(57)【要約】【課題】本発明により、非キラル性出発材料からの光学的に純粋なスフィンゴシンのバイオ触媒合成のための方法を提供する。【解決手段】スフィンゴシンの立体異性体は、所望のスフィンゴシン又はその誘導体を得るため、立体特異的反応技術を利用してキラルアレンジオールから調製する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｄ−エリトロ−スフィンゴシンの合成のための方法であって：
ａ．（＋）−cis −２，３−ジヒドロキシ−１−クロロ−シクロヘキサ−４，６−ジエンをｐ−トルエンスルホン酸により、２，２−ジメトキシプロパンの存在下で処理して（２Ｒ，３Ｓ）−２，３−イソプロピリデン−１−クロロシクロヘキサ−４，６−ジエンを形成する；
ｂ．前記（２Ｒ，３Ｓ）−２，３−イソプロピリデン−１−クロロシクロヘキサ−４，６−ジエンをオゾン分解に委ね、次いでこのオゾン分解生成物を環化に委ねて２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリツルロノラクトンを形成する；
ｃ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリツルロノラクトンをナトリウムボロハイドライドの存在下で還元してナトリウム（Ｓ，Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−ヒドロキシブタノエートを生成する；
ｄ．前記ナトリウム（Ｓ，Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−ヒドロキシブタノエートをヨードメタンの存在下で環化して２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロノ−１，４−ラクトンを形成する；
ｅ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロノ−１，４−ラクトンをDIBAL 溶液で処理して２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロースを形成する；
ｆ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロースを脱保護してＬ−エリトロースを形成する；
ｇ．前記エリトロースをWittigオレフィン化に委ねて次式を有する生成物を得る：
【化１】
2006028196.tif 000018
ｈ．工程ｇの生成物をＨ+ による触媒脱保護に委ねて次式を有する生成物を得る：
【化２】
2006028196.tif 000019
ｉ．工程ｈの生成物をベンズアルデヒドと、Ｈ+ の存在下で反応させて次式を有する生成物を得る：
【化３】
2006028196.tif 000020
ｊ．工程ｉの生成物をメタンスルホニルクロリド、リチウムブロミド、アジ化ナトリウム及びリチウムアルミニウムハイドライドと４段階反応において反応させて次式を有する生成物を得る：
【化４】
2006028196.tif 000021
ｋ．工程ｊの生成物を塩化水素と反応させてＤ−エリトロ−スフィンゴシンを得る；
ことを含んで成る方法。
【請求項２】
Ｄ−トレオ−スフィンゴシンの合成のための方法であって：
ａ．（＋）−cis −２，３−ジヒドロキシ−１−クロロ−シクロヘキサ−４，６−ジエンをｐ−トルエンスルホン酸により、２，２−ジメトキシプロパンの存在下で処理して（２Ｒ，３Ｓ）−２，３−イソプロピリデン−１−クロロシクロヘキサ−４，６−ジエンを形成する；
ｂ．前記（２Ｒ，３Ｓ）−２，３−イソプロピリデン−１−クロロシクロヘキサ−４，６−ジエンをオゾン分解に委ね、次いでこのオゾン分解生成物を環化に委ねて２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリツルロノラクトンを形成する；
ｃ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリツルロノラクトンをナトリウムボロハイドライドの存在下で還元してナトリウム（Ｓ，Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−ヒドロキシブタノエートを生成する；
ｄ．前記ナトリウム（Ｓ，Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−ヒドロキシブタノエートをヨードメタンの存在下で環化して２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロノ−１，４−ラクトンを形成する；
ｅ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロノ−１，４−ラクトンをDIBAL 溶液で処理して２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロースを形成する；
ｆ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロースを脱保護してＬ−エリトロースを形成する；
ｇ．前記Ｌ−エリトロースをWittigオレフィン化に委ねて次式を有する生成物を得る：
【化５】
2006028196.tif 000022
ｈ．工程ｇの生成物をＨ+ による触媒脱保護に委ねて次式を有する生成物を得る：
【化６】
2006028196.tif 000023
ｉ．工程ｈの生成物をベンズアルデヒドと、Ｈ+ の存在下で反応させて次式を有する生成物を得る：
【化７】
2006028196.tif 000024
ｊ．工程ｉの生成物をメタンスルホニルクロリド、アジ化ナトリウム及びリチウムアルミニウムハイドライドと３段階反応において反応させて次式を有する生成物を得る：
【化８】
2006028196.tif 000025
ｋ．工程ｊの生成物を塩化水素と反応させてＤ−トレオ−スフィンゴシンを得る；
ことを含んで成る方法。
【請求項３】
Ｌ−トレオ−スフィンゴシンの合成のための方法であって：
ａ．（＋）−cis −２，３−ジヒドロキシ−１−クロロ−シクロヘキサ−４，６−ジエンをｐ−トルエンスルホン酸により、２，２−ジメトキシプロパンの存在下で処理して（２Ｒ，３Ｓ）−２，３−イソプロピリデン−１−クロロシクロヘキサ−４，６−ジエンを形成する；
ｂ．前記（２Ｒ，３Ｓ）−２，３−イソプロピリデン−１−クロロシクロヘキサ−４，６−ジエンをオゾン分解に委ね、次いでこのオゾン分解生成物を環化に委ねて２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリツルロノラクトンを形成する；
ｃ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリツルロノラクトンをナトリウムボロハイドライドの存在下で還元してナトリウム（Ｓ，Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−ヒドロキシブタノエートを生成する；
