(57)【要約】【課題】  脂肪細胞の分化を促進する作用を有しながらも、日々安全な食品として摂取することのできる脂肪細胞分化促進剤を提供することを目的とするものである。【解決手段】  マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、前駆脂肪細胞から脂肪細胞への脂肪細胞分化促進剤；同じく肥大化脂肪細胞から小型正常脂肪細胞への脂肪細胞分化促進剤；同じく内臓脂肪増加抑制剤；同じくアディポサイトカイン分泌異常を伴う生活習慣病の予防、改善剤；同じく脂肪細胞の分化に関連する転写因子を介した疾病の予防、改善剤を提供するものである。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、前駆脂肪細胞から脂肪細胞への脂肪細胞分化促進剤。
【請求項２】
マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、肥大化脂肪細胞から小型正常脂肪細胞への脂肪細胞分化促進剤。
【請求項３】
マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、内臓脂肪増加抑制剤。
【請求項４】
マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、アディポサイトカイン分泌異常を伴う生活習慣病の予防、改善剤。
【請求項５】
マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、脂肪細胞の分化に関連する転写因子を介した疾病の予防、改善剤。
【請求項６】
請求項１記載の脂肪細胞分化促進剤を含有する食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は脂肪細胞分化促進剤に関し、詳しくはマティコ（Matico）（Piper sp.)から抽出される成分を有効成分とし、前駆脂肪細胞から脂肪細胞への分化促進作用により、肥大化脂肪細胞を減らし、小型脂肪細胞を増やす性質を有する脂肪細胞分化促進剤に関する。特に生活習慣病と関連するアディポサイトカイン類の過剰分泌を引き起こす内臓脂肪の肥大化を抑えることにより、糖尿病、高脂血症、高血圧、動脈硬化、ガン等の生活習慣病を幅広く予防、改善するための健康食品素材、医薬に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
我が国では食生活が豊かになり、現在では飽食の時代とも呼ばれ、カロリー摂取過剰、運動不足も原因となり、肥満或いは糖尿病が急激に増加している。現在、30歳代の男性は3人に１人が過体重か肥満であり、40〜50歳代では4割近くが肥満である。肥満は合併症として高脂血症や動脈硬化症、糖尿病をもたらすことが知られている。
肥満とは、脂肪細胞に異常に脂肪が蓄積して細胞が肥大した状態である。これまで脂肪細胞は、余剰のエネルギーを貯めるための組織であると考えられてきた。
しかしながら、最近、脂肪細胞はレプチン、アディポネクチン、TNF-α、レジスチン、遊離脂肪酸をはじめとして様々なホルモン、サイトカインを分泌し、生体で最も活発な内分泌臓器であることが分かってきた。特に、内臓脂肪において分泌が盛んであることが知られており、肥大脂肪細胞ではインスリン抵抗性惹起分子といわれるTNF-α、レジスチン、遊離脂肪酸などを過剰分泌するようになる。このことがインスリン抵抗性の原因となり、糖尿病、高血圧、高脂血症、動脈硬化、ガン等の生活習慣病につながると考えられている。即ち、内臓脂肪の蓄積が生活習慣病と密接に関係している。
【０００３】
従って、生活習慣病を予防するためには、肥大した脂肪細胞を小型の脂肪細胞にすることが重要と考えられる。脂肪細胞の分化は、核内受容体型転写因子とよばれるPPARγ（peroxisome proliferator-activated receptor γ）によって主に制御がなされている。
小型の脂肪細胞を増やすためには、PPARγの作用を強めて前駆脂肪細胞から脂肪細胞の分化を促す方法が考えられる。糖尿病治療薬に用いられているチアゾリジン系薬剤は、強力なPPARγアゴニスト（作用薬）であり、小型脂肪細胞への分化と共に、肥満した脂肪細胞をアポトーシスにより減らす作用もあるといわれる。実際に臨床においてインスリン感受性が高まり、血糖降下作用のあることが知られている（例えば、特許文献１参照）。
【０００４】
ところで生活習慣病の元凶は、正常の小型脂肪細胞が、大型脂肪細胞へと肥大し、これに伴って、インスリン抵抗性或いは病態惹起物質が過剰分泌されるためである。
従って、種々の生活習慣病を予防、改善するためには、小型脂肪細胞から肥大脂肪細胞への進展を止めること、或いは肥大化脂肪細胞を減らすことが必要である。そのためには、そのような大型脂肪細胞を減らし、小型脂肪細胞への分化を促進するような素材を、日々安全な食品として摂取することが重要と考えられる。
