(57)【要約】【課題】  キノコ類特にタバコウロコタケ科に属するキノコから有用エキス成分を、超音波のような菌核の破壊手段や酵素を用いることなく、効率よく抽出分離することを目的とする。【解決手段】  タバコウロコタケ科に属するキノコを１００〜２５０℃の加圧熱水と接触させて可溶化し、キノコエキス成分を抽出する。また上記抽出を２以上の異なった温度で分別抽出し、それぞれの画分から異なったエキス成分を回収すること、加圧熱水がアルカリを含有すること、タバコウロコタケ科に属するキノコがカバノアナタケ又はキコブタケであること、キノコエキス成分がリグニン系抗酸化性化合物及びβ‐グルカンの中から選ばれる少なくとも１種であることが好ましい。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
タバコウロコタケ科に属するキノコを１００〜２５０℃の加圧熱水と接触させて可溶化し、キノコエキス成分を抽出することを特徴とするキノコエキス成分の抽出分離方法。
【請求項２】
抽出を２以上の異なった温度で分別抽出し、それぞれの画分から異なったエキス成分を回収する請求項１記載の抽出分離方法。
【請求項３】
加圧熱水がアルカリを含有する請求項１又は２記載のキノコエキス成分の抽出分離方法。
【請求項４】
タバコウロコタケ科に属するキノコがカバノアナタケである請求項１、２又は３記載のキノコエキス成分の抽出分離方法。
【請求項５】
タバコウロコタケ科に属するキノコがキコブタケである請求項１、２又は３記載のキノコエキス成分の抽出分離方法。
【請求項６】
キノコエキス成分がリグニン系抗酸化性化合物及びβ‐グルカンの中から選ばれる少なくとも１種である請求項１ないし５のいずれかに記載のキノコエキス成分の抽出分離方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、キノコ、特にタバコウロコタケ科に属するキノコから有用成分を簡単な手段で、しかも効率よく抽出分離する方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
タバコウロコタケ科に属するキノコ、すなわち菌核又はかさ部分には、リグニン系抗酸化性化合物、β‐グルカンなどの有用物質が含まれているが、これらは硬質の菌核内に保蔵され、通常の抽出手段によって分離回収することは困難である。
【０００３】
そのため、この菌核を破壊してその内容物を取り出す方法として、これまでに例えば菌核を超音波で粉砕したのち、プロテアーゼやセルラーゼのような酵素で処理し、次いでアルコールのような有機溶剤や熱水で抽出する方法（特許文献１参照）、同じようにして菌核を破壊後、糖質分解酵素で処理する方法（特許文献２参照）などが提案されている。
しかしながら、これらの方法は、高価な酵素を使用しなければならない上に、菌核が硬くて完全に破壊されないために十分に酵素が作用しないし、また場合によってはキノコに含まれる有用成分の中の糖質由来の有効成分が分解するおそれもあり、工業的に実施するには必ずしも満足できるものではない。
【０００４】
【特許文献１】特開２００２−２６２８２０公報（特許請求の範囲その他）
【特許文献２】特開２００４−１６１７４８公報（特許請求の範囲その他）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、このような事情の下で、キノコ類特にタバコウロコタケ科に属するキノコから有用エキス成分を、超音波のような菌核の破壊手段や酵素を用いることなく、効率よく抽出分離することを目的としてなされたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、タバコウロコタケ科に属するキノコ中に含まれる有用成分を簡単かつ効率よく抽出分離する方法を開発するために鋭意研究を重ねた結果、キノコの菌核又はかさ部分を、加圧熱水と接触させて可溶化し、異なった温度の熱水で分別抽出することにより、その中に含まれている有用成分例えばリグニン系抗酸化性化合物、β‐グルカンなどを抽出分離しうることを見出し、この知見に基づいて本発明をなすに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は、タバコウロコタケ科に属するキノコを１００〜２５０℃の加圧熱水と接触させて可溶化し、キノコエキス成分を抽出することを特徴とするキノコエキス成分の抽出分離方法を提供するものである。
上記のキノコについては、カバノアナタケの場合は、菌核部分を、またキコブタケの場合はかさ部分を用いる。
