(57)【要約】      （修正有）【課題】優れた血圧降下作用を有するコーヒー飲料の製法の提供。【解決手段】焙煎コーヒー豆抽出液に生コーヒー豆抽出物を添加することを特徴とするヒドロキシヒドロキノン含有量が低下し、血圧降下作用を有するコーヒー飲料組成物の製造法。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
焙煎コーヒー豆抽出液に生コーヒー豆抽出物を添加することを特徴とするヒドロキシヒドロキノン含有量の低下したコーヒー飲料組成物の製造法。
【請求項２】
生コーヒー豆抽出物が、６０℃以下の温度で抽出されたものである請求項１記載の製造法。
【請求項３】
生コーヒー豆抽出物の添加を９０℃以下の温度で行うものである請求項１又は２記載の製造法。
【請求項４】
コーヒー飲料組成物中のヒドロキシヒドロキノン含有量が、クロロゲン酸類量の０．１質量％未満である請求項１〜３のいずれか１項記載の製造法。
【請求項５】
コーヒー飲料組成物中のクロロゲン酸類含有量が０．０１〜１０質量％である請求項１〜４のいずれか１項記載の製造法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒドロキシヒドロキノン含有量の低下したコーヒー飲料組成物の製造法に関する。
【背景技術】
【０００２】
高血圧の治療薬としては、神経因子による調節系に作用する各種神経遮断薬、液性因子に関わる調節系に作用するＡＣＥ阻害薬、ＡＴ受容体拮抗薬、血管内皮由来物質による調節系に関わるＣａ拮抗薬、腎臓での体液調節系に関わる降圧利尿薬などの医薬品が挙げられ、これらは主として医療機関において、重症の高血圧患者に使用される。しかし、現状において高血圧対策の目的で使用される医薬品は、有効性に関しては満足できる反面、少なからず存在する副作用のため患者にかかる負担は大きい。
【０００３】
また食餌療法、運動療法、飲酒・喫煙の制限などの生活改善による一般療法が、軽症を含む正常高値高血圧者から重症な高血圧者に広く適用されている。一般療法の重要性の認識の高まりに伴い、特に食生活の改善が重要であるといわれ続けている。血圧降下作用を有する食品は、数多く、従来から食品由来の降圧素材の探索がさかんに行われ、その有効成分の分離・同定が数多く行われている。
【０００４】
このうち、コーヒー等の食品に含まれているクロロゲン酸、カフェ酸、フェルラ酸等が優れた血圧降下作用を示すことが報告されている（特許文献１〜３）。しかしながら、クロロゲン酸類を多量に含むことが知られているコーヒー飲料では、明確な血圧降下作用が認められず、逆に血圧を上昇させるという報告もある（非特許文献１）。
【特許文献１】特開２００２−３６３０７５号公報
【特許文献２】特開２００２−２２０６２号公報
【特許文献３】特開２００２−５３４６４号公報
【非特許文献１】Eur. J. Clin. Nutr., 53(11), 831(1999)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、優れた血圧降下作用を有し、通常摂取できる飲料の製造法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
そこで本発明者らは、コーヒー飲料がクロロゲン酸を含んでいるにもかかわらず、十分な血圧降下作用を示さないことに着目し、血圧降下作用とコーヒー飲料成分との関係について種々検討した結果、コーヒー飲料に含まれているヒドロキシヒドロキノンがクロロゲン酸類の血圧降下作用を阻害していることを見出した。さらに検討した結果、コーヒー飲料中のクロロゲン酸類量を一定範囲に保持し、ヒドロキシヒドロキノン含有量を通常含まれる量より少ない一定量以下に低下させれば、優れた血圧降下作用を有するコーヒー飲料組成物が得られることを見出した。そしてさらに、かかるヒドロキシヒドロキノン含有量の低下したコーヒー飲料を効率的に製造する方法について検討した結果、焙煎コーヒー豆抽出液に生コーヒー豆抽出物を添加すれば、クロロゲン酸類の含有量はほとんど低下せず、ヒドロキシヒドロキノン含有量が選択的に低下したコーヒー飲料が得られることを見出した。
