(57)【要約】本開示は三種陰性乳癌を含む乳癌を治療する方法を提供する。前記方法は、（ａ）タキサンを含むカチオン性リポソーム製剤、（ｂ）タキサンを含む非リポソーム製剤、および（ｃ）さらなる活性剤の投与を含む。前記さらなる活性剤は好ましくはゲムシタビンである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
乳癌を治療する方法であって、
前記方法は、前記治療を必要とする被験体に、
（ａ）１つ以上のカチオン性脂質および治療的有効量のタキサンを含むカチオン性リポソーム製剤と、（ｂ）治療的有効量のタキサンを含む非リポソーム製剤と、（ｃ）治療的有効量のさらなる活性剤と、を投与することを含む、
方法。
【請求項２】
前記方法は、前記治療を必要とする前記被験体に、
約１ｍｇ／ｍ２〜約６０ｍｇ／ｍ２のタキサンを含むカチオン性リポソーム製剤と、非リポソーム製剤中に約５ｍｇ／ｍ２〜約１００ｍｇ／ｍ２のタキサンを含む非リポソーム製剤と、約１００ｍｇ／ｍ２〜約１２５０ｍｇ／ｍ２のさらなる活性剤と、を投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記方法は、前記治療を必要とする前記被験体に、
約１１ｍｇ／ｍ２〜約２２ｍｇ／ｍ２のタキサンを含むカチオン性リポソーム製剤と、約７０ｍｇ／ｍ２〜約９０ｍｇ／ｍ２のタキサンを含む非リポソーム製剤と、約８００ｍｇ／ｍ２〜約１２５０ｍｇ／ｍ２のさらなる活性剤と、を投与することを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記カチオン性リポソーム製剤および前記非リポソーム製剤中のタキサンの総用量は約８０ｍｇ／ｍ２〜１２０ｍｇ／ｍ２である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記カチオン性リポソーム製剤および前記非リポソーム製剤は２８日治療サイクルの第１、８、および１５日に投与され、前記さらなる活性剤は２８日治療サイクルの第１および８日に投与される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記カチオン性リポソーム製剤は１番目に投与され；前記非リポソーム製剤は２番目に投与され；ならびに前記さらなる活性剤は３番目に投与される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記カチオン性リポソーム製剤は前記被験体に最初の１５分間、０．５ｍＬ／分の速度、続いて、次の１５分間、１．０ｍＬ／分の速度、続いて３０分後、１．５ｍＬ／分の速度で投与される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記カチオン性リポソーム製剤は、約３０モル％〜約９９．９モル％のカチオン性脂質を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記カチオン性リポソーム製剤は、少なくとも０．１モル％の量のタキサンを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記カチオン性リポソーム製剤は中性および／またはアニオン性脂質を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記カチオン性リポソーム製剤は３０モル％〜５５モル％の量の中性またはアニオン性脂質をさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記カチオン性リポソーム製剤は約０．０５Ｍ  ＫＣＩ溶液中、約ｐＨ７．５、室温で正のゼータ電位を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記タキサンはパクリタキセルまたはドセタキセルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記カチオン性リポソーム製剤はＤＯＴＡＰ、ＤＯＰＣ、およびパクリタキセルを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記カチオン性リポソーム製剤はＤＯＴＡＰ、ＤＯＰＣ、およびパクリタキセルを約５０：４７：３のモル比で含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記被験体のホルモン受容体状態はエストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体の両方について陰性であり、前記乳癌はＨＥＲ２陽性（ＨＥＲ２＋）である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記被験体のホルモン受容体状態はエストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体の両方について陰性であり、前記乳癌はＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記カチオン性脂質はＮ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム塩（ＤＯＴＡＰ）；ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド（ＤＤＡＢ）；１，２−ジアシルオキシ−３−トリメチルアンモニウムプロパンＮ−［１−（２，３−ジオロイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミン（ＤＯＤＡＰ）；１，２−ジアシルオキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン；Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）；１，２−ジアルキルオキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン；ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン（ＤＯＧＳ）；３β−［Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノ−エタン）カルバモイル］コレステロール（ＤＣ−Ｃｈｏｌ）；２，３−ジオレオイルオキシ−Ｎ−（２−（スペルミンカルボキサミド）−エチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−プロパンアミニウムトリフルオロアセテート（ＤＯＳＰＡ）；β−アラニルコレステロール；セチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）；ジＣ１４−アミジン；Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ’−テトラデシル−３−テトラデシルアミノ−プロピオンアミジン；１４Ｄｅａ２；Ｎ−（α−トリメチルアンモニオアセチル）ジドデシル−Ｄ−グルタメートクロリド（ＴＭＡＧ）；Ｏ，Ｏ’−ジテトラデカノイル−Ｎ−（トリメチルアンモニオアセチル）ジエタノールアミンクロリド；１，３−ジオレオイルオキシ−２−（６−カルボキシ−スペルミル）−プロピルアミド（ＤＯＳＰＥＲ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシルエチル）−２，３−ジオレオイルオキシ−１，４−ブタンジアンモニウムヨージド；１−［２−（アシルオキシ）エチル］２−アルキル（アルケニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）−イミダゾリニウムクロリド；１，２−ジオレオイル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩ）；１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ）；１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシプロピルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−ＨＰ）；１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシブチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−ＨＳ）；１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシペンチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−Ｈｐｅ）；１，２−ジミリスチルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシルエチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）；１，２−ジパルミチルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＰＲＩＥ）；１，２−ジステリルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＳＲＩＥ）；または１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロール−３−エチルホスホコリンである、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
前記１−［２−（アシルオキシ）エチル］２−アルキル（アルケニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）−イミダゾリニウムクロリドは１−［２−（９（Ｚ）−オクタデカノイルオキシ）エチル］−２−（８（Ｚ）−ヘプタデセニル−３−（２−ヒドロキシエチル）−イミダゾリニウムクロリド（ＤＯＴＩＭ）または１−［２−（ヘキサデカノイルオキシ）エチル］−２−ペンタデシル−３−（２−ヒドロキシエチル）イミダゾリニウムクロリド（ＤＰＴＩＭ）である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記中性脂質は中性電荷を有するコレステロール、リン脂質、リゾ脂質、スフィンゴ脂質、またはペグ化脂質である、請求項１０に記載の方法。
【請求項２１】
前記中性脂質はリゾリン脂質である、請求項１０に記載の方法。
【請求項２２】
前記中性脂質は１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、またはスフィンゴミエリンである、請求項１０に記載の方法。
【請求項２３】
１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンは１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンは１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＯＰＣ）である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記さらなる活性剤は化学療法薬である、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
前記化学療法薬はタキサンではない、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記化学療法薬はゲムシタビンである、請求項２６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年１２月３０日に出願された米国仮特許出願第６２／２７２，７７２号（その全内容は参照により本明細書に組み込まれる）の優先権の恩典を主張する。
