(57)【要約】      （修正有）【課題】  安全性が高い新規な４級アンモニウム化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤を提供する。【解決手段】  一般式（Ｉ）又は（Ｉ’）2006193494.tif 000015（式中、Ａは水酸基を有してもよい炭素数１〜４の直鎖状又は分岐状のアルキル基、Ｒ１〜Ｒ３は、直鎖状又は分岐状の炭素数１〜１２のアルキル基、Ｒ４〜Ｒ８の一つはＣＯ２−又はＳＯ３−、残りのうちの多くとも三つは水酸基、炭素数１〜４のアルコキシ基から選ばれる基、それ以外は水素原子、Ｒ'４〜Ｒ'８の一つはＣＯ２Ｈ又はＳＯ３Ｈ、残りのうちの多くとも三つは保護された水酸基及び炭素数１〜４のアルコキシ基から選ばれる基、それ以外は水素原子、Ｘ−は、４級アンモニウム基と塩を形成しうる陰イオンを表す。）で表わされる４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）又は（Ｉ'）
【化１】
2006193494.tif 000014
（式中、Ａは炭素数１〜４の直鎖状アルキル基、炭素数２〜４の枝分かれしたアルキル基、水酸基を有する炭素数１〜４の直鎖状アルキル基、又は水酸基を有する炭素数２〜４の枝分かれしたアルキル基を表わし、Ｒ１からＲ３は、互いに同一もしくは異なった直鎖状、又は枝分れした炭素数１〜１２のアルキル基を表わし、Ｒ４からＲ８の一つはＣＯ２−、又はＳＯ３−、残りのＲ４からＲ８のうちの多くとも三つは水酸基、及び炭素数１〜４のアルコキシ基からなる群から選ばれる基、それ以外のＲ４からＲ'８は水素原子を表わし、Ｒ'４からＲ'８の一つはＣＯ２Ｈ、又はＳＯ３Ｈ、残りのＲ'４からＲ'８のうちの多くとも三つは保護された水酸基、及び炭素数１〜４のアルコキシ基からなる群から選ばれる基、それ以外のＲ'４からＲ'８は水素原子を表わし、Ｘ−は、４級アンモニウム基と塩を形成しうる陰イオンを表わす。）
で表わされる４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤。
【請求項２】
請求項１において、Ｒ４からＲ８の一つはＣＯ２−、又はＲ'４からＲ'８の一つはＣＯ２Ｈである４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤。
【請求項３】
請求項１において、Ｒ４からＲ８の一つはＳＯ３−、又はＲ'４からＲ'８の一つはＳＯ３Ｈである４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤。
【請求項４】
請求項２において、残りのＲ４からＲ８、又はＲ'４からＲ'８の一つが水酸基である４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤。
【請求項５】
請求項３において、残りのＲ４からＲ８、又はＲ'４からＲ'８の一つが水酸基である４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤。
【請求項６】
請求項４において、Ａが炭素数２の直鎖状アルキル基である４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤。
【請求項７】
請求項５において、Ａが炭素数２の直鎖状アルキル基である４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤。
【請求項８】
請求項６において、Ｒ１からＲ３は、メチル基である４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤。
【請求項９】
請求項７において、Ｒ１からＲ３は、メチル基である４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定の４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
