(57)【要約】【課題】全身性炎症反応症候群（特には敗血症）の予防又は治療剤を提供する。【解決手段】前記の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤は、マツタケ若しくはその抽出物を有効成分として含有する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マツタケ又はその抽出物を有効成分として含有する、全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤。
【請求項２】
前記マツタケが、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株である、請求項１に記載の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤。
【請求項３】
前記マツタケが、菌糸体、培養物、又は子実体である、請求項１又は２に記載の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤。
【請求項４】
前記マツタケ抽出物が、マツタケの熱水抽出液若しくはその乾燥体、マツタケのアルカリ溶液抽出液若しくはその乾燥体、又はマツタケの熱水抽出液及び／若しくはアルカリ溶液抽出液の陰イオン交換樹脂吸着画分である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤。
【請求項５】
マツタケ若しくはその抽出物を有効成分として含有する、全身性炎症反応症候群の予防又は治療用食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、全身性炎症反応症候群（systemic inflammatory response syndrome；ＳＩＲＳ）、特には敗血症の予防又は治療剤に関する。本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤は、医薬品として投与することができるだけでなく、種々の形態、例えば、健康食品（好ましくは機能性食品）又は飼料として飲食物の形で与えることも可能である。なお、前記食品には飲料が含まれる。更には、オーラル衛生用組成物、例えば、口中に一時的に含むものの、そのほとんどを口中より吐き出す形態、例えば、歯磨剤、洗口剤、チューインガム、又はうがい剤の形で与えることも、あるいは、鼻から吸引させる吸入剤の形で与えることも可能である。
【背景技術】
【０００２】
病原微生物に対する化学療法や医療技術の進歩にも拘らず、敗血症は増加しており、多くの場合、その予後は致命的である。微生物やその産物により引き起こされる敗血症の病理は複雑であり、一旦発症すると、ＳＩＲＳ（systemic inflammatory response syndrome）からＣＡＲＳ（Compensatory anti-inframmatory response syndrome）に到る一連のカスケードを防止することはできず、ホメオスタシスのバランスは大きく崩れる。すなわち、敗血症の初期では、免疫応答は過剰に働くが、すぐに低下し、その状態が持続する。過剰応答の際に起こる炎症や凝固、繊維素溶解は、血管内凝固や微小血栓の全身撒き散らしの原因となり、臓器不全に陥り、場合によっては死に至る。
【０００３】
集中治療室（ＩＣＵ）で免疫抑制性の医療処置を受けて感染抵抗性の低下している患者にとって、敗血症防止のために、免疫能の維持・改善は重要である。敗血症で起こる一連の異常反応に対応し、その発症と進行防止を目的とすることを目的として、抗ＴＮＦ−α抗体、ホスホリパーゼＡ２阻害剤、一酸化窒素合成酵素阻害剤、抗エンドトキシン抗体、抗凝固剤、補体の阻害剤、グルココルチコイド類、抗酸化剤などの薬剤の効果が、動物モデルや患者を用いて評価されている。しかし、これまでのところ、これらの薬剤は、グラム陽性細菌と陰性細菌による生体反応のカスケードの違いや薬剤の活性不足などの様々な理由で、期待したほどの成果は上がっていない。それ故、新規な治療剤や治療方法の出現が待たれている。
【０００４】
一方、マツタケ［Tricholoma matsutake (S. Ito & Imai) Sing.］には種々の生理活性物質が含まれていることが知られており、例えば、特許文献１及び特許文献２には、マツタケに含有される各種の抗腫瘍性物質が開示されている。前記特許文献１には、マツタケ菌糸体の液体培養物を熱水又は希アルカリ溶液で抽出して得られる抽出液から分離精製されたエミタニン−５−Ａ、エミタニン−５−Ｂ、エミタニン−５−Ｃ、及びエミタニン−５−Ｄに、サルコーマ１８０細胞の増殖阻止作用があることが開示されている。また、前記特許文献２には、マツタケ子実体の水抽出物から分離精製された分子量２０〜２１万のタンパク質（サブユニットの分子量＝１０〜１１万）が抗腫瘍活性を有することが開示されている。
