(57)【要約】  クロマトグラフィカラムをクロマトグラフィ媒体で充填するための方法であって、本方法は、入口／出口（７）を含む閉じた第１の端部（５）を有するカラムチューブ（３，１９，２１）と、カラムチューブの第２の端部に隣接する媒体入口（１５）と、カラムチューブの第２の端部に最初に隣接してカラムチューブの内側に配置され、カラムチューブの内面と接触して摺動し封止するためのアダプタ（９）と、を含むシステムを提供するステップであって、カラムチューブおよびアダプタは、内部容積を画定し、媒体入口が内部容積と流体連通するように最初に配置される、ステップと、媒体スラリー源を媒体入口に接続するステップと、媒体入口を介して媒体スラリーで内部容積を少なくとも部分的に充填するステップと、内部容積を減少させて、媒体入口が減少した内部容積ともはや流体接続しないように、アダプタをカラムチューブの第１の端部に向かって押し込むステップと、を含む。【選択図】図１ｂ
2019501393.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロマトグラフィカラムアセンブリ（１）をクロマトグラフィ媒体で充填する方法であって、
入口／出口（７）を含む閉じた第１の端部（５）を有するカラムチューブ（３）と、前記カラムチューブ（３）の第２の端部（６）に隣接する媒体入口（１５）と、前記カラムチューブ（３）の前記第２の端部（６）に最初に隣接して前記カラムチューブ（３）の内側に配置され、前記カラムチューブの内面と接触して摺動し封止するためのアダプタ（９）と、を提供するステップであって、前記カラムチューブ（３）および前記アダプタ（９）は、内部容積を画定し、前記媒体入口（１５）が前記内部容積と流体連通するように最初に配置される、ステップと、
媒体スラリー源を前記媒体入口（１５）に接続するステップと、
前記媒体入口（１５）を介して媒体スラリーで前記内部容積を少なくとも部分的に充填するステップと、
前記内部容積を減少させて、前記媒体入口（１５）が前記減少した内部容積ともはや流体接続しないように、前記アダプタ（９）を前記カラムチューブ（３）の前記第１の端部（５）に向かって押し込むステップと、
を含む方法。
【請求項２】
前記アダプタは、入口／出口（１３）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記システムおよび前記媒体スラリーを予め滅菌された状態で提供するステップと、前記媒体入口（１５）、前記第１の端部の入口／出口（７）および／または前記アダプタの入口／出口（１３）に無菌のおよび／または衛生的なコネクタを設けるステップと、をさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記アダプタ（９）を前記カラムチューブ（３）の前記第１の端部（５）に向かって押し込むステップの後に、前記アダプタ（９）の上に残っている前記カラムチューブ（３）の空の部分を前記カラムの残りから分離するステップをさらに含む、請求項１乃至３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
システムを提供する前記ステップは、延長チューブ壁（２１）を基本カラムチューブ壁（１９）に接続するステップをさらに含み、両者は本質的に同じ内径を有し、接続されて前記カラムチューブ（３）を形成する、請求項１乃至４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記アダプタ（９）を前記第１の端部（５）に向かって押し込む前記ステップは、前記アダプタ（９）を前記基本カラムチューブ壁（１９）内であるが前記延長チューブ壁（２１）の外側の位置に押し込むステップを含み、前記カラムチューブ（３）の前記空の部分を分離する前記ステップは、前記延長チューブ壁（２１）を前記基本カラムチューブ壁（１９）から切り離すステップを含む、請求項４または５に記載の方法。
【請求項７】
