(57)【要約】【課題】異なる種類の羽毛からなる羽毛混合物の組成混合比の客観的な評価を迅速かつ、簡便に行う方法を提供する。【解決手段】被検体たる羽毛より分離されたタンパク質の分子量の分布を検出する検出工程と、前記検出工程で検出された分子量の分布に基づいて、前記分離されたタンパク質の個々の分子量を算出する分子量算出工程と、前記分離されたタンパク質を同定する同定工程と、からなる。【選択図】        なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
被検体たる羽毛より分離されたタンパク質の分子量の分布を検出する検出工程と、
前記検出工程で検出された分子量の分布に基づいて、前記分離されたタンパク質の個々の分子量を算出する分子量算出工程と、
この分子量算出工程により算出された分子量の中で、５０ＫＤａ付近のタンパク質と、３０ＫＤａ付近のタンパク質の両方を含み、かつ１００ＫＤａ付近のタンパク質が含有されていないことを検出する同定工程と、
からなる羽毛の判別方法。
【請求項２】
請求項１記載の羽毛の判別方法は、２種以上の羽毛からなる混合物より前記混合物中に含まれている羽毛の種類を特定するものであり、前記分子量と前記分子量の分布とに基づいて前記羽毛混合物中の羽毛の種類、及び混合比を算出する請求項１記載の羽毛の判別方法。
【請求項３】
前記羽毛混合物が充填材料用羽毛からなる請求項１又は２記載の羽毛の判別方法。
【請求項４】
前記羽毛混合物は、ダウン又はスモールフェザーとからなる請求項１から３いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【請求項５】
前記羽毛混合物は、グースの羽毛とダックの羽毛とからなる請求項１から４いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【請求項６】
前記検出工程と前記分子量算出工程、及び前記同定工程は、電気泳動により行われるものである請求項１から５いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【請求項７】
前記羽毛の種類及び混合比の算出は、前記グースの羽毛とダックの羽毛との電気泳動パターンのうち、５０ＫＤａ付近、３０ＫＤａ付近及び１００ＫＤａ付近のタンパク質のバンドの面積比より算出される請求項１から６いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【請求項８】
前記検出工程と前記分子量算出工程、及び前記同定工程は、質量分析により行われるものである請求項１から５いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【請求項９】
前記羽毛の種類及び混合比の算出は、前記グースの羽毛とダックの羽毛とのマススペクトルにおいて、電気泳動を行った時の分子量に換算して５０ＫＤａ付近、３０ＫＤａ付近及び１００ＫＤａ付近のタンパク質の分子量を示すピークの強度比より算出される請求項１から５及び８いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、異なる種類の羽毛からなる羽毛混合物中の羽毛の判別方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
羽毛布団やダウンジャケット等、羽毛製品の品質は、充填されている羽毛の種類や質によって大きく異なる。具体的には、(１)軽くて暖かいこと（２）かさがあって回復性がよいこと（３）悪臭などがないこと（４）ラージフェザー、きょう雑物などがごく少量であること、の４点を満たすものが高品質とされている。例えば、同じ種類の鳥でもダウンとフェザーとでは羽軸を持たないダウンの方が空気を沢山取り込むため、寝具や衣類には適しているとされている。また、同じダウンを使用するならグースとダックとではグースの方が、ダウンの一つ一つが大きいため、保温性に優れていて品質が良いとされている。
【０００３】
羽毛製品は、原料羽毛を輸入し国内で製品化していることが多い。そのため、原料羽毛の良し悪しや、加工処理工程で適切に処理されているかを調べることは、自社の製品の信用に関わる事であり、大変重要なことである。特に、輸入時の原料羽毛の品質表示に関しては、国内と海外との基準が異なる場合があるため、整合性をとる必要がある。言い換えれば、国内の評価基準で再検査する必要がある。検査は、かさ高性、酸素計数、組成混合比など１２種類以上の項目に渡って行われる。このうちもっとも手間がかかる検査は、羽毛の種類についての検査である。
