(57)【要約】【課題】  不溶解物の生成を抑えることが容易な高品質の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤を提供する。【解決手段】酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤は、水に、バチルス・サブティリス由来のエンド型中性プロテアーゼを用いたタンパク質分解酵素処理が施されたＲＪ（酵素処理ＲＪ）、及び増粘多糖類としてのジェランガムを含有してなるものである。このドリンク剤中の酵素処理ＲＪの含有量は０．６〜１．２質量％が好ましい。また、ドリンク剤中のジェランガムの含有量は０．０１〜０．０９質量％が好ましく、０．０２〜０．０５質量％がより好ましい。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
バチルス・サブティリス由来のエンド型中性プロテアーゼを用いたタンパク質分解酵素処理が施された酵素処理ローヤルゼリーと、ジェランガムとを含有することを特徴とする酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤。
【請求項２】
バチルス・サブティリス由来のエンド型中性プロテアーゼ処理が施された酵素処理ローヤルゼリー、ジェランガム、糖液、酸味料、ビタミンＣ以外のビタミン群、香料、色素及び水からなることを特徴とする酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤。
【請求項３】
前記酵素処理ローヤルゼリーを０．６〜１．２質量％含有し、前記ジェランガムを０．０１〜０．０９質量％含有することを特徴とする請求項１又は請求項２に記載の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤。
【請求項４】
血圧降下作用を有することを特徴とする請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高血圧症の予防や治療等を目的とする健康飲料、医薬品、医薬部外品等として有用な酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ローヤルゼリーは、栄養価の高い健康飲食品或いは生薬として、従来より利用されてきた天然物である。ローヤルゼリーは、血圧降下作用、抗腫瘍作用、創傷治癒促進、血清コレステロール低下作用、血流増加作用、性中枢老化防止作用、抗菌作用、成長促進作用、放射線及び化学療法剤の副作用軽減作用、慢性疾患に対する作用等の種々の生理作用を有しており、多くの文献により報告されている。例えば、非特許文献１には、ローヤルゼリーに含まれるタンパク質をタンパク質分解酵素処理することによって得られた酵素処理ローヤルゼリーが開示されている。
【非特許文献１】丸山  広恵、外６名、"プロテアーゼ処理ローヤルゼリー中に含まれるアンジオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチドの単離同定"、食科工、２００３、５０，３１０−３１５。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
ところが、ローヤルゼリーを健康飲料、医薬品、医薬部外品等の各種飲料に使用する際には、同ローヤルゼリーに含有されているタンパク質やペプチド等が、飲料の製造時の加熱殺菌によって凝集したり、沈殿したりする可能性がある。上記従来のローヤルゼリーは、タンパク質が分解処理されているため全般的に水への溶解性は比較的良好であるが、ローヤルゼリーの添加量の増加に伴ってタンパク質やペプチド等の凝集及び沈殿が避けられない。特に疎水性アミノ酸を高含有するタンパク質やペプチドについては、凝集及び沈殿の生成が起こりやすいものが存在し、飲料の品質低下を引き起こしやすいという問題があった。
【０００４】
そこで、本発明者らは鋭意研究の結果、タンパク質やペプチド等の凝集及び沈殿が抑制された品質の高いドリンク剤を開発し、本発明を完成するに至った。本発明の目的とするところは、不溶解物の生成を抑えることが容易な高品質の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記の目的を達成するために、請求項１に記載の発明の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤は、バチルス・サブティリス由来のエンド型中性プロテアーゼを用いたタンパク質分解酵素処理が施された酵素処理ローヤルゼリーと、ジェランガムとを含有することを要旨とする。