前記アダプタ（９）が前記第１の端部（５）に向かって押し込まれて、前記媒体が充填された後に、前記アダプタ（９）を前記カラムチューブ（３）に固定するステップをさらに含む、請求項１乃至６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記カラムチューブ（３）の前記第２の端部（６）に隣接して前記カラムチューブ（３）に空気出口（１７）を設けるステップをさらに含む、請求項１乃至７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記内部容積を媒体スラリーで充填する前記ステップは、この内部容積に正確な量の媒体スラリーを充填するステップ、または媒体スラリーが前記空気出口（１７）から流出し始めるまで前記内部容積を媒体スラリーで満たすステップを含む、請求項１乃至８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記アダプタ（９）が前記第１の端部（５）に向かって押し込まれた後に停止して前記カラムチューブ（３）に固定されるべき位置を、前記媒体スラリー濃度、前記システムに充填された媒体スラリーの量、および所望の圧縮係数を使用して計算するステップをさらに含む、請求項１乃至９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記アダプタ（９）が前記第１の端部（５）に向かって押し込まれた後に停止して前記カラムチューブ（３）に固定されるべき所望の位置および／または所望の圧縮係数の入力に基づいて、前記システムの前記内部容積に充填された前記媒体スラリーの体積および／または濃度を調整するステップをさらに含む、請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
１つまたは複数のそれぞれの流体経路の端部に１つまたは複数の閉鎖可能なコネクタ（３３、３５、３７、３９）を含むカラムアセンブリ充填装置（１８）を設けるステップであって、前記１つまたは複数のコネクタは少なくとも前記入口／出口（１５）と相補的である、ステップと、
前記１つまたは複数のコネクタを前記充填するステップの終了時に切り離して、前記充填装置にそれぞれの閉鎖流体経路を残すステップと、
本請求項が請求項２に従属する場合には、任意選択的に、前記入口／出口（１５）および／または前記クロマトグラフィアセンブリ（１）の任意の他の入口／出口に１つまたは複数の閉鎖可能な要素（３３’、３９’）を設けるステップと、
をさらに含む、請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の前記方法により、クロマトグラフィ媒体で充填されたクロマトグラフィカラムアセンブリ。
【請求項１４】
前記クロマトグラフィカラムは、無菌の一回使用の充填されたクロマトグラフィカラムである、請求項１３に記載のクロマトグラフィカラムアセンブリ。
【請求項１５】
クロマトグラフィカラムアセンブリ（１）であって、
入口／出口（７）を含む閉じた第１の端部（５）を有するカラムチューブ（３）と、媒体スラリー源に接続可能な前記カラムチューブ（３）の第２の端部（６）に隣接する媒体入口（１５）と、
前記カラムチューブの内面と接触して摺動し封止するために、前記カラムチューブ（３）の前記第２の端部（６）に隣接して前記カラムチューブ（３）の内側の第１の位置に配置可能なアダプタ（９）と、を含み、前記カラムチューブ（３）および前記アダプタ（９）は、前記第１の位置に配置された場合に内部容積を画定し、前記媒体入口（１５）は前記内部容積と流体接続し、前記アダプタは、前記内部容積を減少させるために少なくとも第２の位置に移動可能であり、前記第２の位置では、前記媒体入口（１５）は前記減少した内部容積ともはや流体接続していない、クロマトグラフィカラムアセンブリ（１）。
【請求項１６】
前記アダプタ（９）は、入口／出口（１３）を含む、請求項１５に記載のクロマトグラフィカラム。
【請求項１７】
前記装置および前記媒体スラリーは、予め滅菌された状態で提供され、前記装置は、前記媒体入口（１５）、前記第１の端部の入口／出口（７）および／または前記アダプタの入口／出口（１３）に設けられた無菌のおよび／または衛生的なコネクタをさらに含む、請求項１５または１６に記載のクロマトグラフィカラム。
【請求項１８】
前記カラムチューブ（３）は、前記閉じた第１の端部（５）を含む基本カラムチューブ壁（１９）に接続された前記媒体入口（１５）を含む延長チューブ壁（２１）を含み、前記アダプタの前記第１の位置は前記延長チューブ壁（２１）内にあり、前記アダプタ（９）の前記第２の位置は前記基本カラムチューブ壁（１９）内にある、請求項１５乃至１７のいずれか１項に記載のクロマトグラフィカラム。
【請求項１９】
