(57)【要約】  【課題】  生体を酸化ストレスから保護するための新規の素材を提供する。  【解決手段】  上記一般式（Ｉ）に表されるポリフェノール又はその塩を提供する。かかる化合物は、クルミ科ユグランス属の植物の種子の仁より、非極性溶剤による抽出を行い、液液抽出により、極性成分を除き、カラムクロマトグラフィーにて精製することにより得られる。このものを食品組成物に含有させ、経口的に投与することにより、酸化ストレスより、生体を保護することが出来る。【化１】2006052184.tif 000007一般式（Ｉ）（但し、式中Ｒ１〜Ｒ２６はそれぞれ独立に、水素原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアシル基を表す。）  【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次に示す一般式（Ｉ）で表されるポリフェノール又はその塩。
【化１】
2006052184.tif 000005
一般式（Ｉ）
（但し、式中Ｒ１〜Ｒ２６はそれぞれ独立に、水素原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアシル基を表す。）
【請求項２】
一般式（Ｉ）に表されるポリフェノールが、下記に示すグランスリンＤであることを特徴とする、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【化２】
2006052184.tif 000006
グランスリンＤ
【請求項３】
請求項１又は２に記載のポリフェノール及び／又はその塩を有効成分とする、抗酸化剤。
【請求項４】
請求項１又は２に記載のポリフェノール及び／又はその塩を、抗酸化剤として含有する、食品組成物。
【請求項５】
生体の酸化ストレス抑制用であることを特徴とする、請求項４に記載の食品組成物。
【請求項６】
前記請求項４又は５に記載の食品組成物に於いて、酸化ストレス抑制作用を有する旨の表示を有することを特徴とする、請求項４又は５に記載の食品組成物。
【請求項７】
抗酸化剤として、請求項１又は２に記載のポリフェノール及び／又はその塩を含有することを表示してあることを特徴とする、請求項６に記載の食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は食品組成物に関し、更に詳細には、酸化ストレス抑制用の食品組成物に好適な食品組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
酸化は生命活動においては、生命活動の維持に必要なエネルギーを作り出す、重要な化学反応であり、且つ、免疫系において細菌などの侵入非自己生物を攻撃する有用な生体防御手段でもある。しかし、一方、酸化反応、それも生体による制御の効かない酸化反応は生体に大きなダメージを与える。特に、脂質などが酸化されて生じる過酸化物は生体にとって大きな傷害をもたらすし、光老化では過酸化物が大きな要因となっていることが指摘されている。又、炎症においても酸化は大きな役割を果たしており、慢性的な炎症が発ガンの重要因子であることを考えると、酸化は発ガンとも深い関係にあるといえる。特に重要なのは、近年生活慣習病に分類されている、血栓症や脳循環関連の病気にも酸化ストレス、取り分け血管内皮細胞の酸化ストレスが関与しており、これらの酸化ストレスを軽減する手段が求められている。即ち、生体において、適切に酸化反応、詳細に言えば、過酸化反応を制御することは、生体の維持と健康の維持にとって大変有用なことであるといえる。この様な目的で、種々の抗酸化 剤が使用されており、例えば、この様な抗酸化 剤としては、古くはＢＨＴ或いはＢＨＡと言った芳香族系の物質が存在し、近年においてはアスコルビン酸、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド等のアスコルビン酸類、トコフェロール類などが存在する。しかしながら、芳香族系の物質については安全性の懸念がぬぐいきれず、アスコルビン酸やその誘導体は、水溶性が高いために生体内での貯留時間に不適切な場合があったり、安定性に問題がある場合があった。トコフェロール類においては、着色や異臭の問題がある場合があり、これらを適度に組み合わせて使用しているのが現状であるといえる。又、これらのものに於いては、例えその組合せに於いても、血管内皮にまで配向し、血管内皮を酸化ストレスから保護するには、前記の物性故充分とは言えなかった。即ち、生体を酸化ストレスから保護するための新規の素材の開発が望まれていたと言える。
