(57)【要約】【課題】コンブ属の種を鑑定するために、種特異的な多型を含んだ塩基配列に関する情報を見出し、容易で精度の高いコンブ属の種の鑑定方法を提供すること。【解決手段】コンブ属のミトコンドリアＤＮＡの塩基配列上に種特異的な多型を含む領域が存在することを見出し、さらに、この塩基配列情報を用いることでコンブ属の種を鑑定が可能であり、上記の課題を解決し得ることを見出した。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列表の配列番号１、２、３、４、５、６、７、８に示されるいずれか一つまたは複数の塩基配列若しくはこれらの塩基配列に相補的な塩基配列の一部であって、かつ、１０塩基以上から成る連続した塩基配列から成ることを特徴とするヌクレオチド鎖
【請求項２】
請求項１に記載のヌクレオチド鎖であって、かつ、１０％以下の数の塩基が置換、欠失、挿入若しくは付加された塩基配列から成ることを特徴とするヌクレオチド鎖。
【請求項３】
配列表の配列番号１に示される塩基配列若しくはこれらの塩基配列に相補的な塩基配列の一部であって、かつ、コンブ属の種間における塩基配列上の多型を含む領域を遺伝子増幅法により増幅し得るプライマーとして利用できる塩基配列から成ることを特徴とする、請求項１または２に記載のヌクレオチド鎖。
【請求項４】
下記に示したａ）またはｂ）で表されるコンブ属のミトコンドリアＤＮＡに関する情報と被検体であるコンブ属の種とを関連付けることにより、コンブ属の種を鑑定する方法。
ａ）コンブ属のミトコンドリアＤＮＡが、配列番号１、２、３、４、５、６、７、８に示される塩基配列若しくはこれらの塩基配列の一部のうち、いずれの塩基配列を有しているかについての情報。
ｂ）コンブ属のミトコンドリアＤＮＡの塩基配列において、配列番号６に示される塩基配列の２９３番目から３２１番目に相当する領域での多型に関する情報。
【請求項５】
被検体であるコンブ属から抽出したＤＮＡを鋳型とし、請求項１、２、３のいずれか１項に記載のヌクレオチド鎖から成るプライマーを用いて遺伝子増幅法により増幅されたＤＮＡ断片を解析し、コンブ属のミトコンドリアＤＮＡの情報として用いることを特徴とする、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
上記のＤＮＡ断片の解析が、ダイレクトシークエンシング法、制限酵素断片長多型検出法（ＲＦＬＰ）、電気泳動による分画法のいずれか１つまたは複数の方法であることを特徴とする、請求項４または５に記載の方法。
【請求項７】
上記のコンブ属が、マコンブ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）、ミツイシコンブ（Ｌ．ａｎｇｕｓｔａｔａ）、ナガコンブ（Ｌ．ｌｏｎｇｉｓｓｉｍａ）、ガッガラコンブ（Ｌ．ｃｏｒｉａｃｅａ）、オニコンブ（Ｌ．ｄｉａｂｏｌｉｃａ）、ホソメコンブ（Ｌ．ｒｅｌｉｇｉｏｓａ）、リシリコンブ（Ｌ．ｏｃｈｏｔｅｎｓｉｓ）のいずれか１つまたは複数であることを特徴とする、請求項４、５、６のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】本発明は、コンブ属の種を鑑定する方法、及び鑑定に用いるヌクレオチド鎖に関する。
【背景技術】
【０００２】農水産物は、種（あるいは品種）により品質に差が見られるため、品種、銘柄、原材料名などの表示により消費者に情報提供されている。【０００３】しかしながら、表示の内容については、販売者と消費者の間の信頼関係に頼らざるを得ず、近年、この表示の信憑性が揺らぎ始めているため、表示内容について確認手法の確立が急がれている。【０００４】日本国内で生産または流通している主なコンブ属は、マコンブ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）、ミツイシコンブ（Ｌ．ａｎｇｕｓｔａｔａ）、ナガコンブ（Ｌ．