【手続補正書】
【提出日】平成19年9月12日(2007.9.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列に超可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲ１はアミノ酸配列Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（ＮＹＩＩＨ）を有し、該ＣＤＲ２はアミノ酸配列Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ-Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（ＹＦＮＰＹＮＨＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ）を有し、そして該ＣＤＲ３はアミノ酸配列Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｔｈｒ（ＳＧＰＹＡＷＦＤＴ）を有している少なくとも１つの抗原結合部位を含む結合分子。
【請求項２】
ａ）配列に超可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲ１はアミノ酸配列Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（ＮＹＩＩＨ）を有し、該ＣＤＲ２はアミノ酸配列Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ-Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（ＹＦＮＰＹＮＨＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ）を有し、そして該ＣＤＲ３はアミノ酸配列Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｔｈｒ（ＳＧＰＹＡＷＦＤＴ）を有している第１のドメイン；および
ｂ）配列に超可変領域ＣＤＲ１’、ＣＤＲ２’およびＣＤＲ３’を含み、ＣＤＲ１’はアミノ酸配列Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ（ＲＡＳＱＮＩＧＴＳＩＱ）を有し、ＣＤＲ２’はアミノ酸配列Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ（ＳＳＳＥＳＩＳ）を有し、そしてＣＤＲ３’はアミノ酸配列Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（ＱＱＳＮＴＷＰＦＴ）を有している第２ドメイン
を含む請求項１に記載の結合分子。
【請求項３】
キメラまたはヒト化結合分子である請求項１または２のいずれかに記載の結合分子。
【請求項４】
キメラまたはヒト化結合分子がキメラまたはヒト化モノクローナル抗体である請求項１から３のいずれかに記載の結合分子。
【請求項５】
多くて１個のグリコシル化部位を含む請求項１から４のいずれかに記載の結合分子。
【請求項６】
グリコシル化部位がＮグリコシル化部位である請求項５に記載の結合分子。
【請求項７】
グリコシル化部位が可変領域に存在しない請求項１から６のいずれかに記載の結合分子。
【請求項８】
配列番号：１のポリペプチドおよび／または配列番号：２のポリペプチドを含む請求項１から７のいずれかに記載の結合分子。
【請求項９】
配列番号：３のポリペプチドおよび／または配列番号：４のポリペプチドを含む請求項１から７のいずれかに記載の結合分子。
【請求項１０】
キメラモノクローナル抗体である請求項８または９のいずれかに記載の結合分子。
【請求項１１】
配列番号：９もしくは配列番号：１０のポリペプチドおよび／または配列番号：７もしくは配列番号：８のポリペプチドを含むヒト化抗体である結合分子。
【請求項１２】
配列番号：３１もしくは配列番号：３２のポリペプチドおよび／または配列番号：７もしくは配列番号：８のポリペプチドを含むヒト化抗体である結合分子。
【請求項１３】
配列番号：９のポリペプチドおよび配列番号：７のポリペプチド、
配列番号：９のポリペプチドおよび配列番号：８のポリペプチド、
配列番号：１０のポリペプチドおよび配列番号：７のポリペプチド、
配列番号：１０のポリペプチドおよび配列番号：８のポリペプチド、
配列番号：３１のポリペプチドおよび配列番号：７のポリペプチド、
配列番号：３１のポリペプチドおよび配列番号：８のポリペプチド、
配列番号：３２のポリペプチドおよび配列番号：７のポリペプチド、または
配列番号：３２のポリペプチドおよび配列番号：８のポリペプチド、
を含むヒト化抗体である結合分子。
【請求項１４】
請求項１から１３のいずれかに記載の結合分子をコードするポリヌクレオチドを含む単離されたポリヌクレオチド。
【請求項１５】
請求項２に記載のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のアミノ酸配列をコードする請求項１４に記載のポリヌクレオチド、ならびに／または請求項２に記載のＣＤＲ１’、ＣＤＲ２’およびＣＤＲ３’のアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチド。
【請求項１６】
