(57)【要約】      （修正有）【課題】公知のＰＤＥインヒビタの様々な副作用、例えば吐き気及びおう吐、を抑制し、改善された治療幅を有する新規ＰＤＥ４インヒビタ及びその製法の提供。【解決手段】式（１）のヒドロキシインドール[式中、Ｒ１、Ｒ５は−Ｃ１〜Ｃ１２−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ１２−アルケニル、−単環式、二環式又は三環式炭素環；−単環式、二環式、又は三環式複素環、炭素環又は複素環スピロ環であり；Ｒ２、Ｒ３は水素又は−ＯＨであり、この際、両方の置換基の少なくとも１つは−ＯＨでなければならない]。2006249091.tif 000010【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式１：
【化１】
2006249091.tif 000008
［式中、Ｒ１、Ｒ５は、
直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ１２−アルキル（場合により、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒ６、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−（ＣＳ）Ｒ６、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環、５〜１５個の環員及び１〜６個のヘテロ原子（有利にはＮ、Ｏ及びＳである）を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環で１回以上置換されていてよく、その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び包含される炭素環及び複素環置換基それ自体、場合により１回以上、Ｒ４で置換されていてよい）、
１つ以上に不飽和で直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ１２−アルケニル（場合により、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒ６、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−（ＣＳ）Ｒ６、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環、５〜１５個の環員及び１〜６個のヘテロ原子（有利にはＮ、Ｏ及びＳである）を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環で１回以上置換されていてよく、その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び包含される炭素環及び複素環置換基それ自体、場合により１回以上、Ｒ４で置換されていてよい）、
３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環（場合により、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒ６、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−（ＣＳ）Ｒ６、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環、５〜１５個の環員及び１〜６個のヘテロ原子（有利にはＮ、Ｏ及びＳである）を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環で１回以上置換されていてよく、その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び包含される炭素環及び複素環置換基それ自体、場合により１回以上、Ｒ４で置換されていてよい）、
５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する飽和、又は１つ以上の不飽和単環式、二環式又は三環式複素環（場合により、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒ６、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−（ＣＳ）Ｒ６、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環、５〜１５個の環員及び１〜６個のヘテロ原子（有利にはＮ、Ｏ及びＳである）を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環で１回以上置換されていてよく、その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び包含される炭素環及び複素環置換基それ自体、場合により１回以上、Ｒ４で置換されていてよい）、
複素環系が、有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を含有する、３〜１０個の環員を有する飽和又は１つ以上の不飽和の炭素環又は複素環系スピロ環（場合により、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒ６、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−（ＣＳ）Ｒ６、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環、５〜１５個の環員及び１〜６個のヘテロ原子（有利にはＮ、Ｏ及びＳである）を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環で１回以上置換されていてよく、その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び包含される炭素環及び複素環置換基それ自体、場合により１回以上、Ｒ４で置換されていてよい）であり、この際Ｒ１及びＲ５は同じか又は異なってよく；
Ｒ２、Ｒ３は水素又は−ＯＨであってよいが、その際これらの置換基の少なくとも１個は−ＯＨであるべきであり；
Ｒ４は−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、−（ＣＳ）Ｒ６、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ２Ｒ６であり；
Ｒ６は−Ｈ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４アリール）、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｃ１〜Ｃ１２−アルキルを直鎖又は分枝鎖で、Ｃ２〜Ｃ１２−アルケニルを１つ以上不飽和の、直鎖の、又は分枝鎖で、３〜１４個の環員を有する飽和の、又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環を、５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環を表し、
Ａは結合か、又は−（ＣＨ２）ｍ−、−（ＣＨ２）ｍ−（ＣＨ＝ＣＨ）ｎ−（ＣＨ２）ｐ−、−（ＣＨＯＺ）ｍ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｓ）−、−（Ｃ＝Ｎ−Ｚ）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＺ−（ここでｍ、ｐは０〜３であり、かつｎは０〜２である）であり、かつ
Ｚは−Ｈを、又は−Ｃ１〜Ｃ１２−アルキルを直鎖又は分枝鎖で、−Ｃ２〜Ｃ１２−アルケニルを１つ以上の不飽和、直鎖又は分枝鎖で、３〜１４個の環員を有する不飽和又は１つ以上の不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環を、５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する飽和又は１つ以上の不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環を表し、
Ｂは炭素又はイオウであってよいか、又は−（Ｓ＝Ｏ）−を表してよく、
Ｄは酸素、イオウ、ＣＨ２又はＮ−Ｚであってよいが、その際、Ｂが炭素を表す場合にのみ、ＤはＳ又はＣＨ２であってよく、
Ｅは結合であるか、又は−（ＣＨ２）ｍ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−（Ｎ−Ｚ）−であるが、その際、ｍ及びＺは前記の意味を有する］のヒドロキシインドール。
【請求項２】
無機又は有機酸での塩基の中和による、もしくは無機又は有機塩基での酸の中和による、もしくは４級化アンモニウム塩への３級アミンの４級化による、請求項１に記載の式１の化合物の生理学的に認容性の塩。
【請求項３】
Ｄ−形、Ｌ−形及びＤ，Ｌ混合物で不斉炭素原子を有する、並びに複数不斉炭素原子の場合にはジアステレオマー形を有する、請求項１又は２に記載の式１の化合物。
【請求項４】
特に次の化合物の１つ：
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド；
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド−Ｎａ−塩；
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−ヒドロキシ−アセトアミド；