【０００６】
上記構成の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤には、増粘効果に特に優れているジェランガムが含有されている。このため、このドリンク剤には、好適な粘性が付与され、その結果、酵素処理ローヤルゼリーに含有されているタンパク質やペプチド等の沈殿及び凝集が有効に抑制される。特に、ジェランガムは、酵素処理ローヤルゼリー中のタンパク質やペプチド等の沈殿及び凝集を抑える効果に非常に優れている。すなわち、本構成によれば、タンパク質やペプチド等の沈殿や凝集が抑制され、それらに起因する不溶解物の生成が抑えられた高品質のドリンク剤が提供される。
【０００７】
請求項２に記載の発明の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤は、バチルス・サブティリス由来のエンド型中性プロテアーゼ処理が施された酵素処理ローヤルゼリー、ジェランガム、糖液、酸味料、ビタミンＣ以外のビタミン群、香料、色素及び水からなることを要旨とする。
【０００８】
上記構成の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤には、褐変化を誘発させるビタミンＣ（アスコルビン酸）が含有されていない。ビタミンＣは、酸化されやすく、タンパク質やペプチドのアミノ基と反応して褐変しやすい物質に変化するものである。従って、本構成によれば、タンパク質やペプチド等の沈殿や凝集に起因する不溶解物の生成が抑制されるとともに、褐変化が抑制された高品質のドリンク剤が提供される。
【０００９】
請求項３に記載の発明の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤は、請求項１又は請求項２に記載の発明において、前記酵素処理ローヤルゼリーを０．６〜１．２質量％含有し、前記ジェランガムを０．０１〜０．０９質量％含有することを要旨とする。
【００１０】
上記構成の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤には、酵素処理ローヤルゼリーに含有されているタンパク質やペプチド等の沈殿及び凝集が有効に抑制される量のジェランガムが含有されている。このため、沈殿や凝集に起因する不溶解物の生成が抑制された高品質のドリンク剤が提供される。
【００１１】
請求項４に記載の発明の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤は、請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の発明において、血圧降下作用を有することを要旨とする。
上記構成の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤によれば、ＡＣＥ阻害活性を有する酵素処理ローヤルゼリーを介して良好な血圧降下作用が発揮される。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、不溶解物の生成を抑えることが容易な高品質の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
以下、本発明の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤（以下、ドリンク剤と称す）を具体化した一実施形態を詳細に説明する。なお、本実施形態では「ローヤルゼリー」を「ＲＪ」と略記する。
【００１４】
本実施形態のドリンク剤は、バチルス・サブティリス由来のエンド型中性プロテアーゼを用いたタンパク質分解酵素処理が施された酵素処理ＲＪと、増粘多糖類としてのジェランガムとを含有するものである。このドリンク剤は、ジェランガムの乳化作用によって、酵素処理ＲＪ中の難水溶性の成分が水に対して高い分散安定性を発揮するように構成されており、不溶解物の生成が効果的に抑えられるようになっている。本実施形態のドリンク剤の利用形態としては、例えば、医薬品、医薬部外品、健康飲料等が挙げられる。
