(57)【要約】【課題】  肝機能の改善、血中アルコール水準の減少及び体内抗酸化能の増進に有効な新規組成物の提供。【解決手段】  ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅからなる組成物を提供する。【選択図】  図５
2006298917.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅからなることを特徴とする、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物。
【請求項２】
前記ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧは、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ハンノキ抽出物は、乾燥したハンノキの木質及び樹皮を沸かし水に入れて１〜５時間抽出した後、濾過して得たもの、
前記ウツボグサ抽出物は、乾燥したウツボグサを沸かし水に入れて１〜５時間抽出した後、濾過して得たもの、
前記オオアザミ抽出物は、総フラボノイド含量が８０重量％〜９５重量％であり、シリビン含量が２８重量％〜３２重量％であるもの、
前記生豆−米糠発酵抽出物は、（株）東洋発酵（日本）の液状生豆−米糠発酵抽出物のもの、
前記蕪濃縮液は、３４Ｂｉｒｘ０〜３６Ｂｒｉｘ０のもの、
前記トマト抽出物は、水で洗浄したトマト実を水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記ブロッコリー抽出物は、熱水で洗浄したブロッコリーを水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記パインアップル抽出物は、水で洗浄したパインアップルを水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記初乳粉末は、５０，０００倍で蒸留水に希釈したときにＨＡＶ(hepatitis A virus)に特異的なＩｇＧの力価４９０ｎｍで吸光度が１〜１．７のもの、
前記ベタインは、ベタイン含量９９重量％〜１００重量％の食品添加物用無水ベタインのもの、
前記ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅは、複合ビタミンフリーミックス（ＤＳＭ、シンガポール）からなることを特徴とする、請求項１に記載の肝機能の改善、血中アルコールの減少および体内抗酸化に有効な組成物。
【請求項３】
前記組成物１００重量％に対し、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１は０．００１重量％〜０．１重量％、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２は０．００１重量％〜０．１重量％、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧは０．００１重量％〜０．１重量％、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１は０．００１重量％〜０．１重量％、ハンノキ抽出物は３２重量％〜３６重量％、ウツボグサ抽出物は３８重量％〜４２重量％、オオアザミ抽出物は０．１重量％〜０．８重量％、生豆−米糠発酵抽出物は１．０重量％〜２．５重量％、蕪濃縮液は０．１重量％〜０．２重量％、トマト抽出物は０．８重量％〜１．５重量％、ブロッコリー抽出物は０．１重量％〜０．５重量％、パインアップル抽出物は０．１５重量％〜０．２５重量％、初乳粉末は３．０重量％〜４．０重量％、ベタインは４．５重量％〜５．０重量％、複合ビタミンフリーミックスは２．０重量％〜３．０重量％含有し、残部は３．８５重量％〜１８．２４重量％の水からなることを特徴とする、請求項２に記載の肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物。
【請求項４】
ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅからなる、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、発酵乳食品。
【請求項５】
前記ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧは、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ハンノキ抽出物は、乾燥したハンノキの木質及び樹皮を沸かし水に入れて１〜５時間抽出した後、濾過して得たもの、
前記ウツボグサ抽出物は、乾燥したウツボグサを沸かし水に入れて１〜５時間抽出した後、濾過して得たもの、
前記オオアザミ抽出物は、総フラボノイド含量が８０重量％〜９５重量％であり、シリビン含量が２８重量％〜３２重量％であるもの、
前記生豆−米糠発酵抽出物は、（株）東洋発酵（日本）の液状生豆−米糠発酵抽出物のもの、
前記蕪濃縮液は、３４Ｂｉｒｘ０〜３６Ｂｒｉｘ０のもの、
前記トマト抽出物は、水で洗浄したトマト実を水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記ブロッコリー抽出物は、熱水で洗浄したブロッコリーを水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記パインアップル抽出物は、水で洗浄したパインアップルを水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記初乳粉末は、５０，０００倍で蒸留水に希釈したときにＨＡＶ(hepatitis A virus)に特異的なＩｇＧの力価４９０ｎｍで吸光度が１〜１．７のもの、
前記ベタインは、ベタイン含量９９重量％〜１００重量％の食品添加物用無水ベタインのもの、
前記ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅは、複合ビタミンフリーミックス（ＤＳＭ、シンガポール）からなる、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、請求項４に記載の発酵乳食品。
【請求項６】
前記組成物１００重量％に対し、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１は０．００１重量％〜０．１重量％、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２は０．００１重量％〜０．１重量％、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧは０．００１重量％〜０．１重量％、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１は０．００１重量％〜０．１重量％、ハンノキ抽出物は３２重量％〜３６重量％、ウツボグサ抽出物は３８重量％〜４２重量％、オオアザミ抽出物は０．１重量％〜０．８重量％、生豆−米糠発酵抽出物は１．０重量％〜２．５重量％、蕪濃縮液は０．１重量％〜０．２重量％、トマト抽出物は０．８重量％〜１．５重量％、ブロッコリー抽出物は０．１重量％〜０．５重量％、パインアップル抽出物は０．１５重量％〜０．２５重量％、初乳粉末は３．０重量％〜４．０重量％、ベタインは４．５重量％〜５．０重量％、複合ビタミンフリーミックスは２．０重量％〜３．０重量％含有し、残部は３．８５重量％〜１８．２４重量％の水からなることを特徴とする、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、請求項５に記載の発酵乳食品。
【請求項７】
ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅからなる、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、機能性飲料。
【請求項８】
前記ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧは、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ハンノキ抽出物は、乾燥したハンノキの木質及び樹皮を沸かし水に入れて１〜５時間抽出した後、濾過して得たもの、
前記ウツボグサ抽出物は、乾燥したウツボグサを沸かし水に入れて１〜５時間抽出した後、濾過して得たもの、
前記オオアザミ抽出物は、総フラボノイド含量が８０重量％〜９５重量％であり、シリビン含量が２８重量％〜３２重量％であるもの、
前記生豆−米糠発酵抽出物は、（株）東洋発酵（日本）の液状生豆−米糠発酵抽出物のもの、
前記蕪濃縮液は、３４Ｂｉｒｘ０〜３６Ｂｒｉｘ０のもの、
前記トマト抽出物は、水で洗浄したトマト実を水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記ブロッコリー抽出物は、熱水で洗浄したブロッコリーを水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記パインアップル抽出物は、水で洗浄したパインアップルを水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記初乳粉末は、５０，０００倍で蒸留水に希釈したときにＨＡＶ(hepatitis A virus)に特異的なＩｇＧの力価４９０ｎｍで吸光度が１〜１．７のもの、
前記ベタインは、ベタイン含量９９重量％〜１００重量％の食品添加物用無水ベタインのもの、
前記ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅは、複合ビタミンフリーミックス（ＤＳＭ、シンガポール）からなる、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、請求項７に記載の機能性飲料。
【請求項９】
