(57)【要約】【課題】 バイオ処理部の両端に低圧真空チャンバーを形成して大気圧と真空チャンバーの圧力差によってバイオ試料が外部エネルギー源なしにバイオ処理部を通過してバイオ処理されるようにする真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置及びその方法を提供する。【解決手段】  分析しようとするバイオ試料に対するバイオ前処理（ｐｒｅ−ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ）を施すバイオ処理部と、一側は開放されバイオ処理部の一端と連結されバイオ試料が注入される第１真空チャンバーと、一側は開放されバイオ処理部の他の一端と連結され、第１真空チャンバーに注入されたバイオ試料がバイオ処理部を通過して排出される第２真空チャンバーとを含み、第１真空チャンバーと第２真空チャンバーの開放された一側は互いに結合して大気圧より低い低圧が形成され、バイオ試料の注入によって発生した第１真空チャンバーと第２真空チャンバーとの圧力差によってバイオ試料が第２真空チャンバー方向に移動する。【選択図】      図３Ｂ
2006038863.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
分析しようとするバイオ試料に対するバイオ処理（ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ）を施すバイオ処理部と、
一側は開放され前記バイオ処理部の一端と連結され、前記バイオ試料が注入される第１真空チャンバーと、
一側は開放され前記バイオ処理部の他の一端と連結され、前記第１真空チャンバーに注入された前記バイオ試料が前記バイオ処理部を通過して排出される第２真空チャンバーと、を含み、
前記第１真空チャンバーと前記第２真空チャンバー、及び前記バイオ処理部は互いに結合して大気圧より低い低圧が形成され、前記バイオ試料の注入によって発生した前記第１真空チャンバーと前記第２真空チャンバーとの圧力差によって前記バイオ試料が前記第２真空チャンバー方向に移動することを特徴とする真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置。
【請求項２】
前記第１真空チャンバー及び前記第２真空チャンバーは前記バイオ処理部の内部に形成されることを特徴とする請求項１に記載の真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置。
【請求項３】
前記第１真空チャンバー及び前記第２真空チャンバーの間に位置し、前記バイオ処理部を支持する隔膜部をさらに含むことを特徴とする請求項１に記載の真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置。
【請求項４】
前記第１真空チャンバーの内部及び前記第２真空チャンバーの内部のうちいずれか１つに前記バイオ処理部を支持する支持台が形成されることを特徴とする請求項３に記載の真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置。
【請求項５】
前記バイオ処理部の外部に形成され、前記バイオ前処理に必要な物質を供給するためのバルブをさらに含むことを特徴とする請求項１に記載の真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置。
【請求項６】
前記第１真空チャンバーの閉鎖された一側にマイクロ針を用いて前記バイオ試料を注入することを特徴とする請求項１に記載の真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置。
【請求項７】
前記第２真空チャンバーに排出されるバイオ試料はマイクロ針を用いて獲得することを特徴とする請求項１に記載の真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置。
【請求項８】
バイオ試料に対するバイオ処理を施すバイオ処理部、大気圧より低い低圧が形成される第１、第２真空チャンバーを備える真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置において、
前記第１真空チャンバーに前記バイオ試料を注入して前記第１真空チャンバーに大気圧を形成する段階と、
前記第１真空チャンバーと前記第２真空チャンバーとの圧力差によって前記バイオ試料が前記バイオ処理部を通過して前記第２真空チャンバーに移動する段階と、