【０００７】
すなわち、本発明は、焙煎コーヒー豆抽出液に生コーヒー豆抽出物を添加することを特徴とするヒドロキシヒドロキノン含有量の低下したコーヒー飲料組成物の製造法を提供するものである。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、ヒドロキシヒドロキノン含有量が低く、かつクロロゲン酸類含有量の保持されたコーヒー飲料組成物が、効率良く得られる。得られたコーヒー飲料組成物は、優れた血圧降下作用を有し、かつ長期間摂取可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明方法に用いる焙煎コーヒー豆抽出液は、焙煎されたコーヒー豆及び／又はその粉砕物から水〜熱水で抽出することにより得られる。その抽出液は必要に応じて濃縮又は希釈して用いてもよい。
【００１０】
用いるコーヒー豆の種類は、特に限定されないが、例えばブラジル、コロンビア、タンザニア、モカ等が挙げられる。コーヒー種としては、アラビカ種、ロブスタ種などがある。コーヒー豆は１種でもよいし、複数種をブレンドして用いてもよい。コーヒー豆の焙煎方法については特に制限はなく、焙煎温度、焙煎環境についても何ら制限はなく、通常の方法を採用することができる。
【００１１】
生コーヒー豆抽出物としては、焙煎コーヒー豆抽出液中のヒドロキシヒドロキノン含有量を低下させる作用を有する成分が含まれていればよく、例えば６０℃以下、さらに５〜３０℃の温度で抽出された抽出物が好ましい。抽出溶媒は、水性媒体が好ましく、水又は塩を含む水が好ましい。生コーヒー豆としては、焙煎していないコーヒー豆であればよく、必要に応じて粉砕して用いてもよい。生コーヒー豆の種類も特に制限されないが、例えば、ブラジル、コロンビア、タンザニア、モカ等が用いられる。コーヒー種としては、アラビカ種、ロブスタ種などがある。生コーヒー豆も１種でもよいし、複数種をブレンドして用いてもよい。
【００１２】
焙煎コーヒー豆抽出液に生コーヒー豆抽出物を添加するには、生コーヒー豆抽出物中の成分を有効に作用させるため、８０℃以下、さらに３０〜６０℃の温度で行うのが好ましい。添加量は、焙煎コーヒー豆抽出液に対して０．１％〜５０％、さらに０．５％〜１０％、特に１％〜５％が好ましい。具体的には、生コーヒー豆抽出物を焙煎コーヒー豆抽出液に添加して撹拌すればよい。撹拌時間は、条件により異なるが、１分〜５時間程度で十分である。
【００１３】
生コーヒー豆抽出物添加後は、ヒドロキシヒドロキノン含有量が十分に低下した時点で、加熱して反応を終了させるのが、ヒドロキシヒドロキノン含有量を低下させ、かつクロロゲン酸類含有量を保持するうえで望ましい。加熱処理としては、８０℃以上、さらに９０〜１００℃に加熱するのが簡便である。
【００１４】
前記の処理により得られた焙煎コーヒー豆抽出液は、そのままコーヒー飲料とすることもできるが、容器詰コーヒー飲料とすることもでき、さらにソリュブルコーヒー飲料とすることもできる。本発明におけるコーヒー飲料組成物には、これらの容器詰コーヒー飲料、ソリュブルコーヒー飲料も含まれる。容器詰飲料とする場合、容器は酸素非透過性のものを用いるのが好ましい。
【００１５】
