【手続補正書】
【提出日】平成19年5月24日(2007.5.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘパリンの成分多糖の一般的構造を有し、かつ以下の特性：
−1800〜2400ダルトンの平均分子量、
−190 IU／mgから450 IU／mgの間の抗−Xa活性、
−抗−IIa活性を有しないかまたは実質的に有さず、
−上記混合物の成分オリゴ糖類は、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩の形態で、
−２〜16糖単位を含み、
−末端の一方に４,５−不飽和ウロン酸２−Ｏ−硫酸単位を有し、
−以下の式：
【化１】
2006528614.tif 000001
の六糖を含むことが理解される、
を有するオリゴ糖混合物。
【請求項２】
アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩がナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩およびマグネシウム塩である、請求項１記載のオリゴ糖混合物。
【請求項３】
20％〜100％および特に30％〜60％の六糖画分を含む、請求項１または２記載のオリゴ
糖混合物。
【請求項４】
六糖画分が請求項１に定義される六糖ΔIIa−IIs−Isを20％〜70％および特に25％〜50％含む、請求項３記載のオリゴ糖混合物。
【請求項５】
1900〜2200の間および特に1950〜2150ダルトンの平均分子量を有する、請求項１〜４のいずれか１項に記載のオリゴ糖混合物。
【請求項６】
190 IU／mgから410 IU／mgの間および特に200〜300 IU／mgの間の抗−Xa活性を有する
が、同時に抗−IIa活性を有しないかまたは実質的に有しない、請求項１〜５のいずれか
１項に記載のオリゴ糖混合物。
【請求項７】
以下の特性:
−1950〜2150ダルトンの平均分子量、
−190 IU／mgから410 IU／mgの抗−Xa活性、および存在しないかまたは実質的に存在しない抗−IIa活性、
−30％〜60％の六糖画分を含み、これは25％〜55％のΔIIa−IIs−Is画分を含むこと、
を有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載のオリゴ糖混合物。
【請求項８】
140 IU／mgより大きいaXa活性、５ IU／mgより大きいaIIa活性および2000〜3000ダルトンの間の平均分子量を有する超低分子ヘパリンが以下の化学反応：
ａ）ベンゼトニウムヘパリネートを得るための塩化ベンゼトニウムの作用による塩交換、
ｂ）塩化ベンジルの作用により得られたベンゼトニウムヘパリネートのエステル化、および超低分子ヘパリンのベンジルエステルのナトリウム塩を得るための処理、
ｃ）得られたベンジルエステルの塩交換および第４級アンモニウム塩の製造、      
ｄ）解重合超低分子ヘパリンを得るための、好ましくは20より大きいpKa値を有する強
有機塩基による解重合、
ｅ）ナトリウム塩への解重合超低分子ヘパリンの第４級アンモニウム塩の変換、
ｆ）残留エステルの鹸化および場合により精製
に供される、請求項１〜７のいずれか１項に記載のオリゴ糖混合物を製造する方法。
【請求項９】
解重合工程ｄ）中に用いられる強塩基／エステルモル比が0.2〜５の間および好ましく
は0.6〜２の間である、請求項８記載の製造方法。
【請求項１０】
解重合工程ｄ）が塩基としてホスファゼン誘導体を用いて行われる、請求項８または９記載の製造方法。
【請求項１１】
製法を超低分子ヘパリンのベンジルエステルのベンゼトニウム塩に対して１モル当量のホスファゼン塩基を用いて行う場合、解重合工程ｄ）を0.3％未満の水含有量で行う、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１２】
解重合工程ｄ）中に用いられるホスファゼンファミリーの塩基が好ましくは、式:
【化２】
2006528614.tif 000002
(式中、基R1〜R7は、同一または異なって、１〜６個の炭素原子を含む直鎖、分枝鎖また
は環状アルキル基を示し、これは適当な場合、R3およびR4が、これらを担持する−Ｎ−Ｐ−Ｎ−基と共に６−員複素環を形成できる)
の塩基である、請求項８〜１１のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１３】
解重合工程に用いられるホスファゼンのファミリーの塩基が２−tert−ブチルイミノ−２−ジエチルアミノ−１,３−ジメチルペルヒドロ−１,３,２−ジアザホスホリンである