【００１５】
さらに、このドリンク剤は、酵素処理ＲＪに含まれる有効成分の作用によりレニン−アンジオテンシン−アルドステロン系の血圧上昇に関与する情報伝達を阻害して高い血圧降下作用を発揮する。レニン−アンジオテンシン系（ＲＡＳ）は、カテコールアミンやバソプレッシンとともに生体内における血圧の調節や体内電解質の維持に重要な役割を果たしている。すなわち、アンジオテンシノーゲンより生成するアンジオテンシンＩは、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）によりアンジオテンシンＩＩになる。アンジオテンシンＩＩは、強い昇圧活性を有し、副腎球状層からのアルドステロンの分泌を促進させる。このアンジオテンシンＩＩは、主に、細動脈平滑筋を収縮させて血圧を上昇させる血管収縮作用と、副腎球状層に作用してアルドステロンの合成と遊離を促進させる作用とを介して昇圧活性を発揮する。前記アルドステロンは、腎遠位尿細管からのナトリウム再吸収を増加させる作用を有する。これに対し、ドリンク剤中に含まれる有効成分としての酵素処理ＲＪは、ＡＣＥ阻害活性、さらには前記アルドステロンの分泌を阻害する作用を有しており、ナトリウムの再吸収を抑えて循環血漿量低下させ、結果として血圧降下作用を発揮する。
【００１６】
酵素処理ＲＪは、少なくともＩｌｅ−Ｔｙｒ（ＩＹ）、Ｖａｌ−Ｔｙｒ（ＶＹ）及びＩｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ（ＩＶＹ）の各種ペプチドからなる有効成分を含有している。また、この酵素処理ＲＪには、配列番号１〜３で表されるアミノ酸配列からなるペプチドもそれぞれ含まれている。配列番号１〜３で表されるアミノ酸配列からなるペプチドは、いずれもドリンク剤の有効成分として機能し、例えば、ＡＣＥ活性の阻害を介した血圧降下作用に優れている。このドリンク剤は、ＲＪ由来の前記ペプチド及びその他未同定成分（主にペプチド）が有効成分として含有されている。
【００１７】
この酵素処理ＲＪは、ＲＪにバチルス・サブティリス由来のエンド型中性プロテアーゼを用いたタンパク質分解酵素処理を施すことにより得られる。
ＲＪは、蜜蜂のうち日齢３〜１２日の働き蜂が下咽頭腺及び大腮腺から分泌する分泌物を混合して作る乳白色のゼリー状物質である。このＲＪは、人体に対し好ましい生理活性を持つことが知られている。このＲＪ中の主な生理活性成分としては、例えば、タンパク質、糖類、ＲＪに特有な１０−ハイドロキシデセン酸等の有機酸類、脂質、ビタミンＢ類や葉酸、ニコチン酸、パントテン酸等のビタミン類、各種ミネラル類等が挙げられる。本実施形態のドリンク剤に用いられるＲＪとしては、生ＲＪ又は該生ＲＪを乾燥させて粉末化したＲＪ粉末のいずれを採用してもよい。また、ＲＪの産地は、中国、ブラジル、ヨーロッパ諸国、オセアニア諸国、アメリカ等いずれであってもよい。
【００１８】
前記タンパク質分解酵素処理は、バチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のエンド型中性プロテアーゼを用いて、ＲＪに含有されるタンパク質のペプチド結合を加水分解してＩｌｅ−Ｔｙｒ、Ｖａｌ−Ｔｙｒ、Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ等のペプチドを得る処理をいう。バチルス・サブティリス由来のエンド型中性プロテアーゼは、金属プロテイナーゼに属しており、至適ｐＨが概ね６．５〜７．５の範囲にある。
【００１９】
この酵素処理ＲＪの製造方法は、分解工程と酵素失活工程と乾燥工程とを備えている。分解工程は、ＲＪにバチルス・サブティリス由来のエンド型中性プロテアーゼを用いたタンパク質分解酵素処理を行う工程である。酵素失活工程は、前記分解工程で用いたエンド型中性プロテアーゼを失活させる工程である。乾燥工程は、前記酵素失活工程後のＲＪを乾燥する工程である。
【００２０】