【０００２】
技術分野
本開示は乳癌を治療するための方法を提供する。
【背景技術】
【０００３】
乳癌は最も頻繁に診断される癌であり、集団検診および療法の改善にも関わらず、世界中の女性の中の癌死亡の主因の１つのままである。乳癌の治療は、癌のステージおよび患者の年齢を含む様々な因子に依存する。乳癌は、通常、乳腺腫瘍摘出術または乳房切除術などの外科手術、続いて薬物療法および／または放射線療法により治療される。薬物療法は、ホルモン−ブロッキング剤、化学療法薬、およびモノクローナル抗体を含む。
【０００４】
乳癌は乳房の異なる領域、例えば乳管、小葉、または間にある組織で始まる。よって、乳癌の異なる型は、どこを癌細胞が起源とするかに依存し、非侵襲性、侵襲性、再発性、および転移性として特徴付けることができる。異なる型の乳癌の例としては、乳管内上皮内癌（ＤＣＩＳ）、侵襲性乳管癌（ＩＤＣ）、炎症性乳癌、および三種陰性乳癌が挙げられる。ＤＣＩＳは、異常細胞が乳管の内膜において見出される、非侵襲性癌である。時として浸潤性乳管癌と呼ばれるＩＤＣは、最も一般的な型の乳癌である。炎症性乳癌は、癌細胞が乳房の皮膚およびリンパ管を浸潤する、高悪性度の急激に成長する乳癌である。
【０００５】
乳癌はいくつかの異なる癌腫を含み、それらは、それらのエストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰｒＲ）、およびヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ２）状態に従い、治療理由について分類される。ＥＲ、ＰｒＲ、およびＨＥＲ２に対する標的療法が使用可能である。しかしながら、これらの治療選択は、三種陰性乳癌（ＴＮＢＣ）と呼ばれる、これらの受容体標的を欠く腫瘍を有する患者にはない。ＴＮＢＣは治療選択が限られ、標準アントラサイクリンまたはタキサンレジメン後の進行をたどる非常に悪い予後を有する高悪性度のサブタイプである。全乳癌症例の約１５％がＥＲ、ＰｇＲおよびＨＥＲ−２について陰性である。これらの症例では、予後は非常に悪く、再発率は８０％であり、生存期間中央値はわずか６ヶ月である。
【０００６】
国際ガイドラインによれば、既存の細胞傷害性薬物に基づく従来の全身化学療法が、進行ＴＮＢＣを有する患者に対する唯一の治療選択のままである（Ｃａｒｄｏｓｏ  Ｆ，  Ｃｏｓｔａ  Ａ，  Ｎｏｒｔｏｎ  Ｌら：  １ｓｔ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  （ＡＢＣ  １）．  Ｂｒｅａｓｔ．  ２１：２４２−２５２，  ２０１２）。しかしながら、特定の化学療法レジメンの使用を支持するロバストで、プロスペクティブな、ランダム化されたデータは存在しない。エビデンスを欠く結果として、これらの患者を臨床診療において管理するための特定の推奨はない。欧州臨床腫瘍学会ガイドラインは、アントラサイクリンに基づくアジュバント療法がレベル−１エビデンスを有する唯一の標準治療となった後に進行する患者における第一選択療法としてのタキサンに基づくレジメンを示す。
【０００７】
タキサンは乳癌を治療するために使用されてきた化学療法薬である。しかしながら、タキサンは有害な副作用を誘発する。その上、時間と共に、かつ使用を繰り返すにつれ、癌細胞は、他の化学療法薬と同様、タキサンに対する抵抗性を発症し、これにより、患者にさらなる利益を提供しないことが報告されている。薬物耐性の問題を扱う従来の戦略は、できる限り迅速にかつ完全に全ての腫瘍細胞を根絶しようとして、タキサンの用量を最大耐用量（ＭＴＤ）まで増加させることである。しかしながら、この戦略は重篤な有害作用を引き起こし、長期間使用することができない。したがって、治療は、ＭＴＤでの、通常、１週間に１日の短い治療期間、続いて、患者を回復させるための数週間の治療なし間隔のサイクルから構成される。治療なし間隔中、腫瘍成長が再開する可能性があることが報告されている。一般的な解決策は第２の薬物による治療を開始させることであった。しかしながら、腫瘍はしばしば、ある一定量の時間の間、応答するにすぎず、腫瘍の一時的な退縮に至るにすぎない。その結果として、腫瘍はまた、第２の薬物に抵抗性となる。この戦略を続けると、多剤耐性腫瘍の発症に至るにすぎず、それらは最終的に、全ての使用可能な抗癌剤に不応性となる。
【０００８】
単剤療法ではなく、併用療法、例えば、１つ以上の化学療法薬の併用が高悪性度の、または内臓転移性疾患を有する患者について、特に、彼等のよくない生存の予後に関して考慮される。例えば、２００４年に、ゲムシタビン（３週サイクルの第１日および第８日に１２５０ｍｇ／ｍ２）とパクリタキセル（３週サイクルの第１日に１７５ｍｇ／ｍ２）の併用が、転移性乳癌の第一選択治療のために認可された。しかしながら、水中での溶解度が非常に低いパクリタキセルは、クレモフォールＥＬ（ポリエトキシル化ヒマシ油）を含むビヒクル中で製剤化され、投与され、これは、パクリタキセルは水に溶解しにくいので、様々な副作用を誘発する。
【０００９】
さらに、有害作用は、単剤療法よりも併用療法においてより普通である可能性がある。例えば、転移性乳癌患者において、ゲムシタビン（第１日および第８日に１２５０ｍｇ／ｍ２）／パクリタキセル（第１日に１７５ｍｇ／ｍ２）を第一選択療法としての週３回パクリタキセル（１７５ｍｇ／ｍ２）単独と比較するＩＩＩ相研究では、グレード３／４好中球減少症（４８対１１％）および発熱性好中球減少症（５対１．２％）のより高い発生率が、併用アームにおける患者において報告され、より高頻度の非造血系毒性、例えば無力症（７対２％）、肝機能の変化（７対２％）および末梢性ニューロパチー（６対４％）もまた報告された（Ａｌｂａｉｎ  ＫＳ，  Ｎａｇ  ＳＭ，  Ｃａｌｄｅｒｉｌｌｏ−Ｒｕｉｚ  Ｇ，  Ｊｏｒｄａａｎ  ＪＰ，  Ｌｌｏｍｂａｒｔ  ＡＣ，  Ｐｌｕｚａｎｓｋａ  Ａ  ら  Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ  ｐｌｕｓ  Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ  ｖｅｒｓｕｓ  Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ  ｍｏｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ｐｒｉｏｒ  ａｎｔｈｒａｃｙｃｌｉｎｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．  ２００８；２６：３９５０−７）。
【００１０】
よって、タキサンに基づく療法については、効果を増強させ、副作用を低減させた、タキサンを送達させる方法および／または投与レジメンを開発する必要がある。
【発明の概要】
【００１１】
本開示は、重篤な有害作用、例えばクレモフォールＥＬ製剤中の高い初期治療用量のタキサンを投与することにより引き起こされるもののない、タキサンをその必要のある被験体に治療的有効量で投与することにより乳癌を治療する方法を提供する。
【００１２】
本明細書で提供される方法は、その必要のある被験体に、治療的有効量の、１つ以上のカチオン性脂質およびタキサンを含むカチオン性リポソーム製剤を投与することを含む。方法は、１つ以上のさらなる活性剤を含む１つ以上の非リポソーム製剤を投与することをさらに含む。
【００１３】
その必要のある被験体に下記を投与することを含む方法もまた、本明細書で記載される：（ａ）１つ以上のカチオン性脂質および治療的有効量のタキサンを含むカチオン性リポソーム製剤；ならびに（ｂ）治療的有効量のタキサンを含む非リポソーム製剤；ならびに（ｃ）治療的有効量のさらなる活性剤。実施形態では、さらなる活性剤はタキサンではない。特定の実施形態では、さらなる活性剤はゲムシタビンである。
【００１４】
いくつかの実施形態では、本開示の方法は、少なくとも１つのサイクルを含む投与レジメンに関し、ここで、サイクルは２８日の期間であり、ここで、各サイクルについて、カチオン性リポソーム製剤はサイクルの第１日、８日および１５日に約１〜６０ｍｇ／ｍ２タキサンの用量で投与され；非リポソームはサイクルの第１日、８日および１５日に約５〜１００ｍｇ／ｍ２タキサンの用量で投与され；ならびにさらなる活性剤、例えば、ゲムシタビンはサイクルの第１日および第８日に約１００〜１２５０ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【００１５】
実施形態では、方法は、被験体に、約１１ｍｇ／ｍ２〜約２２ｍｇ／ｍ２のタキサンを含むカチオン性リポソーム製剤を投与することを含む。
【００１６】
実施形態では、方法は、被験体に、約７０ｍｇ／ｍ２〜約９０ｍｇ／ｍ２タキサンを含む非リポソーム製剤を投与することを含む。
【００１７】
実施形態では、方法は、被験体に、さらなる活性剤、例えばゲムシタビンを約８００ｍｇ／ｍ２〜約１２５０ｍｇ／ｍ２で投与することを含む。
【００１８】
実施形態では、方法は、非リポソーム製剤の前に、カチオン性リポソーム製剤を被験体に投与することを含み、方法は、ゲムシタビン前に非リポソーム製剤を被験体に投与することを含む。
【００１９】
いくつかの実施形態では、被験体のホルモン受容体状態はエストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体の両方について陰性である。他の実施形態では、乳癌はＨＥＲ２陽性（ＨＥＲ２＋）である。特定の実施形態では、乳癌はＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）である。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】ＴＮＢＣ腫瘍モデルにおける合剤の活性を示す。
【図２】臨床試験設計の略図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本明細書では、「治療的有効量」という用語は、治療される被験体において所望の治療効果を達成するのに十分な活性剤の量である。結果は疾患の徴候、症状、または原因の１つ以上の低減、寛解、緩和、低下、遅延、および／または軽減とすることができる。いくつかの実施形態では、治療的有効量は腫瘍の縮小および成長速度の減少を引き起こすのに十分な量を含む。いくつかの実施形態では、治療的有効量は腫瘍再発を防止または遅延させるのに十分な量である。いくつかの実施形態では、治療的有効量は、末梢臓器への癌細胞浸潤を阻止する、妨害する、ある程度減速させる、および中止させることができる；腫瘍転移を阻止する（すなわち、ある程度減速させる、および中止させることができる）；腫瘍成長を阻止する；腫瘍の発生および／または再発を防止または遅延させるのに十分な量である。治療的有効量は、１以上の投与で投与することができる。
【００２２】
本明細書では、「被験体」という用語は、哺乳類、例えばヒトまたは動物を示す。実施形態では、被験体は治療の必要があり（その必要があり）、被験体はヒト癌患者である。特定の実施形態では、治療の必要がある（その必要がある）被験体は乳癌を有する被験体である。実施形態では、被験体は乳癌、例えばＤＣＩＳ、ＩＤＳ、炎症性乳癌、および三種陰性乳癌と診断された、またはこれを患うヒト患者である。特定の実施形態では、被験体は三種陰性乳癌と診断されたヒト患者である。ヒト患者は閉経前または後であってもよい。治療される癌は、サイズ、分布、および転移形成の程度に従って、異なる臨床ステージにある可能性がある。
【００２３】
