(57)【要約】【課題】  加齢性黄斑変性症を有する哺乳類において黄斑に近接した眼後部へのテノン嚢下投与のための医薬組成物の提供。【解決手段】  本組成物は、式Ｉ、IIおよびIII：  【化１】2006306877.tif 000020の化合物、またはその製薬的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の投与剤形からなる。本発明はさらにこれらの投与剤形を投与することによる、哺乳類の加齢性黄斑変性症の治療のための方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ、IIもしくはIII：
【化１】
2006306877.tif 000018
の化合物、またはその製薬的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を含み、ここで式Ｉ、IIまたはIIIの化合物は約１μg〜約1,500μgである、投与剤形。
【請求項２】
投与剤形がさらに１またはそれ以上の製薬的に受容可能な賦形剤を含む、請求項１記載の投与剤形。
【請求項３】
式Ｉ、IIまたはIIIの化合物は約50μg〜約1,000μgである、請求項１記載の投与剤形。
【請求項４】
式Ｉ、IIまたはIIIの化合物は約100μg〜約600μgである、請求項１記載の投与剤形。
【請求項５】
式Ｉ、IIまたはIII：
【化２】
2006306877.tif 000019
の化合物、またはその製薬的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の治療有効量を含有する組成物を哺乳類に投与することを含む、哺乳類の眼疾患の治療方法であって、該治療有効量は約１μg〜約1,500μgである上記方法。
【請求項６】
組成物がさらに１またはそれ以上の製薬的に受容可能な賦形剤を含む、請求項５記載の方法。
【請求項７】
組成物が眼へのテノン嚢下送達により投与される、請求項５記載の方法。
【請求項８】
眼疾患が非滲出性（ドライAMD）および滲出性（ウエットAMD）を含む加齢性黄斑変性症（AMD）、脈絡膜血管新生、糖尿病性網膜症および未熟児網膜症のような網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、網膜炎、ブドウ膜炎、嚢腫状黄斑浮腫、緑内障ならびに他の眼の後区の疾患または症状から選択される、請求項５記載の方法。
【請求項９】
治療有効量が約50μg〜約1,000μgである、請求項５記載の方法。
【請求項１０】
治療有効量が約100μg〜約600μgである、請求項５記載の方法。
【請求項１１】
組成物が年１〜１２回投与される、請求項５記載の方法。
【請求項１２】
請求項１記載の投与剤形を哺乳類に投与することを含む、哺乳類の視力を安定させる方法。
【請求項１３】
請求項１記載の投与剤形を哺乳類に投与することを含む、哺乳類の視力を改善させる方法。
【請求項１４】
請求項１記載の投与剤形を哺乳類に投与することを含む、眼疾患を予防する方法。
【請求項１５】
眼疾患が眼血管新生である、請求項１４記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は薬物送達、および特に医薬組成物、投与剤形、ならびに医薬活性物質の眼の後区分（back of the eye）への送達方法に関する。より特定すれば、本発明は医薬組成物の投与剤形および医薬活性物質の黄斑に近接した眼後区分（posterior segment of the eye）へのテノン嚢下送達方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、眼内の標的組織への薬物送達を至適化すること、および、それらの組織内での有効な薬物用量を維持することについて大きな進歩がなされてきている。しかしながら、眼疾患の多くの薬理学的管理では、水滴での溶液の眼表面への局所的適用が使われ続けている。典型的には局所的に適用した薬物の５％未満が、角膜を透過しそして眼内組織に到達していると見積もられてきた。局所投与された薬物用量の比較的小部分が眼組織の前区分に最終的に到達するにもかかわらず、多くは投与された非常に高濃度の薬物のおかげで、局所投与はあいかわらず有効である。しかしながら、治療量の薬物の眼後区分の組織への送達は、いまだに大きな挑戦的目標として残っている。
【０００３】
現在、後区分の疾患の治療は、有効量の薬物を眼後部の標的組織へ送達することの困難さのために著しく制限されている。薬物の後区分への送達のために４つの手段、すなわち、局所的、全身性、眼内および眼周囲（例えばテノン嚢下、結膜下および眼球後）送達法が使用できる。局所投与された薬物は、結膜を透過しそして強膜を通して拡散してゆくことで眼に入っていくことができるが、この手段は通常は後部硝子体、網膜または脈絡膜における治療用薬物濃度はもたらさない。全身性投与は眼後部へ薬物を送達できるが、必要とされる大量の全身性投与量はしばしば深刻な副作用を伴う。硝子体内注射は、後区分の組織へ薬物を送達するための最も直接的な手段を提供し、そして治療的組織内薬物濃度を達成できるが、網膜剥離、出血、眼内炎および白内障という固有の副作用の可能性が残り、そしてしばしば必要とされる反復投与は必ずしも患者には十分耐えられるものではない。さらに、硝子体への直接の薬物投与は急速に排泄される。硝子体内持続放出型器具が反復投与を避けるために使用されてきた。しかしながら、これらの器具は眼内手術を必要とし、定期的に置換されなければならず、そして硝子体内注射に伴うものと同様の副作用を有する可能性がある。
【０００４】
テノン嚢下、結膜下または眼球後投与による眼周囲への薬物送達および持続放出器具の設置は、眼後部組織への薬物送達のための代替ルートを提供する。この薬物送達の手段は、硝子体内注射より安全でかつより侵襲性が低く、そして局所的で持続放出薬物送達の可能性も提供する。
【０００５】
この媒体による薬物送達は理想的には強膜経由であり、それにより強膜の大きな表面積の利点を利用することができる。強膜の平均17-cm2 の表面積は、眼球の総表面積の95％を占め、そして角膜の１−cm2の表面面積に比べて、眼の内側への薬物拡散のための著しく広い通路を提供する。また、強膜の厚さの領域毎の差異は、もし持続放出送達器具またはシステムを強膜透過性が最も大きい領域に設置できる場合、さらに強膜経由薬物拡散を至適化するために使用することができるだろう。強膜は、例えば視神経の近くでは1.0mm厚であり、角膜強膜輪部では平均0.53mm厚であり、そして眼球赤道部では平均0.39mmまで薄くなっており、多くの眼においては0.1mmまでも薄い場合がある。さらに、増加している証拠の蓄積により、強膜が、広範囲の溶質に対して非常に透過的であり、そして後区分薬物送達に関する非常に大きな可能性を有していることが示唆されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、眼の高い過敏性のために、眼後部への薬物送達は、眼の後部組織に対して非刺激性のビークルを必要としている。そのために、眼科学の分野には、眼後区分への医薬的活性物質を送達するための安全で有効な、改良された医薬組成物およびそれらの使用方法に対する必要性が存在している。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明はインダゾール化合物、そうした化合物を含む医薬組成物、および、そうした化合物を用いた、血管形成、および／または、加齢性黄斑変性症のような血管新生性眼疾患を含む細胞増殖に関連する疾患状態の治療のために、特定のプロテインキナーゼ活性を媒介しおよび／または阻害するそうした化合物を使用する方法に関している。より特定すれば、本発明はそうした化合物および医薬組成物の、黄斑に近接した眼後区分へのテノン嚢下送達のための、投与剤形に関する。
【０００８】
本願に記載された組成物、投与剤形および方法で有用なインダゾール化合物は、米国特許第6,531,491号；同第6,534,524号；および同第6,869,962号； 米国特許出願公開第10/737,655号および同第10/796226号；ならびに米国仮出願第60/620,394号に記載されており、それらの開示は参照により全体で全ての目的のために本願に組み込まれる。
【０００９】
特に、これらの特許および出願は式Ｉ、II、またはIII：
【化１】
2006306877.tif 000002
を有する化合物、およびそれらの製薬的に受容可能な塩または溶媒和物を開示している。
【００１０】
式Ｉ、IIおよびIIIの化合物は、加齢性黄斑変性症の治療を意図したチロシンキナーゼ阻害剤である。典型的には、これらの化合物は無菌性懸濁液の組成物として製剤化され、そして、テノン嚢下投与を介して黄斑に近接した眼後区分の後部へ投与される。現在、これらの化合物の製剤は、第三相治験およびそれに続く市販化のために開発中である。
【００１１】
本発明の事情を説明するために、本発明の背景の議論が本願に含まれる。このことは、参照された全てのものが、米国内または他のいかなる国においても、全ての請求項について優先日において、公表された、知られていたまたは一般的な常識の一部であったことを認めたものと理解されるべきではない。
【００１２】
式Ｉ、IIもしくはIIIの化合物またはその製薬的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の投与剤形、ならびに、加齢性黄斑変性症のような眼疾患を有する哺乳類において、黄斑に近接した眼後区分へテノン嚢下投与をするためのその医薬組成物を提供することが、本発明の目的である。それらの投与剤形を投与する哺乳類の眼疾患の治療方法を提供することが、本発明のもう一つの目的である。
【００１３】
式Ｉ、IIまたはIIIの化合物の治療有効量は、テノン嚢下投与、眼内、全身または局所投与を介して、哺乳類に投与することができる。式Ｉ、IIまたはIIIの化合物の治療有効量は、片眼または両眼へ、同時にまたは異なった間隔で投与することができる。
【００１４】
したがって、他の局面で、本発明は式Ｉ、IIもしくはIIIの化合物またはその製薬的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を含み、ここで式Ｉ、IIまたはIIIの化合物は約１μg〜約1,500μgである、投与剤形を提供する。
【００１５】
他の局面で、本発明は、投与剤形がさらに１またはそれ以上の製薬的に受容可能な賦形剤を含む、投与剤形を提供する。
【００１６】
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIの化合物が約50μg〜約1,000μgである、投与剤形を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIの化合物が約100μg〜約600μgである、投与剤形を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIの化合物が約１μgである、投与剤形を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIの化合物が約50μgである、投与剤形を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIの化合物が約100μgである、投与剤形を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIの化合物が約150μgである、投与剤形を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIの化合物が約300μgである、投与剤形を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIの化合物が約600μgである、投与剤形を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIの化合物が約1,000μgである、投与剤形を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIの化合物が約1,500μgである、投与剤形を提供する。
【００１７】
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIおよびIIIの化合物またはその製薬的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の治療有効量を投与することを含む、哺乳類の眼疾患の治療のための方法を提供し、ここで該治療有効量は約１μg〜約1,500μgである。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで組成物はさらに１またはそれ以上の製薬的に受容可能な賦形剤を含む。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで組成物は眼へのテノン嚢下送達によって投与される。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで眼疾患は、非滲出性（ドライAMD）および滲出性（ウエットAMD）のような加齢性黄斑変性症（AMD）、脈絡膜血管新生、糖尿病性網膜症および未熟児網膜症のような網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、網膜炎、ブドウ膜炎、嚢腫状黄斑浮腫、緑内障ならびに他の眼後区分の疾患または症状から選択される。
