(57)【要約】【課題】  高度な加工技術を必要とせず製造が容易で簡単な構成とし、微量な試料で簡易迅速且つ効果的に分析を行うことのできる逐次移送式反応槽、逐次移送式反応槽の製造方法及び逐次移送式反応槽を用いた試験方法を提供すること。【解決手段】  試薬６及び試料７を反応させるための密封された収容部Ｓと、該収容部Ｓを配置する基盤２とを備え、前記収容部Ｓは、充填される試薬６に対応してヒートシール４によって複数の小部屋８、９、１０に分割及び合体可能に区画されることを特徴とする。【選択図】    図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料及び試薬を反応させるための密封された収容部と、該収容部を配置する基盤とを備え、前記収容部は、充填される試料及び試薬に対応して仕切り手段によって複数の小部屋に分割および合体可能に区画されることを特徴とする逐次移送式反応槽。
【請求項２】
収容部はチューブ内に形成されていることを特徴とする請求項１に記載の逐次移送式反応槽。
【請求項３】
収容部は基盤とこの基盤上面を覆うフィルムとの間に形成されていることを特徴とする請求項１記載または請求項２のいずれかに記載の逐次移送式反応槽。
【請求項４】
基盤に試薬または試料及び試薬を配置するための凹部が形成されていることを特徴とする請求項３記載の逐次移送式反応槽。
【請求項５】
仕切り手段は、チューブ内あるいはフィルムを接着して仕切る接着部であることを特徴とする請求項１記載から４のいずれかに記載の逐次移送式反応槽。
【請求項６】
仕切り手段は、チューブ内あるいはフィルムを基盤に圧着して仕切る押圧具であることを特徴とする請求項１から４のいずれかに記載の逐次移送式反応槽。
【請求項７】
仕切り手段は、加圧されることで流通可能な微細な隙間を備えた仕切り部分であることを特徴とする請求項１から４のいずれかに記載の逐次移送式反応槽。
【請求項８】
仕切り手段により区画され、加圧されることで混合可能な試薬または試料及び試薬を収容する複数の密封された小部屋を備えたことを特徴とする逐次移送式反応槽。
【請求項９】
基盤にチューブを接着する工程と、チューブ内に試薬または試料及び試薬を入れる工程と、仕切り手段により密封する工程と、チューブの開放端を閉塞する工程とを有することを特徴とする請求項１から８のいずれかに記載の逐次移送式反応槽の製造方法。
【請求項１０】
基盤上に、試薬または試料及び試薬を配置する工程と、基盤と該試薬または試料及び試薬とをフィルムで覆う工程と、仕切り手段により密封する工程と、フィルムと基盤との間の開放端を閉塞する工程とを有することを特徴とする請求項１から８のいずれかに記載の逐次移送式反応槽の製造方法。
【請求項１１】
少なくともひとつの密封された小部屋に試料を充填する工程と、この試料が充填された小部屋と隣接する試薬が充填された小部屋との区画を開放する工程と、この試料が充填された小部屋を加圧して隣接する試薬用の小部屋内の試薬と混合・撹拌する工程とを有することを特徴とする請求項１から８のいずれかに記載の逐次移送式反応槽を用いた試験方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、例えばＰＣＲ（ポリメラーゼ連鎖反応法）産物の確認、抗原抗体反応による検出、酵素活性測定等に用いられる逐次移送式反応槽、逐次移送式反応槽の製造方法及び逐次移送式反応槽を用いた試験方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、化学反応等において微量の試料を用いることで、反応が効果的に行われることに着目し、このような微量な試料を用いた検査装置が提案されている。例えば、基材にマイクロ機械加工方法を用いて微細な加工を施し、試料を収容するための試料収容部、試薬を収容するための試料収容部、試料と試薬を反応させるための反応部、及びこれらを接続する流路を形成して、微量な試料、試薬で各種の分析を行っている（例えば、特許文献１参照）。分析にあたっては、前記各収容部に微量な試料や試薬を収容し、電気誘導を用いて試料と試薬を反応部に導き、ここで反応させるものである。
