【手続補正書】
【提出日】平成19年1月12日(2007.1.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
３’末端もしくはヌクレオシド間結合において結合した少なくとも２つのオリゴヌクレオチドまたは非ヌクレオチドリンカーへの官能化された核酸塩基もしくは糖を含むイムノマーであって、少なくとも１つのオリゴヌクレオチドが、アクセス可能な５’末端を有し、構造ＲｐＧを有する免疫賦活性ジヌクレオチドを含む免疫調節性オリゴヌクレオチドであり、ここでＲが、図１４に示す構造を有し、Ｇが、グアノシン、２’−デオキシグアノシン、２’デオキシ−７−デアザグアノシン、２’−デオキシ−６−チオグアノシン、アラビノグアノシン、２’−デオキシ−２’置換アラビノグアノシン、２’−Ｏ置換アラビノグアノシンまたは他の非天然プリンヌクレオシドからなる群から選択されている、前記イムノマー。
【請求項２】
構造ＲｐＧを有し、ここでＲが、図１４に示す構造を有し、Ｇが、グアノシン、２’−デオキシグアノシン、２’デオキシ−７−デアザグアノシン、２’−デオキシ−６−チオグアノシン、アラビノグアノシン、２’−デオキシ−２’置換アラビノグアノシン、２’−Ｏ置換アラビノグアノシンまたは他の非天然プリンヌクレオシドからなる群から選択されている免疫賦活性ジヌクレオチドを含む、免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項３】
構造
５’−Ｎｎ−Ｎ１−Ｙ−Ｚ−Ｎ１−Ｎｎ−３’      （ＩＩＩ）
式中、
Ｙの塩基は、２−オキソ−７−デアザ−８−メチル−プリンであり、
Ｚの塩基は、グアニン、２−アミノ−６−オキソ−７−デアザプリン、２−アミノ−６−チオプリン、６−オキソ−プリンまたは他の非天然プリンであり、
各々の存在におけるＮ１およびＮｎは、天然に存在するか、もしくは合成のヌクレオシドまたは脱塩基ヌクレオシド類、アラビノヌクレオシド類、２’−デオキシウリジン、α−デオキシリボヌクレオシド類、β−Ｌ−デオキシリボヌクレオシド類および、ホスホジエステルもしくは修飾されたヌクレオシド間結合により、３’側上の隣接するヌクレオシドに結合したヌクレオシド類からなる群から選択された免疫賦活性部分であり、ここで、引用したオリゴヌクレオチドは、他のオリゴヌクレオチドに直接的に、または間接的に結合している、
を有する、請求項１に記載のイムノマー。
【請求項４】
修飾されたヌクレオチド間結合が、約２オングストローム〜約２００オングストロームの長さを有するリンカー、Ｃ２〜Ｃ１８アルキルリンカー、ポリ（エチレングリコール）リンカー、２−アミノブチル−１，３−プロパンジオールリンカー、グリセリルリンカー、２’−５’ヌクレオシド間結合、およびホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、またはメチルホスホネートヌクレオシド間結合から選択される、請求項３に記載のイムノマー。
【請求項５】
構造
５’−Ｎｎ−Ｎ１−Ｙ−Ｚ−Ｎ１−Ｎｎ−３’      （ＩＩＩ）
式中、
Ｙの塩基は、２−オキソ−７−デアザ−８−メチル−プリンであり、
Ｚの塩基は、グアニン、２−アミノ−６−オキソ−７−デアザプリン、２−アミノ−６−チオプリン、６−オキソ−プリンまたは他の非天然プリンであり、
各々の存在におけるＮ１およびＮｎは、天然に存在するか、もしくは合成のヌクレオシドまたは脱塩基ヌクレオシド類、アラビノヌクレオシド類、２’−デオキシウリジン、α−デオキシリボヌクレオシド類、β−Ｌ−デオキシリボヌクレオシド類および、ホスホジエステルもしくは修飾されたヌクレオシド間結合により、３’側上の隣接するヌクレオシドに結合したヌクレオシド類からなる群から選択された免疫賦活性部分である、
を有する、請求項２に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項６】
修飾されたヌクレオチド間結合が、約２オングストローム〜約２００オングストロームの長さを有するリンカー、Ｃ２〜Ｃ１８アルキルリンカー、ポリ（エチレングリコール）リンカー、２−アミノブチル−１，３−プロパンジオールリンカー、グリセリルリンカー、２’−５’ヌクレオシド間結合、およびホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、またはメチルホスホネートヌクレオシド間結合から選択される、請求項５に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項７】
