(57)【要約】【課題】  親株よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が著しく上昇し、しかも酒類の醸造における実用株として有用な新規麹菌、及び該麹菌を用いる酒類の製造方法を提供する。【解決手段】  親株よりもアリルアルコールに耐性を示し、かつ親株よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が上昇したアスペルギルス属に属する麹菌。該麹菌が、親株よりもアクリフラビンに対して感受性を示す麹菌。当該麹菌を用いて製麹し、得られた麹を用いる酒類の製造方法。親株の例としては、分類上、こうじカビ属に属し、酒類の製造に使用できるアスペルギルス属に属する麹菌がある。【効果】  原料利用率を向上させ、酵素剤の使用量を低減する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
親株よりもアリルアルコールに耐性を示し、かつ親株よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が上昇したアスペルギルス属に属する麹菌。
【請求項２】
請求項１に記載の麹菌が、親株よりもアクリフラビンに対して感受性を示す麹菌。
【請求項３】
親株が、アスペルギルス・カワチに属する請求項１又は２に記載の麹菌。
【請求項４】
麹菌が、ＦＥＲＭ  Ｐ−２０２７５である請求項１、２又は３に記載の麹菌。
【請求項５】
請求項１、２、３又は４に記載の麹菌を用いて製麹し、得られた麹を用いる酒類の製造方法。
【請求項６】
酒類が、焼酎である請求項５に記載の酒類の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アスペルギルス属に属する麹菌、及び該麹菌を用いる酒類の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
焼酎、清酒、みりん等の酒類の製造では、アスペルギルス・カワチ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｋａｗａｃｈｉｉ、以下本発明では、ＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓをＡ．と略記する）、アスペルギルス・アワモリ（Ａ．  ａｗａｍｏｒｉ）、アスペルギルス・ニガー（Ａ．  ｎｉｇｅｒ）、アスペルギルス・オリーゼ（Ａ．  ｏｒｙｚａｅ）といった麹菌が用いられている。麹菌は、各種酵素系に富んでおり、用途に応じ、その各種酵素系の発現に適した製麹方法が採られている。前記した酒類の製造においては、蒸煮した穀類等の固体原料へ麹菌の胞子を散布し、その表面で麹菌を増殖させる固体培養法により製麹された固体麹が広く利用されている。麹の原料となる米や麦等の穀類、イモ類等の種類により、また、それらのα化度、水分量により、製麹中の温度、湿度、培養時間、手入れ条件、通風・換気条件等のさまざまな製麹条件を調整して、糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性を目的とする一定の水準に保つように管理するのが一般的である。
【０００３】
焼酎、清酒、みりん等の酒類の製造では、醪を十分溶解させ原料利用率を向上させることが重要であるが、麹菌により得られる糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性だけでは不十分な場合がある。そのような場合、グルコアミラーゼ、α−アミラーゼ、セルラーゼ、プロテアーゼ等の市販酵素剤を添加して製造を行っている。コスト面、作業性等の点から、できるだけ酵素剤を使用せずに製造するのが望ましく、麹菌により得られる糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性を更に上昇させることができれば、酵素剤の使用量の低減につながるので、糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性をより上昇させた麹菌の開発が求められていた。
【０００４】
