【手続補正書】
【提出日】平成19年4月27日(2007.4.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナノメートル構造領域を含んでいる一種の分離用または分析用のナノメートル構造担体であって、前記ナノメートル構造領域は従来の固相担体上に固定されたナノメートル構造を含んでいて、前記ナノメートル構造は非定方向に配列するナノメートル構造ユニットを含んでいて、前記ナノメートル構造ユニットは突出高さが3 nmより高く、それに突出半分高さの箇所の最小の一次元寸法が1〜500 nm、最適には1〜100nm寸法のナノメートル凸状体を含み、さらに、前記ナノメートル構造領域は、
１）前記ナノメートル凸状体がナノメートル構造領域における分布密度が1個/μm2より大きく、最適には10個/μm2より大きく、
２）下記のいずれか１つまたはそれ以上の特徴を有することによって特徴付けられるナノメートル構造担体。
（１）前記ナノメートル構造領域のナノメートル構造被覆率が20％より大きく、最適には30％より大きいこと。
（２）前記ナノメートル構造領域の表面積が２００％より大きく、望ましくは３００％より大きく、最適には４００％より大きいこと。
（３）前記ナノメートル構造領域の吸着能力の増加率が115％より大きく、望ましくは130％より大きく、最適には150％より大きいこと。
（４）前記ナノメートル構造領域の吸着能力減衰比率が90％より小さく、最適には80％より小さいこと。
【請求項２】
前記ナノメートル構造ユニットは、直径が1〜500nmで、望ましくは1〜100nmで、最適には1〜50nmであるナノメートル粒子からなることを特徴とする、請求項１記載のナノメートル構造担体。
【請求項３】
請求項２記載のナノメートル構造担体であって、前記ナノメートル粒子は、
１）下記に含まれる無機ナノメートル粒子
（１）磁性無機ナノメートル粒子
及び／又は
（２）非磁性金属ナノメートル粒子及び／または非磁性非金属ナノメートル粒子を含む非磁性無機ナノメートル粒子
及び／又は
２）有機ナノメートル粒子
及び／又は
３）無機及び／又は有機ナノメートル粒子の誘導体
を含み、
前記誘導体は表面の化学基に結合しているナノメートル粒子及び／又は有機物が被覆しているナノメートル粒子含むことを特徴とする、請求項２記載のナノメートル構造担体。
【請求項４】
前記無機非磁性非金属ナノメートル粒子は、酸化シリコン粒子、酸化チタン粒子または酸化アルミ粒子を含む酸化物ナノメートル粒子を含むことを特徴とする請求項３記載のナノメートル構造担体。
【請求項５】
請求項３記載のナノメートル構造担体であって、
１）前記化学基は次のＡ群の表面化学基の一種以上の基を含んでいることを特徴とし、
２）前記有機物は次のＢ群の一種以上の有機物を含んでいることを特徴とするナノメートル構造担体。
Ａ群：アミノ基、アルデヒド基、エポキシ基、アミノヒドラジン、ジエチルアミノエチル基、ジエチル−（2-ヒドロキシプロピル）アミノエチル基、カルボキシルメチル基、スルホン酸プロピル基、スルフヒドリルエチルピリディン基、シロキサン基、チオール基、アルキル基。
Ｂ群：（１）ポリビニルピロリドン、トゥイーン類表面活性剤を含む表面活性剤
（２）ポリアミノ酸を含むポリ電解質
（３）ポリシロキサンを含む親油性有機物
（４）ポリグルコース誘導体、アガロース誘導体、セルロース誘導体ポリアクリルアミンを含むイオン交換重合体
（５）ヘパリンナトリウム、抗原および抗体を含む親和物質。
【請求項６】
前記ナノメートル構造担体は次のものを含むことを特徴とする、請求項１〜請求項１１のいずれかの項記載のナノメートル構造担体。
１）ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物、
２）ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物、または
３）ナノメートル粒子/ミクロン粒子/バイオチップ基板複合物。
【請求項７】
請求項１〜請求項６のいずれかの一項記載のナノメートル構造担体を製作する方法であって、
１）前記ナノメートル粒子の懸濁コロイドと前記従来の固相担体とを接触させてから、
２）前記ナノメートル粒子を前記ナノメートル構造担体で固定する
ことを含み、
固定化反応時、前記懸濁コロイドでのナノメートル粒子の重量/体積濃度（g/ml）が五百分の一〜十五万分の一、或いはナノメートル粒子モル濃度が0.12〜37.4 nMであることを特徴とするナノメートル構造担体を製作する方法。
【請求項８】
前記ナノメートル粒子重量/体積濃度（g/ml）が五千分の一〜十五万分の一、或いはナノメートル粒子モル濃度が0.12〜3.74 nMであることを特徴とする、請求項７記載の方法。
【請求項９】
請求項７又は８記載の方法であって、前記固定の後に化学架橋処理を含む方法。
【請求項１０】
請求項７〜請求項９のいずれか一項に記載の方法であって、
前記固定後に、加温と冷却からなる産物に対する熱処理も含み、前記熱処理は30℃より高く、望ましくは37℃より高く、最適には40℃より高く、固相担体の軟化温度以下の条件の下で加温して冷却することを含むことを特徴とする方法。
【請求項１１】
一種の分析及び／又は分離用ナノメートル構造機能化担体であって、ナノメートル構造機能化領域を含み、前記ナノメートル構造機能化領域は従来の固相担体及びこの上に固定された機能化ナノメートル構造を含み、前記機能化ナノメートル構造は非定方向配列のナノメートル構造ユニット及びその上に固定された機能化試薬を含み、前記ナノメートル構造ユニットは突出高さが3 nmより高く、半分高さ箇所での横断面の少なくとも一次元の寸法が1〜500 nmで、最適には1〜100nmのナノメートル凸状体を含み、さらに  
１）前記ナノメートル構造領域での前記ナノメートル凸状体の分布密度は1個/μm2より大きく、最適には10個 /μm2より大きいことを特徴とし、さらに、
２）次の一種またはそれ以上の特徴を有するナノメートル構造機能化担体。
（１）前記ナノメートル構造機能化領域でのナノメートル構造被覆率は30％より大きく、最適には75％より大きいことを特徴とするナノメートル構造機能化担体。
（２）前記ナノメートル構造機能化領域の表面積増加率が200％より大きく、望ましくは400％より大きく、最適には600％より大きいことを特徴とし、または吸着能力増加率が115％より大きく、望ましくは130％より大きく、最適には150％より大きいことを特徴とし、またはその双方であることを特徴とするナノメートル構造機能化担体。
（３）前記ナノメートル構造機能化領域の敏感度増加率が120％より大きく、望ましくは150％より大きく、最適には200％より大きいことを特徴とするナノメートル構造機能化担体。
（４）前記ナノメートル構造機能化領域の識別信号の減衰率比が90％より小さく、最適には70％より小さいことを特徴とし、または吸着量減衰速度速率比が90％より小さく、最適には80％より小さいことを特徴とし、またはその双方であることを特徴とする項記載のナノメートル構造機能化担体。
【請求項１２】
前記分離及び／又は分析が、ポリペプチド及び／又はポリペプチドと相互作用する薬品の分離及び／又は分析を含むことを特徴とする請求項１１記載のナノメートル構造機能担体。
【請求項１３】
前記分離及び／又は分析が核酸及び／又は核酸と相互作用する薬品の分離及び／又は分析を含むことを特徴とする請求項１１記載のナノメートル構造機能担体。
【請求項１４】
請求項１１〜１３のいずれか一項に記載のナノメートル構造機能化担体であって、該ナノメートル構造機能化担体は機能化ナノメートル粒子と固相担体との複合物であって、
１）前記機能化ナノメートル粒子は、
（１）粒子粒径が1〜500nmで、望ましくは1〜100nmで、最適には1〜50nmであり、一つまたはそれ以上の機能化領域を該前記ナノメートル粒子の上で固定する機能化ナノメートル粒子、
（２）連結剤からなり、
２）前記固相担体が従来の固相担体または請求項１〜請求項６のいずれか一項に記載のナノメートル構造担体であることを特徴とする、ナノメートル構造機能化担体。
【請求項１５】
前記ナノメートル粒子は請求項６〜請求項１１のいずれか一項に記載のナノメートル粒子を含み、最適には前記無機非磁性非金属ナノメートル粒子またはそれらの誘導体またはその双方を含むことを特徴とする、請求項１４記載のナノメートル構造機能化担体。
【請求項１６】
次の組の一つを含むことを特徴とする、請求項１５記載のナノメートル構造機能化担体。
（１）機能化ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物、
（２）機能化ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物、
（３）機能化ナノメートル粒子/ナノメートル構造バイオチップ基板複合物、
（４）機能化ナノメートル粒子/ナノメートル構造ミクロン粒子複合物、及び
（５）これらの組合せたもの。
【請求項１７】
次の組の一つを含むことを特徴とする、請求項１５記載のナノメートル構造機能化担体。（１）機能化試薬/ナノメートル構造バイオチップ基板複合物、（２）機能化試薬/ナノメートル構造ミクロン粒子複合物、及び（３）これらの組合せたもの。
【請求項１８】
ナノメートル構造分析チップを含むことを特徴とする、請求項１１〜請求項１７のいずれかの項記載のナノメートル構造機能化担体。
【請求項１９】
次の組の一つを含むことを特徴とする、請求項１１〜請求項１７のいずれかの項記載のナノメートル構造機能化担体。（１）ナノメートル構造ＥＬＩＳＡマイクロプレート、（２）ナノメートル構造平面クロマトグラフィー試薬板、及び（３）ナノメートル構造クロマトグラフィー機能化ゲルを含むナノメートル構造機能化分離固定相。
【請求項２０】
請求項１１〜請求項１９のいずれかの項記載のナノメートル構造機能化担体を製作する方法で、
１）前記機能化ナノメートル粒子の懸濁コロイドと前記従来固相担体とを接触させ、
２）前記機能化ナノメートル粒子を従来の機能化担体に固定化反応させることを含み、
前記固定化反応時に、前記懸濁コロイドでのナノメートル粒子重量/体積濃度（g/ml）は五百分の一〜十五万分の一またはナノメートル粒子モル濃度が0.12〜37.4 nMであり、前記接触は、表面直径が0.5mmより小さい場合の点接触または表面直径が0.5mmより大きい場合の面接触であることを特徴とするナノメートル構造機能化担体を製作する方法。
【請求項２１】
前記ナノメートル粒子重量/体積濃度（g/ml）が五千分の一〜十五万の一或いはナノメートル粒子モル濃度が0.12〜3.74 nMであることを特徴とする、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
前記ナノメートル粒子重量/体積濃度（g/ml）が二万分の一〜六万分の一，或いはナノメートル粒子モル濃度が0.31〜0.93 nMであることを特徴とする、請求項２０記載の方法。
【請求項２３】
前記固定化反応後の産物に対する化学架橋処理も含むことを特徴とする、請求項２０〜請求項２２のいずれかの項記載の方法。
【請求項２４】
前記固定化反応後の産物に対する熱処理も含む方法であって、前記熱処理は、機能化試薬保護剤を任意的に選択して保護する条件の下で、30℃より高く、望ましくは37℃より高く、最適には４０℃より高く、但し前記固相担体の軟化温度以下で加温してから冷却することを含むことを特徴とする、請求項２０〜請求項２３のいずれかの項記載の方法。
【請求項２５】
請求項１１〜請求項１９のいずれかの項記載のナノメートル構造機能化担体及び／又は請求項１〜請求項６のいずれかの項記載のナノメートル構造担体を含む一種の分析または分離またはその双方の装置。
【請求項２６】
次を含むことを特徴とする、請求項２５記載の装置。１）マイクロアレーを持つ分析チップ、２）マイクロアレーおよび流路を持つ分析チップ、および３)流路を持つ分析チップ。この中で、前記流路は、（１）前記ナノメートル構造担体を持つナノメートル構造流路、または（２）前記ナノメートル構造機能化担体を持つナノメートル構造機能化チャンネル、またはその双方を含む。
【請求項２７】
少なくとも一つの標識を含む一種の定量または定性またはその双方の分析標識システムであって、前記標識は標識リガンド/ナノメートル構造/分子標識物質の複合物であり、前記ナノメートル構造はナノメートル粒子またはナノメートル粒子またはその双方からなる構造を含み、前記ナノメートル粒子は、粒径1〜100 nmで、標識物質強化剤ではない非磁性無機非金属粒子であることを特徴とする分析標識システム。
【請求項２８】
前記非磁性無機非金属粒子は、酸化物ナノメートル粒子を含む非磁性無機非金属粒子を含み、該酸化物ナノメートル粒子は酸化シリコン粒子及び／又は酸化チタン粒子及び／又は酸化アルミニウム粒子を含むことを特徴とする、請求項２７記載の標識システム。
【請求項２９】
前記分子標識物質は蛍光物質、化学発光物質、化学発光触媒、非鉄金属塩、染料および顔料ののうち一種以上の物質を含むことを特徴とする、請求項４２又は２８記載の標識システム。。
【請求項３０】
一種の定量及び／又は定量定性分析方法であって、
１）請求項２５又は２６記載の分析及び／又は分析分離装置を用いてサンプル目的物を捕獲及び／又は輸送及び／又は分離し、
２)請求項２７〜請求項２９のいずれか一項記載の定量及び／又は定量定性分析標識システムを使用して１）の結果を標識する
ことを含む定量及び／又は定量定性分析方法。
【請求項３１】
一種の定量及び／又は定量定性分析キットであって、１）請求項２５又は２６記載の装置及び２）請求項２７〜２９のいずれか一項記載の標識システムを含む定量及び／又は定量定性分析キット。
【請求項３２】
一種の定量及び／又は定量定性分析方法であって、請求項２５又は２６記載の分析及び／又は分離装置を用いてサンプル目的物を捕獲及び／又は輸送及び／又は分離することを含む定量及び／又は定量定性分析方法。
【請求項３３】
請求項２５又は２６記載の装置を含む定量及び／又は定量定性分析キット。
【請求項３４】
一種の定量及び／又は定量定性検定方法であって、請求項２７〜２９のいずれか一項に記載の定量及び／又は定量定性分析標識システムを用いて分析反応を標識することを含む定量或いは/及び定量定性検定方法。
【請求項３５】
一種の定量及び／又は定量定性検定キットであって、請求項２７〜２９のいずれか一項に記載の定量及び／又は定量定性分析標識システムを含む定量及び／又は定量定性検定キット。
【請求項３６】
一種のチップ検定方法であって、下記を含んでいる：
１）下記を提供し、
(１)目的物を含む可能性のあるサンプル
(２)機能試薬アレーを固定する分析チップ
(３)標識及び着色剤及び任意に着色制御剤及び着色定着剤を含むシステムであって、該標識は、標識リガンド/ナノメートル構造/触媒の複合物を含み、該ナノメートル構造は、ナノメートル粒子及び／又はナノメートル粒子からなる構造を含み、該ナノメートル粒子は、粒径1−100 nmの、無機ナノメートル粒子及び／又は有機ナノメートル粒子及び／又は無機ナノメートル粒子の誘導体及び／又は有機ナノメートル粒子の誘導体から選択され、該誘導体は結合された表面化学基及び／又は被覆された有機物を有するナノメートル粒子から成り、該無機ナノメートル粒子は磁性無機ナノメートル粒子及び／又は非磁性無機ナノメートル粒子を含み、該非磁性無機ナノメートル粒子は、非磁性金属ナノメートル粒子及び／又は非磁性非金属ナノメートル粒を含むことを特徴とするシステム
２）下記の操作によって、前記標識の前記ナノメートル構造及び触媒を分析チップに固定し、
(１)前記の目的物を固定してから、固定された目的物と標識リガンドを反応させて前記標識を前記分析チップに固定する、もしくは
（２）前記目的物を前記標識の全部又は一部に繋いでから、固定された目的物と前記固定された機能化試薬を反応させて前記標識を前記分析チップに固定する、
３)前記着色剤を加えて、前記分析チップ上で下記の特徴を有する着色反応を行い、
(１) ２)で固定された触媒の作用で、着色反応は、前記固定機能化試薬と前記目的物の結合箇所に対してではなく、２）で固定された前記ナノメートル構造に対して行われ、また、
(２) 前記着色反応において、前記着色制御剤及び／又は着色定着剤が任意に使用され、
４）３）の着色結果を検定・分析する。
【請求項３７】
請求項３６に記載の方法であって、前記標識は染色剤も含み、
１）前記染色剤は、前記着色反応前及び／又は着色反応中及び又は着色反応後に染色反応に使用され、
２）前記染色剤は下記の一種又はそれ以上の標識を含み、
（１）標識リガンド/ナノメートル構造/触媒/染色剤の複合物
（２）標識リガンド/ナノメートル構造/染色剤の複合物及び
（３）標識リガンド/染色剤の複合物；
前記ナノメートル構造は請求項２７記載のナノメートル構造であるを特徴とする方法。
【請求項３８】
請求項３６又は３７記載の方法であって、前記標識システムのナノメートル粒子は請求項３〜５のいずれか一項に記載のナノメートル粒子を含むことを特徴とする方法。
【請求項３９】
請求項３６又は３７記載の方法であって、
１）前記触媒は金属化合物還元反応に使用される金属触媒及び／又は酵素触媒を含み、且つ／もしくは
２）前記染色剤は染料を含み、且つ／もしくは
３）前記着色剤は金属化合物を含む
ことを特徴とする方法。
【請求項４０】
一種のチップ検定方法であって、少なくとも下記の手順を含む：
１）下記を提供し、
（１）目的物を含む可能性のあるサンプル
（２）機能試薬アレーを固定する分析チップ
（３）標識及び着色剤及び任意に着色制御剤及び着色定着剤を含むシステムであって、該標識は、標識リガンド、触媒、染色剤、任意にナノメートル構造を含み、該ナノメートル構造、染色剤、触媒、着色剤はそれぞれ請求項３６〜３９記載のものであり、
２）下記を通じて反応部位を染色、着色し、
（１）前記チップに前記サンプルを入れて、前期目的物が含まれれば前記固定化機能化試薬と前記目的物とが反応した後、前記分析チップに前記標識と着色剤を入れる。もしくは、
（２）前記サンプルと前記標識の全部又は一部と混ぜて、前記含まれる可能性のある目的物と前記標識リガンドとを反応させた後で前記チップを入れ、前記固定化機能化試薬と前記含まれる可能性のある目的物を反応させた後、前記分析チップに着色剤を入れる。
３）２）の着色結果に対して検定分析を行う。
【請求項４１】
一種の分析チップキットであって、少なくとも請求項３６〜４０のいずれか一項に記載の標識システムのうちひとつを含むことを特徴とする分析チップキット。
【請求項４２】
請求項４１記載の分析チップキットであって、ポリペプチド及び／又はポリペプチド関連薬品の分析に使用するための分析チップキット。
【請求項４３】
請求項４１記載の分析チップキットであって、核酸及び／又は核酸関連薬品の分析に使用するための分析チップキット。
【請求項４４】
一種のポリペプチド分析用の分析チップ検定方法であって、下記の磁性ナノメートル粒子を使用する手順を少なくとも一つ含む分析チップ検定方法。
１）サンプルと磁性ナノメートル粒子を混ぜる
２）サンプルと機能化試薬/磁性ナノメートル粒子の複合物を混ぜる
３）サンプルを、外部磁場存在下もしくは非存在下で、ナノメートル構造分析チップと接触させて反応させ、前記ナノメートル構造は磁性ナノメートル粒子を含んでいる。
４）標識リガンド/磁性ナノメートル粒子/分子標識物質の複合物を使用して反応させる。そのうち、
（１）標識反応は、任意に外部磁場存在下もしくは非存在下で行う。また、
（２）前記標識複合物は一種又はそれ以上の分子標識物質、一種又はそれ以上の磁性ナノメートル粒子、一種又はそれ以上の機能化試薬を含み、任意に密封剤を含む。
そのうち、
i)前記磁性ナノメートル粒子は磁粒子又はその誘導体であって、三次元スペース中、少なくとも一次元は1〜200 nmで、望ましくは1〜100 nmで、最適には1〜50 nmであり、さらに前記粒子自身が分子標識物質強化剤ではない。
ii)前記標識リガンドはポリペプチドと作用できる次の物質から選ばれる：ポリペプチド、多糖、ビタミン、抗生物質、ウイルス、細胞、及び機能有機物；
iii)前記標識複合物の標識反応時の磁性ナノメートル粒子濃度は下記の通りであること：
(i)ナノメートル粒子重量/体積濃度（g/ml）が三万分の一より大きく、望ましくは三千分の一より大きく、最適には五百分の一より大きい。或いは
(ii)ナノメートル粒子モル濃度は0.25nMより大きく、望ましくは2.4nMより大きく、最適には15.0nMより大きい。
【請求項４５】
請求項４４記載の方法であって、前記磁性ナノメートル粒子は、酸化鉄及びその誘導体から選択され、
１）該酸化鉄は四酸化三鉄及び／又は三酸化二鉄を含み、
２）前記誘導体は表面導出の誘導体ラジカルのある表面修飾或いは、表面修飾と機能有機物で被覆される誘導体を含むことを特徴とする方法。
【請求項４６】
請求項４４又は４５記載の磁性ナノメートル粒子を含むことを特徴とする一種のポリペプチド分析チップキット。
【請求項４７】
請求項２５記載の分離装置を含むことを特徴とする一種の分離方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【発明の名称】ナノメートル構造の分析または分離用装置、及びその製作方法と応用
【技術分野】
【０００１】
当発明は分離用あるいは分析用あるいはその双方のナノメートル構造担体に関わる。特にチップのバイオチップ基板、ELISAマイクロプレートのバイオチップ基板、平面クロマトグラフィー紙、クロマトグラフィーゲルである。当発明はまた、分離用あるいは、分析用あるいはその双方の敏感度の高いナノメートル構造機能化担体、特にチップ、ELISAマイクロプレート、平面クロマトグラフィー試薬紙、クロマトグラフィーゲルに関わる。当発明は分析用のナノメートル構造を含む標識システムにも関わる。当発明はキット、特にチップキット、酵素標識キット、平面クロマトグラフィーキットにも関わる。また当発明は上述の関連物の製作方法及び応用、特にチップ分析、ELISAマイクロプレート分析、平面クロマトグラフィー紙分析、クロマトグラフィー分離の面の応用にも関わる。
【背景技術】
【０００２】
担体、特に選択性反応活性のある機能化担体は多くの面で、特にサンプル中の目的物に対する定性または定量またはその双方の分析、または分離またはその双方の面で広範に応用されている。分離面で応用される機能化担体には例えば、親和クロマトグラフィーゲルがある。分析面で応用される機能化担体、例えば抗原または抗体またはその双方のチップがある。
