(57)【要約】【課題】  反芻動物のルーメンにおける微生物の生理・生態に重要な影響を及ぼすことのない、飼料効率向上剤を提供する。【解決手段】  ユッカ、キラヤ又はそれらの抽出物を有効成分とする、反芻動物の飼料効率向上剤。【選択図】  図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ユッカ、キラヤ又はそれらの抽出物を有効成分とする、反芻動物の飼料効率向上剤。
【請求項２】
上記飼料効率向上剤が反芻動物のルーメンにおけるメタン生成抑制剤である、請求項１記載の飼料効率向上剤。
【請求項３】
キラヤ又はその抽出物を有効成分とする、請求項１又は２記載の飼料効率向上剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、反芻動物のルーメン内有用菌に悪影響を及ぼさずに飼料エネルギー効率を向上させることができる飼料効率向上剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ウシやめん羊などの反芻家畜は、ルーメン内で微生物によって飼料を消化・発酵させ、その発酵生産物を利用して生きている。発酵生産物は、酢酸・プロピオン酸・酪酸などの揮発性脂肪酸（VFA）や微生物態タンパク質であり、ルーメン内の微生物叢は家畜維持及び生産に大きな影響を及ぼしている。反芻家畜のこの独自の機能の最大の特徴は、セルロース等の構造性炭水化物を効率よく分解して利用できるところにある。飼料炭水化物のルーメン内微生物発酵による消化過程で、水素及び二酸化炭素も大量に生産される。この水素は代謝性水素といい、ルーメン内から速やかに除去されなければルーメンｐHの低下などルーメン発酵に悪影響を及ぼす。代謝性水素を除去する働きの大半を担っているのがメタン生成菌である。
【０００３】
ルーメン内のメタン生成菌は水素を利用して二酸化炭素を還元し、メタンを大量に生成する水素資化菌であり、ルーメン内微生物生態系の維持に大きな役割を果たしている。しかし、生成されたルーメンメタンは曖気として大気中に放出されるが、メタンはエネルギー化合物であるため、ルーメンでのメタン生成は飼料エネルギーの損失である。その損失は総エネルギーの6〜13％及び可消化エネルギーの12％程度と見積もられる。他方、メタンは二酸化炭素と同様に赤外線を吸収する性質を有するために、地球温暖化にも寄与しており、その寄与率は二酸化炭素に次いで高く、総メタン放出量のうち、反芻家畜から放出されるメタンは15〜20％を占めるとされる。すなわち、メタンを抑制することは、家畜のエネルギーロスの減少及び温室効果ガスの低減という面から、重要な研究課題の一つである。しかし、上記のとおり、メタン菌はルーメン内で水素のスカベンジャー（掃除屋）としての大切な役割をもっているために、メタン菌の直接的な除去はルーメン微生物の生理・生態に重要な影響を及ぼすと考えられる。
【０００４】
反芻家畜によるメタン放出を抑制する目的で、様々な飼料添加剤が検討されてきた。飼料効率の改善に効果があるモネンシン等のイオノフォア類は、乳牛の育成牛飼料及び肉牛飼料に実用化され、広く一般に普及しているが、メタン抑制効果も知られている。モネンシンは、ルーメン微生物に対して選択的な抑制効果を示し、酢酸を生産する菌の生育を阻害するが、プロピオン酸を生成する菌を阻害しない。その結果、ルーメン液中の酢酸濃度／プロピオン酸濃度比（A/P比）が低くなり、水素の生成が減少し、さらに水素消費も高まることから、モネンシンはメタン生成を低減させる働きがある。プロピオン酸は他の揮発性脂肪酸に比べてATP生成効率が高いことから、プロピオン酸の増加によって家畜のエネルギー蓄積率の割合が高まり、飼料効率が改善される結果となる。しかし、酢酸を生成する菌にはセルロース分解菌が多く、セルロース分解の抑制や耐性菌の出現等の家畜生産に対する悪影響も報告されている。さらに畜産物中への残留等、食品としての安全性に深刻な問題が生じているため、モネンシンの使用は制限されてきている。よって、家畜や人体に対して安全な飼料添加剤の開発が早急に必要になっている。安全な飼料添加剤としては天然植物成分が検討されている。
【０００５】
