(57)【要約】【課題】  食品、栄養機能食品、特定保健用食品、栄養補助剤、栄養剤、動物薬、飲料、飼料、化粧品、医薬品、治療薬、予防薬等の素材として有用な還元型ビタミンＫの製造方法を提供する。【解決手段】  還元型ビタミンＫを水溶性有機溶媒の溶液中で晶析することを特徴とする還元型ビタミンＫの製造方法。本発明によれば、高収率で高品質な還元型ビタミンＫ結晶を簡便に製造することができる。【選択図】    なし。【特許請求の範囲】
【請求項１】
還元型ビタミンＫを水溶性有機溶媒の溶液から晶析することを特徴とする還元型ビタミンＫの製造方法。
【請求項２】
還元型ビタミンＫがフィロキノール、メナキノール、又はメナジオールである請求項１記載の製造方法。
【請求項３】
還元型ビタミンＫがメナキノール−４、又はメナキノール−７である請求項１記載の製造方法。
【請求項４】
晶析に供する還元型ビタミンＫは、酸化型ビタミンＫを還元することにより得られたものである請求項１〜３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項５】
水溶性有機溶媒がアルコール類、ケトン類、ニトリル類、エーテル類、脂肪酸類のいずれかである請求項１〜４のいずれかに記載の製造方法。
【請求項６】
水溶性有機溶媒が、炭素数１〜５の１価アルコール、炭素数３〜６のケトン、炭素数２〜８のニトリル、炭素数４〜８のエーテルのいずれかである請求項１〜４のいずれかに記載の製造方法。
【請求項７】
水溶性有機溶媒が、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、アセトン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサンのいずれかである請求項１〜４のいずれかに記載の製造方法。
【請求項８】
貧溶媒として水を使用する請求項１〜７のいずれかに記載の製造方法。
【請求項９】
結晶化終了時の溶媒中の水の割合が１〜９５ｗ／ｗ％である請求項８記載の製造方法。
【請求項１０】
強酸の共存下に晶析を行う請求項１〜９のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１１】
強酸が、無機酸である請求項１０記載の製造方法。
【請求項１２】
強酸の使用量は、還元型ビタミンＫの１モルに対して０．１モル％以上である請求項１０又は１１記載の製造方法。
【請求項１３】
溶媒中の強酸濃度は、溶媒重量に対する強酸のモル量として、０．１ｍｍｏｌ／ｋｇ以上である請求項１０〜１２のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１４】
アスコルビン酸類及び／又はクエン酸類の共存下に晶析を行う請求項１〜１３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１５】
還元型ビタミンＫ１００重量部に対し、アスコルビン酸類及び／又はクエン酸類を、その総量として０．１重量部以上共存させることを特徴とする請求項１４記載の製造方法。
【請求項１６】
溶媒１００重量部に対し、アスコルビン酸類及び／又はクエン酸類を、その総量として０．０１重量部以上共存させることを特徴とする請求項１４記載の製造方法。
【請求項１７】
アスコルビン酸類が、アスコルビン酸、rhamno−アスコルビン酸、arabo−アスコルビン酸、gluco−アスコルビン酸、fuco−アスコルビン酸、glucohepto−アスコルビン酸、xylo−アスコルビン酸、galacto−アスコルビン酸、gulo−アスコルビン酸、allo−アスコルビン酸、erythro−アスコルビン酸、６−デスオキシアスコルビン酸、それらのエステル、又はそれらの塩のうち少なくとも一種である請求項１４〜１６のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１８】
クエン酸類がクエン酸、クエン酸のエステル、又はクエン酸の塩のうち少なくとも一種である請求項１４〜１６のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１９】
晶析は、冷却晶析、もしくは、冷却晶析に他の晶析方法を組み合わせて行う請求項１〜１８のいずれかに記載の製造方法。
【請求項２０】
晶析時の最終冷却温度は、２５℃以下である請求項１９記載の製造方法。
【請求項２１】
冷却速度は、４０℃／時間以下である請求項１９又は２０記載の製造方法。
【請求項２２】
晶析濃度は、晶析終了時の晶析溶媒の重量に対する還元型ビタミンＫの重量として１５ｗ／ｗ％以下である請求項１〜２１のいずれかに記載の製造方法。
【請求項２３】
晶析は、単位容積当たりの撹拌所要動力として０．０１ｋＷ／ｍ3以上の強制流動下に実施する請求項１〜２２のいずれかに記載の製造方法。
【請求項２４】
脱酸素雰囲気下で実施する請求項１〜２３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項２５】
不純物を母液に除去する請求項１〜２４のいずれかに記載の製造方法。
【請求項２６】
還元型ビタミンＫ／酸化型ビタミンＫの重量比が５０％超である還元型ビタミンＫの結晶。
【請求項２７】
還元型ビタミンＫが、フィロキノール、メナキノール、メナジオールである請求項２６記載の還元型ビタミンＫの結晶。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、還元型ビタミンＫの製造方法に関する。還元型ビタミンＫはビタミンＫが生理活性を示すための活性本体であることが知られており、食品、栄養機能食品、特定保健用食品、栄養補助剤、栄養剤、動物薬、飲料、飼料、化粧品、医薬品、治療薬、予防薬等として有用な化合物である。
【背景技術】
【０００２】
ビタミンＫは基本骨格に２−メチル−１，４−ナフトキノンを有する化合物の誘導体である。例えば、ビタミンＫ1（フィロキノン）は、２−メチル−１，４−ナフトキノンの３位にフィチル側鎖をもつ化合物である。ビタミンＫ１は、植物にみられる唯一のビタミンＫ同族化合物として知られており、植物の葉緑体で太陽の光エネルギーを化学エネルギーに変換する過程において、電子受容体として働くと考えられている。
【０００３】
また、ビタミンＫ2は２−メチル−１，４−ナフトキノンの３位に４から１３のイソプレン単位を含むイソプレニル側鎖を持ち、一般にメナキノンと呼ばれている。ビタミンＫ2は、主に微生物の代謝産物として生産されており、微生物において化学エネルギー（ＡＴＰ）の産生、電解質の輸送、微生物固有の運動性の支持などの役割を果たすと考えられている。
【０００４】
また、ビタミンＫ3は２−メチル−１,４−ナフトキノンそのものを言い、メナジオンとも呼ばれる。ビタミンＫ4は、ビタミンＫ3の還元型であり、メナジオールとも呼ばれる。ビタミンＫ3、ビタミンＫ4は合成ビタミンＫとして知られている。
【０００５】
動物組織からは種々のビタミンＫが分離されているが、これらは、腸管内の細菌や食餌に由来するものであると考えられている。ヒトにおいては、イソプレニル側鎖の繰り返し構造を４個持つメナキノン−４（メナテトレノン）が腸管内の細菌によって合成され、ビタミンＫの必要量の一部を供給している。
【０００６】
