(57)【要約】【課題】  紫外線照射によって引き起こされる皮膚のダメージを改善する新規な剤、及び抗紫外線ダメージ作用に優れた皮膚外用剤を提供する。【手段】  ラン科カトレヤ（Ｌａｅｌｉｏｃａｔｔｌｅｙａ  ｄｒｕｍｂｅａｔ）の抽出物を有効成分とする紫外線ダメージ改善剤である。また、該紫外線ダメージ改善剤を含有する皮膚外用剤である。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラン科カトレヤ（Ｌａｅｌｉｏｃａｔｔｌｅｙａ  ｄｒｕｍｂｅａｔ）の抽出物を有効成分とする紫外線ダメージ改善剤。
【請求項２】
請求項１記載の紫外線ダメージ改善剤を含有する皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、紫外線による皮膚の細胞のダメージを改善する剤及び該剤を含有する皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
紫外線は、様々な皮膚障害をもたらすことが知られている。過度の紫外線は、皮膚細胞に障害を与え、活性酸素やサイトカイン等を産生することにより、細胞自身や周りの細胞に働きかけ、日焼けなどの急性炎症反応を引き起こす。紫外線は、遺伝子の損傷を起こすことも知られており、損傷の激しい細胞は、アポトーシスを誘導する。皮膚内におけるアポトーシスの増加は、組織再生能の低下につながり、皮膚老化を促進する原因となる（非特許文献１参照）。従って、紫外線により生じる障害を防止、改善することは、皮膚の保温、バリア機能、弾力性といった皮膚機能を維持することにもつながる。また、紫外線の慢性的な暴露は、光加齢を促進し、色素沈着や皮膚の皺、弛みの原因となる（非特許文献２参照）。従って、紫外線により誘発される皮膚の炎症反応やその後に生じる皮膚機能の障害を防止、改善することは、皮膚の老化を防止、改善することにつながる。
【０００３】
従来、紫外線による障害を予防する方法として、ベンゾフェノン誘導体等の紫外線吸収剤や酸化チタン、酸化亜鉛等の無機紫外線散乱剤を配合したサンスクリーン製品が用いられている（特許文献１〜３参照）。これらは高い紫外線防御効果が得られているものの、感触などの使用感の問題や、耐摩擦性、耐汗性などの物理的耐久性の限界から継続的な予防効果は満足できるものでないうえ、紫外線吸収剤で炎症を起こすなど、安全性の点でも問題となっていた。さらに紫外線に暴露された後に生じる炎症やその後に引き起こされる障害等を予防・改善することのできる製剤も望まれていた。
【０００４】
一方、ラン科植物から得られた水溶性の抽出物を含有する化粧料やカトレヤの植物抽出物を含有する皮膚外用剤が提案されているが、これらの抽出物の紫外線の照射によって引き起こされるダメージに対する作用効果についてはなんら記載されていない（特許文献４及び５参照）。
【０００５】
【特許文献１】特開平６−３０５９４９号公報
【特許文献２】特開平７−１４５０２９号公報
【特許文献３】特開平８−２５９４１９号公報
【特許文献４】特開平２−２７９６１８号公報
【特許文献５】特開２００４−６７５４９号公報
【非特許文献１】大戸  信明，フレグランスジャーナル（ＦＲＡＧＲＡＮＣＥ  ＪＯＵＲＮＡＬ），２００２年，第７巻,ｐ．５７−６１
【非特許文献２】宮地  良樹，フレグランスジャーナル（ＦＲＡＧＲＡＮＣＥ  ＪＯＵＲＮＡＬ），１９９２年，第１１巻,ｐ．４９−５４
