(57)【要約】【課題】ＰＤＥ７を選択的に阻害する作用を有し、これによって、細胞内ｃＡＭＰレベルが高まり、さらにはＴ細胞の活性化を阻害することによって様々なアレルギー疾患、炎症・免疫疾患の予防および治療に有用である化合物の提供。【解決手段】下記の式、（ＩＡ）または（ＩＢ）：【化１】2006219373.tif 000017で表されるピリジニルピラゾロピリミジノン誘導体であり、特に、Ｒ１がシクロヘキシル基またはシクロヘプチル基であり、Ｒ２がメチル基であり、Ｒ３が基：−ＮＲ５Ｒ６または−Ｓ(Ｏ)０〜２であり、Ｒ４がメトキシ基またはエトキシ基であるピリジニルピラゾロピリミジノン誘導体。【選択図】          なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（ＩＡ）または（ＩＢ）：
【化１】
2006219373.tif 000016
（式中、
Ｒ１は、置換されていてもよいＣ３〜８のシクロアルキル基または、tert-ブチル基を示し、
Ｒ２は、水素原子またはＣ１〜３のアルキル基を示し、
Ｒ３は、基：−ＮＲ５Ｎ６、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ７または−Ｓ(Ｏ)０〜２Ｒ８を示し、
Ｒ４は水素原子または必要に応じて１つ以上のフッ素で置換されたＣ１〜３のアルコキシ基を示し、
Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、置換されていてもよいＣ１〜６のアルキル基、置換されていてもよいアシル基、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル基、またはそれらが結合している窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロシクロアルキル環を形成し、
Ｒ７は、基：−ＯＲ９または−ＮＲ５Ｎ６を示し、
Ｒ８は、水素原子、ハロゲン原子、基：−ＮＲ５Ｒ６、置換されていてもよいＣ１〜６のアルキル基、または置換されていてもよいアリール基を示し、
Ｒ９は、水素原子または置換されていてもよいＣ１〜６のアルキル基を示す。)
で表されるピリジニルピラゾロピリミジノン誘導体、その薬理学的許容される塩またはその溶媒和物。
【請求項２】
一般式（ＩＡ）で表される請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
一般式（１Ｂ）で表される請求項1に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がシクロヘキシル基またはシクロヘプチル基である請求項１、２または３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２がメチル基である請求項１ないし４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ４がメトキシ基またはエトキシ基である請求項１ないし５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ３が基：−ＮＲ５Ｒ６である請求項１ないし６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
請求項１ないし７のいずれかに記載の化合物、その薬理学的に許容される塩、またはその溶媒和物を有効成分として含有する医薬組成物。
【請求項９】
請求項１ないし７のいずれかに記載の化合物、その薬理学的に許容される塩、またはその溶媒和物を有効成分として含有するＰＤＦ７阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【発明の属する技術分野】
【０００１】
本発明は、選択的なＰＤＥ７（ＶＩＩ型ホスホジエステラーゼ）阻害作用を有するピリジニルピラゾロピリミジノン誘導体に関する。これらの化合物は、アレルギー疾患や炎症・免疫疾患を含む様々な治療分野の疾患に対して、有効な化合物である。
【０００２】
【従来の技術】
細胞内セカンドメッセンジャーであるｃＡＭＰもしくはｃＧＭＰは、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ１〜１１）によって分解され、不活化される。このうちのＰＤＥ７は、選択的にｃＡＭＰを分解するものであり、同じくｃＡＭＰを分解するＰＤＥ４の選択的阻害剤であるロリプラムによって阻害されない酵素として、特徴付けられている。
【０００３】
ＰＤＥ７は、Ｔ細胞の活性化に重要な役割を果たしていることが示唆されており（Beavoら；Science, 283 (1999) 848）、また、Ｔ細胞の活性化が様々なアレルギー疾患や炎症・免疫疾患、例えば、気管支喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、乾癬、アトピー性皮膚炎、結膜炎、変形性関節症、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、炎症性腸炎、肝炎、膵炎、脳脊髄炎、敗血症、クローン病、移植における拒絶反応、ＧＶＨ病、血管形成術後の再狭窄などに対する疾患における病態の増悪化に関与していることが知られている（J. Allergy Clin. Immunol., 2000 Nov; 106(5 Suppl):S221-6；Am. J. Respir. Crit. Care Med., 1996 Feb;153(2): 629-32；Am. J. Respir. Crit. Care Med., 1999 Nov; 160(5 Pt 2):S33-7；Clin. Exp. Allergy, 2000 Feb; 30(2):242-54；Hosp. Med., 1998 Jul; 59(7):530-3；Int. Arch. Allergy Immunol., 1998 Mar; 115(3): 179-90；J. Immunol., 1991 Feb 15; 146(4):1169-74；Osteoarthritis Cartilage, 1999 Jul; 7(4):401-2；Rheum. Dis. Clin. North Am., 2001 May; 27(2):317-34；J. Autoimmun., 2001 May; 16(3):187-92；Curr. Rheumatol. Rep., 2000 Feb; 2(1):24-31；Trends Immunol., 2001 Jan; 22(1):21-6：Curr. Opin. Immunol., 2000 Aug; 12(4):403-8；Diabetes Care, 2001 Sep; 24(9):1661-7；J. Neuroimmunol., 2000 Nov 1; 111(1-2):224-8；Curr. Opin. Immunol., 1997 Dec; 9(6):793-9；JAMA, 1999 Sep 15; 282(11):1076-82；Semin. Cancer Biol., 1996 Apr; 7(2):57-64；J. Interferon Cytokine Res., 2001 Apr; 21(4):219-21）。したがって、ＰＤＥ７阻害活性を有する化合物は、Ｔ細胞が関与する様々なアレルギー疾患や炎症・免疫疾患に対して有用であると考えられる。
【０００４】
これまでにＰＤＥ７を選択的に阻害する化合物として、イミダゾピリジン誘導体（特許文献１）、ジヒドロプリン誘導体（特許文献２）、ピロール誘導体（特許文献３）、ベンゾチオピラノイミダゾロン誘導体（特許文献４）、複素環化合物（特許文献５、特許文献６）、キナゾリンおよびピリドピリミジン誘導体（特許文献７）、スピロ三環系誘導体（特許文献８）、チアゾールおよびオキサヂアゾール誘導体（特許文献９）、スルホンアミド誘導体（特許文献１０）、ヘテロビアリルスルホンアミド誘導体（特許文献１１）、ジヒドロイソキノリン誘導体（特許文献１２）、グアニン誘導体（非特許文献１）、ベンゾチアジアジン、ベンゾチエノチアジアジン誘導体（非特許文献２、３）等が提供されているが、当該酵素の阻害作用を主薬効メカニズムとする治療薬は開発されていない。
【０００５】
一方、ピラゾロピリミジノン骨格を有する化合物（特許文献１３〜１８）が、ｃＧＭＰ特異的ＰＤＥ阻害剤として知られているが、ＰＤＥ７阻害活性については何ら示唆されていない。
【０００６】
【特許文献１】
特許国際公報ＷＯ  ０１／３４６０１号公報
【特許文献２】
特許国際公報ＷＯ  ００／６８２０３号公報
【特許文献３】
特許国際公開ＷＯ  ０１／３２６１８号公報
【特許文献４】
ドイツ特許第１９９５０６４７号
【特許文献５】
特許国際公開ＷＯ  ０２／８８０８０号公報
【特許文献６】
特許国際公開ＷＯ  ０２／８７５１３号公報
【特許文献７】
特許国際公開ＷＯ  ０２／１０２３１５号公報
【特許文献８】
特許国際公開ＷＯ  ０２／７４７５４号公報
【特許文献９】
特許国際公開ＷＯ  ０２／２８８４７号公報
【特許文献１０】
特許国際公開ＷＯ  ０１／９８２７４号公報
【０００７】
【特許文献１１】
特許国際公開ＷＯ  ０１／７４７８６号公報
【特許文献１２】
特許国際公開ＷＯ  ０２／４０４５０号公報
【特許文献１３】
ヨーロッパ特許出願第ＥＰ４６３７５６号
【特許文献１４】
ヨーロッパ特許出願第ＥＰ５２６００４号
【特許文献１５】
ヨーロッパ特許出願第ＥＰ３４９２３９号
【特許文献１６】
ヨーロッパ特許出願第ＥＰ６３６６２６号
【特許文献１７】
ヨーロッパ特許出願第ＥＰ９９５７５１号
【特許文献１８】
特開平８−２５３８４号公報
【非特許文献１】
Bioorg. Med.Chem. Lett., 11 (2001) 1081
【非特許文献２】
J. Med. Chem., 43 (2000) 683
【非特許文献３】
Eur. J. Med. Chem., 36 (2001) 333
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、ＰＤＥ７阻害活性を有する新たな化合物、および当該化合物を有効成分とするＰＤＥ７阻害剤を提供することを目的とする。
本発明により提供される化合物は、ＰＤＥ７を選択的に阻害することにより、細胞内ｃＡＭＰレベルが高まり、さらにはＴ細胞の活性化を阻害することによって、様々なアレルギー疾患、炎症・免疫疾患に対して有用な化合物である。
【０００９】
