(57)【要約】【課題】  ヘミデスモソームの構成成分であるβ４インテグリンの産生を促進する成分を含む、美白効果に優れた化粧料を提供する。【解決手段】  Ｒ(Ｃｌ)−Ｘで示される塩素置換アルコール、アルデヒド又はカルボン酸、その塩もしくはそのエステルからなる群より選ばれる１種以上からなるβ４インテグリン産生促進剤（式中、Ｒ(Ｃｌ)は少なくとも１つ以上の水素原子が塩素原子で置換されたメチル基又はエチル基を示す。Ｘは−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯ又は−ＣＯＯＹであり、Ｙは水素原子、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウム、有機アンモニウム又は炭素原子数３以下のアルキル基を示す。）を含有することを特徴とする美白化粧料。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｒ(Ｃｌ)−Ｘで示される塩素置換アルコール、アルデヒド又はカルボン酸、その塩もしくはそのエステルからなる群より選ばれる１種以上からなるβ４インテグリン産生促進剤（式中、Ｒ(Ｃｌ)は少なくとも１つ以上の水素原子が塩素原子で置換されたメチル基又はエチル基を示す。Ｘは−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯ又は−ＣＯＯＹであり、Ｙは水素原子、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウム、有機アンモニウム又は炭素原子数３以下のアルキル基を示す。）。
【請求項２】
請求項１記載のβ４インテグリン産生促進剤を含有することを特徴とする美白化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヘミデスモソームの構成成分であるβ４インテグリンの産生を促進する成分を含む美白化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
シミの形成機構はまだ完全に明らかにされていないが、色素細胞でのメラニン産生増加と、表皮ターンオーバー低下によるメラニン排泄の遅れが、その状態を引き起こすと考えられている。β４インテグリンは表皮基底細胞と基底膜との接着を担うヘミデスモソームの構成分子のひとつであり、正常皮膚の構造維持に重要な働きをしているほか（非特許文献１参照）、生存シグナルや増殖シグナルを細胞内に伝達する働きも有し、表皮ターンオーバーの調節に関与している（非特許文献２、３参照）。しかしながら、シミ部位における表皮ターンオーバーの低下に、β４インテグリンが係っているかどうか、さらにどのように係るのかについては、十分な知見は得られていなかった。従来、表皮角化細胞に対する細胞賦活活性を有する成分として、ジクロロ酢酸が知られているが（非特許文献４参照）、化粧料中に配合した場合、いかなる効果を奏するものであるかは知られていなかった。
【非特許文献１】Ｖｉｄａｌ  Ｆ  ｅｔ  ａｌ：Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ，１９９５年，１０巻，ｐ２２９−２３４
【非特許文献２】Ｄａｗｌｉｎｇ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ：Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ，１９９６年，１３４巻，ｐ５５９−５７２
【非特許文献３】Ｍａｉｎｉｅｒｏ  Ｆ  ｅｔ  ａｌ：ＥＭＢＯ  Ｊ，１９９７年，１６巻、ｐ２３６５−２３７５
【非特許文献４】Ｋｉｔａｍｕｒａ  Ｎ  ｅｔ  ａｌ：Ｓｋｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ａｐｐｌ  Ｓｋｉｎ  Ｐｈｙｓｉｏｌ，１９９９年，１２巻，ｐ３１７−３２５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本願発明は、シミ患部における現象に着目し、表皮のターンオーバーに係る新たなメカニズムに基づく美白化粧料を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明者は、シミ部位の皮膚組織について各種の解析を行った結果、シミ部位においてはβ４インテグリンの発現が低下していることを見出した。そして、特定の塩素置換アルコール、アルデヒド又はカルボン酸類が、β４インテグリンの産生を促進するβ４インテグリン産生促進剤としての新規の機能を有することを見出した。さらに、このβ４インテグリン産生促進剤を化粧料に配合したところ、顕著な美白作用を有すること見出し本願発明を完成させるに至った。
【０００５】
即ち本発明は、Ｒ(Ｃｌ)−Ｘで示される塩素置換アルコール、アルデヒド又はカルボン酸、その塩もしくはそのエステルからなる群より選ばれる１種以上からなるβ４インテグリン産生促進剤にある（式中、Ｒ(Ｃｌ)は少なくとも１つ以上の水素原子が塩素原子で置換されたメチル基又はエチル基を示す。Ｘは−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯ又は−ＣＯＯＹであ
