(57)【要約】【課題】ｄｄＹ系マウスに見出された白内障の遺伝様式及び原因遺伝子の染色体上での位置を明らかにする。【解決手段】発症個体同士の交配による次世代の白内障発症時期ならびに発症個体と正常個体との交配による次世代（Ｆ１およびＦ２）について白内障発生頻度を調べ、日本産野生マウスとの戻し交配世代の発症個体２０例について連鎖解析を行い、原因遺伝子の存在する染色体を決定した。さらに、戻し交配世代の発症世代の発症３３２例について、マーカー３２例について、マーカーＤ２ｊｐｋ４とその近傍に位置する２４のマーカーを用いて連鎖解析を行った。結果として、本白内障は常染色体劣性遺伝の様式をとり、原因遺伝子はＤ２Ｍｉｔ５１５及びＤ２Ｍｉｔ４６７〜Ｄ２Ｍｉｔ３２０及びＤ２Ｍｉｔ３６８の３．９１cＭの領域に位置している。【選択図】  図４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
白内障マウスの染色体において、Ｄ２Ｍｉｔ５１５及びＤ２Ｍｉｔ４６７〜Ｄ２Ｍｉｔ３２０及びＤ２Ｍｉｔ３６８の３．９１ｃＭの領域に位置している白内障原因遺伝子。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ｄｄＹ系マウスに発見された白内障の疾患原因遺伝子に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来は白内障を発症した場合の治療は外科手術しかなく、白濁した水晶体を除去しプラスチック製レンズを挿入するものであったが、このレンズは単焦点で問題も多い。そこで根本的な治療方法として、遺伝子治療を目標としての技術開発が必要となる。
【０００３】
これまでには遺伝性白内障マウスに関する報告は多数あり、ヒトの白内障発症モデルとして利用研究されているが、遺伝子レベルでの研究は少ない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明では、ｄｄＹ系マウスに見出された白内障の遺伝様式および原因遺伝子の染色体上での位置を明らかにし、今後の白内障治療薬や遺伝子治療の開発に利用することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
白内障マウスはヒト白内障の最適の疾患モデルとしてその発症機序、予防、治療などの究明に極めて有用な研究素材となり得るものであり、ヒトを研究対象とするだけでは到底
得られないような基礎的かつ系統的な知見をもたらすものである。
【発明の効果】
【０００６】
Ｉｃｓｔ以外には本白内障遺伝子の存在する領域に眼球異常に関する遺伝子は報告されていないことから、本白内障マウスは現在迄報告されているものとは全く別の白内障モデルであることが示唆された。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
感染症以外のほとんどすべての病気は、遺伝子の働きの異常がその原因だという考えは定着している。
【０００８】
ヒトゲノムが解読され、病気の原因がすべて遺伝子と結び付けられて理解されるようになり、それぞれに応じた治療薬や遺伝子治療の開発が可能となる。
【０００９】
原因となっている遺伝子を特定して釣り上げるのは大変に手間と時間のかかる仕事だが、ゲノムの解読はこの仕事を大幅に楽にするであろう。
【００１０】
上記課題を解決する手段として、本学に維持されていたｄｄＹ系マウスのコロニーの中に眼球（水晶体）の白濁している数例の個体（白内障発症）が発見されたマウスを使用して、遺伝様式を明らかにするため交雑を行う。
【実施例】
【００１１】
遺伝様式を明らかにするため交雑実験を行ったところ、発症個体同士の交配では次世代は100％の発症率で、発症時期は６週齢から８週齢の間に限局していた。
【００１２】
発症個体と正常個体の交配で得られたＦ１世代では発症個体は認められず、Ｆ２世代では発症個体と非発症個体は１：３の割合で出現した。このことから、本白内障は常染色体劣性遺伝の様式をとることがわかった。
【００１３】
本白内障原因遺伝子の存在する染色体を明らかにするため、日本産野性マウス（ＭＳＭ／Ｍｓ）との戻し交配世代｛ｄｄＹ系白内障マウス×（ＭＳＭ系マウス）｝の発症個体２０例について、連鎖解析を行った。
【００１４】
２０例全ての個体で第２染色体上のマイクロサテライトマーカーＤ２Ｊｐｋ４がｄｄＹ系白内障ホモを示し、第２染色体上に原因遺伝子が存在することが明らかになった。
【００１５】
