(57)【要約】【課題】  不快臭及び不要成分を除去したカピリン含有エキス、及びこれを用いてなる抗菌剤を提供すること。【解決手段】  カワラヨモギ抽出物をカラムクロマトグラフィーを用いて精製することによって、不快臭及び不要成分を除去したカピリン含有エキスを、高純度、高回収率で調製することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
カワラヨモギから得た抽出液から、カラムクロマトグラフィーを用いてカピリン成分を精製する事を特徴とする抗菌剤及びその製造法。
【請求項２】
カラムクロマトグラフィーの充填剤が逆相系吸着剤である請求項１記載の抗菌剤及びその製造法。
【請求項３】
カラムクロマトグラフィーの充填剤がシリカゲルあるいはアルミナであることを特徴とする請求項１記載の抗菌剤及びその製造法。
【請求項４】
カワラヨモギ抽出液からｎ−ヘキサン不溶物を除去した成分を用いて請求項1〜３記載の手法で処理した抗菌剤の及びその製造法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カピリンを含有するカワラヨモギ抽出液から、カラムクロマトグラフィーを用いてかピリン成分を精製することを特徴とする抗菌剤及びその製造法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
食品や化粧品の保存料に関しては、近年、販売業者や消費者の間で合成保存料に対して特に敬遠する傾向が顕著であり、それに伴ってより安全性の高い天然物由来の抗菌剤が求められてきている。
【０００３】
天然物由来の保存料の一種としては、従来より非特許文献１〜２及び特許文献１に記載されたカピリンを含有するカワラヨモギ抽出物が知られている。カピリンは、次の構造式の化合物である。
【０００４】
【化１】
2006241071.tif 000002
【０００５】
【非特許文献１】「既存添加物名簿収載品目リスト注解書」、１９９９年、ｐ．１６２
【非特許文献２】薬学雑誌、ｖｏｌ.７６、ｐ．４００−４０４
【特許文献１】特開２００３−２６５１５２号公報
【０００６】
非特許文献1では、カワラヨモギ抽出物に抗菌抗黴性があり、抗菌抗黴性の有効成分がカピリンであることが開示されている。
【０００７】
一方、特許文献1には、カワラヨモギからカピリン含有エキスを抽出し、更にこのエキスを高真空下で精留することによって特異臭を有する成分を除去したカピリン含有エキスが開示されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
従来、カワラヨモギから得られるカピリン含有エキスは高い抗カビ効果を有しているが、カワラヨモギの特異臭のため、化粧品や特に食品への配合が困難であった。
【０００９】
一方、特許文献１に開示されたカピリン含有エキスの特異臭成分の低減法によると、高真空下で精留を行なうことにより特異臭成分の除去を行なう事ができるとされている。しかしながら、かピリンは揮発性成分であるため、高真空下での操作を行なうことにより、目的のカピリン成分の回収率が大きく低下してしまうという問題が起こる。これは、カワラヨモギ中に含まれるカピリンは極微量であるため、回収率の低下により得られる目的物の収量が低くなり、生産性は悪くまた大幅なコストアップにつながるという問題点があった。
【００１０】
また、非特許文献２および非特許文献３では、従来より分析用にカラムクロマトグラフィーによるカピリンの分離、定量が報告されていた。しかしながら、これらの方法は、実験的な分析目的で行なわれており、カラム精製を行う前に、前処理として水蒸気蒸留や精留の工程が必要となっている。また使用している溶出液はヘキサン、ヘキサン／ベンゼン、ヘキサン／酢酸エチルと順次置き換えをしてカピリンを溶出する操作であるため作業が煩雑で非常に手間がかかる方法であり、さらにこのような精製工程によって得られたカピリン含有エキスは、その煩雑な操作によってカピリンの回収率が大きく低下してしまうという欠点を持っている。したがって工業的にカピリン含有エキスを製造する際には、より容易な方法でより収率よく製造する必要があるため、これらの方法は工業的なカピリン含有エキス製造法には適していない。