従来、麹菌の糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性を上昇させる方法としては、突然変異法、細胞融合法、形質転換法などがある。前記酵素活性に関し、親株よりも酵素活性を多重に上昇させる場合において、細胞融合法では、良質の形質を有する菌株同士を融合させる必要があるため、細胞融合に先立ち、良質の形質を有する菌株を得なければならない。したがって、多重に酵素活性を上昇させるには突然変異法あるいは形質転換法が有効である。例えば、麹菌の一種であるアスペルギルス・オリーゼ（Ａ．  ｏｒｙｚａｅ）では、固体培養法及び液体培養法における酵素発現の差異に関する遺伝子工学的な解析研究がなされている（特許文献１、特許文献２、特許文献３）。
アスペルギルス・ニドランス（Ａ．  ｎｉｄｕｌａｎｓ）、アスペルギルス・ニガーでは、ｃｒｅＡ遺伝子の変異を行い、グルコース抑制が解除された変異株が得られている。
また、プロテアーゼ活性及びペプチダーゼ活性が上昇している麹菌とその育種法、及び該麹菌を用いる調味料の製造法がある(特許文献４)。更に、基本的代謝プロセスの調節に関与する遺伝子の変異により、目的とする各種酵素の発現の増強を図る方法がある(特許文献５、特許文献６)。
しかしながら、これらの方法では、広範な遺伝子の発現を制御する因子を常に活性化された状態にしてしまう、すなわち目的とする酵素以外の遺伝子の発現が活性化された状態にしてしまう、あるいは生育が顕著に影響を受けるなどの問題があった。
【０００５】
このように、種々の試みはなされているが、醸造用麹菌での実用株として、糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が上昇し、かつ、生育が良好である菌株は得られていないのが現状である。
【０００６】
【特許文献１】特開平１０−８４９６８号公報
【特許文献２】特開平１１−２２５７４６号公報
【特許文献３】特開２００２−１９１３６６公報
【特許文献４】特開２００１−３２１１８８公報
【特許文献５】特表平１１−５１２９３０号公報
【特許文献６】特表２００１−５０００２２公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、親株よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が著しく上昇し、しかも焼酎、清酒等の醸造における実用株として有用な新規麹菌、及び該麹菌を用いて製麹し、得られた麹を用いる酒類の製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明を概説すれば、本発明の第１の発明は、親株よりもアリルアルコールに耐性を示し、かつ親株よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が上昇したアスペルギルス属に属する麹菌に関し、第２の発明は、第１の発明に記載の麹菌が、親株よりもアクリフラビンに対して感受性を示す麹菌であり、第３の発明は、親株が、アスペルギルス・カワチに属する第１の発明又は第２の発明に記載の麹菌であり、第４の発明は、麹菌が、ＦＥＲＭ  Ｐ−２０２７５である第１の発明、第２の発明又は第３の発明に記載の麹菌であり、第５の発明は、第１の発明、第２の発明、第３の発明又は第４の発明に記載の麹菌を用いて製麹し、得られた麹を用いる酒類の製造方法であり、第６の発明は、酒類が、焼酎である第５の発明に記載の酒類の製造方法に関する。
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を行った結果、白麹菌（アスペルギルス・カワチ）を親株とし、その変異処理株をアリルアルコール含有の寒天培地で培養し、麹菌の菌体当りのグルコアミラーゼ活性を指標として選択することによって、グルコアミラーゼ活性のみならず他の糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が親株よりも顕著に上昇することを見出し、本発明を完成するに至った。
【発明の効果】
【００１０】