免疫賦活性部分が、脱塩基ヌクレオシド類、アラビノヌクレオシド類、２’−デオキシウリジン、α−デオキシリボヌクレオシド類、β−Ｌ−デオキシリボヌクレオシド類および、変性ヌクレオシド間結合により、３’側上の隣接するヌクレオシドに結合したヌクレオシド類からなる群から選択されており、修飾されたヌクレオチド間結合が、Ｃ２〜Ｃ１８アルキルリンカー、ポリ（エチレングリコール）結合、２−アミノブチル−１，３−プロパンジオールリンカー、２’−５’ヌクレオシド間結合、メチルホスホネートヌクレオシド間結合；メチルホスホノチオエート類、ホスホトリエステル類、ホスホチオトリエステル類、ホスホロチオエート類、ホスホロジチオエート類、トリエステルプロドラッグ、スルホン類、スルホンアミド類、スルファメート類、ホルムアセタール、Ｎ−メチルヒドロキシルアミン、カーボネート、カルバメート、モルホリノ、ボラノホスホネート、ホスホラミデート類、並びに立体特異性結合、糖変性を有するヌクレオシド、２’置換ペントース糖類；３’−置換ペントース糖類；１’，２’−ジデオキシリボース；アラビノース；置換アラビノース糖類、ヘキソース糖類、並びにアルファ−アノマー類、ペプチド核酸類（ＰＮＡ）、ホスフェート基を有するペプチド核酸類（ＰＨＯＮＡ）、ロックされた核酸類（ＬＮＡ）、モルホリノ核酸類、並びに約２オングストローム〜約２００オングストロームの長さを有する主鎖リンカー部分を有するオリゴヌクレオチド、アルキルリンカーまたはアミノリンカー、ＤＮＡイソ型、β−Ｌ−デオキシリボヌクレオシド類、α−デオキシリボヌクレオシド類、非天然ヌクレオシド間結合位置を有するヌクレオシド類、並びに修飾された複素環式塩基を有するヌクレオシド類からなる群から選択されている、請求項３に記載のイムノマー。
【請求項８】
ホスホラミデート類が、第一アミノ−ホスホラミデート類、Ｎ３ホスホラミデート類およびＮ５ホスホラミデート類から選択され、かつ／または２’置換ペントース糖類が、２’−Ｏ−メチルリボース、２’−Ｏ−メトキシエチルリボース、２’−Ｏ−プロパルギルリボースおよび２’−デオキシ−２’−フルオロリボースから選択され、かつ／または３’−置換ペントース糖類が、３’−Ｏ−メチルリボースである、請求項７に記載のイムノマー。
【請求項９】
免疫賦活性部分が、脱塩基ヌクレオシド類、アラビノヌクレオシド類、２’−デオキシウリジン、α−デオキシリボヌクレオシド類、β−Ｌ−デオキシリボヌクレオシド類および、変性ヌクレオシド間結合により、３’側上の隣接するヌクレオシドに結合したヌクレオシド類からなる群から選択されており、修飾されたヌクレオチド間結合が、Ｃ２〜Ｃ１８アルキルリンカー、ポリ（エチレングリコール）結合、２−アミノブチル−１，３−プロパンジオールリンカー、２’−５’ヌクレオシド間結合、メチルホスホネートヌクレオシド間結合；メチルホスホノチオエート類、ホスホトリエステル類、ホスホチオトリエステル類、ホスホロチオエート類、ホスホロジチオエート類、トリエステルプロドラッグ、スルホン類、スルホンアミド類、スルファメート類、ホルムアセタール、Ｎ−メチルヒドロキシルアミン、カーボネート、カルバメート、モルホリノ、ボラノホスホネート、ホスホラミデート類、並びに立体特異性結合、糖変性を有するヌクレオシド、２’置換ペントース糖類；３’−置換ペントース糖類；１’，２’−ジデオキシリボース；アラビノース；置換アラビノース糖類、ヘキソース糖類、並びにアルファ−アノマー類、ペプチド核酸類（ＰＮＡ）、ホスフェート基を有するペプチド核酸類（ＰＨＯＮＡ）、ロックされた核酸類（ＬＮＡ）、モルホリノ核酸類、並びに約２オングストローム〜約２００オングストロームの長さを有する主鎖リンカー部分を有するオリゴヌクレオチド、アルキルリンカーまたはアミノリンカー、ＤＮＡイソ型、β−Ｌ−デオキシリボヌクレオシド類、α−デオキシリボヌクレオシド類、非天然ヌクレオシド間結合位置を有するヌクレオシド類、並びに修飾された複素環式塩基を有するヌクレオシド類からなる群から選択されている、請求項５に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項１０】
ホスホラミデート類が、第一アミノ−ホスホラミデート類、Ｎ３ホスホラミデート類およびＮ５ホスホラミデート類から選択され、かつ／または２’置換ペントース糖類が、２’−Ｏ−メチルリボース、２’−Ｏ−メトキシエチルリボース、２’−Ｏ−プロパルギルリボースおよび２’−デオキシ−２’−フルオロリボースから選択され、かつ／または３’−置換ペントース糖類が、３’−Ｏ−メチルリボースである、請求項９に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項１１】