を含むことを特徴とする真空チャンバーを用いたバイオ試料処理方法。
【請求項９】
前記真空チャンバーは前記バイオ処理部の外部及び内部のうちいずれか１つの両端に形成されることを特徴とする請求項８に記載の真空チャンバーを用いたバイオ試料処理方法。
【請求項１０】
マイクロ針を用いて前記第１真空チャンバーに前記バイオ試料を注入する段階をさらに含むことを特徴とする請求項８に記載の真空チャンバーを用いたバイオ試料処理方法。
【請求項１１】
前記第２真空チャンバーに移動した前記バイオ試料を前記第２真空チャンバーと前記バイオ処理部を分離することにより獲得する段階をさらに含むことを特徴とする請求項８に記載の真空チャンバーを用いたバイオ試料処理方法。
【請求項１２】
前記第２真空チャンバーに移動した前記バイオ試料をマイクロ針を用いて獲得する段階をさらに含むことを特徴とする請求項８に記載の真空チャンバーを用いたバイオ試料処理方法。
【請求項１３】
前記第１真空チャンバー及び前記第２真空チャンバーは前記バイオ処理部の外部に形成されることを特徴とする請求項１に記載のバイオ試料処理装置。
【請求項１４】
バイオ試料処理のためのバイオ処理部と、
一側は開放され前記バイオ処理部の一端と連結され、前記バイオ試料が注入される第１真空チャンバーと、
一側は開放され前記バイオ処理部の他の一端と連結され、前記バイオ試料が前記バイオ処理部を通過して排出される第２真空チャンバーを含み、
前記第１真空チャンバーと前記第２真空チャンバー、及び前記バイオ処理部は互いに結合して外部圧力（ａｍｂｉｅｎｔ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ）より低い低圧が形成され、前記バイオ試料の注入によって発生した前記第１真空チャンバーと前記第２真空チャンバーとの圧力差によって前記バイオ試料が前記第２真空チャンバー方向に移動することを特徴とする真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置。
【請求項１５】
バイオ処理部、外部圧力より低い低圧が形成される第１、第２真空チャンバーを備えるバイオ処理装置におけるバイオ処理方法において、
前記第１真空チャンバーに前記バイオ試料を注入して前記第１真空チャンバーに前記外部圧力を形成する段階と、
前記第１真空チャンバーと前記第２真空チャンバーとの圧力差によって前記バイオ試料が前記バイオ処理部を通過して前記第２真空チャンバーに移動する段階と、
を含むことを特徴とする真空チャンバーを用いたバイオ試料処理方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置及びその方法に関し、さらに詳しくは、バイオ処理部の両端に低圧の真空チャンバーを形成して圧力差によりバイオ試料がバイオ処理部を通過するようにする真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置及びその方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
バイオチップは、ガラス、シリコン、またはナイロンなどの材質よりなる小さい固形の基板上に、その配列が知られているＤＮＡ、ＤＮＡ片、ＲＮＡ等の生分子（ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ）を数百個から数十万個まで一定間隔で配列して付着することにより、遺伝子の発現方式、分布様相及び突然変異などを分析することができる生物学的マイクロチップを指す。バイオチップ技術は、このような狭い意味としては遺伝子分析の先端技術として認められているＤＮＡマイクロアレイ技術を意味するが、広い意味としては生体物質と既存の物理、化学、及び光変換器を組合わせたバイオセンサ（ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ）、ＤＮＡ探針が内蔵されたＤＮＡマイクロアレイ、酵素や抗体抗原などのようなタンパク質が使用されたタンパク質チップ、植物細胞を用いたセルチップ（ｃｅｌｌ  ｃｈｉｐ）、神経細胞を直接に使用したニューロンチップ（ｎｕｒｅｏｎ  ｃｈｉｐ）等を意味する。
【０００３】
