(57)【要約】 【課題】  表皮の脂質含有量を改善し、皮膚の柔軟性を高めるための薬剤及び組成物を提供する。【解決手段】  次の式(Ｉ)：【化１】2006070048.tif 000005{上式中：Ｒ１は水素原子等を表し、Ｒ２は糖残基又は-ＣＯＲ５基を表し、ここでＲ５は、置換されていてもよい、直鎖状、環状又は分枝状で飽和又は不飽和のＣ１-Ｃ２０炭化水素基等を表し、Ｒ３及びＲ４は同一でも異なっていてもよく、水素原子又は上述した-ＣＯＲ５基を表すか、又は互いに共同してイソプロピリデン基を形成する}のアスコルビン酸誘導体又はこの誘導体の塩を使用する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
−  アスコルビン酸の２-Ｏ-α-Ｄ-グルコピラノシル、
−  (５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-ヘキサデカノアート、
−  アスコルビル-２-シンナマート、
−  アスコルビル-２-フェルラート、
−  (５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-フェルラート、及び
−  (５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-(４-アセトキシフェルラート)、
からなる群から選択される少なくとも１種のアスコルビン酸誘導体又はこの誘導体の塩類からなる、表皮セラミドの合成を増大させる薬剤。
【請求項２】
アスコルビン酸誘導体が、アスコルビン酸の２-Ｏ-α-Ｄ-グルコピラノシルと(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-ヘキサデカノアートから選択されることを特徴とする請求項１に記載の薬剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の少なくとも１つの薬剤からなる、再構成された表皮のバリアー機能及び／又は脂質含有量を改善するための薬剤。
【発明の詳細な説明】
【発明の開示】
【０００１】
本発明は、表皮セラミド類の合成を増大させるための、組成物の製造における所定のアスコルビン酸誘導体の使用に関する。
【０００２】
ヒトの皮膚は、２つの区画、すなわち深層区画である真皮と表層区画である表皮とからなる。
真皮は表皮に堅牢な支持部を付与している。真皮はまた表皮の栄養因子でもある。真皮は、主として線維芽細胞と細胞外マトリックスとからなり、細胞外マトリックス自体は、主にコラーゲン、エラスチン及び基底物質と称される物質から構成され、これら成分は線維芽細胞によって合成される。さらに、白血球、肥満細胞又は組織マクロファージもまたその内部に見出される。またさらに、真皮は血管と神経線維も含んでいる。
【０００３】
表皮は外部の環境と接している。表皮の役割は、脱水と、化学的、機械的、物理的なものであれ、又は感染性攻撃であれ、外部要因から体を保護することにある。
天然のヒトの表皮は、主に三種の細胞、すなわち、大部分を占めるケラチノサイトとメラノサイトとランゲルハンス細胞から構成されている。これらの細胞型の各々は、その特定の機能を通じて、生物体において皮膚が果たす本質的な役割に寄与している。
【０００４】
表皮を構成する細胞は脂質ドメインにより画成されている。分化の間、その役割が表皮の生きている層の細胞膜の流動構造を形成させることであるリン脂質が、主として脂肪酸、コレステロール及びスフィンゴ脂質からなる混合物と徐々に置き換えられる。
これらの脂質は、その完全性が、存在するフラクションの質に依存するばかりでなくその各々の割合にも依存する特定のラメラ構造に組織化されている。表皮の脂質ドメインにおける脂質のこのラメラ構造が、流動性、従って皮膚の柔軟性をもたらしている。
【０００５】
脂質はまた表皮、特に角質層の「バリアー」特性をもたらしている。
表皮脂質は主に生きた表皮において合成される。表皮脂質は、主としてリン脂質、スフィンゴ脂質、コレステロール、遊離脂肪酸、トリグリセリド、コレステロールのエステル類及びアルカン類からなる。
リン脂質は細胞膜の形成に必須である。リン脂質は細胞外シグナルを媒介し、エネルギーの生産に用いられる遊離脂肪族鎖を形成する点において重要な役割を担っている。リン脂質はスフィンゴ脂質の生成に必要な遊離脂肪酸の貯蔵所を構成している。
【０００６】
スフィンゴ脂質(又はセラミド)は、角質細胞間脂質の多重膜構造を維持するために必須である。スフィンゴ脂質はまた水分関連交換と表皮の「バリアー」機能に対して必須である。
コレステロールは、皮膚の保湿と表皮の「バリアー」機能において重要な役割を果たしている。
