(57)【要約】【課題】カカオ豆の外皮を利用して製造することができると共に、生理活性を有するカカオ豆外皮抽出物を提供すること。【解決手段】カカオ豆の外皮を極性溶媒で抽出して得られるカカオ豆外皮抽出物である。該カカオ豆外皮抽出物は、フェネチルアミンを含有する。極性溶媒は、例えばメタノール、エタノール等のアルコールであることが好ましい。また、カカオ豆の外皮は、カカオ豆の胚乳部を原料としてカカオマスを製造するときに生じるものを用いることができる。【選択図】図３
2006063011.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
カカオ豆の外皮を極性溶媒で抽出して得られるカカオ豆外皮抽出物であって、
該カカオ豆外皮抽出物は、フェネチルアミンを含有することを特徴とするカカオ豆外皮抽出物。
【請求項２】
請求項１において、上記極性溶媒は、アルコールを含有することを特徴とするカカオ豆外皮抽出物。
【請求項３】
請求項１又は２において、上記カカオ豆の外皮は、カカオ豆の胚乳部を原料としてカカオマスを製造するときに生じるものであることを特徴とするカカオ豆外皮抽出物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カカオ豆の外皮を抽出して得られるカカオ豆外皮抽出物に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来より、カカオは、チョコレートやココアの主原料として利用されている。
カカオは、主として赤道付近の高温多湿な地方で栽培される熱帯植物であり、カカオの木の果実の中にある種子（カカオ豆、カカオビンズ）は、チョコレートやココア等に用いられるカカオマスの原料として用いられている。
【０００３】
カカオマスは、カカオビンズ（カカオ豆）を発酵・焙煎等することにより得ることができる。具体的には、図５及び図６に示すごとく、例えばＬＢＣＴ（図５）又はＳＬＳ（図６）と呼ばれる方法により製造されている。
図５及び図６に示すごとく、ＬＢＣＴやＳＬＳ等のカカオマスの製造工程においては、分離（ウィノーイング）工程でカカオビンズを種皮（外皮、シェル）と胚乳部（カカオニブ）とに分離し、このうち胚乳部だけがカカオマスの製造に用いられる。
したがって、カカオマスの製造においては、副生成物としてカカオビンズの外皮が大量に生じる。この外皮は、利用価値がほとんどないため、その大部分が廃棄物として大量に処理されていた。
【０００４】
カカオの歴史は古く、紀元前２０００年頃のメキシコ付近に存在した古代アステカ王国において、カカオの栽培がすでに行われていたことが実証されている。当時はカカオは「神様の食べ物」といわれ、「適量を飲むと元気になり、快活、活気づく」とされていた。また、１６世紀の初め頃には、不老長寿の薬といわれていた。
しかし、カカオから得られるカカオマスを原料とする現代のチョコレートやココアには、強壮効果等の生理活性は確認されていない。
近年、チョコレート中には、フェニルアラニンの代謝物質であり、脳内生理活性物質であるフェネチルアミンが含まれていることが確認された。しかし、その含有量は極少量であり、強壮効果等を促す程の生理活性は確認されていない。
しがたって、カカオには、未だ明らかになっていない生理活性があると考えられていた。
【０００５】
このような背景の中、カカオ豆を原料とし、これを用いて発癌抑制剤を作製する技術が開発されている（特許文献１参照）。この発癌抑制剤は、カカオ豆を原料として得られ、ガン細胞の増殖を抑制するという生理活性を有する。また、この発癌物質の製造方法においては、外皮を除去していないカカオビンズをそのまま原料として用いることができるため、カカオビンズの外皮の廃棄物量を低減することができる。
