(57)【要約】【課題】  本発明の課題は、ＩＬ−４の産生を抑制できるスピルリナ組成物及び該スピルリナ組成物を含有する抗アレルギー食品を提供することである。【解決手段】  ＩＬ−４の産生を抑制できるスピルリナ組成物及び該スピルリナ組成物を含有する抗アレルギー食品を提供し、かつ該スピルリナ組成物を含有する組成物の摂取を含むアレルギー疾患の予防、改善方法を提供する。スピルリナ組成物は、スピルリナと亜鉛化合物とを含有し、かつ、亜鉛化合物の含有量がスピルリナの乾燥重量１００重量部に対し亜鉛換算で０．０４〜５重量部である。このスピルリナ組成物を摂取するとＩＬ−４の産生が抑制され、アレルギー疾患の予防、改善に効果がある。また、この組成物を種々の食品に含有させた食品にもアレルギー疾患の予防、改善が期待でき、抗アレルギー食品として使用できる。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
スピルリナと亜鉛化合物とを含有し、かつ、亜鉛化合物の含有量がスピルリナの乾燥重量１００重量部に対し亜鉛換算で０．０４〜５重量部であることを特徴とするスピルリナ組成物。
【請求項２】
前記亜鉛化合物が水溶性亜鉛化合物である請求項１記載のスピルリナ組成物。
【請求項３】
前記水溶性亜鉛化合物が塩化亜鉛、硫酸亜鉛、グルコン酸亜鉛およびアスコルビン酸亜鉛からなる群から選ばれる１種類以上の水溶性亜鉛化合物である請求項２記載のスピルリナ組成物。
【請求項４】
前記亜鉛化合物をスピルリナの乾燥重量１００重量部に対し亜鉛として０．０７〜０．５重量部含有する請求項１〜３のいずれか１項記載のスピルリナ組成物。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項記載のスピルリナ組成物を含有することを特徴とする抗アレルギー食品。
【請求項６】
請求項１記載のスピルリナ組成物の摂取を含むアレルギー疾患の予防および改善方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インターロイキン−４（ＩＬ−４）の産生を抑制するスピルリナ組成物と、該スピルリナ組成物の摂取を含む方法および該スピルリナ組成物を含有する抗アレルギー食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、草アレルギーやアトピー性皮膚炎、気管支喘息といった種々のアレルギー疾患が問題になっている。それらアレルギー疾患に対しては、一般に薬理効果の高いステロイド系の医薬品が使用されているが、副腎機能の抑制や皮膚細胞の増殖抑制等による種々の副作用がある。また非ステロイド系の医薬品であるヒスタミンあるいはロイコトリエンの遊離抑制剤や免疫グロブリンＥ（ＩｇＥ）抗体産生抑制剤等も使用されているが、効果が十分ではない。
【０００３】
ＩＬ−４は、抗原で刺激されたＴリンパ球によって産生される糖蛋白質で、Ｂリンパ球に作用してアレルギー疾患に関連するＩｇＥ抗体等の産生を増強することが知られている。それ故、このＩＬ−４の産生を抑制することができれば、アレルギー疾患を予防、改善できるのではないかと考えられている。
【０００４】
ところで、上述したような医薬品は一般に高価であり、入手に処方箋が必要であり、副作用に対する注意が必要である等様々な制約がある。その為、アレルギー疾患を予防改善するのに、医薬品のような制約が無い、即ち、安価で入手しやすく、副作用の心配も無く、更に簡便に摂取できる食品〔機能性食品（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｆｏｏｄ）〕が求められている。
【０００５】
このような機能性食品としては、例えばスピルリナ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）が知られている。スピルリナは、藍藻類のアルスロスピラ属あるいはスピルリナ属に属する原核生物で、アフリカのチャド湖などに自生している。このスピルリナは蛋白質、ビタミン、脂質、糖質、植物性色素等を豊富に含み、その消化吸収率も高く、打錠やカプセル充填する等により製剤化され、あるいは乾燥粉末で利用されている。更にスピルリナは、カルシウム（４００〜１２００ｍｇ：スピルリナ１００ｇ中の含有量、以下同様。）、カリウム（８００〜２０００ｍｇ）、鉄（５０〜１５０ｍｇ）、亜鉛（１〜３ｍｇ）、銅（０．３〜０．６ｍｇ）等のミネラルも含むことが知られている（例えば非特許文献１参照）。