本明細書では、「投与レジメン」は、リポソーム製剤または非リポソーム製剤を被験体に投与するために使用されるプロトコルを示す。投与レジメンは、用量および投与間隔を含む。投与レジメンは、投与持続期間をさらに含む。本明細書では、「用量」は、単回投与で与えられる活性剤の量を示す。用量間の間隔は所望の時間量とすることができ、「投与間隔」と呼ばれる。本明細書では「投与持続期間」は、一用量が投与される期間を示す。
【００２４】
「ｍｇ／ｍ２」という単位は、ヒト体表面積（ｍ２）あたりの活性剤の量を示す。用量計算は、脂質部分ではなく、活性剤の質量のみを示す。
【００２５】
「併用療法」という用語は、本明細書では、少なくとも２つの活性剤の被験体への同時投与または第２に投与される治療薬が投与された時に、第１に投与された治療薬が被験体中に依然として存在する期間内でのそれらの連続投与を含む。
【００２６】
「リポソーム」という用語は、顕微鏡的な球状の膜に囲まれた小胞（約５０−２０００ｎｍ直径）を示す。「リポソーム」という用語は、脂質二重層により封入された任意のコンパートメントを包含する。リポソームは脂質小胞とも呼ばれる。リポソームを形成させるために、脂質分子は細長い非極性（疎水性）部分および極性（親水性）部分を含む。分子の疎水性および親水性部分は好ましくは、細長い分子構造の２つの端に配置される。そのような脂質が水中に分散されると、それらは自然にラメラと呼ばれる二重層膜を形成する。ラメラは脂質分子の２つの単層シートから構成され、それらの非極性（疎水性）表面が向かい合い、それらの極性（親水性）表面が水性媒質に面している。脂質により形成された膜は、細胞の内容物を封入する細胞膜と同様に、水相の部分を封入する。
【００２７】
よって、リポソームの二重層は細胞膜と類似性を有し、細胞膜内に存在するタンパク質成分はない。本明細書では、リポソームという用語は多重膜リポソームを含み（これらは一般に約１〜１０マイクロメートルの範囲の直径を有し、どこでも、水相の層と交互になった２〜数百の同心円状脂質二重層を有する）、および、単層小胞も含み（これらは、単一脂質層であり、約２０〜約４００ナノメートル（ｎｍ）、約５０〜約３００ｎｍ、約３００〜約４００ｎｍ、または約１００〜約２００ｎｍの範囲の直径を有する）、その小胞は、多重膜リポソームを超音波に供することにより、加圧下で、規定されたサイズの細孔を有する膜に通して押出加工することにより、または高圧均質化により生成させることができる。リポソームは単層小胞とすることができ、それらは単一脂質二重層、および約２５−４００ｎｍの範囲の直径を有する。
【００２８】
本明細書で提供されるカチオン性リポソーム製剤は、１つ以上のカチオン性脂質、タキサン、および任意で、中性および／またはアニオン性脂質を含む。本明細書では、「リポソーム」、「リポソーム調製物」、および「リポソーム製剤」という用語は、本出願を通して同義語として使用される。
【００２９】
カチオン性リポソーム製剤中のカチオン性脂質の量は約３０モル％〜約９９．９モル％である。カチオン性リポソーム製剤中のタキサンの量は少なくとも約０．１モル％である。中性および／またはアニオン性脂質の量は約３０モル％〜約７０モル％である。
【００３０】
いくつかの実施形態では、カチオン性リポソーム製剤中のカチオン性脂質の量は、約４０モル％〜約９５モル％、約５０モル％〜約９０モル％、約６０モル％〜約８５モル％、約６５モル％〜約７５モル％、または約７０モル％を含む。
【００３１】
他の実施形態では、カチオン性リポソーム製剤は、約０．５モル％〜約１０モル％、約１．０モル％〜約８モル％、約２モル％〜約６モル％、約２．５モル％〜約５モル％、または約２．５モル％〜約３．０モル％の量のタキサンを含む。
【００３２】
任意で、カチオン性リポソーム製剤は、約３０モル％〜約７０モル％、約４０モル％〜約６０モル％、または約４５モル％〜約５５モル％の量の中性および／またはアニオン性脂質を含む。
【００３３】
実施形態では、リポソーム製剤は、約ｐＨ７．５の約０．０５ｍＭ  ＫＣｌ溶液中で、約０ｍＶ〜約１００ｍＶの範囲、または約２０ｍＶ〜約１００ｍＶの範囲のゼータ電位を有する。
【００３４】
本明細書では、「ゼータ電位」という用語は、機器、例えば、ゼータサイザー３０００を用い、レーザドップラーマイクロ−電気泳動を使用して、特定された条件下で測定された、粒子、例えばリポソームの測定電位を示す。ゼータ電位は、バルク溶液と流体力学的せん断または拡散層の領域の間の境界での電位を示す。用語は「界面動電位」と同義である。というのも、これは、外向きに作用し、粒子の動電挙動の原因となる粒子の電位であるからである。
【００３５】
カチオン性リポソーム製剤中の１つ以上のカチオン性脂質は下記からなる群より選択され：Ｎ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム塩、例えばＮ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム塩（ＤＯＴＡＰ）；ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド（ＤＤＡＢ）；１，２−ジアシルオキシ−３−トリメチルアンモニウムプロパン、例えば、ジオレオイル、ジミリストイル、ジラウロイル、ジパルミトイル、およびジステアロイルが含まれ、およびグリセロールバックボーンに連結された２つの異なるアシル鎖を有するものが含まれる）；Ｎ−［１−（２，３−ジオロイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミン（ＤＯＤＡＰ）；１，２−ジアシルオキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン、例えば、ジオレオイル、ジミリストイル、ジラウロイル、ジパルミトイル、およびジステアロイルが含まれ、グリセロールバックボーンに連結された２つの異なるアシル鎖を有するものが含まれる；Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）；１，２−ジアルキルオキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン、例えばジオレイル、ジミリスチル、ジラウリル、ジパルミチル、およびジステアリルが含まれ、グリセロールバックボーンに連結された２つの異なるアルキル鎖を有するものが含まれる；ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン（ＤＯＧＳ）；３β−［Ｎ−−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノ−エタン）カルバモイル］コレステロール（ＤＣ−Ｃｈｏｌ）；２，３−ジオレオイルオキシ−Ｎ−（２−（スペルミンカルボキサミド）−エチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−プロパナム−イニウムトリフルオロ−アセテート（ＤＯＳＰＡ）；β−アラニルコレステロール；セチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）；ジＣ１４−アミジン；Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ’−テトラデシル−３−テトラデシルアミノ−プロピオンアミジン；１４Ｄｅａ２；Ｎ−（α−トリメチルアンモニオアセチル）ジドデシル−Ｄ−グルタメートクロリド（ＴＭＡＧ）；Ｏ，Ｏ’−ジテトラデカノイル−Ｎ−（トリメチルアンモニオ−アセチル）ジエタノールアミンクロリド；１，３−ジオレオイルオキシ−２−（６−カルボキシ−スペルミル）−プロピルアミド（ＤＯＳＰＥＲ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシルエチル）−２，３−ジオレオイルオキシ−１，４−ブタン−ジアンモニウムヨージド；１−［２−（アシルオキシ）エチル］−アルキル（アルケニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）−イミダゾリニウムクロリド誘導体、例えば１−［２−（９（Ｚ）−オクタデカノイルオキシ）エチル］−２−（８（Ｚ）−ヘプタデセニル−３−（２−ヒドロキシエチル）−イミダゾリニウムクロリド（ＤＯＴＩＭ）および１−［２−（ヘキサデカノイルオキシ）エチル］−２−ペンタデシル−３−（２−ヒドロキシエチル）イミダゾリニウムクロリド（ＤＰＴＩＭ）；四級アミン上にヒドロキシアルキル部分を含む、２，３−ジアルキルオキシプロピル四級アンモニウム化合物誘導体、例えば、１，２−ジオレオイル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩ）、１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ）、１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシプロピルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−ＨＰ）、１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシブチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−ＨＢ）、１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシペンチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−Ｈｐｅ）、１，２−ジミリスチルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシルエチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）、１，２−ジパルミチルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＰＲＩＥ）、および１，２−ジステリルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＳＲＩＥ）；アシルカルニチンのカチオン性エステル；ならびにホスファチジルコリンのカチオン性トリエステル、例えば、１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロール−３−エチルホスホコリン、ここで、炭化水素鎖は飽和もしくは不飽和および分枝もしくは非分枝であり、鎖長はＣ１２〜Ｃ２４であり、２つのアシル鎖は同一であってもよく、そうでなくてもよい。
【００３６】
任意で、リポソーム調製物は１つ以上の中性および／またはアニオン性脂質を含む。中性およびアニオン性脂質はステロールまたは脂質、例えばコレステロール、リン脂質、リゾ脂質、リゾリン脂質、スフィンゴ脂質、またはペグ化脂質（中性または負の正味電荷を有する）から選択される。特定の実施形態では、中性およびアニオン性脂質としては下記が挙げられる：ホスファチジルセリン；ホスファチジルグリセロール；ホスファチジルイノシトール；脂肪酸；カルボン酸基を含むステロール、例えば、コレステロール；１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、ＤＯＰＥが含まれる；１，２−ジアシル−グリセロ−３−ホスホコリン；ならびにスフィンゴミエリン。グリセロールバックボーンに連結された脂肪酸は様々な長さおよび二重結合の数を有する。リン脂質は２つの異なる脂肪酸を有することができる。実施形態では、中性および／またはアニオン性脂質は、室温で液晶状態にあり、それらは、適用される比率で、使用されるカチオン性脂質と混和される。中性および／またはアニオン性脂質およびカチオン性脂質は均一な相を形成することができ、相分離またはドメイン形成は起こらない。実施形態では、中性脂質はＤＯＰＣ（１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）である。
