(57)【要約】【課題】  血中ＬＤＬコレステロール及びリポプロテイン（ａ）の両方を低下させる薬剤の提供。【解決手段】  ジアシルグリセロール及び植物ステロール類を含有する血中ＬＤＬコレステロール及びリポプロテイン（ａ）低下剤。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジアシルグリセロール及び植物ステロール類を含有する血中ＬＤＬコレステロール及びリポプロテイン（ａ）低下剤。
【請求項２】
ジアシルグリセロール１５〜９９．９５質量％及び植物ステロール類０．０５〜２０質量％を含有するものである請求項１記載の血中ＬＤＬコレステロール及びリポプロテイン（ａ）低下剤。
【請求項３】
形態が油脂組成物である請求項１又は２記載の血中ＬＤＬコレステロール及びリポプロテイン（ａ）低下剤。
【請求項４】
閉経後の女性用である請求項１〜３記載の血中ＬＤＬコレステロール及びリポプロテイン（ａ）低下剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は動脈硬化症の危険因子として特に重要な低密度リポ蛋白質（ＬＤＬ）コレステロール及びリポプロテイン（ａ）（以下、Ｌｐ（ａ）と記載）の両方の低下剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
リポ蛋白質のうち、ＬＤＬはコレステロールを肝臓から末梢組織へ運搬する役割を有するが、ＬＤＬが過剰になると変性ＬＤＬが生成する。変性ＬＤＬがマクロファージに貧食されると、変性コレステロールを大量に蓄積した泡沫細胞へと分化する。やがて泡沫細胞は、血管内皮の下に潜り込み、コレステロールを蓄積し、血管平滑筋などの増殖を促進し、動脈硬化巣を形成すると考えられている。従って、血中ＬＤＬコレステロールは、悪玉コレステロールとも呼ばれるように、動脈硬化症の危険因子として重要である。
【０００３】
一方、Ｌｐ（ａ）は、ＬＤＬ粒子にアポリポ蛋白質（ａ）という糖蛋白がジスルフィド結合したものであるが、ＬＤＬよりもさらに動脈硬化を惹起することが知られ、Ｌｐ（ａ）の血中濃度の上昇は、心疾患や脳卒中のリスクを上げることが明らかとなっている。そのため、できるだけ血中のＬｐ（ａ）濃度は高くならないようにすることが望ましい。しかしながら、特に閉経を迎えた女性においては、体内の女性ホルモンが枯渇することにより、月経が停止し、ＬＤＬレセプターの数が減少して（ＬＤＬコレステロールの回収能力の低下）、ＬＤＬコレステロールの血中濃度が上昇するだけでなく、Ｌｐ（ａ）の血中濃度が１０〜２０％も上昇することが知られている。このような体内の急激な変化に伴い、心血管系疾患の罹患率が著しく増加する。したがって、閉経後の女性にとって、極めて危険度の高いリスクファクターであるＬＤＬコレステロールとＬｐ（ａ）の両方を管理していくことは、動脈硬化性疾患を予防していく上で、非常に大切となる。
一般に、コレステロールを低下させる薬剤（例えば、スタチン系の薬剤やイオン交換樹脂系の薬剤等）や食品（植物ステロールを含有する食品等）を使用すると、肝臓でのＬＤＬコレステロールの合成抑制、回収促進、吸収抑制により、ＬＤＬコレステロールの血中濃度を低下させることは可能であっても、Ｌｐ（ａ）の血中濃度を低下させることは困難であった。
【０００４】
ところでジアシルグリセロールは、体重増加抑制、血清トリグリセリド低下、体脂肪蓄積抑制、レムナント様リポ蛋白低下、ＨＤＬコレステロール上昇、小腸上皮における脂質代謝改善（特許文献１〜６）等の作用を有することが知られている。また、ジアシルグリセロールと植物ステロールを併用すると、血中コレステロールが低下（特許文献７）することが知られている。しかし、ＬＤＬコレステロールとＬｐ（ａ）に対する作用についての報告はない。
【特許文献１】特開平４−３００８２６号公報
【特許文献２】特開平４−３００８２５号公報
【特許文献３】特開平１０−１７６１８１号公報
【特許文献４】特開２００１−３０２５０９号公報
【特許文献５】特開２００１−６４１７０号公報
