(57)【要約】【課題】  安全で有効な育毛剤及び白髪防止剤を提供する。【解決手段】  ロキシスロマイシンを有効成分として含有する育毛剤及び白髪防止剤。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ロキシスロマイシンを有効成分として含有する育毛剤。
【請求項２】
ロキシスロマイシンを有効成分として含有する白髪防止剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ロキシスロマイシンを含む育毛剤及び白髪防止剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在までにいくつかの外用育毛剤及び白髪防止剤が発売されてきているが、未だ十分満足の得られる物質は、知られていない。
【０００３】
ロキシスロマイシンは、１４員環のマクロライド系抗生物質であり、皮膚感染症を始め多くの感染性疾患に用いられているが、その育毛効果及び白髪防止効果については、知られていない。
【０００４】
したがって、毛髪成長を促進することができ、白髪を防止することができる物質の解明が待たれている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、安全で有効な育毛剤及び白髪防止剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、すでに十分医薬品として使用され、安全性の確認されているＲＸＭという成分に、インビトロにおける毛組織細胞のアポトーシスを阻止する効果、ヒト、マウス両方の培養毛髪の成長を有意に促進する効果、及びヒトの白髪を防止する効果があることを見いだし、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明は、ロキシスロマイシンを有効成分として含有する育毛剤及び白髪防止剤に関する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明は、安全性に優れた育毛剤及び白髪防止剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
ロキシスロマイシン（ＲＸＭ：エリスロマイシン  ９−｛Ｏ−［（２−メトキシエトキシ）メチル］オキシム｝）は、１４員環のマクロライド系抗生物質であり、皮膚感染症を始め多くの感染性疾患に用いられており、その安全性と効果が広く認められている。また、ＲＸＭには抗生物質としての効果以外に、様々な免疫修飾効果があることもわかってきている（Ohshima A, Tokura Y, Wakita H, Furukawa F, Takigawa M. Roxithromycin down-modulates antigen-presenting and interleukin-1 beta-producing abilities of murine Langerhans cells. J Dermatol Sci 1998; 17:214-222.）。
【００１０】
また、インターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）が、培養されたヒト成長期毛に中間期様変化を誘導することが知られている（Ito T et al., IFN-γ is a potent inducer of catagen-like changes in cultured human anagen hair follicles. Br J Dermatol 2004 in press.）。ＲＸＭは、ＩＦＮ−γによって誘導される退行期毛やアポトーシス変化を阻害することもわかった。他の１４員環マクロライド系抗生物質であるクラリスロマイシン（ＣＬＭ）、エリスロマイシン（ＥＭ）にはそのような効果を見なかったため、この効果はＲＸＭに特有なものである。
【００１１】