【０００５】
また、本発明者（及びその共同研究者）は、マツタケ又はその抽出物が、種々の生理活性、例えば、免疫増強活性（特許文献３）、ストレス負荷回復促進活性（特許文献４）、癌予防効果（特許文献５）、並びに病原性微生物に対する感染予防及び治療効果（特許文献６）を有することを既に見出している。
【０００６】
【特許文献１】特公昭５７−１２３０号公報
【特許文献２】特許第２７６７５２１号明細書
【特許文献３】国際公開第０１／４９３０８号パンフレット
【特許文献４】国際公開第０２／３０４４０号パンフレット
【特許文献５】特開２００４−２１０６９５号公報
【特許文献６】特開２００４−２１０６９４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明者は、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、特に敗血症の予防又は治療を目的に、担子菌マツタケの多彩な生物活性に着目し、鋭意検討したところ、敗血症のモデルである盲腸結紮穿刺術［Cecal Ligation and Punctur（ＣＬＰ）］処置マウスにおいてマツタケ菌糸体乾燥物が有効に作用することを見出した。
従って、本発明の課題は、全身性炎症反応症候群（特に敗血症）の予防又は治療剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
前記課題は、本発明による、マツタケ又はその抽出物を有効成分として含有する、全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤により解決することができる。
また、本発明は、マツタケ又はその抽出物を有効成分として含有する、全身性炎症反応症候群の予防又は治療用食品に関する。
【０００９】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防若しくは治療剤又は予防若しくは治療用食品の好ましい態様によれば、前記マツタケがマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株である。
本発明の全身性炎症反応症候群の予防若しくは治療剤又は予防若しくは治療用食品の別の好ましい態様によれば、前記マツタケが菌糸体、培養物、又は子実体である。
本発明の全身性炎症反応症候群の予防若しくは治療剤又は予防若しくは治療用食品の更に別の好ましい態様によれば、前記マツタケ抽出物が、マツタケの熱水抽出液若しくはその乾燥体、マツタケのアルカリ溶液抽出液若しくはその乾燥体、又はマツタケの熱水抽出液及び／若しくはアルカリ溶液抽出液の陰イオン交換樹脂吸着画分である。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、全身性炎症反応症候群、特に敗血症の予防又は治療が可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤は、有効成分として、マツタケ［例えば、マツタケの菌糸体、培養物（Ｂｒｏｔｈ）、又は子実体］又はその抽出物を含有する。本発明において有効成分として用いることのできる各種成分について以下に詳述するが、本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤は、これらの各種有効成分を単独で、あるいは、適宜組み合わせて含有することができる。
【００１２】
本発明における有効成分である前記マツタケとしては、あるいは、前記マツタケ抽出物を調製するのに用いるマツタケとしては、例えば、天然のマツタケの子実体若しくは菌糸体、又は培養により得られるマツタケの菌糸体（すなわち、培養菌糸体）、培養物（Ｂｒｏｔｈ）、若しくは子実体を挙げることができる。全身性炎症反応症候群の予防又は治療効果を強く示す活性成分を含む点で、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株［Tricholoma matsutake (S. Ito & Imai) Sing. CM6271］を用いることが好ましい。
【００１３】
マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株（国際公開第０２／３０４４０号パンフレット）は、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター［（旧）工業技術院生命工学工業技術研究所（あて名：〒３０５−８５６６ 日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１ 中央第６）］に平成１２年９月１４日より寄託しているものである。このマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株は、京都府亀岡市で採取したマツタケＣＭ６２７１株から子実体組織を切り出し、試験管内で培養することにより、菌糸体継代株を得たものであり、呉羽化学工業株式会社生物医学研究所で維持している。