４級アンモニウム系化合物として、[２−（４−メトキシカルボニル−フェノキシ）−エチル]−トリメチルアンモニウム、及び[２−（４−エトキシカルボニル−フェノキシ）−エチル]−トリメチルアンモニウムが知られているが（特許文献１参照）、それらが心臓疾患に対する治療効果を示すことについては知られていない。
まして、新規なフェノキシ基含有４級アンモニウム系化合物が、安全性に優れ、心臓疾患治療剤として極めて優れた効果を発現することは、これまで全く知られていない。
【特許文献１】英国特許９１９１２６号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明が解決しようとする課題は、安全性が高く、虚血性心疾患及び不整脈等の心臓疾患に対して優れた治療効果を有する、特定な４級アンモニウム化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明者らは、多数の化合物を検討し、安全性や薬理効果が高く、虚血性心疾患及び不整脈等の心臓疾患に対して優れた効果を有する新規なフェノキシ基含有４級アンモニウム化合物を見出し、本発明に至った。
即ち、本発明は、
一般式（Ｉ）又は（Ｉ’）
【０００５】
【化１】
2006193494.tif 000002
【０００６】
（式中、Ａは炭素数１〜４の直鎖状アルキル基、炭素数２〜４の枝分かれしたアルキル基、水酸基を有する炭素数１〜４の直鎖状アルキル基、又は水酸基を有する炭素数２〜４の枝分かれしたアルキル基を表わし、Ｒ１からＲ３は、互いに同一もしくは異なった直鎖状、又は枝分れした炭素数１〜１２のアルキル基を表わし、Ｒ４からＲ８の一つはＣＯ２−、又はＳＯ３−、残りのＲ４からＲ８のうちの多くとも三つは水酸基、及び炭素数１〜４のアルコキシ基からなる群から選ばれる基、それ以外のＲ４からＲ８は水素原子を表わし、Ｒ'４からＲ'８の一つはＣＯ２Ｈ、又はＳＯ３Ｈ、残りのＲ'４からＲ'８のうちの多くとも二つは水酸基、それ以外のＲ'４からＲ'８は水素原子を表わし、Ｘ−は、４級アンモニウム基と塩を形成しうる陰イオンを表わす。）
で表わされる４級アンモニウム系化合物を有効成分とする心臓疾患治療剤に関する。
【発明の効果】
【０００７】
本発明は、心臓疾患治療剤として有用な新規な４級アンモニウム化合物を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の一般式（Ｉ）又は（I’）
【０００９】
【化２】
2006193494.tif 000003
で示される４級アンモニウム系化合物におけるＲ１からＲ３は、互いに同一もしくは異なった直鎖状、或いは枝分れした炭素数１〜１２のアルキル基であり、具体的には、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｓ−ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、オクチル基、デシル基、ドデシル基等の炭素数１〜１２のアルキル基が挙げられ、好ましくは炭素数１〜４の低級アルキル基、特にメチル基が好ましい。
一般式（Ｉ）で示されるＲ４からＲ８の一つはＣＯ２−、又はＳＯ３−であり、残りのＲ４からＲ８のうちの多くとも三つは水酸基、及び炭素数１〜４のアルコキシ基からなる群から選ばれる基、それ以外のＲ４からＲ８は水素原子を表わす。ここで、残りのＲ４からＲ８は、水酸基を含んでも含まなくてもよいが、最低１個の水酸基を含むことが好ましい。また、一般式（Ｉ'）で示されるＲ'４からＲ'８の一つはＣＯ２Ｈ、又はＳＯ３Ｈであり、残りのＲ'４からＲ'８のうちの多くとも三つは水酸基、及び炭素数１〜４のアルコキシ基からなる群から選ばれる基、それ以外のＲ'４からＲ'８は水素原子を表わし、Ｘ−は、４級アンモニウム基と塩を形成しうる陰イオンを表わす。ここで、残りのＲ'４からＲ'８は、水酸基を含んでも含まなくてもよいが、最低１個の水酸基を含むことが好ましい。
【００１０】