【００１８】
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約50μg〜約1,000μgである。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約100μg〜約600μgである。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約１μgである。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約50μgである。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約100μgである。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約150μgである。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約300μgである。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約600μgである。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約1,000μgである。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約1,500μgである。
【００１９】
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約50μg／眼〜約600μg／眼である。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで治療有効量は約150μg／眼である。
【００２０】
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで組成物は年12回投与される。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで組成物は年４回投与される。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで組成物は年３回投与される。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで組成物は年２回投与される。
他の局面で、本発明は哺乳類の眼疾患の治療方法を提供し、ここで組成物は年１回投与される。
【００２１】
他の局面で、本発明は、本発明の投与剤形を投与することを含む、哺乳類の視力を安定させる方法を提供する。
他の局面で、本発明は、本発明の投与剤形を投与することを含む、哺乳類の視力を改善させる方法を提供する。
【００２２】
他の局面で、本発明は、本発明の投与剤形を投与することを含む、眼疾患を予防する方法を提供する。
他の局面で、本発明は、眼疾患を予防する方法を提供し、ここで眼疾患は眼の血管新生である。
【００２３】
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIもしくはIIIの化合物またはその製薬的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の治療有効量を投与することを含む、哺乳類の癌の治療のための方法を提供し、ここで該治療有効量は約１μg〜約1,500μgである。
他の局面で、本発明は哺乳類の癌の治療方法を提供し、ここで組成物はさらに１またはそれ以上の製薬的に受容可能な賦形剤を含む。
【００２４】
医薬活性物質の黄斑に近接した眼後区分へのテノン嚢下送達のための組成物および方法を提供することが本発明の他の目的である。
したがって、一つの局面で、本発明は、式Ｉ、IIもしくはIIIを有する医薬活性物質、またはその製薬的に受容可能な塩もしくは溶媒和物；１またはそれ以上の賦形剤；および１またはそれ以上の緩衝液を含む医薬組成物を提供し、ここで該組成物の張度およびpHは生理的条件に調整し；そして該組成物は黄斑に近接した眼後区分へのテノン嚢下送達のためのものである。
【００２５】
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで１またはそれ以上の賦形剤は凝集剤である。
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで凝集剤は約0.001％〜約10％の塩化ベンザルコニウムである。
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで凝集剤は約0.02％の塩化ベンザルコニウムであり、組成物の張度は約4.5％マンニトールにより生理的条件に調整されている。
【００２６】
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで緩衝液は約10mM PBS緩衝液である。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.01mg/mL〜約２mg/mL含む、医薬組成物を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.1mg/mL〜約1.2mg/mL；約0.02％塩化ベンザルコニウム；約10mM PBS緩衝液を含み；および、組成物の張度は約4.5％マンニトールにより生理的条件に調整されている、医薬組成物を提供する。
【００２７】
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで凝集剤は約0.001％〜約10％のドキュセートナトリウムである。
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで凝集剤は約0.005％のドキュセートナトリウムを含み、組成物の張度は約0.9％塩化ナトリウムにより生理的条件に調整されている。
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで緩衝液は約10mM PBS緩衝液である。
【００２８】
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.01mg/mL〜約２mg/mL含む、医薬組成物を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.1mg/mL〜約1.2mg/mL；約0.005％ドキュセートナトリウム；約10mM PBS緩衝液を含み；および、組成物の張度は約0.9％塩化ナトリウムにより生理的条件に調整されている、医薬組成物を提供する。
【００２９】
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで凝集剤は約0.001％〜約10％のラウリル硫酸ナトリウムである。
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで凝集剤は約0.01％のラウリル硫酸ナトリウムを含み、組成物の張度は約４％マンニトールおよび約0.2％塩化マグネシウムにより生理的条件に調整されている。
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで緩衝液は約10mM PBS緩衝液である。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.01mg/mL〜約２mg/mL含む、医薬組成物を提供する。
【００３０】
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.1mg/mL〜約1.2mg/mL；約0.01％ラウリル硫酸ナトリウム；約10mM PBS緩衝液を含み；および、組成物の張度は約４％マンニトールおよび約0.2％塩化マグネシウムにより生理的条件に調整されている、医薬組成物を提供する。
【００３１】
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで医薬活性物質は血管新生阻害剤である。
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここで血管新生阻害剤はプロテインキナーゼ受容体の阻害剤である。
他の局面で、本発明は医薬組成物を提供し、ここでプロテインキナーゼ受容体はVEGF受容体である。
【００３２】
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質、またはその製薬的に受容可能な塩もしくは溶媒和物；１またはそれ以上の賦形剤；および１またはそれ以上の緩衝液を含み、組成物の張度およびpHは生理的条件に調整されている、医薬組成物の黄斑に近接した眼後区分へのテノン嚢下送達のための方法を提供する。
他の局面で、本発明は、医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここで１またはそれ以上の賦形剤は凝集剤である。
他の局面で、本発明は、医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここで凝集剤は約0.001％〜約10％の塩化ベンザルコニウムである。
【００３３】
他の局面で、本発明は、約0.02％の塩化ベンザルコニウムを含み、組成物の張度は約4.5％マンニトールにより生理的条件に調整されている、医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供する。
他の局面で、本発明は、医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここで緩衝液は約10mM PBS緩衝液である。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.01mg/mL〜約２mg/mL含む、医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供する。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.1mg/mL〜約1.2mg/mL；約0.02％塩化ベンザルコニウム；約10mM PBS緩衝液を含み；および、組成物の張度は約4.5％マンニトールにより生理的条件に調整されている、医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供する。
【００３４】
他の局面で、本発明は医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここで凝集剤は約0.001％〜約10％のドキュセートナトリウムである。
他の局面で、本発明は医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここで凝集剤は約0.005％のドキュセートナトリウムを含み、組成物の張度は約0.9％塩化ナトリウムにより生理的条件に調整されている。
他の局面で、本発明は医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここで緩衝液は約10mM PBS緩衝液である。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.01mg/mL〜約２mg/mL含む、医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供する。
【００３５】
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.1mg/mL〜約1.2mg/mL；約0.005％ドキュセートナトリウム；約10mM PBS緩衝液を含み；および、組成物の張度は約0.9％塩化ナトリウムにより生理的条件に調整されている、医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供する。
他の局面で、本発明は医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここで凝集剤は約0.001％〜約10％のラウリル硫酸ナトリウムである。
他の局面で、本発明は医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここで凝集剤は約0.01％のラウリル硫酸ナトリウムを含み、組成物の張度は約４％マンニトールおよび約0.2％塩化マグネシウムにより生理的条件に調整されている。
