(57)【要約】【課題】  温度感応性及び生体適合性を有する有機ホスファゼン系高分子及びその製造方法を提供する。【解決手段】  化学式１：【化１４】2006089745.tif 000017（式中、Ｒはメチル又はエチル、Ｒ′はＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、ＣＨ2Ｃ6Ｈ5、ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3又はＣＨ3、Ｒ″はＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、ＣＨ2Ｃ6Ｈ5、ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3又はＣＨ3、Ｒ″′はＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ又はＨ、ｎは３０〜１００、ｘは３、４、７、１２又は１６、ｙは０．５〜１．５、ａ＝１、ｂ及びｃはそれぞれ０又は１である）で示される有機ホスファゼン系高分子。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式１：
【化１】
2006089745.tif 000011
（式中、Ｒは、メチル基又はエチル基であり、
Ｒ′は、ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、ＣＨ2Ｃ6Ｈ5、ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3及びＣＨ3からなる群より選択される基であり、Ｒ″は、ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、ＣＨ2Ｃ6Ｈ5、ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3及びＣＨ3からなる群より選択される基であり、Ｒ″′は、ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ及びＨからなる群より選択される基であり、ここで、Ｒ′、Ｒ″及びＲ″′におけるＲは、メチル基又はエチル基であり、
ｎは、３０〜１００の値を有し、ｘは、３、４、７、１２、１６から選択される数であり、ｙは、０．５〜１．５の値を有し、ａ＝１、ｂ及びｃは、それぞれ０又は１である）
で示される有機ホスファゼン系高分子。
【請求項２】
（１）化学式４で示されるポリエチレングリコールを、化学式３で示されるポリジクロロホスファゼンと反応させる工程と、
（２）工程（１）の生成物を、化学式６で示されるオリゴペプチドエステル又はその酸性塩と反応させる工程と、
を含む、化学式１：
【化２】
2006089745.tif 000012
【化３】
2006089745.tif 000013
【化４】
2006089745.tif 000014
【化５】
2006089745.tif 000015
（式中、Ｒは、メチル基又はエチル基であり、
Ｒ′は、ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、ＣＨ2Ｃ6Ｈ5、ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3及びＣＨ3からなる群より選択される基であり、Ｒ″は、ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、ＣＨ2Ｃ6Ｈ5、ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3及びＣＨ3からなる群より選択される基であり、Ｒ″′は、ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ及びＨからなる群より選択される基であり、ここで、Ｒ′、Ｒ″及びＲ″′におけるＲは、メチル基又はエチル基であり、
ｎは、３０〜１００の値を有し、ｘは、３、４、７、１２、１６から選択される数であり、ｙは、０．５〜１．５の値を有し、ａ＝１、ｂ及びｃは、それぞれ０又は１である）
で示される有機ホスファゼン系高分子の製造方法。
【請求項３】
前記工程（１）で、化学式４で示されるポリエチレングリコールの代わりに、化学式５で示されるナトリウム塩を使用する、請求項２に記載の製造方法。
【化６】
2006089745.tif 000016
【請求項４】
前記工程（１）の反応が、トリエチルアミンの存在下で行われる、請求項２又は３に記載の製造方法。
【請求項５】
前記工程（１）の反応溶媒が、テトラヒドロフラン、ベンゼン及びトルエンからなる群より選択される、請求項２又は３に記載の製造方法。
【請求項６】
ポリエチレングリコール又はそのナトリウム塩とポリジクロロホスファゼンとのモル比が、０．５〜１．５の範囲である、請求項２又は３に記載の製造方法。
【請求項７】
前記工程（２）の酸性塩が、塩酸塩、シュウ酸塩又はトリフルオロ酢酸塩である、請求項２又は３に記載の製造方法。
【請求項８】
前記工程（２）において、前記工程（１）の生成物中の置換されていない塩素原子１当量に対し、化学式６のオリゴペプチドエステル又はその酸性塩を１．０〜１．５当量使用する、請求項２又は３に記載の製造方法。
【請求項９】
前記工程（２）を、置換されていない塩素原子１当量に対してトリエチルアミン３〜６当量の存在下で行う、請求項２又は３に記載の製造方法。
【請求項１０】
前記工程（２）の反応溶媒が、クロロホルムである、請求項２又は３に記載の製造方法。
【請求項１１】
前記工程（２）の反応完了後、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した後、残留物をテトラヒドロフランに再び溶解し、ここに、エチルエーテル又はヘキサンを加えて生成物の沈殿を形成し、その沈殿物を濾過して蒸留水に溶解した後に透析し、化学式１の精製された有機ホスファゼン系高分子を得る工程をさらに含む、請求項２又は３に記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、温度変化によって相転移が起こる生体適合性有機ホスファゼン系高分子及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般に、温度感応性高分子とは、水溶液中で、温度変化によって液相（ゾル）からゲル相又は固相（沈殿）への相転移が起こる高分子である。このような相転移は、可逆的にも非可逆的にも起こる。このような相転移挙動は、低い温度では、高分子中の親水性部分が、溶媒の水分子との強い水素結合により水溶液中に均一に分散し、温度が上がると、このような水素結合が弱まり、高分子中の疏水性基の間の分子間引力が強まって、物理的結合による網目を形成するという事実によって起こる。ここで、高分子の網目が水分子を保持するのに充分に強い場合にはゲルが形成され、そしてこのようにゲルが形成される温度を「ゲル化温度」という。しかしながら、網目が強くなく、高分子の網目から水分子が排出される場合には、高分子の沈殿を形成する。このような沈殿が起こる温度を、「低臨界溶液温度（ＬＣＳＴ）」という。温度感応性高分子は、高分子骨格に結合されている疏水性（すなわち、親油性）基と親水性基との均衡によって、相転移温度が異なってくる。一般に、親水性基の含量が高い場合は相転移温度が上がり、逆に、疏水性基の含量が高い場合は相転移温度が下がる。そのような温度官能性高分子は、薬物送達システムを主軸とする医療用材料分野、環境分野、生物学分野、化粧品分野などの多様な分野に応用の大きな可能性があり、現在、温度感応性高分子を応用するための研究が行われている。温度官能性高分子の例として、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、ポリエチレンオキシド共重合体、ヒドロキシ基含有高分子、及び数種のポリホスファゼン系高分子が、温度感応性を示すことが報告されている（非特許文献１）。しかしながら、現在知られている温度感応性高分子の大部分は、毒性を示すだけでなく、難生分解性であるため、薬物担体としては適していないことが報告されている。最近発表された温度感応性高分子であるポリ乳酸とポリエチレンオキシドからなるブロック共重合体は、生分解性はあるが（非特許文献２）、生体内で分解される際に酸性となり、特に、蛋白質医薬品を変性させるおそれがあるので、今後、薬物の主流になるであろう蛋白質系薬物送達システムの担体としては適していない。
【０００３】
ポリホスファゼンは、米国のAllcockグループにより最初に合成された無機／有機ハイブリッド高分子である（非特許文献３）。具体的には、リン原子と窒素原子との交互からなる高分子骨格を形成し、リン原子に有機置換基が側鎖として結合している線形高分子であり、側鎖の分子構造によって多様な物性を示す。このようなポリホスファゼン系高分子は、有機高分子が有していない優れた物性を有するが、高価であるために、限定された目的に一部実用化されているだけで、汎用高分子材料としては使用されていない。特に、薬物担体として採用するための研究開発はほとんど進展していないが、その主な原因は、Allcockグループによって一般用に開発された、従来の方法によるポリホスファゼンは、強い機械的強度を必要とするため、分子量がＭｗ＞１０6であることを必須条件とするが、糸球体からの排他のためには、ポリマーの分子量の上限が約７０，０００であることが知られており、生体適合性の薬物送達システムのためには、その分子量は、１０5以下に制御されたものでなければならないからである。好ましくは、Ｍｗ＝１０4-5である。
【０００４】
