(57)【要約】【課題】高い抗腫瘍作用及び免疫活性作用を有する飲食品及び医薬品を提供することにある。【解決手段】  抗腫瘍性飲食品は、メマツタケの抽出物と、マンネンタケの抽出物と、梅肉の抽出物とを含有する。抗腫瘍剤は、ヒメマツタケの抽出物と、マンネンタケの抽出物と、梅肉の抽出物とを有効成分として含有する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒメマツタケの抽出物と、マンネンタケの抽出物と、梅肉の抽出物とを含有することを特徴とする抗腫瘍性飲食品。
【請求項２】
ヒメマツタケの抽出物は、ヒメマツタケの子実体、ヒメマツタケの子実体の細胞壁破壊品、ヒメマツタケ培養菌糸体及びヒメマツタケ培養菌糸体の細胞壁破壊品からなる群から選択される少なくとも１種を熱水で抽出したものである請求項１に記載の抗腫瘍性飲食品。
【請求項３】
マンネンタケの抽出物は、梅の木で栽培されたマンネンタケの子実体又は前記マンネンタケの子実体の細胞壁破壊品を熱水で抽出したものである請求項１に記載の抗腫瘍性飲食品。
【請求項４】
梅肉の抽出物は、梅の果肉を加温抽出したもの又は前記梅の果肉の加温抽出物を有機溶媒でさらに抽出したものである請求項１に記載の抗腫瘍性飲食品。
【請求項５】
ヒメマツタケの抽出物と、マンネンタケの抽出物と、梅肉の抽出物とを有効成分として含有することを特徴とする抗腫瘍剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒメマツタケ、マンネンタケ及び梅肉の抽出物を含有する抗腫瘍性飲食品及び抗腫瘍剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代人の病気の中で、癌は、大きなウエイトを占め、これを克服するための研究が数多くなされている。発明者らも、きのこ類や梅の果実の抗腫瘍作用について、これまでに次のような発表を行なっている。
ヒメマツタケは、学名を「アガリクス・ブラゼイ・ムリル」といい、その抽出物は、担腫瘍状態下においてマクロファージ活性化作用を有し、抗腫瘍効果を有する（非特許文献１）。
マンネンタケは、ヒダナシタケ目サルノコシカケ科に属する担子菌の一種であり、その子実体が霊芝と称されることから、梅の老木で人工栽培されたマンネンタケの子実体を特に古梅霊芝(株式会社梅丹本舗の登録商標)と称し、この抽出物に含まれる蛋白多糖体は抗腫瘍効果を有する（非特許文献２）。
梅の果肉つまり梅肉を加温した煮汁から抽出したものは、一般的に、梅肉エキスと称され、梅肉エキスは、担腫瘍状況下において、免疫機能を亢進し、抗腫瘍効果を有する（非特許文献３）。
【０００３】
【非特許文献１】伊藤均, Biotherapy, 第14巻, 第10号, 2000年10月, 1009-1015頁。
【非特許文献２】Ito, H., Naruse, S. & Shimura, K.; Antitumor effect of the polysaccharide preparations from Ganoderma lucidum on mouse sarcoma 180. Mie Med J, 1977, vol.26, 147-152頁。
【非特許文献３】松本紘斉, 伊藤浩子, 伊藤均, 医学と生物学, 第142巻, 第2号, 2001年2月10日, 27-30頁。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
最近の高寿命化が進む中で、健康維持機能を有する飲食品等に対する機能向上の要請は高まるばかりで、ヒメマツタケ、マンネンタケ及び梅肉の各抽出物についても、抗腫瘍効果のさらなる向上が期待されている。
