(57)【要約】  【課題】  本発明は，構成ポリペプチドの立体構造を制御したポリマーブレンドの製造方法を提供することを目的とする。  【解決手段】  上記の課題は，２種以上のホモポリペプチドを混合し，調製するポリペプチド調製工程と，前記ポリペプチド調製工程で，調製したポリペプチドの立体構造を壊す立体構造破壊工程と，前記立体構造破壊工程で破壊した立体構造を再構築する立体構造再構築工程とを含むポリマーブレンドの製造方法により解決される。  【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
２種以上のホモポリペプチドを混合し，調製するポリペプチド調製工程と，
前記ポリペプチド調製工程で調製したポリペプチドの立体構造を壊す立体構造破壊工程と，
前記立体構造破壊工程で破壊した立体構造を再構築する立体構造再構築工程とを含む，  ポリマーブレンドの製造方法。
【請求項２】
前記「２種以上のホモポリペプチド」が，２種のホモポリペプチドである請求項１に記載のポリマーブレンドの製造方法。
【請求項３】
前記「２種以上のホモポリペプチド」が，ポリ（Ｌ−アラニン）とポリ（Ｌ−バリン），ポリ（Ｌ−アラニン）とポリ（Ｌ−イソロイシン），ポリグリシンとポリ（Ｌ−バリン），又はポリ（Ｄ−アラニン）とポリ（Ｌ−バリン）のいずれかの組合せであり，
それぞれの重量比が，４：１〜１：４である請求項１に記載のポリマーブレンドの製造方法。
【請求項４】
前記立体構造破壊工程は，有機酸を用いる請求項１に記載のポリマーブレンドの製造方法。
【請求項５】
前記立体構造破壊工程は，有機酸及び濃硫酸を用いる請求項１に記載のポリマーブレンドの製造方法。
【請求項６】
前記立体構造再構築工程は，塩基性溶媒，又は水を用いる請求項１に記載のポリマーブレンドの製造方法。
【請求項７】
前記立体構造破壊工程は，有機溶媒の存在下又は非存在下，有機酸を添加して，０℃〜８０℃において，１分〜１日反応させる工程であり，
前記立体構造再構築工程は，塩基性溶媒又は中性溶媒下，前記立体構造破壊工程における酸の当量の１／２当量〜２倍当量の塩基を０℃〜４０℃で１分〜１時間反応させる工程であるポリマーブレンドの製造方法。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれかに記載の製造方法により製造されるポリマーブレンド。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は，立体構造を制御したポリマーブレンドの製造方法，及びその製造方法を用いて製造されたポリマーブレンドなどに関する。
【背景技術】
【０００２】
ホモポリペプチドは，同一種類のアミノ酸がペプチド結合により高分子となったものである。これまで様々なホモポリペプチドが合成され，市販されている。ホモポリペプチドは，タンパク質と同様，α−ヘリックスやβ−シートといった高次構造（立体構造）を形成する。これらのポリペプチドはそのアミノ酸の種類や環境によって安定な立体構造は決まっている。ただし，温度環境などを変化させると，ホモポリペプチドの立体構造が相互に入れ替わることが知られている。これは，分子内及び分子間での水素結合が変化し，それぞれの環境において安定な立体構造に変化することなどに起因する。このように，ホモポリペプチドにおいて，立体構造が変化することは知られており，ホモポリペプチドにおける立体構造を形成するための水素結合は，解明されている。
【０００３】
なお，ポリグリシン（ＰＧ）とポリＬ−バリン（ＰＬＶ）とのポリマーブレンドを合成し，その分子内水素結合について報告した例はある（下記特許文献１〜３参照）。しかしながら，これらの報告例によっても，ポリマーブレンドの立体構造を制御する方法や，立体構造を制御したポリマーブレンドの製造方法，及び立体構造が制御されたポリマーブレンドについては開示されていない。
【０００４】
また，ペプチド繊維に機能性を持たせた構造体を製造する方法が知られている（下記特許文献１参照）。この方法は，ペプチド内にβ−シート構造部分を作成し，そのβ−シート部位に機能性材料を付加するというものである。この系は，複数のアミノ酸からなるポリペプチドを用いたものである。そして，その実施例において，α−ヘリックス構造からβ−シート構造へと転移を起させている。ポリペプチドを調整し，調整後のポリペプチドの立体構造を破壊し，再構築することによりポリペプチドの立体構造を制御するものではない。また，β−シート構造に機能性を付加することを意図しているため，α−へリックス構造とβ−シート構造とが混在することや，その比率を制御することは意図されていない。
【特許文献１】特開2003-277397号公報
【非特許文献１】Katsuyoshi Murata, Hiroyuki Kono, Etsuko Katoh, Shigeki Kuroki, and Isao Ando, "A study of conformational stability of polypeptide blends by solid state two dimensional 13C-1H heteronuclear correlation NMR spectroscopy" Polymer 44 (2003) pp. 4021-4027
