(57)【要約】【課題】  本発明は、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度を判定するための方法の提供【解決手段】  生物学的試料中のゲノムＤＮＡ上に存在するα２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ塩基多型を検出する工程を含む、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度を判定するための方法。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物学的試料中のゲノムＤＮＡ上に存在するα２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ塩基多型を検出する工程を含む、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度を判定するための方法。
【請求項２】
薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度の判定基準が、下記：
α２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ塩基多型がＴ／Ｔホモ接合型の場合は、最も低い、
α２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ塩基多型がＴ／Ｃヘテロ接合型の場合は、２番目に低い、
α２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ塩基多型がＣ／Ｃホモ接合型の場合は、最も高い、
である、請求項１記載の方法。
【請求項３】
薬物が、降圧剤、抗癲癇剤、免疫抑制剤である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
降圧剤が、カルシウム拮抗剤である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
抗癲癇剤が、フェニトインである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
免疫抑制剤が、サイクロスポリンＡである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
配列番号１の８０７番目の塩基を含み、連続する１５個以上の塩基配列からなるフラグメントを含む、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度を判定するためのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度を判定するための方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
歯肉増殖症は上下顎のすべての歯肉が著しく増殖する疾患であり、薬物例えば抗癲癇剤、カルシウム拮抗薬、免疫抑制剤の投与によって歯肉が増殖することがある。投薬を中止することによって、正常に復することが多い。肉眼的には歯冠部を覆うように歯肉が増殖し、歯周組織は線維性に肥厚した結果、一部の例では歯冠部がほとんど隠れてしまうこともある。ラットを用いた組織学的解析では、歯肉結合組織中でのコラーゲン線維の増生が著明であった。一般に、歯肉結合組織ではコラーゲンの合成と分解のバランスが保たれているが、歯肉増殖症ではこのバランスを保つための機能が障害を受け、Ｉ型コラーゲンの過剰な増生が引き起こされた結果、線維症が発症することが報告されている。発明者等は、カルシウム拮抗薬ニフェジピンを投与したラットでＩ型コラーゲンｍＲＮＡの発現量が抑制されている事から、コラーゲンの分解が抑制された結果線維の蓄積が起こり歯肉増殖症を誘起すると推定した。さらに、ニフェジピン投与により歯肉由来線維芽細胞のコラーゲンファゴサイトーシスが抑制されていることが判明した。従って、コラーゲンの分解が抑制される事が歯肉増殖症の原因の一つであると考えられる（非特許文献１）。
【０００３】
降圧剤として作用するカルシウム拮抗薬ニフェジピン、抗癲癇薬フェニトイン、免疫抑制剤サイクロスポリンＡの長期服用によって歯肉増殖症が惹起される例が知られている。
ニフェジピンと同じジヒドロピリジン系に属するニトレンジピン、オキソジピン、アムロジピン、フェロジピン、さらにジヒドロピリジン系以外のカルシウム拮抗薬であるジルチアゼム、ベラパミルの服用によっても同様の歯肉増殖症が報告されている（非特許文献２）。