本発明では、親株よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が上昇したアスペルギルス属に属する麹菌、及び該麹菌を用いて製麹し、得られた麹を用いる酒類の製造方法を提供することができる。本発明の麹菌を、例えば焼酎等の酒類の製造に用いることにより、親株を用いた場合よりも原料利用率を向上させることができ、更に、グルコアミラーゼ、α−アミラーゼ、セルラーゼ、プロテアーゼ等の市販酵素剤の使用量を低減することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下、本発明を具体的に説明する。
本発明における親株として用いられる麹菌とは、分類上、こうじカビ属に属していればいかなる菌株であってもよく、特に限定はされないが、焼酎、清酒、みりん等の酒類の製造に使用できる糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性を有するアスペルギルス属に属する麹菌である。アスペルギルス・カワチ、アスペルギルス・アワモリ、アスペルギルス・ニガー、アスペルギルス・オリーゼなどの麹菌が挙げられる。特に好ましくは、アスペルギルス・カワチ等に代表される白麹菌である。更に、前記した麹菌株を親株として、人為的に改変された株あるいは天然に存在する変異株なども包含される。
【００１２】
本発明の新規麹菌は、親株よりもアリルアルコールに耐性を示し、かつ親株よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が上昇したアスペルギルス属に属する麹菌であればよく、その取得方法に限定はないが、変異が好ましい。変異処理としては、公知の変異処理方法を用いることができ、物理的な紫外線（ＵＶ）、放射線等を照射させる方法、化学的なエチルメタンスルホネート、Ｎ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン、亜硝酸、アクリジン色素等の変異剤を用いる方法がある。特に好ましくは、紫外線（ＵＶ）を照射させる方法を挙げることができる。
【００１３】
本発明でいう「糖質分解酵素」とは、グルコアミラーゼ、α−アミラーゼ、α−グルコシダーゼ、β−グルコシダーゼ及びセルラーゼからなる酵素群のうち１種又は２種以上をいい、「タンパク質分解酵素」とは、酸性プロテアーゼ及び酸性カルボキシペプチダーゼからなる酵素群のうち１種又は２種をいう。
【００１４】
本発明における各種酵素活性の測定は以下の通りである。
グルコアミラーゼ活性、酸性プロテアーゼ活性及び酸性カルボキシペプチダーゼ活性の測定は、第四回改正国税庁所定分析法により行った。第四回改正国税庁所定分析法は、例えば、平成５年２月２０日、財団法人日本醸造協会発行、注解編集委員会編、「第四回改正国税庁所定分析法注解」（第四回改正版）、第２１１頁〜の「固体こうじ」の項に記載の方法である。
α−アミラーゼ活性の測定は、α−アミラーゼ測定キット〔キッコーマン（株）製〕を用いて行い、第四回改正国税庁所定分析法の活性に換算した。
α−グルコシダーゼ活性の測定は、今井らの方法〔日本醸造協会誌、第９２巻、第４号、第２９６〜３０２頁（１９９７年）〕により行い、３７℃で１分間に１μｍｏｌｅのｐ−ニトロフェノールを遊離する酵素力をα−グルコシダーゼ活性の１単位とした。
β−グルコシダーゼ活性の測定は、太田らの方法〔日本醸造協会誌、第８６巻、第７号、第５３６〜５３９頁（１９９１年）〕により行った。
セルラーゼ活性は、ＣＭＣ（カルボキシメチルセルロース）糖化力で代替することとし、１％ＣＭＣ溶液（５０ｍＭ酢酸緩衝液、ｐＨ４．０）１ｍｌに酵素液０．３ｍｌを加え、４０℃で６０分間反応させたときに生成するグルコース量を測定し、グルコース１ｍｇを生成する力価をセルラーゼ活性の１単位とした。
【００１５】
本発明の新規麹菌は、親株よりもアリルアルコールに耐性を示し、かつ親株よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が上昇したアスペルギルス属に属する麹菌であるという特徴を有する。本発明において、親株として用いる麹菌を培地に接種するときの形態は任意であり、胞子又は菌糸を用いることができる。本発明に使用する培地は、前記親株として用いる麹菌が生育できるものであれば限定はされないが、好ましくは、麹汁培地、ＹＰＤ培地が挙げられる。常法により製麹を行い、麦麹及びイモ麹を調製して、得られた麹菌の評価を行った。なお、イモ麹には、麹の原料として、特開２００１−９５５２３公報記載の方法に従い、生イモを３ｍｍ×３ｍｍ×５ｍｍにカットし、２３０℃で１２０秒焙炒した焙炒イモを用いた。