本発明者らは、環状クロロホスファゼン三量体（Ｎ3Ｐ3Ｃｌ6）から熱重合によってポリジクロロホスファゼン高分子を合成する際に、触媒として塩化アルミニウムを使用する場合、触媒の使用量により分子量を調節できることを見出し、これを非特許文献４で発表した。現在、各種の両親媒性ポリホスファゼン系高分子を、薬物送達システムとして開発する研究を続けている。
【０００５】
本発明者らは、ポリジクロロホスファゼンの塩素原子を、親水性のポリエチレングリコールと疎水性のアミノ酸で求核的に、段階的に置換して得られた有機ホスファゼン系高分子が、所定の温度以下では水に溶解するが、温度を徐々に昇温させる場合、所定の温度以上では水に溶解しない固相の沈殿に相転移する、温度感応性高分子の特性を示すこと、及びこのような温度感応性ポリホスファゼン系高分子が、水溶液中で徐々に加水分解されることを、非特許文献５で報告した。しかしながら、このようなポリオルガノホスファゼン系高分子の大部分は、その相転移温度が体温以上であること、及び相転移温度を体温以下に下げるためには、親水性のポリエチレングリコール基に対する疏水性のアミノ酸エステルのモル比を大幅に高めなければならないこと、又は少なくとも２種のアミノ酸エステル基を混合して導入しなければならないことなど、合成上の困難があった。特に、親水性基として、メトキシ化ポリエチレングリコールの代わりにα−アミノ−ω−メトキシポリエチレングリコールを用いて、体温以下のゲル化温度をもつポリオルガノホスファゼンゲルを合成できるが（非特許文献６）、このアミノポリエチレングリコールが導入されたゲルは、動物実験の結果、皮膚の炎症を起こすという致命的な欠点が発見され、生体適合性がないことが確認されて、開発が中断された。
【０００６】
【非特許文献１】K. Park 編, Controlled Drug Delivery, 485(1997)
【非特許文献２】B. Jeongら, Nature, 388, 860(1997)
【非特許文献３】H. R. Allcock, R. L. Kugel, J. Am. Chem. Soc., 87, 4216(1965)
【非特許文献４】Youn Soo Sohnら, Macromolecules, 1995, 28, 7566
【非特許文献５】Youn Soo Sohnら, Macromolecules, 1999, 32, 2188
【非特許文献６】Youn Soo Sohnら, Macromolecules, 2002, 35, 3876
【非特許文献７】Kathryn E. Uhrich, Chem, Rev., 1999, 99, 3198
【非特許文献８】John Jones, Amino Acid and Peptide Synthesis, Oxford University Press, 32-34, 1994
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
それゆえ、本発明の目的は、このような従来技術の問題点を解決するために、温度感応性と親油性（疏水性）を調節できる、新規な生体適合性有機ホスファゼン系高分子及びその製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、前述のような従来技術の問題点を解決するために、親水性基として、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）から承認された、分子量１００以上のポリエチレングリコールを導入し、疏水性基として、アミノ酸の代わりに、アミノ酸よりも疏水性が高く、細胞内酵素により生分解されるオリゴペプチドエステルを導入することにより、生分解性であるばかりでなく、体温近くを包含する広範囲な温度でゲルや沈殿を形成する、多様な有機ホスファゼン系高分子を合成することができた。すなわち、本発明においては、疏水性基として、アミノ酸に比べて疏水性が強くて酵素分解性を有するオリゴペプチドエステルをホスファゼン骨格に導入することにより、相転移温度が薬物担体への使用に適し、特に、今後は薬物の主流になる蛋白質系薬物の担体に適した生体適合性高分子新物質群の開発に成功した。
【０００９】
また、本発明者らは、本発明の有機ホスファゼン系高分子に導入された側鎖の疎水性オリゴペプチド基が、疏水性の高い薬物との強い疎水性相互作用を増進させることができるので、溶解度の低い蛋白質又はポリペプチド系の薬物だけでなく、タクソール（Taxol）のように溶解度の低い抗癌剤など、多様な用途の薬物担体として使用でき、それゆえ、疎水性薬物自体を、本発明の有機ホスファゼン系高分子の水溶液に、注射しうる形に可溶化できることを見出した。さらに、本発明者らは、ポリホスファゼン系高分子の相転移温度が、ポリエチレングリコールとオリゴペプチドエステルの相対モル比、用いられるオリゴペプチドの種類などによって異なり、それゆえ、これらに基づいてポリホスファゼン系高分子の相転移温度を調節できることを見出した。
【００１０】
本発明は、前述のような発見に基づいてなされたものであり、本発明者らは、ポリジクロロホスファゼン主鎖に、親水性基としてメトキシポリエチレングリコールを導入し、さらに、疏水性基としてオリゴペプチドエステルを導入することにより、体温を包含する広範囲の温度で相転移が起こる温度感応性と、生体内で徐々に分解され、炎症反応を起こさないことにより、生体適合性を有する有機ホスファゼン系高分子を合成して、本発明を完成した。
【００１１】
一般に、ポリホスファゼン系高分子は、生体内で加水分解されると、窒素原子とリン原子からなる高分子骨格が、生体に無害なリン酸アンモニウムに転換されること（非特許文献７）、ならびに加水分解速度が、ホスファゼン骨格に置換されている側鎖の体積が大きく、疏水性が高くなるほど減少することが、よく知られている（非特許文献５）。しかしながら、本発明の有機ホスファゼン系高分子は、側鎖としてアミノ酸を含むものと加水分解速度に差を示さず、加水分解されると、人体に無害なリン酸アンモニウム、ポリエチレングリコール、オリゴペプチド及びアミノ酸が生成することが確認された。
【００１２】
本発明に用いられるオリゴペプチドエステルは、疏水性基として、アミノ酸よりも分子構造が複雑なばかりでなく、疏水性の範囲がより広くて強く、そしてそれゆえに、水溶液中の高分子のオリゴペプチドの間で、分子内及び分子間の疎水性相互作用が増大し、したがって、体温近くの広範囲な温度で、水分子と高分子中の親水性のポリエチレングリコールとの間の水素結合が、低臨界溶液温度（ＬＣＳＴ）と呼ばれるある温度で弱められるときに、このようにしてアミノ酸よりも容易にゲルや沈殿が得られると信じられる。また、ＬＣＳＴは、親水性基と疎水性基の変化に富む組合せによって、体温を包含する各種の温度に制御できると信じられる。多様な有機ホスファゼン系高分子を合成することができた。前記オリゴペプチドエステルは、疏水性基としてアミノ酸より疏水性が強くて酵素分解性を有するので、相転移温度が薬物担体への使用に適し、特に、今後主流になる蛋白質系薬物担体として適した生体適合性高分子新物質群が得られる。さらに、オリゴペプチドの導入は、疏水性の高い薬物との相互作用を増進させるため、溶解度が低い蛋白質とポリペプチド系の薬物だけでなく、タクソールのように溶解度が低い抗癌剤など、多様な用途の薬物担体として使用することができる。そのうえ、このようなオリゴペプチド類は、細胞中でリソソーム酵素によって生分解されることが知られており、それがポリマーの生分解に寄与することができる。
【００１３】
したがって、本発明は、ホスファゼン高分子骨格に、親水性基としてポリエチレングリコールが導入され、疏水性基としてアミノ酸に比べて疏水性の高い多様なオリゴペプチドが導入された、温度変化によってより多様なゾル−ゲル又はゾル−固体の相転移挙動を示し、かつ、生体適合性に優れた、下記化学式１で表す有機ホスファゼン系高分子及びその製造方法に関する。
【００１４】
【化７】
2006089745.tif 000002
【００１５】
式中、Ｒは、メチル基又はエチル基であり、
Ｒ′は、ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、ＣＨ2Ｃ6Ｈ5、ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3及びＣＨ3からなる群より選択される基であり、Ｒ″は、ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、ＣＨ2Ｃ6Ｈ5、ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3及びＣＨ3からなる群より選択される基であり、Ｒ″′は、ＣＨ2ＣＯＯＲ、ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＲ及びＨからなる群より選択される基であり、ここで、Ｒ′、Ｒ″及びＲ″′におけるＲは、メチル基又はエチル基であり、
ｎは、ポリホスファゼンの重合度であって、３０〜１００の値を有し、ｘは、ポリエチレングリコールの反復単位数であって、３、４、７、１２、１６から選択される数であり、ｙは、ポリエチレングリコールのモル量を示し、０．５〜１．５の値を有し、ａ＝１、ｂ及びｃは、それぞれ０又は１である。
【発明の効果】
【００１６】
本発明によって、温度感応性と生体適合性が向上した両親媒性ホスファゼン系高分子及びその製造方法が提供される。本発明によるポリホスファゼン系高分子は、生体適合性、温度感応性、生分解性をともに有し、ホスファゼン主鎖に置換されたオリゴペプチドの種類と含量を調節することにより、感応温度を、体温を含有する広い温度範囲で自由に調節することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
