(57)【要約】【課題】安価な前駆体からＢＣＨ−１８９の類似体を提供すること。【解決手段】式：2006141408.tif 000010（式中、Ｙは水素又はフッ素であり、Ｒはアシル基である）のヌクレオシドエナンチオマーの分割方法であって、ブタ肝臓エステラーゼ、ブタ膵臓リパーゼおよびズブチリシンからなる群から選択した酵素を用いてヌクレオシドを処理することを含む方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2006141408.tif 000009
（式中、Ｙは水素又はフッ素であり、Ｒはアシル基である）のヌクレオシドエナンチオマーの分割方法であって、ブタ肝臓エステラーゼ、ブタ膵臓リパーゼおよびズブチリシンからなる群から選択した酵素を用いてヌクレオシドを処理することを含む方法。
【請求項２】
Ｙが水素である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｙがフッ素である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
酵素がブタ肝臓エステラーゼである請求項２または３に記載の方法。
【請求項５】
酵素がブタ膵臓リパーゼである請求項２又は３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗ウィルス性ヌクレオシド類似体、特にＢＣＨ−１８９（２′，３′−ジデオキシ−３′−チア−シチジン）を調製するための組成物および方法に関する。さらに詳細には、本発明は、ＢＣＨ−１８９および関連化合物のβ異性体の選択的合成、およびエナンチオマーについて富化されたＢＣＨ−１８９および関連化合物の選択的合成に関する。
【背景技術】
【０００２】
１９８１年に、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）およびその前駆症であるＡＩＤＳ関連合併症（ＡＲＣ）として知られるようになった疾病について証拠文献が出始めた。１９８３年にはＡＩＤＳの原因は、ヒト免疫不全ウィルスタイプ１（ＨＩＶ−１）と命名されたウィルスであることが確立された。通常、このウィルスに感染した人は、いつかはＡＩＤＳを発症することになる；ＡＩＤＳについての知られている全ての症例は、最終的には常に死に至っている。
【０００３】
ＡＩＤＳという疾病は、ＨＩＶ−１ウィルスの複雑なライフサイクルの最終的な結果である。ビリオンのライフサイクルは、宿主ヒトＴ−４リンパ球免疫細胞に、ビリオンの保護コート表面上の糖タンパク質とリンパ球細胞上のＣＤ４糖タンパク質との結合を介して結合した、ビリオンに始まる。結合するとビリオンは、その糖タンパク質コートを脱ぎ捨てて、宿主細胞の膜内に侵入し、そのＲＮＡコートを脱ぐ。ビリオンの酵素、逆転写酵素は、ＲＮＡから一重鎖のＤＮＡを転写する工程を制御する。このウィルスのＲＮＡは分解され、第２のＤＮＡ鎖がつくられる。こうして二重鎖となったＤＮＡは、ヒト細胞遺伝子に組み込まれ、これらの遺伝子が細胞複製に使用される。
【０００４】
この時点で、ヒト細胞は、細胞自身のＲＮＡポリメラーゼを用いて、組み込まれたＤＮＡをウィルスのＲＮＡへ転写することにより、その複製を行なう。ウィルスＲＮＡは、糖タンパク質、構造タンパク質およびウィルス酵素に転写され、これらはウィルスＲＮＡと一緒に元のウィルスに組み立てられる。宿主細胞は、Ｔ−４リンパ球ではなくて新たなビリオン細胞の発芽で、その複製ステップを終える。このようにして、ＨＩＶ−１ウィルスの数は増加し、一方でＴ−４リンパ球の数は減少していく。
【０００５】
ビリオンのライフサイクルのほとんどの期間が免疫細胞内の潜伏期間に費されるので、侵入したビリオンを死滅させる典型的なヒト免疫系の応答は困難を背負っている。さらに、新たなビリオン細胞を形成する際に使用される、ウィルスの逆転写酵素は、非常に特異的というわけではなく、転写ミスを生じる結果、継続的にウィルスの保護コート表面上の糖タンパク質の変化が起こる。この特異性の欠除は、免疫系の効力を減じる。なぜなら、１つの糖タンパク質に対して特異的につくられた抗体は、他に対しては不用であり得、そのためウィルスの攻撃に利用できる抗体の数が少なくなるからである。ウィルスは続けて増殖し、免疫応答系は引続き弱められる。結局、ＨＩＶは、身体の免疫系に大きな空隙地帯をつくったまま保ち、これは日和見感染の発生を可能にして、抗ウィルス剤および／または免疫モジュレーターの投与がなければ、確実に死をもたらすことになる。
【０００６】
抗ウィスル剤の標的として認識されている、このウィルスのライフサイクルには３つの重要な点がある：（１）ビリオンのＴ−４リンパ球またはマクロファージのサイトヘの最初の結合、（２）ウィルスＲＮＡからウィルスＤＮＡへの転写および（３）複製の間の新たなビリオン細胞の組立て。
【０００７】
第２の重要な点における、即ちウィルスＲＮＡからウィルスＤＮＡへの転写工程における、ウィルスの抑制は、ＡＩＤＳ治療に用いられる療法の大部分を占める。この転写は、ビリオンの遺伝子がＲＮＡ内にコードされ；宿主細胞はＤＮＡだけを読むので、ビリオンが複製するためには生じなければならない工程である。逆転写酵素にウィルスのＤＮＡの形成を完了させないようにする薬剤を導入することによって、ＨＩＶ−１の複製は停止し得る。
【０００８】
３′−アジド−３′−デオキシチミジン（ＡＺＴ）、２′，３′−ジデオキシシチジン（ＤＤＣ）、２′，３′−ジデオキシチミジエン（Ｄ４Ｔ）、２′，３′−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）およびこれらのヌクレオシドの種々のフルオロ−誘導体のような、ヌクレオシド類似体は、逆転写酵素の段階でのＨＩＶ複製の停止において、比較的有効である。また別の有望な逆転写酵素抑制剤は、２′，３′−ジデオキシ−３′−チア−シチジン（ＢＣＨ−１８９）である。これは、ヌクレオシドの糖成分が置き換わってオキサチオラン環を含む。
【０００９】
ＡＺＴは、宿主Ｔ−４リンパ球細胞内部のウィルスのＤＮＡの形成を妨げるので、有効な抗ＨＩＶ薬剤である。ＡＺＴが細胞に入ると、細胞キナーゼは、ＡＺＴをＡＺＴトリホスフェートにリン酸化することにより、ＡＺＴを活性化する。その後、ＡＺＴトリホスフェートは、ＨＩＶ逆転写酵素のリセブター部位に対し、天然のチミジンヌクレオシドと競合する。天然のヌクレオシドは、２つの活性化末端を有している。１つは前のヌクレオシドと結びつくため、もう１つは次のヌクレオシドと結合するためである。ＡＺＴ分子は、１つ目の反応末端のみを有する；アジドは３′，５′−ホスホジエステルを続くヌクレオシドのリボース成分と共に形成し得ないので、ＡＺＴアジド基は、一度ＨＩＶ酵素部位内部に入ると、ウィルスのＤＮＡ形成を終結する。
