(57)【要約】      （修正有）【課題】金属フタロシアニンの持つ酸化還元触媒機能を利用したアレルゲンの分解剤を用いたアレルゲン分解用繊維素材、及びアレルゲン分解機能を有する繊維製品を提供する。【解決手段】式（Ｉ）2006144219.tif 000023（式中、ＭはＦｅ、Ｃｏ、Ｍｎ、Ｔｉ、Ｖ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｏ、Ｗ、Ｏｓから選択される金属）で示されるアレルゲン分解剤が担持されている天然繊維、合成繊維、半合成繊維または再生繊維を含む綿、糸、織布、不織布、編物、または紙からなる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）
【化１】
2006144219.tif 000019
（式（Ｉ）中、ＭはＦｅ、Ｃｏ、Ｍｎ、Ｔｉ、Ｖ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｏ、Ｗ、Ｏｓから選択される金属）で示される金属フタロシアニンの誘導体を有効成分に含むアレルゲン分解剤が担持されている天然繊維、合成繊維、半合成繊維または再生繊維を含む綿、糸、織布、不織布、編物、または紙からなることを特徴とするアレルゲン分解用繊維素材。
【請求項２】
前記金属フタロシアニンの誘導体が、下記式（ＩＩ）
【化２】
2006144219.tif 000020
（式（ＩＩ）中、ＭはＦｅ、Ｃｏ、ＣｕおよびＮｉから選択される金属、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は同一または異なるＣＯＯＨ基またはＳＯ３Ｈ基であり、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は０〜４で１≦ｎ１＋ｎ２＋ｎ３＋ｎ４≦８を満たす正数）で示される化合物、またはその塩であることを特徴とする請求項１に記載のアレルゲン分解用繊維素材。
【請求項３】
下記式（Ｉ）
【化３】
2006144219.tif 000021
（式（Ｉ）中、ＭはＦｅ、Ｃｏ、Ｍｎ、Ｔｉ、Ｖ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｏ、Ｗ、Ｏｓから選択される金属）で示される金属フタロシアニンの誘導体を有効成分に含むアレルゲン分解剤が担持されている天然繊維、合成繊維、半合成繊維または再生繊維を含む綿、糸、織布、不織布、編物、または紙からなるアレルゲン分解用繊維素材を少なくとも一部に有して形づくられていることを特徴とするアレルゲン分解機能を有する繊維製品。
【請求項４】
前記金属フタロシアニンの誘導体が、下記式（ＩＩ）
【化４】
2006144219.tif 000022
（式（ＩＩ）中、ＭはＦｅ、Ｃｏ、ＣｕおよびＮｉから選択される金属、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は同一または異なるＣＯＯＨ基またはＳＯ３Ｈ基であり、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は０〜４で１≦ｎ１＋ｎ２＋ｎ３＋ｎ４≦８を満たす正数）で示される化合物、またはその塩であることを特徴とする請求項３に記載のアレルゲン分解機能を有する繊維製品。
【請求項５】
前記アレルゲン分解用繊維素材を少なくとも一部に含み、寝具、マスク、衣類、布団、カーテン、壁紙、カーペット、またはエアーフィルタに形づくられたことを特徴とする請求項３に記載のアレルゲン分解機能を有する繊維製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、金属フタロシアニンの誘導体を有効主成分としてアレルゲンを分解する薬剤を、担持させた繊維素材、及びそれから形づくられた繊維製品に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
アレルギー症状は、皮膚や、呼吸器、消化器からアレルゲンがヒトの身体に侵入すると、ヒトが生来的に持つ抗原抗体反応に誘発されて体内にヒスタミンやロイコトリエンなどの化学伝達物質が遊離したり、活性酸素が生ずるため、二次症状として発熱、発疹、そう痒、嘔吐、鼻炎などを発症する。このようなアレルギー症状は、アレルゲンの種類とヒトの各個体が持つ体質との組み合わせに依存して発症する。
【０００３】
アレルゲンは、例えばダニ、その死骸や排泄物、スギ・ブタクサ・カモガヤ等の花粉、細菌、かび、卵、牛乳、魚貝類、大豆、昆虫、獣毛、獣やヒトのフケなどの成分として含まれ、多くは蛋白質である。アレルギー症状に効果を示す投薬剤は未だない現状において、アレルギー症状を発症させないためには、アレルギー体質を持つヒトからアレルゲンを遠ざけることが肝要である。しかし、アレルゲンは、自然界に存在するものも数多く、ヒトが生活するに欠かせないものに付随していることもあるため、生活圏から全面的に取り除くことが極めて困難であり、実質上不可能である。
【０００４】
発生したアレルゲンを除去する手段として、特許文献１には、抗アレルゲンフィルターが示されている。フィルターに茶の抽出成分である茶ポリフェノールをアレルギー不活性剤として添着している。特許文献２には、アレルゲンと反応して不活性化させるジルコニウム塩を含有させた綿、麻、羊毛、絹、レーヨン、ナイロン、ポリエステル、アクリル等の抗アレルゲン繊維、および寝具、マスク、カーテン等の繊維製品が示されている。
【０００５】
また、繊維製品のダニを防除する手段として防ダニ剤処理が知られている。防ダニ剤は、少量では忌避効果しか期待できず、ダニを殺虫するには多量用いる必要があり、ヒトへの安全性上その使用量に制限がある。しかも防ダニ剤は、ダニの死骸や排泄物等のダニ由来のアレルゲンによって発症するアレルギー症状に対して、何ら抑制効果が認められない。
【０００６】
水鳥の羽毛製品は、保温性と保湿性と通気性とに優れているので、寝具や衣類の素材として汎用されている。羽毛製品は、動物性蛋白質である羽毛がダニの餌であるうえ、ヒトの発汗等による水分を適度に吸収し、ヒトの体温で適度に暖められていて、ダニが増殖する環境となっているので、ダニ由来のアレルゲン量が著しく増大し易い。防ダニ剤で処理されておらず、安全で、ダニ由来のアレルゲンを吸着する効果を有する抗アレルゲン羽毛は知られていない。
【０００７】
一方、特許文献３、特許文献４には、金属フタロシアニンを有効成分とする消臭剤が開示されている。特許文献４には金属フタロシアニンの誘導体が酸化還元触媒として作用して消臭剤としての効果を示す旨が記載されている。
【０００８】
【特許文献１】特開２０００−５５３１号公報
【特許文献２】特開２００１−２１４３６７号公報
【特許文献３】特開昭５６−６３３５５号公報
【特許文献４】特開昭６１−２５８８０６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の発明者は、金属フタロシアニンの酵素様触媒作用を永年に渡って研究し、その吸着性や酸化還元触媒機能によって蛋白質を変性させることを見出した。アレルゲンの発生を全面的に取り除くことは極めて困難であることに鑑みて、本発明は、金属フタロシアニンの持つそのような特性を利用したアレルゲンの分解剤を用いたアレルゲン分解用繊維素材、及びアレルゲン分解機能を有する繊維製品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
前記の目的を達成するためになされた、特許請求の範囲の請求項１に記載されたアレルゲン分解用繊維素材は、下記式（Ｉ）
【化１】
2006144219.tif 000002
（式（Ｉ）中、ＭはＦｅ、Ｃｏ、Ｍｎ、Ｔｉ、Ｖ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｏ、Ｗ、Ｏｓから選択される金属）で示される金属フタロシアニンの誘導体を有効成分に含むアレルゲン分解剤が担持されている天然繊維、合成繊維、半合成繊維または再生繊維を含む綿、糸、織布、不織布、編物、または紙からなることを特徴とする。
【００１１】
請求項２に記載のアレルゲン分解用繊維素材は、請求項１に記載された構成を具備し、前記金属フタロシアニンの誘導体が、下記式（ＩＩ）
【化２】
2006144219.tif 000003
（式（ＩＩ）中、ＭはＦｅ、Ｃｏ、ＣｕおよびＮｉから選択される金属、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は同一または異なるＣＯＯＨ基またはＳＯ３Ｈ基であり、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は０〜４で１≦ｎ１＋ｎ２＋ｎ３＋ｎ４≦８を満たす正数）で示される化合物、またはその塩であることを特徴とする。
【００１２】
