【手続補正書】
【提出日】平成18年12月4日(2006.12.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象の皮膚領域または毛髪を明色化する方法であって、皮膚領域または毛髪の細胞に含有される色素を酸化するために好適な様式で少なくとも１つのタイプのリグニン改変酵素を皮膚領域または毛髪に適用することを含む方法。
【請求項２】
前記リグニン改変酵素はリグニンペルオキシダーゼである請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記リグニンペルオキシダーゼはイソ酵素Ｈ１または改変された形態のイソ酵素Ｈ２である請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記適用は、前記少なくとも１つのタイプのリグニン改変酵素を含む調製物の局所適用によって達成される請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記適用は、前記少なくとも１つのタイプのリグニン改変酵素を含む調製物の皮内投与または皮下投与によって達成される請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記少なくとも１つのタイプの前記リグニン改変酵素は、皮膚または毛髪への適用のために配合された組成物に含まれる請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記組成物は電子受容体をさらに含む請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記組成物はベラトリルアルコールをさらに含む請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記組成物は少なくとも１つのタイプの表皮浸透剤を含む請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記組成物は少なくとも１つのタイプの毛髪浸透剤を含む請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
前記適用は所望される明色化のレベルに従って選択された期間にわたって行われる請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
対象の皮膚領域または毛髪を明色化するための化粧用組成物であって、少なくとも１つのタイプのリグニン改変酵素と、化粧用として許容され得るキャリアとを含む化粧用組成物。
【請求項１３】
前記少なくとも１つのタイプの前記リグニン改変酵素はリグニンペルオキシダーゼである請求項１２に記載の化粧用組成物。
【請求項１４】
前記リグニンペルオキシダーゼはイソ酵素Ｈ１または改変された形態のイソ酵素Ｈ２である請求項１３に記載の化粧用組成物。
【請求項１５】
電子受容体をさらに含む請求項１２に記載の化粧用組成物。
【請求項１６】
前記電子受容体は過酸化水素である請求項１５に記載の化粧用組成物。
【請求項１７】
前記化粧用として許容され得るキャリアには、トランスキュトールおよび／またはブチレングリコールが含まれる請求項１２に記載の化粧用組成物。
【請求項１８】
前記化粧用として許容され得るキャリアには、アルカノールアミンが含まれる請求項１２に記載の化粧用組成物。
【請求項１９】
前記リグニンペルオキシダーゼは少なくとも１Ｕ／ｇの濃度で提供される請求項１３に記載の化粧用組成物。
【請求項２０】
前記過酸化水素は少なくとも０．００５％の濃度で提供される請求項１６に記載の化粧用組成物。
【請求項２１】
ベラトリルアルコールをさらに含む請求項１２に記載の化粧用組成物。
【請求項２２】
前記ベラトリルアルコールは少なくとも０．０５％の濃度で提供される請求項２１に記載の化粧用組成物。
【請求項２３】
皮膚領域または毛髪を明色化するためのキットであって、リグニン改変酵素を含む第１の容器と、電子受容体を含む第２の容器とを含むキット。
【請求項２４】
前記第１の容器はベラトリルアルコールをさらに含む請求項２３に記載のキット。
【請求項２５】
前記第１の容器に含まれる前記リグニン改変酵素はリグニンペルオキシダーゼである請求項２３に記載のキット。
【請求項２６】
前記リグニンペルオキシダーゼはイソ酵素Ｈ１または改変された形態のイソ酵素Ｈ２である請求項２５に記載のキット。
【請求項２７】
前記含まれる電子受容体は過酸化水素である請求項２３に記載のキット。
【請求項２８】