前記カラムチューブ（３）は、前記カラムチューブ（３）の前記第２の端部（６）に隣接する空気出口（１７）をさらに含む、請求項１５乃至１８のいずれか１項に記載のクロマトグラフィカラム。
【請求項２０】
前記アセンブリおよび装置は、分離可能かつ閉鎖可能である相補的な流体相互接続経路を有する、請求項１３乃至２０のいずれか１項に記載のクロマトグラフィカラム、およびカラム充填装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クロマトグラフィカラムをクロマトグラフィ媒体で充填するための方法および装置に関する。本発明は、この方法によるクロマトグラフィ媒体で充填されたクロマトグラフィカラムおよびこの充填方法の間に使用される延長チューブ壁にさらに関する。
【背景技術】
【０００２】
クロマトグラフィでは、一回使用のクロマトグラフィカラムを用いることが現在では非常に一般的である。一回使用のクロマトグラフィカラムでは、使用時点で顧客が充填している従来のカラムとは異なり、カラムが顧客に送達される前に、供給業者によって媒体が予め充填される。一回使用のカラムは、使い易さのために予め充填されており、顧客が容易に導入することができる。他の一回使用の技術と同様に、カラムは専用プロセスで限られた数のプロセスサイクルおよび／またはキャンペーンで使用することを意図している。一回使用の製品は、使用前および使用後の機器の洗浄の必要性および関連する労働、検証および品質管理の努力を排除する。また、品質管理、製品特性および性能に関する予め定義された要件を満たすために、一回使用の製品を製造して供給することもできる。フロー充填、圧力充填などクロマトグラフィカラムの充填には様々な技術がある。一般的で自動制御可能な方法に基づいた最良かつ最も再現性のある結果は、通常、軸方向圧縮充填技術で達成され、その技術では、スラリー（懸濁液）が第１のステップでカラム空間に導入され、充填されたベッドが形成され、第２のステップでアダプタの移動によって部分的に圧縮される。軸方向圧縮充填では、媒体スラリーは、４０〜７０％の典型的なスラリー濃度を有する媒体の懸濁液である。これにより、充填作業中に長いカラムチューブが必要となるが、充填後にカラムチューブの高さの半分以上が空の状態になることが多い。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】欧州特許出願公開第２３２４８９８号明細書
【発明の概要】
【０００４】
本発明の目的は、クロマトグラフィカラムを充填するための改良された方法および装置を提供することである。
【０００５】
これは、クロマトグラフィカラムアセンブリをクロマトグラフィ媒体で充填する方法で達成され、本方法は、
入口／出口を含む閉じた第１の端部を有するカラムチューブと、カラムチューブの第２の端部に隣接する媒体入口と、カラムチューブの第２の端部に最初に隣接してカラムチューブの内側に配置され、カラムチューブの内面と接触して摺動し封止するためのアダプタと、を含むシステムを提供するステップであって、カラムチューブおよびアダプタは、内部容積を画定し、媒体入口が内部容積と流体連通するように最初に配置される、ステップと、
媒体スラリー源を媒体入口に接続するステップと、
媒体入口を介して媒体スラリーで内部容積を少なくとも部分的に充填するステップと、
内部容積を減少させて、媒体入口が減少した内部容積ともはや流体接続しないように、アダプタをカラムチューブの第１の端部に向かって押し込むステップと、
を含む。
【０００６】
これはまた、クロマトグラフィカラムアセンブリによって達成され、クロマトグラフィカラムアセンブリは、
入口／出口を含む閉じた第１の端部を有するカラムチューブと、媒体スラリー源に接続可能なカラムチューブの第２の端部に隣接する媒体入口と、
カラムチューブの内面と接触して摺動し封止するために、カラムチューブの第２の端部に隣接してカラムチューブの内側の第１の位置に配置可能なアダプタと、を含み、カラムチューブおよびアダプタは、前記第１の位置に配置された場合に内部容積を画定し、媒体入口は内部容積と流体接続し、アダプタは、内部容積を減少させるために少なくとも第２の位置に移動可能であり、第２の位置では、媒体入口は減少した内部容積ともはや流体接続していない。
【０００７】
