(57)【要約】【課題】  従来の化粧料より効果的な化粧料原料及び化粧料組成物を提供することを課題とする。詳しくは、細胞賦活作用により皮膚細胞を活性化し、さらにコラーゲン産生促進作用により若々しい肌を取り戻し、抗酸化作用により皮膚の老化を予防するとともに、きめ細かなみずみずしい肌を作ることを実現する化粧料原料及び該化粧料原料を含有する化粧料組成物を提供することを課題とする。【解決手段】  大豆サポニンからなる細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤、並びに該細胞賦活剤、該コラーゲン産生促進剤及び／又は該抗酸化剤を含有する化粧料原料、並びに該化粧料原料を含有する化粧料組成物を提供する。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
大豆サポニンからなることを特徴とする細胞賦活剤。
【請求項２】
大豆サポニンからなることを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項３】
大豆サポニンからなることを特徴とする抗酸化剤。
【請求項４】
前記大豆サポニンが次式１（化１）で示されるソーヤサポゲノールＡ及び／又は次式２（化２）で示されるソーヤサポゲノールＢであることを特徴とする請求項１に記載の細胞賦活剤。
【化１】
2006213649.tif 000015
【化２】
2006213649.tif 000016
（但し、式中Ｒ１は、α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル基、又はα−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）−α−Ｌ−アラビノピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル基、或いはβ−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル基、Ｒ２は、水素原子又はＤ−グルコピラノシル基を示す。）
【請求項５】
前記大豆サポニンが次式３（化３）で示されるソーヤサポゲノールＡ及び／又は次式４（化４）で示されるソーヤサポゲノールＢであることを特徴とする請求項２に記載のコラーゲン産生促進剤。
【化３】
2006213649.tif 000017
【化４】
2006213649.tif 000018
【請求項６】
前記大豆サポニンが次式５（化５）で示されるソーヤサポゲノールＡ及び／又は次式６（化６）で示されるソーヤサポゲノールＢであることを特徴とする請求項３に記載の抗酸化剤。
【化５】
2006213649.tif 000019
【化６】
2006213649.tif 000020
【請求項７】
請求項１又は４に記載の細胞賦活剤、請求項２又は５に記載のコラーゲン産生促進剤、及び請求項３又は６に記載の抗酸化剤からなる群から選択される少なくとも１種を含有することを特徴とする化粧料原料。
【請求項８】
水及びアルコールが含有されることを特徴とする請求項７に記載の化粧料原料。
【請求項９】
前記アルコールがエタノール、１，３−ブチレングリコール及びグリセリンからなる群から選択される１種以上であることを特徴とする請求項８に記載の化粧料原料。
【請求項１０】
請求項１又は４に記載の細胞賦活剤、請求項２又は５に記載のコラーゲン産生促進剤、及び請求項３又は６に記載の抗酸化剤からなる群から選択される少なくとも１種、
水、
エタノール
及び１，３−ブチレングリコールからなることを特徴とする化粧料原料。
【請求項１１】
請求項１又は４に記載の細胞賦活剤、請求項２又は５に記載のコラーゲン産生促進剤、及び請求項３又は６に記載の抗酸化剤からなる群から選択される少なくとも１種が０．００１〜２０重量％、
水５〜６０重量％、
エタノール１５〜６０重量％及び
１，３−ブチレングリコール１５〜７５重量％の範囲で前記４種の物質の合計量が１００重量％となるように含有することを特徴とする化粧料原料。
【請求項１２】
請求項７乃至１１のいずれかに記載の化粧料原料が含有されることを特徴とする化粧料組成物。
【請求項１３】
皮膚の柔軟性若しくは弾力性を保つ効果を有することを特徴とする請求項１２記載の化粧料組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は大豆サポニンからなる細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤、並びに該細胞賦活剤に関する。さらに詳しくは、細胞賦活作用により皮膚細胞を活性化することが可能である細胞賦活剤、コラーゲン産生促進作用により若々しい肌を取り戻すことが可能であるコラーゲン産生促進剤、さらに、抗酸化作用により皮膚の老化を予防するとともに、きめ細かなみずみずしい肌を作ることが可能である抗酸化剤に関する。
また、本発明は、前記細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤を含有する化粧料原料及び該化粧料原料を含有する化粧料組成物に関する。詳しくは、上記細胞賦活効果、コラーゲン産生促進効果及び抗酸化効果により、皮膚細胞を活性化させ、若々しい肌を取り戻し、皮膚の老化を予防するとともに、きめ細かなみずみずしい肌を作ることが可能である化粧料原料及び該化粧料原料を含有する化粧料組成物に関する。