り、Ｙは水素原子、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウム、有機アンモニウム又は炭素原子数３以下のアルキル基を示す。）。
【０００６】
また本願第２の発明は、上記のβ４インテグリン産生促進剤を含有することを特徴とする美白化粧料にある。
【発明の効果】
【０００７】
本願発明に係る特定の塩素置換アルコール、アルデヒド又はカルボン酸類からなるβ４インテグリン産生促進剤は、表皮基底細胞におけるβ４インテグリンの産生を促進させ、基底細胞と基底膜との接着を正常化する。そして、β４インテグリン産生促進剤を含有する美白化粧料は、シミ患部で低下している表皮ターンオーバーを改善し、美白効果を発揮する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明におけるβ４インテグリン産生促進剤は、Ｒ(Ｃｌ)−Ｘで示される塩素置換アルコール、アルデヒド又はカルボン酸、その塩もしくはそのエステルからなる群より選ばれる１種以上である（式中、Ｒ(Ｃｌ)は少なくとも１つ以上の水素原子が塩素原子で置換されたメチル基又はエチル基を示す。Ｘは−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯ又は−ＣＯＯＹであり、Ｙは水素原子、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウム、有機アンモニウム又は炭素原子数３以下のアルキル基を示す。）。有機アンモニウムとしては、メチルアンモニウム、ジメチルアンモニウム、トリメチルアンモニウム、エチルアンモニウム、モノエタノールアンモニウム、ジエタノールアンモニウム、トリエタノールアンモニウム、モノプロパノールアンモニウム、ジイソプロピルアンモニウム等が使用可能である。これらの化合物は、従来公知の方法により合成することが可能である。また市販品として入手することも可能である。
【０００９】
本発明のβ４インテグリン産生促進剤は、表皮細胞においてβ４インテグリンの産生を促進させる作用を有し、化粧料に配合させることにより、シミ部位で低下している表皮ターンオーバーを改善して美白効果を発揮する、本発明の美白化粧料となすことができる。
【００１０】
本発明の美白化粧料におけるβ４インテグリン産生促進剤の配合量は、０．００１〜５．０質量％が好ましく、さらに０．０１〜１．０質量％が好ましい。配合量が０．０１質量％より少ないと十分な効果が得られず、５．０質量％を超えて配合してもそれに見合った効果は得られない。
【００１１】
本発明の美白化粧料は、必須の構成成分である上述したβ４インテグリン産生促進剤に加え、アルブチン、エラグ酸、油溶性甘草エキス、レチノイド、フェノール性二量体化合物、４−ｎ−ブチルレゾルシノール、エラグ酸、トラネキサム酸、カミツレ抽出物、リノール酸、α−ヒドロキシ酸、ハイドロキノン、システイン、グルタチオン、ビタミンＥ、ビタミンＣ誘導体等の美白成分から選ばれる１種以上を適宜配合することで、更なる美白効果が期待される。これらの中では、アルブチン、エラグ酸、４−ｎ−ブチルレゾルシノール及びビタミンＣ誘導体が特に好ましく用いられ、美白化粧料中の濃度は０．０１質量％以上であれば良い。
【００１２】
さらに、本願美白化粧料には、本発明の目的を損なわない範囲で他の成分、例えば、陰イオン性界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、粘剤、油剤、粉体（色素、樹脂、顔料）、防腐剤、香料、保湿剤、生理活性成分、塩類、溶媒、酸化防止剤、キレート剤、パール化剤、中和剤、ｐＨ調整剤、昆虫忌避剤、酵素等の成分を適宜配合することができる。以下に配合成分の具体例を示すが、これらに限られるものではない。
【００１３】
陰イオン性界面活性剤としては、α−アシルスルホン酸塩、アルキルスルホン酸塩、ア
ルキルアリルスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルキルアミド硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルアミドエーテル硫酸塩、アルキルリン酸塩、アルキルアミドリン酸塩、アルキロイルアルキルタウリン塩、Ｎ−アシルアミノ酸塩、スルホコハク酸塩、パーフルオロアルキルリン酸エステル等が挙げられる。
【００１４】
両性界面活性剤としては、グリシン型、アミノプロピオン酸型、カルボキシベタイン型、スルホベタイン型、スルホン酸型、硫酸型、リン酸型等が挙げられ、好適なものとして２−アルキル−Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−ヒドロキシエチルイミダゾリニウムベタイン、ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン等が例示できる。
