(57)【要約】【課題】  蛍光物質の存在のみならず、その絶対的な量の検出を可能として、細胞等の活性度等を高い分解能で定量化する。【解決手段】  体腔内に挿入される挿入部３の先端に、生体組織Ａに対して光を照射する投光部１１と、生体組織Ａからの戻り光を受光する受光部１２とを有し、該受光部１２において受光された戻り光を画像化する内視鏡観察装置１であって、挿入部３の先端に着脱可能に取り付けられ、生体組織Ａに接触させられることで、生体組織Ａに対して挿入部３先端を位置決めする位置決め部材１７を備え、該位置決め部材１７に、挿入部３に沿って形成されたチャネル１６内に挿入され、挿入部３先端の開口から出没させられる処置具を通過可能な開口１８が設けられている内視鏡観察装置１を提供する。【選択図】    図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
体腔内に挿入される挿入部の先端に、生体組織に対して光を照射する投光部と、生体組織からの戻り光を受光する受光部とを有し、該受光部において受光された戻り光を画像化する内視鏡観察装置であって、
前記挿入部の先端に着脱可能に取り付けられ、生体組織に接触させられることで、生体組織に対して挿入部先端を位置決めする位置決め部材を備え、
該位置決め部材に、前記挿入部に沿って形成されたチャネル内に挿入され、挿入部先端の開口から出没させられる処置具を通過可能な開口が設けられている内視鏡観察装置。
【請求項２】
前記位置決め部材の先端に、生体組織に接触する突起部を備える請求項１に記載の内視鏡観察装置。
【請求項３】
体腔内に挿入される挿入部の先端に、生体組織に対して光を照射する投光部と、生体組織からの戻り光を受光する受光部とを有し、該受光部において受光された戻り光を画像化する内視鏡観察装置であって、
前記挿入部に沿って形成されたチャネル内に挿入され、挿入部先端の開口から出没させられる位置決め部材と、
該位置決め部材の前記挿入部先端からの突出量を調節する位置調節機構とを備える内視鏡観察装置。
【請求項４】
前記受光部において受光された戻り光を画像化した画像を表示する画像表示部を備え、
該画像表示部に、前記位置決め部材の先端が表示されるとともに、該位置決め部材の先端の前記突出量を表示する突出量表示手段を備える請求項３に記載の内視鏡観察装置。
【請求項５】
体腔内に挿入される挿入部の先端に、生体組織に対して光を照射する投光部と、生体組織からの戻り光を受光する受光部とを有し、該受光部において受光された戻り光を画像化する内視鏡観察装置であって、
前記挿入部の先端を生体組織に対して位置決めする位置決め部材を備え、
前記投光部が、生体に対して励起光を照射し、
前記受光部において受光された蛍光の蛍光強度に基づいて蛍光物質の濃度を算出する変換手段と、該変換手段により算出された蛍光物質の濃度分布画像を表示する濃度画像表示部とを備える内視鏡観察装置。
【請求項６】
前記濃度画像表示部が、蛍光物質の濃度分布画像とともに濃度インデックスを表示する請求項５に記載の内視鏡観察装置。
【請求項７】
前記濃度インデックスが、蛍光物質の濃度分布画像上の明るさまたは色と、蛍光物質の濃度値との関係を示す請求項６に記載の内視鏡観察装置。
【請求項８】
前記濃度インデックスが、蛍光物質の濃度分布画像上の明るさまたは色と、生体組織に供給した薬剤濃度との関係を示す請求項６に記載の内視鏡観察装置。
【請求項９】
前記濃度インデックスが、蛍光物質の濃度分布画像上の明るさまたは色と、生体組織内における酵素の活性度との関係を示す請求項６に記載の内視鏡観察装置。
【請求項１０】
前記変換手段が、蛍光物質の濃度と蛍光量との関係を示す変換関数を備える請求項５から請求項９のいずれかに記載の内視鏡観察装置。
【請求項１１】
前記変換手段が、既知の濃度の蛍光物質を含有する基準ファントムについて取得した蛍光強度に基づいて前記変換関数を較正する較正手段を備える請求項１０に記載の内視鏡観察装置。
【請求項１２】
既知の濃度の蛍光物質を含有する基準ファントムにおける蛍光物質の濃度値を入力可能な入力手段を備え、
前記変換関数が、複数の基準ファントムについて取得した複数の蛍光強度と、前記入力手段により入力された各基準ファントムにおける蛍光物質の濃度値とに基づいて構成される請求項１０に記載の内視鏡観察装置。
【請求項１３】
前記基準ファントムに備えられ該基準ファントムに含有される蛍光物質の濃度値に関連づけられた識別符号を読み取る読み取り手段と、読み取られた識別符号に基づいて蛍光物質の濃度値を検索するデータベースとを備える請求項１２に記載の内視鏡観察装置。
【請求項１４】
前記変換手段が、蛍光の強度との励起光の強度との比と、蛍光物質の濃度との関係を示す変換関数を備え、蛍光の強度との励起光の強度との比に基づいて蛍光物質の濃度を算出する請求項５から請求項９のいずれかに記載の内視鏡観察装置。
【請求項１５】
体腔内に挿入した挿入部の先端を生体組織に対して所定の距離に配置し、
前記挿入部の先端から励起光を照射して、生体組織において発生した蛍光を受光し、
受光された蛍光の強度に基づいて、所定の変換関数により蛍光物質の濃度分布を算出し、
算出された蛍光物質の濃度分布画像を濃度インデックスとともに表示する内視鏡観察方法。
【請求項１６】
前記所定の変換関数が、既知の濃度の蛍光物質を含有する複数の基準ファントムについて取得した複数の蛍光強度に基づいて構成されている請求項１２に記載の内視鏡観察方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、内視鏡観察装置および内視鏡観察方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、生体組織に励起光を照射して発生した蛍光を観察する蛍光内視鏡装置として、例えば、特許文献１に示される構造のものがある。
この蛍光内視鏡装置は、生体に対して励起光を照射して、生体からの自家蛍光や生体に注入した薬剤からの蛍光を２次元画像として検出するものであり、その蛍光像から生体組織の変性や癌等の疾患状態を診断することを可能にしている。
【０００３】
また、体腔内に挿入される挿入部の先端には、該先端を被覆する先端面を有する透明カバーや、透明バルーンが備えられている。そして、これら透明カバーの先端面や膨張させた透明バルーンの外面を被検部位に密着させることで、凹凸の激しい腸などの被検部位を平坦化して励起光を均一に照射し、生体組織から発生する蛍光を均一に受光することを可能にしている。
