(57)【要約】【課題】  異なる波長の蛍光を検出するために、ダイクロイックミラーを交換する際に、精密な位置調整を不要とし、特に、小型の観察装置においても、ダイクロイックミラーを簡易に交換可能とする。【解決手段】  光源６に着脱可能に接続され、光源６からの励起光を伝播する光源用光ファイバ７と、該光源用光ファイバ７から出射される励起光を平行光にして光走査部１７に入射させるコリメートレンズ２４と、試料Ａにおいて発生し、対物レンズ２０および光走査部１７を介して戻る蛍光を励起光の光路から分岐して光検出器１５に向かわせるダイクロイックミラー２７とを備え、これら光源用光ファイバ７、コリメートレンズ２４およびダイクロイックミラー２７が、光軸調整された状態で相互に固定されている接続ユニット１を提供する。【選択図】    図１
2006208681.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
光源からの励起光を走査する光走査部と該光走査部により走査された励起光を試料に結像させる対物レンズとを備える装置本体に着脱可能に取り付けられる接続ユニットであって、
光源に着脱可能に接続され、光源からの励起光を伝播する光源用光ファイバと、
該光源用光ファイバから出射される励起光を平行光にして光走査部に入射させるコリメートレンズと、
試料において発生し、対物レンズおよび光走査部を介して戻る蛍光を励起光の光路から分岐して光検出器に向かわせるダイクロイックミラーとを備え、
これら光源用光ファイバ、コリメートレンズおよびダイクロイックミラーが、光軸調整された状態で相互に固定されている接続ユニット。
【請求項２】
光検出器に着脱可能に接続され、ダイクロイックミラーにより分岐された蛍光を光検出器まで伝播する検出器用光ファイバと、
該検出器用光ファイバの端面に蛍光を集光するカップリングレンズとを備え、
検出器用光ファイバおよびカップリングレンズが、ダイクロイックミラーに対して光軸調整された状態で相互に固定されている請求項１に記載の接続ユニット。
【請求項３】
前記対物レンズの結像位置と共役な位置にピンホールが配置され、
該ピンホールが光検出器用ファイバに対して光軸調整された状態で相互に固定されている請求項２に記載の接続ユニット。
【請求項４】
前記検出器用光ファイバが、マルチモードファイバからなり、
前記ピンホールが、ピンホール径を調節可能である請求項３に記載の接続ユニット。
【請求項５】
前記検出器用光ファイバが、光検出器に固定された光ファイバの一端に対してコネクタにより着脱可能に接続される請求項２から請求項４のいずれかに記載の接続ユニット。
【請求項６】
前記光源用光ファイバが、光源に固定された光ファイバの一端に対してコネクタにより着脱可能に接続される請求項１から請求項５のいずれかに記載の接続ユニット。
【請求項７】
光源と、
光源からの励起光を走査する光走査部と該光走査部により走査された励起光を試料に結像させる対物レンズとを備える装置本体と、
試料において発生し、対物レンズおよび光走査部を介して戻る蛍光を検出する光検出器と、
前記装置本体に着脱可能に取り付けられる請求項１から請求項６のいずれかに記載の接続ユニットとを備える光走査型蛍光観察装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、接続ユニットおよび光走査型蛍光観察装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、光走査型蛍光観察装置として、例えば、走査型共焦点顕微鏡が知られている（例えば、特許文献１参照。）。
この走査型共焦点顕微鏡は、光検出器の交換や画像チャネル数の増加を可能とするために、光源からの光を標本上で２次元的にスキャンしかつ標本から戻る光をデスキャンしてピンホールに向かわせる光走査部を備える走査ユニットに対し、少なくとも１つの光検出器を有する検出ユニットを光ファイバの着脱によって着脱可能に接続している。
【０００３】
また、複数種類のレーザ光を切り替えて観察できる走査型レーザ顕微鏡が知られている（例えば、特許文献２参照。）。
この走査型レーザ顕微鏡は、複数種類の蛍光色素で染色された多重染色試料に対して各蛍光色素を励起する複数の波長のレーザ光を選択的に切り替えて出射可能なレーザ光源と、出射されるレーザ光の波長に対応するダイクロイックミラーを選択的に光路上に配置可能なターレットとを備えている。