【００１５】
非イオン性界面活性剤としては、脂肪酸アルカノールアミド、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルエステル、ショ糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、アルキルアミンオキシド等が挙げられる。
【００１６】
粘剤の例としては、アクリル酸アミド及びその誘導体、カルボキシビニルポリマー、アルキル変性カルボキシビニルポリマー、セルロース、ケラチン及びコラーゲン又はその誘導体、アルギン酸カルシウム、プルラン、寒天、ゼラチン、タマリンド種子多糖類、キサンタンガム、カラギーナン、ハイメトキシルペクチン、ローメトキシルペクチン、グァーガム、アラビアゴム、結晶セルロース、アラビノガラクタン、カラヤガム、トラガカントガム、アルギン酸、アルブミン、カゼイン、カードラン、ジェランガム、デキストラン等が挙げられる。
【００１７】
油剤としては、通常化粧料に用いられる揮発性及び不揮発性の油剤、溶剤及び樹脂が挙げられ、常温で液体、ペースト、固体であっても構わない。油剤の例としては、例えばセチルアルコール、イソステアリルアルコール、ラウリルアルコール、ヘキサデシルアルコール、オクチルドデカノール等の高級アルコール、イソステアリン酸、ウンデシレン酸、オレイン酸等の脂肪酸、ミリスチン酸ミリスチル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、オレイン酸デシル、ミリスチン酸イソプロピル、ジメチルオクタン酸へキシルデシル、モノステアリン酸グリセリン、トリオクタン酸グリセリン、フタル酸ジエチル、モノステアリン酸エチレングリコール、オキシステアリン酸オクチル等のエステル類、ステアリン酸コレステリル、オレイン酸コレステリル、分岐脂肪酸コレステリル等のコレステロールエステル、流動パラフィン、ワセリン、スクワラン等の炭化水素、ラノリン、還元ラノリン、カルナバロウ等のロウ、ミンク油、カカオ脂、ヤシ油、パーム核油、ツバキ油、ゴマ油、ヒマシ油、オリーブ油等の油脂、ジメチルポリシロキサン、環状ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン等のシリコーン油等が挙げられる。
【００１８】
粉体の例としては、赤色２０１号、黄色４号、青色１号、黒色４０１号等の色素、黄色４号Ａｌレーキ、黄色２０３号Ｂａレーキ等のレーキ色素、ナイロンパウダー、シルクパウダー、シリコーンパウダー、セルロースパウダー、シリコーンエラストマー球状粉体、ポリエチレン末等の樹脂、黄酸化鉄、赤色酸化鉄、酸化クロム、カーボンブラック、群青、紺青等の有色顔料、酸化亜鉛、酸化チタン等の白色顔料、タルク、マイカ、セリサイト、カオリン等の体質顔料、雲母チタン等のパール顔料の顔料、硫酸バリウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、珪酸マグネシウム等の金属塩、シリカ、アルミナ等の無機粉体、ベントナイト、スメクタイト、窒化ホウ素等が挙げられる。これらの粉体の形状（球状、棒状、針状、板状、不定形状、燐片状、紡錘状等）に特に制限はない。
【００１９】
生理活性成分としては、皮膚に塗布した場合に皮膚に何らかの生理活性を与える物質が挙げられる。例えば、老化防止剤、紫外線防御剤、ひきしめ剤、抗酸化剤、保湿剤、血行促進剤、抗菌剤、殺菌剤、乾燥剤、冷感剤、温感剤、ビタミン類、アミノ酸、創傷治癒促
進剤、刺激緩和剤、鎮痛剤、細胞賦活剤、酵素成分等が挙げられる。
【００２０】
本発明の美白化粧料は、常法に従って製造することができる。また、本発明の化粧料は、一般の皮膚化粧料に限定されるものではなく、医薬部外品、指定医薬部外品、外用医薬品等を包含するものであり、その剤形も特に限定されず、目的に応じて任意に選択することができる。すなわち、クリーム、軟膏、乳液、溶液、ゲル等の剤形やパック、ローション（化粧水）、パウダー、スティック等の形態とすることができる。
【実施例】
【００２１】
以下、実施例を挙げて本発明を更に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。尚、特に断らない限り実施例中の配合量の単位は質量％である。
［ヒト表皮におけるβ４インテグリンの発現］
ヒト正常皮膚及びシミ皮膚組織を凍結包埋処理し、５μｍの薄切切片を作製した。切片をアセトン固定した後、抗ヒトβ４インテグリン抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ社）を一次抗体として抗体染色を行った。検出にはＶＥＣＴＡＳＴＡＩＮ  ＡＢＣキット（ＶＥＣＴＯＲ社）及びＤＡＢ基質キット（フナコシ株式会社）を用いた。
【００２２】
ヒト表皮におけるβ４インテグリンの発現を図１と図２に示す。正常皮膚（図１）では、表皮と真皮の境界である基底膜に沿って連続的に、表皮基底細胞においてβ４インテグリンの発現が確認された。一方、メラニンを過剰に有するシミ皮膚（図２）では、表皮基底細胞におけるβ４インテグリンの発現量が低下していることが確認された。
