(57)【要約】【課題】  食品素材であるγ−アミノ酪酸を用いて、疲労感や精神的疲労を緩和・抑制することができ、日常的に継続して摂取可能であり、安全かつ安価な、精神的疲労改善組成物を提供することを課題とする。【解決手段】  本精神的疲労改善組成物は、γ−アミノ酪酸を含有することを特徴とする。即ち、本発明の精神的疲労改善組成物は、精神的疲労物質として報告されている体内セロトニン濃度の上昇を抑制する作用を有するγ−アミノ酪酸を有効成分としていることを特徴とする。また、この精神的疲労改善組成物は、飲食品に使用できる。【選択図】  図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
経口で摂取する事により精神的（中枢性）疲労を改善させることができる、γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）を含有する精神的疲労改善組成物。
【請求項２】
体内セロトニン濃度の上昇を抑制させることができる事を特徴とする請求項１記載の精神的疲労改善組成物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の精神的疲労改善組成物を含む飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、運動後の疲労感、精神的疲労時に認められる精神（中枢性）疲労物質である体内セロトニン濃度の上昇を抑制することのできる、精神的疲労改善組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代社会は複雑化しており、老若男女を問わず全てのヒトが何らかの『疲れ』を感じている。１９９９年厚生労働省疲労調査研究班が行った１５〜６５歳の男女３，０００名以上の回答により疫学調査では、疲労感を自覚している人々の割合は約６０％であって、実にその半数を超える人々（全体の３７％）が半年以上続く慢性疲労に悩んでいる事が明らかとなった。この事実から日本の就労人口8千万人に対し、実に３千万人近い人々が疲労感に悩んでいる事になる。（非特許文献１参照）
【０００３】
疲労には『肉体的（末梢）疲労』と『精神（中枢性）疲労』が存在する。肉体（抹消）疲労は、過度の運動によって発生する乳酸やアンモニアなどの代謝産物が原因として起こる事が知られている。乳酸が発生する事により筋肉が酸性状態になり、筋繊維の運動がスムーズにいかなくなり、疲労が蓄積される。この乳酸の蓄積を抑制することにより、肉体的疲労を軽減した例として、特許文献１，２が挙げられる。
【０００４】
一方、精神的疲労の問題を解決するための試みとして、特許文献３，４が挙げられる。例えば、特許文献３では、肉体的ならびに精神的疲労を速やかに回復する効果のあるアミノ酸栄養組成物を提供している。しかし、この発明では、原料が高価であったり、多種の成分を同時に取らなければならない為、充分な量の成分を添加するのが困難であったり、苦味やえぐ味を伴ったりと、一般に飲食品として広く普及させるには問題が伴った。
【０００５】
また、特許文献４では、カフェイン、テアニン及びアルギニンからなる精神疲労軽減組成物が提供されている。しかし、配合量や配合バランスが限定されており、また、その組成物を一定量以上摂取すると、かえって意に反する効果が出てしまう為、飲食品への使用に注意を要する。
【０００６】
一方、精神（中枢性）疲労の原因として『セロトニン』が挙げられる。スポーツ（運動）やストレスなどにより、血液中のアミノ酸バランスが崩れると、脳内のセロトニン濃度が上昇する。このセロトニンによって、疲労感や倦怠感、さらには眠気を引き起こすと報告されている。（非特許文献２及び３参照）
【０００７】
現代の疲労感による悩みは、まさにこのセロトニンが関与する精神的（中枢性）疲労によるものであり、この解決が望まれている。
【０００８】
特許文献３，４では、このセロトニンとの関連については、何ら記載されていない。
【０００９】
さらに、近年、γ−アミノ酪酸の研究開発が活発にされている中で、特許文献５では、γ−アミノ酪酸の摂取によりα波を増やす事を報告している。しかし、あくまでもリラックスする物質の提供であり、精神疲労を改善している事には繋がらず、また現時点では、脳波と精神（中枢性）疲労の関係は明らかにされていない。
【特許文献１】特開２００１−１７２１９０号公報
【特許文献２】特許第２５１８６９２号公報
【特許文献３】特開平８−１９８７４８号公報
【特許文献４】特開２００２−３２２０６３号公報