【００１１】
【非特許文献３】「既存添加物名簿収載品目リスト注解書」、１９９９年、ｐ．５０
【００１２】
上記の理由に鑑み、本発明では化粧品や食品に添加した際に不快な臭気がないまた不要成分の少ないカピリン含有エキスを、工業的に容易な手段を用いて高品質、高回収率で得る方法を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者は、上記課題の解決の為に鋭意検討を行なった結果、より容易なカラムクロマトグラフィーによって精製処理することより、上記の課題を解決することが可能であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１４】
すなわち、本発明はカピリン抽出液からカラムクロマトグラフィーを用いてカピリン成分を精製することを特徴とする抗菌剤及びその製造方法に関するものであり、これにより化粧品や食品へ配合した際に不快な臭気がないまた不要物の少ないカピリン含有エキスを提供するものである。
【発明の効果】
【００１５】
上記のように精製されたカピリン含有エキスは、工程によるカピリンの収率低下が殆どなく高回収率で精製する事ができ、また化粧品や食品へ配合した際に不快な臭気を感じさせないまた不要物の少ないものとなる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下、本発明を実施形態に基づき詳細に説明する。
【００１７】
まず、本発明の原料となるカワラヨモギは、生薬インチンコウとして使用されている学名Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ  Ｔｈｕｎｂ．のキク科の植物である。その抽出物には抗菌抗黴性があり、抗菌抗黴性の有効成分はカピリンである。
【００１８】
カピリンは、カワラヨモギの地上部から抽出した精油中に多く含まれる。抽出溶媒としてはメタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等の低級アルコール、グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等の多価アルコール、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、石油エーテル等の炭化水素類、メチルエーテル等のエーテル類等の有機溶媒等が挙げられる。有機溶媒は単独あるいは２種類以上を混合して使用しても良く、またこれらのうち水と混和する溶剤では水との混合溶剤を使用することができる。
【００１９】
このようにして得られた抽出液をカラムクロマトグラフィーにより精製するが、その前に濃縮しておくことが好ましい。濃縮は例えばエバポレーター等による減圧濃縮により行なうことができるが、抽出溶媒としてグリセリンやプロピレングリコール等の高沸点溶剤を使用した際には、必要に応じて抽出液に水を添加した後、ｎ−ヘキサン等の低沸点の有機溶媒により液−液抽出を行なったのちに濃縮を行なうことが好ましい。また、メタノールやエタノール等の極性溶媒を使用した際にも、カワラヨモギの水溶性成分が大量に抽出されるため、同様に必要に応じて抽出液に水を添加した後、ｎ−ヘキサン等の低沸点の有機溶媒により液−液抽出を行なうことによってｎ−ヘキサン不溶物を除去し、濃縮に供することが好ましい。
【００２０】
このようにして得られた抽出液あるいは濃縮液を、吸着剤を充填したカラムクロマトグラフィーを用いて精製処理を行なう。充填剤としてスチレン−ジビニルベンゼン系、メタアクリル酸エステル系、ＯＤＳ型、ＤＭＳ型等の結合シリカゲル系などのいわゆる逆相系合成樹脂吸着体を使用し、溶出溶媒を水−エタノール系で行なう方法や、シリカゲル、アルミナ、マグネシア、フロリジル等の順相系無機鉱物を担体とし、ｎ−ヘキサン等の非極性溶媒で溶出する方法などが挙げられるが、このうち順相系の吸着剤を担体として非極性溶媒により溶出する方法が好ましく、吸着剤にシリカゲルあるいはアルミナさらに好ましくは中性化処理したアルミナを使用し、ｎ−ヘキサンで溶出する方法がより好ましい。また、これらの吸着剤を混合して使用しても良く、さらに異なる種類のカラムを組み合わせて使用しても良い。
