(57)【要約】【課題】優れたコラーゲン産生促進作用及び表皮角化細胞増殖作用の少なくともいずれかを有し、皮膚の老化を予防及び改善し得る抗老化剤及び該抗老化剤を配合した皮膚化粧料の提供。【解決手段】ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物の抽出物を含有することを特徴とする抗老化剤である。該抗老化剤は、皮膚線維芽細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有する態様が好ましい。前記抗老化剤を有効成分として含有することを特徴とする皮膚化粧料である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物の抽出物を含有することを特徴とする抗老化剤。
【請求項２】
ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物がセキチク（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．）である請求項１に記載の抗老化剤。
【請求項３】
ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物がトコナツ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．ｖａｒ．ｓｅｍｐｅｒｆｌｏｒｅｎｓ）である請求項１に記載の抗老化剤。
【請求項４】
コラーゲン産生促進作用及び表皮角化細胞増殖作用の少なくともいずれかを有する請求項１から３のいずれかに記載の抗老化剤。
【請求項５】
請求項１から４のいずれかに記載の抗老化剤を有効成分として含有することを特徴とする皮膚化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）の抽出物を含有する抗老化剤、及び該抗老化剤を配合した皮膚化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の表皮及び真皮は、表皮細胞、線維芽細胞及びこれらの細胞の外にあって皮膚構造を支持するエラスチン、ヒアルロン酸、コラーゲン等の細胞外マトリックスにより構成されている。若い皮膚においては、線維芽細胞の増殖が活発であり、線維芽細胞、コラーゲン等の皮膚組織の相互作用が恒常性を保つことによって水分保持、柔軟性、弾力性等が確保され、肌は外見的にも張りや艶があってみずみずしい状態に維持される。
【０００３】
ところが、紫外線の照射、空気の著しい乾燥、加齢が進んだりすると、細胞外マトリックスの主要構成成分であるエラスチンやコラーゲンの分解及び変質が生じる。その結果、皮膚の弾力性は低下し、肌は張りを失い、荒れ、シワ等の老化症状を呈するようになる。また、線維芽細胞の増殖が遅くなり、細胞外マトリックスの産生能力が低下することにより、肌は張りや弾力を失い、肌荒れ、シワ等の老化症状を呈するようになる。
このように、皮膚の老化に伴う変化、即ち、シワ、きめの消失、弾力性の低下等には、コラーゲン、エラスチン、ヒアルロン酸等の細胞外マトリックス成分の減少及び変性、並びに線維芽細胞の増殖低下が関与している。従って、コラーゲンの産生を促進することにより、また、線維芽細胞の増殖を促進することにより、皮膚の老化を防止及び改善することができると考えられる。
【０００４】
そこで、コラーゲン産生促進作用、表皮角化細胞増殖作用を有する物質を安全性の点で有利な天然物から取得しようという試みがなされている。コラーゲン産生促進作用を有するものとして、例えば、スターフルーツ葉抽出物（特許文献１参照）、クスノハガシワ抽出物（特許文献２参照）、などが確認されている。また、線維芽細胞増殖作用を有するものとして、例えば、月桃葉抽出物（特許文献３参照）、オニイチゴ抽出物（特許文献４参照）、などが確認されている。
【０００５】
しかしながら、入手が容易で安価であり、安全性の高い天然物系のものであって、皮膚化粧料に使用可能な抗老化剤として十分満足できるものは未だ提供されておらず、その速やかな提供が求められているのが現状である。
【０００６】
【特許文献１】特開２００２−２２６３２３号公報
【特許文献２】特開２００３−１４６８３７号公報
【特許文献３】特開２００２−００３３９０号公報
【特許文献４】特開２００３−１３７８０１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、前記従来における問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、第１に、優れたコラーゲン産生促進作用及び表皮角化細胞増殖作用の少なくともいずれかを有し、皮膚の老化を予防及び改善し得る抗老化剤を提供することを目的とする。
また、本発明は、第２に、本発明の前記抗老化剤を配合した皮膚のシワや弾力の低下の防止及び改善することができる皮膚化粧料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
前記課題を解決するため本発明者が鋭意検討を重ねた結果、ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）の抽出物が、優れたコラーゲン産生促進作用及び表皮角化細胞増殖作用の少なくともいずれかを有し、皮膚の老化を予防及び改善し得る抗老化剤として有効であることを知見した。また、ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）の抽出物を有効成分として含有する皮膚化粧料が、優れた抗老化作用を有することを知見した。
【０００９】
本発明は、本発明者の前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞  ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物の抽出物を含有することを特徴とする抗老化剤である。
