(57)【要約】      （修正有）【課題】  発光反応によるマイクロチャネルからの光量の再現性を高め、かつ光検出器の受光部に入射させる光量を十分に増加させることができるマイクロチャネルチップ及びこれを用いた発光量測定装置を提供すること。【解決手段】  マイクロチャネル５を有するマイクロチャネルチップ１であって、マイクロチャネル５が折返し部５ａ〜５ｄを有することを特徴とする。【選択図】  図２
2006246796.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
マイクロチャネルを有するマイクロチャネルチップであって、
前記マイクロチャネルが少なくとも一つの折返し部を有すること、
を特徴とするマイクロチャネルチップ。
【請求項２】
前記マイクロチャネル内で生じた光を反射する光反射部が、前記マイクロチャネルに対向して設けられていること、
を特徴とする請求項１に記載のマイクロチャネルチップ。
【請求項３】
マイクロチャネルを有するマイクロチャネルチップと、
前記マイクロチャネル内で生じた光を受光する受光部を有する光検出器とを備え、
前記マイクロチャネルチップは、前記受光部と前記マイクロチャネルとが対向するように前記光検出器と対向配置され、
前記マイクロチャネルが少なくとも一つの折返し部を有すること、
を特徴とする発光量測定装置。
【請求項４】
前記マイクロチャネルチップは、
前記受光部と対向する領域に、前記マイクロチャネルの全ての折返し部が含まれるように前記光検出器と対向配置されていること、
を特徴とする請求項３に記載の発光量測定装置。
【請求項５】
前記マイクロチャネルチップが、前記マイクロチャネルに対して前記受光部と反対側に、前記マイクロチャネル内で生じた光を反射する光反射部を更に有すること、
を特徴とする請求項３又は４に記載の発光量測定装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マイクロチャネルチップ及び発光量測定装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
バイオテクノロジー等の分野においては、細胞内ＡＴＰを含む溶液と発光試薬とを発光反応により発光させ、これにより生じる光の量を測定して微生物等の検出が行われる。このような発光反応に伴う発光量を測定するために、チューブ状の容器内で発光反応を起こさせて光をレンズで集め、これを受光素子で検出することが提案されている（例えば、下記特許文献１及び２参照）。
【０００３】
また、下記特許文献３には、発光反応場として直線状のマイクロチャネルを備えたマイクロリアクタが開示されているが、これも発光反応によって生じる光の量の測定に用いることができる。
【特許文献１】特開２０００−２４５５００号公報
【特許文献２】特開２００３−８８３９８号公報
【特許文献３】特開平１０−３３７１７３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、上記特許文献１及び２で提案されている発明においては、発光反応場であるチューブ状の容器の容積が比較的大きいため、高感度の光検出が可能であるものの、反応に関与する物質の混合状態にばらつきがあり、測定結果にむらが生じる。
【０００５】
他方、上記特許文献３に開示されているマイクロリアクタでは、マイクロチャネルから光検出器の受光素子に入射させる光量が十分とは言えない。このため、マイクロリアクタから発せられる光を光検出器の受光素子で検出させると、光検出感度が低くなる。また、光検出器の受光素子への入射光量が閾値に到達せず、光を検出できないことも多い。
【０００６】
そこで、本発明は、発光反応によるマイクロチャネルからの光量の再現性を高め、かつ光検出器の受光部に入射させる光量を十分に増加させることができるマイクロチャネルチップ及びこれを用いた発光量測定装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記目的を達成するため、本発明は、マイクロチャネルを有するマイクロチャネルチップであって、マイクロチャネルが少なくとも一つの折返し部を有することを特徴とする。
【０００８】