【００１４】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤における有効成分として用いることのできるマツタケの菌糸体としては、培養により得られる菌糸体を使用する場合には、例えば、培養により得られる菌糸体（すなわち、培養菌糸体）と培地との混合物から適当な除去手段（例えば、濾過）により培地を除去しただけの状態で使用することもできるし、あるいは、培地を除去した後の菌糸体から適当な手段（例えば、凍結乾燥）で水分を除去した菌糸体乾燥物の状態で使用することもできるし、更には、前記菌糸体乾燥物を粉砕した菌糸体乾燥物粉末の状態で使用することもできる。また、天然の菌糸体を使用する場合には、例えば、天然の菌糸体をそのまま使用することもできるし、あるいは、天然の菌糸体から適当な手段（例えば、凍結乾燥）で水分を除去した菌糸体乾燥物の状態で使用することもできるし、更には、前記菌糸体乾燥物を粉砕した菌糸体乾燥物粉末の状態で使用することもできる。
【００１５】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤における有効成分として用いることのできるマツタケの培養物（Ｂｒｏｔｈ）としては、例えば、培養により得られる菌糸体（すなわち、培養菌糸体）と培地との混合物の状態でそのまま使用することもできるし、あるいは、前記混合物から適当な手段（例えば、凍結乾燥）で水分を除去した培養物（Ｂｒｏｔｈ）乾燥物の状態で使用することもできるし、更には、前記培養物（Ｂｒｏｔｈ）乾燥物を粉砕した培養物（Ｂｒｏｔｈ）乾燥物粉末の状態で使用することもできる。
【００１６】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤における有効成分として用いることのできるマツタケの子実体としては、例えば、天然の子実体又は培養により得られる子実体をそのままで、あるいは、前記子実体を破砕した状態で使用することもできるし、あるいは、前記子実体から適当な手段（例えば、凍結乾燥）で水分を除去した子実体乾燥物の状態で使用することもできるし、更には、前記子実体乾燥物を粉砕した子実体乾燥物粉末の状態で使用することもできる。
【００１７】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤における有効成分として用いることのできるマツタケの抽出物としては、例えば、マツタケの熱水抽出液若しくはその乾燥体、マツタケのアルカリ溶液抽出液若しくはその乾燥体、又はマツタケの熱水抽出液及び／若しくはアルカリ溶液抽出液の陰イオン交換樹脂吸着画分を挙げることができる。
【００１８】
マツタケの熱水抽出液は、例えば、天然のマツタケの子実体若しくは菌糸体、又は培養により得られるマツタケの菌糸体（すなわち、培養菌糸体）、培養物（Ｂｒｏｔｈ）、若しくは子実体を、熱水で抽出することにより得ることができる。
熱水抽出に用いる熱水の温度は、マツタケに含有されるストレス負荷回復促進作用を示す成分が、熱水抽出液中に充分に抽出されることのできる温度である限り、特に限定されるものではないが、６０〜１００℃であることが好ましく、８０〜９８℃であることがより好ましい。
【００１９】
菌糸体又は子実体を熱水抽出に用いる場合には、抽出効率が向上するように、破砕物又は粉体の状態に加工することが好ましい。
また、抽出の際には、抽出効率が向上するように、撹拌又は振盪しながら実施することが好ましい。抽出時間は、例えば、マツタケの状態（すなわち、子実体、菌糸体、又は培養物のいずれの状態であるか、あるいは、破砕物又は粉体の状態に加工した場合にはその加工状態）、熱水の温度、又は撹拌若しくは振盪の有無若しくは条件に応じて、適宜決定することができるが、通常、１〜６時間であり、２〜３時間であることが好ましい。
【００２０】
得られた熱水抽出液は、不溶物が混在する状態で、そのまま、本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤の有効成分として用いることもできるし、あるいは、不溶物を除去してから、あるいは、不溶物を除去し、更に、抽出液中の低分子画分を除去してから、本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤の有効成分として用いることもできる。例えば、不溶物が混在する熱水抽出液を遠心分離することにより不溶物を除去し、得られる上清のみを、本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤の有効成分として用いることができる。あるいは、不溶物が混在する熱水抽出液を遠心分離して得られる前記上清を透析し、低分子画分（好ましくは分子量３５００以下の画分）を除去してから、本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤の有効成分として用いることができる。更には、熱水抽出液（例えば、不純物が混在する熱水抽出液、前記熱水抽出液を遠心分離して得られる上清、あるいは、前記上清の透析物などを含む）から、適当な手段（例えば、凍結乾燥）で水分を除去した乾燥体の状態で、本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤の有効成分として用いることができる。