しかしながら、カカオ豆の利用範囲は、依然として広くなく、カカオマスの製造の際に生じる外皮の廃棄量を低減するほど充分ではなかった。
【０００６】
【特許文献１】特開２００３−１３７８００号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明はかかる従来の問題点に鑑みてなされたものであって、カカオ豆の外皮を利用して製造することができると共に、生理活性を有するカカオ豆外皮抽出物を提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、カカオ豆の外皮を極性溶媒で抽出して得られるカカオ豆外皮抽出物であって、
該カカオ豆外皮抽出物は、フェネチルアミンを含有することを特徴とするカカオ豆外皮抽出物にある（請求項１）。
【０００９】
本発明のカカオ豆外皮抽出物は、カカオ豆の外皮を極性溶媒で抽出して得られる。
即ち、上記カカオ豆外皮抽出物においては、従来その大部分が廃棄されていたカカオ豆の外皮を原料として製造することができる。そのため、カカオ豆の外皮の廃棄量を低減することができる。また、上記カカオ豆外皮抽出物は、廃棄されるカカオ豆の外皮を原料とすることができるため、低コストで作製することができる。
【００１０】
また、上記カカオ豆外皮抽出物は、フェネチルアミンを含有している。
フェネチルアミンは、フェニルアラニンの代謝物質であり、脳内におけるある種の感情発現を司る物質であると考えられている。
この脳内生理活性物質であるフェネチルアミンは、カカオ豆の胚乳部（カカオニブ）から製造されたチョコレート等にも微量含有されるが、上記カカオ豆外皮抽出物は、カカオニブを原料として得られるチョコレート等よりも高濃度のフェネチルアミンを含有することができる。
それ故、上記カカオ豆外皮抽出物は、例えばクロマトグラフ法等により、フェネチルアミンを生成するための原料として用いることができる。また、上記カカオ豆外皮抽出物自体も、優れた脳内生理活性を発揮することができる。
【００１１】
また、上記カカオ豆外皮抽出物は、アレルギー反応の原因となる好塩基性白血球（好塩基球）の脱顆粒現象を抑制することができる。そのため、上記カカオ豆外皮抽出物は、アレルギー反応に対する抑制効果を発揮することができる。
【００１２】
このように本発明によれば、カカオ豆の外皮を利用して製造することができると共に、生理活性を有するカカオ豆外皮抽出物を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明において、上記カカオ豆外皮抽出物は、カカオ豆の外皮を極性溶媒で抽出して得られる。
上記極性溶媒中におけるカカオ豆の外皮の抽出は、例えば上記カカオ豆の外皮を極性溶媒中に浸漬し、加熱することにより行うことができる。具体的には、例えばリフラックス等により行うことができる。
【００１４】
また、上記極性溶媒の量は、上記カカオ豆の外皮１重量部に対して、２〜１０重量部であることが好ましい。
上記極性溶媒の量が２重量部未満の場合には、上記カカオ豆の外皮からフェネチルアミン等の生理活性物質が充分に抽出されず、上記カカオ豆外皮抽出物の生理活性が低下するおそれがある。一方、上記極性溶媒の量が１０重量部を超える場合には、極性溶媒の増加に見合った効果が得られず、ムダにコストを増加させ溶媒の浪費となってしまうおそれがある。
【００１５】
また、上記カカオ豆の外皮を極性溶媒で抽出後、濾過することが好ましい。この場合には、不純固形物を除去することができ、上記カカオ豆外皮抽出物の生理活性成分の濃度をより高めることができる。
また、上記カカオ豆外皮抽出物においては、抽出後に減圧乾固させることもできる。この場合には、上記カカオ豆外皮抽出物は、長期間保存させても安定して生理活性を示すことができる。即ち、この場合には上記カカオ豆外皮抽出物の安定性を向上させることができる。
