(57)【要約】【課題】  経口摂取が可能なラクトフェリンを有効成分とするインターフェロン−α産生増強剤及び／又はインターフェロン−β産生増強剤を提供する。【解決手段】  ラクトフェリンを有効成分として含有するヒトを含む哺乳動物のインターフェロン−α産生増強剤及び／又はインターフェロン−β産生増強剤、及び該インターフェロン−α産生増強剤及び／又はインターフェロン−β産生増強剤を含有してなる飲食品、並びにラクトフェリンを含有し、インターフェロン−α及び／又はインターフェロン−βの産生増強のために用いられるものである旨の表示を付した飲食品。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトフェリンを有効成分として含有するインターフェロン−α産生増強剤。
【請求項２】
ラクトフェリンが、金属飽和型、金属部分飽和型、アポ型からなる群より選択される１種又は２種以上の混合物である請求項１に記載のインターフェロン−α産生増強剤。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載のインターフェロン−α産生増強剤を含有してなる飲食品。
【請求項４】
ラクトフェリンを含有し、インターフェロン−α産生増強作用を有するものであることを特徴とし、インターフェロン−α産生増強のために用いられるものである旨の表示を付した飲食品。
【請求項５】
ラクトフェリンを有効成分として含有するインターフェロン−β産生増強剤。
【請求項６】
ラクトフェリンが、金属飽和型、金属部分飽和型、アポ型からなる群より選択される１種又は２種以上の混合物である請求項５に記載のインターフェロン−β産生増強剤。
【請求項７】
請求項５又は請求項６に記載のインターフェロン−β産生増強剤を含有してなる飲食品。
【請求項８】
ラクトフェリンを含有し、インターフェロン−β産生増強作用を有するものであることを特徴とし、インターフェロン−β産生増強のために用いられるものである旨の表示を付した飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ラクトフェリンを有効成分とする、抗ウイルス、抗腫瘍、細胞増殖抑制、免疫修飾作用等の効果を有するインターフェロン−α産生増強剤及びインターフェロン−β産生増強剤、並びにこれを含有してなる飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
ラクトフェリン（ＬＦ）には、種々の免疫賦活作用を有することが報告されている。特に様々な病態モデルの動物実験において、ウシラクトフェリン経口投与が病態改善効果を発揮しているが、これらがウシラクトフェリンの免疫賦活作用を介してもたらされると説明されている。ウシラクトフェリンの免疫賦活作用のうち、インターフェロン（ＩＦＮ）−γの産生増強を示すものがいくつかある。ＩＦＮ−γは細胞性免疫の調節において中心的役割を果たす因子であり、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、インターロイキン−１８（ＩＬ−１８）等のサイトカインによって産生が誘導される。
【０００３】
インターフェロンは、タイプＩとタイプＩＩに大別されるが、ＩＦＮ−γは、唯一のタイプＩＩのインターフェロンとして知られている。これに対して、タイプＩのインターフェロンには、ＩＦＮ−α、−β、−κ、−ω、−τ、limitin等が属しており、さらに、ＩＦＮ−αには１４種のサブタイプが報告されている。また、タイプＩのＩＮＦ遺伝子は、マウスで第４染色体、ヒトで第９染色体にそれぞれコードされ、タイプＩＩのＩＮＦ遺伝子は、マウスで第１０染色体、ヒトで第１２染色体にそれぞれコードされている。さらに、タイプＩとタイプＩＩの両者にMolecular homologyはなく、タイプＩではacid-stableであるのに対し、タイプＩＩはacid-labileである。
【０００４】
タイプＩ、及びタイプＩＩのＩＦＮの両者では、ともに抗ウイルス、抗腫瘍、細胞増殖抑制、免疫修飾作用等を有するが、いずれの効果についても、その作用メカニズムは異なっている。ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βは、共通のレセプターＩＦＮＡＲ１とＩＦＮＡＲ２ｃを介し、ＩＦＮ−γはＩＦＮＧＲ１とＩＦＮＧＲ２を介して細胞にシグナルを伝達する。
【０００５】
例えば、抗ウイルス作用に関して、ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βは感染細胞でＰＫＲ（dsRNA-dependent protein kinase）又はＭｘタンパク質の発現を上げてウイルス増殖を抑制するのに対し、ＩＦＮ−γはマクロファージのＮＯＳ（nitric oxide synthase）の発現を増加させることによって抗ウイルス作用を発揮する。
【０００６】
ＩＦＮ−γの主要な産生細胞はＴ細胞やマクロファージであり、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８及びＩＦＮ−γ自身によって産生が誘導され、細胞性免疫を担う細胞障害性Ｔ細胞やＮＫ細胞、マクロファージを活性化する。
【０００７】
一方、ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βは、マクロファージ、樹上細胞、及び上皮細胞において産生され、若しくは微生物やウイルスの刺激によって産生が誘導され、ＮＫ細胞を活性化してこれらの感染に対する初動防御機構として作用するとともに、ＮＫ細胞からのＩＦＮ−α産生を誘導して細胞性免疫の発動を促すのである。
