(57)【要約】【課題】この発明は、キノコ由来の糖類分解酵素阻害活性剤（α−グルコシダーゼ阻害活性剤、及びスクラーゼ阻害活性剤）及びこれを含有する健康食品を提供することを目的とする。【解決手段】（１）カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ等のキノコの菌糸体由来物質の1以上を含有する糖類分解酵素阻害活性剤。（２）キノコ菌糸体由来物質が、キノコ菌糸体の熱水抽出物である前記糖類分解酵素阻害活性剤。（３）前記糖類分解酵素阻害活性剤を含有する健康食品。【選択図】  なし。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記に記載するキノコの菌糸体由来物質の1以上を含有することを特徴とする糖類分解酵素阻害活性剤。
（１）ヤマブシタケ（Ｈｅｒｉｃｉｕｍ  ｅｒｉｎａｃｅｕｍ）
（２）マイタケ（Ｇｒｉｆｏｌａ  ｆｒｏｎｄｏｓａ）
（３）ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｓｈｉｍｅｊｉ）
（４）ハナビラタケ（Ｓｐａｒａｓｓｓｉｓ  ｃｒｉｓｐａ）
（５）カラカサタケモドキ（Ｍａｃｒｏｌｅｐｉｔａ  ｇｒａｃｉｌｅｎｔａ）
（６）カアバノアナタケ（Ｆｕｓｃｏｐｏｒｉａ  ｏｂｌｉｑｕａ）
（７）タモギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ）
（８）マツタケ（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ  ｍａｔｓｕｔａｋｅ）
（９）エリンギ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｅｒｙｎｇｉｉ）
（１０）ブナハリタケ（Ｍｙｃｏｌｅｐｔｏｄｏｎｏｉｄｅｓ  ａｉｔｃｈｉｓｏｎｉｉ）
（１１）ハタケシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｄｅｃａｓｔｅｓ）
（１２）カンゾウタケ（Ｆｉｓｔｕｌｉｎａ  ｈｅｐａｔｉｃａ）
（１３）シロアギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｎｅｂｒｏｄｅｎｓｉｓ）
（１４）ツリガネタケ（Ｆｏｍｅｓ  ｆｏｍｅｎｔａｒｉｕｓ）
（１５）ムキタケ（Ｈｏｅｎｂｕｅｈｅｌｉａ  ｓｅｒｏｔｉｎａ）
（１６）ヤケコゲタケ（Ｉｎｏｎｏｔｕｓ  ｈｉｓｐｉｄｕｓ）
（１７）カワリハツ（Ｒｕｓｓｕｌａ  ｃｙａｎｏｘａｎｔｈａ）
（１８）冬虫夏草（Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ  ｍｉｌｉｔａｌｉｓ）
（１９）クリタケ（Ｎａｅｍａｔｏｌｏｍａ  ｓｕｂｌａｔｅｒｉｔｉｕｍ）
【請求項２】
キノコ菌糸体由来物質が、キノコ菌糸体の熱水抽出物である請求項１に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項３】
キノコが、カバノアナタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項４】
キノコが、ハナビラタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項５】
キノコが、ハタケシメジである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項６】
キノコが、エリンギある請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項７】
キノコが、ブナハリタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項８】
キノコが、マツタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項９】
キノコが、カラカサタケモドキである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項１０】
キノコが、ホンシメジである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項１１】
キノコが、シロアギタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項１２】
キノコが、マイタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項１３】
キノコが、ヤマブシタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項１４】
キノコが、カンゾウタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項１５】
キノコが、タモギタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項１６】
キノコが、ツリガネタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項１７】
キノコが、ムキタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項１８】
キノコが、ヤケコゲタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項１９】
