選択される、態様５７記載の方法。
６２．疾患が、乳癌、子宮頸部癌、黒色腫、腎癌および前立腺癌より成る群から選択される、態様５５記載の方法。
６３．疾患が、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、乾癬およびクローン病より成る群から選択される、態様５５記載の方法。
６４．抗原をコードする前記ポリヌクレオチドが、Ｆｃ抗体フラグメントもしくはインターロイキンをコードする、態様４３記載の方法。
６５．ポリヌクレオチド配列がインターロイキン５をコードする、態様６４記載の方法。
６６．細胞結合要素をコードする前記ポリヌクレオチドが、細胞表面受容体に結合するリガンドのポリヌクレオチド配列である、態様４３記載の方法。
６７．リガンドの前記ポリヌクレオチド配列が、Ｆｃフラグメント、トキシン細胞結合ドメイン、サイトカイン、小ペプチドおよび抗体をコードするポリヌクレオチド配列より成る群から選択される、態様６６記載の方法。
６８．前記ポリヌクレオチド配列がシュードモナス属の外毒素の細胞結合ドメインをコードする、態様６７記載の方法。
６９．前記ポリヌクレオチド配列がインターロイキン５もしくはインターロイキン６をコードする、態様６７記載の方法。
７０．細胞結合要素をコードする前記ポリヌクレオチドが、同種ポリヌクレオチド配列もしくは異種ポリヌクレオチド配列である、態様４３記載の方法。
７１．細胞結合要素をコードする前記ポリヌクレオチドが同種のＦｃフラグメントである、態様７０記載の方法。
７２．細胞結合要素をコードする前記ポリヌクレオチドが異種のＦｃフラグメントである、態様７０記載の方法。
７３．前記発現ベクターが、細胞のゲノム中への前記発現ベクターの組込みを助長する組込みシグナル配列をさらに含んで成る、態様４３記載の方法。
７４．組込みシグナル配列が、ウイルスの末端反復配列もしくはアデノ随伴ウイルスのＩＴＲ配列である、態様７３記載の方法。
７５．ベクターが、ウイルスベクター、細菌ベクターおよび哺乳動物ベクターより成る群から選択される、態様４３記載の方法。
７６．発現ベクターを抗原提示細胞中に導入して、形質導入された抗原提示細胞を産生させること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；前記形質導入された抗原提示細胞を、処理を受けたことのないＴ細胞もしくはプライミングされたＴ細胞と接触させること；ならびにいずれかの処理を受けたことのないＴ細胞もしくはプライミングされたＴ細胞が前記形質導入された抗原提示細胞との接触に際して活性化されるかどうかを評価すること（ここで、前記Ｔ細胞の活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能な遺伝子もしくはそのフラグメントであることを示す）、の段階を含んで成る、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能である最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードするポリヌクレオチド配列の同定方法。
７７．試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが腫瘍細胞系から単離されたｃＤＮＡライブラリーである、態様７６記載の方法。
７８．試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ウイルスゲノム、細菌ゲノム、寄生虫ゲノムおよびヒトゲノムより成るｃＤＮＡライブラリーの群から選択される、態様７６記載の方法。
７９．  発現ベクターを抗原提示細胞中に導入して、形質導入された抗原提示細胞を産生させること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；前記形質導入された抗原提示細胞を、非経口経路を介して哺乳動物に投与すること；
脾細胞からＴ細胞を収集すること、および樹状細胞と共培養すること；ならびにＴ細胞の活性化を評価すること（ここで、Ｔ細胞の前記活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能なポリヌクレオチド配列もしくはそのフラグメントであることを示す）、の段階を含んで成る、インビボで免疫応答を導き出すことが可能である最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードするポリヌクレオチド配列の同定方法。
８０．試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが腫瘍細胞系から単離されたｃＤＮＡライブラリーである、態様７９記載の方法。
８１．試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ウイルスゲノム、細菌ゲノム、寄生虫ゲノムおよびヒトゲノムより成るｃＤＮＡライブラリーの群から選択される、態様７９記載の方法。
８２．非経口経路を介して発現ベクターを哺乳動物に投与すること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；脾細胞からＴ細胞を収集すること、および樹状細胞と共培養すること；ならびにＴ細胞の活性化を評価すること（ここで、Ｔ細胞の前記活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能なポリヌクレオチド配列もしくはそのフラグメントであることを示す）、の段階を含んで成る、インビボで免疫応答を導き出すことが可能である最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードするポリヌクレオチド配列の同定方法。
８３．試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが腫瘍細胞系から単離されたｃＤＮＡライブラリーである、態様８２記載の方法。
８４．試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ウイルスゲノム、細菌ゲノム、寄生虫ゲノムおよびヒトゲノムより成るｃＤＮＡライブラリーの群から選択される、態様８２記載の方法。
８５．最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードする試験ポリペプチドを同定すること（ここで、前記ポリペプチドは、全部が操作可能に連結されたポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る発現ベクターで抗原提示細胞を形質導入する条件下で同定され）、ならびにＴ細胞の活性化を評価すること（ここで、Ｔ細胞の前記活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能な遺伝子もしくはそのフラグメントであることを示し）；ならびに非経口経路を介して抗原提示細胞を哺乳動物に投与すること（ここで、前記抗原提示細胞は試験ポリペプチドで形質導入される）、の段階を含んで成る、癌の治療方法。