これにより、閉じたシステムを充填方法に提供することができる。これにより、無菌的に充填プロセスを行うことができる。予め滅菌された部品および予め滅菌された媒体スラリーが使用され、無菌のコネクタが接続に使用される場合には、充填方法の全体を無菌で行うことができる。これにより、無菌の一回使用の予め充填されたクロマトグラフィカラムを提供することができる。本明細書では、無菌、滅菌および類似の用語は、完全に無菌の（バイオバーデンまたは他の汚染物質を含まない）状態から、許容される低レベルのバイオバーデンまたは汚染が、制御された充填環境によって閉じたシステム内に存在する清浄な状態までの清浄範囲を含むことが意図されている。
【０００８】
この目的はまた、この方法に従ってクロマトグラフィカラムの充填中にクロマトグラフィカラムの基本カラムチューブ壁に接続されるように配置された延長チューブ壁によって達成される。前記延長チューブ壁は、媒体入口を含む。
【０００９】
本発明のさらなる目的は、クロマトグラフィ媒体で充填されたクロマトグラフィカラムを提供することである。これは、この方法によるクロマトグラフィ媒体を充填したクロマトグラフィカラムによって達成される。
【００１０】
本発明の一実施形態によれば、本方法は、システムおよび媒体スラリーを予め滅菌された状態で提供するステップと、媒体入口、第１の端部の入口／出口および／またはアダプタの入口／出口に無菌のおよび／または衛生的なコネクタを設けるステップと、をさらに含む。
【００１１】
一実施形態では、カラムアセンブリおよびその充填装置を分解し、場合によってはさらなるカラムに接続するための流体経路のみを残して、閉じたシステムの外側の環境に曝される充填装置の部分を最小限に抑えることができる。これにより、充填されたクロマトグラフィカラムが無菌である一回使用のクロマトグラフィカラムを充填するための方法が達成される。
【００１２】
本発明の一実施形態によれば、方法は、アダプタをカラムチューブの第１の端部に向かって押し込むステップの後に、アダプタの上に残っているカラムチューブの空の部分をカラムの残りから分離するステップをさらに含む。
【００１３】
これにより、充填された無菌の一回使用のクロマトグラフィカラムが、充填されたベッドの上に延在するカラムチューブなしで提供される。
【００１４】
本発明の一実施形態によれば、システムを提供するステップは、延長チューブ壁を基本カラムチューブ壁に接続するステップをさらに含み、両者は本質的に同じ内径を有し、接続されてカラムチューブを形成し、アダプタをカラムチューブの第１の端部に向かって押し込むステップは、アダプタを基本カラムチューブ壁内であるが延長チューブ壁の外側の位置に押し込むステップを含み、カラムチューブの空の部分を分離するステップは、延長チューブ壁を基本カラムチューブ壁から切り離すステップを含む。
【００１５】
これにより、アダプタの上に残っているカラムチューブの空の部分をカラムの残りから分離するための便利な方法が達成される。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１ａ】充填手順の第１のステップにおける本発明の一実施形態によるクロマトグラフィカラムの断面図である。
【図１ｂ】充填手順の第２のステップにおける図１ａのクロマトグラフィカラムの断面図である。
【図２ａ】本発明の一実施形態による方法によって充填された一回使用のクロマトグラフィカラムの斜視図である。
【図２ｂ】図２ａの一回使用のクロマトグラフィカラムの断面図である。
【図３】本発明の一実施形態による方法のフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
図１ａは、充填手順の第１のステップにおける本発明の一実施形態によるクロマトグラフィカラムアセンブリ１の断面図である。クロマトグラフィカラムアセンブリ１は、閉じた第１の端部５を有するカラムチューブ３を含む。前記第１の端部５は、第１のベッド支持部４および入口／出口７を含む。アダプタ９は、カラムチューブ３の内側に配置され、充填手順のこの第１のステップにおいて、カラムチューブの第２の端部６に隣接して、カラムチューブの内面と接触して摺動し封止する。カラムチューブ３およびアダプタ９は、内部容積を画定し、充填手順のこの第１のステップにおいて第２の端部６に隣接するカラムチューブに設けられた媒体入口１５が内部容積と流体接続するように配置される。アダプタ９は、カラムチューブ３の内側に位置し、カラムチューブ３の内径とほぼ同じ直径を有する。アダプタ９は、アダプタとカラムチューブ３の内面との間の漏れ防止接続が提供されるように、シール１１をさらに含む。