［β４インテグリン発現促進作用の評価］
１．ヒト新生児包皮由来表皮角化細胞（クラボウ社より購入）を使用した。
２．表皮角化細胞を５．５×１０４個／ｍｌとなるように培地にて調製し、６ｃｍφ培養プレート（ファルコン社製）に５ｍｌずつ播種した。培地は、増殖因子としてＢＰＥ（牛脳下垂体抽出液）、インシュリン、エタノールアミン、ホスホエタノールアミン、ハイドロコルチゾンを添加したＭＣＤＢ１５３培地を使用した。５％（Ｖ／Ｖ）ＣＯ２雰囲気下、３７℃でコンフルエント状態まで前培養した。
３．培地上清を吸引除去し、試験試料を規定濃度添加した培地に培地交換し、５％（Ｖ／Ｖ）ＣＯ２雰囲気下、３７℃で７２時間培養した。培地は増殖因子としてインシュリン、エタノールアミン、ホスホエタノールアミンを添加したＭＣＤＢ１５３培地を使用した。４．培養後、ＲＮＡ精製キット（キアゲン社製）をにより総ＲＮＡを抽出した。Super Script II試薬（インビトロジェン社製）を用いて逆転写反応を行ったのち、リアルタイムＰＣＲ解析システム（ABI PRISM 7000、アプライドバイオシステムズ社）を用いてＰＣＲ反応を行い、β４インテグリンｍＲＮＡ発現量を調べた。β４インテグリン検出用のＰＣＲ用プローブは、アプライドバイオシステムズ社より販売されているプライマーセットを使用し、また、ＰＣＲの反応条件はプロトコールに従った。また同時に、ハウスキーピング遺伝子であるＧ３ＰＤＨｍＲＮＡ発現量を定量し、β４インテグリンｍＲＮＡ／Ｇ３ＰＤＨｍＲＮＡによりβ４インテグリン発現量を評価した。
【００２３】
上記の評価系により、本願発明のβ４インテグリン産生促進剤の産生促進作用を評価した。評価に使用したジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸及びクロロ酢酸は和光純薬より、ジクロロエタノールはシグマアルドリッチ社より購入した。
実施例１（ジクロロ酢酸）
β４インテグリン産生促進剤としてジクロロ酢酸を、濃度を変えて添加した時のβ４インテグリンの発現量を図３に示す。ジクロロ酢酸の添加により、濃度依存的にβ４インテグリンｍＲＮＡの発現が促進された。なお、ジクロロ酢酸添加によりＧ３ＰＤＨｍＲＮＡ
発現量に変化は見られなかった。
実施例２（ジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸、クロロ酢酸、ジクロロエタノール）
ジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸、クロロ酢酸、ジクロロエタノールを１００μｍｏｌ／ｌ添加した時のβ４インテグリンの発現量を図４に示す。トリクロロ酢酸はジクロロ酢酸と同様のレベルでβ４インテグリンｍＲＮＡの発現を促進した。クロロ酢酸およびジクロロエタノールのβ４インテグリン産生促進活性はさらに高く、ジクロロ酢酸およびトリクロロ酢酸の約２倍高い活性を示した。
【００２４】
本発明のβ４インテグリン産生促進剤を配合した美白化粧料の効果を、つぎの美白実用試験により評価した。
［美白実用試験方法］
顔面部にシミを有する被験者１０名のシミ患部を対象として、評価試料を１日２回、適量を塗布させた。塗布期間は最低７週間以上とした。アンケート結果に基づき、各塗布部位のシミの状態が試験開始前と比較して改善したと回答した被験者の人数を、美白実用試験における評価の指標とした。
実施例３、比較例１：ローション
下記表１の原料組成と製造方法に従い、実施例３のローションを調製し、美白実用試験を実施した。なお、Ｃ成分を配合しないものを比較例１のローションとした。
（表１）
――――――――――――――――――――――――
原  料  成  分                        配合量
――――――――――――――――――――――――
Ａ成分
(1) エタノール                          ８．０
(2) モノラウリン酸ポリオキシエチレン    ０．５
ソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．）
(3) 香料                                ０．０１
(4) メチルパラベン                      ０．１
Ｂ成分
(5) グリセリン                          ３．０
(6) １，３−ブチレングリコール          １．０
(7) カラギーナン                        ０．２
(8) クエン酸                            ０．０１
(9) クエン酸ナトリウム                  ０．０９
(10)ジイソプロピルアミン                ０．２５
(11)精製水                              残  量
Ｃ成分（β４インテグリン産生促進剤）