ｌｏｎｇｉｓｓｉｍａ）、ガッガラコンブ（Ｌ．ｃｏｒｉａｃｅａ）、オニコンブ（Ｌ．ｄｉａｂｏｌｉｃａ）、ホソメコンブ（Ｌ．ｒｅｌｉｇｉｏｓａ）、リシリコンブ（Ｌ．ｏｃｈｏｔｅｎｓｉｓ）の７種が挙げられ、価格や品質に違いが見られる。【０００５】しかしながら、細断、粉砕、乾燥等の加工が施されると、外観のみでコンブ属の種を区別することができない。【０００６】近年、農水産物の種を判別する手段の一つとして、ＤＮＡ鑑定が注目されており、様々な農水産物で利用され始めている。コンブ属に関しても、これまでに、核ＤＮＡ（非特許文献１参照）または葉緑体ＤＮＡ（非特許文献２参照）を由来とした塩基配列に基づく分類法は報告されているが、種に特異的な塩基配列がほとんど含まれていないため、コンブ属の種を鑑定するのは困難である。
【非特許文献１】Ｙｏｔｓｕｋｕｒａ，Ｎ．，Ｄｅｎｂｏｈ，Ｔ．，Ｍｏｔｏｍｕｒａ，Ｔ．，Ｈｏｒｉｇｕｃｈｉ，Ｔ．，Ｃｏｌｅｍａｎ，Ａ．Ｗ．  ａｎｄ  Ｉｃｈｉｍｕｒａ，Ｔ．（１９９９）Ｐｈｙｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｓ．４７，７１−８０
【非特許文献２】Ｙｏｏｎ，Ｈ．Ｓ．，Ｌｅｅ，Ｊ．Ｙ．，Ｂｏｏ，Ｓ．Ｍ．  ａｎｄ  Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｙａ，Ｄ．Ｍｏｌ．（２００１）Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔ．Ｅｖｏｌ．２１（２），２３１−２４３
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】客観的な農水産物の種判別手段の一つとして、ＤＮＡ鑑定が挙げられる。コンブ属の種をＤＮＡ鑑定することができれば、上述したような表示の確認をすることが可能となり、さらに、流通過程における製品管理を客観的に行うことが可能となる。しかしながら、これまでに報告されているコンブ属の塩基配列には、種に特異的な塩基配列がほとんど含まれていないため、ＤＮＡ鑑定に用いるＤＮＡマーカーとして適していなかった。コンブ属の種をＤＮＡ鑑定するためには、ＤＮＡマーカーとなりうる種特異的な多型を含んだ塩基配列に関する情報を見出し、容易で精度の高い鑑定方法を見出すことが重要な課題となっている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意研究の結果、コンブ属のミトコンドリアＤＮＡの塩基配列上に種特異的な多型を含む領域が存在することを見出し、さらに、この塩基配列情報を用いることでコンブ属の種を鑑定できる手段を今回新たに見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、下記の１）〜７）を提供するものである。【０００９】１）配列表の配列番号１、２、３、４、５、６、７、８に示されるいずれか一つまたは複数の塩基配列若しくはこれらの塩基配列に相補的な塩基配列の一部であって、かつ、１０塩基以上から成る連続した塩基配列から成ることを特徴とするヌクレオチド鎖。【００１０】２）１）に記載のヌクレオチド鎖であって、かつ、１０％以下の数の塩基が置換、欠失、挿入若しくは付加された塩基配列から成ることを特徴とするヌクレオチド鎖。【００１１】３）配列表の配列番号１に示される塩基配列若しくはこれらの塩基配列に相補的な塩基配列の一部であって、かつ、コンブ属の種間における塩基配列上の多型を含む領域を遺伝子増幅法により増幅し得るプライマーとして利用できる塩基配列から成ることを特徴とする、１）または２）に記載のヌクレオチド鎖。【００１２】４）下記に示したａ）またはｂ）で表されるコンブ属のミトコンドリアＤＮＡに関する情報と被検体であるコンブ属の種とを関連付けることにより、コンブ属の種を鑑定する方法。