以下、前記化学式１で表す有機ホスファゼン系高分子の製造方法を説明する。本発明において、すべての製造反応の工程は、乾燥した窒素又はアルゴン雰囲気を用い、反応に使用される原料と溶媒は、水分を完全に除去したものが好ましい。まず、下記化学式２で示すクロロホスファゼン三量体［（Ｎ＝ＰＣｌ2）3］を、特許文献４の方法によって熱重合させ、分子量が低い（Ｍｗ＝１０4-5）、化学式３で表すポリジクロロホスファゼン線状重合体を得る。
【００１８】
【化８】
2006089745.tif 000003
【００１９】
【化９】
2006089745.tif 000004
【００２０】
具体的には、昇華法で精製した化学式２のクロロホスファゼン環状三量体（Ｎ＝ＰＣｌ2）3と、これに対し３〜１０重量％の塩化アルミニウム（ＡｌＣｌ3）を、ガラス反応管に入れて密封した後、反応管を１０〜２０rpmの速度で回転させて、２３０〜２５０℃で３〜５時間溶融反応させると、化学式３のポリジクロロホスファゼンが得られる。化学式３において、ｎは重合度であって、３０〜１００の値を有する。
【００２１】
次に、化学式４で示されるポリエチレングリコール、又は化学式５で示されるそのナトリウム塩を、化学式３で表すポリジクロロホスファゼンと反応させて、ホスファゼン系高分子骨格にポリエチレングリコール基を導入する。
【００２２】
【化１０】
2006089745.tif 000005
【００２３】
【化１１】
2006089745.tif 000006
【００２４】
化学式４及び５において、ｘは、化学式１で定義されたものと同様である。
【００２５】
化学式５で表すポリエチレングリコールのナトリウム塩は、化学式４のポリエチレングリコールを、ポリエチレングリコールに対し１〜１．５当量のナトリウム金属又は水素化ナトリウムと反応させることによって得られる。ここで、化学式４のポリエチレングリコールは、７０〜８０℃の油浴で１〜２日間真空乾燥して使用することが好ましく、溶媒としては、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ベンゼン又はトルエンを使用する。
【００２６】
化学式４のポリエチレングリコール又は化学式５のポリエチレングリコールのナトリウム塩と、化学式３のポリジクロロホスファゼンとの反応は、化学式４のポリエチレングリコール又は化学式５のポリエチレングリコールのナトリウム塩を、−６０〜−７８℃の化学式３のポリジクロロホスファゼン溶液に３０〜５０分間滴下し、常温で１５〜２０時間反応させる方法で行われる。反応溶媒としては、テトラヒドロフラン、ベンゼン又はトルエンを使用し、特に、化学式４のポリエチレングリコールと化学式３のポリジクロロホスファゼンとを反応させる場合は、ポリエチレングリコールに対して、過剰量、たとえば少なくとも３当量のトリエチルアミンを添加しなければならない。ここで、親水性基であるポリエチレングリコールとポリジクロロホスファゼンとのモル比は、使用目的によって０．５〜１．５の範囲で調節することができる。すなわち、親水性基であるポリエチレングリコールのモル比が増加するほど、最終的に得られる高分子の溶解度は増加するが、低臨界溶液温度が高くなる。それゆえ、次に導入するオリゴペプチドエステルの種類によって、所望の物性に合わせて適切なモル比を選択しなければならない。前記モル比が前記の範囲を外れる場合、高分子の溶解度を喪失するか、又は低臨界溶液温度が観察されないので好ましくない。
【００２７】
最後に、化学式４又は５の化合物と化学式３との反応生成物を、化学式６で表すオリゴペプチドエステル又はその酸性塩と反応させて、本発明による化学式１の有機ホスファゼン系高分子を得る。
【００２８】
【化１２】
2006089745.tif 000007
【００２９】
式中、Ｒ、Ｒ′、Ｒ″、Ｒ″′、ａ、ｂ及びｃは、化学式１で定義されたものと同じである。
【００３０】
この工程では、前の工程の反応生成物を、この生成物中に置換されずに残っている塩素１当量に対して、化学式６のオリゴペプチドエステル又はその酸性塩１．０〜１．５当量と反応させる。酸性塩としては、塩酸塩、シュウ酸塩又はトリフルオロ酢酸塩が好ましい。この反応は、上記の塩基１当量に対して３〜６当量のトリエチルアミンの存在下で、クロロホルムを溶媒として使用して、還流しつつ１〜３日間反応させる方法で行う。
【００３１】
化学式４又は５の化合物と化学式３の化合物との反応が完結すると、反応溶液を濾過して沈殿物（Ｅｔ3Ｎ・ＨＣｌ又はＮａＣｌ）を除去し、濾液を減圧濃縮する。濃縮物にテトラヒドロフラン溶媒を加えて再び溶解させ、エチルエーテル又はへキサンを加えて沈殿させることにより、未反応のポリエチレングリコールとオリゴペプチドエステルを取り除く。この工程を２〜３回繰り返す。その後、このような方法で得られた沈殿物を少量の蒸留水に溶かし、透析膜（ＭＷＣＯ：３５００）で１〜２日間透析する。凍結乾燥すると、化学式１で表す高分子の純粋な最終製品が得られる。
【００３２】
一方、前記化学式６で表すオリゴペプチドは、非特許文献８に記載された方法により合成することができる。
【００３３】
前述の本発明の有機ホスファゼン系高分子の製造工程を、下記反応式１で示す。
【００３４】
【化１３】
2006089745.tif 000008
【００３５】
式中、Ｒ、Ｒ′、Ｒ″、Ｒ″′、ｎ、ｘ、ｙ、ａ、ｂ及びｃは、化学式１で定義されたものと同じである。
【実施例】
【００３６】
以下、実施例を挙げて本発明をより詳しく説明する。
【００３７】
本発明の化合物に対する炭素、水素及び窒素元素の分析は、Perkin-Elmer C, H, N分析器によって行った。水素核磁気共鳴（1Ｈ  ＮＭＲ）スペクトルは、Bruker DPX-250 NMR分光器を使用して測定し、リン核磁気共鳴スペクトル（31Ｐ  ＮＭＲ）は、Varian Gemini-400 NMR分光器を使用して測定した。
【００３８】
実施例１
ポリ［（メトキシトリエチレングリコール）（グリシルグルタミン酸ジエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＴｒＥＧ）0.85（ＧｌｙＧｌｕ（Ｅｔ2）1.25）］nの製造
メトキシトリエチレングリコール（１．４１ｇ、８．６mmol）と水素化ナトリウム（０．２２ｇ、９．０mmol）を、乾燥テトラヒドロフラン溶媒に分散させ、アルゴン気流下で２時間攪拌して、メトキシトリエチレングリコールのナトリウム塩を製造した。ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、１．００ｇ、８．６mmol）を、反応フラスコ中の乾燥テトラヒドロフラン溶媒に溶解した後、ドライアイス−アセトン浴（−７８℃）に入れ、この溶液に、先に製造されたメトキシトリエチレングリコールのナトリウム塩溶液を、３０分間滴下した。３０分後に、ドライアイス−アセトン浴を離して、さらに常温で８時間撹拌して反応させた。この溶液に、トリエチルアミン（６．２６ｇ、６１．９mmol）とグリシルグルタミン酸ジエチルエステルのシュウ酸塩（３．１３ｇ、５．１５mmol）を溶解したクロロホルム溶液（１００ml）を加えた。反応混合物を常温で１２時間撹拌し、ついで５０℃まで昇温して、さらに４８時間反応させた。反応混合物を濾過して、生成した沈殿物（Ｅｔ3Ｎ・ＨＣｌ又はＮａＣｌ）を除去し、濾液を減圧濃縮した。この濃縮液をテトラヒドロフランに溶解した後、過剰量のエチルエーテル又はヘキサンを加えて、沈殿を起こした。この工程を２回繰り返した。得られた沈殿を、透析膜（ＭＷＣＯ：３５００）を用いて、メタノールと水でそれぞれ１８時間透析し、ついで凍結乾燥して、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（ＯＣＨ2ＣＨ2）3ＯＣＨ3］0.85｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3）ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝1.25］nを、収率５０％で得た。
組成式：C20H41N4O12P
元素分析値：C(43.89), H(8.31), N(10.03)
理論値：C(43.51), H(7.52), N(9.66)
水素核磁気共鳴（1Ｈ  ＮＭＲ）スペクトル(DMSO, ppm):
δ 1.1-1.2(m, 7.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 1.8-2.1(m, 2.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 2.3-2.5(t, 1.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.2-3.3(s, 3.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)2CH3)
δ 3.3-3.7(b, 13.8H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)2CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.9-4.2(b, 5.4H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3,
-OCH2CH2O(CH2CH2O)2CH3)
δ 4.2-4.4(b, 1.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴（31Ｐ  ＮＭＲ）スペクトル(DMSO, ppm):δ2.25
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1%(w/v) テトラブチルアンモニウムブロミドのテトラヒドロフラン溶液）：73,000
低臨界溶液温度：25℃
【００３９】
実施例２
