(57)【要約】【課題】  安全で副作用のない鎮痛用組成物を提供すること。【解決手段】  血液・脳関門を通過するアミノ酸であるテアニンをそのまま、或いはテアニンと他のアミノ酸とから構成されるジペプチドの投与により、疼痛を軽減することができる。また、この組成物は、飲食品または医薬品に含有させることができる。【選択図】            なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液・脳関門を通過するアミノ酸および／または血液・脳関門を通過するアミノ酸を含むペプチドを有効成分とする鎮痛用組成物。
【請求項２】
請求項１記載のアミノ酸が、テアニンであることを特徴とする鎮痛用組成物。
【請求項３】
請求項１記載のペプチドが、（Ａ）テアニンと、（Ｂ）テアニン、グルタミン、アラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、アルギニン、及びシステインから選ばれる１種類のアミノ酸とから構成されるジペプチドであることを特徴とする鎮痛用組成物。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載の組成物を含有する飲食品および医薬品。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれかに記載の組成物を含有する錠剤を製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液・脳関門を通過するアミノ酸であるテアニンおよび／またはテアニンを含むジペプチドを有効成分とする鎮痛用組成物に関する。また、その鎮痛用組成物の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
痛みとは、体が苦しいという感覚であり、不快、苦痛、もだえ苦しみの原因となる。痛みは、持続痛、あるいは拍動痛であることもある。また、刺すような痛み、うずくような痛み、締め付けられるような痛みであることもある。どのように痛みが感じられても、痛みを描写したり定義できるのは、痛みを経験した人しかいない。痛みは、そのくらい個人差があるため、真に、第三者によって評価されることができないものである。
【０００３】
痛みは、臨床上、急性痛と慢性痛（持続痛）に分類される。急性痛は、創傷・炎症などの特定の原因により発生するもので、従来の鎮痛剤はいずれも急性痛を対照として開発され、臨床に応用されたものである。一方、慢性痛は、急性痛の原因になった創傷などが治った後も、数ヶ月或いは何年にも渡って、痛みが持続するものである。慢性痛に対しては、従来の鎮痛剤は必ずしも有効ではなく、病態に応じて各種の薬剤（抗不安薬、抗けいれん薬など）が使用されている。しかしながら、慢性痛を治癒するための決め手になる薬剤はないというのが実情である（非特許文献１）。
【０００４】
現存の鎮痛剤は２つのカテゴリーに分類することができる。一方は、例えばモルヒネ(morphine)、コデイン(codeine)及びジヒドロコデイン(dihydrocodeine)のような麻薬性鎮痛剤(narcotic analgesics)であり、他方は例えばアスピリン(aspirin)、イブプロフェン(ibuprofen)のような非ステロイド系抗炎症剤(NSAIDSs : non-steroidal anti-inflammatory drugs)である。
麻薬性鎮痛剤は、中枢神経系の受容体に作用して軽痛及び激痛の両者を緩和する。疼痛の度合いに依存して用量を増加させて使用され、鎮痛効果は卓越である。しかしながら、麻薬性鎮痛剤の効果は実際上用量依存性であり、鎮痛剤に対する耐性が生じる。最悪の場合には、場合によっては呼吸器及び循環器の機能低下と云う副作用を生じ、また中毒性もあることが知られている。
【０００５】
【非特許文献１】高木博司、急性痛および慢性痛の薬理、日本医師会雑誌１０４号、第１号、第３７−４１頁、１９９０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、上記した事情に鑑みてなされたものであり、その目的は、依存性や耐性を発現しない安全で副作用のない鎮痛用組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、上記問題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、血液・脳関門を通過するアミノ酸の一種であるテアニン、および血液・脳関門を通過するアミノ酸の一種であるテアニンを含むペプチドが鎮痛作用を有することを見出し、基本的には本発明を完成するに至った。
テアニンは、茶に含まれるアミノ酸であり副作用は認められないことに加え、即効性の効果がある。本発明の組成物に関する上記効果は、本発明者らが初めて見出した新規効果である。
【０００８】
すなわち、本発明は次の（１）〜（５）である。
（１）血液・脳関門を通過するアミノ酸および／または血液・脳関門を通過するアミノ酸を含むペプチドを有効成分とする鎮痛用組成物。
（２）前記（１）記載のアミノ酸が、テアニンであることを特徴とする鎮痛用組成物。
（３）前記（１）記載のペプチドが、（Ａ）テアニンと、（Ｂ）テアニン、グルタミン、アラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、アルギニン、及びシステインから選ばれる１種類のアミノ酸とから構成されるジペプチドであることを特徴とする鎮痛用組成物。
（４）前記（１）〜（３）のいずれかに記載の組成物を含有する飲食品および医薬品。
（５）前記（１）〜（３）のいずれかに記載の組成物を含有する錠剤を製造する方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、依存性や耐性を発現しない安全で副作用のない鎮痛用組成物、及びこの組成物を含有する飲食品、医薬品を提供することが可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