前記組成物１００重量％に対し、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１は０．００１重量％〜０．１重量％、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２は０．００１重量％〜０．１重量％、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧは０．００１重量％〜０．１重量％、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１は０．００１重量％〜０．１重量％、ハンノキ抽出物は３２重量％〜３６重量％、ウツボグサ抽出物は３８重量％〜４２重量％、オオアザミ抽出物は０．１重量％〜０．８重量％、生豆−米糠発酵抽出物は１．０重量％〜２．５重量％、蕪濃縮液は０．１重量％〜０．２重量％、トマト抽出物は０．８重量％〜１．５重量％、ブロッコリー抽出物は０．１重量％〜０．５重量％、パインアップル抽出物は０．１５重量％〜０．２５重量％、初乳粉末は３．０重量％〜４．０重量％、ベタインは４．５重量％〜５．０重量％、複合ビタミンフリーミックスは２．０重量％〜３．０重量％含有し、残部は３．８５重量％〜１８．２４重量％の水からなることを特徴とする、 肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、請求項８に記載の機能性飲料。
【請求項１０】
ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅからなる、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、健康補助食品。
【請求項１１】
前記ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧは、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１は、凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り１０１１ｃｆｕ、
前記ハンノキ抽出物は、乾燥したハンノキの木質及び樹皮を沸かし水に入れて１〜５時間抽出した後、濾過して得たもの、
前記ウツボグサ抽出物は、乾燥したウツボグサを沸かし水に入れて１〜５時間抽出した後、濾過して得たもの、
前記オオアザミ抽出物は、総フラボノイド含量が８０重量％〜９５重量％であり、シリビン含量が２８重量％〜３２重量％であるもの、
前記生豆−米糠発酵抽出物は、（株）東洋発酵（日本）の液状生豆−米糠発酵抽出物のもの、
前記蕪濃縮液は、３４Ｂｉｒｘ０〜３６Ｂｒｉｘ０のもの、
前記トマト抽出物は、水で洗浄したトマト実を水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記ブロッコリー抽出物は、熱水で洗浄したブロッコリーを水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記パインアップル抽出物は、水で洗浄したパインアップルを水と混合して粉砕し、濾過した後、噴霧乾燥させたもの、
前記初乳粉末は、５０，０００倍で蒸留水に希釈したときにＨＡＶ(hepatitis A virus)に特異的なＩｇＧの力価４９０ｎｍで吸光度が１〜１．７のもの、
前記ベタインは、ベタイン含量９９重量％〜１００重量％の食品添加物用無水ベタインのもの、
前記ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅは、複合ビタミンフリーミックス（ＤＳＭ、シンガポール）からなる、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、請求項１０に記載の健康補助食品。
【請求項１２】
前記組成物１００重量％に対し、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１は０．００１重量％〜０．１重量％、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２は０．００１重量％〜０．１重量％、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧは０．００１重量％〜０．１重量％、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１は０．００１重量％〜０．１重量％、ハンノキ抽出物は３２重量％〜３６重量％、ウツボグサ抽出物は３８重量％〜４２重量％、オオアザミ抽出物は０．１重量％〜０．８重量％、生豆−米糠発酵抽出物は１．０重量％〜２．５重量％、蕪濃縮液は０．１重量％〜０．２重量％、トマト抽出物は０．８重量％〜１．５重量％、ブロッコリー抽出物は０．１重量％〜０．５重量％、パインアップル抽出物は０．１５重量％〜０．２５重量％、初乳粉末は３．０重量％〜４．０重量％、ベタインは４．５重量％〜５．０重量％、複合ビタミンフリーミックスは２．０重量％〜３．０重量％含有し、残部は３．８５重量％〜１８．２４重量％の水からなることを特徴とする、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、請求項１１に記載の健康補助食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物に係り、より詳しくは、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅを有効成分として含有して肝機能を改善し、飲み過ぎまたは慢性的なアルコール摂取による肝損傷を保護及び治癒する機能を持つと共に、飲酒後に血中アルコールを低下させる機能及び体内抗酸化能を増進させる機能を持つ組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
酸素は、地球上で最も多い元素（５３．８％）であって、乾燥大気中の２１％を占めている。われわれの身体は酸素を呼吸してエネルギーを獲得する。ところが、酸素は、このように生命維持に絶対的に必要であるが、安定な分子状態である基底状態の三重項酸素(ground state triplet oxygen)が体内酵素系、還元代謝、化学薬品、公害物質、光化学反応などの各種物理的、化学的、環境的要因などによってスーパーオキシドラジカル（Ｏ２-・）、ヒドロキシルラジカル（・ＯＨ）、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）、一重項酸素（１Ｏ２）など反応性の非常に大きい遊離基(free radical)としての活性酸素(reactive oxygen)に転換されると、生体に致命的な酸素毒性を生じさせるという両面性を持っている。これら活性酸素は、細胞構成成分、例えば脂質、蛋白質、糖、ＤＮＡなどと反応して破壊作用をすることにより、癌を始めとして老化や、脳卒中、パーキンソン病などの脳疾患、心臓疾患、虚血、動脈硬化、皮膚損傷、炎症、リウマチ疾患、自己免疫疾患などの各種疾病を引き起こす原因となっている。また、脂質過酸化反応により生成される体内脂質過酸化物も、細胞に対する酸化的破壊による各種機能障害を生じさせることにより、老化や各種疾病などの原因となることもある。特に薬物や毒劇物、飲酒などの酸化的反応を起こす化学物質の摂取による酸化作用は、肝に損傷を与え、最悪のときには肝硬変(Cirrhosis)を引き起こす。
【０００３】
肝（肝臓）は、人体で最も大きい臓器であって、その主要機能は、体外から流入された、或いは体内で生成された各種物質を加工処理し、重要な物質を合成供給するものである。また、血液にはわれわれの身体で重要な役割をする様々な蛋白質があるが、この中の約９０％は肝で生成される。この他にも、肝は、解毒作用および免疫器官の役割などをするが、われわれの身体に入ってきた各種薬物と有害な物質は、肝で害の少ない物質に変えて尿または胆嚢汁で排泄される。特に、肝にはクッパー細胞という免疫細胞があって、体外から入り込む細菌、毒素または異物を食べた後分解させて体外に排出させる。
【０００４】
このように肝は、様々で重要な機能を行うために、肝機能が大幅低下すると、いろいろの問題が発生する。ところが、肝は、旺盛な再生力を持っているため、７５％を切除しても４〜６ヶ月後にはその大きさと機能が回復する。
【０００５】
肝疾患は、発病する根本原因によって、ウィルスによる肝疾患、飲み過ぎによるアルコール性肝疾患、薬物による毒性肝疾患、肝に脂肪が蓄積される脂肪肝、人体免疫系統の異常による自己免疫性肝疾患、毒性物質が過多に蓄積されて生ずる代謝性肝疾患などに区分される。
【０００６】
韓国内において、慢性肝疾患の主原因はＢ型肝炎ウィルスであり、Ｃ型肝炎は増加する趨勢にある。このようなウィルス性肝疾患に比べては相対的に少ないが、近年、アルコール消費量の増加に伴って習慣性飲酒によるアルコール性肝疾患が相当増えている。
【０００７】
アルコール性肝疾患は、臨床及び病理学的所見によって脂肪肝、アルコール性肝炎、アルコール性肝硬変症などに大別される。アルコール性脂肪肝は習慣的に酒を飲む人の９０〜１００％で発生し、アルコール性肝炎は１０〜３５％、アルコール性肝硬変症は８〜０％のみで発生すると知られている。
【０００８】
アルコールは主に消化臓器で吸収されるが、体内に吸収されたアルコールは、１０％程度が呼気、尿、汗から排泄され、９０％が肝で代謝される。血液を介して肝に移動したアルコールは、肝で生成されるいろいろの酵素（Alcohol Dehydrogenase, Microsomal ethanol oxidizing system, Catalase等）によってアセトアルデヒドに酸化し、アセトアルデヒドはさらに酵素によって身体に無害な酢酸に酸化する。一方、アルコールは、腸内に存在する多くの微生物によってアセトアルデヒドに酸化し易い。最近、腸内に存在する乳酸菌がエタノールをアセトアルデヒドに、アセトアルデヒドを酢酸に転換させてアルコール及びアセトアルデヒドの吸収を抑制し且つ肝を保護する機能を持つと報告されている。ところが、全ての乳酸菌がこのような機能を持っておらず、このような機能を持つ乳酸菌の開発が必要なのが実情である。このような乳酸菌を開発するときに重要な点は、人体腸内でよく増殖してその機能性を効果的に発揮することが可能な乳酸菌を開発しなければならないことにある。特に、乳酸菌は、宿主特異性を示すので、ヒトのための整腸剤または発酵製品のためにはヒトから分離した乳酸菌を使用しなければならない。ヒトから分離した乳酸菌を使用しなければ、実際人体内に定着することができず、所期の効果を得ることができない。
【０００９】
アルコールの酸化により生成される代謝産物であるアセトアルデヒドは、反応性の強い毒性物質であって、蛋白質と結合して酵素活性を阻害し、脂質と酸化の増加によりミトコンドリアエに損傷を与え、グルタチオンの欠乏を招き、ピリドキシン、ビタミンＡ、亜鉛及びセレニウムなどの欠乏を招くうえ、チューブリン重合阻害による蛋白質分泌及び移動阻害などの肝損傷を誘発する主要因子として指摘されている。また、アセトアルデヒドによる遊離基の生成は肝のコラーゲン合成を促進させるので、アセトアルデヒドは慢性的なアルコール摂取者において肝繊維化（肝硬変）の原因となるものと報告されている。
【００１０】
