(57)【要約】  本発明は、１）ポリミキシンＢとトリメトプリムとを含む組成物Ａと、２）リファンピシン、リファブチン、リファペンチン、リファキシミン、メシル酸ペフロキサシン、スパルフロキサシン、サラフロキサシンＨＣｌ、トブラマイシン、ロメフロキサシン、ベシフロキサシン、メシル酸ダノフロキサシン、エンロフロキサシン、ナジフロキサシン及びクリナフロキサシンからなる群から選択される抗生物質と、その局所医薬品と、を具備する抗菌性組成物、ならびに１と２との混合物を用いて細菌性感染症を治療する方法を特徴とする。【選択図】図１Ａ、図１Ｂ
2019528268.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性剤である１）ポリミキシンＢとトリメトプリムとを含む組成物Ａ、ならびに２）ａ）リファマイシン、またはリファンピシン（もしくはリファンピン）、リファブチン、リファペンチン、リファラジル及びリファキシミンからなる群から選択されるリファマイシン誘導体、あるいはｂ）メシル酸ペフロキサシン、スパルフロキサシン、サラフロキサシンＨＣｌ、トブラマイシン、ロメフロキサシン、ベシフロキサシン、メシル酸ダノフロキサシン、エンロフロキサシン、ナジフロキサシン及びクリナフロキサシンからなる群から選択されるもののうちの１つである１つの抗生物質と、１つ以上の医薬的に許容される担体または賦形剤と、を具備する、抗菌性組成物。
【請求項２】
前記組成物Ａと前記抗生物質との重量比が、約１：１０００〜約１０００：１である、請求項１に記載の局所医薬組成物。
【請求項３】
前記組成物Ａと前記抗生物質との重量比が、約１：５００〜約５００：１である、請求項２に記載の局所医薬組成物。
【請求項４】
前記組成物Ａと前記抗生物質との重量比が、約１：１００〜約１００：１である、請求項２に記載の局所医薬組成物。
【請求項５】
前記組成物Ａと前記抗生物質との重量比が、約１：１、約１：１０、約１：１５、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０、約１：１００、約１：１２５、約１：１５０、約１：１７５、約１：２００、約１：２５０、約１：３００、約１：３５０、約１：４００、約１：４５０、約１：５００、約１：５５０、約１：６００、約１：６５０、約１：７００、約１：７５０、約１：８００、約１：８５０、約１：９００、約１：９５０、約１：１０００、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約８：１、約１０：１、約１５：１、約２０：１、約２５：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１２５：１、約１５０：１、約１７５：１、約１９０：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、約８００：１、約８５０：１、約９００：１、約９５０：１、または約１０００：１である、請求項２に記載の局所医薬組成物。
【請求項６】
前記組成物Ａがポリトリムを含む、請求項１〜５のいずれかに記載の抗菌性組成物。
【請求項７】
前記抗生物質をリファンピシンとした、請求項１〜５のいずれかに記載の抗菌性組成物。
【請求項８】
前記組成物ＡをポリミキシンＢとトリメトプリムとからなるものとし、且つ前記抗生物質をリファンピシンとした、請求項１〜５のいずれかに記載の抗菌性組成物。
【請求項９】
前記組成物Ａをポリトリムを含むものとし、且つ前記抗生物質をリファンピシンとした、請求項１〜５のいずれかに記載の抗菌性組成物。
【請求項１０】
ポリトリム及びリファンピシンを唯一の活性剤とした、請求項９に記載の抗菌性組成物。
【請求項１１】
前記組成物Ａと前記抗生物質の総濃度が、約１重量％〜約５０重量％である、請求項１〜１０のいずれかに記載の抗菌性組成物。
【請求項１２】
活性剤である１）ポリミキシンＢとトリメトプリムとを含む組成物Ａ、ならびに２）抗生物質であるａ）リファマイシン、またはリファンピシン（もしくはリファンピン）、リファブチン、リファペンチン、リファラジル及びリファキシミンからなる群から選択されるリファマイシン誘導体、あるいはｂ）メシル酸ペフロキサシン、スパルフロキサシン、サラフロキサシンＨＣｌ、トブラマイシン、ロメフロキサシン、ベシフロキサシン、メシル酸ダノフロキサシン、エンロフロキサシン、ナジフロキサシン及びクリナフロキサシンからなる群から選択されるもののうちの１つと、１つ以上の医薬的に許容される担体または賦形剤と、を具備する、局所医薬組成物。
【請求項１３】
前記組成物Ａと前記抗生物質との重量比が、約１：１０００〜約１０００：１である、請求項１２に記載の局所医薬組成物。
【請求項１４】
前記組成物Ａと前記抗生物質との重量比が１：５００〜約５００：１である、請求項１３に記載の局所医薬組成物。
【請求項１５】
前記組成物Ａと前記抗生物質との重量比が１：１００〜約１００：１である、請求項１３に記載の局所医薬組成物。
【請求項１６】
前記組成物Ａと前記抗生物質との重量比が、約１：１、約１：１０、約１：１５、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０、約１：１００、約１：１２５、約１：１５０、約１：１７５、約１：２００、約１：２５０、約１：３００、約１：３５０、約１：４００、約１：４５０、約１：５００、約１：５５０、約１：６００、約１：６５０、約１：７００、約１：７５０、約１：８００、約１：８５０、約１：９００、約１：９５０、約１：１０００、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約８：１、約１０：１、約１５：１、約２０：１、約２５：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１２５：１、約１５０：１、約１７５：１、約１９０：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、約８００：１、約８５０：１、約９００：１、約９５０：１、または約１０００：１である、請求項１３に記載の局所医薬組成物。
【請求項１７】
前記組成物Ａがポリトリムを含む、請求項１２〜１６のいずれかに記載の局所医薬組成物。
【請求項１８】
前記抗生物質をリファンピシンとした、請求項１２〜１６のいずれかに記載の局所医薬組成物。
【請求項１９】
前記組成物ＡをポリミキシンＢとトリメトプリムとからなるものとし、且つ前記抗生物質をリファンピシンとした、請求項１２〜１６のいずれかに記載の局所医薬組成物。
【請求項２０】
前記組成物Ａをポリトリムを含むものとし、且つ前記抗生物質をリファンピシンとした、請求項１２〜１６のいずれかに記載の局所医薬組成物。
【請求項２１】
ポリトリム及びリファンピシンを唯一の活性剤とした、請求項２０に記載の局所医薬組成物。
【請求項２２】
前記組成物が、対象における眼、耳、鼻、皮膚または創傷感染症の治療を用途としたものである、請求項１〜２１のいずれかに記載の局所医薬組成物。
【請求項２３】
前記感染症が細菌と関連する、請求項２２に記載の局所医薬組成物。
【請求項２４】
前記感染症が細菌性眼感染症である、請求項２３に記載の局所医薬組成物。
【請求項２５】
前記細菌性眼感染症が、細菌性角膜炎、細菌性結膜炎、または細菌性眼内炎である、請求項２４に記載の局所医薬組成物。
【請求項２６】
活性剤である１）ポリミキシンＢとトリメトプリムとを含む組成物Ａ、ならびに２）抗生物質であるａ）リファマイシン、またはリファンピシン（もしくはリファンピン）、リファブチン、リファペンチン、リファラジル及びリファキシミンからなる群から選択されるリファマイシン誘導体、あるいはｂ）メシル酸ペフロキサシン、スパルフロキサシン、サラフロキサシンＨＣｌ、トブラマイシン、ロメフロキサシン、ベシフロキサシン、メシル酸ダノフロキサシン、エンロフロキサシン、ナジフロキサシン及びクリナフロキサシンからなる群から選択されるもののうちの１つと、１つ以上の医薬的に許容される担体または賦形剤と、を具備し、前記組成物Ａの濃度が局所医薬組成物の単位あたり約０．００１重量％〜約８重量％であり、且つ前記抗生物質の濃度が局所医薬組成物の単位あたり約０．００１重量％〜約１０重量％である、局所医薬組成物。
【請求項２７】
前記組成物Ａと前記抗生物質との重量比が、約１：１０００〜約１０００：１である、請求項２６に記載の局所医薬組成物。
【請求項２８】
前記組成物Ａがポリトリムを含む、請求項２６または２７に記載の局所医薬組成物。
【請求項２９】
前記抗生物質をリファンピシンとした、請求項２６または２７に記載の局所医薬組成物。
【請求項３０】
前記組成物ＡをポリミキシンＢとトリメトプリムとからなるものとし、且つ前記抗生物質をリファンピシンとした、請求項２６または２７に記載の局所医薬組成物。
【請求項３１】
前記組成物Ａをポリトリムを含むものとし、且つ前記抗生物質をリファンピシンとした、請求項２６または２７に記載の局所医薬組成物。
【請求項３２】
ポリトリム及びリファンピシンを唯一の活性剤とした、請求項３１に記載の局所医薬組成物。
【請求項３３】
対象における細菌性感染症を治療する方法であって、前記対象に治療上有効量の請求項１または請求項１２または請求項２６に記載の組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項３４】
前記細菌性感染症が、眼感染症、耳感染症、鼻腔感染症、皮膚感染症、または創傷感染症である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記細菌性感染症が、以下の微生物：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｖｉｒｉｄａｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ及びＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの感受性株によって誘発される、急性細菌性結膜炎及び眼瞼結膜炎をはじめとする細菌性眼表面感染症である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
前記細菌性感染症が、細菌のコロニー化またはバイオフィルム形成を特徴とする、請求項３３または３４に記載の方法。
【請求項３７】
細菌性生物を脱コロニー化する方法であって、前記細菌性生物を請求項１または１２または２６に記載の組成物と接触させることを含む、前記方法。
【請求項３８】
前記細菌性生物がグラム陽性菌またはグラム陰性菌である、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記細菌性生物を請求項１または１２または２６に記載の組成物と接触させることを含む、細菌性生物のバイオフィルム形成を破壊するか、または中断するか、または阻害するかまたは低減させる方法。
【請求項４０】
前記細菌性生物がグラム陽性菌またはグラム陰性菌である、請求項３９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年８月１６日に出願された米国仮特許出願第６２／３７５，７２０号、及び２０１７年４月２５日に出願された米国仮特許出願第６２／４８９，５３５号の優先権を主張するものである。
【０００２】
連邦政府による資金援助を受けた研究または開発に関する陳述
本発明は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈによって授与された１Ｒ０１ＡＩ１０３５０７の下、政府の支援を受けて為されたものである。本発明における一定の権利は、政府によって留保されている。
【０００３】
本発明は、細菌性感染症、特に細菌性角膜炎のような、眼組織における細菌性感染症の治療を用途とした、抗菌性組成物に関する。
【背景技術】
【０００４】
眼科的または眼の障害／疾患は、複合的且つ視力を脅かすものとして、従来から認識されてきた。それらの治療を用途とした医薬品及び組成物は数多く存在するが、それらの副作用プロファイル及び有効性は所望されるよりも少ない。細菌性角膜感染症（角膜炎）は、壊滅的となる可能性のある眼科疾患である。急性感染症は、後続の潰瘍形成及び穿孔を伴う密集角膜浸潤を呈する可能性があり、積極的治療にもかかわらず、角膜瘢痕、緑内障及び白内障のような視力を脅かす長期の続発症を招来する恐れもある。Ｌｏｔｔｉ  Ｒ，Ｄａｒｔ  ＪＫ．１９９２．Ｃａｔａｒａｃｔ  ａｓ  ａ  ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｅｖｅｒｅ  ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｋｅｒａｔｉｔｉｓ．Ｅｙｅ（Ｌｏｎｄｏｎ，Ｅｎｇｌａｎｄ）６（Ｐｔ  ４）：４００−４０３、及びＺａｒｅｉ−Ｇｈａｎａｖａｔｉ  Ｓ，Ｂａｇｈｄａｓａｒｙａｎ  Ｅ，Ｒａｍｉｒｅｚ−Ｍｉｒａｎｄａ  Ａ，Ｎｇｕｙｅｎ  Ｍ，Ｙｕ  Ｆ，Ｌｅｅ  ＧＪ，Ｄｅｎｇ  ＳＸ．２０１１を参照。眼内圧の上昇は、活動性微生物性角膜炎中によく見られる合併症である。Ａｍｅｒｉｃａｎ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  １５２：５７５−５８１  ｅ５７１。世界的に見て、潰瘍による角膜混濁は、視力喪失の原因の首位を占め、毎年約２００万人の新たな失明例の発生に寄与しているのが、実状である。Ｒｅｓｎｉｋｏｆｆ  Ｓ，Ｐａｓｃｏｌｉｎｉ  Ｄ，Ｅｔｙａ’ａｌｅ  Ｄ，Ｋｏｃｕｒ  Ｉ，Ｐａｒａｒａｊａｓｅｇａｒａｍ  Ｒ，Ｐｏｋｈａｒｅｌ  ＧＰ，Ｍａｒｉｏｔｔｉ  ＳＰ．２００４．Ｇｌｏｂａｌ  ｄａｔａ  ｏｎ  ｖｉｓｕａｌ  ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｙｅａｒ  ２００２．Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ８２：８４４−８５１、及びＷｈｉｔｃｈｅｒ  ＪＰ，Ｓｒｉｎｉｖａｓａｎ  Ｍ，Ｕｐａｄｈｙａｙ  ＭＰ．２００１．Ｃｏｒｎｅａｌ  ｂｌｉｎｄｎｅｓｓ：ａ  ｇｌｏｂａｌ  ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ．Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ７９：２１４−２２１を参照。
【０００５】
細菌性角膜炎は、迅速な進行を呈して、数時間のうちに永久的な視力喪失に至る恐れがあるため、網羅範囲の広い即時の経験的治療が必要される。Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ及びＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの２つは、最も頻度の高い起因菌とされており、それゆえ、局所フルオロキノロン、特にモキシフロキサシンまたはガチフロキサシンのような第四世代剤が、グラム陽性及び陰性生物に対する広域スペクトル活性の用途に一般的に用いられている。Ｇｒｅｅｎ  Ｍ，Ａｐｅｌ  Ａ，Ｓｔａｐｌｅｔｏｎ  Ｆ．２００８．Ｒｉｓｋ  ｆａｃｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｃａｕｓａｔｉｖｅ  ｏｒｇａｎｉｓｍｓ  ｉｎ  ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｋｅｒａｔｉｔｉｓ．Ｃｏｒｎｅａ  ２７：２２−２７を参照。しかしながら、フルオロキノロン耐性の割合は上昇しつつある。実際に、１９９３年から２０１２年の間に採取されたＭＲＳＡ角膜炎菌分離株の抗菌薬感受性試験において、試験の対象とされた分離株の約３５．２％及び４５．９％がそれぞれモキシフォキサシンとガチフロキサシンに対する耐性を示したことが見出された。Ｃｈａｎｇ  ＶＳ，Ｄｈａｌｉｗａｌ  ＤＫ，Ｒａｊｕ  Ｌ，Ｋｏｗａｌｓｋｉ  ＲＰ．２０１５．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  Ｋｅｒａｔｉｔｉｓ：ａ  ２０−Ｙｅａｒ  Ｒｅｖｉｅｗ．Ｃｏｒｎｅａ  ３４：６９８−７０３を参照。同研究の発見によると、スルファメトキサゾール（５．７％耐性）及びトリメトプリム（１１．５％耐性）に対する耐性率は、評価された全ての抗生物質の中で最も低いものの１つであり、これらの薬剤のうちのいずれかを含む薬剤の方が、第四世代のフルオロキノロンよりもＭＲＳＡに対する有効性が高いことを示唆する。したがって、ポリミキシンＢ（ポリトリム）とトリメトプリムの併用が、眼感染症に対する一般的な局所剤であることは、驚くべきことではないかもしれない。Ｎｏｚｉｋ  ＲＡ，Ｓｍｏｌｉｎ  Ｇ，Ｋｎｏｗｌｔｏｎ  Ｇ，Ａｕｓｔｉｎ  Ｒ．１９８５．Ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ−ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ  Ｂ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｓｕｒｆａｃｅ  ｏｃｕｌａｒ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  １７：７４６−７４８、及びｖａｎ  Ｒｅｎｓｂｕｒｇ  ＳＦ，Ｇｉｂｓｏｎ  ＪＲ，Ｈａｒｖｅｙ  ＳＧ，Ｂｕｒｋｅ  ＣＡ．１９８２．Ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ−ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｖｅｒｓｕｓ  ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖｉｔｉｓ．Ｐｈａｒｍａｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａ  ３：２７４−２７７を参照。しかしながら、ポリトリムは遅効性であり、眼組織透過性が限られ、且つ他の眼科用抗菌剤と比較して効力に限りのあることが実証されている。Ｓｐｅｅｄ  ｏｆ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｋｉｌｌ  ｗｉｔｈ  ａ  ｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅ  ｃｏｍｐａｒｅｄ  ｗｉｔｈ  ｎｏｎｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ：ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ａ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｋｉｌｌ  ｓｔｕｄｉｅｓ．Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅｒａｐｙ  ２４：１０９８−１１１１、Ｇｒａｎｅｔ  ＤＢ，Ｄｏｒｆｍａｎ  Ｍ，Ｓｔｒｏｍａｎ  Ｄ，Ｃｏｃｋｒｕｍ  Ｐ．２００８を参照。Ａ  ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒ  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ  Ｂ  ｓｕｌｆａｔｅ／ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｏｘｉｆｌｏｘａｃｉｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｓｐｅｅｄ  ｏｆ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖｉｔｉｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｐｅｄｉａｔｒｉｃ  ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｓｔｒａｂｉｓｍｕｓ  ４５：３４０−３４９、及びＰｒｉｃｅ  ＦＷ，Ｊｒ．，Ｄｏｂｂｉｎｓ  Ｋ，Ｚｅｈ  Ｗ．２００２．Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｏｐｉｃａｌｌｙ  ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ  ｏｆｌｏｘａｃｉｎ  ａｎｄ  ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ  ｉｎｔｏ  ａｑｕｅｏｕｓ  ｈｕｍｏｒ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｏｃｕｌａｒ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：ｔｈｅ  ｏｆｆｉｃｉａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｏｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  １８：４４５−４５３。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、活性剤である１）ポリミキシンＢとトリメトプリムとからなる組成物Ａと、２）ａ）リファマイシン、またはリファンピシン（もしくはリファンピン）、リファブチン、リファペンチン、リファラジル及びリファキシミンからなる群から選択されるリファマイシン誘導体、あるいはｂ）メシル酸ペフロキサシン、スパルフロキサシン、サラフロキサシンＨＣｌ、トブラマイシン、ロメフロキサシン、ベシフロキサシン、メシル酸ダノフロキサシン、エンロフロキサシン、ナジフロキサシン及びクリナフロキサシンからなる群から選択されるもののうちの１つである１つの抗生物質と、１つ以上の医薬的に許容される担体または賦形剤と、を含有する、抗菌性組成物を提供するものである。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：１０００〜約１０００：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：５００〜約５００：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質の重量比は、約１：１００〜約１００：１である。
【０００７】
本発明の一実施形態において、本明細書に記載の抗菌性組成物の組成物Ａは、ポリトリムを含む。本発明の一実施形態において、本明細書に記載の抗菌性組成物の組成物Ａは、ポリミキシンＢとトリメトプリムとからなる。
【０００８】
また、本発明の一実施形態において、本明細書に記載の抗菌性組成物の抗生物質はリファンピシンである。
【０００９】
本発明の別の実施形態において、組成物ＡはポリミキシンＢとトリメトプリムとからなり、且つ前記抗生物質をリファンピシンとしたものである。また、本発明の別の実施形態において、抗菌性組成物は、ポリミキシンＢ、トリメトプリム、及びリファンピシンからなる。
【００１０】
本発明の更に別の実施形態において、抗菌性組成物は、トリメトプリムとリファンピシンとを含む。
【００１１】
本発明の更にもう１つの実施形態において、ポリトリム及びリファンピシンは、唯一の活性剤とされている。
【００１２】
本出願には、本明細書に記載の本発明の抗菌性組成物における組成物Ａ、及び抗生物質の総濃度が、抗菌性組成物の単位あたり約１重量％〜約５０重量％であることも記載されている。総濃度は、抗菌性組成物の単位あたり約５０重量百分率（重量％）、約４０重量％、約３０重量％、約２５重量％、約２０重量％、約１５重量％、約１０重量％、約５重量％、約３重量％、約２重量％、約１重量％であることが好ましい。
【００１３】
本明細書に記載の本発明の抗菌性組成物は、対象における眼組織、耳の組織、鼻の組織、皮膚または創傷における細菌性感染症を治療することを目的として、投与に用いることができる。
【００１４】
別の実施形態において、本明細書の上記に記載の本発明の抗菌性組成物は、局所医薬組成物に調合される。局所医薬組成物は、本明細書において上記に定義されている様々な実施形態の抗菌性組成物、ならびに１つ以上の医薬的に許容される担体または賦形剤を含む。
【００１５】