具体的には、気管支喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、乾癬、アトピー性皮膚炎、結膜炎、変形性関節症、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、炎症性腸炎、肝炎、膵炎、脳脊髄炎、敗血症、クローン病、移植における拒絶反応、ＧＶＨ病、血管形成術後の再狭窄などに対する疾患の予防または治療剤として有用である。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、優れたＰＤＥ７阻害作用を有する化合物を開発するべく、鋭意研究を進めた結果、後記する一般式（ＩＡ）または（ＩＢ）で示されるピリジニルピラゾロピリミジノン骨格を有する化合物に、強力なＰＤＥ７阻害作用および優れたＰＤＥ７阻害選択性が存在することを新たに見出し、本発明を完成させるに至った。
【００１１】
すなわち、本発明に従えば、下記一般式（ＩＡ）または（ＩＢ）：
【００１２】
【化２】
2006219373.tif 000002
【００１３】
（式中、
Ｒ１は、置換されていてもよいＣ３〜８のシクロアルキル基または、tert-ブチル基を示し、
Ｒ２は、水素原子またはＣ１〜３のアルキル基を示し、
Ｒ３は、基：−ＮＲ５Ｎ６、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ７または−Ｓ(Ｏ)０〜２Ｒ８を示し、
Ｒ４は水素原子または必要に応じて１つ以上のフッ素で置換されたＣ１〜３のアルコキシ基を示し、
Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、置換されていてもよいＣ１〜６のアルキル基、置換されていてもよいアシル基、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル基、またはそれらが結合している窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロシクロアルキル環を形成し、
Ｒ７は、基：−ＯＲ９または−ＮＲ５Ｎ６を示し、
Ｒ８は、水素原子、ハロゲン原子、基：−ＮＲ５Ｒ６、置換されていてもよいＣ１〜６のアルキル基、または置換されていてもよいアリール基を示し、
Ｒ９は、水素原子または置換されていてもよいＣ１〜６のアルキル基を示す。)
で表されるピリジニルピラゾロピリミジノン誘導体、その薬理学的に許容される塩またはその溶媒和物を提供する。
【００１４】
また本発明は、上記で提供されたピリジニルピラゾロピリミジノン誘導体、その薬理学的許容される塩またはその溶媒和物を有効成分として含有するＰＤＥ７阻害剤を提供するものでもある。
【００１５】
【発明の実施の形態】
以下に本発明を詳細に説明していく。
本明細書において、「Ｃ１〜３のアルキル基」とは炭素数１から３までの直鎖または分枝状のアルキル基であり、具体例としては、メチル、エチル、プロピル基などをあげることができ、「Ｃ１〜６のアルキル基」とは、炭素数１から６個までの直鎖または分岐状のアルキル基であり、具体例としては、メチル、エチル、プロピル、及び、ブチル、ペンチル、ヘキシル基などをあげることができる。また、「Ｃ３〜８のシクロアルキル基」とは、炭素数３〜８のシクロアルキル基であり、具体例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル基などをあげることができる。「ヘテロシクロアルキル基」とは、酸素原子、窒素原子あるいは硫黄原子からなるヘテロ原子を１個ないし４個含有する３ないし７員環であり、具体例としては、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロピラニル、モルホニル、アゼチジニル基などをあげることができる。
【００１６】
「Ｃ１〜３のアルコキシ基」とは、炭素数１〜３のアルコキシ基であり、具体例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ基をあげることができる。
また、「アシル基」とは、炭素数が１ないし８個であるアシル基であり、具体例としては、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブタノイル、ペンタノイル、ベンゾイル、トルオイル基などをあげることができ、「ハロゲン原子」とは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素原子である。
また、「アリール基」とは、炭素数が６ないし１２個からなるフェニル、ナフチル、ビフェニル基などをあげることができ、「ヘテロアリール基」とは、炭素数が２ないし８個であり、酸素原子、窒素原子あるいは硫黄原子からなるヘテロ原子を１個ないし４個含有する５ないし７員環からなる単環もしくはそれらの同一または異なる２以上の単環が融合した多環式のヘテロアリール基、例えばピロール、フリル、チエニル、イミダゾリル、チアゾリル、ピラジル、インドリル、キノリル、イソキノリル、テトラゾリル、ピリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル基などをあげることができる。
【００１７】
本発明において、「置換されていてもよいＣ１〜６のアルキル基」の好ましい置換基の例としては、水酸基、ハロゲン原子などをあげることができ、「置換されていてもよいアシル基」の好ましい置換基の例としては、ハロゲン原子、ニトロ基をあげることができ、「置換されていてもよいアリール基」の好ましい置換基の例としては、Ｃ１〜３のアルキル基、ハロゲン原子、アミノ基、アシル基、アミド基、水酸基、アシルアミノ基、カルボキシル基、スルホニル基などをあげることができ、「置換されていてもよいＣ３〜８のシクロアルキル基」の好ましい置換基の例としては、Ｃ１〜３のアルキル基、水酸基、オキソ基などをあげることができ、「置換されていてもよいヘテロシクロアルキル基」の好ましい置換基の例としては、アミノ基、アルキルアミノ基、アシルアミノ基、水酸基、オキソ基、エチレンジオキシ基、メチル基、エチル基、ヒドロキシエチル基などをあげることができる。
【００１８】
本発明が提供する一般式（ＩＡ）および（ＩＢ）の化合物において、好ましい化合物の群は、Ｒ１がシクロヘキシル基またはシクロヘプチル基であり、Ｒ２がメチル基であり、Ｒ３が基：−ＮＲ５Ｒ６または−Ｓ(Ｏ)０〜２Ｒ８であり、Ｒ４がメトキシ基またはエトキシ基である化合物である。
【００１９】
なお、一般式（ＩＡ）および（ＩＢ）の化合物は、互変異性体の形で存在してもよく、個々の互変異性体および、個々の互変異性体の混合物として存在してもよい。さらに、一般式（ＩＡ）および（ＩＢ）の化合物の放射能標識した誘導体も、また本発明に含まれる。
【００２０】
また、本発明が提供する化合物は、１個ないし複数個の不斉炭素原子を有するものも含み、これに基づく（Ｒ）体、（Ｓ）体の光学異性体、ラセミ体、ジアステレオマーなどが存在する。また、置換基の種類によっては二重結合を有するので、（Ｚ）体、（Ｅ）体などの幾何異性体も存在する。したがって、本発明が提供する化合物中には、これらの異性体の分離されたもの、あるいは異性体の混合物であっても、いずれの場合をも包含するものである。
【００２１】
本発明が提供する化合物は、各種の酸により塩を形成することができるものがある。かかる塩としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの鉱酸や、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、クエン酸、酒石酸、安息香酸、ピクリン酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、アスパラギン酸、グルタミン酸などの有機酸との酸付加塩をあげることができる。
【００２２】
また、本発明が提供する化合物は、さらに、金属、特にアルカリ金属、アルカリ土類金属と共に医療用として許容しうる金属塩を形成することができる。そのような塩の例としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩などをあげることができる。さらに、本発明の化合物は、水和物、エタノール、イソプロパノールなどの溶媒和物や、結晶多形の物質も含むことができる。
【００２３】
本発明が提供する一般式（ＩＡ）または（ＩＢ）で示されるピリジニルピラゾロピリミジノン誘導体のなかで、特に好ましい具体例としては、以下のものを例示することができる。
【００２４】
１−シクロヘキシル−５−｛２−メトキシ−６−［（４−メチルフェニル）スルファニル］−３−ピリジニル｝−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
１−シクロへキシル−５−（２−メトキシ−６−［（４−メチルフェニル）スルホニル］−３−ピリジニル）−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
３−シクロへキシル−６−（２−メトキシ−６−［（４−メチルフェニル）スルファニル］−３−ピリジニル）−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
３−シクロへキシル−６−（２−メトキシ−６−［（４−メチルフェニル）スルホニル］−３−ピリジニル）−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
１−シクロへキシル−５−［２−メトキシ−６−（４−メチル−１−ピペラジニル）−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
１−シクロへキシル−５−［２−メトキシ−６−（４−モルフォリニル）−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
１−シクロへキシル−５−［２−メトキシ−６−（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
１−シクロヘキシル−５−［６−（１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４．５］デカ−８−イル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
１−シクロヘキシル−５−［２−メトキシ−６−（４−オキソ−１−ピペリジニル）−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
１−シクロヘキシル−５−［６−（４−ヒドロキシ−１−ピペリジニル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
【００２５】
１−シクロヘキシル−５−｛２−メトキシ−６−［４−（メチルアミノ）−１−ピペリジニル］−３−ピリジニル｝−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