【００２１】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤における有効成分である、マツタケのアルカリ溶液抽出液又はその乾燥体の製法は、例えば、先に説明した、マツタケの熱水抽出液の製造方法に準じた方法により実施することができる。すなわち、熱水の代わりにアルカリ溶液を用いること以外は、マツタケの熱水抽出液の前記製造方法と同様の方法により、調製することができる。例えば、天然のマツタケの子実体若しくは菌糸体、又は培養により得られるマツタケの菌糸体（すなわち、培養菌糸体）、培養物（Ｂｒｏｔｈ）、若しくは子実体を、アルカリ溶液で抽出することにより得ることができる。
【００２２】
アルカリ溶液抽出に用いるアルカリ溶液としては、特に限定されるものではないが、例えば、アルカリ金属（例えば、ナトリウム又はカリウム）の水酸化物、特には水酸化ナトリウムの水溶液を用いることができる。前記アルカリ溶液のｐＨは、８〜１３であることが好ましく、９〜１２であることがより好ましい。アルカリ溶液抽出は、０〜３０℃で実施することが好ましく、０〜２５℃で実施することがより好ましい。得られたアルカリ溶液抽出液は、中和処理を実施してから、本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤の有効成分として用いることもできるし、あるいは、中和処理を実施することなく、そのまま、本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤の有効成分として用いることもできる。
【００２３】
マツタケのアルカリ溶液による抽出は、熱水抽出を実施した後のマツタケ残渣（例えば、菌糸体残渣、培養物残渣、又は子実体残渣、好ましくは菌糸体残渣又は子実体残渣）を用いて実施することもできる。従って、本明細書における「マツタケのアルカリ溶液抽出液」には、熱水抽出を実施した後のマツタケ残渣のアルカリ溶液抽出液も含まれる。
また、マツタケの熱水抽出は、アルカリ溶液抽出を実施した後のマツタケ残渣（例えば、菌糸体残渣、培養物残渣、又は子実体残渣、好ましくは菌糸体残渣又は子実体残渣）を用いて実施することもできる。従って、本明細書における「マツタケの熱水抽出液」には、アルカリ溶液抽出を実施した後のマツタケ残渣の熱水抽出液も含まれる。
【００２４】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤における有効成分である、マツタケの熱水抽出液及び／又はアルカリ溶液抽出液の陰イオン交換樹脂吸着画分は、マツタケの熱水抽出液若しくはアルカリ溶液抽出液、又はマツタケの熱水抽出液とアルカリ溶液抽出液との混合抽出液を陰イオン交換樹脂に吸着させた後（以下、陰イオン交換樹脂吸着工程と称する）、適当な溶離液により吸着画分を溶出する（以下、溶出工程と称する）ことにより、得ることができる。また、マツタケの熱水抽出液の陰イオン交換樹脂吸着画分と、マツタケのアルカリ溶液抽出液の陰イオン交換樹脂吸着画分とを混合することによっても得ることができる。
【００２５】
陰イオン交換樹脂吸着工程に用いることのできる陰イオン交換樹脂としては、公知の陰イオン交換樹脂を用いることができ、例えば、ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）セルロース又はトリエチルアンモニオエチル（ＴＥＡＥ）セルロースを挙げることができる。
溶出工程に用いる溶離液は、陰イオン交換樹脂吸着工程に用いる陰イオン交換樹脂の種類に応じて適宜決定することができ、例えば、塩化ナトリウム水溶液などを挙げることができる。
溶出工程により溶出される画分は、そのまま、本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤の有効成分として用いることができるが、通常、溶離液に由来する塩を含有するので、それを除去するために、更に透析を実施することが好ましい。
【００２６】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤における有効成分である、マツタケ又はその抽出物は、全身性炎症反応症候群の予防又は治療作用を示す。
従って、本発明における有効成分である、マツタケ又はその抽出物は、それ単独で、あるいは、好ましくは薬剤学的又は獣医学的に許容することのできる通常の担体又は希釈剤と共に、全身性炎症反応症候群の予防又は治療が必要な対象に有効量で投与することができる。