キノコが、カワリハツである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項２０】
キノコが、冬虫夏草である請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項２１】
キノコが、クリタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
【請求項２２】
前記請求項１から請求項２１に記載する糖類分解酵素阻害剤を含有することを特徴とする健康食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、糖類分解酵素阻害剤に関するものであり、更に詳しくは、キノコ（カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケ、ツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ）の菌糸体由来物質の1以上を含有する糖類分解酵素阻害剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
一般に糖尿病は、インスリン依存型糖尿病（ＩＤＤＮ）とインスリン非依存型（ＮＩＤＤＮ）に大別されるが、現在世界的に、特にインスリン非依存型が急増しており、工業化・近代化に伴う生活習慣の変化に伴う現代病として世界的な問題となっている。
この問題を解決するために、副作用の少ない天然物由来の糖尿病治療効果、血糖降下作用を有する物質がキノコについても検索され、従来、アガリクス（Ａｇａｒｉｃｕｓ ｂｌａｚｅｉ  Ｍｕｒｉｌｌ）とメシマコブ（Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ ｌｉｎｔｅｕｓ ）については、これらの成分を含有する糖尿病治療剤、血糖降下剤が知られている。
【特許文献１】特開平１１−８００１４
【特許文献２】特開２００４−１５５６６７
【特許文献３】特開２００４−１６８６８９
【特許文献４】特開２００４−３３１５６７
【０００３】
しかしながら、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケ、ツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ等のキノコ（特にこれらのキノコの菌糸体由来成分）についての糖尿病治療効果、血糖降下作用は知られていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
そこで発明者等は、副作用の少ない天然物由来の糖尿病治療効果、血糖降下作用を有する物質を得るために、アガリクスとメシマコブ以外のキノコに着目し、鋭意研究したところ、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ等のキノコ（特にこれらのキノコの菌糸体由来成分）には、顕著なα―グルコシダーゼ阻害活性、及びスクラーゼ活性阻害作用が存在することを知り本発明を完成した。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本願発明は、下記の請求項１〜請求項２２により構成されている。
請求項１：  下記に記載する（１）〜（２２）のキノコの菌糸体由来物質の1以上を含有することを特徴とする糖類分解酵素阻害活性剤。
（１）ヤマブシタケ（Ｈｅｒｉｃｉｕｍ  ｅｒｉｎａｃｅｕｍ）
（２）マイタケ（Ｇｒｉｆｏｌａ  ｆｒｏｎｄｏｓａ）
（３）ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｓｈｉｍｅｊｉ）
（４）ハナビラタケ（Ｓｐａｒａｓｓｓｉｓ  ｃｒｉｓｐａ）
（５）カラカサタケモドキ（Ｍａｃｒｏｌｅｐｉｔａ  ｇｒａｃｉｌｅｎｔａ）
（６）カアバノアナタケ（Ｆｕｓｃｏｐｏｒｉａ  ｏｂｌｉｑｕａ）
（７）タモギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ）
（８）マツタケ（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ  ｍａｔｓｕｔａｋｅ）
（９）エリンギ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｅｒｙｎｇｉｉ）
（１０）ブナハリタケ（Ｍｙｃｏｌｅｐｔｏｄｏｎｏｉｄｅｓ  ａｉｔｃｈｉｓｏｎｉｉ）
（１１）ハタケシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｄｅｃａｓｔｅｓ）
（１２）カンゾウタケ（Ｆｉｓｔｕｌｉｎａ  ｈｅｐａｔｉｃａ）
（１３）シロアギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｎｅｂｒｏｄｅｎｓｉｓ）
（１４）ツリガネタケ（Ｆｏｍｅｓ  ｆｏｍｅｎｔａｒｉｕｓ）
（１５）ムキタケ（Ｈｏｅｎｂｕｅｈｅｌｉａ  ｓｅｒｏｔｉｎａ）
（１６）ヤケコゲタケ（Ｉｎｏｎｏｔｕｓ  ｈｉｓｐｉｄｕｓ）
（１７）カワリハツ（Ｒｕｓｓｕｌａ  ｃｙａｎｏｘａｎｔｈａ）
（１８）冬虫夏草（Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ  ｍｉｌｉｔａｌｉｓ）
（１９）クリタケ（Ｎａｅｍａｔｏｌｏｍａ  ｓｕｂｌａｔｅｒｉｔｉｕｍ）