１−シクロヘキシル−５−｛６−［４−（ジメチルアミノ）−１−ピペリジニル］−２−メトキシ−３−ピリジニル｝−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
６−［６−（４−アミノ−１−ピペリジニル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−１−シクロヘキシル−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
Ｎ−｛１−［５−（１−シクロヘキシル−３−メチル−７−オキソ−６，７−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−５−ｙｌ）−６−メトキシ−２−ピリジニル］−４−ピペリジニル｝アセタミド；
１−シクロヘキシル−５−（２−メトキシ−３−ピリジニル）−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
３−シクロへキシル−６−［６−（１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４．５］デカ−８−イル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
３−シクロへキシル−６−［２−メトキシ−６−（４−オキソ−１−ピペリジニル）−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
３−シクロへキシル−６−［６−（４−ヒドロキシ−１−ピペリジニル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
３−シクロへキシル−６−（２−メトキシ−６−［４−（メチルアミノ）−１−ピペリジニル］−３−ピリジニル）−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
３−シクロへキシル−６−｛６−［４−（ジメチルアミノ）−１−ピペリジジル］−２−メトキシ−３−ピリジニル｝−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
【００２６】
６−［６−（４−アミノ−１−ピペリジニル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−３−シクロへキシル−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
Ｎ−｛１−［５−（３−シクロへキシル−１−メチル−４−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−６−イル）−６−メトキシ−２−ピリジニル］−４−ピペリジニル｝アセタミド；
１−シクロへキシル−５−（２−メトキシ−３−ピリジニル）−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；
３−シクロヘキシル−６−［２−メトキシ−６−（４−メチル−１−ピペラジニル）−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
３−シクロヘキシル−６−［２−メトキシ−６−（４−モルフォリニル）−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
３−シクロヘキシル−６−［２−メトキシ−６−（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
３−シクロヘキシル−６−［６−（１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４．５］デカ−８−イル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
３−シクロヘキシル−６−［２−メトキシ−６−（４−オキソ−１−ピペリジニル）−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
３−シクロヘキシル−６−［６−（４−ヒドロキシ−１−ピペリジニル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
【００２７】
３−シクロヘキシル−６−｛２−メトキシ−６−［４−（メチルアミノ）−１−ピペリジニル］−３−ピリジニル｝−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
３−シクロヘキシル−６−｛６−［４−（ジメチルアミノ）−１−ピペリジニル］−２−メトキシ−３−ピリジニル｝−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
６−［６−（４−アミノ−１−ピペリジニル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−３−シクロヘキシル−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
Ｎ−｛１−［５−（３−シクロヘキシル−１−メチル−４−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−６−メトキシ−２−ピリジニル］−４−ピペリジニル｝アセタミド；
３−シクロヘキシル−６−（２−メトキシ−６−スルファニル−３−ピリジニル）−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
５−（３−シクロヘキシル−１−メチル−４−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−６−メトキシ−２−ピリジンスルホニル  クロリド；
３−シクロヘキシル−６−｛２−メトキシ−６−［（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）スルホニル］−３−ピリジニル｝−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
１−シクロヘキシル−５−｛２−メトキシ−６−［（４−メチルフェニル）スルフィニル］−３−ピリジニル｝−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン。
【００２８】
本発明に係る式（ＩＡ）の化合物は、たとえば以下に示す方法によって合成することができる。
【００２９】
【化３】
2006219373.tif 000003
【００３０】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ８は前記定義のとおりであり、ＬはＣ１〜３の低級アルキル基であり、Ｙは水酸基またはハロゲン原子、好ましくは塩素原子である。）
【００３１】
本方法を実施するには、公知方法に従い、先ず、化合物（ＸＩ）から化合物（ＩＸ）を得る。この反応は、塩酸、硫酸などの無機酸水溶液類；ベンゼン、トルエンなどの芳香族炭化水素類；酢酸などの有機酸類；メタノール、エタノールなどのアルコール類あるいはこれらの混合物中、もしくは無溶媒中、室温〜１２０℃にて化合物（Ｘ）に対し、１〜２当量、好ましくは約１当量のＲ１ＮＨＮＨ２またはその塩を作用させ、反応終了後、無機塩基、例えば水酸化ナトリウムの水溶液を加え、水と混和しない有機溶媒で抽出し、全有機物を水、飽和食塩水にて順次洗浄し、溶媒を留去することにより、目的化合物（ＩＸ）を得ることができる。なお、必要であれば、再結晶などで精製することができる。
【００３２】
出発原料である化合物（Ｘ）は市販の化合物、または公知の化合物を用いることができる。また、化合物（Ｒ１ＮＨＮＨ２またはその塩）についても、市販の化合物または公知の化合物を用いることができるが、公知の方法（例えば、J. Org. Chem., 1981, 46, 5414-5415）に記載の方法により、容易に合成して得た化合物を用いることも可能である。
【００３３】
次いで、得られた化合物（ＩＸ）から、公知方法に従って化合物（ＶＩＩＩ）へ変換される。この反応は、例えば、トルエン、ベンゼンなどの芳香族炭化水素類、または無溶媒中、室温から還流温度にて化合物（ＩＸ）に対し１〜５当量のオキシ塩化リン、塩化チオニルなどのハロゲン化試薬を作用させることにより実施することができる。反応終了後、溶媒を留去することによって、目的化合物（ＶＩＩＩ）を得ることができる。
【００３４】
得られた化合物（ＶＩＩＩ）は、精製することなく、公知方法に従って、ニトロ基を導入した化合物（ＶＩＩ）へ変換される。この反応は、濃硫酸中、または無水酢酸中、−２０℃〜室温にて硝酸を用いる反応で行うことができる。反応終了後、反応液を氷に注ぎ、析出した固体を濾取することによって、目的化合物（ＶＩＩ）を得ることができる。なお、必要であれば、再結晶などで精製することができる。
【００３５】
次いで、得られた化合物（ＶＩＩ）から、公知方法に従って、化合物（ＶＩ）を得る。具体的には、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどのような極性溶媒中、室温〜１２０℃にて、シアン化カリウム、シアン化ナトリムのような金属シアン化物を１〜３当量用いる反応により行うことができる。反応終了後、水を加え、水と混和しない有機溶媒で抽出した後、全抽出物を水、飽和食塩水で順次洗浄し、溶媒を留去することによって、目的化合物（ＶＩ）を得ることができる。なお、必要であれば、カラムクロマトグラフィーなどで精製することができる。
【００３６】
得られた化合物（ＶＩ）から、公知方法に従って、化合物（Ｖ）を得ることができる。この反応は、ニトリル基の加水分解により酸アミドを合成する方法であり、多くの方法で実施することができる。例えば、水、またはメタノール、エタノールなどのアルコール類；１，４−ジオキサン、テトラヒドロフランなどのエーテル類、あるいはこれらの混合液中、０℃〜室温にて、水酸化ナトリウム、炭酸カリウムなど塩基存在下、過酸化水素を作用させる方法で実施することができる。反応終了後、水と混和しない有機溶媒にて希釈した後、水、飽和食塩水で順次洗浄し、溶媒を留去することによって目的化合物（Ｖ）を得ることができる。なお、必要であれば、再結晶などで精製することができる。
【００３７】
