(57)【要約】  【課題】使用感の良い、炎症抑制剤を提供する。  【解決手段】ピロリドンカルボン酸亜鉛塩を含有することを特徴とする皮膚の炎症抑制剤を提供し、更に、当該炎症抑制剤を含有することを特徴とする化粧料を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ピロリドンカルボン酸亜鉛塩を含有することを特徴とする炎症抑制剤
【請求項２】
ピロリドンカルボン酸亜鉛塩を含有することを特徴とする皮膚炎症抑制剤
【請求項３】
ピロリドンカルボン酸亜鉛塩が、L体又はDL体のいずれかである、請求項２記載の皮膚炎症抑制剤。
【請求項４】
請求項２又は３のいずれかに記載の皮膚炎症抑制剤を含有してなることを特徴とする皮膚炎症性疾患の予防または治療剤
【請求項５】
皮膚炎症性疾患が紫外線誘起疾患であることを特徴とする請求項４に記載の予防または治療剤
【請求項６】
請求項２又は３のいずれか1項に記載の炎症抑制剤から選ばれる一種または二種以上を有効成分として含有する化粧料または皮膚外用剤を皮膚に塗布することを特徴とする紫外線により促進される皮膚の加齢による変化あるいは皮膚の美容上好ましくない変化を予防し、遅延させ、改善しまたは治療するための方法
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は炎症性疾患または、炎症に起因する皮膚の損傷や疾病を予防し、遅延させ、改善しまたは治療するのに有用な炎症抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の炎症を引き起こす要因としては、細菌やウイルスのような感染性物質、アレルギー反応を生じさせる抗原性物質、組織の損傷を引き起こす刺激因子、皮膚ガンを引き起こしたり、皮膚の老化を促進する紫外線などがある。これらの要因により、皮膚はさまざまな損傷を受けるが、その原因になっている過度の炎症反応を抑えることは、皮膚の損傷を軽減することにつながる。
【０００３】
近年、皮膚の炎症の作用機序に関する研究が進んできたが、その要因として例えばIL-1αやTNFαといった炎症性サイトカインや、コラゲナーゼ等の細胞外マトリクス分解酵素が関与していることが明らかになってきた。このようなサイトカインや細胞外マトリクス分解酵素の発現は、NF-κBやAP-1といった転写調節因子によって遺伝子レベルで制御されている。例えば、太陽光に含まれる紫外線が皮膚にあたると、皮膚細胞のNF-κBやAP-1が活性化され、それが皮膚の老化促進の原因であることが報告されている。（例えば、非特許文献１）従って、これらの炎症性因子を抑制できれば、さまざまな要因で起こる皮膚の障害を軽減できることが期待される。
【０００４】
皮膚の損傷の原因になる炎症性因子を抑制する物質として、さまざまなものが報告されている。例えば、Ｎ−アセチル−Ｌ−システインのような抗酸化物質が、表皮細胞のNF-κBやAP-1活性化を抑制することが示されている。（例えば、非特許文献、非特許文献３）しかしながら、その有効濃度は10mM〜30mMで効果の程度が不十分、あるいは細胞に対する毒性が強いなどの問題があった。Ｎ−アセチル−Ｌ−システインの他には、レチノイン酸によるAP-1活性化ならびに細胞外マトリクス分解酵素発現の抑制（例えば、非特許文献４）が報告されている。しかしながら、レチノイン酸には刺激性や皮膚剥離などの副作用があり、それらの使用には制限がある。紫外線による皮膚傷害の抑制に関しては、アミノ酸の亜鉛塩や脂肪酸の亜鉛塩が、皮膚の内因性抗酸化物質であるメタロチオネインを誘導することにより、これを抑制することが知られている（例えば、特許文献１、２）。しかし、これらの化合物は、水にも油性成分にも難溶で、化粧品や皮膚外用剤の成分として用い難く、その効果は不十分である。また、これらの物質が紫外線による炎症の大きな要因であるAP-1などの遺伝子転写因子の活性化を抑制することも報告されていない。亜鉛関連物質として、酸化亜鉛がおむつかぶれを抑制することが報告されている（例えば、非特許文献５）が、この化合物も水にも油性成分にも難溶で、化粧品や皮膚外用剤の成分として用い難い上、その効果は不十分である。一方酢酸亜鉛のような水溶性亜鉛塩は、例えば、血管内被細胞を亜鉛欠乏下で培養した際に上昇するAP-1活性を抑制することにより、動脈硬化を防止する可能性があることが報告されている（非特許文献６）が、皮膚の炎症を抑制することは知られていない。
【特許文献１】国際公開パンフレットＷＯ００／４４３４１
【特許文献２】国際公開パンフレットＷＯ９３／１４７４８
【非特許文献１】Nature、379巻、335〜339頁、1996年
【非特許文献２】Free Rad. Biol. Med. 26巻  174-183頁、１９９９年
【非特許文献３】FEBS Letters, 384巻、92〜96頁、1996年
【非特許文献４】Nature、379巻、335〜339頁、1996年
【非特許文献５】Eur. Acad. Dermatol. Veneol. 15(Suppl.1) 5-11頁、2001年
【非特許文献６】J Am. Clloge Nutrt. 16(5) 411-417頁、1997年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上記の背景技術をもとに、本発明の目的は、細胞外マトリクス分解酵素の遺伝子転写因子の活性化を抑制することにより、皮膚の炎症性障害を予防し、改善し、または治療する炎症抑制成分を有効性分とする炎症抑制剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意検討を重ねた結果、ピロリドンカルボン酸亜鉛塩のような水溶性亜鉛塩が細胞外マトリクス分解酵素の遺伝子転写因子の活性化を抑制することを見出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明は、ピロリドンカルボン酸(PCA)の亜鉛塩を有効性成分として含有することを特徴とする炎症抑制剤、好ましくは皮膚の炎症抑制剤に関し、以下の内容を含むものである。
（１）ピロリドンカルボン酸亜鉛塩を含有することを特徴とする炎症抑制剤
（２）ピロリドンカルボン酸亜鉛塩を含有することを特徴とする皮膚炎症抑制剤
（３）ピロリドンカルボン酸亜鉛塩が、L体又はDL体のいずれかである、（２）の皮膚炎症抑制剤。
（４）前記（２）又は（３）記載の皮膚炎症抑制剤を含有してなることを特徴とする皮膚炎症性疾患の予防または治療剤
（５）皮膚炎症性疾患が紫外線誘起疾患であることを特徴とする（４）に記載の予防または治療剤
（６）前記（１）乃至（３）のいずれか1に記載の炎症抑制剤から選ばれる一種または二種以上を有効成分として含有する化粧料または皮膚外用剤を皮膚に塗布することを特徴とする紫外線により促進される皮膚の加齢による変化あるいは皮膚の美容上好ましくない変化を予防し、遅延させ、改善しまたは治療するための方法
【発明の効果】
【０００８】