【０００３】
現行の機能化担体は殆ど機能化試薬（例えばリガンド）を直接固相担体表面に固定して製作した。現行の機能化担体の機能化試薬反応動力学条件は改善する必要がある。その表現は敏感度或いは、敏感度と特異性が向上する必要があり、または敏感度と特異性が向上するかまたは反応時間を短縮するかまたはその双方の必要がある。
【０００４】
担体の表面改造とは、固定機能化試薬の改造と分析或いは/及び分析分離研究開発の一つの内容であり、数千の実験室を惹きつけた。担体表面に対するナノメートル粒子或いはゲルの改造だけでも多くの研究者が作業している。但しこれらの仕事は主な目標を敏感度と確定しなかったり、（例えばWO 0183825）、主な目標を固定機能化試薬と確定しなかったり（例えば、アメリカ特許出願No:20030207296）、獲得した担体のコストが高すぎたりする（例えば、アメリカ3M社が製作した方向決定配列は不連続のサブミクロン髭結晶構造で、）。文書WO 0183825中、コロイド、特にサイズが100 nm〜500 nmの有機粒子をリガンド担体として使用している。その目的及び達成したい効果はチップの加工労働量を減少するだけである。例えば、均質なプローブスポットを有するチップを作成するために処理手順が単純化される。No:20030207296アメリカ特許出願において、重点はナノメートル粒子自身を核酸検定リガンド担体として使用することである。但しナノメートル粒子の性質変えのバイオチップ基板に関する研究が不足である。
【０００５】
敏感度と検定時間を決めるもう一つのキー要素は標識システムである。現行の標識システムは主に分子分散標識システムで、その敏感度を向上させる必要がある。数百の実験室はこの面の仕事を実施している。現在標識システムに一部分のナノメートル粒子を導入して検定敏感度（例えば、WO 00/72018 A1，No:20030211488アメリカ特許出願で、コロイド金を標識として、銀強化システムを加える）を向上させるが、これらは標識物質自身であったり、標識物質強化剤であったりする（例えば、No:20030232388、20030166297、20020142480、20030211488アメリカ特許出願で、ラマン効果(強化)のある金属を使用する）。ほかの幾つかの特許で、ミクロン粒子に一部分のナノメートル結晶体粒子を導入して各種類の活性分子を連接するミクロン粒子担体の識別コードとする。（例えば、No:6544732アメリカ特許）
また、分離装置、例えばクロマトグラフィー装置に機能化担体を大量に使用する。例えば親和クロマトグラフィー官能基。クロマトグラフィー官能基に使用する粒子はバイオチップ基板より表面積が大きいが、クロマトグラフィー時間とクロマトグラフィー収率等の面で改善する必要がある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
当発明の主要な目的はより低いコストで分析、分離中の機能化担体或いは/及び分離中の機能化担体と反応効率を向上させ、検定敏感度或いは/及び検定敏感度或いは/及び特異性を向上させることにある。或いはプラス検定時間を短縮する。或いはそれとより多い種類の敏感度が十分に高い固相担体を提供する。当発明の目標は担体、機能化担体及び標識システムに対する開発を通じて実現する。担体と機能化担体の研究のために、当発明のもう一つの目的は媒質の分離効率を向上させることである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
したがって、当発明の第一実施形態は、一種の分離及び／又は分離分析用のナノメートル構造担体を提供することであり、その中にはナノメートル構造領域を含む。該ナノメートル構造領域は従来の固相担体及びその上に固定されたナノメートル構造を含んでおり、該ナノメートル構造は非定方向に配列するナノメートル構造ユニットを含んでいる。上述のナノメートル構造ユニットは突出高が3 nmより大きく、突出部半分の高さの箇所に少なくとも一つの次元のサイズが1〜500 nmで、最適には1〜100nmのナノメートル凸状体を持つ。また、１）上述のナノメートル凸状体は上述のナノメートル構造領域において、1個/μm2より大きな、最適には10個/μm2より大きな分布密度で配置され、２）下記（１）〜（４）のいずれか１つまたはそれ以上の特徴を有する
ことによって特徴付けられるナノメートル構造担体である。
（１）前記ナノメートル構造領域のナノメートル構造被覆率が20％より大きく、最適には30％より大きいこと。
（２）前記ナノメートル構造領域の表面積が２００％より大きく、望ましくは３００％より大きく、最適には４００％より大きいこと。
（３）前記ナノメートル構造領域の吸着能力の増加率が115％より大きく、望ましくは130％より大きく、最適には150％より大きいこと。
（４）前記ナノメートル構造領域の吸着能力減衰比率が90％より小さく、最適には80％より小さいこと。
【０００８】
当発明中、用語“ナノメートル凸状体”は少なくとも一つの次元が1〜1000nmサイズで、頂上部の突出がひとつだけのものを指す。例えば、固相担体或いは他の構造に固定されたナノメートル粒子。用語“ナノメートル構造ユニット”は少なくとも一つの次元が1〜1000nmサイズの構造ユニットを指す。例えば、一つのナノメートル粒子。用語“ナノメートル構造”はナノメートル構造ユニットを構造ユニットとして構成した高さが1000nm以下の構造である。例えば、ナノメートル構造ユニット或はナノメートル凸状体からなる枝状、丘状、網状、或いは他の幾何形状、及びその間のナノメートル構造ユニット或いはナノメートル凸状体の相互関係（例えば、上述の枝状は上向き或いは表面と平行して走っていても良い。添付図１中、これらはナノメートル凸状体或いはナノメートル凸状体を含む枝状体を示す）。
【０００９】
用語“ナノメートル構造領域”はナノメートル構造担体で、当発明の特定の特徴をもっている領域（たとえばナノメートル構造ユニット分布及び分布密度等）を指す。そのうち上述のナノメートル構造及び存在する上述のナノメートル構造を固定していない従来の固相担体表面を指す。用語“非ナノメートル構造領域”はナノメートル構造担体上のナノメートル構造領域以外の領域を指す。非ナノメートル構造領域はナノメートル構造を含有できるが、ナノメートル構造領域の特徴を持っていない。当発明のナノメートル構造担体はナノメートル構造領域と存在する非ナノメートル構造領域を任意的に選択するものを含む。上述の分離或いは/及び分析した目的物は下記の一組或いは数組の物質を含む。ポリペプチド、ポリペプチドと反応する薬品、核酸、核酸と反応する薬品。
【００１０】
当発明中、用語“ナノメートル構造被覆率”とは上述のナノメートル構造が被覆する従来の固相担体の表面積が、ナノメートル構造領域の含有する従来の固相担体の総表面積中での比率を指す。すなわち、ナノメートル構造被覆率=ナノメートル構造被覆した従来の固相担体表面積/従来の固相担体総表面積。
【００１１】
当発明中、用語“ナノメートル構造領域表面積増加率”とはナノメートル構造領域とその箇所が含有する上述従来固相担体の比表面積での比率を指す。すなわち、表面積増加率=（ナノメートル構造領域比表面積/含有の従来の固相担体の比表面積）×100％。表面積増加率は直接測定したり、間接測定したりしても良い。
【００１２】
当発明の用語“ナノメートル構造領域の吸着能力増加率”とはナノメートル構造領域とその中の従来の固相担体の吸着能力との比率を指す。すなわち、吸着能力増加率=（ナノメートル構造領域吸着能力/その中の従来の固相担体の吸着能力）×100％。吸着能力中の被吸着物の選択は公知の方法で行う。
【００１３】
当発明中、用語“ナノメートル構造領域の吸着量減衰速度比率”とはナノメートル構造領域の吸着量減衰速度とその中の従来の固相担体の吸着量減衰速度の間において、吸着量が目的物濃度の降下につれて減衰する速度を比較する率のことである。すなわち、吸着量減衰速度比率=（ナノメートル構造領域の吸着量が目的物濃度の降下につれて減衰する速度/その中の従来の固相担体の吸着量が目的物濃度の降下につれて減衰する速度）×100％。
【００１４】
当発明のナノメートル構造担体は、確定的なナノメートル構造の特徴（例えば、ナノメートル構造領域及びその中のナノメートル構造ユニット分布及び分布密度、ナノメートル構造被覆率等）及びナノメートルの特性（たとえば、表面積増加率、吸着能力増加率、吸着量減衰速度比率等）を持っている。当発明のナノメートル構造担体のナノメートル特性は上述のナノメートル構造に関わる可能性があり、上述のナノメートル構造に関係しない可能性もある。
【００１５】
当発明のナノメートル構造担体は、“ナノメートル粒子被覆担体”と異なる。実際に、たとえ従来の担体としても、その上にナノメートル粒子があるかもしれない。例えば、加工の欠陥、非専門的な微塵吸着等。しかしこれらは当発明のナノメートル構造担体ではない。たとえ専門的にナノメートル粒子で担体を被覆しても、製作したナノメートル粒子被覆担体は多くの状況の下で当発明のナノメートル構造担体の特徴を持たない。特にナノメートル構造領域の特徴を持たない。これは従来の担体とは本質的な区別がない（例えば、表面積増加率、吸着能力増加率、吸着量減衰速度比率等）。従って、当発明のナノメートル構造担体ではない。
【００１６】
当発明のナノメートル構造担体は多種多様な方法で獲得できる。但し、当発明のナノメートル構造機能化担体の製作方法は、最適化する製作方法である。特に強調すべきは当発明の制作方法中、最適化のナノメートル粒子濃度は当発明のナノメートル構造担体を獲得する肝心なポイントである。当発明の一実施例中、最適濃度以外の状況下で製作したナノメートル粒子被覆担体は、当発明的ナノメートル構造担体の特徴を持たず、当発明のナノメートル構造担体ではない。
【００１７】
当発明のナノメートル構造担体において、上述のナノメートル構造ユニットはナノメートル粒子からなる。上述のナノメートル粒子の粒径は、1〜500nmサイズで、望ましくは1〜100nmで、最適には1〜50nmである。上述のナノメートル粒子と固相担体間或いは、固相担体と上述のナノメートル粒子間に、一種以上の方式で結合できる。例えば共有結合、非特異性物理化学吸着、抗原−抗体吸着、親和吸着、ヌクレオチドカップリング、及び軟化温度以下の場合の熱結合等。最適には、上述の結合は固相担体或いは、固相担体またはナノメートル粒子またはその双方の表面で結合剤を通して作用する。上述の結合剤は表面リガンドまたは被覆有機物またはその双方を含んでいる。
【００１８】
当発明のナノメートル構造担体において、以下を含んでいる。
１）下記に含まれる無機ナノメートル粒子
（１）磁性無機ナノメートル粒子
及び／又は
（２）非磁性金属ナノメートル粒子及び／または非磁性非金属ナノメートル粒子を含む非磁性無機ナノメートル粒子
及び／又は
２）有機ナノメートル粒子
及び／又は
３）無機及び／又は有機ナノメートル粒子の誘導体
を含み、
前記誘導体は表面の化学基に結合しているナノメートル粒子及び／又は有機物が被覆しているナノメートル粒子含む。
【００１９】
前記ナノメートル粒子は、プラスチックナノメートル粒子、多糖ナノメートル粒子等を含む。
【００２０】
上述の無機非磁性非金属ナノメートル粒子は酸化シリコン粒子、酸化チタン粒子、酸化アルミ粒子などの酸化物ナノメートル粒子を含んでいる。上述の非磁性金属ナノメートル粒子は金粒子、バナジウム粒子、鉛粒子を含んでいる。ナノメートル粒子金等の金属粒子は高速検査試薬紙に使用しているが、粒子分子標識物質として使用しており、当発明方法の固相担体として使用することではない。
【００２１】
当発明の第一の面として考えられるナノメートル構造担体において、上述の従来の固相担体は下記の1組或いは多組の材料及びその誘導体から製作された、サイズが1000nmより大きい固相担体を含んでいる。すなわち、ガラス、シリコン、シリコン・ゲル、セラミックス、金属酸化物、金属、重合体材料及びこれらの複合物。上述の誘導体は、表面基団が結合している或いは/及び表面基団と有機物が被覆している誘導体を含んでいる。上述の固相担体は面状担体（例えば、生物チップ、ELISAマイクロプレート等のバイオチップ基板）、粒状担体（例えば、クロマトグラフィーゲル、特にミクロン粒子クロマトグラフィーゲル）と膜状担体（例えば、平面クロマトグラフィー紙）を含んでいる。
【００２２】
当発明のナノメートル構造担体において、１）上述の表面基団は下記の一種以上のリガンドを含んでいる。すなわち、アミノ基、アルデヒド基、エポキシ基、アミノヒドラジン、ジエチルアミノエチル基、ジエチル−（2-ヒドロキシプロピル）アミノエチル基、カルボキシルメチル基、スルホン酸プロピル基、スルフヒドリルエチルピリディン基、シロキサン基、チオール基、アルキル基。
【００２３】
２）上述の被覆有機物は下記の一種以上の有機物を含んでいる。（１）リビニルピロリドン、トゥイーン類表面活性剤等を含む表面活性剤、（２）ポリアミノ酸を含むポリ電解質、（３）ポリシロキサンを含む親油性有機物、（４）ポリグルコース誘導体、アガロース誘導体、セルロース誘導体、ポリアクリルアミンを含むイオン交換重合体、それに、（５）ヘパリンナトリウム、抗原、抗体を含む親和物質。
【００２４】
上述の表面基団は長いアーム誘導体リガンドR−(CH2)x−である可能性もある。そのうち、Rは誘導体リガンドで、ｘは２以上で、望ましくは４より大きく、最適には６より大きい。当発明中、特に被覆誘導体の製作によって、ナノメートル粒子表面に導入できる機能化有機リガンドの範囲が大きくなる。例えば、当発明の実施例中、ナノメートル粒子誘導体、例えば超疎水酸化シリコン（CDS7）にアルキル基があり、被覆誘導体の表面に有機物を被覆するリガンドがある。例えば、ポリアミノ酸にアミノ基があり、アミノヒドラジン−ポリアミノ酸にアミノ基とアミノヒドラジン−基があり、DEAE−デキストランにジエチルアミノエチル基がある等。
【００２５】
他方で、表面活性剤、例えばポリビニルピロリドン(PVP)、ポリ電解質、例えばポリアミノ酸、イオン交換重合体、例えばDEAE−デキストラン、親和物質、例えば蛋白質A等はすべて本発明において、リガンド/ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物とリガンド/ナノメートル粒子/分子標識化合物の製作に使用できる。実際に粒子誘導体の重要な面は誘導体を被覆することにある。当発明の方法での被覆誘導体は一重或いは多重被覆誘導体である可能性がある。例えば分散剤或いは、分散剤及び分散安定剤を被覆している酸化シリコン粒子（一重被覆）の上に、PVP（二重被覆）も被覆できて、その後蛋白質A（三重被覆）も被覆できる等。従って選択できる被覆有機物の範囲は大きい。上述の表面基団または被覆有機物またはその双方はナノメートル粒子或いは/及びナノメートル粒子或いは/及び従来の固相担体に固定できる。
【００２６】
当発明のナノメートル構造担体において、上述のナノメートル構造担体は下記のものを含んでいる。すなわち、ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物、ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物或はナノメートル粒子/ミクロン粒子/バイオチップ基板複合物。強調すべき必要事項は次の通りである。すなわち、当発明のナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物、ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物或いは、ナノメートル粒子/ミクロン粒子/バイオチップ基板複合物は、当発明のナノメートル構造担体とするナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物、ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物或いは、ナノメートル粒子/ミクロン粒子/バイオチップ基板複合物として使われるということである
当発明第一の面として考えられるナノメートル構造担体は、チップナノメートル構造バイオチップ基板、ELISAマイクロプレートナノメートル構造マイクロプレート、平面クロマトグラフィーナノメートル構造バイオチップ基板、ナノメートル構造分離固定相、及びナノメートル構造クロマトグラフィーゲルを含むナノメートル構造分離固定相として使用できる。
【００２７】
当発明の第二の面から考えると、当発明第一のナノメートル構造担体の製作に基づいた方法を提供できる。それは上述のナノメートル粒子懸濁コロイドを上述の従来の固相担体と接触して固定化反応を実施することを含む。また固定化反応時上述の懸濁コロイド中のノメートル粒子重量/体積濃度（g/ml）は五百分の一から十五万分の一であるか、或いはナノメートル粒子のモル濃度は0.12〜37.4 nMである。当発明のナノメートル構造担体制作方法中、確定したナノメートル粒子濃度が一つポイントとなる。当発明の方法によって製作したナノメートル構造担体は、分析チップバイオチップ基板、分析チップチャンネル、ELISAマイクロプレートバイオチップ基板、平面クロマトグラフィー試薬紙バイオチップ基板、及びクロマトグラフィーゲルの担体等とすることができる。
【００２８】
当発明の第二の面の方法において、上述のナノメートル粒子は、重量/体積濃度（g/ml）は五千分の一から十五万分の一までか、或いはナノメートル粒子モル濃度は0.12〜3７．4 nMを示す。最適には、重量/体積濃度（g/ml）が二万分の一から六万分の一か、或いはモル濃度が0.31〜0.93 nMである。
【００２９】
当発明の第二の面の方法は、また下記の一種以上の機能化（functionalization）処理も含む。それによって他の関連物質と結合させる。
【００３０】
（a）上述のナノメートル粒子或いは/及び上述の従来の固相担体を最初に機能化してから上述の物質の接触と固定を行う。
【００３１】
（b）上述の接触と固定をしてから、上述のナノメートル粒子或いは/及び上述の従来の固相担体を機能化する。
【００３２】
（c）上述のナノメートル粒子或いは/及び上述の従来の固相担体を機能化してから、上述の接触と固定を行う。それから最後に上述のナノメートル粒子或いは/及び上述の従来の固相担体の機能化を行う。
【００３３】
そのうち上述の機能化処理は上述の表面基団或いは/及び被覆有機物の導入も含む。
【００３４】
当発明の第二の面の方法は、上述の固定化反応後の産物に対する架橋処理を含む可能性もある。当発明中使用できる架橋剤はカップリング剤を含んでいる。例えば、クロロエポキシプロパン、ウロトロピン等。
【００３５】
当発明の第二の面の方法は上述の固定化反応後の産物に対する熱処理を含む可能性もある。上述の熱処理は30℃より大きい、望ましくは37℃より大きく、最適には40℃より大きい。但し、固相担体の軟化温度以下で加温してから冷却する。現有の技術中、ナノメートル粒子被覆バイオチップ基板の安定性を向上させる一つの方法は、固相担体の軟化温度での熱処理である。但し軟化温度での熱処理は固相担体が変形し、応用が困難になる可能性がある。驚くべきことに当発明の熱処理方法で、軟化温度より低い場合、数十度低く、また百度余り低くても、固相担体とナノメートル粒子の間に強い結合力がある。当発明では討論せずにただ次のことを仮設する。ナノメートル粒子は従来の材料と異なる熱性質を持っている。当発明の熱処理方法では固相担体変形をしない。
【００３６】
当発明の第３の実施形態としては、
一種の分析及び／又は分離用ナノメートル構造機能化担体であって、ナノメートル構造機能化領域を含み、前記ナノメートル構造機能化領域は従来の固相担体及びこの上に固定された機能化ナノメートル構造を含み、前記機能化ナノメートル構造は非定方向配列のナノメートル構造ユニット及びその上に固定された機能化試薬を含み、前記ナノメートル構造ユニットは突出高さが3 nmより高く、半分高さ箇所での横断面の少なくとも一次元の寸法が1〜500 nmで、最適には1〜100nmのナノメートル凸状体を含み、さらに
１）前記ナノメートル構造領域での前記ナノメートル凸状体の分布密度は1個/μm2より大きく、最適には10個 /μm2より大きいことを特徴とし、さらに２）次の一種またはそれ以上の特徴を有するナノメートル構造機能化担体である。
（１）前記ナノメートル構造機能化領域でのナノメートル構造被覆率は30％より大きく、最適には75％より大きいことを特徴とするナノメートル構造機能化担体。
（２）前記ナノメートル構造機能化領域の表面積増加率が200％より大きく、望ましくは400％より大きく、最適には600％より大きいことを特徴とし、または吸着能力増加率が115％より大きく、望ましくは130％より大きく、最適には150％より大きいことを特徴とし、またはその双方であることを特徴とするナノメートル構造機能化担体。
（３）前記ナノメートル構造機能化領域の敏感度増加率が120％より大きく、望ましくは150％より大きく、最適には200％より大きいことを特徴とするナノメートル構造機能化担体。
（４）前記ナノメートル構造機能化領域の識別信号の減衰率比が90％より小さく、最適には70％より小さいことを特徴とし、または吸着量減衰速度速率比が90％より小さく、最適には80％より小さいことを特徴とし、またはその双方であることを特徴とする項記載のナノメートル構造機能化担体。
【００３７】
当発明中、用語“機能化領域”は上述の機能化試薬が固定された領域を指す。機能化領域は全体の固相担体を含む可能性があり、固相担体の一つ或いは互いに独立する幾つかの領域（例えば、マイクロアレーチップ）だけ含む可能性もある。用語“非機能化領域”は機能化領域以外の領域を指す。用語“ナノメートル構造機能化領域”は機能化領域中の上述の機能化試薬以外に、当発明の確定した特徴（例えば、ナノメートル構造ユニット分布及び分布密度等）を持つナノメートル構造領域も含む。そのうち上述のナノメートル構造、ナノメートル構造に固定された機能化試薬、その上に上述のナノメートル構造を含まない現存の従来の固相担体表面（添付図2中に、これらのナノメートル凸状体或いはナノメートル凸状体を含む枝状体を示す。）を任意的に選択する。
【００３８】
