(57)【要約】  本発明は、４０ｍｇ酢酸グラチラマーを含むデポ製剤をＭＳ患者の筋肉内に投与することにより多発性硬化症（ＭＳ）を治療または改善するための組成物およびその使用方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）に罹患しているヒト患者または最初の臨床症状を発現したことがありかつ臨床的に明白な多発性硬化症を発症するリスクが高いと判定されるヒト患者においてＲＲＭＳの少なくとも１つの症状を軽減する方法であって、２〜６週間毎に４０ｍｇ用量の酢酸グラチラマー（ＧＡ）を含むデポ製剤の治療上有効な単回筋肉内注射のレジメンを前記患者に実施することを含み、前記レジメンが前記患者の少なくとも１つの症状を軽減するのに十分であり、前記症状が前記患者の再発の頻度、脳ＭＲＩの増強病変の数または新たな病変画像の数、および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアからなる群より選択される、方法。
【請求項２】
前記デポ製剤が４週間毎に１回投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
症状を軽減することが前記再発の頻度を低下させることを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
症状を軽減することが脳における増強病変の数もしくは体積または新たな病変の数を減少させることを含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
症状を軽減することが前記患者において、脳萎縮を減少させること、Ｇｄ増強病変の数もしくは体積を減少させること、Ｔ１強調増強病変の数もしくは体積を減少させること、または新たなＴ２強調病変の数を減少させることを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
症状を軽減することが前記患者のＥＤＳＳスコアを減少させることを含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記方法が２０ｍｇのＧＡの連日皮下投与または４０ｍｇのＧＡの週３回の皮下注射と少なくとも同程度に効果的に前記症状を軽減する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記患者が前記レジメンの開始前にＧＡ療法を受けたことがある、請求項１または７に記載の方法。
【請求項９】
前記デポ製剤がポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）、ポリ（グリコール酸）（ＰＧＡ）、およびその任意の組合せからなる群より選択される薬学的に許容される生分解性担体をさらに含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記生分解性担体がＰＬＧＡである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記デポ製剤が前記ＧＡを含む内部水相と、生分解性または非生分解性ポリマーを含む水不混和性ポリマー相と、外部水相とを含む微粒子の形態である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記デポ製剤が水中油中水型（ｗ／ｏ／ｗ）二重乳化工程によって調製される微粒子の形態である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記内部水相が前記ＧＡを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記水不混和性ポリマー相がＰＬＧＡを含む、請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記外部水相がポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリソルベート、ポリエチレンオキシド−ポリプロピレンオキシドブロックコポリマーおよびセルロースエステルから選択される界面活性剤を含む、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記デポ製剤が２０％〜３０％の固体を含む、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＧＡと前記薬学的に許容される生分解性担体の間の重量比が１：１〜１：１００である、請求項９〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＧＡと前記薬学的に許容される生分解性担体の間の重量比が１：５〜１：２５である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記デポ製剤が実質的に同じ用量のグラチラマーの即放製剤と比較して対象においてグラチラマーの長時間の放出または長時間の作用をもたらす、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記グラチラマーの約８０％が常時攪拌下３７℃にてＰＢＳ中で２２日以内に前記デポ製剤から放出される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記グラチラマーの約２０％が常時攪拌下３７℃にてＰＢＳ中で５日以内に前記デポ製剤から放出される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
再発寛解型多発性硬化症に罹患しているヒト患者においてＧＡ治療の耐容性を増大させる方法であって、皮下注射の頻度を２０ｍｇ用量のＧＡの連日皮下注射または各注射間に少なくとも１日を有して７日の期間にわたる４０ｍｇ用量のＧＡの３回の皮下注射から、２〜６週間毎の４０ｍｇ用量のＧＡのデポ製剤の単回筋肉内注射の治療上有効なレジメンに減らすことを含み、それにより前記患者においてＧＡ治療の耐容性を増大させる、方法。
【請求項２３】
再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）に罹患しているヒト患者においてＲＲＭＳの進行を抑えるまたは遅延させる方法であって、２〜６週間毎に４０ｍｇ用量の酢酸グラチラマー（ＧＡ）を含むデポ製剤の単回筋肉内注射の治療上有効なレジメンを前記ヒト患者に実施することを含む、方法。
【請求項２４】
前記レジメンが前記患者の（ａ）再発の頻度、（ｂ）増強病変の数もしくは体積、（ｃ）新たな病変の数、または（ｄ）総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアを改善するのに十分である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記レジメンが前記患者の再発の頻度、増強病変の数もしくは体積、新たな病変の数、および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアを改善するのに十分である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
再発寛解型多発性硬化症に罹患しているヒト患者において疾患活動性を抑える方法であって、２〜６週間毎に４０ｍｇ用量のＧＡのデポ製剤の単回注射の治療上有効なレジメンを前記患者に実施することを含み、前記レジメンが前記患者において再発、１２週間の確定された能力障害進行（ＣＤＰ）、新たな病変形成および既存の病変の増強を抑えるのに十分である、方法。
【請求項２７】
ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）と封入されるＧＡを含む第一の容器と、注射用の薬学的に許容される賦形剤を含む第二の別個の容器とを含む、キット。
【請求項２８】
４０ｍｇのＧＡと注射用の水（ＷＦＩ）とを含む、請求項２７に記載のキット。
【請求項２９】
前記第一の容器と前記第二の容器の内容物を混合することが希釈剤２ｍＬ当たり４０ｍｇのＧＡをもたらす、請求項２７または２８に記載のキット。
【請求項３０】
再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）の少なくとも１つの症状を軽減する方法、ＧＡ治療の耐容性を増大させる方法、ＲＲＭＳの進行を抑えるもしくは遅延させる方法、またはＲＲＭＳの活動性を抑える方法における使用のための、請求項２７〜２９のいずれか１項に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酢酸グラチラマーおよび他のグラチラマーの薬理学的に許容される塩の長時間作用型剤形に関する。具体的には、本発明は、酢酸グラチラマーの長時間放出のためのデポ製剤および他の埋め込み可能なシステムに関する。
【背景技術】
【０００２】
多発性硬化症（ＭＳ）は、中枢神経系（ＣＮＳ）の慢性で消耗性の自己免疫疾患である。ＭＳの疾患活動性は、脳の磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、能力障害の蓄積、ならびに再発の割合および重症度によってモニターできる。多発性硬化症には、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）を含む、複数の型がある。ＲＲＭＳに罹患している患者は、孤発性の増悪または再発、および寛解期間を経験する。
【０００３】
再発寛解型の多発性硬化症（ＭＳ）に対し、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）（酢酸グラチラマー）、ＴＹＳＡＢＲＩ（登録商標）（ナタリズマブ）、ＰＬＥＧＲＩＤＹ（登録商標）（ペグインターフェロンベータ１ａ）およびＺＩＮＢＲＹＴＡ（登録商標）（ダクリズマブ）を含む、複数の治療薬が承認されている。治療効果の様々な尺度が上記の治療薬について報告されている。重要な治療目標の１つは、疾患活動性の認められない状態（Ｎｏ  Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ）（ＮＥＤＡ）であり、新たな転帰尺度となった（Ｒｏｔｓｔｅｉｎら，ＪＡＭＡ  Ｎｅｕｒｏｌ．，２０１５，Ｖｏｌ．７２（２）：１５２−１５８）。
【０００４】
酢酸グラチラマー
酢酸グラチラマー（ＧＡ）としても知られ商標名Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）として市販されているＣｏｐｏｌｙｍｅｒ−１は、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−アラニン、Ｌ−チロシンおよびＬ−リジンを含有する合成ポリペプチドの混合物の酢酸塩を含む。アミノ酸の平均モル分率はそれぞれ０．１４１、０．４２７、０．０９５および０．３３８であり、Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ−１の平均分子量は５，０００〜９，０００ダルトンである。化学的には、酢酸グラチラマーは、Ｌ−アラニン，Ｌ−リジンおよびＬ−チロシンを含むＬ−グルタミン酸ポリマー酢酸（塩）と命名されている。その構造式は、（Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ｔｙｒ）ｘ・ｘＣＨ３ＣＯＯＨ；（Ｃ５Ｈ９ＮＯ４・Ｃ３Ｈ７ＮＯ２・Ｃ６Ｈ１４Ｎ２Ｏ２・Ｃ９Ｈ１１ＮＯ３）ｘ・ｘＣ２Ｈ４Ｏ２［ＣＡＳ−１４７２４５−９２−９］である。Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）は、透明で無色ないしわずかに黄色の無菌で無発熱性の皮下注射用溶液である。１ミリリットルに酢酸グラチラマーが２０ｍｇまたは４０ｍｇおよびマンニトールが４０ｍｇ含まれる。溶液のｐＨの範囲は約５．５〜７．０である（Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標），Ｆｕｌｌ  Ｐｒｅｓｃｒｉｂｉｎｇ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ，２００９）。Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）は、最初の臨床症状を発現したことがありＭＲＩの特徴が多発性硬化症と一致する患者を含む、ＲＲＭＳ患者での再発の頻度の低下に適応される（Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標），酢酸グラチラマー注射，Ｆｕｌｌ  Ｐｒｅｓｃｒｉｂｉｎｇ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ，２０１６）。
【０００５】
作用機序
酢酸グラチラマーの作用機序は知られていないが、このコポリマーの重要な免疫学的特性がいくつか明らかにされている。Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ−１を投与すると、Ｔ細胞集団が炎症誘発性Ｔｈ１細胞から炎症性応答を抑制する調節性Ｔｈ２細胞に移行する（ＦＤＡ  Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）ラベル）。Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ−１がミエリン塩基性タンパク質に類似していることを考慮すると、Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ−１はデコイとしての役割も果たし、ミエリンに対する自己免疫応答の方向を変えるものと思われる。しかし、血液脳関門の完全性は、少なくとも治療の初期段階では、Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ−１によって大きく影響されない。
【０００６】
Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ−１は、例えば様々な種でのミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）（Ｓｅｌａら，Ｂｕｌｌ  Ｉｎｓｔ．Ｐａｓｔｅｕｒ（１９９０）８８  ３０３−３１４）、プロテオリピドタンパク質（ＰＬＰ）（Ｔｅｉｔｅｌｂａｕｍら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．（１９９６）６４  ２０９−２１７）およびミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質（ＭＯＧ）（Ｂｅｎ−Ｎｕｎら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．（１９９６）２４３（Ｓｕｐｐｌ．１）Ｓ１４−Ｓ２２）などの、あらゆるミエリン抗原を含むマウス脊髄ホモジネート（ＭＳＣＨ）を含む様々な脳炎惹起性薬剤によって誘導される実験的アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ）を抑制することが示されている、非自己抗原である。ＥＡＥは、多発性硬化症の認められたモデルである。