このため、アルコール代謝抑制剤、アルコール代謝促進剤、アルコール分解酵素などの多くの製品が開発され或いはその組成物が活用されてきた。たとえば、特許文献１には肝保護及び肝臓疾患治療用医薬組成物、特許文献２には宿酔解消及び肝機能改善用漢方生液剤の飲料とその製造方法、特許文献３にはケンポナシ、ハンノキ、葛の混合物を用いた宿酔解消機能性食品およびその製造方法、特許文献４にはアルコール代謝向上剤および肝障害低減剤、特許文献５にはアルコール吸収抑制剤を含有した宿酔除去及び肝臓保護用組成物、特許文献６にはケンポナシとハンノキを主材とした健康食品などがそれぞれ開示されている。
【００１１】
また、特許文献７にはケンポナシの幼い枝から分離された、肝毒性、宿酔及び疲労の解消活性を持つ低級アルコール不溶性抽出分画及び多糖体物質とこれを含有した組成物、特許文献８にはケンポナシから分離された、肝毒性及び宿酔の解消活性を持つ低級アルコール不溶性抽出分画及び多糖体物質とこれを含有した組成物、特許文献９にはケンポナシの木質部から分離された、肝保護活性を持つ低級アルコール不溶性抽出物、これから分離された多糖体およびこれを含有する組成物がそれぞれ開示されており、特許文献１０には宿酔解消用組成物及びこれを有効成分として含有する宿酔解消剤などが開示されているが、これは、予防的観点からの肝機能保護及び改善よりは主にアルコール過量摂取の際に発生する宿酔の解消に主目的を置いている。
【特許文献１】韓国特許登録第０１７８６９６号明細書
【特許文献２】韓国公開特許第２００１−００５０３３３号明細書
【特許文献３】韓国特許登録第０３４５７９８号明細書
【特許文献４】韓国公開特許第２００２−００２１９８０号明細書
【特許文献５】韓国公開特許第２００２−０００４１９３号明細書
【特許文献６】韓国公開特許第２００３−０００５１２７号明細書
【特許文献７】韓国特許登録第０４０３７２０号明細書
【特許文献８】韓国特許登録第０４０３７２１号明細書
【特許文献９】韓国特許登録第０４０３７２２号明細書
【特許文献１０】韓国特許登録第２００４−００５２９３０号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
したがって、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅを含有して予防的観点から肝を保護し或いは肝機能を改善する技術は、未だ製品化には至っていない状態である。
【００１３】
そこで、本発明はこのような問題点に鑑みてなされたもので、その目的とするところは、
肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な新規組成物を提供することにある。
【００１４】
また、本発明は、前記肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を有効成分として含有する発酵乳食品を提供することにある。
【００１５】
また、本発明は、前記肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を有効成分として含有する機能性飲料を提供することにある。
【００１６】
また、本発明は、前記肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を有効成分として含有する健康補助食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
上記課題を解決するために、本発明のある観点によれば、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅからなることを特徴とする、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物が提供される。
【００１８】
また、本発明の他の観点によれば、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅからなる、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、発酵乳食品が提供される。
【００１９】
また、本発明の別の観点によれば、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅからなる、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、機能性飲料が提供される。
【００２０】
また、本発明の別の観点によれば、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅからなる、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、健康補助食品が提供される。
【発明の効果】
【００２１】
以上述べたように、本発明に係るラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅからなる組成物は、低下した肝機能を改善し、飲み過ぎまたは慢性的なアルコールの摂取による肝損傷を保護及び治癒する効果が非常に優れており、飲酒の後に血中アルコールを低下させる機能があり、体内抗酸化能を増進させる効果が優れているので、各種肝疾患の予防及び肝機能の改善に効果的に使用できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
以下、本発明の実施の形態をより詳しく説明する。
【００２３】
本発明に係る肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物は、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅからなる。
【００２４】
肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物に含まれるラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１（韓国特許出願第２００３−００７７４８８号、寄託機関：韓国の農業生命工学研究院、寄託番号：ＫＡＣＣ９１０６９、寄託日：２００３年１０月６日）菌株は、健康な韓国成人の糞便から分離したものである。この菌株は、アルコール（エタノール）とアセトアルデヒド分解酵素活性及び減少能に優れているため、腸内で摂取アルコール（エタノール）をアセトアルデヒドに、アルコール（エタノール）の分解によって生成されて肝損傷誘発因子として作用するアセトアルデヒドを酢酸に転換させる。したがって、摂取したアルコール（エタノール）の吸収を効果的に抑制することにより、過多なアルコール代謝による肝機能障害、アルコール性肝疾患及び腸疾患の発生を予防することができる。
【００２５】
また、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物に含まれるラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２（韓国特許出願第２００４−００９８７１７号、寄託機関：韓国の農業生命工学研究院、寄託番号：ＫＡＣＣ９１１３８、寄託日：２００４年１０月２６日）も、小腸内アルコール（エタノール）代謝に関与して血中アルコール及びアセトアルデヒドの含量を低める機能を持っているため、アルコール摂取の際に小腸内におけるアルコールの吸収を抑制することにより、過量のアルコールが肝に移されて分解されることを予防する（Yang, W. Y., Ahn Y. T., Lim, K. S., Huh, C. S., Baek, Y. J., and Kim, H. S. 2004. Ethanol metabolism by probiotic lactic acid bacteria in vivo. Proceeding of 2004 JOINT ANNUAL MEETING. American Dairy Science Association, American Society of Animal Science, Poultry Science Association. p. 384）。
【００２６】
また、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物に含まれるラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧとビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１（韓国特許登録第１４２６１５号）は、肝毒性物質である四塩化炭素に対するマウスの肝損傷を抑制する効果が卓越しているため、市販の肝臓薬より肝数値（ＡＳＴとＡＬＴ）を低める効果が高いものと報告された（ハンソンイ、ハチョルソン、キムドンヒョン．Hepatoprotective effect of lactic acid bacteria, inhibitor of β-glucuronidase production against intestinal bacteria. 大韓薬学会秋季学術大会、Proceeding. 2004.）。
【００２７】
また、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物に含まれるハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、及び蕪濃縮液は、肝臓の保護及び血中アルコールの分解に有効な組成物（Ｙ−ＭＩＸと命名、韓国特許出願第２００４−００７２２１３号）であって、次の効果がある。
【００２８】
前記ハンノキ(Alnus japonica Steud.)は、カバノキ科に属する落葉高木であって、輸理木または赤楊ともいい、中国では茶條ともいう。深い山の中にある土産種朝鮮ハンノキの場合には、酒毒を解き且つ肝を保護する効果があると知られている。その主要成分は、タンニン、トリテルペノイドであるタラクセロール、ベツリン酸、精油などが知られている。このハンノキは、肝炎、肝硬化、脂肪肝などの各種肝疾患に治療効果が優れた薬木として知られている。
【００２９】
前記ウツボグサ(Prunella vulgaris var. lilacina Nakai)は、夏に果樹が半分萎れると、採取して日光に干して薬材として使用してきた無毒な漢方生薬である。漢方では、慢性的な腫れ物、痘瘡、急性乳腺炎およびリンパ腺結核などに用いられてきた。その主要成分としては、オレアノール酸(oleanolic acid)、ウルソル酸(ursolic acid)などのサポニン類、カロチン(carotene)、ビタミンＣ、ビタミンＫ、タンニン(tannin)、コーヒー酸(caffeic acid)、クロロゲン酸(chlorogenic acid)などが知られている［韓国有用植物資源研究総覧、韓国化学研究所、ｐｐ．４８０〜４８２（１９８８）］。