前記ベラトリルアルコールは少なくとも０．０５％の濃度で提供される請求項２４に記載のキット。
【請求項２９】
前記リグニンペルオキシダーゼは少なくとも１Ｕ／ｇの濃度で提供される請求項２５に記載のキット。
【請求項３０】
前記過酸化水素は少なくとも０．００５％の濃度で提供される請求項２７に記載のキット。
【請求項３１】
前記第１の容器および／または第２の容器は、表皮浸透のために好適な化粧用として許容され得るキャリアをさらに含む請求項２３に記載のキット。
【請求項３２】
前記第１の容器および／または第２の容器は、毛髪浸透のために好適な化粧用として許容され得るキャリアをさらに含む請求項２３に記載のキット。
【請求項３３】
前記化粧用として許容され得るキャリアには、トランスキュトールおよび／またはブチレングリコールが含まれる請求項３１に記載のキット。
【請求項３４】
前記化粧用として許容され得るキャリアには、アルカノールアミンが含まれる請求項３２に記載のキット。
【請求項３５】
包装材と、対象の皮膚領域または毛髪を明色化するために同定された、前記包装材に含有される化粧用組成物とを含む製品であって、前記化粧用組成物は、有効成分としてのリグニン改変酵素と、化粧用として許容され得るキャリアとを含む製品。
【請求項３６】
前記リグニン改変酵素はリグニンペルオキシダーゼである請求項３５に記載の製品。
【請求項３７】
前記リグニンペルオキシダーゼはイソ酵素Ｈ１または改変された形態のイソ酵素Ｈ２である請求項３６に記載の製品。
【請求項３８】
前記化粧用組成物は電子受容体をさらに含む請求項３５に記載の製品。
【請求項３９】
前記化粧用組成物はベラトリルアルコールをさらに含む請求項３５に記載の製品。
【請求項４０】
前記電子受容体は過酸化水素である請求項３８に記載の製品。
【請求項４１】
前記化粧用として許容され得るキャリアは、表皮または毛髪浸透のために好適な組成物を含む請求項３５に記載の製品。
【請求項４２】
対象の皮膚領域を明色化する方法であって、皮膚領域の細胞に含有される色素を酸化するために好適な様式でリグニン改変酵素を皮膚領域の細胞において発現させることを含む方法。
【請求項４３】
皮膚領域の前記細胞に電子受容体を提供する工程をさらに含む請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記電子受容体は過酸化水素である請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
皮膚領域の前記細胞にベラトリルアルコールを提供する工程をさらに含む請求項４２に記載の方法。
【請求項４６】
発現は、前記リグニン改変酵素を発現することができる発現ベクターを前記細胞に導入することによって達成される請求項４２に記載の方法。
【請求項４７】
前記発現ベクターはウイルスベクターである請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記発現ベクターは、リグニン改変酵素のコード配列に機能的に連結されたプロモーターを含む請求項４６に記載の方法。
【請求項４９】
前記リグニン改変酵素はリグニンペルオキシダーゼである請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記リグニンペルオキシダーゼは、配列番号１に示されるポリヌクレオチド配列によってコードされる請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
リグニンペルオキシダーゼを製造する方法であって：
（ａ）ファネロカエテ・クリソスポリウム（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ）菌を、所定の期間、グリセロールを含有する撹拌および通気された培養培地において多孔性マトリックス上で培養すること；
（ｂ）前記所定の期間の後、可溶性画分を前記ファネロカエテ・クリソスポリウム菌から抽出して、それによりリグニンペルオキシダーゼを製造すること；
を含む方法。
【請求項５２】
前記培養培地はマンガンイオンを含まない請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記通気された培養は、前記培養培地を０．１〜１リットル／リットル／分の範囲における通気速度に供することによって得られる請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
前記培養は３７℃の温度で達成される請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