さらに、本発明の化粧料原料は液状であり、その有効成分である細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤が好適に分散されると同時に、化粧料組成物を構成する溶媒に優れた相溶性を有するために、前記有効成分の効果を最大限に、均等に発揮することが可能である化粧料原料及び該化粧料原料を含有する化粧料組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、皮膚の老化に関与する重大な要因として、活性酸素が挙げられる。紫外線や化学物質により、皮膚に活性酸素が発生し、皮膚を構成する脂質を酸化させて過酸化脂質をつくりだす。ここに紫外線を吸収したメラニン色素が集合すると、シミをつくる原因となってしまう。また、皮膚の弾力をつくるコラーゲンや線維組織のエラスチンなども、紫外線を浴びると酸化して変性するため、弾力が失われてシワができやすくなる。さらに、活性酸素はコラーゲンの合成に必要なビタミンCを減少させることが知られるようになってきた。
【０００３】
活性酸素には、スーパーオキサイド、ヒドロキシラジカル、過酸化水素および一重項酸素が含まれており、また、これらの金属や脂質との反応生成物も広義の活性酸素として知られている。今後、紫外線や化学物質にさらされる機会が増えるにつれ、ますます、皮膚を活性酸素のダメージから守るための抗酸化作用をもつ活性成分が配合された化粧料の誕生が期待されている。
【０００４】
さらに、コラーゲンの変性もまた皮膚の老化の原因の１つとして考えられる。皮膚の真皮には、繊維芽細胞および細胞の外にあるコラーゲンなどの細胞外マトリックスが存在している。シワ、くすみ、きめの消失、弾力性の低下等、皮膚の老化には細胞外マトリックスの減少が関与している。近年に至っては、この老化現象を防ぐために、コラーゲンを補給する方法が提案され、数々のコラーゲン配合化粧料が作り出されてきた（特許文献１参照）。
【０００５】
しかしながら、コラーゲン配合の化粧品が肌の上から与えられた場合、確かに、表面の角質層に潤いを与えるといった一時的な効果をもたらすものの、真皮部分にまで到達させることが難しく、単に保湿剤としての役割を果たすだけである。そこで、ホルモンの一種であるエストラジオール配合の化粧料（特許文献２参照）、或は女性ホルモン様作用を有するイソフラボンが、コラーゲン産生を効果的に促進させるとして用いられているが、ホルモン含有化粧料は、使用にあたって注意を払う必要があり、身近な化粧品とは言いがたいものである。即ち、皮膚細胞を活性化すると同時に、コラーゲン産生を効果的に促進することができる皮膚外用剤の誕生が望まれている。
【０００６】
さらに、現在、人体にとって極めて安全性の高い植物抽出物を有効成分として含有する皮膚外用剤が多数発明されている。例えば、特許文献３には、千里光、鋪地草、黄花倒水蓮、回心草及び蓮子草等の植物からの抽出物を有効成分として含有するコラーゲン産生促進剤が開示されている。また、特許文献４には、五指毛桃からの抽出物を、有効成分として含有する抗炎症剤、抗酸化剤または抗老化剤が開示されている。しかしながら、植物抽出物を皮膚外用剤又は化粧料に含有する際、多くの場合において、植物抽出物はその相溶性に欠けるため、有効成分が分散し難いという欠点を生じる。即ち、有効成分の沈殿が生じたり、皮膚外用剤又は化粧料中において、有効成分の不均一を生じることとなる。
【０００７】
【特許文献１】特開２００３−３００８５４号公報
【特許文献２】特開２００１−２２０３４０号公報
【特許文献３】特開２００３−２１２７４８号公報
【特許文献４】特開２００３−０９５９７０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
即ち、皮膚細胞を活性化することが可能である細胞賦活剤、コラーゲン産生促進作用により若々しい肌を取り戻すことが可能であるコラーゲン産生促進剤、さらに、抗酸化作用により、皮膚の老化を予防するとともに、きめ細かなみずみずしい肌を作ることが可能である抗酸化剤を提供することを課題とする。
また、従来の化粧料より効果的な化粧料原料及び化粧料組成物を提供することを課題とする。詳しくは、細胞賦活作用により皮膚細胞を活性化し、さらにコラーゲン産生促進作用により若々しい肌を取り戻し、抗酸化作用により皮膚の老化を予防するとともに、きめ細かなみずみずしい肌を作ることを実現する化粧料原料及び該化粧料原料を含有する化粧料組成物を提供することを課題とする。
従来の化粧料より、使用者の皮膚の劣化を防ぐとともに、健やかに保つことができる化粧料原料及び化粧料組成物を提供することを課題とする。即ち、皮膚或は肌に潤いやハリを与えることにより、柔軟性や弾力性を保ち、さらには高めることができ、肌を生き生きとさせることが可能である化粧料原料及び化粧料組成物を提供することを課題とする。
さらに、有効成分である細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤が好適に分散されると同時に、化粧料組成物に含有される溶媒に対して優れた相溶性を有することにより、前記有効成分の効果を最大限に、均等に発揮することを可能とする化粧料原料を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は上記課題を鑑みてなされたものであって、即ち、
請求項１に係る発明は、大豆サポニンからなることを特徴とする細胞賦活剤に関する。
請求項２に係る発明は、大豆サポニンからなることを特徴とするコラーゲン産生促進剤に関する。
請求項３に係る発明は、大豆サポニンからなることを特徴とする抗酸化剤に関する。
