(57)【要約】【課題】バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質を利用しながら、例えば、農園芸における有害生物に対して、より低薬量にて優れた防除効果を有する有害生物防除剤を提供可能とすること。【解決手段】バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質及びリンゴ酸若しくはその塩を含有することを特徴とする有害生物防除組成物等。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質及びリンゴ酸若しくはその塩を含有することを特徴とする有害生物防除組成物。
【請求項２】
バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質及びリンゴ酸若しくはその塩が重量比で１：５０００〜５０：１の割合で含有されてなることを特徴とする請求項１記載の有害生物防除組成物。
【請求項３】
殺虫性タンパク質が、バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）の生菌体、その菌芽胞、それらを熱若しくは化学的手段により死菌化処理された菌体、又はそれら菌体の破砕物に含まれた状態である殺虫性タンパク質であることを特徴とする請求項１又は２記載の有害生物防除組成物。
【請求項４】
リンゴ酸若しくはその塩が、Ｄ−リンゴ酸若しくはその塩、Ｌ−リンゴ酸若しくはその塩又はそのラセミ体若しくはその塩のいずれかであることを特徴とする請求項１又は２記載の有害生物防除組成物。
【請求項５】
バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質とリンゴ酸若しくはその塩との両者の有効量を、混用又は同時若しくは非同時に併用して、保護すべき植物、有害生物又は有害生物の生息場所に施用することを特徴とする有害生物防除方法。
【請求項６】
有害生物が鱗翅目害虫の幼虫であることを特徴とする請求項４記載の有害生物防除方法。
【請求項７】
有害生物がハスモンヨトウであることを特徴とする請求項４記載の有害生物防除方法。
【請求項８】
有害生物防除のための、バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質とリンゴ酸若しくはその塩との組み合わせ使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、有害生物防除組成物、より具体的には、バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質及びリンゴ酸若しくはその塩を含有する有害生物防除組成物等に関する。
【背景技術】
【０００２】
バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質が殺虫活性を有することが知られている（例えば、非特許文献１参照）。
【０００３】
【非特許文献１】昆虫病理学  福原敏彦  著  （学会出版センター）01641-1104
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質を利用しながら、例えば、農園芸における有害生物に対して、より低薬量にて優れた防除効果を有する有害生物防除剤の開発が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者等は、かかる状況下に鋭意検討した結果、単に混合した時に得られると予想される相加効果以上の相乗効果を得ることが出来、使用する薬量の低減を可能とする有害生物防除組成物における組み合わせを見出し、本発明に至った。
即ち、本発明は、
１．バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質（以下、本タンパク質と記すこともある。）及びリンゴ酸若しくはその塩（以下、本化合物と記すこともある。）を含有することを特徴とする有害生物防除組成物（以下、本発明組成物と記すこともある。）；
２．バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質及びリンゴ酸若しくはその塩が重量比で１：５０００〜５０：１の割合で含有されてなることを特徴とする前項１記載の有害生物防除組成物；
３．殺虫性タンパク質が、バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）の生菌体、その菌芽胞、それらを熱若しくは化学的手段により死菌化処理された菌体、又はそれら菌体の破砕物に含まれた状態である殺虫性タンパク質であることを特徴とする前項１又は２記載の有害生物防除組成物；
