(57)【要約】【課題】  長期に服用しても、副作用などのおそれがない、優れた抗肥満作用を有する組成物を提供する。【解決手段】  アカシア属樹皮由来物を含有することを特徴とする、抗肥満組成物。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アカシア属樹皮由来物を含有することを特徴とする、抗肥満組成物。
【請求項２】
アカシア属樹皮由来物がアカシア属の樹皮の抽出物である、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
アカシア属樹皮由来物がアカシア樹皮ポリフェノールである、請求項１記載の組成物。
【請求項４】
食品である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
動物用飼料である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
医薬品である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
医薬部外品である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アカシア属（Acacia）に属する樹木に由来する抗肥満組成物ならびにこの抗肥満組成物を含有する食品、動物用飼料、医薬及び医薬部外品としての使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般に、肥満とは、脂肪組織が過剰に体に蓄積した状態をいい、健康診断等で用いられるBMI  （Body  Mass  Index（体格指数）、体重（ｋｇ）を身長（ｍ）の二乗で割ったもの）で、BMIが２２となる体重を標準体重といい、それより１割以上多い体重を過体重、２割以上多い体重を肥満という。そして、近年、食生活の欧米化、交通機関の発達による運動不足などのため、肥満やその予備軍が増加している。特に、肥満は、高血圧症、糖尿病、脂肪肝、動脈硬化症、脳梗塞、高脂血症、末梢血管障害、虚血性心疾患の発症との関連性が高く、これら疾患の発症の予防と治療の観点からも肥満の予防または解消が極めて重要となってきている。
【０００３】
肥満を予防又は解消するには、食事療法や運動療法などの生活習慣の改善が望ましいが、容易に行い得るものではない。また、肥満に対する治療としては、脂質吸収阻害剤、消化吸収阻害剤などの薬物療法もあるが、その使用は、重度の肥満症に限られている。
【０００４】
このような中で、多彩な作用を有し、長期に服用しても、副作用などのおそれの少ない天然物由来成分を用いた様々な物がダイエット食品などとして肥満の予防や解消のため販売されており、また、新たな抗肥満活性を有する物質の探索が行われている。
【０００５】
例えば、特許文献１は黄杷の葉又は樹皮の乾燥粉末、抽出物又は精製物がラットやヒトにおける体重減少効果を有することを開示している。また、特許文献２はポリフェノールの一種であるタンニンがα−アミラーゼ阻害効果を有し抗肥満効果を有すること開示している。
【０００６】
一方で、アカシアについては、アカシア蜂蜜やその樹皮から抽出されるタンニンが皮なめし剤や木材用接着剤として利用できることが知られており、また、最近はアカシア属の抽出物にＣＯＸ−２の選択的阻害効果（特許文献３）のあることやアカシア属の樹皮に活性酸素消去効果（特許文献４）やチロシナーゼ活性阻害効果による美白効果（特許文献５）のあることが開示されている。しかしながら、アカシア属の樹皮や樹皮由来のポリフェノールに抗肥満作用があることは知られていなかった。
【特許文献１】特許公開２００４−０９１４６４
【特許文献２】特許公開２００２−０５１７３５
【特許文献３】特許公表２００４−５３２８１１
【特許文献４】特許公開２００４−３５２６３９
