(57)【要約】【課題】  真菌に対して優れた抗菌活性を持ち、安全性の優れた抗真菌活性を有し、Ｎ−ミリストイル転移酵素阻害活性を有する新規なベンゾチアゾール誘導体の提供。【解決手段】  次の一般式（Ｉ）【化１】2006070014.tif 000033（式中、Ｒ1、Ｒ2及びＸは置換基を示す）で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体又はその製薬上許容される塩。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（Ｉ）
【化１】
2006070014.tif 000032
（式中Ｒ1はシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基又は置換基を有していてもよい窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子を含む芳香族複素環基を示し、Ｒ2は低級アルキル基、置換基を有していてもよいアラルキル基、シクロアルキル基、オキシラニル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基又は置換基を有していてもよい窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子を含む芳香族複素環基を示し、Ｘは基−Ｙ−ＣＨ（Ｒ3）−Ｚ−Ｎ（Ｒ4）−ＣＯ−又は基−Ｚ−ＣＯＮＨ−を示し；Ｙは基−（ＣＨ2）n−（ここでｎは０又は１を示す）を示し、Ｚは直鎖又は分岐鎖の低級アルキレン基、又は５〜６員環のシクロアルキル基を示し、Ｒ3及びＲ4は各々独立に水素原子、低級アルキル基を示すか、又はＲ3とＲ4が一緒になって窒素原子を含む４〜６員環の飽和複素環基を示す）
で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体又はその製薬上許容される塩。
【請求項２】
請求項１に記載の一般式（Ｉ）で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体又はその製薬上許容される塩を有効成分とする医薬。
【請求項３】
抗真菌剤である請求項２記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗真菌活性を有し、Ｎ−ミリストイル転移酵素阻害活性を有する新規な２−アミノベンゾチアゾ−ル誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
真菌症には、各種白癬、頑癬、乾癬、皮膚カンジダ症等に代表される表在性真菌症と、真菌性髄膜炎、真菌性呼吸器感染症、真菌血症、尿路真菌症等に代表される深在性真菌症とがある。このうちカンジダ症、アスペルギルス症等の深在性真菌症は、癌化学療法剤や免疫抑制剤の繁用、ＨＩＶ感染等による生体内免疫の低下等により、特に近年増加の傾向にあり、これらの菌に有効な薬剤が望まれている。従来、アスペルギルス菌及びカンジダ菌に有効な薬剤としては、アムホテリシンＢやアゾール系化合物であるフルコナゾール、イトラコナゾール等が知られているが、抗真菌スペクトル、体内動態、耐性化等の点で充分満足できるものではない。また、この領域において長年研究されてきたアゾール系薬剤は、重篤な患者への有効性、同一薬剤の長期使用による耐性化が問題となっていることから、従来の化合物とは作用機序が異なり、深在性真菌症に対して優れた抗菌活性を持ち、安全性の優れた化合物の開発が望まれている。
【０００３】
Ｎ−ミリストイル転移酵素は、真核生物及びウイルス由来タンパク質のＮ末端グリシンにミリストイルＣｏＡからミリストイル基を転移する酵素である。Ｎ−ミリストイル化タンパク質の多くは細胞情報伝達に関与する生理活性タンパク質であり、ミリストイル化されることで細胞膜に局在化され機能発現が可能となる。遺伝子研究から、この酵素が病原性真菌の生存に必須の酵素であって、例えば、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓの生存に関して不可欠な酵素であることが知られている（非特許文献１）。このことから、Ｎ−ミリストイル転移酵素阻害剤は、殺真菌的な抗真菌剤の開発における標的タンパク質と考えられている。実際、この酵素の阻害作用を有するベンゾフラン誘導体が抗真菌作用を有すること（非特許文献２、３等）が報告されている。一方、これら化合物は消化管での安定性や体内動態に問題があることも報告されている。従って、より安定で効果的なＮ−ミリストイル転移酵素阻害剤の開発が望まれている。
【非特許文献１】Ｗｅｉｎｂｅｒｇら；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ １９９５、１６、２４１−２５０
【非特許文献２】Ｄｅｖａｄａｓら；Ｊ.Ｍｅｄ.Ｃｈｅｍ.１９９７、４０、２６０９−２６２５
【非特許文献３】海老池ら；Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２００２、１２、６０７−６１０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、真菌に対して優れた抗菌活性を持ち、優れたＮ−ミリストイル転移酵素阻害活性を有し、抗真菌剤として有用な化合物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
そこで、本発明者は、多くのベンゾチアゾ−ル化合物を合成し、その薬理作用を検討してきたところ、下記式（１）で表される構造を有する化合物に優れたＮ−ミリストイル転移酵素阻害活性及び抗真菌活性を有することを見出し、本発明を完成した。
【０００６】
すなわち、本発明は、次の一般式（Ｉ）
【０００７】
【化１】
2006070014.tif 000002
【０００８】
（式中Ｒ1はシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基又は置換基を有していてもよい窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子を含む芳香族複素環基を示し、Ｒ2は低級アルキル基、置換基を有していてもよいアラルキル基、シクロアルキル基、オキシラニル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基又は置換基を有していてもよい窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子を含む芳香族複素環基を示し、Ｘは基−Ｙ−ＣＨ（Ｒ3）−Ｚ−Ｎ（Ｒ4）−ＣＯ−又は基−Ｚ−ＣＯＮＨ−を示し；Ｙは基−（ＣＨ2）n−（ここでｎは０又は１を示す）を示し、Ｚは直鎖又は分岐鎖の低級アルキレン基、又は５〜６員環のシクロアルキル基を示し、Ｒ3及びＲ4は各々独立に水素原子、低級アルキル基を示すか、又はＲ3とＲ4が一緒になって窒素原子を含む４〜６員環の飽和複素環基を示す）