【０００６】
このスピルリナの機能については種々検討されており、例えば、本発明者らは、健常者から採取した末梢血単核球にスピルリナのリン酸緩衝生理食塩水抽出物を作用させたところ、腫瘍細胞の増殖を抑制するインターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）の産生量が対照区に比べ著しく増加することを確認し、スピルリナはＩＦＮ−γの産生を促進する事を報告しているが、ＩＬ−４の産生量は減少しなかった（例えば非特許文献２参照）。
【非特許文献１】済木育夫、「究極の完全食品  スピルリナ」、株式会社高輪出版社、１９９６年１２月２０日、ｐ．６２−６５
【非特許文献２】Ｍ．Ｅ．ＧＥＲＳＨＷＩＮ，ｅｔ．ａｌ．、"Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  Ｂｌｏｏｄ  Ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ  Ｃｅｌｌｓ"、ジャーナル・オブ・メディカル・フード（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｆｏｏｄ）、２０００、ｖｏｌ．３、ｐ．１３５−１４０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の課題は、ＩＬ−４の産生を抑制できるスピルリナ組成物及び該スピルリナ組成物を含有する抗アレルギー食品を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討をおこなった結果、以下の（１）及び（２）の知見を見出した。
（１）ミネラル成分として極少量の亜鉛化合物（亜鉛として１〜３ｍｇ）を含有しているスピルリナでは前記非特許文献２の報告のようにＩＬ−４産生抑制効果は認められないが、より多量（スピルリナの乾燥重量１００重量部に対し亜鉛換算で０．０４〜５重量部）の亜鉛化合物を含有させたスピルリナ組成物はＩＬ−４の産生を効果的に抑制できること。
（２）前記スピルリナ組成物を含有する食品はアレルギー疾患を予防、改善する抗アレルギー食品として好適であること。
本発明は上記知見に基づいて完成したものである。
【０００９】
即ち本発明は、スピルリナと亜鉛化合物とを含有し、かつ、亜鉛化合物の含有量がスピルリナの乾燥重量１００重量部に対し亜鉛換算で０．０４〜５重量部であることを特徴とするスピルリナ組成物を提供するものである。
【００１０】
また本発明は、前記スピルリナ組成物を含有する事を特徴とする抗アレルギー食品を提供するものである。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のスピルリナ組成物を摂取するとＩＬ−４の産生が抑制され、アレルギー疾患の予防、改善に効果がある。また、この組成物を種々の食品に含有させた食品にもアレルギー疾患の予防、改善が期待でき、抗アレルギー食品として使用できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下、本発明をさらに詳細に説明する。
本発明のスピルリナ組成物はスピルリナと亜鉛化合物とを含有し、かつ、亜鉛化合物の含有量がスピルリナの乾燥重量１００重量部に対し亜鉛換算で０．０４〜５重量部であることが必要である。前記亜鉛化合物の含有量が０．０４重量部よりも小さいとＩＬ−４の産生抑制効果が低くなるので好ましくない。前記亜鉛化合物の含有量が５重量部より多くしても、ＩＬ−４産生抑制効果の向上は望めないし、また、亜鉛を摂取しすぎると健康に悪影響を及ぼす可能性もあるので好ましくない。亜鉛化合物の含有量はスピルリナの乾燥重量１００重量部に対し亜鉛換算で０．０７〜０．５重量部が好ましく、０．１〜０．３重量部がより好ましい。
【００１３】