【０００８】
次に、本発明方法を添付図面に従って説明する。
図１は本発明方法を実施するのに好適な連続式加圧熱水分解装置の１例を示す説明図である。この図において、貯水タンク１からの水は、高圧ポンプ２により加圧され、加熱器３を通って所定の温度に加熱され、加圧熱水としてタバコウロコタケ科に属するキノコが充填されている抽出カラム４に供給される。この抽出カラム４には、冷却管５及び系内を一定圧力に維持するための保圧弁６が直列に連結されている。なお、１１は圧力計である。
【０００９】
抽出カラム４の中に充填されるキノコとしては、例えばカバノアナタケの菌核部分やキコブタケのかさ部分が用いられ、これらは原形のまま用いてもよいが、抽出効率を高めるために、粒状又は粉末状で用いるのが好ましい。
【００１０】
抽出カラム４の両端部は、充填物が流出しないように、金属フィルター、焼結フィルターのような耐熱耐圧性多孔性栓材料（図示せず）で閉塞されている。抽出カラム４からの抽出液は、冷却管５により冷却され、受器７に捕集される。この抽出カラム４には、所望に応じ不活性ガス例えば窒素ガスを送入して抽出液が分解又は変質するのを防止することができる。
【００１１】
この図１としては、連続式の加圧熱水分解装置を示したが、図２に示すように水と原料キノコを充填した抽出容器４とそれを加熱する加熱手段８からなる回分式の加圧熱水分解装置を用いることもできる。
この図２において９は温度制御手段であり、１０は抽出を効率よく行うための振とう手段、１１は圧力計、１２はストップバルブである。
【００１２】
また、抽出カラム又は抽出容器４に充填するキノコ原料（菌核又はかさ部分）の粉末又は粒体を用いる場合には、キノコ原料を乾燥したのち、慣用の粉砕手段例えばロールミル、ボールミル、クラッシャーなどを用いて粒径０．５〜５．０ｍｍ程度に粉砕する。この粉砕は、細かくすればするほど抽出は容易になるが、あまり細かくすると目詰りして取り扱いにくくなる。
【００１３】
本発明方法における加圧熱水の温度としては、１００〜２５０℃、好ましくは１２０〜２２０℃の範囲で選ばれる。１００℃未満では熱水の溶解力が低下するし、２５０℃を越えると抽出しようとする成分が分解するおそれがある。
この熱水の圧力としては、熱水が完全な液体状態を保持しうるように、蒸気圧以上の圧力を用いることが必要であるが、通常は０．５〜５．０ＭＰａの範囲で選ばれる。
【００１４】
この加圧熱水との接触によってキノコのエキス成分は抽出されるが、これに少量のアルカリ例えば水酸化アルカリを添加することによって、その抽出速度を大幅に向上させることができる。このアルカリの添加量としては、加圧熱水のアルカリ濃度が１〜１００ｍｏｌ／ｍ3（０．００１〜０．１Ｎ）になるように選ぶのが好ましい。このアルカリ濃度が、１ｍｏｌ／ｍ3未満では十分な抽出速度の向上は認められないし、１００ｍｏｌ／ｍ3よりも高くなるとセルロースなどの成分が抽出され、得られる色素成分又は生理活性成分の純度が低下する。
【００１５】
この際添加するアルカリとしては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムなどが用いられる。
【００１６】
本発明方法において、キノコのエキス成分の抽出を１回で行うこともできるが、温度の異なる加圧熱水を用いて、２以上例えば２〜４の画分に分別して抽出することもできる。このようにすると、異なった種類のエキス成分を別々に分取することができるので便利である。例えば１４０℃の画分と２００℃の画分の２回に分別すれば、前者にはβ‐グルカンを多く含むものが、また後者には抗酸化性化合物を多く含むものが得られる。このようにして、タバコウロコタケ科に属するキノコのエキス成分を水溶液として得ることができるが、この水溶液からエバポレターや凍結乾燥機や噴霧乾燥機を用いて水を除去すれば、それぞれの抽出物を固体例えば粉末として回収することができる。また、フェノール性水酸基やカルボキシル基をもつ抗酸化性化合物などは、上記の水溶液のｐＨが３以下になるよう酸を添加すると析出してくるので、これを濾過又は遠心分離し、乾燥することにより粉末として回収することができる。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、硬い菌核を有するタバコウロコタケ科のキノコを酵素を用いることなく簡単に可溶化し、その中の有用成分例えば抗酸化性化合物、β‐グルカンなどを効率よく抽出することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