【０００８】
ＩＦＮ−αは、現在Ｃ型慢性肝炎の唯一の治療薬として承認されている。また、ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βは多発性硬化症、乾癬、肝細胞癌、メラノーマ、ＳＡＲＳ（Severe Acute Respiratory Syndrome：重症急性呼吸器症候群）、髄鞘脱落性多発性神経根炎（Guillan-Barre症候群）に対する治療効果が報告されており、さらに幅広いスペクトルでの抗ウイルス作用も報告されている（非特許文献１）。この他に、ＩＦＮ−βは骨リモデリングの正常なバランスを保つために必須の因子であることが明らかになっている（非特許文献２）。
このように様々な効果を有するインターフェロンではあるが、臨床で用いられるＩＦＮ−αには、大量に投与した場合、副作用を引き起こすことが報告されており、投与方法は静脈内投与に限られている。
【０００９】
ラクトフェリンは、Ｃ型慢性肝炎患者に対するＩＦＮ−αによる治療効果を増強することが知られている（特許文献１）。また、ラクトフェリンにはＢ型肝炎ウイルスの肝細胞感染を阻害する効果を有すること（特許文献２）、Ｃ型肝炎ウイルスの肝細胞感染を阻害する効果を有すること（特許文献３）がそれぞれ開示されている。
さらに、ラクトフェリンまたはその加水分解物及びセラミド類を含有するヒトを含む哺乳動物のＩＦＮ−γ産生増強剤組成物が開示されている（特許文献４）。
一方、ラクトフェリンによる、ＩＦＮ−γとは分類も構造も異なるＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βの産生を誘導あるいは増強する効果は従来より全く報告されていない。
【００１０】
【特許文献１】国際公開第２００２／０４３７５２号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００２／０４３７５３号パンフレット
【特許文献３】特開２００２−３３２２４２号公報
【特許文献４】国際公開第０１／０５１０７９号パンフレット
【非特許文献１】サイトカイン療法、高久史麿偏、南江堂、１９９２年、ｐ．８９−９７
【非特許文献２】ネイチャー（Nature）、第４１６巻、２００２年、ｐ．７４４−７４９
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
タイプＩのインターフェロンと同様の作用を有し、かつ経口摂取でその作用が発揮されることを期待する患者、もしくはＩＦＮ−α製剤の適応外の疾患、例えば多発性硬化症、肝細胞癌、メラノーマなどに対して治療効果を期待する患者にとって、または、治療と言うよりは予防的に用いることを想定した場合等には、副作用が多く、投与方法が制限されるＩＦＮ−α製剤を使用することは困難であった。
【００１２】
前記特許文献１の発明では、ウシラクトフェリンがＣ型慢性肝炎患者に対し、ＩＦＮ−α様の活性に基づいて、ＩＦＮ療法の治療効果を増強するという効果が開示されているが、ＩＦＮ−αそのものの産生を誘導することは一切記載されていなかった。同様に、特許文献２及び特許文献３においても、ラクトフェリンによる抗肝炎ウイルス効果は確認されているものの、インターフェロンそのものを誘導あるいは増強することは一切記載も示唆もされていなかった。
【００１３】
また、特許文献４では、ラクトフェリンとセラミド類によるＩＦＮ−γ産生増強効果を開示しているが、ＩＦＮ−γとはタイプや構造が異なるＩＦＮ−αやＩＦＮ−βを増強するという効果は一切記載されていなかったことから、ＩＦＮ−αやＩＦＮ−βの製剤を必要とする患者にとって要求される治療の問題、及びＩＦＮ−αやＩＦＮ−βでしか解決できない問題は依然残されたままであった。
【００１４】
本発明者らは前記問題点を鑑み、副作用が殆ど無く、安全性が高い、ＩＦＮ−α製剤の代替となるような有用物質を探索した結果、ウシ・ラクトフェリンを経口摂取することによって、ＩＦＮ−αのみならずＩＦＮ−βについても、その産生を顕著に誘導し、腸管付属リンパ組織であるパイエル板においてＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βの発現を高めることを見出し、本発明を完成するに至った。特に、ラクトフェリンによるＩＦＮ−βの産生を増強する効果は、前記引用文献には一切記載されておらず、本発明によって初めて見いだされた効果である。
【００１５】
これにより、ＩＦＮ−α及び／又はＩＦＮ−βの臨床適用となっていない疾病に対して有用であるとともに、ＩＦＮ−α製剤を直接投与する必要がある患者にとって、薬剤治療のための副作用が少ない補助剤としても利用できる点で、従来知られていなかったラクトフェリンによる、多発性硬化症、乾癬、肝細胞癌、メラノーマ、ＳＡＲＳ（Severe Acute Respiratory Syndrome：重症急性呼吸器症候群）、髄鞘脱落性多発性神経根炎（Guillan-Barre症候群）等に対する治療補助剤、並びに癌細胞等の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の治療剤又は予防剤としての新規な医薬用途を見いだしたのである。
【００１６】