次いで、得られた化合物（Ｖ）から公知方法に従って、化合物（ＩＩＩ）を得る。この反応は、ニトロ基を還元反応により還元し、アミノ基にする方法であり、多くの方法により実施することができる。例えば、塩酸などの無機酸類中０℃〜還流温度にて、化合物（Ｖ）に対して２〜１０当量の二塩化スズを作用させることにより実施することができる。反応終了後、水酸化ナトリウムなどの無機塩基で中和し、セライト濾過した後、濾液を水と混和しない有機溶媒で抽出し、抽出した有機溶媒層を水、飽和食塩水で順次洗浄し、溶媒を留去することにより目的化合物（ＩＩＩ）を得ることができる。なお、必要であればカラムクロマトグラフィーなどで精製することができる。
【００３８】
得られた化合物（ＩＩＩ）から、公知方法に従って化合物（ＩＩ）を得るのであるが、この反応は、アミン化合物（ＩＩＩ）とカルボン酸成分（ＩＶ）から酸アミドを合成する方法であり、多くの方法で実施することができる。例えば、Ｙがハロゲン原子（好ましくは塩素原子）の場合には、不活性溶媒、例えばジクロロメタン中、０℃〜室温にて、化合物（ＩＩＩ）に対し１〜５当量、好ましくは２．５当量の第３級アミン、例えばトリエチルアミンの存在下、化合物（ＩＩＩ）に対し１〜１．５当量好ましくは１．２当量の化合物（ＩＶ）を用いて、場合により触媒、例えば４−ジメチルアミノピリジンの存在下、行うことができる。また、Ｙが水酸基の場合には、不活性溶媒、例えばジクロロメタン中、０℃〜室温にて、化合物（ＩＩＩ）に対し１〜１．５当量、好ましくは１．２当量の縮合剤、例えば１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩存在下、化合物（ＩＩＩ）に対し１〜１．５当量好ましくは１．２当量の化合物（ＩＶ）を用いて、場合により触媒、例えば４−ジメチルアミノピリジンの存在下に行うことができる。反応終了後、水と混和しない有機溶媒にて希釈した後、水、飽和食塩水にて順次洗浄し、溶媒を留去することによって目的化合物（ＩＩ）を得ることができる。なお、必要であれば、カラムクロマトグラフィーなどで精製することができる。
【００３９】
次いで、得られた化合物（ＩＩ）から、ピリミジン環形成反応を行い、化合物（ＩＡ'）へ変換する。この環化反応は、例えば、化合物（ＩＩ）を水酸化ナトリウム、カリウムｔ−ブトキシドまたは炭酸カリウムのような塩基を用いて、封管容器中、エタノール−水溶媒中、１２０〜１４０℃にて反応させることにより実施することができる。さらに、高沸点溶媒、例えば、メトキシエタノール中、カリウムｔ−ブトキシドのような塩基を用い、１２０〜１４０℃にて反応させてもよい。反応終了後、水と混和しない有機溶媒にて希釈した後、水、飽和食塩水にて順次洗浄し、溶媒を留去することによって目的化合物（ＩＡ'）を得ることができる。なお、必要であれば、カラムクロマトグラフィーまたは再結晶などで精製することができる。
【００４０】
さらに官能基の変換反応に付し、化合物（ＩＡ'）からｍ−クロロ安息香酸やマグネシウム  モノパーオキシフタレートなどの過酸を用い、ジクロロメタンまたはクロロホルム中、０℃から室温で反応させ、化合物（ＩＡ''）に変換することができる。
【００４１】
得られた化合物（ＩＡ''）に対し、アミンをｎ−ブチルリチウムなどで処理したリチウムアミドを作用させることによって、化合物（ＩＡ'''）に変換することができる。反応は、例えば、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフランなどのエーテル類中、化合物（ＩＡ''）に対し２〜５当量のアミンに、−７８〜０℃にてアミンと当量のｎ−ブチルリチウムを滴下し、リチウムアミドとした後、化合物（ＩＡ''）を加え反応させることにより実施することができる。反応終了後、水を加え、水と混和しない有機溶媒にて希釈した後、水、飽和食塩水にて順次洗浄し、溶媒を留去することによって化合物（ＩＡ'''）を得ることができる。
【００４２】
なお、上記の反応で使用したカルボン酸成分（ＩＶ）は、例えば、以下に示す方法によって合成することができる。
【００４３】
【化４】
2006219373.tif 000004
【００４４】
（式中、Ｌ、Ｙ、Ｒ４およびＲ８は前記定義のとおりであり、Ｘはハロゲン原子を示す。）
【００４５】
本方法を実施するには、公知方法（Chem. Pharm. Bull., 48(12), 1847-1853 (2000)）に従い、化合物（ＸＩＩＩ）から化合物（ＸＩＩ）を得る。この反応は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの極性溶媒中、化合物（ＸＩＩＩ）に対して約１当量のエタンチオールやベンゼンチオールなどのチオール類を、ｔ−ブトキシカリウムなどの塩基で処理し、室温〜−３０℃、好ましくは−３０℃にて化合物（ＸＩＩＩ）を作用させることにより実施することができる。反応終了後、水を加え、水と混和しない有機溶媒で抽出し、全有機物を水、飽和食塩水にて順次洗浄し、溶媒を留去することにより目的化合物（ＸＩＩ）を得ることができる。なお、必要であれば再結晶などで精製することができる。
【００４６】
次いで、得られた化合物（ＸＩＩ）から公知方法に従って、化合物（ＸＩ）を得る。反応は、例えば、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフランなどのエーテル類中、化合物（ＸＩＩ）に対して、例えばナトリウムメチラートなどのアルコールの金属塩を少過剰加え、室温〜還流温度で、化合物（ＸＩＩ）を加え反応させる。反応終了後、水を加え、水と混和しない有機溶媒にて希釈した後、水、飽和食塩水にて順次洗浄し、溶媒を留去することによって化合物（ＸＩ）を得ることができる。なお、必要であれば再結晶などで精製することができる。
【００４７】
得られた化合物（ＸＩ）は、公知方法に従って化合物（ＩＶ）へ変換される。この反応は、エステルの加水分解反応であり、多くの方法で実施することができる。例えば、メタノールなどのアルコール類、水、あるいはそれらの混合溶媒中、水酸化ナトリウムなどの塩基を用い、室温から還流温度で反応を行うことができる。反応終了後、溶媒を濃縮し、塩酸などで中和することによって、化合物（ＩＶ）が得られる。
【００４８】
以上で説明した製造方法に基づく反応は、すべて全く一般的なものであり、これらの実施のための適当な試薬および条件は、標準的教科書および後述の実施例を参考することにより直ちに確立することができる。
【００４９】
また、本発明が提供する化合物（ＩＡ）で定義されるすべての化合物を調製することのできる別法、および変法もまた、当業者であれば明らかである。
【００５０】
本発明が提供する式（ＩＢ）で示される化合物は、例えば、以下に示す方法によって合成することができる。
【００５１】
【化５】
2006219373.tif 000005
【００５２】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は前記定義のとおりであり、Ｙは水酸基またはハロゲン原子、好ましくは塩素原子である。）
【００５３】
本方法を実施するには、公知方法（例えば、J. Chem. Soc., Perkin Trans.1, 1996, 1545-1552）に従い、先ず、化合物（ＸＸ）から化合物（ＸＩＸ）を得る。この反応は、塩化メチレンなどのハロゲン化炭化水素類；トルエン、ベンゼンなどの芳香族炭化水素類；ジエチルエーテル、テトラヒドロフランなどのエーテル類、またはこれらの混合物中、０℃〜室温にて、化合物（ＸＸ）に対し２〜２.５当量の水素化ナトリウム、水素化カリウムなどの水素化アルカリ金属、またはトリエチルアミンなどの３級アミンの存在下、化合物（ＸＸ）に対して１〜１．５当量の化合物（ＸＸＩ）を作用させることにより実施することができる。反応終了後、水と混和しない有機溶媒にて希釈した後、水、飽和食塩水にて順次洗浄し、溶媒を留去することによって目的化合物（ＸＩＸ）を得ることができる。必要であれば、カラムクロマトグラフィーなどで精製することができる。
【００５４】
次いで、得られた化合物（ＸＩＸ）から、公知方法（例えば、J. Chem. Soc.,Perkin Trans.1, 1996, 1545-1552）に従って化合物（ＸＶＩＩＩ）へ変換する。反応は、トルエン、ベンゼンなどの芳香族炭化水素類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサンなどのエーテル類、またはこれらの混合物中、室温〜還流温度にて、化合物（ＸＩＸ）に対して５〜１０当量のジメチル硫酸などのメチル化試薬を用いる反応で実施することができる。反応終了後、水と混和しない有機溶媒にて希釈した後、水、飽和食塩水にて順次洗浄し、溶媒を留去することによって目的化合物（ＸＶＩＩＩ）を得ることができる。なお、必要であれば、カラムクロマトグラフィーなどで精製することができる。
【００５５】
得られた化合物（ＸＶＩＩＩ）から、公知方法（例えば、J. Chem. Soc., Perkin Trans.1, 1996, 1545-1552）に従って、化合物（ＸＶＩ）を得ることができる。この反応は、エタノールなどのアルコール類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサンなどのエーテル類、またはこれらの混合物中、室温〜還流温度にて、化合物（ＸＶＩＩＩ）に対し１〜１．５当量の化合物（ＸＶＩＩ）を用いる反応で実施することができる。反応終了後溶、媒を留去することによって目的化合物（ＸＶＩ）を得ることができる。なお、必要であれば、カラムクロマトグラフィーなどで精製することができる。
【００５６】
次いで、得られた化合物（ＸＶＩ）から、公知方法に従って化合物（ＸＶ）へ変換する。この反応はニトリル基の加水分解により酸アミドを合成する方法であり、多くの方法が実施することができる。例えば、水、またはエタノール、メタノールなどのアルコール類；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサンなどのエーテル類、あるいはこれらの混合液中、室温〜１００℃にて硫酸、塩酸などの触媒を作用させることにより実施することができる。反応終了後、反応液を弱アルカリ性にし、水と混和しない有機溶媒にて希釈した後、水、飽和食塩水にて順次洗浄し、溶媒を留去することによって目的の化合物（ＸＶ）を得ることができる。必要であれば再結晶などで精製することができる。
【００５７】