【特許文献１】特許第３２０７４２４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
上記従来技術においては、高価な試薬や貴重な試料が微量で済む点で有利である反面、基材に微細な加工を施さなくてはならないため、製造が困難であるという問題がある。また、電気誘導を利用して、試料、試薬を移動させるものであるため、各々の試料の粘度に合わせて調節を行わなければならず、作業に時間と手間が掛かるという問題がある。さらに、試料は微量であるので、外部にさらしたままの状態ではわずかながら蒸発してしまう虞があるため、取り扱いに注意が必要となる。
【０００４】
本発明は、このような事情を考慮してなされたもので、高度な加工技術を必要とせず製造が容易で簡単な構成とし、微量な試料で簡易迅速且つ効果的に分析を行うことのできる逐次移送式反応槽、逐次移送式反応槽の製造方法及び逐次移送式反応槽を用いた試験方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、上記課題を解決するため、以下の手段を採用する。請求項１記載の発明は、試料（この発明の実施形態の試料７）及び試薬（この発明の実施形態の試薬６）を反応させるための密封された収容部（この発明の実施形態の収容部Ｓ）と、該収容部を配置する基盤（この発明の実施形態の基盤２）とを備え、前記収容部は、充填される試薬に対応して仕切り手段（この発明の実施形態のヒートシール４、ロール１２、隙間ｃ）によって複数の小部屋（この発明の実施形態の小部屋８、９、１０）に分割および合体可能に区画されることを特徴とする。
このように構成することで、複数の小部屋に必要に応じて試料、試薬を収容し、反応に際しては仕切り手段を開放して小部屋を合体し、試料と試薬を反応させることが可能となる。
【０００６】
請求項２記載の発明は、収容部はチューブ（この発明の実施形態のチューブ３）内に形成されていることを特徴とする。
このように構成することで、収容部がチューブ内に密封されることにより外部から覆われることになり、試薬及び試料の蒸発を防ぐとともに試薬及び試料を外部環境から確実に遮断することが可能となる。
【０００７】
請求項３記載の発明は、収容部は基盤とこの基盤上面（この発明の実施形態の上面２ａ）を覆うフィルム（この発明の実施形態のフィルム１４）との間に形成されていることを特徴とする。
【０００８】
請求項４記載の発明は、基盤に試薬または試料及び試薬を配置するための凹部（この発明の実施形態の凹部１３）が形成されていることを特徴とする。
このように構成することで、試薬または試料及び試薬を確実に凹部内に配置することが可能となる。
【０００９】
請求項５記載の発明は、仕切り手段は、チューブ内あるいはフィルムを基盤に接着して仕切る接着部（この発明の実施形態のヒートシール４）であることを特徴とする。
このように構成することで、チューブ内を接着部により自由に仕切ることが可能となる。
【００１０】
請求項６記載の発明は、仕切り手段は、チューブ内あるいはフィルムを基盤に圧着して仕切る押圧具（この発明の実施形態のロール１２）であることを特徴とする。
このように構成することで、押圧具を開放することで必要な小部屋の合体が可能となる。
【００１１】
請求項７記載の発明は、仕切り手段は、加圧されることで流通可能な微細な隙間（この発明の実施形態の隙間ｃ）を備えた仕切り部分であることを特徴とする。
このように構成することで、仕切り部分自体に、隣接する小部屋を仕切る機能と小部屋を合体する機能を併せ持たせることが可能となる。
【００１２】
請求項８記載の発明は、仕切り手段により区画され、加圧されることで混合可能な試料及び試薬を収容する複数の密封された小部屋を備えたことを特徴とする。
