(57)【要約】【課題】  抗原の量を連続的に測定するための抗原量測定センサ及び抗原量測定方法を提供する。【解決手段】  抗原量測定センサ２０は、抗体２３を固定化したトランスデューサ２２と、このトランスデューサ２２を浸漬する不揮発性有機媒体を入れた容器２１と、ポンプ２５とを備える。そして、ポンプ２５を用いて、容器２１内の不揮発性有機媒体中に空気を吸入してバブリングすることにより、空気とともに抗原２６を容器２１内の不揮発性有機媒体２７中に取り込むとともに、不揮発性有機媒体２７中の水分量を維持する。そして、不揮発性有機媒体２７中に取り込まれた抗原２６と抗体２３との抗原抗体反応を利用して、トランスデューサ２２により抗原量を測定する。【選択図】      図１
2006090808.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体を固定化したトランスデューサと、
前記トランスデューサを浸漬する不揮発性有機媒体を入れた容器と、
前記容器内の不揮発性有機媒体中の水分量を所定値以上に維持するための水分維持手段とを備え、
測定対象気体から前記不揮発性有機媒体中に取り込まれた抗原と前記抗体との抗原抗体反応を利用して、前記トランスデューサを用いて抗原量を測定する抗原量測定センサ。
【請求項２】
前記不揮発性有機媒体は、多価アルコール類であることを特徴とする請求項１に記載の抗原量測定センサ。
【請求項３】
前記不揮発性有機媒体は、イオン性液体であることを特徴とする請求項１に記載の抗原量測定センサ。
【請求項４】
前記水分維持手段は、前記容器内の不揮発性有機媒体中に空気を導入して気泡を生成するポンプであることを特徴とする請求項１〜３に記載の抗原量測定センサ。
【請求項５】
前記トランスデューサは、水晶振動子マイクロバランス法、表面プラズモン共鳴法、表面弾性波法、カンチレバー法のいずれか１つによるものであることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１つに記載の抗原量測定センサ。
【請求項６】
前記不揮発性有機媒体中の水分量を測定する水分量測定センサと、
前記測定された水分量に基づいて、前記トランスデューサにより測定された抗原量を補正する補正部と
を備えたことを特徴とする請求項１〜５のいずれか１つに記載の抗原量測定センサ。
【請求項７】
抗体を固定化したトランスデューサと、前記トランスデューサを浸漬する不揮発性有機媒体を入れた容器とを用いて、
水分維持手段によって容器中の不揮発性有機媒体に所定値以上の水分量を維持するとともに、
測定対象気体から前記不揮発性有機媒体中に取り込まれた抗原と前記抗体との抗原抗体反応を利用して、前記トランスデューサを用いて抗原量を測定する抗原量測定方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗原抗体反応を利用して抗原量を測定する抗原量測定センサ及び抗原量測定方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来より、免疫反応を利用したアレルゲンや菌等の測定が行われている。この免疫反応を利用したアレルゲンや菌等の測定は、通常、緩衝液中で行われる場合や、密閉系内で行われる場合が多い。
【０００３】
一方、免疫反応に有機溶媒を利用した従来技術が数件報告されている（例えば、特許文献１参照。）。この特許文献１の記載の技術では、有機溶媒は揮発性のアルコール類やケトン類等で、水との混合溶媒（混合比１０〜５０％程度）の形で使用されており、水難溶性の農薬や環境ホルモン物質等の溶解を主な目的としている。
【０００４】
また、有機溶媒あるいは有機溶媒と水との混合溶媒を用いることで免疫反応を増感させる技術も報告されている（例えば、特許文献２参照。）。しかし、これも揮発性の有機溶媒を利用したものである。
【０００５】
一方、不揮発性の有機溶媒を免疫反応に利用した技術も開示されている（例えば、特許文献３参照。）。この特許文献３の発明は、不揮発性の二価アルコール類を利用して免疫反応を抑制することで、高濃度の検体を原液のまま測定することを目的としている。
【特許文献１】特開平９−１５４５９６号公報
【特許文献２】特開平８−３１３５２６号公報