【００１６】
上記極性溶媒としては、例えば、エタノール、メタノール等のアルコールや、水等から選ばれる１種以上の溶媒を用いることができる。
【００１７】
好ましくは、上記極性溶媒は、アルコールを含有することがよい（請求項２）。
この場合には、上記カカオ豆外皮抽出物は、上記カカオ豆外皮中に含まれるフェネチルアミン等の生理活性物質をより高濃度で含有することができる。より好ましくは、メタノール、エタノールがよい。
【００１８】
また、上記カカオ豆の外皮は、カカオ豆の胚乳部を原料としてカカオマスを製造するときに生じるものであることが好ましい（請求項３）。
この場合には、カカオマスの製造時に廃棄物として大量に生じるカカオ豆の外皮を有効利用することができる。そのため、カカオ豆の外皮の廃棄量を低減することができる。
【実施例】
【００１９】
（実施例１）
次に、本発明のカカオ豆外皮抽出物の実施例につき、説明する。
本例のカカオ豆外皮抽出物は、カカオ豆の外皮を極性溶媒としてのメタノール又はエタノールで抽出して得られるものである。カカオ豆外皮抽出物は、フェネチルアミンを含有する。
【００２０】
以下、本例のカカオ豆外皮抽出物の製造方法につき、説明する。
まず、カカオ豆の胚乳部を原料としてカカオマスを製造するときに生じるカカオ豆の外皮を準備した。このカカオ豆の外皮に、その重量の５倍量のメタノールを加えて、外套温度８０℃にてリフラックスを行い、カカオ豆の外皮の抽出を行った。次いで、抽出液を濾紙にて濾過し、固液分離した後、減圧乾固を行い、カカオ豆外皮抽出物を得た。これを試料Ｅ１とする。
【００２１】
次に、極性溶媒の種類を変えてカカオ豆外皮抽出物を作製した。
即ち、上記試料Ｅ１において極性溶媒として用いたメタノールの代わりに、エタノールを用いてカカオ豆の抽出を行い、カカオ豆外皮抽出物を得た。これを試料Ｅ２とする。
試料Ｅ２は、メタノールの代わりにエタノールを用いて作製した点を除いては、上記試料Ｅ１と同様にして作製したものである。
【００２２】
次いで、上記のようにして得られた試料Ｅ１及び試料Ｅ２に、フェネチルアミン（２−フェニルエチルアミン）が含まれているか否かを高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により確認した。
具体的には、各試料（試料Ｅ１及び試料Ｅ２）、及び各試料に標品として市販のフェネチルアミン（２−フェニルエチルアミン）を添加した試料のＨＰＬＣを行うことにより、フェニルエチルアミンのピーク位置を特定した。
【００２３】
ＨＰＬＣによる分析は、カラムに２５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ．のDAISO-PAK SP-120-5-ODS-APを用い、移動相にメタノール３００ｍｌと純水７００ｍｌとの混合溶媒にリン酸２０ｍｍｏｌ及び１−ペンタスルホン酸ナトリウム２ｇを溶解してなるSolvent１又はメタノール２５０ｍｌと純水７５０ｍｌとの混合溶媒にリン酸２０ｍｍｏｌ及び１−ペンタスルホン酸ナトリウム２ｇを溶解してなるSolvent２を用いて行った。また、流速は１ｍｌ／ｍｉｎ、温度は４０℃とし、検出には波長２５４ｎｍのＵＶを用いた。
また、ＨＰＬＣ分析用のサンプルは、各試料（試料Ｅ１、試料Ｅ２）１００ｍｇをそれぞれ５０ｖｏｌ％メタノール水溶液１ｍｌに溶解し、その内の５μｌを用いた。
このＨＰＬＣによる分析により、試料Ｅ１及び試料Ｅ２には、標品と同様の位置にピークが観察された（図示略）。即ち試料Ｅ１及び試料Ｅ２には、フェネチルアミンが含まれることがわかった。
【００２４】