北アフリカ、米国南部、メキシコ北部等の砂漠地帯に自生する潅木植物であるユッカ（Yucca schidigera）から抽出したエキスは、糖成分であるサポニンの一種のサルサポニン(ステロイド・サポニン)を多量に含有し、微生物態タンパク質合成促進作用(非特許文献１及び２)、プロピオン酸生成増加作用(非特許文献３及び４)、抗プロトゾア作用(非特許文献４)などが報告されている。サポニンには反芻家畜のルーメン内において発生する飼料由来のアンモニア（NH3）を一時的に吸着し、捕捉する作用がある。すなわち、ユッカはNH3濃度が高い環境ではNH3を吸着し、低い濃度の環境においてはNH3を放出する働きがある。この働きにより、ルーメン内でのアンモニアの利用が向上し、その結果、微生物態タンパク質合成効率が上昇するとされている(非特許文献２及び４)。さらにサポニンは水と油の両方に結合する性質をもつ界面活性剤であり、浸透圧を変化させることで細胞壁を持たないプロトゾアを溶解する働きがあり、サポニンによってプロトゾアの抑制を実証した報告がされている(非特許文献４及び５)。また、プロトゾアの表面にはメタン菌が寄生しており、プロトゾアの減少はメタンが減少する要因の一つと考えられる。その他にも、タンパク質分解酵素生成菌を抑制することにより、ルーメン内でのタンパク質の分解を抑制すること、セルロース分解菌を抑制するなど、イオノフォアと類似する、微生物に対する選択的な抑制効果も知られている。このような静菌作用がメタン抑制に関与すると推察されているが、詳細な検討例は報告されていない。
【０００６】
また、南米チリに自生する木本植物であるキラヤ（Quillaja saponarea）から抽出したエキスにも、ユッカ同様にサポニン（トリテルペノイド・サポニン）が多く含まれる。キラヤのサポニンは、ユッカに比べて含有するサポニンの種類が多く(50種以上)、界面活性に極めて優れた効果を有する。キラヤにはユッカ同様にNH3吸着作用や抗プロトゾア作用、微生物体タンパク質合成効率の増加が報告されている(非特許文献５、６及び７)。
【非特許文献１】Harinder外、1998
【非特許文献２】Hussan及びCheeke、1995
【非特許文献３】Kil外、1994
【非特許文献４】Hristov外、1999
【非特許文献５】Hristov外、2003
【非特許文献６】Makkar及び Becker、1997
【非特許文献７】Harinder外、1998
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、反芻動物のルーメンにおける微生物の生理・生態に重要な影響を及ぼすことのない、飼料効率向上剤を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、ユッカ、キラヤ又はそれらの抽出物を有効成分とする、反芻動物の飼料効率向上剤である。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の飼料効率向上剤は、ルーメン内の有用菌に悪影響を及ぼすことなく、ルーメン内のメタン生成を抑制し、飼料タンパク質の利用効率及び飼料エネルギー利用効率を増加させることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明に用いられるユッカ及びキラヤとしては、植物の粉砕物でもよいが、抽出物として使用するのが好ましい。当該抽出物としては、水、熱水、又は有機溶媒による抽出物が挙げられる。抽出に用いられる有機溶媒としては、アルコール、更に低級アルコール、特にエタノールが好ましい。
【００１１】
本発明の飼料効率向上剤中のユッカ、キラヤ又はそれらの抽出物の含有量は特に制限されないが、１〜１００質量％、さらに５〜１００質量％、特に１０〜１００質量％が好ましい。
【００１２】
本発明の飼料効率向上剤には、ユッカ、キラヤ及びそれらの抽出物以外に、従来公知の反芻動物用の飼料効率向上成分を添加することができる。そのような成分としては、モネンシン、サリノマイシン、ラサロシロ等のイオノフォア類、Ｌ−システイン等が挙げられる。
【００１３】
また、本発明の飼料効率向上剤には、他の栄養成分、例えばアミノ酸、ビタミン類、ミネラル類、タンパク質、脂質（共役リノール酸等の脂質）を配合することもできる。
【００１４】