で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体又はその製薬上許容される塩を提供するものである。
また、本発明は一般式（Ｉ）で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体又はその製薬上許容される塩を有効成分とする医薬を提供するものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の一般式（Ｉ）で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体は、真菌に対して優れた抗菌活性を持ち、優れたＮ−ミリストイル転移酵素阻害活性を有することから、安全性の高い抗真菌剤として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
一般式（Ｉ）におけるシクロアルキル基としては、炭素数３〜９、更に炭素数３〜７のシクロアルキル基が好ましい。具体例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基等が挙げられる。
【００１１】
低級アルキル基としては、炭素数１〜６、更に炭素数１〜５の直鎖又は分岐鎖のアルキル基が好ましい。具体例としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等が挙げられる。
【００１２】
アラルキル基は、炭素数６〜１４のアリール基に炭素数１〜５のアルキル基が結合した基が好ましく、例えば、フェニル−Ｃ1-5−アルキル基、ナフチル−Ｃ1-5−アルキル基が挙げられる。より具体的には、ベンジル基、フェネチル基等が挙げられる。当該アルキル基には、炭素数１〜６のアルキル基、トリフルオロメチル基、ハロゲン原子等が１〜４置換していてもよい。
【００１３】
芳香族炭化水素基としては、炭素数６〜１４のアリール基が挙げられる。具体的には、フェニル基、ナフチル基、インデニル基、フルオレニル基等が挙げられる。また、芳香族複素環基としては、窒素原子、酸素原子又は硫黄原子を含む５又は６員環の芳香族複素環であり、具体的には、ピロリル基、ピラゾリル基、イミダゾリル基、フラニル基、オキサゾリル基、チエニル基、チアゾリル基、ピリジル基、ピリミジニル基等が挙げられる。これらの芳香族炭化水素基及び芳香族複素環基は置換基を有していてもよく、当該置換基としては、ハロゲンが置換していてもよい炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、ハロゲンが置換していてもよいシクロアルキル基、水酸基、ニトロ基、シアノ基、炭素数１から６のアルキルチオ基、ハロゲンが置換していてもよい炭素数６〜１４のアリール基等が挙げられ、これらは１〜４個置換していてもよい。ここで、シクロアルキル基、アリール基等は前記と同じである。
【００１４】
Ｚで示される直鎖又は分岐鎖の低級アルキレン基としては、炭素数１〜６のアルキレン基、例えば、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、テトラメチレン基等が挙げられる。５〜６員環のシクロアルキル基としては、シクロペンチル基、シクロヘキシル基が挙げられる。
【００１５】
−ＣＨ（Ｒ3）−Ｚ−Ｎ（Ｒ4）−で形成される飽和複素環としては、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジンが挙げられる。
【００１６】
本発明の一般式（Ｉ）で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体には、そのラセミ体、光学異性体及び同位体も包含される。
【００１７】
本発明の２−アミノベンゾチアゾール誘導体の塩としては塩酸塩、硝酸塩、臭化水素酸塩、ｐ−トルエンスフォン酸塩、メタンスルフォン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩等が挙げられる。
【００１８】
本発明の一般式（Ｉ）で表される２−アミノベンゾチアゾ−ル誘導体は、例えば、以下に示す反応式Ａ〜Ｃに記載の方法で製造することができる。ここで、溶媒、反応温度、圧力、その他の反応条件については当業者であれば容易に選定し得、特に限定されない。また、出発原料等は、市販の化合物等が適宜使用され、また、公知の製造法で製造される。
【００１９】
反応式Ａは、一般式（Ｉａ）で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体の一般的な製造法の例である。
【００２０】
【化２】
2006070014.tif 000003
【００２１】
２−アミノベンゾチアゾール−６−カルボン酸エステル（２）は、公知の方法（Ｓｔｕｃｋｗｉｓｃｈ、Ｃ．ｇ．；Ｊ. Ａｍ. Ｃｈｅｍ. Ｓｏｃ. １９４９、７１、３４１７やＩｓｍａｉｌ、ｉ．Ａ．；Ｓｈａｒｐ、ｄ．Ｅ．；Ｃｈｅｄｅｋｅｌ、Ｍ．Ｒ．；Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８０、４５、２２４３参照）を用いて容易に調製される。
得られた化合物（２）はアミド結合を形成する為の公知の条件で（例えば第４版実験化学講座２２有機合成ＩＶ酸、アミノ酸、ペプチド参照）、カルボン酸（Ｒ2ＣＯＯＨ）又はその反応性誘導体（例えばカルボン酸無水物（（Ｒ2ＣＯ）2Ｏ）やカルボン酸クロライド（Ｒ2ＣＯＣｌ））と縮合反応を行うことで、化合物（３）を得る。
化合物（３）のエステル部分をアルカリ加水分解することで、カルボン酸（４）を得る。アルカリ加水分解には塩基としては水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム水溶液等が使用可能である。溶媒にはメタノール、エタノール等のアルコール系の溶媒が好ましい。
得られたカルボン酸（４）を、前述の化合物（３）の合成と同様の手法で１級アミンや２級アミンと縮合することで、カルボキサミド誘導体（５）を得る。
カルボキサミド誘導体（５）は、ジオキサン、ジクロロメタン等の溶媒中、塩酸やトリフルオロ酢酸等の酸触媒を用いて、ｔ−ブトキシカルボニル基（反応式中Ｂｏｃと記載）を除去して、化合物（６）の塩酸、トリフルオロ酢酸等の塩を得る。
【００２２】