次に、各試料中に含まれるフェネチルアミン（２−フェニルエチルアミン）の定量を行った。即ち、標品（市販の２−フェニルエチルアミン）及び試料Ｅ１及び試料Ｅ２について、ＨＰＬＣを以下の条件にて行うとともに、標品の検量線を作製し、この検量線から試料Ｅ１及び試料Ｅ２に含まれるフェネチルアミンの含有量を算出した。
【００２５】
具体的には、まず、市販の２−フェニルエチルアミンを水に溶解し、濃度２ｍｇ／ｍｌと３ｍｇ／ｍｌの２種類の２−フェニルエチルアミン溶液を作製した。濃度２ｍｇ／ｍｌの２−フェニルエチルアミン溶液を標品Ａとし、濃度３ｍｇ／ｍｌの２−フェニルエチルアミン溶液を標品Ｂとする。
次に、標品Ａ及び標品Ｂについて、ＨＰＬＣ分析を行った。
ＨＰＬＣによる分析は、カラムに２５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ．のDAISO-PAK SP-120-5-ODS-APを用い、移動相にはメタノール２５０ｍｌと純水７５０ｍｌとの混合溶媒にリン酸２０ｍｍｏｌ及び１−ペンタスルホン酸ナトリウム２ｇを溶解してなるSolvent２を用いて行った。流速は１ｍｌ／ｍｉｎ、温度は４０℃とし、検出には波長２５４ｎｍのＵＶを用いた。また、ＨＰＬＣ分析用のサンプルは、各標品を５μｌずつ用いた。
その結果をそれぞれ図１及び図２に示す。図１が標品ＡのＨＰＬＣの結果であり、図２が標品ＢのＨＰＬＣの結果である。そして、図１及び図２の結果から、２−フェニルエチルアミンの検量線を作製した（図示略）。
【００２６】
次に、上記試料Ｅ１及び試料Ｅ２について、標品Ａ及び標品Ｂと同様の条件でＨＰＬＣ分析を行った。試料Ｅ１のＨＰＬＣの結果を図３に示す。また、試料Ｅ２のＨＰＬＣの結果を図４に示す。図３及び図４においては、矢印にて示すピークが、標品（市販のフェネチルアミン）と同様のピーク位置である。
【００２７】
この試料Ｅ１及び試料Ｅ２のＨＰＬＣの結果を上述の２−フェニルエチルアミンの検量線に当てはめて、試料Ｅ１及び試料Ｅ２の濃度を算出した。その結果、試料Ｅ１中の２−フェニルエチルアミンの含有量は０．７０ｍｇ／ｍｌ（０．７０重量％）であった。また、試料Ｅ２中の２−フェニルエチルアミンの含有量は１．０１ｍｇ／ｍｌ（１．０１重量％）であった。
なお、試料Ｅ１のＨＰＬＣ分析においては、３５０ｍｇの試料Ｅ１にメタノール１．７５ｍｌを加え溶解させたものに、純水を同量加え、フィルター濾過したものをＨＰＬＣ分析用のサンプルとして用いた（１００ｍｇ／ｍｌ）。試料Ｅ２のＨＰＬＣ分析においては、３８０ｍｇの試料Ｅ２にメタノール１．９ｍｌを加え溶解させたものに、純水を同量加え、フィルター濾過したものをＨＰＬＣ分析用のサンプルとして用いた（１００ｍｇ／ｍｌ）。
【００２８】
また、本例においては、比較用として、市販のココアをメタノールにて抽出してココア抽出物を作製し、該ココア抽出物中に含まれるフェネチルアミンの含有量を調べた。
まず、市販のココア５ｇにメタノール２０ｍｌを加え、一晩抽出し、ココア抽出物を得た。これを試料Ｃ１とする。
次いで、この試料Ｃ１をろ過し、得られた溶液に純水２０ｍｌを加え、再度フィルターろ過を行ってＨＰＬＣ分析用のサンプルとした（１２５ｍｇ／ｍｌ）。
【００２９】
このサンプル（試料Ｃ１）について、上記標品、試料Ｅ１及び試料Ｅ２と同様に、ＨＰＬＣ分析を行った。次いで、試料Ｅ１及び試料Ｅ２と同様に、その結果を上述の２−フェニルエチルアミンの検量線に当てはめて、試料Ｃ１の濃度を算出した。
その結果、試料Ｃ１は、２−フェニルエチルアミンを０．０３ｍｇ／ｍｌ（０．０２重量％）含有していた。
【００３０】
このようにして得られた上記試料Ｅ１、試料Ｅ２、及び試料Ｃ１中に含まれる２−フェネチルアミンの含有量を下記の表１に示す。
【００３１】
【表１】
2006063011.tif 000003
【００３２】
