(57)【要約】【課題】本発明は、ニューロン死に伴う神経学的疾患の防止と予防のための組成物及び方法を提供することを課題とする。【解決手段】本発明は、５−ベンジルアミノサリチル酸（ＢＡＳ）及びその誘導体の合成を含む。 ＢＡＳ及びその誘導体は、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテート、Ｚｎ２＋及び反応性酸素類による毒性のある損傷から大脳皮質ニューロンを保護する。それによって、本発明は、興奮毒性、Ｚｎ２＋神経毒性及びフリーラジカル神経毒性による深刻なニューロンの損失を伴う発作、外傷性脳損傷と外傷性脊椎損傷、てんかん、及び、神経変性疾患を治療する為の組成物及び方法を提供する。 【選択図】図２
2006160752.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の構造式(I) 
【化１】
2006160752.tif 000028
（上記式中、 
Ｘは、ＣＯ、ＳＯ２、又は、（ＣＨ２）ｎ（ｎは１から５の整数である）
Ｒ１は、水素、アルキル基又はアルカノイル基、
Ｒ２は、水素又はアルキル基、
Ｒ３は、水素又はアセトキシ基、及び、
Ｒ４は、無置換又はニトロ基、ハロゲン、ハロアルキル基及びＣ１−Ｃ５アルコ
キシ基からなる群から選択された１つ以上の置換基で置換されたフェニル基であ
る）で表わされる化合物、又は、
その薬学的に許容される塩。 
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ニューロン死滅によって誘発される、神経系疾患の防止と予防のため
の新規なサリチル酸塩化合物、組成物及び方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
＜興奮毒性及び脳疾患＞  
Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテートに敏感なイオンチャネル型グルタミン酸受容体
（ｉｏｎｏｔｒｏｐｉｃ  ｇｌｕｔａｍａｔｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＮＭＤＡ  
ｒｅｃｅｐｔｏｒ）を過度に活性化すると、ニューロン死滅がもたらされ、多様
な神経系疾病の媒介となることが知られている（Ｃｈｏｉ，  Ｎｅｕｒｏｎ  １
：６２３−６３４（１９８８））。低酸素−局所貧血症患者の脳に大量に蓄積さ
れる興奮性神経伝達物質のグルタメートは、Ｃａ２＋及びＮａ＋を透過させるイ
オンチャネル型グルタミン酸受容体を活性化させた後、ニューロン死滅を誘発さ
せる（Ｃｈｏｉ  ａｎｄ  Ｒｏｔｈｍａｎ，Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｎｅｕｒｏｓｃ
ｉ  １３：１７１−１８２（１９９０））。ＮＭＤＡ受容体に対するアンタゴニ
ストは、低血糖症、低酸素症又は低酸素−局所貧血症よる脳疾患を著しく軽減す
る(Ｓｉｍｏｎ，Ｓｗａｎ，Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，ａｎｄ  Ｍｅｌｄｒｕｍ．Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ  ２２６：８５０−８５２（１９８４）、Ｐａｒｋ，  Ｎｅｈｌｓ
，Ｇｒａｈａｍ，  Ｔｅａｓｄａｌｅ，ａｎｄ  ＭｃＣｕｌｌｏｃｈ，Ａｎｎ  
Ｎｅｕｒｏｌ  ２４：５４３−５５１（１９８８）．；Ｗｉｅｌｏｃｈ，Ｓｃｉ
ｅｎｃｅ  ２３０：６８１−６８３（１９８５）; Ｋａｓｓ，Ｃｈａｍｂｅｒｓ
，ａｎｄ  Ｃｏｔｔｒｅｌｌ，Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．１０３：１１６−１２２
（１９８９）、Ｗｅｉｓｓ，Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，ａｎｄ  Ｃｈｏｉ，Ｂｒａｉｎ
Ｒｅｓ．３８０：１８６−１９０（１９８６）)。したがって、ＮＭＤＡ受容
体に対するアンタゴニストは、低血糖症、低酸素症及び低酸素−局所貧血症から
脳を保護する潜在的治療能力を保有している。 
興奮毒性は、脳外傷（ＴＢＩ）による神経変性の一員であると考えられる。ＴＢ
Ｉ患者(人間)の場合において、ＮＭＤＡ受容体に対する内因性アゴニストである
、キノリン酸の生成量が５から５０倍増加した（Ｅ．Ｈ．Ｓｉｎｚ，Ｐ．Ｍ．Ｋ
ｏｃｈａｎｅｋ，Ｍ．Ｐ．Ｈｅｙｅｓ，Ｓ．Ｒ．Ｗｉｓｎｉｅｗｓｋｉ，Ｍ．Ｊ
．Ｂｅｌｌ，Ｒ．Ｓ．Ｃｌａｒｋ，Ｓ．Ｔ．ＤｅＫｏｓｋｙ，Ａ．Ｒ．Ｂｌｉｇ
ｈｔ，ａｎｄ  Ｄ．Ｗ．Ｍａｒｉｏｎ）。キノリン酸は、脳脊髄液中で増加し、
人間のＴＢＩ後の死亡率とも相関がある（Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏ
ｗ  Ｍｅｔａｂ．１８：６１０−６１５，（１９９８））。脳外傷の動物モデル
において、グルタメートとアスパルテートの量が著しく増加した（Ｆａｄｅｎ，
Ｄｅｍｅｄｉｕｋ，Ｐａｎｔｅｒ，ａｎｄ  Ｖｉｎｋ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４
：７９８−８００（１９８９））。また、衝撃外傷後のラットの脊椎においても
グルタメートの放出が観察された（Ｄｅｍｅｄｉｕｋ，Ｄａｌｙ，ａｎｄ  Ｆａ
ｄｅｎ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．５２：１５２９−
１５３６（１９８９））。ＮＭＤＡ受容体に対するアンタゴニストによって、脳
外傷又は脊椎損傷によるニューロン死滅が減少する（Ｆａｄｅｎ，Ｌｅｍｋｅ，
Ｓｉｍｏｎ，ａｎｄ  Ｎｏｂｌｅ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ．５：３３−４
５（１９８８）；Ｏｋｉｙａｍａ，Ｓｍｉｔｈ，Ｗｈｉｔｅ，Ｒｉｃｈｔｅｒ，
ａｎｄ  ＭｃＩｎｔｏｓｈ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ．１４：２１１−２２
２（１９９７））。 
グルタメートは、発作の誘発と進行において重要な役割を担っている（Ｄｉｎｇ
ｌｅｄｉｎｅ，ＭｃＢａｉｎ，ａｎｄ  ＭｃＮａｍａｒａ，Ｔｒｅｎｄｓ．Ｐｈ
ａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．１１：３３４−３３８（１９９０）、Ｈｏｌｍｅｓ．
Ｃｌｅｖｅ．Ｃｌｉｎ．Ｊ．Ｍｅｄ．６２：２４０−２４７（１９９５））。
ＮＭＤＡ受容体に対するアンタゴニストは、多様なてんかんの類型において抗痙
攣剤及びてんかん発作抑制剤（ａｎｔｉｅｐｉｌｔｏｇｅｎｉｃ  ｄｒｕｇ）と
して作用することが立証された（Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｓｗａｒｔｚｗｅｌｄｅｒ
，ａｎｄ  Ｗｉｌｓｏｎ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．５７：１−２１（１
９８７）；Ｗｏｎｇ，Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｃｈｏｉ，ａｎｄ  Ｐｒｉｎｃｅ．  Ｎ
ｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．８５：２６１−２６６（１９８８）、ＭｃＮａｍａ
ｒａ，Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｒｉｇｓｂｅｅ，ａｎｄ  Ｂｏｎｈａｕｓ，Ｎｅｕｒｏ
ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ２７：５６３−５６８（１９８８））。  
筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）は、上部及び下部運動ニューロン全ての退化を伴
い、神経の萎縮、弱化及び繊維束性痙縮が特徴である。ＡＬＳの発病原因は未解
決のままであるが、興奮毒性がＡＬＳの過程中に発生するものと予測されている
。 具体的には、ＡＬＳ患者は、細胞外グルタメートの増加とグルタメートの運
搬障害を示す。ＡＬＳ患者脊椎の病的変化と類似な症状が興奮毒素（ｅｘｃｉｔ
ｏｔｏｘｉｎ）の投与時にも起きる（Ｒｏｔｈｓｔｅｉｎ．Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒ
ｏｓｃｉ．３：３４８−３５９（１９９５）；Ｉｋｏｎｏｍｉｄｏｕ，Ｑｉｎ，
Ｌａｂｒｕｙｅｒｅ，ａｎｄ  Ｏｌｎｅｙ  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．Ｅ
ｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．５５：２１１−２２４（１９９６））。
拮抗するＮＭＤＡ受容体は、パーキンソン氏病（ＰＤ）を治療する時にも適用出
来るものと考えられる。ＮＭＤＡ受容体に対する何種類かのアンタゴニストによ
って、ドパーミン作用性ニューロンは、神経毒素であるＭＰＴＰ（１−Ｍｅｔｈ
ｙｌ−４−ｐｈｅｎｙｌ−１，２，３，６−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒｉｄｉ
ｎｅ）から保護される（Ｌａｎｇｅ，Ｌｏｓｃｈｍａｎｎ，Ｓｏｆｉｃ，Ｂｕｒ
ｇ，Ｈｏｒｏｗｓｋｉ，Ｋａｌｖｅｒａｍ，Ｗａｃｈｔｅｌ，ａｎｄ  Ｒｉｅｄ
ｅｒｅｒ．Ｎａｕｎｙｎ  Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓ  Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ
ａｃｏｌ．３４８：５８６−５９２（１９９３）、Ｂｒｏｕｉｌｌｅｔ  ａｎｄ
Ｂｅａｌ．Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ．４：３８７−３９０（１９９３））。ま
た、ＮＭＤＡ受容体に対するアンタゴニストは、レボドーパ（エルドーパ）誘導
運動異常（ジスキネジー）を改善し、よってレボドーパに対する治療効果を向上
させることができる（Ｐａｐａ  ａｎｄ  Ｃｈａｓｅ，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．
３９：５７４−５７８  （１９９６）、Ｍａｒｉｎ，Ｐａｐａ，Ｅｎｇｂｅｒ，
Ｂｏｎａｓｔｒｅ，Ｔｏｌｏｓａ，ａｎｄ  Ｃｈａｓｅ，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．
７３６：２０２−２０５（１９９６））。ＮＭＤＡ受容体に対する２種類のアン
タゴニストであるメマンチン及びデキストロメトルファンは、ＰＤ患者を治療す
るにあたり効果的であることが立証されている（Ｖｅｒｈａｇｅｎ，Ｄｅｌ  Ｄ
ｏｔｔｏ，Ｎａｔｔｅ，ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｍｕｎｃｋｈｏｆ，ａｎｄ  Ｃｈａｓ
ｅ，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ５１：２０３−２０６（１９９８）；Ｍｅｒｅｌｌｏ
，Ｎｏｕｚｅｉｌｌｅｓ，Ｃａｍｍａｒｏｔａ，ａｎｄ  Ｌｅｉｇｕａｒｄａ．
Ｃｌｉｎ．  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２：２７３−２７６（１９９９
））。 
ハンチントン氏病（ＨＤ）は、線条体内にソマトスタチン及びニューロペプチド
を含むＮＡＤＰＨ−ジアフォラーゼニューロンには影響を及ぼさないが、主に小
型及び中型の介在ニューロンに影響を及ぼす進行性神経変性疾患である。キノリ
ン酸の線条体内注入後の線条体組織又はＮＭＤＡに曝露して培養された線条体ニ