このように構成することで、複数の小部屋に必要に応じて試料、試薬を収容し、反応に際しては、仕切り手段を開放して小部屋を合体し、加圧して試料と試薬を反応させることが可能となる。
【００１３】
請求項９記載の発明は、基盤にチューブを接着する工程と、チューブ内に試薬または試料及び試薬を入れる工程と、仕切り手段により密封する工程と、チューブの開放端を密閉する工程とを有することを特徴とする。
【００１４】
請求項１０記載の発明は、基盤上に、試薬または試料及び試薬を配置する工程と、基盤と該試薬または試料及び試薬とをフィルムで覆う工程と、仕切り手段により密封する工程と、フィルムと基盤との間の開放端を閉塞する工程とを有することを特徴とする。
【００１５】
請求項１１記載の発明は、少なくともひとつの密封された小部屋に試料を充填する工程と、この試料が充填された小部屋と隣接する試薬が充填された小部屋との区画を開放する工程と、この試料が充填された小部屋を加圧して隣接する試薬用の小部屋内の試薬と混合させる工程と、この混合物を撹拌する工程とを有することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１６】
請求項１記載の発明によれば、複数の小部屋に必要に応じて試料、試薬を収容し、反応に際しては仕切り手段を開放して小部屋を合体し、試料と試薬を反応させることが可能となるため、製造が容易で簡単な構成とし、微量な試料で迅速且つ効果的に分析を行うことができるという効果がある。
【００１７】
請求項２及び３記載の発明によれば、収容部がチューブあるいはフィルム内に密封されることにより外部から覆われることになり、試薬及び試料の蒸発を防ぐとともに試薬及び試料を外部環境から確実に遮断することが可能となるため、貴重な試薬、試料の濃度変化、異物の混入による実験結果のばらつきをなくし実験精度を高めることができるという効果がある。
【００１８】
請求項４記載の発明によれば、基盤に凹部を設けることにより試薬または試料及び試薬を確実に凹部内に配置することが可能となるため、これらの小部屋への収容作業が容易となるという効果がある。
【００１９】
請求項５記載の発明によれば、チューブ内あるいはフィルムを接着部により自由に仕切ることが可能となるため、試料や試薬の量に応じて、小部屋の区画自由度を高めることができる効果がある。
【００２０】
請求項６記載の発明によれば、押圧具を開放することで必要な小部屋の合体が可能となるため、チューブあるいはフィルムの損傷を最小限に食い止めることができる効果がある。
【００２１】
請求項７記載の発明によれば、仕切り部分自体に、隣接する小部屋を仕切る機能と小部屋を合体する機能を併せ持たせることが可能となるため、一旦仕切り部分を形成しさえすれば、後においてこの仕切り部分を開放する作業が必要なくなるため実験工程を削減できる効果がある。
【００２２】
請求項８記載の発明によれば、複数の小部屋に必要に応じて試料、試薬を収容し、反応に際しては、仕切り手段を開放して小部屋を合体し、加圧して試料と試薬を反応させることが可能となるため、製造が容易で簡単な構成とし、微量な試料で迅速且つ効果的に分析を行うことができるという効果がある。
【００２３】
請求項９記載の発明によれば、微細な加工を必要とせず簡単に且つ確実に低コストで逐次移送式反応槽を製造することができる。
【００２４】
請求項１０記載の発明によれば、フィルムで覆う前に、基盤上に試薬または試料及び試薬を配置するため、試薬の注入が容易になるという効果がある。
【００２５】
請求項１１記載の発明によれば、区画された小部屋を合体させることを利用して、試料、試薬を移動、混合、撹拌させるものであるため、各々の試料の粘度の影響を受けず、確実に両者を混合等することが可能となり、したがって試験が短時間で簡単に行えるという効果がある。さらに、密封された小部屋内の試料は蒸発しないため、取り扱いが容易であるという効果がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】
以下、本発明の実施形態について、図面を参照して説明する。