【特許文献６】特開２００２−３２２０５２号公報
【特許文献７】国際公開第９９／４８３７８号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、動脈硬化の危険因子であるＬＤＬコレステロールとＬｐ（ａ）の両方を同時に低下させることのできる薬剤の開発が望まれており、本発明はそのような薬剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
そこで本発明者は、血中ＬＤＬコレステロールとＬｐ（ａ）の両者が高い動脈硬化症ハイリスク者の集団を対象にして、ジアシルグリセロールと植物ステロール類を同時に摂取させたところ、ジアシルグリセロールのみを摂取させた場合に比べて顕著にＬＤＬコレステロールとＬｐ（ａ）の両者が低下することを初めて見出した。本発明におけるＬＤＬコレステロールとＬｐ（ａ）の両者の改善は、とりわけ閉経後の女性にとって永年望まれおり、極めて有用である。
【０００７】
すなわち、本発明はジアシルグリセロール及び植物ステロール類を含有する血中ＬＤＬコレステロール及びＬｐ（ａ）低下剤を提供するものである。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、動脈硬化症の危険因子として重要な血中ＬＤＬコレステロールとＬｐ（ａ）の両者を同時に低下させることができる。特に閉経後の女性のように、これらの２つの危険因子が同時に上昇しているヒトに極めて有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明では、ジアシルグリセロールと植物ステロール類とを組み合せて摂取すればよく、それぞれ別個の組成物として摂取してもよいが、ジアシルグリセロール及び植物ステロール類を含有する油脂組成物として摂取するのが好ましい。
【００１０】
本発明で使用するジアシルグリセロールの構成脂肪酸は、炭素数８〜２４、特に１６〜２２であることが好ましい。ジアシルグリセロールの全構成脂肪酸中、不飽和脂肪酸含量は、好ましくは８０〜１００質量％（以下単に％と記載する）、より好ましくは８５〜１００％、さらに好ましくは９０〜１００％、特に好ましくは９３〜１００％、最も好ましくは９４〜９８％である。
【００１１】
さらに、本発明の効果をより高めるという点から、（シス型不飽和脂肪酸量）／（トランス型不飽和脂肪酸量＋飽和脂肪酸量）は質量比で６以上が好ましく、より好ましくは９〜２５、さらに好ましくは９〜２０である。また、ジアシルグリセロール中のトランス型不飽和脂肪酸は、５％以下が特に好ましい。飽和脂肪酸含量は、１０％以下が好ましく、５％以下が特に好ましい。
【００１２】
ジアシルグリセロールを構成する脂肪酸のうち、オレイン酸の含有量は２０〜６５％、好ましくは２５〜６０％、特に３０〜５０％、殊更３０〜４５％であるのが外観、脂肪酸の摂取バランスの点で望ましい。
【００１３】
ジアシルグリセロールを構成する脂肪酸のうち、リノール酸の含有量は１５〜６５％、好ましくは２０〜６０％、特に３０〜５５％、殊更３５〜５０％であるのが、脂肪酸の摂取バランスの点で望ましい。さらに、酸化安定性、生理効果の点から、リノール酸／オレイン酸の含有重量比が０．０１〜２．０、好ましくは０．１〜１．８、特に０．３〜１．７であることが望ましい。
【００１４】
ジアシルグリセロールを構成する脂肪酸のうち、リノレン酸の含有量は１５％未満、好ましくは０〜１３％、さらに１〜１０％、特に２〜９％であるのが、脂肪酸の摂取バランス、酸化安定性の点で望ましい。リノレン酸には、異性体としてα−リノレン酸とγ−リノレン酸が知られているが、α−リノレン酸が好ましい。
【００１５】
ジアシルグリセロールには、１，３−ジアシルグリセロールと１，２−ジアシルグリセロール（２，３−ジアシルグリセロール）が存在する。１，３−ジアシルグリセロールと１，２−ジアシルグリセロールの質量比率は７：３であることがより好ましい。ジアシルグリセロール中の１，３−ジアシルグリセロールが、全ジアシルグリセロール中の５０％以上、さらに５５〜１００％、特に６０〜９０％であることが、本発明の効果を強化し、工業的生産性の点から好ましい。
