(57)【要約】【課題】  果実風味の無果汁飲料や、果汁含量の低い果汁飲料に対し、高果汁飲料のような風味、コク、ボリューム感・濃厚感を付与し、風味を改善する素材の提供。。【解決手段】  果実に含まれる微量成分であるビセニン−２からなる渋味付与剤、ビセニン−２を有効量含有することを特徴とする渋味付与剤組成物、ビセニン−２を１０２〜１０５ｐｐｍ含有することを特徴とする香味料。これらの素材を飲食物に添加することにより爽やかな渋味を付与することができ、その結果、より天然らしいコク、ボリューム感・濃厚感を有する飲食物を提供することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ビセニン−２からなることを特徴とする渋味付与剤。
【請求項２】
ビセニン−２を有効成分として含有することを特徴とする渋味付与剤組成物。
【請求項３】
ビセニン−２を含有することを特徴とする香味料。
【請求項４】
ビセニン−２の含有量が１０２〜１０５ｐｐｍであることを特徴とする請求項３に記載の香味料。
【請求項５】
請求項３又は４に記載の香味料を添加したことを特徴とする飲食物。
【請求項６】
ビセニン−２を１０−１〜１０２ｐｐｍ添加したことを特徴とする飲食物。
【請求項７】
ビセニン−２が柑橘果実由来であることを特徴とする請求項１に記載の渋味付与剤。
【請求項８】
ビセニン−２が柑橘果実由来であることを特徴とする請求項３又は４に記載の香味料。
【請求項９】
ビセニン−２が柑橘果実由来であることを特徴とする請求項５又は６に記載の飲食物。
【請求項１０】
果汁風味の無果汁飲料又は低果汁飲料に対してビセニン−２を１０−１〜１０２ｐｐｍ添加することを特徴とする果汁感増強方法。
【請求項１１】
ビセニン−２が柑橘果実由来であることを特徴とする請求項１０に記載の果汁感増強方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は渋味付与剤、香味料及びこれらを含有する飲食物並びに果汁感増強方法に関する。さらに詳しくは、ビセニン−２からなることを特徴とする渋味付与剤、ビセニン−２を含有することを特徴とする香味料、該香味料を含有することを特徴とする飲食物並びにビセニン−２を添加することを特徴とする飲食物への果汁感増強方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、清涼飲料、なかでも果汁風味の無果汁飲料又は低果汁飲料は巨大な市場を持っている。そしてこれら果汁風味の無果汁飲料又は低果汁飲料には、糖を低カロリーの甘味料で代用した組成が急速に増えている。しかしながら、無果汁飲料又は果汁含量が１から３０％未満の低果汁飲料は、果汁含量が５０％以上の飲料に比べると味が単調で、人工的な風味を持つという欠点があった。このため、無果汁又は果汁含量の低い果汁飲料に対して、高果汁飲料のような風味、コク、ボリューム感・濃厚感を付与することのできる素材が求められていた。
【０００３】
果汁感を向上させる素材としては、例えば内分岐環状構造部分と外分岐構造部分とを有する、重合度が５０以上であるグルカンを有効成分として含有することを特徴とする果汁含有飲食物の果汁感向上剤（特許文献１）が提案されているが、無果汁又は果汁含量の低い果汁飲料に対して高果汁飲料のような風味、コク、ボリューム感・濃厚感を付与するという観点からは十分なものであると言うことはできなかった。一方、飲食物の風味改善という観点からは、ヘスペリジン配糖体を添加することで果汁の苦味をマスキングし、果汁感を向上させる方法（特許文献２）、フェノキシアルカン酸誘導体を添加することで飲食物に苦味・渋味を与えることにより風味を改善すること（特許文献３）などが提案されているが、更なる技術開発が求められていた。