【００３７】
実施形態では、リポソームおよび非リポソーム製剤はタキサンを含む。本明細書では、「タキサン」という用語は本明細書では、細胞分裂を阻止する、微小管に結合する機能を有し、タキサン環構造および細胞分裂阻害活性に必要とされる立体特異的側鎖を含む構造を有する、抗悪性腫瘍薬のクラスを示す。タキサンという用語はまた、様々な公知の誘導体、例えば親水性誘導体および疎水性誘導体を含む。タキサン誘導体は下記を含む：国際特許出願第ＷＯ９９／１８１１３号に記載されるガラクトースおよびマンノース誘導体；ＷＯ９９／１４２０９号に記載されるピペラジノおよび他の誘導体；ＷＯ９９／０９０２１号、ＷＯ９８／２２４５１号、および米国特許第５，８６９，６８０号に記載されるタキサン誘導体；ＷＯ９８／２８２８８号に記載される６−チオ誘導体；米国特許第５，８２１，２６３号に記載されるスルフェンアミド誘導体；ならびに米国特許第５，４１５，８６９号に記載されるタキソール誘導体。タキサンの例としては、パクリタキセル、ドセタキセル、およびカバジタキセル（ｃａｒｂａｚｉｔａｘｅｌ）が挙げられる。
【００３８】
「パクリタキセル」という用語は類似体、製剤、および誘導体、例えば、例として、ドセタキセル（タキソテール、ドセタキセルの製剤）、パクリタキセルの１０−デスアセチル類似体およびパクリタキセルの３’Ｎ−デスベンゾイル−３’Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル類似体を含む。パクリタキセルは、当業者に知られている技術を使用して容易に調製することができ（ＷＯ９４／０７８８２号、ＷＯ９４／０７８８１号、ＷＯ９４／０７８８０号、ＷＯ９４／０７８７６号、ＷＯ９３／２３５５５号、ＷＯ９３／１００７６号；米国特許第５，２９４，６３７号；５，２８３，２５３号；５，２７９，９４９号；５，２７４，１３７号；５，２０２，４４８号；５，２００，５３４号；５，２２９，５２９号；ならびにＥＰ５９０，２６７号もまた、参照されたい）、または、様々な商業的供給源、例えば、例として、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，  Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ，  Ｍｏ．（Ｔａｘｕｓ  ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａからＴ７４０２；またはＴａｘｕｓ  ｙａｎｎａｎｅｎｓｉｓからＴ−１９１２）から入手することができる。パクリタキセルは、パクリタキセルの普通の化学的に入手可能な形態（例えばタキソール（登録商標））だけでなく、類似体（例えば、タキソテール、上述）およびパクリタキセルコンジュゲート（例えば、パクリタキセル−ＰＥＧ、パクリタキセル−デキストラン、またはパクリタキセル−キシロース）も示す。
【００３９】
「誘導体」という用語は、他の何らかの化合物から誘導されるが、その一般的構造特徴を維持する化合物を示す。誘導体は、例えば、化学的官能化または誘導体化により得ることができる。
【００４０】
「リポソームパクリタキセル」または「脂質複合パクリタキセル」という用語は、リポソーム調製物を示す。特定的なリポソームパクリタキセル製剤はＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１である。そのような製剤の製造は、ＷＯ２００４／００２４６８号、ＵＳ７７９４７４７号、ＵＳ８０７５９１３号、ＵＳ８６６３６０６号、およびＵＳ９２３８０２１号において開示される。ＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１は５０：４７：３モル％のＤＯＴＡＰ、ＤＯＰＣおよびパクリタキセルのモル比を有する、リポソーム調製物である。
【００４１】
脂質の立体形状および両親媒性のために、自己組織化により、脂質二重層（膜）の形成に至り、この場合、疎水性アルキル鎖は互いに向かって配向され、極性頭部基は水相に向かって配向される。これらの膜は、球状小胞、いわゆるリポソームとして組織化される。二重層膜中のカチオン性（正電荷を持つ）脂質分子の存在の結果として、リポソームはカチオン性となる。ＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１は、凍結乾燥粉末の形態である。これは、適用前に注射のために水を用いて再構成させることができる。得られた溶液は、約３００ｎｍ未満の強度加重平均粒子サイズを有する小さなリポソーム小胞から構成される。
【００４２】
本明細書で記載されるカチオン性リポソーム製剤は１つ以上のカチオン性脂質、１つ以上の中性脂質、およびタキサンを含む。実施形態では、カチオン性脂質はＤＯＴＡＰであり；中性脂質はＤＯＰＣであり；ならびに、タキサンはパクリタキセルである。カチオン性脂質、中性脂質、およびタキサンのモル比は、約４０〜６０のカチオン性脂質、約３９〜５５の中性脂質、および約１〜５のタキサンの範囲内である。特定の実施形態では、カチオン性リポソーム製剤はＤＯＴＡＰ、ＤＯＰＣ、およびパクリタキセルを約５０：４７：３のモル比で含む。
【００４３】
タキサンをカチオン性リポソーム製剤および非リポソーム製剤中で投与する以外に、本開示の方法は、さらなる活性剤を投与することを含む。実施形態では、さらなる活性剤はパクリタキセルでなく、またはタキサンではない。
【００４４】
本明細書では、「活性剤」という用語は、治療的に有効な作用物質を示す。活性剤は、細胞傷害性または細胞分裂阻害物質、例えば、抗腫瘍または抗内皮細胞活性物質、化学療法薬または免疫学的活性物質、過敏症反応を低減または排除する化合物、もしくは化学療法増感剤またはそれらの組み合わせとすることができる。
【００４５】
化学療法薬の例としては、乳癌に対して有効なものが挙げられ、下記が含まれる：葉酸拮抗薬、例えばメトトレキサートおよびペメトレキセド；プリン拮抗薬、例えばクラドリビン、クロファラビン、フルダラビン、６−メルカプトプリン、ネララビン、およびペントスタチン；ピリミジン拮抗薬、例えばカペシタビン、シタラビン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、およびヒドロキシ尿素；生物学的応答調節物質、例えばインターフェロン−α；ブレオマイシン；ＤＮＡアルキル化剤、例えばニトロソウレア、カルムスチン、およびロムスチン；ＤＮＡ架橋剤およびアルキル化剤、例えばベンダムスチン、クロランブシル、シクロホスファミド、イホスファミド、メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード）、メルファラン、ダカルバジン、テモゾロミド、およびプロカルバジン；アスパラギナーゼ；抗生物質、例えばマイトマイシン；白金錯体、例えばカルボプラチン、シスプラチン、およびオキサリプラチン；プロテオソーム（ｐｒｏｔｅｏｓｏｍｅ）阻害剤、例えばボルテゾミブ；紡錘体毒、例えばタキサン、例えばドセタキセルおよびパクリタキセル、およびビンカ、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン、およびビノレルビン；トポイソメラーゼ阻害剤、例えばアントラサイクリン（例えば、ダウノルビシン、ダウノマイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、バルルビシン、およびミトキサントロン）、カンプトテシン、（例えばイリノテカン、およびトポテカン）、およびポドフィロトキシン（例えばエトポシド、テニポシドおよびミトキサントロン）；チロシンキナーゼ阻害剤、（例えばエルロチニブ（タルセバ）、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、ソラフェニブ、およびスニチニブ）。
【００４６】
乳癌の治療のために有効な活性剤の併用は、シクロホスファミド、メトトレキサート、および５−フルオロウラシルの併用であるＣＭＦ；シクロホスファミド、ドキソルビシン、および５−フルオロウラシルの併用であるＣＡＦ（ＦＡＣ）；ドキソルビシンおよびシクロホスファミドの併用であるＡＣ；エピルビシンおよびシクロホスファミドの併用であるＥＣ；ドセタキセル、ドキソルビシンおよびシクロホスファミドの併用であるＴＡＣ；ドキソルビシンおよびシクロホスファミド、続いてパクリタキセルまたはドセタキセルの併用であるＡＣ→Ｔを含み；ハーセプチンはＨＥＲ２陽性腫瘍のために、パクリタキセルまたはドセタキセルと共に与えられてもよく；ドキソルビシンの併用、続いてＣＭＦであるＡ→ＣＭＦ；シクロホスファミド、エピルビシンおよび５−フルオロウラシルの併用（これは、続いてドセタキセルであってもよい）であるＣＥＦ（ＦＥＣ）；ドセタキセルおよびシクロホスファミドの併用である、ＴＣ；ならびに、ドセタキセル、カルボプラチン、およびＨＥＲ２陽性腫瘍のためのハーセプチンの併用である、ＴＣＨ。
【００４７】
実施形態では、他の活性剤は、過敏症反応を低減または排除する化合物を含むことができる。そのような化合物の例は、ステロイド、抗ヒスタミン薬、Ｈ２受容体拮抗薬、およびそれらの組み合わせを致命的アナフィラキシー反応を防止をするのに十分な量で含む。特定の実施形態では、化合物はラニチジン、デキサメタゾン、ジフェンヒドラミン、ファモチジン、ヒドロコルチゾン、クレマスチン、シメチジン、プレドニゾロン、クロルフェニラミン、マレイン酸ジメチンデン、およびプロメタジンを含む。
【００４８】
他の実施形態では、他の活性剤は化学療法増感剤を含む。本明細書では、「化学療法増感剤」という用語は、化学療法が影響を与える、特に癌細胞を死滅させるのをより容易にする物質または薬物を示す。化学療法増感剤の例としては、細胞周期モジュレーター、ベラパミルのような薬物耐性を復帰させる物質、降圧薬のような血管作動性物質、および、プロタミンのようなカチオン性リポソームの血液成分との相互作用を改変する物質が挙げられる。
【００４９】
カチオン性リポソーム製剤および／または非リポソーム製剤は、１つ以上の担体を含むことができる。本明細書では、「担体」という用語は、診断または治療薬を投与するのに好適な希釈剤、アジュバント、賦形剤、またはビヒクルを示す。この用語はまた、そのような作用物質のその意図された標的部位への輸送を促進する作用物質を含む、これと複合体化する、またはこれと別様に関連させられる薬学的に許容される担体を示す。担体としては、当技術分野で知られているもの、例えばリポソーム、ポリマ、脂質複合体、血清アルブミン、抗体、シクロデキストリン、デキストラン、キレート、または他の超分子会合体が挙げられる。
【００５０】
本明細書で開示される製剤、特にカチオン性リポソーム製剤は、乾燥、脱水、または凍結乾燥形態で提供することができる。投与前に、製剤は医薬品グレード水または生理食塩水または、好ましくは生理的に許容される担体、例えばバッファーを含む、別の好適な液体中で水和させることができる。
【００５１】
本明細書で開示される製剤は、キットの形態で提供することができる。実施形態では、キットは、カチオン性リポソーム製剤、非リポソーム製剤および１つ以上のさらなる活性剤を含むことができる。１つ以上の活性な、さらなる活性剤は化学療法薬とすることができる。特定の実施形態では、キット中のカチオン性、非リポソーム製剤はタキサン、例えばパクリタキセルを含み、１つ以上のさらなる活性剤はゲムシタビンを含む。本明細書で提供されるキットはまた、投与用の製剤を調製するための容器および／または試薬を含むことができる。一例として、カチオン性リポソーム製剤は脱水形態とすることができ、これは水和により再構成させることができる。
【００５２】