他の局面で、本発明は医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここで緩衝液は約10mM PBS緩衝液である。
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.01mg/mL〜約２mg/mL含む、医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供する。
【００３６】
他の局面で、本発明は、式Ｉ、IIまたはIIIを有する医薬活性物質を約0.1mg/mL〜約1.2mg/mL；約0.01％ラウリル硫酸ナトリウム；約10mM PBS緩衝液を含み；および、組成物の張度は約４％マンニトールおよび約0.2％塩化マグネシウムにより生理的条件に調整されている、医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供する。
他の局面で、本発明は医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここで医薬活性物質は血管新生阻害剤である。
他の局面で、本発明は医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここで血管新生阻害剤はプロテインキナーゼ受容体の阻害剤である。
他の局面で、本発明は医薬組成物のテノン嚢下送達のための方法を提供し、ここでプロテインキナーゼ受容体はVEGF受容体である。
【００３７】
定義
本願で用いられる「視力の安定化」または「視力を安定化する」という表現は、他に指示が無ければ、１年またはそれ以上の時点で、早期治療用糖尿病性網膜症試験で使用される視力検査用チャート（ETDRSチャート）を用いて測定した時、ベースラインからの視力の喪失が15文字未満、または代わりに、喪失が３行未満であることを意味している。ETDRSチャートは、American Journal of Ophthalmology 94:91-96, 1982でFerris, F.L.等により論じられており、それらの開示は参照により全体で全ての目的のために本願に組み込まれる。
【００３８】
本願で用いられる「視力の改善」または「視力を改善する」という表現は、他に指示が無ければ、１年以内に、ETDRSチャートを用いて測定して、ベースラインからの視力の獲得が15文字またはそれ以上、または代わりに、獲得が３行またはそれ以上であることを意味している。
【００３９】
本願で用いられる「眼血管新生の予防」または「眼血管新生を予防する」という表現は、蛍光血管造影および／または着色眼底写真のような当該分野で周知の技法により測定された時、非滲出性の加齢性黄斑変性症（ドライAMD）から滲出性の加齢性黄斑変性症（ウエットAMD）への進行を止めることを意味している。
【００４０】
本願で用いられる「治療する」という表現は、他に指示が無ければ、そうした表現が用いられる疾患もしくは症状、または１もしくはそれ以上のそうした疾患もしくは症状の症候を回復させ、緩和し、進行を抑制し、または予防することを意味している。本願で用いられる「治療」という表現は、他に指示が無ければ、治療する行為を意味する（ここの「治療する」は直前で定義されている）。
【００４１】
本願で用いられる「製薬的に受容可能な塩」という表現は、他に指示が無ければ、化合物中に存在しうる酸性または塩基性基の塩を含む。本来塩基性である化合物は種々の無機および有機酸と共に多くの種類の塩を生成することができる。そうした塩基化合物の製薬的に受容可能な酸付加塩を製造するために使用される酸は、非毒性の酸付加塩を生成するものであり、すなわち製薬的に受容可能なアニオンを含む塩であり、例えば、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カムシレート（camsylate）、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジスリレート（edislyate）、エストレート（estolate）、エシレート（esylate）、エチルコハク酸塩、フマル酸塩、グルセプテート（gluceptate）、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン（hydrabamine）、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化物、イソチオネート、乳酸塩、ラクトビオネート（lactobionate）、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシラート、メチル硫酸塩、ムケート（mucate）、ナプシレート（napsylate）、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩（エンボネート（embonate））、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクレート（teoclate）、トシル酸塩、トリエトヨウ化物（triethiodode）および吉草酸塩が挙げられる。
【００４２】
本発明はまた、式Ｉ、IIおよびIIIの化合物と同一であるが、通常天然に存在する原子番号または質量数とは異なった原子番号または質量数を有する原子により１またはそれ以上の原子が置換されている、同位体標識された化合物を含む。本発明の化合物中に組み込むことができる同位元素の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素および塩素の同位元素、例えば、それぞれ2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18Fおよび36Clが挙げられる。上記の同位元素および／または他の原子の同位元素を含む、本発明の化合物、そのプロドラッグ、および該化合物または該プロドラッグの製薬的に受容可能な塩は本発明の範囲に含まれる。本発明の特定の同位元素標識化合物、例えば、3Hおよび14Cのような放射性同位元素が組み込まれたものは、薬物および／または基質の組織内分布アッセイにおいて有用である。トリチウム化した、すなわち、3H、および炭素−14、すなわち、14C、同位元素は特にそれらの製造が容易なことおよび検出能力のために好ましい。さらに、より重い同位元素、例えば、重水素、すなわち、2Hは、代謝的安定性の高さから来る、ある種の治療上の利点、例えばインビボでの半減期の増加または投与必要量減少を提供することができ、それゆえに特定の環境下では好ましいだろう。同位元素標識された本発明の式Ｉ、IIまたはIIIの化合物は、一般に、非標識化合物のために記載された方法を、非同位元素標識試薬を、容易に入手できる同位元素標識試薬と置き換えることによって実施して、製造することができる。
【００４３】
本発明の実施態様およびそれらの利点は、ヒトの眼10を概略的に説明した図１を参照することにより最も良く理解できる。眼10は角膜12、水晶体14、強膜16、脈絡膜18、網膜20、および視神経22を有する。眼10の前区分24は一般に眼10の線25の前部22を含み、一方、眼10の後区分26は一般に眼10の線25の後部25を含んでいる。網膜20は物理的に脈絡膜18に基準面（pars plana）28に近接して円周状に接着している。網膜20は視神経22に対して少しだけ側面に位置している黄斑30を有している。黄斑30は主に網膜錐体により構成されており、そして網膜20中で最大の視力を示す領域である。テノン（Tenon）嚢またはテノン膜34は強膜20上に位置している。結膜36は角膜輪部32（球結膜）後方の眼10の球の狭い領域を覆っており、そして畳み上げられるか（上部盲嚢）畳み下げられ（下部盲嚢）て、それぞれ、上部眼瞼35および下部眼瞼37の内側領域を覆っている。結膜36はテノン嚢34の頂部に位置している。強膜16およびテノン嚢34は眼球10の外部表面を規定する。非滲出性（ドライAMD）および滲出性（ウエットAMD）を含む加齢性黄斑変性症（AMD）、脈絡膜血管新生、網膜症、網膜炎、ブドウ膜炎、嚢腫状黄斑浮腫（CME）、緑内障ならびに他の眼後区分26の疾患または症状の治療のために、眼科学的に受容可能な医薬活性物質の特定の分量を、直接に強膜16の外側表面上およびテノン嚢34下に送達しデポ（depot）38を形成する。さらに、非滲出性（ドライAMD）および滲出性（ウエットAMD）を含む加齢性黄斑変性症（AMD）ならびにCMEの場合は、デポ38は直接に、テノン嚢34下の強膜16の外側表面上、そして通常は黄斑30の上方に挿入される。物質を眼後部組織へ眼周囲送達することは当業者には周知である。例えば米国特許第6,413,245号には、薬物のテノン嚢下送達で有用な器具を記載しており、それらの開示は参照により全体で全ての目的のために本願に組み込まれる。
【００４４】
本発明は式Ｉ、IIおよびIIIの化合物の投与剤形、その医薬組成物、および、化合物および／または組成物が黄斑に近接した眼後区分へ投与されるテノン嚢下送達の方法を提供する。本願で記載された組成物はさらに、繊細な眼組織に対して安全で非刺激的な種々の賦形剤および緩衝液を含んでいる。
【００４５】
本発明の組成物において有用な医薬活性物質は、加齢性黄斑変性症および眼後区分に影響する他の疾患、例えば脈絡膜血管新生、糖尿病性網膜症、緑内障および色素性網膜炎からくる重症の視力損失の治療のために有用である。
【００４６】
例えば、薬物デポ38を形成するために用いられる本発明の組成物は、本願で記載された１またはそれ以上の賦形剤に加えて、１またはそれ以上の医薬活性物質を含むことができる。本発明の組成物において有用な医薬活性物質の例には、抗感染剤、例えば、それに限定されないが、抗生物質、抗ウイルス剤および抗真菌剤；抗アレルギー剤およびマスト細胞安定化剤；ステロイド性および非ステロイド性抗炎症剤（例えばネパフェナク）；シクロオキシゲナーゼ阻害剤、例えば、それに限定されないが、Cox IおよびCox II阻害剤；抗感染剤と抗炎症剤との組合せ；消炎剤；抗緑内障剤、例えば、それに限定されないが、アドレナリン作動剤、βアドレナリン性遮断剤、αアドレナリン性作用剤、副交感神経模倣剤（parasypathomimetic agents）、コリンエステラーゼ阻害剤、炭酸脱水素酵素阻害剤およびプロスタグランジン；抗緑内障剤の組合せ；抗酸化剤；栄養補助剤；嚢腫黄斑浮腫の治療剤、例えば、それに限定されないが、非ステロイド性抗炎症剤；非滲出性（ドライAMD）および滲出性（ウエットAMD）を含む加齢性黄斑変性症（AMD）の治療剤、例えば、それに限定されないが、血管新生阻害剤、例えばVEGF受容体であるプロテインキナーゼ受容体のようなプロテインキナーゼ受容体を阻害する血管新生阻害剤；ならびに、栄養補助剤；疱疹感染およびCMV眼感染の治療剤；増殖性硝子体網膜症の治療剤、例えば、それに限定されないが、抗代謝剤および繊維素溶解剤；創傷調整剤、例えば、それに限定されないが、成長因子；抗代謝剤；神経保護剤、例えば、それに限定されないが、エリプロジル；ならびに、後区分26の疾患または症状、例えば、それに限定されないが、非滲出性（ドライAMD）および滲出性（ウエットAMD）を含む加齢性黄斑変性症（AMD）、脈絡膜血管新生、網膜症、網膜炎、ブドウ膜炎、嚢腫状黄斑浮腫および緑内障を治療するための血管形成阻害性ステロイド、が挙げられる。そうした血管新生阻害性ステロイドは、米国特許第5,679,666号および同5,770,592号により詳細に開示されている。嚢腫状黄斑浮腫の治療のための非ステロイド性抗炎症剤はネパフェナクである。
【００４７】
眼への投与のために、本発明の化合物は、該化合物が角膜および／または強膜および眼の内側領域、例えば前室、後室、硝子体、房水、硝子体液、角膜、虹彩／毛様体、水晶体、脈絡膜／網膜および強膜へと浸透するために充分な時間、該化合物が眼の表面に留まれるような、製薬的に受容可能な眼科用ビークル中で送達される。製薬的に受容可能な眼科用ビークルは、軟膏、植物油、またはカプセル化材料であっていい。本発明の化合物はまた直接に硝子体液または房水中に投与してもいい。
【００４８】
さらに、化合物は、周知の受容可能な方法、例えばテノン嚢下および／または結膜下投与によっても投与可能である。眼科領域で周知のように、黄斑は主に網膜錐体で構成されており、網膜上で最大の視力を示す領域である。テノン嚢またはテノン膜は強膜上に位置する。結膜は角膜輪部（球結膜）後方の眼球の狭い領域を覆っており、そして畳み上げられるか（上部盲嚢）畳み下げられ（下部盲嚢）て、それぞれ、上部眼瞼および下部眼瞼の内側領域を覆っている。結膜はテノン嚢の頂部に位置している。強膜およびテノン嚢は眼球の外部表面を規定する。非滲出性（ドライAMD）および滲出性（ウエットAMD）を含む加齢性黄斑変性症（AMD）、脈絡膜血管新生、網膜症（糖尿病性網膜症および未熟児網膜症のような網膜症）、糖尿病性黄斑浮腫、網膜炎、ブドウ膜炎、嚢腫状黄斑浮腫（CME）、緑内障ならびに他の眼後区分の疾患または症状の治療のために、眼科学的に受容可能な医薬活性物質の特定の分量のデポを、直接に強膜の外側表面上およびテノン嚢下に挿入することが好ましい。さらに、非滲出性（ドライAMD）および滲出性（ウエットAMD）を含む加齢性黄斑変性症（AMD）ならびにCMEの場合は、デポを直接に、テノン嚢下の強膜の外側表面上、そして通常は黄斑の上方に挿入されるのが最も好ましい。
