(57)【要約】【課題】しわ形成抑制剤としての効果のあるメイラード反応阻害剤を見出すこと。【解決手段】大高良姜（Alpinia galanga Will）の抽出物が皮膚真皮組織のコラーゲンの異常架橋であるメイラード反応を優位に阻害し、さらに保湿剤、細胞賦活剤、抗炎症剤、抗酸化剤、美白剤、抗プラスミン剤、活性酸素抑制剤、抗ヒスタミン剤の特定の薬剤にいずれか1種または2種以上を配合することにより、しわ、たるみ、くすみなどの皮膚の老化を改善あるいは予防することが見出された。【特許請求の範囲】
【請求項１】
大高良姜（Alpinia galanga Will.）の抽出物を配合することを特徴とするメイラード反応阻害剤
【請求項２】
大高良姜（Alpinia galanga Will.）の抽出物と保湿剤、細胞賦活剤、抗炎症剤、抗酸化剤、美白剤、抗プラスミン剤、活性酸素抑制剤、抗ヒスタミン剤のいずれか１種または２種以上を含む請求項１のメイラード反応阻害剤
【請求項３】
保湿剤、細胞賦活剤、抗炎症剤、抗酸化剤、美白剤、抗プラスミン剤、活性酸素抑制剤、抗ヒスタミン剤がアサガオカラクサの全草、アサムの材、アダトダ  バシカ（Adhatoda vasica）の材、イエロウメランチの材イステカ(Ixcate)(Hippocratea celastroides)の樹皮、イボナシツヅラフジの枝、インドサルサの根、インドセンダンの樹皮、ウッドフォディア  フルティコサ（Woodfordia fruticosa）の花および葉、ウバメガシの材、オオバナサルスベリ（lagerstroemia speciosa）の葉、カスカ‐ドーチェ(CASCA‐DOCE)(学名Pradosia  lactescens又はLucumaglyciphloea又はChrysophyllum  buranhem) 、カツラの材、カプールの材、カミメボウキの茎や枝、カワラケツメイ属（決明子、センナ、望江南、山扁豆、ナンバンサイカチ）、キレンソウの全草、キンコウボクの花、クアチャララテ(Cuachalalate)(Juliania adstringens Schl)の樹皮、グァバの葉、クウェルクス  ピダンクレイト（Quercus pedunculate）の果実、クミンの種子、ケブラコの心材、コウスイガヤの根茎、コスティラス(Costillas)(Acalypha diversifolia Jacq.)の幹や枝、コバノブラッシュノキ(Melaleuca  leucadendron)の樹皮、ゴルドロボ(Gordolobo)(Gnaphalium sphacellatum)の全草、サフランのめしべ、サラカ  インディカ（Saraka indica ）の樹皮、ジェキティバ(JEQUITIBA)(Carinianabrasiliensis又はCouratari  legalis又はPyxidaria  macrocarpa)の樹皮、シモニロの全草、ジャトバ(JATOBA)(Hymenaea  coubaril)の果皮、ジャンボラン（Eugenia jambolana）の樹皮、シロバナチョウセンアサガオの種子、スファランサス  インディクス(Sphaeranthus  indicus)の全草、スプールースの樹皮、スミラックス  ゼイラニカ（Smilax zeylanica）の根、セプターの材、タブノキの樹皮、チャバコショウの根、デスモディウム  ガンゲチクム（Desmodium gangeticm）の全草、テルミナリア  ホーリダ（Terminalia horrida）の果実、トラギア  インボルクラタ(Tragia  involucrata)の全草、ニゲラ  サティバの種子、ハマビシの全草、ヒエルバデルサボ(Hierba  del  sapo)(Eryngium comosum)の全草、ヒハツの根、ピルル(Pirul)(Schinus molle)の全草、フィランサス  ヌリリ(Phyllanthus  nuriri)の全草、フウセンカズラの全草、プサ(PUCA)(Cissus  antiparaliticus)の実、ベチバーの根、ヘデサルム  アウストロシビリクス(Hedysarum austrosibiricus)の根、ヘルペストリス  モンニエス（Herpestris monnies）の全草、ベロニカ(VERONICA)(Veronica  