請求項４に係る発明は、前記大豆サポニンが次式１（化１）で示されるソーヤサポゲノールＡ及び／又は次式２（化２）で示されるソーヤサポゲノールＢであることを特徴とする請求項１に記載の細胞賦活剤に関する。
【００１０】
【化１】
2006213649.tif 000003
【００１１】
【化２】
2006213649.tif 000004
（但し、式中Ｒ１は、α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル基、又はα−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）−α−Ｌ−アラビノピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル基、或いはβ−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル基、Ｒ２は、水素原子又はＤ−グルコピラノシル基を示す。）
請求項５に係る発明は、前記大豆サポニンが次式３（化３）で示されるソーヤサポゲノールＡ及び／又は次式４（化４）で示されるソーヤサポゲノールＢであることを特徴とする請求項２に記載のコラーゲン産生促進剤に関する。
【００１２】
【化３】
2006213649.tif 000005
【００１３】
【化４】
2006213649.tif 000006
請求項６に係る発明は、前記大豆サポニンが次式５（化５）で示されるソーヤサポゲノールＡ及び／又は次式６（化６）で示されるソーヤサポゲノールＢであることを特徴とする請求項３に記載の抗酸化剤に関する。
【００１４】
【化５】
2006213649.tif 000007
【００１５】
【化６】
2006213649.tif 000008
請求項７に係る発明は、請求項１又は４に記載の細胞賦活剤、請求項２又は５に記載のコラーゲン産生促進剤、及び請求項３又は６に記載の抗酸化剤からなる群から選択される少なくとも１種を含有することを特徴とする化粧料原料に関する。
請求項８に係る発明は、水及びアルコールが含有されることを特徴とする請求項７に記載の化粧料原料に関する。
請求項９に係る発明は、前記アルコールがエタノール、１，３−ブチレングリコール及びグリセリンからなる群から選択される１種以上であることを特徴とする請求項８に記載の化粧料原料に関する。
請求項１０に係る発明は、請求項１又は４に記載の細胞賦活剤、請求項２又は５に記載のコラーゲン産生促進剤、及び請求項３又は６に記載の抗酸化剤からなる群から選択される少なくとも１種、
水、
エタノール
及び１，３−ブチレングリコールからなることを特徴とする化粧料原料に関する。
請求項１１に係る発明は、請求項１又は４に記載の細胞賦活剤、請求項２又は５に記載のコラーゲン産生促進剤、及び請求項３又は６に記載の抗酸化剤からなる群から選択される少なくとも１種が０．００１〜２０重量％、
水５〜６０重量％、
エタノール１５〜６０重量％及び
１，３−ブチレングリコール１５〜７５重量％の範囲で前記４種の物質の合計量が１００重量％となるように含有することを特徴とする化粧料原料に関する。
請求項１２に係る発明は、請求項７乃至１１のいずれかに記載の化粧料原料が含有されることを特徴とする化粧料組成物に関する。
請求項１３に係る発明は、皮膚の柔軟性若しくは弾力性を保つ効果を有することを特徴とする請求項１２記載の化粧料組成物に関する。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の細胞賦活剤は、その細胞賦活作用により皮膚細胞を活性化することが可能である。また本発明のコラーゲン産生促進剤は、コラーゲン産生促進作用により若々しい肌を取り戻し、さらに本発明の抗酸化剤は、抗酸化作用により皮膚の老化を予防するとともに、きめ細かなみずみずしい肌を作ることが可能である。
また、本発明の化粧料原料及び該化粧料原料を含有する化粧料組成物は、上記細胞賦活効果、コラーゲン産生促進効果及び抗酸化効果により、皮膚細胞を活性化させ、若々しい肌を取り戻し、皮膚の老化を予防するとともに、きめ細かなみずみずしい肌を作ることが可能である。
本発明の化粧料原料及び化粧料組成物は、従来の化粧料より優れたコラーゲン促進作用を有する。詳しくは、本発明の化粧料原料及び化粧料組成物は、女性ホルモンのエストラジオール及び女性ホルモン様作用を持つイソフラボンより優れたコラーゲン促進作用を有する。
本発明の化粧料原料及び化粧料組成物は、細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤を含むため、使用者の皮膚の劣化を防ぐとともに、健やかに保つことができる。即ち、皮膚或は肌に潤いやハリを与えることにより、柔軟性や弾力性を保ち、さらには高めることができ、肌を生き生きとさせることが可能である。
さらに、本発明の化粧料原料は液状であり、その有効成分である細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤が好適に分散されると同時に、化粧料組成物に含有される溶媒に優れた相溶性を有する。従って、本発明の化粧料組成物は、前記有効成分の効果を最大限に、均等に発揮することが可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