ｄ．前記ナトリウム（Ｓ，Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−ヒドロキシブタノエートをヨードメタンの存在下で環化して２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロノ−１，４−ラクトンを形成する；
ｅ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロノ−１，４−ラクトンをDIBAL 溶液で処理して２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロースを形成する；
ｆ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロースを脱保護してＬ−エリトロースを形成する；
ｇ．前記Ｌ−エリトロースをWittigオレフィン化に委ねて次式を有する生成物を得る：
【化９】
2006028196.tif 000026
ｈ．工程ｇの生成物をＨ+ による触媒脱保護に委ねて次式を有する生成物を得る：
【化１０】
2006028196.tif 000027
ｉ．工程ｈの生成物をＨ+ 及びアセトンの存在下でジメトキシプロパンと反応させて次式を有する生成物を得る：
【化１１】
2006028196.tif 000028
ｊ．工程ｉの生成物をMitsunobu 転化に委ねて次式を有する生成物を得る：
【化１２】
2006028196.tif 000029
ｋ．工程ｊの生成物をベンズアルデヒドと、Ｈ+ の存在下で反応させて次式を有する生成物を得る：
【化１３】
2006028196.tif 000030
ｌ．工程ｋの生成物をメタンスルホニルクロリド、リチウムブロミド、アジ化ナトリウム及びリチウムアルミニウムハイドライドと４段階反応において反応させて次式を有する生成物を得る：
【化１４】
2006028196.tif 000031
ｍ．工程ｌの生成物を塩化水素と反応させてＬ−トレオ−スフィンゴシンを得る；
ことを含んで成る方法。
【請求項４】
Ｌ−エリトロ−スフィンゴシンの合成のための方法であって：
ａ．（＋）−cis −２，３−ジヒドロキシ−１−クロロ−シクロヘキサ−４，６−ジエンをｐ−トルエンスルホン酸により、２，２−ジメトキシプロパンの存在下で処理して（２Ｒ，３Ｓ）−２，３−イソプロピリデン−１−クロロシクロヘキサ−４，６−ジエンを形成する；
ｂ．前記（２Ｒ，３Ｓ）−２，３−イソプロピリデン−１−クロロシクロヘキサ−４，６−ジエンをオゾン分解に委ね、次いでこのオゾン分解生成物を環化に委ねて２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリツルロノラクトンを形成する；
ｃ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリツルロノラクトンをナトリウムボロハイドライドの存在下で還元してナトリウム（Ｓ，Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−ヒドロキシブタノエートを生成する；
ｄ．前記ナトリウム（Ｓ，Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−ヒドロキシブタノエートをヨードメタンの存在下で環化して２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロノ−１，４−ラクトンを形成する；
ｅ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロノ−１，４−ラクトンをDIBAL 溶液で処理して２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロースを形成する；
ｆ．前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロースを脱保護してＬ−エリトロースを形成する；
ｇ．前記Ｌ−エリトロースをWittigオレフィン化に委ねて次式を有する生成物を得る：
【化１５】
2006028196.tif 000032
ｈ．工程ｇの生成物をＨ+ による触媒脱保護に委ねて次式を有する生成物を得る：
【化１６】
2006028196.tif 000033
ｉ．工程ｈの生成物をＨ+ 及びアセトンの存在下でジメトキシプロパンと反応させて次式を有する生成物を得る：
【化１７】
2006028196.tif 000034
ｊ．工程ｉの生成物をMitsunobu 転化に委ねて次式を有する生成物を得る：
【化１８】
2006028196.tif 000035
ｋ．工程ｊの生成物をベンズアルデヒドと、Ｈ+ の存在下で反応させて次式を有する生成物を得る：
【化１９】
2006028196.tif 000036
ｌ．工程ｋの生成物をメタンスルホニルクロリド、アジ化ナトリウム及びリチウムアルミニウムハイドライドと３段階反応において反応させて次式を有する生成物を得る：
【化２０】
2006028196.tif 000037
ｍ．工程ｌの生成物を塩化水素と反応させてＬ−エリトロ−スフィンゴシンを得る；
ことを含んで成る方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はスフィンゴシンの合成方法に関する。より詳しくは、本発明は非キラル出発材料の変換による４種の立体異性体１〜４の合成に関する。
【背景技術】
【０００２】
スフィンゴシンは近縁の長鎖脂肪族２−アミノ−１，３−ジオールのグループを構成し、そのうちのＤ−エリトロ−１，３−ジヒドロキシ−２−アミノ−４，５−trans −オクタデセンが動物グリコスフィンゴ脂質の中で最も往々にして認められている。グリコスフィンゴ脂質はＮ−アシルスフィンゴシンのグリコシドであり、その一般名はセラミドである。脂肪酸、スフィンゴシン及び炭水化物の構造変化は多大な数の化学的に相違するグリコスフィンゴ脂質をもたらす。即ち、スフィンゴシン及びその誘導体グリコスフィンゴ脂質は関心がもたれ、その理由はその多彩な生物活性及び生物学的役割にある。これらの活性にはプロテインキナーゼＣ活性の阻害及び発育中の脊椎動物細胞間での情報の伝達が含まれる。スフィンゴシンは様々なガングリオシドの連鎖ターミネータをも担う。ガラクトシルセラミドはCD４レセプターを欠く細胞におけるHIV 結合のためのレセプターであることが示されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
有用なスフィンゴシン誘導体を獲得するためには、光学的に純粋なスフィンゴシンをまずその全ての異性体について合成する：
【０００４】
【化１】
2006028196.tif 000002
【０００５】
Ｄ−エリトロ−スフィンゴシン（１）
【化２】
2006028196.tif 000003
【０００６】
Ｌ−トレオ−スフィンゴシン（２）
【化３】
2006028196.tif 000004
【０００７】
Ｌ−エリトロ−スフィンゴシン（３）
【化４】