【特許文献３】特開平９−３１８６３２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかし、従来の緩衝液を用いる方法は、液の蒸発が無視できる程度の短時間でのバッチ処理による測定を想定したもので、溶媒の交換の必要等が生じ、抗原量の測定を連続的に行うことはできない。また、密閉系内では、空気中の抗原量の測定を行うことはできない。また、免疫反応を利用したアレルゲンや菌等の測定において免疫反応に用いられる有機溶媒の多くは揮発性があり、水難溶性の物質を溶解することを主な目的としている。上記特許文献３の発明は、不揮発性の有機溶媒を利用しており、高濃度の検体を測定することができるが、免疫反応を連続的に行うことは想定されていない。
【０００７】
以上のように、免疫反応を連続的に行う為の技術は報告されていない。特に、イオン性液体を用いた免疫反応に関してはこれまで報告されていない。
本発明は、上記課題を解決するためになされたものであり、その目的は、抗原の量を連続的に測定するための抗原量測定センサ及び抗原量測定方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の抗原量測定センサは、抗体を固定化したトランスデューサと、前記トランスデューサを浸漬する不揮発性有機媒体を入れた容器と、前記容器内の不揮発性有機媒体中の水分量を所定値以上に維持するための水分維持手段とを備え、測定対象気体から前記不揮発性有機媒体中に取り込まれた抗原と前記抗体との抗原抗体反応を利用して、前記トランスデューサを用いて抗原量を測定することを特徴とする。これによれば、容器内の不揮発性有機媒体中の水分量を所定値以上に維持できる。そして、その不揮発性有機媒体に浸漬
させた抗体を固定化したトランスデューサを用いて、測定対象気体から不揮発性有機媒体中に取り込まれた抗原と、上記抗体との抗原抗体反応を利用して抗原量を測定できる。また、抗原抗体反応による特異的な反応を利用するため、測定対象の抗原の量を、選択的に測定できる。
【０００９】
この抗原量測定センサにおいて、前記不揮発性有機媒体は、多価アルコール類とすることができる。
この抗原量測定センサにおいて、前記不揮発性有機媒体は、イオン性液体とすることができる。
【００１０】
この抗原量測定センサにおいて、前記水分維持手段を、前記容器内の不揮発性有機媒体中に空気を導入して気泡を生成するポンプとすることで、前記容器内の不揮発性有機媒体中に空気を導入して気泡を生成することにより、不揮発性有機媒体中の水分を維持することができる。
【００１１】
この抗原量測定センサにおいて、前記トランスデューサは、水晶振動子マイクロバランス法、表面プラズモン共鳴法、表面弾性波法、カンチレバー法のいずれか１つによるものとすることができる。
【００１２】
この抗原量測定センサにおいて、さらに、不揮発性有機媒体中の水分量を測定する水分量測定センサと、前記測定された水分量に基づいて、前記トランスデューサにより測定された抗原量を補正する補正部とを備える。これによれば、不揮発性有機媒体中の水分量が変化し、これによる抗原量の測定誤差が生じた場合にも、水分量測定センサにより測定された水分量に基づいて、測定された抗原量を補正できる。
【００１３】
本発明の抗原量測定方法は、抗体を固定化したトランスデューサと、前記トランスデューサを浸漬する不揮発性有機媒体を入れた容器とを用いて、水分維持手段によって容器中の不揮発性有機媒体に所定値以上の水分量を維持するとともに、測定対象気体から前記不揮発性有機媒体中に取り込まれた前記抗体との抗原抗体反応を利用して、前記トランスデューサを用いて抗原量を測定することを特徴とする。これによれば、容器中の不揮発性有機媒体中の水分量を所定値以上に維持できる。そして、その不揮発性有機媒体に浸漬させた抗体を固定化したトランスデューサを用いて、測定対象気体から不揮発性有機媒体中に取り込まれた抗原と、上記抗体との抗原抗体反応を利用して抗原量を測定できる。また、抗原抗体反応による特異的な反応を利用するため、測定対象の抗原の量を、選択的に測定できる。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、抗原の量を連続的に測定できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