【非特許文献２】Katsuyoshi Murata, Shigeki Kuroki, and Isao Ando, "A study of conformational stability of poly(L-alanine), poly(D-alanine), poly(L-isoleucine), polyglycine and poly(L-valine), and their polypeptide blends in the solid-state by 13C CP/MAS NMR" Polymer 43 (2002) pp. 6871-6878
【非特許文献３】Katsuyoshi Murata, Shigeki Kuroki, Hideaki Kimura and Isao Ando, "A study of conformational stability of poly(L-Alanine), poly(L-Valine), and poly(L-Alanine)/poly(L-Valine) Blends in the Solid State by 13C Cross Polarization/Magic Angle Spinning NMR" Biopolymers 64 (2002) pp. 26-33
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は，ポリマーブレンドの製造方法を提供することを目的とする。
【０００６】
本発明は，ヘリックス構造と，β−シート構造とが共存するポリマーブレンドの製造方法を提供することを別の目的とする。
【０００７】
本発明は，ヘリックス構造とβ−シート構造との割合を制御したポリマーブレンドの製造方法を提供することを別の目的とする。
【０００８】
本発明は，ヘリックス構造とβ−シート構造との割合を制御したポリマーブレンドを提供することを別の目的とする。
【０００９】
本発明は，β−シート構造を有するホモポリペプチド同士からなるポリマーブレンドの製造方法を提供することを別の目的とする。
【００１０】
本発明は，β−シート構造を有するホモポリペプチド同士からなるポリマーブレンドの製造方法において，ポリマーブレンドを構成するホモポリペプチドの割合を制御したポリマーブレンドの製造方法，及びそのようなポリマーブレンドを提供することを別の目的とする。
【００１１】
本発明は，ヘリックス構造構造を有するホモポリペプチド同士からなるポリマーブレンドの製造方法を提供することを別の目的とする。
【００１２】
本発明は，ヘリックス構造を有するホモポリペプチド同士からなるポリマーブレンドの製造方法において，ホモポリペプチドの割合を制御したポリマーブレンドの製造方法，及びそのようなポリペプチドを提供することを別の目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は，基本的には，２種以上のホモポリペプチドを混合し，それらの立体構造を崩した後に，立体構造を再構築させるものである。本発明は，原料のホモポリペプチドの混合比や，立体構造を再構築する際に使用する溶媒及びアルカリの量などを制御することにより，生成されるポリマーブレンドの立体構造を制御できるという知見に基づくものである。
【００１４】
[1]  すなわち，上記の課題のうち少なくとも一つを解決するため，本発明の立体構造を制御したポリマーブレンドの製造方法は，２種以上のホモポリペプチドを混合し，調製するポリペプチド調製工程と，前記ポリペプチド調製工程で，調製したポリペプチドの立体構造を壊す立体構造破壊工程と，前記立体構造破壊工程で破壊した立体構造を再構築する立体構造再構築工程とを含む，ポリマーブレンドの製造方法である。
【００１５】
[2]  本発明のポリマーブレンドの製造方法の好ましい態様は，前記「２種以上のホモポリペプチド」が，２種のホモポリペプチドである上記[1]に記載のポリマーブレンドの製造方法である。
【００１６】
[3]  本発明のポリマーブレンドの製造方法の好ましい別の態様は，前記「２種以上のホモポリペプチド」が，ポリ（Ｌ−アラニン）とポリ（Ｌ−バリン），ポリ（Ｌ−アラニン）とポリ（Ｌ−イソロイシン），ポリグリシンとポリ（Ｌ−バリン），又はポリ（Ｄ−アラニン）とポリ（Ｌ−バリン）のいずれかの組合せであり，それぞれの重量比が，４：１〜１：４である上記[1]に記載のポリマーブレンドの製造方法である。
【００１７】
[4]  本発明のポリマーブレンドの製造方法の好ましい別の態様は，前記立体構造破壊工程は，有機酸を用いる上記[1]に記載のポリマーブレンドの製造方法である。
【００１８】
[5]  本発明のポリマーブレンドの製造方法の好ましい別の態様は，前記立体構造破壊工程は，有機酸及び濃硫酸を用いる上記[1]に記載のポリマーブレンドの製造方法である。
【００１９】
[6]  本発明のポリマーブレンドの製造方法の好ましい別の態様は，前記立体構造再構築工程は，塩基溶媒，又は水を用いる上記[1]に記載のポリマーブレンドの製造方法である。
【００２０】
[7]  本発明のポリマーブレンドの製造方法の好ましい別の態様は，前記立体構造破壊工程は，有機溶媒の存在下又は非存在下，有機酸を添加して，０℃〜８０℃において，１分〜１日反応させる工程であり，前記立体構造再構築工程は，塩基性溶媒又は中性溶媒下，前記立体構造破壊工程における酸の当量の１／２当量〜２倍当量の塩基を０℃〜４０℃で１分〜１時間反応させる工程であるポリマーブレンドの製造方法である。