2006028196.tif 000005
【０００８】
Ｄ−トレオ−スフィンゴシン（４）
光学的に純粋なスフィンゴシンを合成する従来の方法はキラル構成単位としてのセリンの利用を頼りとする。例えば、Newman, J. Am. Chem., 95 (12) : 4098 (1973) ; Boutinら、J. Org. Chem. ,51：5320 (1986) ; Garnerら、J. Org. Chem. , 53：4395 (1988); Poltら、J. Org. Chem. , 57：5469 (1992) ; Herold, Helv. Chim. Acta, 71：354 (1988)；Nimkarら、Tetrahedron Letters , 29 (25) : 3037 (1988) ; 及び米国特許第 5,110,987号は、セリン又は近縁化合物からのスフィンゴシン又はその誘導体の調製を述べている。これらの方法は、同一の出発化合物からスフィンゴシンの４種の立体異性体全てを獲得することの不能さに基づき不利である。更に、出発材料としてセリンを利用する方法はかなり時間がかかり、それ故潜在的なスケールアップができない。
【０００９】
光学的に純粋なスフィンゴシンを合成するための別の試みはクロロフマル酸をフマラーゼにより立体特異的に水和してキラルプール試薬としてＬ−トレオ−クロロリンゴ酸を得、そしてＤ−エリトロ−スフィンゴシンを得ることにある。これはJ. Org. Chem. , 52：2838-2848 (1987)に記載されている。この方法は複雑であり、そしてスフィンゴシンのうちの１の立体異性体の合成しかもたらさない。
【００１０】
光学的に純粋なスフィンゴシンを得るためのいくつかの試みは出発材料として炭水化物を使用している。Zimmerman and Schmidt らのLiebigs Ann. Chem., 663 (1988)の中に、Ｄ−ガラクトースを利用するＤ−エリトロ−スフィンゴシンの合成法が記載されている。米国特許第 4,937,328号はＤ−ガラクトースからのスフィンゴシン誘導体の合成を述べている。Obayashiら、Chemistry Letters 頁1715-1718 (1985)は糖前駆体を用いるスフィンゴシンの合成を述べている。出発材料として糖を利用することは、そのデザインを特異的な立体中心の形態に限定する。所望の異性体を得るために必要な必須の操作及び転化は合成プロセスを長める。
【００１１】
従来の研究にもかかわらず、スフィンゴシンの合成のための効率的な方法は今までに得られていなかった。更に、所望の立体異性体の製造を可能にする、スフィンゴシンを合成するための方法についての要望が当業界にある。
【００１２】
従って、本発明の目的は全てのスフィンゴシンの合成のための一般的な方法を提供する。
【００１３】
本発明の更なる目的は同一の出発材料から４種のスフィンゴシンの立体異性体の合成のための方法の提供にある。
【００１４】
本発明の更なる目的は、容易に入手できる出発材料を用いるスフィンゴシンの合成のための方法の提供にある。
【００１５】
本発明の更なる目的は、最少の工程数で生成物を生成しうるスフィンゴシンの合成のための方法の提供にある。
【００１６】
本発明の更なる目的は、スフィンゴシンの合成のための環境的に許容される方法の提供にある。
【００１７】
本発明のこれら及びその他の目的は以降の明細書及び添付の請求の範囲の参照により明らかとなるであろう。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
以上の目的に従い、本発明により、立体特異的スフィンゴシンの合成のための方法を提供し、この方法は、次式のアレンジオールを用意する
【化５】
2006028196.tif 000006
【００１９】
（式中、ＸはＨ、ハロゲン、OH、OR、フェニル、アセチレン、NH２、Ｎ３、NR２、NRH 、NO２、CO２H又はCNであり、そしてＲは低級アルキル又は低級アルケニルである）；
【００２０】
このジオールを下記の式を有するそのアセトニドとして保護する
【化６】
2006028196.tif 000007
【００２１】
このアセトニドを次式を有するエポキシドに変換する
【化７】
2006028196.tif 000008
【００２２】
このエポシキドを、そのエポキシドを立体特異的に開環させるのに有効な量のアジド塩を反応させ、そして次式を有するアジドアルコールを得る
【化８】
2006028196.tif 000009
【００２３】
このアジドアルコールをまず過剰量のオゾンと、次いで過剰量のボロハイドライドと反応させて次式を有する第一ラクトールを得る
【化９】
2006028196.tif 000010
【００２４】
この第一ラクトールを酸性イオン交換樹脂と反応させて第一ラクトールを脱保護し、そして次式の第二ラクトールを得る
【化１０】
2006028196.tif 000011
【００２５】
この第二ラクトールを次式を有する第三ラクトールを得るのに有効な量の過ヨウ化アルカリと反応させる
【化１１】
2006028196.tif 000012
【００２６】
この第三ラクトールをWittigオレフィン化に委ねてアジドスフィンゴシンを得、そしてこのアジドスフィンゴシンをアミンに還元して所望のスフィンゴシンを得る、ことを含んで成る。
【００２７】
本発明の別の態様において、立体特異的スフィンゴシンは、エポキシドをまずFeCl３と、次いでアジド塩と反応させて立体特異的アジドアルコールを得ることを含む方法により合成する。
【００２８】
本発明の別の態様において、立体特異的スフィンゴシンは、エポキシドをまずエチルアセトアセテートの存在下でLiClと、次いでアジド塩と反応させて立体特異的アジドアルコールを得ることを含む方法により合成する。
【００２９】
本発明の別の態様において、立体特異的スフィンゴシンは、エポキシドをアジド塩と反応させて立体特異的アジドアルコールを得ることを含む方法により合成する。
【００３０】
本発明の更なる態様において、クロロベンゼンからの中間体Ｌ−エリトロースを介する立体特異的スフィンゴシンの合成のための方法を提供する。
【００３１】
以降でより明らかとなるであろう本発明の上記及びその他の目的、利点及び特徴により、本発明の本質は以下の本発明の好適な態様の詳細な説明、図面及び添付の請求の範囲の参照により一層明らかとなりうる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３２】
クロロベンゼンから対応のホモキラルシクロヘキサジエン cis−ジオールに至るバイオ触媒変換はこの度、慎重なる対称性ベース計画を通じて、スフィンゴシン立体異性体の立体多様性合成を可能にすることが見い出された。1970年において、Gibson及び共同研究者らは、土壌細菌のシュードモナス・プチダ（Pseudomanas putida）の突然変異体によるトルエンからcis −トルエンジオールに至る鏡像選択的酸化を報告している。これより、数多くのその他の単純なアレンが微生物酸化技術を有してこのタイプのジオールを生成することが示された。