次に、本発明の実施形態について、詳細に説明するが、本発明の技術的範囲は、これらの実施形態によって限定されるものではなく、発明の要旨を変更することなく様々な形態で実施することができる。また、本発明の技術的範囲は、均等の範囲にまで及ぶものである。
本発明における血液・脳関門とは、血液と脳の間にある関所のように血液中の物質を無作為に脳に通さない仕組みである。アミノ酸には血液・脳関門を選択的に通過するものがあり数種の輸送系が存在する。本発明に用いるアミノ酸とは、血液・脳関門を通過するアミノ酸であり、特にＬ系を介して輸送されるアミノ酸である。Ｌ系を介して輸送されるアミノ酸には、フェニルアラニン、チロシン、ロイシン、イソロイシン、バリン、ヒスチジン、メチオニン、スレオニン、テアニンなどの長鎖の中性アミノ酸である。
【００１１】
本発明に用いられるテアニンとは、茶の葉に含まれているグルタミン酸誘導体で、茶の旨味の主成分であって、呈味を用途とする食品添加物として使用されている。本発明に用いられるテアニンの製造法としては、茶葉から抽出する方法、有機合成反応させてテアニンを得る方法（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１９（７）１３０１−１３０７（１９７１））、グルタミンとエチルアミンの混合物にグルタミナーゼを作用させてテアニンを得る方法（特公平７−５５１５４号）、エチルアミンを含有する培地で茶の培養細胞群を培養し、培養細胞群中のテアニン蓄積量を増加させつつ培養細胞群の増殖促進を図る方法（特開平５−１２３１６６号）、エチルアミンをエチルアミン塩酸塩などのエチルアミン誘導体に置き換えて、テアニンを得る方法（特開２０００−０２６３８３号）などがありいずれの方法でも良い。ここでいう茶葉とは、緑茶、ウーロン茶、紅茶などがあげられる。このような方法により得られたテアニンは、Ｌ−体、Ｄ−体、ＤＬ−体いずれも使用可能であるが、中でもＬ−体は、食品添加物にも認められており、経済的にも利用しやすいため、本発明においては、Ｌ−体が好ましい。
【００１２】
また、本発明に用いるテアニンは、精製品（テアニン含量９８％以上）、粗精製品（テアニン含量５０％〜９８％）、抽出エキス（テアニン含量１％〜５０％）などのいずれの形状でも良い。
本発明に用いられるテアニンの安全性は高く、たとえば、マウスを用いた急性毒性試験において５ｇ／ｋｇ経口投与で死亡例がなく、一般状態および体重などに異常は認められない。また、特にテアニンは茶のうまみ成分として知られているものであり、呈味を用途とする食品添加物としても使用され、食品衛生法上、その添加量に制限はない。
【００１３】
本発明におけるペプチドとは、二個以上のアミノ酸がペプチド結合（アミド結合とも呼ぶ）によって縮合してできた化合物のことである。多数のアミノ酸からなるものはポリペプチドといい、タンパク質は一または数個のポリペプチドからなる。ペプチドの加水分解により、もとのアミノ酸が生成する。また、ジペプチドとは、２つのアミノ酸がペプチド結合したペプチドである。ジペプチドの製法は、特に限定されないが化学合成、酵素合成、たんぱく質の加水分解によって生成できる。
【００１４】
本発明におけるジペプチドとは、テアニルテアニン、テアニルグルタミン、グルタミニルテアニン、テアニルアラニン、アラニルテアニン、テアニルアスパラギン、アスパラギニルテアニン、テアニルグルタミン酸、グルタミルテアニン、テアニルアスパラギン酸、アスパルチルテアニン、テアニルグリシン、グリシルテアニン、テアニルヒスチジン、ヒスチジルテアニン、テアニルイソロイシン、イソロイシルテアニン、テアニルロイシン、ロイシリルテアニン、テアニルリジン、リジルテアニン、テアニルメチオニン、メチオニルテアニン、テアニルフェニルアラニン、フェニルアラニルテアニン、テアニルプロリン、プロリルテアニン、テアニルセリン、セリルテアニン、テアニルスレオニン、スレオニルテアニン、テアニルトリプトファン、トリプトファニルテアニン、テアニルチロシン、チオシニルテアニン、テアニルバリン、バリルテアニン、テアニルアルギニン、アルギニルテアニン、テアニルシステイン、システイニルテアニンなどが挙げられる。
【００１５】
「痛み」いわゆる疼痛とは、不快な知覚や実際の、又は潜在的な組織の障害、又は障害のような語を用いて表現される状態に伴う感情経験（Classification of Chronic Pain,2nd Edition, IASP Task Force on Taxonomy, edited by H. Merskey and N. Bogdug, IASP Press, Seattle, 1994, p209）として定義される。
急性疼痛の定義として、典型的なものは、Halpern, 1984, Advances in Pain Research and Therapy, Vol 7, Ed. C. Bendetii et al, page 47に示されるが、本発明においては、これに限定されない。例えば、自律（反射）反応が関与する不快な感覚、知覚、感情経験の型、及び傷害や、急性疾患によって引き起こされる精神的、行動的反応の類型が含まれる。組織の傷害は侵害受容器によって脊髄に伝達される活動電位に変換される一連の侵害性刺激を引き起こし、その刺激は、上位の神経系へと伝達される。急性疼痛の例としては、歯痛、術後疼痛、産科痛、神経痛、筋痛などが挙げられる。本願化合物が予防又は治療可能な急性疼痛の例として、歯痛、術後疼痛、産科痛、神経痛、筋痛、生理痛などが含まれる。特に、本願化合物は、歯科手術や陣痛を含む外科的手術に伴う急性疼痛を弱めるために手術前に投与することが可能である。
【００１６】
慢性疼痛の定義として、典型的なものは、Halpern, ibid, 1984に依れば、急性疾患の通常の経過を越える持続する痛み、又は創傷治癒の通常の経過を越える痛みとされるが、本発明においては、これに限定されない。慢性疼痛は侵害性疼痛系の持続的な機能障害の典型的な結果である。慢性疼痛の例としては、三叉神経痛、発疹後の神経痛（急性ヘルペスに引き続いて起こる皮膚に分布する皮膚変化に伴う慢性疼痛の一形態）、糖尿病性神経痛、灼熱痛、幻肢痛、頭痛、偏頭痛、関節痛、肘痛や、頚肩腕症候群、良性前立腺肥大症、頚椎核脱出症、慢性及び再発性膀胱炎、変性関節炎、リューマチ性関節炎、骨粗鬆症、臓腑痛慢性胃炎、頚椎捻挫、肩関節周囲炎、骨関節炎、及び癌などに伴う疼痛などが挙げられる。