Ｎ−（ピリジン−４−イル）−２−［１−（２，６−ジフルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド；
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（２，６−ジフルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド；
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（３−ニトロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド−Ｎａ−塩；
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−（１−プロピル−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド；
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−（１−イソプロピル−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド；
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−（１−シクロペンチルメチル−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド；
Ｎ−（２，６−ジクロロフェニル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド；
Ｎ−（２，６−ジクロロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド；
Ｎ−（２，６−ジクロロ−４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド；
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−６−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド；
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−５−ヒドロキシ−１−（４−メトキシベンジル）−インドール−３−カルボン酸アミド
である、請求項１から３までのいずれかに１項に記載の式１の化合物。
【請求項５】
請求項１から４までのいずれかに記載の式１の化合物の製法において、式中のＲ２又はＲ３もしくはＲ２及びＲ３が−Ｏ−Ｒ７を表す式１の化合物を、Ｒ７を離脱させることにより本発明の化合物に変え、その際、式中のＲ７が脱離基として好適な置換基であることを特徴とする、請求項１から４までのいずれか１項に記載の式１の化合物の製法。
【請求項６】
特に有利には式中のＲ７が、アルキル基、シクロアルキル基、アリールアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、Ｎ−置換されたアミノカルボニル基、シリル基、スルホニル基並びに錯体形成剤、例えばホウ酸の化合物、リン酸の化合物並びに共有結合又は配位結合金属、例えば亜鉛、アルミニウム又は銅を表す式１の化合物からの、請求項５に記載の式１の化合物の製法。
【請求項７】
式１の化合物を部分構造：
【化２】
2006249091.tif 000009
の変換により、他の式１の本発明の化合物に変える、請求項１から４までのいずれか１項に記載の式１の化合物の製法。
【請求項８】
ＴＮＦαの抑制が治療において有効である疾患を治療するための薬剤製造のための治療用作用物質としての、請求項１から４までのいずれか１項に記載の式１の化合物の使用。
【請求項９】
ホスホジエステラーゼ４の抑制が治療において有効である疾患を治療するための薬剤製造のための治療用作用物質としての、請求項１から４までのいずれか１項に記載の式１の化合物の使用。
【請求項１０】
好酸球の作用と関連している疾患を治療するための薬剤製造のための治療用作用物質としての、請求項１から４までのいずれか１項に記載の式１の化合物の特に有利な使用。
【請求項１１】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）を治療するための薬剤製造のための治療用作用物質としての、請求項１から４までのいずれか１項に記載の式１の化合物の特に有利な使用。
【請求項１２】
慣用の生理学的に認容性の担持剤及び／又は希釈剤もしくは助剤の他に、請求項１から４までのいずれか１項に記載の化合物１種以上を含有することを特徴とする、薬剤。
【請求項１３】
請求項１２に記載の薬剤の製法において、請求項１から４までのいずれか１項に記載の化合物１種以上を慣用の薬剤学的担持剤及び／又は希釈剤もしくは他の助剤を用いて、薬剤学的組成物に加工するか、もしくは治療で使用可能な形にすることを特徴とする、請求項１２に記載の薬剤の製法。
【請求項１４】
単独で、又は相互に組み合わせての、又は担持剤及び／又は希釈剤もしくは他の助剤と組み合わせての、請求項１から４までのいずれか１項に記載の一般式１の化合物及び／又は請求項１２又は１３に記載の薬剤学的組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は一般式１：
【０００２】
【化１】
2006249091.tif 000002
の置換されたヒドロキシインドール、その製法、この化合物を含有する製剤学的組成物、並びに本発明の化合物により免疫担当細胞（例えばマクロファージ及びリンパ球）中のホスホジエステラーゼ４−活性を抑制することで影響を及ぼすことができる疾患を治療するための作用物質としての、ホスホジエステラーゼ４のインヒビタであるこの化合物の製剤学的使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
伝達物質による細胞膜のレセプターの活性化は、「第２メッセンジャー」システムの活性化をもたらす。アデニル酸シクラーゼはＡＭＰ及びＧＭＰから有効なサイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）もしくはサイクリックＧＭＰ（ｃＧＭＰ）を合成する。これらは例えば、平滑筋細胞に弛緩を、もしくは炎症細胞にメディエーター遊離もしくは−合成の抑制をもたらす。ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）により、「第２メッセンジャー」ｃＡＭＰ及びｃＧＭＰの分解が生じる。ＰＤＥ酵素の家族７員（ＰＤＥ１〜７）が従来公知であるが、これらはその基質特異性（ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ又は両方）及び他の基質への依存性（例えば、カルモジュリン）において異なる。これらのアイソザイムは体内で様々な機能を有し、かつ個々の細胞種で様々に顕著である（Beavo JA, Conti M and Heaslip RJ. Multiple cyclic nucleotide Phosphodiesterase. Mol. Pharmacol. 1994, 46:399-405; Hall IP. Isoenzyme selective phosphodiesterase inhibitors: potentia clinical uses, Br. J. clin. Pharmacol. 1993, 35:1-7）。様々なＰＤＥアイソザイムタイプを抑制することにより、細胞中にｃＡＭＰもしくはｃＧＭＰの蓄積が生じ、このことは、治療学的に使用することができる(Torphy TJ, Livi GP, Christensen SB. Novel Phosphodiesterase Inhibitors for the Therapy of Asthma, Drug News and Perspectives 1993, 6:203-214）。
【０００４】
アレルギー性炎症に重要な細胞（リンパ球、マスト細胞、好酸性顆粒球、マクロファージ）では、支配的なＰＤＥアイソザイムはタイプ４である（Torphy, J. T. and Undem, B. J. Phosphodiesterase inhibitors: new oppotunities for the treatment of asthma. Thorax 1991, 46:512-523）。好適なインヒビタによるＰＤＥ４の抑制は従って、数多くのアレルギーにより誘発される疾患を治療するための重要な手がかりと見なされる（Schudt Ch, Dent G, Rabe K Phosphodiesterase Inhibitors, Academic Press London 1996）。
【０００５】
ホスホジエステラーゼ４インヒビタの重要な特性の１つは、炎症細胞からの腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）の遊離の抑制である。ＴＮＦαは、多数の生物学的プロセスに影響を及ぼす重要なプロ−炎症性サイトカインである。例えば活性化マクロファージ、活性化Ｔ−リンパ球、マスト細胞、好塩基球、繊維芽細胞、内皮細胞及び脳内の星状細胞からＴＮＦαが遊離される。これは、好中球、好酸球、繊維芽細胞及び内皮細胞に活性に作用し、これにより様々な組織破壊性メディエーターが遊離される。単球、マクロファージ及びＴリンパ球中で、ＴＮＦαは更なるプロ炎症性サイトカイン、例えばＧＭ−ＣＳＦ（顆粒球マクロファージコロニー刺激因子）又はインターロイキン−８をより多く産生させる。その炎症促進及び分解作用の故に、ＴＮＦαは数多くの疾患、例えば気道の炎症、関節の炎症、内毒素ショック、組織剥離、ＡＩＤＳ及び数多くの他の免疫疾患で中心的な役割を有する。従って、このようなＴＮＦα関連疾患を治療するために、ホスホジエステラーゼ４のインヒビタも好適である。