【００２１】
[8]  本発明のポリマーブレンドは，上記の[1]〜[7]のいずれかに記載の製造方法により製造されるポリマーブレンドである。
【発明の効果】
【００２２】
本発明によれば，2種以上のホモポリペプチドを混合し，その立体構造を壊した後に再構築するという，ポリマーブレンドの新規な製造方法を提供できる。
【００２３】
本発明によれば，ヘリックス構造と，β−シート構造とが共存するポリマーブレンドの製造方法を提供できる。
【００２４】
本発明によれば，原料のホモポリペプチドの混合比を変化させることなどにより，ヘリックス構造とβ−シート構造との割合を制御できるのでヘリックス構造とβ−シート構造との割合を制御したポリマーブレンドの製造方法，及びそのようなポリマーブレンドを提供できる。
【００２５】
本発明によれば，β−シート構造を有するホモポリペプチド同士からなるポリマーブレンドの製造方法を提供することができる。
【００２６】
本発明によれば，β−シート構造を有するホモポリペプチド同士からなるポリマーブレンドの製造方法において，ポリマーブレンドを構成するホモポリペプチドの割合を制御したポリマーブレンドの製造方法，及びそのようなポリマーブレンドを提供することができる。
【００２７】
本発明によれば，ヘリックス構造構造を有するホモポリペプチド同士からなるポリマーブレンドの製造方法を提供することができる。
【００２８】
本発明によれば，ヘリックス構造を有するホモポリペプチド同士からなるポリマーブレンドの製造方法において，ホモポリペプチドの割合を制御したポリマーブレンドの製造方法，及びそのようなポリペプチドを提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２９】
1. 立体構造を制御したポリマーブレンドの製造方法
以下では，本発明の「立体構造を制御したポリマーブレンドの製造方法」について説明する。本発明の製造方法は，基本的には，2種以上のホモポリペプチドを混合し，調製するポリペプチド調製工程と，混合したポリペプチドの立体構造を壊す立体構造破壊工程と，立体構造を再構築する立体構造再構築工程とを含む。本発明の製造方法は，これらの工程の他に，精製工程など公知のポリペプチドや公知の有機化合物を製造する方法における各種工程を含んでいても良い。
【００３０】
1.1.  ポリペプチド調製工程
「ポリペプチド調製工程」は，2種以上のホモポリペプチドを混合し，調製するための工程である。「ポリペプチド調製工程」では，基本的には，2種以上のホモポリペプチドからなる原料を選別する。
【００３１】
「ポリペプチド調製工程」における原料は，2種以上のホモポリペプチドであれば特に限定されず，公知のホモポリペプチドを用いることができる。このようなホモポリペプチドは，１種類のアミノ酸がペプチド結合により長鎖状態になったものである。本発明におけるホモポリペプチドとして，ポリグリシン,ポリ-Dバリン, ポリ-Dアラニン,ポリ-Dロイシン,ポリ-Dイソロイシン,ポリ-Dセリン,ポリ-Dスレオニン,ポリ-Dシステイン,ポリ-Dメチオニン,ポリ-Dフェニルアラニン,ポリ-Dチロシン,ポリ-Dトリプトファン,ポリ-Dプロリン,ポリ-Dアスパラギン酸,ポリ-Dグルタミン酸，ポリ-Dリジン,ポリ-Dヒスチジン,ポリ-Dアルギニン,ポリ-Dグルタミン，ポリ-Lバリン, ポリ-Lアラニン,ポリ-Lロイシン,ポリ-Lイソロイシン,ポリ-Lセリン,ポリ-Lスレオニン,ポリ-Lシステイン,ポリ-Lメチオニン,ポリ-Lフェニルアラニン,ポリ-Lチロシン,ポリ-Lトリプトファン,ポリ-Lプロリン,ポリ-Lアスパラギン酸,ポリ-Lグルタミン酸,ポリ-Lリジン,ポリ-Lヒスチジン,ポリ-Lアルギニン,ポリ-Lグルタミン, ポリ-βベンジル-Lアスパルテート,ポリ-βベンジル-Dアスパルテート,ポリ-γベンジル-Lグルタメート及びポリ-γベンジル-Dグルタメートがあげられる。これらの中でも，分子間で水素結合を形成し安定な構造を構築するβ−シート構造を有するホモポリペプチドが好ましい。これらのホモポリペプチドは，公知の製造方法に従って製造でき，既に市販されている。このようなホモポリペプチドは，化学的に合成しても良いし，生物学的に合成しても良い。
【００３２】
原料のひとつとしてポリグリシン（ＰＧ）を用いる場合，平均重合度として10〜50があげられ，15〜30であれば好ましく，17〜19であればさらに好ましく，数平均分子量として500〜3000があげられ，800〜2000であればより好ましく，900〜1500であればさらに好ましい。原料のひとつとしてポリ（Ｌ−アラニン）（ＰＬＡ）を用いる場合，平均重合度として100〜1000があげられ，150〜600であればより好ましく，300〜400であればさらに好ましく，数平均分子量として7000〜70000があげられ，10000〜50000であればより好ましく，20000〜30000であればさらに好ましい。原料のひとつとしてポリ（Ｄ−アラニン）（ＰＤＡ）を用いる場合，平均重合度として14〜130があげられ，好ましくは20〜100であり，より好ましくは30〜50であり，平均分子量として1000〜10000があげられ，好ましくは1500〜6000であり，より好ましくは2000〜4000である。原料のひとつとしてポリ（Ｌ−バリン）（ＰＬＶ）を用いる場合，平均重合度として6〜60があげられ，好ましくは9〜36であり，より好ましくは15〜20であり，平均分子量として500〜6000があげられ，好ましくは1000〜4000であり，より好ましくは1500〜2000である。原料のひとつとして、ポリ（Ｌ−イソロイシン）（ＰＬＩＬ）を用いるばあい，平均重合度として25〜250があげられ，35〜150が好ましく，70〜80であればより好ましく，平均分子量として2500〜25000があげられ，4000〜17000が好ましく，7000〜10000であればより好ましい。
