(57)【要約】      （修正有）【課題】化粧品・皮膚外用剤用途での機能・効果が優れたリン脂質誘導体を提供する。【解決手段】式（１）で示されるリン脂質誘導体。2006265104.tif 000010（Ｒ１ＣＯは炭素数１４〜１８の脂肪酸の残基であり、この脂肪酸に占める不飽和脂肪酸の割合が０．１ｍｏｌ％以下である。Ｒ２ＣＯは、炭素数１４〜２２の脂肪酸の残基であり、この脂肪酸に占める炭素数１８〜２２のモノ不飽和脂肪酸の割合が９０ｍｏｌ％以上であり、２個以上の不飽和基を持つ炭素数１４〜２２の不飽和脂肪酸の割合が０．１ｍｏｌ％以下である。）【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
天然水素添加リン脂質の２位置換誘導体であって、相転移温度が３７℃以下である、式（１）で示される皮膚外用剤用リン脂質誘導体。
【化１】
2006265104.tif 000009
（Ｒ１ＣＯは炭素数１４〜１８の脂肪酸の残基であり、この脂肪酸に占める不飽和脂肪酸の割合が０．１モル％以下である。
Ｒ２ＣＯは、炭素数１４〜２２の脂肪酸の残基であり、この脂肪酸に占める炭素数１８〜２２のモノ不飽和脂肪酸の割合が９０モル％以上であり、２個以上の不飽和基を持つ炭素数１４〜２２の不飽和脂肪酸の割合が０．１モル％以下である。）
【請求項２】
前記モノ不飽和脂肪酸がオレイン酸である、請求項１記載の皮膚外用剤用リン脂質誘導体。
【請求項３】
ホスファチジルコリン含有量が８５重量％以上である、請求項１または２記載の皮膚外用剤用リン脂質誘導体。
【請求項４】
前記天然水素添加リン脂質が水素添加大豆リン脂質である、請求項１〜３のいずれか一つの請求項に記載の皮膚外用剤用リン脂質誘導体。
【請求項５】
Ｃａ２＋含有量が１００ｐｐｍ以下である、請求項１〜４のいずれか一つの請求項に記載の皮膚外用剤用リン脂質誘導体。
【請求項６】
４０℃で１ヶ月経過後の過酸化物価が５以下である、請求項１〜５のいずれか一つの請求項に記載の皮膚外用剤用リン脂質誘導体。
【請求項７】
クロロホルム／メタノール＝２／１（体積比）の溶剤で２０重量％の溶液とした際の色相がＡＰＨＡ：１０以下である、請求項１〜６のいずれか一つの請求項に記載の皮膚外用剤用リン脂質誘導体。
【請求項８】
酸価が１０以下である、請求項１〜７のいずれか一つの請求項に記載の皮膚外用剤用リン脂質誘導体。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一つの請求項に記載の皮膚外用剤用リン脂質誘導体を配合してなる皮膚外用剤。
【請求項１０】
請求項１〜８のいずれか一つの請求項に記載の皮膚外用剤用リン脂質誘導体を含むリポソーム。
【請求項１１】
請求項１〜８のいずれか一つの請求項に記載の皮膚外用剤用リン脂質誘導体を配合してなる脂肪乳剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、天然水素添加リン脂質を原料に、１位に飽和脂肪酸、２位に高純度で安定性の高いモノ脂肪酸が結合したリン脂質誘導体、及びこれを配合した皮膚外用剤、リポソーム、脂肪乳剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、化粧品に対する安全性の要求が以前にも増して求められており、天然由来の化粧品が消費者へ安心感を与え、消費者の天然由来嗜好が高まっている。特に、狂牛病などの影響もあり、植物由来の原料を用いた化粧品が望まれている。また、環境面からも自然界で自浄作用のある天然由来原料が望まれている。
【０００３】
その中で、安全性や入手性の点から大豆あるいは卵黄由来のリン脂質が広く用いられている。その用途は、乳化剤、分散剤、マイクロエマルジョン剤、リポソーム形成材料等として広く利用されている。このような多様な要求に対応するため、各々の用途に応じた適切な機能を有する種々のリン脂質が求められている。
しかしながら、天然由来の未水素添加リン脂質を用いた場合では、色や臭いが悪く、特に安定性が悪い問題点がある。これは、リン脂質を構成する脂肪酸として、リノール酸、リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アラキドン酸などの２つ以上の二重結合を有するポリエン脂肪酸を含むため、容易に酸化され、着色や変臭などが起こり、用途が非常に限られていた。
【０００４】
そのため、例えば特許文献１では、未水素添加の卵黄リン脂質に低級アルコールを残留させた組成物が提案されているが、安定性が改善されるものの、満足できるものではなかった。
【特許文献１】特開平１０−１５５４２７号公報
【０００５】
また、別の解決方法として、一般的に水素添加したリン脂質を用いることが検討されている。しかしながら、水素添加により、リン脂質の相転移温度を上昇させてしまう。このリン脂質の相転移温度とは、ゲル状態から液晶状態へ変化する際の温度であり、相転移温度以下ではアシル鎖の運動が抑制され流動性がないゲル状であり、相転移温度以上では流動性の増した液晶状態となる。一般に相転移温度はリン脂質を構成する脂肪酸鎖長、不飽和度、親水基の種類等によって大きく異なる。天然由来のリン脂質では組成に幅があるが、水素添加により相転移温度が、一般的な大豆リン脂質では−２０℃〜−１０℃から５０〜５５℃へ、一般的な卵黄リン脂質では−１５℃〜−５℃から４５℃〜５０℃へと上昇する。こうした相転移温度の上昇により、分散性、溶解度等の界面化学的な物性が変化し、その機能効果に大きく影響を与えるため、用途が限られる。特に、化粧品では分散性が悪くなり、分離・凝集し、また使用感として硬い感じになり、のび・なめらかさといった重要な要因に影響を与えるという欠点がある。そのため、例えば特許文献２では、水素添加レシチンにグリコール類を添加する方法が提案されているが、製品の処方が制限される等の問題があった。
