(57)【要約】【課題】ＮＦκＢ活性化による皮膚の老化の予防、症状の改善に有効な剤を提供する。【解決手段】本発明は化学式（１）で表される化合物/またはその塩を含有することを特徴とするＮＦκＢ阻害剤に関する（式中のＲ１、Ｒ２はそれぞれ水素、アルキル基、アリール基、アシル基、酢酸エチレンから選ばれる）。本発明の化学式（１）で表される化合物および／またはその塩は、ＮＦκＢ阻害作用を有し、皮膚の老化や炎症、ＭＭＰの亢進が原因で起こる各種疾患の予防、抑制または症状の改善に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学式（１）で表される化合物および/またはこれらの塩を配合することを特徴とするＮｕｃｌｅａｒ  Ｆａｃｔｏｒ  κＢ（ＮＦκＢ）阻害剤。
2006143661.tif 000005
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ２が水素原子であることを特徴とする請求項１記載のＮＦκＢ阻害剤。
【請求項３】
請求項１〜２のいずれか記載のＮＦκＢ阻害剤を含有する化粧品、医薬部外品、医薬品または食品。
【請求項４】
化学式（１）で表される化合物および/またはこれらの塩を配合することを特徴とするマトリックスメタロプロテアーゼ発現抑制剤。
【請求項５】
化学式（１）で表される化合物および/またはこれらの塩を配合することを特徴とするマトリックスメタロプロテアーゼ活性阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＮＦκＢ阻害剤に関し、詳しくは、皮膚の老化や炎症、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）の亢進が原因で起こる各種疾患の予防、抑制または症状の改善に効果が期待でき、かつ安全性の高いＮＦκＢ阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
太陽紫外線によって加速される皮膚の加齢変化を光加齢と呼ぶ。光老化にともなう皮膚変化の一つであるシワは、真皮の細胞外マトリックス成分の減少および変性により皮膚弾力性の低下が起こることが原因となって発生する。シワの形成を抑制する手段としては、従来、コラーゲン、ヒアルロン酸等の真皮細胞外マトリックス成分を皮膚に塗布したり、紫外線や活性酸素から皮膚を守るための防御物質を配合した組成物を用いるのが主流であったが、これらの効果は十分なものではなかった。
【０００３】
紫外線や活性酸素に曝された皮膚の真皮では細胞外マトリックス成分を分解するＭＭＰの活性が亢進するので、このＭＭＰを阻害することがシワの形成抑制につながると考えられている。
【０００４】
さらに、皮膚においてＭＭＰ等のタンパクは、ＤＮＡの情報を翻訳して作り出される。ＤＮＡ情報の翻訳は、ＤＮＡ上のプロモーター領域に、転写因子が結合することにより開始される。転写因子の一つであるＮｕｃｌｅａｒ  Ｆａｃｔｏｒ  κＢ（ＮＦκＢ）はＭＭＰのＤＮＡのプロモーター領域に結合し、ＮＦκＢの活性が高まると、ＭＭＰが過剰に翻訳、合成されるため、ＮＦκＢはシワの形成に関与することが以下の非特許文献１〜３に示されている。
【０００５】
【非特許文献１】Ｈａｎ  Ｙ−Ｐ等，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０００，１１４，１３１−１３９
【非特許文献２】Ｙｕａｎ  Ｗ等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００１，２７６，３８５０２−３８５１０
【非特許文献３】Ｆｉｅｂｅｒ  Ｃ等，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００４，１１７，３５９−３６７
【０００６】
ＮＦκＢは紫外線によって活性が高まることが非特許文献４〜５で示されており、光老化の根本原因となっている可能性が極めて高く、ＮＦκＢの活性を制御することがシワの形成抑制につながると考えた。
【０００７】
【非特許文献４】Ａｈｎ  Ｋ  Ｓ等，Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｓｃｉ．，２００３，３１，１９３−２０１
【非特許文献５】Ｍａａｌｏｕｆ  Ｓ等，Ｍｏｌ，Ｃａｒｃｉｎｏｇ．，２００２，３４，１２１−１３０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、ＮＦκＢに対して阻害活性を有し、皮膚の老化や炎症、ＭＭＰの亢進が原因で起こる各種疾患の予防、抑制または症状を改善しうるＮＦκＢ阻害剤を得ることを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
このような事情により、本発明者らは鋭意研究検討した結果、化学式（１）で表される化合物および/またはそれらの塩が非常に高いＮＦκＢ阻害効果を示すこと、またこれを含有する皮膚外用剤が優れたシワ形成抑制作用を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
本発明の化学式（１）は、天然由来のものを利用することができるほか、トコフェロールから常法により合成でき、下記の文献も参考にできる。
【００１１】
【特許文献１】特公昭６１−２０５８３
【特許文献２】特公平３−３２５５８
【００１２】
また、本発明においては化学式（１）の塩も使用可能であり、塩の種類は限定されないが、一般的にはナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属塩が用いられる。
【００１３】
本発明のＮＦκＢ阻害剤は、医薬品、医薬部外品、化粧品または食品いずれにも用いることができ、その剤型としては、例えば、散剤、丸剤、錠剤、注射剤、座剤、乳剤、カプセル剤、顆粒剤、液剤（チンキ剤、流エキス剤、酒精剤、懸濁剤、リモナーデ剤等を含む）、化粧水、クリーム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデーション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤、ペースト剤、プラスター剤、エッセンス、錠菓、飲料等が挙げられる。また、本発明の効果を損なわない範囲内で、通常の化粧品、医薬部外品、医薬品等に用いられる各種成分、例えば油性成分、乳化剤、保湿剤、増粘剤、薬効成分、防腐剤、顔料、粉体、ｐＨ調整剤、紫外線吸収剤、抗酸化剤、香料等を適宜配合することができる。
【００１４】