(12)ジクロロ酢酸                      表２に記載
――――――――――――――――――――――――
（製造方法）
表１記載のＡ成分、Ｂ成分をそれぞれ混合溶解したのち、Ｂ成分をＡ成分に加えて混合攪拌し、さらにＣ成分を加えて混合攪拌した。
（美白実用試験結果）
美白実用試験を実施した結果を表２に記載した。表２に示す如く、β４インテグリンの
産生を促進する成分を含有する本発明の実施例３の美白化粧料（ローション）は、明らかに良好な結果を示した。
（表２）
――――――――――――――――――――――――
評価試料                    濃度    美白実用試験
――――――――――――――――――――――――
実施例３（ジクロロ酢酸）  ０．２５      ７
比較例１    （−）          −          １
――――――――――――――――――――――――
また、実施例３の美白化粧料は、皮膚に発赤、炎症、その他副作用と考えられる症状は発現せず、本発明に係る美白化粧料は安全性にも優れることが示された。
実施例４、比較例２：クリーム
下記表３の原料組成と製造方法に従いクリームを調製した。なお、Ｄ成分を配合しないものを比較例２のクリームとした。
（表３）
――――――――――――――――――――――――
原  料  成  分                        配合量
――――――――――――――――――――――――
Ａ成分
(1) グリセリルモノステアレート          ２．０
(2) ステアリン酸                        １．０
(3) ベヘニルアルコール                  ０．７
(4) ポリオキシエチレン                  １．０
セチルエーテル（２Ｅ．Ｏ．）
(5) ワセリン                            １．５
(6) オリーブスクワラン                  ６．０
(7) メチルフェニルシリコン              ４．０
(8) シクロペンタシロキサン              ３．０
(9) ブチルパラベン                      ０．０５
(10)ジイソプロピルアミン                ０．２５
Ｂ成分
(11)Ｎ−ステアロイル                    ０．９
−Ｌ−グルタミン酸ナトリウム
(12)キサンタンガム                      ０．２
(13)メチルパラベン                      ０．１
(14)精製水                              残  量
Ｃ成分
(15)エタノール                          ５．０
(16)フェノキシエタノール                ０．３
Ｄ成分（β４インテグリン産生促進剤）
(17)ジクロロ酢酸                        ０．２５
――――――――――――――――――――――――
（製造方法）
表３記載の（Ａ）、（Ｂ）の各成分をそれぞれ７０℃に加熱し、完全溶解したのち、油相部を水相部に混合し、乳化機にて乳化処理する。乳化物を冷却し、５０℃にて（Ｃ）、
(Ｄ)を加え、さらに終温３０℃まで冷却する。
（美白実用試験結果）
美白実用試験の結果、β４インテグリンの産生を促進する成分を含有する本発明の実施例４の美白化粧料（クリーム）は、比較例２と比べて明らかに美白効果に優れ、また、安全性にも問題は見られなかった。
【産業上の利用可能性】
【００２５】
以上のように、特定の化合物からなる本発明のβ４インテグリン産生促進剤は、表皮基底細胞におけるβ４インテグリンの産生を促進させることで、表皮基底層の細胞接着および生存、増殖に係わるシグナル伝達を十分に起こさせ、シミ患部で低下しているターンオーバーを改善し美白効果を発揮する。そしてこれを化粧料に配合することにより、シミの予防・防止・改善を目的とした美白化粧料を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】ヒト正常皮膚の基底細胞におけるβ４インテグリンの発現を示す、図面代用の免疫組織染色の顕微鏡写真である。濃い部分がβ４インテグリンが発現している箇所である。
【図２】ヒトシミ皮膚の基底細胞におけるβ４インテグリンの発現を示す、図面代用の免疫組織染色の顕微鏡写真である。
【図３】ヒト表皮角化細胞にジクロロ酢酸（ＤＣＡ）を添加濃度を変えて処理した場合のβ４インテグリンの産生促進作用を示す図である。
【図４】ヒト表皮角化細胞にジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸、クロロ酢酸、ジクロロエタノールを処理した場合のβ４インテグリンの産生促進作用を示す図である。
【図３】
2006045084.tif 000002
【図４】
2006045084.tif 000003
【図１】
2006045084.tif 000004
【図２】
2006045084.tif 000005