【００３３】
本発明は、立体特異的スフィンゴシンを効率的に合成するための、アレンジオールの微生物酸化において導入されたキラル性の利点を利用する。即ち、驚くべきことに、立体特異的スフィンゴシンは非キラル性芳香族起原から得られうる。このようにして得たスフィンゴシンは光学的に純粋であり、そして有用なスフィンゴシン又はその他の誘導体の製造のために利用できる。更に、本発明の方法によるスフィンゴシンの合成はこのプロセスの経済的なスケールアップを可能とし、なぜなら全ての立体異性体が同一の出発材料並びに非常に類似の合成反応体及び手順を利用して調製できるからである。
【００３４】
図１には本発明に従うＬ−トレオ−スフィンゴシンの合成について記載してある。この合成は本発明を例示するために全体にわたって利用しているが、しかしその中に示している反応体及び化合物に本発明が制約されるものと考えるべきでない。
【００３５】
スフィンゴシンのその他の異性体は、アジドアルコールの他の３種の異性体ができることを条件に、同一の工程による得ることができる。スフィンゴシン立体異性体をもたらすアジドアルコールは以下の通りである。
【００３６】
【化１２】
2006028196.tif 000013
【００３７】
Ｄ−エリトロ−スフィンゴシン（１）
【化１３】
2006028196.tif 000014
【００３８】
Ｌ−トレオ−スフィンゴシン（２）
【化１４】
2006028196.tif 000015
【００３９】
Ｌ−エリトロ−スフィンゴシン（３）
【化１５】
2006028196.tif 000016
【００４０】
Ｄ−トレオ−スフィンゴシン（４）
【００４１】
スフィンゴシンの合成のため、シュードモナス・プチダ39Ｄ株による微生物酸化により好適に得られる置換化ベンゼンジオールをまず得る。このジオールは適当なジオールが得られることを条件に、その他のシュードモナス・プチダ株による微生物酸化により得られうる。微生物酸化を介して得られるベンゼンジオールはGenecor International, Rochester, N.Y., ICI Fine Chemicals, Manchester, U.K.又はEnzymatics, Ltd., Cambridge, U.K. より商業的に入手できる。
【００４２】
好適な態様において、ジオールはクロロベンゼンジオール５((２Ｒ，３Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−クロロシクロヘキサ−４，６−ジエン）である。しかしながら、ほぼ全ての原子又は官能基が、微生物工程によってのみ限定される置換により、即ち、微生物工程にとっての基質を担いうる置換化アレンにより、芳香環の末端に置くことができる。適当な置換基には、Ｈ、ハロゲン、OH、OR、フェニル、アセチレン、NH２、Ｎ３、NR２、NRH 、NO２、CO２H又はCNが含まれ、そしてＲは低級アルキル又は低級アルケニルである。好ましくは、Ｒは約１〜６個の炭素を有する。好適な態様において、そして本明細書に例示する通り、ＸはClである。
【００４３】
スフィンゴシン２及び３を得るため、ベンゼンジオール５をそのアセトニドとして、ジオールを図１の第一工程度ａにおいてケトン保護試薬と反応させることにより保護する。このジオールは次の反応工程における選択性を可能とするように保護しておく。硬質なアセトニドにおいて、求電子試薬の接近のために片側のみを開き、次の立体中心の立体制御型導入をもたらす。
【００４４】
当業者に公知の任意のケトン保護試薬、例えばアセトン、ジメトキシプロパン、シクロヘキサノンがとりわけ利用できうる。好適な態様において、ジオールを２，２−ジメトキシプロパンと、触媒、ｐ−トルエンスルホン酸及び溶剤の塩化メチレンの存在下で反応させる。この反応は任意の適当な溶媒、例えばとりわけ塩化メチレン又はアセトンの中で行ってよい。この反応は引用することで本明細書に組入れる米国特許第 5,200,516号に記載してある。
【００４５】
スフィンゴシン２及び３の合成のため、アセトニドを、好ましくは図１のａの第二工程において適当な溶媒の中でメタ−クロロ過安息香酸(mCPBA）によるアセトニドのエポキシ化によりantiエポキシド６に変換する（米国特許第 5,200,516号を参照のこと）。好ましくは、この溶媒はアセトニドを得るための反応に用いたものと同じものとし、多重の反応槽の必要性をなくす。
【００４６】
スフィンゴシン１及び４の合成のため、ジオールをmCPBA と直接反応させてsyn エポキシドを得、次いで上記の通りにしてアセトニドとしての保護をエポキシ化工程の後に行う。
【００４７】
antiエポキシド６又はsyn エポキシドを、所望の異性体に依存して、工程ｂにおいてエポキシドを立体特異的に開環するのに有効な量のアジド塩と反応させて、アジドアルコール７を得るか、又はアジドアルコール異性体を得る（上記参照）。好適なアジドはアジ化ナトリウムである。他方、その他のアジド塩、例えば、限定することなく、アジ化リチウム、アジ化カリウム、アジ化セシウム又はアジ化テトラアルキルアンモニウムが利用できる。アジドアルコール７を得るための反応は好ましくは触媒としての塩化アンモニウムの存在下で実施する。１，２−ジメトキシエタン及びエタノールを溶媒として利用するのが好ましいが、しかし当業者に公知のその他の適当な溶媒を利用してよい。好適な態様において、この反応は室温より高温で、特に約55℃〜約85℃の温度で実施する。最も好適な態様において、反応は約70℃で実施する。
【００４８】
アジドはエポキシドを立体特異的に開環し、そして所望のアジドアルコールを生成するのに有効な量で提供する。アジドは一般に完全な反応を保障するために若干過剰の量で用いる。この工程は所望のスフィンゴシン異性体の製造を可能にする。アジドアルコールの立体特異的製造に関する論述は、引用することで本明細書に組入れるHudlickyら、J.Chem. Soc. Perkin Trans. １、頁2907-2917 及びHudlickyら、J. Org. Chem. , 58：985 (1993)の中に見い出せうる。
【００４９】
得られるアジドアルコールは得るべきスフィンゴシンの立体異性体を決定するであろう。Ｄ−エリトロ−スフィンゴシン（１）を合成するのに必要なアジドアルコールは、FeCl３  をsyn エポキシドと反応させ、次いでそれから得られる生成物をアジド塩と反応させることにより得られうる。
【００５０】
Ｌ−トレオ−スフィンゴシン（２）を合成するのに必要なアジドアルコールは、antiエポキシドをアジド塩と、塩化アンモニウムの存在下で前述の通りに反応させることにより得られうる。
【００５１】
Ｌ−エリトロ−スフィンゴシン（３）を合成するのに必要なアジドアルコールは、antiエポキシドをLiClと、エチルアセトアセテートの存在下で反応させ、次いでそれ由来の生成物をアジド塩と反応させることにより得られうる。
【００５２】
Ｄ−トレオ−スフィンゴシン（４）を合成するのに必要なアジドアルコールは、syn エポキシドをアジド塩と反応させることにより得られうる。