【００３０】
前記オオアザミ(Silybum marianum L. Gaertn.)は、菊科植物であって、１年草または２年生の地中海地方原産の植物であって、伝統的にヨーロッパで薬用植物として広く使用されてきた植物である。今日は、この植物の精製抽出物質であるシリマリン(silymarin)またはその主成分であるシリビン(silybin)が中毒性肝損傷、慢性炎症性肝疾患、ウィルス性肝炎及び肝硬変に対する補助治療剤として使用中にある。この他にも、蛋白質合成増加による肝の再生、肝損傷の際に生成されるロイコトリエン(leukotriene)と炎症反応性プロスタグランジン(inflammatory prostaglandin)の形成抑制、強力な抗酸化効果、飲み過ぎ後の解毒過程に必須成分であるグルタチオン(glutathione)の欠乏予防など様々な生理活性を示す。
【００３１】
前記生豆−米糠発酵抽出物は、炒めていないコーヒー豆と穀物から、微生物を利用した発酵工法によって発酵抽出した天然物であって、抗酸化作用と有害酸素除去効果のあるリン酸イノシトール(inositol phosphate)とポリフェノール(polyphenol)、アミノ酸(amino acid)、ペプチド(peptide)が含有された機能性植物発酵抽出物であって、人体に有害な有害酸素を除去してＤＮＡ損傷（癌発生原因）防止、不飽和脂肪酸の過酸化防止効果、ＡＣＥ阻害作用による高血圧防止作用などの効果がある。
【００３２】
前記蕪(Brassica campestris L. Var. rapifera)の有効成分としては、硫黄を含有した化合物であるイソチオシアン酸塩(isothiocyanate)、ジスルフィド(disulfide)、スルフォラファン(sulforaphane)などがある。蕪の辛い味を出すイソシアン酸は、前々から抗癌成分として知られており、動物実験では食道癌、肝癌、肺癌、大腸癌を予防する効果が立証された。このイソシアン酸は、最近、韓国内の動物実験で肝癌、肝硬化症の症状を軽減させる効果があるとも報告されている。
【００３３】
また、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物に含まれるトマト抽出物、ブロッコリー抽出物、及びパインアップル抽出物は、抗酸化に有効な組成物（韓国特許出願第２００５−０００９４４１）であって、次の効果がある。
【００３４】
前記トマト(Lycopersicon esculentum Mill)は、南アメリカ西部高原地帯原産であって、実を食用し、民間で高血圧や夜盲症、糖尿などに薬として使っている。トマト実は、水分９５重量％、蛋白質０．７重量％、脂肪０．１重量％、炭水化物３．３重量％、セルロース０．４重量％、及び灰分０．５重量％が含有されている。トマト実１００ｇ当りカロチン３９０μｇ、ビタミンＣ２０ｍｇ、ビタミンＢ１０．０５ｍｇ、ビタミンＢ２０．０３ｍｇ、ビタミンＢ６、カリウム、リン、マンガン、ルチン、ナイアシンなどが含有されている。この他にも、リコピンやケルセチン(quercetin)、フィトエン(phytoene)、フィトフルエン(phytofluene)、シクロリコピン(cyclolycopene)、サリチル酸塩(salicylates)、トマチン(tomatine)などの様々な生理活性物質が含有されている。特に、トマトは、カロチノイドとビタミンＥより抗酸化力及び抗癌作用に優れているリコピン(lycopene)の主要供給源として知られており、米国人の場合、約８０重量％のリコピンの供給をトマトまたはトマト加工食品から受けると知られている。フラボン(flavone)類に属するケルセチンは、男性ホルモンであるアンドロゲン受容体の発現を阻止することにより、前立腺癌の予防に効果があると知られている。
【００３５】
前記ブロッコリー(Brassica oleracea var. italica Plenck)は、地中海沿岸が原産地であって、花キャベツといわれるカリフラワー(cauliflower)の一種であり、幼い芽と茎を食用とする。ブロッコリーは、緑黄色野菜の中でも最も栄養価の高い作物であって、ブロッコリー１００ｇ当りビタミンＣ１１４ｍｇ、カロチン１．９ｍｇ、カリウム１６４ｍｇ、カルシウム１５０ｍｇなどが含有されている。鉄分も他の野菜に比べて２倍多く含有されている。ビタミンＣの含有量は、レモンの２倍、ジャガイモの７倍であって、野菜の中でも著しく多い方である。その他にも、ビタミンＡを始めとしてビタミンＢ１、Ｂ２とカリウム、リン、カルシウムなどのミネラルがほうれん草と同様に多量含有されている。一方、ブロッコリーに豊富に含有されているグルコシノレート(glucosinolate)などは抗癌作用があり、特に結腸癌の抑制にはブロッコリーがキャベツよりも優れているという最近の研究結果もある。特に、最近、ブロッコリーのグルコシノレートの酵素的加水分解産物の一つであるスルフォラファン(sluforaphane)が体内グルタチオンＳトランスフェラーゼなどの活性を選択的に誘導して発癌に対し防御作用を示すと知られている。
【００３６】
前記パインアップル(Ananas comosus)は、双子葉植物綱−粉胚乳目−パインアップル科の常緑多年草であって、パインアップルという名は、松毬に似ている実という意味から由来した。このパインアップは、中央アメリカと南アメリカ北部原産であって、実は汁が多く、スクロースが１０％、クエン酸が１％程度入っており、爽快な酸っぱい味と甘い味がする。ビタミンＡ、Ｂ、Ｃが豊富であり、特にビタミンＣは、果実内に最も多く含有されているが、１００ｇ当たり６０ｍｇが入っている。パインアップルにはブロメライン(bromelain)ともいう蛋白質分解酵素も入っているため、肉類の消化を助ける。また、ブロメラインは、血清のフィブリン(fibrin)とフィブリノゲン(fibrinogen)を加水分解して血液の凝固を抑制する役割をすると知られている。
【００３７】
また、肝機能の改善、血中アルコールの減少および体内抗酸化能の増進に有効な組成物に含まれるベタイン（トリメチルグリセリン）は、コリン(choline)、葉酸(folic acid)、及びビタミンＢ１２と類似の作用をする。これらは、肝で「メチル基供与体(Methyl donor)」としての作用をして有毒な物質の形にメチル基（−ＣＨ３）を化学的に供給して生体内の生化学的作用を円滑に行えるように助ける役割をする。特に、ベタインは、肝機能と関連して肝細胞の増殖、毒素除去能力に重要な作用をしていると知られている。アルコール摂取の際に肝でメチオニンシンターゼ(Methionine synthase)の活性が阻害されるため、メチオニンを代謝して生じたホモシステイン(homocysteine)をメチル化(Methylation)させることができない。したがって、肝毒性物質であるホモシステインが蓄積される。ベタインは、血中のホモシステインの含量を低める効果があり、特に飲酒による脂肪肝の症状を改善させる。ベタインが豊富な食品としては、魚類、砂糖大根、マメ科植物などがある。
【００３８】
また、Ａ型肝炎ウィルスの感染抑制に有効な初乳粉末は、乳牛の初乳を乾燥させたものであって、Ａ型肝炎ウィルスに対する抗体に有効な成分（韓国特許出願第２００４−００７２２１２号）である免疫グロブリンが多量含有されている。
【００３９】
また、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物に含まれるビタミンＢ群、例えばチアミン(thiamin、Ｂ)、リボフラビン(riboflavin、Ｂ２)、ナイアシン(niacin、Ｂ３)、葉酸(folic acid、Ｂ９)、コバラミン(cobalamin、Ｂ１２)などは、主にエネルギー代謝と関連して摂取した食品の栄養素を生体エネルギーに転換することに重要な役割をしている。また、ビタミンＢ群は、抗ストレスビタミンとも呼ばれており、肉体的または精神的に疲れを感じるときに最も速く消耗される栄養素である。人間の肉体は、ストレスに抵抗するためにこれらのビタミンを必要とするうえ、ストレスによってこれらを消尽し次第これらのビタミンが補充されなければならない。ビタミンＢ群の欠乏は、疲労、不安感、脱毛、爪損傷などを招くこともある。特に、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、葉酸などは、ベタインと同様の作用により毒性物質のホモシステインの含量を低めて肝損傷を防ぐ機能を持つ。
【００４０】
また、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物に含まれる抗酸化ビタミンＣは、水溶性ビタミンであって、欠乏の際に壊血病を生じさせる。この他にも、抗酸化ビタミンＣは、癌、精神分裂症、ＡＩＤＳ、紫斑病などを防止することが可能なビタミンであって、酸化物質である酵素または化合物に電子を提供する物質なので、電子を失い易くて良い還元物質となる抗酸化物質として作用し、果物と野菜に多量含有されている。
【００４１】
また、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物に含まれる抗酸化ビタミンＥは、脂溶性ビタミンであって、グループの中で最も重要なものはα−トコフェロールである。抗酸化ビタミンＥの欠乏は、生殖能力の低下、筋肉硬化症、中枢及び末梢神経の退化、心臓腫の発生、赤血球の溶血などを招く。この他にも、嚢胞性繊維症、非正常的ベータリポ蛋白血症、慢性胆うっ滞性肝疾患、小児脂肪便症、短腸症、及びその他の慢性下痢症を招く。抗酸化ビタミンＥは、植物性油脂（大豆油、コーン油、綿実油、サフラワー油など）、小麦の胚芽、緑色葉野菜などに多く含有されているが、食品の加工、貯蔵、調理中に多量損失する。
【００４２】
