(57)【要約】【課題】  嚢内に設置された眼内レンズの固定状態や後発白内障の発生状況等を容易に観察することができる埋植眼内レンズの観察方法を提供する。【解決手段】  眼内レンズが埋植された動物眼を摘出した後、該動物眼を赤道部より半割するとともに虹彩を取り除き、前記動物眼を染色液により染色した状態にて前記眼内レンズが設置された水晶体嚢全体を観察することにより水晶体上皮細胞の遊走状態や前記眼内レンズの嚢内固定状態を評価する。【選択図】      図７
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
眼内レンズが埋植された動物眼を摘出した後、該動物眼を赤道部より半割するとともに虹彩を取り除き、前記動物眼を染色液により染色した状態にて前記眼内レンズが設置された水晶体嚢全体を観察することにより水晶体上皮細胞の遊走状態や前記眼内レンズの嚢内固定状態を評価する埋植眼内レンズの観察方法。
【請求項２】
請求項１の埋植眼内レンズの観察方法は、摘出された前記動物眼を赤道部より半割した後、さらに角膜を切り外し、その後角膜が切除された前眼部を前記染色液にて染色することを特徴とする埋植眼内レンズの観察方法。
【請求項３】
請求項２の埋植眼内レンズの観察方法において、前記染色液に用いる染色剤はヘマトキシリンを用いることを特徴とする埋植眼内レンズの観察方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動物眼に埋植した眼内レンズを観察する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、白内障の治療のため、白濁した水晶体を取り除き、水晶体の代替として水晶体嚢内に眼内レンズを埋植する治療が知られている。この眼内レンズは、水晶体の代替となる光学部と、この光学部を嚢内にて固定支持するための支持部とからなり、この支持部が嚢内から嚢を押し広げるように接触させることにより、光学部を嚢内に固定支持する。このような眼内レンズは、光学部が嚢内にて固定支持されやすいような支持部の形状や材質が求められている。
また、嚢内に眼内レンズを設置後、嚢内に残っている水晶体上皮細胞が増殖し、後発白内障を引き起こすことが知られている。このような後発白内障を抑制するために、眼内レンズの形状を工夫したものが知られている（特許文献１参照）。
【特許文献１】特開平７−２５５７５７号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
このように材質や形状を検討されて得られた眼内レンズは、嚢内での固定支持が適切に行われるか、または眼内レンズ埋植後の後発白内障の発生状況等を検討する必要がある。しかしながら、嚢内における眼内レンズの固定状態や眼内レンズ埋植後の後発白内障の発生状況等を一度に観察し、その評価を行うための観察方法は確立されていないのが現状である。
上記従来技術の問題点に鑑み、嚢内に設置された眼内レンズの固定状態や後発白内障の発生状況等を容易に観察することができる埋植眼内レンズの観察方法を提供することを技術課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
上記課題を解決するために、本発明は以下のような構成を備えることを特徴とする。
（１）  埋植眼内レンズの観察方法において、眼内レンズが埋植された動物眼を摘出した後、該動物眼を赤道部より半割するとともに虹彩を取り除き、前記動物眼を染色液により染色した状態にて前記眼内レンズが設置された水晶体嚢全体を観察することにより水晶体上皮細胞の遊走状態や前記眼内レンズの嚢内固定状態を評価することを特徴とする。
（２）  （１）の埋植眼内レンズの観察方法は、摘出された前記動物眼を赤道部より半割した後、さらに角膜を切り外し、その後角膜が切除された前眼部を前記染色液にて染色することを特徴とする。
（３）  （２）の埋植眼内レンズの観察方法において、前記染色液に用いる染色剤はヘマトキシリンを用いることを特徴とする。
【発明の効果】
【０００５】
