(57)【要約】【課題】赤霊芝及び黒霊芝の抽出物を含有する血栓症改善剤を提供する。【解決手段】赤霊芝と黒霊芝の抽出物を併用することにより、赤霊芝抽出物または黒霊芝抽出物単独の場合と比較して、特に優れた血小板凝集抑制作用を示した。赤霊芝と黒霊芝の抽出物を含有する食品、医薬部外品、医薬品は、抗血栓作用を有し、血栓症の改善ばかりでなく、血栓が関与する動脈硬化、くすみ、痴呆、肩こり、頭痛などの症状の予防や改善に有効である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
赤霊芝及び黒霊芝の抽出物を含有することを特徴とする血栓症改善剤。
【請求項２】
赤霊芝の水抽出物及び黒霊芝の溶媒抽出物を含有することを特徴とする血栓症改善剤。
【請求項３】
赤霊芝の溶媒抽出物及び黒霊芝の水抽出物を含有することを特徴とする血栓症改善剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項記載の血栓症改善剤を有効成分として含有する血栓症の予防や改善を目的とする医薬品、食品。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか１項記載の血栓症改善剤を有効成分として含有し、血行悪化に起因する、動脈硬化、くすみ、痴呆、血圧異常、めまい、肩こり、頭痛、腰痛、関節痛の予防や改善を目的とする医薬品、食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗血栓作用を有する新規な薬効成分ならびにこれを有効成分として含有する医薬品、食品に関する。本薬効成分は主として赤霊芝及び黒霊芝に含有する。
【背景技術】
【０００２】
血小板は血栓形成において極めて重要な因子である。すなわち、血栓の形成は、血管内の損傷などに起因して、アラキドン酸などにより血小板の凝集能が高まり血栓形成に至るといわれている。血栓が大量に形成されると、その形成部位から先の血流が著しく悪くなり、組織に重大な障害を引き起こし、血栓症が起こる。
例えば、心臓や脳の血管に血栓が形成されると、心筋梗塞、脳梗塞を引き起こし、生命に危険をもたらす。また、重度の血栓ではなくても、正常状態よりも血栓の量が増加すると、動脈硬化、痴呆、血圧異常、めまい、肩こり、頭痛、腰痛、関節痛、目のかすみ、不眠、動悸、息切れ、血圧異常、不整脈などの症状を引き起こす。また、その他に血流の悪化によって起こりうる、くすみ、くまなどの症状も引き起こす。
【０００３】
従って、血栓の形成を防止し、血栓に起因する種々の疾患を治療するには血小板凝集を抑制することが有効である。
【０００４】
従来の血栓治療剤としては、アセチルサリチル酸、パナルジンなどが使用されている。最近では、天然物に薬効を望む傾向もあるが、現在に至るまで有効に予防や改善できる天然物はほとんど存在しなかった。
【０００５】
マンネンタケの代表としては、赤霊芝が一般的であり、従来技術として、マンネンタケの抗血栓効果が知られている（特許文献１）。この成分は、熱水に可溶であり、アルコールに不溶な成分であることが記載されている。また、霊芝の水溶性成分のアデノシンやその誘導体に血小板凝集抑制効果があることが知られている（非特許文献１）。しかし、赤霊芝と黒霊芝を併用して効果が増強することは一切報告されていなかった。
【０００６】
これらの文献は、赤霊芝の成分がほとんどであるが、黒霊芝の成分についても抗血栓効果に関する報告がある（特許文献２）。
【０００７】
【特許文献１】特開昭５７−１１２３３１号公報
【特許文献２】特願２００３−４００１９１号公報
【非特許文献１】Ｓｈｉｍｉｚｕ．Ａ，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ，Ｖｏｌ．３３，３０１２−３０１５，１９８５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、血栓の形成や血栓による血行悪化を予防や改善できるような天然抽出物や、これを含有した医薬品、食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
この様な事情により、本発明者らは鋭意研究検討した結果、赤霊芝や黒霊芝を単独で用いるよりも赤霊芝と黒霊芝の抽出物を併用することにより、相乗的に抗血栓効果が得られることを発見し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
