(57)【要約】      （修正有）【課題】  シリーズ観察画像の取得時におけるインターバル期間中に別観察を行えるようにする。【解決手段】  レーザ光などの点光源１からのスポット光が、二次元走査スキャナ２、対物レンズ３を通してステージ５上の試料４へ照射され、試料４から到来する光の強度に基づいて試料４の観察画像を一定の周期で順次取得する。ここで、コンピュータ８が当該周期と無関係である観察画像の取得の指示を取得したときには、当該指示の取得に応じて当該周期の途中で当該観察画像を取得することができる。【選択図】      図１Ａ
2006178044.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料から到来する光の強度に基づいて形成される当該試料についての画像である観察画像を取得する観察画像取得手段と、
前記画像取得手段を制御して前記観察画像を一定の周期で順次取得させるシリーズ観察画像取得制御手段と、
前記周期と無関係である前記観察画像の取得の指示を取得する指示取得手段と、
前記指示の取得に応じて前記画像取得手段を制御して前記周期の途中で前記観察画像を取得させる別観察画像取得制御手段と、
を有することを特徴とする顕微鏡装置。
【請求項２】
前記周期の途中での前記観察画像の取得が前記観察画像取得手段で可能であることを報知する報知手段を更に有することを特徴とする請求項１に記載の顕微鏡装置。
【請求項３】
前記観察画像取得手段が前記観察画像を取得するときの取得条件である観察条件であって前記別観察画像取得制御手段による制御の下での当該取得の際におけるものである別観察時観察条件の設定を取得する別観察時観察条件取得手段を更に有し、
前記別観察画像取得制御手段は、前記シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下での前記観察画像取得手段による前記観察画像の取得の際における前記観察条件を前記別観察時観察条件へと切替えて前記観察画像を取得させる、
ことを特徴とする請求項１に記載の顕微鏡装置。
【請求項４】
前記別観察画像取得制御手段は、前記観察画像取得手段による前記周期の途中での前記観察画像の取得を終えた後に、当該観察画像取得手段における前記別観察時観察条件を元の前記観察条件へと復帰させることを特徴とする請求項３に記載の顕微鏡装置。
【請求項５】
前記シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下での前記観察画像取得手段による前記観察画像の取得の際における前記観察条件を、前記別観察時観察条件へと変更する観察条件変更手段を更に有することを特徴とする請求項３に記載の顕微鏡装置。
【請求項６】
前記シリーズ観察画像取得制御手段は、前記観察画像の取得時に至ったときに前記観察画像取得手段が前記別観察画像取得制御手段による制御の下での前記観察画像の取得を行っている途中である場合には、当該別観察画像取得制御手段による制御の下での当該観察画像の取得を終了させることを特徴とする請求項１に記載の顕微鏡装置。
【請求項７】
前記シリーズ観察画像取得制御手段は、前記観察画像取得手段が前記観察画像を取得するときの取得条件である観察条件を切替えて前記別観察画像取得制御手段による制御の下での前記観察画像の取得を行っていた場合には、当該別観察画像取得制御手段による制御の下での当該観察画像の取得を終了させた後に、当該観察条件を当該切替え前のものへと復帰させることを特徴とする請求項６に記載の顕微鏡装置。
【請求項８】
前記観察画像が格納される格納手段を更に有し、
前記観察画像取得手段が前記シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像と、当該観察画像取得手段が前記別観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像とは、前記格納手段における別個の格納領域へ格納される、
ことを特徴とする請求項１に記載の顕微鏡装置。
【請求項９】
前記観察画像取得手段が前記シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像が格納される前記格納手段の格納領域へ、当該観察画像取得手段が前記別観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像を格納させる格納制御手段を更に有することを特徴とする請求項８に記載の顕微鏡装置。
【請求項１０】
試料から到来する光の強度に基づいて形成される当該試料についての画像である観察画像を取得する顕微鏡を制御して当該観察画像を一定の周期で順次取得させ、
前記周期と無関係である前記観察画像の取得の指示を取得し、
前記指示の取得に応じて前記顕微鏡を制御して前記周期の途中で前記観察画像を取得させる、
ことを特徴とする顕微鏡装置の制御方法。
【請求項１１】
試料から到来する光の強度に基づいて形成される当該試料についての画像である観察画像を取得する顕微鏡を制御して当該観察画像を一定の周期で順次取得させる処理と、
前記周期と無関係である前記観察画像の取得の指示を取得する処理と、
前記指示の取得に応じて前記顕微鏡を制御して前記周期の途中で前記観察画像を取得させる処理と、
をコンピュータに行わせるためのプログラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は顕微鏡の技術に関し、特に、複数枚の試料の画像を時間の経過に応じて順次取得する技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
共焦点走査型顕微鏡は、光走査されている試料から到来する光のうちピンホールを通過したものの光強度に基づいて当該試料の三次元情報を得るものである。
共焦点走査型顕微鏡に関し、例えば特許文献１には、試料の時間変化の観察（シリーズ観察）の手法を提供するために、一定の時間間隔をおいて試料の画像を共焦点走査型顕微鏡で繰り返し取得する技術が開示されている。
【特許文献１】特開平６−２７３８３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