本明細書で提供される製剤は第一、第二、または第三選択治療において使用することができる。治療される被験体は、腫瘍切除のための外科手術（例えば、乳腺腫瘍摘出術または乳房切除術）、放射線療法、および／または化学療法を受けていてもよい。乳癌のための一般的な化学療法はアントラサイクリンに基づく併用レジームである。典型的には、この併用レジメンはアントラサイクリン薬物、例えばドキソルビシンまたはエピルビシンを含む。一例として、第一選択治療はアントラサイクリン薬物およびタキサン薬物の併用療法を含むことができ、第二選択治療は本明細書で提供されるカチオン性リポソーム製剤または本明細書で提供されるカチオン性リポソーム製剤および非リポソーム製剤の併用とすることができる。
【００５３】
本明細書では、「併用」または「共投与」という用語は、同時、連続、重複、交互、並行である投与スケジュール、または、様々な活性剤または治療薬が単一治療レジメン、処方または指示の一部として投与される、または様々な作用物質および治療薬が投与される期間が別様に、部分的にまたは完全に一致する、任意の他の治療スケジュールを示す。
【００５４】
リポソーム製剤および非リポソーム製剤の併用は、別個に、同時に、または順次共投与することができる。カチオン性リポソーム製剤および非リポソーム製剤は、同じ日または異なる日の異なる時点で投与することができる。実施形態では、カチオン性リポソーム製剤は、非リポソーム製剤の前、例えば、非リポソーム製剤の投与前１時間超、しかし、１２時間以下に投与される。
【００５５】
実施形態では、リポソーム製剤、非リポソーム製剤、およびさらなる活性剤は順次投与される。特定の実施形態では、リポソーム製剤が１番目に投与され、非リポソーム製剤が２番目に投与され、さらなる活性剤は３番目に投与される。
【００５６】
実施形態では、カチオン性リポソーム製剤の投与速度は段階的に増加される。カチオン性リポソーム製剤は初速度、続いて１つ以上のより高い速度で投与される。カチオン性リポソーム製剤は最初の１５分間約０．３〜０．７ｍＬ／分の速度で、第２の１５分間約０．８〜１．２ｍＬ／分の速度で、３０分後約１．３〜１．７ｍＬ／分の速度で投与される。特定の実施形態では、カチオン性リポソーム製剤は、最初の１５分間約０．５ｍＬ／分の速度で、第２の１５分間約１．０ｍＬ／分の速度で、３０分後約１．５ｍＬ／分の速度で投与される。
【００５７】
製剤は、被験体に治療的有効量で少なくとも週１回投与することができる。実施形態では、製剤は週１回または２回投与される。他の実施形態では、製剤は治療期間中週１回および週２回の交互で投与することができる。
【００５８】
治療の持続期間および観察される副作用によって、製剤の投与はまた、治療期間中、少なくとも１週間または数週間の間省略することができる。
【００５９】
実施形態では、本明細書で記載される方法は、カチオン性リポソーム製剤を約１ｍｇ／ｍ２〜約６０ｍｇ／ｍ２の単一用量で投与することを含む。
【００６０】
本明細書では、単位「ｍｇ／ｍ２」は、被験体の体表面（ｂｓ）１ｍ２あたりの活性剤、例えばパクリタキセルのｍｇを示す。
【００６１】
本明細書では、単位ｍｇ／ｋｇ被験体の体重またはｍｇ／ｋｇは、被験体の体重（ｂｗ）１ｋｇあたりの活性剤、例えばパクリタキセルのｍｇを示す。
【００６２】
実施形態では、平均して、ヒト被験体は約１．８４ｍ２の体表面を有する。よって、７０ｋｇ体重および１７２ｃｍ身長の平均的な人では、ｍｇ／ｋｇ体重（ｂｗ）で表される単一用量、月用量、などに対する値は、ヒト応用では、公知の方法により種特異的係数を掛けることにより、ｍｇ／ｍ２人体表面（ｂｓ）で表される対応する値に変換することができる。同様に、ｍｇ／ｍ２ヒト被験体のｂｓで表される用量は、ｍｇ／ｋｇヒト被験体のｂｗに変換することができる。
【００６３】
本明細書で記載される方法では、カチオン性リポソーム製剤は、約１ｍｇ／ｍ２〜約５０ｍｇ／ｍ２、約２５ｍｇ／ｍ２〜約５０ｍｇ／ｍ２、約１０ｍｇ／ｍ２〜約２５ｍｇ／ｍ２、または約１１ｍｇ／ｍ２〜約２２ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。特定の実施形態では、カチオン性リポソーム製剤は、約１ｍｇ／ｍ２、約２．５ｍｇ／ｍ２、約５ｍｇ／ｍ２、約７．５ｍｇ／ｍ２、１１ｍｇ／ｍ２、約２２ｍｇ／ｍ２、約２５ｍｇ／ｍ２、約２８ｍｇ／ｍ２、約３１ｍｇ／ｍ２、約３３ｍｇ／ｍ２、約３５ｍｇ／ｍ２、約３８ｍｇ／ｍ２、約４１ｍｇ／ｍ２、約４４ｍｇ／ｍ２、または約４７ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【００６４】
実施形態では、カチオン性リポソーム製剤は週１回または２回、約１１ｍｇ／ｍ２または約２２ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。他の実施形態では、カチオン性リポソーム製剤は２８日治療サイクルの第１、８、および１５日に投与される。治療サイクルは、所望であれば数回、例えば少なくとも２、３、４、５、または６回繰り返してもよい。
【００６５】
本明細書で記載される方法は、タキサン、例えばパクリタキセルまたはその誘導体を含むカチオン性リポソーム製剤、非リポソーム製剤、およびさらなる活性剤、例えばゲムシタビンを投与することを含む。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法で使用されるカチオン性リポソーム製剤はＤＯＴＡＰ、ＤＯＰＣ、およびパクリタキセルを含む。
【００６６】
実施形態では、非リポソーム製剤の単一用量におけるタキサン、例えばパクリタキセルは約５ｍｇ／ｍ２〜約１００ｍｇ／ｍ２、約５ｍｇ／ｍ２〜約５０ｍｇ／ｍ２、約５０ｍｇ／ｍ２〜約１００ｍｇ／ｍ２、または約７０ｍｇ／ｍ２〜約９０ｍｇ／ｍ２被験体の体表面（ｂｓ）である。特定の実施形態では、約７０ｍｇ／ｍ２、約８０ｍｇ／ｍ２、または約９０ｍｇ／ｍ２被験体のｂｓで投与される非リポソーム製剤中のタキサンは２８日治療サイクルの第１、８、および１５日に投与される。治療サイクルは、所望であれば数回、例えば少なくとも２、３、４、５または６回繰り返してもよい。
【００６７】
実施形態では、ゲムシタビンは、約１００ｍｇ／ｍ２〜約１２５０ｍｇ／ｍ２、約１００ｍｇ／ｍ２〜約５００ｍｇ／ｍ２、約５００ｍｇ／ｍ２〜約１２５０ｍｇ／ｍ２、約６００ｍｇ／ｍ２〜約１２５０ｍｇ／ｍ２、約７００ｍｇ／ｍ２〜約１２５０ｍｇ／ｍ２、または約８００ｍｇ／ｍ２〜約１２５０ｍｇ／ｍ２被験体のｂｓである。特定の実施形態では、ゲムシタビンは約８００ｍｇ／ｍ２、１０００ｍｇ／ｍ２または約１２５０ｍｇ／ｍ２の用量で、２８日治療サイクルの第１日および第８日に投与される。治療サイクルは、所望であれば数回、例えば少なくとも２、３、４、５または６回繰り返してもよい。ゲムシタビン（ジェムザール（登録商標））は市販されている。
【００６８】
２００４年に、食品医薬品局（ＦＤＡ）は、転移性乳癌を有する患者の第一選択治療のために、ゲムシタビン（第１日および第８日に１２５０ｍｇ／ｍ２）を、パクリタキセル（第１日に１７５ｍｇ／ｍ２）と併用して２１日毎に投与することを認可した。本明細書で提供される併用療法の実施形態では、ゲムシタビンは、ＦＤＡに認可された標準療法におけるものと比べてより低い週用量で適用することができる。特定の実施形態では、ゲムシタビンは約８００ｍｇ／ｍ２〜約１０００ｍｇ／ｍ２の週用量で投与され得る。
【００６９】
本明細書で提供される併用療法の実施形態では、総パクリタキセル（カチオン性リポソーム製剤および非リポソーム製剤中のパクリタキセル）は、ＦＤＡに認可された標準療法におけるものと比べてより低い週用量で適用することができる。特定の実施形態では、カチオン性リポソーム製剤は、約１１ｍｇ／ｍ２または２２ｍｇ／ｍ２のパクリタキセルの用量で、約７０ｍｇ／ｍ２、約８０ｍｇ／ｍ２、または約９０ｍｇ／ｍ２のパクリタキセルの用量での非リポソーム製剤と併用して、すなわち８１ｍｇ／ｍ２、９１ｍｇ／ｍ２、９２ｍｇ／ｍ２、１０１ｍｇ／ｍ２、１０２ｍｇ／ｍ２または１１２ｍｇ／ｍ２のパクリタキセルの総用量で投与される。
【００７０】
特定の実施形態では、カチオン性リポソーム調製物は２５−３５ｍｇ／ｍ２のドセタキセルを含む。これらの用量はｍｇ／ｍ２被験体のｂｓの量で表される。
【００７１】
実施形態では、カチオン性リポソーム製剤は被験体に、約１０ｍｇ／ｍ２〜約２００ｍｇ／ｍ２、約２０ｍｇ／ｍ２〜約１５０ｍｇ／ｍ２、約３０ｍｇ／ｍ２〜約１３５ｍｇ／ｍ２、約４０ｍｇ／ｍ２〜約１２０ｍｇ／ｍ２、または約６０ｍｇ／ｍ２〜約１００ｍｇ／ｍ２被験体の体表面（ｂｓ）の、総月用量で投与される。特定の実施形態では、カチオン性リポソーム製剤は被験体に約１１ｍｇ／ｍ２、約２２ｍｇ／ｍ２、約３３ｍｇ／ｍ２、約４４ｍｇ／ｍ２、約６６ｍｇ／ｍ２、約８８ｍｇ／ｍ２、約１１０ｍｇ／ｍ２、または約１３２ｍｇ／ｍ２被験体のｂｓの総月用量で投与される。
【００７２】
製剤の用量は１日複数回〜１ヶ月期間中複数回投与することができ、その回数の各々は、数日〜数週間の投与間隔で分けられる。実施形態では、投与間隔は６〜１０日とすることができる。
【００７３】
製剤はまた、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、または１２ヶ月間の長期投与に好適である。実施形態では、週１回または２回投与スケジュールの投与持続期間は数週間、例えば、少なくとも７週間である。
【００７４】
週１回または２回のより低い用量の連続投与は、少なくとも、１回高用量の投与または休止間隔により中断される高頻度低用量投与と同じくらい有効である。投与レジメンの有効性によって、製剤の用量および投与間隔は、治療期間中、一定に維持され、増加され、または減少され得る。
【００７５】
実施形態では、パクリタキセルを含むカチオン性リポソーム製剤および非リポソーム製剤は週１回、治療サイクルの第１、８、および１５日に投与され、ゲムシタビンは週１回、第１および８日に投与される。治療なし間隔は６〜１４日とすることができる。特定の実施形態では、治療サイクルは６〜１２回繰り返すことができる。
【００７６】
カチオン性リポソーム製剤または非リポソーム製剤は静脈内投与することができる。
【００７７】
本明細書で開示される方法は、選択的ターゲティング、改善された効力、従来の化学療法と比べて低減された有害な副作用、低減された疾患関連疼痛、改善された生活の質、治療中の体重の安定化、および他の治療レジームとの相乗効果により特徴付けられる。
【００７８】
特に、本明細書で提供される週１回または２回投与スケジュールは、より長い回復時間およびより少ない入院のために、被験体にとって物理的により負担が少ない。その上、数週間または数ヶ月、例えば４週間〜５２週間のより長い時間枠にわたる投与は、短い期間にわたる頻繁な適用よりも有効である。週１回または２回投与スケジュールは、治療を受ける被験体に対して改善された生活の質を提供する。
【００７９】
当業者であれば理解されるように、本明細書で開示される各実施形態は、その特別な指定要素、工程、材料成分または成分を含む、これから本質的に構成される、またはこれから構成される可能性がある。よって、「含有する」または「含有している」という用語は、「を含む、から構成される、またはから本質的に構成される」を述べていると解釈されるべきである。移行用語「含む」または「含んでいる」は、含有することを意味するが、それに限定されず、特定されていない要素、工程、材料成分、または成分を、大量ですら、含むことを可能にする。移行句「から構成される」は特定されていない全ての要素、工程、材料成分または成分を排除する。移行句「から本質的に構成される」は実施形態の範囲を特定された要素、工程、材料成分または成分に、および実質的に実施形態に影響しないもの、例えば、乳癌細胞をインビトロまたはインビボで死滅させる能力の統計学的に有意な低減の欠如に制限する。
【００８０】