このマイクロチャネルチップによれば、発光試薬と反応して発光する検体を含む液体と、発光試薬を含む液体とをマイクロチャネル内で混合させると、マイクロチャネルは十分に狭い空間であるため、導入した液体同士の混合状態のばらつきを十分に小さくすることが可能となる。従って、発光反応によるマイクロチャネルからの光量の再現性を高めることが可能となる。
【０００９】
また、発光反応による発光量を光検出器の受光部で測定する場合、マイクロチャネルが少なくとも一つの折返し部を有するので、マイクロチャネルが折返し部を有しない場合と比較して、マイクロチャネルのうち受光部に対向する領域の長さを大きくすることが可能となり、受光部に入射させる光の量を十分に増加させることができる。また、発光強度は一般に、上記試料と発光試薬との混合位置より下流側で最大となり、その下流側に向かうにつれて次第に低下する。そして、この発光強度のピーク位置は通常、発光試薬と試料との組合せによって異なる。このため、マイクロチャネルからの光を確実且つ十分に受光するためには、受光部を大きくするか、受光部の位置を発光強度のピーク位置に合わせて移動させる必要が生じる。本発明のマイクロチャネルチップによれば、マイクロチャネルが少なくとも一つの折返し部を有するため、発光が生じる領域を、制限された領域内に密に配置することが可能となる。このため、発光強度のピーク位置が、試料と発光試薬との組合せの相違によりずれたとしても、受光部を大きくすることなく受光部に入射させる光の量を十分に増加させることが可能となる。また、受光部の位置を発光強度のピーク位置に合わせて移動させる必要も少なくなる。更に、発光強度のピーク位置は、マイクロチャネルに導入される液体の流量又は流速を調節することによっても変えることができるが、本発明のマイクロチャネルでは、試料と発光試薬との組合せに関わらず受光部に十分な量の光を入射させることが可能となるので、発光強度のピーク位置を受光部に対向する位置とするために、検体及び発光試薬の組合せが変わるたびごとに、それらの流量及び流速を厳密に設定する作業が不要となり、マイクロチャネルからの発光量の測定操作が簡便になる。
【００１０】
上記マイクロチャネルチップにおいては、マイクロチャネル内で生じた光を反射する光反射部が、マイクロチャネルに対向して設けられていることが好ましい。
【００１１】
この場合、マイクロチャネルに対して光反射部と反対側に光検出器の受光部を配置させると、マイクロチャネルで発せられ、マイクロチャネルに対して受光部と反対側に向かう光のうち、光反射部で反射した光の少なくとも一部が受光部に入射することになる。このため、マイクロチャネルで発せられる光をより十分に受光部に入射させることが可能となる。
【００１２】
また、本発明の発光量測定装置は、マイクロチャネルを有するマイクロチャネルチップと、マイクロチャネル内で生じた光を受光する受光部を有する光検出器とを備え、マイクロチャネルチップは、受光部とマイクロチャネルとが対向するように光検出器と対向配置され、マイクロチャネルが少なくとも一つの折返し部を有することを特徴とする。
【００１３】
この発光量測定装置によれば、発光試薬と反応して発光する試料を含む液体と、発光試薬を含む液体とをマイクロチャネルチップのマイクロチャネル内で混合させると、マイクロチャネルにおいて発光が起こる。このとき、マイクロチャネルは十分に狭い空間であるため、試料と発光試薬との混合状態のばらつきを十分に小さくすることが可能となる。従って、マイクロチャネルからの光量の再現性が高められ、マイクロチャネルからの光量が受光部で検出されると、その測定結果の再現性を高めることができる。
【００１４】
また、マイクロチャネルが少なくとも一つの折返し部を有するので、マイクロチャネルが折返し部を有しない場合と比較して、マイクロチャネルのうち受光部に対向する領域の長さを大きくすることが可能となり、受光部に入射される光の量が十分に増加される。また、発光強度は一般に、上記試料と発光試薬との混合位置より下流側で最大となり、その下流側に向かうにつれて次第に低下する。そして、この発光強度のピーク位置は通常、発光試薬と試料との組合せによって異なる。このため、マイクロチャネルからの光を確実且つ十分に受光するためには、受光部を大きくするか、受光部の位置を発光強度のピーク位置に合わせて移動させる必要が生じる。