本発明の飼料効率向上剤は、飼料に添加して投与することができ、その剤形としては、粉末、粒剤、造粒品等が挙げられる。これらの製剤を調製するには、種々の結合剤、賦形剤を配合するのが好ましい。
【００１５】
本発明の飼料効率向上剤の投与量は、ユッカ、キラヤ又はそれらの抽出物として１日当たり０．６〜１．５ｇが好ましい。
【００１６】
本発明の飼料効率向上剤は、特にルーメン内のメタン生成抑制剤として作用し、これにより飼料効率を向上することができる。
ルーメン内でのメタン生成の時系列の情報を得るためには、メタン生成菌の動態を知る必要がある。この目的のためには、バッチ式によるメタン発生量の測定には限界があるため、本発明者は連続測定を可能にする新しいメタンバイオリアクターシステムを開発した。このシステムによって、発生ガスである二酸化炭素とメタンを連続的に測定することが可能であるため、メタン生成菌によるメタン生成の動態を知ることが可能になった。本発明では、このバイオリアクターシステムを用い、ユッカ及びキラヤの二つの植物抽出添加剤のルーメンメタン生成および発酵性状に及ぼす影響を解析し、飼料添加剤としての有効性を以下の通り検討した。
【００１７】
材料及び方法
１）in vitro培養実験材料
１．培養液
イノキュラム（接種菌液）としてルーメンフィステル装着牛より朝の給餌前に採取したルーメン液ナイロン布濾過液400mlとマックドウガル（McDougall）の人工唾液400mlを混合したものを培養液とした。
２．基質
培養基質として、乾草・アルファルファヘイキューブ・配合飼料を２：１：１の割合で混合した風乾粉砕評品を10g用いた。飼料の化学成分及びエネルギー含量は表１に示す。
【００１８】
【表１】
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【００１９】
３．試験区
・無添加区
添加剤を加えないものを無添加区（CTL区）とし、対照区として設置した。
・モネンシン添加区
シグマ  アルドリッチ  ジャパン株式会社より購入のモネンシンナトリウム  90−95％を10μM（培養液800mlあたり5.6mg）添加し、これをモネンシン添加区（MON区）とし、対照区として設置した。
・ユッカ抽出液添加区
ユッカエキス（ＦＯＡＭＡＴＩＯＮ  50、デザート・キング・インターナショナル社）を培養液800ml当たり1600μl添加し、これをユッカ抽出液添加区（YUC区）とした。
・キラヤ抽出液添加区
キラヤエキス（ＱＬ  Ａｇｒｉ、デザート・キング・インターナショナル社）を培養液800ml当たり1600μl添加し、これをキラヤ抽出液添加区（QUI区）とした。添加量はユッカと同量に設定した。
【００２０】
２）in vitro培養実験方法
１．培養装置及び培養時間
メタンバイオリアクターシステム（高杉製作所）を用いて24時間培養を3反復した。概略図を図１に示す。
２．培養手順
まず、予めCO2とN2を通気してｐHを6.6に調節した人工唾液を四つの各発酵槽内に400ｍl宛加え、培養液温度を設定した。発酵槽内の培養液温度は、発酵槽内の温度センサーにより感知し、コンピューターによって自動制御した。発酵槽内の攪拌はマグネット方式を採用し、回転速度をコンピューターによって制御した。
次に、培養液温度が設定温度に達したのを確認後、発酵槽に基質を加えた。同時に、各発酵槽に所定量の飼料添加物を加えた。
その後、ルーメン液400ｍlを加え、飼料が均一に混ざるように一度攪拌し、密封した。密封した時点からを培養開始時とした。
発酵槽内の嫌気条件は窒素ガスを流し、槽内に残量する酸素を除去して確保した。発生したガスは水分凝縮器と除湿容器により除湿した後、計測器に通気した。
メタンガスと二酸化炭素濃度は、赤外線分析計で連続測定し、コンピューター上でリアルタイムにモニタリングした。
また培養中の発酵性状を測定するために、培養開始から０、２、４、６、８、１０、１２、１４、２４時間後にサンプルを採取した。図２に示すように、窒素ガスの供給によって発酵槽内を陽圧にし、培養液内に通した管のコックを開放し、チューブを通して内容液を採取した。内溶液サンプルを採取した後に、同量の人工唾液をメスシリンダーからポンプを用いて補充した。
採取した内容液サンプルは、ｐＨ，酸化還元電位及び比濁度を測定した後、分析用サンプルとして凍結保存した。同時に発酵槽に人工唾液15mlを補充した。