本発明によれば、嚢内に設置された眼内レンズの固定状態や後発白内障の発生状況等を容易に観察することができ、眼内レンズの評価を行うことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
本発明の実施の形態を図面に基づいて説明する。図１は本発明に用いる眼内レンズの構成を示した図である。
【０００７】
１は眼内レンズ光学部、２は光学部１を眼内（水晶体嚢）にて固定・支持させるための支持部（ループ）である。光学部１及び支持部２は、ＰＭＭＡ（ポリメチルメタクリレート）等の硬いアクリル材料にて形成しても良いし、シリコーンやＨＥＭＡ（ヒドロキシエチルメタクリレート）等の単体や、アクリル酸エステルとメタクリル酸エステルの複合材料等からなる軟性アクリル基材を用いて折り曲げ可能な眼内レンズを製作することもできる。また、図１に示す眼内レンズは、光学部と支持部とを別々に形成し、その後の工程で１つに結合させることにより得られる３ピースタイプとしているが、これに限るものではなく、光学部と支持部とが一体的に形成された１ピースタイプであってもよい。なお、図１に示した眼内レンズは一例であり、光学部１や支持部２の形状は、これに限るものではない。
【０００８】
本実施形態における眼内レンズの観察方法は、図１に示すような眼内レンズを動物眼の水晶体嚢に埋植し、所定期間を経た後、動物眼を摘出して嚢内に設置された状態の眼内レンズを顕微鏡等で観察するものである。以下にその観察方法を図２のフローチャート、及び図３〜図７に沿って説明する。
埋植眼内レンズの観察に用いるための動物眼は、眼内レンズの嚢内固定状態等を観察するために、できるだけ人眼の大きさと近似する動物眼を用いる。人眼に近い大きさを持つ動物は、豚、ウサギ等が挙げられる。
【０００９】
始めに図１に示すような眼内レンズを動物眼に埋植する。眼内レンズの埋植は、既知である超音波乳化吸引術を用いて水晶体嚢から水晶体を取り除き、替わりにこの嚢内に眼内レンズを設置する。なお、眼内レンズの光学部１は、支持部２によって嚢内に固定・支持される。また、所定期間経過後に、埋植した眼内レンズによる後発白内障の抑制状態を確認したい場合には、故意に細胞増殖を行わせるために水晶体嚢から水晶体を完全に取り除くことはせず、一部の水晶体上皮細胞を嚢内に残留させておく。
【００１０】
眼に眼内レンズを埋植後、所定期間動物を飼育する。眼内レンズが埋植された動物を飼育する期間は、嚢内に残留する水晶体上皮細胞から、水晶体線維芽様細胞や水晶体線維細胞が十分に増殖しうる飼育期間（後発白内障の発生状況を観察・評価するのに必要な期間）を設定する。飼育期間は２週間〜４週間程度が好ましい。飼育期間が２週間に満たないと十分な細胞増殖が見込め難い。また、飼育期間が４週間を超えても差し支えないが、飼育期間が長くなれば効率が悪くなる。
【００１１】
眼内レンズが埋植された動物を所定期間飼育後、全身麻酔を行い、頚部動脈を切断し動物を放血致死させ、その後眼球を摘出する。眼内レンズが埋植された眼球を摘出後、固定液に一旦眼球を浸し、さらにその後、眼球の赤道部に沿って割を入れ、眼球内部にまで固定液が入る状態にして所定時間浸しておく。なお、ここで用いる固定液は、摘出した眼球を完全に固定させない、弱めの固定液を使用することが好ましい。
【００１２】
固定液によって固定された眼球の赤道部に沿って切開し、判割する。半割した眼球の前眼部側をさらにホルマリン等の固定液に所定時間浸しておき、完全に固定化させることにより、眼球の固定を完了する（図３参照）。固定が完了した半割の眼球（以下、前眼部と記す）より角膜を輪部に沿って剪刀で切開し、角膜を眼球から除去する（図４参照）。角膜を除去した前眼部を染色液に所定時間浸し、単染色する（図５参照）。染色液は、水晶体上皮細胞（水晶体線維細胞、水晶体線維芽様細胞）を染色することができる染色液であればよい。前眼部の染色後、前眼部に残る余計な染色液を洗浄して落とした後、虹彩の根元付近を毛様体、チン小帯を傷つけないように気をつけながら、剪刀でカットし、前眼部から虹彩を取り除く（図６参照）。このような手順により、角膜及び虹彩が切除されるとともに、嚢内に眼内レンズが設置された状態にて水晶体上皮細胞等が染色された前眼部を得ることができる（図７参照）。このような虹彩が取り除かれた染色済みの前眼部を後嚢側から顕微鏡等で観察し、水晶体嚢全体を観察して、水晶体上皮細胞の遊走状態（増殖状態）や眼内レンズの嚢内固定状態、嚢内に眼内レンズを設置することによる嚢への影響等を容易に把握し、評価することができる。なお、観察は顕微鏡等にて直接行わず、被写体を撮影し、画像データまたは写真を観察することもできる。