【０００３】
一方、クルミ科ユグランス属の植物の果実の仁部には、強い抗酸化作用を有するポリフェノール類が多種含有されていることが知られており、これらのポリフェノールの幾つかは同定され、抗酸化食品へと応用されている。（例えば、特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４を参照）しかしながら、一般式（Ｉ）に表される化合物は、文献未記載の新規化合物であり、かかる化合物が、クルミ科ユグランス属の植物の果実の仁部に含まれていることも、強い抗酸化作用を有することも全く知られていない。
【０００４】
【特許文献１】特開２００４−１９６７４５号公報
【特許文献２】特開２００４−１０７３１４号公報
【特許文献３】特開２００３−２９２９５２号公報
【特許文献４】特開２０００−７１２６８６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、この様な状況下為されたものであり、生体を酸化ストレスから保護するための新規の素材を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
この様な状況に鑑みて、本発明者らは、生体を酸化ストレスから保護するための新規の素材を求めて、鋭意研究、努力を重ねた結果、クルミ科ユグランス属の植物の果実の仁部に含有される、次に示す一般式（Ｉ）で表されるポリフェノール又はその塩が、優れた抗酸化作用を有することを見出し、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は、以下に示すとおりである。
【０００７】
【化１】
2006052184.tif 000002
一般式（Ｉ）
（但し、式中Ｒ１〜Ｒ２６はそれぞれ独立に、水素原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアシル基を表す。）
【０００８】
（１）上記一般式（Ｉ）に表されるポリフェノール又はその塩。
（２）一般式（Ｉ）に表されるポリフェノールが、下記に示すグランスリンＤであることを特徴とする、（１）に記載の化合物又はその塩。
【０００９】
【化２】
2006052184.tif 000003
グランスリンＤ
【００１０】
（３）（１）又は（２）に記載のポリフェノール及び／又はその塩を有効成分とする、抗酸化剤。
（４）（１）又は（２）に記載のポリフェノール及び／又はその塩を、抗酸化剤として含有する、食品組成物。
（５）生体の酸化ストレス抑制用であることを特徴とする、（４）に記載の食品組成物。
（６）前記（４）又は（５）に記載の食品組成物に於いて、酸化ストレス抑制作用を有する旨の表示を有することを特徴とする、（４）又は（５）に記載の食品組成物。
（７）抗酸化剤として、請求項１又は２に記載のポリフェノール及び／又はその塩を含有することを表示してあることを特徴とする、（６）に記載の食品組成物。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
（１）本発明の化合物