また、本発明における有効成分である、マツタケ又はその抽出物は、全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤、全身性炎症反応症候群の予防又は治療用医薬組成物、全身性炎症反応症候群の予防又は治療用機能性食品、あるいは、全身性炎症反応症候群の予防又は治療用オーラル衛生用組成物を製造するために使用することができる。
【００２７】
本明細書において「全身性炎症反応症候群」とは、“各種感染症”や重症外傷、熱傷により惹起される全身性炎症反応である（日本臨床、62巻、12号、p.2166）。前記「全身性炎症反応症候群」には、例えば、敗血症、外傷、熱傷、又は急性膵炎などが含まれ、好ましくは敗血症である。敗血症とは、一般には“感染症”に起因した全身性炎症反応症候群を意味する。ここで、前述の全身性炎症反応症候群なる概念は、敗血症（sepsis）及びその関連病態の定義を整理すべく、１９９０年代初頭に米国胸部医学会／米国集中治療医学会の合同委員会から提唱された概念である（日本臨床、62巻、12号、p.2291-2295）。
【００２８】
背景技術欄で先述したとおり、本発明者（及びその共同研究者）は、マツタケ抽出物である特定画分が病原性微生物に対する感染症の予防及び治療効果を有することを既に見出している（特開2004-210694号公報）。しかし、前記公報では、一般的な感染症を対象としており、その実施例では、特定の病原微生物の全身感染を評価系としており、血中に侵入した微生物に対する作用に焦点を当てている。
【００２９】
一方、敗血症は、腸管からの非特定病原微生物の侵入により、微生物に対する反応が過剰におきて生体を傷つけ、反応の強さに生体が疲弊して致死に至る病気である。例えば、後述の実施例では、敗血症モデルとして、マウスの腸を注射針で傷つけ、内容物を少し搾り出す実験系を使用している。敗血症は非常に複雑な病状を呈するので、単に病原菌を排除するだけ（感染症）で対応可能な病気ではない。敗血症が感染症と異なることは、抗菌薬に対する作用の面からも言及可能である。感染症の治療には抗菌薬が汎用されているのは公知であるが、敗血症の治療剤は、抗生物質は無効であり、単なる抗微生物作用だけでなく、抗炎症作用も必要とされている。また、治療に用いられる抗菌薬の種類によってはサイトカインなどのメディエーター産生を介して生体障害を憎悪させ、敗血症ショック誘発のリスクを増大させることが知られている。その主要メカニズムとして、抗菌薬が病原菌に作用し、病原菌からエンドトキシンの遊離を引き起こし、遊離エンドトキシンは生体の免疫細胞に作用してサイトカインの過剰分泌を促すと考えられている（Journal of Chemotherapy 13: 159-172, 2001）。このように、特開2004-210694号公報に記載の感染症予防及び治療効果と、本発明の敗血症予防及び治療効果とは、全く異なる効果である。
【００３０】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤の投与剤型としては、特に限定がなく、例えば、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン剤、シロップ剤、エキス剤、若しくは丸剤等の経口剤、又は注射剤、外用液剤、軟膏剤、坐剤、局所投与のクリーム、若しくは点眼薬などの非経口剤を挙げることができる。
【００３１】
これらの経口剤は、例えば、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、澱粉、コーンスターチ、白糖、乳糖、ぶどう糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、デキストリン、ポリビニルピロリドン、結晶セルロース、大豆レシチン、ショ糖、脂肪酸エステル、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、ケイ酸マグネシウム、無水ケイ酸、又は合成ケイ酸アルミニウムなどの賦形剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、希釈剤、保存剤、着色剤、香料、矯味剤、安定化剤、保湿剤、防腐剤、又は酸化防止剤等を用いて、常法に従って製造することができる。
【００３２】
非経口投与方法としては、注射（皮下、静脈内等）、又は直腸投与等が例示される。これらのなかで、注射剤が最も好適に用いられる。
例えば、注射剤の調製においては、有効成分の他に、例えば、生理食塩水若しくはリンゲル液等の水溶性溶剤、植物油若しくは脂肪酸エステル等の非水溶性溶剤、ブドウ糖若しくは塩化ナトリウム等の等張化剤、溶解補助剤、安定化剤、防腐剤、懸濁化剤、又は乳化剤などを任意に用いることができる。