上掲した特許文献１に開示されている技術では、一定の時間間隔をおいた試料の画像（シリーズ観察画像）を取得する場合、例えば、試料の三次元像の観察のためのＸＹＺ画像観察に加えて時間経過の観察をも実施するＸＹＺＴ観察のための試料のシリーズ観察画像を取得する場合において、先行するＸＹＺ観察からその観察に後続する次のＸＹＺ観察までの期間（インターバル期間）中に別のもの（同一試料の別の観察部位あるいは別の試料）の観察（以下、「別観察」と称することとする）を実行することを考慮されていない。従って、一旦観察条件を設定してシリーズ観察を開始すると、そのシリーズ観察が完全に終了するまで別観察をすることはできない。そのため、例えば、予め設定していた観察条件で指定されている観察領域から外れている試料の部位の様子をシリーズ観察中に知りたくなった場合には、観察者は、実施中のシリーズ観察の終了を待ってから当該部位の様子を観察するか、若しくは、実施中のシリーズ観察を中止しなければならなかった。
【０００４】
本発明は上述した問題に鑑みてなされたものであり、その解決しようとする課題は、シリーズ観察画像の取得時におけるインターバル期間中に別観察を行えるようにすることである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の態様のひとつである顕微鏡装置は、試料から到来する光の強度に基づいて形成される当該試料についての画像である観察画像を取得する観察画像取得手段と、当該画像取得手段を制御して当該観察画像を一定の周期で順次取得させるシリーズ観察画像取得制御手段と、当該周期と無関係である当該観察画像の取得の指示を取得する指示取得手段と、当該指示の取得に応じて当該画像取得手段を制御して当該周期の途中で当該観察画像を取得させる別観察画像取得制御手段と、を有することを特徴とするものであり、この特徴によって前述した課題を解決する。
【０００６】
なお、上述した本発明に係る顕微鏡装置において、当該周期の途中での当該観察画像の取得が当該観察画像取得手段で可能であることを報知する報知手段を更に有するように構成してもよい。
【０００７】
また、前述した本発明に係る顕微鏡装置において、当該観察画像取得手段が当該観察画像を取得するときの取得条件である観察条件であって当該別観察画像取得制御手段による制御の下での当該取得の際におけるものである別観察時観察条件の設定を取得する別観察時観察条件取得手段を更に有し、当該別観察画像取得制御手段は、当該シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下での当該観察画像取得手段による当該観察画像の取得の際における当該観察条件を当該別観察時観察条件へと切替えて当該観察画像を取得させる、ように構成してもよい。
【０００８】
なお、このとき、当該別観察画像取得制御手段は、当該観察画像取得手段による当該周期の途中での当該観察画像の取得を終えた後に、当該観察画像取得手段における当該別観察時観察条件を元の当該観察条件へと復帰させるように構成してもよい。
【０００９】
あるいは、このとき、当該シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下での当該観察画像取得手段による当該観察画像の取得の際における当該観察条件を、当該別観察時観察条件へと変更する観察条件変更手段を更に有するように構成してもよい。
【００１０】
また、前述した本発明に係る顕微鏡装置において、当該シリーズ観察画像取得制御手段は、当該観察画像の取得時に至ったときに当該観察画像取得手段が当該別観察画像取得制御手段による制御の下での当該観察画像の取得を行っている途中である場合には、当該別観察画像取得制御手段による制御の下での当該観察画像の取得を終了させるように構成してもよい。
【００１１】
なお、このとき、当該シリーズ観察画像取得制御手段は、当該観察画像取得手段が当該観察画像を取得するときの取得条件である観察条件を切替えて当該別観察画像取得制御手段による制御の下での当該観察画像の取得を行っていた場合には、当該別観察画像取得制御手段による制御の下での当該観察画像の取得を終了させた後に、当該観察条件を当該切替え前のものへと復帰させるように構成してもよい。
【００１２】
また、前述した本発明に係る顕微鏡装置において、当該観察画像が格納される格納手段を更に有し、当該観察画像取得手段が当該シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像と、当該観察画像取得手段が当該別観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像とは、当該格納手段における別個の格納領域へ格納される、ように構成してもよい。
【００１３】
なお、このとき、当該観察画像取得手段が当該シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像が格納される当該格納手段の格納領域へ、当該観察画像取得手段が当該別観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像を格納させる格納制御手段を更に有するように構成してもよい。
【００１４】
本発明の別の態様のひとつである顕微鏡装置の制御方法は、試料から到来する光の強度に基づいて形成される当該試料についての画像である観察画像を取得する顕微鏡を制御して当該観察画像を一定の周期で順次取得させ、当該周期と無関係である当該観察画像の取得の指示を取得し、当該指示の取得に応じて当該顕微鏡を制御して当該周期の途中で当該観察画像を取得させる、ことを特徴とするものであり、この特徴によって前述した課題を解決する。
【００１５】
本発明の更なる別の態様のひとつであるプログラムは、試料から到来する光の強度に基づいて形成される当該試料についての画像である観察画像を取得する顕微鏡を制御して当該観察画像を一定の周期で順次取得させる処理と、当該周期と無関係である当該観察画像の取得の指示を取得する処理と、当該指示の取得に応じて当該顕微鏡を制御して当該周期の途中で当該観察画像を取得させる処理と、をコンピュータに行わせるためのプログラムであり、このプログラムをコンピュータで実行させることにより、当該コンピュータで前述した課題が解決される。
【発明の効果】
【００１６】
本発明によれば、以上のようにすることにより、シリーズ観察画像の取得時におけるインターバル期間中に別観察を行えるようになるという効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
以下、本発明の実施の形態を図面に基づいて説明する。
図１Ａは本発明を実施する共焦点走査型顕微鏡装置の構成を示している。