本発明で使用するスピルリナの種類としては、例えば、アルスロスピラ（スピルリナ）・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）  ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）、アルスロスピラ（スピルリナ）・マキシマ（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）  ｍａｘｉｍａ）、スピルリナ・サブサルサ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  ｓｕｂｓａｌｓａ）、スピルリナ・メジャー（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  ｍａｊｏｒ）、スピルリナ・ゲイトレリ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  ｇｅｉｔｌｅｒｉ）、スピルリナ・サイアミーゼ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  ｓｉａｍｅｓｅ）、スピルリナ・プリンセプス（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  ｐｒｉｎｃｅｐｓ）、スピルリナ・ラキシシマ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  ｌａｘｉｓｓｉｍａ）、スピルリナ・クルタ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  ｃｕｒｔａ）、スピルリナ・スピルリノイデス（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  ｓｐｉｒｕｌｉｎｏｉｄｅｓ）等が挙げられ、特に、アルスロスピラ（スピルリナ）・プラテンシス、アルスロスピラ（スピルリナ）・マキシマ、スピルリナ・ゲイトレリ、スピルリナ・サイアミーゼは人工的に培養できるため入手が容易で好ましい。
【００１４】
本発明で使用するスピルリナは、市販のものを用いても良いし、自分で培養したものを用いても良い。また、生の状態のスピルリナを使用しても良いし、この生の状態のスピルリナを乾燥させたものでも良いが、スピルリナの栄養素が豊富であることから生のスピルリナが好ましい。
【００１５】
スピルリナを培養する際の培養方法としては、藍藻の培養に用いられている通常の方法に従って行えばよく、例えば、生存しているスピルリナを乾燥藻体重量として通常２０〜５００ｍｇ／Lの濃度になるよう培地に接種し培養を行えば良い。培養する際の光源は、太陽光でも人工光でも良く、通常１０００〜１０万ルクスの光源を用いる。培養の温度は通常２０〜６５℃、好ましくは３０〜４０℃である。培養期間は、通常５〜１０日間である。また、培養中に、適宜炭酸ガスあるいは空気を吹き込み、溶液中の炭酸イオンの量を増加させることが好ましい。
【００１６】
スピルリナの培養に用いる培地は藍藻を培養するのに通常用いる液体培地、例えばリンを１０〜５００ｍｇ／L、窒素を１００〜２０００ｍｇ／L、カリウムを１００〜２０００ｍｇ／Lおよびその他微量金属塩を含有する藍藻用液体培地を用いることができ、好ましくはＳＯＴ培地である。
【００１７】
前記ＳＯＴ培地は、炭酸水素ナトリウム１６．８ｇ／L、リン酸二カリウム０．５ｇ／L、硝酸ナトリウム２．５ｇ／L、硫酸カリウム１．０ｇ／L、塩化ナトリウム７．０ｇ／L、硫酸マグネシウム０．２ｇ／L、塩化カルシウム０．０４ｇ／L、硫酸第一鉄０．０１ｇ／L、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）０．０８ｇ／Lおよび下記Ａ５溶液１ｍL／Lを含有する培地である。
前記Ａ５溶液は、ホウ酸  ２．８６ｇ／L、塩化マンガン２．５０ｇ／L、硫酸亜鉛０．２２ｇ／L、硫酸銅  ０．０８ｇ／Lおよびモリブデン酸ナトリウム０．０２ｇ／Lを含有する溶液である。
【００１８】