【特許文献５】特許公開平１０−０２５２３８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、長期に服用しても、副作用などのおそれがない、優れた抗肥満作用を有する組成物を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決すべく、鋭意研究を重ねた結果、アカシア属樹皮由来物が、抗肥満作用を有し、肥満の予防、解消又は治療に有用であることを見出し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明は、アカシア属樹皮由来物を含有することを特徴とする、抗肥満組成物に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、抗肥満作用を有する組成物を得ることができる。
しかも、本発明によれば、安全で、長期に服用しても副作用などの心配の少ない組成物を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明で使用できるアカシア属樹皮由来物とは、アカシア属（Acacia）に属する樹木（以下、「アカシア」または「アカシア属」という）の樹皮を原料として得られるものであれば特に制限されず、例えば、アカシア属の樹皮の細片、粉末及びこれらの懸濁液、アカシア属の樹皮の抽出液、濃縮抽出液、及びエキス粉末などの抽出物ならびにこの抽出物を精製して得た精製物が挙げられる。優れた抗肥満活性を得られる上で、アカシア樹皮の抽出物、特にアカシア樹皮のポリフェノールが好ましい。
本発明では、これらアカシア属樹皮由来物を１種のみ使用してもよいし、２種以上併用してもよい。
【００１１】
本発明で使用できるアカシアは、アカシア属に属する樹木であれば特に制限されないが、優れた抗肥満作用があるアカシア属樹皮由来物が得られる点で、学名：Acacia mearnsii De Wild.（一般名ブラックワトル）、学名：Acacia mangium Willd.（一般名アカシアマンギュウム）、学名：Acacia dealbata Link.、学名：Acacia decurrens Willd.、及び学名：Acacia pycnantha Benth.からなる群より選ばれるアカシア属の樹皮が好ましく、特にAcacia mangium Willd.とAcacia mearnsii De Wild.が好ましい。
本発明では、これらアカシア属の樹皮を１種のみ使用してもよいし、２種以上併用してもよい。
【００１２】
上記アカシア属の樹皮は、通常、樹木として伐採したのち、樹皮だけ剥がして採取し乾燥することで得られるが、好ましくはさらに天日で乾燥させた樹皮が好ましい。
アカシア属の樹皮は、外皮とやや繊維質の内皮とからなり、含水率２０％程度以下に乾燥するとハンマーミルなどの粉砕機で容易に微粉化する。本発明では、アカシア属樹皮として、このアカシア属の内皮と外皮の両方を一緒に用いてもよいし、いずれか一方のみを用いてもよい。
【００１３】
前記アカシア属の樹皮の細片は、慣用の方法に従って、アカシア属の樹皮を適当な大きさに粉砕して得ることができる。
また、前記アカシア属の樹皮の粉末は、アカシア属の樹皮を慣用の方法で粉砕し粉末化して得ることができるが、特に、粒径が１００μｍ以下、特に５０〜７０μｍである粉末が好ましい。粉末の分画は、含水率２０％以下に乾燥した樹皮を適当な大きさ、例えば粒径１．６ｍｍ以下程度に粉砕し、得られた粉末を振動ふるい機などで分級して所要の粉末を得ることができる。
【００１４】
上記アカシア属の樹皮の抽出物は、アカシア属の樹皮を慣用の方法に従って抽出して得ることができる。優れた抗肥満作用を有するアカシア属の樹皮の抽出物を得るために、アカシア属の樹皮をアルコールや極性溶媒で抽出することが好ましい。
このようなアルコールとしてエタノールが、極性溶媒としては水などが使用でき、また必要に応じてそれら溶媒を単独あるいは２種以上を併用してもよい。特に、優れた抗肥満作用を得るために、水とエチルアルコールなどのアルコールとの混合溶媒が好ましい。
さらに、同一又は異なる溶媒によって複数回抽出操作を行ってもよい。