それでもなお、アダプタをカラムチューブ３の内面に沿って動かすことができる。アダプタは、第２のベッド支持部１２と入口／出口１３とを含む。本発明のこの実施形態では、空気出口１７もカラムチューブ３に設けられている。空気出口はまた、カラムチューブ３の第２の端部６に隣接して設けられる。空気出口１７は、媒体充填率を高めるために、カラムチューブ３上の媒体入口１５と同じ高さの位置に、または媒体入口１５の位置よりわずかに下に設けることができる。本発明の別の実施形態では、アダプタ９の入口／出口１３が空気を取り出すために使用できるので、別個の空気出口は必要ではない。出口１７と入口／出口１３とは一緒に使用することができることが理解されよう。さらに、スラリーの充填後に上部カラム空間に残っている空気を、媒体入口１５を介して追加的にまたは単独で取り出すことも可能であり、これにより、隣接する媒体入口チューブ内の残留スラリーを移動させることができ、それによって、残留スラリーを回収することができる。
【００１８】
アダプタ９には、圧縮フレーム１８が接続されている。図１ａに示す実施形態では、圧縮フレーム１８がアダプタの入口／出口１３の周りに配置されている。圧縮フレーム１８は、充填中にアダプタがカラムチューブ３の第１の端部５に向かって押し込まれるように、アダプタ９の動きを制御するように構成される。
【００１９】
図１ａに示す本発明の一実施形態では、カラムチューブ３は、２つの部分、すなわち基本カラムチューブ壁１９および延長チューブ壁２１に分割される。基本カラムチューブ壁１９の第１の端部２０ａには、閉じた第１の端部５が設けられている。基本カラムチューブ壁１９の第２の端部２０ｂは、延長チューブ壁２１に接続される。基本カラムチューブ壁１９と延長チューブ壁２１とは本質的に同じ内径を有し、カラムの充填中に接続手段２３によって互いに接続される。これは、締め付け、またはねじ、バヨネットもしくはロック要素を用いた機械的インターロックによって達成することができる。本発明の充填方法の第１のステップ、すなわち媒体スラリーがカラム内に充填される方法のステップの間に、アダプタ９は、延長チューブ壁２１の上端部２２ａ（カラムチューブ３の第２の端部６とも呼ばれる）の近くに設けられる。延長チューブ壁２１の下端部２２ｂは、基本カラムチューブ壁１９の第２の端部２０ｂに接続されている。
【００２０】
ここで、カラムアセンブリ１は、カラムチューブ３およびそれに関連するポート１３、１５、１７、７、ならびにアダプタ９、およびフィルタ１２、４を含む。カラム充填装置は、圧縮フレーム１８と、図示していないが、ポンプ、制御手段、および流体供給／排出経路を含む。充填装置は、選択されたコネクタ３３、３５、３７、３９においてカラムアセンブリ１から分離可能であり、コネクタ３３、３５、３７および３９の端部から離れて、汚染のない閉鎖されたカラムアセンブリへの流体経路を開く。コネクタ３３、３５、３７、３９のまたはその近傍のバルブは、流体経路を閉じた状態に維持するのを助ける。
【００２１】
本発明によれば、クロマトグラフィカラムをクロマトグラフィ媒体で充填するための方法が提供される。本方法のステップを説明するフローチャートが図３に示されており、このステップを以下で説明する。
【００２２】
Ｓ１：入口／出口７を含む閉じた第１の端部５を有するカラムチューブ３と、カラムチューブ３の第２の端部６に隣接する媒体入口１５と、カラムチューブ３の第２の端部６に最初に隣接してカラムチューブ３の内側に配置され、カラムチューブの内面と接触して摺動し封止するためのアダプタ９と、含むシステムを提供するステップであって、カラムチューブ３およびアダプタ９は、内部容積を画定し、媒体入口１５が内部容積と流体連通するように最初に配置される。
【００２３】
Ｓ３：媒体スラリー源を媒体入口１５に接続するステップ。
【００２４】
アダプタとスラリーの表面との間の空気の除去を適切に行うことができる。これは、例えば、スラリー充填の間もしくは後に、または媒体入口１５を介したスラリー充填後に、空気出口１７（空気出口がシステムに設けられている場合）またはアダプタの入口／出口１３を介して空気を抜き出すことによって行うことができる。
【００２５】