遊離脂肪酸は角質層の脂質のラメラ構造を維持し、また細胞膜の生成(そこでは、膜の流動性をもたらす)並びにレセプター機能又は酵素活性のような生理プロセスにおいて主要な役割を果たしている。
よって、皮膚の脂質が果たす本質的な役割とその完全性がもたらす重要性が理解できる。
【０００７】
しかしながら、ある状況においては、特定の病理的症状(アトピー性皮膚炎)、皮膚加齢、光線性加齢、乾燥肌、又は物理的又は化学的攻撃の繰り返しによりバリアー機能が損傷を受けた場合のいずれにおいても、ヒトの表皮はその脂質合成及び／又は組成に変化がみられる。
【０００８】
表皮の脂質含有量を改善し、よって皮膚の柔軟性に作用を及ぼすために、２つの作用経路を考えることができる。第１は局所経路による脂質化合物の外来的な供給である。第２は内因性脂質の合成を刺激することからなる。例えば、培地にアスコルビン酸(ビタミンＣ)を添加することにより再構成された皮膚の脂質プロフィールを改善可能であることが立証されている（非特許文献１）。しかしながら、その化学構造(アルファ-ケトラクトン)のために、アスコルビン酸はいくつかの環境パラメータ、例えば光、熱及び水性媒体、特にアルカリ性及び／又は好気性媒体に対して非常に敏感である。これらの安定性に関する問題があるために、アスコルビン酸を含有する組成物の皮膚に対する効果を観察するには、高濃度のアスコルビン酸を使用する必要がある。
【０００９】
さらに、アスコルビン酸そのものよりも安定しているビタミンＣ誘導体が知られている。例えば、特許文献１には、アスコルビン酸又は誘導体と、ケイ皮酸又はその誘導体の一つとのモノ-及びジエステルが記載されている。これらの化合物は、特にフリーラジカルにより誘発される酸化から皮膚の脂質を保護するための化粧品用又は製薬用組成物に酸化防止剤として使用することができる。(５,６-イソプロピリデン)アスコルビルエステル類である他のアスコルビン酸誘導体が、特許文献２及び特許文献３に記載されている。最後に、他のアスコルビン酸誘導体、例えばＬ-アスコルビン酸の２-Ｏ-α-Ｄ-グルコピラノシル(又はアスコルビルグルコシド)が商業的に入手可能である。アスコルビルグルコシドは、特に色素脱失剤として使用される。
【非特許文献１】J. Invest. Dermatol. 109：348-355, 1997
【特許文献１】欧州特許出願第０６６４２９０号明細書
【特許文献２】特許第４６０２４６９９号公報
【特許文献３】特許第４４０００２２０号公報
【００１０】
本出願人は、驚くべきことに、アスコルビン酸自体よりもより安定していることが知られているある種のアスコルビン酸誘導体が、表皮の脂質生成においてアスコルビン酸よりもより大きな効力を示し、よってより少量の用量で使用可能であることを見出した。
【００１１】
よって、本発明の主題は、次の式(Ｉ)：
【化１】
2006070048.tif 000002
{上式中：
Ｒ１は水素原子、糖残基、カルボニル基、アルキルオキシカルボニル基、又はカルバミル基を表すか、又はＲ１Ｏがスルファート官能基又はホスファート官能基を表し、
Ｒ２は糖残基又は-ＣＯＲ５基を表し、ここでＲ５は：
(ａ)置換されていてもよく、特にヒドロキシル化されていてもよい、直鎖状、環状又は分枝状で飽和又は不飽和のＣ１-Ｃ２０炭化水素基、
(ｂ)置換されていてもよく、特にヒドロキシル化されていてもよいアリール基、
(ｃ)次の式(ＩＩ)：
【化２】
2006070048.tif 000003
[上式中、Ｒ、Ｒ'及びＲ''は同一でも異なっていてもよく、水素原子、ヒドロキシル、アルコキシ、フルオロアルコキシ又はアルキルカルボニルオキシ基を表す]
のアラルキル基から選択され、
Ｒ３及びＲ４は同一でも異なっていてもよく、水素原子又は上述した-ＣＯＲ５基を表すか、又は互いに共同してイソプロピリデン基を形成する}
の少なくとも１つのアスコルビン酸誘導体又はこの誘導体の塩の、表皮セラミド類の合成を増大させるための薬剤としての、又は組成物の製造における使用にある。
【００１２】
Ｒ１基は、Ｒ１Ｏ結合が皮膚と接触して容易に加水分解されうるように選択される。
「糖残基」という表現は、好ましくはグルコース、ガラクトース、マンノース、フルクトース又はＮ-アセチルグルコサミン残基を意味すると理解される。
「１〜２０の炭素原子を有する直鎖状又は分枝状で飽和した炭化水素基」という表現は、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert-ブチル、ヘキシル、ヘプチル、２-エチルヘキシル、オクチル、ノニル、イソノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル及びオクタデシル基、好ましくはウンデシル基からなる群から選択される基を意味すると理解される。