本発明により、化粧料等に好適に使用可能な、炎症抑制剤が得られる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明の詳細を説明する。
まず、本発明に係わる化合物の具体例を説明する。本発明に用いられるピロリドンカルボン酸亜鉛塩（以下「PCA亜鉛塩」）としては、L-PCA亜鉛塩やDL-PCA亜鉛塩を用いることができる。これらを単独あるいは混合して用いることが可能であり、DL体を用いる場合、D体とＬ体の比率は特に限定されない。本発明のPCA亜鉛塩を炎症性皮膚疾患、炎症性皮膚損傷の予防や改善の有効成分として、化粧料や皮膚外用剤に配合する場合は、その配合量を０．０１％〜１０重量％、好ましくは、０．１％〜５重量％とすることができる。０．０１重量％未満の配合では炎症抑制能が十分発揮されず、また１０％を超える配合量では皮膚に対してきしみ感が生じるなど使用感に問題があり、いずれも好ましくない。PCA亜鉛塩を化粧料や皮膚外用剤に配合するとき、これらの成分以外に、一般に化粧料あるいは皮膚外用剤として使用される成分を本発明の効果を阻害しない範囲で添加することができる。
【００１０】
一般に化粧料あるいは皮膚外用剤に使用されている成分としては、抗酸化剤、抗炎症剤、紫外線吸収剤、美白剤、細胞賦活剤、保湿剤、金属キレート剤、油性原料、界面活性剤、溶剤、高分子物質、粉体物質、色素類、香料、経皮吸収促進剤及びステロイドホルモン等を挙げることができる。
【００１１】
上記ＰＣＡ亜鉛塩を含有する化粧料あるいは皮膚外用剤の剤型には特に制限はなく、溶液状、ペースト状、ゲル状、固体状、粉末状等任意の剤型をとることができる。また、本発明の化粧料或いは皮膚外用剤は、オイル、ローション、クリーム、乳液、ゲル、シャンプー、ヘアリンス、ヘアコンディショナー、エナメル、ファンデーション、リップスティック、おしろい、パック、軟膏、錠剤、注射液、顆粒、カプセル、香水、パウダー、オーデコロン、歯磨、石鹸、エアゾル、クレンジングフォーム等の他、皮膚老化防止改善剤、皮膚炎症防止改善剤、浴用剤、養毛剤、皮膚美容液、日焼け防止剤、色素性乾皮症・日光蕁麻疹等の光線過敏症の防止改善剤、光アレルギーの防止改善剤、光免疫抑制の防止改善剤あるいは、外傷・あかぎれ・ひびわれ等による肌荒れの防止改善剤、消毒剤、抗菌剤、殺虫剤、害虫駆除剤、角質溶解剤、表皮剥離剤、ニキビの防止改善剤、角化症・乾皮症・魚鱗癬・乾癬等の各種皮膚疾患の防止改善剤等に用いることができる。
【００１２】
更に化粧料または皮膚外用剤におけるその他の常用成分を、上記成分ＰＣＡ亜鉛塩を含有する化粧料あるいは皮膚外用剤に本発明の効果を阻害しない範囲で添加することができる。化粧料または皮膚外用剤におけるその他の常用成分としては、防腐剤、褪色防止剤、緩衝剤、にきび用薬剤、ふけ・かゆみ防止剤、制汗防臭剤、熱傷用薬剤、抗ダニ・シラミ剤、角質軟化剤、乾皮症用薬剤、抗ウイルス剤、ホルモン類、ビタミン類、アミノ酸・ペプチド類、タンパク質類、収れん剤、清涼・刺激剤、動植物由来成分、抗生物質、抗真菌剤、育毛剤等を挙げることができる。
【実施例】
【００１３】
以下、本発明を実施例（合成例、試験例および配合例）により更に具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。尚、これらの実施例において、配合量は重量％で表した。
【００１４】
実施例１．合成例PCA亜鉛塩の合成及び、比較物質の合成
DL-PCA亜鉛塩は特許（特開平３−１６８２４０）記載の方法に準じ、DL-PCAと酸化亜鉛を水中１００℃で２時間反応させた後、室温下５時間攪拌を続け、析出した結晶をろ別することにより合成した。L-PCA亜鉛塩は以下の方法で合成した。オートクレーブ中にて、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム１水和物（６１．１ｇ）の水溶液を１８０℃で２時間加熱し、５０ｗｔ％のピロリドンカルボン酸ナトリウム塩溶液を得た。５０ｗｔ％のピロリドンカルボン酸ナトリウム塩溶液１００．０ｇ（0.33 mol, pH 7.7, 光学純度 84%, L/D 比率=92/8) に、硝酸（純度 60 wt%）２．７ｇを添加し、ｐＨ５．２に調整した。硫酸亜鉛７水和物４７．６ｇ（０．１７ｍｏｌ）を水３４．２ｇに溶解した水溶液を、ピロリドンカルボン酸ナトリウム塩溶液（ｐＨ４．１）に添加した。この溶液を３０分間室温（ｐＨ３．７）で結晶を得るまで混和し、ろ過した。得られた結晶は水（２１．９ｇ）で洗浄し、３２．０ｇ（０．０９ｍｏｌ、収率５５％）のピロリドンカルボン酸亜鉛二水和物を得た。光学純度は９９．８％（Ｌ／Ｄ比率９９．９／０．１）であった。
比較物質であるグリシン亜鉛塩は市販品（東京化成）を用いた。ラウリン酸亜鉛塩は以下の方法にて合成した。ラウリン酸250mg(1.25mmole)を10mlのエチルアルコールに溶解し、これとは別に１％の酢酸亜鉛（和光純薬）エタノール溶液を調製した。この1%酢酸亜鉛15.1ml（酢酸亜鉛  0.69mmole,ラウリン酸に対して0.55当量）を、先に調製したラウリン酸エタノール溶液10mlに加え、生成した沈殿をろ別した。得られた沈殿を水、エタノール、アセトンで洗浄後減圧乾燥し、ラウリン酸亜鉛塩200mgを得た。
【００１５】
試験例１．  紫外線によるAP-1活性化に対するPCA亜鉛塩の作用
培養プレート内でコンフルエントに達したヒト真皮繊維芽細胞に損傷を与えない濃度範囲で被験化合物を添加して１８時間経過後、培養液をフェノールレッド不含培地に置換した。デルマレイＭ−ＤＭＲ−８０（東芝医療用品社製）を用いて細胞に紫外線（ＵＶA：２０J/cm２）を照射した。４〜５時間経過後、細胞を回収し、常法により核蛋白質を抽出した。得られた核蛋白質についてゲルシフトアッセイ法または、酵素抗体法(TransAM Kit ACTIVE MOTIF社)により活性化されたAP-1を検出した。ゲルシフトアッセイ法においては、バイオイメージングアナライザーＢＡＳ２０００（富士フィルム社製）を用いて、AP-1バンドの放射活性値を測定することにより、AP-1の定量を行った。
被験化合物のAP-1活性化抑制率は次式により算出した。
AP-1活性化抑制率(%) = {１−（Ａ１−Ａ３）/（Ａ２−Ａ３）} x 100
Ａ１：被験化合物添加時のAP-1バンドの放射活性値
Ａ２：被験化合物未添加時のAP-1バンドの放射活性値
Ａ３：被験化合物未添加で紫外線照射も行わなかった時のAP-1バンドの放射活性
酵素抗体法はキットのマニュアルどおりの方法で、活性化されたAP-1をc-Junまたは、c-Fosを定量することにより求めた。
被験化合物のAP-1（c-Junまたは、c-FOS）活性化抑制率は次式により算出した。
AP-1活性化抑制率(%) = {１−（Ｂ１−Ｂ３）/（Ｂ２−Ｂ３）} x 100
Ｂ１：被験化合物添加時の450nmの吸光度  （核内蛋白量あたり）
Ｂ２：被験化合物未添加時の450nmの吸光度（核内蛋白量あたり）
Ｂ３：被験化合物未添加で紫外線照射も行わなかった時の450nmの吸光度（核内蛋白量あたり）
