(57)【要約】【課題】  簡便に作製可能で、正確な判定が可能なイムノクロマトグラフィー用キットを提供すること。【解決手段】  本発明のイムノクロマトグラフィー用キットは、試料を収容した試験容器と、一端側から試験容器に挿入されて用いられるイムノクロマトグラフィー用試験具と、を備え、試験具が試料中の第１測定対象の検出を判定するための第１判定部を有し、試験容器が試験具の第１判定部に対応する位置に、第１判定部の種別の表示を有する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料を収容するための試験容器と、一端側から試験容器に挿入されて用いられるイムノクロマトグラフィー用試験具とを備え、
試験具が、試料中の第１測定対象の検出を判定するための第１判定部を有し、試験容器が、試験具の第１判定部に対応する位置に、第１判定部の種別の表示を有するイムノクロマトグラフィー用キット。
【請求項２】
試験具が、試料中の第２測定対象の検出を判定するための第２判定部を有し、試験容器が、試験具の第２判定部に対応する位置に、第２判定部の種別の表示を有する請求項１に記載のイムノクロマトグラフィー用キット。
【請求項３】
試験具が、試料が第１判定部を通過したことを確認するための対照部を有し、対照部が、第１判定部の下流側に配置される請求項１に記載のイムノクロマトグラフィー用キット。
【請求項４】
試験具が、試料が第１判定部及び第２判定部を通過したことを確認するための対照部を有し、対照部が、第１判定部及び第２判定部の下流側に配置される請求項２に記載のイムノクロマトグラフィー用キット。
【請求項５】
試験具が、基材上に、試料添加用部材と、試料中の第１測定対象と抗原抗体反応する第１標識物質及び対照用標識物質を保持する標識保持部材と、第１測定対象と抗原抗体反応する第１固定化用物質が固定化された第１判定部及び対照用標識物質を捕捉する対照部とを有するクロマト用膜担体を備えてなる請求項３に記載のイムノクロマトグラフィー用キット。
【請求項６】
試験具が、基材上に、試料添加用部材と、試料中の第１測定対象と抗原抗体反応する第１標識物質、試料中の第２測定対象と抗原抗体反応する第２標識物質及び対照用標識物質を保持する標識保持部材と、第１測定対象と抗原抗体反応する第１固定化用物質が固定化された第１判定部及び第２測定対象と抗原抗体反応する第２固定化用物質及び対照用標識物質を捕捉する対照部とを有するクロマト用膜担体を備えてなる請求項４に記載のイムノクロマトグラフィー用キット。
【請求項７】
試験容器が、試料中の第１測定対象と抗原抗体反応する第１標識物質及び対照用標識物質を収容し、試験具が、基材上に、試料添加用部材と、第１測定対象と抗原抗体反応する第１固定化用物質が固定化された第１判定部及び対照用標識物質を捕捉する対照部を有するクロマト用膜担体とを備える請求項３に記載のイムノクロマトグラフィー用キット。
【請求項８】
試験容器が、試料中の第１測定対象と抗原抗体反応する第１標識物質、試料中の第２測定対象と抗原抗体反応する第２標識物質及び対照用標識物質を収容し、試験具が、基材上に、試料添加用部材と、第１測定対象と抗原抗体反応する第１固定化用物質が固定化された第１判定部、第２測定対象と抗原抗体反応する第２固定化用物質及び対照用標識物質を捕捉する対照部を有するクロマト用膜担体とを備える請求項４に記載のイムノクロマトグラフィー用キット。
【請求項９】
試験容器が、試験具の対照部に対応する位置に、対照部を表す表示を有する請求項３または４に記載のイムノクロマトグラフィー用キット。
【請求項１０】
イムノクロマトグラフィー用試験具により測定対象の検出が判定される試料を収容するための試験容器であって、試験具の判定部に対応する位置に、判定部の種別の表示を有する試験容器。
【請求項１１】
測定対象が、第１測定対象および第２測定対象であり、判定部が第１測定対象の検出を判定するための第１判定部および第２測定対象の検出を判定するための第２判定部からなり、試験具の第１判定部および第２判定部に対応する位置に、第１判定部および第２判定部の種別の表示を有する請求項１０に記載の試験容器。