４．リンゴ酸若しくはその塩が、Ｄ−リンゴ酸若しくはその塩、Ｌ−リンゴ酸若しくはその塩又はそのラセミ体若しくはその塩のいずれかであることを特徴とする前項１又は２記載の有害生物防除組成物；
５．バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質とリンゴ酸若しくはその塩との両者の有効量を、混用又は同時若しくは非同時に併用して、保護すべき植物、有害生物又は有害生物の生息場所に施用することを特徴とする有害生物防除方法（以下、本発明有害生物防除方法と記すこともある。）；
６．有害生物が鱗翅目害虫の幼虫であることを特徴とする前項５記載の有害生物防除方法；
７．有害生物がハスモンヨトウであることを特徴とする前項５記載の有害生物防除方法；
８．有害生物防除のための、バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質とリンゴ酸若しくはその塩との組み合わせ使用；
等を提供するものである。
【発明の効果】
【０００６】
本発明は、単に混合した時に得られると予想される相加効果以上の相乗効果を得ることが出来、使用する薬量の低減を可能とする有害生物防除組成物を提供可能とする。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明組成物において一つの有効成分として用いられる本タンパク質は、バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）が産生し得る殺虫性タンパク質であれば特に制限はないが、具体的には例えば、ＣｒｙI（ａ）、ＣｒｙIＡ（ｂ）、ＣｒｙIＡ（ｃ）、ＣｒｙIＢ、ＣｒｙIＣ、ＣｒｙIＤ、ＣｒｙIＦ、ＣｒｙIIＡ、ＣｒｙIIＢ、ＣｒｙIIIＡ、ＣｒｙIIIＢ、ＣｒｙIIIＣ、ＣｒｙIIIＤ、ＣｒｙＶ、ＣｒｙＶＩ等をあげることができる。
これら本タンパク質は、バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）に属する細菌により産生されるが、その中でも例えば、クルスタキ（kurstaki）、アイザワイ(aizawai)、テネブリオニス(tenebrionis)、ヤポネンシス・ブイブイ（japonensis Buibui）等の亜種に属する前記細菌により産生されるものが本発明組成物に好ましく用いることができる。
また、本タンパク質は、天然に存在するバチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）に属する細菌により産生されるものであっても、通常の遺伝子工学的な手法を用いて作製された形質転換体（例えば、大腸菌、枯草菌、植物等）により産生されるものであってもよい。尚、このような形質転換体を作製する際に用いられる、本タンパク質のアミノ酸配列をコードする塩基配列を有する遺伝子（以下、本遺伝子と記すこともある。）は、（１）天然に存在する遺伝子の中からクローニングされたものであってもよいし、（２）天然に存在する遺伝子であっても、このクローニングされた遺伝子の塩基配列において、その一部の塩基の欠失、置換又は付加が人為的に導入されてなる遺伝子（即ち、天然に存在する遺伝子を変異処理（部分変異導入法、突然変異処理等）を行ったもの）であってもよいし、（３）人為的に合成されたものであってもよい。
【０００８】
上記のような微生物は、天然から分離してもよいし、菌株保存機関等から購入してもよい。
天然から分離する場合には、まず、土壌を野外から採取する。採取された土壌を滅菌水で懸濁させた後、当該懸濁液を、例えば、枯草菌等の微生物分離用固体培地上に塗布し、これを２５℃で培養し、数日後に生えてきた菌の独立したコロニーを切り取り、新しい、例えば、枯草菌等の微生物分離用固体培地に移植し、これをさらに２５℃で培養する。生育してきた菌について、SNEATH, (P.H.A.), MAIR, (N.S.) SHARPE, (M.E.) and HOLT, (J.G.):Bergey's manual of Systematic Bacteriorogy. Vol.2. 1984, Williams and Wilkins, Baltimore.等に記載される方法等に従って、バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）に属する細菌であるかを同定することにより、バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）に属する細菌を選抜すればよい。