図１Ａにおいて、光源１はレーザ光などの点光源である。この光源１からのスポット光は二次元走査スキャナ２へ導かれる。
【００１８】
二次元走査スキャナ２は、光源１からのスポット光を試料４上で二次元走査させるものである。二次元走査スキャナ２は、例えばＸ軸方向へスポット光を走査させるＸスキャナとしてのガルバノミラーと、当該Ｘ軸に対して直交するＹ軸方向へスポット光を走査させるＸスキャナとしてのガルバノミラーとを有しおり、これらのＸスキャナとＹスキャナとを各々動作させると、スポット光を試料４上でＸＹ方向に振ることができる。
【００１９】
二次元走査スキャナ２から出力されたスポット光は、対物レンズ３を通してステージ５上の試料４へ照射される。このステージ５は、スポット光の光軸方向であってＸ軸及びＹ軸のどちらに対しても垂直であるＺ軸方向に移動可能であり、ステージ５上に載置された試料４を当該光軸方向に移動させることができる。
【００２０】
スポット光が照射された試料４から到来する光（例えば蛍光）は、対物レンズ３を通して二次元走査スキャナ２へ一旦戻された後、光検出器６へ導かれる。この光検出器６の受光面の前方には図示しないピンホールが配置されており、光検出器６はこのピンホールを通過した光を受光面で受光し、その光の強度（光量）に応じたアナログ電気信号を出力する。
【００２１】
光検出器６から出力される電気信号は、Ａ／Ｄ変換器７によってデジタルデータへ変換された後にコンピュータ８へ入力される。
コンピュータ８は二次元走査スキャナ２、ステージ５、表示部９、及び入力装置１０と電気的に接続されており、マウスやキーボード等の入力装置１０に対する操作によって入力された内容を分析して各部に所定の制御指示、例えば、二次元走査スキャナ８に対しレーザ光の走査の開始指示やステージ５のＺ軸方向への移動の指示などを行う一方で、光検出器６により検出される試料４の光強度に対応する信号（光強度検出値）に基づいた三次元の立体像の形成や前述したシリーズ画像の形成を行う。また、コンピュータ８は、得られた画像を表示部９に表示させる。
【００２２】
以上のように、観察画像取得手段として機能する図１Ａに示した共焦点走査型顕微鏡装置の有している構成自体は、従来のものと大差無いものである。
図１Ｂはコンピュータ８の構成を示している。コンピュータ８は、ＣＰＵｌｌ、半導体メモリ等のメモリ１２、及びハードディスク装置等の記憶装置１３を有している。
【００２３】
ＣＰＵｌｌは、光検出器６により検出される試料４の光強度検出値に基づいて試料４の二次元断層画像を形成して当該画像を表している画像データをメモリ１２に格納する。この画像の保存指示が観察者により入力装置１０へ入力されると、このメモリ１２に格納しておいた画像データを記憶装置１３へ記憶させる。また、ＣＰＵ１１は、記憶装置１３に予め記録させておいた処理プログラムを読み出して実行することにより、後述する各種の制御処理を行う。
【００２４】
なお、コンピュータ８の構成は、標準的な構成のコンピュータであれば大概有しているものであるので、例えば一般的なパーソナルコンピュータを利用することもできる。また、後述する各種の制御処理をコンピュータ８に行わせるためには、当該処理をコンピュータ８に行わせるための制御プログラムを作成して記憶装置１３やＣＤ−ＲＯＭ等の記録媒体に予め記録させておき、必要に応じてこの処理プログラムを読み出してコンピュータ８のメモリ１２上に配置し、ＣＰＵｌｌに実行させるようにすればよい。
【００２５】
図１Ｃはメモリ１２の記憶領域の使用状況を示している。
格納手段としての機能を有するメモリ１２の記憶領域には、同図に示すように、シリーズ観察画像データメモリ保存領域１４と別観察画像データ保存領域１５とが別個の領域として確保される。ここで、シリーズ観察用に取得される観察画像の画像データはシリーズ観察画像データ保存領域１４に格納され、シリーズ観察におけるインターバル期間中に取得される観察画像についての画像データは別観察画像データ保存領域１５に格納される。
【００２６】
図１Ｄは、コンピュータ８が、図１Ａに示した共焦点走査型顕微鏡装置を使用する観察者へ各種の情報を提供するために、指標のためのポインタと共に表示部９に表示させる、ＧＵＩ（Graphical User Interface）画面例を示している。
【００２７】
同図に示す画面は、データファイルの保存や印刷、プログラムの終了などといった、各種のアプリケーションソフトで標準的に備えられている一般的な機能の選択を行うための領域であるメニューバー１６、この共焦点走査型顕微鏡装置での観察条件（観察位置、走査の速度、走査範囲、画像取得時の分解能、シリーズ観察におけるインターバル期間の時間、画像取得枚数など）の設定を行うための領域である観察条件設定パネル１８、この共焦点走査型顕微鏡装置で取得した画像の表示部９での表示方法（コマ送り表示、表示中画像の保持や、例えば光検出器６を複数備えており観察条件の異なる画像が取得可能な場合における表示画像の選択や当該異なる画像の重畳表示など）の指定を行うための領域である表示方法指定バー１９、及びこの取得画像を表示する領域である取得画像表示ウィンドウ２１を有して構成されている。取得画像表示ウィンドウ２１は、例えばシリーズ観察によって取得した画像を取得画像表示ウィンドウ２１ａで表示する一方で、別観察によって取得した画像を取得画像表示ウィンドウ２１ｂに表示するようにして、表示部９に同時に表示しながらもお互いを区別できるように配慮している。
【００２８】
また、観察条件設定パネル１８の図１Ｄにおける上方に隣接して、画像取得のための光走査を開始させる指示を行うための走査開始ボタン１７が配置されている。なお、この走査開始ボタン１７は、例えば表示形態が変化する、本実施形態においては通常色の表示とグレー表示とで表示色が変化することにより、光走査の開始指示を行うことができる状態にあるのか否かを報知する機能を兼ねている。
【００２９】
また、表示方法指定バー１９の同図における右横に隣接して、別観察で取得した画像をシリーズ観察で取得する画像に追加する指示を行うための画像追加ボタン２０と、別観察における現在の観察条件の設定をシリーズ観察へ反映させる指示を行うための設定反映ボタン２２が配置されている。
【００３０】
上述した共焦点走査型顕微鏡装置を用いる本発明の各実施例について以下に説明する。
なお、以下の説明において使用する変数を説明すると、
ｎ：サンプリング番号（ｎ＝１，２，３，…，Ｎ（設定された画像取得枚数））
Ｔｎ：第ｎ番目のシリーズ観察画像