本発明によれば、前述した特性を持っているラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１、ハンノキ抽出物、ウツボグサ抽出物、オオアザミ抽出物、生豆−米糠発酵抽出物、蕪濃縮液、トマト抽出物、ブロッコリー抽出物、パインアップル抽出物、初乳粉末、ベタイン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ６、Ｂ９、Ｂ１２、及び抗酸化ビタミンＣ、Ｅは、様々な組成範囲の内で混合できるが、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進効果を含んだ薬理効果と製造コストなどを考慮すれば、総組成物１００重量％に対し、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１を０．００１重量％〜０．１重量％、好ましくは０．０１重量％、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２を０．００１重量％〜０．１重量％、好ましくは０．０１重量％、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧを０．００１重量％〜０．１重量％、好ましくは０．０１重量％、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１を０．００１重量％〜０．１重量％、好ましくは０．０１重量％、ハンノキ抽出物を３２重量％〜３６重量％、好ましくは３５重量％、ウツボグサ抽出物を３８重量％〜４２重量％、好ましくは４０重量％、オオアザミ抽出物を０．１重量％〜０．８重量％、好ましくは０．５重量％、生豆−米糠発酵抽出物を１重量％〜２．５重量％、好ましくは２重量％、蕪濃縮液を０．１重量％〜０．２重量％、好ましくは０．１６重量％、トマト抽出物を０．８重量％〜１．５重量％、好ましくは１重量％、ブロッコリー抽出物を０．１重量％〜０．５重量％、好ましくは０．３重量％、パインアップル抽出物を０．１５重量％〜０．２５重量％、好ましくは０．２重量％、初乳粉末３．０重量％〜４．０重量％、好ましくは３．５重量％、ベタインを４．５重量％〜５．０重量％、好ましくは４．８重量％、複合ビタミンフリーミックスを２．０重量％〜３．０重量％、好ましくは２．３５重量％を含有し、残部は３．８５重量％〜１８．２４重量％、好ましくは１０重量％の水からなることがよい。
【００４３】
この際、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、及びビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１は、総組成物１００重量％に対し、０．００１重量％未満で含有される場合には、人体の腸内でよく定着して増殖することが難しいという問題点があり、０．１重量％超過で含有される場合には、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧ、及びビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１の含量は０．００１重量％〜０．１重量％とすることが好ましい。
【００４４】
ハンノキ抽出物は、総組成物１００重量％に対し、３２重量％未満で含有される場合には、血中アルコールの濃度減少効果が低下するという問題点があり、３６重量％超過で含有される場合には、味が低下し、色が黒色に変わるうえ、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、ハンノキ抽出物の含量は３２重量％〜３６重量％とすることが好ましい。
【００４５】
ウツボグサ抽出物は、総組成物１００重量％に対し、３８重量％未満で含有される場合には、抗酸化効果が低下するという問題点があり、４２重量％超過で含有される場合には、味が低下し、色が黒色に変わるうえ、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、ウツボグサ抽出物の含量は３８重量％〜４２重量％とすることが好ましい。
【００４６】
オオアザミ抽出物は、総組成物１００重量％に対し、０．１重量％未満で含有される場合には、肝機能の改善及び抗酸化効果が低下するという問題点があり、０．８重量％超過で含有される場合には、味が低下し、色が黒色に変わるうえ、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、オオアザミ抽出物の含量は０．１重量％〜０．８重量％とすることが好ましい。
【００４７】
生豆−米糠発酵抽出物は、総組成物１００重量％に対し、１．０重量％未満で含有される場合には、抗酸化効果が低下するという問題点があり、２．５重量％超過で含有される場合には、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、 生豆−米糠発酵抽出物の含量は１．０重量％〜２．５重量％とすることが好ましい。
【００４８】
蕪濃縮液は、総組成物１００重量％に対し、０．１重量％未満で含有される場合には、損傷した肝細胞の再生が難しいという問題点があり、０．２重量％超過で含有される場合には、味が低下し、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、蕪濃縮液の含量は０．１重量％〜０．２重量％とすることが好ましい。
【００４９】
トマト抽出物は、総組成物１００重量％に対し、０．８重量％未満で含有される場合には、抗酸化効果が低下するという問題点があり、１．５重量％超過で含有される場合には、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、トマト抽出物の含量は０．８重量％〜１．５重量％とすることが好ましい。
【００５０】
ブロッコリー抽出物は、総組成物１００重量％に対し、０．１重量％未満で含有される場合には、抗酸化効果が低下するという問題点があり、０．５重量％超過で含有される場合には、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、ブロッコリー抽出物の含量は０．１重量％〜０．５重量％とすることが好ましい。
【００５１】
パインアップル抽出物は、総組成物１００重量％に対し、０．１５重量％未満で含有される場合には、抗酸化効果が低下するという問題点があり、０．２５重量％超過で含有される場合には、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、パインアップル抽出物の含量は０．１５重量％〜０．２５重量％とすることが好ましい。
【００５２】
初乳粉末は、総組成物１００重量％に対し、３．０重量％未満で含有される場合には、Ａ型肝炎ウィルスの感染を抑制することが難しいという問題点があり、４．０重量％超過で含有される場合には、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、初乳粉末の含量は３．０重量％〜４．０重量％とすることが好ましい。
【００５３】
ベタインは、総組成物１００重量％に対し、４．５重量％未満で含有される場合には、損傷した肝細胞の再生が難しいという問題点があり、５．０重量％超過で含有される場合には、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、ベタインの含量は４．５重量％〜５．０重量％とすることが好ましい。
【００５４】
複合ビタミンフリーミックスは、総組成物１００重量％に対し、２．０重量％未満で含有される場合には、肝細胞の毒性物質除去及び抗酸化効果が低下するという問題点があり、３．０重量％超過で含有される場合には、味が低下し、製造コストの上昇を誘発するという問題点があるので、複合ビタミンフリーミックスの含量は２．０重量％〜３．０重量％とすることが好ましい。
【００５５】
以下、本発明の構成を実施例によってさらに詳しく説明する。但し、下記実施例は、本発明を例示するためのもので、本発明を限定するものではない。
【００５６】
実施例１
【００５７】
肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物の製造
【００５８】
ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１は、食品原料用プロテオースペプトンＮｏ．３(Proteose peptone #3)、酵母エキス(Yeast Extract)、牛肉エキス(Beef Extract)、ブドウ糖を添加した液体培地を製造して３７℃で約１６時間培養した後、培養液を遠心分離し、滅菌した生理食塩水で洗浄し、その後滅菌乳に分散した。さらに凍結乾燥させて凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り約１０１１ｃｆｕ菌数を得た。
【００５９】
ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２も、前記ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１と同様にして培養し、最終的に凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り約１０１１ｃｆｕ菌数を得た。
【００６０】
ラクトバチルスアシトフィラスＣＳＧも、前記ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１と同様にして培養し、最終的に凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り約１０１１ｃｆｕ菌数を得た。
【００６１】
ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１は、食品原料用プロテオースペプトンＮｏ．３、酵母エキス、牛肉エキス、ブドウ糖、及びＬ−システインで培養し、最終的に凍結乾燥粉末グラム（ｇ）当り約１０１１ｃｆｕ菌数を得た。
【００６２】
ハンノキ抽出物は、乾燥したハンノキの木質及び樹皮１００ｇを１００℃の沸かし水１０００ｇに入れて１〜５時間抽出した後、その抽出液を５μｍのろ過紙で濾過して最終的に得た５００ｇを使用した。
【００６３】
ウツボグサ抽出物は、乾燥したウツボグサ５０ｇを１００℃の沸かし水１０００ｇに入れて１〜５時間抽出した後、その抽出液を４００メッシュで濾過して最終的に得た６００ｇを使用した。
【００６４】
オオアザミ抽出物（ＴＧＳ、日本）は、粉末状態で総フラボノイド含量が８０重量％〜９５重量％であり、シリビンの含量が２８重量％〜３２重量％であるものを市中で購入して使用し、生豆−米糠発酵抽出物（(株)東洋発酵、日本）は、液状のものを市中で購入して使用し、蕪濃縮液（（株）江華名品、韓国）は、液状（３４Ｂｒｉｘ０〜３６Ｂｒｉｘ０）のものを市中で購入して使用した。
【００６５】
トマト抽出物は、水でよく洗浄したトマト実１００ｇと水１００ｇを混合してミキサによって粉砕し、木綿布で濾過してトマト濾液１２５ｇを得た後、これを噴霧乾燥させて最終的に得た４．５ｇを使用した。
【００６６】
ブロッコリー抽出物は、熱水でよく洗浄したブロッコリー１００ｇと水１００ｇを混合してミキサによって粉砕し、２時間静置させた後、木綿布で濾過してブロッコリー濾液１００ｇを得、これを冷凍乾燥させて最終的に得た１．８ｇを使用した。
【００６７】
パインアップル抽出物は、冷水でよく洗浄したパインアップル１００ｇを細かく切った後、水１００ｇと混合してミキサによって粉砕し、その後木綿布で濾過してパインアップル濾液１００ｇを得、これを噴霧乾燥させて最終的に得た４．５ｇを使用した
【００６８】