別記されない限り、明細書および特許請求の範囲において使用される材料成分の量、特性、例えば分子量、反応条件、などを表す全ての数字は、全ての場合において、「約」という用語により修飾されることが理解されるべきである。したがって、反対のことが示されない限り、明細書および添付の特許請求の範囲において明記される数値パラメータは近似値であり、これは、本開示により得られることが求められる所望の特性によって変動し得る。少なくとも、等価物の原則の特許請求の範囲への適用を制限しようとする試みとしてではなく、各数値パラメータは少なくとも、報告された有効桁の数を考慮して、および通常の四捨五入技術を適用することにより解釈されるべきである。さらなる明確さが要求される場合、「約」という用語は、指定された数値または範囲と共に使用される場合、当業者によりこれに合理的に属するものとみなされる意味を有し、すなわち指定された値または範囲より幾分多いまたは幾分少ない、下記の範囲内までを示す：指定された値の±２０％；指定された値の±１９％；指定された値の±１８％；指定された値の±１７％；指定された値の±１６％；指定された値の±１５％；指定された値の±１４％；指定された値の±１３％；指定された値の±１２％；指定された値の±１１％；指定された値の±１０％；指定された値の±９％；指定された値の±８％；指定された値の±７％；指定された値の±６％；指定された値の±５％；指定された値の±４％；指定された値の±３％；指定された値の±２％；または指定された値の±１％。
【００８１】
一例として、「約」という用語は、量の値との関連では、指示された値に基づき、最大＋／−２０％、＋／−１０％、または＋／−５％の平均偏差を示す。例えば、約３０モル％カチオン性脂質の量は、総脂質／両親媒性物質モル濃度に関して、３０モル％＋／−６モル％、または３０モル％＋／−３モル％カチオン性脂質を示す。
【００８２】
発明の広範な範囲を明記する数値範囲およびパラメータは近似値であるにも関わらず、具体例で明記される数値は可能な限り正確に報告される。しかしながら、全ての数値は、それらの個々の試験測定で見出される標準偏差に必然的に起因するある一定の誤差を本質的に含む。
【００８３】
発明の記載との関連で（とりわけ、下記特許請求の範囲との関連で）使用される「１つの（ａ、ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」という用語ならびに同様の指示対象は、本明細書で別記されない限り、または文脈により明確に否定されない限り、単数形および複数形の両方を包含すると解釈されるべきである。本明細書における値の範囲の列挙は、単に、その範囲内に含まれる各別個の値に個々に言及する省略方法としての役割を果たすことが意図される。本明細書で別記されない限り、各個々の値は、それが個々に本明細書で列挙されたかのように明細書に組み込まれる。本明細書で記載される全ての方法は、本明細書で別記されない限り、または別に文脈により明確に反対されない限り、任意の好適な順序で実施することができる。本明細書で提供される任意のおよび全ての例、または例示的な言語（例えば、「など」）の使用は、単に、発明をよりよく説明するために意図されたものであり、別様に特許請求される発明の範囲に制限を課すものではない。明細書中のいずれの言い回しも、本開示の実施に必須の特許請求されていない要素を示すものとして解釈されるべきではない。
【００８４】
発明を実施するために発明者らに知られている最良の形態を含む、この開示のある一定の実施形態は本明細書で記載される。もちろん、これらの記載される実施形態についての変形は、前記記載を読めば、当業者に明らかになるであろう。発明者は当業者に、必要に応じてそのような変形を採用することを期待し、発明者らは、特定的に本明細書で記載されるものとは別様に発明が実施されることを意図する。したがって、この開示は、準拠法により許可される、本明細書に添付された特許請求の範囲に列挙される対象物の全ての改変および等価物を含む。その上、その全ての可能な変形の上記要素の全ての併用が、本明細書で別記されない限り、または別に文脈により明確に反対されない限り、本開示により包含される。
【００８５】
上記対象物は例として提供されるにすぎず、制限するものと解釈されるべきではない。様々な改変および変更が、説明され、記載される実施形態例および適用に従うことなく、下記特許請求の範囲で明記される本開示の真の精神および範囲から逸脱せずに、本明細書で記載される対象物に対して可能である。
【００８６】
下記実施例は本明細書で提供される例示的な方法を説明する。これらの実施例は、本開示の範囲を制限することを意図せず、そういうものとして解釈されるべきではない。方法は、特に本明細書で記載されるものとは別様に実施することができることは明らかであろう。多くの改変および変更は、本明細書の教示を考慮すると可能であり、そのため、本開示の範囲内にある。
【００８７】
実施形態の例
１．その必要のある被験体に下記を投与することを含む、乳癌を治療する方法：（ａ）１つ以上のカチオン性脂質および治療的有効量のタキサンを含むカチオン性リポソーム製剤；（ｂ）治療的有効量のタキサンを含む非リポソーム製剤；ならびに（ｃ）治療的有効量のさらなる活性剤。
２．方法は、被験体に下記を投与することを含む、実施形態１の方法：約１ｍｇ／ｍ２〜約６０ｍｇ／ｍ２のタキサンを含むカチオン性リポソーム製剤；非リポソーム製剤中に約５ｍｇ／ｍ２〜約１００ｍｇ／ｍ２のタキサンを含む非リポソーム製剤；ならびに約１００ｍｇ／ｍ２〜約１２５０ｍｇ／ｍ２のさらなる活性剤。
３．方法は、被験体に下記を投与することを含む、実施形態１または２の方法：約１１ｍｇ／ｍ２〜約２２ｍｇ／ｍ２のタキサンを含むカチオン性リポソーム製剤；約７０ｍｇ／ｍ２〜約９０ｍｇ／ｍ２のタキサンを含む非リポソーム製剤；ならびに約８００ｍｇ／ｍ２〜約１２５０ｍｇ／ｍ２のさらなる活性剤。
４．カチオン性リポソーム製剤および非リポソーム製剤中のタキサンの総用量は約８０ｍｇ／ｍ２〜１２０ｍｇ／ｍ２である、実施形態１〜３のいずれか一つの方法。
５．カチオン性リポソーム製剤および非リポソーム製剤は２８日治療サイクルの第１、８、および１５日に投与され、さらなる活性剤は２８日治療サイクルの第１および８日に投与される、実施形態１〜４のいずれか一つの方法。
６．カチオン性リポソーム製剤は１番目に投与され；非リポソーム製剤は２番目に投与され；ならびにさらなる活性剤は３番目に投与される、実施形態１〜５のいずれか一つの方法。
７．カチオン性リポソーム製剤は被験体に最初の１５分間、０．５ｍＬ／分の速度、続いて、次の１５分間、１．０ｍＬ／分の速度、続いて３０分後、１．５ｍＬ／分の速度で投与される、実施形態１〜６のいずれか一つの方法。
８．カチオン性リポソーム製剤は、約３０モル％〜約９９．９モル％のカチオン性脂質を含む、実施形態１〜７のいずれか一つの方法。
９．カチオン性リポソーム製剤は、少なくとも０．１モル％の量のタキサンを含む、実施形態１〜８のいずれか一つの方法。
１０．カチオン性リポソーム製剤は中性および／またはアニオン性脂質を含む、実施形態１〜９のいずれか一つの方法。
１１．カチオン性リポソーム製剤は３０モル％〜５５モル％の量の中性またはアニオン性脂質をさらに含む、実施形態１〜１０のいずれか一つの方法。
１２．カチオン性リポソーム製剤は約０．０５Ｍ  ＫＣＩ溶液中、約ｐＨ７．５、室温で正のゼータ電位を有する、実施形態１〜１１のいずれか一つの方法。
１３．タキサンはパクリタキセルまたはドセタキセルである、実施形態１〜１２のいずれか一つの方法。
１４．カチオン性リポソーム製剤はＤＯＴＡＰ、ＤＯＰＣ、およびパクリタキセルを含む、実施形態１〜１３のいずれか一つの方法。
１５．カチオン性リポソーム製剤はＤＯＴＡＰ、ＤＯＰＣ、およびパクリタキセルを約５０：４７：３のモル比で含む、実施形態１−１４のいずれか一つの方法。
１６．被験体のホルモン受容体状態はエストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体の両方について陰性であり、乳癌はＨＥＲ２陽性（ＨＥＲ２＋）である、実施形態１〜１５のいずれか一つの方法。
１７．被験体のホルモン受容体状態はエストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体の両方について陰性であり、乳癌はＨＥＲ２陰性（ＨＥＲ２−）である、実施形態１〜１６のいずれか一つの方法。
１８．カチオン性脂質はＮ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム塩（ＤＯＴＡＰ）；ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド（ＤＤＡＢ）；１，２−ジアシルオキシ−３−トリメチルアンモニウムプロパンＮ−［１−（２，３−ジオロイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミン（ＤＯＤＡＰ）；１，２−ジアシルオキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン；Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）；１，２−ジアルキルオキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン；ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン（ＤＯＧＳ）；３β−［Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノ−エタン）カルバモイル］コレステロール（ＤＣ−Ｃｈｏｌ）；２，３−ジオレオイルオキシ−Ｎ−（２−（スペルミンカルボキサミド）−エチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−プロパンアミニウムトリフルオロアセテート（ＤＯＳＰＡ）；β−アラニルコレステロール；セチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）；ジＣ１４−アミジン；Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ’−テトラデシル−３−テトラデシルアミノ−プロピオンアミジン；１４Ｄｅａ２；Ｎ−（α−トリメチルアンモニオアセチル）ジドデシル−Ｄ−グルタメートクロリド（ＴＭＡＧ）；Ｏ，Ｏ’−ジテトラデカノイル−Ｎ−（トリメチルアンモニオアセチル）ジエタノールアミンクロリド；１，３−ジオレオイルオキシ−２−（６−カルボキシ−スペルミル）−プロピルアミド（ＤＯＳＰＥＲ）；Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシルエチル）−２，３−ジオレオイルオキシ−１，４−ブタンジアンモニウムヨージド；１−［２−（アシルオキシ）エチル］２−アルキル（アルケニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）−イミダゾリニウムクロリド；１，２−ジオレオイル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩ）；１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ）；１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシプロピルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−ＨＰ）；１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシブチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−ＨＳ）；１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシペンチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−Ｈｐｅ）；１，２−ジミリスチルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシルエチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）；１，２−ジパルミチルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＰＲＩＥ）；１，２−ジステリルオキシプロピル−３−ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＳＲＩＥ）；または１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロール−３−エチルホスホコリンである、実施形態１〜１７のいずれか一つの方法。