得られた化合物（ＸＶ）から、公知方法に従って化合物（ＸＩＶ）を得ることができる。一般に、Ｙがハロゲン原子（好ましくは塩素原子）の場合には、不活性溶媒、例えばジクロロメタン中、０℃〜室温にて、化合物（ＸＶ）に対し１〜５当量、好ましくは約２．５当量の第３級アミン、例えばトリエチルアミン存在下、化合物（ＸＶ）に対し１〜２当量、好ましくは約１．４当量の化合物（ＩＶ）を用いて、場合により触媒、例えば４−ジメチルアミノピリジンの存在下、行うことができる。また、第３級アミンの替わりに、ピリジンを溶媒として用いてもよい。また、Ｙが水酸基の場合には、不活性溶媒、例えばジクロロメタン中、０℃〜室温にて、化合物（ＸＶ）に対し１〜１．５当量、好ましくは約１．２当量の縮合剤、例えば１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩存在下、化合物（ＸＶ）に対し１〜１．５当量、好ましくは約１．２当量の化合物（ＩＶ）を用いて、場合により触媒、例えば４−ジメチルアミノピリジンの存在下行うことができる。反応終了後、水と混和しない有機溶媒にて希釈した後、水、飽和食塩水にて順次洗浄し、溶媒を留去することによって目的化合物（ＸＩＶ）を得ることができる。
【００５８】
次いで、得られた化合物（ＸＩＶ）は精製することなく次の反応に用い、ピリミジン環形成について公知（例えばJ.Med.Chem., 39 1635-1644(1996)）の反応を用いて、目的とする化合物（ＩＢ）を得ることができる。この環化反応は、例えば、化合物（ＸＩＶ）を水酸化ナトリウム、カリウムｔ−ブトキシドまたは炭酸カリウムのような塩基を用いて、封管容器中、エタノール−水溶媒中、１２０〜１４０℃にて反応させることにより行うことができる。さらに高沸点溶媒、例えば、メトキシエタノール中、カリウムｔ−ブトキシドのような塩基を用い１２０〜１４０℃にて反応させてもよい。反応終了後水と混和しない有機溶媒にて希釈した後、水、飽和食塩水にて順次洗浄し、溶媒を留去することによって、目的化合物（ＩＢ）を得ることができる。なお、必要であれば、カラムクロマトグラフィーまたは再結晶などで精製することができる。
【００５９】
この上記した反応は、すべて全く一般的なものであり、これらの実施のための適当な試薬および条件は、標準的教科書および後述の実施例を参考することにより直ちに確立することができる。したがって、化合物（ＩＢ）で定義されるすべての化合物を調製することのできる別法および変法もまた、当業者であれば明らかである。
【００６０】
【実施例】
以下に、試験例、実施例により、本発明を更に詳細に説明する。
本発明の化合物の合成およびそこで用いるための中間体を、後述する実施例で詳しく説明する。
また、実施例で製造された本発明化合物およびその中間体の化学構造およびその同定データは、実施例の後に表としてまとめて示した。
なお、実施例における各化合物は、後記する表中において対応する実施例番号として記載している。
【００６１】
本発明の範囲はこれらの試験例、実施例によって限定されるものではないことはいうまでもない。
以下の実施例で製造された本発明化合物のＰＤＥ７（ＶＩＩ型ホスホジエステラーゼ）阻害活性は、以下に示す試験例により確認された。
【００６２】
試験例１．ＰＤＥ７阻害活性測定法
ＰＤＥ７（ＶＩＩ型ホスホジエステラーゼ）を抑制する本発明化合物の能力を評価するために、Biochemical. Pharmacol., 48(6), 1219-1223 (1994) の方法を一部改変して、以下のアッセイを用いた。
【００６３】
１）ＰＤＥ７（ＶＩＩ型ホスホジエステラーゼ）活性画分を得た。すなわち、ヒト急性リンパ芽球様リンパ腫Ｔ細胞株であるＭＯＬＴ−４（ＡＴＣＣから、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ−１５８２として購入できる）を、１０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地で培養し、５×１０８個のＭＯＬＴ４を得た。遠心分離により細胞を回収し、１０ｍｌの緩衝液Ａ（２５ｍＭトリス−ＨＣｌ、５ｍＭ  ２−メルカプトエタノール、２ｍＭベンズアミジン、２ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１ｍＭ４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルフォニルヒドロクロリド、ｐＨ＝７．５）に懸濁した。ポリトロンホモジナイザーにより細胞をホモジナイズし、遠心分離（４℃、２５，０００Ｇ，１０分間）後の上清をさらに超遠心分離（４℃、１００，０００Ｇ，６０分間）することにより得られた上清を０．２μｍフィルタ−で濾過することにより可溶性画分を得た。
【００６４】
２）緩衝液Ａで平衡化されたＨｉＴｒａｐＱカラム（５ｍｌ×２）に、得られた可溶性画分を充填した。０〜０．８Ｍ塩化ナトリウムの線形勾配液を含有する緩衝液Ａ  ３００ｍｌを用いてホスホジエステラーゼを溶離し、５ｍｌ分画６０本を回収した。各分画をｃＡＭＰ代謝ホスホジエステラーゼ活性について検査した。各分画中ｃＡＭＰの代謝活性を有し、かつ１０μＭロリプラム（ＩＶ型ホスホジエステラーゼ選択的阻害薬）および１０μＭミルリノン（ＩＩＩ型ホスホジエステラーゼ選択的阻害薬）により代謝活性を消失しない分画のうち、３５０ｍＭ塩化ナトリウム付近を中心とする活性ピークとして溶出される分画を集め、ＰＤＥ７阻害活性を検査するための貯蔵溶液として使用した。
【００６５】
３）試験化合物は所望の濃度を２０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、１ｍＭＭｇＣｌ２、１００μＭ  ＥＤＴＡ、３３０μｇ／ｍｌウシ血清アルブミン、４μｇ／ｍｌ  ５’−ヌクレオチダ−ゼ、０．１μＣｉ  ３Ｈ−ｃＡＭＰ（０．０６４μＭ  ｃＡＭＰ）、１０μＭロリプラムおよびＶＩＩ型ホスホジエステラーゼ貯蔵溶液の含有している反応混合液中で、２５℃２時間反応させた。反応液に１０ｍＭヘペス−Ｎａ（ｐＨ＝７．０）に懸濁したＱＡＥ−セファデックスを加え５分間静置した後、上清を得てさらにＱＡＥ−セファデックスを加え５分間静置した後得られた上清中にある放射活性を測定した。
【００６６】
４）ＩＣ５０は、ＰＤＥ７の代謝活性を５０％阻害する試験化合物濃度として、各化合物について算出した。
【００６７】
各化合物のＰＤＥ7阻害活性
上記測定法により測定され、ホスホジエステラーゼ７阻害活性のＩＣ５０値が０．１μＭ以下を確認した実施例番号の化合物を示す。
１６、１７、１８、２０、２１、２２、２５、２６、２７、２８、２９、３２、３３、３６
さらに、上記の測定法により得られたホスホジエステラーゼ７阻害活性のＩＣ５０値の具体例を以下に示す。
化合物２６：ＩＣ５０＝０．００２６μＭ
化合物３２：ＩＣ５０＝０．００３２μＭ
【００６８】
上記ホスホジエステラーゼ阻害活性試験の結果、本発明によるピリジニルピラゾロピリミジノン誘導体は、極めて良好なＰＤＥ７阻害効果を示すことが確認された。
本発明化合物は、ＰＤＥ７に選択的な阻害剤であり、他のホスホジエステラーゼイソ酵素に対し、１０倍以上の選択性を有していた。このことから、他のイソ酵素に起因する副作用は少ないであろうことが予想された。
【００６９】
例として、本発明化合物のＰＤＥ４（ＩＶ型ホスホジエステラーゼ）阻害活性は、以下に示す試験により確認された。
【００７０】
試験例２．ＰＤＥ４阻害活性測定法
ＰＤＥ７を抑制する本発明化合物のＰＤＥ４抑制を評価するために、Biochemical. Pharmacol., 48(6), 1219-1223 (1994)の方法を一部改変して、以下のアッセイを用いた。
【００７１】
１）ＰＤＥ４活性画分を得た。すなわち、３匹のＢａｌｂ／ｃマウス（雌、１２週齢）（日本クレアより購入できる）より得た肝臓を、３０ｍｌの緩衝液Ｂ（２０ｍＭビス−トリス、５ｍＭ  ２−メルカプトエタノール、２ｍＭベンズアミジン、２ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１ｍＭ  ４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルフォニルヒドロクロリド、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ＝６．５）に懸濁した。ポリトロンホモジナイザーにより肝臓をホモジナイズし、遠心分離（４℃、２５，０００Ｇ，１０分間）後の上清をさらに超遠心分離（４℃、１００，０００Ｇ，６０分間）することにより得られた上清を０．２μｍフィルタ−で濾過することにより、可溶性画分を得た。
【００７２】
２）緩衝液Ｂで平衡化された１ｘ１０ｃｍ  ＤＥＡＥセファロースカラムに、得られた可溶性画分を充填した。０．０５〜１Ｍ酢酸ナトリウムの線形勾配液を含有する緩衝液Ｂ  １２０ｍｌを用いてホスホジエステラーゼを溶離し、５ｍｌ分画２４本を回収した。各分画をｃＡＭＰ代謝ホスホジエステラーゼ活性について検査した。各分画中ｃＡＭＰの代謝活性を有し、かつ３０μＭロリプラム（ＰＤＥ４選択的阻害薬）により代謝活性を消失した分画のうち、６２０ｍＭ酢酸ナトリウム付近を中心とする活性ピークとして溶出される分画を集め、ＰＤＥ４阻害活性を検査するための貯蔵溶液として使用した。
【００７３】
３）試験化合物は所望の濃度を２０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、１ｍＭＭｇＣｌ２、１００μＭ  ＥＤＴＡ、３３０μｇ／ｍｌウシ血清アルブミン、４μｇ／ｍｌ  ５’−ヌクレオチダ−ゼ、０．１μＣｉ  ３Ｈ−ｃＡＭＰ（０．０６４μＭ  ｃＡＭＰ）およびＰＤＥ４貯蔵溶液の含有している反応混合液中で２５℃２時間反応させた。反応液に１０ｍＭヘペス−Ｎａ（ｐＨ＝７．０）に懸濁したＱＡＥ−セファデックスを加え５分間静置した後、上清を得てさらにＱＡＥ−セファデックスを加え５分間静置した後得られた上清中にある放射活性を測定した。
【００７４】
４）ＩＣ５０はＰＤＥ４の代謝活性を５０％阻害する試験化合物濃度として、各化合物について算出した。
上記試験の結果、本発明化合物のホスホジエステラーゼ４に対するＩＣ５０は、同一化合物のホスホジエステラーゼ７阻害作用に比べ、１０倍以上弱い阻害活性であった。
上記の測定法で得られたホスホジエステラーゼ４に対するＩＣ５０値の具体例を、以下に示す。
化合物２６：ＩＣ５０＝１．２μＭ
化合物３２：ＩＣ５０＝０．９８μＭ
【００７５】
本発明の化合物は、ＰＤＥ７を選択的に阻害することにより、細胞内ｃＡＭＰレベルが高まり、さらにはＴ細胞の活性化を阻害することによって様々なアレルギー疾患、炎症・免疫疾患に有用である。すなわち、気管支喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、乾癬、アトピー性皮膚炎、結膜炎、変形性関節症、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、炎症性腸炎、肝炎、膵炎、脳脊髄炎、敗血症、クローン病、移植における拒絶反応、ＧＶＨ病、血管形成術後の再狭窄などに対する疾患の予防または治療剤として有用である。
【００７６】