【請求項１２】
試験具が、試料が判定部を通過したことを確認するための対照部を有し、試験具の対照部に対応する位置に、対照部を表す表示を有する請求項１０または請求項１１に記載の試験容器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イムノクロマトグラフィー用キット及びイムノクロマトグラフィーに用いる試験容器に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液、血清、咽頭拭い液などの体液を検体として用いて、簡易に各種疾患の検査を行う方法してイムノクロマトグラフィーを用いる方法がある。
【０００３】
従来のイムノクロマトグラフィーは試料添加用部材に検体を滴下すると、乾燥させてあるラテックス粒子で標識された抗体が検体により移動しながら検体中の測定対象と複合体を形成する。この複合体は、支持体に粘着させたクロマト用膜担体上を移動し、クロマト用膜担体に固定されている抗体に捕捉されて判定部にラテックス粒子による有色のラインが形成される。この有色のラインを目視することにより、検体中の測定対象の存在の有無を確認する。
【０００４】
一方、判定部に有色のラインが形成されない場合として、操作は正常に行われたが、検体中に測定対象が含まれていない場合や、何らかの理由で検体が判定部にまで達していない場合の操作自体が異常な場合がある。従って、測定対象の有無に関わらず、上記判定部に試料が通過するとラインが形成される対照部が必要となる。
【０００５】
従来はイムノクロマトグラフィーに必要な構成物がケースに収容された状態で供給され、そのケース上に、形成された上記判定部や対照部のラインの種別の表示を行っていた。
【０００６】
しかし、近年イムノクロマトグラフィーに必要な構成物がケースに収容されていない形態で供給されるようになり、従来ケースに表示を行っていたラインの種別ができなくなった。そのため、どの位置に判定部に相当するラインが形成され、どの位置に対照部に相当するラインが形成されるか判断が難しいという問題があった。
【０００７】
そのため、判定部や対照部のラインが形成されるクロマト用膜担体上に直接ライン種別を印刷する方法が提案されている（特許文献１）。
【特許文献１】特開２００１−０１３１４３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
クロマト用膜担体に直接ライン種別を印刷する方法は、クロマト用膜担体にライン種別を印刷するという作業工程が一工程増えるのでコスト高になるという問題があった。また、細いクロマト用膜担体に直接ライン種別を印刷するのは困難であり、また、印刷に用いるインク等が操作自体に影響を及ぼしたり、さらに、印刷の際にクロマト用膜担体を傷つけるといった問題があった。
【０００９】
本発明は係る事情に鑑みてなされたものであり、簡便に作製可能で、正確な判定が可能なイムノクロマトグラフィー用キットを提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明のイムノクロマトグラフィー用キットは、試料を収容した試験容器と、一端側から試験容器に挿入されて用いられるイムノクロマトグラフィー用試験具とを備え、試験具が試料中の第１測定対象の検出を判定するための第１判定部を有し、試験容器が試験具の第１判定部に対応する位置に、第１判定部の種別の表示を有する。
本発明者らは、検体を収容しイムノクロマトグラフィー用試験具が挿入される試験容器に、判定部に対応する位置に判定部の種別を表示することにより、簡便に作製可能で、正確な判定が可能なイムノクロマトグラフィー用キットを提供できることを見出した。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、簡便に作製可能で、正確な判定が可能なイムノクロマトグラフィー用キットが提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下、本発明の実施形態を図面を用いて説明する。図面は、説明の便宜のために用いられるものであり、本発明の範囲は、図面に示す実施形態に限定されない。