別の態様において、本発明によって提供される局所医薬組成物は、活性剤である１）ポリミキシンＢとトリメトプリムとを含む組成物Ａ、ならびに２）ａ）リファマイシン、またはリファンピシン（もしくはリファンピン）、リファブチン、リファペンチン、リファラジル及びリファキシミンからなる群から選択されるリファマイシン誘導体、あるいはｂ）メシル酸ペフロキサシン、スパルフロキサシン、サラフロキサシンＨＣｌ、トブラマイシン、ロメフロキサシン、ベシフロキサシン、メシル酸ダノフロキサシン、エンロフロキサシン、ナジフロキサシン及びクリナフロキサシンからなる群から選択されるもののうちの１つである１つの抗生物質と、１つ以上の医薬的に許容される担体または賦形剤と、を具備し、前記組成物Ａの濃度が、局所医薬組成物の単位あたり約０．００１重量％〜約８重量％であり、且つ抗生物質の濃度が、局所医薬組成物の単位あたり約０．００１重量％〜約１０重量％である。一実施形態において、前記組成物Ａの濃度は、局所医薬組成物の単位あたり約０．０１５重量％〜約１重量％であり、且つ抗生物質の濃度は、局所医薬組成物の単位あたり約０．０１５重量％〜約２重量％である。更なる一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：１０００〜約１０００：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：５００〜約５００：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：１００〜約１００：１である。
【００１６】
一実施形態において、局所医薬組成物の組成物Ａはポリトリムを含む。一実施形態において、局所医薬組成物の抗生物質はリファンピシンである。一実施形態では、組成物Ａを活性剤であるポリミキシンＢとトリメトプリムとからなるものとし、且つ前記抗生物質をリファンピシンとしたものである。一実施形態において、組成物Ａをポリトリムを含むものとし、且つ抗生物質をリファンピシンとしたものである。本発明の一実施形態では、ポリトリム及びリファンピシンを唯一の活性剤としている。
【００１７】
一実施形態において、本明細書に記載の抗菌性組成物または局所医薬組成物は、対象における眼、耳、鼻、皮膚もしくは創傷感染症の治療を用途としたものである。一実施形態において、前記感染症は細菌性感染症である。一実施形態において、細菌性眼感染症は、細菌性角膜炎、細菌性結膜炎、または細菌性眼内炎である。更なる実施形態において、抗菌性組成物または局所医薬組成物は、以下の微生物：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｖｉｒｉｄａｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．、Ｍｏｒｅｘｃｅｌｌａ  ｓｐ．、及びＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなどの感受性株により誘発される急性細菌性結膜炎及び眼瞼結膜炎をはじめとする細菌性眼表面感染症の治療を用途とする。
【００１８】
一実施形態において、本発明の抗菌性組成物または局所医薬組成物は、クリーム、ローション、軟膏、ヒドロゲル、コロイド、ゲル、泡、油、乳液、懸濁液、ワイプ、スポンジ、溶液、エマルジョン、ペースト、パッチ、プレジェット、綿棒、包帯、スプレーまたはパッドの形態を取りうる。
【００１９】
一実施形態において、本発明の局所医薬組成物は、局所用眼科用医薬組成物であり、好ましくは、溶液もしくは懸濁液、エマルジョン、軟膏、クリーム、ゲル、または徐放性ビヒクルの形態、例えば眼用挿入剤とされる。
【００２０】
別の態様において、本発明は、本明細書全体を通じて、治療上有効量の本明細書に記載の抗菌組成物を別々に、同時にまたは連続して対象に投与することを含む、対象における細菌性感染症の治療方法を提供する。一実施形態において、抗菌性組成物は、局所医薬組成物に調合される。一実施形態において、局所医薬組成物は、眼、耳、鼻、皮膚または創傷感染症の治療を用途とした製剤である。一実施形態において、細菌性感染症は、グラム陽性菌またはグラム陰性菌、あるいは両方の併用に由来する。
【００２１】
一実施形態において、局所医薬組成物は、細菌性眼感染症の治療を用途とした眼科用製剤である。細菌性眼感染症の例としては、限定されるものではないが、細菌性角膜炎、細菌性結膜炎、または細菌性眼内炎である。一実施例において、眼科用製剤は、以下：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｖｉｒｉｄａｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ及びＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなどの微生物の感受性株により誘発される、急性細菌性結膜炎及び眼瞼結膜炎をはじめとする細菌性眼表面感染症の治療を用途としたものである。
【００２２】
一実施形態において、本発明は、本明細書全体を通じて、本明細書に記載の抗菌組成物と別々に、同時に、または連続して細菌性生物を接触させることを含む、細菌性生物を脱コロニー化する方法を提供する。
【００２３】
一実施形態において、本発明は、本明細書全体を通じて、本明細書に記載の局所医薬組成物と別々に、同時に、または連続して細菌性生物を接触させることを含む、細菌性生物を脱コロニー化する方法を提供する。
【００２４】
一実施形態において、本発明は、本明細書全体を通じて、本明細書に記載の抗菌性組成物と別々に、同時に、または連続して細菌性生物を接触させることを含む、細菌性生物のバイオフィルム形成を破壊または中断または阻害または低減する方法を提供する。
【００２５】
一実施形態において、本発明は、本明細書全体を通じて、本明細書に記載の局所医薬組成物と別々に、同時に、または連続して細菌性生物を接触させることを含む、細菌性生物のバイオフィルム形成を破壊または中断または阻害または低減する方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１Ａ】図１Ａ及び図１Ｂは、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＰＡＯ１（図１Ａ）及びＳ．ａｕｒｅｕｓ  ＵＡＭＳ−１（図１Ｂ）に対する、モキシフロキサシン、トブラマイシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム、リファンピシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム＋リファンピシン、及びポリミキシンＢ／トリメトプリム＋トブラマイシンの抗バイオフィルム活性を示す。
【図１Ｂ】図１Ａ及び図１Ｂは、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＰＡＯ１（図１Ａ）及びＳ．ａｕｒｅｕｓ  ＵＡＭＳ−１（図１Ｂ）に対する、モキシフロキサシン、トブラマイシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム、リファンピシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム＋リファンピシン、及びポリミキシンＢ／トリメトプリム＋トブラマイシンの抗バイオフィルム活性を示す。
【図２Ａ】Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＰＡＯ１に対する、モキシフロキサシン、トブラマイシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム、リファンピシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム＋リファンピシン、及びポリミキシンＢ／トリメトプリム＋トブラマイシンによる死滅率を示す。
【図２Ｂ】Ｓ．ａｕｒｅｕｓ  ＵＡＭＳ−１に対する、モキシフロキサシン、トブラマイシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム、リファンピシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム＋リファンピシン、及びポリミキシンＢ／トリメトプリム＋トブラマイシンによる死滅率を示す。
【図３Ａ】リファンピシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム、またはそれらの併用で処置した後４０時間にわたる、耐性Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＰＡＯ１細胞の増殖を、モキシフロキサシンと比較して示したものである。
【図３Ｂ】リファンピシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム、またはそれらの併用で処置した後４０時間にわたる、Ｓ．ａｕｒｅｕｓの増殖を、モキシフロキサシンと比較して示したものである。
【図４Ａ】漸増濃度のポリミキシンＢ／トリメトプリムの存在下でのＰＡＯ１のコロニー形成単位を示す。１０６個の細胞が残存する濃度を抑制性以下と見なし、後続ライブラリのスクリーニングに利用した。
【図４Ｂ】漸増濃度のポリミキシンＢ／トリメトプリムの存在下でのＵＡＭＳ−１のコロニー形成単位を示す。１０６個の細胞が残存する濃度を抑制性以下と見なし、後続ライブラリのスクリーニングに利用した。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
本明細書を解釈する目的に合わせて、以下の定義が適用され、適切な場合は随時、単数形にて用いられる用語には複数形も包含され、逆もまた同様である。
【００２８】
本明細書において、「微生物（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｏｒｇａｎｉｓｍ）」または「微生物（ｍｉｃｒｏｂｅ）」または「微生物（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ）」または「微生物（ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ）」という用語は、細胞壁を欠く可能性があるか、あるいは細胞壁を有する場合はグラム陽性もしくはグラム陰性もしくはそれらの改変物（すなわちマイコバクテリウム）であり、鞭毛によって、しばしばコロニーまたはモーチルに凝集し、典型的に土壌、水、有機物または植物や動物の体内に住んでいて、通常は独立栄養的、腐栄養的または栄養的に寄生的であり、且つその生化学的効果と病原性に関して注目される、原核生物の円形、らせん形もしくは棒状の単細胞、多細胞もしくは無細胞の微生物のドメイン（細菌）を指す。この用語は、原核生物、または真核生物の細胞、または顕微鏡サイズを有する生物を包含し、且つ全ての種の細菌、ウイルス、古細菌及び真正細菌、ならびに酵母及び真菌のような真核微生物を含むことを意図したものである。また、この用語は、生化学物質の生成を目的に培養しうる、任意の種の細胞培養物を含む。非限定例において、微生物の活性の測定は、微生物の数の対数減少を計算することにより行うことができる。
【００２９】
本明細書において、「細菌」という用語は、限定されるものではないが、以下のクラス及び特定の種類の生物に対する言及を含む：
１）グラム陽性球菌、例えばＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ（Ｓｔａｐｈ．ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔａｐｈ．ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈ．ａｕｒｉｃｕｌａｒｉｓ、Ｓｔａｐｈ．ｃａｐｉｔｉｓ  ｃａｐｉｔｉｓ、Ｓｔａｐｈ．ｃ．ｕｒｅｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈ．ｃａｐｒａｅ、Ｓｔａｐｈ．ｃｏｈｎｉｉ  ｃｏｈｎｉｉ、Ｓｔａｐｈ．ｃ．ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈ．ｅｑｕｏｒｕｍ、Ｓｔａｐｈ．ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｓｔａｐｈ．ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈ．ｈｏｍｉｎｉｓ  ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｓｔａｐｈ．ｈ．ｎｏｖｏｂｉｏｓｅｐｔｉｃｉｕｓ、Ｓｔａｐｈ．ｈｙｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈ．ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ、Ｓｔａｐｈ．ｌｕｇｄｕｎｅｎｓｉｓ、Ｓｔａｐｈ．ｐａｓｔｅｕｒｉ、Ｓｔａｐｈ．ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈ．ｓｃｈｌｅｉｆｅｒｉ  ｓｃｈｌｅｉｆｅｒｉ、Ｓｔａｐｈ．ｓ．ｃｏａｇｕｌａｎｓ、Ｓｔａｐｈ．ｓｃｉｕｒｉ、Ｓｔａｐｈ．ｓｉｍｕｌａｎｓ、Ｓｔａｐｈ．ｗａｒｎｅｒｉ及びＳｔａｐｈ．ｘｙｌｏｓｕｓなど）、
２）Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ（例えばβ溶血性化膿性連鎖球菌（例えばＳｔｒｅｐｔ．ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｃａｎｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ  ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ  ｅｑｕｉｓｉｍｉｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｅｑｕｉ  ｅｑｕｉ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｅｑｕｉ  ｚｏｏｅｐｉｄｅｍｉｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｉｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｐｏｒｃｉｎｕｓ及びＳｔｒｅｐｔ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、微好気性化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ「ｍｉｌｌｅｒｉ」、例えばＳｔｒｅｐｔ．ａｎｇｉｎｏｓｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｃｏｎｓｔｅｌｌａｔｕｓ  ｃｏｎｓｔｅｌｌａｔｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｃｏｎｓｔｅｌｌａｔｕｓ  ｐｈａｒｙｎｇｉｄｉｓ及びＳｔｒｅｐｔ．ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ）、「ｍｉｔｉｓ」の口腔レンサ球菌（α溶血性−鎖球菌「ｖｉｒｉｄａｎｓ」、例えばＳｔｒｅｐｔ．ｍｉｔｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｏｒａｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｓａｎｇｕｉｎｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｃｒｉｓｔａｔｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｇｏｒｄｏｎｉｉ及びＳｔｒｅｐｔ．ｐａｒａｓａｎｇｕｉｎｉｓ）、「ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ」（非溶血性、例えばＳｔｒｅｐｔ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ及びＳｔｒｅｐｔ．ｖｅｓｔｉｂｕｌａｒｉｓ）及び「ｍｕｔａｎｓ」（歯表面連鎖球菌、例えばＳｔｒｅｐｔ．ｃｒｉｃｅｔｉ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｍｕｔａｎｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｒａｔｔｉ及びＳｔｒｅｐｔ．ｓｏｂｒｉｎｕｓ）群、Ｓｔｒｅｐｔ．ａｃｉｄｏｍｉｎｉｍｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｂｏｖｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｅｑｕｉｎｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ及びＳｔｒｅｐｔ．ｓｕｉｓ、あるいはＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｌ、Ｐ、ＵもしくはＶ群の連鎖球菌として代替的に分類される連鎖球菌）、
３）グラム陰性球菌、例えばＮｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｃｉｎｅｒｅａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｅｌｏｎｇａｔａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｌａｃｔａｍｉｃａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｕｃｏｓａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｓｉｃｃａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｓｕｂｆｌａｖａ及びＮｅｉｓｓｅｒｉａ  ｗｅａｖｅｒｉ、
４）Ｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ、例えばＢａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ及びＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ、
５）Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ、例えばＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ及びＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅなど）、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ（例えばＣｉｔｒｏｂ．ｆｒｅｕｎｄｉｉ及びＣｉｔｒｏｂ．ｄｉｖｅｒｎｉｓ）、Ｈａｆｎｉａ（Ｈａｆｎｉａ  ａｌｖｅｉなど）、Ｅｒｗｉｎｉａ（Ｅｒｗｉｎｉａ  ｐｅｒｓｉｃｉｎｕｓなど）、Ｍｏｒｇａｎｅｌｌａ  ｍｏｒｇａｎｉｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｃａ及びＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ）、Ｓｈｉｇｅｌｌａ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｆｌｅｘｎｅｒｉ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｂｏｙｄｉｉ及びＳｈｉｇｅｌｌａ  ｓｏｎｎｅｉなど）、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ（Ｋｌｅｂｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｋｌｅｂｓ．ｏｘｙｔｏｃａ、Ｋｌｅｂｓ．ｏｒｎｉｔｈｏｌｙｔｉｃａ、Ｋｌｅｂｓ．ｐｌａｎｔｉｃｏｌａ、Ｋｌｅｂｓ．ｏｚａｅｎａｅ、Ｋｌｅｂｓ．ｔｅｒｒｉｇｅｎａ、Ｋｌｅｂｓ．ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｉｓ（Ｃａｌｙｍｍａｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｉｓ）及びＫｌｅｂｓ．ｒｈｉｎｏｓｃｌｅｒｏｍａｔｉｓなど）、Ｐｒｏｔｅｕｓ（Ｐｒ．ｍｉｒａｂｉｌｉｓ、Ｐｒ．ｒｅｔｔｇｅｒｉ及びＰｒ．ｖｕｌｇａｒｉｓなど）、Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ（Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ  ａｌｃａｌｉｆａｃｉｅｎｓ、Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ  ｒｅｔｔｇｅｒｉ及びＰｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ  ｓｔｕａｒｔｉｉなど）、Ｓｅｒｒａｔｉａ（Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ及びＳｅｒｒａｔｉａ  ｌｉｑｕｉｆａｃｉｅｎｓなど）、及びＹｅｒｓｉｎｉａ（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ及びＹｅｒｓｉｎｉａ  ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓなど）、
６）Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ａｖｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｃａｓｓｅｌｉｆｌａｖｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｃｅｃｏｒｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｄｉｓｐａｒ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｄｕｒａｎｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｈｉｒａｅ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｍａｌｏｄｏｒａｔｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｎｄｔｉｉ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｓｅｕｄｏａｖｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｒａｆｆｉｎｏｓｕｓ及びＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｏｌｉｔａｒｉｕｓなど）、
７）Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｃｉｎａｅｄｉ及びＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｆｅｎｎｅｌｌｉａｅなど）、
８）Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ（例えば、Ａ．ｂａｕｍａｎｎｉｉ、Ａ．ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ、Ａ．ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ａ．ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ、Ａ．ｊｕｎｉｉ、Ａ．Ｉｗｏｆｆｉ及びＡ．ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔｅｎｓ）、
９）Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ（Ｐｓ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｐｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）、Ｐｓ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ、Ｐｓ．ｃｈｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ、Ｐｓ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ、Ｐｓ．ｌｕｔｅｏｌａ．Ｐｓ．ｍｅｎｄｏｃｉｎａ、Ｐｓ．ｍｏｎｔｅｉｌｉｉ、Ｐｓ．ｏｒｙｚｉｈａｂｉｔａｎｓ、Ｐｓ．ｐｅｒｔｏｃｉｎｏｇｅｎａ、Ｐｓ．ｐｓｅｕｄａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ、Ｐｓ．ｐｕｔｉｄａ及びＰｓ．ｓｔｕｔｚｅｒｉなど）、
１０）Ｂａｃｔｅｒｉｏｄｅｓ  ｆｒａｇｉｌｉｓ、
