(57)【要約】  【課題】本発明は、血液灌流、血液吸着式血液浄化モジュールと血液透析、血液濾過および血液透析濾過式血液浄化モジュールが直列に接続して使用される場合の血液透析、血液濾過および血液濾過透析式血液浄化モジュールの施行中の性能低下を軽減することで治療効果を高め、さらには中空糸の目詰まりを抑制することで安全かつ効率的な治療方法を提供することを課題とする。  【解決手段】血液灌流、血液吸着用血液浄化モジュールと血液透析、血液濾過および血液透析濾過式血液浄化モジュールが直列に接続して使用される場合の血液透析、血液濾過および血液濾過透析式血液浄化モジュールを血液灌流および血液吸着式血液浄化モジュールの上流に接続する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールと、血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールとを、直列に接続して併用する血液浄化方法であって、血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールを、血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールの上流側に接続して使用することを特徴とする血液浄化方法。
【請求項２】
前記血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールが中空糸膜からなる血液浄化モジュールであることを特徴とする請求項１に記載の血液浄化方法。
【請求項３】
前記血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールが、粒子、不織布、織物、編み物、中空糸、繊維状物または平膜で構成される吸着材が充填された血液浄化モジュールであることを特徴とする請求項１または２に記載の血液浄化方法。
【請求項４】
血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールと、血液灌流または血液吸着式血液浄化モジュールとを、直列に接続した血液循環回路であって、血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールが、血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールの血液の流れの上流側に配置されたことを特徴とする血液循環回路。
【請求項５】
前記血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールが中空糸膜からなる血液浄化モジュールであることを特徴とする請求項４に記載の血液循環回路。
【請求項６】
前記血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールが、粒子、不織布、織物、編み物、中空糸、繊維状物または平膜で構成される吸着材が充填された血液浄化モジュールであることを特徴とする請求項４または５に記載の血液循環回路。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールと血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールを併用する際の血液浄化方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液浄化とは、基本的には血液中から病因（関連）物質を除去することを目的としており、その技術は多様化し人工透析、持続的血液濾過、血漿交換、血液灌流、血液吸着、血漿吸着等多種多用に用いられている。血液浄化療法は循環動態の不安定な急性腎不全、肝不全、呼吸不全、多臓器不全、敗血症などの治療に用いられ、これらの病態においては血液中の水・電解質、尿毒物質などの有害物質除去により腎臓機能を補助するために血液濾過器が適用されている。
血液透析（Ｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓ：ＨＤ）は半透膜（透析膜）を介し、溶質が濃度の高い側から低い側に移動する現象（拡散）を用いて、血液中の物質を透析液に移動させ排出する手技である。また、透析膜の内外の圧格差によって水分を移動させる（限外濾過）こともできる。除去できるのは透析膜を通過する物質のみのため、分子量２０００以下と比較的小さい場合に限られる。血液濾過（Ｈｅｍｏｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ：ＨＦ）は、血液を濾過性能の高い濾過膜を通して濾過排出し、不足した水分、電解質を補う方法で、除去できる物質は使用する膜の細孔径によって異なるが、最大分子量４００００程度の物質まで除去できるとされている。