図１は、本発明における第１の実施形態を示す図であって、本発明を適用した逐次移送式反応槽を示す。
前記逐次移送式反応槽（以下、チップと称する）１は、略長方形の板状基盤２の上に、全体として円筒状をなしているチューブ３と、接着剤４及び細板状のヒートシール４などの仕切り手段とを設けて構成されている。以下、ヒートシール４を仕切り手段として用いた場合で説明する。
【００２７】
この基盤２は、ガラス基板や金属板、ＰＣ（ポリカーボネート）、ＰＤＭＳ（ポリジメチルシロキサン）、ＰＭＭＡ（メタクリル樹脂）等からなり、その縦横寸法はチューブ３を配置可能なものとし、大きくても縦横１０ｃｍ程度の寸法とし、さらに作業中に容易に折れ曲がることのない厚みをもたせて形成される。そして基盤上面２ａに、前記チューブ３が基盤２の長手方向と平行となるように接着して設けられている。
【００２８】
前記チューブ３は、柔軟性を有する素材で円筒状に形成されており、内部が密封された収容部Ｓとして構成されるものであって、例えば、ＰＰ（ポリプロピレン）、ＰＥＴ（ポリエチレン・テレフタレート樹脂）、Ｎｙ（ナイロン）、ＰＣ（ポリカーボネート）、ＰＶＣ（ポリ塩化ビニール）、ＰＶＤＣ（ポリ塩化ビニリデン）等の単層フィルム、または、多層フィルムからなり、試薬６及び試料７を収容するためのものである。このチューブ３の径は、数１０μｍ〜数ｃｍであり、その長さは反応形態によって自由に調節可能なものとする。また厚さ寸法は、内部に試薬６または試料７を有し、外部から機械的に加圧あるいは指圧された場合にも破壊することのない厚さとする。
【００２９】
そして、チューブ３のどちらか一方の端部は、密閉されて逆止弁５が設けられており、他方の端部は密封されている。ここでヒートシール４（第１ヒートシール４ａ、第２ヒートシール４ｂ）は、チューブ３が押圧された場合に開放されるような弱い密着力で、且つ確実に溶着（矢印で示す）されるようになっている。
尚、逆止弁５を設けずに、チューブ３に孔を空けてシリンジ１７により試薬６または試料７を注入し、ヒートシール４で封印してもよい。
【００３０】
次に、第１実施形態の作用について説明する。
図１に示すように、前記チップ１の小部屋８に試料７、小部屋９に試薬６、小部屋１０に別の試薬６が充填された状態で、図２に示すように小部屋８に圧力を印加すると（矢印で示す）、前記第１ヒートシール４ａ（形成部位を鎖線で示す）が開放され、小部屋８内の試料７が小部屋９内の試薬６と混合される。次に、さらに一体となった小部屋８と小部屋９のいずれかの部位を間欠的に押圧すれば統一された両小部屋８、９の内部で試薬６と試料７とが撹拌される。この状態で必要に応じて反応等の観察を行う。さらに統一された両小部屋８、９に圧力を印加すると今度は第２ヒートシール４ｂが開放され、さらに小部屋１０がこれらに合体して全体が統一された部屋となり、新たに別の試薬６が混合される。そして、全体が一体となった小部屋８〜小部屋１０のいずれかの部位を間欠的に押圧すれば統一された両小部屋８〜小部屋１０の内部で別の試薬６と試料７とが撹拌される。この状態でこの別の試薬６による反応等の観察を行う。
【００３１】
上記第１実施形態によれば、複数の小部屋８に試料７を小部屋９と小部屋１０に異なる試薬６を収容し、圧力を印加することで簡単に第１ヒートシール４ａ、第２ヒートシール４ｂを開放して小部屋８〜小部屋１０を必要に応じて合体し、試薬６と試料７を反応させることが可能となるため、製造が容易で簡単な構成とし、微量な試薬６、試料７で迅速且つ効果的に分析を行うことができる。したがって、各々の試薬６及び試料７の粘度に影響を受けず調節作業が必要なくなる。
【００３２】
また、収容部Ｓがチューブ３内に密封されることにより外部から覆われることになり、試薬６及び試料７の蒸発を防ぐとともに試薬６及び試料７を外部環境から確実に遮断することが可能となるため、貴重な試薬６、試料７の濃度の変化、異物の混入による実験結果のばらつきをなくし実験精度を高めることができる。