化合物（６）又はその塩とアルデヒド（Ｒ1ＣＨＯ）との還元的アミノ化反応、即ちメタノール、ジクロロメタン、ジクロロエタン、ジメチルホルムアミド等の溶媒中ナトリウムトリアセトキシボロハイドライド（ＭａｒｙａｎｏｆｆらＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９６、６１、３８４９参照）、ナトリウムシアノボロハイドライド、ポリスチレンに担持されたトリアセトキシボロハイドライド（ＢｈａｔｔａｃｈａｒｙｙａらＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２００３、４４、４９５７参照）等の還元剤存在下反応を行うことで一般式（Ｉ）で示される２−アミノベンゾチアゾール誘導体を得る。特に、ポリスチレンに担持されたトリアセトキシボロハイドライドを還元剤として用いる反応では目的物の単離精製が容易になる利点があり、合成ロボットを用いたパラレル合成が可能である。
【００２３】
また、以下に示す反応式Ｂを用いることによっても、一般式（Ｉａ）で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体を製造することができる。
【００２４】
【化３】
2006070014.tif 000004
【００２５】
化合物（７）とアルデヒド（Ｒ1ＣＨＯ）とを、メタノール、ジクロロメタン、ジクロロエタン、ジメチルホルムアミド等の溶媒中、ナトリウムシアノボロハイドライド、ナトリウムトリアセトキシボロハイドライド、ポリスチレンに担持されたトリアセトキシボロハイドライド等の還元剤存在下反応を行うことで化合物（８）を得、次いで２級アミン部分をアリルカルバメート基（反応式中Ａｌｌｏｃと記載）で保護することで化合物（９）を得る。
化合物（９）は、ジオキサン、ジクロロメタン等の溶媒中、塩酸やトリフルオロ酢酸等の酸触媒を用いて、ｔ−ブトキシカルボニル基（反応式中Ｂｏｃと記載）を除去し、化合物（１０）を得る。
化合物（１０）は、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド等の溶媒中縮合剤存在下ベンゾチアゾール−６−カルボン酸誘導体と縮合して、カルボキサミド誘導体（１１）を得る。
更に、上記方法でｔ−ブトキシカルボニル基を除去し、化合物（１２）を得、次いで各種カルボン酸（Ｒ1ＣＯＯＨ）又はその反応性誘導体と縮合することで化合物（１３）を得る。
【００２６】
最終的にアリルカルバメート基を適当な炭素求核剤、（例えばジメドン、バルビツール酸、固相担持バルビツール酸（塚本等；Ｓｙｎｌｅｔｔ  ２００３，１１０５参照））パラジウム触媒存在下で脱保護することで、一般式（Ｉ）で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体を得る。特に塚本等の固相担持バルビツール酸を用いた脱保護反応は、最終生成物の単離生成が非常に容易であり、合成ロボットを使用したパラレル反応も可能である。
【００２７】
次の反応式Ｃは、一般式（Ｉｂ）で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体の一般的な製造法の例である。
【００２８】
【化４】
2006070014.tif 000005
【００２９】
出発原料に化合物（１４）を用いること以外は、反応式（Ａ）と同様に反応を行うことで化合物（１６）を製造することができる。
化合物（１６）を、パラジウム炭素等の遷移金属触媒を用いた接触水素化反応に付してアミン（１７）を得る。反応にはメタノール、エタノール等のアルコール系の溶媒が好適である。得られたアミン（１７）は、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド等の溶媒中縮合剤存在下で、アミノ酸誘導体と縮合することで化合物（１８）を得る。以降は反応式Ａと同様の方法で一般式（Ｉｂ）で表される２−アミノベンゾチアゾール誘導体を製造することができる。
【００３０】
反応混合物から本発明の２−アミノベンゾチアゾ−ル誘導体を単離するには、例えば液液抽出、固相抽出、再結晶、カラムクロマトグラフィー、イオン交換等の手段により行うことができる。
【００３１】
本発明の２−アミノベンゾチアゾール誘導体及びその製薬上許容される塩は、Ｎ−ミリストイル転移酵素阻害活性、抗真菌活性に優れ、通常、医薬製剤化に用いられる担体、賦形剤、添加剤を用いて、錠剤、散剤、細粒剤、果粒剤、カプセル剤、丸剤、液剤、注射剤、坐剤、膣剤、軟膏、貼付剤等に調製され、経口又は非経口投与される。
固形製剤を製造するには、本発明の２−アミノベンゾチアゾ−ル及びその製薬上許容される塩に、賦形剤、更に必要に応じて結合剤、崩壊剤、増量剤、被覆剤、糖衣剤等を加えた後、常法により錠剤、果粒剤、カプセル剤、坐剤等にすることが好ましい。
注射剤を調整する場合は、本発明の２−アミノベンゾチアゾ−ル及びその製薬上許容される塩を、注射用蒸留水等の水性担体にあらかじめ溶解、分散又は乳化した液剤とするか又は用時溶解用の注射用粉末とするのが好ましい。注射剤の投与方法としては、静脈内投与、動脈内投与、腹腔内投与、皮下投与、静脈点滴等があげられる。
【００３２】
本発明の２−アミノベンゾチアゾ−ル誘導体のヒトに対する投与量は、感染の状態、投与方法によっても異なるが、例えば、カンジダ感染症の治療目的で成人患者に投与する場合、経口投与では、本発明の２−アミノベンゾチアゾ−ル誘導体として、約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日、さらに好ましくは約１〜２０ｍｇ／ｋｇ／日である。
【実施例】
【００３３】
以下に参考例及び実施例を記載し、本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されない。
【００３４】
なお、パラレル法により合成した化合物に関しては、ＬＣ−ＭＳにて構造の確認を行った。測定条件を下記に示す。
[測定条件]
ＬＣ−ＭＳ：カラム：ＩＮＥＲＴＳＩＬ  ＯＤＳ  １．５Ｘ１５０ｍｍ；カラム温度：３０℃；測定波長：２２０，２５４ｎｍ；ＭＳイオン化法：ＡＰＣＩ法；溶離液Ａ：０．０５％ｖ／ｖギ酸水溶液；溶離液Ｂ：０．０５％ｖ/ｖギ酸アセトニトリル溶液；流速：０．１２ｍｌ／１０分；グラジエント条件：Ｂ  in  Ａ（０−５分；５％→９５％，５−１２分；９５％；１２−１４分，９５％→５％，１４−２５分；５％（リニアグラジエント）
【００３５】
参考例１  ２−アミノ−ベンゾチアゾール−６−カルボン酸エチル
４−アミノ安息香酸エチルエステル１６．５ｇ（０．１ｍｏｌ）、チオシアン酸カリウム９７．１８ｇ（１ｍｏｌ）、硫酸銅８０ｇ（０．５ｍｏｌ）、メタノール２７０ｍＬの混合物を３時間加熱攪拌し、放冷後不溶物を吸引濾過により除去した。濾液に水４００ｍＬを加え加熱攪拌しながら反応液が均一になるまでエタノールを加えた後反応液を氷冷した。析出した結晶を濾取、水で洗浄後、風乾し淡黄色結晶を得た。（収量１１ｇ、収率５０％）
【００３６】
1H-NMR (DMSO-d6)δ(ppm): 8.34 (d, J=1.4Hz, 1H), 7.87 (dd, J=1.4, 8.3Hz, 1H), 7.42 (d, J=8.3Hz, 1H), 4.30 (q, J=7.3Hz 2H), 1.32 (t, J=7.3Hz, 3H).