【００５３】
所望のスフィンゴシンは全く、適当なアジドアルコールが供されたら、同一の反応系列により作られうるものと信じられている。従って、図１の中で説明する残りの工程はどのスフィンゴシンが合成されようと、実質的に同一であろう。
【００５４】
図１の工程ｃにおいては、２段階の反応を実施する。第一に、アジドアルコールを低温で過剰のオゾンと反応させる。溶媒、例えばメタノールを利用してよい。この反応の温度は好ましくは約−70℃〜約−85℃、最も好ましくは約−78℃であろう。
【００５５】
図１におけるｃで表示する反応の第二段階において、過剰のボロハイドライドをオゾン分解由来の生成物と反応させて第一ラクトール８を生成する。好適なボロハイドライド試薬はナトリウムボロハイドライドである。その他のボロハイドライド、例えば限定することなく、リチウム、カリウム又はテトラアルキルアンモニウムボロハイドライドが利用できる。この反応のための温度は好ましくは約０℃にまで上昇させる。この反応は好ましくは、反応が完了したことを確認するために薄層クロマトグラフィーによりモニターする。この反応温度は必要ならばラクトール８に至る還元を完了させるためにほぼ室温にまで上昇させてよい。
【００５６】
この第一ラクトールを次に工程ｄにおいて酸性イオン交換樹脂と接触させてそれを脱保護し、そして第二ラクトン９ａを生成する。適当なイオン酸性交換樹脂はAldrich 又はその他の会社から市販されている。一部の適切な樹脂には、Amberlyst 15, Amberlyst IR 118, Amberlite CG-50, Dowex 50 X 8-100 がとりわけ含まれる。
【００５７】
次に、第二ラクトール９ａの工程ａにおいて、９ｂを介して第三ラクトールｗを生成するのに有効な量のアルカリ金属過ヨウ化物と反応させる。アルカリ金属過ヨウ化物は、例えばリチウム、ナトリウム又はカリウム塩であってよい。好適なアルカリ金属過ヨウ化物は過ヨウ素酸ナトリウムである。
【００５８】
得られるラクトールを次に工程ｆのWittigオレフィン化にかけてアジドスフィンゴシン11を生成する。Wittig反応は一般に不活性ガス雰囲気、例えば窒素下で、低温において、脂肪族トリフェニルホスホニウムハライドを用い、塩基の存在下で実施する。スフィンゴシンの製造の目的のためには、ｎ−テトラデシルトリフェニルホスホニウムブロミドが好ましい。Wittig反応にとって適当な塩基には有機リチウム化合物、例えばフェニルリチウム、リチウムメチレートもしくはリチウムエチレート、又はアジ化ナトリウム、ナトリウムメチレート及びナトリウムカーボネートの如くの化合物が含まれる。好適な態様において、塩基はフェニルリチウムとする。利用できる溶媒は芳香族炭化水素と、例えばベンゼン、トルエンもしくはキシレン、又はエーテル、例えばジエチルエーテル、テトラヒドロフランもしくはジオキサンである。好適な態様において、この溶媒はトルエン、THF 又はその混合物である。好ましくは、溶媒は無水とする。
【００５９】
Wittig反応は好ましくは約−25℃〜約−40℃の温度で行う。好適な態様において、反応は約−35℃〜約−30℃で行う。
【００６０】
アジドスフィンゴシンは好ましくは工程ｇで所望のスフィンゴシン異性体へと還元する。この還元は当業界公知の任意の方法により、例えばとりわけH２S 、Ｈ２／触媒（Pd）、LiAlH４又はNaBH４により、実施できうる。好適な態様において、アジドスフィンゴシンをピリジン又はその他の溶媒の中で硫化水素により還元する。
【００６１】
調製した光学的に純粋なスフィンゴシンの誘導体が所望されるなら、かかる誘導体を得るための任意の公知の反応を行ってよい。図１において、工程ｈはスフィンゴシンのアシル化を例示する。化合物12を得るため、この工程は溶媒、好ましくはピリジン中で無水酢酸を用いて実施する。
【００６２】
図２はスフィンゴシン異性体Ｄ−エリトロ−スフィンゴシンを合成するときに得られる中間体を示し、これは天然に見い出せる立体異性体である。エポキシド13は上記の通りm-CPBAにより得られ、ジオールによりsyn へと誘導され、そしてその後のジメトキシプロパン又はその他のケトン保護剤との反応により保護しておく。次いでエポキシドをまず FeCl３と、次いでアジド塩と反応させてアジドアルコール14を得る。図１由来のアジドアルコールから展開したのと同一の反応条件下でのアジドアルコール14の処理は、天然の異性体をもたらすであろう。
【００６３】
本発明の別の態様において、図３及び４の合成系を利用する。特に、４種の異性体全てが図３及び４に示す工程の利用により得られる。これらの化合物は最終生成物のジアステオ性／鏡像性の相違のために特異的に作られる。単一又は二重転化を利用するアジドによる置換は全ての立体異性体をもたらすであろう。
【００６４】
上記の通り、出発材料はアレンジオール、好ましくはクロロベンゼンジオールである。このジオールは、共に引用することで本明細書に組入れるHudlickyら、J. Org, Chem., 55 : 4683 (1990) 及び米国特許第 5,200,516号の示す通りにして、Ｌ−エリトロース15を得るように反応させる。一般に、エリトロースは以下の通りに合成する： (＋) −cis −２，３−ジヒドロキン−１−クロロ−シクロヘキサ−４，６−ジエンをｐ−トルエンスルホン酸と、２，２−ジメトキシプロパンの存在下で（２Ｒ，３Ｓ）−２，３−イソプロピリデン−１−クロロ−シクロヘキサ−４，６−ジエンを形成する；この（２Ｒ，３Ｓ）−２，３−イソプロピリデン−１−クロロシクロヘキサ−４，６−ジエンをオゾン分解にかけ、次いで前記オゾン分解の生成物を環化して２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリツルロノラクトンを生成する；この２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリツルロノラクトンをナトリウムボロハイドライドの存在下で還元してナトリウム（Ｓ，Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−ヒドロキシブタノエートを生成する；前記ナトリウム（Ｓ，Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−ヒドロキシブタノエートをヨードメタンの存在下で環化して、２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロノ−１，４−ラクトンを形成する；前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロノ−１，４−ラクトンをDIBAL 溶液で処理して２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロースを形成する；次いで前記２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−エリトロースを脱保護してＬ−エリトロースを形成する。
【００６５】