請求項２：  キノコ菌糸体由来物質が、キノコ菌糸体の熱水抽出物である請求項１に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項３：  キノコが、カバノアナタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項４：  キノコが、ハナビラタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項５：  キノコが、ハタケシメジである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項６：  キノコが、エリンギある請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項７：  キノコが、ブナハリタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項８：  キノコが、マツタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項９：  キノコが、カラカサタケモドキである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項１０：  キノコが、ホンシメジである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項１１：  キノコが、シロアギタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項１２：  キノコが、マイタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項１３：  キノコが、ヤマブシタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項１４：  キノコが、カンゾウタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項１５：  キノコが、タモギタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項１６：  キノコが、ツリガネタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項１７：  キノコが、ムキタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項１８：  キノコが、ヤケコゲタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項１９：  キノコが、カワリハツである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項２０：  キノコが、冬虫夏草である請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤。
請求項２１：  キノコが、クリタケである請求項1又は請求項2に記載する糖類分解酵素阻害剤
請求項２２：  前記請求項１から請求項２１に記載する糖類分解酵素阻害剤を含有することを特徴とする健康食品。
【０００６】
本願発明を以上のように構成する理由は、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ等のキノコ（特にこれらのキノコの菌糸体由来成分）の菌糸体由来成分には、顕著なα―グルコシダーゼ阻害活性、及びスクラーゼ活性阻害作用が存在するので、糖尿病治療剤、血糖降下剤として利用が期待できるからである。
【発明の効果】
【０００７】
本願発明によれば、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ等のキノコ（特にこれらのキノコの菌糸体由来成分）の菌糸体から、天然物由来で副作用の心配のない顕著なα―グルコシダーゼ阻害活性、及びスクラーゼ阻害活性作用を有する糖類分解酵素阻害剤が容易に得られるという効果を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
＊各キノコの菌糸体乾燥粉末の取得
本発明に係る１３種類のキノコ（カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ）を下記の条件で各々培養した。
大型タンク（１０００Ｌ）を用いて、炭素源としてグルコースを４．０％、天然物由来窒素源イーストエキス及びポリぺプトンを各０．３％、ＫＨ2ＰＯ4及びＮａ2ＨＰＯ4 を各０．０５％を含み、初発培地ｐＨ５．５の培養液に、各キノコの菌糸体を接種し、強制的に０．２２μｍフィルターを通した無菌空気を培地内へ通気し、温度２８℃で４５日間培養した。
この培養液を遠心分離して得られた菌糸体を凍結乾燥して各キノコの菌糸体の乾燥粉末を得た。
【０００９】
＊各キノコの菌糸体の熱水抽出物
前記各キノコの菌糸体の乾燥粉末に１０倍量のイオン交換水を加え、１００℃で２時間、熱水抽出処理を行ない、不溶物を除去して各キノコの菌糸体の熱水抽出物を得た。この熱水抽出物を約７０℃で減圧濃縮した後凍結乾燥した。
なお、前記各キノコの乾燥菌糸体粉末１３００ｇより、前記各キノコの熱水抽出乾燥物が約１２０〜１８０ｇ得られた。
【００１０】
＊α―グルコシダーゼ阻害活性、及びスクラーゼ阻害活性効果の測定
（１）被検試料（前記１９種類の各キノコの菌糸体の熱水抽出物）の調製
前記各キノコの各熱水抽出乾燥物をマレイン酸緩衝液（マレイン酸５．６ｇに、１Ｎ水酸化ナトリウム７８ｍｌを加え、蒸留水にて５００ｍｌとした後、ｐＨ６．０に調製したもの）に溶解し、試料濃度を、５ｍｇ／ｍｌ、及び１ｍｇ／ｍｌに調製したものを使用した。
