(57)【要約】【課題】  天然の動植物、微生物などに含まれる新規の化学成分を提供すること。【解決手段】  上記（１）式で示されることを特徴とする６−ヒドロキシスタウロスポリノンおよび上記（２）式で示されることを特徴とする５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡとする。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記（１）式で示されることを特徴とする６−ヒドロキシスタウロスポリノン
【化１】
2006256984.tif 000009
【請求項２】
下記（２）式で示されることを特徴とする５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡ
【化２】
2006256984.tif 000010
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物である６−ヒドロキシスタウロスポリノン及び５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡに関する。
【背景技術】
【０００２】
２１世紀となった現在でも、地球上の人口の６割以上の人は、ふだんの病気や怪我の治療に、身近な自然の中にある植物や菌類（キノコなど）あるいはそれ由来の生薬を用いていると言われている。また、一方では、現在病院や家庭で使われている医薬品の中には、もともと天然の動植物、微生物などの体の中に含まれる化学成分として見つけ出されたもの（以下、「天然物」という）が沢山ある。また、天然の化学成分を原形として化学構造に改良を加えることにより、元の天然物よりも更に有効で安全な合成化合物も数多く開発されている。このように新しい有用な天然物を探すという研究は、薬を創り出す出発点とも言うべき大変重要なことと位置づけることができる。
【０００３】
しかしながら、地球上の全ての生物種の中で、これまでに有効成分を探すための材料として研究されたものは未だ１０％にも満たないと言われている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、上述した事情に鑑み、天然の動植物、微生物などに含まれる新規の化学成分を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、人間と地球環境との共存・保全の立場を十分尊重しつつ、未利用資源の開発と有効成分の探索研究に力を注いで、野外採取した変形菌Ｌｙｃｏｇａｌａ ｅｐｉｄｅｎｄｒｕｍ（マメホコリ）の成分研究を行い、新規化合物を見出した。
【０００６】
かかる本発明の第一の態様は、下記（１）で示されることを特徴とする６−ヒドロキシスタウロスポリノンにある。
【化１】
2006256984.tif 000003
【０００７】
また、本発明の第二の態様は、下記（２）式で示されることを特徴とする５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡにある。
【化２】
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【発明の効果】
【０００８】
本発明は、変形菌Ｌｙｃｏｇａｌａ ｅｐｉｄｅｎｄｒｕｍ（マメホコリ）由来の新規化合物である６−ヒドロキシスタウロスポリノン及び５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡを提供することができる。この新規化合物は有用な生物活性が期待でき、大いに有用な医薬品となることが期待される。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下本発明の実施形態について詳細に説明する。
【００１０】
本実施形態にかかる化合物は、  本発明の新規化合物は、上記（１）式で表される６−ヒドロキシスタウロスポリノン（６−ｈｙｄｒｏｘｙｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｏｎｅ）および上記（２）式で表される５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡ（５，６−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙａｒｃｙｒｉａｆｌａｖｉｎ  Ａ）である。この６−ヒドロキシスタウロスポリノン及び５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡは、変形菌Ｌｙｃｏｇａｌａ ｅｐｉｄｅｎｄｒｕｍ（マメホコリ）から単離することにより製造することができる。例えば、野外採取した変形菌からメタノール及びアセトンを溶媒として成分を抽出し、分画することにより得ることができ、その方法は限定されない。また、合成してもよい。
【００１１】
また、本実施形態にかかるパルビフロレンＨおよびパルビフロレンＩは、細胞毒性物質として利用できる。本実施形態にかかる６−ヒドロキシスタウロスポリノン及び５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡはヒト子宮頸がんＨｅＬａ細胞に対する細胞毒性を有する可能性があって、しかも従来前例のない新規化学構造を有するため、新規細胞毒性物質（治療薬）としての有用性が期待される。
【００１２】
以下、本発明について実施例に基づき説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００１３】
（実施例）
（１）６−ヒドロキシスタウロスポリノン及び５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡの単離
野外にて採取した変形菌Ｌｙｃｏｇａｌａ ｅｐｉｄｅｎｄｒｕｍ（マメホコリ）の子実体（計１７７．６ｇ）を９０％メタノール２．５Ｌで３回、９０％アセトン２．５Ｌで１回抽出し、それらの抽出物をあわせて溶媒留去し、抽出物４６．４
ｇを得た。この抽出物を水１Ｌに溶かし、酢酸エチル１Ｌで３回、ｎ−ブタノール１Ｌで３回分配を行い、酢酸エチル抽出物２４．８ｇ、ｎ−ブタノール抽出物５．５ｇ、水抽出物１１．４ｇを得た。
【００１４】
得られた酢酸エチル抽出物について、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（カラムＡ；φ５０×５００ｍｍ）に負荷し、クロロホルム−メタノール溶媒系で順次溶出し、１２のフラクションを得た。クロロホルム／メタノール（９／１）で溶出したフラクション２．１ｇをＯＤＳカラムクロマトグラフィー（φ３５×４００ｍｍ）に負荷し、水−メタノール溶媒系で順次溶出し、１１のフラクションを得た。水／エタノール（３／７）で溶出したフラクション４６０．０ｍｇを逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３、φ１０×２５０ｍｍ；溶出液、６０％  メタノール；流速２．０ｍＬ／ｍｉｎ；検出、ＵＶ２５４ｎｍ）によって精製した。その結果、保持時間４５分のフラクションに６−ヒドロキシスタウロスポリノン（化合物１、６．０ｍｇ）を得た。
【００１５】