次に、実施例により本発明を実施するための最良の形態を説明するが、本発明はこれによってなんら限定されるものではない。
なお、各例中の食品の抗酸化機能の評価は、（財）日本食品分析センターに依頼し、ＤＰＰＨ分光測定法により行った。
【実施例１】
【００１９】
粒径１〜３ｍｍ径に粉砕したカバノアナタケ（含水量１３．８質量％）７ｇを図１に示す加圧熱水流通式反応装置の抽出カラムに仕込み、窒素ガスで系内の圧力を３．５ＭＰａに調節した後、１４０℃の熱水を１０ｍｌ／ｍｉｎの割合で１時間通して第１画分を分取し、その後さらに２２０℃の熱水を１０ｍｌ／ｍｉｎで１時間流して第２画分を得た。
乾燥試料基準で求めたそれぞれの抽出画分は次のとおりである。
第１画分（１４０℃）    ３４質量％
第２画分（２２０℃）    ３９質量％
残渣                    ２１質量％
ガスロス                  ６質量％
【００２０】
第１画分中に含まれるβ‐グルカン量はカバノアナタケ菌糸体総量の７．９質量％であった。第２画分中に含まれるβ‐グルカン量は同じく０．６２質量％であった。
また、これらの画分及び原料のＤＰＰＨラジカル消去活性は次のとおりであった。
カバノアナタケ粉砕物        ６６単位／ｇ
第１画分                  ９５０単位／ｇ
第２画分                １３００単位／ｇ
残渣                        ４４単位／ｇ
これから分るように、第１画分、第２画分は高いＤＰＰＨラジカル消去活性を示した。
【実施例２】
【００２１】
粒径１〜３ｍｍに粉砕したカバノアナタケ（含水量１３．８質量％）７ｇを、図１に示す加圧熱水流通式反応装置の抽出カラムに仕込み、窒素ガスで系内の圧力を２．５ＭＰａに調節した後、常温から昇温しながら２２０℃まで加圧熱水を１０ｍｌ／ｍｉｎの割合で１時間流して第１画分を、その後さらに２２０℃の熱水を１０ｍｌ／ｍｉｎの割合で１時間流して第２画分を得た。
第１画分（常温から２２０℃まで）    ４２質量％
第２画分（２２０℃）                ２５質量％
残渣                                ２８質量％
ガスロス                              ５質量％
第１画分中に含まれるβ‐グルカン量はカバノアナタケ菌糸体総量の０．８４質量％であった。第２画分中に含まれるβ‐グルカン量は同じく５．８３質量％であった。
【００２２】
比較例１
実施例１で用いたのと同じカバノアナタケ１ｇに蒸留水３５ｍｌを加え、６０℃で加温し２時間抽出を行った。このときの残査収率は乾燥試料基準で８８質量％であり、抽出エキス収率は１２質量％であった。β‐グルカン量はカバノアナタケ菌糸体総量の０．０９質量％であった。
抽出エキスについて実施例１と同様にＤＰＰＨラジカル消去活性を測定したところ１２０単位／ｇであった。
【実施例３】
【００２３】
図２に示すバッチ式の加圧熱水分解装置を用い、その抽出容器としてＳＵＳ３１６製回分式反応装置（内容積６０ｍｌ）を用い、その中にキコブタケ（含水量１０質量％）５ｇ及び水を４０ｍｌ仕込み、塩浴で２００℃に加熱した。２０分後、抽出容器を水浴に移し反応を停止させた。次いで抽出容器内の内容物をグラスフィルターに通し、水可溶分と不溶分に分け、水可溶分についてはロータリーエバポレーターで水分を除いた。
キコブタケ乾燥固体質量に対し７０質量％が可溶化し、３０質量％が不溶成分として残った。
【実施例４】
【００２４】
実施例１と同じカバノアナタケ７ｇを図１に示す熱水流通式装置に仕込み、窒素ガスにより圧力を２ＭＰａに調節したのち、２００℃に保った０．０１モル濃度の水酸化ナトリウム水溶液を１０ｍｌ／ｍｉｎの割合で１時間流した。その結果、８５質量％の抽出物と１０質量％の残渣が得られた。
【００２５】
比較例２
キコブタケ試料（含水量１０質量％）５ｇに蒸留水３５ｍｌを加え、６０℃に加温し２時間抽出を行った。このときの残査収率は乾燥試料基準で８０質量％であり、上記画分に相当する抽出エキス収率は２０質量％であった。
【００２６】
このようにして得た実施例と比較例とを比較することにより、次のことが分かった。