ポリ［（メトキシテトラエチレングリコール）（グリシルグルタミン酸ジエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＴｅＥＧ）0.95（ＧｌｙＧｌｕ（Ｅｔ2）1.05）］nの製造
メトキシテトラエチレングリコール（１．７９ｇ、８．６mmol）、水素化ナトリウム（０．２２ｇ、９．０３mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、１．００ｇ、８．６mmol）、トリエチルアミン（６．３ｇ、６２．４mmol）、グリシルグルタミン酸ジエチルエステルのシュウ酸塩（３．２ｇ、５．２mmol）を使用して、実施例１と同様の方法で、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（ＯＣＨ2ＣＨ2）4ＯＣＨ3］0.95｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3）ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝1.05］nを、収率３６％で得た。
組成式：C20H40N3O18P
元素分析値：C(45.09), H(8.46), N(8.60)
理論値：C(45.37), H(6.00), N(8.16)
水素核磁気共鳴スペクトル(DMSO, ppm):
δ 1.1-1.3(m, 5.7H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 1.8-2.1(m, 1.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 2.2-2.4(t, 1.6H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.2-3.3(s, 3.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)3CH3)
δ 3.3-3.8(b, 13.7H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)3CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.8-4.2(b, 4.4H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3,
-OCH2CH2O(CH2CH2O)3CH3)
δ 4.2-4.4(b, 1.01H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(CDCl3, ppm):δ0.349
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1%(w/v) テトラブチルアンモニウムブロミドのテトラヒドロフラン溶液）：150,000
低臨界溶液温度：27℃
【００４０】
実施例３
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール３５０）（グリシルグルタミン酸ジエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）1.05（ＧｌｙＧｌｕ（Ｅｔ2））0.95］nの製造
分子量３５０のメトキシポリエチレングリコール（６．３４ｇ、１８．１mmol）とナトリウム片（０．４６ｇ、１９．９mmol）を、乾燥テトラヒドロフラン溶媒に分散させ、アルゴン気流下で２４時間還流させて、メトキシポリエチレングリコールのナトリウム塩を製造した。ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、２．００ｇ、１７．２mmol）を、反応フラスコ中の乾燥テトラヒドロフラン溶媒に溶解した後、ドライアイス−アセトン浴（−７８℃）に入れ、この溶液に先に製造されたメトキシポリエチレングリコールのナトリウム塩溶液を３０分間滴下した。３０分後にドライアイス−アセトン浴を離して、常温で８時間撹拌して反応させた。この反応溶液に、トリエチルアミン（１４．８ｇ、１４７mmol）とジペプチドであるグリシルグルタミン酸ジエチルエステルのシュウ酸塩（７．６ｇ、１２．２５mmol）を入れて溶解したクロロホルム溶液（１００ml）を加えた後、常温で１２時間反応させ、ついで７０℃まで昇温して、さらに２４〜４８時間反応させた。反応液を濾過して、生成した過剰量の沈殿物（Ｅｔ3Ｎ・ＨＣｌ又はＮａＣｌ）を除去し、濾液を減圧濃縮した。この濃縮液をテトラヒドロフランに溶解した後、過剰量のエーテル又はヘキサンを加えて沈殿を起こした。この工程を２回繰り返した。ついで再び少量の水（１００ml）に溶解し、透析膜（ＭＷＣＯ：３５００）を用いて１８時間透析した。ついで凍結乾燥して、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（ＯＣＨ2ＣＨ2）7ＯＣＨ3）1.05｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3）ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝0.95］nを、収率７７％で得た。
組成式：C26H55N3O14P
元素分析値：C(47.49), H(7.78), N(5.73)
理論値：C(45.91), H(7.83), N(5.93)
水素核磁気共鳴スペクトル：
δ 1.1-1.3(m, 6.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 1.9-2.2(m, 2.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 2.4-2.6(t, 2.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.3-3.4(s, 3.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.4-3.7(b, 28.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.9-4.2(b, 6.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3,
-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 4.2-4.4(b, 1.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(D2O, ppm):δ1.4
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1M 硝酸ナトリウム水溶液：アセトニトリル＝４：１）：18,000
低臨界溶液温度：81℃
【００４１】
実施例４
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール３５０）（グリシルアスパラギン酸ジエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）1.1（ＧｌｙＡｓｐ（Ｅｔ2）0.9）］nの製造
分子量３５０のメトキシポリエチレングリコール（６．６２ｇ、１８．９mmol）、ナトリウム金属片（０．４８ｇ、２０．８mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、２．００ｇ、１７．２mmol）、トリエチルアミン（１４．１ｇ、１３９．４mmol）、グリシルアスパラギン酸ジエチルエステルのシュウ酸塩（６．７ｇ、１１．６１mmol）を使用して、実施例３と同様の方法で、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（（ＯＣＨ2ＣＨ2）7ＯＣＨ3）1.1｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3）ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝0.9］nを、収率７１％で得た。
組成式：C25H50N3O12P
元素分析値：C(47.20), H(7.89), N(5.90)
理論値：C(47.10), H(7.60), N(6.03)
水素核磁気共鳴スペクトル（D2O, ppm）：
δ 1.0-1.2(m, 5.4H) (-NHCH2CONHCH(CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 2.6-2.8(m, 1.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.2-3.3(s, 3.3H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.4-3.7(b, 30.4H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.9-4.1(b, 5.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3,
-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 4.2-4.3(b, 0.9H) (-NHCH2CONHCH(CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(D2O, ppm):0.9
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1M 硝酸ナトリウム水溶液：アセトニトリル＝４：１）：36,000