MS (FAB): 223 (M+1)
【００３７】
参考例２  ２−［（シクロヘキサンカルボニル）アミノ］−ベンゾチアゾール−６−カルボン酸エチル
参考例１の化合物５０ｇ（０．２２５ｍｏｌ）、シクロヘキサンカルボン酸３５ｇ（０．２７ｍｏｌ）を２００ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解し、氷冷下１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（以下ＥＤＣと記載する）６５ｇ（０．３３８ｍｏｌ）、１−ヒソロキシベンゾトリアゾール（以下ＨＯＢｔと記載する）４６ｇ（０．３３８ｍｏｌ）を加え室温で３時間攪拌し、次いで５０℃で１６時間攪拌した。１．５Ｌの水に注ぎ析出した結晶を濾取し、水で十分に洗浄後風乾した。結晶を熱ジイソプロピルエーテルで洗浄し淡黄色結晶を得た。（収量３３ｇ、４１％）
【００３８】
1H-NMR (CDCl3) δ(ppm): 10.87 (bs, 1H), 8.57 (d, J=1.4Hz, 1H), 8.14 (dd, J=1.4, 8.3Hz, 1H), 7.76 (d, J=8.3Hz, 1H), 4.43 (q, J=6.8Hz, 2H), 2.28-2.45 (m, 1H), 1.09-1.95 (m, 13H).
MS (FAB): 333 (M+1)
【００３９】
参考例３  ２−［（シクロヘキサンカルボニル）アミノ］−ベンゾチアゾール−６−カルボン酸
参考例２の化合物３３ｇ（０．１ｍｏｌ）、１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液１Ｌ、メタノール２００ｍＬの混合物を室温で４時間攪拌後減圧下メタノールを留去した。残渣にクロロホルムを加えて分液した後、水層を氷冷下１０％塩酸で酸性とし析出結晶を濾取した。十分に水で洗浄後風乾し無色結晶を得た。（収量２５ｇ、８４％）
【００４０】
1H-NMR (CDCl3) δ(ppm): 8.58 (d, J=1.4Hz, 1H), 7.99 (dd, J=1.4, 8.3Hz, 1H), 7.77(d, J=8.3Hz, 1H), 3.26 (bs, 1H), 2.48-2.60 (m, 1H), 1.09-1.90 (m, 10H).
MS (FAB): 305 (M+1)
【００４１】
参考例４  ２−［（シクロヘキサンカルボニル）アミノ］−Ｎ−［（２−ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エチル）−ベンゾチアゾール−６−カルボキサミド
参考例３の化合物１ｇ（３．４８ｍｍｏｌ）、Ｎ−（２−アミノエチル）カルバミン酸ｔ−ブチル０．５６ｇ（３．４８ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解し、その溶液に１ｇのＥＤＣ（５．２２ｍｍｏｌ）と０．７ｇのＨＯＢｔ（５．２２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１６時間攪拌した。反応液を水に注ぎ析出した結晶を濾取し、水で十分に洗浄後風乾した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し淡黄色結晶を得た。（収量１．２８ｇ、収率８６％）
【００４２】
1H-NMR (DMSO-d6)δ(ppm): 12.34 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.90 (d, J=8.3Hz, 1H), 7.75 (d, J=8.3Hz, 1H), 6.83 (bs, 1H), 3.25-3.38 (m, 2H), 3.08-3.19 (m, 2H), 2.50-2.62 (m, 1H), 1.16-1.91 (m, 19H).
MS (FAB): 447 (M+1)
【００４３】
参考例５  ２−［（シクロヘキサンカルボニル）アミノ］−Ｎ−（２−アミノエチル）−ベンゾチアゾール−６−カルボキサミド・塩酸塩
参考例４の化合物２１０ｍｇ（０．４７ｍｍｏｌ）に４ｍｍｏｌ／Ｌ−塩酸／ジオキサン１０ｍＬを加え室温で１６時間攪拌した。結晶を濾取し、ジオキサンで洗浄後減圧下乾燥し無色結晶を得た。（収量１７９ｍｇ、収率１００％）
【００４４】
1H-NMR (DMSO-d6)δ(ppm): 12.38 (bs, 1H), 8.75-8.87 (m, 1H), 8.56 (d, J=1.4Hz, 1H), 8.05-8.30 (bs, 3H), 8.00 (dd, J=8.3, 1.4Hz, 1H), 7.76 (d, J=8.3Hz, 1H), 7.17 (bs, 2H), 3.48-3.63 (m, 2H), 2.92-3.08 (m, 2H), 2.48-2.65 (m, 1H), 1.13-1.91 (m,
10H).