イムノマーが、遺伝子に相補的な少なくとも１つのオリゴヌクレオチドを含む、請求項１に記載のイムノマー。
【請求項１２】
イムノマーが、少なくとも１つのリボザイムまたはデコイオリゴヌクレオチドを含む、請求項１に記載のイムノマー。
【請求項１３】
イムノマーが、Ｇ３〜Ｇ１０領域を含む少なくとも１つのＮｎ部分を含む、請求項１に記載のイムノマー。
【請求項１４】
免疫賦活性ジヌクレオチド中の１つのプリンヌクレオシドが、構造（ＩＩ）：
【化１】
2006512929.tif 000001
式中：
Ｄは、水素結合供与体であり；
Ｄ’は、水素、水素結合供与体および親水性基からなる群から選択されており；
Ａは、水素結合受容体または親水性基であり；
Ｘは、炭素または窒素であり；
各々のＬは、独立して、Ｃ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選択された原子であり；
Ｓ’は、ペントースもしくはヘキソース糖環または天然に存在しない糖である、
を有する、請求項１に記載のイムノマー。
【請求項１５】
糖環が、ホスフェート部分、修飾されたホスフェート部分または、プリンヌクレオシドを他のヌクレオシドもしくはヌクレオシド類似体に結合させるのに適する他のリンカー部分で誘導体化されている、請求項１４に記載のイムノマー。
【請求項１６】
水素結合供与体が、−ＮＨ−、−ＮＨ２、−ＳＨおよび−ＯＨからなる群から選択されている、請求項１４に記載のイムノマー。
【請求項１７】
水素結合受容体が、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、−Ｎ＝および芳香族複素環の環窒素原子からなる群から選択されている、請求項１４に記載のイムノマー。
【請求項１８】
天然に存在しないプリンが、２−アミノ−６−チオプリン、６−オキソプリンまたは２−アミノ−６−オキソ−７−デアザプリンである、請求項１４に記載のイムノマー。
【請求項１９】
非ヌクレオチドリンカーが、長さが約２オングストローム〜約２００オングストロームのリンカー、金属、可溶性または不溶性生分解性ポリマービーズ、オリゴヌクレオチドの３’末端ヌクレオシドへの結合を可能にする官能基を有する有機部分、生体分子、環式または非環式小分子、いずれかが随意に、オリゴヌクレオチドに結合した直鎖状鎖において、またはこれに付着して、ヒドロキシ、アミノ、チオール、チオエーテル、エーテル、アミド、チオアミド、エステル、尿素およびチオ尿素からなる群から選択された１種または２種以上の官能基を含むことができる、脂肪族または芳香族炭化水素；アミノ酸、炭水化物、シクロデキストリン、アダマンタン、コレステロール、ハプテン抗生物質、式ＨＯ−（ＣＨ２）ｏ−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ２）ｐ−ＯＨで表され、式中ｏおよびｐは、独立して１〜約６の整数である、グリセロールまたはグリセロール類似体、並びに１，３−ジアミノ−２−ヒドロキシプロパンの誘導体からなる群から選択されている、請求項１に記載のイムノマー。
【請求項２０】
ヌクレオシド間結合が、本質的にホスホジエステル結合からなる、請求項１に記載のイムノマー。
【請求項２１】
請求項１に記載のイムノマーおよび、アクセス可能な５’末端以外の位置においてイムノマーに接合した抗原を含む、イムノマー接合体。
【請求項２２】
Ｇが、アラビノグアノシンまたは２’−デオキシ−２’置換アラビノグアノシン、２’−デオキシ−７−デアザグアノシンまたは２’−デオキシ−６−チオグアノシンまたは２’−デオキシイノシンである、請求項１に記載のイムノマー。
【請求項２３】
オリゴヌクレオチドが、遺伝子に相補的である、請求項２に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項２４】
オリゴヌクレオチドが、リボザイムまたはデコイオリゴヌクレオチドを含む、請求項２に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項２５】
Ｇ３〜Ｇ１０領域を含む少なくとも１つのＮｎ部分を含む、請求項２に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項２６】
