(57)【要約】      （修正有）【課題】生体高分子の結晶核の形成及び結晶化の成功率と作業効率を高められる結晶成長方法及び装置を提供する。【解決手段】生体高分子を蒸気拡散法によって結晶成長させる装置において、生体高分子を含有する溶液１１を表面張力により基板２６の間隙に保持し、その基板の間隙近傍に位置して対を成す電極３１によって、間隙に保持された溶液に対して交流電場を印加することで、生体高分子に誘起双極子を誘起して溶液中を移動させ、結晶核の形成を促進する。誘電泳動効果により形成された蛋白質の結晶核は、溶液中に浮遊しながら成長し単結晶となる。【選択図】図５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体高分子を蒸気拡散法によって結晶成長させる装置において、
生体高分子を含有する溶液を保持する間隙の備わった基板と、
その基板の間隙近傍に位置して、間隙に保持された溶液に電圧を印加する少なくとも一対の電極と、を有する
ことを特徴とする生体高分子の結晶成長装置。
【請求項２】
基板の間隙が、略鉛直方向に貫通した貫通孔である
請求項１に記載の生体高分子の結晶成長装置。
【請求項３】
電極の表面が、絶縁化処理されている
請求項１または２に記載の生体高分子の結晶成長装置。
【請求項４】
電極が、基板の両面に設けられ、
その基板の互いに別の面に設けられた電極が対を成して結線され、その電極間に交流電場が印加される
請求項１ないし３に記載の生体高分子の結晶成長装置。
【請求項５】
生体高分子を蒸気拡散法によって結晶成長させる装置において、
生体高分子を含有する溶液を、基板の間隙に保持し、その基板の間隙近傍に位置して対を成す電極によって、間隙に保持された溶液に対して交流電場を印加することで、
生体高分子に誘起双極子を誘起して溶液中を移動させ、結晶核の形成を促進する
ことを特徴とする生体高分子の結晶成長方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、蛋白質をはじめとする生体高分子を、凝集、吸着、分離する方法、より詳細には生体高分子を結晶成長させる方法、並びに、その方法を実施する装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
蛋白質に代表される生体高分子の三次元立体構造を明らかにすることは、その分子の生体中における生理機能を明らかにできるばかりでなく、合理的な医薬品の開発（ドラッッグデザイン）を進める上でも極めて有用であると考えられている。この生体高分子の三次元立体構造を解析する実用的な手法には、ＮＭＲ（核磁気共鳴）法とＸ線結晶構造解析法とがあるが、解析上分子量に制限が無いＸ線結晶構造解析法が、今後特に有効であると考えられている。
Ｘ線結晶構造解析法では、多結晶や双晶などでは解析が困難なので単結晶を作製しなければならない。更に、結晶構造解析の分解能などの精度を向上させるために、良質な結晶性の良い単結晶を作製する必要がある。
しかし、この結晶化がボトルネックとなっていて、迅速で高精度の結晶構造解析を妨げているのが実状である。
【０００３】
生体高分子の単結晶作製法としては、図１に示すような従来公知の方法が現在主に採用されている。図１（ａ）は、ハンギングドロップ蒸気拡散法を示す正面断面説明図、図１（ｂ）は、シッティングドロップ蒸気拡散法を示す正面断面説明図、図１（ｃ）は、マイクロバッチ法を示す正面断面説明図である。
図１（ａ）（ｂ）に示す蒸気拡散法では、少量の蛋白質を含む水溶液（１１）を、結晶化プレート（２１）を閉蓋するカバーガラス（２２）の下面、或いは結晶化プレート（２１）内の支持台部（２３）上に滴下すると共に、底部のリザーバー（２４）に沈殿剤（１２）を充填して、容器を密閉する。これにより蛋白質溶液（１１）はやがて過飽和状態となり、この蛋白質溶液（１１）中で結晶が析出する。
また、図１（ｃ）に示すバッチ法では、蛋白質溶液と沈殿剤との等量の混合液（１３）をウエル（２５）内に分注し、その上部にパラフイン等のオイル（１４）を注入して封入する。これにより、混合液（１３）中で蛋白質溶液成分が過飽和状態となり晶出する。
【０００４】
以上のような従来法は、蛋白質溶液中で偶発的に結晶核の形成と成長が引き起こされるもの（均一核形成反応）である。そのため、結晶化の成功の可否は、数多くの溶液の作製条件、すなわち、蛋白質を溶解させる緩衝溶液の種類、ｐＨ、イオン濃度、初期の蛋白質濃度、更には沈殿剤の種類や濃度など、諸々の条件に左右されてしまう。