＜２＞  ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物がセキチク（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．）である前記＜１＞に記載の抗老化剤である。
＜３＞  ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物がトコナツ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．ｖａｒ．ｓｅｍｐｅｒｆｌｏｒｅｎｓ）である前記＜１＞に記載の抗老化剤である。
＜４＞  コラーゲン産生促進作用及び表皮角化細胞増殖作用の少なくともいずれかを有する前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の抗老化剤である。
＜５＞  前記＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の抗老化剤を有効成分として含有することを特徴とする皮膚化粧料である。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の抗老化剤によると、優れたコラーゲン産生促進作用及び表皮角化細胞増殖作用の少なくともいずれかを通じて、皮膚のシワや弾力の低下の防止及び改善することができる。
また、本発明の抗老化剤は、使用感と安全性に優れているので皮膚化粧料に配合するのに好適なものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
（抗老化剤）
本発明の抗老化剤は、ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物の抽出物を含有してなり、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。
前記抗老化剤は、表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有する。
【００１２】
前記ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物は、ユーラシアの半乾燥地域を中心に、北米の北部やアフリカに３００種類ほど分布しており、多くは、多年草で、対生する葉は線形になり地乾性的な環境に適応する。前記ナデシコ属の植物は、古くから園芸品種として栽培されており、また種間交雑による園芸種が多く作られている。
【００１３】
前記ナデシコ属植物の抽出物に含有される表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有する物質の詳細は不明であるが、植物の抽出に一般に用いられている抽出方法によって、表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有する抽出物を得ることができる。なお、前記ナデシコ属植物の抽出物には、ナデシコ属植物を抽出原料として得られる抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１４】
前記ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、アメリカナデシコ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｂａｒｂａｔｕｓ Ｌ．）、カーネーション（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌｕｓ Ｌ．）、セキチク（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．）、ヒメナデシコ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｄｅｌｔｏｉｄｅｓ Ｌ．）、フジナデシコ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ Ｔｈｕｎｂ．）、トコナデシコ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｐｌｕｍａｒｉｕｓ Ｌ．）、シナノナデシコ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｓｈｉｎａｎｅｎｓｉｓ Ｙａｔａｂｅ）、カワラナデシコ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｓｕｐｅｒｂｕｓ Ｌ．ｖａｒ．ｌｏｎｇｉｃａｌｙｃｉｎｕｓ）、トコナツ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ ｖａｒ．ｓｅｍｐｅｒｆｌｏｒｅｎｓ）等が挙げられる。これらの中でも、優れた表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有することから、セキチク（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．）、トコナツ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ ｖａｒ．ｓｅｍｐｅｒｆｌｏｒｅｎｓ）が好ましい。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上併用してもよい。
【００１５】
前記ナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物の抽出原料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、葉部、茎部、根部、花部、種子又はこれらの混合部位を含む全草を好適に用いることができる。
