(57)【要約】【課題】イリノテカン(CPT-11)、トポテカンおよび他のカンプトテシンアナログのようなカンプトテシン薬物の副作用を低減する新規処置方法、組成物およびキットを提供すること。【解決手段】胆汁による活性カンプトテシン種の排泄を低減する能力を有する組成物であって、カンプトテシン化合物を動物に投与して、この化合物の毒性を低減することにおける使用のための組成物。抱合酵素活性またはグルクロノシルトランスフェラーゼ活性を増大する薬剤、およびシクロスポリンＡのような胆汁輸送タンパク質活性を低減する薬剤と組み合わせてそのような薬物を使用する治療および処置方法が開示される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＴＰ−１１を動物に投与する際に、該ＣＴＰ−１１の毒性を低減することにおける使用のための、胆汁による活性カンプトテシン種の排泄を低減する能力を有する組成物であって、ここで、該組成物が抱合酵素活性を増大する、組成物。
【請求項２】
前記組成物が第Ｉ相抱合酵素活性を増大する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物がチトクロムＰ４５０酵素活性を増大する、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物が第ＩＩ相抱合酵素活性を増大する、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物がグルクロノシルトランスフェラーゼ酵素活性を増大する、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物がジチオレチオンである、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記組成物がオルチプラズである、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物が、アリールオキシカルボン酸、アリールカルボン酸、クロロフェノキシカルボン酸またはフィブリン酸である、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物が、クロフィブラート、シプロフィブラート、フェノフィブラート、ベザフィブラート、ゲムフィブラゾル、チアデノールまたはプロブコールである、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物が、フェノバルビタール、ジランチン、クロナゼパム、クロトリマゾール、ブチオニンスルホキシミン（ＢＳＯ）、シクロホスファミド、イホスファミド、レチノイン酸、リファンピンまたはジスルフィラム（アンタブース）である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物がコルチコステロイドである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
前記組成物が経口避妊薬である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物であって、ガンまたは寄生感染を有する動物に、組成物およびＣＰＴ−１１を組み合わせ投与して、ガンまたは寄生感染を処置することにおける使用のための組成物。
【請求項１４】
前記組成物が、前記ＣＰＴ−１１の前に前記動物へ投与されることが意図される、請求項１〜１３のいずれかに記載の組成物。
【請求項１５】
前記組成物が非経口投与される、請求項１〜１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
前記組成物が経口投与される、請求項１〜１４のいずれかに記載される組成物。
【請求項１７】
前記組成物がヒト患者への投与を意図される、請求項１〜１６のいずれかに記載の組成物。
【請求項１８】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の組成物と、胆汁輸送タンパク質の活性を低減する第２の組成物とを、動物への、同時投与、別個の投与または連続投与するための組み合わせ調製物として含む、製品。
【請求項１９】
９０分にわたる注入により投与する２５ｍｇ／ｍ２のＣＰＴ−１１、ならびに注入により投与する６０ｍｇ／ｋｇのフェノバルビタールおよび１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡを含む、請求項１８に記載の製品。
【請求項２０】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の組成物と組み合わせてＣＰＴ−１１を含む、組成物。
【請求項２１】
フェノバルビタール、オルチプラズ、全−トランスのレチノイン酸、フェニトイン、デキサメタゾン、リファンピンおよびクロフィブラートから選択される第１の薬剤、ならびにシクロスポリンＡ、ＳＤＺ  ＰＳＣ  ８３３、ＮＡ−３８２、ベラパミルおよびデックスベラパミルから選択される第２の薬剤と組み合わせてＣＰＴ−１１を含む、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
薬学的に受容可能な処方物中に分散された、請求項２０〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２３】
ＣＰＴ−１１と、請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物の薬学的処方物とを、動物への、同時投与、別個の投与または連続投与するための組み合わせ調製物として含む、製品。
【請求項２４】
前記ＣＰＴ−１１および前記組成物が単一のコンテナ手段内に存在する、請求項２３に記載の製品。
【請求項２５】
前記ＣＰＴ−１１および前記組成物が異なるコンテナ手段内に存在する、請求項２３に記載の製品。
【請求項２６】
前記薬学的処方物が非経口投与または経口投与に適切である、請求項２３、２４または２５に記載の製品。
【請求項２７】
ＣＰＴ−１１と、フェノバルビタール、オルチプラズ、全−トランスのレチノイン酸、フェニトイン、デキサメタゾン、リファンピンおよびクロフィブラートから選択される第１の薬剤の薬学的処方物と、シクロスポリンＡ、ＳＤＺ  ＰＳＣ  ８３３、ＮＡ−３８２、ベラパミルおよびデックスベラパミルから選択される第２の薬剤の薬学的処方物とを含む。請求項２３〜２６のいずれかに記載の製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の背景）
本出願は、1994年７月５日に出願された、同時係属中の米国特許出願第08/271,278号の一部継続出願であり、その開示の全部の本文および図面は、放棄することなく参考として特に援用される。合衆国政府は、国立衛生研究所から契約番号：-CM-07301ならびに認可番号CA-14599およびR01CA56078に応じて本発明における権利を所有し得る。
【０００２】
（Ａ．発明の分野）
本発明は、一般に、薬物毒性を低減する分野および薬物の効力を増大する分野に関する。より特定すれば、本発明は、イリノテカン（irinotecan）(CPT-11)およびトポテカン（topotecan）のようなカンプトテシン（camptothecin）薬物を、胆汁による活性なカンプトテシン種の排泄を低減する薬剤と組み合わて含む、新規処置方法、組成物およびキットに関する。グルクロノシルトランスフェラーゼ活性のような抱合酵素活性を増大する薬剤、およびシクロスポリンＡのような、p()糖タンパク質活性を低減する薬剤が特に提供される。
【背景技術】
【０００３】
Ｂ．関連技術の記載
カンプトテシンは、トポイソメラーセ１を阻害することにより、有望なインビトロ抗新生物活性を示したCamptotheca  acuminataの幹木由来の粗抽出物の活性成分として同定された(非特許文献１)。カンプトテシンは、1970年代の初めに臨床試験に入ったが、これらは中止された(Muggiaら、1972；Gottliebら、1970)。この薬物は、胃腸管悪性およびメラノーマに僅かなまたは部分的な応答を示したが、重篤な用量を制限する出血性膀胱炎および予想されない骨髄抑制を生じた。これら試験では、このアルカロイドのナトリウム塩を用いた。これはその水溶性を改善したが、それはまた、抗腫瘍活性の約10倍の減少および毒性の増大を生じた(Waniら、1980；Giovanellaら、1991)。低減した活性は、カンプトテシンが最適活性に閉じたラクトン環構造を必要とするという事実に起因した。ナトリウム塩としての処方物は、弱いトポイソメラーゼ１阻害を示す環のヒドロキシ酸への開環を生じた。
【０００４】
従って、高い抗腫瘍活性および低い毒性を有するカンプトテシンの水溶性誘導体の合成に向けた努力がなされてきた。トポテカンが、10-ヒドロキシカンプトテシン環の９-位に塩基性の側鎖を導入することにより合成された。これは、トポテカンが、ラクトン形態でその水溶解度を保持することを可能にした(Kingsburyら、1991)。CPT-11は、カンプトテシンの7-位にエチル基、および10-位にピペリジノピペリジノカルボニル基とのエステル結合を形成する水酸基を導入することにより合成された(Kunimotoら、1987)。このエステル結合は、化合物の極性を増大した。
【０００５】
CPT-11は、インビボでプロドラッグとして作用し、そして酵素カルボキシルエステラーゼによりSN-38(7-エチル-10-ヒドロキシ-カンプトテシン)に転換される水溶性の半合成誘導体である（Tsujiら、1991）。SN-38は、グルクロン酸抱合を受け対応するグルクロニドを形成することが示され、これはSN-38の主要な排除経路である(Atsumiら、1991)。SN-38Gは、腸内微生物相（microflora）により脱抱合されて、SN-38を形成することが報告されている(Kanedaら、1990)。CPT-11を用いた処置後のトポイソメラーゼＩ阻害および一本鎖破壊は、主にSN-38濃度により測定される(Kawatoら、1991)。
【０００６】
腸におけるSN-38の蓄積は、ヌードマウスにおけるCPT-11投与に起因する下痢の原因であることが示された(Arakiら、1993)。従って、CPT-11のインビボ活性および毒性は、SN-38濃度に依存し、そしてCPT-11投与後の代謝物の分布（disposition）の特徴付けは、最適用量スケジュールを設計するために重要である。下痢および骨髄抑制の両者が、重篤なおよび/または生命を脅かす毒性が共通である、重大な関心事であった。
【０００７】
CPT-11およびトポテカン(TPT)の使用に関して言えば、Slichenmyerら(1993)は、CPT-11のプロドラッグの減少した代謝活性化、およびp()糖タンパク質媒介輸送による標的細胞からのTPTの活性流出が、特定のガン患者で観察されるこれら薬剤の細胞傷害性効果に対する耐性に寄与し得ることを提唱した。薬剤耐性を勝ち取るために、Slichenmyerら(1993)は、カルボキシルエステラーゼのような活性化酵素活性を増加すること、または標的細胞p()糖タンパク質活性を減少することが効果的であり得ることを示唆しているようである。
【０００８】
しかし、Slichenmyerの提唱は、カンプトテシンに関連する毒性に対する解決を提供しない。さらに、示唆されるように、他の干渉方法がなければそれらの代謝活性化を増加することは、カンプトテシン毒性を実際に増大し得る。カンプトテシンを他の活性な化学療法薬剤と組み合わせるSlichenmyerら(1993)のさらなる提唱はまた、毒性の副作用を増大し、そしてそれ故、患者の利益を制限しそうである。
【０００９】
先の研究は、SN-38薬動力学および胃腸管毒性とCPT-11の用量または薬動力学との間の一致しない相互関係を示した(Negoroら、1991；Oheら、1992；Rothenbergら、1993；Rowinskyら、1994)。さらに、ヒトにおけるカンプトテシン薬剤の代謝的運命に関する情報がほとんどなく、ヒトにおけるCPT-11投与後のSN-38Gの血漿プロフィールの明確な定義がなく、そしてカンプトテシン毒性を低減するための受け入れられた機構もない。進行中の臨床試験にもかかわらず、CPT-11代謝のより詳細な理解がより安全な処置が設計され得る前に必要であることは明らかである。
【非特許文献１】Ｗａｌｌら、「Ｔｈｅ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ，ａ  ｎｏｖｅｌ  ａｌｋａｌｏｉｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｆｒｏｍ  ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃａ  ａｃｕｍｉｎａｔａ」、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１９６６年、８８：ｐ．３８８８−３８９０
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
（発明の要旨）
本発明により、以下が提供される。
（項目１）  カンプトテシン化合物を動物に投与する際の、該化合物の毒性を低減することにおける使用のための製剤の調製における薬剤の使用であって、該薬剤は、胆汁による活性カンプトテシン種の排泄を低減する能力を有する、使用。
（項目２）  動物に投与する際の、カンプトテシン化合物の毒性を低減することにおける使用のための製剤の調製における薬剤の使用であって、該薬剤は、該動物への該製剤および該カンプトテシン化合物の投与の際に、胆汁による活性カンプトテシン種の排泄を低減するのに有効な量で該製剤中に存在する、使用。
（項目３）  前記カンプトテシン化合物が、７位、９位または１０位での置換を有するカンプトテシンアナログである、項目１に記載の使用。
（項目４）  前記カンプトテシン化合物が、トポテカン、９−アミノ−カンプトテシン（９−ＡＣ）、９−ニトロ−カンプトテシン、ＧＧ２１１またはＣＰＴ−１１（イリノテカン）である、項目１に記載の使用。
（項目５）  前記カンプトテシン化合物が、ＣＰＴ−１１である、項目４に記載の使用。
（項目６）  動物にカンプトテシン化合物を投与する際の、該カンプトテシン化合物の毒性を低減することにおける使用のための製剤の調製における薬剤の使用であって、該薬剤は、以下：
抱合酵素活性を増大する能力；または
胆汁輸送タンパク質の活性を低減する能力
を有する、使用。
（項目７）  前記薬剤が、抱合酵素活性を増大する、項目６に記載の使用。
（項目８）  前記薬剤が、第Ｉ相抱合酵素活性を増大する、項目７に記載の使用。
（項目９）  前記薬剤が、チトクロムＰ４５０酵素活性を増大する、項目８に記載の使用。
（項目１０）  前記薬剤が、第ＩＩ相抱合酵素活性を増大する、項目７に記載の使用。
（項目１１）  前記薬剤が、グルクロノシルトランスフェラーゼ酵素活性を増大する、項目１０に記載の使用。
（項目１２）  前記薬剤が、ジチオレチオンである、項目７に記載の使用。
（項目１３）  前記薬剤が、オルチプラズである、項目１２に記載の使用。
（項目１４）  前記薬剤が、アリールオキシカルボン酸、アリールカルボン酸、クロロフェノキシカルボン酸またはフィブリン酸である、項目７に記載の使用。
（項目１５）  前記薬剤が、クロフィブラート、シプロフィブラート、フェノフィブラート、ベザフィブラート、ゲムフィブラゾル、チアデノールまたはプロブコールである、項目１４に記載の使用。
（項目１６）  前記薬剤が、フェノバルビタール、ジランチン、クロナゼパム、クロトリマゾール、ブチオニンスルホキシミン（ＢＳＯ）、シクロホスファミド、イホスファミド、レチノイン酸、リファンピンまたはジスルフィラム（アンタブース）である、項目７に記載の使用。
（項目１７）  前記薬剤が、コルチコステロイドである、項目７に記載の使用。
（項目１８）  前記薬剤が、経口避妊薬である、項目７に記載の使用。
（項目１９）  前記薬剤が、胆汁輸送タンパク質の活性を低減する、項目６に記載の使用。
（項目２０）  前記薬剤が、ｐ（）糖タンパク質の活性を低減する、項目１９に記載の使用。
（項目２１）  前記薬剤が、シクロスポリン、セファロスポリンまたはスタウロスポリンである、項目１９に記載の使用。
（項目２２）  前記薬剤が、ＳＤＺ  ２８０  ４４６、３’−ケト−シクロスポリン  Ｄ、セフォペラゾンまたはスタウロスポリンである、項目２１に記載の使用。
（項目２３）  前記薬剤が、シクロスポリンＡ、ＳＤＺ  ＰＳＣ  ８３３またはＮＡ−３８２である、項目２１に記載の使用。
（項目２４）  前記薬剤が、カルシウムチャンネルブロッカーである、項目１９に記載の使用。
（項目２５）  前記薬剤が、ジヒドロピリジンアナログ、ベラパミル、デクスベラパミミル、チアパミル、ニフェジピン、ジルチアゼム、ニカルジピン、ニソルジピン、ニモジピンまたはニトレンジピンである、項目２４に記載の使用。
（項目２６）  前記薬剤が、カルモジュリンアンタゴニストである、項目１９に記載の使用。
（項目２７）  前記薬剤が、トランス−フルペンチキソール、シス−フルペンチキソール、クロルペンチキソール、フルフェナジン、クロルプロマジン、トリフルプロマジン、トリフルオペラジン、プロクロルペラジンまたはチオリダジンである、項目２６に記載の使用。
（項目２８）  前記薬剤が、プロゲステロン、プロゲステロン代謝物、プレグネノロン、ＲＵ  ４８６またはチリラザドである、項目１９に記載の使用。
（項目２９）  前記薬剤が、抗新生物薬剤である、項目１９に記載の使用。
（項目３０）  前記薬剤が、ビンクリスチン、ビンブラスチン、アクチノマイシンＤ、コルチシン、エトポシド、ダウノマイシン、ダウノルビシン、ドクソルビシン、タクソテレ、タクソールまたはタモキシフェンである、項目２９に記載の使用。
（項目３１）  前記薬剤が、レセルピン、ジピリダモル、クロロキン、プロプラノロール、テルフェナジン、イベルメクチンまたはキニジンである、項目１９に記載の使用。
（項目３２）  前記薬剤が、ｐ（）糖タンパク質に結合する抗体である、項目１９に記載の使用。
（項目３３）  項目６に記載の使用であって、ここで：
前記製剤が、抱合酵素活性を増大する第１の薬剤および胆汁輸送タンパク質の活性を低減する第２の薬剤を含むか；あるいはここで、
第１の製剤が、抱合酵素活性を増大する薬剤を含み、そして第２の製剤が胆汁輸送タンパク質の活性を低減する薬剤を含み、この両方が、前記動物への投与のために調製される、
使用。
（項目３４）  ガンまたは寄生感染を有する動物に、製剤およびカンプトテシン化合物を組み合わせ投与する際の、ガンまたは寄生感染を処置することにおける使用のための製剤の調製における薬剤の使用であって、該薬剤は、活性カンプトテシン種の胆汁排泄を低減する能力を有する、使用。
（項目３５）  ガンまたは寄生感染を処置することにおける使用のための製剤の調製における薬剤の使用であって、該薬剤は、ガンまたは寄生感染を有する動物に、該製剤およびカンプトテシン薬物を組み合わせ投与する際に、活性カンプトテシン種の胆汁排泄を低減するのに有効な量で該製剤中に存在する、使用。
（項目３６）  前記カンプトテシン薬物が、トポテカン、９−アミノ−カンプトテシン（９−ＡＣ）、９−ニトロ−カンプトテシン、ＧＧ２１１またはＣＰＴ−１１である、項目３４に記載の使用。
（項目３７）  前記製剤が、前記カンプトテシン薬物の前に前記動物へ投与されることが意図される、項目３４に記載の使用。
（項目３８）  前記製剤または前記カンプトテシン薬物が非経口投与される、項目３４に記載の使用。
（項目３９）  前記製剤または前記カンプトテシン薬物が経口投与される、項目３４に記載の使用。
（項目４０）  前記製剤がヒト患者への投与を意図される、項目３４に記載の使用。
（項目４１）  ガンまたは寄生感染を有する動物に、製剤およびカンプトテシン化合物を組み合わせ投与する際の、ガンまたは寄生感染を処置することにおける使用のための製剤の調製における薬剤の使用であって、該薬剤は、以下：
抱合酵素活性を増大する能力；または
胆汁輸送タンパク質の活性を低減する能力
を有する、使用。
（項目４２）  前記薬剤が、グルクロノシルトランスフェラーゼ酵素活性を増大する、項目４１に記載の使用。
（項目４３）  前記薬剤が、オルチプラズ、クロフィブラート、シプロフィブラート、フェノフィブラート、ベザフィブラート、ゲムフィブラゾル、チアデノール、プロブコール、フェノバルビタール、ジランチン、クロナゼパム、クロトリマゾール、ブチオニンスルホキシミン（ＢＳＯ）、シクロホスファミド、イホスファミド、レチノイン酸、コルチコステロイド、経口避妊薬、リファンピンまたはジスルフィラム（アンタブース）である、項目４２に記載の使用。
（項目４４）  前記薬剤が、フェノバルビタール、オルチプラズ、全−トランスのレチノイン酸、フェニトイン、デキサメタゾン、リファンピンおよびクロフィブラートである、項目４３に記載の使用。
（項目４５）  前記薬剤がｐ（）糖タンパク質の活性を低減する、項目４１に記載の使用。
（項目４６）  前記薬剤が、ＳＤＺ  ２８０  ４４６、３’−ケト−シクロスポリン  Ｄ、セフォペラゾン、スタウロスポリン、シクロスポリン  Ａ、ＳＤＺ  ＰＳＣ  ８３３、ＮＡ−３８２、ジヒドロピリジンアナログ、ベラパミル、デクスベラパミル、チアパミル、ニフェジピン、ジルチアゼム、ニカルジピン、ニソルジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、トランス−フルペンチキソール、シス−フルペンチキソール、クロルペンチキソール、フルフェナジン、クロルプロマジン、トリフルプロマジン、トリフルオペラジン、プロクロルペラジン、チオリダジン、プロゲステロン、プロゲステロン代謝物、プレグネノロン、ＲＵ  ４８６、チリラザド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、アクチノマイシン  Ｄ、コルチシン、エトポシド、ダウノマイシン、ダウノルビシン、ドクソルビシン、タクソテレ、タクソール、タモキシフェン、レセルピン、ジピリダモル、クロロキン、プロプラノロール、テルフェナジン、イベルメクチンまたはキニジンである、項目４５に記載の使用。
（項目４７）  前記薬剤が、シクロスポリン  Ａ、ＳＤＺ  ＰＳＣ  ８３３、ＮＡ−３８２、ベラパミルまたはデクスベラパミルである、項目４６に記載の使用。
（項目４８）  項目４１に記載の使用であって、ここで：
前記製剤が、抱合酵素活性を増大する治療的に有効な量の第１の薬剤および胆汁輸送タンパク質の活性を低減する治療的に有効な量の第２の薬剤を含むか；あるいはここで、
第１の製剤が、抱合酵素活性を増大する治療的に有効な量の薬剤を含み、そして第２の製剤が胆汁輸送タンパク質の活性を低減する治療的に有効な量の薬剤を含み、この両方が、前記動物への投与のために調製される、
使用。
（項目４９）  約９０分にわたる注入によって約２５ｍｇ／ｍ２のＣＰＴ−１１を投与する工程、注入によって約６０ｍｇ／ｋｇのフェノバルビタールおよび約１０ｍｇ／ｋｇのシクロスポリンＡを投与する工程を包含する、項目４８に記載の使用。
（項目５０）  組成物であって、該組成物は、抱合酵素活性を増大するか、または胆汁輸送タンパク質の活性を低減する薬剤と組み合わせてカンプトテシン薬物を含む、組成物。
（項目５１）  前記カンプトテシン薬物が、トポテカン、９−アミノ−カンプトテシン（９−ＡＣ）、９−ニトロ−カンプトテシン、ＧＧ２１１またはＣＰＴ−１１である、項目５０に記載の組成物。
（項目５２）  前記薬剤が、グルクロノシルトランスフェラーゼ酵素活性を増大する、項目５０に記載の組成物。
（項目５３）  前記薬剤が、オルチプラズ、クロフィブラート、シプロフィブラート、フェノフィブラート、ベザフィブラート、ゲムフィブラゾル、チアデノール、プロブコール、フェノバルビタール、ジランチン、クロナゼパム、クロトリマゾール、ブチオニンスルホキシミン（ＢＳＯ）、シクロホスファミド、イホスファミド、レチノイン酸、コルチコステロイド、経口避妊薬、リファンピンまたはジスルフィラム（アンタブース）である、項目５２に記載の組成物。
（項目５４）  前記薬剤が、フェノバルビタール、オルチプラズ、全−トランスのレチノイン酸、フェニトイン、デキサメタゾン、リファンピンおよびクロフィブラートである、項目５３に記載の組成物。
（項目５５）  前記薬剤がｐ（）糖タンパク質の活性を低減する、項目５０に記載の組成物。
（項目５６）  前記薬剤が、ＳＤＺ  ２８０  ４４６、３’−ケト−シクロスポリン  Ｄ、セフォペラゾン、スタウロスポリン、シクロスポリン  Ａ、ＳＤＺ  ＰＳＣ  ８３３、ＮＡ−３８２、ジヒドロピリジンアナログ、ベラパミル、デクスベラパミル、チアパミル、ニフェジピン、ジルチアゼム、ニカルジピン、ニソルジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、トランス−フルペンチキソール、シス−フルペンチキソール、クロルペンチキソール、フルフェナジン、クロルプロマジン、トリフルプロマジン、トリフルオペラジン、プロクロルペラジン、チオリダジン、プロゲステロン、プロゲステロン代謝物、プレグネノロン、ＲＵ  ４８６、チリラザド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、アクチノマイシン  Ｄ、コルチシン、エトポシド、ダウノマイシン、ダウノルビシン、ドクソルビシン、タクソテレ、タクソール、タモキシフェン、レセルピン、ジピリダモル、クロロキン、プロプラノロール、テルフェナジン、イベルメクチンまたはキニジンである、項目５５に記載の組成物。
（項目５７）  前記薬剤が、シクロスポリン  Ａ、ＳＤＺ  ＰＳＣ  ８３３、ＮＡ−３８２、ベラパミルまたはデクスベラパミルである、項目５６に記載の組成物。
（項目５８）  フェノバルビタール、オルチプラズ、全−トランスのレチノイン酸、フェニトイン、デキサメタゾン、リファンピンおよびクロフィブラートから選択される第１の薬剤、ならびにシクロスポリンＡ、ＳＤＺ  ＰＳＣ  ８３３、ＮＡ−３８２、ベラパミルおよびデックスベラパミルから選択される第２の薬剤と組み合わせてＣＰＴ−１１を含む、項目５０に記載の組成物。
（項目５９）  薬学的に受容可能な処方物中に分散された、項目５０に記載の組成物。
（項目６０）  治療用キットであって、該キットは、適切なコンテナ手段中に、カンプトテシン薬物の薬学的処方物、ならびにグルクロノシルトランスフェラーゼ酵素活性を増大するか、またはｐ（）糖タンパク質輸送活性を低減する薬剤の薬学的処方物を含む、キット。
（項目６１）  前記カンプトテシン薬物および前記薬剤が、単一のコンテナ手段内に存在する、項目６０に記載のキット。
（項目６２）  前記カンプトテシン薬物および前記薬剤が、異なるコンテナ手段内に存在する、項目６０に記載のキット。
（項目６３）  前記薬学的処方物が非経口投与または経口投与に適切である、項目６０に記載のキット。
（項目６４）  前記カンプトテシン薬物がＣＰＴ−１１である、項目６０に記載のキット。
（項目６５）  前記薬剤が、フェノバルビタール、オルチプラズ、全−トランスのレチノイン酸、フェニトイン、デキサメタゾン、リファンピンまたはクロフィブラートである、項目６０に記載のキット。
（項目６６）  前記薬剤が、シクロスポリン  Ａ、ＳＤＺ  ＰＳＣ  ８３３、ＮＡ−３８２、ベラパミルまたはデクスベラパミルである、項目６０に記載のキット。
（項目６７）  フェノバルビタール、オルチプラズ、全−トランスのレチノイン酸、フェニトイン、デキサメタゾン、リファンピンおよびクロフィブラートから選択される第１の薬剤、ならびにシクロスポリンＡ、ＳＤＺ  ＰＳＣ  ８３３、ＮＡ−３８２、ベラパミルおよびデックスベラパミルから選択される第２の薬剤と組み合わせてＣＰＴ−１１を含む、項目６０に記載のキット。
（項目６８）  患者におけるカンプトテシン薬物毒性の程度を推定する方法であって、該方法は、該患者から生物学的サンプル得る工程および該サンプルを試験して該患者のグルクロン酸抱合または胆汁輸送能力を測定する工程を包含し、ここで、正常レベルと比較して低減したグルクロン酸抱合能力または増大した胆汁輸送能力がカンプトテシン薬物毒性の危険にある患者の指標である、方法。
（項目６９）  患者におけるＣＰＴ−１１毒性の程度を推定するための方法としてさらに規定される、項目６８に記載の方法。
（項目７０）  前記サンプルを試験して前記患者のグルクロン酸抱合能力を測定する工程を包含する、項目６８に記載の方法。
（項目７１）  患者におけるカンプトテシン薬物の毒性の程度を推定することにおける使用のための処方物の調製における、グルクロン酸抱合可能な基質の使用。
（項目７２）  前記グルクロン酸抱合可能な基質が、アセトアミノフェン、ジフルニサルまたはモルヒネである、項目７１に記載の使用。
【００１１】
本発明は、イリノテカン(CPT-11)、トポテカンおよび他のカンプトテシンアナログのようなカンプトテシン薬物の副作用を低減する新規処置方法、組成物およびキットを提供することにより、先行技術に固有のこれらおよび他の欠点を克服することを目的とする。本発明は、同じ治療利益を達成するために必要なカンプトテシン化合物の用量を低減する方法、および増大した治療効果を達成するために、より通例の用量、または増加した用量さえ用いる方法を提供する。本発明の方法は、一般に、カンプトテシン化合物を、胆汁による活性なカンプトテシン種の排泄を低減するために有効な量の第２の薬剤と組み合わせて用いることによる。
【００１２】
本発明者らは、CPT-11の顕著な毒性の基礎となる１つの機構が、例えば、CPT-11代謝物SN-38の欠陥グルクロン酸抱合（deficient  glucuronidation）であることを発見した。本発明者らは、活性なSN-38種が胆汁中に輸送され、そこでそれが、胆汁トランスポーターp()糖タンパク質により悪影響を引き起こすことをさらに発見した。従って、SN-38のような、活性なカンプトテシン種の胆汁中への排泄を低減する有益な方法は、グルクロノシルトランスフェラーゼ活性のような、抱合酵素活性を増加する工程；およびp()糖タンパク質のような、胆汁、または毛細胆管、輸送タンパク質の活性を低減する工程を包含する(図１)。
【００１３】
本発明の方法、組成物およびキットは、少なくとも一部が胆汁により排泄される活性種または代謝物を有する任意のカンプトテシン薬物とともに用いられる得る。このようなカンプトテシン薬物はそれ自身「活性種」であり得る。9-AC、トポテカンおよびGG211は、とりわけ、このグループのカンプトテシンアナログの例である。あるいは、カンプトテシン化合物または薬物は、体内で代謝されて、CPT-11（これはSN-38に転換される）のような活性種または代謝物を提供するものであり得る。このクラスのさらなる例は、とりわけ、9-ニトロ-カンプトテシンを含む。