低臨界溶液温度：89℃
【００４２】
実施例５
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール３５０）（グリシルロイシンエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）0.92（ＧｌｙＬｅｕＥｔ）1.08］nの製造
分子量３５０のメトキシポリエチレングリコール（５．５３ｇ、１５．８mmol）、ナトリウム金属片（０．４ｇ、１７．４mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、２．００ｇ、１７．２mmol）、トリエチルアミン（１６．９２ｇ、１６７．２mmol）、グリシルロイシンエチルエステルのトリフルオロ酢酸塩（９．２ｇ、２７．９mmol）を使用して、実施例３と同様の方法で、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（ＯＣＨ2ＣＨ2）7ＯＣＨ3］0.92｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2）ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝1.08］nを、収率８２％で得た。
組成式：C24H50N3O10P
元素分析値：C(49.06), H(8.38), N(7.43)
理論値：C(49.32), H(8.19), N(7.39)
水素核磁気共鳴スペクトル(D2O, ppm):
δ 0.7-0.9(m, 5.4H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
δ 1.0-1.3(m, 2.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
δ 1.4-1.7(t, 2.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
δ 3.2-3.3(s, 2.7H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.5-3.8(b, 26.1H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
δ 3.9-4.2(b, 3.6H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3,
-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 4.2-4.3(b, 0.9H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(D2O, ppm):3.8
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1M 硝酸ナトリウム水溶液：アセトニトリル＝４：１）：36,000
低臨界溶液温度：65℃
【００４３】
実施例６
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール３５０）（グリシルフェニルアラニンエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）0.78（ＧｌｙＰｈｅ（Ｅｔ）1.22）］nの製造
分子量３５０のメトキシポリエチレングリコール（３．０１ｇ、８．６mmol）、水素化ナトリウム（０．２２ｇ、９．０３mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、１．００ｇ、８．６mmol）、トリエチルアミン（６．３ｇ、６１．９mmol）、グリシルフェニルアラニンエチルエステルの塩酸塩（２．９６ｇ、１０．３２mmol）を使用して、実施例１と同様の方法で、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（（ＯＣＨ2ＣＨ2）7ＯＣＨ3）0.78｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2Ｃ6Ｈ5）ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝1.22］nを、収率４２％で得た。
組成式：C27H46N3O11P
元素分析値：C(50.77), H(7.11), N(6.43)
理論値：C(49.38), H(7.09), N(7.10)
水素核磁気共鳴スペクトル(DMSO, ppm):
δ 0.7-1.2(b, 1.9H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 2.9-3.2(b, 1.2H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 3.2-3.3(s, 3.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.3-3.7(b, 25.4H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3,
-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.7-4.1(b, 2.9H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3,
-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 4.4-4.6(b, 0.7H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 7.0-7.3(b, 2.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(CDCl3, ppm):0.231
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1%(w/v) テトラブチルアンモニウムブロミドのテトラヒドロフラン溶液）：140,000
低臨界溶液温度：70℃
【００４４】
実施例７
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール５５０）（グリシルグルタミン酸ジメチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ５５０）1.10（ＧｌｙＧｌｕ（Ｍｅ2）0.90）］nの製造
分子量５５０のメトキシポリエチレングリコール（１０．４ｇ、１８．９２mmol）、ナトリウム金属片（０．４８ｇ、２０．８mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（３％  ＡｌＣｌ3、２．００ｇ、１７．２mmol）、トリエチルアミン（１４．１ｇ、１３９．４mmol）、グリシルグルタミン酸ジメチルエステルのシュウ酸塩（７．１ｇ、１１．６mmol）を使用して、実施例３と同様の方法で、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（（ＯＣＨ2ＣＨ2）12ＯＣＨ3）1.1｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3）ＣＯＯＣＨ3｝0.90］nを、収率７９％で得た。
組成式：C35H70N3O17P
元素分析値：C(50.68), H(8.43), N(4.63)
理論値：C(50.29), H(8.44), N(4.94）
水素核磁気共鳴スペクトル(D2O, ppm):
δ 1.7-2.2(m, 1.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH3)COOCH3)
δ 2.3-2.5(t, 1.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH3)COOCH3)
δ 3.3-3.4(s, 3.3H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)11CH3)
δ 3.5-3.8(b, 52.4H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)11CH3,
δ 3.9-4.1(b, 5.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH3)COOCH3,
-OCH2CH2O(CH2CH2O)11CH3)
δ 4.2-4.4(b, 0.9H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH3)COOCH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(D2O, ppm):0.9
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1M 硝酸ナトリウム水溶液：アセトニトリル＝４：１）：62,000
低臨界溶液温度：98℃
【００４５】
実施例８
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール７５０）（グリシルグルタミン酸ジエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ７５０）0.8（ＧｌｙＧｌｕ（Ｅｔ2）1.2）］nの製造