【００１６】
親株よりもアリルアルコールに耐性を示し、かつ親株よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が上昇したアスペルギルス属に属する麹菌の選抜方法の一例について説明する。具体的には、麹菌の胞子にＵＶ照射を施した後、アリルアルコールを含有する寒天培地を用いて培養し、親株よりもアリルアルコール耐性を示す菌株の中から、麹菌の菌体当りのグルコアミラーゼ活性を指標として選択することによって、グルコアミラーゼ活性のみならず他の糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が親株よりも顕著に上昇した変異株を取得することができる。
【００１７】
本発明でいう「親株よりもアリルアルコールに耐性を示す」とは、親株が市販の焼酎用麹菌アスペルギルス・カワチの場合、例えば、４０ｍＭ、５０ｍＭ及び６０ｍＭのアリルアルコールを含有する寒天培地を用いて、培養４日目から培養６日目までの生育の状態を観察し、変異株が親株よりも高いアリルアルコール濃度において、生育できることをいう。アスペルギルス・カワチ以外の他の菌株の場合、培地に含有させるアリルアルコール濃度は、各菌株に応じて適宜その濃度範囲を決定すればよい。
【００１８】
本発明の新規麹菌のうち、親株よりもアリルアルコールに耐性を示し、更に、親株よりもアクリフラビンに対して感受性を示す変異株は、親株よりも糖質分解酵素活性及びタンパク質分解酵素活性が顕著に上昇したアスペルギルス属に属する麹菌であるという特徴を有する。なお、アクリフラビンは、ＩＵＰＡＣ名では３,６−ジアミノ―１０−メチルアクリジニウムクロリドであるが、本発明では、一般名であるアクリフラビンに統一している。
本発明でいう「親株よりもアクリフラビンに感受性を示す」とは、親株が市販の焼酎用麹菌アスペルギルス・カワチの場合、例えば、０．０３０％、０．０３５％及び０．０４０％のアクリフラビンを含有する寒天培地を用いて、培養８日目から培養１１日目までの生育の状態を観察し、変異株が親株よりも低いアクリフラビン濃度において、生育できないことをいう。アスペルギルス・カワチ以外の他の菌株の場合、培地に含有させるアクリフラビン濃度は、各菌株に応じて適宜その濃度範囲を決定すればよい。
【００１９】
本発明の新規麹菌は、親株よりもアリルアルコールに耐性を示し、かつ親株よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が上昇したアスペルギルス属に属する麹菌であり、麦麹及びイモ麹において、親株よりも、グルコアミラーゼ、α−アミラーゼ、α−グルコシダーゼ、β−グルコシダーゼ及びセルラーゼの糖質分解酵素活性、更に酸性プロテアーゼ及び酸性カルボキシペプチダーゼのタンパク質分解酵素活性が顕著に上昇していることが確認されている。
【００２０】
焼酎用白麹菌であるアスペルギルス・カワチを親株として、本発明で新規に取得した麹菌は、下記の菌学的性質を有し、アスペルギルス属に属する麹菌であるが、親株よりもアリルアルコールに耐性を示し、更に、親株よりもアクリフラビンに対して感受性を示し、かつ親株よりも糖質分解酵素活性及びタンパク質分解酵素活性が顕著に上昇していることから、親株のアスペルギルス・カワチの変異株であると認め、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｋａｗａｃｈｉｉ  ７１１Ｃ（以下、７１１Ｃと略記する）と命名、表示し、独立行政法人産業技術総合研究所  特許生物寄託センターにＦＥＲＭ  Ｐ−２０２７５として寄託されている。
【００２１】
７１１Ｃの菌学的性質を下記に示す。
（菌学的性質）
１．形態的性状
形態的性状において、７１１Ｃは、親株のアスペルギルス・カワチと相違はない。
２．生理的性質
（ａ）生育温度：１５〜４５℃