本発明の発光量測定装置によれば、マイクロチャネルが少なくとも一つの折返し部を有するため、発光が生じる領域が、制限された領域内に密に配置される。このため、発光強度のピーク位置が、試料と発光試薬との組合せの相違によりずれたとしても、受光部を大きくすることなく受光部に入射される光の量が十分に増加される。従って、光検出感度を高めることが可能となる。また、受光部の位置を発光強度のピーク位置に合わせて移動させる必要も少なくなる。更に、発光強度のピーク位置は、マイクロチャネルに導入される液体の流量又は流速を調節することによっても変えることができるが、本発明の発光量測定装置では、試料と発光試薬との組合せに関わらず受光部に十分な量の光が入射されるので、発光強度のピーク位置を受光部に対向する位置とするために、試料及び発光試薬の組合せが変わるたびごとに、それらの流量及び流速を厳密に設定する作業が不要となり、マイクロチャネルからの発光量の測定操作が簡便になる。
【００１５】
上記発光量測定装置において、マイクロチャネルチップは、受光部と対向する領域に、マイクロチャネルの全ての折返し部が含まれるように光検出器と対向配置されていることが好ましい。
【００１６】
この場合、マイクロチャネルからの光をより十分に受光することが可能となり、光検出感度をより十分に高めることができる。
【００１７】
また、上記発光量測定装置においては、マイクロチャネルチップが、マイクロチャネルに対して受光部と反対側に、マイクロチャネル内で生じた光を反射する光反射部を更に有することが好ましい。
【００１８】
この場合、マイクロチャネルに対して光反射部と反対側に光検出器の受光部が配置されているので、マイクロチャネルで発せられ、マイクロチャネルに対して受光部と反対側に向かう光のうち、光反射部で反射した光の少なくとも一部が受光部に入射することになる。このため、マイクロチャネルで発せられる光をより十分に受光部に入射させることが可能となり、光検出感度をより十分に高めることができる。
【発明の効果】
【００１９】
本発明によれば、発光反応によるマイクロチャネルからの光量の再現性を高め、かつ光検出器の受光部に入射させる光量を十分に増加させることができるマイクロチャネルチップ及びこれを用いた発光量測定装置が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
以下、図面を参照して本発明の実施形態について説明する。なお、図面の説明においては、同一要素には同一符号を用いるものとし、重複する説明は省略する。
【００２１】
（第１実施形態）  図１は、本発明による発光量測定装置の第１実施形態を示す断面図である。図１に示されるように、本実施形態の発光量測定装置１００は、マイクロチャネルチップ１と、光検出器２とを備えている。
【００２２】
マイクロチャネルチップ１は、本体部３と、本体部３の表面３ａを覆うように設けられるカバー部材４とからなる基板１Ａを備えている。本体部３の表面３ａ上にはマイクロチャネル５が形成されており、カバー部材４は、マイクロチャネル５を密閉するように本体部３の表面３ａに貼り合わせられている。即ち、基板１Ａはマイクロチャネル５を有する。図２は、図１の本体部を表面側から見た図である。なお、図２において、マイクロチャネル５は、便宜上、斜線で描いてある。
【００２３】
マイクロチャネル５には、例えば微生物等の検体を含有する検体液を収容する検体液用ウェルと、微生物から細胞内ＡＴＰを抽出する抽出液を収容する抽出液用ウェルと、発光試薬を含有する発光液を収容する発光液用ウェルとがマイクロチャネル５の上流側から下流側に向かって順次接続されており、検体液、抽出液及び発光液をマイクロチャネル５に導入することが可能となっている。但し、検体液用ウェル、抽出液用ウェル及び発光液用ウェルは図１において示されていない。
【００２４】
発光液用ウェルは、図２に示すように、流路６を介してマイクロチャネル５の発光液導入部７に接続されており、発光液用ウェルに収容された発光液が流路６を経て発光液導入部７に導入されるようになっている。
【００２５】