【００１６】
本発明に係わる被験化合物と比較化合物の結果を下記表１〜３に示す。被験物質であるDL-PCA亜鉛塩および、L-PCA亜鉛塩は、皮膚のメタロチオネインを誘導することによる紫外線防御作用が知られているグリシンのようなアミノ酸の亜鉛塩（例えば、ＷＯ９３／１４７４８）やラウリン酸のような脂肪酸の亜鉛塩（例えば、ＷＯ００／４４３４１）に比べ高い抑制率を示した。これらの結果は本発明に係わる化合物が、紫外線に対する皮膚の防御作用が知られている既知のアミノ酸亜鉛や脂肪酸亜鉛にはない、高い炎症抑制作用を有することを示している。
【００１７】
【表１】
2006022090.tif 000002
【００１８】
【表２】
2006022090.tif 000003
【００１９】
2006022090.tif 000004
【００２０】
種々の製剤の配合例１〜１６を次に示す。これらの製剤は常法に従い調製した。尚、配合量は重量％で表した。
【００２１】
配合例１  軟膏
L-PCA亜鉛塩                                                            １．０％
塩化ベンザルコニウム                                                   ０．１％
尿素                                                                 ２０．０％
白色ワセリン                                                         １５．０％
軽質流動パラフィン                                                     ６．０％
セタノール                                                             ３．０％
ステアリルアルコール                                                   ３．０％
モノステアリン酸グリセリル                                             ５．０％
香料                                                                       適量
防腐剤                                                                     適量
緩衝剤                                                                 １．０％
精製水                                                                     残部
【００２２】
配合例２  化粧水
L-PCA亜鉛塩                                                             ３．０％
グリコール酸                                                            ５．０％
グリセリン                                                              ３．０％
ソルビトール                                                            ２．０％
ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテル                              １．０％
エタノール                                                            １５．０％
パラフェノールスルホン酸亜鉛                                            ０．２％
緩衝剤                                                                  ０．１％
香料                                                                    ０．２％
防腐剤                                                                      適量
精製水                                                                      残部
【００２３】
配合例３  化粧水
DL-PCA亜鉛塩                                                           ０．５％
クエン酸                                                               １．０％
尿素                                                                    ４．０％
サリチル酸                                                              ２．０％
乳酸                                                                    ２．０％
グリセリン                                                              ２．０％
ベタイン                                                                ２．０％
ヒアルロン酸                                                            ０．１％
エタノール                                                            １５．０％
緩衝剤                                                                  ０．１％
香料                                                                    ０．２％
防腐剤                                                                      適量
精製水                                                                      残部
