【手続補正書】
【提出日】平成19年9月25日(2007.9.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリヌクレオチドが以下：
(ａ)配列番号２、配列番号３、配列番号６、配列番号７、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38及び配列番号39からなる群より選択されるアミノ酸配列を含んでなるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；
(ｂ)(ａ)に規定されるものに相補的な精製ポリヌクレオチド；
(ｃ)(ａ)に規定されるポリヌクレオチドに少なくとも70％同一である精製ポリヌクレオチド；
(ｄ)(ａ)に規定されるポリヌクレオチドに少なくとも80％同一である精製ポリヌクレオチド；
(ｅ)(ａ)に規定されるポリヌクレオチドに少なくとも90％同一である精製ポリヌクレオチド；及び
(ｆ)50〜68℃の温度にて５×SSC中で洗浄することを含んでなるストリンジェントな条件下で、(ａ)に規定されるポリヌクレオチドにハイブリダイズする精製ポリヌクレオチドからなる群において選択される、NF-κBシグナル伝達経路を阻害するポリペプチドをコードする精製ポリヌクレオチド。
【請求項２】
ポリペプチドがNEMOオリゴマー化を妨害する請求項１に記載の精製ポリヌクレオチド。
【請求項３】
請求項１に記載の精製ポリヌクレオチドを含んでなるベクター。
【請求項４】
請求項１に記載の精製ポリヌクレオチドを含んでなる宿主細胞。
【請求項５】
以下：
ａ)配列番号３、配列番号７、配列番号14、配列番号16、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38及び配列番号39からなる群において選択されるアミノ酸配列を有するNEMO型ポリペプチド；
ｂ)ａ)に規定されるポリペプチドに少なくとも70％同一である精製ポリペプチド；
ｃ)ａ)に規定されるポリペプチドに少なくとも80％同一である精製ポリペプチド；
(ｄ)ａ)に規定されるポリペプチドに少なくとも90％同一である精製ポリペプチド；
(ｅ)ａ)に規定されるポリペプチドに少なくとも95％同一である精製ポリペプチド
からなる群において選択されるNF-κB経路を阻害する精製ポリペプチド。
【請求項６】
NEMOオリゴマー化を妨害する請求項５に記載の精製ポリペプチド。
【請求項７】
以下：
ａ)配列番号３、配列番号７、配列番号14、配列番号16、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38及び配列番号39からなる群において選択され、且つ高トランスダクション能を有するポリペプチドに連結されているアミノ酸配列を含んでなるポリペプチド融合構築物；
ｂ)ａ)に規定されるアミノ酸配列に少なくとも80％同一なアミノ酸配列を含んでなるポリペプチド融合構築物；
ｃ)ａ)に規定されるアミノ酸配列に少なくとも90％同一なアミノ酸配列を含んでなるポリペプチド融合構築物；
ｄ)ａ)に規定されるアミノ酸配列に少なくとも95％同一なアミノ酸配列を含んでなるポリペプチド融合構築物；
ｅ)配列番号３、配列番号７、配列番号14、配列番号16、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38及び配列番号39からなる群より選択されるアミノ酸配列に少なくとも70％同一であり、且つ高トランスダクション能を有するポリペプチドに連結されているアミノ酸配列を含んでなるポリペプチド融合構築物；
からなる群において選択されるアミノ酸配列を含んでなるNF-κB経路を阻害するポリペプチド融合構築物。
【請求項８】
ポリペプチド融合構築物がNEMOオリゴマー化を妨害する請求項７に記載のポリペプチド。
【請求項９】
連結が１〜35アミノ酸の範囲の長さを有するアミノ酸スペーサー配列による請求項７に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
アミノ酸スペーサー配列が配列番号９及び配列番号10からなる群より選択される請求項９に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
高トランスダクション能を有するポリペプチドが配列番号１のアミノ酸配列を有する請求項７に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
ポリペプチド融合構築物が配列番号２、配列番号６、配列番号13及び配列番号15からなる群において選択されるアミノ酸配列を有する請求項１１に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
インビトロで真核細胞を請求項７〜１２のいずれか１項に記載のポリペプチド融合構築物と接触させることを含んでなるNF-κBシグナル伝達経路を阻害する方法。
【請求項１４】
インビトロでNEMOを請求項７〜１２のいずれか１項に記載のポリペプチド融合構築物と接触させることを含んでなるNEMOのオリゴマー化を妨害する方法。