１１）Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ（例えば、Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｉｇｅｒ）、
１２）Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、
１３）Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ（例えば、Ｃ．ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｃ．ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃ．ｔｅｔａｎｉ、Ｃ．ａｂｓｏｎｕｍ、Ｃ．ａｒｇｅｎｔｉｎｅｎｓｅ、Ｃ．ｂａｒａｔｉｉ、Ｃ．ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ、Ｃ．ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋｉｉ、Ｃ．ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ、Ｃ．ｃａｄａｖｅｒｉｓ、Ｃ．ｃａｍｉｓ、Ｃ．ｃｅｌａｔｕｍ、Ｃ．ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｏｆｏｒｍｅ、Ｃ．ｃｏｃｈｌｅａｒｉｕｍ、Ｃ．ｃｏｃｌｅａｔｕｍ、Ｃ．ｆａｌｌａｘ、Ｃ．ｇｈｏｎｉｉ、Ｃ．ｇｌｙｃｏｌｉｃｕｍ、Ｃ．ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ｃ．ｈａｓｔｉｆｏｒｍｅ、Ｃ．ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ｃ．ｉｎｄｏｌｉｓ、Ｃ．ｉｎｎｏｃｕｕｍ、Ｃ．ｉｒｒｅｇｕｌａｒｅ、Ｃ．ｌｅｐｔｕｍ、Ｃ．ｌｉｍｏｓｕｍ、Ｃ．ｍａｌｅｎｏｍｉｎａｔｕｍ、Ｃ．ｎｏｖｙｉ、Ｃ．ｏｒｏｔｉｃｕｍ、Ｃ．ｐａｒａｐｕｔｒｉｆｉｃｕｍ、Ｃ．ｐｉｌｉｆｏｒｍｅ、Ｃ．ｐｕｔｒｅｆａｓｃｉｅｎｓ、Ｃ．ｒａｍｏｓｕｍ、Ｃ．ｓｅｐｔｉｃｕｍ、Ｃ．ｓｏｒｄｅｌｉｉ、Ｃ．ｓｐｈｅｎｏｉｄｅｓ、Ｃ．ｓｐｏｒｏｇｅｎｅｓ、Ｃ．ｓｕｂｔｅｒｍｉｎａｌｅ、Ｃ．ｓｙｍｂｉｏｓｕｍ及びＣ．ｔｅｒｔｉｕｍ）、
１４）マイコプラズマ（例えば、Ｍ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｍ．ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｍ．ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ及びＭ．ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）、
１５）マイコバクテリア（例えば、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｆｏｒｔｕｉｔｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍａｒｉｎｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｋａｎｓａｓｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｈｅｌｏｎａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｂｓｃｅｓｓｕｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｅｐｒａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｍｅｇｍｉｔｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｆｒｉｃａｎｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｌｖｅｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｓｉａｔｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｕｒｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｏｈｅｍｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｏｖｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｒａｎｄｅｒｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｒｕｍａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｅｌａｔｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｈｕｂｅｎｓｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｏｎｆｌｕｅｎｔｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｏｎｓｐｉｃｕｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｏｏｋｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｇａｄｉｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｇａｓｔｒｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｇｅｎａｖｅｎｓｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｇｏｒｄｏｎａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｇｏｏｄｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｈａｓｓｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｉｎｔｅｒｊｅｃｔｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｅｎｓｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｅｎｔｉｆｌａｖｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍａｌｍｏｅｎｓｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｉｃｒｏｇｅｎｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｉｃｒｏｔｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｕｃｏｇｅｎｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｎｅｏａｕｒｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｎｏｎｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｅｒｅｇｒｉｎｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｈｌｅｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｃｒｏｆｕｌａｃｅｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｈｉｍｏｉｄｅｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｉｍｉａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｚｕｌｇａｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｅｒｒａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｈｅｒｍｏｒｅｓｉｓｔａｂｉｌｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｒｉｐｌｅｘ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｒｉｖｉａｌｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｓｃｉａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｖａｃｃａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｗｏｌｉｎｓｋｙｉ及びＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｘｅｎｏｐｉ）、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｄｕｃｒｅｙｉ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ａｅｇｙ���ｔｉｕｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｐａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ及びＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓなど）、
１６）Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｅｑｕｕｌｉなど）、
１７）Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｈｏｍｉｎｉｓ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｇｎｉｅｒｅｓｉｉ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｉｓ及びＡｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｕｒｅａｅ、
１８）Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ  ｉｓｒａｅｌｉｉなど）、
１９）Ｂｒｕｃｅｌｌａ（Ｂｒｕｃｅｌｌａ  ａｂｏｒｔｕｓ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ  ｃａｎｉｓ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ  ｍｅｌｉｎｔｅｎｓｉｓ及びＢｒｕｃｅｌｌａ  ｓｕｉｓなど）、
２０）Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｃｏｌｉ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｌａｒｉ及びＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｆｅｔｕｓなど）、
２１）Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、
２２）Ｖｉｂｒｉｏ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ及びＶｉｂｒｉｏ  ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｖｉｂｒｉｏ  ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｃａｒｃｈａｒｉａｅ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｆｌｕｖｉａｌｉｓ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｆｕｒｎｉｓｓｉｉ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｈｏｌｌｉｓａｅ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｍｅｔｓｃｈｎｉｋｏｖｉｉ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｍｉｍｉｃｕｓ及びＶｉｂｒｉｏ  ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓなど）、
２３）Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ  ｒｈｕｓｏｐａｔｈｉａｅ、
２４）Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｊｅｉｋｅｕｍ及びＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍなど）、
２５）Ｓｐｉｒｏｃｈａｅｔａｃｅａｅ、例えばＢｏｒｒｅｌｉａ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｔｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ａｆｚｅｌｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ａｎｄｅｒｓｏｎｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｉｓｓｅｔｔｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｇａｒｉｎｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｌｕｓｉｔａｎｉａｅ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｔａｎｕｋｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｔｕｒｄｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｖａｌａｉｓｉａｎａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｃａｕｃａｓｉｃａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｃｒｏｃｉｄｕｒａｅ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｄｕｔｔｏｎｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｇｒａｉｎｇｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｈｅｒｍｓｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｈｉｓｐａｎｉｃａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｌａｔｙｓｃｈｅｗｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｍａｚｚｏｔｔｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｐａｒｋｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｐｅｒｓｉｃａ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｔｕｒｉｃａｔａｅ及びＢｏｒｒｅｌｉａ  ｖｅｎｅｚｕｅｌｅｎｓｉｓなど）ならびにＴｒｅｐｏｎｅｍａ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ  ｓｓｐ．ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ  ｓｓｐ．ｅｎｄｅｍｉｃｕｍ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ  ｓｓｐ．ｐｅｒｔｅｎｕｅ及びＴｒｅｐｏｎｅｍａ  ｃａｒａｔｅｕｍ）、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｂｅｔｔｙａｅ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｃａｎｉｓ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｄａｇｍａｔｉｓ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃａ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ  ｇａｌｌｉｃｉｄａ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ  ｓｅｐｔｉｃａ、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｔｒｏｐｉｃａ及びＰａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｓｔｏｍａｔｉｓなど）、
２６）Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｈｉｎｚｉｉ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｈｏｌｍｓｅｉｉ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ及びＢｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｔｒｅｍａｔｕｍなど）、
２７）Ｎｏｃａｒｄｉａｃｅａｅ、例えばＮｏｃａｒｄｉａ（Ｎｏｃａｒｄｉａ  ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ及びＮｏｃａｒｄｉａ  ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓなど）、
２８）Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ（例えば、ＲｉｃｋｓｅｔｔｓｉｉまたはＣｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｉｉ）、
２９）
３０）Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ（Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ａｎｉｓａ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍｅｎｓｉｓ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｂｏｚｅｍａｎｉｉ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉｅｎｓｉｓ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｄｕｍｏｆｆｉｉ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｆｅｅｌｅｉｉ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｇｏｒｍａｎｉｉ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｈａｃｋｅｌｉａｅ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｊｏｒｄａｎｉｓ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｌａｎｓｉｎｇｅｎｓｉｓ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｌｏｎｇｂｅａｃｈａｅ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｍａｃｅａｃｈｅｍｉｉ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｍｉｃｄａｄｅｉ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｏａｋｒｉｄｇｅｎｓｉｓ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｓａｉｎｔｈｅｌｅｎｓｉ、Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｔｕｃｓｏｎｅｎｓｉｓなど、
３１）Ｌｅｇｉｏｎａｌｌａ  ｗａｄｓｗｏｒｔｈｉｉ、
３２）Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、
３３）Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒａ  ｃａｙｅｔａｎｅｎｓｉｓ、
３４）Ｅｎｔａｍｏｅｂａ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ、
３５）Ｇｉａｒｄｉａ  ｌａｍｂｌｉａ、
３６）Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ、
３７）Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ、
３８）Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ、
３９）Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ及びＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ、
４０）Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、
４１）Ｇａｒｄｎｅｒｅｌｌａ（Ｇａｒｄｎｅｒａｌｌａ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ及びＧａｒｄｎｅｒａｌｌａ  ｍｏｂｉｌｕｎｃｕｓなど）、Ｓｔｒｅｐｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｉｓ、
４２）Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ、例えばＣａｐｎｏｃｙｔｏｐｈａｇａ（Ｃａｐｎｏｃｙｔｏｐｈａｇａ  ｃａｎｉｍｏｒｓｕｓ、Ｃａｐｎｏｃｙｔｏｐｈａｇａ  ｃｙｎｏｄｅｇｍｉ、Ｃａｐｎｏｃｙｔｏｐｈａｇａ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ、Ｃａｐｎｏｃｙｔｏｐｈａｇａ  ｇｒａｎｕｌｏｓａ、Ｃａｐｎｏｃｙｔｏｐｈａｇａ  ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃａ、Ｃａｐｎｏｃｙｔｏｐｈａｇａ  ｏｃｈｒａｃｅａ及びＣａｐｎｏｃｙｔｏｐｈａｇａ  ｓｐｕｔｉｇｅｎａなど）、
４３）Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ（Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ  ｂａｃｉｌｌｉｆｏｒｍｉｓ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ  ｃｌａｒｒｉｄｇｅｉａｅ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ  ｅｌｉｚａｂｅｔｈａｅ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ  ｈｅｎｓｅｌａｅ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ  ｑｕｉｎｔａｎａ及びＢａｒｔｏｎｅｌｌａ  ｖｉｎｓｏｎｉｉ  ａｒｕｐｅｎｓｉｓ）、