請求項３に記載のアレルゲン分解機能を有する繊維製品は、下記式（Ｉ）
【化３】
2006144219.tif 000004
（式（Ｉ）中、ＭはＦｅ、Ｃｏ、Ｍｎ、Ｔｉ、Ｖ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｏ、Ｗ、Ｏｓから選択される金属）で示される金属フタロシアニンの誘導体を有効成分に含むアレルゲン分解剤が担持されている天然繊維、合成繊維、半合成繊維または再生繊維を含む綿、糸、織布、不織布、編物、または紙からなるアレルゲン分解用繊維素材を少なくとも一部に有して形づくられていることを特徴とする。
【００１３】
請求項４に記載のアレルゲン分解機能を有する繊維製品は、請求項３に記載された構成を具備し、前記金属フタロシアニンの誘導体が、下記式（ＩＩ）
【化４】
2006144219.tif 000005
（式（ＩＩ）中、ＭはＦｅ、Ｃｏ、ＣｕおよびＮｉから選択される金属、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は同一または異なるＣＯＯＨ基またはＳＯ３Ｈ基であり、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は０〜４で１≦ｎ１＋ｎ２＋ｎ３＋ｎ４≦８を満たす正数）で示される化合物、またはその塩であることを特徴とする。
【００１４】
請求項５に記載のアレルゲン分解機能を有する繊維製品は、請求項３に記載された構成を具備し、前記アレルゲン分解用繊維素材を少なくとも一部に含み、寝具、マスク、衣類、布団、カーテン、壁紙、カーペット、またはエアーフィルタに形づくられたことを特徴とする。
【発明の効果】
【００１５】
アレルゲン分解剤の有効成分である金属フタロシアニンの誘導体は、その中心金属に、アレルゲンの蛋白質を配位し、空気中の酸素酸化によってペプチド結合を切るので、低分子化させたり、分子構造を変化させたりする。金属フタロシアニンの誘導体は、アレルゲンを単に吸着するだけではなく、分解触媒として作用するので、その作用が永続的である。アレルゲンはヒトの身体に侵入し、その分子構造によってヒトが持つ抗体に特異的に結合しアレルギ−症状を示すが、アレルゲンが低分子化したり、アレルゲンの分子構造が変化したりしていると、それまで反応していた抗体に結合することがない。
【００１６】
生活環境内にあるアレルゲンは、この分解剤によって多くが分解され、僅かな残余がアレルギー体質を持つヒト身体内に入ってもアレルギー症状を発症する閾値まで濃度が到達しない。そのため、アレルゲンの分解剤が生活環境内に置かれていれば、アレルギー体質を持つヒトであっても発症することなく日常生活を送ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
以下に、実施例を用いて本発明を更に具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００１８】
アレルゲンの分解剤は、前記金属フタロシアニンの誘導体が、金属フタロシアニンジカルボン酸、金属フタロシアニンテトラカルボン酸、金属フタロシアニンオクタカルボン酸、金属フタロシアニンジスルホン酸、金属フタロシアニンテトラスルホン酸、金属フタロシアニンオクタスルホン酸、またはこれら酸の塩であると好ましい。
【００１９】
金属フタロシアニンジカルボン酸の構造式は、下記式（ＩＩＩ）
【化５】
2006144219.tif 000006
【００２０】
金属フタロシアニンテトラカルボン酸の構造式は、下記式（ＩＶ）
【化６】
2006144219.tif 000007
【００２１】
金属フタロシアニンオクタカルボン酸の構造式は、下記式（Ｖ）
【化７】
2006144219.tif 000008
【００２２】
金属フタロシアニンジスルホン酸の構造式は、下記式（ＶＩ）
【化８】
2006144219.tif 000009
【００２３】
金属フタロシアニンテトラスルホン酸の構造式は、下記式（ＶＩＩ）
【化９】
2006144219.tif 000010
【００２４】
金属フタロシアニンオクタスルホン酸の構造式は、下記式（ＶＩＩＩ）
【化１０】
2006144219.tif 000011
で例示される。
【００２５】
アレルゲンの分解剤、およびアレルゲンの分解方法について説明する。
【００２６】
アレルゲンの分解剤は、前記式（Ｉ）で示される金属フタロシアニンの誘導体を有効成分に含み、Ｍは前記した金属から選択されるものであるが、なかでもＦｅ、ＣｏまたはＣｕが好ましい。最も好ましいものは、鉄フタロシアニンテトラカルボン酸である。
【００２７】
化学式（ＩＩ）の金属フタロシアニン化合物またはその塩は、市販のものであってもよく、公知の方法により製造したものであってもよい。例えば、「フタロシアニン  −化学と機能−」（白井汪芳、小林長夫著、株式会社アイピーシー出版、平成９年２月２８日発行）に記載の方法により、製造することができる。例えば、鉄フタロシアニンテトラカルボン酸は、以下のようにして得ることができる。ニトロベンゼンにトリメリット酸無水物と、尿素と、モリブデン酸アンモニウムと、塩化第二鉄無水物とを加えて撹拌し、加熱還流させて沈殿物を得る。得られた沈殿物にアルカリを加えて加水分解し、次いで酸を加えて酸性にすることで得られる。コバルトフタロシアニンオクタカルボン酸は、上記鉄フタロシアニンテトラカルボン酸の原料であるトリメリット酸無水物に代えてピロメリット酸無水物、塩化第二鉄無水物に代えて塩化第二コバルトを用いて同様の方法で製造可能である。
【００２８】
金属フタロシアニンの誘導体は、有機物、無機物の担体に担持または混合してアレルゲンの分解剤とすることが好ましい。有機物の担体としては繊維が特に好ましい。繊維は、嵩量があり大きな表面積を持つため、金属フタロシアニン或いはその誘導体が効率よく空気中のアレルゲンに接触する。
【００２９】
繊維素材は、例えばセルロース系繊維（木綿、麻、レーヨンなど）、蛋白質系繊維（羊毛、絹など）、ポリアミド系繊維、ポリエステル系繊維、ポリアクリル系繊維、ポバール系繊維、ポリ塩化ビニル系繊維、ポリ塩化ビニリデン系繊維、ポリオレフィン系繊維、ポリウレタン系繊維などあらゆる天然繊維、再生繊維、半合成繊維、合成繊維が使用される。なかでもセルロース系繊維、特に木綿は、吸水性が良いため、吸水した培地として酵素様機能を発現するための好条件をそなえている。
【００３０】
前記金属フタロシアニンの誘導体を有効成分に含むアレルゲンの分解剤を担持した繊維素材を生活環境内に置き、蛋白質由来のアレルゲンを分解する。
【００３１】
アレルゲンの分解剤を担持した繊維は、衣類や布団としてアレルギー体質を持つヒトの身体をアレルゲンから隔離しつつアレルゲンを分解し、カーテンとして屋外から進入するアレルゲンを遮断しつつ分解し、壁紙やカーペットとして浮遊或いは落ちているアレルゲンを分解し、エアーフィルタとして通過するアレルゲンを分解する。
【００３２】
抗アレルゲン羽毛は、前記の金属フタロシアニンの誘導体が羽毛に担持されている。これに用いられる前記式（ＩＩ）で示される金属フタロシアニンの誘導体は、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、ＳＯ３Ｈ基であり、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４が、１であることが好ましい。同じく式中、ＭがＣｏまたはＦｅであることが好ましい。
【００３３】
抗アレルゲン羽毛は、前記金属フタロシアニンの誘導体が前記式（ＩＩ）で示される化合物のナトリウム塩または銅（ＩＩ）塩であると好ましい。
【００３４】
抗アレルゲン羽毛は、前記金属フタロシアニンの誘導体の担持量が、前記羽毛の重量に対して、０．１質量％以上１０質量％以下であると好ましい。
【００３５】
この抗アレルゲン羽毛、それを含んでいる組成物や羽毛製品は、防ダニ剤で処理されておらず、かつ、ダニ自体のみならず、ダニの死骸や排泄物等のダニ由来のアレルゲンを吸着する効果を有する。従って、ダニ由来のアレルゲンを除去することが可能である。
【実施例】
【００３６】
以下、実施例１によりアレルゲンの分解剤および分解方法を更に具体的に説明する。
【００３７】
（実施例１）
アレルゲン分解剤の有効性を確かめるため、金属フタロシアニンの誘導体として鉄フタロシアニンテトラカルボン酸につき、試験管実験による薬効の確認と動物実験、その他の実験による安全性の確認をおこなった。
【００３８】
（薬効の確認）
アレルゲンとしてダニ抗原ＤｅｒｆＩＩ（アサヒビール株式会社製）を選び、このダニアレルゲンを鉄フタロシアニンテトラカルボン酸と混合した場合の電気泳動と、アレルゲンのみの電気泳動を比較した。
【００３９】
１．溶液の調製