（２）酵素溶液の調製
市販ラット腸管由来アセトンパウダー（ＳＩＧＭＡ社）０．１ｇにマレイン酸緩衝液３ｍｌを加え、氷中にてソニケーション（出力レベル３．１０秒×２４回）し、酵素を均一に抽出した後、１１０００ｒｐｍ、１５ｍｉｎ、４℃で遠心分離し、上清を採取し酵素溶液とした。
この酵素溶液を、α―グルコシダーゼ阻害活性試験においては、２倍に希釈したものを使用し、又スクラーゼ阻害活性試験においてはそのまま使用した。
（３）α−グルコシダーゼ阻害活性評価（測定）
前記酵素溶液１００μｌと被検試料溶液５０μｌをエッペンチューブに入れ、５分間３７℃でプレインキュベートし、１．５ｍＭ  ｐ−ニトロフェニル−α−グルコピラノシド溶液１００ｍｌ（基質）を加えた。ブランクにはマレイン酸緩衝液を加えた。更に１５分間３７℃でインキュベートした後、５分間１００℃で熱処理することにより、酵素反応を停止させた。ヒートブロックより取り出し、０．１モルリン酸水素二ナトリウム溶液５００μｌを加え、６０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ、４℃で遠心分離した後、波長４００ｎｍ（黄色）で吸光度を測定した。
本測定にいて、基質から遊離するｐ−ニトロフェノールの検量線を図１に示す。
（４）スクラーゼ阻害活性評価（測定）
前記酵素溶液５０μｌと被検試料溶液５０μｌをエッペンチューブに入れ、５分間３７℃でプレインキュベートし、６０ｍＭ  スクロース溶液１００ｍｌ（基質）を加えた。ブランクにはマレイン酸緩衝液を加えた。更に１５分間３７℃でインキュベートした後、３，５−ジニトロサリチル酸試薬２００μｌを加え、５分間１００℃で熱処理することにより、酵素反応を停止させた。ヒートブロックより取り出し、蒸留水１ｍｌを加え、６０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ、４℃で遠心分離した後、波長５４０ｎｍ（橙色）で吸光度を測定した。
本測定にいて、生成される３−アミノ−５−ニトロサリチル酸の検量線を図２に示す。
【００１１】
（５）各キノコのサンプル（熱水抽出乾燥物）の５ｍｇ／ｍｌ、及び１ｍｇ／ｍｌの）α−グルコシダーゼ阻害活性阻害率、及びスクラーゼ阻害活性阻害率の測定結果を表１に示す。
表1の結果によれば、前記キノコは、優れた糖類分解酵素阻害活性を有することがわかる。
【００１２】
【表１】
2006347960.tif 000002
【００１３】
前記各キノコの熱水抽出物は、そのまま、又は他の任意の食品（粉末）、又は任意の健康食品（粉末）と混合して摂取することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】α−グルコシダーゼ阻害活性評価の検量線を示す図である。
【図２】スクラーゼ阻害活性評価の検量線を示す図である。
【図１】
2006347960.tif 000003
【図２】
2006347960.tif 000004
【手続補正書】
【提出日】平成17年9月2日(2005.9.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記に記載する（１）〜（１９）のキノコの菌糸体由来物質の１以上を含有することを特徴とする糖類分解酵素阻害活性剤。
（１）ヤマブシタケ（Ｈｅｒｉｃｉｕｍ  ｅｒｉｎａｃｅｕｍ）
（２）マイタケ（Ｇｒｉｆｏｌａ  ｆｒｏｎｄｏｓａ）
（３）ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｓｈｉｍｅｊｉ）
（４）ハナビラタケ（Ｓｐａｒａｓｓｓｉｓ  ｃｒｉｓｐａ）
（５）カラカサタケモドキ（Ｍａｃｒｏｌｅｐｉｔａ  ｇｒａｃｉｌｅｎｔａ）
（６）カアバノアナタケ（Ｆｕｓｃｏｐｏｒｉａ  ｏｂｌｉｑｕａ）
（７）タモギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ）
（８）マツタケ（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ  ｍａｔｓｕｔａｋｅ）
（９）エリンギ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｅｒｙｎｇｉｉ）
（１０）ブナハリタケ（Ｍｙｃｏｌｅｐｔｏｄｏｎｏｉｄｅｓ  ａｉｔｃｈｉｓｏｎｉｉ）
（１１）ハタケシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｄｅｃａｓｔｅｓ）
（１２）カンゾウタケ（Ｆｉｓｔｕｌｉｎａ  ｈｅｐａｔｉｃａ）
（１３）シロアギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｎｅｂｒｏｄｅｎｓｉｓ）
（１４）ツリガネタケ（Ｆｏｍｅｓ  ｆｏｍｅｎｔａｒｉｕｓ）
（１５）ムキタケ（Ｈｏｅｎｂｕｅｈｅｌｉａ  ｓｅｒｏｔｉｎａ）
（１６）ヤケコゲタケ（Ｉｎｏｎｏｔｕｓ  ｈｉｓｐｉｄｕｓ）
（１７）カワリハツ（Ｒｕｓｓｕｌａ  ｃｙａｎｏｘａｎｔｈａ）
（１８）冬虫夏草（Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ  ｍｉｌｉｔａｌｉｓ）
（１９）クリタケ（Ｎａｅｍａｔｏｌｏｍａ  ｓｕｂｌａｔｅｒｉｔｉｕｍ）
【請求項２】
キノコ菌糸体由来物質が、キノコ菌糸体の熱水抽出物である請求項１に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項３】