また、本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤は、徐放性ポリマーなどを用いた徐放性製剤の手法を用いて投与してもよい。例えば、本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤をエチレンビニル酢酸ポリマーのペレットに取り込ませて、このペレットを治療又は予防すべき組織中に外科的に移植することができる。
【００３３】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤は、これに限定されるものではないが、マツタケ又はその抽出物を、０．０１〜９９重量％、好ましくは０．１〜８０重量％の量で含有することができる。
【００３４】
本発明の全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤を用いる場合の投与量は、病気の種類、患者の年齢、性別、体重、症状の程度、又は投与方法などに応じて適宜決定することができ、経口的に又は非経口的に投与することが可能である。
【００３５】
また、投与形態も医薬品に限定されるものではなく、種々の形態、例えば、機能性食品や健康食品（飲料を含む）、又は飼料として飲食物の形で与えることも可能である。
食品には、（１）栄養素としての働き（第一次機能）、（２）人間の五感に訴える働き（第２次機能）の他に、（３）人間の健康、身体能力、又は心理状態に好ましい影響を与える働き（第３次機能）、例えば、消化器系、循環器系、内分泌系、免疫系、又は神経系などの生理系統を調節して、健康の維持や健康の回復に好ましい効果を及ぼす働きがあることが知られている。本明細書において「健康食品」とは、健康に何らかの効果を与えるか、あるいは、効果を期待することができる食品を意味し、「機能性食品」とは、前記「健康食品」の中でも、前記の種々の生体調節機能（すなわち、消化器系、循環器系、内分泌系、免疫系、又は神経系などの生理系統の調節機能）を充分に発現することができるように設計及び加工された食品を意味する。
【００３６】
更には、オーラル衛生用組成物、例えば、口中に一時的に含むものの、そのほとんどを口中より吐き出す形態、例えば、歯磨剤、洗口剤、チューインガム、又はうがい剤の形で与えることも、あるいは、鼻から吸引させる吸入剤の形で与えることも可能である。例えば、マツタケ又はその抽出物を、添加剤（例えば、食品添加剤）として、所望の食品（飲料を含む）、飼料、歯磨剤、洗口剤、チューインガム、又はうがい剤等に添加することができる。
【実施例】
【００３７】
以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。
【００３８】
《実施例１：マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体乾燥物の調製》
本実施例は、特開2004-210695号公報の実施例１に記載の方法に従って、菌糸体乾燥物を調製した。具体的には、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株菌糸体を、滅菌処理した培地（３％グルコース、０．３％酵母エキス、ｐＨ６．０）３．５ｔの入った７ｔ容培養タンクに接種し、２５℃で攪拌しながら４週間培養を行った。得られた培養物を濾布濾過し、菌糸体を分離した後、蒸留水で充分に洗浄した。得られた菌糸体の一部（約１ｋｇ）を−６０℃に凍結した後、凍結乾燥機（MINIFAST MOD. DO. 5; Edwards社）を用いて凍結乾燥することにより、乾燥菌糸体１１０ｇを得た。得られた菌糸体を、ホモブレンダー（Wonder Blender社）を用いて粉砕することにより、乾燥物粉末１００ｇを得た。得られた菌糸体乾燥物粉末を、以下の実施例における被検物質として使用した。
【００３９】
《実施例２：ＣＬＰ処置した担癌マウスにおけるマツタケ子実体乾燥物の効果の評価》
（１）担癌マウスの作製と被検物質の投与
実験動物として、７週齢の雄性Ｃ５７ＢＬ／６マウス（日本チャールズリバー社）を購入し、予備飼育の後、８週齢で実験に用いた。担癌マウスは、マウスメラノーマＢ１６細胞（１×１０６細胞／匹）を雄性Ｃ５７ＢＬ／６マウスの皮下に移植することにより作製した。なお、メラノーマＢ１６細胞は、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの皮膚に発生した腫瘍に由来する腫瘍細胞株（An NY Acad. Sci 100: 762-790, 1963）であり、本実施例では、東北大学・加齢医学研究所付属医用細胞資源センター（保管番号：TKG0144）から入手し、呉羽化学工業株式会社・生物医学研究所において、Ｃ５７ＢＬ／６Ｎマウスの腋窩部皮下で継代・維持している細胞を使用した。
【００４０】