免疫賦活性ジヌクレオチド中の１つのプリンヌクレオシドが、構造（ＩＩ）：
【化２】
2006512929.tif 000002
式中：
Ｄは、水素結合供与体であり；
Ｄ’は、水素、水素結合供与体および親水性基からなる群から選択されており；
Ａは、水素結合受容体または親水性基であり；
Ｘは、炭素または窒素であり；
各々のＬは、独立して、Ｃ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選択された原子であり；
Ｓ’は、ペントースもしくはヘキソース糖環または天然に存在しない糖である、
を有する、請求項２に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項２７】
糖環が、ホスフェート部分、修飾されたホスフェート部分または、プリンヌクレオシドを他のヌクレオシドもしくはヌクレオシド類似体に結合させるのに適する他のリンカー部分で誘導体化されている、請求項２６に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項２８】
水素結合供与体が、−ＮＨ−、−ＮＨ２、−ＳＨおよび−ＯＨからなる群から選択されている、請求項２６に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項２９】
水素結合受容体が、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、−Ｎ＝および芳香族複素環の環窒素原子からなる群から選択されている、請求項２６に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項３０】
天然に存在しないプリンが、２−アミノ−６−チオプリンまたは２−アミノ−６−オキソ−７−デアザプリンである、請求項２６に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項３１】
非ヌクレオチドリンカーが、長さが約２オングストローム〜約２００オングストロームのリンカー、金属、可溶性または不溶性生分解性ポリマービーズ、オリゴヌクレオチドの３’末端ヌクレオシドへの結合を可能にする官能基を有する有機部分、生体分子、環式または非環式小分子、いずれかが随意に、オリゴヌクレオチドに結合した直鎖状鎖において、またはこれに付着して、ヒドロキシ、アミノ、チオール、チオエーテル、エーテル、アミド、チオアミド、エステル、尿素およびチオ尿素からなる群から選択された１種または２種以上の官能基を含むことができる、脂肪族または芳香族炭化水素；アミノ酸、炭水化物、シクロデキストリン、アダマンタン、コレステロール、ハプテン抗生物質、式ＨＯ−（ＣＨ２）ｏ−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ２）ｐ−ＯＨで表され、式中ｏおよびｐは、独立して１〜約６の整数である、グリセロールまたはグリセロール類似体、並びに１，３−ジアミノ−２−ヒドロキシプロパンの誘導体からなる群から選択されている、請求項２に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項３２】
ヌクレオシド間結合が、本質的にホスホジエステル結合からなる、請求項２に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項３３】
請求項２に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド、およびアクセス可能な５’末端以外の位置においてイムノマーに接合した抗原を含む、免疫調節性オリゴヌクレオチド接合体。
【請求項３４】
Ｇが、アラビノグアノシンまたは２’−デオキシ−２’置換アラビノグアノシン、２’−デオキシ−７−デアザグアノシンまたは２’−デオキシ−６−チオグアノシンまたは２’−デオキシイノシンである、請求項２に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド。
【請求項３５】
請求項１に記載のイムノマーおよび生理学的に許容し得る担体を含む、医薬製剤。
【請求項３６】