４４）Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ  ｂｉｆｌｅｘａ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ  ｂｏｒｇｐｅｔｅｒｓｅｎｉｉ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ  ｉｎａｄａｉ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ  ｉｎｔｅｒｒｏｇａｎｓ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ  ｋｉｒｓｃｈｎｅｒｉ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ  ｎｏｇｕｃｈｉｉ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ  ｓａｎｔａｒｏｓａｉ及びＬｅｐｔｏｓｐｉｒａ  ｗｅｉｌｉｉなど）、
４５）Ｓｐｉｒｉｌｌｉｕｍ（Ｓｐｉｒｉｌｌｕｍ  ｍｉｎｕｓなど）、
４６）Ｂａｃｅｔｅｒｏｉｄｅｓ（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｃａｃｃａｅ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｃａｐｉｌｌｏｓｕｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｄｉｓｔａｓｏｎｉｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｅｇｇｅｒｔｈｉｉ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｆｏｒｓｙｔｈｕｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｆｒａｇｉｌｉｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｍｅｒｄａｅ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｏｖａｔｕｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｐｕｔｒｅｄｉｎｉｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｓｐｌａｎｃｈｉｎｉｃｕｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｓｔｅｒｃｏｒｉｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｔｅｃｔｕｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｔｈｅｔａｉｏｔａｏｍｉｃｒｏｎ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｕｎｉｆｏｒｍｉｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｕｒｅｏｌｙｔｉｃｕｓ及びＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｖｕｌｇａｔｕｓなど）、
４７）Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｂｉｖｉａ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｂｕｃｃａｅ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｃｏｒｐｏｒｉｓ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｄｅｎｔａｌｉｓ（Ｍｉｔｓｕｏｋｅｌｌａ  ｄｅｎｔａｌｉｓ）、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｄｅｎｔｉｃｏｌａ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｄｉｓｉｅｎｓ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｅｎｏｅｃａ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｈｅｐａｒｉｎｏｌｙｔｉｃａ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｌｏｅｓｃｈｉｉ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｏｒａｌｉｓ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｏｒｉｓ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｏｕｌｏｒａ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｔａｎｎｅｒａｅ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｖｅｎｏｒａｌｉｓ及びＰｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｚｏｏｇｌｅｏｆｏｒｍａｎｓなど）、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｃａｎｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｃａｎｏｒｉｓ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｃａｎｓｕｌｃｉ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｃａｔｏｎｉａｅ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｃｉｒｃｕｍｄｅｎｔａｒｉａ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｃｒｅｖｉｏｒｉｃａｎｉｓ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｅｎｄｏｄｏｎｔａｌｉｓ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖｉｃａｎｉｓ、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｌｅｖｉｉ及びＰｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｍａｃａｃａｅなど）、
４８）Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ（Ｆ．ｇｏｎａｄｉａｆｏｒｍａｎｓ、Ｆ．ｍｏｒｔｉｆｅｒｕｍ、Ｆ．ｎａｖｉｆｏｒｍｅ、Ｆ．ｎｅｃｒｏｇｅｎｅｓ、Ｆ．ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ  ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ、Ｆ．ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ  ｆｕｎｄｉｌｉｆｏｒｍｅ、Ｆ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍ  ｎｕｃｌｅａｔｕｍ、Ｆ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍ  ｆｕｓｉｆｏｒｍｅ、Ｆ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｕｍ、Ｆ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍ  ｖｉｎｃｅｎｔｉｉ、Ｆ．ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｉｃｕｍ、Ｆ．ｒｕｓｓｉｉ、Ｆ．ｕｌｃｅｒａｎｓ及びＦ．ｖａｒｉｕｍなど）、
４９）Ｃｈｌａｍｙｄｉａ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓなど）、
５０）Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ（Ｃ．ｐａｒｖｕｍ、Ｃ．ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｃ．ｃａｎｉｓ、Ｃ．ｆｅｌｉｓ、Ｃ．ｍｅｌｅａｇｒｉｄｉｓ及びＣ．ｍｕｒｉｓなど）、
５１）Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ（Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ  ａｂｏｒｔｕｓ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｓｉｔｔａｃｉ）、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）及びＣｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ  ｐｓｉｔｔａｃｉ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｓｉｔｔａｃｉ）など）、
５２）Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｃｉｔｒｅｕｍ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｃｒｅｍｏｒｉｓ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｌａｃｔｉｓ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ及びＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｐｓｅｕｄｏｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓなど）、
５３）Ｇｅｍｅｌｌａ（Ｇｅｍｅｌｌａ  ｂｅｒｇｅｒｉ、Ｇｅｍｅｌｌａ  ｈａｅｍｏｌｙｓａｎｓ、Ｇｅｍｅｌｌａ  ｍｏｒｂｉｌｌｏｒｕｍ及びＧｅｍｅｌｌａ  ｓａｎｇｕｉｎｉｓなど）、ならびに
５４）Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ  ｐａｒｖｕｍ及びＵｒｅａｐｌａｓｍａ  ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍなど）。
【００３０】
本明細書において、「微生物のコロニー化」という用語は、同じ種類の微生物（細菌など）のコンパクトな集団、例えば、微生物（細菌など）の細胞が再生し始めるときに発生するコロニーなどの形成を指す。微生物のコロニー化（細菌のコロニー化など）は、疾患の症状を引き起こす場合もあれば引き起こさない場合もある。脱コロニー化とは、存在する微生物（細菌など）の数の減少を指す。微生物が完全に脱コロニー化されると、微生物は根絶されて検出不可能となる。
【００３１】
本明細書において、「バイオフィルム」という用語は、微生物が分散し、及び／またはコロニーを形成する、生物学的または非生物学的表面へのマトリックス封入微生物（細菌など）の付着を指す。バイオフィルムは典型的に、多糖類及び他の高分子から作られる。バイオフィルム形成は、敵対的環境において細胞の残存を可能にする、保護付き成長モードを表す。
【００３２】
本明細書において、「バイオフィルム形成」という用語は、バイオフィルム構造に含有される微生物の形成、成長及び修飾、ならびにバイオフィルム構造の多糖マトリックスの合成及び維持を含むことを意図している。また、この用語の範囲内には、多糖をマトリックス中に分泌しないタンパク質を主成分とするバイオフィルムの形成が含まれ、一方、細菌によるバイオフィルム構造の形成を可能にするタンパク質を含む。
【００３３】
本明細書において、「リファマイシン」という用語は、細菌Ａｍｙｃｏｌａｔｏｐｓｉｓ  ｒｉｆａｍｙｃｉｎｉｃａを介して天然にまたは人工的に合成される、一群の抗生物質を指す。リファマイシン群には、「従来の」リファマイシン薬、ならびにリファマイシン誘導体であるリファンピシン（もしくはリファンピン）、リファブチン、リファペンチン、リファラジル及びリファキシミンが包含される。
【００３４】
本明細書において、「対象」という用語は動物を指す。動物は哺乳類であることが好ましい。また、対象とは、例えば、霊長類（ヒトなど）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、魚、鳥などを指す。好ましい実施形態において、対象はヒトである。
【００３５】
本明細書において、本発明の化合物の「治療有効量」という用語は、対象の生物学的もしくは医学的反応を誘発するか、または症状を改善するか、または疾患の進行を遅延させるか、または疾患を予防するなどの、本発明の化合物の量を指す。一実施形態において、この用語は、微生物のコロニー形成もしくは感染を阻害または低減する量を指す。一実施形態において、この用語は、細菌性感染症を阻害または低減する、あるいは細菌バイオフィルムの形成を予防または破壊する量を指す。単独で投与される個々の活性成分に適用された場合、その用語はその単独成分を指す。この用語は、併用投与に適用された場合、併用投与、連続投与、または同時投与に関係なく、治療効果をもたらす活性成分の併用量を指す。
【００３６】
本明細書において、「医薬的に許容される担体または賦形剤」という用語は、組成物の有効成分（複数可）の生物学的活性の有効性を妨げず、投与される濃度において宿主に対して過度に毒性ではない、担体媒体または賦形剤を指す。本発明の文脈において、医薬的に許容される担体または賦形剤は、局所製剤に好適であることが好ましい。この用語には、限定されるものではないが、溶媒、安定化剤、可溶化剤、等張化剤、構造形成剤、懸濁剤、分散剤、キレート剤、乳化剤、消泡剤、軟膏基剤、皮膚軟化剤、皮膚保護剤、ゲル形成剤、増粘剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、浸透促進剤、錯化剤、滑剤、粘滑剤、粘度向上剤、生体接着性ポリマー、またはそれらの組み合わせが挙げられる。そのような薬剤を医薬的に活性な物質を製剤化することを目的に使用することは、当該技術分野において周知である（例えば、全体が本明細書において参照により援用されている“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”，Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ，１８ｔｈ  Ｅｄ．，１９９０，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）を参照。
【００３７】
本明細書中の任意の疾患または障害の「治療すること」もしくは「治療」という用語は、一実施形態において、疾患もしくは障害を寛解させること（すなわち、疾患またはその臨床症状の少なくとも１つの発症を阻止もしくは軽減すること）を指す。別の実施形態において、「治療する」または「治療」とは、患者に認識されない可能性がある、少なくとも１つの身体的パラメータを改善することを指す。更に別の実施形態において、「治療する」または「治療」は、物理的に（例えば、識別可能な症状の安定化）、生理学的に（例えば、身体的パラメータの安定化）、あるいはその両方のいずれかで、疾患または障害を調節することを指す。更にもう１つの実施形態において、「治療すること」または「治療」とは、疾患もしくは障害の発症または発呈または進行を、予防することまたは遅延させることを指す。「治療する」または「治療」という用語はまた、１つ以上の症状の重篤度の約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、または約１００％の低下を指す。
【００３８】
本明細書において、「局所投与」という用語は、製剤を対象の表面または局所領域に直接接触させることによって対象に送達することを指す。局所送達の最も一般的な形態は、皮膚を対象とするものであるが、本明細書に開示されている組成物はまた、身体の他の表面（例えば、眼、粘膜、体腔表面に対して、または内部表面に対して）に直接適用することも可能である。上記されているように、局所送達のうちで最も一般的なのは、皮膚への送達である。この用語は、局所及び経皮を含むがこれらに限定されない、幾つかの投与経路を包含する。これらの投与方法には、皮膚の透過性バリアの浸透、及び標的組織または層への効率的送達が含まれるのが通例である。局所投与は、表皮及び真皮を貫通し、最終的に組成物の全身送達を達成するための手段として、使用できる。
【００３９】
本明細書において、「局所用組成物」（同義的に「局所用製剤」）という用語は、それを必要とする対象の罹患領域への局部もしくは局所塗布を意図した医薬製剤を指すために本明細書中に使用されており、ゲル、クリーム、軟膏、エマルジョン、懸濁液、溶液、滴剤、ローション、塗料、膣坐薬、ドシェ、坐薬、トローチ、スプレー、スポンジ、フィルム、または発泡体のような剤形を包含する。局所製剤は、クリーム、ゲル、または軟膏の形態であることが好ましい。
【００４０】
本明細書において、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、「包含する（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含有する」、「包含する（ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｄｉｎｇ）」、「から本質的になる」、または「からなる」を意味する。この「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、本明細書中に用いられている場合、全ての具体的に言及される特徴、ならびに任意選択的、追加的な、不特定の特徴を包含する。対照的に、「からなる」という用語は、特許請求の範囲において指定されているような特徴だけを含む。それゆえ、「含む」には、「からなる」または「から本質的になる」によって特定される組成物が、限定例として包含される。一実施例において、「含む」という用語は、特許請求の範囲において特定されている特徴のみを含む。
【００４１】
本発明の文脈において（とりわけ、特許請求の範囲の文脈において）本明細書中に使用される用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」及び同様な用語は、本明細書中で別段に示されない限り、または文脈上矛盾することが明らかでない限り、単数形と複数形の両方を網羅するものと解釈すべきである。本明細書中で値の範囲が列挙されている場合、その範囲内に含まれる別々の各値を個々に指す簡潔な方法としての役目を果たすことを、専ら意図したものである。本明細書中に別途記載のない限り、個々の値はそれぞれ、あたかも本明細書中に個々に列挙されているかのように、本明細書中に援用されている。本明細書に記載の全ての方法は、本明細書に別途記載のない限り、または文脈上矛盾することが明らかでない限り、任意の好適な順序で実行できる。本明細書において提供されているありとあらゆる実施例、または例示的な言葉（例えば、「のような（ｓｕｃｈ  ａｓ）」）の使用は、あくまで本発明の理解をより容易にすることを意図したものであって、特許請求の範囲に記載されている本発明の範囲を限定するものではない。本明細書中の如何なる言葉も、本発明を実施するうえで必要不可欠な要素のうち、特許請求の範囲内に含まれない任意の要素を指示するものとして解釈すべきではない。
【００４２】
本明細書において、「約」という用語は、所与の値または範囲の１０％以内、好ましくは５％以内、より好ましくは１％以内を指す。代替的に、「約」という用語は、当業者によって考慮された場合、平均の標準誤差の許容範囲内に含まれることを指す。
【００４３】
本発明によって提供されている組成物は、抗菌効力が増強されており、細菌性感染症などの微生物感染症の抑制、軽減もしくは治療、及び／または微生物の脱コロニー化、及び／または細菌バイオフィルム形成の破壊、中断、抑制もしくは軽減に有効である。我々は、驚異的且つ予期せぬことを発見した。その発見は、活性剤である１）ポリミキシンＢとトリメトプリムとを含む組成物Ａと、２）ａ）リファマイシン、またはリファンピシン（もしくはリファンピン）、リファブチン、リファペンチン、リファラジル及びリファキシミンからなる群から選択されるリファマイシン誘導体、あるいはｂ）メシル酸ペフロキサシン、スパーフロキサシン、サラフロキサシンＨＣｌ、トブラマイシン、ロメフロキサシン、ベシフロキサシン、メシル酸ダノフロキサシン、エンロフロキサシン、ナジフロキサシン及びクリナフロキサシンからなる群から選択されるもののうちの１つである１つの抗生物質と、の組み合わせを具備する組成物を、微生物（細菌など）の治療に使用した場合に、微生物（細菌など）、コロニー化または感染、あるいはバイオフィルムの形成に対して相乗効果を発揮するというものである。本明細書において、「相乗的」という用語は、化合物及び／または薬剤を併用した場合の方が、各化合物を別々に添加した場合よりも、得られる効果が大きいことを指す。本発明の併用治療は、相乗効果があることが明らかにされた。この相乗効果は、例えば、反応の程度、反応の持続時間、反応率、安定化率、安定化の持続時間、感染症を軽減または解消するまでの時間、微生物が根絶されるまでの時間が、併用治療の成分の一方または他方をその通常の用量にて投与した際に達成可能な反応の程度、反応の持続時間、反応率、安定化率、安定化の持続時間、感染症を軽減または解消するまでの時間、微生物が根絶されるまでの時間に対して測定される。例えば、本発明の併用治療の効果が相乗的である理由は、一成分単独で達成できる効果に比べて併用治療の方が治療的に優れていることにある。秀逸な効果は、微生物の薬物耐性低下、併用治療によって微生物が減少または根絶され且つ検出不可能になる程度が、改善されることでありうる。また、本発明の併用治療の効果が相乗的である理由は、例えば、微生物を死滅させるのにかかる時間が短いことにある。また、例えば、本発明の併用治療の効果が相乗的である理由は、併用治療の方が一成分単独の場合よりも広範な抗菌活性が得られることにある。また、例えば、本発明の併用治療の効果が相乗的である理由は、本発明に記載されている組成物中の成分のうちの一方がその通常の用量で投与され、且つ他の成分（複数可）が低用量で投与されることにある。この治療効果は、例えば、細菌などの微生物の死滅及び／または増殖抑制の程度、細菌などの微生物を死滅させ且つ／またはその増殖を抑制するための所要期間、あるいは、微生物のコロニーを破壊または抑制するための所要期間、あるいはバイオフィルムの形成もしくは成長を中断、阻害、または低減させるための所要期間を基準に測定される治療効果であって、従来の量の併用治療の成分を投与した際に達成可能な治療効果と同等とされる。
【００４４】
一態様において、本発明は、活性剤である１）ポリミキシンＢとトリメトプリムとを含む組成物Ａ、ならびに２）ａ）リファマイシン、またはリファンピシン（もしくはリファンピン）、リファブチン、リファペンチン、リファラジル及びリファキシミンからなる群から選択されるリファマイシン誘導体、あるいはｂ）メシル酸ペフロキサシン、スパーフロキサシン、サラフロキサシンＨＣｌ、トブラマイシン、ロメフロキサシン、ベシフロキサシン、メシル酸ダノフロキサシン、エンロフロキサシン、ナジフロキサシン及びクリナフロキサシンからなる群から選択されるもののうちの１つである１つの抗生物質と、１つ以上の医薬的に許容される担体または賦形剤と、含む抗菌性組成物を提供するものである。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：１０００〜約１０００：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：５００〜約５００：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：１００〜約１００：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：１〜約５０：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約５：１〜約２５：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：１、約１：１０、約１：１５、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０、約１：１００、約１：１２５、約１：１５０、約１：１７５、約１：２００、約１：２５０、約１：３００、約１：３５０、約１：４００、約１：４５０、約１：５００、約１：５５０、約１：６００、約１：６５０、約１：７００、約１：７５０、約１９０：１、約１：８００、約１：８５０、約１：９００、約１：９５０、または約１：１０００である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約８：１、約１０：１、約１５：１、約２０：１、約２５：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１２５：１、約１５０：１、約１７５：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、約８００：１、約８５０：１、約９００：１、約９５０：１、または約１０００：１である。