【００１４】
入手可能なカンプトテシンアナログのタイプおよび範囲は、当業者に周知であり、そして多くのテキストに記載されている。例えば、Slichenmyerら(1994；1993)、BurrisおよびFields(1994)およびHawkins(1992)（各々本明細書に参考として援用される）は、カンプトテシンの使用を総説している。上記テキストで記載される任意の化合物が本発明で用いられ得ることが意図される。
【００１５】
活性カンプトテシンアナログの特定の例は、Emersonら(1995)により記載されるような７位が置換された水溶性カンプトテシンアナログ；Sugimoriら(1994)により記載されるような６員環カンプトテシンアナログ；および、それぞれWallら(1993)に記載される、９位または10位において、アミノ、ハロゲノ、または水酸基での置換を有する20S配置カンプトテシン、10、11-メチレンジオキシ置換カンプトテシンおよび水溶性20-グリシネートエステル改変体を含む。また、(RS)-20-デオキシアミノ-7-エチル-10-メトキシカンプトテシンのようなE-環-修飾(RS)-カンプトテシンアナログ(Ejimaら、1992)；Kingsburyら(1991)の水溶性9-[(ジメチルアミノ)メチル]-10-ヒドロキシカンプトテシン；およびWaniら(1987、1986、1980)の9-、および10-置換カンプトテシンが用いられ得る。
【００１６】
所望であれば、カンプトテシンアナログは、例えば、以下の方法により合成され得る；Emersonら(1995)；Sugimoriら(1994)；Wallら(1993)；Ejimaら(1992)；Waniら(1980；1987；1986)；Kingsburyら(1991)およびSugasawaら(1976)（各々は参考として本明細書に援用される）およびそれらの改変。
【００１７】
従って、特定の実施態様では、本発明は、CPT-11のようなカンプトテシン化合物または薬物の毒性を低減する方法を提供し、この方法は、１つまたはそれ以上のカンプトテシン薬物を、抱合酵素活性を増大する、あるいは胆汁、または毛細胆管、輸送タンパク質活性を低減する有効量の第２の薬剤と組み合わせて投与する工程を包含する。
【００１８】
特定の状況における「有効量」とは、その通常のレベルに比較して、再現性良く抱合酵素活性を増加するためまたは胆汁輸送タンパク質活性を低減するために有効な量である。好ましくは、有意に適切な活性変化を達成する化合物が用いられる。所望であれば、インビトロで一連の化合物をスクリーニングし本発明における使用のための第２の薬剤を同定し得る。ここで、抱合酵素活性における有意な増加は、例えば、グルクロノシルトランスフェラーゼアッセイを用いて測定したとき、少なくとも約30％〜40％の増加により、そして最も好ましくは少なくとも約50％の増加により(もちろんより高い値が可能である)表される。グルクロノシルトランスフェラーゼアッセイは、当該分野で周知であり、そしてインビトロまはインビボで実施され得る。
【００１９】
p()糖タンパク質結合アッセイ、あるいは細胞または胆汁輸送アッセイを用いる場合、有意な活性減少は、少なくとも約30％〜40％の、そして最も好ましくは少なくとも約50％の減少により(より顕著な減少もまた可能である)表される。p()糖タンパク質結合および阻害アッセイは一般に、多剤耐性(MDR)の反転に関連して当該分野で周知である。アッセイは、Ichikawa-Haraguchiら(1993；本明細書に参考として援用される)により記載されるように実施され得る。１つの有効な輸送アッセイがThalhammerら(1994；本明細書に参考として援用される)により記載され、これは、毛細胆管を通過するカチオン性色素アクリジンオレンジのp()糖タンパク質媒介輸送を測定する。Thalhammerら(1994)は、この活性がシクロスポリンＡおよびベラパミルにより阻害されたことを示した。従って、候補物質がこのタイプの研究で阻害を示した場合、それは本発明における使用のための適切な化合物であり得るようである。
【００２０】
しかし、定量的インビトロ試験は本発明に必要ではない。何故なら、一般に、第２の薬剤がしばしばそれらの既知の性質を基礎に、または本明細書に開示の薬剤との構造的および/または機能的比較により選択されることが想像されるからである。従って、有効量は、しばしば、別の意味で、例えば本明細書で開示されるように、動物への投与に安全であることが提唱されている量である。本発明は、特定の代謝物および生理学的事象の本発明者らの発見、ならびに本発明者らの要素の予期せぬ組み合わせから一部生じているので、第２の薬剤の単独の使用および用量に関して利用可能なかなりの情報があり、その情報は、今や本発明とともに使用され得る。
【００２１】
先に引用された毒性レベルを超えない第２の薬剤の用量が必要である限り、第２の薬剤の有効量は、単に、第１のカンプトテシン薬物と組み合わせて動物に投与される場合１つまたはそれ以上の第１のカンプトテシン薬物の副作用または毒性を低減するために有効な量として定義され得る。これは、動物または患者をモニターし、そして所定の処置の成功の指標であるこれらの健康および疾患の物理的および生化学的パラメータを測定することにより容易に決定され得る。このような方法は、動物試験および臨床試験ではルーチンである。好ましくは、通常の臨床医により決定可能であるように、毒性の有意な低減を示す化合物が用いられる。
【００２２】
特定の実施態様では、本発明で用いられる、CPT-11および他のアナログのような、カンプトテシン薬物の用量は、しばしば、先行技術で用いられる用量より少ない。実際、これは本発明の１つの利点である。何故なら、それは、同じ有益な抗ガンまたは他の治療結果を達成するために与えられるべきより少ない用量を提供するからである。例えば、シクロスポリンＡとのCPT-11の使用は、CPT-11用量で約３倍の低減を可能にする。
【００２３】
他の実施態様では、投与されるカンプトテシン薬物の用量は、当該分野で現在用いられている用量とほぼ同じであり得る。このような場合、活性種または代謝物の胆汁排泄を低減する第２の薬剤との組み合わせでのカンプトテシン化合物の使用は、活性成分のバイオアベイラビリティーの増加を生じる。これは、例えば、進行した疾患を有する患者またはカンプトテシンのより低い用量に耐性であることが判明した患者で用いられ得る。第２の薬剤がレシピエント動物または患者で有意な毒性または好ましくない影響を防止するための量で提供される限り、より高いカンプトテシンレベルもまた用いられ得る。
【００２４】
いずれの場合においても、本発明は、カンプトテシン薬物の毒性の低減、およびカンプトテシン薬物のバイオアベイラビリティーの増加を提供するので、本発明が、以前の方法より、カンプトテシン種の用量においてより多くの可変性を提供することは明らかである。従って、担当医は、個々の患者に対して処置を最適化し得、以前には問題であった疾患の不均質性における変動に有効に対処し得る。
【００２５】
本発明はまた、化学療法剤の組み合わせを用いることなく、有効な治療法の機会を提供する。大きく患者毎に基づいて、本発明の特定の局面では、さらなる薬物および化学療法剤の組み合わせの使用が意図されるが、多くの状況において本発明の利点は、他の化学療法剤がかならずしも有意な応答を達成しないことである。これは、それが全体の毒性を低減し、そしてまた有害な、または致命的でさえある薬物相互作用の可能性を取り除くので有益である。
【００２６】
さらなる実施態様では、カンプトテシン薬物(単数または複数)は、抱合酵素活
性を増大する１つまたはそれ以上の第２の薬剤と、胆汁輸送またはp()糖タンパク質輸送活性を阻害する１つまたはそれ以上の第２の薬剤(またはいわば「第３の薬剤」)の両方と組み合わせて投与され得る。これは、２つの異なる代謝経路において干渉することにより活性カンプトテシン種の胆汁排泄を低減する付加的な利点を与え得る。
【００２７】
本明細書で用いる用語「抱合酵素」とは、活性カンプトテシン種を修飾する酵素をいうことが理解される。これらの酵素は、CPT-11のようなプロドラッグを、SN-38のような活性カンプトテシン種に代謝する「活性化タイプ」酵素とは異なる。このような酵素の例はカルボキシルエステラーゼである。
【００２８】
抱合酵素活性を増大する第２の薬剤に関して、このような酵素は、第Ｉ相抱合酵素活性を増大し得るが、好ましくは第II相酵素活性を増大する。本明細書で用いられる用語「抱合酵素活性」は、抱合により、代謝物の水溶性を増大し、その結果得られる抱合体がより容易に排泄され得るような酵素を描写するために用いる。用語「第II相抱合酵素」はまた、第II相酵素として、より一般に公知であり得る酵素をいうために用いられる。
【００２９】
第Ｉ相酸化酵素の例はチトクロムP450酵素を含む。第II相抱合酵素の例は、グルクロノシルトランスフェラーゼ酵素、グルタチオンS-トランスフェラーゼ(GST)、N-アセチルトランスフェラーゼ、およびさらにキノンレダクターゼ(QR)を含む(ProchaskaおよびFernandes、1992)。SN-38(CPT-11の活性代謝物)のグルクロン酸抱合が患者で特異的に観察されているので、グルクロノシルトランスフェラーゼ酵素活性を増大する化合物が現在のところ好ましい。
【００３０】
胆汁輸送および排泄を低減または阻害する第２の薬剤は、化合物の胆汁中への輸送を低減する薬剤、およびさらに胆汁流を低減する薬剤、すなわち胆汁うっ滞剤により例示される。輸送の阻害は、一般に、毛細胆管に存在しそしてカンプトテシンアナログを輸送するために機能する任意の膜輸送タンパク質またはタンパク質複合体を阻害することにより達成される。本発明者らは、p()糖タンパク質がカンプトテシン種CPT-11、SN-38およびSN-38Gを輸送し、そしてそれ故、p()糖タンパク質が好ましい標的であることを発見した。
【００３１】
ガン処置の文献では、p()糖タンパク質は、しばしば、標的細胞タンパク質に関連して言及される。実際、p()糖タンパク質は、細胞から薬物を能動的に汲み出すことによりガン細胞で観察される多剤耐性表現型に寄与している。このタイプの薬物流出は、細胞p()糖タンパク質を、抗ガン剤に関する科学的研究および特定の研究の主題とした。しかし、このような標的細胞p()糖タンパク質研究は、胆汁輸送に関して本発明者らにより採られたアプローチとは異なることを理解すべきである。即ち、本発明者らは、究極の標的細胞における事象に焦点をあてるよりむしろ動物全体のアプローチを採った。
【００３２】
p()糖タンパク質は、肝臓、腎臓、および副腎のような正常ヒト組織で発現されると報告されているが、その機能およびこれらの組織中で輸送する基質は決定されていない(Ichikawa-Haraguchiら、1993)。
【００３３】
p()糖タンパク質輸送活性を阻害し得る第２の薬剤を同定するために、p()糖タンパク質結合、またはp()糖タンパク質のフォトアフィニティーラベルの阻害に基づいて最初のスクリーニングを実施し得(Akiyamaら、1988)、次いで阻害活性を確認する研究を行い得る。阻害活性は、インビトロで標識化合物の輸送について競合することにより、インビトロで標識化合物の輸送を阻害することにより、またはさらにインビトロで細胞における薬物耐性の反転により確認され得る。もちろん、低減したカムブトテシン毒性を示す動物試験および前臨床研究が、本発明を最適化するための好ましい手段であることが認識される。
【００３４】
実質的に任意の方法を用いて、グルクロノシルトランスフェラーゼのような抱合酵素の活性を増大し得る。これらの方法は、この酵素のレベルを増大すること、固定量の酵素の活性を増大すること、この酵素のインヒビターを除去することなどを含む。例えば、グルクロノシルトランスフェラーゼのような、抱合酵素のレベルを増大するための方法は、その転写、翻訳または安定性を増大することを含む。このような抱合酵素の活性を増大するための方法は、所定の酵素または酵素ファミリーの特異的または一般的アクチベーターを投与すること；任意の特異的または一般的インヒビターを除去することなどを含む。グルクロノシルトランスフェラーゼの既知のインデューサーは、一般に、この酵素のデノボ合成を増大することにより作用する(Bockら、1978)。
【００３５】
胆汁トランスポーター活性、例えば、p()糖タンパク質活性の阻害についてもまた、種々の方法が利用可能である。例えば、この酵素またはトランスポーターのレベルを低減すること、この酵素またはトランスポーターの固定量の活性を低減すること、この酵素またはトランスポーターのアクベーターまたはエンハンサーを除去することなどである。p()糖タンパク質トランスポーターのレベルを低減する方法は、その転写、翻訳または安定性を低減することを含む。トランスポーターの活性を低減する方法は、p()糖タンパク質トランスポーターまたはトランスポーターファミリーの特異的または一般的インヒビターを投与すること；任意の特異的または一般的アクチベーターを除去することなどを含む。
【００３６】
本発明は、グルクロノシルトランスフェラーゼのような抱合酵素の量の増大、およびp()糖タンパク質のようなトランスポーターの量の低減を提供するので、有用な「第２の薬剤」はまた、組換えベクターおよび構築物を含む。例えば、グルクロノシルトランスフェラーゼ酵素の組換え形態、またはp()糖タンパク質トランスポーター核酸配列に相補的であるアンチセンスDNA構築物を投与することが意図される。第２の薬剤組換えベクターは、抱合酵素をコードする配列領域または胆汁輸送タンパク質のアンチセンス形を含むようなベクターであり、ここでこのベクターは処置されるべき哺乳動物のタイプの配列領域を発現し得る。
【００３７】
一般に、化学的薬剤を用いて抱合酵素の活性または量を増加することは、分子生物学的薬剤より好ましい。抱合酵素活性を増加する第２の薬剤として用いられ得る化合物は、チトクロムP450酵素のインデューサーであると示されている、またはインデューサーであると信じられているような化合物を含む。これらは、例えば、シクロホスファミド；イホスファミド；ジランチン(フェニトインとしても知られる)；ジスルフィラム(アンタブースとしても知られる)；リファンピン；クロナゼパムおよびクロトリマゾール(Lubetら、1992)を含む。
【００３８】
しばしば抗痙攣剤として用いられるフェノバルビタールのようなバルビツレートもまた、抱合酵素を活性化する第２の薬剤として用いられる得る。事実、CPT-11およびフェノバルビタールを用いて、本発明者らは、実施例８に示されるように毒性の顕著な低減を見出した。3-メチルコラントレンもまた、グルクロノシルトランスフェラーゼを誘導するために用いられ得、この場合それはフェノバルビタールに対して酵素の異なるイソ形態を誘導する(Rajaonarisonら、1993；BurchellおよびCoughtrie、1989)。
【００３９】
抱合酵素活性を増大するために用いられ得る別のグループの化合物は、全トランスレチノイン酸、9-シスレチノイン酸および13-シスレチノイン酸のようなレチノイン酸である。抗-AIDS薬物ジドブジン(AZTとしても知られている)もまた、Burgerら(1993)により記載されるように、限られた状況で、大部分はリファンピンと組み合わされて用いられ得る。例えば、表５に記載されるような、多くのコルチコステロイドの任意が使用され得る（デキサメタゾンが特定の例として挙げられる）。本明細書で記載されるような経口避妊薬が、第２の薬剤としての使用の別の可能性を形成する。
【００４０】
薬物抱合の増大に関連して、第２の抗毒性薬剤としての使用に特に意図される化合物は、グルクロン酸抱合を促進し得ることが知られている、または促進し得ると考えられているような化合物である。これらはL-ブチオニン-S,R-スルホキシミン(BSO；ManningおよびFranklin、1990)；およびブチル化ヒドロキシアニソール(BHA；tert-ブチル-4-ヒドロキシアニソール；Ansherら、1983)のような抗酸化剤を含む。
【００４１】
グルクロン酸抱合を促進する化合物のグループの内では、２つのグループの化合物が現在好適である。第１は、ジチオレチオン類(ジチオールチオンとしても知られている、Ansherら、1983)であり、その例は、3H-1,2,-ジチオール-3-チオン；3H-1,2,-ジチオール-3-オン；1,3-ジチオール-2-チオン；[1,2]ジチオロ[4,3-c]-1,2-ジチオール-3,6-ジチオン；4-メチル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン；5-メチル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン；4,5-ジメチル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン；4-エチル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン；5-エチル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン；5-tert-ブチル-3H-1,2-ジチオール-チオン；3-チオキソ-3H-1,2-ジチオール-4-カルボン酸；3-チオキソ-3H-1,2-ジチオール-5-カルボン酸；3-チオキソ-3H-1,2-ジチオール-4-カルボキシアミド；3-チオキソ-3H-1,2-ジチオール-5-カルボキシアミド；4-フェニル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン；5-フェニル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン；4-メチル-5-フェニル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン；4-メチル-5-フェニル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン-S-オキシド；4,5,6,7-テトラヒドロベンゾ-3H-1,2-ジチオール-3-チオン；5,6-ジヒドロシクロペンタ-1,2-ジチオール-3  (4H)-チオン；4-メチル-5-ピラジニル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン(オルチプラズ（Oltipraz）)；4-メチル-5-ピラジニル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン-S-オキシド；7-メチル-6,8-ビス(メチルチオ)ピロロ-[1,2-a]-ピラジン；5-(4-メトキシフェノール)-3H-1,2-ジチオール-3-チオン；5-(4-メトキシフェノール)-4-メチル-3H-1,2-ジチオール-3-チオン(Egnerら、1994)を含む。オルチプラズ(RP-35972；4-メチル-5(2-ピラジニル)-3H-1,2-ジチオール-3-チオン；Rhone-Poulencから入手可能)が特に好ましく、そしてアセトアミノフェンに作用することが示された(DaviesおよびSchnell、1991)。
【００４２】
グルクロン酸抱合を促進し得るさらなる好ましい化合物は、アリールオキシカルボン酸、アリールカルボン酸、クロロフェノキシカルボン酸またはフィブリン酸（fibric  acid）として知られるような化合物を含み、これらの化合物は、しばしば、低脂血症化合物として機能する(Boiteux-Antoineら、1989)。適切なアリールオキシカルボン酸およびアリールカルボン酸は、クロフィブラート、シプロフィブラート、フェノフィブラート、ベザフィブラート、ゲムフィブラゾル、チアデノール、プロブコールおよび活性化合物2-フェニルプロピオン酸を含む(Magdalouら、1993；Fournelら、1985；Boiteux-Antoineら、1989)。用語「クロフィブリン酸」自身は、4’-クロロフェノキシ酢酸、4’-クロロフェノキシプロピオン酸および4’-クロロフェノキシイソ酪酸を含む。このようなフィブリン酸のすべては、グルクロン酸抱合の誘導において有効であることが示されており、そしてそれ故本発明における使用に意図される。
【００４３】
現在、抱合酵素活性の増大における使用に好ましい化合物は、フェノバルビタール、オルチプラズ、全-トランスレチノイン酸、フェニトイン、デキサメタゾン、リファンピン、およびクロフィブラートのようなフィブリン酸である。オルチプラズ、全-トランスレチノイン酸、リファンピンおよびフェノバルビタールが現在特に好適である。
【００４４】
胆汁輸送を低減するために、胆汁輸送タンパク質の数を低減することよりむしろこのようなタンパク質の活性を低減することが一般に好ましい。p()糖タンパク質トランスポーターのような胆汁トランスポーターを阻害する第２の薬剤として用いられ得る化合物は、特にp()糖タンパク質トランスポーターファミリーの、膜輸送成分の一般的または特異的インヒビターであることが示されている、または一般的または特異的インヒビターであると考えられているような化合物を含む。例えば、p()糖タンパク質トランスポーターを不活性化または修飾するインヒビター(すなわち、非競合的阻害剤)同様、p()糖タンパク質結合部位について競合し、そしてトランスポーターを問題のカンプトテシン薬物についてより利用可能でなくする薬剤(即ち、競合的阻害剤)が意図される。
【００４５】
現在、特に好ましい第２の薬剤のグループは、シクロスポリン、シクロスポリン誘導体、およびさらにセフォペラゾンなどのセファロスポリンのような免疫抑制剤である。非免疫抑制性のシクロスポリン誘導体でさえ、p()糖タンパク質をプロックする能力を有する。１つのこのような例は、SDZ  PSC  833であり、これはシクロスポリンＡより有効である(Boeschら、1991；Pourtier-Manzanedoら、1992；BoeschおよびLoor、1994；Zacherlら、1994)。SDZ  28-446は、用いられ得る別のシクロスポリンＡアナログである(Pourtier-Manzanedoら、1992)。
【００４６】
シクロスポリンＡ、Ｃ、ＧおよびＨが一般に用いられ、シクロスポリンＡが特に好ましい。しかし、シクロスポリンＤアナログである3’-ケト-シクロスポリンＤ(Bellら、1994)もまた用いられ得る。シクロスポリンＡをCPT-11と併用することが特に有益であることを示す結果が本明細書に示されている(実施例１９)。スタウロスポリンおよびスタウロスポリン誘導体、特にNA-382もまた用いられ得る(Miyamotoら、1992a；1993)。
【００４７】
p()糖タンパク質トランスポーターインヒビターのさらなる例は、カルシウムチャンネルブロッカーである。１つの特に有用な化合物のグループは、ジヒドロピリジンアナログ(Kamiwatariら、1989)、およびそれらの臨床的等価物である。特定の例は、ベラパミル、デクスベラパミルおよびそれらのアナログである(Ohiら、1992；Doigeら、1992；Inoueら、1993；Hunterら、1993；Thalhammerら、1994；Mullerら、1994；Bear、1994；BoeschおよびLoor、1994)。ベラパミルは、p()糖タンパク質の有効な競合的阻害剤であることが知られている。
【００４８】
その他の有用なカルシウムチャンネルブロッカーは、1993RO-11-2933のようなチアパミルおよびチアパミルアナログ(Campainら、1993)；ニフェジピンおよびニフェジピンアナログ(Wilsonら、1991；Doigeら、1992；Hunterら、1993)；ジルチアゼム(Morrisら、1991)；ニカルジピン(Niwaら、1992)；プレニルアミン；ニモジピン；ニソルジピンおよびニトレンジピンを含む。
【００４９】
p()糖タンパク質トランスポーターを阻害する第２の薬剤のさらなる例は、カルモジュリンアンタゴニストである。このグループの薬剤は、チオキサンテン、フェノチアジン、ならびにシス-フルペンチキソール、トランス-フルペンチキソールおよびクロルペンチキソールのようなフルペンチキソールを含む(Fordら、1990；Haitら、1993)。他のカルモジュリンアンタゴニストは、クロミプラミン、フルフェナジン、クロルプロマジン、トリフルプロマジン、トリフルオペラジン、プロクロルペラジンおよびチオリダジンを含む。
【００５０】
p()糖タンパク質トランスポーターを阻害する第２の薬剤のなおさらなる例は、抗-新生物薬剤である。本発明は、広範な種類の他の薬剤を包含するが、抗-新生物化合物もまた使用され得る。これらの例は、ビンクリスチンである(Shiraiら、1994；Fricheら、1993)；ビンブラスチン(Bear、1994；McKinneyおよびHosford、1993)；アクチノマイシンＤ(McKinneyおよびHosford、1993)；コルチシン(Bear、1994；McKinneyおよびHosford、1993；Doigeら、1992)；エトポシド；ダウノマイシン(Bear、1994)；ダウノルビシン(Mullerら、1994)；ドキソルビシン(MechetnerおよびRoninson、1992)およびドキソルビシンの14-Ｏ-ヘミエステルのようなアナログ；タキソテレ(Hunterら、1993)；タキソール(MechetnerおよびRoninson、1992)；およびタモキフェン(Trumpら、1992)である。
【００５１】
p()糖タンパク質トランスポーターを阻害する第２の薬剤のなおさらなる例は、レゼルピン；ジピリダモル(DPM)(Suzuki、1990；Tatsutaら、1991)；クロロキン、キナクリン、プロプラノロール、セファランチンおよびAkiyamaら(1988)により記載される他の化合物のようなカチオン性化合物である。
【００５２】
他の薬剤の様々なグループが、p()糖タンパク質と相互作用しそして阻害することが示されている。例えば、プレグネノロン、プロゲステロンおよび代謝物(Ichikawa-Haraguchiら、1993；Gruolら、1994；Doigeら、1992）；RU  486；および21-アミノステロイド誘導体、ラザロイドおよびチリラザド(Abrahamら、1993))を含む特定のステロイド(Chinら、1992)である。デキサメタゾンもまた、この局面における使用のために意図される(Millerら、1991)。タウロケノデオキシコレート、グリコケノデオキシコレート、タウロリトコレートおよびウルソデオキシコレート（Mazzantiら、1994）のような特定の胆汁酸もまた用いられ得る。使用され得る他の薬剤は、DNR、N,N-ジベンジル-DNRおよびN-ベンジルアドリアマイン-14-バレレート(AD-198)(Fricheら、1993)；テルフェナジン(セルダン(Seldane))(Haitら、1993)；特定のジヒドロピリジンアナログ(Suzuki、1990；Kiueら、1990；Kamiwatariら、1989)；イベルメクチン(Schinkelら、1994)；およびキニジン(Akiyamaら、1988)のようなアントラシクリンアナログを含む。
【００５３】
p()糖タンパク質の外部エピトープに結合する抗体もまた、阻害を達成する第２の薬剤として用いられ得る。モノクローナル抗体(MAb)が一般に好ましい。MAb  C219(Miyamotoら、1992b)およびMAb  JSB-1およびC-219(Millerら、1991)により例示されるような、多くのこのような抗体が知られている。MAb  UIC2(MechetnerおよびRoninson、1992)、およびSchinkelのグループにより開発された、HYB-241、7G4および4E3のような他のMAbもまた用いられ得る(Schinkelら、1993)。MAb  MRK16およびマウス-ヒトキメラ型MH162(Hamadaら、1990)は、マウス-ヒトキメラ抗体、MH171(Ariyoshiら、1992)およびMAb  UIC2(MechetnerおよびRoninson、1992)がそうであるように、好ましい薬剤である。MRK16、MH171およびUIC2は動物で安全に用いられている。他の有用なモノクローナル抗体もまた、そのMAbが、一般に、Schinkelら(1993)により記載されるように、p()糖タンパク質の外部エピトープに対して結合親和性を示す限り、得られまたは調製され得る。
【００５４】
現在、p()糖タンパク質活性の低減における使用に好適な化合物は、シクロスポリンおよびスタウロスポリン、特に、シクロスポリンＡ、SDZ  PSC  833、NA-382、およびベラパミルおよびデクスベラパミルである。
【００５５】
本発明における使用のためのカンプトテシンのクラスの薬剤は、トポイソメラーゼＩを阻害し、そして種々の治療用途を有する。例えば、9-ニトロ-カンプトテシンは、抗寄生剤として特定の状況で適用され、そしてカンプトテシンアナログは、耐性の固形腫瘍、特に、結腸、肺ガンおよび卵巣ガン、ならびに難治性白血病に対して十分に証明された活性を有する。CPT-11自身は、肺、頚部、卵巣、結腸、および直腸のガン腫を有する患者、および非Hodgkinリンパ腫を有する患者における第II相試験で抗腫瘍活性を示した。しかし、カンプトテシンが実際に任意のガンを処置するために用いられ得ることは将来認識されるであろう。
【００５６】
このようなカンプトテシン薬剤（例えば、CPT-11）の使用は、以前は、吐き気、嘔吐、および腹痛を含む（これらの副作用は致命的であり得る）顕著な胃腸管毒性により制限されていた。カンプトテシン薬剤毒性を調整することにより、本発明はそれ故、所望されるように、ガン、白血病、寄生感染および他の疾患および障害を処置するための改善された方法も提供する。
【００５７】
この処置方法は、一般に、ヒト患者を含むガンを有する動物に、CPT-11のような１つまたはそれ以上のカンプトテシン薬物と、胆汁による活性カンプトテシ種の排泄を低減することによりカンプトテシン毒性を低減する１つまたはそれ以上の第２の薬剤との、治療的に有効な組み合わせを投与することを含む。第２の薬剤は、抱合酵素活性を増大する、そして/またはp()糖タンパク質輸送活性を阻害するものにより例示される。第２の薬剤(単数または複数)は、上記に列挙した任意の薬剤、およびその機能的等価物であり得る。
【００５８】