一般式（Ｉ）におけるＡは炭素数１〜４の直鎖状アルキル基、或いは炭素数２〜４の枝分かれしたアルキル基、又は水酸基を有する炭素数１〜４の直鎖状アルキル基、或いは炭素数２〜４の枝分かれしたアルキル基を表わす。Ａで表わされるアルキル基として、例えば、ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２等の直鎖状アルキル基、ＣＨ（ＣＨ３）、ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２、ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２等の枝分かれしたアルキル基、又はこれらのアルキル基に水酸基の置換した基が挙げられるが、これらの基のなかで、直鎖状のアルキル基が好ましく、特にＣＨ２ＣＨ２が好ましい。
上記一般式（Ｉ’）に於けるＸ−としては、通常のアンモニウム基と塩形成が可能な陰イオンであればよく、例えば、フッ素イオン、塩素イオン、臭素イオン、ヨウ素イオン等のハロゲンイオン、水酸化物イオン、有機酸のイオンとして、ギ酸アニオン、酢酸アニオン、プロピオン酸アニオン、メタンスルホン酸アニオン、ｐ−トルエンスルホン酸アニオン、シュウ酸アニオン、コハク酸アニオン、マレイン酸アニオン、フタル酸アニオン等が含まれる。また、炭酸イオン、硫酸イオン、硝酸イオン、リン酸イオン等の鉱酸類の陰イオンが挙げられる。
また、炭素原子の置換基によっては、光学活性体になるが、ここで含まれる光学活性体は、Ｒ体、Ｓ体どちらであってもよい。
【００１１】
次に、本発明の一般式（I）及び（I’）で表される化合物は、例えば以下の製造方法によって、製造することができる。
【００１２】
【化３】
2006193494.tif 000004
又は
【００１３】
【化４】
2006193494.tif 000005
（式中、Ａは炭素数１〜４の直鎖状アルキル基、炭素数２〜４の枝分かれしたアルキル基、水酸基を有する炭素数１〜４の直鎖状アルキル基、又は水酸基を有する炭素数２〜４の枝分かれしたアルキル基を表わし、Ｒ１からＲ３は、互いに同一もしくは異なった直鎖状、又は枝分れした炭素数１〜１２のアルキル基を表わし、Ｒ４からＲ８の一つはＣＯ２−、又はＳＯ３−、残りのＲ４からＲ８のうちの多くとも三つは水酸基、及び炭素数１〜４のアルコキシ基からなる群から選ばれる基、それ以外のＲ４からＲ８は水素原子を表わす。Ｒ'４からＲ'８の一つはＣＯ２Ｈ、又はＳＯ３Ｈ、残りのＲ'４からＲ'８のうちの多くとも三つは水酸基、及び炭素数１〜４のアルコキシ基からなる群から選ばれる基、それ以外のＲ'４からＲ'８は水素原子を表わし、Ｘ−は、４級アンモニウム基と塩を形成しうる陰イオンを表わす。また、Ｒ９からＲ１３の一つは、エステル基により保護されたカルボキシル基、又はスルホン酸基、残りのＲ９からＲ１３のうちの多くとも三つは保護された水酸基、及び炭素数１〜４のアルコキシ基からなる群から選ばれる基、それ以外のＲ９からＲ１３は水素原子を表わし、Ｒ１４からＲ１５は、互いに同一もしくは異なった直鎖状、又は枝分れした炭素数１〜１２のアルキル基を表す。）
【００１４】
先ず、第一工程として、上記一般式（II）で表わされる化合物と一般式（IV）
【００１５】
【化５】
2006193494.tif 000006
（IV）
（上式中の記号は前出と同じ。）
で表されるスルホン酸エステルとのアルキル化反応を行う。一般式（IV）で表される化合物としては、例えば、ＡがＣＨ２ＣＨ２である化合物を製造する場合、（２−ジメチルアミノエチル）−メタンスルホネート塩酸塩等のスルホン酸エステル類を用いる。ここで、スルホン酸エステル類としては、メタンスルホン酸エステル、エタンスルホン酸エステル、トリフロロメタンスルホン酸エステル、ベンゼンスルホン酸エステル、トルエンスルホン酸エステル、ニトロ−トルエンスルホン酸エステル類が挙げられるが、メタンスルホン酸エステルが好ましい。これらのスルホン酸エステル類は、公知の製造方法によって製造することができる。
反応は、塩基性物質の存在下に行い、使用される塩基性物質としては、通常のアルキル化反応に用いる物質が挙げられ、例えば、アルカリ金属、アルカリ金属水素化物、一般式（II）で表される化合物の種類によっては、金属アルコラート、金属水酸化物等を挙げることができる。アルカリ金属としては、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属を、また、アルカリ金属水素化物としては、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム等のアルカリ金属水素化物を、金属アルコラートとしては、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド等の金属アルコラート、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の金属水酸化物を挙げることができる。