【０００７】
第ＩＩＩ相臨床試験で、Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ−１の連日皮下注射が、増悪寛解型多発性硬化症の能力障害の進行速度を低下させ再発率を低下させることが見出された（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＫＰ，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ（１９９５），１，６５−７０）。Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ−１療法は現時点で、毎日または週３回の皮下投与に限られている。経口摂取または吸入によるＣｏｐｏｌｙｍｅｒ−１での治療が米国特許第６，２１４，７９１号に開示されるが、これらの投与経路はヒト患者に臨床効果を有するとは明らかにされていない。
【０００８】
承認用量
Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）は１９９６年以来、連日皮下注射によって投与される２０ｍｇの用量で再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）の治療に承認されている。２０１４年以来、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）は少なくとも４８時間の間隔を空けて実施される、週３回の注射によって投与される４０ｍｇの用量でも承認されている。Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）を用量２０ｍｇで連日投与する場合と比較して、後者の用量およびレジメンは、同じ効果を維持しつつ、１年間の注射回数を約２００回低減する。  
【０００９】
副作用
現時点で、多発性硬化症のいくつかの承認された治療は、活性物質の自己注射を含む。よくみられる注射部位での問題は、刺激、過敏症、炎症、疼痛および場合によっては壊死（インターフェロン１β治療の場合）ならびにその結果生じる患者コンプライアンスの問題を含む。
【００１０】
副作用としては一般に、注射部位のしこり（注射部位反応）、疼痛、発熱、および悪寒が挙げられる。これらの副作用は一般に軽度の性質である。反応が注射から数分後に起こることもり、その際に潮紅、息切れ、不安および頻脈がある。これらの副作用は３０分以内に治まる。時間の経過とともに、脂肪組織の局所的破壊に起因し脂肪萎縮として知られる、注射部位での目に見えるへこみが生じることもある。このため、別の投与方法が望ましい。
【００１１】
ＦＤＡの処方ラベルによれば、酢酸グラチラマーの重篤な副作用が複数報告されており、このようなものとして、身体の心血管系、消化器系（肝臓を含む）、血液およびリンパ系、筋骨格系、神経系、呼吸器系、特殊感覚（特に眼球）、泌尿生殖器系に対する重篤な副作用が挙げられ、代謝および栄養障害も報告されているが、酢酸グラチラマーと上記の有害作用の間の関係は明確に確立されていない（ＦＤＡ  Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）ラベル）。
【００１２】
デポシステム
低分子量および高分子量の送達には静脈内（ＩＶ）注射、筋肉内（ＩＭ）注射または皮下（ＳＣ）注射による非経口経路が最も一般的で効果的な形態である。しかし、針刺しによる疼痛、不快感および不便さが、この薬物送達様式を患者が最も好まないものにする。このため、注射の総回数を最小限に減らすことができる何らかの薬物送達技術が好ましい。実際に薬物投与の頻度のこのような減少は、緩徐であるが予測可能な様式で薬物を放出できる注射用デポ製剤の使用によって達成し得、その結果としてコンプライアンスを向上させる。多くの低分子量薬物では、その用量に応じて、デポシステムを用いることにより注射頻度を連日から月ごとにまたは場合によってはそれより長い期間（６か月）に１回または２回へと減らすことが可能かもしれない。高分子量薬物、特にタンパク質またはポリペプチド薬物に関しては、デポ製剤の開発はほとんど成功していない。
【００１３】
微粒子、埋め込み物およびゲルは、体内での薬物放出時間を長くするために実際に用いられている最も一般的な形態の生分解性ポリマー装置である。微粒子は注射直前に水性溶媒に懸濁され、懸濁液中に４０％もの固体を含ませることができる。埋め込み物／ロッド製剤は、水性溶媒を必要とせず乾燥状態で特殊な針を用いてＳＣ／ＩＭ組織に送達される。ロッド／埋め込み物のこの特徴がり、より大きな製剤の質量および薬物含量を送達することを可能にする。さらに、ロッド／埋め込み物では、微粒子に比べ埋め込みでのはるかに小さな面積のため、初期バーストの問題が最小限に抑えられる。生分解性システムに加えて、体外に装着できる非生分解性埋め込み物および注入ポンプがある。非生分解性埋め込み物は、ＳＣ／ＩＭ組織内に装置を埋め込むためにだけでなく、薬物放出期間の後にそれらを取り外すためにも医師を必要とする。
【００１４】
微粒子調製物を含有する注射用組成物は諸問題の影響を特に受けやすい。微粒子懸濁液は、他のタイプの注射用懸濁液での０．５〜５％の固体と比較して４０％もの固体を含有し得る。さらに、注射用デポ製品で使用される微粒子は、ＩＭまたはＳＣ投与に推奨される５μｍ未満の粒子径と比較して、大きさの範囲が最大約２５０μｍ（平均値６０〜１００μｍ）である。より高い固体の濃度、ならびにより大きな固体の粒子径は、より大きなサイズの針（約１８〜２１ゲージ）を注射のために必要とする。全体的にみれば、より大きくて不快感を伴う針の使用は頻度が低いものの、患者は依然として、小さい針での毎日の薬物注射よりも、はるかに投与頻度の低い剤形の方を好む。
【００１５】
ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）の生分解性ポリエステルおよびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）またはポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）と呼ばれるラクチドとグリコリドのコポリマーが生分解性剤形で使用される最も一般的なポリマーである。ＰＬＡは疎水性分子であり、ＰＬＧＡは親水性グリコリド基がより多数存在するためＰＬＡより速く分解する。これらの生体適合性ポリマーは、エステル結合のランダムな非酵素的加水分解を受けて、体内の通常の化合物である、乳酸およびグリコール酸を形成する。吸収性の縫合糸、クリップおよび埋め込み物は、これらのポリマーの応用として最も古いものである。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅは１９７０年に最初の合成吸収性縫合糸（ＤＥＸＯＮ（登録商標））を開発した。徐放剤形でのＰＬＧＡポリマーの使用について記載する最初の特許が１９７３年に登場した（米国特許第３，７７３，９１９号）。いくつかの実施形態では、生分解性ポリマーは、ＰＬＧＡ、ＰＬＡ、ＰＧＡおよびその任意の組合せから選択される。それぞれの可能性は本発明の個々の実施形態を表す。
【００１６】
現在、ＰＬＧＡポリマーは複数の供給業者から市販されている。ＰＬＧＡおよびＰＬＡ以外にも、デンプン、デンプン誘導体、デキストランおよび非ＰＬＧＡ合成ポリマーなどの天然のセルロース系ポリマーが上記のようなシステムでの生分解性ポリマーとして検討されている。
【００１７】
一部の本発明者の国際公開第２０１１／０８０７３３号は、グラチラマーを含む長時間作用型非経口医薬組成物を記載する。Ｋｈａｎら（Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．２０１３，Ｖｏｌ．７３，７０５−７１３ページ）は、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）の患者で週３回投与される４０ｍｇ酢酸グラチラマーの有効性および安全性を評価する試験を記載している。米国特許第８，２３２，２５０号、同第８，３９９，４１３号、同第８，９６９，３０２号、同第９，１５５，７７６号および同第９，４０２，８７４号は、７日間にわたって４０ｍｇ  ＧＡを３回注射することにより再発寛解型多発性硬化症の症状を軽減する方法を記載する。
【００１８】
これまで、酢酸グラチラマーの長時間作用型剤形はＲＲＭＳに罹患したヒトでの安全性および有効性に関して試験されておらず、したがって、ヒトの治療用には市販されていない。上記の製剤は多数の患者に極めて有益であると思われることから、このような状況では医療上の必要性が満たされているとは言えない。
【発明の概要】
【００１９】
本発明は、再発寛解型多発性硬化症を治療するための組成物および方法であって、月１回用量４０ｍｇの薬学的に許容されるグラチラマーの塩、特に酢酸グラチラマー（ＧＡ）を投与するデポ製剤の形態での組成物の単回非経口投与または埋め込みを含む、組成物および方法を提供する。
【００２０】
これより、本発明の原理に従う長時間作用型の医薬組成物およびデポ製剤が市販の連日のまたは週３回の注射用剤形、すなわちＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）と同等の、またはこれより優れた治療効果をもたらすことを初めて開示する。さらに、驚くべきことに、本発明の原理に従う４０ｍｇ酢酸グラチラマーのデポ剤の４週間に１回の単回投与が、２０ｍｇ酢酸グラチラマーの連日注射または４０ｍｇ酢酸グラチラマーの週３回の投与と少なくとも同程度の治療効果を示し、それによりＧＡ投与（注射）の必要性をそれぞれ２８倍および１２倍低減することがわかった。重要なのは、ＧＡの総投与量がそれぞれ１４分の１および１２分の１に低減されるにもかかわらず、治療効率が同等であるということである。本発明に開示される方法によるＭＳ患者の治療は、既に利用可能な酢酸グラチラマー療法と比較して、必要とされる注射の回数が少なく、ＧＡの投与量がより少ない。
【００２１】
さらに、本発明による方法は、疾患活動性の認められない状態（Ｎｏ  Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ）（ＮＥＤＡ）を達成することにおいて、ＴＹＳＡＢＲＩ（登録商標）（ナタリズマブ）、ＰＬＥＧＲＩＤＹ（登録商標）（ペグ化インターフェロンベータ１ａ）およびＺＩＮＢＲＹＴＡ（登録商標）（ダクリズマブ）などの他のＭＳ薬物で報告されている１年間のＮＥＤＡの成績と比較して１年間の治療後に実質的に優れた成績を有したことが本明細書に初めて開示される。したがって、本発明の原理に従う組成物による治療は、既知の治療法と比較して疾患活動性の認められない状態（Ｎｏ  Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ）の可能性を高める。
【００２２】
本発明は、一態様では、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）に罹患しているヒト患者または最初の臨床症状を発現したことがあり臨床的に明白な多発性硬化症を発症するリスクが高いと判定されるヒト患者でＲＲＭＳの少なくとも１つの症状を軽減する方法であって、患者に４０ｍｇ用量の酢酸グラチラマー（ＧＡ）を含むデポ製剤の治療上有効な単回筋肉内注射のレジメンを２〜６週間毎に実施することを含み、レジメンが患者の少なくとも１つの症状を軽減するのに十分であり、症状が患者の再発の頻度、脳ＭＲＩの増強病変の数または新たな病変画像の数および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアからなる群より選択される、方法を提供する。
【００２３】
ある特定の実施形態では、デポ製剤を３〜５週間に１回投与する。ある特定の実施形態では、デポ製剤を３週間に１回投与する。ある特定の実施形態では、デポ製剤を４週間に１回投与する。ある特定の実施形態では、デポ製剤を５週間に１回投与する。
【００２４】
ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、再発の頻度を低下させることを含む。
【００２５】
ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、脳における増強病変の数もしくは体積または新たな病変の数を減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者において、脳萎縮を減少させること、Ｇｄ増強病変の数もしくは体積を減少させること、Ｔ１強調増強病変の数もしくは体積を減少させること、または新たなＴ２強調病変を減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者の脳でのＧｄ増強病変の平均累積数を減少させること、新たなＴ２病変の平均数を減少させること、Ｔ２病変の総体積を減少させること、またはＴ１強調画像上の増強病変の累積数を減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者において強調Ｔ１スキャン上の新たな低強度病変の数を減少させること、または患者において強調Ｔ１スキャン上の低強度病変の総体積を減少させることを含む。
【００２６】
ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者のＥＤＳＳスコアを減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者のＥＤＳＳスコアを少なくとも０．５点減少させることを含む。
【００２７】
ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者において、作業生産性および活動障害と全般的健康状態（ＷＰＡＩ−ＧＨ）に関するアンケートにより、またはＥｕｒｏＱｏＬ（ＥＱ−５Ｄ）アンケートにより測定される、能力障害レベルを低下させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者において歩行指標（Ａｍｂｕｌａｔｉｏｎ  Ｉｎｄｅｘ）の変化を減少させることを含む。
【００２８】
上記の方法のある特定の実施形態では、この方法は、少なくとも２０ｍｇのＧＡの連日皮下投与または４０ｍｇのＧＡの週３回の皮下注射と同程度に効果的に症状を軽減する。