しかしながら、食品素材としてそのような観点から研究された例はなく、このような機能性を持つ素材は知られていない。
【０００５】
【特許文献１】特許第３１７６６９４号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、このような従来の課題を解消し、脂肪細胞の分化を促進する作用を有しながらも、日々安全な食品として摂取することのできる脂肪細胞分化促進剤を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
そこで、本発明者らは、肥大化脂肪細胞を減らし、小型脂肪細胞を増加させることを目的としてPPARγアゴニスト様作用をもつ植物を脂肪細胞の分化促進を指標にスクリーニングを行ってきた。その結果、マティコ（Matico）（Piper sp.)からの抽出エキスが前駆脂肪細胞から脂肪細胞への分化を促進することを見出し、また、実際に遺伝的糖尿病db/dbマウスの糖代謝、脂質代謝を著しく改善することを確認した。このような知見に基づき、本発明を完成するに至った。
【０００８】
請求項１に係る本発明は、マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、前駆脂肪細胞から脂肪細胞への脂肪細胞分化促進剤を提供するものである。
請求項２に係る本発明は、マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、肥大化脂肪細胞から小型正常脂肪細胞への脂肪細胞分化促進剤を提供するものである。
請求項３に係る本発明は、マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、内臓脂肪増加抑制剤を提供するものである。
請求項４に係る本発明は、マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、アディポサイトカイン分泌異常を伴う生活習慣病の予防、改善剤を提供するものである。
請求項５に係る本発明は、マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、脂肪細胞の分化に関連する転写因子を介した疾病の予防、改善剤を提供するものである。
請求項６に係る本発明は、請求項１記載の脂肪細胞分化促進剤を含有する食品を提供するものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の脂肪細胞分化促進剤は、前駆脂肪細胞から脂肪細胞への分化を促進することにより、正常の小型脂肪細胞を増やし、糖及び脂質の代謝を活性化させる。また、肥大化脂肪細胞から脂肪細胞への分化を促進することにより、正常の小型脂肪細胞を増やし、肥大化脂肪細胞を減少させる。従って、肥大化脂肪細胞の増加に伴い引き起こされる糖尿病、高脂血症、高血圧、肥満、免疫異常、ガン等の生活習慣病に対して、予防及び治療効果を示すものと考えられる。
本発明の脂肪細胞分化促進剤は、低濃度においても強い活性を有しているので、様々な食品や加工食品や医薬品等に添加して利用可能であり、上記のような生活習慣病の予防、改善のための食品として有効に利用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
請求項１に係る本発明は、マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とする、前駆脂肪細胞から脂肪細胞への脂肪細胞分化促進剤である。
請求項１に係る本発明の脂肪細胞分化促進剤は、マティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分としており、具体的にはマティコ（Matico）の茎、葉及び根のいずれか１以上から抽出される成分を有効成分としている。マティコ（Matico）の茎及び／又は葉、特に茎及び葉が好ましく用いられるが、これに制限されるものではない。マティコ（Matico）の茎、葉、根としては、それらの乾燥品を用いることができ、さらに、この乾燥品を粉砕して用いることもできる。
【００１１】
ここでマティコ（Matico）とは、コショウ科コショウ属に属する南米原産の植物の総称（Piper sp.)である。本発明においてマティコ（Matico）とは、一般的にマティコ（Matico）と呼ばれている、パイパー・アングスティフォリウム［Piper. angustifolium (P. angusitifoliaともいう。)］とパイパー・エロンガタム［P. elongatum］の他に、広くパイパー・アダンカム・エル［P. aduncum L.］，パイパー・ヒスピディウム［P. hispidium］，パイパー・パープラセンス［P. purpurascence］，パイパー・アクニュスティフォリウム・バル［P. acnyustifolium vall］を含む。