本発明の細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤は大豆サポニンからなる。サポニンを抽出するための大豆は、その根部、葉部、茎部、果実部、花部などの地上部及び地下部の全部位が使用可能であり、その全草を使用しても、各部位を単独でまた二種以上の部位を混合して使用しても構わない。特に本発明では、種子部を使用することが好ましい。
【００１８】
大豆からサポニンを単離する方法は特に限定されない。サポニンを得る際に用いられる抽出溶媒もまた特に限定されず、水やアルコール等の親水性有機溶媒、あるいはこれらの混液などを好適に用いることができる。尚、親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール等の一価アルコールや多価アルコール、アセトン等を例示することができる。また、抽出方法としては、冷浸法や温浸法を例示することができ、さらに精製処理を施すこともできるが、特に限定はされない。前記方法により得られた抽出物のうち、水やエタノールなど人体に対する安全性の高い抽出溶媒を用いて抽出した場合はそのまま用いても、また濃縮して軟エキスとして用いても、或いは凍結乾燥や噴霧乾燥により乾燥させて、乾燥エキスとして用いても構わない。
【００１９】
本発明において好適に使用されるソーヤサポニンは、例えば、以下の方法で単離することができる。
まず原料大豆種子を以下の方法で粉末とする。乾燥させた大豆種子を粉砕後、４０〜１００メッシュ、より好ましくは６０〜８０メッシュの粒度に調整する。
【００２０】
大豆種子粉末を脂溶性有機溶媒で脱脂する。脂溶性有機溶媒としては特に限定はされないが、ｎ−ヘキサン、アセトン、エーテル、ベンゼン、石油エーテル、リグロイン、酢酸エチル等が挙げられ、より好ましくはｎ−ヘキサンを使用する。脱脂する条件としては、大豆種子粉末１重量部につき３〜２０重量部、好ましくは５〜１０重量部とする。また、脱脂する温度としては３０〜７０℃、好ましくは４０〜６０℃で脱脂する。
【００２１】
次に脱脂した大豆種子粉末を水又は低級脂肪族アルコール或いは含水低級脂肪族アルコールを用いて加熱抽出する。低級脂肪族アルコールとしては特に限定はされないが、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等が挙げられ、好ましくはメタノール又はエタノールを使用する。含水低級脂肪族アルコールとしては前記低級脂肪族アルコールの水混合物で低級脂肪族アルコールが０〜６０重量％程度含まれるものが良い。抽出条件としては、大豆種子粉末１重量部につき３〜２０重量部、好ましくは５〜１０重量部とする。また、抽出する温度としては３０〜７０℃、より好ましくは４０〜６０℃で抽出する。
【００２２】
抽出液を濃縮して得られた残渣を水に溶解又は懸濁させた後、カラムに充填した合成樹脂吸着剤と接触させ、大豆サポニン成分他を合成樹脂吸着剤に吸着させる。その後、水で洗浄することによって糖、アミノ酸などの不純物を除去する。吸着させる合成樹脂吸着剤としては特に限定はされないが、セルヴァクロムＸＡＤ−２（商品名，セルバ社製）、アンバーライトＸＡＤ−２（商品名，ローム・アンド・ハース社製）等が挙げられる。好ましくはセルヴァクロムＸＡＤ−２を使用する。
【００２３】
糖、アミノ酸などの不純物を除去した後、合成樹脂吸着剤に吸着した大豆サポニン成分他を低級脂肪族アルコールを流下させることにより溶出し回収する。使用する低級脂肪族アルコールとして前記低級脂肪族アルコールが挙げられ、好ましくはメタノール又はエタノールを使用する。
【００２４】
次に低級脂肪族アルコール抽出画分を乾燥する。乾燥する理由としては低級脂肪族アルコール分の留去によって水洗浄性が高くなるからである。低級脂肪族アルコール抽出画分を乾燥する方法としては特に限定はされないが、スプレードライ法、減圧乾燥、凍結乾燥等があり、スプレードライ法がより好ましく、その理由としては大豆サポニンが熱の影響を受けにくく、乾燥工程が短く大量生産が可能であるからである。
【００２５】
前記乾燥物を溶剤に溶解又は懸濁させた後、カラムに充填した吸着剤と接触させ、大豆サポニンをカラムに吸着させる。その後、溶剤で洗浄することによってイソフラボンを完全に除去する。吸着剤としては特に限定されないが、シリカゲル、アルミナ、マグネシア、炭酸カルシウム等が挙げられ、好ましくはシリカゲル、アルミナを使用する。
【００２６】
使用する溶剤としては、特に限定されないが、クロロホルム、ジクロロメタン、ベンゼン等の非極性溶媒、又はメタノール、エタノール、イソプロパノール等の低級脂肪族アルコールを使用し、好ましくはメタノール−クロロホルム（５：１）を使用する。大豆サポニンを含む溶剤溶出画分を回収した後、蒸発乾燥して高純度の大豆サポニンを得る。
【００２７】
或は次のような方法によっても大豆からサポニンを単離することができる。
原料大豆種子粉末を脱脂処理する工程、脱脂処理した大豆種子粉末のアルコール抽出物を濃縮し、水に溶解又は懸濁させた後、合成樹脂吸着剤に吸着させて水溶出画分を除去した後、アルコールで溶出し、アルコール溶出画分を回収する工程、までは上記第一の方法と同じ方法で行う。
【００２８】
前記アルコール溶出画分を減圧濃縮しアルコールを除去した後、アルカリ水溶液に溶解又は懸濁させる。アルカリ水溶液としては特に限定はされないが、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウムなどが挙げられ、より好ましくは水酸化ナトリウムを使用する。
【００２９】