１９．１−［２−（アシルオキシ）エチル］２−アルキル（アルケニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）−イミダゾリニウムクロリドは１−［２−（９（Ｚ）−オクタデカノイルオキシ）エチル］−２−（８（Ｚ）−ヘプタデセニル−３−（２−ヒドロキシエチル）−イミダゾリニウムクロリド（ＤＯＴＩＭ）または１−［２−（ヘキサデカノイルオキシ）エチル］−２−ペンタデシル−３−（２−ヒドロキシエチル）イミダゾリニウムクロリド（ＤＰＴＩＭ）である、実施形態１〜１８のいずれか一つの方法。
２０．中性脂質は中性電荷を有するコレステロール、リン脂質、リゾ脂質、スフィンゴ脂質、またはペグ化脂質である、実施形態１〜１９のいずれか一つの方法。
２１．中性脂質はリゾリン脂質である、実施形態１〜２０のいずれか一つの方法。
２２．中性脂質は１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、またはスフィンゴミエリンである、実施形態１〜２１のいずれか一つの方法。
２３．１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンは１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）である、実施形態１〜２２のいずれか一つの方法。
２４．１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリンは１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＯＰＣ）である、実施形態１〜２２のいずれか一つの方法。
２５．さらなる活性剤は化学療法薬である、実施形態１〜２４のいずれか一つの方法。
２６．化学療法薬はタキサンではない、実施形態１〜２５のいずれか一つの方法。
２７．化学療法薬はゲムシタビンである、実施形態１〜２６のいずれか一つの方法。
【００８８】
実施例
実施例１：ＴＮＢＣ腫瘍モデルでの合剤の活性
抗腫瘍活性をインビトロヒト転移モデルにおいてＴＮＢＣ細胞株、ＭＤＭＡＢ−２３１を用いて評価した。ＭＤＭＡＢ−２３１を９６−ウェルプレートにおいて４０００細胞／ウェルで蒔き、３７℃でインキュベートした。細胞を次の日、合剤で処理した。細胞に対する合剤の抗成長効果をＭＴＳ／ＰＭＳ細胞生存率アッセイ（ＭＴＳ：３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム、分子内塩；ＰＭＳ：フェナジンメトサルフェート）により測定した。
【００８９】
代謝活性を使用して、非線形回帰分析を使用することにより個々のＩＣ５０値を推定した。全ての実験は３連で実施した。
【００９０】
合剤：ゲムシタビン＋タキソール（登録商標）：
ＭＤＭＡＢ−２３１細胞を９６−ウェルプレートにおいて４０００細胞／ウェルで蒔き、３７℃／５％ＣＯ２で１６時間の間インキュベートし、その後、タキソール（登録商標）（パクリタキセル）を用いて、培地中６００ｎＭ、２００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、５ｎＭまたは１ｎＭの濃度で処理した。２４時間後、ゲムシタビンを、パクリタキセルの濃度に対して１０倍または５倍濃度で添加した。例えば、１ｎＭパクリタキセルを、１０ｎＭまたは５ｎＭゲムシタビンと併用した。７２時間のインキュベーション期間後、細胞株に対するゲムシタビンおよびタキソール（登録商標）の成長阻害効果をＭＴＳ／ＰＭＳ細胞生存率アッセイにより測定した。
【００９１】
合剤：ゲムシタビン＋タキソール（登録商標）＋ＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１
ＭＤＭＡＢ−２３１細胞を９６−ウェルプレートにおいて４０００細胞／ウェルで蒔き、３７℃／５％ＣＯ２で１６時間の間インキュベートし、その後、タキソール（登録商標）およびＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１で処理した。タキソール（登録商標）およびＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１のモル比は１：１とし、総タキソール（登録商標）濃度を培地中６００ｎＭ、２００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、５ｎＭまたは１ｎＭとした。２４時間後、総パクリタキセルの濃度に対して１０倍または５倍濃度のゲムシタビンを添加した。例えば、１ｎＭパクリタキセルを、１０ｎＭまたは５ｎＭゲムシタビンと併用した。７２時間のインキュベーション期間後、ゲムシタビンおよびタキソール（登録商標）およびＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１の成長阻害効果をＭＴＳ／ＰＭＳ細胞生存率アッセイにより測定した。
【００９２】
図１に示されるように、ＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１＋タキソール（登録商標）＋ゲムシタビン（３つ併用）は、タキソール（登録商標）＋ゲムシタビン（２つ併用）よりも増強された抗腫瘍活性を示した。２つ併用および３つ併用におけるタキソール（登録商標）のＩＣ５０は、それぞれ、１３９．２ｎＭおよび１００．４ｎＭであった。
【００９３】
実施例２：三種受容体陰性乳癌（ＴＮＢＣ）患者におけるＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１の効力の評価
２．１目的
主目的は、転移性ＴＮＢＣを有する患者において、パクリタキセルを含むＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１の非リポソームパクリタキセルおよびゲムシタビンと併用した毎週注入対非リポソームパクリタキセルのゲムシタビンと併用した毎週注入の効力を比較することである。副次的目的は、転移性ＴＮＢＣを有する患者において、パクリタキセルを含むＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１の非リポソームパクリタキセルおよびゲムシタビンと併用した毎週注入対非リポソームパクリタキセルのゲムシタビンと併用した毎週注入の効力に関するデータならびに安全性および認容性に関するデータを得ることである。
【００９４】
２．２評価項目
主要有効性評価項目：
無増悪生存期間（ＰＦＳ）はランダム化からブラインド中心放射線画像評価または任意の理由による死亡（どちらか最初に起こる方）に基づく疾患進行までの時間として規定される。
【００９５】
副次的有効性評価項目：
１．全生存期間（ＯＳ）は、ランダム化から任意の理由による死亡までの時間として規定される。
２．臨床的有用率は、任意の持続期間の客観的応答または６ヶ月以上安定している疾患として規定される。
３．最も良好な全腫瘍奏効率は、任意の持続期間の客観的応答または安定している疾患として規定される。
４．応答の持続期間は、療法に応答する患者のサブグループにおけるランダム化から疾患進行までの時間として規定される。
５．バイオマーカー分析：血清腫瘍マーカー：ＣＡ１５．３、ＣＥＡおよびＣＹＦＲＡ２１．１；ならびに追加のバイオマーカー：循環腫瘍細胞および腫瘍幹細胞循環内皮および内皮前駆細胞、ＶＥＧＦ。
【００９６】
２．３研究デザイン
この研究には２つのステージが存在する、用量漸増安全性導入ステージ；ならびに主研究ステージ。研究デザインの概略図を、図２に示す。
【００９７】
２．３．１安全性導入ステージ
主研究の開始前に、主研究のための推奨される用量（ＲＤ）を決定するための安全性導入ステージが存在する。用量漸増安全性導入ステージ中、３つの投与集中毎週タキサンレジメンがおよそ９〜１８人の患者に投与される。各治療サイクルは３週間の治療、続いて１週間の治療を含まない間隔で、合計４週間を含む。データ安全性モニタリング委員会（ＤＳＭＢ）は、治験を通して使用するため、ならびに患者の安全性および治療効力データをモニタリングするためのＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１、非リポソームパクリタキセル、およびゲムシタビンのＲＤを決定するように制定されている。
【００９８】
２．３．１．１実験群：
用量１：２８日サイクルの第１、８、および１５日にＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１中の１１ｍｇ／ｍ２のパクリタキセルおよび７０ｍｇ／ｍ２の非リポソームパクリタキセル、ならびに第１日および第８日に１０００ｍｇ／ｍ２ゲムシタビンの静脈内注入。
用量２：２８日サイクルの第１、８、および１５日にＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１中の２２ｍｇ／ｍ２のパクリタキセルおよび７０ｍｇ／ｍ２の非リポソームパクリタキセル、ならびに第１日および第８日に１０００ｍｇ／ｍ２ゲムシタビンの静脈内注入。
用量３：２８日サイクルの第１、８、および１５日にＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１中の２２ｍｇ／ｍ２のパクリタキセルおよび７０ｍｇ／ｍ２の非リポソームパクリタキセル、ならびに第１日および第８日に１２５０ｍｇ／ｍ２ゲムシタビンの静脈内注入。
【００９９】
安全性導入ステージ中、患者は用量１から開始する上記用量コホートにより処置される。用量コホートは、ＤＳＭＢの決定に基づき、互いに順次進む。第１の治療サイクルの蓄積データが審査される。次の用量レベルへの漸増は、ＤＳＭＢが現コホートの安全性データを審査した後、進む。ＤＳＭＢが、安全性データを審査した後、とりわけ予め規定された用量規制毒性（ＤＬＴ）について、著しい安全性および認容性の懸念を認めなければ、用量は漸増される。安全性導入ステージからの結果に基づき、ＤＳＭＢは、主研究に対するＲＤを決定する。
【０１００】
２．３．２主研究
主研究では、合計４００人の患者が処置群または対照群に１：１の配分率でランダム化される。適格患者は、ＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１、非リポソームパクリタキセルおよびゲムシタビンにより、ＲＤまたは下記対照群に基づく用量で処置される：
【０１０１】
ＲＤ決定後に選択される対照群における用量：
・用量１のための対照：２８日サイクルの第１、８、および１５日に８０ｍｇ／ｍ２パクリタキセル、ならびに第１日および第８日に１０００ｍｇ／ｍ２ゲムシタビンの静脈内注入
・用量２のための対照：２８日サイクルの第１、８、および１５日に９０ｍｇ／ｍ２パクリタキセル、ならびに第１日および第８日に１０００ｍｇ／ｍ２ゲムシタビンの静脈内注入
・用量３のための対照：２８日サイクルの第１、８、および１５日に９０ｍｇ／ｍ２パクリタキセル、ならびに第１日および第８日に１２５０ｍｇ／ｍ２ゲムシタビンの静脈内注入