【００２１】
３）測定項目及び測定方法
１．気相
・メタン、二酸化炭素生成量
メタンガスと二酸化炭素濃度の計測は、1セットの計測システムによって4連の培養を同時に行うため、10分間毎に計測を切替えるようにプログラム上で制御した。計測時間は、10分のうちの最初の3分間は計器内に残留する前発酵槽のガスを排除するために要する時間で、これを除く計７分間を、連続計測するようにプログラムした。ガスの切り替えは、図１に示すように計器内のガスの「方向切り替え弁」により自動に行い、各発酵槽のガスが混合することはないように設計した。計測された数値を元に累積生成量を算出した。
・各ガス生成量の回帰分析
積生成量の経時的な変化を非線形回帰分析し、処理間の比較を行った。すなわち、ルーメン内のガス生成量は、ルーメン内微生物による発酵の程度を表し、その増殖を反映している。よって、微生物の増殖を反映するルーメン発酵は動物の成長様式に類似すると考えられ、ハートレー（Hartley）の成長モデル式G＝α（１−βe-kt）を適用した。ガス生成様相の回帰分析から、ガス生成速度を表すパラメータを求めた。
２．液相
・ｐＨ、酸化還元電位、比濁度
サンプル採取後、直ちにｐＨメーター（島津携帯ｐＨメーター）を用い、ｐＨ及び酸化還元電位（ＯＲＰ）を測定した。また、採取したサンプルのうち0.2ｍlを蒸留水3.8mlで希釈し、HITACHI Model 100-20分光光度計により６６０ｎｍにおける比濁度（O.D.660）を測定した。測定後、培養液は凍結保存した。
・遠心分離後の比濁度
サンプル内容液0.4mlを蒸留水7.6mlで希釈し、その後プロトゾアや飼料片を含まない、バクテリアを主とする画分を得る目的で、1000rpm、４℃、５分間遠心分離した。その上澄み液4mlを取り、HITACHI Model 100-20分光光度計により比濁度(O.D.660)を測定した。
・アンモニア態窒素濃度（NH3-N）
コーンウェイ（Conway）及びオマレー（O'mally）によって報告された微量拡散法を一部改変した定量法を用い、サンプル内容液のアンモニア態窒素濃度を測定した。すなわち、拡散剤として飽和炭酸カリウム（K2CO3）、及び吸着剤としてホウ酸を用い、1/100N  H2SO4で滴定した。
・揮発性脂肪酸濃度
サンプル内容液を遠心分離（18,000×ｇ、15分）し、上澄液0.8ｍlに25％メタリン酸0.2ｍlを加え、一晩凍結保存した。翌日、その解凍液を遠心分離（8,000×ｇ、15分）し、その上澄液0.5ｍlに10ｍＭ  2-エチル-ブチル溶液を0.5ｍl加え、分析用サンプル液として調製した。校正用標準液として、50ｍＭ酢酸、50ｍＭプロピオン酸、50ｍＭ酪酸、10ｍＭイソバレリアン酸、10ｍＭバレリアン酸、5ｍＭイソカプロン酸、5ｍＭカプロン酸の混合液を用い、サンプル液と同様に調製した。揮発性脂肪酸（ＶＦＡ）の分析はキャピラリーガスクロマトグラフィ（島津  ＣＧ−１４）により測定した。各ＶＦＡ濃度の定量演算プログラムはクロマトパック（島津  ＣＲ−４Ａ）の自動演算プログラムで行った。
【００２２】
４）統計処理
統計処理は、ＳＡＳのＧＬＭを用い、処理間の有意差検定はダンカン（ＤＵＮＣＡＮ）の多重範囲検定によって行った。
【００２３】
結果
１）ガス生成に及ぼす各飼料添加剤の影響
1.メタン及び二酸化炭素生成速度に及ぼす各飼料添加剤の影響
メタン生成速度の経時的な変化を測定した。メタン生成速度は、培養開始後2−4時間でピークを迎え、その後は減少した。また、YUC区及びQUI区では、培養開始直後から二時間後までの間において生成速度がCTL区、MON区よりも低い傾向を示した。
二酸化炭素生成速度の変化を測定した。培養開始時に二酸化炭素が測定され、その後、減少した。培養開始後2、3時間ではMON区で有意に低い値を示した（P<0.05）。しかし、QUI区は培養開始2、3時間は相対的に高い傾向を示した。
2.メタン及び二酸化炭素の累積生成量に及ぼす各飼料添加剤の影響
生成速度の値を元に、累積生成量を算出した。図３に累積メタン生成量及び図４に累積二酸化炭素生成量を示す。さらに、累積生成量の値をハートレー（Hartley）の非線型モデルによって回帰させ、その結果得られた回帰曲線も示した。回帰により求められたメタン及び二酸化炭素の非線型回帰式のパラメータ及び決定係数は表２及び表３にそれぞれ示す。