最近、このようなバイオチップにラボオンチップ（ＬＯＣ: Ｌａｂ−Ｏｎ−ａ−Ｃｈｉｐ）の概念を導入して血液、尿、セル、唾などのような実質的な生体試料や天然物、薬品、食品、医薬など多様な種類の試料を直接使って、チップ内で試料の前処理、誘導体化、分離、分析などの全ての実験室作業を、１つのチップに統合しようとするＤＮＡ-ＬＯＣ及びタンパク質-ＬＯＣ開発が行なわれている。このようなラボオンチップは生化学物質の分析時に使われる自動分析装置の試料前処理過程に必要なバルブ、液体量測定器、反応器、抽出器及び分離システムの機能とセンサ技術を同一チップにまとめたものを指す。
【０００４】
このようなバイオチップを用いてバイオ試料が含有している物質に関する情報を分析するためにはバイオ試料に対する前処理過程を必要とする。
図１Ａ〜図１Ｃは一般的なバイオ試料前処理を示す図である。
図１Ａはバイオ試料として使用しようとする細胞を分離する装置を示す図であり、図１Ｂは細胞の一部分をバイオ試料として使用するために粉砕する装置を示す図である。そして、図１Ｃは粉砕装置において粉砕された細胞の一部分でバイオ試料として使用するための分子を抽出する装置を示す図である。
【０００５】
図１Ａ〜図１Ｃに示すように、バイオチップに使われるバイオ試料を作るためには前処理（ｐｒｅ−ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ）過程を経る。バイオ試料前処理は細胞においてバイオ試料として使用するＤＮＡ、ＲＮＡなどを獲得するために細胞分離、粉砕、抽出、精溜等の過程を指す。
図２Ａ〜図２Ｃは従来のバイオ試料処理装置を示す図である。
【０００６】
図２Ａは一般のバイオ試料処理装置を示す図であり、図２Ｂはバイオ試料処理及び分析が１つのチップで可能なラボオンチップを示す図である。そして、図２Ｃは従来のバイオセンサを示す図である。
図２Ａの一般的なバイオ試料処理装置は巨視スケールの外部ポンプ、チャンバー、バルブ、反応炉などよりなっており、自己エネルギー源を備えていない場合にはバイオ試料を前処理するために外部ポンプを使う必要がある。また、このようなバイオ試料処理装置は使い捨てではないため、必ず洗浄過程を必要とし、多チャネルを具現し難いとの問題点がある。
【０００７】
図２Ｂの従来のラボオンチップにおけるバイオ試料処理の場合にも図２Ａの場合と同様に、バイオ試料処理のためには外部エネルギー源が必要であり、これによって内部にＭＥＭＳポンプが備えられ、構造が相対的に複雑な問題点がある。
図２Ｃの従来のバイオセンサは、図２Ａ及び図２Ｂの場合のように自体エネルギー源を備えていなくて、図２Ｃに示すように、バイオセンサの内部にマイクロポンプを備える。このようなマイクロポンプを使用する場合、マイクロポンプを具現するための工程が複雑でありコストアップになる問題点がある。また、マイクロポンプの場合その性能が他のポンプに比べて相対的に微弱であるという短所がある。内部にポンプを具現する代わりに、外部ポンプを使用することもできるが、外部ポンプを使用する場合はマイクロ構造物と外部ポンプとの連結及びその制御が困難であるという問題点がある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、前記のような問題点を鑑みてなされたものであって、その目的はバイオ処理部の両端に低圧真空チャンバーを形成して、大気圧と真空チャンバーとの圧力差によってバイオ試料が外部エネルギー源なしに、バイオ処理部を通過してバイオ処理されるようにする真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置及びその方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
前記の目的を達成するための本発明に係る真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置は、分析しようとするバイオ試料に対するバイオ前処理（ｐｒｅ−ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ）を施すバイオ処理部と、一側は開放されバイオ処理部の一端と連結されバイオ試料が注入される第１真空チャンバーと、一側は開放されバイオ処理部の他の一端と連結され、第１真空チャンバーに注入されたバイオ試料がバイオ処理部を通過して排出される第２真空チャンバーとを含み、第１真空チャンバーと第２真空チャンバーの開放された一側は互いに結合して大気圧より低い低圧が形成され、バイオ試料の注入によって発生した第１真空チャンバーと第２真空チャンバーとの圧力差によってバイオ試料が第２真空チャンバー方向に移動する。
【００１０】
望ましくは、第１真空チャンバー及び第２真空チャンバーはバイオ処理部の外部及び内部のいずれか１つに形成される。