【０００６】
慢性閉塞性肺疾患（COPD）は住民に拡がっていて、かつ多大な経済的な意味も有している。例えば、発展国では全医療費の約１０〜１５％がＣＯＰＤ疾患により、かつ米国では全死亡ケースの約２５％がこの原因に起因し(Norman P.: COPD: New developments and therapeutic opportunities, Drug News Perspect. 11(7), 431-437, 1998)し、患者の死亡年齢の多くは５５才以上である（Nolte D.: Chronische Bronchitis - eine Volkskrankheit multifaktorieller Genese. Atemw.-Lungenkrkh. 20(5), 260-267, 1994)。ＣＯＰＤは２０年以内に死因の第３位になるであろうと、ＷＨＯは予測している。
【０００７】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の病状では、咳の症状及び喀痰を伴う慢性気管支炎並びに進行性及び非可逆性の肺機能低下（特に呼気の際に生じる）の様々な病状全てがみられる。疾患の進行は病勢増悪の形であり、往々にして細菌感染により合併症を起こす（Rennard S.I.: COPD: Overview of definitions, Epidemiology, and factors influencing its development. Chest, 113(4) Suppl., 235S-241S, 1998)。疾患が進行すると、肺機能が徐々に低下し、肺は徐々に肺気腫になり、かつ患者の呼吸困難が明白になる。この疾患は、患者の身体状態に明らかに悪影響を及ぼし（呼吸促迫、低い負荷性）、かつその余命を著しく短くする。環境因子の他の主な危険因子は喫煙であり（Kummer F.: Asthma und COPD. Atemw.-Lungenkrkh. 20(5), 299-302, 1994; Rennard S.I.: COPD: Overview of definitions, Epidemiology, and factors influencing its development. Chest, 113(4) Suppl., 235S-241S, 1998)、女性よりも男性にかなり頻繁に発生する。しかし、生活習慣の変化及び喫煙女性数の増大により、このイメージは将来変化するだろう。
【０００８】
現在の治療は疾患の進行に根本的に影響を及ぼすことなく、症状の軽減のみを目的としている。長期作用性β２−アゴニスト（例えばSalmeterol）を場合によりムスカリン(muscarinergen)アンタゴニスト（例えばイプラトロピウム）と組み合わせて使用すると、気管支拡張作用により肺機能が改善され、習慣的に使用される（Norman P.: COPD: New developments and therapeutic opportunities, Drug News Perspect. 11(7), 431-437, 1998）。細菌感染はＣＯＰＤ病勢増悪の際に大きな役割を有し、抗生物剤を用いて治療しなければならない（Wilson R.: The role of infection in COPD, Chest, 113(4) Suppl., 242S-248S, 1998; Grossman R.F.: The value of antibiotics and the outcomes of antibiotic therapy in exacerbations of COPD. Chest, 113(4) Suppl., 249S-255S, 1998)。この疾患の治療は従来、特に肺機能の恒常的な低下に関してまだ不十分である。炎症メディエータ、プロテアーゼ又は付着分子で攻撃する新規の治療の手がかりは非常に有望でありえた（Barnes P.J.: Chronic Obstructive disease: new opportunities for drug development, TiPS 10(19), 415-423, 1998)。
【０００９】
疾患を複雑にする最近感染に関わらず気管支には、好中性顆粒球によって支配される慢性炎症が存在する。気道に観察される構造変化（気腫）に関して殊に、好中性顆粒球によって遊離されるメディエータ及び酵素にその原因がある。好中性顆粒球の活性の抑制は従って、ＣＯＰＤの進行（肺機能パラメータの悪化）を抑制するか、又は緩慢にする合理的な手がかりである。顆粒球の活性に関する重大な刺激は、プロ炎症サイトカインＴＮＦα（細胞壊死因子）である。例えばＴＮＦα−は好中性顆粒球による酸素ラジカルの形成を刺激することが公知である（Jersmann, H.P.A.: Tathjen, D.A. and Ferrante A.: Enhancement of LPS-induced neutrophil oxygen radical production by TNFα, Infection and Immunity, 4, 1744-1747, 1998）。ＰＤＥ４−インヒビタは非常に効果的に多くの細胞からのＴＮＦαの遊離を阻止するので、好中性顆粒球の活性を抑制する。非特異的ＰＤＥインヒビタのペントキシフィリン(Pentoxifylline)により、酸素ラジカルの形成も、好中性顆粒球の貪食性も抑制することができる(Wenisch, C., Zedtwitz-Liebenstein, K.: Parschalk, B. and Graninger W.: Effect of pentoxifylline in vitro on neutrophil reactive oxygen production and phagocytic ability assessed by flow cytometry, Clin. Drug Invest., 13(2):99-104, 1997)。
【００１０】
既に様々なＰＤＥ４インヒビタが公知である。その場合、先ずはキサンチン誘導体、ロリプラム（Rolipram）類似体又はニトラクヴァゾン(Nitraquazon)誘導体がこれに該当する（Karlsson J-A, Aldos D Phosphodiesterase 4 inhibitors for the treatment of asthma, Exp. Opin. Ther. Patents 1997, 7: 989-1003参照）。これらの化合物のどれも、これまで臨床的に使用することができていなかった。公知のＰＤＥインヒビタは様々な副作用、例えば吐き気及びおう吐も有し、これは従来、十分に抑制することができていなかったことが確認されているはずであった。従って、改善された治療幅を有する新規ＰＤＥ４インヒビタの開発が求められていた。
【非特許文献１】Beavo JA, Conti M and Heaslip RJ. Multiple cyclic nucleotide Phosphodiesterase. Mol. Pharmacol. 1994, 46:399-405
【非特許文献２】Hall IP. Isoenzyme selective phosphodiesterase inhibitors: potentia clinical uses, Br. J. clin. Pharmacol. 1993, 35:1-7
【非特許文献３】Torphy TJ, Livi GP, Christensen SB. Novel Phosphodiesterase Inhibitors for the Therapy of Asthma, Drug News and Perspectives 1993, 6:203-214
【非特許文献４】Torphy, J. T. and Undem, B. J. Phosphodiesterase inhibitors: new oppotunities for the treatment of asthma. Thorax 1991, 46:512-523
【非特許文献５】Schudt Ch, Dent G, Rabe K Phosphodiesterase Inhibitors, Academic Press London 1996
【非特許文献６】Norman P.: COPD: New developments and therapeutic opportunities, Drug News Perspect. 11(7), 431-437, 1998
【非特許文献７】Nolte D.: Chronische Bronchitis - eine Volkskrankheit multifaktorieller Genese. Atemw.-Lungenkrkh. 20(5), 260-267, 1994
【非特許文献８】Rennard S.I.: COPD: Overview of definitions, Epidemiology, and factors influencing its development. Chest, 113(4) Suppl., 235S-241S, 1998
【非特許文献９】Kummer F.: Asthma und COPD. Atemw.-Lungenkrkh. 20(5), 299-302, 1994
【非特許文献１０】Rennard S.I.: COPD: Overview of definitions, Epidemiology, and factors influencing its development. Chest, 113(4) Suppl., 235S-241S, 1998