本発明のロキシスロマイシンは、市販されているものを購入することができる。また、ロキシスロマイシンのみならず、本発明の効果を有する限りロキシスロマイシンの誘導体や生理学的に許容可能な塩を用いることもできる。
【００１２】
本発明の育毛剤及び白髪防止剤においては、この他に、必要に応じて、抗炎症剤（グリチルリチン酸、グアイアズレン等）、末梢血管拡張剤（酢酸トコフェロール、ニコチン酸ベンジル、オタネニンジンエキス、センブリ抽出エキス、トウガラシエキス等）、副腎皮質ホルモン（酢酸ハイドロコーチゾン、吉草酸ベタメタゾン、酪酸プロピオン酸ハイドロコーチゾン等）、抗ヒスタミン剤（塩酸ジフェンヒドラミン、塩酸イソチベンジル等）、局所麻酔剤（塩酸ジブカイン、塩酸リドカイン等）、角質溶解剤（尿素、サリチル酸等）、ビタミン剤（ビタミンＥアセテート、酢酸レチノール、レチナール、レチノイン酸等）、卵胞ホルモン（１７β−エストラジオール、エストロン等）、黄体ホルモン（プロゲステロン、１７α−ヒドロキシプロゲステロンアセテート等）、抗アンドロゲン剤（シブロテロンアセテート、４−アンドロステン−３−オン−１７β−カルボキシリックアシッド等）、保湿剤（プロピレングリコール、グリセリン、ジグリセリン等）、溶媒（エチルアルコール、イソプロピルアルコール、１，３−ブタンジオール、精製水等）、保存剤（パラペン類等）、油分（流動パラフィン、セチルアルコール、スクワラン、オリーブ油等）、殺菌剤（イオウ、グルコン酸クロルヘキシジン、イソプロピルメチルフェノール、第４級アンモニウム塩、ヒノキチオール等）、界面活性剤（ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、グリセリンモノ脂肪酸エステル、プロピレングリコールモノ脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油誘導体等）、ゲル化剤（メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシビニルポリマー等）、ｐＨ調整剤（ジイソプロパノールアミン等）、酸化防止剤（ジブチルヒドロキシトルエン等）、清涼剤（１−メントール、カンフル等）、香料、金属イオン封鎖剤、紫外線吸収剤、色素などを本発明の効果を損なわない範囲で配合することができる。
【００１３】
本発明の育毛剤及び白髪防止剤は、通常用いられる方法、たとえば、第１２改正日本薬局方に規定する方法等）にしたがって、ローション、乳液、クリーム、ゲル、エアゾール等の剤形に調製することができる。
【００１４】
本発明の育毛剤及び白髪防止剤の投与量は、頭皮に適量を、１日１〜数回塗布することによって行うことができる。
【００１５】
本発明の育毛剤及び白髪防止剤の投与方法は、限定されないが、経口育毛剤、外用育毛剤等として使用することが好ましく、外用育毛剤がとして使用することがより好ましい。
【００１６】
本発明の育毛剤及び白髪防止剤中のロキシスロマイシンの含有量は、通常０．０００１〜５０重量％、好ましくは０．００１〜１０重量％、より好ましくは０．０１〜１重量％である。
【００１７】
本発明の経口育毛剤及び白髪防止剤の形態としては、錠剤、カプセル剤、粉末、丸剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、シロップ剤、トローチ剤等があげられる。エラジタンニンの純品、精製物、粗精製物等、又はこれらとプロアントシアニジン、アスコルビン酸又はその塩、ビタミンＥ、パントテン酸若しくはその誘導体又はそれらの塩、ビオチン、亜鉛及び酵母エキスからなる群から選ばれる１つ以上との組合わせをそのまま投与してもよいが、薬理的に許容される賦形剤とともに、錠剤、カプセル剤、粉末、丸剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、シロップ剤、トローチ剤等の形態で投与してもよい。賦形剤としては、ソルビトール、ラクトース、グルコース、乳糖等の糖類、デキストリン、澱粉、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム等の無機物、結晶セルロース、蒸留水、ゴマ油、トウモロコシ油、オリーブ油、綿実油等、一般に使用されているものであればいずれも用いることができる。製剤化する際には、結合剤、滑沢剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、希釈剤、緩衝剤、抗酸化剤、細菌抑制剤等の添加剤を用いることもできる。