赤霊芝及び黒霊芝は、生薬「霊芝」に用いられる担子菌であり、マンネンタケ科（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｔａｃｅａｅ）、マンネンタケ属（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ）に属し、学名は、赤霊芝（赤芝、学名：Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）、黒霊芝（黒芝、学名：Ｇ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ、Ｇ．ｓｉｎｅｎｓｅ、Ｇ．ａｔｒｕｍ）といわれている。また、マンネンタケ属のキノコについては、中国の薬学古書である「本草綱目」や「神農本草経」には、黒霊芝（黒芝）のほか、赤霊芝（赤芝）、紫霊芝（紫芝）、青霊芝（青芝）、黄霊芝（黄芝）及び白霊芝（白芝）が存在すると記載されている。赤霊芝や黒霊芝は広く中国や日本市場などで流通しているものを用いることができるし、自生品や栽培品を用いても良い。
【００１１】
本発明に用いられる赤霊芝及び黒霊芝は、子実体、菌糸体、天産物、栽培物、及び培養物などを問わず使用することができる。また、必要に応じてそのままの状態、破砕物、或いは乾燥物などを適宜選択して抽出操作に付することができる。
【００１２】
抽出する溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノールなど）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリンなど）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトンなど）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチルなど）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、石油エーテルなど）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテルなど）が挙げられる。これらの溶媒は一種でも二種以上を混合して用いても良い。好ましくは、低級アルコール、ケトン類、エステル類などや、これらの含水溶媒が良い。特に好ましくは、赤霊芝は水抽出が良く、黒霊芝はエタノール又は含水エタノールが良い。
【００１３】
本発明の抽出物をさらに精製する方法として、互いに混合しない溶媒で液・液分配抽出により溶媒分画精製することもできる。
【００１４】
液・液分配抽出に用いる溶媒としては、上記の溶媒を用いることが可能である。例えば、（水又は含水アルコール）・炭化水素系、（水又は含水アルコール）・エーテル系、（水又は含水アルコール）・エステル系、水・ブタノール系などを採用できる。上記にとらわれず、互いに混合しない溶媒系であれば採用できる。好ましくは、溶媒抽出物（固形物）に含水低級アルコールと炭化水素溶媒を加えて抽出し、炭化水素溶媒可溶分を除去した残液にエステル溶媒を加えて抽出することにより本発明の抽出物を精製することができる。また、酸や塩基による分別抽出を行うこともできる。
【００１５】
本発明の抽出物をさらに精製する方法として、マンネンタケ抽出物又は上記の溶媒分画物を吸着剤に吸着させ、溶媒により溶出させることにより、抽出物を精製することができる。
【００１６】
上記抽出物や精製物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈、ろ過、活性炭などによる脱色、脱臭、エタノール沈殿などの処理をして用いても良い。更には、抽出や精製した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥などの処理を行い、乾燥物として用いても良い。
【００１７】
本発明の抗血栓剤には、上記抽出物や吸着剤などによる精製物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内で、希釈剤を用いることができ、希釈剤としては固体、液体、半固体でもよく、たとえば次のものがあげられる。すなわち、賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、香料、保存料、溶解補助剤、溶剤などである。具体的には、乳糖、ショ糖、ソルビット、マンニット、澱粉、沈降性炭酸カルシウム、重質酸化マグネシウム、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、セルロース又はその誘導体、アミロペクチン、ポリビニルアルコール、ゼラチン、界面活性剤、水、生理食塩水、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、カカオ脂、ラウリン脂、ワセリン、パラフィン、高級アルコールなどである。
【００１８】
