(57)【要約】【構成】西洋バラ（Rosacentifolia(Rosaceae)）花、子房、ハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）花、子房、ガク、葉、茎、エイジツ（Rosamultiflora  Thunberg（Rosaceae））、ブドウ（Vitisvinifera  Linne’  （Vitaceae））葉、カキ（Diospyroskaki  Thunberg（Ebenaceae））葉、リンゴ（Malus  pumila（Rosaceae））葉、マリーゴールド（Calendula  officinalis  L.  (Compositae)）花、モクレン（Magnolia  lililora（Manoliaceae）））葉の抽出物を有効成分として含有するメイラード反応阻害剤、またはそれを含有する皮膚外用剤。【効果】メイラード反応を阻害し、肌の硬化、しわ形成、はり・つやの喪失の原因となるコラーゲンの架橋形成及び肌のくすみの原因となる着色を抑制して優れた皮膚老化防止効果、美肌効果を示す皮膚外用剤を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
西洋バラ（Rosa centifolia(Rosaceae)）花、子房、ハイブリッドローズ（Rosa
Hybrida(Rosaceae)）花、子房、ガク、葉、茎、エイジツ（Rosamultiflora  Thunberg（Rosaceae））、ブドウ（Vitisvinifera  Linne’  （Vitaceae））葉、カキ（Diospyroskaki  Thunberg（Ebenaceae））葉、リンゴ（Malus  pumila（Rosaceae））葉、マリーゴールド（Calendula  officinalis  L.  (Compositae)）花、モクレン（Magnolia  lililora（Manoliaceae）））葉の抽出物の抽出物を有効成分として含有することを特徴とするメイラード反応阻害剤。
【請求項２】
請求項１に記載のメイラード反応阻害剤を１種又は２種以上含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項３】
バラ科バラ属植物の子房部の抽出物を有効成分として含有することを特徴とするメイラード反応阻害剤。
【請求項４】
請求項３に記載のメイラード反応阻害剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タンパク質またはアミノ酸と還元糖との縮合反応であるメイラード反応を抑制するメイラード反応阻害剤及びそれを含有する皮膚外用剤に関し、更に詳しくは、メイラード反応すなわちブドウ糖とコラーゲンとが非酵素的に縮合して生じるアマドリ転移生成物の生成を阻害し、肌の硬化、しわ形成、はり・つやの喪失の原因となるコラーゲンの架橋形成（老化架橋ともいわれる）及び肌のくすみの原因となる着色を抑制する皮膚老化防止効果や美肌効果を有するメイラード反応阻害剤及びそれを含有する皮膚外用剤に関する。
【従来の技術】
【０００２】
メイラード反応は、アミノ酸、タンパク質等のＮ末端のアミノ基と還元糖が非酵素的に結合し、シッフ塩基を形成し、その後アマドリ転移により安定なアマドリ化合物を形成する。この蛋白質の非酵素的糖化に関する研究は、特に食品科学の分野では古くから行われおり、メイラード反応としてよく知られる現象である。アマドリ化合物は、温度、水分活性、ｐH、保存方法などの環境条件によりさらに化学的に分解を受け、その分解物が重合してAGE（advanced  glycosylation  end  products）を形成する。AGEは、蛍光を有し、褐色調を呈するため、この反応は褐色反応とよばれる。
【０００３】
生体内の蛋白質においても糖の存在で、生理的にこれらとまったく同様な反応が生じていることが明らかにされるようになった。特に高血糖の持続している糖尿病患者においてはメイラード反応が亢進しており、臨床的にはヘモグロビン糖化度を測定して糖尿病コントロールの指標として広く用いられている。近年では本反応の結果生じる構造や機能の変化が糖尿病のみならず種々の病変、老化に深い関わりがあることが判明している。
【０００４】
メイラード反応の機構は、現在次のように理解されている。すなわち、まずタンパク質の遊離アミノ基をグルコース等の還元糖のアルデヒド基が求核反応によって攻撃し、シッフ塩基を形成する。このシッフ塩基は不安定であり、分子内電子転移反応を起こしてアマドリ転移生成物を形成し安定化する。次いで、アマドリ生成物は種々のデオキシオソンを生成し、更にタンパク質のアミノ基と反応を起こして重合体形成をひき起こす。最後に、この重合体形成によりタンパク質の溶解度が低下し、プロテアーゼの作用を受けにくくなり、多くは蛍光を発する褐変物質となるのである。
【０００５】
以上のことからメイラード反応は、特に代謝回転の緩やかなタンパク質において顕著であることが知られ、化粧品科学においては特にコラーゲンのメイラード反応が皮膚の硬化、しわ、黄くすみ等すなわち皮膚老化の要因の１つであることが確認されてきている。
【０００６】
現在すでに、このメイラード反応を阻害する物質がいくつか知られている。メイラード反応阻害活性を有する成分としては、アミノグアニジン、アミノプロピオニトリル、ペニシラミンなどが良く知られている。その他、尿素やグアニジン（特開昭６２−２４９９０８号）、メチルトリシラノール等のケイ素化合物（特開昭６２−２４９９０９号）、ベンゾフェノン類（特開平４−３６８３２０号）、黄ごんフラボノイド（特開平３−２４０７２５号）について、これらがメイラード反応阻害活性を有することが報告されている。しかし、幼年期の動物が、アミノグアニジンやアミノプロピオニトリルは効果的には強いが、幼年期の動物がアミノプロピオニトリルを含むマメ科植物の花を食することによって、成長時に必要なコラーゲンなどの架橋を抑制し、奇形になる原因と考えられている。また、その他の化合物は、作用が弱く、実用化のために十分満足のゆくものではなかった。