【特許文献５】特開２００３−２５２７５５号公報
【非特許文献１】Molecular  Medicine  Vol.41、No.10  (2004)
【非特許文献２】S.P.Bailey, J.M. Davis, E.N. Ahlborn; Int. J. Sports Med. 14, 330-333(1993)
【非特許文献３】J.D.Fernstrom; J Am Diet Assoc. 94, 71-77(1994)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明では、食品素材を用いて、味もよく、過剰摂取の心配もなく、疲労感や精神的疲労を改善させることのできる精神的疲労改善組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、上記課題を達成するために鋭意検討した結果、γ−アミノ酪酸に、運動後の体内セロトニン濃度の上昇を抑制する作用があることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【００１２】
即ち、本発明の精神的疲労改善組成物は、経口で摂取する事により精神的（中枢性）疲労を改善させることができること、及びγ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）を含有することを特徴とする。
【００１３】
また、本発明の精神的疲労改善組成物においては、体内セロトニン濃度の上昇を抑制させることができることが好ましい。
【００１４】
本発明により、運動後の疲労感ならびに精神的疲労を抑制することのできる、精神的疲労改善組成物を提供することができる。
【００１５】
発明のもう１つは、前記の精神的疲労改善組成物を含む飲食品である。
【００１６】
本発明により、運動後の疲労感ならびに精神的疲労を改善することのできる飲食品を提供することができる。
【発明の効果】
【００１７】
本発明の精神的疲労改善組成物、又はこれを含有する飲食品によれば、運動後の体内セロトニンの上昇を抑制することのできるので、運動後の疲労感、精神的疲労を抑え、より積極的にスポーツを楽しむ事ができる。ひいては健康の増進に役立てることも可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
本発明におけるγ−アミノ酪酸とは、特に限定するものではないが、野菜、果物、穀物などから抽出されたγ−アミノ酪酸、発酵法により生産されたγ−アミノ酪酸、有機合成から生産されたγ−アミノ酪酸のことをいう。特に限定するものではないが、大量且つ安価にＧＡＢＡを得ることができる乳酸菌による発酵法が好ましい。例えば、グルタミン酸ソ−ダ、ブドウ糖、パン酵母エキス等を含む培養液に、乳酸菌（ラクトバチルス
ブレ ビス（ＩＦＯ１２００５株）、ラクトバチルス ヒルガルディーＫ−３株（ＦＥＲＭ Ｐ−１８４２２）等）の培養液を添加し、２０〜 ３０℃で、１〜３日間培養し、この培養液を、加熱殺菌後、濾過して濾液を得る。なお、乳酸菌としてラクトバチルス
ヒルガルディー Ｋ−３株（ＦＥＲＭ Ｐ−１８４２２）を用いた場合、培養液中のＧＡＢＡ含量は約５質量％、固形分当りに換算するとＧＡＢＡは約５０％を占める。この濾液は、適宜濃縮してそのまま、又は更に乾燥して粉末として、本発明の精神的疲労改善組成物に用いることができる。
【００１９】
また、市販品「ファーマギャバ２０―Ｄ」（株式会社ファーマフーズ製）を用いてもよい。
【００２０】
本発明の組成物中または飲食品中のγ−アミノ酪酸の検出方法は特に限定されるものではないが、イオン交換カラムを用いての高速クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で分離し、オルトフタルアルデヒド（ＯＰＡ）によるポストカラムでの誘導体化後、蛍光検出器で検出定量する方法が好ましい。
【００２１】
本発明の精神的疲労改善組成物におけるγ−アミノ酪酸の含有量は、特に限定されるものではないが、γ−アミノ酪酸を１〜１００質量％含むことが好ましい。含有量が１質量％未満であると、本精神的疲労改善組成物を有効摂取量摂るのに大量の粉末や液体を摂取する必要が出てきたり、本精神的疲労改善組成物を飲食品に添加する場合、高濃度で添加することになるため、好ましくない。
【００２２】
本発明の精神的疲労改善組成物の形態は特に制限はなく、用途に応じて溶液、粉末などを選択できる。粉末化の方法としては、熱風乾燥、噴霧乾燥、凍結乾燥、通常の公知の粉末化方法を採用できる