「治療的に有効な量」とは、レシピエント動物または患者において有利な結果を生じるために有効な量である。このような量は、最初、公開された文献を検討することにより、インビトロ試験を実施することによりまたは健康な実験動物における代謝研究を実施することにより決定され得る。臨床設定において用いる前に、動物モデル、好ましくは処置されるべき特定の疾患の広く受け入れられている動物モデルで確認研究を実施することが有益であり得る。特定の実施態様における使用の好ましい動物モデルは齧歯類モデルであり、それはそれらが使用のために経済的であるため、そして特に、得られる結果が、臨床値の予想として広く受け入れられるので好適である。
【００５９】
本明細書で記載される動物研究のタイプに加えて、それぞれ本明細書に参考として援用される、Matternら(1993)、Takiguchiら(1994)およびKanedaら(1990)により記載される動物モデル研究は、本発明に関連して使用され得る。これらの研究は、カンプトテシンアナログが白血病および転移性ガンに対して活性であることを示した。ガンの種々の動物モデル系で薬物の組み合わせを評価することは、当該分野で周知であり、そして臨床に結果を翻訳することを困難にする、他の疾患（例えば、AIDS）のモデル系の制限を受けない。
【００６０】
いくつかの場合において、ヒト処置についてカンプトテシン薬物および第２の薬剤の両方が先に認可されている場合は、疾患を有する動物における前臨床試験は必ずしも必要ではない。いずれの場合にも、ヒト処置について治療的に有効な量を決定または最適化するために必要なすべては、第１の薬物(単数または複数)を、１つまたはそれ以上の選択された第２の薬剤の所定量と組み合わせて投与すること、および患者をモニターして、患者に対する利益が得られるか否かを決定することである。好ましくは、カンプトテシン毒性の有意な減少または抗腫瘍(または抗寄生)応答の任意の増加により評価したところ、患者に有意な利益をもたらす量を使用し得る。従って、第２の薬剤の最適用量は、科学的文献に見出されるおよび本明細書に詳細に記載されるような一般的開始範囲に従って容易に同定され得る。
【００６１】
動物および患者はまた、２つまたはそれ以上の第２の薬剤と組み合わせたカンプトテシン薬剤(単数または複数)を、上記の異なるクラス由来である少なくとも１つの薬剤とともに用いて処置され得る。ここで、これらの薬剤はまた、第２の薬剤および第３の薬剤として記載され得る。これは、カンプトテシン排泄経路中の２つの異なる点で作用する利点を有し、そしてさらに改善された効果または相乗効果さえ生じ得る。
【００６２】
処置方法では、第１のカンプトテシン薬物(単数または複数)（例えば、CPT-11）は、第２の薬剤(単数または複数)を投与する前に動物または患者に投与され得、または第１の薬物(単数または複数)および第２の薬剤(単数または複数)は同時に投与され得る。第１の薬物(単数または複数)および１つまたはそれ以上の第２の薬剤の両方を含む単一の組成物が、同時投与のために使用され得、またはこれら処方物の１つのみを含む別々の組成物が用いられ得る。１つまたはそれ以上の第３の薬剤が用いられる場合、所望であれば、組み合わせの治療カクテルが調製され得そして投与され得る。
【００６３】
別々の組成物の使用は、一般に、第２の薬剤の数が比較的少ない場合に好適である。何故なら、これは個々の用量のより多くの制御を提供し得るからである。しかし、成分の総数がより多い場合、繰り返し投与に起因する動物または患者の不快感を最小限にするためにはカクテルが好ましい。
【００６４】
現在、系を「プライム」するために、第２の薬剤を、カンプトテシン薬物(単数または複数)の前に動物または患者に投与することが好ましい。カンプトテシン薬物の前に第２の薬剤を送達すること、およびカンプトテシン送達期間を通じて第２の薬剤を継続送達することが、現在好ましい処置方法の１つである。「送達」は、これらに関しては、好ましくは連続的注入を意味する。GCSF(GMCSF)のような任意の骨髄抑制と戦うことが意図される薬剤を用いた処置がまた意図される。これはカンプトテシン薬物の投与後ときおり実施される。
【００６５】
１つの現在好ましい処置様式は、約90分間にわたって注入により約25mg/m2のCPT-11を、注入により約10mg/kgのシクロスポリンＡを、そして必要に応じてまた約60mg/kgのフェノバルビタールを投与することを含む。
【００６６】
種々の他の送達方法がまた、担当医により所望される場合に用いられ得る。連続注入および静脈内注射、筋肉内注射および皮下注射を含む非経口投与のような標準的送達方法を使用することが便利であるようである。しかし、経口送達のような他の方法が、第１のカンプトテシン薬物(単数または複数)の毒性を低減しまたはバイオアベイラビリティーを増大するために用いられる第２の薬剤に依存して使用され得る。
【００６７】
有効な薬物送達を達成する方法に関して、当該分野では多くの指標がある。例えば、Lubetら(1992)；Burgerら(1993)；ManningおよびFranklin(1990)；Ansherら(1983)；Egnerら(1994)；DaviesおよびSchnell(1991)；Magdalouら(1993)；Fournelら(1985)；Boiteux-Antoineら(1989)；Abigergesら(1995)；Silberら(1994)；MikiおよびKotake(1993)；およびKingsburyら(1991)（各々は本明細書に参考として援用される）により公開された方法および用量の使用に従い得る。これらの用量および方法に対する適切な改変が、必要に応じてなされ得、それは当業者により過度の実験を要することなく容易に決定され得る。カンプトテシンアナログの使用を概説する、例えば各々本明細書に参考として援用されるSlichenmyerら(1994、1993)およびHawkins(1992)のようなさらなる刊行物が利用可能である。
【００６８】
CPT-11のような１つまたはそれ以上の第１のカンプトテシンを、抱合酵素活性を増大するまたは胆汁輸送タンパク質活性を低減する１つまたはそれ以上の第２の薬剤を組み合わせて含有する、薬学的に受容可能な処方物を含む、新規組成物および処方物もまた提供される。このような組成物は、第１のカンプトテシン薬物(単数または複数)を、オルチプラズ、クロフィブラート、シプロフィブラート、フェノフィブラート、ベザフィブラート、ゲムフィブラゾル、チアデノール、プロブコール、フェノバルビタール、ジランチン、クロナゼパム、クロトリマゾール、ブチオニンスルホキシミン(BSO)、シクロホスファミド、イホスファミド、レチノイン酸、コルチコステロイド、経口避妊薬、リファンピンまたはジスルフィラム(アンタブース)との組み合わせで含み得；そして好ましくは、CPT-11を、フェノバルビタール、オルチプラズ、全-トランスレチノイン酸、フェニトイン、デキサメタゾン、リファンピンまたはクロフィブラートとの組み合わせで含み得る。
【００６９】
組成物はまた、１つまたはそれ以上の第１のカンプトテシン薬物を、シクロスポリンまたはスタウロスポリン、特にシクロスポリンＡまたはSDZ  PSC  833、NA-382；および/またはベラパミルまたはデクスベラパミルと組み合わせて含み得る。
【００７０】
組成物はまた、有利には、第１のカンプトテシン薬物(単数または複数)を、抱合酵素活性を増大する群から選択される１つまたはそれ以上の第２の薬剤、および胆汁輸送タンパク質活性を低減する群から選択される１つまたはそれ以上の第２または第３の薬剤と組み合わせて含み得る。
【００７１】
本明細書で用いられる用語「薬理学的または薬学的に受容可能な」は、動物または患者に与えられた場合、顕著な毒性、有害な副作用、または他の都合の悪い反応を生じない組成物についていう。CPT-11のようなカンプトテシンが、本発明の前には、特定の毒性制限を受けることが知られていた点で、「薬学的に受容可能な」組成物が、動物に与えられた場合、特定の有害な影響をなお有し得ることが理解される。従って、本発明に関して「薬学的に受容可能な」は、同じ一般的なガイドラインを用いて入手可能なまたは開発された薬学的に受容可能な製品から選択されるべき、希釈剤、結合剤などのような他の成分をいう。
【００７２】
CPT-11のようなカンプトテシン薬物、および１つまたはそれ以上の第２または第３の薬剤を含む治療キットは、本発明の別の局面を形成する。このようなキットは、一般に、適切なコンテナ手段中に、カンプトテシン薬物(単数または複数)の薬学的処方物、抱合酵素活性を増大するまたは胆汁輸送タンパク質活性を低減する１つまたはそれ以上の第２の薬剤の薬学的処方物を含む。異なる特異性を有する複数の薬剤を使用し得る。このキットは、すべての薬物および薬剤をその中に備えた単一のコンテナ手段を有し得るか、あるいは化合物または同様に作用する化合物のグループの各々毎に１つの、２つ、３つまたは複数の異なるコンテナ手段を有し得る。
【００７３】
キットの成分は液体溶液(単数または複数)、あるいは乾燥粉末(単数または複数)として提供され得る。成分が液体溶液で提供される場合、この液体溶液は水性溶液であり、滅菌水溶液であることが特に好ましい。試薬または成分が乾燥粉末として提供される場合、この粉末は、適切な溶媒の添加により再構成され得る。溶媒がまた、別のコンテナ手段中に提供され得ることが意図される。
【００７４】
キットの成分は、１つまたはそれ以上の流体または注射可能な組成物で提供され得る。そのような場合、コンテナ手段は、それ自身、静脈内送達バッグ、シリンジ、ピペット、点眼容器、または他のそのような装置であり得、そこから、処方物が、動物中に注入または注射されるか、身体の疾患領域に適用されるか、あるいはキットの他の成分に適用および混合され得る。
【００７５】
キットのコンテナ手段は、一般に、少なくとも１つの静脈内送達流体バッグ、バイアル、試験管、フラスコ、ボトル、シリンジまたは他の適切なコンテナであり、その中に薬物および/または薬剤が配置され得、そして好ましくは適切に割り当てられる。本発明のキットはまた、代表的には、その中に所望のバイアルが保持される例えば注入またはブロー成形プラスチックコンテナのような、市販のために密閉してバイアルを含むための手段を備える。
【００７６】
コンテナの数またはタイプに拘わらず、本発明のキットはまた、動物への最終的な組成物の、注入、注射または投与のための補助器具を含むか、またはそれとともにパッケージされ得る。このような器具は、シリンジ、１つまたはそれ以上の送達チューブ、また点眼器または計量スプーンでさえ、または任意のそのような医療的に認可された送達ビヒクルであり得る。
【００７７】
本発明はまた、CPT-11のようなカンプトテシン薬物の、患者で生じ得る毒性の程度を推定するための方法を提供する。１つのこのような方法は、一般に、患者のグルクロン酸抱合能力を測定する工程を包含し、ここで、正常のレベルと比較して低減したグルクロン酸抱合能力が、CPT-11のような薬物が単独で与えられた場合、発生する薬物毒性の危険にある患者の指標である。
【００７８】
別のこのような方法は、一般に、患者の胆汁輸送能力を測定する工程を包含し、ここで、正常のレベルに比較して増大したp()糖タンパク質活性のような胆汁輸送能力がCPT-11様薬物が単独で投与される場合、発生する薬物毒性の危険にある患者の指標であり得る。
【００７９】
特定の診断方法は、「遺伝子型タイピング」、即ち、カンプトテシン、特にCPT-11の代謝に関与する酵素における遺伝子多型をアッセイすること、を使用し得る。ここで、患者のグルクロン酸抱合また胆汁輸送能力は、グルクロノシルトランスフェラーゼ酵素またはp()糖タンパク質のような胆汁輸送タンパク質をコードするDNAまたはRNAの量を測定する手段により測定される。このような分子生物学的方法の実施は当該分野で周知であり、そして例えば、患者の生物学的サンプル由来の核酸を、哺乳動物グルクロノシルトランスフェラーゼ酵素またはp()糖タンパク質のような胆汁輸送タンパク質をコードするDNA(またはRNA)セグメントと接触させることにより実施されるサザンおよびノーザンブロッテングを含む。これは、実質的に相補的な核酸のハイブリダイゼーションを可能にするために有効な条件下で行われ、そしてこのように形成されたハイブリダイズした核酸複合体は、後に、放射標識のような検出可能な標識を用いて検出される。
【００８０】
好ましい実施態様では、診断方法は、一般に、事実上「表現形」であり、例えば、ここでは患者のグルクロン酸抱合能力が、アセトアミノフェン、ジフルニサルまたはモネヒネのようなグルクロン酸抱合基質を、患者に投与すること、および次いで基質のグルクロン酸抱合の程度を、例えば、HPLCにより基質-グルクロニド抱合体を検出することにより測定される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００８１】
（好適な実施態様の詳細な説明）
カンプトテシンは、染色体DNAにおける一本鎖破壊を誘導し、そして核酸合成を阻害する能力を有する抗増殖剤のグループを構成する。約0.5μMの濃度で、カンプトテシンは、ガン化学的療法の新規な標的である酵素DNAトポイソメラーゼ１の存在下で、DNA中に、即時かつ可逆的なニックを生成する(Hsiangら、1985)。
【００８２】
正常細胞では、トポイソメラーゼ１は、核酸の一本鎖に結合して「切断可能な複合体」を形成することにより超らせんDNAの弛緩を生成する(D’ArpaおよびLiu、1989)。複合体の形成後、DNA鎖の破壊が生じ、それによって非破壊鎖の継代（passage）を促進する。次いでこの破壊はトポイソメラーゼにより再封鎖される。カンプトテシンはこの再封鎖工程をDNAおよびトポイソメラーゼ１と３要素からなる複合体を形成することによりブロックし、切断可能な複合体の蓄積および核酸合成の阻害を生じる。
【００８３】
カンプトテシンの細胞傷害性は、G1-G2期に比べてS期で至適であることが示されており、このことは一本鎖破壊が細胞死の引き金となり得る複製フォークで生成され得ることを示唆する(HorwitzおよびHorwitz、1973；Liら、1972)。トポイソメラーゼ１活性のレベルは腫瘍検体中で上昇し、そしてそれらをカンプトテシン活性の選択的標的にしていることが報告されている(Giovanellaら、1989)。
【００８４】
【化１】
2006328087.tif 000002
カンプトテシンアナログは、Ａに示す構造に一般的に基づく。この構造には様々なＲ基を加え得る。構造Ｂはカンプトテシン自体であり；Ｃはトポテカンであり；ＤはCPT-11であり；そしてＥは9-アミノ-カンプトテシン（9-AC）である。構造Ｂ〜Ｅのカンプトテシンは、本発明で用い得るカンプトテシンの形態例でしかない。例えばSlichenmyerら（1994、1993）、BurrisおよびFields（1994）、ならびにHawkins（1992）に記載されているように、数多くの他のカンプトテシンアナログが利用可能である。
【００８５】
活性カンプトテシンアナログの具体例は、9-ニトロ-カンプトテシン（構造Ｅに示されるアミノ基の代わりにニトロ基を第９位に有している）；GG211；７位置換された水溶性カンプトテシン（Emersonら、1995）、ヘキササイクリックカンプトテシンアナログ（Sugimoriら、1994）；９位または10位置換されたカンプトテシン（Waniら、1987；1986；1980；Wallら、1993；Kingsburyら、1991）およびＥ環が修飾されたカンプトテシン（Ejimaら、1992）である。
【００８６】
Emersonら（1995）；Sugimoriら（1994）；Wallら（1993）；Ejimaら（1992）；Waniら（1980；1987；1986）；Kingsburyら（1991）およびSugasawaら（1976）はそれぞれ、カンプトテシンアナログを合成するための効果的な方法論を記載している。しかし、多くは様々な供給源から市販されている。例えばトポテカンは一般的に、マンニトール（pH３〜４）との凍結乾燥混合物(lyophilized  mixture)中の、あるいはグルコネートバッファ（pH  3.0）中の塩酸塩として、供給されている。
【００８７】
インビトロクロノジェニックアッセイ(clonogenic  assay)で、トポテカンは、胸部、卵巣、非小細胞肺(non-small  cell  lung)、結直腸、食道ならびに腎臓細胞の各ガン腫において活性を示した（Burrisら、1992）。また、ヌードマウスにおいて上衣細胞腫(ependymoma)、神経膠腫(glioma)および髄芽腫(medulloblastoma)から得られた異種移植(xenograft)のパネルにおいても、活性が見られた（Friedmanら、1994）。結直腸ガン、小細胞肺ガン、食道ガン、腎臓細胞ガン腫、卵巣ガンならびに扁平上皮細胞ガンにおいて、臨床試験(clinical  trail)での応答が見られている。
【００８８】
9-アミノ-20(s)-カンプトテシン（9-AC）は、強力な前臨床抗ガン活性を示したもう一つのカンプトテシンアナログである。ヒト異種移植研究において、9-ACは有意な抗結腸ガン活性を示した。9-ACの臨床開発は進行中である。
【００８９】
イリノテカン（CPT-11）は、インビボおよびインビトロ腫瘍モデルにおいて、広いスペクトルで有意な活性を示した。S180およびMeth  A  繊維芽肉腫と、Lewis肺(Lewis  lung)、Ehrlich、およびラットWalker  256ガン腫と、L1210およびP388白血病と、ならびに膵臓および乳腺ガン種（Furutaら、1988；Tsuruoら、1988；Kawatoら、1991）とを含む、幅広い種類の前臨床の腫瘍異種移植において、効果的であった。抗ヒト腫瘍異種移植活性は、結腸および食道腺ガン種、乳ガン種、および扁平上皮細胞肺ガン腫917を含む。臨床的研究において、主に転移性結直腸ガン、非小細胞および小細胞肺ガン、乳ガン、子宮頚部ガンおよび卵巣ガン、ならびに白血病およびリンパ腫における応答が報告されている。
【００９０】
CPT-11はインビボで、もとの薬物(parent  drug)に比して600〜1000倍強力な活性代謝物SN-38に変換される。CPT-11およびSN-38は両方とも、投与後に開環および閉環形態のラクトンとして生じる。しかし、ラクトンの閉環形態のみが有意な抗腫瘍活性を有する。閉環形態の最終半減期(terminal  half-life)は、CPT-11では5.4〜6.1時間、SN-38では7.6〜8.8時間の範囲であった。動物実験において、CPT-11は胆汁および尿中に等しく排泄され、一方SN-38は主として胆汁中に排泄されることが観察された。
【００９１】
日本および欧州において、ならびに米国の２つのセンターにおいて、いくつかのCPT-11のフェーズＩ研究が既に行われている。これらの研究でCPT-11は、毎週×４、隔週×２、４週毎、毎日×５を４週毎、１日２回×７日を４週毎ならびに毎日×３を毎週を含む様々なスケジュールに基づいて、90分間のIV注入として投与されている。CPT-11はまた、４週毎に５日間の連続注入としても投与されている。フェーズＩ研究において、DLTは髄抑制(myelosuppression)または下痢のいずれかであることが見られた。吐き気、嘔吐および腹痛等の他の胃腸毒性もまた観察されている。CPT-11および／またはSN-38  AUCと下痢および／または髄抑制との間の薬力学的相関関係に関し、不一致な結果が得られている。
【００９２】
この情報に基いて、発明者らは、６週間サイクルにおける毎週×４の90分間の注入として投与されるCPT-11のフェーズＩ研究を開始した。発明者らは、G-CSFおよび下痢の最適薬理学的管理によって、より高い平均用量（同スケジュールにおける）が達成され得るという仮説を立てた。
【００９３】
研究開始（1993年６月29日）以来、100〜175mg／m2の範囲のCPT-11用量にて、合計25人の患者らが処置を受けている。本願に示した詳細な実施例は、21人の患者の処置を反映している。主な毒性は、髄抑制、下痢、および痙攣性腹痛を含んでいた。髄抑制は、第１用量レベル（100mg／m2）においては有意な毒性ではなかったが、一人の第２用量レベル（120mg/m2）の患者において、用量制限的(dose-limiting)であった。第３の用量レベル（145mg／m2）では、２人の患者において用量制限的であったが、その後の予防的G-CSFの使用によって全体的に改善された。
【００９４】
有意な胃腸毒性は、まず第２用量レベル（120mg／m2）で示された。患者４（120mg／m2）および21（145mg／m2）は、グレード３の腹部痙攣を有し、サイクル２では投与量を減少された。患者15（145mg／m2）もまたグレード３の腹部痙攣を有し、CPT-11の第２サイクルを減少した。他の４人の患者が穏やかな（グレード１）の腹部痙攣を有した。腹部痙攣は、必ずしも下痢と相関していなかった。３人の患者が、研究中に小さな腸閉塞を発病した。これらの症例のうち２人は、診査上の(exploratory)腹壁切開において、疾病の進行によるものと観察され、そのうち１人は従来療法の後に解決したが疾病の進行によるものであった可能性が大きい。用量＞120mg／m2で処置を受けた患者の大部分が、制吐剤により制御されるグレード１〜２の吐き気および嘔吐を有した。しかし数人の患者においては、軽減を達成するために高用量のオンダンセトロン(ondansetron)が必要であった。
【００９５】
145mg／m2で処置を受けた患者13および16は、それぞれサイクル１の週４および週３の間、好中球減少熱(neutropenic  fever)のため入院した。患者17から始めて全ての患者が、CPT-11の各投与後に５日間G-CSFを受けた。この介入後、145mg／m2では好中球減少症＞グレード１の症例は観察されなかった。しかし、175mg／m2で処置を受けた最初の２人の患者は、予防的G-CSFにも関わらず、好中球減少熱により入院した。
【００９６】
本研究において、４つの別々のHPLCアッセイが用いられている。これらは、開環および閉環のCPT-11、開環および閉環のSN-38、全CPT-11およびSN-38、ならびにSN-38グルクロニドを測定する。血漿濃度の他に、最初の投与後の最初の24時間の尿を発明者らは採取している。
【００９７】
Rothenbergら（1993）の方法を改変した方法により、氷上で輸送された新鮮な血漿を、開環ラクトン対閉環ラクトンのCPT-11およびSN-38に関して直ちに分析する。血漿250μLからサンプルを調製する。500μLの冷メタノール（-20℃）を添加し、続いて遠心分離することにより、タンパク質を沈殿させる。開環対閉環CPT-11分析のために、３mMヘプタンスルホネートを含む150μLの0.1Ｍリン酸二水素ナトリウム（pH４）を用いて、上澄み液150μLの希釈物を作成する。μBondapak  C18  Guard  PakおよびμBondapak  C18カラム、3.9×300mm、10μ上に、50μLを注入する。65：35のメタノール：３mMヘプタンスルホネートを含む0.1Mリン酸二水素ナトリウム（pH４）を用いて、流速0.8mL／分で用いることにより、開環形態および閉環形態を分離し、蛍光により検出する（それぞれ380および430nmの励起および放射波長を用いる）。開環対閉環SN-38の分析のために、上澄み液の150μLを脱イオン化水150μLによって希釈し、200μLをNovapak  C18  Guard  PakおよびNovapak  C18  カラム、3.9×150mm、４μに、注入する。１：３のアセトニトリル：脱イオン水（pH6.2）を流速0.8mL／分で用いることにより開環形態および閉環形態を分離し、蛍光により検出する（それぞれ375および566nmの励起および放射波長を用いる）。
【００９８】
ラクトン形態のみが薬理学的活性を有するが、開環のヒドロキシ酸と閉環のラクトン形態との間の変換は可逆的である。このように、これは、遊離のおよび結合した薬物を、有意にタンパク質と結合する薬剤に関して別々に測定することと類似である。活性（閉環のラクトンまたは遊離の非結合）対全薬物の比が比較的一定である場合は、全薬物に対する活性および不活性種の両方を測定することの利点は比較的少ない。CPT-11およびSN-38に対してこのようなアッセイはかなり労力を要するためにその研究を修正し、このような詳細なアッセイを、小さな部分集合の標本に対して行い、各用量レベルにつき第１の患者に対し選択された時点でのみ行うようにした。発明者らはまた、個々の標本に関し、閉対全薬物の比は正確なpH滴定そのものに大きく依存するため、信頼性が無いかもしれないことを示した。
【００９９】
発明者らは、全CPT-11およびSN-38に対し、標準的な集中サンプリングを用い、Chabotら（1992）のアッセイを改変して応用し、アッセイを行った。上述のように液体−液体抽出を用いる。冷メタノール（２mL）を用いてCPT-11およびSN-38を抽出し、窒素下で乾燥するまで蒸発させる。残渣を１％の10N  HClを含有するメタノール250μLを用いて再構成し、μBondapak  C18  Guard  PakおよびμBondapak  C18カラム、3.9×300mm、10μに注入し、蛍光により検出する（それぞれ375nmおよび566nmの励起および放射波長を用いる）。
【０１００】
以前の研究者は、SN-38グルクロニドの薬動力学(pharmacokinetics)的特徴を決定していなかった。本発明者らは、この経路は、活性代謝物SN-38の主要な解毒ルートを表しているためこれを非常に重要であると考えた。よってSN-38のグルクロン酸抱合における有意な個人間相違の発見は、臨床的意義を有する。更に、胆汁中に排泄されたSN-38は、依然として有意な薬理学的毒性を有し得るため、発明者らは、胆汁SN-38排泄における個人間相違は、本治療中に起こる下痢へのかかりやすさと相関しているという仮説を立てた。SN-38分析に先立って血漿サンプルをβ−グルクロニダーゼを用いてインキュベートすることにより、SN-38グルクロニドをアッセイしている。これは、ついでSN-38とSN-38グルクロニドとの合計を表しており、後者はそのようなインキュベートを行わないSN-38濃度を引算することによって決定され得る。0.12〜2.53の範囲にわたるSN-38対SN-38グルクロニドのAUCの比によって示されるように、グルクロン酸抱合度には、幅広い変動があった。グルクロン酸抱合されていない実質的に全てのSN-38が胆汁排泄によって除かれるため、発明者らは、SN-38対SN-38グルクロニド比は重要なパラメータであるという仮説を立てた。使用可能薬物量の個人間変動を制御するため、この比をCPT-11のAUCによって乗算することによってこの「胆汁インデックス」を得た。
【０１０１】
今日までの結果は、グレード０〜２の下痢（ｎ＝12）およびグレード３〜４（ｎ＝９）の下痢による患者の分類を可能にした。CPT-11、SN-38およびSN-38グルクロニドのAUCから求められる最も重要な薬力学的パラメータは「胆汁インデックス」（Ｐ＜0.0004）のようである。145mg／m2の均一な用量で処置された10人の患者のみを用いると、「胆汁インデックス」が唯一の有意な変数であり、各々グレード０〜２およびグレード３〜４の下痢を有する５人の患者においてメジアン値は2275および4747であった（Ｐ＝0.03）。
【０１０２】
グルクロン酸抱合は多型的でかつ潜在的には典型（typeable）であるように思われるため、本発明者らは、CPT-11の開発はアモナフィド(amonafide)に用いられたものと同様であり得ると提案する。第１のステップは、「グルクロン酸抱合不十分(poor  glucuronidators)」である患者はCPT-11誘導下痢のリスクが高いことを示す本研究を進展させることである。これらの研究に関連して、発明者らは、SN-38グルクロン酸抱合をグルクロン酸抱合プローブと相関させる。SN-38と同様にエーテルグルクロン酸抱合を経るアセトアミノフェンは、他の研究者らに用いられてきた（DeMoraisら、1992）。もしこれが予備実験であることが示されるならば、アモナフィドに対して以前行われたように、これら２つの母集団に対してRPTDを別個に決定することが可能である。最近のデータは黒人は「グルクロン酸抱合不十分」のより高い発生率を有し得ることを示唆しているため（Hechtら、1994）、CPT-11毒性の人種間相違を評価することが特に重要である。やはり発明者らは、少数民族の患者においてアモナフィド毒性のリスクがより高いことを以前に示している。グルクロン酸抱合の性別間および人種間相違の可能性のため、発明者らは、特定の人種および性別部分集合を注意深く評価する。
【０１０３】
発明者らは、グルクロン酸抱合状態とCPT-11毒性との間に相関関係が存在し、そのためこの第II相酵素を誘導することが非常に重要であることを提案する。第II相酵素の誘導は、これら酵素の発ガン性物質の解毒における重要性のため、化学的予防分野の研究者らにとって大いな興味であった。これらの酵素系のインデューサーとして研究中の薬剤は、ジチオールチオンであるオルチプラズ(oltipraz)である。オルチプラズは、GSTおよびUDP−グルクロノシルトランスフェラーゼのインデューサーであることが示されており、齧歯類モデルにおいてアセトアミノフェン毒性を減少させる（Egnerら、1994）。従ってオルチプラズは、CPT-11処置に先立ってグルクロン酸抱合を誘導するための潜在的な薬剤と考えられ、アセトアミノフェン表現型を用いてモニターされる。このような戦略はCPT-11の治療インデックスを大きく高めると考えられる。
【０１０４】
胃腸毒性は、腸内に排出される胆汁中の過剰SN-38量に関連していたため、発明者らは例えばCPT-11等のカンプトテシンの毒性を減少するための別のアプローチは、胆汁中への輸送を減少させることであることを見出した（図１）。よって発明者らは、カンプトテシン輸送活性に関連する胆汁成分を同定するための研究を計画した。p()糖タンパク質トランスポーターが一つの候補であると推論された。p()糖タンパク質は、肝細胞の細管膜(canalicular  membrane)中に位置しており、いくつかの化合物の胆汁輸送に関与していると考えられている。発明者らは、CPT-11およびSN-38の両方が実際p()糖タンパク質と相互作用を有していることを決定した。
【０１０５】
従って、発明者らは、p()糖タンパク質インヒビターは、カンプトテシンとともに投与するための有用な薬剤となり得ると推論した。動物実験で、シクロスポリンＡ（cyc  A）が高用量および低用量の両方においてCPT-11の全身のアベイラビリティーを増加させることが見出され、胆汁排泄の減少または阻害を示した。従ってシクロスポリンＡ等のp()糖タンパク質インヒビターによる前処置は、CPT-11の毒性および血漿からのクリアランスを減少させるため、ならびにSN-38のバイオアベイラビリティーを改善するための有用な手段であることを提案する。