【００２９】
ある特定の実施形態では、デポ製剤は患者により筋肉内に投与される。ある特定の実施形態では、デポ製剤は三角筋内に注射される。
【００３０】
ある特定の実施形態では、患者は、レジメンの開始前にＧＡ療法を受けたことがない。ある特定の実施形態では、患者は、レジメンの開始前にＧＡ療法を受けたことがある。ある特定の実施形態では、患者は、ＭＲＩスキャンにより検出可能な大脳病変を少なくとも１つ有し、病変は脳組織炎症、ミエリン鞘損傷または軸索損傷に関連する。ある特定の実施形態では、病変は、脳ＭＲＩで見える脱髄性白質病変であり、白質病変は、直径が少なくとも３ｍｍである。ある特定の実施形態では、患者は最初の臨床症状を発現したことがあり、最初の臨床症状としては視神経炎、視界のぼやけ、複視、不随意の急速眼球運動、失明、平衡感覚喪失、振戦、運動失調、眩暈、四肢のぎこちなさ、協調運動障害、１つもしくは複数の四肢の脱力、筋緊張異常、筋硬直、攣縮、刺痛、錯感覚、灼熱感、筋肉痛、顔面痛、三叉神経痛、突き刺すような鋭い痛み、焼けるようなひりひりする痛み、発話速度の低下、不明瞭な発語、発話リズムの変化、嚥下障害、疲労、膀胱の問題（尿意切迫、頻尿、残尿および失禁を含む）、腸の問題（便秘および腸制御の喪失を含む）、陰萎、性的興奮の減退、熱に対する感覚、感度の喪失、短期記憶の喪失、集中力の低下または判断力もしくは論理的思考力の低下の臨床症状が挙げられる。
【００３１】
ある特定の実施形態では、注射直後の反応の頻度、注射直後の反応の重症度または注射部位反応の頻度が２０ｍｇのＧＡの連日皮下投与または４０ｍｇのＧＡの週３回の皮下注射と比べ低下される。
【００３２】
ある特定の実施形態では、デポ製剤は、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）、ポリ（グリコール酸）（ＰＧＡ）およびその任意の組合せからなる群より選択される薬学的に許容される生分解性担体をさらに含む。ある特定の実施形態では、生分解性担体はＰＬＧＡである。
【００３３】
ある特定の実施形態では、デポ製剤は、ＧＡを含む内部水相と、生分解性または非生分解性ポリマーを含む水不混和性ポリマー相と、外部水相とを含む微粒子の形態である。
【００３４】
ある特定の実施形態では、デポ製剤は、水中油中水型（ｗ／ｏ／ｗ）二重乳化工程によって調製される微粒子の形態である。ある特定の実施形態では、内部水相はＧＡを含む。ある特定の実施形態では、水不混和性ポリマー相はＰＬＧＡを含む。
【００３５】
ある特定の実施形態では、外部水相は、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリソルベート、ポリエチレンオキシド−ポリプロピレンオキシドブロックコポリマーおよびセルロースエステルから選択される界面活性剤を含む。ある特定の実施形態では、界面活性剤はＰＶＡである。
【００３６】
ある特定の実施形態では、デポ製剤は２ｍＬの注射用水（ＷＦＩ）で投与される。ある特定の実施形態では、デポ製剤は１０％〜４０％の固体を含む。ある特定の実施形態では、デポ製剤は２０％〜３０％の固体を含む。ある特定の実施形態では、デポ製剤は２５％の固体を含む。
【００３７】
ある特定の実施形態では、ＧＡと薬学的に許容される生分解性担体の間の重量比は１：１〜１：１００である。ある特定の実施形態では、ＧＡと薬学的に許容される生分解性担体の間の重量比は１：５〜１：２５である。
【００３８】
ある特定の実施形態では、デポ製剤は、実質的に同じ用量のグラチラマー即放製剤と比較して、対象での長時間の放出または長時間の作用をもたらす。ある特定の実施形態では、常時攪拌下３７℃でのＰＢＳ中で、グラチラマーの約８０％が２２日以内にデポ製剤から放出される。ある特定の実施形態では、常時攪拌下３７℃でのＰＢＳ中で、グラチラマーの約２０％が５日以内にデポ製剤から放出される。
【００３９】
本発明は、別の態様で、再発寛解型多発性硬化症に罹患しているヒト患者でのＧＡ治療の耐容性を増大させる方法であって、皮下注射の頻度を２０ｍｇ用量のＧＡの連日の皮下注射または注射毎に少なくとも１日空けて７日間にわたる４０ｍｇ用量のＧＡの３回の皮下注射から、２〜６週間毎の４０ｍｇ用量のＧＡのデポ製剤の単回筋肉内注射の治療上有効なレジメンに減らし、それにより患者におけるＧＡ治療の耐容性を増大させることを含む、方法をさらに提供する。
【００４０】
ある特定の実施形態では、デポ製剤は３〜５週間に１回投与される。ある特定の実施形態では、デポ製剤は４週間に１回投与される。
【００４１】
ある特定の実施形態では、再発寛解型多発性硬化症に罹患している患者でＧＡ治療の耐容性を増大させることは、注射の頻度を減らすことを含む。ある特定の実施形態では、再発寛解型多発性硬化症に罹患している患者でＧＡ治療の耐容性を増大させることは、注射部位反応の頻度を低下させることを含む。
【００４２】
本発明は、別の態様で、再発寛解型多発性硬化症に罹患しているヒト患者または最初の臨床症状を発現したことがあり臨床的に明白な多発性硬化症を発症するリスクが高いと判定されるヒト患者での再発の頻度を低下させる方法であって、患者に４０ｍｇ用量のＧＡのデポ製剤の治療上有効な単回注射のレジメンを２〜６週間毎に実施することを含み、レジメンが患者での再発の頻度を低下させるのに十分である、方法をさらに提供する。
【００４３】
本発明は、別の態様で、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）に罹患しているヒト患者でのＲＲＭＳの進行を抑える、または遅延させる方法であって、ヒト患者に４０ｍｇ用量の酢酸グラチラマー（ＧＡ）を含むデポ製剤の治療上有効な単回筋肉内注射のレジメンを２〜６週間毎に実施することを含む、方法をさらに提供する。
【００４４】
ある特定の実施形態では、レジメンは、患者の（ａ）再発の頻度、（ｂ）増強病変の数もしくは体積、（ｃ）新たな病変の数、または（ｄ）総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアを改善するのに十分である。ある特定の実施形態では、レジメンは、患者の再発の頻度、増強病変の数または体積、新たな病変の数および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアを改善するのに十分である。
【００４５】
本発明は、別の態様で、再発寛解型多発性硬化症に罹患しているヒト患者での疾患の活動性を抑える方法であって、患者に４０ｍｇ用量のＧＡのデポ製剤の治療上有効な単回注射のレジメンを２〜６週間毎に実施することを含み、レジメンが患者での再発、１２週間の確定された能力障害進行（ＣＤＰ）、新たな病変形成および既存の病変の増強を抑えるのに十分である、方法をさらに提供する。
【００４６】
本発明は、別の態様で、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）と封入されたＧＡを含む第一の容器と、注射用の薬学的に許容される賦形剤を含む第二の別個の容器とを含む、キットをさらに提供する。
【００４７】
ある特定の実施形態では、キットは、４０ｍｇのＧＡと２〜１０ｍｌのＷＦＩとを含む。ある特定の実施形態では、第一の容器の内容物を賦形剤２ｍｌと混合することにより、懸濁液２ｍｌ当たり４０ｍｇのＧＡが得られる。ある特定の実施形態では、キットは、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）の少なくとも１つの症状を軽減する方法、ＧＡ治療の耐容性を増大させる方法、ＲＲＭＳの進行を抑えるもしくは遅延させる方法、またはＲＲＭＳの活動性を抑える方法で使用するためのものである。
【００４８】
以下に記載する詳細な説明から本発明のさらなる実施形態および全適用範囲が明らかになるであろう。ただし、この詳細な説明から本発明の趣旨と範囲に含まれる様々な改変および修正が当業者に明らかになることから、詳細な説明および具体例は、本発明の好ましい実施形態を示すと同時に、単なる例示として記載されることを理解するべきである。
【図面の簡単な説明】
【００４９】
【図１】Ｃ５７ＢＬ／６マウスの生理食塩水対照群、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）群（２ｍｇのＧＡ、第０〜８日）およびＧＡデポ剤群（４ｍｇのＧＡ、第０日）の平均臨床スコアの結果を示す図である。＊は、一因子ＡＮＯＶＡ、次いで不等分散を仮定した片側ｔ検定を実施し、未治療対照と比較して全治療群についてＰ＜０．０５であったことを表す。Ｎ＝２０／グループ、＋／−標準誤差。
【図２】Ｃ５７ＢＬ／６マウスの生理食塩水対照群、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）群（２ｍｇのＧＡ、第０〜８日）およびＧＡデポ剤（４ｍｇのＧＡ、第０日）の平均体重の結果を示す図である。一因子ＡＮＯＶＡ、次いで不等分散を仮定した片側ｔ検定を実施し、＊は、未治療対照と比較して全治療群についてＰ＜０．０５であったことを表し、＊＊は、未治療対照と比較してＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）群がＰ＜０．０５であったことを表す。Ｎ＝２０／グループ、＋／−標準誤差。
【発明を実施するための形態】
【００５０】
（発明の詳細な説明）
本発明は酢酸グラチラマーの長時間作用型デポ製剤を提供し、それは連日または週３回のＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）注射と比べ同等の、またはこれより優れた治療効果をもたらし、それにより患者コンプライアンスを向上させる。同等のまたは優れた治療効果をもたらすことに加えて、本発明の長時間作用型の注射または埋め込み物は高頻度の注射に起因する有害副作用を軽減する。
【００５１】
本発明は、ＭＳ患者に対する現在の標準治療、すなわち注射による２０ｍｇのＧＡ連日投与が、総使用薬物量および侵襲的投与の頻度の点で必要以上に攻撃的であるという驚くべき発見に基づく。具体的には、驚くべきことに、４０ｍｇのＧＡを２８日に１回投与すれば有益な臨床効果を得るのに十分であり、その臨床効果は、総用量が５６０ｍｇになるよう２８日間にわたって連日投与されるＧＡの有益な臨床効果と少なくとも同等であることがわかった。本発明はこのように、現時点でもなお用いられている最初の標準治療と比較して、投与量が１４分の１に減少しかつ投与頻度が２８分の１に減少したＭＳを治療する方法を提供する。
【００５２】
本発明はさらに、４０ｍｇのＧＡの週３回投与を含む、ごく最近のＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）治療レジメンより優れている。この場合、本発明に従いＲＲＭＳを治療することは、総投与量および投与頻度での１２倍の減少をもたらす。
【００５３】
本発明は、一態様で、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）に罹患しているヒト患者、または最初の臨床症状を発現したことがあるヒト患者、または臨床的に明白な多発性硬化症を発症するリスクが高いと判定されるヒト患者でのＲＲＭＳの少なくとも１つの症状を軽減する方法であって、患者に少なくとも２０ｍｇ用量のグラチラマーまたは任意の薬学的に許容されるグラチラマーの塩を含む長時間作用型デポ製剤の治療上有効な単回注射のレジメンを２〜６週間毎に実施することを含み、レジメンが患者の少なくとも１つの症状を軽減するのに十分であり、症状が患者の再発の頻度、脳ＭＲＩの増強病変の数または新たな病変画像の数および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアからなる群より選択される、方法を提供する。
【００５４】
本発明は、一態様で、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）に罹患しているヒト患者、または最初の臨床症状を発現したことがあるヒト患者、または臨床的に明白な多発性硬化症を発症するリスクが高いと判定されるヒト患者でのＲＲＭＳの少なくとも１つの症状を軽減する方法であって、患者に少なくとも２０ｍｇ用量のグラチラマーまたは任意の薬学的に許容されるグラチラマーの塩を含む長時間作用型デポ製剤の治療上有効な単回注射のレジメンを２〜６週間毎に実施することを含み、レジメンが患者の少なくとも１つの症状を軽減するのに十分であり、症状が患者の再発の頻度、脳ＭＲＩの増強病変の数または新たな病変画像の数および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアからなる群より選択される、方法を提供する。
【００５５】
ある特定の実施形態では、デポ製剤を３〜５週間に１回投与する。ある特定の実施形態では、デポ製剤を４週間に１回投与する。
【００５６】
本明細書で使用される「長時間作用型」という用語は、対象の体循環全体または対象の局所的作用部位にグラチラマー塩の長時間放出、徐放または持続放出をもたらす組成物を指す。この用語はさらに、対象において長時間の、徐放性の、または持続性の作用時間（薬力学）をもたらす組成物を指し得る。必要とされる予想作用時間に応じて、本発明の各デポ剤または埋め込み型装置は通常、４週間にわたり１回〜４週ごとに、１年間にわたり１３回放出されるよう設計された、約４０〜５２０ｍｇの有効成分を含有する。
【００５７】
本明細書で使用される「治療すること」という用語は、多発性硬化症発症後の少なくとも１つの症状の抑制または軽減を指す。多発性硬化症発症後によくみられる症状としては、特に限定されないが、視力の低下または喪失、つまずきおよび一定しない歩行、不明瞭な発語、ならびに頻尿および失禁が挙げられる。さらに、多発性硬化症は、気分の変化および抑うつ、筋攣縮ならびに重度麻痺を引き起こし得る。
【００５８】
本明細書で使用される「ＲＲＭＳの少なくとも１つの症状を軽減すること」という語句は、ＲＲＭＳの症状の重症度または症状の頻度での任意の有益な変化を指す。この語句はさらに、未治療のＲＲＭＳ患者と比較して、または他の治療法、薬物もしくはレジメンにより治療されるＲＲＭＳ患者と比較してＲＲＭＳ症状の進行を抑える、または遅延させることを包含する。
【００５９】
本明細書で使用される「臨床的に明白な多発性硬化症を発症するリスクが高いと判定されるヒト患者」という語句は、少なくとも１つのＲＲＭＳ発症リスク群に含まれることが明らかな患者（１つまたは複数）を指す。ＲＲＭＳリスク群はかなり以前より知られており、例えばＭｃＫａｙら（Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｉｎｔ．，２０１５，Ｖｏｌ．２０１５，Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  ８１７２３８）により概説されている。ある特定の実施形態では、臨床的に明白な多発性硬化症を発症するリスクが高いと判定されるヒト患者は、ＭＲＩの特徴が多発性硬化症と一致する。ある特定の実施形態では、臨床的に明白な多発性硬化症を発症するリスクが高いと判定されるヒト患者は、最初の臨床症状を発現したことがあり、かつＭＲＩの特徴が多発性硬化症と一致する。