【請求項１５】
請求項７〜１２のいずれか１項に記載のポリペプチド融合構築物の有効量と、１又はそれより多い医薬的に許容されるキャリア又は賦形剤とを含んでなる、NF-κBシグナル伝達経路により調節される障害をその必要がある患者において調整するか又は治療するための医薬組成物。
【請求項１６】
NF-κBシグナル伝達経路により調節される障害が炎症応答、腫瘍形成及びウイルス感染からなる群より選択される請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
請求項７〜１２のいずれか１項に記載のポリペプチド融合構築物の有効量と、１又はそれより多い医薬的に許容されるキャリア又は賦形剤とを含んでなる、細胞増殖又はアポトーシスをその必要がある患者において調節するための医薬組成物。
【請求項１８】
請求項７〜１２のいずれか１項に記載のポリペプチド融合構築物の有効量と、１又はそれより多い医薬的に許容されるキャリア又は賦形剤とを含んでなる、抗原刺激におけるＢ又はＴリンパ球をその必要がある患者において調節するための医薬組成物。
【請求項１９】
その必要がある患者がヒトである請求項１５〜１８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
有効量が0.1mg/Kg/日〜30mg/Kg/日の範囲である請求項１５〜１９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
経口、直腸、経鼻、非経口、槽内、膣内、腹腔内、舌下、局所及び口腔粘膜投与からなる群より選択される形態で投与される請求項１５〜２０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
静脈内投与される請求項１５〜２１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
ａ)候補ポリペプチド配列を同定すること；
ｂ)候補ポリペプチド配列を高トランスダクション能を有するポリペプチドにスペーサー配列を介して連結することによりポリペプチド融合構築物を創ること；
ｃ)細胞培養物をポリペプチド融合構築物と接触させること；及び
ｄ)NF-κBシグナル伝達経路の活性をモニターすること；
ｅ)ポリペプチド融合構築物の存在下でのNF-κBシグナル伝達経路の活性を、ポリペプチド融合構築物の非存在下でのNF-κBシグナル伝達経路の活性と比較して、ポリペプチド融合構築物による相対的阻害を決定すること；及び
ｆ)ポリペプチド融合構築物による相対的阻害をNEMOオリゴマー化に相関させること
を含んでなるNEMOのオリゴマー化を調整するポリペプチドを同定する方法。
【請求項２４】
候補ポリペプチド配列がコイルドコイル又はヘリカル構造を有する請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
候補ポリペプチド配列が20〜60アミノ酸を有する請求項２３又は２４に記載の方法。
【請求項２６】
候補ポリペプチド配列がNEMO由来である請求項２３〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
スペーサー配列が１〜35アミノ酸の範囲の長さを有する請求項２３〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
スペーサー配列が配列番号９及び配列番号10からなる群より選択される請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
高トランスダクション能を有するポリペプチドが配列番号１のアミノ酸配列を有する請求項２３に記載の方法。
【請求項３０】
細胞培養物が、2003年４月１日にフランス、75724 パリ  セデックス15、リュ  ドゥ  ドクトール  リュー  28のCNCM(Collection Nationale de Cultures de Microorganismes)に番号I-3004で寄託された、NF-κB依存性β-ガラクトシダーゼレポーター遺伝子でトランスフェクトされたpre-B 70Z/3リンパ球を含んでなる請求項２３に記載の方法。
【請求項３１】
ポリペプチド融合構築物がＮ末端システイン残基を更に含んでなる請求項２３に記載の方法。
【請求項３２】
b-1)ポリペプチド融合構築物を標識すること；及び
c-1)標識したポリペプチド融合構築物の細胞取込みをモニターすること
を更に含んでなる請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
標識がシステイン残基を蛍光体と化学的に反応させることを含んでなる請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
蛍光体がBODIPYである請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
細胞取込みをモニターすることがFACSによる請求項３２に記載の方法。