キノコが、カバノアナタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項４】
キノコが、ハナビラタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項５】
キノコが、ハタケシメジである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項６】
キノコが、エリンギある請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項７】
キノコが、ブナハリタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項８】
キノコが、マツタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項９】
キノコが、カラカサタケモドキである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項１０】
キノコが、ホンシメジである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項１１】
キノコが、シロアギタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項１２】
キノコが、マイタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項１３】
キノコが、ヤマブシタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項１４】
キノコが、カンゾウタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項１５】
キノコが、タモギタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項１６】
キノコが、ツリガネタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項１７】
キノコが、ムキタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項１８】
キノコが、ヤケコゲタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項１９】
キノコが、カワリハツである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項２０】
キノコが、冬虫夏草である請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項２１】
キノコが、クリタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
【請求項２２】
前記請求項１から請求項２１に記載する糖類分解酵素阻害活性剤を含有することを特徴とする健康食品。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、糖類分解酵素阻害活性剤に関するものであり、更に詳しくは、キノコ（カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケ、ツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ）の菌糸体由来物質の1以上を含有する糖類分解酵素阻害活性剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
一般に糖尿病は、インスリン依存型糖尿病（ＩＤＤＮ）とインスリン非依存型（ＮＩＤＤＮ）に大別されるが、現在世界的に、特にインスリン非依存型が急増しており、工業化・近代化に伴う生活習慣の変化に伴う現代病として世界的な問題となっている。
この問題を解決するために、副作用の少ない天然物由来の糖尿病治療効果、血糖降下作用を有する物質がキノコについても検索され、従来、アガリクス（Ａｇａｒｉｃｕｓ ｂｌａｚｅｉ  Ｍｕｒｉｌｌ）とメシマコブ（Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ ｌｉｎｔｅｕｓ ）については、これらの成分を含有する糖尿病治療剤、血糖降下剤が知られている。
【特許文献１】特開平１１−８００１４
【特許文献２】特開２００４−１５５６６７
【特許文献３】特開２００４−１６８６８９
【特許文献４】特開２００４−３３１５６７
【０００３】
しかしながら、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケ、ツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ等のキノコ（特にこれらのキノコの菌糸体由来成分）についての糖尿病治療効果、血糖降下作用は知られていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
そこで発明者等は、副作用の少ない天然物由来の糖尿病治療効果、血糖降下作用を有する物質を得るために、アガリクスとメシマコブ以外のキノコに着目し、鋭意研究したところ、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ等のキノコ（特にこれらのキノコの菌糸体由来成分）には、顕著なα―グルコシダーゼ阻害活性、及びスクラーゼ阻害活性作用が存在することを知り本発明を完成した。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本願発明は、下記の請求項１〜請求項２２により構成されている。