スピルリナの工業的に製造する方法としては、例えば以下の方法等が挙げられる。まず実験室でＳＯＴ培地等の液体培地の入った０．５〜５L容の扁平フラスコや三角フラスコにスピルリナを接種し、約１万ルクスの蛍光灯下３０〜４０℃で空気を液体培地に通気しながら培養し第一培養液を製造する。この第一培養液を屋外に設置した培養容器に接種し、太陽光下３０〜４０℃で空気を通気しながら培養し第二培養液を製造する。第二培養液を製造する時に用いる液体培地の量は通常８０〜１２０Lである。また、第一培養液の接種は通常スピルリナの乾燥藻体の重量換算で２０〜５００ｍｇ／Lの濃度になるように行う。第二培養液を製造する際の培養時間は通常５〜１０日である。この第二培養液を屋外の培養池に接種し、太陽光下３０〜４０℃で空気を通気しながら培養し第三培養液を製造する。培養池の大きさは通常５〜１０ｍ３である。第三培養液を培養する際の第二倍溶液の接種量や培養時間は第二培養液を培養する際と同じ条件を用いることができる。培養池としては、例えば、撹拌パドルつきレースウエイ型培養池等を用いることができる。そして、第三培養液を培養した培養池の１０倍容量の培養池に第三培養液を種藻として接種し、培養池のスケールアップを行う。このようにして、培養液を更に種藻として順次容量の大きい培養池で培養を行い、最終的に５０００〜１００００ｍ３の培養池で培養する。
【００１９】
前記のような方法で培養して得られたスピルリナはそのまま用いる事もできるし、培養したスピルリナをろ布やろ紙で回収し、水で洗浄後、水に懸濁し懸濁液としても良い。更に、前記培養液や懸濁液を濃縮した湿藻体としても良いし、その湿藻体を凍結乾燥やスプレー乾燥等により乾燥した乾燥藻体としても良いし、その乾燥藻体を粉末化しても良い。
【００２０】
本発明で使用する亜鉛化合物は、各種の亜鉛化合物が使用できるが、なかでも、食品として安全なものが好ましく、例えば塩化亜鉛、酸化亜鉛、硫酸亜鉛等の無機亜鉛化合物；グルコン酸亜鉛、ステアリン酸亜鉛、アスコルビン酸亜鉛等の有機亜鉛化合物等が挙げられる。亜鉛化合物としては、水溶性の亜鉛化合物が、本発明のスピルリナ組成物や抗アレルギー性食品を摂取した際に体内への吸収が良好なことから好ましい。そのような水溶性の亜鉛化合物としては、例えば、塩化亜鉛、硫酸亜鉛、グルコン酸亜鉛およびアスコルビン酸亜鉛からなる群から選ばれる１種類以上の水溶性亜鉛化合物が好ましく使用できる。
【００２１】
前記亜鉛化合物は、その化合物自身を用いても良いし、例えば、酵母を培養する際に培地に亜鉛化合物を含有させておき、培養中に亜鉛化合物を体内に取り込ませた酵母を亜鉛化合物として用いることもできる。
【００２２】
本発明のスピルリナ組成物はその形態に制限は無く、例えば、液状のスピルリナ組成物でも良いし、液状のスピルリナ組成物よりも水分含有量が少ない湿った状態のスピルリナ組成物でも良いし、乾燥状のスピルリナ組成物でも良いが、使用しやすいことから乾燥状のスピルリナ組成物が好ましい。
【００２３】
本発明のスピルリナ組成物は、例えば、スピルリナと亜鉛化合物とを混合する事により得ることができる。具体的には、例えば、液状のスピルリナ組成物を製造するには、以下の１〜３の方法等が挙げられる。
１．スピルリナの培養液、あるいはスピルリナの培養液からスピルリナを回収し、洗浄した後、再び水等に再懸濁した懸濁液に水溶性亜鉛化合物を添加し、水溶性亜鉛化合物を溶解混合する。
２．水溶性亜鉛化合物を添加し溶解した培地を用いてスピルリナを培養し、これをそのまま本発明のスピルリナ組成物とする。
３．粉末等乾燥状態にあるスピルリナと水溶性亜鉛化合物と水とを混合し、水に水溶性亜鉛化合物を溶解する。
【００２４】
前記湿った状態のスピルリナ組成物を製造するには、例えば、４または５の方法等が挙げられる。
４．スピルリナの培養液から藻湿体となる程度に水分を除去し藻湿体とした後、水溶性亜鉛化合物を添加し藻湿体中の水に溶解させ混合する。
５．粉末等乾燥状態にあるスピルリナと水溶性亜鉛化合物と水とを藻湿体を形成する量比で混合する。
【００２５】
前記乾燥状のスピルリナ組成物を製造するには、例えば、６〜８の方法等が挙げられる。
６．スピルリナの培養液から藻湿体となる程度に水分を除去し藻湿体とした後、水溶性亜鉛化合物を添加混合し藻湿体中の水に溶解させる。その後、乾燥させる。