【００４９】
化合物はデポ製剤として製剤化できる。そうした長期作用性製剤はインプラント（例えば皮下または筋内に）、筋内投与または上記のテノン嚢下もしくは硝子体内注射で投与できる。その代わりに、活性成分は、適切なビークル、例えば無菌の発熱物質を含まない水で使用直前に構成するための粉末形態であってもいい。
【００５０】
本発明の特に好ましい実施態様において、化合物は生理食塩水中で（眼科用製剤で通常使用されている保存剤および抗微生物剤のいずれかと組み合わせて）局所投与のために製造され、そして涙様形態で投与される。溶液または懸濁液はその純粋な形態で製造され、一日に何度も投与される。代わりに、上記のように製造された本発明の組成物はまた角膜に直接投与してもいい。
【００５１】
好ましい実施態様において、組成物は、角膜に結合する粘膜付着性ポリマーと共に製造できる。したがって、例えば、化合物は適切な重合性もしくは疎水性材料（例えば、受容可能な油中の乳濁液として）またはイオン交換樹脂と共に、または難溶性誘導体、例えば難溶性塩として、製剤化できる。
【００５２】
疎水性化合物のための医薬用担体は、ベンジルアルコール、非極性界面活性剤、水混和性有機ポリマーおよび水相を含む、共溶媒系である。この共溶媒系はVPD共溶媒系であっていい。VPDは、ベンジルアルコールが３％ w/v、非極性界面活性剤ポリソルベート80が８％ w/v、およびポリエチレングリコール300が65％ w/vの溶液であり、無水エタノールを加えて容積を合わせている。このVPD共溶媒系（VPD：５W）は、５％デキストロース水溶液で１：１に希釈されたVPDを含有している。この共溶媒系は、疎水性化合物も良く溶解し、そしてそれ自体、全身投与において低毒性である。当然なことに、共溶媒系の比率は、その溶解性および毒性特性を破壊することなしに、相当の範囲で変えることができる。さらに、共溶媒成分の同一性は変えてよく：例えば、他の低毒性非極性界面活性剤をポリソルベート80の代わりに使用することができ；ポリエチレングリコールの割合の大きさを変えても良く；他の生体適合ポリマー、例えばポリビニルピロリドンを、ポリエチレングリコールと置き換えても良く；および、他の糖類または多糖類をデキストロースと置き換えてもいい。
【００５３】
代わりに、疎水性医薬化合物のための他の送達系を使用してもよい。リポソームおよび乳濁液は、疎水性薬物のための送達ビークルまたは担体の公知の例である。ジメチルスルフォキシドのような特定の有機溶媒も使用できるが、普通は毒性が大きくなるという欠点が伴う。さらに、この化合物は、治療剤を含有する固体疎水性ポリマーの半透過性マトリクスのような、持続放出系を用いて送達できる。種々の持続放出材料が確立されており当業者に知られている。持続放出カプセルは、それらの化学特性に応じて、数週間から100日を超えるまでの期間、化合物を放出できる。治療剤の化学特性および生物学的安定性に依存して、タンパク質安定化のための追加の工夫が用いられるだろう。
【００５４】
医薬組成物はまた、適切な固形またはゲル相の担体または賦形剤を含有することができる。そうした担体または賦形剤の例には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、糖類、澱粉、セルロース誘導体、セラチン、および、ポリエチレングリコールのようなポリマーが挙げられる。
【００５５】
本発明の化合物のあるものは、製薬的に適合可能な対イオンとの塩として提供される。製薬的に適合可能な塩は、多くの酸、例えば塩酸、硫酸、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸等を用いて形成できる。水溶液または他のプロトン性溶媒中でより溶解性となりやすい塩は、対応する遊離塩基形態である。
【００５６】
本発明の好ましい化合物の製造は以下の実施例に詳細に記載されているが、当業者は記載された化学反応が多くの本発明の他の化合物を製造するために容易に適合できることを理解するであろう。例えば、本発明の実施例に記載されていない化合物の合成は、当業者に知られた修正法、例えば適切な保護用干渉基により、技術分野で知られた他の適切な試薬と代えることにより、または反応条件の日常的な修正を行うことによって、上手く達成することができる。代わりに、本願で開示されたまたは技術分野で知られた他の反応が、本発明の他の化合物を製造するための適用性を有することが理解されるだろう。
【００５７】
式Ｉ、IIおよびIIIの化合物の化合物は、加齢性黄斑変性症の治療を目的としたチロシンキナーゼ阻害剤である。典型的には、これらの化合物は、無菌懸濁剤の組成物として製剤化され、そしてテノン嚢下投与により投与される。現在、こうした化合物の懸濁剤製剤は、第三相治験にあり続く商業化のために開発中である。しかしながら、これらの懸濁液はガラスバイアルに充たして逆向きにして保管した場合、化合物の粒子が硝子とストッパーの間の環状部中に沈殿してしまい、再懸濁することがかなり困難である。これは部分的にはミクロン大の化合物粒子がそれらの表面に密に充填されていることによる。この沈殿は、続く手で振って再懸濁した場合、製品の薬理活性を減少させる結果をもたらす。薬理活性の低下はバイアルを上向きに保管している場合は観察されない。ガラスストッパーの環状部からの粒子の再懸濁を促進する他の手法は、DLVO理論として記載された二次エネルギーを最小にして粒子間引力が最大化された、ゆるい構造の綿状沈殿（凝集物）を形成する粒子を導入することである。
【００５８】
粒子を二次エネルギーが最小になるように導びく、製剤を基礎とした手法は、立体斥力もしくは静電気斥力、またはこれら２つの組合せのいずれかとファンデルワール引力とを平衡させる。一般に、綿状凝集（flocculation）の効率は粒子濃度を増やすと共に増加する。立体斥力による制御された綿状凝集は、大分子（水性または液体）を粒子表面に吸着させることにより達成される。凝集剤は、メチルセルロースのような中性ポリマーまたはポリビニルアルコールのような界面活性剤であっていい。そうした薬剤により、分子の分子量が増加することにより斥力も増加する。反対に、静電気斥力により制御された綿状凝集は、イオン性分子が粒子表面に吸着されることにより達成される。そうした凝集剤はカチオン性界面活性剤であり、例えば塩化ベンザルコニウム、ドキュセートナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム等である。それらのイオン性界面活性剤の濃度の増加は、斥力を増加させる。界面活性剤の粒子表面への吸着が最大になった場合は、次に界面活性剤の濃度をそれ以上増加させても斥力には何の影響もない。
【００５９】
綿状凝集製剤はまた、綿状凝集が個々の粒子のように表面に密に充填されないために、より再懸濁しやすい。例えば、それらのバイアルを手で振って、その綿状凝集を壊すことにより、この製剤を投与が可能なようにすることができる。これらの製剤において、ゆるい構造の綿状凝集の形成のための至適条件の達成は、綿状凝集の明確な機械的な理解および包括的な綿状凝集の評価方法により促進される。様々な凝集剤を用いた種々の技法が、綿状凝集工程を作成し至適化するために開発されてきた。記載された多くの薬剤は、ウサギの眼に投与した時に計画濃度で毒性が最小であることが示されてきた。
【００６０】
本発明の組成物および方法において、賦形剤は凝集剤もしくは懸濁剤として；または界面活性剤もしくは湿潤剤として作用できる。「懸濁剤」という表現は、液体（拡散用媒体）中に拡散した（懸濁した）微細に分けた固形物からなる二相系を意味する。懸濁液は他の投与剤形に比べて特定の利点を有している。いくつかの医薬活性物質は全ての受容可能な媒体中で不溶性であり、したがって、懸濁剤として投与しなければならない。その液体としての特性により、懸濁剤はテノン嚢下投与のための理想的な投与剤形を表す。さらに、そうした薬剤は懸濁液中では溶液中より化学的により安定である。時間がたつと、懸濁された薬剤は沈降しがちで投与量の均一性の欠失をもたらす。しかしながら、これは、注意深い製剤化と投与前の懸濁液の振盪により最小化できる。
【００６１】
凝集剤は特に懸濁薬物粒子が望ましい場合、例えば懸濁組成物中で有用である。賦形剤の選択および組合せにより、懸濁組成物は、薬物濃度、物理的安定性および効率に関する改善された性能を示すものが提供できる。懸濁液の物理的安定性は凝集剤により制御される。凝集剤は、懸濁粒子の正味ゼータ電位とは反対の電荷を担っている電解質である。ある臨界濃度の凝集剤の添加は懸濁粒子上の表面電荷を打ち消し、そして綿状凝集、または、弱いファンデルワール引力によりゆるく一緒に保持されている粒子の集合の形成を可能にする。粒子は共にゆるく結合しているので、ケーキ状にはならずこの懸濁液を振盪することによって容易に再拡散できる。一般に、綿状凝集体はほぼ同じ大きさの粒子を有し、それゆえに、粒子を静置したときに明瞭な境界が見られる。適切な凝集剤の非限定的な例には、塩化ベンザルコニウム、ドキュセートナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、塩化セチルピリジニウム、ポリソルベート80、ソルビタンモノラウレート、カルボキシメチルセルロースナトリウム、キサンタンゴム、タラガカント、メチルセルロース、PEG、マグネシウムアルミニウムケイ酸塩、アタパルガイト（attapulgite）、ベントナイト、二水素リン酸カリウム、塩化アルミニウム、塩化ナトリウムおよびそれらの混合物が含まれる。
【００６２】
塩化ベンザルコニウムは、一般式：
【化２】
2006306877.tif 000003
（式中、Ｒはアルキルの混合で、全てまたはいくつかの基はn-C8H17から始まっており、より高級の同族体を通して、主要部分を含むn-C12H25、n-C14H29およびn-C16H33と共に伸長している）を有する塩化アルキルベンジルジメチルアンモニウムの混合物である。塩化ベンザルコニウムの平均分子量は360ｇ/moleであり、そして抗微生物性保存剤、防腐剤、殺菌剤、可溶化剤、および湿潤剤として作用することが知られている。塩化ベンザルコニウムは白色または黄白色の非晶質の粉末、粘度の高いゲル、またはゲル状フレークとして存在する。これは吸湿性であり、触ると石鹸状で、そしてかすかな芳香性香と強い苦味を有している。眼科用製剤では、塩化ベンザルコニウムは0.01〜0.02％ w/vの濃度で最も広く使用されている保存剤の１つである。これは、しばしば、シュードモナス株に対するその抗微生物作用を増大させる、他の保存剤または賦形剤と組み合わせて使用される。
【００６３】
ドキュセートナトリウムまたは１，４−ビス（２−エチルヘキシル）スルホコハク酸ナトリウムは、実験式C20H37NaO7Sおよび構造式：
【化３】
2006306877.tif 000004
を有している。
【００６４】
ドキュセートナトリウムは白色またはほぼ白色の、蝋状で、苦味の、特徴的なオクタノール様香を有する可塑性固形物である。これは吸湿性で通常ペレット、フレークまたは薄片ロール材料の形態で利用できる。ドキュセートナトリウムおよびドキュセート塩は医薬製剤においてアニオン性界面活性剤として広く用いられている。ドキュセートナトリウムは、湿潤化および溶解を助けるために、主にカプセルおよび直接圧縮錠剤製剤として用いられる。ドキュセート塩はまた下剤および緩下剤として経口製剤で用いられている。
【００６５】
ラウリル硫酸ナトリウムは、主にC12H25NaO4Sからなっており、構造式：
【化４】
2006306877.tif 000005
を有するアルキル硫酸ナトリウムの混合物である。
【００６６】
ラウリル硫酸ナトリウムは白色またはクリーム色から淡黄色の結晶、フレークまたは粉末からなり、滑らかな感触を持ち、石鹸状で、苦味があり、そして脂肪性物質のかすかな香りを有している。ラウリル硫酸ナトリウムは、経口医薬製剤および化粧品で広範に使用されているアニオン性界面活性剤である。これはまた、洗剤；乳化剤；皮膚浸透剤；錠剤やカプセル剤の滑剤；および、アルカリ性および酸性条件で有効な湿潤剤である。
【００６７】
界面活性剤または湿潤剤は親水性または疎水性のいずれかであり、そしてそれらを含有している本発明の組成物の表面張力を低下させる作用を有する。当該分野で周知のように、「親水性」および「疎水性」という表現は、相対的な表現である。界面活性剤として機能するために、化合物は必然的に極性または荷電親水性部分と同時に疎水性（親油性）部分（すなわち、界面活性剤化合物は両親媒性でなければならない）を含んでいなければならない。非イオン性両親媒性化合物の相対的な親水性および疎水性を特徴付けるために通常用いられる実験的パラメーターは、親水性−親油性バランス（「HLB」値）である。より低いHLB値を有する界面活性剤はより疎水性であり、そして油中でより大きい溶解性を有し、その一方、より高いHLB値を有する界面活性剤はより親水性で、そして水性媒体中でより大きい溶解性を有する。簡略な指針としてHLB値を用いることで、親水性界面活性剤は一般に約10を超えたHLB値を有するそうした化合物、および、HLB値を通常は適用できないアニオン性、カチオン性、または両性イオン性化合物であると考えられている。同様に、疎水性界面活性剤は約10未満のHLB値を有する化合物である。