【００３３】
なお，ホモポリペプチド以外にも主鎖にポリペプチドと同様な骨格を有するポリマーを原料としても構わない。この場合でも，ホモポリペプチドを原料とした場合と同じメカニズムによって，ポリマーブレンドを製造できる。この場合，公知の方法によりポリマーを合成できる。
【００３４】
本発明におけるホモポリペプチドは，塩基性基に基づく塩や酸性基に基づく塩などの「塩」であっても良い。「塩基性基に基づく塩」として，弗化水素酸塩，塩酸塩，臭化水素酸塩，沃化水素酸塩のようなハロゲン化水素酸塩，硝酸塩，過塩素酸塩，硫酸塩，燐酸塩等の無機酸塩；メタンスルホン酸塩，トリフルオロメタンスルホン酸塩，エタンスルホン酸塩のような低級アルカンスルホン酸塩，ベンゼンスルホン酸塩，ｐ−トルエンスルホン酸塩のようなアリ−ルスルホン酸塩，酢酸塩，りんご酸塩，フマ−ル酸塩，コハク酸塩，クエン酸塩，アスコルビン酸塩，酒石酸塩，蓚酸塩，マレイン酸塩等の有機酸塩；及び，グリシン塩，リジン塩，アルギニン塩，オルニチン塩，グルタミン酸塩，アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩をあげることができ，これらの中で好ましい塩はハロゲン化水素酸塩である。
【００３５】
一方，「酸性基に基づく塩」として，ナトリウム塩，カリウム塩，リチウム塩のようなアルカリ金属塩，カルシウム塩，マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩，アルミニウム塩，鉄塩等の金属塩；アンモニウム塩のような無機塩，ｔ−オクチルアミン 塩，ジベンジルアミン 塩，モルホリン塩，グルコサミン塩，フェニルグリシンアルキルエステル塩，エチレンジアミン 塩，Ｎ−メチルグルカミン塩，グアニジン塩，ジエチルアミン 塩，トリエチルアミン 塩，ジシクロヘキシルアミン 塩，Ｎ，Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン 塩，クロロプロカイン塩，プロカイン塩，ジエタノールアミン 塩，Ｎ−ベンジルフェネチルアミン 塩，ピペラジン塩，テトラメチルアンモニウム塩，トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩のような有機塩等のアミン 塩；及び，グリシン塩，リジン塩，アルギニン塩，オルニチン塩，グルタミン酸塩，アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩をあげることができる。
【００３６】
本発明におけるホモポリペプチドは，水和物などの「溶媒和物」であっても良い。また，本発明におけるホモポリペプチドは，基本的には単一のアミノ酸からなる純粋ホモポリペプチドであるが，その立体構造が大きく変わらない限り，一部に他の化合物が含まれていてもよい。
【００３７】
「ポリペプチド調製工程」における原料であるホモポリペプチドの重合度は，特に制限されないが，少なくとも溶媒に溶解しうる程度の重合度が好ましい。より具体的には，ホモポリペプチドの平均重合度として，10〜1000があげられ，好ましくは15〜400であり，より好ましくは20〜100である。また，ホモポリペプチドの平均分子量として，500〜100000があげられ，好ましくは800〜30000であり，より好ましくは1000〜100000である。
【００３８】
また，本発明におけるホモポリペプチドの組合せとして，上記のホモポリペプチドの任意の２種以上（好ましくは２種）の組合わせがあげられる。なお，ホモポリペプチドの構造上の相同性を考慮するとβ−シート構造を有するホモポリペプチド同士の組合わせや，同一の構造骨格を有するD体とL体のホモポリペプチド組合わせ，分子間で水素結合を形成し安定な構造を構築するβ−シート構造のホモポリペプチドとその他のホモポリペプチドの組合わせが好ましい。なお，ヘリックス構造を有するホモポリペプチド同士の組合せであってもよい。なお，原料となるホモポリペプチドの割合を制御することで，製造されるポリペプチド中のホモポリペプチドの組成比や，ヘリックス構造を採る部位の割合とβ−シート構造を採る部位の割合を制御できる。組合わせられるホモポリペプチドの分子量は，特に限定されないが同程度であっても良いし，一方の分子量が他方の分子量の２倍〜５倍などであってもよい。なお，用いられる各ポリペプチド自体の分子量は，ほぼ一様であることが望ましいが，ばらつきがあってもかまわない。
【００３９】
より具体的な組合せとして，ポリ（Ｌ−アラニン）とポリ（Ｌ−バリン），ポリ（Ｌ−アラニン）とポリ（Ｌ−イソロイシン），ポリグリシンとポリ（Ｌ−バリン），又はポリ（Ｄ−アラニン）とポリ（Ｌ−バリン）のいずれかの組合せがあげられる。