マティコ（Matico）は、南米に自生する低木であり、民間療法として皮膚炎の治療その他に利用されており、また、マティコ（Matico）の１つであるパイパー・アングスティフォリウム［Piper. angustifolium］の溶剤抽出物は、脂肪組織分解剤として特許されている（特許第１７８４２１６号）が、脂肪細胞の分化促進作用を示すことはこれまで全く知られていない。
【００１２】
抽出は、メタノール、エタノール、ブタノール、ジエチルエーテル等の有機溶媒又はこれらの含水物を用いて行うことができ、特にエタノールを用いて行うことが好ましい。さらに、後記実施例２に示すように、エタノール抽出物のヘキサン可溶性画分に、ヘキサン不溶性画分と比べて強いグリセロール−３−リン酸脱水素酵素活性（以下、ＧＰＤＨ活性と略称する。）と高いトリグリセライド（ＴＧ）量が見られる。
なお、後記実施例１に示すように、製造例２で得られたマティコ（Matico）の熱水抽出物は、製造例１で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出物に比べて顕著な分化促進作用は示さなかったことから、熱水によっては顕著な分化促進作用を示す成分は、抽出されないか、或いは殆ど抽出されないものと認められる。
【００１３】
請求項１に係る本発明の脂肪細胞分化促進剤は、抽出液（抽出エキス）をそのまま、或いはこれを濃縮乾固して用いることができ、さらに機能性食品製剤、医薬品などとして、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤などの各種形態とし、経口摂取したり、静脈注射などの方法によって生体内に取り入れることができる。その他、栄養補助剤を本製剤に添加して用いることもできる。なお、各種剤型とするに際し、慣用の賦形剤を用いることもできる。
【００１４】
請求項１に係る本発明の脂肪細胞分化促進剤の使用量については、基本的には脂肪細胞への分化を促進するために有効な量であるが、具体的には、成人で１日あたり、抽出エキス量として、０．００１ｇ〜１０ｇ、好ましくは０．０１ｇ〜１ｇ程度が摂取できるように、１日１回乃至数回に分けて用いると良い。通常、数週間乃至数ヶ月間反復摂取（服用）することが望ましい。
【００１５】
請求項２に係る本発明は、請求項１に係る本発明と同じくマティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とするものであるが、請求項１に係る本発明の如き前駆脂肪細胞から脂肪細胞への脂肪細胞分化促進剤ではなく、肥大化脂肪細胞から小型正常脂肪細胞への脂肪細胞分化促進剤である点で異なっている。
請求項２に係る本発明によれば、肥大化脂肪細胞から小型正常脂肪細胞への脂肪細胞分化促進作用により、肥大化脂肪細胞を減らし、小型正常脂肪細胞を増やすことができる。
【００１６】
次に、請求項３に係る本発明は、請求項１に係る本発明と同じくマティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とするものであるが、内臓脂肪増加抑制剤である。
請求項３に係る本発明によれば、内臓脂肪の増加、肥大化を抑制することができる。
【００１７】
また、請求項４に係る本発明は、請求項１に係る本発明と同じくマティコ（Matico）から抽出される成分を有効成分とするものであるが、アディポサイトカイン分泌異常を伴う生活習慣病の予防、改善剤である。
請求項４に係る本発明によれば、特に生活習慣病と関連するアディポサイトカインの分泌異常を引き起こす内臓脂肪の肥大化を抑えることにより、脂肪細胞に由来する、糖尿病、高血圧、高脂血症、動脈硬化、ガン等の生活習慣病を幅広く予防、改善することができる。
【００１８】
請求項５に係る本発明は、請求項１に係る本発明と同じくマティコ（Matico）の茎及び／又は葉から抽出される成分を有効成分とするものであるが、脂肪細胞の分化に関連する転写因子を介した疾病の予防、改善剤である。脂肪細胞の分化に関連する転写因子を介した疾病としてより具体的には、高血圧、糖尿病、高脂血症、動脈硬化、免疫疾患、ガン、肥満、炎症等を挙げることができ、請求項５に係る本発明は、そのような脂肪細胞の分化に関連する転写因子を介した疾病を幅広く予防、改善することができる。
即ち、マティコ（Matico）から抽出される成分は、脂肪細胞分化関連転写因子を介した疾病の予防、改善剤として、或いはPPARγ、PPARα、PPARδを含むPPARｓ、を介した疾病の予防、改善剤として有効に用いられる。
【００１９】
さらに、請求項６に係る本発明は、請求項１記載の脂肪細胞分化促進剤を含有する食品である。