【００３３】
ここで、第１ヒートシール４ａ、第２ヒートシール４ｂの位置は、自由に設定することができるため、試薬６や試料７の量に応じて、小部屋８〜小部屋１０の区画自由度を高めることができる。
【００３４】
このようにして、区画された小部屋８〜小部屋１０を合体させることを利用して、試薬６、試料７を移動、混合させるものであるため、各々の試薬６等の粘度の影響を受けず、確実に両者を混合し、試験時間を短くすることができ、さらに、密封された小部屋８〜小部屋１０内での試験により、試薬６等の蒸発を防止して、取り扱いの容易化を図ることができるのである。
【００３５】
次に、前記第１の実施形態のチップ１の製造方法について説明する。
まず、図３の矢印で示すように、基盤２の上面２ａに、チューブ３の一部を超音波あるいは熱により溶着して強い接着力のヒートシール４０を形成し、チューブ３を固定する。または、接着剤を用いて基盤２の上面２ａにチューブ３を固定する。
次に、図４に示すように、逆止弁５がある側に超音波あるいは熱により、チューブ３の幅方向に横断する向きに第１のヒートシール４ａを形成して、ここに小部屋８を密封して設ける。そして、矢印で示すようにチューブ３の開放端側から試薬６を入れ、所定間隔を隔てて再度第２ヒートシール４ｂを形成して小部屋９を密封して設ける。ここで、この第１ヒートシール４ａと第２ヒートシール４ｂは、弱い接着力となっている。
次に、第２ヒートシール４ｂとチューブ３の開放端との間に別の試薬６を入れ、チューブ３の開放端をヒートシール４で閉塞する。チップ１を使用するにあたっては、逆止弁５から小部屋８内に試料７を注入すればよい。
したがって、この製造方法によれば、微細な加工を必要とせず簡単に且つ確実に低コストでチップ１を製造することができる。
ここで、試薬６等を入れるのに先立って予め小部屋を形成し、孔を空けて試薬６等を各小部屋に注入し、この孔とチューブ３の開放端を閉塞する方法も採用できる。
【００３６】
次に、本発明の第２の実施形態を図５、図６に基づいて説明する。尚、上記第１の実施形態と同一構成要素には同一符号を付してその説明を省略し、相違点を中心に説明する。
第２の実施形態のチップ１‘は、前記第１の実施形態のヒートシール４に変えて、例えば金属棒またはロール１２（仕切り手段）等を用いたものである。具体的には、第１のロール１２ａにより、チューブ３を基盤２に押し付けてチューブ３内を圧着し、小部屋８と小部屋９とを仕切り、第２のロール１２ｂにより、同様に、チューブ３を基盤２に押し付けてチューブ３内を圧着し、小部屋９と小部屋１０とを仕切るものである。一方このロール１２のいずれか一方の押圧を解除すれば、隣接する小部屋は合体して各小部屋内の試薬６等は混合されることとなる。また、各ロール１２は、基盤２の上面２ａからやや上方に離隔してチューブ３を押圧した状態で、チューブ３の長手方向に沿って移動させることで撹拌操作なども同時に行うこともできる。
したがって、第２の実施形態によれば、ロール１２を開放することで必要な小部屋の合体が可能となるため、チューブ３の損傷を最小限に食い止めることができる。
【００３７】
次に、本発明の第３の実施形態を図７〜図９に基づいて説明する。尚、上記第１の実施形態と同一構成要素には同一符号を付してその説明を省略し、相違点を中心に説明する。
第３の実施形態のチップ２０は、基盤２と、この基盤２の上面２ａを覆うフィルム１４で構成されている。具体的にはチューブ３同様、上記した材料の単層フィルム、または、多層フィルムからなる。そして、フィルム１４の径は、数１０μｍ〜数ｃｍであり、その長さは反応形態によって自由に調節可能なものとする。
また、基盤２の上面ａの周囲にフィルム１４の周縁がヒートシール１４ａにより溶着され、基盤２の上面２ａとフィルム１４との間に、密封された収容部Ｓが形成されている。
または、接着剤を用いて、基盤２の上面２ａとフィルム１４とを接着することにより、密封された収容部Ｓが形成されている。