【０００４】
また、近年、単に励起光を照射されただけでは蛍光をほとんど発しないが、生体内に注入され、生体内において分泌されている酵素により分解されることにより、励起光により蛍光を発するようになる蛍光薬剤が開発されている（例えば、特許文献２参照。）。例えば、酵素の１つであるカテプシンは癌細胞において多く分泌される酵素である。したがって、この蛍光薬剤を生体内に注入して励起光を照射することで、数個レベルの微細な癌細胞の存在を検出することができる。また、癌細胞の存在の検出のみならず、カテプシンの分泌量、すなわち、癌細胞の活性度を、高い分解能で検出することができるという利点がある。
【０００５】
【特許文献１】特開平７−２２２７１２号公報（第２頁等）
【特許文献２】米国特許第６５９２８４７号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、癌細胞の活性度を精度よく検出するためには、単に上記蛍光薬剤を使用しただけでは足りず、生体組織から発生している蛍光量の絶対値を精度よく求めることが必要である。挿入部の先端に配置されている受光部に受光される蛍光量は、光源から発せられる励起光の強度の変動、挿入部の先端と生体組織との距離の変動、挿入部に配置される光学系や光検出器の個体差によって変動するため、これらの変動や個体差によらず蛍光量の絶対値を求める工夫が必要である。
【０００７】
また、得られた蛍光量の絶対値は、必ずしも、酵素の分泌量や細胞の活性度を表すものとは限られないので、単に、検出した蛍光を画像化しただけでは、酵素の分泌量等を直接的に把握することができず、不便である。
【０００８】
さらに、特許文献１に示される蛍光内視鏡装置では、透明カバーにより挿入部の先端と生体組織との距離が一定に保たれるものの、凹凸の激しい生体組織を平坦にするための先端面を必須構成として備えている。このため、該先端面により挿入部の先端が覆われてしまい、内視鏡装置に通常備えられている鉗子チャネルを利用した処置を観察と同時に行うことができないという不都合がある。
また、伸縮可能な透明バルーンでは、挿入部の先端と生体組織との距離を一定に保つことができないという問題がある。
【０００９】
本発明は上述した事情に鑑みてなされたものであって、蛍光物質の存在のみならず、その絶対的な量の検出を可能として、細胞等の活性度等を高い分解能で定量化することができる内視鏡観察装置および内視鏡観察方法を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記目的を達成するために、本発明は、以下の手段を提供する。
本発明は、体腔内に挿入される挿入部の先端に、生体組織に対して光を照射する投光部と、生体組織からの戻り光を受光する受光部とを有し、該受光部において受光された戻り光を画像化する内視鏡観察装置であって、前記挿入部の先端に着脱可能に取り付けられ、生体組織に接触させられることで、生体組織に対して挿入部先端を位置決めする位置決め部材を備え、該位置決め部材に、前記挿入部に沿って形成されたチャネル内に挿入され、挿入部先端の開口から出没させられる処置具を通過可能な開口が設けられている内視鏡観察装置を提供する。
【００１１】
本発明によれば、体腔内に挿入部を挿入し、その先端を生体組織の被観察部位に近接させると、挿入部の先端に取り付けられた位置決め部材が生体組織に接触して、挿入部の先端が生体組織に対して所定の距離だけ離れた位置に位置決めされる。この状態で投光部から光を照射して生体組織からの戻り光を受光することにより、生体組織に対して一定の強度の光を照射し、また、生体組織からの戻り光を一定の条件下で受光することが可能となる。したがって、受光部において受光される戻り光の強度と蛍光薬剤の濃度あるいは生体組織の活性度の情報との関係を予め設定しておくことにより、受光された戻り光の強度に基づいて、蛍光薬剤の濃度や生体組織の活性度を高い分解能で定量化することが可能となる。また、この場合において、位置決め部材に開口が設けられているので、挿入部に沿って形成されているチャネルを介した処置具が、開口を通して生体組織まで到達でき、観察と同時に処置具を用いた種々の処置を行うことが可能となる。
【００１２】
上記発明においては、前記位置決め部材の先端に、生体組織に接触する突起部を備えることとしてもよい。
このようにすることで、生体組織に凹凸があっても突起部を生体組織に接触させることで、挿入部の先端と生体組織との距離を一定の距離に安定して維持することができる。
【００１３】
また、本発明は、体腔内に挿入される挿入部の先端に、生体組織に対して光を照射する投光部と、生体組織からの戻り光を受光する受光部とを有し、該受光部において受光された戻り光を画像化する内視鏡観察装置であって、前記挿入部に沿って形成されたチャネル内に挿入され、挿入部先端の開口から出没させられる位置決め部材と、該位置決め部材の前記挿入部先端からの突出量を調節する位置調節機構とを備える内視鏡観察装置を提供する。
【００１４】
本発明によれば、体腔内に挿入部を挿入し、その先端を生体組織の被観察部位に近接させると、挿入部に沿って形成されたチャネルの挿入部先端の開口から突出させられている位置決め部材が生体組織に接触して、挿入部の先端が生体組織に対して所定の距離だけ離れた位置に位置決めされる。この状態で投光部から光を照射することにより、上記と同様に、生体組織に対して一定の強度の光を照射し、また、生体組織からの戻り光を一定の条件下で受光することが可能となる。
また、本発明によれば、位置調節機構を作動させることにより位置決め部材の挿入部先端からの突出量を調節できる。したがって、被観察部位や使用する蛍光薬剤等に合わせて、最適な位置に挿入部の先端位置を配置することができる。
【００１５】
上記発明においては、前記受光部において受光された戻り光を画像化した画像を表示する画像表示部を備え、該画像表示部に、前記位置決め部材の先端が表示されるとともに、該位置決め部材の先端の前記突出量を表示する突出量表示手段を備えることとしてもよい。戻り光を画像化した画像内において位置決め部材の先端を表示するのと同時に、突出量表示手段により、先端の突出量を画像表示部に表示することで、画像表示部の表示を見ながら、挿入部の先端位置を生体組織に対して容易に位置決めすることができる。