【００１７】
鎮痛用組成物とは、疼痛の予防、又は治療のために用いられる食品および医薬を意味し、鎮痛剤、麻酔剤や、手術前、手術後の疼痛管理に用いられる医薬が含まれる。
本発明における鎮痛作用が発揮されるテアニンおよびジペプチドの投与量は症状、投与対照の年令、性別などを考慮して個々の場合に応じて適宜決定されるが、通常０.１mg/kg体重〜１０００mg/kg体重(成人当り５ｍｇ〜５００００mg)、好ましくは１mg/kg体重〜１００mg/kg体重(成人当り５０ｍｇ〜５０００mg)であり、成人１日当り５ｍｇ〜５００００mgを、１回で、あるいは２回〜４回の適宜に分けて投与してもよい。静脈内投与や、持続的静脈内投与の場合には、一日当たり１時間〜２４時間で投与しても良い。上記に示すとおり、投与量は種々の状態によって決められる。有効である場合は、上記の範囲よりも少ない投与量を用いることができる。
【００１８】
また、本発明の組成物には、生薬、ハーブ、アミノ酸、ビタミン、ミネラル、その他飲食品、医薬品に許容される素材・原料を併用することができる。ここにおいて、使用する生薬とは特に限定されるものではないが、カノコソウ、当帰、芍薬、牡丹、高麗人参などがあげられる。
ハーブとは特に限定されるものではないが、アニス、キャロットシード、クローブ、コリアンダー、サイプレス、シナモン、ジュニパー、ジンジャー、スイートオレンジ、パインニードル、バジル、パチュリ、ビターオレンジ、フェンネル、ブラックペッパー、ベイ、ペパーミント、ベルガモット、マンダリン、ミルラ、レモングラス、ローズマリー、グレープフルーツ、シダーウッド、シトロネラ、セージ、タイム、ティートゥリー、バイオレットリーフ、バニラ、ヒソップ、ユーカリ、ライム、レモン、イランイラン、カルダモン、クラリセージ、ジャスミン、ゼラニウム、カモミール、ブルガリアローズ、ローズ、オリバナム、ラベンダー、カミツレ、ゼラニウム、サンダルウッドネロリ、バーベナ、プチグレン、ベチバー、マージョラム、メリッサ、ローズウッド、オトギリソウ、セイントジョーンズワート、カワカワなどがあげられる。
【００１９】
使用するアミノ酸においては、血液・脳関門を通過するアミノ酸が挙げられる。Ｌ系を介して輸送されるアミノ酸として、フェニルアラニン、チロシン、ロイシン、イソロイシン、バリン、ヒスチジン、メチオニン、スレオニン、テアニンなどの長鎖の中性アミノ酸、また、Ａ系を介して輸送されるアミノ酸として、アラニン、グリシン、セリン、スレオニンなどの短鎖の中性アミノ酸、ＡＳＣ系を介して輸送されるアミノ酸として、アラニン、セリン、システインなどがあり、他の系により輸送されるアミノ酸には、タウリン、グルタミン酸、アスパラギン、リジン、アルギニンなどがある。
【００２０】
使用するビタミンにおいては、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、葉酸、ニコチン酸、リポ酸、パントテン酸、ビオチン、ユビキノン、プロスタグランジンなどが挙げられ、これらビタミンの誘導体も含まれるが、これらのみに限定されるものではない。
使用するミネラルにおいては、カルシウム、鉄、マグネシウム、銅、亜鉛、セレン、カリウムなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００２１】
また、その他、アロエ、ローヤルゼリー、メラトニン、プラセンタ、プロポリス、イソフラボン、大豆レシチン、卵黄レシチン、卵黄油、コンドロイチン、カカオマス、コラーゲン、酢、クロレラ、スピルリナ、イチョウ葉、緑茶、杜仲茶、黄妃茶、ウーロン茶、桑の葉、甜茶、バナバ茶、不飽和脂肪酸、糖アルコールやオリゴ糖などの糖類、ビフィズス菌や紅麹などの菌類、アガリクス茸、姫マツタケ、霊芝、マイタケなどのキノコ類、ブルーベリー、プルーン、ブドウ、オリーブ、うめや柑橘類などの果実類、落花生、アーモンド、ゴマや胡椒などの種実類、ピーマン、唐辛子、ネギ、カボチャ、ウリ、人参、ゴボウ、モロヘイヤ、ニンニク、シソ、ワサビ、トマト、らっきょ、葉菜、芋や豆などの野菜類、ワカメなどの海草類、魚介類、獣鳥鯨肉類、穀類などが使用でき、さらにこれらの抽出物、乾燥品、粗精製品、精製品、加工品、醸造品なども使用できる。
【００２２】
また、本発明品である鎮痛用組成物組成物を飲食品又は医薬品に含有させて摂取するには、本発明の組成物を含有する溶液、懸濁物、粉末、固体成形物などの形態であれば良く、特に限定するものではない。より具体的には、練り製品、大豆加工品、調味料、ムース、ゼリー、冷菓、飴、チョコレート、ガム、クラッカー、ケーキ、パン、スープ、コーヒー、ココア、緑茶、ウーロン茶、紅茶、ハーブティーなどの茶類、濃縮果汁、濃縮還元ジュース、ストレートジュース、果実ミックスジュース、果粒入り果実ジュース、果汁入り飲料、果実・野菜ミックスジュース、野菜ジュース、炭酸飲料、清涼飲料、乳飲料などの飲料、乳製品、錠剤、カプセル、医薬品、顆粒品などが挙げられる。
【００２３】
また、医薬品としての剤形は、内服薬、注射薬、貼付薬、座薬、吸入薬などが挙げられる。内服薬は、従来使用されている錠剤、カプセル、粉末剤、顆粒剤、ドリンク剤などによって摂取されるものである。注射薬は、筋肉注射、皮内注射、皮下注射、静脈注射などによって体内に注入されるものである。また、貼付薬は従来使用されている軟膏に混合することにより体内に吸収させるものである。座薬は、従来使用されるカカオ脂、グリセロゼラチン、ステアリン酸ナトリウム、プロピレングリコールモノステアレートなどと混合することにより体内に吸収させるものである。吸入薬は、従来の方法により吸入させるものであって、例えば、水蒸気又は空気の中に発明品を加えることにより鼻孔あるいは口腔より体内に吸収されるものである。
【００２４】
本発明における錠剤の製造方法は特に限定されないが、原料を混合後直接打錠する方法、原料を湿式造粒または乾式造粒後に打錠する方法などが挙げられる。また、必要に応じて結晶セルロース、糖類などの賦形剤を配合することもできる。更に打錠特性を良くするために、シュガーエステル、ポリグルタミン酸エステルなどの滑沢剤を併用することもできる。一般的に、飲食品や医薬品などに使用されている矯味剤を含有することができる。そのような矯味剤としては、各種フレーバーを用いることができるが、例としては、レモンフレーバー、オレンジフレーバー、グレープフルーツフレーバー、チョコレートフレーバー、ｄｌ−メントール、ｌ−メントールなどが挙げられる。