当発明中、用語“ナノメートル構造チップ”は少なくとも一つの当発明で述べたナノメートル構造機能化領域（例えば、プローブのマイクロアレー中の一サンプル点）のチップを含む。一つのチップにいくつかの反応器を含む可能性がある。一つの反応器に幾つかの機能化試薬を含むサンプル点（プローブ点）があるかもしれない。その中の一つのサンプル点が当発明のナノメートル構造機能化領域であれば、その全チップは当発明のナノメートル構造機能化担体或いはナノメートル構造チップである。
用語“非ナノメートル構造機能化領域”とは機能化領域の中のナノメートル構造機能化領域以外の領域を指す。非ナノメートル構造領域はナノメートル構造を含むかもしれないが、ナノメートル構造機能化領域の特徴を持っていない。用語“ナノメートル凸状体”、“ナノメートル構造ユニット”、“ナノメートル構造”、“ナノメートル構造領域”、“非ナノメートル構造領域域”はすでに上述段落で定義された。ナノメートル構造機能化担体は機能化領域上に存在する非機能化領域を任意的に選択する。上述の機能化領域はナノメートル構造機能化領域上に存在する非ナノメートル構造機能化領域を任意的に選択する領域を含む。当発明中上述の機能化試薬は上述のナノメートル構造機能化担体に反応活性（例えば、目的物との反応活性）を持たせる試薬である。例えばイオン交換剤、薬品、ポリペプチド、多糖、ビタミン、抗生物質、機能有機物、抗原、及びウイルス、細胞或いはこれらの成分。当発明のナノメートル構造機能化担体は標識物質（例えば、ルシフェリン（luciferin）が含んでいない生物チップ）を含まず、反応器だけ応用する。従って当発明のナノメートル構造機能化担体は標識を含まない。
【００３９】
特に強調すべきは、確定的なナノメートル構造の特徴及びナノメートル性質の特徴をもつ当発明中のナノメートル構造機能化担体と、一般的な意義のナノメートル粒子含有の機能化担体との相違である。一部分のファイル（例えば、第20030207296号のアメリカ特許出願）での機能化担体は、固相担体と固相担体のナノメートル粒子の機能化担体を含んでいるが、我々の数多くの実験中における驚くべき発見は以下の通りである。異なる特徴（例えば、異なる表面外観特徴）の機能化担体の活性（例えば、検定敏感度）は非常に異なっている。当発明のナノメートル構造機能化担体は確定的な特徴を持ち、その結果高い活性（例えば、検定敏感度）を持つ。また、アメリカ特許US6025202の自己アセンブリコロイド金属コロイド層（Self-assemble metal colloid monolayers）も当発明のナノメートル構造機能化担体の技術案と全く異なる。前者は当発明ナノメートル構造機能化担体の特徴を持っていない。実際に担体表面に付着した機能化ナノメートル粒子は必ずしも当発明の上述のナノメートル構造機能化領域を形成するとはかぎらない。
【００４０】
当発明中、用語“ナノメートル構造機能化領域のナノメートル構造被覆率”とは上述のナノメートル構造より被覆された従来の固相担体の表面積が、ナノメートル構造機能化領域の全体の従来の固相担体表面積中の比率を指す。すなわち、ナノメートル構造被覆率=ナノメートル構造より被覆された従来の固相担体表面積/従来の固相担体の総表面積。 
当発明中、用語“ナノメートル構造機能化領域表面積増加率”とはナノメートル構造機能化領域とその中の上述の従来の固相担体表面積との比率を指す。すなわち、表面積増加率=（ナノメートル構造機能化領域表面積比例/その中の上述の従来の固相担体の表面積）×100％。表面積増加率は直接あるいは間接に測定してもかまわない。当発明の一実施例中、チップの表面積増加率の分析を全体のバイオチップ基板上で、機能化ナノメートル粒子及び機能化試薬をそれぞれ塗布することによって間接測定した。当発明のチップの表面積増加率は800％以上になるかもしれない。
【００４１】
当発明中用語“ナノメートル構造機能化領域の敏感度増加率”とは、ナノメートル構造機能化領域と同じ従来の固相担体および機能化試薬を含む非ナノメートル構造機能化担体の分析敏感度の比率を指す。すなわち、敏感度増加率=（ナノメートル構造機能化領域の敏感度/非ナノメートル構造機能化担体の敏感度）×100％。用語“ナノメートル構造機能化領域の吸着能力増加率”はナノメートル構造機能化領域と同じ従来の固相担体と機能化試薬を含む、非ナノメートル構造機能化担体の吸着能力の比率を指す。すなわち、吸着能力増加率=（ナノメートル構造機能化領域の吸着能力/非ナノメートル構造機能化担体の吸着能力）×100％。用語“非ナノメートル構造機能化担体”は当発明のナノメートル構造機能化領域を含まない機能化担体を指す。例えば、HCV抗原をエポキシガラス片につけて形成するチップ（ナノメートル構造機能化担体の例中、当発明のHCV抗原が被覆した酸化シリコンナノメートル粒子の懸濁コロイドをガラス片につけて形成したチップがある）。吸着能力中、被吸着物の選択は固定された上述の機能化試薬より決められる。当発明中のチップ敏感度増加率は300％以上に達するであろう。
【００４２】
当発明中、用語“ナノメートル構造機能化領域の識別信号の減衰速度比率”とは、ナノメートル構造機能化領域と、同一の従来の固相担体および機能化試薬を含む非ナノメートル構造機能化担体との間で目的物濃度が降下するに連れて、減衰する速度の比率を指す。すなわち、識別信号減衰速度比率=（ナノメートル構造領域識別信号が目的物低濃度降下に連れて減衰する速度/非ナノメートル構造機能化担体識別信号が目的物低濃度降下に連れて減衰する速度）×100％。
【００４３】
用語“ナノメートル構造機能化領域の吸着量減衰速度比率”とは、ナノメートル構造領域と、同一の従来の固相担体および機能化試薬を含む非ナノメートル構造機能化担体との間で、吸着量が目的物低濃度降下に連れて、減衰する吸着速度の比率を指す。すなわち、吸着量減衰速度比率=（ナノメートル構造機能化領域の吸着量が目的物低濃度降下に連れて減衰する速度/非ナノメートル構造機能化担体の吸着量が目的物低濃度降下に連れて減衰する速度）×100％。
【００４４】
当発明のナノメートル構造機能化担体の技術案はPCT国際特許出願PCT/US96/04485で述べた生物機能化担体とは異なる。後者の機能化ナノメートル構造は定方向配列したナノメートル結晶からなる。その最適な製作方法も当発明の最適な製作方法と全く異なる。その結果コストが高くなり、当発明のあるチップのように、固相担体の必要な箇所で、機能化ナノメートル粒子アレーを固定することはできない。
【００４５】
当発明のナノメートル構造機能化担体は、公開された他のナノメートル構造を含む機能化担体とは異なる。当発明のナノメートル構造機能化担体は確定的なナノメートル構造の特徴（例えば、ナノメートル構造機能化領域及びその中のナノメートル構造ユニット分布及び分布密度、ナノメートル構造被覆率等）及びナノメートル特性（表面積増加率、吸着能力増加率、吸着量減衰速度比率、敏感度増加率、識別信号減衰速度比率等）を持っている。
【００４６】
当発明のナノメートル構造機能化担体のナノメートル特性は上述のナノメートル構造に関わるかもしれない。或いは総述していないナノメートル構造にかかわる可能性がある。当発明での確定的なナノメートル構造特徴及びナノメートル特性を持っている、ナノメートル構造担体が一般的な意味の“ナノメートル粒子被覆担体”と異なるように、当発明の確定的なナノメートル構造の特徴及びナノメートル特性を持っているナノメートル機能化構造担体は、一般的な意味の“ナノメートル粒子被覆担体”と同じく、“機能化試薬を含むナノメートル粒子被覆担体”とは異なる。
【００４７】
当発明のナノメートル構造機能化担体は多種の方法で獲得できる。但し、当発明のナノメートル構造機能化担体の製作方法は、最適な製作方法である。特に強調すべきは、当発明の製作方法中、一つの優先する機能化ナノメートル粒子濃度は当発明のナノメートル構造機能化担体を獲得するポイントの一つである。当発明の一実施例中、最適濃度以外の条件で製作したナノメートル粒子被覆機能化担体は当発明のナノメートル構造機能化担体の特徴を持たず、それは当発明のナノメートル構造機能化担体ではない。当発明の一実施例中、我々はそれらの違いを検討する。例えば外観の差。電子プローブ顕微鏡（DFM）と電子走査電子顕微鏡の助けで、表面の一部分の凸状体を観察できるが、突出サイズはナノメートルサイズの凸状体よりずっと大きい。ナノメートル粒子の重合体である可能性が大きい。また、大サイズのナノメートル粒子重合体は一部分のナノメートル構造特性を失うかもしれない。少なくとも部分的に失う。例えば実施例中の活性酸化シリコン濃度が1％より大きい時に形成した機能化担体。そのうち当種類の凸状体（非ナノメートル構造機能化領域）が機能化領域に占める割合が大きい為、検定敏感度が低くなる。
【００４８】
結論として、厳格な構造設計のない条件下で形成した機能化ナノメートル粒子を含む機能化担体は、当発明のナノメートル構造機能化担体と異なる。上述の特徴を持つ機能化担体だけが当発明のナノメートル構造機能化担体である。また当発明のナノメートル構造機能化担体はナノメートル構造単機能化担体とナノメートル構造多機能化担体を含む。そのうち上述のナノメートル構造単機能化担体は、同じ固相担体の上に一種の機能化試薬を含む機能化ナノメートル粒子だけ固定する。上述のナノメートル構造多機能化担体は、機能化固相担体上で二種より多い機能化試薬を含む機能化ナノメートル粒子を固定することによって作られる。第20030207296号アメリカ特許出願の中には、ナノメートル構造単機能化担体しかない。ナノメートル構造多機能化担体を含む装置例はチップと平面クロマトグラフィー試薬紙で、ナノメートル構造単機能化担体を含む装置例はELISAマイクロプレートである。
【００４９】
当発明のナノメートル構造機能化担体において、上述の分離或いは/及び分析の目的物は、ポリペプチド或いは、ポリペプチドと反応する薬品を含んでいる。周知の目標ポリペプチドと反応する機能化試薬はいろいろある。例えば、イオン交換剤、薬品、ポリペプチド、多糖、ビタミン、抗生物質、機能有機物、抗原、及びウイルス、細胞とこれらの成分。この種類のナノメートル構造機能化担体において、上述の機能化ナノメートル構造は、上述の固相担体との間にヌクレオチドの助けがなくても結合できる。例えば、下記の一種以上の方式の結合、すなわち、共有結合、非特異性物理化学吸着、抗原−抗体吸着、及び親和吸着。また、上述の結合は、固相担体またはナノメートル粒子またはその双方の表面の結合剤の助けで実現した。上述の結合剤は表面基団或いは/及び被覆有機物或い/及び上述の機能化試薬を含む。第20030207296号アメリカ特許出願においては、ナノメートル粒子とバイオチップ基板間の結合はヌクレオチドの助けがなくてはならない。核酸以外の物質の処理、例えばポリペプチドの検定と分離に適していない。
【００５０】
当発明のナノメートル構造機能化担体において、上述の分離或いは/及び分析の目的物は、核酸或いは/及び核酸と反応する薬品を含んでいる。たとえ当発明の核酸ナノメートル粒子がバイオチップ基板を被覆しても、確定的なナノメートル構造の特徴及びナノメートル特性をもっているので、第20030207296号アメリカ特許出願の中の核酸ナノメートル粒子が被覆するバイオチップ基板とは異なる。
【００５１】
当発明のナノメートル構造機能化担体は、機能化ナノメートル粒子と固相担体との複合物であるかもしれない。そのうち上述の機能化ナノメートル粒子はナノメートル粒子とそれに固定された一種以上の上述の機能化試薬を含む。または存在する結合剤を任意的に選択する。上述のナノメートル粒子の粒径は1〜500nmで、望ましくは1〜100nmで、最適には1〜50nmである。上述の固相担体は従来の固相担体或いは請求項1〜14のいずれかの上述のナノメートル構造担体である。当発明の機能化ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物は多種の方法で獲得できるが、当発明の機能化ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物の制作方法は当発明の最適な製作方法である。
【００５２】
当発明のナノメートル構造機能化担体において、上述のナノメートル粒子は当発明の第一のナノメートル粒子で、最適案は、上述の無機非磁性非金属ナノメートル粒子及びその誘導体である。但し、当発明のナノメートル構造機能化担体の構造の特徴は、アメリカ特許6025202とPCT国際特許出願PCT/US96/04485（及びCN96193700.9）中の構造の特徴と異なる。さらに、当発明ナノメートル構造機能化担体の最適案は、金属表面および金属ナノメートル粒子のないナノメートル構造機能化担体も含む。但しアメリカ特許US6025202中においては、ナノメートル構造表面に金属を塗布していて、PCT国際特許出願PCT/US96/04485（及CN96193700.9）中においては、コロイド金（コロイド金を有機フィルムに固定して、有機フィルムをバイオチップ基板に固定する）を使用する。その結果、当発明ナノメートル構造機能化担体の製作はより便利で、コストがより低くなる。
【００５３】
当発明の第三の面によるナノメートル構造機能化担体は、以下の組から選出する複合物の一つを含む。すなわち、機能化ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物、機能化ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物、機能化ナノメートル粒子/ナノメートル構造バイオチップ基板複合物、機能化ナノメートル粒子/ナノメートル構造ミクロン粒子複合物、及びこれらの組み合わせ。
【００５４】
当発明のナノメートル構造機能化担体は、機能化試薬である可能性もあり、当発明の第一の面によるナノメートル構造担体の複合物である可能性もある。
【００５５】
当発明のナノメートル構造機能化担体は、以下の組から選出する複合物の一つを含む。すなわち、機能化試薬/ナノメートル構造バイオチップ基板複合物、機能化試薬/ナノメートル構造ミクロン粒子複合物、及びこれらの組み合わせ。
【００５６】
当発明のナノメートル構造機能化担体において、一種以上のナノメートル粒子と固相担体の間に一重或いは多重リガンドがあり、或いは/及び一種以上のリガンドと固相担体の間に一重或いは多重ナノメートル粒子があってもよい。または上述の少なくとも一重ナノメートル粒子と他の一重ナノメートル粒子の間に一重或いは多重リガンドがあってもよい。一種以上のナノメートル粒子と担体の間に、多重リガンドのあるナノメートル構造機能化担体の例では、下記の通り製作する。すなわち、それぞれ担体を一重のリガンド1で被覆してリガンド1被覆担体にして、ナノメートル粒子を一重の他の一種のリガンド2（リガンド1と2の間でカップリング反応が起こる可能性もある）で被覆してリガンド2/ナノメートル粒子複合物にする。それからリガンド2/ナノメートル粒子複合物をリガンド1被覆担体に被覆したりつけたりして、リガンド2−ナノメートル粒子−リガンド2−リガンド1−担体の形式の複合物にする。リガンド重数が2より大きい時、このように類推する。一重のナノメートル粒子と他の一重ナノメートル粒子の間で、多重リガンドのナノメートル構造機能化担体はいろいろな種類がある。例えばリガンド3−ナノメートル粒子−リガンド3−リガンド2−ナノメートル粒子−リガンド2−リガンド1−担体或いはリガンド2−ナノメートル粒子−リガンド2−リガンド1−ナノメートル粒子−リガンド1−担体等。一種以上のリガンドと担体の間で、多重のナノメートル粒子のナノメートル構造機能化担体は下記の通り製作できる。すなわち、一種或いは一種より大きい上述のナノメートル粒子と多種の上述のリガンドを結合させて多種の機能化ナノメートル粒子（例えば、リガンド2−ナノメートル粒子−リガンド2、リガンド3−ナノメートル粒子−リガンド2、リガンド1−ナノメートル粒子−リガンド1等）にしてから、これらの機能化ナノメートル粒子を順次に或いは同時に上述の担体に結合して、リガンド2−ナノメートル粒子−リガンド2−リガンド1−ナノメートル粒子−リガンド1−担体、リガンド3−ナノメートル粒子−リガンド2−リガンド1−ナノメートル粒子−リガンド1−担体等のような形式のナノメートル構造機能化担体を形成させる。
【００５７】
当発明のナノメートル構造機能化担体はナノメートル構造分析チップにしても良い。また、ナノメートル構造ELISAマイクロプレート、ナノメートル構造平面クロマトグラフィー試薬条、及びナノメートル構造クロマトグラフィー機能化ゲルを含むナノメートル構造機能化分離固定相にしても良い。 
当発明の第四の面は、一種の当発明の第二の面によるナノメートル構造機能化担体の制作方法を提供する。それには、上述の機能化ナノメートル粒子の懸濁コロイドと上述の従来の固相担体を接触させて固定化反応をさせることが含まれている。それに固定化反応時に上述の懸濁コロイドでのナノメートル粒子重量/体積濃度（g/ml）は五百分の一から十五万分の一、或いはナノメートル粒子モル濃度が0.12〜37.4nMである。上述の接触は表面直径が0.5mmより小さい点接触或いは表面直径が0.5mmより大きい面接触である。当発明の機能化ナノメートル粒子と固相担体との複合物の一つの形成例は次の通りである。すなわち、ナノメートル粒子懸濁コロイドとリガンド溶液を混合して反応させた後に、機能化ナノメートル粒子を形成する。サンプルをつけることによって、混合液をチップのバイオチップ基板につけて、結合反応を行う等。
【００５８】
当発明の上述の担体は他の構造と共存する方式でも準備できる。例えば多くの基質と基板のバイオチップ基板等。上述の機能化ナノメートル粒子はナノメートル粒子とリガンド及び他の物質との混合物で準備できる。例えば、着色剤或いは結合剤或いはその双方を含むナノメートル粒子懸濁コロイド、安定剤を含むリガンド溶液等。上述の機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドは、混合物（例えば、ナノメートル粒子とリガンド混合反応後の未精製物）と精製物（例えば、ナノメートル粒子とリガンド混合反応後、遠心分離で自由リガンドを除去した精製物）を含有している。またその精製物中の一種ナノメートル粒子に一種以上のリガンドが固定されている。特に強調すべきは、ナノメートル粒子が希釈不足或いは希釈し過ぎた場合、一部分のナノメートル粒子で製作した上述の複合物に敏感度の向上が見えない。
【００５９】
当発明の第四の面による方法において、上述のナノメートル粒子の重量/体積濃度（g/ml）は五千分の一から十五万分の一、或いはナノメートル粒子モル濃度は0.12〜3.74nMである。最適には、上述のナノメートル粒子の重量/体積濃度（g/ml）が二万分の一から六万分の一、或いはナノメートル粒子モル濃度が0.31〜0.93 nMである。
【００６０】
当発明の第四の面による方法は上述の固定化反応後の産物に対する架橋処理も含んでいる。また、当方法は上述の固定化反応後の産物に対する熱処理も含むかもしれない。それに存在している機能化試薬保護剤を任意的に選択して上述の熱処理を保護する状況の下で、熱処理は、30℃より大きく、望ましくは37℃より大きく、最適には40℃より大きい熱処理を含む。但し固相担体の軟化温度以下で加温してから冷却することを含んでいる。上述の機能化試薬保護剤は下述の一種以上の保護剤を含む。すなわち、アミノ酸、蛋白質及び糖類。
【００６１】
当発明の第五の面は、一種の分析或いは/及び分離装置を提供する。当発明の第一の面によるナノメートル構造担体或いは、当発明の第三の面によるナノメートル構造機能化担体を含む。ポリペプチド分析、核酸分析、或いは薬品分析に用いる装置を含む。当発明のナノメートル構造機能化担体は分析チップ、ELISAマイクロプレート、平面クロマトグラフィー試薬紙、及びクロマトグラフィーゲル，或いはこれらを組合わせた装置としても良い。
【００６２】
当発明の第五の面による装置は以下の分析チップの一つを含む。マイクロアレーチップ、マイクロアレー−チャンネルチップ及びチャンネルチップ。上述のチャンネルは上述のナノメートル構造担体含有のナノメートル構造チャンネルを含む。或いは上述のナノメートル構造機能化担体含有のナノメートル構造機能化チャンネルを含む。当発明の分析チップは当発明の重点である。
【００６３】
当発明の分析チップの一つはチャンネルを含むチップである。現在一番広範的に検討している反応器チャンネル構造と反応器分離構造はマイクロチャンネルである。マイクロチャンネルサイズは一般には次の通りである。幅が0.10 mmより小さく、深さが0.025 mmより小さい。従って、現有のマイクロチャンネルは実際には一種の凹みチャンネルである。マイクロチャンネルを含むチップはマイクロチャンネルチップと称される。即ちマイクロチャンネルは、ネットワーク接続マイクロポンプ、マイクロバルブ、マイクロ液体貯蔵器、マイクロ電極、マイクロ検定ユニット等のような、サンプル採集、前処理、液体運輸等の分析機能を一体に集めるマイクロ全面分析システムである。
【００６４】
マイクロ流体チップの各反応器には普段一種のリガンドだけ固定される。一回でサンプルにおいて一つの目的物だけ検定する。マイクロチャンネルチップの一つの例はカリパー技術社（Caliper Technologies Inc.）（www.caliper.com）の検定用チップである。マイクロチャンネルチップのメリットは高い敏感度と速い速度である。デメリットは次の通りである。すなわち、1）生産中まずマイクロチャンネルをエッチング（食刻）して、プローブを取り付けてから、マイクロチャンネル密封製作を行う。構造が複雑で、工業化生産が非常に難しい。2）検定時の液体流動速度は専門的な精密設備により制御される。例えば、電気浸透装置等。3）反応が終わった後、固定されたプローブ分子がその内部表面にあるので、一部分の検定、例えば、蛍光標識物検定に対して、直接普通チップスキャナーで結果を読み取ることができない。
【００６５】
現在、マイクロチャンネルに関する研究（例えば、No.878437、801390とNo.090840アメリカ特許出願）はさまざまであるが、製作し易く且つコストの低いチャンネル構造は依然として注目テーマの一つである。当発明のチャンネルは固相担体にナノメートル構造或いは、機能化ナノメートル構造を固定して製作した。例えばナノメートル粒子或いは、機能化ナノメートル粒子をチップバイオチップ基板チャンネル位置でコーティングする。そのサイズの変化は制御し易い。例えばマイクロチャンネルが形成できると同時に、広いチャンネルも形成できる。その流動相の運輸能力は必要に応じて、ナノメートル粒子の性質を変えることによって実現し易い。またこの製作コストは十分低い。
【００６６】