【００１８】
液状又は固形状の剤型としては、ヘヤーリキッド、ヘヤートニック、ヘヤーローション等の液状剤型、軟膏、ヘヤークリーム等の固形状剤型があげられ、各々好適な基剤に本発明に用いられるロキシスロマイシンを添加し、常法により製造することができる。
【００１９】
次に、実施例により本発明を詳細に説明する。
【実施例１】
【００２０】
組織：
４週齢のメスＢａｌｂ／ｃマウスをＳＬＣ（浜松市）から購入し、髭毛（vibrissa）を採取した。なお４週齢の髭毛は成長期に入っている。ヒトの毛髪は、患者の同意を得た上で、外科手術で得られた頭皮組織の提供をうけ、そこから成長期毛をPhilpottらの培養法にしたがって採取した（Philpott MP, Sanders D, Westgate GE, Kealey T. Human hair growth in vitro: model for the study of hair biology. J Dermatol Sci 1994; 7: S55-72.）。
【００２１】
培養：
培養は，ヒト毛髪もマウス髭毛もPhilpottらの培養法（ibid.）に基づいて行った。基本となる培養液にはウィリアムＥ培地（Sigma, St.Louis, MO, USA）を用い、それに１０mg/mLインスリン（Sigma）、１０ng/mLヒトドコルチゾン（Sigma）、１００IU/mLペニシリン（Sigma）、１００mg/mLストレプトマイシン（Sigma）、１mM  Ｌ−グルタミン（Sigma）を添加した。培養容器には２４穴培養用シャーレを用いた。
【００２２】
薬剤添加：
リン酸緩衝生理食塩液（ＰＢＳ）添加群（コントロール群）、ＩＦＮ−γ  ５０IU/ml、ＲＸＭ５μM群、ＩＦＮ−γ  ５０IU/ml＋ＲＸＭ１０mM群、ＣＬＭ５μM群、ＣＬＭ１０mM群、ＥＭ５μM群及びＥＭ１０mM群を設定した。
各培養液を各ウェルに５００μlずつ加え、そこにＢａｌｂ／ｃマウスの髭毛又はヒト頭髪をそれぞれ３本ずつ入れて培養を開始した。２日おきに培養液を交換し、その際に毛の長さを、実体顕微鏡を用いて計測した。
【００２３】
ＨＥ染色と毛サイクルの時期の観察：
毛サイクルの時期（成長期、退行期、休止期）の判定のため、−８０℃に保存されていた凍結標本を、クリオスタット（Zeiss, Germany）を用いて５μmに切り出し、スライドグラスにのせ、ヘマトキシリン・エオジンで染色した。毛サイクルの時期（hair cycle stage）の決定は教科書や文献に従った(Kligman et al. 1959, Sinclair et al. 1999, Whiting et al. 1996, Mueller-Roever et al. 2001)。
概略としては、ヘマトキシリンエオジン染色した組織切片を顕微鏡下に形態的変化を
観察した。成長期は完全に成長した毛包であり、形態的に毛球がタマネギ様（Onion-shapedといわれる）の形で細長い毛乳頭を呈する。早期退行期はメラニンの産生が低下し、毛包の大きさは縮小し細長くなる。毛乳頭は開大する。中期退行期では、棍棒状の角化部が毛乳頭の上方のEpithelial strandという部分の上部に出現する。後期退行期ではEpithelial strandが狭小化し、ガラス様膜が肥厚し、毛乳頭は球状になって残存する。
これら判定のもとに各サンプルの毛周期スコアを計算した。