【００６８】
本発明の組成物で使用できる界面活性剤には、それに限定されないが、ポリオキシエチレンソルビタンエステル（ツイーンTM）およびエチレンオキシドおよびプロピレンオキシドのブロックコポリマー（ポロキサマーTM）が含まれる。多種類のポリエチレンソルビタンエステルが商業的に利用可能であり、本発明の組成物における界面活性剤として使用するために適している。一般に、これらのエステルは、このクラスのいくつかの疎水性部分も使用できるが、親水性であり、そして界面活性剤として作用する。本発明の組成物において有用なポリエチレンソルビタンエステルには、ポリエチレンソルビタンモノラウレート（ツイーンTM 20）、ポリエチレンソルビタンモノパルミテート（ツイーンTM 40）、ポリエチレンソルビタンモノステアレート（ツイーンTM 60）、およびポリエチレンソルビタンモノオレエート（ツイーンTM 80）等が挙げられる。
【００６９】
ポロキサマーTMはエチレンオキシドおよびプロピレンオキシドのブロックコポリマーであり、そして構造：HO(C2H4O)x(C3H6O)y(C2H4O)xH（プルロニックTM）；または HO(C3H6O)x(C2H4O)y(C3H6O)xH（プルロニックTM R）を有し、ここでｘは約２〜約150であり、ｙは約15〜約70であるか、または、ｘが約80でｙが約27の上記のブロックコポリマーである。上の記載に適合したエチレンオキシドおよびプロピレンオキシドのブロックコポリマーは、BASFから商標「Pluronic and Lutrol F Block Copolymers」として販売されて利用可能である。（そうしたポリマーの詳細な仕様に関しては、BASF社のプルロニックポリオールに関する技術データシートを参照し、この開示は参照により本願に組み入れられる）。
【００７０】
本発明の組成物で有用なポロキサマーTMは水溶性、クリーム中または軟膏形態であるブロックコポリマーを包含し、無水条件下で長期間保存することができ、そして界面活性剤および／または凝集剤として作用する。本願で記載されているポロキサマーTMは親水性−親油性バランス（HLB）値が８から30の範囲であり、分子量は1,000から16,000ｇ/moleの範囲である。ポロキサマーTM188（プルロニックTM F68）は、構造式：HO(C2H4O)x(C3H6O)y(C2H4O)xH、および平均分子量が8,400ｇ/moleのポリエチレン−ポリプロピレングリコールコポリマーである。BASFのラベルをコード化しているポロキサマーTMを用いて、本発明の組成物において使用するための適切なポロキサマーTMは、それに限定されないが、プルロニックTM／ルトロールTM F44（ポロキサマーTM 124）、プルロニックTM／ルトロールTM
F68（ポロキサマーTM 188）、プルロニックTM／ルトロールTM F87（ポロキサマーTM 237）、プルロニックTM／ルトロールTM F108（ポロキサマーTM 388）、およびプルロニックTM／ルトロールTM F127（ポロキサマーTM 407）である。
【００７１】
賦形剤は本発明の組成物の中で懸濁剤として作用することができる。懸濁剤は、本発明の組成物の粘度を増加させることにより懸濁剤の増大する安定性を提供する製薬的に不活性な物質である。本発明の組成物で有用な懸濁剤には、それに限定はされないが、PEG 3350のようなポリエチレングリコール類（PEG）およびモノメトキシポリエチレングリコール−ジステアロイルホスファチジル−エタノールアミン（m-PEG-DSPE）のようなPEG-ホスファチジルエタノールアミン誘導体；高、中、および低粘度（分子量）カルボキシメチルセルロース（CMC）、例えば、タイプのようなセルロース誘導体、7H4、7H3S、7HOF、7H、および9H4；7M、7M8S、7M2、9M31、9M8、12M31、および12M8；7Lおよび7L2、ヘルキュールズ社（Hercules Inc.）からアクアロンTMとして入手可能なもの、ならびにメチルセルロース（MC）誘導体が挙げられる。
【００７２】
様々な分子量のPEGが多くの異なった調達先から購入可能であり、または、代わりに、これらは当業者に周知の標準的な重合化技術を用いて合成することができ、そして、本発明の組成物において界面活性剤または湿潤剤として有用である。PEGは、約20から約2,000,000個が結合したモノマーを含有する、ポリエチレングリコールポリマーである。例えば、様々な数の結合したモノマーを含有するPEGには、PEG 20、PEG 30、PEG 40、PEG60、PEG 80、PEG 100、PEG 115、PEG 200、PEG 300、PEG 400、PEG 500、PEG 600、PEG 1000、PEG 1500、PEG 2000、PEG 3350、PEG 4000、PEG 4600、PEG 5000、PEG 6000、PEG 8000、PEG 11000、PEG 12000、PEG 2,000,000およびそれらの全ての混合物が挙げられる。
【００７３】
様々の鎖長および飽和度の様々なアシル鎖基を有するホスファチジルエタノールアミンは、ポリエチレングリコール誘導体と共役して、本発明の組成物で界面活性剤または湿潤剤として有用なPEG−脂質共役体を形成することができる。そうしたホスファチジルエタ
ノールアミンは購入可能であり、または当業者に知られた方法を用いて単離もしくは合成される。C10からC20の炭素鎖長を有する飽和または不飽和脂肪酸を含有するホスファチジルエタノールアミンが好ましい。モノ−またはジ−不飽和脂肪酸ならびに飽和および不飽和脂肪酸の混合物を有するホスファチジルエタノールアミンもまた使用できる。適切なPEG-ホスファチジルエタノールアミン誘導体には、それに限定されないが、モノメトキシポリエチレングリコール−ジステアロイルホスファチジル−エタノールアミン（m-PEG-DSPE）が含まれる。
【００７４】
本発明の組成物は１またはそれ以上の懸濁剤を含んでもいい。懸濁剤は、本発明の組成物の粘度を増加させることにより懸濁剤の増大する安定性を提供する、製薬的に不活性な物質である。これらの薬剤はまた、長く放置することにより沈殿してしまった粒子の再分散を促進する。様々なセルロース誘導体が商業的に入手可能であり、本発明の懸濁剤として使用するために適している。例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム（CMC）およびメチルセルロース（MC）が容易に入手可能であり、そして本発明の組成物における懸濁剤として適切である。CMCは無色、無臭、無毒性、水溶性の粉末であり、種々の洗剤、石鹸、食品、繊維、被覆材、塗料、化粧品および医薬で用いられ、それらの中で水結合剤、増粘剤、懸濁剤、または乳化安定剤として作用している。このCMC構造は、セルロースのベータ−（1->4）−Ｄ−グルコピラノースポリマーを基礎としている。CMCの異なった製品は異なった置換度を有していいが、通常はモノマー単位当り約0.6から約0.9個の誘導体である。一般に、CMCの分子量および平均鎖長（すなわち、重合度）が大きくなれば、それらのポリマーの粘度も対応して大きくなる。高粘度または高分子量CMCは約700,000ｇ/moleの平均分子量、および約3,200の重合度を有し；中粘度または中分子量CMCは約250,000ｇ/moleの平均分子量、および約1,100の重合度を有し；低粘度または低分子量CMCは約90,000ｇ/moleの平均分子量、および約400の重合度を有している。多くの異なったタイプのCMCが購入可能である。本発明の組成物で有用なCMCには、それに限定されないが、7H4、7H3S PH、7HOF、7H、および9H4タイプのアクアロンTMのような高粘度CMC；7M、7M8S、7M2、9M31、9M8、12M31、および12M8タイプのような中粘度CMC；ならびに7Lおよび7L2のような低粘度のCMC等が挙げられる。アクアロンTMはヘルキュール社より入手可能なCMCであり、その技術情報はアクアロンTMの製品小冊子（アクアロンTM、カルボキシメチルセルロースナトリウムの物理的および化学的性質）に記載されており、参照によってその全体が全ての目的で本願に含まれる。
【００７５】
メチルセルロース（MC）はまた本発明の組成物の懸濁剤として有用である。MCはまたセルロースから誘導された半合成の可水溶性ポリマーである。このMCの構造は、セルロースのベータ−（1->4）−Ｄ−グルコピラノースポリマーを基礎としている。MCは天然セルロースのメチル化により製造される粉末状物質であり、食品添加物、増量性下剤、乳化剤、および、水中で膨潤してゲルを形成する増粘剤として使用される。
【００７６】
グリセリンは三価アルコールであり、室温で、澄んだ、無色透明で粘性と吸湿性のある液体である。グリセリンは製薬業界で、内側および外側の両方のための種々の医薬ビークルでの溶媒および可溶化剤として幅広く使用されてきており、本発明の組成物でもビークルとして有用である。
【００７７】
本発明の組成物は場合によっては１またはそれ以上の水性緩衝液、またはそれらの混合物を含むことができる。緩衝液は通常、医薬組成物において使用され、酸または塩基を溶液に加えた時に、溶液の酸性または塩基性の変動を最小限にして組成物のpHを安定化する作用を有する。緩衝液は、少量の添加した酸または塩基と反応することで溶液のpHを維持する。これを行うことができる緩衝液について、酸と塩基の両方が含まれていなければならず；酸はどのような添加した塩基とも反応し、塩基はどのような添加した酸とも反応する。しかし、これらはお互いに反応することなしに共存できる必要がある。そうするために、酸および塩基は共役する酸−塩基対でなければならない。緩衝液の例には、エタン酸とエタン酸ナトリウム、またはアンモニア溶液と塩化アンモニウムの混合物が挙げられる。
【００７８】
本発明の組成物で有用な緩衝液は通常、生物学的緩衝液として知られており、そして、それには限定されないが、リン酸二水素カリウム（KH2PO4）、リン酸水素カリウム（K2HPO4）、リン酸カリウム（K3PO4）、リン酸二水素ナトリウム（NaH2PO4）、リン酸水素ナトリウム（Na2HPO4）、およびリン酸ナトリウム（Na3PO4）ならびにそれらの混合物のような、リン酸緩衝液が含まれる。他の有用な緩衝液には、それに限定されないが、クエン酸とクエン酸ナトリウム；クエン酸と水酸化ナトリウム；クエン酸とリン酸水素ナトリウム；ホウ酸−クエン酸−リン酸二水素カリウム−ジエチルバルビツール酸および水酸化ナトリウム；酢酸と酢酸ナトリウム；フタル酸水素カリウムと水酸化ナトリウム；カコジル酸ナトリウム塩と酢酸ナトリウム；リン酸二水素カリウムとリン酸水素ナトリウム；リン酸二水素ナトリウムとリン酸水素ナトリウム；四ホウ酸ナトリウムとホウ酸；２−アミノ−２−メチル−１，３−プロパンジオールと塩酸；ジエタノールアミンと塩酸；塩化カリウム−ホウ酸と水酸化ナトリウム；ホウ酸−水酸化ナトリウムおよび塩化カリウム；グリシンと水酸化ナトリウム；炭酸ナトリウムと炭酸水素ナトリウム；リン酸水素ナトリウムと水酸化ナトリウム；塩化カリウムと水酸化ナトリウム；コハク酸、イミダゾールと塩酸、リン酸、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、グリシルグリシン、およびホウ酸緩衝液、ならびにそれらの混合物が挙げられる。他の緩衝液もまた、本発明の組成物において有用であり、そして当業者によって容易に置き換えることができる。理想的には、本発明の組成物で使用される緩衝液は、ほぼ生理的pH（7.38）であり、そして約１mMから100mM(１mM＝0.001M）の濃度の範囲で存在している。そうした緩衝液は、容易に、市販のものが利用可能であり、または、当該分野で周知の実験室の方法を用いて製造される。例えば、10mM PBS（リン酸緩衝液生理食塩水）は、市販のもの（Zymed Cat. No. 00-3000）が利用可能であり、または、KH2PO4 0.26ｇ、Na2HPO4-7H20 2.17ｇ、NaCl 8.71ｇ、蒸留水800mLを混合し、そしてNaOHまたはHClを用いて、塩濃度を変える可能性があるので、行き過ぎないようにおよび逆滴定しないように、pHを7.4に調節し、水で１Lに容量を合わせる。本発明の組成物はまた、１またはそれ以上の張度調整剤を含むこともできる。張度調整剤は、組成物の有効浸透圧を増加させ、それにより、それらの細胞性環境内での適合性を改善するように作用する。例えば、細胞が低張性溶液（すなわち、低溶質濃度を有し、そのために高い水濃度を有する溶液）に置かれた場合、そこには細胞内への水の正味の移動が生じ、細胞を膨潤させ破壊（溶解）させるだろう。反対に、細胞が高張性溶液に置かれた場合は、細胞は収縮するだろう。張度調整剤は、それに限定されないが、塩化ナトリウムのような塩；マンニトールのような糖類が含まれ、そして本発明の組成物中でほぼ等張性調製物のために十分な量で存在している。本発明の組成物において、組成物の張度およびpHは生理的条件んい調整される。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easter, Pa., 第15版 (1975)を参照する。