当発明の第五の面による装置は下記の一つを含む。ELISAマイクロプレート、平面クロマトグラフィー試薬紙、及びクロマトグラフィー管を含む分離固定相のある装置。
【００６７】
当発明の第六の面は一種定量或いは/及び定性分析標識システムを提供する。このシステムは標識物を含んでいる。また少なくとも一種の標識物は標識試薬/ナノメートル構造/分子標識物質複合物である。上述のナノメートル構造はナノメートル粒子或いは、ナノメートル粒子で組織結合を含んでいる。また、上述のナノメートル粒子の粒径が1〜100 nmである。それ自身は標識物質増強剤に属する非磁性無機非金属粒子ではない。
【００６８】
当発明リガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物は混合物或いは精製物である。精製物は一種以上の分子標識物質、一種以上のナノメートル粒子、一種以上の標識試薬を含む。また、密封剤を任意的に選択する。当発明の標識物で標識できる目的物は広範である。例えば、ペプチド及びポリペプチドと反応する薬品等。当発明の標識物も核酸および核酸と相互作用する薬品。当発明中に標識される活性試薬は、その機能を認識する目的物に結合する標識物において使われる。例えば、抗原、抗体、単鎖或いは多鎖のDNA、RNA、ヌクレオチド、及びウイルス、細胞或いはこれらの成分等。この面で、当発明のリガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物はリガンドナノメートル粒子複合物と異なる。例えば、ナノメートル担体を含んでいないリガンド粒子リガンド、リガンドナノメートル磁性粒子等。なぜかというと、当発明の複合物中標識物質が分子標識物質（例えば、ローダミン）で、ナノメートル粒子ではない。ナノメートル粒子は標識物質ではなく、担体である。担体は活性標識試薬の活性位点を保持する手段の一つとしても良い。
【００６９】
当発明のリガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物は、リガンドマイクロボール−蛍光粒子複合物、分子標識物質−微粒子リガンドとも異なる。なぜかというと、当発明の複合物の中の担体がナノメートル粒子（例えば、40 nmのナノメートル酸化硅素）で、サイズの大きいマイクロ球或いはマイクロ粒子ではない。また、ナノメートル粒子が通常ずっと高い分散特性および結合活性を持っている。
【００７０】
上述標識システムにおいて、活性試薬/ナノメートル構造/分子標識物質複合物の製作方法はいろいろある。例えば上述の一種以上のリガンド、一種以上のナノメートル粒子、及び一種以上の上述の分子標識物質を下記の一種の方式で結合する。すなわち、上述のリガンドを上述のナノメートル粒子と結合させてから、上述の分子標識物質と結合させる。上述のナノメートル粒子を上述の分子標識物質と結合させてから上述のリガンドと結合させる。上述のリガンドを上述の分子標識物質と結合させてから上述のナノメートル粒子と結合させる。上述のリガンドを上述の分子標識物質及び上述のナノメートル粒子と同時に結合させる。またこれらの方式を基礎とする組合せである。当発明の複合物の製作方法は簡単で、製作物の水溶性が良く敏感度が高い。
【００７１】
当発明の第六の面による標識システムにおいて、上述の非磁性無機非金属粒子が当発明の第一の面によるナノメートル構造担体で述べた非磁性無機非金属粒子に含まれている。当発明の標識システムにおいて、上述の複合物の中に含まれる非磁性無機非金属ナノメートル粒子はサイズ1〜100 nm、最適に1〜50nmの酸化物粒子及びその誘導体を含んでいる。上述の酸化物粒子は酸化シリコン、酸化チタン、酸化アルミニウムを含む。上述の誘導体は、表面に誘導体基を含み又は／及び有機化合物も被覆する誘導体である。上述の誘導体基団は下述の一種以上の基を含む。アミノ基、アルデヒド基、エポキシ基、アミノヒドラジン基、ジエチルアミノエチル基、ジエチル−（2−ヒドロキシプロピル）アミノエチル基、カルボキシルメチル基、スルホン酸プロピル基、スルフヒドリルエチルピリディン基、シロキサン基、チオール基、アルキル基。上述の官能有機物は下述の一種以上の有機物を含む。ポリビニルピロリドン(PVP)、トゥイーン類表面活性剤等を含む表面活性剤、ポリアミノ酸を含むポリ電解質、ポリシロキサンを含む親油性有機物、ポリグルコース誘導体、アガロース誘導体、セルロース誘導体、ポリアクリルアミンを含むイオン交換重合体、それに、ヘパリンナトリウムを含む活性物質。そのうち、上述のマイクロ担体被覆誘導体中のマイクロ担体は上述のナノメートル粒子を含んでいる。
【００７２】
当発明の第六の面による標識システムにおいて、上述の分子標識物質は下述の一種以上の物質を含む。すなわち、蛍光物質、化学発光物質、化学発光触媒、非鉄金属塩類、染料と顔料。例えば下述物質の一種以上の物質。蛍光素、ローダミン、海藻蛋白質、塩類銀、酵素、塩基性ブラック、塩基性紫、アミン基黒、クマシーブルー、結晶紫等。
【００７３】
当発明の第七の面は、一種の定量或いは/及び定性分析方法を提供する。そのうち、当発明の第五の面による分析或いは/及び分離装置を使用して、サンプル目的物を獲得し、運輸し、または／及び分離することを含む。それに当発明の第六の面による定量或いは/及び定性分析標識システムを使用して標識することを含んでいる。この方法は少なくとも下記のものを含んでいる。すなわち、上述のナノメートル構造担体活を利用して、目的物を固定することや、または、上述のリガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物を使用して目的物を標識すること、或いは、，上述のナノメートル構造チャンネル或いは/及び機能化ナノメートル構造チャンネルを利用して、反応媒質を運輸或いは/及び分離すること。目的物の固定と標識は少なくとも２種の方式で行える。すなわち、１）サンプル中の存在可能な上述の目的物を上述の装置の中に固定してから、上述の標識物を標識として上述のナノメートル構造機能化担体上の目的物に結合させること。または、２）サンプル中の存在可能な上述の目的物を上述の標識物と結合させてから、結合産物を上述の装置に固定すること。その他当発明の分析方法の一部分の実施例において、上述で製作したナノメートル構造機能化担体の方法において観察したナノメートル粒子の影響と全く異なる点は下記の通りである。すなわち、検定敏感度は、上述の標識試薬/ナノメートル構造/分子標識物質複合物のナノメートル粒子濃度の増加に連れて向上するので、使用する標識試薬/ナノメートル構造/分子標識物質複合物中のナノメートル粒子の重量/体積濃度（g/ml）は、三万分の一より大きく、望ましくは千分の一より大きく、最適には百分の一より大きい。或いはナノメートル粒子のモル濃度が0.25nMより大きく、望ましくは7.48 nMより大きく、最適には74.8 nMより大きい。
【００７４】
当発明の第八の面は、一種の定量或いは/及び定量定性検定キットを提供する。これは当発明の第五の面の分析或いは/及び分離装置或いは装置を含む。それに、当発明の第六の面の定量或いは/及び定性分析標識システムを含む。これらの物質の詳細状況は上記の関連段落を参考すること。
【００７５】
第八の面のキットはポリペプチド或いは/及びポリペプチド関連の薬品分析用のキットかもしれない。ポリペプチド分析チップキット、ポリペプチド分析酵素標識キット、或いはポリペプチド分析平面クロマトグラフィーキットを含む。それに、核酸或いは/及び核酸と核酸関連薬品分析用キットである可能性もある。
【００７６】
当発明の第九の面は、一種の定量或いは/及び定性分析方法を提供する。そのうち当発明の第五の面による分析或いは/及び分離装置を使い、サンプル目的物を獲得し、または運輸し、或いは/及びこの目的物を分離することを含む。この方法には少なくとも下記のことを含んでいる。すなわち、上述のナノメートル構造担体を利用して目的物を固定すること、或いは/及び上述のナノメートル構造チャンネルや或いは/及び機能化ナノメートル構造チャンネルを利用して、反応媒質を運輸し、或いは/及び分離すること。目的物の固定は少なくとも下記の２種類の方法がある。すなわち、１）サンプルの存在可能な上述の目的物を上述の装置に固定すること。或いは２）サンプルの存在可能な上述の目的物を標識物と結合してから、結合産物を上述の装置に固定すること。
【００７７】
当発明の第十の面は、一種の定量或いは/及び定性検定キットを提供する。そのうち当発明の第五の面による分析或いは/及び分離装置を含む。これらの装置の詳細状況は上述の関連の段落を参照することができる。
【００７８】
当発明の第十の面によるキットはポリペプチド或いは、ポリペプチド関連の薬品分析用キットかもしれない。そのうち、ポリペプチド分析チップキット、ポリペプチド分析酵素標識キット、或いはポリペプチド分析平面クロマトグラフィーキットを含む。最適には、核酸或いは、核酸関連薬品分析用のキットである。
【００７９】
当発明の第十一の面は、一種の定量或いは/及び定性分析方法を提供する。そのうち当発明の第六の面による定量或いは/及び定性分析標識システムを使用して標識することを含んでいる。当方法は少なくとも上述の標識物で機能化担体より獲得された上述の目的物を標識することを含む。或いは上述の標識物をサンプルに加えて、存在可能な上述の目的物を標識することを含む。その他、当発明の分析方法の一部実施例において、上述の製作したナノメートル構造機能化担体方法で観察したナノメートル粒子の影響と全く異なるのは下記の通りである。すなわち、検定敏感度は、上述の標識試薬/ナノメートル構造/分子標識物質複合物であるかもしれないこと、及びナノメートル粒子濃度の向上につれて上昇すること。従って、使用する標識試薬/ナノメートル構造/分子標識物質複合物中のナノメートル粒子の重量/体積濃度（g/ml）が三万分の一より大きく、望ましくは千分の一より大きく、最適には百分の一より大きい。或いは、ナノメートル粒子のモル濃度が0.25nMより大きく、望ましくは7.48 nMより大きく、最適には74.8 nMより大きい。
【００８０】
当発明の第十二の面は、一種の定量或いは/及び定性検定キットを提供する。そのうち当発明第六の面による定量或いは/及び定性分析標識システムを含んでいる。これらの標識システムの詳細状況は上記の関連段落を参照することができる。
【００８１】
発明の第十二の面によるキットは、ポリペプチド或いは/及びポリペプチド関連の薬品分析用キットであるかもしれない。ポリペプチド分析チップキット、ポリペプチド分析酵素標識キット、或いはポリペプチド分析平面クロマトグラフィーキットを含む。核酸或いは、核酸関連の薬品分析のキット用のものが最適である。
【００８２】
発明の第十三の面は、一種のチップ検定方法を提供する。この方法は少なくとも下記の手順を含む。
【００８３】
（１）サンプル、チップ及びチップ標識システムの準備。上述のサンプル中目的物を含む可能性がある。上述のチップは固定化機能化試薬アレーを含む。上述のチップ標識システムは標識物、着色剤の上に、存在する着色制御剤及着色凝固剤を任意的に選択する。また上述の標識物は標識試薬/ナノメートル構造/触媒複合物を含む。そのうち、上述のナノメートル構造はナノメートル粒子或いは、ナノメートル粒子からなる構造を含む。上述のナノメートル粒子は粒径1〜100 nmの無機ナノメートル粒子或いは、有機ナノメートル粒子或いは、これらの誘導体であるかもしれない。上述の無機ナノメートル粒子は非磁性無機ナノメートル粒子と磁性無機ナノメートル粒子を含む。上述の非磁性無機ナノメートル粒子は非磁性金属ナノメートル粒子と非磁性非金属ナノメートル粒子を含む。上述の誘導体は表面基団が結合しているか或いは、有機物が被覆している誘導体を含む。
【００８４】
（２）上述の固定化機能化試薬で上述の目的物を固定してから、上述の目的物と上述の標識物中の活性標識試薬との反応によって、上述の標識物中のナノメートル構造及びその上の触媒を固定する。或いは、
（３）上述の目的物を上述の全部或は部分標識物上に結合させてから、上述の目的物と上述の固定化機能化試薬反応によって、上述の標識物中のナノメートル構造及びその上の触媒を固定する。
【００８５】
（４）上述の着色剤を入れて、上述の触媒作用の下で、上述の固定化機能化試薬と上述の目的物を結合するのではなく、上述のナノメートル構造の上で着色反応を行う。上述の可視光線着色反応中、着色制御剤及び着色安定剤の任意的な選択も含む。
【００８６】
（５）手順（４）の着色反応の結果、及び手順（３）或いは（４）中の着色剤の着色結果に対する検定、分析を行う。
【００８７】
当発明方法の技術案は標識試薬−除去された目的物結合箇所に触媒反応を行うのとは異なる。標識試薬−除去された目的物結合箇所に触媒反応を行うのでは、その反応速度は制御し難い。当発明の方法では、除去された目的物と結合するナノメートル構造で触媒反応を行う為、ナノメートル構造パラメーター（標識試薬量、触媒量、ナノメートル粒子サイズ等）及び特異性（分離し易い等）を制御することによって、反応速度を制御し易い。その結果当発明の方法は、より速い目的物−標識物反応時間と、より高い検定特異性を持っている。
【００８８】
発明の第十三の面は、上述の標識物に染色剤も含んでいる。上述の着色反応前と反応中、或いは反応後に染色反応も行う。そのうち、上述の染色剤は下述の一種以上の標識物中に存在している。すなわち、標識試薬/ナノメートル構造/触媒/染色剤複合物、標識試薬/ナノメートル構造/染色剤複合物、及び標識試薬/染色剤複合物。そのうち上述のナノメートル構造は、当発明の上述の面における上述のナノメートル構造であるかもしれない。当発明の方法の一最適案は、着色且つ染色することによって、より高い敏感度とより高い特異性を獲得することである。
【００８９】
本発明の第十三の面による方法において、上述の標識システムでの上述のナノメートル粒子は、当発明の第一の面によるナノメートル構造担体中の上述のナノメートル粒子を含む。
【００９０】
当発明の第十三の面による方法において、上述の触媒は金属化合物の還元反応の金属触媒或いは、酵素触媒を含む。上述の染色剤は染料を含む。上述の着色剤は金属化合物を含む。
【００９１】
当発明の第十四の面は、一種のチップ検定方法を提供する。当方法は少なくとも下記の手順を含む。
【００９２】
(a)サンプル、チップ及びチップ標識システムを準備する。上述のサンプルは目的物を含むかもしれない。上述のチップは固定化機能化試薬アレーを含む。上述のチップ標識システムは、標識物、着色剤、及びオプションとして着色制御剤と着色安定剤とを、含む。また、上述の標識物は、活性試薬、触媒、染色剤、オプションとして存在しているナノメートル構造を含む。そのうち、上述のナノメートル構造、染色剤、触媒、着色剤はそれぞれ、当発明の上述のチップ標識システムでのナノメートル構造、染色剤、触媒、着色剤である。
【００９３】
（b）上述のチップに上述のサンプルを入れる。上述の固定化機能化試薬と存在可能な上述の目的物を反応した後、上述の標識物および着色剤を入れて、上述の反応箇所に対して染色と着色を行う。或いは、
（c）上述のサンプルを部分的にまたは完全に上述の標識物と混ぜる。上述の標識試薬を存在可能な上述の目的物と反応させた後、上述のチップに入れる。上述の固定化機能化試薬と存在可能な上述の目的物を反応させた後に上述の着色剤を入れて、チップの上述の反応箇所に対して染色および着色を行う。
【００９４】
（d）手順（b）或いは（c）の染色と着色結果に対して検定、分析を行う。
【００９５】
当発明の第十五の面は、標識システムを含む一種のチップキットを提供する。そのうち、上述のパラグラフにおいて述べた本発明の標識システムである少なくとも一種が存在する。これらの物質の詳細状況は、関連の段落を参照して下さい。
【００９６】
当発明の第十五の面のキットは、ポリペプチド或いは、ポリペプチド関連薬品分析用のキットであるかもしれない。核酸或いは/及び核酸関連薬品分析用のキットが最適である。
【００９７】
当発明の第十六の面は、一種のポリペプチド分析の分析チップ検定方法を提供する。当方法は少なくとも下述の一つの手順を含む：
（a）サンプルと磁性ナノメートル粒子を混合させる。
【００９８】
（b）サンプルと機能化試薬/磁性ナノメートル粒子複合物を混合させる。
【００９９】
（c）サンプルとチップを接触させて反応させる。反応時に存在する外部磁場を任意的に選択する。上述のチップはナノメートル構造チップである。その上、上述のナノメートル構造は磁性ナノメートル粒子を含む。
【０１００】
（d）標識試薬/磁性ナノメートル粒子/分子標識物質複合物を標識反応に使用して、標識時に、存在している外部磁場を任意的に選択する。上述の活性標識試薬/磁性ナノメートル粒子/分子標識物質複合物は、一種以上の分子標識物質、一種以上の磁性ナノメートル粒子、一種以上の活性試薬であり、他に、オプションとして存在している密封剤の混合物或いは精製物である。
【０１０１】
本方法において、上述の磁性ナノメートル粒子は、三次元スペースで少なくとも一次元が1〜200 nmで、望ましくは1〜100 nmで、最適には1〜50 nmである。それ自身は分子標識物質強化剤の磁性粒子でもその誘導体でもない。上述の活性試薬は、下記のグループ中のポリペプチドと相互作用する物質から選ばれる。ポリペプチド、多糖、ビタミン、抗生物質、ウイルス、細胞、及び機能有機物。上述の活性試薬/磁性ナノメートル粒子/分子標識物質複合物は標識時の磁性ナノメートル粒子濃度は次の通りである。すなわち、ナノメートル粒子重量/体積濃度（g/ml）は、三万分の一より大きく、或いはナノメートル粒子モル濃度は0.25nMより大きい。望ましくは、ナノメートル粒子重量/体積濃度（g/ml）は三千分の一より大きく、或いはナノメートル粒子モル濃度は2.4nMより大きい。最適には、ナノメートル粒子重量/体積濃度（g/ml）は五百分の一より大きく、或いはナノメートル粒子モル濃度は15.0nM大きい。
【０１０２】
当発明の第十六の面による方法において、上述の磁性粒子は、四酸化第三鉄、三酸化第二鉄を含むフェライト及びその誘導体から選ばれる。上述の誘導体は、表面基団と結合した誘導体或いは/及び機能有機物で被覆した誘導体を含む。第十六の面による方法において、、上述の外部磁場はパルス式である。
【０１０３】
当発明第十七の面は、一種のポリペプチド分析チップキットを提供する。そのうち、当発明の上述の面による磁性ナノメートル粒子を含む。これらの物質の詳細状況は上述段落を参照して下さい。そのキットにおいて、上述の磁性ナノメートル粒子を単独で使用して、反応媒質と混ぜる。上述のリガンド/磁性ナノメートル粒子は濃縮サンプル目的物として使用される。上述のリガンド/磁性ナノメートル粒子/分子標識物質複合物は反応標識に使用される。そのうち、当発明の第五の面による分離装置の使用も含んでいる。
【発明の効果】
【０１０４】
当発明の分離或いは/及び分析用のナノメートル構造担体のメリットは次の通りである。製作が容易で、コストが低く、吸着性が良い。
【０１０５】
当発明でのナノメートル構造担体の製作方法のメリットは次の通りである。簡単且つ有効で、コストが低い。固相担体軟化点（固相担体変化が小さい）に加熱しなくても安定的且つ確定的なナノメートル構造の特徴を持つナノメートル構造担体を得ることもできる。
【０１０６】
当発明の分離或いは/及び分析用のナノメートル構造機能化担体のメリットは次の通りである。敏感度が高く、製作が容易で、コストが低く、反応効率が高く、反応速度が高い。
【０１０７】
当発明でナノメートル構造機能化担体を製作する方法のメリットは次の通りである。適応性が強く、簡単且つ有効で、コストが低い。固相担体軟化点（固相担体変化が小さい）に加熱しなくても安定的且つ確定的なナノメートル構造の特徴を持つナノメートル構造担体を得ることもできる。
【０１０８】
当発明の分析或いは/及び分離装置のメリットは次の通りである。敏感度が高く、製作が容易で、コストが低く、反応効率が高く、反応速度が高い。
【０１０９】
当発明の定量或いは/及び定性分析標識システムのメリットは次の通りである。反応効率が高く、製作が容易である。
【０１１０】
当発明の検定方法（ナノメートル構造機能化担体とリガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物を使用）のメリットは次の通りである。ナノメートル構造機能化担体を利用してサンプルの中の目標ポリペプチドを捕獲すると同時に、リガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物で標識する。これによって、検定敏感度を大幅に向上させるか或いは/及び検定速度を大きく向上させる。
【０１１１】
当発明の検定キット（それは、ナノメートル構造機能化担体とリガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物とを含む）のメリットは次の通りである。ナノメートル構造機能化担体とリガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物との両方のメリットを合わせて、敏感度が高く、検定速度が高く、製作が容易である。
【０１１２】
当発明の検定方法（ナノメートル構造機能化担体を使用）のメリットは次の通りである。敏感度が高く、検定速度が高く、製作が容易である。当発明の検定キット（ナノメートル構造機能化担体を含む）のメリットは次の通りである。敏感度が高く、検定速度が高く、製作が容易である。
【０１１３】
当発明の検定方法（リガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物を使用）のメリットは次の通りである。検定敏感度を向上させるか或いは/及び検定速度を向上させる。
【０１１４】
当発明の検定キット（リガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物を含む）のメリットは次の通りである。検定敏感度を向上させるか或いは/及び検定速度を向上させる。
【０１１５】
当発明のチップ検定方法（リガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物を含む）のメリットは次の通りである。検定敏感度或いは/及び検定速度を向上させる。
【０１１６】
当発明のチップ検定方法（活性標識試薬/ナノメートル構造/触媒複合物を使用）のメリットは次の通りである。検定敏感度、検定速度と検定特異性を向上させる。
【０１１７】