、請求項８〜１２のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１４】
工程ｂ）中のヘパリンのベンジルエステルの第４級アンモニウム塩のエステル化度が40％〜100％の間および好ましくは70％〜90％の間である、請求項８記載の製造方法。
【請求項１５】
請求項８記載の製法の工程ｂ）にしたがって製造される超低分子ヘパリンのベンジルエステルの第４級アンモニウム塩のナトリウム塩への変換が、15〜25℃の間の温度で、反応媒体をアルコール性酢酸ナトリウム溶液を用いておよび好ましくはメタノール中の酢酸ナトリウム10％溶液(質量／容量)を用いて処理することにより行われる、請求項８記載の製造方法。
【請求項１６】
エステル化工程ｂ）中に添加される酢酸ナトリウムの質量当量が、解重合反応に用いられるヘパリンのベンジルエステルの第４級アンモニウム塩の質量より３倍大きい、請求項１５記載の製造方法。
【請求項１７】
工程ｃ）中に得られる超低分子ヘパリンのベンジルエステルの第４級アンモニウム塩が、好ましくは、ベンゼトニウム、セチルピリジニウムまたはセチルトリメチルアンモニウム塩である、オリゴ糖混合物を製造する請求項８記載の方法。
【請求項１８】
工程ｆ）による鹸化が、水性媒体中、０〜20℃の間および好ましくは０〜10℃の間の温度で、アルカリ金属水酸化物、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたは水酸化リチウムを用いて行われる、請求項８記載の製造方法。
【請求項１９】
１〜５モル当量のアルカリ金属水酸化物およびより特に１〜２モル当量のアルカリ金属水酸化物が用いられる、請求項１８記載の製造方法。
【請求項２０】
二糖および四糖画分もまた、特にポリアクリルアミドアガロースタイプのゲルで満たされたカラムのクロマトグラフィーにより除去される、オリゴ糖混合物のXa因子に対する増大した選択性を有する請求項１〜５のいずれか１項に記載のオリゴ糖混合物を製造する請求項８〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
低分子ヘパリンが出発物質として用いられるか、または請求項８に定義される超低分子ヘパリンの代わりに100〜140 IU／mgの間の抗−Xa活性を有する超低分子ヘパリン(1500〜3000 Da)が用いられる、請求項１〜７のいずれか１項に記載のオリゴ糖混合物を製造する請求項８〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
100〜140 IU/mgの間の抗-Xa活性を有する超低分子ヘパリン(1500〜4000 Da)が、請求項８に定義される超低分子ヘパリンの代わりに出発物質として用いられる、請求項１〜７のいずれか１項記載のオリゴ糖混合物を製造する請求項８〜２０のいずれか１項記載の方法。
【請求項２３】
低分子ヘパリンがエノキサパリン、フラキシパリン、フラグミン、インノヘップ(また
はロギパリン)、ノルミフロ、エンボレックス(またはサンドパリン)、フルクサム(またはミニダルトン)、クリバリンおよびヒボールから選択される、請求項２１記載の製造方法
。
【請求項２４】
請求項７〜２３のいずれか１項に記載の方法により得ることができる、請求項１〜７のいずれか１項に記載のオリゴ糖混合物。
【請求項２５】
医薬品としての請求項１〜７のいずれか１項に記載のオリゴ糖混合物。
【請求項２６】
抗血栓活性を有する医薬品としての請求項１〜７のいずれか１項に記載のオリゴ糖混合物。
【請求項２７】
静脈および動脈血栓症、深部静脈血栓、肺塞栓症、不安定狭心症、心筋梗塞、心臓虚血、末梢動脈の閉塞性疾患および心房性細動、平滑筋細胞増殖、アテローム性動脈硬化症および動脈硬化、血管形成および成長因子を変化させることによる癌、ならびに糖尿病疾患、例えば糖尿病性網膜症および糖尿病性ネフロパシーを治療または予防するための、請求項２５または２６記載の医薬品。
【請求項２８】
請求項２５記載の少なくとも１つの医薬品および１またはそれ以上の製薬上不活性な賦形剤またはビヒクルまたは添加剤を含有する医薬組成物。
【請求項２９】
皮下または静脈内注射用の溶液からなる、請求項２８記載の医薬組成物。
【請求項３０】
吸入のための肺用製剤からなる、請求項２８記載の医薬組成物。
【請求項３１】
経口製剤からなる、請求項２８記載の医薬組成物。
【請求項３２】
アミド分解法が発色基質において使用され、ここで再構成緩衝液がポリエチレングリコール6000(PEG 6000)である、請求項１〜７のいずれか１項に記載のオリゴ糖混合物の抗−Xa活性を決定する方法。