(57)【要約】【課題】リポジストロフィー処置用の新規医薬品を開発する。【解決手段】リポジストロフィー処置剤を製造するために、生理学的に活性な脂肪酸、それらの塩およびそれらのエステルを、場合によりCastanea  sativaの抽出物またはその活性な成分と組み合わせて使用する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
生理学的に活性な脂肪酸、その塩またはそのエステルを含有するリポジストロフィー処置剤。
【請求項２】
（a）生理学的に活性な脂肪酸、その塩またはそのエステル、および
（b）Castanea  sativaの抽出物またはその活性な成分
を含む活性な組成物を含有するリポジストロフィー処置剤。
【請求項３】
生理学的に活性な脂肪酸（成分a）が、18個〜26個の炭素原子および2個〜6個の二重結合を含む請求項１または２に記載のリポジストロフィー処置剤。
【請求項４】
成分（a）が、前記脂肪酸とグリセロールまたはステロールとのエステルである請求項１〜３のいずれかに記載のリポジストロフィー処置剤。
【請求項５】
成分（a）が、共役リノール酸またはω3脂肪酸である請求項１〜４のいずれかに記載のリポジストロフィー処置剤。
【請求項６】
成分（b）が、β−エスシン、またはβ−エスシンに富むCastanea  sativaの抽出物である請求項２〜５のいずれかに記載のリポジストロフィー処置剤。
【請求項７】
成分（a）および成分（b）を99：1〜50：50の重量比で含む請求項２〜６のいずれかに記載のリポジストロフィー処置剤。
【請求項８】
マクロカプセル化またはマイクロカプセル化されている請求項１〜７のいずれかに記載のリポジストロフィー処置剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は医薬組成物の分野に関し、リポジストロフィーを処置するための新規な活性薬剤または組成物の使用を提供する。
【背景技術】
【０００２】
リポジストロフィーは、体脂肪の選択的な喪失によって特徴づけられる脂肪組織の障害を意味する。この疾患の典型的な症状には、
・頬のこけ、
・顔における脂肪の増大、
・脚の静脈が浮いて見えること、
・脚および腕における脂肪の喪失、
・臀部における形状の崩れ、
・胃の周りにおける脂肪の増大（体幹性肥満または中心性肥満と呼ばれる）、
・乳房腫大、
・頸部における脂肪パッド（バッファローハンプと呼ばれることがある）、および
・脂肪腫（身体の種々の部分における脂肪増殖）
がある。
【０００３】
リポジストロフィーに罹っている患者は、インスリン抵抗性、糖尿病、血清中の高いトリグリセリドレベルおよびコレステロールレベル（トリグリセリド過剰血症）、ならびに脂肪肝を発症する傾向を示す。遺伝的（遺伝する）または後天的（遺伝しない）であるリポジストロフィーの数多くの形態が存在する。遺伝的形態のリポジストロフィーには、先天性全身性リポジストロフィー（Berardinelli−Seip症候群）および複数種の家族性部分的リポジストロフィー（Dunnigan型、Koebberling型、mandibuloacral dysplasia型）が含まれる。後天的形態のリポジストロフィーには、後天性全身性リポジストロフィー（Lawrence症候群）、後天性部分的リポジストロフィー（Barraquer−Simons症候群）、および、HIVを処置するために使用されるプロテアーゼ阻害剤により誘発されるリポジストロフィーが含まれる。
【０００４】
従来技術からは、例えば、リポジストロフィーの処置のために、脂肪標的化ペプチド［国際特許出願公開WO03／022991A1、テキサス大学］またはクロミフェンのような抗エストロゲン剤［米国特許出願公開第20040171697号A1（Zonagen）］が知られている。米国特許第6365176号B1（Functional Food）によれば、血中トリグリセリドレベルおよび血中コレステロールレベルを低下させるために、血糖インデックスの低い炭水化物源、タンパク質源、脂肪源、ステロール源および／またはスタノール源、クロム源、サリチル酸源、ならびに薬用ニンジン源を含む栄養補助物を食物に添加することが提案される。それにもかかわらず、これまで、活性剤または組成物はどれも、満足すべき結果を与えていないことがわかっている。
【０００５】
【特許文献１】国際公開第03／022991号パンフレット
【特許文献２】米国特許出願公開第2004／171697号明細書