前記基盤２の上面２ａは試薬６等を配置するための凹部１３が形成され、この凹部１３は、固体及び液体等の試薬６が配置可能な形状となっている。この実施形態では、３つの凹部１３が形成されている。前記収容部Ｓの一方の端部には逆止弁５が設けられている。そして基盤２の各凹部１３との間を仕切るようにヒートシール４が設けられ、収容部Ｓ内に複数の小部屋（例えば３つ）８、９、１０が区画形成されている。
この第３の実施形態によれば、固体及び液体の試薬６を確実に凹部１３内に配置することが可能となるため、試薬６の各小部屋への収容作業が容易となる。
【００３８】
次に、第３の実施形態の製造方法について説明する。チップ２０は、図７〜図９に示すように、基盤２の上面２ａに、機械加工によって複数の凹部１３（ここでは３つ）を形成し、各凹部１３に各々の試薬６等を充填させて、その試薬６及び基盤２を覆うようにフィルム１４の周縁をヒートシール１４ａによって密封し収容部Ｓを形成する。その後、ヒートシール４を用いてフィルム１４の内部と各凹部１３の間の基盤２を熱癒着させて各小部屋８〜小部屋１０を区画形成する。
第３の実施形態の製造方法によれば、微細な加工を必要とせず簡単且つ確実に低コストでチップ２０を製造することができる。
【００３９】
次に、本発明の第４の実施形態を図１０に基づいて説明する。尚、上記第１の実施形態と同一構成要素には同一符号を付してその説明を省略し、相違点を中心に説明する。
第１の実施形態のヒートシール４は、チューブ３の幅方向に横断する向きの全幅に渡って形成されているのに対して、第４の実施形態のチップ３０は、加圧されることで流通可能な微細な隙間ｃ（仕切り手段）を残した第１ヒートシール４ｃ、第２ヒートシール４ｄが形成されたものである。したがって、第１ヒートシール４ｃ、第２ヒートシール４ｄにより、圧力が掛からない通常状態では、小部屋８〜小部屋１０は区画されることとなり、圧力が作用すると隙間ｃにより各小部屋間で試薬６等が流通できる。
したがって、第４の実施形態によれば、第１のヒートシール４ｃ、第２ヒートシール４ｄ自体に、隣接する小部屋を仕切る機能と小部屋を合体する機能を併せ持たせることが可能となるため、一旦第１のヒートシール４ｃ、第２ヒートシール４ｄを形成しさえすれば、後においてこの第１のヒートシール４ｃ、第２ヒートシール４ｄを開放する作業が必要なくなるため試験工程を削減できる。
【００４０】
図１１から図１５に基づいて上述したチップを実際に試験に用いる場合について、説明する。
尚、実際の試験では、チップ１は、後述する検査装置１８にセットされて用いられるが、以下の説明では試料の注入から検出までを簡単に説明する。ここで試料７とは、血液、抽出試料、ＰＣＲ産物等である。
まず、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）産物の確認について説明する。
図１１に示すように、第１の小部屋８に、逆止弁５からシリンジ１７を用いて試料７を注入する。尚、図示都合上逆支弁５については符号のみを示し、図示は省略する。次に、注入が完了した後、図１２の矢印で示すように圧力を掛けることによって、弱めに接着されていたヒートシール４が破線で示すように開放され、区画されていた第１の小部屋８及び第２の小部屋９とを統一させる。チューブ３の第２の小部屋９には、例えばポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）用試薬の凍結乾燥もしくは液体試薬が試薬として充填されているものとする。このとき撹拌が必要な場合は、超音波、振動、回転及び後述するロール１２等によって撹拌を行う。次に、図１３に示すように、全体をヒートブロックにより加熱冷却し、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う。反応終了後、図１４、図１５に示すように、再び圧力を掛けて、蛍光試薬が充填されている第３の小部屋（検出部）１０と統一させ、ＰＣＲ反応溶液と検出溶液とを混合し、ＰＣＲ産物を蛍光検出により確認する。
