(57)【要約】【課題】  新規な、ヌクレオチドオリゴマー、ヌクレオチドポリマー、これらのヌクレオチドオリゴマーやヌクレオチドポリマーを合成する場合の原料や中間体として使用できるヌクレオシド体、ならびに、標的に対し高い親和性を示す機能性物質の構造を決定し、製造するための新規な技術を提供する【解決手段】  塩基に置換基が導入されたヌクレオシド単位を含み、当該置換基が三重結合を介して当該塩基と結合している修飾ヌクレオチドｎ量体（ここで、ｎは２以上の整数を表す。）を使用する。【選択図】      図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
塩基に置換基が導入されたヌクレオシド単位を含み、当該置換基が三重結合を介して当該塩基と結合している、下記式１８で表される構造を有する修飾ヌクレオチドｎ量体（ここで、ｎ＝１。）。
【化１】
2006217881.tif 000093
（式１８中、Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基、Ｒ2は、他の式とは独立に、水酸基、Ｏ−βシアノエトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基、Ｏ−メトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基またはＨ−ホスホネート基を表す。）。
【請求項２】
請求項１に記載の修飾ヌクレオチドｎ量体を構成要素として含む、修飾ヌクレオチドｍ量体（ここで、ｍは２以上の整数を表す。）。
【請求項３】
塩基に置換基が導入されたヌクレオシド単位を含み、当該置換基が三重結合を介して当該塩基と結合している修飾ヌクレオチドｎ量体（ここで、ｎは２以上の整数を表す。）。
【請求項４】
前記塩基がプリン塩基またはピリミジン塩基である、請求項３に記載の修飾ヌクレオチドｎ量体。
【請求項５】
前記塩基が、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を有する、請求項３に記載の修飾ヌクレオチドｎ量体。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかに記載の修飾ヌクレオチドｎ量体の構造を含む修飾ヌクレオチド配列。
【請求項７】
請求項６に記載の修飾ヌクレオチド配列を含み、標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）。
【請求項８】
請求項６に記載の修飾ヌクレオチド配列を含み、標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）の構成要素。
【請求項９】
標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）の候補を合成し、
当該機能性物質候補の中から、標的に対し親和性を有する機能性物質を選別し、
当該選別された機能性物質から特定の置換基を脱離し、または脱離せず、
当該選別された機能性物質または当該特定の置換基を脱離した機能性物質を増幅し、
当該増幅された機能性物質の構造を決定する、
機能性物質の構造決定方法において、
当該機能性物質候補の合成を請求項１〜５のいずれかに記載の修飾ヌクレオチドｎ量体を用いて行う
機能性物質の構造決定方法。
【請求項１０】
標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）の候補を合成し、
当該機能性物質候補の中から、標的に対し親和性を有する機能性物質を選別し、
当該選別された機能性物質から特定の置換基を脱離し、または脱離せず、
当該選別された機能性物質または当該特定の置換基を脱離した機能性物質を増幅し、
当該増幅された機能性物質の構造を決定し、
当該構造に基づいて、機能性物質を製造する
機能性物質の製造方法において、
当該機能性物質候補の合成を請求項１〜５のいずれかに記載の修飾ヌクレオチドｎ量体を用いて行う
機能性物質の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な、ヌクレオチドオリゴマー、ヌクレオチドポリマー、これらのヌクレオチドオリゴマーやヌクレオチドポリマーを合成する場合の原料や中間体として使用できるヌクレオシド体、多種の標的に対し高い親和性および／または認識特異性を示し、薬品、ドラッグデリバリー、バイオセンサー、遺伝子の発現量の制御、遺伝子異常による疾病の克服、遺伝子により翻訳されるタンパク質の機能解明、反応触媒の開発などに応用可能であり、特にタンパク質の解析・スクリーニング等に好適な機能性物質（本発明では、標的に対し親和性を有する物質を機能性物質という）ならびにその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
バイオサイエンスの発展に伴い、研究者や科学者の興味の中心は、遺伝子からの遺伝子産物であるタンパク質の解析に移行してきている。タンパク質の解析は、対象となる個々のタンパク質に対し親和性を有する物質の解析を通じてなされる場合が多い。
【０００３】
従って、タンパク質の解析は、タンパク質に対し親和性を有する物質が存在して初めて可能になるといっても過言ではない。解析の対象であるタンパク質は、細胞中に非常に多種存在し、そのアミノ酸配列や構造等が全く未知であるものが多数であるので、タンパク質を解析するための物質も多種必要になる。
【０００４】
しかしながら、上記タンパク質を解析するための物質を作製または入手するための効率的な方法は、現時点では十分確立されているとは言えない。ある特定のタンパク質に対して親和性のある物質を得る最も一般的な方法としては、動物の免疫系を用いてアフィニティー抗体を選別する方法が知られている。ところが、この方法の場合、動物を使っているため、多量のタンパク質が必要となり、工程数が多く、高コストである。しかも、この方法で選別し入手したアフィニティー抗体は、増幅（すなわち複製）することができない。また、同一標的に対し親和性を有するアフィニティー抗体しか選別することができないという問題がある。したがって、細胞内に存在する多くの種類のタンパク質に対し、親和性を有する個々のアフィニティー抗体を選別し、十分な量入手することは極めて困難である。
【０００５】
また、遺伝情報を持つタンパク質の合成に関しては、ｍＲＮＡの３’末端にピューロマイシンを導入した研究がある（たとえば、特許文献１参照）。これはピューロマイシンが、翻訳系においてアミノ酸と間違われてタンパク質に組み込まれやすいという性質を利用したものである。しかし、現在までのところ、ピューロマイシンの組み込み効率が悪く、ランダムなアミノ酸３残基のライブラリーから機能性物質を選別できたという報告がなされている程度である。
【０００６】
一方、抗体を用いたタンパク質の同定法としては、たとえば、ｉｍｍｕｎｏｓｅｎｓｏｒａｍｐｅｒｏｍｅｔｒｉｃ法などが開発されている。この方法によれば２ｎｇ／Ｌ程度の微量なタンパク質でも測定可能である。しかし、上記のような低濃度のタンパク質溶液中では殆どの抗体はタンパク質と結合しておらず、夾雑物を多く含む溶液（たとえば、血清など）中では不特定（ｎｏｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ）な反応が多く起こって、測定精度が低下してしまうという問題がある。
【０００７】
また、ウイルス等を被覆可能な超分子アセンブリーなども提案されているものの（たとえば、特許文献２参照）、この場合、構造が複雑である上、多種の標的に対し、抗体以上の高い親和性を示すものを効率的に製造することができないという問題がある。
【特許文献１】特開２００２−２９１４９１号公報（特許請求の範囲）
【特許文献２】特表平１０−５０８３０４号公報（特許請求の範囲）
【特許文献３】特開２００４−３３７０２２号公報（段落番号［００４０］）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
標的に対し親和性を有する物質を、そのような物質の多数の候補をそれぞれ極少量ずつ含む混合物を合成し、この物質の候補の中から、標的に対し親和性を有する物質を選別し、ついで選別された物質を何らかの方法で増幅し、この増幅された物質を使用して、その構造を解析し、解析された構造に基づいて目的とする物質を選択的に合成する方法によって製造する方法がある（たとえば、特許文献３参照。）。
【０００９】
具体例をあげれば、標的があるタンパク質で、上記のような機能を有する物質がヌクレオチド配列の場合には、候補となる多数のヌクレオチド配列を含む混合物を合成し、その中から、標的であるタンパク質に対し親和性のあるヌクレオチド配列を選別し、増幅し、その後、この増幅されたヌクレオチド配列の塩基配列を決定し、この決定された配列（すなわち、決定された構造）を元に、標的タンパク質に親和性のあるヌクレオチド配列を製造するのである。
【００１０】
このようにすれば、少量の機能性物質候補の中から目的とする機能性物質を決定でき、製造に結びつけることができるので、十分な量の新規な機能性物質を迅速に開発することが可能となる。
【００１１】
十分な量の機能性物質が入手できれば、その構造を解析することにより、標的の構造（たとえばタンパク質の配列構造）の解析やスクリーニング等を進展させ、この結果を、薬品、ドラッグデリバリー、バイオセンサー、遺伝子の発現量の制御、遺伝子異常による疾病の克服、遺伝子により翻訳されるタンパク質の機能解明、反応触媒の開発などに応用可能となる。
【００１２】
従って、候補となるヌクレオチド配列を合成するための新規な原料や中間体についてのニーズは大きい。
【００１３】
また、この増幅にはＰＣＲ（ポリメラーゼ連鎖反応法：ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ）が利用されることが多く、増幅後のヌクレオチド配列には修飾基が含まれないため、アデニン，グアニン，シトシン，チミンの四つの塩基でしか区別できない問題点があり、増幅後に四つの塩基以外の相違により区別できるヌクレオチド配列へのニーズも大きい。
【００１４】
このニーズに応えるものとして、たとえば修飾ヌクレオチドｎ量体を使用する技術がある。これは、たとえば二量体（ｎ＝２）のみの組み合わせを使用すれば、ヌクレオチド配列中における二量体の組み合わせにより相互の区別が可能になることを利用したものである。
【００１５】
従って、このような技術に使用できるヌクレオチド配列を合成するための新規な原料や中間体についてのニーズも大きい。
【００１６】
さらに、選別された機能性物質によってはこの増幅ができず、十分な量の機能性物質を入手できないという問題がある。たとえば、選別された機能性物質によっては増幅が阻害されてしまう場合がある。選別された機能性物質が強い正の電荷を有している場合等にそのような阻害が生じる。増幅が阻害されるとその後の構造の決定も機能性物質の製造も不可能となる。
【００１７】
この原因の一つに、たとえば、タンパク質に対する機能性物質の親和性を向上させる等の目的のために導入された置換基によるＰＣＲ等の増幅反応の阻害が挙げられる。
【００１８】
本発明は、上記課題に応え、新規な、ヌクレオチドオリゴマー、ヌクレオチドポリマー、これらのヌクレオチドオリゴマーやヌクレオチドポリマーを合成する場合の原料や中間体として使用できるヌクレオシド体、ならびに、標的に対し高い親和性を示す機能性物質の構造を決定し、製造することを可能とする新規な技術を開発することを目的としている。本発明のさらに他の目的および利点は、以下の説明から明らかになるであろう。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
本発明の一態様によれば、塩基に置換基が導入されたヌクレオシド単位を含み、当該置換基が三重結合を介して当該塩基と結合している、下記式１８で表される構造を有する修飾ヌクレオチドｎ量体（ここで、ｎ＝１。）が提供される。
【００２０】
【化２】
2006217881.tif 000003
（式１８中、Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基、Ｒ2は、他の式とは独立に、水酸基、Ｏ−βシアノエトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基、Ｏ−メトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基またはＨ−ホスホネート基を表す。）。本発明態様により、新規なヌクレオチドモノマーが得られる。
【００２１】
本発明の他の一態様によれば、上記修飾ヌクレオチドｎ量体を構成要素として含む、修飾ヌクレオチドｍ量体（ここで、ｍは２以上の整数を表す。）が提供される。本発明態様により、新規なヌクレオチドオリゴマーが得られる。
【００２２】
本発明の他の一態様によれば、塩基に置換基が導入されたヌクレオシド単位を含み、当該置換基が三重結合を介して当該塩基と結合している修飾ヌクレオチドｎ量体（ここで、ｎは２以上の整数を表す。）が提供される。本発明態様により、新規なヌクレオチドオリゴマーが得られる。
【００２３】
前記塩基がプリン塩基またはピリミジン塩基であること、前記塩基が、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を有すること、前記置換基が、置換基を有していてもよい、天然または非天然のアミノ酸基、金属錯体基、蛍光色素基、酸化還元色素基、スピンラベル化が可能な基、炭素数１〜１００のアルキル基および、式１〜１０で表される基からなる群から選ばれた少なくとも一つの基を有すること、
【００２４】
【化３】
2006217881.tif 000004
前記置換基が、式１１で表される基であること、
【００２５】
【化４】
2006217881.tif 000005
（式１１中、Ｒは、他の式とは独立に、水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
前記置換基が、式１２〜１７で表される基からなる群から選ばれた基であること、
【００２６】
【化５】
2006217881.tif 000006
【００２７】
【化６】
2006217881.tif 000007
【００２８】
【化７】
2006217881.tif 000008
【００２９】
【化８】
2006217881.tif 000009
【００３０】
【化９】
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【００３１】
【化１０】
2006217881.tif 000011
（式１２〜１６中、Ｒ1は、互いに独立に、トリフロロメチル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、メチル基、ｔ−ブチルジフェニルシリル基、２−ベンゼンスルホン酸エトキシ基または９−フローレニルメチル基を表す。）
ｎが２〜４の整数であること、が好ましい。
【００３２】
本発明の他の態様によれば、下記式１９〜２３で表される構造を有するヌクレオシド体が提供される。本発明態様により、新規なヌクレオシド体が得られる。
【００３３】
【化１１】
2006217881.tif 000012
（式１９中、Ｒ2は、他の式とは独立に、水酸基、Ｏ−βシアノエトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基、Ｏ−メトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基またはＨ−ホスホネート基を表す。）
【００３４】
【化１２】
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（式２０中、Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒ10は、ＮＨ2またはＮＨ−（ＣＯ）−Ｒを表す。このＲは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
【００３５】
【化１３】
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（式２１中、Ｒ5は、他の式とは独立に、水酸基またはＯ−（ＣＯ）ＣＨ2ＣＨ2（ＣＯ）ＣＨ3を表す。Ｒ6は、他の式とは独立に、水酸基または２−シアノエトキシ基を表す。Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
【００３６】
【化１４】
2006217881.tif 000015
（式２２中、Ｒ7は、水酸基またはジメチルトリチル基を表す。Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
【００３７】
【化１５】
2006217881.tif 000016
（式２３中、Ｒ5は、他の式とは独立に、水酸基またはＯ−（ＣＯ）ＣＨ2ＣＨ2（ＣＯ）ＣＨ3を表す。Ｒ6は、他の式とは独立に、水酸基または２−シアノエトキシ基を表す。Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
本発明の他の一態様によれば、上記のヌクレオシド体を原料または中間体として使用する修飾ヌクレオチドｎ量体の製造方法（ここで、ｎは１以上の整数を表す。）が提供される。この製造される修飾ヌクレオチドｎ量体としては、上記した修飾ヌクレオチドｎ量体であることが好ましい。本発明態様により、新規なヌクレオチドモノマーまたはオリゴマーが得られる。
【００３８】
本発明の他の態様によれば、上記の修飾ヌクレオチドｎ量体の構造を含む修飾ヌクレオチド配列や、上記修飾ヌクレオチドｎ量体の製造方法により製造された修飾ヌクレオチドｎ量体の構造を含む修飾ヌクレオチド配列が提供される。本発明態様により、新規な修飾ヌクレオチド配列が得られる。
【００３９】
本発明の他の態様によれば、上記の修飾ヌクレオチド配列を含み、標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）やその構成要素が提供される。本発明態様により、新規な機能性物質が得られる。
【００４０】
本発明の他の一態様によれば、標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）の候補を合成し、当該機能性物質候補の中から、標的に対し親和性を有する機能性物質を選別し、当該選別された機能性物質から特定の置換基を脱離し、または脱離せず、当該選別された機能性物質または当該特定の置換基を脱離した機能性物質を増幅し、当該増幅された機能性物質の構造を決定する、機能性物質の構造決定方法において、当該機能性物質候補の合成を上記の修飾ヌクレオチドｎ量体を用いて行う機能性物質の構造決定方法が提供される。本発明態様により、新規な機能性物質の構造決定方法が得られる。
【００４１】
本発明の他の一態様によれば、標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）の候補を合成し、当該機能性物質候補の中から、標的に対し親和性を有する機能性物質を選別し、当該選別された機能性物質から特定の置換基を脱離し、または脱離せず、当該選別された機能性物質または当該特定の置換基を脱離した機能性物質を増幅し、当該増幅された機能性物質の構造を決定し、当該構造に基づいて、機能性物質を製造する機能性物質の製造方法において、当該機能性物質候補の合成を上記の修飾ヌクレオチドｎ量体を用いて行う機能性物質の製造方法や、この機能性物質の構成要素の製造方法が提供される。本発明態様により、新規な機能性物質の製造方法が得られる。
【００４２】
いずれの場合についても、前記標的が、タンパク質、リポタンパク質、糖タンパク質、ポリペプチド、脂質、多糖類、リポ多糖類、核酸、環境ホルモン、薬物、これらの複合体およびこれらの分解物からなる群から選択される少なくとも一つの物質であることが好ましい。
【発明の効果】
【００４３】
本発明により、新規な、ヌクレオチドオリゴマー、ヌクレオチドポリマー、これらのヌクレオチドオリゴマーやヌクレオチドポリマーを合成する場合の原料や中間体として使用できるヌクレオシド体、ならびに、標的に対し高い親和性を示す機能性物質の構造を決定し、製造するための新規な技術を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４４】
以下に、本発明の実施の形態を図、実施例等を使用して説明する。なお、これらの図、実施例等および説明は本発明を例示するものであり、本発明の範囲を制限するものではない。本発明の趣旨に合致する限り他の実施の形態も本発明の範疇に属し得ることは言うまでもない。なお、本発明に係る式中、末端の単線はメチル基であることを意味し、折れ線はメチレン基のつながりであることを意味する。Ｒは、式毎に独立に、水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表し、Ｒ1は、式毎に独立に、トリフロロメチル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、メチル基、ｔ−ブチルジフェニルシリル基、２−ベンゼンスルホン酸エトキシ基または９−フローレニルメチル基等オリゴＤＮＡを分解しない条件で脱保護可能な官能基を表し、Ｒ2は、式毎に独立に、水酸基、Ｏ−βシアノエトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基、Ｏ−メトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基またはＨ−ホスホネート基を表し、Ｒ3は、式毎に独立に、水素、アセチル基、イソブチリル基、ベンゾイル基、フェノキシアセチル基、あるいは、ｐ−（ｉ−プロピル）フェノキシアセチル基を表し、Ｒ4は、式毎に独立に、水素、アセチル基、イソブチリル基、ベンゾイル基、フェノキシアセチル基、あるいは、ｐ−（ｉ−プロピル）フェノキシアセチル基を表し、Ｒ5は、式毎に独立に、水酸基またはＯ−（ＣＯ）ＣＨ2ＣＨ2（ＣＯ）ＣＨ3を表す。Ｒ6は、式毎に独立に、水酸基または２−シアノエトキシ基を表す。Ｒ7は水酸基またはジメチルトリチル基を表す。Ｒ8は、図７のビオチン化ＳＨ末端分子の末端基を表す。Ｒ9は、図６のＸまたはＹ中の末端基を表す。Ｒ10はＮＨ2またはＮＨ−（ＣＯ）−Ｒを表す。
【００４５】
また、本発明におけるｂａｓｅは塩基を意味し、特に断らない限り、図９に示すアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシルまたはその保護体の他、本発明における修飾ヌクレオチドｎ量体の塩基と同様の塩基を使用することができる。
【００４６】
まず、本発明に係る若干の用語について定義する。
【００４７】
（ヌクレオシド単位）
本発明に係るヌクレオシド単位は糖と塩基とを含む。リン酸基やホスファイト基を含んでいてもよい。
【００４８】
（ヌクレオシド体）
糖と塩基とを含む構造体を意味する。リン酸基やホスファイト基を含む場合もある。糖と塩基との対を一組だけ有する場合も２以上有する場合もある。リン酸基を含む場合はヌクレオチドでもある。
【００４９】
（三重結合を介して塩基と結合している置換基）
この置換基については特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。たとえば、天然または非天然のアミノ酸基、金属錯体基、蛍光色素基、酸化還元色素基、スピンラベル化が可能な基、炭素数１〜１００のアルキル基、式１〜１０で表される基を有するものなどが挙げられる。これらは、置換基で更に置換されていてもよい。これらは一種類使用しても複数種類使用してもよい。
【００５０】
【化１６】
2006217881.tif 000017
上記天然または非天然のアミノ酸基としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、たとえば、バリン、ロイシン、イソロイシン、アラニン、アルギニン、グルタミン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、プロリン、システイン、スレオニン、メチオニン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、アスパラギン、グリシン、セリンおよびこれらに由来する基が挙げられる。
【００５１】
上記金属錯体基としては、金属イオンに配位子が配位した化合物に由来する基であれば特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、たとえば、Ｒｕビピリジル錯体、フェロセン錯体、ニッケルイミダゾール錯体などに由来する基が挙げられる。
【００５２】
上記蛍光色素基としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、たとえば、フルオレセイン系列、ローダミン系列、エオシン系列、ＮＢＤ系列等の蛍光色素などに由来する基が挙げられる。
【００５３】
上記酸化還元色素基としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、たとえば、ロイコアニリン、ロイコアントシアニン、等のロイコ色素などに由来する基が挙げられる。
【００５４】
上記スピンラベル化が可能な基としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、たとえば、鉄Ｎ−（ジチオカルボキシ）サルコシン（ｓａｒｃｏｓｉｎｅ）、ＴＥＭＰＯ（テトラメチルピペリジン）誘導体などに由来する基が挙げられる。
【００５５】
上記炭素数１〜１００のアルキル基としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、たとえば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、ネオペンチル基、ヘキシル基、シクロヘキシル基、オクチル基、ノニル基、デシル基などが挙げられる。
【００５６】
更に、式１１で表される基も好ましい。
【００５７】
【化１７】
2006217881.tif 000018
なお、式１１中、Ｒは、他の式とは独立に、水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。
【００５８】
式１１で表される基としては、式１２〜１７で表される基からなる群から選ばれた基であることがより好ましい。
【００５９】
【化１８】
2006217881.tif 000019
【００６０】
【化１９】
2006217881.tif 000020
【００６１】
【化２０】
2006217881.tif 000021
【００６２】
【化２１】
2006217881.tif 000022
【００６３】
【化２２】
2006217881.tif 000023
【００６４】
【化２３】
2006217881.tif 000024
なお、式１２〜１６中、Ｒ1は、互いに独立に、トリフロロメチル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、メチル基、ｔ−ブチルジフェニルシリル基、２−ベンゼンスルホン酸エトキシ基または９−フローレニルメチル基等オリゴＤＮＡを分解しない条件で脱保護可能な官能基を表す。
【００６５】
（修飾ヌクレオチドｎ量体）
ヌクレオチドｎ量体とはヌクレオシド単位を１以上含むヌクレオチドオリゴマーを意味する。すなわち、ｎは１以上の整数を表す。一分子中のリン酸基の数は、ヌクレオシド単位の数より少ない場合もある。本発明におけるヌクレオチドｎ量体中のヌクレオシド単位の数（すなわちｎ）を数える場合には、糖と塩基とよりなる対の数で決め、リン酸基の数および、その他の置換基、保護基等の存否や相違は考慮されない。「修飾」とは塩基に置換基を有することを意味する。ただし、ヌクレオシド単位やその他の位置に他の置換基が存在していてもよい。
【００６６】
（修飾ヌクレオチド配列）
修飾ヌクレオチド配列とは修飾基を有するヌクレオチドオリゴマーまたはポリマーを意味する。本発明に係る修飾ヌクレオチドｎ量体の構造を含む修飾ヌクレオチド配列は、オリゴマーの場合であっても、上記ヌクレオチドｎ量体の場合より、通常、かなり高い分子量を有する。この修飾基には、本発明に係る修飾ヌクレオチドｎ量体に由来する修飾基が含まれるが、場合によっては他の修飾基を含んでいてもよい。なお、「本発明に係る修飾ヌクレオチドｎ量体の構造を含む」とは、修飾ヌクレオチド配列が本発明に係る修飾ヌクレオチドｎ量体の構造以外の構造部分を有していてもよいことを意味する。従って、「本発明に係る修飾ヌクレオチドｎ量体と本発明に係る修飾ヌクレオチドｎ量体以外のヌクレオチドオリゴマーとを重合してなる修飾ヌクレオチド配列」も本発明の範疇に属し得る。本発明に係る修飾ヌクレオチドｎ量体のみを重合したものも上記修飾ヌクレオチド配列の範疇に属することは言うまでもない。
【００６７】
本発明によれば、新規な修飾ヌクレオチドｎ量体（以下、種々の場合に「ｎ量体」を使用するが、すべての場合について、特に断らない限りｎは２以上の整数を表す。）が提供される。この修飾ヌクレオチドｎ量体の特徴は、塩基に置換基が導入されたヌクレオシド単位を含み、その置換基が三重結合を介して塩基と結合していることである。
【００６８】
三重結合を採用することにより、修飾ヌクレオチドｎ量体を機能性物質等の用途に使用すると、処理の途中で、構造変化が生じることを防止できる。すなわち、従来から塩基に導入されているトランス二重結合がシス二重結合に変化してしまう場合に典型的に示されるような構造変化の問題を回避できる。
【００６９】