アミノ酸配列Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ（ＲＡＳＱＮＩＧＴＳＩＱ）を有する該ＣＤＲ１’、アミノ酸配列Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ（ＳＳＳＥＳＩＳ）を有するＣＤＲ２’、およびアミノ酸配列Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（ＱＱＳＮＴＷＰＦＴ）を有するＣＤＲ３’によるＣＤＲ１’、ＣＤＲ２’およびＣＤＲ３’のアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチド。
【請求項１７】
配列番号：５のポリヌクレオチドおよび／または配列番号：６のポリヌクレオチドを含むポリヌクレオチド。
【請求項１８】
配列番号：７もしくは配列番号：８のポリペプチドおよび／または配列番号：９もしくは配列番号：１０のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むポリヌクレオチド。
【請求項１９】
配列番号：１１もしくは配列番号：１２のポリヌクレオチドおよび／または配列番号：１３もしくは１４のポリヌクレオチドを含むポリヌクレオチド。
【請求項２０】
配列番号：７もしくは配列番号：８のポリペプチドおよび／または配列番号：３１もしくは配列番号：３２のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むポリヌクレオチド。
【請求項２１】
配列番号：３４もしくは配列番号：３５のポリヌクレオチドおよび／または配列番号：３３；配列番号：１４もしくは１３のポリヌクレオチドを含むポリヌクレオチド。
【請求項２２】
請求項１４から２１のいずれかに記載のポリヌクレオチド含む発現ベクター。
【請求項２３】
請求項１４から２１のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む発現系であって、該発現系またはその一部が適合する宿主細胞に存在するとき、該発現系またはその一部が請求項１から１３のいずれかに記載のポリペプチドを生成することができるものである、発現系。
【請求項２４】
請求項１４から２１のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む発現系であって、該発現系またはその一部が適合する宿主細胞に存在するとき、該発現系またはその一部が配列に超可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含み、該ＣＤＲ１はアミノ酸配列Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（ＮＹＩＩＨ）を有し、該ＣＤＲ２はアミノ酸配列Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ-Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（ＹＦＮＰＹＮＨＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧ）を有し、そして該ＣＤＲ３はアミノ酸配列Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｔｈｒ（ＳＧＰＹＡＷＦＤＴ）を有している少なくとも１つの抗原結合部位を含む結合分子を生成することができるものである、発現系。
【請求項２５】
請求項２３または２４に記載の発現系を含む単離された宿主細胞。
【請求項２６】
薬剤として請求項１から１３のいずれかに記載の結合分子またはヒト化抗体の使用。
【請求項２７】
自己免疫疾患、移植片拒絶、乾癬、皮膚炎、炎症性腸疾患および／もしくはアレルギーの処置ならびに／または予防における請求項２６に記載の使用。
【請求項２８】
移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の処置および／または予防における請求項２７に記載の使用。
【請求項２９】
膵臓島細胞移植片拒絶の処置のための医薬品の調製における請求項１から１３のいずれかに記載の結合分子またはヒト化抗体の使用。
【請求項３０】
結合分子またはヒト化抗体が配列番号：３１もしくは配列番号：３２のポリペプチドおよび／または配列番号：７もしくは配列番号：８のポリペプチドを含む請求項２６から２９のいずれかに記載の使用。
【請求項３１】
少なくとも１つの薬学的に許容される担体または希釈剤に随伴されて請求項１から１３のいずれかに記載の結合分子またはヒト化抗体を含む医薬組成物。
【請求項３２】
有効量の請求項１から１３のいずれかに記載の結合分子またはヒト化抗体をかかる処置および／または予防を必要とする対象に投与することを含む、自己免疫疾患、移植片拒絶、乾癬、皮膚炎、炎症性腸疾患および／またはアレルギーに関連する疾患の処置および予防の方法。
【請求項３３】
有効量の請求項１から１３のいずれかに記載の結合分子またはヒト化抗体をかかる処置および／または予防を必要とする対象に投与することを含む乾癬の処置および／または予防の方法。
【請求項３４】
有効量の請求項１から１３のいずれかに記載の結合分子またはヒト化抗体をかかる処置および／または予防を必要とする対象に投与することを含む移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の処置および／または予防の方法。
【請求項３５】