（ｂ）最適生育温度：２５〜４０℃
（ｃ）生育ｐＨ：２．０〜９．０
（ｄ）最適生育ｐＨ:３．０〜９．０
（ｅ）グルコアミラーゼ活性（麦麹及びイモ麹を製麹後、酵素活性を測定、以
下同じ）
親株であるアスペルギルス・カワチに比べて、グルコアミラーゼ活性は顕著に上昇していた（２〜３倍）。
（ｆ）α−アミラーゼ活性（同上）
親株であるアスペルギルス・カワチに比べて、α−アミラーゼ活性は顕著に上昇していた（約２倍）。
（ｇ）α−グルコシダーゼ活性（同上）
親株であるアスペルギルス・カワチに比べて、α−グルコシダーゼ活性は顕著に上昇していた（２〜５倍）。
（ｈ）β−グルコシダーゼ活性（同上）
親株であるアスペルギルス・カワチに比べて、β−グルコシダーゼ活性は顕著に上昇していた（２〜８倍）。
（ｉ）セルラーゼ活性（同上）
親株であるアスペルギルス・カワチに比べて、セルラーゼ活性は顕著に上昇していた（２〜５倍）。
（ｊ）酸性プロテアーゼ活性（同上）
親株であるアスペルギルス・カワチに比べて、酸性プロテアーゼ活性は顕著に上昇していた（２〜３倍）。
（ｋ）酸性カルボキシペプチダーゼ活性（同上）
親株であるアスペルギルス・カワチに比べて、酸性カルボキシペプチダーゼ活性は顕著に上昇していた（約２倍）。
（ｌ）酸生成
酸度は麦麹で４〜６、イモ麹で６〜９を示し、親株であるアスペルギルス・カワチと比較しても遜色のない酸度を示し、焼酎等の酒類の製造に用いる醸造用麹菌としては十分なものであった。なお、酸度の測定は、第四回改正国税庁所定分析法により行った。
【００２２】
以下、実施例によって本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されない。
【実施例１】
【００２３】
７１１Ｃの取得
市販の焼酎用白麹菌アスペルギルス・カワチの胞子を用い、麹汁〔米麹：井水＝１：４（重量）比率で混合し、５５℃で１８時間反応させた後、そのろ液を井水でブリックス度５．０にしたもの〕寒天培地に接種し、単一コロニーを生成させた。これを別の麹汁寒天培地に移植し、胞子を形成させ、この胞子の塊に０．０２５％Ｔｗｅｅｎ８０を含む滅菌水溶液を加え、胞子をスプレッターで軽くかきとり、胞子懸濁液を得た。胞子懸濁液の菌数を１×１０６個／ｍｌに調整し、この胞子懸濁液に２０ｃｍの距離から１５ＷのＵＶランプを1分間照射した。このときの生存率は３０〜５０％であった。胞子懸濁液０．１ｍｌを５０ｍＭアリルアルコールを含有する寒天培地に塗布し、３０℃で６日間培養し、生育してくる菌株の中から、親株よりもアリルアルコール耐性を示す菌株を分離した。分離株について、麹汁寒天培地で胞子を形成させ、その胞子懸濁液を、炭素源として２％デンプン及び２％グルコースを含有する液体培地（５００ｍｌ容斜ヒダ付三角フラスコに培地１５０ｍｌ）に植菌して、３５℃、１４０ｒｐｍで培養した。２０時間後、４０時間後に培養液のグルコアミラーゼ活性を測定し、親株よりも有意に高いグルコアミラーゼ活性を示す菌株をスクリーニングした。本スクリーニング方法により、親株よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が上昇した麹菌の菌株が複数得られた。それらの菌株のうち、親株よりもアクリフラビンに対して感受性を示す、親株よりもグルコアミラーゼ活性が約２倍高い菌株である７１１Ｃは、グルコアミラーゼ活性のみならず他の糖質分解酵素活性及びタンパク質分解酵素活性の活性すべてにおいて親株よりも顕著に上昇していた。
【実施例２】
【００２４】
７１１Ｃの培養及び薬剤耐性・感受性
（７１１Ｃの液体培養）
７１１Ｃと親株であるアスペルギルス・カワチについて、表１に示す３種類の炭素源の培地で、実施例１と同様の条件で液体培養を行い、２０時間後、４０時間後に培養液のグルコアミラーゼ活性を測定した。
【００２５】
【表１】
2006211966.tif 000002
【００２６】
結果を図１に示す。
すなわち、図１は、７１１Ｃと親株について、各種炭素源の培地でのグルコアミラーゼ活性（Ｕ／ｍｇ菌体）を比較した図である。