【００２１】
カラムクロマトグラフィーでの精製は、オープンカラムで行なうことも可能であるが、工業的には低圧、中圧あるいはフラッシュクロマトグラフィーで行なうことが好ましい。
【００２２】
カピリン含有エキスとして、カラムクロマトグラフィーによって分画されたフラクションをそのまま使用しても良いが、溶出液によって希薄となっている為、濃縮して使用することが好ましい。また、溶出液にｎ−ヘキサンや酢酸エチル、クロロホルムなど化粧品や食品に使用する際に好ましくない溶剤を使用した際にも、完全に溶剤を留去するか、溶剤をエタノールやグリセリン、プロピレングリコール、中鎖脂肪酸トリグリセライド、各種動植物性油等の油類などに置換することが好ましい。
【００２３】
上記のように精製したカピリン含有エキスは、そのまま抗菌剤として使用できるが、必要に応じて各種成分を任意に配合することができる。食品に使用する場合に任意に配合しうる成分としては、食品素材、食品添加物であれば特に限定されるものではなく、水、グリセリン等の多価アルコール、ソルビトール等の糖アルコール、中鎖脂肪酸トリグリセライド、各種動植物性油脂等の油脂類等を溶剤として、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、レシチン等の食品用乳化剤を可溶化剤として、さらにはデキストリンや可溶性でんぷん等を賦形剤として例示することができる。また、化粧料に使用する場合に任意に配合しうる成分としては、化粧料に通常使用される成分であれば特に限定されるものではなく、溶剤としては水、グリセリン等の多価アルコール、ソルビトール等の糖アルコール、流動パラフィン、スクワラン等の炭化水素、イソオクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル等のエステル油、中鎖脂肪酸トリグリセライド、各種動植物性油等の油類等を例示することができ、可溶化剤としてポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテル等の界面活性剤を例示することができる。
【００２４】
本発明の抗菌剤は、パン類、菓子類、麺類、乳製品類、惣菜類、漬物類、飲料類等の各種飲食品、ローション、乳液、クリーム等の基礎化粧料類、ハンドクリーム、ボディローション等の身体用化粧料類、洗顔料、ボディシャンプー等の皮膚洗浄料類、ヘアシャンプー、リンス、トリートメント、ヘアスタイリング剤、ヘアカラー等の頭髪用化粧料類、ファンデーション、アイライナー、マスカラ、口紅等のメイキャップ類、歯磨き等の口腔用化粧料等の各種化粧料など抗菌性を有する物質を添加して製品自体の腐敗を防止することが必要なあらゆる製品に使用することができる。
【実施例】
【００２５】
以下、実施例及び比較例により本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらにより何ら限定されるものではない。尚、以下の実施例中の数値の単位は、特に断りのない限り重量％である。
【００２６】
（カワラヨモギ抽出液の調製）
乾燥したカワラヨモギの花穂１ｋｇにエタノール５ｋｇを加えて３７℃にて２０時間浸漬して抽出後、ろ過し、さらに４２０ｍｍＨｇ、７０〜７５℃の条件で濃縮することにより、カワラヨモギ抽出液を得た。高速液体クロマトグラフィーによる分析の結果、この抽出液のカピリン含有量は０．１％であった。
高速液体クロマトグラフィーの分析条件
（株）島津製作所製  ＬＣ−１０Ａシステム
カラム：信和加工（株）製  ＳＴＲ  ＯＤＳ−２
４．６ｍｍＩ．Ｄ．×１５０ｍｍＬ