有効量の請求項１から１３のいずれかに記載の結合分子またはヒト化抗体をかかる処置および／または予防を必要とする対象に投与することを含む膵臓島細胞移植拒絶に関連する疾患の処置および／または予防の方法。
【請求項３６】
結合分子またはヒト化抗体が配列番号：３１もしくは配列番号：３２のポリペプチドおよび／または配列番号：７もしくは配列番号：８のポリペプチドを含む請求項３２から３５のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
ＣＤ４５ＲＯおよびＣＤ４５ＲＢの双方に関して結合特異性を有する結合分子の医薬品における使用。
【請求項３８】
結合分子がキメラ、ヒト化または完全ヒトモノクローナル抗体である請求項３７に記載の使用。
【請求項３９】
結合分子が解離定数（Ｋｄ）＜１５ｎＭでＣＤ４５ＲＯアイソフォームに結合する請求項３７または３８に記載の使用。
【請求項４０】
結合分子が解離定数（Ｋｄ）＜１５ｎＭでＣＤ４５ＲＢアイソフォームに結合する請求項３７から３８のいずれかに記載の使用。
【請求項４１】
ＣＤ４５分子のＡおよびＢエピトープを含むが、Ｃエピトープを含まない；および／もしくは
ＣＤ４５分子のＢエピトープを含むが、Ａを含まずそしてＣエピトープを含まない；
ＣＤ４５アイソフォーム；ならびに／または
ＣＤ４５分子のＡ、ＢまたはＣエピトープのいずれか１つを含まないアイソフォーム；
に結合分子が結合する請求項３７から４０のいずれかに記載の使用。
【請求項４２】
ＣＤ４５分子のＡ、ＢおよびＣエピトープの全てを含む；および／または
ＣＤ４５分子のＢおよびＣエピトープの双方を含むが、Ａエピトープを含まない；
ＣＤ４５アイソフォームに結合分子が結合しない請求項３７から４１のいずれかに記載の使用。
【請求項４３】
結合分子がＰＥＥＲ細胞上のその標的エピトープに結合し、そしてここで該結合はＫｄ＜１５ｎＭである請求項３７から４２のいずれかに記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
白血球共通抗原に対する抗体（ＬＣＡ）すなわちＣＤ４５は抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）の主要な成分である。ＣＤ４５は膜貫通型チロシンホスファターゼのファミリーに属し、そして受容体相互作用に依存して細胞活性化の陽性および陰性双方の調節因子である。ＣＤ４５のホスファターゼ活性はＢおよびＴリンパ球の抗原受容体に随伴されるＳｒｃファミリーキナーゼの活性化に必要であるようだ(Trowbridge IS et al, Annu Rev Immunol. 1994;12:85-116)。したがって、Ｔ細胞活性化においてＣＤ４５はシグナル１に必須であり、そしてＣＤ４５欠乏細胞はＴＣＲ媒介の活性化事象において深刻な欠陥を有する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
（図面の説明）
図１  「候補ｍＡｂ」による１次ＭＬＲの阻害は０.００１から１０μｇ／ｍｌの範囲で用量依存的であることを示している。「濃度」は「候補ｍＡｂ」の濃度である。
図２  配列番号：１５の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１２（３９２１−４２７４）のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＭＶ−Ｇ１  ＨｕＡ６−ＶＨＱのプラスミドマップを示す。
図３  配列番号：１６の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１１（３９２１−４２７４）のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＭＶ−Ｇ１  ＨｕＡ６−ＶＨＥのプラスミドマップを示す。
図４  配列番号：１７の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１４（３９６４−４２８４）のヌクレオチド配列を有する軽鎖を含む発現ベクターＨＣＭＶ−Ｋ  ＨｕＡｂ−ＶＬ１ｈｕｍＶ１のプラスミドマップを示す。
図５  配列番号：１８の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１３（３９２１−４２７４）のヌクレオチド配列を有する軽鎖を含む発現ベクターＨＣＭＶ−Ｋ  ＨｕＡｂ−ＶＬ１ｈｕｍＶ２のプラスミドマップを示す。
図６  配列番号：３６の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：３３のヌクレオチド配列を有する軽鎖を含む発現ベクターＬＣＶＬ１ＳＰ２０のプラスミドマップを示す。
図７  配列番号：３９の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１３のヌクレオチド配列を有する軽鎖を含む発現ベクターＬＣＶＬ２ＳＰ２０のプラスミドマップを示す。
図８  配列番号：３７の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：３４のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＶＨＥＮ７３Ｄ  Ｓｐ２０のプラスミドマップを示す。
