(57)【要約】【課題】  試料の質量分析により得られた測定データを用いた分析において、試料の解析に必要となるピークを精度よく選別する。【解決手段】  試料の質量分析により得られた測定データを用いた分析において、重なりがある同位体ピーク群を分離した後に、各同位体ピークの強度比を理論的な強度比と比較して、強度比が一致すると判断される同位体ピーク群のみを選別し、そのモノアイソトピックピークを選別する。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料の質量分析により得られた測定データに含まれる複数のピークの中から、試料の解析に必要となる目的のピークと、当該目的のピークに対応する構造体に含まれる元素の一部に同位元素を含む同位体構造体に対応する同位体ピークとを含む同位体ピーク群を検出するステップと、
前記同位体ピーク群を解析して、前記試料の解析において使用するピークデータを作成するステップと、
を含むことを特徴とする分析方法。
【請求項２】
請求項１に記載の分析方法において、
前記ピークデータを作成するステップにおいて、前記同位体ピーク群のモノアイソトピックピークを選択して、前記ピークデータに加えることを特徴とする分析方法。
【請求項３】
請求項１または２に記載の分析方法において、
前記ピークデータを作成するステップは、前記同位体ピーク群に含まれる前記目的のピークと前記同位体ピークの分布状態に基づき、当該同位体ピーク群が前記試料の解析に必要か否かを判断するステップを含み、
前記同位体ピーク群が前記試料の解析に必要と判断された場合に、当該同位体ピーク群のモノアイソトピックピークを選択して、前記ピークデータに加えることを特徴とする分析方法。
【請求項４】
請求項３に記載の分析方法において、
前記ピークデータを作成するステップは、解析対象の試料の元素組成に基づき予測された目的のピークとその同位体ピークとの分布状態に基づいた判断基準を取得するステップをさらに含み、
前記判断するステップにおいて、前記同位体ピーク群に含まれる前記目的のピークと前記同位体ピークとの分布状態と、前記判断基準とを比較して、当該同位体ピーク群が前記試料の解析に必要か否かを判断することを特徴とする分析方法。
【請求項５】
請求項１乃至４いずれかに記載の分析方法において、
前記ピークデータを作成するステップは、前記同位体ピーク群を検出するステップにおいて検出された前記同位体ピーク群に元素組成が異なる複数の構造体のピークが含まれるか否かを判断するステップと、
前記同位体ピーク群に元素組成が異なる複数の構造体のピークが含まれる場合に、前記同位体ピーク群をそれぞれ単一の構造体の同位体ピーク群に分離するステップと、
をさらに含み、
前記分離するステップで分離された各前記同位体ピーク群を解析して、前記ピークデータを作成することを特徴とする分析方法。
【請求項６】
請求項５に記載の分析方法において、前記ピークデータを作成するステップは、
前記同位体ピーク群に分離するステップにおいて、前記同位体ピーク群に元素組成が異なる複数の構造体のピークが含まれ、これらが重なっている場合に、目的とする一の前記同位体ピーク群以外の前記同位体ピーク群が平均元素組成を有すると仮定して前記目的とする一の前記同位体ピーク群を他の前記同位体ピーク群から分離する処理を行い、
前記分離するステップで分離された各前記同位体ピーク群を、当該前記同位体ピーク群以外の前記同位体ピーク群が平均元素組成を有すると仮定したことによる誤差を考慮して、解析する分析方法。
【請求項７】
請求項１乃至６いずれかに記載の分析方法において、
前記試料がタンパク質であることを特徴とする分析方法。
【請求項８】
請求項７に記載の分析方法において、
前記測定データは、前記タンパク質を所定の位置で選択的に断片化して得られる複数のペプチド断片に由来するピークを含むことを特徴とする分析方法。
【請求項９】
試料の質量分析により得られた測定データに含まれる複数のピークの中から、試料の解析に必要となる目的のピークと、当該目的のピークに対応する構造体に含まれる元素の一部に同位元素を含む同位体構造体に対応する同位体ピークとを含む同位体ピーク群を検出する同位体ピーク検出部と、
前記同位体ピーク群を解析して、前記試料の解析において使用するピークデータを作成するピークデータ作成部と、
を含むことを特徴とする分析システム。
【請求項１０】
請求項９に記載の分析システムにおいて、
前記ピークデータ作成部は、前記同位体ピーク群のモノアイソトピックピークを選択して、前記試料の解析において使用するピークデータに加えることを特徴とする分析システム。
【請求項１１】
請求項９または１０に記載の分析システムにおいて、
前記ピークデータ作成部は、前記同位体ピーク群に含まれる前記目的のピークと前記同位体ピークの分布状態に基づき、当該同位体ピーク群が前記試料の解析に必要か否かを判断し、必要と判断される場合に、当該同位体ピーク群のモノアイソトピックピークを選択して前記ピークデータに加えることを特徴とする分析システム。
【請求項１２】
請求項１１に記載の分析システムにおいて、
前記ピークデータ作成部は、前記同位体ピーク群に含まれる前記目的のピークと前記同位体ピークとの分布状態と、解析対象の試料の元素組成に基づき予測された目的のピークとその同位体ピークとの分布状態に基づいた判断基準とを比較して、当該同位体ピーク群が前記試料の解析に必要か否かを判断することを特徴とする分析システム。
【請求項１３】
請求項９乃至１２いずれかに記載の分析システムにおいて、
前記ピークデータ作成部は、前記同位体ピーク群を検出するステップにおいて検出された前記同位体ピーク群に元素組成が異なる複数の構造体のピークが含まれるか否かを判断し、前記同位体ピーク群に元素組成が異なる複数の構造体のピークが含まれる場合に、前記同位体ピーク群をそれぞれ単一の構造体の同位体ピーク群に分離するとともに、分離された各前記同位体ピーク群を解析して、前記ピークデータを作成することを特徴とする分析システム。
【請求項１４】
請求項９乃至１３いずれかに記載の分析システムにおいて、
前記ピークデータ作成部が作成した前記ピークデータに基づき、前記試料の同定を行う同定処理部をさらに含むことを特徴とする分析システム。
【請求項１５】
コンピュータを、
試料の質量分析により得られた測定データに含まれる複数のピークの中から、試料の解析に必要となる目的のピークと、当該目的のピークに対応する構造体に含まれる元素の一部に、同位元素を含む同位体構造体に対応する同位体ピークとを含む同位体ピーク群を検出する同位体ピーク検出手段、
前記同位体ピーク群を解析して、前記試料の解析において使用するピークデータを作成するピークデータ作成手段、
として機能させることを特徴とする分析プログラム。
【請求項１６】
請求項１５に記載の分析プログラムにおいて、
前記ピークデータ作成手段は、前記同位体ピーク群のモノアイソトピックピークを選択して、前記試料の解析において使用するピークデータに加えることを特徴とする分析プログラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、試料の質量分析により得られた測定データを用いた分析方法および分析システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
