(57)【要約】【課題】アトピー性皮膚炎の予防・治療効果に優れ、副作用の恐れがなく安全性に優れたアレルギー抑制物質を提供する。【解決手段】酪酸菌（Clostridium butyricum）培養液又は酪酸菌培養エキスを有効成分として含有させてなるアレルギー抑制物質である。また、酪酸菌培養液又は酪酸菌培養エキスに、酪酸菌の生菌体及び／又は死菌体を加えてなるアレルギー抑制物質である。この酪酸菌培養液又は酪酸菌培養エキスを用いたアレルギー抑制物質は、アトピー性皮膚炎の予防・治療効果に優れ、副作用の恐れがなく安全性に優れたものである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
酪酸菌(Clostridium butyricum)培養液又は酪酸菌培養エキスを含有することを特徴とするアレルギー抑制物質。
【請求項２】
前記酪酸菌(Clostridium butyricum)培養液又は酪酸菌培養エキスに、酪酸菌(Clostridium butyricum)の生菌体及び／又は死菌体を加えることを特徴とする請求項１記載のアレルギー抑制物質。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アトピー性皮膚炎等に対するアレルギー抑制物質に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、アトピー性皮膚炎，食品アレルギー，アレルギー性鼻炎，アレルギー性喘息などのアレルギー性疾患の患者数は増加し、我が国の国民の３人に１人は既に何らかのアレルギー症状を発症しており、社会的な問題となっている。特に、アトピー性皮膚炎は乳幼児期に発症することが多く、増悪・寛解をくり返しながら長期間続く皮膚炎で、痒みのある湿疹を主な症状とする皮膚疾患である。乳幼児期に発症したアトピー性皮膚炎は、成長と共に治癒することが多かったが、近年は成人期まで続くこともあり、中には成人になってから発症する患者が急増している。そしてこのような現状に対して、種々の抗アレルギー剤が開発され市販されている。
【０００３】
一方、酪酸菌(Clostridium butyricum)は、偏性嫌気性の芽胞形成性菌であり、腐敗菌を始めとした種々の消化管病原体に対して拮抗作用を有し、乳酸菌等のいわゆる腸内有益菌と共生することにより、整腸効果を発揮することが知られており、その酪酸菌の培養液、又は当該培養液をろ過して生菌を回収した後に残る酪酸菌培養エキスにも腸内菌叢作用があることが知られている（例えば特許文献１参照）。
【特許文献１】特開平６−９２８６２号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
上述したように種々の抗アレルギー剤が開発され市販されているが、これらは長期の連用においては、副作用の面で満足のいくものではない。このため、副作用の恐れがなく、優れた抗アレルギー作用、特にアトピー性皮膚炎に対する抗アレルギー作用を有する薬剤が望まれている。
【０００５】
そこで、本発明は、アトピー性皮膚炎の予防・治療効果に優れ、副作用の恐れがなく安全性に優れたアレルギー抑制物質を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記課題を鑑みて鋭意検討した結果、酪酸菌培養液及び酪酸菌培養エキスが抗アレルギー作用を有することを見出し、本発明に想到した。
【０００７】
本発明の請求項１のアレルギー抑制物質は、酪酸菌(Clostridium butyricum)培養液又は酪酸菌培養エキスを含有することを特徴とする。
【０００８】
本発明の請求項２のアレルギー抑制物質は、請求項１において、前記酪酸菌(Clostridium butyricum)培養液又は酪酸菌培養エキスに、酪酸菌(Clostridium butyricum)の生菌体及び／又は死菌体を加えることを特徴とする。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の請求項１のアレルギー抑制物質は、酪酸菌培養液又は酪酸菌培養エキスを含有するものである。
【００１０】
この請求項１によれば、アレルギーの予防・治療効果に優れ、副作用の恐れがなく安全性に優れたアレルギー抑制物質を提供することができる。
【００１１】
本発明の請求項２のアレルギー抑制物質は、請求項１において、前記酪酸菌培養液又は酪酸菌培養エキスに、酪酸菌の生菌体及び／又は死菌体を加えたものである。
【００１２】
この請求項２によれば、更にアレルギーの予防・治療効果に優れ、副作用の恐れがなく安全性に優れたアレルギー抑制物質を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