以下に各工程について記載する。分解工程では、溶液の粘度を低下させて酵素反応（分解反応）を円滑に進行させるために、上記ＲＪを所定量の水又は緩衝液で希釈したＲＪ希釈液を用いるのが好ましい。さらにこのとき、前記ＲＪ希釈液のｐＨを前記エンド型中性プロテアーゼの至適ｐＨ付近に調整するのが好ましく、具体的にはＲＪ希釈液のｐＨを好ましくは６．５〜７．５、特に好ましくは６．８〜７．２に調整するのが好ましい。ＲＪ希釈液を調製する際には、タンパク質分解酵素処理を効率的に進行させるとともに乾燥工程を迅速に進行させるために、ＲＪの重量に対し、好ましくは２〜１０倍量、より好ましくは２．５〜６倍量の水又は緩衝液にて希釈されるとよい。
【００２１】
また、ＲＪ中には数多くの成分が含有されており、前記エンド型中性プロテアーゼに対して阻害的に働く可能性もあることから、通常の基質に対して酵素処理を行う場合の１０倍量以上使用することが好ましい。但し、これも反応時間との兼ね合いで任意に選択することができる。このタンパク質分解酵素処理は前記エンド型中性プロテアーゼの至適温度である４０〜６０℃で行われるのが好ましい。
【００２２】
酵素失活工程は、前記分解工程後のＲＪ希釈液を前記エンド型中性プロテアーゼが失活する温度に加熱する工程である。この酵素失活工程における加熱温度は、エンド型中性プロテアーゼを十分に失活させるために、７５〜１００℃であるのが好ましい。また、加熱時間は５〜６０分間であるとよい。一方、乾燥工程は、常法に従って行われればよく、例えば真空凍結乾燥機等を用いて前記酵素失活工程後のＲＪ希釈液を凍結乾燥することにより実施される。この乾燥工程を行うことにより、粉末状の酵素処理ＲＪが得られる。
【００２３】
ＲＪのタンパク質分解酵素処理により得られるＩｌｅ−Ｔｙｒ、Ｖａｌ−Ｔｙｒ、Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙｒは、それぞれＡＣＥ阻害活性を有するとともに、アルドステロンの分泌阻害活性を有している。さらに、前記タンパク質分解酵素処理により得られる配列番号１〜３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド及びその他未同定成分にも、高いＡＣＥ阻害活性及びアルドステロンの分泌阻害活性が存在する。
【００２４】
このドリンク剤は、例えば、経口摂取しやすいことから１００ｍｌ程度の容量となるように構成され、当該１００ｍｌ中には血圧降下作用を必要十分に発揮させるために、前記酵素処理ＲＪの固形分が６００〜１２００ｍｇ程度含有されている。このとき、ドリンク剤中の酵素処理ＲＪ（固形分）の含有量は０．６〜１．２質量％となり、そのままでは水に対して分散し難くなり、タンパク質やペプチド等の不溶解物が沈殿又は凝集しやすくなる。
【００２５】
ジェランガムは、Ｄ−グルコース、Ｄ−グルクロン酸、Ｄ−ラムノース等の糖から構成される天然高分子多糖類である。このジェランガムは、ドリンク剤に粘性を付与するために含有され、前記不溶解物の沈殿及び凝集を抑えるために含有されている。ドリンク剤中のジェランガムの含有量は０．０１〜０．０９質量％が好ましく、０.０２〜０.０５質量％がより好ましい。ジェランガムの含有量が０．０１質量％未満の場合には、ドリンク剤に十分な粘性が付与されず、０．０９質量％を超える場合には不経済である。
【００２６】
本実施形態のドリンク剤には、糖液、酸味料、ビタミンＣ以外のビタミン群、香料、色素等の各種添加剤を含有してもよい。
本実施形態では、糖液として果糖ブドウ糖液糖及びハチミツが好適に用いられる。果糖ブドウ糖液糖は、デンプンの分解、異性化反応等により生成される糖液であり、果糖の含有量がブドウ糖の含有量よりも高いものである（例えば果糖が５５質量％）。この果糖ブドウ糖液糖は、ドリンク剤に甘味を付与する甘味料として含有される。ドリンク剤中の果糖ブドウ糖液糖の含有量は３〜２０質量％が好ましく、４〜１５質量％がより好ましい。果糖ブドウ糖液糖の含有量が３質量％未満の場合には、甘味が少なく、良好な風味が十分に付与されない可能性が高い。一方、２０質量％を超える場合には、ドリンク剤に過剰な甘味が付与されてしまい、風味が低下する可能性が高い。
【００２７】
ハチミツは、前記果糖ブドウ糖液糖と同様、ドリンク剤に甘味を付与する甘味料として含有される。ドリンク剤中のハチミツの含有量は７質量％以下が好ましい。ハチミツの含有量が７質量％を超える場合には、ドリンク剤に過剰な甘味が付与されてしまい、風味が低下する可能性が高い。
【００２８】