【特許文献２】特開２００４−５１４９５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
このように従来の天然由来の未水素添加リン脂質、あるいは水素添加リン脂質では、化粧品として使用する場合に必要な、色、臭い、安定性、分散性および溶解度等の界面化学的な物性、使用感（のび・なめらかさなど）を同時に満足するのが困難である。特に、長期間の保存で凝集や沈殿物を生じないことと、酸化に対する安定性を満足するのが困難である。
【０００７】
本発明の課題は、天然由来の未水素添加リン脂質あるいは水素添加リン脂質では得られない優れた酸化安定性と適正な相転移温度を有し、分散性、溶解度等の界面化学的な物性が良好で、化粧品・皮膚外用剤用途での機能・効果が優れたリン脂質誘導体を工業的に提供することである。
【０００８】
そのため、リン脂質のアシル基の種類と、不純物による物性への影響、相転移温度などの物性と機能・効果の関係を検討し、優れた機能や効果として、安定性が高く、分散性、溶解度等の界面化学的な物性が優れたリン脂質誘導体を提供することである。
【０００９】
特に、本発明の課題は、化粧品・皮膚外用剤用途において、原料が天然由来であるリン脂質誘導体を配合することにより、安定性が高くかつ水分散性が良好でかつ使用感に優れた効果を発揮する皮膚外用剤、リポソーム、脂肪乳剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
すなわち、本発明は以下に示すものである。
（１）  天然水素添加リン脂質の２位置換誘導体であって、相転移温度が３７℃以下である、式（１）で示される皮膚外用剤用リン脂質誘導体。
【化２】
2006265104.tif 000002
（Ｒ１ＣＯは炭素数１４〜１８の脂肪酸の残基であり、この脂肪酸に占める不飽和脂肪酸の割合が０．１ｍｏｌ％以下である。
Ｒ２ＣＯは、炭素数１４〜２２の脂肪酸の残基であり、この脂肪酸に占める炭素数１８〜２２のモノ不飽和脂肪酸の割合が９０ｍｏｌ％以上であり、２個以上の不飽和基を持つ炭素数１４〜２２の不飽和脂肪酸の割合が０．１ｍｏｌ％以下である。）
【００１１】
（２）  ２位脂肪酸残基がオレイン酸残基である前記のリン脂質誘導体。
（３）  ホスファチジルコリン含有量が８５重量％以上である前記のリン脂質誘導体。
（４）  天然水素添加リン脂質が水素添加大豆リン脂質である前記のリン脂質誘導体。
（５）  Ｃａ２＋含有量１００ｐｐｍ以下である前記のリン脂質誘導体。
（６）  ４０℃で１ヶ月経過後の過酸化物価が５以下である前記のリン脂質誘導体。
（７）  クロロホルム／メタノール＝２／１（体積比）の溶剤で２０重量％の溶液とした際の色相がＡＰＨＡ：１０以下である前記のリン脂質誘導体。
（８）  酸価が１０以下である前記のリン脂質誘導体。
（９）  前記のリン脂質誘導体を配合してなる皮膚外用剤。
（１０）  前記のリン脂質誘導体を含むリポソーム。
（１１）  前記のリン脂質誘導体を配合してなる脂肪乳剤。
【発明の効果】
【００１２】
本発明により、飽和リン脂質と不飽和リン脂質の特性を併せ持ち、安定性が高く、分散性、溶解度等の界面化学的な物性が優れ、かつ皮膚外用剤・化粧品での機能効果や使用感が良好な相転移温度の範囲を有する原料が天然由来であるリン脂質誘導体の提供が可能となった。特に、２位に高純度モノ不飽和脂肪酸を導入することにより、安定性が飛躍的に高くなった。
【００１３】
さらに、リン脂質中のＣａ２＋含有量を１００ｐｐｍ以下とすることにより、このリン脂質誘導体の溶解性、水分散性が改善可能となった。また、このリン脂質誘導体を配合することにより、安定性が高くかつ水分散性が良好でかつ使用感に優れた効果を発揮する皮膚外用剤、リポソーム、脂肪乳剤の提供が可能となった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
式（１）で示される本発明のリン脂質誘導体の原料は、天然由来のリン脂質である。また、安定性等の点から、不飽和脂肪酸を実質的に有しない水素添加品とする。このような水素添加天然リン脂質原料としては、哺乳類に由来しないリン脂質が好ましく、植物または卵黄由来のリン脂質が更に好ましい。植物由来の水素添加リン脂質としては、水素添加大豆リン脂質が特に好ましい。
【００１５】
このリン脂質原料のリン脂質純度の低いものは、加水分解の際に副生成物が多く生成するので、純度８５重量％以上のものが好ましく、特に９０重量％以上のものが好ましい。
【００１６】
また、リン脂質原料中のホスファチジルコリン含有量が８５重量％以上のものが好ましく、特に９０重量％以上のものが好ましい。原料のリン脂質中のホスファチジルコリン含有量を８５重量％以上とすることによって、得られるリン脂質誘導体中のホスファチジルコリン含有量も高くなり、分散性、溶解度といった界面化学的な物性が向上し、皮膚外用剤・化粧品で必須の分散性が良好となり、分離・凝集を防止でき、使用感も向上する。
【００１７】