【００７９】
本発明の組成物の製造および医薬活性物質またはその製薬的に受容可能な塩もしくは溶媒和物のテノン嚢下送達方法は、以下の実施例に詳細が記載されている。当業者は、本願の組成物および方法が、テノン嚢下、眼内、全身または局所送達のための他の多くの本発明の組成物の製造に容易に適合できることを理解するだろう。
【実施例】
【００８０】
実施例１
LC-API/MS/MSによるヒト血漿（ヘパリンナトリウム処理）中の式Ｉの化合物の測定のための生物分析方法
式Ｉの化合物および内部標準物質（式I-d7の化合物）を酢酸エチル：ヘキサン（50：50）を用いた液−液抽出によりヒト血漿（ヘパリンナトリウム処理）500μLから抽出した。蒸発乾燥および再構成後、抽出物をLC-API/MS/MSで分析した。稼働時間は約2.5分であった。式Ｉの化合物の計量下限（LLOQ）は0.0100 ng/mLであった（図１）。信頼応答範囲は0.0100〜10.0ng/mLであった。
生物分析方法はヒト血漿での完全な検証試験の結果に基づいている。関連する結果および報告はALTAの検証報告書AR139Kにある。
【００８１】
合格判定基準
上記で参照した検証結果に基づいて：
１．許容できる分析の実施は、少なくとも75％の個々の標準点が方法の基準に合うような標準曲線を有するべきである。逆算された標準の偏差（％DEV）は名目上の濃度の±15％以内でなければならないが、例外的にLLOQのについては±20％の偏差が許容される。標準曲線の２回測定した最低点の少なくとも１つの計算された濃度は、LLOQとして定量するための基準に合っていなければならない。もしこの基準が合わなければ、このLLOQは次のレベルに持ち上げられる。
２．許容できる分析QCの計算された濃度は名目上の濃度の±15％以内でなければならない。全ての分析QCの少なくとも３分の２が、表示されたそれぞれのQCレベルにより、与えられた規準に合わなければならない。
３．許容できる希釈QCの計算された濃度は名目上の濃度の±15％以内でなければならない。希釈QCの少なくとも３分の２が、それぞれの希釈スキームのために与えられた規準に合わなければならない。もし、与えられた希釈スキームのための希釈QCが基準に合わなければ、次にこの希釈スキームに関連した全ての試験検体は反復させる必要がある。
４．もし、標準曲線および分析QCのいずれもの基準も合わなければ、分析結果は拒絶される。
【００８２】
改定の記録
改定１は、評価、事前注意および、新規なすすぎ用溶媒の添加を含む、注入器の持越し効果に対する防御をもたらした。
【００８３】
分析方法
器具および設備
SCIEX API 4000TM 質量分析計（PE-SCIEX コンコード、オンタリオ、カナダ）
島津LC-10AD HPLCポンプ（２）混合ティー（またはその等価物）付の島津SCL-10A コントローラ（またはその等価物）またはHTC-PAL 自動注入器（またはその等価物）
IEC セントラGP8R遠心機（またはその等価物）
ターボバップLV エバポレーター
試薬および化学品
基準物質、式Ｉの化合物、および内部標準物質（式I-d７の化合物）はファイザー社下のアグロン（Agouron）製薬会社から入手した。使用時、アセトニトリル（ACN）、メタノール（MeOH）、酢酸エチル、ヘキサンおよび水はHPLC級またはその等価物である。
【００８４】
試薬および溶液の調製のための以下の方法は例示のためにのみ提供される。他の調製方法にも、最終濃度が同一であるかぎり、置き換えが可能である。
１．構成用試薬／希釈溶媒：MeOH：水（50：50）等容量のMeOHおよび水を混合する。
２．１Ｍ NH4OAc（酢酸アンモニウム）NH4OAcの77.09ｇを水１Lに溶解する。
３．５mM NH4OAc  １Ｍ NH4OAcの５mLと水995mLを混合する。
４．酢酸エチル：ヘキサン（50：50）酢酸エチル500mLとヘキサン500mLを混合する。
５．再構成用溶媒：MeOH：５mM NH4OAc（50：50）。MeOHの50mLと５mM NH4OAcの50mLを混合する。
６．移動相Ａ：0.1％ギ酸  水999mLとギ酸1mLを混合する。
７．移動相Ｂ：0.1％ギ酸を含むACN  CANの999mLとギ酸１mLを混合する。
８．自動注入器すすぎ液１：0.3％ポリエチレンイミン（PEI）を含むACN：水（50：50）：ACNの500mL、水500mLおよびPEIの３mLを混合する。
９．自動注入器すすぎ液２：0.5％ギ酸を含むMeOH：水（10：90）：MeOHの100mL、水900mLおよびギ酸５mLを混合する。溶液を良く混ぜて、使用前に溶液を室温まで持っていく。
【００８５】
標準品および品質管理用検体の調製
以下の方法を、検量曲線（CC）および品質管理（QC）用溶液の調製のための例として提供する。他の秤量および希釈は、検量範囲が変わらずQC濃度がほぼ与えられたものと同一であれば、置き換えることができる。検量曲線点の例を以下に示す。
【００８６】
１．CCおよびQCストック溶液
ａ）式Ｉの化合物のCCストック溶液をMeOH中で100μg/mLの濃度で調製する。
ｂ）式Ｉの化合物のQCストック溶液をMeOH中で、独立した秤量により100μg/mLの濃度で調製する。
【００８７】
２．CCスパイキング溶液
希釈溶媒（MeOH：水（50：50））中のCCサブストックおよびスパイキング溶液を以下に示すように調製する。
【表１】
2006306877.tif 000006
【００８８】
３．内部標準溶液
ａ）式I-d72の化合物の100μg/mLの内部標準（IS）ストック溶液を調製する。
ｂ）希釈溶媒中のISスパイキング溶液は、分析当日に以下に示すように用時調製する：
【表２】
2006306877.tif 000007
【００８９】
プールしたマトリックスQC
QCはコントロールマトリックス（ヘパリンナトリウムを添加したヒト血漿）を式Ｉの化合物の10μg/mL QCサブストック溶液（QCストック溶液の１mLをMeOHで10mLまで希釈して作成する）でスパイキングして調製し、次に、コントロールマトリックスで希釈して適当な濃度とする。QC調製の例を以下に記載する：
【表３】
2006306877.tif 000008
【００９０】
ｃ）添加（fortification）後、それぞれのQCプールを完全にボルテックスで混合する。
ｄ）それぞれのQCプールの適当量（例えば、1.2mL）のアリコットを標識したポリプロピレンチューブ（例えば、２mL）へ入れる。
ｅ）プールしたQC検体を使用時まで−20℃で冷凍保存する。
【００９１】
４．システム適合性のための試験溶液
LLOQの最終抽出物の濃度またはその近傍で、式Ｉの化合物を含む試験溶液（0.025ng/mL）およびIS（５ng/mL）が調製でき、また低検量線点を試験注入のために使用することができる。前者を製造するために、５ng/mLの式Ｉの化合物（例えば、CC-0.5）を50μL、および、20ng/mLの式I-d7の化合物（例えば、ISスパイキング溶液）を2.5mL混合し、そして再構成用溶媒（50：50 MeOH：５mM NH4OAc）で最終容積10mLまで希釈する。
【００９２】
対照およびブランクの定義
１．ISを含まないブランク（BI/BI）：BI/BIとして同定される検体はコントロールマトリクスを含み内部標準を添加していない。
２．ISを含むブランク（BI/IS）：BI/ISとして同定される検体はコントロールマトリクスを含み内部標準を添加している。
３．溶媒ブランク：適切な溶媒または移動相をバックグラウンドの欠失またはクロマトグラフィーシステムからの繰越を証明するために用いた。
【００９３】
特別な考慮
検体および抽出物を光から保護する。追加のBI/BI検体は注入器の繰越効果から検体を防御するために抽出しなければならない。
【００９４】
段階毎の抽出方法
１．全てのチューブ（ネジ蓋付ガラスチューブまたは均等物）に標識を付する。
２．コントロールマトリクス、QCおよび試験検体を室温まで融解する。
３．コントロールマトリクス、QCおよび試験検体容器を混合する。
４．必要な場合には検体を遠心し粒子を除く。
５．適当なチューブに：
ａ）コントロールマトリクス（ヘパリンナトリウム処理ヒト血漿）の500μLを、BI/BI (N＞１)、BI/IS (N＞１) および秤量曲線(N＝２) で標識したそれぞれのチューブにピペットで加える。
ｂ）QC（低、中、および高レベルでN＞２）および試験検体(N＝１)の500μLを、それぞれの適切に標識したチューブにピペットで加える。より少ない検体アリコットを取った場合は、コントロールマトリクスで（QS）を500μLに希釈するかまたは別のチューブ中で、コントロールマトリクスで希釈し、そして500μLアリコットを抽出チューブへピペットで加える。
ｃ）試験検体を希釈した場合は、一組のQC検体(N＝３)を試験検体と同一の様式で希釈しなければならない。
【００９５】
６．それぞれのCCスパイキング溶液の50μLを適当な検量曲線用チューブ（二本づつ調製）に加える。
７．ISスパイキング溶液（分析当日に調製した20ng/mLの式I-d7の化合物）の50μL、全てのBI/BI以外の、それぞれの標識したチューブに加える。
８．メークアップ試薬（50：50 MeOH：H2O）を加える：
ａ）メークアップ試薬の100μLをBI/BI検体に加える。
ｂ）メークアップ試薬の50μLをBI/IS、QCおよび試験検体に加える。
９．ボルテックスで混合する（約５〜10秒）。
10．酢酸エチル：ヘキサン(50：50)の約８mLをそれぞれのチューブに加える。
11．栓（ポリプロピレンまたはテフロン）をし、そしてオービタルミキサーで約５分間、100 RPMで混合する。
12．検体を2500RPMの設定で５分間遠心する。
13．ドライアイス／アセトン浴によりまたはチューブを−70℃冷凍庫に置いて（約30分間）水相を注意して凍結する。
14．上清を、ターボ−バップで使用するためのガラスチューブ（例えば、16×100mmガラス培養用チューブまたは均等物）にあける。
15．30℃で窒素を用いて蒸発乾固させる。
16．再構成溶媒（50：50 MeOH：５mM NH4OAc）の200μLを用いて再構成し、そして簡単に攪拌する（約10〜20秒間）。
17．琥珀製自動注入バイアルにポリエチレン挿入部分（または均等物）を用いて移す。
18．検体抽出物は分析まで冷蔵庫内に保管できる。
【００９６】
クロマトグラフィー
分離は逆相クロマトグラフィーを用いて行う。
HPLC操作条件：
カラム：Keystone Betasil C18, (５μm) 100×２mm (Thermo Hypersil-Keystone)
ガード：Keystone Betasil C18, (５μm) 10×２mm (Thermo Hypersil-Keystone)
カラム温度：周辺温度
注入容積：30μL（クロマトグラフィーの統合性が維持されていれば、異なった注入容積を用いてもいい）
流速：0.4mL／分
移動相：定組成（Isocratic）、移動相Ａ：移動相Ｂ  55：45 (v/v)
分析物質   〜保持時間（分）
式Ｉの化合物                1.2
式I-d7の化合物              1.2
【００９７】
0.5μmのステンレススチール製プレカラムフィルターおよび／またはフリットを、カラムの寿命を延ばすために使用することができる。このプレカラムフィルターは、明らかな逆圧が観察されなければ、各種の分析用セットで用いることができる。
自動注入器のすすぎのための適切な試薬はオートインジェクターリンス１および２である。他の適切なすすぎ液を用いることができる。
【００９８】
質量分析法による検出
検出はタンデム型質量分析法（MS/MS）により行われる。HPLCシステムはターボロンスプレーTM（TurbolonSprayTM）常圧イオン化注入口を用いた質量分析法と組み合わせている。分析は陽イオン化MS/MSにより行われる。高圧液体窒素ジャワーからの高純度窒素ガスを、噴霧器、ターボロンスプレーTMおよびカーテンガスのために使用する。他の窒素源または空気源もまた使用することができる。
検出は、多数反応モニタリングモード（MRM）で行われる。断片化イオンを生成するための衝突用ガスは高純度窒素である。
適切な感度を達成した場合は、カラム溶出液はデッドボリューム（dead volume）をゼロにしたティー（tee）（バルコ（Valco）社、ヒューストン、テキサス、またはその均等物）を用いて、適当な分割比で、カラム後に分割され、その他の全ての溶出液は注入口へと向けることができる。
【００９９】
以下の反応がモニターされる：
分析物質    遷移（±0.2 amu）
式Ｉの化合物          m/z 468.1 ? 193.1
式I-d7の化合物        m/z 475.1 ? 193.1
【０１００】
以下の機器パラメータを検証化の間に用いた。実測のパラメータ値は、機器の感度を至適化するために毎日変えてもいい。分析セットで用いた実際のパラメータ値は生データ中に記録しておかなければならない。
質量分析パラメーター：
ISV電圧（IS）：4400 V