当発明のチップキット（それは、活性標識試薬/ナノメートル構造/触媒複合物を含む）のメリットは次の通りである。検定敏感度、検定速度と検定特異性を向上させる。
【０１１８】
当発明のチップ検定方法（それは、リガンド、触媒、染色剤の標識物の使用を含む）のメリットは次の通りである。検定敏感度と検定特異性を向上させる。当発明のチップキット（それは、活性試薬、触媒、染色剤の標識物を含む）のメリットは次の通りである。検定敏感度と検定特異性を向上させる。
【０１１９】
当発明のチップキット（ナノメートル構造機能化担体或いは/及びリガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物を含む）のメリットは次の通りである。検定敏感度或いは/及び検定速度を向上させる。
【０１２０】
当発明のポリペプチド分析の分析チップ検定方法（磁性ナノメートル構造を使用）のメリットは次の通りである。検定敏感度或いは/及び検定速度を向上させる。
【０１２１】
当発明のポリペプチド分析チップキット（磁性ナノメートル構造を含む）のメリットは次の通りである。検定敏感度或いは/及び検定速度を向上させる。
【０１２２】
当発明の分離方法の優位性は高い吸着率および高い分解能である。
【０１２３】
添付図の説明
図1は一種のナノメートル構造担体のDFM平面図である。
【０１２４】
図2Aと2Bはそれぞれ一種のナノメートル構造機能化担体のDFM平面図と立体図である。
【０１２５】
説明が必要なものは次の通りである。すなわち、これらの図は当発明のナノメートル構造担体とナノメートル構造機能化担体の多種DFM図の一種であり、当発明の他のナノメートル構造担体とナノメートル構造機能化担体を代表するものではない。
【発明を実施するための最良の形態】
【０１２６】
（用語の定義）
当発明の用語“検定装置”は定量或いは／及び定性検定中に使用する同じサンプル目的物と反応するために用いられるリガンドを含む。例えば、リガンドを捕獲する機械、消耗剤を含む標識キット、リガンドを捕獲する標識キット及びリガンドを標識するキット。この例の中に、分析チップ、ELISAマイクロプレート、親和電気泳動板、親和クロマトグラフィー管、平面クロマトグラフィー試薬片、分析チップキット、ELISAマイクロプレートキット、親和電気泳動キット等がある。定量或いは／及び定性検定プロセスは体外で行えるが、体内でも行える。
【０１２７】
当発明の用語“分離装置”は分離プロセスで使用する分離機能のある物質の分離用品を指す。分離プロセスは分離方法でサンプル成分の全部或いは部分を獲得するプロセスである。分離装置の例としては、クロマトグラフィー装置を挙げるころができる。分離機能のある物質の例にクロマトグラフィー担体等がある。
【０１２８】
当発明の用語“リガンド/磁性ナノメートル粒子/固相担体”は一種の少なくともリガンド、磁性ナノメートル粒子、及び担体を含む複合物を指す。その中で、リガンド、磁性ナノメートル粒子、担体の間の結合はさまざまな形式がある。その中に、直接結合と間接結合を含む。
【０１２９】
当発明の用語“機能化試薬”は相互作用（親和作用、イオン交換、親油作用等）で目的物を捕獲する物質を指す。リガンド（英語のLigandと等しい）とイオン交換剤を含む。例えば、ジエチルアミノエチル基（DEAE）、ジエチル−（2−ハイドロキシプロピル基）アミノエチル基（QAE）、カルボキシルメチル基（CM）、スルホン酸プロピル基（SP）、メリカプトエチルピリディン基（MEP）、−NR3+、−RCOOH、シロキサン基、チオアルコール基、アルキル基、抗原、抗体、配位子、配位子指数強化システム進化技術で篩い分けた配合分子、リガンド、ポリペプチド、多糖、補助酵素、共同因子、抗生物質、ステロイド、ウイルス、細胞等。
【０１３０】
当発明の用語“標識機能化試薬”は標識に含有して、目的物と相互作用する（親和作用、イオン交換、親油作用等を含む）ことによって目的物標識を実現する物質を指す。リガンド（英語の“Ligand”に相当する），例えば、抗原、抗体、配位子、配位子指数強化システム進化技術でふるい分けた配合分子、リガンド、ポリペプチド、多糖、補助酵素、共同因子、抗生物質、ステロイド、ウイルス、細胞等も含んでいる。
【０１３１】
当発明の用語“ポリペプチド”（ 英語の“polypeptide”に相当する）は天然或いは合成蛋白質、蛋白質の一部分、合成ペプチド等を含んでいる。免疫検定における標準的な目的物及び検定中の一般的リガンド、例えば抗原、抗体等は全部ポリペプチドに属する。
【０１３２】
当発明の用語“ナノメートル粒子”は三次元空間で少なくとも一次元が500 nmより小さく、望ましくは100 nmより小さく、最適には50 nmより小さい。
【０１３３】
当発明の用語“固相担体”について、当発明の固相担体は従来の担体及びナノメートル構造担体を含む。その中で述べた従来の担体は表面でナノメートル構造が固定されていない固相担体である。そのナノメートル構造担体はナノメートル構造が固定されている固相担体である。その固相担体は面状担体（例えば生物チップ、ELISAマイクロプレート等のバイオチップ基板）、粒状担体（例えばクロマトグラフィーゲル、特にミクロン粒子クロマトグラフィーゲル）と膜状担体（例えば平面クロマトグラフィー板）を含む。
【０１３４】
当発明の用語“バイオチップ基板”は固定機能があると同時に、一方の側に巨視的な平面がある固相担体を指す。例えば、分析チップバイオチップ基板、ELISAマイクロプレートバイオチップ基板、電気泳動フィルム、平面クロマトグラフィー担体等。
【０１３５】
当発明の用語“リガンド/ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物”は、リガンド、ナノメートル粒子、及びバイオチップ基板を含む一種類の混合物を指す。その中のリガンド、ナノメートル粒子、及びバイオチップ基板の間の結合は種々の形式がある。例えば、リガンド・ナノメートル粒子・バイオチップ基板、リガンド・ナノメートル粒子・リガンドバイオチップ基板、リガンド・ナノメートル粒子・リガンドナノメートル粒子・バイオチップ基板、リガンド・ナノメートル粒子・リガンド・ナノメートル粒子・リガンド・バイオチップ基板等。
【０１３６】
当発明の用語“機能化ナノメートル粒子”は機能化試薬とナノメートル粒子が共有結合或いは／及び非共有結合で形成する複合物を指す。
【０１３７】
当発明の用語“反応器”は、その中で固定機能化担体と目標分子が特異性反応を行う場所及びこれらと接続する他の関連構造を指す。例えば、解放式マルチ反応器生物チップでの反応ウエル及び関連の隔壁構造と液体入口および出口等、96ウエルELISAマイクロプレート上のウエル、敏速検定キットの試薬板等。
【０１３８】
当発明の用語“ベースプレート”はバイオチップ基板を基礎として、他の構造がない（例えば隔壁構造）ものと結合して、リガンドが固定された後にチップを形成する製品を指す。ベースプレート上に一つ或いは幾つかのバイオチップ基板ウエルがあるかもしれない。単一バイオチップ基板ウエルのベースプレート上には一般に隔壁構造がない。この場合、ベースプレートが即ちバイオチップ基板（例えば市販のアミノ基ガラススライド）である。マルチバイオチップ基板ウエルのベースプレート上に隔壁構造がある。この場合、フィルムはバイオチップ基板と隔壁構造を含む。バイオチップ基板ウエルにリガンドが固定された後に反応器を形成する。マルチバイオチップ基板ウエルとバイオチップ基板はマルチ反応器チップを形成する。バイオチップ基板はリガンド及び他の補助剤（もしある場合）の固定用の担体である。その表面化学的性質と光学的性質はチップ性能及びチップコストを決定する-重要な要素である。
【０１３９】
当発明の用語“バイオチップ基板ウエル”はバイオチップ基板と隔壁構造からなる構造を指す。
【０１４０】
当発明の用語“分析チップ”の略称は“チップ”で、英語のＢio-chip、Microarray、Bioarrayに限らない。これは定性及び/或いは定量分析中の一種の検定装置で、その反応器でのマイクロリガンドがサンプルでの目標分子との特異反応の結果によってアドレス捜索の方法にて識別できる。チップの核心はその反応器である。反応器の核心はその上に固定されたバイオチップとリガンドとの基板である。チップはマイクロチャンネルチップ（英語のMicrochannel Ｂio-chipに等しい）とマイクロアレーチップ（英語のＢio-chip、Microarray、Bioarrayに等しい）を含んでいるが、周知のように現有の敏速検査試薬板を含まない。当発明のチップは、（オプションとして標識システムを持つ）単一反応器或いはマルチ反応器を含んでいる。また、無標識システムがある。その反応器において、リガンド上のバイオチップ基板分布密度は、10点/cm2より大きく、最適には、20点/cm2より大きい。また、各リガンドのスポット面積は1 mm2以下である。生物チップは高フラックス性と細密性の特徴を持っているから、広範に応用されている。すなわち、次の領域に応用される。遺伝子の表現検定、遺伝子の篩い分け、薬物の篩い分け、病気の診断と治療、環境監視と管理、司法鑑定等。敏感度と特異性は生物チップ検定の二つの主要品質指標である。担体、特に機能化担体は敏感度と特異性を決める肝要な点の一つである。
【０１４１】
当発明の中の用語“ナノメートル構造チップ”は少なくとも一つの当発明で述べたナノメートル構造機能化領域（例えば、プローブのマイクロアレー中の一つのサンプルスポット）を含む。一つのチップに多くの反応器があるかもしれない。一つの反応器に多くの機能化試薬を含むサンプルスポット（プローブスポット）があるかもしれない。その中の一つだけのサンプルスポットが当発明のナノメートル構造機能化領域であれば、そのチップは当発明のナノメートル構造機能化担体或いはナノメートル構造チップである。
【０１４２】
当発明の用語“クロマトグラフィー”は英語の“Chromatography”に等しく、親和クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、疎水クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー等がある。これは平面クロマトグラフィー（例えば敏速検査試薬板と敏速検査キット）と管クロマトグラフィー等に分類される。
【０１４３】
当発明の用語“分子標識物質”は検出信号の形成し或いはその形成に参与して、標識の場合に分子形態のある物質を指す。例えば、チップ検定で良く使っている標識の中のローダミン、CY3、CY5等。
【０１４４】
当発明の用語“ナノメートル構造”はナノメートル寸法があり、部分的に或いは完全にナノメートル効果（例えば表面効果、寸法効果等）が反映する構造を指す。
【０１４５】
当発明の用語“突出距離”は凸状体の頂上から底部までの距離を指す
当発明の用語“凸状体の半分の高さでの断面”は上述凸状体の半分の高さにおける凸状体の水平面を指す。
【０１４６】
当発明の用語“単機能化担体”は一種だけの上述機能化試薬が固定されている機能化担体を指す。
【０１４７】
当発明の用語“多機能化担体”は一種を越える多種の上述機能化試薬が固定されている機能化担体を指す。
【０１４８】
当発明の用語“ナノメートル粒子モル濃度”は、ナノメートル粒子が分子としてふるまう時、モル濃度を指し，単位体積/液体中のナノメートル粒子の数を示す。それは、次のように計算される。現行のサプライヤーによって提供されるナノメートル粒子濃度、平均半径及び比重に基づいてナノメートル粒子の数を数え、その数を分子の数とし、公知のモル濃度−重量/体積濃度（g/ml）の式に従って単位体積でのナノメートル粒子の数を計算する。使用しているnＭの意味はナノモルである。
【実施例】
【０１４９】
以下の実施例を用いて、当発明をより詳細に説明する。
【０１５０】
以下の実施例で使用するナノメートル粒子及び誘導体は下表1の通り。
【表１】
2007502998.tif 000001
【０１５１】
以下の実施例で使われる機能化試薬は表2に示される。
【表２】
2007502998.tif 000002
【０１５２】
下記の実施例で使用するバイオチップ基板とミクロン粒子は下表3の通り。
【表３】
2007502998.tif 000003
2007502998.tif 000004
【０１５３】
＜実施例1：ナノメートル粒子誘導体の製作方法＞
当実施例で製作したナノメートル粒子誘導体は有機物機能高分子で被覆した誘導体である。使用したナノメートル粒子は表1中のナノメートル粒子（前記ナノメートル粒子はすべて非結晶ナノメートル粒子である）を含む。使用した機能高分子を表4にリストされている。その中に、ポリイオン型有機物（ポリリシン）、イオン型誘導体重合体（DEAE−ポリグルコース、QAE−セルロース、アミノヒドラ遺伝子−ポリリシン）、高分子表面活性剤（ポリビニルピロリドン）を含む。
【０１５４】
有機物に被覆されたナノメートル粒子の製作方法の要点は次の通りである。すなわち、ナノメートル粒子を超音波振動にてそれぞれ異なる濃度（w/v）のナノメートル粒子液に調合してから、同じ体積の濃度が1/12500（w/v）の有機物溶液と混ぜて、超音波振動の下で37℃で１時間反応させる。反応生成物をクロマトグラフィゲルの入れた回旋管に流す。4000 rpm/minの条件の下で遠心処理をして、収集管の液体を取って今後の使用の為に準備する。（すべての条件を最適化した時は、遠心分離手順を省略しても良い）。
【０１５５】
当実施例で製作したナノメートル粒子被覆誘導体の一部分の例を下表4にリストされている。
【表４】
2007502998.tif 000005
【０１５６】
＜実施例2：機能化ナノメートル粒子の製作方法＞
当実施例で製作した機能化ナノメートル粒子または使用した機能化ナノメートル粒子は表1から選んだナノメートル粒子及び実施例1で製作されたナノメートル粒子誘導体を含む。使用する機能化試薬は表2中のリガンドから選ばれた。
【０１５７】
当実施例の機能化ナノメートル粒子製作方法は次の手順を含む。ナノメートル粒子或いはナノメートル粒子ポリマーを超音波振動の下でそれぞれ濃度1/6250〜1/25000（w/v）のナノメートル粒子液に調合してから、濃度が1〜2 mg/mlのリガンド溶液をそれぞれこれらと1：1に混ぜて、室温の条件で１時間反応する。精製が必要な場合、その方法は次の通りである。すなわち、反応生成物をゲルの入れた回旋管に流す。それから、4000 rpm/min条件の下で遠心を行って、收集管から液体を除き、今後の使用のために準備する。他のナノメートル粒子または/及び機能化試薬を利用して機能化ナノメートル粒子を製作するのに、同じ方法を使用できる。当実施例で獲得した一部分の機能化ナノメートル粒子の例は表5を参照して下さい。
【表５】
2007502998.tif 000006
2007502998.tif 000007
【０１５８】
＜実施例3：ナノメートル構造担体の製作方法＞
当実施例で製作されたナノメートル構造担体はナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物及びナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物を含む。公開されたミクロン粒子/バイオチップ基板複合物の製作方法でナノメートル粒子/ミクロン粒子/バイオチップ基板複合物も製作できる。当実施例で製作されたナノメートル構造担体はそれぞれ分析チップバイオチップ基板、ELISAマイクロプレートバイオチップ基板、平面クロマトグラフィー試薬板バイオチップ基板、及びクロマトグラフィーゲルとしても良い。
【０１５９】
当実施例で使用する固相担体は通用の固相担体で、表1でのガラススライド、96ウエルポリスチロール板およびニトロセルロース膜板を含む。当実施例の製作方法は同じように次の材料或いはその誘導体から製作された従来の固相担体に適用できる。すなわち、シリコンシート、シリカ、シリカ・ゲル、シリコン・ゲル、セラミックス、金属酸化物、金属、他の重合体材料及びこれらの複合物。当実施例で使用するナノメートル粒子は無機ナノメートル粒子（例えば、表1中の酸化シリコンナノメートル粒子（STN−3）、酸化シリコン（LuDOX AS−40）、酸化チタンナノメートル粒子、コロイド金）及びこれらの誘導体（例えば実施例の製作物）を含む。当実施例の方法は有機ナノメートル粒子及び他の無機ナノメートル粒子にも適用できる。例えば、酸化アルミ粒子を含む無機非磁性酸化物ナノメートル粒子。その中には、バナジウム粒子、鉛粒子を含む非磁性金属ナノメートル粒子金粒子とプラスチック、多糖、ラテックス、樹脂粒子を含む有機ナノメートル粒子がある。当実施例で使用したナノメートル粒子誘導体は表面基が結合する或いは／及び有機物が被覆する誘導体を含む。また、前記表面基はアミノ基を含む。また、前記被覆有機物はポリビニルピロリドン及びポリグルコース誘導体を含む。
【０１６０】
当実施例で使用するガラスス誘導体表面基団はアミノ基、アルデヒド基、エポキシ基、アミノヒドラ遺伝子を含む。被覆有機物はポリビニルピロリドン及びポリグルコース誘導体を含む。当実施の方法はナノメートル粒子或いは／及び固相担体の誘導体にも適用できる。例えば、下述表面基団或いは／及び被覆有機物の誘導体を含む。上述表面基団は次の一種以上の基を含む。すなわち、ジエチルアミノエチル基（DEAE）、ジエチル−（2−ハイドロキシプロピル基）アミノエチル基（QAE）、カルボキシルメチル基（CM）、スルホン酸プロピル基（SP）、スルフヒドリルエチルピリディン基（MEP）、シロキサン基、チオアルコール基、アルキル基。被覆有機物は次の一種以上の有機物を含む。トゥイーン類表面活性剤を含む表面活性剤、ポリアミノ酸を含むポリ電解質、ポリシロキサンを含む親油有機物、ポリグルコース誘導体、アガロース誘導体、セルロース誘導体、及びポリアクリルアミンを含むイオン交換重合体，ヘパリンナトリウム、抗原および抗体を含む親和物質がある。
【０１６１】
1）ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物の製作
（1）ナノメートル粒子懸濁コロイド固定化法におよるバイオチップ基板の製作
（a）直接固定化
表1中のスライド或いは他のバイオチップ基板を表3或いは表4から選んだ異なる濃度のナノメートル粒子懸濁コロイドに入れて、2時間以上浸してから、洗浄して乾燥する。この方法で多数のナノメートル構造チップバイオチップ基板を得ることができる。
【０１６２】
（b）機能化してから固定化する
ナノメートル粒子或いは／及びバイオチップ基板を機能化してから、ナノメートル粒子を固定する操作を含む。例えば、上述のナノメートル粒子に対して、上述の機能化試薬或いは／及び上述の固相担体の結合に有利な活性化処理を行って、この懸濁コロイドを上述の固相担体と接触させて固定化反応を行う。或いは上述の固相担体に対して、上述のナノメートル粒子或いは／及び上述の機能化試薬の結合に有利な活性化処理を行ってから、上述のナノメートル粒子懸濁コロイドと接触させて固定化反応を行う。
【０１６３】
例えば、表1の中のガラススライド或いは他のバイオチップ基板を実施例1で製作したナノメートル粒子誘導体（表4）の異なる濃度の懸濁コロイドから選んだものに入れて、2時間以上浸してから洗浄して乾燥する。もう一つの例としては、表1中のスライドを濃度が10％のNaOH及びHNO3で処理して、洗浄・乾燥を行って、機能化スライドを製作する。それから、上述機能化載物ガラスを表3或いは表4のナノメートル粒子の異なる濃度の懸濁コロイドから選んだものに入れて、2時間以上浸してから洗浄して乾燥する。当方法で多くの異なるナノメートル構造のバイオチップ基板を獲得できる。
【０１６４】
（c）固定してから機能化する
上述のナノメートル粒子の懸濁コロイドを上述の固相担体と接触させて固定化反応を行う。それから述べた機能化試薬の固定化に有利な機能化処理を行う。例えば、表１でのスライドを表3或いは表4のナノメートル粒子の異なる濃度懸濁コロイドから選んだものに入れて、２時間以上浸して、洗浄して乾燥してからスライドの機能化方法で機能化処理を行う。この方法で多くの異なるナノメートル構造のバイオチップ基板を獲得できる。
【０１６５】
（2）化学架橋処理法でバイオチップ基板を製作する
固相担体に固定化されて、高分子が被覆されたナノメートル粒子について、化学架橋の方法でこの固定の安定性を増加できる。例えば、表１での載物ガラスをDeae−ポリグルコースで被覆してから、実施例1で製作したCM−ポリグルコース被覆の酸化シリコンナノメートル粒子の異なる濃度の懸濁コロイドに入れて、2時間以上浸して、洗浄して乾燥してから架橋剤エピクロルヒドリンでポリグルコース架橋を行う。この方法でたくさんの安定性の高いナノメートル構造バイオチップ基板を獲得できる。
【０１６６】
（3）熱処理方法でバイオチップ基板を製作する
固相担体に固定化されたナノメートル粒子は熱処理でその固定の安定性を増加できる。例えば、上述ナノメートル粒子懸濁コロイドを固定化する方法で製作したバイオチップ基板を30℃以上、固相担体の軟化温度以下で加温してから冷却すると、固定の安定性を増加できる。表現は次の通りである。すなわち、熱処理方法で製作（例えば37℃15時間以上、60℃10時間以上，或いは150℃1時間以上）したバイオチップ基板は、ナノメートル粒子懸濁コロイド固定化法だけで製作したバイオチップ基板と比べて、両者を超音波1時間洗浄後のローダミン標識二次抗体の固定化強度は、前者が後者より高い。この方法で多くの安定性の高いナノメートル構造バイオチップ基板を獲得できる。
【０１６７】
（4）ナノメートル構造チャンネルを持つバイオチップ基板の製作
当発明のナノメートル構造担体中のナノメートル構造領域は、流動相の運輸チャネルとして使うこともできる。当実施例でのナノメートル構造チャンネルを持つバイオチップ基板の製作方法は、上述のバイオチップ基板の製作方法と同じである。しかし、この方法のバイオチップ基板をナノメートル粒子懸濁コロイドに入れて浸すことではない。代わりに、チャンネル寸法及びバイオチップ基板上のチャネル位置に従って、異なる濃度のナノメートル粒子懸濁コロイドを定量定位の方式（例えば幅0.3〜1.0 mm，長さ3mmのラインで基板表面を分離する）でバイオチップ基板表面に塗って0.5時間以上反応を行ってから、洗浄と乾燥を行うこととする。ガラススライドバイオチップ基板に固定された親水性ナノメートル粒子（例えば表1でのLUDOX AS-40と表4でのDEAE−ポリグルコース被覆ナノメートル粒子、QAE−セルロース被覆ナノメートル粒子とポリビニルピロリドン被覆ナノメートル粒子）が形成したナノメートル構造領域域について測定した結果、表面水接触度はガラススライドバイオチップ基板より小さく、水運輸機能を持っている。理論の検討に入るつもりではないが、、その上のナノメートル構造の作用（例えばより大きな表面積、より多くの小さい凹状物）による当発明のマイクロチャンネルは、この種類の “毛細現象”の原因或いは一部分の原因であるかもしれない。当発明のマイクロチャンネルは極簡単であるが、専門家が周知する通り、当発明のマイクロチャンネルがマイクロチャンネルチップ製作の他の公知技術と結びつけば、各種の異なるマイクロチャンネルチップを利用できるようになるだろう。