【０００３】
更に、この血液濾過を持続的に行う方法が持続的血液濾過（Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  Ｈｅｍｏｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ：ＣＨＦ）および持続的血液濾過透析（Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  Ｈｅｍｏｄｉａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ：ＣＨＤＦ）である。持続的血液濾過器のハウジング内に、中空糸内を流れる血液と対向流になるように透析液を灌流させ、透析の要素も持たせたのが持続的血液濾過透析であり、血液濾過で除去される低分子量物質から持続的血液濾過で除去される中・高分子量物質までを除去することができる。これらの血液浄化モジュールには人工腎臓に多用されている中空糸膜が一般的に使用されており、病因物質の除去はこの中空糸膜壁を介した物質移動により行われる。人工透析はＡｂｅｌ，Ｒｏｗｎｔｒｅｅ，Ｔｕｒｎｅｒが、１９１３年にセロイジン膜を用いてサリチル酸の薬物中毒に対する透析実験を実施したのが始めで、その後、種々の改良改善が行われてその性能は飛躍的に向上し、今日では国内で約２０万人の透析患者の治療に使用されている。今日までの歴史の中で血液透析器は、血液適合性の改善が行われ、その結果、数時間におよぶ透析施行後の返血時に、中空糸の血液成分による着色が肉眼的には観察されないレベルにまで高められている。
一方、血液灌流（Ｈｅｍｏｐｅｒｆｕｓｉｏｎ：ＨＰ）、血液吸着（Ｈｅｍｏａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ：ＨＡ）と呼ばれる血液浄化法がある。これらの血液浄化モジュールは血中の病因物質を選択的且つ効率的に吸着するため、活性炭（特許文献１）、陰イオン交換樹脂（特許文献２）、ビーズ状支持体（特許文献３）、繊維状担体（特許文献４）等からなる吸着材が充填されており、血液がこの吸着材に接触、通過する過程で病因物質が吸着・除去または解毒される。すなわち、血液透析、血液濾過および血液透析濾過式血液浄化血液浄化モジュールには無い特定の病因物質に特化した吸着・除去能力を発現するために設計されている。ただし、これらの中空糸を用いない血液浄化モジュールは、血液中の水・電解質、尿毒物質などの有害物質除去により腎臓機能を補助する機能を有しない。
そのため、これらの血液灌流（Ｈｅｍｏｐｅｒｆｕｓｉｏｎ：ＨＰ）、血液吸着（Ｈｅｍｏａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ：ＨＡ）を目的とした血液浄化モジュールは単独で使用されることもあるが、患者の病態によっては血液透析（Ｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓ：ＨＤ）、血液濾過（Ｈｅｍｏｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ：ＨＦ）、持続的血液濾過（Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  Ｈｅｍｏｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ：ＣＨＦ）および持続的血液濾過透析（Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  Ｈｅｍｏｄｉａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ：ＣＨＤＦ）等の血液浄化モジュールと接続して併用することによって血中病因物質の選択的吸着と腎機能補助を両立する。
このように血液浄化モジュールを直列に２本以上接続して血液灌流および血液吸着と血液透析、血液透析濾過および血液透析を同時に施行する際、一般的に血液灌流および血液吸着式血液浄化用カラムを上流にして、そのあとに血液透析、血液濾過および血液透析濾過式血液浄化モジュールを下流に接続して施行されている。