【非特許文献１１】Norman P.: COPD: New developments and therapeutic opportunities, Drug News Perspect. 11(7), 431-437, 1998
【非特許文献１２】Wilson R.: The role of infection in COPD, Chest, 113(4) Suppl., 242S-248S, 1998
【非特許文献１３】Grossman R.F.: The value of antibiotics and the outcomes of antibiotic therapy in exacerbations of COPD. Chest, 113(4) Suppl., 249S-255S, 1998
【非特許文献１４】Barnes P.J.: Chronic Obstructive disease: new opportunities for drug development, TiPS 10(19), 415-423, 1998
【非特許文献１５】Jersmann, H.P.A.: Tathjen, D.A. and Ferrante A.: Enhancement of LPS-induced neutrophil oxygen radical production by TNFα, Infection and Immunity, 4, 1744-1747, 1998
【非特許文献１６】Wenisch, C., Zedtwitz-Liebenstein, K.: Parschalk, B. and Graninger W.: Effect of pentoxifylline in vitro on neutrophil reactive oxygen production and phagocytic ability assessed by flow cytometry, Clin. Drug Invest., 13(2):99-104, 1997
【非特許文献１７】Karlsson J-A, Aldos D Phosphodiesterase 4 inhibitors for the treatment of asthma, Exp. Opin. Ther. Patents 1997, 7: 989-1003
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
数年来、様々な適用のために新規な作用物質を開発する際にインドールは重要な役割を有してきたが、ヒドロキシインドールはＰＤＥ４のインヒビタとしてはこれまで全く知られていなかった。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は一般式１：
【００１３】
【化２】
2006249091.tif 000003
［式中、Ｒ１、Ｒ５は、
直鎖又は分枝鎖のＣ１〜Ｃ１２−アルキル（場合により、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒ６、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−（ＣＳ）Ｒ６、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環、５〜１５個の環員及び１〜６個のヘテロ原子（有利にはＮ、Ｏ及びＳである）を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環で１回以上置換されていてよく、その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び包含される炭素環及び複素環置換基それ自体、場合により１回以上、Ｒ４で置換されていてよい）、
１つ以上に不飽和で直鎖又は分枝鎖のＣ２〜Ｃ１２−アルケニル（場合により、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒ６、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−（ＣＳ）Ｒ６、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環、５〜１５個の環員及び１〜６個のヘテロ原子（有利にはＮ、Ｏ及びＳである）を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環で１回以上置換されていてよく、その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び包含される炭素環及び複素環置換基それ自体、場合により１回以上、Ｒ４で置換されていてよい）、
３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環（場合により、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒ６、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−（ＣＳ）Ｒ６、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環、５〜１５個の環員及び１〜６個のヘテロ原子（有利にはＮ、Ｏ及びＳである）を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環で１回以上置換されていてよく、その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び包含される炭素環及び複素環置換基それ自体、場合により１回以上、Ｒ４で置換されていてよい）、
５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する飽和、又は１つ以上の不飽和単環式、二環式又は三環式複素環（場合により、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒ６、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−（ＣＳ）Ｒ６、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環、５〜１５個の環員及び１〜６個のヘテロ原子（有利にはＮ、Ｏ及びＳである）を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環で１回以上置換されていてよく、その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び包含される炭素環及び複素環置換基それ自体、場合により１回以上、Ｒ４で置換されていてよい）、
複素環系が、有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を含有する、３〜１０個の環員を有する飽和又は１つ以上の不飽和の炭素環又は複素環系スピロ環（場合により、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒ６、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−（ＣＳ）Ｒ６、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、３〜１４個の環員を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環、５〜１５個の環員及び１〜６個のヘテロ原子（有利にはＮ、Ｏ及びＳである）を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環で１回以上置換されていてよく、その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び包含される炭素環及び複素環置換基それ自体、場合により１回以上、Ｒ４で置換されていてよい）であり、この際Ｒ１及びＲ５は同じか又は異なってよく；
Ｒ２、Ｒ３は水素又は−ＯＨであってよいが、その際これらの置換基の少なくとも１個は−ＯＨであるべきであり；
Ｒ４は−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＲ６、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｒ６、−（ＣＳ）Ｒ６、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｏ（ＣＯ）Ｒ６、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＲ６、−ＳＯ２Ｒ６であり；
Ｒ６は−Ｈ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４アリール）、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｃ１〜Ｃ１２−アルキルを直鎖又は分枝鎖で、Ｃ２〜Ｃ１２−アルケニルを１つ以上不飽和の、直鎖の、又は分枝鎖で、３〜１４個の環員を有する飽和の、又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環を、５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する飽和又は１つ以上不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環を表し、
Ａは結合か、又は−（ＣＨ２）ｍ−、−（ＣＨ２）ｍ−（ＣＨ＝ＣＨ）ｎ−（ＣＨ２）ｐ−、−（ＣＨＯＺ）ｍ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｓ）−、−（Ｃ＝Ｎ−Ｚ）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＺ−（ここでｍ、ｐは０〜３であり、かつｎは０〜２である）であり、かつ