ューロンにおいて、上記のＨＤの病的特徴が観察され、ＮＭＤＡ受容体が介在す
る神経毒性が、ＨＤにおける選択的なニューロン死滅に寄与する可能性を増加さ
せている（Ｋｏｈ，Ｐｅｔｅｒｓ，ａｎｄ  Ｃｈｏｉ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３４
：７３−７６  （１９８６）；．Ｂｅａｌ，Ｋｏｗａｌｌ，Ｅｌｌｉｓｏｎ，  
Ｍａｚｕｒｅｋ，Ｓｗａｒｔｚ，ａｎｄ  Ｍａｒｔｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１
：１６８−１７１  （１９８６）；．Ｂｅａｌ，Ｆｅｒｒａｎｔｅ，Ｓｗａｒｔ
ｚ，ａｎｄ  Ｋｏｗａｌｌ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１１：１６４９−１６５９
（１９９１））。 
＜フリーラジカル及び脳疾患＞
低酸素−局所貧血症又は脳外傷及び脊椎損傷による退行性脳部位では、フリーラ
ジカルが生成される（Ｈａｌｌ  ａｎｄ  Ｂｒａｕｇｈｌｅｒ，Ｆｒｅｅ  Ｒａ
ｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．６：３０３−３１３  （１９８９）；Ａｎｄｅｒｓ
ｏｎ  ａｎｄ  Ｈａｌｌ，Ａｎｎ．Ｅｍｅｒｇ．Ｍｅｄ．２２：９８７−９９２
（１９９３）、Ｓｉｅｓｊｏ  ａｎｄ  Ｓｉｅｓｊｏ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ａｎａｅ
ｓｔｈｅｓｉｏｌ．１３：２４７−２６８（１９９６）、Ｌｏｖｅ，Ｂｒａｉｎ
Ｐａｔｈｏｌ．９：１１９−１３１（１９９９））。フリーラジカルの除去の
ための抗酸化剤又は処置方法によって、低酸素−局所貧血症又は外傷性損傷は軽
減する（Ｆａｄｅｎ，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．７８：１２−１７
（１９９６）；Ｚｅｉｄｍａｎ，Ｌｉｎｇ，Ｄｕｃｋｅｒ，ａｎｄ  Ｅｌｌｅ
ｎｂｏｇｅｎ，Ｊ．Ｓｐｉｎａｌ．Ｄｉｓｏｒｄ．９：３６７−３８０（１９９
６）；Ｃｈａｎ，Ｓｔｒｏｋｅ  ２７：１１２４−１１２９（１９９６）、Ｈａ
ｌｌ，Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．Ｃｌｉｎ．Ｎ．Ａｍ．８：１９５−２０６（１９９
７））。恐らくＡＬＳ中のＣｕ／Ｚｎスーパーオキシドジスムターゼ内の点突然
変異、ＰＤ中のグルタチオンの減少及び鉄の増加、ＡＤ中の鉄の蓄積、又は、Ｈ
Ｄ中のミトコンドリアの機能不全によって、神経変性疾患における退行が進行し
ている脳部位内でフリーラジカルが生成され得るということは、多くの証拠によ
り裏付けされている（Ｒｏｓｅｎ，Ｓｉｄｄｉｑｕｅ，Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ，  
Ｆｉｇｌｅｗｉｃｚ，Ｓａｐｐ，Ｈｅｎｔａｔｉ，Ｄｏｎａｌｄｓｏｎ，Ｇｏｔ
ｏ，Ｏ’Ｒｅｇａｎ，ａｎｄ  Ｄｅｎｇ．Ｎａｔｕｒｅ  ３６２：５９−６２（
１９９３）；Ｊｅｎｎｅｒ  ａｎｄ  Ｏｌａｎｏｗ，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ４７
：Ｓ１６１−Ｓ１７０（１９９６）；Ｓｍｉｔｈ，Ｈａｒｒｉｓ，Ｓａｙｒｅ，
ａｎｄ  Ｐｅｒｒｙ， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．
９４：９８６６−９８６８（１９９７）、Ｂｒｏｗｎｅ  Ｆｅｒｒａｎｔｅ，ａ
ｎｄ  Ｂｅａｌ，Ｂｒａｉｎ  Ｐａｔｈｏｌ．９：１４７−１６３（１９９９）
）。したがって、抗酸化剤は、上記の神経変性疾患に対する神経保護剤である（
Ｊｅｎｎｅｒ，Ｐａｔｈｏｌ．Ｂｉｏｌ．（Ｐａｒｉｓ．）４４：５７−６４（
１９９６）；Ｂｅａｌ，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．３８：３５７−３６６（１９９
５）；Ｐｒａｓａｄ，Ｃｏｌｅ，ａｎｄ  Ｋｕｍａｒ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｎ
ｕｔｒ．１８：４１３−４２３（１９９９）、Ｅｉｓｅｎ  ａｎｄ  Ｗｅｂｅｒ
，  Ｄｒｕｇｓ  Ａｇｉｎｇ  １４：１７３−１９６（１９９９）；Ｇｒｕｎｄ
ｍａｎ, Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．７１：６３０Ｓ．−６３６Ｓ（２００
０））。 
＜亜鉛と脳疾患＞  
Ｚｎ２＋は、発作、局所貧血症、外傷及びＡＤで観察される神経変性過程を媒介
する。発作誘導性興奮毒素であるカイネートの中枢神経系への投与によって、Ｚ
ｎ２＋はいくつかの前脳部位内のシナプス後の退行ニューロンへ移動する(Ｆｒ
ｅｄｅｒｉｃｋｓｏｎ，Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ，ａｎｄ  ＭｃＧｉｎｔｙ．Ｂｒａ
ｉｎ  Ｒｅｓ．４８０：３１７−３２１（１９８９）)。Ｃａ−ＥＤＴＡを利用
したＺｎ２＋移動の妨害により、前脳の一時的な局所貧血症又は脳外傷によるニ
ューロン喪失が減少する（Ｋｏｈ，Ｓｕｈ，Ｇｗａｇ，Ｈｅ，Ｈｓｕ  ａｎｄ  
Ｃｈｏｉ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７２：１０１３−１０１６（１９９６）、Ｓｕｈ
，  Ｃｈｅｎ，Ｍｏｔａｍｅｄｉ，Ｂｅｌｌ，Ｌｉｓｔｉａｋ，Ｐｏｎｓ，Ｄａ
ｎｓｃｈｅｒ，ａｎｄ  Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋｓｏｎ，  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．８
５２  ：２６８−２７３（２０００））。Ｚｎ２＋は、ＡＤ内の細胞外プラーク
及び退行ニューロンで観察され、これは、ＡＤの神経変性にも寄与するように思
われる（Ｂｕｓｈ，Ｐｅｔｔｉｎｇｅｌｌ，Ｍｕｌｔｈａｕｐ，Ｐａｒａｄｉｓ
，  Ｖｏｎｓａｔｔｅｌ，Ｇｕｓｅｌｌａ，Ｂｅｙｒｅｕｔｈｅｒ，Ｍａｓｔｅ
ｒｓ，  ａｎｄ  Ｔａｎｚｉ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６５：１４６４−１４６７（
１９９４）、Ｓｕｈ，Ｊｅｎｓｅｎ，Ｊｅｎｓｅｎ，Ｓｉｌｖａ，Ｋｅｓｓｌａ
ｋ，  Ｄａｎｓｃｈｅｒ，ａｎｄ  Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋｓｏｎ．Ｂｒａｉｎ  Ｒ
ｅｓ．  ８５２：２７４−２７８  ８５２（２０００））。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
発明の要約 
本発明は、下記の構造式(I) 
【０００４】
【化２】
2006160752.tif 000003
【０００５】
（上記式中、 
Ｘは、ＣＯ、ＳＯ２、又は、（ＣＨ２）ｎ（ｎは１から５の整数である）
Ｒ１は、水素、アルキル基又はアルカノイル基、
Ｒ２は、水素又はアルキル基、
Ｒ３は、水素又はアセトキシ基、及び、
Ｒ４は、無置換又はニトロ基、ハロゲン、ハロアルキル基及びＣ１−Ｃ５アルコ
キシ基からなる群から選択された１つ以上の置換基で置換されたフェニル基であ
る）で表わされる新規の５−ベンジルアミノサリチル酸（ＢＡＳ）、又は、
その薬学的に許容される塩
を提供する。
本発明はまた中枢神経系（ＣＮＳ）の損傷で苦しむ患者又は動物に対して、構造
式（Ｉ）で表わされる神経保護化合物を治療的に適当な量投与することにより、
上記ＣＮＳの急性又は慢性的損傷から中枢神経を保護する方法を提供する。
本発明はさらに、構造式（Ｉ）で表わされる神経保護化合物を治療的に適当な含
む、中枢神経系の急性又は慢性的損傷から中枢神経を保護する組成物を提供する
。 
本発明はまた、中枢神経系の急性又は慢性的損傷に苦しむ患者若しくは動物に対
して、構造式（Ｉ）で表わされる上記化合物を治療的に適当な量投与することに
よる、ＮＭＤＡ神経毒性、Ｚｎ２＋神経毒性又は酸化的ストレスと関連した神経
系疾患の治療又は予防のための方法を提供する。 
本発明はさらに、中枢神経系（ＣＮＳ）の急性又は慢性的損傷から中枢神経を保
護するための薬物の製造のための構造式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
本発明の上記及びその他の特徴は、本発明が属する技術分野における通常の当業
者によって、下記の詳細な説明から容易に理解できるであろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
発明の詳細な説明
本発明らは、５−ベンジルアミノサリチル酸（ＢＡＳ）及びその誘導体を合成し
て、上記合成された化合物が複数の神経保護作用効果を持っていることを立証し
た。
第一に、ＢＡＳ及びその誘導体は、１００〜１，０００μＭの服用量でＮＭＤＡ
神経毒性を軽減させる。第二に、ＢＡＳ及びその誘導体は、抗酸化剤であり、
１〜３００μＭの服用量でフリーラジカル神経毒性を遮断する。最後に、ＢＡＳ
及びその誘導体は、Ｚｎ２＋神経毒性を軽減させる。このようなＢＡＳ及びその
誘導体の新規な複数の神経保護効果は、興奮毒性、Ｚｎ２＋神経毒性及びフリー
ラジカル神経毒性により付随する発作、脳外傷と脊椎損傷、テンカン、及び神経
変性疾患治療に有効である。 
ＢＡＳ及びその誘導体は、５−アミノサリチル酸を適当な化合物と反応させるこ
とによって、上記５−アミノサリチル酸から合成できる。下記のスキームはＢＡ
Ｓ及びその誘導体の合成を示したものである。 
スキーム １
【０００７】
【化３】
2006160752.tif 000004
【０００８】
反応試薬 （ａ）：ベンジルブロマイド、４−ニトロベンジルブロマイド、４−
クロロベンジルクロライド、４−（トリフルオロメチル）ベンジルクロライド、
４−フルオロベンジルブロマイド、４−メトキシベンジルクロライド、Ｎ，Ｎ−
ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、トリエチルアミン、室温、４時間。
構造式（Ｉ）の好ましい化合物の種類には、 
上記式で、Ｘは、ＣＯ、ＳＯ２又は（ＣＨ２）ｎ(ｎは１から５の整数である)、
Ｒ１は水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル基又はＣ２−Ｃ５アルカノイル基、Ｒ２は水素
又はＣ１−Ｃ５アルキル基、Ｒ３は水素又はアセトキシ基、及び、Ｒ４は無置換
又はニトロ基、ハロゲン、ハロアルキル基及びＣ１−Ｃ５アルコキシ基からなる
群から選ばれた一つ以上の置換基で置換されたフェニル基である化合物、又は、
その薬学的に許容される塩を含む。 
【０００９】
スキーム ２
【００１０】
【化４】
2006160752.tif 000005
【００１１】
反応試薬 （ａ）：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、トリエチルアミ
ン、室温、４時間 
スキーム ３
【００１２】
【化５】
2006160752.tif 000006
【００１３】
反応試薬 
（ａ）：ＥｔＯＨ、Ｈ２ＳＯ４、還流、６時間。
（ｂ）：無水酢酸、ＭｅＯＨ、０℃、３０分。 
（ｃ）：無水酢酸、Ｈ２ＳＯ４、０℃、３０分。
構造式（Ｉ）の好ましい化合物の種類には、 
上記式で、Ｘは、ＣＯ、ＳＯ２又は（ＣＨ２）ｎ（ｎは、１、２、又は、３）、
Ｒ１は水素、Ｃ１−Ｃ３アルキル基又はＣ２−Ｃ３アルカノイル基、Ｒ２は水素
又はＣ１−Ｃ３アルキル基、Ｒ３は水素又はアセトキシ基、及び、Ｒ４は無置換
又はニトロ基、ハロゲン、ハロアルキル（Ｃ１−Ｃ３）基及びＣ１−Ｃ３アルコ
キシ基からなる群から選択された１つ以上の置換基で置換されたフェニル基であ
る化合物、又は、その薬学的に許容される塩を含む。 