一方、本体部３に対してカバー部材４と反対側には、受光部２ａを有する光検出器２が対向配置されている。即ち、マイクロチャネルチップ１は、受光部２ａとマイクロチャネル５とが対向するように光検出器２と対向配置されている。より具体的に述べると、受光部２ａに対向する領域、例えば、受光部２ａを本体部３の表面３ａ上に投影させた領域を受光部投影面８とした場合、受光部投影面８は、発光液導入部７が当該受光部投影面８の外側に配置されるように位置している。そして、受光部投影面８の外周８ａとマイクロチャネル５とは、交差部９ａ及び交差部９ｂで交差している。ここで、マイクロチャネル５のうち２つの交差部９ａ，９ｂの間の部分（以下、この部分を「発光領域」という）５Ａは、４つの折返し部５ａ，５ｂ，５ｃ，５ｄを有し、蛇行状となっている。そして、受光部投影面８は、マイクロチャネル５の全ての折返し部を含んでいる。
【００２６】
なお、本体部３は、マイクロチャネル５と光検出器２の受光部２ａとの間が透光性を有する材料で構成されていれば特に限定されないが、全体が透光性材料で構成されているものが好ましい。このような透光性材料としては、例えば、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）、ポリイミド、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）等の樹脂や、石英ガラス又はパイレックス（登録商標）ガラス等のガラスが用いられる。また、カバー部材４としては、透光性材料で構成されているものが好ましく、このような透光性材料としては、例えば、ＰＣ、ＰＥＴ、ＰＭＳＤ、ポリイミド、ＰＳ、ＰＭＭＡ等の樹脂や、石英ガラス又はパイレックス（登録商標）ガラス等のガラスが用いられる。
【００２７】
光検出器２としては、光電子増倍管、ルミノメーター、ゲルマニウムフォトダイオード、ガリウムヒ素フォトダイオード、フォトトランジスタ、ＣＣＤ素子等を用いることができる。
【００２８】
上記発光量測定装置１００によれば、発光試薬と反応して発光する検体試料を含む検体液及び抽出液がマイクロチャネル５に導入され、発光試薬を含む発光液が発光液用ウェルから流路６を経てマイクロチャネル５の発光液導入部７に導入されて混合されると、発光領域５Ａにおいて発光が起こる。このとき、マイクロチャネル５は十分に狭い空間であるため、検体試料と発光試薬との混合状態のばらつきが十分に低減される。従って、発光領域５Ａからの光量の再現性が高められ、発光領域５Ａからの光量が受光部２ａで検出されると、その測定結果の再現性を高めることができる。
【００２９】
また、マイクロチャネル５のうちの発光領域５Ａが４つの折返し部５ａ〜５ｄを有し、蛇行状に形成されているので、発光領域５Ａが折返し部を有しない場合と比較して、マイクロチャネル５のうち受光部２ａに対向する領域における発光領域５Ａの長さを大きくすることが可能となり、受光部２ａに入射される光の量が十分に増加される。
【００３０】
また、発光強度は一般に、上記検体試料と発光試薬との混合位置より下流側で最大となり、その下流側に向かうにつれて次第に低下する。そして、この発光強度のピーク位置は通常、発光試薬と検体試料との組合せによって異なる。このため、発光領域５Ａからの光を確実且つ十分に受光するためには、受光部２ａを大きくするか、受光部２ａの位置を発光強度のピーク位置に合わせて移動させる必要が生じる。
【００３１】
発光量測定装置１００によれば、マイクロチャネル５のうちの発光領域５Ａが４つの折返し部５ａ〜５ｄを有するため、発光領域５Ａが、制限された領域内に密に配置される。このため、発光強度のピーク位置が、検体試料と発光試薬との組合せの相違によりずれたとしても、受光部２ａを大きくすることなく受光部２ａに入射される光の量が十分に増加される。従って、光検出感度を高めることが可能となる。また、受光部２ａの位置を発光強度のピーク位置に合わせて移動させる必要も少なくなる。
【００３２】
更に、発光強度のピーク位置は、マイクロチャネル５に導入される液体の流量又は流速を調節することによっても変えることができるが、発光量測定装置１００では、検体試料と発光試薬との組合せに関わらず受光部２ａに十分な量の光が入射されるので、発光強度のピーク位置を受光部２ａに対向する位置とするために、検体試料及び発光試薬の組合せが変わるたびごとにそれらの流量及び流速を設定する作業が不要となり、マイクロチャネル５の発光領域５Ａからの発光量の測定操作が簡便になる。