実施例１と比較例１とから、カバノアナタケの加圧熱水処理温度を１４０℃と２２０℃の２段階に分けて設定した場合、加圧熱水温度を１４０℃に設定した時のエキス抽出率は従来法の煎じ法のエキス抽出率に対して約３．７倍のエキス抽出率であり、その後の加圧熱水温度を２２０℃に設定した時には従来法の煎じ法のエキス抽出率に対して約４．３倍のエキス抽出率であった。したがって、カバノアナタケの加圧熱水処理温度を１４０℃と２２０℃の２段階に分けて設定した実施例１において、比較例１に比べ約８倍のエキス抽出率を得たことになる。
【００２７】
次に、カバノアナタケの加圧熱水処理温度を１時間かけて常温から２２０℃まで次第に上昇させ、その後２２０℃で一定に固定し１時間抽出した場合、そのエキス抽出率は従来法の煎じ法のエキス抽出率に対して約４．６倍であり、その後加圧熱水処理温度を２２０℃に固定した時に約２．８倍のエキス抽出率を得た。したがって、カバノアナタケの加圧熱水処理温度を１時間かけて常温から２２０℃まで次第に上昇させ、その後２２０℃で一定に固定し１時間抽出した実施例２において、比較例１に比べ約７．４倍のエキス抽出率を得たことが分かった。
【００２８】
すなわち、加圧熱水流通式反応装置を用いた加圧熱水処理温度を２段階に設定した実施例１及び当初連続昇温処理の操作を行った実施例２においてカバノアナタケのエキス抽出率は比較例１と比較し極めて高く、今回用いた加圧熱水流通式反応装置と熱水流通法によるカバノアナタケのエキス抽出方法はカバノアナタケのエキス抽出装置及び方法として有用である。
【００２９】
加圧熱水流通式反応装置によるカバノアナタケのエキス中のβ‐グルカンの分析結果を従来法の煎じ法のエキス中のβ‐グルカンの分析結果と比較すると、実施例１において、加圧熱水処理温度を１４０℃に設定した時の第１画分中に含まれるβ‐グルカン量はカバノアナタケ菌糸体の７．９質量％に相当し、その後の加圧熱水温度を２２０℃に設定した時の第２画分（２２０℃）中に含まれるβ‐グルカン量はカバノアナタケ菌糸体の０．６２質量％に相当した。
【００３０】
第１画分であるエキス中のβ‐グルカン量は従来法の煎じ法のエキス中のβ‐グルカン量に対して約８８倍であった。同じく第２画分であるエキス中のβ‐グルカン量は従来法の煎じ法のエキス中のβ‐グルカン量に対して約７倍であった。したがって、カバノアナタケの加圧熱水処理温度を１４０℃と２２０℃の２段階に分けて設定した実施例１において、比較例１に比べ約９５倍のβ‐グルカンの抽出率を得たことが分かる。
【００３１】
実施例２において、加圧熱水処理温度を常温から２２０℃まで次第に上昇させたときの第１画分中に含まれるβ‐グルカン量はカバノアナタケ菌糸体の０．８４質量％に相当し、その後の加圧熱水温度を２２０℃に設定した時の第２画分（２２０℃）中に含まれるβ‐グルカン量はカバノアナタケ菌糸体の５．８３質量％に相当した。第１画分であるエキス中のβ‐グルカン量は従来法の煎じ法のエキス中のβ‐グルカン量に対して約９．３倍であり、また同じく第２画分であるエキス中のβ‐グルカン量は従来法の煎じ法のエキス中のβ‐グルカン量に対して約６５倍であった。したがってカバノアナタケの加圧熱水処理温度を１時間かけて常温から２２０℃まで次第に上昇させ、その後２２０℃で一定に固定し１時間抽出した実施例２において、比較例１に比べ約７４倍のβ‐グルカンの抽出率を得たことが分かる。
【００３２】
すなわち、加圧熱水流通式反応装置を用い加圧熱水処理温度を２段階に設定した実施例１及び当初連続昇温処理の操作を行った実施例２においてカバノアナタケのエキス抽出率とエキス中のβ‐グルカン量の観点から比較例１と比較したとき、それらの値は極めて高い。
熱水流通式反応装置によるカバノアナタケのエキス抽出法は、そのエキス量の収率が格段に優れており、有効成分の指標となるβ‐グルカン量及び抗酸化活性が極めて高かった。
【産業上の利用可能性】
【００３３】
本発明は、タバコウロコタケ科に属するキノコから、リグニン系抗酸化性化合物、β‐グルカンなどのエキス成分を抽出分離する方法として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】本発明方法を実施するのに好適な加圧熱水流通式反応装置。
【図２】本発明方法を実施するのに好適なバッチ式加圧熱水反応装置。
【符号の説明】
【００３５】
１  貯水タンク
２  高圧ポンプ
３  加熱器
４  抽出カラム
５  冷却管
６  保圧弁
７  受器
８  加熱手段
９  温度制御手段
１０  振とう手段
１１  圧力計
１２  ストップバルブ
【図１】
2006271325.tif 000002
【図２】
2006271325.tif 000003