Ａｋ：別観察で第ｋ番目に取得した共焦点画像（ｋ＝１，２，３，…）
である。
【実施例１】
【００３１】
本実施例は、図１Ａに示した共焦点走査型顕微鏡装置で、シリーズ観察のインターバル期間中の別観察を可能とするものである。
本実施例の概念図を図２Ａに示す。同図の例では、試料４についてのＴ１、Ｔ２、及びＴ３の画像（ＸＹ共焦点画像）を順次取得するシリーズ観察（ＸＹＴ観察）におけるＴ１の取得からＴ２の取得までのインターバル期間中に、試料４についての別観察（シリーズ観察とＺ位置を異ならせた観察）を実行して別観察画像Ａ１を取得するというものである。この一連の観察によって取得された画像についての画像データはメモリ１２に格納されるが、図２Ｂに示すように、シリーズ観察によって取得されるＴ１、Ｔ２、及びＴ３の画像についてのものはシリーズ観察画像データ保存領域１４に格納され、別観察によって取得されるＡ１の画像についてのものは別の領域である別観察画像データ保存領域１５に格納される。従って、シリーズ観察で取得した画像データを消去することなく、別観察により取得した画像データが保存される。
【００３２】
次に図３Ａ及び図３Ｂについて説明する。これらの図は、記憶装置１３に予め格納されている所定の制御プログラムを実行することによりＣＰＵ１１によって行われる、本実施例に係る制御処理の処理内容をフローチャートで示したものである。ここで、図３Ａはそのメインフローを示しており、図３Ｂはタイマ割り込みの発生により実行される処理のフローを示している。
【００３３】
図３Ａに示したメインフローの処理は、入力装置１０を介してシリーズ観察の実行指示をコンピュータ８が取得すると開始される。なお、この開始時において、変数ｎ及びｋの初期値は「１」とする。
【００３４】
まず、Ｓ１０１において、図１Ｄに例示したＧＵＩ画面を表示部９に表示させる処理が行われる。なお、このときには、試料４の画像は未取得であるので、取得画像表示ウィンドウ２１に試料４の画像は表示されない。
【００３５】
Ｓ１０２では、ＧＵＩ画面のうちの走査開始ボタン１７の表示を有効表示である通常色の表示として、試料４に対する光走査が開始可能であることを報知する処理が行われる。
Ｓ１０３及びＳ１０４では、観察条件設定パネル１８での表示に応じて入力装置１０から入力される、シリーズ観察画像の取得枚数Ｎの設定、及びシリーズ観察におけるインターバル期間の時間間隔の設定を取得する処理が各々行われる。
【００３６】
Ｓ１０５では、入力装置１０であるマウスに対するドラッグ操作及びクリック操作等により、走査開始ボタン１７を押下する操作を検出する処理が行われる。このＳ１０５の処理では、当該押下が検出されるとＳ１０６に処理を進める。
【００３７】
Ｓ１０６では、走査開始ボタン１７の表示を無効表示であるグレー表示として、試料４に対する光走査の更なる開始指示は不能であることを報知する処理が行われる。
Ｓ１０７では、観察条件設定パネル１８を利用して設定された観察条件の下で光走査を行い、試料４についてのＸＹ共焦点画像Ｔｎ（シリーズ観察画像）を取得する処理が行われる。
【００３８】
Ｓ１０８では、前ステップの処理によって取得された画像Ｔｎを表示部９の取得画像表示ウィンドウ２１ａに表示させる処理が行われる。
Ｓ１０９では、Ｓ１０７の処理によって取得された画像Ｔｎについての画像データをメモリ１２のシリーズ観察画像データ保存領域１４に格納する処理が行われる。
【００３９】
Ｓ１１０では、画像Ｔｎを、設定されていたシリーズ観察画像の取得枚数だけ取得したか否か、具体的には、変数ｎの現在の値が定数Ｎの値に達したか否かを判定する処理が行われる。ここで、画像Ｔｎを設定枚数だけ取得した（判定結果がＹｅｓ）ならば、指示されていたシリーズ観察を終了したとみなしてＳ１１１に処理を進める。一方、画像Ｔｎの取得枚数が未だ設定枚数に達していない（判定結果がＮｏ）ならばＳ１１２に処理を進める。
【００４０】
Ｓ１１１では、走査開始ボタン１７の表示を有効表示である通常色の表示として、試料４に対する新たな光走査が開始可能であることを報知する処理が行われ、その後はこの図３Ａの制御処理を終了する。
【００４１】
Ｓ１１２では、変数ｎの値を１だけ増加させる処理が行われる。
Ｓ１１３では、観察条件設定パネル１８を利用して設定されたシリーズ観察における観察条件をメモリ１２に複写して保存しておく処理が行われる。
【００４２】
Ｓ１１４では、インターバル期間の時間経過を計測するインターバル時間計測タイマを起動させる処理が行われる。インターバル時間計測タイマは、ＣＰＵ１１自身が備えている、時間経過を計測するタイマ機能を利用して実現され、このタイマが所定時間の経過を計測する度に、図３Ａの処理の進行を一旦停止させ、その代わりに、図３Ｂに示した後述する割り込み処理（インターバル時間計測タイマモジュール）が開始される。
【００４３】
Ｓ１１５では、走査開始ボタン１７の表示を有効表示である通常色の表示として、シリーズ観察中において試料４に対する光走査の開始指示が可能であること、すなわち別観察が可能であることを報知する処理が行われる。つまり、この走査開始ボタン１７は、報知手段としての機能を有している。
【００４４】
Ｓ１１６では、走査開始ボタン１７を押下する操作が検出されたか否かを判定する処理が行われる。ここで、当該操作が検出されたとき（判定結果がＹｅｓのとき）には、別観察の実行指示を取得したとみなしてＳ１１７に処理を進める。一方、当該操作が検出されない（判定結果がＮｏのとき）には、このＳ１１６の判定処理を繰り返す。
【００４５】
Ｓ１１７では、観察条件設定パネル１８を利用して設定されている、別観察のための観察条件を取得する処理が行われる。つまり、ＣＰＵ１１が別観察時観察条件取得手段として機能する。
【００４６】
Ｓ１１８では、走査開始ボタン１７の表示を無効表示であるグレー表示として、試料４に対する光走査の更なる開始指示は不能であることを報知する処理が行われる。
Ｓ１１９では、Ｓ１１７の処理によって取得された別観察での観察条件の下で光走査を行い、試料４についてのＸＹ共焦点画像Ａｋ（別観察画像）を取得する処理が行われる。この処理により、シリーズ観察画像の取得周期とは無関係に別観察画像が取得される。
【００４７】
Ｓ１２０では、前ステップの処理によって取得された画像Ａｋを表示部９の取得画像表示ウィンドウ２１ｂに表示させる処理が行われる。
Ｓ１２１では、Ｓ１１９の処理によって取得された画像Ａｋについての画像データをメモリ１２の別観察画像データ保存領域１５に格納する処理が行われる。
【００４８】