さらに、ＩＦＮ−αやＩＦＮ−βは、ＮＫ細胞の活性を増強することが知られており、インターフェロンで活性化したＮＫ細胞による治療と予防、いわゆるＩＦＮＡＮＫ療法（IFN activated NK細胞）で使用されることから、本発明はＩＦＮＡＮＫ療法の補助剤として利用できる点においても、従来知られていなかったラクトフェリンによる新規な医薬用途を見いだしたのである。
【００１７】
本発明は、インターフェロン製剤の臨床適用となっていないような疾病に対して、ＩＦＮ−α製剤の代替製剤として有用であって、経口摂取が可能なインターフェロン−α産生増強剤及び／又はインターフェロン−β産生増強剤を提供することを第１の目的としている。
【００１８】
さらに、本発明は、ラクトフェリンを有効成分としたインターフェロン−α産生増強剤及び／又はインターフェロン−β産生増強剤を含有する飲食品、又はラクトフェリンを含有し、インターフェロン−α及び／又はインターフェロン−βの産生増強作用を有するものであることを特徴とし、インターフェロン−α及び／又はインターフェロン−βの産生増強のために用いられるものである旨の表示を付した飲食品を提供することを第２の目的としている。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
前記課題を解決する本発明の第一の発明は、ラクトフェリンを有効成分として含有するインターフェロン−α産生増強剤であって、該ラクトフェリンが、金属飽和型、金属部分飽和型、アポ型からなる群より選択される１種又は２種以上の混合物であることを好ましい態様としている。
【００２０】
前記課題を解決する本発明の第二の発明は、前記第一の発明のインターフェロン−α産生増強剤を含有してなる飲食品である。
【００２１】
前記課題を解決する本発明の第三の発明は、ラクトフェリンを含有し、インターフェロン−α産生増強作用を有するものであることを特徴とし、インターフェロン−α産生増強のために用いられるものである旨の表示を付した飲食品である。
【００２２】
前記課題を解決する本発明の第四の発明は、ラクトフェリンを有効成分として含有するインターフェロン−β産生増強剤であって、該ラクトフェリンが、金属飽和型、金属部分飽和型、アポ型からなる群より選択される１種又は２種以上の混合物であることを好ましい態様としている。
【００２３】
前記課題を解決する本発明の第五の発明は、前記第四の発明のインターフェロン−β産生増強剤を含有してなる飲食品である。
【００２４】
前記課題を解決する本発明の第六の発明は、ラクトフェリンを含有し、インターフェロン−β産生増強作用を有するものであることを特徴とし、インターフェロン−β産生増強のために用いられるものである旨の表示を付した飲食品である。
【発明の効果】
【００２５】
本発明のインターフェロン産生増強剤及び飲食品は、経口投与又は摂取によって誘導されるＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βの産生増強により、ＩＦＮ−α及び／又はＩＦＮ−βの臨床適用となっていない疾病に対して有用であるとともに、ＩＦＮ−α製剤を直接投与する必要がある患者にとって、薬剤治療のための副作用が少ない補助剤としても利用することが可能である。
【００２６】
また、ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βによって治療効果が知られている多発性硬化症、乾癬、肝細胞癌、メラノーマ、ＳＡＲＳ（Severe Acute Respiratory Syndrome：重症急性呼吸器症候群）、髄鞘脱落性多発性神経根炎（Guillan-Barre症候群）に対する治療補助剤、並びに癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の治療剤又は予防剤として有用である。
【００２７】
さらに、ＩＦＮ−αやＩＦＮ−βは、ＮＫ細胞の活性を増強することが知られており、インターフェロンで活性化したＮＫ細胞による治療と予防、いわゆるＩＦＮＡＮＫ療法（IFN activated NK細胞）で使用されることから、本発明はＩＦＮＡＮＫ療法の補助剤としても利用することが可能である。
【００２８】
また、ラクトフェリンによりＩＦＮ−βの遺伝子発現を増強することから、ＩＦＮ−β遺伝子に基づく遺伝子治療における治療剤又は補助剤等として有用であると考えられる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２９】
次に、本発明の好ましい実施形態について詳細に説明する。ただし、本発明は以下の好ましい実施形態に限定されず、本発明の範囲内で自由に変更することができるものである。尚、本明細書において百分率は特に断りのない限り質量による表示である。
【００３０】
本発明は、ラクトフェリンを有効成分として含有するインターフェロン（ＩＦＮ）−α産生増強剤及び／又はインターフェロン（ＩＦＮ）−β産生増強剤（本発明において、インターフェロン−α産生増強剤及び／又はインターフェロン−β産生増強剤を「インターフェロン（ＩＦＮ）産生増強剤」と略記することがある。）である。
【００３１】
本発明に使用するラクトフェリンは、市販のラクトフェリンや、哺乳動物（例えば、ヒト、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ウマ等。）の初乳、移行乳、常乳、末期乳、又はこれらの乳の処理物である脱脂乳、ホエー等を原料とし、例えばイオン交換クロマトグラフィー等の常法により、前記原料から分離して得られるラクトフェリンを用いることができる。中でも、工業的規模で製造されている市販のラクトフェリン（例えば、森永乳業社製）を使用することが好適である。更に、遺伝子工学的手法により、微生物、動物細胞、トランスジェニック動物等で生産したラクトフェリンを使用することも可能である。