【０１６８】
（5）ナノメートル粒子被覆マイクロプレートの製作    
当実施例で使用したバイオチップ基板は96ウエルポリスチロール板（ShenzhenJincanhua 実業有限公司）である。使用したナノメートル粒子はそれぞれコロイド金、酸化シリコンナノメートル粒子（STN−3）および酸化シリコン（LUDOX AS−40）（表1）である。当実施例のナノメートル粒子被覆マイクロプレートの製作方法は次の通りである。すなわち、異なる濃度のナノメートル粒子液をポリスチロール板ピンホール底部と接触させて、室温のもとで15時間反応を行ってから蒸留水で繰り返し洗浄する。上述のチップバイオチップ基板の化学架橋製作法と熱処理方法もナノメートル粒子被覆マイクロプレート製作にも使用できる。当実施例で製作した一部分のナノメートル粒子被覆マイクロプレートは表６で一覧にする。
【０１６９】
（6）ナノメートル粒子被覆平面クロマトグラフィー片の製作 
製作方法の要点は上述ナノメートル粒子被覆マイクロプレートの製作方法と同じである。当実施例で製作された一部分のナノメートル粒子被覆平面クロマトグラフィー板を表６で一覧にする。
【０１７０】
2）ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物の製作
当実施例で製作したナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物は分析チップ、ELISAマイクロプレート、平面クロマトグラフィー試薬板、及びクロマトグラフィーゲル製作用のナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物を含む。当実施例で使用するミクロン粒子は表1でのミクロン粒子である。従来のクロマトグラフィーゲル、すなわち、シリカ・ゲル（粒径40〜60μm，中国科学院化学研究所）、Sephadex（Pharmacia）を含む。当実施例の製作方法は、次の材料或いはその誘導体で製作されたミクロン粒子にも同じように適用する。すなわち、セラミックス、金属酸化物、金属、他の重合体材料及びこれらの複合物。その他、表面分布ナノメートル粒子のミクロン粒子も含む。
【０１７１】
当実施例で使用するナノメートル粒子は、無機ナノメートル粒子（例えば、表1中の酸化シリコンナノメートル粒子（STN−3）、酸化シリコン（LUDOX AS−40）、酸化チタンナノメートル粒子、コロイド金）及びこれらの誘導体（例えば実施例1の製作物）を含む。当実施方法は有機ナノメートル粒子及び他の無機ナノメートル粒子にも適用する。例えば、酸化アルミ粒子を含む無機非磁性酸化物ナノメートル粒子、金粒子、バナジウム粒子、および鉛粒子を含む非磁性金属ナノメートル粒子、プラスチック、多糖、ラテックス、および樹脂粒子を含む有機ナノメートル粒子。当実施例で使用するナノメートル粒子誘導体は、表面基或いは／及び被覆有機物が結合する誘導体を含む。また、上述の表面基はアミノ基を含む。上述の被覆有機物はポリビニルピロリドン及びポリグルコース誘導体を含む。当実施例で使用するガラススライド誘導体の中で、表面基はアミノ基、アルデヒド基、エポキシ基、アミノヒドラ遺伝子を含む。被覆有機物はポリビニルピロリドン及びポリグルコース誘導体を含む。当実施の方法はナノメートル粒子或いは／及び固相担体の他の誘導体にも適用する。例えば次の表面基或いは／及び被覆有機物を含む誘導体である。上述の表面基は、次の一種以上の化学薬品を含む。ジエチルアミノエチル基（DEAE）、ジエチル−（2−ハイドロキシプロピル基）アミノエチル基（QAE）、カルボキシルメチル基（CM）、スルホン酸プロピル基（SP）、スルフヒドリルエチルピリディン基（MEP）、シロキサン基、チオアルコール基、アルキル基。被覆有機物は次の一種以上の有機物を含む。トゥイーン類表面活性剤を含む表面活性剤、ポリアミノ酸を含むポリ電解質、ポリシロキサンを含む親油有機物、ポリグルコース誘導体、アガロース誘導体、セルロース誘導体、ポリアクリルアミンを含むイオン交換重合体、及びヘパリンナトリウム、抗原、抗体を含む親和物質。
【０１７２】
当実施例のナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物の製作方法の要点は、上述のナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物の製作方法の要点と同じである。相違点はバイオチップ基板を使用する箇所に関して、ここでミクロン粒子を使用することだけである。
【０１７３】
当実施例で製作した一部分のナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物は表6に一覧する。
【０１７４】
3）ナノメートル構造担体の鑑定
当実施例の中で、ナノメートル構造単元及び分布の確定に、SPA−300HV型走査プローブ顕微鏡（DFM）および電子走査顕微鏡を利用して行う。（例えば図1）。当実施例で製作したナノメートル構造担体の中で、ナノメートル構造単元は、すべて非配向に配置されている（例えば図1）。 
当実施例の中で、ナノメートル凸状体および高さ、半分の高さの所での最小寸法及び分布密度の測定にSPA−300HV型走査プローブ顕微鏡（DFM）及び分析ソフトウエアを使用して行う。（例えば図1）。当実施例で製作したナノメートル構造担体の中で、濃度（w/v）が1/250或いは1/175000のナノメートル粒子懸濁コロイド固相担体を被覆する場合、高さが3 nmより大きく、また半分の高さの所で少なくとも一次元の寸法が1〜500 nmで、ナノメートル凸状体の分布密度が10個/μm2より小さく、乃至は5 /μm2より小さい。当製作の中で、濃度（w/v）が1/25000から1/50000までのナノメートル粒子懸濁コロイドで固相担体を被覆する場合、高さが3 nmより大きく、また突出部分の半分高さ箇所の少なくとも一次元の寸法が1〜500 nmで、ナノメートル凸状体の分布密度が10個/μm2より大きく、乃至は20個/μm2より大きい。
【０１７５】
当実施例の中で、ナノメートル構造領域中のナノメートル構造被覆率の測定はSPA−300HV型走査プローブ顕微鏡（DFM）及び分析ソフトウェアで行う（例えば、図1）（ ナノメートル構造被覆率=ナノメートル構造が被覆する従来の固相担体表面積/従来の固相担体全表面積）。当実施例で製作されたナノメートル構造担体の中で、当製作中で濃度（w/v）（w/v）が1/250）或いは1/175000のナノメートル粒子懸濁コロイドで固相担体を被覆する場合、ナノメートル構造領域でのナノメートル構造被覆率はすべて30％より小さく、乃至は20％より小さい。当製作中で濃度（w/v）が1/25000から1/50000までのナノメートル粒子懸濁コロイドで固相担体を被覆する場合、ナノメートル構造領域でのノメートル構造被覆率がすべて30％より大きく、乃至は40％より大きい。
【０１７６】
当実施例の中で、ナノメートル構造領域の表面積増加率の測定はそれぞれ固相担体およびナノメートル構造担体の比表面積を検定してこれらの比表面積の比を計算することによって行う。[表面積増加率=（ナノメートル構造領域比表面積/その中の従来の固相担体の比表面積）×100％]。その中のナノメートル構造担体は上述のナノメートル粒子を上述方法で全体の固相担体を被覆することによって得る。当実施例製作のナノメートル構造担体の中で、当濃度（w/v）が1/250或いは1/175000のナノメートル粒子懸濁コロイドで固相担体を被覆する時、表面積増加率はすべて300％より小さく、乃至は200％より小さい。一方、製作中の1/25000〜1/50000の濃度（w/v）のナノメートル粒子懸濁コロイドで固相担体を被覆する時、表面積増加率はすべて200％より大きく、乃至は300％より大きく、幾つかの個別のものは500％より大きい。
【０１７７】
当実施例の中で、ナノメートル構造領域の吸着能力増加率の測定はそれぞれ固相担体とナノメートル構造担体の吸着能力を検定することによって行う。[吸着能力増加率=（ナノメートル構造領域の吸着能力/その中の従来の固相担体の吸着能力）×100％]。その中で、ナノメートル構造担体は上述ナノメートル微粒で上述方法を使用して、全体の固相担体を被覆することによって行う。吸着能力の測定は公知方法にて行った。静的吸着時に、室温の下で30分間吸着する。バイオチップ基板鑑定時に、ローダミン標識抗抗体（Molecular Probes F−6163 標識のIgG）に対する吸着能力を測定した。マイクロプレートバイオチップ基板鑑定の時に、酵素標識抗抗体（天壇生物製品株式会社）の吸着能力を測定した。ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物鑑定の際、管クロマトグラフィー固定相として、アルブミン（天壇生物制品股分有限公司）に対する吸着能力を測定した。当実施例で製作されたナノメートル構造担体の中で、当製作中の濃度（w/v）が1/250或いは1/175000のナノメートル粒子懸濁コロイドで固相担体を被覆した時、吸着能力増加率が130％より小さく、乃至は115％より小さい。一方、製作中の濃度（w/v）が1/25000から1/50000 のナノメートル粒子懸濁コロイドで固相担体を被覆する場合、吸着能力増加率がすべて115％より大きく、乃至は130％より大きく、幾つかの個別のものは180％より大きい。
【０１７８】
当実施例の中で、吸着量減衰速度比率の測定には、それぞれ固相担体とナノメートル構造担体の吸着量が吸着物濃度の降下につれて変化する状況にて測定する（毎回10倍希釈に降下する）。[吸着量減衰速度比率=（ナノメートル構造領域の吸着量が目的物下限濃度の降下に連れて減衰する速度/従来の固相担体の吸着量が目的物下限濃度の降下に連れて減衰する速度）×100％]，その中で、ナノメートル構造担体は上述ナノメートル粒子を使用して、上述方法で全体の固相担体を被覆することによって得られる。吸着量が目的物下限濃度の降下に連れて減衰する速度=（吸着量2−吸着量1）/（吸着物濃度2−吸着物濃度1）。
【０１７９】
吸着量の測定方法は上述吸着能力の測定方法と同じである。当実施例で製作のナノメートル構造担体の中で、当製作中の濃度（w/v）が1/250或いは1/175000であるナノメートル粒子懸濁コロイドを使用して固相担を被覆体する場合、吸着量減衰速度比率が90％より大きく、乃至は100％に近い。一方、製作中で、濃度（w/v）が1/25000〜1/50000 であるナノメートル粒子懸濁コロイドで固相担体を被覆する場合、吸着量減衰速度比率が90％より小さく、乃至は80％より小さく、幾つかの個別のものは65％より小さい。
【０１８０】
当実施例の中で、DFM検定は成都電子科学技術大学分析測定センターで行った。走査電子顕微鏡検定は四川大学分析測定センターで行った。比表面積の検定は中国科学院有機化学研究所分析実験室で行った。バイオチップ基板吸着量は公知のチップ検定方法（詳細は、以下の実施例を参考のこと）を利用して、標準曲線を作ることによって行う。ELISA基板吸着量は、公知のELISA分析法（詳細は、以下の実施例を参考のこと）を利用して、標準曲線を作ることによって行う。ナノメートル粒子/ミクロン粒子吸着量は、公知のクロマトグラフィ検定方法（詳細は、以下の実施例を参考のこと）を利用して、標準曲線を作ることによって行う。異なる検定装置と計算方法によるデータが相違しているが、原則上一部分のデータが他のデータと比べて著しく大きい場合、これらのデータの比は原理的に意味がある。
【０１８１】
＜実施例4：ナノメートル構造機能化担体の製作（1）＞
当実施例で製作されたナノメートル構造機能化担体は、ポリペプチド分析用のナノメートル構造機能化担体、特にナノメートル構造チップである。当発明の中で、用語“ナノメートル構造チップ”は、当発明で述べたすくなくとも一つのナノメートル構造機能化領域（例えばプローブマイクロアレー中の一個のサンプルスポット）を含む。一個のチップに一つより多い反応器があるかもしれない。一個の反応器に一つより多い機能化試薬含有のサンプルスポット（プローブ点）があるかもしれない。そのなかで一つだけのサンプルスポットが当発明のナノメートル構造機能化領域であれば、そのチップは当発明のナノメートル構造機能化担体或いはナノメートル構造チップである。当実施例でのナノメートル構造チップは、機能化ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物と機能化ナノメートル粒子/ミクロン粒子/バイオチップ基板複合物を含む。当実施例のナノメートル構造チップはほかの目的物にも応用できる。例えば、ポリペプチドと互いに作用する薬品。 
当実施例で使用する機能化試薬はポリペプチド（例えば合成ペプチド、EBV VCA−P18）、抗原（例えばHCV、HIVとSyphilis抗原）、及び抗体（例えばHBs抗体）を含む。当実施例の方法は他の機能化試薬、例えば、薬品、多糖、ビタミン、抗生物質、機能有機物、単鎖或いは多鎖DNA、RNA、及びウイルス、細胞或いはこれらの成分。
【０１８２】
当実施例で使用された固相担体は、従来の固相担体とナノメートル構造担体を含む。当実施例で使用された従来の固相担体は、表１中のバイオチップ基板（載物スライド及び載物スライドの誘導体）を含む。当実施例の製作方法は下記材料或いはその誘導体で製作されたバイオチップ基板にも適用する。すなわち、シリコンシート、シリコン・ゲル、セラミックス、金属酸化物、金属、他の重合体材料及びこれらの複合物を含む。実施例で使用したナノメートル構造担体は、上述の機能化試薬が含有されないナノメートル構造担体である。実施例3で製作されたナノメートル構造チップのバイオチップ基板を含む。
【０１８３】
当実施例で使用されたナノメートル粒子は、実施例3で使用されたナノメートル粒子と同じである（表1でのナノメートル粒子及び実施例1で製作されたナノメートル粒子誘導体）。当実施例の方法は他のナノメートル粒子にも適用できる。当実施例で使用された機能化ナノメートル粒子は実施例2で製作された機能化ナノメートル粒子である。当実施例の方法はほかの機能化ナノメートル粒子にも適用できる。当実施例で使用されたミクロン粒子は実施例3で使用されたミクロン粒子と同じである（表１でのミクロン粒子）。
当実施例で製作されたチップはマルチ反応ウエルチップである。製作方法は次の通りである。すなわち、高疎水性有機シリカ塗料（成都晨光化工研究院）をチップの隔壁構造箇所に塗ってから、それを乾燥し、膜を形成する。（膜の厚さが0.05 mmより小さい）これで反応ウエル隔壁構造を形成する（中国特許出願No.03117397.7参照）。一つのチップごとに八つの反応ウエルがある。各反応ウエルの寸法は4.5 mm×4.5 mmで、反応ウエルの間の隔壁構造幅が4.5 mmである。当実施例の方法は単一反応ウエルを持つチップにも適用できる。
【０１８４】
1）機能化ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物の製作（1）
当実施例で製作された機能化ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物は単機能化試薬ナノメートル構造担体である。即ち、一個のナノメートル構造機能化領域は、一種だけの機能化試薬を有するナノメートル構造機能化担体を含む。また、リガンドナノメートル粒子より被覆されたバイオチップ基板、リガンドナノメートル構造−リガンドバイオチップ基板およびリガンドナノメートル構造−リガンドナノメートル粒子より被覆されたバイオチップ基板を含むナノメートル構造機能化担体を含む。当実施例で述べたリガンドは試薬として使われるだけでなく、連結剤としても使用される。
【０１８５】
（1）基本方法 
（a）固定機能化試薬法
上述機能化試薬を直接サンプル付け機械（DY−2003生物チップサンプル付け機械）を使って、マイクロアレーの形式で上述未含上述機能化試薬のナノメートル構造担体に付けると、機能化ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物を製作できる。当実施例で使用されたサンプル付け方法および条件は公知のサンプル付け方法および条件と同じである。当方法で多くの異なるナノメートル構造チップ（リガンドナノメートル粒子被覆バイオチップ基板）を獲得できる。
【０１８６】
（b）固定機能化ナノメートル粒子法
実施例2で製作された親和ナノメートル粒子（表5）を異なる濃度の懸濁コロイドに製作して、サンプル付け機械を使って、（DY−2003生物チップサンプル付け機械）マイクロアレーの形式で上述従来の固相担体（リガンドナノメートル構造−リガンドバイオチップ基板）或いはナノメートル構造担体（リガンドナノメートル構造−リガンドナノメートル粒子被覆バイオチップ基板）に付けて、機能化ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物を製造できる。当実施例の中で、ある場合に、バイオチップ基板に機能化ナノメートル粒子固定用試薬が固定される。例えば結合機能化試薬。当実施例で使用されたサンプル付け方法と条件は公知のサンプル付け方法と同じである。この方法で多くの異なるナノメートル構造チップを獲得できる。
【０１８７】
（2）熱処理方法でのチップ製作
固相担体に固定されたナノメートル粒子は熱処理により固定の安定性を増加する。例えば、上述で製作されたチップ用ウシ血清アルブミン（BSA）を密封した後、蛋白質を洗浄しないままで、乾燥した後に50℃の条件の下で10時間加温してから冷却すると、少なくとも一部分のチップ上のナノメートル構造の安定性を増加できる。公知の機能化試薬の加熱保護剤がたくさんある。例えば、アルブミンの他、糖類（ポリグルコース、麦芽糖等）がある。その熱処理条件は、ナノメートル構造の安定性強化にばかりでなく、保護剤が存在する条件の下で、機能化試薬の安定性強化にも寄与するはずである。ナノメートル構造の安定性の向上は次のことで証明される。熱処理方法で処理（例えば37℃15時間以上、60℃10時間以上，或いは150℃1時間以上）された一部分のチップ（例えば表7中のチップ19と20）を、熱処理方法で処理されていない対応するチップと比べると、両者を超音波で2時間洗浄後の敏感度について、前者が後者より高い。この方法で多くの安定性が高いナノメートル構造チップを獲得できる。
【０１８８】
（3）ナノメートル構造機能化チャンネルを持つチップ或いはバイオチップ基板の製作
当発明のナノメートル構造機能化担体でのナノメートル構造機能化領域を流動相の運輸、分離チャンネルとして使うこともできる。当実施例でのナノメートル構造機能化チャンネルの製作方法は、実施例3でのナノメートル構造チャンネルの製作方法と同じである。相違点は次だけである。ナノメートル粒子を使用する箇所で機能化ナノメートル粒子を使用した（例えば、実施例2で製作された機能化ナノメートル粒子）。当発明の機能化チャンネルは極簡単であるが、専門家に周知のように、公知技術を利用して当発明の機能化チャンネルと結びつけると、多数のタイプのナノメートル構造のチャンネルチップを製作することができる。
【０１８９】
2）機能化ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物の製作（2）
当実施例で製作された機能化ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物は、機能化試薬ナノメートル構造担体、即ち、一つのナノメートル構造機能化領域内に二種或いは二種以上の機能化試薬を含むナノメートル構造機能化担体である。それは次のものを含む。リガンド2−ナノメートル粒子−リガンド2−リガンド1−ナノメートル粒子−リガンド1−バイオチップ基板、及びリガンド2−ナノメートル粒子−リガンド2−リガンド1−バイオチップ基板。その中で、リガンド1がリガンド2とカップリング反応できる。また、リガンド1がリガンド2よりバイオチップ基板と結合し易い。当実施例の一種のリガンド（リガンド2，例えばHBsAb）は試薬として使用すると同時に、連結剤として使用する。他の一種のリガンドは連結剤だけとして使用（リガンド1，例えばHBsAg）する。
【０１９０】
当実施例の中で、リガンド2−ナノメートル粒子−リガンド2−リガンド1−ナノメートル粒子−リガンド1−バイオチップ基板の製作方法は次の通りである。すなわち、ナノメートル粒子濃度が1/25000（W/V）であるリガンド2−ナノメートル粒子−リガンド2とリガンド1−ナノメートル粒子−リガンド1懸濁コロイドを1：1混ぜてから、従来のサンプル付け方法でバイオチップ基板にサンプルを付ける。各種の機能化ナノメートル粒子ごとに二つの点を付けて、3×2アレーを形成する。それからウシ血清アルブミン（BSA）溶液で密封してから必要に備える。得られたチップをチップ223と標識する。サンプル付け時、HBsAb濃度が3 mg/mlである。
【０１９１】
当実施例の中で、リガンド2−ナノメートル粒子−リガンド2−リガンド1−バイオチップ基板複合物の製作方法は次の通りである。すなわち、ナノメートル粒子濃度が1/12500（W/V）であるリガンド2−ナノメートル粒子−リガンド2とリガンド1を1：1混ぜた後、従来のサンプル付け方法でバイオチップ基板に付ける。各種の機能化ナノメートル粒子ごとに二つの点を付けて、3×2アレーを形成する。それから、ウシ血清アルブミン（BSA）溶液で密封してから必要に備える。得られたチップをチップ224と標識する。サンプル付け時、HBsAb濃度が3 mg/mlである。
【０１９２】
3）ナノメートル構造機能化担体の鑑定
当実施例の中で、ナノメートル構造ユニット及び分布，ナノメートル凸状体及び高さ、半分高さ箇所の横断面の最小寸法及びその分布密度の測定，SPA−300HV型走査プローブ顕微鏡（SPM）と電子走査顕微鏡で行う。（例えば図2）測定方法は実施例3中の測定方法と同じである。