【００１０】
ＡＺＴの臨床上の利点は、延命性を増し、日和見感染の頻度および重篤性を減らし、および末梢ＣＤ４リンパ球数を増やすことにある。ＨＩＶ−１活性をトラックするために用いられる抗原であるウィルスｐ２４の、免疫吸着アッセイは、ＡＺＴの使用に伴い著しい低下を示す。しかし、ＡＺＴの利点は、骨髄抑制、吐き気、筋肉痛、不眠症、ひどい頭痛、貧血末梢神経疾患および発作といった重要な副作用に対しても比較検討しなければならない。さらに、ＡＺＴの効果が見られるまでには治療後最低６週間を要するのに対して、これらの好ましくない副作用は処置のすぐ後で生じる。
【００１１】
ＤＤＣおよびＤ４Ｔは共に、ＡＺＴと同様の（Ｄ４Ｔ）または優れた（ＤＤＣ）活性を有する、ＨＩＶ複製の強力な抑制剤である。しかし、ＤＤＣおよびＤ４Ｔは共に、各々の天然の類似体より低い効率で５′トリホスフェートに変換され、デアミナーゼとホスフォリラーゼに耐性を有している。臨床的には、双方の化合物には毒性がある。現在、ＤＤＩは、ＡＩＤＳの処置のためにＡＺＴと組み合わせて使用される。しかし、ＤＤＩは、散在性の膵炎および末梢神経症等の副作用を有する。３′−フルオロ−２′−３−ジデオキシチミジンに関する初期の試験は、抗ウィルス活性がＡＺＴの活性と対等のものであることを示す。
【００１２】
ＢＣＨ−１８９に関する最近の試験では、ＡＺＴおよびＤＤＣの副作用である衰退の原因となる細胞毒性を持たずに、ＡＺＴおよびＤＤＣと同様の抗ＨＩＶ活性を有することが示された。この薬剤を使用する臨床試験および処置には、ＢＣＨ−１８９の十分な量が必要である。
【００１３】
ヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体を合成する、共通して用いられる化学的アプローチは、２つの広い範疇に分類される：（１）元のヌクレオシドを、炭水化物、塩基またはその両方を変換することにより改変するものおよび（２）炭水化物を改変し、塩基またはその合成前駆体を合成の適切な段階で組み込むもの。ＢＣＨ−１８９は、炭化水素環の炭素原子が硫黄原子に置き換わっているので、第２のアプローチがさらに適切である。β異性体だけが有用な生物学的活性を示すため、この後者の戦略において最も重要な因子は、塩基をグリコシル化反応において炭水化物環のβ面から送り込むことである。
【００１４】
当該技術分野では、塩基を炭化水素のアノマーの中心に立体異性選択的に導入することは、炭水化物環の２−置換基の隣接基を用いることによって制御され得ることは周知である（Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．１１４：１２３４（１９８１））。しかし、ＢＣＨ−１８９およびその類似体は２−置換基を持っていない。そのため、制御性でかつ脱離が可能な官能基を導入する、さらなる段階が合成に組み込まれない限り、この方法を利用できない。合成段階が増加すると、合成全体の効率が下がる。
【００１５】
当該技術分野では、「所望されないα−ヌクレオシドの相当量が、２′−デオキシリボシド（ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｓｉｄｅｓ）の合成中に常に形成される」こともまた知られている（Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．１１４：１２４４（１９８１））。さらに、この引例は、ヌクレオシド合成においてＳｎＣｌ４のような簡単なＦｒｉｅｄｅｌ−Ｃｒａｆｔｓ触媒の使用が、反応混合物の後処理において望ましくないエマルジョンを生成し、αおよびβ異性体の複合混合物を生じ、およびＳｎＣｌ４とさらに塩基性のシリル化されたヘテロ環、例えばシリル化されたシトシンとの間の安定なδ−複合体を導くことを教示している。これらの複合体は、より長い反応時間を要し、収率は低く、好ましくない、非天然のＮ−３−ヌクレオシドを生じる。従って、従来技術は、触媒としてトリメチルシリルトリフレートまたはトリメチルシリルパークロレートを、ピリミジン塩基と炭水化物環とをカップリングする間に使用して、生物学的に活性なβ異性体を高収率で得ることを教示している。しかし、ＢＣＨ−１８９またはＢＣＨ−１８９類似体を合成するためにこれらの触媒を使用すると、β異性体を優先的には生成しない；これらの反応は、およそ５０：５０の割合で異性体を生じる。
【００１６】
従って、ＢＣＨ−１８９およびその類似体の効率的な合成経路が必要とされている。これらの化合物、即ちβ−ＢＣＨ−１８９および関連するβ−類似体、の生物学的に活性な異性体の立体異性選択的合成経路の必要もある。さらに、エナンチオマーの一方は不活性であり、そのため５０％は不純物であるので、エナンチオマーについて富化されたβ−ＢＣＨ−１８９の立体異性選択的な合成経路も必要である。
【発明の開示】
【００１７】
本発明は、安価な前駆体からの、ＢＣＨ−１８９およびＢＣＨ−１８９の種々の類似体の非常に効率的な、必要に応じて官能基を導入することのできる、合成経路の発見に関する。この合成経路により、これらの化合物、即ちβ−ＢＣＨ−１８９および関連する化合物、の生物学的に活性な異性体の立体異性選択的な調製が可能になる。さらに、ヌクレオシドの４′位の立体化学は制御し得、エナンチオマーについて富化されたβ−ＢＣＨ−１８９およびその類似体を生成し得る。用語「ＢＣＨ−１８９類似体」は、置換１，３−オキサチオランに結合した、５位が置換されたピリミジン塩基から形成されたヌクレオシドを意味する。
【００１８】
本発明の方法は、式ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＨ２−ＯＲ（ここで、Ｒはアルキル、シリルまたはアシル基のような保護基である）を有するアリルエーテルまたはエステルをオゾン化し、式ＯＨＣ−ＣＨ２−ＯＲを有するグリコアルデヒドを形成する工程；チオグリコール酸をグリコアルデヒドに加え、式２−（Ｒ−オキシ）−メチル−５−オキソ−１，３−オキサチオランで示されるラクトンを形成し；このラクトンをオキサチオラン環の５位でその対応するカルボキシレートに変換し；このアセテートを、シリル化されたピリミジン塩基と、有効量のＳｎＣｌ４の存在下でカップリングし、５′−（Ｒ−オキシ）−２′，３−ジデオキシ−３′−チア−ヌクレオシド類似体のβ異性体を形成する工程；およびこのＲ保護基を水素で置換し、ＢＣＨ−１８９またはＢＣＨ−１８９の類似体を形成する工程を包含する。
