(57)【要約】【課題】  本発明は、クラミジア属細菌の感染または増殖を効果的に抑制する物質及びこれらの物質の利用法を提供することを目的とする。【解決手段】  本発明は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物または食品組成物を提供する【選択図】図１
2006282581.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、組成物。
【請求項２】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、5-ヒドロキシトリプトファン、メラトニン、セロトニン及びこれらの薬理学上許容可能な塩またはエステル或いは誘導体のうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とする、薬剤組成物。
【請求項３】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、メラトニン、セロトニンのうちいずれか１つから選ばれることを特徴とする、薬剤組成物。
【請求項４】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とし、前記抑制の有効濃度が、体内濃度の２倍濃度から１０倍濃度の範囲内であることを特徴とする、薬剤組成物。
【請求項５】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とし、前記抑制の有効濃度が、５μＭから５００μＭの範囲内であることを特徴とする、薬剤組成物。
【請求項６】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とし、前記抑制の有効濃度が、５‐ヒドロキシトリプトファンにおいては５０μＭから５００μＭの範囲内、セロトニンにおいては５０μＭから１００μＭの範囲内、メラトニンにおいては５μＭから５００μＭの範囲内であることを特徴とする、薬剤組成物。
【請求項７】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記クラミジア属細菌が、クラミジア・トラコマティス、クラミジア・ニューモニアエ、クラミジア・シタシ、クラミジア・フェリスのうちの少なくとも１種類であることを特徴とする、薬剤組成物。
【請求項８】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記クラミジア属細菌が、クラミジア・トラコマティス、クラミジア・ニューモニアエ、クラミジア・シタシ、クラミジア・フェリス、のうちの少なくとも１種類であることを特徴とする、請求項２から請求項６までのうちいずれか１項に記載の、薬剤組成物。
【請求項９】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記薬剤が経口薬、塗布薬、点眼薬、注射薬のいずれか１つから選ばれることを特徴とする、薬剤組成物。
【請求項１０】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記薬剤が経口薬、塗布薬、点眼薬、注射薬のいずれか１つから選ばれることを特徴とする、請求項２から請求項８までのうちいずれか１項に記載の、薬剤組成物。
【請求項１１】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、食品組成物。
【請求項１２】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、食品組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、5-ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニン及びこれらの薬理学上許容可能な塩またはエステル或いは誘導体のうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とする、食品組成物。
【請求項１３】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、食品組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とする、食品組成物。
【請求項１４】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、食品組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とし、前記食品が、飴、ガム、清涼飲料のうちの１種類であることを特徴とする、食品組成物。
【請求項１５】
クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、請求項１１から請求項１４のうちいずれか１項に記載の食品組成物を含む、食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細菌感染症の予防と治療に効果のある薬剤組成物及び食品組成物に関し、詳しくは、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物及び食品組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