【００２４】
配合例４  ローション
L-PCA亜鉛塩                                                             ０．５％
乳酸                                                                    ０．１％
フルーツ酸                                                              ０．１％
グリセリン                                                              ４．０％
カオリン                                                                １．０％
カラミン                                                                ０．７％
カンフル                                                                ０．２％
エタノール                                                            １４．０％
香料                                                                        適量
精製水                                                                      残部
【００２５】
配合例５  クリーム
L-PCA亜鉛塩                                                            １．０％
レゾルシノール                                                         ０．１％
コウジ酸                                                               １．０％
ステアリン酸                                                           ２．０％
ポリオキシエチレン（２５）セチルエーテル                               ３．０％
モノステアリン酸グリセリル                                             ２．０％
オクチルドデカノール                                                 １０．０％
セタノール                                                             ６．０％
還元ラノリン                                                           ４．０％
スクワラン                                                             ９．０％
１，３−ブチレングリコール                                             ６．０％
ポリエチレングリコール（１５００）                                     ４．０％
防腐剤                                                                      適量
香料                                                                        適量
精製水                                                                      残部
【００２６】
配合例６  クリーム
DL-PCA亜鉛塩                                                           １．０％
グリコール酸                                                           ２．０％
固形パラフィン                                                         ５．０％
ミツロウ                                                             １０．０％
ワセリン                                                             １５．０％
流動パラフィン                                                       ４１．０％
１，３−ブチレングリコール                                             ４．０％
モノステアリン酸グリセリン                                             ２．０％
モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０）                     ２．０％
ホウ砂                                                                 ０．２％
防腐剤                                                                      適量
香料                                                                        適量
酸化防止剤                                                                  適量
精製水                                                                      残部
【００２７】
配合例７  乳液
L-PCA亜鉛塩                                                            １．０％
乳酸                                                                   ２．０％
ステアリルアルコール                                                   ０．５％
