(57)【要約】 【課題】  インフルエンザの予防にあたって、抗原抗体反応ではなく、天然物由来の物質であって、副作用がほとんどない抗インフルエンザ剤を提供する。【解決手段】  ステビアの植物体の煮沸抽出液を濃縮し、しかる後、発酵させて得られた発酵液を飲用するものであり、人体に対しても予防効果が得られる可能性があるが、特に鶏に、固形物濃度１５〜２０Ｗ／Ｖ％の発酵液を養鶏場の飲み水或いは餌に配合することが好ましい。更に、ひよこに対し生後１週間の間、本発明発酵液を飲み水又は餌に配合することにより、内蔵の基礎が健康に発達し、以後通常の飲み水と餌を与えても出荷が早まり、肉量、肉質共に向上する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ステビアの植物体の煮沸抽出液を濃縮し、しかる後、発酵させて得られた発酵液を飲用することを特徴とするインフルエンザの予防方法。
【請求項２】
ステビアの植物体の煮沸抽出液を濃縮し、しかる後、発酵させて得られた発酵液を、養鶏場の飲み水或いは餌に配合することを特徴とするトリインフルエンザの予防方法。
【請求項３】
ステビアの植物体の煮沸抽出液を濃縮し、しかる後、発酵させて得られた発酵液の固形物濃度が、１５ないし２０Ｗ／Ｖ％であることを特徴とする請求項１又は２記載のインフルエンザの予防方法。
【請求項４】
ひよこに対し生後１週間の間、ステビアの植物体の煮沸抽出液を濃縮し、しかる後、発酵させて得られた発酵原液を、１００倍ないし３００倍に希釈した飲み水を供給することを特徴とするトリインフルエンザの予防方法。
【請求項５】
ひよこに対し生後１週間の間、ステビアの植物体の煮沸抽出液を濃縮し、しかる後、発酵させて得られた発酵液を、０．１ないし３．０％配合した餌を供給することを特徴とするトリインフルエンザの予防方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ステビアの全草の熱水抽出物を濃縮し、しかる後、発酵させた液を飲用することによるインフルエンザ、特に、トリインフルエンザの予防方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
インフルエンザはインフルエンザウイルスによって起こる呼吸器疾患であり、病原ウイルスは呼吸器より侵入し、上気道で感染した後、逐次下気道に向かって進展する。潜伏期は１〜３日と短く、潜伏期の後多くは突然、発熱をもって発病する。発病と同時に頭痛、腰痛、間接痛、筋肉痛や倦怠感といった症状が見られる。インフルエンザは通常１週間程度で治癒する予後の良好な病気であるが、しばしば合併症、特に肺炎を起こして重症化する場合もある。
【０００３】
インフルエンザウイルスはオルソミクソウイルス科に属し、遺伝子としてＲＮＡを用いる。Ａ型、Ｂ型及びＣ型として分類されるが、抗原的には完全に無関係であって１種類による感染は他の種類に対して免疫性を付与しないものである。インフルエンザウイルスの表面にはヘマグルチニン（Ｈ）とノイラミニダーゼ（Ｎ）があり、共に抗原として働くため、ＨとＮによりウイルスを更に分類する。特に、Ａ型ウイルスは抗原が変化し易く、抗原シフトにより誕生した新型ウイルスはＨとＮが従来型と全く異なり、被感染動物に未だ抗体がなく毒性が強くなりがちである。我々は一生に何回もインフルエンザに脅かされるのである。
【０００４】
そのため、ワクチンを製造するにあたっても、次の冬に流行するであろう変種を予測して、Ａ型２種、Ｂ型１種の多価ワクチンを製造している。Ａ型として、特定のＨとＮに結合する２種類の抗体を含有しているが、予測が外れた場合にはインフルエンザの流行を阻止することが困難である。Ａ型インフルエンザウイルスはヒトをはじめ、ヒト、トリ、ブタ、ウマ等にも感染し、トリではキャリアーとなって元気に生息しているものもある。野鳥等のインフルエンザウイルスが養鶏場の鶏に感染し、これがヒトにも感染できるように変異すると大問題になる。
【０００５】
本出願人はステビアの抽出液の発酵物が、畜産上好ましい効果を有することを見出し、畜産上の用途を開発している。特許文献１においては、ステビアの植物体の抽出液を用いてロタウイルスの細胞への侵入を阻害する技術が開示されている。その中で、「本発明の物質はインフルエンザウイルスやヘルペス等のウイルスに対しては効果を有しない。」との否定的記載がある。