表１より知られるごとく、カカオ豆外皮抽出物（試料Ｅ１及び試料Ｅ２）は、ココア抽出物（試料Ｃ１）に比べて高い含有率でフェネチルアミンを含有することがわかる。そのため、カカオ豆外皮抽出物は、フェネチルアミンが有する優れた脳内生理活性を発揮することができる。また、カカオ豆外皮抽出物は、フェネチルアミンを製造するための原料として用いることもできる。この場合、カカオ豆外皮抽出物を例えばクロマトグラフ法によりさらに生成することによりフェネチルアミンを精製することができる。
また、本例のカカオ豆外皮抽出物は、カカオ豆の外皮を原料としている。そのため、これまで用途が少なく、大量に廃棄されていたカカオ豆の外皮を有効に利用することができる。
【００３３】
（実施例２）
本例は、カカオ豆外皮抽出物の生理活性を調べる例である。具体的には、カカオ豆外皮抽出物の生理活性として、アレルギー反応に対する抑制効果、特にＩ型アレルギー反応抑制効果を調べる。
Ｉ型アレルギー反応は、気管支喘息、アレルギー性鼻炎（花粉症）等の発症機序であり、免疫グロブリンＩｇＥが主として関与する反応である。本例においては、その試験管内反応モデルとして、脱顆粒による好塩基性白血球（好塩基球）数の減少に対するカカオ豆外皮抽出物の抑制効果を調べる（試験１及び２）。また、比較用としてカカオ豆外皮抽出物の代わりに生理食塩水（試験３〜５）又はテオフィリン（試験６又は７）を用いて好塩基性白血球の減少に対する抑制効果を調べる。
【００３４】
「試験１」
まず、ＲＡＳＴ（ラジオアレルゴソルベントテスト）によりスコア−４という高値を示した気管支喘息の既住歴のある患者からヘパリン加静脈血を採取し、この血液をシリコンでコートされた試験管に１ｍｌずつ分注した。
次いで、カカオ豆外皮抽出物として、上記実施例１にて作製した試料Ｅ１を準備した。
また、カルボキシメチルセルロースを、濃度が５重量％となるように生理食塩水に溶解して、カルボキシメチルセルロース加生理食塩水を準備した。
次に、試料Ｅ１を上記カルボキシメチルセルロース加生理食塩水に懸濁し、濃度１０００μｇ／ｍｌに調整した。続いて、試料Ｅ１の溶液０．０１ｍｌを、分注した血液（１ｍｌ）に滴下し、温度３７℃にて１０分間インキュベイトした。
【００３５】
次に、ダニ抗原液（Dermatophagoides
farinae、鳥居薬品株式会社製）を生理食塩水で１００００倍に希釈した希釈抗原液を準備した。この希釈抗原液０．０１ｍｌを、上記のごとく試料Ｅ１を添加した血液１ｍｌ中に滴下し、よく撹拌して、温度３７℃にて１５分間インキュベイトした。その後、反応液を、白血球用メランジュールを用いてトルイジンブルー染色液にて希釈染色した。
【００３６】
次いで、フックスローゼンタール血球計算板を用いて、染色された残存好塩基球を４００倍の光学顕微鏡にて観察しつつ、残存好塩基球数を計数した。計数は、フックスローゼンタール血球計算板の全区画における好塩基球の残存数を計数することにより行った。その結果を表２に示す。
【００３７】
「試験２」
試料Ｅ１の濃度を５００μｇ／ｍｌに変えて血液中に滴下し、その他は上述の試験１の場合と同様にして好塩基球の残存数を計数した。その結果を表２に示す。
【００３８】
「試験３」
試料Ｅ１の代わりに生理食塩水を用いると共に、ダニ抗原希釈液の代わりに生理食塩水を用い、その他は試験１の場合と同様にして好塩基球の残存数を計数した。その結果を表２に示す。
【００３９】
「試験４」
試料Ｅ１の代わりに生理食塩水を用いると共に、ダニ抗原希釈液の希釈倍率を５０００倍に変更し、その他は試験１の場合と同様にして好塩基球の残存数を計数した。その結果を表２に示す。
【００４０】
「試験５」
試料Ｅ１の代わりに生理食塩水を用い、その他は試験１の場合と同様にして、好塩基球の残存数を計数した。その結果を表２に示す。
【００４１】
「試験６」