特定の細胞、組織、または器官の中で生産されるタンパク質全体を解析するプロテオーム解析では、細胞等の中に存在するタンパク質の網羅的な同定が試みられている。プロテオーム解析において汎用されているタンパク質の同定手法はペプチドマスフィンガープリント（ＰＭＦ）法である（非特許文献１）。ＰＭＦ法においては、二次元電気泳動などにより分離精製されたタンパク質を酵素分解し、その消化断片ペプチド群の質量分析を行う。そして、質量分析により得られたスペクトルを、データベース等に格納されている既知のタンパク質のアミノ酸配列に関する情報から予測される理論的ピークパターンと照合し、試料タンパク質に対応している遺伝子とタンパク質の候補の同定が行われている。
【非特許文献１】Ｗｅｎｚｈｕ  Ｚｈａｎｇ、Ｂｒｉａｎ  Ｔ．  Ｃｈａｉｔ、「ＰｒｏＦｏｕｎｄ：Ａｎ  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｓｙｓｔｅｍ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｕｓｉｎｇ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ」、２０００年、Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、７２巻、ｐ．２４８２−２４８９
【非特許文献２】Ｓｅｎｋｏ  ｅｔ．ａｌ．，  Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．ＭＳ  １９９５  ｐｐ．２２９−２３３
【非特許文献３】Ｊａｍｅｓ  Ａ．  Ｖｅｒｇｙ、「Ａ  ｇｅｎｅｒａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  ｃａｌｃｕｌａｔｉｎｇ  ｉｓｏｔｏｐｉｃ  ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ  」、１９８３年、  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ  ａｎｄ  Ｉｏｎ  Ｐｈｙｓｉｃｓ、５２巻、ｐ．３３７−３４９
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
従来、ＰＭＦ法では、試料の質量分析により得られたスペクトルと理論的ピークパターンとの照合において、質量が一致するところにピークがあるかないかの判断を行っている。この際、ピークとして検出されている物質の、元素組成に関する解析は行われていない。そのため、前記質量スペクトルにおいて、試料タンパク質由来のピークではないが、参照している理論的ピークの質量と同じ質量をもつピーク（擬陽性ピーク）が存在する場合には、それをノイズとして判定することができないために、目的のピークとしてカウントされてしまい解析結果の精度が落ちてしまうという課題があった。また、同定対象のタンパク質とは別のタンパク質の理論的ピークを参照している場合に、測定データのピークと理論的ピークの質量が一致する場合、それを擬陽性の一致であると判定できないために、解析結果の精度が落ちてしまうという課題があった。
【０００４】
本発明は上記事情に鑑みてなされたものであり、その目的は、試料の質量分析により得られた測定データを用いた分析において、試料の解析に必要な目的のピークを精度よく選別する技術を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明によれば、
試料の質量分析により得られた測定データに含まれる複数のピークの中から、試料の解析に必要となる目的のピークと、当該目的のピークに対応する構造体に含まれる、元素の一部に同位元素を含む同位体構造体に対応する同位体ピークとを含む同位体ピーク群を検出するステップと、前記同位体ピーク群を解析して、前記試料の解析において使用するピークデータを作成するステップと、を含むことを特徴とする分析方法が提供される。
【０００６】
一般に、ペプチド等の高分子の質量スペクトルでは、複数の同位体ピークが観測される。従って、同位体ピークを伴っていないピークは、ノイズである可能性が高い。本発明においては、測定データに含まれる複数のピークを同位体ピーク群に分類して、ピークデータを作成するため、同位体ピークを伴うピークのみを選別することができる。従って本発明によれば、試料の解析や同定に必要となるピークを精度よく選別することができる。これにより、試料の分析を精度よく行うことができる。
【０００７】
以下の記述においては、前記目的のピークと、その同位体ピークとをまとめ合わせることにより得られるピーク群を、同位体ピーク群と呼ぶ。
【０００８】
本発明の分析方法の前記ピークデータを作成するステップにおいて、前記同位体ピーク群のモノアイソトピックピークのみを選択して、前記ピークデータに加えることができる。
【０００９】
ここでモノアイソトピックピークとは、同位体ピーク群に含まれるピークの中で、最も質量の小さいピークのことである。このようにすれば、測定データに含まれる複数のピークの中から、モノアイソトピックピーク以外の同位体ピークを削除することができ、目的のピークを精度よく選別することができる。これにより、試料の分析を精度よく行うことができる。
【００１０】
本発明の分析方法において、前記ピークデータを作成するステップは、前記同位体ピーク群に含まれる前記目的のピークと前記同位体ピークの分布状態に基づき、当該同位体ピーク群が前記試料の解析に必要か否かを判断するステップをさらに含むことができ、前記同位体ピーク群が前記試料の解析に必要と判断される場合に、当該同位体ピーク群のモノアイソトピックピークを選択して、前記ピークデータに加えるステップを含むことができる。
【００１１】
ここで、前記判断するステップにおいて、たとえば同位体ピーク群に含まれるピークの総数に基づき、その同位体ピーク群が試料の解析に必要か否かを判断するステップを含むことができる。また、たとえば、同位体ピーク群に含まれる各ピークの強度比に基づき、その同位体ピーク群が試料の解析に必要か否かを判断するステップを含むことができる。さらに、同位体ピーク群に含まれるピークの総数および各ピークの強度比の両方に基づき、その同位体ピーク群が試料の解析に必要か否かを判断するステップを含むことができる。
【００１２】
前記ピークの総数に基づき判断するステップは、例えば一定数以上のピークを含む同位体ピーク群を、試料の解析に必要であると判断するステップとすることができる。
【００１３】
このようにすれば、試料の解析に必要となるピークを精度よく選別することができる。これは、前記構造体を構成する元素の総数が多くなるほど、質量の大きな同位体の存在率は高くなるために、前記構造体の元素組成に応じた充分な数の同位体ピークを伴わないピークは、ノイズである可能性が高いからである。