硬化パーム油                                                           ３．０％
流動パラフィン                                                       ３５．０％
ジプロピレングリコール                                                 ６．０％
ポリエチレングリコール（４００）                                       ４．０％
セスキオレイン酸ソルビタン                                             １．６％
ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテル                             ２．４％
カルボキシビニルポリマー                                               １．５％
水酸化カリウム                                                         ０．１％
キレート剤                                                                  適量
防腐剤                                                                      適量
香料                                                                        適量
精製水                                                                      残部
【００２８】
配合例８  美容液
L-PCA亜鉛塩                                                            ０．５％
フルーツ酸                                                             ０．５％
ジプロピレングリコール                                                 ５．０％
ポリエチレングリコール（４００）                                       ５．０％
エタノール                                                           １０．０％
カルボキシビニルポリマー                                               ０．５％
アルギン酸ナトリウム                                                   ０．５％
水酸化カリウム                                                         ０．２％
モノステアリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン                   １．０％
モノオレイン酸ソルビット                                               ０．５％
オレイルアルコール                                                     ０．５％
プラセンタエキス                                                       ０．２％
酢酸ｄｌ−α−トコフェロール                                           ０．２％
香料                                                                        適量
防腐剤                                                                      適量
褪色防止剤                                                                  適量
精製水                                                                      残部
【００２９】
配合例９  パック
DL-PCA亜鉛塩                                                           ３．０％
イソプロパノール                                                       ２．０％
ポリビニルアルコール                                                 １５．０％
カルボキシメチルセルロース                                             ５．０％
１，３−ブチレングリコール                                             ５．０％
エタノール                                                           １２．０％
ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテル                             ０．５％
香料                                                                        適量
防腐剤                                                                      適量
緩衝剤                                                                      適量
精製水                                                                      残部
【００３０】
配合例１０  ファンデーション
DL-PCA亜鉛塩                                                           ５．０％
サリチル酸                                                             ０．５％
流動パラフィン                                                       １０．０％