本発明に係る修飾ヌクレオチドｎ量体のヌクレオシド単位は、すべての塩基が三重結合を介した置換基を有している必要はなく、他の置換基を有する塩基や置換基を持たない塩基を有していてもよい。
【００７０】
本発明に係る修飾ヌクレオチドｎ量体は、置換基が三重結合を介して塩基と結合しているヌクレオシド単位を含んでいればどのようなものから選択することもできるが、合成の容易さや化学的安定性から、塩基がプリン塩基またはピリミジン塩基であるものが好ましい。ここでプリン塩基とは、プリンおよびプリン核の種々の部分が置換された誘導体の総称であり、ピリミジン塩基とは、ピリミジンおよびピリミジン核の種々の部分が置換された誘導体の総称である。更に具体的に言えば、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を有するものが好ましい。
【００７１】
三重結合が結合する位置についても、本発明の趣旨に反しない限り特に制限はないが、合成の容易さから、プリン塩基についてはその７位に、ピリミジン塩基については、その５位に結合することが好ましい。より具体的には、７−デアザアデニン骨格と７−デアザグアニン骨格とについては、その７位に、シトシン骨格とウラシル骨格とについては、その５位に三重結合が結合することが好ましい。
【００７２】
これらの例を図１の式２４，２５に示す。式２４，２５は共にウラシル骨格を有する修飾ヌクレオチド２量体の例である。図２の式７４〜８３には、７−デアザアデニン骨格、７−デアザグアニン骨格およびシトシン骨格を使用した修飾ヌクレオチド２量体の例を示す。図２中のＲ、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ6等の記号は、他の場合と同様の意味を有する。なお、図１はＲ2がＯ−βシアノエトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基、Ｒ6が２−シアノエトキシ基の例を表す。
【００７３】
構造変化を防止できるという観点からは、本発明に係る三重結合の導入は、２量体以上の場合のみならず、単量体、すなわち、塩基に置換基が導入されたヌクレオシド単位を含み、当該置換基が三重結合を介して当該塩基と結合している修飾ヌクレオチドｎ量体であって、ｎ＝１の場合にも有用である。このような例としては、式１８で表される構造を有するものを例示することができる。
【００７４】
【化２４】
2006217881.tif 000025
（式１８中、Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基、Ｒ2は、他の式とは独立に、水酸基、Ｏ−βシアノエトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基、Ｏ−メトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基またはＨ−ホスホネート基を表す。）。ＺとＲの組み合わせの例を図８に示す。図８中のＲ、Ｒ3、Ｒ4等の記号は、他の場合と同様の意味を有する。これらのＺとＲの組み合わせは、本発明に係る他の式（式２０〜２３）にも適用することができる。
【００７５】
さらに、この修飾ヌクレオチドｎ量体を構成要素として、修飾ヌクレオチドｍ量体（ここで、ｍは２以上の整数を表す）を合成することもでき、好ましい場合がある。ｍは２〜４が好ましい。
【００７６】
本発明に係る修飾ヌクレオチドｎ量体（ｎ＝１以上。）は、後述のものも含め、修飾ヌクレオチド配列（すなわち、修飾ヌクレオチドｎ量体の構造を含む修飾ヌクレオチド配列）の合成に好適に使用することができ、この修飾ヌクレオチド配列を含み、標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）またはその構成要素として、たとえば新薬の開発等に好適に使用することが可能となる。もちろん、それ以外の用途に使用してもよい。ｎは、精製が比較的容易であることから、２〜４の整数が好ましい。
【００７７】
なお、本発明では、用語「機能性物質」が、機能性物質候補の合成の段階、機能性物質の選別の段階、機能性物質から特定の置換基を脱離する段階、機能性物質を増幅する段階、機能性物質の構造を決定する段階、機能性物質の製造の段階等に使用されているが、上記の修飾ヌクレオチドｎ量体（ｎ＝１以上。）を使用して合成した修飾ヌクレオチド配列を含む機能性物質は、このいずれの段階についても適用される概念である。
【００７８】
上記修飾ヌクレオチドｎ量体（ｎ＝１以上。）の合成および三重結合や置換基の導入には特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。２量体や３量体等のオリゴマーの合成には、たとえば、ジエステル法、トリエステル法、ホスファイト法、ホスホロアミダイト法、Ｈ−ホスホネート法、チオホスファイト法などが挙げられる。これらの中でも、ホスホロアミダイト法が好適である。
【００７９】
修飾ヌクレオチドｎ量体（ｎ＝１以上。）の合成および三重結合や置換基の導入は、たとえばウラシル骨格を使用した系について例示すると図３の合成ルートに示されるような原料または中間体を選択することが、合成が容易であり好ましい。他の骨格系を使用した系についても同様であると考えられる。
【００８０】
これらの原料または中間体を使用する製造方法は、特に、上記の種々の修飾ヌクレオチドｎ量体を合成するのに適している。より一般的な表現で表せば下記式１９〜２３で表されるヌクレオシド体を原料または中間体として使用することが好ましい。
【００８１】
【化２５】
2006217881.tif 000026
（式１９中、Ｒ2は、他の式とは独立に、水酸基、Ｏ−βシアノエトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基、Ｏ−メトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基またはＨ−ホスホネート基を表す。）
【００８２】
【化２６】
2006217881.tif 000027
（式２０中、Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒ10は、ＮＨ2またはＮＨ−（ＣＯ）−Ｒを表す。このＲは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
【００８３】
【化２７】
2006217881.tif 000028
（式２１中、Ｒ5は、他の式とは独立に、水酸基またはＯ−（ＣＯ）ＣＨ2ＣＨ2（ＣＯ）ＣＨ3を表す。Ｒ6は、他の式とは独立に、水酸基または２−シアノエトキシ基を表す。Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
【００８４】
【化２８】
2006217881.tif 000029
（式２２中、Ｒ7は、水酸基またはジメチルトリチル基を表す。Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
【００８５】
【化２９】
2006217881.tif 000030
（式２３中、Ｒ5は、他の式とは独立に、水酸基またはＯ−（ＣＯ）ＣＨ2ＣＨ2（ＣＯ）ＣＨ3を表す。Ｒ6は、他の式とは独立に、水酸基または２−シアノエトキシ基を表す。Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
上記オリゴマーを重合する方法には特に制限はなく、公知の方法の中から目的に応じて適宜選択することができ、たとえば、ＤＮＡシンセサイザー（ＤＮＡ自動合成機）を用いる方法、予め作製しておいたオリゴヌクレオチドランダム配列に対しモノマーブロックを並べてアニーリングし、ＤＮＡリガーゼまたはＲＮＡリガーゼを作用させて結合させる方法などが好適である。
【００８６】
上記ＤＮＡシンセサイザーを用いる方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、たとえば、図４に示すようなＤＮＡシンセサイザーを用い、合成した修飾ヌクレオチド２量体を複数種混合したものを試薬とし、この試薬をコントローラーの制御に基づきノズル７により吸い上げて重合させることにより、ランダムであらゆる配列順序の修飾ヌクレオチド配列を有する機能性物質候補を作製する方法などが好ましい。この方法は、機能性物質候補を効率よく作製することができる点で有利である。
【００８７】
本発明に係る機能性物質の構造決定方法では、上記修飾ヌクレオチドｎ量体（ｎ＝１以上、）を用いて作製した修飾ヌクレオチド配列を機能性物質またはその候補として使用する。この構造決定方法では、機能性物質候補を合成し、この機能性物質候補の中から、標的に対し親和性を有する機能性物質を選別し、この選別された機能性物質から特定の置換基を脱離し、または脱離せず、この選別された機能性物質またはこの特定の置換基を脱離した機能性物質を増幅し、この増幅された機能性物質の構造を決定する。
【００８８】
また、本発明に係る機能性物質の製造方法では、このようにして得た機能性物質の構造に基づいて、機能性物質を製造する。機能性物質の構成要素を製造することもでき、有用である。
【００８９】
（標的）
本発明に係る標的としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、たとえば、タンパク質、リポタンパク質、糖タンパク質、ポリペプチド、脂質、多糖類、リポ多糖類、核酸、環境ホルモン、薬物、これらの複合体などが挙げられる。これらの分解物でもよい。
【００９０】
これらは、１種単独で使用しても、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、血漿タンパク質、腫瘍マーカー、アポタンパク質、ウイルス、自己抗体、凝固・線溶因子、ホルモン、血中薬物、ＨＬＡ抗原、環境ホルモン、核酸などが好適に挙げられる。
【００９１】
上記血漿タンパク質としては、たとえば、免疫グロブリン（ＩｇＧ，ＩｇＡ，ＩｇＭ，ＩｇＤ，ＩｇＥ）、補体成分（Ｃ３，Ｃ４，Ｃ５，Ｃ１ｑ）、ＣＲＰ、α1−アンチトリプシン、α1−マイクログロブリン、β2−マイクログロブリン、ハプトグロビン、トランスフェリン、セルロプラスミン、フェリチンなどが挙げられる。
【００９２】
上記腫瘍マーカーとしては、たとえば、α−フェトプロテイン（ＡＦＰ）、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＣＡ１９−９、ＣＡ１２５、ＣＡ１５−３、ＳＣＣ抗原、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）、ＰＩＶＫＡ−ＩＩ、γ−セミノプロテイン、ＴＰＡ、エラスターゼＩ、神経特異エノラーゼ（ＮＳＥ）、免疫抑制酸性タンパク質（ＩＡＰ）などが挙げられる。
【００９３】
上記アポタンパク質としては、たとえば、アポＡ−Ｉ、アポＡ−ＩＩ、アポＢ、アポＣ−ＩＩ、アポＣ−ＩＩＩ、アポＥなどが挙げられる。
【００９４】
上記ウイルスとしては、たとえば、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＢＣ）、ＨＴＬＶ−Ｉ、ＨＩＶなどが挙げられる。また、ウイルス以外の感染症としては、ＡＳＯ、トキソプラズマ、マイコプラズマ、ＳＴＤなどが挙げられ、これらの病原体、および生じたタンパク質も標的として挙げられる。
【００９５】
上記自己抗体としては、たとえば、抗マイクロゾーム抗体、抗サイログロブリン抗体、抗核抗体、リュウマチ因子、抗ミトコンドリア抗体、ミエリン抗体などが挙げられる。
【００９６】
上記凝固・線溶因子としては、たとえば、フィブリノゲン、フィブリン分解産物（ＦＤＰ）、プラスミノゲン、α2−プラスミンインヒビター、アンチトロンビンＩＩＩ、β−トロンボグロブリン、第ＶＩＩＩ因子、プロテインＣ、プロテインＳなどが挙げられる。
【００９７】
上記ホルモンとしては、たとえば、下垂体ホルモン（ＬＨ、ＦＳＨ、ＧＨ、ＡＣＴＨ、ＴＳＨ、プロラクチン）、甲状腺ホルモン（Ｔ3、Ｔ4、サイログロブリン）、カルシトニン、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、副腎皮質ホルモン（アルドステロン、コルチゾール）、性腺ホルモン（ｈＣＧ、エストロゲン、テストステロン、ｈＰＬ）、膵・消化管ホルモン（インスリン、Ｃ−ペプチド、グルカゴン、ガストリン）、その他（レニン、アンジオテンシンＩ，ＩＩ、エンケファリン、エリスロポエチン）などが挙げられる。
【００９８】
環境ホルモンは、外界に広く存在して生物の生活活動と共に体内に取り込まれてその生殖、発生、行動などを含む生理的な内分泌の諸現象に影響を及ぼす外因性内分泌撹乱化学物質である。上記環境ホルモンとしては、たとえば、ノニルフェノール、オクチルフェノール、ビスフェノールＡ、フタル酸ブチルベンジル、トリブチルスズ、ＰＣＢ、ポリ塩化ジベンゾジオキシン、ポリ塩化ジベンゾフラン、ダイオキシン類、ＤＤＴ、ＤＤＥ、ＤＤＤ、エンドスルファン、メトキシクロル、ヘプタクロル、トキサフェン、ディルドリン、リンデン、ジエチルスチベロール（ＤＥＳ）、エチニルエストラジオール（ピルの成分）、クメストロール、フォルモノネテイン、ゲニステインなどが挙げられる。
【００９９】
上記血中薬物としては、たとえば、カルバマゼピン、プリミドン、バルプロ酸等の抗てんかん薬、ジゴキシン、キニジン、ジギトキシン、テオフィリン等の循環器疾患薬、ゲンタマイシン、カナマイシン、ストレプトマイシン等の抗生物質などが挙げられる。
【０１００】
上記核酸としては、癌関連遺伝子、遺伝病に関連する遺伝子、ウイルス遺伝子〜細菌遺伝子および病気のリスクファクターと呼ばれる多型性を示す遺伝子などが挙げられる。
【０１０１】
癌関連遺伝子としては、たとえば、ｋ−ｒａｓ遺伝子、Ｎ−ｒａｓ遺伝子、ｐ５３遺伝子、ＢＲＣＡ１遺伝子、ＢＲＣＡ２遺伝子、ｓｒｃ遺伝子、ｒｏｓ遺伝子またはＡＰＣ遺伝子などが挙げられる。
【０１０２】
遺伝病に関連する遺伝子としては、たとえば、各種先天性代謝異常症、たとえばフェニールケトン尿症、アルカプトン尿症、シスチン尿症、ハンチントン舞踏病、Ｄｏｗｎ症候群、Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型筋ジストロフィー、血友病などの遺伝子が挙げられる。
【０１０３】
ウイルス遺伝子〜細菌遺伝子としては、たとえば、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、インフルエンザウイルス、麻疹ウイルス、ＨＩＶウイルス、マイコプラズマ、リケッチア、レンサ球菌、サルモネラ菌などの遺伝子が挙げられる。
【０１０４】
多型性を示す遺伝子とは、病気等の原因とは必ずしも直接は関係のない個体によって異なる塩基配列を持つ遺伝子、たとえば、ＰＳ１（プリセリニン１）遺伝子、ＰＳ２（プリセリニン２）遺伝子、ＡＰＰ（ベーターアミロイドプレカーサータンパク質）遺伝子、リポプロテイン遺伝子、ＨＬＡ（ＨｕｍａｎＬｅｕｋｏｃｙｔｅＡｎｔｉｇｅｎ）や血液型に関する遺伝子、あるいは高血圧、糖尿病等の発症に関係するとされている遺伝子などが挙げられる。
【０１０５】
これらの標的は、特定の被検体中に含まれる場合が多い。このような被検体としては、たとえば、細菌、ウイルス等の病原体、生体から分離された血液、唾液、組織病片等、あるいは糞尿等の排泄物が挙げられる。更に、出生前診断を行う場合は、羊水中に存在する胎児の細胞や、試験管内での分裂卵細胞の一部などであってもよい。また、これらの被検体は、直接、または必要に応じて遠心分離操作等により沈渣として濃縮した後、たとえば、酵素処理、熱処理、界面活性剤処理、超音波処理、これらの組合せ等による細胞破壊処理を予め施されていてもよい。
【０１０６】
（機能性物質）
本発明に係る機能性物質は標的に対し親和性を有する物質である。増幅されるべき機能性物質は、標的に対し親和性を有する物質として選別された機能性物質または、選別された機能性物質から特定の置換基を脱離したものである。選別された機能性物質が増幅を妨げる置換基を有している場合にこのような置換基の脱離を含めることが有用である。この場合の特定の置換基とは選別された機能性物質が増幅を妨げる置換基を意味する。増幅を妨げる置換基がない場合はこの脱離操作は不要である。本発明により製造される機能性物質は、増幅されるべき機能性物質またはその分解物、あるいは、増幅されるべき機能性物質またはその分解物を含む物質を意味する。
【０１０７】
本発明に係るこれらの機能性物質は、機能性物質候補の合成を上記修飾ヌクレオチドｎ量体を用いて行うことにより得られる。
【０１０８】
この場合のヌクレオチド配列のつながりの数については特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。たとえば、１０〜１００量体が好ましく、１０〜５０量体がより好ましい。
【０１０９】
標的に対する親和性については特に制限はなく、生物学的吸着、物理的吸着、電気的吸引、化学的吸着、化学的結合のいずれであってもよいが、選別のしやすさからは解離定数（Ｋｄ）が小さいものが好ましい。たとえばＫｄが１０-9以下のものが好ましい。
【０１１０】
本発明に係る機能性物質の標的に対する親和性は、特定の一つの標的のみに親和性を示すもの、特定の構造を有する標的に特異的親和性を示すもの（たとえば、特定の塩基配列を有するタンパク質にのみ親和性を示すものや、特定の空間配置を持つタンパク質にのみ親和性を示すもの）というように、特異的親和性を有するものが好ましい。
【０１１１】
（特定の置換基）
機能性物質には、標的との親和性を高める、安定性を高める、合成を容易にする等の種々の理由から種々の置換基が導入される。本発明に係る三重結合を介して当該塩基と結合している置換基や特定の置換基はこの置換基の一種である。
【０１１２】
本発明に係る特定の置換基は、機能性物質に含まれている置換基であって、その置換基を脱離した機能性物質の増幅が進行し得る置換基であればどのような置換基でも対象足り得る。
【０１１３】
このような特定の置換基は、典型的には、その置換基が存在する場合には増幅が進行せず、その置換基が存在しない場合には増幅が進行するものを指すが、その置換基が存在する場合にも増幅が進行するものであっても差し支えない。増幅の進行を妨げるか否かを問わず、一律に特定の置換基を脱離し、その結果増幅が進行すれば、特定物質の構造を解析するという本発明の目的を達し得るからである。なお、特定の置換基を脱離した結果、その置換基のあった個所に別の種類の置換基が生じる場合もあるが、増幅を進行できる限り、このような別の種類の置換基が生じてもかまわない。
【０１１４】
（機能性物質候補）
本発明に係る機能性物質候補には特に制限はなく、上記修飾ヌクレオチドｎ量体を用いて行うことにより得られるどのようなものを選択してもよい。機能性物質候補の数には特に制限はなく、何千、何万の機能性物質候補の中からたった一つの機能性物質を選別することもあり得る。
【０１１５】
（選別）
本発明に係る選別としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。修飾ヌクレオチド配列を含んでなる機能性物質の場合には、たとえば、アフィニティークロマトグラフィー、フィルター結合、液−液分割、ろ過、ゲルシフト、密度勾配遠心分離などの各種方法が挙げられる。これらは、１種単独で行ってもよく、２種以上行ってもよい。これらの中でも、アフィニティークロマトグラフィーが好ましい。選別される機能性物質は１種類ではなく複数種類であることもあり得る。
【０１１６】
アフィニティークロマトグラフィーは、特定の成分同士が結合し易い生物学的親和性を利用した分離・精製手段であり、具体的には、機能性物質が修飾ヌクレオチド配列を含んでなる場合には、標的を樹脂等のカラム充填材に固定化し、結合用緩衝液で平衡化してから、機能性物質候補を含む溶液をカラム中に流し込み、一定条件下に放置すると、標的と親和性を有する修飾ヌクレオチド配列がカラムに吸着し、結合用緩衝液で充分洗浄することにより、残留する修飾ヌクレオチド配列以外の成分を除去することができる。その後、上記標的を含む溶液あるいは純水をカラムに流すことにより、上記修飾ヌクレオチド配列を含む機能性物質を回収し、選別することができる。
【０１１７】
標的自体が未知で２種以上存在する場合（たとえば、臓器や血清など）には、標的を一次元〜三次元の空間配置を持つマトリックス上にマッピングして区画化して固定し、標的が固定され区画化されたマトリックスに対し、機能性物質候補を作用させ、標的と結合した機能性物質を選別してもよい。
【０１１８】
マトリックス上に標的を固定する方法については、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、たとえば、標的がタンパク質である場合には、標的をポリアクリルアミド電気泳動（たとえば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥなど）処理した後に膜状のマトリックスに転写するウエスタンブロット法、膜状のマトリックスに標的またはその希釈液を直接染み込ませるドットブロット法やスロットブロット法などが挙げられる。これらの中でも、細胞抽出液などの複雑な組成の溶液中に微量に含まれるタンパク質でも明瞭に検出可能な点で、ウエスタンブロット法が好ましい。ウエスタンブロット法は、電気泳動の優れた分離能と抗原抗体反応の高い特異性を組み合わせて、タンパク質混合物から特定のタンパク質を検出する手法であり、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、等電点電気泳動、二次元電気泳動等の後、ゲルからタンパク質を電気的に膜状のマトリックスに移動・固定化させる方法である。膜状のマトリックスとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、タンパク質が結合し易い疎水性の高いニトロセルロース膜、疎水性に優れたＰＶＤＦ（ポリビニリデンジフルオライド、Ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｉｄｅｎｅｄｉｆｌｕｏｒｉｄｅ）膜などが好適に挙げられる。
【０１１９】
上記選別工程の前に、合成された機能性物質候補を他の物質から分離する予備精製操作を加えてもよい。この予備精製操作には、標的に対し親和性を有する機能性物質およびその他の機能性物質候補に対し親和性を有し、他の物質には親和性を示さないような条件で、上記選別と同様の技術を適用することができる。
【０１２０】
また、上記選別工程の際、機能性物質の精製を行ってもよい。精製は、標的と機能性物質との解離定数をモニターしながら機能性物質を標的から遊離させることにより行うのが好ましい。この方法は、最小一回の処理で所望の解離定数を持つ機能性物質を効率よく選別することができる点で有利である。なお、解離定数は、標的に応じて適宜設定することができ、たとえば、サーフェスプラズモン共鳴を用いた測定機器により測定することができる。
【０１２１】
なお、選別工程においては、たとえば、解離定数の異なる２種以上の物質の相互作用を利用し、小さい解離定数に適応した洗浄操作を行って機能性物質を選別し、大きい解離定数に適応した洗浄操作を行って担体を再生させることもできる。標的が２種以上あっても、担体を再生可能とし、一つの担体で複数種の機能性物質を一括して効率よく選別することもできる。
【０１２２】
（特定の置換基の脱離）
選別された機能性物質をそのままでは増幅できない場合や増幅が困難な場合には、その原因となる特定の置換基を脱離する操作が有用である。本発明に係る特定の置換基の脱離には特に制限はなく、公知のどのような方法を採用することもできる。シスジオールの過ヨウ素酸酸化による切断、シリル基のフッ素イオンによる切断または光反応による切断を例示することができる。
【０１２３】
図５の（Ｉ）に、シスジオールの過ヨウ素酸酸化による切断を、（ＩＩ）にシリル基のフッ素イオンによる切断を、（ＩＩＩ）に光反応による切断を例示する。いずれの場合も、切断の結果、デオキシ−５−置換ウリジンの置換基の一部がＯＨに置換される。
【０１２４】
本発明に係る「特定の置換基の脱離」には、このように、置換基の一部が代わる場合も含まれる。言い換えれば、本発明に係る「特定の置換基の脱離」が生じたか否かは、その後の増幅が可能か否かで判断することができる。
【０１２５】
なお、本発明に係る特定の置換基が、本発明に係る、三重結合を介して塩基と結合した置換基である場合もあり得る。また、本発明において、機能性物質やその候補を使用する場合には、その合成の際の副反応の防止や有機溶媒への溶解性を付与するため等の目的で置換基（保護基）が導入されることがしばしばあるが、この保護基と本発明に係る特定の置換基とは、別々の基であっても、同一の基であっても、いずれか一方が他方の一部をなしていてもよい。
【０１２６】
上記した保護基も、通常、機能性物質の構造決定前に脱離を行う。この脱離には公知の方法を使用することができる。保護基の脱離は、機能性物質以外の物質の除去が容易になる場合が多いので、機能性物質の選別前に行うことが多いが、場合によってはその後であってもよい。また、保護基の脱離と特定の置換基の脱離とが同一操作で行われてもよい。
【０１２７】
（増幅）
本発明に係る増幅は、選択された機能性物質について、特定の基の脱離処理を行いまたは行わずに、機能性物質を増幅できるものであればどのような方法でもよく、公知の方法の中から適宜選択することができるが、機能性物質がヌクレオチド配列を含んでなる場合には、ＰＣＲ法、ＬＣＲ（Ｌｉｇａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ）法、３ＳＲ（Ｓｅｌｆ−ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ）法、ＳＤＡ（Ｓｔｒａｎｄ  Ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）法、ＲＴ−ＰＣＲ法、ＩＣＡＮ法、ＬＡＭＰ法などが挙げられる。これらは、１種単独で行ってもよいし、２種以上行ってもよい。これらの中でもＰＣＲ法が好ましい。
【０１２８】
ここで、ＰＣＲ法について簡単に説明する。ＰＣＲ法は、ＤＮＡ複製酵素によるＤＮＡ合成反応の試験管内での繰り返しにより、特定のオリゴヌクレオチド領域を数１０万倍に増幅可能な方法である。ＰＣＲ法においては、使用するプライマーの伸長反応は、４種のヌクレオチド三リン酸（デオキシアデノシン三リン酸、デオキシグアノシン三リン酸、デオキシシチジン三リン酸、およびチミジン三リン酸あるいはデオキシウリジン三リン酸（これらの混合物をｄＮＴＰということもある））を基質としてプライマーに取り込ませることにより行われる。
【０１２９】
この伸長反応を行う場合のＤＮＡ複製酵素としては、Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡポリメラーゼＩ、Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡポリメラーゼＩのクレノウ断片、Ｔ４ＤＮＡポリメラーゼ等の任意のＤＮＡポリメラーゼ、ＴａｑＤＮＡポリメラーゼ、ＴｔｈＤＮＡポリメラーゼ、ＶｅｎｔＤＮＡポリメラーゼ等を用いることができる。
【０１３０】
（機能性物質の構造決定）
本発明に係る機能性物質の構造決定の方法については特に制限はなく、公知のどのような方法を採用してもよい。本発明に係る機能性物質の構造決定における「構造の決定」には原子配列等のどのような構造の決定を含めてもよいが、典型例では、ヌクレオチド配列の決定を意味する。
【０１３１】
ヌクレオチド配列の決定には、たとえば、遺伝子クローニングによる方法、チェーンターミネーター法、サンガー法、ジデオキシ法等によるＤＮＡシーケンサー（ＤＮＡ塩基配列自動決定装置）などを利用することができる。これらは、１種単独で行ってもよいし、２種以上行ってもよい。
【０１３２】
上記遺伝子クローニングでは、増幅したヌクレオチド配列を組み込んだ発現ベクターにより宿主細胞を形質転換し、この形質転換体を培養すること等により製造することができる。なお、上記発現ベクターとしては、たとえば、プラスミドベクター、ファージベクター、プラスミドとファージとのキメラベクターなどが挙げられる。また、上記宿主細胞としては、大腸菌、枯草菌等の原核微生物、酵母菌等の真核微生物、動物細胞などが挙げられる。
【０１３３】
（機能性物質の製造）
以上の機能性物質の構造決定方法を利用すれば、その後、この機能性物質を容易に製造することができる。この製造段階に使用できる方法については特に制限はなく、公知のどのような方法を採用することもできる。この場合には、原料組成を選択することにより、機能性物質を収率よく製造することが可能である。
【０１３４】
以上のようにして、本発明により、標的に対し高い親和性を示す機能性物質の構造を容易に決定し、容易に製造することができる。そのままでは増幅することのできない機能性物質についても、本構造決定方法と製造法とを適用することが可能である。
【０１３５】
さらに、同時に複数の機能性物質を選別しその構造を決定することや、同時に複数の標的を使用して、同時に複数の機能性物質を選別し、その構造を決定することも可能である場合が多い。また、標的に夾雑物が含まれている場合でも、選別、構造決定を行うことができる場合も多い。
【０１３６】
以上の本発明の諸態様により、本発明に係るヌクレオシド体、ヌクレオチドｎ量体、修飾ヌクレオチド配列、標的に対し親和性を有する物質およびその構成要素を利用すれば、たとえば、標的の構造（たとえばタンパク質の配列構造）の解析やスクリーニング等を進展させ、この結果を、薬品、ドラッグデリバリー、バイオセンサー、遺伝子の発現量の制御、遺伝子異常による疾病の克服、遺伝子により翻訳されるタンパク質の機能解明、反応触媒の開発などに応用可能となる。