【０１０６】
以下の実施例は、本発明の好適な実施態様を示すために記載されている。当業者は、以下の実施例に開示された技術は、発明の実施においてよく機能することが発明者によって見出された技術を表しており、従ってその実施のための好適な態様を構成すると考え得る。しかし、当業者は、本開示に基づき、開示された特定の実施例において多くの改変をなしても依然として発明の趣旨および範囲から逸脱することなく同様な結果が得られることを、理解すべきである
【実施例】
【０１０７】
（実施例１）
（患者の選択および処置計画）
固形腫瘍(solid  tumor)またはリンパ腫を有する患者は、標準的な処置法に適合しないか効果的な標準的処置法が存在しない場合に、処置に適していた。全ての患者は、測定可能あるいは評価可能ないずれかの疾患を有しており、少なくとも18才であり、少なくとも70％のKarnofsky能力ステータスを有しており、かつ少なくとも３ヶ月の寿命を有していた。全ての患者は、十分な臓器機能に関する基準を含む、標準的な研究所基準を満たしていた。全ての患者から、CPT-11の最初の投与以前に書面によるインフォームドコンセントを得た。薬物は、500ccの通常の食塩水中の静脈内注入により、毎週90分間を６週間サイクルで４回投与した。毎週の投与を標準フェーズＩ設計により、以下の用量レベルを用いて割り当てた：1)100mg/m2、2)120mg/m2、3)145mg/m2および4)175mg/m2である。最初の投与の後、注入後最初の24時間、薬動力学的評価のため血液および尿のサンプリングを行った。サイクル１中で用いたのと同じ用量およびスケジュールによって第２のサイクルを行った。サイクル１中に用量制限的な毒性が観察された場合には、その患者はその後のサイクル全てにおいて以前の用量レベルで処置した。用量制限的な好中球減少症を経験した患者は、以下に規定する基準に基づき、G-CSFを5μg／kg／日で与えるのに適していた。
【０１０８】
（実施例２）
（毒性評価）
CALGB拡張毒性基準に基づき、毒性評価を行った。研究中任意の時点において＞グレード２の下痢を経験した患者は、経口によるロペラミド４mgの投与を開始し、引き続き毎便後経口により２mgを投与し、全用量が16mg／日になるようにした。ロペラミドが下痢を制御し得なかった場合、患者はオクトレオチドアセテート100〜600μgを日に２〜３回投与することを開始した。また、同時に存在する感染症の検査のため、便採取を行った。下痢が＜グレード２になるまでCPT-11投与を控えた。
【０１０９】
（実施例３）
（サンプル分析）
薬物および代謝物レベルを決定するために、治療の第１サイクルにおいて得られたヘパリン化血液サンプルを遠心分離し、血漿を分析するまで-70℃で保存した。CPT（カンプトテシン、1μg／ml、National  Cancer  Institute、Bethesda、MDから得た）を内部標準として用いた。100μlの血漿を2mlのメタノールで抽出し、2500×ｇで10分間遠心分離し、上清を乾燥するまで蒸発させた。0.1％の10M  HCL（pH約2.0）を含有するメタノール200μlを用いて再構成を行った。SN-38Gの評価に関しては、上述のように血漿サンプルを抽出した。再構成前に、1000Ｕのグルクロニダーゼ（Sigma  Chemical  Co.、St.Louis、MO）を用いて、サンプルを37℃にて２時間インキュベートした。
【０１１０】
血漿中の全CPT-11およびSN-38濃度を、Barileroら（Barileroら、1992）のHPLC法を改変して用いて評価した。C18カラム（μBondapak、10μm、3.9×300mm、Waters  Associates、Milford、MA）をNovapakＣ18ガードカラムの後に用いて、分析を行った。移動相は、３mMヘプタンスルホン酸ナトリウムを含有する、35％アセトニトリル：65％0.1Mリン酸二水素カリウムの混合液（pH4.0）であった。検出は、Hitachi  F1050蛍光検出器（Hitachi  Instruments  Inc.、Naperville、IL）によって、λexが375nmかつλemが566nmにてモニターした。CPT-11（(株)ヤクルト本社、東京、日本から得た）およびSN-38（(株)ヤクルト本社から得た）の標準曲線は、5.0〜2365.3ng／ml（ｒ＝0.99）の範囲および9.8〜116.5ng／ml（ｒ＝0.99）の範囲でそれぞれ直線であった。SN-38G濃度を、グルクロニダーゼを用いたインキュベーション後のSN-38濃度の増加として決定した。
【０１１１】
（実施例４）
（データ分析）
CPT-11、SN-38、およびSN-38Gの血漿濃度−時間データを、PCNONLIN（SCI、Lexington、KY）を用いた非コンパートメント分析により分析した。ゼロ時（投与前）から最後の定量可能濃度（AUCｔ）時までの血漿濃度−時間曲線下面積（AUC）を、台形ルールによって計算した。時刻無限大（AUCｔ→∞）まで外挿されたAUCを、最後の定量可能濃度を、最終排出相(terminal  elimination  phase)の対数−線形回帰によって得られた最終速度定数(terminal  rate  constant)で割ることによって、評価した。AUCは、AUCｔおよびAUCｔ→∞の総和であった。クリアランス（CL）は、用量およびAUCの比として評価した。
【０１１２】
ヌードマウスにおけるCPT-11誘発下痢はSN-38の腸内蓄積に関連付けられた（Arakiら、1993）ため、代謝物の胆汁内濃度は、胃腸毒性を予測し得る。面積分析法の原理を用いて、生体内で変化した薬物の分布(disposition)を評価した（Kaplanら、1973）。本研究はこの原理を用いて、胆汁中に排泄されたSN-38を評価した。グルクロン酸抱合はSN-38の主要な排出経路であるため、抱合していないSN-38の画分は主に胆汁中に排泄される。SN-38の正味の胆汁中濃度は、その形成および排出の結果である。この濃度は、SN-38のSN-38Gに対するAUCの「胆汁比」として表現された。利用可能(available)薬物量の個体変動を制御するため、この比をCPT-11のAUCで乗算することにより、SN-38の「胆汁インデックス」を得た。これは次のように表される：
【０１１３】
【化２】
2006328087.tif 000003
グルクロン酸抱合の速度が遅い患者は、腸内に排出される胆汁中において比較的高濃度のSN-38を有しており、胃腸毒性のリスクが高い。また、CPT-11の高用量を投与された患者は、グルクロン酸抱合経路が飽和し、胆汁内SN-38濃度の上昇を導き得る。総じて、患者の「胆汁インデックス」が高いほど、下痢のリスクが高い。
【０１１４】
非母数Mann-Whitney検定を用いて、CPT-11処置の最初の２サイクル中で経験した最も重篤な下痢の程度として定義される薬動力学的結果の、２つの患者群間における相違を試験した。統計学的検定を、Number  Cruncher  Statistical  System（Dr.  Jerry  Hintz、Kaysville、UT）にて行った。0.05以下の両側の有意レベル(two-sided  significance  level)は、統計的に有意と見なした。
【０１１５】
（実施例５）
（CPT-11の代謝）
CPT-11の静脈内注入の後、２つの代謝物が血漿中で検出され得た。すなわちSN-38およびSN-38Gである。グルクロニドが主要代謝物であり、そのピーク血漿濃度はSN-38ピークの0.5〜３時間後に生じ、血漿レベルは一般にSN-38のレベルを超えた（図２Ａ）。  また、明らかな２次的ピークがSN-38プロフィール（図２Ｂ）に観察された。これらの観察は、24時間にわたって排泄された胆汁放射能の55％、22％および９％は未変化のCPT-11、SN-38GおよびSN-38であり、胆汁放射能の約18％は腸から再吸収されたことを報告したラットにおける前臨床的研究（Atsumiら、1991）と一致するものであった。４つの投与レベルにおける薬物および代謝物の薬動力学的評価を、表１に挙げる。CPT-11およびその代謝物の薬動力学に対して、G-CSFによる前処置の効果は無かった。100mg／m2から175mg／m2の用量レベルにしたときにCPT-11のAUCが、2.6倍非線形的に増加したことはCL評価値の減少と相関しており、CPT-11の非線形薬動力学に関する以前の報告（Kanedaら、1990；Negoroら、1991；KanedaおよびYokokuraら、1990）と一致するものであった。しかし、1.75倍の用量範囲にわたって、SN-38およびSN-38GのAUC評価値にはそれぞれ3.7倍および2.7倍の増加も見られた。興味深いことに、145mg／m2と175mg／m2との用量レベルの間では、SN-38G  AUCには増加が見られなかった。本研究において見られるCPT-11  AUCの非線形的増加は、CPT-11排出の非代謝的なおよび代謝的な両経路が漸次飽和することに起因し得る。２つの最高用量レベルでのSN-38Gのプラトー濃度は、SN-38からSN-38Gへのグルクロン酸抱合の飽和を示している。SN-38  AUCの増加は、CPT-11のCLの減少とは無関係であり、SN-38のグルクロン酸抱合経路の能力限界に起因し得る。血漿プロフィールにおける、AUCSN-38の12％増加に貢献している２次的なピークは、グルクロニダーゼによるSN-38Gの加水分解の結果としての、SN-38の腸肝循環を示唆している。
【０１１６】
【表１】
2006328087.tif 000004
【０１１７】
【表２】
2006328087.tif 000005
（実施例６）
（分布の患者間変動）
用量レベル全体にわたって、変動パーセント係数として測定された、AUCCPT-11評価値では17％から57％の変動、およびAUCSN-38評価値では２％から44％の変動が存在した。CPT-11分布の変動は、カルボキシルエステラーゼレベルの患者間相違に起因するものであることが示唆されている（Negoroら、1991；Oheら、1992；Rothenbergら、1993；Rowinskyら、1994）。しかし、本研究における、患者の投与前血漿サンプル中のカルボキシルエステラーゼ活性の評価は、SN-38  またはSN-38およびSN-38Gの総和の用量で正規化したAUCに対してあまり相関を示さなかった（Guptaら、1994a）。これは、CPT-11からの形成は、SN-38の分布における律速段階ではなかったことを示した。また、平均して用量の0.25％および３％が尿中にそれぞれSN-38およびSN-38Gとして排泄された。従って、腎臓クリアランスは主要でない排出経路であり、SN-38の大部分は抱合および胆汁への排出を経る。この観察は、以前の前臨床的報告と一致する（Atsumiら、1991；Kanedaら、1990；KanedaおよびYokokura、1990）。４つの用量レベルにわたるAUCSN-38Gの患者間変動（変動係数）は、59％から104％の範囲であった。従って、SN-38グルクロン酸抱合経路の投与依存性ならびに個体差は、有意なものであり得、SN-38分布に大きく影響し得る。患者間変動の影響は、0.15から2.53の範囲であった「胆汁比」評価値に反映されていた。
【０１１８】
（実施例７）
（下痢とグルクロン酸抱合との相関）
最低用量レベルの100mg／m2では、下痢は観察されなかった。この毒性には、用量依存性の増加が見られ、120mg／m2、145mg／m2、および175mg／m2用量レベルにおいて、それぞれ、34％、50％および100％の患者がグレード３〜４の下痢を有した。AUCCPT-11、AUCSN-38およびAUCSN-38Gのメジアン値の比較および、145mg／m2の投与レベルにおけるグレード０〜２群とグレード３〜４群との間の「胆汁比」は、有意な差を示さなかった（表２）。唯一の有意な変数は、「胆汁インデックス」であり、グレード０〜２およびグレード３〜４の群におけるメジアン値はそれぞれ2276および4747であった（p＝0.03）。また、全ての投与レベルに基づいて、「胆汁インデックス」と下痢の重篤度との間に有意な相関があった（p＝0.0004、図３）。このインデックスに基づいで明らかに患者が分類できた。すなわち、グレード３〜４の下痢を有する患者の約90％は、インデックス評価値が4000を超えていた。145mg／m2用量レベルにおけるグレード３〜４の下痢を有する５人の患者のうち４人では、「胆汁インデックス」は＞4000であった。５人目の患者はインデックスが3028であったが、Clostridium  difficile  トキシンに対して陽性の（c  diff＋で示される）便培養であり、これが恐らく下痢の重篤度に関連していた。従って、発明者の仮説と一致して、全身循環において利用可能な全CPT-11に関して、グルクロン酸抱合速度が比較的低い患者は、徐々にSN-38を蓄積し、これが毒性につながる。この仮説は、SN-38Gの尿評価値がグレード３〜４の下痢の患者において平均2.5倍低かったという事実によって支持された。
【０１１９】
薬物代謝の薬理遺伝学的変動は、いくつかの抗ガン薬物の処置関連毒性に貢献してきた（Lennardら、1989；Harrisら、1991；Ratainら、1991）。CPT-11の場合、遺伝的であり得るグルクロン酸抱合の変動が、腸におけるSN-38の異なった蓄積の主な要因となっていた。グルクロン酸抱合はSN-38の主な解毒経路を表しているため、この酵素が欠損している患者は、下痢によりかかりやすいはずである。グルクロン酸抱合の人種間差とあわせた個体差が報告されている（Patelら、1992）。グルクロノシルトランスフェラーゼ活性の欠損あるいは能力制限は、アセトアミノフェン等の薬物の毒性の要因であることが示されている（De  MoraisおよびWells、1989；Hjelle、1986）。従って、CPT-11の治療的インデックスを増加するための一つのアプローチは、グルクロノシルトランスフェラーゼ活性を誘導することである。
【０１２０】
（実施例８）
（CPT-11およびフェノバルビタール投与）
UDP-GTのイソ型は、フェノバルビタールおよび3-メチルコランスレンによる誘導の差に基づいて、広く分類することができる（BurchellおよびCoughtrie、1989）。これら２つのタイプのインデューサーのうち、フェノバルビタールは、ヒトにおいて抗コリン性／抗痙性物質および穏鎮静剤として用いられてきた。発明者らのここでの目的は、ラットにおけるSN-38のグルクロン酸抱合に対する、フェノバルビタール投与の効果を調べることにあった。
【０１２１】
（Ａ．材料および方法）
材料：CPT-11溶液を(株)ヤクルト本社、東京、日本から得、フェノバルビタールをElkins-Sinn  Inc.、Cherry  Hill、NJから得た。その他の全ての化学薬品は、分析グレードを有しており、Fisher  Scientific  Co.、Itasca、ILから得た。
【０１２２】
動物プロトコール：永久カテーテルを右頚静脈に設置した雌のWistarラット（約200g）を、Charles  River  Breeding  Laboratories（Wilmington、MA）から得た。ラットは、研究前に少なくとも24時間代謝ケージ中に維持され、食物および水は無制限に与えた。
【０１２３】
誘導実験は、Bockら（1979）に報告されたものに従って設計された。３匹のラットは、生理食塩水中の100mg／kgのフェノバルビタールを、１回腹腔内投与を受け、続いて４日間飲み水中の0.l％（w／v）フェノバルビタールを与えられた。第５日目に、頚カテーテルを介してCPT-11（20mg／kg）が投与され、血液サンプルを抜き出し、後述のように分析した。コントロール動物は、CPT-11の単回投与（20mg／kg）を受けたのみであった。
【０１２４】
連続血液サンプル（200μl）を、CPT-11投与から３、５、10、15、30、60、120、240および260分目に、カテーテルから抜き出した。各サンプリングの後に、カテーテルを等容量の生理的食塩水で洗い流した。サンプルを直ちに2500×ｇで10分間遠心分離し、得られた血漿を分析まで-70℃で保存した。10〜20μlの血漿サンプル中のCPT-11、SN-38およびSN-38Gは、上述のように逆相HPLC法によって定量した（Guptaら、1994b）。
【０１２５】
データ分析：コントロールおよび前処置した群のラットの血漿濃度−時間プロフィールを、非コンパートメント法（PCNONLIN、SCI、Lexington、KY）により分析した。CPT-11および代謝物の全身的曝露を、０時間から６時間までの濃度−時間曲線下面積（AUC）として評価した。非母数Mann-Whitney検定を用いて、コントロールおよび前処置した群間のAUC差を試験した。
【０１２６】
（Ｂ．結果）
１匹のラットの頚カテーテルの不具合により、フェノバルビタールを与えられた３匹のラットのうち２匹のラットのみを評価した。誘導された動物はコントロールに対してAUCが173％増加したことから観察されるように、フェノバルビタールはSN-38  UDP-GT活性を誘導することに成功した（表３、図４Ａ、図４Ｂ、図４Ｃ）。一方、CPT-11およびSN-38の両方のAUCは、60％および50％の減少を示した。CPT-11濃度の減少は恐らく、CPT-11のSN-38への脱エステル化が促進されたことに起因するものであった。しかし得られたSN-38のプールは、誘導されたUDP-GTの増大した基質要求性を補うには不十分であり、SN-38のAUCを50％減少させる結果となった。CPT-11およびSN-38の両方のAUCの全体的な減少は、SN-38のUDP-GTによる抱合が増大したことを示すものであった。
【０１２７】
【表３】
2006328087.tif 000006
フェノバルビタール前処置による、CPT-11の分布に対する効果。コントロールラットは、20mg／kgのCPT-11の単回ボーラス投与を受けた。前処置ラットは、フェノバルビタール（100mg／kg）の１回の腹腔内投与および飲み水中の0.1％（w／v）フェノバルビタール投与を連続４日間受けた。第５日目に、前処置ラットは、20mg／kgのCPT-11の単回ボーラス投与を受けた。データは、コントロール群は平均±SD、前処置群は平均として示している。
【０１２８】
UDP-GTによるSN-38Gのグルクロン酸抱合は、解毒経路を表しており、この排泄経路を誘導することは、SN-38に帰因する用量制限的な下痢の発生率を下げるために有用であることが判明する。逆に、SN-38の胆汁排泄は、腸内のSN-38の蓄積につながり下痢を起こすため、望ましくない排泄経路を形成している。フェノバルビタールによるUDP-GT誘導は、SN-38G濃度の2.7倍の増加につながり、またCPT-11およびSN-38アベイラビリティーの約２倍の減少につながった。これにより腸内に排出されるSN-38の濃度は実質的に低下する。
【０１２９】
フェノバルビタールを１日60mg／kg、治療中毎日患者に投与することを提案する。
【０１３０】
本実施例および以下の全実施例において、示唆した投与法は、抱合酵素活性を増大させる第２の薬剤の投与の開始点として提供したものである。記載した用量をCPT-11と組み合わせた治療用途に考慮してもよいが、このような用量は最適値であるようには意図されていず、むしろ通常の場合において医師が容易に最適化し得る範囲を提供するものである。更なる指針のために毒性および致死用量をしばしば引用しているが、勿論これは避けられるべきである。
【０１３１】
（実施例９）
（オルチプラズ）
オルチプラズ(RP-35972;  ４-メチル-５(２-ピラジニル)-3H-1,2-ジチオール-３-チオン;Rhone-Poulencから入手可能である)は、本発明に好ましく用いられる薬物の１つである。オルチプラズは、四塩化炭素およびアセトアミノフェン毒性に対する化学保護効果を発揮することが示されている(Ansherら、1983;  DaviesおよびSchnell、1991;  Egnerら、1994)。従って、オルチプラズは、グルクロン酸抱合を誘導するための潜在的な薬物として考えられ、CPT-11処置の前に、または処置とともに用いられる。本明細書においてそれぞれ参考として援用されるAnsherら、1983;  DaviesおよびSchnell、1991;およびEgnerら、1994に記載のような用量が採用され得る。
【０１３２】
（実施例10）
（アリールオキシカルボン酸およびフィブリン酸(Fibric  acid)）
（Ａ.  クロフィブラート）
クロフィブラートは、プロパン酸,２-(４-クロロフェノキシ)-２-メチル-,エチルエステル;  Atromid-Sであり、Ayersから入手可能である。
【０１３３】
クロフィブラートは、適切な脱塩化水素剤の存在下にて、フェノールを、エチル２-クロロ-２-メチルプロピオナートと縮合し、次いで塩素化することによって調製し得る。
【０１３４】
薬物は、吸収の間および肝臓を通過中に加水分解されて、クロフィブリン酸(clofibric  acid)になり、活性はこの酸に起因する。酸は、血漿タンパク質に強く結合する。約60%が代謝されて、主にグルクロニド抱合体になる。半減期は、無尿状態が100時間を越える場合を除いて、６から25時間(平均11時間)である。遅い代謝速度を有する患者ほど、良好な臨床応答を示した。
【０１３５】
成人に用いられる適切な用量は、抗高脂血症効果を得るために用いられる用量と類似の用量が意図される。すなわち体重が120ポンド未満の者には500mgを１日３回、体重が120〜180ポンドの者には１日４回、そして体重が180ポンドを越える者には１日５回、または抗利尿効果を得るために用いられる用量と類似の場合には、６〜８g/日を２〜４回に分けた用量である。クロフィブラートは、500mgのカプセルで入手できる。
【０１３６】
（Ｂ.  シプロフィブラート）
集合的にフィブリン酸と称される、クロフィブラートのいくつかの化学的関連物質は、クロフィブラートそのものより、毒性が少なく、高トリグリセリド血症、および高コレステロール血症の処置により効果的ということが証明されている。これらの薬物の内の１つがシプロフィブラートである。
【０１３７】
（Ｃ.  ゲムフィブロジル）
ゲムフィブロジルは、1970年代半ばからアメリカおよびヨーロッパにおいて広く用いられ、1982年にアメリカにおける使用が認可された。ゲムフィブロジルの単回投与(600mg)によって、血漿中の濃度が、２時間後に約15μg/ml、９時間後に５μg/mlになる。最終的な排泄は、主として腎臓を通り、主にグルクロニドとして行われる。ゲムフィブロジル(LOPID)は、300mgのカプセル、および600mgの錠剤として入手し得る。通常勧められる用量(成人のみ)は、600mgを１日に２回であり、朝食および夕食の30分前に服用する。
【０１３８】
（Ｄ.  フェノフィブラート）
関連化合物であるフェノフィブラートは、ヨーロッパにおいて広く処方されている。通常の用量は、経口投与で毎食後100mgである。食事とともに薬物を投与することによって、一部の患者に起こる胃への刺激を減少する。
【０１３９】
（Ｅ.  ベザフィブラート）
クロフィブラートおよび関連するフィブリン酸誘導体の構造式を表４に示す。ゲムフィブロジル、フェノフィブラート、ベザフィブラート、およびシプロフィブラートの全てが、クロフィブラートよりも効力を有しており、少ない用量で使用され得る。
【０１４０】
【表４】
2006328087.tif 000007
（実施例11）
（抗痙攣剤）
（Ａ.  フェノバルビタール）
フェノバルビタールは、2,4,6(1H,3H,5H)-ピリミジントリオン,５-エチル-５-フェニル-,フェニルエチルマロニル尿素であり、様々な市販源から入手できる。
【０１４１】
塩化ベンジルを、シアン化ナトリウムで処理し、次いで、アルコールの存在下、酸加水分解し、フェニル酢酸エステル(エチルフェニルアセテート)に変換することによって、フェノバルビタールを調製する。エステルを、アルコールおよび金属ナトリウムの存在下で、シュウ酸エチルと縮合し、ジエチルナトリウムフェニルオキザロアセテートを形成する。HClを加えて、ジエチルフェニルオキザロアセテートを遊離する。これを約180゜にて蒸留すると一酸化炭素を分離し、フェニルマロン酸エステル[C６H５CH(COOC２H５)２]を形成する。フェニルマロン酸エステル中のCHの水素を、次いでエチル化し、得られたエチルフェニルマロン酸エステルを尿素と縮合する。
【０１４２】
経口用量の約80%が吸収され、16〜18時間でピーク血漿レベルに達する。治療的な血漿レベルは、10〜30μg/mLの範囲にある。見かけの血漿での半減期は、成人の場合、50〜120時間まで変化する。成人に作用するために適切な用量は、30〜120mgを２または３回の分割投与;100〜320mg、および50〜100mgを１日に２または３回、を含むことが意図される。通常の用量の範囲は１日30〜600mgである。フェノバルビタルは、多くの投与剤型：エリキシル；15または20mg/５mL；カプセル：16mg；錠剤：８、16、32、65、および100mgで入手できる。
【０１４３】
フェノバルビタールナトリウムは、2,4,6(1H,3H,5H)-ピリミジントリオン,５-エチル-５-フェニル-,一ナトリウム塩であり、Winthropおよび様々な市販源から入手できる。フェノバルビタールナトリウムは、フェノバルビタールを、等量のNaOHのアルコール溶液に溶解し、低温度で蒸発することによって調製され得る。フェノバルビタールナトリウムは、水に溶解するため、非経口で投与され得、ゆっくりとした静脈内注入によって与えられ得る。成人に対する適切な用量としては：筋肉内、または静脈内注入で100〜130mg;必要であれば、６時間に200〜300mgを繰り返すことが含まれる。フェノバルビタールナトリウムは注射剤：30、60、65、および130mg/mL；滅菌粉剤、120mgのアンプルの投与剤型で入手し得る。
【０１４４】
（Ｂ.  ジランチン(Dilantin)(フェニトイン)）
フェニトインは、2,4-イミダゾリジンジオン,5,5-ジフェニル-,ジフェニルヒダントインであり、Parke-Davisから入手可能である。
【０１４５】
適切な用量の範囲は、経口で１日300〜600mg；通常、成人は100mgを１日３回；用量はその後個別化する。投与剤型は、チュアブル錠：50mg；経口用懸濁剤：30mg/5mLおよび125mg/5mLで入手できる。
【０１４６】
フェニトインナトリウムは、2,4-イミダゾリジンジオン,5,5-ジフェニル-,一ナトリウム塩であり、アレプシン(Alepsin)、エパヌチン(Epanutin)、エプトイン(Eptoin）、およびジランチンナトリウム(Dilantin  Sodium)としても知られており、Parke-Davisから入手可能である。フェニトインナトリウムは、ベンズアルデヒドをシアン化ナトリウムの溶液で処理し、２モルのベンズアルデヒドを縮合して１モルのベンゾインとし(ベンゾイン縮合)、硝酸または硫酸銅でベンジルに酸化する。ベンジルを次いで、ナトリウムエトキシドまたはイソプロポキシドの存在下において、尿素と加熱して、フェニトインナトリウムを形成する。
【０１４７】
治療的な血漿レベルは、成人の場合には10〜20μg/mL、小児の場合には５〜20μg/mLの範囲にある。毒性レベルは、30〜50μg/mLの範囲にあり、致死レベルは約100μg/mLであり、これらのレベルは避けるべきである。
【０１４８】
フェニトインナトリウムカプセルには、２つの異なる形態：即時-放出タイプ(即時型フェニトインナトリウムカプセル)、および遅延-溶解タイプ(遅延型フェニトインナトリウムカプセル)がある。前者は、30分間に85%以上の溶解速度を有し、１日に３または４回の投与に用いられる。これに対して、後者は、30分間に15〜35%、１時間に45〜65%、２時間で85%以上の遅い溶解速度を有し、１日１回の投与に用いられ得る。100mgの即時型フェニトインナトリウムカプセルを１日に３回投与する場合と、300mgの遅延型フェニトインナトリウムカプセル(Dilantin  Kapseals,  Parke  Davis)を１日に単回投与する場合とを比較した研究の結果は、吸収、ピーク血漿レベル、生物学的半減期、ピークと最小値との差、および尿回復が同等であることを示す。
【０１４９】
他の薬物との併用によって、その代謝は有意に変化し得る。血清レベルを増加させる薬物には、クロラムフェニコール、ジクマロール、トルブタミド、イソニアジド、フェニルブタゾン、急性アルコール摂取、サリチル酸塩、クロルジアゼポキシド、フェノチアジン、ジアゼパム、エストロゲン、エトスクシミド、ハロタン、メチルフェニデート、スルホンアミド、シメチジン、およびトラゾドンが含まれる。血清レベルを減少する薬物には、カルバマゼピン、慢性アルコール中毒、レセルピン、およびカルシウムを含有する調製物が含まれる。血清レベルの増加または減少のいずれかを起こす薬物には、フェノバルビタール、バルプロ酸、およびバルプロ酸ナトリウムが含まれる。
【０１５０】
適切な用量の範囲は：経口で１日に200〜600mg；通常、経口で100mgを１日に最高４回；通常、静脈内投与で150〜250mg、続いて必要であれば、30分後に100から150mg(静脈内投与は50mg/分を越えてはならない)；通常、100〜200mgの筋肉内注入を６〜８時間ごとに合計３または４回。投与剤型−カプセル：100mg(フェノバルビタールが0.16または0.32mg)；即時型カプセル：30および100mg；遅延型(１日１回の投与)カプセル：30および100mg。
【０１５１】
（Ｃ.  クロナゼパム）
クロナゼパムは、2H-1,4-ベンゾジアゼピン-２-オン,５-(２-クロロフェニル)-1,3-ジヒドロ-７-ニトロであり、Rocheから入手し得る。
【０１５２】
クロナゼパムはｏ-クロロベンゾイルクロリドをｐ-ニトロアニリンと反応させ、２-アミノ-５-ニトロ-２’-クロロベンゾフェノンを形成し、これをブロムアセチルブロミドと縮合し、２-ブロモアセトアミド-５-ニトロ-２’-クロロベンゾフェノンを形成し、次いでアンモニアで処理して対応するアセトアミド化合物を形成することによって、クロナゼパムを調製する。アセトアミド化合物を、メタノール中の無水HClによって塩酸塩に変換し、煮沸メタノールに溶解し、ピリジンを触媒として環化し、クロナゼパムとする。治療的な血漿レベルは、20〜80ng/mLの範囲にある。
【０１５３】