【特許文献１】特開２００２−２２１６６３号公報
【特許文献２】特開２００３−２１７８４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、特許文献１の走査型共焦点顕微鏡は、光検出器の交換や画像チャネル数の増加を図ることはできるが、その際に、走査ユニットへの接続部において光ファイバの端部を着脱することにより光検出器を含む検出ユニットを交換あるいは増設するものであるため、交換の度に光ファイバの端面の位置と走査ユニット内の光学素子、例えば、集光レンズやダイクロイックミラーとの位置関係が崩れ、その都度、位置調整を行わなければならないという不都合がある。特に、光ファイバのファイバコアは直径約５μｍ〜５０μｍと極めて小さいので、精密な位置調整を行わなければならない。
【０００５】
また、特許文献２の走査型レーザ顕微鏡においては、ターレットの回転によりダイクロイックミラーが変更されるため、各ダイクロイックミラーの角度成分の誤差により走査位置にずれが発生するが、これにより生ずる画像の位置ずれ量を画像処理により求めて補正することができる。
しかしながら、ダイクロイックミラーをターレットの回転により逐次交換して波長の異なる蛍光を検出する形式の走査型レーザ顕微鏡においては、画像処理による補正も有効であるが、ダイクロイックミラーの交換頻度が少ない場合や、ターレットを搭載できないほどの小型の走査型観察装置においては、画像処理により逐次補正する必要性はない。
【０００６】
本発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、異なる波長の蛍光を検出するために、ダイクロイックミラーを交換する際に、精密な位置調整を不要とし、特に、小型の観察装置においても、簡易にダイクロイックミラーを交換することができる接続ユニットおよび光走査型蛍光観察装置を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記目的を達成するために、本発明は、以下の手段を提供する。
本発明は、光源からの励起光を走査する光走査部と該光走査部により走査された励起光を試料に結像させる対物レンズとを備える装置本体に着脱可能に取り付けられる接続ユニットであって、光源に着脱可能に接続され、光源からの励起光を伝播する光源用光ファイバと、該光源用光ファイバから出射される励起光を平行光にして光走査部に入射させるコリメートレンズと、試料において発生し、対物レンズおよび光走査部を介して戻る蛍光を励起光の光路から分岐して光検出器に向かわせるダイクロイックミラーとを備え、これら光源用光ファイバ、コリメートレンズおよびダイクロイックミラーが、光軸調整された状態で相互に固定されている接続ユニットを提供する。
【０００８】
本発明に係る接続ユニットによれば、装置本体に着脱可能に設けられているので、装置本体に取り付けることで、光源からの励起光を光源用光ファイバを介して装置本体まで伝播させることができる。光源用光ファイバを介して伝播された励起光は、コリメートレンズを通過させられることにより、平行光となってダイクロイックミラーを通過し、光走査部に入射させられる。また、試料において発生し、対物レンズおよび光走査部を介して戻る蛍光はダイクロイックミラーにより励起光の光路から分岐され光検出器により検出されるようになる。
【０００９】
この場合に、光源用光ファイバ、コリメートレンズおよびダイクロイックミラーが光軸調整された状態で相互に固定されているので、接続ユニット交換時における精密な光軸調整は不要である。また、接続ユニットの装置本体からの着脱が、ダイクロイックミラーと光走査部との間の平行光区間において行われるので、この位置における光軸方向に沿う位置調整は大まかでよい。したがって、ダイクロイックミラーを交換等する際に、接続ユニットごと交換することで、交換時の調整作業を容易にして、作業時間を短縮し、かつ、操作位置の位置ずれをより確実に防止することができる。
【００１０】
上記発明においては、光検出器に着脱可能に接続され、ダイクロイックミラーにより分岐された蛍光を光検出器まで伝播する検出器用光ファイバと、該検出器用光ファイバの端面に蛍光を集光するカップリングレンズとを備え、検出器用光ファイバおよびカップリングレンズが、ダイクロイックミラーに対して光軸調整された状態で相互に固定されていることが好ましい。