成長期VI  ＝０
早期退行期＝１
中期退行期＝２
後期退行期＝３
それぞれのサンプルのスコアをまとめて、治療の効果が統計的に有意に存在するのか検討した。
【００２４】
インサイツ（in situ）ＴＵＮＥＬ法：
培養毛では、実際の毛のサイクルに比べて成長期の長さが短縮し、ヒトの培養毛では、培養開始後７〜９日程度で退行期に入ることが知られている。退行期になると毛の成長は鈍化し、毛母細胞や近位外毛根鞘でのアポトーシスが観察される。一方、成長期では、毛の成長は維持され、アポトーシスに陥る毛母細胞の数も少ない。そこで、アポトーシス細胞を観察するためにＴＵＮＥＬ  ｋｉｔ（Apoptag, Oncor Apligene, Heidelberg, Germany）を用いてインサイツＴＵＮＥＬを行った。
【００２５】
−８０℃で保存しておいた生の凍結標本を、クリオスタットを用いて５μmの厚さに薄切し、薄切標本をスライドグラスにのせ、室温で１０分乾燥させた後、スライドグラスを１％パラホルムアルデヒドに１０分間浸し、標本を固定した。引き続いて、標本をエタノール／酢酸中で５分間、−２０℃で放置した後、ＴｄＴ存在下でｄｉｇｏｘｙｇｅｎｉｎ−ｄＵＴＰと３７℃で１時間インキュベートした。ＴＵＮＥＬ陽性細胞は、蛍光色素（ＦＩＴＣ）で標識したｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎに対する抗体と反応させることで観察した。観察細胞は、Auber's line（Auber L., The anatomy of follicles producing wool-fibers, with special reference to keratinization. Trans Roy Soc Edingburgh 1952; 62: 191-254）より末梢の細胞とした。
【００２６】
ＲＸＭは、培養マウス髭毛の成長を促進するが、ＥＭ、ＣＬＭは培養マウス髭毛の成長に影響を与えない（図１）。
６日間の培養において、コントロール群（ＰＢＳ投与群、ｎ＝３２）における髭毛の成長量は、１．１６mm±０．２３（平均±標準偏差、以下同様）であった。一方、ＲＸＭ  ５mM投与群では、３．８mm±０．２３であり、またＲＸＭ１０mM投与群では、４．３mm±０．１９であり、いずれの処理群においてもコントロール群と比べて有意な（ｐ＜０．０１）髭毛の成長の促進が認められた。一方、ＣＬＭ  ５mM投与群では、髭毛の成長が、１．５３mm±０．３７であり、ＣＬＭ１０mM投与群では、１．６４mm±０．５０であり、ＥＭ  ５mM投与群では、１．６８mm±０．４２であり、そして、ＥＭ１０mM投与群では、１．７６mm±０．３０であり、ＣＬＭ、ＥＭ投与群では、コントロール群と比べた有意な差は認められなかった。
【００２７】
ＲＸＭはＩＦＮ−ｇ存在下においてもＶｉｂｒｉｓｓａの成長を促進する（図２）。
毛包周囲における過剰なＩＦＮ−γの存在は、円形脱毛症を引き起こす原因とされ（Hoffmann R. The potential role of cytokines and T cell in alopecia areta. J Invest Dermatol Symp Proc 1999; 4: 235-238）、ヒト培養毛でも退行期を誘導することが報告されている（Ito T., et al., IFN-γ is a potent inducer of catagen-like changes in cultured human anagaen hair follicles. Br J Dermatol 2004 in press）。
【００２８】
そこで、ＲＸＭが、ＩＦＮ−γ（５０IU/ml）による退行期の誘導を阻害することができるかを、毛の成長の程度で評価した。図１と同様に、ＲＸＭ  ５mM投与群（１．６７mm±０．１２）及び１０mM投与群（１．８７mm±０．１７）では、コントロール群（０．６０mm±０．１２）と比べて有意な毛の成長の増加を認めた（ｐ＜０．０５）。一方、ＩＦＮ−γ投与群では、コントロール群と比べて有意な毛の成長の阻害は認められなかった（０．６３mm±０．０２）。