次に非水溶性アルコール／水混合懸濁液を加え、攪拌後静置すると非水溶性アルコール層と水層に分離するので、非極性アルコール層を回収する。非水溶性アルコールとしては特に限定されないが、ブチルアルコール、イソブチルアルコールなどが挙げられる。非水溶性アルコール／水混合懸濁液としては、ブタノール−水（１：１）混合懸濁液が好ましく用いられる。この場合大豆サポニンはブタノール層に、大豆イソフラボンは水層に分離する。この大豆サポニンを含むブタノール層を回収した後、蒸発乾燥して高純度の大豆サポニンを得る。
【００３０】
本発明に係る大豆サポニンは原料大豆の種類によって構成される成分の種類、量に若干の差がみられるが、次式７（化７）で示される３−Ｏ−〔β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル〕−２２−Ｏ−〔β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｌ−アラビノピラノシル〕ソーヤサポゲノールＡ、又は３−Ｏ−〔β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）−β−Ｄ−ガラクトピラシル−（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル〕−２２−Ｏ−〔β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｌ−アラビノピラノシル〕ソーヤサポゲノールＡ、次式８（化８）で示される、３−Ｏ−〔α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル〕−ソーヤサポゲノールＢ、又は３−Ｏ−〔α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）−α−Ｌ−アラビノピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル〕−ソーヤサポゲノールＢ、或いは３−Ｏ−〔β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル〕−ソーヤサポゲノールＢなどのサポニン物質が含有されている。（但し、式中Ｒ１は、α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル基、又はα−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）−α−Ｌ−アラビノピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル基、或いはβ−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル基、Ｒ２は、水素原子又はＤ−グルコピラノシル基を示す。）
【００３１】
【化７】
2006213649.tif 000009
【００３２】
【化８】
2006213649.tif 000010
【００３３】
本発明の大豆サポニンからなる細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤の用途は特に限定されず、化粧品、医薬品、医薬部外品等の皮膚外用剤に含有させることができる。医薬品または医薬部外品としては、軟膏剤、クリーム剤、外用液剤等の医薬品又は医薬部外品が挙げられる。
【００３４】
本発明化粧料原料には、その有効成分として、本発明の細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤からなる群から選択される１種以上が含有される。本発明化粧料原料中における細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤からなる群から選択される１種以上の総含有量は、本発明の効果を発揮すれば特に限定されないが、０．００１〜２０重量％とすることが好ましく、１〜３重量％とすることがより好ましい。０．００１重量％未満では、細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤としての効果に劣り、また、２０重量％を超える場合、本発明の細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤の溶解率に影響を及ぼすため、ソーヤサポニンの種類に応じて溶解率を勘案して含有量を定めればよい。
【００３５】
本発明に係る化粧料原料の溶媒としてアルコール及び／又は水が用いられる。前記アルコールとして、例えば、２個から５個の炭素原子を有するモノアルコール、例えばエタノール、イソプロパノールまたはｎ−プロパノール、２個から８個の炭素原子をもつポリオール、例えばグリセリン、ジグリセリン、プロピレングリコール、エチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ソルビトール、ペンチレングリコールが挙げられる。本発明の化粧料原料に好適に用いられるアルコールとして、エタノール、１，３−ブチレングリコール及びグリセリンが挙げられ、さらに好ましくは、エタノール及び１，３−ブチレングリコールが用いられる。前記エタノール及び１，３ブチレングリコールにおいて、化粧料原料における大豆サポニンはその安定性が高くなる。
【００３６】
本発明化粧料原料の溶媒として好適に用いられる水、エタノール及び１，３−ブチレングリコールは単独或は２種以上を混合して溶媒とされる。