【００１１】
このようにすることで、ダイクロイックミラーにより分岐された蛍光は、カップリングレンズを介して集光され、検出用光ファイバの端面に入射される。そして、検出用光ファイバにより伝播されて光検出器により検出される。
この場合において、ダイクロイックミラーに対して検出器用光ファイバおよびカップリングレンズが光軸調整された状態で固定されているので、ダイクロイックミラーにより分岐された蛍光を検出器用光ファイバの端面に位置ずれなく入射させ、検出することができる。
【００１２】
また、上記発明においては、対物レンズの結像位置と共役な位置にピンホールが配置され、該ピンホールが光検出器用ファイバに対して光軸調整された状態で相互に固定されていることとしてもよい。
このようにすることで、接続ユニットを装置本体に取り付けるだけで、精密な位置調整を行うことなく、試料の結像位置における共焦点蛍光画像を取得することが可能となる。
【００１３】
さらに、上記発明においては、前記検出器用光ファイバが、マルチモードファイバからなり、前記ピンホールが、ピンホール径を調節可能であることが好ましい。
このように構成することで、ピンホール径を大きくすることで、コンフォーカリティを低下させる代わりに、明るく、深度の深い蛍光画像を得ることができる一方、ピンホール径を小さくすることで、コンフォーカリティを向上させることができる。
【００１４】
また、上記発明においては、前記検出器用光ファイバが、光検出器に固定された光ファイバの一端に対してコネクタにより着脱可能に接続されることとしてもよい。
このようにすることで、検出器用光ファイバの接続において、光ファイバどうしの端面を突き合わせて接続するコネクタを用いることができ、これにより、ダイクロイックミラー交換時の光検出器への接続も、精密な調整を不要として、簡易化することができる。
【００１５】
さらに、上記発明においては、前記光源用光ファイバが、光源に固定された光ファイバの一端に対してコネクタにより着脱可能に接続されることとしてもよい。
このようにすることで、光源用光ファイバの接続において、光ファイバどうしの端面を突き合わせて接続するコネクタを用いることができ、これにより、ダイクロイックミラー交換時の光源との接続も、精密な調整を不要として、簡易化することができる。
【００１６】
また、本発明は、光源と、光源からの励起光を走査する光走査部と該光走査部により走査された励起光を試料に結像させる対物レンズとを備える装置本体と、試料において発生し、対物レンズおよび光走査部を介して戻る蛍光を検出する光検出器と、前記装置本体に着脱可能に取り付けられる上記いずれかの接続ユニットとを備える光走査型蛍光観察装置を提供する。
【００１７】
この発明によれば、装置本体に対して着脱可能な接続ユニットを交換することで、種々のダイクロイックミラーにより、種々の波長の蛍光を検出することが可能となる。この場合に、接続ユニットを装置本体に接続する際における精密な位置調整作業が不要となり、熟練を要することなく簡単に接続することができる。
そして、光源用光ファイバによって光源から分離された装置本体を小型化して、試料に対して自由な姿勢および位置に配置することを可能としつつ、ダイクロイックミラーの簡易な交換を可能として、種々の波長の蛍光を検出することができる。
【発明の効果】
【００１８】
本発明によれば、装置本体を小型化しながら、ダイクロイックミラーの交換を可能とし、かつ、交換の際における精密な位置調整作業を不要として、接続作業を簡易化することができるという効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
以下、本発明の第１の実施形態に係る接続ユニット１および光走査型蛍光観察装置２について、図１および図２を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る光走査型蛍光観察装置２は、図１に示されるように、光源ユニット３と、光検出ユニット４と、装置本体５と、これらを接続する接続ユニット１とを備えている。
【００２０】
光源ユニット３は、波長の異なる複数のレーザ光源６と、これらのレーザ光源６からのレーザ光を合成して単一の光ファイバ７に入射させるミラー８、ダイクロイックミラー９およびカップリングレンズ１０を備えている。