酸味料は、ドリンク剤のｐＨを好適な範囲（３．５〜６．０）に調整するために使用される。本実施形態では、酸味料としてクエン酸が好適に用いられる。ドリンク剤中のクエン酸の含有量は０．１〜０．５質量％が好ましく、０.２〜０.４質量％がより好ましい。クエン酸の含有量が０．１質量％未満、及びドリンク剤のｐＨが６．０を超える場合には、ドリンク剤の酸味が乏しくなるため、風味が損なわれる可能性が高い。一方、クエン酸の含有量が０．５質量％を超える場合、及びドリンク剤のｐＨが３．５未満の場合には、ドリンク剤に過剰な苦味が付与されてしまう可能性が高い。また、ジェランガムの安定性を低下させる可能性も高い。
【００２９】
また、本実施形態では、ビタミンＣ以外のビタミン群としてビタミンＢ２が好適に用いられる。ビタミンＢ２は、ドリンク剤に栄養価を付与するために使用される。ビタミンＢ２としては、フラビンアデニンジヌクレオチドナトリウム、リボフラビン、リン酸リボフラビンナトリウム、酪酸リボフラビン等や、これらの誘導体が挙げられる。これらは単独で使用されてもよく、２種以上を組合せて使用されてもよい。ドリンク剤中のビタミンＢ２の含有量は０.０００１〜０.０１質量％が好ましく、０.０００４〜０.０００８質量％がより好ましい。ビタミンＢ２の含有量が０.０００１質量％未満の場合には、ドリンク剤に十分な栄養価が付与されない可能性が高い。一方、ビタミンＢ２の含有量が０.０１質量％を超える場合には、ビタミンＢ２の過剰摂取となるとともに、ドリンク剤の風味も損なわれる可能性が高い。
【００３０】
香料は、ドリンク剤の苦味や刺激味を抑制するために使用される。この香料としては、従来周知のいずれのものであってもよいが、乳化香料を使用するのが特に好ましい。乳化香料は、一般的にクラウディーと呼ばれ、油溶性香料を乳化剤及び安定剤を用いて乳化した香料である。当該香料は、単独で使用されてもよく、２種以上を組合せて使用されてもよい。
【００３１】
また、色素は、ドリンク剤に良好な嗜好性を付与するために使用される。この色素としては、アントシアニン系色素、アザフィロン系色素、カロテノイド系色素、ベタシアニン系色素及びポリフェノール系色素等が挙げられる。これらは単独で使用されてもよく、２種以上を組合せて使用されてもよい。
【００３２】
上記ドリンク剤は、瓶、缶又は紙パックに充填されて最終製品となる。なおこのとき、常法により加熱殺菌される。
さて、酵素処理ＲＪは、Ｉｌｅ−Ｔｙｒ、Ｖａｌ−Ｔｙｒ、Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ等の有効成分がＲＡＳ−アルドステロン系の情報伝達を阻害すべく作用する。この酵素処理ＲＪを経口投与する場合には、前記有効成分が消化官から吸収され、血中に移行し、腹部大動脈や肺等の特定臓器においてＡＣＥ活性を阻害する。このとき、前記有効成分は、前記特定臓器においてＡＣＥ活性を阻害してアンジオテンシンＩからのアンジオテンシンＩＩの生成を抑制する。このアンジオテンシンＩＩの生成抑制は、副腎球状層からのアルドステロンの分泌を阻害し、腎遠位尿細管からのナトリウム再吸収を抑える。その結果、循環血漿量が低下して血圧が降下する。従って、上記酵素処理ＲＪによれば、血圧の上昇が好適に抑制され、高血圧症を予防及び改善することができるようになる。
【００３３】
前記の実施形態によって発揮される効果について、以下に記載する。
・  本実施形態のドリンク剤にはジェランガムが含有されているため、当該ドリンク剤に好適な粘性が付与される。その結果、酵素処理ＲＪに含有されるタンパク質やペプチドをはじめ、上記各種添加剤が安定して均一に分散される。すなわち、ドリンク剤を加熱殺菌したり、長期に亘って保存する際にも各種成分（タンパク質、ペプチド、各種添加剤）の沈殿及び凝集が抑制される。従って、本実施形態によれば、不溶解物の沈殿及び凝集が抑制された高品質のドリンク剤を得ることができる。
【００３４】
・  また、本実施形態のドリンク剤には、酵素処理ＲＪのタンパク質（タンパク質のアミノ基）と反応して褐変しやすい物質に変化するビタミンＣが含有されていない。このため、ドリンク剤を加熱殺菌したり、長期に亘って保存する際にも、褐変化が生じることがなく、風味の低下が抑制される。すなわち、本実施形態のドリンク剤によれば、良好な保存安定性が得られ、品質を高めることができる。
【００３５】