本発明のリン脂質誘導体に結合する１位の脂肪酸Ｒ１ＣＯＯＨは、炭素数１４〜１８の脂肪酸であり、この脂肪酸に占める不飽和脂肪酸の割合が０．１ｍｏｌ％以下である（これは特に好ましくは実質的に含有されていない）。即ち、１位の脂肪酸はほぼ飽和脂肪酸からなる。この脂肪酸は、１種または２種以上の混合物でも良く、好ましくは２種以上の混合物である。本発明の１位のアシル基Ｒ１ＣＯは、原料である天然水素添加リン脂質の１位アシル基組成のままであり、炭素数１４〜１８である。これは例えばミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸などの１種または２種以上の混合物である。
【００１８】
本発明のリン脂質誘導体の組成中には、一位に炭素数１４未満の脂肪酸や炭素数１８を超える脂肪酸が置換されたリン脂質誘導体が不純物として存在していても良いが、これらの不純物量は少ないことが好ましく、具体的には本発明のリン脂質誘導体１００ｍｏｌ％に対して１．０ｍｏｌ％以下が好ましく、０．１ｍｏｌ％以下が更に好ましい。炭素数が１４未満の飽和脂肪酸の場合には、臭気や安定性の問題から好ましくなく、炭素数１８より多い炭素数の飽和脂肪酸は、相転移温度が高くなるため好ましくない。
【００１９】
本発明の２位置換リン脂質誘導体を合成するには、天然水素添加リン脂質（特に好ましくは水素添加大豆リン脂質）を原料に用い、２位を塩化カルシウム共存下、ホスホリパーゼＡ２で加水分解し、リゾリン脂質を得る。次に、このリゾリン脂質の２位を、炭素数１８〜２２の脂肪酸（２個以上の不飽和基を持つ不飽和脂肪酸が０．１ｍｏｌ％以下であり、モノ不飽和脂肪酸が９０ｍｏｌ％以上である）でアシル化して得られる。アシル化の方法としては、特に限定されず、通常のアシル化法を用いればよい。
【００２０】
本発明のリン脂質誘導体の２位に導入する際用いる脂肪酸としては、２個以上の不飽和基を持つ炭素数１４〜２２の不飽和脂肪酸が０．１ｍｏｌ％以下であり、炭素数１８〜２２のモノ不飽和脂肪酸が９０ｍｏｌ％以上である炭素数１４〜２２の脂肪酸を使用する。
【００２１】
炭素数１８〜２２のモノ不飽和脂肪酸としては、例えば、オレイン酸、ガドレイン酸、エルカ酸などから選ばれるモノ不飽和脂肪酸が好ましい。特に好ましくはオレイン酸が良い。炭素数１８より小さいモノ不飽和脂肪酸が多くなると、特異な臭気が強くなり、化粧料として使用しにくくなるため好ましくない。炭素数２２より大きいモノ不飽和脂肪酸が多くなると、安定性、分散性等が悪く、また高純度原料を入手しにくいため好ましくない。これらモノ不飽和脂肪酸は天然植物由来であることが好ましい。二位を置換するべき炭素数１４〜２２の脂肪酸のうち、２個以上の不飽和成分が０．１ｍｏｌ％以下かつ炭素数１８〜２２のモノ不飽和脂肪酸が９０ｍｏｌ％以上（好ましくは９５ｍｏｌ％以上）の脂肪酸組成物を原料に用いることが好ましい。
【００２２】
２位に導入する脂肪酸には、炭素数１４以上、１８未満のモノ不飽和脂肪酸が含まれていても良いが、その比率は、炭素数１４〜２２の脂肪酸全体の９．９ｍｏｌ％以下でなければならず、４．９ｍｏｌ％以下であることが好ましく、１．０ｍｏｌ％以下であることが更に好ましい。特に好ましくは、炭素数１４以上、１８未満のモノ不飽和脂肪酸が実質的に含有されていない。
【００２３】
２位に導入する脂肪酸には、炭素数１４〜２２の飽和脂肪酸が含まれていても良いが、その比率は、炭素数１４〜２２の脂肪酸全体の９．９ｍｏｌ％以下でなければならず、４．９ｍｏｌ％以下であることが好ましく、１．０ｍｏｌ％以下であることが更に好ましい。特に好ましくは、炭素数１４〜２２の飽和脂肪酸が実質的に含有されていない。
【００２４】
また、２位に導入する脂肪酸には、炭素数１４以上、１８未満のモノ不飽和脂肪酸と炭素数１４〜２２の飽和脂肪酸との両方が含まれていても良いが、その合計比率は、炭素数１４〜２２の脂肪酸全体の９．９ｍｏｌ％以下でなければならず、４．９ｍｏｌ％以下であることが好ましく、１．０ｍｏｌ％以下であることが更に好ましい。
【００２５】
また、本発明のリン脂質誘導体の組成中には、２位に炭素数１４未満の脂肪酸や炭素数２２を超える脂肪酸が置換されたリン脂質誘導体が不純物として存在していても良いが、これらの不純物量は少ないことが好ましく、具体的には本発明のリン脂質誘導体１００ｍｏｌ％に対して０．５ｍｏｌ％以下が好ましく、０．１ｍｏｌ％以下が更に好ましい。
【００２６】
２位に導入する際用いる不飽和脂肪酸としては、従来工業スケールで生産されている市販のモノ不飽和脂肪酸（二重結合が１つの脂肪酸）を用いた場合では、純度が５０〜９０ｍｏｌ％程度と低く、さらに各種の微量不純物をも有しているため、色、臭い、安定性などの品質が不十分である。特に、２個以上の不飽和基を持つ脂肪酸が多いため、安定性等が良くない問題がある。
【００２７】
そのため、高純度なモノ不飽和脂肪酸を用いなければならない。その原料としては、モノ不飽和脂肪酸を含有する脂肪酸混合物であればよいが、好ましくは天然植物由来のオリーブ油、ゴマ油、米ヌカ油、大豆油、茶実油、ツバキ油、コーン油、ナタネ油、パーム油、落花生油、サフラワー油、ひまわり油、マカダミアナッツ油などの油脂を加水分解して得られる脂肪酸やこれらの混合物が使用でき、市販の天然植物由来のモノ不飽和脂肪酸も原料とすることが出来る。当然のことながら、モノ不飽和脂肪酸の含量が高い原料ほど効率良く、高純度モノ不飽和脂肪酸を得ることができる。こうした原料より、公知の分子蒸留法、尿素付加法、液体クロマトグラフィー法、超臨界抽出法、溶剤分別法などの方法により精製された、２個以上の不飽和結合を有するポリエン不飽和脂肪酸成分が０．１ｍｏｌ％以下かつ純度９０ｍｏｌ％以上（特に好ましくは、９５ｍｏｌ％以上）のモノ不飽和脂肪酸を用いなければならない。