本発明の化合物は上記一般式（Ｉ）に表されるポリフェノール又はその塩からなる。一般式（Ｉ）に表される化合物の内、Ｒ１〜Ｒ２６の表される基が全て水素原子であるものは、クルミ科ユグランス属の植物の果実の仁部に存在することを、本発明者らは見出した。かかるポリフェノールは、本発明者らによって、グランスリンＤと命名されているが、後記に示す如く、優れた抗酸化作用を有する。このものを濃縮乃至は単離して、食品組成物や、皮膚外用剤などに配合し、生体に投与することにより、生体に負荷される酸化ストレスを抑制し、生体を酸化ストレスから保護することが出来る。又、かかるグランスリンＤの水酸基は何れもフェノール性の水酸基であるため、常法に従って処理することにより、エーテル体或いはアシル化体へと誘導することが出来る。この様な構造変換により、臓器移行性を変えることが出来、対象臓器によって、置換基の数などを変えるなどして、適宜生体利用性を調整することも出来る。この様なエーテル体であれば、ジメチルホルムアミドなどを溶媒として、水素化ナトリウムなどのアルカリ存在下、メチルアイオダイドの様な、アルキルハライドを反応させることにより誘導できる。又、アシル化体は、ピリジンやトリエチルアミンなどの塩基性溶剤を溶媒として、アセチルクロリドなどのアシルハライドを反応させることにより誘導できる。反応温度と、反応試薬の量を調整することにより、誘導する基の数をコントロールすることも出来る。活性の面からはＲ１〜Ｒ２６に表される基が全て水素原子である、グランスリンＤが特に好ましい。又、塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、トリエタノールアミン塩、トリエチルアミン塩等の有機アミン塩類、リジン塩、アルギニン塩等の塩基性アミノ酸塩等が好ましく例示できる。これらのポリフェノール及び／又はその塩が、優れた抗酸化作用を有する故に、本発明の抗酸化剤でもある。
【００１２】
クルミ科ユグランス属の植物の果実の仁より、グランスリンＤを得る方法であるが、かかる植物としては、ペカン、ピスタッチオ、ヒメグルミ、カシグルミ、オニグルミ、マンシュウグルミ、ウォールナッツ等のユグランス属の植物の果実の殻を除去して仁を取り出した後、水、エタノールやイソプロパノール、１，３−ブタンジオールなどのアルコール類、酢酸エチルや蟻酸メチルなどのエステル類、ジエチルエーテルやテトラヒドロフラン等のエーテル類、アセトンやメチルエチルケトンなどのケトン類などの溶剤を用いて、仁に対して１〜１０倍量の溶剤を加え、室温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間、浸漬して、しかる後に、濾過などを行い、不溶物を除去した後、溶剤を溜去し、これをカラムクロマトグラフィーで精製することにより単離することが出来る。カラムクロマトグラフィーを行う前に、前処理として、非混和二溶剤系で液液抽出することにより、グランスリンＤの濃度を高めることも好ましい。この様な非混和二溶剤系としては、例えば、ノルマルヘキサン−水系、ジエチルエーテル−水系、酢酸エチル−水系、ノルマルブタノール−水系などの系が例示できる。これらの系で順次液液抽出を行ってゆくことにより、水相にグランスリンＤを濃縮することが出来る。
【００１３】
グランスリンＤを抽出物からカラムクロマトグラフィーによって単離する方法であるが、使用できるカラム充填剤としては、特段の制限無く用いることが出来、例えば、シリカゲル、アルミナ、ＯＤＳ等のようなアルキル基修飾シリカゲル、イオン交換樹脂、ゲル濾過剤等が好ましく例示できる。これらは、必要に応じて、紫外吸収などをモニターしながら分画することが出来る。又、この様なカラムクロマトグラフィーは、同条件で数回繰り返すことも可能であるし、担体や溶媒を変えて、繰り返し行うことも可能である。
【００１４】
（２）本発明の食品組成物
本発明の食品組成物は前記一般式（Ｉ）に表されるポリフェノール及びその塩から選択される１種乃至は２種以上を含有することを特徴とする。前記一般式（Ｉ）に表されるポリフェノール及びその塩から選択される１種乃至は２種以上の配合目的は抗酸化剤であり、かかる抗酸化剤の配合により、生体に於ける酸化ストレスを軽減し、以て生体を酸化ストレスから守ることを旨とする。本発明の食品組成物に於いて、かかる一般式（Ｉ）に表される化合物乃至はその塩は、唯一種を含有させることも出来るし、二種以上を組み合わせて含有させることも出来る。本発明の食品組成物に於けるかかる成分の好ましい含有量は、総量で０．１〜４０質量％であり、より好ましくは、０．５〜３０質量％である。これは、少なすぎると前記作用を発揮しない場合が存し、多すぎても効果が頭打ちになり、徒に処方の自由度を制限する場合が存するためである。