前記抽出原料であるナデシコ属（Ｄｉａｎｔｈｕｓ）植物は、乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用い粉砕して溶媒抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用されている乾燥機を用いて行ってもよい。なお、前記ナデシコ属は、ヘキサン、ベンゼン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。なお、脱脂等の前処理を行うことにより、ナデシコ属の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００１６】
前記抽出に用いる溶媒としては、水、親水性有機溶媒、又はこれらの混合溶媒を室温又は溶媒の沸点以下の温度で用いることが好ましい。
前記抽出溶媒として使用し得る水としては、例えば、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。従って、前記抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００１７】
前記親水性有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコールなどが挙げられ、これら親水性有機溶媒と水との混合溶媒などを用いることができる。
なお、前記水と親水性有機溶媒との混合溶媒を使用する場合には、低級アルコールの場合は水１０質量部に対して１〜９０質量部、低級脂肪族ケトンの場合は水１０質量部に対して１〜４０質量部添加することが好ましい。多価アルコールの場合は水１０質量部に対して１〜９０質量部添加することが好ましい。
【００１８】
本発明において、抽出原料であるナデシコ属植物から表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有する物質を抽出するにあたって特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温又は還流加熱下で、任意の装置を用いて抽出することができる。
【００１９】
具体的には、抽出溶媒を満たした処理槽に抽出原料としてのナデシコ属植物の全草を投入し、更に必要に応じて時々攪拌しながら、３０分〜２時間静置して可溶性成分を溶出した後、ろ過して固形物を除去し、得られた抽出液から抽出溶媒を留去し、乾燥することにより抽出物が得られる。抽出溶媒量は通常、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）である。抽出条件は、抽出溶媒として水を用いた場合には、通常５０〜９５℃にて１〜４時間程度である。また、抽出溶媒として水とエタノールとの混合溶媒を用いた場合には、通常４０〜８０℃にて３０分〜４時間程度である。なお、溶媒で抽出することにより得られる抽出液は、抽出溶媒が安全性の高いものであればそのまま配合して本発明の抗老化剤として用いることができる。
【００２０】
得られるナデシコ属植物の抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
【００２１】
なお、得られたナデシコ属植物の抽出液はそのままでも抗老化剤として使用することができるが、濃縮液又はその乾燥物としたものの方が利用しやすい。抽出液の乾燥物を得るにあたっては、吸湿性を改善するためにデキストリン、シクロデキストリン等のキャリアーを添加してもよい。また、前記ナデシコ属植物は特有の匂いを有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、皮膚化粧料に添加する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。なお、精製は、具体的には、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等によって行うことができる。
【００２２】
前記セキチクは、別名カラナデシコ、学名Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．のナデシコ科の植物であって、中国原産の多年草であり、園芸品種として知られている。前記セキチクの全草は、必尿器系感染症、無月経等に効能があることが知られているが、前記セキチクの抽出物が、表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有し、皮膚のシワや弾力の低下の防止及び改善することができる抗老化剤として有用であることは、これまで全く知られておらず、これらのことは、本発明者の新知見である。
【００２３】
前記セキチクの抽出物に含有される表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有する物質の詳細は不明であるが、植物の抽出に一般に用いられている抽出方法によって、表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有する抽出物を得ることができる。なお、前記セキチクの抽出物には、セキチクを抽出原料として得られる抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００２４】
前記セキチクの抽出原料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、葉部、茎部、根部、花部、種子又はこれらの混合部位を含む全草を好適に用いることができる。
前記セキチクの抽出方法としては、前記ナデシコ属植物の抽出方法と同様の方法が挙げられる。
【００２５】