さらに、「１〜２０の炭素原子を有する直鎖状又は分枝状で不飽和の炭化水素基」という表現は、特にアリル基等の、２〜５の炭素原子を含有し、一又は複数のエチレン性不飽和を有する基からなる群から選択される基を意味すると理解される。
好ましい置換又は未置換のアリール基はベンジル基である。
【００１３】
上述した式(ＩＩ)に相当するアラルキル基の例は、アリール基が一又は複数の基、ヒドロキシル；メトキシ、エトキシ及びブトキシ基からなる群、好ましくはメトキシ基から選択される基等のアルコキシ；トリフルオロメトキシ基等のフルオロアルコキシ；及びアセトキシ、プロピオニルオキシ及びブチリルオキシからなる群、好ましくはアセトキシ基から選択される基等のアルキルカルボニルオキシで置換されたものである。
【００１４】
本発明で使用される好ましいアスコルビン酸誘導体は：
(ａ)(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-ヘキサデカノアート、
(ｂ)(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-ベンゾアート、
(ｃ)(５,６-イソプロピリデン)アスコルビン酸の２-Ｏ-α-Ｄ-グルコピラノシル、
(ｄ)アスコルビル-２-シンナマート、
(ｅ)アスコルビル-２-フェルラート、
(ｆ)(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-フェルラート、及び
(ｇ)(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-(４-アセトキシフェルラート)、
からなる群から選択される。
(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-ヘキサデカノアートと(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-ベンゾアートが特に好ましい。
【００１５】
上述した化合物(ａ)及び(ｂ)及びそれらの調製方法は、それぞれ日本国特許出願第４６０２４６９９号及び日本国特許出願第４４０００２２０号に記載されている。化合物(ｃ)は商品名アスコルビン酸-２-グルコシドとして、ハヤシバラから商業的に入手可能である。化合物(ｄ)、(ｅ)、(ｆ)及び(ｇ)は欧州特許出願第０６６４２９０号に記載されているようにして調製することができる。
【００１６】
上述したアスコルビン酸誘導体は、一般的に生理学的に許容可能な媒体を含有する組成物自体、又はその製造に使用される。この組成物は、特に、生理学的な組成物、さらには局所適用組成物、化粧品用組成物又は皮膚用組成物であり、有利には、０．００１〜１０重量％、好ましくは０．０１〜１重量％のアスコルビン酸誘導体を含有する。
【００１７】
本出願人は、これらの化合物により表皮セラミド類の合成が増大することを実証した。本明細書において「表皮セラミド類」という表現は、ＩないしＶＩＩ型セラミド類、特にＩＶないしＶＩＩ型セラミド類、及びアシルグルコシルセラミド類の両方を意味すると理解される。
脂質生成に関する本発明のこれらのアスコルビン酸誘導体の特性により、これらを含有する組成物が、皮膚の水分保持力をより良好にする皮膚のバリアー機能の改善に特に適したものとなる。よって、上述したアスコルビン酸誘導体は保湿化粧品用組成物に使用することができ、得られた組成物は皮膚を保湿するための美容方法に使用することができ、該方法はこの組成物を皮膚に適用することを含む。
より一般的には、本発明のアスコルビン酸誘導体は、皮膚の柔軟性及び／又は皮膚表面の外観(特にきめの粗さ及びシワやコジワの存在によって明らかになるもの)を改善し、及び／又は皮膚の内因性加齢に抗するか又はこれを防止するための薬剤として、美容目的に使用することができる。またそれらは、攻撃、特に界面活性剤等の化学物質、レチノイド類等の刺激性化粧品用物質、摩擦等の物理的攻撃の影響、さらには冷気又は風等の影響から皮膚を保護するのにも有用である。
【００１８】
また、本発明の組成物は、皮膚のバリアー機能を改善する調製物の製造に使用することもできる。このような調製物は、アトピー性又は脂漏性皮膚炎等のバリアー機能の崩壊に関与するある種の病状の治療を意図したものでありうる。
【００１９】