成人における適切な用量には、1.5mgの３回の分割投与；または、３日ごとに0.5〜1.0mgが含まれることが意図される。１日の最大用量は20mgである。錠剤の投与剤型は：0.5、1.0および2.0mgで入手し得る。
【０１５４】
（Ｄ.  クロトリマゾール）
クロトリマゾールは、1H-イミダゾール,１-[２-クロロフェニル)ジフェニルメチル]であり、Scheringから入手し得るロトリミン(Lotrimin)、およびMilesから入手し得るミセレックス(Mycelex)とも称される。トリメチルアミンをプロトン受容体として用いて、イミダゾールと、２-クロロトリフェニルメチルクロリドとを反応させて調製する。
【０１５５】
適切な用量は、成人において、１日に１%のクリームを５g、または100mgの錠剤を好ましくは就寝前に連続７〜１４日間；トローチとして10mgを１日に５回ゆっくりと口内で溶解することを含む。投与剤型として、クリーム：１%；膣クリーム：１%(１つのアプリケータが丁度５gのクリームを含有する);局所溶液：１%；膣錠剤：100および500mg；トローチ：10mgで入手できる。
【０１５６】
（実施例12）
（コルチコステロイド）
（Ａ.  デキサメタゾン）
デキサメタゾンは、プレグナ-1,4-ジエン-3,20-ジオン,９-フルオロ-11,17,21-トリヒドロキシ-16-メチル-,(11β、16α)-であり、様々な市販源から入手できる。Millerら(1991)は、経口デキサメタゾンが、ガン処置においてベラパミルとともに用いられて効果が得られることを記載している。
【０１５７】
成人に対する適切な用量は、まず500μgから９mgを１日に１回または分割投与、通常は少な目に;もしくは、２日ごとに、８mgを１ヶ月;もしくは、デキサメタゾンリン酸ナトリウムの非経口投与の後、２mgを１日２または３回投与することが含まれる。投与剤型は、局所エアロゾル:  0.01〜0.04%；エリキシル:  0.5mg/5mL；ゲル:  0.1%；眼用懸濁液:  0.1%；錠剤：0.25、0.5、0.75、１、1.5、２、４、および６mgで入手できる。
【０１５８】
デキサメタゾンリン酸ナトリウムは、プレグナ-４-エン-３,20-ジオン,９-フルオロ-11,17-ジヒドロキシ-16-メチル-21-(ホスホノオキシ)-,二ナトリウム塩,(11β、16α)-,デキサメタゾン21-  (リン酸二ナトリウム)；であり、MSDから入手し得るデカドロン(Decadron)として知られ;およびForestから入手し得るダラロン(Dalalone)としても知られている。
【０１５９】
デキサメタゾンリン酸ナトリウムは、最も溶解しやすい副腎皮質化合物の１つである。従って、静脈内投与、局所注入、および吸入に適しており、さらに、溶液、および局所塗布のための水性の軟膏にも適している。適切な用量は、成人で、静脈内または筋肉内投与で１日420μg〜7.5mgで、応答が生じれば用量を減らす。関節内、病変内部位、または柔組織への注入では、170μg〜５mgである。投与剤型には、注射剤:  3.3、8.33、16.66があり、同様に、種々のエアロゾル、スプレー、クリーム、軟膏および眼用溶液も利用可能である。
【０１６０】
【表５】
2006328087.tif 000008
（実施例13）
（経口避妊薬）
種々の経口避妊薬が採用され得る。これらは、エチノジオールジアセテート；レボノルゲストレル(Wyethより入手可能)；メドロキシプロゲステロンアセテート(UpjohnまたはReid  Rowellより入手可能)；ノルエチンドロン(Ortho、SyntexまたはParke-Davisより入手可能)；ノルエチンドロンアセテート(AyerstまたはParke-Davisより入手可能)；ノルエチンオドレル(Searleより入手可能)；ノルゲストレル(Wyethより入手可能)を包含する。
【０１６１】
これらは以下の用量で利用可能である：エチノジオールジアセテート／エチニルエストラジオール(1mg/35または50μg)錠剤；エチノジオールジアセテート／メストラノール(0.5または1mg/100μg)錠剤；レボノルゲストロール／エチニルエストラジオール、0.15/30  mg/μgの一相錠剤；0.05/30、0.075/40および0.125/30  mg/μgの三相錠剤；ノルエチンドロン／エチニルエストラジオール、1mg/50μg、1mg/35μg、0.5mg/35μg、0.4mg/35μgの一相錠剤；  0.5Bmg/35μg(x10)および1mg/35μg(x11)の二相錠剤；0.5mg/35μg(x7)、1mg/35μg(x7)および0.5mg/35μg(x7)、あるいは、0.5mg/35μg(x7)、0.75mg/35μg(x7)およびd1  mg/35μg(x7)の三相錠剤；ノルエチンドロン／メストラノール、1/20、1/50、1/80、および0.5または2/100  mg/μgの一相錠剤；  0/20(x17)および0.25/20(x7)、あるいは、0/40(x17)および0.5/40(x7)、あるいは、0/80(x17)および1/80(x7)  mg/μgの二相錠剤；ノルエチンドロンアセテート／エチニルエストラジオール(1/20、1.5/30、1/50および2/50  mg/μg)錠剤；ノルエチンオドレル／メストラノール(2.5:100、5:75および9.85:150  mg:μg)錠剤；および、ノルゲストレル／メストラノール(500:50および300:30  μg:μg)錠剤。
【０１６２】
（実施例14）
（シクロホスファミド）
シクロホスファミドは、2H-1,3,2-オキサザホスホリン-2-アミン,  N,N-ビス(2-クロロエチル)テトラヒドロ-,  2-オキシド,  モノハイドレートであり；シトキサン（Cytoxan）としてMead  Johnsonから、およびネオサール（Neosar）としてAdriaから入手可能である。シクロホスファミドは、3-アミノ-1-プロパノールとN,N-ビス(2-クロロエチル)ホスホルアミドジクロライド[(ClCH2CH2)2N-POCl2]とを、トリエチルアミン触媒の影響下でジオキサン溶液中で縮合することにより調製される。縮合は二重（ヒドロキシル基およびアミノ基の両方を含む）であり、従って、環化が行なわれる。
【０１６３】
他のβ-クロロエチルアミノアルキル化剤とは異なり、これは、肝臓酵素により活性化されるまで活性エチレンイモニウム形態へと容易に環化しない。従って、この物質は、消化管内で安定であり、抵抗性に優れ、そして経口および非経口経路で有効である。この物質は、局所的な発疱疹、壊死、静脈炎または疼痛さえ引き起こさない。
【０１６４】
成人に対する適切な用量は以下を包含する：経口では、消化管抵抗性に応じて１〜５mg/kg/日  (通常、組み合わせ)；または１〜２mg/kg/日；静脈内投与では、初期には、２〜５日間にわたって分割投与で40〜50mg/kg、または７〜10日毎に10〜15mg/kg、または３〜５mg/kgを１週間に２回、または1.5〜３mg/kg/日。消化管への悪影響という理由で、投与(loading)には静脈内経路が好ましい。持続期間中は、通常、3000〜4000/mm3の白血球カウントが望ましい。この薬物はまた、筋肉内注射により、浸潤により、または体腔内に投与される場合がある。100、200および500mgの注射、ならびに25および50mgの錠剤の投与剤型が利用可能である。
【０１６５】
（実施例15）
（レチノイン酸）
レチネン（レチナール）のアルデヒド基がカルボキシル基に酸化されると、レチノイン酸（いわゆるビタミンＡ酸）が形成される。ある種のカロテノイドと共に、ビタミンＡは、免疫系の機能を増強し、結果として感染性疾患を低減し、そして、ある種の悪性腫瘍の発達を防御するようである。その結果、ガンの予防および種々の前ガン状態の処置のためのレチノイドの薬理学的使用が大きな興味の対象となっている。
【０１６６】
レチノールを含有する多くのタイプの調製物がある。ビタミンＡカプセルは、カプセル当たり３〜15mgのレチノール(10,000〜50,000  I.U.)を含有する；経口ドロップもまた利用可能である。水混和性調製物(15mg/ml；50,000  I.U./ml)は筋肉内注射により投与され得る。イソトレチノイン(13-シス-レチノイン酸；ACCUTANE)が、10-、20-、および40-mgカプセルとして経口使用に利用可能である。初期の１日の用量は、通常、２回に分けて0.5〜１mg/kgであり、最大で２mg/kgまでである。１クールの治療は、通常15〜20週間である；これは、２ヶ月の間隔をおいた後、繰り返され得る。エトレチネート(TEGISON)が、10-および25-mgカプセルとして経口使用に利用可能である。初期の１日の用量は、通常、0.75〜１mg/kgであり、最大で1.5mg/kgまでである。
【０１６７】
（実施例16）
（リファンピン）
リファンピンは、リファマイシン，3-[[(4-メチル-1-ピペラジニル)イミノ]メチル]-,  リファンピシン；Merrell  Dowから入手可能なリファジン（Rifadin）；およびCiba-Geigyより入手可能なリマクタン（Rimactane）を包含する。
【０１６８】
リファマイシンSV（これは、Sensiらの方法(米国特許第3,313,804号)により調製され得る）は、3-ホルミルリファマイシンSVとしても知られている8-カルボキシアルデヒド誘導体に転換され、そしてこれは、シッフ塩基反応において1-アミノ-4-メチルピペラジンと縮合され、リファンピンが得られる。
【０１６９】
代謝は、300より大きく450mgまでの用量については、用量依存性である；治療用量に関しては、血清の半減期は1.5〜５時間である。たとえそうであるとしても、薬物は、通常、８〜12時間間隔で投与される。なぜなら、吸収が、有効レベルを８〜10時間持続するに十分に緩慢であるからである。
【０１７０】
適切な成人用量は以下を包含する：経口では、食事の少なくとも１時間前にコップ一杯の水と共に１日１回600mg；高齢の患者または衰弱した患者には、１日１回10mg/kg。これは以下の投与剤型で利用可能である：カプセル：150および300mg；カプセル(イソニアジドとの組み合わせ)：300mgのリファンピンおよび150mgのイソニアジド；錠剤：300mg。
【０１７１】
（実施例17）
（ジスルフィラム（アンタブース(Antabuse)））
ジスルフィラムは、チオパーオキシジカルボニックジアミド,  テトラエチル-,  テトラエチルチウラムジスルフィド(Ayerstから入手可能なアンタブース（Antabuse）として知られる)である。ジスルフィラムは、アルコール中のジエチルアミンおよび二硫化炭素の冷却溶液をヨウ素のアルコール性溶液で処理することにより調製される。氷水がジスルフィラムの分離を促進するために加えられ得る。適切な用量は、通常、経口では、最初の２または３週間は１日500mgまで；持続期間中は、１日250mgである。錠剤の投与剤型が利用可能である：250および500mg。
【０１７２】
（実施例18）
（P()糖タンパク質結合）
CPT-11およびSN-38がp()糖タンパク質と相互作用するかどうかを測定するために、多剤耐性の胸部腫瘍細胞株MCF-7/Adr由来の膜小胞を用いて、ベラパミルのフォトアフィニティーアナログの5nMのp()糖タンパク質に対する結合の阻害効果を測定した。
【０１７３】
Ａ．細胞のフォトアフィニティーラベル：
多剤耐性のヒト胸部腫瘍細胞株MCF-76/Adr由来の膜小胞を用いた。この小胞を、増加濃度のCPT-11、SN-38または非ラベルのベラパミル(正のコントロール)の非存在下または存在下、ベラパミルのフォトアフィニティーアナログであるN-(p-アジド-[3,5-125I]サリチル)-ベラパミル([125I]BAS-VP)の50nMでフォトラベルした。P-gpに特異的なモノクローナル抗体を用いて、[125I]ベラパミルの免疫沈降反応を行った。タンパク質を5〜15％ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)により分離し、そして蛍光写真により検出した。
【０１７４】
CPT-11(10μM)およびSN-38(100μM)は、それぞれ、p()糖タンパク質のアフィニティーラベルを80％および60％阻害した。このことは、これらの化合物が共にp()糖タンパク質の基質であったことを示唆している（図５）。
【０１７５】
（実施例19）
（CPT-11およびシクロスポリンＡの投与）
P()糖タンパク質は、ATP依存性膜貫通流出ポンプとして機能する170〜180kDaの膜糖タンパク質であり、多剤耐性の発達の原因となると思われる（EndicottおよびLing、1989）。このタンパク質は、肝細胞の胆管ドメインに位置すると報告されており、おそらく細胞外来異物(cellular  xenobiotics)の排泄において役割を果たす(Thiebautら、1987；Kamimotoら、1989)。一般に、多剤耐性を逆転する薬剤は、p()糖タンパク質の共通結合部位についての細胞傷害性薬物と競合させることによりそのように機能し、シクロスポリン(ヒトにおいて成功を収めた臓器移植を補助した免疫抑制剤)を輸送することが報告されている（Foxwellら、1989；Saekiら、1993）。p()糖タンパク質部位へのシクロスポリンＡの競合または非競合結合に起因する、シクロスポリンＡによるヒトにおけるいくつかの化合物のp()糖タンパク質媒介輸送の阻害を示す証拠が存在する（TamaiおよびSafa、1991；Lannoyら、1992；Okamuraら、1993；Zacherlら、1994；Charukら、1994）。実施例18の研究は、CPT-11、SN-38ならびにSN-38Gがp()糖タンパク質の基質であることを示した。本研究の目的は、CPT-11およびその代謝物の胆汁輸送におけるシクロスポリンＡによるp()糖タンパク質の阻害の効果を調べることであった。
【０１７６】
（Ａ．物質および方法）
物質：CPT-11溶液をYakult  Honsha  Co.,  Tokyo,  Japanから得、そしてシクロスポリンＡ(Sandimmune)をSandoz  Pharmaceutical  Co.,  East  Hanover,  NJから購入した。他の全ての化学物質は分析グレードのものであり、Fisher  Scientific  Co.,  Itasca,  ILから得た。
【０１７７】
動物プロトコール：右頚静脈に永久カテーテルが装着された雌Wistarラット(約200g)を、Charles  River  Breeding  Laboratories  (Wilmington,  MA)から得た。このラットを、研究前少なくとも24時間は代謝ケージに保持し、食料および水を任意に供給した。
【０１７８】
CPT-11の分布に対するシクロスポリンＡの効果を調べるために、動物を２つの群に分けた。コントロール群には、6mg/kg、10mg/kgまたは20mg/kgの用量で、カテーテルを介してCPT-11を静脈内にボーラス投与した。前処理群のラットには、CPT-11を投与する５分前にシクロスポリンＡ(60mg/kg)を静脈内にボーラス注射した。各薬物の投与後に、カテーテルを500μlの生理食塩水で洗い流した。
【０１７９】
CPT-11投与の３、５、10、15、30、60、120、240および260分後に、カテーテルを介して連続的な血液サンプル(200μl)を採取した。各サンプルを採取後、カテーテルを等容量の生理食塩水で洗い流した。サンプルを直ちに2500Xgで10分間遠心分離し、得られた血漿を-70℃で分析まで保存した。10〜20μlの血漿サンプル中のCPT-11、SN-38およびSN-38Gを、前述の逆相HPLC法(Guptaら、1994b)により定量した。
【０１８０】
データ分析：コントロール群および前処理群のラットの血漿濃度−時間プロフィールを、非コンパートメント法(non-compartmental  method)（PCNONLIN,  SCI,  Lexington,  KY）を用いて分析した。CPT-11および代謝物の全身性曝露(systemic  exposure)を、時間０から６時間までの濃度−時間曲線下面積(AUC)として推定した。非母数Mann-Whitney検定を用いて、コントロール群と前処理群との間のAUCの違いを試験した。
【０１８１】
（Ｂ．結果）
３つの用量レベル(20mg/kg、10mg/kgおよび6mg/kg)すべてにおいて、シクロスポリンＡは、コントロールの血漿レベルと比較してCPT-11、SN-38およびSN-38Gの血漿濃度を顕著に増加させた（図６Ａ、図６Ｂ、図６Ｃ；図７Ａ、図７Ｂ、図７Ｃ；図８Ａ、図８Ｂ、図８Ｃ）。濃度の漸進的な増加の開始がCPT-11投与後15〜30分の間で現れ、このことは、シクロスポリン投与とp()糖タンパク質阻害との間の時間のずれを示唆している。３つの用量レベルにわたるAUCの正味の増加が、CPT-11およびSN-38については約３倍、ならびにSN-38Gについては約２倍であることから、増加はCPT-11用量には無関係なようであった(表６；表７)。
【０１８２】
【表６】
2006328087.tif 000009
ラットにおけるCPT-11および代謝物の分布についてのシクロスポリンＡの効果。コントロール群には、20、10または6mg/kgの用量で、CPT-11を静脈内にボーラス投与した。前処理群には、CPT-11を投与する５分前にシクロスポリン(60mg/kg)を静脈内にボーラス投与した。CPT-11、SN-38およびSN-38Gのバイオアベイラビリティーの増加を、コントロール群に対する前処理群の６時間AUCの比として計算した。全体の増加を、各用量レベルで観察された増加の平均として決定した。＊：コントロールと比較して有意に高い（ｐ＜0.05）。データは、平均±SDで表される。
【０１８３】
【表７】
2006328087.tif 000010
シクロスポリン投与後のCPT-11、SN-38およびSN-38Gのバイオアベイラビリティーの増加(AUCの増加を反映する)は、p()糖タンパク質関連輸送の阻害の低減に対して副次的であった。P()糖タンパク質は肝細胞の胆細管面および腎臓の近位管細胞の頂端表面に位置することが報告されているので、胆汁および腎臓両方の排泄の低減が、CPT-11および代謝物の身体全体におけるクリアランスの減少に寄与し得、従って、顕著に増加したAUCが得られる。しかし、胆汁排泄が、CPT-11、SN-38およびSN-38G排出の主要経路であり、ラットの尿にはCPT-11用量の約20％しか排出されない（KanedaおよびYokokura、1990）。従って、おそらく胆汁排泄における低減がクリアランスの減少の主要な要因であり、そしてCPT-11および代謝物の身体全体におけるクリアランスに対するこの排泄経路の顕著な寄与を反映している。
【０１８４】
シクロスポリンの阻害効果が細胞に不可逆な損傷を与えることは報告されておらず、細胞はシクロスポリン除去後も完全なまま維持される（TamaiおよびSafa、1991）。P()糖タンパク質を過剰発現する頂端管細胞におけるシクロスポリン存在下でのジゴキシン輸送の阻害のインビトロ研究では、輸送は培地からのシクロスポリン除去後にコントロールレベルに回復した。従って、シクロスポリンのp()糖タンパク質への結合は可逆的であり、そして効果の持続はシクロスポリンの存在に依存すると結論付けられ得る。ラットおよびヒトにおいては、シクロスポリンの血漿半減期は約４〜６時間であると報告されている。CPT-11分布のp()糖タンパク質阻害の効果はシクロスポリン送達後最大24時間の期間について認められると予測され得るので、この期間中に約90％の薬物(シクロスポリン)が身体から排出されていた。
【０１８５】
シクロスポリンＡの付随的な投与により、薬物および代謝物のAUCが増大した。シクロスポリンはSN-38の胆汁排泄を阻害するので、中央コンパートメント(central  compartment)におけるこの代謝物の蓄積は、腸内におけるSN-38Gの顕著な低下に起因する。SN-38の胆汁濃度の減少および血漿濃度の増加は、毒性を低減させるだけでなく、CPT-11の治療効果を増大させる。より高濃度の血漿SN-38は、より多量の活性代謝物を悪性腫瘍組織に体内分布させる。従って、実質的により低用量のCPT-11を用いて、同様の治療効果を達成し得る可能性がある。しかし、SN-38の胆汁排泄の低下はシクロスポリンの存在に依存するので、腸内でのSN-38の蓄積はシクロスポリンの全身からの排出後に起こり得る。フェノバルビタールの存在は、SN-38の解毒作用を増強させることによって、この現象を逆転させ得る。結論として、シクロスポリンをCPT-11と共に投与することは、毒性を低減させ、かつCPT-11の治療インデックスを増大させる有効な別の手段であることが提案される。シクロスポリン、フェノバルビタールおよびCPT-11を組み合わせて使用することもさらに興味深い。
【０１８６】
シクロスポリンＡは、現在、６時間の注入による10mg/kgでの使用が提案され、そしてCPT-11は、シクロスポリンの注入開始約３時間後に開始する90分間の注入による25mg/m2での使用が提案されている。
【０１８７】
本実施例および以下のすべての実施例においては、示唆される投与法は、胆汁輸送タンパク質活性を減少させる（例えば、p()糖タンパク質活性を減少させる）第２の薬剤の投与開始時点として提供される。記載される用量は、カンプトテシン(例えば、CPT-11)と組み合わせて治療に使用されると考えられ得るが、このような用量は最適な値であることは意図されず、通常の実施において医師によって容易に最適化され得る範囲を提供することが意図される。さらなる指針が引用されている場合には、毒性量および致死量は回避されるべきである。
【０１８８】
（実施例20）
（シクロスポリンおよびスタウロスポリン）
（Ａ．シクロスポリン）
Thalhammerら(1994)は、胆細管を横切るカチオン染料(アクリジンオレンジ)のp()糖タンパク質媒介輸送がシクロスポリンＡにより阻害されることを示した。
【０１８９】
Pourtier-Manzanedoら(1992)は、非免疫抑制シクロスポリン誘導体(SDZ  PSC  833)がp()糖タンパク質を阻害することを報告した。この著者らはまた、準合成シクロペプトリド(SDZ  280-446)がp()糖タンパク質ブロッカーであることを示した。
【０１９０】
Boeschら(1991)はまた、SDZ  PSC  833が有効なインヒビターであることを示した。標的細胞の研究において、PSC  833は、多剤耐性(MDR)  P388細胞の薬物感受性の回復について、シクロスポリンＡよりも少なくとも１桁高い活性であった。
【０１９１】
その後、BoeschおよびLoor(1994)は、  SDZ  PSC  833、SDZ  280-446、シクロスポリンＡおよびベラパミルが、p()糖タンパク質を阻害するに有効であることを報告した。CsA、SDZ  280-446およびSDZ  PSC  833はベラパミルよりも強力なインヒビターであることが示された。SDZ  PSC  833は、単回パルス曝露（single  pulse  exposure）の２日後でさえもp()糖タンパク質機能の阻害を示した。従って、いくつかの薬剤により付与されるPgp阻害の持続性に関するBoeschおよびLoorの研究(1994)は本明細書の教示と組み合わせられ得、さらに有効な臨床プロトコールの設計を可能にする。
【０１９２】
Zacherlら(1994)はまた、ベラパミル、シクロスポリンＡおよびSDZ  PSC  833が、HCT-8腸ガン単一層を横切るp()糖タンパク質媒介ビンブラスチン輸送を阻害することを報告した。10ng/ml(9nM)という低濃度で阻害を示す非免疫抑制誘導体(SDZ  PSC  833)が最も有効なインヒビターであることもまた報告された。その高い阻害能力に加えて、PSC  833の阻害活性は、酸性である細胞外条件には影響されない。
【０１９３】
シクロスポリンＡ  [59865-13-3]  C62H111N11O12  (1202.63)は、サプレッサーT-リンパ球にもB-リンパ球にも有意に影響を与えることなくヘルパーT-リンパ球を抑制するために使用される。従って、この薬物は、他の多くの免疫抑制薬物の細胞傷害性の特徴を有さない選択性の免疫抑制薬物である。この薬物は、いくつかの体液性免疫を抑制するために適切な効果を有する。
【０１９４】
この薬物は、腎臓、肝臓または心臓の異種移植における移植拒絶反応を防止するために最も有効な免疫抑制剤である。この薬物はまた、重篤な再生不良性貧血、ある種の重症筋無力症、最近発症した小児期糖尿病(childhood  diabetes)(I型)、グレーブス病、クローン病(Crohn  disease)、多発性硬化症、天疱瘡および類天疱瘡、皮膚筋炎、多発性筋炎、アトピー性皮膚炎、重篤な乾癬、ベーチェット病、ぶどう膜炎、胆汁性肝硬変(biliary  cirrhosis)および肺サルコイドーシスの管理においても用いられる。この薬物は、通常、グルココルチコイドと組み合わせて用いられる。他の免疫抑制剤との組み合わせは通常避けられるが、骨髄移植においては、メトトレキサートと組み合わせて用いるのが一般的である。
【０１９５】
用量は、静脈内注入の場合には、成人および小児について２〜６mg/kg/日であり、移植の４〜12時間前に開始し、そして経口投与が許容され得るまで継続する。経口の場合には、成人および小児について初期は12〜15mg/kg/日であり、移植の４〜12時間前またはIV注入後に開始し、そして１〜２週間継続する；その後、５〜10mg/kg/日の持続用量まで用量を１週間に５％ずつ減らす。250mg/5mLの注射用投与剤型が利用可能であり；5g/100mLの経口溶液が利用可能である。
【０１９６】
3’-ケト-シクロスポリンＤ（これは、無視できるほどの免疫抑制活性しか有さない）もまた、多剤耐性哺乳動物腫瘍細胞のp()糖タンパク質を強く阻害し(Bellら、1994)、従って、本発明の範囲内であり得る。
【０１９７】
（Ｂ．セフォペラゾン）
セファペラゾンは、抗菌活性を有する第３世代のセファロスポリンである。Enterobacter、  P.  aeruginosaならびに嫌気性球菌およびバチルスにより引き起こされる尿路感染症における使用が承認され；Enterobacter、  E.  coliおよび他の生物により引き起こされる呼吸器感染症における使用が承認されている。
【０１９８】
経口では、この薬物はあまり吸収されない。静脈内投与により、送達速度に応じて250〜357μg/mLのピーク血漿濃度が得られ；筋肉内投与により、80〜120μg/mLの濃度が得られる。血漿では、82〜93％がタンパク質に結合する。体内分布容量は、成人では0.13〜0.20mL/gであるが、新生児では0.5mL/gである。胆汁排泄により薬物の70％が排出され、尿排泄により薬物の30％が排出される。肝不全には用量調整が必要とされるが、腎不全には用量調整は必要とされない。
【０１９９】
セフォペラゾンナトリウムＡの用量(セフォペラゾン等価物中)は以下の通りである：筋肉内または静脈内注入では、軽い感染症の成人について、12時間毎に１〜２g；重篤な感染症については、６時間毎に1.5〜３g、８時間毎に２〜４g、または12時間毎に３〜６g。１および２gの注射用粉末形態が利用可能である。
【０２００】
（Ｃ．スタウロスポリン）
スタウロスポリン誘導体(例えば、NA-382)もまた、p()糖タンパク質を阻害することにより多剤耐性を阻害する(Miyamotoら、1993)。腫瘍細胞の多剤耐性に対するスタウロスポリン誘導体（N-エトキシカルボニル-7-オキソ-スタウロスポリン(NA-382)）の効果は、p()糖タンパク質への薬物の結合を阻害することに起因することが示された。従って、スタウロスポリンおよびNA-382は共に、カンプトテシンに関する二次的薬剤としても使用され得る。
【０２０１】
（実施例21）
（カルシウムチャンネルブロッカー）
カルシウムチャンネルブロッカー（カルシウム導入遮断薬物(CEB)またはカルシウムアンタゴニストとも称される）は、特殊化されたカルシウムチャンネルを介するカルシウムの細胞への導入を防止または遅延させることをその主要な薬理学的効果とする薬剤群である。これらの薬物のうち以下の５つが米国で利用可能である：ベラパミル、ニフェジピン、ニトレンジピン、ニカルジピンおよびジルチアゼム。ニフェジピンおよびニトレンジピンはジヒドロピリジンであり、この化学クラスには新規なカルシウムチャンネルブロッカーのほとんどが属する。
【０２０２】
【化３】
2006328087.tif 000011
（Ａ．ジヒドロピリジンアナログ）
ヒト細胞におけるp()糖タンパク質のフォトラベルを阻害することにより示されるように、ある種のジヒドロピリジンアナログはp()糖タンパク質を阻害する(Kamiwatariら、1989)。10種の合成ジヒドロピリジンアナログが、多剤耐性ヒトガン細胞株における薬物耐性を逆転する能力について研究された。４種のジヒドロピリジンアナログは耐性を完全に逆転し、３種は耐性を低減させたが、３種は効果が少なかった。Kamiwatariら(1989)に記載のこの７種の優れた阻害性ジヒドロピリジンは、本発明における使用が意図される。カチオン性化合物であるセファランチンおよびレセルピンもまた、この研究において阻害を示した。
【０２０３】
（Ｂ．ベラパミル）
ベラパミルは、以下に記載のようにp()糖タンパク質の競合的阻害剤であることが知られている：Inoueら(1993)；Hunterら(1993)；Horiら(1993)；Pourtier-Manzanedoら(1992)；BoeschおよびLoor(1994)；Zacherlら(1994)；Shiraiら(1991)；Morrisら(1991)；Mullerら(1994)；およびMiyamotoら(1992b)。
【０２０４】
Thalhammerら(1994)は、胆細管を横切るカチオン染料(アクリジンオレンジ)のp()糖タンパク質媒介輸送がシクロスポリンＡおよびベラパミルにより阻害されることを示した。p()糖タンパクによる肝細胞細管膜での両親媒性カチオンのATP依存輸送もまた、Mullerら(1994)により研究された。永久的に荷電した両親媒性カチオンの輸送が、ベラパミル、キニジンおよびダウノルビシンにより阻害された。
【０２０５】
Bear(1994)は、ベラパミル、コルヒチン、ビンブラスチンおよびダウノマイシン(50μM)が、p()糖タンパク質発現に関連することが提案されている外向き整流クロライドチャンネルをブロックすることを示した。
【０２０６】