つぎに、選抜されたバチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）に属する細菌から、当該細菌中に存在する殺虫性タンパク質の有無を、例えば、生物活性評価法や顕微鏡観察法等に従って確認することにより、バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）に属する細菌を選抜すればよい。
【０００９】
本発明組成物で用いられる本タンパク質は、当該タンパク質自体そのままでもよいが、例えば、バチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）の生菌体、その菌芽胞、それらを熱若しくは化学的手段により死菌化処理された菌体、又はそれら菌体の破砕物に含まれた状態である殺虫性タンパク質であってもよい。
尚、殺虫性タンパク質を産生し得るバチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）に属する細菌を培養する培地としては、一般的細菌用培地、普通ブイヨン液体培地等があげられるが、当該細菌が増殖する培地であれば何でもよい。前述の如く、上記の培地を用いて培養されたバチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）に属する細菌及びその産生物を培地ごと遠心分離及び／又は乾燥して本発明組成物の一つの有効成分である本タンパク質として用いるか、或いは公知の方法に従って前記培地から分離された殺虫性タンパク質自体そのままを用いればよい。因みに、本タンパク質自体そのままの分子量は、数万〜十数万ダルトンであり、所定回数の分裂を繰り返したバチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）に属する細菌が崩壊する際に菌芽胞とともに放出される結晶性物質である。
【００１０】
また、本発明組成物で用いられる本タンパク質は、市販のＢＴ製剤品を用いてもよく、好ましくは、ダイポール（商標登録）（住友化学（株））、エスマルク（商標登録）（住友化学（株））、フローバック（商標登録）（住友化学（株））、ゼンターリ（商標登録）（住化武田農薬（株））、Novodor（商標登録） (Valent BioSciences co.)、ブイハンター（商標登録）（住友化学（株））等をあげることができる。
【００１１】
本発明組成物において他の一つの有効成分として用いられるリンゴ酸は、Ｃ４Ｈ６Ｏ５ で示される化合物であって、ヒドロキシコハク酸に相当するカルボン酸である。不斉炭素原子1個を持ち、Ｄ−、Ｌ−及びラセミ体の３種が知られている。Ｄ−リンゴ酸（ｌ−リンゴ酸）は遊離の状態（フリーな酸）または塩としてリンゴ、ブドウそのほかの果実中に存在している。潮解性無色の針状結晶で、融点１００℃であり、水、アルコールによく溶解し希薄水溶液は弱い左旋性を示す。Ｌ−リンゴ酸（ｄ−リンゴ酸）は、Ｌ−酒石酸をヨウ化水素酸で還元するか、又はヴァルデン反転を利用してＤ−リンゴ酸を五塩化リンでＤ−クロルコハク酸に変え、これに湿った酸化銀を作用させることにより得られる。光学不活性のＤＬ−リンゴ酸は、融点１３０〜１３１℃で、フマル酸またはマレイン酸をアルカリと熱して水を付加するか、ブドウ酸をヨウ化水素酸で還元するか、ブロムコハク酸を水と酸化銀、希酸または希アルカリと加熱することにより得られる（例えば、岩波  理化学辞典  第３版  p1438  （岩波書店）参照）。
【００１２】
本発明組成物は、例えば、広範囲な農園芸における有害生物（例えば、昆虫類や有害ダニ類等）の防除に利用できる。特に鱗翅目害虫に対して好適に用いることができる。その代表例として、下記のものが挙げられる。
【００１３】
鱗翅目害虫：ニカメイガ（Chilo suppressalis）、コブノメイガ（Cnaphalocrocis medinalis）ヨーロピアンコーンボーラー（Ostrinia nubilalis）、シバツトガ（Parapediasia teterrella）等のメイガ類、ハスモンヨトウ（Spodoptera litura）、シロイチモジヨトウ（Spodoptera exigua）、アワヨトウ（Pseudaletia separata）、ヨトウガ（Mamestra brasicae）、タマナヤガ（Agrotis ipsilon）、イラクサギンウワバ（Trichoplusia ni）、タマナギンウワバ（Autographa nigrisigna）、ヘリオティス属（Heliothis spp.）、ヘリコベルパ属（Helicoverpa spp.）、エアリアス属（Earias spp.）