【実施例】
【０１３７】
次に本発明の実施例を詳述する。評価には次の方法を採用した。以下で使用する略号等について、その説明をその次に纏めて説明する。
【０１３８】
（質量分析）
ブルッカーダルトニックス社製の  ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ（Ｍａｒｉｘ  Ｌａｓｅｒ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｄｉｓｏｒｐｔｉｏｎ  Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  −Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）オートフレックスＩＩを採用した。脂溶性化合物については、ジスラノール（ｄｉｔｈｒａｎｏｌ）１０ｍｇ／ｍＬのアセトン溶液８μＬと、サンプル希釈液（２０ｐｍｏｌ／Ｌが目安）２μＬとを混合し、Ｍａｓｓｉｖｅ  Ｔａｒｇｅｔに１μＬ展開して測定した。検量線用内部標準はジスラノールマトリックスを用いた。
【０１３９】
水溶性のオリゴヌクレオチドについては、まずサンプルの希釈液を水素イオン型イオン交換樹脂にて処理した。別にクエン酸一水素二アンモニウム（ＤＡＣ）と３−ヒドロキシピコリン酸（ＨＰＡ）の１：１混合水溶液１μＬをあらかじめＴＯＦ−ＭＳターゲットであるＡｎｃｈｏｒ  Ｃｈｉｐに展開し、さらにサンプル液１μＬを混合し、ゆっくりと風乾した後に測定した。検量線用標準物質には規定の検量線用ペプチド混合サンプルを用いた。
【０１４０】
（ＮＭＲ分析）
1Ｈ−ＮＭＲについては、サンプル約１０ｍｇを重溶媒に溶解して測定した。内部標準は溶媒ピークを基準とした。31Ｐ−ＮＭＲについては、外部標準としてＰＰｈ3を用い−６．２ｐｐｍを基準として測定した。ＢＣＭにて測定を行った。
【０１４１】
物質の符号：物質の次のローマ数字は図や式中のローマ数字と一致する。そのあとの添字は図や式中のＲを意味する。その後にあるｂａｓｅ＝Ａ等は塩基の種類を意味する。Ｌｙｓはリジン型、Ｔｙｒはチロシン型、Ｓｅｒはセリン型、Ｔｙｐはトリプトファン型、Ｇｌｕはグルタミン酸型、Ｌｅｕはロイシン型、Ｐｈｅはフェニルアラニン型を意味する。たとえば、物質ＶLysｂａｓｅ＝Ａは、この物質が図３中のＶで示された構造を持つ物質であって、Ｒがリジン型であり、塩基がアデニン骨格を有する基であることを意味する。
【０１４２】
ｐｈ：フェニル基
Ｐｐｈ3：トリフェニルホスフィン
Ｅｔ：エチル基
Ｍｅ：メチル基
Ｂｔ：ブチル基
ｉＰｒ：イソプロピル基
Ｂｚ：ベンゾイル基
ｒ．ｔ．：室温（ｒｏｏｍ  ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）
Ｅｔ3Ｎ：トリエチルアミン
Ｐｙｒ：ピリジン
ＡｃＯＨ：酢酸
Ａ：アデニン骨格を有する基
Ｇ：グアニン骨格を有する基
Ｃ：シトシン骨格を有する基
Ｕ：ウラシル骨格を有する基
ＤＭＴｒ：ジメチルトリチル基
ＤＭＴｒｄＵI：式の左の構造を有する物質。添字Ｉはヨウ素を意味する。Ｐ  ＤＭＴｒｄＮＯＨ：式２７の左の構造を有する物質。
【０１４３】
ＤＩＭＡＰ：ジメチルアミノピリジン
ＴＦＡ：トリフロロ酢酸
４−ＤＭＡＰ：４−ジメチルアミノピリジン
ＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィ−
ＨＰＬＣ：Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＴＢＤＭＳ：ｔ−ブチルジメチルシリル基
ＴＢＤＰＳ：ｔ−ブチルジフェニルシリル基
ＨＯＢＴ：ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＤＢＵ：ジアザビシクロウンデセン
ＦＭＯＣ基：フローレニルメトキシ基
［実施例１］（物質Ｉの合成、式２６）
【０１４４】
【化３０】
2006217881.tif 000031
ＤＭＴｒｄＵI３０．６ｇ（４６．７ｍｍｏｌ）を塩化メチレン４７０ｍＬに溶解しアルゴン雰囲気下に置換した。この溶液にＥｔ3Ｎ９．３４ｍＬ，ＣｕＩ３．５６ｇ，Ｐｄ（Ｐｐｈ3）１０．８ｇ及びプロパルギルアミン４．８１ｍＬを加え、室温にて１時間攪拌した。この反応溶液を直接、シリカゲルにロードし、クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン−エタノール（体積比で１：０から９：１へ徐々に変更）)にて精製し、目的物を２９．３ｇ（ＮＭＲよりの純度８０重量％）（収率８６％）得た。本粗生成物を用いることで以降の反応を行った。また少量をＨＰＬＣにより精製した。次のデータを得た。
【０１４５】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．２１（１Ｈ，ｍ），３．１０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．９，１０．４Ｈｚ），３．１４（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０．６，２．９Ｈｚ），３．２１（３Ｈ，ｍ），３．７３（６Ｈ，ｓ），３．９１（１Ｈ，ｍ），４．２７（１Ｈ，ｍ），５．３２（１Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ），６．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，６．９Ｈｚ），６．８８（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．１９−７．４２（９Ｈ，ｍ），７．８９（１Ｈ，ｓ）
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ３３Ｈ３３Ｎ３Ｏ７Ｎａ）＝６０６．２２２［Ｍ＋Ｎａ］+、実測値＝６０６．２７５。
【０１４６】
［実施例２］（物質ＸＩＩＩの合成、式２７）
【０１４７】
【化３１】
2006217881.tif 000032
ＤＭＴｒｄＮＯＨ１０ｍｍｏｌを脱水ジオキサン５０ｍＬに溶解し、ＤＩＭＡＰ９８ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ），ＤＣＣ４．１２ｇ（２０ｍｍｏｌ）およびレブリン酸２．０６ｍＬ（２０ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３０分攪拌した。続いてメタノール５ｍＬを加え１５分攪拌した。不溶物をろ別し、ろ液を濃縮乾固した。本残渣を７０ｍＬの脱水塩化メチレンを溶解、氷冷し１．４ｍＬのトリフロロ酢酸を加え、０℃で３０分攪拌した。この反応溶液を直接、シリカゲルにロードし、クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノール（体積比で１：０から９：１へ徐々に変更））にて精製し、物質ＸＩＩＩを得た。
【０１４８】
＜Ｂａｓｅ＝Ａの場合＞
収量３．８６ｇ（収率８５％）。
【０１４９】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．１３（３Ｈ，ｓ），２．５４（３Ｈ，ｍ），２．７７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），３．０４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１４．５，８．９，６．１Ｈｚ），３．６３（２Ｈ，ｍ），４．１０（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝６．１，２．８，１．５Ｈｚ），５．２０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），５．３７（１Ｈ，ｍ），６．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．９，６．２Ｈｚ），７．５４（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，７．１Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｔｔ，Ｊ＝７．５，２．０Ｈｚ），８．０３（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．１，２．０Ｈｚ），８．７１（１Ｈ，ｓ），８．７６（１Ｈ，ｓ），１１．２３（１Ｈ，ｓ）。
【０１５０】
＜Ｂａｓｅ＝Ｇの場合＞
収量３．７７ｇ（収率８７％）。
【０１５１】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．１８（３Ｈ，ｓ），２．４８（３Ｈ，ｍ），２．７５（３Ｈ，ｍ），２．８２（１Ｈ，ｍ），３．５７（２Ｈ，ｍ），４．０１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝５．９，２．８，１．６Ｈｚ），５．１１（１Ｈ，ｂｒ・ｔ，Ｊ＝４．６Ｈｚ），５．２９（１Ｈ，ｍ），６．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．０，６５．５Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｓ），８．７１（１Ｈ，ｓ），１１．６９（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），１２．０７（１Ｈ，ｓ）。
【０１５２】
＜Ｂａｓｅ＝Ｃの場合＞
収量３．８０（収率８９％）。
【０１５３】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．１２（３Ｈ，ｓ），２．２１（１Ｈ，ｍ），２．４７（３Ｈ，ｍ），２．７４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），３．６４（２Ｈ，ｍ），３．６３（２Ｈ，ｍ），４．１０（１Ｈ，ｍ），５．２０（２Ｈ，ｍ），６．１６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．７，６．０Ｈｚ），７．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），７．５０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，７．１Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），８．００（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），８．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１１．２３（１Ｈ，ｓ）。
【０１５４】
＜Ｂａｓｅ＝Ｔの場合＞
収量３．１４ｇ（収率９２％）。
【０１５５】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．７６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），２．１０（３Ｈ，ｓ），２．１６（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１４．４，６．０，２．０Ｈｚ），２．１６（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１４．４，９．０，６．２Ｈｚ），２．４８（２Ｈ，ｍ），２．７３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），３．６４（２Ｈ，ｍ），３．６３（２Ｈ，ｍ），３．９３（１Ｈ，ｍ），５．２０（２Ｈ，ｍ），６．１６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．０，６．０Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），１１．３５（１Ｈ，ｓ）。
【０１５６】
［実施例３］（物質ＩＶの合成、式２８）
【０１５７】
【化３２】
2006217881.tif 000033
物質ＸＩＩＩ（５ｍｍｏｌ）を脱水塩化メチレンで３回共沸脱水し乾燥した。これを脱水塩化メチレン２０ｍＬに溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（１．３１ｍＬ，７．５ｍｍｏｌ）を加え０℃に冷却した。ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（１．３４ｍＬ，６．０ｍｏｌ）の脱水塩化メチレン溶液（５．０ｍＬ）を滴下した。１時間攪拌後、メタノールを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、塩化メチレンにて希釈し、飽和、炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水、で洗浄した。中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン−ＥｔＯＨ（体積比で１：０から９：１へ徐々に変更））にて精製し、物質ＩＶを得た。
【０１５８】
＜Ｂａｓｅ＝Ａの場合＞
収量２．６７ｇ（収率８２％）、
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．０８（１２Ｈ，ｍ），２．１３（３Ｈ，ｓ），２．５６（１Ｈ，ｍ），２．７４（３Ｈ，ｍ），３．１３（１Ｈ，ｍ），３．５１（２Ｈ，ｍ），３．９２−３．６５（４Ｈ，ｍ），４．２３（１Ｈ，ｍ），５．４３（１Ｈ，ｍ），６．５１（１Ｈ，ｍ），７．５４（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，７．１Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｔｔ，Ｊ＝７．５，２．０Ｈｚ），８．０３（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．１，２．０Ｈｚ），８．６３（１／２Ｈ，ｓ），８．６４（１／２Ｈ，ｓ），８．７４（１Ｈ，ｓ），１１．２１（１Ｈ，ｓ）。
【０１５９】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１４８．０２。
【０１６０】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ３１Ｈ４１Ｎ７Ｏ７Ｐ）＝６５４．２８０５［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝６５４．１１２。
【０１６１】
＜Ｂａｓｅ＝Ｇの場合＞
収量２．９３ｇ（収率９２％）。
【０１６２】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．０８（１８Ｈ，ｍ），２．１２（３Ｈ，ｓ）２．４７（１Ｈ，ｍ），２．７５（５Ｈ，ｍ），２．８６（１Ｈ，ｍ），３．５３（２Ｈ，ｍ），３．７４（４Ｈ，ｍ），４．１７（１Ｈ，ｍ），５．３１（１Ｈ，ｍ），６．２４（１Ｈ，ｍ），８．１８（１／２Ｈ，ｓ），８．１９（１／２Ｈ，ｓ），１１．７１（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），１２．０４（１Ｈ，ｂｒ・ｓ）。
【０１６３】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１４８．１４，１４７．４７。
【０１６４】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ２８Ｈ４３Ｎ７Ｏ８Ｐ）＝６３６．２９１１［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝６３６．１３３。
【０１６５】
＜Ｂａｓｅ＝Ｃの場合＞
収量２．４５（収率７８％）。
【０１６６】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１２（１２Ｈ，ｍ），２．１５（３Ｈ，ｓ），２．２６（１Ｈ，ｍ），２．５１（１Ｈ，ｍ），２．７７（４Ｈ，ｍ），３．５５（２Ｈ，ｍ），３．８０（４Ｈ，ｍ），４．２７（１Ｈ，ｍ），５．２２（１Ｈ，ｍ），６．１５（１Ｈ，ｍ），７．３７（１Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），７．５０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，７．２Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｔｔ，Ｊ＝７．５，１．３Ｈｚ），８．００（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．２，１．３Ｈｚ），８．２１（１／２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），８．２２（１／２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）１１．２９（１Ｈ，ｓ）。
【０１６７】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１４８．３３，１４７．０８。
【０１６８】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ３０Ｈ４１Ｎ５Ｏ８Ｐ）＝６３０．２６９３［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝６３０．１３０。
【０１６９】
＜Ｂａｓｅ＝Ｔの場合＞
収量２．４７ｇ（収率９２％）。
【０１７０】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１２（１２Ｈ，ｍ），１．７７（３／２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ），１．７８（３／２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ），２．１０（３Ｈ，ｓ），２．２６（２Ｈ，ｍ），２．５０（２Ｈ，ｍ），２．７６（４Ｈ，ｍ），３．５６（２Ｈ，ｍ），３．７７（４Ｈ，ｍ），４．１０（１Ｈ，ｍ），５．１５（１／２Ｈ，ｍ），５．２１（１／２Ｈ，ｍ），６．１４（１／２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，７．０Ｈｚ），６．２０（１／２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９，６．２Ｈｚ），７．５０（１／２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ），７．６０（１／２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ），１１．３８（１Ｈ，ｓ）。
【０１７１】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１４８．３３，１４７．０８。
【０１７２】
［実施例４］（トリフルオロアセチルアミノカプロン酸の合成、式２９）
【０１７３】
【化３３】
2006217881.tif 000034
ω−アミノカプロン酸（２．５９ｇ，１９．７ｍｏｌ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（４．２ｍＬ，２９．９ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸エチル（３．５ｍＬ，２９．５ｍｍｏｌ）を加え、一昼夜、室温にて攪拌した。１重量％塩酸（１００ｍＬ）に反応液を注ぎ込み、塩化メチレンで一回抽出した。塩化メチレン層を水で一回、飽和食塩水で一回洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮して、２．７８ｇの粗生成物を得た。
【０１７４】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１．３９（２Ｈ，ｍ），１．６３（４Ｈ，ｍ），２．３６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），３．３６（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），６．４２（１Ｈ，ｂｒ・ｓ）。
【０１７５】
［実施例５］（モノマー：物質ＩＩLysの合成、式３０）
【０１７６】
【化３４】
2006217881.tif 000035
ω−トリフルオロアセチルアミノカプロン酸粗生成物１．２３ｇ（５．４１ｍｍｏｌ）とヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物０．９２ｇ（６．０１ｍｍｏｌ）を脱水塩化メチレン５４ｍＬに溶解した。この溶液にジシクロヘキシルカルボジイミド１．１６ｇ（５．７６ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３５分間攪拌した後、０℃に冷却し、物質Ｉ（３．６５ｇ，８０重量％，５．００ｍｍｏｌ）の脱水塩化メチレン溶液１０ｍＬを５分かけて滴下した。０℃にて一時間攪拌した後、室温まで昇温した。沈殿をろ過した後に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノール（体積比で１：０から９：１へ徐々に変更））にて精製し、目的物ＩＩLysを３．４０ｇ（収率８６％）得た。
【０１７７】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．２１（２Ｈ，ｍ），１．４５（４Ｈ，ｍ，），２．０６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，），２．１８（１Ｈ，ｍ，Ｃ（２）’Ｈ），２．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１３．５Ｈｚ），３．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．９，１０．４Ｈｚ），３．１４（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝６．０，６．７Ｈｚ），３．２５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，１０．４Ｈｚ），３．７３（３Ｈ，ｓ），３，７３（３Ｈ，ｓ），３．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，），３．８９（１Ｈ），４．２６（１Ｈ，ｍ），５．３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ），６．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，７．０Ｈｚ），６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），６．８９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．１５−７．３５（７Ｈ，ｍ），７．３９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．９０（１Ｈ，ｓ），８．１７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），９．３９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），１１．６６（１Ｈ，ｂｒ）。
【０１７８】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ４１Ｈ４４Ｆ３Ｎ４Ｏ９）＝７９３．３０６［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝７９３．２９７［Ｍ＋Ｈ］+。
【０１７９】
［実施例６］（モノマーアミダイト：物質ＩＩＩLysの合成、式３１）
【０１８０】
【化３５】
2006217881.tif 000036
物質ＩＩLys（０．５１７ｇ，０．６５５ｍｏｌ）を脱水アセトニトリル１ｍＬで３回共沸脱水し乾燥した。これを脱水アセトニトリル２．３ｍＬに溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（１６７μＬ，０．９８２ｍｍｏｌ）を加え０℃に冷却した。ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（０．１９９ｇ，０．８４１ｍｏｌ）の脱水アセトニトリル溶液（１．０ｍＬ）を滴下した。１時間攪拌後、メタノールを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、塩化メチレンにて希釈し、飽和、炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水、で洗浄した。中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：ヘキサンを、体積比１：１から１：０に徐々に変更した後、２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から１９：１に徐々に変更)にて精製し、物質ＩＩＩLys０．５８６ｇを得た。収率８７％。
【０１８１】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．９７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．１０（９Ｈ，ｍ），１．２１（２Ｈ，ｍ，），１．４４（４Ｈ，ｍ），２．０５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），２．３０（１Ｈ，ｍ），２．４１（１Ｈ，ｍ），２．６４（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，），２．７５（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），３．１３（２Ｈ，ｍ），３．１３（１Ｈ，ｍ），３．２８（１Ｈ，ｍ），３．５０（２Ｈ，ｍ），３．６１（２Ｈ×１／２，ｍ），３．７０（２Ｈ×１／２，ｍ），３．７２（６Ｈ，ｓ），３．８９（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），３．９２（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），４．０１（１Ｈ×１／２，ｂｒ），４．０５（１Ｈ×１／２，ｂｒ），４．４８（１Ｈ，ｂｒ），６．０８（１Ｈ，ｍ），６．０７（１／２Ｈ，ｍ），６．０９（１／２Ｈ，ｍ），６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，），６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，），７．１５−７．３５（７Ｈ，ｍ），７．３９，（２Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．９４（１／２Ｈ，ｓ），７．９５（１／２Ｈ，ｓ），８．１８（１／２Ｈ，ｂｒ），８．２０（１／２Ｈ，ｂｒ），９．３９（１Ｈ，ｂｒ），１１．６７‘１Ｈ，ｂｒ）。
【０１８２】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１４７．６２，１４８．０２。
【０１８３】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ５０Ｈ６１Ｆ３Ｎ６Ｏ１０Ｐ+）＝９９３．４１３［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝９９３．４００［Ｍ＋Ｈ］+。
【０１８４】
［実施例７］（ダイマー：物質ＶLysｂａｓｅ＝Ａの合成、式３２）
【０１８５】
【化３６】
2006217881.tif 000037
物質ＩＩLys（２．２４ｇ，２．８３ｍｍｏｌ）とＮ−ベンゾイル−３’−レブロイルアデノシン５’−（ジイソプロピルアミノ）シアノエチルホスホアミダイト（物質ＶＩｂａｓｅ＝Ａ，２．２２ｇ，３．４０ｍｍｏｌ）を２００ｍＬナスフラスコに量り取り、脱水アセトニトリルで３回共沸した後、真空ポンプで乾燥した。０．４５ｍｏｌ／Ｌのテトラゾール／アセトニトリル溶液３１．５ｍＬ（テトラゾール１５．８ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３０分攪拌した。反応系に飽和重曹水を加え中和した後、塩化メチレンで３回抽出した。合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮した。
【０１８６】