ヒトなどの哺乳動物でのビタミンＫの生理的に最も重要な役割は、血液凝固因子の活性化にある。血液凝固反応を起こす酵素(トロンビン等)の前駆体であるプロトロンビン等の血液凝固因子は、その構成アミノ酸の一つであるグルタミン酸残基のγ位がカルボキシル化されることにより活性化するが、当該γ−カルボキシル化を触媒する酵素であるγ−カルボキシラーゼの補酵素としてビタミンＫが必要である。そのため、ビタミンＫが欠乏した場合には、グルタミン酸残基のγ−カルボキシル化が不十分となり、血液凝固に関する機能が十分に発現されず、出血傾向あるいは血液凝固の遅延といった症状が現れる。
【０００７】
さらに、骨芽細胞によって作られるビタミンＫ依存性タンパクであるオステオカルシンは、先述した血液凝固因子と同様にグルタミン酸残基のγ−カルボキシル化によって活性化される。この活性化されたオステオカルシンが骨のヒドロキシアパタイトと結合して骨基質中に蓄積され、骨形成に関与し、さらに骨吸収を抑制する。ビタミンＫが不足した場合には、オステオカルシンの活性化が不十分となり、骨からのカルシウムの溶出が進み、骨密度の低下といった症状が表れる。
【０００８】
このようなことから、ビタミンＫ1やビタミンＫ2の一つであるメナテトレノンは、出産や外科手術の際の出血予防薬、新生児や乳児のビタミンＫ欠乏性出血症の予防薬、骨粗鬆症の治療薬として用いられてきている。さらに、最近、ビタミンＫは、医薬品、治療用途以外でも栄養剤、栄養補助剤等のサプリメントとしても用いられている。
【０００９】
一方、上述したようにグルタミン酸残基がγ−カルボキシ化されるためには、生体内にてビタミンＫが還元型に変換される必要があること、すなわち、生体内でのビタミンＫの活性本体は還元型のビタミンＫであることが知られている。しかし、還元型ビタミンＫは非常に不安定で、空気中の酸素により容易に酸化されるためか、これまで、還元型ビタミンＫの簡便な製造方法は存在せず、ビタミンＫを含有する既存の製品もすべて酸化型ビタミンＫを有効成分とするものであった。
【００１０】
このようなことから、ビタミンＫとして還元型ビタミンＫを含有するビタミンＫ製品を提供するために、還元型ビタミンＫの簡便な製造方法の開発が望まれていた。しかしながら、還元型ビタミンＫの取得方法についてはこれまでほとんど報告されておらず、特開平５−４９５１（特許文献１）において還元型ビタミンＫの取得方法が記載されているのみである。
【００１１】
上記公報においては、還元型ビタミンＫを含む溶液を濃縮させ、残渣にヘキサンを加えることにより、還元型ビタミンＫの結晶を取得している。しかし、本発明者らが還元型ビタミンＫ2の１つであるメナキノール−４を用いて予備的に検討した結果、ヘキサン等の非水溶性有機溶媒に対するメナキノール−４の溶解度は高いため、収率良く結晶を得るには、過剰な冷却が必要であり、結晶化溶媒としては適当でないことがわかった。また、得られた結晶のメナキノール−４／メナキノン−４の重量比は４０％程度であり、必ずしも高品質のメナキノール−４の結晶を取得できるわけではないこともわかった。
【特許文献１】特開平５−４９５１
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、上記に鑑み、医薬品、食品、栄養機能食品、特定保健用食品、栄養補助剤、栄養剤、飲料、飼料、化粧品として有用な還元型ビタミンＫの製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者らは、上記課題を解決すべく、鋭意検討した結果、還元型ビタミンＫの晶析において、水溶性有機溶媒を含有する溶液から還元型ビタミンＫを晶出させることにより、還元型ビタミンＫが容易に結晶化し、高品質の還元型ビタミンＫを高収率で取得できることを見出し、本発明を完成させた。
【００１４】
すなわち本発明は、還元型ビタミンＫを水溶性有機溶媒を含有する溶液から晶析させることを特徴とする還元型ビタミンＫの製造方法である。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、還元型ビタミンＫを製造する方法において、結晶分離を含む単離プロセス、あるいは、その単離プロセスを含む全プロセスが最短化かつ簡便化でき、高純度の還元型ビタミンＫを高収率で得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下、本発明を詳細に説明する。尚、本明細書において、酸化型、還元型を問わず、ビタミンＫとのみ記載されているものは、ビタミンＫ1、ビタミンＫ2、ビタミンＫ4を問わない。これらが混在する場合には、混合物全体をあらわす。また、還元型、酸化型の明記がない場合は、還元型、酸化型を問わず、両者が混在する場合には、混合物全体を表す。
【００１７】
まず、還元型ビタミンＫ結晶の製造方法、すなわち、還元型ビタミンＫの晶析方法について説明する。
【００１８】
本発明で使用する還元型ビタミンＫは、一般にビタミンＫと呼ばれている化合物の還元型であれば特に制限されず、例えば、還元型ビタミンＫ1（フィロキノール）、還元型ビタミンＫ2（メナキノール）、ビタミンＫ4（メナジオール）等を挙げることができる。
【００１９】
還元型ビタミンＫ2としては、特に制限されないが、２−メチル−１，４−ナフトキノールの３位のイソプレニル側鎖の繰り返し単位を４〜１３持つものが好ましい。好ましくは、イソプレン単位を４つ持つメナキノール−４、イソプレン単位を７つ持つメナキノール−７であり、特に好ましくは、メナキノール−４である。
【００２０】
本発明の晶析に用いる還元型ビタミンＫは、例えば、合成、発酵、天然物からの抽出等の従来公知の方法により得ることができる。好ましくは、還元型ビタミンＫ中に含まれる酸化型ビタミンＫ、或いは、酸化型ビタミンＫを還元することにより得られたものであり、より好ましくは、後述する本発明の還元反応を用いて得られたものである。本発明の晶析法は、酸化型ビタミンＫを比較的多く含有するものについても適用できるが、後述する還元方法等により調製された高純度の還元型ビタミンＫに対して特に有効である。本発明においては、従来公知の方法により得られた、あるいは、後述する還元方法等により製造された還元型ビタミンＫを含有する反応液や抽出液に含有される不純物の除去も兼ねて精製晶析するのが特に効果的である。言うまでもなく、上記精製晶析は還元型ビタミンＫ結晶を再精製するための、再結晶法としても非常に有効である。
【００２１】
本発明において、還元型ビタミンＫは、水溶性有機溶媒の溶液中で晶析される。好ましくは、アルコール類、ケトン類、ニトリル類、エーテル類、脂肪酸類等であり、より好ましくは、アルコール類、ケトン類、脂肪酸類等であり、最も好ましくはアルコール類である。
【００２２】
本発明で用いるアルコール類としては、環状、非環状を問わず、又、飽和、不飽和を問わず、特に制限されないが、一般に、飽和のものが好ましく用いられる。例えば、炭素数１〜２０、普通炭素数１〜１２、特に炭素数１〜６、とりわけ炭素数１〜５、なかでも炭素数１〜４、なかんずく炭素数１〜３、更には炭素数２〜３の１価アルコールが好ましく、又、炭素数２〜５の２価アルコールが好ましく、又、炭素数３の３価アルコールが好ましい。上記の炭素数１〜５の１価アルコールは、水と相溶性の高いアルコールであり、水との混合溶媒として使用する場合に好適に用いられる。