一方、先に述べたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにおいて、クロロホルム/メタノール（８／２）で溶出したフラクショ３．２ｇを、先ほどと同様にＯＤＳカラムクロマトグラフィー（φ５０×２５０ｍｍ）に負荷し、水−メタノール溶媒系で順次溶出し、水／メタノール（１／４）で溶出したフラクション１９５．４ｍｇを逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３，φ１０×２５０ｍｍ；溶出液、６８％  メタノール；流速、２．０ｍＬ／ｍｉｎ；検出、ＵＶ  ２５４ｎｍ）によって精製した。その結果、保持時間２７分のフラクションに５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡ（化合物２、５．６ｍｇ）を得た。なおこの一連のスキームを図１に示す。
【００１６】
（２）構造
得られた６−ヒドロキシスタウロスポリノンおよび５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡの物理化学的性質を調べた。具体的には、ＭＳ、ＨＲＦＡＢＭＳ、ＵＶ、ＩＲについてそれぞれ測定を行った。
【００１７】
（２−１）６−ヒドロキシスタウロスポリノンの構造
粉末は淡黄色の粉末であった。また、高性能ＦＡＢＭＳにより［Ｍ+］と推測されるｍ／ｚ３２７．０９８１のピークが観測されたことから、分子式Ｃ２０Ｈ３１３Ｏ２Ｎ３をもつと推定された。
【００１８】
またＵＶスペクトル及びＩＲスペクトルについても測定を行ったところ、ＵＶスペクトルにおいては波長２２６ｎｍにおいてε２７７６８、波長２９４ｎｍにおいてε５４３５８、波長３４２においてε１９４０６の値を示し（図２参照）、ＩＲスペクトルにおいては３２８２、１６４６、１５８３、１４５３、１４０２、１３２７ｃｍ−１においてそれぞれ吸収ピークが観測された。なおこれら値を表１に示す。
【表１】
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【００１９】
また、１Ｈ  ＮＭＲおよび １３Ｃ  ＮＭＲによっても測定を行った。１Ｈ  ＮＭＲのスペクトルを図３に、１Ｈ  ＮＭＲ及び１３Ｃ  ＮＭＲのデータを表２に示す。１Ｈ ＮＭＲでは、δH １１.０８、１０.７６にＮＨ由来のシグナルが、δH  ６.７−９.２付近に芳香環由来のシグナルが、またδH ５.０２に積分値２Ｈのメチレン基由来のシグナルが観測された。また、１３Ｃ ＮＭＲではδC １７３.６にカルボニル基由来のシグナルが、δC  ９７−１５７付近に二重結合もしくは芳香環由来のシグナルが、δC  ４６.２にメチレン基由来のシグナルが観測された。さらに１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ，ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣスペクトルの解析により非対称型ビスインドール骨格を導き、化合物１はｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｏｎｅの６位にヒドロキシ基が結合した化合物であると推定した。またＮＯＥＳＹ相関によりδH  ５.０２（Ｈ−９'）とδH  ８.００（Ｈ−４'）およびδH  ７.２７（Ｈ−５'）に相関が観測されたことから、ヒドロキシ基は６位に結合していることが明らかとなった。以上のことから化合物１の構造を下記式に示すものと推定した。なお図４に１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣスペクトルにより得られた相関データを示しておく。
【化３】
2006256984.tif 000006
【表２】
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【００２０】
（２−２）５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡの構造
一方化合物２は黄色い粉末として得られた。高分解能ＦＡＢＭＳにより［Ｍ］＋と推測されるｍ／ｚ  ３５７．０７６２のイオンピークを示したことからその分子式をＣ２０Ｈ１１Ｏ４Ｎ３と決定した。
【００２１】
またＵＶスペクトル及びＩＲスペクトルについても測定を行ったところ、ＵＶスペクトルにおいては波長２３０ｎｍにおいてε３７８３４、波長２８４ｎｍにおいてε１８８６３、波長３３０ｎｍにおいてε３６９８１の値を示し（図５参照）、ＩＲスペクトルにおいては３３０７、１７３３、１６２７、１５６５、１４７５、１４０４、１３２０ｃｍ−１においてそれぞれ吸収ピークが観測された（表１参照）。
【００２２】
また、重アセトン（ａｃｅｔｏｎｅ−ｄ６）中の１Ｈおよび１３Ｃ  ＮＭＲデータ（表２参照）から、化合物２も化合物１同様に、非対称型ビスインドールであることが示唆され、二次元ＮＭＲ（１Ｈ−１Ｈ  ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣ）より、ａｃｙｒｉａｆｌａｖｉｎ  Ａの５位および６位にヒドロキシ基がそれぞれ結合していることが明らかとなった。以上のことから化合物２の構造は下記式に示すものと推定した。なお図６に１Ｈ  ＮＭＲのスペクトルを、図７に１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣスペクトルにより得られた相関データを示しておく。
【化４】
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【００２３】
（３）細胞毒性
パルビフロレンＨおよびパルビフロレンＩのＨｅＬａ細胞に対する細胞毒性を調べたところ、ＩＣ５０値は，各々５．４ および ２．１ μｇ/ｍＬであった。これにより、上記物質は新規細胞毒性物質（治療薬）としての有用性が期待される。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】６−ヒドロキシスタウロスポリノン及び５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡの抽出における一連のスキームを示す図。
【図２】６−ヒドロキシスタウロスポリノンのＵＶスペクトル。
【図３】６−ヒドロキシスタウロスポリノンの１Ｈ ＮＭＲスペクトル。
【図４】６−ヒドロキシスタウロスポリノンの１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣスペクトルにより得られた相関データを示す図。
【図５】５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡのＵＶスペクトル。
【図６】５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡの１Ｈ ＮＭＲスペクトル。
【図７】５，６−ジヒドロキシアルキリアフラビンＡの１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣスペクトルにより得られた相関データを示す図。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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