(57)【要約】【課  題】ビタミンＢ１２類とニコチン酸類を含有する組成物において、該組成物中のビタミンＢ１２類の安定性が保たれたビタミン類含有組成物を提供する。【解決手段】組成物に配合されるビタミンＢ１２類として、酢酸ヒドロキソコバラミンを芯物質として含有し、膜形成物質がゼラチンを主体としてなるマイクロスフィア（ビーズ）を用いる。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ビタミンＢ１２類とニコチン酸類を含有する組成物であって、該組成物に配合されるビタミンＢ１２類として、酢酸ヒドロキソコバラミンを芯物質として含有し、膜形成物質がゼラチンを主体としてなるマイクロスフィア（ビーズ）が用いられていることを特徴とするビタミン類含有組成物。
【請求項２】
膜形成物質として更に糖類、糖アルコール類または多価アルコール類を含有するマイクロスフィア（ビーズ）が用いられていることを特徴とする請求項１に記載のビタミン類含有組成物。
【請求項３】
組成物が、ビタミンＢ１主薬製剤、ビタミンＢ６主薬製剤、ビタミンＢ１・Ｂ６・Ｂ１２主薬製剤またはビタミンＥ主薬製剤であることを特徴とする請求項１または２に記載のビタミン類含有組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はビタミンＢ１２類とニコチン酸類を含有する組成物に関するものであり、詳しくはニコチン酸類、特にニコチン酸アミドと配合変化を起こすことなく、ビタミンＢ１２類が安定化されたビタミン類含有組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ビタミンＢ１２はビタミンＢ１主薬製剤、ビタミンＢ６主薬製剤、ビタミンＢ１・Ｂ６・Ｂ１２主薬製剤またはビタミンＥ主薬製剤等に配合される重要なビタミンである。しかし、ビタミンＢ１２はアスコルビン酸、チアミン塩、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ニコチン酸類、フィトナジオン等と併用する場合、配合変化を起こすことがある（例えば、特許文献１、非特許文献１参照）。
【０００３】
これらの点を解決するために従来から種々の方法が提案されている。それらは、α化デンプン類とビタミンＢ１２類をセルロース系高分子化合物又はアクリル系高分子化合物でコーティングしてなるビタミンＢ１２類含有組成物（例えば、特許文献１参照）、特定式によって表される水溶性の食物級澱粉誘導体で被覆された微細粒子状のビタミンＢ１２からなる安定な乾燥した自由流動性ビタミンＢ１２組成物（例えば、特許文献２参照）、ビタミンＢ１２１重量部と融点４０〜９０℃の油脂と、レシチン、グリセリン脂肪酸モノエステル、ショ糖脂肪酸エステルの１種または２種以上からなる被覆剤約１〜２００重量部を含有するビタミン製剤（例えば、特許文献３参照）、ビタミンＢ１２類がα化デンプン類中に分散状態にある粒状ないし粉末状の組成物、および該組成物全量に対して０．１〜１０重量％のワックス類を使用してコーティングした組成物（例えば、特許文献４参照）、ビタミンＢ１２類がデンプンおよびデキストリンの混合物中に分散状態にあるビタミンＢ１２類含有組成物（例えば、特許文献５参照）、多糖類中に分散させたビタミンＢ１２類を含有する成型物を内層とし、ビタミンＢ１２類および／またはビタミンＢ６類を配合した外層を有する製剤（例えば、特許文献６参照）、等が知られている。
【０００４】
しかしこれらの方法をもってしても、ビタミンＢ１２類とその配合禁忌物質を含有する組成物中のビタミンＢ１２類の安定性が十分保証されているとは決していえない。