尚、検出方法はこれに限った方法だけではなく、比色、化学発光、沈殿、発熱、ＲＩ法等も利用することができる。
【００４１】
次に、抗体抗原反応による抗原検出について説明する。尚、実質的な手順は前記ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）産物の確認と同様であるので、図１１から図１５を援用して説明する。
まず、３０ｍｍ×７０ｍｍの長方形状の基盤上に、長さ２５ｍｍ、径５ｍｍのチューブを設置した、チップ１を用意する。前記チューブは、第１の小部屋８、第２の小部屋９、第３の小部屋１０の長さが、それぞれ５ｍｍ、１０ｍｍ、１０ｍｍとなるようにヒートシール４を用いて仕切られている。そして、チップ１の第２の小部屋９には、ＤＮＡ分解酵素と界面活性剤等が充填され、さらに第３の小部屋１０には検出したい抗原に対する抗体が充填されている。ここで、例えばＤＮＡ分解酵素と界面活性剤とは合わせて５０マイクロリットルであり、具体的には、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ＰＨ７．４）、２ｍＭ  ＮａＣｌ（塩化ナトリウム）、１０ｍＭ  ＥＤＴＡ、２％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、２％  ＤＯＣ、０．２％  ＳＤＳ、２％  Ｔｒａｓｙｌｏｌ  からなっている。
図１１に示すように、第１の小部屋８に、逆止弁５からシリンジ１７を用いて、試料７を注入する。次に、注入が完了した後、図１２の矢印で示すように圧力を掛けることによって、弱めに接着されていたヒートシール４が破線で示すように開放され、区画されていた第１の小部屋８及び第２の小部屋９とを統一させた後、超音波、振動、回転及び後述するロール１２等のいずれかの方法によって、図１３に示すように（この例では、ヒートブロックは行わない）撹拌を行う。撹拌終了後、上述したように、統一された第１の小部屋と第２の小部屋９に再び圧力を掛けて、第３の小部屋１０（検出部）との間に介在するヒートシール４を開放し、図１４の破線で示すように、開放された区画部分から反応液を移動させて第３の小部屋１０（検出部）と統一し、図１５にて抗原抗体反応を行う。ここで、凝集が起これば試料中に目的の抗原が含まれると判断することができるので、沈殿方法により抗原検出を行う。
【００４２】
次に、酵素活性測定について同様に図１１から図１５を援用して説明する。
チップ１の第２の小部屋９には、ＤＮＡ分解酵素と界面活性剤等が充填されている。そして、第３の小部屋１０（検出部）には、酵素反応により、例えば蛍光色素とクエンチャーを標識したペプチドであれば、プロテアーゼによりクエンチャー蛍光色素がはずれ、発色する蛍光試薬が充填されている。
この場合においても、第１の小部屋８の逆止弁５からシリンジ１７を用いて試料７を注入する（図１１）。注入が完了した後、図１２の矢印で示すように圧力を掛けることによって、弱めに接着されていたヒートシール４が破線で示すように開放され、開放された区画部分から試薬６及び試料７を移動させる（図１３）。第１の小部屋８及び第２の小部屋９とを統一させた後、超音波、振動、回転及び後述するロール１２等のいずれかの方法によって撹拌を行う。このとき、試料７の溶解も含まれる。撹拌及び試料７の溶解が終了した後、上述したように、再び圧力を掛けてヒートシール４を開放する（図１４）。そして、第３の小部屋１０（検出部）と統一して（図１５）反応液を移動させ、標識したペプチドあるいは蛋白質を切断するプロテアーゼの測定を行う。
尚、酵素と基質の組み合わせにより種々の酵素活性測定を行うことができる。
【００４３】
次に、図１６に基づいて、チップ１がセットされる検査装置（以下、キットと称する）１８について簡単に説明する。同図において、キット１８は、チップ１を装着するための装着部Ａ、試薬６及び試料７を充填するための充填部Ｂ、第１加圧部Ｃ、加熱部Ｄ、第２加圧部Ｅ、表示部Ｆを備えている。