ところで、これらの体外循環の施行においては抗凝固剤を併用することが必要である。血液は異物に接触すると凝固する性質を有する。血液凝固系は一般的に内因系凝固機序と外因系凝固機序に分類され、血液浄化療法などの体外循環で血液が血管内皮以外の異物と接触した際に活性化される経路は、血液凝固の第ＸＩＩ因子の活性化により凝固が開始される内因系凝固機序である。
そのため血液浄化モジュールには血液適合性を付与するため種々の工夫（特許文献５〜８）が成されてきたが、今日においても材料の有する血液適合性のみによって体外循環が問題なく施行されることはなく、施行時にはメシル酸ナファモスタット、ヘパリン、低分子ヘパリンなどの抗凝固剤の投与が不可欠で血液凝固系の活性化を抑えることによって、血液浄化モジュールや血液回路内の血液凝固を抑止し体外循環を施行しているのが実態である。
【特許文献１】特開昭５３−２２１７８号公報
【特許文献２】特開昭６２−８２９７２号公報
【特許文献３】特開平５−３２９３６４号公報
【特許文献４】特開２０００−２３７５８５号公報
【特許文献５】特開平１１−２０１６５３号公報
【特許文献６】特開平６−２３７９９６号公報
【特許文献７】特開平５−３２９３６４号公報
【特許文献８】特開２０００−２５４２２２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
中空糸を用いる血液浄化モジュールにおける病因物質の除去は中空糸膜壁を介した物質移動により行われる。その物質移動は中空糸膜壁に存在する数十ｎｍ〜数百ｎｍという微細な孔（ミクロポア）により行われる。血液透析、血液濾過および血液濾過透析式血液浄化モジュールの性能はこの微細な孔に依存しているため、凝固系が活性化した血液の接触により血小板やフィブリン、血漿蛋白など血液凝固因子が中空糸膜表面に付着すると、これらの微細な孔（ミクロポア）のいわゆる目詰まりが起こり血液濾過器の性能低下が起こる。病態によっては治療のため施行時間が数時間から２４時間以上の長時間に及ぶこともあるため、この間に、血液濾過および血液透析性低下が進行し本来の治療効果が得られないばかりでなく、血栓による中空糸自体の閉塞による血液浄化モジュールの圧力上昇により、体外循環が施行不能という事態も起こりうる。その場合、施行を一時的に中断して血液浄化モジュールの交換が必要となる。
本発明は、かかる従来技術の問題点に鑑み、血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールと、血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールとが、直列に接続して使用される場合の血液透析式、血液濾過式および血液濾過透析式血液浄化モジュールの施行中の性能低下を軽減することで血液浄化の効果を高め、さらには中空糸の目詰まりを抑制することで安全かつ効率的な血液浄化方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
血液灌流式または血液吸着用血液浄化モジュールと、血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールとが直列に接続して使用される場合において、血液透析式、血液濾過式または血液濾過透析式血液浄化モジュールを血液灌流および血液吸着式血液浄化モジュールの上流側に接続する。
【発明の効果】
【０００６】
本発明により、血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールと、血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールとを直列に接続して使用する場合の血液透析式、血液濾過式または血液濾過透析式血液浄化モジュールの施行中の性能低下、さらには中空糸の閉塞を軽減、防止することにより有効かつ安全に治療を行うことが出来る。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明は、血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールと、血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールとを直列に接続して使用する場合の血液透析式、血液濾過式または血液濾過透析式血液浄化モジュールを血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールの上流側に接続することを特徴とする。