得られた残渣を、ＴＨＦ４２ｍＬ，ピリジン１４ｍＬ，水７ｍＬに溶解し、ヨウ素２．１６ｇ（８．５０ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３０分攪拌した。反応系を塩化メチレンで希釈した後、５重量％亜硫酸ナトリウム水溶液を加え過剰のヨウ素を還元処理し、その後、水層をさらに２回、塩化メチレンで抽出した。合わせた塩化メチレン層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノール（体積比で１：０から９：１へ徐々に変更））を用いて精製し、目的物ＶLysｂａｓｅ＝Ａを３．２４ｇ（収率８４％）得た。
【０１８７】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．２１（２Ｈ，ｍ），１．４５（４Ｈ，ｍ），２．０５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，），２．１０（３Ｈ×１／２，ｓ，），２．１０（３Ｈ×１／２，ｓ），２．４０−２．５５（６Ｈ，ｍ），２．７４（２Ｈ，ｍ），２．８２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．０５−３．２０（４Ｈ，ｍ），３．２８（１Ｈ，ｍ），３．８９（２Ｈ，ｂｒ），４．０９（３Ｈ，ｍ），４．２７（３Ｈ，ｍ），４．９８（１Ｈ，ｍ），５．４３（１Ｈ，ｍ），６．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．９，６．８Ｈｚ），６．５０（１Ｈ，ｍ），６．８６（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），７．２０−７．４０（９Ｈ，ｍ），７．５３（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．０，７．３Ｈｚ）），７．６４（１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），７．８９（１／２Ｈ，ｓ），７．９０（１／２Ｈ，ｓ），８．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），８．１７（１Ｈ，ｍ），８．６３（１／２Ｈ，ｓ，），８．６３（１／２Ｈ，ｓ），８．７２（１Ｈ，ｓ），９．３８（１Ｈ，ｓ，），１１．２０（１Ｈ，ｂｒ），１１．６９（１Ｈ，ｂｒ）。
【０１８８】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．１６，−２．０６。
【０１８９】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ６６Ｈ６８Ｆ３Ｎ１０ＮａＯ１７Ｐ+）＝１３８３．４３４６［Ｍ＋Ｎａ］+、実測値＝１３８３．２００［Ｍ＋Ｎａ］+。
【０１９０】
［実施例８］（ダイマー脱レブロイル化：物質ＶLysｂａｓｅ＝Ａの合成、式３３）
【０１９１】
【化３７】
2006217881.tif 000038
物質ＶLysｂａｓｅ＝Ａ（３．２４ｇ，２．３８ｍｏｌ）をピリジン−酢酸混合溶媒（体積比で８：２）に６４ｍＬ溶解し、ヒドラジン一水和物（１．１０ｍＬ，２２．６３ｍｏｌ）を加え、室温にて１０分攪拌した。０℃にてアセトンを適当量加え過剰のヒドラジンをアゾンとした後、塩化メチレンで希釈し、過剰の酢酸を飽和重曹水で中和した。塩化メチレンで３回抽出した後、合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濃縮した。得られた残渣を、中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から９：１に徐々に変更）)を用いて精製し、目的物ＶＩLysｂａｓｅ＝Ａ２．２３ｇ（収率７４％）を得た。
【０１９２】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．２１（２Ｈ，ｍ），１．４５（４Ｈ，ｍ，），２．０５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，），２．４０（１Ｈ，ｍ），２．５０（２Ｈ，ｍ），２．８２（２Ｈ，ｂｒ・ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），２．８８（１Ｈ，ｍ），３．１３（３Ｈ，ｍ），３．３０（１Ｈ，ｍ），３．７０（３Ｈ，ｓ），３．７０（３Ｈ，ｓ），３．８９（２Ｈ，ｂｒ・ｍ），４．０−４．３（６Ｈ，ｍ），４．５０（１Ｈ，ｍ），４．９９（１Ｈ，ｍ），５．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），６．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，７．２Ｈｚ），６．４８（１Ｈ，ｍ），６．８６（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．１５−７．３０（７Ｈ，ｍ），７．３６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．５３（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，７．２Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．８９（１／２Ｈ，ｓ），７．９１（１／２Ｈ，ｓ），８．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），８．１９（１Ｈ，ｂｒ），８．５９（１／２Ｈ，ｓ），８．６０（１／２Ｈ，ｓ，），８．７１（１Ｈ，ｍ），９．４０（１Ｈ，ｂｒ），１１．１９（１Ｈ，ｓ），１１．７０（１Ｈ，ｓ）。
【０１９３】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．１４，−２．０１。
【０１９４】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ６１Ｈ６２Ｆ３Ｎ１０ＮａＯ１５Ｐ+）＝１２８５．３９７８［Ｍ＋Ｎａ］、実測値＝１２８５．１８７［Ｍ＋Ｎａ］。
【０１９５】
［実施例９］（ダイマーアミダイト：物質ＶLysｂａｓｅ＝Ａの合、式３４）
【０１９６】
【化３８】
2006217881.tif 000039
物質ＶＩLysｂａｓｅ＝Ａ（１．６６ｇ，１．３１ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリルを用いて三回共沸脱水し、真空ポンプで十分に乾燥した。アセトニトリル１３ｍＬを加え、ジイソプロピルエチルアミン（２９８μＬ，１．７１ｍｍｏｌ）を加え、０℃に冷却した後、ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（０．３５ｍＬ，１．５８ｍｍｏｌ）を加え、０℃にて１時間攪拌した。
【０１９７】
メタノール１．３ｍＬを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、塩化メチレンにて希釈し、飽和、炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水、で洗浄した。溶媒を減圧留去し、残渣を中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から９：１に徐々に変更）で精製し、目的物ＶＩＩLysｂａｓｅ＝Ａ１．５６ｇ（収率８１％）を得た。
【０１９８】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１６（１４Ｈ，ｍ），１．４４（４Ｈ，ｍ，），２．０５（２Ｈ，ｍ，），２．５０（２Ｈ，ｍ），２．５２（１Ｈ，ｍ），２．８０（４Ｈ，ｍ），３．００−３．２０（４Ｈ，ｍ），３．３０（１Ｈ，ｍ），３．６０（２Ｈ，ｍ），３．７０（６Ｈ，ｓ），３．７７（２Ｈ，ｍ），３．８９（２Ｈ，ｓ），４．００−４．３５（６Ｈ，ｍ），４．７９（１Ｈ，ｍ），４．９８（１Ｈ，ｍ），６．０９（１Ｈ，ｂｒ・ｄｄ，Ｊ＝６．４，６．９Ｈｚ），６．４９（１Ｈ，ｍ），６．８５（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．１０−７．３０（７Ｈ，ｍ），７．３６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．５６（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．２，７．５Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．９０（１Ｈ，ｓ），８．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），８．１７（１Ｈ，ｂｒ），８．６０（１Ｈ，ｂｒ），８．７１（１Ｈ，ｂｒ），９．３８（１Ｈ，ｂｒ），１１．１９（１Ｈ，ｓ），１１．６９（１Ｈ，ｓ）。
【０１９９】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．１４，−２．０９，１４８．３５，１４８．４２。
【０２００】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ７０Ｈ７９Ｆ３Ｎ１２ＮａＯ１６Ｐ２+）＝１４８５．５０５７［Ｍ＋Ｎａ］+、実測値＝１４８５．３７６［Ｍ＋Ｎａ］+。
【０２０１】
［実施例１０］（式３５の右側の物質の合成、）
【０２０２】
【化３９】
2006217881.tif 000040
水素化ナトリウム（１．１８ｇ，２９．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ懸濁液に０℃で（４−ヒドロキシフェニル）酢酸（２．２５ｇ，１４．８ｍｍｏｌ）を固体のままゆっくり加え、攪拌した。約５分後にｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（４．４５ｇ，２９．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液を加えた。反応がおさまった時点で、室温に上げ攪拌した。引き続き、炭酸ナトリウム（１５．６ｇ，１４７．４ｍｍｏｌ）を固体で加え、水を加えて、攪拌した。ＴＬＣで反応の終了を確認した後、塩化アンモニウムを固体（１８．９ｇ，３５４．０ｍｍｏｌ）で加え、水を加え、さらに攪拌した。減圧下濃縮し、残渣をジクロロメタンで洗って、有機物を取り出した。この溶液を濃縮し、中圧カラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ジクロロメタン、（体積比で１：０から０：１へ徐々に変更））、その後、ジクロロメタン−酢酸９８：２）により精製し、目的のカルボン酸を得た（３．２６３８ｇ，収率８３％）。
【０２０３】
［実施例１１］（モノマー：物質ＩＩTyrの合成、式３６）
【０２０４】
【化４０】
2006217881.tif 000041
Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物１．１２ｇ（７．２８ｍｍｏｌ）に４−（ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）フェニル）酢酸（１．６１ｇ，６．０３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液を加え、攪拌した。引き続き、ジシクロヘキシルカルボジイミド（１．４９ｇ，７．２３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液を加え、３０分間攪拌した。０℃に冷却し、（４．３６ｇ，８０重量％，５．９７ｍｍｏｌ）の物質Ｉのジクロロメタン溶液を加え、さらに０℃のまま約２時間攪拌した。ＴＬＣで反応の終了を確認した後、ジシクロヘキシル尿素をろ過により除去した。水を加え、そのままジクロロメタンで抽出し、さらに１回水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過した後、減圧下濃縮した。中圧カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン−酢酸エチルを、体積比で１：０から０：１へ徐々に変更）により精製し、目的物ＩＩTyrを得た（４．０１ｇ，収率８０％）。
【０２０５】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．１５（６Ｈ，ｓ），０．９３（９Ｈ，ｓ），２．１８（１Ｈ，ｍ），２．２５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，１２．１Ｈｚ），３．０７（１Ｈ，ｍ），３．２５（１Ｈ，ｍ），３．３３（２Ｈ，ｓ），３．７２（６Ｈ，ｓ），３．８８（１Ｈ，ｍ），３．９９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），４．２７（１Ｈ，ｍ），６．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），６．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，６．８Ｈｚ），６．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６．８７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．１０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．１５−７．３０（７Ｈ，ｍ），７．３８（２Ｈ，ｄ，＝７．２Ｈｚ），７．８９（１Ｈ，ｓ），８．３７（１Ｈ，ｂｒ，ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），１１．６３（１Ｈ，ｂｒ・ｓ）。
【０２０６】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ４７Ｈ５４Ｎ３Ｏ９Ｓｉ+）＝８３２．３６２４［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝８３２．０８３［Ｍ＋Ｈ］+。
【０２０７】
［実施例１２］（アミダイト：物質ＩＩＩTyrの合成、式３７）
【０２０８】
【化４１】
2006217881.tif 000042
アセトニトリルを用いて、物質ＩＩTyr０．３３４ｇ（０．４０２ｍｍｏｌ）から、共沸（３回）により水を除いた後、真空ポンプにより乾燥した。アルゴン雰囲気下、このアミドを４ｍＬのアセトニトリルに溶解し、室温で、ジイソプロピルエチルアミン８０μＬ（０．４７０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液（０．５ｍＬ）および２−シアノエチルジイソプロピルクロロホスホルアミダイト０．１０９ｇ（０．４６１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液（０．５ｍＬ）を加え、約１時間攪拌した。ＴＬＣで反応の終了を確認した後、メタノールを加えて３０分攪拌した。その後、水を加えてジクロロメタンで抽出し（２回）、食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過した後、減圧下濃縮した。中圧カラムクロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：ヘキサンを、体積比で１：１から１：０に徐々に変更した後、２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：アセトンを、体積比で１：０から４：１に徐々に変更）により精製し、目的物ＩＩＩTyrを得た（０．３０５ｇ，収率７４％）。
【０２０９】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．１６（６Ｈ，ｓ），０．９３（９Ｈ，ｓ），０．９８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．１２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．３２（１Ｈ，ｍ），２．４２（１Ｈ，ｍ，），２．６４（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ），２．７５（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ），３．１５（１Ｈ，ｍ），３．３０（１Ｈ，ｍ），３．３３（２Ｈ，ｓ），３．４８（２Ｈ，ｍ），３．５２（２Ｈ，ｍ），３．７２（３Ｈ，ｓ），３．７２（３Ｈ，ｓ），３．９１（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，），３．９４（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），４．０３（１／２Ｈ，ｍ），４．０６（１／２Ｈ，ｍ），４．４８（１Ｈ，ｍ），６．０８（１／２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，），６．１０（１／２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），６．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，），７．１１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．１５−７．３５（７Ｈ，ｍ），７．３９（２Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．９４（１／２Ｈ，ｓ），７．９４（１／２Ｈ，ｓ），８．３９（１／２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），８．４０（１／２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），１１．５６（１Ｈ，ｂｒ）。
【０２１０】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１４７．６２，１４８．００。
【０２１１】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ５６Ｈ７１Ｎ５Ｏ１０ＰＳｉ+）＝１０３２．４７０２［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝１０３２．５３３［Ｍ＋Ｈ］+。
【０２１２】
［実施例１３］（ダイマー：物質ＶTyrｂａｓｅ＝Ｇの合成、式３８）
【０２１３】
【化４２】
2006217881.tif 000043
物質ＩＩtyr（３．６７ｇ，４．４１ｍｍｏｌ）とＮ−イソブチリル−３’−レブロイルグアノシン−５’−ジイソプロピルアミノシアノエチルホスホアミダイト（物質ＩＶｂａｓｅ＝Ｇ，３．３６ｇ，５．２９ｍｍｏｌ）を２００ｍＬナスフラスコに量り取り、脱水アセトニトリルで３回共沸した後、真空ポンプで乾燥した。脱水アセトニトリル２５ｍＬに溶解した後、０．４５ｍｏｌ／Ｌのテトラゾール／アセトニトリル溶液（４９ｍＬ，テトラゾール２２．１ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３０分攪拌した。反応系に飽和重曹水を加え中和した後、塩化メチレンで３回抽出した。合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮した。
【０２１４】
得られた残渣をＴＨＦ１１．５ｍＬに溶解し、０．１２ｍｏｌ／Ｌのヨウ素／ＴＨＦ−ピリジン−水（体積比で２：２：１）（１１．５ｍＬ，ヨウ素１１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３０分攪拌した。反応系を塩化メチレンで希釈した後、１０重量％チオ硫酸ナトリウム水溶液を加え過剰のヨウ素を還元処理し、その後、水層をさらに２回、塩化メチレンで抽出した。合わせた塩化メチレン層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノール（体積比で１：０から９：１へ徐々に変更））を用いて精製し、目的物を５．６２ｇ（収率９２％）得た。
【０２１５】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．１２（６Ｈ，ｓ），０．８９（９Ｈ，ｓ），１．０８（６Ｈ，ｍ），２．０６（３Ｈ×１／２，ｓ），２．０７（３Ｈ×１／２，ｓ），２．４７（４Ｈ，ｍ），２．７１（２Ｈ，ｍ），２．７５（１Ｈ，ｍ），２．８１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．８１（１Ｈ，ｍ），２．８５（１Ｈ，ｍ），３．０８（１Ｈ，ｍ），３．２８（１Ｈ，ｍ），３．３１（２Ｈ×１／２，ｓ），３．３２（２Ｈ×１／２，ｓ），３．６８（３Ｈ，ｓ），３．６８（３Ｈ，ｓ），３．８９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），４．００−４．３０（６Ｈ，ｍ），５．００（１Ｈ，ｍ），５．２９（１Ｈ，ｍ），６．０８（１Ｈ，ｍ），６．２１（１Ｈ，ｍ），６．７１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），６．８３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），６．８３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，），７．０８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．１５（１Ｈ，ｍ），７．２２（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．２２（２Ｈ，ｍ），７．３３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚｈ），７．８９（１／２Ｈ，ｓ），７．９０（１／２Ｈ，ｓ），８．１７（１／２Ｈ，ｓ），８．１８（１／２Ｈ，ｓ），８．４１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），１１．５９（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），１１．６９（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），１２．０５（１Ｈ，ｂｒ・ｓ）。
【０２１６】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＢＣＭ，１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：−２．１９，−２．０６。
【０２１７】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ６９Ｈ８０Ｎ９ＮａＯ１８ＰＳｉ+）＝１４０４．５０２［Ｍ＋Ｎａ］+、実測値＝１４０４．６３２。
【０２１８】
［実施例１４］（ダイマー脱レブロイル化：物質ＶＩTyrｂａｓｅ＝Ｇの合成、式３９）
【０２１９】
【化４３】
2006217881.tif 000044
物質ＶTyrｂａｓｅ＝Ｇ（５．６１ｇ，４．０６ｍｍｏｌ）をピリジン４１ｍＬに溶解し、ヒドラジン一水和物（２．０ｍＬ，４１．１ｍｍｏｌ）のピリジン−酢酸（体積比で３：２）混合溶媒溶液４１ｍＬを加え、０℃にて１時間攪拌した。アセトンを４ｍＬ加え過剰のヒドラジンをアゾンとした後、塩化メチレンで希釈し、過剰の酢酸を飽和重曹水で中和した。塩化メチレンで３回抽出した後、合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濃縮した。
【０２２０】
得られた残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノール（体積比で１：０から９：１へ徐々に変更））を用いて精製し、目的物ＶＩTyrｂａｓｅ＝Ｇ４．６５ｇ（収率９０％）を得た。
【０２２１】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：０．１４（６Ｈ，ｓ），０．９２（９Ｈ，ｓ），１．１１（６Ｈ，ｍ），２．３３（１Ｈ，ｍ），２．５０（２Ｈ，ｍ），２．６１（１Ｈ，ｍ），２．７５（１Ｈ，ｍ），２．８４（２Ｈ，ｍ），３．１１（１Ｈ，ｍ），３．２９（１Ｈ，ｍ），３．３３（２Ｈ，ｓ，），３．７０（３Ｈ，ｓ），３．７１（３Ｈ，ｓ），３．９２（２Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），４．０１（１Ｈ，ｍ），４．１１（２Ｈ，ｍ），４．１０−４．３０（３Ｈ，ｍ），４．４０（１Ｈ，ｍ），５．０２（１Ｈ，ｍ），５．５３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．９Ｈｚ），６．１０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，７．５Ｈｚ），６．２３（１Ｈ，ｍ），６．７３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６．８６（４Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．１０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．１５−７．３０（７Ｈ，ｍ），７．３５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．９１（１／２Ｈ，ｓ），７．９２７．９１（１／２Ｈ，ｓ），８．１４（１／２Ｈ，ｓ），８，１６（１／２Ｈ，ｓ，），８．４４（１Ｈ，ｂｒ・ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），１１．６０（１Ｈ，ｂｒ），１１．７２（１Ｈ，ｂｒ）。
【０２２２】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＢＣＭ，１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：−２．０９，−１．９４。
【０２２３】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ６４Ｈ７４Ｎ９ＮａＯ１６ＰＳｉ+）＝１３０６．４６５３［Ｍ＋Ｈ］、実測値＝１３０６．３７５［Ｍ＋Ｈ］。
【０２２４】
［実施例１５］（ダイマーアミダイト：物質ＶＩＩTyrｂａｓｅ＝Ｇの合成、式４０）
【０２２５】
【化４４】
2006217881.tif 000045
物質ＶＩTyrｂａｓｅ＝Ｇ（１．４４ｇ，１．１２ｍｍｏｌ）を、脱水アセトニトリルを用いて三回共沸脱水し、真空ポンプで十分に乾燥した。アセトニトリル１１ｍＬを加え、ジイソプロピルエチルアミン（２５２μＬ，１．４６ｍｍｏｌ）を加え、０℃に冷却した後、ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（３００μＬ，１．３５ｍｍｏｌ）を加え、０℃にて１時間攪拌した。
【０２２６】
メタノール１．０ｍＬを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、水と塩化メチレンで分配し、有機層を濃縮後、中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から９：１に徐々に変更）にて精製し、目的物ＶＩＩTyrｂａｓｅ＝Ｇ０．９９ｇ（収率６０％）を得た。
【０２２７】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．１４（６Ｈ，ｓ），０．９２（９Ｈ，ｓ），１．１４（１８Ｈ，ｍ），２．５（３Ｈ，ｍ），３．１１（１Ｈ，ｍ），３．３（１Ｈ，ｍ），３．５８（２Ｈ，ｍ），３．７０（３Ｈ，ｓ），３．７１（３Ｈ，ｓ），３．７２（２Ｈ，ｍ），３．９１（２Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），４．０−４．３（６Ｈ，ｍ），４．６１（１Ｈ，ｍ），５．０１（１Ｈ，ｍ），６．１０（１Ｈ，ｍ），６．２５（１Ｈ，ｍ），６．７３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．０９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．１５−７．３（７Ｈ，ｍ），７．９１（１Ｈ，ｓ），８．１７（１Ｈ，ｓ），８．４３（１Ｈ，ｂｒ），１１．５５（１Ｈ×１／２，ｓ），１１．５７（１Ｈ×１／２，ｓ），１１．７１（１Ｈ，ｓ），１２．０７（１Ｈ，ｓ）。
【０２２８】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．０１，−１．８９，１４８．４２，１４８．７０。
【０２２９】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ７３Ｈ９１Ｎ１１ＮａＯ１７Ｐ２Ｓｉ+）＝１５０６．５７３１［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝１５０６．３１７［Ｍ＋Ｈ］+。
【０２３０】