７．粉末等乾燥状態にあるスピルリナと水溶性亜鉛化合物と水とを藻湿体を形成しうる量比で混合し、水に亜鉛化合物を溶解させる。その後、乾燥させる。
８．粉末等乾燥状態にあるスピルリナと亜鉛化合物とを混合する。
【００２６】
本発明のスピルリナ組成物は乾燥状態のスピルリナ組成物が好ましいが、この乾燥状態のスピルリナ組成物を製造する方法としては、前記６．の製造方法が好ましい。以下に前記６．の製造方法について詳しく説明する。
【００２７】
まず、スピルリナの培養液から藻湿体となるまで水分を除去し藻湿体を製造する。水分を除去するには、例えば、ろ布濃縮機あるいは遠心濃縮機等の濃縮機を使用することができる。水分の除去は、湿藻体と亜鉛化合物を均一に混合しやすいこと、後の乾燥の効率も良好なことから、藻湿体の含水率が７０〜９５重量％となるように行うのが好ましく、８０〜９０重量％となるように行うのがより好ましい。
【００２８】
次に得られた藻湿体に亜鉛化合物を添加する。亜鉛化合物は固形のものを添加しても良いし、予め水に溶解して水溶液としたものを用いても良いが、予め水に溶解して水溶液としたものを用いるのが好ましい。この水溶液を用いる時の水溶液の容量は、藻湿体を維持できる程度の量が好ましい。そのような容量としては、例えば藻湿体１００容量部に対して前記水溶液０．０５〜０．４容量部が好ましく、０．１〜０．３容量部がより好ましい。
【００２９】
藻湿体に亜鉛化合物を添加した後に混合する。混合は、例えば、ニーダー、スクリュー型混合機などの混合機を用いることが出来る。混合する時間は、藻湿体と亜鉛化合物が良好に混合されること、藻湿体の変性が起こりにくいことから、５〜６０分間が好ましく、１０〜３０分間がより好ましい。
【００３０】
混合した後は乾燥を行う。乾燥は、例えば、スプレー乾燥機や凍結乾燥機などの乾燥機等を用いて行うことができる。
【００３１】
本発明の抗アレルギー食品は、スピルリナ組成物を含有するものであれば良く、特に形状に制限はないが、例えば粉末、錠剤、カプセル、顆粒等が挙げられる。
【００３２】
粉末の抗アレルギー食品は、例えば、本発明のスピルリナ組成物の乾燥粉末を必須として、更に必要に応じて下記に示す任意成分の粉末とを粉体混合機で混合することにより製造することができる。
【００３３】
錠剤の抗アレルギー食品は、例えば、本発明のスピルリナ組成物の乾燥粉末を必須として、必要に応じて後述する任意成分の粉末とを粉体混合機で混合し混合粉末とした後、ロータリー打錠機等の打錠機で打錠することにより製造することができる。混合粉末を製造する際には、必要に応じて滑沢剤粉末を加えても良い。滑沢剤粉末としては、例えば、ステアリン酸マグネシウムエステルや菜種油硬化油あるいはショ糖脂肪酸エステル等が挙げられる。滑沢剤粉末の使用量は、本発明のスピルリナ組成物の乾燥粉末と必要に応じて添加する任意成分との合計１００重量部に対して０．１〜１０重量部が好ましい。更に、前記混合粉末の流動性が悪い場合は、混合粉末に二酸化珪素微粉末を加えると流動性を改善することができる。二酸化珪素微粉末の使用量としては、混合粉末１００重量部に対し０．１〜２重量部が好ましい。
【００３４】
カプセルの抗アレルギー食品は、例えば、本発明のスピルリナ組成物の乾燥粉末を必須として、必要に応じて下記に示す任意成分の粉末とを粉体混合機で混合し混合粉末とした後、カプセル充填機を用いてゼラチンカプセル等に充填することにより製造することができる。混合粉末を製造する際には、必要に応じて滑沢剤粉末を加え混合粉末としても良い。滑沢剤粉末の使用量は、前記錠剤の抗アレルギー食品に使用する量を好ましく使用できる。また、流動性を上げるため二酸化珪素微粉末を加えても良く、その使用量は前記錠剤の抗アレルギー食品に使用する量を好ましく使用できる。
【００３５】