【００１３】
１．第１の実施形態
図１は、本発明の第１の実施形態のイムノクロマトグラフィー用キットを示す。このキットは、試料を収容するための試験容器１と、一端側４ａから試験容器１に挿入されて用いられるイムノクロマトグラフィー用試験具４とを備える。また、図２は、図１の試験具４の（ａ）平面図、（ｂ）側面図である。
【００１４】
試験具４は、図２に示すように、表面に粘着層を有するプラスチック板からなる基材１２上に、レーヨンの不織布からなる試料添加用部材５と、グラスファイバーの不織布からなる標識保持部材７と、ニトロセルロースの多孔体からなるクロマト用膜担体９と、セルロースの不織布からなる吸収部材１１とを備える。標識保持部材７は、試料添加用部材５に接触して配置され、試料中の測定対象と抗原抗体反応する標識物質を保持する。クロマト用膜担体９は、標識保持部材７に接触して配置され、測定対象と抗原抗体反応する固定化用物質が固定された判定部を有する。吸収部材１１は、クロマト用膜担体９と接触するように配置されている。
【００１５】
クロマト用膜担体９には、上流側から順に、ライン状の第１判定部９Ａ、第２判定部９Ｂ及び対照部９Ｃが形成され、標識保持部材７には、第１標識物質、第２標識物質及び対照用標識物質が保持されている。第１判定部９Ａ、第２判定部９Ｂ及び対照部９Ｃには、固定化用物質として、それぞれ、抗インフルエンザＡ抗体、抗インフルエンザＢ抗体（以下、それぞれ「抗ＦｌｕＡ抗体」、「抗ＦｌｕＢ抗体」とする。）、ビオチンが固定されている。第１標識物質及び第２標識物質は、それぞれ、青色ラテックス粒子で標識された抗ＦｌｕＡ抗体及び抗ＦｌｕＢ抗体であり、対照用標識物質は、赤色ラテックス粒子で標識されたアビジンである。抗ＦｌｕＡ抗体及び抗ＦｌｕＢ抗体は、それぞれ、第１測定対象であるインフルエンザＡ型ウィルス及び第２測定対象であるインフルエンザＢ型ウィルス（以下、それぞれ「ＦｌｕＡウィルス」、「ＦｌｕＢウィルス」とする。）と抗原抗体反応により結合する。
【００１６】
ＦｌｕＡウィルスを例にとると、試料中にＦｌｕＡウィルスが含まれていると、標識保持部材７にある標識された抗ＦｌｕＡ抗体は、ＦｌｕＡウィルスの所定部位を認識して、抗原抗体反応により結合して複合体を形成する。次に、クロマト用膜担体９にある抗ＦｌｕＡ抗体は、ＦｌｕＡウィルスの別の部位を認識して複合体を捕捉する。複合体が捕捉されると、第１判定部９Ａには青色のラインが現れ、ＦｌｕＡウィルスが目視により検出される。
【００１７】
また、アビジンは、クロマト用膜担体９にある抗ＦｌｕＡ抗体、抗ＦｌｕＢ抗体には捕捉されないが、ビオチンと特異的に結合するので、対照部９Ｃに固定されたビオチンに捕捉される。アビジンが捕捉されると、対照部９Ｃには赤色のラインが現れ、アビジンが対照部９Ｃに到達したことが目視される。対照部９Ｃは、第１判定部９Ａ及び第２判定部９Ｂの下流に設けられるので、赤色のラインを確認することにより、試料が第１判定部９Ａ及び第２判定部９Ｂを通過したことが確認される。
【００１８】
試験容器１は、ガラスからなり、試験容器１には、試験具４の第１判定部９Ａ、第２判定部９Ｂ及び対照部９Ｃに対応する位置に第１判定部９Ａ、第２判定部９Ｂ及び対照部９Ｃの種別を表示（それぞれ、「Ａ」，「Ｂ」，「！」で表している。）するラベル３が貼られている。ラベル３は、透明基材の所定の位置に「Ａ」，「Ｂ」，「！」を印刷したものであり、ラベル３の上端を試験容器１の入口に一致させることにより、ラベル３と試験容器１の上下方向の位置合わせを行っている。
【００１９】
次に、本発明のキットの使用方法について、図３を用いて説明する。