officinalis)の樹皮、ボッレリア  ヒスピダの根や茎、ポンガミア  グラブラ（Pongamia glabra）の根、ミズキの樹皮、ミズメの樹皮、ミムソプス  エレンギ(Mimusops elengi  ミサキノハナ)の全草、ムラヤ  コエニギイ（Murraya koenigii）の茎枝、ムンロニア  プミラの全草、メラピーの材、モクレン科ホオノキ属の樹皮、ヤマザクラの材、ランボの材、ルウメックス  シプリウス(Rumex cyprius)の葉、ワットルの樹皮、愛玉子、一條根、王不留行、化石草、貝母、貫衆、岩弁慶の根、Paeonia anomalaの根、栗いが、栗葉、鶏血藤、沙棗、使君子、小金櫻、秦皮、辛夷、西河柳、石蓮子、石榴根皮、石榴実皮、石榴樹皮、仙鶴草、穿破石、蒼朮、谷精草、中国産白朮、鉄包金、冬葵子、琵琶葉、菱実、鳳尾草、了哥王、蓮の葉、檳榔子、胖大海、茘枝、訶子、鉤藤、鵝不食草、イシゲ科の海藻、；真珠末、コンキオリン、コンキオリン加水分解物、コンキオリンの加水分解物を無水コハク酸で処理した物質、貝類の粘液を加水分解して得られる物質、貝類肉より得られたステロール類、貝��肉より得られる酸性多糖類、貝類肉より得られたコラーゲン、貝類肉より得られたグリコーゲン、貝類肉より得られたリン脂質、貝類肉より得られたデオキシリボ核酸、チオサリチル酸及びその塩、マグノロール、ホオノキオール、１−（４−ヒドロキシフェニチオ）−２−プロパノール、２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジチアン、２−（４−アセトキシフェニル）−１，３−ジチアン、２，５−ジヒドロキシベンズアミド、２，６−ジヒドロキシベンズアミド、４−アミノフェノール、４−ヒドロキシチオフェノール、４−ヒドロキシベンズアミド、５−ヒドロキシインドール、6-dihydroxy)-dihydrobenzofuran-3-yl-(3'4'-dihydroxy)-phenyl ketone、スチルベンガロイル配糖体、シトラシンＣ、エチレンジアミン誘導体、カラハナエノンの誘導体、カシューナッツ殻油、カルダノール、カルドール、アナカルド酸、センノサイド、α−アルブチン、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｒｇの配列を含むペプチドもしくはこのペプチドのカルボキシル基末端をアミド体に変換したまたは／およびアミノ基末端をアシル化体に変換したペプチドである請求項２のメイラード反応阻害剤
【請求項４】
さらに水酸基を２つ以上含む多価アルコール、低級アルコール、界面活性剤、低分子ベタインのいずれか１種または２種以上を含む請求項１乃至請求項３のメイラード反応阻害剤
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明品は、特定の植物から抽出された抽出物が皮膚真皮組織のでメイラード反応を優位に阻害することで、しわの形成を抑え、これと保湿剤、細胞賦活剤、抗炎症剤、抗酸化剤、美白剤、抗プラスミン剤、活性酸素抑制剤、抗ヒスタミン剤の特定した薬剤を組み合わせ配合することにより、さらに肌のたるみ、くすみなどの皮膚老化現象に対して極めて高い改善及び予防効果が得られるメイラード反応阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
大高良姜（Alpinia galanga Will.）は別名、キョウリョウキョウ（高良姜）、ガランガと呼ばれる。香辛料として用いられるほかに、生薬として上腹部の寒通に用いられているほか、ゲットウ抽出物の皮膚外用剤への配合としては、ニキビ及び肌荒れ改善効果（特許文献１参照）、殺菌効果（特許文献２参照）、育毛・発毛効果（特許文献３参照）が開示されている。
【０００３】
健康な若年層の肌は、真皮の細胞外マトリックスは規則正しいシート状構造をとるコラーゲンとエラスチン線維の網目束からなっており、その隙間にグリコサミノグリカンや水分保持力の高いヒアルロン酸などが埋まっている構造をとっている。中でもコラーゲン線維は成熟とともに架橋形成が進行し直線的な太い繊維束になることで、肌の弾力と柔らかさを保っている。