これらの塩基性物質は、通常、反応させる化合物（II）に対し、１〜５倍モル用いることができるが、１〜３倍モルが好ましい。
【００１６】
また、本反応は、有機溶媒中で行う。使用される有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール等の低級アルコール類、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、テトラヒドロピラン、１，２−ジメトキシエタン、ビス（２−メトキシエチル）エーテル等の炭素数４〜６の環状、又は鎖状エーテル類が挙げられ、特に１，２−ジメトキシエタンが好ましい。また、アミド系有機溶媒としては、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン等の有機溶媒が挙げられる。
【００１７】
反応温度は、用いる塩基性物質、並びに反応溶媒の種類によっても異なるが、一般に−２０℃〜１２０℃、好ましくは０℃〜８０℃であり、反応時間は、通常１〜１０時間である。
同様にして、ＡがＣＨ２ＣＨ２以外の化合物についても、対応するアルキル基を有するスルホン酸エステルを用いて製造することができる。
【００１８】
次に、第二工程として、得られた化合物（III）の４級アンモニウム化反応を行う。
本反応では、４級アンモニウム系化合物を製造する通常の試薬を用いることができ、このような試薬として、例えば、例えば、ヨウ化メチル、ヨウ化エチル、臭化ブチル、臭化イソブチル、臭化ヘキシル、臭化オクチル、臭化デシル、臭化ドデシル等の直鎖状、又は枝分れした炭素数１〜１２のハロゲン化アルキルを挙げることができ、ハロゲン化物としては、塩化物、臭化物、ヨウ化物等が挙げられる。また、メタンスルホン酸メチル、メタンスルホン酸エチル、メタンスルホン酸ヘキシル、メタンスルホン酸オクチル、メタンスルホン酸デシル、トルエンスルホン酸メチル、トルエンスルホン酸エチル、トルエンスルホン酸オクチル、トルエンスルホン酸ドデシル等のスルホン酸エステル等の試薬を挙げることができる。本反応は、反応を阻害しない有機溶媒中で行うことができ、有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール等のアルコール系溶媒が挙げられる。
反応温度は、用いる塩基性物質、並びに反応溶媒の種類によっても異なるが、一般に−２０℃〜１２０℃、好ましくは０℃〜８０℃であり、反応時間は、通常１〜５時間である。
【００１９】
最後に脱保護反応を行う。Ｒ９からＲ１３の一つがエステル基により保護されたカルボキシル基の場合、有機溶媒、含水有機溶媒、或いは水中で、塩基性物質と反応させることにより行うことができる。塩基性物質としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化アルキル金属類が挙げられ、用いられる有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロパノール等のアルコール系溶媒が挙げられる。また、水酸基が保護基を有する場合、保護基は、先のアルキル化反応に影響を受けない通常の水酸基の保護基として用いられるものでよく、例えば、メチル基等の低級アルキル基、ベンジル基等のアラルキル基が挙げられる。これらの脱保護反応は、公知の方法により行うことができる。
【００２０】
更に、一般式（Ｉ）で表わされる化合物の製造には、イオン交換樹脂による処理を行う。イオン交換樹脂としては、陰イオン交換樹脂が好ましく、樹脂を円筒形のカラムに投入し、脱保護後の化合物を付し、精製水で展開し、留分を減圧下に濃縮を行う等の通常の処理法により行うことができる。