請求項１：  下記に記載する（１）〜（１９）のキノコの菌糸体由来物質の１以上を含有することを特徴とする糖類分解酵素阻害活性剤。
（１）ヤマブシタケ（Ｈｅｒｉｃｉｕｍ  ｅｒｉｎａｃｅｕｍ）
（２）マイタケ（Ｇｒｉｆｏｌａ  ｆｒｏｎｄｏｓａ）
（３）ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｓｈｉｍｅｊｉ）
（４）ハナビラタケ（Ｓｐａｒａｓｓｓｉｓ  ｃｒｉｓｐａ）
（５）カラカサタケモドキ（Ｍａｃｒｏｌｅｐｉｔａ  ｇｒａｃｉｌｅｎｔａ）
（６）カアバノアナタケ（Ｆｕｓｃｏｐｏｒｉａ  ｏｂｌｉｑｕａ）
（７）タモギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ）
（８）マツタケ（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ  ｍａｔｓｕｔａｋｅ）
（９）エリンギ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｅｒｙｎｇｉｉ）
（１０）ブナハリタケ（Ｍｙｃｏｌｅｐｔｏｄｏｎｏｉｄｅｓ  ａｉｔｃｈｉｓｏｎｉｉ）
（１１）ハタケシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｄｅｃａｓｔｅｓ）
（１２）カンゾウタケ（Ｆｉｓｔｕｌｉｎａ  ｈｅｐａｔｉｃａ）
（１３）シロアギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｎｅｂｒｏｄｅｎｓｉｓ）
（１４）ツリガネタケ（Ｆｏｍｅｓ  ｆｏｍｅｎｔａｒｉｕｓ）
（１５）ムキタケ（Ｈｏｅｎｂｕｅｈｅｌｉａ  ｓｅｒｏｔｉｎａ）
（１６）ヤケコゲタケ（Ｉｎｏｎｏｔｕｓ  ｈｉｓｐｉｄｕｓ）
（１７）カワリハツ（Ｒｕｓｓｕｌａ  ｃｙａｎｏｘａｎｔｈａ）
（１８）冬虫夏草（Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ  ｍｉｌｉｔａｌｉｓ）
（１９）クリタケ（Ｎａｅｍａｔｏｌｏｍａ  ｓｕｂｌａｔｅｒｉｔｉｕｍ）
請求項２：  キノコ菌糸体由来物質が、キノコ菌糸体の熱水抽出物である請求項１に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項３：  キノコが、カバノアナタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項４：  キノコが、ハナビラタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項５：  キノコが、ハタケシメジである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項６：  キノコが、エリンギある請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項７：  キノコが、ブナハリタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項８：  キノコが、マツタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項９：  キノコが、カラカサタケモドキである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項１０：  キノコが、ホンシメジである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項１１：  キノコが、シロアギタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項１２：  キノコが、マイタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項１３：  キノコが、ヤマブシタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項１４：  キノコが、カンゾウタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項１５：  キノコが、タモギタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項１６：  キノコが、ツリガネタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項１７：  キノコが、ムキタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項１８：  キノコが、ヤケコゲタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項１９：  キノコが、カワリハツである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項２０：  キノコが、冬虫夏草である請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項２１：  キノコが、クリタケである請求項１又は請求項２に記載する糖類分解酵素阻害活性剤。