本発明の有効成分を医薬組成物、またはＰＤＥ７阻害剤として使用するには、本発明の化合物を１種類もしくは２種類以上を配合して、常法にしたがって投与方法に応じた剤形に製剤して用いれば良い。例えば、経口投与には、カプセル剤、錠剤、顆粒剤、細粒剤、シロップ剤、ドライシロップ剤等の剤形が例示され、非経口投与には、注射剤の他、坐薬、膣坐薬等の坐剤、噴霧剤等の経鼻投与剤、軟膏、経皮吸収性のテ-プ等の経皮吸収剤が例示される。
【００７７】
本発明の化合物の臨床投与量は、投与する患者の症状、重症度、年齢、合併症の有無等によって異なり、また製剤によっても異なるが、経口投与の場合は、有効成分として、通常成人１日当り０．１〜１０００ｍｇ、好ましくは０．１〜５００ｍｇ、より好ましくは１〜１００ｍｇ、非経口投与の場合は、経口投与の場合の１０分の１量〜２分の１量を投与すればよい。これらの投与量は、患者の年齢、症状等により適宜増減することが可能である。
【００７８】
更に、本発明化合物の毒性は低く、これらの化合物の安全性は高いと予想される。
【００７９】
［実施例］
次に、本発明の化合物の合成およびそこで用いるための中間体を、以下の実施例により説明する。なお、以下の実施例における化合物の化学構造及び同定データを後記の表中にまとめて示した。実施例の化合物は、表中の実施例番号と対応している。
【００８０】
実施例１
２−シクロヘキシル−５−メチル−２，４−ジヒドロ−３Ｈ−ピラゾール−３−オン
アセト酢酸メチル１４．５ｍｌ（０．１３４ｍｏｌ）とシクロヘキシルヒドラジン塩酸塩２０．２ｇ（０．１３４ｍｏｌ）の混合物を２時間１２０℃で撹拌し、次いで冷却した。反応液を４Ｍ水酸化ナトリウム水溶液３０ｍｌで中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し減圧下溶媒を留去した。残渣にヘキサンを加え、析出した結晶を濾取することにより標記化合物１９．０ｇ（７９％）を得た。
【００８１】
実施例２
５−クロロ−１−シクロヘキシル−３−メチル−４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール
実施例１で得た化合物９．３ｇ（５１．６ｍｍｏｌ）にオキシ塩化リン１０ｍｌ（１０７ｍｍｏｌ）を加え１２０℃で１０時間撹拌した。次に反応液を室温にし、過剰のオキシ塩化リンを減圧下留去した。残渣に無水酢酸４５ｍｌを加えて溶かし、この溶液に氷冷下発煙硝酸９ｍｌをゆっくりと滴下した。同温度で２時間撹拌した後、反応液を氷に注ぎ固体を濾取した。この固体をジクロロメタンに溶かし、炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残渣をヘキサンから再結晶（ヘキサン）にて精製することにより標記化合物６．２８ｇ（５０％）を得た。また、濾液を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝６／１）にて精製することにより、標記化合物４．２１ｇ（３３％）を得た。
【００８２】
実施例３
１−シクロヘキシル−３−メチル−４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル
実施例２で得た化合物１０．３ｇ（４２．４ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド９０ｍｌ溶液にシアン化ナトリウム４．２ｇ（８４．９ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で１．５時間撹拌した。次に反応液を室温にし、水を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝６／１）にて精製し、標記化合物９．１８ｇ（９３％）を得た。
【００８３】
実施例４
４−アミノ−１−シクロヘキシル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニトリル
実施例３で得た化合物１．０ｇ（４．２７ｍｍｏｌ）のメタノール１０ｍｌ、濃塩酸１０ｍｌの混合懸濁液に鉄粉１．２ｇ（２１．４ｍｍｏｌ）を加え、２時間加熱還流した。次に反応液を室温にし、炭酸水素ナトリウム水溶液で反応液を中和後セライトろ過した。濾液をジクロロメタンで抽出し、有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝７／１）にて精製し、標記化合物０．７５ｇ（８７％）を得た。
【００８４】
実施例５
１−シクロヘキシル−３−メチル−４−ニトロ−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド
実施例３で得た化合物９．０ｇ（３８．５ｍｍｏｌ）のメタノール２５ｍｌ溶液に、３０％過酸化水素水溶液１２ｍｌ、３Ｍ水酸化ナトリウム水溶液３０ｍｌを加え、室温で１．５時間撹拌した。次に反応液を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去することにより、標記化合物７．８ｇ（８０％）を得た。
【００８５】
実施例６
４−アミノ−１−シクロヘキシル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド
実施例５で得た化合物７．７ｇ（３０．６ｍｍｏｌ）の濃塩酸１８０ｍｌ懸濁液に二塩化スズ２水和物２７．６ｇ（１２２ｍｍｏｌ）を加え８０℃で１．５時間撹拌した。次に反応液を室温にし、水酸化ナトリウム水溶液で中和した後、セライトろ過した。濾液をジクロロメタンで抽出し、有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製し、標記化合物６．０５ｇ（８９％）を得た。
【００８６】
実施例７
２−メトキシ−６−［（４−メチルフェニル）スルファニル］ニコチン酸
メチル  ２−メトキシ−６−（４−メチルベンジルチオ）ピリジン−３−カルボキシレート９．２５ｇ（３１．９６ｍｍｏｌ）のメタノール８０ｍｌ懸濁液に１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液３８．３６ｍｌ（３８．３６ｍｍｏｌ）を加え１時間加熱還流した。次に反応液を室温に戻し、減圧下溶媒を濃縮後、水で薄め、２Ｎ−塩酸を加え、析出固体を集めることによって、標記化合物８．９２ｇ（定量的）を得た。
【００８７】
実施例８
１−シクロヘキシル−５−｛２−メトキシ−６−［（４−メチルフェニル）スルファニル］−３−ピリジニル｝−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
実施例７で得た化合物３．０３ｇ（１１ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン３０ｍｌ懸濁液に、塩化チオニル１．６０ｍｌ（２２ｍｍｏｌ）を加え、１．５時間加熱還流した。次に反応液を室温にし、減圧下溶媒を留去することによって、薄黄色固体の酸クロリドを得た。
実施例６で得た化合物２．２２ｇ（１０ｍｍｏｌ）のクロロホルム３０ｍｌの溶液に、室温で上記酸クロリドのクロロホルム２０ｍｌ溶液、トリエチルアミン３．４８ｍｌ（２５ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン５ｍｇを加え、１晩攪拌した。次に反応液に水を加えた後、クロロホルムで抽出し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去し、薄黄色固体のアミド体を得た。
上記アミド体をメトキシエタノール５０ｍｌに懸濁し、カリウムｔ−ブトキシド２．８１ｇ（２５ｍｍｏｌ）を加え、１３０℃で４０分間攪拌した。次に反応液を室温に戻し、減圧下溶媒を濃縮後、水で薄め、１Ｎ−塩酸２６ｍｌを加え、クロロホルムで抽出、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）にて精製し、標記化合物３．６４ｇ（７９％）を得た。
【００８８】
実施例９
１−シクロヘキシル−５−｛２−メトキシ−６−［（４−メチルフェニル）スルホニル］−３−ピリジニル｝−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
実施例８で得た化合物１．５ｇ（３．２５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン４０ｍｌ溶液に、０℃でｍ−クロロ過安息香酸１．５４ｇ（７．１５ｍｍｏｌ）を加え、２時間攪拌した。次に反応液に飽和重曹水を加えた後、ジクロロメタンで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥、減圧下溶媒を留去し、標記化合物１．７５ｇ（定量的）を得た。この化合物は精製することなく次の反応に用いた。
【００８９】
実施例１０
２−［シクロヘキシル（ヒドロキシ）メチレン］マロノニトリル
マロノニトリル３．９６ｇ（０．０６ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン６０ｍｌ溶液に、０℃で水素化ナトリウム４．８ｇ（６０％油状懸濁物、０．１２ｍｏｌ）を４回に分けて加え、０℃で３０分撹拌した。次にシクロヘキサンカルボン酸クロリドを滴下し、室温にて３０分撹拌後、１Ｍ塩酸１５０ｍｌをゆっくりと加え、酢酸エチルで抽出した。次に、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残渣をジイソプロピルエーテルで再結晶を行い標記化合物８．１６ｇ（７７％）を得た。
【００９０】
実施例１１
２−［シクロヘキシル（メトキシ）メチレン］マロノニトリル
実施例１０で得た化合物２．６４ｇ（１５ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン２４ｍｌ、水４ｍｌの混合溶液に、室温で炭酸水素ナトリウム１０ｇを加え、さらにジメチル硫酸１０ｍｌを５分間で滴下した。８５℃で２．５時間加熱後、室温に戻し、水を加え、ジエチルエーテルで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）で精製し、標記化合物２．３５（８２％）を得た。
【００９１】
実施例１２−１
５−アミノ−３−シクロヘキシル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル
実施例１１で得た化合物２．３ｇ（１２．１ｍｍｏｌ）のエタノール２０ｍｌの溶液に、室温でメチルヒドラジン０．６４３ｍｌ（１２．１ｍｍｏｌ）を加え、５時間加熱還流した。室温に戻し、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝５０／１）で精製し、標記化合物１．４８ｇ（６０％）を得た。