実施例５
【００１４】
【化６】
2006160752.tif 000007
【００１５】
反応試薬  （ａ）：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、トリエチルアミ
ン、室温、４時間。 
構造式（Ｉ）の好ましい化合物を具体的に下記に示す。 
５−ベンジルアミノサリチル酸（ＢＡＳ）、５−（４−ニトロベンジル）アミノ
サリチル酸(ＮＢＡＳ)、（５−（４−クロロベンジル）アミノサリチル酸（５−
（ＣＢＡＳ）、（５−（４−トリフルオロメチルベンジル）アミノサリチル酸（
ＴＢＡＳ）、（５−（４−フルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＦＢＡＳ）、
５−（４−メトキシベンジル）アミノサリチル酸（ＭＢＡＳ）、５−（ペンタフ
ルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＰＢＡＳ）、５−（４−ニトロベンジル）
アミノ−２−ヒドロキシエチルベンゾエート（ＮＡＨＥ）、５−（４−ニトロベ
ンジル）−Ｎ−アセチルアミノ−２−ヒドロキシ  エチルベンゾエート（ＮＮＡ
ＨＥ）、５−（４−ニトロベンジル）−Ｎ−アセチルアミノ−２−アセトキシエ
チルベンゾエート（ＮＮＡＡＥ）、５−（４−ニトロベンゾイル）アミノサリチ
ル酸（ＮＢＡＡ）、５−（４−ニトロベンゼンスルホニル）アミノサリチル酸（
ＮＢＳＡＡ）、５−［２−（４−ニトロフェニル）-エチル］アミノサリチル酸
（ＮＰＡＡ）、及び、５−［３−（４−ニトロフェニル）−ｎ−プロピル］アミ
ノサリチル酸（ＮＰＰＡＡ）、又は、その薬学的に許容される塩である。
「薬学的に許容される塩」という語には、アルカリ金属塩及び遊離酸又は遊離塩
基の付加塩を形成するために一般的に使用される塩が含まれる。薬学的に許容さ
れるものである限り、塩の特性は特に限定されず、上記塩を形成するために使用
できる酸又は塩基は、もちろん当業者に公知のものである。薬学的に許容される
酸付加塩を形成するために使用できる酸の例としては、塩酸、硫酸及びリン酸等
の無機酸や、マレイン酸、コハク酸及びクエン酸等の有機酸等がある。その他の
塩としては、ナトリウム、カリウム、カルシウム及びマグネシウム等のアルカリ
金属又はアルカリ土類金属からなる塩、又は、ジシクロヘキシルアミン（等の有
機塩基からなる塩が含まれる。上記全ての塩は、構造式（Ｉ）に相応する化合物
から、例えば、構造式（Ｉ）の化合物を適当な酸又は塩基等を反応させることに
よって、従来の手段で製造できる。 
合成例は、代表的化合物（Ｉ）を調製するための例示的な方法を提示する。
＜合成例１＞  ５−ベンジルアミノサリチル酸（ＢＡＳ）の調製
窒素大気圧下の室温で、５−アミノサリチル酸（２．０ｇ、１３ｍｍｏｌｅ、米
国Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙから購入）とトリエチル
アミンの乾燥ＤＭＦ（２５ｍｌ）中溶液にベンジルブロマイド(２．６８ｇ、１
．９０ｍｌ、１５．６ｍｍｏｌｅ)を添加した。反応混合液を室温で４時間撹拌
した。氷片を反応混合液に添加した後に真空下で溶媒を除去した。上記反応混合
液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水とブラインで洗浄した後に
、無水ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させた後に、残留物をカラムクロマト
グラフィーで精製し、メタノール／エチルアセテート／ヘキサン（１：３：１）
で再結晶させて、白色固体状の５−ベンジルアミノサリチル酸３．６ｇ（収率７
３％）を得た。融点１７３．５〜１７４．５℃(分解)。 
Ｃ１４Ｈ１３ＮＯ３の元素分析  
【００１６】
【表１】
2006160752.tif 000008
【００１７】
＜合成例２＞  ５−（４−ニトロベンジル）アミノサリチル酸（ＮＢＡＳ）の調
製
５−アミノサリチル酸（２．００ｇ、１３．０ｍｍｏｌｅ）及び４−ニトロベン
ジルブロマイド（３．３８ｇ、１５．６ｍｍｏｌｅ）を使用して合成例１と類似
の方法を行なうことにより、薄い黄色固体状の５−（４−ニトロベンジル）アミ
ノサリチル酸２．９０ｇ（収率７９％）を得た。融点２１１〜２１２℃。
Ｃ１４Ｈ１３Ｎ２Ｏ５の元素分析
【００１８】
【表２】
2006160752.tif 000009
【００１９】
＜合成例３＞  ５−（４−クロロベンジル）アミノサリチル酸（ＣＢＡＳ）の調
製
５−アミノサリチル酸（５００ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌｅ）及び４−クロロベン
ジルクロライド（６３０ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌｅ）を使用して合成例１と類似
な方法を行なうことにより、白色固体状の５−（４−クロロベンジル）アミノサ
リチル酸４８０ｍｇ（収率５３％）を得た。融点２２７〜２２８℃。
Ｃ１４Ｈ１２ＣｌＮＯ３の元素分析
【００２０】
【表３】
2006160752.tif 000010
【００２１】
＜合成例４＞  ５−（４−トリフルオロメチルベンジル）アミノサリチル酸（Ｔ
ＢＡＳ）の調製
５−アミノサリチル酸（５００ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌｅ）及び４−（トリフル
オロメチル）ベンジルクロライド（７６０ｍｇ、３．９２ｍｍｏｌｅ）を使用し
て合成例１と類似の方法を行なうことにより、白色固体状の５−（４−（トリフ
ルオロメチル）ベンジル）アミノサリチル酸５１０ｍｇ（収率５０％）を得た。
融点１８８℃以上(分解)。
Ｃ１４Ｈ１２Ｆ３ＮＯ３の元素分析
【００２２】
【表４】
2006160752.tif 000011
【００２３】
＜合成例５＞  ５−（４−フルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＦＢＡＳ）の
調製
５−アミノサリチル酸（５００ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌｅ）及び４−フルオロベ
ンジルブロマイド（７４０ｍｇ、３．９２ｍｍｏｌｅ）を使用して合成例１と類
似の方法を行なうことにより、白色固体状の５−（４−フルオロベンジル）アミ
ノサリチル酸４８０ｍｇ（収率４４％）を得た。融点２１０℃以上(分解)。 
【００２４】
Ｃ１４Ｈ１２ＦＮＯ３の元素分析
【００２５】
【表５】
2006160752.tif 000012
【００２６】
＜合成例６＞  ５−（４−メトキシベンジル）アミノサリチル酸（ＭＢＡＳ）の
調製
５−アミノサリチル酸（１．００ｇ、６．５３ｍｍｏｌｅ）及び４−メトキシベ
ンジルクロライド（１．２３ｇ、７．８４ｍｍｏｌｅ）を使用して合成例１と類
似の方法を行なうことにより、白色固体状の５−（４−メトキシベンジル）アミ
ノサリチル酸８９０ｍｇ（収率５０％）を得た。融点２０５〜２０６℃。
Ｃ１５Ｈ１５ＮＯ４の元素分析
【００２７】
【表６】
2006160752.tif 000013
【００２８】
＜合成例７＞  ５−（ペンタフルオロベンジル）アミノサリチル酸の製造
５−アミノサリチル酸(５００ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌｅ)及びペンタフルオロベ
ンジルブロマイド（１．０２ｇ、３．９２ｍｍｏｌｅ）を使用して合成例１と類
似の方法を行なうことにより、白色固体状の５−（ペンタフルオロベンジル）ア
ミノサリチル酸６５０ｍｇ（収率６０％)を得た。融点１９０℃以上(分解)。 
Ｃ１４Ｈ８Ｆ５ＮＯ３の元素分析
【００２９】
【表７】
2006160752.tif 000014
【００３０】
＜合成例８＞  ５−（４−ニトロベンジル）アミノ−２−ヒドロキシエチルベン
ゾエートの調製
５−（４−ニトロベンジル）アミノサリチル酸（１．０ｇ、３．４ｍｍｏｌｅ）
のエタノール（３５ｍｌ）中溶液に０℃で濃Ｈ２ＳＯ４（３．５ｍｌ）を注意し
て添加した。上記反応混合液を８０℃で６時間撹拌後、室温で冷却した。溶媒を
真空下で除去後、反応混合液を酢酸エチルで抽出した。有機層をＨ２Ｏ、１０％
ＮａＨＣＯ３溶液、５％ＨＣｌ溶液及びブラインで洗浄した。上記有機層を、無
水ＭｇＳＯ４で乾燥し、真空下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー
で精製し、エチルアセテート／ヘキサン（１：２）で再結晶させて、黄色固体状
の５−（４−ニトロベンジル）アミノ−２−ヒドロキシエチルベンゾエート５０
０ｍｇ（収率４６％）を得た。融点１０６．５〜１０７．５℃。
Ｃ１６Ｈ１６Ｎ２Ｏ５の元素分析
【００３１】
【表８】
2006160752.tif 000015
【００３２】
＜合成例９＞  ５−（４−ニトロベンジル）−Ｎ−アセチルアミノ−２−ヒドロ
キシエチルベンゾエートの調製
窒素大気圧下、５−（４−ニトロベンジル）アミノ−２−ヒドロキシエチルベン
ゾエート（５００ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌｅ）の乾燥メタノール（５０ｍｌ）中
溶液に、０℃で無水酢酸（５ｍｌ）を注意して添加した。反応混合液を１０℃で
２時間撹拌した。上記反応混合液に氷片をゆっくり添加後、溶媒を真空下で除去
した。上記反応混合液を酢酸エチルとＨ２Ｏで抽出した後、有機層をＨ２Ｏ、
１０％ＮａＨＣＯ３（３０ｍｌ×３）溶液、５％ＨＣｌ（３０ｍｌ×２）溶液及
びブラインで洗浄した。上記有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、溶媒を蒸発させ
た。残留物をカラムクロマトグラフィーで精製して、エチルアセテート／ヘキサ
ン（１：３）で再結晶させて、淡黄色固体状の５−（４−ニトロベンジル）−Ｎ
−アセチルアミノ−２−ヒドロキシエチルベンゾエート ４００ｍｇ（収率７０
％）を得た。融点１０５．５〜１０６．０℃。  
Ｃ１８Ｈ１８Ｎ２Ｏ６  元素分析
【００３３】
【表９】
2006160752.tif 000016
【００３４】
＜合成例１０＞  ５−（４−ニトロベンジル）−Ｎ−アセチルアミノ−２−アセ
トキシエチルベンゾエートの調製
窒素大気圧下、５−（４−ニトロベンジル）アミノ−２−ヒドロキシエチルベン
ゾエート（５００ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌｅ）の無水酢酸（１０ｍｌ）中溶液に
０℃で濃Ｈ２ＳＯ４（０．５ｍｌ）を注意して添加した。反応混合液を１０℃で
３０分間撹拌した。上記反応混合液に氷片をゆっくり添加した後、溶媒を真空下
で除去した。上記反応混合液を水で希釈した後、酢酸エチルで抽出した。有機層
をＨ２Ｏ、１０％ＮａＨＣＯ３（３０ｍｌ×３）溶液、５％ＨＣｌ（３０ｍｌ×
２）溶液及びブラインで洗浄して、無水ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させ
、残留物をカラムクロマトグラフィーで精製して、淡黄色油状液体の５−（４−
ニトロベンジル）−Ｎ−アセチルアミノ−２−アセトキシエチルベンゾエート４
５０ｍｇ（収率７１％）を得た。 
Ｃ２０Ｈ２０Ｎ２Ｏ７の元素分析
【００３５】
【表１０】
2006160752.tif 000017
【００３６】
＜合成例１１＞  ５−（４−ニトロベンゾイル）アミノサリチル酸の調製
５−アミノサリチル酸（５００ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌｅ）及び４−ニトロベン
ゾイルクロライド（７００ｍｇ、３．７７ｍｍｏｌｅ）を使用して合成例１と類
似の方法を行なうことにより、淡黄色固体状の５−（４−ニトロベンゾイル）ア
ミノサリチル酸５５０ｍｇ（収率５６％）を得た。融点２７０〜２７１℃。