また、一般式（Ｉ'）で表わされる化合物の製造には、脱保護後の化合物に、反応容器中で酸性物質を添加し、処理することによって製造することができる。酸性物質としては、塩酸、臭化水素酸等の鉱酸、ギ酸、酢酸、シュウ酸、プロピオン酸等の有機カルボン酸類、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ニトロベンゼンスルホン酸等のスルホン酸類の酸性物質を挙げることができる。こうして得られた一般式（Ｉ'）で表わされる化合物は、通常、再結晶法による精製を行い、精製品を得ることができる。
更に、一般式（Ｉ）、又は（Ｉ'）で表される化合物のうち、Ｒ４からＲ８の一つがＳＯ３−、又はＲ'４からＲ'８の一つがＳＯ３Ｈである場合でも、同様にして製造することができる。
【００２１】
こうして得られた、本発明の一般式（Ｉ）で示される４級アンモニウム系化合物の具体例としては、例えば、以下の表１及び表２に記載の化合物が挙げられる。
但し、表中のＭｅはメチル基、Ｅｔはエチル基、Ｂｕはブチル基、Ｈｅｘはヘキシル基、Ｏｃｔはオクチル基、Ｄｏｄはドデシル基を、空欄は水素原子を表わすが、これらの記載によって、本発明にいう４級アンモニウム系化合物の範囲が限定されるものではない
【００２２】
【表１】
2006193494.tif 000007
【００２３】
【表２】
2006193494.tif 000008
【００２４】
【表３】
2006193494.tif 000009
【００２５】
本発明にいう４級アンモニウム系化合物は、一般式（I）で表される化合物、即ち分子内で塩を形成する化合物であっても、一般式（I’）で表される化合物分子間で生理学的に許容される陰イオンと塩を形成する化合物であってもよい。
【００２６】
本発明の４級アンモニウム系化合物は、極めて優れた心臓疾患治療剤として使用することができる。ここで本発明にいう心臓疾患とは、上室性期外収縮、発作性上室頻拍、発作性心房細動、慢性心房細動、心房細動、心室性期外収縮、心室性頻拍、心室細動及び房室ブロック等の不整脈、虚血性心疾患（心筋梗塞、狭心症等）に伴う不整脈、急性心筋梗塞、慢性心筋梗塞、心不全、狭心症、ウルフ−パーキンソン−ホワイト（WPW）症候群等である。
【００２７】
本発明化合物の投与法は、通常医薬品の投与法として用いられる方法であればよく、経口、或いは非経口投与のどちらでも差し支えなく、例えば、好ましい投与法の一例として、注射剤による静脈内投与が挙げられる。
かかる製剤中における本発明化合物の含有量は、その剤型に応じて異なるが、一般に０．０１〜１００重量％であることが望ましい。
本発明化合物の投与量は、対象とする人間をはじめとする温血動物の種類、症状の軽重、医師の判範断等により広範囲に変えることが出来るが、一般に有効成分として、経口投与の場合、体重１ｋｇ当たり１日に０．０１〜５０ｍｇが好ましく、特に０．０５〜１０ｍｇが好ましい。また、非経口投与の場合の投与量は、同様に、体重１ｋｇ当たり１日に０．０１〜１０ｍｇが好ましい。また、上記投与量は１日１回又は数回に分けて投与することが出来、患者の症状の軽重、医師の診断に応じて適宜変えることができる。
【実施例】
【００２８】
次に、実施例、及び参考例によって本発明を具体的に説明するが、もとより本実施例により本発明の範囲が限定されるものではない。
【００２９】
（実施例１）安全性試験
本発明化合物の安全性を確認するため表１〜３に記載された化合物３、９、２７〜３３、３９、５６、６０、６６、７１、７７について、ラット静脈内投与による安全性の確認を行い、何れの化合物でも１５０ｍｇ/ｋｇの投与で死亡例が確認されず、本発明化合物は安全性に優れていることが確認された。
【００３０】
（実施例２）モルモットのウアバイン誘発不整脈モデルによる薬効試験
本発明化合物の心臓疾患治療作用を確認するため、実施例１で用いた化合物に於いて、抗不整脈薬の薬効評価に広く用いられているウアバイン誘発不整脈モデルを用いた薬効試験（新薬開発のための動物モデル利用集成、Ｒ＆Ｄプランニング、１６６頁、１９８５年）を行なった。
