【手続補正書】
【提出日】平成19年2月26日(2007.2.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
５型アデノウイルス変異体であって、該５型アデノウイルス変異体は、該５型アデノウイルスのウイルス主要後期転写単位のｉ−リーダーヌクレオチド配列において少なくとも１つの変異を含み、該少なくとも１つの変異が、該ｉ−リーダータンパク質の切断を生じさせる、５型アデノウイルス変異体。
【請求項２】
請求項１に記載の５型アデノウイルス変異体であって、前記ｉ−リーダーヌクレオチド配列における前記少なくとも１つの変異が停止コドンを生じる、５型アデノウイルス変異体。
【請求項３】
前記ｉ−リーダーヌクレオチド配列における前記少なくとも１つの変異が、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号Ｍ７３２６０として登録されたゲノムを有する野生型５型アデノウイルス参照配列の、８３５０ヌクレオチドでのＣからＴへの変異である、請求項２に記載の５型アデノウイルス変異体。
【請求項４】
前記アデノウイルスが、Ｏｎｙｘ２０１またはＯｎｙｘ２０３からなる群より選択される、請求項３に記載の５型アデノウイルス変異体。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の５型アデノウイルス変異体であって、腫瘍抑制タンパク質を機能的に欠く癌細胞における該５型アデノウイルス変異体の複製を容易にする変異をさらに含む、５型アデノウイルス変異体。
【請求項６】
前記腫瘍抑制タンパク質がｐ５３を含む、請求項５に記載の５型アデノウイルス変異体。
【請求項７】
請求項６に記載の５型アデノウイルス変異体であって、腫瘍抑制タンパク質ｐ５３を機能的に欠く癌細胞における該５型アデノウイルス変異体の複製を容易にする前記変異が、該アデノウイルスのＥ１Ｂ領域中に変異を含む、５型アデノウイルス変異体。
【請求項８】
前記腫瘍抑制タンパク質がｐＲｂを含む、請求項５に記載の５型アデノウイルス変異体。
【請求項９】
請求項８に記載の５型アデノウイルス変異体であって、腫瘍抑制タンパク質ｐＲｂを機能的に欠く癌細胞における該５型アデノウイルス変異体の複製を容易にする前記変異が、該アデノウイルスのＥ１Ａ領域中に変異を含む、５型アデノウイルス変異体。
【請求項１０】
非相同遺伝子をさらに含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の５型アデノウイルス変異体。
【請求項１１】
前記非相同遺伝子が、ネガティブ選択遺伝子またはサイトカインをコードする、請求項１０に記載の５型アデノウイルス変異体。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の５型アデノウイルス変異体であって、組織特異的プロモーター、または該アデノウイルスの複製に必須であるアデノウイルス遺伝子に作動可能に連結されているＥ２Ｆ応答エレメントをさらに含む、５型アデノウイルス変異体。
【請求項１３】
５型アデノウイルス変異体であって、５型アデノウイルスゲノムの野生型配列は、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号Ｍ７３２６０として登録されており、該野生型配列は、ウイルス主要後期転写単位の野生型ｉ−リーダーヌクレオチド配列を含み、該ｉ−リーダーヌクレオチド配列は、ｉ−リーダータンパク質をコードし、該５型アデノウイルス変異体は、該ｉ−リーダーヌクレオチド配列において少なくとも１つの変異を含み、該少なくとも１つの変異は、該ｉ−リーダーヌクレオチド配列における停止コドンである、５型アデノウイルス変異体。
【請求項１４】
癌の処置における使用のための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の５型アデノウイルス変異体。
【請求項１５】
癌細胞を殺傷するための薬学的組成物であって、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の５型アデノウイルス変異体を含む、薬学的組成物。
【請求項１６】
癌細胞を殺傷するインビトロでの方法であって、該癌細胞を、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の５型アデノウイルス変異体と、該癌細胞を殺傷するに十分な時間にわたって接触させる工程を包含する、方法。
【請求項１７】
癌細胞を殺傷するための薬学的組成物の調製のための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の５型アデノウイルス変異体の使用。
【請求項１８】
ウイルス主要後期転写単位のアデノウイルスｉ−リーダーヌクレオチド配列において少なくとも１つの変異を含むアデノウイルス変異体であって、ここで該ｉ−リーダーヌクレオチド配列における少なくとも１つの変異は、同じ血清型の野生型アデノウイルスと比較して、該アデノウイルス変異体が癌細胞において複製しかつ癌細胞を殺傷する能力を増強する、アデノウイルス変異体。
【請求項１９】
前記癌細胞におけるウイルスＤＮＡ複製およびウイルス遺伝子産物蓄積は、同じ血清型の野生型アデノウイルスと比較して、前記アデノウイルス変異体に関してより迅速に起こる、請求項１８に記載のアデノウイルス変異体。
【請求項２０】
前記アデノウイルスは、血清型５型アデノウイルスまたは血清型２型アデノウイルスである、請求項１８に記載のアデノウイルス変異体。
【請求項２１】
前記少なくとも１つの変異は、ｉ−リーダー配列における停止コドンを生じて、切断型ｉ−リーダータンパク質を生じる、請求項１８に記載のアデノウイルス変異体。
【請求項２２】
腫瘍抑制タンパク質を機能的に欠く癌細胞における前記アデノウイルスの複製を容易にする変異をさらに含む、請求項１８〜２２のいずれか１項に記載のアデノウイルス変異体。
【請求項２３】
非相同遺伝子をさらに含む、請求項１８〜２２のいずれか１項に記載のアデノウイルス変異体。
【請求項２４】
癌細胞を殺傷する方法において使用するための、請求項１８〜２３のいずれか１項に記載のアデノウイルス変異体。
【請求項２５】
請求項１８〜２３のいずれか１項に記載のアデノウイルス変異体を含む、癌細胞を殺傷するための薬学的組成物。
【請求項２６】
癌細胞を殺傷するためのインビトロでの方法であって、該方法は、
該癌細胞を、請求項１８〜２３のいずれか１項に記載のアデノウイルス変異体と、該癌細胞を殺傷するに十分な時間にわたって接触させる工程を包含する、方法。
【請求項２７】
請求項１〜１２、１８〜２３のいずれか１項に記載のアデノウイルスを作成する方法であって、
野生型アデノウイルスを提供する工程、
ランダム変異誘発によって野生型アデノウイルスゲノムに少なくとも１つの変異を導入して、変異したアデノウイルスを生成する工程、
該野生型アデノウイルスと比較して、インビトロで該癌細胞中で複製しかつ該癌細胞を殺傷する増強した能力を有するアデノウイルスを同定するために、該変異したアデノウイルスをスクリーニングする工程、
該野生型アデノウイルスと比較して、インビトロで該癌細胞中で複製しかつ該癌細胞を殺傷する増強した能力を有する変異したアデノウイルスを同定する工程、
を包含する、方法。
【請求項２８】
前記野生型アデノウイルスは、血清型５型アデノウイルスまたは血清型２型アデノウイルスである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記スクリーニングする工程は、前記野生型アデノウイルスと比較して、星状細胞中で実質的に同じかまたは低下した細胞傷害性を示す変異したアデノウイルスを同定するために、前記変異したアデノウイルスをスクリーニングする工程をさらに包含する、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
請求項１〜１２、１８〜２３のいずれか１項に記載のアデノウイルスを作成する方法であって、
野生型アデノウイルスを提供する工程、
ウイルス腫瘍後期転写単位のアデノウイルスｉ−リーダー配列において少なくとも１つの変異を含む組換えアデノウイルスを構築する工程、
を包含する、方法。