望ましくは、第１真空チャンバー及び第２真空チャンバーの間に位置し、バイオ処理部を支持する隔膜部をさらに含む。また、第１真空チャンバー内部及び第２真空チャンバー内部のうちいずれか１つにバイオ処理部を支持する支持台が形成される。
【００１１】
望ましくは、バイオ処理部の外部に形成され、バイオ前処理に必要な物質を供給するためのバルブをさらに含む。
そして、第１真空チャンバーの閉鎖された一側にマイクロ針を用いてバイオ試料を注入する。また、第２真空チャンバーに排出されるバイオ試料はマイクロ針を用いて獲得する。
【００１２】
一方、本発明の真空チャンバーを用いたバイオ試料処理方法はバイオ試料に対するバイオ前処理を施すバイオ処理部と、バイオ処理部の両端に形成され大気圧より低い低圧が形成される第１、第２真空チャンバーを備える真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置において、第１真空チャンバーに前記バイオ試料を注入して前記第１真空チャンバーに大気圧を形成する段階と、第１真空チャンバーと第２真空チャンバーとの圧力差によってバイオ試料がバイオ処理部を通過して第２真空チャンバーに移動する段階とを含む。
【００１３】
望ましくは、真空チャンバーはバイオ処理部の外部及び内部のうちいずれか１つの両端に形成される。そして、第１真空チャンバーへのバイオ試料の注入はマイクロ針を用いる。
望ましくは、第２真空チャンバーに移動されたバイオ試料を第２真空チャンバーとバイオ処理部を分離することにより獲得する段階をさらに含む。または、第２真空チャンバーに移動された前記バイオ試料をマイクロ針を用いて獲得する段階をさらに含む。
【発明の効果】
【００１４】
前述したように、本発明によれば、バイオ処理部の両端に形成された真空チャンバーの圧力差を用いてバイオ試料がバイオ処理部を通過するようにすることにより、内部または外部のポンプを使用しないことから構造が簡単であり、低価格のバイオ処理装置を作製することができる。
また、バイオ試料がバイオ処理部を通過するようにするために外部エネルギー源を必要としないため、場所及び時間を問わず容易にバイオ試料処理が施せる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
〈第１実施形態〉
以下、添付した図面に基づき本発明の好適な一実施形態について詳述する。
図３Ａ〜図３Ｄはそれぞれ本発明の第１実施形態による真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置を示す図である。図３Ａは本発明の第１実施形態による真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置を示す斜視図であり、図３Ｂは図３Ａを分解した分解斜視図である。そして、図３Ｃは図３Ａの正面図であり、図３Ｄは図３Ａのバイオ処理部３０の内部を示す図である。
【００１６】
図３Ａ〜図３Ｄに示すように、本発明に係る真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置は、第１真空チャンバー１０、隔膜部２０、支持台２５、バイオ処理部３０、及び第２真空チャンバー部４０とを備える。
まず、第１真空チャンバー１０は一端が開放されており、他の一端は閉鎖されている。開放された第１真空チャンバー１０の一端は隔膜部２０と結合され、第１真空チャンバー１０と隔膜部２０とが結合されることにより、第１真空チャンバー４０の内部には低圧が形成される。そして、閉鎖された第１真空チャンバー１０の一端にはマイクロ針などを用いてバイオ試料５０が注入されるため、第１真空チャンバー１０はマイクロ針などが容易に注入され得る材料で形成される。この際、図２ＡにおいてＩ領域はマイクロ針などが注
入される領域を示したものである。
【００１７】
第２真空チャンバー４０は一端は開放されており、他の一端は閉鎖されている。第２真空チャンバー４０の開放された一端は第２真空チャンバー４０内に低圧が形成されるように隔膜部２０と結合される。この第２真空チャンバー４０にはバイオ処理部３０でフィルタリング、粉砕（ｌｙｓｉｓ）、抽出（ｅｘｔｒａｃｉｏｎ）、精溜（ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）等のバイオ処理過程を経たバイオ試料５０を得ることができる。獲得したバイオ試料５０は第２真空チャンバー４０を隔膜部２０から分離することにより容易に得られる。または、第１真空チャンバー１０にバイオ試料５０を注入する時に使用され得るマイクロ針などが使用され得る。