以下、実施例および試験例により本発明をより詳細に説明するが、本発明は当該実施例および試験例に限定するものではない。
【実施例】
【００２５】
＜実施例１＞  酵素法によるテアニンの製造
０.３Ｍグルタミン及び１.５Ｍ塩酸エチルアミンを０.０５Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ１１）中、０.３Ｕグルタミナーゼ（市販品）存在下にて、３０℃、２２時間反応させ、２２５ｎｍｏｌのＬ−テアニンを得た。次いで、反応液をＤｏｗｅｘ  ５０×８、Ｄｏｗｅｘ  １×２カラムクロマトグラフィー（共に室町化学工業（株）製）にかけ、これをエタノール処理することにより、反応液から目的物質を単離した。
【００２６】
この単離物質をアミノ酸アナライザー（日立製作所株式会社製）、及びペーパークロマトグラフィーにかけ、標準物質と同じ挙動を示すことにより、Ｌ−テアニンであることを確認した。塩酸またはグルタミナーゼで加水分解処理を行うと、１：１の割合で、グルタミン酸とエチルアミンを生じた。このように、単離物質がグルタミナーゼによって加水分解されたことから、エチルアミンがグルタミン酸のγ位に結合していたことが示された。また、加水分解で生じたグルタミン酸がＬ体であることは、グルタミン酸デヒドロゲナーゼにより確認した。以上より、８.５ｇのＬ−テアニンが得られた。
【００２７】
＜実施例２＞  テアニンの茶葉からの抽出
茶（Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ）葉１０ｋｇを熱水で抽出後、カチオン交換樹脂（室町化学工業（株）製、Ｄｏｗｅｘ  ＨＣＲ  Ｗ−２）に通し、１Ｎ  ＮａＯＨにより溶出した。溶出画分を活性炭（二村化学工業（株）製太閤活性炭ＳＧ）に通し、１５％エタノールによる溶出画分をＲＯ膜（日東電工（株）製、ＮＴＲ７２９ＨＦ）を用いて濃縮し、カラムクロマトグラフィーにて精製し、更に再結晶を行い、Ｌ−テアニン２４.８ｇを製造した。
なお、以下における各試験および各組成物の製造にはＬ−テアニン[商品名：サンテアニン、太陽化学株式会社製]を用いた。
【００２８】
＜実施例３＞  テアニン配合錠剤の製造
テアニン配合鎮痛用組成物を含有する錠剤の１例として、下表１に示す原料を混合後打錠し、テアニン配合錠剤を製造した。
【表１】
2006306811.tif 000002
すなわち、上記配合に従って各原料を混合し、造粒後に、１粒あたり０.７５ｇとなるように打錠した。
【００２９】
＜実施例４＞  テアニルテアニンの製造
０.３２Ｍ  Ｌ−テアニンを０.０５Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ１１）中、０.３Ｕグルタミナーゼ（市販品）存在下にて、３０℃、２２時間反応させ１５０ｎｍｏｎのテアニルテアニンを得た。次いで、反応液をＤｏｗｅｘ  ５０×８、Ｄｏｗｅｘ  １×２カラムクロマトグラフィー（共に室町化学工業（株）製）にかけ、反応液から目的物質を単離した。
【００３０】
＜実施例５＞  テアニルテアニン配合錠剤の製造
テアニルテアニン配合鎮痛用組成物を含有する錠剤の１例として、下表２に示す原料を混合後打錠し、テアニルテアニン配合錠剤を製造した。
【表２】
2006306811.tif 000003
すなわち、上記配合に従って各原料を混合し、造粒後に、１粒あたり０.７５ｇとなるように打錠した。
【００３１】
＜実施例６＞  テアニルグルタミンおよびグルタミニルテアニン混合物の製造
０.４M  Ｌ−テアニン及び０.４Ｍ  Ｌ−グルタミンを０.０５Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ１１）中、０.３Ｕグルタミナーゼ（市販品）存在下にて、３０℃、２２時間反応させ、１２０ｎｍｏｌのテアニルテアニンおよびグルタミニルテアニンの混合物を得た。次いで、反応液をＤｏｗｅｘ  ５０×８、Ｄｏｗｅｘ  １×２カラムクロマトグラフィー（共に室町化学工業（株）製）にかけ、反応液から目的物質を単離した。テアニルグルタミンおよびグルタミニルテアニンは、マススペクトル分析およびＮＭＲで構造解析を行い、確認を行なった。
【００３２】
＜実施例７＞  テアニルグルタミンおよびグルタミニルテアニン混合物配合錠剤の製造
テアニルグルタミンおよびグルタミニルテアニン混合物配合鎮痛用組成物を含有する錠剤の１例として、下表３に示す原料を混合後打錠し、テアニルテアニンおよびグルタミニルテアニン配合錠剤を製造した。
【表３】
2006306811.tif 000004
すなわち、上記配合に従って各原料を混合し、造粒後に、１粒あたり０.７５ｇとなるように打錠した。
【００３３】
＜試験例１＞
急性疼痛テスト（tail flick test）におけるテアニンの効果
急性疼痛テスト（tail flick test）の実施方法は、次の通りであった。体重が約２００ｇである雄SDラット（1群：各7匹）にて試験を実施した。試験群として、L-テアニンを蒸留水で溶解し、０.０１mg/kg体重〜１０００mg/kg体重で経口投与した。対照群として、蒸留水のみを投与した。テアニンまたは蒸留水を投与後のラットを透明のプラスティック性円筒形のケージに入れ、備え付けられた溝に沿って、尾を後方に伸ばした。尾部先端より２〜３ｃｍの位置に高輝度光線(Tail Flick Analgesia Meter 0570-001L, Columbus Instruments International Co, Ltd., コロンバス、オハイオ、U.S.A.)を照射し侵害刺激（熱刺激）を与えた。熱刺激開始より尾の跳ね上げまでの時間を測定し、反応潜時とした。組織障害を防ぐため、熱刺激は反応のない場合でも最大14秒までとした（カットオフタイム）。反応潜時は、投与前、薬剤投与後10、30、60、90、120分後、及び反応時間がベースラインに戻るまで１時間間隔（最大360分）で測定した。
