【手続補正書】
【提出日】平成19年9月26日(2007.9.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ネズミモノクローナル抗体ＢＡＴ−１（ｍＢＡＴ−１）の少なくとも１つの相補性決定領域（ＣＤＲ）とアクセプターヒト免疫グロブリン由来のフレームワーク領域（ＦＲ）とを有するヒト化モノクローナル抗体であって、
前記ヒト化抗体が、ｍＢＡＴ−１モノクローナル抗体の抗腫瘍活性を保っており、ヒト対象において前記ネズミ抗体よりも免疫原性が低い、ヒト化モノクローナル抗体。
【請求項２】
前記ヒト化抗体が前記親ネズミＢＡＴ−１抗体よりも大きな抗腫瘍効果を誘発させる、請求項１に記載のヒト化モノクローナル抗体。
【請求項３】
前記ネズミモノクローナル抗体ＢＡＴ−１（ｍＢＡＴ−１）の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、
ａ．次式の軽鎖可変領域：
ＦＲＬ１−ＣＤＲＬ１ＦＲＬ２−ＣＤＲＬ２−ＦＲＬ３−ＣＤＲＬ３ＦＲＬ４
［式中、各ＦＲはそれぞれ独立にヒト抗体のフレームワーク領域であり、各ＣＤＲはｍＢＡＴ−１由来の相補性決定領域である］；及び
ｂ．次式の重鎖可変領域：
ＦＲＨ１−ＣＤＲＨ１−ＦＲＨ２−ＣＤＲＨ２−ＦＲＨ３−ＣＤＲＨ３−ＦＲＨ４
［式中、各ＦＲは個別にヒト抗体のフレームワーク領域であり、各ＣＤＲはｍＢＡＴ−１由来の相補性決定領域である］
を含む請求項１に記載のヒト化抗体。
【請求項４】
前記ネズミモノクローナル抗体ＢＡＴ−１（ｍＢＡＴ−１）の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む遺伝子改変したＦａｂ領域を有し、前記遺伝子改変した抗体が前記ｍＢＡＴ−１の生物活性を保っており、前記遺伝子改変したモノクローナル抗体が
（ｉ）ＣＤＲＨ１（配列番号１２）；ＣＤＲＨ２（配列番号１３）；ＣＤＲＨ３（配列番号１４）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、ＣＤＲＬ１（配列番号９）；ＣＤＲＬ２（配列番号１０）；ＣＤＲＬ３（配列番号１１）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；
（ｉｉ）ＣＤＲＨ１（配列番号１２）；ＣＤＲＨ２（配列番号１３）；ＣＤＲＨ３（配列番号１４）；ＣＤＲＬ１（配列番号９）；ＣＤＲＬ２（配列番号１０）；ＣＤＲＬ３（配列番号１１）の配列の全て又はその一部に約８０％を超える相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖可変領域；
（ｉｉｉ）１つ又は複数のアミノ酸残基が前記抗体の前記生物活性又は結合特異性に実質的に影響を与えずに付加、欠失、置換又は化学改変された（ｉ）又は（ｉｉ）の抗体
から選択されるアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体。
【請求項５】
前記フレームワーク領域（ＦＲ）がヒト抗体由来である、請求項４に記載のモノクローナル抗体。
【請求項６】
ネズミモノクローナル抗体ＢＡＴ−１（ｍＢＡＴ−１）の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、
ａ．次式の軽鎖可変領域：
ＦＲＬ１−ＣＤＲＬ１−ＦＲＬ２−ＣＤＲＬ２−ＦＲＬ３−ＣＤＲＬ３−ＦＲＬ４
［式中、各ＦＲはそれぞれ独立にヒト抗体のフレームワーク領域であり、各ＣＤＲは相補性決定領域であり、ＣＤＲＬ１のアミノ酸配列がＳＡＲＳＳＶＳＹＭＨ（配列番号９）であり、ＣＤＲＬ２のアミノ酸配列がＲＴＳＮＬＡＳ（配列番号１０）であり、ＣＤＲＬ３のアミノ酸配列がＱＱＲＳＳＦＰＬＴ（配列番号１１）である］；及び
ｂ．次式の重鎖可変領域：
ＦＲＨ１−ＣＤＲＨ１−ＦＲＨ２−ＣＤＲＨ２−ＦＲＨ３−ＣＤＲＨ３−ＦＲＨ４
［式中、各ＦＲは個別にヒト抗体のフレームワーク領域であり、各ＣＤＲは相補性決定領域であり、ＣＤＲＨ１のアミノ酸配列がＮＹＧＭＮ（配列番号１２）であり、ＣＤＲＨ２のアミノ酸配列がＷＩＮＴＤＳＧＥＳＴＹＡＥＥＦＫＧ（配列番号１３）であり、ＣＤＲＨ３のアミノ酸配列がＶＧＹＤＡＬＤＹ（配列番号１４）である］
を含む請求項３に記載のヒト化モノクローナル抗体。
【請求項７】
前記ヒト化抗体が、ネズミＢＡＴ−１モノクローナル抗体よりも大きな抗腫瘍効果を誘発させる、請求項６に記載のヒト化抗体。