各実験調製例の所定濃度（ｗ／ｖ％）の鉄フタロシアニンテトラカルボン酸カリウム（Ｆｅ−Ｐｃ−ＣＯＯＫ）水溶液およびＤｅｒｆＩＩ溶液と、ＩＰＧ（Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ  ｐＨ  Ｇｒａｄｉｅｎｔ：  固定化ｐＨ勾配）バッファーを含んだ膨潤用ストック溶液（Ｕｒｅａ  ８ｍｏｌ／Ｌ、ＣＨＡＰＳ  ２ｗ／ｖ％、ＩＰＧ  Ｂｕｆｆｅｒ  ２％、Ｂｒｏｍｏｐｈｅｎｏｌ  ｂｌｕｅ  適量、蒸留水）との混合溶液を調製し、表４の実験調製例１〜４の試験溶液とした。
【００４０】
一方、ＤｅｒｆＩＩ溶液とＩＰＧバッファーを含んだ膨潤用ストック溶液との混合溶液を調製し、表４の比較調製例１〜４の試験溶液とした。
【００４１】
２．一次元電気泳動
一次元電気泳動用ゲルのフィルム（以下Ｓｔｒｉｐという）を２種類、Ｓｔｒｉｐ  ｐＨ４〜７およびＳｔｒｉｐ  ｐＨ３〜１０．５を用意し、各試験溶液に浸漬して乾燥防止のシリコンオイルを適量添加し、１０時間静置した。試験溶液から各Ｓｔｒｉｐを取り出して水洗し、一次元電気泳動装置にセットし、乾燥防止のシリコンオイルを添加し、一次元電気泳動を１６時間行った。
【００４２】
Ｓｔｒｉｐ  ｐＨ４〜７の一次元電気泳動プログラムは表１のとおりである。
【００４３】
【表１】
2006144219.tif 000012
【００４４】
Ｓｔｒｉｐ  ｐＨ３〜１０．５の一次元電気泳動プログラムは表２のとおりである。
【００４５】
【表２】
2006144219.tif 000013
【００４６】
３．二次元電気泳動（１次元電気泳動のＳｔｒｉｐが異なっても操作は同様）
一次元電気泳動の終了したＳｔｒｉｐを泳動装置より取り出し水洗した。ＳＤＳ（ｓｏｄｉｕｍ  ｄｏｄｅｃｙｌ  ｓｕｌｆａｔｅ：ドデシル硫酸ナトリウム）平衡化用バッファー（１．５ｍｏｌ／Ｌ  ｐＨ８．８  Ｔｒｉｓ−Ｃｌ  ５０ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｕｒｅａ  ６ｍｏｌ／Ｌ、８７ｖ／ｖ％  Ｇｌｙｃｅｒｏｌ  ３０ｖ／ｖ％、ＳＤＳ  ２ｖ／ｖ％、Ｂｒｏｍｏｐｈｅｎｏｌ  ｂｌｕｅ  適量、蒸留水）にＤＴＴ（ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌ：ジチオトレイトール）１００ｍｇ／１０ｍＬを加えた溶液１０ｍＬにＳｔｒｉｐを浸漬し１０分間浸透させた。Ｓｔｒｉｐ  を取り出し、ＳＤＳ平衡化用バッファーにｉｏｄｏａｃｅｔａｍｉｄｅ（２５０ｍｇ／１０ｍＬ）を加えた溶液１０ｍＬに浸漬し１０分間浸透させた。Ｓｔｒｉｐ  を取り出して水洗しふき取った後、二次元電気泳動ゲル、ろ紙、電極ゲル、分子量マーカーをセットした二次元電気泳動装置に取り付け、１時間４０分電気泳動を行った。
【００４７】
二次元電気泳動プログラムは表３のとおりである。
【００４８】
【表３】
2006144219.tif 000014
【００４９】
４．染色、撮影
資料の作成には、Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ製のＳｉｌｖｅｒ  Ｓｔａｉｎｉｎｇ  Ｋｉｔ，  Ｐｒｏｔｅｉｎを使用した。
【００５０】
固定用溶液（エタノール１００ｍＬ，  酢酸２５ｍＬ，  蒸留水で２５０ｍＬにメスアップ）に二次元電気泳動ゲルを浸漬し３０分間浸透させた。増感用溶液（エタノール７５ｍＬ、２５ｗ／ｖ％グルタルアルデヒド１．２５ｍＬ、５ｗ／ｖ％チオ硫酸ナトリウム１０ｍＬ、酢酸ナトリウム１７ｇ、蒸留水で２５０ｍＬにメスアップ）に二次元電気泳動ゲルを浸漬し３０分間浸透させた。蒸留水２５０ｍＬに二次元電気泳動ゲルを浸漬し５分間浸透させる洗浄を３回繰返した。銀反応用溶液（２．５ｗ／ｖ％酢酸銀溶液２５ｍＬ，  ３７ｗ／ｖ％ホルムアルデヒド０．１ｍＬ，  蒸留水で２５０ｍＬにメスアップ）に二次元電気泳動ゲルを浸漬し２０分間浸透させた。蒸留水２５０ｍＬに二次元電気泳動ゲルを浸漬し３０分間浸透させる洗浄を２回繰返した。現像用溶液（炭酸ナトリウム６．２５ｇ，  ３７ｗ／ｖ％ホルムアルデヒド０．０５ｍＬ，  蒸留水で２５０ｍＬにメスアップ）に二次元電気泳動ゲルを浸漬し２〜５分間浸透させた。停止用溶液（ＥＤＴＡ−Ｎａ２・２Ｈ２Ｏ  ３．６５ｇ，  蒸留水で２５０ｍＬにメスアップ）に二次元電気泳動ゲルを浸漬し１０分間浸透させた。蒸留水２５０ｍＬに二次元電気泳動ゲルを浸漬し５分間浸透させる洗浄を３回繰返した。
【００５１】
このようにして銀染色した二次元電気泳動ゲルを、ＡＴＴＯ社製Ｐｒｉｎｔｇｒａｐｈ−１電気泳動撮影装置にて撮影した。
【００５２】
各実験調製例の鉄フタロシアニンテトラカルボン酸カリウム水溶液の濃度とともに、一次元電気泳動のＳｔｒｉｐ  ｐＨ、二次元電気泳動のゲル勾配（ゲル中に含まれるポリアクリルアミドの濃度の勾配）、撮影した二次元電気泳動ゲルの写真が掲載されている図の番号を表４に示してある。
【００５３】
【表４】
2006144219.tif 000015
【００５４】
図１、図２、図３、図４の各写真で中央のスポット列は分子量マーカーで、分子量の目安となる。図１、図２、図３の写真における分子量マーカーのスポットは、下から順に１４．４、２０．１、３０、４５、６６、９７ＫＤａ（Ｋｉｒｏ  Ｄａｌｔｏｎ）の分子量である。図４の写真における分子量マーカーのスポットは、下から順に３．５、６．５、１４．３、２０．１、３０、４５ＫＤａの分子量である。各写真の中央のスポット列で分けられるＡ、Ｂの各横軸は一次元電気泳動のＳｔｒｉｐ  ｐＨである。
【００５５】
各写真のＡにおけるスポットは鉄フタロシアニンテトラカルボン酸カリウムおよびダニアレルゲンを混合したもの、Ｂにおけるスポットはダニアレルゲンだけである。鉄フタロシアニンテトラカルボン酸カリウムによりダニアレルゲンの変化が無ければ、ＡとＢにおけるスポットは同様となるが、写真からＡではｐＨ５〜６付近のスポットが消失しており鉄フタロシアニンテトラカルボン酸カリウムによりダニアレルゲンが変化していることが分かる。
【００５６】
（安全性の確認）
アレルゲンの分解剤が、安全に使用できることを実証するために、鉄フタロシアニンテトラカルボン酸について以下の実験を行った。
【００５７】
１．ウサギに対する皮膚一次刺激性試験
鉄フタロシアニンテトラカルボン酸を１重量％含有するニット生地を、アレルゲン分解の機能性繊維の試料とした。
【００５８】
投与前日に健康で無傷な皮膚を有する１７週齢日本白色種雄性ウサギ（Ｋｂ１：ＪＷ（ＳＰＦ））６例を選択し、その背部を除毛し、４ヵ所の投与区分（１区分：２．５×２．５ｃｍ）を設定した。そのうち２ヵ所は正常皮膚、他の２ヵ所はシェーバーで軽く剃毛してからセロファンテープでストリッピングして損傷皮膚とした。正常皮膚と損傷皮膚の各１ヵ所に注射用水で湿らせた機能性繊維を貼付し、ガーゼを被せてからテーピングテープで固定した。他方は無処置部位とし、ガーゼとテーピングテープの貼付を同様に行った。さらに布製カバー及びチューブ型ネット包帯を用いて被覆固定した。２４時間後に機能性繊維、ガーゼ及びテーピングテープを除去し、投与部位を微温湯にて清拭した。
【００５９】
投与前、被験物質除去後１、２４、４８及び７２時間に肉眼的判定を行った。判定はＤｒａｉｚｅの判定基準（Ａｐｐｅｎｄｉｘ３）に準拠して、紅斑（痂皮形成）及び浮種についてそれぞれ評価した。正常皮膚と損傷皮膚に分けて、各観察時点に紅斑（痂皮形成）、浮種及びそれらの合計評点（ＴＳ）について平均値と標準偏差を算出した。また、ＩＳＯ１０９９３−１０の評価基準（Ａｐｐｅｎｄｉｘ３）に準じて、正常皮膚と損傷皮膚について各々２４、４８及び７２時間の評価により一次刺激指数（紅斑（痂皮形成）と浮種の合計評点の平均値、ＰＩＩ）を算出し、得られた一次刺激指数から被験物質の刺激性の強度を判定した。
【００６０】
その結果、機能性繊維投与部位では、正常皮膚および損傷皮膚ともに全観察期間を通じて刺激性反応は全く認められなかった。機能性繊維のＰＩＩは正常皮膚及び損傷皮膚ともに０．０であり、刺激性への強度は「Ｎｅｇｌｉｇｉｂｌｅ」と判定され、機能性繊維の皮膚に対する安全性に問題はないと考えられる。
【００６１】
２．ウサギに対する皮膚累積刺激性試験
前記同一のアレルゲン分解の機能性繊維を試料とし、同様にウサギの損傷皮膚とした。正常皮膚と損傷皮膚の各１ヵ所に注射用水で湿らせた機能性繊維を貼付し、ガーゼを被せてからテーピングテープで固定した。他の各１ヵ所は無処置部位とし、ガーゼとテーピングテープの貼付を同様に行った。さらに布製カバー及びチューブ型ネット包帯を用いて被覆固定した。２３時間後に機能性繊維、ガーゼ及びテーピングテープを除去し、投与部位を微温湯にて清拭した。投与期間は２１日間とし、毎日の除去後１時間に刺激性を肉眼的に評価した。判定はＤｒａｉｚｅの判定基準に準拠して、紅斑（痂皮形成）及び浮種についてそれぞれ評価した。正常皮膚と損傷皮膚に分けて、各観察時点ごとに紅斑（痂皮形成）、浮種及びそれらの合計評点（ＴＳ）について平均値と標準偏差を算出した。投与期間終了後に動物をペントバルビタールナトリウム麻酔下で放血致死させ、各投与部位皮膚を１０％中性緩衝ホルマリン液で固定後、ＨＥ染色を施し病理組織学的検査を行った。