モルモット（ハートレイ系、６週齢）をウレタン麻酔した後、後肢及び前肢に誘導電極を装着し、標準第二誘導での心電図を動物用心電図解析システム（ECG-01、株式会社ジャパンエナジー製）により記録、解析した。心電図の波形及び心拍数が正常の範囲内であることを確認した後、頸の表皮を切開し、気管挿管後、左の外頸静脈及び左総頸動脈にポリエチレンチューブをカニュレーションした。
右外頸静脈から注射針を用いて本発明化合物を生理的食塩水溶液として投与した直後に、左外頸静脈にカニュレーションしたポリエチレンチューブからウアバイン ３μｇ／０.１ｍｌ／分をシリンジポンプ（アトムシリンジポンプ1235、アトム株式会社製）を用いて持続投与した。
また、左総頸動脈にカニュレーションしたポリエチレンチューブを圧トランスデューサーに（P23XL、Gould Electronics）に接続し、プレッシャープロセッサーシグナルコンディショナー（Gould Electronics）に導き、サーマルアイレコーダー（TA-11、Gould Electronics）上に血圧及び心拍数を記録した。
効果の判定は不整脈の出現及び心停止が起こるまでに投与したウアバインの投与量（μｇ／ｋｇ）を比較した（抗不整脈効果が高ければ、多量のウアバインを投与しても不整脈は誘発されない）。尚、溶剤投与群（被験薬剤群と同量の生理的食塩水のみを投与）と、陽性対照群として代表的抗不整脈薬であるリン酸ジソピラミド（生理的食塩水溶液）を投与した群とを設けた。試験結果を表４に示す。
【００３１】
【表４】
2006193494.tif 000010
【００３２】
表４に示すように、本発明の溶剤投与群ではウアバインを持続注入して総投与量が１３２μｇ／ｋｇで不整脈が誘発され、引き続き１７６μｇ／ｋｇにて心停止に至った。これに対して代表的な抗不整脈薬のリン酸ジソピラミド３．９ｍｇ／ｋｇ（ジソピラミドとして３．０ｍｇ／ｋｇ）の投与によりウアバインの不整脈及び心停止誘発閾値が増加され、各々１７５μｇ／ｋｇ、２４７μｇ／ｋｇとなり、リン酸ジソピラミドには抗不整脈作用が認められた。
一方、本発明化合物の投与では、リン酸ジソピラミドと同等又はそれ以上の不整脈及び心停止誘発閾値の増加が認められた。
本実施例が示すように本発明化合物は市販の抗不整脈薬と同等以上の抗不整脈作用を有し、心臓疾患治療剤として有用である。
【００３３】
（実施例３）モルモットにおける不整脈誘発作用の検討
心臓疾患治療薬、特に抗不整脈薬は副作用として心毒性を示すものが多く、実施例２において陽性対照として使用したリン酸ジソピラミドも抗不整脈作用を有する一方で催不整脈作用を有することが知られている（医薬品要覧第５版、大阪府病院薬剤師会、５４３頁、１９９２年）。
本実施例では実施例２と同様の操作方法により、ウアバインを投与せずリン酸ジソピラミド、又は本発明化合物のみを投与して投与後１時間まで不整脈又は心停止誘発の有無を観察した。検討結果を表５に示す。
【００３４】
【表５】
2006193494.tif 000011
【００３５】
表５に示すように、リン酸ジソピラミドは１２．９ｍｇ／ｋｇ（ジソピラミドとして１０ｍｇ／ｋｇ）を投与した直後、不整脈発生を確認する間もなく心停止し、その治療量と毒性量との間は極めて狭かった。これに対して、本発明の化合物を、３又は１０ｍｇ／ｋｇを投与しても心臓に対する毒性は観察されず、有効性を示す３ｍｇ／ｋｇの約３倍量の１０ｍｇ／ｋｇでも安全であることが判明した。
【００３６】
（実施例４） イヌ虚血再潅流心筋障害モデルよる薬効試験
本発明化合物の心筋梗塞及び心筋梗塞に起因する不整脈に対する有効性を確認するため、実施例１で用いた化合物に於いて、イヌを用いた虚血再潅流心筋障害モデルによる薬効試験を行なった。
体重約１０ｋｇのイヌをペントバルビタール（３０ｍｇ／ｍｌ／ｋｇ）により麻酔し、人工呼吸を開始してから手術部位を毛刈りした。大腿静脈及び大腿動脈を剥離しカニュレーションした。大腿静脈は被験薬を投与するルートとして、大腿動脈は血圧測定用とした。
次に左胸部を開胸し心嚢膜を切開し、左心室を露出した後、左冠動脈を剥離した。冠動脈に閉塞用の絹糸を通し、血流測定用電磁流量計プローブを装着した。