Ｚは−Ｈを、又は−Ｃ１〜Ｃ１２−アルキルを直鎖又は分枝鎖で、−Ｃ２〜Ｃ１２−アルケニルを１つ以上の不飽和、直鎖又は分枝鎖で、３〜１４個の環員を有する不飽和又は１つ以上の不飽和の単環式、二環式又は三環式炭素環を、５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する飽和又は１つ以上の不飽和の単環式、二環式又は三環式複素環を表し、
Ｂは炭素又はイオウであってよいか、又は−（Ｓ＝Ｏ）−を表してよく、
Ｄは酸素、イオウ、ＣＨ２又はＮ−Ｚであってよいが、その際、Ｂが炭素を表す場合にのみ、ＤはＳ又はＣＨ２であってよく、
Ｅは結合であるか、又は−（ＣＨ２）ｍ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−（Ｎ−Ｚ）−であるが、その際、ｍ及びＺは前記の意味を有する］の置換されたヒドロキシインドールに関する。
【００１４】
更に、本発明は式１の化合物の生理学的に認容性の塩に関する。
【００１５】
生理学的に認容性の塩を通常の方法で、無機又は有機酸での塩の中和により、もしくは無機又は有機塩基での酸の中和により得る。無機酸としては例えば、塩酸、硫酸、リン酸又は臭化水素酸が、有機酸としては例えばカルボン酸、スルホ酸又はスルホン酸、例えば酢酸、酒石酸、乳酸、プロピオン酸、グリコール酸、マロン酸、マレイン酸、フマル酸、タンニン酸、コハク酸、アルギン酸、安息香酸、２−フェノキシ安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、クエン酸、リンゴ酸、サリチル酸、３−アミノサリチル酸、アスコルビン酸、エンボン酸（Embonsaeure）、ニコチン酸、イソニコチン酸、シュウ酸、アミノ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−メチルベンゼンスルホン酸又はナフタリン−２−スルホン酸が該当する。無機塩基としては例えば水酸化ナトリウム溶液、水酸化カリウム溶液、アンモニアが、並びに有機塩基としてはアミン、有利には３級アミン、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、キノリン、イソキノリン、α−ピコリン、β−ピコリン、γ−ピコリン、キナルジン又はピリミジンが該当する。
【００１６】
更に、３級アミノ基を有する誘導体を自体公知の方法で４級化剤を用いて相応する４級アンモニウム塩に変えることにより、式１の化合物の生理学的に認容性の塩を得ることができる。４級化剤として例えば、アルキルハロゲン化物、例えばヨウ化メチル、臭化エチル及び塩化ｎ−プロピル、更にアリールアルキルハロゲン化物、例えば塩化ベンジル又は２−フェニルエチルブロミドがこれに該当する。
【００１７】
更に本発明は、不斉炭素原子を含有する式１の化合物のうち、Ｄ形、Ｌ形及びＤ，Ｌ−混合物、並びに複数の不斉炭素原子の場合にはジアステレオマー形に関する。不斉炭素原子を含有し、かつ通常、ラセミ体として生じる式１の化合物のいずれも、自体公知の方法で、例えば光学活性な酸を用いて、光学活性異性体に分離することができる。しかし始めから、光学活性な出発物質を使用することもでき、その際、最終生成物として相応する光学活性化合物もしくは光学活性ジアステレオマー化合物が得られる。
【００１８】
本発明の化合物には、治療で使用することができる薬剤学的に重要な特性が見出されている。本発明の化合物はＴＮＦαの遊離のインヒビタである。従って本発明の目的は、式１の化合物及びその塩並びにこれらの化合物又はその塩を含有する薬剤学的組成物を、ＴＮＦαのインヒビタが効果的である疾患の治療のために使用することである。
【００１９】
これらの疾患には例えば、関節炎、リウマチ性関節炎を含む関節炎症状並びに他の関節炎疾患、例えばリウマチ性脊椎炎及び変形性関節炎が該当する。他の使用可能性は、敗血症、敗血症性ショック、グラム陰性敗血症、毒性ショック症、呼吸困難症、喘息又は他の慢性肺疾患、骨吸収障害又は移植拒絶反応又は他の自己免疫疾患、例えば紅斑性エリテマトーデス、多発性硬化症、腎炎及びブドウ膜塩、インシュリン依存性糖尿病並びに慢性脱髄を患っている患者の治療である。更に、本発明の化合物は感染、例えば細菌感染、寄生虫感染の治療のために、例えばマラリア、感染性発熱、感染性筋肉痛、ＡＩＤＳ及びカヘキシーの治療のためにも使用することができる。
【００２０】
本発明の化合物は、ホスホジエステラーゼ４のインヒビタである。従って、式１の化合物及びその塩並びにこれらの化合物又はその塩を含有する薬剤学的組成物を、ホスホジエステラーゼ４のインヒビタが有効である疾患の治療のために使用することが本発明の目的である。本発明の化合物は気管支拡張薬として、かつ喘息予防のために使用することができる。
【００２１】
式１の化合物は更に、好酸球の蓄積並びにその活性のインヒビタである。従って、本発明の化合物は、好酸球が１つの役割を有する疾患の際にも使用することができる。この疾患には例えば、炎症性気道疾患、例えば気管支喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、湿疹、アレルギー性血管炎、好酸球により仲介される炎症、例えば、好酸球性筋膜炎、好酸球性肺炎及びＰＩＥ症（好酸球での肺湿潤）、じんま疹、潰瘍性大腸炎、クローン病及び増殖性皮膚疾患、例えば乾癬又は角化症が該当する。
【００２２】
この本発明の目的は、式１の化合物及びその塩が、インビトロでのヒトの血液中でのＴＮＦαのリポ多糖体（ＬＰＳ）誘発遊離も、インビボでのフェレット及び飼育用豚でのＬＰＳ誘発の肺の好酸球湿潤も抑制することができることである。この見出された薬剤学的に重要な特性の全部は、式１の化合物及びその塩並びにこれらの化合物又はその塩を含有する薬剤学的処方物が慢性閉塞性肺疾患を治療するために治療学的に使用することができることを実証している。
【００２３】
本発明の化合物は更に、神経保護特性を有し、かつ神経保護が有効である疾患の治療のために使用することができる。このような疾患は例えば、老人性痴呆（アルツハイマー病）、記憶喪失、パーキンソン病、鬱病、卒中発作及び間欠性跛行である。
【００２４】
本発明の化合物の更なる使用可能性は前立腺疾患、例えば良性前立腺肥大症、頻尿、夜間頻尿の予防及び治療並びに膀胱機能低下(Blasenschwaeche）及び尿結石により生じる疝痛の治療である。最後に、本発明の化合物は鎮痛薬、例えばモルヒネの反復使用の際の薬物依存性の上昇を抑制するためにも、並びにこれらの鎮痛薬の反復使用の際の許容性の低下のためにも使用することができる。
【００２５】
薬剤を製造するために、慣用の助剤、担持剤及び添加物の他に、本発明の化合物又はその塩の有効量を使用する。
【００２６】
作用物質の配量は投与方法、患者の年齢、体重、治療すべき疾患の種類及び重度及び類似のファクターによって変動させることができる。
【００２７】
一日用量は一度に投与すべき単一用量として、又は２つ以上の一日用量に分けて施与することができ、かつ通常、０．００１〜１００ｍｇである。
【００２８】
投与形としては経口、非経口、静脈内、経皮、局所、吸入及び鼻腔内組成物が該当する。
【００２９】
慣用の製剤組成物形、例えば錠剤、糖衣錠、カプセル、分散粉末、顆粒、水溶液、水性又は油性懸濁液、シロップ、クリーム又は液滴を使用する。
【００３０】
固形薬剤形は不活性内容物及び担持剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム、ラクトース、デンプン、マンニット、アルギン酸塩、ゼラチン、ガーゴム、ステアリン酸マグネシウム又はステアリン酸アルミニウム、メチルセルロース、タルク、高分散性ケイ酸、シリコーンオイル、高分子量の脂肪酸（例えばステアリン酸）、ゼラチン、寒天又は植物性又は動物性脂肪及びオイル、固体の高分子量ポリマー（例えばポリエチレングリコール）；経口投与のために好適な組成物は所望の場合には、付加的な矯味剤及び／又は甘味剤を含有してよい。
【００３１】
液体薬剤形を殺菌してよいか、かつ／又は場合により助剤、例えば保存量、安定剤、架橋剤、浸透剤、乳化剤、展着剤、溶解助剤、浸透圧を調整するための、又は緩衝のための塩、糖又は糖アルコール及び／又は粘度調節剤を含有してよい。
【００３２】
このような添加剤は例えば酒石酸塩緩衝剤、クエン酸緩衝剤、エタノール、錯体形成剤（例えばエチレンジアミン−テトラ酢酸及びその非毒性塩）である。粘度を調節するためには高分子量のポリマー、例えば液体ポリエチレンオキシド、微結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、デキストラン又はゼラチンが該当する。固体担持剤は例えばデンプン、ラクトース、マンニット、メチルセルロース、タルク、高分散性ケイ酸、高分子量の脂肪酸（例えばステアリン酸）、ゼラチン、寒天、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、動物性及び植物性脂肪、固体の高分子量ポリマー、例えばポリエチレングリコールである。
【００３３】