以下、本発明を具体化した実施形態について図面を参照しながら説明する。
図１に示すように、抗原量測定センサ２０は、容器２１内に不揮発性有機媒体２７を充填し、この不揮発性有機媒体２７中に、トランスデューサ２２が浸漬されている。トランスデューサ２２の表面には、抗体２３が固定されている。そして、このトランスデューサ２２には、信号処理部２４が接続されている。トランスデューサ２２は、抗原抗体反応による質量、密度、応力等の変化を電気信号に変換して信号処理部２４に出力する。信号処理部２４は、この電気信号に基づいて、測定された抗原量を表示し、記録する。
【００１６】
抗原量測定センサ２０には、ポンプ２５が備えられている。このポンプ２５は、容器２１内の不揮発性有機媒体２７中に、外部の空気を、バブリングを行いながら注入する。こ
れにより、空気中のアレルゲンや菌等の抗原２６が容器２１内の不揮発性有機媒体２７中に拡散される。
【００１７】
容器２１内に充填する不揮発性有機媒体２７としては、多価アルコール類やイオン性液体が挙げられる。ここで用いる不揮発性有機媒体２７としては、抗原測定中の期間における蒸発量が少ない媒体であって、吸湿性が高く、媒体中の水分量を高く維持できるものが好ましい。蒸発量の少ないという点では、例えば、蒸気圧が常温で１Ｐａ以下が望ましい。また、吸湿性が高く、媒体中の水分量を高く維持できるという点では、水との相互溶解度が高いことが望ましい。このような不揮発性有機媒体２７としては、例えば、イオン性液体であるテトラフルオロホウ酸１−エチル−３−メチルイミダゾリウム（1-ethyl-3-methyl imidazolium tetrafluoroborate（ＥＭＩＭ−ＢＦ４））や、二価アルコールであるエチレングリコール等が挙げられる。
【００１８】
この不揮発性有機媒体２７は、予め、所定の水分量を含むようにしておくことが好ましい。具体的には、不揮発性有機媒体２７は、後述するように、４０％（重量％）程度の水分量を含むことが好ましい。このため、不揮発性有機媒体２７は、不揮発性有機媒体と４０％程度のリン酸緩衝液との混合液としておくことが好ましい。
【００１９】
トランスデューサ２２は、電極表面に固定化した抗体２３に抗原２６が反応したことによる、質量、密度、応力等の変化を電気信号に変換する。トランスデューサ２２としては、例えば、水晶振動子マイクロバランス（ＱＣＭ：Quartz Crystal Microbalance ）法、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ：Surface Plasmon Resonance ）法、表面弾性波（ＳＡＷ：Surface Acoustic Wave ）法、カンチレバー法等によるものが挙げられる。なお、トランスデューサ２２は、電極表面に抗体２３を固定化し、この抗体２３に抗原２６が反応したことによる、質量、密度、応力等の変化を電気信号に変換するものであれば、これらに限定されない。
【００２０】
水晶振動子マイクロバランス（ＱＣＭ）法は、電極表面における物質の吸着等による質量変化を、水晶振動子の共振周波数変化として検出する。水晶振動子の電極表面に抗体を固定化しておき、この抗体に抗原が結合すると、質量変化によって、水晶振動子の発振周波数変化が生じる。この発振周波数変化により、媒体中の抗原量を測定することができる。
【００２１】
表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）法は、電極裏面から光を照射し、プラズモン共鳴現象で光の吸収の起こる角度変化から、電極表面状態の変化を検出する。電極表面に抗体を固定化し、照射するビームの角度を変えると表面プラズモンの強度も変わり、共鳴によって最強となる角度を求めることができる。そして、抗原と固定化した抗体が結合すると、界面状態が変化して最強の表面プラズモンが発生する角度も変化する。この変化によって媒体中の抗原量を測定することができる。
【００２２】
表面弾性波（ＳＡＷ）法は、電極表面における物質の吸着等による質量変化を、表面弾性波の周波数変化として検出する。電極表面に抗体を固定化しておき、この抗体に抗原が結合すると、質量変化によって、表面弾性波の周波数変化が生じる。この表面弾性波の周波数変化により、媒体中の抗原量を測定することができる。