【０００５】
一方、ビタミンＢ１２類を含有し、ゼラチンを主たるゲル化剤とするマイクロカプセルについては、水溶性薬物を含有した微粒子であって、該水溶性薬物がビタミンＢ１２類であるゼラチンビーズ（例えば、特許文献７参照）、水溶性ビタミンを、ゼラチン及びキトサンを主剤とし、高級脂肪酸、グリセリン脂肪酸エステル及び／又は水溶性糖類を含有する被覆材で被覆してなる水溶性ビタミン粒状製剤（例えば、特許文献８参照）等が知られている。また、マイクロカプセルの製造方法については、既に多くの方法が知られている（例えば、特許文献９、１０、非特許文献２参照）。
【０００６】
【特許文献１】特開２０００−０１６９４０号公報
【特許文献２】特開昭４９−１０８２２４号公報
【特許文献３】特開昭５５−０４９３１３号公報
【特許文献４】特開平０１−２０３３２９号公報
【特許文献５】特開平０３−１７３８２３号公報
【特許文献６】特開平０９−１２４４８０号公報
【特許文献７】特開平０５−１３９９５９号公報
【特許文献８】特開平０１−１６５５１９号公報
【特許文献９】特開平０６−２５４３８２号公報
【特許文献１０】特開２０００−１８５２２９号公報
【非特許文献１】「第十四改正  日本薬局方解説書」、廣川書店、Ｃ−１４２７
【非特許文献２】井上、五十嵐、「マイクロスフィア技術による微量成分の安定化とその利用」、食品と開発、平成７年４月、ＶＯＬ．３０、Ｎｏ．４、ｐ．４５−４７
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、ビタミンＢ１２類とニコチン酸類を含有する組成物において、該組成物中のビタミンＢ１２類の安定性が保たれたビタミン類含有組成物を提供するためになされたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、組成物に配合するビタミンＢ１２類として、酢酸ヒドロキソコバラミンを芯物質として含有するマイクロスフィア（ビーズ）を用いることにより上記課題が解決されることを見出し、この知見に基づいて本発明をなすに至った。
【０００９】
即ち、本発明は、次の１〜３からなっている。
１．ビタミンＢ１２類とニコチン酸類を含有する組成物であって、該組成物に配合されるビタミンＢ１２類として、酢酸ヒドロキソコバラミンを芯物質として含有し、膜形成物質がゼラチンを主体としてなるマイクロスフィア（ビーズ）が用いられていることを特徴とするビタミン類含有組成物。
２．膜形成物質として、更に糖類、糖アルコール類または多価アルコール類を含有するマイクロスフィア（ビーズ）が用いられていることを特徴とする前記１に記載のビタミン類含有組成物。
３．組成物が、ビタミンＢ１主薬製剤、ビタミンＢ６主薬製剤、ビタミンＢ１・Ｂ６・Ｂ１２主薬製剤またはビタミンＥ主薬製剤であることを特徴とする前記１または２に記載のビタミン類含有組成物。
【発明の効果】
【００１０】
ビタミンＢ１２類とニコチン酸類を含有する組成物であって、なおかつビタミンＢ１２類の安定性が長期間保たれた医薬製剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明におけるビタミンＢ１２類としては、シアノコバラミン、ヒドロキソコバラミン、酢酸ヒドロキソコバラミン、塩酸ヒドロキソコバラミン、メコバラミン、補酵素型ビタミンＢ１２等のコバラミン類縁化合物およびその生理学的に許容し得る塩が挙げられ、とりわけ酢酸ヒドロキソコバラミンが好ましい。
【００１２】