発明者らは、ヒメマツタケ、マンネンタケ及び梅肉の各抽出物について鋭意研究を重ねた結果、これらを同時に飲食又は服用すると、各々の抗腫瘍作用が複合的又は相乗的に機能し、より強力な抗腫瘍効果が発揮されることを見出した。
それゆえ、本発明の目的は、ヒメマツタケ、マンネンタケ及び梅肉の夫々の抽出物を単独で飲食又は服用した場合に比べて、さらにすぐれた抗腫瘍効果を発揮する飲食品及び製剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、ヒメマツタケの抽出物と、マンネンタケの抽出物と、梅肉の抽出物とを含有することを特徴とする抗腫瘍性飲食品を提供するものである。
本発明はまた、ヒメマツタケの抽出物と、マンネンタケの抽出物と、梅肉の抽出物とを有効成分として含有することを特徴とする抗腫瘍剤を提供するものである。
【発明の効果】
【０００６】
ヒメマツタケの抽出物、マンネンタケの抽出物及び梅肉の抽出物の３種物質を含む組成物を同時に飲食又は服用すると、前記３種物質の各々を、別々に飲食又は服用した場合と比べて、抗腫瘍効果が有意的に向上する。なお、マンネンタケは、梅の老木で栽培されたものが好ましい。
また、本発明の前記３種物質含有組成物を飲食又は服用すると、３種物質の各々を別々に飲食又は服用した場合と比べて、体内の重要な免疫細胞であるマクロファージの数に有意的な増加が認められ、さらには、個々のマクロファージがもつ貪食能についても有意的な向上が認められる。
このマクロファージの数の増加と貪食能の向上によって、体内における免疫賦活作用がより一層高められ、ひいては抗腫瘍効果が向上するものと考えられる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
＜ヒメマツタケの抽出物＞
ヒメマツタケの抽出物は、ヒメマツタケの子実体、ヒメマツタケの子実体の細胞壁破壊品、ヒメマツタケ培養菌糸体及びヒメマツタケ培養菌糸体の細胞壁破壊品からなる群から選択される少なくとも１種を熱水で抽出して得られる。
なお、ヒメマツタケの抗腫瘍作用に有効な成分の多くは子実体及び菌糸体に蓄積されているので、この有効成分を効果的に取り出すには、子実体及び菌糸体を直接熱水抽出するよりも、まず子実体及び菌糸体の細胞壁を破壊し、得られた細胞壁破壊品をそのまま、又は乾燥した後、熱水で抽出することが好ましい。
【０００８】
以下では、ヒメマツタケの子実体の細胞壁破壊品を熱水で抽出した例について説明する。
まず、ヒメマツタケの子実体の細胞壁破壊について説明する。
採取又は培養したヒメマツタケを約８０℃で焙煎し、殺菌、乾燥した後、アルピネ、ミル等を用いて粉砕し、２０〜１００メッシュの粉末を作る。なお、一旦凍結させた後粉砕すると、細かな粉末を容易に得ることができる。
得られた粉末に、水を加えて、ヒメマツタケの濃度が２０〜９０重量％の水性懸濁液を調製する。
【０００９】
この水性懸濁液を、直径約０.５〜１.０ｍｍの剛体メディア(例えば、ジルコン又はジルコニアビーズ)が８０〜８５容量％満たされたシリンダーの中に装入する。シリンダーは、約２０００〜３５００ｒｐｍで回転する羽根が配備されており、ヒメマツタケの水性懸濁液は剛体メディアと共に、回転羽根で回転・混和され、剛体メディアと回転羽根の摩砕作用によってヒメマツタケの子実体の細胞壁が破壊される。
なお、この際、同時に熱が発生し、これを放置すると、得られるヒメマツタケ粉末の品質が悪化するため、温度を５０℃以下に保つ必要がある。温度を５０℃以下に保つには、前記ヒメマツタケ水性懸濁液を前もって冷却しておくこともできるが、シリンダーの外部に冷却外套等の冷却手段を設けた装置を用いることが好ましい。冷却外套を備えた連続湿式微粉砕機として、好適には、ダイノ−ミル(DYNO-MILL, Willy A. BachofenAG Maschinenfabrik)が用いられる。