【００２４】
【表２】
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【００２５】
【表３】
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【００２６】
図３に示すように、メタンの累積生成量は、CTL区と比較してMON区で最も低く、次いでYUC区、QUI区と低い傾向を示した。表２に示すように、最大累積値を表すαは、MON区で有意に低く（P<0.05）、YUC及びQUI区もCTL区に比べて低い傾向を示した。速度に関するパラメータであるｋが、MON区はCTL区より有意に高いことから（P<0.05）、モネンシンはメタン生成速度を増加したといえる。
図４に示すように、二酸化炭素についてはMON区では低くなる傾向を示し、QUI区がCTL区よりも高くなる傾向を示した。同様に表３に示すように、α値はCTL区よりもYUC区及びQUI区で高くなる傾向を示した。
【００２７】
２）ルーメン液性状に及ぼす各飼料添加剤の影響
1.ｐH
培養液ｐHの経時的変化を測定した。培養開始後2時間でYUC区及びQUI区が有意に低い値となった（P<0.05）。また培養開始後6時間からQUI区のｐHは上昇する傾向を示し、培養開始後８時間を経過してからはCTL区より有意に高い値を示した（P<0.05）。
2.酸化還元電位
培養液酸化還元電位の経時的変化を測定した。培養開始後6〜14時間にMON区、YUC区及びQUI区はCTL区より低い値の傾向を示した。
3.比濁度
図５に内溶液サンプル採取直後の比濁度の経時的変化を示す。培養開始後2時間以降YUC区及びQUI区でCTL区及びMON区と比較して有意に高い値を示した（P<0.05）。
図６に遠心分離後の比濁度の経時的変化を示す。サンプル採取直後の測定と同様に、YUC区では培養開始後2時間以降CTL区及びMON区よりも有意に高い値を示した（P<0.05）。またQUI区は、培養開始後４時間以降にCTL区及びMON区よりも高い傾向を示し、培養10時間以降では有意に高い値を示した（P<0.05）。
4.アンモニア態窒素濃度
採取した内容液サンプルを直接微量拡散法に供し、アンモニア態窒素濃度を測定した。培養開始後2時間にMON区で有意に低い値を示した（P<0.05）。また培養開始後10時間以降ではCTL区とMON区で高い傾向を示した。培養開始後24時間では、YUC区及びQUI区は、MON区と比較して有意に低い値を示した（P<0.05）。CTL区と比較した場合も、YUC区及びQUI区のアンモニア態窒素濃度は低い傾向を示した。
サポニンに吸着したアンモニアを分離して除去する目的で遠心分離（12500×ｇ、15分）を行い、上澄液の遊部のアンモニア態窒素を培養開始後24時間測定した。YUC区及びQUI区は、CTL区及びMON区より有意に低い値を示した（P<0.05）。
5．揮発性脂肪酸（VFA）濃度
表４に培養開始後24時間のVFA濃度を示す。総VFA濃度はMON区で有意に低い値を示した（P<0.05）。一方、YUC区及びQUI区では増加傾向を示した。酢酸／プロピオン酸比（A/P比）は、MON区、YUC区及びQUI区共にCTL区よりも有意に低い値を示した（P<0.05）。酢酸濃度は、CTL区に比べ、MON区で有意に低い値を示したが（P<0.05）、YUC区及びQUI区ではCTL区との間に差は認められなかった。しかし、プロピオン酸濃度は、CTL区に比べてMON区では高くなる傾向を示し、YUC区及びQUI区では有意に高い値となった（P<0.05）。
【００２８】
【表４】
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【００２９】
考察
表２に示すように、最大メタン生成量はMON区で有意に低い値を示したことから（P<0.05）、本実験の結果は、これまでのモネンシンに関する報告と一致し、モネンシンのメタン抑制効果を裏づけるものとなった。同様にYUC区及びQUI区においても、メタン生成を抑制する傾向が認められた。またYUC区及びQUI区では最大二酸化炭素生成量がCTL区に比べて高い傾向を示したことから、ユッカ及びキラヤは、メタン生成菌以外の還元菌を賦活したものと推察される。すなわち、ルーメンメタン生成菌は、水素と二酸化炭素からメタンを生成する水素資化菌であるため、メタン菌により利用される水素の量がユッカ及びキラヤによって低下したためにメタンへの還元量が減少したものと推察される。他方、MON区での二酸化炭素の減少は、モネンシンによるルーメン内微生物への直接の抑制作用も関与した可能性が考えられる。