Ｓ１２２では、変数ｋの値を１だけ増加させる処理が行われる。
Ｓ１２３では、Ｓ１１３の処理によってメモリ１２で保存しておいたシリーズ観察における観察条件を読み出し、後に行われる光走査における観察条件とするべく復帰させる処理が行われ、その後はＳ１１５へと処理を戻して上述した処理が繰り返される。
【００４９】
以上までの処理が図３Ａの処理である。
次に、インターバル時間計測タイマに基づいて実行される割り込み処理（インターバル時間計測タイマモジュール）について、図３Ｂを参照しながら説明する。
【００５０】
この処理が開始されると、まず、Ｓ１３１において、シリーズ観察画像Ｔｎの撮像が直近に行われてからの経過時間（インターバル時間）を計測するためのカウンタを一定数だけ進める（カウントする）処理が行われる。この図３Ｂの処理は、インターバル時間計測タイマにより一定時間間隔で実行されるので、この時間間隔にこのカウンタでの計数値を乗じることによって、インターバル時間を得ることができる。
【００５１】
Ｓ１３２では、このカウンタの値から得られたインターバル時間が、図３ＡのＳ１０４の処理によって取得していたシリーズ観察におけるインターバル期間の時間間隔を経過したか否かを判定する処理が行われ、経過したとき（判定結果がＹｅｓのとき）には、シリーズ観察における次の共焦点画像の撮影を行うべく、Ｓ１３３に処理を進める。一方、未だ経過していない（判定結果がＹｅｓのとき）ときには、この図３Ｂの処理を終了する。
【００５２】
Ｓ１３３では、インターバル時間計測タイマを停止させる処理が行われる。
Ｓ１３４では、別観察の処理、すなわち、図３ＡにおけるＳ１１９の処理、すなわち別観察画像の取得の処理が現在実行中であるか否かを判定する処理が行われる。ここで、この別観察画像取得処理が実行中であるとき（判定結果がＹｅｓのとき）は、シリーズ観察を別観察に優先して行うべく、Ｓ１３５に処理を進める。一方、別観察画像取得処理を実行していないとき（判定結果がＮｏのとき）は、図３ＡのＳ１０６へ処理を進め、以降図３Ａの処理を再開させる。
【００５３】
Ｓ１３５では、別観察画像取得処理をその時点で終了し、続くＳ１３６において、それまでの取得処理によって取得された画像Ａｋについての画像データをメモリ１２の別観察画像データ保存領域１５に格納する処理が行われる。
【００５４】
Ｓ１３６では、変数ｋの値を１だけ増加させる処理が行われ、続くＳ１３７では、図３ＡのＳ１１３の処理によってメモリ１２で保存しておいたシリーズ観察における観察条件を読み出し、後に行われる光走査における観察条件とするべく復帰させる処理が行われ、その後は図３ＡのＳ１０６へ処理を進め、以降図３Ａの処理を再開させる。
【００５５】
以上までの処理が図３Ｂの処理であり、この処理によって図３Ａの処理がＳ１０６から繰り返し実行されることによって、シリーズ観察画像が設定された一定の周期で順次取得される。
【００５６】
本実施例においては、ＣＰＵ１１が上述した図３Ａ及び図３Ｂの処理を行うことでシリーズ観察画像取得制御手段、指示取得手段、及び別観察画像取得制御手段として機能することにより、シリーズ観察のインターバル期間中に別観察が可能となる。また、この別観察で取得した画像データが、メモリ１２におけるシリーズ観察とは別の記憶領域で保存される。これらにより、観察者は、シリーズ観察を中断する等して影響を与えることなく、またシリーズ観察が終了するまで待つことなく、インターバル期間中に任意の部位を別個の観察条件で別観察することができるようになるので、無駄な観察時間が削減される。
【００５７】
なお、本実施例では、シリーズ観察についての画像データと別観察についての画像データとをメモリ１２における別々の領域に画像を保存している例を示しているが、これはあくまでも一例であってこの実施例に限定されるものではなく、例えば物理的に別個の記憶装置に各々の画像データを保存するようにするなど、シリーズ観察についての画像データを消去ことなく保存できるのであれば、どのような手段でも構わない。
【実施例２】
【００５８】
本実施例は、図１Ａに示した共焦点走査型顕微鏡装置で、別観察のために設定された観察条件を進行中のシリーズ観察へ反映できるようにするものである。
例えば生きている細胞を観察対象の試料としてシリーズ観察を行う場合、インターバル期間を長く設定すると、試料自らが移動してしまうことがある。そこで、本実施例では、次のインターバル期間中に別観察を実行して試料が移動していないかどうか確認する。ここで、試料が移動している場合には最適な観察位置を観察者が探し出し、その結果を元のシリーズ観察に反映する。
【００５９】
本実施例の概念図を図４に示す。同図の例では、試料４についてのＴ１及びＴ２の画像（ＸＹ共焦点画像）を順次取得するシリーズ観察（ＸＹＴ観察）におけるＴ１の取得からＴ２の取得までのインターバル期間中に別観察を行う、ここで、試料４が移動したことを観察者が認識したときには、試料４についての別観察画像の取得を行って最適な観察位置（Ａ１の観察位置）を見つけ出し、進行中のシリーズ観察における観察条件に反映させて観察位置を補正した上でＴ２を取得している様子を示している。
【００６０】
ここで図５について説明する。同図は、記憶装置１３に予め格納されている所定の制御プログラムを実行することによりＣＰＵ１１によって行われる、本実施例に係る制御処理の処理内容をフローチャートで示したものである。
【００６１】
図５に示した処理内容は、図３Ａに示した実施例１に係る制御処理と似たものとなっているが、図３ＡにおけるＳ１２２からＳ１２３の処理がＳ２０１からＳ２０５の処理と置き換えられている点で異なっている。ここでは、この異なる部分についてのみ説明する。
【００６２】
Ｓ１１９の処理によって取得された別観察に係る画像Ａｋについての画像データがＳ１２１の処理によってメモリ１２の別観察画像データ保存領域１５に格納された後、Ｓ２０１では、観察条件設定パネル１８を利用して設定された別観察における観察条件をメモリ１２に格納して退避させる処理が行われる。
【００６３】
Ｓ２０２では、Ｓ１１３の処理によってメモリ１２で保存しておいたシリーズ観察における観察条件を読み出し、後に行われる光走査における観察条件とするべく一旦復帰させる処理が行われる。
【００６４】
Ｓ２０３では、入力装置１０であるマウスに対するドラッグ操作及びクリック操作等により、図１Ｄに例示したＧＵＩ画面における設定反映ボタン２２を押下する操作の有無を検出する処理が行われ、続くＳ２０４において、設定反映ボタン２２の押下操作が検出されたか否かを判定する処理が行われる。