【００６２】
その結果、機能性繊維投与部位では、正常皮膚および損傷皮膚ともに全観察期間を通じて刺激性反応は全く認められなかった。病理組織学的検査においても変化はみられなかった。以上の結果より、機能性繊維の皮膚に対する安全性に問題はないと考えられる。
【００６３】
３．ウサギに対する眼粘膜刺激性試験
１０週齢の日本白色種雄性ウサギ各３匹からなる非洗浄群及び洗浄群の２群を設定した。ウサギは７日間の予備飼育の後、体重推移及び一般状態に異常のないことを確認した。また、投与前日に両眼について肉眼的に異常のないこと、フルオレセイン染色（フルオル試験紙、ロット番号３９９０８４９、ワイス・アイアースト  ラボラトリーズ、アメリカ）を施し、スリットランプ（ＳＬ−５型、興和（株））を用いて角膜に損傷のないことを確認して試験に供した。
【００６４】
各ウサギの右眼結膜嚢内に被験物質である鉄フタロシアニンテトラカルボン酸の粉末であって３００μｍのメッシュを１回通したもの１００ｍｇを入れ、約１秒間上下眼瞼を穏やかに合わせて保持した。洗浄群で投与の３０秒後に微温湯２３０〜３３０ｍＬを用いて結膜嚢内を洗浄し、被験物質を除去した。左眼は非洗浄群、洗浄群とも無処置とした。投与後１，２４，４８及び７２時間に角膜、虹彩及び結膜を無処置対照眼と比較しながら観察した。なお、非洗浄群では投与後７２時間においても刺激性反応が認められたため、２１日目まで観察期間を延長した。認められた所見はＤｒａｉｚｅ（Ａｐｐｅｎｄｉｘ３）の評価基準に従って判定し、Ｋａｙ  ａｎｄ  Ｃａｌａｎｄｒａ（Ａｐｐｅｎｄｉｘ４）の分類方法に従い刺激性を評価した。
【００６５】
非洗浄群では、全例に明らかな刺激性反応が発現し、角膜の混濁と表面粗造化、虹彩のうっ血、結膜の発赤、浮種、分泌物等が認められた。その他、被験物質による角膜と虹彩の着色（緑色）が認められた。これらの反応は投与後２４時間に最も強く発現した。その後は徐々に回復し、角膜と虹彩の反応が投与後７２時間までに、結膜の反応が１０日目までに消失した。なお、虹彩の着色のみは投与後２１日目まで継続して認められた。眼粘膜刺激性の評価はＭｏｄｅｒａｔｅｌｙ  ｉｒｒｉｔａｔｉｎｇであった。
【００６６】
洗浄群では、投与後１時間に全例の結膜に軽い発赤が認められたが、いずれも投与後２４時間には消失した。角膜と虹彩には変化が認められなかった。眼粘膜刺激性の評価はＰｒａｃｔｉｃａｌｌｙ  ｎｏｎｉｒｒｉｔａｉｎｇであった。鉄フタロシアニンテトラカルボン酸はウサギの眼粘膜に対してＭｏｄｅｒａｔｅｌｙ  ｉｒｒｉｔａｔｉｎｇ（Ｍ３）の刺激性を有するが、生じた刺激性反応は回復性があり、洗浄によりＰｒａｃｔｉｃａｌｌｙ  ｎｏｎｉｒｒｉｔａｉｎｇ（Ｐ）まで軽減されることが確認された。
【００６７】
４．ラットに対する抽出液の静脈投与
塩化ナトリウム８４４ｍｇ、塩化カリウム１２００ｍｇ、塩化カルシウム１４６ｍｇ、塩化マグネシウム５２ｍｇ、リン酸二カリウム３４２ｍｇ、精製水１０００ｍＬで調製した生理食塩液に、被験物質である機能性繊維を０．２ｇ／ｌｍＬの割合で浸し、オートクレーブ内で１２１±２℃で１時間抽出した後、２０〜３０℃に冷却し室温で保存し２４時間以内に使用した。
【００６８】
機能性繊維の生理食塩液抽出物の２０ｍＬ／ｋｇ（抽出に用いた機能性繊維換算で４ｇ／ｋｇ）を６週齢のＣｒｊ：ＣＤ（ＳＤ）ＩＧＳ（ＳＰＦ）ラット雌雄２６匹に２８日間反復静脈内投与した時の毒性を検討した。対照群には生理食塩液を投与した。その結果、死亡は認められなかった。
【００６９】
一般状態、体重推移、摂餌量推移、病理解剖学的検査及び病理組織学的検査では、機能性繊維生理食塩液抽出物投与の影響を示唆する変化は認められなかった。尿検査、血液学的検査、血液化学的検査及び器官重量では、対照群と比較し機能性繊維生理食塩液抽出物投与群に有意差を示した項目が散見されたが、バックグラウンドデータの範囲内の変動であることやその差を示唆する他の検査項目の変化を伴わないことなどから、いずれも毒性とは無関係な偶発的変化と考えられる。
【００７０】
以上のことから、機能性繊維生理食塩液抽出物は極めて毒性が低いと考えられ、今回の試験条件下における毒性学的な無毒性量は雌雄とも２０ｍＬ／ｋｇ（抽出に用いた機能性繊維換算で４ｇ／ｋｇ）を超えるものと推察された。
【００７１】
５．ラットに対する抽出液の単回経口投与毒性試験
５週齢のＣｒｊ：ＣＤ（ＳＤ）ＩＧＳ（ＳＰＦ）ラット雌雄各２６匹を１週間予備検疫飼育し、異常は認められなかったことから全数を試験に供した。予備飼育前に測定した体重を基準として層物連続無作為化法により各群に割り付けた。群に割り付けられなかった余剰動物は群分けした。投与時の週齢は雌雄とも６週齢、体重は雄が１７８〜１９７ｇ、雌が１２２〜１４２ｇであった。
【００７２】
塩化ナトリウム８４４ｍｇ、塩化カリウム１２００ｍｇ、塩化カルシウム１４６ｍｇ、塩化マグネシウム５２ｍｇ、リン酸二カリウム３４２ｍｇ、精製水１０００ｍＬで調製した人工唾液に、被験物質である機能性繊維を０．２ｇ／ｌｍＬの割合で浸し、オートクレーブ内で１２１±２℃で１時間抽出した。後２０〜３０℃に冷却し室温で保存し２４時間以内に投与した。
【００７３】
投与量は投与直前の体重を基準にして体重１ｋｇにつき抽出液を５０ｍＬとした。抽出液５０ｍＬは抽出した繊維に換算すると１０ｇに相当する。投与回数は１回とした。投与前日の夕方より１８時間以上絶食させた後、９：００〜１３：３０の間にディスポーザブルシリンジ及び経口ゾンデを用いて強制経口投与した。観察期間は投与後１４日間とした。
【００７４】
投与前及び投与後５、１５、３０分、１、２、４時間まで継続的に観察した。投与翌日からは毎日１回観察した。投与前及び投与後１、３、７、１０、１４日の９：００〜１２：００に体重測定した。観察期間終了時に、全例の頭部及び胸腹部の器官・組織を観察し異常の有無を確認した。
【００７５】
その結果、人工唾液抽出物投与群及び対照群の雌雄に死亡はみられなかった。投与後の一般状態観察では、人工唾液抽出物投与群及び対照群の雌雄には異常は認められなかった。人工唾液抽出物投与群の雌雄とも順調に体重増加し、対照群とほぼ同様の推移を示した。人工唾液抽出物投与群及び対照群の雌雄に病理解剖学的異常は認められなかった。
【００７６】
以上のことから、致死量は、機能性繊維に換算して１０ｇ／ｋｇ以上と推察された。
【００７７】
６．ラットに対する原体溶解液の単回経口投与毒性試験
５週齢のＣｒｊ：ＣＤ（ＳＤ）ＩＧＳ（ＳＰＦ）ラット雌雄各２６匹を１週間検疫飼育し、異常が認められなかったことから全数を試験に供した。検疫飼育の直前に測定した体重を基準として層物連続無作為化法により各群に割り付けた。群に割り付けられなかった余剰動物は群分け実施日に試験から除外し、安楽死させ処分した。投与時の週齢は雌雄とも６週齢、体重は雄が１７２〜１８６ｇ、雌が１３０〜１５１ｇであった。
【００７８】
投与直前に被験物質である鉄フタロシアニンテトラカルボン酸を必要量秤量し、１規定の水酸化ナトリウムでｐＨを１０．２に調製した精製水に溶解させた。溶解後に１規定の塩酸を用いてｐＨを７．１１に調製した後、鉄フタロシアニンテトラカルボン酸の最終濃度が１００ｍｇ／ｍＬになるように精製水でメスアップして投与液を調製した。医薬品毒性試験ガイドラインに準拠し、技術的に投与可能な最大用量として経口投与の場合の上限である２０００ｍｇ／ｋｇを被験物質の投与用量に設定した。その他、対照物質（日本薬局方精製水）を投与する対照群を設定し、試験群を計２群とした。各群には雌雄各１０匹を割り付けた。
【００７９】
投与液量は２０ｍＬ／ｋｇとし、投与日における投与直前の体重を基準に個別に算出した。投与回数は１回とした。投与直前の夕方より１８時間以上断食させた後、ディスポーザブルシリンジ（テルモ（株））及び経口ゾンデ（フチガミ器械店、ディスポーザブル経口ゾンデ）を用いて強制経口投与し、１４日間観察した。一般状態及び生死の観察は、投与前及び投与後５、１５、３０分、１、２、４時間まで継続的に観察した。投与翌日からは毎日１回観察した。体重測定は、投与前及び投与後１、３、７、１０、１４日の９：００〜１２：００に測定した。観察期間終了時に、全例の頭部及び胸腹部の器官・組織を観察し異常の有無を確認した。
【００８０】
その結果、被験物質投与群及び対照群の雌雄に死亡はみられなかった。投与後の一般状態観察では、被験物質投与群の雌雄全例に投与日の投与後２時間以降で液状緑色便がみられ、投与後１〜３日には緑色便が認められた。被験物質は濃緑色粉体で、便の緑色はこの固有色を反映したものである。対照群の雌雄には異常は認められなかった。被験物質投与群の雌雄とも順調に体重増加し、対照群とほぼ同様の推移を示した。また液状便は被験物質の大量投与による一過性の下痢症状と考えられ、いずれも毒性を示唆する所見とは考えられない。