エリトロース15を次に塩基の存在下で脂肪族トリフェニルホスホニウムハライドを用いるWittig反応にかけて化合物16を得る。
【００６６】
図４は化合物16からの各スフィンゴシン異性体の合成のための反応経路を示す。異性体１及び４を得るため、化合物16をまずＨ＋又は酸と反応させて触媒脱保護を行い、そして化合物17を供する。この化合物をベンジルアルデヒドと、酸の存在下で反応させて化合物20にし、これを４段階反応でメタンスルホニルクロリド（MSCL）、リチウムプロミド、アジ化ナトリウム及びリチウムアルミニウムハイトライドと反応させて化合物22にし、これを次に塩化水素に委ねてスフィンゴシン１を得る。他方、化合物20は段階反応でメタンスルホニルクロロド、アジ化ナトリウム及びリウチウムアルミニウハイドライトと反応させて化合物23にしてよく、次いでこれを塩化水素に委ねてスフィンゴシン４を得る。
【００６７】
その他の異性体を得るため、化合物17をジメトキシプロパンと、酸及びアセトンの存在下で反応させて化合物18を得、次いでこれをMitsunobu 転化に委ね（一般には反応体としてジエチルジアゾジカルボキシレート、トリフェニルホスフェン及び安息香酸；引用することで本明細書に組入れる米国特許第 5,110,987号を参照のこと）、化合物19にする。化合物19をベンズアルデヒドと、酸の存在下で反応させて化合物21を得、これを上記の同じ反応に委ねて化合物24及び25を得、これを塩化水素と反応させてスフィンゴシン２及び３をそれぞれ得る。
【００６８】
上記の反応にとっての手順、反応体及び反応条件は当業者により容易に理解されるであろう。
【００６９】
以下の実施例は本発明を例示する。しかしながら、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００７０】
実施例１−Ｌ−トレオ−スフィンゴシンの製造
図１はＬ−トレオ−スフィンゴシンの合成を例示し、そして図１における番号を付した構造体は、その合成が、本明細書に記載してある、番号を付した化合物に相当する。
【００７１】
クロロベンゼンジオール５は、引用することで本明細書に組入れるHudlickyら、J. Am. Chem. Soc., 110（14) : 4735（1988) に教示の通り、シュードモナス・プチダ39Ｄによるクロロベンゼンの酵素的酵素化により得られる。Ｐ．プチダ 39Ｄを 250mlのエーレンマイヤーフラスコの中で MBS−アルギニン培地（75ml) 中で28℃で増殖させる。トルエンをネオプレン栓を介してフラスコに取付けられている計量バルブにより供給し、そして培養物は往復シェーカー上で通気させておいた。６時間後、その培養物を5000rpmで10分遠心し、培地を捨て、そして細胞を 400mlの新鮮な MBS−アルギニン培地に懸濁し、そしてバブラーの付いた１Ｌのエーレンマイヤーフラスコの中に入れた。エアー／クロロベンゼン（容量２：５：１）のストリームを28〜29℃にサーモスタットでコントロールした培地に吹き込んだ。24時間後、その培地を遠心し、細胞を捨て、そして培地のpHを水性NaOHで 8.9に合わせた。その溶液をNaClで飽和にし、再び遠心し、そして酢酸エチル（無酸、５× 100ml) で抽出した。有機抽出物をNa２SO４で乾かし、そして溶媒をエバポレートし、そしてシリカゲルの小プラグ (10％不活性化；ヘキサン／酢酸エチル、１：１）で濾過して白色固体m.p.82−84℃の純粋なクロロベンゼンジオールを得た。
【００７２】
ワンポット操作において、得られるクロロベンゼンジオール５をｐ−トルエンスルホン酸の存在下で２，２−ジメトキシプロパンの反応によりアセトニドとして保護した。10mlの２，２−ジメトキシプロパン（DMP)−アセトン（３：１）の中のベンゼンジオール（736.5mg, 4,646mmol) の溶液に、触媒量のｐ−トルエンスルホン酸を加え、そしてその反応混合物を水分から保護しながら30分室温で攪拌した。ジエンジオールをGibsonら、Biochemistry 9 : 1626 (1970)に記載の通りにして得た。この混合物に５mlの10％の水性NaOHを加え、そしてこの反応混合物を10分攪拌した。この反応混合物を10mlの酢酸エチルで希釈し、そして有機層をブラインで洗った（３×５ml）。その有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾かし、そして溶媒をエバポレートし、 832mg (95％) の無色液体を得た((２Ｓ，３Ｓ)−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−１−クロロシクロヘキサ−４，６−ジコン)；Ｒｆ＝0.8 （ヘキサン酢酸エチル，８：２）；〔α〕２５Ｄ＝＋45  （Ｃ 0.50, CHCl３) ；IR (正味) 2988，2935, 2898, 1652, 1380cm−１；１H NMR (CDCl３)δ 6.05(ｄ, Ｊ＝5.5 Hz, １Ｈ), 6.85(ｍ, ２Ｈ), 4.7 (dd, Ｊ＝3.4 Hz, Ｊ＝8.8 Hz, １Ｈ) 4.57（ｄ，Ｊ＝8.8 Hz，１Ｈ), 1.36(ｓ，６Ｈ) ；１３C NMR (CDCl３)δ 133.3, 124.0, 123.2, 121.6, 106.3, 74.7, 72.6, 26.6, 24.9。
【００７３】
得られる中間体アセトニドをCH２Cl２ (75ml) の中でのm-CPBAとの反応によりエポキシ化に委ねた。０℃のアセトニトの溶液（1.915ｇ, 10.3mmol） にm-CPBA (1.78ｇ， 8.2mmol) を小分けして加えた。この溶液を室温にまで温め、そして８時間攪拌した。この反応混合物を15％の水性亜硫酸ナトリウム (２×50ml)、飽和水性炭酸水素ナトリウム（２×50ml） 及び水 (50mlで洗い、そして乾し、濾過し、そして、濃縮した。未反応の出発材料を真空で除去し、無色固体としての1.50g (7.3mmol, 89％) の純粋なエポキシド６、（１Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ） −３−クロロ−４，５−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−７−オキサビシクロ〔４．１．０〕ヘプト−２−エン）が残った；mp59〜66℃。
【００７４】
次いでこのエポキシド６をアジ化ナトリウムにより立体特異的開環に委ね、アジドアルコール７を得た。
【００７５】