８６．最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードする試験ポリペプチドを同定すること（ここで、前記ポリペプチドは、全部が操作可能に連結されたポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る発現ベクターで抗原提示細胞を形質導入する条件下で同定され）、ならびにＴ細胞の活性化を評価すること（ここで、Ｔ細胞の前記活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能な遺伝子もしくはそのフラグメントであることを示し）；ならびに非経口経路を介して発現ベクターを哺乳動物に投与すること（ここで、前記発現ベクターは、少なくとも、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドおよび細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドを含んで成る）の段階を含んで成る、癌の治療方法。
８７．最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードする試験ポリペプチドを同定すること（ここで、前記ポリペプチドは、全部が操作可能に連結されたポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る発現ベクターで抗原提示細胞を形質導入する条件下で同定され）、ならびにＴ細胞の活性化を評価すること（ここで、Ｔ細胞の前記活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能な遺伝子もしくはそのフラグメントであることを示し）；ならびに非経口経路を介して抗原提示細胞を哺乳動物に投与すること（ここで、前記抗原提示細胞は試験ポリペプチドで形質導入される）の段階を含んで成る、ウイルス感染症の治療方法。
８８．最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードする試験ポリペプチドを同定すること（ここで、前記ポリペプチドは、全部が操作可能に連結されたポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る発現ベクターで抗原提示細胞を形質導入する条件下で同定され）、ならびにＴ細胞の活性化を評価すること（ここで、Ｔ細胞の前記活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能な遺伝子もしくはそのフラグメントであることを示し）；ならびに非経口経路を介して発現ベクターを哺乳動物に投与すること（ここで、前記発現ベクターは、少なくとも、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドおよび細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドを含んで成る）、の段階を含んで成る、ウイルス感染症の治療方法。
８９．最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードする試験ポリペプチドを同定すること（ここで、前記ポリペプチドは、全部が操作可能に連結されたポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る発現ベクターで抗原提示細胞を形質導入する条件下で同定され）、ならびにＴ細胞の活性化を評価すること（ここで、Ｔ細胞の前記活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能な遺伝子もしくはそのフラグメントであることを示し）；ならびに非経口経路を介して抗原提示細胞を哺乳動物に投与すること（ここで、前記抗原提示細胞は試験ポリペプチドで形質導入される）、の段階を含んで成る、自己免疫疾患の治療方法。
９０．最低１種のＭＨＣ−ＩＩに拘束されるエピトープをコードする試験ポリペプチドを同定すること（ここで、前記ポリペプチドは、全部が操作可能に連結されたポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る発現ベクターで抗原提示細胞を形質導入する条件下で同定され）、ならびにＴ細胞の活性化を評価すること（ここで、Ｔ細胞の前記活性化は、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、ＣＤ４＋  ヘルパーＴ細胞を活性化することが可能な遺伝子もしくはそのフラグメントであることを示し）；ならびに非経口経路を介して発現ベクターを哺乳動物に投与すること（ここで、前記発現ベクターは、少なくとも、試験ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列および細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドを含んで成る）、の段階を含んで成る、自己免疫疾患の治療方法。
９１．抗原提示細胞中に発現ベクターを導入して形質導入された抗原提示細胞を産生させることにより前記抗原提示細胞を形質導入すること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；ならびに抗原が細胞から分泌される条件下で前記ベクターを発現させて前記抗原を産生させること、の段階を含んで成る、哺乳動物を免疫感作するためのワクチンの製造方法。
９２．抗原提示細胞が、哺乳動物に投与する前にインビトロでワクチンで形質導入される、態様４１記載のワクチンの投与方法。
９３．ワクチンが非経口で投与される、態様３８記載のワクチンの投与方法。
９４．抗原提示細胞が、哺乳動物に投与する前にエクスビボでワクチンで形質導入される、態様４１記載のワクチンの投与方法。
９５．サイトカイン発現ベクターおよびレトロゲン発現ベクターを哺乳動物に共投与すること（ここで、レトロゲン発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る）の段階を含んで成る、免疫応答の誘導方法。
９６．サイトカイン発現ベクターがＧＭ−ＣＳＦの配列を含有する、態様９５記載の方法。
９７．サイトカイン発現ベクターがＩＬ−２の配列を含有する、態様９５記載の方法。
９８．哺乳動物に１種の発現ベクターを投与すること（ここで、前記発現ベクターは、１個のプロモーターの転写制御下に、サイトカインタンパク質をコードするポリヌクレオチド配列および融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列を含んで成り、前記融合タンパク質はシグナル配列、抗原および細胞結合要素を含んで成る）の段階を含んで成る、免疫応答の誘導方法。