試料Ｅ１の代わりに濃度１０００μｇ／ｍｌのテオフィリン（和光純薬工業（株）製）を用い、その他は試験１の場合と同様にして好塩基球の残存数を計数した。その結果を表２に示す。
【００４２】
「試験７」
試料Ｅ１の代わりに濃度５００μｇ／ｍｌのテオフィリン（和光純薬工業（株）製）を用い、その他は試験１の場合と同様にして好塩基球の残存数を計数した。その結果を表２に示す。
【００４３】
また、試験１〜試験７の残存好塩基級数の結果から脱顆粒率及び脱顆粒抑制率を算出した。その結果を表２に示す。
なお、脱顆粒率Ａ（％）は、試験３における残存好塩基球数をＲa、各試験における残存好塩基球数をＲxとすると下記の式（１）にて算出することができる。
Ａ（％）＝（Ｒa−Ｒx）／Ｒa×１００  ・・・（１）
また、脱顆粒抑制率Ｂ（％）は、試験５における脱顆粒率をＡ5、各試験における脱顆粒率Ａxとすると下記の式（２）にて算出することができる。なお、脱顆粒抑制率は、試験１、試験２、試験５、試験６及び試験７について算出した。
Ｂ（％）＝（１−Ａx／Ａ5）×１００  ・・・（２）
【００４４】
【表２】
2006063011.tif 000004
【００４５】
表２において、まず、試験３〜試験５を比較して知られるごとく、抗原を添加することにより、脱顆粒現象が起こり、抗原濃度依存的に残存好塩基球数が減少していることが確認できる。一般にアレルギー反応においては、抗原に反応して、好塩基性白血球が脱顆粒現象を起こしてトルイジンブルー染色液にて染色される好塩基性白血球の数が減少する。即ち、試験４及び試験５においては、抗原に反応してアレルギー反応を起こして好塩基白血球数が減少していると考えられる。
【００４６】
一方、試料Ｅ１を添加した試験１及び試験２においては、試験５に比べて、抗原添加後の残存好塩基球数が増加し、好塩基性白血球の脱顆粒現象が抑制されていることが確認できる。したがって、試料Ｅ１は、好塩基性白血球の脱顆粒現象を抑制する効果を有し、これによりアレルギー反応を抑制する効果を有することがわかる。
また、試験１及び試験２と、試験６及び試験７とを比較して知られるごとく、試料Ｅ１は、気管支喘息の薬として利用されるテオフィリンと同様に、濃度依存的に好塩基性白血球の脱顆粒を抑制できることがわかる。
【００４７】
このように、本例によれば、カカオ豆外皮抽出物（試料Ｅ１）は、アレルギー反応に対する抑制効果を有していることがわかる。
【００４８】
（実施例３）
本例は、カカオ豆外皮抽出物の生理活性として、カカオ豆外皮抽出物の自律神経系への影響を調べた。具体的には、カカオ豆外皮抽出物を被験者に投与し、このときの被験者の皮膚温、脈拍、血圧の変化を調べた。
【００４９】
即ち、まず、カカオ豆外皮抽出物として、実施例１にて作製した試料Ｅ１を準備し、この試料Ｅ１をその濃度が２０重量％となるようにエタノールに溶解して試料Ｅ１のエタノール溶液を作製した。この試料Ｅ１のエタノール溶液１０ｍｌを水５０ｍｌに混和し、４人の被験者（被験者Ａ〜Ｄ）に経口摂取した。
【００５０】
経口摂取後から６０分まで１５分毎に、各被験者の皮膚温、脈拍、最高及び最低血圧を測定した。
皮膚温は、オージー技研（株）製の皮膚温測定機（ＶＡＳＯ−Ｔｒａｉｎｅｒ）を用いて測定した。この皮膚温測定機においては、発光ダイオードにより皮膚温の変化を１〜１０個のランプの点灯（１０段階）により表示することができ、温度が最も低い場合は１個のランプが点灯し、温度が最も高い場合は１０個のランプが点灯する。本例の測定においては、皮膚温の低下が予測されたので、皮膚温測定機の調節メモリにより、測定開始時においてランプが１０個点灯するように設定して、皮膚温の測定に用いた。皮膚温の測定は、ランプの点灯数によって行った。その結果を表３〜６に示す。
【００５１】