一実施形態では、内部容積を媒体スラリーで充填するステップＳ５の前にプライミングするステップが実行される。次いで、プライミング液を第１のベッド支持部４に供給して、第１のベッド支持部をプライミングすることができる。ベッド支持部のプライミングは、それを濡らし、および／またはそこから空気を除去するためのものである。スラリーがカラムに充填される前に、第１のベッド支持部に付加されたプライミング液を入口／出口７を通して除去することができ、またはステップＳ５の間にどのくらいの量の媒体スラリーをカラムに供給すべきかを決定するときに、ベッド支持部に提供されたプライミング液の容量を考慮に入れることができる。
【００２６】
Ｓ７：アダプタ９を第１の端部５に向けて押し込んで内部容積を減少させ、媒体入口１５（および、システムに空気出口が設けられている場合は空気出口１７）が、カラムチューブ３およびアダプタ９によって画定されたカラムの減少した内部容積ともはや流体接続しなくなるようにする、ステップ。本発明の一実施形態によれば、アダプタを停止すべき位置は、媒体スラリー濃度、閉じたシステムに充填された媒体スラリーの量、および所望の圧縮係数を使用することによって計算することができる。
【００２７】
あるいは、媒体スラリーの正確な濃度および／またはスラリーの体積を調整して、所望の最終ベッド高さおよび最終アダプタ位置に対する正しい圧縮係数を達成することができる。
【００２８】
カラムチューブ３が２つの部分、基本カラムチューブ壁１９および延長チューブ壁２１に分割されている本発明の実施形態では、アダプタ９はこのステップで基本カラムチューブ壁１９内に押し込まれる。
【００２９】
Ｓ９：本発明の一実施形態では、アダプタ９は、カラムチューブ３（カラムチューブ３が２つの部分に分割される実施形態では、基本カラムチューブ壁１９である）に固定される。アダプタは、溶接、締め付け、またはねじ、バヨネットもしくはロック要素を使用した機械的インターロックによってカラムチューブに固定することができる。これに対応するために追加の要素を使用してもよい。
【００３０】
一実施形態では、アダプタはプレス嵌めによって、例えば、アダプタが最終的なアダプタ位置に近づいたときにアダプタを下部チューブ内に押し込んでクランプするように、チューブの上部セグメントよりも小さい直径を有するように設計されたチューブの下部セグメント（図１ａ、図１ｂの方向を参照）にチューブ壁を有することにより、カラム内に固定される。このプレス嵌めは、エンドユーザープロセスでのカラムの使用中に全負荷と流体圧力を取ることができるアダプタの最終的な固定に対応できるように十分に強く設計することができる。別の実施形態では、アダプタの固定は一時的な固定であってもよく、最終的な固定は次のステップで実行されてもよい。最終的な第２の固定するステップは、アダプタを固定する別の方法を用いて達成することができるが、固定するのと同じ方法を用いるが、異なる、追加のもしくは拡張された力、変位または他の必要とされる適切な処置を適用することによっても達成することができる。
【００３１】
Ｓ１１：本発明の一実施形態では、方法の次のステップは、アダプタ９の上に残っているカラムチューブの空の部分をカラムの残りから分離することである。カラムチューブ３が２つの部分に分割されている実施形態では、延長チューブ壁２１は、基本カラムチューブ壁１９から切り離されている。
【００３２】
本発明の一実施形態によれば、閉じたシステムおよび媒体スラリーは、予め滅菌された状態で提供され、無菌のおよび／または衛生的なコネクタが、少なくとも媒体入口、第１の端部の入口／出口および／またはアダプタの入口／出口などの、充填方法中に係合された少なくともすべての入口および出口に設けられる。これにより、充填方法は、閉じたシステムでの無菌充填方法として提供することができ、充填クロマトグラフィカラムは、無菌充填方法の結果として無菌カラムとして提供することができる。
【００３３】
さらなる実施形態によれば、無菌充填プロセスから得られる無菌カラムは、使用場所でカラムを処理機器に接続する際に無菌状態で係合されるさらなる無菌コネクタを含むことができる。充填方法と最終処理の両方でカラムの同じ入口および／または出口が使用される場合には、２つ以上の無菌コネクタをカラムのそれぞれの入口および／または出口に設けることができる。２つ以上の無菌コネクタを備えた前記入口および／または出口の各々に対して、２つ以上のコネクタと接続されたラインとの間を切り替えるためのバルブ機構またはマニホールド手段を設けることができる。例えば、入口／出口７は、１つの無菌コネクタに接続することによってカラム充填手順中に使用されてもよい。次に、このコネクタを閉めてバルブで分離することができる。前記バルブは、処理のためにカラムを後で使用するときに処理機器に接続する別の（新鮮な）無菌コネクタと係合するように構成することができる。