【００２３】
１価のアルコールとしては、例えば、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブチルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、１−ペンタノール、２−ペンタノール、３−ペンタノール、２−メチル−１−ブタノール、イソペンチルアルコール、ｔｅｒｔ−ペンチルアルコール、３−メチル−２−ブタノール、ネオペンチルアルコール、１−ヘキサノール、２−メチル−１−ペンタノール、４−メチル−２−ペンタノール、２−エチル−１−ブタノール、１−ヘプタノール、２−ヘプタノール、３−ヘプタノール、１−オクタノール、２−オクタノール、２−エチル−１−ヘキサノール、１−ノナノール、１−デカノール、１−ウンデカノール、１−ドデカノール、アリルアルコール、プロパルギルアルコール、ベンジルアルコール、シクロヘキサノール、１−メチルシクロヘキサノール、２−メチルシクロヘキサノール、３−メチルシクロヘキサノール、４−メチルシクロヘキサノール等を挙げることができる。
【００２４】
好ましくは、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブチルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、１−ペンタノール、２−ペンタノール、３−ペンタノール、２−メチル−１−ブタノール、イソペンチルアルコール、ｔｅｒｔ−ペンチルアルコール、３−メチル−２−ブタノール、ネオペンチルアルコール、１−ヘキサノール、２−メチル−１−ペンタノール、４−メチル−２−ペンタノール、２−エチル−１−ブタノール、シクロヘキサノールであり、より好ましくは、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブチルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、１−ペンタノール、２−ペンタノール、３−ペンタノール、２−メチル−１−ブタノール、イソペンチルアルコール、ｔｅｒｔ−ペンチルアルコール、３−メチル−２−ブタノール、ネオペンチルアルコールであり、さらに好ましくは、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、イソブチルアルコール、２−メチル−１−ブタノール、イソペンチルアルコールであり、とりわけ、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノールが好ましく、更に、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノールが好ましく、最も好ましくは、エタノールである。
【００２５】
２価のアルコールとしては、１，２−エタンジオール、１，２−プロパンジオール、１，３−プロパンジオール、１，２−ブタンジオール、１，３−ブタンジオール、１，４−ブタンジオール、２，３−ブタンジオール、１，５−ペンタンジオール等を挙げることができる。好ましくは、１，２−エタンジオール、１，２−プロパンジオール、１，３−プロパンジオールであり、最も好ましくは、１，２−エタンジオールである。
【００２６】
３価のアルコールとしてはグリセリン等を好適に用いることができる。
【００２７】
ケトン類としては、特に制限されず、普通炭素数３〜６のものが好適に用いられる。具体例としては、例えば、アセトン、メチルエチルケトン、メチルブチルケトン、メチルイソブチルケトン等を挙げることができ、好ましくは、アセトン、メチルエチルケトンであり、最も好ましくは、アセトンである。
【００２８】
ニトリル類としては、環状、非環状を問わず、又、飽和、不飽和を問わず、特に制限されないが、一般に飽和のものが好ましく用いられる。普通、炭素数２〜２０、特に炭素数２〜１２、とりわけ炭素数２〜８のものが好適に用いられる。
【００２９】
具体例としては、例えば、アセトニトリル、プロピオニトリル、マロノニトリル、ブチロニトリル、イソブチロニトリル、スクシノニトリル、バレロニトリル、グルタロニトリル、ヘキサンニトリル、ヘプチルシアニド、オクチルシアニド、ウンデカンニトリル、ドデカンニトリル、トリデカンニトリル、ペンタデカンニトリル、ステアロニトリル、クロロアセトニトリル、ブロモアセトニトリル、クロロプロピオニトリル、ブロモプロピオニトリル、メトキシアセトニトリル、シアノ酢酸メチル、シアノ酢酸エチル、トルニトリル、ベンゾニトリル、クロロベンゾニトリル、ブロモベンゾニトリル、シアノ安息香酸、ニトロベンゾニトリル、アニソニトリル、フタロニトリル、ブロモトルニトリル、メチルシアノベンゾエート、メトキシベンゾニトリル、アセチルベンゾニトリル、ナフトニトリル、ビフェニルカルボニトリル、フェニルプロピオニトリル、フェニルブチロニトリル、メチルフェニルアセトニトリル、ジフェニルアセトニトリル、ナフチルアセトニトリル、ニトロフェニルアセトニトリル、クロロベンジルシアニド、シクロプロパンカルボニトリル、シクロヘキサンカルボニトリル、シクロヘプタンカルボニトリル、フェニルシクロヘキサンカルボニトリル、トリルシクロヘキサンカルボニトリル等を挙げることができる。好ましくは、アセトニトリル、プロピオニトリル、スクシノニトリル、ブチロニトリル、イソブチロニトリル、バレロニトリル、シアノ酢酸メチル、シアノ酢酸エチル、ベンゾニトリル、トルニトリル、クロロプロピオニトリルであり、より好ましくは、アセトニトリル、プロピオニトリル、ブチロニトリル、イソブチロニトリルであり、最も好ましくは、アセトニトリルである。
【００３０】
エーテル類としては、環状、非環状を問わず、又、飽和、不飽和を問わず、特に制限されないが、一般に、飽和のものが好ましく用いられる。普通、炭素数３〜２０、特に炭素数４〜１２、とりわけ炭素数４〜８のものが好適に用いられる。具体例としては、例えば、ジエチルエーテル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、ジプロピルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジブチルエーテル、ジヘキシルエーテル、エチルビニルエーテル、ブチルビニルエーテル、アニソール、フェネトール、ブチルフェニルエーテル、メトキシトルエン、ジオキサン、フラン、２−メチルフラン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、エチレングリコールジメチルエーテル、エチレングリコールジエチルエーテル、エチレングリコールジブチルエーテル、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールジブチルエーテル等を挙げることができる。ジエチルエーテル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、ジプロピルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジブチルエーテル、ジヘキシルエーテル、アニソール、フェネトール、ブチルフェニルエーテル、メトキシトルエン、ジオキサン、２−メチルフラン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、エチレングリコールジメチルエーテル、エチレングリコールジエチルエーテル、エチレングリコールジブチルエーテル、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル等が好ましく、特に、ジエチルエーテル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、アニソール、ジオキサン、テトラヒドロフラン、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル等が好ましい。最も好ましくは、ジエチルエーテル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、アニソール、ジオキサン、テトラヒドロフラン等であり、とりわけ、ジオキサン、テトラヒドロフランが好ましい。