【００１６】
また、本発明は、体腔内に挿入される挿入部の先端に、生体組織に対して光を照射する投光部と、生体組織からの戻り光を受光する受光部とを有し、該受光部において受光された戻り光を画像化する内視鏡観察装置であって、前記挿入部の先端を生体組織に対して位置決めする位置決め部材を備え、前記投光部が、生体に対して励起光を照射し、前記受光部において受光された蛍光の蛍光強度に基づいて蛍光物質の濃度を算出する変換手段と、該変換手段により算出された蛍光物質の濃度分布画像を表示する濃度画像表示部とを備える内視鏡観察装置を提供する。
【００１７】
本発明によれば、挿入部を体腔内に挿入して、位置決め部材により挿入部の先端を生体組織に対して位置決めした状態で、投光部から励起光を照射すると、生体において発生された蛍光が受光部に受光される。挿入部の先端が生体組織に対して位置決めされているので、相対的な距離の変動による蛍光量の変動が防止される。そして、変換手段の作動により、受光された蛍光の蛍光強度に基づいて蛍光物質の濃度を算出することにより、生体組織内における蛍光物質の濃度を定量化することができ、濃度画像表示部の作動により、定量化された蛍光物質の濃度分布画像が表示されることになる。
【００１８】
上記発明においては、前記濃度画像表示部が、蛍光物質の濃度分布画像とともに濃度インデックスを表示することが好ましい。蛍光物質の濃度分布を画像として表示する場合、等高線や明るさ、濃淡、色の変化により表示することが考えられるが、濃度インデックスを同時に表示することにより、観察者が濃度分布の変化のみならず、その濃度分布画像の各位置における濃度値を定量的に把握することが可能となる。
【００１９】
上記発明においては、前記濃度インデックスが、蛍光物質の濃度分布画像上の明るさまたは色と、蛍光物質の濃度値との関係を示すこととしてもよい。また、前記濃度インデックスが、蛍光物質の濃度分布画像上の明るさまたは色と、生体組織に供給した薬剤濃度との関係を示すこととしてもよい。また、前記濃度インデックスが、蛍光物質の濃度分布画像上の明るさまたは色と、生体組織内における酵素の活性度との関係を示すこととしてもよい。これらの濃度インデックスを切り替えて使用することにしてもよい。
濃度インデックスとして観察に適したものを採用することにより、蛍光物質の濃度分布画像を用いたまま、所望の物理量の分布を把握することが可能となる。
【００２０】
また、上記発明においては、前記変換手段が、蛍光物質の濃度と蛍光量との関係を示す変換関数を備えることとしてもよい。
変換関数によれば、蛍光量を測定するだけで、蛍光物質の濃度を簡易かつ精度よく算出することができる。
【００２１】
また、上記発明においては、前記変換手段が、既知の濃度の蛍光物質を含有する基準ファントムについて取得した蛍光強度に基づいて前記変換関数を較正する較正手段を備えることとしてもよい。
基準ファントムに対して挿入部の先端を位置決めした状態で蛍光量を検出し、較正手段の作動により変換関数を較正することによって、内視鏡観察装置の個体差あるいは経時変化によらず、蛍光物質の濃度を精度よく定量化することができる。
【００２２】
また、上記発明においては、既知の濃度の蛍光物質を含有する基準ファントムにおける蛍光物質の濃度値を入力可能な入力手段を備え、前記変換関数が、複数の基準ファントムについて取得した複数の蛍光強度と、前記入力手段により入力された各基準ファントムにおける蛍光物質の濃度値とに基づいて構成されることとしてもよい。
複数の基準ファントムについて取得した蛍光強度と、各基準ファントムにおける蛍光物質の濃度値とに基づくことにより、内視鏡観察装置ごとに、最適な変換関数を構成でき、蛍光物質の濃度をより精度よく定量化することが可能となる。
【００２３】
また、上記発明においては、前記基準ファントムに備えられ該基準ファントムに含有される蛍光物質の濃度値に関連づけられた識別符号を読み取る読み取り手段と、読み取られた識別符号に基づいて蛍光物質の濃度値を検索するデータベースとを備えることとしてもよい。
読み取り手段の作動により基準ファントムに備えられた識別符号を読み取り、データベースを検索することで、蛍光物質の濃度値と受光部に受光された蛍光量とを自動的に対応づけることができ、簡易に、かつ、誤りなく変換関数を構成することができる。
【００２４】
また、上記発明においては、前記変換手段が、蛍光の強度との励起光の強度との比と、蛍光物質の濃度との関係を示す変換関数を備え、蛍光の強度との励起光の強度との比に基づいて蛍光物質の濃度を算出することが好ましい。
受光部に受光される蛍光の強度は、投光部から照射される励起光の強度によっても変動するため、蛍光の強度と励起光の強度との比を蛍光物質の濃度と関連づけた変換関数を用いることにより、励起光の強度が変動しても、蛍光物質の濃度を精度よく算出することができる。
【００２５】
本発明は、体腔内に挿入した挿入部の先端を生体組織に対して所定の距離に配置し、前記挿入部の先端から励起光を照射して、生体組織において発生した蛍光を受光し、受光された蛍光の強度に基づいて、所定の変換関数により蛍光物質の濃度分布を算出し、算出された蛍光物質の濃度分布画像を濃度インデックスとともに表示する内視鏡観察方法を提供する。
【００２６】
本発明によれば、挿入部の先端を生体組織に対して所定の距離に配置するので、距離の変動による蛍光の強度の変動が防止される。また、蛍光の強度分布をそのまま表示するのではなく、変換関数により蛍光物質の濃度分布に変換して表示するので、観察者は蛍光物質の濃度分布を視覚的に把握することができる。この場合に、濃度インデックスとともに濃度分布画像を表示することで、観察者は、蛍光物質の濃度分布を定量的にも把握することができる。
【００２７】
上記発明においては、前記所定の変換関数が、既知の濃度の蛍光物質を含有する複数の基準ファントムについて取得した複数の蛍光強度に基づいて構成されていることが好ましい。
基準ファントムによれば、内視鏡観察装置の個体差や経時変化に依存することなく、精度よく濃度分布を定量化可能な変換関数を構成できる。
【発明の効果】
【００２８】
本発明によれば、内視鏡観察装置の挿入部の先端と生体組織における被測定部位との相対距離の変動を防止し、生体組織からの戻り光を精度よく定量化することができるという効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２９】