【０００４】
これらの薬剤によって誘発される歯肉増殖症の病態は臨床的に共通する特徴を有している。肉眼的には歯冠部を覆うように歯肉が増殖し、歯周組織は線維性に肥厚し、一部の例では歯冠部がほとんど隠れてしまうこともある。高発部位としては上顎よりも下顎、舌側よりも頬側に歯肉増殖が顕著に認められる。発症頻度は、ニフェジピンでは０．８〜８３％、フェニトインでは１０〜５０％、サイクロスポリンＡの場合は８〜７０％の服用患者に歯肉増殖症が報告されている（非特許文献３）。発症頻度に大きい幅があるが、これは対象患者数が少ないこと、歯肉増殖症の定義が明瞭でないために診断基準に差があることが原因の１つと考えられる。
【０００５】
歯肉増殖症の発症機構を明らかにするために、発明者等は若年ラットを用いた実験的歯肉増殖症モデルを開発した。本系では、ニフェジピン、フェニトイン、サイクロスポリンＡのいずれの薬剤も２０齢ラットに各薬剤を経口投与することにより１００％の発症頻度で歯肉増殖症を惹起させることができるが、成熟ラット（５０日齢及び９０日齢）ではほとんど歯肉増殖が起こらなかった。本系を用いた所見から、薬物投与単独で歯肉増殖症がおこる可能性が高いと判断した。
【０００６】
ヒトと同様に、ラットの歯肉増殖症は歯肉結合組織の線維性肥厚すなわちコラーゲン線維の増生として特徴づけられる。歯肉増殖症はＩ型コラーゲンの合成促進あるいは分解抑制によりその過剰な増生が引き起こされた結果、線維症が発症すると報告されている（非特許文献４）。
【０００７】
α２β１インテグリンはコラーゲンの受容体であり、血流中で血小板が細胞外マトリックスに癒着するための重要な役割を果たす。血小板中でのα２β１インテグリン遺伝子の発現レベルはＩ型或いはＩＩＩ型コラーゲンへの癒着と相関する。血小板ではα２インテグリン遺伝子８０７番目の塩基配列がＴＴの場合はＣＣの場合と比べてα２インテグリン遺伝子の発現量は１／３にまで減少する。従って、８０７Ｔ／Ｔのゲノタイプを有する場合には血小板はＩ型コラーゲンに結合しにくい傾向があるといえる（非特許文献５）。
【０００８】
しかし、薬物の長期服用による歯肉増殖症とα２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ多型との関連については、これまで全く知られていない。
【非特許文献１】岡田宏、石川烈、村山洋二監修：「先端医療シリーズ・歯科医学２歯周病  新しい治療を求めて」p444-448、片岡正俊、淺原洋士、永田俊彦：第８節  薬物誘発性歯肉増殖症、先端医療技術研究所出版、2000
【非特許文献２】石田浩、西川聖二、森崎市治郎：ニフェジピンと歯肉増殖症、この薬のこの副作用（松田重三編）、医歯薬出版株式会社、東京、第1版、p212-213、1996
【非特許文献３】Nishikawa S, Nagata T, Morisaki I, Oka T., Ishida H.: Pathogenesis of drug-induced gingival overgrowth. A review of studies in the rat model. J. Periodontol. 67, 463-471, 1996
【非特許文献４】Korn JH, Thrall RS, Wilbar DC et al: Fibroblast heterogeneity: clonal selection of fibroblasts as a model for fibrotic disease. In: Pulmonary fibroblast heterogeneity. Philipps RP, editor. CRC press. Boca Raton, FL: 119-133, 1992
【非特許文献５】T.J. Kunicki, M. Kritzik, D.S.Annis, and D.J.Nugent: Hereditary Variation in Platelet Integrin α２β１ density is associated with two silent polymorphisms in the α２ gene coding sequence, Blood, 89(5), 1939-1943, 1997