９９．サイトカインタンパク質をコードするポリヌクレオチド配列および融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列が別個の転写制御下にあり、また、サイトカインタンパク質をコードするポリヌクレオチド配列および融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列が１個の発現ベクター中で縦列にある、態様９８記載の方法。
１００．哺乳動物に２種の異なるレトロゲン発現ベクターを共投与すること（ここで、第一のレトロゲン発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、第一の抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り；また、第二のレトロゲン発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、第二の抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成る）の段階を含んで成る、免疫応答の誘導方法。
１０１．哺乳動物に１種の発現ベクターを投与すること（ここで、前記発現ベクターは、１個のプロモーターの転写制御下に第一の融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列および第二の融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列を含んで成り、前記第一の融合タンパク質は、第一のシグナル配列、第一の抗原および第一の細胞結合要素を含んで成り、かつ、前記第二の融合タンパク質は、第二のシグナル配列、第二の抗原および第二の細胞結合要素を含んで成る）の段階を含んで成る、免疫応答の誘導方法。
１０２．前記第一および第二のシグナル配列が同一のシグナル配列であり、第一および第二の抗原が異なる抗原であり、そして前記第一および第二の細胞結合要素がＦｃフラグメントである、態様１０１記載の方法。
１０３．前記第一および第二のシグナル配列が同一のシグナル配列であり、第一および第二の抗原が異なる抗原であり、そして前記第一および第二の細胞結合要素が同一の細胞結合要素である、態様１０１記載の方法。
１０４．前記第一および第二のシグナル配列が異なるシグナル配列であり、第一および第二の抗原が異なる抗原であり、そして前記第一および第二の細胞結合要素が同一の細胞結合要素である、態様１０１記載の方法。
１０５．前記第一および第二のシグナル配列が同一のシグナル配列であり、第一および第二の抗原が異なる抗原であり、そして前記第一および第二の細胞結合要素が異なる細胞結合要素である、態様１０１記載の方法。
１０６．前記第一および第二のシグナル配列が異なるシグナル配列であり、第一および第二の抗原が異なる抗原であり、そして前記第一および第二の細胞結合要素が異なる細胞結合要素である、態様１０１記載の方法。
１０７．第一の融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列および第二の融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列が別個の転写制御下にあり、また、第一の融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列および第二の融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列が１個の発現ベクター中で縦列にある、態様１０１記載の方法。
１０８．融合タンパク質を投与すること（ここで、該タンパク質は細胞結合要素に融合されたＭＨＣ−ＩおよびＭＨＣ−ＩＩエピトープの双方を含んで成る）の段階を含んで成る、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋双方のＴ細胞の同時誘導方法。
１０９．発現ベクターを抗原提示細胞中に導入して形質導入された抗原提示細胞を産生させることにより、前記抗原提示細胞を形質導入すること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、抗原をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；ならびに融合タンパク質が細胞から分泌される条件下で前記ベクターを発現させて前記融合タンパク質を産生させること、の段階を含んで成る、融合タンパク質の製造方法。
１１０．哺乳動物に投与する前にインビトロで融合タンパク質で形質導入された抗原提示細胞を投与することを含んで成る、融合タンパク質の投与方法。
１１１．哺乳動物に融合タンパク質を非経口で投与することを含んで成る、融合タンパク質の投与方法。
１１２．細胞中に発現ベクターを導入すること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、細胞内タンパク質をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成り）；ならびに融合タンパク質が細胞から分泌される条件下で、前記ベクターを発現させて前記融合タンパク質を産生させること、の段階を含んで成る、細胞内タンパク質の分泌方法。
１１３．細胞内タンパク質をコードする前記ポリヌクレオチドの一領域が、分泌の効率を増大させるよう短縮される、態様１１２記載の方法。
１１４．細胞内タンパク質をコードする前記ポリヌクレオチドの一領域が、分泌の効率を増大させるよう突然変異される、態様１１２記載の方法。
１１５．細胞内タンパク質をコードする前記ポリヌクレオチドがＨＰＶ  １６  Ｅ７である、態様１１２記載の方法。
１１６．発現ベクターを細胞中に導入すること（ここで、前記発現ベクターは、全部が操作可能に連結された、ポリヌクレオチドプロモーター配列、シグナル配列をコードするポリヌクレオチド、膜タンパク質をコードするポリヌクレオチド、細胞結合要素をコードするポリヌクレオチドおよびポリヌクレオチドポリアデニル化配列を含んで成）；ならびに融合タンパク質が細胞から分泌される条件下で、前記ベクターを発現させて前記融合タンパク質を産生させること、の段階を含んで成る、膜タンパク質の分泌方法。
１１７．膜タンパク質をコードする前記ポリヌクレオチドの一領域が、分泌の効率を増大させるよう短縮される、態様１１６記載の方法。
１１８．膜タンパク質をコードする前記ポリヌクレオチドの一領域が、分泌の効率を増大させるよう突然変異される、態様１１６記載の方法。
１１９．膜タンパク質をコードする前記ポリヌクレオチドがＥＢＶ核抗原１である、態様１１６記載の方法。