請求項１または１４に記載のイムノマー、請求項２１に記載のイムノマー接合体、請求項２、５または２６に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド、および請求項３３に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド接合体からなる群から選択される免疫賦活剤の、脊椎動物における免疫応答を発生させるための医薬の製造への使用。
【請求項３７】
請求項１または１４に記載のイムノマー、請求項２１に記載のイムノマー接合体、請求項２、５または２６に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド、および請求項３３に記載の免疫調節性オリゴヌクレオチド接合体からなる群から選択される免疫賦活剤の、疾患または障害を有する患者を治療的に処置するための医薬の製造への使用。
【請求項３８】
処置されるべき疾患または障害が、癌、自己免疫障害、気道炎症、炎症性障害、皮膚障害、アレルギー、喘息または病原体により生じた疾患である、請求項３７に記載の使用。
【請求項３９】
免疫応答を発生させることが、ワクチンの投与をさらに含む、請求項３６に記載の使用。
【請求項４０】
イムノマーもしくはワクチンまたは両方が、免疫原性タンパク質に結合している、請求項３９に記載の使用。
【請求項４１】
免疫応答を発生させることが、アジュバントの投与をさらに含む、請求項３９に記載の使用。
【請求項４２】
治療的処置が、他の治療剤の投与をさらに含む、請求項３７に記載の使用。
【請求項４３】
他の治療剤が、ワクチン、抗体、アレルゲン、抗生物質および化学療法剤からなる群から選択されている、請求項４２に記載の使用。
【請求項４４】
非ヌクレオチドリンカーにより５’から３’に共有結合した２つまたは３つ以上のオリゴヌクレオチドセグメントを含む、免疫賦活性オリゴヌクレオチド。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
他の態様において、免疫賦活性オリゴヌクレオチドまたはイムノマーは、ＣｐＧ、Ｃ＊ｐＧ、ＣｐＧ＊およびＣ＊ｐＧ＊からなる群から選択された免疫賦活性ジヌクレオチドを含み、式中、Ｃの塩基は、シトシンであり、Ｃ＊の塩基は、チミン、５−ヒドロキシシトシン、Ｎ４−アルキル−シトシン、４−チオウラシルまたは他の非天然ピリミジンヌクレオシドまたは２−オキソ−７−デアザ−８−メチル−プリンであり、ここで、塩基が、２−オキソ−７−デアザ−８−メチル−プリンである際には、これは、好ましくは、ペントースの１’位置に、塩基の１位を介して共有結合しており；Ｇの塩基は、グアニンであり、Ｇ＊の塩基は、２−アミノ−６−オキソ−７−デアザプリン、２−アミノ−６−チオプリン、６−オキソプリンまたは他の非天然プリンであり、ｐは、ホスホジエステル、ホスホロチオエートおよびホスホロジチオエートからなる群から選択されたヌクレオシド間結合である。いくつかの好ましい態様において、免疫賦活性ジヌクレオチドは、ＣｐＧではない。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
本発明の目的のために、用語「オリゴヌクレオチド」は、複数の結合したヌクレオシド単位から形成したポリヌクレオチドを意味する。このようなオリゴヌクレオチドは、ゲノムまたはｃＤＮＡを含む在来の核酸供給源から得られるが、好ましくは合成的方法により製造される。好ましい態様において、各々のヌクレオシド単位は、複素環式塩基およびペントフラノシル、トレハロース、アラビノース、２’−デオキシ−２’置換アラビノース、２’−Ｏ置換アラビノースまたはヘキソース糖基を含む。ヌクレオシド残基は、互いに、多くの既知のヌクレオシド間結合のすべてにより結合することができる。このようなヌクレオシド結合には、限定されずに、ホスホジエステル、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、アルキルホスホネート、アルキルホスホノチオエート、ホスホトリエステル、ホスホラミデート、シロキサン、カーボネート、カルボアルコキシ、アセトアミデート、カルバメート、モルホリノ、ボラノ、チオエーテル、架橋ホスホラミデート、架橋メチレンホスホネート、架橋ホスホロチオエート、およびスルホンヌクレオシド間結合が含まれる。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
本発明の好ましいピリミジンヌクレオシドは、構造（Ｉ）：
【化１】
2006512929.tif 000003
式中：
Ｄは、水素結合供与体であり；
Ｄ’は、水素、水素結合供与体、水素結合受容体、親水性基、疎水性基、電子求引基および電子供与基からなる群から選択されており；