本発明方法により、コーヒー飲料組成物中のヒドロキシヒドロキノン含有量を、クロロゲン酸類量の０．１質量％未満にまで低下させることができる。クロロゲン酸類量に対してヒドロキシヒドロキノン量が０．１質量％未満であれば、クロロゲン酸類の血圧降下作用が十分に発揮される。より好ましくは０．０１質量％以下である。クロロゲン酸類量に対してヒドロキシヒドロキノン量が０．０１質量％以下であればクロロゲン酸の血圧降下作用はまったく抑制されない。ここで、本発明により得られるコーヒー飲料組成物中のヒドロキシヒドロキノン含量は０であってもよい。
【００１６】
当該ヒドロキシヒドロキノン含量は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により測定することができる。ＨＰＬＣにおける検出手段としては、ＵＶ検出が一般的であるが、ＣＬ（化学発光）検出、ＥＣ（電気化学）検出、ＬＣ−Ｍａｓｓ検出等により更に高感度で検出することもできる。なお、ＨＰＬＣによるヒドロキシヒドロキノン含量の測定にあたっては、コーヒー飲料を濃縮した後に測定することもできる。
なお、ヒドロキシヒドロキノン量の測定にあたっては、容器詰飲料の場合には開缶後直ちに、例えば０.１Ｎ(規定)となるように塩酸を加えて、又は、０．１Ｎの塩酸／水酸化ナトリウムバッファー系で測定するのが好ましい。
【００１７】
本発明により得られるコーヒー飲料組成物は、血圧降下作用及び味の点で、クロロゲン酸類を０．０１〜１０質量％含有するのが好ましい。容器詰コーヒー飲料などの、そのまま飲む形態のコーヒー飲料組成物の場合には、クロロゲン酸類を０．０１〜１質量％、さらに０．０５〜１質量％、特に０．１〜１質量％含有するのが好ましい。またソリュブルコーヒー組成物にはクロロゲン酸類は０．１〜１０質量％、さらに０．５〜１０質量％、特に１〜１０質量％含有するのが好ましい。（Ａ）当該クロロゲン酸類としては（Ａ1）モノカフェオイルキナ酸、（Ａ2）フェルラキナ酸、（Ａ3）ジカフェオイルキナ酸の三種を含有する。ここで（Ａ1）モノカフェオイルキナ酸としては３−カフェオイルキナ酸、４−カフェオイルキナ酸及び５−カフェオイルキナ酸から選ばれる１種以上が挙げられる。また（Ａ2）フェルラキナ酸としては、３−フェルラキナ酸、４−フェルラキナ酸及び３−フェルラキナ酸から選ばれる１種以上が挙げられる。（Ａ3）ジカフェオイルキナ酸としては３，４−ジカフェオイルキナ酸、３，５−ジカフェオイルキナ酸及び４，５−ジカフェオイルキナ酸から選ばれる１種以上が挙げられる。
【００１８】
本発明のコーヒー飲料組成物は、ヒドロキシヒドロキノン含有量を低減させる以外は、通常のコーヒー成分をそのまま含有しているのが好ましい。
【００１９】
本発明のコーヒー飲料組成物は、カリウムを３０〜３００mg／１００ｇ、好ましくは４０〜２５０mg／１００ｇ、更に好ましくは５０〜２００mg／１００ｇ含有するのが好ましい。カリウム濃度は原子吸光光度法によって測定することができる。
【００２０】
本発明のコーヒー飲料組成物は、１００ｇあたりコーヒー豆を１ｇ以上使用したものをいう。好ましくはコーヒー豆を２．５ｇ以上使用しているものである。さらに好ましくはコーヒー豆を５ｇ以上使用しているものである。
【００２１】
本発明のコーヒー飲料組成物には、所望により、ショ糖、グルコース、フルクトース、キシロース、果糖ブドウ糖液、糖アルコール等の糖分、乳成分、抗酸化剤、pH調整剤、乳化剤、香料等を添加することができる。乳成分としては、生乳、牛乳、全粉乳、脱脂粉乳、生クリーム、濃縮乳、脱脂乳、部分脱脂乳、れん乳等が挙げられる。本発明のコーヒー飲料組成物のpHとしては、３〜７、さらに４〜７、特に５〜７が飲料の安定性の面で好ましい。
【００２２】