優れた抗肥満作用を有する抽出物を得る上で、アカシア属の樹皮からの水又は熱水による抽出物をさらにエタノールで抽出して得た抽出物を使用してもよい。
【００１５】
抽出は、アカシア属の樹皮の細片や粉末などに溶媒を加えて必要に応じて攪拌し抽出するが、温度や時間あるいは固液比については特に限定されない。溶媒に水を用いる場合には、熱水で抽出してもよい。得られた抽出液は、そのまま凍結乾燥あるいは噴霧乾燥してもよいし、あるいは減圧濃縮してから凍結乾燥又は噴霧乾燥してもよい。得られる抽出物は、抽出液、溶液、粉末、濃縮液、ペースト状物などの種々の形態とすることができ、広く必要に応じて使用できる。
さらに、これらの形態で得られた本発明のアカシア属の樹皮抽出物はそのまま抗肥満組成物として使用できるほか、さらに必要に応じて精製し、その精製物も抗肥満成分として使用することができる。
【００１６】
本発明では、アカシア属樹皮由来物として、アカシア属の樹皮に含有されている成分も例示される。このような成分として、アカシア樹皮ポリフェノールなどが例示される。特に、アカシア樹皮ポリフェノールは、優れた抗肥満作用を示すので好ましい成分である。
本発明のアカシア樹皮ポリフェノールとは、フラバン−3−オールを基本骨格とするフラバノール類の重合体である縮合型タンニンの一種を意味する。ここで、このような縮合型タンニンとして分子量５００〜３０００のものが好ましい。本発明で用いるアカシア樹皮ポリフェノールは、上記アカシア属の樹皮の粉末などを熱水抽出することにより得ることができる。
また、アカシア樹皮由来のポリフェノール製品としてはＭＩＭＯＳＡ  ＣｅｎｔｒａｌＣｏ−ｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｌｔｄ．製の登録商標  ＭＩＭＯＳＡ  ＭＥ  ＰＯＷＤＥＲ、ＭＩＭＯＳＡ  ＭＳ  ＰＯＷＤＥＲ、ＭＩＭＯＳＡ  ＧＳ  ＰＯＷＤＥＲ、ＭＩＭＯＳＡ  ＦＳ  ＰＯＷＤＥＲ、ＭＩＭＯＳＡ  ＷＳ  ＰＯＷＤＥＲ、ＭＩＭＯＳＡ  ＲＧ  ＰＯＷＤＥＲ、ＭＩＭＯＳＡ  ＲＮ  ＰＯＷＤＥＲ、ＭＩＭＯＳＡ  ＤＫ  ＰＯＷＤＥＲ、ＭＩＭＯＳＡ  ＡＬ  ＰＯＷＤＥＲ、ＭＩＭＯＳＡ  ＣＲ  ＰＯＷＤＥＲ、ＧＯＬＤＥＮ  ＭＩＭＯＳＡ  ＰＯＷＤＥＲなどが例示される。
【００１７】
本発明で用いる抗肥満作用とは、ある物質を体に摂取することで体重または体脂肪の量、重量もしくは濃度をその物質を摂取しない場合と比較して低減又は抑制させる作用を意味する。
本発明で用いる体脂肪には、脂肪が脂肪細胞の中に貯まって生じる皮下脂肪や内臓脂肪以外に、血液中に流れているコレステロールや中性脂肪（トリグリセライド）、リン脂質、遊離脂肪酸なども含む。
【００１８】
本発明の組成物は、アカシア属樹皮由来物、例えば、アカシア属の樹皮、その抽出物、その精製物、又はアカシア樹皮ポリフェノールその物であってもよいが、他の抗肥満作用を有する物質、例えば、オオバコに含まれるフラボノイドなどを含んでもよい。
【００１９】
本発明の組成物は、アカシア属の樹皮、その抽出物、その精製物、又はアカシア樹皮ポリフェノールその物であってもよいが、本発明の効果を損なわない限り、賦形剤、甘味料、酸味料、増粘剤、香料、色素、乳化剤及びその他に食品で一般に利用されている素材を含んでいてもよい。
【００２０】
本発明に係る組成物は、食品または動物用飼料として、肥満の予防、解消などの目的で健康食品、機能性食品、健康補助食品、特定保健用食品、美容食品及び栄養補助食品（サプリメント）として使用することができる。これら食品または動物用飼料は、例えば、お茶及びジュースなどの飲料水；アイスクリーム、ゼリー、あめ、チョコレート及びチューインガムなどの形態であってもよい。また、液剤、粉剤、粒剤、カプセル剤又は錠剤の形態であってもよい。ここで、動物用飼料の動物には、ペット動物、畜産動物または動物園等で飼育されている動物を含む肥満の予防、解消又は治療を必要とする全ての動物を含む。