クラミジア属細菌（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｃｅａｅ）は、人など真核生物の細胞内でのみ増殖が可能な偏性細胞内寄生性細菌であり、その一種であるクラミジア・トラコマティス（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、性病クラミジア）は主に生殖器に感染し、日本において性感染症の第一原因菌となるなど、広く一般に知られるようになってきた。またクラミジア・ニューモニアエ（Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、肺炎クラミジア）は、主に肺や動脈における炎症部位に感染し、風邪の原因菌であると同時に動脈硬化や虚血性心疾患への関連性が指摘されており、クラミジア・シタシ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｓｉｔｔａｃｉ）は主に気管から肺にかけての気道に感染し、オウム病の原因菌として肺炎などを起こす事が知られ、更にはクラミジア・フェリス（Ｃｈｌａｍｉｄｏｐｈｉｌａ  ｆｅｌｉｓ、猫クラミジア）は猫に感染する一方、人の目の粘膜などに感染し結膜炎を引き起こすなど、人畜感染症の例も報告されており、感染症原因菌としてのクラミジアへの対策が急務となっている。
【０００３】
クラミジア感染症への対策には、大きな問題点が２つ存在する。その第一は、表面に現れる症状の軽さである。性病クラミジアによる感染（不顕性感染の性感染症）や肺炎クラミジアによる感染では、よくあるただの風邪に似た症状で治まるという特徴があり、また、治療が必要と考えられる重篤な症状になりにくく、感染と症状が密かに進行してしまうという問題点がある。
【０００４】
第二点目の問題点としては、治療が必要な症状が現れた際、治療において用いられる抗生物質が表面的にはよく効果を示し、疾患が感知したかの様に理解されてしまうことである。クラミジアの感染症は表面的な症状の軽さに隠れて進行し、長期間の潜伏・持続感染の結果、性病クラミジアは骨盤内感染症や不妊を引き起こし、肺炎クラミジアは肺がんや動脈硬化に発展する危険性を秘める。クラミジア感染症に対する戦略としては、悪化した時のみの表面的治療、例えば抗生物質や抗体等による治療では不十分であり、予防や持続感染の阻止を講じる必要がある。
【０００５】
現在、世界的に性病クラミジア、肺炎クラミジアに対するワクチンの開発も進められている。動物のクラミジアに対するワクチンは開発され、既に販売も始まっている。しかし残念ながら、クラミジア感染症に十分な効果の得られるワクチンの開発には至っていない。また菌体全体を用いたワクチンでは、その菌体内に含まれる熱ショックタンパク質などがクラミジア感染での炎症反応や動脈硬化などを悪化させる可能性が報告されている。すなわち、クラミジア感染症に対する戦略には、より安全で有効なワクチンの開発とともに、クラミジア感染の特徴を踏まえた「潜在的に存在するクラミジア」の排除を可能とする治療方法や体質改善方法の確立が必須である。
【特許文献１】特許第３４０２３０４号  猫クラミジアワクチンの製造方法
【特許文献２】特開２００２‐０２０２９３  クラミジア感染症処置剤
【特許文献３】特開２００１‐２８８１１４  自己免疫性疾患治療剤
【特許文献４】特許第３４０２３０４号  猫クラミジアワクチンの製造方法
【非特許文献１】Ｒｏｔｔｅｎｂｅｒｇ  ＭＥ  Ｇ‐ＲＡ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４：４４４‐４５１
【非特許文献２】Ｂｅｌｌａｎｄ  ＲＪ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１００：１５９７１‐１５９７６
【非特許文献３】Ｃａｒｌｓｏｎ  ＬＬ．ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ    ２５：Ｊｕｎ．７０
【非特許文献４】Ｃｈａｎ  ＡＳ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ．１４：２４９‐２５７
【非特許文献５】Ｓｈｉｒａｉ  Ｍ  ＨＨ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２８：Ａｐｒ．１１
【非特許文献６】Ｍａｔｓｕｓｈｉｍａ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｊ．Ｖｅｔ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．６４：２１５‐２１９