【００１９】
本発明は、酵素による立体異性的な選択がなされ得るように、適切なＲ保護基を選択することによって、４′位でエナンチオマー富化されたＢＣＨ−１８９またはＢＣＨ−１８９類似体の生成に用いられ得る。例えば、このＲ保護基は、ブタ肝臓エステラーゼによる立体異性選択的な酵素加水分解を行ない得るために、オキサチオランラクトンの２位での置換基がブチリルオキシであるように選択され得る。得られた光学的に活性な加水分解されたラクトンは、その後、対応するジアセテートに変換され得、シリル化されたピリミジン塩基と上記のように結合され得る。
【００２０】
従って、本発明の目的の１つは、このＢＣＨ−１８９およびＢＣＨ−１８９類似体のβ異性体を高収率で調製するための効率的な方法を提供することである。さらに、本発明のもう１つの目的は、ＢＣＨ−１８９およびＢＣＨ−１８９の類似体のラセミ混合体ではなく、１種類だけの光学異性体を生成するための合成方法を提供することである。本発明のさらなる目的は、エナンチオマー富化されたβ−ＢＣＨ−１８９を生成する合成経路を提供することである。
【００２１】
さらに、本発明のもう１つの目的は、式２−（Ｒ−オキシメチル−５−アシルオキシ−１，３−オキサチオランで示される、ＢＣＨ−１８９またはＢＣＨ−１８９類似体がそれから合成され得る中間体（ここでＲはアルキル、シリルまたはアシル基のような保護基である）、およびこれらの化合物を調製する方法を提供することである。さらに、本発明の１つの目的は、エナンチオマー富化された、２−アセトキシメチル−５−アセトキシ−１，３，−オキサチオランおよび２−ブトキシメチル−５−オキソ−１，３，−オキサチオランおよびこれらの化合物の調製方法を提供することである。
【００２２】
本発明のまた別の目的は、式：
【００２３】
【化２】
2006141408.tif 000002
を有し、それからＢＣＨ−１８９またはＢＣＨ−１８９類似体が合成され得る、中間体およびこれらの化合物の調製方法を提供することであって、上記式において、Ｒはアルキル、シリルまたはアシルのような保護基であり、Ｙは水素、メチル、ハロ、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、チオアルキル、セレノアルキル、フェニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、チオアリールおよびセレノアリールであり得る。
【００２４】
さらに、本発明は、式：
【００２５】
【化３】
2006141408.tif 000003
を有し、それからＢＣＨ−１８９またはＢＣＨ−１８９類似体が合成され得る、中間体およびこれらの化合物の調製方法を提供し、上記式において、Ｒはアルキル、シリルまたはアシルのような保護基であり、Ｙは水素、メチル、ハロ、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、チオアルキル、セレノアルキル、フェニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、チオアリールおよびセレノアリールであり得る。
【００２６】
ＢＣＨ−１８９は、式：
【００２７】
【化４】
2006141408.tif 000004
の化合物である。
【００２８】
本発明のＢＣＨ−１８９およびＢＣＨ−１８９類似体の調製のための工程を、図１に説明する。１のアリルエステルまたはエステルは、オゾン化され、アルデヒド２を生じる。このアルデヒド２はチオグリコール酸と反応して、ラクトン３を生じる。このラクトン３は、還元剤；例えば、ジイソブチルアルミニウムハイドライド（ＤＩＢＡＬ）、ナトリウムビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムハイドライド（「Ｒｅｄ−Ａｌ」ＴＭと呼ばれる、３．４モルのトルエン溶液として市販で入手し得る）およびＮａＢＨ４；で処理され、続いてカルボン酸無水物で処理され、カルボキシレート４を生成する。このカルボキシレートはシリル化されたピリミジン塩基と、ＳｎＣｌ４のような立体異性特異的カップリングを触媒し得る、ルイス酸の存在下でカップリングされ、置換ヌクレオシド５のβ異性体を、本質的に１００：０の割合のβ：α異性体が生じる。置換されたヌクレオシド５を脱保護して、ＢＣＨ−１８９またはＢＣＨ−１８９類似体６を生成する。
【００２９】
この工程は、４′位でエナンチオマー富化されたＢＣＨ−１８９またはＢＣＨ−１８９類似体を生成するように、調整し得る。これは、ブタ肝臓エステラーゼ、ブタ膵臓リパーゼまたはズブチリシンまたは３を立体異性選択的に加水分解するその他の酵素のような酵素で、３の立体異性選択的な酵素加水分解をなし得るように、適切なＲ保護基を選択することによりなされ得る。得られた光学活性な３は、エナンチオマー富化されたカルボキシレート４に変換され、上記のようにシリル化されたピリミジン塩基とカップリングされ得、エナンチオマー富化されたＢＣＨ−１８９またはＢＣＨ−１８９類似体を生成する。
【００３０】
１のこの保護基Ｒは、最終段階（５から６の形への脱保護）が実施されるまで対応するアルコールを保護するために、選択され得る。さらに、この保護基は、所望するならば、後にエナンチオ−選択的加水分解反応において使用される酵素の認識部位をさらに提供するために、選択され得る。例えば、本明細書中に詳細に説明される方法による、ブタ肝臓エステラーゼ、ブタ膵臓リパーゼ、またはズブチリシンを用いる処理により、ＢＣＨ−１８９のβ異性体のアルキルエステルは、その（＋）−エナンチオマーと（−）−エナンチオマーとに分離され得る。この様に機能する基は、いかなる基も使用され得る。例えば、アルキル、シリルおよびアシル保護基またはこれらの基と実質的に同様の特性を有する基が使用され得る。
【００３１】
ここで使用されるアルキル保護基は、トリフェニルメチルまたは実質的にトリフェニルメチルと同様の保護特性を有するアルキル基である。ここで使用されるシリル保護基は、式：
【００３２】
【化５】
2006141408.tif 000005