このようにして、約９０％以上の粉体が粒径３５０メッシュ以下の微細なヒメマツタケ粉末が得られる。
【００１０】
ヒメマツタケ粉末を、水分が約１０％程度になるまで乾燥した後、その倍量の熱水で、ヒメマツタケの有効成分を抽出する。その熱水抽出液を更に減圧濃縮し、液体クロマトグラフィーにより分画し、透析を行なった後、凍結乾燥して、本発明に係るヒメマツタケの抽出物が得られる。
【００１１】
なお、ヒメマツタケは特有の臭気を有するため、熱水抽出の前に、有機溶媒又は含水有機溶媒で抽出処理を行なうことが好ましい。有機溶媒として、メタノール、エタノール、エーテル等があり、含水有機溶媒として、一般に約３０％以下の範囲で水を含有する含水メタノール、含水エタノール等がある。
【００１２】
ヒメマツタケ抽出物の代表的化学的組成として、重量％にて、粗灰分６％、粗蛋白４０％、粗脂質４.５％、粗繊維６％、糖質４３.４％、エルゴステロール０.１％を示すことができる。
【００１３】
＜マンネンタケの抽出物＞
マンネンタケの抽出物は、好適には、梅の木、特に梅の老木(例えば、樹齢約１０年以上)で人工栽培されたマンネンタケの子実体又は前記マンネンタケの子実体の細胞壁破壊品を熱水で抽出して得られる。
マンネンタケの子実体は、抗腫瘍作用に有効な成分の多くが菌糸壁に蓄積されているから、この有効成分を効果的に取り出すには、ヒメマツタケの場合と同様、まずマンネンタケ子実体の細胞壁を破壊し、得られた細胞壁破壊品を乾燥した後、熱水で抽出することが好ましい。
【００１４】
以下では、マンネンタケの子実体の細胞壁破壊品を熱水で抽出した例について説明する。
まず、マンネンタケの子実体の細胞壁破壊について説明する。
採取したマンネンタケを約８０℃で焙煎し、殺菌、乾燥した後、ハンマークラッシャー、ミル等を用いて粉砕し、５０〜２００メッシュの粉末を作る。なお、一旦凍結させた後粉砕すると、細かな粉末を容易に得ることができる。
得られたマンネンタケ粉末に水を加えて、マンネンタケの濃度が１０〜２５％の懸濁液とする。
【００１５】
この水性懸濁液を、直径約０.５〜１.０ｍｍの剛体メディア(例えば、ジルコン又はジルコニアビーズ)が８０〜８５容量％満たされたシリンダーの中に装入する。シリンダーは、約２０００〜３５００ｒｐｍで回転する羽根が配備されており、マンネンタケの水性懸濁液は剛体メディアと共に、回転羽根で回転・混和され、剛体メディアと回転羽根の摩砕作用により、マンネンタケの子実体の細胞壁が破壊される。
なお、この際、同時に熱が発生し、これを放置すると、得られるマンネンタケ粉末の品質が悪化するため、温度を５０℃以下に保たなければならない。温度を５０℃以下に保つには、前記マンネンタケの水性懸濁液を前もって冷却しておくこともできるが、シリンダーの外部に冷却外套等の冷却手段を設けた装置を用いることが好ましい。冷却外套を備えた連続湿式微粉砕機として、好適には、ダイノ−ミル(DYNO-MILL, Willy A. BachofenAG Maschinenfabrik)が用いられる。
このようにして、約９０％以上の粉体が粒径３５０メッシュ以下のマンネンタケ粉末が得られる。
【００１６】
マンネンタケ粉末を水分が約１０％程度になるまで乾燥した後、その５倍量の熱水で、マンネンタケの有効成分を抽出する。その熱水抽出液を更に減圧濃縮し、液体クロマトグラフィーにより分画し、透析を行なった後、凍結乾燥して、本発明に係るマンネンタケの抽出物が得られる。
マンネンタケの代表的化学的組成として、例えば、重量％にて、粗灰分２％、粗蛋白７％、粗脂質５％、粗繊維５３％、可溶性炭水化物２０％、熱湯抽出物９％、水溶性全糖３.５％、エルゴステロール０.５％を示すことができる。