一方、肌は外界と皮膚内からの酸化に曝されており、その原因としては紫外線や乾燥、細胞の代謝の際に生じる活性酸素やフリーラジカルなどがあげられる。活性酸素やフリーラジカルはコラーゲン線維にたんぱく質と糖の化学結合を促進するという異常な架橋形成をもたらし（メイラード反応）、それによって真皮が硬直化し、本来の弾力性に富むはりが失われてしまう。この真皮の硬直化による肌のはりの低下は、他の種々の原因とあいまってしわを形成させる一因と考えられている。
【特許文献１】特開２０００−１９１４９３号公報
【特許文献２】特開平９−１２４６７７号公報
【特許文献３】特開２０００−３５５２５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、メイラード反応阻害剤としての効果ある安全で有効な物質を見出し、シワの改善を成すため、さらにはこれを有効に活用するために種々検討した。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
前記目的を達成するため、本発明者らは鋭意検討した結果、大高良姜の抽出物にその効果が高いことを見出した。さらに特定の薬剤（保湿剤、細胞賦活剤、抗炎症剤、抗酸化剤、美白剤、抗プラスミン剤、活性酸素抑制剤、抗ヒスタミン剤など）を配合することによって、しわはもとより、たるみやくすみなど、皮膚老化現象に対して極めて高い改善及び予防効果が得られることが分かった。
【０００６】
大高良姜の抽出物の形態はなんら限定されるものではないが、好ましくは大高良姜を陰乾し、粉砕後、抽出溶媒（例えばエタノール等のアルコール、水またはこれら混合）とともに、３日間浸漬または１時間１００度にて加温、冷却、ろ過した液を使用する。
【０００７】
試験例１；メイラード反応阻害試験
メイラード反応の中間物であるケトアミンを測定するＮＢＴ還元法により、大高良姜（Alpinia galanga Will.）の抽出物についてメイラード反応阻害作用を調べた。水で調製した試験品50μｌに精製水100μｌ、0.1Mリン酸緩衝液(pH6.0)500μｌを加え、２Ｍのグルコース水溶液を100μｌ添加した。さらに4mg/ml  ＢＳＡ水溶液200μｌを添加、攪拌し、60℃で30時間インキュベートした。30時間後、反応液300μlに0.2mg/0.9ml[リン酸緩衝液（pH10.3）]NBT溶液を2.7ml添加、37℃で30分間インキュベートし、Abs.530nmにて吸光度(A)を測定した。同様に、BSA水溶液の代替として水を用いた場合の吸光度(B)、試験品の代替として水を用いた場合の吸光度(C)、BSA水溶液の代替として水をかつ試験品の代替として水を用いた場合の吸光度(D)を測定し、下記の数式よりメイラード反応阻害率(%)を算出した。
メイラード反応阻害率(%)=[1-(A-B)/(C-D)]×100
試験品は以下に示し、試験結果を表１に示す。
大高良姜Ｅ：大高良姜（根茎乾燥物）(20g)のエタノール(100ml)エキス
大高良姜ＥＷ：大高良姜（根茎乾燥物）(20g)の50%エタノール−水(100ml)エキス
大高良姜Ｗ：大高良姜（根茎乾燥物）(20g)の熱水(100ml)エキス
ハナミョウガ(Alpinia japonica mig.)Ｅ：ハナミョウガ（根茎乾燥物）(20g)のエタノール(100ml)エキス
ハナミョウガ(Alpinia japonica mig.)ＥＷ：ハナミョウガ（根茎乾燥物）(20g)の50%エタノール−水(100ml)エキス
ハナミョウガ(Alpinia japonica mig.)Ｗ：ハナミョウガ（根茎乾燥物）(20g)の熱水(100ml)エキス
【０００８】
【表１】
2006062987.tif 000002
【０００９】
大高良姜（Alpinia galanga Will.）の抽出物は乾燥物換算で０．０００００１〜１０重量%で配合すれば阻害効果等を十分発揮することから、この濃度で配合することが望ましい。
【００１０】
さらに、大高良姜（Alpinia galanga Will）の抽出物に特定の薬剤（保湿剤、細胞賦活剤、抗炎症剤、抗酸化剤、美白剤、抗プラスミン剤、活性酸素抑制剤、抗ヒスタミン剤など）を配合すると、しわ、たるみ、くすみなど皮膚老化抑制を改善あるいは予防することがわかった。