本発明の第１の実施形態に係る内視鏡観察装置について、図１〜図４を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る内視鏡観察装置１は、光源部２と、該光源部２に接続され、体腔内に挿入される細長い挿入部３と、受光された戻り光に基づいて所定の画像処理を行う画像処理部４と、画像処理部４において生成された画像を表示する画像表示部５とを備えている。
【００３０】
光源部２は、例えば、図１に示されるように、キセノンランプ、ハロゲンランプ等の広帯域の光を発する光源６と、図１および図２に示されるように、該光源６からの光を透過させることにより、励起光および赤色光、緑色光、青色光を順次出射させる複数のフィルタ７を備えるフィルタターレット８と、該フィルタターレット８を回転させるモータ９とを備えている。
【００３１】
前記挿入部３は、前記光源部２からの光を先端部まで導くライトガイド１０（あるいは光ファイバ束）と、先端部に配置され、ライトガイド１０内を伝播されてきた光を拡散させて、対向配置された生体組織Ａに照射する拡散レンズ１１と、生体組織Ａからの戻り光を集光する対物レンズ１２と、励起光を遮断するバリアフィルタ１３と、集光された戻り光を撮像する、例えば、荷電結合素子（ＣＣＤ）からなる撮像素子１４と、該撮像素子１４からの画像信号を前記画像処理部４に入力するケーブル１５とを備えている。
【００３２】
また、挿入部３には、その長さ方向の途中位置から挿入された鉗子等の処置具を先端部まで案内する鉗子チャネル１６が備えられている。鉗子チャネル１６は先端部に開口し、案内されてきた処置具を先端部から突出させて、生体組織Ａに対して、切断、除去等の所定の処置を施すことができるようになっている。
【００３３】
また、挿入部３の先端には、図１に示されるように、位置決め部材１７が着脱可能に取り付けられるようになっている。位置決め部材１７は、挿入部３の先端に嵌合される略円筒状に形成されている。位置決め部材１７の内部には、長さ方向に貫通する開口部１８と、挿入部３の外面に嵌合する嵌合面１９と挿入部３の先端を突き当てる段部２０とが備えられている。位置決め部材１７は、挿入部３の先端に取り付けられたときに、嵌合面１９を挿入部３の外面に嵌合させ、段部２０を挿入部３の先端に突き当てることにより、その先端位置が挿入部３の先端に対して所定の位置に配置されるように構成されている。
【００３４】
前記画像処理部４は、光源部２からの赤色光、緑色光および青色光の出射時に、撮像素子１４から送られてきた戻り光の強度信号に対しては、各戻り光の強度信号に、該戻り光に対応するフィルターターレット８の各フィルタ７の色彩を合成したＲ画像、Ｇ画像、およびＢ画像をそれぞれ生成するとともに、それらの画像を合成したカラー画像を生成して画像表示部５に出力するようになっている。また、光源部２からの励起光の出射時に撮像素子１４から送られてきた蛍光の強度信号に対しては、所定の処理を施して画像表示部５に出力するようになっている。
画像表示部５は、画像処理部４から送られてきたカラー画像および蛍光画像を切り替えて、あるいは、画面分割して同時に表示することができるようになっている。
【００３５】
このように構成された本実施形態に係る内視鏡観察装置１によれば、位置決め部材１７を先端に取り付けた挿入部３を体腔内に挿入し、位置決め部材１７の先端を生体組織Ａの被観察部位に接触させると、挿入部３の先端が、被観察部位に対して、位置決め部材１７によって設定された所定の距離だけ離れた位置に位置決め配置される。そして、この状態で光源部２を作動させ、フィルターターレット８のフィルタ７を透過させることにより、励起光および赤色光、緑色光、青色光が順次出射される。出射された光は、ライトガイド１０を介して挿入部３の先端まで導かれ、挿入部３の先端の拡散レンズ１１によって拡散されて生体組織Ａに照射される。
【００３６】
そして、生体組織Ａからの戻り光、例えば、励起光を照射された生体組織Ａから発せられる蛍光や、可視光を照射された生体組織Ａ表面における反射光が、対物レンズ１２によって集光され、バリアフィルタ１３によって反射して戻る励起光が遮断されて撮像素子１４により検出されることになる。この場合において、本実施形態に係る内視鏡観察装置１によれば、生体組織Ａに向けて励起光が発せられる挿入部３の先端が位置決め部材１７によって、生体組織Ａに対して所定の距離に位置決めされているので、光源部２からの励起光の強度を一定に保っておきさえすれば、一定の強度の励起光を生体組織Ａに照射することができる。したがって、撮像素子１４により検出される蛍光強度の大小によって、生体組織Ａ内における蛍光物質の濃度の大小、あるいは、酵素の活性度の大小を把握することができる。
【００３７】
また、位置決め部材１７には、長さ方向に貫通する開口部１８が設けられているので、鉗子チャネル１６を通して導かれてきた種々の処置具を挿入部３の先端から突出させ、位置決め部材１７の開口部１８を通過させて生体組織Ａに対し種々の処置を施すことができる。
また、位置決め部材１７は、挿入部３の先端に着脱可能に取り付けられているので、挿入部３先端と生体組織Ａとの位置決め距離を変更したい場合には、長さの異なるものに簡易に交換することで対応することができる。
【００３８】
なお、本実施形態に係る内視鏡観察装置１においては、位置決め部材１７を略円筒状の部材により構成したが、これに代えて、図３および図４に示されるように、挿入部３の先端外面に嵌合するリング状の嵌合部１７ａと、該嵌合部１７ａの先端面から前方に向けて突出する周方向に間隔をあけた複数本、例えば、３本のピン１７ｂとからなる位置決め部材１７′を採用してもよい。挿入部３の先端と生体組織Ａとの位置決め距離に応じてピン１７ｂの長さを設定しておくことにより、ピン１７ｂの先端を生体組織Ａに突き当てることで、挿入部３の先端位置を生体組織Ａに対して所定の距離に配置することができるようになっている。
【００３９】
このように構成することで、生体組織Ａに対して位置決め部材１７′を接触させると、位置決め部材１７′は複数本のピン１７ｂの先端のみにおいて生体組織Ａに接触する。したがって、例えば、生体組織Ａの表面が平坦な場合のみならず、表面に凹凸がある場合においても、これを避けるようにして必要最小限の接触箇所において接触し、生体組織Ａに対して挿入部３の先端を安定的に所定の距離に保持することができるという利点がある。