【００３２】
本発明のインターフェロン産生増強剤の効果において、ラクトフェリン中の金属含有量は特に限定されず、本発明では、ラクトフェリンを塩酸やクエン酸等により脱鉄したアポ型ラクトフェリン；該アポ型ラクトフェリンを、鉄、銅、亜鉛、マンガン等の金属でキレートさせて得られる飽和度１００％の状態の金属飽和ラクトフェリン；及び１００％未満の各種飽和度で金属が結合している状態の金属部分飽和ラクトフェリンからなる群から選ばれる、いずれか１種又は２種以上の混合物を用いることができる。
【００３３】
上記の種々のラクトフェリンは、ＩＦＮ−α及び／又はＩＦＮ−βの産生増強作用を有する。ここで、本発明において「ＩＦＮ−α及び／又はＩＦＮ−βの産生増強」とは、ＩＦＮ−α及び／又はＩＦＮ−βの産生細胞におけるＩＦＮ−α及び／又はＩＦＮ−βの産生を増強あるいは産生を誘導することを意味する。従って、本発明におけるＩＦＮ−α産生増強剤及び／又はＩＦＮ−β産生増強剤（ＩＦＮ産生増強剤）は、ＩＦＮ−α産生誘導剤及び／又はＩＦＮ−β産生誘導剤（ＩＦＮ産生誘導剤）と換言することも可能である。
【００３４】
また、本発明のＩＦＮ産生増強剤の刺激を受けてＩＦＮ−α及び／又はＩＦＮ−βを産生増強する細胞（又は臓器）は、白血球、ＮＫ細胞、樹状細胞、線維芽細胞、パイエル板組織（例えば、小腸粘膜上に分布するパイエル板）等が例示され、本発明のＩＦＮ産生増強剤は前記の細胞を産生する臓器等に効果的に働いてＩＦＮ−α及び／又はＩＦＮ−βを効率よく産生することが可能である。
【００３５】
本発明のインターフェロン産生増強剤は、インターフェロンが関与する疾患、例えば多発性硬化症、乾癬、メラノーマ、髄鞘脱落性多発性神経根炎（Guillan-Barre症候群）等の予防・治療剤、若しくは癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、肝細胞癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）の増殖や転移の抑制剤やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳ（Severe Acute Respiratory Syndrome：重症急性呼吸器症候群）ウイルス等）の増殖抑制剤として有用である。さらに、本発明のインターフェロン産生増強剤は、癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の治療又は予防、並びにこれら疾病・合併症等のリスクを低減することが可能である。
【００３６】
本発明のインターフェロン産生増強剤は、単独で使用しても良いが、公知の前記疾患の予防・治療剤、又は前記ウイルス増殖抑制剤と併用して使用することも可能である。併用することによって、前記疾患の予防・治療効果、又は前記ウイルス増殖抑制効果を高めることができる。併用する前記疾患の予防・治療剤、又は前記ウイルス増殖抑制剤は、本発明の組成物中に有効成分として含有させても良いし、本発明の組成物中には含有させずに別個の薬剤として組合わせて商品化しても良い。
【００３７】
本発明のインターフェロン産生増強剤と併用することが可能な薬剤としては、公知の抗ウイルス剤、抗腫瘍剤の他に、一般的にインターフェロンインデューサーと呼ばれる因子又はこの因子を含む薬剤、細菌内毒素、細菌類等が例示されるが、中でも合成又は天然の２本鎖核酸（２本鎖ＲＮＡ、ポリＩＣ等）、リポポリサッカライド、多糖類（β−グルカン等）、タキソール等の抗癌剤、ディフェンシン、熱ショック蛋白質、フィブリノーゲン、ヒアルロン酸分解産物などが好ましい。また、これらの前記インターフェロンインデューサーを併用すれば、工業的規模でのインターフェロンの産生（製造）を行うことも可能である。
【００３８】
本発明のインターフェロン産生増強剤はラクトフェリンの製剤学的に許容される製剤担体と組合わせて、経口的、又は非経口的にヒトを含む哺乳動物に投与することができる。本発明の製剤の投与単位形態は特に限定されず、治療目的に応じて適宜選択でき、具体的には、錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、坐剤、注射剤、軟膏剤、貼付剤、点眼剤、点鼻剤等を例示できる。製剤化にあたっては製剤担体として通常の薬剤に汎用される賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤、界面活性剤、注射剤用溶剤等の添加剤を使用できる。
【００３９】
本発明の製剤中に含まれるラクトフェリンの量は特に限定されず適宜選択すればよいが、例えばいずれも通常製剤中に０．０１〜６０質量％、好ましくは０．１〜４０質量％とするのがよい。
【００４０】
本発明の製剤の投与方法は特に限定されず、各種製剤形態、患者の年齢、性別、その他の条件、患者の症状の程度等に応じて決定される。本発明の製剤の有効成分の投与量は、用法、患者の年齢、性別、疾患の程度、その他の条件等により適宜選択される。通常有効成分としてのラクトフェリンの量は、０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．６〜６００ｍｇ／ｋｇ／日、特に好ましくは６〜３００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲となる量を目安とするのが良く、１日１回又は数回に分けて投与することができる。