【００３３】
なお、マイクロチャネル５におけるチャネル幅は、好ましくは１ｍｍ以下であり、更に好ましくは０．１〜５００μｍである。ここで、チャネル幅は、マイクロチャネルが形成されている面内に平行な方向でかつマイクロチャネルの延び方向に直交する方向に沿った長さを言う。チャネル幅ｄが１ｍｍを超えると、チャネル幅ｄが１ｍｍ以下である場合に比べて、発光反応の際の検体と発光試薬との混合状態のばらつきが大きくなり、発光量の測定結果の再現性が低くなる傾向がある。チャネル幅ｄが０．１〜５００μｍであると、発光反応の際の発光系物質の混合状態のばらつきが小さくなり、測定結果の再現性が高くなる傾向が顕著である。
【００３４】
（第２実施形態）  図３は、本発明による発光量測定装置の第２実施形態を示す部分平面図、図４は、図３の発光量測定装置のＩＶ−ＩＶ線に沿った断面図である。図３及び図４に示すように、本実施形態の発光量測定装置２００は、基板１Ａに対し受光部２ａと反対側に、即ちマイクロチャネル５に対し受光部２ａと反対側に、光を反射する光反射部１０を更に備えている点で第１実施形態の発光量測定装置１００と相違する。ここで、光反射部１０は、発光量を増加させる観点からは、受光部投影面８の全体を覆うように形成されていることが好ましいが、必ずしも受光部投影面８の全体を覆う必要はない。要するに、光反射部１０がマイクロチャネル５内で生じた光を反射させる位置に設けられている限り、光反射部１０は受光部投影面８の一部のみを覆っていてもよい。
【００３５】
第２実施形態の発光量測定装置２００によれば、マイクロチャネル５内で生じた光のうち光検出器２の受光部２ａと反対側に向かう光も、光反射部１０で反射されて受光部２ａに入射される。このため、受光部２ａに入射する光の量がより多くなり、光反射部１０を有していない場合と比べて、即ち第１実施形態の発光量測定装置１００と比べて、光検出感度がより高くなる。
【００３６】
本体部３及びカバー部材４は、透光性を有する材料で構成されていれば特に限定されず、このような透光性材料としては、例えば、ＰＣ、ＰＥＴ、ＰＭＳＤ、ポリイミド、ＰＳ、ＰＭＭＡ等の樹脂や、石英ガラス又はパイレックス（登録商標）ガラス等のガラスが用いられる。
【００３７】
光反射部１０は、例えばアルミニウムで構成されており、このような光反射部１０は、例えば蒸着やスパッタにより形成することができる。また、光反射部１０は、光を反射する材料で構成されていればよく、アルミニウムに限定されるものではない。光反射部１０を構成する材料として、アルミニウム以外に、例えば、ニッケル、チタン、クロム、金、銅、鉄等を用いることができる。
【００３８】
（第３実施形態）  図５は、本発明による発光量測定装置の第３実施形態を示す部分平面図、図６は、図５の発光量測定装置のＶＩ−ＶＩ線に沿った断面図である。図５及び図６に示すように、本実施形態の発光量測定装置３００は、カバー部材４の本体部３と反対側の表面４ａにおいて、光反射部１０を囲むように２本の溝１１ａ，１１ｂが更に形成され、かつ、これら２本の溝１１ａ，１１ｂにそれぞれ光反射部１２ａ，１２ｂが埋め込まれている点で第２実施形態の発光量測定装置２００と相違する。ここで、溝１１ａ，１１ｂは、例えば、カバー部材４が樹脂材料で構成されている場合は、射出成形、ホットエンボス等による成形時に形成することができ、また、カバー部材４がガラス材料で構成されている場合は、ウェットエッチング、サンドブラスト、超音波加工等の方法で形成することができる。光反射部１２ａ，１２ｂは、例えば、スパッタ、蒸着等の半導体プロセスや、部材のインサートプロセスを用いて、溝１１ａ，１１ｂに埋め込むことができる。
【００３９】
本実施形態の発光量測定装置３００では、マイクロチャネル５内で生じた光のうち光検出器２の受光部２ａと反対側に向かう光も、光反射部１０及び光反射部１２ａ，１２ｂで反射することによって受光部２ａに入射することになるので、受光部２ａに入射する光の量が更に多くなり、光反射部１２ａ，１２ｂを有していない場合と比べて、即ち第２実施形態の発光量測定装置２００と比べて、光検出感度がより高くなる。
【００４０】
