(57)【要約】【課題】本発明は、オピオイドレセプター傷害抑制剤に関し、特にオピオイドレセプターの傷害により生じる皮膚機能の低下に対して有効な防止、改善効果を有するオピオイドレセプター傷害抑制剤を提供することを目的とする。【解決手段】マンネンタケ属に属するキノコの抽出物を含有させることで、外部刺激によるオピオイドレセプターの損傷の防止に有効なオピオイドレセプター傷害抑制剤およびそれを含有する化粧品、医薬部外品及び医薬品に関する。【効果】本発明のオピオイドレセプター傷害抑制剤及びそれを含む皮膚外用剤は、紫外線などの外部刺激を介して促進されるオピオイドレセプターの損傷に対して、抑制作用を有する。詳しくは、オピオイドレセプターの損傷により誘導される皮膚バリア機能の低下を改善し、皮膚の乾燥防止、肌荒れの改善、角質肥厚に伴うくすみなどの改善に有効なオピオイドレセプター傷害抑制剤に関するものである。 【特許請求の範囲】
【請求項１】
マンネンタケ属に属するキノコの抽出物を含有することを特徴とするオピオイドレセプター傷害抑制剤。
【請求項２】
マンネンタケ属に属するキノコがマゴジャクシであるオピオイドレセプター傷害抑制剤。
【請求項３】
マンネンタケ属に属するキノコの抽出物を含有することを特徴とする表皮角化細胞の分化促進剤。
【請求項４】
マンネンタケ属に属するキノコの抽出物を含有することを特徴とする皮膚バリア機能回復促進剤。
【請求項５】
請求項１あるいは２のオピオイドレセプター傷害抑制剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、オピオイドレセプター傷害抑制剤に関し、特にオピオイドレセプターの傷害により生じる皮膚機能の低下に対して有効な防止、改善効果を有するオピオイドレセプター傷害抑制剤を提供することを目的とする。詳しくは、マンネンタケ属に属するキノコの抽出物を含有することで、紫外線や炎症などの外部刺激により促進される皮膚細胞のオピオイドレセプターの損傷に対して優れた抑制効果を有し、オピオイドレセプターの損傷により誘導される皮膚バリア機能の低下、皮膚の乾燥、肌荒れ、角質肥厚に伴うくすみなどの改善効果が期待されるオピオイドレセプター傷害抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
オピオイドレセプターは、β−エンドルフィンに代表される内因性のオピオイドペプチドと特異的に結合し、モルヒネ様鎮痛作用を示す受容体である。従来、神経細胞などの痛覚伝達経路に分布すると考えられてきたが、近年生体内に幅広く分布することが確認され、内因性オピオイドペプチドの広範な機能が示唆されている（非特許文献１）。皮膚においても、皮膚を構成する主要な細胞である表皮角化細胞および線維芽細胞にオピオイドレセプターの発現およびオピオイドペプチドの分泌が確認されており、その機能に関する研究が進められている。
【非特許文献１】今堀和友，生化学辞典  第３版，東京化学同人，２５３-２５４，１９９８.
【０００３】
オピオイドレセプターが皮膚細胞に与える影響としては、アゴニストであるβ−エンドルフィンと結合することで、表皮角化細胞の分化マーカーであるＣｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ１６（サイトケラチン１６）の産生が高まるという報告（非特許文献２）や、ケラチノサイトの遊走が刺激されるという報告（非特許文献３）がある。つまり、オピオイドレセプターは、β−エンドルフィンを介して、表皮の分化を促進する重要な作用を有すると考えられる。よって、オピオイドレセプターの障害を抑制または修復させることにより、皮膚バリア機能が正常化され、皮膚の乾燥防止、肌荒れの改善、角質肥厚に伴うくすみなどを特に効果的に改善させることが可能になった。
【非特許文献２】Ｂｉｇｌｉａｒｄｉ-Ｑｉ  Ｍ．，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，１１４： ５２７−５３２，２０００．
【非特許文献３】Ｂｉｇｌｉａｒｄｉ  ＰＬ，Ｊ．Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ，２２：１９１−１９９，２００２.