【００４１】
本発明のインターフェロン産生増強剤を含有する飲食品は、食品又は飲料にラクトフェリンを添加して製造することができ、経口的に摂取することが可能である。飲食品の形態としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果汁飲料、乳酸菌飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む）；アイスクリーム、シャーベット、かき氷等の氷菓；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類：加工乳、乳飲料、発酵乳、バター等の乳製品；パン；経腸栄養食、流動食、育児用ミルク、スポーツ飲料；その他機能性食品等が例示される。
【００４２】
本発明の飲食品において、ラクトフェリンを添加する量は、飲食品の形態によって適宜設定されるが、通常の食品又は飲料中０．０１〜６０質量％、好ましくは０．１〜４０質量％となるように添加すればよい。
【００４３】
本発明のインターフェロン産生増強剤を含有する飲食品における用途としては、インターフェロン−α及び／又はインターフェロン−βの産生増強作用を有することを特徴とし、インターフェロン−α及び／又はインターフェロン−βの産生増強のための用途、具体的には、インターフェロンが関与する疾患、例えば多発性硬化症、乾癬、メラノーマ、髄鞘脱落性多発性神経根炎（Guillan-Barre症候群）等の予防・治療、若しくは癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、肝細胞癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）の増殖や転移の抑制、ウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖抑制等の効果を利用するような種々の用途をとることが可能である。さらに、本発明のインターフェロン産生増強剤を含有する飲食品は、癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の予防、並びにこれら疾病・合併症等のリスクを低減することが可能である。
【００４４】
本発明のインターフェロン産生増強剤を含有する飲食品は、インターフェロン−α及び／又はインターフェロン−βの産生増強作用を有するものであることを特徴とし、インターフェロン−α及び／又はインターフェロン−βの産生増強のために用いられる旨の表示を付した飲食品、具体的には、インターフェロンが関与する疾患、例えば多発性硬化症、乾癬、メラノーマ、髄鞘脱落性多発性神経根炎（Guillan-Barre症候群）等の予防・治療、若しくは癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、肝細胞癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）の増殖や転移の抑制、ウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖抑制等を利用するような種々の用途が表示された飲食品等として販売することが好ましい。例えば「ラクトフェリンを含有するインターフェロン産生増強用飲食品」、あるいは「インターフェロン産生増強用と表示された、ラクトフェリンを含有する飲食品」、等として販売することが好ましい。尚、本発明のインターフェロン産生増強剤は癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の予防等の効果を有することから、インターフェロン産生増強用の表示には、癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の予防等の効果の意味も有すると考えられる。したがって、本発明の飲食品は、「癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の予防用」と表示することができる。すなわち、前記インターフェロン産生増強用の表示とは、このような「癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の予防用」の表示であってもよい。
【００４５】
なお、以上のような表示を行うために使用する文言は、「インターフェロン産生増強用」、又は「癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の予防用」という文言のみに限られるわけではなく、それ以外の文言であっても、インターフェロン産生増強、又は癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の予防、する効果を表す文言であれば、本発明の範囲に包含されることはいうまでもない。そのような文言としては、例えば、需要者に対して、インターフェロン産生増強、又は癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の予防の効果を認識させるような種々の用途に基づく表示も可能である。
【００４６】