顆粒の抗アレルギー食品は、例えば、本発明のスピルリナ組成物の乾燥粉末を必須として、必要に応じて下記に示す任意成分の粉末とを粉体混合機で混合した混合粉末に水を加えて混合し、造粒機等で造粒し、温風で乾燥することにより製造することができる。水の使用量は、混合粉末１００重量部に対して３０〜１００重量部が好ましい。前記造粒機としては、例えば、押出造粒機や流動層造粒機等が挙げられる。乾燥する際の温風の温度は通常４０〜１００℃である。また、必要に応じて滑沢剤粉末を加え混合粉末としても良い。滑沢剤粉末は混合粉末を製造するときに加えても良いし、混合粉末と水とを混合するときに加えても良い。滑沢剤粉末の使用量は、前記錠剤の抗アレルギー食品に使用する量を好ましく使用できる。
【００３６】
前記任意成分としては、例えば、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、葉酸、パントテン酸、ナイアシン、ビオチン等のビタミン類；カルシウム、鉄等のミネラル類；乳糖、セルロース等の賦形剤；種々の香料等が挙げられる。
【００３７】
また、本発明のスピルリナ組成物は例えば、パン、うどん、そば等の食品や、炭酸水等の飲料水に添加して抗アレルギー食品とすることもできる。
【００３８】
本発明のスピルリナ組成物や抗アレルギー食品は摂取することによりＩＬ−４の産生を効果的に抑制させ、アレルギー疾患を予防、改善することができる。摂取量としてはＩＬ−４の産生を効果的に抑制し、かつ、摂取しやすいことから、スピルリナ組成物の乾燥重量換算で１日に１〜１０ｇが好ましく、２〜４ｇがより好ましい。
【００３９】
以下、実施例及び比較例を用いて本発明をさらに詳細に説明する。例中「部」、「％」は特に断りのない限り重量基準である。
【実施例１】
【００４０】
ＳＯＴ培地２０ｍ３を入れた１００ｍ３の攪拌機付き培養池にアルスロスピラ（スピルリナ）・プラテンシスを乾燥藻体重量として４ｋｇ接種し、平均日照時間１２時間、平均照度８万ルクスで７日間培養した。培養液を目開き４０μｍのろ布でろ過してスピルリナを濃縮し、含水率８５％の湿藻体１６３ｋｇを得た。２Ｌの水に３００ｇのアスコルビン酸亜鉛（商品名Ｚｉｎｃ  Ａｓｃｏｒｂａｔｅ  Ｂｌｅｎｄ  １５％  Ｌｏｗ  Ｌｅａｄ，Ｋｅｌａｔｒｏｎ  Ｃｏｒｐ．，Ｏｇｄｅｎ，ＵＴ）を溶解して亜鉛化合物の水溶液を製造し、この水溶液の全量を前記湿藻体１６３ｋｇに添加した。添加後湿藻体をニーダーで２０分混合した。その後湿藻体をスプレー乾燥して、２３．１ｋｇの粉末状のスピルリナ組成物を得た。このスピルリナ組成物の亜鉛含有量を原子吸光分光光度計で分析したところ、スピルリナ組成物１００重量部に対し亜鉛換算で０．１１重量部であった。
【００４１】
この粉末状のスピルリナ組成物１０ｋｇと、ビタミンＣ粉末０．２ｋｇ、セルロース粉末１ｋｇ、二酸化珪素微粉末０．１ｋｇおよびステアリン酸マグネシウムエステル粉末０．１ｋｇとを混合し、これを青色に着色した＃０００サイズのゼラチンカプセルに充填し、カプセル剤を調製した。これをカプセル１と略記する。カプセル１中のスピルリナ組成物乾燥粉末は５００ｍｇである。
【００４２】
６０名の成人女性と３０名の成人男性から成る健常者のボランティア９０名を、無作為に３０名ずつグループ１、グループ２およびグループ３の３つのグループに分けた。グループ１のボランティアからクエン酸ナトリウム入り採血管にて採血した後、各ボランティアに対してカプセル１を１日４カプセル、１２週間連続して摂取させた。摂取後、グループ１から更に１２名を無作為に選び、クエン酸ナトリウム入り採血管にて採血した。１２名のボランティアのカプセル１摂取前と摂取後に採血した血液（全血）を用いて、全血に含まれる単核球のＩＬ−４産生量の測定を行った。測定方法は以下の通りである。
【００４３】
全血１０ｍLとＨａｎｋ‘ｓ平衡塩（塩化カルシウム不含、塩化マグネシウム不含、硫化マグネシウム不含、Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ、以下ＨＢＳＳと略記する）１０ｍLとを混合し、希釈全血を調製した。この希釈全血を、Ａｃｃｕ−Ｐａｑｕｅ  ｇｒａｄｉｅｎｔ試薬（Ａｃｃｕｒａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ＆  ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＣｏｒｐ．，Ｗｅｓｔｂｕｒｙ，ＮＹ）を用いて、室温、５００ｇで３０分間密度勾配遠心し、境界層から末梢血単核球（以下ＰＢＭＣと略記する）を採取した。このＰＢＭＣをＨＢＳＳで２回洗浄し、採取したＰＢＭＣの数を計数した。このＰＢＭＣを、１０％の非働化ウシ胎児血清（Ａｔｌａｎｔａ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｎｏｒｃｒｏｓｓ，ＧＡ、以下ＦＢＳと略記する）と０．１％の５０ｍｇ／ｍLゲンタマイシン溶液（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ）を添加したＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ）に再懸濁しＰＢＭＣ細胞懸濁液を得た。ＰＢＭＣ細胞懸濁液を得る際には、ＰＢＭＣの数がトリパン青で染色される生細胞が１×１０６個／ｍLになるように調整した。
【００４４】
４８穴マイクロプレートにＰＢＭＣ細胞懸濁液１ｍLとフィトヘマグルチニン（以下ＰＨＡと略記する）２０μｇとを加え、フィトヘマグルチニンによりＰＢＭＣのＩＬ−４産生を刺激した。このときの条件は５％炭酸ガス濃度の環境下、３７℃、７２時間である。７２時間後、ＰＢＭＣ細胞懸濁液の上清を回収した。
【００４５】
次にこの上清に含まれるＩＬ−４の濃度を測定し、ＰＨＡの刺激によりＰＢＭＣが産生したＩＬ−４の産生能を評価した。この結果を第１表に示す。測定結果は１２人の測定値の平均値である（以下同様）。ＩＬ−４の濃度が低いほどＩＬ−４の産生が抑制されていることを示す。測定は、検出限界が０．２５ｐｇ／ｍLのＨｉｇｈ  Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ  Ｈｕｍａｎ  ＩＬ−４  ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）を用いた。この結果から、本発明のスピルリナ組成物の摂取によりＩＬ−４の産生が抑制されていることが明らかである。
【実施例２】
【００４６】
スピルリナ組成物乾燥粉末５ｋｇに、ビタミンＣ粉末０．１ｋｇ、セルロース粉末５．５ｋｇ、二酸化珪素微粉末０．１ｋｇ、およびステアリン酸マグネシウムエステル粉末０．１ｋｇを混合し、これを青色に着色した＃０００サイズのゼラチンカプセルに充填し、カプセル剤を調製した。これをカプセル２と略記する。カプセル２中のスピルリナ組成物乾燥粉末は２５０ｍｇである。このカプセル２のＩＬ−４産生抑制能の評価をグループ２のボランティア群を用いて実施例１と同様にして行った。測定結果を第１表に示す。この結果から、本発明のスピルリナ組成物の摂取によりＩＬ−４の産生が抑制されていることが明らかである。
【００４７】
（比較例１）
セルロース粉末１０ｋｇ、二酸化珪素微粉末０．１ｋｇおよびステアリン酸マグネシウムエステル粉末０．１ｋｇとを混合し、これを青色に着色した＃０００サイズのゼラチンカプセルに充填し、カプセル剤を調製した。これをカプセル３と略記する。カプセル２中のスピルリナ組成物乾燥粉末は０ｍｇである。このカプセル３のＩＬ−４産生抑制能の評価をグループ３のボランティア群を用いて実施例１と同様にして行った。測定結果を第１表に示す。この結果から、本発明のスピルリナ組成物を摂取しない時は、ＩＬ−４の産生が抑制されていないことが明らかである。
【００４８】
【表１】
2006025668.tif 000002
【実施例３】
【００４９】
実施例１で製造したスピルリナ組成物４３０ｍｇを５０ｍＬのリン酸緩衝生理食塩水（ＧｉｂｃｏＢＲＬ、以下ＰＢＳと略記する）に加えて激しく振とう懸濁し、遠心分離し上清を回収した。この上清を、孔径０．４５μｍのメンブランフィルターでろ過し、さらに孔径０．２μｍのメンブランフィルターでろ過し、ろ過液を得た。これをスピルリナ組成物ろ過液と言う。
【００５０】
健常者のボランティア６名からクエン酸ナトリウム入り採血管にて全血を採血した。採決した全血からＰＢＭＣの数がトリパン青で染色される生細胞が２×１０６個／ｍＬになるように調整した以外は実施例１と同様にして調製した。
【００５１】