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、紫外線、特にＵＶ−Ｂの照射によって皮膚に生じた種々のダメージ、例えば、皮膚の炎症、色素沈着、皮膚の皺および弛み等のダメージを、予防又は改善する効果を有する新規な剤を提供することを課題とする。また、紫外線による種々のダメージ、皮膚の炎症、色素沈着、皮膚の皺および弛み等のダメージを予防又は改善し得る皮膚外用剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、鋭意検討した結果、ラン科カトレヤの抽出物が、紫外線照射によって引き起こされる種々の皮膚ダメージを改善する作用を有するという知見を得、この知見に基づいてさらに検討を重ね、本発明を完成するに至った。
本発明は、ラン科カトレヤ（Ｌａｅｌｉｏｃａｔｔｌｅｙａ  ｄｒｕｍｂｅａｔ）の抽出物を有効成分とする紫外線ダメージ改善剤、及び該紫外線ダメージ改善剤を含有する皮膚外用剤に関する。
さらに別の観点から、本発明によって、ラン科カトレヤ（Ｌａｅｌｉｏｃａｔｔｌｅｙａ  ｄｒｕｍｂｅａｔ）の抽出物を皮膚に適用することを含む紫外線によって引き起こされた皮膚ダメージを改善する方法；及びラン科カトレヤ（Ｌａｅｌｉｏｃａｔｔｌｅｙａ  ｄｒｕｍｂｅａｔ）の抽出物を皮膚に適用することを含む皮膚の光加齢防止方法；が提供される。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、紫外線照射によって引き起こされる皮膚ダメージを改善する剤を提供することができる。本発明の皮膚外用剤は、紫外線の照射によって皮膚に生じた種々のダメージ、皮膚の炎症、色素沈着、皮膚の皺および弛み等のダメージを予防又は改善し得る。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明は、ラン科カトレヤ（Ｌａｅｌｉｏｃａｔｔｌｅｙａ  ｄｒｕｍｂｅａｔ）の抽出物を有効成分として含有する紫外線ダメージ改善剤に関する。ラン科カトレヤは、ラン科レリオカトレヤ属に分類される、カトレヤとレリアとの交配種である。本発明では、ラン科カトレヤ（以下、単に「カトレヤ」という）の根、茎、葉、花、果実、種子等いずれの部分の抽出物も用いることができ、２箇所以上の部分から得られた抽出物を混合して用いてもよく、あるいは２箇所以上の部分から異なる溶媒により抽出された抽出物を二種以上混合して用いてもよい。中でも、花を除いた全草の抽出物を用いるのが好ましい。
【００１０】
前記カトレヤの抽出物は、その根、茎、葉、花、果実、種子等の１箇所又は２箇所以上を、適当な溶媒によって抽出することによって得られる。これらの部分に乾燥、細切、圧搾、又は発酵などの適宜の処理を施した後、抽出処理を施してもよい。抽出は、カトレヤを低温ないし加温下で溶媒中に所定の時間浸漬することによって実施できる。抽出溶媒としては特に限定されないが、例えば水；メチルアルコール、エチルアルコール等の低級１価アルコール；グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等の液状多価アルコール；アセトン等のケトン類；エチルエーテル等のエーテル類；酢酸エチル等のエステル類；等の一種又は二種以上を用いることができる。
【００１１】
上記方法で調製した前記カトレヤの抽出物は、そのまま紫外線ダメージ改善剤の有効成分として用いることができる。また、適宜の期間そのまま放置し、熟成させた後に用いることもできる。必要ならば、効果に影響のない範囲で、さらに、濾過やイオン交換樹脂等による脱臭、脱色等の精製処理を施した後に用いることもできる。又、液体クロマトグラフィー等の分離手段を用いて、活性の高い画分のみを用いることもできる。
【００１２】
本発明の紫外線ダメージ改善剤は、カトレヤ抽出物を有効成分として含有し、例えば、食品、医薬、皮膚外用剤（化粧料及び皮膚外用品を含む）等に配合することができる。