移動相：０．５％酢酸水溶液５５％＋エタノール４５％、０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出器：ＵＶ２８０ｎｍ  
試  料：移動相により１０％に希釈、２０μＬ注入
【００２７】
（実施例１）
カワラヨモギ抽出液１００ｇを４２０ｍｍＨｇ、７０〜７５℃の条件で濃縮し、濃縮物１０ｇを得た。この濃縮物をアンバーライトＸＡＤ−２カラム（１．５×３０ｃｍ、溶出液：８０％エタノール）で分画し、カピリン含有フラクションから溶媒を除去してカピリン含有エキス０．５７ｇを得た。
【００２８】
（実施例２）
カワラヨモギ抽出液１００ｇを４２０ｍｍＨｇ、７０〜７５℃の条件で濃縮し、濃縮物１０ｇを得た。この濃縮物を活性アルミナカラム（溶出液：ｎ−ヘキサン）で分画し、カピリン含有フラクションから溶媒を除去してカピリン含有エキス０．４０ｇを得た。
【００２９】
（実施例３）
実施例２で使用したアルミナの代わりに、中性処理したアルミナを使用した。中性処理アルミナは活性アルミナを酢酸エチルに一晩浸漬したのちメタノールで洗浄し、乾燥させて作製したものを使用した。カピリン含有フラクションから溶媒を除去してカピリン含有エキス０．３７ｇを得た。
【００３０】
（実施例４）
実施例２で使用したアルミナの代わりに、シリカゲルを使用した。カピリン含有フラクションから溶媒を除去してカピリン含有エキス０．２３ｇを得た。
【００３１】
（実施例５）
カワラヨモギ抽出液１００ｇにイオン交換水を４００ｇ加えて混合したのちに、ｎ−ヘキサン５００ｇで抽出した。ｎ−ヘキサン相を４５０ｍｍＨｇ、５５〜６０℃の条件で濃縮し、濃縮物を得た。この濃縮物を中性アルミナカラム（溶出液：ｎ−ヘキサン）で分画し、カピリン含有フラクションから溶媒を除去してカピリン含有エキス０．３５ｇを得た。
【００３２】
（比較例１）
カワラヨモギ抽出液１００ｇにイオン交換水１０００ｇを加え、２５０〜４００ｍｍＨｇ、７０〜８０℃の条件で蒸留を行なった。この操作をカワラヨモギ抽出液中のカピリン量が蒸留前のカピリン量の１％以下になるまで行なった。得た留分にｎ−ヘキサン２００ｇを加えて液−液抽出を行なった。この抽出を３回繰り返し、ｎ−ヘキサン相を４５０ｍｍＨｇ、５５〜６０℃の条件で濃縮し、濃縮物１．０２ｇを得た。
【００３３】
（比較例２）
カワラヨモギ抽出液１００ｇを４２０ｍｍＨｇ、７０〜７５℃の条件で濃縮し、濃縮物１０ｇを得た。これを、減圧蒸留装置を用いて１．０〜２．０ｍｍＨｇ下で精留し、７０〜１３０℃のカピリン含有留分を０．１７ｇ回収した。
【００３４】
上記実施例１〜５及び比較例１〜２で得られたカピリン含有エキスのカピリンの回収率を表１に示した。
【００３５】
【表１】
2006241071.tif 000003
【００３６】
実施例及び比較例で調製したカピリン含有エキスに、カピリン含量が０．１％となるようにプロピレングリコールを加えて混合溶解し、抗菌剤とした。この抗菌剤を使用してオレンジ果汁飲料及びローションを調製し、臭気の比較を行なった。
【００３７】
［オレンジ果汁飲料の調製］
オレンジ果汁飲料は、果糖ブドウ糖液糖が１１０ｇ、オレンジ果汁が２００ｇ、クエン酸が１．５ｇ、ビタミンＣが０．５ｇに上記抗菌剤を１ｇ加え、水を加えて１０００ｇとした。
【００３８】
［ローションの調製］
ローションは、エタノール１５．０ｇ、グリセリン５．０ｇ、ポリオキシエチレンオレイルアルコール１．０ｇ、クエン酸０．１ｇに上記抗菌剤０．１ｇを配合し、水を加えて１００ｇとした。
【００３９】
＜臭気の判定＞
調製したオレンジ果汁飲料及び化粧水を用い、２０人のパネラーによる官能試験による臭気の判定を行なった。結果を表２に示す。
【００４０】
◎：全てのパネラーが特異臭を感じない。
○：８割以上のパネラーが特異臭を感じない。
△：５割以上のパネラーが特異臭を感じない。
▲：５割以上のパネラーが特異臭を感じる。
×：８割以上のパネラーが特異臭を感じる。
【００４１】
【表２】
2006241071.tif 000004