【００３４】
＜データ解析と統計＞
Tail flick testの反応潜時は、次式に従って、％ＭＰＥ（最大反応効果）に変換した。
％ＭＰＥ＝［（投与後の反応潜時−投与前反応潜時）／（カットオフタイム−投与前反応潜時）］×１００（カットオフタイムは14秒とした。）
投与群間の差は、スチューデントt-検定で有意差検定を実施した。Ｐ値が0.05以下の場合に統計学的に有意であるとみなした。
【００３５】
＜結果＞
Tail flick testのベースライン（投与前）の反応潜時は3.1±0.1秒(平均±標準偏差)であった。テアニンの経口投与は用量依存的にtail flick反応潜時を延長させた（図１）。表４に示すように、テアニンを投与した群では、0.1mg/kg〜1000mg/kgにおいて、対照群に比較して有意に反応潜時を延長することがわかった。
【００３６】
【表４】
2006306811.tif 000005
【００３７】
＜試験例２＞
急性疼痛モデル（tail flick test）におけるテアニルテアニンの効果
試験例１において、テアニンの代わりに、実施例４のテアニルテアニンを用いた他は、試験例１と同様の試験（tail flick test）を実施した。
＜データ解析と統計＞
試験例１に記載の％ＭＰＥ（最大反応効果）を求めた。投与群間の差はスチューデントt-検定で有意差検定を実施した。Ｐ値が0.05以下の場合に統計学的に有意であるとみなした。
【００３８】
＜結果＞
Tail flick testのベースライン（投与前）の反応潜時は3.1±0.1秒(平均±標準偏差)であった。テアニルテアニンの経口投与は用量依存的に tail flick 反応潜時を延長させた（図２）。表５に示すように、テアニルテアニンを投与した群では、10mg/kg〜1000mg/kgにおいて、対照群に比較して有意に反応潜時を延長することがわかった。
【表５】
2006306811.tif 000006
【００３９】
＜試験例３＞
急性疼痛モデル（tail flick test）におけるテアニルグルタミンおよびグルタミニルテアニン混合物の効果
試験例１において、テアニンの代わりに、実施例６のテアニルグルタミンおよびグルタミルテアニン混合物を用いた他は、試験例１と同様の試験（tail flick test）を実施した。
【００４０】
＜データ解析と統計＞
試験例１に記載の％ＭＰＥ（最大反応効果）を求めた。投与群間の差はスチューデントt-検定で有意差検定を実施した。Ｐ値が0.05以下の場合に統計学的に有意であるとみなした。
【００４１】
＜結果＞
Tail flick testのベースライン（投与前）の反応潜時は3.0±0.1秒(平均±標準偏差)であった。表６に示すように、テアニルグルタミンおよびグルタミルテアニンを投与した群では、10mg/kgにおいて、対照群に比較して有意に反応潜時を延長することがわかった。一方、1000mg/kgでは、対照群との間に有意な反応潜時の延長は認められなかった。
【表６】
2006306811.tif 000007
【００４２】
＜試験例４＞
ラットの急性及び慢性疼痛モデルでのテアニンの効果
ホルマリンテスト（Formalin test）の実施方法は、次の通りであった。ラットにテアニンを経口投与し、１０分後に３％ハロセンで麻酔を施し、自発行動が消失するのを確認した後、麻酔箱から取り出した。５％ホルマリン50μlを30G針で右後肢の甲部に皮下投与し、ラットをプレキシグラスチャンバーに入れ６０分間観察した。投与後１−２分目、５−６分目、及び10分目以降は５分間隔毎に、後込み(flinch)及び注射された足を振る動作(shaking)の頻度を計測し疼痛反応を定量化した。ホルマリン刺激による疼痛反応は、J. Pharmacol. Exp. Ther. 263: 136-146, 1992に記載の通り二相性に発現した。すなわち、フェーズ１（Phase1）は、ホルマリン投与後０−６分間に認められ、フェーズ２（Phase2）は、投与後約１０分目以降に認められた。
【００４３】
＜結果＞
Phase 1（１−６分）及び phase 2（１０−６０分）の両方において後込み(flinch)の数は、テアニンの投与量が増加するに従い減少した（図３）。また表７に示すように、対照群と比較し、テアニン0.1mg/kg投与群では、有意に後込み(flinch)の数を抑制した。この効果は、テアニン10mg/kg投与群を最大効果として、1000mg/kg投与群まで認められた。
【００４４】
【表７】
2006306811.tif 000008
【００４５】
＜試験例５＞
ラットの急性及び慢性疼痛モデルでのテアニルテアニンの効果
試験例４において、テアニンに代えて、テアニルテアニンを投与した以外は、試験例４と同様にホルマリンテストを実施した。
＜結果＞
表８に示すように、phase 2（１０−６０分）において後込み(flinch)の数は、対照群と比較し、テアニルテアニン10mg/kg投与群では、有意に後込み(flinch)の数を抑制した。この効果は、テアニルテアニン10mg/kg投与群を最大効果として、1000mg/kg投与群まで認められた。
【００４６】
【表８】
2006306811.tif 000009
【００４７】
＜試験例６＞
ラットの急性及び慢性疼痛モデルでのテアニルグルタミンおよびグルタミニルテアニン混合物の効果
試験例４において、テアニンに代えて、テアニルグルタミンおよびグルタミルテアニンを投与した以外は、試験例４と同様にホルマリンテストを実施した。
＜結果＞
表９に示すように、phase 2（１０−６０分）において後込み(flinch)の数は、対照群と比較し、テアニルテアニン10mg/kg投与群では、有意に後込み(flinch)の数を抑制した。この効果は、テアニルテアニン10mg/kg投与群を最大効果として、1000mg/kg投与群まで認められた。
【００４８】
【表９】
2006306811.tif 000010
【００４９】
以下、体験例により服用の結果を示す。
１．イニシャル  M.O.  55歳  女性  体重５４ｋｇ
主  訴：指の全関節痛と浮腫