等のヤガ類、モンシロチョウ（Pieris rapae crucivora）等のシロチョウ類、チャノコカクモンハマキ（Adoxophyes honmai）、リンゴコカクモンハマキ（Adoxophyes orana fasciata）、ナシヒメシンクイ（Grapholita molesta）、コドリングモス（Cydia pomonella）等のハマキガ類、モモシンクイガ（Carposina niponensis）等のシンクイガ類、モモハモグリガ（Lyonetia clerkella）等のチビガ類、キンモンホソガ（Phyllonorycter ringoniella）等のホソガ類、ミカンハモグリガ（Phyllocnistis citrella）等のコハモグリガ類、コナガ（Plutella xylostella）などのスガ類、ドクガ（Euproctis taiwana）、マイマイガ（Lymantria dispar）、モンシロドクガ（Euproctis similis）などのドクガ類、ヒメクロイラガ（Scopelodes contracus）などのイラガ類、マツカレハ（Dendrolimus spectabilis）などのカレハガ類、ピンクボールワーム（Pectinophora gossypiella）等のキバガ類、ヒトリガ類、ヒロズコガ類等。
双翅目害虫：マメハモグリバエ（Liriomyza trifolii）、ナスハモグリバエ（Liriomyza bryoniae）、トマトハモグリバエ（Liriomyza sativae）、ヨメナスジハモグリバエ（Liriomyza asterivora）、ナモグリバエ（Chromatomyia horticola）等のハモグリバエ類、イエカ類、ヤブカ類、ハマダラカ類、ユスリカ類、イエバエ類、クロバエ類、ニクバエ類、ハナバエ類、タマバエ類、ミバエ類、ショウジョウバエ類、チョウバエ類、アブ類、ブユ類、サシバエ類等
鞘翅目害虫：ハムシ類、コガネムシ類、ゾウムシ類、オトシブミ類、テントウムシ類、カミキリムシ類、ゴミムシダマシ類等
【００１４】
本発明組成物において、本タンパク質とリンゴ酸との混合比としては、例えば、重量比で１：５０００〜５０：１の割合、好ましくは１：１０００〜１０：１の割合、より好ましくは１：２０〜４：１の割合等をあげることができる。
本発明組成物を用いる場合には、他の何らの成分も加えず、そのまま本化合物と本タンパク質とを混合しても用いてよいが、通常は当該混合物にさらに固体坦体、液体坦体、ガス状担体等、必要により界面活性剤、その他の製剤用補助剤を加えることにより、油剤、乳剤、水和剤、顆粒水和剤、水中懸濁剤・水中乳濁剤等のフロアブル剤、粉剤、粒剤、エアゾール、マイクロカプセル剤、加熱燻蒸剤、毒餌剤等の各種製剤して用いることが好ましい。これらの製剤には、有効成分として本発明組成物を、通常、重量比で約０．０１〜９５％含有させることがよい。
【００１５】
製剤化の際に用いられる固体坦体としては、例えば、粘土類（カオリンクレー、珪藻土、ベントナイト、フバサミクレー、酸性白土等）、合成含水酸化珪素、タルク類、セラミック類、その他の無機鉱物（セリサイト、石英、硫黄、活性炭、炭酸カルシウム、水和シリカ等）、化学肥料（硫安、燐安、硝安、尿素、塩安等）等の微粉末や粒状物があげられる。
液体坦体としては、例えば、水、アルコール類（メタノール、エタノール等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、芳香族炭化水素類（トルエン、キシレン、エチルベンゼン、メチルナフタレン等）、非芳香族炭化水素類（ヘキサン、シクロヘキサン、灯油、軽油等）、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、ニトリル類（アセトニトリル、イソブチロニトリル等）、エーテル類（ジイソプロピルエーテル、ジオキサン等）、酸アミド類（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド類）、ハロゲン化炭化水素類（ジクロロメタン、トリクロロエタン、四塩化炭素等）、ジメチルスルホキシド、植物油（大豆油、綿実油等）等があげられる。
また、ガス状担体、即ち、噴射剤としては、例えばフロンガス、ブタンガス、液化石油ガス、ジメチルエーテル、炭酸ガス等があげられる。
【００１６】
界面活性剤としては、例えば、アルキル硫酸エステル塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルアリールスルホン酸塩、アルキルアリールエーテル類及びそのポリオキシエチレン化合物、ポリエチレングリコールエーテル類、多価アルコールエステル類、糖アルコール誘導体等があげられる。