本発明におけるニコチン酸類としては、例えばニコチン酸、ニコチン酸アミドなどが挙げられ、とりわけニコチン酸アミドが好ましい。
【００１３】
本発明においては、酢酸ヒドロキソコバラミンを芯物質として含有するマイクロスフィア（ビーズ）が調製される。該マイクロスフィア（ビーズ）は、酢酸ヒドロキソコバラミンを、膜形成物質としてゼラチンを主たるゲル化剤とし、これに好ましくは糖類、糖アルコール類または多価アルコール類を含有する水溶液に加えて加熱・溶解し、次に自体公知の方法で微粒子化される。
【００１４】
本発明に係るゼラチンとしては、通常牛、豚、鶏等の皮、骨、けんなどを原料とし、酸またはアルカリで処理して得られる粗コラーゲンを水で加熱抽出して製造されたものが用いられる。また、鮪、鮭、ティラピア等の魚類の皮、骨を原料とする魚類ゼラチンも用いることができる。ゼラチンのゼリー強度は０〜２８５ｇの範囲のものを用いることができ、好ましくはゼリー強度が８５ｇ以上、より好ましくはゼリー強度が８５〜１３５ｇの範囲のものである。また、ゼリー強度が８５ｇ以下のものとゼリー強度が８５ｇ以上のものを、それらゼリー強度の相加平均値が８５ｇ以上、好ましくは８５〜１３５ｇの範囲となるよう混合して用いてもよい。尚、ゼリー強度はＪＩＳＫ６５０３−２００１に準拠して測定される。
【００１５】
本発明においては、ゼラチンの一部を、例えば寒天、ペクチン、アルギン酸塩、アラビアガム、キサンタンガム、グアーガム、澱粉類、マルトデキストリン等に置き換えてもよい。
【００１６】
本発明に係る糖類としては、例えばキシロース、ブドウ糖、果糖等の単糖、精製白糖（ショ糖、グラニュー糖ともいう。）、乳糖、麦芽糖等のオリゴ糖、デキストリン、水飴等のでん粉分解物、マルトトリオース、マルトテトラオース、マルトペンタオース、マルトヘキサオース等のマルトオリゴ糖等が挙げられる。また糖アルコールとしては、例えばソルビトール、マンニトール、マルチトール、還元水飴等が挙げられる。これら糖類、糖アルコール類はそれぞれ単独でも、２種以上を組み合わせて用いてもよく、好ましくは精製白糖のみの使用である。
【００１７】
本発明においては、糖類または糖アルコール類の一部または全部を多価アルコールに置き換えてもよい。ここで、多価アルコールとしては例えばグリセリン、プロピレングリコール等が挙げられる。
【００１８】
本発明においては、膜形成物質としてゲル化剤と糖類、糖アルコール類または多価アルコール類の外に、必要であれば酸化防止剤、乳化剤、着色料、香料等の食品添加物を加えてもよい。ここで酸化防止剤としては、例えばｔ−ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ｔ−ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、トコフェロール等が挙げられる。また、乳化剤としては、例えばグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、レシチン等が挙げられる。
【００１９】
上記グリセリン脂肪酸エステルには、グリセリンと脂肪酸とのエステルの外、グリセリン酢酸エステル、グリセリン酢酸脂肪酸エステル、グリセリン乳酸脂肪酸エステル、グリセリンクエン酸脂肪酸エステル、グリセリンコハク酸脂肪酸エステル、グリセリンジアセチル酒石酸脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル及びポリグリセリン縮合リシノール酸エステルが含まれる。ポリグリセリン脂肪酸エステルには、ジグリセリン脂肪酸エステル、トリグリセリン脂肪酸エステル、テトラグリセリン脂肪酸エステル、ヘキサグリセリン脂肪酸エステル、オクタグリセリン脂肪酸エステル、デカグリセリン脂肪酸エステル等が含まれる。またレシチンには、分別レシチン、酵素分解レシチン、酵素処理レシチン等が含まれる。