【００１６】
本発明で使用するジアシルグリセロールは、例えば目的の構成脂肪酸を有する油脂とグリセリンとをエステル交換反応するか、あるいは目的の構成脂肪酸又はそのエステルとグリセリンとの混合物にリパーゼを作用させてエステル化反応を行うことにより製造される。反応中の異性化を防止する上で、リパーゼを用いたエステル化反応がより好ましい。また、リパーゼを用いたエステル化反応においても、反応終了後の精製段階における異性化を防止するため、精製手段も脂肪酸の異性化が生起しないような穏和な条件で行うのが好ましい。
【００１７】
ジアシルグリセロールは植物ステロール類及びトリグリセリド等も含有する油脂組成物として使用するのが好ましい。当該油脂組成物としては、効果の点からジアシルグリセロールを１５〜９９．９５％含むのが好ましく、より好ましくは３５〜９８．８５％、さらに好ましくは６０〜９４．８％、特に好ましくは７０〜９４．７％、殊更８０〜９４．５５％含有するのが好ましい。
【００１８】
当該油脂組成物中のトリグリセリド含量は、効果、風味、酸化安定性の点から０〜８４．９５％含むのが好ましく、より好ましくは１〜６４．８５％、さらに好ましくは５〜３９．８％、特に好ましくは５〜２９．７％、殊更５〜１９．５５％含有するのが好ましい。トリグリセリドの構成脂肪酸として、効果、風味、食感の点で炭素数１６〜２２の不飽和脂肪酸を好ましくは８０〜１００％、より好ましくは８５〜１００％、さらに９０〜１００％、特に９３〜１００％、最も好ましくは９４〜９８％含有するのがよい。また酸化安定性の点から、トリグリセリドの構成脂肪酸として、ω３系不飽和脂肪酸を好ましくは０〜４０％、さらに０〜３０％、特に０〜２０％、最も好ましくは０〜１５％含有するのがよい。
【００１９】
当該油脂組成物にはモノアシルグリセロールを含んでいてもよく、その含量は、風味、酸化安定性の点から０〜３０％であり、好ましくは０．１〜１０％、さらに好ましくは０．１〜５％、特に好ましくは０．１〜２％、最も好ましくは０．１〜１．５％であるのがよい。モノアシルグリセロールの構成脂肪酸は、製造上の観点から、ジアシルグリセロールと同じであることが好ましい。
【００２０】
当該油脂組成物に含まれる遊離脂肪酸（塩）は、風味、発煙防止、工業的生産性の点から、３．５％以下に低減されるのがよく、好ましくは０〜２％、さらに好ましくは０〜１％、特に好ましくは０〜０．５％、最も好ましくは０．０５〜０．２％とするのがよい。
本発明に使用される油脂組成物を構成する全脂肪酸中、炭素−炭素二重結合を４つ以上有する脂肪酸の含有量は、酸化安定性の点で０〜４０％、好ましくは０〜２０％、さらに０〜１０％、特に０〜１％であるのがよく、実質的に含まないのが最も好ましい。
【００２１】
また、本発明で使用される植物ステロール類としては、例えばα−シトステロール、β−シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール、α−シトスタノール、β−シトスタノール、スチグマスタノール、カンペスタノール、シクロアルテノール等のフリー体、及びこれらの脂肪酸エステル、フェルラ酸エステル、桂皮酸エステル等のエステル体が挙げられる。当該植物ステロールは、前記ジアシルグリセロールを含有する油脂組成物中に植物ステロール類を配合して用いるのが好ましい。当該油脂組成物中の植物ステロール類の含有量は、０．０５〜２０％であることが好ましく、より好ましくは０．０５〜７％、さらに好ましくは０．１〜５％、特に好ましくは０．２〜５％、殊更０．３〜４．７％であることが好ましい。
【００２２】
当該油脂組成物には酸化安定性を向上させるために、抗酸化剤を添加するのが好ましい。抗酸化剤としては、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、リン脂質、ポリフェノール、ターシャルブチルヒドロキノン（ＴＢＨＱ）等が挙げられ、２種以上を組み合わせて使用してもよい。上記の抗酸化剤は、油脂組成物１００質量部に対し０．００５〜０．２質量部、特に０．０４〜０．１質量部含有することが好ましい。