前記トコナツは、学名Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ ｖａｒ．ｓｅｍｐｅｒｆｌｏｒｅｎｓのナデシコ科の植物であって、平安時代に中国から渡来したセキチク（石竹：Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．）を江戸時代に改良した園芸品種である。明治の中ごろ、大正の終わり、昭和の初期などにも流行のピークがあり、日本の風土に育った植物だけに耐冬性をもつ。しかし、前記トコナツ抽出物が、表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有し、皮膚のシワや弾力の低下の防止及び改善することができる抗老化剤として有用であることは、これまで全く知られておらず、これらのことは、本発明者の新知見である。
【００２６】
前記トコナツの抽出物に含有される表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有する物質の詳細は不明であるが、植物の抽出に一般に用いられている抽出方法によって、表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを有する抽出物を得ることができる。なお、前記トコナツの抽出物には、トコナツを抽出原料として得られる抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００２７】
前記トコナツの抽出原料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、葉部、茎部、根部、花部、種子又はこれらの混合部位を含む全草を好適に用いることができる。
前記トコナツの抽出方法としては、前記ナデシコ属植物の抽出方法と同様の方法が挙げられる。
【００２８】
本発明の抗老化剤は、優れた表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを通じて、皮膚のシワや弾力の低下の防止及び改善に有用であると共に、高い安全性を有しており、以下の本発明の皮膚化粧料に好適に使用することができる。
【００２９】
（皮膚化粧料）
本発明の皮膚化粧料は、本発明の前記抗老化剤を有効成分として含有してなり、更に必要に応じて適宜選択したその他の成分を含有してなる。
【００３０】
ここで、前記皮膚化粧料の用途としては、特に制限はなく、各種用途から適宜選択することができ、例えば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ゼリー、リップクリーム、口紅、入浴剤、アストリンゼント、などが挙げられる。
【００３１】
前記抗老化剤の前記皮膚化粧料全体に対する配合量は、皮膚化粧料の種類や抽出物の生理活性等によって適宜調整することができるが、前記ナデシコ属植物の抽出物に換算して０．００１〜１０質量％が好ましい。
【００３２】
前記抗老化剤を配合する皮膚化粧料は、更に必要に応じて本発明の効果を損なわない範囲で、その皮膚化粧料の製造に通常使用される各種主剤及び助剤、その他成分を使用することができる。本発明の前記抗老化剤を配合する皮膚化粧料は、皮膚の老化防止及び改善に関し、本発明の前記抗老化剤のみが主剤となるものに限られるわけではない。
【００３３】
−その他の成分−
前記その他の成分としては、抗老化作用の妨げにならない限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択した成分が挙げられ、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、抗酸化・活性酸素除去剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料、などが挙げられる。これらの成分は、前記ナデシコ属植物抽出物と共に併用した場合、相乗的に作用して、通常期待される以上の優れた使用効果をもたらすことがある。
【００３４】
本発明の皮膚化粧料は、皮膚に使用した場合に高い安全性を有し、優れた表皮角化細胞増殖作用及びコラーゲン産生促進作用の少なくともいずれかを効果的に達成することができ、皮膚のシワや弾力の低下の防止及び改善に有用である。
【００３５】
なお、本発明の抗老化剤、及び皮膚化粧料は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【実施例】
【００３６】
以下、本発明の実施例を説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。
（製造例１）
−セキチク水抽出物の調製−
セキチク（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．）の全草の粗粉砕物１００ｇを水１０００ｍＬに投入し、８０℃にて３時間加熱抽出を行った。その後、ろ過し、ろ液を減圧下にて濃縮し、乾燥してセキチク水抽出物を得た。得られた抽出物の収率を表１に示す。
【００３７】
（製造例２）
−セキチク３０質量％抽出物の調製−
セキチク（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．）の全草の粗粉砕物１００ｇを３０質量％エタノール（水とエタノールとの質量比７：３）１０００ｍＬに投入し、８０℃にて３時間加熱抽出を行った。その後、ろ過し、ろ液を減圧下にて濃縮し、乾燥してセキチク３０質量％エタノール抽出物を得た。得られた抽出物の収率を表１に示す。
【００３８】
（製造例３）
−セキチク６０質量％抽出物の調製−
セキチク（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．）の全草の粗粉砕物１００ｇを６０質量％エタノール（水とエタノールとの質量比２：３）１０００ｍＬに投入し、８０℃にて３時間加熱抽出を行った。その後、ろ過し、ろ液を減圧下にて濃縮し、乾燥してセキチク６０質量％エタノール抽出物を得た。得られた抽出物の収率を表１に示す。