光検出ユニット４は、光ファイバ１１を介して伝播されてきた蛍光を平行光に変換するコリメートレンズ１２と、平行光にされた蛍光を波長毎に分岐する複数のダイクロイックミラー１３と、分岐されたそれぞれの波長の蛍光を集光する集光レンズ１４と、集光された蛍光を検出する光検出器１５とを備えている。光検出器１５としては、例えば、ゼロ次元の光検出素子である光電子増倍管（ＰＭＴ：Photomultiplier Tube）が用いられている。
【００２１】
前記装置本体５は、筐体１６内に、光源ユニット３から送られてきたレーザ光を２次元的に走査する光走査部１７と、該光走査部１７により走査されたレーザ光を集光して中間像を結像させる瞳投影レンズ１８と、中間像を結像したレーザ光を集光する結像レンズ１９と、結像レンズ１９により集光されたレーザ光をさらに集光して試料Ａに再結像させる対物レンズ２０とを備えている。
光走査部１７は、例えば、互いに直交する２つの軸線回りに揺動させられる２枚のガルバノミラー１７ａ，１７ｂを対向配置させてなる近接ガルバノミラーにより構成されている。
【００２２】
前記接続ユニット１は、光源ユニット３に接続される第１の光ファイバ７と、光検出ユニット４に接続される第２の光ファイバ１１と、前記装置本体５の筐体１６に着脱可能に接続されるカセット部２１とを備えている。第１の光ファイバ７の一端７ａはコネクタ２２を介して光源ユニット３に着脱可能に取り付けられている。第１の光ファイバ７の他端７ｂは、前記接続ユニット１のカセット部２１に固定されている。
【００２３】
第２の光ファイバ１１の一端１１ａは、コネクタ２３を介して光検出ユニット４に着脱可能に取り付けられている。第２の光ファイバ１１の他端１１ｂは、前記接続ユニット１のカセット部２１に固定されている。第１、第２の光ファイバ７，１１は、例えば、コア径が約５μｍのシングルモードファイバである。
【００２４】
前記接続ユニット１のカセット部２１には、固定された第１の光ファイバ７の他端７ｂに対向配置されるコリメートレンズ２４、第２の光ファイバ１１の他端に対向配置されるカップリングレンズ２５、コリメートレンズ２４に隣接して配置されるミラー２６およびカップリングレンズ２５に隣接して配置されるダイクロイックミラー２７が相互に固定されて収容されている。これら各光ファイバ７，１１、コリメートレンズ２４、カップリングレンズ２５、ミラー２６およびダイクロイックミラー２７は、相互に光軸調整された状態で固定されている。
【００２５】
これにより、第１の光ファイバ７により伝播されてきたレーザ光は、コリメートレンズ２４によって平行光にされ、ミラー２６およびダイクロイックミラー２７により反射されて光走査部１７に入射されるようになっている。一方、試料Ａにレーザ光が照射されることにより、試料Ａにおいて発生した蛍光は、対物レンズ２０、結像レンズ１９、瞳投影レンズ１８および光走査部１７を介して、平行光としてカセット部２１内に戻り、ダイクロイックミラー２７を透過することによってレーザ光から分岐され、カップリングレンズ２５により第２の光ファイバ１１の他端１１ｂに入射させられるようになっている。
【００２６】
このように構成された本実施形態に係る接続ユニット１および光走査型蛍光観察装置２の作用について以下に説明する。
本実施形態に係る光走査型蛍光観察装置２により試料Ａを観察するには、図１に示されるように、装置本体５の姿勢および位置を調節して、試料Ａの観察部位に対物レンズ２０を対向配置させる。このとき、装置本体５は接続ユニット１の第１、第２の光ファイバ７，１１により光源ユニット３および光検出ユニット４から分離されているので、光ファイバ７，１１を湾曲させることで、その位置および姿勢を比較的自由に調節して所望の観察対象部位の観察に適した位置に配置することができる。
【００２７】
この状態で、光源ユニット３、光検出ユニット４および装置本体５を作動させ、光源ユニット３の各レーザ光源６からレーザ光を出射させる。レーザ光源６から発せられたレーザ光は、カップリングレンズ１０によって第１の光ファイバ７内に入射される。第１の光ファイバ７内を伝播したレーザ光は、カセット部２１内に入り、コリメートレンズ２４により平行光とされ、ミラー２６およびダイクロイックミラー２７により反射されて、平行光の形態でカセット部２１から出射される。
【００２８】