４０時間後のグルコアミラーゼ活性を比較すると、グルコアミラーゼの生産を抑制するといわれている４％グルコース培地では親株はほとんどグルコアミラーゼが生産されなかったのに対し、７１１Ｃはグルコアミラーゼが生産され、明らかに親株との違いが認められた。また、グルコアミラーゼの生産を誘導する４％デンプン培地においても、７１１Ｃは親株に比べてグルコアミラーゼ活性は約２倍に上昇していた。
【００２７】
更に、７１１Ｃと親株であるアスペルギルス・カワチについて、２％グルコース及び２％デンプンを含有する液体培地と４％デンプンを含有する液体培地で、実施例１と同様の条件で液体培養を行い、経時的に培養液のグルコアミラーゼ活性を測定した。
結果を図２に示す。
すなわち、図２は、７１１Ｃと親株について、液体培地での経時的なグルコアミラーゼ活性を比較した図であり、横軸は、それぞれ培養時間（時間）、縦軸はグルコアミラーゼ活性（Ｕ／ｍｇ菌体）を意味する。
両方の培地において、７１１Ｃは培養初期から親株に比べ、約２倍高いグルコアミラーゼ活性を示した。７１１Ｃにおけるグルコアミラーゼは、グルコースによる抑制が緩和されていた。
【００２８】
（７１１Ｃの固体培養）
７１１Ｃと親株であるアスペルギルス・カワチについて、麦麹、イモ麹を製麹し、５０時間後の固体培養における各種酵素活性、ｐＨ、酸度、アミノ酸度を測定した。結果を表２に示す。
【００２９】
【表２】
2006211966.tif 000003
【００３０】
７１１Ｃは親株に比べ、グルコアミラーゼ活性、α−アミラーゼ活性、セルラーゼ活性(ＣＭＣ糖化力で評価)は約２倍、α−グルコシダーゼ活性は約３倍、β−グルコシダーゼ活性は約６倍高くなった。酸性プロテアーゼ活性も約２倍高くなった。また、親株と同様に、生育も良好であった。
【００３１】
更に、市販の白麹菌５社７株について麦麹の製麹を行い、７１１Ｃと各種酵素活性を比較した。製麹は、２６時間までは３８℃（湿度９８％）、２６時間以降は３５℃（湿度９６％）とし、４８時間後に出麹を行い、各種酵素活性を測定した。一般に市販されている白麹菌７株と比較した結果を表３に示す。
【００３２】
【表３】
2006211966.tif 000004
【００３３】
７１１Ｃは、グルコアミラーゼ活性、α−アミラーゼ活性は約２倍、α−グルコシダーゼ活性は５〜６倍、β−グルコシダーゼ活性は３〜５倍、セルラーゼ活性(ＣＭＣ糖化力で評価)は２〜３倍高くなった。酸性プロテアーゼ活性は２〜３倍、酸性カルボキシペプチダーゼ活性は約２倍高くなった。７１１Ｃは、各種酵素活性が上昇した麹菌であり、他の市販白麹菌に比べて優れていた。
これらの結果により、７１１Ｃは、液体培養、固体培養それぞれにおいて、糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が親株よりも上昇し、また、親株と同様に、生育も良好で、醸造用麹菌での実用株として優れていることを示すものである。
【００３４】
（７１１Ｃの薬剤耐性）
７１１Ｃと市販の白麹菌７株について、４０ｍＭ、５０ｍＭ及び６０ｍＭのアリルアルコールを含有する寒天培地での生育を調べた。各菌株について、麹汁寒天培地で単一コロニーを生成させ、これを別の麹汁寒天培地に移植し、胞子を形成させた。各菌株について、０．０２５％Ｔｗｅｅｎ８０溶液により胞子懸濁液を調製し、これを爪楊枝でアリルアルコールを含有する寒天培地にスポットし、３０℃で４〜６日培養を行い、各菌株の生育を比較した。結果を表４に示す。
【００３５】
【表４】
2006211966.tif 000005
【００３６】
培養４日目において、４０ｍＭ、５０ｍＭのアリルアルコールを含有する寒天培地で市販の白麹菌７株は全く生育しないのに対し、７１１Ｃは生育が認められた。培養６日目においては、５０ｍＭのアリルアルコールを含有する寒天培地で７１１Ｃと他の市販の白麹菌７株との生育の違いがはっきりと確認でき、明らかにアリルアルコールに耐性を示した。
【００３７】
更に、７１１Ｃと市販の白麹菌７株について、０．０３０％、０．０３５％及び０．０４０％のアクリフラビンを含有する寒天培地での生育を調べた。各菌株について、胞子懸濁液を調製し、これを爪楊枝でアクリフラビンを含有する寒天培地にスポットし、３０℃で８〜１１日培養を行い、各菌株の生育を比較した。結果を表５に示す。
【００３８】
【表５】
2006211966.tif 000006
【００３９】