【００４０】
また、挿入部３の先端部までライトガイド１０により光を導く場合について説明したが、これに限定されるものではなく、挿入部３の先端にＬＥＤ等の光源を配置することにより投光部を構成してもよい。
また、挿入部３の先端にＣＣＤカメラのような撮像素子１４を配置したが、これに限定されるものでなく、撮像素子１４は挿入部３の外部に配置し、光ファイバ束等を用いて挿入部３の先端から撮像素子１４まで光を伝播させることにしてもよい。
【００４１】
次に、本発明の第２の実施形態に係る内視鏡観察装置２１について、図５および図６を参照して以下に説明する。
なお、本実施形態の説明において、上述した第１の実施形態に係る内視鏡観察装置１と構成を共通とする箇所に同一符号を付して説明を簡略化する。
【００４２】
本実施形態に係る内視鏡観察装置２１は、第１の実施形態に係る内視鏡観察装置１において、挿入部３の先端に着脱可能に取り付けられた位置決め部材１７に代えて、図５に示されるように、鉗子チャネル１６を通して挿入された位置決め部材２２を挿入部３の先端から所定量だけ突出させる点において、第１の実施形態に係る内視鏡観察装置１と相違している。
【００４３】
位置決め部材２２は、鉗子チャネル１６に沿って挿入されるワイヤ状の部材であって、挿入部３の変形に伴って任意の形態に変形され、かつ、鉗子チャネル１６に沿って移動可能に設けられている。挿入部３の後端側に配置された鉗子チャネル１６の入口部１６ａには、図５に示されるように、位置決め部材２２を鉗子チャネル１６に沿って移動させ、かつ、所望の位置において固定する移動機構２３が備えられている。
【００４４】
移動機構２３は、例えば、図５に示される例では、鉗子チャネル１６の入口部１６ａに固定され、鉗子チャネル１６の延長方向に沿って延びるガイド部２４と、ガイド部２４に移動可能に支持され、前記位置決め部材２２を固定したスライダ部２５と、該スライダ部２５に設けられたダイヤル式のノブ２６と、該ノブ２６の回転力をガイド部２４に沿う直線駆動力に変換する、例えば、ラックギア２７とピニオンギア２８のような公知の直動機構とを備えている。これにより、ノブ２６を回転させると、スライダ部２５がガイド部２４に沿って直線移動させられる結果、スライダ部２５に固定された位置決め部材２２が鉗子チャネル１６に沿ってスライダ部２５の移動量だけ移動させられるようになっている。また、ノブ２６の回転を停止すると、位置決め部材２２はその位置に固定され、すなわち、位置決め部材２２の先端が挿入部３の先端から所定量だけ突出された状態に維持されるようになっている。
【００４５】
また、位置決め部材２２の先端は、対物レンズ１２の視野範囲内に突出させられるようになっている。したがって、画像表示部５には、図６に示されるように、挿入部３の鉗子チャネル１６の先端開口から突出させられた位置決め部材２２の先端部が表示されるようになっている。また、画像表示部５には、位置決め部材２２の先端の突出量を示す目盛２９が描かれている。これにより、オペレータは、画像表示部５を見ながら、移動機構２３のノブ２６を操作して、画像表示部５上において位置決め部材２２の先端が、目盛２９の所定の位置に一致するまで、位置決め部材２２を移動させることにより、挿入部３の先端に対して位置決め部材２２の先端を所望の突出量だけ突出させることができるようになっている。
【００４６】
このようにして位置決め部材２２の突出量を所望の値に調節した状態で、位置決め部材２２の先端を生体組織Ａに接触させることにより、挿入部３の先端を生体組織Ａに対して所望の距離に固定して、一定の励起光を生体組織Ａに照射し、生体組織Ａにおける蛍光物質の濃度や酵素の活性度を定量化することができる。
【００４７】
次に、本発明の第３の実施形態に係る内視鏡観察装置３０について図７を参照して以下に説明する。
なお、本実施形態の説明において、上述した第１の実施形態に係る内視鏡観察装置１と構成を共通とする箇所に同一符号を付して説明を簡略化する。
【００４８】
本実施形態に係る内視鏡観察装置３０は、第１の実施形態の係る内視鏡観察装置１とは画像処理部３１において相違している。
本実施形態において画像処理部３１には、図７に示されるように、挿入部３の先端に配置された撮像素子１４と、キャリブレーション状態か否かを選択する外部スイッチ３２と、キャリブレーション時に挿入部３の先端に対向配置される基準ファントム３３における蛍光物質の濃度を入力する、例えば、キーボードのような濃度入力部３４とが接続されている。基準ファントム３３は、既知の濃度の蛍光物質、例えば、生体組織Ａ内に注入するのと同様の蛍光薬剤を所定の基材に均一に分布させたものである。
【００４９】
また、画像処理部３１は、撮像素子１４から送られてくる蛍光画像を処理する蛍光画像処理部３５と、濃度インデックス発生部３６とを備えている。
蛍光画像処理部３５は、前記外部スイッチ３２からのＯＮ信号によってＯＮ状態に切り替えられる切替スイッチ３７と、撮像素子１４から入力された蛍光画像の強度信号を生体組織Ａ内の蛍光物質の濃度信号に変換する変換関数ｋを有する濃度算出部３８と、該変換関数ｋを算出する変換関数算出部３９と、求められた変換関数ｋを記憶する変換関数記憶部４０とを備え、変換関数記憶部４０に記憶されている変換関数ｋにより、濃度算出部３８の変換関数ｋを置き換えるように構成されている。
【００５０】
前記変換関数算出部３９は、実際の内視鏡観察装置３０を用いて基準ファントム３３を撮像した際に得られる蛍光強度ＦＦと、濃度入力部３４から入力された基準ファントム３３の蛍光物質濃度ＤＦとが、図１４に示されるような比例関係を有するものとして、それらの比を計算することにより変換関数ｋを算出するようになっている。
【００５１】
また、濃度インデックス発生部３６は、画像表示部５に表示される蛍光物質の濃度の分布画像における輝度と、蛍光物質濃度の数値とを対応づけるスケール状の濃度インデックス４１を発生するようになっている。濃度インデックス発生部３６において発生された濃度インデックス４１は、画像表示部５の一部に蛍光物質の濃度分布画像Ｇとともに表示させるために、画像表示部５に供給されるようになっている。
【００５２】