本発明は、上記第１〜第３実施形態に限定されるものではない。例えば、上記第３実施形態では、カバー部材４の表面４ａに光反射部１０を囲むように２本の溝１１ａ，１１ｂが環状に、かつ不連続に形成されているが、２本の溝１１ａ，１１ｂは相互に接続されて１つの連続した環状溝となっていてもよい。また、光反射部１２ａ，１２ｂは、溝１１ａ，１１ｂに埋め込まれているが、溝１１ａ，１１ｂの各内面に沿った膜で構成されていてもよい。
【００４１】
また、上記第３実施形態では、溝１１ａ，１１ｂに光反射部１２ａ，１２ｂがそれぞれ埋め込まれているが、光反射部１２ａ，１２ｂは必ずしも埋め込まれている必要はない。この場合でも、カバー部材４と溝内の空気との屈折率の差により、溝１１ａ，１１ｂに入射した光が反射されることになる。
【００４２】
また、上記第１〜第３実施形態では、本体部３は１層で構成されているが、図７に示すように、本体部３が、異なる２つの部材３Ａ，３Ｂで構成されていてもよい。なお、図７は、マイクロチャネルチップ１の厚さ方向に沿った部分断面図である。この場合、中間層である部材３Ｂに貫通溝が形成され、その上部と下部に、部材３Ｂを挟持するようにカバー部材４及び部材３Ａが積層されることによってマイクロチャネル５が形成されている。
【００４３】
また、上記第１〜第３実施形態では、マイクロチャネル５は本体部３側にのみ形成されているが、図８に示すように、本体部３とカバー部材４のそれぞれの表面に溝を形成し、本体部３とカバー部材４とが貼り合わせられることによってマイクロチャネル５が形成されていてもよい。なお、図８は、マイクロチャネルチップ１の厚さ方向に沿った部分断面図である。
【００４４】
また、上記第１〜第３実施形態では、マイクロチャネルチップ５が、検体液用ウェル、抽出液用ウェル及び発光液用ウェルを有していると述べたが、マイクロチャネルチップ５は、これらのウェルを必ずしも有している必要はない。この場合は、シリンジ等を用いてマイクロチャネルに検体液、発光試薬等を注入すればよい。
【００４５】
マイクロチャネル５や発光液導入部７に液体を流通させるための手段は、流量又は流速を設定できる方法であればよい。例えば、液体を吸引し、又は押し出すポンプが挙げられる。
【００４６】
発光液導入部７及びマイクロチャネル５には逆止弁を設けてもよい。逆止弁が設けられると、液体の逆流を防いで、逆流によるトラブルを未然に防ぐことができる。
【００４７】
マイクロチャネルチップ１には加熱装置や冷却装置を設けてもよい。発光反応は発熱又は吸熱を伴うため、反応温度を調節しないと、温度変化により反応が不安定になるおそれがある。また、温度が変化すると、液体が膨張して不要な気泡が発生し、チャネルの目詰まりが生じるおそれがある。加熱装置や冷却装置を設ければ、そのようなトラブルを未然に防ぐことができる。
【実施例】
【００４８】
以下、本発明の内容を、実施例及び比較例を用いてより具体的に説明するが、本発明は、以下の実施例に限定されるものではない。
【００４９】
（実施例１）
本体部としてＰＤＭＳを、カバー部材としてガラスを用いて、図１及び図２に示されるような形状のマイクロチャネル（幅４００μｍ、深さ３００μｍ）を備えるマイクロチャネルチップを作成した。なお、マイクロチャネルとしては、検体を含有する検体液を収容する検体液用ウェルと、発光試薬を含有する発光液を収容する発光液用ウェルとがマイクロチャネル５の上流側から下流側に向かって順次接続されているものを用いた。
【００５０】
一方、光検出器としては、光電子増倍管（Ｈ７１５５、浜松ホトニクス）を用意し、光検出器の受光部とマイクロチャネルチップのマイクロチャネルとの位置関係が、図１及び図２に示されるような関係になるように、即ち、受光部投影面の外周がマイクロチャネルと２つの交差部で交差し、かつ発光領域が受光部投影面内に含まれるようにマイクロチャネル及び光検出器を配置して、発光量測定装置を作製した。
【００５１】