エポキシド（133mg, 0.657mmol）,  アジ化ナトリウム (2.63mmol, 171mg)  及びドライ塩化アンモニウム (2.63mmol，141mg)を DME−EtOH−H２O (1.5：１：１)の混合物に溶かし、次いでこの溶液を80℃で１ｈ加熱した。冷却後、ブライン（15ml） 及び酢酸エチル（５ml） を加え、10分間連続攪拌した。層分離させ、そしてその水性層を酢酸エチル (３×５ml) で抽出した。合わせた有機抽出物を乾かし (Na２SO４) 、そしてエバポレートにかけて 192mgの淡黄色の固体を生成し、これをフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン／酢酸エチル  ７：３）により精製し、88％の収率（141mg,  0.574mmol） で純粋なアルコール７、((３Ｓ, ４Ｒ, ５Ｓ, ６Ｓ) −３−アジド−１−クロロ−４−ヒドロキシ−５，６−Ｏ−イソプロピリデン−１−シクロヘキヘセン)を生成した。分析用サンプルをCH２Cl２−ヘキサンからの再結晶化により得た；Ｒｆ＝0.09（シリカゲル；ヘキサン／酢酸エチル、８：２）；Mp：94−94.5℃。〔α〕Ｄ２３：−10.2°（ｃ＝0.96, MeOH） 。IR (film) 3454，2113,1250, 1085, 1074, 869cm−１。１H NMR： (CDCl３)δ 5.87(ｄ, Ｊ＝2.1 Hz, １Ｈ), 4.6（ｄ，Ｊ＝6.4 Hz, １Ｈ）, 4.16(dd, Ｊ＝8.7,  6.4Hz, １Ｈ), 3.96(dd, Ｊ＝8.7, 1.4 Hz,１Ｈ）, 3.69 (td，Ｊ＝8.6, 3.0 Hz,１Ｈ）, 2.88 (ｄ，Ｊ＝3.0 Hz, １Ｈ), 1.53(ｓ，３Ｈ) ，1.40 (ｓ，３Ｈ),  １３C NMR： (CDCl３)δ 131.0 (C)，126.6 (CH), 111.5 (C), 77.9 (CH)，75.6, 73.1 (CH), 61.3 (CH)，28.1 (CH3), 25.9 (CH3)。MS：(CI) m/z (相対強度) 246 （Ｍ＋１）(40), 230 (100), 218 (20)。C９H１２N３O３Cl についての計算分析後：Ｃ，44.0；Ｈ，4.92；Ｎ，17.10 。実験値：Ｃ，44.11 ；Ｈ，4.92；Ｎ，17.07 。
【００７６】
アジドアルコール７ (1097.0mg，4.465mmole) をメタノール (11ml) と共に反応槽 (ガラス) に入れた。この溶液をドライアイス／アセトン浴槽の中で冷やし、そして過剰量のＯ３ ／Ｏ２ をこの溶液に25分間吹き込んだ。次いで窒素をこの溶液に−78℃で30分吹き込んだ。反応温度を０℃にまで上げた。
【００７７】
次に1.12当量のNaBH４(190mg, 5.022mmol)を５分かけて加えた。30分後、この手順を繰り返した。薄層クロマトグラフィー(TLC) により、その還元は完璧でなかったため、反応温度を室温にまで上げた。更に30分後、NaBH４(30mg, 70mg, 50mg)を３回に分けて30分毎に加えた (TLC により定常的にモニターしながら) 。その反応体を水性HCl (0.8Ｍ 11.5ml)を用いてpH＝4.0 となるまで酸性化した。EtOAc による抽出 (４×）、有機層のブライン洗浄、MgSO４乾燥及び溶媒の除去は、1.260gの粗生成物をもたらした。カラムクロマトグラフィーはラクトール８の透明油 676.8mg (2.760mmol,  62％)をもたらした（構造式については図１参照のこと）。
【００７８】
ラクトール８の特性は以下の通りと決定された：Ｒｆ＝.38 （ヘキサン，酢酸エチル１：１）；IR（フィルム）υ 3400, 2105, 1650 cm−１；１H NMR (CDCl３)δ 5.42(ｓ, １Ｈ), 4.76(dd, Ｊ＝5.9, 3.6 Hz,１Ｈ), 4.64 （ｄ，Ｊ＝5.9 Hz, １Ｈ） 4.27(dd, Ｊ＝12.2, 3.4 Hz, １Ｈ),  4.14（ｄ，Ｊ＝2.0 Hz, １Ｈ）, 3.85(ｍ, ２Ｈ),3.74 (ｍ，１Ｈ), 2.95 (bs,１Ｈ), 1.47(ｓ, ３Ｈ), 1.32 （ｓ，３Ｈ） ；１３C NMR ： (CDCl３)δ 112.9 (C)，100.9 (CH), 85.9 (CH), 79.9 (CH), 79.5 (CH), 63.5 (CH), 62.1 (CH２)，25.9 (CH３), 24.8 (CH３)；MS (CI，70 eV) m/z（相対強度) 246(Ｍ＋１，４), 230 (85), 218 (90), 202 (100), 188 (100), 170 (100), 160 (100) 。
【００７９】
水（２ml） をラクトール８（49.4mg, 0.2014mmol） に加え、次いでAmberlyst 15（ウェット）イオン変換樹脂（261mg）を加えた。温度を65℃にまで高めた；５時間後、TLC により反応は終了していた。その溶液を濾過し、そしてpHを飽和NaHCO３で 7.0に合わせた。この溶液をH２O で総容量が５mlとなるまで希釈した。NaIO４(51.7mg,  0.2417mmol)を加えた。８時間後、TLC により反応は終了していた。その生成物を EtOAc／EtOH (１：１）で抽出した；有機層をMgSO４で乾かし、そして溶媒を除去した。カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／EtOAc １：４）は、図１に示すラクトール10の構造を有する18.8mg (0.1295mmol, 69％）の透明油をもたらした。
【００８０】
ラクトール10は以下の特性を有することが見い出された：Ｒｆ＝.36 （ヘキサン／EtOAc,１：４）；IR（フィルム）υ 3400, 2105, 1660, 1640 cm−１：１H NMR (DMSO) δ 6.38(ｍ，２Ｈ), 5.60(ｄ,Ｊ＝4.4 Hz, １Ｈ), 5.30(ｄ，Ｊ＝6.8 Hz, １Ｈ), 5.60 （ｔ，Ｊ＝5.4, 4.5 Hz,１Ｈ), 5.00(dd, Ｊ＝4.6, 1.3 Hz,１Ｈ), 4.02(ｍ，３Ｈ) ，3.80（ｍ，２Ｈ), 3.70(ｍ，１Ｈ), 3.40(ｍ, ２Ｈ) ；１３C NMR (DMSO)δ 102.5 (CH), 95.7(CH′), 80.4 (CH), 75.8 (CH′), 65.3 (CH), 64.7 (CH′), 68.3 (CH２), 66.7 (CH２′) ；MS (CI 70eV) m/z（相対強度) 128 (15)，118 (8), 103 (6), 88 (93), 73 (30), 60 (100)。
【００８１】
丸底フラスコにｎ−テトラデシルトリフェニルホスホニウムブロミド（371.159mg, 0.688mmol),  次いでトルエン (6.0ml)を加えた；次いでその温度を水浴で下げた。次にフェニルリチウム(1.8Ｍの溶液 1.53ml)を10分かけて加えた（その当初の無色の溶液は濃赤茶色となる）。これを15分攪拌し、次いで温度を40℃に下げた。その浴槽温度を−35℃〜−30℃に40分維持し、そのうちの最初の20分はラクトール10 (THF (2.0ml) に溶解した86.8mg, 0.598mmol)を加えるのに用いた。その温度を30分かけて０℃に上げ、そしてその反応をCH３OH (2.0ml) 、次いでH２O (2.0ml) で停めた。EtOAc による抽出、MgSO４H乾燥、及びカラムクロマトグラフィーは図１に示す構造式11を有するオレフィンの２：１(trans／cis)混合物 5.3mg (2.72％) をもたらした。