【０１０２】
２．４研究対象集団の選択
組み入れ基準
下記判断基準を満たす患者はこの研究に参加するのに適格であると考えられる：
１．性別：女性
２．年齢として１８歳以上または現地の規制上の要件に従いインフォームドコンセントを提供するための法定年齢。
３．認定現地研究所により（または、確認のための既存の診療記録が安全性導入ステージにおいて患者に対して受け入れられる）、元の外科手術標本由来の、または入手可能な後の材料由来の、保存記録パラフィン化材料を用いて、組織学的に確認された転移性ＴＮＢＣ。認定現地研究所の結果は、ランダム化を可能にするために入手可能でなければならない。
腫瘍は免疫組織化学（ＩＨＣ；＜１％陽性腫瘍核、ＡＳＣＯ／米国臨床病理医協会（ＣＡＰ）ガイドライン勧告の通り、Ｈａｍｍｏｎｄら  ２０１０）によりＥＲおよびＰｒＲについて陰性である、およびＩＨＣまたは蛍光もしくは発色性インサイチューハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨまたはＣＩＳＨ）によりＨＥＲ２について陰性であると考えられるべきである。ＩＨＣにより疑わしいＨＥＲ２結果を有する患者は、ＦＩＳＨにより確認される陰性状態を有するはずである。
４．患者は連続または同時アントラサイクリン−および／またはタキサンに基づく化学療法のいずれかを用いて、事前アジュバント療法を受けていなければならない。
５．１２ヶ月以上のアントラサイクリン−および／またはタキサンに基づくアジュバント療法で無病間隔（ＤＦＩ）を有する患者。
６．患者は研究者により判断される、内臓転移性疾患のための多剤化学療法を用いた治療に適応されなければならない。
７．研究者により評価されるＲＥＣＩＳＴバージョン１．１による、少なくとも１つの測定可能または測定不能な腫瘍病変（局所放射線画像評価）。
８．ＥＣＯＧ活動状態０または１。
９．妊娠検査陰性（妊娠の可能性がある女性）。
１０．研究中および化学療法治療後６ヶ月の間二重バリア避妊を実施する意志（妊娠の可能性がある女性）
１１．署名されたインフォームドコンセント。
【０１０３】
除外基準
下記判断基準の１つ以上を満たす患者は研究に参加するのに適格でないと考えられる：
１．局部再発性および／または転移性乳癌、例えば内臓疾患のための、事前第一選択化学療法。
２．脳転移／わかっている進行性脳転移（安定状態の脳転移を有する、または成功した外科的または放射線治療後の患者は研究に参加することが許される）。
３．登録前４週間未満の大手術。
４．任意の時間での癌免疫療法。
５．重篤な肺閉塞性または拘束性疾患。
６．コントロール不良の炎症疾患（自己免疫性または感染性）。
７．臨床的に有意な心疾患（ニューヨーク心臓協会［ＮＹＨＡ］病期＞２）
８．指定限界外の臨床検査結果（血液学、凝固、臨床化学）：
・白血球（ＷＢＣ）数≦３×１０９／Ｌ
・絶対好中球数（ＡＮＣ）≦１．５×１０９／Ｌ
・血小板≦１００×１０９／Ｌ
・ヘモグロビン（Ｈｂ）≦９．０ｇ／ｄＬ（≦５．６ｍｍｏｌ／Ｌ）
・部分トロンボプラスチン時間／国際標準化比（ＰＴＴ／ＩＮＲ）＞１．５×正常上限（ＵＬＮ）
・アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）またはアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）＞２．５×ＵＬＮ（＞５×ＵＬＮ、肝臓転移が存在する場合）
・アルカリホスファターゼ（ＡＰ）＞２×ＵＬＮ（＞５×ＵＬＮ、肝臓転移が存在する場合）
・総ビリルビン＞１．５×ＵＬＮ（＞２．５×ＵＬＮ、肝臓転移が存在する場合）
９．妊娠または看護状態。
１０．病歴における既知の陽性ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染。
１１．グレード０または１まで回復していない前のタキサン療法に関連する末梢性ニューロパチー。
１２．ＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１、標準パクリタキセルおよび／またはゲムシタビン製剤のいずれかの成分に対する既知の過敏症。
１３．局部的に治療された皮膚癌（すなわち、基底細胞がんまたは扁平上皮がん）を除く、登録前５年未満の乳癌以外の悪性腫瘍病歴。
１４．インフォームドコンセントの理解および提供を妨げる、または治験中の中枢神経系の臨床および放射線学的評価を妨害する、活動性または重篤な神経障害または精神障害の病歴。
１５．他の実験的製品との併用治療。研究参加前３０日以内の任意の研究製品を用いる別の臨床試験への参加。
１６．Ｂ型肝炎（Ｂ型肝炎ウイルス表面抗原（ＨＢｓＡｇ）陽性；またはＨＢｓＡｇ陰性であるが、抗Ｂ型肝炎ウイルスコア（ＨＢｃ）抗体陽性およびＨＢＶ  ＤＮＡ陽性）あるいはＣ型肝炎（抗Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）抗体陽性）に対する陽性試験。抗ＨＣＶ抗体陽性である患者はまた、さらにＨＣＶ  ＲＮＡ検出が陰性結果を示した場合、適格であると判断することができる。
【０１０４】
２．５薬物投与
ＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１／パクリタキセル／ゲムシタビンが投与される患者では、安全性導入ステージにおいてか、主研究においてかに関係なく、用量のＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１がパクリタキセルおよびゲムシタビン（第１日および第８日）前、またはパクリタキセル（第１５日）前、同じ日に投与される。ＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１の注入は徐々に開始され（０．５ｍＬ／分で１５分、続いて１．０ｍＬ／分で１５分）、１．５ｍＬ／分の最大速度まで増加される。パクリタキセルの注入は、ＥｎｄｏＴＡＧ（登録商標）−１注入の終了後１時間以内に開始されるべきではない。パクリタキセルは、１時間注入（９０ｍｇ／ｍ２）またはそれ以下（９０ｍｇ／ｍ２未満の用量）として投与されるべきである。パクリタキセル注入後、ゲムシタビンは静脈内に３０分にわたって投与されるべきである。
【０１０５】
全ての処置群において、パクリタキセルのための標準前投薬（すなわち、１０ｍｇのデキサメタゾンの静脈内注入）はパクリタキセルの各注入前３０〜６０分に投与される。
【０１０６】
２．６用量調整
研究処置の用量およびスケジュールは、毒性に基づき変更（一般に低減）され得る。毒性の分類および重症度グレード分類はＮＣＩ−ＣＴＣＡＥバージョン４．０３を用いて評価される。
【０１０７】
安全性導入ステージでは、特定のＡＥが患者に起こり、研究者が必要と考えた場合、用量低減が下記レジメンに従い実施される：
【表１】
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【表２】
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【０１０８】
一時的に低減された用量が１回投与され、その後、用量は通常用量レベルに戻る。同じ一時的な用量低減が患者において２回適用される場合、用量レベルは、この患者については永遠に低減される。
【０１０９】
主研究における患者については、安全性の問題による用量低減は、研究者が適用できると考えた場合に実施される。レジメンは、安全性導入ステージにおける用量低減の前の経験に基づき、研究者により決定される。
【０１１０】
２．７一般的な評価
腫瘍受容体状態の評価
主研究のスクリーニングステージでは、再発腫瘍、転移、または初期腫瘍の組織試料が、三種陰性腫瘍受容体状態の組織学的確認のために認定現地研究所に送られる。発送のための指示および発送文書が各研究サイトのＩＳＦにおいて提供される。腫瘍は、ＩＨＣによりＥＲおよびＰｒＲの発現について、ＩＨＣまたは、ＦＩＳＨ、またはＣＩＳＨによりＨＥＲ２の発現について分析される。ＩＨＣにより疑わしいＨＥＲ２結果を有する患者は、ＦＩＳＨにより確認される陰性状態を有するはずである。
【０１１１】
患者集団のさらなる分類を可能にするために、腫瘍はＩＨＣにより、ＥＲ、ＰｒＲおよびＨＥＲ２発現に加えてＥＧＦＲおよびサイトケラチン５／６の発現について分析される（コア基底様腫瘍を同定するための５バイオマーカー法；Ｃｈｅａｎｇら  ２００８）。腫瘍組織はまた、ＢＲＣＡ１、ＢＲＣＡ２およびｐ５３の突然変異、ならびにクローディン３／４およびクローディン７ならびに増殖マーカーＫｉ−６７の発現レベルについて分析される。
【０１１２】
２．８効力評価
無増悪生存期間は、ランダム化から疾患進行または任意の理由による死亡（どちらか最初に起こる方）までの時間として規定される。増悪後ＰＦＳ（ＰＦＳ−２）は、治験参加後に投与される第二およびその後の選択治療の開始から、疾患進行（局所放射線画像評価または臨床評価に基づく）または任意の理由による死亡（どちらか最初に起こる方）までの時間として規定される。全生存期間は、ランダム化から任意の理由による死亡までの時間として規定される。
【０１１３】
腫瘍応答は研究サイトでＲＥＣＩＳＴバージョン１．１に従い評価される。１を超える測定可能な病変がベースラインに存在している場合、合計最大５つの病変および、全ての関連する臓器を代表する臓器１つあたり最大２つの病変までの全ての病変が標的病変として同定されるべきである。標的病変はそれらのサイズ（最長直径を有する病変）およびそれらの正確な繰り返し測定（イメージング技術による、または臨床的に）についての適合性に基づいて選択されるべきである。全ての測定値は、定規またはノギスの使用によりメートル表示で記録されるべきである。全ての標的病変についての直径の合計（非結節性病変では最長、結節性病変では短軸）が計算され、報告される。標的病変の評価：
−完全奏功（ＣＲ）：全ての標的病変の消失
−部分奏功（ＰＲ）：基準としてベースライン合計直径を考慮して、標的病変の直径の合計における少なくとも３０％の減少
−進行性疾患（ＰＤ）：基準として研究時の直径の最小和を考慮して、標的病変の直径の合計における少なくとも２０％の増加、かつ少なくとも５ｍｍの増加。１つ以上の新病変の出現もまた、進行と考えられる
−安定している疾患（ＳＤ）：基準として研究時の直径の最小和を考慮して、ＰＲに該当する十分な縮小もなく、ＰＤに該当する十分な増加もない
【０１１４】
スクリーニング時に存在する全ての他の病変は非標的病変として同定される。これらの病変の測定は必要とされないが、各々の存在の有無に注意すべきである。非標的病変の評価：
−ＣＲ：全ての非標的病変の消失および腫瘍マーカーレベルの正常化
−非ＣＲ／非ＰＤ：１つ以上の非標的病変（複数可）の残存および／または腫瘍マーカーレベルの正常上限を超えての維持
−ＰＤ：既存の非標的病変の明白な進行。１つ以上の新病変の出現も進行と考えられる
【０１１５】
生活の質の評価では、ＥＯＲＴＣ  ＱＬＱ−Ｃ３０−およびＢＲ２３−質問表がスクリーニング（ベースライン値）から、主研究における疾患進行まで使用される。質問表は、各施設訪問の初めに、全ての研究関連検査または処置の前に、患者により埋められなければならない。
【０１１６】
この明細書において引用される全ての刊行物、特許および特許出願は、それらの全体として、各それぞれの刊行物、特許または特許出願が、参照により組み込まれることが特定的に、かつ個々に示されるかのように、参照により本明細書に組み込まれる。前記は、様々な実施形態の観点から記載されているが、当業者であれば、様々な改変、置換、省略および変更がその精神から逸脱せずに可能であることを認識するであろう。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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