(57)【要約】【課題】            育毛剤や創傷治癒剤として有効に応用し得る、毛包周辺あるいは創傷部位の血管新生誘導効果に優れた、皮膚への外用に好適なＶＥＧＦ産生促進剤を得ることを課題とした。【解決手段】        アニスアルコール、サリチル酸イソアミル、α，α−ジメチルフェニルエチルアルコール、バグダノール、ヘリオナール、及び安息香酸イソアミルから選択される１種もしくは２種以上の化合物を配合することで、育毛剤や創傷治癒剤に特に有効なＶＥＧＦ産生促進剤を提供できた。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アニスアルコール、サリチル酸イソアミル、α，α−ジメチルフェニルエチルアルコール、バグダノール、ヘリオナール、及び安息香酸イソアミルから選択される１種もしくは２種以上の化合物を含有する血管内皮細胞増殖因子産生促進剤。
【請求項２】
アニスアルコール、サリチル酸イソアミル、α，α−ジメチルフェニルエチルアルコール、バグダノール、ヘリオナール、及び安息香酸イソアミルから選択される１種もしくは２種以上の化合物を含有する育毛剤。
【請求項３】
アニスアルコール、サリチル酸イソアミル、α，α−ジメチルフェニルエチルアルコール、バグダノール、ヘリオナール、及び安息香酸イソアミルから選択される１種もしくは２種以上の化合物を含有する創傷治癒剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血管内皮細胞増殖因子（＝Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ／以下ＶＥＧＦと略す）の産生を促進し得るＶＥＧＦ産生促進剤に関する。本発明にかかるＶＥＧＦ産生促進剤は、特に、育毛剤、創傷治癒剤に応用され得るものである。
【背景技術】
【０００２】
従来より、創傷の治癒剤や、育毛剤においては、血行を促進したり、皮膚の新陳代謝を活性化したりする作用を有する成分が用いられてきた。かかる血行促進剤としては、センブリ抽出物、セファランチン、ビタミンＥおよびその誘導体、γ−オリザノール等が挙げられ、皮膚の新陳代謝を促進する物質としては、炭素数１８〜２２の不飽和結合を２以上含有する脂肪酸またはその塩等（特許文献１参照）、ヒドロキシサリチル酸またはそのエステルの配糖体（特許文献２参照）などが開示されている。また、創傷治癒効果を有する物質としては、アスコルビン酸、アラントイン、アズレン化合物、パントテン酸またはその塩、ビタミンＢ群化合物などが知られており、その他、単球走化性活性化因子（特許文献３参照）、ヒオウギ抽出物（特許文献４参照）、フラボノイド配糖体（特許文献５参照）、アデノシン−３’，５’−環状リン酸誘導体（特許文献６参照）等が開示されている。
【０００３】
【特許文献１】特開平７−１９６４６５号公報
【特許文献２】特開平８−２６８８７０号公報
【特許文献３】特開平７−８２１６９号公報
【特許文献４】特開平７−１３８１７９号公報
【特許文献５】特開平７−１８８０３１号公報
【特許文献６】特開平９−１９４３７９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、上記の成分に関しては、必ずしも適用部位において特異的に作用するとは限らず、期待した作用効果が十分得られない場合があった。植物抽出物は、化学組成の同定が難しく、ロット間での品質のばらつきが懸念されている。また、実際に製剤化した場合には、変色や変臭が生じる場合があった。従って、本発明の目的は、創傷治癒剤や育毛剤に特に有効に応用し得るような、創傷部位あるいは毛包周辺の血管新生誘導効果に優れる皮膚への外用に好適なＶＥＧＦ産生促進剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
即ち、本発明はアニスアルコール、サリチル酸イソアミル、α，α−ジメチルフェニルエチルアルコール、バグダノール、ヘリオナール、及び安息香酸イソアミルから選択される１種もしくは２種以上の化合物を含有するＶＥＧＦ産生促進剤、育毛剤、及び創傷治癒剤に関する。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、血管新生効果に優れたＶＥＧＦ産生促進剤、育毛剤、及び創傷治癒剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明に於いては、アニスアルコール、サリチル酸イソアミル、α，α−ジメチルフェニルエチルアルコール、バグダノール、ヘリオナール、及び安息香酸イソアミルから１種もしくは２種以上を選択して用いる。これらの化合物は単独でＶＥＧＦ産生促進剤として用いることができるが、各種基剤または担体に含有させても良い。ＶＥＧＦ産生促進剤全量に対する添加量としては、０．００００１〜１．０重量％であり、好ましくは０．０００１〜０．１重量％である。
【０００８】
本発明に係るＶＥＧＦ産生促進剤は、液剤、乳液、ゲル剤、クリーム剤、軟膏剤、粉剤、顆粒剤、丸剤等種々の剤型で提供することができる。また、本発明に係るＶＥＧＦ産生促進剤には、その効果を損なわない範囲で、油性成分、界面活性剤、保湿剤、賦形剤、紫外線吸収剤、抗酸化剤、香料、防腐剤等の一般的な医薬品および化粧料用添加剤を含有させることができ、これらを併用することで、クリームや乳液などの乳化物や、化粧水や育毛剤などの水性皮膚外用剤、さらには、これをゲル化した水性ゲル状皮膚外用剤、あるいは石鹸や洗顔フォーム、シャンプーなどの洗浄用化粧料、あるいはピールオフ型や洗い流し型のパック剤などにすることができる。
【実施例】
【０００９】
さらに本発明について、実施例を用いて詳細に説明する。