また現状では、生化学的特性の異なる個々の蛋白質に対して、有効な結晶化条件をあらかじめ予測した上で結晶化実験を進める手法は確立されていない。そのため、結晶化の初期には、スクリーニングによって結晶化条件を網羅的に探索する方法が一般的に行われている。
【０００５】
一般に、蛋白質の結晶化では、その初期過程において蛋白質溶液中で結晶核が生成され、更にそれが安定して溶液中で一定時間存続することが必須である。
溶液中で蛋白質の結晶核を作製する手段は、従来から様々なものが提案されている。
代表的な方法の一つは不均一核形成法である。これは、固体物質等の表面上で結晶核形成を行う方法であり、化学熱力学的な理由から低過飽和度の溶液条件下での結晶化では、結晶核形成が起こりやすいことが知られている（非特許文献１）。これを蛋白質の結晶成長に適用することも可能である。
【非特許文献１】W. Tiller, "The Science of Crystallization: Microscopic Interfacial Phenomena", Cambridge University Press
【０００６】
また、上記の固体表面での不均一核形成法と原理は異なるが、固体表面の場を利用した蛋白質等の微小粒子の二次元的な結晶成長法が報告されている（特許文献１、非特許文献２）。
この方法は、シリコン等の原子レベルで平滑な固体表面上に蛋白質等の微粒子を、液膜の乾燥時の溶液に対する駆動力を応用して、溶液端部から二次元薄膜として集積化するというものである。
【特許文献１】特開平９―９２６１７  “ナノスケール微粒子の２次薄膜集積法”
【非特許文献２】N. D. Denkov 他、Langmuir, Vol.8, No.12 (1992) p3183 " Mechanism of Formation of Two-Dimensional Crystals from Latex Particles on Substrates"
【０００７】
更に、上記の不均一核形成法を利用せずに、外部から集光された高エネルギーでかつ極短パルス幅（フェムト秒程度）のレーザー光を、低過飽和度の蛋白質溶液に照射して結晶核及び結晶を作製する方法もある（非特許文献３〜５）。
【非特許文献３】H. Adachita他、Jpn. J. Appl. Phys. 42, L798 (2003)
【非特許文献４】安達宏昭他、日本結晶学会誌 29, 445 (2002)
【非特許文献５】安達宏昭他、日本結晶学会誌 46, 238 (2004)
【０００８】
蛋白質に代表される生体高分子の結晶核形成及び結晶成長に関しては、以上述べたような方法が提案され、用途に応じて用いられている。
しかし、これら従来技術には、実用上、次のような問題点がある。
（１）  固体基板上に不均一核形成反応を利用して蛋白質の結晶成長を行った場合、結晶は固体表面上に吸着した状態で成長してしまう。従って、サイズの大きな結晶にまで成長させた場合、結晶の下面が基板と密着しているため、結晶を取り出そうとすると、結晶が割れたり結晶内にクラックが入ってしまい、解析に使用できなくなるといった問題が生じる。
（２）  固体基板表面に蛋白質分子の二次元結晶核を成長させる方法の場合、二次元結晶のドメインサイズは大きくできず、更には引き続き乾燥させずに三次元結晶にまで成長させることは不可能である。
（３）  蛋白質溶液にレーザー光を照射する方法は、装置が特殊で大型になるため汎用性が無くなり、更に非常に高価であるため、どこでも結晶化に供せられるものではない。また、結晶化の条件は、スクリーニングによりあらかじめ決定された条件の近傍でかつ低過飽和度下で行われなければならず、結晶核形成条件の設定が難しい。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
そこで、本発明は、生体高分子の結晶核の形成及び結晶化の成功率と作業効率を高められる結晶成長方法及び装置を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記課題を解決するため、本発明の生体高分子の結晶成長方法は、生体高分子を蒸気拡散法によって結晶成長させる装置において、生体高分子を含有する溶液を、基板の間隙に保持し、その基板の間隙近傍に位置して対を成す電極によって、間隙に保持された溶液に対して交流電場を印加することで、生体高分子に誘起双極子を誘起して溶液中を移動させ、結晶核の形成を促進することを特徴とする。
【００１１】