本発明の他の実施態様では、上述したアスコルビン酸誘導体は、再構成された表皮のバリアー機能及び／又は脂質含有量を改善するために使用することもできる。よって、再構成された表皮用の培養培地に少なくとも１つのこれらの誘導体を添加することにより、これらの表皮を正常なヒトの皮膚構造により類似したものにすることができ、よってこれらの表皮において行われるインビトロ試験(特に浸透性の研究)を、インビボで観察されるであろう現象について予測性をより高めたものとできる。
【００２０】
本発明の組成物は局所適用に対して通常使用される任意のガレノス形態(galenic forms)、特に水性、水性-アルコール又は油性の溶液、水中油型又は油中水型又は多相エマルション、水性又は油性のゲル、液状、ペースト状又は固体状の無水生成物、小球体により水相に油を分散させた形態で提供することができ、これらの小球体はポリマー性微小(ナノ)粒子、例えばナノスフェア及びナノカプセル、より好ましくはイオン性及び／又は非イオン性の脂質小胞体であってよい。 
【００２１】
この組成物は、多かれ少なかれ流動的なものであってよく、白色又は有色のクリーム、軟膏、ミルク、ローション、漿液、ペースト又はムースの外観を有するものであってもよい。また、場合によってはエアゾールの形態で皮膚に適用することもできる。さらに、固体状の形態、特にひびの切れた唇を処置することを意図した口紅の形態で提供してもよい。またさらに、皮膚の手入れ用品及び／又はメークアップ用品として使用することもできる。
【００２２】
また、知られている方法で、本発明の組成物は、化粧品の分野で慣習的なアジュバント、例えば親水性又は親油性のゲル化剤、親水性又は親油性の活性剤、防腐剤、酸化防止剤、溶媒、香料、フィラー、スクリーン剤、顔料、臭気吸収剤及び着色物質をさらに含有してもよい。これら種々のアジュバントの量は、当該分野において従来より使用されている量、例えば組成物の全重量に対して０．０１％〜２０％である。これらのアジュバントは、その性質に応じて、脂肪相、水相、脂質小胞体及び／又はナノ粒子中に取り込むことができる。いずれの場合でも、これらのアジュバント並びにそれらの割合は、本発明の活性剤の組合せに所望される特性を妨げないように選択される。
【００２３】
本発明の組成物がエマルションである場合、脂肪相の割合は、組成物の全重量に対して５〜８０重量％、好ましくは５〜５０重量％の範囲である。エマルションの形態の組成物に使用される油、乳化剤及び共乳化剤は、当該分野で従来より使用されているものから選択される。乳化剤及び共乳化剤は、組成物中に、組成物の全重量に対して０．３〜３０重量％、好ましくは０．５〜２０重量％の範囲の割合で存在する。 
【００２４】
本発明で使用可能な油としては、鉱物性油(流動パラフィン)、植物性油(アボカド油、大豆油)、動物性油(ラノリン)、合成油(ペルヒドロスクワレン)、シリコーン油(シクロメチコーン)及びフッ化油(ペルフルオロポリエーテル)を挙げることができる。また脂肪物質としては、脂肪アルコール(セチルアルコール)、脂肪酸及びロウ(カルナウバロウ、オゾケライト)を使用することもできる。
本発明で使用可能な乳化剤及び共乳化剤としては、例えばポリエチレングリコールと脂肪酸のエステル、例えばＰＥＧ-２０ステアラート、及びグリセリンと脂肪酸のエステル、例えばステアリン酸グリセリルを挙げることができる。
【００２５】
親水性のゲル化剤としては、特に、カルボキシビニルポリマー類(カーボマー：carbomer)、アクリルコポリマー類、例えばアクリラート／アクリル酸アルキルのコポリマー類、ポリアクリルアミド類、多糖類、天然ガム類及びクレー類を挙げることができ、また、親油性のゲル化剤としては、変性クレー類、例えばベントーン類、脂肪酸の金属塩、疎水性シリカ及びポリエチレンを挙げることができる。
【００２６】
活性剤としては、特に角質溶解及び／又は落屑剤、色素脱失剤、ＵＶ遮蔽剤、抗フリーラジカル剤及びそれらの混合物を使用することができる。非融和性である場合、相互に非融和性である活性剤が組成物中で互いに分離するように、活性剤の少なくともいくつかは、小球体、特にイオン性又は非イオン性の小胞体又はナノ粒子(ナノカプセル及び／又はナノスフェア)に導入され得る。
【実施例】
【００２７】
例証するものであって限定するものではない以下の実施例を参照すれば、本発明はさらに明確に理解され、その利点もより明らかになるであろう。
実施例１：表皮脂質合成におけるアスコルビルグルコシドの効果
エピスキン社(EPISKIN)(フランス、リヨン)から販売されている皮膚等価物を７日間培養した後に、アスコルビルグルコシドとアスコルビン酸そのものを該皮膚等価物について試験した。培養及びアッセイ培地は供給者より販売されているキットに含まれているものである。各化合物を、培地中で５μｇ／ｍｌ及び０．０５μｇ／ｍｌ(ビタミンＣ等価物として)で試験した。再構成された表皮を５日間処理し、培地を４８時間毎に取り替えた。対照は、試験される化合物を含まない培地の局所適用が施される同一の表皮等価物からなる。