【００２３】
本発明の精神的疲労改善組成物は、上述した成分のほかに、賦形剤、乳化剤、安定剤、甘味料、ｐＨ調整剤、増粘剤、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、脂質、多糖類、オリゴ糖等の通常食品に用いられる成分を含んでいてもよい。
【００２４】
本発明の精神的疲労改善組成物は、飲食品に加えるだけでなく投与形態に応じて種々の形に調製され、粉末（または顆粒）、ドリンク剤、錠剤、カプセル剤等として用いることもできる。
【００２５】
本発明に包含される飲食品としては、乾燥食品、サプリメント等の固形食品、また、清涼飲料やスポーツドリンク・ミネラルウォーター、嗜好飲料等の液状食品を挙げることができる。固形食品としては特に限定されるものではないが、詳しくは、たとえば、練り製品、大豆加工品、ムース、ゼリー、ヨーグルト、冷菓、飴、チョコレート、ガム、クラッカー、ビスケット、クッキー、ケーキ、パン等が挙げられる。また、液状食品としては特に限定されるものではないが、詳しくは、たとえば、炭酸飲料、スポーツドリンク、清涼飲料、緑茶・ウーロン茶・紅茶・ハーブティー等の茶類、濃縮果汁、濃縮還元ジュース、ストレートジュース、果実ミックスジュース、果肉入り果実ジュース、果汁入り飲料、果実・野菜ミックスジュース、野菜ジュース、ミネラルウォーター、牛乳、乳飲料等が挙げられる。
本発明の飲食品の製法は特に限定されるものではなく、たとえば、γ−アミノ酪酸と他の原材料を粉体混合する製法、溶媒中にγ−アミノ酪酸と他の原材料を溶かし混合溶液とする製法、またその混合溶液を凍結乾燥する製法、噴霧乾燥する製法等、一般的な飲食品の製法を適用することができる。本発明の飲食品を製造する際に用いることができるγ−アミノ酪酸以外の成分は、γ−アミノ酪酸による所望の効果の発現が阻害されないかぎり、適宜所望の用途に合わせて選択することができる。 
【００２６】
本発明の飲食品における精神的疲労改善組成物の添加量は、特に限定されるものではないが、０．０１質量％以上１００質量％以下が好ましい。０．０１                質量％未満であると、有効成分であるγ−アミノ酪酸の摂取が難しい。
【００２７】
本発明である精神的疲労改善組成物は、前記γ−アミノ酪酸を有効成分として含有するものである。その有効摂取量は年齢や性別、体質などにより異なるが、通常、成人運動1回あたりγ−アミノ酪酸換算で10mgから1gが好ましい。1回につきγ−アミノ酪酸換算で3gほど摂取しても特に悪影響は見られないが、1回あたり1g以上摂取しても、特に効果が顕著になるわけではない。
【００２８】
本発明において用いられるγ−アミノ酪酸の安全性は高く、たとえば、マウスを用いた急性毒性試験において５ｇ／ｋｇ経口投与で死亡例はなく、一般状態および体重等に異常は認められない。食品衛生法上、その添加量に制限はない。しかも、従来の薬物と異なり、γ−アミノ酪酸による副作用は全く認められないので、本発明の組成物によれば、安全かつ効果的に精神的疲労を改善させることができる。
【００２９】
以下実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれによって特に限定されるものではない。
【実施例１】
【００３０】
（乳酸菌発酵γ−アミノ酪酸高含有素材の調製）  
表１に示す割合で各成分を含有する発酵原料（ｐＨ５．０）５０Ｌを、９０℃で１０分間加熱殺菌した後、キムチ由来の乳酸菌（ラク
トバチルス ヒルガルディーＫ−３株（ＦＥＲＭ Ｐ−１８４２２））培養液５０ｍＬを接種し、３０℃で３日間培養した。なお、発酵終了後の発酵液のＧＡＢＡ含量は５１ｇ／Ｌであった。この発酵液を９０℃で１０分間加熱殺菌した後、濾過助剤を加えてろ過し、得られたろ液を噴霧乾燥機にて乾燥、粉末化して乳酸菌発酵γ−アミノ酪酸高含有素材（ＧＡＢＡ含量：２１質量％）を得た。
【００３１】
【表１】
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【００３２】
尚、本製造法は１例であり特に本特許を限定するものではない。
【実施例２】
【００３３】
（ラット強制遊泳試験）
（実験動物）  Wistar  クリーンラット、５週齢、雄、体重１００ｇ前後のものを用いた。
【００３４】
（強制水泳試験方法）  プールは直径１．２メートル、水温は１８℃  水の深さは３０ｃｍ。ラットの腹部に体重の５％のおもり（鉛製の板おもり）をつけた。水泳は１５分間行なった。これは、この条件下でラットが水泳を持続できる限界に近い時間設定である。