【００１７】
その他の製剤用補助剤としては、例えば、カゼイン、ゼラチン、糖類（澱粉、アラビアガム、セルロース誘導体、アルギン酸等）、リグニン誘導体、ベントナイト、合成水溶性高分子（ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸類等）、ＰＡＰ（酸性リン酸イソプロピル）、ＢＨＴ（２，６−ジ−tert−ブチル−４−メチルフェノール）、ＢＨＡ（２−tert−ブチル−４−メトキシフェノールおよび３−tert−ブチル−４−メトキシフェノール）、植物油、鉱物油、界面活性剤、脂肪酸、脂肪酸エステル等が挙げられる。
【００１８】
毒餌剤の基材としては、例えば、穀物粉、植物油、糖、結晶セルロース等の餌成分、ジブチルヒドロキシトルエン、ノルジヒドログアイアレチン酸等の酸化防止剤、デヒドロ酢酸等の保存料、トウガラシ末等の誤食防止剤、チーズ香料、タマネギ香料等の誘引性香料等が挙げられる。
【００１９】
水中懸濁剤・水中乳濁剤等のフロアブル剤は、通常、約１〜７５重量％の有効成分化合物を、約０．５〜１５重量％の懸濁補助剤（例えば保護コロイドやチクソトロピー性を付与しうる物質）、約０〜１０重量％の補助剤（例えば消泡剤、防錆剤、安定剤、展着剤、浸透助剤、凍結防止剤、防腐剤、防黴剤等）を含む水中で、微少に分散させることにより得ることができる。
【００２０】
本発明組成物は、各々の有効成分を上記の製剤手法により製剤した後、これら製剤を混合することにより調製することもできる。即ち、本発明組成物は、その製剤形態によっては、本化合物を予め製剤化したものと、本タンパク質を予め製剤化したものとを混合することにより調製してもよく、また、両者を施用時に混用又は同時若しくは非同時に併用することもできる。
このようにして製剤化された本発明組成物は、そのままで、あるいは水等に希釈して用いる。また、さらに他の殺虫剤、殺ダニ剤、殺線虫剤、殺菌剤、除草剤、植物成長調節剤、共力剤、肥料、土壌改良剤、動物用飼料等を混用又は同時若しくは非同時に併用することもできる。
【００２１】
本発明組成物は、その有効量を、有害生物、有害生物の生息場所、有害生物から保護すべき植物等に処理される。その際、本発明組成物が乳剤、水和剤、顆粒水和剤、フロアブル剤等に製剤化されたものである場合には、通常、水等で希釈して処理される。
【００２２】
本発明組成物を、例えば、農園芸における有害生物に対して処理する場合には、本発明組成物の有効量又は施用量は、通常、１０００ｍ２当たりの施用量で約０．１〜１０００ｇである。尚、粒剤、粉剤、油剤等のまま施用する場合には、通常、上記の有効量又は施用量となるように何ら希釈することなくそのまま施用すればよい。また、乳剤、水和剤、顆粒水和剤、フロアブル剤等を水に希釈して施用する場合でも、上記の有効量又は施用量となるように水で希釈して施用すればよい。具体的には例えば、乳剤、水和剤、顆粒水和剤、フロアブル剤等を水で希釈して用いる場合には、本発明組成物の施用濃度としては、通常、約１〜１００００ｐｐｍをあげることができる。
【００２３】
上記の有効量又は施用量は、いずれも製剤の種類、施用時期、施用場所、施用方法、害虫の種類、被害程度等の状況によって異なり、上記の範囲に関わることなく増減して適宜選択することができる。
【実施例】
【００２４】
以下、本発明を製剤例及び試験例によりさらに詳しく説明するが本発明はこれらの例に限定されるものではない。
【００２５】
尚、後述された「ＢＴ菌培養物」とは、１ｍｌ当たり１×１０３個のバチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）に属する細菌由来の生芽胞を含む胞子懸濁液１００μｌを、５００ｍｌフラスコに入れて滅菌されたＬ−ｂｒｏｔｈ液体培地（１００ｍｌ）に接種し、２５℃の条件下で、２〜５日間程度振とう培養（１５０ｒｐｍ）を行い、その後、得られた培養液からバチルス・チューリンジエンシス（Bacillus thuringiesis）に属する細菌由来の芽胞と形成殺虫性タンパク質との両者を遠心分離により回収し、乾燥することにより得られた培養物（即ち、本タンパク質の一つの形態）を意味する。
【００２６】
製剤例１  乳剤
本化合物１部と、ＢＴ菌培養物１０部とを、キシレン３６．５部及びジメチルホルムアミド３６．５部に溶解し、これにポリオキシエチレンスチリルフェニルエーテル１０部及びドデシルベンゼンスルホン酸カルシウム６部を加え、よく攪拌混合して乳剤を得る。
【００２７】
製剤例２  水和剤
本化合物５部と、ＢＴ菌培養物４５部とを、ラウリル硫酸ナトリウム４部リグニンスルホン酸カルシウム２部、合成含水酸化珪素微粉末２２部及び珪藻土２２部を混合した中に加え、よく攪拌混合して水和剤を得る。