【００３１】
脂肪酸類としては、例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸等を挙げることができるが、ギ酸、酢酸が好ましく、最も好ましくは酢酸である。
【００３２】
言うまでもなく、上記水溶性有機溶媒は２種以上を併用して使用してもよい。
【００３３】
本発明の晶析方法としては、特に制限されず、冷却晶析、濃縮晶析、溶媒置換晶析、貧溶媒添加晶析等のうちの少なくとも一つを用いて実施することができる。上記水溶性有機溶媒中での還元型ビタミンＫの溶解度は極めて好適な温度依存性を示し、これは還元型ビタミンＫの溶解量を好適に減じて結晶状態へ高収率で移行させる上で好適に寄与するので、この特性を最大限に発揮するためには、冷却晶析、もしくは、冷却晶析と他の晶析方法を組み合わせて行うのが特に好ましく、冷却晶析と貧溶媒添加晶析を組み合わせて行うのが最も好ましい。上記貧溶媒は、還元型ビタミンＫを含有する水溶性有機溶媒の溶液に添加しても良いし、貧溶媒に還元型ビタミンＫを含有する水溶性有機溶媒の溶液を添加しても良い。
【００３４】
貧溶媒としては、実質的に還元型ビタミンＫの溶解性を好適に減じる溶媒であれば特に制限されないが、還元型ビタミンＫの溶解性を好適に減じて高い収率を得る、スラリー性状を改善するという観点から、水を用いるのが最も好ましい。
【００３５】
水の使用量は、水溶性有機溶媒の種類によっても異なるので一律に規定できず、特に制限されない。好ましくは、結晶化終了時の溶媒中の水の割合が、約１ｗ／ｗ％以上であり、より好ましくは約５ｗ／ｗ％以上であり、特に好ましくは約１０ｗ／ｗ％以上、とりわけ約２０ｗ／ｗ％以上である。上限は特に制限されないが、好適なスラリー性状を得るという観点から、普通約９５ｗ／ｗ％以下、好ましくは約９０ｗ／ｗ％以下、より好ましくは約８０ｗ／ｗ％以下、特に好ましくは約７０ｗ／ｗ％以下である。通常、約１〜約９５ｗ／ｗ％で好適に実施でき、約２０〜約７０ｗ／ｗ％で最も好適に実施できる。
【００３６】
本発明の晶析方法においては、上記水溶性有機溶媒又は上記水溶性有機溶媒と水との混合溶媒を主成分とする溶媒を用いるのが好ましいが、スラリー性状や結晶性状に悪影響を与えない範囲で、他の溶媒を共存させることを妨げないし、添加することも妨げない。これらの他の溶媒としては、特に制限されないが、例えば、炭化水素類、脂肪酸エステル類、ニトリル類を除く窒素化合物類、硫黄化合物類等を挙げることができる。
【００３７】
炭化水素類としては、特に制限されないが、例えば、脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素、ハロゲン化炭化水素等を挙げることができる。特に、脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素が好ましく、とりわけ、脂肪族炭化水素が好ましい。
【００３８】
脂肪族炭化水素としては、環状、非環状を問わず、又、飽和、不飽和を問わず、特に制限されないが、通常、炭素数３〜２０、好ましくは、炭素数５〜１２のものが用いられる。
【００３９】
具体例としては、例えば、プロパン、ブタン、イソブタン、ペンタン、２−メチルブタン、シクロペンタン、２−ペンテン、ヘキサン、２−メチルペンタン、２，２−ジメチルブタン、２，３−ジメチルブタン、メチルシクロペンタン、シクロヘキサン、１−ヘキセン、シクロヘキセン、ヘプタン、２−メチルヘキサン、３−メチルヘキサン、２、３−ジメチルペンタン、２，４−ジメチルペンタン、メチルシクロヘキサン、１−ヘプテン、オクタン、２，２，３−トリメチルペンタン、イソオクタン、エチルシクロヘキサン、１−オクテン、ノナン、２，２，５−トリメチルヘキサン、１−ノネン、デカン、１−デセン、ｐ−メンタン、ウンデカン、ドデカン等を挙げることができる。
【００４０】
中でも、炭素数５〜８の飽和脂肪族炭化水素が好ましく、炭素数５のペンタン、２−メチルブタン、シクロペンタン（ペンタン類と称す）；炭素数６のヘキサン、２−メチルペンタン、２，２−ジメチルブタン、２，３−ジメチルブタン、メチルシクロペンタン、シクロヘキサン（ヘキサン類と称す）；炭素数７のヘプタン、２−メチルヘキサン、３−メチルヘキサン、２，３−ジメチルペンタン、２，４−ジメチルペンタン、メチルシクロヘキサン（ヘプタン類と称す）；炭素数８のオクタン、２，２，３−トリメチルペンタン、イソオクタン、エチルシクロヘキサン（オクタン類と称す）、及びこれらの混合物が好ましく用いられる。とりわけ、上記ヘプタン類は酸化からの防護効果が特に高い傾向があり、さらに好ましく、ヘプタンが最も好ましい。
【００４１】
芳香族炭化水素としては、特に制限されないが、普通、炭素数６〜２０、特に炭素数６〜１２、とりわけ炭素数７〜１０のものが好適に用いられる。具体例としては、例えば、ベンゼン、トルエン、キシレン、ｏ−キシレン、ｍ−キシレン、ｐ−キシレン、エチルベンゼン、クメン、メシチレン、テトラリン、ブチルベンゼン、ｐ−シメン、シクロヘキシルベンゼン、ジエチルベンゼン、ペンチルベンゼン、ジペンチルベンゼン、ドデシルベンゼン、スチレン等を挙げることができる。好ましくは、トルエン、キシレン、ｏ−キシレン、ｍ−キシレン、ｐ−キシレン、エチルベンゼン、クメン、メシチレン、テトラリン、ブチルベンゼン、ｐ−シメン、シクロヘキシルベンゼン、ジエチルベンゼン、ペンチルベンゼンであり、より好ましくは、トルエン、キシレン、ｏ−キシレン、ｍ−キシレン、ｐ−キシレン、クメン、テトラリンであり、最も好ましくは、クメンである。
【００４２】
ハロゲン化炭化水素としては、環状、非環状を問わず、又、飽和、不飽和を問わず、特に制限されないが、一般に、非環状のものが好ましく用いられる。普通、塩素化炭化水素、フッ素化炭化水素が好ましく、特に塩素化炭化水素が好ましい。炭素数１〜６、特に炭素数１〜４、とりわけ炭素数１〜２のものが好適に用いられる。
【００４３】
具体例としては、例えば、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、１，１−ジクロロエタン、１，２−ジクロロエタン、１，１，１−トリクロロエタン、１，１，２−トリクロロエタン、１，１，１，２−テトラクロロエタン、１，１，２，２−テトラクロロエタン、ペンタクロロエタン、ヘキサクロロエタン、１，１−ジクロロエチレン、１，２−ジクロロエチレン、トリクロロエチレン、テトラクロロエチレン、１，２−ジクロロプロパン、１，２，３−トリクロロプロパン、クロロベンゼン、１，１，１，２−テトラフルオロエタン等を挙げることができる。