Ａは、水素結合受容体または親水性基であり；
Ａ’は、水素結合受容体、親水性基、疎水性基、電子求引基および電子供与基からなる群から選択されており；
Ｘは、炭素または窒素であり；
Ｓ’は、ペントースもしくはヘキソース糖環または天然に存在しない糖である、
を有する。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
好ましい態様において、免疫賦活性ジヌクレオチドは、ＣｐＧ、Ｃ＊ｐＧ、ＣｐＧ＊およびＣ＊ｐＧ＊からなる群から選択され、式中、Ｃの塩基は、シトシンであり、Ｃ＊の塩基は、２’−チミン、５−ヒドロキシシトシン、Ｎ４−アルキル−シトシン、４−チオウラシルまたは他の非天然ピリミジンまたは２−オキソ−７−デアザ−８−メチルプリンであり、ここで、塩基が、２−オキソ−７−デアザ−８−メチル−プリンである際には、これは、好ましくは、ペントースの１’位置に、塩基の１位を介して共有結合しており；Ｇの塩基は、グアニンであり、Ｇ＊の塩基は、２−アミノ−６−オキソ−７−デアザプリン、２−オキソ−７−デアザ−８−メチルプリン、６−チオグアニン、６−オキソプリンまたは他の非天然プリンであり、ｐは、ホスホジエステル、ホスホロチオエートおよびホスホロジチオエートからなる群から選択されたヌクレオシド間結合である。いくつかの好ましい態様において、免疫賦活性ジヌクレオチドは、ＣｐＧではない。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
免疫賦活性オリゴヌクレオチドは、免疫賦活性部分を、免疫賦活性ジヌクレオチドの一方または両方の側上に含むことができる。従って、いくつかの態様において、免疫賦活性オリゴヌクレオチドは、構造（ＩＩＩ）：
５’−Ｎｎ−Ｎ１−Ｙ−Ｚ−Ｎ１−Ｎｎ−３’      （ＩＩＩ）
式中：
Ｙの塩基は、シトシン、チミン、５−ヒドロキシシトシン、Ｎ４−アルキル−シトシン、４−チオウラシルまたは他の非天然ピリミジンヌクレオシドまたは２−オキソ−７−デアザ−８−メチルプリンであり、ここで、塩基が、２−オキソ−７−デアザ−８−メチル−プリンである際には、これは、好ましくは、ペントースの１’位置に、塩基の１位を介して共有結合しており；
Ｚの塩基は、グアニン、２−アミノ−６−オキソ−７−デアザプリン、２−オキソ−７デアザ−８−メチルプリン、２−アミノ−６−チオ−プリン、６−オキソプリンまたは他の非天然プリンであり；
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６８】
【表１】
2006512929.tif 000004
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５６】
リンカー８および９を含むＣｐＧ  ＤＮＡの免疫賦活効果を比較するために、本発明者らは、５’隣接配列における置換を有するＣｐＧ  ＤＮＡ１４５および１５２を選択し、ＢＡＬＢ／ｃマウス脾臓細胞培養物中でのサイトカインＩＬ−１２およびＩＬ−６分泌を誘発するこれらの能力をアッセイした。ＣｐＧ  ＤＮＡ１４５および１５２の両方は、濃度依存性サイトカイン分泌を誘発した。図１６は、基本的なＣｐＧ  ＤＮＡ４と比較しての、０．３μｇ／ｍＬの濃度における、マウス脾臓細胞培養物中で１４５および１５２により誘発されたＩＬ−１２およびＩＬ−６のレベルを示す。両方のＣｐＧ  ＤＮＡは、基本的なＣｐＧ  ＤＮＡ４よりも高いレベルのＩＬ−１２およびＩＬ−６を誘発した。グリセロールリンカー（８）を含むＣｐＧ  ＤＮＡは、アミノリンカー（９）を含むＣｐＧ  ＤＮＡよりもわずかに高いレベルのサイトカイン（特にＩＬ−１２）を誘発した（図１６）。これらの結果は、さらに、親水性基を含むリンカーが、ＣｐＧ  ＤＮＡの免疫賦活活性のために一層好ましいことを確認する。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７３】
例１６
ヒトＢ細胞および形質細胞様(plasmacytoid)樹状細胞（ｐＤＣ）の単離
新たに取り出した健康な志願者の血液からのＰＢＭＣ(CBR Laboratories, Boston, MA)を、フィコール密度勾配遠心分離法(Histopaque-1077, Sigma)により単離し、Ｂ細胞を、ＰＢＭＣから、陽性の選択により、ＣＤ１９細胞単離キット(Miltenyi Biotec)を用いて、製造者の指示に従って単離した。