Ｃ１４Ｈ１０Ｎ２Ｏ６の元素分析
【００３７】
【表１１】
2006160752.tif 000018
【００３８】
＜合成例１２＞  ５−（４−ニトロベンゼンスルホニル）アミノサリチル酸の調
製
５−アミノサリチル酸（５００ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌｅ）及び４−ニトロベン
ゼンスルホニルクロライド（７２０ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌｅ）を使用して合成
例１と類似な方法にしたがって、黄色固体状の５−（４−ニトロベンゼンスルホ
ニル）アミノサリチル酸３９０ｍｇ（収率３５％）を得た。融点２３９〜２４０
℃。 
Ｃ１３Ｈ１０Ｎ２Ｏ７Ｓの元素分析
【００３９】
【表１２】
2006160752.tif 000019
【００４０】
＜合成例１３＞  ５−［２−（４−ニトロフェニル）エチル］アミノサリチル酸
の調製 
５−アミノサリチル酸（５００ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌｅ）及び４−ニトロフェ
ネチルブロマイド（９００ｍｇ、３．９２ｍｍｏｌｅ）を使用して合成例１と類
似の方法を行なうことにより、淡黄色固体状の５−（４−ニトロフェネチル）ア
ミノサリチル酸８９０ｍｇ（収率５０％）を得た。融点２３４〜２３６℃。
【００４１】
Ｃ１５Ｈ１４Ｎ２Ｏ５の元素分析
【００４２】
【表１３】
2006160752.tif 000020
【００４３】
＜合成例１４＞  ５−［３−（４−ニトロフェニル）−ｎ−プロピル］アミノサ
リチル酸の調製
５−アミノサリチル酸（５００ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌｅ）及び３−（４−ニト
ロフェニル）プロピルブロマイド（９５０ｍｇ、３．９２ｍｍｏｌｅ）を使用し
て合成例１と類似の方法を行なうことにより、淡黄色固体状の５−［３−（４−
ニトロフェニル）−ｎ−プロピル］アミノサリチル酸５２０ｍｇ（収率５０％）
を得た。融点２２９〜２３１℃。 
Ｃ１６Ｈ１６Ｎ２Ｏ５の元素分析
【００４４】
【表１４】
2006160752.tif 000021
【００４５】
＜実施例＞  
胚児期のマウスから１次大脳皮質細胞培養液を調製して、各化合物の神経保護作
用を調べるために使用した。神経系疾患において、ニューロン死滅のメカニズム
と薬理学的関与を研究するのに、マウス大脳皮質細胞培養系が広範囲に使用され
てきた。要約すれば、動物保護委員会(ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  ａｎｉｍ
ａｌ  ｃａｒｅ  ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ)によって承認されたプロトコルにしたが
って、生後１５日のマウスの脳からマウスの大脳皮質を除去した。上記新皮質を
丁寧に粉末化した後、１００μｇ/ｍｌポリ−Ｄ−リシンと４μｇ/ｍｌラミニン
で前もってコートされた２４ウェルプレート(５つの半球／１プレート)に塗抹し
た。塗抹培地は、５％ウマ血清、５％ウシ胎児血清、２ｍＭグルタミン及び２１
ｍＭブドウ糖を補充したイーグルの最少必須培地（Ｅａｇｌｅｓ  ｍｉｎｉｍａ
ｌ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｍｅｄｉａ、ＭＥＭ、Ｅａｒｌｅｓ  ｓａｌｔｓ、グ
ルタミン欠如状態で供給）からなる。加湿化された５％ＣＯ２大気下、３７℃で
培養を維持した。ｉｎ  ｖｉｔｒｏで７日間培養（ＤＩＶ  ７）したあと、培養
液を、塗抹培地と同一であるが胎児血清が欠乏した成長培地に継代させた。ＤＩ
Ｖ  ７〜９で、グリア細胞の過成長を止めるために、１０ｍＭシトシンアラビノ
フラノシドを注入した。以後、一週当り２回ずつニューロンとグリア細胞の混合
培養液を与えた。 
ＮＭＤＡ又はＺｎ２＋によるニューロン損傷を誘導する為に、大脳皮質細胞培養
液をＨＥＰＥＳで緩衝された対照塩溶液（ＨＣＳＳ：１２０ｎＭ  ＮａＣｌ、５
ｍＭ  ＫＣｌ、１．６ｍＭ  ＭｇＣｌ２、２．３ｍＭ  ＣａＣｌ２、１５ｍＭ  
ブドウ糖、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ及び１０ｍＭ  ＮａＯＨ））中で１０分間ＮＭ
ＤＡの有毒服用量に、又は、３０分間Ｚｎ２＋の有毒服用量に接触させた。接触
後に培養液を３回洗浄し、ブドウ糖２５ｍＭ及び重炭酸ナトリウム２６．２ｍＭ
に調節されたＭＥＭで取り替えたあと、２０〜２４時間ＣＯ２培養器に放置した
。フリーラジカル神経毒性を誘導する為に、ブドウ糖２５ｍＭ及び重炭酸ナトリ
ウム２６．２ｍＭに調節されたＭＥＭ中で、大脳皮質細胞培養液を２０〜２４時
間の間継続してＦｅ２＋又はＢＳＯに接触させた。
位相差光学顕微鏡で定量する、又は、上記で説明した方式（Ｋｏｈ  ａｎｄ  Ｃ
ｈｏｉ、Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０：８３−９０、１９８７
）のように、神経毒素による損傷後、２４時間、バシング（ｂａｔｈｉｎｇ）培
地で放出された乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）の量を測定することによって全体細胞
損傷を定量した。ニューロン死滅パーセントを、５００μＭ  ＮＭＤＡ（＝１０
０）又は虚偽対照（＝０）と継続的に接触させた後、２４時間で放出された平均
ＬＤＨ量として標準化した。 
抗酸化効果を調べる為に、安定なフリーラジカルである、ＤＰＰＨ（２，２−ｄ
ｉｐｈｅｎｙｌ−１−ｐｉｃｒｙｌ−ｈｙｄｒａｚｙｌ  ｒａｄｉｃａｌ）をエ
タノールに溶解させ、１００μＭ溶液を調製した。化合物をＤＰＰＨ又はエタノ
ールと反応させた。 ３０分間培養後に、波長５１７ｎｍでのＤＰＰＨ吸光度の
相対的な減少度を分光光度計で測定した。 
＜実施例１＞  ５−アミノサリチル酸の抗酸化作用 
５−アミノサリチル酸（ＡＳ）の神経保護作用を１次大脳皮質細胞培養液で調査
した。１０〜３００μＭのＡＳを注入しても、３００μＭのＮＭＤＡに１０分接
触後に２４時間展開されたニューロン死滅を軽減できなかった(図 １ａ)。興味
深いのは、１０〜１００μＭのＡＳを添加すると、Ｆｅ２＋に２４時間接触した
後のフリーラジカル神経毒性を服用量依存的に防止した(図 １ｂ)。３００μＭ
のＺｎ２＋に３０分間接触後に２４時間の間展開されたニューロン死滅は、Ｚｎ
２＋処理の間及びＺｎ２＋処理後にＡＳを継続的に注入しても減少しなかった(
図 １ｃ)。フリーラジカル神経毒性に対するＡＳの神経保護作用は、ＡＳが安定
なフリーラジカルであるＤＰＰＨの量を減少させるのと同じく、化合物の直接的
な抗酸化特性に起因する(表１)。ビタミンＥの膜透過可能な形態であるトロロク
ス（ｔｒｏｌｏｘ）と比較する時、ＡＳは弱い抗酸化剤である。
【００４６】
[表 1] 
ＡＳの抗酸化特性
【００４７】
【表１５】
2006160752.tif 000022
【００４８】
ＡＳ又はトロロクスをエタノールに溶解させた１００μＭ  ＤＰＰＨと３０分間
反応させた。エタノール単独から得たバックグラウンド値を控除した後に、平均
±ＳＥＭ(１条件当たりｎ＝３試験管)とし、５１７ｎｍでＤＰＰＨの量の変化
を測定することによって抗酸化特性を分析した。＊は、ＡＮＯＶＡ及びスチュー
デント−ニューマン−カウルズテスト（Ｓｔｕｄｅｎｔ−Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｅｕ
ｌｓ  ｔｅｓｔ）を使用した場合において、Ｐ  ＜  ０．０５でＤＰＰＨ単独の
場合と有意な差があることを示す。 
ＡＳは、ＮＭＤＡ又はＺｎ２＋神経毒性に対する有益な効果はないが、フリーラ
ジカル損傷からニューロンを保護できる。しかし、ＡＳは、フリーラジカルを除
去する効果はトロロクスより弱い。 
＜実施例２＞  ５−ベンジルアミノサリチル酸及びその誘導体の神経保護効果
＜２−１＞  ５−ベンジルアミノサリチル酸の神経保護効果
ＢＡＳを合成して大脳皮質細胞培養液に誘導されたニューロン損傷に対して調べ
た。３００μＭの５−ベンジルアミノサリチル酸（ＢＡＳ）を同時に加えると、
ＮＭＤＡに誘導されたニューロン死滅をおよそ５０％程度減少させた(図 ２ａ)
。５０μＭ Ｆｅ２＋(図 ２ｂ)又は１０ｍＭ  ＢＳＯ(図 ２ｃ)に接触させた後
のニューロン死滅は、１μＭ  ＢＡＳの存在下で十分に減少し、３μＭ  ＢＡＳ
の添加によって、ほとんど完全に遮断された。３０〜３００μＭのＢＡＳの投与
は、３０分間３００μＭ  Ｚｎ２＋に接触させた後、２４時間服用量依存的にニ
ューロン死滅を減少させた(図 ２ｄ)。ＡＳ又はトロロクスと同様、ＢＡＳは、
直接的な抗酸化剤として作用した(表 ２)。ＢＡＳの抗酸化特性は、たった１μ
Ｍの低服用量においても観察された。 
[表 ２] 
ＢＡＳの抗酸化特性 
【００４９】
【表１６】
2006160752.tif 000023
【００５０】
ＢＡＳを、エタノールに溶解させた１００μＭ  ＤＰＰＨと３０分間反応させた
。エタノール単独から得たバックグラウンド値を控除した後に、平均±ＳＥＭ(
１条件当たりｎ＝３試験管)とし、５１７ｎｍでＤＰＰＨの量の変化を測定して
抗酸化特性を分析した。＊は、ＡＮＯＶＡ及びスチューデント−ニューマン−カ
ウルズテストを使用した場合において、Ｐ＜０．０５でＤＰＰＨ単独（［ＢＡＳ
＝０］の場合と有意な差があることを示す。
＜２−２＞  ＢＡＳ誘導体 
ＢＡＳ誘導体は、ＢＡＳのベンジルアミノ基のパラ位の−Ｈを、−ＮＯ２に［５
−（４−ニトロベンジルアミノ）サリチル酸、ＮＢＡＳ］、−Ｃｌに［５−（４
−クロロベンジルアミノ）サリチル酸、ＣＢＡＳ］、−ＣＦ３に[５−（４−ト
リフルオロメチルベンジルアミノ）サリチル酸、ＴＢＡＳ] 置換することによっ
て合成した。電子求引性基へこのような置換をおこなっても、ＮＭＤＡ、Ｚｎ２
＋又はフリーラジカル神経毒性に対するＢＡＳの神経保護効果は減少しなかった
(図 ３、４、５)。このようなＢＡＳ誘導体は、フリーラジカル神経毒性を防止
するに際してＢＡＳよりもさらに強力だった。 
[表３] 
ＮＢＡＳの抗酸化特性
【００５１】
【表１７】
2006160752.tif 000024
【００５２】
ＮＢＡＳを、エタノールに溶解させた１００μＭ  ＤＰＰＨと３０分間反応させ
た。 エタノール単独から得たバックグラウンド値を控除した後に、平均±ＳＥ
Ｍ(１条件当りｎ＝３試験管)とし、５１７ｎｍでＤＰＰＨの量の変化を測定して
抗酸化特性を分析した。＊は、ＡＮＯＶＡ及びスチューデント−ニューマン−カ
ウルズテストを使用した場合において、Ｐ＜０．０５でＤＰＰＨ単独（［反応体
＝０］）の場合と有意な差があることを示す。
−ＮＯ２を、−Ｆ又は−ＯＣＨ３に置換した場合には、ＮＭＤＡ毒性に対して神
経保護が減少したが、フリーラジカル損傷に対しては、神経保護能力が増加する
ことがわかった(図６及び図７)。
＜実施例３＞  ５−（ペンタフルオロベンジル）アミノサリチル酸の神経保護効
果 
５−（ペンタフルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＰＢＡＳ）を合成してニュ
ーロン損傷について試験した。１００〜１０００μＭ  ＰＢＡＳを同時に加える
と、服用量依存的にＮＭＤＡに誘導されたニューロン死滅が減少した。３００μ
Ｍ  ＰＢＡＳで処理すると、ＮＭＤＡ神経毒性がおよそ６５％程度減少した(図
８ａ)。１ｍＭまでＰＢＡＳの服用量を増加すると、３００μＭ  ＮＭＤＡへの
接触後のニューロン死滅を完全に遮断した。５０μＭ  Ｆｅ２＋を継続的に接触
にさせた後のニューロン死滅は、１μＭ  ＰＢＡＳを加えることにより十分に減
少した。Ｆｅ２＋で誘導されたニューロン死滅が、３μＭ  ＰＢＡＳの存在下で
ほぼ完全に遮断された。１０ｍＭ  ＢＳＯへの接触より及ぼされるフリーラジカ