【００２８】
ここで、２個以上の不飽和基を持つポリエン不飽和脂肪酸残基の比率が０．１ｍｏｌ％より多い場合は、リン脂質誘導体の酸化安定性、保存安定性が悪くなる。モノ不飽和脂肪酸純度が９０ｍｏｌ％未満の場合は、分散性、溶解度等の界面化学的な物性が悪化する。２個以上の不飽和基を持つポリエン不飽和脂肪酸残基は実質的に含有されていないことが特に好ましい。
【００２９】
こうした高純度なモノ不飽和脂肪酸を用いて得られる本発明のリン脂質誘導体に結合した２位の不飽和脂肪酸残基としては、２個以上の不飽和基を持つ不飽和脂肪酸残基が０．１ｍｏｌ％以下であり、かつモノ不飽和脂肪酸が９０ｍｏｌ％以上である炭素数１８〜２２の脂肪酸残基とする。２個以上の不飽和基を持つ不飽和脂肪酸残基が０．１ｍｏｌ％より多い場合は、リン脂質誘導体の酸化安定性、保存安定性が悪くなる。炭素数１８〜２２の不飽和脂肪酸残基としては、例えば、オレイン酸、ガドレイン酸、エルカ酸などから選ばれるモノ不飽和脂肪酸残基が好ましい。特に好ましくはオレイン酸が良い。これらモノ不飽和脂肪酸残基は天然植物由来であることが好ましい。また、脂肪酸純度として、２個以上の不飽和成分が０．１ｍｏｌ％以下かつ純度９０ｍｏｌ％以上のモノ不飽和脂肪酸残基であることが好ましく、この純度は、特に好ましくは、９５ｍｏｌ％以上である。
【００３０】
本発明に用いるリン脂質誘導体はホスファチジルコリン含有量が８５重量％以上であることが好ましく、より好ましくは９０重量％以上である。リン脂質中のホスファチジルコリン含有量が低いと、分散性、溶解度等の界面化学的な物性が悪く、特に、皮膚外用剤・化粧品では分散性が悪くなり、分離・凝集し、使用感等の重要な要因に影響を与えるという欠点がある。
【００３１】
一般的にリン脂質のアシル基の脂肪酸鎖長、不飽和度は、そのリン脂質の相転移温度に大きく影響を与える。相転移温度はアシル基鎖長が長くなるにつれて高くなり、飽和に比べ不飽和の方が極端に低下する。この相転移温度とは、ゲル状態から液晶状態へ変化する際の温度であり、相転移温度以下ではアシル鎖の運動が抑制され流動性がないゲル状であり、相転移温度以上では流動性の増した液晶状態となる。この相転移温度の前後で、リン脂質の分散性、溶解度等の界面化学的な物性が変化し、その機能効果に大きく影響を与える。そこで、リン脂質の構造と相転移温度、物性と機能効果の関係を詳細に検討した結果、本発明の１位に飽和脂肪酸、２位にモノ不飽和脂肪酸を結合させたリン脂質誘導体が分散性、溶解度等の界面化学的な物性が優れ、かつ皮膚外用剤での機能効果や使用感が良好であるためには、相転移温度が３７℃以下であることが好ましいことを見出した。特に好ましくは、２５℃以下である。相転移温度が３７℃より高い場合は、分散性、溶解度等の界面化学的な物性が悪く、特に、皮膚外用剤・化粧品では分散性が悪くなり、分離・凝集し、また使用感として硬い感じになり、のび・なめらかさといった重要な要因に影響を与える。
【００３２】
また、リン脂質誘導体を配合して使用する際には、一般的に相転移温度以上の高温条件下で攪拌・混合しなければ均一に分散しないので、相転移温度の高いリン脂質では熱劣化しやすく、特に、不飽和結合を有するリン脂質やその他熱に不安定な配合成分が劣化しやすい。そのため、相転移温度が低いことが好ましい。
【００３３】
本発明に用いるリン脂質誘導体は、天然水素添加リン脂質、特に好ましくは水素添加大豆リン脂質を原料に用い、リゾ化反応を行う際には、アシル基の転移反応を起こさず、高い反応率を得るために塩化カルシウムを添加している。そこで、０．１ｍＭから２Ｍの濃度となるような塩化カルシウム共存下、ホスホリパーゼＡ２で加水分解する。得られたリゾリン脂質には、そのため不純物としてＣａ２＋が残存する。こうしたＣａ２＋のような２価の金属イオンがリン脂質中に残存した場合、溶解性や分散性が悪くなる。そこで、水・有機溶剤による洗浄・晶析とイオン交換等のカラムクロマトグラフィーを組合わせた精製を行うことにより、Ｃａ２＋残存量が１００ｐｐｍ以下となった精製リゾリン脂質を得る。
【００３４】
次に、このリゾリン脂質の２位をアシル化し、水・有機溶剤による洗浄・晶析とイオン交換等のカラムクロマトグラフィーを組合わせた精製を行うことにより、不純物を除去し、Ｃａ２＋残存量が１００ｐｐｍ以下となるように精製して、本発明に用いるリン脂質誘導体が得られる。アシル化の方法としては特に限定されず、通常のアシル化法を用いればよい。しかし、リゾリン脂質中のＣａ２＋残存量が１００ｐｐｍより多い場合は、アシル化反応が阻害され、目的物の純度が悪くなってしまうため、Ｃａ２＋残存量を１００ｐｐｍ以下とすることが望ましい。またさらに、リン脂質中のＣａ２＋含有量を１００ｐｐｍ以下とすることにより、本発明のリン脂質誘導体の溶解性が良好となり、特に、水への溶解性に優れたものが得られる。特に好ましくは、Ｃａ２＋含有量を１０ｐｐｍ以下とするのが良い。Ｃａ２＋含有量が１００ｐｐｍより多い場合は、水に溶解しにくく、溶け残りを生じやすく、特に、長期間保存した場合は沈殿物を生じやすい。
【００３５】