以下、本発明の実施形態について詳細に説明する。
【００１４】
本発明に用いられる酪酸菌(Clostridium butyricum)は、偏性嫌気菌で芽胞を形成するグラム陽性の桿菌である。芽胞の形成により、耐熱性、耐酸性をもち、生菌としての安定性に富んでいる。
【００１５】
本発明において酪酸菌培養液とは、酪酸菌を通常の酪酸菌を培養する培地例えば、アミノ酸，コンスターチ，水等を含む培地で２０〜４２℃、２０〜７２時間培養して得られる培養液のことをいう。
【００１６】
また、本発明において酪酸菌培養エキスとは、上記酪酸菌培養液を遠心分離等により固液分離して、得られる液部のことをいう。  
【００１７】
なお、酪酸菌培養液又は酪酸菌培養エキス中には、酪酸菌の生菌体の他に、代謝産物である酪酸，酢酸，プロピオン酸等の有機酸、及び自己融解した菌体成分，アミラーゼ，各種アミノ酸等が含まれている。また、酪酸菌培養液又は酪酸菌培養エキスには有機酸として酪酸や酢酸等を含有しているため、特異臭を有する欠点があるが、この臭いを例えば香料でマスキングしてもよい。香料としては、酪酸菌臭のマスキングに有効なものであれば特に制限されないが、食品添加物として用いられるものが好ましい。
【００１８】
本発明に用いられる酪酸菌の生菌体は、芽胞形成期のものでも栄養体期のものでも制限はないが、ペプチドグリカンを豊富に含有する栄養体期のものが好ましい。栄養体期を豊富に含有する生菌体は、例えばペプトン，イーストエクストラクト，グルコース，水等を含有するＰＹＧ培地などで、２０〜４２℃、２０〜７２時間培養し、遠心分離等の方法で集菌して得ることができる。
【００１９】
また、本発明に用いられる酪酸菌の死菌体は、生菌体を通常の方法により、例えば空気（酸素）被爆や熱処理を用いて処理することによって得られる。死菌体を製造するための生菌としては芽胞形成期のものでも栄養体期のものでも制限はないが、ペプチドグリカンを豊富に含有する栄養体期のものが好ましい。
【００２０】
本発明のアレルギー抑制物質は、酪酸菌培養液又は酪酸菌培養エキスを有効成分として含有するものである。そして、更に酪酸菌の生菌体及び／又は死菌体を１０５個／ｍｌ以上含むことが好ましい。但し、生菌体及び／又は死菌体の数はこれに限定されず、１０５個／ｍｌ以下であってもよく、また、アレルギー抑制物質は生菌体及び／又は死菌体を含まないものであってもよい。
【００２１】
本発明のアレルギー抑制物質を製剤するには、目的、投与形態、投与対象、最終形態等に応じて、上記のようにして得られた酪酸菌の生菌体または死菌体に加えて、任意成分としてその他の添加剤を配合し、例えば液状，エマルジョン，粉末状，顆粒状，錠剤状，ゲル状，ゼリー状，ペースト状等の任意の形状に調製することができる。これらは当業者の通常の方法に従って調製することができる。また、本実施形態のアレルギー抑制物質は、そのまま単独で或いは一成分として配合して、病者用食品、特定保健用食品、栄養補助食品等の食品、並びに内用の医薬品又は医薬部外品として使用することができる。具体的には、錠剤，散剤，顆粒剤，カプセル剤，丸剤，トローチ剤，液剤，エキス剤等が挙げられる。なお、本発明における製剤中には１０５個／ｍｌ以上の酪酸菌培養液の生菌体または死菌体が含まれているのが好ましい。
【００２２】
本発明のアレルギー抑制物質の投与（或いは摂取）方法としては、経口投与が好ましい。
【００２３】
また、上記のアレルギー抑制物質を含有する食品としては、例えば飲食物などのように経口的に摂取されるものを含み、具体的には、例えば飲料（炭酸飲料，清涼飲料，乳飲料，コーヒー飲料，ミネラルウォーター，アルコール飲料，果汁飲料，茶類，栄養飲料等），粉末飲料（粉末ジュース，粉末スープ等），菓子類（ガム，キャンディー，クッキー，せんべい，ビスケット，ゼリー等），水産練り製品（蒲鉾，竹輪等），畜産製品（ハム，ソーセージ等），調味料（ソース，マヨネーズ，ふりかけ，香辛料，ドレッシング等），米穀類，パン，麺類，シリアル等の種々の食品を挙げることができる。
【００２４】
以下、本発明の調製例、実験例及び実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明は下記の例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００２５】
〔製造例〕酪酸菌培養エキスの製造方法例：酪酸菌（Clostridium butyricum)を、ＣＳ培地〔（コンスターチ１．０重量％，アミノ酸１．０重量％，水９８．０重量％）又は（コンスターチ０．５重量％，アミノ酸０．５重量％，食塩０．１重量％，水９８．９重量％）〕で、２０〜４２℃、２０〜７２時間培養し、遠心分離により固液分離を行い、この液部を酪酸菌培養エキス１として使用した。