【００１３】
本発明の紫外線ダメージ改善剤は、皮膚に適用することにより、紫外線、特に波長３２０〜２８０ｎｍ程度の中波長紫外線（ＵＶ−Ｂ）の照射によって引き起こされる種々の皮膚ダメージを改善する剤である。ＵＶ−Ｂの照射によって引き起こされる皮膚ダメージの例としては、皮膚の炎症、色素沈着、皮膚の皺および弛み等がある。本発明の紫外線ダメージ改善剤は、これらの皮膚ダメージを治療し、皮膚状態を改善する作用を有する。さらに、本発明の紫外線ダメージ改善剤は、紫外線の集中的な照射によって引き起こされる急性の皮膚ダメージのみならず、慢性的な紫外線の照射によって生じる皮膚の光加齢、例えば、皮膚の皺、たるみ等を改善する作用も有する。
【００１４】
本発明の皮膚外用剤は、前記紫外線ダメージ改善剤を含有し、紫外線、特にＵＶ−Ｂの照射によって引き起こされる各種皮膚ダメージを改善する作用を示す。前記皮膚外用剤における本発明の紫外線ダメージ改善剤の含有量は、好ましくは０．００００１〜５質量％（以下単に「％」で示す）であり、より好ましくは０．００１〜０．５％である。この範囲内であれば、カトレヤ抽出物を安定に配合することができ、かつ高い抗老化効果を発揮させることができる。又、溶液状態の抽出物を使用する場合は、溶質であるカトレヤ抽出物の含有量が上記範囲内であれば、その抽出物溶液濃度は何ら限定されるものではない。
本発明の皮膚外用剤は、本発明の紫外線ダメージ改善剤を常法に従い、種々の形態の基剤に配合して、製剤化することにより調製することができる。
【００１５】
さらに本発明に係る皮膚外用剤に、活性酸素消去剤、抗炎症剤、美白剤、細胞賦活剤、殺菌剤の他、油類、界面活性剤、保湿剤、紫外線吸収剤、粉体、香料、防腐剤等、一般的な外用剤及び化粧料原料を配合することができる。
【００１６】
本発明に係る皮膚外用剤は、液状、ゲル状、クリーム状又は粉末状の形態で提供することができる。また本発明に係る皮膚外用剤は、ローション剤、乳剤、ゲル剤、クリーム剤、軟膏等の剤型で提供することができ、さらに化粧水、乳液、クリーム、パック等の皮膚化粧料、メイクアップベースローション、メイクアップベースクリーム、液状又はクリーム状或いは軟膏型のファンデーションといったメイクアップ化粧料、ハンドクリーム、レッグクリーム、ボディローション等の身体用化粧料などとしても提供することができる。
【実施例】
【００１７】
以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定されることはない。
［参考例１  カトレヤ抽出物の調製］
レリオカトレヤ  ドラムビート（Ｌａｅｌｉｏｃａｔｔｌｅｙａ  ｄｒｕｍｂｅａｔ）の全草１０ｇに、５０ｖｏｌ％含水エチルアルコール溶液１３０ｍＬを加え、加熱抽出を行った後、濃縮液を得て、更に溶媒を除去してカトレヤ抽出物を０．０２ｇ得た。
【００１８】
［紫外線ダメージ改善作用の試験例及び結果］
ヒト正常皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）を１０％  ＦＢＳ含有α−ＭＥＭを用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞をα−ＭＥＭを用いて２．０×１０5ｃｅｌｌｓ／ｍＬの濃度に希釈した後、４８ｗｅｌｌプレートに１ｗｅｌｌ当たり２００μＬずつ播種した。２４時間培養後、培地を１００μＬのＰＢＳ（−）へ交換し、１．０Ｊ／ｃｍ2のＵＶ−Ｂを照射した。照射後、直ちに、ＰＢＳ（−）を抜き、１０％ＦＢＳ含有α−ＭＥＭに溶解した参考例１で調製したカトレヤ抽出物を６．２５、２５、１００μｇ／ｍＬにそれぞれ調整した被験試料溶液を、各ｗｅｌｌに４００μＬ添加し、２４時間培養した。