【００２９】
ＩＦＮ−γの濃度が５０IUという低濃度であり、このような低濃度のＩＦＮ−γは、退行期に認められる毛母細胞でのＭＨＣクラスＩ発現などを亢進することが報告されている（Ito et al., Collapse and restoration of MHC class-I-dependent immune privilege: exploiting the human hair follicle as a model. Am J Pathol 2004 164: 623-634）。したがって、５０IU/mlを超える濃度のＩＦＮ−ｇは、非生理学的であることから採用しなかった。ＩＦＮ−γ  ５０IU/ml存在下にＲＸＭ  １０mMを添加して培養したところ、毛の成長が１．２０mm±０．０６であり、有意（ｐ＜０．０５）な毛の成長の促進が認められた。
【００３０】
ＲＸＭはＩＦＮ−γによる退行期誘導を阻害し、成長期を維持した（図３）。
毛の成長においては、ＩＦＮ−γ  ５０IU/ml投与群は、コントロール群と比べて有意な差は認められなかったが、組織学的には退行期にあった。一方で、ＩＦＮ−γ  ５０IU/ml＋ＲＸＭ  １０mM投与群では、組織学的にも成長期が維持されていた。
【００３１】
ＲＸＭはＩＦＮ−γによるアポトーシス誘導を阻害した（図４）
ＩＦＮ−γは、毛母細胞をアポトーシスに陥らせることによって退行期を誘導していることが想定されている。そこで、ＲＸＭがＩＦＮ−γによるアポトーシス誘導を阻害するのかを、インサイツＴＵＮＥＬ法を用いて評価した。培養４日目のコントロール群では、４±１．３個のアポトーシス細胞がAuber's line以下で認められた。一方、ＩＦＮ−γ  ５０IU/ml投与群では、アポトーシス細胞数が１０５±２３個であり、著しい増加が認められた。しかし、ＲＸＭをＩＦＮ−γと同時に投与した場合には、アポトーシス細胞数が１３±４．３個であり、ＲＸＭの添加によって、ＩＦＮ−γによるアポトーシス細胞数の増加が、有意（ｐ＜０．０１）に抑制された。
【００３２】
ＲＸＭはヒト毛髪の成長を有意に促進する（図５）
マウスで得られた実験結果のヒト培養細胞における再現性を評価した。同意を得た上で採取した手術後頭皮切片の６日間の培養毛において、コントロール群（ＰＢＳ投与群）（ｎ＝６４）の成長量は、１．９６mm±０．１９であった。一方、ＲＸＭ  ５mM投与群の成長量は、３．４mm±０．２０であり、ＲＸＭ１０mM投与群では、３．３２mm±０．１９であり、いずれもコントロール群と比べた有意（ｐ＜０．０１）な毛の成長の促進が認められた。一方、ＣＬＭ  ５mM投与群では、毛の成長量が、２．１７mm±０．１３であり、ＣＬＭ１０mM投与群では、１．９３mm±０．１８であり、ＥＭ  ５mM投与群では、２．８５mm±０．１３であり、そしてＥＭ１０mM投与群では、２．０５mm±０．１９であり、ＣＬＭ、ＥＭ投与群では、コントロール群と比べた有意差は認められなかった。
【００３３】
育毛作用は、ＲＸＭと類似の構造を持つ１４員環の抗生物質であるエリスロマイシン（ＥＭ）、クラリスロマイシン（ＣＬＭ）には認められなかった。ＲＸＭ、ＥＭ、ＣＬＭの化学構造式から検討すれば、ＲＸＭはペンタデカンＣ６に水酸基、Ｃ９に（２−メトキシエトキシ）メトキシイミノ基が結合しており、ＥＭはペンタデカンＣ６に水酸基、Ｃ９にカルボニル基が結合しており、ＣＬＭはペンタデカンＣ６にメトキシ基、Ｃ９にカルボニル基が結合していることから、Ｃ９に結合した（２−メトキシエトキシ）メトキシイミノ基側鎖が育毛に寄与している可能性が高いと思われる。したがって、この側鎖の長さを変えることにより、また側鎖に新たな残基を結合させるか又は側鎖の残基を取ることにより、側鎖の構造をさまざまに修飾し、より高い育毛効果をもった化合物を得ることができる。