・  果糖ブドウ糖液糖を用いることによって褐変化がより一層起こりにくくなる。ビタミンＣと反応して褐変化（メイラード反応）しやすいのはブドウ糖であって、果糖の含有量が高い果糖ブドウ糖液糖は褐変化防止に優れている。すなわち、本実施形態のドリンク剤によれば、果糖ブドウ糖液糖の作用効果により相乗的にドリンク剤の褐変化を抑制することができる。
【実施例１】
【００３６】
（酵素処理ＲＪの調製）
中国産生ＲＪ（固形分３２．７％）８ｇに水４５ｍｌを加えて５分間攪拌し、ＲＪ希釈液を調製した。次に、前記ＲＪ希釈液に、バチルス・サブティリス由来のエンド型中性プロテアーゼ（天野エンザイム社製プロテアーゼＮ）を２５ｍｇ添加し、至適ｐＨである７．０に調整した後、５０℃で１４時間反応させた。反応終了後、９８℃で５分間加熱することにより酵素失活工程を行い、次いで凍結乾燥にて乾燥工程を行うことにより粉末状の酵素処理ＲＪを調製した。なおデータは示さないが、この酵素処理ＲＪには、Ｉｌｅ−Ｔｙｒ、Ｖａｌ−Ｔｙｒ及びＩｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙｒに加え、配列番号１〜３で表されるアミノ酸配列からなるペプチドが含まれていたことがＨＰＬＣ分析にて確認された。
【００３７】
（乳化剤の検討）
ここでは、酵素処理ＲＪの溶解時に生成する不溶解物が油性の物質である可能性を考え、各種乳化剤を添加し、不溶解物が分散された酵素処理ＲＪの性状（沈殿が生成するか否か）を目視にて評価することにより乳化剤のスクリーニングを行った。即ち、上記酵素処理ＲＪ６００ｍｇと、糖液、酸味料、及び下記表１に示される乳化剤（表中の含有量（ｗ／ｖ％）は終濃度）を混合し、水で全量１００ｍｌとした混合液を調製した後、これを７５℃で２０分間加熱殺菌した。混合時及び加熱殺菌直後の酵素処理ＲＪの性状を評価し、表１に示す。なお、表１には各乳化剤のＨＬＢ（Hydrophilic-Lipophilic Balance）値を併記する。
【００３８】
【表１】
2006061038.tif 000002
表１から明らかなように、乳化剤の添加のみでは、沈殿（不溶解物）を分散させることはできなかった。なお、これら乳化剤の中でも、ショ糖ラウリン酸エステル、ラウリン酸デカグリセリン等のラウリン酸系乳化剤に関しては、混合時には一旦均一となって比較的性状は良かったが、経時的に沈殿が発生した。
【００３９】
（酵素処理ＲＪに対する各種添加剤の検討）
酵素処理ＲＪ６００ｍｇと以下に示すその他の添加剤とを混合し、水にて全量１００ｍｌとした混合液を調製し、それら添加剤が及ぼす影響について検討した。前記添加剤としては、糖液をオリゴ糖（１０％，２３．５％）、砂糖（９％，１８％）、マルチトール（１５％，３０％）、エリスリトール（５％）、エスイー（ＳＥ）（１０，２５％）とし、乳化剤をＱ１２Ｓ、増粘多糖類をキサンタンガム０．１％に固定するとともに、ビタミンＣ濃度をそれぞれ０，０．６，１．２％となるように添加した。なお、上記括弧内の数字は、混合液の体積に対する各添加剤の質量の百分率を示す。そして、各種混合液に関し、冷蔵、室温、４０℃及び８０℃の各温度条件において、それぞれ性状の経時変化を目視にて評価した。これらの混合液のうち、代表的な処方例を下記表２に示す。また、各種混合液のＢｘ及びｐＨを同表に併せて示す。
【００４０】
【表２】
2006061038.tif 000003
各混合液について上記温度条件でそれぞれ加速試験を行い、その後、各混合液の性状を確認するとともに、ＨＰＬＣを用いてそれぞれのペプチド減少量を評価した。その結果、いずれの混合液に関しても、性状及びペプチド減少量についての大きな変化はみられなかった。乳化剤の有無に関しても、性状及びペプチド減少量について大きな変化はみられなかった。また、Ｂｘの値が高い混合液ほど、性状が安定していた。加えて、各混合液を４０℃で加速保存すると、それぞれ褐変化が進行することが確認された。
【００４１】
（褐変化抑制の検討）
次に、一般的なドリンク剤に処方される基本的な添加剤の中から、褐変化を引き起こす物質（褐変物質）のスクリーニングを行った。なお、酵素処理ＲＪを水に混合した混合液では、見た目の性状だけでなく、ペプチドの安定性も評価すべきであるため、ここではペプチドの安定性についても検討した。具体的には、下記糖液のスクリーニング、ビタミンＣ濃度の検討、ｐＨの検討、及び酵素処理ＲＪの含有量とビタミンＣとの関係の検討を行った。
【００４２】
＜糖液のスクリーニング＞