このような方法を実施する生体高分子の結晶成長装置は、生体高分子を蒸気拡散法によって結晶成長させる装置において、生体高分子を含有する溶液を保持する間隙の備わった基板と、その基板の間隙近傍に位置して、間隙に保持された溶液に電圧を印加する少なくとも一対の電極と、を有することを特徴とする。
【００１２】
ここで、基板の間隙としては、略鉛直方向に貫通した貫通孔が好適である。
【００１３】
また、電極の表面を絶縁化処理して、生体高分子に誘電泳動を誘起しやすくしてもよい。
【００１４】
電極を基板の両面に設け、その基板の互いに別の面に設けられた電極で対を成して結線し、その電極間に交流電場を印加するようにして、結晶核の形成を促進させてもよい。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によると、誘電泳動効果を利用して効率よく基板の間隙に結晶核を形成し、結晶性良く成長した結晶を安全に取り出すこともできる。そのため、高精度の結晶構造解析に使用できる単結晶を生産性良く製造可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下に、図面を基に本発明の実施形態を説明する。
本発明の結晶化方法は、誘電泳動効果を利用することを基本としている。生体高分子における一般的な誘電泳動効果については非特許文献６、特に細胞を用いた例については非特許文献７に、開示事項がある。
【非特許文献６】M. Washizu, et al., " Molecular Dielectrophoresis of Biopolymers", IEEE Transactions on Industry  Applications, Vol.30 (1994) 835-845
【非特許文献７】X. -B. Wang et al., "Non-uniform spatial distributions of both the magnitude and phase of AC electric fields determined dielectrophoretic forces", Biochimica at Biophysica Acta, 1243 (1995) 185-194
【００１７】
非特許文献６による方法は、水溶液中の蛋白質分子を誘起双極子と見なし、それに対して、表面が絶縁化された一対の対向電極に交流電場を印加することで、電極のマイナス極或いはプラス極に向かって、蛋白質分子が電極間を移動し（誘電泳動効果）、更には電極間に捕獲されることを利用するものである。
蛋白質分子が誘電泳動効果により移動するための閾値が、理論的に見積もられていて、分子量が数万KDa、分子サイズが数nmの一般的な球状蛋白質分子の場合、交流電場の周波数は約1MHz、電界強度は電極間距離が数μmで数十ボルトである。
このような誘電泳動効果を生体高分子に利用した例については、上記文献に記載があるが、いずれも生体高分子や微粒子の捕獲（分子トラッピング）を目的とするものであって、結晶化に適用した例はない。
【００１８】
また、生体高分子の結晶化を目的として直流電場を利用する方法には、特許文献２及び非特許文献８がある。更に直流電場の印加により電気泳動効果を利用して結晶化を行う従来技術には特許文献３がある。
【特許文献２】G. D. Craig, R. Glass, and B. Rupp, "System and method for forming synthetic protein crystals to determine the conformational structure by crystallography", United States Patents, Patent Number: 5,597,457, Date of Patent: Jan. 28, 1997
【非特許文献８】M. Taleb, et al., "Crystallization of proteins under an external electric field", J. Crystal Growth, 200 (1999) 575-582
【特許文献３】G. D. Craig, B. Rupp, "Electrorheological crystallization of proteins and other molecules", United State Patents, Patent Number: 5,525,198, Date of Patent: Jun. 11, 1996