【００１７】
＜梅肉の抽出物＞
梅肉の抽出物は、梅の果肉を加温した煮汁から抽出することができ、株式会社梅丹本舗が販売する梅肉エキスを用いることができる。
代表的な梅肉抽出物１００ｇの分析試験結果として、灰分６.５ｇ、リン２００ｍｇ、鉄１２ｍｇ、カルシウム１３５ｍｇ、ナトリウム２２ｍｇ、カリウム３.５ｇ、マグネシウム１２５ｍｇ、マンガン３ｍｇ、クエン酸４２ｇ、リンゴ酸７ｇ、コハク酸０.１ｇ、フマル酸０.０６ｇ、酢酸０.０４ｇを示すことができる。
なお、梅肉抽出物は、好適には、この加温抽出物をさらに有機溶媒で抽出したものが用いられる。有機溶媒は、クロロホルム、メタノール、アルコール等の脂溶性のものが好ましい。加温抽出物を有機溶媒と共に遠心分離機に付し、上清を回収する。次に得られた上清をエバポレータを用いて減圧濃縮することにより、有効成分がさらに濃縮された梅肉抽出物が得られる。
【００１８】
＜抗腫瘍性飲食品及び抗腫瘍剤＞
本発明に係る抗腫瘍性飲食品は、ヒメマツタケの抽出物と、マンネンタケの抽出物と、梅肉の抽出物の３種物質を含有している。これら３種物質の配合割合は、重量比で、１：１〜５：１〜５とすることができる。
なお、前記３種物質は、そのまま飲食品として供することもできるが、糖類、酸類、塩類及び香料をさらに調合した飲食品として、また、様々な加工食品及び飲料の中に添加した飲食品として供することもできる。
また、本発明に係る抗腫瘍剤は、ヒメマツタケの抽出物と、マンネンタケの抽出物と、梅肉の抽出物の３種物質を有効成分として含有しており、常法に従って、例えば、担体、賦形剤、矯味剤、安定剤その他薬剤学的に許容される各種成分と共に製剤化される。
【実施例】
【００１９】
ヒメマツタケの抽出物
採取したヒメマツタケを８０℃で２時間焙煎し、水分が１０〜１２％になるまで乾燥し、これをアルピスを用いて５分間粉砕し、５メッシュの粉末を得る。これを更にボールミル(株式会社山本鉄工所製)で５分間粉砕し、５０メッシュのヒメマツタケ粉末を得た。このヒメマツタケ粉末に水を加えて、濃度１０％のヒメマツタケ・水性懸濁液を調製した。次に、ダイノ−ミルの中に、前記水性懸濁液を１５l/ｈｒにて装入し、回転・混和によって細胞壁を破壊した。ダイノ−ミルは、冷却外套が配備され、シリンダーには直径０.５〜１ｍｍのジルコンビーズが装填され、羽根の回転数は３２００ｒｐｍである。水性懸濁液の混和によって得られたスラリーを減圧低温乾燥機に付し、細胞壁が破壊されたヒメマツタケ粉末を得た。なお、得られたヒメマツタケ粉末の粒径は９０％以上が３５０メッシュ以下である。
【００２０】
得られたヒメマツタケ粉末に約１０倍量の精製水を加え、緩やかに撹拌しながら水浴上で２時間、熱水抽出した。同一操作を２回繰り返し、２回の熱水抽出液を合わせた後、減圧濃縮液とした。この減圧濃縮液に最終エタノール濃度が７０％になるまでエタノールを加え、遠心分離して、エタノール沈澱物を分離した。エタノール沈澱物をカラムクロマトグラフィーに供し、フェノール硫酸法により糖の発色が無くなるまで溶出して、溶出画分を分画した。溶出画分を透析した後、凍結乾燥し、ヒメマツタケの供試用熱水抽出物を得た。
【００２１】
マンネンタケの抽出物
採取したマンネンタケを８０℃で２時間焙煎し、水分が１０〜１２％になるまで乾燥し、これをハンマークラッシャー(相互産業株式会社製)で５分間粉砕し、５メッシュの粉末を得る。これを更にボールミルで５分間粉砕し、５０メッシュのマンネンタケ粉末を得た。このマンネンタケ粉末に水を加えて、マンネンタケの濃度が１０％の水性懸濁液を調製した。次に、ダイノ−ミルの中に、前記水性懸濁液を１５l/ｈｒにて装入し、回転・混和した。ダイノ−ミルは、冷却外套が配備され、シリンダーには直径０.５〜１ｍｍのジルコンビーズが装填され、羽根が３２００ｒｐｍで回転している。水性懸濁液の混和によって得られたスラリーを減圧低温乾燥機に付し、９０％以上が３５０メッシュ以下の粒径で、細胞壁が破壊されたマンネンタケ粉末を得た。