［実施例１６］（モノマー：物質ＩＩSerの合成、式４１）
【０２３１】
【化４５】
2006217881.tif 000046
Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド１．２７ｇ（１２．５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン３０ｍＬに溶解し、室温で攪拌しながら、アセトキシアセチルクロリド（１．０８ｍＬ，１０．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１０ｍＬ）を加えた。引き続きトリエチルアミン（１．６６ｍＬ，１２．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１０ｍＬ）を加え、約４０分間攪拌を続けた。（５．６８ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）の物質Ｉのジクロロメタン溶液（１０ｍＬ）を加え、さらに約２時間攪拌した。ＴＬＣで反応の終了を確認した後、水を加え、そのままジクロロメタンで抽出した。有機層に食塩水を加えて塩析し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過した後、減圧下濃縮した。中圧カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン−酢酸エチルを、体積比で１：０から０：１へ徐々に変更）により精製し、目的のアミドを得た（５．９９ｇ，収率８８％）。
【０２３２】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．０７（３Ｈ，ｓ），２．１６（１Ｈ，ｍ），２．２６（１Ｈ，ｍ），３．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．６，１０．３Ｈｚ），３．２５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．２，１０．３Ｈｚ），３．７３（６Ｈ，ｓ），３．９１（１Ｈ，ｍ），３．９３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），４．２５（１Ｈ，ｍ），４．４４（２Ｈ，ｓ），５．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），６．０８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，６．８Ｈｚ），６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ＤＭＴｒ），６．８９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．２０−７．３５（７Ｈ，ｍ），７．３９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．９０（１Ｈ，ｓ），８．４７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），１１．６７（１Ｈ，ｓ）。
【０２３３】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ３７Ｈ３８Ｎ３Ｏ１０＋）＝６８４．２５５２［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝６８３．９６０［Ｍ＋Ｈ］+。
【０２３４】
［実施例１７］（アミダイト：物質ＩＩＩSerの合成、式４２）
【０２３５】
【化４６】
2006217881.tif 000047
物質ＩＩSer３４２ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリル５ｍＬで３回共沸脱水し乾燥した。これを脱水アセトニトリル１０ｍＬに溶解し、ジイソプロピルエチルアミン１０４μＬ（０．６０ｍｍｏｌ）を加えた後に、氷冷下、ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（１２２μＬ，０．５５ｍｍｏｌ）を加えた。２時間攪拌後、メタノールを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、塩化メチレンにて希釈し、飽和、炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水、で洗浄した。中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：ヘキサンを、体積比１：１から１：０に徐々に変更した後、２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から１９：１に徐々に変更）にて精製し、物質ＩＩＩSerを３６７ｍｇ得た（収率８７％）。
【０２３６】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．９８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．１０（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．１２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），２．０７（３Ｈ，ｓ），２．３０（１Ｈ，ｍ），２．４３（１Ｈ，ｍ），２．６４（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，），２．７４（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．１６（１Ｈ，ｍ），３．２８（１Ｈ，ｍ），３．５０（２Ｈ，ｍ），３．６５（２Ｈ，ｍ），３．９５（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），３．９８（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），４．０６（１Ｈ，ｍ），４．４４（２Ｈ，ｓ），４．４８（１Ｈ，ｍ），６．０７（１／２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，７．０Ｈｚ），６．０９（１／２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，６．８Ｈｚ），６．８７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，），７．２０−７．３５（７Ｈ，ｍ），７．３９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．９４（１Ｈ，ｓ），８．４３（１／２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，），８．４５（１／２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），１１．６４（１Ｈ，ｓ）。
【０２３７】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＢＣＭ，１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：１４７．６２，１４８．０２。
【０２３８】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ４６Ｈ５４Ｎ５ＮａＯ１１Ｐ+）＝９０６．３４５［Ｍ＋Ｎａ］+、実測値＝９０５．８５７［Ｍ＋Ｎａ］+。
【０２３９】
［実施例１８］（レブロイル基導入及び脱ＤＭＴｒ化：物質ＩＸserの合成、式４３）
【０２４０】
【化４７】
2006217881.tif 000048
物質ＩＩSer（１．９６ｇ，２．８７ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２３ｍＬ）に溶解し、ピリジン（０．５８ｍＬ）、Ｎ−エチル−Ｎ’−（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１．３８ｇ，７．２２ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（０．０３０ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）、レブリン酸（０．６０ｍＬ，５．８４ｍｍｏｌ）を室温にて順次加えた。５時間２０分室温にて攪拌した後、塩化メチレンと飽和重曹水で分配し、さらに塩化メチレンで２回抽出した。合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０２４１】
濃縮残渣を塩化メチレン４１ｍＬに溶解し、氷冷した後、トリフルオロ酢酸（４１０μＬ）を加え１時間、０℃にて攪拌した。重曹を紛体で加え大部分のトリフルオロ酢酸を中和した後ろ過し、濃縮した。濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノール（体積比で１：０から９：１へ徐々に変更））にて精製し、１．１６ｇの目的物ＩＸserを得た（収率８４％）。
【０２４２】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．０８（３Ｈ，ｓ，），２．１１（３Ｈ，ｓ），２．２７（２Ｈ，ｍ），２．４９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），２．７６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），３．６２（２Ｈ，ｍ），３．９９（１Ｈ，ｍ），４．１１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），４．４０（２Ｈ，ｓ，），５．１９（１Ｈ，ｍ），５．２８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），６．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，７．５Ｈｚ），８．１７（１Ｈ，ｓ），８．５８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），１１．６９（１Ｈ，ｓ）。
【０２４３】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ２１Ｈ２６Ｎ３Ｏ１０+）＝４８０．１６１３［Ｍ＋Ｈ］Ｈ+、実測値＝４８０．２３４。
【０２４４】
［実施例１９］（ダイマー：物質ＸSerｂａｓｅ＝Ｔの合成、式４４）
【０２４５】
【化４８】
2006217881.tif 000049
物質ＩＸSer（１．０９ｇ，２．２８ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリルで三回共沸脱水し、真空ポンプにて乾燥した。これに５’−（４，４’−ジメトキシトリフェニルメチル）−チミジン−３’−（ジイソプロピルアミノ）シアノエチルホスホアミダイト（１．７０ｇ，２．２９ｍｍｏｌ）を加え、脱水アセトニトリル１２ｍＬを加え、０．４５ｍｏｌ／Ｌのテトラゾール／アセトニトリル溶液（２５ｍＬ，テトラゾール１１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温にて４５分間攪拌した。塩化メチレンと飽和重曹水を加えて分配した後、さらに水層を塩化メチレンで二回抽出し、合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０２４６】
濃縮残渣をＴＨＦ３４ｍＬ，ピリジン９．５ｍＬ，水４．７ｍＬの混合溶液の溶解し、ヨウ素１．４５ｇ（５．７０ｍｍｏｌ）を加え、３０分間室温にて攪拌した。塩化メチレンで希釈した後、亜硫酸ナトリウム３．６ｇを加え、室温で１５分攪拌した。無水硫酸ナトリウムを用い水分を除いた後に、濃縮した。濃縮残渣を塩化メチレンで希釈し、水で洗浄した。水層を塩化メチレンで二回抽出し、合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０２４７】
濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比で１：０から９３：７へ徐々に変更）で精製し、目的物ＸSerｂａｓｅ＝Ｔ２．００ｇを得た（収率７７％）。
【０２４８】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．４２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），２．０６（３Ｈ×１／２，ｓ），２．０６（３Ｈ，ｓ），２．０７（３Ｈ×１／２，ｓ），２．２３（１Ｈ，ｄｄＪ＝６．４，１３．６Ｈｚ），２．４３（５Ｈ，ｍ），２．７０（２Ｈ，ｍ），２．８７（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），２．８９（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），３．２１（１Ｈ，ｍ），３．３０（１Ｈ，ｍ），３．７２（６Ｈ，ｓ），４．０５−４．３０（８Ｈ，ｍ），４．４４（２Ｈ×１／２，ｓ），４．４５（２Ｈ×１／２，ｓ），５．１１（２Ｈ，ｍ），６．０６（１Ｈ×１／２，ｄｄ，Ｊ＝６．１，６．１Ｈｚ，），６．０９（１Ｈ×１／２，ｄｄ，Ｊ＝６．１，６．１Ｈｚ），６．２１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．０，７．２Ｈｚ），６．８８（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．２３（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．２０−７．４０（５Ｈ，ｍ），７．４８（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），７．９５（１Ｈ，ｂｒ），８．５３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，），１１．３９（１Ｈ，ｂｒ），１１．７１（１Ｈ，ｂｒ）。
【０２４９】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＢＣＭ，１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．１９，−２．１１。
【０２５０】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ５５Ｈ５９Ｎ６ＮａＯ１９Ｐ+）＝１１６１．３４６［Ｍ＋Ｎａ］、実測値＝１１６１．２５９［Ｍ＋Ｎａ］。
【０２５１】
［実施例２０］（ダイマー脱レブロイル化：物質ＸＩSerｂａｓｅ＝Ｔの合成、式４５）
【０２５２】
【化４９】
2006217881.tif 000050
物質ＸSerｂａｓｅ＝Ｔ（１．９２ｇ，１．６９ｍｍｏｌ）をピリジン２３ｍＬに溶解しヒドラジン一水和物（０．７８ｍＬ，１６．０ｍｍｏｌ）およびピリジン−酢酸（体積比で３：２）混合溶媒（２３ｍＬ）を加え、室温で５分攪拌した。氷冷下、アセトン１７ｍＬを加えた。反応液を塩化メチレンで希釈し、分配した後、さらに水層を塩化メチレンで２回抽出した。合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０２５３】
濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比で１：０から９３：７へ徐々に変更）で精製し、目的物ＸＩSerｂａｓｅ＝Ｔを１．５０ｇ得た（収率８６％）。
【０２５４】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．４４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），２．０６（３Ｈ，ｓ），２．０９（１Ｈ，ｍ），２．２０（１Ｈ，ｍ），２．５０（２Ｈ，ｍ），２．８７（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），２．８９（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），３．３（２Ｈ，ｍ），３．７３（６Ｈ，ｓ），３．９０（１Ｈ，ｍ），４．０８（２Ｈ，ｍ），４．１０−４．２５（５Ｈ，ｍ），４．４４（２Ｈ，ｓ），５．０８（１Ｈ，ｍ），５．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），６．０８（１Ｈ，ｍ），６．２１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．２，７．３Ｈｚ），６．８８（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．２４（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．２２−７．４０（５Ｈ，ｍ），７．４７（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），７．８６（１／２Ｈ，ｓ），７．８７（１／２Ｈ，ｓ），８，４８（１Ｈ，ｂｒ），１１．３４（１Ｈ，ｂｒ），１１．６２（１Ｈ，ｂｒ）。
【０２５５】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＢＣＭ，１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−１．９９，−１．８９。
【０２５６】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ５０Ｈ５３Ｎ６ＮａＯ１７Ｐ+）＝１０６３．３１０［Ｍ＋Ｎａ］、実測値＝１０６３．２８８［Ｍ＋Ｎａ］。
【０２５７】
［実施例２１］（ダイマーアミダイト：物質ＸＩＩSerｂａｓｅ＝Ｔの合成、式４６）
【０２５８】
【化５０】
2006217881.tif 000051
物質ＸＩSerｂａｓｅ＝Ｔ（１．２３ｍｇ，１．１８ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリルを用いて三回共沸脱水し、真空ポンプで十分に乾燥した。アセトニトリル１２ｍＬ、塩化メチレン４ｍＬを加え、ジイソプロピルエチルアミン（２６８μＬ，１．５４ｍｍｏｌ）を加え、−２０℃に冷却した後、ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（０．３２ｍＬ，１．４４ｍｍｏｌ）を加え、室温にて１時間攪拌した。
【０２５９】
メタノール１．２ｍＬを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、濃縮し残渣を中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から９：１に徐々に変更）にて精製した結果、目的物ＸＩＩSerｂａｓｅ＝Ｔ１．２１ｇ（収率８２％）を得た。
【０２６０】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１２（１２Ｈ，ｍ），１．４１（３Ｈ，ｂｒ・ｓ），２．０６（３Ｈ×１／２，ｓ），２．０６（３Ｈ×１／２，ｓ），２．２５（１Ｈ，ｍ），２．３８（１Ｈ，ｍ），２．７５（２Ｈ，ｍ），２．８５（２Ｈ，ｍ），３．２１（１Ｈ，ｂｒ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ），３．３０（１Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ），３．５６（２Ｈ，ｍ），３．７２（６Ｈ，ｓ），３．７２（２Ｈ，ｍ），４．００−４．３５（８Ｈ，ｍ），４．４４（２Ｈ，ｓ），４，４４（１Ｈ，ｍ），５．０８（１Ｈ，ｍ），６．０７（１Ｈ，ｍ），６．２２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．０，７．０Ｈｚ），１１．４０（１Ｈ，ｓ），１１．６８（１Ｈ，ｂｒ・ｓ）。
【０２６１】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．１９，１４８．４７．
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ５９Ｈ７０Ｎ８ＮａＯ１８Ｐ２+）＝１２６３．４１７６［Ｍ＋Ｎａ］、実測値＝１２６３．２９３。
【０２６２】
［実施例２２］（式４７の右側の物質の合成）
【０２６３】
【化５１】
2006217881.tif 000052
水素化ナトリウム（ミネラルオイル中６０重量％，１．５２ｇ，３８．１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２１ｍＬ）に懸濁し、３−インドール酢酸（２．１１ｇ，１２．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（７ｍＬ）を室温にて１０分かけて滴下した。滴下１０分後、ＴＢＤＰＳＣｌ（１０ｇ，３６．４ｍｍｏｌ）を室温にて２０分かけて滴下した。１時間１５分、室温にて攪拌した後、水を滴下し過剰の水素化ナトリウムを反応させた後、水と酢酸エチルで分配し、水層をさらに２回酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮した。
【０２６４】
濃縮残渣をＴＨＦ１００ｍＬ、水４０ｍＬの混合溶媒に乳濁し、固体の炭酸ナトリウム（１２．８ｇ，０．１２０ｍｍｏｌ）を室温にて加えた。５時間、室温にて攪拌した後、固体の塩化アンモニウムを加えた。水と酢酸エチルで分配し、水層をさらに２回酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮した。
【０２６５】
濃縮残渣にメタノールを加え懸濁状態にし、シラノールを析出させた後にろ過し、ろ液を濃縮した。濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比１：０から９：１へ徐々に変更））にて精製し、目的物３．４６ｇ（収率６９％）を得た。
【０２６６】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１．１５（９Ｈ，ｓ）３．７６（２Ｈ，ｓ）６．６７（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝０．９，８．４Ｈｚ）６．７８（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．１，７．２，８．４Ｈｚ）７．００（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝０．９，７．０，７．２Ｈｚ）７．１８（１Ｈ，ｓ）７．２−７．４（６Ｈ，ｍ）７．５−７．６（５Ｈ，ｍ）。
【０２６７】
［実施例２３］（モノマー：物質ＩＩTypの合成、式４８）
【０２６８】
【化５２】
2006217881.tif 000053
ＨＯＢＴ一水和物（０．６６６ｇ，４．３５ｍｍｏｌ）と、Ｎ−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）インドール酢酸（１．７８ｇ，４．３１ｍｍｏｌ）を塩化メチレン３３ｍＬに懸濁し、ＤＣＣ（０．９１０ｇ，４．４１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３０分攪拌した後、物質Ｉ（３．１４ｇ，純度８０重量％，４．３１ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液１０ｍＬを１５分かけて滴下した。室温で７０分攪拌した後ろ過し、ろ液を濃縮した。濃縮残渣に酢酸エチルを加え、不溶物を析出させた後ろ過し、ろ液を濃縮し、中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比１：０から９：１へ徐々に変更）で精製した。３．０５ｇ（収率７２％）の目的物ＩＩTypを得た。
【０２６９】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１４（９Ｈ，ｓ）２．２２（２Ｈ，ｍ）３．０８（１Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ），３．２７（１Ｈ，ｍ），３．６１（２Ｈ，ｓ），３．７０（６Ｈ，ｓ），３．９４（３Ｈ，ｍ），４．２６（１Ｈ，ｍ），５．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），６．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．５，６．５Ｈｚ），６．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６．７４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．２，８．１Ｈｚ），６．９（４Ｈ，ｍ），６．９４（１Ｈ，ｍ），７．１８（１Ｈ，ｍ），７．２２−７．６（２０Ｈ，ｍ），７．８９（１Ｈ，ｓ），８．４３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ）１１．６３（１Ｈ，ｓ）。
【０２７０】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ59Ｈ58Ｎ4Ｏ8Ｓｉ）＝９７８．４１０［Ｍ］+、実測値＝９７９．９１９［Ｍ＋Ｈ］+。
【０２７１】
［実施例２４］（アミダイト：物質ＩＩＩTypの合成、式４９）
【０２７２】
【化５３】
2006217881.tif 000054
物質ＩＩTyp（０．３７８ｇ，０．３８６ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリル１ｍＬで３回共沸脱水し乾燥した。これを脱水アセトニトリル１．０ｍＬに溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（１００μＬ，０．４５０ｍｍｏｌ）を加え、０℃に冷却し、ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（０．１０２ｇ，０．４３２ｍｍｏｌ）の脱水アセトニトリル溶液（０．５ｍＬ）を滴下した。１時間攪拌後、メタノールを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、塩化メチレンにて希釈し、飽和、炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水、で洗浄した。中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：ヘキサンを、体積比１：１から１：０に徐々に変更した後、２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から１９：１に徐々に変更）にて精製し、目的物ＩＩＩTypを０．３４１ｇ得た（収率７５％）。
【０２７３】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．９８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．１０（６Ｈ，ｍ），１．１４（９Ｈ，ｓ），２．３０（１Ｈ，ｍ），２．４１（１Ｈ，ｍ），２．６３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．７４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．１４（１Ｈ，ｍ），３．３（１Ｈ，ｍ），３．５２（２Ｈ，ｍ），３．６０（２Ｈ，ｓ），３．７０（６Ｈ，ｓ），３．６５（２Ｈ，ｍ），３．７３（２Ｈ，ｍ），３．９６（２Ｈ，ｍ），４．０３（１Ｈ，ｍ），４．４６（１Ｈ，ｍ），６．０７（１／２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，６．８Ｈｚ），６．０９（１／２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，６．８Ｈｚ），６．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６．７４（１Ｈ，ｍ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，７．２Ｈｚ），６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），６．８７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），６．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，７．７Ｈｚ），７．１−７．６（２０Ｈ，ｍ），７．９３（１Ｈ，ｓ），８．４４（１Ｈ，ｍ），１１．６３（１Ｈ，ｓ）。
【０２７４】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＢＣＭ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１４７．９７，１４７．６０。