ソリュブルコーヒー組成物とは粉体状のインスタントコーヒー粉体等の粉体食品のことである。インスタントコーヒー粉体は常法にしたがって製造することができる。例えばコーヒー抽出液をノズルからスプレーし、約２１０〜３１０℃の熱風中を落下させることにより、多孔質、水可溶性のコーヒー粉末にする噴霧乾燥（スプレードライ）、あるいはコーヒー抽出物を液体窒素や冷凍庫等で凍結し、粉砕し、篩別したのち真空で水分を昇華させて、水分を３％以下にする凍結乾燥（フリーズドライ）等により乾燥粉体を得ることができる。
【００２３】
本発明のコーヒー飲料組成物又はソリュブルコーヒーはＰＥＴボトル、缶（アルミニウム、スチール）、紙、レトルトパウチ、瓶（ガラス）等の容器に詰めることができる。この場合、本発明のコーヒー飲料組成物はそのまま容器に詰めて５０〜２５００mLの容器詰飲料とすることができる。また本発明のソリュブルコーヒーは１ｇあたり２５〜５００mLの水又はお湯に溶解して飲むことができる。
【実施例】
【００２４】
参考例１
（ａ）ヒドロキシヒドロキノン含有量を低下させたコーヒー飲料組成物を次のように製造した。インスタントコーヒー（ネスカフェカフェインレス）２．５ｇをＯＤＳ充填剤（ＹＭＣ  ＧＥＬ  ＯＤＳ−Ａ  細孔径６nm  粒子径１５０μｍ）５００ｇを充填したカラムにアプライし、０．５％酢酸水６Ｌでヒドロキシヒドロキノンを含む画分を溶出し、クロロゲン酸類その他の成分を含む画分はメタノール６Ｌで溶出した。クロロゲン酸類その他の成分を含む画分Ａは凍結乾燥法によりメタノールを完全に除去した。インスタントコーヒー２．５ｇから画分Ａは０．９３３ｇ得られた。
【００２５】
（ｂ）コーヒー飲料組成物のクロロゲン酸類及びヒドロキシヒドロキノンの分析法は次の通りである。分析機器はＨＰＬＣ（島津製作所（株））を使用した。装置の構成ユニットの型番は次の通り。ディテクター：ＳＰＤ−Ｍ１０Ａ、オーブン：ＣＴＯ−１０ＡＣ、ポンプ：ＬＣ−１０ＡＤ、オートサンプラー：ＳＩＬ−１０ＡＤ、カラム：Inertsil ＯＤ
Ｓ−２  内径４．６mm×長さ２５０mm。
分析条件は次の通り。サンプル注入量：１０μＬ、流量：１．０mL/min、紫外線吸光光度計検出波長：３２５nm（クロロゲン酸類）、２９０nm（ヒドロキシヒドロキノン）、溶離液Ａ：０．０５Ｍ酢酸３％アセトニトリル溶液、溶離液Ｂ：０．０５Ｍ酢酸１００％アセトニトリル溶液
【００２６】
濃度勾配条件
時間      溶離液Ａ      溶離液Ｂ
０分      １００％          ０％
２０分        ８０％        ２０％
３５分        ８０％        ２０％
４５分          ０％      １００％
６０分          ０％      １００％
７０分      １００％          ０％
１２０分      １００％          ０％
【００２７】
クロロゲン酸類のリテンションタイム（単位：分）（Ａ1）モノカフェオイルキナ酸：１７．９、２０．４、２２．０の計３点（Ａ2）フェルラキナ酸：２２．８、２５．８、２７．０の計３点（Ａ3）ジカフェオイルキナ酸：３２．３、３３．０、３５．８の計３点ここで求めたエリアから５―カフェオイルキナ酸を標準物質とし、質量％を求めた。
ヒドロキシヒドロキノンのリテンションタイム：５．５分、ここで求めたエリアからヒドロキシヒドロキノンを標準物質とし、質量％を求めた。
インスタントコーヒーと上記参考例１（ａ）で製造した画分Ａの総クロロゲン酸量及びヒドロキシヒドロキノン量は表１に示すものであった。
【００２８】
【表１】
2006149236.tif 000003
【００２９】
参考例２
血圧降下評価
ｉ）実験材料及び方法
（ａ）１２週齢の雄性自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）を予備的に５日間連続で市販のラット用非観血式血圧測定装置（ソフトロン社製）を用いて血圧測定することにより、ラットを血圧操作に十分慣れさせた後、評価試験を測定した。ラットはすべて温度２５±１℃、相対湿度５５±１０％、照明時間１２時間（午前７時〜午後７時）の条件下（ラット区域内飼育室）で飼育した。