【００２２】
得られたマンネンタケ粉末に約１０倍量の精製水を加え、緩やかに撹拌しながら水浴上で２時間、熱水抽出した。同一操作を２回繰り返し、２回の熱水抽出液を合わせた後、減圧濃縮液とした。この減圧濃縮液に最終エタノール濃度が７０％になるまでエタノールを加え、遠心分離して、エタノール沈澱物を分離した。エタノール沈澱物をカラムクロマトグラフィーに供し、フェノール硫酸法により糖の発色が無くなるまで溶出して、溶出画分を分画した。溶出画分を透析した後、凍結乾燥し、マンネンタケの供試用熱水抽出物を得た。
【００２３】
梅肉の抽出物
市販の梅肉エキス(株式会社梅丹本舗)に、５０％クロロホルム・メタノール等量混合液を加えて、室温で５分間ホモジナイズした。次に、５０〜６０℃に温度を保ちながら、５時間撹拌した。得られた溶液を４℃で１０分間、遠心加速度９０００×Ｇの条件で遠心分離し、上清を回収した。回収された上清を５０℃で３０分間、エバポレータで減圧濃縮して、梅肉の供試用抽出物を得た。
【００２４】
＜抗腫瘍試験＞
試験方法は、伊藤均らが発表した文献(Anticancer Research 17巻、277-284頁、1997年)に基づいて実施した。
４週齢ｓｌｃ：ＩＣＲ系雌マウスを日本エスエルシー株式会社から購入し、クレア製固形飼料(ＣＥ−７)、水を自由摂取させ、ＳＰＦ(Specific Pathogen Free)環境下で飼育、実験をした。
１週間の予備飼育をした５週齢のｓｌｃ：ＩＣＲ系雌マウス１０匹を１群とした。これに、移植後７日目の同系マウスから７日目の同系マウスから採取したＳａｒｃｏｍａ１８０腫瘍細胞(５×１０6個)を皮下に移植し、２４時間経過後から、供試用組成物を、毎日、朝・夕２回、連日２０日間、胃ゾンデにて強制的に経口投与した。
投与した組成物は、No.１〜No.３が、ヒメマツタケ抽出物、マンネンタケ抽出物及び梅肉抽出物を１：１：１の重量比で含む本発明の実施例であり、１回当たりの投与量は、No.１が２４０ｍｇ／ｋｇ、No.２が４８０ｍｇ／ｋｇ、No.３が７２０ｍｇ／ｋｇである。
No.４〜No.６は比較例で、No.４はヒメマツタケ抽出物単独、No.５はマンネンタケ抽出物単独、No.６は梅肉抽出物単独の組成物であり、夫々、１回当たりの投与量は２４０ｍｇ／ｋｇである。
No.７は、どの抽出物も投与せず、生理食塩水のみを投与した対照群である。
【００２５】
移植２１日目に腫瘍の大きさ(ｃｍ3、４／３・π・ａ2・ｂ／２、但し、ａは短径、ｂは長径である)を測定し、対照群と比較して腫瘍抑制率(％)＝(１−Ｔ／Ｃ)×１００を算出した。なお、Ｔは検体投与群の腫瘍の大きさ、Ｃは対照群の腫瘍の大きさを表している。
また、移植２８日目における腫瘍完全消失率及びマウスの生存率を対照群と比較した。試験結果を表１に示す。
【００２６】
【表１】
2006298853.tif 000002
【００２７】
No.１、No.２、No.３の腫瘍移植２１日後の腫瘍抑制率は、夫々、４０.４％、６４.４％、８０.３％である。また、No.２とNo.３は、２８日後の腫瘍完全消失率は、夫々、４０％と６０％を示し、移植３５日後の生存率は、両方とも、１００％であり、顕著な抗腫瘍効果と用量依存性が認められた。