【００２３】
カンチレバー法は、一端を固定した微少レバー上への物質の吸着等を、レバーの撓みや応力変化として検出する。カンチレバー上に固定化された抗体に抗原が結合すると、抗体の自己組織膜において相互作用力が生じ、この相互作用力のためカンチレバーの片面には表面応力が発生し、カンチレバーに撓みが生じる。この撓み量を検出することにより、抗体に結合した抗原分子を定量化でき、媒体中の抗原量を測定できる。
【００２４】
このトランスデューサ２２の電極上に多数の抗体２３を固定化しておくことで、反応した抗原２６の量を連続的に測定できる。
抗体２３は、測定対象の抗原２６と、抗原抗体反応をする抗体であればよい。抗原２６としては、例えば、ダニや花粉等のアレルゲンや菌類等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２５】
ポンプ２５は、抗原量測定センサ２０内の不揮発性有機媒体２７中に、外部から取り込んだ空気を、バブリングを行いながら注入する。これにより、空気中の抗原２６が、不揮発性有機媒体２７中に取り込まれる。また、バブリングを行いながら外部の空気を注入することにより、空気中の水分が、不揮発性有機媒体２７中に注入される。これにより、不揮発性有機媒体２７中に、必要な水分量を維持することが可能となる。従って、ポンプ２５は、特許請求の範囲に記載の水分維持手段として機能する。また、バブリングにより、不揮発性有機媒体２７が撹拌される。後述するように、不揮発性有機媒体２７が攪拌されることにより、抗原２６と抗体２３との反応強度が上がるという測定結果が得られている。なお、バブリングを行うためには、不揮発性有機媒体は、より粘度が低いものが好ましい。
【００２６】
以上、本実施形態によれば、以下に示す効果を得ることができる。
・  上記実施形態では、多価アルコール類やイオン性液体等の不揮発性有機媒体中で、抗原抗体反応を利用して抗原量を測定する。蒸発によって媒体が減少してしまうと抗原濃度が上昇してしまうが、蒸発量の少ない不揮発性有機媒体を用いるため、連続して抗原量の測定を行う場合にも、測定誤差が発生することを防止できる。
【００２７】
・  上記実施形態では、抗体２３を固定化したトランスデューサ２２を用いて、ポンプ２５で吸入された空気中の抗原２６の量を測定する。このため、抗原抗体反応による特異的な反応を利用するため、選択的にターゲットの抗原の量を測定できる。また、トランスデューサの電極上に多数の抗体２３を固定化しておくことで、反応した抗原２６の量を連続的に測定できる。
【００２８】
・  上記実施形態では、容器２１内の不揮発性有機媒体２７中の水分量を所定値以上に維持する。このため、抗原抗体反応の反応強度を保つことができる。また、連続して測定を行う場合も、水分量が所定値以上であるため、抗体が失活するのを防止できる。
【００２９】
・  上記実施形態では、測定対象気体である空気をポンプ２５により容器２１内に吸入して、容器２１内の不揮発性有機媒体２７中でバブリングを行う。そして、より低粘性の媒体を用いることでバブリングを容易にする。このため、容器２１内に空気中の抗原２６を取り込めるとともに、バブリングにより、容器２１内の不揮発性有機媒体２７中の水分量を所定値以上に維持できる。これにより、抗原抗体反応の反応強度を保つことができるとともに、連続して測定を行う場合も、抗体の失活を防止できる。また、バブリングにより、容器２１内の不揮発性有機媒体２７を攪拌できる。これにより、トランスデューサ２２に固定された抗体２３と、抗原２６との反応を促進することができる。
【００３０】
以下、本発明を実施するための好適な条件を求めるために行った測定結果を説明する。なお、本発明は、以下に示した条件に限定されない。
＜使用した不揮発性有機媒体及びその物性評価＞
まず、使用した不揮発性有機媒体及びその物性評価を説明する。
【００３１】
（不揮発性有機媒体の揮発性）
不揮発性有機媒体としては、二価アルコールであるエチレングリコール（ＥＧ）、ポリ
エチレングリコール２００（ＰＥＧ２００）、イオン性液体であるテトラフルオロホウ酸１−エチル−３−メチルイミダゾリウム（1-ethyl-3-methyl imidazolium tetrafluoroborate（ＥＭＩＭ−ＢＦ４））、テトラフルオロホウ酸１−ブチル−３−メチルイミダゾリウム（1-butyl-3-methyl imidazolium tetrafluoroborate（ＢＭＩＭ−ＢＦ４））を用いて試験を行った。