【００２３】
当該油脂組成物には、さらに結晶抑制剤を添加するのが好ましい。本発明で使用する結晶抑制剤としては、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル等のポリオール脂肪酸エステル等が挙げられる。これらは２種以上を組み合わせて使用してもよい。結晶抑制剤は、当該油脂組成物１００質量部に対し、０．０２〜０．５質量部、特に０．０５〜０．２質量部含有するのが好ましい。
【００２４】
本発明の医薬の投与形態としては、例えば散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、錠剤等の固形製剤、水剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等の経口投与剤が挙げられる。この経口投与剤は、それぞれ上記油脂組成物の他、経口投与剤の形態に応じて一般に用いられる、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、界面活性剤、アルコール類、水、水溶性高分子、甘味料、矯味剤、酸味料等のうちの１種又はそれ以上を添加して製造することができる。油脂組成物を使用する場合、経口投与用医薬品中のその含有量は、医薬品の用途及び形態によっても異なるが、一般に０．１〜１００％、さらに１〜８０％、特に２〜８０％が好ましい。
【００２５】
本発明において、ジアシルグリセロールと植物ステロール類を食品形態にして摂食する場合、ジアシルグリセロールと植物ステロール類を含有した油脂加工食品とすればよく、例えば特定の機能を発揮して健康増進を図る健康食品、機能性食品、特定保健用食品、病者用食品等とすることができる。具体的には、カプセル、錠剤、顆粒剤、パンやケーキ、クッキー、パイ、バー、ベーカリーミックス等のベーカリー食品類、フレンチドレッシング等のドレッシング類、マヨネーズ等の水中油型乳化食品、マーガリンやスプレッド等の油中水型乳化食品、クリーム類、チョコレートやポテトチップス、アイスクリーム、デザート等の菓子や、飲料、スープ、ソース、コーヒーホワイトナー、ホイップクリーム、焼き肉のタレ、ピーナツバター、フライングショートニング、ベーキングショートニング、加工肉製品、冷凍食品、粉末食品、ミールリプレイサー等の他、天ぷらやフライ、炒め物等に用いる調理油のような食品素材が挙げられる。かかる食品は、油脂組成物の他に、食品の種類に応じて一般に用いられる食品原料を添加し、製造することができる。このような食品中の油脂組成物の含有量は、食品の種類によっても異なるが、一般に０．１〜１００％、さらに１〜８０％、特に２〜８０％が好ましい。
【００２６】
以下、本発明のジアシルグリセロールと植物ステロール類を含有した油脂加工食品について説明する。本発明において、油脂加工食品とは、ジアシルグリセロール及び植物ステロールを含有する油脂組成物と、他の食品原料を配合し、加工した食品をいう。油脂加工食品に用いられる原料成分としては、下記のものがある。
【００２７】
（１）食用油脂
本発明に使用する食用油脂は、一般的な食用油脂であれば特に限定されない。例えば、天然の動植物油脂の他、それらにエステル交換、水素添加、分別等を施した加工油脂が挙げられる。好ましくは、大豆油、菜種油、綿実油、米糠油、コーン油、ヒマワリ油、パーム油、パーム核油、ヤシ油等の植物油及びそれらの加工油脂を用いるのがよい。
【００２８】
（２）乳化剤
一般的に食品に用いられる乳化剤であれば特に限定されない。例えば、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、レシチン及びその分解物、卵蛋白、大豆蛋白、乳蛋白及びこれらの蛋白質より分離もしくは加水分解により得られる各種蛋白質、ペプチド等が挙げられる。
【００２９】
（３）増粘剤