MS (FAB): 347 (M+1)
【００４５】
参考例６  Ｎ−（２−アミノエチル）−２−（プロパノイルアミノ）−ベンゾチアゾール−６−カルボキサミド・トリフルオロ酢酸塩
参考例４と同様の手法により調製したＮ−［（２−ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エチル）−２−（プロパノイルアミノ）−ベンゾチアゾール−６−カルボキサミド１３７ｍｇ（０．３５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２ｍＬに溶解し、その溶液にトリフルオロ酢酸１ｍＬを加え、室温で１時間攪拌した。減圧下濃縮し残渣にイソプロピルエーテルを加えて結晶化後、結晶を濾取し、減圧下乾燥することで淡黄色結晶を得た。（収量９０ｍｇ、収率６３％）
【００４６】
1H-NMR (DMSO-d6)δ(ppm): 12.50 (s, 1H), 8.65-8.71 (m, 1H), 8.49 (d, J=1.5Hz, 1H), 7.90-7.95 (m, 5H), 7.79 (d, J=8.3Hz, 1H), 3.50-3.58 (m, 2H), 3.00-3.04 (m, 2H), 2.53 (q, 2H, J=7.3Hz), 1.12 (t, 3H, J=7.3Hz).
MS (FAB): 293 (M+1)
【００４７】
参考例４，５又は６の方法を用いて、表１に記載する参考例化合物を合成した。
【００４８】
【表１】
2006070014.tif 000006
【００４９】
参考例１９  ２−アミノ−６−ニトロ−ベンゾチアゾール
４−ニトロアニリン６．９ｇ（０．０５ｍｏｌ）、チオシアン酸カリウム９．７ｇ（０．１ｍｏｌ）を７０ｍＬの酢酸に溶解後氷冷した。その溶液に臭素２．５６ｍＬ（０．０５ｍｏｌ）の酢酸溶液を滴下し、室温で１６時間攪拌した。反応液を水に注ぎ、次いで飽和重曹水で中和した。析出した結晶を濾取し、水で十分に洗浄後風乾した。結晶を酢酸エチルで洗浄後減圧下乾燥し黄色結晶を得た。（収量９．７ｇ、９９％）
【００５０】
参考例２０  Ｎ−（６−ニトロ−ベンゾチアゾール−２−イル）シクロヘキサンカルボキサミド
参考例１９の化合物を用い、参考例２と同様の操作を行うことで標題化合物を得た。（収量８．５ｇ、収率５６％）
【００５１】
1H-NMR (DMSO-d6)δ(ppm): 12.61 (bs, 1H), 9.09 (d, J=2.4Hz, 1H) , 8.26 (dd, J=2.4, 8.7Hz, 1H), 7.86 (d, J=8.7Hz, 1H), 2.52-2.64 (m, 1H), 1.19-1.95 (m, 10H).
MS (FAB): 306 (M+1)
【００５２】
参考例２１  Ｎ−（６−アミノ−ベンゾチアゾール−２−イル）シクロヘキサンカルボキサミド
メタノール中、参考例２０の化合物４ｇ（１３．１ｍｍｏｌ）、５％パラジウム−炭素を用い、水素４気圧下２時間接触還元を行った。触媒を濾去し減圧下濃縮することで標題化合物を得た。（収量３．５ｇ、収率９９％）
【００５３】
1H-NMR (DMSO-d6)δ(ppm): 11.81 (bs, 1H), 7.38 (d, J=8.7Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.70 (dd, J=8.7, 1.4Hz, 1H), 5.06 (bs, 2H), 2.40-2.58 (m, 1H), 1.17-1.83 (m, 10H).MS (FAB): 276 (M+1)
【００５４】
参考例２２  Ｎ−６−｛［（３−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］アミノ｝−ベンゾチアゾール−２−イル−シクロヘキサンカルボキサミド
参考例２１の化合物３３０ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）、３−ｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピオン酸２２７ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）を用い、参考例４と同様に操作することで標題化合物を得た。（収量３２１ｍｇ、収率６０％）
【００５５】
1H-NMR (CDCl3) δ(ppm): 10.42 (bs, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.63 (d, J=8.3Hz, 1H), 7.37 (d, J=6.8Hz, 1H), 5.26 (bs, 1H), 3.48-3.60 (m, 2H), 2.59-2.75 (m, 2H), 2.31-2.43 (m, 1H), 1.16-1.98 (m, 10H), 1.40 (s, 9H).
MS (FAB): 447 (M+1)
【００５６】
参考例２３  Ｎ−６−［（３−アミノプロパノイル）アミノ］−ベンゾチアゾール−２−イル−シクロヘキサンカルボキサミド・塩酸塩
参考例２２の化合物３２５ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ）を用い参考例５と同様の方法で標題化合物を無色結晶として得た。（収量２７０ｍｇ、９９％）
【００５７】
1H-NMR (DMSO-d6)δ(ppm): 12.14 (bs, 1H), 10.44 (s, 1H), 8.29 (d, J=1.9Hz, 1H), 8.01 (bs, 2H), 7.65 (d, J=8.3Hz, 1H), 7.55 (dd, J=8.3, 1.9Hz, 1H), 6.30 (bs, 2H),3.02-3.15 (m, 2H), 2.71-2.81 (m, 2H), 2.41-2.59 (m, 1H), 1.13-1.83 (m, 10H).