カーテンガス（CUR）：15
ターボロンスプレー温度（TEM）：700℃
衝突圧（CAD）：N2 @ 7
クラスタ分離化電位（DP）：90
衝突エネルギー（CE）：59
GS1：50
GS2：75
【０１０１】
定量化法
ピーク領域をアプライドバイオシステム社のMDS SCIEX AnalystTMソフトウエアで積分する。平準化ファクターを用いることができる。使用した場合は、同一の平準化ファクターを、用いたセットの全ての積分のために使用しなければならない。検量線はピーク領域比（分析物質／内部標準）から、標準検量線の名目上の濃度に対する最小二乗回帰法の比を用いて導かれる。回帰線からの偏差は、それぞれの検量標準レベルの濃度を逆算する回帰式を用いて計算される。QC検体の濃度はまた、それらの回帰曲線から、計算ピーク領域比を用いて計算される。
回帰型：    線形    
重み係数：  １／×２*
* ｘが所与の検量標準レベルの濃度である場合。
【０１０２】
式Ｉの化合物のヒト血漿パラメータの記録
プロジェクト：モード：ISV
記録：機器：SX9
【表４】
2006306877.tif 000009
【０１０３】
実施例２
加齢性黄斑変性症を有するカニクイザルおよびヒトにおける、式Ｉの化合物（VEGFR阻害剤）の、全身性作用を最小にした有効な脈絡膜濃度の達成：
式Ｉの化合物は、副作用を最小限にするために、テノン嚢下投与により黄斑に近接した眼後部へ送達できる。式Ｉの化合物は、VEGER2チロシンキナーゼ活性の強力な阻害剤であることが発見され、VEGERチロシンキナーゼに対して選択的である。この化合物はまた、既存の血管の漏出の減少を伴った萎縮および血管新生の抑制を含む各種の前臨床モデルにおける、眼の血管新生の強力で、持続しそして再現性のある阻害剤であることがわかっている。
【０１０４】
式Ｉの化合物の薬物溶解性は低く、PBS中で約0.8μg/mlであり、硝子体中では約５μg/mlである。この化合物はタンパク質に強く結合し、例えば、血清結合性は約99.9％である。そうした高いタンパク質結合性および低溶解性は、薬物がゆっくり消失する沈殿体（depot）を形成することを意味している。例えば、式Ｉの化合物の14C放射性等価物は、最初に色素細胞に取り込まれ、そして投与後８週間にわたって存在し続ける。したがって、眼組織中の薬物レベルは平衡状態に達し、そして相対的に延長された期間内で一定のままである。さらにこの化合物の物理化学的特性は、テノン嚢下投与に適している。
【０１０５】
加齢性黄斑変性症を伴った中心下脈絡膜血管新生に罹患した被験者における、式Ｉの化合物の安全性および効果に関する、臨床の第１／２相の、無作為で、マスクされた、単回および複数回投与、連続投与−増量試験を実施した。この試験型の実施では、式Ｉの化合物の、52週間の反復後部テノン嚢下投与およびそれに続く52週間のフォローアップによる、無作為マスク第１／２相の単回および複数回投与、連続投与−増量試験を含んでいた。この試験は２つのステージを含んでおり、ステージ２は13週目で安全性が証明された後で行った。これらの試験への参加者には、全ての型の中心窩下脈絡膜血管新生を伴った55才以上の非滲出型（乾燥型）および滲出型（湿潤型）を含む滲出性加齢性黄斑変性症（AMD）の114人の男女を含んでいる。彼らの視力は73から24文字（20/40 20/320）として測定され、スクリーニングの前３ヶ月以内ならば先の一回のPDTが許された。この試験のグループ数には：３つのコホートの４つの分枝：50mg(q13 and 26 w)、150mg (q26 w) および600mg (q52 w)、が含まれ、参加した試験センターは、オランダ(4)、米国(24)、英国(6)およびオーストラリア(5)、ならびにウイシコンシン大学FPRCの独立した一ヶ所の解読センターである。
【０１０６】
この試験の第一のエンドポイントは以下の：単回のテノン嚢下投与後の13週間および複数回投与後の104週間での眼および全身への安全性である。失敗率：喪失した（すなわち、15文字未満の）被験者の％。第二のエンドポイントには：15文字以上を獲得した被験者の応答率％；ベースラインからの視力の平均変動；眼底写真、蛍光眼底血管造影およびOCTの変化；テノン嚢下投与後の式Ｉの化合物の薬物代謝；ならびに健康に関連した生活の質のスコアの変化が含まれる。
【０１０７】
臨床上の安全性のために、最長のフォローアップ期間は12ヶ月（４回の注射）であり；治療に関連するAEは−被験者の8/60 (13％)であり（全て軽度）；薬物に関連するSAEはなく；そして死亡例もなかった。
【０１０８】
ヒトにおいて、式Ｉの化合物は、アッセイの感度：10pg/mL；ステージ１の間に測定した血漿濃度：回収された378の検体で、35 (９％)の検体が測定可能な血漿濃度を有し；35人の活性薬物を受けた患者の内、19 (54％)人の患者が少なくとも１回の測定可能な血漿濃度を有しており；最大の測定可能な血漿濃度は102pg/mL（３日目）；４週間後には測定可能な血漿濃度はなかった。血漿濃度は、IC90＝60ng/gと見積もられた予想最小有効組織濃度より低かった。
【０１０９】
マスクされた有効試験において、47人の被験者が、低用量（50μg）、中用量（150μg）および高用量（600μg）のコホートでの13週間の訪問を達成し、そのうち42人には活性薬物そして５人にはプラセボが与えられた。13週間のフォローアップ期間の終了時の視力のベースラインからの変化は以下のようであった：４人の被験者は15以上の文字を獲得し；36人の被験者の視力が安定し（ベースラインから±14文字以内）；そして７人の被験者は15以上の文字を失った。
【０１１０】
式Ｉの化合物は強力で有効な小分子VEGFR2阻害剤である。前臨床用の動物種で、式Ｉの化合物は少なくとも16週間、脈絡膜中の目標とした濃度を超えた。ヒト血漿濃度は治療レベルより著しく低いことが証明された。これまでの第１／２相試験において、顕著な副作用は観察されなかった。したがって、式Ｉの化合物は、非滲出型（ドライAMD）および滲出型（ウエットAMD）を含む血管新生性加齢性黄斑変性症（AMD）の治療のための有効な薬物である可能性がある。
【０１１１】
実施例３
式Ｉの化合物をカニクイザルにテノン嚢下投与したときの眼および全身性薬物代謝
式Ｉの化合物のVEGFR チロシンキナーゼ阻害剤は、加齢性黄斑変性症に関連した脈絡膜血管新生の治療のためのテノン嚢下投与について臨床開発が行われている。式Ｉの化合物の眼および全身性分布は、テノン嚢下投与後のカニクイザルを用いて評価した。
【０１１２】
単回投与での薬物代謝および毒性代謝試験をオスおよびメスカニクイザルで行った。式Ｉの化合物を、可能な臨床用量より数倍高い投与量で、無菌ショ糖懸濁液をテノン嚢下注射により投与した。薬物の沈着は黄斑の後部の視神経に隣接した箇所を標的とした。血漿は投与後48時間まで採取した。脈絡膜、網膜、投与部位組織、眼筋、強膜、硝子体、虹彩−毛様体、水晶体および房水を含む眼組織を、一つの試験で16週までの種々の時間点で採取した。投与部位組織、脈絡膜、網膜および硝子体の式Ｉの化合物の濃度を、続く試験の13週目で測定した。血漿および組織濃度はLC-MS/MSで測定した。
【０１１３】
式Ｉの化合物の血漿濃度は、１検体以外の全ての投与群の全ての例で0.2ng/mL未満であった。式Ｉの化合物は、試験された全ての投与量で単回テノン嚢下投与の後で、16週まで投与部位組織（投与部位の強膜に近接して採取された結膜および脂肪組織）で観察された。加齢性黄斑変性症の標的組織である脈絡膜中での式Ｉの化合物の濃度は、ラット網膜PK/PDモデルにおけるVEGF-R2阻害のための式Ｉの化合物のIC90の25〜125倍で、３日以内に達成され、そして16週まで維持された。式Ｉの化合物の網膜の濃度は通常IC90以下であり、またテノン膜に包まれており、軽度のしかし変動するレベルを示した。強膜中の式Ｉの化合物の濃度は８週まで増加し、そして12および16週で減少した。非常に低濃度の式Ｉの化合物が、虹彩−毛様体または水晶体で観察され、そして硝子体または房水中には観察されなかった。〔図２〕
【０１１４】
式Ｉの化合物（すなわちAG-013958）は、加齢性黄斑変性症を有するカニクイザルおよびヒトにおいて、最小の全身性効果で有効な脈絡膜濃度を達成するVEGFR阻害剤である。式Ｉの化合物の懸濁液のテノン嚢下投与は、強膜の後部表面上に薬物の沈着を形成し、末梢組織にほとんど影響のないそして測定可能な全身性曝露を有せず、脈絡膜に対する持続する曝露を与えた。このデータは、別途報告された、式Ｉの化合物の前臨床安全性評価、およびまた、この化合物の加齢性黄斑変性症の治療のための進行中の臨床評価を裏付けする。
【０１１５】
【表５】
2006306877.tif 000010
【０１１６】
式Ｉの化合物の物理化学的特性には、低い薬物溶解性：PBS中で約0.8μg/ml；硝子体中で約５μg/ml；タンパク質に強く結合；血清結合性が約99.9％；が含まれ、高いタンパク質結合性および低溶解性は、薬物がゆっくり消失する沈殿体（depot）を形成することを意味し、したがって、眼組織中の薬物レベルは平衡状態に達し、そして延長された期間内で比較的一定のままである。これらの物理化学的特性は、テノン嚢下投与に適している。
【０１１７】
【表６】
2006306877.tif 000011
【０１１８】
式Ｉの化合物は強力で有効な小分子VEGFR2阻害剤である。前臨床用の動物種で、式Ｉの化合物は少なくとも16週間、脈絡膜中の目標とした濃度を超えた。ヒト血漿濃度は治療レベルより著しく低いことが証明された。これまでの第１／２相試験において、顕著な副作用は観察されなかった。式Ｉの化合物は、血管新生性加齢性黄斑変性症の治療のための有効な薬物である可能性がある。
【０１１９】
実施例４
VEGF受容体チロシンキナーゼ阻害剤、式Ｉの化合物、ウサギおよび霊長類における眼投与後の評価
式Ｉの化合物は、加齢性黄斑変性症のような血管新生性眼疾患の治療のために、現在第１／２相の臨床試験が実施中の、血管内皮増殖因子受容体チロシンキナーゼ阻害剤である。式Ｉの化合物の安全性は、予想される臨床用量の１〜30倍増やした投与量（それぞれ眼に）で、テノン嚢下（ST）、硝子体内（IVT）または静脈内（IV）投与での、一連の非臨床試験で評価された。式Ｉの化合物の単回テノン嚢下投与（意図される臨床投与経路）は、霊長類で治療の13週まで化合物に起因する肉眼的な所見は得られなかった。眼および全身組織の顕微鏡的所見では治療後８および13週でテノン嚢下投与部位にマクロファージの存在が見出された。この所見は、式Ｉの化合物の存在に対する異物反応と一致しており、そして組織の損傷または劇症炎症反応は伴っていなかった。ウサギおよび霊長類におけるIVT投与経路を用いた試験での主要な所見は、注射後８週間までの両方の動物種の硝子体中で肉眼的に認められる試験物質の同定であった。IVT投与のウサギの硝子体中のマクロファージの存在は、異物反応と考えられた。IVT試験で選択された用量は、テノン嚢下投与で試験されたものより２〜３倍高い式Ｉの化合物の脈絡膜濃度を生じさせた。選択された最大のIVT投与量での単回ボーラスIV投与で与えられた式Ｉの化合物は、治療後５日までに全身性毒性の兆しは生じさせなかった。全体として、式Ｉの化合物の前臨床安全性評価により、この化合物がウサギおよび霊長類において良く耐えられ、そして、この化合物の非滲出型（ドライAMD）および滲出型（ウエットAMD）を含む血管新生性加齢性黄斑変性症（AMD）の治療のためのさらなる開発を支援する。
【０１２０】
加齢性黄斑変性症のような眼血管疾患は米国における視力消失および盲目の主たる原因である(1)。血管内皮増殖因子（VEGF）は血管新生に関連していると考えられており、VEGF経路の阻害は脈絡膜血管新生の治療に対して医薬による干渉として証明された希望を有している(2)。式Ｉの化合物は、血管内皮増殖因子受容体２（VEGF-R2）のチロシンキナーゼ（TK）ドメインの活性を阻害する低分子である。式Ｉの化合物については現在、加齢性黄斑変性症の患者の脈絡膜血管新生の治療を意図した血管新生阻害剤として、第１／２相臨床試験が行われている。臨床の送達経路はテノン嚢下（ST）投与によるものである。この研究は、ダッチベルテッドウサギ（Dutch-belted rabbits）およびカニクイザルにおけるテノン嚢下および硝子体内（IVT）投与による、ならびに、ウサギにおける静脈内ボーラス注射による、前臨床安全性評価を探求している。
【０１２１】
材料および方法
動物：オスおよびメスのダッチベルトウサギ（1.5〜２kg）およびカニクイザル（２〜４kg）。
全ての動物関連操作は、IACUCで承認された手順の下に、動物保護法の基準および実験動物のケアと使用の指針に従って行った。この研究は、眼科および視覚研究での動物の使用に関するARVO勧告に適合している。
【０１２２】
眼科投与
霊長類でのテノン嚢下投与：動物を麻酔し（キシラジン／ケタミン）ついで小さい切開（１〜２mm）を眼の一時的な下部象眼に作成して強膜に曝露しテノン嚢下のスペースに接触できるようにした。曲がった23ゲージの鈍端カニューレを、テノン嚢下スペースに挿入し、そして後部方向に進めた。式Ｉの化合物またはビークル（ショ糖をベースにした製剤）は0.5mlのボーラス注射で投与した。