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、上記の現状に鑑み、クラミジア属細菌の感染または増殖を効果的に抑制する物質及びこれらの物質の利用法を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、ゲノム解析と情報科学的な比較解析によって、クラミジア属最近の病原性解明を進めている。その解析から、クラミジア属細菌においては、トリプトファン合成酵素遺伝子群に存在の有無も含め大きな「揺らぎ」があることが明らかとなってきた（図５）。この点に着目し、トリプトファンの代謝阻害剤等をクラミジアの感染実験等に用いる中で、トリプトファン代謝中間産物、特にメラトニンとセロトニンがクラミジアの感染や増殖を阻害する効果を持つことを見出した。メラトニンやセロトニンは神経伝達物質として知られているが、一般に知られる医学・生物学関連の文献には、クラミジア感染や増殖を阻害する効果に関する類似の報告は無く、これらの化合物が持つ新規の薬理作用であると考えられた。
【０００８】
すなわち、本発明は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物または食品組成物を提供するものである。
【０００９】
本発明の第１の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とする、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする組成物を提供する。
【００１０】
本発明の第２の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とする、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする薬剤組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が５‐ヒドロキシトリプトファン、メラトニン、セロトニン及びこれらの薬理学上許容可能な塩またはエステル或いは誘導体のうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とする、薬剤組成物を提供する。
【００１１】
本発明の第３の態様は、前記第２の様態におけるトリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、メラトニン、セロトニンのうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とする、薬剤組成物を提供する。
【００１２】
本発明の第４の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とし、前記抑制の有効濃度が、体内濃度の２倍濃度から１０倍濃度の範囲内であることを特徴とする、薬剤組成物を提供する。
【００１３】
本発明の第５の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とし、前記抑制の有効濃度が、５μＭから５００μＭの範囲内であることを特徴とする、薬剤組成物を提供する。
【００１４】
本発明の第６の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とし、前記抑制の有効濃度が、５‐ヒドロキシトリプトファンにおいては５０μＭから５００μＭの範囲内、セロトニンにおいては５０μＭから１００μＭの範囲内、メラトニンにおいては５μＭから５００μＭの範囲内であることを特徴とする、薬剤組成物を提供する。
【００１５】
本発明の第７の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記クラミジア属細菌が、クラミジア・トラコマティス、クラミジア・ニューモニアエ、クラミジア・シタシ、クラミジア・フェリスのうちの少なくとも１種類であることを特徴とする、薬剤組成物を提供する。
【００１６】
本発明の第８の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記クラミジア属細菌が、クラミジア・トラコマティス、クラミジア・ニューモニアエ、クラミジア・シタシ、クラミジア・フェリス、のうちの少なくとも１種類であることを特徴とする、第２から第６の態様のうちいずれか１つに記載の、薬剤組成物を提供する。
【００１７】
本発明の第９の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記薬剤が経口薬、塗布薬、点眼薬、注射薬のいずれか１つから選ばれることを特徴とする、薬剤組成物を提供する。
【００１８】
本発明の第１０の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記薬剤が経口薬、塗布薬、点眼薬、注射薬のいずれか１つから選ばれることを特徴とする、第２から第８の態様のうちいずれか１つに記載の、薬剤組成物を提供する。
【００１９】
本発明の第１１の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、食品組成物を提供する。
【００２０】
本発明の第１２の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、食品組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニン及びこれらの薬理学上許容可能な塩またはエステル或いは誘導体のうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とする、食品組成物を提供する。
【００２１】