【００３４】
別の実施形態では、無菌接続機能に適応するために、コネクタまたは断路器の代わりに溶接方法を使用することができる。例えば、カラムと流体経路のコネクタとの間に、流体経路の閉鎖および／または切断を達成するために、溶接方法をさらに使用することができる。さらに、無菌の断路器を使用して、滅菌流体ラインを切断することができ、例えば、充填プロセス後に充填システムからカラムを切り離すことができる。
【００３５】
好ましい実施形態では、システムおよびクロマトグラフィ媒体は、無菌充填プロセスによって予め滅菌され充填されたカラムを達成するために予め滅菌されて提供される。別の実施形態では、システムおよび／またはクロマトグラフィ媒体は、予め滅菌されていないが、好ましくは既知の制御された状態およびバイオバーデンの状態で提供される。後者の実施形態では、閉じたシステムは、構成要素、特にカラム容積内に充填されたクロマトグラフィ媒体の既知の制御された状態および状況を維持することを可能にする。例えばガンマ線照射による充填カラムの滅菌が可能であり、閉じた充填システムによって促進される。
【００３６】
別の実施形態では、充填カラムは、分析の証明書を確立するために、例えば、滞留時間分析および／または水圧浸透性の特性付けによって、充填後に試験され、認定されてもよい。カラムが無菌条件下で予め滅菌された構成要素から調製されている場合には、試験は好ましくは滅菌性を維持するために予め滅菌され滅菌濾過された溶液を用いて行われる。試験機器および試験流体をシステムに接続するために、前記複数の無菌接続部およびコネクタをシステムの入口および／または出口に接続することができる。
【００３７】
さらなる実施形態では、カラムは閉じたシステムに充填され、その後のステップで滅菌され、次に、例えば生物医薬品製造のような処理に使用する前の次のステップにおいて無菌条件下で試験および／または認定される。
【００３８】
本発明の一実施形態では、流体接触しているカラムのすべての部分、および適切にはカラムに設けられたコネクタも衛生的であり、設計が効率的な洗浄および衛生化を促進することを意味する。これにより、出荷および／または貯蔵の前に静菌性貯蔵溶液でカラムを効果的にフラッシュすること、あるいは、カラムを洗浄し、多数の処理サイクルおよび／またはキャンペーンにわたってカラムを洗浄し、貯蔵および再使用することが可能になる。
【００３９】
図１ｂは、充填手順の第２のステップにおける図１ａのクロマトグラフィカラムの断面図である。ここで、アダプタ９は、カラムチューブ３の第１の端部５に向かって押し込められていることが分かる。この実施形態では、カラムチューブ３は、基本カラムチューブ壁１９と延長チューブ壁２１とに分割され、この実施形態では、アダプタ９は、基本カラムチューブ壁１９内であるが延長チューブ壁２１の外側の位置に押し込まれる。これにより、媒体入口１５もアダプタ９を通過し、媒体入口１５は、カラムチューブ３およびアダプタ９によって画定されたカラムの内部容積ともはや流体接続しなくなる。一実施形態では、媒体スラリー濃度、閉じたシステムに充填された媒体スラリーの量、および所望の圧縮係数を使用することによって、アダプタ９を押し込むべき距離、したがって充填されたベッドの最終高さを計算することができる。これにより、正確に充填された媒体のベッドが達成される。媒体スラリー濃度および／または閉じたシステムに充填された媒体スラリーの量を調整することによって、最終的なアダプタ位置および充填されたベッド高さを、充填後のアダプタ９が、常に、基本カラムチューブ壁１９の内部および高さで、かつ延長チューブ壁２１の外側で終わるように、基本カラムチューブ壁１９の高さに調整することができる。これにより、正確に充填されたベッドは、常に所望の最終ベッド高さで達成することができる。好適には、スラリーからの過剰な液体は、アダプタ９の下方移動の間、すなわち充填プロセスの間に、第１の端部５の入口／出口７を通ってカラムから出る。充填後およびアダプタ９が基本カラムチューブ壁１９内の正しい位置にある場合の次のステップは、上記のようにアダプタをカラムチューブに固定し、延長チューブ壁２１を基本カラムチューブ壁１９から切り離すことである。別の実施形態では、カラムチューブ３は２つの部分に分割されず、その場合には、充填後にアダプタ９上に残されたカラムチューブ３の一部は単純に切断することができる。