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明者らは、鋭意研究を行った結果、α２インテグリン遺伝子（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｘ１７０３３）のＣ８０７Ｔ塩基多型が、薬物の長期服用した患者における歯肉増殖症の発症に影響を与えていることを明らかにし、本発明を完成するに至った。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
すなわち、本発明は、下記のとおりである。
１．生物学的試料中のゲノムＤＮＡ上に存在するα２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ塩基多型を検出する工程を含む、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度を判定するための方法。
２．薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度の判定基準が、下記：
α２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ塩基多型がＴ／Ｔホモ接合型の場合は、最も低い、
α２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ塩基多型がＴ／Ｃヘテロ接合型の場合は、２番目に低い、
α２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ塩基多型がＣ／Ｃホモ接合型の場合は、最も高い、
である、上記１記載の方法。
３．薬物が、降圧剤、抗癲癇剤、免疫抑制剤である、上記１又は２に記載の方法。
４．降圧剤が、カルシウム拮抗剤である、上記１〜３のいずれか１に記載の方法。
５．抗癲癇剤が、フェニトインである、上記１〜３のいずれか１に記載の方法。
６．免疫抑制剤が、サイクロスポリンＡである、上記１〜３のいずれか１に記載の方法。
７．配列番号１の８０７番目の塩基を含み、連続する１５個以上の塩基配列からなるフラグメントを含む、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度を判定するためのキット。
【発明の効果】
【００１１】
本発明は、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度を判定することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
発明者等はラットを用いてニフェジピン、フェニトイン、サイクロスポリンＡを投与することによって歯肉増殖症を発症する実験動物系を確立した。ヒトではこれらの薬剤を長期投与することにより歯肉増殖症が発症する場合とそうではない事例が知られている。
【００１３】
本発明はヒトでの薬剤誘発性歯肉増殖症がある種の遺伝子のＳＮＰｓに関連する可能性を鋭意研究した。その結果、α２インテグリン遺伝子の８０７番目の塩基がシトシン（Ｃ）ではなくチミン（Ｔ）であるＳＮＰ（Ｃ８０７Ｔ塩基多型）が薬剤誘発性歯肉増殖症の発症と明らかに関係することを見出した。
【００１４】
すなわち、α２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ塩基多型がホモ接合体Ｔ／Ｔの時には薬剤誘発性歯肉増殖症の発症が極めて少なく、Ｃ８０７Ｔ塩基多型がホモ接合体Ｃ／Ｃ又はヘテロ接合体Ｔ／Ｃの時には有意差をもって本疾患の発症が高いことを見出した。α２インテグリン遺伝子の８０７番目の塩基は、α２インテグリンタンパク質の２５３番目のアミノ酸であるフェニルアラニンをコードするが、Ｃ８０７Ｔ塩基多型であってもコードするアミノ酸はフェニルアラニンのままである。
【００１５】
したがって、本ＳＮＰｓを調べる事により、予め薬剤誘発性歯肉増殖症の発症リスクを予想することが可能となり、リスクが高いと判断された場合にはそれに対処することができ、薬剤誘発性歯肉増殖症を予防或いは発症を遅らせるか疾患の程度を低減化することが可能となる。
【００１６】
α２インテグリン遺伝子の８０７番目の塩基を含む４ヶ所の一塩基多型は、血小板でのα２β１インテグリン遺伝子の発現に関与していることが報告されているが、薬剤誘発性歯肉増殖症との関連については全く触れられていない（Kritzik M., Savage B., Nugent D.J., Santoso, S., Ruggeri, Z.M., Kunicki T.J.: Nucleotide polymorphisms in the α2 gene define multiple alleles that are associated with differences in platelet α2β1 density, Blood 92, 2382-2388, 1998）。