【００６５】
ここで、当該押下操作が検出されたとき（判定結果がＹｅｓのとき）は、Ｓ２０５において、Ｓ２０１の処理によってメモリ１２で保存しておいた別観察における観察条件を読み出し、読み出した観察条件を、シリーズ観察における観察条件がＳ１１３の処理によって保存されているメモリ１２の記憶領域へ上書きして、後に行われるシリーズ観察における観察条件を別観察における観察条件に変更する処理が行われ、その後はＳ１１５へと処理を戻して上述した処理が繰り返される。一方、当該押下操作が検出されなかったとき（判定結果がＮｏのとき）は、上述したＳ２０５の処理を行うことなくＳ１１５へと処理を戻して上述した処理が繰り返される。
【００６６】
以上までの処理が図５の処理である。
なお、本実施例においても、インターバル時間計測タイマに基づいて割り込み処理（インターバル時間計測タイマモジュール）が実行されるが、その処理内容は、図３Ｂに示したものと同様である。
【００６７】
本実施例においては、ＣＰＵ１１が上述した図５及び図３Ｂの処理を行うことで観察条件変更手段としても機能することにより、別観察のために設定された観察条件を進行中のシリーズ観察へ反映できるようになる。これにより、観察者はシリーズ観察中の試料の変位にも迅速に対応でき、常に一定の位置での試料の経過を観測できるようになる。
【実施例３】
【００６８】
本実施例は、図１Ａに示した共焦点走査型顕微鏡装置で、実施例２と同様に、別観察のために設定された観察条件を進行中のシリーズ観察へ反映できるようにする上に、別観察によって取得した画像をシリーズ観察画像に追加できるようにするものである。
【００６９】
例えば、シリーズ観察において試料の変化が観察者の予想を越えて大きいために、観察前に予め設定していたシリーズ観察の観察条件では観察データを取り損ねてしまうような場合がある。そこで、本実施例では、インターバル期間中に別観察を実行し、当該別観察によって見出された観察条件をシリーズ観察に反映すると共に、一群のシリーズ観察画像に、当該別観察による取得画像を追加する。
【００７０】
本実施例の概念を図６Ａ及び図６Ｂを参照しながら説明する。これらの図の例は、ＦＲＡＰ（Fluorescence Recovery After Photobleaching：フォトブリーチング後の蛍光回復）の実験を示している。ＦＲＡＰの実験では、観察者は試料の任意の点にレーザ刺激を与えることによる蛍光の褪色からその回復までをシリーズ観察する。なお、刺激を与えた付近の注目部位の観察をインターバル期間中に行うためには、実施例１を適用することで実現することができる。また、試料自らの移動に対処するには、実施例２を適用すればよい。
【００７１】
図６Ａは、観察開始前に予め設定されたインターバル期間の時間間隔に従ってＦＲＡＰ実験のシリーズ観察を行う様子を示している。
まず、観察者は試料４の任意の箇所にレーザ光による刺激を与えながらシリーズ観察画像Ｔ１を取得し、その後、予め設定されているインターバル期間の経過後にシリーズ観察画像Ｔ２を取得していた。本来は、この後も、間隔時間に従ってＴ３、Ｔ４、Ｔ５の各シリーズ観察画像の取得を行うはずであったのだが、試料４の蛍光の回復が予想以上に早いことを観察者がＴ２の取得後に認識したので、試料４についての別観察画像Ａ１の取得を行ってインターバル期間の時間間隔の設定を短くし、図６Ｂに示すように、進行中のシリーズ観察における観察条件に反映させることにより短くなったインターバル期間で、以降のシリーズ観察画像Ｔ３’、Ｔ４’、Ｔ５’を取得する様子を示している。
【００７２】
ところで、この一連の観察によって取得された画像についての画像データはメモリ１２に格納される。ここで、前述した実施例１及び実施例２においては、シリーズ観察によって取得されるＴ１及びＴ２の画像についてのものはシリーズ観察画像データ保存領域１４に格納され、別観察によって取得されるＡ１の画像についてのものは別の領域である別観察画像データ保存領域１５に格納されるのであるが、本実施例においては、図６Ｃに示すように、別観察画像データ保存領域１５に格納されているＡ１の画像についての画像データを複写（コピー）してシリーズ観察画像データ保存領域１４に格納することができる。この複写により、別観察によって取得した画像がシリーズ観察画像に追加される。
【００７３】
ここで図７について説明する。同図は、記憶装置１３に予め格納されている所定の制御プログラムを実行することによりＣＰＵ１１によって行われる、本実施例に係る制御処理の処理内容をフローチャートで示したものである。
【００７４】
図７に示した処理内容は、図５に示した実施例２に係る制御処理と似たものとなっているが、図５におけるＳ２０５の処理の後（Ｓ２０４の判定処理でＮｏと判定された場合を含む）に、Ｓ３０１からＳ３０３の処理が追加されている点で異なっている。ここでは、この異なる部分についてのみ説明する。
【００７５】
Ｓ２０５の処理の後、若しくは、Ｓ２０４の判定処理でＮｏと判定された後、Ｓ３０１において、入力装置１０であるマウスに対するドラッグ操作及びクリック操作等により、図１Ｄに例示したＧＵＩ画面における画像追加ボタン２０を押下する操作の有無を検出する処理が行われ、続くＳ３０２において、画像追加ボタン２０の押下操作が検出されたか否かを判定する処理が行われる。
【００７６】
ここで、当該押下操作が検出されたとき（判定結果がＹｅｓのとき）は、Ｓ３０３において、Ｓ１２１の処理によってメモリ１２の別観察画像データ保存領域１５に格納した別観察画像データＡｋを複写（コピー）してシリーズ観察画像データ保存領域１４に格納する処理が行われ、その後はＳ１１５へと処理を戻して上述した処理が繰り返される。一方、当該押下操作が検出されなかったとき（判定結果がＮｏのとき）は、上述したＳ３０３の処理を行うことなくＳ１１５へと処理を戻して上述した処理が繰り返される。
【００７７】
以上までの処理が図７の処理である。
なお、本実施例においても、インターバル時間計測タイマに基づいて割り込み処理（インターバル時間計測タイマモジュール）が実行されるが、その処理内容は、図３Ｂに示したものと同様である。
【００７８】
本実施例においては、ＣＰＵ１１が上述した図７及び図３Ｂの処理を行うことで格納制御手段としても機能することにより、観察者がシリーズ観察のインターバル期間中に任意の別観察を実行して取得した別観察画像をシリーズ観察画像に追加することができ、併せて、別観察のために設定された観察条件を進行中のシリーズ観察へ反映できるようになるので、試料４の突然の変化にも即応して観察画像を取得し保存しておくことができるようになる。