【０２７５】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ６８Ｈ７６Ｎ６Ｏ９ＰＳｉ+）＝１１７９．５２０［Ｍ＋Ｈ］、実測値＝１１７８．９３７［Ｍ＋Ｈ］。
【０２７６】
［実施例２５］（ダイマー：物質ＶTypｂａｓｅ＝Ｃの合成、式５０）
【０２７７】
【化５４】
2006217881.tif 000055
物質ＩＩTyp０．９１４ｇ（０．９３４ｍｍｏｌ）と３’−レブロイル−４−ベンゾイルシチジン−５’−（ジイソプロピルアミノ）シアノエチルホスホアミダイト（物質ＩＶｂａｓｅ＝Ｃ，０．７０９ｇ，１．１３ｍｍｏｌ）を２００ｍＬナスフラスコに量り取り、脱水アセトニトリルを用いて三回共沸脱水操作を行い、真空ポンプで乾燥した。脱水アセトニトリル１０ｍＬを加えた後、室温にて０．４５ｍｏｌ／Ｌのテトラゾール／アセトニトリル溶液（１０．４ｍＬ，テトラゾール４．６８ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分間攪拌した。飽和重曹水を加え中和した後、塩化メチレンで三回抽出し、合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮した。
【０２７８】
濃縮残渣をＴＨＦ７ｍＬに溶解し、０．１２ｍｏｌ／Ｌのヨウ素／ＴＨＦ−ピリジン−水（体積比で２：２：１）（１３ｍＬ，ヨウ素２．３６ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分間攪拌した。反応系を塩化メチレンで希釈した後、１０重量％チオ硫酸ナトリウム水溶液で過剰のヨウ素を還元し、その後、水層を三回、塩化メチレンにて抽出した。合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０２７９】
濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比１：０から９：１へ徐々に変更）で精製し、目的物ＶTypｂａｓｅ＝Ｃ１．３５ｇ（収率９５％）を得た。
【０２８０】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１３（９Ｈ，ｓ），２．０８（３Ｈ×１／２，ｓ），２．０９（３Ｈ×１／２，ｓ），２．３５（１Ｈ，ｍ），２．５（５Ｈ，ｍ），２．７２（２Ｈ，ｍ），２．８８（２Ｈ，ｍ），３．１４（１Ｈ，ｍ），３．３２（１Ｈ，ｍ），３．６１（２Ｈ，ｓ），３．６８（６Ｈ，ｓ），３．９５（２Ｈ，ｂｒ・ｓ），４．１−４．４（６Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．１３（２Ｈ，ｍ），６．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３，７．９Ｈｚ），６．８６（４Ｈ，ｍ），６．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３，７．７Ｈｚ），７．１−７．７（２４Ｈ，ｍ），７．９３（１Ｈ，ｓ），７．９８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），８．１４（１Ｈ，ｍ），８．５（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），１１．２９（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），１１．７２（１Ｈ，ｂｒ・ｓ）。
【０２８１】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ＢＣＭ）δ：−２．１１，−１．９９。
【０２８２】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ８３Ｈ８３Ｎ８ＮａＯ１７ＰＳｉ+）＝１５４５．５２８［Ｍ＋Ｎａ］、実測値＝１５４５．４６８［Ｍ＋Ｎａ］。
【０２８３】
［実施例２６］（ダイマー脱レブロイル化：物質ＶＩTypｂａｓｅ＝Ｃの合成、式５１）
【０２８４】
【化５５】
2006217881.tif 000056
物質ＶTypｂａｓｅ＝Ｃ（１．２０ｇ，０．７８９ｍｍｏｌ）をピリジン７．９ｍＬに溶解し０℃に冷却した。ヒドラジン一水和物３８５μＬをピリジン−酢酸（体積比で３：２）混合溶媒溶液（７．９ｍＬ）を加え、０℃にて２０分間攪拌した。アセトンを加え過剰のヒドラジンをアゾンとした後、塩化メチレンで希釈し、飽和重曹水を加え分配した。水層をさらに二回、塩化メチレンで抽出した後、合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮した。
【０２８５】
濃縮残渣を中圧クロマトグラフィーで精製し、１．１７ｇの目的物ＶＩTypｂａｓｅ＝Ｃを収率８４％で得た。
【０２８６】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１３（９Ｈ，ｓ），２．１２（１Ｈ，ｍ），２．６１（１Ｈ，ｍ），６．２４（１Ｈ，ｍ），２．８８（１／２×２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），２．９０（１／２×２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），３．１５（１Ｈ，ｍ），３．３４（１Ｈ，ｍ），３．６１（２Ｈ，ｓ），３．６８（６Ｈ，ｓ），３．９６（２Ｈ，ｂｒ・ｓ），４．０３（１Ｈ，ｍ），４．１−４．３（６Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｍ），５．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），６．１３（２Ｈ，ｍ），６．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），６．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３，７．８Ｈｚ），６．８５（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），６．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，７．７Ｈｚ），７．１−７．７（２５Ｈ，ｍ），７．９３（１Ｈ，ｓ），７．９９（２Ｈ，ｄ＝７．３Ｈｚ），８．１２（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），８．５０（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），１１．２５（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），１１．７１（１Ｈ，ｂｒ・ｓ）。
【０２８７】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＢＣＭ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−１．８４，−２．０４。
【０２８８】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ７８Ｈ７７Ｎ８ＮａＯ１５ＰＳｉ+）＝１４４７．４９１［Ｍ＋Ｎａ］、実測値＝１４４７．２９６［Ｍ＋Ｎａ］。
【０２８９】
［実施例２７］（ダイマーアミダイト：物質ＶＩＩTypｂａｓｅ＝Ｃの合成、式５２）
【０２９０】
【化５６】
2006217881.tif 000057
物質ＶＩTypｂａｓｅ＝Ｃ（０．２１４ｇ，０．１５０ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリルを用いて三回共沸脱水し、真空ポンプで十分に乾燥した。アセトニトリル１．５ｍＬを加え、ジイソプロピルエチルアミン（３４μＬ，０．１９７ｍｍｏｌ）を加え、０℃に冷却した後、ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（０．０４ｍＬ，０．１７９ｍｍｏｌ）を加え、０℃にて１時間攪拌した。
【０２９１】
メタノール０．１ｍＬを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から９：１に徐々に変更）で精製し、目的物ＶＩＩTypｂａｓｅ＝Ｃ０．１８７ｍｇ（収率７６％）を得た。
【０２９２】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１３（２１Ｈ，ｍ），２．２６（１Ｈ，ｍ），２．４５（１Ｈ，ｍ），２．５２（２Ｈ，ｍ，），２．７８（２Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｍ），３．１３（１Ｈ，ｍ），３．３３（１Ｈ，ｍ），３．５−３．８（４Ｈ，ｍ），３．６０（２Ｈ，ｓ），３．６８（６Ｈ，ｓ），３．９５（２Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ），４．１−４．３（６Ｈ，ｍ），４．４９（１Ｈ，ｍ，Ｃ（３’）Ｈ），５．０４（１Ｈ，ｍ，Ｃ（３’）Ｈ），６．１３（２Ｈ，ｍ），６．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），６．４９（４Ｈ，ｄ＝８．４Ｈｚ），６．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３，７．７Ｈｚ），６．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３，７．７Ｈｚ），７．１−７．７（２５Ｈ，ｍ），７．９９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），８．１１（１／２Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．１３（１／２Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．５０（１Ｈ，ｂｒ），１１．２８（１Ｈ，ｂｒ・ｓ），１１．７１（１Ｈ，ｂｒ・ｓ）。
【０２９３】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，ＢＣＭ）δ：−２．１１，−２．０６，−１．９６，１４８．４５，１４８．５２，１４８．６０。
【０２９４】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ８７Ｈ９４Ｎ１０ＮａＯ１６Ｐ２Ｓｉ）＝１６４７．５９９１、実測値＝１６４７．５００。
【０２９５】
［実施例２８］（式５３の右側の物質の合成）
【０２９６】
【化５７】
2006217881.tif 000058
９−フルオレンメタノール５．８９ｇ（３０ｍｍｏｌ）、無水グルタル酸４．１１ｇ（３６ｍｍｏｌ），ＤＩＭＡＰ１６８ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン５．０ｍＬ（３６ｍｍｏｌ）からなる脱水塩化メチレン９０ｍＬ混合溶液を室温で４時間攪拌した。反応溶液を水で洗浄し、水層をさらに２回塩化メチレンで抽出した。合わせた塩化メチレン層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮した。
【０２９７】
濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（１体積％酢酸ジクロロメタン溶液：エタノールを、体積比で１：０から１９：１に徐々に変更）にて精製し、目的物８．２０ｇ（収率８８％）を得た。
【０２９８】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：１．６８（２Ｈ，ｔｔ，Ｊ＝７．５，７．３Ｈｚ），２．１８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），２．３４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），４．２５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）４．３９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）７．３２（２Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．５，１．３Ｈｚ），７．４１（２Ｈ，ｂｒ・ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．６４（２Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．８８（２Ｈ，ｂｒ・ｄ，＝７．５Ｈｚ），１２．０３（１Ｈ，ｂｒ・ｓ）。
【０２９９】
［実施例２９］（モノマー：物質ＩＩGluの合成、式５４）
【０３００】
【化５８】
2006217881.tif 000059
グルタル酸９−フルオレンメタノールハーフエステル３．１２ｇ（１０．５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ−水和物１．６８ｇ（１１．０ｍｍｏｌ）の脱水塩化メチレン５０ｍＬ溶液にＤＣＣ２．２２ｇ（１０．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分攪拌した。不溶物を炉別した本反応溶液を、物質Ｉ５．８４ｇ（１０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１００ｍＬ）に０℃で加えた。混合溶液を室温で１時間攪拌した。反応溶液を水で洗浄し、水層をさらに２回塩化メチレンで抽出した。合わせた塩化メチレン層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮した。濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比で１９：１から９：１へ徐々に変更）にて精製し、目的物ＩＩGlu７．３１ｇ（収率８３％）を得た。
【０３０１】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．６９（２Ｈ，ｍ），２．０８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，），２．１８（１Ｈ，ｍ），２．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１３．２Ｈｚ），２．３１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），３．０７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．９，１０．５Ｈｚ），３．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．６，９．４Ｈｚ），３．７２（６Ｈ，ｓ），３．８９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），３．９０（１Ｈ，ｍ），４．２４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），４．２５（１Ｈ，ｍ），４．３６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），５．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ），６．０８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，６．８Ｈｚ），６．８７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），６．８７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），７．２０−７．４５（１３Ｈ，ｍ），７．６３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．８７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），７．８８（１Ｈ，ｓ），８．１４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），１１．６２（１Ｈ，ｓ）。
【０３０２】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ５２Ｈ５０Ｎ３Ｏ１０+）＝８７６．３４９１、実測値＝８７６．２０７。
【０３０３】
［実施例３０］（モノマーアミダイト：物質ＩＩＩGluの合成、式５５）
【０３０４】
【化５９】
2006217881.tif 000060
物質ＩＩGlu（４４５ｍｇ，０．５１ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリル５ｍＬで３回共沸脱水し乾燥した。これを脱水アセトニトリル１１ｍＬに溶解し、ジイソプロピルエチルアミン１０６μＬ（０．６１ｍｍｏｌ）を加えた後に、氷冷下、ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（１２４μＬ，０．５６ｍｍｏｌ）を加えた。２時間攪拌後、メタノールを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、塩化メチレンにて希釈し、飽和、炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水、で洗浄した。中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：ヘキサンを、体積比１：１から１：０に徐々に変更した後、２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から１９：１に徐々に変更）にて精製し、物質ＩＩＩGluを４４２ｍｇ得た（収率８１％）。
【０３０５】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．９６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．０８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．０９（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．６９（２Ｈ，ｔｔ，Ｊ＝６．９，６．６Ｈｚ），２．０８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），２．３１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），２．３９（２Ｈ，ｍ），２．６５（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，），２．７６（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），３．１７（１Ｈ，ｍ），３．２７（１Ｈ，ｍ），３．５３（２Ｈ，ｍ），３．５９（２Ｈ，ｍ），３．７１（３Ｈ，ｓ），３．７１（３Ｈ，ｓ），３．８９（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），３．９３（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），４．０２（１Ｈ×１／２，ｍ），４．０５（１Ｈ×１／２，ｍ），４．２４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），４．３６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），４．４６（１Ｈ，ｍ），６．０６（１Ｈ×１／２，ｄｄ，Ｊ＝７．３，７．０Ｈｚ），６．０８（１Ｈ×１／２，ｄｄ，Ｊ＝７．０，６．８Ｈｚ），６．８５（４Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），６．８７（４Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．１８−７．４２（１３Ｈ，ｍ），７．６３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．９３（１Ｈ×１／２，ｓ），７．９４（１Ｈ×１／２，ｓ），８．１９（１Ｈ×１／２，ｂｒ・ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），８．２１（１Ｈ×１／２，ｂｒ・ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），１１．５８（１Ｈ，ｂｒ・ｓ）。
【０３０６】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１４７．６５，１４８．０５。
【０３０７】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ６１Ｈ６７Ｎ５Ｏ１１Ｐ+）＝１０７６．４５６９［Ｍ＋Ｈ］、実測値＝１０７５．９４４［Ｍ＋Ｈ］。
【０３０８】
［実施例３１］（レブロイル基導入及び脱ＤＭＴｒ化：物質ＩＸGluの合成、式５６）
【０３０９】
【化６０】
2006217881.tif 000061
物質ＩＩGlu（２．１８ｇ，２．４９ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）に溶解し、ピリジン（０．６０ｍＬ，７．４２ｍｍｏｌ）、Ｎ−エチル−Ｎ’−（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１．１８ｇ，６．１８ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（０．０３１６ｇ，０．２５９ｍｍｏｌ）、レブリン酸（０．５１ｍＬ，４．９６ｍｍｏｌ）を室温にて順次加えた。５時間２０分室温にて攪拌した後、塩化メチレンと飽和重曹水で分配し、さらに塩化メチレンで２回抽出した。合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０３１０】
濃縮残渣を塩化メチレン５７ｍＬに溶解し、氷冷した後、トリフルオロ酢酸（５５０μＬ）を加え１時間、０℃にて攪拌した。重曹を紛体で加え大部分のトリフルオロ酢酸を中和した後ろ過し、濃縮した。濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比１：０から９：１へ徐々に変更）にて精製し、１．３０ｇの目的物ＩＸGluを得た（収率７８％）。
【０３１１】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．７１（２Ｈ，ｍ），２．０７（２Ｈ，ｍ），２．１（３Ｈ，ｓ），２．２５（２Ｈ，ｍ），２．３３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．４９（２Ｈ，ｍ），２．７３（２Ｈ，ｍ），３．６１（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．５，４．５Ｈｚ），３．９９（１Ｈ，ｍ），４．０７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），４．２５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），，４．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），５．１９（１Ｈ，ｍ），６．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，７．７Ｈｚ），７．３２（２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．１，７．３，７．５Ｈｚ），７．４１（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３，７．５Ｈｚ），７．６４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），８．１５（１Ｈ，ｓ），８．２７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ）。
【０３１２】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ３６Ｈ３８Ｎ３Ｏ１０+）＝６７２．２５５２［Ｍ＋Ｈ］、実測値６７２．３８２。
【０３１３】
［実施例３２］（ダイマー：物質ＸGluｂａｓｅ＝Ｇの合成、式５７）
【０３１４】
【化６１】
2006217881.tif 000062
物質ＩＸGlu（１．４８ｇ，２．２０ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリルで三回共沸脱水し、真空ポンプにて乾燥した。これに５’−（４，４’−ジメトキシトリフェニルメチル）−グアノシン−３’−（ジイソプロピルアミノ）シアノエチルホスホアミダイト（２．２５ｇ，２．６８ｍｍｏｌ）を加え、脱水アセトニトリル１２ｍＬを加え、０．４５ｍｏｌ／Ｌのテトラゾール／アセトニトリル溶液（２５ｍＬ，テトラゾール１１．３ｍｍｏｌ）を加え、室温にて４５分間攪拌した。塩化メチレンと飽和重曹水を加えて分配した後、さらに水層を塩化メチレンで二回抽出し、合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０３１５】
濃縮残渣をＴＨＦ２３ｍＬに希釈し、０．１２ｍｏｌ／Ｌのヨウ素／ＴＨＦ−ピリジン−水（体積比２：２：１）溶液２３ｍＬを室温にて加え、３０分間攪拌した。塩化メチレンで希釈した後、１０重量％チオ硫酸ナトリウム水溶液を加え、過剰のヨウ素を還元した後、さらに水層を塩化メチレンで二回抽出し、合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０３１６】
濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比１：０から９：１へ徐々に変更）で精製し、２．６６ｇの目的物ＸGluｂａｓｅ＝Ｇを得た（収率８５％）。
【０３１７】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１１（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．７０（２Ｈ，ｍ，），２．０７（３Ｈ，ｓ），２．０９（２Ｈ，ｍ），，２．２３（１Ｈ，ｍ），２．３２（２Ｈ，ｍ），２．４６（１Ｈ，ｍ），２．４９（２Ｈ，ｍ），２．７０（２Ｈ，ｍ），２．７３（１Ｈ，ｍ），２．７４（１Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｍ），３．０２（１Ｈ，ｍ），３．１７（１Ｈ，ｍ），３．２９（１Ｈ，ｍ），３．７０（６Ｈ，ｓ），４．０４（２Ｈ，ｍ），４．１−４．３０（７Ｈ，ｍ），４．３６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），５．１３（２Ｈ，ｍ），６．０９（１Ｈ，ｍ），６．２６（１Ｈ，ｍ），６．７８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），６．８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．１−７．５（１３Ｈ，ｍ），７．９３（１／２Ｈ，ｓ），７．９５（１／２Ｈ，ｓ），８．０８（１／２Ｈ，ｓ），８．０９（１／２Ｈ，ｓ），８．２５（１Ｈ，ｂｒ），１１．５５（１Ｈ，ｂｒ），１１．６７（１Ｈ，ｂｒ），１２．０５（１Ｈ，ｂｒ）。
【０３１８】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．３１。
【０３１９】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ７４Ｈ７６Ｎ９ＮａＯ１９Ｐ+）＝１４４８．４８９［Ｍ＋Ｎａ］、実測値＝１４４８．４４３［Ｍ＋Ｎａ］。
【０３２０】
［実施例３３］（ダイマー脱レブロイル化：物質ＸＩGluｂａｓｅ＝Ｇの合成、式５８）
【０３２１】
【化６２】
2006217881.tif 000063
物質ＸGluｂａｓｅ＝Ｇ（２．６６ｇ，１．８６ｍｍｏｌ）をピリジン１９ｍＬに溶解し０℃に冷却し、ヒドラジン一水和物（０．９１ｍＬ，１８．７ｍｍｏｌ）のピリジン−酢酸（体積比で３：２）混合溶媒溶液（１９ｍＬ）を滴下した。滴下終了後４５分間、０℃にて攪拌した後、アセトン２ｍＬを加え、過剰のヒドラジンをアゾンとした。反応液を塩化メチレンで希釈し、飽和重曹水で酢酸を中和し、分配した後、さらに水層を塩化メチレンで２回抽出した。合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０３２２】
濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比１：０から９：１へ徐々に変更）で精製し、１．９５ｇの目的物ＸＩGluｂａｓｅ＝Ｇを得た（収率８１％）。
【０３２３】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１１（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．６９（２Ｈ，ｍ），２．０７（２Ｈ，ｍ，），２．０７（１Ｈ，ｍ），２．２１（１Ｈ，ｍ），２．３１（２Ｈ，ｍ），２．７２（２Ｈ，ｍ），２．９０（２Ｈ，ｍ），３．０２（１Ｈ，ｍ），３．１８（１Ｈ，ｍ），３．２８（１Ｈ，ｍ），３．７０（６Ｈ，ｓ），３．９１（１Ｈ，ｍ），４．０４（２Ｈ，ｍ），４．１−４．３（６Ｈ，ｍ），４．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），５．１０（１Ｈ，ｍ），５．４５（１Ｈ，ｍ），６．１０（１Ｈ，ｍ），６．２６（１Ｈ，ｍ），６．７８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，４ＨｏｆＤＭＴｒ），６．８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．１−７．３５（１１Ｈ，ｍ），７．３９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．６２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．８７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．８８（１Ｈ，ｍ），８．１０（１／２Ｈ，ｓ），８．１１（１／２Ｈ，ｓ），８．２９（１Ｈ，ｂｒ），１１．５９（１Ｈ，ｂｒ），１１．６６（１Ｈ，ｂｒ），１２．０６（１Ｈ，ｂｒ）。
【０３２４】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＢＣＭ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−１．９６，−２．０１。
【０３２５】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ６９Ｈ７０Ｎ９ＮａＯ１７Ｐ+）＝１３５０．４５１９［Ｍ＋Ｎａ］、実測値＝１３５０．４１１［Ｍ＋Ｎａ］。
【０３２６】
［実施例３４］（ダイマーアミダイト：物質ＸＩＩGluｂａｓｅ＝Ｇの合成、式５９）
【０３２７】
【化６３】
2006217881.tif 000064
物質ＸＩGluｂａｓｅ＝Ｇ（２０３ｍｇ，０．１５３ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリルにて三回共沸脱水し、真空ポンプで十分に乾燥した。アセトニトリル１．５ｍＬを加え、ジイソプロピルエチルアミン（３４μＬ，０．１９７ｍｍｏｌ）を加え、０℃に冷却した後、ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（０．０４ｍＬ，０．１７９ｍｍｏｌ）を加え、０℃にて２時間攪拌した。
【０３２８】
メタノール０．１ｍＬを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から９：１に徐々に変更）で精製し、目的物ＸＩＩGluｂａｓｅ＝Ｇ１２４ｍｇ（収率５３％）を得た。
【０３２９】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１０（１８Ｈ，ｍ）１．６８（２Ｈ，ｍ），２．０７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），２．２（１Ｈ，ｍ），２．３１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），２．４（１Ｈ，ｍ），２．７（２Ｈ，ｍ），２．７５（２Ｈ，ｍ），２．８８（２Ｈ，ｍ，），３．０３（１Ｈ，ｍ），３．１５（１Ｈ，ｍ），３．２８（１Ｈ，ｍ），３．５４（２Ｈ，ｍ），３．７０（６Ｈ，ｓ），３．７０（２Ｈ，ｍ），４．０３（２Ｈ，ｍ），４．０−４．３（７Ｈ，ｍ），４．３５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），４．４５（１Ｈ，ｂｒ），５．１０（１Ｈ，ｍ），６．０８（１Ｈ，ｍ），６．２５（１Ｈ，ｍ），６．７７（４Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），６．７９（４Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），７．１−７．２５（７Ｈ，ｍ），７．３（４Ｈ，ｍ），７．３９（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．２，７．３Ｈｚ），７．６２（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．８７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．９０（１／４Ｈ，ｓ），７．９１（１／４Ｈ，ｓ），７．９２（１／４Ｈ，ｓ），７．９３（１／４Ｈ，ｓ），２．９２（１／２Ｈ，ｓ），８．１１（１／４Ｈ，ｓ），８．１１（１／４Ｈ，ｓ），８．２９（１Ｈ，ｂｒ），１１．５８（１Ｈ，ｂｒ），１１．６７（１Ｈ，ｂｒ），１２．０６（１Ｈ，ｂｒ）。
【０３３０】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．０６，−１．９９，１４８．４７。
【０３３１】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ７８Ｈ８８Ｎ１１Ｏ１８Ｐ２+［Ｍ＋Ｈ］+）＝１５２８．５７８、実測値＝１５２８．４９２。
【０３３２】
［実施例３５］（モノマー：物質ＩＩLeuの合成、式６０）
【０３３３】
【化６４】
2006217881.tif 000065
吉草酸１．１３ｍＬ（９．０ｍｏｌ）およびＨＯＢＴ−水和物１．４４ｇ（９．４ｍｍｏｌ）の脱水塩化メチレン４３ｍＬ溶液にＤＣＣ１．８６ｇ（９．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分攪拌した。不溶物を炉別した本反応溶液を、物質Ｉ（６．２７ｇ，８０重量％，８．６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（８６ｍＬ）に０℃で加えた。混合溶液を室温で１時間攪拌した。反応溶液を水で洗浄し、水層をさらに２回塩化メチレンで抽出した。合わせた塩化メチレン層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮した。濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比で１９：１から９：１へ徐々に変更）にて精製し、目的物ＩＩLeu４．４６ｇ（収率７３％）を得た。
【０３３４】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．８３（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．３５（２Ｈ，ｍ），１．４７（１Ｈ，ｍ），２．０６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），２．２４（２Ｈ，ｍ），３．０７（１Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），３．３（１Ｈ，ｍ），３．７３（６Ｈ，ｓ），３．８９（３Ｈ，ｍ），４．２５（１Ｈ，ｍ），５．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ），６．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，ＯＨ），６．８８（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．２−７．５（９Ｈ，ｍ），７．８７（１Ｈ，ｓ），８．１２（１Ｈ，ｂｒ），１１．６２（１Ｈ，ｂｒ）。
【０３３５】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ３９Ｈ４４Ｎ３Ｏ８+）＝６８２．３１２［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝６８２．０９８［Ｍ＋Ｈ］+。
【０３３６】
［実施例３６］（モノマーアミダイト：物質ＩＩＩLeuの合成、式６１）
【０３３７】
【化６５】
2006217881.tif 000066
物質ＩＩLeu（３４１ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリル５ｍＬで３回共沸脱水し乾燥した。これを脱水アセトニトリル１０ｍＬに溶解し、ジイソプロピルエチルアミン１０４μＬ（０．６０ｍｍｏｌ）を加えた後に、氷冷下、ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（１２２μＬ，０．５５ｍｍｏｌ）を加えた。２時間攪拌後、メタノールを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、塩化メチレンにて希釈し、飽和、炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水、で洗浄した。中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：ヘキサンを、体積比１：１から１：０に徐々に変更した後、２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から１９：１に徐々に変更）にて精製し、物質ＩＩＩLeuを４０７ｍｇ得た（収率９２％）。
【０３３８】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．８３（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），０．９７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．０９（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．１２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．３７（２Ｈ，ｍ），１．４６（１Ｈ，ｍ），２．０６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．３０（１Ｈ，ｍ），２．４０（１Ｈ，ｍ），２．６４（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），２．７５（１Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，），３．１４（１Ｈ，ｍ，），３．２８（１Ｈ，ｍ），３．５２（２Ｈ，ｍ），３．６２（２Ｈ，ｍ），３．７３（６Ｈ，ｓ），３．８９（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，），３．９２（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），４．０３（１Ｈ，ｍ），４．４８（１Ｈ，ｍ），６．０７（１Ｈ，ｍ），６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．２０−７．３５（７Ｈ，ｍ），７．３９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．９３（１Ｈ，ｂｒ），８．１５（１／２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），８．１７（１／２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，）。
【０３３９】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：１４７．８０，１４８．２０．
ＭＬＤＩ−ＴＯＦ   計算値（Ｃ４８Ｈ６１Ｎ５Ｏ９Ｐ＋）＝８８２．４２０１［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝８８２．２７７。
【０３４０】
［実施例３７］（モノマーレブロイル基導入及び脱ＤＭＴｒ化：物質ＩＸLeuの合成、式６２）
【０３４１】
【化６６】
2006217881.tif 000067
物質ＩＩLeu（１．４０ｇ，２．０５ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）に溶解し、ピリジン（０．５０ｍＬ，６．１８ｍｍｏｌ）、Ｎ−エチル−Ｎ’−（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０．９９９ｇ，５．２１ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（０．０２６０ｇ，０．２１３ｍｍｏｌ）、レブリン酸（０．４２ｍＬ，４．０９ｍｍｏｌ）を室温にて順次加えた。２時間５０分室温にて攪拌した後、塩化メチレンと飽和重曹水で分配し、さらに塩化メチレンで２回抽出した。合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０３４２】
濃縮残渣を塩化メチレン４７ｍＬに溶解し、氷冷した後、トリフルオロ酢酸（４７０μＬ）を加え３０分間、０℃にて攪拌した。重曹を紛体で加え大部分のトリフルオロ酢酸を中和した後ろ過し、濃縮した。濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比１：０から９：１へ徐々に変更）にて精製し、０．７５９ｇの目的物ＩＸLeuを得た（収率７７％）。
【０３４３】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．８４（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．３９（２Ｈ，ｍ），１．４７（１Ｈ，ｍ），２．１０（３Ｈ，ｓ），２．１０（２Ｈ，ｍ），２．２６（２Ｈ，ｍ），２．７３（２Ｈ，ｂｒ・ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），２．４９（２Ｈ，ｍ），３．６１（２Ｈ，ｍ），３．９９（１Ｈ，ｍ），４．０５（２Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），５．１９（１Ｈ，ｂｒ），６．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，７．５Ｈｚ），８．１４（１Ｈ，ｓ），８．２７（１Ｈ，ｂｒ），１１．６４（１Ｈ，ｓ）。
【０３４４】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ２３Ｈ３２Ｎ３Ｏ８+）＝４７８．２１８４［Ｍ＋Ｈ］+、実測値＝４７８．２７６。
【０３４５】
［実施例３８］（ダイマー：物質ＸLeuｂａｓｅ＝Ａの合成、式６３）
【０３４６】
【化６７】
2006217881.tif 000068
物質ＩＸleu（１．２７ｇ，２．６６ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリルで三回共沸脱水し、真空ポンプにて乾燥した。これに５’−（４，４’−ジメトキシトリフェニルメチル）−４−ベンゾイルアデノシン−３’−（ジイソプロピルアミノ）シアノエチルホスホアミダイト（２．７５ｇ，３．２１ｍｍｏｌ）を加え、脱水アセトニトリル１５ｍＬを加え、０．４５ｍｏｌ／Ｌのテトラゾール／アセトニトリル溶液（３０ｍＬ，テトラゾール１１．３ｍｍｏｌ）を加え、室温にて４５分間攪拌した。塩化メチレンと飽和重曹水を加えて分配した後、さらに水層を塩化メチレンで二回抽出し、合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０３４７】
濃縮残渣をＴＨＦ２８ｍＬに希釈し、０．１２ｍｏｌ／Ｌのヨウ素／ＴＨＦ−ピリジン−水（体積比２：２：１）溶液２３ｍＬ（ヨウ素６．７２ｍｍｏｌ）を室温にて加え、３０分間室温にて攪拌した。塩化メチレンで希釈した後、１０重量％チオ硫酸ナトリウム水溶液を加え、過剰のヨウ素を還元した後、さらに水層を塩化メチレンで二回抽出し、合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０３４８】
濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比１：０から９：１へ徐々に変更）で精製し、２．６５ｇの目的物ＸLeuｂａｓｅ＝Ａを得た（収率８０％）。
【０３４９】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ：０．７４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），０．７５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），１．３９（３Ｈ，ｍ），２．０６（３Ｈ×１／２，ｓ），２．０７（３Ｈ×１／２，ｓ），２．１（２Ｈ，ｍ），２．２３（１Ｈ，ｍ），２．３８（１Ｈ，ｍ），２．４７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），２．６７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），２．７３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），２．７５（１Ｈ，ｍ），３．１３（１Ｈ，ｍ），３．３７（２Ｈ，ｍ），３．６７（６Ｈ×１／３，ｓ），３．６８（６Ｈ×１／３，ｓ），３．６９（６Ｈ×１／３，ｓ），３．６８（１Ｈ，ｍ），４．０−４．５（７Ｈ，ｍ），５．２５（２Ｈ，ｍ），６．１２（１Ｈ，ｍ），６．４４（１Ｈ，ｍ）。
【０３５０】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＢＣＭ，１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．３１。
【０３５１】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ６４Ｈ６８Ｎ９ＮａＯ１６Ｐ+）＝１２７２．４４１４、実測値＝１２７２．６６９。
【０３５２】
［実施例３９］（ダイマー脱レブロイル化：物質ＸＩLeuｂａｓｅ＝Ａの合成、式６４）
【０３５３】
【化６８】
2006217881.tif 000069
物質ＸLeuｂａｓｅ＝Ａ（２．６５ｇ，２．１２ｍｍｏｌ）をピリジン２１ｍＬに溶解し０℃に冷却し、ヒドラジン一水和物（１．０３ｍＬ，１８．７ｍｍｏｌ）およびピリジン−酢酸（体積比３：２）混合溶媒（２１ｍＬ）を滴下した。滴下終了後１時間、０℃にて攪拌した後、アセトン２ｍＬを加え、過剰のヒドラジンをアゾンとした。反応液を塩化メチレンで希釈し、飽和重曹水で酢酸を中和し、分配した後、さらに水層を塩化メチレンで２回抽出した。合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０３５４】
濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比１：０から９：１へ徐々に変更）で精製し、２．１３ｇの目的物ＸＩLeuｂａｓｅ＝Ａを得た（収率８７％）。
【０３５５】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．８１（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），１．３５（２Ｈ，ｍ），１．４４（１Ｈ，ｍ），２．０６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），２．１０（１Ｈ，ｍ），２．２３（１Ｈ，ｍ），２．７７（１Ｈ，ｍ），２．９２（２Ｈ，ｍ），３．２９（３Ｈ，ｍ）３．７１（６Ｈ，ｓ），３．９９（１Ｈ，ｍ），４．０３（２Ｈ，ｍ），４．１５−４．３０（５Ｈ，ｍ），４．３５（１Ｈ，ｍ），５．２８（１Ｈ，ｍ），５．４３（１Ｈ，ｍ），６．１１（１Ｈ，ｍ），６．５２（１Ｈ，ｍ），６．８０（４Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），６．８１（４Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．１０−７．３（７Ｈ，ｍ），７．３３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．５４（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．２，７．５Ｈｚ，Ｂｚ），７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．２，７．５Ｈｚ），７．８８（１Ｈ，ｓ），８．０３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），８．５５（１Ｈ×１／２，ｓ），８．２２（１Ｈ，ｂｒ・ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），８．５７（１Ｈ×１／２，ｓ），１１．１５（１Ｈ，ｂｒ），１１．６２（１Ｈ，ｂｒ）。
【０３５６】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＢＣＭ，１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−１．９９，−１．８９。
【０３５７】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ５９Ｈ６２Ｎ９ＮａＯ１４Ｐ+）＝１１７４．４０４６［Ｍ＋Ｎａ］+、実測値＝１１７４．３０８。
【０３５８】
［実施例４０］（ダイマーアミダイト：物質ＸＩＩLeuｂａｓｅ＝Ａの合成、式６５）
【０３５９】
【化６９】
2006217881.tif 000070
物質ＸＩLeuｂａｓｅ＝Ａ（０．２００ｇ，０．１７４ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリルにて三回共沸脱水した後、脱水アセトニトリル１．７ｍＬに溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（４１μＬ，０．２２９ｍｍｏｌ）を加えた。ここにシアノエチルクロロジイソプロピルホスホアミダイト（４７μＬ，０．２１１ｍｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。ＭｅＯＨを加え、過剰のクロロアミダイトを反応させた後、中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から９：１に徐々に変更）で分離精製し、０．１４８ｇの目的物ＸＩＩLeuｂａｓｅ＝Ａを得た。（収率６３％）
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．８１（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．１１（１２Ｈ，ｍ），１．３５（２Ｈ，ｍ），１．４４（１Ｈ，ｍ），２．０６（１Ｈ，ｍ），２．０６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），２．２７（１Ｈ，ｍ），２．４０（１Ｈ，ｍ），２．７４（３Ｈ，ｍ），２．９１（２Ｈ，ｍ），３．２８（３Ｈ，ｍ），３．５５（２Ｈ，ｍ），３．７０（２Ｈ，ｍ），４．０３（２Ｈ，ｍ），４．１−４．４（５Ｈ，ｍ），４．４９（１Ｈ，ｍ），５．２７（１Ｈ，ｍ），６．１０（１Ｈ，ｍ），６．５２（１Ｈ，ｍ），６．７９（４Ｈ×１／２，ｄＪ＝８．２Ｈｚ），６．８１（４Ｈ×１／２，ｄＪ＝８．２Ｈｚ），７．２０（７Ｈ，ｍ），７．３３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），７．５４（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．１，７．５Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，７．５Ｈｚ），７．９２（１Ｈ×１／２，ｓ），７．９４（１Ｈ×１／２，ｓ），８．０３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｂｒ），８．５６（１Ｈ×１／２，ｓ），８．５６（１Ｈ×１／２，ｓ），１１．２０（１Ｈ，ｂｒ），１１．６７（１Ｈ，ｂｒ）。
【０３６０】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０Ｈｚ，ＢＣＭ，ＤＭＳＯ）δ：−２．０１，−１．９４，１４８．６９，１４８．７９。
【０３６１】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ６８Ｈ７９Ｎ１１ＮａＯ１５Ｐ２+）＝１３７４．５１２５［Ｍ＋Ｎａ］+、実測値＝１３７４．３２９［Ｍ＋Ｎａ］+。
【０３６２】
［実施例４１］（モノマー：物質ＩＩPheの合成、式６６）
【０３６３】
【化７０】
2006217881.tif 000071
Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド１．２７ｇ（１１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン１．６８ｍＬ（１２ｍｍｏｌ）の脱水塩化メチレン５０ｍＬ溶液にフェニルアセチルクロリド１．２１ｍＬを加え、室温で１５分攪拌した。不溶物を炉別した本反応溶液を、物質Ｉ７．１０ｇ（１０ｍｍｏｌ相当）のジクロロメタン溶液（５０ｍＬ）に０℃で加えた。混合溶液を室温で３時間攪拌した後ピペリジン１ｍＬを加えさらに３０分攪拌した。反応溶液を水で洗浄し、水層をさらに２回塩化メチレンで抽出した。合わせた塩化メチレン層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮した。濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比で１：０から９３：７へ徐々に変更）にて精製し、目的物ＩＩPhe６．４７ｇ（収率９２％）を得た。
【０３６４】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．１８（１Ｈ，ｍ），２．２５（１Ｈ，ｍ），３．０７（１Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），３．２５（１Ｈ，ｍ），３．４１（２Ｈ，ｓ），３．７２（６Ｈ，ｓ），３．９０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），４．２６（１Ｈ，ｍ），６．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，６．８Ｈｚ），６．８８（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），６．１５−６．３５（７Ｈ，ｍ），７．３８（２Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．８９（１Ｈ，ｓ），８．４５（１Ｈ，ｂｒ）。
【０３６５】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ４１Ｈ４０Ｎ３Ｏ８+）＝７０２．２８１［Ｍ＋Ｈ］、実測値＝７０１．９０１。
【０３６６】
［実施例４２］（モノマーアミダイト：物質ＩＩＩPheの合成、式６７）
【０３６７】
【化７１】
2006217881.tif 000072
物質ＩＩPhe（３５１ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリル５ｍＬで３回共沸脱水し乾燥した。これを脱水アセトニトリル１０ｍＬに溶解し、ジイソプロピルエチルアミン１０４μＬ（０．６０ｍｍｏｌ）を加えた後に、氷冷下、ジイソプロピルクロロフォスホアミダイト（１２２μＬ，０．５５ｍｍｏｌ）を加えた。２時間攪拌後、メタノールを加え過剰のアミダイト化試薬を不活性化した後、塩化メチレンにて希釈し、飽和、炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水、で洗浄した。中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：ヘキサンを、体積比１：１から１：０に徐々に変更した後、２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から１９：１に徐々に変更）にて精製し、物質ＩＩＩPheを３９３ｍｇ得た（収率８７％）。