カセット部２１から出射されたレーザ光は光走査部１７により２次元的に走査され、瞳投影レンズ１８、結像レンズ１９および対物レンズ２０を介して試料Ａに結像させられる。これにより、レーザ光が試料Ａにおいて２次元的に移動させられ、各位置において発生した蛍光が対物レンズ２０、結像レンズ１９、瞳投影レンズ１８および光走査部１７を介して戻り、平行光としてカセット部２１に入射させられる。
【００２９】
カセット部２１内に入射された蛍光は、ダイクロイックミラー２７を透過することによりレーザ光から分岐させられた後、カップリングレンズ２５によって第２の光ファイバ１１の他端１１ｂに集光させられる。そして、第２の光ファイバ１１に入射された蛍光は、第２の光ファイバ１１内を伝播させられた後に、光検出ユニット４に入射され、コリメートレンズ１２によって平行光にされ、ダイクロイックミラー１３および集光レンズ１４を介して波長毎に別個の光検出器１５により検出されることになる。
【００３０】
本実施形態においては、第２の光ファイバ１１として、シングルモードファイバが採用されているので、カップリングレンズ２５によって蛍光が集光される第２の光ファイバ１１の端面１１ｂが、共焦点ピンホールとして機能する。したがって、光検出器１５により、分解能の高い共焦点蛍光画像を得ることができる。
【００３１】
この場合において、接続ユニット１を構成する第１、第２の光ファイバ７，１１およびカセット部２１内のコリメートレンズ２４、カップリングレンズ２５、ミラー２６およびダイクロイックミラー２７は、相互に光軸調整された状態で固定されているので、装置本体５の筐体１６に取り付けるだけで、レーザ光源６からのレーザ光を試料Ａの所定位置に入射させ、かつ、その位置から戻る蛍光を正しく検出することが可能となる。この場合には、従来のように、第１の光ファイバ７とコリメートレンズ２４、第２の光ファイバ１１とカップリングレンズ２５の精密な位置合わせを行う必要がなく、簡易な位置調整で足りるので、着脱作業を容易にすることができる。
【００３２】
また、ダイクロイックミラー２７を交換する場合には、図２に示されるように、装置本体５の筐体１６からカセット部２１を取り外し、同じく光軸調整された他のダイクロイックミラー２７を収容した他のカセット部２１に交換する。これにより、従来のように、ダイクロイックミラー２７の角度誤差による走査範囲の変動を防止でき、筐体１６に対するカセット部２１の簡易な位置調整で足りるので、交換作業を容易にすることができる。
【００３３】
また、本実施形態に係る接続ユニット１および光走査型蛍光観察装置２によれば、検出したい波長の蛍光を分岐可能なダイクロイックミラー２７を備えた接続ユニット１を、波長毎に準備することにより、接続ユニット１を交換することで、所望の波長の蛍光を検出することが可能となる。このとき、ターレットのような大がかりな装置を設ける必要がないので、装置本体５を小型することができ、とり回し性を向上することができる。
【００３４】
なお、この場合に、接続ユニット１を交換すると、光源ユニット３と第１の光ファイバ７との光軸調整が必要となるが、光軸ユニット３は、装置本体５とは異なりその大きさの制限が比較的少ないので、自動位置調節装置（図示略）を設けることができ、これにより、交換作業を容易にすることができる。また、光検出ユニット４と第２の光ファイバ１１との位置調整は、光検出器１５が光電子増倍管であるため、検出位置は大まかに設定するだけで足り、精密な位置調整が必要とされることはない。
【００３５】
また、図３に示されるように、光源ユニット３に光ファイバ２８を固定し、該光ファイバ２８の先端に、光コネクタ２９を介して第１の光ファイバ７を接続することにしてもよい。この場合、光源ユニット３内に配置されている、レーザ光源６、ダイクロイックミラー９、カップリングレンズ１０および光ファイバ２８は、相互に光軸調整された状態で固定されていればよい。
【００３６】
光コネクタ２９としては、例えば、図４に示されるように、相互にネジ３０により締結されるハウジング３１，３２と、各光ファイバ７，２８のシース先端から口出しされた心線７Ａ，２８Ａに取り付けられるフェルール３３，３４とこれらフェルール３３，３４の突き当て部を覆うように配されるスリーブ３５とフェルール３３，３４どうしを押しつけるように付勢力を作用させるコイルバネ３６，３７とを備えている。
【００３７】