【００１９】
これらの方法は、いずれも直流電場を溶液に印加して、極性を有する蛋白質分子を正負いずれかの電極側に引き寄せ集合させることで、結晶化を行おうとするものであり、直流電場を印加する点が本発明の方法と根本的に異なる。
本発明の誘電泳動効果を利用した結晶化方法においては、表面が絶縁処理された電極間に位置する基板間隙に、蛋白質溶液を保持した後、所定周波数の交流電場を印加することで、蛋白質分子に誘起される誘起双極子を、対向電極のいずれかの極性を有する側に捕獲・凝集することで結晶核の形成を促進させる点に特徴がある。そして、基板の間隙に結晶成長を起こさせるので、大型の単結晶にまで成長しても、傷つけることなく安全に取り外すことができ、高精度の構造解析に使用できる。
【００２０】
図２は、本発明による結晶化装置の正面断面説明図である。
図示の結晶化装置は蒸気拡散法を利用するものであり、沈殿剤（１２）を保持するリザーバー（２４）、基板（２６）において蛋白質溶液（１１）を保持するための蛋白質溶液用セル（１５）、表面が絶縁処理された一対の電極（３１）（３２）、電極（３１）（３２）を支持するために設けられたガイド穴（２７）とを備える。
【００２１】
結晶化装置の本体は、絶縁性のものであればどのような素材でも構成できるが、安価で加工性に優れる樹脂製の素材が利用しやすい。
電極（３１）（３２）は表面が絶縁処理されるが、この処理は溶液内において蛋白質分子に誘電泳動を効果的に誘起するために必要となる。そのためには、電極（３１）（３２）は導電性を有する素材を用いなければならないが、各種金属、導電性高分子等が適宜利用できる。
電極（３１）（３２）の表面を絶縁処理するには、表面に耐水性の樹脂を数〜数十μm程度の厚みになるよう塗布・乾燥する方法が簡便である。金属表面を陽極酸化することで絶縁化する方法も利用できる。
【００２２】
一対の電極（３１）（３２）間の間隔は、マイクロマニュピレーター等によって調整される。ガイド穴（２７）には、溶液の流出を防止するために、ガスケットやゲルが充填される。
電極（３１）（３２）間の間隔は、例えば、通常のサイズ（数nm程度）の水溶性蛋白質を結晶化する場合ならば、数〜数十μmとなるように調整するのが好ましい。これ以上の電極間隔では、誘電泳動効果を誘起させるのが困難となる。
【００２３】
結晶化を行う際には、リザーバー（２４）に沈殿剤（１２）を分注した後、目的とする蛋白質を含む水溶液（１１）と沈殿剤（１２）とを、蛋白質溶液用セル（１５）内にそれぞれ所定量分注して混合する。その後、装置上面等の開口部にシールテープ等を貼着することで密閉する。
【００２４】
図３（ａ）（ｂ）は、表面集積化型の結晶化チップを示す平面説明図及び正面断面説明図である。
基板（２６）の上には、対向した一対の電極（３１）（３２）が、両先端部間に一定の間隔をおいて配置され、更にその上部に絶縁膜（３３）が形成されている。そして、電極（３１）（３２）の間では、基板（２６）の一部が貫通して、貫通孔（２８）を有する開口部（２９）を形成している。なお、貫通孔（２８）としては、装置を設置した際に孔が略鉛直方向に配向される形態が、結晶を浮遊させる点で好ましい。
【００２５】
図４は、上記の結晶化チップを用いた結晶化装置の要部を示す正面断面説明図である。
蛋白質の結晶化に当たっては、前述のように結晶化プレート（２１）内に蛋白質溶液（１１）及び沈殿剤（１２）をセットした後、交流電源に接続された端子（３４）（３５）を介して電極（３１）（３２）に通電を行なう。
【００２６】
図５（ａ）は、本発明による結晶化の様子を示す正面断面説明図である。
基板（２６）の貫通孔（２８）では、蛋白質溶液（１１）が表面張力により保持されるため、誘電泳動効果により形成された蛋白質の結晶核は、溶液中に浮遊しながら成長し単結晶となる。
図５（ｂ）は、参考の別形態による結晶化の様子を示す正面断面説明図である。この図のように貫通孔がないと、誘電泳動効果により形成された結晶核は、主として基板（２６）の表面に吸着した状態で成長するので、結晶を取り外し難くなってしまう。
【００２７】
図３に示した結晶化チップでは、表面の対向電極（３１）（３２）、絶縁膜（３３）、及び貫通孔（２８）が、半導体微細加工技術を用いることにより作製されている。そのため、電極（３１）（３２）間のギャップの大きさや絶縁膜（３３）の膜厚を所望の値に高精度で制御することができる。このような結晶化チップの製造方法を図６に示す。なお、本方法は後述の結晶化チップの製造にも利用できるものである。