本発明における血液浄化とは血液透析、血液濾過、血液濾過透析、血液灌流、血液吸着などの血液中の病因（関連）物質を除去することを目的としたものをいう。血液透析式、血液濾過式および血液濾過透析式の血液浄化モジュールには人工腎臓に代表される中空糸膜を用いた製品が好ましく用いられる。これらの製品には例えば旭メディカル（株）社製パンフロー（登録商標）、ニプロ（株）社製ＵＴフィルター（登録商標）、東レ（株）社製ヘモフィールＳＨ（登録商標）、ミンテック（株）社製ダイアフィルター（登録商標）などが例としてあげられるが、血液透析、血液濾過または血液濾過透析ができるものであれば特にこれらに限定するものではない。一方、血液灌流式または血液吸着式の血液浄化モジュールには中空糸の他にビーズなどの粒子、不織布、織物、編み物、繊維状物、平膜などから構成される吸着材を用いた製品が好ましく用いられる。これらの吸着材を用いた製品としては、活性炭吸着カラム（ＤＨＰ−１：クラレ（株）、プラソーバ（登録商標）Ｎ−３５０：旭メディカル（株））、β２ミクログロブリン吸着カラム（リクセル（登録商標）：鐘淵化学工業（株））、エンドトキシン吸着カラム（トレミキシン（登録商標）：東レ（株））、白血球除去カラム（セルソーバ（登録商標）：旭メディカル（株）、アダカラム（登録商標）：日本抗体研究所（株））、サイトカイン吸着カラム、活性化補体除去カラムなどが例としてあげられるが特にこれらに限定するものではない。
【０００８】
本発明に使用される血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールの血液適合性が、併用する血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールに比較して良好であることがより望ましいがこれに限定するものではない。
本発明の血液浄化方法または血液循環回路においては、血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールのいずれか１つと、血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールのうちのいずれか１つとを直列に接続する。本発明において、血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールと、血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールとの直列接続に使用される血液回路は、人工透析用血液回路、持続濾過用血液回路等の一般的に血液浄化時に使用されるものであれば良く、特に限定されない。動脈側血液回路に添加される抗凝固剤は、血液灌流式または血液吸着式血液浄化モジュールの上流に配置された血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールによって、その一部が除去されてしまうために、血液透析式、血液濾過式または血液透析濾過式血液浄化モジュールを通過後の血液に抗凝固剤を追加添加することが容易な回路構成であることが更に望ましい。例えば、ウベ循研（株）製の血液回路Ｕ−５２５ＭＣまたはＵ−５２５ＳＨと、Ｕ−００１の組み合わせ使用が抗凝固剤の追加添加に適しているが、これに限定されるものではない。
また、本発明の血液浄化方法または血液循環回路に使用される血液浄化用装置としては、医療施設で一般的に血液浄化に用いられる血液濾過透析装置であれば施行可能であるが、たとえば旭メディカル（株）社製のＡＣＨ−０７Ｓや東レ・メディカル（株）社製のＴＲ−５２５、ＴＲ−５２０に代表される持続的血液濾過透析装置が特に好ましく用いられる。
以下に実施例を用いて詳細に説明を加えるが、発明の内容が実施例に限定されるものではない。
【実施例】
【０００９】
（実施例１）血液吸着式血液浄化カラム通過前後のヒト血液を用いた血液濾過透析膜への血小板付着試験
（１）血液吸着式血液浄化カラム用吸着材の合成
６５重量比の海成分（ポリスチレン）と３５重量比の島成分（ポリプロピレン）とからなる海島型複合繊維（強度：１．０ｇ／ｄ、伸度：４７．７％、太さ：１４６．７デシテックス、島の数：１６）からなる編み地３０ｇを、６０ｇのＮ−メチロール−α−クロロアセトアミド、４００ｇのニトロベンゼン、４００ｇの９８重量％硫酸、０．８６ｇのパラホルムアルデヒドの混合溶液と２０℃で１時間反応させた。その後、繊維をニトロベンゼンで洗浄し、その後メタノールにより反応を停止させた後、さらにメタノールで洗浄することによりα−クロロアセトアミドメチル化架橋ポリスチレン繊維（以下、ＡＭＰＳｔ繊維と略す）を得た。