【００４５】
組成物ＡのポリミキシンＢ及びトリメトプリムは、抗菌剤である。環状リポペプチド抗生物質であるポリミキシンＢは、多様なグラム陰性生物、とりわけＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａに対し殺菌性を発揮し、膜のリン脂質成分との相互作用によって細菌細胞膜の透過性を増強する。トリメトプリムは、多様な好気性グラム陽性及びグラム陰性眼科病原体に対し活性な、合成抗菌薬である。トリメトプリムは、酵素ジヒドロ葉酸レダクターゼに結合して可逆的に阻害することによって、ジヒドロ葉酸からテトラヒドロ葉酸が生成されるのを阻止する。この結合は、対応する哺乳動物の酵素に対してよりも細菌の酵素に対して強力なため、核酸及びタンパク質の細菌生合成を選択的に妨げる。研究者らによって明らかにされてきたように、ポリミキシンＢは、以下の非限定的な細菌性病原体：Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｅｎｔｅｒ  ｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ及びＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａなどに対して活性を有する。トリメトプリムは、それは以下の非限定的な細菌性病原体：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ及びＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ａｅｇｙｐｔｉｕｓ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ（インドール陰性）、Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｖｕｌｇａｒｉｓ（インドール陽性）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ及びＳｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓなどに対して活性であることが公知である。
【００４６】
したがって、本発明の一実施形態において、組成物Ａは、ポリミキシンＢとトリメトプリムとからなる。また、本発明の別の実施形態において、抗菌性組成物は、活性剤であるポリミキシンＢ、トリメトプリム、及びリファンピシンからなる。
【００４７】
また、組成物ＡのポリミキシンＢ及びトリメトプリムも、ポリトリムと命名された薬物の２つの活性成分である。ポリトリムは、１０，０００単位／ｍＬの硫酸ポリミキシンＢ、１ｍｇ／ｍＬの硫酸トリメトプリム、及び薬学的に許容される賦形剤または担体を含有する、点眼液である。また、ＦＤＡ  ＮＤＡ出願第Ｎ０５０５６７号も参照のこと。ポリトリム点眼液は、細菌性眼表面感染症の治療において適応とされる。そのような感染症の非限定的な例には、以下の微生物：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｖｉｒｉｄａｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ及びＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなどの感受性株によって引き起こされる急性細菌性結膜炎、及び眼瞼結膜炎が包含される。
【００４８】
したがって、本発明の一実施形態において、本明細書に記載の抗菌性組成物の組成物Ａは、ポリトリムを含む。一実施形態において、ポリトリムと抗生物質の重量比は、約１：１０００〜約１０００：１である。一実施形態において、ポリトリムと抗生物質の重量比は、約１：５００〜約５００：１である。一実施形態において、ポリトリムと抗生物質の重量比は、約１：１００〜約１００：１である。一実施形態において、ポリトリムと抗生物質の重量比は、約１：１〜約５０：１である。一実施形態において、ポリトリムと抗生物質の重量比は、約５：１〜約２５：１である。一実施形態において、ポリトリムと抗生物質の重量比は、約１：１、約１：１０、約１：１５、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０、約１：１００、約１：１２５、約１：１５０、約１：１７５、約１：２００、約１：２５０、約１：３００、約１：３５０、約１：４００、約１：４５０、約１：５００、約１：５５０、約１：６００、約１：６５０、約１：７００、約１：７５０、約１：８００、約１：８５０、約１：９００、約１：９５０、または約１：１０００である。一実施形態において、ポリトリムと抗生物質の重量比は、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約８：１、約１０：１、約１５：１、約２０：１、約２５：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１２５：１、約１５０：１、約１７５：１、約１９０：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、約８００：１、約８５０：１、約９００：１、約９５０：１、または約１０００：１である。
【００４９】
また、本発明の一実施形態において、本明細書に記載の抗菌性組成物の抗生物質はリファンピシンである。一実施形態において、組成物Ａとリファンピシンとの重量比は、約１：１０００〜約１０００：１である。一実施形態において、組成物Ａとリファンピシンとの重量比は、約１：５００〜約５００：１である。一実施形態において、組成物Ａとリファンピシンとの重量比は、約１：１００〜約１００：１である。一実施形態において、組成物Ａとリファンピシンとの重量比は、約１：１〜約５０：１である。一実施形態において、組成物Ａとリファンピシンとの重量比は、約５：１〜約２５：１である。一実施形態において、組成物Ａとリファンピシンとの重量比は、約１：１、約１：１０、約１：１５、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０、約１：１００、約１：１２５、約１：１５０、約１：１７５、約１９０：１、約１：２００、約１：２５０、約１：３００、約１：３５０、約１：４００、約１：４５０、約１：５００、約１：５５０、約１：６００、約１：６５０、約１：７００、約１：７５０、約１：８００、約１：８５０、約１：９００、約１：９５０、または約１：１０００である。一実施形態において、組成物Ａとリファンピシンとの重量比は、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約８：１、約１０：１、約１５：１、約２０：１、約２５：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１２５：１、約１５０：１、約１７５：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、約８００：１、約８５０：１、約９００：１、約９５０：１、または約１０００：１である。
【００５０】
本発明の更に別の実施形態において、抗菌性組成物は、ポリトリムとリファンピシンとを含む。本発明の別の実施形態では、ポリトリム及びリファンピシンを唯一の活性剤としている。一実施形態において、ポリトリム対リファンピシンの重量比は、約１：１０００〜約１０００：１である。一実施形態において、ポリトリム対リファンピシンの重量比は、約１：５００〜約５００：１である。一実施形態において、ポリトリム対リファンピシンの重量比は、約１：１００〜約１００：１である。一実施形態において、ポリトリム対リファンピシンの重量比は、約１：１〜約５０：１である。一実施形態において、ポリトリム対リファンピシンの重量比は、約５：１〜約２５：１である。一実施形態において、ポリトリム対リファンピシンの重量比は、約１：１、約１：１０、約１：１５、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０、約１：１００、約１：１２５、約１：１５０、約１：１７５、約１：２００、約１：２５０、約１：３００、約１：３５０、約１：４００、約１：４５０、約１：５００、約１：５５０、約１：６００、約１：６５０、約１：７００、約１：７５０、約１：８００、約１：８５０、約１：９００、約１：９５０、または約１：１０００である。一実施形態において、ポリトリム対リファンピシンの重量比は、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約８：１、約１０：１、約１５：１、約２０：１、約２５：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１２５：１、約１５０：１、約１７５：１、約１９０：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、約８００：１、約８５０：１、約９００：１、約９５０：１、または約１０００：１である。
【００５１】
本出願には、本明細書に記載の本発明の抗菌性組成物における組成物Ａ、及び抗生物質の総濃度が、抗菌性組成物の単位あたり約１重量％〜約５０重量％であることも記載されている。総濃度は、抗菌性組成物の単位あたり約５０重量百分率（重量％）、約４０重量％、約３０重量％、約２５重量％、約２０重量％、約１５重量％、約１０重量％、約５重量％、約３重量％、約２重量％、約１重量％であることが好ましい。
【００５２】
本明細書に記載の本発明の抗菌性組成物は、対象における眼組織、耳の組織、鼻の組織、皮膚または創傷における細菌性感染症を治療することを目的として、投与に用いることができる。一実施形態において、細菌性感染症は、グラム陽性菌またはグラム陰性菌、あるいはその両方の組み合わせに起因する。一実施形態において、細菌性感染症は以下：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．、例えばＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ；Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．、例えばＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ；Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐｐ．、例えばＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ；Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．、例えばＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｎｉｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐｐ．、例えばＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ；Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．；Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ；Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｓｐｐ．；Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐｐ．；Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐｐ．、例えばＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ；Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．；Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．；Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｓｐｐ．；Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．、例えばＡまたはＢ群Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｃｏｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ；Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．、例えばＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ；Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｓｐｐ．、例えばＮｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｅａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ；Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ；Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｓｐｐ．、例えばＳｈｉｇｅｌｌａ  ｆｌｅｘｎｅｒｉ；Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ；Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｓｐｐ．、例えばＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ；Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｓｐｐ．、例えばＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｓｉｔｔａｃｉ；Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｆｕｌａｒｅｎｓｉｓ；Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐｐ．、例えば  Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ；Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ  ｓｐｐ．、例えば  Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ；Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｓｐｐ．、例えばＹｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ；Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｓｐｐ．；Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｓｐｐ．；Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ及びＢ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉなど、またはそれらの組み合わせから選択されるものの１つである。この感染症は、以下を含むＥＳＫＡＰＥ病原体のいずれか：Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．、例えばＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ；Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．、例えばＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ；Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐｐ．、例えばＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ；Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．、例えばＡｃｉ���ｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｎｉｉ；Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐｐ．、例えばＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ；Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．、またはそれらの組み合わせなどに起因するものであることが好ましい。また、一実施形態において、細菌はＡｃｉｄｏｔｈｅｒｍｕｓ  ｃｅｌｌｕｌｙｔｉｃｕｓ、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ  ｏｄｏｎｔｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ  ｍｅｔａｌｌｉｒｅｄｉｇｅｎｓ、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ  ｏｒｅｍｌａｎｄｉｉ、Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｕｒｅｓｃｅｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｌａｕｓｉｉ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｈａｌｏｄｕｒａｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ、Ｂｉｆｉｄｉｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｏｎｇｕｍ、Ｃａｌｄｉｃｅｌｌｕｌｏｓｉｒｕｐｔｏｒ  ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｃａｒｂｏｘｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ  ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ａｃｅｔｏｂｕｔｙｌｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋｉｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｃｅｌｌｕｌｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｋｌｕｙｖｅｒｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｌｅｐｔｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｎｏｖｙｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｈｅｒｍｏｃｅｌｌｕｍ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｅｆｆｉｃｉｅｎｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｊｅｉｋｅｉｕｍ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ、Ｄｅｓｕｌｆｉｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｈａｆｎｉｅｎｓｅ、Ｄｅｓｕｌｆｏｔｏｍａｃｕｌｕｍ  ｒｅｄｕｃｅｎｓ、Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｖｅｎｔｒｉｏｓｕｍ、Ｅｘｉｇｕｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｉｂｉｒｉｃｕｍ、Ｆｉｎｅｇｏｌｄｉａ  ｍａｇｎａ、Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｋａｕｓｔｏｐｈｉｌｕｓ、Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｅｒｍｏｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｎｓ、Ｊａｎｉｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．、Ｋｉｎｅｏｃｏｃｃｕｓ  ｒａｄｉｏｔｏｌｅｒａｎｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｉｎｎｏｃｕａ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｗｅｌｓｈｉｍｅｒｉ、Ｍｏｏｒｅｌｌａ  ｔｈｅｒｍｏａｃｅｔｉｃａ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｏｖｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｇｉｌｖｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｅｐｒａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐａｒａｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｍｅｇｍａｔｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｖａｎｂａａｌｅｎｉｉ、Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ  ｓｐ．、Ｎｏｃａｒｄｉａ  ｆａｒｃｉｎｉｃａ、Ｏｃｅａｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｉｈｅｙｅｎｓｉｓ、Ｐｅｌｏｔｏｍａｃｕｌｕｍ  ｔｈｅｒｍｏｐｒｏｐｉｏｎｉｃｕｍ、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．、Ｓａｃｃｈａｒｏｐｏｌｙｓｐｏｒａ  ｅｒｙｔｈｒａｅａ、コアグラーゼ陰性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ種、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ）、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ（ＭＲＳＥ）、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｓｅｕｄｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｄｅｌｐｈｉｎｉ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｇｏｒｄｏｎｉｉ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｉｔｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｏｒａｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｎｇｕｉｎｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｕｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ａｖｅｒｍｉｔｉｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ、Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｅｔｈａｎｏｌｉｃｕｓ、Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ、またはそれらの組み合わせから選択される。