【００２１】
また、本発明に係る組成物は、医薬または医薬部外品として、肥満の予防、解消又は治療などに使用することができる。これら医薬品または医薬部外品は、例えば、錠剤、コーティング錠、糖衣錠、硬若しくは軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳濁剤又は懸濁剤の形態で経口的に投与する。
【００２２】
本発明に係る組成物の摂取量は、特に制限されないが、剤型、ならびに使用者又は患者の年齢、体重及び症状に応じて適宜選択することができる。例えば、成人１日当たり有効成分量として、０．００５〜１．０ｇ、好ましくは０．００５〜０．５ｇ、より好ましくは０．００５〜０．１ｇのアカシア樹皮ポリフェノールを経口摂取することが、優れた抗肥満作用が得られるので、望ましい。
摂取期間は、使用者又は患者の年齢、症状に応じて任意に定めることができる。
【００２３】
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例】
【００２４】
以下、製造例、試験例、配合例を挙げて本発明を更に詳しく具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。特に、ここでは本発明のアカシア属の樹皮を外皮と内皮とに分けないで実施例を示しているが、外皮を内皮から分離してそれぞれ使用することもできる。
以下の製造例、試験例等において、本発明の各アカシアをそれぞれの学名の後の括弧内に示した番号で示す。例えば、学名：Ａｃａｃｉａ  ｍｅａｒｎｓｉｉ  Ｄｅ  Ｗｉｌｄ．のアカシアをアカシアＮｏ．１と記す。
学名：Ａｃａｃｉａ  ｍｅａｒｎｓｉｉ  Ｄｅ  Ｗｉｌｄ．（Ｎｏ．１）、学名：Ａｃａｃｉａ  ｍａｎｇｉｕｍ  Ｗｉｌｌｄ．（Ｎｏ．２）、学名：Ａｃａｃｉａ  ｄｅａｌｂａｔａ  Ｌｉｎｋ．（Ｎｏ．３）、学名：  Ａｃａｃｉａ  ｄｅｃｕｒｒｅｎｓ  Ｗｉｌｌｄ．（Ｎｏ．４）、学名：Ａｃａｃｉａ  ｐｙｃｎａｎｔｈａ  Ｂｅｎｔｈ．（Ｎｏ．５）。
【００２５】
アカシア樹皮粉末の製造例１
アカシアＮｏ．１の樹皮を含水率２０％以下まで乾燥し、その乾燥樹皮をハンマーミル（Ｒａｙｍｏｎｄ社製）で１．６ｍｍ以下（１０メッシュ篩（タイラー：Ｔｙｌｅｒ）通過）の粉末に粉砕した後、更に振動ふるい機で分級し、６３μｍ以下（２５０メッシュ篩下）の微粉末を得た。
同様にして、残り４種のアカシアＮｏ．２〜５の樹皮を粉砕してそれぞれ６３μｍ以下の微粉末を得た。種類によって２５０メッシュ篩通過の微粉末の収率に多少の差はあるが、目的とする微粉末が得られた。
【００２６】
アカシア樹皮抽出物の製造例２
本発明の各アカシアＮｏ．１〜５の樹皮をそれぞれ含水率２０％以下まで乾燥し、その乾燥樹皮をハンマーミルで１．６ｍｍ以下の粉末に粉砕した後、この乾燥粉砕樹皮１００ｇに対して５倍量の熱水を加え、沸騰してから１５分間抽出し、１０〜２０μｍのフィルターを用いて濾過した。得られた濾液をスプレードライヤで噴霧乾燥し、樹皮抽出物各４０ｇを得た。
以下、各樹皮抽出物はアカシアＮｏ．１〜５熱水抽出物と記す。
【００２７】
アカシア樹皮抽出物の製造例３
本発明のアカシアの樹皮を含水率２０％以下まで乾燥し、その乾燥樹皮をハンマーミルで１．６ｍｍ以下の粉末に粉砕した後、この乾燥粉砕樹皮１００ｇに対して５倍量のエタノールを加え、沸騰させて還流させながら１５分間抽出し、１０〜２０μｍのフィルターを用いて濾過した。得られた濾液からエタノールを蒸発させた後、濃縮液をクローズドスプレードライヤで噴霧乾燥し、樹皮抽出物（以下、アカシアＮｏ．１エタノール抽出物の如く記す）４０ｇを得た。
アカシアＮｏ．１〜５のエタノール抽出物を得た。
【００２８】
アカシア樹皮抽出物の製造例４
製造例２で得られたアカシア熱水抽出物１０ｇに３倍量のエタノールを加え、沸騰させて還流させながら１５分間抽出し、１０〜２０μｍのフィルターを用いて濾過した。得られた濾液からエタノールを蒸発させて、それに水を加えてから凍結乾燥させて９ｇの抽出物（以下、アカシアＮｏ．１熱水抽出物エタノール画分の如く記す）を得た。