他方、マイクロチャネルに流す溶媒としては、アデノシン三リン酸二ナトリウム三水和物（ＩＣＮBiomedicals, Inc．）１ｎＭ及び塩化マグネシウム六水和物（ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ）（和光純薬工業）１０ｍＭをTris−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．８）に溶解した溶液Ａを調製した。また、ルシフェラーゼ（和光純薬工業）５μＭ、Ｄ(−)−ルシフェリン（和光純薬工業）２．５ｍＭ及び塩化マグネシウム六水和物（ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ）（和光純薬工業）１０ｍＭをTris−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．８）に溶解した溶液Ｂ（発光試薬溶液）を調製した。
【００５２】
そして、溶液Ａをマイクロチャネルに１０μＬ／minで、溶液Ｂを流路を経て発光液導入部に１０μＬ／minで流通させ、発光量を測定した。
【００５３】
（実施例２）
図３に示されるように、受光部投影面の全体を覆うようにカバー部材の表面上にアルミニウムを蒸着することによって厚さ１μｍの光反射部を設けたこと以外は、実施例１と同様にしてマイクロチャネルチップを作製した。そして、実施例１と同様にして発光量を測定した。
【００５４】
（実施例３）
図５に示されるように、受光部投影面の全体を覆うようにカバー部材の表面上に光反射部を設け、かつ光反射部を囲むように幅１００μｍ、深さ１０００μｍの２本の溝を形成し、これらの溝に、アルミニウムからなる光反射部を埋め込んだこと以外は、実施例１と同様にしてマイクロチャネルチップを作製した。そして、実施例１と同様にして発光量を測定した。
【００５５】
（比較例１）
マイクロチャネルの発光領域を直線状としたこと以外は、実施例１と同様にしてマイクロチャネルチップを作製した。そして、実施例１と同様にして発光量を測定した。
【００５６】
実施例１〜３及び比較例１の発光量測定結果を図９に示す。図９は、実施例１〜３及び比較例１において測定された発光量（ＣＰＳ）を示すグラフである。図９より、実施例１〜３の発光量測定装置は、比較例１の発光量測定装置よりも発光量が大幅に大きくなっていることが分かった。また、実施例１〜３及び比較例１において、発光量測定をそれぞれ３回行ったところ、発光量は実施例１〜３及び比較例１のいずれにおいてもほぼ同様な値を示した。
【００５７】
このことから、本発明のマイクロチャネルチップによれば、発光量の再現性を高めることができ、かつ光検出器の受光部に入射させる光量を十分に増加させることができることが確認された。特に、マイクロチャネルに対し受光部と反対側に光反射部を設けることによって、光検出感度が顕著に改善されることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
本発明のマイクロチャネルチップ及び発光量測定装置は、ＡＴＰを指標とした細菌等の微生物の検出に利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５９】
【図１】本発明による発光量測定装置の第１実施形態を示す部分断面図である。
【図２】図１の本体部を表面側から見た図である。
【図３】本発明による発光量測定装置の第２実施形態を示す部分平面図である。
【図４】図３の発光量測定装置のＩＶ−ＩＶ線に沿った断面図である。
【図５】本発明による発光量測定装置の第３実施形態を示す部分平面図である。
【図６】図５の発光量測定装置のＶＩ−ＶＩ線に沿った断面図である。
【図７】マイクロチャネルチップの第１変形例を示す部分断面図である。
【図８】マイクロチャネルチップの第２変形例を示す部分断面図である。
【図９】実施例１〜３及び比較例１において測定された発光量（ＣＰＳ）を示すグラフである。
【符号の説明】
【００６０】
１…マイクロチャネルチップ、１Ａ…基板、２…光検出器、２ａ…受光部、３…本体部、３ａ…本体部の表面、３Ａ，３Ｂ…部材、４…カバー部材、４ａ…カバー部材の表面、５…マイクロチャネル、５Ａ…発光領域、５ａ〜５ｄ…折返し部、６…流路、７…発光液導入部、８…受光部投影面、８ａ…外周、９ａ，９ｂ…交差部、１０…光反射部、１１ａ，１１ｂ…溝、１２ａ，１２ｂ…光反射部、１００，２００，３００…発光量測定装置。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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