【特許文献１】特開昭６２−２４９９０８号公報
【特許文献２】特開昭６２−２４９９０９号公報
【特許文献３】特開平３−２４０７２５号公報
【特許文献４】特開平４−３６８３２０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の課題は、上記の欠点を解消し、生体内に影響を与えず、実用に耐え得るメイラード反応阻害剤の提供である。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、皮膚のコラーゲンに着目し、西洋バラ（Rosa centifolia(Rosaceae)）、ハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）の抽出物やその他植物抽出物を用いてペントシジンの生成抑制効果を調べた結果、西洋バラ（Rosa
centifolia(Rosaceae)）花、子房、ハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）花、子房、ガク、葉、茎、エイジツ（Rosamultiflora  Thunberg（Rosaceae））、ブドウ（Vitisvinifera  Linne’  （Vitaceae））葉、カキ（Diospyroskaki  Thunberg（Ebenaceae））葉、リンゴ（Malus  pumila（Rosaceae））葉、マリーゴールド（Calendula  officinalis  L.  (Compositae)）花、モクレン（Magnolia  lililora（Manoliaceae）））葉の抽出物がペントシジンの生成すなわちメイラード反応を阻害し、肌の硬化、しわ形成、はり・つやの喪失の原因となるコラーゲンの架橋形成や、肌の黄くすみの原因となる着色を抑制し、皮膚老化防止効果や美肌効果において優れた性質を示すことを見い出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
即ち、本発明は西洋バラ（Rosa
centifolia(Rosaceae)）花、子房、ハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）花、子房、ガク、葉、茎、エイジツ（Rosamultiflora  Thunberg（Rosaceae））、ブドウ（Vitisvinifera  Linne’  （Vitaceae））葉、カキ（Diospyroskaki  Thunberg（Ebenaceae））葉、リンゴ（Malus  pumila（Rosaceae））葉、マリーゴールド（Calendula  officinalis  L.  (Compositae)）花、モクレン（Magnolia  lililora（Manoliaceae）））葉の抽出物を有効成分として含有することを特徴とするメイラード反応阻害剤及びそれを含有することを特徴とする皮膚外用剤である。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、西洋バラ（Rosa centifolia(Rosaceae)）花、子房、ハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）花、子房、ガク、葉、茎、エイジツ（Rosamultiflora  Thunberg（Rosaceae））、ブドウ（Vitisvinifera  Linne’  （Vitaceae））葉、カキ（Diospyroskaki  Thunberg（Ebenaceae））葉、リンゴ（Malus  pumila（Rosaceae））葉、マリーゴールド（Calendula  officinalis  L.  (Compositae)）花、モクレン（Magnolia  lililora（Manoliaceae）））葉の抽出物を含有した安全であり、生体内で生成するメイラード反応を抑えることによる肌の硬化、しわ形成、はり・つやの喪失の原因となるコラーゲンの架橋形成や、肌のくすみの原因となる着色を抑制して、優れた皮膚老化防止効果、美肌効果を示す皮膚外用剤を提供することが可能となった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下、本発明について詳述する。本発明で用いられる西洋バラ（Rosa centifolia(Rosaceae)）又はハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）は、バラ科バラ属に属し、Rosa
centifoliaは、17世紀初頭にオランダの品種改良家が開発し、「百枚の花びら」という意味を持ち、キャベツ・ローズとも呼ばれる。化用品原料としては、ダマスクローズと共に、バラ精油、ローズ水やバラエキスの材料として花弁が使用される。Rosa Hybridaは、四季咲き・大輪化などを目的に交雑種が開発され、観賞用のバラはほとんどこの種である。Rosa Hybridaの花弁は香りがRosa
centifolia等に比べて弱いため、バラ精油には利用できないが、ローズ水やバラエキスが生産され、近年、化粧品への利用がされるようになった。
【００１２】
バラの化粧品への利用は、花弁が中心であり、葉、茎、鍔、子房は、廃棄されるか家畜の餌に利用されるしかなかった。ここで言う子房は花の構造の中で、めしべの一部分であり、種子を作る植物で裸子植物にはなく、被子植物に特有な部分である。子房は、受粉後、種子となる胚珠を包み、子房の部分が果実となる。