【００６０】
本明細書で使用される「多発性硬化症」という用語は、本明細書に既に記載した症状の１つまたは複数を伴う中枢神経系の自己免疫疾患を指す。
【００６１】
本明細書で使用される「酢酸グラチラマー」という用語は、以前はＣｏｐｏｌｙｍｅｒ  １として知られ、商標名Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）で販売される化合物を指し、４種類の天然アミノ酸：Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−アラニン、Ｌ−チロシンおよびＬ−リジンをそれぞれ０．１４１、０．４２７、０．０９５および０．３３８の平均モル分率で含有する、合成ポリペプチドの酢酸塩を包含する。Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）中の酢酸グラチラマーの平均分子量は４，７００〜１１，０００ダルトンであり（ＦＤＡ  Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）ラベル）、アミノ酸の数は約１５〜約１００アミノ酸の範囲である。この用語は、同化合物の化学的誘導体および類似体も指す。同化合物は通常、米国特許第５，９８１，５８９号；同第６，０５４，４３０号；同第６，３４２，４７６号；同第６，３６２，１６１号；同第６，６２０，８４７号；および同第６，９３９，５３９号のいずれかに明記されている通りに調製され特徴付けられる。
【００６２】
いくつかの実施形態では、酢酸グラチラマーは、グルタミン酸約０．１４、アラニン約０．４３、チロシン約０．１０およびリジン約０．３３のモル比でＬ−アラニン、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−リジンおよびＬ−チロシンの酢酸塩を含む。他の実施形態では、酢酸グラチラマーまたはその他の薬学的に許容されるグラチラマーの塩は、アミノ酸を約１５〜約１００個含む。ある特定の実施形態では、埋め込み型デポ剤は皮下または筋肉内への埋め込みに適している。別の実施形態では、長時間作用型非経口医薬組成物は、グラチラマー塩のための薬学的に許容される生分解性または非生分解性の担体を含む。いくつかの実施形態では、担体は、ＰＬＧＡ、ＰＬＡ、ＰＧＡ、ポリカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアルカン酸無水物、ゼラチン、コラーゲン、酸化セルロースおよびポリホスファゼンから選択される。いくつかの実施形態では、担体は、ＰＬＧＡ、ＰＬＡ、ＰＧＡおよびその任意の組合せから選択される。各可能性は本発明の個々の実施形態を表す。
【００６３】
ある特定の実施形態では、改善される少なくとも１つの症状は、再発の頻度および脳ＭＲＩの増強病変の数または新たな病変画像の数である。
【００６４】
ある特定の実施形態では、改善される少なくとも１つの症状は、患者の脳ＭＲＩの増強病変の数または新たな病変画像の数および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアである。
【００６５】
ある特定の実施形態では、改善される少なくとも１つの症状は、患者の再発の頻度および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアである。
【００６６】
ある特定の実施形態では、改善される少なくとも１つの症状は、患者の再発の頻度、脳ＭＲＩの増強病変の数または新たな病変画像の数、および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアである。
【００６７】
コポリマーは、当業者が利用可能な任意の方法により作製できる。例えば、溶液中で所望のモル比のアミノ酸を用いる縮合条件下で、または固相合成法によりコポリマーを作製できる。縮合条件としては、あるアミノ酸のカルボキシル基を別のアミノ酸のアミノ基と縮合させてペプチド結合を形成させるために適切な温度、ｐＨ、および溶媒条件が挙げられる。縮合剤、例えばジシクロヘキシルカルボジイミドを用いて、ペプチド結合の形成を促進できる。
【００６８】
いくつかの実施形態では、組成物は、特に限定されないが、硫酸塩、ピロ硫酸塩、硫酸水素塩、亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、酢酸塩、硝酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプリン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、トコフェリルコハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−ジオアート、ヘキシン−１，６−ジオアート、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、β−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホナート、ｐ−トルエンスルホン酸塩、マンデル酸塩などの塩を含めた他の任意の薬学的に許容されるグラチラマーの塩を含み得る。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。
【００６９】
ある特定の実施形態では、剤形として、特に限定されないが、生分解性注射用デポシステム、例えばＰＬＧＡ系注射用デポシステム；非ＰＬＧＡ系注射用デポシステム、および注射用生分解性ゲルまたは分散液剤が挙げられる。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。本明細書で使用される「生分解性」という用語は、少なくとも部分的に、周囲の組織液中に存在する物質との接触によって、または細胞の作用によって、時間とともにその表面で侵食される、または分解する成分を指す。具体的には、生分解性成分は、特に限定されないが、ポリラクチド、例えばポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）、すなわちＰＬＡなどの乳酸系ポリマー；ポリグリコリドもしくはポリ（グリコール酸）（ＰＧＡ）、例えばＬＡＣＴＥＬ（登録商標）などのグリコール酸系ポリマー；ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、すなわちＰＬＧＡ（ＲＥＳＯＭＥＲ（登録商標）ＲＧ−５０４、ＲＥＳＯＭＥＲ（登録商標）ＲＧ−５０２、ＲＥＳＯＭＥＲ（登録商標）ＲＧ−５０４Ｈ、ＲＥＳＯＭＥＲ（登録商標）ＲＧ−５０２Ｈ、ＲＥＳＯＭＥＲ（登録商標）ＲＧ−５０４Ｓ、ＲＥＳＯＭＥＲ（登録商標）ＲＧ−５０２Ｓ、ＬＡＣＴＥＬ（登録商標））；ポリ（ｅ−カプロラクトン）、すなわちＰＣＬ（ＬＡＣＴＥＬ（登録商標））などのポリカプロラクトン；ポリ酸無水物；ポリ（セバシン酸）ＳＡ；ポリ（リセノール酸）（ｐｏｌｙ（ｒｉｃｅｎｏｌｉｃ  ａｃｉｄ））ＲＡ；ポリ（フマル酸）、ＦＡ；ポリ（脂肪酸ディマー）（ｐｏｌｙ（ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ  ｄｉｍｍｅｒ））、ＦＡＤ；ポリ（テレフタル酸）、ＴＡ；ポリ（イソフタル酸）、ＩＰＡ；ポリ（ｐ−｛カルボキシフェノキシ｝メタン）、ＣＰＭ；ポリ（ｐ−｛カルボキシフェノキシ｝プロパン）、ＣＰＰ；ポリ（ｐ−｛カルボキシフェノキシ｝ヘキサン）ＣＰＨ；ポリアミン、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオイトエステル（ｐｏｌｙｏｉｔｈｏｅｓｔｅｒ）｛ＣＨＤＭ：シス／トランス−シクロヘキシルジメタノール、ＨＤ：１，６−ヘキサンジオール。ＤＥＴＯＵ：（３，９−ジエチリデン−２，４，８，１０−テトラオキサスピロウンデカン）｝；ポリジオキサノン；ポリヒドロキシ酪酸；シュウ酸ポリアルキレン；ポリアミド；ポリエステルアミド；ポリウレタン；ポリアセタール；ポリケタール；ポリカルボナート；ポリオルトカルボナート；ポリシロキサン；ポリホスファゼン；スクシナート；ヒアルロン酸；ポリ（リンゴ酸）；ポリ（アミノ酸）；ポリヒドロキシバレラート；コハク酸ポリアルキレン；ポリビニルピロリドン；ポリスチレン；合成セルロースエステル；ポリアクリル酸；ポリ酪酸；トリブロックコポリマー（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ）、トリブロックコポリマー（ＰＥＧ−ＰＬＧＡ−ＰＥＧ）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）（ＰＮＩＰＡＡｍ）、ポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）トリブロックコポリマー（ＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＥＯ）、ポリ吉草酸；ポリエチレングリコール；ポリヒドロキシアルキルセルロース；キチン；キトサン；ポリオルトエステルおよびコポリマー、ターポリマー；コレステロール、レシチンなどの脂質；ポリ（グルタミン酸−ｃｏ−グルタミン酸エチル）など、またはその混合物などのポリマーである。
【００７０】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、特に限定されないが、ＰＬＧＡ、ＰＬＡ、ＰＧＡ、ポリカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアルカン酸無水物、ゼラチン、コラーゲン、酸化セルロース、ポリホスファゼンなどから選択される生分解性ポリマーを含む。それぞれの可能性が個々の実施形態を表す。
【００７１】
ある特定の実施形態では、生分解性ポリマーは乳酸系ポリマー、例えば、ポリラクチドまたはポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、すなわちＰＬＧＡである。生分解性ポリマーは、組成物の約１０％〜約９８％ｗ／ｗの量で存在する。乳酸系ポリマーは、１００：０〜約０：１００、例えば１００：０〜約１０：９０の範囲の乳酸対グリコール酸のモノマー比を有し、約１，０００〜２００，０００ダルトンの平均分子量を有する。ただし、生分解性ポリマーの量は使用期間などのパラメータによって決まることが理解される。
【００７２】
特定の実施形態では、本発明の長時間作用型医薬組成物は、水中油中水型二重乳化工程によって調製される微粒子の形態である。ある特定の実施形態では、本発明の長時間作用型医薬組成物は、治療有効量の薬学的に許容されるグラチラマーの塩を含む内部水相と、生分解性および非生分解性ポリマーから選択される担体を含む水不混和性ポリマー相と、外部水相とを含む。他の実施形態では、水不混和性ポリマー相は、ＰＬＧＡ、ＰＬＡおよびその組合せから選択される生分解性ポリマーを含む。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。さらなる実施形態では、外部水相は、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリソルベート、ポリエチレンオキシド−ポリプロピレンオキシドブロックコポリマーおよびセルロースエステルから選択される界面活性剤を含む。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。
【００７３】
本発明の組成物は、特に限定されないが、共界面活性剤、溶媒／共溶媒、水不混和性溶媒、水、水混和性溶媒、油性成分、親水性溶媒、乳化剤、保存剤、抗酸化剤、消泡剤、安定剤、緩衝剤、ｐＨ調整剤、浸透圧剤、チャネル形成剤、浸透圧調整剤、または当該技術分野で公知の他の任意の添加剤から選択される１つまたは複数の薬学的に許容される添加剤（１つまたは複数）をさらに含み得る。適切な共界面活性剤としては、特に限定されないが、ポリエチレングリコール、「ポロキサマー」として知られるポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックコポリマー、モノラウリン酸デカグリセリルおよびモノミリスチン酸デカグリセリルなどのポリグリセリン脂肪酸エステル、モノステアリン酸ソルビタンなどのソルビタン脂肪酸エステル、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（Ｔｗｅｅｎ）などのポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、モノステアリン酸ポリオキシエチレンなどのポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンラウリルエーテルなどのポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などのポリオキシエチレンヒマシ油および硬化ヒマシ油またはその混合物が挙げられる。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。適切な溶媒／共溶媒としては、特に限定されないが、アルコール、トリアセチン、ジメチルイソソルビド、グリコフロール、炭酸プロピレン、水、ジメチルアセトアミドなどまたはその混合物が挙げられる。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。適切な消泡剤としては、特に限定されないが、ケイ素エマルションまたはセスキオレイン酸ソルビタンが挙げられる。本発明の組成物中の成分の劣化を防ぐ、または抑えるのに適した安定剤としては、特に限定されないが、抗酸化剤、例えばグリシン、ａ−トコフェロールもしくはアスコルビン酸塩、ＢＨＡ、ＢＨＴなどまたはその混合物が挙げられる。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。適切な浸透圧調整剤としては、特に限定されないが、マンニトール、塩化ナトリウム、およびグルコースが挙げられる。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。適切な緩衝剤としては、特に限定されないが、適切な陽イオンを有する酢酸塩、リン酸塩およびクエン酸塩が挙げられる。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。
【００７４】