【００３５】
（グループわけと経口投与サンプル）
コントロール群（０分、運動前採血）：経口投与なし、5匹。
水群：０．９％生理食塩水１ｍＬ / 100g B.W.を経口投与、5匹。
γ−アミノ酪酸群（ＧＡＢＡ群）：γ−アミノ酪酸（和光純薬製）１０％水溶液１ｍＬ/ 100g
B.W.を経口投与  5匹
【００３６】
（試験）水群およびＧＡＢＡ群について、各ラット順番に経口投与後、速やかにラットにおもりをつけた後、15分の水泳を負荷した。1匹目の水泳開始と共に、すべてのラットの餌を抜いた。水泳後は、布で体の水を簡単に拭き、一匹ずつもとのケージに戻した。サンプル投与後30分（回復期間15分）、120分（回復期間115分）、各群各時間毎に断頭により屠殺し、血液を採取した。コントロール群は、水泳群（水群とＧＡＢＡ群）がすべて終わった後から屠殺し、血液を採取した。血液は、4℃、3000rpmで20分間遠心し、血清を採取した。
【００３７】
(血中γ−アミノ酪酸濃度の測定)
γ−アミノ酪酸濃度は、以下の方法により測定した。
各試料を０．２Ｎクエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ２．２）で適宜希釈後、遠心分離又はろ過して固形物を除去し、測定試料とした。γ−アミノ酪酸の含量はアミノ酸含量測定の常法に従って高速液体クロマトグラフで以下の条件で分析した。
【００３８】
使用機器：（株）島津製作所製の高速液体クロマトグラフＬＣ−９Ａ
分析用カラム：強酸性陽イオン交換樹脂カラムＳｈｉｎ−ｐａｃｋ Ｉｓｃ−０７Ｎａ型
移動層緩衝液：（株）島津製作所製のアミノ酸移動層キットＮａ型
移動層流量：０．３ｍｌ／分
反応層１：０．０４％次亜塩素酸ナトリウム溶液（ｐＨ１０のホウ酸−炭酸緩衝液５００ｍｌに対して次亜塩素酸０．２ｍｌ）
反応層２：（株）島津製作所製のアミノ酸分析キットＯＰＡ試薬
反応層流量：０．２ｍｌ／分
検出：蛍光検出 Ｅｘ３４８ｎｍ、Ｅｍ４５０ｎｍ
【００３９】
(脳内モノアミン含有量の測定法)
脳内モノアミンの測定は、HPLC-ECD法にて行った。サンプル調製、移動相の組成、分析条件を以下に示す。
【００４０】
（１）サンプル調製
脳サンプルに、５倍量の0.2M 過塩素酸（内部標準：イソプロテレノール塩酸塩
0.1mg/L）を加え、超音波ホモジナイザー（SONIFIER
250: BRANSON, Danbury, CT）を用いてホモジナイズした。4℃にて30分以上放置した後、0℃、20,000g×20minで遠心分離（SCR20B: 日立製作所, Tokyo, Japan）を行った。遠心後、上清を採取して上清：1Ｍ 酢酸ナトリウム= 5：1の割合で酢酸ナトリウムを混合してpHを３付近に調製したものを、0.45mｍのメンブランフィルター(ADVANTEC TOYO, Tokyo, Japan)にかけ、分析用サンプルとした。
【００４１】
（２）分析装置と条件
検出器  EICOM ECD-300（エイコム, Kyoto, Japan）、作用電極  Gc-Ce、参照電極  Ag-Cl、カラム  EICOM  SC-5ODS（3.0×150mm）（カラム温度  25℃）
【００４２】
（３）移動相
0.1M酢酸ナトリウム-クエン酸緩衝液  84%
メタノール  16%
1-オクタンスルホン酸ナトリウム（和光純薬工業, Osaka, Japan）  200mg/L
EDTA-2Na  30mg/L
【００４３】
（試験例１）
実施例２の強制水泳試験における、血中のγ−アミノ酪酸濃度を図１に示す。本結果より、ＧＡＢＡ群では、投与したγ−アミノ酪酸は速やかに吸収され、投与後１５分から６０分の時点で血中γ−アミノ酪酸濃度の上昇が認められた。
【００４４】
（試験例２）
実施例２の強制水泳試験における、脳内セロトニン濃度の変動を図２に示す。コントロール群に対し水群は、投与後３０分の時点で脳内セロトニン濃度の上昇が認められたが、ＧＡＢＡ群では、脳内セロトニン濃度の上昇抑制効果が認められた。
【実施例３】
【００４５】
（清涼飲料水）
実施例１で調製した乳酸菌発酵γ−アミノ酪酸高含有素材を含有する清涼飲料水を調製した。すなわち、組成が混合異性化糖１５００ｇ、レモン果汁１０００ｇ、乳酸菌発酵γ−アミノ酪酸高含有素材５０ｇ、香料 １０ｇ、炭酸カルシウム１０ｇに水を加えて１０Ｌとなるように原料を混合し、プレート殺菌機を用いて90℃、15秒間殺菌し、γ−アミノ酪酸を含有する精神的疲労改善用の清涼飲料水を製造した。即ち、飲料２００ｍＬ中にγ−アミノ酪酸を約２００ｍｇ含有する。また、対照用清涼飲料水として、乳酸菌発酵γ−アミノ酪酸高含有素材を省いて同様に調整した飲料も製造した。