本発明の血栓症改善剤は、食品、医薬部外品又は医薬品のいずれにも用いることができ、その剤形としては、例えば、経口用として散剤、顆粒剤、錠剤、糖衣錠剤、カプセル剤、シロップ剤、丸剤、懸濁剤、液剤、乳剤などである。非経口用として注射液にすることが出来る。また、座薬とすることも出来る。
【００１９】
本発明に用いる抽出物の摂取量は、投与形態、使用目的、年齢、体重などによって異なるが、赤霊芝と黒霊芝固形分の合計として、０．１〜５，０００ｍｇ／日、好ましくは１〜５００ｍｇ／日の範囲で１日１回から数回経口投与できる。もちろん前記したように、投与方法や投与量は種々の条件で変動するので、上記投与範囲より少ない量で十分な場合もあるし、また、範囲を超えて投与する必要がある場合もある。また、製剤化における薬効成分の添加法については、予め加えておいても、製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【００２０】
本発明に用いる赤霊芝と黒霊芝の抽出物の配合比は、固形物の重量比で５：９５〜９５：５、好ましくは１０：９０〜９０：１０である。
【発明の効果】
【００２１】
赤霊芝と黒霊芝の抽出物を併用することにより、高い抗血栓効果が得られる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる抽出物の製造例、本発明の処方例及び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量の部とは重量部を示し、％は重量％を示す。
【実施例１】
【００２３】
製造例１  赤霊芝の水抽出物
赤霊芝子実体の乾燥物１００ｇに精製水２Ｌを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して赤霊芝の水抽出物を６．０ｇ得た。
【００２４】
製造例２  赤霊芝の５０％エタノール抽出物
赤霊芝子実体の乾燥物１００ｇに精製水１Ｌ及びエタノール１Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して赤霊芝の５０％エタノール抽出物を１．８ｇ得た。
【００２５】
製造例３  赤霊芝のエタノール抽出物
赤霊芝子実体の乾燥物１Ｋｇにエタノール１５Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、赤霊芝のエタノール抽出物を２０ｇ得た。
【００２６】
製造例４  赤霊芝の溶媒分画精製物
製造例３の赤霊芝のエタノール抽出物３．０ｇをエタノール５００ｍＬに溶解し、同容量の精製水とヘキサンを加えて抽出した。水層部分を１／２に濃縮し、同容量の酢酸エチルを加えて抽出した後、濃縮乾固し、酢酸エチル画分０．８４ｇを得た。
【００２７】
製造例５  黒霊芝の水抽出物
黒霊芝子実体の乾燥物２０ｇに精製水４００ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して黒霊芝の水抽出物を１．４ｇ得た。
【００２８】
製造例６  黒霊芝の５０％エタノール抽出物
黒霊芝子実体の乾燥物１００ｇに精製水１Ｌ及びエタノール１Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して黒霊芝の５０％エタノール抽出物を５．５ｇ得た。
【００２９】
製造例７  黒霊芝のエタノール抽出物
黒霊芝子実体の乾燥物１．５Ｋｇにエタノール２０Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、黒霊芝のエタノール抽出物を３０ｇ得た。
【００３０】
製造例８  黒霊芝の溶媒分画精製物
製造例７の黒霊芝のエタノール抽出物２．０ｇをエタノール３５０ｍＬに溶解し、同容量の精製水とヘキサンを加えて抽出した。水層部分を１／２に濃縮し、同容量の酢酸エチルを加えて抽出した後、濃縮乾固し、酢酸エチル画分０．５６ｇを得た。
【実施例２】
【００３１】
血小板凝集抑制作用
文献（嘉久志寿人，四家勉，早崎洋子，松原尚志，内田清久，本間義春，川角浩，竹内良夫，日本薬理学雑誌，Ｖｏｌ．９５，３３５−３４６，１９９０、Ｂｏｒｎ，Ｇ．Ｖ．Ｒ．，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．１９４，９２７−９２９，１９６２）を参考に行った。
エーテル麻酔下でモルモットの心臓より３．８％クエン酸ナトリウム１容に対し血液９容の割合で採血し、室温で１，０００ｒｐｍ、１５分遠心後上清を採取し多血小板血漿（Ｐｌａｔｅｌｅｔ−Ｒｉｃｈ  Ｐｌａｓｍａ：ＰＲＰ）とした。残りの血液は室温で３，０００ｒｐｍ、１５分遠心し乏血小板血漿（Ｐｌａｔｅｌｅｔ−Ｐｏｏｒ  Ｐｌａｓｍａ：ＰＰＰ）を得、ＰＲＰとＰＰＰを等量混合したもの（Ａ液とする）を試験に用いた。