【００４４】
好ましくは、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、１，１−ジクロロエタン、１，２−ジクロロエタン、１，１，１−トリクロロエタン、１，１，２−トリクロロエタン、１，１−ジクロロエチレン、１，２−ジクロロエチレン、トリクロロエチレン、クロロベンゼン、１，１，１，２−テトラフルオロエタンであり、より好ましくは、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエチレン、トリクロロエチレン、クロロベンゼン、１，１，１，２−テトラフルオロエタンである。
【００４５】
脂肪酸エステル類としては、特に制限されないが、例えば、プロピオン酸エステル、酢酸エステル、ギ酸エステル等を挙げることができる。特に、酢酸エステル、ギ酸エステルが好ましく、とりわけ、酢酸エステルが好ましい。特に制限されないが、一般に、エステル基としては、炭素数１〜８のアルキルエステル又はアラルキルエステル、好ましくは炭素数１〜６のアルキルエステル、より好ましくは炭素数１〜４のアルキルエステルが好ましく用いられる。
【００４６】
プロピオン酸エステルとしては、例えば、プロピオン酸メチル、プロピオン酸エチル、プロピオン酸ブチル、プロピオン酸イソペンチルを挙げることができる。
【００４７】
酢酸エステルとしては、例えば、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、酢酸イソブチル、酢酸ｓｅｃ−ブチル、酢酸ペンチル、酢酸イソペンチル、酢酸ｓｅｃ−ヘキシル、酢酸シクロヘキシル、酢酸ベンジル等を挙げることができる。好ましくは、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、酢酸イソブチル、酢酸ｓｅｃ−ブチル、酢酸ペンチル、酢酸イソペンチル、酢酸ｓｅｃ−ヘキシル、酢酸シクロヘキシルであり、より好ましくは、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、酢酸イソブチルであり、最も好ましくは、酢酸エチルである。
【００４８】
ギ酸エステルとしては、例えば、ギ酸メチル、ギ酸エチル、ギ酸プロピル、ギ酸イソプロピル、ギ酸ブチル、ギ酸イソブチル、ギ酸ｓｅｃ−ブチル、ギ酸ペンチル等を挙げることができる。好ましくは、ギ酸メチル、ギ酸エチル、ギ酸プロピル、ギ酸ブチル、ギ酸イソブチル、ギ酸ペンチルであり、最も好ましくは、ギ酸エチルである。
【００４９】
ニトリル類を除く窒素化合物類としては、例えば、ニトロメタン、トリエチルアミン、ピリジン、ホルムアミド、Ｎ−メチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン等を挙げることができる。
【００５０】
硫黄化合物類としては、例えば、ジメチルスルホキシド、スルホラン等を挙げることができる。
【００５１】
これらの他の溶媒と、上記水溶性有機溶媒又は水溶性有機溶媒と水との混合溶媒との割合は、溶媒の種類によっても異なるので一律に規定できず、実質的に上記水溶性有機溶媒又は水溶性有機溶媒と水との混合溶媒を主成分とする溶媒であれば特に制限されないが、好ましくは、全溶媒中の上記水溶性有機溶媒又は水溶性有機溶媒と水との混合溶媒の割合が、約８０ｗ／ｗ％以上であり、より好ましくは約９０ｗ／ｗ％以上であり、特に好ましくは約９５ｗ／ｗ％以上であり、とりわけ約９８ｗ／ｗ％以上である。
【００５２】
晶析濃度は、一つの重要な因子であり、晶析終了時の濃度、一般に、晶析終了時の晶析溶媒の重量に対する還元型ビタミンＫの重量として、普通約２０ｗ／ｗ％以下、好ましくは約１５ｗ／ｗ％以下、より好ましくは約１３ｗ／ｗ ％以下であり、特に好ましくは約１０ｗ／ｗ％以下である。上記濃度を維持することによって、工業的規模での操作性に耐えうる好適な晶析が可能となる。生産性の観点から、普通、濃度の下限は約１ｗ／ｗ％であり、好ましくは約２ｗ／ｗ％である。
【００５３】
上記晶析は、強制流動下に実施するのが好ましい。過飽和の形成を抑制し、スムースに核化・結晶成長を行うため、或いは、高品質化の観点から、単位容積当たりの撹拌所要動力として、通常約０．０１ｋＷ／ｍ3以上、好ましくは約０．１ｋＷ／ｍ3以上、より好ましくは約０．３ｋＷ／ｍ3以上の流動が好ましい。上記の強制流動は、通常、撹拌翼の回転により与えられるが、上記流動が得られれば必ずしも撹拌翼を用いる必要はなく、例えば、液の循環による方法などを利用しても良い。
【００５４】
晶析に際しては、過飽和の形成を抑制し、スムースに核化・結晶成長を行うために、種晶を添加することも好ましく行われる。
【００５５】
還元型ビタミンＫの晶析温度（晶析時の最終冷却温度）は、特に制限されないが、収率等の観点より、好ましくは２５℃以下、より好ましくは２０℃以下、特に好ましくは１５℃以下、とりわけ１０℃以下で実施される。下限は、系の固化温度である。通常、０〜２５℃程度で好適に実施できる。
【００５６】
晶析時には、単位時間当たりの結晶の晶出量を制御して、過飽和の形成を制御するのが好ましい。好ましい単位時間当たりの晶出量は、例えば、単位時間当たり全晶出量の約５０％量が晶出する速度以下（即ち、最大で５０％量／時間）であり、好ましくは、単位時間当たり全晶出量の約２５％量が晶出する速度以下（即ち、最大で２５％量／時間）である。冷却晶析の場合、冷却速度として、普通、約４０℃／時間以下、好ましくは約２０℃／時間以下である。
【００５７】
尚、還元型ビタミンＫは分子酸素により還元型ビタミンＫから酸化型ビタミンＫへと容易に酸化されるが、本発明者らは、還元型ビタミンＫと強酸とを接触させることにより、還元型ビタミンＫの分子酸素からの酸化を防護できることも見出した。すなわち、還元型ビタミンＫを、強酸の共存下に水溶性有機溶媒の溶液中で晶析することにより、高品質の還元型ビタミンＫ結晶を得ることができる。
【００５８】
上記強酸としては、特に制限されないが、例えば、水溶液中におけるｐＫａが２．５以下のものが好ましく、より好ましくは２．０以下であり、特に好ましくは１．５以下であり、とりわけ１．０以下である。なお、強酸が硫酸のような多塩基酸である場合には、上記ｐＫａは、その値が最も小さくなる第１段での値をいう。
【００５９】
強酸の具体例としては、硫酸、塩化水素（塩酸も含む）、燐酸等の無機酸；メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等のスルホン酸やトリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸等のカルボン酸等の有機酸などを挙げることができる。なかでも、硫酸、塩化水素、燐酸等の無機酸が好ましく、晶析後に該強酸を蒸発させるという観点等からは塩化水素が最も好ましい。
【００６０】
強酸の使用量としては、強酸の種類にもよるが、普通、触媒量以上であれば良く、還元型ビタミンＫの１モルに対して、例えば、０．１モル％量以上、好ましくは１モル％量以上であれば充分である。上限は特に制限されないが、経済性等も考慮すると、上限は１００モル％量である。