分子量７５０のメトキシポリエチレングリコール（１５．４８ｇ、２０．６４mmol）、ナトリウム金属片（０．５２ｇ、２２．７mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、２．００ｇ、１７．２mmol）、トリエチルアミン（１８．８ｇ、１８５．８mmol）、グリシルグルタミン酸ジエチルエステルのシュウ酸塩（１２．５ｇ、２０．５mmol）を使用して、実施例３と同様の方法で、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（ＯＣＨ2ＣＨ2）16ＯＣＨ3］0.8｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3）ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝1.2］nを、収率８０％で得た。
組成式：C39H77N3O17P
元素分析値：C(49.75), H(8.00), N(5.00)
理論値：C(49.74), H(8.00), N(4.98)
水素核磁気共鳴スペクトル(D2O, ppm):
δ 1.0-1.2(m, 7.2H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 1.8-2.1(m, 2.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 2.3-2.5(t, 2.4H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.2-3.3(s, 2.4H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)15CH3)
δ 3.4-3.7(b, 52.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)15CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.9-4.1(b, 6.4H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3,
-OCH2CH2O(CH2CH2O)15CH3)
δ 4.2-4.4(b, 1.2H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(D2O, ppm):0.8
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：０．１Ｍ  硝酸ナトリウム水溶液：アセトニトリル＝４：１）：35,000
低臨界溶液温度：90℃
【００４６】
実施例９
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール３５０）（グリシルフェニルアラニルロイシンエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）1.02（ＧｌｙＰｈｅＬｅｕ（Ｅｔ）0.98）］nの製造
分子量３５０のメトキシポリエチレングリコール（３．０１ｇ、８．６mmol）、水素化ナトリウム（０．２２ｇ、９．０３mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、１．００ｇ、８．６mmol）、トリエチルアミン（６．３ｇ、６１．９mmol）、グリシルフェニルアラニルロイシンエチルエステル（３．７５ｇ、１０．３２mmol）を使用して、実施例１と同様の方法で、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（（ＯＣＨ2ＣＨ2）7ＯＣＨ3）1.02｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2Ｃ6Ｈ5）ＮＨＣＨ（ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2）ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝0.98］nを、収率５０％で得た。
組成式：C36H69N5O15P
元素分析値：C(52.31), H(8.71), N(8.42)
理論値：C(52.54), H(7.90), N(8.29)
水素核磁気共鳴スペクトル(CDCl3, ppm):
δ 0.7-1.0(b, 5.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
δ 1.1-1.4(b, 3.9H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
δ 1.4-1.8(b, 2.6H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
δ 2.9-3.2(b, 1.6H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
δ 3.2-3.3(s, 3.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.5-3.9(b, 23.3H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.9-4.3(b, 4.7H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
δ 4.3-4.7(b, 1.7H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
δ 7.0-7.4(b, 5.2H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(CDCl3, ppm):0.720
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1%(w/v) テトラブチルアンモニウムブロミドのテトラヒドロフラン溶液）：110,000
ゲル化温度：25℃
【００４７】
実施例１０
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール３５０）（グリシルロイシルフェニルアラニンエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）0.84（ＧｌｙＬｅｕＰｈｅ（Ｅｔ）1.16）］nの製造
分子量３５０のメトキシポリエチレングリコール（３．０１ｇ、８．６mmol）、水素化ナトリウム（０．２２ｇ、９．０３mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、１．００ｇ、８．６mmol）、トリエチルアミン（６．３ｇ、６１．９mmol）、グリシルロイシルフェニルアラニンエチルエステル（３．７１ｇ、１０．３２mmol）を使用して、実施例１と同様の方法で、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（（ＯＣＨ2ＣＨ2）7ＯＣＨ3）0.84｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2）ＮＨＣＨ（ＣＨ2Ｃ6Ｈ5）ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝1.16］nを、収率４３％で得た。
組成式：C34H63N4O13P
元素分析値：C(51.93), H(7.52), N(8.14)
理論値：C(52.90), H(7.53), N(7.89)
水素核磁気共鳴スペクトル(DMSO, ppm):
δ 0.7-1.0(b, 3.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 1.0-1.3(b, 3.6H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 1.3-1.8(b, 1.6H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 2.8-3.1(b, 1.1H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 3.1-3.2(s, 3.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.2-3.8(b, 23.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.8-4.3(b, 3.9H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 4.3-4.8(b, 1.7H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 7.1-7.4(b, 4.2H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(DMSO, ppm):4.967
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1%(w/v) テトラブチルアンモニウムブロミドのテトラヒドロフラン溶液）：110,000
ゲル化温度：28℃
【００４８】
実施例１１
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール３５０）（グリシルロイシルフェニルアラニンエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）0.7（ＧｌｙＬｅｕＰｈｅ（Ｅｔ）1.3）nの製造