アカシアＮｏ．１〜５の熱水抽出物エタノール画分を得た。
【００２９】
試験例１  ラット脂肪食負荷モデルを用いた抗肥満試験
ラット脂肪食負荷モデルにアカシア樹皮抽出物を混餌投与して、投与最終日翌日に採血を行い血中のトリグリセリド、総コレステロール、リン脂質、ケトン体、遊離脂肪酸及び腹腔内脂肪量を測定し、体脂肪に及ぼす影響を検討した。
【００３０】
１．被験物質：製造例２に記載のアカシアＮｏ．１熱水抽出物の粉末１ｋｇ、保存条件：暗所で室温保存
【００３１】
２．媒体の調製及び保存
１）媒体
（ａ）粉末飼料の名称：ＦＲ−２、ロット番号：４３９、販売元：株式会社船橋農場、性状又は剤型：粉末、保存条件：室温保存
（ｂ）脂肪食作成物質の名称：ラード、製造元：雪印乳業株式会社、性状又は剤型：固形、保存条件：室温保存
【００３２】
３．調製方法
１）２０％ラード混合飼料の調製及び保存
ラード：粉末飼料＝２０ｇ：８０ｇの割合で混合した。
必要量のラード及び粉末飼料を秤量し、ケンミックスミキサー（株式会社愛工製作所）に移し、充分に混合した。
調製は週１回の頻度で行い、調製後は容器に入れ室温保存した。
２）被験物質混合飼料の調製及び保存
被験物質：ラード：粉末飼料＝５ｇ：２０ｇ：７５ｇの割合で混合した。
必要量の被験物質、ラード及び粉末飼料を秤量し、ケンミックスミキサー（株式会社愛工製作所）に移し、充分に混合した。調製は週１回の頻度で行い、調製後は容器に入れ室温保存した。
３）残飯の処置
使用後の残飯は廃棄した。
【００３３】
４．試験系
１）動物種、系統及び性別：ラット、Ｓ１ｃ：ＳＤ、ＳＰＦ、雄
２）供給元：日本工スエルシー株式会社
３）週齢及び使用数
入荷時週齢：４週齢、使用数：１４匹、使用開始時週齢：５週齢、使用開始時の体重範囲：１２０〜１６４ｇ
４）検疫及び馴化期間
入荷後１週間の検疫・馴化期間を設けた。
検疫・馴化期間中に、一般状態を１日１回観察し、動物入荷の翌日及び検疫・馴化終了日に体重を測定した。
５）群分け方法
検疫・馴化終了目の体重を用い、コンピュータを用いた完全無作為抽出法により各群にランダムに割り当てた。
６）試験系の識別
（ａ）検疫・馴化期間
動物は油性インクにより識別した。ケージは、検疫・馴化期間、試験番号、入荷年月日、性別、ケージ番号、検疫番号を記載したケージカードにより識別した。
（ｂ）群分け後
動物は油性インクにより識別した。ケージは、試験番号、性別、投与量、ケージ番号、動物番号を記載した色別ケージカードにより識別した。
７）屠殺方法
動物はエーテル麻酔により安楽死させた。
【００３４】
５．動物管理
１）飼育環境
動物は温度２０〜２６℃、相対湿度４０〜７０％、換気回数１０〜２０回／時間、照明時間１２時間（７：００〜１９：００）に設定したクリーン飼育室で、ステンレス製ハンガーケージ（４３cmＤ×２７cmＤ×１５cmＨ）で飼育した。１ケージあたりの匹数は、検疫・馴化期間中は２〜３匹、群分け後は１匹とした。
２）飼料及び飲料水
飼料は、動物入荷日から投与開始時までは上記粉末飼料を自由に摂取させた。飲料水は上水道水を給水瓶により自由に摂取させた。
【００３５】
６．群構成、被験物質濃度及び投与方法
１）群構成及び被験物質濃度
【００３６】
【表１】
2006232782.tif 000002
【００３７】
以上、２群で１群７例での実験を行うため１４匹のラットを使用した。
２）投与方法
（ａ）投与経路
経口投与（混餌投与）
（ｂ）投与方法
粉末用給餌器に被験物質混合飼料を入れ、自由に摂取させた。被験物質混合飼料の交換は１回／週の頻度で行い、１回／週の頻度で被験物質混合飼料を追加した。対照群には、２０％ラード混合飼料を上記と同様に摂取させた。
（ｃ）被験物質摂取量の算出
各摂餌量測定のデータより投与期間を通した１個体の１週間当たりの摂餌量及び１日当たりの平均摂取量を算出した。
３）投与期間
５６日間（投与開始日を０目目と起算した）