前記撹拌された培養培地は、前記培養培地を５０ｒｐｍ〜３００ｒｐｍの範囲における速度で撹拌することによって得られる請求項５１に記載の方法。
【請求項５６】
前記撹拌された培養培地は、前記培養培地を１６０ｒｐｍの速度で撹拌することによって得られる請求項５１に記載の方法。
【請求項５７】
前記所定の期間は、３日〜１０日の範囲から選択される請求項５１に記載の方法。
【請求項５８】
前記所定の期間は７日である請求項５１に記載の方法。
【請求項５９】
前記グリセロールは３グラム／リットル〜２０グラム／リットルの濃度範囲で提供される請求項５１に記載の方法。
【請求項６０】
前記グリセロールは６グラム／リットルの濃度で提供される請求項５１に記載の方法。
【請求項６１】
前記培養培地はベラトリルアルコールをさらに含む請求項５１に記載の方法。
【請求項６２】
前記ベラトリルアルコールは０．５ｍＭ〜４ｍＭの濃度範囲で提供される請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記ベラトリルアルコールは２ｍＭの濃度で提供される請求項６１に記載の方法。
【請求項６４】
前記リグニンペルオキシダーゼはイソ酵素Ｈ１または改変された形態のイソ酵素Ｈ２である請求項５１に記載の方法。
【請求項６５】
前記多孔性マトリックスはポリウレタンフォームである請求項５１に記載の方法。
【請求項６６】
５００ユニット／リットル〜２０００ユニット／リットルの範囲でリグニンペルオキシダーゼ酵素活性を示すファネロカエテ・クリソスポリウム菌の水性抽出物。
【請求項６７】
前記リグニンペルオキシダーゼ活性は１５００ユニット／リットルである請求項６６に記載の水性抽出物。
【請求項６８】
前記リグニンペルオキシダーゼ酵素活性はイソ酵素Ｈ１または改変された形態のイソ酵素Ｈ２である請求項６５に記載の水性抽出物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４８】
記載された好ましい実施形態におけるなおさらなる特徴によれば、培養培地はマンガンイオンを含まない。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８５】
下記の実施例の節の材料および実験方法において記載されるように、ファネロカエテ・クリソスポリウムは、マンガンイオンを含まず、グリセロールを炭素源として含有する培養条件のもとで培養される。好ましくは、本発明のグリセロールは３グラム／リットル〜２０グラム／リットルの濃度範囲で提供される。現時点で好ましい形態によれば、グリセロールは６グラム／リットルの濃度で提供される。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７７】
Ｐ．ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍによるリグニン分解酵素の発現は、窒素または炭素の制限によって開始される特発性の（ｉｄｉｏｐｈａｓｉｃ）事象であり、培養条件および培地組成に非常に依存している（ＤｏｓｏｒｅｔｚおよびＧｒｅｔｈｌｅｉｎ、１９９１；ＦａｉｓｏｎおよびＫｉｒｋ、１９８５；Ｓｔｅｗａｒｔら、１９９２；ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｗｏｕｄｅら、１９９３）。ＬＩＰの形成は、高い酸素圧に対する培養物の暴露に特に依存している（Ｄｏｓｏｒｅｔｚら、１９９０；ＦａｉｓｏｎおよびＫｉｒｋ、１９８５）。定常状態の培養物の内部への酸素移行が制限され、その結果として、培養ヘッドスペースにおける大きい酸素分圧が、十分な酸素を水面下の菌糸が利用できるようにするために必要とされることが提案されている（Ｌｅｉｓｏｌａら、１９８３；Ｍｉｃｈｅｌら、１９９２）。ＬＩＰ形成が、この菌類に対する酸素の利用性を改善する非浸漬型液体培養において菌類を多孔性担体に固定化することによって空気にさらされた培養物において観測された（Ｄｏｓｏｒｅｔｚら、１９９０；Ｐｏｐｐら、１９９０）。培地におけるＭｎ２＋の濃度はＬＩＰおよびＭＮＰの形成に悪影響を及ぼした。ＭＮＰの形成は、ＭＮＰの転写を高めるＭｎに依存しているが、ＬＩＰの形成はＭｎによって阻害される。Ｒｏｔｈｓｃｈｉｌｄら（１９９９）は、Ｐ．ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍの窒素制限培養および窒素過剰培養の両方において、ＬＩＰ形成のために要求される高い酸素レベルがＭｎ欠乏によって置き換えられ得ることを示した。