初乳粉末は、５０，０００倍で蒸留水に希釈したとき、ＨＡＶ(hepatitis A virus)に特異的なＩｇＧの力価４９０ｎｍで吸光度が１〜１．７のものをカルチャーシステムスコリアから購入して使用した。
【００６９】
ベタインは、ベタイン含量９９重量％〜１００重量％の食品添加物用無水ベタイン（ＤＡＮＩＳＣＯ、フィランド）を購入して使用した。
【００７０】
ビタミンは、複合ビタミンフリーミックス（ＤＳＭ、シンガポール）を購入して使用し、原料名及び含量は次のとおりである。チアミンヒドロクロライド（Ｂ１）０．６９３３重量％、リボフラビン（Ｂ２）０．６３１２重量％、ナイアシンアミド（Ｂ３）６．１２６５重量％、ピリドキシンヒドロクロライド（Ｂ６）０．９９８２重量％、葉酸（Ｂ９）０．１４６１重量％、ビタミンＢ１２０．５０６５重量％、アスコルビン酸ナトリウム（ビタミンＣ）５６．４９７２重量％、ビタミンＥ２５．１５５８重量％、マルトデキストリン９．２４５２重量％が含有されている。
【００７１】
こうして得られた各成分を混合攪拌するが、総組成物１００重量％に対し、ラクトバチルスブレビスＨＹ７４０１を０．０１重量％、ラクトバチルスファーメンタムＣＳ３３２を０．０１重量％、ラクトバチルスアシドフィラスＣＳＧを０．０１重量％、ビフィドバクテリウムロンガムＨＹ８００１を０．０１重量％、ハンノキ抽出物を３５重量％、ウツボグサ抽出物を４０重量％、オオアザミ抽出物を０．５重量％、生豆−米糠発酵抽出物を２重量％、蕪濃縮液を０．１６重量％、トマト抽出物を１重量％、ブロッコリー抽出物を０．３重量％、パインアップル抽出物を０．２重量％、初乳粉末を３．５重量％、ベタインを４．８重量％、複合ビタミンフリーミックスを２．５重量％、水を１０重量％含有することを特徴とする、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物を得た。
【００７２】
一方、前記本発明の肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を有効成分として通常の担体や賦形剤などを添加することにより、各種機能性飲料や発酵乳食品、健康補助食品などに製造できる。
【００７３】
実施例２
【００７４】
肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする発酵乳食品の製造
【００７５】
乳酸菌培養液、前記肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物及び混合果汁シロップからなる発酵乳食品を製造する方法は、次のとおりである。
【００７６】
乳酸菌培養液は、原乳９５．３６重量％と脱脂粉乳（または混合粉乳）４．６重量％を攪拌し、１５℃での比重が１．０４７３〜１．０４７５、適正酸度が０．２００〜０．２２０％、ｐＨが６．６５〜６．７０、２０℃でのＢｒｉｘ０が１６．３〜１６．５％程度となるように混合した。その後、これをＵＨＴ熱処理（１３５℃で２秒間殺菌）し、４０℃に冷却した後、ストレプトコッカスサーモフィラス菌と乳糖分解酵素（Ｖａｌｌｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、ＵＳＡ）をそれぞれ０．０２重量ずつ添加し、６時間培養することにより、ＢＣＰ培地での総乳酸菌数が１．０×１０９ｃｆｕ／ｍＬ以上、適正酸度が０．８９〜０．９１％、ｐＨが４．５５〜４．６５となるようにして製造した。
【００７７】
混合果汁シロップは、液状果糖１０〜１５重量％、白砂糖３〜５重量％、茶色砂糖３〜５重量％、混合果汁濃縮液５６Ｂｒｉｘ０１０〜１５重量％、ペクチン０．１〜１．０重量％、フレッシュフルーツミックスエッセンス０．０５〜０．１５重量％、及び精製水５８．８５〜７３．８５重量％を３０〜３５℃で攪拌して混合した後、ＵＨＴ熱処理（１３５℃で２秒間殺菌）した後、冷却して製造した。
【００７８】
そして、前記の方法で製造された乳酸菌培養液３５〜５０重量％、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物５．５〜７．０重量％、及び混合果汁シロップ４３．０〜５９．５重量％を組み合わせて１５０ｂａｒで均質処理した後、１０℃以下に冷却して肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、発酵乳食品を製造した。
【００７９】
実施例３
【００８０】
肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする機能性飲料
【００８１】
前記肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物と混合果汁シロップからなる機能性飲料を製造する方法は、次のとおりである。
【００８２】
混合果汁シロップは、液状果糖１０〜１５重量％、白砂糖３〜５重量％、茶色砂糖３〜５重量％、混合果汁濃縮液５６Ｂｒｉｘ０１０〜１５重量％、ペクチン０．１〜１．０重量％、フレッシュフルーツミックスエッセンス０．０５〜０．１５重量％、及び精製水５８．８５〜７３．８５重量％を３０〜３５℃で攪拌して混合した後、ＵＨＴ熱処理（１３５℃で２秒間殺菌）した後、冷却して製造した。
【００８３】
前記の方法で製造された混合果汁シロップ４３．０〜５９．５重量％、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物５．５〜７．０重量％、及び残部水３３．５〜５１．５重量％を組み合わせて１５０ｂａｒで均質処理した後、１０℃以下に冷却し、その後これをガラス瓶、パッド瓶などの小包装容器に包装して肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする、機能性飲料を製造した。
【００８４】
実施例４
【００８５】
肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を有効成分として含有することを特徴とする健康補助食品
【００８６】
本発明の肝機能の改善、血中アルコールの減少、及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物は、単独でまたは薬剤学的に許容される賦形剤と通常の薬剤学的方法によって錠剤、カプセル剤などの剤形に製剤化して使用できる。
【００８７】
前記肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を有効成分とする健康補助食品を製造する方法は、次のとおりである。
【００８８】
本発明の肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を６５℃で１５分間殺菌した後冷却し、適量ずつ小さく分けて直ちに凍結させる。凍結させた本発明の肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を凍結乾燥させた後粉砕し、密封包装して製品化した。
【００８９】
試験例１（組成物の血中アルコールの低下）
【００９０】
本発明の試験例に使用した実験動物としては、５週齢のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系雄性マウス（大韓バイオリンク株式会社、韓国）を室温２５±１℃、湿度５０℃±５％の一定の条件で固形飼料（ＣＪ株式会社製、韓国）で１週間予備飼育した後、試験用とした。
【００９１】
本発明の肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物投与時の血中アルコール低下効果を次のような動物実験によって確認した。
【００９２】
対照群には２週間リン酸緩衝生理食塩水(Phosphate buffered saline)を５ｍＬ／ｋｇ Ｂ．Ｗ．強制経口投与し、組成物投与群には本発明の肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を５ｍＬ／ｋｇＢ．Ｗ．２週間投与した。各群はそれぞれ５匹とした。試験１５日目、対照群にはリン酸緩衝生理食塩水を、組成物投与群には本発明の肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物をそれぞれ５ｍＬ／ｋｇＢ．Ｗ．投与した後、３０分以内に対照群と組成物投与群に２２％アルコール溶液を４ｇ／ｋｇＢ．Ｗ．強制経口投与した。アルコールの投与から一定の時間が経過した後、微静脈からヘパリン処理毛細管で１００μＬの血液を取り、ここに１ｍＬのジクロロメタン(dichloromethane)（Ｓｉｇｍａ）を加えて強く攪拌した後、少量の無水硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＳＯ４）を処理して水分を除去し、濾過して血液内アルコール含量の分析に使用した。アルコール投与の後、１時間毎に採血して血中アルコールの量を測定した。血液内アルコールの含量は、ガスクロマトグラフィ（Ｈｅｗｌｅｔｔ Ｐａｃｋａｒｄ ＨＰ６８９０、ＧＣ）を使用し、試料は、自動試料注入器（ＨＰ Ｇ１５１２Ａ ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ）を用いてガスクロマトグラフィに注入した。検出器は、火炎イオン化検出器（ＦＩＤ）を使用した。キャリアガスとしては、窒素を使用した。分析に使用したカラムはＤＢ−Ｗａｘ（３０ｍ×０．２５ｍｍ×０．１５μｍ、Ａｇｉｌｅｎｔ）であり、分析条件は、インジェクター(injector)の温度を２００℃に維持し、温度プログラミング(temperature programming)によって５５℃で２分間維持し、１０℃／ｍｉｎずつ増加させて７０℃で４分間維持させた。内部標準物質として酢酸エチル(ethyl acetate)を使用した。
【００９３】
その結果を図１に示した。図１より、本発明の肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化に有効な組成物は対照群に比べて優れた血中アルコール低下能を示すことが分かる。
【００９４】
試験例２（組成物の慢性アルコール摂取に対する肝保護効果）
【００９５】