【００８２】
アジドスフィンゴシン11の特性は以下の通りである；１H NMR (CDCl３)δ 5.80(ｍ, １Ｈ), 5.54(ｍ, １Ｈ), 4.24(ｔ, １Ｈ), 3.91(ｍ, １Ｈ), 3.75(ｍ, １Ｈ), 3.43(ｍ, １Ｈ), 2.1（ｍ，８Ｈ), 1.25(ｍ, 50Ｈ), 0.85(ｔ, ７Ｈ) 。表示は純粋な cis−アジドスフィンゴシンの１H-NMRの補助を伴う。
【００８３】
次いでこのアジドスフィンゴシンをピリジンの中で硫化水素と反応させ (引用することで本明細書に組入れるSchmidt, Liebigs. Ann. Chem.,  663-667 (1988) 及び米国特許第 4,937,328号参照)、Ｌ−トレオ−スフィンゴシンを得る。
【化１６】
2006028196.tif 000017
【００８４】
Ｌ−トレオ−スフィンゴシン（２）
【００８５】
実施例２−（３Ｒ, ４Ｒ, ５Ｓ, ６Ｓ) −３−アジド−１−クロロ−５，６−Ｏ−イソプロピリデン−４−ヒドロキシ−１−シクロヘキセン
無水THF (30ml)中の実施例１において調製したエポキシド（615mg, 3.04mmol）の溶液にエチルアセトアセテート（1.16ml, 9.1mmol）及び塩化リチウム (643mg, 1.51mmol)を室温で加えた。45℃で16時間攪拌後、その反応を飽和NH４Cl (10ml)及びブライン (10ml) で停めた。分離後、水性層をCH２CL２ (２×20ml) で抽出した。その有機層をブライン（１×15ml) で洗い、Na２SO４で乾かし、そして溶媒をエバポレートした。その粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン／酢酸エチル  ３：１）で精製し、91％の収率で対応の trans−クロロヒドリン (664mg, 2.78mmol)及び微量の cis−クロロヒドリン（２〜３％）を得た。 trans−クロロヒドリン；Ｒｆ＝0.38（ヘキサン／酢酸エチル、３：１）。〔αＤ２６〕：−7.3 °(c＝2.08，CHCl３)。IR：（正味）3436, 2990, 1649, 1081cm−１。１H NMR： (CDCl３)δ 6.04(dd, Ｊ＝2.0, 1.0 Hz,１Ｈ), 4.63(ｄ, Ｊ＝6.3 Hz, １Ｈ), 4.38 (ddd, Ｊ＝8.4, 2.0, 1.0 Hz,１Ｈ), 4.18(dd, Ｊ＝8.4, 8.4 Hz,１Ｈ), 3.81(ｔ, Ｊ＝8.4 Hz,１Ｈ), 3.11 (brs, １Ｈ), 1.56(ｓ, ３Ｈ), 1.43(ｓ，３Ｈ) 。１３C NMR ; (CDCl３) δ 130.5 (C), 128.7 (C), 111.6 (C), 77.5 (CH), 75.7 (CH), 74.3 (CH), 58.2 (CH), 28.0 (CH3), 25.9 (CH3)。MS：(CI) m/z (相対強度) 239(Ｍ＋１，100), 223 (20), 145 (20), 89 (18) 。C９H１３Cl１O３について計算したHRMS：239.024175。実験値：239.021317。
【００８６】
ドライDMF (30ml)中の trans−クロロヒドリン (664mg, 2.78mmol)の溶液にアジ化ナトリウム (542mg, 8.33mmol)をアルゴンの雰囲気下で加えた。この反応混合物を室温で24時間、次いで55℃で12時間攪拌した。その反応混合物をエーテル (30ml) で希釈し、そして10％のNa２SO３ (20ml) で洗った。分離後、その水性層をEt２O (２×20ml) で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗い、乾かし (Na２S２O４)、そして溶媒をエバポレートした。得られる油をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル；ヘキサン／酢酸エチル  ３：１）により精製し、スフィンゴシン３の前駆体のアジドアルコールを91％の収率 (621mg, 2.53mmol)で、及び 2.7％ (18mg, 0.075mmol)の出発trans-クロロヒドリンを得た。Ｒｆ＝0.5 （ヘキサン／酢酸エチル、３：１）。Mp：93.5−94℃ (CH２Cl２／ヘキサン) 。〔α〕Ｄ２７；−99°(c＝0.68，MeOH) 。IR：(KBr) 3884, 2115, 1651, 1383cm−１。１H NMR： (CDCl３)δ 5.9 (dd, Ｊ＝3.6, 0.5 Hz,１Ｈ), 4.58(dd, Ｊ＝5.6, 1.1 Hz,１Ｈ), 4.39(ｔ, Ｊ＝5.6 Hz, １Ｈ), 4.23(ｍ，１Ｈ), 4.19(ｍ, １Ｈ), 2.49(br s, １Ｈ), 1.42(ｓ，３Ｈ), 1.38(ｓ, ３Ｈ) 。１３C NMR : (CDCl３) δ 134.7 (C), 122.2(CH), 110.9 (C), 75.9 (CH), 75.0 (CH), 69.4 (CH), 27.6 (CH3), 26.0 (CH3)。MS：(CI) m/z (rel. intensity) 246(Ｍ＋，100),160 (35), 145 (60), 96 (100)。C９H１２ClN１２O３についての分析計算値：Ｃ，44.00 ；Ｈ，4.92；Ｎ，17.10 。実験値：Ｃ，44.05 ; Ｈ，4.95；Ｎ，17.03 。
【００８７】
好適な態様のみを本明細書において詳しく例示及び説明したが、本発明の数多くの改良及び改変が上記の教示の範囲内で、且つ本発明の範囲を逸脱することなく、なされることが理解されることであろう。
【図面の簡単な説明】
【００８８】
【図１】本発明に従うＬ−トレオ−スフィンゴシン又はその誘導体の合成を示す。文字ａ〜ｈは使用した以下の試薬を示す：（ａ）（１）２，２−ジメトキシプロパン、触媒p-TsOH, CH２Cl２（２）mCPBA, CH２Cl２  ；（ｂ）NaN３, NH４  ＋Cl−  ，１，２−ジメトキシエタン／EtOH／H２O, 70 ℃；（ｃ）（１）Ｏ３  ，CH３OH,−78℃，（２）NaBH４, CH３OH，０℃〜RT；（ｄ）Amberlyst 酸性樹脂；（ｅ）NaIO４, H２O；（ｆ）ｎ−テトラデシルトリフェニルホスホニウムブロミド 1.2当量、フェニルリチウム 4.4当量、トルエン／THF,−30℃, ０℃で急冷；（ｇ）H２S 、ピリジン；（ｈ）無水酢酸、ピリジン。
【図２】Ｄ−エリトロ−スフィンゴシンを合成するのに用いたエポキシドとアジドアルコールとの合成を示す。
【図３】本発明に係るスフィンゴシンの立体異性体を獲得するために有用であることが見い出された中間体の合成を示し、その中間体はクロロベンゼンから合成されたＬ−エリトロースから得られる。
【図４】図３の中間体からのスフィンゴシンの立体異性体の合成を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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