平成１５年２月中旬から左手すべての指関節の疼痛と関節の腫脹が認められるようになった。血清検査の結果、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）と診断され、平成１５年４月から疼痛対策として上記実施例３テアニン配合錠剤を１日６錠投与された。併用薬はなし。投与後２日目から疼痛が軽減されおり、５日目で疼痛の消失を認められた。上記実施例３テアニン配合錠剤の投与を５日目から１日２錠に減じており、鎮痛効果の耐性は認められていない。平成１６年１０月まで、投与を続けているが、病状の再発は見られず、副作用も一切生じていない。途中平成１６年の６月に１ヶ月服用を止めた時期があり、その期間は疼痛が再発した。
【００５０】
２．イニシャル  J．O．  ４８歳  男性  体重６５ｋｇ
主  訴：両側膝関節炎
平成１２年１１月頃から両膝関節痛が持続したため、慢性関節リウマチ（ＲＡ）を疑い、諸検査を行った。その結果、抗核抗体が３５倍と陽性のため、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）との診断のもとに、上記実施例の錠剤を平成１３年５月から上記実施例５のテアニルテアニン配合錠剤を１日７錠の投与を開始した。その後、症状は漸次軽快し、同年１２月１日の受診時には症状は全く消失した。その後、錠剤の投与を中止した２週間は関節痛が再発したが、依存性はなかった。再度投与を開始すると症状は改善されていった。以後、今日まで疼痛を認めていない。
【００５１】
３．イニシャル  F．F．  ５８歳  男性  体重７６ｋｇ
主  訴：腰痛、両膝関節痛
平成１１年８月、腰痛のため整形外科を受診し、腰椎椎間板ヘルニアと診断され、消炎剤、外用薬の処方を受けたが改善せず、平成１２年９月、両膝関節痛および全身倦怠感が加わったため、同年１０月、内科を受診し、諸検査の結果、多発性関節リウマチと診断され、同年１２月１５日から上記実施例７のテアニルグルタミンおよびグルタミニルテアニン混合物配合錠剤のみを１日８錠投与された。２週間後の受診時には関節痛は全く消失していたが、念の為、１日３錠の投与を継続した。平成１２年１０月まで、関節痛の再発は見られず、副作用もまったく見られない。
【００５２】
４．イニシャル  A.K.  ２５歳  女性  体重４６ｋｇ
主  訴：両膝関節痛、前胸部痛
平成１２年６月頃から両膝関節痛があり、疼痛は運動時及び正座時に強かった。同年８月から整骨院において電気療法を受けたが改善せず、平成１３年４月整形外科を受診し、外用薬の投与を受けて一時軽快した。平成１４年１２月ごろから、再び両膝関節痛と前胸部痛があり、内科を受診した。胸骨前縁に圧痛を認め、諸検査の結果ＳＬＥと診断され、平成１３年２月１３日から上記実施例３のテアニン配合錠剤を１日１２錠投与され、平成１３年１２月の時点で、関節痛はほとんど消失している。平成１４年１月からは２日おきに１日４錠投与されているが、投与休止期間における依存性は確認されていない。
【００５３】
５．イニシャル  N．F．  ６６歳  女性  体重６３ｋｇ
主  訴：慢性腰痛
５０歳の頃から腰痛がひどく、時々寝込むことがあった。薬局で鎮痛剤や漢方薬を求めていたが、寒いときや疲労が溜ると痛みがひどくなり、つらい生活を送っていた。骨粗鬆症の心配があるとの指摘を受け、平成１３年５月に整形外科を受診した。レントゲン検査の結果は骨粗鬆症の心配はないとされ、上記実施例５のテアニルテアニン配合錠剤を１日５錠ずつ投与された。投与後１０日目に急に痛みが消失し驚いた。痛みが消失した為服用を中止した１日後から痛みの再発が表われた。再度服用を開始すると痛みが消失し、再発を恐れるため、現在も１日３錠ずつを服用している。
【００５４】
６．イニシャル  M．I．  ５３歳  女性  ４９ｋｇ
主  訴：肩関節周囲炎
肩がコチコチに凝り、動かすと激しい痛みを感じたので、受診したところ、いわゆる五十肩と診断された。痛みが激しかったので上記実施例７のテアニルグルタミンおよびグルタミニルテアニン混合物配合錠剤を平成１６年７月から１日１０錠ずつ服用した。服用後７日目には痛みが激減したが、再発防止と完全治癒を目指して服用を続けた。
【００５５】
＜実施例８＞  テアニン配合キャンディーの製造
テアニン配合鎮痛用組成物を含有する飲食品又は医薬品の１例として、下表１０に示す原料を用いてテアニン配合キャンディーを製造した。
【表１０】
2006306811.tif 000011
【００５６】
グラニュー糖６４ｋｇを水２０ｋｇに溶解しながら１１０℃まで加熱し、テアニンを溶解した残りの水１０ｋｇと水飴を加えて、１４５℃まで温度を上げた。火を止め、５０％酒石酸を添加し、混合した。７５〜８０℃まで冷却し、成形ローラーで成形し、テアニン配合キャンディーを調整した。
なお、キャンディー中のテアニンの含量を測定した結果、含量は１個（１.２ｇ）あたり、８９.６ｍｇ／ｇであった。
【００５７】
＜実施例９＞  テアニン配合ブルーベリー飲料の製造
テアニン配合鎮痛用組成物を含有する飲食品又は医薬品の１例として、下表１１に示す原料を用いてテアニン配合飲料を製造した。
【表１１】
2006306811.tif 000012
【００５８】
果糖ブドウ糖、ブルーベリー濃縮果汁、１／５透明レモン果汁、クエン酸Ｎａ、およびテアニンを水に加え攪拌溶解した。５０％クエン酸Ｎａ(結晶)を用い、溶液のｐＨを３.１に調製し、９５℃まで昇温後、香料を加えて、１００ｍＬずつ容器に充填して冷却し、テアニン配合ブルーベリー飲料を製造した。なお、ブルーベリージュース中のテアニンを定量した結果、含量は９８.３ｍｇ／１００ｍＬであった。
【００５９】
＜実施例１０＞  テアニルテアニン配合グレープフルーツ飲料の製造
テアニルテアニン配合鎮痛用組成物を含有する飲食品又は医薬品の１例として、下表１２に示す原料を用いてテアニルテアニン配合飲料を製造した。
【表１２】
2006306811.tif 000013
【００６０】
果糖ブドウ糖液、テアニルテアニン、ピロリン酸第二鉄、プラセンタエキス、およびグレープフルーツ果汁１００％を水に加え攪拌溶解した。クエン酸Ｎａを用い、溶液のｐＨを３.１に調製し、９５℃まで昇温後、香料を加えて、１００ｍＬづつ容器に充填して冷却し、テアニルテアニン配合グレープフルーツ飲料を製造した。なお、グレープフルーツジュース中のテアニルテアニンを定量した結果、含量は９６.４ｍｇ／１００ｍＬであった。
