【手続補正書】
【提出日】平成19年5月1日(2007.5.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）Ｔ−カドヘリンと相互作用する被験物質を得るステップ、
（ｂ）該被験物質を第１の動物に投与するステップ、
（ｃ）該被験物質の投与後の該第１の動物における１又はそれ以上の生理学的パラメータを測定するステップ、
（ｄ）該被験物質の投与後の該第１の動物における該１又はそれ以上の生理学的パラメータと、
ｉ．該被験物質の投与前の該第１の動物及び
ｉｉ．該被験物質が投与されていない第２の動物
からなる群より選ばれた１又はそれ以上の対照被験体における該１又はそれ以上の生理学的パラメータとを比較するステップ、
を含み、
該１又はそれ以上の生理学的パラメータが、血糖濃度、血中遊離脂肪酸濃度、血中トリグリセリド濃度、生理的下のインシュリン濃度の存在下でのグルコース産生、新生内膜肥厚、冠動脈疾患に関連する損傷及び体重からなる群より選択され、該１又はそれ以上の対照被験体における１又はそれ以上の生理学的パラメータに比べた、該被験物質の投与後に該第１の動物で測定される１又はそれ以上の生理学的パラメータの減少により、該被験物質が、アジポネクチンの作用を模倣するものとして同定される、被験物質が、アジポネクチンの作用を模倣するかどうかの決定方法。
【請求項２】
前記第１及び第２の動物が遺伝子改変マウスであり、より好ましくは、ｏｂ／ｏｂマウス、ＮＯＤマウス及びＡｐｏＥ−欠損マウスからなる群より選択される遺伝子改変マウスである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
（ａ）Ｔ−カドヘリンと相互作用する被験物質を得るステップ、
（ｂ）Ｔ−カドヘリンを発現する第１の細胞と該被験物質とを接触させるステップ、
（ｃ）該第１の細胞と該被験物質とを接触させた後の該第１の細胞における１又はそれ以上の細胞パラメータを測定するステップ、
（ｄ）該第１の細胞と該被験物質とを接触させた後の該第１の細胞における１又はそれ以上の細胞パラメータと、
ｉ．該第１の細胞と該被験物質とを接触させるより前の該第１の細胞、
ｉｉ．該被験物質と接触させていない第２の細胞、及び
ｉｉｉ．Ｔ−カドヘリンを発現しない第２の細胞
からなる群より選択された、１又はそれ以上の対照細胞における該１又はそれ以上の細胞パラメータとを比較するステップ、
を含み、
該１又はそれ以上の細胞パラメータが、次の群（ｉ）から選択されたものであり、
（ｉ）脂肪酸酸化、グルコース取り込み、インシュリン感受性、乳酸生産、５'−ＡＭＰ−活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）リン酸化、アセチルコエンザイムＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）リン酸化、及びＩＲＳ−１−媒介ＰＩ−３−キナーゼ活性であり、該１又はそれ以上の対照細胞における該細胞パラメータに比べた、該第１の細胞と該被験物質との接触後の該第１の細胞で測定された該１又はそれ以上の細胞パラメータの増加により、該被験物質が、アジポネクチンの作用を模倣するものとして同定される、
又は該１又はそれ以上の細胞パラメータが、次の群（ｉｉ）から選択されたものである、
（ｉｉ）平滑筋細胞増殖、平滑筋細胞遊走、ＴＮＦ−α−誘導ＮＦ−κＢシグナル伝達及び接着分子のＴＮＦ−α−誘導発現であり、該１又はそれ以上の対照細胞における該１又はそれ以上の細胞パラメータと比べた、該第１の細胞と該被験物質とを接触させた後の該第１の細胞で測定された該１又はそれ以上の細胞パラメータの減少により、該被験物質がアジポネクチンの作用を模倣するものとして同定される、
被験物質がアジポネクチンの作用を模倣するかどうかの決定方法。
【請求項４】
前記第１及び第２の細胞が、Ｃ２Ｃ１２細胞、ヒト大動脈平滑筋細胞（ＨＡＳＭＣｓ）及びヒト大動脈内皮細胞（ＨＡＥＣｓ）からなる群より選択されたものである、請求項３記載の方法。
【請求項５】
（ｅ）Ｔ−カドヘリンを発現する第１の細胞と被験物質とを接触させるステップ、
（ｆ）Ｔ−カドヘリンを発現しない第２の細胞と該被験物質とを接触させるステップ、
（ｇ）該第１及び第２の細胞と被験物質とを接触させた後の該第１及び第２の細胞における１又はそれ以上の細胞パラメータを測定するステップ、
（ｈ）該第１及び第２の細胞と被験物質とを接触させた後の該第１の細胞における該１又はそれ以上の細胞パラメータと該第２の細胞における該１又はそれ以上の細胞パラメータとを比較するステップ、