【０００４】
また、皮膚は、紫外線や熱、物理刺激、炎症などの刺激を常時受けている。これらの外部刺激により、オピオイドレセプターの損傷が起こり、β−エンドルフィンの皮膚細胞への作用が低下する恐れがある。つまり、β−エンドルフィンがあるにも関わらず、そのレセプターであるオピオイドレセプターの損傷により、β−エンドルフィンの皮膚細胞への作用が十分に現れず、表皮の分化が低下する等、皮膚機能の低下が起こる可能性が高いと考えられる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、外部刺激による皮膚細胞のオピオイドレセプター傷害を抑制し、その結果生じる皮膚機能の低下に対して有効な防止、改善効果を有するオピオイドレセプター傷害抑制剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
この様な事情により、本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、マンネンタケ属に属するキノコの抽出物が、皮膚細胞のオピオイドレセプター傷害に対して、優れた抑制効果を持つことを見出し、本発明を完成するに至った。
【発明の効果】
【０００７】
本発明のマンネンタケ属に属するキノコの抽出物及びそれを含有するオピオイドレセプター傷害抑制剤は、外部刺激により促進される皮膚細胞のオピオイドレセプターの損傷に対して抑制作用を有する。詳しくは、オピオイドレセプターの損傷により誘導される皮膚バリア機能の低下を改善し、皮膚の乾燥防止、肌荒れの改善、角質肥厚に伴うくすみなどの改善に有効なオピオイドレセプター傷害抑制剤に関するものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明に用いるマンネンタケは、マンネンタケ科、マンネンタケ属に属し、霊芝（赤霊芝、学名：Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）、黒霊芝（学名：Ｇ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ，Ｇ．ｓｉｎｅｎｓｅ，Ｇ．ａｔｒｕｍ）、紫霊芝（学名：Ｇ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ，Ｇ．ｓｉｎｅｎｓｅ）、マゴジャクシ（学名：Ｇ．ｎｅｏ−ｊａｐｏｎｉｃｕｍ）等が含まれる。本発明のマンネンタケの抽出物とは、例えば子実体や菌糸体等の抽出物が挙げられ、単独又は両者を混合して用いてもよい。また、マンネンタケの抽出物を併用してもよい。
【０００９】
以上マンネンタケ属に属するキノコのなかでも、マンネンタケやマゴジャクシが好ましい。
【００１０】
また、本発明で使用するマンネンタケ属に属するキノコの抽出物は、マンネンタケ属に属するキノコを抽出溶媒と共に浸漬または加熱した後、濾過し、必要ならば濃縮して得られる。抽出溶媒としては、例えば、水、低級１価アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール等）、炭化水素（ヘキサン、ペンタン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）、アセトニトリル等があげられる。これらの溶媒は単独で用いても２種以上を混合して用いてもよい。好ましくは、水あるいは水溶性溶媒（水と任意の割合で混合可能な溶媒。例えば、エタノール、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール等）のうち１種または２種以上の溶媒を用いるのがよい。抽出物はそのまま用いてもよいし、溶媒を一部、または全部留去して用いてもよい。
【００１１】
本発明のオピオイドレセプター傷害抑制剤には、上記マンネンタケ属に属するキノコの抽出物をそのまま使用しても良く、効果を損なわない範囲内で、通常の外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤等の成分を配合することもできる。
【００１２】
本発明に用いるオピオイドレセプター傷害抑制剤は、化粧品、医薬部外品及び医薬品のいずれにも用いることができ、その剤型としては、例えば、化粧水、クリーム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、パップ剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデーション、打粉、口紅、軟膏、シャンプー、リンス、トリートメント、トニック等が挙げられる。
【００１３】
本発明に用いるマンネンタケ属に属するキノコの抽出物の配合量は特に限定されないが、乾燥物として０．０００１〜７５重量％の範囲が好ましく、さらに好ましくは０．００１〜３０重量％である。０．０００１重量％以下では効果が低く、また７５重量％を超えても効果に大きな増強はみられにくく、効率的でない。また、添加の方法については、予め加えておいても製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【実施例１】
【００１４】
次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる抽出物の製造例、処方例及び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量は重量％を示す。
【００１５】
製造例１  マゴジャクシの熱水抽出物
マゴジャクシの乾燥物２０ｇに４００ｍＬの精製水を加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、不溶物を濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してマゴジャクシの熱水抽出物２．０ｇを得た。
【００１６】
製造例２  黒霊芝の熱水抽出物
黒霊芝の乾燥物２０ｇに４００ｍＬの精製水を加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、不溶物を濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して黒霊芝の熱水抽出物１．３ｇを得た。
【００１７】
製造例３  霊芝の熱水抽出物
霊芝の乾燥物２０ｇに４００ｍＬの精製水を加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、不溶物を濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して霊芝の熱水抽出物１．４ｇを得た。
【００１８】
製造例４  マゴジャクシのエタノール抽出物
マゴジャクシの乾燥物１００ｇに９００ｍＬのエタノールを加え、常温で７日間抽出した後、不溶物を濾過し、その濾液を濃縮乾固してマゴジャクシのエタノール抽出物１．５ｇを得た。
【００１９】
製造例５  黒霊芝のエタノール抽出物
黒例芝の乾燥物１００ｇに９００ｍＬのエタノールを加え、常温で７日間抽出した後、不溶物を濾過し、その濾液を濃縮乾固して黒霊芝のエタノール抽出物１．５ｇを得た。
【００２０】
製造例６  霊芝のエタノール抽出物
霊芝の乾燥物１００ｇに９００ｍＬのエタノールを加え、常温で７日間抽出した後、不溶物を濾過し、その濾液を濃縮乾固して霊芝のエタノール抽出物１．６ｇを得た。
【００２１】
製造例７  マゴジャクシの１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物