とくに有効なものを列記すると、アサガオカラクサの全草、アサムの材、アダトダ  バシカ（Adhatoda vasica）の材、イエロウメランチの材、イステカ(Ixcate)(Hippocratea celastroides)の樹皮、イボナシツヅラフジの枝、インドサルサの根、インドセンダンの樹皮、ウッドフォディア  フルティコサ（Woodfordia fruticosa）の花および葉、ウバメガシの材、オオバナサルスベリ（lagerstroemia speciosa）の葉、カスカ‐ドーチェ(CASCA‐DOCE)(学名Pradosia  lactescens又はLucumaglyciphloea又はChrysophyllum  buranhem) 、カツラの材、カプールの材、カミメボウキの茎や枝、カワラケツメイ属（決明子、センナ、望江南、山扁豆、ナンバンサイカチ）、キレンソウの全草、キンコウボクの花、クアチャララテ(Cuachalalate)(Juliania adstringens Schl)の樹皮、グァバの葉、クウェルクス  ピダンクレイト（Quercus pedunculate）の果実、クミンの種子、ケブラコの心材、コウスイガヤの根茎、コスティラス(Costillas)(Acalypha diversifolia Jacq.)の幹や枝、コバノブラッシュノキ(Melaleuca  leucadendron)の樹皮、ゴルドロボ(Gordolobo)(Gnaphalium sphacellatum)の全草、サフランのめしべ、サラカ  インディカ（Saraka indica ）の樹皮、ジェキティバ(JEQUITIBA)(Carinianabrasiliensis又はCouratari  legalis又はPyxidaria  macrocarpa)の樹皮、シモニロの全草、ジャトバ(JATOBA)(Hymenaea  coubaril)の果皮、ジャンボラン（Eugenia jambolana）の樹皮、シロバナチョウセンアサガオの種子、スファランサス  インディクス(Sphaeranthus  indicus)の全草、スプールースの樹皮、スミラックス  ゼイラニカ（Smilax zeylanica）の根、セプターの材、タブノキの樹皮、チャバコショウの根、デスモディウム  ガンゲチクム（Desmodium gangeticm）の全草、テルミナリア  ホーリダ（Terminalia horrida）の果実、トラギア  インボルクラタ(Tragia  involucrata)の全草、ニゲラ  サティバの種子、ハマビシの全草、ヒエルバデルサボ(Hierba  del  sapo)(Eryngium comosum)の全草、ヒハツの根、ピルル(Pirul)(Schinus molle)の全草、フィランサス  ヌリリ(Phyllanthus  nuriri)の全草、フウセンカズラの全草、プサ(PUCA)(Cissus  antiparaliticus)の実、ベチバーの根、ヘデサルム  アウストロシビリクス(Hedysarum austrosibiricus)の根、ヘルペストリス  モンニエス（Herpestris monnies）の全草、ベロニカ(VERONICA)(Veronica  officinalis)の樹皮、ボッレリア  ヒスピダの根や茎、ポンガミア  グラブラ（Pongamia glabra ）の根、ミズキの樹皮、ミズメの樹皮、ミムソプス  エレンギ(Mimusops elengi  ミサキノハナ)の全草、ムラヤ  コエニギイ（Murraya koenigii）の茎枝、ムンロニア  プミラの全草、メラピーの材、モクレン科ホオノキ属の樹皮、ヤマザクラの材、ランボの材、ルウメックス  シプリウス(Rumex cyprius)の葉、ワットルの樹皮、愛玉子、一條根、王不留行、化石草、貝母、貫衆、岩弁慶の根、Paeonia