特許文献２には、バラ科植物の抽出物を有効成分とする抗インフルエンザウイルス剤が開示されている。
【特許文献１】特開２００１−１０６６３５号公報
【特許文献２】特開２００２−１４５７９０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本出願人はステビアの抽出発酵液を養鶏場の飲み水に配合したり、或いは餌に配合することにより、カルシウム代謝が促進され、産んだ卵がベルトコンベアに落ちる前に割れる率が激減することを見出した。また、生後１週間以内において、ステビアの抽出発酵液を与えると雛の生育が早く、特に、内蔵が健康に生育する。鶏は生後１週間で内蔵が完成するため、この間にのみステビア抽出発酵液を与えることにより、内蔵が健全になり、以後の生育が早く、且つ肉重量も増加し肉質も向上する。特許文献１にはステビア抽出液はインフルエンザウイルスの予防に対し否定的に記載されているが、ステビアの各種効果に加えるに、抗インフルエンザウイルス性も望ましく、再度、抗インフルエンザウイルス性を期待してステビア抽出発酵液の試験を行った。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は上記課題を解決することを目的とし、その構成は、ステビアの植物体の煮沸抽出液を濃縮し、しかる後、発酵させて得られた発酵液を飲用するものであり、人体に対しても予防効果があるが、固形物濃度、１５〜２０Ｗ／Ｖ％の発酵液を養鶏場の飲み水或いは餌に配合することが好ましい。更に、ひよこに対し生後１週間の間、本発明発酵液を飲み水又は餌に配合することにより、内蔵の基礎が健康に発達し、以後通常の飲み水と餌を与えても出荷が早まり、肉量、肉質共に向上する。
【０００８】
すなわち、本発明はステビアの全草を煮沸抽出して得られた抽出液を濃縮し、常温で発酵させた発酵液が、各種の型のインフルエンザウイルスの増殖を抑制することを確認したものである。しかも、ステビアの発酵液は１００倍〜３００倍に希釈して、鶏の雛に生後１週間飲み水として与えることにより内蔵が健康に発育し、その後ステビア発酵液を全く与えなくとも、体重が増加し、肉質が良好となる。更に、産卵用鶏に関しても同様の効果がある上、産卵率が向上する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、養鶏場において同一雛を用いて短時間で出荷することができ、且つ肉重量及び肉質も向上する。産卵用鶏に関しては、カルシウムを多く配合した餌を与えても産卵数が多いため、殻が薄くなりがちであり、産卵後、ベルトコンベアに落ちるまでの樋内で破損する率は１０〜１５％であった。ステビア発酵液を飲食させることにより、カルシウム代謝が向上し、破損率を２〜３％に低下することができた。その上、ヘマグルチニンやノイラミニダーゼの型に関係なくインフルエンザを予防する可能性があるため、養鶏産業上の効果は大きい。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明の原料となるステビアとは、南米原産のキク科の多年生植物、ステビア・レバウディアナ・ベルトニ（Stevia rebaudiana Bertoni ）及びその類縁植物である。実験の結果、有効成分は葉及び茎、特に蕾を持つ前の茎や成熟した植物の茎に多く含有されるが、根にも、花にも、幼弱植物にも有効成分が含有されることを確認した。本発明はステビアの植物組織全体の抽出物が含有されていればよく、他の物質と配合されていても差支えない。
【００１１】
抽出法は特に限定はなく、ステビアの植物組織に含有される成分を溶出できればよく、熱水抽出、冷水抽出、或いは低級アルコール等による抽出液も使用できる。
抽出するにあたっては、葉のみを摘み取り、或いは植物の地上部を刈り取り、乾燥し或いはそのまま微粉砕する。茎は固いため微粉砕に先立ち断裁してもよい。有効成分の溶出を容易にするためには微粉砕することが好ましい。抽出は熱水を用いて３０分以上煮沸する。場合によっては一回目の抽出工程で得られた抽出水を分離した残滓を、新たな抽出用熱水に投入して再抽出すると有効成分がほぼ完全に抽出される。
ステビア抽出液は濃縮して固形物濃度１５〜２０Ｗ／Ｖ％の抽出原液として使用する。一般にステビアの微粉砕物１ｋｇから０．３〜３リットルの抽出原液が得られる。
【００１２】