マゴジャクシの乾燥物１００ｇに１ｋｇの精製水及び１ｋｇの１，３−ブチレングリコールを加え、常温で７日間抽出した後、不溶物を濾過し、マゴジャクシの１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物１．９ｋｇを得た。
【００２２】
製造例８  黒霊芝の１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物
黒霊芝の乾燥物１００ｇに１ｋｇの精製水及び１ｋｇの１，３−ブチレングリコールを加え、常温で７日間抽出した後、不溶物を濾過し、黒霊芝の１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物１．９ｋｇを得た。
【００２３】
製造例９  霊芝の１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物
霊芝の乾燥物１００ｇに１ｋｇの精製水及び１ｋｇの１，３−ブチレングリコールを加え、常温で７日間抽出した後、不溶物を濾過し、霊芝の１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物１．９ｋｇを得た。
【実施例２】
【００２４】
次に、本発明に係る実施例の処方を示す。
【００２５】
処方例１  クリーム
処方                                                配合量（重量％）
１．マゴジャクシの熱水抽出物（製造例１）              ０．０５
２．スクワラン                                        ５．５
３．オリーブ油                                        ３．０
４．ステアリン酸                                      ２．０
５．ミツロウ                                          ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル                      ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）  ３．０
８．ベヘニルアルコール                                １．５
９．モノステアリン酸グリセリン                        ２．５
１０．香料                                              ０．１
１１．１，３−ブチレングリコール                        ８．５
１２．パラオキシ安息香酸エチル                          ０．０５
１３．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１４．精製水                                          ６８．１
［製造方法］成分２〜９を加熱して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００２６】
比較例１  従来のクリーム
実施例１において、マゴジャクシの熱水抽出物を精製水に置き換えたものを従来のクリームとした。
【００２７】
処方例２  化粧水
処方                                                配合量（重量％）
１．黒霊芝の熱水抽出物（製造例２）                    ０．０１
２．１，３−ブチレングリコール                        ８．０
３．グリセリン                                        ２．０
４．キサンタンガム                                    ０．０２
５．クエン酸                                          ０．０１
６．クエン酸ナトリウム                                ０．１
７．エタノール                                        ５．０
８．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）    ０．１
１０．香料                                              ０．１
１１．精製水                                          ８４．５６
［製造方法］成分１〜６及び１１と、成分７〜１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とする。
【００２８】
処方例３  乳液
処方                                                配合量（重量％）
１．霊芝の熱水抽出物（製造例３）                      ０．０５
２．スクワラン                                        ５．０
３．オリーブ油                                        ５．０
４．ホホバ油                                          ５．０
５．セタノール                                        １．５
６．モノステアリン酸グリセリン                        ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）  ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート        ２．０
９．香料                                              ０．１
１０．プロピレングリコール                              １．０
１１．グリセリン                                        ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１３．精製水                                          ７３．１５
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００２９】
処方例４  軟膏
処方                                                配合量（重量％）
１．マゴジャクシのエタノール抽出物（製造例４）        １．０
２．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．）  ２．０
３．モノステアリン酸グリセリン                      １０．０
４．流動パラフィン                                    ５．０
５．セタノール                                        ６．０
６．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
７．プロピレングリコール                            １０．０