これに対し、比較例のNo.４(No.１の３倍量のヒメマツタケ)、No.５(No.１の３倍量のマンネンタケ)及びNo.６(No.１の３倍量の梅肉)は、腫瘍移植２１日後の腫瘍抑制率は、夫々、２８.２％、２１.１％及び１５.０％にすぎず、No.１の４０.４％よりも有意的に劣っている。また、移植３５日後の生存率も、No.１と比べて半分以下である。この結果は、とりもなおさず、本発明の組成物であるNo.１が、ヒメマツタケとマンネンタケと梅肉の各抽出物が複合的に作用を及ぼし合って、夫々の抗腫瘍作用の代数和以上の相乗的効果を有することを示すものである。
【００２８】
＜マクロファージによるポリスチレンラテックスビーズ貪食活性試験＞
試験方法は、伊藤均らが発表した文献(International Journal of Cancer Research and Treatment 15巻、1937-1948頁、1995年)に基づいて実施した。
５週齢のｓｌｃ：ＩＣＲ系雌マウス８匹を１群とした。これに、これらマウスに、供試組成物を、毎日、朝・夕２回、連日１４日間、胃ゾンデにて強制的に経口投与した。
投与した組成物は、No.１〜No.３が、ヒメマツタケ抽出物、マンネンタケ抽出物及び梅肉抽出物を１：１：１の重量比で含む本発明の実施例であり、１回当たりの投与量は、No.１が２４０ｍｇ／ｋｇ、No.２が４８０ｍｇ／ｋｇ、No.３が７２０ｍｇ／ｋｇである。
No.４〜No.６は比較例で、No.４はヒメマツタケ抽出物単独、No.５はマンネンタケ抽出物単独、No.６は梅肉抽出物単独の組成物であり、夫々、１回当たりの投与量は２４０ｍｇ／ｋｇである。
No.７は、どの抽出物も投与せず、生理食塩水のみを投与した対照群である。
【００２９】
最終投与後、マウスを放血させてから、Ｅａｇｌｅ'ｓ ＭＥＭ３ｍｌで腹腔マクロファージを洗い出し、１０6細胞／ｍｌに調製した。予め０.０１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００で洗い、ＰＢＳ(ｐＨ７.４リン酸緩衝液)でよく洗ったポリスチレンラテックス粒子(１.１μｍ、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ)を１細胞につき４００個の割合で加え、６０ｍｍＰｅｔｒｉディッシュに並べたカバースリップ上に注ぎ、３７℃、６％ＣＯ2インキュベータで２時間インキュベートした。さらにＰＢＳで３回洗い、固定は９５％エタノールで行なった。次に、カバースリップ上でギムザ染色を行ない、３００個の細胞中のラテックス粒子の貪食率を顕微鏡下で計測した。
試験結果を表２に示す。
【００３０】
【表２】
2006298853.tif 000003
【００３１】
No.１、No.２、No.３と、対照群のNo.７とを比較すると、貪食活性率は、夫々、３.１８倍、５.２７倍、７.９３倍であり、顕著な貪食能の上昇が認められた。
なお、この実験に用いられたラテックス粒子は、マクロファージの抗体の依存性は無いから、ラテックスビーズの貪食能の上昇は、マクロファージ自体の活性化を示している。このように、本発明の試験群は、生体の感染防御機構の機能上昇の点に関しても、有利に作用するものと考えられる。
これに対し、比較例のNo.４(No.１の３倍量のヒメマツタケ)、No.５(No.１の３倍量のマンネンタケ)及びNo.６(No.１の３倍量の梅肉)と、対照群のNo.７とを比較すると、貪食活性率は、夫々、１.６５倍、１.５７倍及び１.４７倍にすぎず、No.１の３.１８倍よりも有意的に劣っている。これは、とりもなおさず、本発明の組成物であるNo.１が、ヒメマツタケとマンネンタケと梅肉の各抽出物が複合的に作用を及ぼし合って、夫々がもつ貪食能の代数和以上の相乗的効果を有することを示すものである。
【００３２】
＜マクロファージの活性試験＞