【００２０】
本発明に係るマイクロスフィア（ビーズ）１ｇに含有されるビタミンＢ１２類の量に制限はないが、好ましくは０．１〜３００ｍｇ程度、より好ましくは１〜１５０ｍｇ程度である。また膜形成物質として、ゼラチンの量は１５０〜８５０ｍｇ、好ましくは４００〜８００ｍｇ含有される。また、（Ａ）ゼラチンと（Ｂ）糖類、糖アルコール類または多価アルコール類の配合割合は、Ａ／Ｂが１／０．２〜１／５、好ましくは１／０．２５〜１／１．５、更に好ましくは１／０．２５〜１／０．５である。
【００２１】
本発明に係るマイクロスフィア（ビーズ）の製造方法は特に制限されないが、例えば以下に示す方法により製造することができる。
【００２２】
１）膜形成物質を水に溶解し、これに酢酸ヒドロキソコバラミンを加えて加温・溶解する。得られた溶液を食用油脂中に注加し、攪拌して水溶液を細かく分散させ、次にゼラチンのゲル化温度以下に冷却して微細粒子を得る。ろ過等により食用油脂を除いて該微細粒子を集め、付着している食用油脂を有機溶剤、例えばイソプロパノール、で洗浄して除き、最後に乾燥することによって溶剤を除き、目的とする水分量のマイクロスフィア（ビーズ）が得られる。
【００２３】
２）上記酢酸ヒドロキソコバラミンを含む溶液を、回転円盤式噴霧乾燥装置に供給し、例えば回転数１０，０００ｒｐｍ、熱風入口温度１７０℃、排気温度７０℃の条件下で噴霧乾燥する。乾燥物はサイクロンで捕集され、マイクロスフィア（ビーズ）が得られる。
【００２４】
３）上記酢酸ヒドロキソコバラミンを含む溶液を、雰囲気温度がゼラチンのゲル化温度以下に冷却されている塔内に噴霧する。噴霧には加圧式噴霧ノズルや回転円盤式噴霧ノズルなどが用いられる。噴霧された溶液は冷却されて微細粒子となり、塔下部に置かれた捕集粉末上に落下し、捕集される。捕集粉末としては、例えば加工澱粉（製品名：ドライフロー；ナショナル  スターチ  プロダクツ社）などが用いられる。集められた該微細粒子は、必要であれば目的とする水分量まで乾燥され、付着している捕集粉末を篩別して除かれ、マイクロスフィア（ビーズ）が得られる。
【００２５】
４）上記酢酸ヒドロキソコバラミンを含む溶液を、液体窒素の充填された塔内に噴霧する。噴霧された溶液は冷却されて微細粒子となって塔下部に落下し、凍結状態の粒子として捕集される。集められた該微細粒子は、例えば真空凍結乾燥などにより目的とする水分量まで乾燥され、マイクロスフィア（ビーズ）が得られる。
【００２６】
本発明に係るマイクロスフィア（ビーズ）の特性値は、乾燥減量が１０．０質量％以下、好ましくは７．０質量％以下（１ｇ，１０５℃，２時間）、粒度は１７００μｍの篩を全量通過し、７５μｍの篩を通過するものが全量の１０％以下であることが好ましい。尚、乾燥減量は「日局方  一般試験法１０．乾燥減量試験法」に準じて、また粒度は「日局方  一般試験法５６．粉体粒度測定法」および「日局方  一般試験法７０（７）．計量器・用器」に準じて測定される。
【００２７】