【００９２】
実施例１２−２
５−アミノ−３−シクロヘキシル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル
窒素気流下、マロノニトリル１７．２ｇ（２６０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン２６０ｍｌ溶液に水素化ナトリウム２０．８ｇ（約６０％油状懸濁物、５２０ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくりと加えた。次に同温度でシクロヘキサンカルボニルクロリド３５ｍｌ（２６０ｍｍｏｌ）滴下し、滴下後反応液を室温にし１．５時間撹拌した。次にこの反応液にジメチル硫酸３０ｍｌ（３１２ｍｍｏｌ）を加え、３時間加熱還流をし、その後氷冷下でトリエチルアミン１７．４ｍｌ（１２５ｍｍｏｌ）、メチルヒドラジン１３．８ｍｌ（２６０ｍｍｏｌ）を加え、１時間加熱還流した。反応液を室温にし、減圧下反応液を留去した後、残渣に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝３０／１〜２０／１）で精製し、更に得られた粗結晶を再結晶（ヘキサン−酢酸エチル）にて精製し、標記化合物２０．７（３９％）を得た。また、母液をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製することで、標記化合物１１．３ｇ（２１％）を得た。
【００９３】
実施例１３
５−アミノ−３−シクロヘキシル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド
実施例１２で得た化合物２５．３ｇ（１２４ｍｍｏｌ）に氷冷下濃塩酸７５ｍｌを加え、室温で１５分間撹拌し、更に６０℃で１時間撹拌した。次に反応液を氷に注ぎ、水酸化ナトリウム水溶液で中和した後、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去した。残渣を再結晶（酢酸エチル）にて精製し、標記化合物２０．０ｇ（７３％）を得た。
【００９４】
実施例１４
３−シクロヘキシル−６−｛２−メトキシ−６−［（４−メチルフェニル）スルファニル］−３−ピリジニル｝−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例７で得た化合物２．７０ｇ（９．８１ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン３０ｍｌ懸濁液に、塩化チオニル１．４３ｍｌ（１９．６ｍｍｏｌ）を加え、２時間加熱還流した。次に反応液を室温にし、減圧下溶媒を留去することによって、薄黄色固体の酸クロリドを得た。
上記酸クロリドのピリジン３０ｍｌ溶液に実施例１３で得た化合物１．８２ｇ（８．１７ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン５ｍｇを加え、室温で２０時間攪拌した。次に反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた後、クロロホルムで抽出し、有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去し、薄黄色固体のアミド体を得た。
上記アミド体をメトキシエタノール５０ｍｌに懸濁し、カリウムｔ−ブトキシド２．３０ｇ（２０．４ｍｍｏｌ）を加え、１４０℃で２時間攪拌した。次に反応液を室温に戻し、減圧下溶媒を濃縮後、水で薄め、１Ｎ−塩酸２１ｍｌを加え、クロロホルムで抽出した。有機層を、水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝１００／１）にて精製し、さらにシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製し、さらに酢酸エチルから再結晶することにより、標記化合物１．１２ｇ（３０％）を得た。
【００９５】
実施例１５
３−シクロヘキシル−６−｛２−メトキシ−６−［（４−メチルフェニル）スルホニル］−３−ピリジニル｝−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例９において実施例８で得た化合物に代えて、実施例１４で得た化合物を用いた他は同様に反応を行い、標記化合物１．０２ｇ（８７％）を得た。
【００９６】
実施例１６
１−シクロヘキシル−５−［２−メトキシ−６−（４−メチル−１−ピペラジニル）−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
Ｎ−メチルピペラジン１３４μｌ（１．２２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン５ｍｌ溶液に、−３０℃でｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液７７９μｌ（１．５６Ｍヘキサン溶液、１．２２ｍｍｏｌ）を滴下し、同温度で、１５分間で攪拌した。次に、実施例９で得た化合物を−３０℃で加え、１５分間で攪拌した。水を加え、室温に戻し、酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝３０／１）で精製し、標記化合物１２３ｍｇ（９３％）を得た。
【００９７】
実施例１７
１−シクロヘキシル−５−［２−メトキシ−６−（４−モルフォリニル）−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
実施例１６においてＮ−メチルピペラジンに代えて、モルホリンを用いた他は同様に反応を行い、標記化合物７２ｍｇ（５６％）を得た。
【００９８】
実施例１８
１−シクロヘキシル−５−［２−メトキシ−６−（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
実施例１６においてＮ−メチルピペラジンに代えて、Ｎ−メチルホモピペラジンを用いた他は同様に反応を行い、標記化合物１６ｍｇ（１２％）を得た。
【００９９】
実施例１９
１−シクロヘキシル−５−（２−メトキシ−３−ピリジニル）−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
実施例６で得た化合物２００ｍｇ（０．９０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン３ｍｌ溶液に、２−メトキシニコチン酸１６５ｍｇ（１．０８ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩２０７ｍｇ（１．０８ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣にエタノール６ｍｌ、水酸化ナトリウム水溶液３ｍｌを加え、９時間加熱還流した。反応液を室温に冷却後、水で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製し、さらに酢酸エチル−ヘキサンの混合溶媒から再結晶することにより標記化合物７８ｍｇ（２６％）を得た。
【０１００】
実施例２０
３−シクロヘキシル−６−［２−メトキシ−６−（４−メチル−１−ピペラジニル）−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例１６において実施例９で得た化合物に代えて、実施例１５で得た化合物を用いた他は同様に反応を行い、標記化合物８６ｍｇ（６５％）を得た。
【０１０１】
実施例２１
３−シクロヘキシル−６−［２−メトキシ−６−（４−モルフォリニル）−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例１６においてＮ−メチルピペラジンに代えて、モルホリンを用い、実施例９で得た化合物の代わりに、実施例１５で得た化合物も用いた他は同様に反応を行い、標記化合物５８ｍｇ（４５％）を得た。
【０１０２】
実施例２２
３−シクロヘキシル−６−［２−メトキシ−６−（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例１６においてＮ−メチルピペラジンに代えて、Ｎ−メチルホモピペラジンを用い、実施例９で得た化合物の代わりに、実施例１５で得た化合物も用いた他は同様に反応を行い、標記化合物１１５ｍｇ（８４％）を得た。
【０１０３】
実施例２３
３−シクロヘキシル−６−［６−（１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４．５］デカ−８−イル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例１６においてＮ−メチルピペラジンに代えて、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４，５］デカンを用い、実施例９で得た化合物の代わりに、実施例１５で得た化合物も用いた他は同様に反応を行い、標記化合物７７６ｍｇ（定量的）を得た。
【０１０４】
実施例２４
３−シクロヘキシル−６−［２−メトキシ−６−（４−オキソ−１−ピペリジニル）−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例２３で得た化合物７４３ｍｇ（１．５５ｍｍｏｌ）のアセトン３０ｍｌ、水３ｍｌ混合懸濁液にｐ−トルエンスルホン酸１水和物３５３ｍｇ（１．８６ｍｍｏｌ）を加え、５時間加熱還流した。次に反応液を室温に戻し、溶媒を減圧下留去した。残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣を酢酸エチル−エタノール混合溶媒から再結晶することにより、標記化合物４０５ｍｇ（９３％）を得た。
【０１０５】
実施例２５
３−シクロヘキシル−６−［６−（４−ヒドロキシ−１−ピペリジニル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例２４で得た化合物１２０ｍｇ（０．２８ｍｍｏｌ）のメタノール３ｍｌ懸濁液に、水素化ホウ素ナトリウム１２．５ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）を加え、室温で２．５時間攪拌した。次に反応液にアセトンを加え、減圧下溶媒を留去した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／酢酸エチル＝２／１〜１／２）にて精製し、得られた粗結晶をエタノールから再結晶することにより、標記化合物８５ｍｇ（７０％）を得た。
【０１０６】