【００３２】
図２に、エチレングリコールについての測定結果を示す。図２のグラフにおいて、横軸は経過日数であり、縦軸は揮発量（相対値）である。このエチレングリコール及び他の各媒体とも、約３か月間の放置試験で揮発はほとんど認められなかった。従って、使用した不揮発性有機媒体については、揮発性に関しては、連続して抗原量の測定を行うことが可能であり、本発明において用いることができる。
【００３３】
（不揮発性有機媒体の吸湿性）
上記の各不揮発性有機媒体について、経過日数に従った水分量（重量％）の変化を測定した。なお、室内及びデシケータ内でそれぞれ測定し、それぞれ相対湿度を、あわせて測定した。二価アルコール及びイオン性液体とも、粘性の低いエチレングリコールやＥＭＩＭ−ＢＦ４への溶解量が多かった。図３に、エチレングリコール（ＥＧ）とイオン性液体であるＥＭＩＭ−ＢＦ４についての測定結果を示す。
【００３４】
図３のグラフにおいて、横軸は経過日数であり、縦軸は水分量（重量％）である。また、相対湿度を、あわせて示す。図３に示すように、平均相対湿度２０〜５０％という比較的乾燥した条件下で、ＥＧ中の水分量は７〜１３％、ＥＭＩＭ−ＢＦ４中の水分量は２〜８％であった。
【００３５】
また、各媒体中の水分量は、試験環境の湿度により変動した。つまり、空気中の水蒸気の溶解平衡による媒体中の水分量は、試験環境湿度に依存することがわかった。後述するように、媒体中の水分量は免疫反応効率に影響する。従って、より精度よく抗原量の測定を行うためには、媒体中の水分量を維持するために、測定環境の湿度を維持することが好ましい。更に、媒体中の水分量を一定量以上に維持できればよいため、媒体中の水分量を維持する別の手段を本発明の抗原量測定センサに含めてもよい。
【００３６】
＜不揮発性有機媒体中での免疫反応＞
上記の各不揮発性有機媒体中の、ダニ及び花粉を用いた免疫反応強度をＥＬＩＳＡ法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay ）により測定した。このＥＬＩＳＡ法では、例えば、抗体を固相として抗原を反応させ、洗浄後、固相抗体とは異なる抗体を反応させ、さらに酵素で標識した抗体（ラベル抗体）を反応させて、酵素に対する基質を加えて発色させる（サンドイッチＥＬＩＳＡ法）。従って、固相抗体に反応した抗原量が多いほど、吸光度が高くなる。このように、ＥＬＩＳＡ法を用いて吸光度を測定することで、反応量（反応強度）を測定することができる。
【００３７】
（水分量による反応量）
測定対象の抗原がダニ又は花粉である場合について、媒体中の水分量を変化させた場合の反応量を測定した。ここでは、リン酸緩衝液と、１０％、２５％、４０％の水分量をそれぞれ含むエチレングリコールとを用いた場合について、抗原を固相とし、ラベル抗体の濃度を変えて反応させ、測定を行った。なお、１０％、２５％、４０％の水分量をそれぞれ含むエチレングリコールとしては、エチレングリコール及びリン酸緩衝液の混合液を用いる。測定結果を図４、図５に示す。
【００３８】
図４は、測定対象の抗原がダニである場合の測定結果を示す。図４のグラフにおいて、横軸はラベル抗体の希釈倍率であり、縦軸は吸光度である。リン酸緩衝液（水溶液）を用
いた場合と比較して、エチレングリコールを用いた場合は、いずれの場合も吸光度が低く、すなわち、反応強度が小さくなっていた。そして、その反応強度は、媒体中に含まれる水分量に依存して、ほぼ水分量に比例し、水分量が４０％のエチレングリコールにおいて、より大きい反応強度を得た。
【００３９】
図５は、測定対象の抗原が花粉である場合の測定結果を示す。測定対象の抗原が花粉である場合についても、ダニの場合と、ほぼ同様の結果となった。つまり、リン酸緩衝液（水溶液）を用いた場合と比較して、エチレングリコールを用いた場合は、いずれの場合も吸光度が低く、すなわち、反応強度が小さくなった。そして、その反応強度は媒体中に含まれる水分量に依存して、ほぼ水分量に比例し、水分量が４０％のエチレングリコールにおいて、より大きい反応強度を得た。
【００４０】