【請求項８】
前記ヒト化抗体が、ネズミＢＡＴ−１モノクローナル抗体よりも大きな転移抑制効果を誘発させる、請求項６に記載のヒト化抗体。
【請求項９】
前記抗体が完全長抗体である請求項６に記載のヒト化抗体。
【請求項１０】
前記抗体がアイソタイプＩｇＧである請求項９に記載のヒト化抗体。
【請求項１１】
前記アイソタイプサブクラスがＩｇＧ１又はＩｇＧ４から選択される、請求項１０に記載のヒト化抗体。
【請求項１２】
前記重鎖可変領域のＦＲが、ヒトｈｓｉｇｈｖ１２９５抗体の重鎖可変領域のＦＲに由来する、請求項６に記載のヒト化抗体。
【請求項１３】
κ軽鎖可変領域のＦＲが、ヒトＴＥＬ９抗体のκ軽鎖可変領域のＦＲに基づく、請求項６に記載のヒト化抗体。
【請求項１４】
ヒトκ定常領域を有する請求項６に記載のヒト化抗体。
【請求項１５】
Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）、Ｆ（ａｂ’）２、単鎖抗体からなる群から選択される、請求項６に記載のヒト化抗体由来の抗体断片。
【請求項１６】
前記抗体が、さらに検出可能な標識で標識されているか、固相上に固定されているか、又は外来化合物に結合されている、請求項６に記載のヒト化抗体。
【請求項１７】
前記ヒト化モノクローナル抗体軽鎖可変領域がＢＡＴＲκＡ（配列番号１５）、ＢＡＴＲκＢ（配列番号１６）、ＢＡＴＲκＣ（配列番号１７）、ＢＡＴＲκＤ（配列番号１８）からなる群から選択され、前記重鎖可変領域がＢＡＴＲＨＡ（配列番号２０）、ＢＡＴＲＨＢ（配列番号２１）、ＢＡＴＲＨＣ（配列番号２２）、ＢＡＴＲＨＤ（配列番号２３）及びＢＡＴＲＨＥ（配列番号２４）からなる群から選択される、請求項６に記載のヒト化抗体。
【請求項１８】
前記ヒト化モノクローナル抗体可変領域がＢＡＴＲＨＡ／ＢＡＴＲκＡ（配列番号２０／配列番号１５）、ＢＡＴＲＨＢ／ＢＡＴＲκＡ（配列番号２１／配列番号１５）、ＢＡＴＲＨＢ／ＢＡＴＲκＢ（配列番号２１／配列番号１６）、ＢＡＴＲＨＣ／ＢＡＴＲκＢ（配列番号２２／配列番号１６）、ＢＡＴＲＨＢ／ＢＡＴＲκＤ（配列番号２１／配列番号１８）、及びＢＡＴＲＨＣ／ＢＡＴＲκＤ（配列番号２２／配列番号１８）からなる群から選択される、請求項６に記載のヒト化抗体。
【請求項１９】
ＣＤＲ移植を利用して組換えＤＮＡ技術によって作製した請求項６に記載の抗体。
【請求項２０】
請求項１から１９までのいずれかに記載のモノクローナル抗体又はその断片をコードしている単離したポリヌクレオチド構築体。
【請求項２１】
配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８からなる群から選択されるκ軽鎖可変領域をコードしている、請求項２０に記載の単離したポリヌクレオチド構築体。
【請求項２２】
配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９からなる群から選択される、請求項２１に記載の単離したポリヌクレオチド構築体。
【請求項２３】
配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４からなる群から選択される重鎖可変領域をコードしている、請求項２０に記載の単離したポリヌクレオチド構築体。
【請求項２４】
配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２からなる群から選択される、請求項２３に記載の単離したポリヌクレオチド構築体。
【請求項２５】
請求項２０から２４までに記載のいずれかのポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項２６】
前記抗体をコードしているポリヌクレオチドに発現可能に連結されたプロモーター、１つ又は複数の耐性遺伝子、コザック配列、複製起点、１つ又は複数の選択マーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、転写ターミネーター、シグナルペプチド、ゲノムヒトκ定常領域、ゲノムヒトＩｇＧ定常領域からなる群から選択される構成要素の少なくとも１つをコードしているポリヌクレオチド配列をさらに含む、請求項２５に記載のベクター。
【請求項２７】
前記ベクターがプラスミド又はウイルスである、請求項２６に記載のベクター。
【請求項２８】
ｐＫＮ１１０、ｐＧ１Ｄ２００、ｐＧ１ＫＤ２１０、ｐＵＣ又はｐＢＲ３２２を含む群から選択される、請求項２７に記載のベクター。