を有する３置換されたシリル基である。ここでＲ１、Ｒ２およびＲ３が低級−アルキル、例えばメチル、エチル、ブチルおよび炭素原子が５個またはそれ以下のアルキル；またはフェニルであり得る。さらに、Ｒ１は、Ｒ２と同一であり得；Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はすべて同一で有り得る。シリル保護基の例は、トリメチルシリルおよびｔ−ブチルジフェニルシリルを含むが、これらに限定はされない。
【００３３】
アシル保護基（１にあるような）またはカルボキシレート（４にあるような）を述べるためにここで使用されるアシル基は、式：
【００３４】
【化６】
2006141408.tif 000006
を有する。ここでＲ′は低級アルキル、例えば、メチル、エチル、ブチルおよび炭素原子を５個またはそれ以下のアルキル；アルキル基が１つ、２つまたはそれ以上の簡単な置換基（この置換基はアミノ、カルボキシ、ヒドロキシ、フェニル、および例えばメトキシおよびエトキシのような低級アルコキシを含むが、これらに限定されない）で置換された置換低級アルキル、；フェニル；フェニル基が１つ、２つまたはそれ以上の簡単な置換基で置換された置換フェニル（この置換基は低級アルキル、クロロおよびブロモ、スルファト、スルフォニルオキシ、カルボキシル、例えばカルボメトキシおよびカルボエトキシ等のカルボ−低級−アルコキシ、アミノ、例えばメチルアミノ、アミド、ヒドロキシ等のモノおよびジ低級アルキルアミノ、例えばメトキシおよびエトキシ等の低級アルコキシ、アセトキシ等の低級−アルカノイルオキシを含むがこれらに限定はされない）を含むが、これらに限定はされない。
【００３５】
ここで使用するシリル化されたピリミジン塩基は、式：
【００３６】
【化７】
2006141408.tif 000007
を有し、ここでＸは３置換されたシリルオキシまたは３置換されたシリルアミノ基のどちらかであり、Ｚは３置換されたシリル基であり、およびＹはさらに以下に記載される、化合物である。ここで使用される３置換されたシリル基が、式：
【００３７】
【化８】
2006141408.tif 000008
を有する基であり、ここでＲ１、Ｒ２およびＲ３が低級−アルキル、例えばメチル、エチル、ブチルおよび炭素原子が５個またはそれ以下のアルキル、またはフェニルであり得る。さらに、Ｒ１は、Ｒ２と同一であり得；Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はすべて同一で有り得る。３置換されたシリル基の例は、トリメチルシリルおよびｔ−ブチルジフェニルシリルを含むが、これらに限定はされない。
【００３８】
シリル化されたピリミジン塩基は、シリル化（ｓｉｌｙａｔｅｄ）されたピリミジン塩基の５位（図１のＹ置換基）において種々のＹ置換基によって、ＢＣＨ−１８９類似体の輸送特性または代謝速度などの特性を改善するために置換され得る。この置換基は、水素、メチル、ハロ、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、チオアルキル、セレノアルキル、フェニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、チオアリールおよびセレノアリールを含むが、これらに限定はされない。
【００３９】
図２、３および４、および下記の記述において、本発明に記載のＢＣＨ−１８９またはＢＣＨ−１８９の類似体の合成を例示する。
【００４０】
図２は、アリルアルコール７を出発物質とする、ＢＣＨ−１８９の合成を示す。ＮａＨオイル懸濁液（４．５ｇ、６０％、１１０ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦで２回（１００ｍｌ×２）洗浄し、得られた固体をＴＨＦ（３００ｍｌ）中に懸濁した。この懸濁液を０℃に冷却し、アリルアルコール７（６．８ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）を滴下して加え、その混合物を０℃で３０分間撹拌した。ｔ−ブチル−ジフェニルシリルクロリド（２５．８ｍｌ、１００．８ｍｍｏｌ）を、０℃で滴下して加え、その反応混合物を０℃で１時間撹拌した。この溶液を水（１００ｍｌ）でクエンチし、ジエチルエーテル（２００ｍｌ×２）で抽出した。この抽出物を合わせて、水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮した。その残渣を減圧下（０．５〜０．６ｍｍＨｇで９０〜１００℃）で蒸留して、無色の液体８（２８ｇ、９４ｍｍｏｌ、９４％）を得た。
【００４１】
（１Ｈ  ＮＭＲ：７．７０−７．３５（１０Ｈ，ｍ，芳香族−Ｈ）；５．９３（１Ｈ，ｍ，Ｈ２）；５．３７（１Ｈ，ｄｔ，Ｈ１）Ｊ＝１．４および１４．４Ｈｚ；５．０７（１Ｈ，ｄｔ，Ｈ１）Ｊ＝１．４および８．７Ｈｚ；４．２１（２Ｈ，ｍ，Ｈ３）；１．０７（９Ｈ，ｓ，ｔ−Ｂｕ））
【００４２】
シリルアリルエーテル８（１５．５ｇ、５２．３ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（４００ｍｌ）に溶解させ、−７８℃でオゾン化した。オゾン化が完了してから、ＤＭＳ（１５ｍｌ、２０４ｍｍｏｌ、３．９当量）を−７８℃で加え、この混合物を室温にまで戻し、一晩撹拌した。この溶液を水（１００ｍｌ×２）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮した。これを、減圧下（０．５〜０．６ｍｍＨｇで１００〜１１０℃）で蒸留して、無色の液体９（１５．０ｇ、５０．３ｍｍｏｌ、９６％）を得た。
【００４３】
（１Ｈ  ＮＭＲ：９．７４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−ＣＯ）；７．７０−７．３５（１０Ｈ，ｍ，芳香族−Ｈ）；４．２１（２Ｈ，ｓ，−ＣＨ２）；１．２２（９Ｈ，ｓ，ｔ−Ｂｕ））
【００４４】
シリル化されたグリコアルデヒド９（１５．０ｇ、５０．３ｍｍｏｌ）をトルエン（２００ｍｌ）に溶解させ、チオグリコール酸（３．５０ｍｌ、５０．３ｍｍｏｌ）を一度に加えた。この溶液を２時間還流し、得られた水をＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップで除去した。この溶液を室温にまで戻し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、この水性洗浄液をジエチルエーテル（２００ｍｌ×２）で抽出した。この抽出物を合わせて、水（１００ｍｌ×２）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮して、無色のオイル１０（１６．５ｇ、４４．３ｍｍｏｌ、８８％）を得た。これは減圧下で徐々に固化した。ヘキサンからの再結晶化により、白色固体１０（１５．８ｇ、８４％）を得た。