【００１５】
本発明の食品組成物に於いては、これらの一般式（Ｉ）に表されるポリフェノールやその塩以外に、通常食品組成物で使用される任意成分を含むことが出来る。この様な任意成分としては、例えば、デンプン、結晶セルロース、乳糖などの賦形剤、グアーガム、アラビアガムなどの結合剤、ゼラチン、ツェイン、シェラック等の被覆剤、矯味矯臭剤、糖衣剤等が例示できる。これらの任意成分と、必須成分である、一般式（Ｉ）に表されるポリフェノール又はその塩を、常法に従って処理することにより、本発明の食品組成物は製造することが出来る。本発明の食品組成物は、その好ましい使用態様を遵守してもらうために、酸化ストレス抑制作用を有する旨の表示、一般式（Ｉ）に表されるポリフェノール又はその塩を抗酸化剤として含有する旨の表示を掲げることが好ましい。かかる表示は包装形態に掲げることが出来る。
【００１６】
以下に、実施例を挙げて、本発明について、更に詳細に説明を加えるが、本発明がこれら実施例にのみ限定されないことは言うまでもない。
【実施例１】
【００１７】
カシグルミの可食部１０ｋｇを圧搾用の型にいれ、３５℃条件下、１００Ｋｇ／ｃｍ２で４時間加圧して、油脂分を除去した。圧搾した残りを７０％エタノール水溶液で抽出し、濾過して不溶物を除去した後、減圧濃縮して残査３１０ｇ（本発明の抗酸化用の組成物１）を得た。これをヘキサン，酢酸エチル，１−ブタノールと水で順次液−液抽出を行い，抽出液を濃縮・乾燥し，ヘキサン，酢酸エチル，１−ブタノール，水の各エキスを得た．このうち水エキスの１２５ｇをダイアイオンＨＰ−２０（三菱化成製）カラムクロマトグラフィー（溶出溶媒；水：メタノール＝１００：０〜０：１００）およびトヨパールＨＷ−４０Ｃ（トーソー製），ＭＣＩ−ＧＥＬ  ＣＨＰ２０Ｐ（三菱化成製）カラムクロマトグラフィーで精製し、グランスリンＤを２５ｍｇ得た。この化合物の物性値は以下の通り。
【００１８】
（グランスリンＤ）
黄色みがかったアモルファスの粉末；[α]D +58.9°（c 0.2, MeOH）；ＥＳＩＭＳ m/z 1738[M+NH4]+；CD (MeOH)[θ] (nm) +2.0×105 (237), -5.4×104 (262), +2.9×104 (282), -6.3×104 (311)； UV λmax (MeOH) nm (log ε) 265.5(4.73), 216.0 (5.14)； 1H NMR (600 MHz, アセトン-d6+重水)δ7.13(2H, s), 7.09(1H, s), 7.07(2H, s), 6.69(1H, s), 6.59(1H, s), 6.51(1H, s), 6.43(1H, s), 6.38(1H, s), 6.18(1H, s), グルコースプロトンδ6.13 (1H, d, J=9.0 Hz), 5.84 (1H, d, J=7.8 Hz), 5.38(1H, dd, J=9.0, 10.2 Hz), 5.27(1H, dd, J=7.8, 9.6 Hz), 5.22(1H, dd, J=6.6, 13.2 Hz), 5.15(1H, dd, J=6.6, 13.2 Hz), 5.14(1H, t, J=9.0 Hz), 5.07(1H, t, J= 10.2 Hz), 4.96(1H, dd, J=9.6 Hz), 4.41(1H, dd, J=6.6, 10.2 Hz), 4.16(1H, dd, J=6.6, 9.6 Hz), 4.12(1H, t, J=9.6 Hz), 3.75(1H, d, J=13.2 Hz), 3.73(1H, d, J=13.2 Hz)； 13C NMR(150 MHz, アセトン-d6+重水)δ63.0, 63.3, 69.0, 72.4, 73.0, 73.1, 74.1, 75.8, 75.9, 77.2, 92.0, 93.3, 104.8, 107.1 (2C), 107.3, 107.8, 108.1, 