【００１８】
隔膜部２０はバイオ処理部３０を支持する役割を果たし、内部に支持台２５を備える。隔膜部２０は第１真空チャンバー１０及び第２真空チャンバー４０にそれぞれ低圧が形成されるように一端が開放された第１真空チャンバー１０及び第２真空チャンバー４０とそれぞれ結合して開放された一端を閉鎖する。そして、隔膜部２０の内部に形成された支持台２５は両端が開放されており、バイオ処理部３０と結合されバイオ処理部３０を支持するようにバイオ処理部３０と類似した形態に形成される。図３Ａ及び図３Ｂの場合は、支持台２５が第２真空チャンバー４０と結合される隔膜部２０の方向に形成されている。しかし、この支持台２５は第１真空チャンバー４０と結合される隔膜部２０の方向に形成されることもできる。一方、隔膜部２０は第１真空チャンバー１０、第２真空チャンバー４０とそれぞれ結合されるが、第１真空チャンバー１０及び第２真空チャンバー４０のいずれか１つと一体形成され得る。この場合、支持台２５は第１真空チャンバー１０または第２真空チャンバー４０の内部に形成され得る。
【００１９】
バイオ処理部３０はバイオ試料５０を処理するためのフィルタ部、粉砕部、精溜部、抽出部などを備えており、両端には孔（ｈｏｌｅ）が形成されている。バイオ処理部３０の両端の孔のうち１つの孔にはバイオ試料５０が注入されバイオ処理部３０を経た後、他の孔からバイオ試料５０が排出される。
このバイオ処理部３０は両端が開放された隔膜部２０の支持台２５と結合され隔膜部２０の支持台２５により支えられる。この隔膜部２０はそれぞれ第１真空チャンバー１０と第２真空チャンバー４０と結合されるため、バイオ処理部３０の両端はそれぞれ第１真空チャンバー１０、第２真空チャンバー４０の内部に位置するようになる。
〈第２実施形態〉
図４Ａ及び図４Ｂは本発明の第２実施形態による真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置を示す図である。図４Ａ〜図４Ｄの場合は、真空チャンバーがバイオ処理部３０の外部に形成された場合である一方、図４Ａ及び図４Ｂの場合は、それぞれ真空チャンバーがバイオ処理部３０の内部に形成された断面図及び斜視図である。そして、図４Ｂはバイオ処理部３０の外部にバルブが形成された場合を示す。
【００２０】
図４Ａに示すように、本発明に係る真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置は、第１真空チャンバー１０、バイオ処理部３０、及び第２真空チャンバー４０を備える。図４Ａ〜図４Ｄと違って、第１真空チャンバー１０及び第２真空チャンバー４０がバイオ処理部３０の内部に形成されるため、バイオ処理部３０を支持するための隔膜部２０が求められない。そして、第１真空チャンバー１０及び第２真空チャンバー４０は、図４Ａ〜図４Ｄに基づいて説明したような機能を果たす。すなわち、第１真空チャンバー１０及び第２真空チャンバー４０の内部には低圧が形成され、第１真空チャンバー１０にはバイオ試料５０が注入され、第２真空チャンバー４０にバイオ処理部３０を通過したバイオ試料５０を獲得することができる。
【００２１】
図４Ｂに示すように、バイオ処理部３０の外部に第１、第２外部バルブ６０、７０が形成されている。第１、第２外部バルブ６０、７０は、必要に応じてバイオ処理部３０の外部に形成することができ、これはバイオ試料５０の処理過程に必要な溶液などが注入されるための空間、処理過程で排出される廃棄物を保管する空間などとして用いられる。
図５は本発明の一実施形態による真空チャンバーを用いたバイオ試料処理方法を示す流れ図である。
【００２２】
図５に示すように、第１真空チャンバー１０の閉鎖された一端にバイオ試料５０を注入する（Ｓ５０１）。バイオ試料５０の注入はマイクロ針などを用いて第１真空チャンバー１０の図３Ａに示すようなＩ領域に注入される。従って、第１真空チャンバー１０はマイクロ針などが容易に挿入できる材質で形成される。
次いで、第１真空チャンバー１０に注入されたバイオ試料５０はバイオ処理部３０を経て第２真空チャンバー４０方向に移動する（Ｓ５０３）。すなわち、図２Ｃに示すような矢印方向にバイオ試料５０は移動するようになる。これは第１真空チャンバー１０にバイオ試料５０が注入されることにより、低圧状態である第１真空チャンバー１０の内部は大気圧状態になる。従って、第１真空チャンバー１０の内部の圧力が第２真空チャンバー４０の内部の圧力より大きくなり、このような第１真空チャンバー１０と第２真空チャンバー４０との圧力差によってバイオ試料５０は高圧である第１真空チャンバー１０から低圧である第２真空チャンバー４０方向に吸い込まれるようになる。バイオ試料５０は、バイオ処理部３０の一側に形成された孔を通じて、バイオ処理部３０の内部に入り込むようになって、一連のフィルタリング、粉砕、抽出、精溜等の過程を経た後、バイオ処理部３０の他の一側に形成された孔を通じて排出される。