モノオレイン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン                     ３．５％
プロピレングリコール                                                   ３．０％
酸化チタン                                                             ９．０％
カオリン                                                             ２４．０％
タルク                                                               ４２．０％
着色顔料                                                               ３．０％
香料                                                                        適量
防腐剤                                                                      適量
酸化防止剤                                                                  適量
【００３１】
配合例１１  液体ハンドソープ
L-PCA亜鉛塩                                                             ５．０％
ラウリル硫酸ナトリウム                                                ３０．０％
ベタイン                                                                ３．０％
グリセリン脂肪酸エステル                                                １．０％
フェノキシエタノール                                                    １．０％
ＥＤＴＡ                                                                ０．１％
精製水                                                                      残部
【００３２】
配合例１２シャンプー
DL-PCA亜鉛塩                                                            ０．１％
ポリオキシエチレン（３）ラウリルエーテル硫酸トリエタノールアミン        ３．０％
ポリオキシエチレン（３）ラウリルエーテル硫酸ナトリウム                  ６．０％
ラウリル硫酸ナトリウム                                                  １．５％
ラウリン酸ジエタノールアミド                                            ３．０％
ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン                                      ２．５％
カチオン化セルロース                                                    ０．２％
ジステアリン酸エチレングリコール                                        ２．０％
香料                                                                        適量
防腐剤                                                                      適量
キレート剤                                                                  適量
緩衝剤                                                                      適量
精製水                                                                      残部
【００３３】
配合例１３  毛髪用化粧水
DL-PCA亜鉛塩                                                            １．０％
乳酸                                                                  ０．０２％
オレイルアルコール                                                      ０．２％
流動パラフィン                                                          ０．５％
エタノール                                                              ５．０％
ソルビトール                                                            ４．０％
ポリオキシエチレン（２０）ラウリルエーテル                             ２．５％
モノラウリン酸ソルビタン                                                ０．５％
色素                                                                    ０．１％
防腐剤                                                                  ０．１％
香料                                                                    ０．１％
精製水                                                                      残部
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明は、化粧品の分野において利用可能である。