本発明の第１３の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、食品組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とする、食品組成物を提供する。
【００２２】
本発明の第１４の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、食品組成物であって、前記トリプトファン代謝中間産物が、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つから選ばれることを特徴とし、前記食品が、飴、ガム、清涼飲料のうちの１種類であることを特徴とする、食品組成物を提供する。
【００２３】
本発明の第１５の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、第１１から第１４の態様のうちいずれか１つに記載の食品組成物を含む、食品を提供する。
【発明の効果】
【００２４】
本発明に記載の薬剤組成物を利用することにより、慢性的な感染症の原因菌であるクラミジア属細菌に対して有効で、しかも人体に対して安全な薬剤を製造することが可能となる。
【００２５】
また、本発明に記載の食品組成物を利用することにより、クラミジア属細菌の感染を比較的容易に、かつ安全・安価に予防可能な機能性食品を製造することが可能となる。慢性感染症を引き起こすクラミジア属細菌への対策としては、薬剤による治療効果に加え、食品などによる予防効果も十分に利用可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】
以下に、本発明を実施するための最良の形態を説明する。本発明の第１の態様は、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とする、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする組成物を提供する。前述の通り、これらの物質は公知ではあるが、「クラミジア属細菌に対する効果」はこれまで知られておらず、これらの物質を薬剤や食品の組成物として利用することが開示される。
【００２７】
本発明の第２から第６の態様においては、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする薬剤組成物が開示される。前記トリプトファン代謝中間産物は、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニン及びこれらの薬理学上許容可能な塩またはエステル或いは誘導体のうち少なくとも１つから選ばれるものであり、好ましくは、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つを含んでなることを特徴とし、更に好ましくは、前記抑制の効果を得るために５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンの濃度が体内濃度の２倍濃度から１０倍濃度の範囲内となるような薬剤組成物、または５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンの濃度が５μＭから５００μＭの範囲内、詳しくは５‐ヒドロキシトリプトファンにおいては５０μＭから５００μＭの範囲内、セロトニンにおいては５０μＭから１００μＭの範囲内、メラトニンにおいては５μＭから５００μＭの範囲内となるような薬剤組成物が開示される。後段の実施例で述べるとおり、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンの３物質はクラミジア感染に対し抑制効果を持つことが本発明者らによって明らかにされたため、この性質を利用した薬剤組成物が提示される。
【００２８】
図１にヒト細胞内におけるトリプトファン代謝経路を示すが、クラミジア属細菌に対する効果を示し、ヒト体内で合成されるメラトニン、セロトニンに加え、これらを化学的に修飾した物質であってヒト細胞に悪影響を及ぼさない物質もまた、薬剤組成物として利用可能である。メラトニン、セロトニンはいずれも、トリプトファンからヒト体内で合成されるものであるが、体内濃度ではクラミジア属細菌に対する前記効果が期待できないため、例えばクラミジア属細菌に感染したヒト細胞に対して効果を示すためには体内の２倍から１０倍濃度の範囲内が望ましい。この濃度はクラミジア属細菌に十分な効果を持ち、かつヒト細胞に悪影響を与えない濃度である。
【００２９】
本発明の第７、第８の態様においては、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする薬剤組成物であって、前記クラミジア属細菌が、クラミジア・トラコマティス、クラミジア・ニューモニアエ、クラミジア・シタシ、クラミジア・フェリスのうちの少なくとも１種類であることを特徴とする薬剤組成物を提供する。これらのクラミジアは、ヒト細胞に寄生し疾患の原因となる点では共通しているが、主な寄生部や表す病態はそれぞれの種によって異なっており、例えばクラミジア・トラコマティスは生殖器に、クラミジア・ニューモニアエは肺や動脈における炎症部位に、クラミジア・シタシは気管から肺にかけての気道に、クラミジア・フェリスは目の粘膜にそれぞれ寄生することが知られている。これらの個々の感染に対して、適切な形態で薬剤を投与することが必要であり、対象菌を限定することでより高い効果の期待できる薬剤の開発が可能となる。