本発明のリン脂質誘導体は、２位に結合した脂肪酸に占める、２個以上の不飽和基を持つ脂肪酸の割合が０．１ｍｏｌ％以下であるため、酸化安定性、保存安定性が極めて高く、４０℃、１ヶ月後の過酸化物価は５以下である。このため、分散性、溶解度等の界面化学的な物性はほとんど変わらず、かつ皮膚外用剤での機能効果や使用感が良好なまま維持される。４０℃、１ヶ月後の過酸化物価が５より大きく上昇する場合は、分散性、溶解度等の界面化学的な物性や皮膚外用剤での機能効果や使用感が好ましくなくなり、場合によっては着色、変臭等の問題を引き起こす。
【００３６】
本発明のリン脂質誘導体は皮膚外用剤等への配合や安定性の観点から、色相は本発明のリン脂質誘導体をクロロホルム／メタノール＝２／１（体積比）の溶剤で２０重量％の溶液とした際にＡＰＨＡが１０以下であることが好ましい。ＡＰＨＡが１０より多い場合は、酸化安定性、保存安定性が悪くなり、これを配合する皮膚外用剤での機能効果や使用感が好ましくなくなり、場合によっては着色、変臭等の問題を引き起こす。
【００３７】
本発明のリン脂質誘導体は、安定性や分散性の観点から酸価が１０以下であることが好ましい。特に好ましくは、５以下である。酸価が１０より高い場合は、安定性や分散性が悪く、経時的に加水分解反応が進行し、遊離脂肪酸とリゾリン脂質が多くなり、さらに、安定性や分散性が悪なり、皮膚外用剤での機能効果や使用感の点からも好ましくない。また、配合物とした際に、加水分解によりｐＨ等も下がり、その他の配合物の安定性にも影響を与えるため好ましくない。
【００３８】
本発明の皮膚外用剤とは、薬事法の言う化粧品、医薬部外品、医薬品のいずれに属していてもよく、また属していなくともよい。本発明の皮膚外用剤は、人体の外用に使用される化粧、ヘアケアを目的し、乳液、ローション、クリーム、美容液、パック、洗顔料、などの基礎化粧品や、ファンデーション、口紅、頬紅、アイライナイー、アイシャドー、まゆずみなどの仕上げ化粧品、整髪料、養毛料、シャンプー、リンスなどの頭髪化粧品などをいう。
【００３９】
本発明のリン脂質誘導体は、化粧料中、乳化剤、分散剤、マイクロエマルジョン剤、可溶化剤、保湿剤、感触向上剤、リポソーム形成材料、顔料の表面処理剤等に幅広く配合することができるが、その配合量は、皮膚外用剤のそれぞれの要求特性等によって異なるが、通常０．０１重量％以上が好ましい。
【００４０】
また、本発明の皮膚外用剤には、前記必須成分以外に、精製水、従来から使用されている油脂、油脂誘導体、界面活性剤、増粘剤、ｐＨ調整剤、色素、無機顔料、香料、酸化防止剤、防腐剤、保湿剤などを適宜配合して、常法により製造することができる。
【００４１】
また、特に、本発明のリン脂質をリポソームとして調製する場合は、一般的なリポソームの製法が適用できる。例えば、ボルテクスィング法、ソニケーション法、プレベシクル法、エタノール注入法、フレンチプレス法、エーテル注入法、アニーリング法、逆相蒸発法、Ｗ／Ｏ／Ｗエマルジョン法などの方法が挙げられるが、これらのいずれの調製法を用いてもよく、またこれらに限定されるものではない。
【００４２】
本発明のリン脂質誘導体を配合してなる脂肪乳剤とは、主として油成分、乳化剤、有効成分、水、その他添加剤からなり、本発明のリン脂質誘導体は乳化剤の成分として利用できる。これらは慣用の高圧乳化法等の方法により混合され、脂肪乳剤として調製することができる。
【実施例】
【００４３】
参考例、試験例及び実施例を挙げて本発明を更に説明する。各例中、「％」は特別な言及がない限り、「重量％」単位である。
【００４４】
（参考例１）
１．  試料
本発明において、リン脂質の組成分析、純度測定は薄層クロマトグラフィー（以下、ＴＬＣという）で行った。ＴＬＣは、「Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ  ６０」（Merck & Co.Inc.）を用い、５％の試料２マイクロリットルをスポットし、クロロホルム：メタノール：蒸留水＝65:25:4（容量比）で展開し、硫酸銅（無水）１０ｇとリン酸（８５％）８ミリリットルを蒸留水で１００ミリリットルとした溶液を噴霧後加熱する方法により行った。また、本発明の合成例において用いた原料の天然植物由来モノ不飽和脂肪酸の脂肪酸純度は、脂肪酸試料１０ｍｇに、三フッ化ホウ素／メタノール試薬５ｍＬを加え、水浴上で１５分間加温した。冷却後、ｎ−ヘキサン５ｍＬと飽和食塩水１５ｍＬを加えて振とうし、静置後、ｎ−ヘキサン相のガスクロマトグラフィー分析を下記の条件で行って、純度を測定した。
カラム温度：                  ２１０℃
注入温度：                    ２２５℃
スプリット比：                １／１００
キャリアーガスとその流量：    窒素ガス、３０ｍＬ／分
検出器：                      ＦＩＤ
試料量：                      ２．０μＬ
【００４５】
（本発明品１の調製）