また、脈拍、最高及び最低血圧については、テルモ（株）製のテルモ電子血圧計Ｐ３０２を用いて、被験者の上腕部を測定した。
脈拍、最高及び最低血圧は、それぞれ径口摂取前の脈拍、最高及び最低血圧を１００とし、これに従って経時毎の測定値を比例計算で算定し直すことにより、指数表示した。その結果をそれぞれ表３〜表６に示す。
【００５２】
また、本例においては、試料Ｅ１の比較用として、試料Ｅ１の代わりに濃度２０ｖｏｌ％のエタノール水溶液を各被験者に投与し、上記試料Ｅ１の場合と同様に、経時後の各被験者の皮膚温、脈拍、最高血圧及び最低血圧の変化を調べた。その結果を表３〜表６に示す。
なお、表３は被験者Ａ、表４は被験者Ｂ、表５は被験者Ｃ、表６は被験者Ｄの結果をそれぞれ示すものである。
【００５３】
【表３】
2006063011.tif 000005
【００５４】
【表４】
2006063011.tif 000006
【００５５】
【表５】
2006063011.tif 000007
【００５６】
【表６】
2006063011.tif 000008
【００５７】
表３〜表６から知られるごとく、カカオ豆外皮抽出物（試料Ｅ１）の投与から３０分後に、４例の被験者すべてにおいて皮膚温の低下が観察された。これに対し、２０％エタノール溶液を投与した場合には、皮膚温の変化はほとんどなかった。
【００５８】
また、カカオ豆外皮抽出物投与による最高血圧、最低血圧、脈拍への影響を明確にするため、表３〜６におけるカカオ豆外皮抽出物（試料Ｅ１）の投与から３０分後における各被験者の脈拍、最高及び最低血圧の値を、エタノール溶液を投与した場合に対する相対値で表し、その結果を図７にまとめた。
図７より知られるごとく、カカオ豆外皮抽出物は、４例の内３例の被験者において、エタノール溶液を投与した場合に比べて、最高血圧及び脈拍を上昇させる効果を有していた。また、４例の内３例の被験者において、カカオ豆外皮抽出物は、最低血圧を低下させる効果を有していることがわかる。
【００５９】
この結果から、カカオ豆外皮抽出物は、交感神経を亢進させ血圧を上昇させると共に、末梢血管を収縮させて皮膚温を低下させる効果を有すると推察される。
また、表３〜表６より知られるごとく、カカオ豆外皮抽出物が有する上述の効果は、投与後６０分後には消退することから一過性のものであり、カカオ豆外皮抽出物は安全性の高いものであると考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００６０】
【図１】実施例１にかかる、濃度２ｍｇ／ｍｌの２−フェニルエチルアミン水溶液のＨＰＬＣ分析の結果を示す説明図。
【図２】実施例１にかかる、濃度３ｍｇ／ｍｌの２−フェニルエチルアミン水溶液のＨＰＬＣ分析の結果を示す説明図。
【図３】メタノールを抽出溶媒として作製したカカオ豆外皮抽出物（試料Ｅ１）のＨＰＬＣ分析の結果を示す説明図。
【図４】エタノールを抽出溶媒として作製したカカオ豆外皮抽出物（試料Ｅ２）のＨＰＬＣ分析の結果を示す説明図。
【図５】ＬＢＣＴ法によるカカオマスの製造工程の概略を示す説明図。
【図６】ＳＬＳ法によるカカオマスの製造工程の概略を示す説明図。
【図７】実施例３にかかる、カカオ豆外皮抽出物の投与から３０分後における４人の被験者（被験者Ａ〜Ｄ）の脈拍、最高血圧、最低血圧について、エタノール溶液を投与した場合に対する相対値を示す説明図。
【図１】
2006063011.tif 000009
【図２】
2006063011.tif 000010
【図３】
2006063011.tif 000011
【図４】
2006063011.tif 000012
【図５】
2006063011.tif 000013
【図６】
2006063011.tif 000014
【図７】
2006063011.tif 000015