【００３０】
本発明の第９、第１０の態様においては、クラミジア属細菌の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、薬剤組成物であって、前記薬剤が経口薬、塗布薬、点眼薬、注射薬のいずれか１つから選ばれることを特徴とする、薬剤組成物を提供する。先に述べた通り、クラミジア属細菌は種毎に主な感染部位や症状が異なっており、それに対する薬剤の態様も症状に合わせたものであることが望ましい。例えば、クラミジア・トラコマティス感染に対しては患部への塗布薬や経口薬、クラミジア・ニューモニアエ感染やクラミジア・シタシ感染に対しては喉粘膜への塗布薬や経口薬または注射薬、クラミジア・フェリス感染に対しては点眼薬といった様に、個々の感染に応じた薬剤の投与形態が好ましい。個々の菌に対する薬剤の個々の形態においては、前記有効成分の濃度を変えたり、またその組み合わせを変えることで、より効果の高い薬剤を作成することも、本発明の開示する範囲内にあるものである。
【００３１】
本発明の第１１から第１５の態様においては、クラミジア属の感染または増殖を抑制することを特徴とし、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とする、食品組成物を提供する。前述の通りトリプトファン代謝中間産物はヒト体内で合成されるきわめて安全な物質であり、また、後段の実施例で述べるとおり、トリプトファン代謝中間産物によるクラミジア阻害効果は、クラミジア菌に対するいわゆる「殺菌的」な効果ではなく、宿主の細胞に穏やかに作用しクラミジア菌に感染しにくくするような「予防的」な効果であるため、更には、クラミジア属細菌の慢性的な感染状況を鑑みるに、本発明は薬剤組成物のみならず食品組成物としても、利用可能である。本発明のトリプトファン代謝中間産物とは、クラミジア属細菌に対して感染または増殖を抑制する効果があれば特に限定されるものではないが、好ましくは、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニン及びこれらの薬理学上許容可能な塩またはエステル或いは誘導体のうち少なくとも１つから選ばれるものであり、より好ましくは５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンのうち少なくとも１つから選ばれるものである。本発明の態様における食品とは、前記クラミジア属細菌に対する効果を保持していれば特にその形態を限定するものではないが、好ましくは、例えば、クラミジア属細菌の喉粘膜上の感染や増殖を抑える目的でのど飴の形態で提供されたり、同様の目的でチューインガムの形態で提供されたり、また、清涼飲料の１原料として提供されることが考えられる。いずれにしても、トリプトファン代謝中間産物を有効成分とし、クラミジア属細菌感染に対する予防効果を示す食品であれば、本発明の開示の範囲内であると考えられる。
【実施例１】
【００３２】
本実施例において用いられる略称の意味は、次の通りである。ＩＦＮ‐γ；ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ‐γ，ＩＦＵ；ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｕｎｉｔ，ＦＣＳ；ｆｅｔａｌ  ｃａｌｆ  ｓｅｒｕｍ，ＭＯＩ；ｍａｇｎｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ＥＢ；ｅｌｅｍｅｎｔａｒｙ  ｂｏｄｙ，ＲＢ；ｒｅｔｉｃｕｌａｔｅ  ｂｏｄｙ，ＩＤＯ；ｉｎｄｏｌｅａｍｉｎｅ  ２，３‐ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ，ｃＡＭＰ；ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ３‘：５’‐ｃｙｃｌｉｃ  ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ．
【００３３】
ＨＥｐ‐２細胞（ＡＴＣＣ  Ｃｃｌ‐２３）をクラミジア感染実験の宿主細胞として、ＨＥｐ‐２培養液（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ‘ｓ  ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  ｍｅｄｉｕｍ，１０％  ｈｅａｔ‐ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄ  ＦＣＳ，５０μｇ／ｍｌ  ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ）中において３７℃、二酸化炭素濃度５％の条件下で培養した。クラミジア菌株としては、Ｃ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  Ｊ１３８株（肺炎クラミジア）、Ｃ．ｆｅｌｉｓ  Ｆｅ／Ｃ‐５６株（ネコクラミジア）、Ｃ．ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ  ｓｅｒｏｖｅｒ  Ｄ株（性病クラミジア）を用いた。