【００３９】
（製造例４）
−セキチク８０質量％抽出物の調製−
セキチク（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．）の全草の粗粉砕物１００ｇを８０質量％エタノール（水とエタノールとの質量比１：４）１０００ｍＬに投入し、８０℃にて３時間加熱抽出を行った。その後、ろ過し、ろ液を減圧下にて濃縮し、乾燥してセキチク８０質量％エタノール抽出物を得た。得られた抽出物の収率を表１に示す。
【００４０】
【表１】
2006137742.tif 000002
【００４１】
（実施例１）
−コラーゲン産生促進作用試験−
ヒト正常線維芽細胞（Ｄｅｔｒｏｉｔ  ５５１）を１０質量％ＦＢＳ、１質量％ＮＥＡＡ、及び１ｍｍｏｌ／Ｌピルビン酸ナトリウム含有ＭＥＭを用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を２×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬの濃度に上記培地で希釈した後、９６ｗｅｌｌマイクロプレートに１ｗｅｌｌ当たり１００μＬずつ播種し、一晩培養した。培養終了後、培地を抜き、０．５質量％ＦＢＳ含有ＭＥＭに溶解した被験試料を各ｗｅｌｌに１５０μＬ添加し、３日間培養した。培養後、各ｗｅｌｌの培地中のコラーゲン量をＥＬＩＳＡ法により測定した。
これらの結果から、下記数式１により、コラーゲン産生促進率を求めた。試料溶液が濃度２００ｐｐｍの時の結果を表２に示す。
【００４２】
＜数式１＞
コラーゲン産生促進率（％）＝（Ａ／Ｂ）×１００
ただし、前記数式１中、Ａは被験試料添加時のコラーゲン量を表す。Ｂは被験試料無添加時のコラーゲン量を表す。
【００４３】
【表２】
2006137742.tif 000003
表２の結果から、製造例１〜４のセキチク抽出物がコラーゲン産生促進作用を有することが確認できた。
【００４４】
（実施例２）
−皮膚線維芽細胞増殖促進作用試験−
ヒト正常皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）を１０質量％ＦＢＳ含有α−ＭＥＭを用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を７．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬの濃度に５質量％ＦＢＳ含有α−ＭＥＭで希釈した後、９６ｗｅｌｌプレートに１ｗｅｌｌ当たり１００μＬずつ播種し、一晩培養した。培養終了後、５質量％ＦＢＳ含有α−ＭＥＭで溶解した被験試料を各ｗｅｌｌに１００μＬ添加し、３日間培養した。皮膚線維芽細胞増殖作用は、ＭＴＴアッセイ法を用いて測定した。培養終了後、各ｗｅｌｌから１００μＬずつ培地を抜き、終濃度５ｍｇ／ｍＬでＰＢＳ（−）に溶解したＭＴＴを各ｗｅｌｌに２０μＬずつ添加した。４．５時間培養した後に、１０質量％ＳＤＳを溶解した０．０１ｍｏｌ／Ｌ塩酸溶液を各ｗｅｌｌに１００μＬずつ添加し、一晩培養した後、波長５７０ｎｍにおける吸光度を測定した。同時に濁度として波長６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。また、同様の方法で空試験を行い補正した。
これらの結果から、下記数式２により、皮膚線維芽細胞増殖促進率を求めた。試料溶液が濃度２００ｐｐｍの時の結果を表３に示す。
【００４５】
＜数式２＞
皮膚線維芽細胞増殖促進率（％）＝〔（Ｓｔ−Ｓｂ）／（Ｃｔ−Ｃｂ）〕×１００
ただし、前記数式２中、Ｓｔは被験試料を添加した細胞での吸光度を表す。Ｓｂは被験試料を添加した空試験の吸光度を表す。Ｃｔは被験試料を添加しない細胞での吸光度を表す。Ｃｂは被験試料を添加しない空試験の吸光度を表す。
【００４６】
【表３】
2006137742.tif 000004
表３の結果から、製造例１〜４のセキチク抽出物が皮膚線維芽細胞増殖促進作用を有することが確認できた。
【００４７】
（実施例３）
−表皮角化細胞増殖促進作用試験−
正常ヒト新生児包皮角化細胞（ＮＨＥＫ）を正常ヒト表皮角化細胞長期培養用増殖培地（ＥｐｉＬｉｆｅ−ＫＧ２）を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を１．５×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍｌの濃度にＥｐｉＬｉｆｅ−ＫＧ２で希釈した後、コラーゲンコートした９６ｗｅｌｌプレートに１ｗｅｌｌ当たり１００μLずつ播種し、一晩培養した。培養終了後、ＥｐｉＬｉｆｅ−ＫＧ２で溶解した被験試料を各ｗｅｌｌに１００μＬ添加し、３日間培養した。表皮角化細胞増殖作用は、ＭＴＴアッセイ法を用いて測定した。培養終了後、培地を抜き、終濃度０．４ｍｇ／ｍＬでＰＢＳ（−）に溶解したＭＴＴを各ｗｅｌｌに１００μＬずつ添加した。２時間培養した後に、細胞内に生成したブルーホルマザンを２−プロパノール１００μＬで抽出した。抽出後、波長５７０ｎｍにおける吸光度を測定した。同時に濁度として波長６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。また、同様の方法で空試験を行い補正した。
これらの結果から、下記数式３により、表皮角化細胞増殖促進率を求めた。なお、試料溶液が濃度３．１２５ｐｐｍの時の結果を表４に示す。を添加しない空試験の吸光度を表す。
【００４８】
＜数式３＞
表皮角化細胞増殖促進率（％）＝Ｓｔ／Ｃｔ×１００
ただし、前記数式３中、Ｓｔは被験試料を添加した細胞での吸光度を表す。Ｓｂは被験試料を添加しない細胞での吸光度を表す。
【００４９】