このように本実施例によれば、依存性や耐性を発現しない安全で副作用のない鎮痛用組成物、及びこの組成物を含有する飲食品、医薬品を提供することが可能であった。
【００６１】
本発明における実施態様項を例示すると、次のようである。
（１）テアニルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（２）テアニルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（３）グルタミニルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（４）テアニルアラニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（５）アラニルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（６）テアニルアスパラギンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（７）アスパラギニルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（８）テアニルグルタミン酸を有効成分とする鎮痛用組成物。
（９）グルタミルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（１０）テアニルグリシンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（１１）グリシルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（１２）テアニルヒスチジンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（１３）ヒスチジルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（１４）テアニルイソロイシンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（１５）イソロイシルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（１６）テアニルロイシンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（１７）ロイシリルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（１８）テアニルリジンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（１９）リジルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（２０）テアニルメチオニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
【００６２】
（２１）メチオニルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（２２）テアニルフェニルアラニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（２３）フェニルアラニルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（２４）テアニルプロリンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（２５）プロリルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（２６）テアニルセリンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（２７）セリルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（２８）テアニルスレオニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（２９）スレオニルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（３０）テアニルトリプトファンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（３１）トリプトファニルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（３２）テアニルチロシンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（３３）チオシニルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（３４）テアニルバリンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（３５）バリルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（３６）テアニルアルギニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（３７）アルギニルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（３８）テアニルシステインを有効成分とする鎮痛用組成物。
（３９）システイニルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（４０）アルパルチルテアニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
【００６３】
（４１）テアニルアスパラギン酸を有効成分とする鎮痛用組成物。