【００１３】
即ち、西洋バラ（Rosa
centifolia(Rosaceae)）花、子房、ハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）花、子房、ガク、葉、茎、エイジツ（Rosamultiflora  Thunberg（Rosaceae））、ブドウ（Vitisvinifera  Linne’  （Vitaceae））葉、カキ（Diospyroskaki  Thunberg（Ebenaceae））葉、リンゴ（Malus  pumila（Rosaceae））葉、マリーゴールド（Calendula  officinalis  L.  (Compositae)）花、モクレン（Magnolia  lililora（Manoliaceae）））葉の抽出物は、抽出溶媒としては、水やエタノールなどの各種極性有機溶媒及びそれらの混液を用いることができる。抽出物の精製は、様々な方法が用いられるが、活性炭、スチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着剤（ＨＰ−２０：三菱化成社製）やオクタデシルシラン処理シリカ（Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ  ＯＤＳ：富士シリシア化学製）により吸着させ、適当な溶媒で溶出する方法が簡便でかつ実用的である。
【００１４】
本発明のメイラード反応阻害剤は、常法に従い、必須成分である西洋バラ（Rosa centifolia(Rosaceae)）花、子房、ハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）花、子房、ガク、葉、茎、エイジツ（Rosamultiflora  Thunberg（Rosaceae））、ブドウ（Vitisvinifera  Linne’  （Vitaceae））葉、カキ（Diospyroskaki  Thunberg（Ebenaceae））葉、リンゴ（Malus  pumila（Rosaceae））葉、マリーゴールド（Calendula  officinalis  L.  (Compositae)）花、モクレン（Magnolia  lililora（Manoliaceae）））葉の抽出物を通常の製剤用基剤に配合して調製することができる。
【００１５】
本発明のメイラード反応阻害剤は皮膚外用剤、すなわち、軟膏剤、クリーム剤、外用液剤等の皮膚外用剤や、乳液、クリーム、化粧水、パック、ファンデーション、洗浄料、美容液等の化粧料に添加する剤形、あるいはそれらの剤形そのものとすることができる。
【００１６】
本発明のメイラード反応阻害剤及びそれを含有する皮膚外用剤における西洋バラ（Rosa centifolia(Rosaceae)）花、子房、ハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）花、子房、ガク、葉、茎、エイジツ（Rosamultiflora  Thunberg（Rosaceae））、ブドウ（Vitisvinifera  Linne’  （Vitaceae））葉、カキ（Diospyroskaki  Thunberg（Ebenaceae））葉、リンゴ（Malus  pumila（Rosaceae））葉、マリーゴールド（Calendula  officinalis  L.  (Compositae)）花、モクレン（Magnolia  lililora（Manoliaceae）））葉の抽出物の含有量は、乾燥固形分として好ましくは０．０００１〜１０重量％（以下、特に記載のあるもの以外は重量％を単に％で示す）、より好ましくは０．０１〜５％である。抽出液を使用する場合は、溶質である乾燥固形分の含有量が上記範囲内であれば、その抽出液濃度等は何ら限定されるものではない。
【００１７】
本発明において、前記西洋バラ（Rosa
centifolia(Rosaceae)）花、子房、ハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）花、子房、ガク、葉、茎、エイジツ（Rosamultiflora  Thunberg（Rosaceae））、ブドウ（Vitisvinifera  Linne’  （Vitaceae））葉、カキ（Diospyroskaki  Thunberg（Ebenaceae））葉、リンゴ（Malus  pumila（Rosaceae））葉、マリーゴールド（Calendula  officinalis  L.  (Compositae)）花、モクレン（Magnolia  lililora（Manoliaceae）））葉の抽出物を配合する製剤用基剤は、前記の使用の態様に応じて選択することができ、例えば、精製水、低級アルコール、多価アルコール、高級アルコール、油脂、ロウ、シリコン類、粉体、界面活性剤、水溶性高分子、植物エキス、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、防腐剤、香料、酸化防止剤等を用いることができる。
【実施例】
【００１８】
以下に参考例、試験例及び実施例を挙げ、本発明について更に説明する。なお、これらは本発明を何ら限定するものではない。
【００１９】
〔製造例１〕
西洋バラ（Rosa centifolia(Rosaceae)）、ハイブリッドローズ（Rosa
Hybrida(Rosaceae)）の花弁、子房部、葉、鍔、茎やその他植物を乾燥させる。この乾燥物１０重量部に水または５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液１５０重量部を加え、水の場合は６０℃で３時間、５０％エタノールの場合は室温で時々攪拌しながら３日間抽出し、濾過して、溶媒を留去し、抽出物を得た。これらを試料として試験例１の方法により、メイラード反応阻害能を測定した。水抽出物の結果を表1に５０％エタノール抽出物の結果を表２に示した。