109.6, 110.0 (2C), 110.2 (2C), 112.6, 114.4, 114.9, 115.6, 115.7, 116.2, 117.7, 119.3, 120.4, 125.1, 125.6, 125.7, 125.9, 126.0, 126.4, 136.1, 136.2, 136.4, 136.5, 136.6, 137.0, 137.7, 139.3, 140.0, 140.3, 141.2, 143.1, 144.1, 144.2, 144.3, 144.4, 144.7, 144.9, 145.0(2C), 145.1 (2C), 145.3, 145.9 (2C), 146.1(2C), 146.7, 162.6, 165.2, 166.6, 167.9, 168.1, 168.2, 168.6, 168.8, 169.4
【実施例２】
【００１９】
＜抗酸化活性の測定＞
キサンチン−キサンチンオキシダーゼ（ＸＯＤ）系により活性酸素のひとつであるスーパーオキシドアニオン（Ｏ2-）を発生させ、発生したＯ2-の生成率を亜硝酸法により測定し、この値をキサンチンオキシダーゼ阻害活性値で補正して抗酸化作用値を求めた。実施例１で得られた本発明の抗酸化剤を５０μｇ／ｍｌの割合で含有する抗酸化組成物水溶液０．１ｍｌを、６５ｍＭリン酸２水素カリウム、３５ｍＭホウ酸ナトリウム、０．５ｍＭＥＤＴＡ２ナトリウム水溶液（以下、緩衝液Ａという）０．２ｍｌ、０．５ｍＭキサンチン溶液０．２ｍｌ、１０ｍＭヒドロキシルアミン塩酸塩水溶液０．１ｍｌ、純水０．２ｍｌの混合液に、加えてよく撹拌し試験液とした。同様にして、抗酸化用の組成物の代わりに純水０．１ｍｌを用いたコントロールの溶液を作製した上記各試験液及びコントロール溶液に、キサンチンオキシダーゼを１μｌ／ｍｌ濃度で含有する緩衝液Ａを０．２ｍｌ加えて撹拌した後、３７℃で３０分インキュベーションした。ブランクとして、上記と同様に調整された試験液及びコントロール溶液に、キサンチンオキシダーゼを含まない緩衝液Ａを０．２ｍｌ加え、上記と同様に処理した溶液を用意した。このようにして得られた各溶液のそれぞれに、３０μＭＮ−１−ナフチルエチレンジアミン塩酸塩、３ｍＭスルファニル酸、２５％氷酢酸混液２ｍｌを加え、３０分間室温で放置した後、各溶液について、５５０ｎｍでの吸光度で活性酸素の発生量を測定した。得られた値を用いて、以下の式に基づき、抗酸化作用値をＥＣ５０として算出した。この結果を表１に示す。これより、本発明の化合物であるグランスリンＤは優れた抗酸化活性を有していることがわかる。尚、この時、アスコルビン酸のＥＣ５０値は、34.6 μMであった。
＜抗酸化活性を求める式＞
抗酸化活性＝［１−（（Ａ550-サンプル−Ａ550-サンプル・ブランク）／（Ａ550-コントロール−Ａ550-コントロール・ブランク））］×１００
【００２０】
【表１】
2006052184.tif 000004
【実施例３】
【００２１】
＜配合例＞
下記に示す処方に従って、本発明の食品組成物を製造した。処方成分を流動層造粒装置に仕込み、２０質量部の２０％エタノール水溶液を噴霧しながら造粒し、４０℃で４８時間送風乾燥した後、篩過して４０メッシュパス・１００メッシュオンを集めて、これを５０ｇ錠に打錠し、５０ｍｇの糖衣をかけて食品とした。これを瓶に１００錠詰め、紙箱に入れて包装した。紙箱には、本品が酸化ストレス抑制作用を有する食品であることと、グランスリンＤを抗酸化剤として１錠あたり１０ｍｇ含有することを表示した。
【００２２】
グランスリンＤ                                  １０    質量部
グアーガム                                        １    質量部
結晶セルロース                                  ３８    質量部
ステアリン酸マグネシウム                          １    質量部
【産業上の利用可能性】
【００２３】
本発明は、酸化ストレス抑制用の食品に応用できる。