【実施例４】
【００４６】
ヒトでの精神的疲労を調べる為、日常慢性疲労を感じているヒトボランティアを集め、運動を負荷させ、疲労感を負荷させる試験を実施した。
【００４７】
（被験者）
２５歳から４０歳までの健常者１２名を選抜し、これら全員に対照飲料を摂取する試験（対照群）と、γ‐アミノ酪酸を含有する飲料を摂取する試験（ＧＡＢＡ群）とを、合計２回行なってもらった。
【００４８】
（運動方法）
運動開始３０分前に、被験者に実施例３で調製した清涼飲料水２００ｍＬ（ＧＡＢＡ群）または対照用清涼飲料水２００ｍｌ（対照群）を摂取してもらい、３０分間のランニングを行なわせた。飲料摂取直前及び運動の直後にＰＯＭＳ試験と尿の採取を行なった。
【００４９】
（評価方法）
運動負荷前後の心理状態の変化を調べるために、日本版ＰＯＭＳ（金子書房発行）を用いて、ＰＯＭＳ(Profile
of Mood States)試験を実施した。ＰＯＭＳ試験は、質問紙を用いてその時点での気分を客観的に評価する質問紙法の一つであり、国際的に権威のある気分評価尺度である。ＰＯＭＳ試験では、緊張、抑うつ、怒り、活気、疲労、混乱の６つの因子が同時に測定できる。今回はこのうち、活気と疲労のスコアの変動を、運動の前後で比較した。
【００５０】
また、尿中のセロトニンのサーカディアンリズムとセロトニン神経活動に高い相関性が認められている事から、尿中セロトニン値が脳内セロトニン神経活動を反映することが報告されている（毛利ら；日本神経学大会抄録集(2002)）。従って、上記試験において、運動負荷前後の尿を採取して尿中のセロトニン濃度を測定した。セロトニン濃度の分析は、尿サンプルを酢酸ナトリウムでｐＨ３付近に調製したものを、0.45mｍのメンブランフィルター(ADVANTEC TOYO, Tokyo, Japan)にかけ、分析用サンプルとし、後は実施例２の脳内モノアミンの測定方法に準じて、HPLC-ECD法にて行った。
【００５１】
（結果）
まずＰＯＭＳの測定結果を図３に示す。図３によると、どちらの群も運動後で「活気」スコアはあまり変化しなかった。また、対照群では、「疲労」スコアが上昇しているのに対し、ＧＡＢＡ群では「疲労」スコアの上昇度が対照群の半分程度となっている。このことは、γ‐アミノ酪酸含有飲料が、運動負荷による疲労感を軽減させることを示している。
【００５２】
次に尿中のセロトニン濃度の変動を図４に示す。図４によると、対照群では運動後にセロトニンの上昇が見られたのに対し、ＧＡＢＡ群では、セロトニン上昇度が対照群よりも低く抑えられた。
【実施例５】
【００５３】
（カプセル剤）
実施例１で得られた乳酸菌発酵γ−アミノ酪酸高含有素材90％、コーンスターチ10％を含むように各原料を配合して、ゼラチンカプセルに充填（カプセル１個当たり200ｍｇ）し、精神的疲労改善用のカプセル剤を製造した。
【実施例６】
【００５４】
（錠剤）
実施例１で得られた乳酸菌発酵γ−アミノ酪酸高含有素材50％、還元麦芽糖18％、結晶セルロース28％、ショ糖エステル4％を含むように各原料を配合後打錠（1錠当たり300ｍｇ）して、精神的疲労改善用の錠剤を製造した。
【産業上の利用可能性】
【００５５】
本発明の精神的疲労改善組成物およびそれを含有する飲食品は、安全で安価なγ−アミノ酪酸を原料とし、運動後の疲労感ならびに精神的疲労を改善する作用をもつため、精神的疲労を感じた時の改善のための健康食品や飲料として利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】実施例２で記載したラット強制遊泳試験における血中γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）濃度の推移を示したグラフである
【図２】実施例２で記載したラット強制遊泳試験における脳内セロトニン濃度の推移を示したグラフである。
【図３】実施例４に記載したヒトボランティア試験におけるＰＯＭＳの測定結果の変動を示したグラフである。
【図４】実施例４に記載したヒトボランティア試験における尿中のセロトニン濃度の変動を示したグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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