【００２０】
〔試験方法及び評価方法〕
ａ．試料本発明の製造例１で得られた抽出液を用い、試験に供した。尚、ブランクとして５０％エタノール溶液、陽性対照として２０mMのアミノグアニジンを同様の条件で調製し、試験に用いた。
ｂ．ペントシジン（ｐｅｎｔｏｓｉｄｉｎｅ）の生成抑制作用の測定試料溶液１０μLに５０mM Ｒｉｂｏｓｅ、５０ｍＭ Ｌｙｓｉｎｅ、５０ｍＭ Ａｒｇｉｎｉｎｅ、１００ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4(ｐＨ7.4)、Ｈ2Ｏを各１００μＬ加え、６０℃、24時間ヒートブロック上でインキュベートし、反応終了後、反応溶液１００μＬにＨ２Ｏ ４００μＬを加え、高速液体クロマトグラフィーにてＰｅｎｔｏｓｉｄｉｎｅ生成量を測定した。
＜高速液体クロマトグラフィー測定条件＞
溶媒は、アセトニトリル：ＴＦＡ：Ｈ２Ｏ＝３：０.１：９６.９を使用。流速は１ｍＬ/ｍｉｎ、カラム温度は室温、励起波長を３３５ｎｍとし測定波長を３８０ｎｍとする。インジェクション量は１０μＬで行う。尚、ペントシジン(ｐｅｎｔｏｓｉｄｉｎｅ)標品は、Monnieの方法に基づいて調整し、各種機器スペクトルデータにより確認した。それを用いて高速液体クロマトグラム上のピークがペントシジン（ｐｅｎｔｏｓｉｄｉｎｅ）であることを確認した。
【００２１】
【表１】
2006273811.tif 000002
【００２２】
【表２】
2006273811.tif 000003
【００２３】
表１及び表２の結果から明らかなように、西洋バラ（Rosa centifolia(Rosaceae)）花、子房、ハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）花、子房、ガク、葉、茎、エイジツ（Rosamultiflora  Thunberg（Rosaceae））、ブドウ（Vitisvinifera  Linne’  （Vitaceae））葉、カキ（Diospyroskaki  Thunberg（Ebenaceae））葉、リンゴ（Malus  pumila（Rosaceae））葉、マリーゴールド（Calendula  officinalis  L.  (Compositae)）花、モクレン（Magnolia  lililora（Manoliaceae）））葉の抽出物は、メイラード反応の公知の阻害剤であるアミノグアニジンと比較して著しく高いメイラード反応によるペントシジン生成抑制効果が認められた。
【００２４】
実施例１〜４及び比較例１〜２クリームを表３に示す組成のクリームを調製し、その美肌効果及び皮膚老化防止効果を評価した。結果を表４に示す。
【００２５】
【表３】
2006273811.tif 000004
【００２６】
（評価方法）女性４８名をパネルとし、毎日朝と夜の２回、２ヶ月にわたり洗顔後に被験クリームの適量を顔面に塗布した。塗布による美肌及び皮膚老化防止効果を下の評価基準によって評価した。
（評価基準）
美肌効果：       ［評価］     ［内 容］
有 効       肌のくすみが目立たなくなった
やや有効    肌のくすみがあまり目立たなくなった
無 効       使用前と変化なし
皮膚老化防止効果：［評価］     ［内 容］
有 効       肌のはり、つや、柔軟性が改善された
やや有効    肌のはり、つや、柔軟性がやや改善された
無 効       使用前と変化なし
【００２７】
【表４】
2006273811.tif 000005
【００２８】
表４の結果から明らかな如く、本発明品は比較例１〜３のものに比べ、肌の「つや」、「はり」、「柔軟性」の改善や、「くすみ」の解消において良好な結果が得られ、皮膚老化防止効果及び美肌効果に優れた効果を示した。
【００２９】
以下に本発明の処方例を挙げる。
＜処方例１＞化粧水
（成分名）                                                （質量％）
ハイブリッドローズ子房水抽出物                              ０．５
グリセリン                                                  ５．０
ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（２０Ｅ．０）    １．５
エタノール                                                  ８．０
クエン酸トリエチル                                          ２．０
防腐剤・酸化防止剤                                          適量 
精製水                                                      残部
【００３０】
＜処方例２＞化粧用クリーム
（成分名）                                              （質量％）
西洋バラ子房エタノール抽出物                                ０．５
ミツロウ                                                    ２．０
ステアリルアルコール                                        ５．０
ステアリン酸                                                ８．０
スクワラン                                                １０．０