実験では他の細菌として、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ，Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  Ｅ１９２，Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＰＡＯ１，Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ＣＰＹ３４０１を用いた。クラミジア感染実験の手順は以下の通りである。２×１０４（ｉｎ  ０．１ｍｌ）ＨＥｐ‐２細胞を９６穴プレートに分注し２４時間培養する。ここに０．２ＭＯＩとなるようにクラミジアＥＢを加え、２２℃，７００×ｇ，６０分遠心して３０分おく。これらの細胞をｐｏｓｔ‐ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｍｅｄｉｕｍ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  ｍｅｄｉｕｍ，５％  ｈｅａｔ‐ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄ  ＦＣＳ，５０μｇ／ｍｌ  ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ，１μｇ／ｍｌ  ｃｙｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ）に移し、４８時間培養する（３６℃，５％  ＣＯ２）。実験における薬剤処理のスケジュールを図１に示す。クラミジア感染率の測定は以下の方法で行った。感染宿主細胞をメタノールで３０分固定し、ＦＩＴＣ標識したクラミジア属細菌特異的な抗体を１時間反応させ（３７℃）、続いて宿主細胞核をＤＡＰＩ（０．１μｇ／ｍｌ）で１０分染色した。蛍光顕微鏡を用い宿主細胞とクラミジア封入体（直径１．０μｍ以上）をカウントした。感染率は３回の独立した実験の平均値から算出した。上記クラミジア以外の細菌に対するメラトニンの影響は、各々の培地にメラトニンまたはゲンタマイシンを加え、３７℃で８時間（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉについては２４時間）培養した後６００ｎｍ  ＯＤを計測することで調べた。
【実施例２】
【００３４】
ヒト由来ＨＥｐ‐２細胞を用いた試験管内における肺炎クラミジアＪ１３８株の感染実験におけるトリプトファン代謝中間産物の効果を試したところ、５‐ヒドロキシトリプトファン、セロトニン、メラトニンが対照と比べて有意にクラミジア増殖阻害効果を示した（図１）。これまでに知られているＩＦＮ‐γによるクラミジア増殖阻害効果（トリプトファン欠乏を引き起こすため、トリプトファン添加によりその効果が打ち消される）と比較するため、トリプトファンの添加実験を行ったところ、ＩＦＮ‐γとは異なり、トリプトファンの添加によってもクラミジア増殖阻害効果は打ち消されず（図２）、クラミジア感染を持続感染に導くことも観察されなかった。更に、トリプトファン合成遺伝子のほぼ完全なセットを持つネコクラミジア、一部を保有する性病クラミジア、全く欠失する肺炎クラミジアのいずれに対しても、メラトニンやセロトニンは阻害効果があることが明らかになった（図３）。反対に、１０種類のヒト常在菌に対しては、トリプトファン代謝中間産物は高濃度の投与によっても全く阻害効果が観察されなかった。
【実施例３】
【００３５】
メラトニンとセロトニンのクラミジア感染阻害効果について、この効果がクラミジアに対するものか、それとも宿主細胞に対するものかを明らかにするために、感染実験に用いる各々の細胞をこれらの物質によって前処理し、その後の感染への影響を調べた。その結果、宿主細胞をメラトニンやセロトニンで前処理した場合、感染阻害効果が見られたが、クラミジア細胞への前処理は感染にほとんど影響を与えなかった（図４）。この結果は、メラトニンやセロトニンの効果が宿主細胞に対するものであることを示している。メラトニンやセロトニンについては、ヒトの様々な組織細胞において、その細胞内への取り込みとシグナル伝達に関与する受容体の存在が知られており、その受容体の多くはGタンパク質を結合した受容体である。そこで、Ｇタンパク質の阻害剤である百日咳毒素を用い、メラトニンやセロトニンによるクラミジア感染阻害効果への影響を調べた。その結果、セロトニンについては百日咳毒素処理により感染阻害効果が打ち消され、反対にメラトニンでは葉百日咳毒素は感染阻害に影響を与えなかった（図４）。このことはすなわち、セロトニンによるクラミジア阻害効果には宿主のＧタンパク質が関与しているが、メラトニンによる効果には関与していないことを示している。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】ｉｎ  ｖｉｔｒｏ条件における、クラミジア感染に対するトリプトファンとその代謝中間産物の効果を示す。Ａ：キヌレニン経路、セロトニン経路からなるトリプトファン代謝経路の模式図を示す。Ｂ：本研究における、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ条件下でのクラミジア感染と薬剤処理の時間設定を表す。