【００３０】
（ｂ）投与方法及び投与量；試験群ではインスタントコーヒからヒドロキシヒドロキノンを除去した画分Ａを投与材料とした。対照群はインスタントコーヒーを使用した。画分Ａインスタントコーヒーをそれぞれ生理食塩水に溶解し、総クロロゲン酸量として２００mg／kgの投与量となるように作製した。投与方法は経口用ゾンデを用いて、経口投与を行った。投与量は５mL/匹とした。
【００３１】
（ｃ）試験方法；ＳＨＲを１群３−６匹使用した。経口投与前と１２時間後の尾静脈の収縮期血圧を測定し、投与前血圧から１２時間後の血圧変化率を算出した。
【００３２】
（ｄ）統計学処理方法；得られた測定結果は、平均値及び標準誤差を表してStudent's t-testを行い、有意水準は５％とした。
【００３３】
ii）結果
表２から明らかなように、ヒドロキシヒドロキノン含有量を低下させたコーヒー飲料組成物を摂取することにより、通常のインスタントコーヒーを摂取した場合に比較して、著明な血圧降下を認めた。
【００３４】
【表２】
2006149236.tif 000004
【００３５】
参考例３
血圧降下評価
ｉ）実験材料及び方法
（ａ）１２週齢の雄性自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）を参考例２と同様に予備飼育した。
【００３６】
（ｂ）投与方法及び投与量；対照群では生理食塩水を経口投与した。比較群ではクロロゲン酸が主成分である生コーヒー豆抽出物（フレーバーホルダーＦＨ１０４１：長谷川香料（株）製）を使用した。投与量は総クロロゲン酸量として３００mg／kgの投与量となるように作製した。試験群１ではＦＨ１０４１を総クロロゲン酸量として３００mg／kg、ヒドロキシヒドロキノンを０．０３mg／kg（総クロロゲン酸量に対して０．０１％）の投与量となるように作製した。以下試験群２では、ＦＨ１０４１を総クロロゲン酸量として３００mg／kg、ヒドロキシヒドロキノンを０．３mg／kg（総クロロゲン酸量に対して０．１％）、試験群３では、ＦＨ１０４１を総クロロゲン酸量として３００mg／kg、ヒドロキシヒドロキノンを３mg／kg（総クロロゲン酸量に対して１％）の投与量となるように作製した。投与方法は経口用ゾンデを用いて、経口投与を行った。投与量は５mL／匹とした。
【００３７】
（ｃ）試験方法；ＳＨＲを１群３匹使用した。経口投与前と１２時間後の尾静脈の収縮期血圧を測定し、投与前血圧から１２時間後の血圧変化率を算出した。
【００３８】
（ｄ）統計学処理方法；得られた測定結果は、平均値及び標準誤差を表して多群検定（Ｓｃｈｅｆｆｅ）を行い、有意水準は５％とした。
ii）結果
表３から明らかなように、クロロゲン酸にヒドロキシヒドロキノンを添加することにより、クロロゲン酸の血圧降下が阻害された。
【００３９】
【表３】
2006149236.tif 000005
【００４０】
実施例１
グァテマラ生豆をブレンダーにて粉砕し、５倍量の５０mMリン酸緩衝溶液（pH６．８）にて氷冷下２０min撹拌抽出した。その後遠心分離により上清を回収し生コーヒー豆抽出液を得た。
【００４１】
３Ｌ容ステンレスビーカーに２Ｌの蒸留水を仕込み、４０℃の恒温水槽にて水温を４０℃にし、インスタントコーヒー（ネスカフェゴールドブレンドカフェインレス）を１．４３％濃度（総クロロゲン酸類含量６６０mg／Ｌ、ヒドロキシヒドロキノン含量７mg／Ｌ）
になるように溶解した。
その後、スターラーにて激しく撹拌し、生豆コーヒー豆抽出液を各種濃度で添加し、反応を行った。