【００５３】
別の実施形態において、本明細書の上記に記載の本発明の抗菌性組成物は、局所医薬組成物に調合される。局所医薬組成物は、本明細書において上記に定義されている様々な実施形態の抗菌性組成物、ならびに１つ以上の医薬的に許容される担体または賦形剤を含む。
【００５４】
別の態様において、本発明は、活性剤である１）ポリミキシンＢとトリメトプリムとを含む組成物Ａと、２）ａ）リファマイシン、またはリファンピシン（もしくはリファンピン）、リファブチン、リファペンチン、リファラジル及びリファキシミンからなる群から選択されるリファマイシン誘導体、あるいはｂ）メシル酸ペフロキサシン、スパルフロキサシン、サラフロキサシンＨＣｌ、トブラマイシン、ロメフロキサシン、ベシフロキサシン、メシル酸ダノフロキサシン、エンロフロキサシン、ナジフロキサシン及びクリナフロキサシンからなる群から選択されるもののうちの１つである１つの抗生物質と、１つ以上の医薬的に許容される担体または賦形剤と、を具備し、本組成物Ａの濃度が局所医薬組成物の単位あたり約０．００１重量％〜約８重量％であり、且つ抗生物質の濃度が局所医薬組成物の単位あたり約０．００１重量％〜約１０重量％である、局所医薬組成物を提供する。一実施形態において、前記組成物Ａの濃度は、局所医薬組成物の単位あたり約０．０１５重量％〜約１重量％であり、且つ抗生物質の濃度は、局所医薬組成物の単位あたり約０．０１５重量％〜約２重量％である。更なる一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は約１：１０００〜約１０００：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：５００〜約５００：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：１００〜約１００：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：１〜約５０：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約５：１〜約２５：１である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約１：１、約１：１０、約１：１５、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０、約１：１００、約１：１２５、約１：１５０、約１：１７５、約１：２００、約１：２５０、約１：３００、約１：３５０、約１：４００、約１：４５０、約１：５００、約１：５５０、約１：６００、約１：６５０、約１：７００、約１：７５０、約１：８００、約１：８５０、約１：９００、約１：９５０、または約１：１０００である。一実施形態において、組成物Ａと抗生物質との重量比は、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約８：１、約１０：１、約１５：１、約２０：１、約２５：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１２５：１、約１５０：１、約１７５：１、約１９０：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、約８００：１、約８５０：１、約９００：１、約９５０：１、または約１０００：１である。
【００５５】
本発明の一実施形態において、局所医薬組成物の組成物Ａは、ポリミキシンＢとトリメトプリムとからなる。一実施形態において、局所医薬組成物の抗生物質はリファンピシンである。一実施形態において、組成物ＡをポリミキシンＢとトリメトプリムとからなるものとし、且つ抗生物をリファンピシンとしたものである。また、本発明の別の実施形態において、抗菌性組成物は、活性剤であるポリミキシンＢ、トリメトプリム、及びリファンピシンからなる。
【００５６】
本発明の一実施形態において、局所医薬組成物の組成物Ａが、ポリトリムを含む。一実施形態において、局所医薬組成物の抗生物質はリファンピシンである。一実施形態において、組成物Ａをポリトリムを含むものとし、且つ抗生物質をリファンピシンとしたものである。本発明の一実施形態では、ポリトリム及びリファンピシンを唯一の活性剤としている。
【００５７】
一実施形態において、本明細書に記載の抗菌性組成物または局所医薬組成物は、それは、対象における眼、耳、鼻、皮膚または創傷感染症の治療を用途としたものである。一実施形態において、前記感染症は細菌性感染症である。一実施形態において、細菌性眼感染症は、細菌性角膜炎、細菌性結膜炎、または細菌性眼内炎である。更なる実施形態において、抗菌性組成物または局所医薬組成物は、以下の微生物：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｖｉｒｉｄａｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ及びＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなどの感受性株によって引き起こされる急性細菌性結膜炎、眼瞼結膜炎をはじめとする、細菌性眼表面感染症の治療を、用途としたものである。
【００５８】
一実施形態において、本発明の抗菌性組成物または局所医薬組成物は、クリーム、ローション、軟膏、ヒドロゲル、コロイド、ゲル、泡、油、乳液、懸濁液、ワイプ、スポンジ、溶液、エマルジョン、ペースト、パッチ、プレジェット、綿棒、包帯、スプレー、またはパッドの形態を取りうる。
【００５９】
本発明の局所用組成物は、１つ以上の医薬的に許容される担体を含む。本発明の文脈において使用可能な医薬的に許容される担体の例としては、担体材料、例えば、溶媒、安定化剤、可溶化剤、充填剤、等張化剤、構造形成剤、懸濁剤、分散剤、キレート剤、乳化剤、消泡剤、軟膏基剤、皮膚軟化剤、皮膚保護剤、ゲル形成剤、増粘剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、浸透促進剤、錯化剤、滑剤、粘滑剤、増粘剤、生体接着性ポリマーまたはそれらの組み合わせが挙げられる。
【００６０】
溶媒の例は、水または精製水、アルコール類（例えば、エタノール、ベンジルアルコール）、植物油、海洋油及び鉱物油、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロール、ならびに液体ポリアルキルシロキサンである。
【００６１】
不活性希釈剤または充填剤は、スクロース、ソルビトール、糖、マンニトール、微結晶セルロース、デンプン、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、またはリン酸ナトリウムでありうる。
【００６２】
緩衝剤の例としては、クエン酸、酢酸、乳酸、リン酸水素、ジエチルアミン、水酸化ナトリウム及びトロメタン（すなわち、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩酸塩）が挙げられる。
【００６３】
好適な懸濁剤は、例えば、天然起源のゴム類（例えば、アカシアゴム、アラビアゴム、キサンタンゴム、及びトラガカントゴム）、セルロース類（例えば、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、及びヒドロキシプロピルメチルセルロース）、アルギン酸塩、ならびにキトサンである。
【００６４】
分散剤または湿潤剤の例は、天然起源のホスファチド（例えば、レシチンもしくはダイズレシチン）、エチレンオキシドと脂肪酸または長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール、及びモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン）である。
【００６５】
保存料を本発明の局所用組成物に添加することによって、製剤の安定性に影響を及ぼし、及び／または患者に感染を引き起こす恐れのある微生物汚染を防止することが可能である。防腐剤の好適な例としては、パラベン（例えば、メチル、エチル、プロピル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸塩、ブチル、イソブチル、及びイソプロピルパラベン）、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸、安息香酸、安息香酸メチル、フェノキシエタノール、ブロノポール、ブロニドックス、ＭＤＭヒダントイン、ヨードプロピニル、カルバミン酸ブチル、塩化ベンザルコニウム、セトリミド、及びベンジルアルコールが挙げられる。
【００６６】
キレート剤の例としては、ＥＤＴＡナトリウム及びクエン酸が挙げられる。
【００６７】
ゲル基剤または増粘剤の例は、流動パラフィン、ポリエチレン、脂肪油、コロイドシリカまたはアルミニウム、グリセロール、プロピレングリコール、炭酸プロピレン、カルボキシビニルポリマー、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、親水性ポリマー（例えばデンプンまたはセルロース誘導体）、水膨潤性親水コロイド、カラギーナン、ヒアルロン酸塩、アルギン酸塩、及びアクリル酸塩である。
【００６８】
本発明の組成物中に用いるのに適した軟膏基剤は、疎水性であってもよいしまたは親水性であってもよく、パラフィン、ラノリン、液体ポリアルキルシロキサン、セタノール、パルミチン酸セチル、植物油、脂肪酸のソルビタンエステル、ポリエチレングリコール、及び脂肪酸のソルビタンエステル間の縮合生成物、ならびにエチレンオキシド（例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン）、ポリソルベート、白色ワセリン及び白色ワックスを含む。
【００６９】
エタノール、イソプロパノールグリセリン、プロピレングリコール、ソルビトール、乳酸及び尿素は、保湿剤の例である。好適な皮膚軟化剤には、コレステロール及びグリセロールが包含される。
【００７０】
皮膚保護剤の例としては、ビタミンＥ、アラトイン、グリセリン、酸化亜鉛、ビタミン類、及び日焼け止め剤が挙げられる。
【００７１】
増粘剤は一般に、粘度を増強すること、及び医薬組成物または化粧品組成物の生体接着特性を改善することを目的に、使用される。増粘剤の例としては、限定されるものではないが、セルロース、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキシド、天然起源のゴム、ゼラチン、カラヤ、ペクチン、アルギン酸、ポビドン、及びＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）ポリマーが挙げられる。増粘剤のなかでも特に興味深いのは、チキソトロピー特性を備えた増粘剤（すなわち、振盪または撹拌によって粘度が低減される薬剤）である。そのような薬剤を組成物中に配合することにより、投与時の組成物粘度を低下させて、その薬剤を皮膚に塗布するのを容易にすることが可能になると共に、塗布後の組成物粘度を増加させて、投与部位に組成物を残留させることも可能となる。
【００７２】
生体接着性ポリマーは、皮膚を水和してその透過性を向上させるのに有用である。また、生体接着性ポリマーは、増粘剤としても機能しうる。生体接着性ポリマーの例としては、限定されるものではないが、ペクチン、アルギン酸、キトサン、ポリソルベート、ポリ（エチレングリコール）、オリゴ糖及び多糖、セルロースエステル及びセルロースエーテル、ならびに改質セルロースポリマーが挙げられる。
【００７３】
透過促進剤は、皮膚を通過する活性成分の送達に影響を与える、特定の薬剤を含有するビヒクルである。浸透促進剤は、概ね、溶媒と界面活性化合物（両親媒性分子）の、２つのクラスに分類される。溶媒透過促進剤の例としては、アルコール（例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール）、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、１−ドデシルアゾシクロヘプタン−２−オン、Ｎ−デシル−メチルスルホキシド、乳酸、Ｎ，Ｎ−ジエチル−ｍ−トルアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ノナン、オレイン酸、ワセリン、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、サリチル酸、尿素、テルペン、及びトリクロロエタノールが挙げられる。界面活性剤浸透促進剤は、非イオン性、両性、カチオン性、または双性イオン性でありうる。好適な非イオン性界面活性剤としては、ポロキサマーとして市販されているポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシプロピレン）ブロックコポリマー、エトキシル化水素化ヒマシ油、Ｔｗｅｅｎ２０またはＴｗｅｅｎ８０などのポリソルベートが挙げられる。両性界面活性剤には四級化イミダゾール誘導体が包含され、カチオン性界面活性剤には塩化セチピリジニウムが包含され、双性イオン性界面活性剤にはベタイン及びスルホベタインが包含される。適切な浸透促進剤の他の例としては、ペンタデカラクトン、２−ピロリジン、１−ドデカル−アザシクロヘプタン−２−オン、チオグリコール酸カルシウム、ヘキサノール、１，３−ジオキサンの誘導体（すなわち、１，３−ジオキサシクロヘキサン）、及び１，３−ジオキサラン（すなわち、１，３−ジオキサシクロペンタン）、１−Ｎ−ドデシル−２−ピロリドン−５−カルボン酸、２−ペンチル−２−オキソ−ピロリジン酢酸、２−ドデシル−２−オキソ−１−ピロリジン酢酸、及び１−アザシクロヘプタン−２−オン−２−ドデシル酢酸が、特に挙げられる。
【００７４】
一実施形態において、本発明の局所医薬組成物は、溶液もしくは懸濁液、エマルジョン、軟膏、クリーム、ゲル、または眼内挿入物のような徐放性ビヒクルの形態の、局所眼科用医薬組成物であることが好ましい。
【００７５】
一実施例において、本発明の局所眼科用医薬組成物は、多回使用もしくは単回使用に対応した点眼薬瓶またはバイアル内に収容された、溶液もしくは懸濁液のような滅菌液体またはゲルである。特定の実施例において、眼科用医薬組成物は、約０．００１５〜約１０．０重量％の、本明細書に記載の抗菌組成物を含む滅菌液体として、多用途点眼薬瓶またはバイアル内に収容されて提供される。点眼製剤は、約ｐＨ４〜約８、典型的には約ｐＨ７．０〜約８．０、より典型的には約ｐＨ７．２〜約ｐＨ７．４の、リン酸緩衝液またはホウ酸緩衝食塩水のような、水性緩衝食塩水を含むのが、ごく一般的である。製剤のオスモル濃度は、典型的に、約２００、２５０、または２７０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜最大約３１０、３５０、または４００ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲内である。多用途点眼薬瓶にパッケージされた液体製剤には、塩化ベンザルコニウムのような防腐剤添加物を含める場合があるのに対し、幾つかの実施例では、眼科用組成物に防腐剤を含めない場合がある。本明細書において、「防腐剤フリー」とは、組成物が抗菌性組成物に加えて防腐剤を含まないことを意味する。
【００７６】
眼科用医薬組成物を、点眼器で投与される溶液または懸濁液のような液体として調合した場合、賦形剤を含めることにより、或る用量の組成物を角膜と接触した状態のままに維持される期間を、延長することが可能である。例えば、賦形剤は、増粘剤及び／または粘膜付着剤でありうる。そのような賦形剤の例としては、高分子量親水性ポリマーを含み、限定されるものではないが、例えば、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、カルボマー、ポリカルボフィル、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックコポリマー（ポロキサマー４０７など）、セルロース誘導体（ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、及びヒドロキシエチルセルロースなど）、天然多糖類（ヒアルロン酸、デキストラン、コンドロイチン硫酸、ジェランガム、キサンタンガム、グアーガム、トレハロース、及びタマリンド種多糖類など）が挙げられる。追加的な粘膜付着性ポリマーは、文献に記載されている（例えば、本明細書において参照により援用されているＹａｄａｖ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，２０１０，２（５）：４１８−４３２を参照）。組成物中には、前述のポリマーの２つ以上の任意の組み合わせが含まれる場合がある。本明細書において、高分子量ポリマーの分子量は少なくとも１００，０００ダルトンである。別の実施例において、組成物は、シクロデキストリン（例えば、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン）を含む。一実施例において、組成物は徐放性液体として調合される。例えば、本組成物は、抗菌性組成物の放出を持続させる粘膜付着性ミクロスフェアを具備する、眼科用懸濁液の形態とされる場合もある。ミクロスフェアは、粘膜付着性ポリマーと抗菌性組成物とを含む。眼科用懸濁液用の粘膜付着性ミクロスフェアの製造方法は、文献に記載されている（例えば、Ｄａｎｄａｇｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉ  Ｐｈａｒｍ（２０１３）８１（１）：２５９−２８０を参照）。
【００７７】
別の特定の実施例において、眼科用医薬組成物は、眼の盲嚢内に配置するための単位用量眼内挿入物として調合される。眼内挿入物を作製する方法は、文献に記載されている（例えば、本明細書において参照により援用されている米国特許第４，７３０，０１３号、米国特許第７，７４９，９７０号、米国特許出願公開第ＵＳ２０１２／０２１５１８４号を参照）。眼内挿入物は、活性剤を含有する生分解性マトリックスからなる活性固形単位用量である。マトリックスは典型的に、高分子量ポリマーまたは高分子量ポリマーの組み合わせ、例えば、前述の親水性ポリマー、及び眼科用挿入物が記載されている前述の特許公報中に開示されている追加的なポリマーから製造される。眼内挿入物に潤滑剤を更に含めることによって、快適性を高めることが可能になる。眼内挿入物は、眼内に配置された際、溶解または侵食期間が数時間から１日、場合によっては数日間に及ぶ。
【００７８】
別の態様において、本発明は、本明細書を通じて本明細書に記載の治療有効量の抗菌性組成物を別々に、同時にまたは連続して対象に投与することを含む、対象における細菌性感染症の治療方法を提供する。一実施形態において、抗菌性組成物は、局所医薬組成物に調合される。一実施形態において、局所医薬組成物は、眼、耳または鼻の感染症の治療を用途とした製剤である。一実施形態において、細菌性感染症は、グラム陽性菌またはグラム陰性菌、あるいは両方の組み合わせに由来する。
【００７９】
一実施形態において、局所医薬組成物は、細菌性眼感染症の治療を用途とした眼科用製剤である。細菌性眼感染症の例としては、限定されるものではないが、細菌性角膜炎、細菌性結膜炎、または細菌性眼内炎である。一実施例において、眼科用製剤は、以下の微生物：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｖｉｒｉｄａｎｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ及びＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなどの感受性株によって引き起こされる急性細菌性結膜炎ならびに眼瞼結膜炎をはじめとする、細菌性眼表面感染症の治療を用途としたものである。
【００８０】
一実施形態において、本発明は、本明細書全体を通じて、本明細書に記載の抗菌組成物と別々に、同時にまたは連続して細菌性生物を接触させることを含む、細菌性生物のコロニー除去方法を提供する。
【００８１】
一実施形態において、本発明は、明細書全体を通じて、本明細書に記載の局所医薬組成物と別々に、同時に、または逐次的に細菌性生物を接触させることを含む、細菌性生物を脱コロニー化する方法を提供する。
【００８２】
一実施形態において、本発明は、本明細書全体を通じて、本明細書に記載の抗菌性組成物と別々に、同時にまたは連続して細菌性生物を接触させることを含む、細菌性生物のバイオフィルム形成を破壊または中断または阻害または低減する方法を提供する。
【００８３】
一実施形態において、本発明は、本明細書全体を通じて、本明細書に記載の局所医薬組成物と別々に、同時にまたは連続して細菌性生物を接触させることを含む、細菌性生物のバイオフィルム形成を破壊または中断または阻害または低減する方法を提供する。
【００８４】
細菌は、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．、例えばＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ；Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．、例えばＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ；Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐｐ．、例えばＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ；Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．、例えばＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｎｉｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐｐ．、例えばＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ；Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．、またはそれらの併用をはじめとする、ＥＳＫＡＰＥ病原体から選択されたものであることが好ましい。
【００８５】
本発明の併用療法は、単独で実施してもよいし、または他の療法と併用して実施することもできる。例えば、医療装置及び留置装置、例えば、ステント、カテーテル、腹膜透析チューブ、排水装置、人工関節、歯科用インプラントなどをはじめとする留置装置の表面上に、本発明の併用療法を、消毒剤、防腐剤、抗生物質または殺生物剤と併用できる。
【００８６】
以下の実施例を挙げることによって、本発明は、ポリミキシンＢ及びトリメトプリムを含む組成物Ａと、微生物定着表面または感染症の治療を目的に投与できる１つの抗生物質と、を具備する、相乗的併用療法を提供する。ここで、以下の実施例を参照する。これらの実施例は、上記の説明と共に、本発明の幾つかの実施形態を非限定的に例証するものである。
【実施例】
【００８７】
我々は細菌性感染症の治療における問題に取り組むため、同時代的Ｓ．ａｕｒｅｕｓ性及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ性の角膜炎分離株に対し改善された抗菌効力を示す、改良型トリメトプリム／ポリミキシンＢ製剤の創製に着手した。したがって、ポリトリムの抗菌活性を改善する能力を有する化合物について、８５３メンバーのＦＤＡ承認薬ライブラリのメンバーをスクリーニングした。我々の結果から判るように、リファマイシンクラスの抗生物質（すなわち、リファンピシン）を添加することによってポリトリムの抗微生物特性が増強し、有効用量が低量になり、且つ殺菌活性が迅速化する。これらの観点から、ポリトリムとリファマイシンの併用は、フルオロキノロン耐性を克服し、ポリトリム単独の治療よりも速効性である眼感染症の治療を用途とした、価値ある新規な治療選択肢の代表例として期待されている。
【００８８】
実施例１
材料と方法
細菌株と増殖条件