「水中油中水型（ｗ／ｏ／ｗ）二重エマルション」の粒子径は、特に限定されないが、この段階で加える力、混合速度、界面活性剤の種類と濃度などを含む様々なパラメータによって決定され得る。適切な粒子径は約１〜１００μｍの範囲である。
【００７５】
本発明のデポシステムは当業者に公知の任意の形態を包含する。適切な形態としては、特に限定されないが、生分解性または非生分解性マイクロスフェア、埋め込み型ロッド、埋め込み型カプセル剤、および埋め込み型リングが挙げられる。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。さらに、長時間放出ゲルデポ剤および侵食性マトリックスが企図される。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。適切な埋め込み型システムは、例えば米国特許出願公開第２００８／００６３６８７号に記載されている。埋め込み型ロッドは、適切なマイクロ押出機を用いて当該技術分野で公知の通りに調製できる。
【００７６】
いくつかの実施形態では、本発明のデポ製剤としては、特に限定されないが、水相、油相またはワックス相中の酢酸グラチラマーの懸濁液；酢酸グラチラマーの難溶性高分子電解質複合体；水混和性溶媒と酢酸グラチラマーの組合せに基づく「ｉｎ−ｓｉｔｕ」ゲル形成マトリックス；および酢酸グラチラマーを組み込んだ生分解性ポリマー微粒子が挙げられる。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。特に、本発明の組成物は、酢酸グラチラマーが生分解性または非生分解性の担体に封入された注射用微粒子の形態である。本発明の微粒子組成物は水中油中水型二重エマルションを含み得る。グラチラマーまたはその任意の薬学的に許容される塩を含む内部水相と、生分解性または非生分解性ポリマーを含む油相または水不混和相と、外部水相とを含む、微粒子組成物が本発明の範囲内に含まれる。外部水相は、界面活性剤、例えば、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリソルベート、ポリエチレンオキシド−ポリプロピレンオキシドブロックコポリマーまたはセルロースエステルをさらに含み得る。「油相」および「水不混和相」という用語は、本明細書では互換的に使用され得る。
【００７７】
いくつかの実施形態では、酢酸グラチラマーは、グルタミン酸約０．１４、アラニン約０．４３、チロシン約０．１０およびリジン約０．３３のモル比でＬ−アラニン、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−リジンおよびＬ−チロシンの酢酸塩を含む。
【００７８】
他の実施形態では、酢酸グラチラマーまたはその他の薬学的に許容されるグラチラマーの塩は、約１５〜約１００個のアミノ酸を含む。
【００７９】
ある特定の実施形態では、デポ製剤を２週間ごとに１回投与する。ある特定の実施形態では、デポ製剤を３週間ごとに１回投与する。ある特定の実施形態では、デポ製剤を４週間ごとに１回投与する。ある特定の実施形態では、デポ製剤を５週間ごとに１回投与する。ある特定の実施形態では、デポ製剤を６週間ごとに１回投与する。
【００８０】
いくつかの実施形態では、長時間作用型医薬組成物は、１週間に１回〜６か月ごとに１回の投与スケジュールに適している。特定の実施形態では、組成物は、２週間ごとに１回〜１か月に１回の投与に適している。いくつかの実施形態では、長時間作用型組成物は、注射１回当たり２０〜７５０ｍｇの用量の酢酸グラチラマーを含む。いくつかの実施形態では、長時間作用型組成物は、注射１回当たり２０〜１６０ｍｇの用量の酢酸グラチラマーを含む。いくつかの実施形態では、長時間作用型組成物は、注射１回当たり３０〜５０ｍｇの用量の酢酸グラチラマーを含む。
【００８１】
ある特定の実施形態では、症状を軽減することは再発の頻度を低下させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者における再発の頻度を、レジメンを開始する前の１２か月間に測定した再発の頻度と比較して３０％以上低下させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者における確定された再発までの時間を、レジメンを開始する前の１２か月間に測定した再発間の時間と比較して増大させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、レジメン期間の１２か月間に測定される患者における確定された再発の総数を、レジメンを開始する前の１２か月間と比較して減少させることを含む。
【００８２】
ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、脳での増強病変の数もしくは体積を減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、脳での新たな病変の数を減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、１２か月間に測定される脳ＭＲＩの増強病変画像の数を減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、１２か月間に測定される脳ＭＲＩの新たな病変画像の数を減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者において、脳萎縮を減少させること、Ｇｄ増強病変の数もしくは体積を減少させること、Ｔ１強調増強病変の数もしくは体積を減少させること、または新たなＴ２強調病変の数を減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者の脳のＧｄ増強病変の平均累積数を減少させること、新たなＴ２病変の平均数を減少させること、Ｔ２病変の総体積を減少させること、またはＴ１強調画像上の増強病変の累積数を減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者において強調Ｔ１スキャン上の新たな低信号病変の数を減少させること、または患者において強調Ｔ１スキャン上の低信号病変の総体積を減少させることを含む。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。別の実施形態では、症状を軽減することは、患者においてＭＲＩでモニターされる患者の疾患活動性の進行を抑えることを含む。
【００８３】
Ｋｕｒｔｚｋｅの総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）は、多発性硬化症における能力障害を定量化する方法の１つである。ＥＤＳＳは、能力障害を８項目の機能別障害度（Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｓｙｓｔｅｍ、ＦＳ）で定量化し、神経内科医がこれらの各項目で機能別障害度スコア（Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｓｃｏｒｅ、ＦＳＳ）を割り当てることを可能にする。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者のＥＤＳＳスコアを減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、１２か月間に測定される患者のＥＤＳＳスコアを減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者のＥＤＳＳスコアを少なくとも０．５減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者のＥＤＳＳスコアを少なくとも１減少させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者のＥＤＳＳスコアを５．０〜９．５の範囲のスコアから０．０〜４．５の範囲のスコアに減少させることを含む。
【００８４】
ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者において、作業生産性および活動障害−全般的健康状態（ＷＰＡＩ−ＧＨ）アンケートにより、またはＥｕｒｏＱｏＬ（ＥＱ５Ｄ）アンケートにより測定される、能力障害のレベルを低下させることを含む。ある特定の実施形態では、症状を軽減することは、患者における歩行指標（Ａｍｂｕｌａｔｉｏｎ  Ｉｎｄｅｘ）の変化を減少させることを含む。
【００８５】
別の実施形態では、症状を軽減することは、患者においてＥＤＳＳスコアにより測定される能力障害のレベルを低下させることを含む。別の実施形態では、症状を軽減することは、患者におけるＥＤＳＳスコアの変化を減少させることを含む。
【００８６】
上記の方法のある特定の実施形態では、この方法は、２０ｍｇ  ＧＡの連日皮下投与または４０ｍｇ  ＧＡの週３回の皮下注射と少なくとも同程度に効果的に症状を軽減する。本発明の原理に従えば、本発明の長時間作用型医薬組成物は、市販の連日注射剤形と同等の、またはこれより優れた治療効果をもたらし、副作用の発現率を低下させ、局所および／または全身レベルで副作用の重症度を軽減する。いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、実質的に同じ用量の酢酸グラチラマーの即放製剤と比較して、対象での長時間の放出または長時間の作用をもたらす。
【００８７】
ある特定の実施形態では、デポ製剤は患者により筋肉内に自己投与される。ある特定の実施形態では、デポ製剤は三角筋内に注射される。
【００８８】
ある特定の実施形態では、患者は、レジメンの開始前にＧＡ療法を受けたことがない。ある特定の実施形態では、患者は、レジメンの開始前にＧＡ療法を受けたことがある。
【００８９】
本発明には、酢酸グラチラマーまたは他の任意の薬学的に許容されるグラチラマーの塩と少なくとも１つ他の活性薬剤の併用療法が包含される。本発明の範囲内に含まれる活性薬剤としては、特に限定されないが、インターフェロン、例えば、ペグ化もしくは非ペグ化α−インターフェロンまたはβ−インターフェロン、例えば、インターフェロンβ−１ａもしくはインターフェロンβ−１ｂまたはτ−インターフェロン；任意選択で抗増殖性／抗悪性腫瘍活性を有する免疫抑制剤、例えば、ミトキサントロン、メトトレキサート、アザチオプリン、シクロホスファミドまたはステロイド、例えばメチルプレドニゾロン、プレドニゾンもしくはデキサメタゾン、またはステロイド分泌剤、例えばＡＣＴＨ；アデノシンデアミナーゼ阻害剤、例えばクラドリビン；様々なＴ細胞表面マーカーに対するＩＶ免疫グロブリンＧ（例えば、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ、１９９８、Ｍａｙ  ５０（５）：１２７３−８１に開示されているもの）モノクローナル抗体、例えば、ナタリズマブ（ＡＮＴＥＧＲＥＮ（登録商標））またはアレムツズマブ；ＴＨ２促進サイトカイン、例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−１０またはＴＨ１促進サイトカインの発現を阻害する化合物、例えばホスホジエステラーゼ阻害剤、例えばペントキシフィリン；バクロフェン、ジアゼパム、ピラセタム、ダントロレン、ラモトリギン、リフルゾール（ｒｉｆｌｕｚｏｌｅ）、チザニジン、クロニジン、ベータブロッカー、シプロヘプタジン、オルフェナドリンまたはカンナビノイドを含む鎮痙剤；ＡＭＰＡグルタミン酸受容体アンタゴニスト、例えば、２，３−ジヒドロキシ−６−ニトロ−７−スルファモイルベンゾ（ｆ）キノキサリン、［１，２，３，４，−テトラヒドロ−７−モルホリン−イル−２，３−ジオキソ−６−（トリフルオロメチル）キノキサリン−ｉ−イル］メチルホスホナート、１−（４−アミノフェニル）−４−メチル−７，８−メチレン−ジオキシ−５Ｈ−２，３−ベンゾジアゼピンまたは（−）１−（４−アミノフェニル）−４−メチル−７，８−メチレン−ジオキシ−４，５−ジヒドロ−３−メチルカルバルノイル（ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｒｎｏｙｌ）−２，３−ベンゾジアゼピン；ＶＣＡＭ−１発現の阻害剤またはＶＣＡＭ−１のリガンドのアンタゴニスト、例えばα４β１インテグリンＶＬＡ−４および／またはα−４−β−７インテグリンのアンタゴニスト、例えばナタリズマブ（ＡＮＴＥＧＲＥＮ（登録商標））；抗マクロファージ遊走阻止因子（抗ＭＩＦ）；ｘｉｉ）カテプシンＳ阻害剤；ｘｉｉｉ）ｍＴｏｒ阻害剤が挙げられる。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。１つの他の活性薬剤の例は、免疫抑制剤のクラスに属するＦＴＹ７２０（２−アミノ−２−［２−（４−オクチルフェニル）エチル］プロパン−１，３−ジオール；フィンゴリモド）である。
【００９０】
別の実施形態では、患者は投与前に、ＭＲＩスキャンにより検出可能であり多発性硬化症を示唆する大脳病変を少なくとも１つ有する。さらに別の実施形態では、病変は、脳組織炎症、ミエリン鞘損傷または軸索損傷に関連する。さらなる実施形態では、病変は、脳ＭＲＩで見える脱髄性白質病変である。さらなる実施形態では、白質病変は、直径が少なくとも３ｍｍである。ある特定の実施形態では、患者は、ＭＲＩスキャンにより検出可能な大脳病変を少なくとも１つ有し、病変は、脳組織炎症、ミエリン鞘損傷または軸索損傷に関連する。ある特定の実施形態では、病変は、脳ＭＲＩで見える脱髄性白質病変であり、白質病変は、直径が少なくとも３ｍｍである。ある特定の実施形態では、患者は、最初の臨床症状を発現したことがあり、最初の臨床症状としては、視神経炎、視界のぼやけ、複視、不随意の急速眼球運動、失明、平衡感覚喪失、振戦、運動失調、眩暈、四肢のぎこちなさ、協調運動障害、１つもしくは複数の四肢の脱力、筋緊張異常、筋硬直、攣縮、刺痛、錯感覚、灼熱感、筋肉痛、顔面痛、三叉神経痛、突き刺すような鋭い痛み、焼けるようなひりひりする痛み、発話速度の低下、不明瞭な発語、発話リズムの変化、嚥下障害、疲労、膀胱の問題（尿意切迫、頻尿、残尿および失禁を含む）、腸の問題（便秘および腸制御の喪失を含む）、陰萎、性的興奮の減退、熱に対する感覚、感度の喪失、短期記憶の喪失、集中力の低下または判断力、もしくは論理的思考力の低下の臨床症状が挙げられる。それぞれの可能性が本発明の個々の実施形態を表す。
【００９１】
ある特定の実施形態では、注射直後の反応の頻度が、２０ｍｇのＧＡの連日皮下投与または４０ｍｇのＧＡの週３回の皮下注射と比べ低下される。ある特定の実施形態では、注射直後の反応の重症度が、２０ｍｇのＧＡの連日皮下投与または４０ｍｇのＧＡの週３回の皮下注射と比べ低下される。ある特定の実施形態では、注射部位反応の頻度が、２０ｍｇのＧＡの連日皮下投与または４０ｍｇのＧＡの週３回の皮下注射と比べ低下される。