まず、患者の鼻腔吸引液などの検体を展開溶媒に希釈して調製した試料１３を試験容器１内に所定量注入する。次に、試験具４を一端４ａから試験容器１に挿入し、一端４ａを試験容器１の底部１ａに接触させる（なお、ここでいう「底部」とは、試験容器１の丸みを帯びた部分を意味する。）。これにより、試験具４と試験容器１とが上下方向に位置合わせされる。この状態で、１０〜２０分程度放置すると、試料１３が毛管現象により、試料添加用部材５、標識保持部材７、クロマト用膜担体９、吸収部材１１を順次移動する。試料１３が、標識保持部材７を通過する際に、標識保持部材７に保持されている標識物質（第１、第２及び対照用標識物質）が展開溶媒に溶出する。試料中にＦｌｕＡウィルス又はＦｌｕＢウィルスが含まれていると、上述した作用により、第１判定部９Ａ又は第２判定部９Ｂには青色のラインが現れる。また、ウィルスの有無に関わらず、対照部９Ｃに赤色のラインが現れる。
【００２０】
ここで、図４を用いて、ラベル３がある場合（図４（ａ））とない場合（図４（ｂ））での測定結果を比較する。図４（ａ）が、本発明のキットに対応する。図４（ａ），（ｂ）は、いずれも、試料中にＦｌｕＡウィルスのみが含まれていた場合の結果を示す。
【００２１】
まず、図４（ｂ）を参照すると、試験具４に青色のライン１５ａと赤色のライン１５ｂが現れていることが分かる。赤色のライン１５ｂは、その色から参照部９Ｃに現れたものであることが分かる。しかし、青色のライン１５ａは、第１判定部９Ａと第２判定部９Ｂのどちらに現れたものであるかの判断が難しい。
【００２２】
次に、図４（ａ）を参照すると、試験容器に貼られたラベル３内の文字「Ａ」が青色のライン１５ａに対応した位置にあることが分かる。この文字「Ａ」があることにより、本発明のキットでは、青色のライン１５ａが第１判定部９Ａに現れたものであると判断することができ、試料中にはＦｌｕＡウィルスのみが含まれていたことが分かる。
【００２３】
このように、本実施形態によれば、現れたラインの種別を正確に識別することができる。
【００２４】
ここまで、特定の実施形態を例にとって説明してきたが、本発明は、この実施形態に限定されるものではなく、種々の変形が可能である。
【００２５】
検出物質は抗原抗体反応を生じる物質であれば特に限定されず、細菌、原生生物や真菌などの細胞、ウイルス、タンパク質、多糖類などが挙げられる。例えば、前記インフルエンザウイルスのほか、パラインフルエンザウイルス、ＲＳウイルス、マイコプラズマニューモニエ、ロタウイルス、カルシウイルス、コロナウイルス、アデノウイルス、エンテロウイルス、ヘルペスウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、肝炎ウイルス、重症急性呼吸器症候群の病原ウイルス、大腸菌、スタフィロコッカスアウレウス、ストレプトコッカスニューモニエ、ストレプトコッカスピヨゲネス、マラリア原虫、その他、消化器系疾患、中枢神経系疾患、出血熱等の様々な疾患の病原体、これらの代謝産物、癌胎児性抗原やシフラなどの腫瘍マーカー、ホルモンなどが例示される。
【００２６】
基材１２は、試料添加用部材５や標識保持部材７などの上記部材を適切に配置するためのものであり、プラスチック以外にも紙やガラスなど種々の材質のものを用いることができる。試料添加用部材５は、レーヨン以外にも、グラスファイバー又はセルロースファイバーなどの種々の素材で形成することができる。標識保持部材７は、グラスファイバー以外にも、セルロースファイバーなどの種々の素材で形成することができる。クロマト用膜担体９は、ニトロセルロース以外にも、ナイロン（例えば、カルボキシル基やアルキル基を置換基として有してもよいアミノ基が導入された修飾ナイロン）、ポリビニリデンジフルオリド（ＰＶＤＦ）、セルロースアセテートなどの種々の素材で形成することができる。吸収部材１１は、セルロース以外にも、グラスファイバーなどの種々の素材で形成することができる。試料添加用部材５、標識保持部材７、クロマト用膜担体９及び吸収部材１１には、不織布又は多孔体以外にも、毛管現象により試料を展開可能な種々の構造のものを用いることができる。
【００２７】