本発明に従うビタミン類含有組成物には、上記するビタミンＢ１２類を含有するマイクロスフィア（ビーズ）とニコチン酸アミドを含有する組成物、および該組成物と更にその他のビタミン類、例えば塩酸チアミン、硝酸チアミン、硝酸ビスチアミン、塩酸ジセチアミン、塩酸フルスルチアミン、ベンフォチアミン等のビタミンＢ１類、リボフラビン、リン酸リボフラビンナトリウム、酪酸リボフラビン等のビタミンＢ２類、塩酸ピリドキシン、リン酸ピリドキサール等のビタミンＢ６類、パンテノール、パントテン酸カルシウム、パントテン酸ナトリウム等のパントテン酸類、葉酸、ビオチン、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸ナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸カルシウム等のビタミンＣ類、コハク酸トコフェロール、コハク酸トコフェロールカルシウム等のビタミンＥ類等の１種または２種以上を含有する組成物、更にこれら組成物を成型した製剤も含まれる。
【００２８】
本発明に従うビタミン類含有組成物としては、好ましくはビタミンＢ１類、ビタミンＢ６類またはビタミンＥ類等の有効成分（主薬）を含有する、ビタミンＢ１主薬製剤、ビタミンＢ６主薬製剤、ビタミンＢ１・Ｂ６・Ｂ１２主薬製剤またはビタミンＥ主薬製剤が挙げられる。
【００２９】
本発明に従うビタミン類含有組成物の剤形としては、例えば顆粒剤、錠剤等の各種経口固形製剤、好ましくは錠剤、更に好ましくは被覆錠、より好ましくは糖衣錠が挙げられる。
【００３０】
本発明に従うビタミン類含有組成物は、自体公知の製剤学的手法の組み合わせにより製造することができる。例えば、糖衣錠は以下のようにして製造することができる。即ち、ビタミンＢ１２類を含有するマイクロスフィア（ビーズ）、ニコチン酸アミドおよびその他の主薬成分を賦形剤（例えば、乳糖、コーンスターチ、デキストリン、加工澱粉、結晶セルロース等）および結合剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等）等を配合し、攪拌造粒機、転動造粒機または流動層造粒機を用いて造粒する。得られた造粒末を、パワーミルを用いて整粒後、崩壊剤（例えば、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、クロスカロメロースナトリウム等）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ショ糖脂肪酸エステル等）等を配合し、例えば、タンブラー型混合機等の混合機を用いて混合する。得られた混合末を錠剤機により、好ましくは約０．１〜３．０トン／杵、より好ましくは約０．５〜２．０トン／杵の打錠圧で錠剤（素錠）を製錠する。得られた素錠に、例えば糖衣機を用いて、滅菌タルクおよびアラビアガム末等の散布剤を散布しながら、酸化チタン、滅菌タルク、グラニュー糖等を含有する練込液を注入し、糖衣層を形成する。更に、所望により一部ないし全配合量のビタミンＢ２類、グラニュー糖等からなるビタミンＢ２類シロップ液で黄色に着色する。更に、必要により、カルナウバロウまたは白ロウ等により艶出しを行う。
【００３１】
本発明に従うビタミン類含有組成物は、哺乳動物、とりわけヒトに安全に投与することができる。その投与態様は経口投与が好ましい。その投与量はヒト成人（体重５０ｋｇ）１日当たり、ビタミンＢ１２類が約１〜１５００μｇ、ニコチン酸アミドが１２〜６０ｍｇ、更にビタミンＢ１類、ビタミンＢ２類、ビタミンＢ６類等の有効成分（主薬）を含有する製剤では、ビタミンＢ１類が１〜１００ｍｇ、ビタミンＢ２類が２〜３０ｍｇ、ビタミンＢ６類が１０〜１００ｍｇ、１日約１〜３回投与される。
【実施例】
【００３２】
以下、実施例をもって本発明を具体的に説明する。しかし、これらは単なる例であって本発明を限定するものではない。
【００３３】
〔実施例１〕