次に、ＡＭＰＳｔ繊維をテトラエチレンペンタミン５．０ｇを溶解したジメチルスルホキシド（以下、ＤＭＳＯと略す）５００ｍＬに添加し、反応を３０℃で３時間行った。さらにその繊維を１．９ｇの４−クロロフェニルイソシアネートを溶解したＤＭＳＯ１０００ｍＬの溶液に添加し、反応を３０℃で１時間行った。その後、ガラスフィルター上でＤＭＳＯ１０００ｍＬを用いて洗浄し、さらに蒸留水１０００ｍＬを用いて洗浄し、尿素結合を導入したＡＭＰＳｔ繊維（以下、ＵＡＭＰ繊維と略す）を得た。
（２）血液吸着式血液浄化カラムの作製およびヒト血液の通過
作製したＵＡＭＰ繊維を用いて、ポリプロピレン製カラムに充填して血液吸着式血液浄化式小型カラムを作製した。直径８ｍｍの円盤状に切り抜いたＵＡＭＰ繊維からなる編み地５５枚を、内径８ｍｍ、長さ２５ｍｍのポリプロピレン製の円筒状カラムに充填した。カラム両端に内径２ｍｍ、外径４ｍｍのシリコンチューブを接続し、カラム上流部にペリスターポンプを設置した。
ヒト静脈から採血後、直ちにヘパリンを５０Ｕ／ｍＬになるように添加した血液を毎分２．５ｍＬで送液して小型カラムを通過した血液を採取した。
（３）血液濾過透析膜への血液接触および付着血小板の観察
１８ｍｍφのポリスチレン製の円形板に両面テープを貼り付け、そこに血液濾過透析器から取り出した中空糸膜を固定した。血液透析濾過器はＵＴフィルター（登録商標）“ＵＴ−７００Ｓ”：ニプロ（株）、パンフロー（登録商標）“ＡＰＦ−１０Ｓ”：旭メディカル（株）、ダイアフィルター（登録商標）“Ｄ−３０ＮＲ”：ミンテック（株）、ヘモフィールＳＨ（登録商標）：東レ（株）の４種を用いた。中空糸膜を片刃カミソリで半円筒状にそぎ切り、中空糸膜の内表面を露出させた。筒状に切ったＦａｌｃｏｎ（登録商標）チューブ（１８ｍｍφ、Ｎｏ．２０５１）に該円形板を、中空糸膜を貼り付けた面が、円筒内部にくるように取り付け、パラフィルムで隙間を埋めた。この円筒管内を生理食塩水で洗浄後、生理食塩水で満たした。前記円筒管内の生理食塩水を廃棄後、（２）に記載の小型カラムを未通過および通過したヒト静脈血を円筒管内に１．０ｍＬ入れて３７℃にて１時間振盪させた。その後、中空糸膜を１０ｍＬの生理食塩水で洗浄し、２．５体積％グルタルアルデヒド生理食塩水で血液成分の固定を行い、２０ｍＬの蒸留水にて洗浄した。洗浄した中空糸膜を常温・０．５Ｔｏｒｒにて１０時間減圧乾燥した。このフィルムを走査型電子顕微鏡の試料台に両面テープで貼り付けた。その後、スパッタリングにより、Ｐｔ−Ｐｄの薄膜を中空糸膜表面に形成させて、試料とした。この中空糸膜の内表面をフィールドエミッション型走査型電子顕微鏡（日立社製Ｓ８００）にて、倍率１５００倍で試料の内表面を観察し、１視野中（４．３×１０３μｍ２）の付着血小板数を数えた。中空糸長手方向における中央付近で、異なる１０視野での付着血小板数の平均値を血小板付着数（個／４．３×１０３μｍ２）とした。その結果を表１に示す。
【００１０】
【表１】
2006305306.tif 000002
【００１１】
その結果、いずれの血液濾過透析膜においても、血液吸着式血液浄化カラムを通過した血液の方が通過前の血液に比べて付着血小板数が増加していることが確認された。
この結果は、血液吸着式血液浄化カラムを血液が通過したことによって血小板が活性化されたため、次に接触した各血液濾過透析膜への付着量が、未通過血液に比べて増大したためと考えられる。
血液濾過透析器の機能はその中空糸膜壁に存在する数十ｎｍ〜数百ｎｍという微細な孔（ミクロポア）により行われるため、血液成分の付着は性能低下を引き起こす。
このことから、血液吸着式血液浄化カラムと血液濾過透析式血液浄化カラムを直列に接続して使用する際は、血液濾過透析式血液浄化カラムを上流に配置することが血液濾過透析式血液浄化カラムへの血液成分の付着を低減し、更に中空糸の目詰まりを防止するのに有効であることがわかる。
（実施例２〜３、比較例１〜２）ビーグル犬を用いた体外循環試験
（１）（実施例１）の（１）で得られた吸着材をポリプロピレン製カラムに充填して血液吸着式血液浄化式小型カラムを作製した。乾燥重量３４ｇのＵＡＭＰ繊維からなる編み地を側面に複数の開口部を有する直径１２ｍｍ、長さ１２５ｍｍのポリプロピレン製のパイプに巻き付けた後、パイプの片側端面に、パイプに巻いた編み地の端面を覆うように円盤状のプレートを取り付けて栓をし、他端には中心部にパイプ内部に繋がる開口部を有する円形のプレートを取り付け、内径４５ｍｍ、長さ１５０ｍｍのポリプロピレン製円筒ケースに挿入した。ケース両端にはルアロック型ノズルを有するポリプロピレン製ヘッダーを融着固定し、カラム内部に０．９重量％食塩水を充填し、両端部のルアロック型ノズルに栓をした後、γ線照射滅菌して血液吸着式血液浄化用カラムを作製した。