ａ）コンブ属のミトコンドリアＤＮＡが、配列番号１、２、３、４、５、６、７、８に示される塩基配列若しくはこれらの塩基配列の一部のうち、いずれの塩基配列を有しているかについての情報。
ｂ）コンブ属のミトコンドリアＤＮＡの塩基配列において、配列番号６に示される塩基配列の２９３番目から３２１番目に相当する領域での多型に関する情報。【００１３】５）被検体であるコンブ属から抽出したＤＮＡを鋳型とし、１）、２）、３）のいずれか１項に記載のヌクレオチド鎖から成るプライマーを用いて遺伝子増幅法により増幅されたＤＮＡ断片を解析し、コンブ属のミトコンドリアＤＮＡの情報として用いることを特徴とする、４）に記載の方法。【００１４】６）上記のＤＮＡ断片の解析が、ダイレクトシークエンシング法、制限酵素断片長多型検出法（ＲＦＬＰ）、電気泳動による分画法のいずれか１つまたは複数の方法であることを特徴とする、４）または５）に記載の方法。【００１５】７）上記のコンブ属が、マコンブ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  Ｊａｐｏｎｉｃａ）、ミツイシコンブ（Ｌ．ａｎｇｕｓｔａｔａ）、ナガコンブ（Ｌ．ｌｏｎｇｉｓｓｉｍａ）、ガッガラコンブ（Ｌ．ｃｏｒｉａｃｅａ）、オニコンブ（Ｌ．ｄｉａｂｏｌｉｃａ）、ホソメコンブ（Ｌ．ｒｅｌｉｇｉｏｓａ）、リシリコンブ（Ｌ．ｏｃｈｏｔｅｎｓｉｓ）のいずれか１つまたは複数であることを特徴とする、４）、５）、６）のいずれか１項に記載の方法。
【発明の効果】
【００１６】本発明により、外観のみで識別できないコンブ属の種を容易かつ高精度に鑑定する方法とそれに用いる塩基配列の情報が提供される。従って、本発明は、販売における表示の確認を客観的に行える手法として大いに貢献するものと期待される。さらに、流通過程における製品管理やコンブ養殖における種苗生産の管理などにも利用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】以下、本発明について詳細に説明する。本鑑定法は、コンブ属のミトコンドリアＤＮＡに関する情報と被検体であるコンブ属の種とを関連付けて、コンブ属の種を鑑定する方法である。コンブ属から抽出したＤＮＡの塩基配列が、配列番号１〜８で示される塩基配列若しくはその一部の塩基配列のうち、いずれの塩基配列を保有するＤＮＡであるかについての情報、または、配列番号６に示される塩基配列を基準としたコンブ属のミトコンドリアＤＮＡの塩基配列における２９３番目から３２１番目に相当する領域を解析することにより得られる多型情報に基づき鑑定が行われる。【００１８】上記の情報を得るための具体的な方法としては、被検体であるコンブ属から抽出したＤＮＡを鋳型とし、遺伝子増幅法によりミトコンドリアＤＮＡの特定領域の増幅を行ない、増幅されたミトコンドリアＤＮＡ断片を解析する方法が好ましくあげられる。【００１９】本鑑定法において、鑑定の対象となるコンブ属とは、少なくともマコンブ、ミツイシコンブ、ナガコンブ、ガッガラコンブ、リシリコンブ、ホソメコンブまたはオニコンブである。なお、これらのコンブ属の他にも、ミトコンドリアＤＮＡの塩基配列情報を用いることにより、鑑定が可能な種が数多く存在することが予想される。【００２０】被検体であるコンブ属から、遺伝子増幅法の鋳型として用いるＤＮＡを調製する方法は、特に限定されず、通常公知のＤＮＡの抽出・精製方法に従って行うことが可能である。また、市販のＤＮＡの抽出・精製キット（ＱＩＡＧＥＮ社のＤＮｅａｓｙ  Ｐｌａｎｔ  Ｍａｘｉ  Ｋｉｔ等）を用いて、ＤＮＡの調製を行うことも可能である。鋳型ＤＮＡの採取対象は、特に限定されるものではなく、どのような生育段階のものや加工された食品から調製することができる。また、鋳型ＤＮＡの採取部位は、根、茎、葉などの組織であっても構わない。【００２１】遺伝子増幅法に用いるプライマーの塩基配列は、コンブ属のミトコンドリアＤＮＡの塩基配列情報を基に設計する。プライマーの設計条件は、特に限定されず、遺伝子増幅法に用いるプライマーの一般的な設計基準に基づき塩基配列を選択することが可能である。