【特許文献１】特開２００３−２８９８３６号公報
【特許文献２】特開平１１−３１８３７９号公報
【特許文献３】ＷＯ９５／００４４７８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明が解決しようとする問題点は、従来の素材では無果汁又は果汁含量の低い果汁飲料などの飲食物に対して、高果汁飲料のような風味、コク、ボリューム感・濃厚感を付与することが困難な点である。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは上記課題を解決すべく果実に含まれる成分を各種分画し、検索した結果、果実に含まれる渋味成分であるビセニン−２を添加することにより、ストレート果汁が有する濃厚な果汁感が付与されることを見い出し、本発明を完成させた。
【０００６】
すなわち本発明は、ビセニン−２からなることを特徴とする渋味付与剤であり、また、ビセニン−２を有効成分として含有することを特徴とする渋味付与剤組成物であり、また、ビセニン−２を含有することを特徴とする香味料であり、詳しくは、ビセニン−２の含有量が１０２〜１０５ｐｐｍであることを特徴とする前記香味料であり、また、前記香味料を添加したことを特徴とする飲食物であり、また、ビセニン−２を１０−１〜１０２ｐｐｍ添加したことを特徴とする飲食物であり、また、ビセニン−２が柑橘果実由来であることを特徴とする前記渋味付与剤であり、また、ビセニン−２が柑橘果実由来であることを特徴とする前記香味料であり、また、ビセニン−２が柑橘果実由来であることを特徴とする前記飲食物であり、また、果汁風味の無果汁飲料又は低果汁飲料に対してビセニン−２を１０−１〜１０２ｐｐｍ添加することを特徴とする果汁感増強方法であり、詳しくは、ビセニン−２が柑橘果実由来であることを特徴とする前記果汁感増強方法である。
【発明の効果】
【０００７】
本発明の渋味付与剤は、果汁を含まないか、もしくは低濃度の果汁を含む果汁風味の飲食物を、高濃度の果汁を含む飲食物の呈味に近づけるとともに爽快な風味を増強することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明のビセニン−２ (ｖｉｃｅｎｉｎ―２)は、６，８−ジ−Ｃ−β−グルコシルアピゲニン  （６，８−Ｄｉ−Ｃ−β−ｇｌｕｃｏｓｙｌａｐｉｇｅｎｉｎ）であり、化学式（１）に示される構造の物質である。（図中ｇｌｃはグルコース残基を表す。）
ＣＡＳ番号：２３６６６−１３−９    
組成式：Ｃ２７Ｈ３０Ｏ１５
分子量：５９４．５２
【０００９】
【化１】
2006238829.tif 000002
【００１０】
ビセニン−２は柑橘類の果汁、果皮、葉、スミレの草体、茶葉等に含まれることが知られている。本発明に用いる場合、十分に精製されたものであれば、いずれの起源のものであっても問題なく使用できる。また、ビセニン−２は必ずしも十分に精製したものでなくとも、その効果を有せば粗精製物として用いることも経済的に有利な場合がある。ビセニン−２を粗精製物の形で使用する場合には、その原料は食経験のあるものが望ましい。ビセニン−２はオレンジ等の柑橘類の果汁、果皮から単離することができるが、そのほかの起源であってもよく、また有効量のビセニン−２を含み、香や味、色が許容できる範囲であれば、粗抽出物や、脱色などの簡単な精製操作を行なっただけの状態であってもよい。例えばビセニン−２又はビセニン−２の粗精製物はＣｈｅｍｉｃａｌ＆Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  Ｖｏｌ．５１，Ｐ．１２０４−１２０７，２００３又は日本農芸化学会誌, Ｖｏｌ．５８，ｐ．１３７−１４３，１９８４記載の方法で得ることができる。