【００１０】
＜ＶＥＧＦ産生促進効果＞
正常ヒト表皮細胞を１穴あたり２．０×１０4個となるように９６穴プレートに播種した。播種培地は市販培地のＫＧ−２（クラボウ製）を用いた。播種２４時間後、任意の試料を添加したＫＧ−２培地に交換し、さらに２４時間培養をおこなった。この培養上清中のＶＥＧＦ量をエンザイム  イムノ  アッセイ法［Ｅｎｚｙｍｅ−ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ）］により定量した。すなわち、新規９６穴プレートを抗ＶＥＧＦ抗体でコーティングし、４℃で１２時間放置した後、１％ウシ血清を添加し、これに上述の培養上清を添加する。続いて、ビオチン標識抗ＶＥＧＦ抗体、ストレプタビジンＨＲＰと反応させた後、２，２’−アジノビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）ジアンモニウム塩［２，２’−Ａｚｉｎｏ−ｂｉｓ（３−ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｔｈｉａｚｏｌｉｎｅ−６−ｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）ｄｉａｍｍｏｎｉｕｍ  ｓａｌｔ（ＡＢＴＳ）］および過酸化水素水を添加した基質溶液を加えて反応させた。得られた溶液の４０５ｎｍにおける吸光度を測定し、あらかじめ測定しておいた細胞数をもとに、単位細胞数あたりのＶＥＧＦ産生量を測定した。コントロールとして
試料を添加しなかった場合のＶＥＧＦ産生量を１００とした相対値を表１に示す。
【００１１】
【表１】
2006160698.tif 000002
【００１２】
表1から明らかなように、各実施例においてＶＥＧＦ産生が促進されることが認められた。
【００１３】
次に各ＶＥＧＦ産生促進剤を配合した処方例を示す。
【００１４】
（実施例７）  液状ＶＥＧＦ産生促進剤
（１）        エタノール                                １０．００（重量％）
（２）        ポリオキシエチレン
硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．）            ０．３０
（３）        アニスアルコール                            ０．０１
（４）        パラオキシ安息香酸メチル                    ０．０２
（５）        濃グリセリン                                ３．００
（６）        １，３−ブチレングリコール                  １．００
（７）        精製水                                  １００とする残部
製法：（１）に（２）、（３）、（４）を順次添加し、均一に溶解しアルコール相とする。これを、あらかじめ（７）に（５）及び（６）を添加して均一にした水相に、攪拌しながら均一に混合する。また、（３）を精製水に代替して調製したものを比較例１とする。
【００１５】
（実施例８）  乳液状ＶＥＧＦ産生促進剤
（１）        スクワラン                                  ６．００（重量％）
（２）        メチルフェニルポリシロキサン                ４．００
（３）        水素添加パーム核油                          ０．５０
（４）        モノステアリン酸ポリオキシエチレン
ソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．）          １．３０
（５）        モノステアリン酸ソルビタン                  １．００
（６）        グリセリン                                １０．００
（７）        パラオキシ安息香酸メチル                    ０．１０
（８）        １重量％カルボキシビニルポリマー水溶液    １５．００
（９）        １０重量％Ｌ−アルギニン水溶液              １．００
（１０）      サリチル酸イソアミル                        ０．００１
（１１）      精製水                                  １００とする残部
製法：（１）〜（５）の油相成分を加熱溶解し、８０℃とする。一方（６）〜（８）を（１１）に加熱溶解したものを油相に加え、均一に攪拌する。次いで、（９）を加え、ホモジナイザーにより均一に乳化した後、冷却し、４５℃にて（１０）を加えて均一にする。また、（１０）を精製水に代替して調製したものを比較例２とする。
【００１６】
（実施例９）  クリーム状ＶＥＧＦ産生促進剤
（１）        スクワラン                                １０．００（重量％）
（２）        ステアリン酸                                ２．００
（３）        水素添加パーム核油                          ０．５０
（４）        水素添加大豆リン脂質                        ０．１０
（５）        セタノール                                  ３．６０