【００２６】
酪酸菌の栄養体死菌体の分取方法例：酪酸菌（Clostridium butyricum）を、グルコース培地（ブドウ糖１．０重量％，アミノ酸１．０重量％，水９８．０重量％）で、２０〜４２℃、２０〜７２時間培養した。次いで、遠心分離により、固液分離を行い、液部と菌体等を含む固相部に分離し、菌体を回収した。この菌体を、オートクレーブにて１００℃以上で１５分間以上滅菌し、栄養体死菌体を得た。
【００２７】
また、上記酪酸菌培養エキス１に、上述のようにして得られた栄養体死菌体を１０５個／ｍｌ以上添加し、これを酪酸菌培養エキス２とした。
【００２８】
〔試験方法〕アトピー性皮膚炎モデルマウス（ＮＣ／Ｎｇａ）にハプテンを塗布してから表１の試験液を経口投与し、アレルギー抑制効果をみるために以下の試験を行った。なお、ＮＣ／Ｎｇａマウスは、通常の環境下で飼育した際に、７〜８週齢を境に痒覚の強い皮膚炎を自然発症し、この掻痒性皮膚炎が臨床的・病理組織学的にヒトのアトピー性皮膚炎と酷似することが知られているマウスである。
【００２９】
まず、ＮＣ／Ｎｇａ  ＴｎｄＣｒｊ系雄性４週令マウス（日本チャールズリバー株式会社）に、マウス用固形飼料及び水道水を与え２週間馴化し、一般状態の観察および体重測定を行い、健康と判断したマウスを実験に使用した。１群６匹として、体重が均一になるようにこれらのマウスを３群に分けた。７〜８週令に達したＮＣ／Ｎｇａマウスに対して腹部を毛刈りし、毛刈りしたＮＣ／Ｎｇａマウス腹部に、ピクリルクロライド（２，４，６−Trinitro−chlorobenzene）溶液（１５０μｌ／匹）を塗布することにより感作させた。感作後４日目から誘発を開始し、以降週１回、５週間誘発を繰返した。なお、誘発は、毛刈りしたＮＣ／Ｎｇａマウス背部及び左右の耳に誘発用ピクリルクロライド溶液（１５０μｌ／匹）を塗布した。
【００３０】
誘発４回目に、対照群には水道水を、酪酸菌培養エキス群１には上記酪酸菌培養液１を、酪酸菌培養液ろ群２には上記酪酸菌培養エキス１に栄養体死菌体を加えたものを経口投与した。なお、基本飼料として精製飼料（AIN９３G，オリエンタル酵母株式会社製）を使用した。
【００３１】
アトピー性皮膚炎の状態を以下のように皮膚炎スコアとして評価した。まず、誘発１回目の前日から週２回皮膚の状態を観察し、ヒトのアトピー性皮膚炎の臨床症状における評価基準５項目（掻痒、発赤・出血、浮腫、擦傷・組織欠損、痴皮形成・乾燥）に基づき、４段階（０：無症状、１：軽度、２：中等度、３：高度）で評点を付け、皮膚炎スコアを評価した。
【００３２】
【表１】
2006143677.tif 000002
【００３３】
結果を図１及び図２に示し、図１には本試験におけるマウスの体重推移を示し、図２には皮膚炎スコアの結果を示す。
【００３４】
図２に示されるように、水道水を投与した対照群と比較し、酪酸菌培養エキス群１及び酪酸菌培養エキス群２は、いずれも皮膚炎を抑制する作用が認められた。
【実施例２】
【００３５】
錠剤又は顆粒剤の実施例を示す。実施例１の製造例で得た酪酸菌培養エキス２を、真空下で遠赤外線を照射して加熱して乾燥した。加熱温度は２８〜４０℃である。その後、乾燥物を砕機で粉砕し、酪酸菌末１５０ｍｇを精製でんぷん末１５０ｍｇ及び乳糖７００ｍｇと混合して錠剤又は顆粒剤を得た。
【実施例３】
【００３６】
酪酸菌末をジュースに添加した実施例を示す。実施例１の製造例で得た酪酸菌培養エキス２を、ポンプにて加圧スプレーにより、１５０〜１８０℃で熱風で瞬間乾燥した。更に、６０〜８５℃で二次乾燥して、乾燥物を砕機で粉砕し、酪酸菌末を得た。この酪酸菌末０．１ｇをリンゴ果汁１００％のジュース１リットルに添加・混合して、ジュースを得た。
【実施例４】
【００３７】
ソフトキャンディーに酪酸菌末を添加した実施例を示す。砂糖３０重量％，水飴５０重量％，ゼラチン１０重量％，アラビアガム１０重量％を加熱溶解後、減圧して濃縮した。これに、実施例１の製造例で得た酪酸菌培養エキス２を凍結乾燥して得られた酪酸菌を０．１重量％添加して均一にし、ソフトキャンディーを得た。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】本発明の実施例１におけるマウスの体重推移を示すグラフである。
【図２】本発明の実施例１における皮膚炎スコアの結果を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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