【特許文献３】米国特許第6365176号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の課題は、人体における脂肪分布に関して、また、皮膚科学的および毒物学的な安全性に関して、より良好な成績を示す、リポジストロフィー処置用の新規医薬品を開発することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は第1に、リポジストロフィー処置用の医薬品を調製するための、生理学的に活性な脂肪酸、それらの塩およびそれらのエステルの使用に関する。
【０００８】
本発明は第2に、リポジストロフィー処置用の医薬品を調製するための、
（a）生理学的に活性な脂肪酸、それらの塩およびそれらのエステル、ならびに
（b）Castanea  sativaの抽出物またはその活性な成分
を含む活性な組成物に関する。
【０００９】
驚くべきことに、生理学的に活性な脂肪酸（主として、共役リノール酸（CLA）またはω3脂肪酸のような不飽和脂肪酸、これらは主に海洋資源に由来する）、それらの塩およびエステルは人体における脂肪分布を改善し、リポジストロフィーの主要な原因である脂肪組織の障害を処置できることがわかった。Castanea  sativa抽出物全般またはその主要な有効成分（β−エスシン）との組合せで、相乗的な効果が見出された。また、単独で投与された脂肪酸は、その効果の発現にある程度の時間を要する一方で、混合物はより大きな活性を示す。最後に、脂肪酸および混合物はいずれも毒物学的および皮膚科学的に安全である。
【００１０】
＜生理学的に活性な脂肪酸、それらの塩およびそれらのエステル＞
成分（a）をなす生理学的活性を有する脂肪酸に共通する特徴は、脂肪鎖、充分な数の炭素原子（分子が身体の胃腸管を通過することを可能にする親油的挙動を提供する）と、充分な数の二重結合とを有することである。従って、前記脂肪酸は通常、18個〜26個の炭素原子および2個〜6個の二重結合を含む。
【００１１】
本発明の第1の実施形態において、共役リノール酸（CLA）またはそのアルカリ塩もしくはアルカリ土類塩およびエステル（好ましくは、1個〜4個の炭素原子を有する低級脂肪族アルコールとのエステル−またはそれらのグリセリド、特にそれらのトリグリセリド）が考慮される。共役リノール酸（CLA）は、市販の生成物で、これは通常、ヒマワリ油または対応するアルキルエステルの塩基触媒による異性化、および、それに続く酵素の存在下での異性化によって得られる。CLAは、必須脂肪酸であるリノール酸（LA、cis−9，cis−12−オクタデカジエン酸、18：2n−6）に由来する位置異性体および幾何異性体について使用される頭字語である。
【００１２】
生理学的観点から、粗混合物の総CLA含有量に基づいて少なくとも30重量％（好ましくは少なくとも50重量％、最も好ましくは少なくとも80重量％）のcis−9，trans−11異性体を有する場合、cis−9，trans−11異性体の使用が、本発明によれば特に重要である。また、総CLA含有量に基づいて、trans−10，cis−12異性体の含有量が多くても45重量％（好ましくは多くても10重量％、最も好ましくは1重量％未満）であり、8，10−異性体、11，13−異性体およびtrans，trans−異性体が全部で1重量％未満であるならば、好都合であることがわかった。このような生成物は、例えば、商標Tonalin（登録商標）CLA−80（Cognis）で市販されている。
【００１３】
第2の実施形態において、いわゆるω3脂肪酸を考慮することができ、これは典型的には、18個〜26個（好ましくは20個〜22個）の炭素原子と、少なくとも4個で、6個までの二重結合とを含む。このような分子も、この技術分野で非常によく知られており、有機化学の標準的な方法によって、例えば、ドイツ国特許DE3926658  C2（Norsk Hydro）に記載されるように、魚油のエステル交換反応後、このようにして得られたアルキルエステルの尿素沈殿、そして、非極性溶媒を使用する最後の抽出によって得ることができる。このようにして得られた脂肪酸はω−3（all−Z）−5，8，11，14，17−エイコサペンタエン酸（EPA）C20：5および（all−Z）−4，7，10，13，16，19−ドコサヘキサエン酸（DHA）C22：6に富む。このような生成物は、商標Omacor（登録商標）（Pronova）で市販されている。
【００１４】