【表４】
2006137742.tif 000005
【００５０】
（配合実施例１）  −乳液−
下記の組成の乳液を常法により製造した。
セキチク水抽出物（製造例１）                            １．０ｇ
ローズマリー抽出物                                      ０．５ｇ
モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン            １．０ｇ
テトラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビット            １．５ｇ
親油型モノステアリン酸グリセリン                        １．０ｇ
ステアリン酸                                            ０．５ｇ
ベヘニルアルコール                                      １．５ｇ
パルミチン酸セチル                                      ０．５ｇ
スクワラン                                            １０．０ｇ
メチルポリシロキサン                                    ０．５ｇ
香料                                                      適量
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）                    ０．１５ｇ
１，３−ブチレングリコール                              ７．０ｇ
キサンタンガム                                          ０．１ｇ
精製水                                                    残部    
合計                                                    １００ｇ
【００５１】
（配合実施例２）  −乳液−
下記の組成の乳液を常法により製造した。
セキチク３０質量％エタノール抽出物（製造例２）          １．０ｇ
ローズマリー抽出物                                      ０．５ｇ
モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン            １．０ｇ
テトラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビット            １．５ｇ
親油型モノステアリン酸グリセリン                        １．０ｇ
ステアリン酸                                            ０．５ｇ
ベヘニルアルコール                                      １．５ｇ
パルミチン酸セチル                                      ０．５ｇ
スクワラン                                            １０．０ｇ
メチルポリシロキサン                                    ０．５ｇ
香料                                                      適量
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）                    ０．１５ｇ
１，３−ブチレングリコール                              ７．０ｇ
キサンタンガム                                          ０．１ｇ
精製水                                                    残部    
合計                                                    １００ｇ
【００５２】
（配合実施例３）  −クリーム−
下記組成のクリームを常法により製造した。
セキチク６０質量％エタノール抽出物（製造例３）          １．０ｇ
ニンジン抽出物                                          １．０ｇ
モノステアリン酸ポリエチレングリコール                  ２．０ｇ
自己乳化型モノステアリン酸グリセリン                    ５．０ｇ
ステアリン酸                                            ２．０ｇ
セタノール                                              ２．０ｇ
スクワラン                                            １２．０ｇ
マカダミアナッツ油                                      ３．０ｇ
メチルポリシロキサン                                    ０．２ｇ
香料                                                      適量
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）                    ０．１５ｇ