前記「表示」とは、需要者に対して上記用途を知らしめるための全ての行為を意味し、上記用途を想起・類推させうるような表示であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物・媒体等の如何に拘わらず、すべて本発明の「表示」に該当する。しかしながら、需要者が上記用途を直接的に認識できるような表現により表示することが好ましい。具体的には、本発明の飲食品に係る商品又は商品の包装に上記用途を記載する行為、商品又は商品の包装に上記用途を記載したものを譲渡し、引き渡し、譲渡若しくは引渡しのために展示し、輸入する行為、商品に関する広告、価格表若しくは取引書類に上記用途を記載して展示し、若しくは頒布し、又はこれらを内容とする情報に上記用途を記載して電磁気的（インターネット等）方法により提供する行為、等が例示できる。
【００４７】
一方、表示としては、行政等によって認可された表示（例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示）であることが好ましく、特に包装、容器、カタログ、パンフレット、ＰＯＰ等の販売現場における宣伝材、その他の書類等への表示が好ましい。
【００４８】
また、例えば、健康食品、機能性食品、経腸栄養食品、特別用途食品、栄養機能食品、医薬用部外品等としての表示を例示することができ、その他厚生労働省によって認可される表示、例えば、特定保健用食品、これに類似する制度にて認可される表示を例示できる。後者の例としては、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク低減表示等を例示することができ、詳細にいえば、健康増進法施行規則（平成１５年４月３０日日本国厚生労働省令第８６号）に定められた特定保健用食品としての表示（特に保健の用途の表示）、及びこれに類する表示が、典型的な例として列挙することが可能である。
【００４９】
次に試験例を示して本発明を詳細に説明する。
［試験例１］
本試験は、ラクトフェリンの経口投与によるインターフェロン−βの発現を遺伝子レベルで検討するために行った。
【００５０】
（１）試験方法
７週齢のＣ５７ＢＬ／６マウス（日本チャールスリバーより購入）２７匹について、１週間馴化飼育した後、１群９匹ずつ３群に分け、それぞれをラクトフェリン（ＬＦ）群、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）群、生理食塩水（対照）群とした。ＬＦ群のマウスには、ウシ・ラクトフェリン（森永乳業社製）の投与量が３００ｍｇ／ｋｇ体重となるように、生理食塩水（大塚製薬社製）に溶解したウシ・ラクトフェリン溶液２００μｌを経口ゾンデを使用して、７日間連続して投与した。同様に、ＢＳＡ群のマウスには、ウシ血清アルブミン（シグマ社製）の投与量が３００ｍｇ／ｋｇ体重となるように、生理食塩水に溶解したＢＳＡ溶液２００μｌを経口ゾンデを使用して、７日間連続して投与した。尚、対照群のマウスには、生理食塩水２００μｌを経口ゾンデを使用して、７日間連続して投与した。投与完了後、マウスの小腸に点在するパイエル板組織を採取し、トータルＲＮＡ抽出用試薬（製品名：RNA-BeeTM Reagent，コスモ・バイオ社製）を使用してパイエル板組織から全ＲＮＡを抽出し、プライマー（センス鎖の配列：TTCCTGCTGTGCTTCTCCAC，アンチセンス鎖の配列：GATTCACTACCAGTCCCAGAGTC。尚、A：アデニン、G：グアニン、T：チミン、C：シトシン、をそれぞれ意味する。）、及びＰＣＲ試薬（製品名：iQ SYBR Green Supermix［カタログ番号：170-8885］、バイオ・ラッド社製）を用いて、サーマルサイクラー（バイオ・ラッド社製）を使用してreal-time PCRを行った。
【００５１】
（２）試験結果
本試験の結果は表１に示すとおりである。表１から、ＬＦ投与群でのＩＦＮ−βのｍＲＮＡ発現量は、対照群に比して顕著（約２倍）に増加することが判明した。尚、ＢＳＡ群ではＩＦＮ−βのｍＲＮＡ発現量の増加は確認されなかった。
【００５２】
【表１】
2006083089.tif 000002
【００５３】
［試験例２］
本試験は、ラクトフェリンの経口投与によるインターフェロン−α産生をウエスタンブロッティング法にて検討するために行った。
【００５４】
（１）試料の調製
７週齢のＣ５７ＢＬ／６マウス（日本チャールスリバーより購入）４匹について、１週間馴化飼育した後、１群２匹ずつ２群に分け、それぞれをラクトフェリン（ＬＦ）群、生理食塩水（対照）群とした。ＬＦ群のマウスには、ウシ・ラクトフェリン（森永乳業社製）の投与量が３００ｍｇ／ｋｇ体重となるように、生理食塩水（大塚製薬社製）に溶解したウシ・ラクトフェリン溶液２００μｌを経口ゾンデを使用して、７日間連続して投与した。同様に、対照群のマウスには、生理食塩水２００μｌを経口ゾンデを使用して、７日間連続して投与した。投与完了後、各投与群のそれぞれのマウスの小腸に点在するパイエル板組織を採取し、採取したパイエル板組織をハンドホモゲナイザーに投入し、さらにホモゲナイズ試薬〔９．１ｍＭリン酸水素二ナトリウム（和光純薬工業社製）、１．７ｍＭリン酸二水素ナトリウム（和光純薬工業社製）、及び１５０ｍＭ塩化ナトリウム（和光純薬工業社製）を含むリン酸緩衝液ｐＨ７．４、並びに最終濃度１％ＮＰ−４０（シグマ社製）、最終濃度０．５％デオキシコール酸ナトリウム（和光純薬工業社製）、最終濃度０．１％ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ：和光純薬工業社製）、最終濃度１００μｇ／ｍｌ（ｐ−アミジノフェニル）メタンスルホニルフルオリド塩酸塩（和光純薬工業社製）をそれぞれ含む溶液〕０．５ｍｌを添加して均質化した。その後、均質化溶液全量をマイクロチューブに移し、４℃で１２，０００ｒｐｍの条件で１０分間遠心分離して上清を回収し、さらにもう一回同一条件で遠心分離して上清を回収して各投与群の試料溶液を調製した。