MS (FAB): 347 (M+1)
【００５８】
参考例２４  ２−［（ナフタレン−２−イルメチル）アミノ］エチル−カルバミン酸−ｔ−ブチル
Ｎ−（２−アミノエチル）カルバミン酸ｔ−ブチル８．６５ｇ（５４ｍｍｏｌ）、２−ナフトアルデヒド７．０３ｇ（４５ｍｍｏｌ）をジクロロエタン１８０ｍＬに溶解し、その溶液にナトリウムトリアセトキシボロハイドライド１４．３ｇ（６７．５ｍｍｏｌ）を加え室温で４時間攪拌し、次いで反応液に飽和重曹水を加え反応を停止した。有機層を分離後、クロロホルムで水層を抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、標題化合物を淡黄色油状物として得た。（収量１０．２６ｇ、収率７６％）
【００５９】
1H-NMR (CDCl3)δ(ppm): 7.80-7.87 (3H, m), 7.74 (1H, s), 4.95 (1H, br), 3.95 (2H,s), 3.22-3.32 (2H, m), 2.78-2.83 (2H, m), 1.44 (9H, s).
MS (FAB): 301 (M+1)
【００６０】
参考例２５  （２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）−ナフタレン−２−イルメチル−カルバミン酸アリル
参考例２４の化合物２３．２ｇ（７７．３３ｍｍｏｌ）を１４０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解した。その溶液に炭酸カリウム２１．３４ｇ（１５４．６６ｍｍｏｌ）の水溶液（８０ｍＬ）を加え氷冷した。反応液にクロロ炭酸アリル９．５５ｇ（７９．２７ｍｍｏｌ）を滴下し、その後室温で２時間攪拌した。反応液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出後、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、淡黄色油状物を得た。（収量２９．７ｇ、１００％）
【００６１】
1H-NMR (CDCl3)δ(ppm): 7.78-7.84 (m, 3H), 7.60-7.73 (m, 1H), 7.26-7.50 (m, 3H), 5.91-6.02 (m, 1H), 5.22-5.36 (m, 2H), 4.69 (s, 4H), 3.27-3.43 (m, 4H), 1.42 (s, 9H).
MS (FAB): 385 (M+1)
【００６２】
参考例２６  （２−アミノエチル）−ナフタレン−２−イルメチル−カルバミン酸アリル
参考例２５の化合物２９ｇ（７７ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのジクロロメタンに溶解し、その溶液にトリフルオロ酢酸１００ｍＬを加え、室温で２時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮し、残渣にジクロロメタン１００ｍＬを加え再度減圧下濃縮を行った。残渣をクロロホルムに溶解し、飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水炭酸カリウムで乾燥した。減圧下濃縮後、残渣をアルミナカラムクロマトグラフィーに付し標題化合物を淡黄色油状物として得た。（収量１６．２７ｇ、収率７４％）
【００６３】
1H-NMR (CDCl3) δ(ppm): 7.77-7.86 (m, 3H), 7.61-7.74 (m, 1H), 7.29-7.55 (m, 3H),5.83-6.03 (m, 1H), 5.16-5.40 (m, 2H), 4.68 (s, 4H), 4.25 (brs, 2H) 3.39-3.54 (m, 2H), 2.91-3.07 (m, 2H).
MS (FAB): 285 (M+1)
【００６４】
参考例２７  Ｎ−｛２−［（２−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ベンゾチアゾール−６−イル）カルボニル］−アミノエチル｝−Ｎ−（２−ナフチルメチル）カルバミン酸アリル
参考例２６の化合物７．１ｇ（２５ｍｍｏｌ）、２−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ベンゾチアゾール−６−カルボン酸６．８５ｇ（２５ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド溶液（１００ｍＬ）にＥＤＣ７．１７ｇ（３７．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ５．０７ｇ（３７．５ｍｍｏｌ）を加え室温で１６時間攪拌した。反応液を水５００ｍＬに注ぎ、析出した結晶を濾取し、水で十分に洗浄した。風乾後シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し標題化合物を無色結晶として得た。（収量１１．２ｇ、収率８０％）
【００６５】
1H-NMR(CDCl3) δ(ppm): 8.26 (s, 1H), 7.77-7.89 (m, 5H), 7.62-7.71 (m, 1H), 7.32-7.49 (m, 3H), 5.88-5.98 (m, 1H), 5.14-5.33 (m, 2H), 4.64-4.75 (m, 4H), 3.54-3.68
(m, 4H), 1.61 (s, 9H).
MS (FAB): 561 (M+1)
【００６６】
参考例２８  Ｎ−｛２−［（２−アミノ−ベンゾチアゾール−６−イル）カルボニル］−アミノエチル｝−Ｎ−（２−ナフチルメチル）カルバミン酸アリル
参考例２７の化合物５．５ｇ（９．８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２０ｍＬに溶解し、その溶液にトリフルオロ酢酸１０ｍＬを加え室温で２時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮後、残渣を少量のクロロホルムに溶解し、その溶液に飽和重曹水を塩基性になるまで加えた。析出した結晶を濾取し、クロロホルムで洗浄した後減圧下乾燥し、標題化合物を無色結晶として得た。（収量４．５ｇ、９９％）
【００６７】
1H-NMR (DMSO-d6)δ(ppm): 8.10 (s, 1H), 7.82-7.91 (m, 3H), 7.66-7.78 (m, 3H), 7.30-7.53 (m, 3H), 5.89-5.97 (m, 1H), 5.10-5.36 (m, 2H), 4.54-4.71 (m, 4H), 3.37-3.49 (m, 4H).
MS (FAB): 461(M+1)
【００６８】
参考例２９  ｛２−［（２−アセチルアミノ−ベンゾチアゾール−６−カルボニル）−アミノ］−エチル｝−ナフタレン−２−イルメチル−カルバミン酸アリル
参考例２８の化合物１３８ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）４−ジメチルアミノピリジン３７ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン１０ｍＬの混合物に無水酢酸９２ｍｇ（０．９ｍｍｏｌ）を加え室温で４時間攪拌した。３ｍｍｏｌ／Ｌ−塩酸で反応液を洗浄後、水、飽和食塩水で順次洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、無色結晶として標題化合物を得た。（収量１３７ｍｇ、収率９１％）
【００６９】
1H-NMR (CDCl3)δ(ppm): 8.30 (s, 1H), 7.35-7.84 (m, 9H), 5.86-5.97 (m, 1H), 5.15-5.34 (m, 2H), 4.66-4.75 (m, 4H), 3.62-3.69 (m, 4H), 2.30 (s, 3H).