【００６１】
また、溶媒中の強酸濃度は、強酸の種類にもよるが、溶媒重量に対する強酸のモル量として、通常、０．１ｍｍｏｌ／ｋｇ以上、好ましくは１ｍｍｏｌ／ｋｇ以上であれば充分である。上限は特に制限されないが、経済性等を考慮すると、上限は１００ｍｍｏｌ／ｋｇである。尚、上記強酸は、酸化防護の目的を達した後には、必要に応じて、中和、蒸発、分液、洗浄等により除去する場合もあり、その点を考慮すると、言うまでもなく、使用目的と得られる効果をもとに、必要最小量を用いるのが好ましい。
【００６２】
上記強酸は、還元型ビタミンＫ結晶が析出する前に添加してもよく、結晶析出中に添加してもよく、結晶析出量が安定してから添加してもよい。還元型ビタミンＫ結晶が析出する前に添加しておくのが好ましい。
【００６３】
上記の還元型ビタミンＫの、強酸を含有する溶媒中での結晶化に際して、系は均一であっても良く、又、不均一であっても良い。上記系を具体的に例示すると、還元型ビタミンＫ、強酸及び溶媒からなる均一液相；還元型ビタミンＫを含有する有機溶媒相と強酸を含有する水相との不均一液相等々を挙げることができる。言うまでもなく、還元型ビタミンＫと強酸との接触効率の高い系が、酸化防護に好適である。
【００６４】
尚、上記の還元型ビタミンＫの晶析において、晶析時に用いた強酸を晶析後に除去するためには、晶析後に強酸を塩基（例えば、水酸化ナトリウム等のアルカリ金属水酸化物や炭酸ナトリウム等のアルカリ金属炭酸塩等）で中和する方法、或いは、強酸として塩化水素等の揮発性の強酸を用いて、該強酸を蒸発させる方法等を採用することができる。
【００６５】
晶析後に強酸を塩基（例えば、水酸化ナトリウム等のアルカリ金属水酸化物；水酸化マグネシウム等のアルカリ土類金属水酸化物；炭酸ナトリウム等のアルカリ金属炭酸塩；炭酸水素ナトリウム等のアルカリ金属炭酸水素塩等）で中和する場合、中和により副生する塩類を母液に溶解、除去するために、結晶の分離に際して、上記塩類を溶解、除去するための水が系中に共存するようにするのも好ましい。これは、一般に、水共存下に結晶化させる、或いは、結晶の分離に際して水を添加する等により達せられる。
【００６６】
また、還元型ビタミンＫを酸化から防護するために、抗酸化剤の共存下に晶析を行うのが好ましい。このような抗酸化剤としては、特に制限されないが、例えば、クエン酸類、アスコルビン酸類等を挙げることができる。
【００６７】
クエン酸類としては、特に制限されないが、クエン酸や、クエン酸イソプロピル、クエン酸エチル、クエン酸ブチル等のクエン酸エステル、さらに、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム等の塩を挙げることができる。特に、クエン酸、クエン酸イソプロピルが好ましい。
【００６８】
アスコルビン酸類としては、特に制限されず、例えば、アスコルビン酸のみならず、rhamno−アスコルビン酸、arabo−アスコルビン酸、gluco−アスコルビン酸、fuco−アスコルビン酸、glucohepto−アスコルビン酸、xylo−アスコルビン酸、galacto−アスコルビン酸、gulo−アスコルビン酸、allo−アスコルビン酸、erythro−アスコルビン酸、６−デスオキシアスコルビン酸等のアスコルビン酸に類するものを含み、更に、それらのエステル体や塩であってもかまわない。これらは、Ｌ体、Ｄ体、或いは、ラセミ体であっても良い。具体的には、例えば、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸パルミテート、Ｌ−アスコルビルステアレート、Ｄ−arabo−アスコルビン酸等を挙げることができる。還元型ビタミンＫの製造において、上記のアスコルビン酸類をいずれも好適に使用しうるが、生成した還元型ビタミンＫとの分離のしやすさ等を考慮すると、上記のアスコルビン酸類のうち、特に水溶性のものが好適に用いられ、最も好ましくは、入手容易性、価格等の観点から、Ｌ−アスコルビン酸、Ｄ−arabo−アスコルビン酸等のフリー体である。
【００６９】
本発明に使用するクエン酸類及び／又はアスコルビン酸類の使用量は、例えば、期待すべき好適な効果や能力を生じうる量（すなわち、有効量）であればよく、具体的には、還元型ビタミンＫが酸化型ビタミンＫに酸化されるのを防護しうる有効量であればよい。一般的に、クエン酸類及び／又はアスコルビン酸類の種類にもより、特に制限されないが、普通、還元型ビタミンＫ１００重量部に対して０．１重量部以上、好ましくは１重量部以上、より好ましくは１０重量部以上である。または、溶媒１００重量部に対して０．０１重量部以上、好ましくは０．１重量部以上あればよい。上限は特に制限されないが、経済性も考慮して、還元型ビタミンＫ１００重量部に対して、普通約１０００重量部以下、好ましくは約１００重量部以下、または、溶媒１００重量部に対して、普通１０重量部以下、好ましくは５重量部以下、より好ましくは１重量部以下で良い。
【００７０】
言うまでもなく、上記のアスコルビン酸類とクエン酸類の両方を共存させることもでき、この場合、アスコルビン酸類及びクエン酸類の総量として、上記の量であればよい。
【００７１】
このようにして得られる還元型ビタミンＫの結晶は、好ましくは、例えば、遠心分離、加圧濾過、減圧濾過等による固液分離、更に、必要に応じて上記アルコール類又はケトン類をはじめとする本発明に記載される溶媒を用いてケーキ洗浄を行って湿体として取得し、更に、内部を不活性ガスに置換した減圧乾燥器（真空乾燥器）に湿体を仕込み、減圧下、乾燥し、乾体として取得することができるし、乾体として取得するのが好ましい。
【００７２】
本発明は、脱酸素雰囲気下で実施することが、酸化防護の上で効果的である。脱酸素雰囲気は、不活性ガスによる置換、減圧、沸騰やこれらを組み合わせることにより達成できる。少なくとも、不活性ガスによる置換、即ち、不活性ガス雰囲気を用いるのが好適である。上記不活性ガスとしては、例えば、窒素ガス、ヘリウムガス、アルゴンガス、水素ガス、炭酸ガス等を挙げることができ、好ましくは窒素ガスである。
【００７３】
次に、本発明に使用するに好適な還元型ビタミンＫの合成法、すなわち、酸化型ビタミンＫから還元型ビタミンＫに還元する反応について述べる。
【００７４】
還元反応は、水素化金属化合物、鉄（金属又は塩としての鉄）、亜鉛（金属としての亜鉛）、次亜硫酸類等を還元剤として用いて実施することができる。
【００７５】
水素化金属化合物としては、特に制限されないが、例えば、水素化ホウ素ナトリウム、水素化リチウムアルミニウム等を挙げることができる。好ましくは水素化ホウ素ナトリウム等である。上記水素化金属化合物の使用量は、水素化金属化合物の種類により異なり、一律に規定できないが、普通、理論水素当量の１〜３倍量で好適に実施できる。
【００７６】
鉄または亜鉛を用いる還元は、普通、酸を使用して実施される。酸としては、特に制限されないが、例えば、酢酸等の脂肪酸、メタンスルホン酸等のスルホン酸、塩酸や硫酸等の無機酸等を挙げることができる。好ましくは無機酸であり、より好ましくは、硫酸である。
【００７７】