【００２２】すなわち、配列表の配列番号１〜８に示されるいずれか一つまたは複数の塩基配列若しくはこれらの塩基配列に相補的な塩基配列の一部であって、かつ、１０塩基以上から成る連続した塩基配列から成るヌクレオチド鎖を好ましくあげることができる。１０塩基以上としてあるのは、１０塩基未満となると、確率的にその塩基配列に相補的な塩基配列が鋳型ＤＮＡ上に複数存在することが想定されるため、遺伝子増幅に用いるプライマーとして精度が低くなるためである。また、プライマーとして用いる塩基配列の１０％以下の数の塩基が置換、欠失、挿入若しくは付加された塩基配列から成るヌクレオチド鎖であっても、鋳型ＤＮＡとハイブリダイズが可能であるため、プライマーとして使用することができる。また、コンブ属の種を鑑定するための遺伝子増幅用プライマーの設計条件として、遺伝子増幅法によりコンブ属の種間における塩基配列上の多型を含む領域を増幅し得る塩基配列から成るヌクレオチド鎖であることを好ましくあげることができる。【００２３】上記のようにして選択した塩基配列を有するオリゴヌクレオチドは、例えば、市販のＤＮＡ合成装置等を用いて合成することも可能である。【００２４】遺伝子増幅法自体は、いくつかの方法がこの分野において周知であり、それらのいずれをも用いることが可能である。代表的な方法としてポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を挙げることができるが、これに限定されるものではない。遺伝子増幅法用の試薬キット及び装置は市販されているので、それらを用いて遺伝子増幅法自体は容易に行うことが可能である。なお、下記実施例にも、ＰＣＲによる増幅の例が具体的に記載されている。【００２５】次いで、増幅されたミトコンドリアＤＮＡ断片を解析することにより、コンブ属の種を鑑定する。具体的には、コンブ属から抽出したＤＮＡの塩基配列が、配列番号１〜８で示される塩基配列若しくはその一部の塩基配列のうち、いずれの塩基配列を保有するＤＮＡであるかについての情報、または、増幅されたＤＮＡ断片において、配列番号６に示される塩基配列を基準としたコンブ属のミトコンドリアＤＮＡの塩基配列における２９３番目から３２１番目に相当する塩基の多型を解析することにより得られる情報を用いて鑑定することが好ましくあげられる。【００２６】上記の情報は、塩基配列上の多型に対して感受性が認められる遺伝子工学的手法を駆使した解析により得ることができる。具体的には、ダイレクトシークエンス法、制限酵素断片長多型（ＲＦＬＰ）法、電気泳動による分画法を好適な解析方法としてあげられる。ダイレクトシークエンス法は、増幅されたＤＮＡ断片の全塩基配列を直接決定することができるため、塩基配列上の多型情報を得ることが可能である。ＲＦＬＰは、遺伝子増幅法により増幅された領域中に含まれる制限酵素認識部位を利用した解析により、塩基配列上の多型情報を得ることが可能である。電気泳動による分画法は、遺伝子増幅法において多型領域の塩基配列を含むプライマーや多型領域を増幅可能なプライマーを用いることで、増幅されるＤＮＡ断片の有無やＤＮＡ断片の長さを解析することにより、塩基配列上の多型情報を得ることができる。【００２７】上記の方法により得られた増幅ＤＮＡ断片の多型情報と配列番号１〜８に示される塩基配列情報を用いることにより、被検体であるコンブ属が、下記ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、ｅ）から選ばれるいずれの種または群であるかを鑑定することが可能である。
ａ）マコンブ
ｂ）ミツイシコンブ
ｃ）ナガコンブ
ｄ）ガッガラコンブ
ｅ）オニコンブ、ホソメコンブまたはリシリコンブ【００２８】このようにして、本鑑定法により、コンブ属の種をミトコンドリアＤＮＡの塩基配列上の多型に関する情報に基づき簡便で精度よく鑑定することが可能となる。また、外観的に識別が困難な被検体のコンブ属についても鑑定が可能であるため、販売における表示の確認を客観的に行える手法として大いに貢献するものと期待される。さらに、流通過程における製品管理やコンブ養殖における種苗生産の管理などにも利用することもできる。