【００４５】
（１Ｈ  ＮＭＲ：７．７２−７．３８（１０Ｈ，ｍ，芳香族−Ｈ）；５．５３（１Ｈ，ｔ，Ｈ２）Ｊ＝２．７Ｈｚ；３．９３（１Ｈ，ｄｄ，−ＣＨ２Ｏ）Ｊ＝９．３Ｈｚ；３．８１（１Ｈ，ｄ，１Ｈ４）Ｊ＝１３．８Ｈｚ；３．７９（１Ｈ，ｄｄ，−ＣＨ２Ｏ）；３．５８（１Ｈ，ｄ，１Ｈ４）；１．０２（９Ｈ，ｓ，ｔ−Ｂｕ））
【００４６】
２−（ｔ−ブチル−ジフェニルシリルオキシ）−メチル−５−オキソ−１，２−オキサチオラン１０（５．０ｇ、１３．４２ｍｍｏｌ）をトルエン（１５０ｍｌ）に溶解させ、この溶液を−７８℃にまで冷却した。Ｄｉｂａｌ−Ｈ溶液（１４ｍｌ、１．０Ｍヘキサン溶液、１４ｍｍｏｌ）を、内部温度を常に−７０℃より低く保ちながら、滴下して加えた。滴下が完了した後、この混合物を−７８℃で３０分間撹拌した。無水酢酸（５ｍｌ、５３ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温にまで戻し、一晩撹拌した。水（５ｍｌ）をこの混合物に加え、得られた混合物を室温で１時間撹拌した。この混合物をジエチルエーテル（３００ｍｌ）で蒸留し、ＭｇＳＯ４（４０ｇ）を加え、この混合物を室温で１時間強く撹拌した。この混合物を濾過し、濃縮し、その残渣を２０％酢酸エチルヘキサン溶液でフラッシュクロマトグラフィーにかけ、無色の液体１１（３．６０ｇ、８．６４ｍｍｏｌ、６４％）を得た。これは６：１のアノマー混合物であった。
【００４７】
（主要な異性体の１Ｈ  ＮＭＲ：７．７０−７．３５（１０Ｈ，ｍ，芳香族−Ｈ）；６．６３（１Ｈ，ｄ，Ｈ５）Ｊ＝４．４Ｈｚ；５．４７（１Ｈ，ｔ，Ｈ２）；４．２０−３．６０（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ２Ｏ）；３．２７（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ４）Ｊ＝４．４および１１．４Ｈｚ；３．０９（１Ｈ，ｄ，１Ｈ４）Ｊ＝１１．４Ｈｚ；２．０２（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３ＣＯ）；１．０５（９Ｈ，ｓ，ｔ−Ｂｕ）；少ない方の異性体の１Ｈ  ＮＭＲ：７．７０−７．３５（１０Ｈ，ｍ，芳香族−Ｈ）；６．５５（１Ｈ，ｄ，Ｈ５）Ｊ＝３．９Ｈｚ；５．４５（１Ｈ，ｔ，Ｈ２）；４．２０−３．６０（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ２Ｏ）；３．２５（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ４）Ｊ＝３．９および１１．４Ｈｚ；３．１１（１Ｈ，ｄ，１Ｈ４）Ｊ＝１１．４Ｈｚ；２．０４（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３ＣＯ）；１．０４（９Ｈ，ｓ，ｔ−Ｂｕ））
【００４８】
２−（ｔ−ブチル−ジフェニルシリルオキシ）−メチル−５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン１１（０．２８ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を１，２−ジクロロエタン（２０ｍｌ）に溶解させ、シリル化したシトシン１２（０．２０ｇ、０．７８ｍｍｏｌ）を、室温で一度に加えた。この混合物を１０分間撹拌し、ＳｎＣｌ４溶液（０．８０ｍｌ、１．０Ｍ  ＣＨ２Ｃｌ液、０．８０ｍｍｏｌ）に室温で滴下して加えた。さらに、シトシン１２（０．１０ｇ、０．３９ｍｍｏｌ）およびＳｎＣｌ４溶液（０．６０ｍｌ）を１時間後に同様に加えた。この反応を２時間行ない、反応が完了した後、この溶液を濃縮し、その残渣をトリエチルアミン（２ｍｌ）でトリチュレートし、フラッシュクロマトグラフィー（初めに酢酸エチルのみ、次に２０％エタノールの酢酸エチルエタノール溶液で）にかけ、黄褐色の固体１３（１００％β配位）（０．２５ｇ、０．５４ｍｍｏｌ、８０％）を得た。
【００４９】
（１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．７５（１Ｈ，ｄ，Ｈ６）Ｊ＝７．５Ｈｚ；７．６５−７．３５（１０Ｈ，ｍ，芳香族−Ｈ）；７．２１および７．１４（２Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＮＨ２）；６．１９（１Ｈ，ｔ，Ｈ５）；５．５７（１Ｈ，ｄ，Ｈ５）；５．２５（１Ｈ，ｔ，Ｈ２′）；３．９７（１Ｈ，ｄｄ，−ＣＨ２Ｏ）Ｊ＝３．９および１１．１Ｈｚ；３．８７（１Ｈ，ｄｄ，−ＣＨ２Ｏ）；３．４１（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ４′）Ｊ＝４．５および１１．７Ｈｚ；３．０３（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ４′）Ｊ＝？；０．９７（９Ｈ，ｓ，ｔ−Ｂｕ））
【００５０】
シリルエーテル１３（０．２３ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３０ｍｌ）に溶解させ、ｎ−Ｂｕ４ＮＦ溶液（０．５０ｍｌ、１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液、０．５０ｍｍｏｌ）に室温で滴下して加えた。この混合物を１時間撹拌し、減圧下で濃縮した。その残渣を取り出してエタノール／トリエチルアミン（２ｍｌ／１ｍｌ）を加え、フラッシュクロマトグラフィー（初めに酢酸エチルで、次に２０％エタノールの酢酸エチル溶液で）にかけ、白色の固体１４を、１００％のアノマー純度で（ＢＣＨ−１８９；０．１１ｇ、０．４８ｍｍｏｌ、９８％）を得た。これをさらにエタノール／ＣＨＣｌ３／ヘキサン混合物から再結晶した。
【００５１】