【００２８】
インキュべーションの終わりに、表皮等価物をコラーゲン性支持体から取り外した。表皮等価物の脂質調製及びＨＰＴＬＣ又は高速薄層クロマトグラフィーによるそれらの分析をM. Ponec(1991, Adv. Lipid Res. 24：83-117)により記載された技術及びバッファーを用いて行った。移動の終わりに、ＣＡＭＡＧ ＴＬＣモデルスキャナー３デンシトメータリーダーにより濃度測定分析を行った。
【００２９】
結果及び結論：
結果を、未処理の対照に対するセラミド４、５、６及び７の増加度合いパーセンテージとして、以下の表１に表す。
【表１】
2006070048.tif 000004
これらの結果には、同一濃度で試験したアスコルビン酸よりも、アスコルビルグルコシドの方が、表皮脂質の合成度合いがより増大している(特に最も極性の強いセラミド類において)ことが示されている。
【００３０】
実施例２：
７日間培養して再構成した表皮に１．１０×１０−４Ｍで６日間適用し、実施例１に記載された試験を、種々のアスコルビン酸誘導体を使用して繰り返した。しかし、生成された表皮セラミド類の量は定量しなかった。代わりに、ＣＡＭＡＧ ＴＬＣ(登録商標)モデルスキャナー３デンシトメータリーダーにより濃度測定分析を行った。
処理された表皮の脂質プロフィールを調べた。用いたアスコルビン酸誘導体は、
−  (５,６-イソプロピリデン)アスコルビン酸の２-Ｏ-α-Ｄ-グルコピラノシル（化合物Ａ）；
−  アスコルビル-２-シンナマート（化合物Ｂ）；
−  アスコルビル-２-フェルラート（化合物Ｃ）；
−  (５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-ヘキサデカノアート（化合物Ｄ）、
−  アスコルビル-２,３-ビス(メトキシカルボニルメトキシ)エーテル（化合物Ｅ）；
−  ２-アスコルビル硫酸バリウム（化合物Ｆ）；及び
−  (５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-ベンゾアート（化合物Ｇ）
である。
化合物Ｅ並びにその調製態様は日本国特許出願第０７２０６８４０号に記載されている。化合物Ｆはシグマ社(SIGMA)から商業的に入手可能である。
【００３１】
未処理(対照)、又はアスコルビン酸(vitC)もしくは上述したアスコルビン酸誘導体ＡないしＧの一つのいずれかで処理して、再構成された表皮サンプルの脂質含有量を調べた。
その結果、再構成された表皮サンプルに化合物Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＧを適用した場合は、対照とアスコルビン酸の両方の場合よりも、表皮における極性セラミド(セラミドＩＶないしＶＩＩ)の含有量が顕著に増大していることが、バンドの数の多さ及び／又はバンドの顕著さから理解できた。これに対して、アスコルビン酸誘導体ではあるが本発明に係る化合物の一般式(Ｉ)には入らない化合物Ｅ及びＦを適用した場合は、表皮の脂質生成に有意な効果は見られなかった。
【００３２】
実施例３：化粧品用組成物
次の組成物を常法により調製した：
オクチルドデカノール                                        ０．２％
シクロメチコーン                                            ５％
ジメチコーンコポリオール                                    ５％
酢酸トコフェリル                                            １％
ＵＶ遮蔽剤                                                  １％
アスコルビルグルコシド                                      ０．１％
グリセリン                                                  ３％
二ナトリウムＥＤＴＡ                                        ０．１％
ｐＨ調節剤                                                  ２．６％
防腐剤                                                      ０．４％