１週間予備飼育した実験動物を対照群と、アルコール群と、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物群に分けた。各群をそれぞれ６匹とした。対照群とアルコール群には、２週間リン酸緩衝生理食塩水（５ｍＬ／ｋｇＢ．Ｗ．）を強制経口投与し、組成物群には、本発明の肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物（５ｍＬ／ｋｇ、Ｂ．Ｗ．）を２週間投与し、アルコール群と肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物群には、それぞれ前記リン酸緩衝生理食塩水と肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を投与すると同時に、２２％アルコール溶液（３ｇ／ｋｇＢ．Ｗ．）を２週間強制経口投与した。試験１４日目に最後に投与した後、全ての群の実験動物を２４時間絶食させ、エーテル麻酔の下で腹部正中線沿いに開腹した後、腹部大動脈から採血して失血死させた。採血した血液は、血液分析器（Ｐｒｉｍｅ、ＢｉｏＳＥＤ）を用いてＡＳＴ(Aspartate aminotransferase)とＡＬＴ(Alanine aminotransferase)を測定した後、その結果をそれぞれ図２ａ、図２ｂに示した。
【００９６】
図２ａ及び図２ｂに示すように、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物群でアルコール群に比べてＡＳＴ及びＡＬＴ数値が減少したことが分かり、このような肝酵素数値（ＡＳＴ、ＡＬＴ）の減少は、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物のアルコールに対する肝保護効果が向上したことを示す。
【００９７】
試験例３（組成物の抗酸化効果）
【００９８】
肝組織内グルタチオンＳトランスフェラーゼの活性増加及びＳＯＤの活性減少による抗酸化能増加効果試験
【００９９】
前記試験例２に準じて当該物質を強制投与した後失血死させた全ての群の実験動物の肝を４℃の生理食塩水で灌流させ、肝組織内に残っている血液を除去した後、摘出した。
摘出した肝組織の一定量に４倍の０．２５Ｍスクロース溶液（０．５ｍＭ ＥＤＴＡ含有）を加えて氷の水槽でガラステフロン（登録商標）ホモジナイザー(glass Teflon homogenizer)で均質液を作った。この均質液を６００×ｇで１０分間遠心分離して核及び未摩砕部分を除去し、上澄み液を１０，０００×ｇで２０分間遠心分離した。さらにミトコンドリア分画を除去した上澄み液を１０５，０００×ｇで１時間超遠心分離して上澄み液（サイトソル分画）を得た。サイトソル分画は、グルタチオンＳトランスフェラーゼ(GSH S-transferase)及びスーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）の活性測定に使用した。酵素の活性に使用した酵素液（サイトソル分画）内の蛋白質含量は、蛋白質測定キット（Ｐｒｏｔｅｉｎ ａｓｓａｙ ｋｉｔ，Ｂｉｏ−ｒａｄ）を用いて測定した。
【０１００】
グルタチオンＳトランスフェラーゼの活性は、次のように測定した。サイトソル分画１０μＬ、０．１Ｍのリン酸カリウム緩衝溶液（ｐＨ６．５）２．９３５ｍＬ、０．１２Ｍ ２−４ＣＮＤＢ(1-chloro-2,4-dinitrobenzene)２５μＬ、及び０．１Ｍ還元型グルタチオン３０μＬを混合して２５℃で２０秒の間隔で３分間の反応を３４０ｎｍで測定した。酵素の活性は、１分間酵素蛋白質ミリグラム（ｇ）当り生成される２，４−ジニトロベンゼン−グルタチオン(2,4-dinitrobenzene-glutathione)の量を２，４−ジニトロベンゼン−グルタチオンの分子吸光度係数（Ｅ ｍＭ／３４０ｎｍ＝９．６ｍＭ−１ｃｍ−１）を用いて測定した［Habig等. J. Biol. Chem. 249:7130-7139(1985)］。対照群のグルタチオンＳトランスフェラーゼの活性と、アルコール群及び肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物群の活性とを比較して活性増加率（％）を求めて図３ａに示した。
【０１０１】
図３ａに示すように、肝の解毒作用と関連のあるグルタチオンＳトランスフェラーゼの活性は、アルコール投与の際に増加したが、アルコール群では１１３％、前記組成物群で１２２％に肝組織内抗酸化酵素活性が向上したことが分かる。
【０１０２】
スーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）の活性は、次のように測定した。５０ｍＭトリス塩酸緩衝溶液（１０ｍＭ ＥＤＴＡ含有、ｐＨ８．６）２．８ｍＬと１５ｍＭのピロガロール(pyrogallol)０．１ｍＬと混合して５℃で５分間前培養させた後、サイトソル液０．１ｍＬを加えて最終反応液が３．０ｍＬとなるようにした。この反応液を２５℃で１０分間反応させた後、１Ｎ塩酸０．１ｍＬを加えて反応を終了させ、４４０ｎｍで吸光度の変化を測定した。酵素活性のユニットは、酵素液を入れずに反応させた１５ｍＭピロガロール溶液の自動酸化を５０％抑制する酵素の量で定め［MarklundとMarklund. Eur. J. Biochem. 47:469-474(1974)］、対照群、アルコール群、並びに肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物群の測定結果を比較して図３ｂに示した。
【０１０３】
図３ｂに示すように、対照群の場合には３．６Ｕ／ｍｇ、前記組成物群の場合には３．９Ｕ／ｍｇ、アルコール群の場合には５．２Ｕ／ｍｇであって、アルコール投与によって肝組織内で増加したスーパーオキシドの分解のために高くなった酵素活性が、組成物群の場合、アルコール群より低い数値を示して肝組織内抗酸化能が向上した。
【０１０４】
肝組織内過酸化脂質減少効果試験
【０１０５】
肝均質液０．１ｍＬに８．１％ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）０．２ｍＬ、２０％酢酸緩衝溶液（ｐＨ３．５）１．５ｍＬ及び０．８％チオバルビツール酸溶液１．５ｍＬを加え、蒸留水を入れて反応溶液を４ｍＬに調節した後、９５℃で１時間反応させた。反応済み後、室温に冷やし、その後蒸留水１ｍＬとブタノール：ピリジン（１５：１）混合溶液５ｍＬを添加して混合した後、４，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、その後５３２ｎｍで吸光度を測定した。１，１，３，３−テトラエトキシプロパンを標準物質として用いて標準曲線を作成し、これからマロンジアルデヒド（ＭＤＡ）の濃度(nmoles MDA/g of liver)で換算して［Okawa等. Anal. Biochemistry. 95:35-41(1979)］、対照群、アルコール群、及び肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物群のＭＤＡ濃度（ｎｍｏｌｅｓ／ｇ）を図３ｃに示した。
【０１０６】
図３ｃに示すように、前記組成物群がアルコール群に比べて低いＭＤＡ濃度（ｎｍｏｌｅｓ／ｇ）を示すことが分かるが、これは、前記組成物群がアルコール群より肝組織内の過酸化脂質生成減少効果に優れることを示す。
【０１０７】
試験例４（組成物の体内アルコール代謝促進効果）
【０１０８】
前記試験例３で製造したマウス間のサイトソル分画内アルコール分解酵素活性を測定した。２．５ｍＭのニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ＋）が含有された０．１Ｍグリシン緩衝溶液（ｐＨ９．６）に、最終濃度が２５ｍＭとなるようにエタノールを添加した後、１００μＬのサイトソル液を添加して２５℃の恒温水槽で反応させた。反応済みの後、還元されるニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）の量に対して分光光度計を用いて２５℃、３４０ｎｍで吸光度を測定した。アルコール分解酵素の活性は、サイトソル分画の蛋白質ミリグラム（ｍｇ）及び反応時間当たり生成される還元されたニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）の量で計算した［Nosova等. Alcohol & Alcoholism. 35:561-568(2000)］。対照群、アルコール群、並びに肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物群のアルコール分解酵素の活性を図４に示した。
【０１０９】
図４に示すように、前記組成物群ではアルコール群に比べてアルコール分解酵素の活性が増加することが分かるが、これは前記組成物群が肝のアルコール代謝を促進することを示す。
【０１１０】
試験例５（組成物の人体肝機能改善効果）
【０１１１】
対象者は、人体効能試験の公告によって無作為に募集した満１８才以上〜６０才未満の成人のうち、担当医師が適合と判定した人達である。研究の目的を理解し参与を受諾した対象者を被験者として選定した。
【０１１２】
肝機能改善効果試験のための対象者は、去る６ヶ月中に肝機能検査数値がＡＳＴ５０以上またはＡＬＴ４５以上またはγ−ＧＴＰ８０以上である人達のうち、肝炎ウィルス（Ｂ、Ｃ）感染有無が確認された場合、または肝炎ウィルスが原因でない場合、全ての人を１次対象者として選定して問診及び精密肝機能検査を施した後、６０名の被験者を最終的に選定した。
【０１１３】
肝機能改善効果試験は、次のように実施した。
【０１１４】
肝機能改善効果試験群は、被験者６０名を偽薬群、陽性対照群、並びに肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物群の小集団として、無作為に分類した。偽薬群、陽性対照群、前記組成物群のいずれも、それぞれの試料（１５０ｍＬ）を一日２回ずつ（朝、夜）８週間服用させた。肝機能改善効果は、最終対象者選定の際に検査した肝機能数値（０週）と、試料服用を始めてから４週及び８週にそれぞれ空腹の際に採血して得た肝機能数値とを比較した。肝機能指標の分析は、全血３ｍＬを２，５００ｒｐｍで１０分間遠心分離して血清を分離した後、生化学自動分析器（Hitachi 7600-110, 7170 automatic analyzer）を用いてＡＳＴ(Aspartate aminotransferase)、ＡＬＴ(Alanine aminotransferase)、γ−ＧＴＰ(γ-glutamyl transpeptidase)を測定した。
【０１１５】
前記試験例５に使用された試料は、次のとおりである。各試験群に提供された全ての試料は、同一容器に入れて完全にパッキングして冷蔵保管状態で研究室まで伝達され、実験群に応じて研究責任者の管理の下に被験者に直接提供された。この際、一定の模様に包装し、被験者が伝達試料の差異を認識し得ないようにした。偽薬は、前記組成物と類似の味を感じることができるように、前記組成物に含有された同一量の混合果汁濃縮液と液状果糖を精製水に添加して１３５℃で２秒間殺菌して製造した。肝機能改善剤（陽性対照群用）は、同一の方法で製造された偽薬に肝機能改善剤中の懸濁液形態のＣａｒｄｕｕｓ ｍａｒｉｎｕｓ ｅｘｔ．（懸濁液１００ｍＬ中のＣａｒｄｕｕｓ ｍａｒｉｎｕｓ ｅｘｔ．１．３８ｇ）を薬局から購入して試料１瓶当り１８．９ｍＬ混合して使用した。