【０１９３】
当実施例で製作されたナノメートル構造機能化担体の中で、ナノメートル構造ユニットはすべて非方向決定配列方式とする（例えば図2）。当製作で、濃度（w/v）が1/250或いは1/175000の機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドを使用して固相担体につける時、高さが3 nmより大きく、また半分高さ箇所で少なくとも一次元の寸法が1〜500 nmで、ナノメートル凸状体の分布密度が10個/μm2より小さく、乃至は5個/μm2より小さい。また、機能化領域内のナノメートル構造被覆率が30％より小さく、乃至20％より小さい。一方、製作中濃度（w/v）が1/25000〜1/50000である機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドを使用して固相担体に付ける時、高さが3 nmより大きく、また半分高さ箇所の横断面で少なくとも一次元の寸法が1〜500 nmであるナノメートル凸状体の分布密度が10個/μm2より大きく、乃至は20個/μm2より大きい。また、ナノメートル構造機能化領域でのナノメートル構造被覆率はすべて30％より大きく、乃至は50％〜80％より大きい。ナノメートル構造被覆率=ナノメートル構造被覆の従来の固相担体表面積/従来の固相担体総表面積。
【０１９４】
当実施例の中で、ナノメートル構造機能化領域の表面積増加率[表面積増加率=（ナノメートル構造機能化領域比表面積/その中の従来の固相担体の比表面積）×100％]の測定方法は実施例3での測定方法と同じである。チップサンプル点数が少ないので、ナノメートル構造機能化領域は機能化ナノメートル粒子（例えば表5中の（HCV  Ag−LuDOX）を使って上述方法で全体のバイオチップ基板（例えば表3中のエポキシ基ガラススライド）を被覆することによって得られたモデルである。しかし、上述の従来の固相担体は全体のバイオチップ基板（例えばエポキシ基ガラススライド）である。当実施例で製作されたナノメートル構造機能化担体の中で、当製作で、濃度（w/v）が1/250或いは1/175000である機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドを使用して、バイオチップ基板を被覆する場合、表面積増加率は300％より小さく、乃至は200％より小さい。一方、当製作で1/25000〜1/50000濃度（w/v） の同じ機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドを使って同じバイオチップ基板を被覆する場合、表面積増加率は200％より大きく、乃至は400％より大きく、幾つかの個別ものは650％より大きい。
【０１９５】
当実施例の中で、ナノメートル構造機能化領域の吸着能力増加率[吸着能力増加率=（ナノメートル構造機能化領域の吸着能力/その中の非ナノメートル構造機能化担体吸着能力）×100％]の測定方法は実施例3中の測定方法と同じである。同じように、機能化ナノメートル粒子を使用して上述方法で全体の固相担体を被覆することによって得られたモデルをナノメートル構造機能化領域とする。当実施例で製作されたナノメートル構造機能化担体に関して、当製作で1/250或いは1/175000濃度（w/v）の機能化ナノメートル粒子懸濁コロイド（例えば表5中の（HCV  Ag−LuDOX）を使用してバイオチップ基板（例えば表3でのエポキシ基ガラススライド）を被覆する時、吸着能力増加率が130％より小さく、乃至は115％より小さい。一方、製作中濃度（w/v）が1/25000〜1/50000の同一の機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドを使用して同一のバイオチップ基板を被覆する時、吸着能力増加率はすべて115％より大きく、乃至は130％より大きく、幾つかの個別のものは180％より大きい。
【０１９６】
当実施例の中で、敏感度増加率の測定はナノメートル構造機能化領域と同じ従来の固相担体と機能化試薬を含む非ナノメートル構造機能化担体の間で、分析敏感度比率を分析することによって行う。敏感度増加率=（ナノメートル構造機能化領域の敏感度/非ナノメートル構造機能化担体敏感度）×100％。
【０１９７】
当実施例の中で、ナノメートル構造チップは、濃度（w/v）が1/25000〜1/50000の機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドをバイオチップ基板（例えば表3中のエポキシ基ガラススライド）に付けることによって製作された。また、サンプルスポットは上述ナノメートル構造機能化領域の概観特徴のあるチップをモデルとし、非ナノメートル構造機能化担体は、同じ機能化試薬を同じ条件の下で同じバイオチップ基板につけることで獲得したチップをモデルとする。当実施例で製作されたナノメートル構造チップの中で、当製作中で濃度（w/v）が1/250或いは1/175000の機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドでバイオチップ基板を被覆する時、敏感度増加率は150％以下、乃至は120％以下である。一方、製作中濃度（w/v）が1/25000〜1/50000の同一の機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドで同一のバイオチップ基板を被覆する時、敏感度増加率はすべて120％以上、乃至は150％以上、幾つかの個別のものが600％以上である。
【０１９８】
当実施例の中で、識別信号減衰速度比率の測定は、それぞれナノメートル構造チップと同じバイオチップ基板と機能化試薬を含む非ナノメートル構造チップに対して、分析時の識別信号が目的物下限濃度の降下に連れて減衰する速度を検定することによって行う。識別信号減衰速度比率=（ナノメートル構造機能化領域の識別信号が目的物下限濃度の降下に連れて減衰する速度/非ナノメートル構造機能化担体識別信号が目的物下限濃度の降下に連れて減衰する速度）×100％。その中で、識別信号が目的物下限濃度の降下に連れて減衰する速度=（識別信号2−識別信号1）/（目的物濃度2−目的物濃度1）。識別信号（例えば蛍光標識機能化ナノメートル構造が捕らえた目的物が共焦点蛍光スキャナでの目盛り）の測定方法は公知のチップ検定方法によって行う。当実施例で製作されたナノメートル構造チップの中で、当製作中濃度（w/v）が1/250或いは1/175000である機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドを使用してバイオチップ基板を被覆する時、識別信号減衰速度比率が70％以上で、乃至は90％以上である。一方、製作中濃度（w/v）が1/25000〜1/50000の同一の機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドを使用して同一のバイオチップ基板を被覆する時、識別信号の減衰速度比率がすべて90％以下で、乃至は70％以下、幾つかの個別ものが50％以下である。
【０１９９】
当実施例で、吸着量減衰速度比率[吸着量減衰速度比率=（ナノメートル構造機能化領域の吸着量が目的物下限濃度降下に連れて減衰する速度/非ナノメートル構造機能化担体吸着量が目的物下限濃度降下に連れて減衰する速度）×100％]の測定方法は実施例3中の測定方法と同じで、すなわち、機能化ナノメートル粒子を上述方法で全体の固相担体を被覆することによって得られたモデルをナノメートル構造機能化領域とする。
【０２００】
当実施例で製作されたナノメートル構造機能化担体で、当製作中濃度（w/v）（w/v）が1/1/250或いは1/175000の機能化ナノメートル粒子懸濁コロイド（例えば表5中の（HCV Ag−LuDOX）を使用してバイオチップ基板（例えば、表3中のエポキシ基ガラススライド）を被覆するとき、吸着量減衰速度比率は80％より大きく、乃至は90％に近い。一方、製作中濃度（w/v）が1/25000至1/50000 の同一の機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドを使用して同一のバイオチップ基板を被覆する時、吸着量減衰速度比率が90％以下で、乃至は80％以下、幾つかの個別ものが70％以下である。
【０２０１】
異なる検定機械と計算方法によるデータの相違があるが、一部分のデータが他の一部分のデータより著しく大きい場合、それらに関する比較研究およびこれらのデータの比率は原理上重要である。
【０２０２】
＜実施例5：ナノメートル構造機能化担体の製作（2）＞
当実施例で製作されたナノメートル構造担体は核酸分析用のナノメートル構造機能化担体で、特に核酸分析ナノメートル構造チップである。当実施例のナノメートル構造機能化担体は他の目的物、例えば核酸と作用し合い薬物にも応用できる。
【０２０３】
当実施例で使用された機能化試薬は単鎖或いは多鎖DNA、RNA、及びウイルスを含む。当実施例で使用された固相担体、ナノメートル粒子は実施例4と同じである。当実施例の製作方法も実施例4と同じである。
【０２０４】
当実施例の鑑定方法は実施例4の方法と同じである。当実施例で製作された機能化ナノメートル担体は実施例4での同じ方法で製作された機能化ナノメートル担体の結果と一致している。当製作中濃度（w/v）が1/25000〜1/50000 の機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドを使用してバイオチップ基板を被覆する時、その結果は次の通りである。すなわち、外観分析によると、ナノメートル構造ユニットはすべて方向決定配列で、高さが3 nm以上、また突出半分高さ箇所の横断面は少なくとも1〜500 nmサイズで、ナノメートル凸状体の分布密度が18個/μm2以上である。ナノメートル構造被覆率はすべて70％以上で、表面積増加率が450％以上である。吸着能力増加率が160％以上で、吸着量減衰速度比率はすべて70％以下である。
【０２０５】
＜実施例6：ナノメートル構造機能化担体の製作（3）＞
当実施例で製作されたナノメートル構造機能化担体は機能化ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物である。当実施例の機能化ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物は分析チップ或いはクロマトグラフィーゲルの製作にも応用できる。 
当実施例で使用された機能化試薬はポリペプチド（例えば合成ペプチドEBV VCA−P18）、抗原（例えばHCV、HIVおよびSyphilis）、及び抗体（例えばHBs抗体）を含む。当実施例の方法は他の機能化試薬、例えば、薬品、多糖、ビタミン、抗生物質、機能有機物、単鎖或いは多鎖DNA、RNA、及びウイルス、細胞或いはこれらの成分にも適用できる。
【０２０６】
当実施例で使用されたミクロン粒子は表１中のミクロン粒子で、従来のクロマトグラフィーゲル、すなわちシリコン・ゲル（粒径40〜60μm，中国科学院科学研究所）、およびSephadex（Pharmacia）を含む。当実施例の製作方法は同じように以下の材料或いはその誘導体から作成されるミクロン粒子にも適用できる。セラミックス、金属酸化物、金属、他のの重合体材料とこれらの複合物、及び表面にナノメートル粒子が分布しているミクロン粒子。
【０２０７】
当実施例で使用されたナノメートル粒子は実施例3で使用されたナノメートル粒子と同じである（表1中のナノメートル粒子及び実施例1で製作されたナノメートル粒子誘導体）。当実施例の方法は他のナノメートル粒子にも適用できる。当実施例で使用された機能化ナノメートル粒子は実施例2で製作された機能化ナノメートル粒子である。当実施例の方法は他の機能化ナノメートル粒子にも適用できる。当実施例で使用されたミクロン粒子は実施例3で使用されたミクロン粒子と同じである（表１でのミクロン粒子）。
【０２０８】
1）製作方法
当実施例での機能化ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物製作方法は三つある。ａ）実施例3で製作されたナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物に機能化試薬を被覆する。ｂ）実施例2で製作された機能化ナノメートル粒子を、実施例3のナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物の製作方法による他の粒子と混合することにより、機能化ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物を製作する。ｃ）ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物の製作のために、実施例３で特定された方法に従って、実施例3で製作されたナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物の上に、実施例2で製作の機能化ナノメートル粒子を被覆する。当実施例で、ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物に機能化試薬を被覆する方法は公知方法によって行う。例えば親和クロマトグラフィーゲルの製作において、は表７に一覧する。ミクロン粒子に機能化試薬を被覆する方法を採用する。当実施例で製作した一部分の機能化ナノメートル粒子/ミクロン粒子複合物は表７に一覧する。
【０２０９】
2）鑑定方法
当実施例の鑑定方法は実施例4の方法と同じである。当実施例で製作された機能化ナノメートル担体は実施例4で同じ方法にて製作された機能化ナノメートル担体の結果と一致している。例えば、当実施例で（HCV Ag）−LuDOXにそれぞれシリカ・ゲルおよびSephadex A50を被覆することによって（HCV Ag）−LuDOX /シリコン・ゲル複合物および（HCV Ag）−LuDOX /Sephadex複合物を製作した。当製作中、濃度（w/v）が1/25000〜1/50000 の同一機能化ナノメートル粒子懸濁コロイドを使用する時、これらの結果は次の通りである。すなわち、局部の外観分析によって、ナノメートル構造ユニットはすべて非方向決定配列で、高さが3 nmより大きい。また、突出半分高さ箇所の横断面は少なくとも一次元の寸法が1〜500 nmである。凸状体の分布密度は15個/μm2より大きい。ナノメートル構造被覆率がすべて50％より大きい。表面積増加率は350％より大きい。吸着能力増加率は130％より大きい。吸着量減衰速度比率はすべて80％より小さい。
【０２１０】
＜実施例7：ナノメートル粒子標識の製作＞
当実施例で製作された標識機能化試薬/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物はチップ用のナノメートル粒子標識である。
【０２１１】
当実施例で使用された標識機能化試薬はポリペプチドを含む。例えば、HCV抗原及びヤギ抗人二次抗体（北京天壇生物製品株式会社）。当実施例の方法は他の標識機能化試薬にも適用できる。例えば、薬品、多糖、ビタミン、抗生物質、機能有機物、単鎖或いは多鎖DNA、RNA、及びウイルス、細胞或いはこれらの成分。
【０２１２】
当実施例で使用されたナノメートル粒子は粒径1〜100 nmで、自身は標識物質強化剤でない非金属粒子である。その中で、表1での無機非金属ナノメートル粒子及び実施例1で製作された無機非金属ナノメートル粒子の誘導体を含む。当実施例の方法は他の非磁性無機非金属ナノメートル粒子にも適用できる。当実施例で使用された機能化ナノメートル粒子は、実施例2で製作された非磁性無機非金属ナノメートル粒子に基づく機能化ナノメートル粒子である。当実施例で使用されたミクロン粒子は、実施例3で使用されたミクロン粒子と同じである（表１でのミクロン粒子）。当実施例で使用された分子標識物質はローダミン（Molecular probes公司）である。当実施例の方法は他の標識物質、例えば、蛍光物質、化学蛍光物質、化学蛍光触媒、有色金属塩、染料と顔料にも適用できる。
【０２１３】
当実施例での照合標識はナノメートル粒子を含有している液体で処理されていない日常的標識（ローダミン標識ヤギ抗人二次抗体，アメリカJackson ImmunoRresearch Laboratories会社）である。
【０２１４】
1）準備
当実施例でのリガンド分子標識物質複合物の製作方法は公知のローダミン標識抗抗体製作方法である。
【０２１５】
当実施例で使用された機能化ナノメートル粒子の製作方法は次の通りである。すなわち、ナノメートル粒子を超音波振動の下で濃度が1/50（1/125）〜1/10000（1/25000）（w/v）であるナノメートル粒子液に分散調合してから、濃度が2 mg/mlである標識機能化試薬溶液とそれぞれ1：1で混ぜて、室温の下で2時間遮光反応を行う。混合物の精製方法は次の通りである。すなわち、混合生成物をゲルの入れた回旋管に入れてから4000 r/min条件の下で遠心して、收集管から液体を取り除く。
【０２１６】
当実施例でのナノメートル粒子−分子標識物質複合物の製作方法は次の通りである。すなわち、ナノメートル粒子を超音波振動の下で濃度が1/1000（1/125）（w/v）であるナノメートル粒子液に分散調合してから、濃度が2 mg/mlである分子標識物質溶液とそれぞれ1：1で混ぜて、室温の下で1時間反応を行う。精製する必要がある場合、混合物の精製方法は次の通りである。すなわち、混合精製物をゲルの入れた回旋管に入れてから4000 r/min条件の下遠心して、收集管からその液体を取り除く。
【０２１７】
2）リガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物の製作
当実施例の製作方法で、上述のリガンド、分子標識物質とナノメートル粒子の結合は次の一種以上の方式を含む。（A）上述の機能化ナノメートル粒子を分子標識物質と結合する、（B）上述のナノメートル粒子−分子標識物質をリガンド結合と結合する、（C）公知方法で製作された分子標識物質より標識されたリガンドをナノメートル粒子と結合する、（D）リガンドを分子標識物質及びナノメートル粒子と同時に結合する。上述の結合では、生成物が混合物か精製物かのどちらでも良い。当実施例で製作された一部分のリガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物を表6に一覧する。
【０２１８】
3）比較
当実施例で使用するチップは公知のチップ製作方法で製作された。（バイオチップ基板はエポキシ基ガラススライドで、リガンドはそれぞれＣ型肝炎ウイルス抗原（HCV Ag）とエイズウイルス抗原（HIV Ag））である。
【０２１９】
比較方法は実施例10でのチップ応用方法と同じである。当実施例で製作された一部分の標識の比較結果を表６に一覧する。これから見ると、敏感度が照合標識より著しく向上した。
【表６】
2007502998.tif 000008
【０２２０】
＜実施例8：チップ標識システムの製作及び応用（1）＞
当実施例で製作されたチップ標識システムは標識、着色剤、並びにオプションの着色制御剤及び着色安定剤を含む。
【０２２１】
1）製作
当実施例で製作されたチップ標識はそれぞれ次の通りである。すなわち、標識機能化試薬/ナノメートル構造/触媒複合物、標識機能化試薬/ナノメートル構造/触媒と着色剤の複合物、標識機能化試薬/ナノメートル構造/触媒複合物および標識機能化試薬/ナノメートル構造/着色剤複合物或いは標識機能化試薬/着色剤複合物の混合物。 
当実施例で使用された標識機能化試薬、ナノメートル粒子及び機能化ナノメートル粒子は実施例7で使用された標識機能化試薬、ナノメートル粒子及び機能化ナノメートル粒子と同じである。。当実施例で使用された触媒は粒径1.4nmのアミノ基コロイド金粒子（2020）（Nanoprobes公司）である。当実施例の方法は他の触媒、例えば酵素触媒にも適用できる。当実施例で使用された着色剤は銀化合物（AgNO3）と結晶紫を含む。当実施例の方法は他の金属化合物と他の染料にも適用できる。
【０２２２】
当実施例での標識機能化試薬/ナノメートル構造/触媒複合物、標識機能化試薬/ナノメートル構造/触媒と着色剤の複合物、標識機能化試薬/ナノメートル構造/着色剤複合物の製作方法は、実施例7でのそれらの製作方法と同じである。。
【０２２３】
当実施例での標識機能化試薬/着色剤複合物の製作方法は文書「中国特許出願番号」(CN03117645.3)を参照して下さい。
【０２２４】
上述の複合物の混合物は、必要によって、一定の体積比で混合して製作された。
【０２２５】
2）応用
公知の方法でHIV抗原とHCV抗原をエポキシ基ガラススライドに付けてHIV抗原/HCV抗原チップが作成される。正の制御（HIV抗体陽性血清およびHCV抗体陽性血清の混合物）と陰性制御血清（HIV抗体陰性血清およびHCV抗体陰性血清の混合物）をそれぞれ各希釈度で入れる。（PBS緩衝液が希釈液である）室温の下で1時間反応後洗浄する。それから、それぞれ上述製作の各種標識（例えば，アミノ基コロイド金/酸化シリコンナノメートル粒子/抗人二次抗体複合物，アミノ基コロイド金/酸化シリコンナノメートル粒子/結晶紫/抗人二次抗体複合物）及前記制御標識（コロイド金標識ヤギ抗人二次抗体）を入れて、10分間反応させた後に、洗浄して2.5％グルタルアルデヒドを入れる。それから、銀強化剤（シグマ社）の説明書で操作して、A液とB液の混合物を入れて、反応後、チオ硫酸ナトリウムで反応を中止する。チップ洗浄後肉眼で観察した結果、いずれかの標識を使用する場合、5000倍希釈の正の制御血清に陽性反応（黒点）を観察できる。当発明の標識を使用する場合、10倍希釈の負の制御血清に陰性反応（黒点がない）が観察されるが、同じ条件の下で制御標識を使用する場合、陽性反応（黒点）が観察される。これは、当発明の標識はより高い特異性があることを説明している。
【０２２６】
＜実施例9：チップ標識システムの製作（2）＞
当実施例で製作されたチップ標識システムは、標識、着色剤、並びにオプションの着色制御剤と着色安定剤を含む。
【０２２７】
1）製作
当実施例で製作されたチップ標識は次の通りである。すなわち、機能化試薬/触媒複合物と機能化試薬/着色剤の混合物、機能化試薬/触媒複合物と機能化試薬/ナノメートル構造/着色剤の混合物、標識機能化試薬/ナノメートル構造/触媒複合物及び標識機能化試薬/ナノメートル構造/着色剤複合物の混合物。