被検物質のマウス（担癌マウス及び健常マウス）への投与は、前記の腫瘍細胞移植の１０日前から開始し、盲腸結紮穿刺術（ＣＬＰ）処置実施前日まで、連日２０回経口投与した。被検物質は、実施例１で調製したマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体乾燥物を秤量し、所定容量の生理食塩水を加えた後、ホモゲナイザーを用いて均一に懸濁し、１ｇ／ｋｇ／日の量で投与した。対照群には、同量の生理食塩水を投与した。また、比較のために、抗生物質アンピシリン［D(-)-α-aminobenzoil penicillin sodium salt；シグマ・アルドリッチ社］を、ＣＬＰ手術処理３０分前に皮下投与（３０ｍｇ／ｋｇ）した。
【００４１】
（２）ＣＬＰ処置
手術は、外来病原微生物による感染防止のため、クリーンベンチ内で実施した。すなわち、実施例２（１）で被検物質を投与した担癌マウスに、ネンブタールを腹腔内注射して麻酔し、腹部の毛を剃った後、ヨードチンキ塗布により滅菌処置を施した。次いで、ハサミを用いて腹壁を縦に約２ｃｍの長さに切って開腹し、盲腸と付着小腸の一部をピンセットにて取り出した。次に、３．０の手術用絹糸で、盲腸の根元部を結紮し、２１ケージの針を用い、盲腸を穿刺した。穿刺操作は２回行った。次いで、盲腸を外から指で軽く揉むことにより、腸内容物を周囲に押し出した後、穴が閉じないように注意しながら、盲腸と付属小腸を、腹腔内の元の場所に戻して、手術糸で腹壁を閉じた。そして、体液補充のため、生理食塩水１ｍＬを皮下注射した。なお、対照として、開腹処置だけで、盲腸結紮穿刺は行なわないマウスをシャム手術群とした。
【００４２】
ＣＬＰ処置後、動物の生死を１日２回観察した。死亡の場合は、剖検により、死因が感染症によるものか否かを確認した。なお、上記実験は、２回実施した。すなわち、第１回目の実験では、担癌マウス（又は健常マウス）におけるＣＬＰ処置が誘発する敗血症の状態を観察することを目的として、被検物質の投与を行わないで上記操作を実施した。次の第２回実験では、担癌マウスにおけるＣＬＰ誘発敗血症に及ぼす被検物質の作用を観察することを目的として、担癌マウスについてのみ、上記操作を実施した。また、これらの実験に先立って実施した予備試験の結果では、ＣＬＰによる死亡は、処置後７日以内におこることを確認していた。
【００４３】
（３）結果
健常マウスにＣＬＰ処置した群では、処置後７日以内に５０％のマウスが死亡し、死亡マウスの平均生存日数は３．１±０．９日であった。一方、Ｂ１６腫瘍移植後１０日目にＣＬＰ処置した群（すなわち、担癌マウスのＣＬＰ処置群）では、ＣＬＰ処置により全例が７日以内に感染により死亡し、平均生存日数は３．５±０．９日であった（図１）。健常・ＣＬＰ処置群と担癌・ＣＬＰ処置群との間にログランクテスト（log-rank test）で有意差が認められた。一方、シャム手術・担癌群では、処置後の平均生存日数は、２０．８±３．７日であり、死亡マウスの剖検時所見は腫瘍死であった。シャム手術・健常群は、実験期間中全数が生存した。
【００４４】
更に、敗血症関連指標の変動を調べるため、ＣＬＰ又はシャム手術後２４時間目の血中の細菌数、血清ＴＮＦα、及びＡＳＡＴ（Aspartate Amino- Transferase）レベルを測定した。なお、細菌数は、エーテル麻酔下で、と殺したマウス腹部大動脈から採取した血液１０μＬを、滅菌ＰＢＳ（リン酸緩衝化生理食塩水）で１０倍毎に段階希釈し、個々の希釈液５０μＬを、トリプトソイ血液寒天培地を分注したシャーレに蒔き、３７℃で２４時間培養し、生成コロニー数を計数することにより算出した。血清ＴＮＦαは、エーテル麻酔下で、と殺したマウス腹部大動脈から採取した血液から、常法により血清を回収し、市販のＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ社、米国）を用いて測定した。ＡＳＡＴは、自動血液分析機（JCA-BM8、日本電子、東京）を用いて測定した。
【００４５】
血中菌数に関しては、シャム手術群で、担癌マウス及び健常マウス共に、菌は検出されなかったが、ＣＬＰ・健常群で１．９±０．６ｃｆｕ／ｍＬ、ＣＬＰ・担癌群で３．１±０．４ｃｆｕ／ｍＬの菌が血中に検出された。また、血中のＴＮＦαレベルに関しては、シャム手術群では、担癌マウス及び健常マウス共に、検出限界以下であったが、ＣＬＰ・健常群で３．３±０．５ｎｇ／ｍＬ、ＣＬＰ・担癌群で４．０±０．７ｎｇ／ｍＬのレベルにあった。更に、血清のＡＳＡＴ値は、シャム手術・担癌群で６５．０±５．６Ｕ／Ｌ、シャム手術・健常群で４３．８±９．０Ｕ／Ｌ、ＣＬＰ・担癌群で１２２．４±１６．２Ｕ／Ｌ、ＣＬＰ・健常群で１０２．６±６６．８Ｕ／Ｌであった。これらのいずれの指標もＣＬＰにより増加しており、敗血症状態にあることを示唆していた。
【００４６】
次に、担癌マウスのＣＬＰ誘発敗血症に及ぼす被検物質投与の影響を調べた。試験に供した動物は、ＣＬＰ手術により、全例感染死した。しかし、生存期間については、対照の生理食塩水投与群の平均値±ＳＤ値が２．８±０．５日であるのに比し、被検物質投与群では４．６±１．０日であり、ログランクテストにおいてｐ＜０．０５で有意差が認められた。一方、比較用の抗生物質（アンピシリン）投与群の平均生存期間は３．０±０．６日であり、被検物質投与群に比べると、活性は明らかに低かった（図２）。