ル神経毒性は、１μＭ  ＰＢＡＳの注入で遮断された。ＰＢＡＳがＤＰＰＨの量
を減少させ(表４)、これは、ＰＢＡＳが直接的な抗酸化剤としてフリーラジカル
神経毒性を遮断したことを示している。１００〜３００μＭ  ＰＢＡＳを同時に
加えると、Ｚｎ２＋神経毒性は軽減した(図８ｄ)。 
[表４] 
ＰＢＡＳの抗酸化特性
【００５３】
【表１８】
2006160752.tif 000025
【００５４】
ＰＢＡＳをエタノールに溶解させた１００μＭ  ＤＰＰＨと３０分間反応させた
。 エタノール単独から得たバックグラウンド値を控除した後に、平均±ＳＥＭ(
１条件当りｎ＝３試験管)とし、５１７ｎｍでＤＰＰＨの量の変化を測定して抗
酸化特性を分析した。＊は、ＡＮＯＶＡ及びスチューデント−ニューマン−カウ
ルズテストを使用した場合において、＜０．０５でＤＰＰＨ単独（［ＰＢＡＳ］
＝０）の場合と有意な差があることを示す。 
＜実施例４＞  ＮＢＡＳ誘導体（Ｘ＝ＣＨ２）の神経保護効果
５−（４−ニトロベンジル）アミノ−２−ヒドロキシエチルベンゾエート（ＮＡ
ＨＥ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝ＣＨ２ＣＨ３、Ｒ３＝Ｈ）、５−（４−ニトロベンジル
）−Ｎ−アセチルアミノ−２−ヒドロキシエチルベンゾエート（ＮＮＡＨＥ、Ｒ
１  ＝ＣＯＣＨ３、Ｒ２＝ＣＨ２ＣＨ３、Ｒ３＝Ｈ）及び５−（４−ニトロベン
ジル）−Ｎ−アセチルアミノ−２−アセトキシエチルベンゾエート（ＮＮＡＡＥ
、Ｒ１＝ＣＯＣＨ３、Ｒ２＝ＣＨ２ＣＨ３、Ｒ３＝ＣＯＣＨ３）のような数種類
のＰＢＡＳ誘導体を合成し、大脳皮質細胞培養液に対する神経保護作用を研究し
た。上記誘導体は、３００μＭでＮＭＤＡ神経毒性を軽減させた(図９〜１１)。
１０μＭ  ＮＡＨＥ、ＮＮＡＨＥ又はＮＮＡＡＥの注入により、Ｆｅ２＋誘導フ
リーラジカル神経毒性は遮断された。 
＜実施例５＞  ＮＢＡＳ誘導体（Ｘ＝  ＣＯ、ＳＯ２、ＣＨ２ＣＨ２又はＣＨ２
ＣＨ２ＣＨ２）の神経保護効果
ＮＢＡＳのＸ(ＣＨ２)基をＣＯ［５−（４−ニトロベンゾイル）アミノサリチル
酸、ＮＢＡＡ］、ＳＯ２［５−（４−ニトロベンゼンスルホニル）アミノサリチ
ル酸、ＮＢＳＡＡ］、ＣＨ２ＣＨ２［５−（４−ニトロフェネチル）アミノサリ
チル酸、ＮＰＡＡ］、又は、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２［５−［３−（４−ニトロフェ
ニル）−ｎ−プロピル］アミノサリチル酸、ＮＰＰＡＡ］で置換した。３０μＭ
の服用量で、ＮＢＡＡはＮＭＤＡの神経毒性を十分に軽減した。しかし、ＮＭＤ
Ａに対するこのような保護効果は、３００μＭの服用量までそれ以上増加しなか
った(図１２ａ)。興味深いのは、３０〜３００μＭ  ＮＢＳＡＡの注入によって
、服用量依存的な傾向でＮＭＤＡ神経毒性を軽減した(図１３ａ)。３００μＭ  
ＮＢＳＡＡの注入で、３００μＭ  ＮＭＤＡの接触後に９０〜１００％ニューロ
ン死滅が顕著に減少した。ＮＢＡＡ及びＮＢＳＡＡもまたＦｅ２＋損傷に対する
神経保護剤ではあるがフリーラジカル神経毒性を減少させるにおいては、ＮＢＡ
Ｓより弱かった(図１２及び図１３、表５)。
ＸとしてのＣＨ２を、ＣＨ２ＣＨ２又はＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２で置換すれば、ＮＭ
ＤＡ神経毒性に対するＮＢＡＳの保護能力は減少した。３００μＭのＮＰＡＡ又
はＮＰＰＡＡの投与によって、大脳皮質ニューロンでＮＭＤＡにより誘導さたニ
ューロン死滅はわずかに減少した(図１４及び図１５)。対照的に、１μＭのＮＰ
ＡＡ又はＮＰＰＡＡの存在下で、Ｆｅ２＋により誘導されたニューロン死滅が完
全に遮断されたことから示されるように、ＮＰＡＡ又はＮＰＰＡＡはフリーラジ
カル神経毒性の遮断において、ＮＢＡＳよりさらに効果的であることが立証され
た。 
[表５] 
ＮＢＡＳ誘導体の抗酸化特性 
【００５５】
【表１９】
2006160752.tif 000026
【００５６】
ＮＢＡＳ誘導体(各々１００μＭ)をエタノールに溶解させた１００μＭＤＰＰ
Ｈと３０分間反応させた。エタノール単独から得たバックグラウンド値を控除し
た後に、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝３試験管)とし、５１７ｎｍでＤＰＰＨの
量の変化を測定して抗酸化特性を分析した。＊は、ＡＮＯＶＡ及びスチューデン
ト−ニューマン−カウルズテストを使用した場合において、＜０．０５でＤＰＰ
Ｈ単独の場合と有意な差があることを示す。
上記の結果は、構造式（Ｉ）の化合物が興奮毒性、Ｚｎ２＋神経毒性及びフリー
ラジカル神経毒性と関連した神経変性疾患を防止するのに効果的に利用できるこ
とを示している。 
構造式（Ｉ）の化合物の人への投与は、経口投与を含む患者又は動物の血管内に
上記化合物を導入できる任意の方法、及び、静脈注射、筋肉内注射及び皮下注射
によって行なうことができる。上記動物には、猫、犬、家禽、家畜等を含むが、
これらに限定されるものではない。 
予防的治療のために指示された化合物は、好ましくは、一般的には１日に体重１
キログラム当り約０．１ｍｇ〜約２０ｍｇの範囲で服用することであろう。より
好ましいのは、１日に体重１キログラム当り約０．２ｍｇないし約１０ｍｇの範
囲で服用することであろう。最も好ましいのは、１日に体重１キログラム当り約
０．５ｍｇ〜約５ｍｇの範囲で服用することであろう。適当な服用量は、１日あ
たり複数回に分けた服用量で投与できる。このように数回に分けて服用する場合
には、単位服用形態で投与できる。一般的に、一回での服用又は数回に分けて服
用する場合、服用単位当り約１ｍｇから約１００ｍｇの活性化合物を含むことが
できる。より好ましい服用量は、服用単位あたり約２ｍｇ〜５０ｍｇの活性化合
物を含むことであろう。最も好ましい服用量は、服用単位当り約３ｍｇ〜約２５
ｍｇの活性化合物を含む服用形態であろう。 
活性化合物は、通常的に薬学的に許容される製剤で投与される。上記製剤は、一
つ又はそれ以上の薬学的に許容される担体又は希釈剤と一緒に活性化合物を含む
ことができる。また、他の治療剤もさらに製剤に含んでもよい。薬学的に許容さ
れる担体又は希釈剤は、不要の副作用を誘発することのない上記活性化合物の運
搬のために適当な運搬体を提供する。上記製剤で活性化合物の運搬は、経口経路
、鼻腔経路、局所経路、口内経路及び舌下経路等の多様な経路又は皮下経路、筋
肉内経路、静脈経路及び皮内経路のような非経口的投与によって行なわれる。
経口投与のための製剤は、潤滑剤、防腐剤、界面活性剤又は分散剤の一つ又はそ
れ以上と一緒にゼラチン又はヒドロキシプロピルメチルセルロースのような結合
剤内に分散された活性化合物を含むカプセルの形態でもかまわない。上記カプセ
ル又は錠剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース内へ活性化合物を配置した
ものの中に、制御放出製剤を含んでもよい。 
非経口的投与のための製剤は、水溶性又は非水溶性の等張滅菌注射溶液や懸濁液
でもかまわない。このような溶液及び懸濁液は、経口投与用の製剤内に使用する
ためのものとして述べた一つ又はそれ以上の担体又は希釈剤を含んだ、滅菌され
た粉末や顆粒から調製できる。
【００５７】
（発明の要旨）
本発明は以下を提供する。
（１）次の構造式(I)
【００５８】
【化１】
2006160752.tif 000027
【００５９】
（上記式中、 
Ｘは、ＣＯ、ＳＯ２、又は、（ＣＨ２）ｎ（ｎは１から５の整数である）
Ｒ１は、水素、アルキル基又はアルカノイル基、
Ｒ２は、水素又はアルキル基、
Ｒ３は、水素又はアセトキシ基、及び、
Ｒ４は、無置換又はニトロ基、ハロゲン、ハロアルキル基及びＣ１−Ｃ５アルコ
キシ基からなる群から選択された１つ以上の置換基で置換されたフェニル基であ
る）で表わされる化合物、又は、
その薬学的に許容される塩。 
（２）Ｘは、ＣＯ、ＳＯ２、又は、（ＣＨ２）ｎ（ｎは１から５の整数
である）、 Ｒ１は、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル基又はＣ２−Ｃ５アルカノイル
基、Ｒ２は、水素又はＣ１−Ｃ５アルキル基、Ｒ３は、水素又はアセトキシ基、
及び、Ｒ４は、無置換又はニトロ基、ハロゲン、ハロアルキル基及びＣ１−Ｃ５
アルコキシ基からなる群から選択された１つ以上の置換基で置換されたフェニル
基であることを特徴とする項目1に記載の化合物、又は、その薬学的に許容さ
れる塩。 
（３）Ｘは、ＣＯ、ＳＯ２、又は、（ＣＨ２）ｎ（ｎは、１、２、又は
、３）、Ｒ１は、水素、Ｃ１−Ｃ３アルキル基又はＣ２−Ｃ３アルカノイル基、
Ｒ２は、水素又はＣ１−Ｃ３アルキル基、Ｒ３は、水素又はアセトキシ基、及び
、Ｒ４は、無置換又はニトロ基、ハロゲン基、ハロ（Ｃ１−Ｃ３）アルキル基及
びＣ１−Ｃ３アルコキシ基からなる群から選択された１つ以上の置換基で置換さ
れたフェニル基であることを特徴とする項目1に記載の化合物、又は、その薬
学的に許容される塩。    
（４）５-ベンジルアミノサリチル酸（ＢＡＳ）、５−（４-ニトロベン
ジル）アミノサリチル酸（ＮＢＡＳ）、５−（４−クロロベンジル）アミノサリ
チル酸（ＣＢＡＳ）、５−（４−トリフルオロメチルベンジル）アミノサリチル
酸（ＴＢＡＳ）、５−（４−フルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＦＢＡＳ）
、５−（４−メトキシベンジル）アミノサリチル酸（ＭＢＡＳ）、５−（４−ペ
ンタフルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＰＢＡＳ）、５−（４−ニトロベン
ジル）アミノ−２−ヒドロキシエチルベンゾエート、５−（４−ニトロベンジル
）−Ｎ−アセチルアミノ―２―ヒドロキシエチルベンゾエート、５−（４−ニト
ロベンジル）−Ｎ−アセチルアミノ−２−アセトキシエチルベンゾエート、５−
（４−ニトロベンゾイル）アミノサリチル酸、５−（４−ニトロベンゼンスルホ
ニル）アミノサリチル酸、５−（４−ニトロフェネチル)アミノサリチル酸、及
び、５−［３−（４−ニトロフェニル）−ｎ−プロピル］アミノサリチル酸、又
は、それらの薬学的に許容される塩からなる群から選択された一つであることを
特徴とする項目１に記載の化合物。 
（５）中枢神経系（ＣＮＳ）への急性又は慢性的損傷から中枢神経を保
護するための薬物の製造のための、項目１、２、３又は４に記載の化合物の使
用。 
（６）前記ＣＮＳ損傷は、局所貧血症（ｉｓｃｈｅｍｉａ）、低酸素症
（ｈｙｐｏｘｉａ）、低血糖症（ｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉａ）、脳外傷（ｔｒａ
ｕｍａｔｉｃ  ｂｒａｉｎ  ｉｎｊｕｒｙ）、脊椎外傷（ｔｒａｕｍａｔｉｃ  
ｓｐｉｎａｌ  ｃｏｒｄ  ｉｎｊｕｒｙ）、てんかん（ｅｐｉｌｅｐｓｙ）、ハ
ンチントン氏病（Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ‘ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、パーキンソン
氏病（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、アルツハイマー病（Ａｌｚ
ｈｅｉｍｅｒ‘ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）又は筋萎縮性側索硬化症（ａｍｙｏｔｒｏ
ｐｈｉｃ  ｌａｔｅｒａｌ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）から誘発されることを特徴と
する項目５に記載の使用。 
（７）前記ＣＮＳ損傷は、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテート（Ｎ−ｍｅ