【００４０】
ホモポリペプチドを２種用いる場合，それらの重量比は１：４〜４：１があげられ，好ましくは１：３〜３：１であり，より好ましくは１：２〜２：１である。この重量比を調整することで，ポリマーブレンドの立体構造を制御できる。たとえば，β−シート構造を有するホモポリペプチドを多く用いれば，β−シート構造部分を多く有するポリマーブレンドを製造できる。
【００４１】
1.2. 立体構造破壊工程
「立体構造破壊工程」は，混合したポリペプチドの立体構造を壊す（ランダムコイル化する）ための工程である。「立体構造破壊工程」では，基本的には，前記のようにして調整したホモポリペプチドに，有機溶媒，有機溶媒と有機酸，有機酸，有機酸と強酸，又は有機溶媒・有機酸・強酸のいずれかを加えて，撹拌することにより原料となるポリペプチドの立体構造を破壊する。
【００４２】
「立体構造破壊工程」における有機溶媒は，ホモポリペプチドを溶解するものであれば特に限定されないが，好ましくは不活性溶媒（溶媒とホモポリペプチド間で化学反応を起こさない溶媒）である。このような有機溶媒として，ヘキサン，ヘプタン，リグロイン，石油エーテルのような脂肪族炭化水素類；ベンゼン，トルエン，キシレンのような芳香族炭化水素類；クロロホルム，ジクロロメタン，１，２−ジクロロエタン，テトラブロムエタン，四塩化炭素のようなハロゲン化炭化水素類；酢酸メチル，酢酸エチル，酢酸プロピル，酢酸ブチル，炭酸ジエチルのようなエステル類；ジエチルエーテル，ジイソプロピルエーテル，テトラヒドロフラン，ジオキサン，ジメトキシエタン，ジエチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；メタノ−ル，エタノ−ル，トリフルオロエタノール，ｎ−プロパノ−ル，イソプロパノ−ル，ｎ−ブタノ−ル，イソブタノ−ル，ｔ−ブタノ−ル，イソアミルアルコ−ル，ジエチレングリコール，グリセリン，オクタノール，シクロヘキサノール，メチルセロソルブのようなアルコ−ル類；アセトニトリル，イソブチロニトリルのようなニトリル類；ホルムアミド，ジメチルホルムアミド，ジメチルアセトアミド，ヘキサメチルリン酸トリアミドのようなアミド類；又は上記溶媒の混合溶媒；があげられ，これらの中で好ましい有機溶媒は，クロロホルム，ジメチルホルムアミド，ジクロロエタン，トリフルオロエタノール，テトラブロムエタンである。
【００４３】
「立体構造破壊工程」における有機溶媒の量は，原料となるホモポリペプチドを溶解し得る量であれば特に限定されない。有機溶媒の量は，原料となるホモポリペプチドの種類やその量に応じて適宜調整すればよい。有機溶媒を用いる場合，有機溶媒の重量と原料となるホモペプチドの重要の比は，１：１０〜１００：１があげられ，１０：１〜３０：１が好ましい。
【００４４】
「立体構造破壊工程」における有機酸は，ホモポリペプチドの立体構造を変化させることができる酸であれば特に限定されない。有機酸として，酢酸，ジクロロ酢酸，トリフルオロ酢酸，蟻酸，蓚酸，メタンスルホン酸，ｐ−トルエンスルホン酸，カンファースルホン酸，又はトリフルオロメタンスルホン酸などがあげられ，これらの中ではジクロロ酢酸（ＤＣＡ），又はトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）が好ましく，トリフルオロ酢酸がより好ましい。
【００４５】
「立体構造破壊工程」における有機酸の量は，原料となるポリペプチド自体の溶解性に関与するので，３０〜９５ｗｔ％が好ましく，５０〜９５ｗｔ％であればより好ましく，７０〜９５ｗｔ％であれば特に好ましい。有機酸と原料となるホモペプチドのモル比は，１０００：１〜１０：１があげられ，５００：１〜１００：１でもよい。
【００４６】
「立体構造破壊工程」において，有機酸と共に加えても良い「強酸」は，強酸であれば特に限定されず，例えば塩酸，硫酸，濃硫酸があげられる。強酸として，濃硫酸が好ましい。
【００４７】
「立体構造破壊工程」において，有機酸と共に加えても良い「強酸」の量は，原料となるポリペプチド自体の安定性(分解性)に関与するので，有機酸に対して０．１〜２０ｗｔ％が好ましく，０．１〜１０ｗｔ％であればより好ましく，０．１〜３ｗｔ％であれば特に好ましい。
【００４８】
「立体構造破壊工程」において，公知の触媒を用いてもよい。このような触媒として，トリメチルシリルトリフレ−ト，トリエチルシリルトリフレ−トのようなトリアルキルシリルトリフレ−ト類，トリフルオロボランエテレ−ト，塩化アルミニウム，塩化亜鉛のようなルイス酸；及び臭化リチウムなどのフッ化アルカリ金属があげられ，これらの中好ましい触媒は，臭化リチウムである。
【００４９】
「立体構造破壊工程」における溶液の温度は，原料，溶媒，触媒などにより適宜調整すればよく，原料となるホモポリペプチドを溶解することができれば特に限定されない。このような温度として，０℃〜８０℃があげられ，好ましくは１０℃〜５０℃であり，より好ましくは室温である。
【００５０】
また，「立体構造破壊工程」は，原料の混合を確実に行うため，撹拌を行うことが好ましい。撹拌速度は，その撹拌装置にもよるが，混合されたホモポリペプチドが溶液中で撹拌される速度であればよい。
【００５１】