anomalaの根、栗いが、栗葉、鶏血藤、沙棗、使君子、小金櫻、秦皮、辛夷、西河柳、石蓮子、石榴根皮、石榴実皮、石榴樹皮、仙鶴草、穿破石、蒼朮、谷精草、中国産白朮、鉄包金、冬葵子、琵琶葉、菱実、鳳尾草、了哥王、蓮の葉、檳榔子、胖大海、茘枝、訶子、鉤藤、鵝不食、イシゲ科の海藻；真珠末、コンキオリン、コンキオリン加水分解物、コンキオリンの加水分解物を無水コハク酸で処理した物質、貝類の粘液を加水分解して得られる物質、貝類肉より得られたステロール類、貝類肉より得られる酸性多糖類、貝類肉より得られたコラーゲン、貝類肉より���られたグリコーゲン、貝類肉より得られたリン脂質、貝類肉より得られたデオキシリボ核酸、チオサリチル酸及びその塩、マグノロール、ホオノキオール、１−（４−ヒドロキシフェニチオ）−２−プロパノール、２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジチアン、２−（４−アセトキシフェニル）−１，３−ジチアン、２，５−ジヒドロキシベンズアミド、２，６−ジヒドロキシベンズアミド、４−アミノフェノール、４−ヒドロキシチオフェノール、４−ヒドロキシベンズアミド、５−ヒドロキシインドール、6-dihydroxy)-dihydrobenzofuran-3-yl-(3'4'-dihydroxy)-phenyl ketone、スチルベンガロイル配糖体、シトラシンＣ、エチレンジアミン誘導体、カラハナエノン誘導体、カシューナッツ殻油、カルダノール、カルドール、アナカルド酸、センノサイド、α−アルブチン、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｒｇの配列を含むペプチドもしくはこのペプチドのカルボキシル基末端をアミド体に変換したまたは／およびアミノ基末端をアシル化体に変換したペプチドが挙げられる。
エチレンジアミン誘導体を例示すれば、Ｎ‐フェニル‐Ｎ‐（２，３，３トリメチル‐１‐シクロペンテン‐１‐エチル）‐Ｎ′，Ｎ′‐ジメチルエタンジアミン、Ｎ‐２‐ピリジル‐Ｎ‐（３，７‐ジメチル‐６‐オクテン‐１‐イル）‐Ｎ′，Ｎ′‐ジメチルエタンジアミン、Ｎ‐２‐ピリジル‐Ｎ‐（２‐ピネン‐１０‐イル）‐Ｎ′，Ｎ′‐ジメチルエタンジアミン、Ｎ‐２‐ピリジル‐Ｎ‐（１，８‐ｐ‐メンタジエン‐７‐イル）‐Ｎ′，Ｎ′‐ジメチルエタンジアミンが挙げることができる。
カラハナエノン誘導体を例示すれば、Ｎ−ｐ−ヒドロキシフェニル−３，３，６−トリメチル−５−シクロヘプタン−２−オン−１−カルボキシアミド、２−ヒドロキシ−Ｎ−ｐ−ヒドロキシフェニル−３，３，６−トリメチル−５−シクロヘプテン−１−カルボキシアミドが挙げることができる。  スチルベンガロイル配糖体を例示すれば、３，５，４′−トリヒドロキシスチルベン４′−０−β−Ｄ−（６″ガロイル）グルコピラノシド、３，５，４′−トリヒドロキシスチルベン４′−０−β−Ｄ−（２″ガロイル）グルコピラノシドが挙げることができる。
【００１１】
さらに水酸基を２つ以上含む多価アルコール、低級アルコール、界面活性剤、低分子ベタインのいずれか１種または２種以上を配合するとより効果が得られることもわかった。
【００１２】
利用できる多価アルコールに特に限定はないが例示すれば、グリセリン、１，３ブチレングリコール、プロピレングリコール、イソプレングリコール、ソルビトール、トレハロース、マルトース等が挙げられる。これらを０．１〜８０重量％、好ましくは１〜３０重量％を配合するが、多価アルコールの種類によって配合量は変化し、また、複数の多価アルコールを利用で
きることはいうまでもない。
【００１３】
低級アルコールを配合することによって吸収性が向上する。低級アルコールの種類は種々あるが通常エタノールを用いる。配合量は特に限定はないが、２〜７０重量％が好ましい。
大高良姜（Alpinia galanga Will.）の抽出物を含む多価アルコールの組み合わせに界面活性剤を併せて配合することも有効であり、さらに前記の低級アルコールをも合わせて配合することも有効である。
界面活性剤には特に限定はなく、用途や剤形によって種類や量を選択すればよい。
界面活性剤は、油剤等の乳化や可溶化等のために用いられ、アニオン性（アルキルカルボン酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキル硫酸エステル塩、アルキルリン酸エステル塩）、非イオン性（エーテル型非イオン界面活性剤、エーテルエステル型非イオン界面活性剤、エステル型非イオン界面活性剤、ブロックポリマー型非イオン界面活性剤、含窒素型非イオン界面活性剤）及び両性（カルボン酸型両性界面活性剤（アミノ型、ベタイン型）、硫酸エステル型両性界面活性剤、スルホン酸型両性界面活性剤、リン酸エステル型両性界面活性剤）その他の界面活性剤（天然界面活性剤、タンパク質加水分解物の誘導体、高分子界面活性剤、チタン・ケイ素を含む界面活性剤、フッ化炭素系界面活性剤）の活性剤を適宜用いることができる。