一般的に食品に用いられる増粘剤であれば特に限定されない。例えば、キサンタンガム、ジェランガム、グアーガム、カラギーナン、ペクチン、トラガントガム、各種デンプン等の多糖類、ゼラチン、卵白等の蛋白質が挙げられる。
【００３０】
（４）食塩、糖質、食酢、調味剤等の各種呈味料
（５）スパイス、フレーバー等の各種香味料
（６）各種着色料
（７）トコフェロール、天然抗酸化成分等の抗酸化剤
【００３１】
以下、本発明の好ましい処方例を示す。しかし、本発明の用途を限定するものではない。
【００３２】
ａ）酸性水中油型油脂加工食品
・油相／水相；２０／８０〜８０／２０（好ましくは３０／７０〜７０／３０）
・ジアシルグリセロールの量；油相中の油脂に対して１５％以上（好ましくは４０％以上、特に８０％以上）
・植物ステロール類の量；油相中の油脂に対して０．０５％以上
・乳化剤量；０．０５〜５％
・pH；２〜６
pHは、食酢、クエン酸等の有機酸又はその塩、レモン果汁等の酸味料で調整する。上記原料を用い、常法により、血中ＬＤＬコレステロール及びＬｐ（ａ）低下効果を有するドレッシング、マヨネーズ等の酸性水中油型油脂加工食品を調製することができる。
【００３３】
＜処方例＞  マヨネーズ
水相
食塩                                          ３．０質量部
砂糖                                          １．０
調味料（グルタミン酸ナトリウム）              ０．５
香辛料（マスタード粉末）                      ０．３
卵黄                                        １４
食酢（酸度１０％）                            ８
増粘剤                                        ０．５
水                                          ２２．７
油相
油脂組成物（後記ＤＡＧ又はＰＳ／ＤＡＧ）    ５０
【００３４】
ｂ）油中水型可塑性油脂加工食品
・水相／油相；１５／８５〜８５／１５（好ましくは２０／８０〜５０／５０）
・ジアシルグリセロールの量；油相中の油脂に対して１５％以上（好ましくは４０％以上、特に５０％以上）
・植物ステロール類の量；油相中の油脂に対して０．０５％以上
・油相中の油脂の融点；２０〜５０℃（好ましくは２０〜４０℃）
上記原料を用い、常法により、血中ＬＤＬコレステロール及びＬｐ（ａ）低下効果を有するマーガリン、スプレッド等の油中水型可塑性油脂加工食品を調製することができる。
【００３５】
＜処方例＞  スプレッド
油相
油脂＊                              ６９．３質量部
レシチン                              ０．１
モノアシルグリセロール                ０．５
フレーバー                            ０．１
水相
水                                  ２８．４
脱脂粉乳                              ０．３
食塩                                  １．３
＊油脂：油脂組成物（後記ＰＳ／ＤＡＧ）；７０％／部分硬化パーム油（ＩＶ＝４０）；３０％、融点３６℃
【００３６】
ｃ）ベーカリー食品
・油脂量；１０〜４０％
・ジアシルグリセロールの量；油相中の油脂に対して１５％以上（好ましくは４０％以上、特に５０％以上）
・植物ステロール類の量；油相中の油脂に対して０．０５％以上
・小麦粉；２０〜６５％
・糖質；５〜３０％
・全卵；０〜２０％
・食塩；０．１〜２％
・ベーキングパウダー；０〜１％
上記原料を用い、常法により、血中ＬＤＬコレステロール及びＬｐ（ａ）低下効果を有するショートブレッド（バー）、ブリオッシュ等のベーカリー食品を調製することができる。
【００３７】
＜処方例＞  ショートブレッド（バー）
小麦粉                                      ６０質量部