試薬６を充填し各小部屋に区画されたチップ１は、まず装着部Ａにセットされる。そして、充填部Ｂより試料７が充填され、第１加圧部Ｃに移動して第１の小部屋に圧力を掛けて、第２の小部屋と統一させる。その後、加熱が必要とされる検査には、加熱部Ｄに移動して全体の加熱が行われる。このとき撹拌が必要な場合には、撹拌が同時に行われる。さらに、第２加圧部Ｅで、統一された第１の小部屋及び第２の小部屋に圧力を掛けて、第３の小部屋と統一させ、表示部Ｆにおいて観察する。
また、キット１８には、場合によってはロール１２を設けてもよく、試薬６の充填及び区画形成されていない状態でチップ１をキット１８の装着部Ａに装着した後、ロール１２の押圧によって区画形成される。そして、充填部Ｂからチューブ３に設けられた逆止弁５を通して試薬６及び試料７が各小部屋に充填される。その後、ロール１２を移動させることにより隣接した小部屋が統一され、同時に試薬６及び試料７が撹拌される。
ここで、キット１８内を移動するチップ１は、上述した順番通りに行われるものではなく、検査内容に応じて任意の各部に移動することができる。尚、このキット１８で、前記チップ１のヒートシール４をも形成できるようにしてもよい。
【００４４】
本発明は、上記実施形態に限定されるものではなく、以下のような様々な態様が採用可能である。基盤２の上面２ａは必ずしも平滑である必要はなく、チューブ３を基盤２に安定させるためにチューブ３の形状に合わせてくぼみを設けて形成してもよく、チューブ３の形状は円筒状としたが、これに限られたものではない。また、最終的な反応を行う小部屋（ここでは、第３の小部屋１０）、つまり検出部に限らず、どの小部屋も反応形態によって大きさを変えることが可能である。検出部への試料の移動は、加圧させて行うのではなく、真空引きにしてもよい。あるいは、予め最後の検出部のみ減圧状態にしておくことも可能である。この最後の検出部の位置は、決められたものではなく、例えば、中央の小部屋にしてもよい。さらに、測定する試薬６の数に応じて検出部が複数あってもよい。
また、チップ１を垂直に立てた状態で使用することもできるし、試薬６及び試料７の移動時のみ垂直にして使用してもよい。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】本発明における第１実施形態のチップを示す斜視図である。
【図２】本発明における第１実施形態の作用を説明する斜視図である。
【図３】本発明における第１実施形態のチップの製造方法を示す側面図である。
【図４】本発明における第１実施形態のチップの製造方法を示す側面図である。
【図５】本発明における第２実施形態のチップを示す斜視図である。
【図６】本発明における第２実施形態の作用を説明する斜視図である。
【図７】本発明における第３実施形態のチップを示す斜視図である。
【図８】本発明における第３実施形態の製造方法を示す説明図である。
【図９】本発明における第３実施形態の製造方法を示す説明図である。
【図１０】本発明における第４実施形態のチップを示す斜視図である。
【図１１】本発明の実施形態のチップを用いた試験例を示す説明図である。
【図１２】本発明の実施形態のチップを用いた試験例を示す説明図である。
【図１３】本発明の実施形態のチップを用いた試験例を示す説明図である。
【図１４】本発明の実施形態のチップを用いた試験例を示す説明図である。
【図１５】本発明の実施形態のチップを用いた試験例を示す説明図である。
【図１６】本発明の実施形態のチップを装着するキットの概略構成図である。
【符号の説明】
【００４６】
２    基盤
２ａ  上面
３    チューブ
４    ヒートシール（仕切り手段）
６    試薬
７    試料
８、９、１０    小部屋
Ｓ    収容部
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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