【００１４】
前記強度比に基づいて判断するステップは、たとえば、同位体ピーク群に含まれる各ピークの強度比がそれぞれ所定の値の範囲におさまるか否かに基づき、強度比が正常化否かを判断するステップを含むことができる。
【００１５】
このようにすれば、試料の解析に必要となるピークを精度よく選別することができる。これは、同位体ピーク群に含まれるピークの強度比は、各同位体の存在比を反映し、各同位体の存在比は前記構造体に固有の値となるために、強度比に異常があるピーク群はノイズである可能性が高いからである。
【００１６】
前記判断するステップにおいて、前記ピークの総数に基づき判断するステップと、前記強度比に基づいて判断するステップとの双方を併せて含めることにより、試料の解析に必要となるピークをさらに精度よく選別することができる。
【００１７】
このように、本発明の分析方法において、各ピーク毎の判断だけでなく、各同位体ピーク群に含まれる目的のピークと同位体ピークの分布状態も考慮してその同位体ピーク群が試料の解析に必要か否かを判断するので、上述したような擬陽性ピークを除外することができる。
【００１８】
本発明の分析方法において、前記ピークデータを作成するステップは、解析対象の試料の元素組成に基づいて予測された目的のピークとその同位体ピークとの分布状態に基づく判断基準を取得するステップをさらに含むことができ、前記判断するステップにおいて、前記同位体ピーク群に含まれる前記目的のピークと前記同位体ピークとの分布状態と、前記判断基準とを比較して、当該同位体ピーク群が前記試料の解析に必要か否かを判断することができる。
【００１９】
ここで、判断基準は、たとえば、解析対象の試料の元素組成に基づく当該試料の同位体存在比に基づいた判断基準とすることができる。解析対象の試料の構造が想定可能な場合は、その構造に基づき判断基準を算出することができる。この場合、想定される質量にピークが存在した場合に、そのピークを目的のピークとして選択し、その同位体ピークを検出する。次いで、目的のピークに対する同位体ピークの強度比を計算する。この結果を、想定される試料の同位体ピークの理論的な存在率（判断基準）と比較し、一致するか否かにより、選択した目的のピークが解析対象の試料のピークであるのか、擬陽性のノイズであるのかを判断することができる。この判断によって、ピークとして検出されている物質の元素組成が、解析対象の試料の元素組成と矛盾するか否かを判断できるためである。
【００２０】
たとえば、本発明の分析方法において、前記試料はタンパク質とすることができ、分析対象の測定データは、前記タンパク質を所定の位置で選択的に断片化して得られる複数のペプチド断片に由来するピークを含む質量スペクトルとすることができる。この場合、解析対象のタンパク質の構造が想定可能な場合は、前記判断基準は、そのタンパク質の一次構造に基づき、それぞれペプチド断片の元素組成を予測し、予測された元素組成に基づいて各ペプチド断片の同位体の理論的な存在比を計算し、この理論的な同位体存在比に基づいて前記判断基準を構成することができる。
【００２１】
また、解析対象の試料の構造が想定可能でなくても、解析対象の試料の種類が想定可能な場合は、その種類の物質の元素組成についての制約条件に基づいて、同位体の存在比が満たすべき制約条件を算出し、算出した制約条件に基づいて、前記判断基準を構成することができる。たとえば、本発明の分析方法において、解析対象のタンパク質の構造が想定できない場合は、ペプチドの平均元素組成（ａｖｅｒａｇｉｎｅ）に基づき、同位体の存在比を算出し、その同位体存在比に基づいて、目的のピークと各同位体ピークとの強度比がとり得る値の範囲を算出し、算出した値の範囲に基づいて前記判断基準を構成することができる。
【００２２】
本発明の分析方法において、前記ピークデータを作成するステップは、前記同位体ピーク群を検出するステップにおいて検出された前記同位体ピーク群に、元素組成が異なる複数の構造体のピークが含まれるか否かを判断するステップと、前記同位体ピーク群に元素組成が異なる複数の構造体のピークが含まれる場合に、前記同位体ピーク群を単一の構造体からなる同位体ピーク群に分離するステップと、をさらに含むことができ、前記分離するステップで分離された各前記同位体ピーク群に基づいて、前記ピークデータを作成することができる。
【００２３】
たとえば、質量分析により得られた測定データにおいては、解析対象の試料の質量分析測定を行う測定装置の質量分解能が不充分な場合には、元素組成が異なる複数の構造体の同位体ピーク群が重ね合わさって検出されることがある。本発明の分析方法によれば、このような場合に、複数の同位体ピーク群を分離してピークデータを作成することができるので、試料の解析に必要となるピークを精度よく選別することができる。
【００２４】
本発明の分析方法において、前記ピークデータを作成するステップは、前記同位体ピーク群に分離するステップにおいて、前記同位体ピーク群に元素組成が異なる複数の構造体のピークが含まれ、これらが重なっている場合に、目的とする一の前記同位体ピーク群以外の前記同位体ピーク群が平均元素組成を有すると仮定して前記目的とする一の前記同位体ピーク群を他の前記同位体ピーク群から分離する処理を行うことができ、前記分離するステップで分離された各前記同位体ピーク群を、当該前記同位体ピーク群以外の前記同位体ピーク群が平均元素組成を有すると仮定したことによる誤差を考慮して、解析することができる。
【００２５】
前記分離するステップにおいては、分離に伴ってピーク強度比の値に誤差が発生する。本発明の分析方法では、前記判断基準は、重ね合わせの分離に伴う誤差評価のための判断基準を含むことができる。これにより、複数の同位体ピーク群の重なりがある場合においても、精度の高い判断ができる。以下、具体的に説明する。
【００２６】
本発明の分析方法において、同位体ピーク群に元素組成が異なる複数の構造体のピークが含まれる場合、以下のような処理を行う。ここでは、二つの構造体のピークが含まれる場合を例として説明する。まず、１つ目のピーク群のピーク強度を、全体のピーク強度から差し引いて、２つ目のピーク群のピーク強度を求める。この際、二つの構造体のピークが重なっている場合、１つ目のピーク群のピーク強度を把握することができない。そのため、１つ目のピーク群が平均元素組成を有すると仮定して、１つ目のピーク群のピーク強度を求める。その後、全体から１つ目のピーク群のピーク強度を差し引いて、２つ目のピーク群のピーク強度を求める。このとき、１つ目のピーク群のピーク強度は、仮定値を用いているため、２つ目のピーク群のピーク強度にも誤差が生じている。そのため、本発明において、２つ目のピーク群が試料の解析に必要か否かを判断する際に、誤差を考慮して、通常よりも緩やかな判断基準を用いることができる。
【００２７】
なお、以上の本発明の分析方法は、同位体ピーク群を検出するステップを実行する同位体ピーク検出部と、ピークデータを作成するステップを実行するピークデータ作成部と、を含む分析システムにより実行することができる。これにより、迅速な処理を行うことができる。