（１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｈ６）Ｊ＝７．６Ｈｚ；７．７６および７．４５（２Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＮＨ２）；６．１９（１Ｈ，ｔ，Ｈ５；５．８０（１Ｈ，ｄ，Ｈ５）Ｊ＝７．６Ｈｚ；５．３４（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＯＨ）；５．１７（１Ｈ，ｔ，Ｈ２）；３．７４（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ２Ｏ）；３．４２（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ４′）Ｊ＝５．６および１１．５Ｈｚ；３．０９（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ４′）Ｊ＝４．５および１１．５Ｈｚ）
【００５２】
ＢＣＨ−１８９およびその類似体は、シリル化したウラシル誘導体が１１とカップリングすることによっても、合成され得る。上記のシトシン誘導体１３の調製で述べたように、ＳｎＣｌ４（５．０ｍｌ）の存在下で、シリル化したウラシル誘導体１５（１．８０ｇ、７．０２ｍｍｏｌ）を、１，２−ジクロロエタン（５０ｍｌ）中の１１（１．７２ｇ、４．１３ｍｍｏｌ）とカップリングさせた。この反応は５時間後に完了した。初めに４０％酢酸エチルのヘキサン溶液で、次に酢酸エチルでフラッシュクロマトグラフィーにかけ、白色の泡沫１６（１．６０ｇ、３．４３ｍｍｏｌ、８３％）を得た。（３４）
【００５３】
（１Ｈ  ＮＭＲ：９．３９（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，−ＮＨ）７．９０（１Ｈ，ｄ，Ｈ６）Ｊ＝７．９Ｈｚ；７．７５−７．３５（１０Ｈ，ｍ，芳香族−Ｈ）；６．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ５′）；５．５１（１Ｈ，ｄ，Ｈ５）Ｊ＝７．９Ｈｚ；５．２３（１Ｈ，ｔ，Ｈ２′）；４．１１（１Ｈ，ｄｄ，−ＣＨ２Ｏ）Ｊ＝３．２および１１．７Ｈｚ；３．９３（１Ｈ，ｄｄ，−ＣＨ２Ｏ）；３．４８（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ４′）Ｊ＝５．４および１２．２Ｈｚ；３．１３（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ４′）Ｊ＝３．２および１２．２Ｈｚ）
【００５４】
ウラシル誘導体１６は、シトシン誘導体１３に変換され得る。このウラシル誘導体１６（０．２０ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を、ピリジン／ジクロロエタン（２ｍｌ／１０ｍｌ）の混合液に溶解させ、この溶液を０℃まで冷却した。トリフルオロ酢酸無水物（７２μｌ、０．４３ｍｍｏｌ）を、０℃で滴下して加え、この混合液を室温にまで戻し、１時間撹拌した。さらにトリフルオロ酢酸無水物（０．５０μｌ、０．３０ｍｍｏｌ）を加え、この混合液を１時間撹拌した。ＴＬＣは、酢酸エチルで移動度を示さなかった。次に、この反応混合液をＮＨ３飽和メタノール溶液（３０ｍｌ）中に抜管し、この混合液を室温で１２時間撹拌した。この溶液を濃縮し、その残渣をフラッシュクロマトグラフィーにかけ、黄褐色の泡沫１３（０．１８ｇ、０．３９ｍｍｏｌ、９１％）を得た。これはシトシンカップリング反応から得られた化合物と同一であった。
【００５５】
図３に、ＢＣＨ−１８９の５−メチルシチジンおよびチミジン誘導体の合成を図示する。シトソン誘導体１３の調製で述べた方法と同様にして、酢酸エステル１１（０．９３ｇ、２．２３ｍｍｏｌ）の１．２−ジクロロエタン（５０ｍｌ）溶液を、シリル化したチミン誘導体１７（１．０ｇ、３．７０ｍｍｏｌ）およびＳｎＣｌ４（４０ｍｌ）と反応させた。
【００５６】
（１Ｈ  ＮＭＲ：８．１０（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，ＮＨ）；７．７５−７．３０（１１Ｈ，ｍ，１０芳香続のＨ′ｓおよび１Ｈ６）；６．３２（１Ｈ，ｔ，Ｈ１′）Ｊ＝５．４Ｈｚ；５．２５（１Ｈ，ｔ，Ｈ４′）Ｊ＝４．２Ｈｚ；４．０１（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ５′）Ｊ＝３．９および１１．４Ｈｚ；３．９３（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ５′）Ｊ＝４．５および１１．４Ｈｚ；３．４１（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ２′）Ｊ＝５．４および１１．７Ｈｚ；３．０４（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ２′）Ｊ＝５．７および１１．７Ｈｚ；１．７５（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３）；１．０７（９Ｈ，ｓ，ｔ−Ｂｕ））
【００５７】
チミジン誘導体１８（０．２０ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を、ピリジン／ジクロロエタン（２ｍｌ／１０ｍｌ）の混合液に溶解させ、この溶液を０℃まで冷却した。この溶液にトリフルオロ酢酸無水物（１００μｌ、０．６０ｍｍｏｌ）を、０℃で滴下して加え、この混合液を続けて撹拌して室温に戻した。室温に達してから、この混合液を１時間撹拌した。ＴＬＣは、酢酸エチルで移動度を示さなかった。次に、この反応混合液をＮＨ３飽和メタノール溶液（２０ｍｌ）中に抜管し、この混合液を室温で１２時間撹拌した。この溶液を濃縮し、その残渣をフラッシュクロマトグラフィーにかけ、黄褐色の泡沫１９（０．１８ｇ、０．３８ｍｍｏｌ、９０％）を得た。
【００５８】
（１Ｈ  ＮＭＲ：７．７０−７．３０（１２Ｈ，ｍ，１０芳香続のＨ′ｓ，およびＨ６）；６．６０（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，１ＮＨ）６．３４（１Ｈ，ｔ，Ｈ１′）Ｊ＝４．５Ｈｚ；５．２５（１Ｈ，ｔ，Ｈ４′）Ｊ＝３．６Ｈｚ；４．０８（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ５′）Ｊ＝３．６および１１．４Ｈｚ；３．９６（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ５′）Ｊ＝３．６および１１．４Ｈｚ；３．５２（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ２′）Ｊ＝５．４および１２．３Ｈｚ；３．０９（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ２′）Ｊ＝３．９および１２．３Ｈｚ；１．７２（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３）；１．０７（９Ｈ，ｓ，ｔ−Ｂｕ））