【請求項２９】
配列番号９３のポリヌクレオチド配列を含む請求項２５に記載のベクター。
【請求項３０】
請求項２３から２７までのいずれかに記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項３１】
抗体又はその断片を発現する能力を有する請求項３０に記載の宿主細胞。
【請求項３２】
前記細胞が真核細胞及び原核細胞から選択される、請求項３０に記載の宿主細胞。
【請求項３３】
ＣＨＯ、ＣＨＯｄｈｆｒ、ＮＳＯ、ＣＯＳ及びＣＯＳ７細胞からなる群から選択される、請求項３０に記載の宿主細胞。
【請求項３４】
請求項１から１９までのいずれかに記載の抗体又は抗体断片を活性成分として含む薬剤組成物。
【請求項３５】
生理的に許容される担体、希釈剤、又は安定剤をさらに含む、請求項３４に記載の薬剤組成物。
【請求項３６】
サイトカイン、ＩＬ−１（インターロイケン−１）、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＦＮ−α（インターフェロン−α）、細胞ワクチン、抗体、Ｔ細胞刺激抗体、及び抗腫瘍治療用抗体から選択される追加の治療剤をさらに含む、請求項３４に記載の薬剤組成物。
【請求項３７】
癌を処置するための、請求項３４から３６までのいずれかに記載の薬剤組成物。
【請求項３８】
前記癌が黒色腫、肺腫瘍、結腸直腸癌又は肝転移から選択される、請求項３７に記載の薬剤組成物。
【請求項３９】
（ｉ）前記抗体をコードしているポリヌクレオチド配列を含むベクターを用いて宿主細胞を形質移入させること、又はそれぞれが前記抗体の重鎖若しくは軽鎖領域をコードしているポリヌクレオチド配列を含む２つのベクターを用いて前記宿主細胞を同時形質移入させること；
（ｉｉ）前記抗体が発現されるように（ｉ）の宿主細胞を培養すること；及び
（ｉｉｉ）（ｉｉ）の宿主細胞培養物から前記抗体を回収すること
を含む、請求項１から１９までのいずれかに記載の抗体を産生させる方法。
【請求項４０】
ネズミモノクローナル抗体ＢＡＴ−１（ｍＢＡＴ−１）の少なくとも１つの相補性決定領域（ＣＤＲ）とアクセプターヒト免疫グロブリン由来のフレームワーク領域（ＦＲ）とを有するヒト化モノクローナル抗体を含む、ＣＤ４＋Ｔ細胞の増殖活性を誘導するための薬剤組成物。
【請求項４１】
ネズミモノクローナル抗体ＢＡＴ−１（ｍＢＡＴ−１）の少なくとも１つの相補性決定領域（ＣＤＲ）とアクセプターヒト免疫グロブリン由来のフレームワーク領域（ＦＲ）とを有するヒト化モノクローナル抗体を含む、ＣＤ４＋Ｔ細胞の細胞溶解活性を誘導するための薬剤組成物。
【請求項４２】
ネズミモノクローナル抗体ＢＡＴ−１（ｍＢＡＴ−１）の少なくとも１つの相補性決定領域（ＣＤＲ）とアクセプターヒト免疫グロブリン由来のフレームワーク領域（ＦＲ）とを有するヒト化モノクローナル抗体を含む、ＣＤ４＋Ｔ細胞の刺激活性を誘導するための薬剤組成物。
【請求項４３】
ネズミモノクローナル抗体ＢＡＴ−１（ｍＢＡＴ−１）の少なくとも１つの相補性決定領域（ＣＤＲ）とアクセプターヒト免疫グロブリン由来のフレームワーク領域（ＦＲ）とを有するヒト化モノクローナル抗体を含む、活性ＣＤ４＋細胞の生存率を増加させる（ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓｕｒｖｉｖａｌ）ための薬剤組成物。
【請求項４４】
ネズミモノクローナル抗体ＢＡＴ−１（ｍＢＡＴ−１）の少なくとも１つの相補性決定領域（ＣＤＲ）とアクセプターヒト免疫グロブリン由来のフレームワーク領域（ＦＲ）とを有するヒト化モノクローナル抗体に、ｅｘ  ｖｉｖｏで活性ＣＤ４＋細胞を接触させることを含む、活性ＣＤ４＋細胞の生存率を増加させる方法。
【請求項４５】
癌を治療するための、請求項４０から４３のいずれか１項に記載の薬剤組成物。
【請求項４６】
遺伝性又は後天性の免疫不全症を治療するための、請求項４０から４３のいずれか１項に記載の薬剤組成物。
【請求項４７】
ＨＩＶ感染の初期段階を治療するための、請求項４６に記載の薬剤組成物。
【請求項４８】
後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）を治療するための、請求項４６に記載の薬剤組成物。
【請求項４９】
全血の血球数において、ＣＤ４＋細胞の増加を示す患者を治療するための、請求項４６に記載の薬剤組成物。