【００２８】
また、分析システムは、ピークデータ作成部が作成したピークデータに基づき、ＰＭＦ法により、試料の同定を行う同定処理部をさらに含むことができる。
【００２９】
以上、本発明に係るシステムについて説明したが、これらの構成要素の任意の組み合わせや、本発明の構成要素や表現を方法、装置、プログラムの間で相互に置換したものもまた、本発明の態様として有効である。
【発明の効果】
【００３０】
本発明によれば、試料の質量分析により得られた測定データを用いた分析において、試料の解析に必要となるピークを精度よく選別することができる。これにより、試料の解析を精度よく行うことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３１】
以下、本発明の実施の形態について、図面を用いて説明する。なお、すべての図面において、同様の構成要素には同様の符号を付し、適宜説明を省略する。
【００３２】
本実施の形態において、本発明の分析方法を、ＰＭＦ法におけるタンパク質の同定に適用する場合を例に説明する。ここで、試料はタンパク質である。また、試料の質量分析により得られた測定データは、タンパク質を所定の位置で選択的に断片化して得られる複数のペプチド断片に由来するピークを含む。
【００３３】
図１は、本発明の実施の形態における分析方法の手順を示すフローチャートである。
本実施の形態における分析方法は、試料の質量分析により得られた測定データに含まれる複数のピークの中から、試料の解析に必要となる目的のピークと、当該目的のピークに対応する構造体に含まれる元素の一部に同位元素を含む同位体構造体に対応する同位体ピークとを含む同位体ピーク群を検出するステップ（Ｓ１２およびＳ１４）と、同位体ピーク群を解析して、試料の同定において使用するピークデータを作成するステップ（Ｓ１６）と、を含む。以下、具体的に説明する。
【００３４】
まず、同定対象の試料の質量分析測定を行う測定系から試料の質量分析により得られた測定データを取得する（Ｓ１０）。つづいて、測定系から取得した試料の質量分析により得られた測定データに含まれる複数のピークの中から、所定の強度を有するピークを選別し、一次ピークリストを作成する（Ｓ１２）。次いで、一次ピークリストに基づき、複数のピークの中から、同位体ピーク群を検出する（Ｓ１４）。ある目的のピークの同位体ピークは、その目的のピークとの質量差を考慮することにより検出することができる。すなわち、目的のピークの同位体ピークの質量は、中性子の質量（約１ｕ）を単位とする間隔で変化する。本実施の形態においては、質量分析により得られた測定データに含まれる複数のピークの中からあるピークを選択し、質量を基準として、そのピークと所定の間隔（約１ｕ）を単位として変化するピークをそのピークの同位体ピークとして選択していく。これにより、同位体ピーク群が検出される。
【００３５】
その後、同位体ピーク群に含まれるピークの分布状態を考慮して、同定対象の試料のピークである蓋然性が高いピークを選別し、二次ピークリストを作成し（Ｓ１６）、出力する（Ｓ１８）。これにより、質量分析により得られた測定データに含まれる複数のピークから、目的の断片ペプチド由来ではない擬陽性ピークを削除したピークリストを作成することができる。そのピークリストに基づき、試料の同定を行うことにより、試料の分析を精度よく行うことができる。
【００３６】
本実施の形態における分析方法は、分析システムにより実行することができる。図２は、本実施の形態における分析システムの構成を示す機能ブロック図である。
本実施の形態における分析システム１００は、試料の質量分析により得られた測定データに含まれる複数のピークの中から、試料の解析に必要となる目的のピークと、当該目的のピークに対応する構造体に含まれる元素の一部に同位元素を含む同位体構造体に対応する同位体ピークとを含む同位体ピーク群を検出する同位体ピーク検出部１２３と、同位体ピーク群を解析して、試料の同定において使用するピークデータを作成する２次ピークリスト作成部１５０と、を含む。具体的には、分析システム１００は、インターフェース部１１０、ピークデータ作成部１２０、記憶部１３０、判断基準作成部１４０を含む。
【００３７】
インターフェース部１１０は、データ取得部１１１、物質情報取得部１１２、解析方式選択部１１３、および出力処理部１１４を含む。ピークデータ作成部１２０は、ピーク検出部１２１、１次ピークリスト作成部１２２、同位体ピーク検出部１２３、および２次ピークリスト作成部１５０を含む。２次ピークリスト作成部１５０は、重ね合わせ分離部１２４、判断演算部１２５、およびモノアイソトピックピーク選択部１２６を含む。記憶部１３０は、測定データ記憶部１３１、０次ピークリスト記憶部１３２、１次ピークリスト記憶部１３３、物質情報記憶部１３４、判断基準記憶部１３５、２次ピークリスト記憶部１３６、および出力用ピークリスト記憶部１３７を含む。
【００３８】
データ取得部１１１は、測定系２００から試料の質量分析により得られた測定データを取得し、取得した測定データを測定データ記憶部１３１に転送する。測定データ記憶部１３１は、データ取得部１１１から測定データを取得し、取得した測定データを記憶する。
【００３９】
ピーク検出部１２１は、測定データ記憶部１３１から測定データを取得し、スペクトルのピークを検出し、各ピークの頂点の質量電荷比（ｍ／ｚ）と、その強度とを対応づけた０次ピークリストを作成する。０次ピークリスト記憶部１３２はピーク検出部１２１から０次ピークリストを取得し、取得した０次ピークリストを記憶する。１次ピークリスト作成部１２２は、０次ピークリスト記憶部１３２から０次ピークリストを取得し、ピークリストに含まれる全ピークの中で強度が最大のピークを基準として、所定値以上の強度（たとえば強度が最大のピークの１％以上の強度）を持つピークを選別し、それ以外のピークをピークリストから除去し、一次ピークリストを作成する。所定値は、予め設定していてもよく、各ピークのＳ／Ｎに基づき、Ｓ／Ｎが一定値以上のピークを選別することもできる。１次ピークリスト記憶部１３３は、１次ピークリスト作成部１２２から１次ピークリストを取得し、取得した１次ピークリストを記憶する。
【００４０】
図３は、一次ピークリストの例を示す図である。一次ピークリストは、ピーク番号欄と、質量電荷比（ｍ／ｚ）欄と、強度（％）欄とを含む。ここでは、Ｎ個のピークが選択されており、各ピークの番号には、質量電荷比と強度とが対応付けられている。
【００４１】
図２に戻り、同位体ピーク検出部１２３は、１次ピークリスト記憶部１３３から一次ピークリストを読み出し、一次ピークリストに含まれるピークから同位体ピーク群を検出する。この処理の詳細は後述する。
【００４２】
物質情報取得部１１２は、入力装置３００から解析対象の物質情報を取得し、物質情報記憶部１３４に転送する。ここで物質情報とは、解析対象とする物質の種類または元素組成に関する情報である。物質情報記憶部１３４は、物質情報取得部１１２から転送された物質情報を記憶する。
【００４３】