【００９２】
ある特定の実施形態では、デポ製剤は２ｍＬの注射用水（ＷＦＩ）、または懸濁化剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、ＣＭＣ）と緩衝剤（例えば、クエン酸塩）と等張化剤（例えば、ＮａＣｌ）とを含有する緩衝液で投与される。ある特定の実施形態では、デポ製剤は２０％〜３０％の固体を含む。本明細書で使用される「注射用水」という用語は、微粒子、溶解固体、有機物、無機物、微生物および内毒素の混入物に関する規制基準を満たす無菌の精製水を意味する。
【００９３】
ある特定の実施形態では、常時攪拌下３７℃にてＰＢＳ中で、（ｉ）グラチラマーの最大１４％が０日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｉｉ）グラチラマーの最大１５％が１日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｉｉｉ）グラチラマーの最大２１％が５日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｉｖ）グラチラマーの最大２５％が８日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｖ）グラチラマーの最大３４％が１３日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｖｉ）グラチラマーの最大４３％が１５日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｖｉｉ）グラチラマーの最大８０％が２２日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｖｉｉｉ）グラチラマーの最大９６％が２７日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｉｘ）グラチラマーの最大９９％が３２日以内にデポ製剤から放出される。それぞれの可能性および可能性の各組合せが、本発明の個々の実施形態を表す。
【００９４】
ある特定の実施形態では、常時攪拌下３７℃にてＰＢＳ中で、（ｉ）グラチラマーの最大１４％が０日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｉｉ）グラチラマーの最大１５％が１日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｉｉｉ）グラチラマーの最大２１％が５日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｉｖ）グラチラマーの最大２５％が８日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｖ）グラチラマーの最大３４％が１３日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｖｉ）グラチラマーの最大４３％が１５日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｖｉｉ）グラチラマーの最大８０％が２２日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｖｉｉｉ）グラチラマーの最大９６％が２７日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｉｘ）グラチラマーの最大９９％が３２日以内にデポ製剤から放出される。
【００９５】
ある特定の実施形態では、常時攪拌下３７℃にてＰＢＳ中で、（ｉ）グラチラマーの約１４％が０日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｉｉ）グラチラマーの約１５％が１日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｉｉｉ）グラチラマーの約２１％が５日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｉｖ）グラチラマーの約２５％が８日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｖ）グラチラマーの約３４％が１３日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｖｉ）グラチラマーの約４３％が１５日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｖｉｉ）グラチラマーの約８０％が２２日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｖｉｉｉ）グラチラマーの約９６％が２７日以内にデポ製剤から放出され、かつ／または（ｉｘ）グラチラマーの約９９％が３２日以内にデポ製剤から放出される。それぞれの可能性および可能性の各組合せが、本発明の個々の実施形態を表す。
【００９６】
ある特定の実施形態では、常時攪拌下３７℃にてＰＢＳ中で、（ｉ）グラチラマーの約１４％が０日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｉｉ）グラチラマーの約１５％が１日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｉｉｉ）グラチラマーの約２１％が５日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｉｖ）グラチラマーの約２５％が８日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｖ）グラチラマーの約３４％が１３日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｖｉ）グラチラマーの約４３％が１５日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｖｉｉ）グラチラマーの約８０％が２２日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｖｉｉｉ）グラチラマーの約９６％が２７日以内にデポ製剤から放出され、かつ（ｉｘ）グラチラマーの約９９％が３２日以内にデポ製剤から放出される。
【００９７】
本発明は、別の態様で、再発寛解型多発性硬化症に罹患しているヒト患者でのＧＡ治療の耐容性を増大させる方法であって、皮下注射の頻度を２０ｍｇ用量のＧＡの連日の皮下注射または注射毎に少なくとも１日空けて７日間にわたる４０ｍｇ用量のＧＡの３回の皮下注射から、２〜６週間毎の４０ｍｇ用量のＧＡまたは他の任意の薬学的に許容されるグラチラマーの塩のデポ製剤の単回筋肉内注射の治療上有効なレジメンに減らし、それにより患者におけるＧＡ治療の耐容性を増大させることを含む、方法をさらに提供する。
【００９８】
ある特定の実施形態では、デポ製剤は３〜５週間ごとに１回投与される。ある特定の実施形態では、デポ製剤は４週間ごとに１回投与される。
【００９９】
ある特定の実施形態では、再発寛解型多発性硬化症に罹患している患者でのＧＡ治療の耐容性を増大させることは、注射の頻度を減らすことを含む。ある特定の実施形態では、再発寛解型多発性硬化症に罹患している患者でのＧＡ治療の耐容性を増大させることは、注射部位反応の頻度を低下させることを含む。さらなる実施形態では、注射部位反応は、注射部位のすぐ周囲にみられる紅斑、出血、硬結、炎症、腫瘤、疼痛、そう痒、蕁麻疹、または笞痕である。
【０１００】
別の実施形態では、再発型多発性硬化症に罹患しているヒト患者でのＧＡ治療の耐容性を増大させることは、注射直後の反応の頻度を低下させることを含む。さらに別の実施形態では、注射直後の反応は、動悸、熱感、潮紅、ほてり、頻脈、呼吸困難、胸部不快感、胸痛、非心臓性胸（ｎｏｎ−ｃａｒｄｉａｃ  ｃｈｅｓｔ）、無力、背部痛、細菌感染、悪寒、嚢胞、顔面浮腫、発熱、インフルエンザ症候群、感染症、注射部位の紅斑、注射部位の出血、注射部位の硬結、注射部位の炎症、注射部位の腫瘤、注射部位の疼痛、注射部位のそう痒、注射部位の蕁麻疹、注射部位の笞痕、頸部痛、疼痛、片頭痛、失神、頻脈、血管拡張、食欲不振、下痢、胃腸炎、胃腸障害、嘔気、嘔吐、斑状出血、末梢浮腫、関節痛、激越、不安、錯乱、下垂足、筋緊張亢進、神経過敏、眼振、発話障害、振戦、眩暈、気管支炎、呼吸困難、喉頭痙攣、鼻炎、紅斑症、単純ヘルペス、そう痒症、発疹、皮膚小結節、発汗、蕁麻疹、耳痛、眼疾患、月経困難症、尿意切迫、または膣モニリア症である。一実施形態では、注射直後の反応の頻度または注射部位反応の頻度が、２０ｍｇ酢酸グラチラマーの連日皮下投与または４０ｍｇ酢酸グラチラマーの週３回の皮下投与と比べて低下される。
【０１０１】
本発明は、別の態様で、再発寛解型多発性硬化症に罹患しているヒト患者または最初の臨床症状を発現したことがあり臨床的に明白な多発性硬化症が発症するリスクが高いと判定されるヒト患者での再発の頻度を低下させる方法であって、患者に４０ｍｇ用量のＧＡまたは他の任意の薬学的に許容されるグラチラマーの塩のデポ製剤の治療上有効な単回注射のレジメンを２〜６週間毎に実施することを含み、レジメンが患者の再発の頻度を低下させるのに十分である、方法をさらに提供する。
【０１０２】
本発明は、別の態様で、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）に罹患しているヒト患者でのＲＲＭＳの進行を抑える、または遅延させる方法であって、ヒト患者に４０ｍｇ用量の酢酸グラチラマー（ＧＡ）を含むデポ製剤の治療上有効な単回筋肉内注射のレジメンを２〜６週間毎に実施することを含む、方法をさらに提供する。
【０１０３】
ある特定の実施形態では、レジメンは、患者の（ａ）再発の頻度、（ｂ）増強病変の数もしくは体積、（ｃ）新たな病変の数、または（ｄ）総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアを改善するのに十分である。
【０１０４】
ある特定の実施形態では、レジメンは、患者の再発の頻度、増強病変の数もしくは体積、新たな病変の数、および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアを改善するのに十分である。
【０１０５】
本発明は、別の態様で、再発寛解型多発性硬化症に罹患しているヒト患者での疾患活動性を抑える方法であって、患者に４０ｍｇ用量のＧＡのデポ製剤の治療上有効な単回注射のレジメンを２〜６週間毎に実施することを含み、レジメンが患者における再発、１２週間の確定された能力障害進行（ＣＤＰ）、新たな病変形成および既存の病変の増強を抑えるのに十分である、方法をさらに提供する。
【０１０６】
ある特定の実施形態では、ＲＲＭＳの活動性を抑えることは、疾患活動性の認められない状態（Ｎｏ  Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ）（ＮＥＤＡ）を達成することを含む。
【０１０７】
本発明は、別の態様で、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）と封入されたＧＡまたは他の任意の薬学的に許容されるグラチラマーの塩を含む第一の容器と、注射用の薬学的に許容される賦形剤を含む第二の別個の容器とを含む、キットをさらに提供する。
【０１０８】
ある特定の実施形態では、キットは、４０ｍｇのＧＡと２ｍＬのＷＦＩとを含む。ある特定の実施形態では、キットは、シリンジと針とをさらに含む。ある特定の実施形態では、第一の容器と第二の容器の内容物を混合することにより、賦形剤２ｍＬ当たり４０ｍｇのＧＡが得られる。ある特定の実施形態では、キットは、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）の少なくとも１つの症状を軽減する方法、ＧＡ治療の耐容性を増大させる方法、ＲＲＭＳの進行を抑えるもしくは遅延させる方法またはＲＲＭＳの活動性を抑える方法での使用のためである。ある特定の実施形態では、キットは、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）の少なくとも１つの症状を軽減する方法、ＧＡ治療の耐容性を増大させる方法、ＲＲＭＳの進行を抑えるもしくは遅延させる方法またはＲＲＭＳの活動性を抑える方法での使用のためであり、この方法は、２〜６週間毎の４０ｍｇ用量の酢酸グラチラマー（ＧＡ）を含むデポ製剤の単回筋肉内注射を含む。上記の方法およびキットの特定の実施形態では、ＧＡデポ剤は２１Ｇ針または２０Ｇ針で投与される。
【０１０９】
別の実施形態では、酢酸グラチラマーの治療的有効量は４０ｍｇである。本発明の様々な実施形態では、グラチラマーの治療的有効量は約１ｍｇ／日〜約２ｍｇ／日の範囲に相当する。あるいは、このようなグラチラマーの治療的有効量は約１．５ｍｇ／日に相当する。ある特定の実施形態では、投与レジメンは、週１回、月２回（２週間ごとに１回程度）〜月１回の範囲である。必要とされる作用の期間に応じて、本発明の各デポ剤または埋め込み装置は通常、２〜３週間から数か月の範囲の期間にわたって放出されるよう設計された、約２０〜７５０ｍｇの有効成分を含有する。
【０１１０】
一実施形態では、医薬組成物は無菌溶液の形態である。別の実施形態では、医薬組成物はマンニトールをさらに含む。さらに別の実施形態では、医薬組成物は５．５〜８．５の範囲のｐＨを有する。一実施形態では、医薬組成物は５．５〜７．０の範囲のｐＨを有する。
【０１１１】
本発明は、一態様で、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）に罹患しているヒト患者または最初の臨床症状を発現したことがあり臨床的に明白な多発性硬化症を発症するリスクが高いと判定されるヒト患者でのＲＲＭＳの少なくとも１つの症状を軽減する方法での使用のための４０ｍｇ用量の酢酸グラチラマー（ＧＡ）を含むデポ製剤を提供する。
【０１１２】
ある特定の実施形態では、デポ製剤は２〜６週間毎にデポ製剤の治療上有効な単回筋肉内注射のレジメンで患者に投与され、レジメンは患者の少なくとも１つの症状を軽減するのに十分であり、症状は患者の再発の頻度，脳ＭＲＩの増強病変の数または新たな病変画像の数、および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアからなる群より選択される。
【０１１３】
上記の実施形態のいずれか１つでは、デポ製剤は３〜５週間ごとに１回投与される。上記の実施形態のいずれか１つでは、デポ製剤は４週間ごとに１回投与される。
【０１１４】