「立体構造破壊工程」における撹拌時間（又は反応時間）は，原料となるホモポリペプチドの立体構造の安定性や，ホモポリペプチド自体の安定性などに依存するが，原料となるホモポリペプチドの立体構造を破壊できる程度であれば，特に限定されない。「立体構造破壊工程における反応時間は，１分〜１日があげられ，例えば10分〜5時間であり，1時間〜3時間でもよく，適宜調整すればよい。
【００５２】
1.3. 立体構造再構築工程
「立体構造再構築工程」は，立体構造を再構築するための工程である。「立体構造再構築工程」では，基本的には，塩基性溶媒（又は中性溶媒）に「立体構造破壊工程」を経た溶液などを加え，撹拌することによりポリペプチドの立体構造を再構築する。（以下，上記の工程と同様に記載する。）
【００５３】
「立体構造再構築工程」における塩基は，例えば，炭酸リチウム，炭酸ナトリウム，炭酸カリウムのようなアルカリ金属炭酸塩類；炭酸水素リチウム，炭酸水素ナトリウム，炭酸水素カリウムのようなアルカリ金属重炭酸塩類；水素化リチウム，水素化ナトリウム，水素化カリウムのようなアルカリ金属水素化物類；水酸化リチウム，水酸化ナトリウム，水酸化カリウムのようなアルカリ金属水酸化物類；リチウムメトキシド，ナトリウムメトキシド，ナトリウムエトキシド，カリウムｔ−ブトキシドのようなアルカリ金属アルコキシド類；ピペリジン，ピペリジニウムアセテート，ピペリジニウムベンゾエート，トリエチルアミン ，トリブチルアミン ，ジイソプロピルエチルアミン ，Ｎ−メチルモルホリン，ピリジン，４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン，Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン，Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン，１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン，１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ），１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］−７−ウンデセン（ＤＢＵ）のような有機アミン 類；であり，これらの中で好ましい塩基は，アルカリ金属炭酸塩類，アルカリ金属重炭酸塩類，又はアルカリ金属水酸化物類であり，特に好ましい塩基は水酸化ナトリウムである。
【００５４】
「立体構造再構築工程」における塩基性溶媒の「溶媒」は，ヘキサン，ヘプタン，リグロイン，石油エーテルのような脂肪族炭化水素類；ベンゼン，トルエン，キシレンのような芳香族炭化水素類；クロロホルム，ジクロロメタン，１，２−ジクロロエタン，テトラブロムエタン，四塩化炭素のようなハロゲン化炭化水素類；酢酸メチル，酢酸エチル，酢酸プロピル，酢酸ブチル，炭酸ジエチルのようなエステル類；ジエチルエーテル，ジイソプロピルエーテル，テトラヒドロフラン，ジオキサン，ジメトキシエタン，ジエチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；メタノ−ル，エタノ−ル，トリフルオロエタノール，ｎ−プロパノ−ル，イソプロパノ−ル，ｎ−ブタノ−ル，イソブタノ−ル，ｔ−ブタノ−ル，イソアミルアルコ−ル，ジエチレングリコール，グリセリン，オクタノール，シクロヘキサノール，メチルセロソルブのようなアルコ−ル類；アセトニトリル，イソブチロニトリルのようなニトリル類；ホルムアミド，ジメチルホルムアミド，ジメチルアセトアミド，ヘキサメチルリン酸トリアミドのようなアミド類；水；又は上記溶媒の混合溶媒；があげられ，これらの中で好ましい溶媒は，水である。
【００５５】
「立体構造再構築工程」における塩基性溶媒の量は，「立体構造破壊工程」を経た溶液などに含まれるポリペプチドの種類や量などに応じて適宜調整すればよい。
【００５６】
「立体構造再構築工程」における塩基性溶媒中のアルカリ当量は，「立体構造破壊工程」の溶液で使用した酸の当量の１／２当量〜２倍当量が好ましく，２／３当量〜３／２当量であればより好ましく，当量であれば特に好ましい。「立体構造再構築工程」における塩基性溶媒の容量は，制限されず任意の容量を採用できる。
【００５７】
なお，「立体構造再構築工程」は，水を溶媒として行っても良い。
【００５８】
「立体構造再構築工程」において，公知の触媒を用いることができる。このような触媒として，パラジウム−炭素，ラネ−ニッケル，酸化白金，白金黒，ロジウム−酸化アルミニウム，トリフェニルホスフィン−塩化ロジウム，パラジウム−硫酸バリウムがあげられる。
【００５９】
「立体構造再構築工程」における溶液の温度は，特に制限されない酸とアルカリの中和反応による発熱があるので，比較的低温が好ましく，反応中はおよそ室温程度に保たれることが好ましい。すなわち，「立体構造再構築工程」における溶液の温度は，０℃〜４０℃があげられ，好ましくは１０℃〜３０℃である。
【００６０】
「立体構造再構築工程」では，中和反応を速やかに行うため，好ましくは溶液を撹拌する。撹拌速度は，その撹拌装置にもよるが，溶質が混合される程度の速度で良い。「立体構造再構築工程」における撹拌時間は，一般的に中和反応は瞬時に終了するため，１分〜１時間があげられ，例えば５分〜３０分，５分〜２０分があげられ，好ましくは１０分程度である。