例えば、本発明化粧料原料の溶媒に、エタノール、１，３−ブチレングリコール及び水が含有される場合において、化粧料原料中のエタノール、１，３−ブチレングリコール及び水の含有量は、エタノールが１５〜６０重量％、１，３−ブチレングリコールが１５〜７５重量％、水が５〜６０重量％とすることが望ましい。また、エタノールが３０〜４０重量％、１，３−ブチレングリコールが３０〜４０重量％、水２０〜３５重量％とすることがより好ましい。即ち、大豆サポニンが０．００１〜２０重量％を含み前記４種が上記の範囲で合計量が１００％となるように含有されることが望ましい。
上記の濃度を有する溶媒において、大豆サポニンはその安定性が高くなる。
【００３７】
本発明の化粧料組成物には、本発明の化粧料原料が含有される。本発明の化粧料組成物中の、本発明化粧料原料の含有量は特に限定されない。
例えば、細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤からなる群から選択される少なくとも１種以上の総含有量が３重量％の化粧料原料の場合、化粧料原料が０．０５％〜３重量％含有されることが好ましく、０．２５〜１重量％とすることがさらに好ましい。組成物中の本発明の化粧料原料が０．０５重量％未満の場合、細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤としての効果が発揮されず、３重量％を超えても大幅な効果の増大は望めない。
化粧料原料がそのまま化粧料として使用される場合、細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤からなる群から選択される少なくとも１種以上の総含有量が、０．００１〜２０重量％含有されていることが望ましく、０．００５重量％〜３重量％がより好ましく、０．００７５〜０．０３重量％含有されていることがさらに好ましい。
【００３８】
本発明の化粧料原料は液状であり、その有効成分である細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤及び抗酸化剤が好適に分散されると同時に、化粧料組成物に含有される溶媒に優れた相溶性を有する。従って、本発明の化粧料組成物は、前記有効成分の効果を最大限に、均等に発揮することが可能である。
【００３９】
本発明の化粧料組成物には、本発明化粧料原料の他に通常化粧品や医薬品等に用いられる成分、例えば油分、湿潤剤、紫外線吸収剤、酸化防止剤、界面活性剤、防腐剤、保湿剤、香料、水、アルコール、増粘剤等を必要に応じて適宜配合することができる。また、本発明の化粧料組成物は、常法に従って製造することができる。さらに、本発明の化粧料組成物は、一般の皮膚化粧料に限定されるものではなく、医薬部外品、指定医薬部外品、外用医薬品等を包含するものであり、その形態は特に限定されず、液状、クリーム状、粉状、エアゾール製品、固形状、乳液状等を例示することができ、具体的には、化粧水、クリーム、乳液、パックなどの基礎化粧品、ファンデーション、口紅、頬紅、アイシャドー、アイライナー、マスカラなどのメークアップ化粧品、シャンプー、リンスインシャンプー、ヘアコンディショナー、ヘアートリートメント、ヘアクリーム、ヘアスプレー、ヘアカラーなどの頭髪用化粧品などを例示することができる。
【００４０】
本発明の化粧料組成物の貯蔵方法は特に限定されないが、気密容器に入れ、遮光し常温で保存することが好ましい。
【実施例】
【００４１】
以下、本発明を実施例に基づき説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。
【００４２】
（大豆サポニンの抽出）
大豆種子粉末１０Kgを１００リットルのｎ−ヘキサンで２回、１時間ずつ加熱抽出し脱脂した。その脱脂乾燥物を１０リットルの９９％メタノールに加え６０℃で１時間加熱抽出した。この操作を３回行い、各濾液を混合し、６０℃以下の温度で減圧濃縮乾燥した。この残留物を水１００mlに溶解した。この溶液を合成樹脂吸着剤セルヴァクロムXAD‐tipe２の１．８Kgを３リットルの水に分散させて内径８cmのカラムに充填したセルヴァクロムXAD‐tipe２カラムの上部から注入し、流速２０ml／分の速度で流下させ、サポニン成分を吸着させた。さらに流下物の着色のなくなるまで水を追加流下し、不純物を除去した。着色がなくなってから９９％メタノールを、流速１０ml／分の速度で流下させ、セルヴァクロムに吸着しているサポニン成分を溶離させた。溶離の完了は、薄層クロマトグラフィー〔担体：キーゼルゲルF２５４、溶剤：クロロホルム／メタノール／水（６：４：１）、検出：１％第二硫酸セリウム−１０％硫酸噴霧後１０５℃で５分間加熱〕でチェックした。５リットルの９９％メタノールの流下によって完全にサポニン成分を溶離した。得られた溶離液を６０℃以下でスプレードライ法により乾固した。この残留物を１００リットルのメタノール−クロロホルム（５：１）に溶解した。この溶液を、吸着剤シリカゲルの1.8Kgを３リットルのメタノール−クロロホルム（５：１）に分散させて内径８cmのカラムに充填したシリカゲルカラムの上部から注入し、流速１０ml／分の速度で流下させ、サポニン成分を溶離させた。溶離の完了は、薄層クロマトグラフィー〔担体：キーゼルゲルF254、溶剤：クロロホルム／メタノール／水（６：４：１）、検出：１％第二硫酸セリウム−１０％硫酸噴霧後１０５℃で５分間加熱〕でチェックした。得られた溶離液を６０℃以下で蒸発乾固して、黄色の大豆サポニン紛末を得た。
【００４３】
（本発明化粧料原料の調製）
以下の組成に従い、上記のサポニンを用い本発明の化粧料原料を調製し実施例１とした。