を含み、該１又はそれ以上の細胞パラメータが、次の群（ｉ）から選択されたものであり、                                                                  （ｉ）脂肪酸酸化、グルコース取り込み、インシュリン感受性、乳酸生産、５'−ＡＭＰ−活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）リン酸化、アセチルコエンザイムＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）リン酸化及びＩＲＳ−１−媒介ＰＩ−３−キナーゼ活性であり、該第１及び第２の細胞と該被験物質とを接触させた後の該第２の細胞で測定された該１又はそれ以上の細胞パラメータと比べた、該第１の細胞で測定された該１又はそれ以上の細胞パラメータの増加により、該被験物質がアジポネクチンの作用を模倣するものとして同定される、
又は該１又はそれ以上の細胞パラメータが、次の群（ｉｉ）から選択されたものであり、
（ｉｉ）平滑筋細胞増殖、平滑筋細胞遊走、ＴＮＦ−α−誘導ＮＦ−κＢシグナル伝達及び接着分子のＴＮＦ−α−誘導発現であり、該第１及び第２の細胞と該被験物質とを接触させた後の該第２の細胞で測定された該１又はそれ以上の細胞パラメータと比べた、該第１の細胞で測定された該１又はそれ以上の細胞パラメータの減少により、該被験物質がアジポネクチンの作用を模倣するものとして同定される、
被験物質がアジポネクチンの作用を模倣するかどうかの決定方法。
【請求項６】
（ａ）一方が検出可能なマーカー若しくは酵素に融合化され、他方が適切な担体に固定される（ｉ）アジポネクチン又はその断片若しくは誘導体及び（ｉｉ）Ｔ−カドヘリン又はその断片若しくは誘導体と、（ｉｉｉ）被験物質とを含有した試験混合物を供給するステップ、
又は、一方が検出可能なマーカー若しくは酵素に融合化され、他方が細胞の表面に発現される、（ｉ）アジポネクチン又はその断片若しくは誘導体及び（ｉｉ‘）Ｔ−カドヘリン又はその断片と、（ｉｉｉ）被験物質とを含有した試験混合物を供給するステップ、
（ｂ）一方が検出可能なマーカー若しくは酵素に融合化され、他方が適切な担体に固定される、（ｉ）アジポネクチン又はその断片若しくは誘導体及び（ｉｉ）Ｔ−カドヘリン又はその断片若しくは誘導体を含有した対照混合物を供給するステップ、
又は、一方が検出可能なマーカー若しくは酵素に融合化され、他方が細胞の表面に発現される、（ｉ）アジポネクチン又はその断片若しくは誘導体及び（ｉｉ‘）Ｔ−カドヘリン又はその断片を含有した対照混合物を供給するステップ、
（ｃ）試験混合物及び対照混合物から、未結合のアジポネクチンとＴ−カドヘリンとを除去するステップ、
（ｄ）該試験混合物及び該対照混合物中における該マーカー又は酵素により生じるシグナルを測定するステップ
を含み、
該対照混合物中における該マーカー又は酵素により生じるシグナルに比べた該試験混合物中におけるマーカー又は酵素により生じるシグナルの減少が、被験物質が有するアジポネクチンとＴ−カドヘリンとの間の相互作用の阻害能を示し、
該対照混合物中における該マーカー又は酵素により生じるシグナルに比べた該試験混合物中における該マーカー又は酵素により生じるシグナルの増加が、被験物質が有するアジポネクチンとＴ−カドヘリンとの間の相互作用の促進能を示す、
被験物質がアジポネクチンとＴ−カドヘリンとの間の相互作用を阻害又は促進するかどうかの決定方法。
【請求項７】
前記被験物質が、モノクローナル抗体である、請求項１乃至６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記被験物質が、Ｔ−カドヘリンと相互作用する抗体である、請求項５又は６記載の方法。
【請求項９】
低アジポネクチン症、肥満症、拒食症、冠動脈疾患、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病及びアテローム性動脈硬化症からなる群より選択された疾患又は状態であるアジポネクチンの欠損又は過多に関連した哺乳動物における疾患又は状態の治療のための医薬の製造のための、アジポネクチンの作用を模倣する、又はアジポネクチンとＴ−カドヘリンとの間の相互作用を阻害又は促進する、薬剤、物質、又はモノクローナル抗体の治療上の効果的な量の使用。
【請求項１０】
低アジポネクチン症、肥満症、拒食症、冠動脈疾患、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病及びアテローム性動脈硬化症からなる群より選択された疾患又は状態であるアジポネクチンの欠損又は過多に関連した疾患又は状態の治療及び／又は予防のための医薬の製造のための、Ｔ−カドヘリン又はその断片若しくは誘導体の使用。
【請求項１１】
低アジポネクチン症、肥満症、拒食症、冠動脈疾患、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病及びアテローム性動脈硬化症からなる群より選択された疾患又は状態であるアジポネクチンの欠損又は過多に関連した疾患又は状態の治療及び／又は予防のための医薬として用いるための、アジポネクチンの作用を模倣又はアジポネクチンとＴ−カドヘリンとの間の相互作用を阻害若しくは促進するモノクローナル抗体。
【請求項１２】
請求項１乃至８のいずれか１項に記載の方法により同定された、請求項１１記載のモノクローナル抗体。