第3の実施形態において、リノール酸、バクシン酸（trans−11−オクタデセン酸）またはcis−ヘキサデセン酸（これは、例えば、植物Thunbergia  alataから得られる）を使用することができる。
【００１５】
また、前記生理学的に活性な脂肪酸エステルは、その低級アルキルエステルまたはグリセリドの形態で使用することができるだけでなく、本発明のさらなる充分に好ましい実施形態は、ステロールとの前記脂肪酸のエステルを含む組成物に関する。グリセリドと同様に、ステロールエステルは人体に容易に吸収され分解されるが、エステル結合の切断により健康増進特性を有する第2の分子が放出されるという事実によって著しい利点がもたらされる。曖昧さを避けるために、「ステロール」、「スタノール」および「ステリン」なる表現は、C−3に1つのヒドロキシル基が結合したステロイドを定義する同義語として使用される。また、27個〜30個の炭素原子を有するステロールは、二重結合を好ましくは5／6位に有し得る。本発明によれば、β−シトステロールまたはその水素化生成物β−シトスタノールとのCLAまたはω3脂肪酸のエステルが好ましい。
【００１６】
＜Castanea  sativaの抽出物およびその活性成分＞
成分（b）をなすクリ（horse  chestnut）（Castanea  sativa）の抽出物の主要な成分は各種サポニンおよびエスシンであり、エスシンは、そのアグリコンがプロテオエスシゲニンに由来し、糖がグルクロン酸または2分子のD−グルコースである2つのグリコシドの混合物である。前記グリコシドはC22位におけるアシル基が異なる。
【００１７】
【化１】
2006137759.tif 000002
R＝チグリン酸またはアンゲリカ酸
【００１８】
α−エスシンは、225℃〜227℃の間で融解する、水に易溶の非晶質粉末であり、一方、β−エスシン（これはまたフロゲンシルとも呼ばれる）は、事実上水に溶けず、アルコールには溶解し得るフレークを形成する。
【００１９】
＜活性な組成物＞
本発明による組成物は、成分（a）単独、または成分（a）および成分（b）の混合物のいずれかであるが、局所的または経口的のいずれかで投与することができる。混合物は成分（a）および成分（b）を99：1〜50：50の重量比で含むことができ、より具体的には95：10〜75：25の重量比で含むことができる。非常に大きい相乗効果が92：8〜80：20の比率で見られる。本発明の組成物は通例、最終的な組成物に基づいて計算した場合、約10重量％までの濃度（具体的には0．5重量％〜8重量％の濃度、より具体的には1重量％〜2重量％の濃度）で使用することができる。1％が特に好適であることがわかった。
【００２０】
セルライトに抗し、また、皮膚を明るくすることによって抗リポジストロフィー効果を支援するために、本発明の組成物はさらに、例えば、Ginkgo  biloba、Oleacea  europensis、Glyzyrrhiza  glabra、Vaccinium  myrtillus、Trifolium  pratense、Litchi  sinensis、Vitis  vinifera、Brassica  oleracea、Punica  granatum、Petroselinium  crispum、Centella  asiatica、Passiflora  incarnata、Medicago  sativa、Valeriana  officinalis、Salix  albaおよびHarpagophytum  procumbensからなる群から選択される植物から選ばれる植物の抽出物またはそれらの活性な成分を含むことができる。
【００２１】
＜マクロカプセル化またはマイクロカプセル化＞
本発明の特定の実施形態において、前記組成物はマクロカプセルまたはマイクロカプセル化される。「マイクロカプセル」は、少なくとも1つの連続した膜によって囲まれている少なくとも1つの固体コアまたは液体コアを有する、直径が約0．1mm〜約5mmの球状の凝集物であることが理解される。より正確には、マイクロカプセルは、薄膜形成ポリマーでコーティングされている細かく分散された液相または固相であり、その製造において、乳化およびコアセルベーションまたは界面重合によって、ポリマーを、カプセル化される物質上に配置する。別の方法では、液体の活性な成分をマトリックス（「マイクロスポンジ」）に吸収させ、そして、マイクロ粒子として、薄膜形成ポリマーでさらにコーティングし得る。微視的に小さいカプセル（ナノカプセルとしてもまた知られている）は、粉末と同じ方法で乾燥することができる。シングルコアマイクロカプセルのほかに、連続した膜物質内に2つ以上のコアが分布したマルチコア凝集物もあり、これはマイクロスフェアとしてもまた知られている。また、シングルコアマイクロカプセルおよびマルチコアマイクロカプセルはさらなる第2、第3等の膜によって囲むことができる。