実施例２６
３−シクロヘキシル−６−｛２−メトキシ−６−［４−（メチルアミノ）−１−ピペリジニル］−３−ピリジニル｝−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例２４で得た化合物１２０ｍｇ（０．２８ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン２ｍｌ懸濁液にメチルアミン５７μＭ（３０％エタノール溶液、０．５５ｍｍｏｌ）、酢酸１０μＭおよび水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム８７ｍｇ（０．４１ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間攪拌した。次に反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をアルカリ性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／酢酸エチル／メタノール＝１０／１０／１）にて精製し、得た粗結晶を酢酸エチル−ヘキサン混合溶媒から再結晶することにより、標記化合物８７ｍｇ（７０％）を得た。
【０１０７】
実施例２７
３−シクロヘキシル−６−｛６−［４−（ジメチルアミノ）−１−ピペリジニル］−２−メトキシ−３−ピリジニル｝−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例２６においてメチルアミンに代えて、ジメチルアミンを用いた他は同様に反応を行い、標記化合物１０３ｍｇ（８０％）を得た。
【０１０８】
実施例２８
６−［６−（４−アミノ−１−ピペリジニル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−３−シクロヘキシル−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例２４でえた化合物２４０ｍｇ（０．５５ｍｍｏｌ）に４Ｍアンモニアエタノール溶液１０ｍｌ、５％パラジウム−炭素２４ｍｇを加え、水素置換し、２４時間室温、常圧で攪拌した。反応液をセライト濾過し、濾液を減圧下留去した。残渣をアルカリ性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／酢酸エチル／メタノール＝１０／１０／１）にて精製し、得られた粗結晶をエタノールから再結晶することにより、標記化合物１６９ｍｇ（７０％）を得た。
【０１０９】
実施例２９
Ｎ−｛１−［５−（３−シクロヘキシル−１−メチル−４−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−６−メトキシ−２−ピリジニル］−４−ピペリジニル｝アセタミド
実施例２８で得た化合物８０ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン２ｍｌ溶液に無水酢酸２１μｌ（０．２２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン３８μｌ（０．２８ｍｍｏｌ）を加え、室温で１．５時間攪拌した。次に反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をエタノールから再結晶することにより、標記化合物７９ｍｇ（９０％）を得た。
【０１１０】
実施例３０
１−シクロヘキシル−５−［６−（１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４．５］デカ−８−イル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
実施例１６においてＮ−メチルピペラジンに代えて、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４．５］デカンを用いた他は同様に反応を行い、標記化合物５８８ｍｇ（８６％）を得た。
【０１１１】
実施例３１
１−シクロヘキシル−５−［２−メトキシ−６−（４−オキソ−１−ピペリジニル）−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
実施例２４において、実施例２３で得た化合物に代えて実施例３０で得た化合物を用いた他は同様に反応を行い、標記化合物２５５ｍｇ（５０％）を得た。
【０１１２】
実施例３２
１−シクロヘキシル−５−｛２−メトキシ−６−［４−（メチルアミノ）−１−ピペリジニル］−３−ピリジニル｝−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
実施例２６において、実施例２４で得た化合物に代えて実施例３１で得た化合物を用いた他は同様に反応を行い、標記化合物６８ｍｇ（５５％）を得た。
【０１１３】
実施例３３
１−シクロヘキシル−５−｛６−［４−（ジメチルアミノ）−１−ピペリジニル］−２−メトキシ−３−ピリジニル｝−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
実施例２６において、実施例２４で得た化合物に代えて実施例３１で得た化合物を、メチルアミンに代えてジメチルアミンを用いた他は同様に反応を行い、標記化合物１０２ｍｇ（９４％）を得た。
【０１１４】
実施例３４
３−シクロヘキシル−６−（２−メトキシ−６−スルファニル−３−ピリジニル）−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例１５で得た化合物２３０ｍｇ（０．４７ｍｍｏｌ）のメタノール５ｍｌ懸濁液に水硫化ナトリウム１００ｍｇを加え、４時間加熱還流した。冷後、反応液に１Ｍ塩酸水溶液を加え、析出した固体を濾取した。得られた個体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝２０／１）にて精製し、標記化合物１３２ｍｇ（７６％）を得た。
【０１１５】
実施例３５
５−（３−シクロヘキシル−１−メチル−４−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−６−メトキシ−２−ピリジンスルホニル  クロリド
実施例３４で得た化合物１２０ｍｇ（０．３２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル３ｍｌ懸濁液に硝酸カリウム８２ｍｇ（０．８１ｍｍｏｌ）を加え、０℃下塩化スルフリル６５μｌ（０．８１ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間攪拌した。次に、反応液に氷水を加え、析出した不溶物を濾取することにより、標記化合物１１４ｍｇ（８１％）を得た。
【０１１６】
実施例３６
３−シクロヘキシル−６−｛２−メトキシ−６−［（４−メチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）スルホニル］−３−ピリジニル｝−１−メチル−１，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
実施例３５で得た化合物１０４ｍｇ（０．２４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン２ｍｌ溶液にＮ−メチルホモピペラジン３５μｌ（０．２９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン８３μｌ（０．５９ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。次に反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をアルカリ性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製し、得た粗結晶を酢酸エチル−ヘキサンから再結晶することにより、標記化合物６８ｍｇ（５６％）を得た。
【０１１７】
実施例３７
１−シクロヘキシル−５−［６−（４−ヒドロキシ−１−ピペリジニル）−２−メトキシ−３−ピリジニル］−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
実施例２５において、実施例２４で得た化合物に代えて実施例３１で得た化合物を用いた他は同様に反応を行い、標記化合物７３ｍｇ（６０％）を得た。
【０１１８】
実施例３８
１−シクロヘキシル−５−｛２−メトキシ−６−［（４−メチルフェニル）スルフィニル］−３−ピリジニル｝−３−メチル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン
実施例８で得た化合物１．５ｇ（３．２５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン３０ｍｌ溶液に、０℃でｍ−クロロ過安息香酸７０１ｍｇ（３．２５ｍｍｏｌ）を加え、４０分攪拌した。次に反応液に飽和重曹水を加えた後、ジクロロメタンで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥、減圧下溶媒を留去し、２−ブタノンで再結晶することによって、標記化合物１．０ｇ（６４％）を得た。
【０１１９】
上記実施例で、製造された化合物の化学構造およびその同定データは、以下の表にまとめて示した。
【０１２０】
【表１】
2006219373.tif 000006
【０１２１】
【表２】
2006219373.tif 000007
【０１２２】
【表３】
2006219373.tif 000008
【０１２３】
【表４】
2006219373.tif 000009
【０１２４】
【表５】
2006219373.tif 000010
【０１２５】
【表６】
2006219373.tif 000011
【０１２６】
【表７】
2006219373.tif 000012
【０１２７】
【表８】
2006219373.tif 000013
【０１２８】
【表９】
2006219373.tif 000014
【０１２９】
【表１０】
2006219373.tif 000015
【０１３０】
【発明の効果】
本発明のピリジニルピラゾロピリミジノン誘導体は、ＰＤＥ７を選択的に阻害する作用を有し、これによって、細胞内ｃＡＭＰレベルが高まり、さらにはＴ細胞の活性化を阻害することによって様々なアレルギー疾患、炎症・免疫疾患の予防および治療に有用である。また、本発明のピリジニルピラゾロピリミジノン誘導体はＰＤＥ７を選択的に阻害するため、他のＰＤＥに対する影響が少なく、医薬として使用した場合の副作用の低減が期待される。