【０２２８】
当実施例で使用された標識機能化試薬、ナノメートル粒子、機能化ナノメートル粒子、触媒及び着色剤は実施例8で使用されたものと同じである。
【０２２９】
当実施例での標識機能化試薬/ナノメートル構造/触媒複合物、標識機能化試薬/ナノメートル構造/触媒と着色剤複合物、標識機能化試薬/ナノメートル構造/着色剤複合物の製作方法は実施例7の製作方法と同じである。
【０２３０】
当実施例での標識機能化試薬/着色剤複合物の製作方法は文書「顔料標識特許出願」を参照して下さい。当実施例で使用された機能化試薬/触媒複合物は1.4nmのナノメートル金標識のヤギ抗人抗抗体（ナノプローブ（Nanoprobes）社）である。
【０２３１】
上述複合物の混合物は必要に応じて、一定の体積比で混ぜたものである。
【０２３２】
2）応用
公知方法でHIV抗原とHCV抗原をエポキシ基ガラススライドに付けてHIV抗原/HCV抗原チップに製作する。正の制御血清（HIV抗体陽性血清およびHCV抗体陽性血清の混合物）と負の制御血清（HIV抗体陰性血清とHCV抗体陰性血清の混合物）をそれぞれ異なる希釈度で入れて（PBS緩衝液は希釈液である）、室温の下で1時間反応してから洗浄する。それから上述製作の各種標識（例えば、アミノ基コロイド金/酸化シリコンナノメートル粒子/結晶紫/抗人二次抗体複合物、アミノ基コロイド金/ 抗人二次抗体複合物と結晶紫/ 抗人二次抗体複合物の混合物）及び制御標識（コロイド金標識ヤギ抗人二次抗体）を入れて、10分間反応してから洗浄して、2.5％グルタルアルデヒドを入れて操作する。その後、銀強化剤（シグマ（Sigma）公司）について説明書に従って。A液とB液の混合物をいれて反応した後、チオ硫酸ナトリウムで反応を中止する。チップ洗浄後、肉眼で観察した結果、すべての標識を使用して、5000倍希釈の正の制御血清で、全部陽性反応（黒点）が観察される。当発明の標識を使用して、15倍希釈の負の制御血清で、全部陰性反応（黒点無し）が観察される。一方、同じ条件の下で、制御標識を使用する場合、陽性反応（黒点）が観察される。この結果は、当発明の標識方法がより高い特異性を持つことを説明している。
【０２３３】
＜実施例10：チップキットの製作及び応用（1）＞
1）キットの製作
当実施例のキットは実施例4で製作された当発明ナノメートル構造チップを含む。
【０２３４】
2）キットの応用
当実施例で、サンプル１はHCV抗体陽性血清で、サンプル２はHIV1＋2抗体陽性人血清で、サンプル３は負の制御物（HCV抗体和HIV1＋2抗体と陰性の血清制御物）である。すべてのサンプルは、従来のELISA方法を用いて、血清20倍希釈反応の条件の下で予め検定する。当実施例の標識はローダミン標識ヤギ抗人二次抗体（アメリカジャクソン免疫研究所（Jackson ImmunoRresearch Laboratories, Inc.））である。
【０２３５】
実験の時、前述の３種類のサンプルをそれぞれ表10で述べたチップの反応ウエルに入れる。その中で、照合チップは表１でのエポキシ基ガラススライドを従来のサンプル付け方法で同じリガンドを固定することによって製作したチップを指す。サンプル加入量は15μlである。30分間反応後5回洗浄して、毎回の洗浄液加入量は25μlである。標識の加入量は15μlである。反応後5次洗浄して、毎回の洗浄液加入量は25μlである。乾燥後35/50の条件の下でスキャニングを行う。スキャナは共焦点レーザスキャナ（アフィメトリックス（Afymetrix）社のGMS 418マイクロアレイスキャナ）である。スキャニング励起光波長が532 nmで、放射光の波長が570 nmである。読み取った信号をソフトウェア（JAGUARII）で処理してから、平均値を計算した後に、カットオフ（Cut−off）値で負（−）または正（+）を判定する。得られた結果の例は表7の通りである。。検定結果は、当発明のナノメートル構造チップがより高い敏感度を表すということを示す。
【表７】
2007502998.tif 000009
2007502998.tif 000010
2007502998.tif 000011
【０２３６】
＜実施例11：チップキットの製作及び応用（2）＞
1）キットの製作
当実施例でのキットはリガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物を含む分析チップキットである。当実施例使用されたものは実施例7で製作された当発明のリガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物である。当実施例のキットに含有しているチップは実施例10で述べた制御チップである。従って、当実施例は数多くの異なるキットを形成できる。
【０２３７】
2）キットの応用
当実施例で使用されたサンプル及び検定方法は実施例10でのサンプル及び検定方法と同じである。。当発明の標識を使用すると、500倍希釈の陽性血清制御からすべて陽性反応が観察されるが、同じ条件のもとで制御標識を使用すると、陰性反応が観察される。これで、当発明の標識の方法を使用することによって、より高い敏感度を獲得できる。
【０２３８】
＜実施例12：チップキットの製作及び応用（3）＞
1）キットの製作
当実施例でのキットは実施例4で製作された当発明のナノメートル構造チップと、実施例7で製作された当発明のリガンド/ナノメートル粒子/分子標識物質複合物を含有している標識システムを含む。従って、当実施例は数多くの異なるキットを形成できる。
【０２３９】
当実施例で、使用されたサンプル及び検定方法は実施例10でのサンプル及び検定方法と同じである。その結果の例は表8の通りである。
【表８】
2007502998.tif 000012
【０２４０】
＜実施例13：チップキットの製作及び応用（4）＞
1）キットの製作
当実施例でのキットは磁性チップを含む。当実施例で使用された磁性ナノメートル粒子は表1での水基磁性溶液（NG−21A）である。使用されたバイオチップ基板は表3でのエポキシ基ガラススライドである。使用されたリガンドは実施例2で使用されたＣ型肝炎ウイルス抗原（HCV Ag）とHIV1+2抗原である。
【０２４１】
1）磁性ナノメートル粒子チップの製作
当実施例での磁性ナノメートル粒子チップは一種のリガンド/磁性ナノメートル粒子/バイオチップ基板複合物である。
【０２４２】
当実施例での磁性ナノメートルチップはマルチ反応器チップである。その中のマルチバイオチップ基板ウエル基板の製作は実施例４でのマルチバイオチップ基板ウエル基板の製作と同じである。。当実施例の親和磁性ナノメートル粒子の製作は実施例での機能化ナノメートル粒子の製作と同じである。
【０２４３】
製作したＣ型肝炎ウイルス抗原（HCV Ag）（1 mg/ml）とHIV1+2抗原（1 mg/ml）を含む親和磁性ナノメートル粒子をマルチバイオチップ基板ウエル基板のバイオチップ基板ウエルに付ける。各種の親和磁性ナノメートル粒子を2点ごと付けて、2×2アレーを形成する。それから、外部磁場の作用の下で、37℃の温度で一時間反応する。外部磁場の役割は、親和磁性ナノメートル粒子をバイオチップ基板へ移動させて固定することを助けることである。被覆完成後、ウシ血清アルブミン溶液で密封して必要に備える。
【０２４４】
当実施例での制御チップは、アルデヒド基をバイオチップ基板として、公知のサンプル付け方法で磁性ナノメートル粒子を含まないＣ型肝炎ウイルス抗原（HCV Ag）（1 mg/ml）とHIV1+2を含む抗原（1 mg/ml）を付けて製作したチップである。
【０２４５】
2）磁性ナノメートル標識の製作
当実施例での磁性ナノメートル標識は一種のリガンド/磁性ナノメートル粒子/分子標識質複合物である。その中で、リガンドはヤギ抗人二次抗体（ジャクソン免疫研究所製）である。
【０２４６】
3）磁性チップキットの製作
当実施例中の磁性チップキットは、一種、二種、三種或いは四種の磁性粒子を含有している成分を含むかもしれない。上述の磁性粒子を含有している成分はそれぞれ次ぎの通りである。上述で製作された磁性ナノメートル粒子チップ、上述で製作された磁性ナノメートル粒子標識、上述で製作された親和磁性ナノメートル粒子（ウシ血清アルブミン（BSA）で密封した）と磁性ナノメートル粒子（ウシ血清アルブミン（BSA）で密封した）。異なる組合せによって異なるキットを形成できる。表１１を参照して下さい。当実施例での磁性チップキットは、一種、二種、三種或いは四種含の磁性粒子を含有している成分を含むかもしれない。上述の磁性粒子を含有している成分はそれぞれ次ぎの通りである。上述で製作された磁性ナノメートル粒子チップ、上述で製作された磁性ナノメートル粒子標識、上述で製作された親和磁性ナノメートル粒子（ウシ血清アルブミン（BSA）で密封した）と磁性ナノメートル粒子（ウシ血清アルブミン（BSA）で密封した）。異なる組合せによって異なるキットを形成できる。
【０２４７】
4）磁性チップキットの応用
当実施例で、磁性チップキットはサンプル血清中のHIV1+2抗体とHCV抗体の負（−）、正（+）の検定に使用される。使用された血清サンプルは実施例2での血清サンプルと同じである。検定方法が公知のチップ検定方法と相違している箇所は次の通りである。すなわち、キットで磁性チップの他、磁性粒子成分（例えば磁性ナノメートル粒子）を含有する場合、検定反応はチップ底部に外部磁場、特に安定パルス磁場の場合、のある条件の下で行う。外部磁場の作用の下で、磁性ナノメートル粒子標識及び親和磁性ナノメートル粒子によって捕獲された目的物が反応器底部への運動に有利である。サンプルに入れた磁性ナノメートル粒子が、パルス磁場の作用の下で、チップ反応器に入れた液相サンプル内部で流動が発生して、サンプルの混合に有利である。キットの種類が多いので、次で一つのキットを例として使用方法を説明する。他のキットの使用方法はこの例によって類推できる。
【０２４８】
当例の中で使用するキットの成分は下記の通りである。制御チップ、磁性ナノメートル粒子、親和磁性ナノメートル粒子を四種の血清サンプルとそれぞれ混ぜる[混合後の磁性ナノメートル粒子濃度が1/2000（W/V）で、親和磁性ナノメートル粒子濃度が1/4000（W/V）である]。その応用手順において、15μlの血清サンプルをチップ反応ウエルに入れ、ナノメートル粒子と混ぜて、パルス磁場の作用の下で、37℃で10分間反応させる。次に、洗浄して、15μl磁性ナノメートル標識を入れて、パルス磁場の作用の下で、37℃で10分間反応させ、洗浄して乾燥してから、実施例10と同じスキャニング及び分析方法でスキャニング及び分析を行う。その結果の例は表9を参照して下さい。
【０２４９】
磁性ナノメートル粒子、親和磁性ナノメートル粒子と三種の血清サンプルをそれぞれまぜてから[混合後の磁性ナノメートル粒子濃度が1/2000（W/V）で、親和磁性ナノメートル粒子濃度が1/4000（W/V）である]、ナノメートルイオンと混合した後の15μl血清サンプルをチップ反応ウエルに入れて、パルス磁場の作用の下で、37℃で10分間反応させる。
【表９】
2007502998.tif 000013
【０２５０】
＜実施例14：ポリペプチド定量或いは／及び定性検定キットの製作及び応用＞
1）キットの製作
当実施例キットは、ナノメートル構造機能化担体を持つELISAキットである。
【０２５１】
当実施例で使用されたリガンドは合成ペプチドである。これは次の文書で公開された方法で製作されたEBV VCA−P18抗原である。Tranchand−Bunel，D.，Auriault，C.，Diesis，E.，Gras−Masse，H. （1998） Detection of human antibodies using “convergent” combinatorial peptide libraries or “mixotopes”designed form a nonvariable antigen：Application to the EBV viral capsid antigen p18，J. Peptide Res. 52，1998，495−508。当実施例で使用されたナノメートル構造ELISAマイクロプレートは上述ナノメートル構造のマイクロプレートのピンホール底部にリガンドを固定することによって形成する。
【０２５２】
（1）ナノメートル粒子が被覆された担体から製作されたナノメートル構造機能化担体：
ナノメートル構造マイクロプレートの製作及び鑑定方法は実施例3を参照して下さい。従来のELISAマイクロプレート製作方法によって、濃度が0.3μg/mlである合成ペプチドを上述ナノメートル粒子被覆のマイクロプレート（コロイド金被覆のマイクロプレート、酸化シリコン被覆のマイクロプレートと酸化シリコン被覆のマイクロプレート）及び制御マイクロプレートに被覆する（96ウエルポリスチロール板）。各種のマイクロプレートに八つの穴を被覆する。被覆後、ウシ血清アルブミン溶液で密封して必要に備える。当実施例中の制御ELISAマイクロプレートは96ウエル板をバイオチップ基板として、上述被覆方法でEBV VCA−P18抗原を被覆したELISAマイクロプレートである。
【０２５３】
（2）機能化ナノメートル粒子から製作されたナノメートル構造機能化担体：
EBV VCA−P18抗原と酸化シリコンナノメートル粒子（STN−3）を含有する機能化ナノメートル粒子の製作方法は、例2での機能化ナノメートル粒子の製作方法と同じである。
【０２５４】
EBV VCA−P18抗原濃度が0.1μg/mlである機能化ナノメートル粒子で、ナノメートル粒子濃度（w/v）が1：25000であるものを、公知のELISAマイクロプレート被覆方法で到表3中の96ウエル板の８個の微小ウエル内に被覆する。被覆後、ウシ血清アルブミン溶液で密封して必要に備える。
【０２５５】
2）応用
当実施例で、使用されたサンプルはEBV IgA陽性血清、EBV IgA陰性血清である。すべてのサンプルは伝統的なELISA方法で血清20倍希釈反応の条件の下で予め検定する。
【０２５６】
実験時、2種のサンプルをそれぞれ上述の制御ELISAマイクロプレート及び三つのナノメートル構造ELISAマイクロプレートに入れて、各種のサンプルを四つの反応ウエルに入れる。サンプルを入れるときに、サンプルを適当に希釈する。サンプル加入量は100μlで、反応温度が37℃である。洗浄液の毎回の加入量は300μlで、3回洗浄する。標識は酵素標識のヤギ抗人IgA（北京天壇生物製品株式会社）である。加入量が100μlで、反応温度が37℃である。反応時間が30分間である。加入されたバイオチップ基板は、伝統的なELISA法と同じ条件の下で、反応する。酵素標識計器（Thermo Labsystems，上海雷勃分析計器有限公司）で色度分析を行う。八つのウエルの平均結果はカットオフ値によって負（−）正（+）を判定する。その結果は表10を参照して下さい。
【表１０】
2007502998.tif 000014
【０２５７】
表10での結果から見ると、ナノメートル構造ELISAマイクロプレートは、制御ELISAマイクロプレートより少なくともより高い敏感度がある上に、より早い反応速度を持つ。
【０２５８】
＜実施例15：ポリペプチド定量または定性検定キットの製作及び応用（2）＞
当実施例でのキットは、ナノメートル構造機能化担体を含む敏速検査キットである。
【０２５９】
1）キットの製作
（1）ナノメートル粒子被覆平面クロマトグラフィー片の製作
当実施例で使用されたバイオチップ基板はニトロセルロース板（福建泉州長立生物化学有限公司）とナイロンニトロセルロース板（福建泉州長立生物化学有限公司）である。使用されたナノメートル粒子はそれぞれ酸化シリコンナノメートル粒子（STN−3）（浙江舟山明日ナノメートル材料有限公司）と酸化シリコン（Ludox AS−40）（ Sigma−Aldrich会社）である。
【０２６０】
当実施例で使用されたナノメートル粒子被覆平面クロマトグラフィー試薬紙の製作方法は次の通りである。すなわち、濃度が1/12500〜1/25000（w/v）であるナノメートル粒子液をバイオチップ基板と接触させて、室温の下で5時間反応させてから蒸留水で繰り返して洗浄する。
【０２６１】
制御バイオチップ基板は、ナノメートル粒子を含む緩衝液で処理されなかったニトロセルロース膜片とナイロンセルロース膜片である。
【０２６２】
（2）ナノメートル構造機能化担体の敏速検査片の製作
当実施例で使用されたリガンドはＣ型肝炎ウイルス抗原（HCV Ag）（中国北京人民病院肝臓病研究所）である。
【０２６３】
濃度が0.5 mg/mlであるＣ型肝炎ウイルス抗原（HCV Ag）をそれぞれ上述の製作された4種のナノメートル構造平面クロマトグラフィー片と2種の制御バイオチップ基板（検定ライン）に付ける。それから、従来の方法でそれぞれ兎抗ヤギIgG品質コントロール線を付けてから、ウシ血清アルブミン溶液で密封して、その上にサンプル付け領域、コロイド金標識ヤギ抗人標識領域、吸水領域を加えて製作する。
【０２６４】
敏速検査制御試薬板はその中の制御バイオチップ基板から製作された敏速検査試薬板である。
【０２６５】
2）応用
当実施例で、サンプル1と2はそれぞれHCV抗体陽性血清とHCV抗体陰性血清である。すべてのサンプルは予め伝統的なELISA方法で負、正性を検定・確定する。
【０２６６】
実験時、2種のサンプルをそれぞれ上述の製作された6種の敏速検査片に付ける。サンプル付け時に、サンプルを適当に希釈する。サンプル加入量は50μlである。サンプル付け後洗浄液を加入して、試薬片で品質コントロール線が出るまでゆっくり吸収する。結果は表11を参照して下さい。
【表１１】
2007502998.tif 000015
【０２６７】
＜実施例16：ナノメートル構造機能化担体分離媒体の製作及び応用＞
当実施例で製作された分離媒体はクロマトグラフィー固定相である。
【０２６８】
1）製作
当実施例で使用されたリガンドはDEAE−ポリグルコース（Pharmacia公司）で、使用されたナノメートル粒子は表1中の酸化シリコンナノメートル粒子（STN−3）で、使用された担体は平均粒径60μmのクロマトグラフィー用のシリコン・ゲル粒子（中国科学院科学研究所）である。
【０２６９】
濃度が1/1000000（w/v）のDEAE−ポリグルコース溶液と濃度1/6250（w/v）の酸化シリコンナノメートル粒子（STN−3）を混ぜて室温の条件の下で4時間撹拌してから、予め干燥されたシリコン・ゲル粒子をその中に浸す。それから当発明者中の一人が発表した文章中の方法で（参考当発明の共同発明者の一人の文章（たんぱく質の高パフォーマンス親和クロマトグラフィーに関する被覆シリカ担体（COATED SILICA SUPPORTS FOR HIGH−PERFORMANCE AFFINITY CHROMATOGRAPHY OF PROTEIN），Journal of Chromatography，476，（1989）195−203）ポリグルコース架橋をして、DEAE−ポリグルコース/ナノメートル粒子/シリカ・ゲル粒子複合物を獲得する。実際に、ナノメートルポリグルコースの導入によって、伝統的なポリグルコース誘導体方法で多種のクロマトグラフィー固定相を誘導できる。
【０２７０】
対照とするDEAE−ポリグルコース/シリカ・ゲル粒子複合物の製作方法は当発明者の一人が発表した方法を参照して下さい（以上と同じ）。
【０２７１】
2）リガンド/ナノメートル粒子/担体複合物分離媒体の応用
当実施例で上述のシリカ・ゲル粒子、DEAE−ポリグルコース/シリカ・ゲル粒子複合物およびDEAE−ポリグルコース/ナノメートル粒子/シリカ・ゲル粒子複合物の人アルブミン動力学吸着容量の検定結果はそれぞれ1.2 mg/ml、7.8 mg/mlおよび13.5 mg/mlである。その中で、DEAE−ポリグルコース/ナノメートル粒子/シリコン・ゲル粒子複合物は一番高い動力学吸着容量を持っている。
【０２７２】
動力学吸着容量検定で、上述媒質のクロマトグラフィー管内径0.5cm、長さ２cm、緩衝液0.01Tris-HCl/pH7.40、流速が１ml/minで、使用するクロマトグラフィー器械(HPLC)はHP1090、サンプルは人アルブミンである。公知の人アルブミン動力学吸着容量はそれぞれ1.2mg/ml、7.8mg/mlと13.5mg/mlである。その中で、DEAE-ポリグルコース/ナノメートル粒子/シリカゲル粒子複合物は最高の動力学吸着容量を持つ。
【０２７３】
＜実施例17：HIV検定核酸解析チップ検定＞
1、HIVチップ製作
当例で使用されたチップは当発明のナノメートル構造チップである。その中のバイオチップ基板はエポキシ基ガラススライド（表3）である。機能化試薬は公開されたHIVウイルス保守領域の8種の標的遺伝子である（その中で、SK領域が6個、P領域が1個、C領域が1個ある）。機能化ナノメートル粒子は機能化試薬被覆の酸化シリコン（Ludox AS−40）である。機能化ナノメートル粒子製作方法は実施例2の通りである。ナノメートル構造チップ製作方法及び鑑定方法は実施例4のものと同じである。
【０２７４】
2、サンプル準備 
沸騰させて10分間非機能化された血液サンプルに対して、従来の方法でその中からDNAを引き取る。引き取られたDNAを98℃まで加熱して、4℃以下に早く冷やして、変性緩衝液で処理する。変性処理されたDNAは、変性緩衝液を除去することによって、標識緩衝液にした後、ローダミンで標識する。標識反応完成後、遠心クロマトグラフィー法で遊離ローダミンを除去して必要に備える。
【０２７５】
3、検定
上述の二つの血液サンプルで製作された標識DNAサンプルを交雑液に入れて混ぜる。加入比率はそれぞれ1：9；1：99；1：199である。それから六つの異なる希釈度のサンプルを六つのチップに加入する。それぞれ四つの反応ウエルに入れて、湿っているボックスに入れて42℃で60分間反応させて、チップを取り出した後、緩衝液で3回洗浄してからアルコールで洗浄した後、乾燥する。レーザー共焦点スキャナで検定し、画像処理ソフトウェアで処理した後、結果を得る。表12は一つのチップでの4個反応ウエルの多数のサンプルスポットの総合評定結果である。
【表１２】
2007502998.tif 000016
【図面の簡単な説明】
【０２７６】
【図１】図1は一種のナノメートル構造担体のDFM平面図である。
【図２】図2Aと2Bはそれぞれ一種のナノメートル構造機能化担体のDFM平面図と立体図である。