さらに、第２染色体における原因遺伝子の存在する位置を明らかにするために、マーカーＤ２Ｊｐｋ４とその近傍に位置するマイクロサテライトマーカーを用いて連鎖解析を行った。
【００１６】
戻し交配世代の発症個体を増やしながら、原因遺伝子の存在領域を狭めて行き（図１〜図４）、最終的に３３２例について戻し交配世代の発症個体を解析した。
【００１７】
３３２例について、３３２例全例でｄｄＹ白内障ホモを示すようなマーカーは認められず、Ｄ２Ｍｉｔ８４〜Ｄ２Ｍｉｔ４６７及びＤ２Ｍｉｔ５１５全てにヘテロを示す個体が１例存在し、この個体はＤ２Ｍｉｔ３２０及びＤ２Ｍｉｔ３６８ではホモを示した。
【００１８】
一方、Ｄ２Ｍｉｔ３２０及びＤ２Ｍｉｔ３６８ともにヘテロを示す個体は１２例存在し、これらの個体はＤ２Ｍｉｔ８４〜Ｄ２Ｍｉｔ４６７及びＤ２Ｍｉｔ５１５ではホモを示した。
【００１９】
以上のことから、ｄｄＹ系に新しく見出された遺伝性白内障の原因遺伝子はＤ２Ｍｉｔ５１５及びＤ２Ｍｉｔ４６７〜Ｄ２Ｍｉｔ３２０及びＤ２Ｍｉｔ３６８の３．９１ｃMの領域に位置している（図４）ことが明らかになった。
【００２０】
白内障マウスで第２染色体上に原因遺伝子が存在すると報告されているものが下記の２文献がある。
【非特許文献１】Ｖａｒｕｍ．Ｄ．Ｓ．（１９８３）Ｂｌｉｎｄ−ｓｔｅｒｉｌｅ：ａ  ｎｅｗ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｏｎ  ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ  ２  ｏｆ  ｔｈｅ  ｈｏｕｓｅ  ｍｏｕｓｅ．  Ｊ．Ｈｅｒｅｄ．  ７４：２０６〜２０７
【非特許文献２】Ｗｅｓｔ．Ｊ．Ｄ．ａｎｄ  Ｆｉｓｈｅｒ，Ｇ．（１９８６）Ｆｕｒｔｈｅｒ  ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｏｕｓｅ  ｄｏｍｉｎａｎｔ  ｃａｔａｒａｃｔ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｔｅｓｔ  ｆｒｏｍ  ａｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ｅｔｈｙｌｎｉｔｒｏｓｏｕｒｅａ．  Ｍｕｔａｔ．Ｒｅｓ．１６４：１２７〜１３６．
【００２１】
どちらの遺伝子も本白内障遺伝子の存在する領域には存在しない。
【００２２】
また、マウスにおいて虹彩と角膜の癒着を特徴とする眼球異常を引き起こす遺伝子、Ｉｃｓｔ（ｉｒｉｓ−ｃｏｒｎｅａｌ  ｓｔａｎｄｓ）がＤ２Ｍｉｔ４６７近傍に存在することが報告されている。
【００２３】
【非特許文献３】Ｔｈａｕｎｇ，Ｃ．，Ｗｅｓｔ，Ｋ．，Ｃｌａｒｋ，Ｂ．Ｊ．，ＭｃＫｉｅ，Ｌ．，Ｍｏｒｇａｎ，Ｊ．Ｅ．，Ａｒｎｏｌｄ，Ｋ．，Ｎｏｌａｎ，Ｐ．Ｍ．，Ｐｅｔｅｒｓ，Ｊ．，Ｈｕｎｔｅｒ，Ａ．Ｊ．，Ｂｒｏｕｎ，Ｓ．Ｄ．，Ｊａｃｋｓｏｎ，Ｉ．Ｊ．，ａｎｄ  Ｃｒｏｓｓ，Ｓ．Ｈ．（２００２）Ｎｏｖｅｌ  ＥＮＵ―ｉｎｄｕｃｅｄ  ｅｙｅ
【００２４】
ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍｏｕｓｅ：ｍｏｄｅｌｓ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ
ｅｙｅ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．１１：７５５〜７６７
【００２５】
本白内障マウスには水晶体以外に形態的異常が認められなかったことから、Ｉｃｓｔ遺伝子は本白内障原因遺伝子の候補遺伝子ではないと考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】マイクロサテライトマーカーで連鎖解析を行い、原因遺伝子の存在領域を狭めて行く段階を示した図である。（第１段階）
【図２】マイクロサテライトマーカーで連鎖解析を行い、原因遺伝子の存在領域を狭めて行く段階を示した図である。（第２段階）
【図３】マイクロサテライトマーカーで連鎖解析を行い、原因遺伝子の存在領域を狭めて行く段階を示した図である。（第３段階）
【図４】マイクロサテライトマーカーで連鎖解析を行い、原因遺伝子の存在領域を狭めて行く段階を示した図である。（最終段階）
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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