【００６１】
1.4.精製工程
上記のようにして得られたポリペプチドは，公知の精製処理を施し，精製することが好ましい。
【００６２】
1.5.その他
上記の製造方法は，ポリペプチドを用いたポリマーブレンドの製造方法であったが，上記の製造方法を応用することにより，主鎖にポリペプチドと同様な骨格を有するポリマーを用いたポリマーブレンドを製造できる。
【００６３】
2.  ポリマーブレンド
以下では，上記の本発明の製造方法にしたがって製造される「ポリマーブレンド」について説明する。
【００６４】
本明細書において「ポリマーブレンド」とは，１種のアミノ酸がペプチド結合によって結合したホモポリペプチド（ポリペプチドを構成する８０％以上，好ましくは９０％以上，より好ましくは９５％以上，最も好ましくは１００％のアミノ酸が同じ種類であるか，ポリペプチドのうち，１〜数個のアミノ酸以外が同一種類のもの）を少なくとも２種類以上用いて、分子が相溶したポリマーを意味する。構成するアミノ酸の種類が増えると立体構造を制御する条件が複雑となるので，本発明の「ポリマーブレンド」を構成するホモポリペプチドのアミノ酸の種類は，２〜５種類が好ましく，２〜４種類がより好ましく，１種類が最も好ましい。本発明の「ポリマーブレンド」は，その原料となるポリペプチドの１次構造を維持したまま２つ以上のポリペプチドが合わさり，その立体構造を構築したものであってもよい。また，「ポリマーブレンド」は，常温にて固体であっても，液体であってもよい。
【００６５】
「ポリマーブレンド」の一態様として，ヘリックス構造と，β−シート構造とが共存するものがあげられる。このような「ポリマーブレンド」は，本法を用い，たとえばヘリックス構造を有するポリペプチドと，β−シート構造を有するポリペプチドを用いることにより製造できる。ヘリックス構造と，β−シート構造とが共存するポリマーブレンドは，その割合によりさまざまな物性が期待できるので好ましい。このような「ポリマーブレンド」において，ヘリックス構造とβ−シート構造との割合（分子量の割合，又は構成するアミノ酸の数の割合）は，原料となるそれぞれのホモポリペプチドの割合を変更することにより制御できる。なお，へリックス構造を有するポリペプチドにオクタノイル基などの疎水性基を導入し，水溶媒下でβ−シート構造を形成するようにしてβ−シート構造の組成を制御することは，本発明の別の実施態様である。
【００６６】
「ポリマーブレンド」の別の態様として，β−シート構造を有するホモポリペプチドを複数含むポリマーブレンドがあげられる。“β−シート構造を有するホモポリペプチドを複数含むポリマーブレンド”として，“β−シート構造を有するホモポリペプチドを２種又は３種含むポリマーブレンド”や，“２種又は３種のβ−シート構造を有するホモポリペプチドからなるポリマーブレンド”があげられる。このような「ポリマーブレンド」は，β−シート構造を有するホモポリペプチドを原料として用いるか，上記の方法などによりへリックス構造をβ−シート構造に変換することにより製造できる。“β−シート構造を有するホモポリペプチドを複数含むポリマーブレンド”は，それぞれが同じ構造を有するので好ましい。このような“β−シート構造を有するホモポリペプチドを複数含むポリマーブレンド”を構成するβ−シート構造の割合（分子量の割合，又は構成するアミノ酸の数の割合）は，原料となるそれぞれのホモポリペプチドの割合を変更することにより制御できる。
【００６７】
「ポリマーブレンド」の別の態様として，ヘリックス構造を有するホモポリペプチドを複数含むポリマーブレンドがあげられる。“ヘリックス構造を有するホモポリペプチドを複数含むポリマーブレンド”として，“ヘリックス構造を有するホモポリペプチドを２種又は３種含むポリマーブレンド”や，“２種又は３種のヘリックス構造を有するホモポリペプチドからなるポリマーブレンド”があげられる。このような「ポリマーブレンド」は，ヘリックス構造を有するホモポリペプチドを用いた本法を用いることによりすることにより製造できる。“ヘリックス構造を有するホモポリペプチドを複数含むポリマーブレンド”は，それぞれが同じ構造を有するので好ましい。このような“ヘリックス構造を有するホモポリペプチドを複数含むポリマーブレンド”を構成するヘリックス構造の割合（分子量の割合，又は構成するアミノ酸の数の割合）は，原料となるそれぞれのホモポリペプチドの割合を制御することにより制御できる。
ポリマーブレンドポリマーブレンドポリマーブレンド
【００６８】
「ポリマーブレンド」は，基本的にはホモポリペプチドにより構成されるが，当該ホモポリペプチドを構成するアミノ酸は，適宜保護基など公知の置換基により置換されていてもよい。
【００６９】
3.  利用方法
上記のようにして製造した「ポリマーブレンド」は，基本的には，アミノ酸から構成される物質なので，生体工学材料、環境工学材料、汎用合成高分子材料として利用できる。また，主鎖にアミド、カルボニルを有する既知合成高分子の新たなブレンド製造方法としても利用できる。
【００７０】
以下では，実施例に基づき本発明を具体的に説明する。
[参考例]
−ランダムコイル化（立体構造破壊）実験−
実施例に先立ち，ホモポリペプチドが，トリフルオロ酢酸（又はトリフルオロ酢酸と濃硫酸）によって立体構造が破壊されるか（すなわち，ランダムコイル化するか）について検討した。