（４２）グルタミニルアラニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（４３）アラニルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（４４）グルタミニルアスパラギンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（４５）アスパラギニルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（４６）グルタミニルグルタミン酸を有効成分とする鎮痛用組成物。
（４７）グルタミニルグリシンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（４８）グリシルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（４９）グルタミニルヒスチジンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（５０）ヒスチジルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（５１）グルタミニルイソロイシンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（５２）イソロイシルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（５３）グルタミニルロイシンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（５４）ロイシリルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（５５）グルタミニルリジンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（５６）リジルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（５７）グルタミニルメチオニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（５８）メチオニルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（５９）グルタミニルフェニルアラニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（６０）フェニルアラニルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
【００６４】
（６１）グルタミニルプロリンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（６２）プロリルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（６３）グルタミニルセリンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（６４）セリルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（６５）グルタミニルスレオニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（６６）スレオニルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（６７）グルタミニルトリプトファンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（６８）トリプトファニルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（６９）グルタミニルチロシンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（７０）チロシルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（７１）グルタミニルバリンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（７２）バリルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（７３）グルタミニルアルギニンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（７４）アルギニルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（７５）グルタミニルシステインを有効成分とする鎮痛用組成物。
（７６）システイニルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（７７）グルタミニルアスパラギンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（７８）アスパラギニルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（７９）グルタミニルアスパラギン酸を有効成分とする鎮痛用組成物。
（８０）アスパルチルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
（８１）グルタミニルグルタミンを有効成分とする鎮痛用組成物。
【図面の簡単な説明】
【００６５】
【図１】Tail flick test におけるテアニンの効果を示すグラフである。
【図２】Tail flick test におけるテアニルテアニンの効果を示すグラフである。
【図３】Formalin test におけるテアニンの効果を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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