【００１４】
低分子ベタインも選択されるべき原料の１つであり、これを配合することによってさらに効果は向上し、且つ塗布感もよくなり、皮膚外用剤として有効性は増す。
利用できる低分子ベタインは、分子量２００以下の、第四アンモニウム塩基、スルホニウム塩基、ホスホニウム塩基等の分子内塩で両性イオンを形成するものを包含し得る。例示すれば、トリメチルグリシン、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアラニン、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルグルタミン酸、トリエチルグリシンなどがあるが、トリメチルグリシンが好適である。
なお、分子量２００以上のものは界面活性能を有し、低分子ベタインの効果とは異なるもので、上述したように界面活性剤を用いることは本発明の効果を高めるが低分子ベタインとは効果が異なる。
【００１５】
本発明の皮膚外用剤は、常法に従い、通常の皮膚外用剤として知られる種々の形態の基材に配合して調製することができる。
【００１６】
外用剤の形態としては、特に限定されず、例えば、乳液、クリーム、水溶液、パック等の任意の剤形を選択することができる。
【００１７】
本発明の皮膚外用剤には、上記した必須成分の他に通常の外用剤に配合される成分、例えば、油剤、粉体、精製水、高分子化合物、ゲル化剤、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤、酸化防止剤、色素、防腐剤、香料、美容成分を本発明の効果を損なわない範囲で適宜選択して用いることができる。
【実施例】
【００１８】
次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらになんら制約されるものではない。また、使用した薬剤の抽出液についての抽出方法は何ら限定されるものではない。
実施例の処方を表２から表４に示す。作成方法は常法により行った。なお、表２はローション、表３は美容液、表４はクリームの処方であり、配合量は重量部で示す。
【００１９】
【表２】
2006062987.tif 000003
【００２０】
【表３】
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【００２１】
【表４】
2006062987.tif 000005
【００２２】
（注１）大高良姜抽出液１は大高良姜（根茎乾燥物）１０ｇに精製水２００ｍｌを加えて１時間煮沸した後、ろ過した抽出液を用いた。
（注２）大高良姜抽出液２は大高良姜（根茎乾燥物）１０ｇに精製水１００ｍｌとエタノール１００ｍｌを加えて１０日間放置後、ろ過した抽出液を用いた。
（注３）大高良姜抽出液３は大高良姜（根茎乾燥物）１０ｇにエタノール２００ｍｌを加えて１０日間放置後、ろ過した抽出液を用いた。
（注４）加水分解コンキオリン液はコンキオリンを硫酸分解し、分子量１０００以下のものを用いた。
（注５）タブノキ抽出液はマチルス抽出液 [丸善製薬（株）製]を用いた。
（注６）ホオノキ抽出液はファルコレックスホオノキE[一丸ファルコス（株）製]を用いた。
（注７）グァバ抽出液はグァバの葉１０ｇにエタノール３００ｍｌを加えて５日間放置後、ろ過した抽出液を用いた。
（注８）西河柳抽出液は西河柳エキス［日本精化株］製］を用いた。
（注９）海藻抽出液はマリンパージ［一丸ファルコス（株）製］を用いた。
（注１０）アカシア樹皮抽出液は樹皮１０ｇにエタノール３００ｍｌを加えて５日間放置後、ろ過した抽出液を用いた。
（注１１）ムラヤコエンギイ抽出液はムラヤコエンギイ］抽出液［山川貿易（株）製を用いた。
（注１２）オオバナサルスベリ抽出液はオオバナサルスベリ抽出液 [山川貿易（株）製]を用いた。
【００２３】
表２〜表４記載の実施例１〜１２及び比較例１〜３のしわ改善試験を実施した。試験方法は２５〜５５才の女性２０名をパネルとし、毎日朝と夜の２回、１２週間にわたって洗顔後に被験外用剤の適量を顔面に塗布した。塗布による肌悩み改善効果の結果を表４に示す。
【００２４】
【表５】
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