１群１０匹のマウスを用いて、抗腫瘍試験と同一条件にて、マクロファージの活性試験を行なった。各検体の最終投与の２４時間後に、各マウスの腹腔マクロファージを採取し、腹腔マクロファージ数を測定し、マクロファージ活性に対する効果を調べた。
【００３３】
投与した組成物は、No.１〜No.３が、ヒメマツタケ抽出物、マンネンタケ抽出物及び梅肉抽出物を１：１：１の重量比で含む本発明の実施例であり、１回当たりの投与量は、No.１が２４０ｍｇ／ｋｇ、No.２が４８０ｍｇ／ｋｇ、No.３が７２０ｍｇ／ｋｇである。
No.４〜No.６は比較例で、No.４はヒメマツタケ抽出物単独、No.５はマンネンタケ抽出物単独、No.６は梅肉抽出物単独の組成物であり、夫々、１回当たりの投与量は２４０ｍｇ／ｋｇである。
No.７は正常マウスの対照群、No.８は担腫瘍マウスの対照群であり、どの抽出物も投与せず、生理食塩水のみを投与した。
【００３４】
【表３】
2006298853.tif 000004
【００３５】
表３の結果を参照すると、マクロファージ活性は、抗腫瘍効果の結果とよく相関しており、用量依存性が示された。
特に、No.３は、抗腫瘍マウス対照群と比較して、マクロファージ活性は４.９８倍と顕著な増加を示している。
これに対し、比較例のNo.４(No.１の３倍量のヒメマツタケ)、No.５(No.１の３倍量のマンネンタケ)及びNo.６(No.１の３倍量の梅肉)と、抗腫瘍マウス対照群のNo.８とを比較すると、マクロファージ活性は、夫々、１.８１倍、１.５３倍及び１.４９倍にすぎず、No.１の２.５３倍よりも有意的に劣っている。これは、とりもなおさず、本発明の組成物であるNo.１が、ヒメマツタケとマンネンタケと梅肉の各抽出物が複合的に作用を及ぼし合って、夫々のマクロファージ活性効果の代数和以上の相乗的効果を有することを示すものである。
【００３６】
前記試験例において記載した本発明の実施例に係る組成物(ヒメマツタケ抽出物、マンネンタケ抽出物、梅肉抽出物を１：１：１の重量比で含む)につき、経口投与による急性毒性試験を行なったが、マウスに対するＬＤ５０(半数致死量)は３０００ｍｇ／ｋｇ超であり、ラットに対するＬＤ５０は３５００ｍｇ／ｋｇ超であった。また、ラット、マウスに対する亜急性毒性試験結果及びウサギ(家兎)に対する一般薬理試験結果からも、本発明組成物は毒性に関する問題点を有しない。
【産業上の利用可能性】
【００３７】
ヒメマツタケ、マンネンタケ及び梅肉の夫々の抽出物は、副作用がなく、すぐれた抗腫瘍性飲食品及び抗腫瘍剤として、食品及び医薬品産業において好適に利用されることができる。
【手続補正書】
【提出日】平成17年5月10日(2005.5.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３４】
【表３】
2006298853.tif 000005
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
表３の結果を参照すると、マクロファージ活性は、抗腫瘍効果の結果とよく相関しており、用量依存性が示された。
特に、No.３は、担腫瘍マウス対照群と比較して、マクロファージ活性は４.９８倍と顕著な増加を示している。
これに対し、比較例のNo.４(No.１の３倍量のヒメマツタケ)、No.５(No.１の３倍量のマンネンタケ)及びNo.６(No.１の３倍量の梅肉)と、担腫瘍マウス対照群のNo.８とを比較すると、マクロファージ活性は、夫々、１.８１倍、１.５３倍及び１.４９倍にすぎず、No.１の２.５３倍よりも有意的に劣っている。これは、とりもなおさず、本発明の組成物であるNo.１が、ヒメマツタケとマンネンタケと梅肉の各抽出物が複合的に作用を及ぼし合って、夫々のマクロファージ活性効果の代数和以上の相乗的効果を有することを示すものである。