【００８１】
観察期間中の死亡率から計数処理して概略の致死量を求めたところ鉄フタロシアニンテトラカルボン酸の本試験条件下における概略の最小致死量は２０００ｍｇ／ｋｇ以上と推察された。
【００８２】
７．モルモットに対する皮膚感作性試験
５週齢の雄性Ｃｒｊ；Ｈａｒｔｌｅｙ系モルモットを媒体対照群、被験物質感作群に分け、Ｍａｘｉｍｉｚａｔｉｏｎ法により機能性繊維の皮膚感作性について試験した。被験物質として細切した機能性繊維に１０倍量のメタノールを加えて室温にて抽出した後、メタノールを留去し、機能性繊維１５１．８８ｇから５．４８２ｇの抽出物が得られた。
【００８３】
媒体対照群においては、媒体対照であるジメチルスルホキシドを１０％の濃度で皮内感作し、ジメチルスルホキシドで経皮感作した後、１０％、１％及び０．１％機能性繊維メタノール抽出物並びにジメチルスルホキシドで惹起した。その結果、いずれの惹起部位においても皮膚反応はみられなかった。
【００８４】
被験物質感作群においては、機能性繊維メタノール抽出物を１０％の濃度で感作した後、１０％、１％及び０．１％機能性繊維メタノール抽出物並びに媒体対照で惹起した。その結果、１０％メタノール抽出物惹起部位に皮膚反応が散見され、同惹起部位における平均評価点及び陽性率は惹起後２４時間で０．７及び１０％、４８時間で１．４及び４０％であった。１％機能性繊維メタノール抽出物惹起部位においては評価点１の紅斑が散見されたが、陽性例はみられなかった。０．１％機能性繊維メタノール抽出物及び媒体対照惹起部位には皮膚反応はみられなかった。惹起後４８時間における陽性率より、機能性繊維メタノール抽出物は１０％の濃度での惹起により中等度（Ｇｒａｄｅ  ＩＩＩ）の皮膚感作性をもつと評価された。
【００８５】
陽性対照群においては、２，４−ジニトロクロロベンゼン（ＤＮＣＢ）を０．１％の濃度で感作した後、０．１％ＤＮＣＢ及びアセトンで惹起した。その結果、全例のＤＮＣＢ惹起部位に皮膚反応がみられ、惹起後４８時間における陽性率は１００％で、ＤＮＣＢは激しい（Ｇｒａｄｅ  Ｖ）皮膚感作性をもつと評価された。
【００８６】
各感作物質をアジュバントを併用して皮内投与し、７日後に各感作物質を４８時間閉塞貼付して経皮感作した。皮内投与後２１日に各惹起物質を２４時間皮膚に閉塞貼付して惹起し、除去後２４及び４８時間に皮膚反応を判定した。皮膚反応の判定基準は、紅斑及び痂皮について、紅斑なし０、わずかな紅斑１、明らかな紅斑２、中等度の紅斑３、強紅斑に痂皮が認められる４、である。浮種について、浮種なし０、わずかな浮種１、中等度の浮種２、強い浮種３、である。
【００８７】
以上より、機能性繊維メタノール抽出物はモルモットに対して皮膚感作性をもつものと考えられ、最低惹起濃度は１０％と考えられた。また、１０％の濃度の惹起での感作性の強さは中等度（ＧｒａｄｅＩＩＩ）と評定された。
【００８８】
８．モルモットに対する皮膚光感作性試験
７の皮膚感作性試験に使用した機能性繊維メタノール抽出物について、５週齢の雄性Ｃｒｊ：Ｈａｒｔｌｅｙ系モルモットを用い、Ａｄｊｕｖａｎｔ  ａｎｄ  Ｓｔｒｉｐ法により皮膚光感作性試験をした。各投与物質０．１ｍＬを除毛したモルモット背部に開放塗布し、３０分後より約１０．２Ｊｏｕｌｅｓ／ｃｍ２の紫外線を照射した。同様の処置を５日間連続して行い、光感作した。最終感光感作後１７日に各投与物質０．１ｍＬを除毛した背部皮膚の左右対称に開放塗布し、動物の右半分をアルミホイルで被覆して約１０．２Ｊｏｕｌｅｓ／ｃｍ２の紫外線を照射して光惹起した。光惹起後２４時間及び４８時間に皮膚反応を判定した。
【００８９】
被験物質光感作群については、機能性繊維のメタノール抽出物を１０％の濃度でジメチルスルホキシドに溶解して感作し、１％の濃度で惹起した。その結果、評点１の紅斑が散見されたが陽性例はみられず、全例が陰性と判定された。媒体対照群については、ジメチルスルホキシドで感作及び惹起した。その結果、いずれの惹起部位にも皮膚反応はみられなかった。陽性対照群については、６−メチルクマリン（６−ＭＣ）を５％の濃度で感作し、１％の濃度で惹起した。その結果、６−ＭＣ惹起部位の紫外線照射部位に評点２〜４の紅斑がみられ、全例が陽性と判定された。
【００９０】
以上より、機能性繊維のメタノール抽出物はモルモットに対し皮膚光感作性をもたないものと考えられた。
【００９１】
９．モルモットに対する光毒性試験
７の皮膚感作性試験に使用した機能性繊維メタノール抽出物について、５週齢の雄性Ｃｒｊ：Ｈｔｌｅｙ系モルモットに対し、Ｍｏｒｉｋａｗａらの方法により光毒性試験をした。被験物質投与群については１０％の濃度でジメチルスルホキシドに溶解した機能性繊維のメタノール抽出物を、媒体対照群についてはジメチルスルホキシドを、陽性対照群については０．０５％  ８−ｍｅｔｈｏｘｙｐｓｏｒａｌｅｎを、それぞれ投与物質として、除毛したモルモットの背部に各投与物質０．０３ｍＬを開放塗布した。開放塗布後３０分に約１１．２Ｊｏｕｌｅｓ／ｃｍ２の紫外線を照射した。照射後２４及び４８時間に皮膚反応を判定した。
【００９２】
その結果、被験物質投与群及び媒体対照群においては、紫外線照射部位と非照射部位いずれにおいても皮膚反応はみられず、全例が陰性と判定された。一方、陽性対照群においては、全例の紫外線照射部位において評点４の皮膚反応がみられた。
【００９３】
以上より、機能性繊維メタノール抽出物はモルモットに対し光毒性をもたないものと考えられた。
【００９４】
１０．細菌を用いる突然変異誘発能試験
ネズミチフス菌Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ  ＴＡ１００、ＴＡ１５３５、ＴＡ９８、ＴＡ１５３７及び大腸菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＷＰ２  ｕｖｒＡを使用して、機能性繊維のメタノール抽出物の突然変異誘発能の有無を検索した。メタノール抽出物は、細切した機能性繊維に１０倍量のメタノールを加え、室温で２４時間攪拌して抽出し、ロータリーエバポレーターでメタノールを留去した残留物である。
【００９５】
その結果、本被験物質処理による復帰変異コロニー数は、代謝活性化の有無にかかわらず塩基対置換型、フレームシフト型のいずれの菌株においても陰性対照と比較して２倍以上には増加せず、用量反応性も認められなかった。従って、機能性繊維のメタノール抽出物は、本試験条件下において突然変異誘発能を有さないと判断する。
【００９６】
１１．ほ乳類細胞を用いる染色体異常試験
機能性繊維のメタノール抽出物の染色体異常誘発性の有無を検索した。ＤＭＳＯを媒体として試験を実施した。細胞増殖抑制試験における被験物質の最高試験用量は、５．０ｍｇ／ｍＬとした。細胞増殖抑制試験の結果、５０％細胞増殖抑制濃度は、短時間処理の代謝活性化系非存在下（以下−Ｓ９ｍｉｘ法と略す）で、５．０ｍｇ／ｍＬ以上となった。また、短時間処理代謝活性化系存在下（以下＋Ｓ９ｍｉｘ法と略す）で、０．８４０ｍｇ／ｍＬとなった。被験物質の沈澱が、０．３１３ｍｇ／ｍＬ以上で認められた。したがって、染色体異常試験の試験用量は、−Ｓ９ｍｉｘ法の最高試験用量を０．３１３ｍｇ／ｍＬとし、公比２で希釈した３用量を設定した。また、＋Ｓ９ｍｉｘ法の最高試験用量を１．２５ｍｇ／ｍＬとし、公比２で希釈した４用量を設定した。
【００９７】
短時間処理法の結果、−Ｓ９ｍｉｘ法における染色体の構造異常を有する細胞及び倍数性細胞の出現頻度は、いずれの試験用量においても５％以下となった。しかしながら、＋Ｓ９ｍｉｘ法では染色体の構造異常を有する細胞の出現頻度が０．３１３ｍｇ／ｍＬ以上で用量依存性のある増加を示し、陽性となった。なお、短時間処理法の結果、陽性と判断したため連続処理法は実施しなかった。
【００９８】
各処理法における陽性対照群では、染色体の構造異常を有する細胞の出現頻度が適正な値を示したことから試験は適切に実施されたものと判断した。以上の結果から、当該被験物質にはチャイニーズ・ハムスター肺由来線維芽細胞（ＣＨＬ／ＩＵ細胞）に対する染色体異常誘発性があるものと判断した。
【００９９】