【０００４】
使用原料羽毛中のグースとダックとの混合比率は、「日本羽毛寝具製造協同組合」の試験規定に基づき判別されたそれぞれの水鳥の羽毛の重量比より算出されている。具体的には、先ず、きょう雑物を取り除き均一に混合されたグースとダックの羽毛の塊５０ｇを混合箱内で平均化するようによく混合し、上層、中層、下層の各部分からランダムに採取した合計１ｇの試料から羽毛の一つ一つの節と節との間隔や、節の大きさ等を顕微鏡又は投影機により判別する。なお、一般にグースの方が節と節の間隔が長く、節の大きさは小さい。次に、判別したグースとダックそれぞれの重量を測定し、グースあるいはダックの羽毛を８５％以上含むときはその種を表示できると規定されている。また、これらの判別した羽毛のかさ高性等の諸特性は、日本工業規格に基づいて算出していた（非特許文献１）。
【非特許文献１】ＪＩＳ  Ｌ  １９０３
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、上記の判別方法では、試料０．１ｇを判別するのに約２時間かかり、試料全体の組成混合比を決定するまでに約２日かかるため、一度に大量の羽毛を判別することは物理的に困難である。また、グースとダックの羽毛の形状を相対的に比較して判別しているため、試験者の主観が入る可能性が大きく、客観的な評価をすることができないということが問題となっていた。また、このような手間をかけてから製品化するため、製品の値段が高くなってしまうという問題もある。
【０００６】
本発明は、以上のような課題に鑑みてなされたものであり、その目的は、異なる種類の羽毛からなる羽毛混合物の組成混合比の客観的な評価を迅速かつ、簡便に行う方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
以上のような目的を達成するために、本発明者らは羽毛の構成タンパク質が、鳥の種類によって異なるものがあるという点に着目し、羽毛のタンパク質を分離する過程において明確な差異が確認されることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
タンパク質以外にもＤＮＡやＲＮＡ、脂質、糖なども鳥の種類によって異なるため、判別は可能であると考えられる。しかし、ＤＮＡやＲＮＡは精密であるが時間とコストがかかってしまうため実用的であるとは言い難く、脂質や糖は判別が難しい。より簡便で迅速に判別することが可能である物質としては、ＤＮＡより精度は劣るがタンパク質が最適である。
【０００９】
具体的には、本発明は以下のようなものを提供する。
【００１０】
（１）  被検体たる羽毛より分離されたタンパク質の分子量の分布を検出する検出工程と、前記検出工程で検出された分子量の分布に基づいて、前記分離されたタンパク質の個々の分子量を算出する分子量算出工程と、この分子量算出工程により算出された分子量の中で、５０ＫＤａ付近のタンパク質と、３０ＫＤａ付近のタンパク質の両方を含み、かつ１００ＫＤａ付近のタンパク質が含有されていないことを検出する同定工程と、からなる羽毛の判別方法。
【００１１】
本発明によれば、羽毛を構成しているタンパク質は、鳥の種類によって異なるため、それぞれの鳥に固有のタンパク質を分離し、検出することによって試料中に含有されている羽毛の種類を特定することができる。特に、グースとダックとからなる試料においては、
５０ＫＤａ付近と３０ＫＤａ付近又は、１００ＫＤａ付近のタンパク質に明確な差異が認められた場合は、グースとダックが試料中に含有されているか否かを即時に判断することができる。
【００１２】
（２）  （１）記載の羽毛の判別方法は、２種以上の羽毛からなる混合物より前記混合物中に含まれている羽毛の種類を特定するものであり、前記分子量と前記分子量の分布とに基づいて前記羽毛混合物中の羽毛の種類、及び混合比を算出する（１）記載の羽毛の判別方法。
【００１３】
本発明によれば、分子量算出工程において、算出された分子量及び分子量の分布に基づいてより具体的なタンパク質の同定を行うことが可能となる。特に、３種以上の羽毛からなる羽毛混合物の羽毛の同定や、羽毛混合物中の羽毛の種類が未知であった場合において有効である。
【００１４】
（３）  前記羽毛混合物が充填材料用羽毛からなる（１）又は（２）記載の羽毛の判別方法。