【実施例２】
【００３４】
ＲＸＭ外用剤の臨床効果及び安全性の検討
壮年性脱毛症、いわゆる若はげの患者６人（年齢、３９歳〜５８歳、全て男性）においてＲＸＭ外用の育毛効果、及びＲＸＭ外用による局所及び全身副作用を検討した。
エチルアルコール６５重量部にプロピレングリコール５重量部、ＲＸＭ  ０．５重量部、及び精製水２９．５重量部を加えて撹拌溶解し、ローションタイプのＲＸＭ液を調製した。このＲＸＭ液６ml〜７mlを一日一回、就寝前に脱毛の明らかな部分に塗布した。
ＲＸＭ液塗布前及び塗布３ヶ月後に、育毛効果を判断するための塗布部位のデジタル写真を撮影し、塗布部皮膚表面の症状の観察し、さらに可及的に肘静脈からの採血による血液検査（赤血球数、ヘモグロビン値、ヘマトクリット値、白血球数、ＧＯＴ、ＧＰＴ、ＬＤＨ、ＢＵＮ、クレアチニン値）、及び尿検査（赤血球、糖、蛋白、ビリルビン）を行った。
育毛効果の判定は、下記に示す方法にしたがった。各患者につき、ＲＸＭ液塗布前及び塗布後の写真２枚を、塗布の前後が分からないように提示し、一方を育毛効果が認められる写真として選び、他方の写真を比較対象として選び、育毛効果の程度を、１点（改善なし）、２点（軽度改善）、３点（改善）、４点（大いに改善）の４段階で評価し、点数をつけた。育毛効果が認められるとして選んだ写真がＲＸＭ液塗布後のものであればプラス評価とし、ＲＸＭ液塗布前であればマイナス評価とした。各患者につき、１０人の皮膚科専門医（社団法人日本皮膚科学会が認定する皮膚科専門医）が判定し、各医師の点数を合計し、平均点及び標準偏差を算出し、評価点とした。
その結果を下記に示す。
ＲＸＭの育毛効果についての臨床結果（平均点±標準偏差）
症例１：  ３．１０点±０．６４
症例２：  ２．７５点±０．８９
症例３：  ２．００点±１．７７
症例４：  ０．９３点±０．８９
症例５：  ０．７５点±１．７５
症例６：−０．７５点±１．７５
軽度改善（平均点２点）以上が３人、無効（平均点１点かそれ以下）が３人であり、６人中３人に軽度改善以上の明らかな育毛効果が認められた。また、育毛効果の認められた患者では、白髪が減少し、黒毛の増加も認められたことから、白髪防止剤としての作用もみられた。図６に著効例をしめす。
また、ＲＸＭ液塗布による塗布部位局所の刺激感、発赤などの副作用は全く認められず、また血液検査及び尿検査においても異常値は全く認められなかった。したがって、ＲＸＭ液塗布は局所的に又全身的に安全であることが確認された。
【実施例３】
【００３５】
溶液中に保存されたＲＸＭの経時的な構造的安定性の検討
遮光プラスチック容器中のエチルアルコール６５重量部、プロピレングリコール５重量部、ＲＸＭ０．５重量部、及び精製水２９．５重量部液を室温１５℃〜３０℃にて１、２、３、４および５ヶ月保存した後、５サンプル中のＲＸＭの化学構造の安定性をＬＣタンデム質量分析計（液体クロマトグラフィー／マススペクトロメトリー／マススペクトロメトリー、サーモエレクトロン株式会社、ＴＳＱ７０００）で測定した。マクロライド系抗生物質であるＥＭを内部標準物質として用いた。最大のイオン化効率が得られる至適サンプルアプライ量を検量線より求め２ng／４mlとした。測定直前に調製したＲＸＭ、ＥＭ各溶液のピーク出現時間及び面積比をコントロールとしてこれらの値と１〜５月保存したＲＸＭ液を比較した。その結果、ピーク出現時間およびピーク面積比（１００％±１５％）の経時的変化は見られなかった。よって、ＲＸＭの１〜５月保存による構造変化はないと考えられた。
【実施例４】
【００３６】
ＲＸＭ液の長期室温保存における機能的安定性の検討
ＲＸＭ液（エチルアルコール６５重量部にプロピレングリコール５重量部、ＲＸＭ０．５重量部、及び精製水２９．５重量部）を遮光プラスチック容器中、室温（１５〜３０℃）で、３ヶ月保存し、マウス髭毛の培養物に添加した。無添加群、ＲＸＭ  ５mM処理群、ＲＸＭ  １０mM処理群を設け、毛の成長を比較した。