［実施例１］                                （重量％）
エタノール                            ３５．０％
１，３−ブチレングリコール            ３５．０％
水                                    ２７．０％
ソーヤサポニン                          ３．０％
合計                                １００．０％
【００４４】
次に、上記実施例１を用いて、本発明化粧料原料の細胞賦活作用、コラーゲン産生促進作用及び抗酸化作用を試験した。
【００４５】
（試験例１：細胞賦活作用）
（試験方法）
マウスの繊維芽様細胞(Balb  3T3)を９６wellマイクロプレートに３×１０5個/wellずつ播種し、３７℃、５%二酸化炭素下で３０分培養後、試料（実施例１）添加培地(最終試料濃度：０．２５%、０．５%および１%)を添加した。７２時間培養後、臭化３‐(４，５‐ジメチル‐２‐チアゾリル)‐２,５‐ジフェニル-３Ｈ-テトラゾリウム(MTT)を５０μg/wellずつ添加し、４時間培養後、細胞内に生成したブルーホルマザンをSDS-DMSO液で抽出し、５７０nmの吸光度を測定しブルーホルマザン生成量とした。各細胞増殖率は、培地に試料を加えず培養した細胞(コントロール)のブルーホルマザン生成量を細胞増殖率１００%として算出した。尚、ＳＤＳ‐ＤＭＳＯ液は、SDS(ドデシル硫酸ナトリウム)１０g、DMSO(ジメチルスルホキシド)９９．４ml、酢酸０．６mlを混合したものである。結果を表１及び図１に示す。
【００４６】
【表１】
2006213649.tif 000011
【００４７】
本発明化粧料原料を細胞に添加すると、コントロールと比較して、実施例１が０．２５%で細胞増殖率が１４６%に、実施例１が０．５%で細胞増殖率が１５５%に、実施例１が１%で細胞増殖率が１６８%にそれぞれ上昇したことから、本発明化粧料原料が細胞を活性化させ、細胞増殖を促進させていることが明らかとなった。
【００４８】
（試験例２：コラーゲン産生促進作用）
（試験方法）
マウスの繊維芽様細胞(Balb  3T3)を１２wellマイクロプレートに３×１０4個/wellずつ播種し、３７℃、５%二酸化炭素下で３０分培養後、試料（実施例１）添加培地(最終試料濃度：０．２５%、０．５%および１%)を添加した。コラーゲンの定量にはSircol  Collagen  Assay  Kit(BIOCOLOR社)を用いた。このキットの原理は、コラーゲンに特異的に結合するSirius  Redという染料でコラーゲンを染色し、吸光度を測定することでコラーゲン量を求めるというものである。細胞に試料を添加して4日間培養後、細胞培養液１００μlを取りSirius  Red1ml中に添加して振とうしコラーゲンとSirius  Redを結合させ、遠心分離して沈殿させ上清を除去した後、０．５M水酸化ナトリウム水溶液1mlで沈殿を溶解し、５４０nmの吸光度を測定した。コラーゲン量既知の標準液の吸光度から検量線（図２参照）を作成し、各well中の培地中のコラーゲン産生量を算出した。さらに各wellごとの細胞数を計測し、細胞1個当たりのコラーゲン産生量を算出した。各コラーゲン産生率は培地に試料を加えず培養した細胞(コントロール)のコラーゲン産生量をコラーゲン産生率１００%として算出した。陽性対照としては、２×１０−４ppmエストラジオールおよび２×10‐５〜10ppmイソフラボン(ダイゼイン)を使用した。結果を表２及び図３に示す。
【００４９】
【表２】
2006213649.tif 000012
【００５０】
（表２）中の各数値の求め方
Ｂ＝５０．６３９Ａ＋１．９７３４×１０００μl／１００μl
Ｄ＝Ｂ／Ｃ
Ｅ＝（D１+D２）／２
Ｆ＝Ｅ／２．６２（コントロール）×１００
【００５１】
コラーゲン産生を促進することで知られている女性ホルモンのエストラジオールはコントロールと比較してコラーゲン産生率が１３０%となった。また女性ホルモン様作用を持つイソフラボンは２×１０−１ppmで最も高いコラーゲン産生率１２０%を示した。一方本発明化粧料原料を細胞に添加すると、実施例１が０．２５%でコラーゲン産生率が１５６%に、実施例１が０．５%でコラーゲン産生率が１６７%に、実施例１が１%でコラーゲン産生率が１８２%にそれぞれ上昇し、エストラジオールやイソフラボンよりも高いコラーゲン産生作用を示すことが明らかとなった。即ち、本発明の化粧料原料は、皮膚の繊維芽細胞を活性化させ、相乗的に細胞のコラーゲン産生を促進することによりコラーゲンの新陳代謝を活発することが可能である。
【００５２】
（試験例3：抗酸化作用）
（試験方法）
マウスの繊維芽様細胞(Balb 3T3)を９６wellマイクロプレートに３×１０５個/wellずつ播種し、３７℃、５%二酸化炭素下で２４時間培養後、試料（実施例１）添加培地(最終試料濃度：０．２５%、０．５%および１%)と過酸化水素水(最終希釈濃度：２５万倍)を添加した。４８時間培養後、臭化３-(４,５-ジメチル-２-チアゾリル)-２,５-ジフェニル-３H-テトラゾリウム(MTT)を５０μg/wellずつ添加し、４時間培養後、細胞内に生成したブルーホルマザンをSDS-DMSO液で抽出し、５７０nmの吸光度を測定しブルーホルマザン生成量とした。各細胞生存率は、培地に実施例１および過酸化水素を加えず培養した細胞(コントロール)のブルーホルマザン生成量を細胞生存率１００%として算出した。尚、SDS-DMSO液は、SDS(ドデシル硫酸ナトリウム)１０g、DMSO(ジメチルスルホキシド)９９．４ml、酢酸０．６mlを混合したものである。表３及び図４に結果を示す。