細胞増殖抑制試験は以下のとおりである。短時間処理法その１；−Ｓ９ｍｉｘ法は、直径６０ｍｍのプラスチック・シャーレ１枚あたり２×１０４個の細胞（培養液５．０ｍＬ）を播種し、３日間培養した。被験物質の最高試験用量は５．０ｍｇ／ｍＬとし、最高試験用量から公比２で希釈した計１０用量（０．０１０、０．０２０、０．０３９、０．０７８、０．１５６、０．３１３、０．６２５、１．２５、２．５及び５．０ｍｇ／ｍＬ）を設定した。陰性対照として媒体（ＤＭＳＯ）対照群を設けた。用量当たり１枚のシャーレに媒体または各試験用量用の被験液を５０μＬ加え、３７℃で６時間作用させた。作用後、シャーレの培養液を取り除き、生理食塩水で細胞を洗浄後、新しい培養液５ｍＬを加えた。さらに、１８時間培養を続けた。培養後、シャーレの培養液を除き、生理食塩水で細胞表面を洗浄後、１０％ホルマリン溶液で固定した。固定後、０．１％クリスタルバイオレット溶液で染色した。細胞の染色の濃淡から単層培養細胞密度計（モノセレータ、オリンパス光学工業（株））を用いて細胞増殖率を測定した。この際、媒体対照細胞の値を１００％とした。これより被験物質の５０％細胞増殖抑制濃度（概略値）を求めた。
【０１００】
短時間処理方法その２；＋Ｓ９ｍｉｘ法は、−Ｓ９ｍｉｘ法と同様に細胞を播種し、３日間培養した。用量当たりのシャーレ枚数及び被験物質の用量は、−Ｓ９ｍｉｘ法と同条件とした。シャーレから０．８３ｍＬの培養液をぬきとり、０．８３ｍＬのＳ９ｍｉｘを加え、Ｓ９ｍｉｘ希釈液（Ｓ９の最終濃度５％）とした。シャーレに媒体または各試験用量用の被験液を５０μＬ加え、３７℃で６時間作用させた。作用後の操作は、−Ｓ９ｍｉｘ法と同様とした。
【０１０１】
染色体異常試験は以下のとおりである。被験物質の試験用量は、細胞増殖抑制試験を行って決定した。細胞増殖抑制試験の結果、５０％細胞増殖抑制濃度は、短時間処理−Ｓ９ｍｉｘ法で、５．０ｍｇ／ｍＬ以上となった。また、短時間処理＋Ｓ９ｍｉｘ法では、０．８４０ｍｇ／ｍＬとなった。
被験物質の沈澱が、０．３１３ｍｇ／ｍＬ以上で認められた。
【０１０２】
以上の結果から、染色体異常試験における短時間処理法の試験用量は以下の通りとした。−Ｓ９ｍｉｘ法：０．０７８、０．１５６及び０．３１３ｍｇ／ｍＬ（公比２、３使用）。＋Ｓ９ｍｉｘ法：０．１５６、０．３１３、０．６２５及び１．２５ｍｇ／ｍＬ（公比２、４使用）。細胞増殖抑制試験の結果、被験物質の最高試験用量は、０．３１３ｍｇ／ｍＬとし、最高試験用量から公比２で希釈した計３用量を設定した。陰性対照として無処理及び媒体対照群を設け、陽性対照としてマイトマイシンＣ（０．０５μｇ／ｍＬ）処理群を設けた。
【０１０３】
その際、染色体標本用シャーレには細胞分裂を分裂中期で停止させるため、標本作製の２時間前にコルセミド（ＧＩＢＣＯ／Ｌｏｔ  Ｎｏ．１１２５５４６）を最終濃度０．２μｇ／ｍＬになるように加えた。２時間後、各シャーレの培養液をスピッツ管に移した。直ちに、各シャーレに０．２５％トリプシン溶液２ｍＬを加え、細胞を剥離後、前述のスピッツ管に回収し、遠心分離（１０００ｒｐｍ、５分）した。上清を捨て、０．０７５Ｍ塩化カリウム溶液を５ｍＬ加え、３７℃の恒温水槽中で１５分間低張処理後、０．５ｍＬの冷却固定液（冷却メタノールと酢酸を３：１に混合したもの）を加え半固定した後、直ちに遠心分離（１０００ｒｐｍ、５分）し、新しい固定液５ｍＬを加えた。同じ操作を３回繰り返し細胞を完全に固定した。固定した細胞を軽く濁る程度の細胞浮遊液に調製したあと、スライドグラスに滴下し、空気乾燥後、１．７％のギムザ液で約１５分間染色した。また、細胞増殖率用シャーレは前述の細胞増殖抑制試験と同様の方法で固定染色後、細胞増殖率を測定した。
【０１０４】
顕微鏡下で、各処理群当たり２００個（シャーレ当たり１００個）の良く拡がった分裂中期像を観察し、構造異常等の種類と異常を持つ細胞の数を記録した。同時に倍数性細胞の数も記録した（３媒体を含めた染色体数３７本以上を倍数性として記録した）。なお、客観的な観察を行うため、盲検法により観察した。
【０１０５】
染色体異常の種類は以下のようにして分類した。ただし、ギャップとは非染色部分が染色部分の縦軸上にあり、その幅が染色分体の幅以下で非染色部分の形状が明確なもの、切断とは非染色部分が染色分体の縦軸にある場合にはその幅が染色分体の幅以上で非染色部分の形状が明確なもの、または、染色体または染色分体の軸よりずれて断片が存在すること、交換とは染色体または染色分体の２ヵ所以上の切断による相互交換と定義し、それ以外の構造異常はその他とした。
【０１０６】
構造異常
染色分体型切断（ｃｔｂ）
染色分体型交換（四放射状交換など、ｃｔｅ）
染色体型切断（ｃｓｂ）
染色体型交換（ニ動原体、環状など、ｃｓｅ）
その他（断片化、ｆｒｇ）
その他の染色体異常
ギャップ（ｇ）
数的異常
倍数性（ｐｏｌｙｐｌｏｉｄ、ｅｎｄｏｒｅｄｕｐｌｉｃａｔｉｏｎ）
【０１０７】
短時間処理の結果、−Ｓ９ｍｉｘ法における染色体の構造異常を有する細胞及び倍数性細胞の出現頻度は、いずれの試験用量においても５％以下となった。しかしながら、＋Ｓ９ｍｉｘ法では染色体の倍数性細胞の出現頻度は、いずれの試験用量においても５％以下となったが、染色体の構造異常を有する細胞の出現頻度が０．３１３、０．６２５及び１．２５ｍｇ／ｍＬでそれぞれ１５．５、４９．５及び７３．０％と用量依存性のある増加を示した。被験物質の沈澱が、０．３１３ｍｇ／ｍＬ以上で認められた。短時間処理法の−Ｓ９ｍｉｘ法陽性対照群（ＭＭＣ）は、染色体の構造異常を有する細胞の出現頻度が１６．０％を示した。また、＋Ｓ９ｍｉｘ法陽性対照群（ＤＭＮ）では、染色体の構造異常を有する細胞の出現頻度が３７．５％を示したことから、試験は適切に実施されたものと判断した。なお、短時間処理の結果、陽性と判断したため連続処理法は実施しなかった。被験物質が構造異常を２０％誘発する試験用量（Ｄ２０値）は、＋Ｓ９ｍｉｘ法で０．３５ｍｇ／ｍＬであった。
【０１０８】
１２．細胞毒性試験
被験物質である機能性繊維８ｇを、高圧蒸気滅菌（１２１℃、２０分）した。冷却、乾燥後、培地８０ｍＬを加えて軽く栓をした後、被験物質が培地中に十分に浸漬していることを確認して、炭酸ガスインキュベーター内に静置して２４時間インキュベートした。ガラス瓶から培地のみを取り出し、この培地を１００％被験物質抽出液とした。培地を用いて１００、８０、７０、５０、３０及び１０％に希釈した。なお、上記の被験物質抽出液の濃度は、予備検討の結果からＩＣ５０値を算出できる適切な範囲で６濃度設定した。
【０１０９】
約２×１５ｍｍの機能性繊維標準材料及びブランク繊維の陰性材料を、それぞれガラス瓶に入れて高圧蒸気滅菌した。冷却、乾燥後、標準材料または陰性材料１ｇに対して培地を１０ｍＬずつの割合で加えて軽く栓をした。炭酸ガスインキュベーター内に静置して２４時間インキュベートした後、ガラス瓶から培地のみを取り出し、この培地をそれぞれ１００％標準材料抽出液及び１００％陰性材料抽出液とした。培地を用いて、標準材料Ａは８．０、３．０、１．０、０．５及び０．１％、標準材料Ｂは９０、８０、７０、５０及び３０％に希釈した。陰性材料については１００％抽出液をそのまま使用した。
【０１１０】
Ｅａｇｌｅ  ＭＥＭ培地（Ｅａｇｌｅの平衡塩類含有、０．２９２ｇ／Ｌ  Ｌ−グルタミン含有、インビトロジェン社、Ｌｏｔ  Ｎｏ．１１０１７２８）に０．１１ｇ／Ｌ  ピルビン酸ナトリウム（和光純薬工業（株）、Ｌｏｔ  Ｎｏ．ＬＤＥ００１９）、２．２ｇ／Ｌ  炭酸水素ナトリウム（関東化学（株）、Ｌｏｔ  Ｎｏ．１０６Ｇ１２６８）、０．１ｍｍｏｌ／Ｌ  ＭＥＭ非必須アミノ酸（インビトロジェン社、Ｌｏｔ  Ｎｏ．１１３３５５７）、５０Ｕ／ｍＬ  ペニシリン（萬有製薬（株）、Ｌｏｔ  Ｎｏ．７ＱＢ０３Ｐ）及び５０μｇ／ｍＬ  ストレプトマイシン（明治製菓（株）、Ｌｏｔ  Ｎｏ．ＳＳＤ４６８）を添加して牛胎児血清（ＦＢＳ、インビトロジェン社、Ｌｏｔ  Ｎｏ．Ａ０２８２２８２）不含Ｍ０５培地とした。ＦＢＳ不含Ｍ０５培地に５ｖ／ｖ％ＦＢＳを添加してＭ０５培地とした。
【０１１１】
細胞培養は、炭酸ガスインキュベーターを用いて温度：３７．０±１．０℃（実測温度：３６．９〜３７．４℃）、ＣＯ２濃度：５．０±０．５％（実測濃度：４．８〜５．１％）、加湿条件下で静置培養した。細胞密度がフラスコ底面積の約３０〜７０％の状態で継代操作を行った。フラスコ内の培地を除去し、Ｃａ２＋及びＭｇ２＋不含のダルベッコ  リン酸塩緩衝液を用いて軽くリンスした。ＰＢＳ（−）を吸引除去した後、細胞が浸る程度の少量の０．０５％  トリプシン及び０．０２％  ＥＤＴＡ・２Ｎａ（同仁化学（株）、Ｌｏｔ  Ｎｏ．ＫＣ１５９）含有ＰＢＳ（−）（トリプシン／ＥＤＴＡ液）を添加し炭酸ガスインキュベーター内に静置した。顕微鏡下で観察し細胞がフラスコ底面からほぼ剥がれたことを確認した後、培地を加えて細胞を回収し、遠沈管に移して約８０ｒｐｍで２分間遠心した。上清を除去して新たに培地を加えて細胞をほぐし、細胞懸濁液とした。継代前の１／３〜１／１０の細胞密度になるように培地で希釈して、新たなフラスコに播種した。
【０１１２】