６日目の髭毛の成長は、無添加群では２．８±０．７５mmであり、ＲＸＭ  ５mM処理群では４．３±０．７６mm（ｐ＜０．０５）であり、ＲＸＭ  １０mM処理群では３．９±１．０mm（ｐ＜０．０５）であり、ＲＸＭ処理群では無添加群に比べて有意に優れた成長が認められた。
以上の結果から、長期室温保存におけるＲＸＭの育毛効果の減少は認められず、長期室温保存における安定性が確認された。
【００３７】
以上の結果から、ＲＸＭは、マウス、ヒト両方の培養毛において有意に毛の成長を促進し、成長期の期間をより長く維持する効果があるという結果を得た。また、育毛効果の認められた患者では、白髪が減少し、黒毛の増加も認められたことから、白髪防止剤としての作用もみられた。過去にＲＸＭと毛髪との関係を発表した例はなく、我々が初めてＲＸＭの毛髪に対する効果を明らかにした。
【００３８】
また、ＲＸＭはＩＦＮ−γによるアポトーシス誘導を阻害することから、ＩＦＮ−γの過剰産生が病因の一つであるとされる円形脱毛症においても、ＲＸＭの発毛効果が期待される。ＲＸＭは、今後、発毛剤、脱毛症治療剤として発展可能な薬剤である。
【産業上の利用可能性】
【００３９】
本発明の育毛剤は、育毛、発毛、脱毛症治療及び白髪防止のために有用である
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】図１は、培養マウス髭毛の成長に対するＲＸＭ、ＥＭ及びＣＬＭの影響を示す。縦軸は、髭毛の成長（mm）を表し、横軸は、時間（日）を表す。各処理群を、コントロール（白四角）、ＥＭ５μM（菱形）、ＥＭ１０μM（白丸）、ＣＬＭ５μM（白三角）、ＣＬＭ１０μM（白四角＋十字）、ＲＸＭ５μM（菱形＋十字）、ＲＸＭ１０μM（白丸＋十字）で示した。
【図２】図２は、ＩＦＮ−ｇ存在下における、培養マウス髭毛の成長に対するＲＸＭの影響を示す。縦軸は、髭毛の成長（mm）を表し、横軸は、時間（日）を表す。各処理群を、コントロール（白四角）、ＩＦＮ−γ（菱形）、ＲＸＭ５μM（白丸）、ＲＸＭ１０μM（白三角）、ＲＸＭ１０μM＋ＩＦＮ−γ（白四角＋十字）で示した。
【図３】図３は、ＲＸＭの毛周期に対する影響を示す。処理群は、左から順に、コントロール群、５０IU/mlＩＦＮ−γ処理群、１０μM  ＲＸＭ処理群及び５０IU/mlＩＦＮ−γ＋１０μM  ＲＸＭ処理群である。毛周期は、Ｃｏｎｔｒｏｌ及び１０μMＲＸＭ群では、成長期ＶＩであり、ＩＦＮ−γ５０IU/ml処理群では、退行期であり、ＩＦＮ−γ＋ＲＸＭ処理群では、成長期〜早期退行期であった。
【図４】図４は、in situＴＵＮＥＬの結果を示す。処理群は、左から順に、コントロール群、５０IU/mlＩＦＮ−γ処理群、５０IU/mlＩＦＮ−γ＋１０μM  ＲＸＭ処理群である。図内を横断する直線（左端の図で矢印で示した）は、Auber's lineを示す。白く見える細胞は、アポトーシスを起こした細胞であり、その数は、コントロール群では、４±１．３細胞／毛であり、５０IU/mlＩＦＮ−γ処理群では、１０５±２３細胞／毛であり、５０IU/mlＩＦＮ−γ＋１０μM  ＲＸＭ処理群では、１３±４．３細胞／毛であった。
【図５】図５は、ＲＸＭのヒト毛髪の成長に対する影響を示す。縦軸は、髭毛の成長（mm）を表し、横軸は、時間（日）を表す。各処理群を、コントロール（白四角）、ＲＸＭ５μM（菱形）、ＲＸＭ１０μM（白丸）、ＥＭ５μM（白三角）、ＥＭ１０μM（白四角＋十字）、ＣＬＭ５μM（菱形＋十字）、ＣＬＭ１０μM（白丸＋十字）で示した。
【図６】図６は、ＲＸＭ外用剤の臨床効果を示す。
【図１】
2006151938.tif 000002
【図２】
2006151938.tif 000003
【図５】
2006151938.tif 000004
【図３】
2006151938.tif 000005
【図４】
2006151938.tif 000006
【図６】
2006151938.tif 000007