【００７９】
その他、本発明は、上述した実施形態に限定されることなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲内で種々の改良・変更が可能である。
【図面の簡単な説明】
【００８０】
【図１Ａ】本発明を実施する共焦点走査型顕微鏡装置の構成を示す図である。
【図１Ｂ】図１Ａに示したコンピュータの構成を示す図である。
【図１Ｃ】図１Ｂに示したメモリの記憶領域の使用状況を示す図である。
【図１Ｄ】図１Ａに示した表示部に表示させるＧＵＩ画面例を示す図である。
【図２Ａ】実施例１の概念図である。
【図２Ｂ】実施例１における画像データのメモリへの格納状況を示す図である。
【図３Ａ】実施例１に係る制御処理の処理内容を示すフローチャートである。
【図３Ｂ】インターバル時間計測タイマモジュールの処理内容を示すフローチャートである。
【図４】実施例２の概念図である。
【図５】実施例２に係る制御処理の処理内容を示すフローチャートである。
【図６Ａ】実施例３の概念図（その１）である。
【図６Ｂ】実施例３の概念図（その２）である。
【図６Ｃ】実施例３における画像データのメモリへの格納状況の変化を示す図である。
【図７】実施例３に係る制御処理の処理内容を示すフローチャートである。
【符号の説明】
【００８１】
１  光源
２  二次元走査スキャナ
３  対物レンズ
４  試料
５  ステージ
６  光検出器
７  Ａ／Ｄ変換器
８  コンピュータ
９  表示部
１０  入力装置
１１  ＣＰＵ
１２  メモリ
１３  記憶装置
１４  シリーズ観察画像データ保存領域
１５  別観察画像データ保存領域
１６  メニューバー
１７  走査開始ボタン
１８  観察条件設定パネル
１９  表示方法指定バー
２０  画像追加ボタン
２１、２１ａ、２１ｂ  取得画像表示ウィンドウ
２２  設定反映ボタン
【図１Ａ】
2006178044.tif 000003
【図１Ｂ】
2006178044.tif 000004
【図１Ｃ】
2006178044.tif 000005
【図１Ｄ】
2006178044.tif 000006
【図２Ａ】
2006178044.tif 000007
【図２Ｂ】
2006178044.tif 000008
【図３Ａ】
2006178044.tif 000009
【図３Ｂ】
2006178044.tif 000010
【図４】
2006178044.tif 000011
【図５】
2006178044.tif 000012
【図６Ａ】
2006178044.tif 000013
【図６Ｂ】
2006178044.tif 000014
【図６Ｃ】
2006178044.tif 000015
【図７】
2006178044.tif 000016
【手続補正書】
【提出日】平成17年3月30日(2005.3.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料から到来する光の強度に基づいて形成される当該試料についての画像である観察画像を取得する観察画像取得手段と、
前記観察画像取得手段を制御して前記観察画像を一定の周期で順次取得させるシリーズ観察画像取得制御手段と、
前記周期と無関係である前記観察画像の取得の指示を取得する指示取得手段と、
前記指示の取得に応じて前記画像取得手段を制御して前記周期の途中で前記観察画像を取得させる別観察画像取得制御手段と、
を有することを特徴とする顕微鏡装置。
【請求項２】
前記周期の途中での前記観察画像の取得が前記観察画像取得手段で可能であることを報知する報知手段を更に有することを特徴とする請求項１に記載の顕微鏡装置。
【請求項３】
前記観察画像取得手段が前記観察画像を取得するときの取得条件である観察条件であって前記別観察画像取得制御手段による制御の下での当該取得の際におけるものである別観察時観察条件の設定を取得する別観察時観察条件取得手段を更に有し、
前記別観察画像取得制御手段は、前記シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下での前記観察画像取得手段による前記観察画像の取得の際における前記観察条件を前記別観察時観察条件へと切替えて前記観察画像を取得させる、
ことを特徴とする請求項１に記載の顕微鏡装置。
【請求項４】
前記別観察画像取得制御手段は、前記観察画像取得手段による前記周期の途中での前記観察画像の取得を終えた後に、当該観察画像取得手段における前記別観察時観察条件を元の前記観察条件へと復帰させることを特徴とする請求項３に記載の顕微鏡装置。
【請求項５】
前記シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下での前記観察画像取得手段による前記観察画像の取得の際における前記観察条件を、前記別観察時観察条件へと変更する観察条件変更手段を更に有することを特徴とする請求項３に記載の顕微鏡装置。
【請求項６】
前記シリーズ観察画像取得制御手段は、前記観察画像の取得時に至ったときに前記観察画像取得手段が前記別観察画像取得制御手段による制御の下での前記観察画像の取得を行っている途中である場合には、当該別観察画像取得制御手段による制御の下での当該観察画像の取得を終了させることを特徴とする請求項１に記載の顕微鏡装置。
【請求項７】
前記シリーズ観察画像取得制御手段は、前記観察画像取得手段が前記観察画像を取得するときの取得条件である観察条件を切替えて前記別観察画像取得制御手段による制御の下での前記観察画像の取得を行っていた場合には、当該別観察画像取得制御手段による制御の下での当該観察画像の取得を終了させた後に、当該観察条件を当該切替え前のものへと復帰させることを特徴とする請求項６に記載の顕微鏡装置。
【請求項８】
前記観察画像が格納される格納手段を更に有し、
前記観察画像取得手段が前記シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像と、当該観察画像取得手段が前記別観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像とは、前記格納手段における別個の格納領域へ格納される、
ことを特徴とする請求項１に記載の顕微鏡装置。
【請求項９】