水素添加大豆リン脂質ホスファチジルコリン（ホスファチジルコリン純度：９０％品、C16:0=17.7ｍｏｌ％, C18:0=81.9ｍｏｌ％）１２０ｇをクロロホルム１８００ミリリットルに溶解し、塩酸１００ミリモルトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン緩衝液（ｐＨ＝８．０）８８０ミリリットル、１００ミリモル塩化カルシウム水溶液１３２０ミリリットル、およびホスホリパーゼＡ２２４０００単位を加え、４０℃で２４時間反応し、２位のアシル基を加水分解した。反応後、反応液を分液ロートに移し、６時間静置し、２層に分離した後、下層を別の分液ロートに移して水洗するため、蒸留水１３２０ミリリットルを加え、振とうし、６時間静置した。２層に分離した後、下層をフラスコに分取し、エバポレーターで溶媒留去し、ヘキサン５０００ミリリットルを加えて４℃に冷却し、同温度で１時間保ったのち、濾過して析出物６４．３ｇを得た。これにクロロホルム１２００ミリリットル、メタノール６００ミリリットルを加えて、溶解し、イオン交換樹脂（アンバーライトIRC-50、ロームアンドハース社製）を充填したカラム（カラム容量：５００ミリリットル）を通液させ、処理液をエバポレータで５００ミリリットルまで濃縮した。これにアセトン５リットルを加えて１０℃に冷却し、同温度で１時間保ったのち、濾過して析出物６０．３ｇを得た。
【００４６】
得られた析出物の組成は、１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％）９８．５％、遊離脂肪酸１．５％、Ca2+残存量１３．９ppmであった。次に、脂肪酸の酸無水物化の方法は、ヒマワリ油由来の高純度オレイン酸（日本油脂株式会社製「ＥＸＴＲＡ  ＯＬＥＩＣ-９９」、オレイン酸純度：９９．５ｍｏｌ％、ポリ不飽和脂肪酸：０．０２ｍｏｌ％）１００．０ｇをクロロホルム２００ミリリットルに溶解し、１０℃に冷却し、ジシクロヘキシルカルボジイミド４０ｇをクロロホルム２０ミリリットルに溶解したものをゆっくり滴下した。１時間反応した後、析出した白色のジシクロヘキシルウレアを濾過により除去し、オレイン酸無水物溶液を得た。次に、得られたろ液のオレイン酸無水物と、先の１−アシル−２−リゾホスファチジルコリンの析出物６０．３ｇ、ジメチルアミノピリジン３．０ｇを加え、２位のアシル化反応を４０℃、２４時間行った。得られた反応液をエバポレーターで溶媒留去し、酢酸エチル１リットル、蒸留水１リットルを加え、４０℃で攪拌を行った後、６時間静置を行った。２層に分離した後、下層を分取し、酢酸エチル１リットルを加え、再び４０℃で攪拌を行った後、６時間静置を行い、２層に分離した後、下層を分取した。次に、この下層にクロロホルム１リットルを加え、４０℃で攪拌を行った後、６時間静置を行い、２層に分離した後、下層を分取した。得られた下層に、クロロホルム１リットルを加えて希釈し、イオン交換樹脂（「アンバーライトIRC-50」、ロームアンドハース社製）を充填したカラム（カラム容量：５００ミリリットル）を通液させ、処理液をエバポレータで５００ミリリットルまで濃縮した。これにアセトン５リットルを加えて１０℃に冷却し、同温度で１時間保ったのち、濾過して析出物５０．１ｇを得た。得られた析出物の組成は、１−アシル−２−オレオイル−３−ホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％、２位アシル C18:1=99.2ｍｏｌ％、略称ＨＳＯＰＣ）９９．４％、１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン０．５％、遊離脂肪酸０．１％、Ca2+残存量６．７ppmであった。
【００４７】
（本発明品２の調製）
ナタネ油由来の高純度ガドレイン酸（ガドレイン酸純度：９９．３ｍｏｌ％、ポリ不飽和脂肪酸：０．０２ｍｏｌ％）１００．０ｇをクロロホルム２００ミリリットルに溶解し、１０℃に冷却し、ジシクロヘキシルカルボジイミド４０ｇをクロロホルム２０ミリリットルに溶解したものをゆっくり滴下した。１時間反応した後、析出した白色のジシクロヘキシルウレアを濾過により除去し、ガドレイン酸無水物溶液を得た。得られたろ液のガドレイン酸無水物と本発明品１で得られた１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％）９８．５％品６０．０ｇとジメチルアミノピリジン３．０ｇを加え、２位のアシル化反応を４０℃、２４時間行った。得られた反応液は本発明品１と同様に処理し、析出物５０．４ｇを得た。得られた析出物の組成は、１−アシル−２−ガドレオイル−３−ホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％、２位アシル C20:1=97.6ｍｏｌ％、略称ＨＳＧＰＣ）９９．２％、１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン０．７％、遊離脂肪酸０．１％、Ca2+残存量７．９ppmであった。
【００４８】
（本発明品３の調製）
ナタネ油由来の高純度エルカ酸（エルカ酸純度：９９．５ｍｏｌ％、ポリ不飽和脂肪酸：０．０２ｍｏｌ％）１００．０ｇをクロロホルム２００ミリリットルに溶解し、１０℃に冷却し、ジシクロヘキシルカルボジイミド４０ｇをクロロホルム２０ミリリットルに溶解したものをゆっくり滴下した。１時間反応した後、析出した白色のジシクロヘキシルウレアを濾過により除去し、エルカ酸無水物溶液を得た。得られたろ液のエルカ酸無水物と本発明品１で得られた１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％）９８．５％品６０．０ｇとジメチルアミノピリジン３．０ｇを加え、２位のアシル化反応を４０℃、２４時間行った。得られた反応液は本発明品１と同様に処理し、析出物４９．９ｇを得た。得られた析出物の組成は、１−アシル−２−エルコイル−３−ホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％、２位アシル C22:1=96.4ｍｏｌ％、略称ＨＳＥＰＣ）９９．５％、１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン０．４％、遊離脂肪酸０．１％、Ca2+残存量５．８ppmであった。