油性成分としては、例えば流動パラフィン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス、スクワラン、ホホバ油、ミツロウ、カルナウバロウ、ラノリン、オリーブ油、ヤシ油、高級アルコール、脂肪酸、高級アルコールと脂肪酸のエステル、シリコーン油等が挙げられる。乳化剤としては、例えばポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等の非イオン界面活性剤、ステアロイル乳酸ナトリウム等のアニオン界面活性剤、大豆リン脂質等の両性界面活性剤、塩化アルキルトリメチルアンモニウム等のカチオン界面活性剤が挙げられる。保湿剤としては、例えばグリセリン、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、１，３−ブチレングリコールなどが挙げられる。増粘剤としては、例えばカルボキシビニルポリマー、キサンタンガム、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ベントナイト等の粘土鉱物等が挙げられる。薬効成分としては、例えば各種ビタミンおよびその誘導体、アラントイン、グリチルリチン酸およびその誘導体、各種動植物抽出物等が挙げられる。
【００１５】
本発明のＮＦκＢ阻害剤中に配合される化合物の量は、剤型や期待する効果の程度により異なるが、通常０．００１重量％以上、好ましくは０．１〜５０重量％程度配合するのがよい。０．００１重量％未満では十分な効果は望みにくい場合があり、５０重量％を超えて配合した場合、効果の増強は認められにくく不経済である。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の新規な薬効成分は、ＮＦκＢに対する阻害効果を有し、ＮＦκＢが関与して起こる皮膚老化に対しても抑制効果を示した。本発明のＮＦκＢ阻害剤は、皮膚の老化や炎症、ＭＭＰの亢進が原因で起こる各種疾患の予防、抑制、症状の改善に有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
次に本発明による効果を具体的な実施例を挙げ説明する。これらの実施例は効果を具体的に説明するもので、発明の範囲を限定するものではない。実施例中の配合量は重量％である。
【実施例１】
【００１８】
本発明の薬効成分は、処方例として下記の製剤化を行うことができる。
【００１９】
処方例１  クリーム                                  配合量
１．ｄｌ−α−トコフェリルリン酸ナトリウム          ２．０重量％
２．スクワラン                                      ５．５
３．オリーブ油                                      ３．０
４．ステアリン酸                                    ２．０
５．ミツロウ                                        ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル                    ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）３．０
８．ベヘニルアルコール                              １．５
９．モノステアリン酸グリセリン                      ２．５
１０．香料                                            ０．１
１１．１，３−ブチレングリコール                      ８．５
１２．パラオキシ安息香酸エチル                        ０．０５
１３．パラオキシ安息香酸メチル                        ０．２
１４．精製水にて全量を１００とする
[製造方法]成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１および１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、さらに３０℃まで冷却して製品とする。
【００２０】
比較例１  従来のクリーム
処方例１において、ｄｌ−α−トコフェリルリン酸ナトリウムを精製水に置き換えたものを従来のクリームとした。
【００２１】
処方例２  化粧水                                    配合量
１．ｄ−α−トコフェリルリン酸ナトリウム            ０．１重量％
２．１，３−ブチレングリコール                      ８．０
３．グリセリン                                      ２．０
４．キサンタンガム                                  ０．０２
５．クエン酸                                        ０．０１  
６．クエン酸ナトリウム                              ０．１
７．エタノール                                      ５．０
８．パラオキシ安息香酸メチル                        ０．１
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）  ０．１
１０．香料                                            適量
１１．精製水にて全量を１００とする
[製造方法]成分１〜６および１１と、成分７〜１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とする。
【００２２】
処方例３  乳液                                      配合量
１．ｄｌ−α−トコフェリルリン酸ジナトリウム        ０．５重量％
２．スクワラン                                      ５．０
３．オリーブ油                                      ５．０
４．ホホバ油                                        ５．０
５．セタノール                                      １．５
６．モノステアリン酸グリセリン                      ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタン
モノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．）                  ２．０
９．香料                                            ０．１
１０．プロピレングリコール                            １．０
１１．グリセリン                                      ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル                        ０．２
１３．精製水にて全量を１００とする
[製造方法]成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１および１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、さらに３０℃まで冷却して製品とする。
【００２３】
処方例４  ゲル剤                                    配合量
１．ｄ−α−トコフェリルリン酸カリウム              ０．１重量％
２．エタノール                                      ５．０
３．パラオキシ安息香酸メチル                        ０．１
４．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                  ０．１
５．香料                                            適量
６．１，３−ブチレングリコール                     
５．０
７．グリセリン                                      ５．０
８．キサンタンガム                                  ０．１
９．カルボキシビニルポリマー                        ０．２
１０．水酸化カリウム                                  ０．２
１１．精製水にて全量を１００とする
成分２〜５と、成分１および６〜１１をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。
【００２４】
処方例５  軟膏                                      配合量
１．ｄｌ−α−トコフェリルリン酸ナトリウム          １．０重量％
２．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．）２．０
３．モノステアリン酸グリセリン                    １０．０
４．流動パラフィン                                  ５．０
５．セタノール                                      ６．０
６．パラオキシ安息香酸メチル                        ０．１
７．プロピレングリコール                          １０．０
８．精製水にて全量を１００とする
[製造方法]成分２〜５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１および６〜８を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化し、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００２５】
実施例６  パック                                    配合量
１．ｄｌ−α−トコフェリルリン酸カリウム            ０．１重量％
２．ポリビニルアルコール                          １２．０
３．エタノール                                      ５．０
４．１，３−ブチレングリコール                      ８．０
５．パラオキシ安息香酸メチル                        ０．２
６．パラオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．）  ０．５
７．クエン酸                                        ０．１
８．クエン酸ナトリウム                              ０．３
９．香料                                            適量
１０．精製水にて全量を１００とする
[製造方法]成分１〜１０を均一に溶解し製品とする。
【００２６】
処方例７  ファンデーション                          配合量
１．ｄ−α−トコフェリルリン酸ジナトリウム          １．０重量％
２．ステアリン酸                                    ２．４
３．ポリオキシエチレンソルビタン
モノステアレート（２０Ｅ．Ｏ．）                １．０
４．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）２．０
５．セタノール                                      １．０
６．液状ラノリン                                    ２．０
７．流動パラフィン                                  ３．０
８．ミリスチン酸イソプロピル                        ６．５
９．パラオキシ安息香酸ブチル                        ０．１
１０．カルボキシメチルセルロースナトリウム            ０．１
１１．ベントナイト                                    ０．５
１２．プロピレングリコール                            ４．０
１３．トリエタノールアミン                            １．１
１４．パラオキシ安息香酸メチル                        ０．２
１５．二酸化チタン                                    ８．０
１６．タルク                                          ４．０