（２）（１）で作製した血液吸着式血液浄化用カラムとＵＴフィルター（登録商標）（ニプロ（株）社製ＵＴ−７００Ｓ）もしくはヘモフィールＳＨ（登録商標）（東レ（株）製）とを以下に示す４種類の組合せに従ってそれぞれ直列に接続して、体外循環を実施した。
１．血液吸着式血液浄化用カラム（上流側）→ＵＴフィルター（登録商標）（下流側）  （比較例１）
２．ＵＴフィルター（登録商標）（上流側）→血液吸着式血液浄化用カラム（登録商標）（下流側）  （実施例２）
３．血液吸着式血液浄化用カラム（上流側）→ヘモフィールＳＨ（登録商標）（下流側）  （比較例２）
４．ヘモフィールＳＨ（登録商標）（上流側）→血液吸着式血液浄化用カラム（下流側）  （実施例３）
Ａ．血液吸着式血液浄化用カラム、ＵＴフィルター（登録商標）およびヘモフィールＳＨ（登録商標）の洗浄
持続濾過用血液回路（株式会社ウベ循研、型式：Ｕ−５２０ＭＣ、製品番号：２０１３２０）を（１）で作製した血液吸着式血液浄化用カラム、ＵＴフィルター（登録商標）およびヘモフィールＳＨ（登録商標）にそれぞれ接続し、血液浄化用装置（ＴＲ−５２５、東レ・メディカル社）を用いて個別に洗浄を行った。
血液濾過器を持続濾過用血液回路（株式会社ウベ循研、形式Ｕ−５２０ＭＣ、製品番号：２０１３２０）を用いて上記１〜４の組合せに従い、血液吸着式血液浄化用カラムと２種類の血液濾過器のいずれかとを直列に接続して個別に洗浄した。洗浄の方法としては、血液吸着式血液浄化用カラムの場合２０００ＩＵ／１Ｌのヘパリン加生理食塩液２Ｌを８０ｍＬ／ｍｉｎ．の流量で流して行った。ただし、最後の５００ｍＬにはメシル酸ナファモスタットを２０ｍｇ添加して流した。
なお、ＵＴフィルター（登録商標）およびヘモフィールＳＨ（登録商標）については、添付文書に記載の洗浄方法に従って実施し、２０００ＩＵ／１Ｌのヘパリン加生理食塩液１Ｌを血液側と透析液側とに分けてそれぞれ５００ｍＬずつ、８０ｍＬ／ｍｉｎ．の流量で流して洗浄した。
血液吸着式血液浄化式カラムとＵＴフィルター（登録商標）もしくはヘモフィールＳＨ（登録商標）の接続には、持続濾過用血液回路（株式会社ウベ循研、型式：ＰＭＸ−ＣＨ直列回路、製品番号：２００６４２）を用いた。
Ｂ．ビーグル犬の試験開始準備および操作
健常なビーグル犬（体重１０〜１２ｋｇの雄）について、ケタラール（登録商標、ケタミン含有量５０  ｍｇ／ｍＬ：三共エール薬品株式会社）２．０〜２．５ｍＬ／ｂｏｄｙを筋肉内投与し、鎮静化したことを確認後、手術台上に背位に固定した。呼吸管理は人工呼吸器で行い、麻酔維持のためイソフルラン（登録商標、日産化学工業株式会社）を吸気中（空気および酸素混合吸気）に混合した。その両後肢の皮膚を切開して大腿動静脈を露出させ、左大腿動静脈にそれぞれ留置針を挿入して固定した。静脈側の留置針には体外循環開始前に注入する生理食塩液の輸液ラインを接続した。次に右大腿動静脈にそれぞれ留置針（１４Ｇ×２”、テルモ株式会社）を挿入して外シャントを作製し、体外循環開始までカテーテル内に生理食塩液を２．５ｍＬのシリンジから注入して充填することでカテーテルを栓止した。また、体外循環直前に血液回路を接続した。
Ｃ．体外循環
動物の術後状態が安定したことを確認後、ヘマトクリット値を下げるために生理食塩液５００ｍＬを左大腿静脈より１０ｍＬ／ｍｉｎの速度で注入し、循環開始直前のヘマトクリットが３５％以下になっていることを確認してから体外循環を開始した。流量は、徐々に増加して最終的に８０ｍＬ／ｍｉｎの流量にて２４時間施行した。体外循環開始１〜２４時間の間、１時間毎にそれぞれのカラムについて入口圧、出口圧を測定し、差圧を求めた。なお、終了後は血液回路中の血液を体内に戻した。
Ｄ．体外循環後の処置
体外循環開始２４時間後に各血管に接続しているカテーテルを抜去した後、血管を完全に結紮した。皮膚切開部位に抗生剤としてペニシリンＧカリウムを滴下し、外科的に皮膚を縫合し、イソジン消毒した後、速やかに麻酔を停止し、自発呼吸の回復を確認した後に人工呼吸器から離脱させた。その後しばらく手術台にて動物の覚醒状態を観察した後、元のケージに戻した。
（３）体外循環時のカラム圧の測定結果（２４時間の測定中における最低差圧と最高差圧）を表２に示す。
【００１２】
【表２】
2006305306.tif 000003
【００１３】
表２から明らかなように、いずれのカラムを用いた場合においても、上流に設置されたカラムは下流に設置されたカラムと比較してカラム入口圧の上昇が軽度であった。この結果より、血液濾過透析式血液浄化カラムを血液吸着式血液浄化カラムの上流側に設置することが中空糸の性能劣化、目詰まりおよび圧力上昇を抑制するために有効であることが確認された。