【実施例】
【００２９】以下に実施例をあげて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例のみに限定されるものではなく、本発明の技術分野における通常の変更を行うことができる。【００３０】実施例１
＜コンブ属ミトコンドリアＤＮＡの多型解析＞
北海道の各沿岸で採集したマコンブ５個体、ミツイシコンブ３個体、ナガコンブ２個体、ガッガラコンブ３個体、オニコンブ３個体、ホソメコンブ３個体、リシリコンブ３個体を細断（約５ｍｍ×５ｍｍ）し、それぞれ約１ｇを１５ｍｌ容チューブに投入した。１０ｍｌの滅菌した蒸留水を加えて撹拌洗浄した後、３０００回転で５分間遠心分離を行い、上澄み液を捨てた後、ＤＮｅａｓｙ  Ｐｌａｎｔ  Ｍａｘｉ  Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社）を用いて全ＤＮＡの抽出を行った。抽出した全ＤＮＡの精製は、ＧＥＮＥＣＬＥＡＮ  ＳＰＩＮ  ＫＩＴ（Ｑｂｉｏｇｅｎｅ社）を用いて行った。【００３１】調製した全ＤＮＡを鋳型とし、ＫＯＤ  Ｄａｓｈ（東洋紡）を用いてＰＣＲを行った。
また、ＰＣＲによるＤＮＡの増幅が確認されない場合には、ＰＣＲ反応液を１０倍に希釈したものを鋳型とし、ＰＣＲ用のプライマーより内側に設計されたプライマーを用いたＮｅｓｔｅｄ  ＰＣＲを行った（図１参照）。【００３２】ＰＣＲ及びＮｅｓｔｅｄ  ＰＣＲに用いたプライマーは、配列番号１（約６．９ｋｂｐのマコンブ由来ミトコンドリアＤＮＡの部分配列）と既知真核藻類のミトコンドリアＤＮＡの塩基配列を比較解析し、両塩基配列で保存された領域の塩基配列を参考に設計した。【００３３】ＰＣＲは、ＲＮＳｅｒＦとｍｔＩＴＳＲ１（図２参照）をプライマーとして使用し、９５℃３分の前加熱後、９５℃３０秒の変性工程、５５℃２秒のアニーリング工程及び７２℃３０秒の伸長工程を３０サイクルの条件で行われた。Ｎｅｓｔｅｄ  ＰＣＲは、１６ＳｕｐＦとｍｔＩＴＳＲ２（図２参照）をプライマーとして使用し、９５℃３分の前加熱後、９５℃３０秒の変性工程、６５℃２秒のアニーリング工程及び７２℃３０秒の伸長工程を３０サイクルの条件で行われた。【００３４】ＰＣＲにより得られた増幅ＤＮＡ断片の塩基配列は、図１および図２に示した１６ＳｕｐＦ、ＬａｍＦ、ＬａｍＦ１、ＬａｍＲ、ｍｓＲ１、ｍｔＩＴＳＲ２の６種類のプライマーを用いたダイレクトシークエンス法により決定された。【００３５】コンブ属７種のミトコンドリアＤＮＡの塩基配列（配列番号２〜８）を比較解析したところ、多型を示す領域が複数あることが確認された。特に、オニコンブの塩基配列（配列番号６）における２９３番目から３２１番目に相当する領域において（図３参照）、塩基の欠失を伴った多型が集中しており、この領域に含まれる塩基数のみから、マコンブ（０塩基）、ミツイシコンブ（２６塩基）、ナガコンブ（２７塩基）、ガッガラコンブ（２４塩基）の４種は単独で識別が可能であった。また、オニコンブ（２９塩基）、ホソメコンブ（２９塩基）、リシリコンブ（２９塩基）の３種は、同領域における塩基の欠失が認められなかったため、前記の４種と異なる１つのコンブ種群として識別可能であった（図４参照）。さらに、この領域において、それぞれのコンブ種内における多型が確認されなかったことから、塩基配列あるいは塩基数により、コンブ属７種を４種と１群（３種）のいずれであるかの鑑定が可能であることがわかった。【００３６】実施例２
＜ＲＦＬＰの検討＞