【０１１６】
研究結果は、ＳＰＳＳ／ＷＩＮ１２．０プログラムを用いて統計処理した。２群の平均比較は、独立した標本の場合には独立標本ｔ−検定(Independent sample t-test)を利用し、対をなした場合には対応標本ｔ−検定(Paired samples t-test)を利用した。３群以上の場合には、一元配置分散分析法(One-way ANOVA)を利用し、事後分析はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉの方法で補正した。反復測定された資料の場合には、反復測定された資料の分散分析法(Repeated measures ANOVA)を利用し、群間差異の事後分析はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉの方法で補正した。
【０１１７】
本発明の肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物の人体肝機能改善効果は、図５ａ｛ａ、ｂ：互いに異なる文字は各群内で統計的に有意な差異を示す（ｐ<０．０５）｝、図５ｂ｛ａ、ｂ、ｃ：互いに異なる文字は各群内で統計的に有意な差異を示す（ｐ<０．０５）｝、及び図５ｃ｛ａ、ｂ：互いに異なる文字は各群内で統計的に有意な差異を示す（ｐ<０．０５）｝に示した。
【０１１８】
図５ａ、図５ｂ及び図５ｃに示すように、前記組成物群では肝数値（ＡＳＴ、ＡＬＴ、γ−ＧＴＰ）の減少効果を示し、特にＡＳＴの場合は市販肝臓薬の減少効果（０週のＡＳＴ数値〜８週のＡＳＴ数値）の約８０％水準を示した。
【０１１９】
試験例６（組成物の人体血中アルコール減少効果）
【０１２０】
人体内アルコール代謝判定試験のための対象者は、先天性または慢性疾患がなく、内科的な診察結果、病的症状または所見がなく、担当医師が食品の特性に応じて実施した血液病理検査、血液化学検査、尿検査などの臨床病理検査の結果、適合と判定された人達を被験者として選定した。体内アルコール代謝試験群は、交差試験形態であって、被験者２６名がまず２週間偽薬を摂取し、３週間休み期間を持った後、さらに肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物を２週間摂取する群（偽薬−組成物群）１３名と、２週間前記組成物を摂取し、３週間休み期間を持った後、さらに偽薬を２週間摂取する群（組成物−偽薬群）１３名に無作為に分類した。
【０１２１】
偽薬−組成物群、組成物−偽薬群のいずれも、の各試料（１５０ｍＬ）を一日２回（朝、夜）ずつ２週間摂取させた。偽薬または前記組成物を服用した後、血中アルコール減少効果の差異を比較分析するために、試料の摂取開始直前と２週間の摂取直後のそれぞれ１回空腹の際に採血を施して血中アルコール水準を分析した。１次試験の後３週間の休みによって対象者を安定化させた後、同一の方法で役割を変えて２次試験を行った。２回の試験が行われる過程でアルコール代謝効果を比較するために、１次及び２次試験の最終日に、全ての被験者は同一成分のアルコール（５０ｍＬ、４０％ｖｏｌ）を１分以内に摂取させ、血中アルコール濃度の個人別変化を見るために、アルコール摂取直前を含んで摂取後４時間まで合計８回（０分、２０分、４０分、６０分、９０分、１２０分、１８０分、２４０分）採血して血液内のアルコール濃度を比色反応法によって分析比較した。血中アルコール濃度を分析するための採血の便宜上、ｈｅｐａｒｉｎｉｚｅｄ ａｎｇｉｏ−ｃａｔｈｅｔｅｒ方式を選択した。
【０１２２】
血中アルコールの濃度分析は、次のように実施した。血中アルコール濃度の測定及び計算は、ＣＯＢＡＳ ＩＮＴＥＧＲＡ ｓｙｓｔｅｍ（Ｉｎｔｅｇｒａ４００、Ｒｏｃｈｅ、ドイツ）を使用した。Ｒ１(buffer reagent:300mmol/L 1,3-diamino-2-hydroxypropane buffer pH 9.0)溶液１２０μＬに、分離された血清２μＬを混合した後、Ｒ２(enzyme reagent:50mmo1/L sodium citrate, 36mmol/L NAD, and ≧2000μkat/L alcohol dehydrogenase)溶液４０μＬを入れて総量が２４５μＬとなるように蒸留水を添加して３７８／４０９ｎｍで吸光度を測定し、血中アルコール濃度（％）で算出した。
【０１２３】
血中アルコールの濃度測定結果は、試験例５と同様に、ＳＰＳＳ／ＷＩＮ １２．０プログラムを用いて同一の方法で統計処理し、図６ａ（＊：ｐ<０．０５．群内における差異はｐａｉｒｅｄ ｔ−ｔｅｓｔを行って確認）と図６ｂ（＊：ｐ<０．０５．群内における差異はｐａｉｒｅｄ ｔ−ｔｅｓｔを行って確認）に示した。
【０１２４】
図６ａ及び図６ｂに示すように、１次、２次試験のいずれにおいて、本発明の肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物群の血中アルコール水準が対照群と比較して大幅減少することが分かる。
【０１２５】
試験例７（組成物の人体抗酸化増進効果）
【０１２６】
組成物の人体抗酸化増進効果試験は、試験例６のアルコール代謝判定試験と同一の試験対象者を対象として実施した。偽薬−組成物群、組成物−偽薬群のいずれも、各試料（１５０ｍＬ）を一日２回（朝、夜）ずつ２週間摂取させた。偽薬又は組成物服用後の抗酸化効果の差異を比較分析するために、試料の摂取開始直前と２週間摂取直後、それぞれ１回空腹の際に採血を施して総抗酸化能（ＴＡＳ；total antioxidant status）及び脂質過酸化抑制能(thiobarbituric acid reactive substance)を分析した。１次試験の後３週間の休みによって対象者を安定化させた後、同一の方法で役割を変えて２次試験を行った。
【０１２７】
総酸化能分析は、次のように実施した。遊離基の一種であるＡＢＴＳ[2,2'-Azino-di-(3-ethylbenzthiazoline sulphonate)]とフェロキシダーゼを過酸化水素で活性化させることにより、生成されたフェリルミオグロビンラジカル種(ferryl myoglobin radical species)との相互作用によって形成されたＡＢＴＳ遊離基陽イオン(free radical cation)の吸光度を測定することに基礎を置いたＴｏｔａｌ Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ Ｓｔａｔｕｓ ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｒａｎｄｏｘ Ｌａｂ．Ｌｔｄ．，ＵＫ）を利用した。被験者から採血した後、分離した血漿２０μＬをクロモゲン(chromogen)溶液１ｍＬを入れて混合した後、室温で１分間反応させ、６００ｎｍで吸光度を測定した（Ａ１）。ここに基質溶液２００μＬを入れて混合し、３分後に同一の波長で吸光度を測定した（Ａ２）。ＴＡＳ濃度（ｍｍｏｌ／Ｌ）は、次の式によって算出した。
【０１２８】
Ａ２−Ａ１＝ΔＡ of samples/standard/blank
Total Antioxidant Status;  Factor＝conc. of standard／(ΔＡ blank−ΔＡ standard)mmol/L＝Factor×(ΔＡ Blank−ΔＡ Sample)
【０１２９】
脂質過酸化抑制能の分析は、次のように実施した。ＴＭＯＰ(1,1,3,3-Tetramethoxypropane)を標準試料として使用したＬｉｐｉｄ Ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ ｋｉｔ（ＣＡＬＢＩＯＣＨＥＭ、ＣＡ、ＵＳＡ）を利用した。被験者から採血した後、分離したプラズマ２００μＬをＲ１(N-methyl-2-phenylindole in acetonitrile)溶液６５０μＬに混合した後、３〜４秒間振とうし、Ｒ２(methanesulfonic acid)溶液１５０μＬを混合して４５℃で６０分間反応させた後、５８６ｎｍで吸光度を測定した。測定された値は、標準曲線に代入させてＭＤＡの量で換算した。
【０１３０】
体内の総抗酸化能と脂質過酸化抑制能の測定結果は、試験例５と同様に、ＳＰＳＳ／ＷＩＮ１２．０プログラムを用いて同一の方法で統計処理し、図７ａ（＊：ｐ<０．０５、群内における差異はｐａｉｒｅｄ ｔ−ｔｅｓｔを行って確認）と図７ｂ（＊：ｐ<０．０５、群内における差異はｐａｉｒｅｄ ｔ−ｔｅｓｔを行って確認）に示した。
【０１３１】
図７ａ及び図７ｂに示すように、１次、２次試験の両方ともで、肝機能の改善、血中アルコールの減少及び体内抗酸化能の増進に有効な組成物群の摂取によって血中総抗酸化物能が増加し、過酸化脂質の含量は減少することが分かる。
【図面の簡単な説明】
【０１３２】
【図１】本発明の組成物による実験動物における血中アルコール水準の減少効果を示すグラフである。
【図２】図２ａは、本発明の組成物による実験動物における慢性的なアルコール摂取時のＡＳＴ減少効果を示すグラフである。図２ｂは、本発明の組成物による実験動物における慢性的なアルコール摂取時のＡＬＴ減少効果を示すグラフである。
【図３】図３ａは、本発明の組成物による実験動物における慢性的なアルコール摂取時のグルタチオンＳトランスフェラーゼの活性増加効果を示すグラフである。図３ｂは、本発明の組成物による実験動物における慢性的なアルコール摂取時のスーパーオキシドディスムターゼの活性減少による抗酸化能増加効果を示すグラフである。図３ｃは、本発明の組成物による実験動物における慢性的なアルコール摂取時の肝組織内過酸化脂質減少効果を示すグラフである。
【図４】本発明の組成物による実験動物におけるアルコール分解酵素の活性増加効果を示すグラフである。
【図５】図５ａは、本発明の組成物による人体内ＡＳＴ減少効果を示すグラフである。図５ｂは、本発明の組成物による人体内ＡＬＴ減少効果を示すグラフである。図５ｃは、本発明の組成物による人体内γ−ＧＴＰ減少効果を示すグラフである。
【図６】図６ａは、本発明の組成物による人体内血中アルコール水準の減少効果（１次）を示すグラフである。図６ｂは、本発明の組成物による人体内血中アルコール水準の減少効果（２次）を示すグラフである。
【図７】図７ａは、本発明の組成物による人体内総抗酸化能増加効果を示すグラフである。図７ｂは、本発明の組成物による人体内過酸化脂質量の減少を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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