【０３６８】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．９８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．１２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．３０（１Ｈ，ｍ，Ｃ（２’）Ｈ），２．４０（１Ｈ，ｍ，Ｃ（２’）Ｈ），２．６４（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．７５（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．１４（１Ｈ，ｍ），３．３０（１Ｈ，ｍ），３．４１（２Ｈ，ｓ），３．５１（２Ｈ，ｍ），３．６２（２Ｈ，ｍ），３．７２（６Ｈ，ｓ），３．９１（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），３．９４（２Ｈ×１／２，ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，），４．０１（１／２Ｈ，ｍ），４．０７（１／２Ｈ，ｍ），４．４８（１Ｈ，ｍ），６．０７（１Ｈ，ｍ），６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．１５−７．３５（７Ｈ，ｍ），７．３８（２Ｈ，ｂｒ・ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），７．９３（１／２Ｈ，ｓ），７．９４（１／２Ｈ，），７．９４（１／２Ｈ，ｓ），，８．４５（１／２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），８．４７（１／２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ）。
【０３６９】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，）δ：１４７．７７，１４８．１７．
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ５０Ｈ５７Ｎ５Ｏ９Ｐ+）＝９０２．３８８８、実測値＝９０１．９９４。
【０３７０】
［実施例４３］（レブロイル基導入及び脱ＤＭＴｒ化：物質ＩＸPheの合成、式６８）
【０３７１】
【化７２】
2006217881.tif 000073
物質ＩＩPhe４．２０ｇ（６．０ｍｍｏｌ）を脱水ジオキサン３０ｍＬに溶解し、ＤＩＭＡＰ５８ｍｇ（０．４８ｍｍｏｌ），ＤＣＣ２．４８ｇ（１２ｍｍｏｌ）およびレブリン酸１．２２ｍＬ（１２ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３０分攪拌した。続いてメタノール３ｍＬを加え１５分攪拌した。不溶物をろ別し、ろ液を濃縮乾固した。本残渣を４２ｍＬの脱水塩化メチレンに溶解、氷冷し０．８８ｍＬのトリフロロ酢酸を加え、０℃で３０分攪拌した。この反応溶液を直接、シリカゲルにロードし、中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比で１９：１から９：１へ徐々に変更）にて精製し、目的物ＩＸPhe２．６７ｇ（収率８８％）を得た。
【０３７２】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＮＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．１０（３Ｈ，ｓ，Ｌｅｖ），２．２７（２Ｈ，ｍ），２．４９（２Ｈ，ｍ），２．７３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），３．４３（２Ｈ，ｓ），３．６２（２Ｈ，ｂｒ）３．９９（１Ｈ，ｍ），４．０８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ），５．１９（１Ｈ，ｍ），５．２４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），６．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，７．３Ｈｚ），７．１５−７．３５（５Ｈ，ｍ），Ｐｈ），８．１６（１Ｈ，ｓ），８．５６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ）。
【０３７３】
［実施例４４］（ダイマー合成：物質ＸPheｂａｓｅ＝Ｃの合成、式６９）
【０３７４】
【化７３】
2006217881.tif 000074
物質ＩＸPhe１．２８ｇ（２．５８ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリルに溶解し、アセトニトリルを減圧留去することにより含有水分を除く操作を三回行った。残渣を５’−（４，４’−ジメトキシトリフェニルメチル）−シチジン−３’−（ジイソプロピルアミノ）シアノエチルホスホアミダイド２．４８ｇ（２．９７ｍｍｏｌ）の脱水アセトニトリル１３ｍＬ溶液に溶解した。本溶液にテトラゾール０．９１ｇ（１２．９ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。続いてメタノール１ｍＬを加え１５分攪拌した。反応溶液を塩化メチレン６０ｍＬで希釈した後、水で洗浄し、水層をさらに２回塩化メチレンで抽出した。合わせた塩化メチレン層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮した。濃縮残渣をＴＨＦ５０ｍＬ，ピリジン１４ｍＬ，水７ｍＬの混合溶液の溶解し、ヨウ素２．２６ｇ（８．９２ｍｍｏｌ）を加え、３０分間室温にて攪拌した。塩化メチレンで希釈した後、亜硫酸ナトリウム５．６ｇを加え、室温で１５分攪拌した。無水硫酸ナトリウムを用い水分を除いた後に、濃縮した。濃縮残渣を塩化メチレンで希釈し、水で洗浄した。水層を塩化メチレンで二回抽出し、合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０３７５】
濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比で１：０から９３：７へ徐々に変更）で精製し、目的物ＸPheｂａｓｅ＝Ｃ３．１９ｇを得た（収率９９％）。
【０３７６】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．０８（３Ｈ，ｓ），２．２６（１Ｈ，ｍ），２．４５（４Ｈ，ｍ），２．７１（３Ｈ，ｍ），２．８６（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，），２．８８（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．３２（２Ｈ，ｍ），３．４２（２Ｈ，ｓ），３．７２（６Ｈ，ｓ），４．００−４．３５（８Ｈ，ｍ），５．０３（１Ｈ，ｍ），５．１５（１Ｈ，ｍ），６．０９（１Ｈ，ｍ），６．１６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．５，６．６Ｈｚ），６．８７（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．１５−７．４０（１４Ｈ，ｍ），７．５０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．７，７．９Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．９４（１Ｈ，ｓ），７．９９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），８．１３（１Ｈ，ｂｒ），８．５０（１Ｈ，ｂｒ），１１．２１（１Ｈ，ｂｒ），１１．６５（１Ｈ，ｂｒ，）。
【０３７７】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．４１，−２．３４．
［実施例４５］（ダイマー脱レブロイル化：物質ＸＩPheｂａｓｅ＝Ｃの合成、式７０）
【０３７８】
【化７４】
2006217881.tif 000075
物質ＸPheｂａｓｅ＝Ｃ（３．１９ｇ，２．５６ｍｍｏｌ）をピリジン２６ｍＬに溶解しヒドラジン一水和物（１．０３ｍＬ，１８．７ｍｍｏｌ）およびピリジン−酢酸（体積比で３：２）混合溶媒（３４ｍＬ）を加え、室温で５分攪拌した。氷冷下、アセトン２６ｍＬを加えた。反応液を塩化メチレンで希釈し、分配した後、さらに水層を塩化メチレンで２回抽出した。合わせた塩化メチレン層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。
【０３７９】
濃縮残渣を中圧クロマトグラフィー（ジクロロメタン−エタノールを、体積比で１：０から９３：７へ徐々に変更）で精製し、目的物ＸＩPheｂａｓｅ＝Ｃを２．３９ｇ得た（収率８２％）。
【０３８０】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．１２（１Ｈ，ｍ），２．２１（１Ｈ，ｍ），２．４７（１Ｈ，ｍ），２．７２（１Ｈ，ｍ），２．８６（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．８８（２Ｈ×１／２，ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．３３（２Ｈ，ｍ），３．４１（２Ｈ，ｓ），３．７２（６Ｈ，ｓ），３．９１（１Ｈ，ｍ），４．０−４．４０（８Ｈ，ｍ），５．０３（１Ｈ，ｍ），５．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），６．０９（１Ｈ，ｍ），６．１９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．２，６．６Ｈｚ），６．８８（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．１５−７．４０（１４Ｈ，ｍ），７．５０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３，７．５Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．８７（１／２Ｈ，ｓ），７．８８（１／２Ｈ，ｓ），８．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），８．１０（１Ｈ，ｂｒ），８．５０（１Ｈ，ｂｒ），１１．２３（１Ｈ，ｂｒ），１１．６２（１Ｈ，ｂｒｗ）。
【０３８１】
31Ｐ−ＮＭＲ（１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．０４，−１．９４．
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ６０Ｈ５８Ｎ７ＮａＯ１５Ｐ）＝  １１７０．３６２６［Ｍ＋Ｎａ］+、実測値＝１１７０．５５９。
【０３８２】
［実施例４６］（ダイマーアミダイト：物質ＸＩＩPheｂａｓｅ＝Ｔの合成、式７１）
【０３８３】
【化７５】
2006217881.tif 000076
物質ＸＩPheｂａｓｅ＝Ｔ（０．４９３ｇ，０．４３０ｍｍｏｌ）を脱水アセトニトリルにて三回共沸脱水した後、脱水アセトニトリル−塩化メチレン（１：１）混合溶媒４．３ｍＬに溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（９６μＬ，０．５５８ｍｍｏｌ）を加えた。ここにシアノエチルクロロジイソプロピルホスホアミダイト（１１５μＬ，０．５１６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。ＭｅＯＨを加え、過剰のクロロアミダイトを反応させた後、塩化メチレンと水で分配後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後濃縮した。残渣を中圧クロマトグラフィー（２％体積Ｅｔ3Ｎ含有ジクロロメタン：エタノールを、体積比１：０から９：１に徐々に変更）にて分離精製し、０．３６３ｇの目的物ＸＩＩPheｂａｓｅ＝Ｔを得た。（収率６３％）。
【０３８４】
1Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１２（１２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），２．２６（１Ｈ，ｍ），２．４２（２Ｈ，ｍ），２．７５（３Ｈ，ｍ），２．８７（２Ｈ，ｍ），３．３３（２Ｈ，ｍ），３．４２（２Ｈ，ｓ），３．５４（２Ｈ，ｍ），３．７１（６Ｈ，ｓ），３．７１（２Ｈ，ｍ），４．０６（２Ｈ，ｂｒ），４．１−４．３（６Ｈ，ｍ），４．４７（１Ｈ，ｍ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．０９（１Ｈ，ｍ），６．１６（１Ｈ，ｍ），６．８８（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），７．２−７．４（１４Ｈ，ｍ），７．５０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，７．６Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．９３（１Ｈ，ｍ），７．９９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），８．１５（１Ｈ，ｂｒ），８．５５（１Ｈ，ｂｒ），１１．２８（１Ｈ，ｍ，ｂｒ），１１．６７（１Ｈ，ｍ，ｂｒ）。
【０３８５】
31Ｐ−ＮＭＲ（ＢＣＭ，１２０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：−２．０１，１４８．５５，１４８．６７。
【０３８６】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ：計算値（Ｃ６９Ｈ７５Ｎ９ＮａＯ１６Ｐ２+）＝１３７０．４７０、実測値＝１３７０．５５９。
【０３８７】
［実施例４７］
（ランダムミックスＤＮＡの作製）
【０３８８】
【表１】
2006217881.tif 000077
【０３８９】
【表２】
2006217881.tif 000078
ｔｔａｔｃａａｃａａａａｔａｃｔｃｃａａｔｔｇ（ＮｐＮｐ）25ｇａａａｇａｔｃｃｃａａｃｇａａａａｇをＤＮＡ自動合成機（アプライド３９１Ａ）で合成した。ＮｐＮｐ部分はダイマーアミダイド表である表１又は２の混合アミダイドを用いることにより合成した。
【０３９０】
表中の記号の説明を図６に纏めた。表の組み合わせで得られるダイマーアミダイトの構造は図６の式８４に示されている。Ａ，Ｇ，Ｃ，Ｔ，Ｘ，Ｙは、図６の式８４で表されるジヌクレオチドの塩基を修飾する基を表す。表中の３’，５’は、式８４の３’Ｂａｓｅと５’Ｂａｓｅとして示される塩基として、Ａ，Ｇ，Ｃ，Ｔ，ＸまたはＹが結合していることを意味する。Ｌｙｓ，Ｔｙｒ，Ｔｒｐ，Ｌｅｕ，Ｇｌｕ，ＳｅｒはＸまたはＹ中のＲ9がＬｙｓ，Ｔｙｒ，Ｔｒｐ，Ｌｅｕ，ＧｌｕまたはＳｅｒであることを意味する。たとえば、表中、３’のＡと５’のＸとの組み合わせで得られるジヌクレオチドは、式８４で表される構造の３’ＢａｓｅにＡが、５’ＢａｓｅにＸが結合し、ＸのＲ9がＬｙｓであることを意味する。
【０３９１】
合成したＤＮＡランダムミックスは固相レジン上でＤＢＵを用い、固相担体上でアミダイトのＦＭＯＣ基を脱保護した後、定法に従いアンモニアを使用してアミダイトＤＮＡを切り出し、残りの保護基の脱保護を行った。アンモニアを蒸発除去した後、ＧＬサイエンス社製ＳＮＰｓｉを用い、ｐＣＡＡＴＴＧＧＡＧＴＡＴＴＴＴＧＴＴＧＡＴＡＡ、ＴＴＡＴＣＡＡＣＡＡＡＡＴＡＣＴＣＣＡＡＴＴＧＡＡＣＣＡＣＴＧＣＴＴからＤＮＡｌｉｇａｓｅを用いアフィニティーレジンを合成後、これを用い、合成ＤＮＡランダムミックスＸ（表１由来）又はＹ（表２由来）の合成物と相補的２本鎖を形成させ、レジンの温度を順次昇温することにより精製を行った。濃度決定はＵＶ吸収強度計を用いて行った。
【０３９２】
（ランダムミックスからアプタマーのアビジンに対するアフィニティ精製）
Ｐｉｅｒｃｅ社製ＭｉｃｒｏＬｉｎｋＰｅｐｔｉｄｅＣｏｕｐｌｉｎｇＫｉｔを用いてレジン上に付属のプロトコールに従い（システインｃａｐｐｉｎｇされた）ビオチン修飾レジンを作成した。図７のビオチン化ＳＨ末端分子のＲ8に図７のａの構造の基を用いることによりＴＦＡ処理し、ＤＭＴｒ+発色から修飾量を同定した後、ビオチン化ＳＨ末端分子のＲ8に図７のｂを用いることによりビオチン修飾レジンを作成した。
【０３９３】
このレジン（２５重量％スラリー、４００μＬ）を用い１０ｍｇ／ｍＬのストレプトアビジンの２００μＬを室温で２時間、遮光下、反応させることによりストレプトアビジン−ビオチン修飾レジンを作成した。
【０３９４】
このレジンを５０℃で、１ｍＬの（０．５ＭのＮａＣｌ，０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０，１０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ＝８．５）で１０回以上洗浄した。
【０３９５】
次に上記ランダムミックスＸ又はＹの２００μＬ（５０ｎｍｏｌ）を室温で一晩、遮光下、反応させることにより修飾核酸−ストレプトアビジン−ビオチン修飾レジンを作成し、５０℃で１ｍＬの（５０ｍＭのＮａＣｌ，１ｍＭのＭｇＣｌ2，０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０，１０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ＝８．５））で１０回以上洗浄し、洗浄液に修飾核酸が存在しないことを定量ＰＣＲを用いて確認した。
【０３９６】
次に本レジンを（５０ｍＭのＫＣｌ，１ｍＭのＭｇＣｌ2，１０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ＝８．５）で湿潤した後、３６６ｎｍの光照射を１０分間行い、１００μＬの（５０ｍＭのＫＣｌ，１ｍＭのＭｇＣｌ2，１０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ＝８．５）で洗い流した。
【０３９７】
本溶液Ｘ，Ｙを用いＴＴＡＴＣＡＡＣＡＡＡＡＴＡＣＴＣＣＡＡＴＴＧ、ＣＴＴＴＴＣＧＴＴＧＧＧＡＴＣＴＴＴＣをプライマーとしてＰＣＲを行いＤＮＡを増幅した。生成物を定法に従いクローニングし、１００クローンについて配列を決定した。
【０３９８】
ブロックコード法によりデコードした後、ＤＮＡ自動合成機により修飾核酸を合成し、各々ストレプトアビジンとの結合解離定数を求めた。
【０３９９】
その結果、Ｘからは２０配列がＫｄ＝１０-7以下であることが確認でき、Ｙからは３配列がＫｄ＝１０-7以下であることが確認できた。よってＸで用いた三重結合リンカーがＹで用いた二重結合リンカーより有用であることが示された。
なお、上記に開示した内容から、下記の付記に示した発明が導き出せる。
【０４００】
（付記１）
塩基に置換基が導入されたヌクレオシド単位を含み、当該置換基が三重結合を介して当該塩基と結合している、下記式１８で表される構造を有する修飾ヌクレオチドｎ量体（ここで、ｎ＝１。）。
【０４０１】
【化７６】
2006217881.tif 000079
（式１８中、Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に、水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
（付記２）
付記１に記載の修飾ヌクレオチドｎ量体を構成要素として含む、修飾ヌクレオチドｍ量体（ここで、ｍは２以上の整数を表す。）。
【０４０２】
（付記３）
塩基に置換基が導入されたヌクレオシド単位を含み、当該置換基が三重結合を介して当該塩基と結合している修飾ヌクレオチドｎ量体（ここで、ｎは２以上の整数を表す。）。
【０４０３】
（付記４）
前記塩基がプリン塩基またはピリミジン塩基である、付記３に記載の修飾ヌクレオチドｎ量体。
【０４０４】
（付記５）
前記塩基が、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を有する、付記３に記載の修飾ヌクレオチドｎ量体。
【０４０５】
（付記６）
前記置換基が、置換基を有していてもよい、天然または非天然のアミノ酸基、金属錯体基、蛍光色素基、酸化還元色素基、スピンラベル化が可能な基、炭素数１〜１００のアルキル基および、式１〜１０で表される基からなる群から選ばれた少なくとも一つの基を有する、付記１〜５のいずれかに記載の修飾ヌクレオチドｎ量体。
【０４０６】
【化７７】
2006217881.tif 000080
（付記７）
前記置換基が、式１１で表される基である、付記１〜６のいずれかに記載の修飾ヌクレオチドｎ量体。
【０４０７】
【化７８】
2006217881.tif 000081
（式１１中、Ｒは、他の式とは独立に、水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
（付記８）
前記置換基が、式１２〜１７で表される基からなる群から選ばれた基である、付記７に記載の修飾ヌクレオチドｎ量体。
【０４０８】
【化７９】
2006217881.tif 000082
【０４０９】
【化８０】
2006217881.tif 000083
【０４１０】
【化８１】
2006217881.tif 000084
【０４１１】
【化８２】
2006217881.tif 000085
【０４１２】
【化８３】
2006217881.tif 000086
【０４１３】
【化８４】
2006217881.tif 000087
（式１２〜１６中、Ｒ1は、互いに独立に、トリフロロメチル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、メチル基、ｔ−ブチルジフェニルシリル基、２−ベンゼンスルホン酸エトキシ基または９−フローレニルメチル基を表す。）
（付記９）
ｎが２〜４の整数である、付記３〜８のいずれかに記載の修飾ヌクレオチドｎ量体。
【０４１４】
（付記１０）
下記式１９で表される構造を有するヌクレオシド体。
【０４１５】
【化８５】
2006217881.tif 000088
（式１９中、Ｒ2は、他の式とは独立に、水酸基、Ｏ−βシアノエトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基、Ｏ−メトキシ−ジイソプロピルアミノホスフィン基またはＨ−ホスホネート基を表す。）
（付記１１）
下記式２０で表される構造を有するヌクレオシド体。
【０４１６】
【化８６】
2006217881.tif 000089
（式２０中、Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒ10は、ＮＨ2またはＮＨ−（ＣＯ）−Ｒを表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
（付記１２）
下記式２１で表される構造を有するヌクレオシド体。
【０４１７】
【化８７】
2006217881.tif 000090
（式２１中、Ｒ5は、他の式とは独立に、水酸基またはＯ−（ＣＯ）ＣＨ2ＣＨ2（ＣＯ）ＣＨ3を表す。Ｒ6は、他の式とは独立に、水酸基または２−シアノエトキシ基を表す。Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
（付記１３）
下記式２２で表される構造を有するヌクレオシド体。
【０４１８】
【化８８】
2006217881.tif 000091
（式２２中、Ｒ7は、水酸基またはジメチルトリチル基を表す。Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
（付記１４）
下記式２３で表される構造を有するヌクレオシド体。
【０４１９】
【化８９】
2006217881.tif 000092
（式２３中、Ｒ5は、他の式とは独立に、水酸基またはＯ−（ＣＯ）ＣＨ2ＣＨ2（ＣＯ）ＣＨ3を表す。Ｒ6は、他の式とは独立に、水酸基または２−シアノエトキシ基を表す。Ｚは、他の式とは独立に、７−デアザアデニン骨格，７−デアザグアニン骨格、シトシン骨格またはウラシル骨格を含む基を表す。Ｒは、他の式とは独立に水素もしくは炭素数０から１００を含む官能基を表す。）
（付記１５）
付記１０〜１４に記載のヌクレオシド体を原料または中間体として使用する修飾ヌクレオチドｎ量体の製造方法（ここで、ｎは１以上の整数を表す。）。
【０４２０】
（付記１６）
前記修飾ヌクレオチドｎ量体が付記１〜９に記載の修飾ヌクレオチドｎ量体である、付記１５に記載の修飾ヌクレオチドｎ量体の製造方法。
【０４２１】
（付記１７）
付記１〜９のいずれかに記載の修飾ヌクレオチドｎ量体の構造を含む修飾ヌクレオチド配列。
【０４２２】
（付記１８）
付記１５または１６に記載の修飾ヌクレオチドｎ量体の製造方法により製造された修飾ヌクレオチドｎ量体の構造を含む修飾ヌクレオチド配列。
【０４２３】
（付記１９）
付記１７または１８に記載の修飾ヌクレオチド配列を含み、標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）。
【０４２４】
（付記２０）
付記１７または１８に記載の修飾ヌクレオチド配列を含み、標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）の構成要素。
【０４２５】
（付記２１）
標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）の候補を合成し、
当該機能性物質候補の中から、標的に対し親和性を有する機能性物質を選別し、
当該選別された機能性物質から特定の置換基を脱離し、または脱離せず、
当該選別された機能性物質または当該特定の置換基を脱離した機能性物質を増幅し、
当該増幅された機能性物質の構造を決定する、
機能性物質の構造決定方法において、
当該機能性物質候補の合成を付記１〜９のいずれかに記載の修飾ヌクレオチドｎ量体を用いて行う
機能性物質の構造決定方法。
【０４２６】
（付記２２）
前記標的が、タンパク質、リポタンパク質、糖タンパク質、ポリペプチド、脂質、多糖類、リポ多糖類、核酸、環境ホルモン、薬物、これらの複合体およびこれらの分解物からなる群から選択される少なくとも一つの物質である、付記２１に記載の機能性物質の構造決定方法。
【０４２７】
（付記２３）
標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）の候補を合成し、
当該機能性物質候補の中から、標的に対し親和性を有する機能性物質を選別し、
当該選別された機能性物質から特定の置換基を脱離し、または脱離せず、
当該選別された機能性物質または当該特定の置換基を脱離した機能性物質を増幅し、
当該増幅された機能性物質の構造を決定し、
当該構造に基づいて、機能性物質を製造する
機能性物質の製造方法において、
当該機能性物質候補の合成を付記１〜９のいずれかに記載の修飾ヌクレオチドｎ量体を用いて行う
機能性物質の製造方法。
【０４２８】
（付記２４）
前記標的が、タンパク質、リポタンパク質、糖タンパク質、ポリペプチド、脂質、多糖類、リポ多糖類、核酸、環境ホルモン、薬物、これらの複合体およびこれらの分解物からなる群から選択される少なくとも一つの物質である、付記２３に記載の機能性物質の製造方法。
【０４２９】
（付記２５）
標的に対し親和性を有する物質（機能性物質）の候補を合成し、
当該機能性物質候補の中から、標的に対し親和性を有する機能性物質を選別し、
当該選別された機能性物質から特定の置換基を脱離し、または脱離せず、
当該選別された機能性物質または当該特定の置換基を脱離した機能性物質を増幅し、
当該増幅された機能性物質の構造を決定し、
当該構造に基づいて、機能性物質を製造する
機能性物質の構成要素の製造方法において、
当該機能性物質候補の合成を付記１〜９のいずれかに記載の修飾ヌクレオチドｎ量体を用いて行う
機能性物質の構成要素の製造方法。
【０４３０】
（付記２６）
前記標的が、タンパク質、リポタンパク質、糖タンパク質、ポリペプチド、脂質、多糖類、リポ多糖類、核酸、環境ホルモン、薬物、これらの複合体およびこれらの分解物からなる群から選択される少なくとも一つの物質である、付記２５に記載の機能性物質の構成要素の製造方法。
【図面の簡単な説明】
【０４３１】
【図１】三重結合が結合した修飾ヌクレオチドの例である。
【図２】修飾ヌクレオチド２量体の例である。
【図３】修飾ヌクレオチドｎ量体の合成ルートを示している。
【図４】ＤＮＡシンセサイザーの模式図である。
【図５】シスジオールの過ヨウ素酸酸化による切断と、シリル基のフッ素イオンによる切断と、光反応による切断の反応の例を示す図である。
【図６】表１，２の符号の説明図である。
【図７】ビオチン化ＳＨ末端分子およびＲ8の構造を示す図である。
【図８】ＺとＲの組み合わせの例を示す図である。
【図９】Ｂａｓｅを示す図である。
【図１】
2006217881.tif 000094
【図２】
2006217881.tif 000095
【図３】
2006217881.tif 000096
【図４】
2006217881.tif 000097
【図５】
2006217881.tif 000098
【図６】
2006217881.tif 000099
【図７】
2006217881.tif 000100
【図８】
2006217881.tif 000101
【図９】
2006217881.tif 000102