クロマト用膜担体９は、判定部を１つだけ備えてもよく、２つ以上備えてもよい。また、クロマト用膜担体９は、対照部を備えなくてもよい。また、判定部・対照部は、ライン状でなくてもよく、例えば島状に形成してもよい。標識保持部材７は、標識物質を１種だけ保持してもよく、２種以上保持してもよい。また、標識保持部材７は、対照用標識物質を保持しなくてもよい。標識物質は、青や赤以外のラテックス粒子や、金などの金属コロイド、色素分子などで標識されてもよい。標識物質が２種以上ある場合、各標識物質は、互いに異なる色に標識されても、同じ色に標識されてもよい。さらに標識物質及び対照用標識物質は、互いに異なる色に標識されても、同じ色に標識されてもよい。本発明によれば、各標識物質が同じ色に標識された場合でも現れるラインの種別を正確に識別することができる。
【００２８】
固定化用物質及び標識物質には、種々の抗体又は抗原を用いることができる。すなわち、測定対象が抗原である場合、固定化用物質及び標識物質は、この抗原と抗原抗体反応する抗体を用い、測定対象が抗体である場合、固定化用物質及び標識物質は、この抗体と抗原抗体反応する抗原を用いる。
【００２９】
対照部の固定化用物質がアビジンであり、対照用標識物質がビオチンであってもよい。さらに、対照部の固定化用物質と対照用標識物質は、ビオチンとアビジンの組み合わせ以外であってもよい。例えば、抗原抗体反応により結合する組み合わせであってもよい。例えば、対照用標識物質に抗原を用い、対照部の固定化用物質にこの抗原と抗原抗体反応する抗体を用いる。この逆であってもよい。対照用標識物質には、測定対象や判定部の固定化用物質と抗原抗体反応しないものを用いる。
【００３０】
試験容器１は、ガラス以外にも、プラスチックなどで形成してもよい。試験容器１の底部１ａは、図５（ａ）のように斜面を有していてもよく、図５（ｂ）のように平坦であってもよく、図５（ｃ）にように試験容器の内側に突出していてもよい。いずれの場合でも、試験具４と試験容器１は、上下方向に位置合わせされる。試験容器１のラベル３は、試験容器１の最下部にラベル３の下端を合わせるようにして上下方向の位置合わせを行ってもよい。また、ラベル３は、不透明なものであってもよい。また、種別表示を印刷したラベル３を試験容器１に貼り付ける代わりに、種別表示を試験容器に直接印刷してもよい。また、試験容器に種別表示を彫刻してもよい。種別表示は、アルファベットや記号以外にも、測定対象の名前などでもよい。また、単に、判定部・対照部に対応する位置に、点や線などを付しておくだけでもよい。例えば、第１判定部９Ａ、第２判定部９Ｂ及び対照部９Ｃに対応する位置に、それぞれ点を打っておくと、３つの点が、下から順に第１判定部９Ａ、第２判定部９Ｂ及び対照部９Ｃを示すことが分かる。このような点や線なども「種別の表示」に含まれる。
また、例えば上記実施形態のように対照用標識物質のみを異なる色で標識している場合、対照部の種別表示を試験容器に付さなくてもよい。種別表示がなくても、現れるラインの色から、そのラインが対照部に現れたものであることが分かるからである。
【００３１】
試験具４としては、図２に示したもの以外に、図６（ａ）〜（ｃ）に示すものなどであってもよい。図６（ａ）の試験具では、試料添加用部材５が、標識保持部材７を覆ってクロマト用膜担体９に接触するように構成されている。図６（ｂ）の試験具では、標識保持部材７が、クロマト用膜担体９と間隔を介して配置され、試料添加用部材５が、標識保持部材７を覆ってクロマト用膜担体９に接触するように構成されている。図６（ｃ）の試験具では、標識保持部材７が、クロマト用膜担体９と間隔を介して配置され、展開用部材１７が、標識保持部材７及びクロマト用膜担体９と接触するように配置されている。展開用部材１７は、試料添加用部材５と同様にレーヨン、グラスファイバー又はセルロースファイバーなどの種々の素材の不織布で構成することができる。図６（ｂ），（ｃ）の構成では、標識保持部材７とクロマト用膜担体９の間に試料の展開速度が速い部材が挟まれているので、標識保持部材７内の標識物質の溶出が速くなり、迅速な測定が可能になる。
【００３２】