また、MON区のVFA濃度の測定結果から、モネンシンは従来の報告と一致し、モネンシンによって、酢酸濃度が減少し、プロピオン酸濃度が増加した。従って、モネンシンはルーメン内微生物に対する直接の抑制作用の他にプロピオン酸生成を促進したことも、メタン抑制の要因となったと考えられる。しかし、総VFA濃度の低下から、モネンシンのルーメン内有用菌に対する静菌作用も関与したものと推察される。一方、YUC区及びQUI区では、総VFA濃度が増加する傾向を示したことから、有用菌の菌態タンパク質合成が促進されたものと考えられる。各VFA濃度をみると、モネンシンにより酢酸は低下したが、ユッカ及びキラヤでは無添加区との間に差はなかった。ユッカのサポニンの試験結果はむしろセルロース分解菌の活性化を示すものとなった。ユッカによってプロピオン酸生成が有意に増加したことは、プロピオン酸菌の増殖を促進したものと考えられる。YUC区及びQUI区で、アンモニア態窒素の低下が示されたことから、ユッカ及びキラヤに含まれるサポニン成分によるアンモニア吸着作用が働き、プロピオン酸生成菌の菌態タンパク質合成を選択的に促進したものと推察される。すなわち、ユッカ及びキラヤは、メタン生成菌に対する直接的な抑制効果ではなく、プロピオン酸生成反応を促進し、メタンの基質となる水素を競分し、メタン生成を低減したものと考えられる。ｐHは、培養開始後2時間と8〜14時間後で有意差が示されたが、ｐH値は全て6.5〜6.9の範囲内であった。このｐHの範囲はセルロース消化の至適範囲であり、ｐHの変化が発酵に影響を与えることはなかったと考えられる。
本実験において微生物量の変動の指標として、比濁度を測定したが、全ての区で時間の経過と共に減少する傾向を示した。この原因の一つとして、ルーメン液中の細菌が、基質として添加した固形性飼料へ付着したためと考えられる。しかし、YUC区及びQUI区と、CTL区及びMON区とではその推移に差が認められた。すなわち、YUC区及びQUI区では減少の程度は小さく、培養開始後２４時間ではCTL区及びMON区と比較して有意に高い値を示した。これは、微生物自体の合成量の差に起因する他に、サポニン成分の界面活性効果により飼料への付着が阻害されたことも原因の一つとして考えられる。そこで遠心分離によって、プロトゾア以上の大きさの粒子をできるだけ除いて再度比濁度を測定した結果、CTL区及びMON区は時間の経過とともに低下の傾向を示した。YUC区では減少は認められなかった。しかし、QUI区ではCTL区との差は小さく、比濁度の変化から総VFA濃度増加を裏付ける結果は得られなかった。
【産業上の利用可能性】
【００３０】
以上の結果から、ユッカ及びキラヤは、モネンシンと同様にプロピオン酸生成を促進し、メタンを低減させる効果があると考えられる。しかし、モネンシンの効果とは異なり、総VFA濃度の低下は示されなかったことから、ユッカ及びキラヤはルーメン内有用菌に対する悪影響を及ぼさないと考えられ、抗生物質に代わるルーメンメタン生成に対する安全なマニピュレータとして実用化できることが示された。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】メタンバイオリアクターシステムの概略図である。
【図２】培養液サンプル採取及び人口唾液補充方法を示す概略図である。
【図３】累積メタン生成量の経時的変化を示すグラフである。
【図４】累積二酸化炭素生成量の経時的変化を示すグラフである。
【図５】採取直後の培養液サンプルの比濁度の経時的変化を示すグラフである。
【図６】遠心分離後の培養液サンプルの比濁度の経時的変化を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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