即ち、請求項１記載の脂肪細胞分化促進剤をそのまま、或いはこれに適宜栄養補助剤等を添加し、糖尿病、高血圧、高脂血症、動脈硬化、ガン等の生活習慣病を幅広く予防、改善するための機能性食品として用いることができる。
【００２０】
なお、請求項２〜５に係る発明について、請求項１と同様に、上記請求項６の如き限定のされたものとすることができる。
即ち、それぞれ請求項２記載の脂肪細胞分化促進剤を含有する食品、請求項３記載の内臓脂肪増加抑制剤を含有する食品、請求項４記載のアディポサイトカイン分泌異常を伴う生活習慣病の予防、改善剤を含有する食品、請求項５記載の脂肪細胞の分化に関連する転写因子を介した疾病の予防、改善剤を含有する食品、とすることができる。
【００２１】
また、請求項１記載の脂肪細胞分化促進剤、請求項２記載の脂肪細胞分化促進剤、請求項３記載の内臓脂肪増加抑制剤、請求項４記載のアディポサイトカイン分泌異常を伴う生活習慣病の予防、改善剤、請求項５記載の脂肪細胞の分化に関連する転写因子を介した疾病の予防、改善剤は、それぞれ飼料中に添加することもでき、上記食品と同様に、それぞれを含有する飼料、とすることができる。ここで飼料としては、例えば、霜降り肉用の飼料等が挙げられる。
【実施例】
【００２２】
次に、本発明を実施例により説明するが、本発明はこれらによって制限されるものではない。
【００２３】
製造例１（マティコ（Matico）のエタノール抽出物の製造）
マティコ（Matico）（パイパー・アングスティフォリウム［Piper. angustifolium］）の乾燥茎葉300ｇにエタノールを3リットル加え、加熱還流抽出を行い、得られた抽出液をロータリーエバポレーターで濃縮、乾固した。これにより、Maticoのエタノール抽出エキス末27ｇを得た。
【００２４】
製造例２（マティコ（Matico）の熱水抽出物の製造）
マティコ（Matico）（パイパー・アングスティフォリウム［Piper. angustifolium］）の乾燥茎葉300ｇに水を3リットル加え、沸騰浴中1時間抽出を行い、得られた抽出液をロータリーエバポレーターで濃縮、乾固した。これによりマティコ（Matico）の熱水抽出物35ｇを得た。
【００２５】
製造例３
製造例1で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出エキス末20ｇに対して、ヘキサン1リットルを加え、ヘキサン可溶性画分（ヘキサン可溶部）とヘキサン不溶性画分（ヘキサン不溶部）とに分けた。ヘキサン可溶性画分（ヘキサン可溶部）11ｇとヘキサン不溶性画分（ヘキサン不溶部）8ｇを得た。
【００２６】
製造例４（マティコ（Matico）のエタノール抽出物の製造）
マティコ（Matico）（パイパー・エロンガタム［P. elongatum］）の乾燥茎葉300ｇにエタノールを3リットル加え、加熱還流抽出を行い、得られた抽出液をロータリーエバポレーターで濃縮、乾固した。これにより、マティコ（Matico）のエタノール抽出エキス末３０ｇを得た。
【００２７】
実施例１
製造例１、２で得られたそれぞれの抽出物（被検物）について、次のようにして脂肪細胞分化促進作用を測定した。
マウス由来の前駆脂肪細胞３Ｔ３−Ｌ１を、６穴マルチプレートを用いて１０％牛胎児血清を含むＤＭＥ培地（ダルベッコ変法イーグル培地）にて３７℃で培養した。なお、培地は２〜３日毎に交換した。細胞が密集状態に達した後、以下の代表的な試薬で分化誘導を行った。即ち、培地にデキサメタゾン，メチルイソブチルキサンチン及びインスリンの３種類の混合液、或いはインスリンを添加することによって、分化誘導処理した。このとき、製造例1、２で得られた抽出物（被検物）をそれぞれ添加した。分化誘導処理は２日間行い、その後は元の培地で培養を続けたが、インスリンと製造例1、２で得られた抽出物（被検物）は培地交換のときに添加し続けた。約１週間後、脂肪細胞への分化の指標となる培地中のＧＰＤＨ活性を定量した。この酵素は、糖及び脂質代謝における重要な酵素であり、前駆脂肪細胞が分化して脂肪細胞になると、活性が上昇する。従って、この酵素活性が上昇すれば、分化が起こっていることになる。また、脂肪細胞への分化が起こると、細胞内でのトリグリセライド（ＴＧ）量が増大するため、同時に細胞内のＴＧ量も測定し、分化の指標とした。
【００２８】
結果を図1に示す。図１は、製造例１で得られたMaticoのエタノール抽出物と製造例２で得られたMaticoの熱水抽出物とについてのＧＰＤＨ活性とＴＧ量を示すグラフである。図中の数値は、インスリンによる分化誘導処理を行った場合のＧＰＤＨ活性を基準（100）として、各種濃度の抽出物（被検物）により生じたＧＰＤＨ活性とＴＧ量を比較した相対値である。
【００２９】