このように構成された本実施形態に係る内視鏡観察装置３０の作用について、以下に説明する。
撮像素子１４により撮像された蛍光強度を蛍光物質の濃度に変換する変換関数ｋとしては、初期的には、標準的な変換関数ｋを変換関数記憶部４０に記憶しておく。通常観察時には、図８に示されるように、外部スイッチ３２がＯＦＦ状態となっており、切替スイッチ３７もＯＦＦ状態となっている。
【００５３】
内視鏡観察装置３０の挿入部３の先端には位置決め部材１７が取り付けられており、挿入部３の先端位置が、生体組織Ａの被観察部位に対して所定の距離に位置決めされているので、挿入部３の先端位置の変動が防止され、距離の変動による蛍光強度の変動が防止されている。挿入部３先端に配置されている撮像素子１４により取得された蛍光画像は画像処理部３１における蛍光画像処理部３５に入力され、濃度算出部３８において変換係数ｋをかけられることにより、生体組織Ａ内における蛍光物質の濃度分布画像Ｇとして画像表示部５に供給される。また、濃度インデックス発生部３６からは、濃度インデックス４１が画像表示部５に供給される。
【００５４】
そして、供給された濃度分布画像Ｇと濃度インデックス４１とが画像表示部５に同時に表示される。これにより、オペレータは、生体組織Ａ内の蛍光物質の濃度分布を一目で確認することができるとともに、濃度インデックス４１と見比べることにより、各部位の濃度の絶対値を容易に把握することができる。
【００５５】
この場合において、本実施形態に係る内視鏡観察装置３０によれば、変換関数ｋとして、測定に先立って基準ファントム３３を用いて行ったキャリブレーションにより較正された新たな変換関数ｋが用いられるので、内視鏡観察装置３０の光学系等の個体差や経年変化による変動が防止され、濃度分布を精度よく表示することができる。また、濃度インデックス４１とともに表示することにより、各部における蛍光物質の濃度の絶対値を正確に把握することができる。
【００５６】
なお、本実施形態に係る内視鏡観察装置３０においては、蛍光物質の濃度分布を画像表示部５に表示することとしたが、これに代えて、生体組織Ａ内の蛍光物質として、特定の酵素の活性度に応じて発生する蛍光量を変化させる蛍光薬剤を使用することにより、同様の画像によって酵素の活性度の分布を表示することとしてもよい。この場合には、変換関数ｋとして、蛍光強度を活性度に変換する変換関数ｋを用い、濃度インデックス４１として、活性度の大小を示すインデックスを発生させることにすればよい。このようにすることで、特定の酵素を産生する細胞、例えば、癌細胞の活性度の分布を精度よく把握することができ、しかも、その定量化を図ることができる。
【００５７】
また、上記実施形態においては、蛍光物質の濃度と得られる蛍光強度とが、図１４に示されるような比例関係にあるものとして、単一の濃度の基準ファントム３３によりキャリブレーションを行う場合について説明したが、これに代えて、例えば、図１５に示されるように、蛍光物質の濃度と得られる蛍光強度とが比例関係にない場合には、図９および図１０に示されるように画像処理部４２を構成してもよい。
【００５８】
画像処理部４２は、撮像素子１４により取得された蛍光画像を処理する蛍光画像処理部４３と、濃度インデックス発生部３６とを備えている。
蛍光画像処理部４３は、図１１あるいは図１２に示されるように、異なる濃度の均一な濃度分布を有する複数のファントム部３３ａ，３３ｂ（，３３ｃ，３３ｄ）を有する基準ファントム３３′，３３″用意し、図９に示されるように、キャリブレーションＯＮ状態においては、変換関数算出部４４において、各ファントム部３３ａ，３３ｂ（，３３ｃ，３３ｄ）について得られた蛍光強度ＦＮと、該基準ファントムの蛍光物質濃度ＤＮとの関係をプロットしていくことで、近似的な変換関数Ｄ＝ｆ（Ｆ）を求めるようになっている。
【００５９】
このようにすることで、蛍光強度Ｆと濃度値Ｄとが比例関係にない場合においても、図１０に示されるように、変換関数算出部４４において近似され、変換関数記憶部４０に記憶された新たな変換関数ｆ（Ｆ）を用いて、撮像素子１４により得られた蛍光強度ＦＡを蛍光物質の濃度値ＤＡに精度よく変換した濃度分布画像Ｇを得ることができる。
【００６０】
また、上記実施形態においては、キーボードのような濃度入力部３４により、オペレータが基準ファントム３３，３３′，３３″の蛍光物質の濃度値を手入力することとしたが、これに代えて、図１１および図１２に示されているように、各基準ファントム３３′，３３″に識別情報４５を付与しておき、その識別情報４５に示される識別番号を手入力し、あるいは、所定の読み取り装置（図示略）によって読み取り可能な識別情報４５を読み取ることにより入力することとしてもよい。
この場合、画像処理部３１，４２に、各基準ファントム３３，３３′，３３″の識別情報４５と濃度値ＤＦ，ＤＮ等を関連づけて記憶するデータベース（図示略）を備えておき、読み取った識別情報４５に基づいて濃度値ＤＦ，ＤＮ等を検索することとすればよい。データベースに含める情報としては、蛍光薬剤の種類、蛍光薬剤の濃度値ＤＦ，ＤＮ、蛍光波長、基材の種類および濃度、蛍光波長での散乱係数および吸収係数等が挙げられる。
【００６１】
また、基準ファントム３３，３３′，３３″としては、均一な濃度分布の蛍光物質を含有するものの他、蛍光物質を全く含有しない基材のみの基準ファントム３３，３３′，３３″を用意してもよい。このような基準ファントム３３，３３′，３３″を用いることで、基準ファントム３３，３３′，３３″の表面における反射光を較正することが可能となる。
【００６２】
また、上記実施形態においては、挿入部３の先端に実際の位置決め部材１７を取り付けて、該位置決め部材１７を基準ファントム３３，３３′，３３″の平坦な面に密着させることで、実際の測定時と同様の距離に基準ファントム３３，３３′，３３″と挿入部３の先端とを配置した状態でキャリブレーションを行うこととしたが、これに代えて、図１３に示されるように、基準ファントム４６自体に、挿入部３の先端位置を位置決めする段部４７を設けておくこととしてもよい。
このようにすることで、位置決め部材１７を使用せずに、挿入部３の先端位置を基準ファントム３３ａ，３３ｂに位置決めし、キャリブレーションを行うことができる。これによれば、予め滅菌してある位置決め部材１７をディスポーザブルに使用する場合に、キャリブレーションのためだけに使用した位置決め部材１７を交換する無駄をなくすことができる。