上記の実施形態のいずれか１つでは、症状を軽減することは、再発の頻度を低下させることを含む。上記の実施形態のいずれか１つでは、症状を軽減することは、脳の増強病変の数もしくは体積または新たな病変の数を減少させることを含む。上記の実施形態のいずれか１つでは、症状を軽減することは、患者において、脳萎縮を減少させること、Ｇｄ増強病変の数もしくは体積を減少させること、Ｔ１強調増強病変の数もしくは体積を減少させること、または新たなＴ２強調病変の数を減少させることを含む。上記の実施形態のいずれか１つでは、症状を軽減することは、患者のＥＤＳＳスコアを減少させることを含む。
【０１１５】
上記の実施形態のいずれか１つでは、方法は、２０ｍｇのＧＡの連日の皮下投与または４０ｍｇのＧＡの週３回の皮下注射と少なくとも同程度に効果的に症状を軽減する。
【０１１６】
上記の実施形態のいずれか１つでは、患者は、レジメンの開始前にＧＡ療法を受けたことがある。
【０１１７】
上記の実施形態のいずれか１つでは、デポ製剤は、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）、ポリ（グリコール酸）（ＰＧＡ）およびその任意の組合せからなる群より選択される薬学的に許容される生分解性担体をさらに含む。上記の実施形態のいずれか１つでは、生分解性担体はＰＬＧＡである。
【０１１８】
上記の実施形態のいずれか１つでは、デポ製剤は、ＧＡを含む内部水相と、生分解性または非生分解性ポリマーを含む水不混和性ポリマー相と、外部水相とを含む微粒子の形態である。
【０１１９】
上記の実施形態のいずれか１つでは、デポ製剤は、水中油中水型（ｗ／ｏ／ｗ）二重乳化工程によって調製される微粒子の形態である。
【０１２０】
上記の実施形態のいずれか１つでは、内部水相はＧＡを含む。
【０１２１】
上記の実施形態のいずれか１つでは、水不混和性ポリマー相はＰＬＧＡを含む。
【０１２２】
上記の実施形態のいずれか１つでは、外部水相は、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリソルベート、ポリエチレンオキシド−ポリプロピレンオキシドブロックコポリマーおよびセルロースエステルから選択される界面活性剤を含む。
【０１２３】
上記の実施形態のいずれか１つでは、デポ製剤は２０％〜３０％の固体を含む。上記の実施形態のいずれか１つでは、ＧＡと薬学的に許容される生分解性担体の間の重量比は１：１〜１：１００である。上記の実施形態のいずれか１つでは、ＧＡと薬学的に許容される生分解性担体は１：５〜１：２５である。上記の実施形態のいずれか１つでは、ＧＡと薬学的に許容される生分解性担体は約１１である。
【０１２４】
上記の実施形態のいずれか１つでは、デポ製剤は、実質的に同じ用量のグラチラマーの即放製剤と比較して、対象での長時間の放出または長時間の作用をもたらす。上記の実施形態のいずれか１つでは、常時攪拌下３７℃にてＰＢＳ中で、グラチラマーの約８０％が２２日以内にデポ製剤から放出される。上記の実施形態のいずれか１つでは、常時攪拌下３７℃にてＰＢＳ中で、グラチラマーの約２０％が５日以内にデポ製剤から放出される。
【０１２５】
本発明は、別の態様で、再発寛解型多発性硬化症に罹患しているヒト患者でのＧＡ治療の耐容性を増大させる方法での使用のための、２〜６週間毎の４０ｍｇ用量のＧＡのデポ製剤の単回筋肉内注射の治療上有効なレジメンを提供する。
【０１２６】
ある特定の実施形態では、方法は、皮下注射の頻度を２０ｍｇ用量のＧＡの連日の皮下注射または注射毎に少なくとも１日空けて７日間にわたる４０ｍｇ用量のＧＡの３回の皮下注射から、２〜６週間毎の４０ｍｇ用量のＧＡのデポ製剤の単回筋肉内注射の治療上有効なレジメンに減らすことを含む。
【０１２７】
本発明は、別の態様で、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）に罹患しているヒト患者でのＲＲＭＳの進行を抑える、または遅延させる方法に使用するための４０ｍｇ用量の酢酸グラチラマー（ＧＡ）を含むデポ製剤を提供する。
【０１２８】
ある特定の実施形態では、方法は、ヒト患者にデポ製剤の治療上有効な単回筋肉内注射のレジメンを２〜６週間毎に実施することを含む。
【０１２９】
上記の実施形態のいずれか１つでは、方法は、患者の（ａ）再発の頻度、（ｂ）増強病変の数もしくは体積、（ｃ）新たな病変の数、または（ｄ）総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアを改善するのに十分である。
【０１３０】
上記の実施形態のいずれか１つでは、方法は、患者の再発の頻度、増強病変の数もしくは体積、新たな病変の数および総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアを改善するのに十分である。
【０１３１】
本発明は、別の態様で、再発寛解型多発性硬化症に罹患しているヒト患者での疾患活動性を抑える方法での使用のための、４０ｍｇ用量のＧＡのデポ製剤を提供する。
【０１３２】
ある特定の実施形態では、方法は、患者にデポ製剤の治療上有効な単回注射のレジメンを２〜６週間毎に実施することを含み、レジメンは患者の再発、１２週間の確定された能力障害進行（ＣＤＰ）、新たな病変形成および既存の病変の増強を抑えるのに十分である。
【０１３３】
本発明は、別の態様で、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）と封入されるＧＡを含む第一の容器と、注射用の薬学的に許容される賦形剤を含む第二の別個の容器とを含む、キットを提供する。
【０１３４】
上記の実施形態のいずれか１つでは、キットは、４０ｍｇのＧＡと２ｍＬの注射用水（ＷＦＩ）とを含む。
【０１３５】
上記の実施形態のいずれか１つでは、第一の容器と第二の容器の内容物は希釈剤２ｍＬ当たり４０ｍｇのＧＡを与える。
【０１３６】
上記の実施形態のいずれか１つでは、キットは、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）の少なくとも１つの症状を軽減する方法、ＧＡ治療の耐容性を増大させる方法、ＲＲＭＳの進行を抑えるもしくは遅延させる方法またはＲＲＭＳの活動性を抑える方法での使用のためである。
【０１３７】
以下の実施例は、本発明の特定の実施形態をさらに十全に説明するために記載される。ただし、これらは、決して本発明の広い範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。当業者は、本発明の範囲から逸脱することなく、本明細書に開示される原理の多数の変形形態および修正形態を容易に考案できる。
【０１３８】
（実施例）
実施例１：４０ｍｇのＧＡのデポ剤のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの調製方法。
調製工程：（１）外部水相の調製：無菌ＷＦＩ中２％ｗ／ｗの濃度の部分加水分解ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）溶液を反応器内中で調製し、０．２２μｍ膜でろ過した。（２）ＮａＣｌの無菌ＷＦＩ溶液を調製し、ＰＶＡを含む反応器中に０．２２μｍ膜でろ過した。（３）有機相の調製：ジクロロメタンとポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）とからなる有機相を反応器中で調製し、０．２２μｍ膜でろ過した。（４）内部水相の調製：無菌ＷＦＩと酢酸グラチラマーとを含有する溶液を調製し、０．２２μｍ膜でろ過した。（５）油中水型（ｗ／ｏ）エマルションの調製：内部水相を有機相に加え、回転子固定子分散装置を備えたＩＫＡ  Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ  Ｔ５０ホモジナイザーを７，２００ＲＰＭで用いて１０分間処理した（高剪断混合）。（６）水中油中水型（ｗ／ｏ／ｗ）エマルションの調製：段階５で調製した油中水型エマルション（ｗ／ｏ）を常時攪拌しながら外部水相の半分に加えた。ｗ／ｏ／ｗ二重エマルションを、外部水相中へのｗ／ｏの転送の終わりから３分間、回転子固定子ヘッドを備えたＩＫＡ  Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ  ＵＴＳ８０ホモジナイザーを２，９００ＲＰＭで用いて処理した。次いで、エマルションに外部水相をさらに３０リットル加えた（反応停止）。（７）溶媒の除去／蒸発：段階（６）で形成されたｗ／ｏ／ｗ二重エマルションを、様々な速度でＩＫＡ  ＵＴＳ８０ホモジナイザーを用いて１５〜１７時間混合した。圧縮空気を０．５Ｐａでエマルションに１０〜１２時間吹き込んだ。工程のこの部分で真空を用いた。（８）分離および洗浄：懸濁液を５，３００ＲＰＭで１０分間遠心分離した。上清を捨て、ペレット（沈降微粒子）をＷＦＩ  ５５０ｇに再懸濁し、マグネチックスターラーを用いて３分間混合した。再懸濁した微粒子を２９００ＲＰＭで１０分間遠心分離した。（９）凍結乾燥：洗浄した微粒子を無菌ＷＦＩ約７５０ｇに再懸濁し、凍結乾燥まで−２０℃で保持した。凍結乾燥を、無菌のｌｙｏｇｕａｒｄトレーを用いて以下の通りに実施した：−４０℃で２４時間凍結する。一次乾燥を０．２ｈＰａ、−５℃で４８時間実施する。二次乾燥を０．２ｈＰａ、１０℃で４８時間実施する。得られた組成物はＧＡとＰＬＧＡ（５０：５０、分子量７，０００〜１７，０００）を１：１１．５の重量比で含む。
【０１３９】
実施例２：ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの４０ｍｇのＧＡのＰＬＧＡデポ剤からのＧＡの放出プロファイル。
組みまれた酢酸グラチラマーの放出を、マルチポイントマグネチックスターラーを備えた恒温器を３７℃で用いて、きつく閉じた２０ｍｌガラスバイアル中で実施した。ｐＨ７．４のリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を放出溶媒として用いた。表１にＧＡのＰＬＧＡデポ剤からの放出プロファイルをまとめる。
【０１４０】
【表１】
2019530648.tif 000002
【０１４１】
実施例３：ｉｎ  ｖｉｖｏでの４ｍｇ  ＧＡのデポ剤と市販のＧＡ（Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標））の比較。
材料および方法
動物：動物試験はいずれも、Ｉｓｒａｅｌｉ  ＭＯＨ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによる承認を受けた。７〜９週齢のＣ５７ＢＬ／６雌マウスを、平均体重がほぼ同じ対照群または治療群に無作為に割り付けた。動物に、実験全体を通じて餌および水を自由摂取させた。
【０１４２】
ＥＡＥの誘導：許容される多発性硬化症の動物モデルであるＥＡＥを誘導するため、改変完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、セントルイス、ミズーリ州、米国）中のＭＯＧ３５−５５（ＧＬ  Ｂｉｏｃｈｅｍ社、上海、中国）のエマルションを以下の通りに調製した：熱殺菌した結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）株Ｈ３７ＲＡ（Ｓｉｇｍａ社）を最終濃度が４ｍｇ／ｍＬになるようＣＦＡに加えた。次いで、２ｍｇ／ｍＬのＭＯＧ  ３５−５５を等量の改変ＣＦＡで乳化した。ＥＡＥを、剪毛したマウス背部の１つの部位でのこのエマルションの皮下（ＳＣ）注射、次いで、第０日およびＭＯＧ免疫感作後４８時間にＰＢＳ中の百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）毒素（Ｓｉｇｍａ社）の腹腔内注射により、誘導した。２１Ｇ針をマウスの注射に用いた。
【０１４３】
測定：体重を第０日から第２８日まで２日毎に測定した。ＥＡＥを免疫感作後第０日から第２８日まで１日１回、マウスの臨床スコアリングにより評価した（表２）。解析には、死亡個体を臨床スコア５とし、その体重を個体死亡前の最後の測定値で記録した。
【０１４４】
【表２】
2019530648.tif 000003
【０１４５】
臨床スコアの生データから以下の計算を実施した：平均最大スコアは、示される解析日まで特定のグループの各マウスについて記録した最高スコアの平均値である；平均疾患持続期間および平均発症日を以下の通りに算出した：平均疾患持続期間＝（各マウスの解析日−疾患発症日）の合計／（１グループ当たりのマウスの数）；平均発症日＝（各マウスの疾患発症日の合計）／（１グループ当たりのマウスの数）。臨床スコアの曲線下面積（ＡＵＣ）を、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌを用いて算出し、疾患負荷量とする。
【０１４６】
酢酸グラチラマーデポ剤（ＧＡデポ剤）：ＧＡデポ剤を注射用水（ＷＦＩ）に懸濁し、示される用量で直ちに筋肉内（ＩＭ）注射した。ＧＡデポ剤の用量を有効成分の量に従って記載する（すなわち、ＧＡデポ剤４ｍｇは４ｍｇのＧＡを含む）。
【０１４７】
ＧＡ結合抗体解析：疾患誘導後第３５日に、各治療群から５個体を屠殺した。血液試料を回収し、血清を単離し−８０℃で保管した（表３および５を参照されたい）。
【０１４８】
ＥＬＩＳＡプレートを以下の通りに調製した：平底ＥＬＩＳＡプレート（Ｎｕｎｃ社）を０．１７Ｍ、ｐＨ８．０のホウ酸緩衝液（ＢＢ）中の５０μｇ／ｍｌのＧＡ  １００ｕｌで４℃にて一晩コートした。ウェルを空にし、室温にて０．０５％Ｔｗｅｅｎ  ２０を含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄した。洗浄後、１％ＢＳＡを室温（ＲＴ）で２時間加え非特異的結合部位をブロックした。次いで、ウェルを洗浄溶液で３回洗浄した。
【０１４９】
ＥＬＩＳＡ試験を以下の通りに実施した：血清試料１００μｌを１：１，０００に希釈しウェルに４℃で１８時間加え（血清の希釈を１％ＢＳＡと０．０５％Ｔｗｅｅｎ  ２０とを含有するＰＢＳを用いて実施した）、次いで、室温にて０．０５％Ｔｗｅｅｎ  ２０を含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で３回洗浄した。次いで、１：５０，０００に希釈したアルカリホスファターゼコンジュゲートＡｆｆｉｎｉｔｙＰｕｒｅヤギ抗マウスＩｇＧ＋ＩｇＭ（Ｈ＋Ｌ）（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）１００μｌをウェルに加え、ＲＴで２時間インキュベートした。ウェルを、洗浄溶液を用いて再び３回洗浄し、呈色反応を、１００μｌの基質であるリン酸ｐ−ニトロフェニル（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を加えること、およびＲＴでの４０〜６０分間インキュベートにより進めた。反応を３ＮのＮａＯＨ  ３０μｌで停止させた。４０５ｎｍでの吸光度を次いで、マイクロＥＬＩＳＡリーダー（Ｄｙｎａｔｅｃｈ社）を用いて記録した。各アッセイプレートは、陽性抗ＧＡ血清試料および正常マウス血清の対照を含んだ（Ｎ＝５）。