従って、本発明において、不揮発性有機溶媒を用いる場合には、４０％程度の水分量が媒体中に含まれることが好ましい。なお、ターゲットとなる抗原の種類については、反応量に関し大きな違いは見られなかった。
【００４１】
（反応液を攪拌した場合の反応量）
反応液（不揮発性有機媒体）を攪拌した場合の反応量を測定し、攪拌しなかった場合の反応量と比較した。リン酸緩衝液（水溶液）、１０％、３０％、４０％の水分量をそれぞれ含むエチレングリコールのそれぞれについて、攪拌を行った場合と、行わなかった場合について、抗原を固相とし、ラベル抗体の濃度を変えて測定を行った。結果を図６に示す。
【００４２】
図６のグラフにおいて、横軸はラベル抗体の希釈倍率であり、縦軸は吸光度である。いずれの場合も、攪拌を行った場合の方が、反応強度が大きかった。
従って、不揮発性有機媒体を用いてより精度よく抗原量の測定を行うためには、反応液の攪拌を行うことが好ましいといえる。本発明の実施形態においては、バブリングを行なうことにより攪拌を行ったが、攪拌のためだけの手段を設けてもよい。例えば、攪拌子とマグネチックスターラーとを用いて、不揮発性有機媒体中に入れた攪拌子により攪拌を行ってもよい。
【００４３】
（反応時間による反応量）
反応時間を１．５時間とした場合、及びオーバーナイトで（一晩）反応させた場合について、リン酸緩衝液（水溶液）、１０％、２５％、４０％の水分量をそれぞれ含むエチレングリコールを用いた場合について、それぞれ測定した。結果を図７に示す。
【００４４】
図７のグラフにおいて、横軸はラベル抗体の希釈倍率であり、縦軸は吸光度である。いずれの場合も、一晩反応させた場合の方が、反応強度が大きかった。
従って、本発明において、不揮発性有機媒体を用いてより精度よく抗原量の測定を行うためには、ある程度長時間（例えば、一晩）反応させることが好ましい。連続して測定を行う場合、この条件を満たすこととなる。
【００４５】
＜不揮発性有機媒体中での抗体活性＞
ＥＬＩＳＡプレートに固定化した抗体をエチレングリコール中で保存し、抗体活性の変化をサンドイッチＥＬＩＳＡ法で調べた。図８に、ダニ抗体の抗体活性（抗体寿命）に関する測定結果を示し、図９に、花粉抗体の抗体活性（抗体寿命）に関する測定結果を示す。ここでは、保存期間なし（０日目）の場合、水分量１０％のエチレングリコールに保存して１日目の場合、水分量２０％のエチレングリコールに保存して３日目の場合、水分量４０％のエチレングリコールに保存して１４日目の場合、リン酸緩衝液（水溶液）に保存して１４日目の場合のそれぞれについての測定結果を示す。
【００４６】
図８及び図９の各グラフにおいて、横軸は抗原濃度（μｇ／ｍｌ）であり、縦軸は吸光度である。ダニ及び花粉抗体とも、エチレングリコール中の水分量が２０％以下の場合は３日程で失活した。エチレングリコール中の水分量が４０％の場合及びリン酸緩衝液の場合は、１４日保存の時点で、活性を保持していた。
【００４７】
そして、エチレングリコール中の水分量が４０％の場合及びリン酸緩衝液の場合は、２〜３週間程度活性を保持した。
従って、本発明において、不揮発性有機媒体中での抗体活性に関する測定結果からも、不揮発性有機溶媒を用いる場合には、４０％程度の水分量が媒体中に含まれることが好ましい。
【００４８】
なお、媒体中の水分量に関しては、抗体の保存後１０日前後から目視で確認できる程度の液（水）の蒸発が起こっていた。このため、媒体中の水分量を一定量以上保持できれば、さらに抗体活性は保持できると考えられる。従って、媒体中の水分を一定量以上保持するための手段を備えれば、より長期間、連続して高精度で抗原量の測定を行うことができる。
【００４９】
＜試験液による測定レンジの違い＞
有機媒体中での抗体の測定濃度レンジと、リン酸緩衝液中での抗体の測定濃度レンジとをそれぞれ調べた。ここでは、リン酸緩衝液、１０％、４０％の水分量をそれぞれ含むエチレングリコールをそれぞれ用いた場合について、サンドイッチＥＬＩＳＡ法で測定を行った。結果を図１０に示す。
【００５０】
図１０のグラフにおいて、横軸は抗原濃度（μｇ／ｍｌ）であり、縦軸は吸光度である。リン酸緩衝液を用いた場合、測定レンジは抗原濃度が１μｇ／ｍｌ未満となるが、水分量４０％のエチレングリコールでは、抗原濃度が１０μｇ／ｍｌでも測定レンジに含まれる。  また、有機媒体中ではリン酸緩衝液中と比べて免疫反応が抑制されるとともに非特異吸着も抑制される。このように、不揮発性有機媒体中では、リン酸緩衝液中と比べて測定レンジが広がる。このため、不揮発性有機媒体中では、ターゲットの抗原や、空気中から取り込まれたその他の物質が、より高濃度となるまで、希釈せずに測定することができる。