前記観察画像取得手段が前記シリーズ観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像が格納される前記格納手段の格納領域へ、当該観察画像取得手段が前記別観察画像取得制御手段による制御の下で取得した画像を格納させる格納制御手段を更に有することを特徴とする請求項８に記載の顕微鏡装置。
【請求項１０】
試料から到来する光の強度に基づいて形成される当該試料についての画像である観察画像を取得する顕微鏡を制御して当該観察画像を一定の周期で順次取得させ、
前記周期と無関係である前記観察画像の取得の指示を取得し、
前記指示の取得に応じて前記顕微鏡を制御して前記周期の途中で前記観察画像を取得させる、
ことを特徴とする顕微鏡装置の制御方法。
【請求項１１】
試料から到来する光の強度に基づいて形成される当該試料についての画像である観察画像を取得する顕微鏡を制御して当該観察画像を一定の周期で順次取得させる処理と、
前記周期と無関係である前記観察画像の取得の指示を取得する処理と、
前記指示の取得に応じて前記顕微鏡を制御して前記周期の途中で前記観察画像を取得させる処理と、
をコンピュータに行わせるためのプログラム。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
上掲した特許文献１に開示されている技術では、一定の時間間隔をおいた試料の画像（シリーズ観察画像）を取得する場合、例えば、試料の三次元像の観察のためのＸＹＺ画像観察に加えて時間経過の観察をも実施するＸＹＺＴ観察のための試料のシリーズ観察画像を取得する場合において、先行するＸＹＺ観察からその観察に後続する次のＸＹＺ観察までの期間（インターバル期間）中に別のもの（同一試料の別の観察部位あるいは別の試料）の観察（以下、「別観察」と称することとする）を実行することが考慮されていない。従って、一旦観察条件を設定してシリーズ観察を開始すると、そのシリーズ観察が完全に終了するまで別観察をすることはできない。そのため、例えば、予め設定していた観察条件で指定されている観察領域から外れている試料の部位の様子をシリーズ観察中に知りたくなった場合には、観察者は、実施中のシリーズ観察の終了を待ってから当該部位の様子を観察するか、若しくは、実施中のシリーズ観察を中止しなければならなかった。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
本発明の態様のひとつである顕微鏡装置は、試料から到来する光の強度に基づいて形成される当該試料についての画像である観察画像を取得する観察画像取得手段と、当該観察画像取得手段を制御して当該観察画像を一定の周期で順次取得させるシリーズ観察画像取得制御手段と、当該周期と無関係である当該観察画像の取得の指示を取得する指示取得手段と、当該指示の取得に応じて当該画像取得手段を制御して当該周期の途中で当該観察画像を取得させる別観察画像取得制御手段と、を有することを特徴とするものであり、この特徴によって前述した課題を解決する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
二次元走査スキャナ２は、光源１からのスポット光を試料４上で二次元走査させるものである。二次元走査スキャナ２は、例えばＸ軸方向へスポット光を走査させるＸスキャナとしてのガルバノミラーと、当該Ｘ軸に対して直交するＹ軸方向へスポット光を走査させるＹスキャナとしてのガルバノミラーとを有しおり、これらのＸスキャナとＹスキャナとを各々動作させると、スポット光を試料４上でＸＹ方向に振ることができる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
光検出器６から出力される電気信号は、Ａ／Ｄ変換器７によってデジタルデータへ変換された後にコンピュータ８へ入力される。
コンピュータ８は二次元走査スキャナ２、ステージ５、表示部９、及び入力装置１０と電気的に接続されており、マウスやキーボード等の入力装置１０に対する操作によって入力された内容を分析して各部に所定の制御指示、例えば、二次元走査スキャナ２に対しレーザ光の走査の開始指示やステージ５のＺ軸方向への移動の指示などを行う一方で、光検出器６により検出される試料４の光強度に対応する信号（光強度検出値）に基づいた三次元の立体像の形成や前述したシリーズ画像の形成を行う。また、コンピュータ８は、得られた画像を表示部９に表示させる。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
Ｓ１３２では、このカウンタの値から得られたインターバル時間が、図３ＡのＳ１０４の処理によって取得していたシリーズ観察におけるインターバル期間の時間間隔を経過したか否かを判定する処理が行われ、経過したとき（判定結果がＹｅｓのとき）には、シリーズ観察における次の共焦点画像の撮影を行うべく、Ｓ１３３に処理を進める。一方、未だ経過していない（判定結果がＮｏのとき）ときには、この図３Ｂの処理を終了する。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５４】
Ｓ１３７では、変数ｋの値を１だけ増加させる処理が行われ、続くＳ１３８では、図３ＡのＳ１１３の処理によってメモリ１２で保存しておいたシリーズ観察における観察条件を読み出し、後に行われる光走査における観察条件とするべく復帰させる処理が行われ、その後は図３ＡのＳ１０６へ処理を進め、以降図３Ａの処理を再開させる。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
本実施例の概念図を図４に示す。同図の例では、試料４についてのＴ１及びＴ２の画像（ＸＹ共焦点画像）を順次取得するシリーズ観察（ＸＹＴ観察）におけるＴ１の取得からＴ２の取得までのインターバル期間中に別観察を行う。ここで、試料４が移動したことを観察者が認識したときには、試料４についての別観察画像の取得を行って最適な観察位置（Ａ１の観察位置）を見つけ出し、進行中のシリーズ観察における観察条件に反映させて観察位置を補正した上でＴ２を取得している様子を示している。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６８】
本実施例は、図１Ａに示した共焦点走査型顕微鏡装置で、実施例２と同様に、別観察のために設定された観察条件を進行中のシリーズ観察へ反映できるようにすることに加え、別観察によって取得した画像をシリーズ観察画像に追加できるようにするものである。