【００２８】
製剤例３  粒剤
本化合物１部に、ＢＴ菌培養物５部、合成含水酸化珪素微粉末５部、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム５部、ベントナイト３０部及びクレー５４部を加え、よく攪拌混合し、次いでこれらの混合物に適当量の水を加え、さらに攪拌し、増粒機で製粒し、通風乾燥して粒剤を得る。
【００２９】
製剤例４  粉剤
本化合物０．５部と、ＢＴ菌培養物４部、合成含水酸化珪素微粉末１部、凝集剤としてドリレスＢ（三共社製）１部及びクレー７部とを乳鉢でよく混合した後にジュースミキサーで攪拌混合する。得られた混合物にカットクレー８６．５部を加えて、充分攪拌混合して粉剤を得る。
【００３０】
製剤例５  フロアブル剤
本化合物１部と、ＢＴ菌培養物１０部及びソルビタントリオエレート１．５部とを、ポリビニルアルコール２部を含む水溶液２６部中に加え、よく攪拌混合し、次いでこれらの混合物をサンドグライダーで微粉砕（粒径３μｍ以下）した後、この中に、キサンタンガム０．０５部及びアルミニウムマグネシウムシリケート０．１部を含む水溶液４８部を加え、さらにプロピレングリコール１５部を加えて攪拌混合してフロアブル剤を得る。
【００３１】
製剤例６  油剤
本化合物０．１部と、ＢＴ菌培養物０．８部とを、キシレン５部及びトリクロロエタン５部に溶解し、これを脱臭灯油８９．１部に混合して油剤を得る。
【００３２】
製剤例７  マイクロカプセル剤
本化合物２部と、ＢＴ菌培養物８部、フェニルキシリルエタン１０部及びスミジュールＬ−７５（住友バイエルウレタン株式会社社製トリレンジイソシアネート）０．５部とを混合した後、アラビアガムの１０％水溶液２０部中に加え、ホモミキサーで攪拌して平均粒径２０μｍのエマルションを得る。次に、これにエチレングリコール２部を加え、さらに６０℃の温浴中で２４時間反応させてマイクロカプセルスラリーを得る。一方、ザンサンガム０．２部及びビーガムＲ（三洋化成株式会社製アルミニウムマグネシウムシリケート）１．０部をイオン交換水５６．３部に分散させて増粘剤溶液を得る。上記マイクロカプセルスラリー４２．５部及び増粘剤溶液５７．５部を混合してマイクロカプセル剤を得る。
【００３３】
次に本発明組成物が優れた有害生物防除効果を示すことを試験例により示す。尚、２種類の有効成分を混合して処理した際に予想される殺虫率の理論値は、例えば、Ｃｏｌｂｙの計算式で代表される計算式（即ち、Ｅ＝Ｘ＋Ｙ−（Ｘ＋Ｙ／１００））により求められる。当該式において、
Ｘ：有効成分ＡをＭｐｐｍで処理した際の殺虫率（％）
Ｙ：有効成分ＢをＮｐｐｍで処理した際の殺虫率（％）
Ｅ：有効成分ＡをＭｐｐｍ、有効成分ＢをＮｐｐｍで処理した際に予想される殺虫率の理論値（％）
【００３４】
試験例１  （Spodoptera litura に対する食葉浸漬試験）
ＢＴ菌製剤品：フローバック（商標登録）（Bacillus thuringiensis var. aizawai ）ドライフロアブル製剤品、住友化学株式会社製）とＤＬ−リンゴ酸（ラセミ体、フリーな酸の結晶、和光純薬工業株式会社製）の水希釈液とを混合して各々の所定濃度になるように加えた希釈液に、展着剤（特製リノー：日本農薬株式会社製）を当該希釈液の１／５０００量加え、試験用薬液を調製した。ポット植えの５〜８葉期のキャベツの葉を切り取り、これを前記試験用薬液に６０秒間浸漬した。プラスチックカップ（５００ｃｃ）内に、直径９０ｍｍの濾紙を敷き、この上に浸漬後風乾したキャベツの葉を置いた。この上に、Spodoptera litura の３齢幼虫を１０頭放飼した（３反復）。処理６日後に供試虫の生死を観察し、下記の式によって補正することにより殺虫率（５）を算出した。その結果を表１及び表２に示す。尚、表１及び表２の中の「本タンパク質」における「施用濃度（ppm）」は、ＢＴ菌製剤品に含まれているＢＴ培養物の量を本タンパク質の量として用いて算出した値である。
【００３５】
殺虫率（％）＝１００×（Ｍｔ−Ｍｃ）／（１００−Ｍｃ）
Ｍｔ：供試化合物処理区における死虫率（％）
Ｍｃ：供試化合物無処理区における死虫率（％）
【００３６】
【表１】
2006265229.tif 000002
【００３７】
【表２】
2006265229.tif 000003
【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明は、単に混合した時に得られると予想される相加効果以上の相乗効果を得ることが出来、使用する薬量の低減を可能とする有害生物防除組成物を提供可能とする。