【００５５】
（２）試験方法
各試料溶液のタンパク質濃度を定量し、３０μｇ相当量を分取して電気泳動サンプルとし、また、組換え体ＩＦＮ−α（ｒＩＦＮ−α：PBL Biomedical Laboratories社製、カタログ番号12100-1）をポジティブコントロールサンプルとして、それぞれＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動を行った。電気泳動後、ゲル中に分離したタンパク質をポリビニリデンジフルオライド（ＰＶＤＦ）・メンブレンフィルター（アマシャムファルマシアバイオテク社製）に転写し、ブロックエース（雪印乳業社製）にてＰＶＤＦメンブレンをブロックした後、ＩＦＮ−α抗ウサギ抗体（PBL Biomedical Laboratories社製、カタログ番号32100-1）溶液を一次抗体として反応させた。さらに、抗ウサギＩｇＧ−抗ヤギ抗体（Cappel社製、カタログ番号55676）を二次抗体として反応させ、ＰＶＤＦメンブレンをＥＣＬ−Ｐｌｕｓウエスタンブロッティング検出用反応液（アマシャムファルマシアバイオテク社製）に５分間浸した。その後、ＰＶＤＦメンブレンを用いてハイパーフィルムＥＣＬ（アマシャムファルマシアバイオテク社製）を感光させ、感光したバンド（ＩＦＮ−α）の濃淡をデンシトメーターにより定量した。
【００５６】
（３）試験結果
本試験の結果は図１及び表２に示すとおりである。図１はウエスタンブロッティングを示し、表２は感光したバンド（ＩＦＮ−α）の濃淡をデンシトメーターにより定量した結果である。その結果、対照群に比して、ラクトフェリン群では、マウスのパイエル板におけるＩＦＮ−αの産生量が約１６倍に増加したことから、ラクトフェリンを投与することにより、顕著にＩＦＮ−α産生増強効果を発揮することが判明した。
【００５７】
【表２】
2006083089.tif 000003
【００５８】
［試験例３］
本試験は、ラクトフェリンの経口投与によるインターフェロン−β産生をウエスタンブロッティング法にて検討するために行った。
【００５９】
（１）試料の調製
７週齢のＣ５７ＢＬ／６マウス（日本チャールスリバーより購入）７匹について、１週間馴化飼育した後、それぞれをラクトフェリン（ＬＦ）群３匹、生理食塩水（対照）群２匹、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）群２匹に群分けした。ＬＦ群のマウスには、ウシ・ラクトフェリン（森永乳業社製）の投与量が３００ｍｇ／ｋｇ体重となるように、生理食塩水（大塚製薬社製）に溶解したウシ・ラクトフェリン溶液２００μｌを経口ゾンデを使用して、７日間連続して投与した。ＢＳＡ群のマウスには、ウシ血清アルブミン（シグマ社製）の投与量が３００ｍｇ／ｋｇ体重となるように、生理食塩水に溶解したＢＳＡ溶液２００μｌを経口ゾンデを使用して、７日間連続して投与した。尚、対照群のマウスには、生理食塩水２００μｌを経口ゾンデを使用して、７日間連続して投与した。投与完了後、各投与群のそれぞれのマウスの小腸に点在するパイエル板組織を採取し、試験例２と同様の方法で各投与群の試料溶液を調製した。
【００６０】
（２）試験方法
各試料溶液のタンパク質濃度を定量し、３０μｇ相当量を分取して電気泳動サンプルとし、また、組換え体ＩＦＮ−β（ｒＩＦＮ−β：PBL Biomedical Laboratories社製、カタログ番号12400-1）をポジティブコントロールサンプルとして、それぞれＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動を行った。電気泳動後、ゲル中に分離したタンパク質をポリビニリデンジフルオライド（ＰＶＤＦ）・メンブレンフィルター（アマシャムファルマシアバイオテク社製）に転写し、ブロックエース（雪印乳業社製）にてＰＶＤＦメンブレンをブロックした後、ＩＦＮ−β抗ウサギ抗体（PBL Biomedical Laboratories社製、カタログ番号32400-1）溶液を一次抗体として反応させた。さらに、抗ウサギＩｇＧ−抗ヤギ抗体（Cappel社製、カタログ番号55676）を二次抗体として反応させ、ＰＶＤＦメンブレンをＥＣＬ−Ｐｌｕｓウエスタンブロッティング検出用反応液（アマシャムファルマシアバイオテク社製）に５分間浸した。その後、ＰＶＤＦメンブレンを用いてハイパーフィルムＥＣＬ（アマシャムファルマシアバイオテク社製）を感光させ、感光したバンド（ＩＦＮ−β）の濃淡をデンシトメーターにより定量した。
【００６１】
（３）試験結果
本試験の結果は図２及び表３に示すとおりである。図２はウエスタンブロッティングを示し、表３は感光したバンド（ＩＦＮ−β）の濃淡をデンシトメーターにより定量した結果である。その結果、対照群に比して、ラクトフェリン群では、マウスのパイエル板におけるＩＦＮ−βの産生量がそれぞれ約４．４倍、約１．８倍、約１１倍となり、いずれの投与群においてもＩＦＮ−βが増加したことから、ラクトフェリンを投与することにより、顕著にＩＦＮ−β産生増強効果を発揮することが判明した。尚、ＢＳＡ群ではＩＦＮ−β産生増強効果は確認されなかった。
【００６２】
【表３】
2006083089.tif 000004
【００６３】