鉄の使用量は、特に制限されないが、酸化型ビタミンＫの仕込み重量に対して、例えば、約１／５重量以上で好適に実施できる。上限は特に制限されないが、経済性の観点等から、約２倍重量以下である。なお、鉄は金属のみならず、硫酸鉄（II）等の塩の形態でも使用できる。
【００７８】
また、亜鉛の使用量は、特に制限されないが、酸化型ビタミンＫの仕込み重量に対して、例えば、約１／１０重量以上で好適に実施できる。上限は特に制限されないが、経済性の観点等から、約２倍重量以下である。
【００７９】
次亜硫酸類としては、特に制限されず、普通、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩等が用いられるが、好ましくはリチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩であり、より好ましくはナトリウム塩である。上記次亜硫酸類の使用量は、特に制限されないが、普通、酸化型ビタミンＫの仕込み重量に対して、約１／５重量以上、好ましくは約２／５重量以上、より好ましくは約３／５重量以上である。多くても特に支障はないが、経済的に不利であるため、普通、約２倍重量以下、好ましくは同重量以下で用いられる。普通、約２／５重量〜約同重量の範囲で好適に実施できる。
【００８０】
アスコルビン酸類としては、前述したアスコルビン酸類を挙げることができる。
【００８１】
上記のアスコルビン酸類の使用量は、特に制限されず、酸化型ビタミンＫを還元型ビタミンＫに変換しうる有効量であればよく、一般的に、酸化型ビタミンＫに対して、普通１倍モル量以上、好ましくは１．２倍モル量以上である。上限は特に制限されないが、経済性も考慮して、普通１０倍モル量、好ましくは５倍モル量、より好ましくは３倍モル量である。
【００８２】
上記還元剤のうち、還元能力、収率、品質といった観点から、水素化金属化合物、亜鉛、次亜硫酸類が好ましく、特に水素化金属化合物、次亜硫酸類（具体的には、次亜硫酸塩）が好ましい。
【００８３】
以下に好ましい還元方法についてより詳細に述べる。
【００８４】
上記水素化金属化合物を用いる還元は、アルコール類を使用するのが好ましいが、還元反応後の水素化金属化合物の処理、還元型ビタミンＫの抽出等を考慮した場合、アルコール類と水と２層を形成する有機溶媒を併用するのがより好ましい。アルコール類と水と２層を形成する有機溶媒の割合は特に制限されないが、溶媒の総量に対するアルコール類の割合は普通約１ｗ／ｗ％以上、好ましくは約３ｗ／ｗ％以上、より好ましくは約５ｗ／ｗ％以上、特に好ましくは約１０ｗ／ｗ％以上である。
【００８５】
上記水素化金属化合物を用いた還元は、反応終了後、残存する水素化金属化合物を酸で処理した後、後工程に供するのが好ましい。酸としては特に制限されないが、上述した強酸の他、ギ酸、酢酸等のカルボン酸等も使用できる。好ましくは、上記強酸であり、より好ましくは塩酸、硫酸等の無機酸である。
【００８６】
上記次亜硫酸類を用いる還元は、水を併用して、水と２層を形成する有機溶媒（好ましくは炭化水素類、より好ましくは脂肪族炭化水素、なかでもヘプタン類、特にヘプタン）との混合溶媒系で実施するのが好ましい。その際、反応時のｐＨは、収率等の観点から、普通ｐＨ７以下、好ましくはｐＨ３〜７、より好ましくはｐＨ３〜６で実施される。上記ｐＨは、酸（例えば、塩酸や硫酸等の鉱酸）や塩基（例えば、水酸化ナトリウム等のアルカリ金属水酸化物）を用いて、調整することができる。
【００８７】
上記次亜硫酸類を用いる還元において、水の使用量は、特に制限されず、還元剤である次亜硫酸類を適度に溶解する量であれば良く、例えば、一般的には、上記次亜硫酸類の水に対する重量が、普通、３０ｗ／ｗ％以下、好ましくは２０ｗ／ｗ％以下になるように調整するのが良い。又、生産性等の観点から、普通、１ｗ／ｗ％以上、好ましくは５ｗ／ｗ％以上、より好ましくは１０ｗ／ｗ％以上であるのが良い。
【００８８】
本発明において記載される還元反応は、強制流動下に実施するのが好ましい。単位容積当たりの撹拌所要動力として、通常約０．０１ｋＷ／ｍ3以上、好ましくは約０．１ｋＷ／ｍ3以上、より好ましくは約０．３ｋＷ／ｍ3以上の流動が好ましい。上記の強制流動は、通常、撹拌翼の回転により与えられるが、上記流動が得られれば必ずしも撹拌翼を用いる必要はなく、例えば、液の循環による方法などを利用しても良い。
【００８９】
還元温度は、還元剤の種類や量によって異なり、一律に規定できない。例えば、次亜硫酸類を用いる還元においては、普通１００℃以下、好ましくは８０℃以下、より好ましくは６０℃以下で実施される。下限は、系の固化温度である。通常、０〜１００℃程度、好ましくは０〜８０℃程度、より好ましくは０〜６０℃程度で好適に実施できる。アスコルビン酸類を用いる還元においては、普通３０℃以上、好ましくは４０℃以上、より好ましくは５０℃以上で実施される。上限は系の沸点である。通常、３０〜１５０℃程度、好ましくは４０〜１２０℃程度、より好ましくは５０〜１００℃程度で好適に実施できる。
【００９０】
反応濃度は、特に制限はないが、一般に、溶媒の重量に対する酸化型ビタミンＫの重量として、普通約１ｗ／ｗ％以上、好ましくは３ｗ／ｗ％以上、より好ましくは１０ｗ／ｗ％以上、とりわけ１５ｗ／ｗ％以上である。上限は、特に制限されないが、普通約６０ｗ／ｗ％、好ましくは５０ｗ／ｗ％、より好ましくは４０ｗ／ｗ％、とりわけ３０ｗ／ｗ％である。一般に、約２〜３０ｗ／ｗ％、好ましくは約５〜３０ｗ／ｗ％、より好ましくは約１０〜３０ｗ／ｗ％で好適に実施できる。
【００９１】
還元反応は、還元剤の種類や量によって異なり、一律に規定できないが、通常、４８時間以内、好ましくは２４時間以内、より好ましくは１０時間以内、とりわけ５時間以内に完了させることができる。
【００９２】
このようにして得られた還元反応液は、該反応液から生成した還元型ビタミンＫを含有する有機相を採取し、必要に応じ（好ましくは）、該有機相を更に繰り返し水や食塩水、希塩酸等を用いて水洗して夾雑物を完全に除去し、所望の水溶性有機溶媒へと置換した後、上述の晶析法に用いることができる。特に、還元剤として、次亜硫酸ナトリウム等の上記の次亜硫酸類や水素化ホウ素ナトリウム等の水素化金属化合物を用いた場合には、還元剤由来の夾雑物を完全に除去する、或いは水相のｐＨを安定させるために、繰り返し水洗することが望ましい。
【００９３】
なお、還元反応や引き続き行われる後処理（還元剤の処理やビタミンＫを含む有機層の水洗等）は、脱酸素雰囲気下で実施するのが極めて好ましい。脱酸素雰囲気は、不活性ガスによる置換、減圧、沸騰やこれらを組み合わせることにより達成できる。少なくとも、不活性ガスによる置換、即ち、不活性ガス雰囲気を用いるのが好適である。上記不活性ガスとしては、例えば、窒素ガス、ヘリウムガス、アルゴンガス、水素ガス、炭酸ガス等を挙げることができ、好ましくは窒素ガスである。
【００９４】
本発明により、高品質の還元型ビタミンＫ結晶を作業性、経済性良く得ることができる。本発明により得られる還元型ビタミンＫ結晶は、還元型ビタミンＫ／酸化型ビタミンＫの重量比は、５０％超、好ましくは６０／４０以上、より好ましくは７０／３０以上、特に好ましくは８０／２０以上、さらに好ましくは約９０／１０以上、中でも約９５／５以上、とりわけ約９８／２以上、最も好ましくは約９９／１以上が期待できる。
【実施例】
【００９５】