判断基準作成部１４０は、物質情報記憶部１３４から同定対象の試料の種類または元素組成に関する情報を読み出し、その情報に基づき、目的のピークとその同位体ピークとの分布状態に関する判断基準を作成する。判断基準作成部１４０の内部構成については、後述する。判断基準記憶部１３５は、判断基準作成部１４０から判断基準を取得し、取得した判断基準を記憶する。本実施の形態においては、ペプチド断片に由来するピークを選出することが目的である。判断基準記憶部１３５には、ペプチド断片の元素組成に基づく同位体存在比に基づいて算出された判断基準が記憶されている。
【００４４】
重ね合わせ分離部１２４は、同位体ピーク検出部１２３が検出した同位体ピーク群を、判断基準記憶部１３５の情報に基づいて解析して、元素組成が異なる複数の構造体の同位体ピーク群の重なりがあるか否かを判定し、重なりがあると判定された場合には、単一の構造体からなる同位体ピーク群に分離する。重ね合わせ分離部１２４の動作の詳細については、後述する。
【００４５】
判断演算部１２５は、判断基準記憶部１３５から判断基準を取得し、該判断基準に基づいて、重ね合わせ分離部１２４による解析を経過した同位体ピーク群を解析し、同定対象の試料のピークである蓋然性が高いピークを選別し、２次ピークリストを作成する。
【００４６】
具体的には、判断演算部１２５は、各同位体ピーク群に含まれるモノアイソトピックピークとその他の同位体ピークとの間の強度の関係を、判断基準記憶部１３５に記憶された判断基準に基づいて解析し、各同位体ピーク群が目的のペプチド断片に由来するピークを含むか否かを判断する。判断演算部１２５は、ペプチド断片に由来するピークを含まないと判断した同位体ピーク群を除去して２次ピークリストを作成することができる。判断演算部１２５の動作の詳細については、後述する。
【００４７】
モノアイソトピックピーク選択部１２６は、判断演算部１２５が選別した同位体ピーク群を取得し、その中からモノアイソトピックピークのみを選択し、それ以外のピークは除去したピークリストを作成し、２次ピークリスト記憶部１３６に出力する。
【００４８】
２次ピークリスト記憶部１３６は、モノアイソトピックピーク選択部１２６から２次ピークリストを取得し、取得した２次ピークリストを記憶する。
【００４９】
出力用ピークリスト記憶部１３７は、０次ピークリスト、１次ピークリスト、または２次ピークリストを記憶する。解析方式選択部１１３は、出力用ピークリスト記憶部１３７にどのピークリストを記憶するかを入力装置３００により入力された指示に基づき制御する。出力処理部１１４は、出力用ピークリストを出力する処理を行う。
【００５０】
以下に、同位体ピーク検出部１２３が同位体ピーク群を検出する処理を詳細に説明する。図４は、同位体ピーク検出部１２３の処理手順の一例を示すフローチャートである。本実施の形態において、同位体ピーク検出部１２３は、あるピークと所定の間隔で並んでいるピークの番号をまとめ、それらを同位体ピーク群を表す数列として出力する。
【００５１】
ここで、Ｎは一次ピークリストに含まれるピークの総数、ｘｋは、低質量側からｋ番目のピークの質量電荷比を示す。
まず、目的のピークｋを設定する（Ｓ１００）。ここで、初期値は、ｋ＝１とする。つづいて、目的のピークの同位体ピークであるか否かを判断する対象のピークｍ＝ｋ＋１を設定する（Ｓ１０２）。次いで、同位体ピーク群を表す数列Ｓｋを設定し、数値ｋのみをＳｋの要素として入力する。（Ｓ１０４）。次いで、ｍ番目のピークの質量ｘｍとｋ番目のピークの質量ｘｋとの差が所定の値以内であるか否かを判断する（Ｓ１０８およびＳ１１０）。まず、ｘｍ−ｘｋ≦１＋αか否かを判断する（Ｓ１０８）。ここで、「１」は、上述したように、中性子の質量を基準にして設定された数値である。αは誤差許容マージンを示す数値であり、たとえば０．０２とすることができる。
【００５２】
ｘｍ−ｘｋ≦１＋αの場合（Ｓ１０８のＹＥＳ）、ｘｍ−ｘｋ＜１−βか否かを判断する（Ｓ１１０）。βは、誤差許容マージンを示す数値であり、たとえば０．０２とすることができる。上記αとβとは同じ数値であってもよいが、異なる数値とすることもできる。ｘｍ−ｘｋ＜１−βの場合（Ｓ１１０のＹＥＳ）、ｋ’＝ｋ、ｍ’＝ｍ＋１と設定する（Ｓ１１２）。次いで、（ｋ’，ｍ’）→（ｋ，ｍ）と再設定して（Ｓ１１４）、ステップＳ１０８に戻り、ステップＳ１１４で再設定されたｋおよびｍに対して、それ以降同様の処理を行う。
【００５３】
ステップＳ１１０において、ｘｍ−ｘｋ≧１−βの場合（Ｓ１１０のＮＯ）、ｋ’＝ｍ、ｍ’＝ｍ＋１と設定する（Ｓ１１６）。つづいて、Ｓｋに数値ｍを追加し（Ｓ１１８）、一次ピークリストから番号ｋを削除する（Ｓ１１９）。この後、ステップＳ１１４に進み、（ｋ’，ｍ’）→（ｋ，ｍ）と再設定してステップＳ１０８に戻り、それ以降同様の処理を行う。
【００５４】
ステップＳ１０８において、ｘｍ−ｘｋ＞１＋αの場合（Ｓ１０８のＮＯ）、一次ピークリストから番号ｋを削除し（Ｓ１２０）、同位体ピーク群を表す数列Ｓｋを削除する（Ｓ１２１）。この後に、一次ピークリストから次の目的のピークｋを選択する（Ｓ１２２）。これは、Ｓ１２０で削除したピークに隣接するピークである。次いで、ステップＳ１２２で選択されたｋがｋ＜Ｎであるか否かを判断し（Ｓ１２４）、ｋ＜Ｎの場合（Ｓ１２４のＹＥＳ）、ステップＳ１００に戻り、ステップＳ１２２で選択されたｋを目的のピークとして設定する。これ以降、同様の処理を行う。
【００５５】
ステップＳ１２４において、ｋ＜Ｎでない場合（Ｓ１２４のＮＯ）、一連のＳｋを出力し（Ｓ１２６）、処理を終了する。
【００５６】
以上の処理により、Ｎ個のピークを含む一次ピークリストから、同位体ピーク群を検出し、出力することができる。
【００５７】
次に、判断基準作成部１４０、判断基準記憶部１３５、重ね合わせ分離部１２４、判断演算部１２５の内部構成を説明し、２次ピークリスト作成部１５０が二次ピークリストを作成する処理手順を説明する。
【００５８】
判断基準作成部１４０は、物質情報記憶部１３４に記憶されている情報を用いて、判断基準記憶部１３５に記憶する判断基準を作成する。具体的には、以下のようにして設定することができる。
ペプチドの平均元素組成（ａｖｅｒａｇｉｎｅ）は、
Ｃ：４．９３８４＝α、Ｈ：７．７５８３＝β、Ｎ：１．３５７７＝γ、Ｏ：１．４７７３＝δ、Ｓ：０．０４１７＝ε
であることが報告されている(非特許文献２)。この平均元素組成に関する情報は、物質情報記憶部１３４に記憶されている。
【００５９】
次に、判断基準作成部１４０が判断基準を作成する処理手順を説明する。与えられた質量Ｍに、最も近い質量をもつ平均元素組成のペプチドは、その元素組成式を
ＣｘＨｙＮｘＯｖＳｗ
とすると、
【００６０】
【数１】
2006284305.tif 000003
【００６１】
となる。ただしここで、［ａ］は”ａ”に最も近い整数値、すなわち”ａ”を四捨五入して得られる整数値を表す。同位体の存在率は、天然の安定同位体元素の存在率と解析対象の物質の元素組成とに基づいて、理論的に算出することができる。具体的には、非特許文献３に記載の方法によって、算出することができる。判断基準記憶部１３５は、理論的に算出された同位体存在比を記憶する。質量分析においては、同位体のイオン化率は互いに等しいために、算出された同位体の存在比は、同位体ピーク群の理論的なピーク強度比とみなすことができる。