【００４９】
（比較品１）
水素添加大豆リン脂質（ホスファチジルコリン純度：９０％品）：略称ＨＳＰＣ
（比較品２）
水素添加卵黄リン脂質（ホスファチジルコリン純度：９０％品）：略称ＨＥＰＣ
（比較品３）
大豆リン脂質（未水素添加品、ホスファチジルコリン純度：９０％品）：  略称：ＳＰＣ
（比較品４）
卵黄リン脂質（未水素添加品、ホスファチジルコリン純度：９０％品）：  略称：ＥＰＣ
【００５０】
（比較品５）
ヒマワリ油由来のオレイン酸（オレイン酸純度：８１．３ｍｏｌ％、ポリ不飽和脂肪酸：３．６ｍｏｌ％）を用いた以外は、本発明品１と同様に行って、析出物４７．７ｇを得た。得られた析出物の組成は、１−アシル−２−オレオイル−３−ホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％、２位アシル C18:1=80.4ｍｏｌ％、略称ＨＳＯＰＣ）９９．０％、１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン０．９％、遊離脂肪酸０．１％、Ca2+残存量７．２ppmであった。
【００５１】
（比較品６）
ヒマワリ油由来のオレイン酸（オレイン酸純度：６０．５ｍｏｌ％、ポリ不飽和脂肪酸：１１．２ｍｏｌ％）を用いた以外は、本発明品１と同様に行って、析出物４１．２ｇを得た。得られた析出物の組成は、１−アシル−２−オレオイル−３−ホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％、２位アシル C18:1=57.8ｍｏｌ％、略称ＨＳＯＰＣ）９８．８％、１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン１．１％、遊離脂肪酸０．１％、Ca2+残存量９．８ppmであった。
【００５２】
（比較品７）
ナタネ油由来のガドレイン酸（ガドレイン酸純度：８１．２ｍｏｌ％、ポリ不飽和脂肪酸：１．８ｍｏｌ％）を用いた以外は、本発明品２と同様に行って、析出物４７．５ｇを得た。得られた析出物の組成は、１−アシル−２−ガドレオイル−３−ホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％、２位アシル C20:1=80.2ｍｏｌ％、略称ＨＳＧＰＣ）９８．８％、１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン１．１％、遊離脂肪酸０．１％、Ca2+残存量８．８ppmであった。
【００５３】
（比較品８）
ナタネ油由来のエルカ酸（エルカ酸純度：８１．４ｍｏｌ％、ポリ不飽和脂肪酸：０．８ｍｏｌ％）を用いた以外は、本発明品３と同様に行って、析出物４８．０ｇを得た。得られた析出物の組成は、１−アシル−２−エルコイル−３−ホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％、２位アシル C22:1=80.4ｍｏｌ％、略称ＨＳＥＰＣ）９９．２％、１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン０．７％、遊離脂肪酸０．１％、Ca2+残存量７．４ppmであった。
【００５４】
（比較品９）
水素添加大豆リン脂質ホスファチジルコリン（ホスファチジルコリン純度：８０％品）を用いた以外は、比較品５と同様に行って、析出物４６．７ｇを得た。得られた析出物の組成は、１−アシル−２−オレオイル−３−ホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％、２位アシル C18:1=８０．２ｍｏｌ％、略称ＨＳＯＰＣ）７９．４％、１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン１．９％、遊離脂肪酸０．７％、その他リン脂質成分１４．８％、その他（脂肪酸エステル類等）３．２％、Ca2+残存量１９．５ppmであった。
【００５５】
（比較品１０）
イオン交換樹脂での処理を行わない以外は、比較品５と同様に行って、粗精製の析出物４３．７ｇを得た。得られた析出物の組成は、１−アシル−２−オレオイル−３−ホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％、２位アシル C18:1=８０．０ｍｏｌ％、略称ＨＳＯＰＣ）９７．４％、１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン２．５％、遊離脂肪酸０．１％、Ca2+残存量２１００ppmであった。
【００５６】
（比較品１１）
イオン交換樹脂での処理を行わない以外は、比較品８と同様に行って、粗精製の析出物４４．１ｇを得た。得られた析出物の組成は、１−アシル−２−エルコイル−３−ホスファチジルコリン（1位アシル C16:0=24.6ｍｏｌ％, C18:0=75.4ｍｏｌ％、２位アシル C22:1=８０．１ｍｏｌ％、略称ＨＳＥＰＣ）９７．２％、１−アシル−２−リゾホスファチジルコリン２．７％、遊離脂肪酸０．１％、Ca2+残存量２３００ppmであった。