紫外線ＵＶ−Ｂダメージからの回復効果は、ＭＴＴアッセイを用いて測定した。培養終了後、培地を抜き、終濃度０．４ｍｇ／ｍＬで溶解したＭＴＴを各ｗｅｌｌに２００μＬずつ添加した。２時間培養した後に、細胞内に生成したブルーホルマザンを２−プロパノール２００μＬで抽出した。抽出後、波長５７０ｎｍおける吸光度を測定した。同時に濁度として波長６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。また、同様に細胞播種した後、ＵＶ−Ｂを照射しない細胞および細胞播種後、ＵＶ−Ｂを照射し被験試料を添加しない細胞についても同様に測定し、それぞれ非照射群と照射群とした。
紫外線（ＵＶ−Ｂ）ダメージに対する改善作用の計算方法は以下のとおりである。
紫外線ダメージ改善率（％）＝
｛（Ｎｔ−Ｃ）−（Ｎｔ−Ｓａ）｝／（Ｎｔ−Ｃ）×１００
Ｎｔ：ＵＶ−Ｂを照射しない細胞での吸光度
Ｃ  ：ＵＶ−Ｂを照射し被験試料を添加しない細胞での吸光度
Ｓａ：ＵＶ−Ｂを照射し被験試料を添加した細胞での吸光度
【００１９】
【表１】
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【００２０】
表１の結果から、参考例１で調製したカトレヤ抽出物には、紫外線照射によりダメージを受けた細胞を改善する効果があることが認められた。
【００２１】
［実施例１：乳液の調製と抗炎症作用試験］
（試験方法）
表１に示した組成及び下記製法で乳液を調製し、背部皮膚に塗布して日焼けによる炎症に対する効果を調べた。その結果を表２に示す。
【００２２】
【表２】
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【００２３】
（製法）
Ａ．成分（１）〜（７）、（１４）及び（１５）を加熱混合し、７５℃に保つ。
Ｂ．成分（９）〜（１３）を加熱混合し、７５℃に保つ。
Ｃ．ＡにＢを加えて乳化する。
Ｄ．Ｃを冷却しながら成分（８）及び（１６）を加え、乳液を得た。
【００２４】
（試験方法）
ヒト背部皮膚（各群１０人）に紫外線（ＵＶ−Ｂ）を照射した。紫外線照射量は２ＭＥＤとした。紫外線照射の２４時間前と照射直後及び照射１２時間後、２４時間後に背部に０．２ｍLずつ塗布した。なお、紫外線照射前に塗布部位を温水で良く洗浄した。照射２４時間後に炎症の程度を観察した。
（評価基準）
炎症についての評価基準（抗炎症効果）
０：炎症が全く認められない
１：ごくわずか炎症が認められる
２：炎症は認められるが、非照射部位との境界は不明瞭
３：炎症が認められ、非照射部位との境界は鮮明
上記評価基準に従い、それぞれの評点が１点以下であるパネルが１０人中何人いたかを数え、以下の判定基準に従って判定した。
（判定基準）
１０人中、評点１点以下のパネル数が
８人以上          ：  著効
６人以上７人以下  ：  有効
４人以上５人以下  ：  やや有効
３人以下          ：  無効
【００２５】
【表３】
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【００２６】
表３の結果より、カトレヤ抽出物を配合した本発明の乳液は、皮膚の炎症を抑制する働きがあり、抗炎症効果を示すことが明らかになった。
【産業上の利用可能性】
【００２７】
本発明によれば、紫外線照射によって引き起こされるダメージを改善し得る剤を提供することができる。本発明の紫外線ダメージ改善剤を含有する本発明の皮膚外用剤は、紫外線、特にＵＶ−Ｂ、が照射されることによって引き起こされる種々のダメージ、例えば、皮膚の炎症、色素沈着、皮膚の皺、弛み等、を予防及び／又は改善するのに優れている。