Ohiら(1992)は、カルシウムチャンネルブロッカー(ベラパミル)を、表在性膀胱ガンの化学療法においてアドリアマイシンと共に使用した。注射可能なベラパミルの５つのアンプル(10ml)が得られた。
【０２０７】
塩酸ベラパミルは、ベンゼンアセトニトリル,  α-[3-[[2-(3,4-ジメトキシフェニル)エチル]-メチルアミノ]プロピル]-3,4-ジメトキシ-α-(1-メチルエチル)-,  ヒドロクロライドであり；  カラン（Calan）およびイソプチン（Isoptin）とも称され、Searle、KnollおよびParke-Davisから入手可能である。
【０２０８】
この薬物は用量の90％を超える量が吸収されるが、肝臓での多量の初回通過代謝のため、用量のわずか20〜35％しか系に到達しない。この薬物は、約90％が血漿タンパク質と結合する。この薬物は、肝臓により迅速にノルベラパミルおよびわずかな量の他の数種の代謝物に代謝される。用量の約70％が代謝物として尿中に排泄され、そして用量の16％が５日以内に便中に現れるようである；変化せずに排泄されるのは５％未満である。
【０２０９】
ベラパミルの効果は経口投与から30〜60分以内で明らかである。ベラパミルの効果のピークは、静脈内投与後15分以内に現れる。半減期は、正常人では1.5〜５時間であるが、慢性治療期間中は９時間を超え得る。肝硬変の患者では、半減期は14〜16時間に増加し得る。肝臓疾患の患者における半減期の増加は、一部は体内分布容量の増加に起因する。繰り返しの投与後、飽和動力学が認められた。
【０２１０】
用量は以下の通りである：静脈内投与では、成人について、最初に２分間(高齢者には３分間)にわたって５〜10mg(0.075〜0.15mg/kg)、必要に応じて、30分後に10mg(0.150mg/kg)；小児について、１歳までは、最初に２分間にわたって(ECGモニターを行いながら)0.1〜0.2mg/kg、必要に応じて、30分後に同様の投与を繰り返す；１〜15歳については、最初に0.1〜0.3mg/kg(5mgを超えないように)、必要に応じて、30分後に同様の投与を繰り返す。経口投与では、成人について、80mgを１日３回または４回、あるいは240mg(持続放出形態)を１日１回、必要に応じて、１日480mgまで徐々に増加させる。
【０２１１】
ベラパミルは、5mg/2mLおよび10mg/4mLの注射可能投与剤型；40mg、80mgおよび120mgの錠剤投与剤型；および、240mgの持続放出錠剤で利用可能である。
【０２１２】
（Ｃ．ティアパミル）
Campainら(1993)は、ティアパミルアナログ(RO-11-2933)がp()糖タンパク質のインヒビターであることを報告した。ティアパミルアナログはまた、Williamsら(1992)により、流出遮断薬物として記載された。ティアパミルは、ベラパミルとほぼ等価な用量での使用が提案されている。
【０２１３】
（Ｄ．ニフェジピン）
Wilsonら(1991)は、ニフェジピンがベラパミルとは構造的に無関係なp()糖タンパク質のインヒビターであることを報告した。しかし、ニフェジピンおよびベラパミルは共に、カルシウムチャンネルブロッカーの群に属する。Hunterら(1993)およびMorrisら(1991)もまた、ニフェジピンがp()糖タンパク質のインヒビターであることを示した。
【０２１４】
ニフェジピンは、3,5-ピリジンカルボン酸,  1,4-ジヒドロ-2,6-ジメチル-4-(2-ニトロフェニル)-,  ジメチルエステルであり；アダラート（Adalat）およびプロカルジア（Procardia）とも称され、それぞれ、MilesおよびPfizerから入手可能である。経口用量の約90％が吸収されるが、そのバイオアベイラビリティーは65〜70％である；肝臓での顕著な初回通過代謝がある。薬物の90％を超える量が血漿タンパク質に結合する。この薬物は、おそらく肝臓により、不活性な代謝物へと代謝される。不活性代謝物の多く(80％)が尿中に排泄され；15％が便中に排泄される。半減期は２〜６時間である。
【０２１５】
経口用量は、成人については、初期は10mgを１日３回、必要に応じて、20〜30mgを１日３回または４回まで徐々に増加させる。通常の有効投与量は、10〜20mgを１日３回であるが、20〜30mgを１日３回または４回の用量が必要であり得る。１日180mgを超える用量は推奨されない。10および20mgのカプセル投与剤型が利用可能である。
【０２１６】
（Ｅ．ジルチアゼム）
Morrisら(1991)は、ベラパミル、ニフェジピンおよびビンブラスチンと共に、ジルチアゼムがp()糖タンパク質インヒビターであることを明らかにした。
【０２１７】
ジルチアゼムは、ベンゾチアゼピン-4(5H)-オン,  3-(アセチルオキシ)-5-[2-(ジメチルアミノ)エチル]-2,3-ジヒドロ-2-(4-メトキシフェニル)-,  (+)-シス-,  モノヒドロクロライドであり；カルジゼム（Cardizem）とも称され、Marionから入手可能である。この薬物は80％が経口で吸収されるが、肝臓での初回通過代謝のため、経口用量のわずか40〜60％しか体循環に到達しない。投与後、70〜80％が血漿タンパク質と結合する。他の薬物によるタンパク質結合部位からの置換は、臨床的な問題ではないようである。この薬物は肝臓によって多量にいくつかの代謝物へと代謝され、代謝物のうちのいくつかは弱い冠血管拡張活性を有する。薬物の４％未満が、尿中で未変化のようである。血漿半減期は約４時間である。
【０２１８】
経口用量は、成人について、初期は30mgを１日４回食前および就寝時に、必要に応じて１日360mgまで増加させる。持続放出調製物は、１日２回投与される。30、60、90および120mgの錠剤投与剤型が利用可能である。
【０２１９】
（Ｆ．ニカルジピン）
ニカルジピンもまた、上記カルシウムチャンネルブロッカーとの類似性に基づき、およびNiwaら(1992)の研究を考慮すると、本発明における使用が提案される。
【０２２０】
ニカルジピンは、ニフェジピンに類似の薬動力学特性および薬物動態学特性を有し、同様の用量での使用が提案される。ニカルジピンは、有効な抗狭心症および抗高血圧薬剤である。
【０２２１】
塩酸ニカルジピン(CARDENE)は、高血圧症および狭心症において使用する20および30mgの錠剤で利用可能である。推奨される投与量は、20〜40mgを１日３回である。投与量の調整は、少なくとも３日経過後に行うべきである。
【０２２２】
（Ｇ．ニソルジピン）
ニソルジピンもまたニカルジピンに類似している。すなわち、特性がニフェジピンに類似し、有効な抗狭心症および抗高血圧症用途を有している。ニソルジピンは、ニカルジピンおよびニフェジピンと同様に、本発明においてカンプトテシンと共に使用することが提案される。
【０２２３】
（Ｈ．ニモジピン）
ニモジピンもまた、他のカルシウムチャンネルブロッカーとの類似性に基づいて、本発明における使用が提案される。ニモジピンは脳血管において効果を有する。ニモジピンは脳血管を選択的に拡張するが、末梢循環にはごくわずかな効果しか有さない。ニモジピンは、クモ膜下出血、片頭痛、急性虚血性卒中および重篤な頭部損傷に続く脳動脈痙攣の処置に有用である。ニモジピンはまた、ニソルジピン、ニカルジピンおよびニフェジピンと同様に、本発明における使用が提案される。
【０２２４】
ニモジピン(NIMOTOP)は、30mgカプセルで利用可能である。その使用についての承認された適用は、先天性頭蓋内動脈瘤の破裂によるクモ膜下出血後の血管痙攣に起因する神経学的欠損を改善することである。推奨される投与量は、出血から96時間以内に開始して、４時間毎に60mgを21日間である。
【０２２５】
（Ｉ．ニトレンジピン）
ニトレンジピンは、3,5-ピリジンジカルボン酸,  1,4-ジヒドロ-2,6-ジメチル-4-(3-ニトロフェニル)-,  エチルメチルエステルであり；バイプレス（Baypress）としてMilesから入手可能である。
【０２２６】
ニトレンジピンは、軽い高血圧から重篤な高血圧までの処置についての使用が承認されている。ニトレンジピンは肝臓で多量に代謝され、若い成人においては、経口用量のわずか10〜22％しか体循環に到達しない。排出の半減期は、２〜23時間の範囲と報告されており、その平均はおそらく12時間であると報告されている。肝機能障害により、半減期が顕著に増大する。体内分布容量は、２〜６L/kgであると種々に報告されている。約98％が血漿タンパク質に結合する。
【０２２７】
ニトレンジピンは、以下の投与剤型で使用される：成人について、初期は５〜20mgを１日１回（朝）、必要に応じて、この用量を１日２回に調整する。ニトレンジピンはまた、上記カルシウムチャンネルブロッカーとの類似性により、本発明における使用が提案される。
【０２２８】
（実施例22）
（カルモジュリンアンタゴニスト）
Fordら(1990)は、チオキサンテンおよびフェノチアジンがp()糖タンパク質を阻害する用途を有することを示した。
【０２２９】
（Ａ．フルペンチキソール）
フェノチアジンは、化学療法薬物に対する多剤耐性(MDR)細胞を、特定の構造的特徴に関連する方法により感受性にすることが示されている。Fordら(1990)は、抗MDR活性の増加に対するフェノチアジンおよびチオキサンテンの構造的関連性を明らかにした。Fordの研究における化合物はいずれも、本発明における使用が提案される。
【０２３０】
Fordら(1990)は、特に、トランス-フルペンチキソール、その立体異性体であるシス-フルペンチキソール、そのフェノチアジンホモログであるフルフェナジン、およびカルシウムチャンネルブロッカーであるベラパミルが、p()糖タンパク質発現細胞株においてのみ、種々の薬物に対する細胞の耐性を逆転することを示した。トランス-フルペンチキソールは、ドキソルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、およびコルヒチンに対する細胞の耐性を、大きく逆転させ、そしてMDRの逆転について、等モル濃度のベラパミルの２〜３倍の効力を有していた。さらに、トランス-フルペンチキソールは、ドキソルビシン、ビンクリスチン、およびコルヒチンに対する耐性を十分に逆転させた。
【０２３１】
トランス-フルペンチキソールの臨床毒性が見かけ上ないことは、この薬物を、インビボでの腫瘍耐性の調節（modulation）において使用され得る魅力的な薬物にする(Haitら、1993)。従って、本明細書に開示されるように、本発明者らは、トランス-フルペンチキソールがカンプトテシンとの組み合わせについて特に有効であることを提案する。シス-フルペンチキソールおよびクロルペンチキソールもまた、本発明における使用が意図される。
【０２３２】
（Ｂ．フルフェナジン）
Fordら(1990)の研究を考慮すると、フルフェナジンの本発明における使用が提案される。塩酸フルフェナジン（ペルミチル(Permitil)およびプロリキシン(Prolixin)とも称される）が、Schering-PloughおよびSquibbから入手可能である。この薬物は、精神障害の症状の管理について意図されるトリフルオロメチルフェノチアジン誘導体である。薬理学的効果は一般に他のフェノチアジンと同様であるが、実験室および臨床での研究によれば、この薬物はいくつかの重要な違いを示すことが示されている。この薬物は、より強力であり、より長期の作用持続期間を示し、高血圧を引き起こす度合が低く、鎮静作用が低く、そして他のフェノチアジンと同程度までCNS抑制薬および麻酔薬を増強しない。
【０２３３】
この薬物は、経口投与または筋肉内投与後迅速に吸収され、作用は１時間以内に起こり始める。ピーク血漿レベルは1.5〜２時間に現れ、作用持続期間は６時間である。エナンテート塩の筋肉内または皮下投与では、持続期間は平均２週間である。
【０２３４】
この薬物は以下の用量で使用される：経口では、成人について、初期は１日0.5〜10mg(分割用量で)；持続期間は１日１回１〜５mg；筋肉内注射では、４用量に分けて１日1.25〜10mg。１日の投与量が20mg(経口)または10mg(筋肉内)を超える場合は、注意して用いるべきである。この薬物は、以下の投与剤型で利用可能である：１mg/2mLのエリキシル剤；５mg/mLの濃縮剤；25mg/10mLの注射用剤；１、2.5、５および10mgの錠剤。
【０２３５】
フルフェナジンデカノエート(プロリキシンデカノエートとも称される)が、Princetonから入手可能である。この薬物は、長期の非経口神経弛緩薬治療を必要とする(例えば、慢性精神分裂症の)患者の管理に示されるトリフルオロメチルフェノチアジン誘導体である。ピーク血漿レベルは、通常、１〜２日で達成され；(１回の投与後の)半減期は6.8〜9.6日であり；作用の開始は１〜３日目であり；そして、作用の持続期間は約４週間である。
【０２３６】
有用な用量は、筋肉内または皮下投与では12.5〜100mg；通常、12.5〜25mgであり；次の注入および投与までの間隔は、患者の応答に基づく。この薬物は、25mg/mLのバイアルおよび１mL  Unimaticシリンジの注射可能投与剤型で利用可能である。
【０２３７】
フルフェナジンエナンテート(プロリキシンエナンテート)は、作用持続期間を除いて、その塩酸塩と同様の作用、用途、禁忌および不都合な影響を有する。エナンテート部分によるフルフェナジンのエステル化は、その有益な効果を過度に減弱することなく、薬物の作用持続期間を顕著に長期化する。作用の開始は、一般に、注入後24〜72時間に現れ、精神病の兆候に対するこの薬物の効果は48〜96時間で有意になる。兆候の改善は１〜３週間またはそれ以上継続し、効果の平均持続時間は約２週間である。
【０２３８】
適切な用量は、筋肉内または皮下投与では１〜３週間毎に12.5〜100mg；通常、12.5〜25mgであり；次の注入および投与までの間隔は、患者の応答に基づく。この薬物は、５mLバイアル中の25mg/mLの注射可能投与剤型で利用可能である。
【０２３９】
（Ｃ．クロルプロマジン）
Akiyamaら(1988)は、クロルプロマジンおよびトリフルオペラジンが、（おそらくp()糖タンパク質に結合することにより）多剤耐性を有効に逆転することを示した。しかし、これらの薬剤は、p()糖タンパク質のフォトアフィニティーラベルに対しては不十分なインヒビターであった。このことは、多剤耐性を表現型的に抑制する薬剤の多くがp()糖タンパク質のフォトアフィニティーラベルも抑制するが、この特性を有さないものがあり得ることを示唆する。従って、p()糖タンパク質の結合および阻害は、分子上の異なる部位で起こり得る。このことはまた、モノクローナル抗体のデータによっても支持される。
【０２４０】
塩酸クロルプロマジンは、10H-フェノチアジン-10-プロパンアミン,  2-クロロ-N,N-ジメチル-,  モノヒドロクロライドである。これはフェノチアジン化合物群のうちで最初の精神安定剤であり、そして精神障害の発現、吐き気および嘔吐、躁鬱病(躁状態)の発現、難治性しゃっくり、手術前の懸念および不安、急性間欠性ポルフィリン症の管理に有効であり、ならびに、破傷風の処置に補助薬として有効である。体内分布容量は、筋肉内投与後は21.8L/kg、単回経口投与後は80.6L/kgであると報告されている。この４倍の差は、経路による低いバイオアベイラビリティー(32％)を反映している。
【０２４１】
投与量は変化し得、厳密な個別化が要求される。投与は、経口、筋肉内または静脈内である。非経口投与は、寝たきり患者または入院患者には差し控えるべきである。歩行患者に使用する場合には、患者は注入後少なくとも１時間仰臥位を維持しなければならない。
【０２４２】
適切な用量は、鎮吐剤として、成人について、経口では嘔吐がやむまで４〜６時間毎に10〜25mg；筋肉内投与では嘔吐がやむまで３〜４時間毎に25〜50mgである。小児には、経口では必要に応じて４〜６時間毎に0.5mg/kg；筋肉内投与では必要に応じて６〜８時間毎に0.5mg/kgである。精神安定剤として、成人について、経口では通常１日２または３回10〜50mg(指示される場合は、１日の総用量が１gまで)；筋肉内投与では25〜50mg、必要に応じて１時間で繰り返す(指示される場合は、１日の総用量が１gまで)。小児には、経口では必要に応じて４〜６時間毎に0.5mg/kg；筋肉内投与では必要に応じて６〜８時間毎に0.5mg/kgである。
【０２４３】
この薬物は、以下の投与剤型で利用可能である：１、２および10mL中の25mg/mLの注射用剤；30、75、150、200および300mgの時間放出カプセル；2mg/mLのシロップ；30および100mg/mLの濃縮剤；および、10、25、50、100および200mgの錠剤。
【０２４４】
クロルプロマジン(トラジンとも称される)は、SmithKlineから入手可能である。用量は、直腸に使用する鎮吐剤としては、６〜８時間毎に50〜100mgである。用量は50〜400mgの範囲である。小児用の鎮吐剤としては、６ヶ月以上の小児について、必要に応じて1mg/kgまたは25mgの座剤の半分を１日３〜４回である；６ヶ月未満の小児には推奨されない。この薬物は、25および100mgの座剤投与剤型で利用可能である。クロミプラミンもまた、同様にして使用され得る。
【０２４５】
（Ｄ．トリフルプロマジン）
塩酸トリフルプロマジンは、10H-フェノチアジン-10-プロパンアミン、N,N-ジメチル-2-(トリフルオロメチル)-モノヒドロクロライドである；塩酸ベルスプリンとも称され、Squibbから入手可能である。この薬物は、塩酸クロルプロマジンの2-(トリフルオロメチル)（2-(tribluoromethyl)）アナログであり、精神障害(精神鬱反応を除く)の管理ならびに重篤な吐き気および嘔吐の制御に必要とされる。
【０２４６】
この薬物がいくらかより強力であること以外は、この薬物はクロルプロマジンと同様の作用および制限を有する。Akiyamaら(1988)の研究を考慮すると、トリフルプロマジンもまた、本発明のp()糖タンパク質阻害の局面における使用が提案される。
【０２４７】
精神障害に対する適切な用量は、通常、成人についての筋肉内投与では、初期は60〜150mg(分割用量で)；皮下投与では１mg(１日の総用量が３mgまで)である。小児には、筋肉内投与では0.2〜2.5mg/kg(１日10mgを超えない)である。吐き気および嘔吐については、通常、成人についての筋肉内投与の場合は単回用量として５〜15mgであり；４時間毎に繰り返され得るが、１日60mgを超えない。高齢のまたは衰弱した患者には、筋肉内投与で2.5mgであり、１日15mgを超えない。２歳半以上の小児には、筋肉内投与で１日0.2〜0.25mg/kg(分割用量で)であり、１日10mgを超えない。この薬物は以下の投与剤型で利用可能である：10および20mg/mLの多回投与バイアルの注射用剤；および、10、25および50mgの錠剤。
【０２４８】
（Ｅ．トリフルオペラジン）
トリフルオペラジンは、p()糖タンパク質のフォトアフィニティーラベルを阻害することなく多剤耐性を逆転する(Akiyamaら、1988)。
【０２４９】
トリフルオペラジンは、10H-フェノチアジン,  10-[3-(4-メチル-1-ピペラジニル)プロピル]-2-(トリフルオロメチル)-,  ジヒドロクロライドである；ステラジンおよびスプラジンとも称される。この薬物は、精神障害の発現の管理に有効なピペラジンフェノチアジンである。この薬物は、神経症において、または身体的状態に関連して見られる過度の不安、緊張および興奮の制御に有効であり得る。薬理学的作用の一般的プロフィルは、他のフェノチアジン誘導体と同様である。バイオアベイラビリティー、時間対ピーク効果、代謝および排出半減期は、クロルプロマジンに類似している。不都合な影響(例えば、高血圧、目のかすみ、および他の自律神経遮断の発現)は、他のフェノチアジンよりもわずらわしさが少ないようである。
【０２５０】
適切な用量は以下の通りである：経口、非入院患者について、１〜２mgを１日２回；入院患者について、初期は２〜５mgを１日２回、１日15〜20mgの最適レベルまで徐々に増加させる（ただし、患者のうち幾人かは１日40mg以上を必要とし得る）；筋肉内投与、必要に応じて４〜６時間毎に１〜２mg。高齢の患者については、通常、より少量の用量で十分である；高齢者は、高血圧および神経筋反応に対してより過敏であるので、厳密に観察し、そして投与量を徐々に増加させる。非精神病的不安については、１〜２mgを１日２回；最大で１日６mg、投与期間は12週間を超えない。（用量は塩基当量で記載されている。）通常、小児用の経口投与では、６〜12歳の入院している小児について、１mgを１日１回または２回、症状が制御されるまで徐々に用量を増加させる；最大で１日15mgである。この薬物は以下の投与剤型で利用可能である：20mg/10mL(塩基当量)の注射用剤；10mg/mLの濃縮剤；１、２、５および10mgの錠剤。
【０２５１】
（Ｆ．プロクロルペラジン）
マレイン酸プロクロルペラジンが、鎮吐剤、抗精神病剤および精神安定剤として使用される。この薬物は、種々の原因(例えば、妊娠初期、麻酔および手術、ならびに放射線療法)に起因する軽いまたは重篤な吐き気および嘔吐の制御に有効な鎮吐剤である。この薬物はまた有効な抗精神病剤であり、重篤な精神医学的障害(例えば、精神分裂症、躁病、退縮期精神病、退行性状態、ならびに老人性および中毒性精神病）に用いられる。精神安定剤として、この薬物は、不安、緊張および興奮が大部分である軽い精神障害に有効であり得る。
【０２５２】
Fordら(1990)およびAkiyamaら(1988)の研究を考慮すると、プロクロルペラジンは、本発明においてカンプトテシンと共に使用することが意図される。
【０２５３】
適切な用量(塩基当量として)は以下の通りである：成人について、経口、鎮吐剤としては、必要に応じて５〜10mgを１日３または４回；精神安定剤としては、５〜35mgを１日３または４回、所望の応答が得られる(それには通常、１日50〜150mgが必要とされる)まで初期の低用量から徐々に増加させる。この薬物は、以下の投与剤型で利用可能である：５、10および25mg(塩基当量)の錠剤；10、15、30および75mgの持続放出カプセル(MajorおよびSmith  Kline＆Frenchより入手可能)。
【０２５４】
プロクロルペラジン(塩基として)はまた、小児には、体重に応じて１日2.5〜10mg(分割用量で)の用量で直腸から投与され；成人には、25mgが１日２回投与される。小児の直腸からの用量は、20〜29重量ポンド、30〜39重量ポンド、および40〜58重量ポンドの小児について、それぞれ、7.5、10および15mgを超えるべきではない。この薬物は、20重量ポンド未満の小児には推奨されない。この薬物は、2.5、５、10および25mgの座剤投与剤型で利用可能である。
【０２５５】
筋肉内注射および経口で投与され得ること以外は、プロクロルペラジンエジシレートもまた、マレイン酸プロクロルペラジンと同様の用途に利用可能である。重篤な吐き気および嘔吐の処置、急性の精神病の即座の制御、あるいは経口製剤をとることができないまたはとらない患者については、非経口治療は、通常、差し控えられる。
【０２５６】
この薬物は、以下の経口投与剤型(塩基当量として)で投与される：鎮吐剤として、必要に応じて５〜10mgを１日３回または４回；精神安定剤として、５〜35mgを１日３回または４回。  通常の経口用量の範囲は、１日５〜150mgである。筋肉内または皮下投与では、鎮吐剤として、必要に応じて５〜10mgを１日６〜８回；精神安定剤として、必要に応じて10〜20mgを１日４〜６回投与する。通常の非経口用量の範囲は、鎮吐剤としては１日５〜40mg；精神安定剤としては１日10〜200mgである。患者が入院して十分な観察下におかれない限りは、任意の24時間の期間内では、40mgを超えない塩基当量が注入されるべきである。急性の精神病患者には、通常の用量は、１〜６時間間隔の筋肉内投与により20〜40mgである。この薬物は以下の投与剤型で利用可能である：5mg/mL(塩基当量)の注射用剤；5mg/5mLのシロップ；および10mg/mLの濃縮剤(施設内使用について)。
【０２５７】
（Ｇ．チオリダジン）
チオリダジンは、10H-フェノチアジン-,  10-[2-(1-メチル-2-ピペリジニル)エチル]-2-(メチルチオ)-である；Mellaril-Sとも称され、Sandozから入手可能である。この薬物は、クロルプロマジンと同様の中枢神経鎮静および行動的効果を有するピペリジル型フェノチアジン精神安定剤である。半減期は、４〜10時間の初期相と26〜36時間の後期相とを有する多相型のようであり；96〜99％が血漿タンパク質に結合する。チオリダジンはクロルプロマジンと同様の効果を有するので、p()糖タンパク質に結合しかつ阻害する本発明の用途に適切であると考えられる。
【０２５８】
適切な用量は以下の通りである：成人には、通常、初期は25〜100mgを１日３回；持続期間は、10〜200mgを１日２〜４回。老人患者における興奮、不安、鬱状態、緊張、不眠および恐怖感の管理については、通常、経口で25mgを１日３回投与する。１日の総用量は、２〜４用量分けて200〜800mgの範囲である。通常、小児用としては、２〜12歳の小児について、１日0.5〜最大で30mg/kg、最適な治療効果が得られるか、最大用量に到達するまで用量を毎日増加させる。この薬物は以下の投与剤型で利用可能である：30および100mg/mLの濃縮剤；25および100mg/5mLの懸濁液；または、10、15、25、50、100、150および200mgの錠剤。
【０２５９】
（実施例23）
（ステロイド）
（Ａ．プロゲステロンおよび代謝物）
Ichikawa-Haraguchiら(1993)は、プロゲステロンおよびその代謝物が、副腎におけるp()糖タンパク質の輸送活性の強力なインヒビターであることを明らかにした。この著者らは、プロゲステロンおよびプレグネノロンがp()糖タンパク質の輸送活性を阻害することを報告した。５β-代謝経路における６つの確認されたプロゲステロン代謝物もまた、p()糖タンパク質を阻害することができた。プロゲステロン代謝物の５位炭素の回りの立体異性が、p()糖タンパク質により認識されるために重要である。従って、プロゲステロンおよびプレグネノロンアナログの正確な立体異性は、本発明における使用が提案される。
【０２６０】
（Ｂ．RU  486）
Gruolら(1994)もまた、プロゲステロンがp()糖タンパク質を結合し、その薬物流出を阻害することを報告した。彼らはさらに、抗プロゲスチンであるRU  486が、p()糖タンパク質による細胞内の多剤耐性を逆転することを報告した。p()糖タンパク質依存性薬物流出の阻害の測定により、RU  486が、プロゲステロンよりもかなり有効であり、ベラパミルの0.5倍有効であることがわかった。従って、RU  486もまた、本発明における使用が提案される。
【０２６１】
（Ｃ．チリラザド）
非グルココルチコイドステロイドアナログ(21-アミノステロイド)もまた、p()糖タンパク質を阻害することにより、ビンブラスチンに対する多剤耐性細胞を感受性にする(Abrahamら、1993)。これらの21-アミノステロイド誘導体(ラザロイドとも称される)は、強力なインヒビターであるチリラザドメシレート(チリラザド、U-74006F)およびU-74389Fを包含する。チリラザドは、ビンブラスチンによる死滅が66倍となるまで耐性細胞を感受性にするが、非耐性の親細胞の感受性は変化させない。チリラザドは、ベラパミルより有効にp()糖タンパク質のフォトアフィニティーラベルを阻害する。研究によれば、チリラザドの複合アミン部分がその逆転活性に重要であり、ステロイド部分はそれほど重要ではないことが示唆されている。従って、チリラザドおよび他の構造的に関連する化合物(例えば、卒中および中枢神経系の外傷を処置するために開発された化合物)は、本発明において有用であることが意図される。
【０２６２】
（実施例24）
（抗腫瘍剤）
（A.  ビンクリスチン）
Shiraiら(1991)は、p()糖タンパク質がビンクリスチンで阻害されることを報告した。彼らはまた、p()糖タンパク質が、排泄解毒性のトランスポーターとして、血液脳関門の複雑な機能に関与していることを報告した。Akiyamaら(1989)はまた、ビンクリスチンをp()糖タンパク質インヒビターであると確認した。
【０２６３】
Fricheら(1993)は、10μMのビンクリスチンが、p()糖タンパク質を95％阻害し、試験したアントラサイクリンアナログよりも効能が強いことを明らかにした。抗p()糖タンパク質MAbを用いて、MechetnerおよびRoninson(1992)は、ビンクリスチンがp()糖タンパク質インヒビターであることを証明した。
【０２６４】
ビンクリスチンは有糸分裂をブロックし、分裂中期の停止を生じる。この薬物の生物活性のほとんどは、それがチューブリンに特異的に結合してタンパクが微小管へ重合するのをブロックする能力により説明できそうに思われる。この細胞分裂装置の微小管の破壊によって、細胞分裂が分裂中期で停止される。有糸分裂中に染色体を正しく分離できなければ、おそらく、細胞は死滅するだろう。
【０２６５】
ビンクリスチンは正常な骨髄細胞および上皮細胞に対して毒性が比較的低いため、この薬剤は、抗腫瘍薬の間では独特であり、しばしば、他の骨髄抑制剤と組み合わせて含有される。
【０２６６】
ビンブラスチンまたはビンクリスチンの経口投与後に、予測できない吸収が報告されている。通常の臨床用量では、各薬物の血漿中最大濃度は、およそ0.4μMである。
【０２６７】
ビンブラスチンおよびビンクリスチンは、血漿タンパクに結合する。これらは、血小板中でかなり濃縮され、白血球中および赤血球中では、濃縮の程度が低い。
【０２６８】
ビンクリスチンは、血漿からのクリアランスが多相様式であり、その最終的なの半減期は、約24時間である。この薬物は肝臓で代謝されるが、生体活性のある誘導体は同定されていない。肝機能障害のある患者では、用量を減らすべきである。血漿中のビリルビン濃度が３mg/dl（約50μM）より高いなら、少なくとも50％の用量低減が指示される。
【０２６９】