【００２３】
次いで、第２真空チャンバー４０において、バイオ処理されたバイオ試料５０を獲得することができる（Ｓ５０５）。第２真空チャンバー４０で獲得されたバイオ試料５０はマイクロ針、ピストンなどを用いて得られる。また、第１、第２真空チャンバー１０、４０がバイオ処理部３０の外部に形成された場合は、第２真空チャンバー４０を隔膜部２０から分離することによりバイオ試料５０が得られ、第１、第２真空チャンバー１０、４０がバイオ処理部３０の内部に形成された場合は、第２真空チャンバー４０が結合されている部分を切断することによりバイオ試料５０が得られる。
【００２４】
以上では、本発明の好適な実施形態について示しかつ説明したが、本発明は前述した特定の実施形態に限定されず、請求の範囲で請求する本発明の要旨を逸脱せず、当該発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者により多様な変形実施が可能なことは勿論、このような変形実施は本発明の技術的思想や展望から個別的に理解されるものではない。
【産業上の利用可能性】
【００２５】
本発明に基づき製造された印刷回路基板は磁界検出素子として用いられ、人が直接に感じられない磁気エネルギーを検出し、その大きさを測定する用途として使用され得る。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１Ａ】一般のバイオ試料前処理装置を示す図である。
【図１Ｂ】一般のバイオ試料前処理装置を示す図である。
【図１Ｃ】一般のバイオ試料前処理装置を示す図である。
【図２Ａ】従来のバイオ試料処理装置を示す図である。
【図２Ｂ】従来のバイオ試料処理装置を示す図である。
【図２Ｃ】従来のバイオ試料処理装置を示す図である。
【図３Ａ】本発明の第１実施形態による真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置を示す図である。
【図３Ｂ】本発明の第１実施形態による真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置を示す図である。
【図３Ｃ】本発明の第１実施形態による真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置を示す図である。
【図３Ｄ】本発明の第１実施形態による真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置を示す図である。
【図４Ａ】本発明の第２実施形態による真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置を示す図である。
【図４Ｂ】本発明の第２実施形態による真空チャンバーを用いたバイオ試料処理装置を示す図である。
【図５】本発明の一実施形態による真空チャンバーを用いたバイオ試料処理方法を示す流れ図である。
【符号の説明】
【００２７】
１０   第１真空チャンバー
２０   隔膜部
２５   支持台
３０   バイオ処理部
４０   第２真空チャンバー
５０   バイオ試料
６０   第１外部バルブ
７０   第２外部バルブ
【図１Ａ】
2006038863.tif 000003
【図１Ｂ】
2006038863.tif 000004
【図１Ｃ】
2006038863.tif 000005
【図２Ａ】
2006038863.tif 000006
【図２Ｂ】
2006038863.tif 000007
【図２Ｃ】
2006038863.tif 000008
【図３Ａ】
2006038863.tif 000009
【図３Ｂ】
2006038863.tif 000010
【図３Ｃ】
2006038863.tif 000011
【図３Ｄ】
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【図４Ａ】
2006038863.tif 000013
【図４Ｂ】
2006038863.tif 000014
【図５】
2006038863.tif 000015