【００６３】
また、図１６および図１７に示されるように、光源６の強度信号Ｓを画像処理部４８の蛍光画像処理部４９に入力し、光源６の強度信号Ｓに応じて、蛍光物質の濃度値Ｄを補正することにしてもよい。すなわち、光源６の強度信号Ｓが変動すると、光源部２から発せられる励起光の強度Ｅｘも、Ｅｘ＝ｇ（Ｓ）の関係により変動するため、励起光強度算出部５０により算出した励起光強度Ｅｘによって、生体組織Ａ内の蛍光物質の濃度値ＤＡを除して（符号５１）、規格化濃度値ＤＡ＊を算出し、画像表示部５に表示することが好ましい。このようにすることで、光源６の強度信号Ｓの変動による濃度値Ｄの変動を未然に防止することができ、蛍光物質の濃度分布あるいは酵素の活性度等をより精度よく定量化することができるので、より効果的である。
【００６４】
また、蛍光画像処理部４９においては、蛍光物質の濃度値の大小を画像の各部の輝度値に対応づけて、画像表示部５における明るさが大きいほど蛍光物質の濃度が高いように表示することとしてもよく、蛍光物質の濃度にそれぞれ色彩を対応づけておくことにより、色分けによって濃度分布画像Ｇを表示することとしてもよい。
【００６５】
ところで、脳外科を始めとする外科手術の現場においては、通常照明として無影灯が設けられ、該無影灯から発せられた可視光による照明の下で、病変部を拡大観察する手術用顕微鏡が備えられている。手術用顕微鏡にはＣＣＤカメラが設けられており、無影灯から照射され病変部において反射した反射光をＣＣＤカメラにより撮像することができるようになっている。一方、病変部の蛍光観察を行うために、蛍光観察用の照明として励起光光源が設けられ、病変部において発生した近赤外の蛍光を撮像するために近赤外カメラが設けられている。
【００６６】
しかしながら、病変部から発生する近赤外の蛍光を観察する場合には、次のような問題点が考えられる。
すなわち、励起光光源から発せられた励起光に対し、病変部において発生する蛍光は極めて微弱であり、鮮明な蛍光画像を得るためには、周囲のノイズをできるだけ除去する必要があるが、病変部において発生している蛍光と同等の波長を有する若干の近赤外光が無影灯からも発せられているため、病変部からの蛍光とともに無影灯からの周囲光が近赤外カメラに撮像されてしまう不都合がある。
【００６７】
この不都合を解消するために、蛍光観察時に、無影灯を消灯して周囲光をなくした状態で観察を行うことにより鮮明な蛍光画像を得ることはできるが、その場合には、手術の途中で蛍光画像により病変部を特定する度に無影灯を消灯し、病変部の特定後に手術を続行するためには無影灯を点灯しなければならないという煩わしさがある。
また、病変部の蛍光画像と病変部の反射光画像とを同時に観察できないので、蛍光画像により特定した病変部の反射光画像における特定が困難であるという不都合もある。
【００６８】
また、励起光光源から発せられる励起光は、蛍光の波長に近接した赤色あるいは近赤外光となるが、赤色光の場合には、ＣＣＤカメラにより撮像される反射光画像が、全体的に赤色となって、その観察が困難となるという不都合がある。
そこで、これらの問題点を解決するために、以下の付記項に記載された近赤外蛍光観察装置を提供する。
【００６９】
［付記］
１．  被観察部位を照明する術野照明手段と、
術野照明手段により照射された照明光の被観察部位における反射光を観察する術野観察手段と、
励起光を発生する励起光光源と、
励起光を照射された被観察部位において発生する近赤外域の蛍光を少なくとも１つの検出波長帯域において検出する蛍光撮像手段とを備え、
前記術野照明手段に、該術野照明手段から発せられる前記蛍光撮像手段の検出波長帯域の近赤外光を遮断する近赤外光カットフィルタが備えられている近赤外蛍光観察装置。
この近赤外蛍光観察装置によれば、術野照明手段から発せられた近赤外光が近赤外光カットフィルタにより遮断されて蛍光撮像手段に到達することがないので、術野照明手段を点灯したままの状態で蛍光観察を行うことが可能となる。
【００７０】
２．  前記術野観察手段に、光バランスの補正手段が設けられている付記項１に記載の近赤外蛍光観察装置。
補正手段を作動させて光バランスを図ることにより、励起光光源からの励起光が赤色の場合においても反射光画像を鮮明化させることができる。
【００７１】
３．  前記補正手段が、励起光を減弱させて通過させる励起光減弱手段である付記項２に記載の近赤外蛍光観察装置。
４．  前記補正手段が、前記励起光光源に連動して作動させられる付記項２または付記項３に記載の近赤外蛍光観察装置。
励起光減弱手段の作動により、術野観察手段に入射される励起光が低減されるので、励起光光源が点灯した場合においても鮮明な反射光画像を得ることができる。
【００７２】
５．  被観察部位を拡大観察する手術用顕微鏡を備え、前記術野観察手段が手術用顕微鏡に設けられている付記項１から付記項４のいずれかに記載の近赤外蛍光観察装置。
６．  前記術野照明手段が、前記手術用顕微鏡に設けられている付記項５に記載の近赤外蛍光観察装置。
７．  前記術野照明手段が手術用無影灯である付記項１に記載の近赤外蛍光観察装置。
８．  前記術野観察手段の光軸と前記蛍光観察手段の光軸とが一致させられている付記項１から付記項７のいずれかに記載の近赤外蛍光観察装置。
【００７３】
上記付記項に記載された近赤外蛍光観察装置の実施形態を図１８から図２０に示す。
図１８に示された近赤外蛍光観察装置１００は、手術室に備えられる無影灯（術野照明手段）１０１と、手術用顕微鏡１０２と、手術用顕微鏡１０２に備えられたＣＣＤカメラ（術野観察手段）１０３と、励起光を発生する励起光光源１０４と、被観察部位Ａから戻る蛍光を撮像する近赤外カメラ１０５とを備えている。図中符号１０６は手術用顕微鏡を移動自在に支持するアーム、符号１０７はカラーバランスを含む画像処理部、符号１０８は画像表示部である。
【００７４】
また、本実施形態においては、無影灯１０１の光照射部全体を覆う近赤外カットフィルタ１０９が設けられ、近赤外カメラ１０５の前面には励起光カットフィルタ１１０が設けられている。また、ＣＣＤカメラ１０３の前面には、励起光光源１０４の動作状態に応じて抜き差しされる励起光減弱フィルタ１１１が配置されている。また、前記画像処理部のカラーバランスは、励起光光源１０４から励起光が出射されるのに連動して、有効に切替られるようになっている。図中符号１１２は近赤外カットフィルタである。