血小板凝集反応はＢｏｒｎの方法に準じて、血小板凝集計（ＮＢＳ  ＨＥＭＡ  ＴＲＡＣＥＲ  ６０１、二光バイオサイエンス）を用いて測定した。すなわちＡ液１８０マイクロＬに試験試料溶液２０マイクロＬを加え、３７℃で１分間撹拌（１，０００ｒｐｍ）予備加熱後血小板凝集惹起物質（ＡＤＰ）２２マイクロＬを添加し、血小板の凝集により生じた透光度の変化を経時的に記録した。血小板の凝集率はＰＲＰ及びＰＰＰの透光度をそれぞれ０％及び１００％とし、凝集剤添加後の最大透光度を最大凝集率とした。血小板凝集阻害率は以下の式で算出した。
血小板凝集阻害率（％）＝｛１−（凝集剤添加後の最大透光度）／（凝集剤添加前の最大透光度）｝×１００
【００３２】
赤霊芝と黒霊芝の抽出物の併用による血小板凝集阻害作用は、以下の式で算出した。
併用効果（倍）＝（赤霊芝と黒霊芝の抽出物の併用による血小板凝集阻害率）／｛（赤霊芝の抽出物による血小板凝集阻害率）＋（黒霊芝の抽出物による血小板凝集阻害率）｝
【００３３】
これらの実験結果を表１及び表２に示した。その結果、本発明に用いた黒霊芝の抽出物と赤霊芝の抽出物を併用することにより、単独での効果と比較して、血小板凝集阻害作用の相乗効果を示した。特に、黒霊芝の溶媒分画精製物との併用が優れた血小板凝集阻害作用を示した。以上により、黒霊芝の抽出物と赤霊芝の併用は、相乗的な血小板凝集阻害作用を示した。
【００３４】
【表１】
2006028128.tif 000002
【００３５】
【表２】
2006028128.tif 000003
【実施例３】
【００３６】
本発明の抽出物は、処方例として下記の製剤化を行うことができる。
【００３７】
処方例１  散剤
処方                                                    配合量
１．赤霊芝の水抽出物（製造例１）                        １０部
２．黒霊芝の水抽出物（製造例５）                        １０
３．乾燥コーンスターチ                                  ２０
４．微結晶セルロース                                    ６０
［製法］成分１〜４を混合し、散剤とする。
【００３８】
処方例２  錠剤
処方                                                    配合量
１．赤霊芝のエタノール抽出物（製造例３）                  ４部
２．黒霊芝の溶媒分画精製物（製造例８）                        ８
３．乾燥コーンスターチ                                  ２５
４．カルボキシメチルセルロースカルシウム                ２０
５．微結晶セルロース                                    ３３
６．ポリビニルピロリドン                                  ７
７．タルク                                                ３
［製法］成分１〜５を混合し、次いで成分６の水溶液を結合剤として加えて顆粒成形する。成形した顆粒に成分７を加えて打錠する。１錠０．５２ｇとする。
【００３９】
処方例３  飲料
処方                                                      配合量
１．赤霊芝の水抽出物（製造例１）                              ０．１部
２．黒霊芝のエタノール抽出物（製造例７）                        ０．２
３．エタノール                                            ２
４．ステビア                                              ０．０５
５．リンゴ酸                                              ５
６．香料                                                  ０．１
７．精製水                                              ９２．５５
［製法］成分１、２及び３を混合する。次いで、成分４、５、６及び７を加えて混合する。
【産業上の利用可能性】
【００４０】
赤霊芝と黒霊芝の抽出物は、高い抗血栓作用を有するため、食品、医薬部外品又は医薬品などに配合することにより、血栓症の予防や改善、血行悪化に起因する、動脈硬化、くすみ、痴呆、血圧異常、めまい、肩こり、頭痛、腰痛、関節痛の予防や改善などに有効である。