［１−１］ビタミンＢ１２マイクロスフィア（ビーズ）の調製
ゼラチン（商品名：ゼラチンＲＯＢ、ゼリー強度：１００ｇ；新田ゼラチン社）７５６ｇ、グラニュー糖３６３ｇ、ソルビタン脂肪酸エステル（商品名：ポエムＬ−３００；理研ビタミン社）２．４ｇを精製水約１６００ｇに加え、５５〜６５℃で約１０分間混合・溶解した。溶液を減圧下で脱気し、更に酢酸ヒドロキソコバラミン１３８．６ｇを精製水約５００ｇに溶解した溶液を加えて混合し、最後に１００号篩（１５０μｍ）を通した。
得られた溶液を、塔下部が液体窒素で冷却された噴霧冷却装置（試験機）に送液し、回転円盤式噴霧ノズルを用いて霧状に噴霧した。噴霧された溶液は冷却されて微細粒子となって塔下部に落下し、凍結状態の粒子として捕集した。
集められた該微細粒子を、流動層乾燥装置を用いて１５〜５０℃で約６時間乾燥し、乾燥物を２６号篩（６００μｍ）で篩い、通過物を１４０号篩（１０６μｍ）で篩い、未通過物としてビタミンＢ１２マイクロスフィア（ビーズ）約８６０ｇを得た。得られたマイクロスフィア（ビーズ）の性状は淡赤色〜赤色の粒状、わずかに特異なにおいがあり、乾燥減量は４．９％（１ｇ，１０５℃，２時間）であった。
【００３４】
［１−２］ビタミンＢ１２マイクロスフィア（ビーズ）含有糖衣錠の調製
１）活性成分としてコハク酸トコフェロールカルシウム４１４３．２ｇ、塩酸ピリドキシン４０００ｇ、γ−オリザノール４００ｇ、軽質無水ケイ酸（商品名：サイリシア３２０；（有）ワイ・ケイ・エフ社）３４２ｇ、結晶セルロース（商品名：ＣＥＯＬＵＳ  ＫＧ−８０２；旭化成ケミカルズ社）１５３０．８ｇを流動層造粒機（型式：ＷＳＧ１５；パウレック社）に仕込み、６質量％ヒドロキシプロピルセルロース（商品名：ＨＰＣ−Ｌ；日本曹達社）水溶液８４００ｇを噴霧した。造粒・乾燥後、パワーミル（型式：Ｐ−３、スクリーン径：１．５ｍｍφ；昭和化学機械工作所社）で整粒し、Ｅ群整粒末とした。
【００３５】
２）活性成分として塩酸フルスルチアミン２１８３．２ｇ、結晶セルロース（商品名：ＣＥＯＬＵＳ  ＫＧ−８０２；旭化成ケミカルズ社）４５０．８ｇを流動層造粒機（型式：ＦＤ−３ＳＮ；パウレック社）に仕込み、６質量％ヒドロキシプロピルセルロース（商品名：ＨＰＣ−Ｌ；日本曹達社）水溶液１１００ｇを噴霧した。造粒・乾燥後、パワーミルで整粒し、Ｔ群整粒末とした。
【００３６】
３）実施例１で得たビタミンＢ１２マイクロスフィア（ビーズ）９２．６ｇ、Ｅ群整粒末１７７４．５ｇ、Ｔ群整粒末８７７．５ｇに活性成分のニコチン酸アミド３９０ｇ、軽質無水ケイ酸（商品名：サイリシア３２０；（有）ワイ・ケイ・エフ社）３２．５ｇ、結晶セルロース（商品名：ＣＥＯＬＵＳ  ＫＧ−８０２；旭化成ケミカルズ社）１６７．４ｇ、崩壊剤として低置換度ヒドロキシプロピルセルロース（商品名：ＬＨ−３１；信越化学工業社）２４７ｇ、ステアリン酸マグネシウム２６ｇをタンブラー混合機（型式：ＴＭ‐１５；昭和化学機械工作所社）で混合し、回転式錠剤機（型式：コレクト１９ＨＵＫ；菊水製作所社）を用い、１錠１８５ｍｇ、８．０ｍｍφ、２段Ｒの杵で打錠圧１０ＫＮ／杵で打錠し、素錠を得た。
【００３７】
４）得られた素錠２９６０ｇをコーティング機（型式：ドリアコーターＤＲＣ−５００；パウレック社）に仕込み、エリスリトール１０６０ｇ、沈降炭酸カルシウム３６０ｇ、タルク２００ｇ、酸化チタン４０ｇ、結晶セルロース（商品名：ＣＥＯＬＵＳ  ＰＨ−Ｆ２０；旭化成ケミカルズ社）１００ｇ、アラビアゴム末２４０ｇ、精製水３０００ｇからなるコーティング液を用いて、１錠当たり９５ｍｇのビルドアップコーティングを施した。次に、グラニュー糖４７４．６ｇ、エリスリトール２０３．４ｇ、ビタミンＢ２１．９３ｇおよび精製水３５０ｇからなるコーティング液でシロップコーティングを施し、１錠３００ｍｇの薄層糖衣錠とした。この糖衣錠の平衡相対湿度（ＥＲＨ）は２８．０％であった。