【００２８】
図６に示す製造方法において、基板（２６）は絶縁性で、化学的に安定であり、かつ加工性に優れる素材であれば任意のものが利用できる。多用される素材としては、ガラス、セラミックス、絶縁性の樹脂フィルム（ポリイミドフィルム）等が挙げられる。基板（２６）の厚みは、通常は数μm〜数十mm、より望ましくは数十μm〜数mm程度である。
表面に形成される電極（３１）（３２）は、主として蒸着またはスパッタリングにより金属薄膜として形成し、更に半導体微細加工技術であるフォトリソグラフィー等により高精度で加工する。表面の対向電極はTi（３６）やAu（３７） 等の金属薄膜を積層して形成する。これらの膜厚は、基板（２６）との密着性や電気伝導性等を考慮して決定されるが、通常は数百Å〜数十μm、より望ましくは数千Å程度である。形成された金属薄膜は化学エッチングやドライエッチングにより所望の形状に加工される。
【００２９】
その後、電極（３１）（３２）の表面には、絶縁膜（３３）が主としてスピンコート法により塗布される。この絶縁膜（３３）の膜厚は、通常は数千Å〜数百μm、より望ましくは数μm程度である。この絶縁膜（３３）の材料としては、ホトレジスト等の感光性樹脂、或いは感光性ポリイミド樹脂等の絶縁性と耐食性に優れる有機系樹脂が好適である。また、このような感光性樹脂を用いることにより、電極（３１）（３２）表面に外部接続端子取付用の電極パッド部（３８）を開口させて形成することが容易になる。
【００３０】
最後に、基板（２６）及び絶縁膜（３３）に、貫通孔（２８）を形成させる。  基板（２６）が、ガラスやセラミックスの場合には、ダイヤモンド・ブラストエッチング法やイオンミリング法、樹脂フィルムの場合にはドライエッチング法を用いる。
【００３１】
図７は、図３に示した結晶化チップの別実施例であり、図７（ａ）（ｂ）は、表面集積化型の結晶化チップを示す平面説明図及び正面断面説明図である。
本実施例では、表面の電極が２対、すなわち４個の電極（３１）（３２）（３１’）（３２’）が設けられている。それぞれ対向する電極（３１）と電極（３１’）、電極（３２）と電極（３２’）とが、同電位となるように外部の端子によって電気的に接続されている。このような電極構成によると、誘電泳動効果が電極（３１）と電極（３２）との間、電極（３１）と電極（３２’）との間、電極（３１’）と電極（３２）との間、電極（３１’）と電極（３２’）との間の４個所で誘起されることになり、結晶核の形成が高頻度で行われることになる。
また、各電極（３１）（３２）（３１’）（３２’）間には貫通孔（２８）を有する開口部（２９）が設けられているため、結晶核はその開口部（２９）に浮遊して成長するので、成長した結晶を取り出すことが容易である。
【００３２】
図８も、結晶化チップの別実施例であり、図８（ａ）（ｂ）は、表面集積化型の結晶化チップを示す平面説明図及び正面断面説明図である。
本実施例では、対向する一対の電極（３１）（３１’）が基板（２６）の表面にされると共に、対向する一対の電極（３２）（３２’）が基板（２６）の裏面に形成されている。このように基板（２６）の両面に電極（３１）（３２）（３１’）（３２’）を配置すると、基板（２６）の表裏間に電場が印加されることになるので、開口部（２９）に満たされている溶液全体にわたって誘電泳動効果を効率よく誘起することができる。
【００３３】
図９は、結晶化装置の使用形態を示した平面説明図である。
通常、本発明の結晶化装置を単一で使用するのであれば図４に示した方法に基づき結晶化を行うが、一度に多数の結晶化条件を試みる場合や、複数の蛋白質の結晶化を同時に行う場合には、図９に示す方法が有効である。
図３に示したような多数の結晶化チップが、配線（３９）によって電気的に接続されている。各チップの一方の電極（３１）が一方の交流電場印加用端子（３４）に接続され、各チップの他方の電極（３２）が他方の交流電場印加用端子（３５）に接続されている。これにより、電極（３４）（３５）間に電圧を印加することで、全ての結晶化装置で同時に結晶化を行うことが可能となる。
【実施例】
【００３４】
図６に示した製造方法に従い、図３に示した結晶化チップを作製した。基板（２６）には、厚みが50μmで４インチ角サイズのポリイミドフィルムを用いた。スパッタリング装置を用いて、Ti（３６）とAu（３７）の積層薄膜をそれぞれ1000Åと1μm形成した。そして、化学エッチングにより金属電極をエッチング除去し、図３に示したような形状の対向電極（３１）（３２）を形成した。その電極間距離は５μmであった。