１，３−ブチレングリコール                              ７．０ｇ
キサンタンガム                                          ０．２ｇ
精製水                                                    残部    
合計                                                    １００ｇ
【００５３】
（配合実施例４）  −美容液−
下記組成の美容液を常法により製造した。
セキチク８０質量％エタノール抽出物（製造例４）          １．０ｇ
カミツレ抽出物                                          １．０ｇ
ソウハクヒ抽出物                                        ０．５ｇ
カルボキシビニルポリマー                                ０．２ｇ
キサンタンガム                                          ０．２ｇ
ヒアルロン酸ナトリウム                                  ０．１ｇ
ポリエチレングリコール                                  ３．０ｇ
グリセリン                                              ６．０ｇ
１，３−ブチレングリコール                              ３．０ｇ
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）                    ０．１５ｇ
Ｌ−アルギニン                                        ０．１５ｇ
精製水                                                  残部    
合計                                                    １００ｇ
【００５４】
（製造例５）
−トコナツ水抽出物の調製−
トコナツ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．ｖａｒ．ｓｅｍｐｅｒｆｌｏｒｅｎｓ）の全草の粗粉砕物１００ｇを水１０００ｍＬに投入し、８０℃にて３時間加熱抽出を行った。その後、ろ過し、ろ液を減圧下にて濃縮し、乾燥してトコナツ水抽出物を得た。得られた抽出物の収率を表５に示す。
【００５５】
（製造例６）
−トコナツ３０質量％抽出物の調製−
トコナツ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．ｖａｒ．ｓｅｍｐｅｒｆｌｏｒｅｎｓ）の全草の粗粉砕物１００ｇを３０質量％エタノール（水とエタノールとの質量比７：３）１０００ｍＬに投入し、８０℃にて３時間加熱抽出を行った。その後、ろ過し、ろ液を減圧下にて濃縮し、乾燥してトコナツ３０質量％エタノール抽出物を得た。得られた抽出物の収率を表５に示す。
【００５６】
（製造例７）
−トコナツ６０質量％抽出物の調製−
トコナツ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．ｖａｒ．ｓｅｍｐｅｒｆｌｏｒｅｎｓ）の全草の粗粉砕物１００ｇを６０質量％エタノール（水とエタノールとの質量比２：３）１０００ｍＬに投入し、８０℃にて３時間加熱抽出を行った。その後、ろ過し、ろ液を減圧下にて濃縮し、乾燥してトコナツ６０質量％エタノール抽出物を得た。得られた抽出物の収率を表５に示す。
【００５７】
（製造例８）
−トコナツ８０質量％抽出物の調製−
トコナツ（Ｄｉａｎｔｈｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｌ．ｖａｒ．ｓｅｍｐｅｒｆｌｏｒｅｎｓ）の全草の粗粉砕物１００ｇを８０質量％エタノール（水とエタノールとの質量比１：４）１０００ｍＬに投入し、８０℃にて３時間加熱抽出を行った。その後、ろ過し、ろ液を減圧下にて濃縮し、乾燥してトコナツ８０質量％エタノール抽出物を得た。得られた抽出物の収率を表５に示す。
【００５８】
【表５】
2006137742.tif 000006
【００５９】
（実施例４）
製造例５〜８のトコナツ抽出物を実施例１と同様のコラーゲン産出促進作用試験を行った。なお、試料溶液が濃度２００ｐｐｍの時の結果を表６に示す。
【００６０】
【表６】
2006137742.tif 000007
表６の結果から、製造例５〜８のトコナツ抽出物がコラーゲン産生促進作用を有することが確認できた。
【００６１】
（実施例５）
製造例５〜８のトコナツ抽出物を実施例２と同様の皮膚線維芽細胞増殖促進作用試験を行った。なお、試料溶液が濃度１００ｐｐｍ、２００ｐｐｍの時の結果を表７に示す。
【００６２】
【表７】
2006137742.tif 000008
表６の結果から、製造例５〜８のトコナツ抽出物が皮膚線維芽細胞増殖促進作用を有することが確認できた。
【００６３】
（実施例６）
製造例５〜８のトコナツ抽出物を実施例３と同様の表皮角化細胞増殖作用試験を行った。なお、試料溶液が濃度１２．５ｐｐｍ、３．１２５ｐｐｍの時の結果を表８に示す。
【００６４】
【表８】
2006137742.tif 000009
【産業上の利用可能性】
【００６５】
本発明の抗老化剤は、コラーゲン産生促進作用及び表皮角化細胞増殖作用の少なくともいずれかを通じて、皮膚のシワや弾力の低下の防止及び改善に有用であり、例えば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ゼリー、リップクリーム、口紅、入浴剤、アストリンゼント、などに幅広く用いられる。