【００４０】
図２ａは、本発明の一実施形態による方法によって充填された一回使用のクロマトグラフィカラムの斜視図である。本発明のこの実施形態は、図１ａおよび図１ｂに関連して示される方法によって充填されたクロマトグラフィカラムである。ここで延長チューブ壁２１は切り離されている。基本カラムチューブ壁１９を見ることができ、アダプタ９は入口／出口１３を有する。
【００４１】
図２ｂは、図２ａの一回使用のクロマトグラフィカラムの断面図である。
【００４２】
図２ａおよび図２ｂに示す予め充填されたカラムの無菌性を維持するために、ポート７、１３における切り離されていないコネクタ３３’、３９’は一体のバルブを有し、例えば、単純なスライドゲートバルブまたは回転可能なスピンドル２もしくは３方向バルブを使用することができる。バルブに加えて、またはその代替として、ポート７、１３の露出した端部を覆う取り外し可能または破裂可能なシールを使用することができ、例えば、ＧＥヘルスケアの商品名ＲｅａｄｙＭａｔｅで販売されている剥離フィルムを使用することができる。このようにして、カラムアセンブリを顧客に出荷することができ、汚染の危険なしに顧客の機器に接続することができる。新しい充填されていないカラムアセンブリをコネクタ３３、３５、３７、３９に接続することによって、カラム充填装置を再使用する（延長チューブ壁２１を廃棄する）ことができ、再び汚染の危険性を最小限に抑えて、次の充填手順の準備ができる。
【００４３】
また、本発明によれば、クロマトグラフィカラムアセンブリ１にクロマトグラフィ媒体を充填し、媒体を圧縮するためのクロマトグラフィカラム充填装置が提供される。この装置は、図１ａおよび図１ｂに示されており、入口／出口７を含む閉じた第１の端部５を有するカラムチューブ３と、媒体スラリー源に接続可能なカラムチューブ３の第２の端部６に隣接する媒体入口１５と、を含む。この装置は、カラムチューブの内面と接触して摺動し封止するために、カラムチューブ３の第２の端部６に隣接してカラムチューブ３の内側の第１の位置に配置可能なアダプタ９をさらに含む。カラムチューブ３およびアダプタ９は、前記第１の位置に配置された場合に内部容積を画定し、媒体入口１５は内部容積と流体接続している。アダプタは、内部容積を減少させるために少なくとも第２の位置に移動可能であり、第２の位置では、媒体入口１５は減少した内部容積ともはや流体接続していない。
【００４４】
本発明の一実施形態では、カラムチューブ３は、閉じた第１の端部５を含む基本カラムチューブ壁１９に接続された媒体入口１５を含む延長チューブ壁２１を含み、アダプタの第１の位置は延長チューブ壁２１内にあり、アダプタ９の第２の位置は基本カラムチューブ壁１９内にある。
【００４５】
本発明の実施形態は、制御可能な環境内で実質的に閉じたままであり、汚染のリスクが最小限に抑えられるように所定の接続点のみで切り離しを可能にするシステムを提供する。
【符号の説明】
【００４６】
１  クロマトグラフィカラムアセンブリ
２  スピンドル
３  カラムチューブ
４  第１のベッド支持部
５  第１の端部
６  第２の端部
７  入口／出口
９  アダプタ
１１  シール
１２  第２のベッド支持部
１３  入口／出口
１５  媒体入口
１７  空気出口
１８  圧縮フレーム
１９  基本カラムチューブ壁
２０ａ  第１の端部
２０ｂ  第２の端部
２１  延長チューブ壁
２２ａ  上端部
２２ｂ  下端部
２３  接続手段
３３  コネクタ
３５  コネクタ
３７  コネクタ
３９  コネクタ
【図１ａ】
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【図１ｂ】
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【図２ａ】
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【図２ｂ】
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【図３】
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【国際調査報告】
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