【００１５】
（４）  前記羽毛混合物は、ダウン又はスモールフェザーとからなる（１）から（３）いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【００１６】
（５）  前記羽毛混合物は、グースの羽毛とダックの羽毛とからなる（１）から（４）いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【００１７】
（６）  前記検出工程と前記分子量算出工程、及び前記同定工程は、電気泳動により行われるものである（１）から（５）いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【００１８】
（７）  前記羽毛の種類及び混合比の算出は、前記グースの羽毛とダックの羽毛との電気泳動パターンのうち、５０ＫＤａ付近、３０ＫＤａ付近及び１００ＫＤａ付近のタンパク質のバンドの面積比より算出される（１）から（６）いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【００１９】
本発明によれば、検出工程により検出された電気泳動パターンのタンパク質のバンド面積の比較により、試料中の羽毛の混合組成比をより正確かつ客観的に算出することができる。また、試料中の羽毛を個別に判別する従来法とは異なり、試料中の羽毛全てを一度に測定するため、作業時間を短縮することが可能となり、コストの削減にもつながる。
【００２０】
（８）  前記検出工程と前記分子量算出工程、及び前記同定工程は、質量分析により行われるものである（１）から（５）いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【００２１】
本発明によれば、質量分析を用いることによって、全ての工程をより迅速にかつ正確に行うことが可能となり、作業効率を大幅に上げることが可能となる。
【００２２】
（９）  前記羽毛の種類及び混合比の算出は、前記グースの羽毛とダックの羽毛とのマススペクトルにおいて、電気泳動を行った時の分子量に換算して５０ＫＤａ付近、３０ＫＤａ付近及び１００ＫＤａ付近のタンパク質の分子量を示すピークの強度比より算出される（１）から（５）及び（８）いずれかに記載の羽毛の判別方法。
【発明の効果】
【００２３】
以上説明したように本発明は、２種類以上の羽毛からなる羽毛混合物中の羽毛のタンパク質の分子量を測定することにより、羽毛の種類を特定するものである。これにより試験者の主観を交えることなく客観的かつ迅速に羽毛の判別及び、混合組成比の算出を行うことが可能となる。また、本発明によって判別された羽毛は、従来法と比べ人件費を抑えることが可能となり、製造コストを抑えることが可能となる。
【００２４】
また、本発明はタンパク質レベルで羽毛の種類を判別しているため、人間の目ではどの種類の羽毛か判別することができないということがなくなり、羽毛の組成混合比をより正確に求めることが可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
以下、本発明をより詳しく説明する。
【００２６】
本発明の羽毛の判別方法は、「被検体たる羽毛より分離されたタンパク質の分子量の分布を検出する検出工程」を有する。「被検体たる羽毛」とは、原毛に付着しているゴミや汚れを取り除き、除塵、熱風乾燥し「精毛」した羽毛を指す。羽毛の具体的な種類は、水鳥、陸鳥を問わないが、衣類や寝具等の充填材料用羽毛としては、ダウンを有する水鳥である方が好ましく、水鳥の種類としては、グース（がちょう）、ダック（あひる、鴨）等、あるいはこれらの混合物であることが好ましい。
【００２７】
「羽毛より分離されたタンパク質を検出する工程」とは、機器分析により羽毛中のタンパク質を分離する工程を指す。ここで、タンパク質を検出する手段としては、電気泳動、クロマトグラフィー、質量分析など、個々のタンパク質及びタンパク質の分子量を検出することが可能な測定手段が挙げられ、これらいずれかの方法を単独あるいは、組み合わせて行うことが好ましい。測定の簡便さ、コスト等を考慮した場合、電気泳動を用いて行うことがより好ましい。
【００２８】