油脂組成物（後記ＰＳ／ＤＡＧ）              １０
砂糖                                        ２４．６
食塩                                          ０．４
全卵                                          ５
【００３８】
後記実施例に示すように血中ＬＤＬコレステロール及びＬｐ（ａ）濃度の高い、動脈硬化ハイリスク集団にジアシルグリセロール及び植物ステロール類を摂取させると、これら両者の濃度が有意に低下する。
【００３９】
本発明における該ジアシルグリセロールの摂取量は、大人１人当たり０．１〜２５ｇ、特に０．１〜２０ｇの範囲で１日に１〜数回に分けるのが好ましい。また、該植物ステロール類の摂取量は、大人１人当たり１００〜５００mg、特に２００〜４００mgの範囲で１日に１〜数回に分けることが好ましい。その摂取期間は１週間以上、好ましくは２週間以上、より好ましくは３週間以上、さらに１ヶ月以上、特に２ヶ月以上、最も好ましくは３ヶ月以上が望ましい。このように血中ＬＤＬコレステロール及びＬｐ（ａ）の高い対象者に長期間ジアシルグリセロールと植物ステロール類を摂取させるためには、トリグリセリドの一部又は全部に該ジアシルグリセロールと植物ステロール類を用いた食品を調製して摂取させるのが好ましい。
【実施例】
【００４０】
Ｉ）対象及び方法：
１．対象：
４５才以上の健常な閉経後女性を対象とした。
【００４１】
２．試験食用油：
本試験では、家庭で使用する調理油を（１）ジアシルグリセロール油（比較品。以下、ＤＡＧと記載）、（２）植物ステロール類（ＰＳ）を４％含有するジアシルグリセロール油（本発明品。以下、ＰＳ／ＤＡＧと記載）のいずれかにブラインドのもとに置き換え、試験期間中、これまでと同様に使用・摂取してもらった。各食用油の組成は、表１と表２に示した。
【００４２】
【表１】
2006062973.tif 000002
【００４３】
【表２】
2006062973.tif 000003
【００４４】
３．方法：
４５才以上のコレステロール値が高めの閉経後女性（ｎ＝１４、年齢４５〜６２才）に対して、４週間のダブルブラインドの無作為クロスオーバー比較試験を実施した。
試験期間中、被験者は家庭で使用する調理油を２種の試験油、（１）ＤＡＧ、又は（２）ＰＳ／ＤＡＧのいずれかにブラインドにて置き換え摂取し、１日あたりの目標摂取量を１０ｇとした。試験期間中の食事は、試験前と変わらぬよう指示をし、その間の血清脂質を測定した。採血は、４週おきに同一日の午前の空腹時に行い、同じ日に身体計測も行った。
【００４５】
４．統計解析：
統計的な有意差は、paired t-testを用い、危険率５％以下の場合に有意差ありと判定した。
【００４６】
５．血清検査：
血清脂質及び生化学の血液検査を実施した。なお、採取した血液は冷蔵下（５℃）で速やかに１５分間の遠心処理（１，５００×ｇ）を行い、血清及び血漿を得た。検査項目の分析は、(株)ＳＲＬに依頼して行った。
【００４７】
II）結果：
血液検査の結果、ＰＳ／ＤＡＧ摂取期間にのみ、総コレステロール、ＬＤＬコレステロール、Ｌｐ（ａ）の有意な低下効果が認められ、ＤＡＧと比較しても有意な差が認められた（表３）。また、ＰＳ／ＤＡＧ摂取期間中のＬｐ（ａ）の変化量は初期のＬｐ（ａ）値と強い負の相関が認められ（ｐ＜０．００１）、初期のＬｐ（ａ）の値の大きい被験者ほどＬｐ（ａ）の低下割合が大きかった（図１）。
【００４８】
【表３】
2006062973.tif 000004
【００４９】
上記のことから、ＬＤＬコレステロール及びＬｐ（ａ）値の高いヒト、例えば閉経後女性に、ジアシルグリセロールと植物ステロール類を投与すれば、コレステロールならびにＬｐ（ａ）が改善されることがわかる。
【図面の簡単な説明】
【００５０】
【図１】ＰＳ／ＤＡＧ摂取によりＬｐ（ａ）の変化を示す図である。
【図１】
2006062973.tif 000005