継代方法に従って細胞を剥離し、細胞数が１０００個／ｍＬになるように培地を用いて希釈調製した細胞懸濁液を、予め培地を３ｍＬ添加しておいた６ウェルプレートに０．１ｍＬ／ウェルずつ添加し、炭酸ガスインキュベーター内で２４時間培養した。培地を除去した後、各濃度の被験物質抽出液、標準材料Ａ及び標準材料Ｂ並びに陰性材料（１００％抽出液のみ）を３ｍＬずつ添加した。また培地のみを添加するウェルを４ウェル設け、コントロール群とした。１濃度につき４ウェルを使用した（ｎ＝４）。各抽出液を添加した後、炭酸ガスインキュベーター内で７日間培養した後、各ウェルの培地を除去し、ＰＢＳ（−）３ｍＬ／ウェルで洗浄した。各ウェルにメタノールを３ｍＬ加えて１０分間静置し細胞を固定した後、メタノールを除去し、リン酸緩衝液（ｐＨ６．４）で希釈した５％ギムザ溶液を３ｍＬ加えて１０分間静置し、コロニーを染色した。精製水で各ウェルを一回洗浄した後、乾燥させて、５０個以上の細胞から成ると判断されるコロニー数を、肉眼または実態顕微鏡にて計測した。
【０１１３】
雄チャイニーズハムスター肺由来樹立株であるＶ７９細胞を１００個／ウェル（６ウェルプレート）で２４時間培養した後、被験物質（機能性繊維）並びに各対照物質（標準材料Ａ：０．１％ｚｉｎｃ  ｄｉｅｔｈｙｌｄｉｔｈｉｏｃａｒｂａｍａｔｅ（ＺＤＥＣ）含有ポリウレタンフィルム、標準材料Ｂ：０．２５％ｚｉｎｃ  ｄｉｂｕｔｈｙｌｄｉｔｈｉｏｃａｒｂａｍａｔｅ（ＺＤＢＣ）含有ポリウレタンフィルム及び陰性材料：高密度ポリエチレンフィルム）の抽出液を各４ウェルずつ添加して、７日間培養した。形成されたコロニー数を計測し、培地のみで同様に培養した場合（コントロール群）のコロニー数の半数となるときの抽出液濃度（ＩＣ５０値）を算出した。コントロール群のコロニー形成能は９５％であり、良好なコロニー形成能を示した。コントロール群と陰性材料の１００％抽出液添加ウェルのコロニー数に統計学的な有意な差は認められなかった。標準材料Ａ及び標準材料ＢのＩＣ５０値は、それぞれ１．３２％及び６８．９２％であり、いずれも試験の成立基準を満たしていた。
【０１１４】
機能性繊維抽出液を添加したウェルとコントロール群のコロニーの大きさを比較すると、高濃度（７０％以上）の抽出液ではコロニーが小さくなる傾向が認められ、細胞の増殖能に対する若干の影響が示唆された。しかし、機能性繊維抽出液のコロニー形成数においてはコントロール群と差異はなく、機能性繊維抽出液のＩＣ５０値は１００％以上であり、コロニー形成能への影響は認められなかった。
【０１１５】
以上の結果から、本試験条件において、機能性繊維抽出液のコロニー形成に対する阻害作用は認められないと判断した。
【０１１６】
次に、抗アレルゲン羽毛、それを含む組成物・羽毛製品の好ましい実施例について説明する。
【０１１７】
本発明は、前記の金属フタロシアニンの誘導体として前記式（ＩＩ）で示される金属フタロシアニン化合物（以下、金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）と記載する）またはその塩が担持された抗アレルゲン羽毛である。前記羽毛に担持される金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩の量は、前記羽毛重量に対して、好ましくは０．１質量％以上１０質量％以下であり、より好ましくは０．３質量％以上５質量％以下であり、さらに好ましくは０．５質量％以上３質量％以下である。金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩の量が０．１質量％以上１０質量％以下であれば、抗アレルゲン羽毛のダニ由来のアレルゲンを吸着する効果に優れるからである。
【０１１８】
前記抗アレルゲン羽毛の素材としては、アヒル、鵞鳥、鴨、マガモ、ルーアンダック、チャイニーズダック、ペキンダック、グース（ビルグリム・グース、エムデン・グース等）、ハイイロガン等から採取した羽毛が挙げられる。また、前記抗アレルゲン羽毛の素材としては、フェザー（ラージフェザー、翼の部分の羽軸を持つ羽毛）、ダウン（胸毛、綿毛）、スモールフェザー（小羽）等を用いることができる。
【０１１９】
金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）の塩としては、例えば無機塩基との塩、有機塩基との塩等が挙げられる。無機塩基との塩の好適な例としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩；ならびに銅（ＩＩ）塩、アンモニウム塩などが挙げられる。有機塩基との塩の好適な例としては、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン等との塩が挙げられる。
【０１２０】
金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩は、前記式（ＩＩ）中、ＭがＣｏまたはＦｅであるのが好ましい。この金属フタロシアニン化合物またはその塩は、前記式（ＩＩ）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、同一で、ＳＯ３Ｈ基であり、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は、同一で、１であるのがより好ましい。そのような金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩は、より具体的には、以下のような構造式で示されるものである。
【０１２１】
【化１１】
2006144219.tif 000016
【０１２２】
【化１２】
2006144219.tif 000017
【０１２３】
金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）の塩は、ナトリウム塩または銅（ＩＩ）塩であるのが、さらに好ましい。
【０１２４】
金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩が担持された抗アレルゲン羽毛は、例えば、以下の方法で製造することができる。まず、羽毛を前処理する。前処理としては、原料羽毛中の土砂、その他の不純物を除去する前除塵処理、小石、砂、脂肪酸等洗浄では除去できない埃、羽毛の垢を除去する洗浄前除塵処理、水（常温水、温水等）での洗浄処理等が挙げられる。
【０１２５】
次いで、金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩の水溶液中に８０℃以上１００℃以下で、３０分〜２時間の間、前処理された羽毛を浸漬させ、水で洗浄し、脱水、および乾燥することにより、この金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩が担持された抗アレルゲン羽毛を製造することができる。
【０１２６】
この金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩の水溶液中のそれらの含有量は、羽毛重量に対して、０．０１質量％以上１０質量％以下が好ましく、０．１質量％以上５質量％以下がより好ましい。
【０１２７】
この金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩の水溶液には、ギ酸、酢酸、塩酸、リン酸、クエン酸など酸性染法で一般的に使用する酸等を含んでもよい。前記酸は、羽毛を構成するアミノ酸のアミノ基のカチオン化、金属フタロシアニン化合物の溶解性を落として羽毛に担持しやすくするために用いる。
【０１２８】
金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩が担持された抗アレルゲン羽毛は、さらに、媒染剤、フィックス剤等で処理されてもよい。前記媒染剤としては、タンニン酸、アルミニウム塩（例えば、酢酸アルミニウム、生みょうばん、焼きみょうばん等）、クロム酸（例えば、酢酸クロム、クロムみょうばん等）、鉄塩（例えば、スルファミン酸第二鉄、木酢酸鉄、塩化第一鉄、硫酸第一鉄等）、スズ塩（例えば、錫酸ソーダ、塩化第一錫等）、銅塩（例えば、酢酸銅等）、バリウム塩（例えば、塩化バリウム等）等を用いることができる。前記フィックス剤としては、銅塩（例えば、硫酸銅等）、アルミニウム塩、第４級アンモニウム塩等を用いることができる。前記媒染剤で処理すると、金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）中の遊離のＳＯ３Ｈ基またはＣＯＯＨ基は塩を形成することができ、この金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）または塩の羽毛への担持を強固にすることができる。従って、金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩が担持された抗アレルゲン羽毛を洗濯しても、長期に渡ってその担持を保つことができる。
【０１２９】