【００１１】
またビセニン−２又はビセニン−２の粗精製物は、柑橘類の果汁又は果皮の水又は水−エタノール抽出液から、スチレン−ジビニルベンゼン共重合物などの合成吸着樹脂等による吸着、及びこの樹脂をエタノール又は水−エタノール混合物などの適当な極性を持つ溶媒で溶出する方法等でも得ることができる。こうして得られたビセニン−２粗精製物は不純物を含むが、香味に問題が無ければそのまま使用することができる。この粗精製物は必要に応じてさらに濾過、濃縮、活性炭による脱臭、脱色処理、液−液分配、逆相クロマトグラフィー、順相クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、再結晶等の公知の技術により精製することができる。また酵素処理によりヘスペリジンなどの難溶解性の不純物を分解する方法を組み合わせることも有効である。本発明の渋味付与剤をビセニン−２粗精製物の形態で用いるときは、該粗精製物はビセニン−２を固形分当たり０．１質量％以上含む必要がある。本発明の効果を高め、使用性を向上させるという観点からは、さらには２質量％以上含むものが望ましい。
【００１２】
こうして得られたビセニン−２、又はその粗精製物は公知の方法で製剤化を行うことができる。例えば、水、エタノール、グリセリンなどの飲食可能な溶媒で溶液又はスラリーとする、若しくは凍結乾燥、又は噴霧乾燥を行い粉末にする、等である。このときデキストリンや糖、果汁等の飲食物、を加えても良いし、界面活性剤、調味料、苦味料、酸味料、香料、強化剤、抗酸化剤、色素等の食品添加物を加えても良い。またフラボノイド誘導体、キナ酸などを含有する風味改善剤等を添加することもできる。
【００１３】
ビセニン−２又はその粗精製物、それらの製剤を飲食物に添加する場合、その添加量はビセニン−２として１０−１〜１０２ｐｐｍの濃度で添加されることが望ましく、特に効果的に用いるためには１〜５０ｐｐｍの濃度で添加することが好適である。そのような濃度で添加する場合においては、ビセニン−２を香味料の中に一定濃度含有させ、該香味料を添加することが使用性に優れており、該香味料が果実香味料であるときに特に有効である。当該香味料にビセニン−２を含有される場合は、その濃度は１０２〜１０５ｐｐｍが適当であり、本発明の効果をより有効に発揮するためには１０３〜１０４ｐｐｍの濃度がより好ましい。
【００１４】
本発明の渋味付与剤は飲食物一般に用いることができ、本発明でいう飲食物とは食品、飲料、香辛料、調味料、医薬品など飲食に供することのできるものをいう。本発明の効果は飲食物に爽やかな渋味を付与するものであるが、その効果は、果汁のもつ濃厚な果汁感を付与するときに最も効果的であることから、本発明は果汁風味の飲食物、特に果汁風味でありながら無果汁若しくは低果汁の飲食物に有効であり、典型的には、果汁風味の無果汁若しくは低果汁の飲料に用いられる。
【００１５】
以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明は実施例の記載に限定されるものではない。
【実施例】
【００１６】
［参考例１］ビセニン−２粗精製物Ａ