【００２２】
膜は、天然物質、半合成物質または合成物質からなり得る。天然の膜物質には、例えば、アラビアゴム、寒天、アガロース、マルトデキストリン、アルギン酸およびその塩（例えば、アルギン酸ナトリウムまたはアルギン酸カルシウム）、脂肪および脂肪酸、セチルアルコール、コラーゲン、キトサン、レシチン、ゼラチン、アルブミン、セラック、多糖（例えば、デンプンまたはデキストランなど）、ポリペプチド、タンパク質加水分解物、スクロース、ならびにワックスがある。半合成の膜物質には、とりわけ、化学修飾されたセルロース、より具体的には、セルロースエステルおよびセルロースエーテル（例えば、酢酸セルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびカルボキシメチルセルロース）、およびデンプン誘導体、より具体的には、デンプンエーテルおよびデンプンエステルがある。合成の膜物質には、例えば、ポリマー（例えば、ポリアクリレート、ポリアミド、ポリビニルアルコールまたはポリビニルピロリドンなど）がある。
【００２３】
知られているマイクロカプセルの例には、下記の市販の生成物がある（膜物質を括弧内に示す）：Hallcrest  Microcapsules（ゼラチン、アラビアゴム）、Coletica  Thalaspheres（海洋コラーゲン）、Lipotec  Millicapseln（アルギン酸、寒天）、Induchem  Unispheres（ラクトース、微結晶セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、Unicerin  C30（ラクトース、微結晶セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、Kobo  Glycospheres（修飾されたデンプン、脂肪酸エステル、リン脂質）、Softspheres（修飾された寒天）、Kuhs  Probiol  Nanospheres（リン脂質）、およびPrimaspheresまたはPrimasponges（キトサン、アニオン性ポリマー）。
【００２４】
本発明による組成物のカプセル化は、活性な物質を制御放出下に放出させなければならない場合に好ましい。従って、当業者は、腸のそれぞれの部分のpH条件下でのカプセルの安定性を比較することによって、適切なカプセル化システムを容易に選択することができる。しかし、ゼラチンのようなタンパク質とアニオン性ポリマー（例えば、カルボキシメチルセルロース）との組合せを使用する方法が非常に有効であるとわかった。例えば、ゼラチンの第1の水溶液と、CMCおよび有効成分の第2の水溶液とを、該タンパク質の融点よりも高い温度で激しい撹拌下に混合する。混合物を冷却すると、マイクロカプセルのコアセルベーションが起こる（これは溶液の増大する濁度によって示される）。カプセルを硬くするために、架橋剤（例えば、グルタルアルデヒド）を加えることによって外皮を網状化することが提案される。この方法の詳細な説明が、例えば、欧州特許EP0937496  A2（Unilever）になされている。ゲル形成剤、アニオン性ポリマーおよびキトサンに基づく他の好適なカプセル化方法が、例えば、国際特許出願公開WO01／01926、WO01／01927、WO01／01928、WO01／01929（Primacare）に記載されている（これらはすべてが参考として組み込まれる）。
【実施例１】
【００２５】
2つの溶液、すなわち、2．8重量％のゼラチン（Geltec（登録商標）SG−730N、Extraco）を含有する溶液と、1．2重量％のナトリウムカルボキシメチルセルロース（DS−07、Aldrich、MW＝90,000）および1．5重量％の共役リノール酸（Tonalin（登録商標）CLA、Cognis）を含有する溶液とを、45℃で蒸留水で調製した。両方の溶液を、1N  NaOH溶液を使用してpH6．5に調節した。CMC溶液を、ゼラチンを含有する溶液に加えて、Ultra  Turrax装置を使用して分散させた。その後、pHを、1N  HCl溶液を使用して4．25に調節し、混合物を撹拌下で25℃に冷却した。その後に、コアセルベートの形成が、増大する濁度によって認められた。そのようにして形成されたコアセルベートを、グルタルアルデヒドを撹拌下で加えることによって硬化した。25℃で4時間の反応時間の後、得られたコアセルベートを、ブッフナー漏斗を使用してろ過し、スラリーとして5℃で貯蔵した。平均粒子サイズは12．8μmであった。