図９  配列番号：３８の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：３５のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＶＨＱＮ７３Ｄ  Ｓｐ２０のプラスミドマップを示す。
図１０  配列番号：４０の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１１のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＶＨＥＳｐ２０のプラスミドマップを示す。
図１１  配列番号：４１の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１２のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＶＨＱＳｐ２０のプラスミドマップを示す。
図１２  ＶＨＥ／ｈｕｍＶ１、ＶＨＥ／ｈｕｍＶ２、ＶＨＱ／ｈｕｍＶ１およびＶＨＱ／ｈｕｍＶ２、ならびにＶＨＥ−Ｎ７３Ｄ／ｈｕｍＶ１と一緒のＶＨＥ／ｈｕｍＶ１のサイズ排除クロマトグラフィー分析を示す。
図１３  ＶＨＥ／ｈｕｍＶ２、ＶＨＥ／ｈｕｍＶ１、ＶＨＱ／ｈｕｍＶ２およびＶＨＱ／ｈｕｍＶ１、ならびにＶＨＥ−Ｎ７３Ｄ／ｈｕｍＶ１と一緒のＶＨＥ／ｈｕｍＶ２の陽イオン交換クロマトグラフィーを示す。
図１４  ＶＨＥ／ｈｕｍＶ２およびＶＨＥ−Ｎ７３Ｄ／ｈｕｍＶ１の逆相クロマトグラフィーを示す。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２０９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２０９】
【図１】「候補ｍＡｂ」による１次ＭＬＲの阻害は０.００１から１０μｇ／ｍｌの範囲で用量依存的であることを示している。「濃度」は「候補ｍＡｂ」の濃度である。
【図２】配列番号：１５の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１２（３９２１−４２７４）のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＭＶ−Ｇ１  ＨｕＡ６−ＶＨＱのプラスミドマップを示す。
【図３】配列番号：１６の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１１（３９２１−４２７４）のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＭＶ−Ｇ１  ＨｕＡ６−ＶＨＥのプラスミドマップを示す。
【図４】配列番号：１７の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１４（３９６４−４２８４）のヌクレオチド配列を有する軽鎖を含む発現ベクターＨＣＭＶ−Ｋ  ＨｕＡｂ−ＶＬ１ｈｕｍＶ１のプラスミドマップを示す。
【図５】配列番号：１８の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１３（３９２１−４２７４）のヌクレオチド配列を有する軽鎖を含む発現ベクターＨＣＭＶ−Ｋ  ＨｕＡｂ−ＶＬ１ｈｕｍＶ２のプラスミドマップを示す。
【図６】配列番号：３６の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：３３のヌクレオチド配列を有する軽鎖を含む発現ベクターＬＣＶＬ１ＳＰ２０のプラスミドマップを示す。
【図７】配列番号：３９の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１３のヌクレオチド配列を有する軽鎖を含む発現ベクターＬＣＶＬ２ＳＰ２０のプラスミドマップを示す。
【図８】配列番号：３７の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：３４のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＶＨＥＮ７３Ｄ  Ｓｐ２０のプラスミドマップを示す。
【図９】配列番号：３８の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：３５のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＶＨＱＮ７３Ｄ  Ｓｐ２０のプラスミドマップを示す。
【図１０】配列番号：４０の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１１のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＶＨＥＳｐ２０のプラスミドマップを示す。
【図１１】配列番号：４１の完全発現ベクターヌクレオチド配列において配列番号：１２のヌクレオチド配列を有する重鎖を含む発現ベクターＨＣＶＨＱＳｐ２０のプラスミドマップを示す。
【図１２】ＶＨＥ／ｈｕｍＶ１、ＶＨＥ／ｈｕｍＶ２、ＶＨＱ／ｈｕｍＶ１およびＶＨＱ／ｈｕｍＶ２、ならびにＶＨＥ−Ｎ７３Ｄ／ｈｕｍＶ１と一緒のＶＨＥ／ｈｕｍＶ１のサイズ排除クロマトグラフィー分析を示す。
【図１３】ＶＨＥ／ｈｕｍＶ２、ＶＨＥ／ｈｕｍＶ１、ＶＨＱ／ｈｕｍＶ２およびＶＨＱ／ｈｕｍＶ１、ならびにＶＨＥ−Ｎ７３Ｄ／ｈｕｍＶ１と一緒のＶＨＥ／ｈｕｍＶ２の陽イオン交換クロマトグラフィーを示す。
【図１４】ＶＨＥ／ｈｕｍＶ２およびＶＨＥ−Ｎ７３Ｄ／ｈｕｍＶ１の逆相クロマトグラフィーを示す。