電気泳動は、一般に用いられているゾーン電気泳動法を用いて支持体の中で泳動を行うことが好ましく、支持体には濾紙、セルロースアセテート膜、セルロース粉末、ゲルなどを用いることが好ましい。中でもポリアクリルアミドゲルを用い、バッファーをタンパク質分子主鎖のペプチド結合近傍に吸着又は結合する、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を用いたＳＤＳ−電気泳動を用いることがより好ましい。
【００２９】
また、本発明の羽毛の判別方法は、「分離されたタンパク質の分子量を算出する分子量算出工程」を有する。分子量算出工程は、例えば電気泳動における検出手段によって分子量既知のタンパク質の泳動パターンとの比較により相対的に算出される方法であるか、例えば質量分析における検出手段によってタンパク質の質量電価比（ｍ／ｚ）より直接的に算出される方法とのいずれかを用いることが好ましい。
【００３０】
更にまた、本発明の羽毛の判別方法は、「前記算出工程において算出された分子量の中で５０ＫＤａ付近のタンパク質と、３０ＫＤａ付近のタンパク質の両方を含み、かつ１００ＫＤａ付近のタンパク質が含有されていないことを検出する同定工程」を含む。同定工程は、羽毛より分離されたタンパク質を検出工程にて検出した後、前記タンパク質がどの羽毛に由来しているかを決定する工程をいい、分子量算出工程にて得られた分子量より決定することが好ましい。なお、１Ｄａは、１．６６１×１０−２４（アボガドロ数の逆数）ｇに相当する。
【００３１】
更にまた、本発明の羽毛の判別方法は、前記検出工程と前記分子量算出工程、及び前記同定工程とを電気泳動にて行った場合は、「羽毛の種類及び混合比の算出は、グースの羽毛とダックの羽毛との電気泳動パターンのタンパク質のバンドの面積比より算出される」工程を含む。電気泳動によってタンパク質は分子量毎に分離され、それが電気泳動パターン中の個々のバンドに反映される。試料中のタンパク質の濃度は、電気泳動パターンの面積に依存するため、面積比が試料中の羽毛の構成比となる。電気泳動パターンの面積比は、デンシトメーターを用いて求めることが好ましい。
【００３２】
更にまた、本発明の羽毛の判別方法は、前記検出工程と前記分子量算出工程、及び前記同定工程とを質量分析にて行った場合は、「グースの羽毛とダックの羽毛とのマススペクトルにおいて、タンパク質の分子量を示すピークの強度比より算出される」工程を含む。質量分析によってタンパク質は分子量毎に分離され、マススペクトルに反映される。試料中のタンパク質の濃度は、マススペクトルの相対強度に依存するため、強度比が試料中の羽毛の構成比となる。
【実施例】
【００３３】
［羽毛の調整］
測定に用いた羽毛は、以下の方法で調整を行った。先ず、グースとダックの羽毛をそれぞれ０．１ｇをアセトンにさらして脱脂を行った後、超純水で洗浄した。次にこの洗浄物を液体窒素で凍結させ粉砕を行った後、超純水を溶媒とし、凍結乾燥した。最後に、この凍結乾燥物を５ｍｇ／ｍｌになるようにＳＤＳサンプルバッファーに溶解し、１００℃で５分間加熱を行ったものをＳＤＳサンプルとした（試料２から７）。また、タンパク質の分子量マーカーには分子量３．５ＫＤａから２０５ＫＤａの標準タンパク質及びポリペプチド１１種類を混合した分子量マーカーを用いた。
【００３４】
［測定装置］
測定には、ＳＤＳ−電気泳動装置を用いた。１００％グースの試料と１００％ダックの試料の電気泳動パターンを図１に示す。図１中、１のパターンが分子量マーカーであり、２から４のパターンがグースのみの試料（試料２から４）のパターンであり、５から７のパターンがダックのみの試料（試料５から７）のパターンである。これより５０ＫＤａ付近と３０ＫＤａ付近に相違が見られ（図中、ｂ´と表示されているライン参照）、１００ＫＤａ付近の白抜きのバンド（図中、ｄと表示されているライン参照）がグースには１本しかないのに対し、ダックでは２本存在することがわかった。
【００３５】
これより、予めグースとダックの混合比が判っている資料を数種用いてタンパク質の分子量の面積比と含有量との相関関係を基に検量線を作成することによって異なる２種以上の羽毛からなる被検体の組成混合比を算出する方法として使用することができることが示された。
【産業上の利用可能性】
【００３６】
本発明は、充填材料用羽毛に関して、異なる２種以上の羽毛からなる被検体の組成混合比を算出する方法として使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３７】
【図１】グースとダックの電気泳動パターンを示した図である。
【図１】
2006337138.tif 000002