【００５３】
【表３】
2006213649.tif 000013
【００５４】
過酸化水素のみを添加した細胞はダメージを受け、コントロールと比較して細胞生存率が６８%まで低下したが、本発明化粧料原料が共存していると、実施例１が０．２５%で細胞生存率が７３%に、実施例１が０．５%で細胞生存率が８２%に、実施例１が１%で細胞生存率が９２%にそれぞれ上昇していることから、本発明化粧料原料は過酸化水素による細胞のダメージを著しく低下させることが明らかとなった。
【００５５】
（試験例４：安定性試験）
本発明の化粧料原料を以下の組成に従い調製し、本発明に係る大豆サポニンの安定性を試験した。試験は、１０〜１５℃の温度で１週間貯蔵した後、化粧料原料に含まれる大豆サポニンの状態を比較した。大豆サポニンの沈殿物が略存在しない状態を○、沈殿物が生じるものを△とした。結果を表４に示す。
【００５６】
【表４】
2006213649.tif 000014
【００５７】
上記安定性試験結果が示すように、本発明に係る化粧料原料の溶媒の好適な組成は、エタノールが１５〜６０%、１，３−ブチレングリコールが１５〜７５%、水が５〜６０%であることがわかる。しかしながら、上記全ての組成において細胞賦活作用、コラーゲン産生促進作用、及び抗酸化作用は認められるため、含有される大豆サポニンの種類に応じて適宜溶媒及びその配合比率を選択すればよい。
【００５８】
次に本発明化粧料組成物の配合例を示すが、本発明は以下の配合例に限定されるものではない。
【００５９】
＜化粧水＞                                  （重量％）
本発明化粧料原料（大豆サポニン３％）    ０．２５％
水酸化カリウム                          ０．０３％
グリセリン                            ２０．００％
エタノール                            １５．００％
防腐・殺菌剤                                適量
色素                                        適量
香料                                        適量
精製水を加えて                      １００．００％
【００６０】
<クリーム状化粧料組成物>                    （重量％）
本発明化粧料原料（大豆サポニン３％）      １．００％
ステアリン酸（トリプルプレス）          １５．００％
パルミチン酸イソプルピル                  ２．００％
ラノリン                                  １．００％
ソルビトール（７０％）                    ８．００％
水酸化カリウム                              適量
防腐剤                                      適量
香料                                        適量  
精製水を加えて                        １００．００％
【００６１】
<乳液>                                      （重量％）
本発明化粧料原料（大豆サポニン３％）      ０．２５％
ステアリン酸                              ２．００％
セトステアリルアルコール                  ０．５０％
流動パラフィン（軽質）                  １０．００％
ラノリン脂肪酸イソプロピル                ３．００％
液状ラノリン                              ４．００％
スクワラン                                ５．００％
セスキイソステアリン酸ソルビタン          １．００％
防腐・殺菌剤、酸化防止剤                    適量
トリエタノールアミン                      ０．６０％
プロピレングリコール                      ５．００％
香料                                        適量  
精製水を加えて                        １００．００％
【図面の簡単な説明】
【００６２】
【図１】試験例１における本発明化粧料原料の細胞増殖率を示すグラフである。
【図２】コラーゲン標準液の吸光度及びコラーゲン標準液の検量線を示す図である。
【図３】試験例２における本発明化粧料原料のコラーゲン産生率を示すグラフである。
【図４】試験例３における本発明化粧料原料の抗酸化作用に関するグラフである。
【図５】試験例３における過酸化水素のみを添加した細胞の顕微鏡写真である。
【図６】試験例３における本発明化粧料原料濃度１％及び過酸化水素を添加した細胞の顕微鏡写真である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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