【００１７】
本発明において、薬物とは、長期服用の副作用として歯肉増殖症を誘導することができるあらゆる薬物をいう。好ましくは、降圧剤、抗癲癇剤又は免疫抑制剤である。
【００１８】
各薬剤の好適例としては、降圧剤としてはカルシウム拮抗剤、より好ましくは、ニフェジピンを、抗癲癇剤としてはフェニトインを、また、免疫抑制剤としてはサイクロスポリンＡを挙げることができる。
【００１９】
長期服用とは、通常の服用回数（１クール〜数クール）を超える回数の服用を行う場合をいう。服用期間は、薬剤によって異なるが、通常４週間を超える服用をいうことが多い。
【００２０】
歯肉増殖症とは、歯肉増殖症とは歯肉（歯茎）がもこもこと線維性に増殖した病気で、上下額の歯肉が著しく増殖する疾患をいう。
【００２１】
本発明において、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度を判定するための基準となる塩基多型は、α２インテグリン遺伝子の第７エクソンの第１２９番目の塩基に相当する位置の一塩基多型（ＳＮＰ）である。この多型は、Takeda及びHemler等の文献[Takeda, Y. and Hemler, M. E.:J. Cell. Biol. 109:397(1989)]に記載の塩基番号に従ってナンバリングされ、「Ｃ８０７Ｔ多型」ともいわれる。
【００２２】
α２インテグリン遺伝子の８０７番目の塩基は、チミン（Ｔ）又はシトシン（Ｃ）であることが確認されている。この部位の塩基は、成熟型α２インテグリンタンパク質の第２２４番目のアミノ酸であるフェニルアラニン（Ｐｈｅ）のコドンの３番目の塩基に相当し、チミン又はシトシンのいずれでも、対応するアミノ酸がフェニルアラニンである、いわゆるサイレントＳＮＰである。
【００２３】
ヒト染色体ＤＮＡは、両親から由来する各一対が存在するので、被検者のＣ８０７Ｔ多型には、両染色体のα２インテグリン遺伝子が共にチミンであるＴ／Ｔ型（Ｔ／Ｔのホモ接合型という）、一方の染色体はシトシンでもう一方の染色体はチミンであるＣ／Ｔ型（Ｃ／Ｔヘテロ接合型という）、そして両染色体ともシトシンであるＣ／Ｃ型（Ｃ／Ｃホモ接合型という）の３つのタイプが存在する。
【００２４】
α２インテグリン遺伝子の８０７番目の塩基がチミンである場合の全長配列を配列番号１に示した。
【００２５】
Ｃ８０７Ｔ多型の解析方法は、当該多型の判別ができる限り、特に限定されず、公知のあらゆる遺伝子多型解析方法を採用することができる。例えば、被検者から採取した血液細胞及び口腔内粘膜細胞等の試料から、染色体ＤＮＡを抽出し、これを鋳型として、目的の多型を含む部分を増幅できるように設計したプライマーを用いてＰＣＲを行い、得られたＰＣＲ産物の塩基配列を解析する方法や、その他、多型に起因する制限酵素切断パターンの違いを利用したＰＣＲ−ＲＦＬＰ法、ＰＣＲプライマーの３’末端にミスマッチがあるとプライマーとして機能しないため増幅が起きないことを利用したアレル特異的ＰＣＲ法、蛍光標識したアレル特異的オリゴとＴａｑＤＮＡポリメラーゼによるＰＣＲ反応とを利用したＴａｑＭａｎ  ＰＣＲ法等によって、遺伝子多型解析を行なうことができる。
【００２６】
さらに、Ｃ８０７Ｔ多型と連鎖不平衡の関係にある多型を解析することによって、Ｃ８０７Ｔ多型を間接的に解析することができる。ここで、「連鎖不平衡」とは、メンデルの独立の法則に従わない遺伝現象、すなわち交雑において生ずる遺伝子の組合せが予想されるだけ起こらず、両親の示した遺伝子の組合せ（本発明においては、遺伝子多型の組み合わせ）がそのまま次の代に残される現象をいい、組み合わされて行動する遺伝子群（遺伝子多型群）が、互いに同一染色体上の近傍に存在するために起こる場合が多い。
【００２７】
例えば、第７エクソン上に存在するＣ８０７Ｔ多型とイントロンＧの第３１６０番目の塩基に相当する位置の一塩基多型とは連鎖不平衡の関係にある。より具体的には、イントロンＧの第３１６０番目の塩基がグアニン（Ｇ）である場合にはＣ８０７Ｔ多型はシトシン（Ｃ）であり、一方、第３１６０番目の塩基がアデニンである場合にはＣ８０７Ｔ多型はチミンである。
【００２８】