【００５９】
シリルエーテル１９（０．１８ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍｌ）に溶解させ、ｎ−Ｂｕ４ＮＦ溶液（０．５０ｍｌ、１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液、０．５０ｍｍｏｌ）を室温で滴下して加えた。この混合液を１時間撹拌し、減圧下で濃縮した。その残渣を取り出しエタノール／トリエチルアミン（２ｍｌ／１ｍｌ）を加えて、フラッシュクロマトグラフィー（初めに酢酸エチルで、次に２０％エタノールの酢酸エチル溶液で）にかけ、白色の固体２０（０．０９ｇ、０．３７ｍｍｏｌ、９７％）を得た。これをさらにエタノール／ＣＨＣｌ３／ヘキサン混合液から再結晶し、８２ｍｇの純粋な化合物（８９％）を得た。
【００６０】
（１Ｈ  ＮＭＲ：（ｄ６−ＤＭＳＯ中）：７．７０（１Ｈ，ｓ，Ｈ６）；７．４８および７．１０（２Ｈ，ｂｒｏａｄ，ＮＨ２）；６．１９（１Ｈ，ｔ，Ｈ１′）Ｊ＝６．５Ｈｚ；５．３１（１Ｈ，ｔ，ＯＨ）；５．１６（１Ｈ，ｔ，１Ｈ４′）Ｊ＝５．４Ｈｚ；３．７２（２Ｈ，ｍ，２Ｈ５′）３．３６（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ２′）Ｊ＝６．５および１４．０Ｈｚ；３．０５（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ２′）Ｊ＝６．５および１４．０Ｈｚ；１．８５（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３））
【００６１】
シリルエーテル１８（０．７０ｇ、１．４６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５０ｍｌ）に溶解させ、ｎ−Ｂｕ４ＮＦ溶液（２ｍｌ、１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液、２ｍｍｏｌ）を室温で滴下して加えた。この混合液を１時間撹拌し、減圧下で濃縮した。その残渣を取り出しエタノール／トリエチルアミン（２ｍｌ／１ｍｌ）を加え、フラッシュクロマトグラフィーにかけ、白色の固体２１（０．３３ｇ、１．３５ｍｍｏｌ、９２％）を得た。
【００６２】
（１Ｈ  ＮＭＲ：（ｄ６−アセトン中）：９．９８（１Ｈ，ｂｒｏａｄ，ＮＨ）；７．７６（１Ｈ，ｄ，Ｈ６）Ｊ＝１．２Ｈｚ；６．２５（１Ｈ，ｔ，Ｈ４′）Ｊ＝５．７Ｈｚ；５．２４（１Ｈ，ｔ，Ｈ１′）Ｊ＝４．２Ｈｚ；４．３９（１Ｈ，ｔ，ＯＨ）Ｊ＝５．７Ｈｚ；３．８５（１Ｈ，ｄｄ，２Ｈ５′）Ｊ＝４．２および５．７Ｈｚ；３．４１（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ２′）Ｊ＝５．７および１２．０Ｈｚ；３．１９（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ２′）Ｊ＝５．４および１２．０Ｈｚ；１．８０（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３））
【００６３】
図４は、エナンチオマー富化されたＢＣＨ−１８９およびその類似体の合成を図示している。アリルブチレート２２（１９．０ｇ、１４８ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（４００ｍｌ）に溶解させ、−７８℃でオゾン化した。オゾン化が完了してから、ジメチルスルフィド（２０ｍｌ、２７０ｍｍｏｌ、１．８当量）を−７８℃で加え、この混合液を室温に戻し、一晩撹拌した。この溶液を水（１００ｍｌ×２）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮した。これを減圧下で蒸留し（０．５〜０．６ｍｍＨｇで７０〜８０℃）、無色の液体２３（１７．０ｇ、１３１ｍｍｏｌ、８８％）を得た。
【００６４】
（１Ｈ  ＮＭＲ：９．５９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−ＣＯ）；４．６６（２Ｈ，ｓ，−ＣＨ２Ｏ）；２．４２（２Ｈ，ｔ，ＣＨ２ＣＯ）Ｊ＝７．２Ｈｚ；１．７１（２Ｈ，ｓｅｘ，−ＣＨ２）；０．９７（３Ｈ，ｔ，ＣＨ３）Ｊ＝７．２Ｈｚ）（ＩＲ（ｎｅａｔ）：２９９０，２９６０，２９００，１７５０，１７４０，１４６０，１４２０，１３９０，１２８０，１１９０，１１１０，１０６０，１０２０，９９０，８８０，８００，７６０）
【００６５】
ブチリルオキノアセトアルデヒト２３（１５．０ｇ、１１５ｍｍｏｌ）をトルエン（２００ｍｌ）に溶解させ、チオグリコール酸（８．０ｍｌ、１１５ｍｍｏｌ）と混合した。この溶液を５時間還流し、得られた水をＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップで除去した。この溶液を室温にまで戻し、５００ｍｌの分液漏斗に移した。次に、この溶液を飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄した。これらの水性洗浄液をジエチルエーテル（２００ｍｌ×２）で抽出し、水層からすべての粗生成物を回収した。このエーテル抽出物をトルエン層に加え、得られた混合液を水（１００ｍｌ×２）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮した。これを減圧下で蒸留し（０．５〜０．６ｍｍＨｇで７０〜８０℃）、無色のオイル２４（１９ｇ、９３ｍｍｏｌ、８１％）を得た。
【００６６】