また、上記実施形態では、図３に示すように、試験具４の一端４ａを試験容器１の底部１ａに接触させることによって、両者の上下方向の位置合わせを行ったが、図７に示すように、試験具４のもう一方の端（他端）４ｂに凸部１９を設け、試験容器１の長さを試験具４よりも長くし、図８に示すように、試験具４の凸部１９が試験容器１の入口に引っかかるようにすることによって、両者の上下方向の位置合わせを行ってもよい。凸部１９は、基材１２自体に形成してもよく、基材１２の裏面に別の部材（プラスチック板など）を貼り付けることによって形成してもよい。凸部１９は、図８に示すように、試験容器１の入口をまたぐような形状であってもよく、図９に示すように、鉤状にして、試験容器１の側壁に引っ掛けるような形状であってもよい。
【００３３】
２．第２の実施形態
図１０は、本発明の第２の実施形態のイムノクロマトグラフィー用キットを示す。また、図１１は、図１０の試験具４の（ａ）平面図、（ｂ）側面図である。
【００３４】
このキットは、第１の実施形態と比べて、試験具４が標識保持部材７を有しない点と、試験容器１が標識物質２１を収容している点が異なっている。本実施形態での試験具４では、図１１に示すように、試料添加用部材５とクロマト用膜担体９とが接触している。標識物質２１には、第１標識物質、第２標識物質及び対照用標識物質が含まれている。
【００３５】
次に、本実施形態のキットの使用方法について、図１２を用いて説明する。
まず、患者の鼻腔吸引液などの検体を展開溶媒に希釈して調製した試料１３を試験容器１内に所定量注入する。次に、試料１３と、試験容器１に収容されている標識物質２１とを十分に攪拌する。次に、試験具４を一端４ａから試験容器１に挿入し、一端４ａを試験容器１の底部１ａに接触させる。これにより、試験具４と試験容器１とが上下方向に位置合わせされる。この状態で、１０〜２０分程度放置すると、試料１３が毛管現象により、試料添加用部材５、クロマト用膜担体９、吸収部材１１を順次移動する。試料中にＦｌｕＡウィルス又はＦｌｕＢウィルスが含まれていると、第１の実施形態で説明した作用により、第１判定部９Ａ又は第２判定部９Ｂには青色のラインが現れる。また、ウィルスの有無に関わらず、対照部９Ｃに赤色のラインが現れる。
【００３６】
本実施形態のキットでも、試験容器に判定部の種別が表示されているので、現れたラインの種別を正確に識別することができる。また、本実施形態のキットについても、第１の実施形態で説明した種々の変形が可能である。
【図面の簡単な説明】
【００３７】
【図１】本発明の第１の実施形態のイムノクロマトグラフィー用キットの構成を示す。
【図２】図１のキットの試験具の（ａ）平面図、（ｂ）側面図である。
【図３】図１のキットの使用状態を示す。
【図４】試験容器にラベルが（ａ）ある場合と（ｂ）ない場合の比較を示す。
【図５】試験容器の底部の種々の形態を示す。
【図６】図１のキットの試験具の種々の変形例を示す。
【図７】図１のキットの変形例を示す。
【図８】図７のキットの使用状態を示す。
【図９】図７のキットの変形例の使用状態を示す。
【図１０】本発明の第２の実施形態のイムノクロマトグラフィー用キットの構成を示す。
【図１１】図１０のキットの試験具の（ａ）平面図、（ｂ）側面図である。
【図１２】図１０のキットの使用状態を示す。
【符号の説明】
【００３８】
１：試験容器  １ａ：試験容器の底部  ３：ラベル  ４：イムノクロマトグラフィー用試験具  ４ａ：試験具の一端  ４ｂ：試験具の他端  ５：試料添加用部材  ７：標識保持部材  ９：クロマト用膜担体  ９Ａ：第１判定部  ９Ｂ：第２判定部  ９Ｃ：対照部  １１：吸収部材  １２：基材  １３：試料  １５ａ：青色ライン  １５ｂ：赤色ライン  １７：展開用部材  １９：凸部  ２１：標識物質
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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