１７．ベンガラ                                        １．０
１８．黄酸化鉄                                        ２．０
１９．香料                                            適量
２０．精製水にて全量を１００とする
[製造方法]成分２〜９を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分２０に成分１０をよく膨潤させ、続いて、成分１および１１〜１４を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分１５〜１８を加え、冷却し、４５℃で成分１９を加え、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００２７】
処方例８  浴用剤                                    配合量
１．ｄｌ−α−トコフェリルリン酸ナトリウム          １．０重量％
２．炭酸水素ナトリウム                            ５０．０
３．黄色２０２号                                    適量
４．香料                                            適量
５．無水硫酸ナトリウムにて全量を１００とする
[製造方法]成分１〜５を均一に混合し製品とする。
【００２８】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【００２９】
実験例１  ＮＦκＢ阻害試験
線維芽細胞においてインターロイキン１β（ＩＬ−１β）を加えるとＭＭＰの発現が亢進することはよく知られている（非特許文献１〜３参照）。ＩＬ-１βのこの様な作用はＮＦκＢの活性化を介して行われるので、ＭＭＰの発現を指標にＮＦκＢの活性を調べることができる。そこでＭＭＰの発現を指標にゼラチンザイモグラフィーを用いて、化学式（１）で表される化合物および/またはそれらの塩のＮＦκＢ阻害試験を行った。すなわち、ＮＢ１ＲＧＢ（ヒト皮膚線維芽細胞）にＩＬ−１βを１０ｎｇ／ｍＬ、試料を５０μＭとなるように添加し、２４時間後に培養液中のＭＭＰを回収した。０．６ｍｇ／ｍＬのゼラチンを含む１０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル（１ｍｍ厚）を作製し、得られた培養上清０．０１５ｍＬを非還元条件下で電気泳動した。その後ゲルを２．５％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００（ＳＩＧＭＡ社製）の溶液にて室温で３０分間２回洗浄してＳＤＳを除去し、２００ｍＭ塩化ナトリウム、５ｍＭ塩化カルシウム、０．０１％ｂｒｉｊ−３５（ＳＩＧＭＡ社製）を含む３０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．６）中にて３７℃で２４時間インキュベートした。反応終了後ゲルを０．２％クマシーブリリアントブルーＲ（ＳＩＧＭＡ社製）の溶液にて染色し、５％メタノール−７．５％酢酸溶液にて脱色した。青色のゲル上で染色されないバンドとして検出される７２ｋＤａ付近のバンドにおけるゼラチナーゼ活性をデンシトメーター（アトー社製、アトーデンシトグラフ、ＡＥ−６９０５）にて定量化し、阻害率を算出した。阻害率の計算は、この例では、用いたデンシトメーターの数値を利用して、次式（１）により計算した。その結果、表１に示すように、化学式（１）で表される化合物および/またはそれらの塩はＩＬ-１βによるＭＭＰの発現を抑制した。
【００３０】
阻害率＝｛１−（Ａ／Ｂ）｝×１００      （１）
Ａ：試料を添加した場合のデンシトメーターの数値
Ｂ：試料を添加しない場合のデンシトメーターの数値
【００３１】
【表１】
2006143661.tif 000002
【００３２】
実験例２  ＭＭＰ活性阻害試験
０．６ｍｇ／ｍＬのゼラチンを含む１０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル（１ｍｍ厚）を作製し、線維芽細胞の培養上清０．０１５ｍＬを非還元条件下で電気泳動した。その後ゲルを２．５％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００（ＳＩＧＭＡ社製）の溶液にて室温で３０分間２回洗浄してＳＤＳを除去し、２００ｍＭ塩化ナトリウム、５ｍＭ塩化カルシウム、０．０１％ｂｒｉｊ−３５（ＳＩＧＭＡ社製）を含む３０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．６）中にて３７℃で２４時間インキュベートした。この際、ゲルを浸した緩衝液中に試料を添加した。反応終了後ゲルを０．２％クマシーブリリアントブルーＲ（ＳＩＧＭＡ社製）の溶液にて染色し、５％メタノール−７．５％酢酸溶液にて脱色した。青色のゲル上で染色されないバンドとして検出される７２ｋＤａ付近のバンドにおけるゼラチナーゼ活性をデンシトメーター（アトー社製、アトーデンシトグラフ、ＡＥ−６９０５）にて定量化し、活性阻害率を実験例１と同様に算出した。その結果、表２に示すように、化学式（１）で表される化合物および/またはそれらの塩は高いＭＭＰ活性阻害作用が認められた。
【００３３】
【表２】
2006143661.tif 000003
【００３４】
実験例３  使用試験
処方例１のクリーム及び比較例１のクリームを用いて、各々女性３０人（３１〜５０才）を対象に２ヶ月間の使用試験を行った。使用後、シワ、たるみ、肌の弾力についてのアンケート調査を行って、老化防止効果を判定した。アンケートの評価基準は、有効なもの「優」、やや有効なものを「良」、わずかに有効なものを「可」、無効なものを「不可」として評価した。
【００３５】
これらの結果を表２に示した。本発明のＮＦκＢ阻害剤は優れた老化防止効果を示した。なお、試験期間中皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。
【００３６】
【表３】
2006143661.tif 000004
【００３７】
その他のＮＦκＢ阻害剤について同様な使用試験を行ったところ、いずれも安全で優れた老化防止・改善効果を示した。
【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明の化学式（１）で表される化合物および／またはその塩は、高いＮＦκＢ阻害作用を有し、皮膚の老化や炎症、ＭＭＰ亢進性疾患に対する予防、抑制または症状の改善を目的とする医薬品、医薬部外品、化粧品または食品に配合することが可能である。