【０１２３】
霊長類およびウサギでのIVT投与：動物を麻酔し（キシラジン／ケタミン）、ついで27ゲージ針を上部／一時的象眼の角膜輪部の後方へ約３mm挿入した。針の先端面取り部を前方位置に置き、そして硝子体中央に進めた。式Ｉの化合物またはビークル（ヒアルロン酸をベースにした製剤）は0.05mlのボーラス注射で投与した。
【０１２４】
実験計画
ウサギおよび霊長類でのIVT試験およびテノン嚢下試験計画を図３で示す。
【０１２５】
結果：
【表７】
2006306877.tif 000012
【０１２６】
【表８】
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【０１２７】
【表９】
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【０１２８】
【表１０】
2006306877.tif 000015
【０１２９】
式Ｉの化合物はテノン嚢下、IVTおよび静脈内投与に十分耐えられる。網膜電図写真および眼科試験は、テノン嚢下投与の後の試験の持続時間を通して正常範囲以内であった。この研究で得られたエンドポイントで測定した全身性毒性は、式Ｉの化合物の眼投与の後には観察されなかった。静脈内注射で投与した式Ｉの化合物は、臨床的観察および組織の組織病理による測定で、全身毒性を生じさせなかった。
【０１３０】
実施例５
カニクイザルへのテノン嚢下投与による式Ｉの化合物の眼および全身性薬物代謝
式Ｉの化合物であるVEGFRチロシンキナーゼ阻害剤は、加齢性黄斑変性症に関連した脈絡膜血管新生の治療のためのテノン嚢下投与について臨床開発が行われている。式Ｉの化合物の眼および全身性分布は、テノン嚢下（ST）投与後のカニクイザルを用いて評価した。
【０１３１】
単回投与での薬物代謝および毒性代謝試験をオスおよびメスカニクイザルで行った。式Ｉの化合物を、可能な臨床用量より数倍高い投与量で、無菌ショ糖懸濁液をテノン嚢下注射により投与した。薬物の沈着は黄斑の後部の視神経に隣接した箇所を標的とした。血漿は投与後48時間まで採取した。脈絡膜、網膜、投与部位組織、眼筋、強膜、硝子体、虹彩−毛様体、水晶体および房水を含む眼組織を、一つの試験で16週までの種々の時間点で採取した。投与部位組織、脈絡膜、網膜および硝子体の式Ｉの化合物の濃度を、続く試験の13周目で測定した。血漿および組織濃度はLC-MS/MSで測定した。
【０１３２】
式Ｉの化合物の血漿濃度は、１検体以外の全ての投与群の全ての例で0.2ng/mL未満であった。式Ｉの化合物は、試験された全ての投与量で単回テノン嚢下投与の後で、16週まで投与部位組織（投与部位の強膜に近接して採取された結膜および脂肪組織）で観察された。加齢性黄斑変性症の標的組織である脈絡膜中での式Ｉの化合物の濃度は、ラット網膜PK/PDモデルにおけるVEGF-R2阻害のための式Ｉの化合物のIC90の25〜125倍で、３日以内に達成され、そして16週まで維持された。式Ｉの化合物の網膜の濃度は通常IC90以下であった。眼筋もまたテノン膜に包まれており、軽度のしかし変動するレベルを示した。強膜検体中の濃度は８週まで増加し、そして12および16週で減少した。非常に低濃度の式Ｉの化合物が、虹彩−毛様体または水晶体で観察され、そして硝子体または房水中には低値しかないかまたは観察されなかった。
【０１３３】
式Ｉの化合物（すなわちAG-013958）は、加齢性黄斑変性症を有するカニクイザルおよびヒトにおいて、最小の全身性効果で有効な脈絡膜濃度を達成するVEGFR阻害剤である。式Ｉの化合物の懸濁液のテノン嚢下投与は、強膜の後部表面上に薬物の沈着を形成し、末梢組織にほとんど影響のないそして測定可能な全身性曝露を有しない、脈絡膜に対する持続する曝露を与えた。このデータは、別途報告された、式Ｉの化合物の前臨床安全性評価、およびまた、この化合物の加齢性黄斑変性症の治療のための進行中の臨床評価を裏付けする。
【０１３４】
以下の試験は、カニクイザルにおいて式Ｉの化合物の眼および全身性分布を測定するために行われた。本化合物は無菌ショ糖懸濁液として調製された。
【０１３５】
16週間試験では、オスおよびメスザルを軽く麻酔し、次いで0.5mL／眼の式Ｉの化合物を投与した。二つの群には、50または1500μg／眼をテノン嚢下注射した。血液検体を投与後１、２、４、８、12、24、48、72時間ならびに4および８週目に採取した。動物は安楽死させ、エンドポイントは３日目、ならびに４、８、12および16週目であった。眼を摘出し、切開し、採取された眼組織は、投与部位、脈絡膜、網膜、硝子体液、房水、水晶体、強膜、虹彩−毛様体および眼筋であった。試験検体はLC-MS/MSで分析した。
【０１３６】
13週間試験では、オスザルの３つの群を軽く麻酔し、次いで50、250または1500μg／眼の式Ｉの化合物を投与した。投与は両側に、視神経近辺へのテノン嚢下注射により行った。血液検体を投与後１、６および24時間後に採取した。13週目に切開した後、採取した眼組織は投与部位、脈絡膜、網膜および硝子体液であった。眼組織および血漿検体はLC-MS/MSで分析した。
【０１３７】
分析した組織：投与部位*；網膜；虹彩−毛様体；強膜；眼筋；硝子体液；房水；水晶体；血漿。
*  投与部位組織は、黄斑の後方で視神経に隣接した薬物沈着領域から採取したテノン嚢下スペースの結膜および脂肪組織からなっている。
【０１３８】
分析
投与部位組織、強膜、眼筋および水晶体  −  0.1％ TFA（トリフルオロ酢酸）を含むCAN（アセトニトリル）。
網膜および脈絡膜  −  CAN:MeOHによるタンパク質沈殿。
LOQ：
網膜  −  0.2ng/ｇ（濃度は組織質量で補正した）
脈絡膜  −  0.5ng/ｇ（濃度は組織質量で補正した）
血漿  −  0.2ng/mL
硝子体  −  0.5ng/mL
投与部位組織、強膜、眼筋および水晶体  −  0.5 ng/mL
【０１３９】
結果
これらの試験の結果は、式Ｉの化合物が両方の投与量で16週までに投与部位組織で検出されたことを示した。50μg／眼の投与量群で、13週目で１μgまたはそれ以上の量が観察された。
【０１４０】
３日目までに、少なくとも1,100ng/ｇの濃度の式Ｉの化合物が脈絡膜組織で検出され、そして16週目まで維持された。両方の試験で検出された濃度は目標IC90より125倍高かった。
【０１４１】
網膜中の式Ｉの化合物の濃度は目標IC90より低くそして変動した。式Ｉの化合物は眼筋および虹彩−毛様体中では中程度であり、水晶体および硝子体液の２、３の検体では低値だった。式Ｉの化合物は房水中または血漿中では検出できず、そして目立った全身性または眼の毒性は観察されなかった。
【０１４２】
式Ｉの化合物は脈絡膜では、３日目に早くも目標有効濃度（IC90）より25〜125倍高くなり、そして16週まで維持された。網膜中の式Ｉの化合物の濃度は脈絡膜および投与部位より著しく低くそしてより変動した。式Ｉの化合物はいかなる眼または全身性毒性を生じさせなかった。
【０１４３】
式Ｉの化合物の投与部位組織および脈絡膜中の蓄積は薬物のゆっくりした放出を証明し、そして臨床での投与の長期の間隔を示唆している。
【０１４４】
実施例６
メスのダッチベルトウサギへのテノン嚢下注射
メスのダッチベルトウサギ（1.5〜２kg）を麻酔し（ケタミン／キシラジン混合液）そして両眼を無菌テノン嚢下注射のために準備した。それぞれの眼に試験賦形剤または製剤の0.5mLボーラス注射を、曲線型23G針を用いて投与した。動物は投与後１週間、毒性／刺激の臨床的徴候を観察した。眼をまた摘出しそして組織病理学検査のためにダビッドソン溶液中で固定した。
【０１４５】
表１で示したように、組成物のためのビークル賦形剤および本願で記載した方法には、塩化ベンザルコニウム、ドキュセートナトリウムおよびラウリル硫酸ナトリウムのような凝集剤、カルボキシメチルセルロース（CMC；低分子量（90kDa）、中分子量（250kDa）および高分子量（700kDa）、0.25-1.0％）、ポリソルベートTM80（0.02および0.2％）、ポリエチレングリコール3350（PEG3350；0.2および1.0％）、ポロキサマーTM188（0.01および0.25％）、ナノ−エッジ（ポロキサマーTM188とPEG3350の組合せ）およびメチルセルロース（MC；0.25％）；マンニトールおよび塩（例えば、NaClやMgCl）のような等張化剤、ならびにPBS緩衝液のような緩衝液を含んでいる。
【０１４６】
【表１１】
2006306877.tif 000016
【０１４７】
【表１２】
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【０１４８】
テノン嚢下注射の後、大部分の処置した眼において眼瞼周囲および注射進入口部位の周囲の結膜に中程度の赤みが観察され、ほとんどの場合に処置後２〜４日以内に消失した。この作用は投与した試験物質とは関係がなく、テノン嚢下投与操作に関わるものと考えられた。全体で、試験したビークル賦形剤はテノン嚢下投与後の眼組織において良好な耐性を示した。
【０１４９】
実施例７
テノン嚢下製剤
式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの化合物のテノン嚢下投与のための適切な製剤が開発された。これらの化合物は約0.05〜約10mg/mLの濃度範囲で；生理的pHのリン酸二水素ナトリウム緩衝液と共に；そして、ほぼ等張性製剤のために十分な量の塩化ナトリウムまたはマンニトールのいずれかと共に製剤化された。
１．ツイーンTM 80、0.001質量％〜0.2質量％；
２．CMC、0.01質量％〜1.0質量％；
３．ポロキサマーTM 188、0.01質量％〜0.25質量％；
４．メチルセルロース（MC）、0.1質量％〜0.25質量％；および
５．ポリエチレングリコール3350（PEG 3350）、0.01質量％〜1.0質量％。
これらの全ての製剤は、適切なビークルによる希釈で少なくとも0.1mg/mlまでの薬物濃度を達成するために希釈することができる。
【０１５０】
式IIの化合物をリン酸ナトリウム緩衝液、および、ほぼ等張性製剤のために十分な量の塩化ナトリウムまたはマンニトールのいずれかを用いて希釈した：
1.2mg/ml 0.25％ CMC, 0.01％ツイーンTM 80  オートクレーブで滅菌済
10mg/ml濾過済み0.1％ MC* ＋ 0.05％ ツイーンTM 80  照射済
式IIIの化合物をリン酸ナトリウム緩衝液、および、ほぼ等張性製剤のために十分な量の塩化ナトリウムまたはマンニトールのいずれかを用いて希釈した：
1.2mg/ml 0.01％ツイーンTM 80  オートクレーブで滅菌済
10mg/ml濾過済み0.5％ MC* ＋ 0.05％ ツイーンTM 80  オートクレーブで滅菌済
【０１５１】
式Ｉ、IIおよびIIIの化合物の製造スキーム：
全ての界面活性剤または懸濁剤溶液は１〜20倍濃縮液として調製し、目的の濃度を達成するために十分容積を加えた。以下に提供するものは、式Ｉ、IIおよびIIIの化合物を含むテノン嚢下用組成物の製造スキームである：
10mM pH 7.4リン酸緩衝液／0.9％生理食塩水溶液を調製する。
PBSを用いて界面活性剤溶液を調製する。0.2μmフィルターを通して濾過し清浄なビンに入れる。
必要な場合は、PBSを用いて懸濁剤溶液を調製する。0.22または５μmフィルターを通して濾過し清浄なビンに入れる。
薬物物質を測り取り適切な分散用容器に入れる。
【０１５２】
必要な容積の界面活性剤／懸濁剤溶液を加える。医薬が完全に湿潤化するまでマグネチックスターラー上に置く。
懸濁した薬物を清浄な混合用容器に移しそして次に分散用容器をPBSで洗浄してこの容器に入れる。
使用される場合は、懸濁剤溶液の必要量を混合用容器に加える。
PBSで最終容積を80〜90％とする。
ホモジナイザーを使用して15分間混合する。
秤量用シリンダーに移し；混合用容器とミキサーヘッドをPBSで洗浄してバルクに入れる。
泡抜きしてから容積を合わせる。
清浄ビンに移し、マグネチックスターラー上に置く。混合速度は懸濁液が充填中に均質になるようにセットする。
２mLバイアルを、校正した１〜５mLを用いて１mLの懸濁液で充たす。
栓をして全てのバイアルに蓋をつける。
必要な場合は、バイアルをオートクレーブで滅菌する（条件：121℃で15分間）。
【０１５３】
本発明を多くの特定の組成物を参照して記載する一方、当業者は本発明が、他の特定の形態で、本発明の精神を離れることなく具体化できることを理解するだろう。したがって、当業者は本発明が上記の詳細な説明によって制限されるのではなく、かえって付随する請求項によって定義されることを理解するであろう。
【図面の簡単な説明】
【０１５４】
【図１】眼の概略図である。
【図２】加齢性黄斑変性症の標的組織である脈絡膜中での式Ｉの化合物の投与後の濃度変化を示す。
【図３】ウサギおよび霊長類でのIVT試験およびテノン嚢下試験計画を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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