（６）        親油型モノステアリン酸グリセリン            ２．００
（７）        グリセリン                                １０．００
（８）        パラオキシ安息香酸メチル                    ０．１０
（９）        １重量％カルボキシビニルポリマー水溶液    １５．００
（１０）      １０重量％Ｌ−アルギニン水溶液              ３．００
（１１）      α，α−ジメチルフェニルエチルアルコール    ０．１０
（１２）      精製水                                  １００とする残部
製法：（１）〜（６）の油相成分を加熱溶解し、８０℃とする。一方（７）〜（９）及び（１２）を加熱溶解し、８０℃とする。これに前記油相を攪拌しながら加えたあと、（１０）を加えて、ホモジナイザーにより均一に乳化する。３０℃まで冷却した後、（１１）を添加し混合、均一化する。また、（１１）を精製水に代替して調製したものを比較例３とする。
【００１７】
（実施例１０）  ゲル状ＶＥＧＦ産生促進剤
（１）        ジプロピレングルコール                    １０．００（重量％）
（２）        カルボキシビニルポリマー                    ０．５０
（３）        １０重量％水酸化カリウム                    ０．１０
（４）        パラオキシ安息香酸メチル                    ０．１０
（５）        バグダノール                                ０．０５
（６）        精製水                                  １００とする残部
製法：（６）に（２）を均一に溶解した後、（１）に（４）、（５）を溶解してこれを添加し、次いで（３）を加えて増粘させる。また、（５）を精製水に代替して調製したものを比較例４とする。
【００１８】
（実施例１１）  液状ＶＥＧＦ産生促進剤（２）
（１）          エタノール                              ５０．００（重量％）
（２）          ポリオキシエチレン
硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）          ０．２０
（３）          ヘリオナール                              ０．１０
（４）          安息香酸イソアミル                        ０．１０
（５）          ジプロピレングリコール                    ５．００
（６）          サリチル酸                                ０．１０
（７）          精製水                                １００とする残部
製法：（１）に（２）から（６）を順次添加し、攪拌後溶解させる。これに（７）を加え、均一に混合する。また、（３）、（４）を精製水に代替して調製したものを比較例５とする。
【００１９】
＜血管新生効果＞
上記実施例７から実施例１０について、モルモットの創傷部位における血管新生促進効果を評価した。同時に比較例１から比較例４についても評価を行った。血管新生促進効果は、背部を剃毛し、人工的に創傷を形成したモルモット５匹を１群とし、各群の創傷部位に実施例および比較例のそれぞれ０．２ｇずつを１日２回塗布し、３日後の組織片を作製して、血管新生の様子を観察して評価した。その結果を表２に示した。
【００２０】
【表２】
2006160698.tif 000003
【００２１】
表２より明らかなように、本発明の実施例７から実施例１０を塗布した群では、４例以上のモルモットにて血管新生を認めた。これに対し比較例塗布群では、明確な血管新生効果を認めた例は１例以下であり、本発明に係る化合物の血管新生効果すなわち創傷治癒促進効果が明らかとなった。
【００２２】
＜育毛効果＞
実施例１１および比較例５を用いて、使用試験を行った。パネラーは３０代から５０代の脱毛症の男性２０人を一群として、各群に実施例および比較例をブラインドにて１日２回、６ヶ月間連続で使用させた。試験終了後、発毛の程度を写真にて下表３に示した基準を用いて判定した。その結果について表４に示した。
【００２３】
【表３】
2006160698.tif 000004
【００２４】
【表４】
2006160698.tif 000005
【００２５】
表４より明らかなように、本発明の実施例１１使用群では約半数の９例で硬毛の発生を認めているのに対して、比較例５使用群では硬毛の発生が認められた例は１例としてなかった。
【００２６】
＜女性における育毛効果＞
実施例１１および比較例５を用いて、使用試験を行った。パネラーは３０代から５０代の薄毛が気になる女性２０人を一群として、各群に実施例および比較例をブラインドにて１日２回、６ヶ月間連続で使用させた。試験終了後、髪の毛の状態の変化に関してアンケートを実施した。その結果について表５にアンケート項目とともに示した。
【００２７】
【表５】
2006160698.tif 000006
【００２８】
表５から明らかなように、本発明の実施例１１使用群では、髪の毛のツヤ、ハリ・コシ、及び量について、１１例以上で改善効果が認められ、比較例５よりも、改善効果が高かった。このことから、本発明におけるＶＥＧＦ産生促進剤は、男性用および女性用の育毛剤としても応用できることがわかった。