【００３８】
７．観察及び検査項目
１）一般状態及び生死の観察
全例について投与期間中、一般状態及び生死の観察を１日１回以上行った。
２）体重測定
全例について投与開始日、以降の投与期間中は週１回及び剖検目に測定した。
３）摂餌量測定
全例について週２回、給餌量と残飯量を測定し、その差より１週間の摂餌量を求め、１日当たりの平均摂餌量を算出した。
４）摂水量測定
全例について週２回、給水量と残水量を測定し、その差より１週間の摂水量を求め、１日当たりの平均摂水量を算出した。
５）血液生化学的検査
全例について投与最終目から翌日まで絶食し、剖検時に腹大動脈から血液を採取した。採取した血液は４℃、１７００×ｇで１５分間遠心分離し、得た血清について、自動分析装置（７１７０形、日立計測エンジニアリング株式会社）により、トリグリセリド、総コレステロール、リン脂質、ケトン体及び遊離脂肪酸を測定した。
６）内臓脂肪重量測定
全例について投与最終日翌日に剖検を行い、腹腔内の内臓脂肪（内臓脂肪とは内臓の周囲につく脂肪）全てを摘出し、絶対重量を測定するとともに、相対重量（体重１００ｇ当たり）を算出した。
【００３９】
８．統計学的方法
測定値は平均値±標準誤差で表した。対照群との有意差検定は、Ｆ検定により分散に一様性が認められる場合にはＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定を、分散に一様性が認められない場合にはＡｓｐｉｎ  Ｗｅｌｃｈのｔ検定を行った。有意水準は５％及び１％で表示した。
【００４０】
９．試験成績
１）一般状態及び生死の観察：全例において死亡及び一般状態異常は認められなかった。
２）体重測定（表２）：対照群と比較して、アカシアＮｏ．１熱水抽出物投与群の投与１週目以降で、体重の減少が認められた。
３）摂餌量測定（表３）および被験物質摂取量測定（表４）：対照群と比較して、アカシアＮｏ．１熱水抽出物投与群の投与１週目を除き、平均摂餌量の差は認められなかった。アカシアＮｏ．１熱水抽出物投与群の投与１週目の摂餌量が少ないのは、マウスがアカシアＮｏ．１熱水抽出物添加の餌に慣れるのに時間を要したためと考えられる。
４）摂水量測定（表５）：対照群と比較して、有意な変化は認められなかった。
５）血液生化学的検査（表６）：対照群と比較して、アカシアＮｏ．１熱水抽出物投与群のトリグリセリド及びリン脂質に減少が認められた。
６）内臓脂肪重量測定（表６）：対照群と比較して、アカシアＮｏ．１熱水抽出物投与群の内臓脂肪の絶対重量及び相対重量に減少が認められた。
【００４１】
【表２】
2006232782.tif 000003
【００４２】
【表３】
2006232782.tif 000004
【００４３】
【表４】
2006232782.tif 000005
【００４４】
【表５】
2006232782.tif 000006
【００４５】
【表６】
2006232782.tif 000007
【００４６】
１０．考察
ラット脂肪食負荷モデルにアカシア樹皮抽出物を混餌投与して、投与最終日翌日に採血を行い血中のトリグリセリド、総コレステロール、リン脂質、ケトン体、遊離脂肪酸及び腹腔内の内臓脂肪量を測定した。対照群と比較して、アカシアＮｏ．１熱水抽出物投与群の腹腔内内臓脂肪の絶対重量及び相対重量（体重１００ｇ当たり）の減少が認められた。血液生化学検査においても、対照群と比較してアカシアＮｏ．１熱水抽出物投与群のトリグリセリド及びリン脂質の減少が認められた。対照群と比較して、アカシアＮｏ．１熱水抽出物投与群の投与１週目以降で、体重の減少が認められた。
平均摂餌量は投与１週目を除き対照群と比較して差は認められなかった。また、平均摂水量でも差は認められなかった。
平均摂餌量及び平均摂水量において差が認められなかったので、アカシアＮｏ．１熱水抽出物投与群で認められた腹腔内内臓脂肪、トリグリセリド、リン脂質および体重における対照群との差は、アカシアＮｏ．１熱水抽出物の投与によるものと考えられた。