ほとんどの実験で、薬剤処理は感染前（ｐｒｅ‐ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）２４時間、及び感染後（ｐｏｓｔ‐ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）４８時間行われた。Ｃ：トリプトファンとその代謝中間産物の、クラミジア感染に対する効果を示す。横軸ＡからＧの記号はそれぞれ、図１Ａにおける代謝産物の右肩に付された記号に対応し（Ａ＝Ｌ‐ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎ，Ｂ＝５‐ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔｏｐｈａｎ，Ｃ＝ｋｙｎｕｒｅｎｉｎｅ，Ｄ＝ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ，Ｅ＝ｍｅｌａｔｏｎｉｎ，Ｆ＝５‐ｈｙｄｒｏｘｙｌｔｒｙｐｔｏｐｈａｎｏｌ，Ｇ＝５‐ｍｅｔｈｏｘｙｉｎｄｏｌｅ  ａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）、数字はヒトＨＥｐ‐２細胞に対するＣ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  Ｊ１３８株の感染実験時における、各物質の濃度（５０，２００μＭ）を表す。ＡからＧのいずれも、本実験の条件下では宿主細胞に対して毒性を示さなかった。グラフ縦軸は対照（処理なし）に対する感染率の相対値（対照＝１００）を示し、グラフは３回繰り返し実験における平均値、付されたバーは±１ＳＤを示す。対照との間に有意差があったものは＊を付した（ｔ  ｔｅｓｔ，ｐ＜０．０１）。
【図２】クラミジア感染に対するメラトニンとインターフェロン‐γ（ＩＦＮ‐γ）の影響を比較した。Ａ：クラミジア感染に対する各物質の影響を示す。＋，−はそれぞれ、メラトニン（１００μＭ）、ＩＦＮ‐γ（１．０ｎｇ／ｍｌ）、トリプトファン（２００μｇ／ｍｌ）の有無を表す。縦軸は感染率の対照（左端、１００）との相対値であり、各グラフは３回の繰り返し実験の平均値を、付されたバーは±１ＳＤを示す。Ｂ：クラミジア感染における封入体を、ＦＩＴＣ標識したクラミジア特異的な抗体で可視化した（Ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ  ｂｏｄｙ行の白四角）。写真右下のバーはそれぞれ１０μｍ。Ｃ：メラトニン処理、ＩＦＮ‐γ処理、対照のそれぞれにおける封入体のサイズ（半径、横軸）分布を示す。
【図３】クラミジア種によるメラトニン感受性の比較を示す。Ｃ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，Ｃ．ｆｅｌｉｓ，Ｃ．ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓそれぞれに対し、２５μＭ，５０μＭ，１００μＭのメラトニン処理を行い、ＩＦＮ‐γ処理との比較を行った。グラフ縦軸は相対感染率（対照＝１００）を、横軸の＋、−は処理の有無を示す。
【図４】ＨＥ‐ｐ２細胞へのＣ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ感染における、メラトニンとセロトニンのターゲットを探索した。Ａ：ＨＥ‐ｐ２細胞、Ｃ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  Ｊ１３８株のそれぞれを単独でメラトニン／セロトニン処理し、その後の感染への影響を調べた。クラミジア細胞への処理は感染前９０分において、ＨＥｐ‐２細胞培養液と同じ液で、２００μＭの濃度で行った。*は対照と処理ありとの間に有意差のあったものを示す（Ｓｔｕｄｅｎｔ  ｔ  ｔｅｓｔ，ｐ＜０．０５）。Ｂ：Ｇタンパク質阻害剤である百日咳毒素（ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ  ｔｏｘｉｎ，２０  ｎｇ／ｍｌ）を、メラトニン処理、セラトニン処理それぞれに対して４８時間加え、その影響を調べた。
【図５】クラミジア属細菌及び宿主細胞における、トリプトファン合成経路の模式図を示す。クラミジア属細菌におけるトリプトファン生合成に関与する遺伝子としては、ｋｙｎＵ，ｋｐｒＳ，ｔｒｐＤ，ｔｒｐＦ，ｔｒｐＣ，ｔｒｐＦ，ｔｒｐＣ，ｔｒｐＡ，ｔｒｐＢが合成経路の各段階で働いている。ネコに感染するＣ．ｆｅｌｉｓはこれらの遺伝子セットを全て持っているが、ヒトに感染するＣ．ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓは不完全な遺伝子セットしか持たず、Ｃ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅは全く持たない。クラミジア属細菌に対するインターフェロン‐γ投与は、キヌレニン経路におけるトリプトファン不足を引き起こし、クラミジア阻害を起こすことが知られている。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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