アクリフラビンについては、０．０３５％の濃度のとき、菌株の生育に差が認められ、７１１Ｃは他の市販の白麹菌７株に比べ、アクリフラビンに対し感受性を示した。
【実施例３】
【００４０】
７１１Ｃ麹を用いた麦焼酎の小仕込試験
７１１Ｃで製麹した麦麹を用いて、表６に示す仕込配合で麦焼酎の小仕込試験を行った。親株であるアスペルギルス・カワチで製麹した麦麹を用いたものを対照とした。７１１Ｃと親株を比較するため、酵素剤は添加しなかった。一次仕込は３０℃一定で６日間、二次仕込は２５℃一定で１５日間発酵させた。
【００４１】
【表６】
2006211966.tif 000007
【００４２】
炭酸ガス減量の経過を図３に示す。
すなわち、図３は、７１１Ｃと親株について、麦焼酎の小仕込試験における炭酸ガス減量の経過を示した図であり、横軸は、醪日数（日）、縦軸は炭酸ガス減量（ｇ）を意味する。
７１１Ｃ麹を用いた醪は、対照に比べ、醪の溶解性が向上し、発酵経過（炭酸ガス減量の立上がり）が良好となった。
発酵終了醪の分析結果を表７に示す。
【００４３】
【表７】
2006211966.tif 000008
【００４４】
７１１Ｃ麹を用いた醪は、対照に比べ、糖消費率が９２．５％から９４．０％に向上し、発酵歩合も８８．８％から８９．３％に向上した。なお、発酵歩合において、９０％近いところでその歩合を更に上昇させていることは、７１１Ｃが優れた醸造用麹菌であることを示している。それらの醪を減圧蒸留したところ、７１１Ｃを用いたものは、対照と同様に、淡麗、きれいで良好な酒質であった。
【実施例４】
【００４５】
７１１Ｃ麹を用いたイモ焼酎の小仕込試験
７１１Ｃで製麹したイモ麹を用いて、表８に示す仕込配合でイモ焼酎の小仕込試験を行った。親株であるアスペルギルス・カワチで製麹したイモ麹を用いたものを対照とした。７１１Ｃと親株を比較するため、酵素剤は添加しなかった。一次仕込は３０℃一定で６日間、二次仕込は３０℃一定で１５日間発酵させた。
【００４６】
【表８】
2006211966.tif 000009
【００４７】
炭酸ガス減量の経過を図４に示す。
すなわち、図４は、７１１Ｃと親株について、イモ焼酎の小仕込試験における炭酸ガス減量の経過を示した図であり、横軸は、醪日数（日）、縦軸は炭酸ガス減量（ｇ）を意味する。
７１１Ｃ麹を使用した醪は、対照に比べ、醪の溶解性が向上し、発酵経過（炭酸ガス減量の立上がり）が良好となった。特に一次醪での差は顕著であった。
発酵終了醪の分析結果を表９に示す。
【００４８】
【表９】
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【００４９】
７１１Ｃ麹を用いた醪は親株を用いたものに比べ、糖消費率が９０．７％から９２．２％に向上し、発酵歩合も８２．０％から８４．９％に向上した。なお、発酵歩合において、８０％を超えたところでその歩合を更に上昇させていることは、７１１Ｃが優れた醸造用麹菌であることを示している。それらの醪を常圧蒸留したところ、７１１Ｃを用いたものは、対照と同様に、香り高く良好な酒質であった。
【産業上の利用可能性】
【００５０】
本発明の麹菌は、通常酒類の製造に用いられる麹菌（親株）よりも糖質分解酵素活性及び／又はタンパク質分解酵素活性が顕著に上昇しており、焼酎、清酒、みりん等の酒類の製造において、原料利用率の向上あるいは別途添加する市販酵素剤の低減につながるので、産業上極めて有用な発明である。
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１】７１１Ｃと親株について、各種炭素源の培地でのグルコアミラーゼ活性を比較した図である。
【図２】７１１Ｃと親株について、液体培地での経時的なグルコアミラーゼ活性を比較した図である。
【図３】７１１Ｃと親株について、麦焼酎の小仕込試験における炭酸ガス減量の経過を示した図である。
【図４】７１１Ｃと親株について、イモ焼酎の小仕込試験における炭酸ガス減量の経過を示した図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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