８．精製水                                          ６５．９
［製造方法］成分２〜５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び６〜８を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００３０】
処方例５  ファンデーション
処方                                                配合量（重量％）
１．黒霊芝のエタノール抽出物（製造例５）              １．０
２．ステアリン酸                                      ２．４
３．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート      １．０
(２０Ｅ．Ｏ．)
４．ポリオキシエチレンセチルエーテル(２０Ｅ．Ｏ．)  ２．０
５．セタノール                                        １．０
６．液状ラノリン                                      ２．０
７．流動パラフィン                                    ３．０
８．ミリスチン酸イソプロピル                          ６．５
９．パラオキシ安息香酸ブチル                          ０．１
１０．カルボキシメチルセルロースナトリウム              ０．１
１１．ベントナイト                                      ０．５
１２．プロピレングリコール                              ４．０
１３．トリエタノールアミン                              １．１
１４．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１５．二酸化チタン                                      ８．０
１６．タルク                                            ４．０
１７．ベンガラ                                          １．０
１８．黄酸化鉄                                          ２．０
１９．香料                                              ０．１
２０．精製水                                          ６０．０
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分２０に成分１０をよく膨潤させ、続いて、成分１及び１１〜１４を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分１５〜１８を加え、ホモミキサーで撹拌し７５℃に保ち水相とする。この水相に油相をかき混ぜながら加え、冷却し、４５℃で成分１９を加え、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００３１】
処方例６  浴用剤
処方                                                配合量（重量％）
１．マゴジャクシの１，３−ブチレングリコール          ５．０
水溶液抽出物（製造例７）
２．炭酸水素ナトリウム                              ５０．０
３．黄色２０２号（１）                                ０．０５
４．香料                                              ０．２５
５．無水硫酸ナトリウム                              ４４．７
［製造方法］成分１〜５を均一に混合し製品とする。
【実施例３】
【００３２】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例をあげる。
【００３３】
実験例１  紫外線によるオピオイドレセプターの減少抑制試験
オピオイドレセプターの減少抑制効果を下記の条件にて測定した。
【００３４】
コンフルエントな状態のヒト表皮角化細胞に４０ｍＪ／ｃｍ２のＵＶＢを照射した。次に１０μｇ／ｍＬの試料を添加したＤＭＥＭ培地にてさらに２４時間培養した後、総タンパクの抽出を行った。このタンパク１０μｇをＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動に供した後、トランスファーメンブレン（ミリポア）にブロッティングした。ブロッティング終了後、1次抗体としてＭｕ  Ｏｐｉｏｉｄ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ（Ｎｅｕｒｏｍｉｃｓ）、２次抗体としてＡｎｔｉ−Ｒａｂｂｉｔ  ＩｇＧ  ＨＲＰ−Ｌｉｎｋｅｄ  ａｎｔｉｂｏｄｙ（アマシャム）、検出試薬としてＥＣＬウエスタンブロッティング検出試薬（アマシャム）を用いてオピオイドレセプタータンパクをバンドとして検出した。これらのバンドをデンシトメーターにて定量化した。ＵＶＢ未照射の細胞に対し、ＵＶＢを照射された細胞ではオピオイドレセプタータンパクの減少がみられる。このコントロールのオピオイドレセプタータンパク量の減少値（Ａ）に対する試料添加時のオピオイドレセプタータンパク量の減少値（Ｂ）から以下の計算式でオピオイドレセプターの減少抑制率を求めた。
オピオイドレセプターの減少抑制率（％）＝（１−Ｂ／Ａ）×１００
【００３５】
これらの試験結果を表１に示した。その結果、マンネンタケ属に属するキノコの抽出物には優れたオピオイドレセプターの減少抑制効果が認められた。
【００３６】
【表１】
2006001837.tif 000002
【００３７】
実験例２  使用試験
処方例１のクリーム及び比較例１の従来のクリームを用いて、肌荒れに悩む女性３０人（２０〜４５才）を対象に１ヶ月間の使用試験を行った。使用後、肌荒れ、皮膚の乾燥及び透明感の改善についてのアンケート調査を行って、皮膚性状の改善効果を判定した。アンケートの評価基準は、有効なものを「優」、やや有効なものを「良」、わずかに有効なものを「可」、無効なものを「不可」として評価した。
【００３８】
これらの結果を表２に示した。処方例１のオピオイドレセプター傷害抑制剤を含む皮膚外用剤は優れた皮膚性状の改善効果を示した。なお、試験期間中皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。
【００３９】
【表２】
2006001837.tif 000003
【００４０】
処方例２〜６の化粧水、乳液、軟膏、ファンデーションおよび浴用剤の使用試験を行ったところ、いずれも安全で優れた皮膚性状の改善効果を示した。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
本発明の活用例として、化粧品、医薬部外品及び医薬品のいずれにも用いることができる。その剤型としては、例えば、化粧水、クリーム、乳液などがあげられ、外用することにより、皮膚バリア機能の低下に由来する肌荒れ、皮膚の乾燥、くすみの防止等の改善効果が期待される。