ここでは、各種糖液がドリンク剤の褐変化に及ぼす影響を調べた。モデル溶液として、有効成分である３種のペプチド標準品（ＶＹ＋ＩＹ＋ＩＶＹ：０．５ｍｇ＋０．５ｍｇ＋１．２ｍｇ）、クエン酸及びビタミンＣを混合し、水にて全量１００ｍｌとした混合液を調製した。これら混合液に対し、下記表３に示される各種糖液を添加し、８０℃で３日間の加速試験を行った。そして、イソマルトオリゴ糖を含有する混合液（室温、０ｄａｙ）についてＨＰＬＣ分析を行い、そこで得られた各ペプチドのピークを基準とし、そのピーク面積（ＡＲＥＡ）から各種混合液中に残存するペプチドの残存率を算出した。さらに、加速試験終了後の各混合液について褐色域（４２０ｎｍ）における吸光度（ＯＤ４２０）を測定した。その結果を表３に示す。
【００４３】
【表３】
2006061038.tif 000004
表３から明らかなように、各種混合液の褐変化とペプチドの減少との間には、特に相関関係はみられなかった。また、各種混合液中のペプチドに関しては、ＶＹ及びＩＹの減少が著しく、ＩＶＹは比較的安定していることが確認された。
【００４４】
＜ビタミンＣ濃度の検討＞
ここでは、ビタミンＣ濃度を適宜変更したときの褐変化及びｐＨについて検討した。すなわち、モデル溶液として、有効成分である３種のペプチド標準品（ＶＹ＋ＩＹ＋ＩＶＹ：０．５ｍｇ＋０．５ｍｇ＋１．２ｍｇ）、各種糖液（２５ｇ）、ペプチド（ＶＹ＋ＩＹ＋ＩＶＹ：０．５ｍｇ＋０．５ｍｇ＋１．２ｍｇ）、クエン酸（０．４ｇ）及びアスコルビン酸（０〜０．４ｇ）を混合し、水にて全量１００ｍｌとした混合液を調製した。これら混合液について８０℃で３日間の加速試験を行った。そして、加速試験終了後における混合液のｐＨと褐色域（４２０ｎｍ）における吸光度（ＯＤ４２０）とを測定した。結果を表４に示す。
【００４５】
【表４】
2006061038.tif 000005
表４に示すように、いずれの糖液を用いた場合でも、アスコルビン酸の濃度が増加するに従って、加速試験後の混合液の褐変化が顕著になることが確認された。このため、アスコルビン酸をドリンク剤の処方から抜くことで、ドリンク剤の褐変化はかなり抑制されるものと思われる。
【００４６】
＜ｐＨの検討＞
ここでは、ｐＨと褐変化との相関について検討した。すなわち、モデル溶液として、有効成分である３種のペプチド標準品（ＶＹ＋ＩＹ＋ＩＶＹ：０．５ｍｇ＋０．５ｍｇ＋１．２ｍｇ）、各種糖液（２５ｇ）、クエン酸（０．２８〜０．４ｇ）、クエン酸３Ｎａ（０〜０．１２ｇ）及びアスコルビン酸（０．２ｇ）を混合し、水にて全量１００ｍｌとした混合液を調製した。これら混合液について８０℃で３日間の加速試験を行った。そして、加速試験終了後における混合液のｐＨと褐色域（４２０ｎｍ）における吸光度（ＯＤ４２０）とを測定した。結果を表５に示す。なおこのとき、クエン酸３Ｎａの置換率を０、１０、２０、３０％とし、クエン酸とクエン酸３Ｎａとの総重量が０．４ｇとなるように混合液を調製した。
【００４７】
【表５】
2006061038.tif 000006
表５に示すように、いずれの糖液を用いた場合でも、クエン酸３Ｎａの置換率を増加させて混合液のｐＨを上げることにより褐変化が若干抑制された。これは、ｐＨが高いほど、アスコルビン酸の酸化が抑制され、その結果、混合液の褐変化が抑制されたものと推測される。
【００４８】
＜酵素処理ＲＪの含有量とビタミンＣとの関係の検討＞
ここでは、酵素処理ＲＪの含有量を適宜変更することにより褐変化に影響を及ぼすか否かについて検討した。すなわち、上記酵素処理ＲＪを水１００ｍｌに２５０ｍｇ、５００ｍｇ又は６００ｍｇ混合した混合液に対し、一定量のビタミンＣを混合した。そして、各混合液について４０℃で６０日間の加速試験を行った後、その褐変化を４２０ｎｍにおける吸光度で評価した。この結果、データは示さないが、酵素処理ＲＪの含有量が増加するに従って、混合液の褐変化が顕著なものとなった。これは、酵素処理ＲＪの含有量が多いほど、ビタミンＣとの反応に寄与するアミノ基も多く存在することから、褐変化が進行しやすくなるものと推測される。
【００４９】
以上の結果、酵素処理ＲＪを含有する混合液の褐変化の主要因はビタミンＣであり、さらに酵素処理ＲＪの含有量も褐変化に関与していることが判明した。一方、糖液に関しては、褐変化に及ぼす影響は僅かなものであった。従って、以下の試験では、ドリンク剤の処方からビタミンＣを除外することとする。