【００５７】
（試料の脂肪酸組成の測定）
参考例１の試料を常法に従い、ＮａＯＨ／メタノールで加水分解した後、三フッ化ホウ素／メタノールでメチルエステルとし、ガスクロマトグラフィーにて各脂肪酸を定量し、1位と2位のアシル基が混合した全体の脂肪酸組成を測定した。また、本発明品1と同様の方法により参考例１の各試料の１−アシル−２−リゾリン脂質を合成し、同様に1位のアシル基を加水分解してガスクロマトグラフィーにて１位脂肪酸組成を測定した。２位アシル基の脂肪酸組成は、全体の脂肪酸組成と１位脂肪酸組成の差分から算出した。表1に結果を示す。
【００５８】
【表１】
2006265104.tif 000003
【００５９】
（相転移温度）
参考例１の試料の相転移温度は、示差走査熱量計ＤＳＣ（Ｓｅｉｋｏ製）で測定した（昇温速度：５℃／分）。表２に結果を示す。
【００６０】
（Ｃａ２＋含量）
参考例１の試料のＣａ２＋含量は、試料を酸で灰化した後、原子吸光測定装置（日立製作所製）で測定した。その際、０〜３０００ｐｐｍの検量線を作成し、定量を行った。表２に結果を示す。
【００６１】
（過酸化物価の経時変化）
参考例１の試料を用いた過酸化物価の経時変化は、試料を固体状態で、経時試験開始時と、空気下、４０℃、１ヶ月保存した後の過酸化物価（ＰＯＶ、日本油化学協会制定の基準油脂分析法２．４．１２−８６に準ず）を測定して行った。表２に結果を示す。
【００６２】
（酸価）
参考例１の試料の酸価は、日本油化学協会制定の基準油脂分析法４．２．１−１９９６に準じて測定した。表２に結果を示す。
【００６３】
（水分散性）
参考例１の試料を用い、２重量％の水分散液をスターラーで調製し、その水分散性を評価した。評価は、調製時（室温）、室温・１ヶ月後と４℃・１ヶ月後で目視にて行った。表２に結果を示す。
（評価の基準）
○：均一
△：やや不均一
×：沈殿を生じ、完全に分離
【００６４】
【表２】
2006265104.tif 000004
【００６５】
（乳液の調製）
参考例１の試料を使用して乳液を作製した。すなわち、表３の組成からなる基材のうち乳化剤を含む油相部を６０℃に加温し均一に溶解した後、攪拌しながら水相部を同温度で添加した。
【００６６】
【表３】
2006265104.tif 000005
【００６７】
（クリームの調製）
参考例１の試料を使用してクリームを作製した。すなわち、表４の組成からなる基材のうち乳化剤を含む油相部を６０℃に加温し均一に溶解した後、攪拌しながら水相部を同温度で添加した。
【００６８】
【表４】
2006265104.tif 000006
【００６９】
（リポソーム液の調製）
参考例１の試料を使用してリポソーム液を作製した。すなわち、参考例１のリン脂質２．００ｇ、コレステロール０．４５ｇ（１．３２ｍｍｏｌ）をナス型フラスコに入れ、クロロホルム５０ｍＬを加えて溶解し、ロータリーエバポレーターにて脱溶剤し、フラスコ内壁に脂質の薄膜を形成した。減圧下にて溶剤除去を十分に行い、ｐＨ７のリン酸緩衝生理食塩水液３０ｍＬを加えて分散し、さらに超音波洗浄器にて５分間処理を行いリポソーム溶液とした。
【００７０】
（安定性試験）
前記した乳液、クリーム、リポソーム液の各試料の安定性試験として、各試料を透明瓶に入れ、密閉し、４０℃、１ヶ月間保存した後、外観、臭いについて評価した。結果を表５に示す。
（臭いの評価基準）
○：良好。
△：やや不良。
×：不良。
【００７１】
（官能試験）
前記した乳液、クリーム、リポソーム液の各試料を皮膚に塗布し、官能試験を行った。官能試験は１０人の専門パネラーで行った。評価方法は、上腕部を洗浄した後に試料を塗布し、塗布時のなめらかさ、べたつきのなさ、塗布後のしっとり感についての評価を下記基準により５段階評価し、さらにその平均点をもとめ判定した。結果を表５に示す。
【００７２】
（評価基準）
５点：非常に良好。
４点：良好。
３点：普通。
２点：やや不良。
１点：不良。
（判定）
◎：平均点：４．５点以上
○：平均点：３．５点以上、４．５点未満
△：平均点：２．５点以上、３．５点未満
×：２．５点未満
【００７３】
【表５】
2006265104.tif 000007
【００７４】
表５の安定性試験および官能試験結果から明らかな如く、本発明品１〜３を用いた配合皮膚外用剤は、安定性に優れ、かつ使用感の良好な優れたものであった。これに対して比較品１〜１１を用いた配合皮膚外用剤は、安定性と使用感を同時に満足すべきものではなかった。
【００７５】
（クリームのパネル試験）
前記したクリームの各試料を、それぞれ３０〜５０歳のパネラー１０名にブラインドにて１ヶ月間使用し、しわ防止、皮膚のはり、皮膚のきめについて評価を行った。しわ防止に関しての評価基準は、「有効」、「やや有効」、「無効」の三段階で、肌のはり、肌のきめに関しての評価基準は、「良好」、「やや良好」、「変化なし」の三段階で行った。結果を表６に示す。ここで表中の数字は、各評価に該当する人数を示している。
【００７６】
【表６】
2006265104.tif 000008
【００７７】
以上の結果から判るように、本発明品は、しわ防止、皮膚のはり、皮膚のきめの各項目について、比較品に比べて著しく優れた特性を示し、皮膚外用剤、特に化粧品として有用であることが判った。