【００７５】
このように構成された本実施形態に係る近赤外蛍光観察装置１００によれば、無影灯１０１から発せられる近赤外光が、近赤外カットフィルタ１０９によりカットされるので、励起光光源１０４を作動させて近赤外カメラ１０５により蛍光観察を行う際に、無影灯１０１を点灯させておいても、近赤外カメラ１０５に撮像される蛍光に無影灯１０１からの近赤外光が混じることが防止され、鮮明な蛍光画像を得ることができる。また、ＣＣＤカメラ１０３による反射光の観察を行いながら蛍光観察を行うことができ、病変部の正確に特定することができる。また、その際に、無影灯１０１の消灯および点灯を繰り返す必要がないという利点がある。
【００７６】
さらに、本実施形態に係る近赤外蛍光観察装置１００によれば、励起光光源が励起光を出射しているときに連動して、ＣＣＤカメラ１０３の前面に励起光減弱フィルタ１１１が挿入され、また、カラーバランスが有効となるので、励起光光源が赤色の光を出射している場合においても、画像表示部１０８に表示される被観察部位Ａにおける反射光の画像に含まれる励起光の影響を低減して画像を鮮明化することができるという利点がある。
【００７７】
図１９および図２０に示す近赤外蛍光観察装置１２０は、図１８において手術用顕微鏡１０２の外部に配置されていた近赤外カメラ１０５を手術用顕微鏡１０２内に収容して、ＣＣＤカメラ１０３と一致する光軸上に配置し、また、通常光源１２１と励起光光源１０４とを励起光反射ミラー１２２によって一致する光軸上に配置したものである。両光源１０４，１２１の光軸もハーフミラー１２３によって手術用顕微鏡１０２の光軸に一致させられている。図中符号１２４は、励起光のオンオフによって切り替えられる励起光減弱フィルタである。励起光減弱フィルタ１２３は、例えば、図２０に示すように、円板の半分に配置され、他の半分は励起光を減弱させないフィルタ１２４である。符号１２５は、励起光減弱フィルタを回転させるモータ、符号１２６は励起光カットフィルタ、符号１２７はダイクロイックミラーである。
ＣＣＤカメラ１０３と近赤外カメラ１０５との光軸を一致させることで、同一方向から被観察部位Ａを観察することができる。したがって、被観察部位Ａにおける病変部等の注目部位の特定を精度よく行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【００７８】
【図１】本発明の一実施形態に係る内視鏡観察装置を示す全体構成図である。
【図２】図１の内視鏡観察装置の光源部に配置されるフィルタターレットを示す図である。
【図３】図１の内視鏡観察装置の位置決め部材の変形例を示す拡大断面図である。
【図４】図３の位置決め部材を一部を破断して示す斜視図である。
【図５】本発明の第２の実施形態に係る内視鏡観察装置を示す全体構成図である。
【図６】図５の内視鏡観察装置の画像表示部に設けられた目盛を説明する図である。
【図７】本発明の第３の実施形態に係る内視鏡観察装置の画像処理部におけるキャリブレーション動作を説明する模式図である。
【図８】図７のキャリブレーションにより較正された変換関数を用いた内視鏡観察方法を説明するための模式図である。
【図９】図７の変形例によるキャリブレーション動作を説明する模式図である。
【図１０】図９のキャリブレーションにより較正された変換関数を用いた内視鏡観察方法を説明するための模式図である。
【図１１】図７の内視鏡観察装置とともに用いられるキャリブレーション用の基準ファントムの一例を示す斜視図である。
【図１２】図１１の基準ファントムの変形例を示す斜視図である。
【図１３】図１１の基準ファントムの他の変形例を示す縦断面図である。
【図１４】線形的な変換関数を示すグラフである。
【図１５】非線形的な変換関数の例を示すグラフである。
【図１６】図７の内視鏡観察装置の画像処理部の変形例によるキャリブレーション動作を説明する模式図である。
【図１７】図１６のキャリブレーションにより構成された変換関数を用いた内視鏡観察方法を説明するための模式図である。
【図１８】近赤外蛍光観察装置の一実施形態を説明する模式図である。
【図１９】手術用顕微鏡に光源およびカメラを一体に搭載した近赤外蛍光観察装置を示す模式図である。
【図２０】図１９に使用されるフィルタの一例を示す図である。
【符号の説明】
【００７９】
１  内視鏡観察装置
３  挿入部
５  画像表示部（濃度画像表示部）
１１  拡散レンズ（投光部）
１２  対物レンズ（受光部）
１６  鉗子チャネル（チャネル）
１７，２２  位置決め部材
１７ｂ  ピン（突起部）
１８  開口部（開口）
２３  移動機構（位置調節機構）
２９  目盛（突出量表示手段）
３８  濃度算出手段（変換手段）  
３３，３３′，３３″  基準ファントム
３４  濃度入力部（入力手段）
３９  変換関数算出部（較正手段）
４１  濃度インデックス
５４  識別符号
Ａ  生体組織
ＤＦ  濃度値
ＦＦ  蛍光強度
Ｇ  濃度分布画像
ｋ  変換関数
【図１】
2006043002.tif 000003
【図２】
2006043002.tif 000004
【図３】
2006043002.tif 000005
【図４】
2006043002.tif 000006
【図５】
2006043002.tif 000007
【図６】
2006043002.tif 000008
【図７】
2006043002.tif 000009
【図８】
2006043002.tif 000010
【図９】
2006043002.tif 000011
【図１０】
2006043002.tif 000012
【図１１】
2006043002.tif 000013
【図１２】
2006043002.tif 000014
【図１３】
2006043002.tif 000015
【図１４】
2006043002.tif 000016
【図１５】
2006043002.tif 000017
【図１６】
2006043002.tif 000018
【図１７】
2006043002.tif 000019
【図１８】
2006043002.tif 000020
【図１９】
2006043002.tif 000021
【図２０】
2006043002.tif 000022