非経口又は局所使用のための油性懸濁液は、植物性合成又は半合成オイル、例えば脂肪酸鎖にそれぞれ８〜２２個のＣ原子を有する液体脂肪酸エステル、例えば１〜６個のＣ原子を有する一価から三価のアルコール、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール又はそれらの異性体、グリコール又はグリセロールでエステル化されているパルミチン酸、ラウリン酸、トリデシル酸、マーガリン酸、ステアリン酸、アラキン酸、ミリスチン酸、ベヘン酸、ペンタデシル酸、リノール酸、エライジン酸、ブラシジン酸、エルカ酸又はオレイン酸である。このような脂肪酸エステルは例えば市販のMiglyole、イソプロピルミリステート、イソプロピルパルミテート、イソプロピルステアレート、ＰＥＧ６−カプリン酸、飽和脂肪族アルコールのカプリル／カプリン酸エステル、ポリオキシエチレングリセロールトリオレエート、エチルオレエート、ワックス状脂肪酸エステル、例えば人工のカモ類尾腺脂肪（Entenbuerzeldruesenfett)、やし油酸−イソプロピルエステル、オレイン酸オレイルエステル、オレイン酸デシルエステル、乳酸エチルエステル、ジブチルフタレート、アジピン酸ジイソプロピルエステル、ポリオール−脂肪酸エステル等である。様々な粘度のシリコーンオイル又は脂肪族アルコール、例えばイソトリデシルアルコール、２−オクチルドデカノール、セチルステアリルアルコール又はオレイルアルコール、脂肪酸、例えばオレイン酸も好適である。更に、植物油、例えばひまし油、アーモンド油、オリーブ油、ゴマ油、綿実油、落花生油又は大豆油も使用することができる。
【００３４】
溶剤、ゲル形成剤及び溶解仲介剤として、水又は水と混合可能な溶剤が該当する。例えばアルコール、例えばエタノール又はイソプロピルアルコール、ベンジルアルコール、２−オクチルドデカノール、ポリエチレングリコール、フタレート、アジペート、プロピレングリコール、グリセリン、ジ−又はトリプロピレングリコール、ワックス、メチルセロソルブ、セロソルブ、エステル、モルホリン、ジオキサン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、シクロヘキサノン等が好適である。
【００３５】
フィルム形成剤として、水にも有機溶剤にも溶解するか、膨潤しうるセルロースエーテル、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース又は溶解デンプンを使用する。
【００３６】
ゲル及びフィルム形成剤との間の混合形も可能である。この場合、特に、イオン性マクロ分子、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸及びそれらの塩、ナトリウムアミロペクチンセミグリコレート、アルギン酸又はプロピレングリコールアルギネートをナトリウム塩として、アラビアゴム、キサンタンゴム、ガーゴム又はカラゲナンを使用する。
【００３７】
更なる成形助剤としては次のものを使用することができる：グリセリン、様々な粘度のパラフィン、トリエタノールアミン、コラーゲン、アラントイン、ノバンチゾル酸（Novantisolsaeure）。界面活性剤、乳化剤又は架橋剤、例えばＮａ−ラウリルスルフェート、脂肪族アルコールエーテルスルフェート、ジ−Ｎａ−Ｎ−ラウリル−β−イミノジプロピオネート、ポリオキシエチル化ひまし油又はソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート（例えばツイーン）、セチルアルコール、レシチン、グリセリンモノステアレート、ポリオキシエチレンステアレート、アルキルフェノールポリグリコールエーテル、セチルトリメチルアンモニウムクロリド又はモノ／ジアルキルポリグリコールエーテル−オルトホスホル酸−モノエタノールアミン塩の使用も、成形のために必要であることがある。安定剤、例えばモンモリロナイト又はエマルジョンの安定のための、又は活性物質の分解の抑制のためのコロイド状ケイ酸、例えば抗酸化剤、例えばトコフェロール又はブチルヒドロキシアニソール又は保存剤、例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸エステルも、所望の処方物の調製のために場合により、必要であることもある。
【００３８】
非経口投与のための組成物は別々の用量単位形で、例えばアンプル又はバイアルで存在してよい。有利には、作用物質の溶液を、有利には水性溶液、ことには等張性溶液、更には懸濁液を使用する。この注入形は、調製プレパラートの形であってよいか、又は使用の直前に初めて、例えば凍結乾燥物の作用化合物と場合により更なる固体担持剤と、所望の溶剤又は懸濁剤とを混合することにより処方することができる。
【００３９】
鼻腔内用組成物は水性溶液又は油性溶液として、もしくは水性懸濁液又は油性懸濁液として存在してよい。これらは凍結乾燥物として存在してもよく、これは、使用前に好適な溶剤又は懸濁剤と処方される。
【００４０】
プレパラートの製造、充填及び封止は通常の抗菌条件及びアスペティックな(aspetischen）条件下に行う。
【００４１】
本発明は更に、本発明の化合物の製法に関する。
【００４２】
本発明では、式中のＲ２又はＲ３もしくはＲ２及びＲ３が−Ｏ−Ｒ７である式１の化合物を、Ｒ７を分離することにより本発明の化合物に変えることにより、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ａ、Ｂ、Ｄ及びＥの前記の意味を有する一般式１：
【００４３】
【化３】
2006249091.tif 000004
の化合物を製造する。
【００４４】
この際、Ｒ７は脱離基として好適な置換基、例えばアルキル基、シクロアルキル基、アリールアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、Ｎ−置換されたアミノカルボニル基、シリル基、スルホニル基、並びに錯体形成剤、例えばホウ酸の化合物、リン酸、並びに共有結合又は配位結合金属、例えば亜鉛、アルミニウム又は銅である。
【００４５】
Ｒ７を脱離するための本発明の製法で特に有利な反応は、好適な塩基、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム又は炭酸ナトリウムもしくは炭酸カリウムでのけん化である。これらのけん化はＲ７がアシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、Ｎ−置換されたアミノカルボニル基、シリル基、スルホニル基並びに錯体形成剤、例えばホウ酸、リン酸の化合物並びに配位結合金属、例えば亜鉛、アルミニウム又は銅である場合に使用するのが有利である。
【００４６】
式中のＲ７がアルキル基、シクロアルキル基、アリールアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基である化合物からＲ７を脱離するための本発明の製法で特に有利な反応は、例えば臭化水素酸、塩化水素酸、ヨウ化水素酸並びに活性ルイス酸、例えばＡｌＣｌ３、ＢＦ３、ＢＢｒ３又はＬｉＣｌを用いて付加的な活性剤、例えばエタン−１，２−ジチオール又はベンジルメルカプタンの不在下又は存在下でのエーテル脱離、並びに水素を用いての加圧下での、又は常圧での、好適な触媒、例えばパラジウム又はイリジウム触媒の存在下でのエーテル脱離である。
【００４７】
本発明では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ａ、Ｂ、Ｄ及びＥの前記の意味を有する一般式１の化合物を、自体公知の反応により部分構造：
【００４８】
【化４】
2006249091.tif 000005
を変換することにより、式１の本発明の化合物を式１の別の本発明の化合物に変えることにより、製造することもできる。式１の本発明の化合物での特に有利な変換反応は例えば、Ａ＝−（Ｃ＝Ｏ）−の場合には、公知の還元剤、例えばホウ水素化ナトリウムでの、もしくは場合により立体選択的に実施可能な水素化によるＡ＝−（ＣＨ−ＯＨ）−又はＡ＝−ＣＨ２−への還元である。
【００４９】
更に有利な変換反応は、Ｄ及びＥが酸素を意味する化合物を、Ｄのみが酸素を意味し、かつＥが−（Ｎ−Ｚ）−である（ここでＺは前記の意味を有する）の物質に変えることである。
【実施例】
【００５０】
式中のＲ７がアルキル−、シクロアルキル−、アリールアルキル−、アリール−、ヘテロアリール基である前記の種類の出発物質から式１の本発明の化合物の製造する方法の例
例１：
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソアセトアミド（１）
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−メトキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソアセトアミド１．４ｇ（３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１００ｍｌ中に溶かす。この溶液を還流まで加熱し、かつ撹拌下にジクロロメタン１５ｍｌ中のＢＢｒ３１４ｍｍｏｌの溶液を添加する。反応混合物を乾留で３時間、加熱する。冷却の後に、この溶液を炭酸水素ナトリウム水溶液２００ｍｌと共に２０℃で３時間、激しく攪拌する。すると、生成物が晶出する。単離し、６０℃で乾燥させ、かつエタノール８０ｍｌから再結晶させる。
【００５１】
収量：１．１ｇ（理論量の８０％）
融点：２１３〜２１４℃
例２：Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド（１）
無水塩化アルミニウム５ｇ（３８ｍｍｏｌ）をエタン−１，２−ジチオール５０ｍｌ中に予め装入する。０℃で、ジクロロメタン５０ｍｌ中のＮ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−メトキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド４．７ｇ（１０ｍｍｏｌ）を添加する。この混合物を０℃で４時間、攪拌する。撹拌下に０〜１０℃で、１０％濃度塩酸５０ｍｌを滴加する。結晶性生成物を単離し、水で洗浄し、かつ２０℃で乾燥させた。エタノール（１８０ｍｌ）からの再結晶により、純粋な生成物が得られる。