４８穴マイクロプレートにＰＢＭＣ細胞懸濁液２５０μＬとスピルリナ組成物ろ過液１２５μL、１０％のＦＢＳを添加したＲＰＭＩ−１６４０培地１２５μＬ、およびＰＨＡ１０μｇを加え、フィトヘマグルチニンによりＰＢＭＣのＩＬ−４産生を刺激した。このときの条件は５％炭酸ガス濃度の環境下、３７℃、７２時間である。７２時間後、ＰＢＭＣ細胞懸濁液の上清を回収した。
【００５２】
次にこの上清に含まれるＩＬ−４の濃度を実施例１と同様にして測定し、ＰＨＡの刺激によりＰＢＭＣが産生したＩＬ−４の産生能を評価した。この結果を第２表に示す。測定結果は６人の測定値の平均値である（以下同様）。
【００５３】
（比較例２）
実施例１で製造したスピルリナ組成物の代わりに市販のアルスロスピラ（スピルリナ）・プラテンシスのスプレー乾燥粉末（Ｅａｒｔｈｒｉｓｅ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｓ，Ｐｅｔａｌｕｍａ，ＣＡ）を用いた以外は実験例３と同様にしてＰＢＭＣが産生したＩＬ−４の産生能を評価した。アルスロスピラ（スピルリナ）・プラテンシスのスプレー乾燥粉末の亜鉛含有量は原子吸光分光光度計で分析した所、前記乾燥粉末１００重量部に対し０．００１５重量部であった。この結果を第２表に示す。この結果から、亜鉛含有量が低い従来市販のスピルリナでは、ＩＬ−４の産生が抑制されていないことが明らかである。
【００５４】
【表２】
2006025668.tif 000003
【００５５】
以上、本発明の好ましい実施例を説明したが、本発明はこれら実施例に限定されることはない。本発明の趣旨を逸脱しない範囲で、構成の付加、省略、置換、およびその他の変更が可能である。本発明は前述した説明によって限定されることはなく、添付のクレームの範囲によってのみ限定される。
【産業上の利用可能性】
【００５６】
本発明のスピルリナ組成物を摂取するとＩＬ−４の産生が抑制され、アレルギー疾患の予防、改善に効果がある。また、この組成物を種々の食品に含有させた食品にもアレルギー疾患の予防、改善が期待でき、抗アレルギー食品として使用できる。
【手続補正書】
【提出日】平成16年9月27日(2004.9.27)
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４１】
この粉末状のスピルリナ組成物１０ｋｇと、ビタミンＣ粉末０．２ｋｇ、セルロース粉末１ｋｇ、二酸化珪素微粉末０．１ｋｇおよびステアリン酸マグネシウムエステル粉末０．１ｋｇとを混合し、これを青色に着色した＃００サイズのゼラチンカプセルに充填し、カプセル剤を調製した。これをカプセル１と略記する。カプセル１中のスピルリナ組成物乾燥粉末は５００ｍｇである。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４６】
スピルリナ組成物乾燥粉末５ｋｇに、ビタミンＣ粉末０．１ｋｇ、セルロース粉末５．５ｋｇ、二酸化珪素微粉末０．１ｋｇ、およびステアリン酸マグネシウムエステル粉末０．１ｋｇを混合し、これを青色に着色した＃００サイズのゼラチンカプセルに充填し、カプセル剤を調製した。これをカプセル２と略記する。カプセル２中のスピルリナ組成物乾燥粉末は２５０ｍｇである。このカプセル２のＩＬ−４産生抑制能の評価をグループ２のボランティア群を用いて実施例１と同様にして行った。測定結果を第１表に示す。この結果から、本発明のスピルリナ組成物の摂取によりＩＬ−４の産生が抑制されていることが明らかである。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
（比較例１）
セルロース粉末１０ｋｇ、二酸化珪素微粉末０．１ｋｇおよびステアリン酸マグネシウムエステル粉末０．１ｋｇとを混合し、これを青色に着色した＃００サイズのゼラチンカプセルに充填し、カプセル剤を調製した。これをカプセル３と略記する。カプセル３中のスピルリナ組成物乾燥粉末は０ｍｇである。このカプセル３のＩＬ−４産生抑制能の評価をグループ３のボランティア群を用いて実施例１と同様にして行った。測定結果を第１表に示す。この結果から、本発明のスピルリナ組成物を摂取しない時は、ＩＬ−４の産生が抑制されていないことが明らかである。