本発明は、金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩が担持された抗アレルゲン羽毛を含む組成物である。前記組成物は、他の素材と組み合わせて、羽毛製品などの成形品に加工されてもよい。
【０１３０】
本発明は、金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩が担持された抗アレルゲン羽毛を含む羽毛製品である。前記羽毛製品としては、羽毛布団などの寝具、羽毛ジャケットなどの衣類が挙げられる。
【０１３１】
以下、実施例２、３により抗アレルゲン羽毛を更に具体的に説明する。なお、この実施例においてかさ高性は、ＪＩＳ Ｌ １９０３羽毛試験方法に準じて、温度２０℃関係湿度６５％の試験室において測定した。
【０１３２】
（実施例２）
前除塵処理、洗浄前除塵処理および水での洗浄処理を行ったグース羽毛（ダウン８５質量％、スモールフェザー１５質量％）（かさ高性１５３ｍｍ）を準備した。
【０１３３】
一方、前記式（ＩＸ）で示されるコバルトフタロシアニンポリスルホン酸ナトリウム０．５質量％（対羽毛重量比）およびギ酸２質量％（対羽毛重量比）を、３０倍の容量の水に溶解させ、試薬溶液を調製した。
【０１３４】
この試薬溶液中へ前記羽毛を浸漬させ、９７℃で５０分間放置した。
コバルトフタロシアニンポリスルホン酸ナトリウムは大部分、羽毛に吸尽された。
【０１３５】
その後、羽毛を水でよく洗浄して残存する試薬溶液を除去した。続いて、脱水および乾燥して、コバルトフタロシアニンポリスルホン酸ナトリウムが担持された抗アレルゲン羽毛（かさ高性１５３ｍｍ）を得た。このようにして得た羽毛は、金属フタロシアニン化合物またはその塩が担持される前の羽毛と比較して、手触り、かさ高性の点においては全く変化がなかった。
【０１３６】
（実施例３）
前除塵処理、洗浄前除塵処理および水での洗浄処理を行ったグース羽毛（ダウン８５質量％、スモールフェザー１５質量％）を準備した。
【０１３７】
一方、前記式（ＩＸ）で示されるコバルトフタロシアニンポリスルホン酸ナトリウム０．５質量％（対羽毛重量比）、ギ酸２質量％（対羽毛重量比）を、３０倍の容量の水に溶解させ、試薬溶液を調製した。この試薬溶液中へ前記羽毛を浸漬させ、９７℃で５０分間放置した。その後、羽毛を水でよく洗浄して残存する試薬溶液を除去した。続いて、脱水および乾燥させた。
【０１３８】
また、硫酸銅五水和物１質量％（対羽毛重量比）を、３０倍の容量の水に溶解させ、試薬液を調製した。この試薬溶液中へ前記羽毛を浸漬させ、３０℃で３０分間放置した。その結果、銅イオンがコバルトフタロシアニンポリスルホン酸と結合し、前記式（Ｘ）で示される銅塩である不溶体を形成した。
【０１３９】
その後、羽毛を水でよく洗浄して残存する試薬溶液を除去した。続いて、脱水および乾燥して、金属フタロシアニン化合物の銅塩（Ｘ）が担持された抗アレルゲン羽毛を得た。このようにして得た羽毛は、金属フタロシアニン化合物またはその塩が担持される前の羽毛と比較して、手触り、かさ高性の点においては全く変化がなかった。
【０１４０】
（評価）
１．ダニアレルゲン吸着力試験
実施例２および３で得た、金属フタロシアニン化合物（ＩＩ）またはその塩が担持された抗アレルゲン羽毛を試料とし、ダニアレルゲンの吸着力を以下のようにして測定した。対照試料としては、実施例２および３において、試薬溶液処理を行っていない羽毛、すなわち、前除塵処理、洗浄前除塵処理および水での洗浄処理を行ったグース羽毛（ダウン８５質量％、スモールフェザー１５質量％）を用いた。
【０１４１】
ダニアレルゲン抗原溶液（アサヒビール  社製、精製ダニアレルゲンｒＤｅｒ２（商品名））（１μｇ／ｍＬ）（２００μｌ）中に、各試料（２ｍｇ）を入れ、２５℃で１時間の間、浸漬させた。試料を取り出した後の溶液を遠心分離（１００００rpm、３分間）した後、上澄み液（１００μｌ）をＥＬＩＳＡ法で測定した。
【０１４２】
酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ法）での測定方法
（１）抗原のコーティング
マイクロプレート（塩化ビニル製９６ウエルプレート、Ｄｙｎａｔｅｃｈ社製）に、前記上澄み液を１００μｌ／ウエル注入し、２５℃で２時間維持した。その後、マイクロピペットを用いて、前記上澄み液をウエルから除去した。ＰＢＳ溶液で３回ウエルを洗浄した。
【０１４３】
（２）ＢＳＡによるブロッキング
ＢＳＡ溶液（ＶＥＣＴＯＲ  社製、ＢＯＶＩＮＥＳＥＲＵＭＡＬＢＵＭＩＮ（商品名））（１％（ｗ／ｖ））を、前記マイクロプレートに１００μｌ／ウエル注入し、２５℃で１時間維持した。その後、マイクロピペットを用いて、前記上澄み液をウエルから除去した。０．０５％Ｔｗｅｅｎ−ＰＢＳ溶液で１回ウエルを洗浄した。
【０１４４】
（３）抗原への１次抗体の反応
前記マイクロプレートにダニアレルゲン抗体溶液（アサヒビール社製、抗Ｄｅｒｆ２モノクローナル抗体（商品名））（５μｇ／ｍＬ）を、１００μｌ／ウエル注入し、２５℃で２時間維持した。
【０１４５】
（４）酵素標識された２次抗体の反応
ビオチン（Ｂｉｏｔｉｎ）標識された抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体溶液（ＶＥＣＴＯＲ社製、ＢＩＯＴＩＮＹＬＡＴＥＤ  ＡＮＴＩ−ＭＯＵＳＥ  ＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）（商品名））（１μｇ／ｍＬ）を、前記マイクロプレートに１００μｌ／ウエル注入し、２５℃で２時間維持した。その後、マイクロピペットを用いて、前記抗体溶液をウエルから除去した。０．０５％Ｔｗｅｅｎ−ＰＢＳ溶液で１回ウエルを洗浄した。
【０１４６】
（５）アビジン（ＡＶＩＤＩＮ）による修飾
アビジン溶液（ＶＥＣＴＯＲ社製、ＡＬＫＡＬＩＮＥ  ＰＨＯＳＰＨＡＴＡＳＥ  ＡＶＩＤＩＮ  Ｄ（商品名））（１００ｕｎｉｔ）を、前記マイクロプレートに１００μｌ／ウエル注入し、２５℃で０．５時間維持した。その後、マイクロピペットを用いて、前記上澄み液をウエルから除去した。０．０５％Ｔｗｅｅｎ−ＰＢＳ溶液で３回ウエルを洗浄した。
【０１４７】
（６）発色基質との反応
ＰＮＰＰ溶液（ＶＥＣＴＯＲ社製、Ｐ−ＮＩＴＲＯＰＨＥＮＹＬ  ＰＨＯＳＰＨＡＴＥ（商品名））（５００μｇ／ｍＬ）を、前記マイクロプレートに１００μｌ／ウエル注入し、２５℃で１０分間維持した。その後、５Ｎ  ＮａＯＨ水溶液を１００ μｌ／ウエルに注入し、反応を停止させた。
【０１４８】
（７）測定
マイクロプレートリーダー（ＢＩＯ−ＲＡＤ社製、ＭＩＣＲＯＰＬＡＴＥ  ＲＥＡＤＥＲ  Ｍｏｄｅｌ  ５５０（商品名））を用いて、４０５ｎｍ以上の吸光度を測定し、各試料に含まれるダニアレルゲンの濃度を定量した。試料を浸漬する前のダニアレルゲンの濃度（１μｇ／ｍｌ）と、試料を浸漬した後のダニアレルゲンの濃度から、以下の式に従い、試料のダニアレルゲン吸着率を算出した。
【０１４９】
吸着率（％）＝［（試料浸漬後のダニアレルゲンの濃度：μｇ／ｍｌ）／（試料浸漬前のダニアレルゲンの濃度：１μｇ／ｍｌ）］×１００
【０１５０】
【表５】
2006144219.tif 000018
【０１５１】
得られた結果から明らかなように、金属フタロシアニンの誘導体が担持された抗アレルゲン羽毛は、防ダニ剤を用いず、かつ、ダニアレルゲンを吸着する能力に優れることが確認できた。従って、本発明の羽毛は、防ダニ剤を用いず、かつ、抗アレルゲン効果に優れる。
【産業上の利用可能性】
【０１５２】
本願発明で使用されるアレルゲンの分解剤は、その有効成分である金属フタロシアニンの誘導体の働きによってアレルゲンを分解する薬効が実験的に確認され、また安全性が実験的に確認もされているから、薬剤として利用可能である。
【０１５３】
さらに、金属フタロシアニンの誘導体を担持させた繊維素材は、アレルゲンを吸着する効果も有するから、それを含む繊維製品に適用できる。
【図面の簡単な説明】
【０１５４】
【図１】図１は、実験調製例１および比較調製例１の試験溶液の二次元電気泳動ゲルを撮影した写真である。
【０１５５】
【図２】図２は、実験調製例２および比較調製例２の試験溶液の二次元電気泳動ゲルを撮影した写真である。
【０１５６】
【図３】図３は、実験調製例３および比較調製例３の試験溶液の二次元電気泳動ゲルを撮影した写真である。
【０１５７】
【図４】図４は、実験調製例４および比較調製例４の試験溶液の二次元電気泳動ゲルを撮影した写真である。
【図１】
2006144219.tif 000024
【図２】
2006144219.tif 000025
【図３】
2006144219.tif 000026
【図４】
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