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。また、実施例中の還元型ビタミンＫの純度、並びに還元型ビタミンＫと酸化型ビタミンＫの重量比は下記ＨＰＬＣ分析により求めたが、得られた還元型ビタミンＫの純度は、本発明における純度の限界値を示すものではなく、また、同様に、還元型ビタミンＫと酸化型ビタミンＫの重量比も本発明における上限値を示すものではない。
【００９６】
（ＨＰＬＣ分析条件）
カラム：ＳＹＭＭＥＴＲＹ  Ｃ１８（Ｗａｔｅｒｓ製）２５０ｍｍ（長さ）４．６ｍｍ（内径）、移動相；ＣＨ3ＯＨ、検出波長；２５４ｎｍ、流速；１ｍｌ／ｍｉｎ、メナキノール−４の保持時間；４．２ｍｉｎ、メナキノン−４の保持時間；１１．５ｍｉｎ、フィロキノールの保持時間；５．９ｍｉｎ、フィロキノンの保持時間；２０．５ｍｉｎ。
【００９７】
（実施例１）
５ｇのメナキノン−４を２５℃で５０ｇの酢酸エチルに溶解させた。攪拌（攪拌所要動力０．３ｋＷ／ｍ3）しながら、還元剤として水素化ホウ素ナトリウム０．８３ｇに１０ｇのメタノールを加えて溶解させた液を、徐々に添加し、２５℃にて還元反応を行った。１時間後、反応液に５０ｇ水を添加し、さらに塩酸を添加して中和した。さらに水相を除去し、希塩酸５０ｇで１回、脱気した水５０ｇで２回水洗し、メナキノール−４を５ｇ含む有機相を得た。この有機相を減圧下にて溶媒置換し、５ｇのメナキノール−４及び３７．５ｇのエタノールからなる溶液を得た。この溶液を３５℃にし、攪拌（攪拌所要動力０．３ｋＷ／ｍ3）しながら濃塩酸０.０５ｇを添加した後、水２２．５ｇを１時間かけて添加し、白色のスラリーを得た。さらに、同温にてさらに１時間保持した後、２℃まで冷却した。なお、減圧下での溶媒置換を除くすべての操作は窒素雰囲気下で実施した。得られたスラリーを減圧ろ過し、湿結晶を２℃のエタノール／水＝１／１の混合溶媒１０ｇを用いて洗浄し、さらに、湿結晶を減圧乾燥（２０〜３０℃、１〜３０ｍｍＨｇ）することにより、白色のメナキノール−４の結晶４．８ｇを得た（有姿収率９６モル％）。得られた結晶のメナキノール−４／メナキノン−４の重量比は９４／６、ビタミンＫとしての純度は９９％であった。
【００９８】
（実施例２）
実施例１と同様にして還元反応、溶媒置換を行い、５ｇのメナキノール−４及び６０ｇのエタノールからなる溶液を得た。この溶液を２５℃にし、攪拌（攪拌所要動力０．３ｋＷ／ｍ3）しながら濃塩酸０.０５ｇを添加し、ゆっくりと冷却した。０℃まで冷却した後、種晶を加え、白色のスラリーを得た。さらに、同温にてさらに１時間保持した後、−１５℃まで冷却した。なお、減圧下での溶媒置換を除くすべての操作は窒素雰囲気下で実施した。得られたスラリーを減圧ろ過し、湿結晶を２℃のエタノール／水＝１／１の混合溶媒１０ｇを用いて洗浄し、さらに、湿結晶を減圧乾燥（２０〜３０℃、１〜３０ｍｍＨｇ）することにより、白色のメナキノール−４の結晶３．４ｇを得た（有姿収率６８モル％）。得られた結晶のメナキノール−４／メナキノン−４の重量比は９２／８、ビタミンＫとしての純度は９８％であった。
【００９９】
（実施例３）
実施例１と同様にして還元反応、溶媒置換を行い、５ｇのメナキノール−４及び３０ｇのイソプロパノールからなる溶液を得た。この溶液を３５℃にし、攪拌（攪拌所要動力０．３ｋＷ／ｍ3）しながら濃塩酸０.０５ｇを添加した後、水４５ｇを１時間かけて添加し、白色のスラリーを得た。さらに、同温にてさらに１時間保持した後、２℃まで冷却した。なお、減圧下での溶媒置換を除くすべての操作は窒素雰囲気下で実施した。得られたスラリーを減圧ろ過し、湿結晶を２℃のエタノール／水＝１／１の混合溶媒１０ｇを用いて洗浄し、さらに、湿結晶を減圧乾燥（２０〜３０℃、１〜３０ｍｍＨｇ）することにより、白色のメナキノール−４の結晶４．８ｇを得た（有姿収率９６モル％）。得られた結晶のメナキノール−４／メナキノン−４の重量比は９４／６、ビタミンＫとしての純度は９９％であった。
【０１００】
（実施例４）
実施例１と同様にして還元反応、溶媒置換を行い、５ｇのメナキノール−４及び５０ｇのアセトニトリルからなる溶液を得た。この溶液を３５℃にし、攪拌（攪拌所要動力０．３ｋＷ／ｍ3）しながら濃塩酸０.０５ｇを添加した後、水２５ｇを１時間かけて添加し、白色のスラリーを得た。さらに、同温にてさらに１時間保持した後、２℃まで冷却した。なお、減圧下での溶媒置換を除くすべての操作は窒素雰囲気下で実施した。得られたスラリーを減圧ろ過し、湿結晶を２℃のエタノール／水＝１／１の混合溶媒１０ｇを用いて洗浄し、さらに、湿結晶を減圧乾燥（２０〜３０℃、１〜３０ｍｍＨｇ）することにより、白色のメナキノール−４の結晶４．８ｇを得た（有姿収率９６モル％）。得られた結晶のメナキノール−４／メナキノン−４の重量比は９４／６、ビタミンＫとしての純度は９９％であった。
【０１０１】
（実施例５）
実施例１と同様にして還元反応、溶媒置換を行い、５ｇのメナキノール−４及び１５ｇのアセトンからなる溶液を得た。この溶液を２５℃にし、攪拌（攪拌所要動力０．３ｋＷ／ｍ3）しながら濃塩酸０.０５ｇを添加した後、水６０ｇを１時間かけて添加し、白色のスラリーを得た。さらに、同温にてさらに１時間保持した後、２℃まで冷却した。なお、減圧下での溶媒置換を除くすべての操作は窒素雰囲気下で実施した。得られたスラリーを減圧ろ過し、湿結晶を２℃のエタノール／水＝１／１の混合溶媒１０ｇを用いて洗浄し、さらに、湿結晶を減圧乾燥（２０〜３０℃、１〜３０ｍｍＨｇ）することにより、白色のメナキノール−４の結晶４．８ｇを得た（有姿収率９６モル％）。得られた結晶のメナキノール−４／メナキノン−４の重量比は９２／８、ビタミンＫとしての純度は９８％であった。
【０１０２】
（実施例６）
ビタミンＫとしてフィロキノンを用いる以外実施例１とまったく同様に還元反応、溶媒置換を行い、５ｇのフィロキノール及び３７．５ｇのエタノールからなる溶液を得た。この溶液を３５℃にし、攪拌（攪拌所要動力０．３ｋＷ／ｍ3）しながら濃塩酸０.０５ｇを添加した後、水３７．５ｇを１時間かけて添加し、白色のスラリーを得た。さらに、同温にてさらに１時間保持した後、２℃まで冷却した。なお、減圧下での溶媒置換を除くすべての操作は窒素雰囲気下で実施した。得られたスラリーを減圧ろ過し、湿結晶を２℃のエタノール／水＝１／１の混合溶媒１０ｇを用いて洗浄し、さらに、湿結晶を減圧乾燥（２０〜３０℃、１〜３０ｍｍＨｇ）することにより、白色のフィロキノールの結晶４．８ｇを得た（有姿収率９６モル％）。得られた結晶のフィロキノール／フィロキノンの重量比は９４／６、ビタミンＫとしての純度は９９％であった。
【０１０３】
（比較例１）
実施例１と同様にして還元反応、溶媒置換を行い、５ｇのメナキノール−４及び１５ｇのノルマルヘキサンからなる溶液を得た。この溶液を２５℃にし、攪拌（攪拌所要動力０．３ｋＷ／ｍ3）しながら−１５℃まで冷却した。なお、減圧下での溶媒置換を除くすべての操作は窒素雰囲気下で実施した。得られたスラリーを減圧ろ過し、湿結晶を２℃のエタノール／水＝１／１の混合溶媒１０ｇを用いて洗浄し、さらに、湿結晶を減圧乾燥（２０〜３０℃、１〜３０ｍｍＨｇ）することにより、白色のメナキノール−４の結晶１．４ｇを得た（有姿収率３８モル％）。得られた結晶のメナキノール−４／メナキノン−４の重量比は４１／５９、ビタミンＫとしての純度は９７％であった。