例えば、ＰＣＲ−ＲＦＬＰ法によるＣ８０７Ｔ多型の解析は、以下のようにして行うことができる。まず、ＰＣＲ法等の核酸増幅法により、Ｃ８０７Ｔ多型と連鎖不平衡の関係にある、イントロンＧの第３１６０番目の塩基に相当する位置の塩基を含む遺伝子断片を増幅する。鋳型となる遺伝子は、ヒト染色体ＤＮＡであればどのような細胞から採取されたものでもよい。また、ＰＣＲによって増幅する場合には、センスプライマー（ｆｏｒｗａｒｄプライマーともいう）として、上記連鎖不平衡多型部位の上流側に相補的な配列を含むものを用い、アンチセンスプライマー（ｒｅｖｅｒｓｅプライマーともいう）としては、上記連鎖不平衡多型部位の下流側に相補的な配列を含むものを用いることができる。
【００２９】
次いで、増幅されたＰＣＲ断片を制限酵素ＢｇｌＩＩで消化する。８０７Ｃ型遺伝子では、イントロンＧの第３１６０番目の塩基がグアニンであるが、これがアデニンである場合（８０７Ｔ型遺伝子）には、制限酵素ＢｇｌＩＩによって認識・切断される制限酵素部位５’−ａｇａｔｃｔ−３’が出現する。よって、増幅断片を制限酵素ＢｇｌＩＩで消化した場合、８０７Ｃ型遺伝子と８０７Ｔ遺伝子とでは異なったサイズの断片が生じる。すなわち、８０７Ｃ／Ｃ型の場合には未消化の５８１ｂｐの一本のバンドが検出され、８０７Ｔ／Ｔ型の場合には３４３ｂｐ及び２３８ｂｐの二本のバンドが検出され、８０７Ｃ／Ｔ型の場合には５８１ｂｐ、３４３ｂｐ及び２３８ｂｐの三本のバンドが検出される。
【００３０】
また、アレル特異的ＰＣＲ法によるＣ８０７Ｔ多型の解析は、以下のようにして行うことができる。本方法は、より詳細にはプライマーの３’末端に一塩基のミスマッチがあるとプライマーのアニーリングが良好に起こらなくなり、結果としてＰＣＲによる増幅が生じないことを利用した方法である。この方法の成否に大きな影響を及ぼすのは、プライマーの３’末端のミスマッチである。そこで、プライマーを３’末端に変異がくるように設計することで、アレルの型により増幅の可否が決定されるため、アレル特異的ＰＣＲによれば増幅産物の有無によりアレルの型が確認できる。アレル特異的ＰＣＲにおけるこのようなプライマーの設計は、α２インテグリン遺伝子の公知の塩基配列に基づいて行うことができる。
【００３１】
アレル特異的プライマーと、適宜選択した逆方向のプライマーとを組合わせてＰＣＲを行い、８０７Ｔアレル特異的プライマーでＰＣＲを行った場合のみ増幅産物が確認された場合は８０７Ｔ／Ｔ型、８０７Ｃアレル特異的プライマーでＰＣＲを行った場合のみ増幅産物が確認された場合は８０７Ｃ／Ｃ型、両方の場合で増幅産物が確認された場合は８０７Ｃ／Ｔ型と判定することができる。
【００３２】
解析の結果、α２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ一塩基多型がＴ／Ｔホモ接合型の場合は、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度が最も低く、α２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ一塩基多型がＴ／Ｃヘテロ接合型の場合は、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度が２番目に低く、α２インテグリン遺伝子のＣ８０７Ｔ一塩基多型がＣ／Ｃホモ接合型の場合は、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度が最も高いと判定することができる。
【００３３】
上記のＣ８０７Ｔ多型をタイピングするためのプライマーを構成要素として含むキットは、薬物の長期服用による歯肉増殖症の発症の危険度判定用キットとして使用することがでる。このキットには、必要に応じ、各ヌクレオチド混液、希釈溶液等を追加することができる。
【実施例】
【００３４】
以下に、本発明の実施例を示して具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。
【００３５】
長期間の薬剤服用患者の年齢は、サイクロスポリン服用者は５〜８歳、カルシウム拮抗薬及び抗癲癇剤フェニトイン服用者の年齢範囲は４０〜５０歳である。カルシウム拮抗薬としてニフェジピン、ヘルベッサー、ノルバスク、アダラート、アムロジン、コニール、スプレンジール、ペルジピンが服用されている。歯肉増殖症の発症群として６１名の患者を、歯肉増殖症非発症群として５７名の患者を選んだ。  これらの患者群ではサイクロスポリン、カルシウム拮抗薬、フェニトインがそれぞれ長期間投薬され、それら薬剤の副作用として歯肉増殖症が発症した群と発症しない群に分類した。歯肉増殖症の判定は一歯以上の部位で歯冠１／２以上線維性肥厚を認めた場合を歯肉増殖症と判定し、線維性肥厚を認めない場合を正常と判定した。