【０１５０】
結果を以下の式に従い結合指数（ＢＩ）で表した：結合指数＝被験血清の平均吸光度／対照血清の平均吸光度。正常マウス血清の平均値は０．２３０  ＯＤであり、結合指数のカットオフ値は２．０±１．０である。したがって、３．０を超える値を陽性と見なした。
【０１５１】
実験計画：試験の実験計画を表３に明記する。
【０１５２】
【表３】
2019530648.tif 000004
【０１５３】
統計解析：データを、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌを用いて解析した。各データセットを、一因子分散分析（ＡＮＯＶＡ）、次いで片側スチューデントｔ検定を用いて解析した。
【０１５４】
結果
ＧＡデポ剤用量の換算。
図１は、生理食塩水対照群（黒丸の印）、２ｍｇ  Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）群（黒四角の印）およびＧＡデポ剤４ｍｇ群（灰色の三角形の印）の平均臨床スコアの結果を示し、上記のグループはそれぞれ、０ｍｇ、２０ｍｇおよび４０ｍｇの提案されるヒト用量（これまでの試験から推論される、アロメトリックな１：１０スケールを用いて）を表す。＊は、一因子ＡＮＯＶＡ、次いで不等分散を仮定した片側ｔ検定を実施し、未治療対照と比較して全治療群についてＰ＜０．０５であったことを表す。Ｎ＝２０／グループ、＋／−標準誤差。
【０１５５】
ＧＡデポ剤群およびＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）群で、未治療対照と比較して平均臨床スコアのＡＵＣ（血中濃度曲線下面積）、平均発症日および平均疾患持続期間が有意に減少された（表４、ｐ＜０．０５）。いずれの計算値にもＧＡデポ剤とＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）の間に統計的有意差はみられなかった（表４）。第１１日〜第１９日で、生理食塩水群の平均臨床スコアは、他のいずれのグループのものより有意に高かった（図１、ｐ＜０．０５）。第２０日で、生理食塩水群の平均臨床スコアは、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）群およびＧＡデポ剤群のものより有意に高かった（図１、ｐ＜０．０５）。免疫感作後第１０日〜第１７日で、ＧＡデポ剤治療群およびＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）治療群の体重は未治療対照より有意に大きかった。第２１日で、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）群の体重は未治療対照群のものより有意に大きかった（図２、Ｐ＜０．０５）。＊は、未治療対照と比較して全治療群についてＰ＜０．０５であったことを表す。＊＊は、未治療対照と比較してＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）群についてＰ＜０．０５であったことを表す。一因子ＡＮＯＶＡ、次いで不等分散を仮定した片側ｔ検定を実施した。Ｎ＝２０／グループ、＋／−標準誤差。
【０１５６】
【表４】
2019530648.tif 000005
【０１５７】
ＧＡに対する抗体により測定されるマウスの免疫応答。
血清をＭＯＧ−ＥＡＥ試験の疾患誘導後第３５日にマウスから単離した。マウスをＧＡデポ剤（１回４ｍｇ）またはＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）（２ｍｇ／日、第０〜８日）で治療した。抗体（Ａｂ）力価を、ＥＬＩＳＡアッセイを用いて評価した。結果を結合指数（ＢＩ）で表す。Ｎ＝５。表５に示すデータは、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）またはＧＡデポ剤に曝露されたマウスは同程度の総抗ＧＡ抗体の力価を生じ、一方で生理食塩水で治療された対照マウスはそのような抗体をもたなかったことを示す。抗体力価は全治療群で同程度であり、同程度の免疫応答を示唆する。
【０１５８】
【表５】
2019530648.tif 000006
【０１５９】
４ｍｇのＧＡデポ剤の単回投与の効果を標準的な２ｍｇのＧＡの連日投与と比較した上のデータは、この２つの投与レジメンの効果が同程度であることを示す。具体的には、ＧＡデポ剤は、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）治療群に認められたものと少なくとも同程度に、疾患発症の遅延および症状の改善に明らかに有意な効果を示した（図１を参照されたい）。
【０１６０】
さらに、この実験はＧＡデポ剤の筋肉内投与が標準的なＧＡの連日皮下注射と同レベルで抗ＧＡ抗体の体液性応答を誘導したことを示す（表５を参照されたい）。したがって、標準的ＧＡ注射剤と比べて同程度のＧＡデポ剤に対する体液性応答は、ＧＡデポ剤に対する免疫応答の類似性を表し得る。したがって、このことは、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）とＧＡデポ剤の間にＡＵＣの統計的に有意な様式で差がないこのＥＡＥ試験からわかるように、同等な臨床上の免疫調節治療効も示していると思われる（表４を参照されたい）。したがって、抗ＧＡ抗体の存在は、新たな製剤で新たな経路を介して投与される場合、薬物の治療上のバイオアベイラビリティに対するマーカーとしての役割を果たし得る。
【０１６１】
データは全体として、ＭＯＧ誘導ＥＡＥでの用量４ｍｇのＧＡのＧＡデポ剤の効果がＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）のものと少なくとも同等であり、かつ両治療に対する免疫応答が同程度であることを裏付ける。ＥＡＥ動物モデルで４ｍｇのＧＡデポ剤を用いて得られた結果に基づき、ヒトでは用量８０ｍｇが４０ｍｇより優れていると予測した。
【０１６２】
実施例４：ＲＲＭＳと診断されたヒトにおける４０ｍｇおよび８０ｍｇのＧＡのデポ剤。
概要：５２週間にわたる治療で４週間の間隔を空けてＲＲＭＳの被験者に４０ｍｇまたは８０ｍｇのＧＡのＧＡデポ剤を筋肉内（ＩＭ）注射として投与した、１年間にわたる前向き非盲検２治療群多施設第ＩＩａ相試験。この試験の目的は、ＲＲＭＳの被験者における４０ｍｇまたは８０ｍｇのＧＡデポ剤の月１回の長時間作用型ＩＭ注射の安全性、耐容性および有効性を評価することであった。試験は、それぞれ２０ｍｇまたは４０ｍｇのＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）注射剤の連日投与または週３回の投与から切り替える被験者を含んだ。
【０１６３】
詳細な説明：再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）と診断され、過去１２か月間にそれぞれ２０ｍｇまたは４０ｍｇのＧＡ（Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標））の連日または週３回の皮下注射による治療を受けた被験者。試験製品は、注射用の持続放出マイクロスフェアと非経口使用のための賦形剤（注射用水）の組合せであるＧＡ長時間作用型注射（ＧＡデポ剤）であった。ＧＡデポ剤を筋肉内に（ＩＭ）投与した。個々の被験者の試験期間は、４週間のスクリーニング評価（第−４〜０週）、次いで５２週間の非盲検治療期間、および４週間の追跡期間からなる、６０週間であり、その間の来院回数は計１７であった。身体、バイタルサインおよび安全性の評価を来院毎に実施した。ＭＲＩを来院１回目（スクリーニング）、第２４週、および第５２週（治療来院の終了時）に実施した。神経学的臨床検査および安全性臨床検査をスクリーニング来院時、来院４回目、１２回目、２４回目、３６回目、および５２回目（治療終了時）に実施した。ＧＡデポ剤を２１Ｇ針または２０Ｇ針で投与した。
【０１６４】
集団および試料規模：ＲＲＭＳを有し、試験登録前に少なくとも１２か月間、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）による治療を受けた患者２５例。インフォームドコンセントフォームに署名した時点の平均年齢：両群で５２．７歳。ＭＳの平均持続期間：４０ｍｇ群および８０ｍｇ群それぞれで１６．５年および１４．６年。有効性集団：８０ｍｇで１２例、４０ｍｇで１３例。
【０１６５】
コア試験後の試験延長：コア試験（注射１３回）を終了した患者１３例にＧＡデポ剤４０ｍｇによる治療を継続するよう依頼した（治療期間の最も長い患者は３４回目の注射を受け、したがって、同患者が受けている治療の３年目の後半であった）。
【０１６６】
選択基準：ＲＲＭＳと診断された男女の被験者；多発性硬化症（ＭＳ）の診断がＭｃＤｏｎａｌｄ基準（２０１０年改訂）と一致する；スクリーニング来院時に治療が継続中であり、過去１２か月間に２０ｍｇまたは４０ｍｇのＧＡ（Ｃｏｐａｘｏｎｅ）による治療を受けている；腎機能が正常である；肝機能が正常である；ヘモグロビン濃度が正常である；臨床的に重要な内科的異常、精神医学的異常または臨床検査異常のいずれも認められない；書面によるインフォームドコンセントの提出が可能である。
【０１６７】
除外基準：治験担当者の見解で、被験者が試験登録に適さないか試験の全側面を完了できなくする何らかの重要な内科的、外科的、もしくは精神医学的病態、臨床検査値、または併用薬が認められる；重症貧血（ヘモグロビン＜１０ｇ／ｄＬ）が認められる；腎機能異常（血清中クレアチニン＞１．５×ＵＬＮ）が認められる；妊娠または授乳中の女性である；出産可能な女性は、スクリーニング来院時の妊娠尿検査の結果が陰性であり、試験期間中、適切な避妊法を用いなければならない。外科手術（子宮摘出術または卵管結紮術）により不妊となった女性または最後の月経がスクリーニング来院の１２か月以上前であった女性は出産の可能性がないものと見なす。許容される避妊形態は、経口、埋込み型または注射避妊薬；少なくとも３か月間所定の位置にある子宮内装置；エストロゲンパッチ；および殺精子薬と組み合わせた適切な十分なバリア法を含む。禁欲は許容される避妊レジメントと見なす；ワクチン接種後のアナフィラキシー反応および／または重篤なアレルギー反応の既往がある、被験薬の成分、例えばＧＡ、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）に対する過敏症が確認されている；薬物またはアルコール乱用の既往が知られている、またはその疑いがある；ＨＩＶ、肝炎、性病研究所（ＶＤＲＬ）、または結核の検査結果が陽性である；本試験の開始前３０日以内に治験薬試験に参加した；過去３０日間に何らかの種類のステロイドによる治療を受けた；過去３０日間に再発が確認された。
【０１６８】
転帰尺度：試験開始１２か月前に観察された再発率と比較した試験期間中に認められる再発率；ベースライン時から治療来院終了時までの脳ＭＲＩの増強病変および新たな病変画像の数の変化；ベースライン時から治療来院終了時までの総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）スコアの変化。
【０１６９】
有害事象（ＡＥ）は主として軽度の部位反応（ＩＳＲ）を含み、予想外のＡＥは報告されなかった。統計的に有意に少ないＩＳＲが、用量８０ｍｇでよりも用量４０ｍｇで報告された。ＧＡ（Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標））で記録された注射直後の反応は一切みられなかった。
【０１７０】
結果
評価項目番号１：試験登録１２か月前に観察された再発率と比較した再発率。試験期間中：試験集団全体で認められた再発（ＥＤＳＳの変化を含まない）１件。試験開始前の１年間に、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）で治療された同じ被験者：再発２件。
【０１７１】
評価項目番号２：ベースラインと比較した脳ＭＲＩスキャン、新たな病変（Ｔ２−ＦＬＡＩＲによる）、増強病変の変化（ＳＰＧＲ  Ｔ１  ＧｄＥによる）のいずれか、またはその両方と定義される変化。
【０１７２】
【表６】
2019530648.tif 000007
【０１７３】
評価項目番号３：ＥＤＳＳスコア。
【０１７４】
【表７】
2019530648.tif 000008
【０１７５】
データが本発明のデポ製剤で１年間治療された患者の極めて高い割合がＮＥＤＡを達成したことを示すことは注目するべきであり、ＮＥＤＡは以下の：再発、１２週間の確定された能力障害進行（ＣＤＰ）、新たな／拡大しつつあるＴ２病変およびＴ１ガドリニウム−増強病変、のいずれも認められないものと定義される、疾患活動性の認められない状態（Ｎｏ  Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ）と定義される。ＮＥＤＡを達成する患者のこの割合は高く、特に、ＭＳの治療に承認されている他の薬物で報告されるＮＥＤＡ値と比較して高い。
【０１７６】
【表８】
2019530648.tif 000009
【０１７７】
結論：
４０ｍｇのＧＡデポ剤の単回筋肉内注射による治療は、新たな病変の形成および病変の増強を抑えるうえで、対応する８０ｍｇのＧＡによる治療より優れていた（表６）。
【０１７８】
４０ｍｇのＧＡデポ剤の単回筋肉内注射による治療は、ＥＤＳＳスコア上昇を抑えるうえで、対応する８０ｍｇのＧＡによる治療に匹敵した（表７）。
【０１７９】
ＧＡのデポ剤組成物による治療は、ＴＹＳＡＢＲＩ（登録商標）（４７％）、ＰＬＥＧＲＩＤＹ（登録商標）（３４％）およびＺＩＮＢＲＹＴＡ（登録商標）（３９％）（Ｒｏｔｓｔｅｉｎら，ＪＡＭＡ  Ｎｅｕｒｏｌ．，２０１５，Ｖｏｌ．７２（２）：１５２−１５８に報告されているもの）と比較して１年でのＮＥＤＡのより優れた結果をもたらした。
【０１８０】
ここまで本発明を具体的に説明してきたが、当業者には、多数の変形および修正を施すことが可能であることが理解されよう。したがって、本発明は、具体的に記載した実施形態に限定されるものとして理解されるべきではなく、また、本発明の範囲および概念は、のちの請求項を参照することによりさらに容易に理解されるであろう。
【図１】
2019530648.tif 000010
【図２】
2019530648.tif 000011
【国際調査報告】
2019530648.tif 000012
2019530648.tif 000013
2019530648.tif 000014