ｔｈｙｌ−Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ、ＮＭＤＡ）グルタメート受容体の活性、Ｚ
ｎ２＋の出入及び蓄積又はフリーラジカルによって誘発されることを特徴とする
項目５に記載の使用。 
（８）前記化合物は、ＮＭＤＡ神経毒性、Ｚｎ２＋神経毒性を弱毒化さ
せ、直接的な抗酸化剤としてフリーラジカル神経毒性を遮断することを特徴とす
る項目５、６、又は、７に記載の使用。 
（９）ＮＭＤＡ神経毒性、Ｚｎ２＋神経毒性又は酸化的ストレスと連係
した神経系疾患を治療し、又は、予防するための薬物の製造のための項目１、
２、３、又は、４に記載の化合物の使用。 
（１０）項目１、２、３又は４に記載の神経保護化合物を薬学的に適
当な量含む、中枢神経系（ＣＮＳ）の急性又は慢性的損傷から中枢神経を保護す
るための組成物。 
【００６０】
本発明は、具体的な形態で説明されてはいるが、本発明がこのような詳細な形態
に制限されるものと解釈されるものではない。本発明の思想と範囲内で多様な均
等物、変化及び変形がなされることが可能であり、このような均等形態も本発明
の一部分である。 
＜参考（Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ）＞  
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（１６）４３：２２，１９９９．  
Ｄ．Ｅ．Ｂｒｅｄｅｓｅｎ，Ｍ．Ｗｉｅｄａｕ−Ｐａｚｏｓ，Ｊ．Ｊ．Ｇｏｔｏ
，Ｓ．Ｒａｂｉｚａｄｅｈ，Ｊ．Ａ．Ｒｏｅ，Ｅ．Ｂ．Ｇｒａｌｌａ，Ｌ．Ｍ．
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ｙ  ４７：Ｓ３６−８，１９９６．  
Ｊ．Ｗ．Ｏｌｎｅｙ．Ｒｅｔｉｎａ  ２：３４１−３５９，１９８２．  
Ｄ．Ｗ．Ｃｈｏｉ  ａｎｄ  Ｊ．Ｙ．Ｋｏｈ． Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏ
ｓｃｉ．  ２１：３４７−７５：３４７−３７５，１９９８．  
Ｄ．Ｗ．Ｃｈｏｉ．  Ｎｅｕｒｏｎ  １：６２３−６３４，１９８８．  
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ｌ．  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ．５ （１）：８１−８９，１９８８．  
Ｅ．Ｙ．Ｋｉｍ，Ｊ．Ｙ．Ｋｏｈ，Ｙ．Ｈ．Ｋｉｍ，Ｓ．Ｓｏｈｎ  ａｎｄ  Ｂ
．Ｊ．Ｇｗａｇ．  Ｅｕｒ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  １１：  ３２７−３３
４．１９９９  
Ｊ．Ｌ  Ｍｏｎｔａｓｔｒｕｃ，Ｏ．Ｒａｓｃｏｌ，ａｎｄ  Ｊ．Ｍ．Ｓｅｎａ
ｒｄ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｂｉｏｂｅｈａｖ．Ｒｅｖ．２１（４）：４７７−
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Ｋ．Ａ．Ｊｅｌｌｉｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｃ．Ｂａｎｃｈｅｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒａ
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Ｍ．Ｆ．Ｂｅａｌ． Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．３８（３）：３５７−３６６，１
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Ｍ．Ｐ．Ｃｕａｊｕｎｇｃｏ  ａｎｄ  Ｇ．Ｊ．Ｌｅｅｓ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ
．Ｒｅｖ． ２３（３）：２１９−２３６，１９９７．  
Ｐ．Ｈ．Ｃｈａｎ．Ｓｔｒｏｋｅ ２７（６）：１１２４−１１２９，１９９６
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Ｓ．Ｊ．Ｗｏｎ，Ｅ．Ｃ．Ｐａｒｋ，Ｂ．Ｒ．Ｒｙｕ，Ｈ．Ｗ  Ｋｏ，Ｓ．Ｓｏ
ｈｎ，  Ｈ．Ｊ．Ｋｗｏｎ，ａｎｄ  Ｂ．Ｊ．Ｇｗａｇ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ
ｏｇｙ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅ （ｉｎ  ｐｒｅｓｓ），２０００  
【図面の簡単な説明】
【００６１】
【図１】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は１０〜３００μＭの５−アミノサリチル酸(ＡＳ)と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（１ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後にバシング（ｂａｔｈｉｎｇ）培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当り ｎ＝９〜１２（１ａ）、ｎ＝４〜８（１ｂ）又はｎ＝４（１ｃ）の培養ウェル)を測定することによって分析し、疑似洗浄（ｓｈａｍ  ｗａｓｈ）（＝０）の後及び継続して５００μＭ  ＮＭＤＡ（＝１００）に接触させた後、２４時間の平均ＬＤＨ流出量を目盛った。＊は、ＡＮＯＶＡ及びスチューデント−ニューマン-カウルズテスト（Ｓｔｕｄｅｎｔ−Ｎｅｕｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ‘  ｔｅｓｔ）を使用した場合において、ｐ＜０．０５で相応する対照と有意な差があることを示す。
【図２】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は１０〜３００μＭの５−アミノサリチル酸(ＡＳ)と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（１ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後にバシング（ｂａｔｈｉｎｇ）培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当り ｎ＝９〜１２（１ａ）、ｎ＝４〜８（１ｂ）又はｎ＝４（１ｃ）の培養ウェル)を測定することによって分析し、疑似洗浄（＝０）の後及び継続して５００μＭ  ＮＭＤＡ（＝１００）に接触させた後、２４時間の平均ＬＤＨ流出量を目盛った。
【図３】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は１０〜３００μＭの５−アミノサリチル酸(ＡＳ)と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（１ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後にバシング（ｂａｔｈｉｎｇ）培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当り ｎ＝９〜１２（１ａ）、ｎ＝４〜８（１ｂ）又はｎ＝４（１ｃ）の培養ウェル)を測定することによって分析し、疑似洗浄（＝０）の後及び継続して５００μＭ  ＮＭＤＡ（＝１００）に接触させた後、２４時間の平均ＬＤＨ流出量を目盛った。
【図４】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−ベンジルアミノサリチル酸(ＢＡＳ)と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（２ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（２ｂ）、１０ｍＭのＢＳＯ（２ｃ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（２ｄ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝７〜８（２ａ）、ｎ＝３〜６（２ｂ）、ｎ＝４（２ｃ）又はｎ＝４（２ｄ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図５】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−ベンジルアミノサリチル酸(ＢＡＳ)と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（２ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（２ｂ）、１０ｍＭのＢＳＯ（２ｃ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（２ｄ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝７〜８（２ａ）、ｎ＝３〜６（２ｂ）、ｎ＝４（２ｃ）又はｎ＝４（２ｄ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図６】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−ベンジルアミノサリチル酸(ＢＡＳ)と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（２ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（２ｂ）、１０ｍＭのＢＳＯ（２ｃ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（２ｄ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝７〜８（２ａ）、ｎ＝３〜６（２ｂ）、ｎ＝４（２ｃ）又はｎ＝４（２ｄ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図７】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−ベンジルアミノサリチル酸(ＢＡＳ)と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（２ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（２ｂ）、１０ｍＭのＢＳＯ（２ｃ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（２ｄ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝７〜８（２ａ）、ｎ＝３〜６（２ｂ）、ｎ＝４（２ｃ）又はｎ＝４（２ｄ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図８】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−ニトロベンジル）アミノサリチル酸（ＮＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（３ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（３ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（３ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝７〜８（３ａ）、ｎ＝３〜６（３ｂ）又はｎ＝４（３ｃ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図９】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−ニトロベンジル）アミノサリチル酸（ＮＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（３ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（３ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（３ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝７〜８（３ａ）、ｎ＝３〜６（３ｂ）又はｎ＝４（３ｃ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図１０】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−ニトロベンジル）アミノサリチル酸（ＮＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（３ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（３ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（３ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝７〜８（３ａ）、ｎ＝３〜６（３ｂ）又はｎ＝４（３ｃ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図１１】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−クロロベンジル）アミノサリチル酸（ＣＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（４ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（４ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（４ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝３〜４（４ａ）、ｎ＝３〜１２（４ｂ）又はｎ＝４（４ｃ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図１２】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−クロロベンジル）アミノサリチル酸（ＣＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（４ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（４ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（４ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝３〜４（４ａ）、ｎ＝３〜１２（４ｂ）又はｎ＝４（４ｃ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図１３】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−クロロベンジル）アミノサリチル酸（ＣＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（４ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（４ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（４ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝３〜４（４ａ）、ｎ＝３〜１２（４ｂ）又はｎ＝４（４ｃ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図１４】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−トリフルオロメチルベンジル）アミノサリチル酸（ＴＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（５ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（５ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（５ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ（１条件当りｎ＝３〜４（５ａ）、ｎ＝３〜１１（５ｂ）又はｎ＝４（５ｃ）の培養ウェル）を測定することによって分析した。
【図１５】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−トリフルオロメチルベンジル）アミノサリチル酸（ＴＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（５ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（５ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（５ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ（１条件当りｎ＝３〜４（５ａ）、ｎ＝３〜１１（５ｂ）又はｎ＝４（５ｃ）の培養ウェル）を測定することによって分析した。
【図１６】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−トリフルオロメチルベンジル）アミノサリチル酸（ＴＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（５ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（５ｂ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（５ｃ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ（１条件当りｎ＝３〜４（５ａ）、ｎ＝３〜１１（５ｂ）又はｎ＝４（５ｃ）の培養ウェル）を測定することによって分析した。
【図１７】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−フルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＦＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（６ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（６ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝７〜８（６ａ）又はｎ＝４〜８（６ｂ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図１８】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−フルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＦＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（６ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（６ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝７〜８（６ａ）又はｎ＝４〜８（６ｂ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図１９】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−メトキシベンジル）アミノサリチル酸（ＭＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（７ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（７ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝７〜８（７ａ）又はｎ＝４〜８（７ｂ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図２０】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−メトキシベンジル）アミノサリチル酸（ＭＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（７ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（７ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝７〜８（７ａ）又はｎ＝４〜８（７ｂ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図２１】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（ペンタフルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＰＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（８ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（８ｂ）、１０ｍＭのＢＳＯ（８ｃ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（８ｄ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝１１〜１６（８ａ）、ｎ＝３〜６（８ｂ）、ｎ＝４〜１１（８ｃ）又はｎ＝１２（８ｄ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図２２】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（ペンタフルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＰＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（８ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（８ｂ）、１０ｍＭのＢＳＯ（８ｃ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（８ｄ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝１１〜１６（８ａ）、ｎ＝３〜６（８ｂ）、ｎ＝４〜１１（８ｃ）又はｎ＝１２（８ｄ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図２３】