５倍濃縮バレンシアオレンジ果汁（宮崎農協より購入）１ｋｇに蒸留水４ｋｇを加えて希釈した。ここに合成吸着樹脂（商品名ＳＰ−７０三菱化学株式会社製）１００ｍｌを不織布の袋に詰めて投入し、１２時間撹拌しながらビセニン−２を吸着させた。合成吸着樹脂を取り出し、蒸留水で洗浄した後、３０％のエタノール水溶液でビセニン−２を溶出した。溶出液から、エバポレーター及び凍結乾燥機により溶媒を除去し、ビセニン−２を１．６質量％含有するビセニン−２粗精製物Ａを５．０ｇ得た。
【００１７】
［参考例２］ビセニン−２粗精製物Ｂ
５倍濃縮バレンシアオレンジ果汁（宮崎農協より購入）１ｋｇに蒸留水４ｋｇを加えて希釈した。ここに合成吸着樹脂（商品名ＳＰ−７０三菱化学株式会社製）１００ｍｌを不織布の袋に詰めて投入し、１２時間撹拌しながらビセニン−２を吸着させた。合成吸着樹脂を取り出し、蒸留水で洗浄した後、９５％のエタノール水溶液でビセニン−２を溶出した。溶出液から、エバポレーター及び凍結乾燥機により溶媒を除去し、ビセニン−２を１．１質量％含有するビセニン−２粗精製物Ｂを６．２５ｇ得た。
【００１８】
［参考例３］ビセニン−２粗精製物Ｃ
５倍濃縮バレンシアオレンジ果汁（宮崎農協より購入）１ｋｇに蒸留水４ｋｇを加えて希釈した。ヘスペリジナーゼ（商品名  可溶性ヘスペリジナーゼ<タナベ>２号  田辺製薬株式会社製）５０ｇを添加し、４０℃で１３時間ヘスペリジンを分解した後、ここに合成吸着樹脂（商品名ＳＰ−７０三菱化学株式会社製）１００ｍｌを不織布の袋に詰めて投入し、１２時間撹拌しながらビセニン−２を吸着させた。合成吸着樹脂を取り出し、蒸留水で洗浄した後、３０％のエタノール水溶液でビセニン−２を溶出した。溶出液から、エバポレーター及び凍結乾燥機により溶媒を除去し、ビセニン−２を２．４質量％含有するビセニン−２粗精製物Ｃを５．１ｇ得た。
【００１９】
［参考例４］ビセニン−２精製物Ｅ
ビセニン−２粗精製物Ａを１０質量％になるように１０％のエタノール溶液に懸濁し、不溶性の沈殿（主にヘスペリジン）を除去した後、ＬＨ−２０（アマシャム  バイオサイエンス株式会社製）を用いたゲル濾過クロマトグラフィーに供した。１０％のエタノール水溶液により順次溶出した画分の３３５ｎｍにおける吸光度をモニターし、ビセニン−２を含む画分を分取した。この画分の溶媒除去を行いビセニン−２粗精製物Ｄ  ２５０ｍｇを得た。ついでビセニン−２粗精製物Ｄの１０質量％エタノール溶液を室温で静置することで、淡黄色の結晶を得た。この結晶を１０％エタノールで２回洗浄した後乾燥し、ビセニン−２を９５質量％含有するビセニン−２精製物Ｅを６０ｍｇ得た。
【００２０】
［参考例５］ビセニン−２精製物Ｆ
ビセニン−２粗精製物Ａを１０質量％になるように１０％のエタノール溶液に懸濁し、不溶性の沈殿（主にヘスペリジン）を除去した後、ＬＨ−２０（アマシャム  バイオサイエンス株式会社製）を用いたゲル濾過クロマトグラフィーに供した。１０％のエタノール水溶液により順次溶出した画分の３３５ｎｍにおける吸光度をモニターし、ビセニン−２を含む画分を分取した。この画分の溶媒除去を行いビセニン−２粗精製物Ｄ  ２５０ｍｇを得た。ついでビセニン−２粗精製物Ｄを１０質量％になるように１０％エタノールに溶解し、浸水型逆相系充填剤ＯＤＳ（ナカライテスク株式会社製「Ｃｏｓｍｏｓｉｌ  ７５  Ｃ１８−ＯＰＮ」）を用いて分画した。水：エタノール＝９０：１０から順次エタノール濃度を上げ、溶出した溶出物の２８０ｎｍにおける吸光度をモニターすることにより、ビセニン−２を含む画分を分取した。この画分の溶媒を除去し、淡黄色の結晶として２８０ｎｍにおけるＨＰＬＣ純度９９％のビセニン−２精製物Ｆ４０ｍｇを得た。