請求項２２：  前記請求項１から請求項２１に記載する糖類分解酵素阻害活性剤を含有することを特徴とする健康食品。
【０００６】
本願発明を以上のように構成する理由は、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ等のキノコ（特にこれらのキノコの菌糸体由来成分）の菌糸体由来成分には、顕著なα―グルコシダーゼ阻害活性、及びスクラーゼ阻害活性作用が存在するので、糖尿病治療剤、血糖降下剤として利用が期待できるからである。
【発明の効果】
【０００７】
本願発明によれば、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ等のキノコ（特にこれらのキノコの菌糸体由来成分）の菌糸体から、天然物由来で副作用の心配のない顕著なα―グルコシダーゼ阻害活性、及びスクラーゼ阻害活性作用を有する糖類分解酵素阻害活性剤が容易に得られるという効果を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
＊各キノコの菌糸体乾燥粉末の取得
本発明に係る１３種類のキノコ（カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケツリガネタケ、ムキタケ、ヤケコゲタケ、カワリハツ、冬虫夏草、クリタケ）を下記の条件で各々培養した。
大型タンク（１０００Ｌ）を用いて、炭素源としてグルコースを４．０％、天然物由来窒素源イーストエキス及びポリぺプトンを各０．３％、ＫＨ2ＰＯ4及びＮａ2ＨＰＯ4 を各０．０５％を含み、初発培地ｐＨ５．５の培養液に、各キノコの菌糸体を接種し、強制的に０．２２μｍフィルターを通した無菌空気を培地内へ通気し、温度２８℃で４５日間培養した。
この培養液を遠心分離して得られた菌糸体を凍結乾燥して各キノコの菌糸体の乾燥粉末を得た。
【０００９】
＊各キノコの菌糸体の熱水抽出物
前記各キノコの菌糸体の乾燥粉末に１０倍量のイオン交換水を加え、１００℃で２時間、熱水抽出処理を行ない、不溶物を除去して各キノコの菌糸体の熱水抽出物を得た。この熱水抽出物を約７０℃で減圧濃縮した後凍結乾燥した。
なお、前記各キノコの乾燥菌糸体粉末１３００ｇより、前記各キノコの熱水抽出乾燥物が約１２０〜１８０ｇ得られた。
【００１０】
＊α―グルコシダーゼ阻害活性、及びスクラーゼ阻害活性効果の測定
（１）被検試料（前記１９種類の各キノコの菌糸体の熱水抽出物）の調製
前記各キノコの各熱水抽出乾燥物をマレイン酸緩衝液（マレイン酸５．６ｇに、１Ｎ水酸化ナトリウム７８ｍｌを加え、蒸留水にて５００ｍｌとした後、ｐＨ６．０に調製したもの）に溶解し、試料濃度を、５ｍｇ／ｍｌ、及び１ｍｇ／ｍｌに調製したものを使用した。
（２）酵素溶液の調製
市販ラット腸管由来アセトンパウダー（ＳＩＧＭＡ社）０．１ｇにマレイン酸緩衝液３ｍｌを加え、氷中にてソニケーション（出力レベル３．１０秒×２４回）し、酵素を均一に抽出した後、１１０００ｒｐｍ、１５ｍｉｎ、４℃で遠心分離し、上清を採取し酵素溶液とした。
この酵素溶液を、α―グルコシダーゼ阻害活性試験においては、２倍に希釈したものを使用し、又スクラーゼ阻害活性試験においてはそのまま使用した。
（３）α−グルコシダーゼ阻害活性評価（測定）
前記酵素溶液１００μｌと被検試料溶液５０μｌをエッペンチューブに入れ、５分間３７℃でプレインキュベートし、１．５ｍＭ  ｐ−ニトロフェニル−α−グルコピラノシド溶液１００ｍｌ（基質）を加えた。ブランクにはマレイン酸緩衝液を加えた。更に１５分間３７℃でインキュベートした後、５分間１００℃で熱処理することにより、酵素反応を停止させた。ヒートブロックより取り出し、０．１モルリン酸水素二ナトリウム溶液５００μｌを加え、６０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ、４℃で遠心分離した後、波長４００ｎｍ（黄色）で吸光度を測定した。
本測定にいて、基質から遊離するｐ−ニトロフェノールの検量線を図１に示す。
（４）スクラーゼ阻害活性評価（測定）
前記酵素溶液５０μｌと被検試料溶液５０μｌをエッペンチューブに入れ、５分間３７℃でプレインキュベートし、６０ｍＭ  スクロース溶液１００ｍｌ（基質）を加えた。ブランクにはマレイン酸緩衝液を加えた。更に１５分間３７℃でインキュベートした後、３，５−ジニトロサリチル酸試薬２００μｌを加え、５分間１００℃で熱処理することにより、酵素反応を停止させた。ヒートブロックより取り出し、蒸留水１ｍｌを加え、６０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ、４℃で遠心分離した後、波長５４０ｎｍ（橙色）で吸光度を測定した。
本測定にいて、生成される３−アミノ−５−ニトロサリチル酸の検量線を図２に示す。
【００１１】
（５）各キノコのサンプル（熱水抽出乾燥物）の５ｍｇ／ｍｌ、及び１ｍｇ／ｍｌの）α−グルコシダーゼ阻害活性率、及びスクラーゼ阻害活性率の測定結果を表１に示す。
表1の結果によれば、前記キノコは、優れた糖類分解酵素阻害活性を有することがわかる。
【００１２】
【表１】
2006347960.tif 000005
【００１３】
前記各キノコの熱水抽出物は、そのまま、又は他の任意の食品（粉末）、又は任意の健康食品（粉末）と混合して摂取することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】α−グルコシダーゼ阻害活性評価の検量線を示す図である。
【図２】スクラーゼ阻害活性評価の検量線を示す図である。