【００３８】
〔比較例１〕
［１−１］ビタミンＢ１２含有糖衣錠の調製
１）活性成分として塩酸フルスルチアミン２１８３．２ｇ、結晶セルロース（商品名：ＣＥＯＬＵＳ  ＫＧ−８０２；旭化成ケミカルズ社）７１９．４６ｇを流動層造粒機（型式：ＦＤ−３ＳＮ；パウレック社）に仕込み、６．２６８質量％酢酸ヒドロキソコバラミン水溶液５００ｇを噴霧し、続けて６質量％ヒドロキシプロピルセルロース（商品名：ＨＰＣ‐Ｌ；日本曹達社）水溶液１１００ｇを噴霧した。造粒・乾燥後、パワーミルで整粒し、Ｔ’群整粒末とした。
【００３９】
２）〔実施例１〕の［１−２］の３）で、ビタミンＢ１２マイクロスフィア（ビーズ）９２．６ｇおよびＴ群整粒末８７７．５ｇをＴ’群整粒末９７５ｇに替え、また結晶セルロース（商品名：ＣＥＯＬＵＳ  ＫＧ−８０２；旭化成ケミカルズ社）１６７．４ｇを１６２．５ｇに減らし、以下同様に処理して素錠を得た。
【００４０】
３）得られた素錠を〔実施例１〕の［１−２］の４）に準じてコーティング処理し、１錠３００ｍｇの薄層糖衣錠を得た。この糖衣錠の平衡相対湿度（ＥＲＨ）は２９．８％であった。
【００４１】
実施例１、比較例１で得た糖衣前の素錠の成分組成を表１に示す。
【表１】
2006096682.tif 000002
【００４２】
［保存安定性試験］
実施例１、比較例１で得た薄層糖衣錠を４０℃および５０℃で保存し、４週間後の酢酸ヒドロキソコバラミンの安定性をその残存率（％）で評価した。結果を表２に示した。
【００４３】
１）試験溶液の調製
試料（糖衣錠）３錠をボールミルで粉砕し、０．５０ｍｍふるい分けを繰り返して全てが通過したらよく混合して調製試料とした。この調製試料を精製水３０ｍｌに溶解し、蛋白質分解酵素（商品名：ブロメラインＦ；天野エンザイム社）１０ｍｇを加え、５０℃で２時間加熱し、更にトリフルオル酢酸５０μｌを加えて５０℃で１時間加熱した後室温まで水冷し、メンブランフィルター（商品名：ＤＩＳＭＩＣ−１３ｃｐ；東洋濾紙社）を用いてろ過し、試験溶液とした。
【００４４】
２）標準溶液の調製
酢酸ヒドロキソコバラミン（別途純度測定済み）約０．０５ｇを精密に量り、精製水を加えて正確に１０００ｍｌとし、標準溶液とする。
【００４５】
３）操作条件
装置        Ｗａｔｅｒｓ２６９５
検出器      紫外可視吸光光度計（Ｗａｔｅｒｓ２４８７）
検出波長    ５２４ｎｍ
カラム      ＤＡＩＳＯＰＡＫ  ＳＰ−１２０−３−ＯＤＳ−ＡＰ
カラム温度  ３５℃
移動相      （Ａ）０．２５％ＴＦＡ・５０ｍＭリン酸アンモニウム
（Ｂ）メタノール
Ａ：Ｂ＝８：２
流量        ０．２ｍｌ／ｍｉｎ
注入量      １０μｌ
【００４６】
４）定量
前記標準溶液を段階希釈し、上記操作条件で測定した。得られたクロマトグラムから求めた標準被検成分のピーク面積を縦軸に、標準被検成分量を横軸にとり、検量線を作成する。次に試験溶液を検量線を作成したときと同一条件で操作し、得られたクロマトグラムから求めた標準被検成分のピーク面積を測定し、検量線を用いて定量した。
【００４７】
５）評価
試験前と試験後の標準被検成分の含量から、次式により残存率（％）を求める。
【数１】
2006096682.tif 000003
【表２】
2006096682.tif 000004