【００１３】
また、以上の実施形態では、前眼部から角膜を切除した後に染色を行うものとしているが、これに限るものではなく、最終的に前眼部が染色されているとともに虹彩が切除されていればよい。染色前に角膜を切除するのは、染色時に前房側からも効率よく染色液を流し込むためであり、例えば、角膜を切除せずに前眼部を染色した後、角膜及び虹彩を切除して水晶体嚢全体の観察を行うこともできる。
次に、上記で説明した埋植眼内レンズの観察方法を用いた実施例を以下に挙げる。
【実施例１】
【００１４】
体重2.5kgのウサギに対して超音波乳化吸引術を用いて水晶体を除去し、代替の眼内レンズを水晶体嚢に設置する。ウサギの眼に眼内レンズを埋植後、３週間飼育する。３週間の飼育後、ペントバルビタールナトリウム１ml／kgを耳介静脈から投与し全身麻酔を行う。その後、頚部動脈を切断し、放血致死させる。
致死させたウサギから眼球を摘出し、1.25％グルタルアルデヒド・2.5%ホルマリン・1/15M-リン酸緩衝固定液に１〜２時間浸した後、固定液が眼球内に入るように、一旦眼球を取り出し、眼球の赤道部に沿って切り込みを入れた後、再び固定液に１日程度浸しておく。固定液から取り出した眼球を赤道部に沿って切開し、判割した眼球の前眼部側を１０％中性緩衝ホルマリン液で１日程度保存する。
【００１５】
中性緩衝ホルマリン液にて保存した前眼部を取り出し、角膜を輪部に沿って剪刀で切開して前眼部から角膜を除去する。角膜が取り除かれた前眼部をマイヤーヘマトキシリン液に浸し、前眼部全体を３０分ほど単染色する。なお、マイヤーヘマトキシリン液は、純水1000mlにヘマトキシリン１ｇ，カリウムミョウバン50g，ヨウ素酸ナトリウム0.2ｇ，抱水クロラール50ｇ，クエン酸１ｇを添加し、溶解させたものを使用する。前眼部を染色後、超純水で染色液を２分程度洗い流した後、さらに0.01％炭酸リチウム溶液に３分ほど浸し、前眼部を洗浄する。炭酸リチウム溶液にて洗浄後、前眼部を再度超純水で洗う。
【００１６】
前眼部から余分な染色液を洗い流した後、角膜鑷子で虹彩をめくり上げながら、虹彩の根元付近を毛様体、チン小帯を傷つけないように剪刀でカットする。チン小帯は透明であるため、染色前はその存在を確認し難いが、虹彩切除時には前眼部は染色されているため、透明なチン小帯が僅かに染色されている。このため、チン小帯を容易に視認することができ、チン小帯を傷つけることなく前眼部から虹彩を切除し易くなっている。
【００１７】
前眼部から虹彩を切除後、嚢全体の様子を光学顕微鏡（（株）ニコン製  SMZ-U）にて観察した。なお、観察は後嚢側から行い、嚢内における眼内レンズの固定状態、眼内レンズを設置したことによる嚢への影響、角膜上皮細胞（角膜線維細胞及び角膜線維芽様細胞）の遊走状態、チン小帯の状態等を一画面で容易に確認することができた。このような観察を行うことにより、埋植した眼内レンズの評価を行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】本実施形態で用いる眼内レンズの構成を示した図である。
【図２】埋植眼内レンズを観察するための手順を示したフローチャートである。
【図３】摘出した兎眼を半割した状態を示した図である。
【図４】半割した眼球から角膜を切除した状態を示した図である。
【図５】角膜を切除した前眼部を染色させた状態を示した図である。
【図６】染色した前眼部から虹彩を切除する様子を示した図である。
【図７】虹彩を切除した後の前眼部を後嚢側から見た状態を示した図である。
【符号の説明】
【００１９】
１  光学部
２  支持部
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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