ビンクリスチン硫酸塩(ONCOVIN、VINCASAR  PFS)は、静脈内注射用溶液（１mg/ml）として入手できる。コルチコステロイドと共に使用されるビンクリスチンは、現在では、小児白血病において緩解を誘発するのに選択される治療の１つである。これらの薬物の最適投薬量は、ビンクリスチンは、静脈内注射で、毎週、体表面積の２mg/m２であり、そしてプレドニソンは、経口で、毎日、40mg/m２であると思われる。ホジキン病または非ホジキン性のリンパ腫のある成人患者は、通常、複合プロトコルの一部として、ビンクリスチンを服用する。MOPPレジュメで使用する場合、ビンクリスチンの推奨用量は、1.4mg/m２である。成人よりも白血病の小児の方が、高用量のビンクリスチンに耐性であるようである。成人では、激しい神経毒に見舞われる場合がある。この薬物を７日ごとよりも頻繁に投与するか、またはこの用量よりも高い用量で投与しても、それに比例した応答速度の改善は得られず、毒性の発現が増加するように思われる。ビンクリスチンを用いた維持療法は、白血病の小児には推奨されない。また事前に注意して、ビンクリスチンの静脈内投与中に血管外遊出を防止するようにすべきである。ビンクリスチン（およびビンブラスチン）は、同様の毒性で静脈内に投与できる用量よりも数倍高い用量で、腫瘍の動脈血供給部（arterial  blood  supply）に注入できる。
【０２７０】
ビンクリスチンは、ホジキン病および他のリンパ腫に効果的である。ビンクリスチンをホジキン病に単独で使用するときは、ビンブラスチンよりも若干有効性が低いと思われるものの、メクロレタミン、プレドニソンおよびプロカルバジン(いわゆるMOPPレジュメ)と共に使用すると、この病気の進行段階(III期およびIV期)では、好ましい治療となる。非ホジキン性のリンパ腫では、特に、シクロホスファミド、ブレオマイシン、ドキソルビシンおよびプレドニソンと共に使用する場合、ビンクリスチンは重要な薬剤である。ビンクリスチンは、リンパ性白血病では、ビンブラスチンよりも有用である。他の種々の腫瘍(特に、ウィルムス腫瘍、神経芽腫、脳腫瘍、横紋筋肉腫、ならびに乳房、膀胱および男性および女性の生殖系のガン腫)の患者では、有効な応答性が報告されている。
【０２７１】
（B.  ビンブラスチン）
McKinneyおよびHosford(1993)は、ビンブラスチン、アクチノマイシンＤおよびコルヒチンのいずれもが、尿細管のモデルでの研究を用いて呈示したように、p()糖タンパク質が媒介する輸送のインヒビターであることを報告した。Kamiwatariら（1989）およびAkiyamaら(1989)はまた、ビンブラスチンがp()糖タンパク質インヒビターであることを確認した。
【０２７２】
p()糖タンパク質遺伝子の破壊についてホモ接合であるマウスを用いて、Schinkelら（1994）は、ビンブラスチンが、通常、p()糖タンパク質と相互作用することを明らかにした。抗p()糖タンパク質MAbを用いて、MechetnerおよびRoninson（1992）はまた、薬物ビンブラスチンがp()糖タンパク質と相互作用することを立証した。
【０２７３】
Bear(1994)はまた、ビンブラスチンが、ある種のp()糖タンパク質活性をブロックすることを提唱し、そしてMorrisら（1991）は、ビンブラスチンをp()糖タンパク質インヒビターとして確認した。
【０２７４】
細胞をビンブラスチンとインキュベートすると、微小管の溶解が起こる。
【０２７５】
ビンブラスチンまたはビンクリスチンの経口投与後に、予測できない吸収が報告されている。通常の臨床用量では、各薬物の血漿中最大濃度は、およそ0.4μMである。ビンブラスチンおよびビンクリスチンは、血漿タンパクに結合する。これらは、血小板中でかなり濃縮され、白血球中および赤血球中では、濃縮の程度が低い。
【０２７６】
静脈内注射後、ビンブラスチンは、血漿からのクリアランスが多相様式である。分布後、薬物は、およそ１時間および20時間の半減期で、血漿から消失する。
【０２７７】
ビンブラスチンは、肝臓において、誘導体であるデスアセチルビンブラスチン（desacetylvinblastine）を生物学的に活性化するために、代謝される。投与用量のおよそ15％は、尿で無傷の状態で検出され、そして約10％は、胆管排泄後に、糞便中に回収される。肝機能障害のある患者では、用量を減らすべきである。血漿中ビリルビン濃度が３mg/dl（約50μM）より高いなら、少なくとも50％の用量低減が指示される。
【０２７８】
ビンブラスチン硫酸塩(VELBAN)は、注射用調製物として入手できる。この薬物は、静脈内注射で投与される。疼痛刺激および潰瘍形成を起こす場合があるので、皮下血管外遊出に対しては、事前に特別な注意を払わなければならない。この薬物は、血行障害のある手または足（extremity）に注射してはならない。0.3mg/体重kgの単回投与後、７日〜10日で、骨髄抑制が最大になる。中程度の白血球減少(およそ3000細胞/mm３)が達成されないなら、毎週の用量を、0.05mg/体重kgずつ徐々に増やしてもよい。精巣ガンを治療するように設定したレジュメでは、血球数または毒性とは無関係に、ビンブラスチンを、３週間ごとに、0.3mg/kgの用量で使用する。
【０２７９】
ビンブラスチンの最も重要な臨床用途は、転移性精巣腫瘍の治療可能な療法において、ブレオマイシンおよびシスプラチンを伴う。種々のリンパ腫(特に、ホジキン病)において、有効な応答性が報告されており、この場合、症例の50〜90％で、顕著な改善を認めることができる。疾患がアルキル化剤に治療抵抗性である場合は、大部分のリンパ腫で、ビンブラスチンの有効性が減少する。ビンブラスチンはまた、カポジ肉腫、神経芽腫およびレトラー−シーヴェ病(組織球症Ｘ)、ならびに女性の乳ガンおよび絨毛ガンに活性がある。
【０２８０】
（C.  アクチノマイシンＤ）
McKinneyおよびHosford（1993）は、アクチノマイシンＤがp()糖タンパク質のインヒビターであることを報告し、MechetnerおよびRoninson（1992）ならびにAkiyamaら（1989）もまた、同じ報告を行った。
【０２８１】
アクチノマイシンＤ（ダクチノマイシン）[50-76-0]；C６２H８６N１２O１６（1255.43）は、DNA依存性RNAポリメラーゼを阻害する抗腫瘍薬である。それは、絨毛ガン、胎児性横紋筋肉腫、精巣腫瘍およびウィルムス腫瘍の治療のために第一選択配合物の一成分である。全身療法に応答しない腫瘍は、時には、局所灌流に応答する。ダクチノマイシンは、放射性療法の効力を高める。それは、第２の(遠心性の)免疫抑制剤である。
【０２８２】
アクチノマイシンＤは、主要な手術、放射線療法および他の薬物（特に、ビンクリスチンおよびシクロホスファミド）と組み合わせて、使用される。抗腫瘍活性はまた、ユーイング腫瘍、カポジ肉腫および軟組織肉腫で認められている。ダクチノマイシンは、絨毛ガンの進行したケースの女性に効果的である。それはまた、転移性の精巣ガン腫の患者において、クロラムブシルおよびメトトレキセートと組み合わせて、一貫した応答性を生じる。時には、ホジキン病および非ホジキン性のリンパ腫の患者において、応答が観察されることもある。ダクチノマイシンはまた、免疫応答（特に、腎臓移植の拒絶反応）を阻害するのに使用されている。
【０２８３】
用量の半分は無傷で胆汁に排泄され、10％は尿に排泄される。その半減期は約36時間である。この薬物は、血液脳関門を通らない。アクチノマイシンＤは、凍結乾燥粉末（各バイアルにおいて、0.5mg）として供給される。その通常の１日用量は、10〜15μg/kgである。これは、静脈内注射で５日間投与される。毒性の発現が認められないなら、３〜４週間隔で、追加の投与を行ってもよい。小児には、100〜400μgの毎日の注射を10〜14日間行う。他のレジュメでは、３〜６μg/kgを全体で125μg/kg、そして7.5μg/kgの毎週の維持用量を使用する。この薬物を静脈内注入の管状物に投与するのが安全であるが、皮下反応を避けるためにバイアルからこの薬物を取り出すのに使用した注射針を捨てるように事前に注意して、直接静脈内注射が行われている。
【０２８４】
（D.  コルヒチン）
Bear(1994)は、ビンブラスチンが、外側で修正する（outwardly-rectifying）塩化物チャンネル（これは、p()糖タンパク質の発現に関連していると提唱されている）をブロックすることを明らかにした。
【０２８５】
Morrisら（1991）はまた、コルヒチンが、サイトカラシンＢと共にp()糖タンパク質を阻害することを確認した。MechetnerおよびRoninson（1992）およびAkiyamaら(1989)の抗体の研究はまた、コルヒチンがp()糖タンパク質と結合することを立証した。
【０２８６】
コルヒチンは、痛風関節炎の急性発作の対症療法の選択薬剤である。それは、適切に使用すると、通常、24〜48時間で、発作を鎮める。この薬物は、経口投与後に良好に吸収される。31％が血漿タンパク質と結合する。それは毒性であるので、毒性（すなわち、下痢、悪心、嘔吐および腹痛)が最初に認められた時点で、投与を中止すべきである。
【０２８７】
適切な用量は、通常、成人の予防的、軽度の痛風には、各週１〜４日、１日１回、0.5〜0.6mgであり、中度から重度の通風には、１日１〜３回、0.3〜0.6  mgである。治療的な投与では、痛みがなくなるかまたは悪心、嘔吐または下痢が生じるまで、経口にて、最初の0.5〜1.2mgに続いて、２時間ごとに0.5〜1.2mgである。累積総用量は、４〜８mgの範囲である。静脈内注射では、痛風の急性発作には、充分な応答が達成されるまで、最初の２mgに続いて、６時間ごとに0.5mgである。１治療過程に対する静脈内注射の総用量は、一般に、４mgを超えてはならない。皮下の血管外遊出は疼痛をもたらし得る。コルヒチンは、0.5mgおよび0.6mgの錠剤の投薬剤型、および１mg/２mLの注射可能な剤型で入手できる。
【０２８８】
（E.  エトポシド）
抗p()糖タンパク質MAbを用いて、MechetnerおよびRoninson（1992）は、これらの薬物、エトポシドおよびピューロマイシンが、p()糖タンパク質と相互作用することを立証した。
【０２８９】
エトポシドの経口投与により、この薬物の約50％が吸収される。静脈内注射後、30μg/mlの最大血漿濃度に達する。正常な腎機能の患者では、二相様式のクリアランスが存在し、最終半減期は約８時間である。エトポシドの投与用量のおよそ40％は、尿中にそのまま排泄される。クレアチニンのクリアランスの減少に比例して、投薬量を少なくすべきである。CSFのエトシドの濃度は、血漿中の同時点の値の１〜10％の範囲である。
【０２９０】
エトポシド(VEPESID)は、静脈内投与には、溶液(20mg/ml)として、経口用途には、50mgの液体充填カプセルとして入手できる。精巣ガンの静脈内用量（併用療法）は、連日50〜100mg/m２を５日間、または１日おきに100mg/m２を３用量である。肺の小細胞のガン腫には、静脈内用量（併用療法）は、連日35mg/m２を４日間から連日50mg/m２を５日間までである。経口投与するとき、この用量は２倍にすべきである。治療サイクルは、通常、３〜４週間ごとに繰り返す。この薬物は、低血圧および気管支痙攣（これらは、おそらく、この処方に使用する溶媒が原因である）を避けるために、30〜60分間の注入の間に、ゆっくりと投与すべきである。
【０２９１】
エトポシドは、主として、ブレオマイシンおよびシスプラチンと組み合わせて、精巣腫瘍の治療に使用され、また、シスプラチンと組み合わせて、肺の小細胞ガン腫の治療に使用される。それはまた、非ホジキン性のリンパ腫、急性非リンパ性白血病、乳ガン、ならびに後天性免疫不全症候群（AIDS）関連のカポジ肉腫に対しても活性である。
【０２９２】
（F.  ダウノマイシン）
Bear（1994）は、ダウノマイシン、ビンブラスチン、コルヒチンおよびベラパミルが、（50μMで）、輸送機能（これは、p()糖タンパク質の発現に関連していると考えられる)をブロックすることを明らかにした。Akiyamaら（1989）はまた、ダウノマイシンがp()糖タンパク質インヒビターであることを確認した。ダウノマイシンは、本発明では、ダウノルビシンと類似の用途が考慮されている。
【０２９３】
（G.  ダウノルビシン）
ベラパミルおよびキニジンに加えて、ダウノルビシンは、p()糖タンパク質により肝細胞の小管膜を横切る両親媒性カチオンのATP依存性の輸送を阻害することが明らかになった（Mullerら、1994）。
【０２９４】
ダウノルビシン塩酸塩、すなわち、5,12-ナフタセネジオン、(8S-シス)-8-アセチル-10-[(3-アミノ-2,3,6-トリデオキシ-α-L-リキソ-ヘキサノピラノシル)オキシ]-7,8,9,10-テトラヒドロ-6,8,11-トリヒドロキシ-10-メトキシ塩酸塩はまた、セルビジン（cerbidine）とも呼ばれ、Wyethから入手できる。ダウノルビシンは、DNAに挿入され、DNA指向性RNAポリメラーゼをブロックし、DNAの合成を阻害する。それは、核酸合成を妨害しない用量で、細胞分裂を防止できる。
【０２９５】
それは、他の薬物と組み合わせて、（緩解を誘発するための）成人の急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、および慢性骨髄性白血病の急性期の第一に選択される化学療法に含まれる。それは、経口吸収が乏しいので、静脈内注射で投与しなければならない。分布の半減期は45分間であり、排泄の半減期は約19時間である。その活性代謝物であるダウノルビシノール（daunorubicinol）の半減期は、約27時間である。ダウノルビシンは、ほとんどが肝臓で代謝され、また、胆汁に排泄される（約40％）。肝臓または腎臓の機能が充分でない場合には、投薬量を少なくしなければならない。
【０２９６】
適切な用量（ベース等価物）は、静脈内注射にて、３週間または４週間ごとに、１、２、または３日間、60歳以下の成人では45mg/m２/日（60歳以上の患者では、30mg/m２/日）、または３週間または４週間ごとに、３〜６日間、0.8mg/kg/日である。生涯に、550mg/m２より多く投与してはならないが、ただし、胸部照射がある場合には、450mg/m２までにとどめる。小児では、毎週１回、25mg/m２であるが、２歳未満の場合または体表面積が0.5m２未満の場合には、体重を基準にした成人のスケジュールを使用する。それは、注射可能な投薬剤型（ベース等価物）では、20mgで入手できる（その塩酸塩は、21.4mgのベース等価物として、入手できる)。
【０２９７】
（H.  ドキソルビシン）
抗p()糖タンパク質MAbを用いて、MechetnerおよびRoninson（1992）は、ドキソルビシンがp()糖タンパク質と相互作用することを立証した。
【０２９８】
ドキソルビシン塩酸塩、すなわち、5,12-ナフタセンジオン、(8s-シス)-10-[(3-アミノ-2,3,6-トリデオキシ-α-L-リキソ-ヘキソピラノシル)オキシ]-7,8,9,10-テトラヒドロ-6,8,11-トリヒドロキシ-8-(ヒドロキシアセチル)-1-メトキシ塩酸塩（ヒドロキシダウノルビシン塩酸塩、アドリアマイシン）は、広範な抗腫瘍性スペクトルで使用されている。それは、DNAに結合し、核酸の合成を阻害し、有糸分裂を阻害し、そして染色体異常を促進する。
【０２９９】
それは、単独で投与すると、甲状腺腺腫および原発性肝細胞ガンの治療に対して、第一に選択される薬物である。それは、卵巣腫瘍、子宮内膜腫瘍および乳房腫瘍、気管支燕麦形細胞ガン（bronchogenic  oat-cell  carinoma）、非小細胞の肺ガン腫、胃腺ガン、網膜芽腫、神経芽腫、菌状息肉腫、膵臓ガン腫、前立腺ガン、膀胱ガン腫、骨髄腫、散在性組織球性リンパ腫、ウィルムス腫瘍、ホジキン病、副腎腫瘍、骨細胞肉腫、軟組織肉腫、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫および急性リンパ性白血病に対して、31個の第一に選択される配合の一成分である。それは、膵島細胞ガン、子宮頚ガン、精巣ガンおよび副腎皮質ガンの治療のための代用薬である。それはまた、免疫抑制剤でもある。
【０３００】
ドキソルビシンは、吸収性に乏しく、静脈内注射で投与しなければならない。その薬動力学は、マルチコンパートメントである。分布相は、12分間および3.3時間の半減期を有する。その排泄半減期は、約30時間である。その40〜50％は、胆汁に排泄される。残りのほとんどは、肝臓において、部分的に活性な代謝物（ドキソルビシノール）に代謝されるが、数％は、尿に排泄される。肝臓障害がある場合は、用量を減らすべきである。
【０３０１】
適切な用量は、静脈内注射では、成人で21日間隔で60〜75mg/m２、または各２日間または３日間連続で、25〜30mg/m２を３または４週間隔で繰り返すか、または週１回20mg/m２である。投薬前に化学療法または腫瘍性骨髄浸潤による骨髄抑制があるとき、またはこの薬物が他の骨髄造血抑制薬と組み合わされるときには、高齢の患者には最も低い用量を使用すべきである。血清ビルビリン値が1.2mg/dLと３  mg/dLとの間にある場合には、この用量を50％少なくするべきであり、それが３mg/dLを上回る場合には、75％少なくするべきである。その生涯総用量は、正常な心機能の患者では550mg/m２を超えてはならず、縦隔照射（mediastinal  irradiation）を受けた患者では、400mg/m２を超えてはならない。小児では、各３日間連続で、30mg/m２を４週間ごとに繰り返す。処方限界は、成人の場合と同じである。
【０３０２】
（I.  タキソテーレ）
タキソテーレ（Taxotere）は、1,9-ジデオキシホルスコリナ（1,9-dideoxyforskolina）およびニフェジピンに加えて、Hunterら（1993）により、p()糖タンパク質のインヒビターであることが明らかとなった。
【０３０３】
（J.  タキソール）
抗p()糖タンパク質MAbを用いて、MechetnerおよびRoninson（1992）は、タキソールが、p()糖タンパク質と相互作用することを立証した。
【０３０４】
タキソールは、実験上の抗有糸分裂剤であり、トネリコ（Taxus  brevifolia）の樹皮から単離される。それ（ビンカアルカロイドに用いる部位とは異なる部位で）は、チューブリンと結合し、微細管の構築を促進する。タキソールは、現在で、臨床上で評価されている。それは、悪性のメラノーマおよび卵巣ガン腫に対して活性がある。最大用量は、１日あたり30mg/m２を５日間、または３週間ごとに１回、210〜250mg/m２である。
【０３０５】
（K.  タモキフェン）
p()糖タンパク質薬の流出を分析する際に、Trumpら（1992）は、トリフェニルエチレン抗エストロゲン、すなわち、タモキフェン、およびその主要代謝物であるN-デスメチルタモキフェンが、種々のヒトおよびマウス細胞株において、４〜６μMの濃度で、細胞傷害薬の細胞内濃度を３倍〜10倍に上げることを報告した。
【０３０６】
高用量の経口タモキフェンの第Ｉ相臨床治験で、Trumpら（1992）はまた、400mg/m２の負荷用量後に１日２回、150mg/m２のタモキフェンを投与すると、用量を制限するような毒性を生じることなく、それぞれ、４マイクロモルおよび６マイクロモルの血漿レベルのタモキフェンおよびN-デスメチルタモキフェンが得られることを報告した。たとえ、タモキフェンがビンブラスチンの毒性を高めなくても(これが、この研究の目的である)、この用量は、p()糖タンパク質が媒介する薬剤耐性を調節するために、タモキフェンの第II相治験に推奨された。それにもかかわらず、高用量のタモキフェンが安全に投与できること、およびp()糖タンパク質の機能を阻害し得る血漿濃度が達成できることを明らかにしたことは、本発明と関連しており、これにより、タモキフェンを、カンプトテシン系薬剤（camptothecins）と組み合わせて用いることが可能となる。
【０３０７】
タモキフェンは、タモキフェンクエン酸塩（エタナミン（ethanamine）、2-[4-1,2-ジフェニル-1-ブテニル)フェノキシ]-N,N-ジチメル-、(Z)-)として入手でき、これはまた、ノルバデックス（Nolvadex）と呼ばれ、Stuartから入手できる。それは、閉経後の女性の乳ガンの一時的な療法に、非ステロイド性の抗エストロゲンとして使用される。この薬物は、細胞質ゾルのエストロゲンレセプターに対してエストロゲンと拮抗し、それゆえ、標的組織において、エストロゲンの効果をブロックする。卵巣におけるバイオアベイラビリティーは、25〜100％である。単回用量の半減期は、18時間であるが、定常状態では、７時間にすぎない。
【０３０８】
それは、乳ガンに対する経口用量では、１日２回、10mgまたは20mgであり、刺激性排卵に対しては、１日２回、５〜40mgを４日間であり、乳房痛に対しては、１日10mgを４カ月間である。それは、10mgの錠剤の投薬剤型で入手できる。
【０３０９】
（実施例25）
（カチオン性化合物）
（A.  レセルピン）
p()糖タンパク質によるジゴキシン輸送を研究する際に、Horiら（1993）は、レセルピンがこのプロセスを阻害することを明らかにした。Akiyamaら（1988）およびMiyamotoら（1992b）はまた、レセルピンがp()糖タンパク質に結合し、光標識（photo-labeling）を阻害することを明らかにした。
【０３１０】
レセルピンは、ヨヒンバン-16-カルボン酸（Yohimban-16-carboxylic  acid）、11,17-ジメトキシ-18-[(3,4,5-トリメトキシベンゾイル)オキシ]-、メチルエステル、(3β、16β、17α、18β、20α)-である。それは、トランキライザーおよび抗高血圧剤として使用される。この血圧低下用量は、一般に、そのトランキライザー効果のための用量よりもかなり少ないために、レセルピンは、精神薬理学的な薬物としてよりも高い安全性があり、その血圧低下効果に対して使用される。それは、交感神経節後の神経において、ノルエピネフリンの部分的な枯渇により、抗高血圧効果を発揮する。静脈注射により、それは、重度の高血圧および高血圧症発症を管理するのに極めて有用である。
【０３１１】
この薬物は、吸収性に乏しく、消化管から不規則に吸収され、このことは、経口用量と静脈注射用量との効能に関して、かなりの差を生じる。それは、特色として、発現の潜伏期が長く、作用の持続期間が延長される。例えば、連日経口投与では、この薬物の効果は、通常、数日から２週間では充分に現れず、経口投薬を中断した後も、４週間の長期にわたって持続し得る。この薬物に対する耐性は、投与を継続しても発現しない。
【０３１２】
適切な用量は、経口投与、成人で、高血圧に対して、最初、１回または２回分割用量で、１日あたり0.05〜0.2mgである。これより高い用量を用いるときには、患者を、気分の抑鬱について継続的に監視しなければならない。この用量は、不安−緊張に対しては、それを抑制するため、最初、１日あたり0.1〜0.5mgであり、次いで、最小効果用量に調整され、精神病に対しては、最初、１日あたり0.1〜１mgであり、抑制を維持するために、引き続いて調整を行う。この用量は、小児（小児への投与は推奨されないが）では、高血圧症に対して、１回または２回分割用量で、１日あたり５〜20μg/kg（または、150〜600μg/m２）である。それは、0.5mgの持続放出性カプセルで入手でき、また、0.1mg、0.25mgおよび１mgの錠剤として入手できる。
【０３１３】
（B.  ジピリダモール）
Tatsutaら（1991）は、多剤耐性のヒト肝ガン細胞に対する抗腫瘍薬の活性が、ジピリダモールにより高められることを明らかにした。ジピリダモール（DPM）は、10μMで、抗腫瘍剤の細胞毒性を高め、用量に依存して、ビンブラスチンの細胞内蓄積を上げた。DPMは、p()糖タンパク質と結合し、活性な薬物の流出を阻害するとの結論に達した。Suzukiら(1990)はまた、ジピリダモールがp()糖タンパク質インヒビターであると報告した。
【０３１４】
ジピリダモールは、[2,6-ビス(ジエタノールアミノ)-4,9-ジピペリジノピリミド-(5,4-d)ピリミジン[58-32-2]、C２４H４０N８O４であり、Boehringer  Ingelheimから入手できる。それは、ホスホジエステラーゼ、トロンボキサンA２の合成、アデノシンの再取り込みを阻害し、そして血管平滑筋におけるプロスタサイクリンの合成を促進する。冠状血管では、これらの全ての作用は、冠状血管拡張に好ましい。この薬物は、心臓の弁の置換において、手術後の血栓塞栓症を防止する際に、プロトロンビン減少性抗凝血剤（prothrombopenic  anticoagulant）と共に、付加的な用途で認可されている。それはまた、冠状バイパス手術において、アスピリンまたはワルファリンと共に使用され、心筋梗塞後の一過性の虚血性発作および深静脈血栓症にて、アスピリンと共に使用されている。
【０３１５】
適切な用量は、経口で、成人において、１日あたり４回、75〜100mgである。それは、25mg、50mgおよび75mgの錠剤投薬剤型で入手できる。臨床的に通常使用される用量では、ジピリダモールは、かなり非毒性である。
【０３１６】
（C.  クロロキン）
クロロキンは、多剤耐性のヒトガン腫細胞の薬剤耐性を部分的に無効にし、この理由のために、本発明での使用が考慮される（Akiyamaら、1988）。クロロキンリン酸塩は、1,4-ペンタンジアミン、N４-(7-クロロ-4-キノリニル)-N１,N１-ジエチルリン酸塩（１：２）であり、Biocraft,  Danburyから入手でき、また（アラレンリン酸塩（Aralen  Phosphate）とも呼ばれ、Winthropから入手できる。
【０３１７】
それは、抗マラリア薬として使用され、耐性Ｐ熱帯熱により引き起こされるもの以外の全てのマラリアの経口治療に対して選択される薬物である。それは、腸のアメーバ症には有用ではないものの、腸外のアメーバ症(特に、アメーバ性肝炎)の治療に効果的な薬剤である。
【０３１８】
この薬物は、消化管からほぼ完全に吸収され、通常、経口的に投与される。それは、非経口投与を行う必要があるときには、(塩酸塩として)、筋肉内に注入される。キナクリン（quinacrine）と全く同程度ではないものの、組織はこの薬物に結合する。それは、組織において未知の生成物に分解される。この薬物は、１週間の初期半減期で、尿中にゆっくりと排泄され、この半減期は、４週間後には、17日に変わり、次いで、最終的には、数カ月になる。
【０３１９】
適切な用量は、経口、成人において、マラリアに対して、抑制剤として、暴露前に２週間、週１回、500mgであり、治療用には、最初の１ｇに続いて、６〜８時間で500mg、次いで、２日目および３日目にて、１日１回、500mgであり、腸外アメーバ症に対しては、２日間、１日４回、250mgに続いて、少なくとも２週間または３週間、１日２回、250mgであり、エリテマトーデスに対しては、２週間、１日２回、250mg、次いでその後は１日１回であり、光発疹（photoeruption）を抑制するためには、２週間、１日２回、250mg、次いで１日１回であり、慢性関節リウマチに対しては、１日１回、250mgであり、必要ならば１日あたり750mgまで増やす。小児の場合は、マラリアに対して、抑制剤として、週１回、8.3mg/kgであり、500mgを超えず、治療用には、最初に16.7mg/kgであり、１ｇを超えず、次いで、６時間、24時間および48時間後に、8.3mg/kgであり、00mgを超えず、腸外アメーバ症に対しては、３週間、連日、10mg/kgであり、600mgを超えない。
【０３２０】
抑制治療は、マラリア発症地域に入る２週間前に開始し、出発後８週間、継続すべきである。２回の週用量を１日に６時間間隔で投与することにより、抑制について急速な負荷を達成できる。それは、250mgおよび500mgの錠剤で入手でき、これは、それぞれ、クロロキンベースの150mgおよび300mgと等価である。
【０３２１】
クロロキン塩酸塩は、1,4-ペンタンジアミン、N４-(7-クロロ-4-キノリニル)-N１,N１-ジエチル、二塩酸塩であり、また、アラレン塩酸塩（Aralen  Hydrochloride）とも呼ばれ、Winthropから入手できる。その作用および用途は、クロロキンリン酸塩と同じであるが、但し、この塩酸塩は、それ自体、筋肉内注射用の溶液に向いている。この筋肉内経路は、経口のクロロキンを寛容し得ない患者において指示してもよい。
【０３２２】
適切な用量は、筋肉内注射では、成人において、マラリアに対し、200〜250mgを、必要ならば６時間ごとに繰り返すが、最初の24時間では、１ｇを超えず、腸外アメーバ症に対しては、10〜12日間に、１日１回、200〜250mgである。小児の場合は、マラリアに対し、6.25mg/kg以下であり、必要ならば６時間ごとに繰り返すが、いずれの24時間期間においても、12mg/kgを超えず、腸外アメーバ症に対しては、10〜12日間に、１日あたり7.5mg/kgである。それは、250mg/５mLの注射可能な剤型で入手でき、これは、クロロキンベースの200mg/５mLと等価である。
【０３２３】
（D.  プロプラノロール）
プロプラノロールもまた、多剤耐性のヒトガン腫細胞の薬剤耐性を部分的に無効にする能力に基づき、本発明での使用が提唱されている（Akiyamaら、1988）。
【０３２４】
プロプラノロールは、高血圧症およびアンギーナの治療に使用されるβ−アドレナリン作動性アンタゴニストである。プロプラノロールの最初経口用量は、一般に、１日あたり40〜80mgである。次いで、この用量は、最適な応答が得られるまで、力価を上げてもよい。アンギーナを治療するためには、この用量は、臨床的に示されるように、１週未満の間隔で増やしてもよい。高血圧症では、数週間は、血圧の充分な応答が発現しないかも知れない。典型的には、用量は、１日あたり320mg未満である。プロプラノロールはまた、生命を脅かす不整脈を管理するために、静脈内に投与してもよい。
【０３２５】
プルプラノロールは、親油性が高く、経口投与後に、ほぼ完全に吸収される。しかしながら、この薬物の大部分は、それが最初に門脈循環を通る間に、肝臓により代謝される。平均して、約25％だけが、全身循環に達する。さらに、肝臓によるプルプラノロールの全身循環前クリアランスには、個人間で差異がある。このことは、この薬物の経口投与後の血漿中濃度の多様性（およそ20倍）に寄与する。プロプラノロールの肝臓抽出度は、用量が増えるにつれて、低下し、プロプラノロールのバイオアベイラビリティーは、食物の摂取により、そしてこの薬物の長期間の投与の間に上昇し得る。
【０３２６】
プロプラノロールは、大きな分布容量（４リットル/kg）を有し、容易にCNSに入る。循環しているこの薬物のおよそ90％は、血漿タンパクに結合している。プロプラノロールは、大部分が代謝され、代謝物のほとんどは尿中に出現する。
【０３２７】
24時間にわたって、血漿中プロプラノロールの治療濃度を維持するために、プロプラノロールの持続性放出性処方物が開発されている。運動により誘発される頻脈の抑制は、この投薬間隔全体にわたって維持され、患者のコンプライアンスが改善できる。
【０３２８】