実施例１で得られた塩基配列情報（配列番号２〜８）について、ＲＦＬＰに応用可能かどうかを検討するため、ナガコンブとガッガラコンブの塩基配列情報（配列番号４および５）を用いて、ＲＦＬＰの検討を行った。【００３７】ナガコンブとガッガラコンブのそれぞれの塩基配列において、制限酵素認識部位を市販の解析ソフトウェアであるＭａｃＶｅｃｔｏｒ（帝人システムテクノロジー）を用いて探索したところ、ガッガラコンブにのみＰｓｔＩ認識部位が確認された（図５参照）。【００３８】ナガコンブ及びガッガラコンブについて、実施例１と同様の操作により鋳型ＤＮＡを調製してＰＣＲを行った。ＰＣＲの条件は、図２に示した１６ＳｕｐＦとｍｓＲ４をプライマーとして使用し、９５℃３分の前加熱後、９５℃３０秒の変性工程、６０℃２秒のアニーリング工程及び７２℃３０秒の伸長工程を３５サイクルとした。【００３９】ＰＣＲ終了後、ＰＣＲ反応液１０μｌ、１０×バッファー１．５μｌ、ＰｓｔＩ１μｌ及び蒸留水８．５μｌから成る各混合物を３７℃で１時間インキュベートすることにより消化を行った。次いで、各消化物を２％アガロースゲル電気泳動にかけた。【００４０】結果を図６に示す。ＰＣＲにより増幅したナガコンブおよびガッガラコンブ由来のＤＮＡ断片（約０．６ｋｂｐ）をＰｓｔＩで消化することにより、ガッガラコンブのＤＮＡ断片にのみ消化断片（約２５０ｋｂｐと約３５０ｋｂｐ）が確認された。このことから、ＲＦＬＰを用いた解析によりナガコンブおよびガッガラコンブの２種を識別することが可能であり、配列表２〜８のミトコンドリアＤＮＡの塩基配列情報を利用したＲＦＬＰによるコンブ属の種の鑑定が可能なことが明らかとなった。【００４１】実施例３
＜市販乾燥コンブの解析＞
市販されている乾燥コンブ５種類（道南産、羅臼産、日高産、釧路産、根室産）を試料として、実施例１と同様の操作を行った。各試料において、実施例１で塩基配列及び塩基数の多型が確認された配列番号６における２９３番目から３２１番目に相当する領域をダイレクトシークエンス法により解析を行った結果、図７に示す結果が得られた。道南産及び羅臼産コンブを解析した結果、マコンブ、ミツイシコンブ、ナガコンブ、ガッガラコンブではなく、オニコンブ、ホソメコンブ、リシリコンブのいずれかであることが確認された。日高産コンブは、ミツイシコンブ、釧路産及び根室産コンブは、ナガコンブであることが確認された。【００４２】以上の結果から、ミトコンドリアＤＮＡの塩基配列による解析は、市販されている乾燥コンブが、マコンブ、ミツイシコンブ、ナガコンブ、ガッガラコンブの４種及び４種以外のオニコンブ、ホソメコンブ、リシリコンブを一つとしたコンブ種群であるか否かを鑑定することが可能であることが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００４３】本発明により、外観的に識別困難なコンブ属の種を容易かつ高精度に鑑定する方法とそれに用いる塩基配列情報が提供される。従って、本発明は、市販コンブにおける表示の確認を客観的かつ科学的に行える手法として利用することができる。さらに、流通過程における製品管理やコンブ養殖における種苗管理などにも利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】ＰＣＲ増幅によるコンブ属ミトコンドリアＤＮＡの模式図を示した図面である。
【図２】領域の増幅及びシクエンシングに用いたプライマーを示した図面である。
【図３】コンブ属７種のミトコンドリアＤＮＡの比較解析結果を示した図である。
【図４】配列番号６の２９３番目から３２１番目に相当する領域におけるコンブ属の多型を示した図面である。
【図５】ナガコンブ及びガッガラコンブにおけるＰｓｔＩ認識部位を示した図面である。
【図６】ナガコンブ及びガッガラコンブにおけるＰｓｔＩで消化した場合のＲＦＬＰの結果を示した図面である。
【図７】市販の乾燥コンブにおける解析結果を示した図面である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【配列表】
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