【００２１】
ビセニン−２精製物Ｆのメタノール溶液のＵＶスペクトルは、２７０ｎｍ及び３３５ｎｍに吸収極大がみられた。プロトン及びカーボン１３核磁気共鳴スペクトルの測定結果を以下示す。測定にはブルカーバイオスピン株式会社製ＡＶＡＮＣＥ４００を用い、磁場強度は４００ＭＨｚ、溶媒は重水を加えたＤＭＳＯ−ｄ６、測定温度は３７℃とした。スペクトルデータを、δ：ｐｐｍ、カップリング定数Ｊ：Ｈｚ単位で表し、シグナルの形はシングレットをｓ、ダブレットをｄ、線幅の広がったシングレットをｂｒ ｓ、線幅の広がったダブレットをｂｒ ｄ、マルチマーをｍで表した。またスペクトルに相当する原子の位置を、例えば１位の炭素はＣ−１、これに結合したプロトンはＨ−１のように示した。
【００２２】
ビセニン-２精製物Ｆのプロトン核磁気共鳴スペクトルは、δ: ６．７６（ｓ，Ｈ−３）、８．００（ｄ，Ｊ＝８．０,  Ｈ−２’,６’）、６．９３（ｍ，Ｊ＝８．０，Ｈ−３’，５’）、４．８３（ｄ，Ｊ＝１０．０，Ｈ−１’’）、３．５０（ｍ，Ｈ−２’’）、３．３７（ｍ，Ｈ−３’’）、３．３８（ｍ，Ｈ−５’’）、３．６０（ｍ，Ｈ−６’’）、３．６５（ｍ，Ｈ−６’’）、４．７７（ｄ，Ｊ＝１０．０，Ｈ−１’’’）、３．８９（ｍ，Ｈ−２’’’）、３．３２（ｍ，Ｈ−３’’’）、３．２５（ｍ，Ｈ−５’’’）、３．５３（ｍ，Ｈ−６’’’）、３．７６（ｍ，Ｈ−６’’’）であった。またこの試料についてＮＯＥＳＹを測定したところ８．００（ｄ，Ｊ＝８．０，Ｈ−２’，６’）と４．７７（ｄ，Ｊ＝１０．０，Ｈ−１’’’）及び３．８９（ｍ，Ｈ−２’’’）の間に相関が見られた。またこの試料のカーボン１３核磁気共鳴スペクトルはδ：１６４．５（Ｃ−２）、１０３．１（Ｃ−３）、１８２．６（Ｃ−４）、１０４．３（Ｃ−４ａ）、１５８．６（Ｃ−５）、１０７．５（Ｃ−６）、１６１．３（Ｃ−７）、１０５．５（Ｃ−８）、１５５．５（Ｃ−８ａ）、１２１．９（Ｃ−１’）、１２９．３（Ｃ−２’，６’）、１１６．２（Ｃ−３’，５’）、１６１．０（Ｃ−４’）、７４．４（Ｃ−１’’）、７２．２（Ｃ−２’’）、７７．８（Ｃ−３’’）、８１．１（Ｃ−５’’）、６０．１（Ｃ−６’’）、７３．６（Ｃ−１’’’）、７１．３（Ｃ−２’’’）、７８．９（Ｃ−３’’’）、８２．０（Ｃ−５’’’）、６１．６（Ｃ−６’’’）であった。ビセニン−２精製物Ｆに少量の炭酸ナトリウムを添加した場合のプロトン核磁気共鳴スペクトルは、δ：６．５１（ｂｒ  ｓ，Ｈ−３）、７．９３（ｄ，Ｊ＝７．６，Ｈ−２’，６’）、６．９４（ｄ，Ｊ＝８．８，Ｈ−３’，５’）、４．９１（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１０．０，Ｈ−１’’）、３．９０（ｍ，Ｈ−２’’）、３．３８（ｍ，Ｈ−３’’）、４．７３（ｄ，Ｊ＝１０．０，Ｈ−１’’’）、４．０７（ｍ，Ｈ−２’’’）、３．３２（ｍ，Ｈ−３’’’）であった。
【００２３】
［試験例１］
本発明のビセニン−２について、熟練したパネル１０名により風味の官能評価を行った。評価サンプルとしては参考例４のビセニン−２精製物Ｅを用い、香味の評価と水中での閾値の測定を行った。その結果、ビセニン−２は爽やかな渋味を有し、その閾値は４３ｐｐｍであることが判った。この値は、一般に知られているカテキン（閾値＝１２０ｐｐｍ：Journal of AGRICULTURAL and FOOD CHEMISTRY 2004, Vol:52, p3498-3508）と比較して有意に低い値である。