【００４７】
《実施例３：ＣＬＰ処置した抗癌剤投与マウスにおけるマツタケ子実体乾燥物の効果の評価》
（１）抗癌剤投与マウスの作製と被検物質の投与
実験動物として、７週齢の雄性Ｃ５７ＢＬ／６マウス（日本チャールズリバー社）を購入し、予備飼育の後、８週齢で実験に用いた。抗癌剤投与マウスは、８週齢の雄性Ｃ５７ＢＬ／６マウスに５−フルオロウラシル（５−ＦＵ；協和発酵）２０ｍｇ／ｋｇを、２０日間、隔日に１０回腹腔内投与することにより作製した。被検物質のマウス（抗癌剤投与マウス及び健常マウス）への投与は、５−ＦＵ投与開始日から開始し、ＣＬＰ処置実施前日まで、連日２０回経口投与した。被検物質は、実施例１で調製したマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体乾燥物を秤量し、所定容量の生理食塩水を加えた後、ホモゲナイザーを用いて均一に懸濁し、１ｇ／ｋｇ／日の量で投与した。対照群には、同量の生理食塩水を投与した。また、比較のために、抗炎症剤イブプロフェン［α-methyl-4-(isobutyl) phenylacetic acid sodium salt；シグマ・アルドリッチ社］を、ＣＬＰ手術処理３０分前に皮下投与（３０ｍｇ／ｋｇ）した。
【００４８】
（２）ＣＬＰ処置
ＣＬＰ処置は、実施例２（２）に記載の手順に従って実施した。
【００４９】
（３）結果
健常マウスにＣＬＰ処置した群では、処置後７日以内に４０％のマウスが死亡し、死亡マウスの平均生存日数は３．４±１．０日であった。一方、５−ＦＵ投与マウスでは、ＣＬＰ処置により全例が７日以内に感染により死亡し、平均生存日数は４．６±１．３日であった（図３）。健常・ＣＬＰ処置群と５−ＦＵ投与・ＣＬＰ処置群との間にログランクテストで有意差が認められた。一方、シャム手術・５−ＦＵ投与群及びシャム手術・健常群共、実験期間中、全数が生存した。
【００５０】
更に、敗血症関連指標の変動を調べるため、ＣＬＰ又はシャム手術後２４時間目の血中の細菌数、血清ＴＮＦα、及びＡＳＡＴレベルを測定した。血中菌数に関しては、シャム手術群で、５−ＦＵ投与マウス及び健常マウス共に、菌は検出されなかったが、ＣＬＰ・健常群で１．７±０．２ｃｆｕ／ｍＬ、ＣＬＰ・５−ＦＵ投与群で２．７±０．４ｃｆｕ／ｍＬの菌が血中に検出された。また、血中のＴＮＦαレベルに関しては、シャム手術群では、５−ＦＵ投与マウス及び健常マウス共に、検出限界以下であったが、ＣＬＰ・健常群で３．０±０．３ｎｇ／ｍＬ、ＣＬＰ・５−ＦＵ投与群で４．０±０．７ｎｇ／ｍＬのレベルにあった。更に、血清のＡＳＡＴ値は、シャム手術・５−ＦＵ投与群で５４．０±７．１Ｕ／Ｌ、シャム手術・健常群で３９．０±５．１Ｕ／Ｌ、ＣＬＰ・５−ＦＵ投与群で１１１．６±２０．５Ｕ／Ｌ、ＣＬＰ・健常群で９２．６±１２．５Ｕ／Ｌであった。これらのいずれの指標もＣＬＰにより増加しており、敗血症状態にあることを示唆していた。
【００５１】
次に、５−ＦＵ投与マウスのＣＬＰ誘発敗血症に及ぼす被検物質投与の影響を調べた。試験に供した動物は、ＣＬＰ手術により、全例感染死した。しかし、生存期間については、対照の生理食塩水投与群の平均値±ＳＤ値が２．９±０７日であるのに比し、被検物質投与群では５．１±１．１日であり、ログランクテストにおいてｐ＜０．０５で有意差が認められた。一方、抗炎症剤（イププロフェン）投与群の平均生存期間は２．９±１．０日であり、被検物質投与群に比べると、活性は明らかに低かった（図４）。
【産業上の利用可能性】
【００５２】
全身性炎症反応症候群の予防又は治療剤は、全身性炎症反応症候群、特に敗血症の予防又は治療の用途に適用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】ＣＬＰ処置マウスの生存期間に及ぼす担癌の影響を示すグラフである。折れ線ａ及びｂは、それぞれ、担癌群及び対照群を示す。
【図２】担癌・ＣＬＰ処置マウスの生存期間に及ぼす被検物質の影響を示すグラフである。折れ線ａ、ｂ、及びｃは、それぞれ、被検物質投与群、比較用抗生物質投与群、及び対照群を示す。
【図３】５−ＦＵ投与マウスの生存期間に及ぼすＣＬＰ処置の影響を示すグラフである。折れ線ａ及びｂは、それぞれ、５−ＦＵ投与群及び対照群を示す。
【図４】５−ＦＵ投与後にＣＬＰ処置したマウスの生存期間に及ぼす被検物質の影響を示すグラフである。折れ線ａ、ｂ、及びｃは、それぞれ、被検物質投与群、比較用抗炎症剤投与群、及び対照群を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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