【実施例２】
【００５０】
（増粘多糖類の検討）
ここでは、上記酵素処理ＲＪを水１００ｍｌに混合した混合液に対し、当該混合液中の不溶解物（タンパク質、ペプチド）を分散安定化させるための増粘多糖類のスクリーニングを行った。すなわち、酵素処理ＲＪ６００ｍｇ又は１２００ｍｇ（０．６〜１．２質量％）、下記表６に示される各種糖液（１３．５質量％）、増粘多糖類（０．０３〜２．２質量％）、ビタミンＣ（０．２質量％）、酸味料（０．４５質量％）及び香料（０.１９質量％）を精製水１００ｍｌに添加して混合液を調製した。そして、各種混合液を加熱殺菌（７５℃、２０分）し、加速試験（４０℃、６０日間）行った後のそれぞれの混合液についてその性状を評価した。結果を表６に示す。
【００５１】
【表６】
2006061038.tif 000007
表６から明らかなように、ペクチンを含有する混合液は、加熱殺菌後に沈殿が生じた。一方、その他の増粘多糖類を含有する混合液は、経時的に沈殿が生じ、比較的安定な性状が得られた。これらの中でも、増粘多糖類として０．０３質量％のジェランガムを含有する混合液は、加速試験後にも沈殿が認められず、最も良好な性状となっていた。すなわち、これらの増粘多糖類の中でも、ジェランガムが、不溶解物の生成抑制に特に優れていることが確認された。
【００５２】
（ビタミンＣを除外した状態での糖液のスクリーニング）
ここでは、ドリンク剤の処方からビタミンＣを除外して、酵素処理ＲＪ存在下での糖液のスクリーニングを行った。すなわち、酵素処理ＲＪ６００ｍｇ、以下に示す各種糖液２０ｇ、クエン酸０.４５ｇ及びジェランガム０.０３を混合し、水にて全量１００ｍｌとした混合液を調製した。これらの混合液を４０℃で６０日間保存した後、それぞれの褐変化をＯＤ４２０における吸光度で評価した。その結果を表７に示す。
【００５３】
【表７】
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表７から明らかなように、ドリンク剤の処方からビタミンＣを除外することで、ドリンク剤の褐変化が好適に抑制された。また、糖液の種類における褐変化の差異は特にみられなかった。
【実施例３】
【００５４】
ここでは、処方からビタミンＣを除外し、上記酵素処理ＲＪ１２００ｍｇを水１００ｍｌに混合した混合液に対し、下記表８に示す各種成分をそれぞれ添加して試作ドリンク剤を調製した。なお、表８に示す数字は、ドリンク剤の体積に対する各成分の質量の百分率を示す。すなわち、ドリンク剤中の酵素処理ＲＪの含有量を１２００ｍｇに、ジェランガムの含有量を０．０３％に固定し、Ｂｘを適宜変更して、ドリンク剤の性状（安定性）を評価した。結果を表８に示す。
【００５５】
【表８】
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表８の結果より、各種ドリンク剤において、ジェランガムの増粘性が好適に発揮されて、いずれの糖液含量でも沈殿を生じることなく良好な性状（安定性）が得られた。従って、表８に示す成分の組み合わせにより、特に優れた性状を有するドリンク剤が得られる。また、加速試験時の安定性、最終製品のカロリー及び製造コストの点からも、表８に示す処方例が優れていることが確認された。
【００５６】
なお、本実施形態は、次のように変更して具体化することも可能である。
・  ドリンク剤に、従来公知の生薬類、ハーブエキス、植物繊維、ミネラル類、保存剤等を必要に応じて適宜組み合わせて添加してもよい。
【００５７】
・  ドリンク剤にビタミンＣを含有させてもよい。この場合、ドリンク剤の褐変化の抑制に関する効果は低下するが、当該ビタミンＣは、不溶解物（タンパク質、ペプチド）の沈殿に関しては何ら関与するものではないため、不溶解物の沈殿を抑制するという本発明の目的は本実施形態と同様に達成される。
【００５８】
さらに、前記実施形態より把握できる技術的思想について以下に記載する。
・  前記糖液として果糖ブドウ糖液糖を含有してなることを特徴とする請求項２に記載の酵素処理ローヤルゼリー含有ドリンク剤。この場合、果糖ブドウ糖液糖は、褐変化を引き起こしにくい果糖の含有量が高いため、ドリンク剤の褐変化を一層抑制することができる。
【配列表】
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