自己乳化型グリセリルモノステアレート                        ３．０
ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．０）              １．０
グリセリン                                                  ５．０
水酸化カリウム                                              ０．３
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【００３１】
＜処方例３＞乳液
（成分名）                                                （質量％）
モクレン葉水抽出物                                          ０．１
スクワラン                                                  ８．０
ワセリン                                                    ２．０
ミツロウ                                                    ０．５
ソルビタンセスキオレエート                                  ０．８
ポリオキシエチレンオレイルエーテル（２０Ｅ．０）            １．２
カルボキシビニルポリマー                                    ０．２
グリセリン                                                  １．５
水酸化カリウム                                              ０．１
エタノール                                                  ７．０
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【００３２】
＜処方例４＞パック剤
（成分名）                                                （質量％）
リンゴ葉水抽出物                                            ０．５
酢酸ビニル樹脂エマルジョン                                １５．０
ポリビニルアルコール                                      １０．０
ホホバ油                                                    ３．０
グリセリン                                                  ５．０
酸化チタン                                                  ８．０
カオリン                                                    ７．０
エタノール                                                  ５．０
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【００３３】
＜処方例５＞軟膏
（成分名）                                                （質量％）
マリーゴールド花エタノール抽出物                            ０．５
酢酸トコフェロール                                          ０．５
パラジメチルアミノ安息香酸オクチル                          ４．０
ブチルメトキシベンゾイルメタン                              ４．０
ステアリルアルコール                                      １８．０
モクロウ                                                  ２０．０
グリセリンモノステアリン酸エステル                          ０．３
ワセリン                                                  ３３．０
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明のによれば、西洋バラ（Rosa
centifolia(Rosaceae)）花、子房、ハイブリッドローズ（Rosa Hybrida(Rosaceae)）花、子房、ガク、葉、茎、エイジツ（Rosamultiflora  Thunberg（Rosaceae））、ブドウ（Vitisvinifera  Linne’  （Vitaceae））葉、カキ（Diospyroskaki  Thunberg（Ebenaceae））葉、リンゴ（Malus  pumila（Rosaceae））葉、マリーゴールド（Calendula  officinalis  L.  (Compositae)）花、モクレン（Magnolia  lililora（Manoliaceae）））葉の抽出物を含有したメイラード反応阻害剤は、肌の硬化、しわ形成、はり・つやの喪失の原因となるコラーゲンの架橋形成や、肌のくすみの原因となる着色を抑制する効果を有するため、皮膚老化防止効果、美肌効果を示す皮膚外用剤に広く応用が期待できる。