【００６２】
ここで、通常のＰＭＦ法で考慮すべき断片の質量範囲は５００〜３，０００［Ｄａ］である。そのため、この質量範囲で、ペプチドの平均元素組成に基づいて、目的のピークと同位体ピークとの理論的な強度比を算出すると、
【００６３】
【数２】
2006284305.tif 000004
【００６４】
となる。従って、Ｍ＜２０００の領域では、５本目以降の同位体ピークの強度割合は充分に小さいために、除去して考えることができる。Ｍ＞２０００の領域でも５本目以降の同位体ピークの強度割合は小さいために、これを除去して考えても解析可能であるが、一般に分子量が大きくなるほど、５本目のピークの強度割合が増加するため、５本目まで考慮に入れたほうがより正確な解析が行える。
【００６５】
次に、着目している同位体ピーク群がペプチドのシグナルであるための必要条件を考慮する。ここで、モノアイソトピック質量がＭであるペプチドの同位体を考える。実際に観測された同位体ピーク群のピークの強度（計測値）が、ｙ１，ｙ２，ｙ３，ｙ４，ｙ５であるとする。まず、数式１に従って、Ｍに最近接の質量を持つａｖｅｒａｇｉｎｅの元素組成を算出する。つづいて、このａｖｅｒａｇｉｎｅの同位体存在比を算出する。ここで算出した同位体の存在比が、ｈ１：ｈ２：ｈ３：ｈ４：ｈ５であるとする。ここでｈ１はモノアイソトープの存在率、ｈ２はモノアイソトープに対して質量数が１だけ多い同位体の存在率、ｈ２はモノアイソトープに対して質量数が２だけ多い同位体の存在率、以下ｈ５まで同様、である。次に、｛ｙ１，ｙ２，ｙ３，ｙ４，ｙ５｝と｛ｈ１，ｈ２，ｈ３，ｈ４，ｈ５｝との双方を比較する。ピーク強度比は、平均元素組成および実測値においてそれぞれ以下のように表される。
【００６６】
【数３】
2006284305.tif 000005
【００６７】
平均元素組成と実測値の強度比の間には、（１）計測値自体の誤差、（２）参照基準が平均元素組成であることにより生じる差分、に基づく差が生じる。以下、これらをまとめて誤差という。
【００６８】
上述したように、ペプチドの同位体では、元素組成が制約されるために、その同位体存在比にも制約が生じる。従って、あるピークがペプチドのシグナルであれば、同位体ピークの強度比は、平均元素組成を参照基準として、一定値の誤差内におさまっていることが想定できる。これを利用して、ペプチド由来のシグナルである蓋然性の高いピークを選別することができる。以下、その例を説明する。
まず、平均元素組成からの差分（誤差）を次式で評価する：
【００６９】
【数４】
2006284305.tif 000006
【００７０】
ペプチドであるならば、適切なε２，ε３，ε４，ε５の値に対して、上式を満たしている必要がある。適切なε２，ε３，ε４，ε５の値は、実験値により求めることができる。式（９）〜（１２）に式（１）〜（８）式を代入して整理すると、以下のようになる。
【００７１】
【数５】
2006284305.tif 000007
【００７２】
以上の式（１３）〜（１６）は、平均元素組成を参照基準とした場合の、ペプチドのピーク群であるための判断基準である。同位体ピーク群に含まれる各ピークが上記式（１３）〜（１６）を満たすか否かを判断することにより、その同位体ピーク群のピークがペプチド由来のものであるか否かを判断することができる。ところで次に説明するように、上記式（１３）〜（１６）を満たさない場合は、複数のペプチドのピーク群が重なり合っている可能性がある。従って、この判断は、元素組成が異なる複数の同位体ピーク群の重なりの可能性があるか否かの判断も兼ねているために、重ね合わせ分離部１２４が行う。重ね合わせ分離部１２４は、この判断に必要な参照基準のピーク強度比を、判断基準記憶部１３５から取得する。
【００７３】
実際はペプチド由来のピークであっても、複数の同位体ピーク群のピークが重なりあって検出された場合、同位体ピーク群が、式（１３）〜（１６）の条件を満たさないという可能性がある。以下では、同位体ピーク群のピーク強度比が、式（１３）〜（１６）の条件を満たさない場合に、それがペプチド由来でないために条件を満たさないのか、複数の同位体ピーク群が重なっているために条件を満たさないのかを判断する手法を説明する。以下、２つの同位体ピーク群の重なりの可能性と、それらの分離を例として説明する。
【００７４】
まず、同位体ピーク群１と同位体ピーク群２が重なっている状況を分類する。ここでは、各同位体ピーク群が、以下のような強度および質量を有する４つのピークを含む場合を想定する。
【００７５】
【数６】
2006284305.tif 000008
【００７６】
同位体ピーク群１と同位体ピーク群２が重なっている状況としては、以下の例が考えられる。
状況（ａ）４つのピーク全てが重なっている→ピーク数４
状況（ｂ）３つのピークが重なっている→ピーク数５
状況（ｃ）２つのピークが重なっている→ピーク数６
状況（ｄ）１つのピークが重なっている→ピーク数７
【００７７】
各状況の重なりの分離例を説明する。
上記状況（ａ）の場合：対処が困難である。
【００７８】
上記状況（ｂ）〜状況（ｄ）の場合：同位体ピーク群１に対応するペプチドが平均元素組成をとると仮定して、２つの同位体ピーク群を分離し、その後に分離された各同位体ピーク群に含まれるピークの強度比が、ペプチドであるための条件を満たすか否かを判断する。
【００７９】
まず、状況（ｂ）の場合を説明する。図５に示すように、２つの同位体ピーク群はそれぞれ４つのピークを含み、そのうち３つのピークが重なり、５つのピークが含まれる。ここで、この５つのピークの質量をＭ１〜Ｍ５とし、これらのピーク強度の実測値を以下のようにする。
【００８０】
【数７】
2006284305.tif 000009
【００８１】
次いで、同位体ピーク群１が平均元素組成をとると仮定して、強度を計算すると、以下のようになる。ここで、Ｍ１は、同位体ピーク群１のモノアイソトピック質量である。
【００８２】
【数８】
2006284305.tif 000010
【００８３】
ここで、以上の分離演算に際して、同位体ピーク群１が平均元素組成をとると仮定したことによる誤差は、同位体ピーク群２のピーク強度（計算値）に累積することになる。次に、この誤差の累積を考慮に入れて、同位体ピーク群２がペプチド由来であるか否かを検証するための同位体ピーク群２のピーク強度の検証方法を説明する。
【００８４】
【数９】
2006284305.tif 000011
【００８５】
【数１０】
2006284305.tif 000012
【００８６】
【数１１】
2006284305.tif 000013
【００８７】
【数１２】
2006284305.tif 000014
【００８８】
【数１３】
2006284305.tif 000015
【００８９】
【数１４】
2006284305.tif 000016
【００９０】
