【手続補正書】
【提出日】平成19年5月25日(2007.5.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  ヘッジホッグタンパク質のある位置で非天然ポリマーに結合されたヘッジホッグタンパク質を含む組成物であって、該ポリマーがポリアルキレングリコール部分を含む当該組成物。
【請求項２】  少なくとも一つのポリアルキレン部分が、チオール基、アルデヒド基、マレイミド基、ビニルスルホン基、スクシンイミジル基、ハロアセテート基、複数のヒスチジン残基、ヒドラジン基及びアミノ基から選択する基によってヘッジホッグタンパク質に結合されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】  基が、チオール基である、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】  基が、マレイミド基である、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】  基が、ビニルスルホン基である、請求項２に記載の組成物。
【請求項６】  基が、ハロアセテート基である、請求項２に記載の組成物。
【請求項７】  基が、複数のヒスチジン残基である、請求項２に記載の組成物。
【請求項８】  カップリング基が、ヒドラジン基である、請求項２に記載の組成物。
【請求項９】  基が、アミノ基である、請求項２に記載の組成物。
【請求項１０】  基が、スクシンイミジル基である、請求項２に記載の組成物。
【請求項１１】  ヘッジホッグタンパク質を、一種より多くのポリマーに、一つより多くの位置で結合した、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】  ヘッジホッグタンパク質を、ソニックヘッジホッグ、インディアンヘッジホッグ及びデザートヘッジホッグよりなる群から選択する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】  ヘッジホッグタンパク質が、変異型ヘッジホッグタンパク質である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】  変異型ヘッジホッグタンパク質が、Ｎ末端システインが改変された任意のヘッジホッグタンパク質である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】  変異型ヘッジホッグタンパク質を、１６９番のアラニン残基が他のアミノ酸で置換されたソニックヘッジホッグタンパク質；１７５番のグリシン残基が他のアミノ酸残基で置換されたソニックヘッジホッグタンパク質；及び１７０番のアラニン残基が他のアミノ酸残基で置換されたデザートヘッジホッグタンパク質よりなる群から選択する、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１６】  ヘッジホッグタンパク質を、そのＮ末端システインにおいて、疎水性基により修飾した、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１７】  ヘッジホッグタンパク質が、ヘッジホッグアンタゴニストである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】  ヘッジホッグアンタゴニストが、抗体同族体である、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】  ヘッジホッグタンパク質が、ＣＨ３１０Ｔ１／２アッセイで測定して、前記のポリマーを欠くヘッジホッグタンパク質の効能を保持している、請求項１に記載の組成物。
【請求項２０】  ヘッジホッグが、ヘッジホッグ融合タンパク質である、請求項１に記載の組成物。
【請求項２１】  ヘッジホッグ融合タンパク質が、免疫グロブリン分子の一部を含む、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】  ヘッジホッグタンパク質が、次の特性:(ａ)ヘッジホッグ活性のアンタゴニストであること；(ｂ)疎水的に改変されていることの少なくとも一つを有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項２３】  式Ａ−[Ｓｐ]−Ｂ−[Ｓｐ]−Ｘ(式中、Ａは、ヘッジホッグタンパク質Ｂに随意的スペーサー[Ｓｐ]を介して結合されたポリアルキレングリコールポリマー部分であり；Ｘは、Ｂに結合された随意的疎水性部分である)で例示される構造を有する生物学的に活性なヘッジホッグタンパク質を含む組成物。
【請求項２４】  Ａが、Ｎ末端システインに結合されておらず、Ｂの何れのリジンにも結合されていない、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】  Ｎ末端及びＣ末端を有する生物学的に活性なヘッジホッグタンパク質であって、ポリマーに結合されたヘッジホッグはポリアルキレングリコール部分を含み、その結合は、ヘッジホッグのＮ末端以外の位置にあり且つヘッジホッグの何れのリジンでもない位置にある当該ヘッジホッグタンパク質。
【請求項２６】  ヘッジホッグ及びポリアルキレングリコール部分を、ヘッジホッグタンパク質が、ポリアルキレン部分を欠くヘッジホッグに対して、増大されたバイオアベイラビリティーを有するように配置した、請求項２３又は２５に記載のヘッジホッグタンパク質。
【請求項２７】  ヘッジホッグタンパク質を、ソニックヘッジホッグ、インディアンヘッジホッグ及びデザートヘッジホッグよりなる群から選択する、請求項２６に記載のヘッジホッグタンパク質。
【請求項２８】  ヘッジホッグタンパク質が、そのＮ末端システインにおいて、疎水性基により修飾されている、請求項２６に記載のヘッジホッグタンパク質。
【請求項２９】  疎水性基が、少なくとも一つのイソロイシンアミノ酸残基を含む、請求項２８に記載のヘッジホッグタンパク質。