分子量３５０のメトキシポリエチレングリコール（３．０１ｇ、８．６mmol）、水素化ナトリウム（０．２２ｇ、９．０３mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、１．００ｇ、８．６mmol）、トリエチルアミン（６．３ｇ、６１．９mmol）、グリシルロイシルフェニルアラニンエチルエステル（３．７１ｇ、１０．３２mmol）を使用して、実施例１と同様の方法で、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（（ＯＣＨ2ＣＨ2）7ＯＣＨ3）0.7｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2）ＮＨＣＨ（ＣＨ2Ｃ6Ｈ5）ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝1.3］nを、収率７４％で得た。
組成式：C35H63N5O13P
元素分析値：C(52.15), H(7.57), N(8.70)
理論値：C(52.60), H(8.07), N(8.47)
水素核磁気共鳴スペクトル(DMSO, ppm):
δ 0.7-1.1(b, 5.2H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 1.1-1.4(b, 4.3H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 1.4-1.8(b, 3.2H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 2.9-3.2(b, 1.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 3.2-3.3(s, 3.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.3-4.0(b, 25.8H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 4.0-4.4(b, 6.2H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 4.4-4.7(b, 3.7H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
δ 7.1-7.4(b, 5.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH(CH2C6H5)COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(CDCl3, ppm):0.926
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1%(w/v) テトラブチルアンモニウムブロミドのテトラヒドロフラン溶液）：120,000
ゲル化温度：5℃
【００４９】
実施例１２
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール３５０）（グリシルフェニルアラニルイソロイシンエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）1.0（ＧｌｙＰｈｅＩｌｅ（Ｅｔ）1.0）］nの製造
分子量３５０のメトキシポリエチレングリコール（３．０１ｇ、８．６mmol）、水素化ナトリウム（０．２２ｇ、９．０３mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、１．００ｇ、８．６mmol）、トリエチルアミン（６．３ｇ、６１．９mmol）、グリシルフェニルアラニルイソロイシンエチルエステル（３．７１ｇ、１０．３２mmol）を使用して、実施例１と同様の方法でポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（（ＯＣＨ2ＣＨ2）7ＯＣＨ3）1.0｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2Ｃ6Ｈ5）ＮＨＣＨ（ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2（ＣＨ3））ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝1.0］nを、収率５７％で得た。
組成式：C34H64N4O14P
元素分析値：C(52.186), H(8.159), N(7.669)
理論値：C(52.24), H(8.15), N(7.07)
水素核磁気共鳴スペクトル(CDCl3, ppm):
δ 0.4-1.0(b, 4.4H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH(CH3)CH2(CH3))COOCH2CH3)
δ 1.0-1.2(b, 3.3H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH(CH3)CH2(CH3))COOCH2CH3)
δ 1.2-1.4(b, 0.7H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH(CH3)CH2(CH3))COOCH2CH3)
δ 1.6-1.9(b, 0.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH(CH3)CH2(CH3))COOCH2CH3)
δ 2.9-3.1(b, 4.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH(CH3)CH2(CH3))COOCH2CH3)
δ 3.2-3.3(s, 3.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.3-3.7(b, 19.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.7-4.2(b, 3.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH(CH3)CH2(CH3))COOCH2CH3,
-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 4.2-4.5(b, 0.8H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH(CH3)CH2(CH3))COOCH2CH3)
δ 4.5-4.7(b, 0.5H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH(CH3)CH2(CH3))COOCH2CH3)
δ 6.8-7.2(b, 3.5H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH(CH3)CH2(CH3))COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(CDCl3, ppm):-0.306
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1%(w/v) テトラブチルアンモニウムブロミドのテトラヒドロフラン溶液）：11,000
ゲル化温度：32℃
【００５０】
実施例１３
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール３５０）（グリシルフェニルアラニルアスパラギン酸ジエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）1.1（ＧｌｙＰｈｅＡｓｐ（Ｅｔ2）0.9）］nの製造
分子量３５０のメトキシポリエチレングリコール（３．０１ｇ、８．６mmol）、水素化ナトリウム（０．２２ｇ、９．０３mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、１．００ｇ、８．６mmol）、トリエチルアミン（６．３ｇ、６１．９mmol）、グリシルフェニルアラニルアスパラギン酸ジエチルエステル（４．０６ｇ、１０．３２mmol）を使用して、実施例１と同様の方法で、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（（ＯＣＨ2ＣＨ2）7ＯＣＨ3）1.1｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2Ｃ6Ｈ5）ＮＨＣＨ（ＣＨ2ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3）ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝0.9］nを、収率５２％で得た。
組成式：C34H65N4O17P
元素分析値：C(48.68), H(6.79), N(7.51)
理論値：C(48.89), H(7.89), N(6.19)
水素核磁気共鳴スペクトル(CDCl3, ppm):
δ 0.9-1.3(b, 3.9H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 2.5-3.0(b, 2.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.1-3.2(s, 3.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.2-3.6(b, 14.7H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 3.7-4.2(b, 3.2H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 4.2-4.8(b, 0.7H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