プロプラノロール塩酸塩は、経口投与用の10〜90mgの薬物を含有する錠剤で入手でき、静脈内投与用途には、１mg/mlの濃度で入手できる。それはまた、80mg、120mgおよび160mgを含む持続性放出性カプセル(INDERAL  LA)で入手できる。
【０３２９】
（実施例26）
（テルフェナジン（セルダン））
テルフェナジン（セルダン（Seldane)）は、多剤耐性のガン細胞に対して感受性を回復する薬物として、提唱されている（Haitら、1993）。彼らは、テルフェナジンは、患者のドキソルビシンに対する感受性を高めるようであり、そしてこのことは、この活性に対して規定される構造的な必要条件を満たすことから、p()糖タンパク質への結合性についてテルフェナジンを試験した。テルフェナジンの作用機構は、p()糖タンパク質の機能の阻害によると考えられる。何故なら、それがドキソルビシンの蓄積を増大し、MDR株からのローダミン123（rhodamine  123）の流出を阻害するが、感受性細胞における薬物の蓄積および流出には効果がないからである。
【０３３０】
テルフェナジンは、臨床上利用可能であり、研究に利用可能な多くの構造上の誘導体があり、そして比較的毒性が低いので、この薬物およびそのクラスの薬物は、現在では、本発明のカンプトテシン系薬物と組み合わせて使用するのが好ましい。
【０３３１】
テルフェナジンは、1-ピペリジンブタノール、α-[4-(1,1-ジメチルエチル)フェニル]-4-(ヒドロキシジフェニルメチル)であり、また、セルダンとも呼ばれ、Merrell-Dowから入手できる。テルフェナジンは、抹消系の独特なH１レセプターアンタゴニストであるが、他の抗ヒスタミン薬とは、化学的および薬理学的に区別される。それは、季節性アレルギー性鼻炎に関連する症状（例えば、くしゃみ、鼻漏、そう痒および流涙）を緩和することが示されている。それは、その広範な初期経路の代謝のために、経口投与後に、迅速かつほぼ完全に吸収され、１％未満が全身循環に達して不変であり、その97％は、血漿タンパクに結合している。最大効果は、１〜２時間以内に認められる。最大血漿レベルは、1.5〜4.5ng/mLの範囲である。血漿濃度は、二相様式で低下する。分布半減期は、3.5時間であり、最終の排泄半減期は、16〜23時間である。
【０３３２】
適切な用量は、通常、成人および12才以上の小児では、経口で、１日２回、60mg、６〜12才の小児では、１日２回、30〜60mg、３〜５才の小児では、１日２回、15mgである。それは、60  mgの錠剤剤型で、入手できる。
【０３３３】
（実施例27）
（イベルメクチン）
p()糖タンパク質遺伝子の破壊についてホモ接合であるマウスを用いて、Schinkelら（1994）は、このようなマウスが、イベルメクチンに対して高い感受性を示すことを明らかにする研究を行った。従って、イベルメクチンは、通常、p()糖タンパク質と相互作用するはずである。Schinkelら(1994)は、p()糖タンパク質インヒビターが、一定範囲の薬物が脳にアクセスするのを選択的に高める際に有用であるかも知れないと提唱した。
【０３３４】
アベルメクチン系薬剤（avermectins）は、新規のクラスの大環状ラクトンである。イベルメクチンは、約80％の成分B１ａおよび20％の成分B１ｂの混合物であり、アベルメクチンB１の選択的触媒的水素化により、形成される。この半合成薬は、家畜（live  stock）およびペット(domestic  animal）に感染する（plague）寄生線虫（回虫）および節足動物（昆虫、マダニ（tick）、およびダニ（mite））により引き起こされる広範な種類の感染症を治療し抑制する家畜・ペット用製剤において、広範に使用されている。
【０３３５】
ヒトでは、イベルメクチンは、現在、回旋糸状虫症、すなわち、糸状虫症盲の原因となるフィラリア感染症を治療し抑制するために選択される薬物である。イベルメクチンは、動物およびヒトに感染する多くの寄生線虫の少なくとも一部の発達段階に対して、効果的であり、高い効能がある。ヒトに感染するある種の胃腸内線虫はまた、イベルメクチンの影響を受けやすい。それゆえ、この薬物は、糞線虫症、蛔虫症、鞭虫症および蟯虫症に効果が高いと思われる。鉤虫もまた、影響を受けるが、その程度はより低い。
【０３３６】
ヒトでは、血漿中のイベルメクチンの最大濃度は、経口投与の４時間以内に達成される。この薬物の半減期は、約10時間である。動物研究では、経口投与されたイベルメクチンの用量の１〜２％だけが、尿中に現れることが明らかになっている。その残りのほとんど全ては、未変化の薬物として、糞便中に見出される。
【０３３７】
イベルメクチンは、MECTIZAN錠剤として、Centers  for  Disease  Controlから入手でき、それぞれ６mgである。データからは、成人の場合、0.15〜0.20mg/kgの単回の経口用量により、皮膚組織および眼球組織において、O.volvulusミクロフィラリアの迅速かつ顕著な減少が起こることが示されている。この効果は、数日以内に認められ、６〜12カ月間持続する。次いで、この用量を繰り返すべきである。
【０３３８】
６〜12カ月ごとに投与される単回用量のイベルメクチン（0.15〜0.20mg/kg）は、ヒトの回旋糸状虫症の制御に対して、効果的で、安全かつ実用的であると考えられている。最も重要なことには、このような治療の結果、眼球組織において、リンパ節疾患の逆行および急性炎症の変化が生じ、ミクロフィラリアが原因となるさらなる眼球病変の発達を押さえる。150〜200mgの単回用量のイベルメクチンが、ヒトの糞線虫症を治癒できるという知見は、特に、この薬物がまた、同時に存在する蛔虫症、鞭虫症および蟯虫症にも効果的であることから、著しい進歩である。
【０３３９】
（実施例28）
（キニジン）
Akiyamaら（1988）は、キニジンがp()糖タンパク質に結合し、光標識を阻害することを明らかにした。Horiら（1993）はまた、キニジンが、p()糖タンパク質によるジゴキシンの輸送を阻害することを明らかにした。さらにp()糖タンパク質による肝細胞小管膜を横切る両親媒性カチオンのATP依存性輸送は、キニジンにより阻害されることが、Mullerら(1994)によりさらに明らかとなった。
【０３４０】
キニジン硫酸塩は、シンコナン-9-オール、6’-メトキシ、(9S)-、硫酸塩（２：１）（塩）、二水和物である。それは、クラス1Aの抗不整脈薬であり、これは、自働性、膜応答性、興奮性および伝導速度を低下させる。それは、心房性早期収縮を抑制するのに効果的であり、そして、心房性細動の再発を転向し保護するのに効果的である。
【０３４１】
キニジンは、経口経路により90％吸収される。血漿では、その82％がタンパクに結合している。その分布容量は、0.47mL/gである。治療上の血漿レベルは、３〜６μg/mLの範囲に達する。排泄は、肝臓の生体内変化により、50〜60％である。その半減期は、３〜17時間であるが、通常、５〜７時間である。アルカリ性の尿は、尿細管再吸収に好ましく、従って、その半減期を延長し、血漿レベルを高める。尿のpHを上げる薬物（多くの抗酸剤、炭酸脱水酵素阻害剤）または食餌を用いる場合は、投薬量の調整を行わなければならない。
【０３４２】
適切な用量は、経口では、成人の場合、従来のカプセルで、最初の早期心房および心室脱分極に対して、８時間ごとに200〜300mg、発作性上室性頻脈に対しては、転換まで、２〜３時間ごとに400〜600mg、心房粗動（ジギタリス化後のみ）に対しては、200mgで、これは転換まで、２〜３時間ごとに増量するように調整され、５〜８用量に対し、２〜３時間ごとに200mgであり、維持用量（maintenance）は全て、１日あたり３回または４回、200〜300mgであり、徐放性錠剤では、８〜12時間ごとに300〜600mgであり、幼児および小児では、もし必要でありかつ寛容であれば、１日５回、180mg/m２である。非経口投与は推奨されないが、注射は利用可能である。
【０３４３】
キニジングルコン酸塩は、シンコナン-9-オール、6’-メトキシ、(9S)-、モノ-D-グルコン酸塩（塩）であり、これはまた、Berlexから入手できるキナグルート（Quinaglute）と呼ばれ、そしてParke-Davisから入手できるヅラクイン（Duraquin）と呼ばれている。それは、キニジン硫酸塩と同じ作用、用途および毒性を有するが、溶液中で非刺激性でかつ安定であるので、筋肉内用途にはより好ましい。キニジンの静脈内投与は、時々行われるにすぎないが、時には、ある種の重体（例えば、急性肺水腫を伴う心室頻脈または重篤なうっ血性不全)では、救命手段となる。この心臓に対する効果は、筋肉内注射の15〜20分間後に認められ得る。血圧降下は頻繁に起こる。それはまた、マラリアの治療にも使用できる。
【０３４４】
適切な用量は、経口で、成人の場合、長期放出性（extended-release）錠剤として、６〜12時間ごとに、324〜660mgであり、これより高い用量は、低い用量での治験、臨床的および実験的再試験および血漿中キニジンレベルの決定の後にのみ、用いるべきである。この用量は、筋肉内注射で、成人の場合、最初に600mgであり、続いて２時間ごとの短い間隔で400mgであり、必要ならば最大の１日用量は５ｇまでである。静脈内注射では、成人の場合、希釈溶液中の200〜800mg（アイソトニックデキストロース注射液で、20mg/mL）を、１mL/分（20mg/分）以下の速度で投与して、心電計および血圧の継続的なモニターを行う。それは、800mg/10mLの注射可能な投薬剤型で入手でき、342mgおよび330mgの長期放出性錠剤として入手できる。
【０３４５】
キニジンポリガラクツロン酸塩はまた、カルジアキン(cardiaquin）とも呼ばれ、Purdue-Frederickから入手できる。その作用、用途および一般的な毒性は、キニジン硫酸塩のものと同じであるが、但し、それは、心室不整の転換には用いられず、また、胃腸内の副作用が起こりにくく、その重篤度も弱いので、経口用途には好ましい。
【０３４６】
適切な用量は、経口で、成人の場合、最初は、３〜４時間間隔で、３または４用量について275〜825mgであり、その後治療上の最終時点に達するか毒性を併発するまで、３または４用量ごとに、137.5〜275mgの増加量で増量するように調整してもよく、次いで維持のために、１日あたり２回または３回、275mgとする。小児の場合、必要性および寛容性に従って、１日あたり３回、８〜25mg/kgまたは247.5mg/m２である。それは、275mgの錠剤投薬剤型で入手でき、これは200mgのキニジン硫酸塩と等価である。
【０３４７】
（実施例29）
（モノクローナル抗体）
（A.  MRK16およびMH162）
p()糖タンパク質に対する第１のマウス−ヒトキメラ抗体は、ヒト薬剤耐性ガンの効果的な治療を考案する際に、Hamadaら（1990）により開発された。この組換えキメラ抗体は、ヒト抗体の定常領域に結合したMRK16の抗原認識可変領域を有する。ヒトエフェクター細胞を用いたとき、このキメラ抗体、MH162は、全マウスモノクローナルMRK16よりも、薬剤耐性の腫瘍細胞を殺すのに効果的であった。MRK16が、異種移植片モデルにおいて、ヒト薬剤耐性の腫瘍細胞の成長を阻害するので、このキメラの改良は、治療上さらに有用になるはずである。
【０３４８】
（B.  MH171）
p()糖タンパク質に対する第２のマウス−ヒトのキメラ状抗体であるMH171は、Ariyoshiら（1992）により開発され、ここで、このマウスモノクローナル抗体MRK17の抗原認識可変領域は、ヒトIgG1抗体の定常領域に結合している。MRK17は、p()糖タンパク質を特異的に認識し、そしてインビトロおよび異種移植片ヌードマウスモデル系にて、多剤耐性(MDR)の腫瘍細胞の成長を阻害する。
【０３４９】
MRK17、MH171、MRK16およびMH162は、カンプトテシン系薬剤を用いた治療用の効果的な第２の薬剤としての用途が想定されており、特に、動物モデルでは、他の適用での成功が証明されている。
C.  UIC2
MechetnerおよびRoninson（1992）は、MAb  UIC2を用いて、p()糖タンパク質の効果的な阻害を達成した。UIC2はMDR細胞からのp()糖タンパク質基質の流出を阻害し、そしてp()糖タンパク質を輸送する薬物の細胞傷害性を著しく高めた。UIC2による細胞傷害性の効力増大は、ビンブラスチン、ビンクリスチン、コルヒチン、タキソール、ドキソルビシン、エトポシド、アクチノマイシンＤ、ピューロマイシンおよびグラミシジンＤのような薬物で認められたが、MDR細胞が交差耐性ではない薬物（メトトレキセート、5-フルオロウラシル、シス−プラチナ（cis-platinum）、G418およびゲンタミシン)のいずれでも認められなかった。
【０３５０】
インビトロでのUIC2の阻害効果は、臨床的に達成可能な最も高い濃度では、ベラパミルの効果と同程度に強かった。従って、UIC2およびその誘導体は、本発明での使用が提唱されている。
【０３５１】
（D.  さらなるMAb）
Schinkelら（1993）は、ヒトp()糖タンパク質の外側のエピトープを認識するMAbの結合特性について記述した。このような抗体は、p()糖タンパク質が媒介する多剤耐性の特異的なインヒビターとして使用できる。Schinkelら（1993）は、MRK16、HYB-241、UIC2、7G4および4E3のようなMAbについて記述しており、その１つは、カンプトテシン系薬剤と組み合わせて、p()糖タンパク質を阻害するのに使用できる。
【０３５２】
Miyamotoら（1992b）はMAb  C219を開発し、Millerら（1991）はMAb  JSB-1を開発したが、それらの両方は、本明細書中において開示されるように、p()糖タンパク質を阻害するのに使用され得る。
【０３５３】
（実施例30）
（薬学的組成物）
本発明の水性組成物は、有効量のCPT-11、および抱合酵素活性を上げる有効量の化合物(第２の薬剤)を有し、第IIフェーズ抱合酵素であるグルクロノシルトランスフェラーゼの活性を上げる化合物によって代表される。このような組成物は、一般に薬学的に受容可能なキャリアまたは水性媒体に溶解または分散される。
【０３５４】
表現「薬学的に受容可能なまたは薬理学的に受容可能な」は、動物またはヒトに適切に投与したとき、有害反応、アレルギー反応または他の不適当な反応を生じない分子実体および組成物をいう。本明細書において使用する「薬学的に受容可能なキャリア」には、溶媒、分散媒体、コーティング剤、抗細菌剤および抗真菌剤、アイソトニック剤および吸収遅延剤などのいずれかおよび全てが含まれる。このような媒体および薬剤を薬学的に活性な物質に使用することは、当該技術分野において周知である。いずれかの従来の媒体または薬剤が活性成分と配合禁忌である範囲を除いて、治療組成物中においてそれを使用することが考慮される。補助的な活性成分（例えば、他の抗ガン剤）もまた、この組成物に取り込むことができる。
【０３５５】
非経口投与（例えば、静脈内注射または筋肉内注射）用に処方した化合物に加えて、他の薬学的な受容可能な剤型には、例えば、経口投与用の錠剤または他の固形剤、経時的放出性カプセル、および現在使用されている他のいずれかの剤型（クリーム、ローション、うがい剤、吸入剤などを含めて）が挙げられる。
【０３５６】
（A.  非経口投与）
この活性化合物は、しばしば、非経口投与用に処方され、例えば、静脈内経路、筋肉内経路、皮下経路または腹腔内経路を介する注射用に処方される。活性成分としてのCPT-11および第２の薬剤を含む水性組成物の調製は、本発明の開示内容を考慮すると、当業者に公知である。典型的には、このような組成物は、液状溶液または懸濁液のいずれかとしての注射可能物として調製できる。注射前に液体を添加して、溶液または懸濁液を調製するために用いるのが適切な固体剤型もまた調製でき、これらの調製物もまた乳化できる。
【０３５７】
遊離塩基または薬学的に受容可能な塩としての活性化合物の溶液は、界面活性剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース）と適切に混合して、水中で調製できる。分散液もまた、グリセロール、液状ポリエチレングリコールおよびそれらの混合物、ならびにオイルにおいて調製できる。通常の保存および使用条件下では、これらの調製物は、微生物の成長を防止するための防腐剤を含有する。
【０３５８】
注射可能な用途に適切な薬学的剤型には、滅菌水溶液または分散液、ごま油、落花生油または水性プロピレングリコールを含む処方物、および滅菌注射用溶液または分散液の用時調製（extemporaneous  preparation）のための滅菌粉末が挙げられる。いずれの場合にも、その剤型は滅菌状態でなければならず、容易な注射器能（syringability）が存在する程度まで液体でなければならない。それは、製造および保存条件下において安定でなければならず、また、微生物（例えば、細菌および真菌）の汚染作用に対して保護されていなければならない。
【０３５９】
これらの活性化合物は、中性の形態または塩の形態で組成物に処方できる。薬学的に受容可能な塩には、（タンパク質の遊離のアミノ基で形成した）酸付加塩が含まれ、これは、無機塩（例えば、塩酸またはリン酸）または有機塩（例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、マンデリン酸）などで形成される。遊離のカルボキシル基で形成される塩はまた、無機塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウムまたは水酸化鉄）、および有機塩基（例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ヒスチジン、プロカイン）などから誘導できる。
【０３６０】
このキャリアはまた、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液状ポリエチレングリコールなど）、それらの適切な混合物および植物油を含む溶媒または分散媒体であり得る。その固有の流動性は、例えば、コーティング剤（例えば、レシチン）を使用することにより、分散液の場合には、必要な粒子サイズを維持することにより、そして界面活性剤を使用することにより、維持できる。微生物の作用は、種々の抗細菌剤および抗真菌剤（例えば、パラベン類、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなど）により、防止できる。多くの場合、アイソトニック剤（例えば、糖または塩化ナトリウム）を含有させるのが好ましい。この注射用組成物の吸収性は、この組成物中において、吸収を遅延させる薬剤（例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチン）を使用することにより、延長できる。
【０３６１】
滅菌注射用溶液は、適切な溶媒中で、必要な量の活性化合物を、上で枚挙した種々の他の成分と混合し、続いて濾過滅菌を行うことにより調製される。一般に、分散液は、種々の滅菌した活性成分を滅菌ビヒクル（これは、塩基性の分散媒体および上で枚挙したもののうちの必要な他の成分を含有する）と混合することにより、調製される。滅菌注射用溶液を調製するための滅菌粉末の場合には、好ましい調製方法は真空乾燥技術および凍結乾燥技術であり、これらにより活性成分と先の滅菌濾過溶液に由来のさらなる任意の所望成分との粉末が得られる。
【０３６２】
ある場合には、本発明の治療用処方物はまた、局所投与に適切な剤型（例えば、クリームおよびローション）で調製できる。これらの剤型は、皮膚に関連した疾患（例えば、種々の肉腫）を治療するのに使用してもよい。
【０３６３】
処方の際には、溶液は投薬処方物に適合する様式、および治療に有効な量で投与される。これらの処方物は、種々の投薬剤型（例えば、上記のタイプの注射用溶液）で容易に投与され、薬物放出性カプセルなどでも使用可能である。
【０３６４】
水溶液での非経口投与には、例えば、この溶液は、必要なら、適切に緩衝化すべきであり、その液状希釈剤は、まず、充分な生理食塩水またはグルコースでアイソトニックにする。これらの特定の水溶液は、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与および腹腔内投与に特に適切である。これに関連して、使用できる滅菌水性媒体は、本発明の開示に照らして、当業者に公知である。例えば、１投薬量は、１mLのアイソトニックNaCl溶液に溶解され、1000mLの皮下注入液に添加されるかまたは提示の注入部位に注射できる（例えば、「Remington’s  Pharmaceutical  Sciences」、15版、1035〜1038頁および1570〜1580頁を参照せよ）。治療する患者の症状に依存して、投薬量のある程度の変更が、必然的に行われる。投与の責任者は、いずれにしろ、個々の被験体の適切な用量を決定する。
【０３６５】
（B.  経口投与）
ある実施態様では、活性化合物は経口的に投与できる。これは、消化酵素によるタンパク分解に一般に耐性があるか、または耐性があるようにされた薬剤を考慮している。このような化合物は、製造業者から錠剤の剤型で入手できる全ての化合物または薬物、それらの誘導体およびアナログを含むことが考慮されている。
【０３６６】
経口投与のためには、この活性化合物は、例えば、不活性の希釈剤または吸収可能な食用キャリアと共に投与されるか、または硬質または軟質のゼラチンカプセルに封入されるか、または錠剤内に圧縮されるか、または食餌の食物中に直接取り込まれ得る。治療用の経口投与には、この活性化合物は、賦形剤と共に取り込まれ得、そして摂取可能な錠剤、バッカル錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、カシュ剤などの剤型で使用され得る。このような組成物および調製物は、少なくとも0.1％の活性化合物を含有すべきである。この組成物および調製物の割合は、もちろん、変えることができ、好都合には、単位重量の約２〜約60重量％の間であり得る。このような治療上有用な組成物中の活性化合物の量は、適当な投薬量が得られるような量である。
【０３６７】
これらの錠剤、トローチ、丸薬、カプセルなどはまた、以下の物質を含有していてもよい：結合剤（例えば、トラガカントゴム、アカシア（acacia）、コーンスターチまたはゼラチン）；賦形剤（例えば、リン酸二カルシウム）；壊変剤（例えば、コーンスターチ、ポテトスターチ、アルギン酸など）；潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）；および甘味料（例えば、スクロース、ラクトースまたはサッカリン）または香料（例えば、ペパーミント、冬緑油またはチェリー香料）。この投薬単位剤型がカプセルのとき、それは、上記タイプの材料に加えて、液体キャリアを含有していてもよい。種々の他の物質は、コーティング剤として、またはこの投薬単位の物理的な形態を変えるために存在し得る。例えば、錠剤、丸薬またはカプセルは、セラック、砂糖またはその両方でコーティングしてもよい。エリキシル剤のシロップは、活性化合物、甘味料としてのスクロース、防腐剤としてのメチルおよびプロピルパラベン、着色料および香料（例えば、チェリー香料およびオレンジ香料）を含有し得る。もちろん、いずれかの投薬単位剤型を調製する際に用いる材料は、使用する量において、薬学的に純粋であり、そして実質的に非毒性であるべきである。さらに、この活性化合物は、徐放性の調製物および処方物に取り込まれてもよい。
【０３６８】
処方の際には、これらの化合物は、投薬処方物に適切な様式、および治療上有効な量で投与される。これらの処方物は、種々の投薬剤型（以下の特定の実施例に記述のもの）で容易に投与される。
【０３６９】
本明細書中において開示し、そして請求した全ての組成物および方法は、本発明の開示内容を考慮すれば、必要以上の実験をすることなく、製造できかつ実施できる。本発明の組成物および方法は、その好ましい実施態様によって記述しているものの、本発明の概念、精神および範囲を逸脱することなく、この組成物、方法、および本明細書に記述の方法の工程および工程の配列に対して、変更を加えてもよいことは、当業者に明らかである。さらに具体的には、本明細書に記述の薬剤を、化学的および生理学的に関連したある種の薬剤で置き換えても、同様または類似の結果が達成されることが明らかである。当業者に明らかなこのような類似の置換および改変は、添付の請求の範囲で規定する本発明の精神、範囲および概念の範囲内にあると認められる。
【０３７０】
【表８−１】
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【０３７１】
【表８−２】
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【０３７２】
【表８−３】
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【０３７３】
【表８−４】
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【０３７４】
【表８−５】
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【０３７５】
【表８−６】
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【０３７６】
【表８−７】
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【０３７７】
【表８−８】
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【０３７８】
【表８−９】
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【０３７９】
【表８−１０】
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【０３８０】
【表８−１１】
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【０３８１】
【表８−１２】
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【０３８２】
【表８−１３】
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【０３８３】
【表８−１４】
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【０３８４】
【表８−１５】
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【０３８５】
【表８−１６】
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【図面の簡単な説明】
【０３８６】
添付の図は本明細書の一部分を形成し、そして本発明の特定の局面をさらに表すために含まれる。本発明は、１つまたはそれ以上のこれらの図面を、本明細書に呈示される特定の実施態様の詳細な記載を組み合わせて参照することによりより良く理解され得る。
【図１】図１。有益なおよび毒性の排泄経路を示すSN-38排泄の代謝経路。
【図２】図２Ａおよび図２Ｂ。CPT-11の静脈内注入後のCPT-11(黒丸)、SN-38(□)およびSN-38G(黒四角)の血漿分布曲線。図２Ａは、グレード0〜2の下痢を有する患者の代表的な血漿プロフィールである。図２Ｂは、グレード3〜4の下痢を有する患者の代表的な血漿プロフィールである。
【図３】図３。下痢のグレードの関数としての「胆汁インデックス」の散乱プロット。用量レベル100mg/m2(黒菱形)、120mg/m2(黒三角)、145mg/m2(黒丸)および175mg/m2(黒四角)からのデータが示される。患者を、グレード0〜2の下痢またはグレード3〜4の下痢のいずれかを有するとして、処置の最初の２サイクルを基に群分けした。２つの群に対する中央値は2228(n=12)および5499(n=9)であった。Clostridium  difficile毒素についてポジティブと試験されそして(cdiff  +)で示されるグレード3〜4の下痢を有する一人の患者は、3028のインデックス値を有していた。非母数Mann  Whitney検定は、「胆汁インデックス」と下痢の重篤度との有意な相関を示した(p=0.0004)。
【図４】図４Ａ、図４Ｂ、図４Ｃ。CPT-11、SN-38およびSN-38Gの血漿濃度。CPT-11の同一用量を受けた、コントロール(CPT-11用量：20  mg/kg、n=4)対フェノバルビタール前処置ラット(n=2)。データは、コントロール群の平均＋SD  対  前処置群の平均として示される。
【図５】図５。MCF-7/Adr細胞の[3H]ベラパミルフォトアフィニティーラベル形質膜のSDS-PAGEフルオログラフィー、およびベラパミルに比較したCPT-11およびSN-38の阻害効果。細胞を、[125I]ベラパミルを用いて、CPT-11の非存在下(レーン１)ならびに10μMおよび100μM  CPT-11の存在下(レーン３およびレーン４)、または10μMおよび100μM  SN-38の存在下(レーン６およびレーン７)または10μMおよび100μMベラパミルの存在下(レーン８およびレーン９)で標識した。CPT-11およびSN-38の両方が[3H]ベラパミルと競合することにより細胞のフォトアフィニティーラベルを低減した。
【図６】図６Ａ、図６Ｂ、図６Ｃ。20mg/kg  CPT-11後の、CPT-11、SN-38およびSN-38Gの血漿濃度(n=4)。前処置群(n=3)は、CPT-11用量の５分前に60  mg/kgのシクロスポリンＡを受けた。データは平均＋SDとして表される。
【図７】図７Ａ、図７Ｂ、図７Ｃ。10mg/kg  CPT-11後の、CPT-11、SN-38およびSN-38Gの血漿濃度(コントロール、n=3)。前処置群(n=4)は、CPT-11用量の５分前に60  mg/kgのシクロスポリンＡを受けた。データは平均＋SDとして表される。
【図８】図８Ａ、図８Ｂ、図８Ｃ。６mg/kg  CPT-11後の、CPT-11、SN-38およびSN-38Gの血漿濃度(コントロール、n=3)。前処置群(n=4)は、CPT-11用量の５分前に60  mg/kgのシクロスポリンＡを受けた。データは平均＋SDとして表される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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