図１から明らかなように、製造例１で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出物100μg/ml添加により、ＧＰＤＨ活性、TGが共に顕著に増大した。
これに対して、製造例２で得られたマティコ（Matico）の熱水抽出物は、製造例１で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出物に比べて顕著な分化促進作用は示さなかった。
【００３０】
実施例２
製造例３で得られたヘキサン可溶性成分（ヘキサン可溶部）と不溶性成分（ヘキサン不溶部）とについて、実施例1と同様にして前駆脂肪細胞３Ｔ３−Ｌ１細胞への分化促進作用について検討を行った。
【００３１】
結果を図２に示した。図２は、製造例３で得られたヘキサン可溶性成分（ヘキサン可溶部）と不溶性成分（ヘキサン不溶部）とについてのＧＰＤＨ活性とＴＧ量を示すグラフである。製造例１で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出物についてのＧＰＤＨ活性とＴＧ量を併せて図２に示した。
【００３２】
図２から明らかなように、製造例３で得られたヘキサン可溶性成分（ヘキサン可溶部）は100μg/mlの添加により、GPDH活性、TG量ともに高い値を示し、無添加に比べGPDH活性は26倍、TG量は170倍へと増大した。これに対して、製造例３で得られたヘキサン不溶性成分（ヘキサン不溶部）においては、GPDＨ, TG共に大きな変化なく、可溶部に比べて低い値であった。
【００３３】
実施例３
製造例1で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出物を用い、自然発症糖尿病モデルdb/dbマウスへの糖代謝、脂質代謝への影響を検討した。
即ち、自然発症糖尿病モデルdb/dbマウスへ、製造例1で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出物500mg/kgを42日間にわたり反復経口投与した。
【００３４】
結果を図３、図４に示した。図３は、血糖値の経時変化を示すグラフであり、図４は、トリグリセライド値の経時変化を示すグラフである。
【００３５】
図３から明らかなように、製造例1で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出物を経口投与した群の血糖値は1週間後より対照群に比べて有意に低下し、その後、実験終了時の42日後まで低値を示した。
また、図４から明らかなように、脂質代謝についてトリグリセライド値を測定したところ、製造例1で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出物を経口投与した群について、2週間目より対照群に比べて有意な低下が示された。
【００３６】
実施例４
製造例４で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出物（被検物）について、実施例１と同様にして脂肪細胞分化促進作用を測定したところ、被検物50μg/mlの濃度で、無添加の対照に比べて、TGは273％、GPDHは677％へと各々増大した。
【００３７】
これらの結果は、マティコ（Matico）の抽出物の反復投与により、脂肪細胞での分化が促進され、正常小型脂肪細胞が増えることにより、アディポサイトカインの異常分泌が改善され、糖代謝、脂質代謝が改善されたことを示している。
【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明の脂肪細胞分化促進剤をそのまま、或いはこれに適宜栄養補助剤等を添加し、糖尿病、高血圧、高脂血症、動脈硬化、ガン等の生活習慣病を幅広く予防、改善するための機能性食品として用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】製造例１で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出物と製造例２で得られたマティコ（Matico）の熱水抽出物とについてのＧＰＤＨ活性とＴＧ量を示すグラフである。製造例１で得られたマティコ（Matico）のエタノール抽出物についてのＧＰＤＨ活性とＴＧ量が併せて示されている。
【図２】製造例３で得られたヘキサン可溶性成分（ヘキサン可溶部）と不溶性成分（ヘキサン不溶部）とについてのＧＰＤＨ活性とＴＧ量を示すグラフである。
【図３】実施例３における血糖値の経時変化を示すグラフである。
【図４】実施例３におけるトリグリセライド値の経時変化を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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