【請求項３０】  ヘッジホッグタンパク質が、ポリマーに、ヘッジホッグのＣ末端又はその付近で結合されている、請求項２６に記載のヘッジホッグタンパク質。
【請求項３１】  ヘッジホッグタンパク質が、そのＣ末端又はその付近以外の部位でポリマーに結合されている、請求項２６に記載のヘッジホッグタンパク質。
【請求項３２】  ヘッジホッグタンパク質が、ヘッジホッグ融合タンパク質を含む、請求項２６に記載のヘッジホッグタンパク質。
【請求項３３】  ヘッジホッグ融合タンパク質が、免疫グロブリン分子の一部を含む、請求項３２に記載のヘッジホッグタンパク質。
【請求項３４】  ヘッジホッグタンパク質が、次の特性：(ａ)ヘッジホッグ活性の機能的アンタゴニストであること；(ｂ)疎水性基によって修飾されていることの内の少なくとも一つを有する、請求項２６に記載のヘッジホッグタンパク質。
【請求項３５】  ポリエチレングリコール部分に結合されたヘッジホッグタンパク質を含む結合体化ヘッジホッグタンパク質であって、そのヘッジホッグが不安定な結合によりポリエチレングリコール部分に結合されており、その不安定な結合が生化学的加水分解及び／又はタンパク質分解によって開裂され得る、当該結合体化ヘッジホッグタンパク質。
【請求項３６】  ポリマーが、約５〜４０キロダルトンの分子量を有する、請求項１又は２３に記載の組成物。
【請求項３７】  請求項記載のヘッジホッグ組成物を含む医薬組成物。
【請求項３８】  哺乳動物患者における潜在的な又は発生した症状又は病状をヘッジホッグタンパク質を用いて治療するための、ポリエチレングリコール部分に結合されたヘッジホッグを含むヘッジホッグ組成物。
【請求項３９】  ヘッジホッグが、ポリマーに、ヘッジホッグ上のＣ末端又はその付近の部位で結合されている、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４０】  ヘッジホッグが、ポリマーに、ヘッジホッグ上のＮ末端又はその付近以外の部位で結合されている、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４１】  ヘッジホッグが、ポリマーに、ヘッジホッグ上のＣ末端又はその付近以外の部位で結合されている、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４２】  ヘッジホッグが、次の特性：(ａ)ヘッジホッグ活性の機能的アンタゴニストであること；(ｂ)疎水性部分により修飾されていることの内の少なくとも一つを有する、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４３】  ヘッジホッグタンパク質のイン・ビボ又はインビトロ系におけるアベイラビリティーを延長させる方法であって、該ヘッジホッグを非天然ポリマー部分に結合させて結合体化ポリマー−ヘッジホッグ組成物を生成して、その結合体化ポリマー−ヘッジホッグ組成物をイン・ビボ又はインビトロ系に導入することを含む、当該方法。
【請求項４４】  ヘッジホッグが、ポリマーに、ヘッジホッグタンパク質上のＣ末端又はその付近の部位で結合されている、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】  ヘッジホッグが、ポリマーに、ヘッジホッグ上のＮ末端又はその付近以外の部位で結合されている、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】  ヘッジホッグが、ポリマーに、ヘッジホッグ上のＣ末端又はその付近以外の部位で結合されている、請求項４３に記載の方法。
【請求項４７】  ポリマーが、アルキレングリコールを含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４８】  導入されるポリマー結合されたヘッジホッグ組成物が、請求項２３に記載の組成物を含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４９】  ポリマー結合されたヘッジホッグ組成物が、ポリアルキレングリコールを固定化されたヘッジホッグに結合させることにより生成される、請求項４７に記載の方法。
【請求項５０】  ヘッジホッグを、樹脂上に固定化する、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】  樹脂が、カチオン交換樹脂である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】  ヘッジホッグタンパク質上のある位置で非天然ポリマーと結合されたヘッジホッグタンパク質を含む組成物であって、該ポリマーを、デキストラン、ポリビニルピロリドン、グリコペプチド及びポリアミノ酸よりなる群から選択する当該組成物。
【請求項５３】  ヘッジホッグタンパク質上のある位置で非天然ポリマーと結合されたヘッジホッグタンパク質を含む組成物であって、該ポリマーがヘテロポリマーを含み、それらの成分の一つがポリアルキレングリコール部分である当該組成物。
【請求項５４】  タンパク質の機能的に重要な領域を限定する方法であって、側鎖が改変剤による改変を受けやすいタンパク質のアミノ酸残基を同定し；適宜、かかる感受性の残基に改変剤による改変を受けさせ、かかる感受性の残基を独立に又は組合せて改変剤により改変して改変されたタンパク質を形成し;その改変タンパク質を機能につき試験し；そして活性に影響を及ぼす同定されたアミノ酸残基の改変タンパク質中の位置を構造−活性データから決定するステップを含む当該方法。
【請求項５５】  分子の機能的に重要な領域をマッピングする方法であって、該分子を分子上の少なくとも一つの特異的部位において異なる大きさと形状の一連の改変剤を用いて改変し;分子がそのように一連の改変剤を用いて改変されたときに分子の活性を測定し;そして如何なる大きさと形状においてかかる改変が分子の活性をブロックするかを測定するステップを含む当該方法。
【請求項５６】  前記の分子を改変するステップが、該分子をポリアルキレングリコール部分を用いて改変することを含む、請求項５５に記載の方法。