ゲル化剤                                                    １．２％
水                                            全体を１００％にする量
皮膚の柔軟性を改善し、シワ及びコジワを滑らかにするために、朝及び／又は晩に適用されうる液体が得られた。
【００３３】
実施例４：化粧品用組成物
以下の成分を混合することにより、水中油型エマルションを調製した：
アスコルビル-２-シンナマート                                ０．１％
５０モルのＥＯを含有するオキシエチレン化
ポリエチレングリコール                                      ３％
モノステアリン酸ジグリセリル                                ３％
流動パラフィン                                            ２４％
セチルアルコール                                            ５％
水                                            全体を１００％にする量
皮膚の柔軟性を改善し、シワ及びコジワを滑らかにするために、朝及び／又は晩に適用されうるクリームが得られた。
【００３４】
実施例５：化粧品用組成物
以下の成分を混合することにより、次の組成物を調製した：
アスコルビル-２-フェルラート                                ０．１％
ホホバ油                                                  １３％
メチル及びプロピルパラベンの混合物                          ０．０５％
カリウム吸収剤                                              ０．３％
シクロペンタジメチルシロキサン                            １０％
ステアリルアルコール                                        １％
ステアリン酸                                                ４％
ポリエチレングリコールステアラート                          ３％
グリセロール                                                ３％
水                                            全体を１００％にする量
乾燥肌の処置に適したクリームが得られた。
この例において、アスコルビル-２-フェルラートは同量の(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-フェルラート又は(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-(４-アセトキシフェルラート)に置き換えてもよい。
【００３５】
実施例６：化粧品用組成物
以下の成分を混合することにより、水中油型エマルションを調製した：
(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-
ヘキサデカノアート                                          ０．１％
パルミチン酸オクチル                                      １０％
モノイソステアリン酸グリセリル                              ４％
流動パラフィン                                            ２４％
ビタミンＥ                                                  １％
グリセロール                                                ３％
水                                            全体を１００％にする量
皮膚の柔軟性を改善し、シワ及びコジワを滑らかにするために、朝及び／又は晩に適用されうるクリームが得られた。上述した組成物において、(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-ベンゾアートを(５,６-イソプロピリデン)アスコルビル-２-ヘキサデカノアートと置き換えてもよい。