これらの研究で使用される細菌株は、従来の実験室株のＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＰＡＯ１及びＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＵＡＭＳ−１を含み、これらの株は両方とも抗生物質感受性であり、堅牢なバイオフィルムを形成しうる。Ｇｉｌｌａｓｐｙ  ＡＦ，Ｈｉｃｋｍｏｎ  ＳＧ，Ｓｋｉｎｎｅｒ  ＲＡ，Ｔｈｏｍａｓ  ＪＲ，Ｎｅｌｓｏｎ  ＣＬ，Ｓｍｅｌｔｚｅｒ  ＭＳ．Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｃｃｅｓｓｏｒｙ  ｇｅｎｅ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒ（ａｇｒ）ｉｎ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｏｆ  ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌ  ｏｓｔｅｏｍｙｅｌｉｔｉｓ．Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １９９５；６３：３３７３−３３８０．を参照。Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの７つの臨床角膜炎分離株を、Ｆｌａｕｍ  Ｅｙｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ  ＮＹから採取し、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ（ＩＨＭＡ；Ｓｃｈａｕｍｂｕｒｇ，ＩＬ）から購入された国の地理的に別個の地域からのＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓの２５個の臨床分離株。プランクトン様培養物を必要とする実験用に、指示された生物をＬｕｒｉａ−Ｂｅｒｔａｎｉブロス（ＬＢ；Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ，ＮＪ）中で一晩増殖させ、新鮮な培地で１：１００に希釈して、対数増殖期初期（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ用にそれぞれ０．１８または０．４ＯＤ６００ｎｍ）まで増殖させて処置した。平底ポリスチレンプレート（Ｆａｌｃｏｎ，Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ；Ｄｕｒｈａｍ，ＮＣ）の個々のウェルに、指示された生物の一夜培養物を、終濃度１×１０７ＣＦＵ  ｍｌ−１になるまで２００μｌの新鮮なＬＢに接種することによりバイオフィルムを確立した。プレートを３７℃の加湿インキュベーター内に７２時間入れて、静置バイオフィルムを形成させた。非接着細胞を吸引し、各実験に先立って、バイオフィルムをリン酸緩衝生理食塩水で２回洗浄した。
【００８９】
化学物質及び化合物ライブラリ
トブラマイシン、リファンピシン、ネオマイシン、シプロフロキサシン、アンピシリン、ゲンタマイシン、ベシフロキサシン及びセフトリアキソンはＳｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から購入されたものであり、点眼液中の化合物（モキシフロキサシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム）は、Ｆｌａｕｍ  Ｅｙｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ，ＮＹ）から入手されたものである。８５３ＦＤＡ承認薬のライブラリは、Ｓｅｌｌｅｃｋ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ（Ｈｏｕｓｔｏｎ、ＴＸ）から入手されたものである。
【００９０】
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ臨床分離株の特性評価
一連の遺伝子型決定及び生物学的アッセイを予備的手段として使用して、採取された臨床的Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ分離株のクローン性を、以下のようにして評価する。Ｑｉａｇｅｎ  ＤＮｅａｓｙキット（Ｈｉｌｄｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して各分離株からゲノムＤＮＡを精製し、このゲノムＤＮＡをポリメラーゼ連鎖反応の鋳型として用い、以前に公開されたプライマーを使用して病原性因子ｅｘｏＳ、ｅｘｏＹ、ｅｘｏＵ、ｅｘｏＴ及びｐｃｒＶの存在を検出する（表１）。Ａｌｌｅｗｅｌｔ  Ｍ，Ｃｏｌｅｍａｎ  ＦＴ，Ｇｒｏｕｔ  Ｍ，Ｐｒｉｅｂｅ  ＧＰ，Ｐｉｅｒ  ＧＢ．Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＥｘｏＵ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｎ  ｌｅａｄｓ  ｔｏ  ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ  ｉｎ  ａ  ｍｕｒｉｎｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ａｃｕｔｅ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ  ａｎｄ  ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｓｐｒｅａｄ．Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２０００；６８：３９９８−４００４、Ｌｏｍｈｏｌｔ  ＪＡ，Ｐｏｕｌｓｅｎ  Ｋ，Ｋｉｌｉａｎ  Ｍ．Ｅｐｉｄｅｍｉｃ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ａ  ｃｌｏｎｅ  ｔｈａｔ  ｉｓ  ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｅｙｅ  ａｎｄ  ｔｈａｔ  ｈａｓ  ａ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ  ｆａｃｔｏｒｓ．Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２００１；６９、及びＬｅｄｂｅｔｔｅｒ  ＥＣ，Ｍｕｎ  ＪＪ，Ｋｏｗｂｅｌ  Ｄ，Ｆｌｅｉｓｚｉｇ  ＳＭ．Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ  ａｎｄ  ｇｅｎｏｔｙｐｅ  ｏｆ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｉｓｏｌａｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  ｃａｎｉｎｅ  ｏｃｕｌａｒ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  ＆  ｖｉｓｕａｌ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００９；５０を参照。モキシフロキサシン、セフトリアキソン、アンピシリン、ネオマイシン、ゲンタマイシン、トブラマイシン及びポリミキシンＢ／トリメトプリムに対する各分離株の抗生物質感受性プロファイルを、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）のガイドラインに準じて評価した。Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃ．Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ：Ｔｗｅｎｔｙ−ｆｉｆｔｈ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ．Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ：Ｔｗｅｎｔｙ−ｆｉｆｔｈ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔを参照。分離株ごとのバイオフィルム形成能力を定量した。この定量を行うことを目的に、７２時間で確立されたバイオフィルムを含むポリスチレンプレートのウェルを０．８％ＮａＣｌで洗浄し、非接着細胞を除去して、クリスタルバイオレットで染色した。バイオフィルム染色を定量するため、プレートをＨ２Ｏで３回洗浄し、染色液を３０���氷酢酸中に懸濁させ、前述のように自動プレートリーダーを用いて各ウェルの光学密度（ＯＤ６００ｎｍ）を計測した。Ｊａｃｏｂｓ  ＡＣ，Ｂｌａｎｃｈａｒｄ  ＣＥ，Ｃａｔｈｅｒｍａｎ  ＳＣ，Ｄｕｎｍａｎ  ＰＭ，Ｍｕｒａｔａ  Ｙ．Ａｎ  ｒｉｂｏｎｕｃｌｅａｓｅ  Ｔ２  ｆａｍｉｌｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｎｉｉ  ａｂｉｏｔｉｃ  ｓｕｒｆａｃｅ  ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ．ＰｌｏＳ  ｏｎｅ  ２０１４；９を参照。
【表１】
2019528268.tif 000003
【００９１】
Ｓｅｌｌｅｃｋライブラリのスクリーニング
ポリミキシンＢ／トリメトプリムの抗菌活性を増強する薬剤を同定するために、我々は最初に、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ株ＰＡＯ１及びＳ．ａｕｒｅｕｓ株ＵＡＭＳ−１の成長を可能にする、最高濃度のポリミキシンＢ／トリメトプリムの組み合わせを特定した。そうするには、標準ＭＩＣプレートアッセイを実施し、２倍濃度のポリミキシンＢ／トリメトプリムの存在下で、１×１０５ＣＦＵをマイクロタイタープレートの各ウェルに加えて、３７℃で１６時間インキュベートした。ＭＩＣは、肉眼で測定したところ、成長を示さなかった薬物濃度として同定された。濃度のより低い薬物の微妙な効果を理解するために、各生物の１倍、０．５倍、０．２５倍及び０．１２５倍のＭＩＣを呈するウェルからアリコート（２０μｌ）を平板培養し、生存ＣＦＵの数を特定した。約１０６ＣＦＵの生存を可能にしたポリミキシンＢ／トリメトプリムの濃度が、中等度の抗菌活性を有する濃度を呈したが、一晩インキュベーションした後に、成長表現型の喪失に至らなかった（図４）ため、この濃度を、このようなスクリーニングにおける使用のために選択した。
【００９２】
Ｓｅｌｌｅｃｋライブラリのスクリーニング用に、新鮮培地８８μｌを含有する９６ウェルマイクロタイタープレートの個々のウェルに、およそ１０５ＣＦＵのＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＰＡＯ１株またはＳ．ａｕｒｅｕｓ  ＵＡＭＳ−１を接種した。次いで、ＰＡＯ１及びＵＡＭＳ−１に対しそれぞれ２μｌのポリミキシンＢ／トリメトプリムを加えて、終濃度を０．２μｇ  ｍｌ−１または１．２５μｇ  ｍｌ−１にした。次いで、ライブラリメンバーを最終濃度５μＭまたは５０μＭのいずれかにて添加した。３７℃にて１６時間プレートをインキュベートし、ヒットを目視可能な増殖のないウェルとして同定した。
【００９３】
分画阻止濃度
チェッカーボード形式では、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ株ＵＡＭＳ−１またはＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ株ＰＡＯ１を、マイクロタイタープレートの個々のウェルに加えた。各プレートの横列を漸増濃度のポリミキシンＢ／トリメトプリム（０〜１２．５μｇ／ｍｌ−１）で処置したのに対し、各縦列を漸増濃度のリファンピシン、トブラマイシンまたはベシフロキサシンで処置した。プレートを１６時間インキュベートし、その時点で（単独で）細菌増殖を阻害する各試験剤の濃度を様々な濃度を併用して測定した。式：（併用中の薬物Ａの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）／単独の薬物ＡのＭＩＣ）＋（併用中の薬物ＢのＭＩＣ／単独の薬物ＢのＭＩＣ）＝ＦＩＣを用い、分画阻止濃度（ＦＩＣ）指数を計算した。相乗的相互作用をＦＩＣ値＜０．５として定義し、相加的相互作用をＦＩＣ値０．５〜１．０として定義し、相互作用なしをＦＩＣ１〜４として定義し、拮抗的相互作用をＦＩＣ＞４として定義した。Ｏｄｄｓ  ＦＣ．Ｓｙｎｅｒｇｙ，ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ，ａｎｄ  ｗｈａｔ  ｔｈｅ  ｃｈｅｑｕｅｒｂｏａｒｄ  ｐｕｔｓ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｔｈｅｍ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ２００３；５２：１を参照。
【００９４】
バイオフィルム感受性
バイオフィルムを上記のようにして確立し、次いでプランクトン様ＰＡＯ１またはＵＡＭＳ−１細胞を、０．５×、１×、２×、４×または８×ＭＩＣの試験剤を補充した１００μｌの新鮮培地で処置した。２４時間後、残りの培地及び非接着細胞を除去し、バイオフィルムを０．８％ＮａＣｌ中に懸濁し、平板培養して生存細菌を定量した。化合物の併用により処置されたバイオフィルムの感受性を、各化合物のプランクトンＭＩＣの比１：１（すなわち、ＰＡＯ１に対して６．２５μｇ  ｍｌ−１のポリミキシンＢ／トリメトプリム及び１５．６μｇ  ｍｌ−１のリファンピシン）を利用して、上記と同じ方法で算定した。バイオフィルムを、０〜６４×ＭＩＣの範囲の漸増量で処置した。
【００９５】
抗菌殺菌曲線：
指示された生物の一晩培養物を用い、１００ｍｌの新鮮培地に接種（１：１００希釈）して、対数増殖期中期まで増殖させた。試験化合物（複数可）を１×、２×、または４×ＭＩＣにて添加し、引き続き培養物をインキュベーションした。アリコートを１時間目、２時間目、３時間目、４時間目、及び２４時間目に採取し、段階希釈してコロニー形成単位用に平板培養した。
【００９６】
抵抗測定
２つの液体培養法を用いて、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ株ＰＡＯ１及びＳ．ａｕｒｅｕｓ株ＵＡＭＳ−１について、指示された試験剤（複数可）に対する自発的耐性を測定した。最初に、プランクトン様増殖細胞（１×１０５ＣＦＵを、１×ＭＩＣのリファンピシン、１×ＭＩＣポリミキシンＢ／トリメトプリム及び１×ＭＩＣを組み合わせて添加した１００μｌのＭｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ培地を含むマイクロタイタープレートの個々のウェルに添加した。プレートを一晩インキュベートし、その時点でアリコートを採取し、生存コロニー形成単位の数を計数するために平板培養した。推定の耐性生存細胞を呈したいずれの試験条件についても、結果として得られた８つのコロニーを上記のように反復ＭＩＣ試験用に無作為に選択して、それらのコロニーが耐性分離株を表すかどうかを立証した。第二のアプローチとして、上記からの各処置条件からの５０μｌの懸濁液を、１．９５ｍｌのＭＨを含有するＢａｃｔｅｒｉｏＳｃａｎ製の採取用キュベットに移した。ＢａｃｔｅｒｉｏＳｃａｎ製のｓ２１６Ｄｘレーザー微生物増殖モニターを使用して増殖を測定し、４０時間にわたって３分ごとに光学的測定を行った。４０時間後、生存コロニー形成単位を測定するため試料を平板培養し、薬剤感受性の再試験を行った。
【００９７】
実施例２
ポリミキシンＢ／トリメトプリムの抗菌活性を改善する化合物の同定
抗生物質ポリミキシンＢ＋トリメトプリム含有の点眼液は、広範囲の抗菌活性と、耐性に関連した低い臨床的失敗を示すが、この併用治療効果は、一部には、特定の細菌種に対する効力が比較的低いこと、殺菌速度が遅く、抗バイオフィルム特性が不十分なことが原因で制限されてきた。ポリミキシンＢ／トリメトプリム点眼液の抗菌性能を潜在的に改善する可能性のある薬剤/を特定するため、まず、別途に阻害濃度以下の濃度のポリミキシンＢ／トリメトプリムの存在下にて、抗菌活性を付与する薬剤について、８５３メンバーのＦＤＡ承認薬ライブラリのメンバーのスクリーニングを行った。これを行うため、１．２μｇ／ｍｌ−１のポリミキシンＢ／トリメトプリム（０．２５ｘＭＩＣ）を補充したマイクロタイタープレートの個々のウェルに、１０５ＣＦＵのＳ．ａｕｒｅｕｓ株ＵＡＭＳ−１を接種した。ライブラリメンバーを低濃度（５μＭ）または高濃度（５０μＭ）で添加してから、一晩インキュベートした後、増殖を阻害する薬剤をスコアで評価した。そのような薬剤は、それ自体で抗菌活性を呈し、及び／またはポリミキシンＢ／トリメトプリムの抗菌活性を増強する化合物を代表することが期待された。並行して、０．２μｇ  ｍｌ−１のポリミキシンＢ／トリメトプリム（０．５×ＭＩＣ）を補充した培地中に接種されたＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＰＡＯ１細胞に対し、増殖表現型の喪失を示す薬剤について低濃度及び高濃度にてライブラリもまたスクリーニングした。
【００９８】
スクリーニングの結果、明らかにされたように、ライブラリ化合物中１５３個は、０．２５×ＭＩＣのポリミキシンＢ／トリメトプリム及びそれらの存在下、５０μＭにてＳ．ａｕｒｅｕｓ増殖表現型の喪失を呈し、また、７５個は５μＭにて抗菌活性を呈し、ポリミキシンＢ／トリメトプリムの抗菌性能の最も強力な抗ブドウ球菌及び／または増強剤であることを示唆している。Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａについては、０．５×ＭＩＣのポリミキシンＢ／トリメトプリムの存在下、合計６３化合物が５０μＭにて増殖を喪失し、そのうちの３２化合物は５μＭにて同様に増殖を阻害された（表２）。
【表２】
2019528268.tif 000004
【００９９】
更なる研究に向けて、化合物の数を絞り込むため、最も治療的に関連性のあるポリミキシンＢ／トリメトプリムカクテル（複数可）に、Ｓ．ａｕｒｅｕｓとＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの両方に対して強力な活性を呈する薬剤を含めることが考慮された。各生物に対するスクリーニング結果を比較したによって、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  の両方に対し、１８種の試験薬剤が５μＭ及び５０μＭにて活性を呈することが明らかにされた。しかも、これらの化合物のうち１６種類は、確立済のＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａバイオフィルム、及び角膜炎の原因物質として認識されているＡｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｎｉｉに対する活性を呈することが以前報告されている。Ｂｌａｎｃｈａｒｄ  Ｃ，Ｂｒｏｏｋｓ  Ｌ，Ｅｂｓｗｏｒｔｈ−Ｍｏｊｉｃａ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ．Ｚｉｎｃ  Ｐｙｒｉｔｈｉｏｎｅ  Ｉｍｐｒｏｖｅｓ  ｔｈｅ  Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｓｉｌｖｅｒ  Ｓｕｌｆａｄｉａｚｉｎｅ  Ｏｉｎｔｍｅｎｔ．ｍＳｐｈｅｒｅ  ２０１６；１、及びＣｏｌｑｕｈｏｕｎ  ＪＭ，Ｗｏｚｎｉａｋ  ＲＡ，Ｄｕｎｍａｎ  ＰＭ．Ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  Ｒｅｌｅｖａｎｔ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ  Ａｌｔｅｒ  Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｂａｕｍａｎｎｉｉ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｐｒｏｍｏｔｅ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｏｖｅｌ  Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ．ＰｌｏＳ  ｏｎｅ  ２０１５；１０を参照。これら１６種の化合物（表３）には、４種のリファマイシン類（リファブチン、リファペンチン、リファンピシン、リファキシミン）、２種のキノロン類（サラフロキサシン、及びペフロキサシン）、８種のフルオロキノロン類（スパルフロキサシン、シタフロキサシン、ロメフロキサシン、ベシフロキサシン、ダノフロキサシン、エンロフロキサシン、ナジフロキサシン、及びクリナフロキサシン）が含まれている。レボフロキサシンは角膜潰瘍治療用のＦＤＡ承認フルオロキノロンであり、アミノグリコシドであるトブラマイシンは、一般的に使用される強化抗生物質であり、細菌性角膜炎のフルオロキノロン治療失敗の設定で利用されているため、２つの追加的な薬剤であるレボフロキサシン及びトブラマイシンを含め、両方とも５μＭ及び５０μＭにてａｅｒｕｇｉｎｏｓａに対して活性を示した一方、Ｓ．ａｕｒｅｕｓに対しては５０μＭにてのみ活性が実証された。各クラスの抗生物質の代表例を、更なる調査対象として選択した。
【表３】
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【０１００】
実施例３
リファンピシン及びトブラマイシンによる、ポリミキシンＢ／トリメトプリムの抗菌活性の向上
ポリミキシンＢ／トリメトプリムの抗菌活性を増強する薬剤と独立した抗菌活性を有する薬剤とを区別するため、リファンピシン（リファマイシン）、トブラマイシン（アミノグリコシド）及びベソフロキサシン（フルオロキノロン）を使用して、プランクトン様Ｓ．ａｕｒｅｕｓ及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ培養物に対し、チェッカーボード形式で分画阻止濃度（ＦＩＣ）測定を実施した。表４に示すように、抗菌感受性試験にて、ポリミキシンＢ／トリメトプリムに対するＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ株ＰＡＯ１のＭＩＣは、０．４１μｇ／ｍｌ−１であったのに対し、リファンピシン、トブラマイシン及びベシフロキサシン単独の場合のＭＩＣは、それぞれ１５．６μｇ／ｍｌ−１、０．４８μｇ／ｍｌ−１、及び１．５６μｇ／ｍｌ−１であったことが明らかにされた。リファンピシンとポリミキシンＢ／トリメトプリムとを併用した結果、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（ＦＩＣ＝０．６３７）に対し相加効果が得られた。このことは、ポリミキシンＢ／トリメトプリムの抗菌活性を増強することを示唆している。ポリミキシンＢ／トリメトプリムとの併用時には、トブラマイシン（ＦＩＣ＝１．２８）及びベシフロキサシン（ＦＩＣ＝１）は相加作用もなく拮抗作用もなかった。Ｓ．ａｕｒｅｕｓ株ＵＡＭＳ−１に対して、ポリミキシンＢ／トリメトプリムのＭＩＣは２μｇ／ｍｌ−１であった一方、リファンピシン、トブラマイシン及びベシフロキサシン単独の場合のＭＩＣはそれぞれ、０．０１μｇ  ｍｌ−１、１．９μｇ  ｍｌ−１及び０．１２μｇ  ｍｌ−１であったことが見出された（表４）。ポリミキシンＢ／トリメトプリムと併用した際、リファンピシンは相乗効果を示し（ＦＩＣ＝０．４６９）、トブラマイシンは相加効果を示した（ＦＩＣ＝０．８７２）。一方、ベシフロキサシンは効果を示さなかった（ＦＩＣ＝１）。総合すれば、これらの結果によると、リファンピシンなどのリファマイシンは、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ及びＳ．ａｕｒｅｕｓの両方に対するポリミキシンＢ／トリメトプリムの活性を改善する可能性があるが、トブラマイシンはＳ．ａｕｒｅｕｓに対してポリミキシンを改善する可能性のあることが示唆される。こうした活性の向上が臨床的に関連のある菌株にわたるものかどうかを調べるため、分画阻止濃度試験を同時代的Ｓ．ａｕｒｅｕｓ及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ臨床角膜炎分離株のパネルが包含されるように拡大した。
【表４】
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【０１０１】
実施例４
ポリミキシンＢ／トリメトプリムの、リファンピシンまたはトブラマイシンとの併用時の臨床眼分離株に対する有効性
７つのＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ眼用組織分離株をＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ  Ｆｌａｕｍ  Ｅｙｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅから受け取り、予備的な遺伝子型決定及び表現型分析に供し、株セットの多様性を確証した。その為に、ＰＣＲを用い、病原性因子、ｅｘｏＳ、ｅｘｏＹ、ｅｘｏＵ、ｅｘｏＴ及びｐｃｒＶの存在または不在を評価し、各株に対する抗生物質感受性プロファイルを確立した（表５）。結果から明らかにされたように、全ての株にｅｘｏＹ、ｅｘｏＴ及びｐｅｒＶが含まれており、４株にはｅｘｏＳ（ＲＷ０１、ＲＷ０２、ＲＷ０３、ＲＷ０６）もまた含まれ、１株にはｅｘｏＵ（ＲＷ０７）が含まれていた。２株にはｅｘｏＳもｅｘｏＵも含まれていなかった（ＲＷ０４、ＲＷ０５）。同様な病原性因子パターンを有する株が、様々な耐性パターンを呈したことから、これらの株がクローン株ではないことが示唆される。また、国の様々な地域からの多様な臨床感染部位を表すＳ．ａｕｒｅｕｓ眼科臨床分離株セットも得られた。総合すれば、このＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ及びＳ．ａｕｒｅｕｓ株のコレクションは、リファンピシンまたはトブラマイシンの不在下及び存在下でポリミキシンＢ／トリメトプリムの活性スペクトルを評価するための、同時代的探索的な眼分離株コレクションを表すものと考えられた。
【表５】
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【０１０２】
表６に示すように、抗菌剤感受性試験で、ポリミキシンＢ／トリメトプリムとリファンピシンを併用した際に、評価された全てのＳ．ａｕｒｅｕｓ及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ臨床分離株について、ポリミキシンＢ＋トリメトプリム、またはリファンピシン単独のいずれかの場合と比較して、抗菌活性に改善が見られることが明らかにされた。併用では、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａに対し、平均ＦＩＣ指数が０．５０９（±０．０４）となり、相加的な抗菌効果が示唆された。Ｓ．ａｕｒｅｕｓについても同様に、併用では、ＦＩＣが０．４６３（±０．０４）となり、リファンピシンとポリミキシンＢ／トリメトプリムとの相加的／相乗的抗菌効果が示唆されている。トブラマイシンをポリミキシンＢ／トリメトプリムに添加した際の平均ＦＩＣ指数は、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａでは１．１４（±０．１７）であり、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ分離株では０．９３６（±０．３７）と、より中程度の効果であり、後者に対する中等度の相加効果が示唆される（表７）。リファンピシン及び比較的程度は低いが、トブラマイシンとポリミキシンＢ／トリメトプリムとの併用では、多様な耐性プロファイルを有する様々なＳ．ａｕｒｅｕｓ及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ臨床分離株に対する活性に改善が見られたことは、角膜炎の治療に対するこれらの併用の臨床的可能性を強調している。
【表６】
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【表７】
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【０１０３】
実施例５
ポリミキシンＢ／トリメトプリムの、リファンピシンまたはトブラマイシンとの併用時の確立済バイオフィルムに対する抗菌効果
Ｓ．ａｕｒｅｕｓ及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの両方が堅牢なバイオフィルムを形成する傾向ならびに角膜疾患の増強におけるバイオフィルムの役割の可能性を考慮し、ポリミキシンＢ／トリメトプリム＋リファンピシンまたはトブラマイシンの有効性を、最新の主要な角膜炎治療のモキシフロキサシンと比較して、各生物によって形成されたバイオフィルムに対し評価した。図１Ａに示すように、確立済Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＰＡＯ１バイオフィルムをポリミキシンＢ／トリメトプリム（単独）で処置した際、中等度の抗バイオフィルム活性を呈し、菌株のプランクトン様ポリミキシン＋トリメトプリムのＭＩＣ（０．４１μｇ  ｍｌ−１）の３２×にて、ＣＦＵ／ｍｌが２ｌｏｇ減少した。確立済Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａバイオフィルムをリファンピシン（単独）またはトブラマイシン（単独）で処置した際、同様な用量依存的応答が生じ、３２×ＭＩＣの濃度にて各々のＣＦＵが５ｌｏｇ減少した。トブラマイシン＋ポリミキシンＢ／トリメトプリムを併用した際、２〜４×ＭＩＣの濃度ではトブラマイシン（単独）よりもわずかにパフォーマンスが劣化したのに対し、より高濃度ではトブラマイシン（単独）と等効力であり、３２×ＭＩＣではバイオフィルム関連ＣＦＵが５ｌｏｇ減少した。リファンピシン＋ポリミキシンＢ／トリメトプリムは、２×ＭＩＣにて開始し、用量依存的にリファンピシン、トブラマイシンまたはポリミキシンＢ／トリメトプリムよりも優れ、３２×ＭＩＣにてＣＦＵが最大６ｌｏｇ減少した。リファンピシン＋ポリミキシンＢ／トリメトプリムは、モキシフロキサシンと比較して、３２×ＭＩＣにて同様な最大対数減少を達成したが、モキシフロキサシンは４×〜１６×ＭＩＣの間で抗バイオフィルム活性が上昇したことを実証した。
【０１０４】
確立済Ｓ．ａｕｒｅｕｓバイオフィルムの抗菌試験では、トブラマイシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム、またはそれらの併用のいずれも、試験された任意の濃度にてバイオフィルム関連の細胞に対する活性が有意とならなかったことが明らかになった。逆に、リファンピシン（単独）はバイオフィルム関連の細胞において用量依存的な減少を呈し、３２×ＭＩＣにてＣＦＵが最大４ｌｏｇ減少した。モキシフロキサシンは、リファンピシンと同様な用量反応を実証し、３２×ＭＩＣにてＣＦＵの４ｌｏｇ減少が達成された。一方、ポリミキシンＢ／トリメトプリムとリファンピシンとの併用は、最も強力な抗バイオフィルム活性を実証し、２×ＭＩＣにて有意な抗菌活性が観察され、３２×ＭＩＣにてＣＦＵが最大６ｌｏｇ減少した。総合すれば、これらの結果が示唆するように、リファンピシンを含有するポリミキシンＢ／トリメトプリムとの併用時、及び比較的程度は低いがトブラマイシンとの併用時には、これら個別に試験された化合物の活性と比較して、確立済Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ及びＳ．ａｕｒｅｕｓバイオフィルム関連の細胞に対する抗菌活性がより強力である。そのうえ、この併用は、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａバイオフィルムに対し一般的な治療用モキシフロキサシンと同様に機能し、確立済Ｓ．ａｕｒｅｕｓバイオフィルムに対してモキシフロキサシンよりも優れ、この併用が眼感染症の治療において有効且つ潜在的に秀逸でありうることを示唆する。
【０１０５】
実施例６
ポリミキシンＢ／トリメトプリムのリファンピシンとの併用時の抗菌効果
リファンピシン、及び比較的程度は低いがトブラマイシンと併用した際に確立済バイオフィルムに対してポリミキシンＢ／トリメトプリムが有効であったことから示唆されるように、これらを併用した場合の方が、それぞれを単独使用した場合と比べて殺菌活性の向上が見られる。併用した際の殺菌効果をより詳細に調べるために、プランクトン様Ｓ．ａｕｒｅｕｓ及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ細胞を使用して標準的な死滅曲線研究を行い、モキシフロキサシンと比較した。これを行うため、各生物体を対数増殖期初期まで増殖させ、その時点で培養物を、リファンピシン、トブラマイシン及びポリミキシンＢ／トリメトプリムの２×ＭＩＣ単独または併用で処置し、生存ＣＦＵの数を平板培養によって測定した。
【０１０６】
図２Ａに示すように、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの死滅曲線から明らかにされたように、トブラマイシン（単独）は、処置後４時間目に、初期ＣＦＵが中程度に２ｌｏｇ減少してから、更に増分して、２４時間目の抗原投与ではＣＦＵが最大７ｌｏｇ減少した。ポリミキシンＢ／トリメトプリム（単独）では、４時間目の処置までにＣＦＵが３ｌｏｇ減少し、２４時間目までに生存細胞が完全に根絶された。併用時に、トブラマイシン＋ポリミキシンＢ／トリメトプリムで処置されたＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ細胞は、ポリミキシンＢ／トリメトプリム（単独）と同様に１〜３時間挙動し、処置後４時間目にわずかに殺菌活性の改善が見られ、結果としてＣＦＵが４ｌｏｇ減少し、２４時間目までに細胞が完全に根絶された。リファンピシン単独では、４時間目までにＣＦＵが６ｌｏｇ減少し、２４時間目には生存細胞が皆無になった。モキシフロキサシンは１〜３時間リファンピシンと同様に機能したが、４時間でＣＦＵの５ｌｏｇ減少が実証され、その後２４時間で完全に根絶した。しかしながら、ポリミキシンＢ／トリメトプリムまたはモキシフロキサシン単独療法のいずれと比較しても、処置後２時間目にポリミキシンＢ／トリメトプリム＋リファンピシンの殺菌活性に顕著な改善が見られ、４時間までに生存細胞が完全に根絶した。
【０１０７】
トブラマイシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム、及びリファンピシンは、Ｓ．ａｕｒｅｕｓに対し、１〜４時間の同様な死滅曲線を生じ、結果として、処置後４時間で３〜４ｌｏｇ減少した（図２Ｂ）。２４時間目に、トブラマイシン（単独）ではＣＦＵが６ｌｏｇ減少した一方、リファンピシン及びポリミキシンＢ／トリメトプリムの両方
は生存細胞が根絶された。トブラマイシンをポリミキシンＢ／トリメトプリムと併用した際には、ＣＦＵが５ｌｏｇ減少したと共に、４時間目までに殺菌活性の改善が見られ、２４時間までには完全に根絶されることが実証された。リファンピシンとポリミキシンＢ／トリメトプリムとの併用では、２時間目までに殺菌活性が向上し、４時間目に生存細胞が６ｌｏｇ減少し、２４時間目に回復可能な生存細胞が存在しなかった。この活性は、全ての時点でモキシフロキサシンとほぼ同じであった。総合すると、これらの結果から、リファンピシンとポリミキシンＢ／トリメトプリムとの併用では、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの両方に対する殺菌活性が向上してモキシフロキサシンと同等またはそれよりもすぐれていたことが判る。
【０１０８】
実施例７
ポリミキシンＢ／トリメトプリム＋リファンピシンの抗菌剤耐性プロファイルの向上
リファンピシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム及びその併用では、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ株ＵＡＭＳ−１及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ株ＰＡＯ１の自発的耐性頻度を、２つの方法を用いて評価した。Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＰＡＯ１またはＡａｕｒｅｕｓ  ＵＡＭＳ−１を用いて、約１０６個のプランクトン様細胞を１×ＭＩＣのリファンピシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム、または各１×ＭＩＣの併用のいずれかで２０時間処置した後、培養物を平板培養し、個々のコロニーを単離した。これらのコロニーが未処置細胞対耐性細胞に相当するものであるかどうかを判別するため、各処置条件からそれぞれ８つの個々のコロニーを無作為に選択し、ＭＩＣの試験を行った。以前にリファンピシンで処置されたＳ．ａｕｒｅｕｓ細胞及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ細胞の両方が、元のＭＩＣの２〜４倍にてリファンピシン耐性を生じた。ポリミキシンＢ／トリメトプリムで処置された細胞についても同様、結果として得られた増殖物には、元のＭＩＣの２〜４倍の耐性細胞が含まれていた。リファンピシンとポリミキシンＢ／トリメトプリムとの併用では、２０時間目に回復可能な生存Ｓ．ａｕｒｅｕｓ細胞またはＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ細胞が見られなくなり、耐性コロニーの単離が皆無となった（データ不図示）。
【０１０９】
リファンピシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリムまたはその併用、ならびにモキシフロキサシンで処置された培養物の間での耐性を発現する傾向を更に研究するため、対数増殖期中期のＳ．ａｕｒｅｕｓまたはＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａプランクトン様培養物の増殖を、各化合物を１×ＭＩＣにて個別に及び併用して、処置後４０時間追跡した。自動レーザー微生物増殖モニターを使用して、これらの培養物の光学プロフィールを経時的に連続して測定した。図３ａに示すように、リファンピシン（単独）またはポリミキシンＢ／トリメトプリム（単独）で処置されたＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ培養物は、最初の１０〜１２時間で増殖が最小限に抑えられたことが実証された。一方、これらの各条件下では、引き続き、細胞が指数関数的に増殖したことが実証され、耐性因子が発生したことが示唆された。モキシフロキサシンで処置された細胞は、およそ２２時間目のインキュベーションではじめて増殖が見られ、その後も同様に、指数関数的な増殖が見られた。しかしながら、リファンピシン＋ポリミキシンＢ／トリメトプリムの併用では、４０時間を通して増殖が見られず、この併用では耐性を発現する傾向がはるかに低いことが示唆される。リファンピシンのみ、ポリミキシンＢ／トリメトプリムのみ、またはモキシフロキサシンで処置された培養物から回収された細胞が、耐性が実証されたことを確認するために、引き続いて、これらの培養物のＭＩＣを再試験した。ここでもまた、各処置群からそれぞれ８つのコロニーを無作為に選択した。リファンピシンで処置された培養物から増殖された細胞は、２〜８×ＭＩＣにて耐性が見られた。ポリミキシンＢ／トリメトプリム処置群では、２×ＭＩＣにて、８コロニー中の７コロニーが耐性を実証し、１コロニーが感受性であることが見出されており、処置後に増殖が見られたことは、耐性細胞と未処置細胞とが混合されたことを示唆する。モキシフロキサシンで処置された細胞は、２×ＭＩＣにて耐性を実証した。リファンピシン＋ポリミキシンＢ／トリメトプリムで処置された培養物から回収可能な細胞は皆無であった。
【０１１０】
Ｓ．ａｕｒｅｕｓに関しては、リファンピシンのみ及びポリミキシンＢ／トリメトプリムのみで処置された細胞は８時間目にはじめて成長が見られたのに対し、モキシフロキサシンで処置された細胞は２６時間目にはじめて成長が見られた（図３Ｂ）。一方、リファンピシンとポリミキシンＢ／トリメトプリムとの併用で処置された細胞は、４０時間の間に増殖が皆無であったことが実証された。ここでもまた、培養物の耐性を再試験し、試験した各化合物についてＭＩＣが２〜４倍に増加したことが実証された。ゆえに、総合すれば、モキシフロキサシン、ポリミキシンＢ／トリメトプリム及びリファンピシン単独の場合はいずれも、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの両方において耐性コロニーが急速に発達したことが実証された。一方、ポリミキシンＢ／トリメトプリム＋リファンピシンの併用では、処置後に耐性コロニーは同定できず、耐性プロファイルに改善が見られたことが実証された。
【０１１１】
結論
フルオロキノロンの使用は、広範囲の経験的感染性角膜炎治療に功を奏してきたにもかかわらず、対応する耐性が出現して臨床的失敗を招来し、新規な治療選択肢に対するニーズが強調されるようになった。Ｂｅｒｔｉｎｏ  ＪＳ．Ｉｍｐａｃｔ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｏｃｕｌａｒ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ：ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｃｕｒｒｅｎｔ  ａｎｄ  ｆｕｔｕｒｅ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ（Ａｕｃｋｌａｎｄ，ＮＺ）２００９；３：５０７−５２１、及びＣｏｌｌｉｅｒ  ＳＡ，Ｇｒｏｎｏｓｔａｊ  ＭＰ，ＭａｃＧｕｒｎ  ＡＫ，ｅｔ  ａｌ．Ｅｓｔｉｍａｔｅｄ  ｂｕｒｄｅｎ  ｏｆ  ｋｅｒａｔｉｔｉｓ−Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ，２０１０．ＭＭＷＲ  Ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ  ａｎｄ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ｗｅｅｋｌｙ  ｒｅｐｏｒｔ  ２０１４；６３：１０２７−１０３０を参照。バンコマイシンまたはトブラマイシンなどの特殊配合抗生物質は、新たな耐性が生ずるのを回避することを目的に幾つかの学術センターで利用可能であるが、治療用の商業的な代替選択肢は限られている。
【０１１２】
その点に関連して、ポリミキシンＢ／トリメトプリムは現在、細菌性結膜炎の治療を用途とする局所眼科用抗生物質併用薬として入手可能である。Ｇｒａｎｅｔ  ＤＢ，Ｄｏｒｆｍａｎ  Ｍ，Ｓｔｒｏｍａｎ  Ｄ，Ｃｏｃｋｒｕｍ  Ｐ．Ａ  ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒ  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ  Ｂ  ｓｕｌｆａｔｅ／ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｏｘｉｆｌｏｘａｃｉｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｓｐｅｅｄ  ｏｆ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖｉｔｉｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｐｅｄｉａｔｒｉｃ  ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｓｔｒａｂｉｓｍｕｓ  ２００８；４５：３４０−３４９を参照。この薬物に固有の幾つかの制限、すなわち眼組織浸透が弱い、死滅速度が遅い、及び抗バイオフィルム活性が制限されているにもかかわらず、その耐性率はフルオロキノロンと比較してより好ましい。この併用によって、改善に向けたプラットフォームが提供される可能性のあることが示唆される。これこそ本研究の目標であった。記載された研究における焦点は、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ及びＳ．ａｕｒｅｕｓに絞り込まれた。これら２つの生物は、細菌性角膜炎感染の大部分を占める。
【０１１３】
提示された結果から示唆されるように、ポリミキシンＢ／トリメトプリム懸濁液にリファンピシンなどのリファマイシンを添加することによって、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの実験室分離株及び臨床分離株の両方に対し付加的な抗菌効果がもたらされたと共に、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ株に対し相乗効果がもたらされ、それによって、有効用量を得るのに必要な有効濃度を低く抑えられる。そのうえ、リファンピシン＋ポリミキシンＢ／トリメトプリムの併用では、Ｓ．ａｕｒｅｕｓまたはＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａのいずれかによって形成された確立済バイオフィルムに対する抗菌性能が改善されたことが観察された。
【０１１４】
生理学的及び代謝的変化により従来の抗微生物療法に対し不応性の細胞がもたらされる可能性があるため、感染症におけるバイオフィルムの形成は、特定の治療上の課題を呈する。活動性細菌性角膜炎においてバイオフィルムの役割は明確には確立されていないが、これらの複雑な構造は広範囲の眼感染症において重要であると広く認められている。加えて、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａは両方とも、コンタクトレンズ上にバイオフィルムを容易に形成する。米国及び他の先進諸国において、角膜炎を発症する危険因子の首位は、依然としてコンタクトレンズの使用である。米国において、コンタクトレンズ装用者は３０００万人近くに及んでおり、年間では、感染性角膜炎罹患者数をコンタクトレンズ装用者５００人中１人とした場合、米国のヘルスケアシステムにおける医師約１００万人の来診コストは毎年１億７５００万ドルにも及ぶと見られている３５。ゆえに、この群の患者において、抗バイオフィルム活性が強力な抗生物質は、特に重要でありうる。重要なことに、細菌性角膜炎の治療に一般的に利用されている第四世代のフルオロキノロンであるモキシフロキサシンと比較して、ポリミキシンＢ／トリメトプリム＋リファンピシンでは、Ｓ．ａｕｒｅｕｓに対する抗バイオフィルム活性及びＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａに対する同等な活性の改善が見られることが実証された。
【０１１５】
また、リファンピシンとポリミキシンＢ／トリメトプリムの併用も、いずれかの化合物単独及びモキシフロキサシンと比較して、耐性を発現する傾向が低いことが実証された。この原因の一部として考えられるのは、リファンピシン、ポリミキシンＢ及びトリメトプリムがいずれも独特の作用機序を有すること、リファンピシンが、ＲＮＡポリメラーゼに結合することによって細菌のＤＮＡ転写を阻害すること、トリメトプリムが、ジヒドロ葉酸レダクターゼの阻害を介して細菌のＤＮＡ合成を阻害すること、ならびにポリミキシンＢが、グラム陰性菌の外膜と内膜を破壊するための界面活性剤として作用することである。これらの異なる作用様式を仮定すると、これらの阻害領域のそれぞれを克服するには複数の突然変異が必要とされるであろう。異種経路の同時標的化は、ＨＩＶ、マラリア及び結核をはじめとする、多様な感染症における既存の耐性を克服するための一般的な戦略である。Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ  ＲＪ，Ｍｅｌａｎｄｅｒ  Ｃ．Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｃｏｍｂａｔ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｂａｃｔｅｒｉａ．Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２０１３；３１及びＦｉｓｃｈｂａｃｈ  ＭＡ．Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ  ｆｏｒ  ｃｏｍｂａｔｉｎｇ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ２０１１；１４を参照。毒性に関して併用薬の予期しない影響がありうるが、リファンピシンとポリミキシンＢ／トリメトプリムは現行のＦＤＡ承認薬であり、安全性プロファイルが良好であるため、それらを併用することで、更なる薬剤開発に大きな利点がもたらされる可能性がある。
【０１１６】
要約すると、リファンピシン＋ポリミキシンＢ／トリメトプリムは、細菌性角膜炎治療に対応した広域スペクトルの抗菌作用と、迅速な殺菌作用と、抗バイオフィルム作用と、抵抗性頻度の低減を備える新規な抗生物質の併用を示し得る。更なる研究に向けて以前にＦＤＡによる承認を受けた薬物の併用を同定することによって、新規な抗菌治療薬に対し多大なニーズのある時代において迅速な開発の可能性が高まりつつある。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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