式（２７）〜（２９）式が、同位体ピーク群１を分離する際の誤差を考慮に入れたうえで、同位体ピーク群２のピークがペプチド由来であるための必要条件となる。分離した同位体ピーク群２のピーク強度が式（２７）〜（２９）を満たすのであれば、同位体ピーク群１および同位体ピーク群２の双方を、ペプチド由来のシグナルとして採用する。逆に満たさないのであれば、同位体ピーク群１はペプチド由来のシグナルである可能性が残るとして採用し、同位体ピーク群２はペプチド由来ではないとして、採用しない。
【００９１】
同様に、状況（ｃ）の場合を説明する。図６に示すように、２つの同位体ピーク群はそれぞれ４つのピークを含み、そのうち２つのピークが重なり、６つのピークが含まれる。ここで、６つのピークの質量をＭ１〜Ｍ６とし、これらのピーク強度の実測値を以下のようにする。
【００９２】
【数１５】
2006284305.tif 000017
【００９３】
【数１６】
2006284305.tif 000018
【００９４】
（２７）式〜（２９）式を導いた計算と同様の計算により、以下の（３０）式〜（３３）式が導かれる。
【数１７】
2006284305.tif 000019
【００９５】
【数１８】
2006284305.tif 000020
【００９６】
式（３０）〜式（３３）が、同位体ピーク群１を分離する際の誤差を考慮に入れたうえで、同位体ピーク群１と同位体ピーク群２のピークがペプチド由来であるための必要条件となる。分離した同位体ピーク群２のピーク強度が式（３０）〜（３３）のすべてを満たすのであれば、同位体ピーク群１および同位体ピーク群２の双方を、ペプチド由来のシグナルとして採用する。式（３０）を満たし、式（３１）〜（３３）の少なくともひとつが満たされない場合は、同位体ピーク群１のみをペプチド由来のシグナルとして採用し、同位体ピーク群２はペプチド由来ではないとして採用しない。式（３１）〜（３３）はすべて満たされ、式（３０）のみが満たされない場合は、同位体ピーク群２のみをペプチド由来のシグナルとして採用し、同位体ピーク群１はペプチド由来ではないとして、採用しない。式（３０）が満たされず、かつ式（３１）〜（３３）の少なくともひとつが満たされない場合は、同位体ピーク群１、同位体ピーク群２の双方を、ペプチド由来ではないとして採用しない。
【００９７】
同様に、状況（ｄ）の場合を説明する。図７に示すように、２つの同位体ピーク群はそれぞれ４つのピークを含み、そのうち１つのピークが重なり、７つのピークが含まれる。ここで、７つのピークの質量をＭ１〜Ｍ７とし、これらのピーク強度の実測値を以下のようにする。
【００９８】
【数１９】
2006284305.tif 000021
【００９９】
【数２０】
2006284305.tif 000022
【０１００】
（２７）式〜（２９）式を導いた計算と同様の計算により、以下の（３４）式〜（３８）式が導かれる。
【０１０１】
【数２１】
2006284305.tif 000023
【０１０２】
【数２２】
2006284305.tif 000024
【０１０３】
式（３４）〜（３８）が、同位体ピーク群１を分離する際の誤差を考慮に入れたうえで、同位体ピーク群1と同位体ピーク群２のピークがペプチド由来であるための必要条件となる。分離した同位体ピーク群２のピーク強度が式（３４）〜（３８）のすべてを満たすのであれば、同位体ピーク群１および同位体ピーク群２の双方を、ペプチド由来のシグナルとして採用する。式（３４）〜（３５）を満たし、式（３６）〜（３８）の少なくともひとつが満たされない場合は、同位体ピーク群１のみをペプチド由来のシグナルとして採用し、同位体ピーク群２はペプチド由来ではないとして採用しない。式（３６）〜（３８）はすべて満たされ、式（３４）〜（３５）の少なくともひとつが満たされない場合は、同位体ピーク群２のみをペプチド由来のシグナルとして採用し、同位体ピーク群１はペプチド由来ではないとして、採用しない。式（３４）〜（３５）の少なくともひとつと式（３６）〜（３８）の少なくともひとつが共に満たされない場合は、同位体ピーク群１、同位体ピーク群２の双方を、ペプチド由来ではないとして採用しない。
【０１０４】
以上の判断過程において、重なりのある同位体ピーク群の強度の分離計算は、重ね合わせ分離部１２４が行う。この際に必要となる参照基準のピーク強度比は、判断基準記憶部１３５から取得する。判断演算部１２５は、重ね合わせ分離部１２４が、重ねあわせがあると判断し分離した同位体ピーク群のみに対して、式（２７）〜（３８）を用いた上述の判断・選別操作を行う。重ね合わせ分離部１２４が、重なりがないと判断したピーク群に対しては、上述の判断・選別は行わない。
【０１０５】
以上、判断基準作成部１４０、重ね合わせ分離部１２４、判断演算部１２５の動作を、ペプチドの平均元素組成（ａｖｅｒａｇｉｎｅ）を参照基準とする場合を例にとり説明した。解析対象のペプチドの元素組成が具体的にわかっている場合は、平均元素組成の代わりに、その具体的な元素組成を用いることによって、より確かな解析を行うことができる。
【０１０６】
図８は、２次ピークリスト作成部１５０が、判断基準記憶部１３５を参照して二次ピークリストを作成する手順を示すフローチャートである。以下で説明する条件式や判断のための数値は判断基準記憶部１３５に記憶されている。
【０１０７】
２次ピークリスト作成部１５０は、同位体ピーク群Ｓｋを取得すると（Ｓ２００のＹＥＳ）、同位体ピーク群Ｓｋに含まれるピーク数が所定数Ｎｐ以上であるか否かを判断する（Ｓ２０２）。ここで、本実施の形態においては、経験的にペプチド由来のピークの場合、同位体ピークが３以上含まれるため、Ｎｐ＝３とすることができる。ピーク数がＮｐ以上の場合（Ｓ２０２のＹＥＳ）、各ピークが上述した条件式（１３）〜（１６）に合致するか否かを検証する（Ｓ２０４）。各ピークが条件を満たす場合（Ｓ２０６のＹＥＳ）、その同位体ピーク群Ｓｋのモノアイソトピックピークを選択する（Ｓ２０８）。その後、ステップＳ２０８で選択されたモノアイソトピックピークをピークリストに記録してピークリストを更新する（Ｓ２０９）。つづいて、次の同位体ピーク群Ｓｋの検証を続けるか否かを判断し（Ｓ２１０）、検証を終了する場合は（Ｓ２１０のＮＯ）、ステップＳ２０９で記録されたピークリストを二次ピークリストとして出力する（Ｓ２１２）。
【０１０８】
ステップＳ２０２で、ピーク数がＮｐより小さい場合（Ｓ２０２のＮＯ）、その同位体ピーク群Ｓｋはペプチド由来のものではないとして、その同位体ピーク群Ｓｋをピークリストから削除する（Ｓ２１６）。
【０１０９】
ステップＳ２０６において、各ピークが条件を満たさない場合（Ｓ２０６のＮＯ）、異なる元素組成の複数の同位体ピーク群が重なっている可能性があるため、これを分離した後にペプチド由来か否かを判断する（Ｓ２１４）。
【０１１０】
図９は、本実施の形態における重なり判断の詳細な手順を示すフローチャートである。
【０１１１】