δ 6.8-7.2(b, 2.7H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2COOCH2CH3)COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(CDCl3, ppm):0.824
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1%(w/v) テトラブチルアンモニウムブロミドのテトラヒドロフラン溶液）：120,000
低臨界溶液温度：47℃
【００５１】
実施例１４
ポリ［（メトキシポリエチレングリコール３５０）（グリシルフェニルアラニルロイシルグリシンエチルエステル）ホスファゼン］、［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）1.0（ＧｌｙＰｈｅＬｅｕＧｌｙ（Ｅｔ）1.0）］nの製造
分子量３５０のメトキシポリエチレングリコール（３．０１ｇ、８．６mmol）、水素化ナトリウム（０．２２ｇ、９．０３mmol）、ポリ（ジクロロホスファゼン）（５％  ＡｌＣｌ3、１．００ｇ、８．６mmol）トリエチルアミン（６．３ｇ、６１．９mmol）、グリシルフェニルアラニルロイシルグリシンエチルエステル（４．３４ｇ、１０．３２mmol）を使用して、実施例１と同様の方法で、ポリホスファゼン系高分子化合物［ＮＰ（（ＯＣＨ2ＣＨ2）7ＯＣＨ3）1.0｛ＮＨＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ2Ｃ6Ｈ5）ＮＨＣＨ−（ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2）ＮＨＣＨ2ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3｝1.0］nを、収率５３％で得た。
組成式：C36H67N5O15P
元素分析値：C(52.186), H(8.159), N(7.669)
理論値：C(51.56), H(7.96), N(8.25)
水素核磁気共鳴スペクトル(CDCl3, ppm):
δ 0.5-1.1(b, 4.9H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)-
NHCH2COOCH2CH3)
δ 1.1-1.4(b, 3.4H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)- 
NHCH2COOCH2CH3)
δ 1.4-1.6(b, 1.9H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)- 
NHCH2COOCH2CH3)
δ 2.8-3.2(b, 1.2H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)- 
NHCH2COOCH2CH3)
δ 3.3-3.4(s, 3.0H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3)
δ 3.4-3.8(b, 20.8H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH2COOCH2CH3)
δ 3.8-4.3(b, 5.3H) (-OCH2CH2O(CH2CH2O)6CH3,
-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)NHCH2COOCH2CH3)
δ 6.8-7.5(b, 5.0H) (-NHCH2CONHCH(CH2C6H5)NHCH(CH2CH(CH3)2)- 
NHCH2COOCH2CH3)
リン核磁気共鳴スペクトル(CDCl3, ppm):2.709
平均分子量（Ｍｗ、溶離液：0.1%(w/v) テトラブチルアンモニウムブロミドのテトラヒドロフラン溶液）：140,000
ゲル化温度：40℃
【００５２】
実施例１５
温度感応性ポリホスファゼン系高分子の加水分解
本発明の温度感応性ポリホスファゼン系高分子に対する加水分解を、次のように実施した。ポリホスファゼン系高分子を、ｐＨがそれぞれ５、７．４及び１０である緩衝溶液に溶解した後、３７℃の水槽中で放置し、放置期間による分子量の減少を、ゲル透過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）を用いて測定した。その結果を表１に示す。表１から分かるように、本発明の実施例により製造された化合物は、中性水溶液で半減期が約２５〜３５日であるため、薬物担体としての使用に適した生分解性を示している。
【００５３】
【表１】
2006089745.tif 000009
【００５４】
実施例１６
疏水性基の差によるホスファゼン系高分子ゲルの強度試験
実施例１２の高分子［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）（ＧｌｙＰｈｅＩｌｅ（Ｅｔ））］n及び既存の代表的アミノ酸含有高分子である［ＮＰ（ＡＭＰＥＧ３５０）（Ｉｌｅ（Ｅｔ））］n（非特許文献６）のそれぞれ１０％水溶液の、各温度による粘度を測定した。その結果を、図１ａ及び図１ｂに示す。図１ａ及び１ｂに示すように、疏水性が高い本発明のオリゴペプチド含有高分子ゲルの強度は、アミノ酸含有高分子に比べて２倍以上高かった。
【００５５】
実施例１７
ポリホスファゼン系高分子を利用した薬物送達システムの局所刺激性の研究
ホスファゼン系高分子と薬物（ヒト成長ホルモン、ｈＧＨ）との混合による薬物安定性の変化と、局所刺激性を試験した。
【００５６】
まず、実施例１で製造された高分子化合物の１２．５％水溶液に、薬物を混合し（７．５mg／ml）、薬物と高分子との反応の有無を、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）で確認した。その結果を図２に示す。すなわち、高分子と薬物とが混合される前の薬物のクロマトグラムと、薬物を実施例１で製造した高分子と混合した後の薬物のクロマトグラムとを比較すると、本発明による高分子は、薬物の安定性に影響を及ぼさないことが示される。
【００５７】
また、前記の調剤薬物をウサギの肩に皮下注射で１mlずつ投与した後、皮膚局所刺激性の有無を観察した。その結果を、下記の表２に示す。表２から示されるように、薬物であるヒト成長ホルモンの含有の有無に関係なく、皮膚反応（紅斑、出血、硬結、浮腫など）は現れず、剖検所見でも刺激に関連した変化（変色、癒着、斑点など）は観察されなかった。したがって、本発明による有機ホスファゼン系高分子は、局所刺激性がなく、生体適合性を有することが判明した。
【００５８】
【表２】
2006089745.tif 000010
【００５９】
実施例１８
ポリホスファゼン系高分子の薬物放出実験
ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）含有ホスファゼン系高分子に対する試験管内（in vitro）放出実験を実施した。すなわち、実施例２で製造された本発明のホスファゼン系高分子の１２．５％水溶液に、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）が１mg／mlになるように混合し、ついで３７℃に加熱して、ヒト成長ホルモンを捕捉した高分子を沈殿させた。ダルベッコのリン酸塩緩衝液（ＤＰＢＳ）に溶解して、ＤＰＢＳ中に放出されたヒト成長ホルモンの累積放出量を、サイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）で測定した。その結果を図３に示す。
図３から示されるように、初期の０．２５日間に緩衝液中に放出されたヒト成長ホルモンは約３０．８％で、それほど高くない初期放出を示し、初期過剰放出の恐れがないことが確認された。その後、１次に近い累積放出曲線を示し、７日間の総累積放出量は、１０６．４％であった。したがって、実施例２のホスファゼン系高分子は、１週剤形に適した生体外（in vitro）放出挙動を示すことが見出された。
【産業上の利用可能性】
【００６０】
本発明によるポリホスファゼン系高分子は、蛋白質又はポリペプチドのような疏水性薬物、及びタクソールのような難溶性薬物の局所的及びシステム的な送達のための材料をはじめとして、多様な分野での応用が期待される。
【図面の簡単な説明】
【００６１】
【図１】図１Ａは、本発明の実施例１２における高分子［ＮＰ（ＭＰＥＧ３５０）（ＧｌｙＰｈｅＩｌｅ（Ｅｔ））］nの１０％水溶液の、各温度における粘度測定結果を示す図である。図１Ｂは、既存の代表的アミノ酸含有高分子［ＮＰ（ＡＭＰＥＧ３５０）（Ｉｌｅ（Ｅｔ））］nの１０％水溶液の、各温度における粘度測定結果を示した図である。
【図２】実施例１で製造された高分子化合物の１２．５％水溶液に薬物（７．５mg／ml）を混合して、薬物と高分子との反応有無を確認するための逆相高速液体クロマトグラム（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を示した図である。
【図３】ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）含有ホスファゼン系高分子の試験管内（in vitro）放出実験結果を示した図である。
【図１】
2006089745.tif 000018
【図２】
2006089745.tif 000019
【図３】
2006089745.tif 000020