また、心室壁長の変化を心筋収縮力として測定するため一対の超音波クリスタルプローブを固定し、更に左心室内圧測定用留置針を設置した。本発明化合物３ｍｇ／ｋｇ（１５％生理食塩水溶液）を大腿静脈より投与し、その１０分後から２０分間冠動脈を閉塞し、その後、冠動脈を再潅流させた。虚血再潅流前の心筋収縮力を１００として、虚血再潅流後の心筋収縮力を各群比較した。また生理食塩水のみを投与した溶剤投与群と比較した。試験結果を表６に示す。
【００３７】
【表６】
2006193494.tif 000012
【００３８】
表６に示すように、溶剤投与群（薬剤非投与群）では虚血再潅流障害により心筋収縮力が４１％に低下した。これに対して、本発明化合物の投与群では心筋収縮力は虚血前の７１〜８９％であり、明らかに虚血再潅流心筋障害を低減した。本実験モデルは心筋梗塞に伴う心筋障害及び、臨床上問題となっている心筋領域への血流再潅流時における心筋障害の実験モデルであり（新薬開発のための動物モデル利用集成、Ｒ＆Ｄプランニング、１６７頁、１９８５年）、本実施例から本発明化合物は心筋梗塞及び心筋梗塞に伴う心筋障害の治療に有用な心臓疾患治療剤であることが明らかとなった。
【００３９】
（実施例５） ラット虚血再潅流心筋障害モデルよる薬効試験
実施例１で用いた化合物に於いて、ラットを用いた虚血再潅流心筋障害モデルによる薬効試験を行なった。
５５ｍｇ／ｋｇのペントバルビタールナトリウム腹腔内投与による麻酔下に背位に保定し、頸部を切開し気管内に人工呼吸用のチューブを挿入し、人工呼吸器（SN-480-7、シナノ）を稼働させた（１.５ｍL／１００ｇ：５０回／分）。血圧は、左大腿動脈に血圧測定用のカニューレを挿入し、圧トランスジューサー（TP-400T、日本光電）及び圧ひずみ計（AP-601G、日本光電）を介して測定した。
また薬剤投与用のカニューレを左大腿動脈に挿入し、第II誘電心電図は電極を前肢、後肢に付け心電計（JB-101J、AB-651J、日本光電）を介し測定した。心拍数は脈圧の波形から心拍計（AT-601G、日本光電）により測定し、体温は保温用マットを用いて３６.５±０.５℃に維持した。
次に第五肋間を開胸し心嚢膜を切開し心臓を露出させ、リング付きピンセットを用いて心臓を胸腔外に出し、糸付き縫合針を肺動脈円錐の筋肉内に刺し込み左冠動脈下行肢の下をくぐらせて糸を通し、直ちに心臓を胸腔内に戻した。この糸をポリエチレンチューブの中に通し結紮の準備をした。
約２０分間血圧及び心拍数が安定するのを確認後、被験物質を静脈内投与した。５分後、ポリエチレンチューブを絞り込みモスキート鉗子で固定し冠動脈を５分間結紮した。結紮後血液を再通過させ、５分間における心室頻拍、及び心室細動の発現を測定し、死亡例の有無を観察した。ラットは１群８匹用い、本発明化合物、リドカインは、ラット体重１ｋｇ当り３ｍｇ（２ｍL）、コントロール群である生理的食塩水は２mＬ投与した。試験結果を表７に示す。
【００４０】
【表７】
2006193494.tif 000013
【００４１】
表７に示すように、溶剤投与群（薬剤非投与群）では虚血再潅流障害により心室頻拍、心室細動が１００％出現し、死亡率も８７．５％と高率であった。また、陽性対照であるリドカイン投与群においては、各々６２．５％、１２．５％、１２．５％と抑制効果が見られた。
これに対して、本発明化合物の投与群には、陽性対照であるリドカイン投与群と同等、又はそれ以上の効果が確認され、本実施例より本発明化合物は心筋梗塞及び心筋梗塞に伴う心筋障害の治療に有用な心臓疾患治療剤であることが明らかである。
【００４２】
（実施例６）（５％散剤）
表１に示す化合物２７の結晶５０ｍｇを乳鉢で粉砕し、それに乳糖９５０ｍｇを添加し、乳棒で粉砕しながら、充分混合し、５％散剤とした。
【００４３】
（実施例７）（１０％顆粒）
乳鉢内で、３００ｍｇの表１に示す化合物２７を３００ｍｇのでんぷんと混合粉砕した。これに２０００ｍｇの乳糖、３７０ｍｇのでんぷんを加え混合した。別にゼラチン３０ｍｇに精製水１ｍｌを加えて、加熱溶解し、冷後かき混ぜながらこれにエタノール１ｍｌを加え、ゼラチン液としたものを調製し、先の混合物にゼラチン液を添加練合し、造粒した後、乾燥して整粒した。
【００４４】
（実施例８）（０．１％注射剤）
１０ｍｇの表１に示す化合物３１を、全量が１０ｍｌになるように注射用蒸留水に溶解し、無菌的にアンプルに充填した。