光コネクタ２９による光ファイバ７，２８の接続は、同径のコアを有する光ファイバ７，２８の端面どうしを突き当てるように配置することにより行われている。光ファイバ７，２８の端面は、例えば、ＰＣ研磨されており、一方の光ファイバ２８の端面から発せられたレーザ光を効率よく他方の光ファイバ７内に引き渡すことができるようになっている。一方、ハウジング３１，３２の締結を緩めることにより、２本の光ファイバ７，２８を簡単に切り離すことができるようになっている。これにより、保守時あるいは交換時には、ハウジング３１，３２の締結を緩めるだけで接続ユニット１を光源ユニット３から取り外すことができ、使用時には、ハウジング３１，３２どうしを締結するだけで簡単に取り付けることができるようになっている。
【００３８】
さらに、図５に示されるように、光検出ユニット４についても、同様にして、光検出ユニット４に固定された光ファイバ３８を設け、第２の光ファイバ１１と光コネクタ２９によって接続することにしてもよい。
また、上記実施形態においては、接続ユニット１として、カセット部２１に接続する２本の光ファイバ７，１１を備える場合について例示したが、これに代えて、光検出ユニット４については、図６に示されるように、光ファイバ１１を介することなく、カセット部２１に光検出器１５を直接固定する方式にしてもよい。
【００３９】
また、上記実施形態においては、第２の光ファイバ１１としてシングルモードファイバを採用し、その端面１１ｂを実質的に共焦点ピンホールとして機能させることで、共焦点蛍光画像を得ることとしていたが、これに代えて、図７に示されるように、第２の光ファイバ１１としてマルチモードファイバを採用し、その端面に開口径を変更可能なピンホール３９を配置してもよい。
【００４０】
ピンホール３９は、カップリングレンズ２５の焦点位置に配置することで、対物レンズ２０の結像位置と共役な位置関係に配置される。したがって、ピンホール３９の開口径を十分に絞ることにより、試料Ａにおける結像位置以外から戻る蛍光を遮ることができ、分解能の高い共焦点蛍光画像を得ることができる。
【００４１】
また、開口径を大きくしていくことにより、コンフォーカリティが弱められていくことになるが、その代わりに、光検出器１５に入射させる蛍光量を増加させて、明るい蛍光画像を得ることができる。また、コンフォーカリティを弱めることで、分解能を下げ、深度の深い蛍光画像を得ることができるという利点がある。
また、励起光を発生する光源としてレーザ光源６を採用したが、これに代えて、キセノンランプと励起フィルタとの組み合わせからなる光源を採用してもよい。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】本発明の第１の実施形態に係る接続ユニットおよび光走査型蛍光観察装置を模式的に示す全体構成図である。
【図２】図１の光走査型蛍光観察装置の装置本体から接続ユニットを取り外した状態を示す図である。
【図３】図１の接続ユニットおよび光走査型蛍光観察装置の第１の変形例を示す全体構成図である。
【図４】図３の接続ユニットにおける光ファイバの接続に用いられる光コネクタの一例を示す縦断面図である。
【図５】図１の接続ユニットおよび光走査型蛍光観察装置の第２の変形例を示す全体構成図である。
【図６】図１の接続ユニットおよび光走査型蛍光観察装置の第３の変形例を示す全体構成図である。
【図７】図１の接続ユニットおよび光走査型蛍光観察装置の第４の変形例を示す全体構成図である。
【符号の説明】
【００４３】
Ａ  試料
１  接続ユニット
２  光走査型蛍光観察装置
５  装置本体
６  レーザ光源（光源）
７  第１の光ファイバ（光源用光ファイバ）
１１  第２の光ファイバ（検出器用光ファイバ）
１１ｂ  他端（端面）
１５  光検出器
１７  光走査部
２０  対物レンズ
２４  コリメートレンズ
２５  カップリングレンズ
２７  ダイクロイックミラー
２８，３８  光ファイバ
２９  光コネクタ（コネクタ）
３９  ピンホール
【図１】
2006208681.tif 000003
【図２】
2006208681.tif 000004
【図３】
2006208681.tif 000005
【図４】
2006208681.tif 000006
【図５】
2006208681.tif 000007
【図６】
2006208681.tif 000008
【図７】
2006208681.tif 000009