鶏のひよこには、生後１週間の間、抽出原液を０．１〜３．０％、好ましくは０．３〜１．０％餌に混ぜて与えると、その後は通常の餌を与えていても生育がよく、養鶏業者として生産性が向上する。また、ステビア原液を５０倍〜５００倍、好ましくは１００倍〜３００倍に希釈して、飲み水としてひよこに与えると、同様の効果が得られる。これは、ひよこにおいては、生後１週間の間に内蔵の基礎が形成されるので、内蔵の基本が健康であると以後の生育状態が極めて良好である事実に起因する。
【実施例１】
【００１３】
抗インフルエンザウイルス活性の測定は、ウイルス感染に伴う細胞死とその抑制を呈色反応として測定するFocus Forming Unit Assay（ＦＦＵ）法を用いて行った。
感染細胞としてはマジン・ダルビー・イヌ腎臓（ＭＤＣＫ）細胞を用い、インフルエンザウイルスとしては、（ニューカレドニア株、Ｈ３Ｎ２）を用いた。ステビアの植物体の煮沸抽出液を濃縮し、しかる後、発酵させて得られた発酵液としては、ヘルシーマム（商標名、ＪＢＢ社製）を用いた。
９６穴マイクロプレートにＭＤＣＫ細胞を培養し、ウイルス液を添加して感染させて１６時間培養後に染色し、染色細胞数が２２０／穴程度となるようにウイルス濃度を調整した。免疫染色された感染細胞は、１ＦＦＵ＝１感染性ウイルスとした。
【００１４】
ＭＤＣＫ細胞を培養した上記マイクロプレートに、濃度を調整したウイルス０．１ｍｌと２倍段階希釈したヘルシーマムを０．１ｍｌ添加して感染させ、１６時間培養後のＦＦＵと希釈率との関係を表１に示した。
表１中、細胞剥離はステビアの毒性による細胞死である。ＦＦＵは３個の穴の平均値を示した。
表１より判断して、感染細胞数を５０％に減少させるヘルシーマムの濃度、すなわち、５０％ Effective Concentration（ＥＣ５０）は約１００倍希釈液である。
【００１５】
【表１】
2006008594.tif 000002
【実施例２】
【００１６】
本発明ステビア濃縮液が、ウイルス感染のどの段階で作用するかを検討した。
(1) 感染前処理として、ヘルシーマム希釈液をＭＤＣＫ細胞が増殖した穴に添加し、ヘルシーマム液を捨て、更に２回洗浄して遊離のヘルシーマム成分を除去し、３０分後に実施例１で用いたウイルス液を添加し、実施例１と同様に培養した後、ＦＦＵを求めた。
(2) 吸着時処理は、被感染細胞にヘルシーマム添加と同時にウイルス液を添加し、１時間感染させ、その後、ヘルシーマム液を捨て、(1) と同様に培養してＦＦＵを求めた。
(3) 吸着後処理は被感染細胞にウイルスを感染させ、感染後にヘルシーマムを添加した。
(4) 吸着時、後処理は、被感染細胞にヘルシーマムを添加すると同時にウイルスを感染させ、更に、吸着後も作用させ、(1）と同様に培養してＦＦＵを求めた。
これらの結果を表２に示した。
表２より、本発明ステビア発酵液はウイルスが標的細胞に吸着する時に阻害するものと考えられ、(4）の条件では、本実施例ステビア液のＥＣ５０は１００倍以上である。
【００１７】
【表２】
2006008594.tif 000003
【実施例３】
【００１８】
トリインフルエンザウイルスに対する本発明ステビア発酵液の効果を検討した。
トリインフルエンザウイルスとして、Ｈ５Ｎ３型ウイルス及びＨ７Ｎ７型ウイルスを用いて、実施例１と同様の実験を行い、ＥＣ５０を求め、その結果を表３に示した。
表３よりトリインフルエンザに対する効果も（Ｈ３Ｎ２）型と同様に、ＥＣ５０は約１００倍であり、本発明ステビア発酵液は抗原抗体反応とは異なる作用機序でインフルエンザウイルスの吸着を阻害することが判明した。更に、予防のみでなく感染後においても、細胞を破壊して副生された大量のインフルエンザウイルスが次の細胞に侵入するのを阻害することができる。
【００１９】
【表３】
2006008594.tif 000004
【産業上の利用可能性】
【００２０】
本発明のステビアの植物体の煮沸抽出液を濃縮し、しかる後、発酵させて得られた発酵液を、１００倍〜３００倍程度に希釈し、生後１週間以内の雛に飲み水として与えることにより、生育が早まり、インフルエンザの感染が予防され、以後は、出荷が早まると共に、肉質、肉量共に向上し、養鶏場経営上、非常に有利になる。
産卵鶏に関しては、ステビア発酵液を１００倍程度に希釈して飲用させることにより、産卵した卵がベルトコンベアに到達する前に破損する率が極度に減少し、養鶏産業上有利である。