ピークリスト作成部１０４は、同位体ピーク群Ｓｋのピーク数が４以上か否かを判断し（Ｓ２２０）、４以上の場合（Ｓ２２０のＹＥＳ）、上述した状況（ｂ）を仮定して、２つの同位体ピーク群を分離してそれぞれの同位体ピーク群のピーク強度を計算する（Ｓ２２２）。次いで、これらのピークが条件式（２７）〜（２９）を満たしているか否かを検証する（Ｓ２２４）。条件を満たしていた場合（Ｓ２２６のＹＥＳ）、それぞれの同位体ピーク群のモノアイソトピックピークを選択する（Ｓ２４４）。
【０１１２】
ステップＳ２２６において、条件を満たしていない場合（Ｓ２２６のＮＯ）、ピーク数が５以上か否かを判断する（Ｓ２２８）。ピーク数が５以上の場合（Ｓ２２８のＹＥＳ）、上述した状況（ｃ）を仮定して、２つの同位体ピーク群を分離してそれぞれの同位体ピーク群のピーク強度を計算する（Ｓ２３０）。次いで、これらのピークが条件式（３０）〜（３３）を満たしているか否かを検証する（Ｓ２３２）。条件を満たしていた場合（Ｓ２３４のＹＥＳ）、それぞれの同位体ピーク群のモノアイソトピックピークを選択する（Ｓ２４４）。
【０１１３】
ステップＳ２３４において、条件を満たしていない場合（Ｓ２３４のＮＯ）、ピーク数が６以上か否かを判断する（Ｓ２３６）。ピーク数が６以上の場合（Ｓ２３６のＹＥＳ）、上述した状況（ｄ）を仮定して、２つの同位体ピーク群を分離してそれぞれの同位体ピーク群のピーク強度を計算する（Ｓ２３８）。次いで、これらのピークが条件式（３４）〜（３８）を満たしているか否かを検証する（Ｓ２４０）。条件を満たしていた場合（Ｓ４２のＹＥＳ）、それぞれの同位体ピーク群のモノアイソトピックピークを選択する（Ｓ２４４）。
【０１１４】
ステップＳ２２０でピーク数が４以上でない場合（Ｓ２２０のＮＯ）、ステップＳ２２８でピーク数が５以上でない場合（Ｓ２２８のＮＯ）、ステップＳ２３６でピーク数が６以上でない場合（Ｓ２３６のＮＯ）、ステップＳ２４２で条件を満たさない場合（Ｓ２４２のＮＯ）は、その同位体ピーク群Ｓｋはペプチド由来のものではないとして、その同位体ピーク群Ｓｋをピークリストから削除する（Ｓ２４６）。
【０１１５】
以上の処理の後、図８のステップＳ２０９に進む。
【０１１６】
以上のように、本実施の形態における分析方法によれば、測定データに含まれる複数のピークを同位体ピーク群に分類してピークデータを作成することにより、目的のピークを精度よく選別することができる。これにより、試料の分析を精度よく行うことができる。また、同位体ピーク群に含まれる各ピークの分布状態や複数の同位体ピーク群の重なり状態を考慮してピークデータを作成することにより、目的のピークをより精度よく選別することができる。さらに、本実施の形態のように、同定対象の試料がペプチド断片であることがわかっている場合、平均元素組成に基づき予め判断基準を作成しておくことができ、測定データと判断基準とを参照してピークデータを作成することができるので、目的のピークをより精度よく選別することができる。
【０１１７】
以上、本発明を実施の形態に基づいて説明した。これらの実施の形態は例示であり、それらの各構成要素や各処理プロセスの組み合わせにいろいろな変形例が可能なこと、またそうした変形例も本発明の範囲にあることは当業者に理解されるところである。
【０１１８】
実施の形態では、図１のステップＳ１４の同位体ピーク群の検出ステップの後に、判断基準記憶部１３５に記憶された判断基準との比較で同位体ピーク群を選別した後に、二次ピークリストを作成する例を示したが、判断基準記憶部１３５に記憶された判断基準との比較処理は省略することもできる。すなわち、二次ピークリストは、単に図１のステップＳ１４の同位体ピーク群の検出ステップで検出された各同位体ピーク群からモノアイソトピックピークを選択して、それ以外のピークを除去する処理を行うことにより作成することもできる。この場合も、一次ピークに含まれる複数のピークの中から、同位体ピークを除去することができ、試料の同定を精度よく行うことができる。また、この際、同位体ピークが存在しないピーク（同位体ピーク群に１つのピークしか含まれないもの）も除去して二次ピークリストを作成することができる。これにより、擬陽性のノイズを除去することができる。
【０１１９】
また、実施の形態では、ＰＭＦ法におけるタンパク質の同定を例に挙げて説明したが、他に、ペプチド、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、核酸等の生体高分子に適用することもできる。また、低分子物質に適用することもできる。
【０１２０】
また、分析システム１００は、２次ピークリスト作成部１５０が作成した二次ピークリストに基づき、試料の同定を行う同定部をさらに含むことができる。この場合、分析システム１００は、タンパク質配列データベースを格納した配列データ記憶部をさらに含むことができ、出力処理部１１４から出力される二次ピークリストとタンパク質配列データベースとのマッチングを行う。さらに、分析システム１００は、同定部による同定結果を表示部や印刷部により出力させることができる。この場合、表示部や印刷物上に同定候補となるタンパク質が提示される。
【０１２１】
また、試料の同定は、たとえばインターネット等のネットワークを介して他の端末上で行うこともできる。この場合、同定プログラムとして、たとえば、ＭＳ−ＦＩＴやＰｒｏＦｏｕｎｄ等を利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１２２】
【図１】実施の形態における分析方法の手順を示すフローチャートである。
【図２】実施の形態における分析システムの構成を示す機能ブロック図である。
【図３】一次ピークリストの例を示す図である。
【図４】同位体ピーク検出部の処理手順の一例を示すフローチャートである。
【図５】二つの同位体ピーク群の重なりの一例を示す図である。
【図６】二つの同位体ピーク群の重なりの他の例を示す図である。
【図７】二つの同位体ピーク群の重なりの他の例を示す図である。
【図８】ピークリスト作成部が二次ピークリストを作成する手順を示すフローチャートである。
【図９】本実施の形態における重なり判断の詳細な手順を示すフローチャートである。
【符号の説明】
【０１２３】
１００  分析システム
１１０  インターフェース部
１１１  データ取得部
１１２  物質情報取得部
１１３  解析方式選択部
１１４  出力処理部
１２０  ピークデータ作成部
１２１  ピーク検出部
１２２  １次ピークリスト作成部
１２３  同位体ピーク検出部
１２４  重ね合わせ分離部
１２５  判断演算部
１２６  モノアイソトピックピーク選択部
１３０  記憶部
１３１  測定データ記憶部
１３２  ０次ピークリスト記憶部
１３３  １次ピークリスト記憶部
１３４  物質情報記憶部
１３５  判断基準記憶部
１３６  ２次ピークリスト記憶部
１３７  出力用ピークリスト記憶部
１４０  判断基準作成部
１５０  ２次ピークリスト作成部
２００  測定系
３００  入力装置
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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