所定の時間反応後、９８℃の温浴槽に反応液を１５min撹拌しながら漬け、反応を停止させ、その後氷冷した。
クロロゲン酸類及びヒドロキシヒドロキノンの定量はＨＰＬＣ法にて行った。
【００４２】
（１）クロロゲン酸類の分析
＜分析機器＞ＨＰＬＣ（島津製作所（株））を使用した。
装置の構成ユニットの型番は次の通り。
ディテクター：ＳＰＤ−１０Ａ
ポンプ：ＬＣ−１０ＡＴ
オートサンプラー：ＳＩＬ−１０ＡＤ
カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−２（φ４．６mm×２５０mm、ＧＬサイエンス）
＜分析条件＞
サンプル注入量：１０μＬ
流量：０．３mL／min
紫外線吸光光度計検出波長：３２５nm
溶離液Ａ：０．０５Ｍ酢酸３％アセトニトリル水溶液
溶離液Ｂ：０．０５Ｍ酢酸１００％アセトニトリル溶液
【００４３】
濃度勾配条件
時間      溶離液Ａ      溶離液Ｂ
０分        １００％          ０％
２０分        ８０％        ２０％
３５分        ８０％        ２０％
４５分          ０％      １００％
６０分          ０％      １００％
７０分      １００％          ０％
１２０分      １００％          ０％
クロロゲン酸類のリテンションタイムは、
３−カフェオイルキナ酸（３−ＣＱＡ）：１７．９min、
５−カフェオイルキナ酸（５−ＣＱＡ）：２０．４min、
４−カフェオイルキナ酸（５−ＣＱＡ）：２２．０min、
３−フェリルキナ酸（３−ＦＱＡ）：２２．８min、
５−フェリルキナ酸（５−ＦＱＡ）：２５．８min、
４−フェリルキナ酸（４−ＦＱＡ）：２７．０min、
３，５−ジカフェイルキナ酸（３，５−ｄｉＣＱＡ）：３２．３min、
３，４ジカフェイルキナ酸（３，４−ｄｉＣＱＡ）：３３．０min、
４，５−ジカフェイルキナ酸（４，５−ｄｉＣＱＡ）：３５．８min
ここで求めたａｒｅａ％から５−ＣＱＡを標準物質とし、重量％を求めた。
【００４４】
（２）ヒドロキシヒドロキノンの分析
クロロゲン酸の分析の場合と同じ機器を用いた。
＜分析条件＞
サンプル注入量：５０μＬ
流量：１．０mL／min
紫外線吸光光度計検出波長：２５８nm
溶離液Ａ：０．０５Ｍ酢酸水溶液
溶離液Ｂ：０．０５Ｍ酢酸１００％アセトニトリル溶液
【００４５】
濃度勾配条件
時間      溶離液Ａ      溶離液Ｂ
０分      １００％          ０％
１５分      １００％          ０％
２５分          ０％      １００％
３５分          ０％      １００％
４５分      １００％          ０％
６０分      １００％          ０％
ここで求めたａｒｅａ％から標準物質により重量％を求めた。
ヒドロキシヒドロキノンのリテンションタイム；６．８min
【００４６】
結果を図１、２に示す。図１、２の結果から明らかの様に、コーヒーに生コーヒー豆抽出液を作用させることにより、クロロゲン酸類含有量を損なうことなく、ヒドロキシヒドロキノンを除去できることがわかる。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
【図１】種々の生コーヒー豆抽出液濃度における反応時間とヒドロキシヒドロキノンの残存率との関係を示したグラフである。
【図２】種々の生コーヒー豆抽出液濃度における反応時間と総クロロゲン酸類量の残存率との関係を示したグラフである。
【図１】
2006149236.tif 000006
【図２】
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