（１Ｈ  ＮＭＲ：５．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ５）Ｊ＝５．０および１．４Ｈｚ；４．３５（１Ｈ，ｄｄ，−ＣＨ２Ｏ）Ｊ＝３．２および１２．２Ｈｚ；４．２９（１Ｈ，ｄｄ，−ＣＨ２Ｏ）Ｊ＝５．７および１２．２Ｈｚ；３．７２（１Ｈ，ｄ，−ＣＨ２Ｓ）Ｊ＝１６．２Ｈｚ；３．６４（１Ｈ，ｄ，−ＣＨ２Ｓ；２．３４（２Ｈ，ｔ，−ＣＨ２ＣＯ）Ｊ＝７．２Ｈｚ；１．６６（２Ｈ，ｓｅｘ，−ＣＨ２）；０．９５（３Ｈ，ｔ，ＣＨ３）Ｊ＝７．２Ｈｚ）（ＩＲ（ｎｅａｔ）：２９８０，２９６０，２９００，１７８０，１７４０，１４６０，１４１０，１３９０，１３５０，１３００，１２９０，１２６０，１２２０，１１７０，１１１０，１０８０，１０７０，１０００，９５０，９１０，８３０，８２０，８００，７６０）．
【００６７】
ブタ肝臓エステラーゼ溶液（９０μｌ）を緩衝溶液（ｐＨ７、１００ｍｌ）に室温で加え、この混合液を５分間強く撹拌した。酪酸エステル２４（２．８ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）を一度にエステラーゼ／緩衝溶液に加え、この混合液を室温で２時間強く撹拌した。この反応混合液を分液漏斗に注いだ。反応フラスコをエーテル（１０ｍｌ）で洗浄し、この洗浄液を漏斗内で反応混合液と合わせた。この混合液をヘキサンで３回（１００ｍｌ×３）抽出した。３回のヘキサン抽出物を合わせて、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮し、光学的に活性な酪酸エステル２４（１．１２ｇ、５．４８ｍｍｏｌ、４０％）を得た。エナンチオマーの過剰率は、トリス（３−ヘプタフルオロプロピル−ヒドロキシメチレン）−（＋）−カンフォラトユーロピウム（ＩＩＩ）誘導体を化学シフト試薬として使用して、ＮＭＲ実験で測定した。この工程は１種のエナンチオマーに関して約４０％の優位性を示した。この反応から得られた残りの水層を、２０時間ＣＨ２Ｃｌ２で連続抽出した。有機層を抽出装置から取り出し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮し、オイル（１．２４ｇ）を得た。これは、ＮＭＲ分析により、少量の酪酸および酪酸エステル２４を含む、２−ヒドロキシメチル−５−オキソ−１，３−オキサチオラン２５を優位に含んでいることが示された。
【００６８】
ラクトン２５（０．８５ｇ、４．１６ｍｍｏｌ）をトルエン（３０ｍｌ）に溶解させ、この溶液を−７８℃に冷却した。Ｄｉｂａｌ−Ｈ溶液（９ｍｌ、１．０Ｍヘキサン溶液、９ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。滴下の間、内部温度を−７０℃より低く保った。滴下が完了した後、この混合液を−７８℃で０．５時間撹拌した。無水酢酸（５ｍｌ、５３ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を一晩撹拌しながら室温に戻した。水（５ｍｌ）を反応混合液に加え、得られた混合液を１時間撹拌した。次にＭｇＳＯ４（４０ｇ）を加え、混合液を室温で１時間強く撹拌した。この混合液を濾過し、濃縮し、その残渣を２０％酢酸エチルのヘキサン溶液でフラッシュクロマトグラフィーにかけ、無色の液体２６（０．４１ｇ、１．８６ｍｍｏｌ、４５％）を得た。これは、Ｃ−４位のアノマーの混合物であった。
【００６９】
この２−アセトキシメチル−５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン２６（０．４０ｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を、１，２−ジクロロエタン（４０ｍｌ）に溶解させ、これにシリル化したシトシン１２（０．７０ｇ、２．７４ｍｍｏｌ）を、室温で一度に加えた。この混合物を１０分間撹拌し、これにＳｎＣｌ４溶液（３．０ｍｌ、１．０Ｍ  ＣＨ２Ｃｌ２溶液、３．０ｍｍｏｌ）を室温で滴下して加えた。さらに、１時間後にＳｎＣｌ４溶液（１．０ｍｌ）を加えた。続いてこの反応液をＴＬＣにかけた。カップリングが完了してから、この溶液を濃縮し、その残渣をトリエチルアミン（２ｍｌ）でトリチュレートし、フラッシュクロマトグラフィー（初めに酢酸エチルのみ、次に２０％エタノールの酢酸エチル溶液で）にかけ、黄褐色の固体２７（０．４２ｇ、１．５５ｍｍｏｌ、８６％）を得た。
【００７０】
（１Ｈ  ＮＭＲ：７．７３（１Ｈ，ｄ，Ｈ６）Ｊ＝７．５Ｈｚ；６．３３（１Ｈ，ｔ，Ｈ４′）；Ｊ＝４．８Ｈｚ；５．８０（１Ｈ，ｄ，Ｈ５）Ｊ＝７．５Ｈｚ；４．５２（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ５′）Ｊ＝５．７および１２．３Ｈｚ；４．３７（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ５′）Ｊ＝３．３および１２．３Ｈｚ；３．５４（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ２′）Ｊ＝５．４および１２．０Ｈｚ；３．１０（１Ｈ，ｄｄ，１Ｈ３）；２．１１（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３））
【００７１】
ＢＣＨ−１８９の５′−酢酸エステル２７（１４０ｍｇ、０５２ｍｍｏｌ）を、無水メタノール（１０ｍｌ）に溶解させ、これにナトリウムメトキシド（１１０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を一度に加えた。この混合液を加水分解が完了するまで室温で撹拌した。加水分解には約１時間を要し、続けてこの反応液をＴＬＣにかけた。完了した後、この混合液を濃縮し、その残渣を取り出しエタノール（２ｍｌ）を加えた。このエタノール溶液を、初めに酢酸エチルで、次に２０％エタノールの酢酸エチル溶液でカラムクロマトグラフィーにかけ、白色の泡沫（１１０ｍｇ、９２％）を得た。これは、ＢＣＨ−１８９１４の標準品のＮＭＲスペクトルと同一のスペクトルを示した。
【図面の簡単な説明】
【００７２】
【図１】本発明に従うＢＣＨ−１８９およびＢＣＨ−１８９類似体の合成の１つの実施態様を示す。
【図２】本発明に従うＢＣＨ−１８９の合成の１つの実施態様を示す。
【図３】本発明に従うＢＣＨ−１８９の５−メチルシチジンおよびチミジン誘導体の合成の１つの実施態様を示す。
【図４】本発明に従うエナンチオマー富化されたＢＣＨ−１８９の合成の１つの実施例を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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