【００５２】
収量：３．１ｇ（理論量の６７％）
溶融点：２１２〜２１４℃
Ｒ７がアシル−、アルコキシカルボニル−、アリールオキシカルボニル−、アミノカルボニル−、Ｎ−置換アミノカルボニル−、シリル−、スルホニル基である前記の種類の出発物質から式１の本発明の化合物を製造する方法の例；
例３：
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド−Ｎａ−塩（２）
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［５−アセトキシ−１−（４−フルオロベンジル）−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド５ｇ（１０ｍｍｏｌ）を希水酸化ナトリウム溶液５０ｍｌ中、４０〜５０℃で１時間、攪拌する。溶液を氷での冷却下に塩酸（１０％濃度）で中和し、乾燥するまで濃縮する。残留物をアセトン８０ｍｌ中に溶かす。不溶性成分を分離する。清澄な溶液に水３ｍｌ中のＮａＯＨ０．４ｇ溶液を添加し、かつ２０℃で２時間、攪拌する。結晶生成物を単離し、アセトンで洗浄し、かつ６０℃で乾燥させる。
【００５３】
収量：２．４４ｇ（理論量の５１％）
融点：２６５℃
式１の本発明の化合物から他の式１の本発明の化合物を製造する方法の例：
例４：
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−ヒドロキシ−アセトアミド（３）
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−２−［１−（４−フルオロベンジル）−５−ヒドロキシ−インドリ−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド１ｇ（１．２ｍｍｏｌ）をメタノール７５ｍｌ中に懸濁させる。希水酸化ナトリウム溶液３ｍｌ中のホウ水素化ナトリウム０．２ｇの溶液を添加した後に、反応混合物を２０℃で６時間攪拌する。溶剤を留去した後に、残留物をエタノール４０ｍｌから再結晶させる。
【００５４】
収量：０．５ｇ（理論量の５０％）
融点：２０５〜２０７℃。
【００５５】
前記の例の変法を用いて、数多くの式１の他の化合物を製造することができ、それを、次の例に示す：
【００５６】
【化５】
2006249091.tif 000006
【００５７】
【表１】
2006249091.tif 000007
【００５８】
本発明の化合物はホスホジエステラーゼ４及びＴＮＦα遊離の強力なインヒビタである。その治療学的ポテンシャルはインビボで、例えばモルモットでの喘息遅発相反応（好酸性）の抑制により、並びに活性感作Brown-Norway ラットでのアレルゲン誘発血管透過性の影響により証明される。
【００５９】
ホスホジエステラーゼの抑制
ＰＤＥ４−活性を、ヒト多形核リンパ球（ＰＭＮＬ）からの酵素プレパラート中で測定し、ＰＤＥ２、３及び５−活性はヒト血小板からのＰＤＥで、測定する。ヒトの血液をクエン酸塩を用いて凝固阻止した。室温で２０分間、７００×ｇでの遠心沈殿により、血小板リッチなプラズマを赤血球及び白血球の上澄みに分離した。血小板を超音波により溶解させ、かつＰＤＥ３及びＰＤＥ５アッセイで使用する。ＰＤＥ２活性の測定のために、サイトゾルの血小板フラクションをアニオン交換体カラムを介してＮａＣｌ勾配により精製し、かつＰＤＥ２ピークをアッセイのために取得した。ＰＤＥ４測定のためのＰＭＮＬをFicoll-Paqueを用いての次のデキストラン沈殿及び続く勾配遠心沈殿法により単離する。細胞を２回洗浄した後に、まだ含有される赤血球を低張緩衝剤１０ｍｌ（ＮＨ４Ｃｌ１５５ｍＭ、ＮａＨＣＯ３１０ｍＭ、ＥＤＴＡ０．１ｍＭ、ｐＨ＝７．４）の添加により、４℃で６分以内に溶解させる。まだ完全なＰＭＮＬをＰＢＳで更に２回洗浄し、かつ超音波で溶解させる。４８０００×ｇ、４℃での１時間の遠心沈殿法の上澄みはＰＤＥ４のサイトゾルフラクションを含有し、かつこれをＰＤＥ測定のために使用する。
【００６０】
ホスホジエステラーゼ活性をThompson et alにより記載された方法により、いくつかの変更と共に測定した(Thompson, W.J.; Appleman, M.M., Assay of cyclic nucleotide phosphodiesterase and resolution of multiple molecular forms of the enzyme. Adv. Cycl. Nucl. Res. 1979, 10, 69-92）。反応混合物はTris-HCl（ｐＨ７．４）５０ｍＭ、ＭｇＣｌ２ ５ｍＭ、様々な濃度のインヒビタ、相応する酵素プレパラート並びに個々のイソ酵素の把握に必要な他の成分（下記参照）を含有する。基質［３Ｈ］−ｃＡＭＰ又は［３Ｈ］−ｃＧＭＰ０．５μＭ（約６０００ＣＰＭ／試験）を添加することにより、反応を開始させる。最終容量は１００ｍｌである。試験物質をＤＭＳＯ中の主溶液として添加する。反応混合物中のＤＭＳＯ濃度は１ｖ／ｖ％である。このＤＭＳＯ濃度では、ＰＤＥ活性に影響は及ばない。基質添加による反応の開始の後に、試料を３７℃で３０分間、インキュベーションする。試験管を１１０℃で２分間、加熱することにより、反応を停止させる。試料を更に１０分間、氷中に置く。５’−ヌクレオチダーゼ３０μｌ（１ｍｇ／ｍｌ、Crotalus adamanteusからの蛇毒懸濁液から）の添加の後に、３７℃で１０分間、インキュベーションした。試料を氷上に置き、それぞれDowex−水−エタノール（１＋１＋１）からなる混合物４００μｌを添加し、よく混合し、かつ再び氷上で１５分間、インキュベーションする。反応溶液を２０分間、３００×ｇで遠心沈殿させる。上澄みのアリコート２００μｌを直接、シンチレーション容器に移した。シンチレータ３ｍｌの添加の後に、試料をベータカウンターで測定する。
【００６１】
ＰＤＥ４、３及び２−活性を測定するために、基質として[３Ｈ]−ｃＡＭＰを、ＰＤＥ５−活性の測定のために[３Ｈ]−ｃＧＭＰを使用する。それぞれ非特異的酵素活性を、ＰＤＥ４ではRolipram１００μＭの存在下に、かつＰＤＥ３及び５の測定ではＩＢＭＸ１００μＭの存在下に測定し、かつ試験値から引く。ＰＤＥ３−アッセイのインキュベーションバッチは、ＰＤＥ４によるありうる汚染を阻止するために、Rolipram１０μｍを含有する。ＰＤＥ２をAmersham社のＳＰＡアッセイを用いて試験する。ＰＤＥ２の活性化剤の存在下に（ｃＧＭＰ５μＭ）、アッセイを実施する。
【００６２】
本発明の化合物に関して、ホスホジエステラーゼ４の抑制に関してＩＣ５０値１０−９〜１０−５Ｍが測定された。ＰＤＥ−タイプ２、３及び５に対する選択率はファクター１００〜１００００である。
【００６３】
鼻ポリープ細胞からのＴＮＦα遊離の抑制
実験装置は主に、Campbell, A.M.及びBousquet Jにより（Anti-allergic activity of H１-blockers. Int. Arch. Allergy Immunol., 1993, 101, 308-310）記載された方法と同様である。出発材料は、外科的処置を受けた患者の鼻ポリープ（ＯＰ材料）である。
【００６４】
組織をＲＰＭＩ１６４０で洗浄し、引き続きプロテアーゼ（２．０ｍｇ／ｍｌ）、コラゲナーゼ（１．５ｍｇ／ｍｌ）、ヒアルロニダーゼ（０．７５ｍｇ／ｍｌ）及びＤＮアーゼ（０．０５ｍｇ／ｍｌ）を用いて３７℃で２時間かけて溶解する（酵素を有するＲＰＭＩ１６４０  ４ｍｌ当たり組織１ｇ）。得られた細胞、上皮細胞、単核細胞、マクロファージ、リンパ球、繊維芽細胞及び顆粒球からなる混合物を濾過し、かつ培養液中で遠心沈殿を繰り返すことにより洗浄し、ヒトＩｇＥの添加により受動感作させ、かつ細胞懸濁液を、ＲＰＭＩ１６４０中２Ｍｉｏ細胞／ｍｌの濃度に調節する（抗生物質で補完、ウシ胎児血清１０％、グルタミン２ｍＭ及びヘペス２５ｍＭ）。この懸濁液を６ウェル−細胞培養プレート（１ｍｌ／ウェル）に分配する。細胞を試験物質と共に様々な最終濃度で３０分、予備インキュベーションし、引き続きＴＮＦα遊離のために抗ＩｇＥ（７．２μｇ／ｍｌ）の添加により刺激する。培養地での最大遊離は約１８時間後に生じる。この間、細胞を３７℃及びＣＯ２５％でインキュベーションする。栄養培地（上澄み）を遠心沈殿により取得し（５分、４０００ｒｐｍ）、かつサイトカイン測定まで−７０℃で貯蔵する。上澄み中のＴＮＦαの測定を、サイトカイン濃度を３０〜１０００ｐｇ／ｍｌの範囲で証明することができるいわゆるサンドイッチＥＬＩＳＡ（ベース材料、Pharmingen）で行う。
【００６５】
抗ＩｇＥで刺激されていない細胞はほとんどＴＮＦαを産生せず、これに対して刺激された細胞は大量のＴＮＦαを分泌し、これは例えば例えばＰＤＥ４インヒビタにより用量に応じて低減することができる。様々な濃度での試験物質の抑制パーセンテージ（抗ＩｇＥで刺激された細胞のＴＮＦα遊離＝１００％）から、ＩＣ５０を算出する（抑制５０％での濃度）。
【００６６】
本発明の化合物では、ＩＣ５０値１０−７〜１０−５Ｍが測定された。
【００６７】
活性感作モルモットでの吸入オボアルブミン攻撃２４時間後の遅発相好酸球増加の抑制