次に実施例を示して本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００６４】
（ラクトフェリンを配合した錠剤の調製）
次の組成からなる錠剤のインターフェロン産生増強剤を次の方法により製造した。
ウシラクトフェリン（森永乳業社製）                        ４０．０（％）
乳糖（森永乳業社製）                                      １８．５
トウモロコシ澱粉（日清製粉社製）                          ３０．７
ステアリン酸マグネシウム（太平化学産業社製）                １．４
カルボキシメチルセルロ−スカルシウム（五徳薬品社製）        ９．４
ウシラクトフェリン、乳糖、トウモロコシ澱粉及びカルボキシメチルセルロ−スカルシウムの混合物に、滅菌精製水を適宜添加しながら均一に混練し、５０℃で３時間乾燥させ、得られた乾燥物にステアリン酸マグネシウムを添加して混合し、常法により打錠し、錠剤を得た。
【実施例２】
【００６５】
（カプセル入りラクトフェリンの調製）
乳糖（和光純薬工業社製）６００ｇ、トウモロコシデンプン（日清製粉社製）４００ｇ、結晶セルロース（和光純薬工業社製）４００ｇ及びウシラクトフェリン（森永乳業社製）６００ｇを、５０メッシュ篩（ヤマト科学社製）により篩分けし、厚さ０．５ｍｍのポリエチレン製の袋にとり、転倒混合し、全自動カプセル充填機（Cesere Pedini社製。プレス式）を用い、前記粉末をカプセル（日本エランコ社製。１号ゼラチンカプセル、Op.Yellow No.6 Body、空重量は７５ｍｇ）に内容量２７５ｍｇで充填し、ウシラクトフェリン８２ｍｇ入りのインターフェロン−α及び／又はインターフェロン−βの産生増強効果を有するカプセル剤７，０００個を得た。
【実施例３】
【００６６】
（ウシラクトフェリンを添加した飲料の調製）
脱脂粉乳（森永乳業社製）９０ｇを５０℃の温湯８００ｍｌに溶解し、砂糖（日新製糖社製）３０ｇ、インスタントコーヒー粉末（ネスレ社製）１４ｇ、カラメル（昭和化工社製）２ｇ、及びコーヒーフレーバー（三栄化学社製）０．０１ｇ、を攪拌しながら順次添加して溶解し、１０℃に冷却し、ウシラクトフェリン（森永乳業社製）１ｇを添加し、ウシラクトフェリン約０．１％を含むインターフェロン−α及び／又はインターフェロン−βの産生増強効果を有する乳飲料を調製した。
【実施例４】
【００６７】
（ウシラクトフェリンを添加した経腸栄養食粉末の調製）
ホエー蛋白酵素分解物（森永乳業社製）１０．８ｋｇ、デキストリン（昭和産業社製）３６ｋｇ、及び少量の水溶性ビタミンとミネラルを水２００ｋｇに溶解し、水相をタンク内に調製した。これとは別に、大豆サラダ油（太陽油脂社製）３ｋｇ、パーム油（太陽油脂社製）８．５ｋｇ、サフラワー油（太陽油脂社製）２．５ｋｇ、レシチン（味の素社製）０．２ｋｇ、脂肪酸モノグリセリド（花王社製）０．２ｋｇ、及び少量の脂溶性ビタミンを混合溶解し、油相を調製した。タンク内の水相に油相を添加し、攪拌して混合した後、７０℃に加温し、更にホモゲナイザーにより１４．７ＭＰａの圧力で均質化した。次いで、９０℃で１０分間殺菌した後に、濃縮し、噴霧乾燥して、中間製品粉末約５９ｋｇを調製した。この中間製品粉末５０ｋｇに、蔗糖（ホクレン社製）６．８ｋｇ、アミノ酸混合粉末（味の素社製）１６７ｇ、及びウシラクトフェリン（森永乳業社製）６０ｇを添加し、均一に混合して、ウシラクトフェリンを約０．１％含有するインターフェロン−α及び／又はインターフェロン−βの産生増強効果を有する経腸栄養食粉末約５７ｋｇを製造した。
【産業上の利用可能性】
【００６８】
本発明のインターフェロン産生増強剤及び飲食品は、経口投与又は摂取によって誘導されるＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βの産生増強により、ＩＦＮ−α及び／又はＩＦＮ−βの臨床適用となっていない疾病に対して有用であるとともに、ＩＦＮ−α製剤を直接投与する必要がある患者にとって、薬剤治療のための副作用が少ない補助剤としても利用することが可能である。
【００６９】
また、ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βによって治療効果が知られている多発性硬化症、乾癬、肝細胞癌、メラノーマ、ＳＡＲＳ（Severe Acute Respiratory Syndrome：重症急性呼吸器症候群）、髄鞘脱落性多発性神経根炎（Guillan-Barre症候群）に対する治療補助剤、並びに癌細胞（骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、悪性リンパ腫、乳癌、骨肉腫、黒色腫、口頭乳頭腫、急性白血病等）やウイルス（単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ＳＡＲＳウイルス等）の増殖に起因する種々の疾病・合併症等の治療剤又は予防剤として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００７０】
【図１】マウスのパイエル板で産生したインターフェロン−αを測定したウエスタンブロッティングである。
【図２】マウスのパイエル板で産生したインターフェロン−βを測定したウエスタンブロッティングである。
【図１】
2006083089.tif 000005
【図２】
2006083089.tif 000006