【００７１】
原料として，平均重合度18平均分子量1000のポリグリシン（ＰＧ），平均重合度333平均分子量23600のポリ（Ｌ−アラニン）（ＰＬＡ），平均重合度42平均分子量3000のポリ（Ｄ−アラニン）（ＰＤＡ），平均重合度18平均分子量1700〜1900のポリ（Ｌ−バリン）（ＰＬＶ），及び平均重合度75平均分子量8500のポリ（Ｌ−イソロイシン）（ＰＬＩＬ）をシグマ社より購入した。
【００７２】
ポリ栓付きサンプル瓶にテフロン（登録商標）皮膜の回転子を入れた。なお，以下ではこのサンプル瓶を「調製用サンプル瓶」と呼ぶ。この調製用サンプル瓶を電子天秤で計量した。この調製用サンプル瓶を電子天秤に置き，上記各50mgを採取した。このようなものを2種類準備した。3mLのメスピペットを用いて，調製用サンプル瓶に100%トリフルオロ酢酸 (ＴＦＡ)を約1.4mL（約2.2ｇ）加えた後，すばやく栓をした。調製用サンプル瓶をマグネチックスターラー上に置き，回転子を回転させて4〜5分間攪拌した。また，100%トリフルオロ酢酸 (ＴＦＡ)を約1.4mL（約2.2ｇ）加え，濃硫酸2mlを加えた。目視により，原料が溶解したことを確認した。
【００７３】
上記の溶液を用いて，ランダムコイル化を確認した。その結果，ＰＧ，ＰＬＡ，及びＰＤＡは，ＴＦＡのみでランダムコイル化し，立体構造を破壊できた。また，全ての原料は，ＴＦＡと濃硫酸ではランダムコイル化した。
【実施例１】
【００７４】
ポリ栓付きサンプル瓶にテフロン（登録商標）皮膜の回転子を入れた。なお，以下ではこのサンプル瓶を「調製用サンプル瓶」と呼ぶ。この調製用サンプル瓶を電子天秤で計量した。この調製用サンプル瓶を電子天秤に置き，ポリグリシン(ＰＧ)50mgを採取した。ＰＧとして，シグマ社製ＰＧ（分子量：１０００）を用いた。なお，ＰＧは，固体状態で３1−ヘリックス構造をとるものとβ−シート構造をとるものがあるが，本実施例では固体状態で最も安定な３1−ヘリックス構造をとるものを用いた。次に，調製用サンプル瓶を電子天秤に置いたまま，ポリ（Ｌ−バリン）(ＰＬＶ)を50mgを加えた。ＰＬＶとして，シグマ社製ＰＬＶ（分子量１７００〜１９００）を用いた。このものはβ−シート構造をとる。3mLのメスピペットを用いて，調製用サンプル瓶に100%トリフルオロ酢酸 (ＴＦＡ)を約1.4mL（約2.2ｇ）加えた後，すばやく栓をした。調製用サンプル瓶をマグネチックスターラー上に置き，回転子を回転させて4〜5分間攪拌した。この際の回転子の回転速度は，１３０ｒｐｍであった。目視で，両ポリペプチドが溶解した様子を確認した。調製用サンプル瓶をマグネチックスターラーから実験台に移した。
【００７５】
パスツールピペットを用いて，この調製用サンプル瓶に濃硫酸を約0.0445ｇ加えた。
その後，電子天秤で計量した。調製用サンプル瓶の栓の外側にパラフィルムを巻き付けて密封した。この調製用サンプル瓶をマグネチックスターラー上に置き，室温で約20時間攪した。この際の回転子の回転速度は，１３０ｒｐｍであった。300mLのビーカーに水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）を約0.78ｇ取り，精製水約150ｍLを加えた後，20分間攪拌した。調製用サンプルを攪拌した後に，開栓して，パスツールピペットを用いて，300mLのビーカー中のＮａＯＨ水溶液に攪拌させながら滴下した。この滴下時間は，3〜4分間であった。滴下が終了した後，室温で10分間，攪拌した。この際の回転子の回転速度は，４５０ｒｐｍであった。溶液を撹拌した後に，溶液をろ紙で自然ろ過した。
【００７６】
ろ紙に残った固形物を300mLのビーカーに精製水で洗い流した後，精製水を加えて総容量を150mLにした。この溶液を室温で30分間，攪拌した。この際の回転子の回転速度は，１３０ｒｐｍであったこの溶液をろ紙で自然ろ過した。精製水での洗浄，撹拌，及びろ過工程を３回繰り返した。ろ紙ごと減圧乾燥器で減圧乾燥した。減圧乾燥は，38℃で５時間行った後，さらに45℃で３時間行った。あらかじめ計量したポリ栓付きサンプル瓶に乾燥した固形物を移し，重量を計測した。固体ＮＭＲにより二次構造の変化を確認した。
【００７７】
ＮＭＲは，ブルカー社のＤＳＸ−３００を用いて行った。その詳細な実験条件は，上記の非特許文献１〜３に記載したとおりである。
【００７８】
上記実施例１と同様にして試料やその量，溶媒，撹拌時間などを変化させ実験を行った。それらの条件は，下記表１のとおりである。なお，表中「溶媒」は，立体構造破壊工程における溶媒を示す。また，結果において「○」は，ランダムコイル化（立体構造が破壊された）ことを表す。
【００７９】
【表１】
2006143604.tif 000002
【００８０】
上記の表１から１種類のホモポリペプチドは，上記の条件で立体構造が破壊されにくく，２種類のホモポリペプチドを用いた場合は，ランダムコイル化しやすい（すなわち立体構造を破壊できる）ことが分る。
【産業上の利用可能性】
【００８１】
本発明の「ポリマーブレンド」は，基本的にはアミノ酸から構成される物質なので，生体工学材料、環境工学材料、汎用合成高分子材料として利用できる。また，主鎖にアミド、カルボニルを有する既知合成高分子の新たなブレンド製造方法としても利用できる。