MS (FAB): 503(M+1)
【００７０】
参考例２３の方法を用いて表２及び３に記載する参考例化合物を合成した。
【００７１】
【表２】
2006070014.tif 000007
【００７２】
【表３】
2006070014.tif 000008
【００７３】
実施例１  ２−［（シクロヘキサンカルボニル）アミノ］−Ｎ−２−［（２−ナフチルメチル）アミノ］エチル−ベンゾチアゾール−６−カルボキサミド
参考例５の塩酸塩（１１５ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、２−ナフトアルデヒド（２５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド２ｍＬの混合物に、固相担持試薬であるＭＰ-トリアセトキシボロハイドライド（アルゴノートテクノロジー社製）４３０ｍｇ（０．９ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間攪拌した。反応液に０．２ｍｍｏｌ相当のＰＳ-ベンズアルデヒド（アルゴノートテクノロジー社製）を加え更に６時間攪拌した。反応液を濾過し、陽イオン交換樹脂であるＭＰ−ＴｓＯＨカートリッジ（アルゴノートテクノロジー社製）に一旦吸着後、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、メタノールで順次洗浄し、その後２Ｍアンモニア／メタノールで溶出した。アンモニア／メタノール溶液を減圧下濃縮することで高純度の粗生成物を得た。粗生成物を１ｇのシリカゲルカラムクロマトに付し標題化合物４３ｍｇ（収率３７％）を得た。
【００７４】
1H-NMR (CDCl3) δ(ppm): 8.26 (d, J=1.4Hz, 1H), 7.75-7.85 (m, 5H), 7.71 (d, J=8.2Hz, 1H), 7.41-7.47 (m, 3H), 6.95-7.04 (m, 1H ), 4.02 (s, 2H), 3.58-3.65 (m, 2H),
2.95-3.05 (m, 2H), 2.35-2.45 (m, 1H), 1.18-2.01 (m, 10H).
LC-MS (APCI): 487 (M+1)
LC-Retention time 9.05 min.
【００７５】
実施例１と同様の手法を対応するアミン、アルデヒドに適応したパラレル合成をおこなって、表４〜１６に記載する実施例２〜１６７の化合物の合成を行った。いずれの化合物もＬＣ−ＭＳにて９５％以上の純度を有することを確認した。
【００７６】
【表４】
2006070014.tif 000009
【００７７】
【表５】
2006070014.tif 000010
【００７８】
【表６】
2006070014.tif 000011
【００７９】
【表７】
2006070014.tif 000012
【００８０】
【表８】
2006070014.tif 000013
【００８１】
【表９】
2006070014.tif 000014
【００８２】
【表１０】
2006070014.tif 000015
【００８３】
【表１１】
2006070014.tif 000016
【００８４】
【表１２】
2006070014.tif 000017
【００８５】
【表１３】
2006070014.tif 000018
【００８６】
【表１４】
2006070014.tif 000019
【００８７】
【表１５】
2006070014.tif 000020
【００８８】
【表１６】
2006070014.tif 000021
【００８９】
実施例１６８  Ｎ−［６−（３−［（２−ナフチルメチル）アミノ］プロパノイルアミノ）−ベンゾチアゾール−２−イル］シクロヘキサンカルボキサミド
参考例２３の化合物、２−ナフトアルデヒドを用い実施例１に記載した方法に順じて反応を行い標題化合物を得た。
【００９０】
1H-NMR (CDCl3) δ(ppm): 10.70 (s, 1H), 8.27 (d, J=1.4Hz, 1H), 7.87-7.90 (m, 4H),7.63 (d, J=8.3Hz, 1H), 7.42-7.55 (m, 3H), 7.35 (d, J=8.3Hz, 1H), 4.06 (s, 2H), 3.08-3.15 (m, 2H), 2.54-2.60 (m, 2H), 2.30-2.39 (m, 1H), 1.20-1.97 (m, 10H).
MS (FAB): 487 (M+1)
【００９１】
実施例１６８と同様の手法を対応するアミン、アルデヒドを用いて行い、表１７〜表２２に記載する実施例１６８〜２１９の化合物の合成を行った。
【００９２】
【表１７】
2006070014.tif 000022
【００９３】
【表１８】
2006070014.tif 000023
【００９４】
【表１９】
2006070014.tif 000024
【００９５】
【表２０】
2006070014.tif 000025
【００９６】
【表２１】
2006070014.tif 000026
【００９７】
【表２２】
2006070014.tif 000027
【００９８】
実施例２２０  ２−（アセチルアミノ）−Ｎ−２−［（２−ナフチルメチル）アミノ］エチル−ベンゾチアゾール−６−カルボキサミド
参考例２９の化合物５０ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム６ｍｇ（０．００５ｍｍｏｌ）、固相担持バルビツール酸１００ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）に無水テトラヒドロフラン１ｍＬを加え、アルゴン気流下５０℃で１２時間攪拌した。反応液を濾過し、ポリスチレン樹脂をテトラヒドロフランで洗浄後、濾液を減圧下濃縮した。残渣を１ｇのシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付すことで標題化合物を無色結晶として得た。（収量３３ｍｇ、収率７９％）
【００９９】
1H-NMR (CDCl3)δ(ppm): 8.24 (s, 1H), 7.65-7.84 (m, 6H), 7.43-7.52 (m, 3H), 3.98-4.04 (m, 2H), 3.56-3.63 (m, 2H), 2.93-3.01 (m, 2H), 2.28 (s, 3H)