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（ペンタフルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＰＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（８ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（８ｂ）、１０ｍＭのＢＳＯ（８ｃ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（８ｄ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝１１〜１６（８ａ）、ｎ＝３〜６（８ｂ）、ｎ＝４〜１１（８ｃ）又はｎ＝１２（８ｄ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図２４】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（ペンタフルオロベンジル）アミノサリチル酸（ＰＢＡＳ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（８ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（８ｂ）、１０ｍＭのＢＳＯ（８ｃ）、又は、３００μＭのＺｎ２＋（８ｄ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝１１〜１６（８ａ）、ｎ＝３〜６（８ｂ）、ｎ＝４〜１１（８ｃ）又はｎ＝１２（８ｄ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図２５】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量のエチル−５−（４−ニトロベンジル）アミノ−２−ヒドロキシエチルベンゾエート（ＮＡＨＥ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（９ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（９ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ（１条件当りｎ＝１０〜１２（９ａ）又はｎ＝３〜４（９ｂ）の培養ウェル）を測定することによって分析した。
【図２６】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量のエチル−５−（４−ニトロベンジル）アミノ−２−ヒドロキシエチルベンゾエート（ＮＡＨＥ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（９ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（９ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ（１条件当りｎ＝１０〜１２（９ａ）又はｎ＝３〜４（９ｂ）の培養ウェル）を測定することによって分析した。
【図２７】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−ニトロベンジル）−Ｎ−アセチルアミノ−２−ヒドロキシエチルベンゾエート（ＮＮＡＨＥ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１０ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１０ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ（（１条件当りｎ＝３〜４（１０ａ）又はｎ＝３〜４（１０ｂ）の培養ウェル）を測定することによって分析した。
【図２８】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−ニトロベンジル）−Ｎ−アセチルアミノ−２−ヒドロキシエチルベンゾエート（ＮＮＡＨＥ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１０ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１０ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ（（１条件当りｎ＝３〜４（１０ａ）又はｎ＝３〜４（１０ｂ）の培養ウェル）を測定することによって分析した。
【図２９】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−ニトロベンジル）−Ｎ−アセチルアミノ−２−アセトキシエチルベンゾエート（ＮＮＡＡＥ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１１ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１１ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ（１条件当りｎ＝１０〜１２（１１ａ）、ｎ＝７〜８（１１ｂ）又はｎ＝４（１１ｃ）の培養ウェル）の培養ウェル）を測定することによって分析した。
【図３０】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−ニトロベンジル）−Ｎ−アセチルアミノ−２−アセトキシエチルベンゾエート（ＮＮＡＡＥ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１１ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１１ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ（１条件当りｎ＝１０〜１２（１１ａ）、ｎ＝７〜８（１１ｂ）又はｎ＝４（１１ｃ）の培養ウェル）の培養ウェル）を測定することによって分析した。
【図３１】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−ニトロベンゾイル）アミノサリチル酸（ＮＢＡＡ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１２ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１２ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当り ｎ＝７〜８（１２ａ）又はｎ＝３〜４（１２ｂ）の培養ウェル)の培養ウェル）を測定することによって分析した。
【図３２】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−ニトロベンゾイル）アミノサリチル酸（ＮＢＡＡ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１２ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１２ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当り ｎ＝７〜８（１２ａ）又はｎ＝３〜４（１２ｂ）の培養ウェル)の培養ウェル）を測定することによって分析した。
【図３３】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−ニトロベンゼンスルホニル）アミノサリチル酸(ＮＢＳＡＡ)と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１３ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１３ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝３〜４（１３ａ）又はｎ＝２〜８（１３ｂ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図３４】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−（４−ニトロベンゼンスルホニル）アミノサリチル酸(ＮＢＳＡＡ)と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１３ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１３ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝３〜４（１３ａ）又はｎ＝２〜８（１３ｂ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図３５】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−［２−（４−ニトロフェニル）−エチル］アミノサリチル酸（ＮＰＡＡ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１４ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１４ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝４（１４ａ）又はｎ＝４〜８（１４ｂ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図３６】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−［２−（４−ニトロフェニル）−エチル］アミノサリチル酸（ＮＰＡＡ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１４ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１４ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当りｎ＝４（１４ａ）又はｎ＝４〜８（１４ｂ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図３７】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−［３−（４−ニトロフェニル）−ｎ−プロピル］アミノサリチル酸（ＮＰＰＡＡ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１５ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１５ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当り ｎ＝４（１５ａ）又はｎ＝３〜８（１５ｂ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図３８】マウスの大脳皮質細胞培養物（ＤＩＶ  １２〜１４）を、単独又は所定量の５−［３−（４−ニトロフェニル）−ｎ−プロピル］アミノサリチル酸（ＮＰＰＡＡ）と共に、３００μＭのＮＭＤＡ（１５ａ）に１０分間、続いて３０分間５０μＭのＦｅ２＋（１５ｂ）に接触させた。ニューロン死滅は、２４時間後に培地に放出されたＬＤＨの量、平均±ＳＥＭ(１条件当り ｎ＝４（１５ａ）又はｎ＝３〜８（１５ｂ）の培養ウェル)を測定することによって分析した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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