物質による肺の好酸球湿潤の抑制を、オボアルブミン（ＯＶＡ）に対して活性に感作されたオスのDunkin-Hartleyモルモット（２００〜２５０ｇ）でのインビボテストで試験する。感作は、連続して２日間で１匹の動物当たり生理学的食塩水０．５ｍｌ中のＯＶＡ２０μｇとアジュバントとしての水酸化アルミニウム２０ｍｇとの懸濁液の腹腔内注射２回により行う。第２回の注射の１４日後に、動物をマレイン酸メピラミン（１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）で処置して、アナフィラキシー性死亡に対して保護する。３０分後、動物をプラスチック製の箱の中で３０分間、圧縮空気（１９．６ｋＰａ）で運転される噴霧器で生じさせたＯＶＡエアロゾルにさらす（０．５ｍｇ／ｍｌ）（アレルゲン攻撃）。対照を、生理学的食塩水溶液と共に噴霧する。攻撃の２４時間後に動物を過量のエチルウレタン（１．５ｇ／体重ｋｇ、腹腔内）で麻酔し、かつ気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）を生理学的食塩溶液５ｍｌを用いて２回、実施する。ＢＡＬ液を集め、３００ｒｐｍで１０分、遠心沈殿処理し、引き続き細胞ペレットを生理学的食塩溶液１ｍｌ中に再懸濁させる。ＢＡＬ中の好酸球を自動細胞鑑別装置(Zelldifferenzierungsgeraet; Bayer Diagnostics Technicon H1）を用いて数える。この試験では、２つの対照群（生理学的食塩溶液を噴霧、かつＯＶＡ溶液を噴霧）も同じく実施する。
【００６８】
物質で処置された試験群の好酸球増加の抑制パーセンテージを次の式で算出する：
抑制％  ＝  １００−１００・（Ｂ−Ｃ）／（Ａ−Ｃ）
Ａ＝ＯＶＡ攻撃及び付形剤を用いる対照群での好酸球、
Ｂ＝ＯＶＡ攻撃を用いる物質処理された群での好酸球、
Ｃ＝０．９％濃度ＮａＣｌ攻撃及び付形剤を用いる対称群での好酸球。
【００６９】
試験物質は腹腔内に、又は経口でアレルゲン攻撃の２時間前に、ポリエチレングリコール３００  １０％及び０．５％濃度のヒドロキシエチルセルロース中の懸濁液として投与する。対称群を試験物質の投与形と同様に付形剤で処理する。
【００７０】
本発明の化合物は遅発相−好酸球増加を、１０ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与の後に３０〜８０％程度、かつ３０ｍｇ／ｋｇの経口投与の後に４０〜７０％抑制する。
【００７１】
本発明の化合物は従って、好酸球の作用と関連する疾患を治療するための薬剤を製造するために特に好適である。
【００７２】
活性感作Brown-Norway ラットでのアレルゲン誘発血管透過性の影響
体重２８０〜３００ｇのオスのBrown-Norwayラットを連続して２日間、１ｍｌ／１動物でオボアルブミン１ｍｇと水酸化アルミニウム１００ｇとの懸濁液を腹腔内注射することにより活性感作する。感作の３週間後に、ラットをチオペンタールナトリウムで麻酔をかけ、かつ背位で固定する。鼻腔を潅流するために、気管にポリエチレンカテーテルを後鼻腔の内部開口部まで逆行挿入して、鼻腔を介して溶液を排出させることができるようにする。短い気管カテーテルを気管に順行挿入して、呼吸を可能にする。潅流のために、リン酸塩緩衝食塩溶液（ＰＢＳ）を連続的に、ローラーポンプを用いて鼻腔を介してポンプ導入して（０．５ｍｌ／分）、かつフラクションコレクターにより捕集した。エバンスブルーを血漿マーカーとして使用し、かつ静脈内で（それぞれ１ｍｌ／１動物、ＰＢＳ中１％濃度溶液）、頸静脈内に置かれたカテーテルを介して注入した。
【００７３】
物質投与は局所的に行った。この投与では、試験物質を潅流媒体（ＰＢＳ）に添加した。鼻粘膜を３０分間、ＰＤＥ４−インヒビタ含有溶液で潅流した。引き続き、エバンスブルーを、オボアルブミン含有溶液（攻撃）での潅流の直前に注入した。オボアルブミン攻撃の開始後（ＰＢＳ中に溶かしたオボアルブミン１０ｍｇ／ｍｌ）、１５分のフラクション全てをフラクションコレクタに、６０分かけて捕集した。潅流物中のエバンスブルー濃度を光度計デジスキャン（Photometer Digiscan）を用いて６２０ｎｍの波長で測定した。その場合、空試験値を自動的に引いた。６０分間に亘る作用経過をＡＵＣプログラムで算出した。プレパラート群の物質作用を付形剤対照に対して％で算出した。
【００７４】
本発明の化合物に関して１０−８〜１０−５Ｍの範囲のＩＣ５０−値が測定された。
【００７５】
慢性閉塞性肺疾患の治療のための、式１の本発明の化合物の使用性を、ヒトの血液中でのＬＰＳ誘発されるＴＮＦα遊離の抑制により、並びにフェレット及びモルモットでのＬＰＳ誘発される肺好中球浸潤の抑制により証明する。
【００７６】
サイトカイン遊離のための単離白血球の刺激は、様々な方法で行うことができる。ＴＮＦα−遊離の実験のために好適な刺激はリポ多糖体（ＬＰＳ）である。ＬＰＳは細菌細胞壁の成分であり、かつ細菌を殺すことにより（抗生物質又は免疫系）遊離される。ＬＰＳは特に、食菌する白血球（組織マクロファージ、顆粒球、単球）の活性を刺激し、かつ該当する組織の血管からの白血球の拡散をもたらす。このメカニズムのための重要なサイトカインはＴＮＦαであり、これは、該当する細胞から（主な源は単球及びマクロファージ）大量に遊離され、かつ別のメディエイタと共に炎症を発し、かつ維持する。
【００７７】
１：５希釈人血中でのＬＰＳ−誘発ＴＮＦα−遊離
ＴＮＦα−遊離の影響のための実験に関して、様々な提供者から血液を採取し（クエン酸による抗凝固）、かつ細胞培養培地ＲＰＭＩ１６４０で１：５に希釈した。試験物質をＬＰＳ攻撃前に試料に、様々な濃度で添加した。白血球の刺激を３０分後に、Salmonella abortus equiのリポ多糖体（ＬＰＳ）で、最終濃度１０μｇ／ｍｌで行った。孵卵用キャビネット中、３７℃、ＣＯ２５％での２４時間に亘る試験バッチのインキュベーションの後に、希釈血液を遠心沈殿させ、かつ細胞を含まない上澄みで、ＴＮＦα−濃度をＥＬＩＳＡにより測定した。
【００７８】
本発明の化合物に関して、１０−７〜１０−５Ｍの範囲のＩＣ５０−値が測定された。実施例１の化合物では例えば０．８μモル／ｌのＩＣ５０値が測定された。これに比較して、対照標準ＳＢ２０７４９９では７．０μモル／ｌのＩＣ５０−値が測定された。
【００７９】
フェレットでの、リポ多糖体（ＬＰＳ）誘発好酸球増加の抑制
物質による肺の好酸球浸潤の抑制をオスのフェレット（０．６〜２ｋｇ）でのインビボテストで試験する。実験動物にペントバルビタールナトリウム（４０ｍｇ／体重ｋｇ、腹腔内）で麻酔をかけ、それぞれ、５ｌ空間用量の密閉噴霧ボックスに入れ、かつ１０分間、０．０１％濃度のＬＰＳ（リポ多糖体）溶液（付加的にＰＢＳ中のヒドロキシルアミン０．１％）からなる超音波噴霧エアロゾルにさらす。エアロゾルを圧縮空気（０．２Ｍｐａ）を用いて操作される噴霧器で生じさせる。対照を生理学的食塩溶液からなるエアロゾルで処理する。全行程の間、動物を観察し、かつ新鮮な空気の供給の後に、噴霧ボックスから出す。噴霧されたＬＰＳは吸入すると直ちに、実験動物の肺内での好中性顆粒球の大量遊離を特徴とする気道の炎症を引き起こす。好中球増加が、ＬＰＳ暴露の４〜６時間後にその最大に達する。遊離された好中性顆粒球の数を測定するために、動物にＬＰＳ誘発の６時間後に、過量のエチルウレタンを用いて（１．５ｇ／体重ｋｇ、腹腔内）麻酔をかけ、かつ気管支肺胞洗浄（肺の洗浄、ＢＡＬ）を生理学的食塩溶液１０ｍｌで２回、実施する。貯留された元のＢＡＬ液体（１００μｌ）中の細胞数を自動細胞数計測装置 Technicon H1E (Bayer Diagnostic社）で測定し、かつ１μｌ当たりの様々な白血球を分類する。いずれのテストでも、対照群２つを一緒に処理する（生理学的食塩溶液を噴霧、又はＬＰＳ溶液を噴霧）。抗炎症作用性物質、特にＴＮＦα−遊離又は好中性顆粒球の機能に影響を及ぼすものは、白血球の遊離を抑制する。遊離の抑制を、未処理の実験動物（ＬＰＳ誘発あり、及びなし）で遊離された好中球の数と比較することにより調べる。
【００８０】
本発明の化合物に関して１〜２０ｍｇ／ｋｇ（腹腔内）の範囲のＩＤ５０−値が測定された。実施例１の化合物を例えば１、３及び１０ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内で、ＬＰＳ誘発の２時間前に、それぞれの用量で３匹までの実験動物に投与した。ＢＡＬ中の好中球増加は用量に応じて抑制された（１８％、６４％及び７８％）。ＩＤ５０は２．４ｍｇ／ｋｇ（腹腔内）である。
【００８１】
選択的ＰＤＥ４インヒビタＲＰＲ−７３４０１（参照物質）の投与により、用量１ｍｇ／ｋｇ（腹腔内）で、４９％の好中球増加の抑制が生じた。
【００８２】
肺内投与のために麻酔下に（４０ｍｇ／ｋｇ（腹腔内）、ペントバルビタール−ナトリウム、３％濃度、１．３ｍｌ／ｋｇ）、動物の気管を開き、７ｃｍ長さのＰＶＣカテーテルを挿入し、かつ試験物質をＬＰＳ誘発の２時間前に、粉末の形で（２０ｍｇ／ｋｇでラクトースと混合）、注射器を用いて肺内に投与する。
【００８３】
用量１、３及び１０ｍｇ／ｋｇでの実施例１の化合物の肺内投与は、ＬＰＳ誘発好中球増加を用量に応じて抑制する（４３％、６５％及び１００％）。ＩＤ５０は１．６５ｍｇ／ｋｇ（肺内）である。
【００８４】
モルモットでのＬＰＳ−誘発好中球増加
肺−好中球増加はモルモットの場合にも、フェレットの場合と同様に生じた。動物に麻酔をかけ（ペントバルビタール１０ｍｇ／ｋｇ、静脈内）、かつ挿管する。気管支鏡を用いて部分的気管支肺胞洗浄を実施して、生理学的条件下での好中性顆粒球の割合を測定する。引き続き、試験物質を投与し、かつ気管内チューブを介して動物に、０．０３％濃度のＬＰＳ（リポ多糖体）−溶液（付加的に、ＰＢＳ中ヒドロキシルアミン０．１％）からなる超音波エアロゾルを２０分間、吸入させる。吸入されたＬＰＳは気道の反応性炎症を生じさせ、かつ大量に好中性顆粒球が遊離される。好中球増加はＬＰＳ誘発の４〜６時間後に最大に達する。６時間後に、気管支肺胞洗浄を繰り返し、かつ好中球数の増加をコンピューターで測定する。
【００８５】
豚が、この実験のために特に好適である。それというのも、ヒトと解剖学的及び生理学的類似性が高いためである。本発明の化合物では１０ｍｇ／１匹の肺内投与で、２０〜６５％のＬＰＳ誘発好中球増加の抑制が測定された。用量１０ｍｇ／動物（約０．７５ｍｇ／ｋｇ）での実施例１の化合物の肺内投与は、ＬＰＳ誘発肺好中球増加を５１％で抑制した。