MS (FAB): 419(M+1)
【０１００】
参考例２９と同様の方法により調製した中間体を用い、実施例２２０に記載した方法で反応を行って、表２３及び２４に記載する実施例２２１〜２４０の化合物を得た。
【０１０１】
【表２３】
2006070014.tif 000028
【０１０２】
【表２４】
2006070014.tif 000029
【０１０３】
実施例２４１
抗真菌効果の測定を、以下の各試験法を用いて行った。
１．  Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ及びＨ．ｓａｐｉｅｎｓ  Ｎ−ミリストイル転移酵素阻害試験
１−１．Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ及びＨ．ｓａｐｉｅｎｓ の組換え型Ｎ−ミリストイル転移酵素の調製
組換え型酵素の調製は、公知の方法（Ｒａｊａｌａ  Ｖ．Ｓ．；  Ｒａｊｕ  Ｓ．Ｓ．；  Ｒａｊｅｎｄｒａ  Ｋ．Ｓ．；  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒ．  Ｐｕｒｉｆ．  １９９６，７，４３１参照）に基づいて、以下の通り行った。
Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ又はＨ．ｓａｐｉｅｎｓ のＮ−ミリストイル転移酵素遺伝子を大腸菌用発現ベクターｐＥＴ−１５ｂ（Ｎｏｖａｇｅｎ：６９６６１−３）に挿入し、それぞれの発現ベクターを構築した。大腸菌による蛋白質発現後、大腸菌を破砕し、メタルアフィニティークロマトグラフィーにより、それぞれのＮ−ミリストイル転移酵素を獲得した。
【０１０４】
１−２．Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ及びＨ．ｓａｐｉｅｎｓ  Ｎ−ミリストイル転移酵素阻害試験
酵素阻害試験は、公知の方法（Ｄｗｉｇｈｔ  ｔ．；  Ｌｕｉｓ  ｇ．；ＰＮＡＳ  １９８６，８３，２８１２参照）に基づいて、以下の通り行った。
被験化合物溶液：被験化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解して、最高１０-4ｍｏｌ／Ｌの１％ＤＭＳＯ溶液から適宜希釈系列を作製し、反応溶液へ添加した。
酵素阻害試験：反応緩衝液（１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．４／１ｍｍｏｌ／Ｌ  ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌ／５ｍｍｏｌ／Ｌ  ＭｇＣｌ2 ／０．１ｍｍｏｌ／Ｌ
ＥＧＴＡ／０．０１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００）１００μＬ中に、［3Ｈ］Ｍｙｒ−ＣｏＡ（７．４ｋＢｑ／最終濃度３５．７ｎｍｏｌ／Ｌ）、基質ペプチド（最終濃度１０μｍｏｌ／Ｌ）、及び各種濃度の被験化合物を加えて３０℃で１０分プレインキュベーションした後、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓはＨ．ｓａｐｉｅｎｓの組換え型酵素を加えて酵素反応を行った。３０℃で１０〜２０分間反応後、１０％ＴＣＡを含むメタノール１００μＬを加えて反応を停止し、反応チューブを氷浴上に放置した。反応液よりＨＰＬＣにて反応産物を分画後、液体シンチレーションカウンターにより反応産物を定量し、被験化合物の各種濃度における阻害率より、被験化合物の５０％阻害濃度ＩＣ50を算出した。
【０１０５】
２．  抗真菌活性測定
Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓに対するｉｎ  ｖｉｔｒｏ抗真菌活性の測定
ＮＣＣＬＳ  ｐｒｏｔｏｃｏｌ  Ｍ２７−Ａ２に従い以下の操作を行った。
被検化合物溶液：被検化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解して最高３．２ｍｇ／ｍＬの溶液とし、ＤＭＳＯにて希釈して2倍希釈系列を作成した。それらの溶液を試験培地へ終濃度１％（Ｖ／Ｖ）の割合で添加した。
試験培地：ＲＰＭＩ１６４０  １０．４４ｇを蒸留水９００ｍＬに溶解後、ＭＯＰ  ｂｕｆｆｅｒ （０．１６５ｍｏｌ／Ｌ）を加えて溶解した。次に、５ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液にてｐＨ７．０に調整した後、蒸留水を加えて１０００ｍＬとし、ろ過滅菌して用いた。
接種菌液：Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ  ＡＴＣＣ９００２８及びＣ．ｋｒｕｓｅ  ＡＴＣＣ６２５８をＳａｂｏｕｒａｕｄ  ｄｅｘｔｒｏｓｅ寒天培地にて３５℃で２４時間培養後、同条件下でさらに１回継代培養し、直径１ｍｍ以上のコロニー５個を採取して５ｍＬの減菌生理食塩水に懸濁した。この懸濁液の吸光度をＭｃＦａｒｌａｎｄ  ０．５になるように調整した後、試験培地で１０００倍希釈し接種菌液とした。
抗真菌活性測定：試験培地による検体の各濃度希釈液を９６穴丸底マイクロプレートの各ウエルに１００μＬずつ分注し、上記の接種菌液１００μＬを加え(最終菌濃度:０．５〜２．５×１０3ｃｅｌｌｓ／ｍＬ)、３５℃で４８時間培養した。培養終了後、６００ｎｍの吸光度を測定し、薬剤無添加対照と比較して８０％以上菌の生育を抑制した最小薬剤濃度をＭＩＣ］（μｇ／ｍＬ）とした。
【０１０６】
本発明のベンゾチアゾール誘導体のカルシウムＮ−ミリストイル転移酵素阻害作用（ＩＣ59値）は、概ね０．０２〜１００μｍｏｌ／Ｌの範囲であった。一方ヒトＮ−ミリストイル転移酵素（ＮＭＴ）に対する作用は非常に弱く真菌選択性が高いことが確認された。測定結果を表２５に示す。
【０１０７】
【表２５】
2006070014.tif 000030
【０１０８】
Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ  ＡＴＣＣ ９００２８及びＣ．ｋｒｕｓｅｉ  ＡＴＣＣ６２５８に対する抗真菌作用の測定結果を表２６に示す。
【０１０９】
【表２６】
2006070014.tif 000031