【実施例２】
【００２６】
2つの溶液、すなわち、2．5重量％のゼラチン（Geltec（登録商標）SG−730N、Extraco）を含有する溶液と、1．3重量％のナトリウムカルボキシメチルセルロース（AV27088D、Aldrich、MW＝約38,000）、1．2重量％の共役リノール酸（Tonalin（登録商標）CLA、Cognis）および0．5重量％のCastanea  sativaの噴霧乾燥された抽出物（Herbalia（登録商標）Horse  chestnut、Cognis）を含有する溶液とを、45℃で蒸留水で調製した。両方の溶液を、1N  NaOH溶液を使用してpH6．5に調節した。CMC溶液を、ゼラチンを含有する溶液に加えて、Ultra  Turrax装置を使用して分散させた。その後、pHを、1N  HCl溶液を使用して4．25に調節し、混合物を撹拌下で25℃に冷却した。その後に、コアセルベートの形成が、増大する濁度によって認められた。そのようにして形成されたコアセルベートを、グルタルアルデヒドを撹拌下で加えることによって硬化した。25℃で4時間の反応時間の後、得られたコアセルベートを、ブッフナー漏斗を使用してろ過し、スラリーとして5℃で貯蔵した。平均粒子サイズは45．5μmであった。
【実施例３】
【００２７】
2つの溶液、すなわち、2．8重量％のゼラチン（Geltec（登録商標）SG−730N、Extraco）を含有する溶液と、1．2重量％のナトリウムカルボキシメチルセルロース（DS−07、Aldrich、MW＝90,000）および1．5重量％のω不飽和魚油脂肪酸（Omacor（登録商標）、Pronova）を含有する溶液とを、45℃で蒸留水で調製した。両方の溶液を、1N  NaOH溶液を使用してpH6．5に調節した。CMC溶液を、ゼラチンを含有する溶液に加えて、Ultra  Turrax装置を使用して分散させた。その後、pHを、1N  HCl溶液を使用して4．25に調節し、混合物を撹拌下で25℃に冷却した。そのようにして形成されたコアセルベートを、グルタルアルデヒドを撹拌下で加えることによって硬化した。25℃で4時間の反応時間の後、得られたコアセルベートを、ブッフナー漏斗を使用してろ過し、スラリーとして5℃で貯蔵した。平均粒子サイズは12．5μmであった。
【実施例４】
【００２８】
2つの溶液、すなわち、2．8重量％のゼラチン（Geltec（登録商標）SG−730N、Extraco）を含有する溶液と、1．2重量％のナトリウムカルボキシメチルセルロース（DS−07、Aldrich、MW＝90,000）および1．5重量％の共役リノール酸の合成トリグリセリド（Tonalin CLA-TG（登録商標）、Cognis）を含有する溶液とを、45℃で蒸留水で調製した。両方の溶液を、1N  NaOH溶液を使用してpH6．5に調節した。CMC溶液を、ゼラチンを含有する溶液に加えて、Ultra  Turrax装置を使用して分散させた。その後、pHを、1N  HCl溶液を使用して4．25に調節し、混合物を撹拌下で25℃に冷却した。25℃で4時間の反応時間の後、得られたコアセルベートを、ブッフナー漏斗を使用してろ過し、スラリーとして5℃で貯蔵した。平均粒子サイズは12．5μmであった。
【実施例５】
【００２９】
2つの溶液、すなわち、2．8重量％のゼラチン（Geltec（登録商標）SG−730N、Extraco）を含有する溶液と、1．2重量％のナトリウムカルボキシメチルセルロース（DS−07、Aldrich、MW＝90,000）および1．5重量％の共役リノール酸ステロールエステルを含有する溶液とを、45℃で蒸留水で調製した。両方の溶液を、1N  NaOH溶液を使用してpH6．5に調節した。CMC溶液を、ゼラチンを含有する溶液に加えて、Ultra  Turrax装置を使用して分散させた。その後、pHを、1N  HCl溶液を使用して4．25に調節し、混合物を撹拌下で25℃に冷却した。25℃で4時間の反応時間の後、得られたコアセルベートを、ブッフナー漏斗を使用してろ過し、スラリーとして5℃で貯蔵した。平均粒子サイズは12．5μmであった。