【００２４】
［実施例１］
参考例１のビセニン−２粗精製物Ａ２．０ｇを、エタノールの５０質量％水溶液３８．０ｇに加え十分に撹拌、抽出した。この懸濁液を濾過して沈殿を除去し、ビセニン−２を０．０８質量％含有する本発明の渋味付与剤組成物を調製した。このものを蒸留水で１．０質量％になるように希釈し安定性を試験したところ、経時的な濁り、沈殿等は見られなかった。
【００２５】
［実施例２］
参考例２のビセニン−２粗精製物Ｂ２．５ｇを、エタノールの５０質量％水溶液３７．５ｇに加え十分に撹拌、抽出した。この懸濁液を濾過して沈殿を除去し、ビセニン−２を０．０７質量％含有する本発明の渋味付与剤組成物を調製した。このものを蒸留水で１．０質量％になるように希釈し安定性を試験したところ、経時的な濁り、沈殿等は見られなかった。
【００２６】
［実施例３］
参考例３のビセニン−２粗精製物Ｃ  ２．０ｇを、エタノールの５０質量％水溶液３８．０ｇで溶解し、ビセニン−２を０．１２質量％含有する本発明の渋味付与剤組成物を調製した。このものを蒸留水で１．０質量％になるように希釈し安定性を試験したところ、経時的な濁り、沈殿等は見られなかった。
【００２７】
［実施例４］
参考例４ビセニン−２精製物０．４ｇを、エタノールの５０質量％水溶液４９．６ｇで溶解し、本発明の渋味付与剤組成物を調製した。このものを蒸留水で１．０質量％になるように希釈し安定性を試験したところ、経時的な濁り、沈殿等は見られなかった。
【００２８】
［試験例２］
本発明の渋味付与剤組成物による果汁飲料の果汁感向上効果を官能評価により確認した。官能評価には訓練された専門パネル１０名を用いた。表１記載の処方による果汁飲料に対して本発明の渋味付与剤組成物を添加した飲料を、評価者には内容がわからない状態で提示し、別途対照として提示した無添加の果汁飲料を４点とした場合の、各飲料の濃厚感（天然果汁らしさ）及び嗜好性を１から７の数値として表した。数字が増えるほど評価が良いことを示す。評価結果の平均値を表２に示した。
【００２９】
【表１】
2006238829.tif 000003
【００３０】
【表２】
2006238829.tif 000004
【００３１】
官能評価の結果、すべてのパネルが本発明の渋味付与剤組成物を加えていない飲料を識別できていた。また、本発明の渋味付与剤組成物を添加したものは濃厚感及び嗜好性が増す傾向が見られ、特に実施例１及び実施例２における効果が優れていた。
【００３２】
［試験例３］
実施例１記載のビセニン−２製剤によるリンゴ風味無果汁飲料に対する風味改善効果を官能評価により確認した。官能評価には訓練された専門パネル７名を用いた。表３の組成の飲料を対照とし、この飲料にビセニン−２製剤を添加した飲料を、評価者には内容がわからない状態で提示した。各飲料の呈味感(天然果汁らしさ)は、対照に対する相対値として７段階の数値で表した。対照と同等は４点とし、数字が増えるほど評価が良いことを示す。評価結果の平均値を表４に示した。またあわせて各飲料の香味のコメントを記載した。
【００３３】
【表３】
2006238829.tif 000005
【００３４】
【表４】
2006238829.tif 000006
【００３５】
官能評価の結果、ビセニン製剤を添加したものは果汁感、シャープさが増す傾向が見られた。
【産業上の利用可能性】
【００３６】
本発明の渋味付与剤は、飲食物に微量添加することにより爽やかな渋味を付与することができ、その結果、より天然らしいコク、ボリューム感・濃厚感を有する飲食物を提供することができる。