【００３６】
歯肉増殖症発症者及び非発症者より血液をＥＤＴＡ入りの採血管に採取し、宝酒造株式会社製のＤＮＡ抽出試薬（Ｇｅｎとるくん、血液用）を用いてＤＮＡを調製した。
【００３７】
α２インテグリン遺伝子の８０７番目の塩基がＣかＴかを判別するためにダイレクトシーケンス法を用いて塩基配列を決定した。調製したＤＮＡを鋳型とし、forward primer（配列番号３）又はreverse primer（配列番号４）をプライマーとして用いて、Thermo Sequenase Cy5.5 Dye Terminator Sequencing Kit（Amersham Biosciences）を使用して製造者の説明書に従ってシーケンス反応を行い、標識ＤＮＡを分離した。この試料をAmersham BiosciencesのGene Rapidにアプライし、電気泳動を行い、α２インテグリン遺伝子の第７エクソンのforward primerからイントロンＧのreverse primerまでのシーケンスの結果を得た（配列番号５）。
【００３８】
その結果を解析し、α２インテグリン遺伝子の８０７番目の塩基がホモ接合体のＴ（Ｔ／Ｔ）か、ホモ接合体のＣ（Ｃ／Ｃ）か、ヘテロ接合体のＴ／Ｃかを判定した。成熟型α２インテグリンタンパク質の２２４番目はフェニルアラニン（Ｐｈｅ）をコードしており、８０７番目の塩基はその第３番目の塩基であり、この配列がＣでもＴでもコドンはＴＴＣ或いはＴＴＴであり、いずれもフェニルアラニンをコードしておりアミノ酸置換は生じない。歯肉増殖症発症者と非発症者で、α２インテグリン遺伝子の８０７番目の塩基のＳＮＰの結果を下記に示した。
【００３９】
該当薬服用者で歯肉増殖症を誘発した患者群と誘発しない患者群とのα２インテグリン遺伝子８０７番目のＳＮＰの関係
χ２検定  ２×３                                          
ＳＮＰ型  歯肉増殖症発症者  歯肉増殖症非発症者      合計 
Ｔ／Ｔ          ４              １７              ２１
Ｔ／Ｃ        ２４              ２０              ４４
Ｃ／Ｃ        ３３              ２０              ５３ 
小計            ６１              ５７            １１８ 
ｐ＝０．００３
【００４０】
χ２検定  ２×２                                          
ＳＮＰ型  歯肉増殖症発症者  歯肉増殖症非発症者      合計 
Ｔ            ３２              ５４              ８６
Ｃ            ９０              ６０            １５０ 
小計          １２２            １１４            ２３６ 
ｐ＝０．０００７
【００４１】
χ２検定２×３では歯肉増殖症発症者６１人中遺伝子型としてＴ／Ｔが４人、Ｔ／Ｃを示す者が２４人、Ｃ／Ｃが３３人であった。歯肉増殖症非発症者５７人のうちＴ／Ｔが１７人、Ｔ／Ｃが２０人、Ｃ／Ｃが５７人であった。この遺伝子型をχ２検定するとｐ値は０．００３となり、統計的にこれらの遺伝子型と歯肉増殖症は相関する結果となった。すなわち、α２インテグリン遺伝子の８０７番目の塩基がＴ／Ｔの場合には薬物誘発性歯肉増殖症は発症頻度が低く、Ｔ／Ｃ及びＣ／Ｃの場合にはその頻度は高い値を示した。
【００４２】
χ２検定２×２では歯肉増殖症発症者のアレル頻度としてＴについては４×２（Ｔ／Ｔは４名）＋１×２４（Ｔ／Ｃは２４名）＝３２となる。Ｃについては２０×１（非発症者でＴ／Ｃは２０名）＋２０×２（非発症者でＣ／Ｃは２０名）＝６０となる。これをχ２検定するとｐ値は０．０００７となり、統計的にこれらアレル頻度と歯肉増殖症の発症は相関する結果となった。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本方法は、薬物の長期服用による歯肉増殖症の治療方針の策定において有用である。
【配列表】
2006136241000001.app