【００５１】
従って、長期間、空気中の抗原を取り込むことで、不揮発性有機媒体中のターゲットの抗原の濃度が上がっても、より高濃度となるまで、連続して抗原量の測定を行うことができる。また、非特異吸着も抑制させることで、空気中のターゲットの抗原以外の物質が不揮発性有機媒体中に取り込まれて、不揮発性有機媒体中のターゲットの抗原以外の物質の濃度が上がっても、より高濃度となるまで、連続して抗原量の測定を行うことができる。
【００５２】
以上のように、測定結果をまとめると、不揮発性有機媒体中に、所定の水分量を維持することにより、抗原量の測定を連続して行うことが可能となる。所定の水分量としては、上記の測定結果が示すように、４０％程度の水分量を有することが好ましい。さらに、攪拌を行うことにより、反応強度を上昇させることができる。
【００５３】
上記実施形態においては、ポンプ２５を用いて不揮発性有機媒体２７中に、外部から取り込んだ空気を、バブリングを行いながら注入することにより、抗原２６とともに空気中の水分が不揮発性有機媒体２７中に注入される。従って、上記実施形態においては、ポンプ２５を用いて外部から取り込んだ空気を、バブリングを行いながら注入することにより、水分量が維持される。また、バブリングにより、不揮発性有機媒体２７が撹拌される。
【００５４】
なお、上記実施形態は、次のように変更して具体化することも可能である。
○  上記実施形態では、ポンプ２５を用いて不揮発性有機媒体２７中に、外部から取り込んだ空気を、バブリングを行いながら注入することにより、不揮発性有機媒体中に必要な水分量を維持したが、不揮発性有機媒体中に必要な水分量を維持するための手段は、これに限られるものではない。
【００５５】
例えば、不揮発性有機媒体中に界面活性剤を添加し、不揮発性有機媒体中で水との逆ミセルを形成させることにより、不揮発性有機媒体中により多くの水分を保持させてもよい。この場合、逆ミセルの内側に水分が保持されることにより、不揮発性有機媒体中により多くの水分が保持される。
【００５６】
○  上記実施形態では、トランスデューサ２２により測定された免疫反応量により、抗原量を求めた。トランスデューサ２２により測定された抗原量に対して、不揮発性有機媒体２７中の水分量を用いて補正を行ってもよい。
【００５７】
例えば、抗原量測定センサ２０に、不揮発性有機媒体２７中の水分量の測定を行う水分量測定センサを備える。また、トランスデューサ２２により測定された抗原量を、不揮発性有機媒体２７中の水分量に基づいて補正するための補正部を信号処理部２４に備える。そして、水分量測定センサによって測定された水分量を用いて、信号処理部２４の補正部により、トランスデューサ２２により測定された抗原量を補正する。
【００５８】
これにより、媒体中の水分量の変化により測定誤差が生じる場合にも、測定された水分量により補正した抗原量を提示できる。
【図面の簡単な説明】
【００５９】
【図１】抗原量測定センサの概略図。
【図２】エチレングリコールの揮発性に関する測定結果を示すグラフ。
【図３】不揮発性有機媒体の吸湿性に関する測定結果を示すグラフ。
【図４】ダニについての水分量による反応量に関する測定結果を示すグラフ。
【図５】花粉についての水分量による反応量に関する測定結果を示すグラフ。
【図６】反応液の攪拌による反応量変化に関する測定結果を示すグラフ。
【図７】反応時間による反応量変化に関する測定結果を示すグラフ。
【図８】ダニ抗体寿命に関する測定結果を示すグラフ。
【図９】花粉抗体寿命に関する測定結果を示すグラフ。
【図１０】測定レンジを示すグラフ。
【符号の説明】
【００６０】
２０…抗原量測定センサ、２１…容器、２２…トランスデューサ、２３…抗体、２５…ポンプ、２６…抗原、２７…不揮発性有機媒体。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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