以上の結果から、アカシア樹皮抽出物を投与することにより、体脂肪が有意に減少した。
【００４７】
試験例２  急性毒性試験（経口投与）
ＯＥＣＤ（Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ４０１、１９８７）に準拠し、マウスを用いた急性経口毒性試験を実施した。
ＩＣＲ系雌雄マウスについて、雄では７，０００ｍｇ／ｋｇ、雌では６，５００ｍｇ／ｋｇを上限として、公差５００ｍｇ／ｋｇで各９用量の検体（上記製造例２のアカシアＮｏ．１熱水抽出物）を雌雄マウスに単回経口投与した。検体は、製造例２のアカシアＮｏ．１熱水抽出物を純水に懸濁して用いた。その結果、ＬＤ５０値は雄では４，４６８ｍｇ／ｋｇ、雌では３，５９４ｍｇ／ｋｇであり、いずれも３，０００ｍｇ／ｋｇの投与量で、死亡例を認めなかった。
上記試験を製造例２のアカシアＮｏ．２〜５熱水抽出物について行って同様の結果を得た。これにより、本発明の組成物は、安全性に優れていることがわかった。
【００４８】
試験例３  突然変異誘起性試験
労働省告示第７７号（昭和６３年９月１日）に準拠し、突然変異誘起性試験を実施した。
Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＷＰ２  ｕｖｒＡ株及びＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ  ＴＡ株系４菌株を用いて代謝活性化を含む復帰突然変異試験を１５６〜５，０００μｇ／プレートの用量の検体（製造例２のアカシアＮｏ．１〜５熱水抽出物）で行った。その結果、いずれの菌株についても復帰変異コロニー数の増加が見られなかったことから、製造例２のアカシアＮｏ．１〜５熱水抽出物の突然変異誘起性は陰性であると結論づけられ、安全性に優れていることがわかった。
【００４９】
配合例１  内服剤の調製
製造例４のアカシア樹皮熱水抽出物エタノール画分を用い、下記に示す組成にて内服剤を調製した。
製造例４の抽出物画分        １．０（重量％）
乳糖                      ３０．０
コーンスターチ            ６０．０
結晶セルロース              ８．０
ポリビニールピロリドン      １．０        
計              １００．０
【００５０】
配合例２  ペットフードの調製
製造例２のアカシア樹皮熱水抽出物を用い、下記に示す組成にてペットフードを調製した。
製造例２の抽出物            １．０（重量％）
オートミール              ８８．０
でんぷん                    ５．０
食塩                        ２．５
全卵                        ３．０
調味料                      ０．５        
計              １００．０
【００５１】
配合例３  錠剤（菓子）の調製
製造例４のアカシア樹皮熱水抽出物エタノール画分を用い、下記に示す組成にて錠剤（菓子）を調製した。
製造例４の抽出物画分        １．０（重量％）
クエン酸                    １．０
脱脂粉乳                  １５．０
ショ糖エステル              １．０
フレーバー                  ０．５
粉糖                      ２０．０
乳糖                      ６１．５        
計              １００．０
【産業上の利用可能性】
【００５２】
本発明の抗肥満組成物は、肥満の予防、解消及び／又は治療に使用するための医薬品、あるいは健康食品、健康補助食品、特定保健用食品又は栄養補助食品などの食品として利用できると考えられた。さらに、高血圧症、糖尿病、脂肪肝、動脈硬化症、脳梗塞、高脂血症、末梢血管障害、虚血性心疾患の予防、治療に利用できると期待される。