【００３５】
その後、基板（２６）の上部表面に絶縁膜（３３）としてネガ型の感光性レジストをスピンコート法により塗布し乾燥させた。乾燥後の膜厚は3000Åであった。更に、基板（２６）のそりを解消させるために、基板（２６）の裏面側にも同様のネガ型の感光性レジストを同一膜厚で塗布し乾燥させた。
最後にドライエッチング法により、電極（３１）（３２）間及びその周囲に貫通孔（２８）を開けて、開口部（２９）を形成した。
【００３６】
結晶化のために、以下の蛋白質溶液を準備した。蛋白質濃度は最終の過飽和度が変わるように、それぞれ低濃度から高濃度まで蛋白質ごとに変えて結晶化を行った。また、各蛋白質について既知の結晶化条件（沈殿剤濃度）を用いて結晶成長の様子を観察した。なお、比較実験としてシッティングドロップ蒸気拡散法により同様の条件で結晶化を行った。本発明の結晶化装置を使用する場合には、交流印加周波数は1MHzとし、印加電圧を0,10,30Vと変えて結晶化を行った。
リザーバー中の沈殿剤は1mL、蛋白質と沈殿剤はそれぞれ1μLを分注・混合した。結晶の観察は、結晶化後３日経過した後に行った。
【００３７】
結晶化実験における各条件と結果を、図１０〜１２の表に示す。
図１０におけるサンプルは、ニワトリ卵白由来リゾチーム（分子量：14KDa）であり、標準的な結晶化条件は0.1M 酢酸Na pH4.6, 1.5M NaClであり、蛋白質濃度は50mg/mL (0.1M 酢酸Na pH4.6 で溶解)とした。
図１１におけるサンプルは、ブタ膵臓由来エラスターゼ（分子量：26KDa）分子量：14KDa）であり、標準的な結晶化条件は0.1M 酢酸Na pH4.6, 2M NaClであり、蛋白質濃度は30mg/mL (0.1M 酢酸Na pH4.6 で溶解)とした。
図１２におけるサンプルは、ウシ肝臓由来カタラーゼ（分子量:240KDa）であり、標準的な結晶化条件は0.1M Tris-HCl pH7.5, 10% PEG6,000, 5% MPDであり、蛋白質濃度は25mg/mL (0.1M リン酸Na pH8.0で溶解)とした。
【００３８】
これらの結果から、通常の蒸気拡散法において蛋白質濃度が低く低過飽和度下の条件でも適切な電圧の交流電場の印加により、結晶が成長することが判明した。これは誘電泳動の効果により、通常は結晶核の形成が起こらない低過飽和度下でも結晶核の生成が誘起され、更にそれが成長して単結晶にまで成長していったことを示唆している。
【産業上の利用可能性】
【００３９】
本発明によると、結晶化が従来は困難であった低過飽和度の条件下でも、良好な単結晶を得ることが可能となった。これにより、大量の蛋白質等の生体高分子を迅速に結晶化して構造解析を行う場合や、高精度の構造解析に使用できる良質な単結晶を作製する場合などに有効であり、用途が広く産業上非常に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】従来の生体高分子の単結晶作製法を示す正面断面説明図
【図２】結晶化装置の正面断面説明図
【図３】結晶化チップの平面説明図及び正面断面説明図
【図４】結晶化装置要部の正面断面説明図
【図５】結晶化の様子を示す正面断面説明図
【図６】結晶化チップの製造方法を示す正面断面説明図
【図７】結晶化チップの別実施例の平面説明図及び正面断面説明図
【図８】結晶化チップの別実施例の平面説明図及び正面断面説明図
【図９】結晶化装置の使用形態を示す平面説明図
【図１０】ニワトリ卵白由来リゾチームの結晶化条件と結果を示す表
【図１１】ブタ膵臓由来エラスターゼの結晶化条件と結果を示す表
【図１２】ウシ肝臓由来カタラーゼの結晶化条件と結果を示す表
【符号の説明】
【００４１】
１１  蛋白質溶液
１２  沈殿剤
１３  蛋白質溶液と沈殿剤の混合液
１４  オイル
１５  蛋白質溶液用セル
２１  結晶化プレート
２２  ガラス
２３  支持台部
２４  リザーバー
２５  ウエル
２６  基板
２７  ガイド穴
２８  貫通孔
２９  開口部
３１、３２、３１’、３２’  電極
３３  絶縁膜
３４、３５  電極端子
３６  Ti
３７  Au
３８  電極パッド部
３９  配線
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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