(57)【要約】【課題】  細菌、かび、酵母、藻などの微生物に対して優れた抗菌活性を有し、かつ溶解度が高く、殺菌処理後に加水分解により毒性の低い化合物に分解される、環境や人体に対し安全性の高いビス四級アンモニウム塩化合物を提供する。【解決手段】  下記一般式（１）で表されるビス四級アンモニウム塩化合物。2006151942.tif 000028【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表されるビス四級アンモニウム塩化合物。
【化１】
2006151942.tif 000021
｛式中、Ｒ１およびＲ４は、炭素数１〜４の直鎖もしくは分岐のアルキレン基であり、Ｒ２およびＲ５は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基または低級アルコキシ基であり、Ｒ３は、炭素数２〜１２の直鎖もしくは分岐のアルキレン基であり、Ｒ６は、炭素数１〜１８の直鎖もしくは分岐のアルキル基であり、Ｚは、塩素原子、臭素原子、沃素原子または式：ＯＳＯ２Ｒ７（Ｒ７は、低級アルキル基または置換もしくは無置換のフェニル基である。）で示される有機基である。｝
【請求項２】
一般式（１）で表されるビス四級アンモニウム塩化合物が、下記一般式（２）で表されるビス四級アンモニウム塩化合物である請求項１に記載のビス四級アンモニウム塩化合物。
【化２】
2006151942.tif 000022
（式中、Ｒ８は、オクチル基、デシル基、ドデシル基、テトラデシル基、ヘキサデシル基またはオクタデシル基である。）
【請求項３】
下記一般式（３）
【化３】
2006151942.tif 000023
（式中、Ｒ１は、炭素数１〜４の直鎖もしくは分岐のアルキレン基であり、Ｒ２は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基または低級アルコキシ基である。）
で表されるピリジン化合物と、下記一般式（４）
【化４】
2006151942.tif 000024
（式中、Ｒ３は、炭素数２〜１２の直鎖もしくは分岐のアルキレン基である。）
で表されるジイソシアナート類とを反応させることにより、下記一般式（５）
【化５】
2006151942.tif 000025
（式中、Ｒ１およびＲ４は、炭素数１〜４の直鎖もしくは分岐のアルキレン基であり、Ｒ２およびＲ５は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基または低級アルコキシ基である。）
で表されるビスカーバメート化合物を製造し、該ビスカーバメート化合物と下記一般式（６）
【化６】
2006151942.tif 000026
｛式中、Ｒ６は、炭素数１〜１８の直鎖もしくは分岐のアルキル基であり、Ｚは、塩素原子、臭素原子、沃素原子または式：ＯＳＯ２Ｒ７（Ｒ７は、低級アルキル基または置換もしくは無置換のフェニル基である。）で示される有機基である。｝
で表されるハロゲン化合物またはスルホン酸エステル化合物とを反応させることを特徴とする、請求項１に記載のビス四級アンモニウム塩化合物の製造方法。
【請求項４】
一般式（５）で表されるビスカーバメート化合物が、下記式（７）で表されるビスカーバメート化合物であることを特徴とする請求項３に記載のビス四級アンモニウム塩化合物の製造方法。
【化７】
2006151942.tif 000027
【請求項５】
請求項１または請求項２に記載のビス四級アンモニウム塩化合物を有効成分として含有する抗菌剤。
【請求項６】
請求項１または請求項２に記載のビス四級アンモニウム塩化合物を有効成分として含有する殺菌剤。
【請求項７】
請求項１または請求項２に記載のビス四級アンモニウム塩化合物を有効成分として含有する防黴剤。
【請求項８】
請求項１または請求項２に記載のビス四級アンモニウム塩化合物を有効成分として含有する消毒剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なビス四級アンモニウム塩化合物およびその製造方法に関し、詳しくは、抗菌性、殺菌性、防黴性に優れ、細菌、かび、酵母、藻などの微生物に対する抗菌剤、殺菌剤、防黴剤または消毒剤として有用なビス四級アンモニウム塩化合物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、第四級アンモニウム塩化合物は、細菌、真菌などの微生物に有効な抗菌効果を有することから、医療産業、繊維産業などの各種産業分野において微生物制御剤として広く利用されてきた。その一つである塩化ベンザルコニウムは、細菌、真菌に対して広い抗菌スペクトルを有し、殺菌消毒剤として位置付けられている。しかし、この種の化合物はグラム陽性菌に対しては有効な抗菌効果を示すが、グラム陰性菌、真菌などに対しては抗菌力が低下するという欠点があった。さらに、環境温度やｐＨの影響を受けて抗菌力が変動するという欠点もあった。
【０００３】
上述したような欠点を解決する方法として、本発明者らは、先に、第四級アンモニウム塩構造を１分子中に２個持つ化合物、ビス四級アンモニウム塩化合物を提案した（例えば、特許文献１〜６参照）。これらのビス四級アンモニウム塩化合物は、細菌、真菌などに優れた抗菌力を示し、温度やｐＨなどの使用環境にも影響されず一定の抗菌活性を有する優れた化合物である。
【特許文献１】特開平９−１１０６９２号公報
【特許文献２】特開平１０−９５７７３号公報
【特許文献３】特開平１０−２８７５６６号公報
【特許文献４】特開２０００−１３６１８５号公報
【特許文献５】特開２０００−９５７６３号公報
【特許文献６】特開２０００−１９８８７９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、これらのビス四級アンモニウム塩化合物は、１分子内に２つの疎水性基を有するため高い分子疎水性を示し、水に対する溶解度が著しく低いので、水系の微生物制御剤としては使用が制限されるという問題点があった。また、抗菌力が極めて高いため、残留薬剤による環境生態系の破壊や人体に対する安全性などが懸念されるという問題点があった。
【０００５】
本発明者等は上記問題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、ピリジン骨格と架橋結合構造の間にアルキル鎖を導入すれば、ビス四級アンモニウム塩化合物の水に対する溶解度が著しく上昇することを見出し、さらに、化合物分子中の加水分解能に着目することで、ピリジン骨格と架橋結合構造の間にアルキル鎖を有し、かつ加水分解可能な構造であるカーバメート結合を架橋構造としたビス四級アンモニウム塩化合物を合成し、本発明を完成するに至った。
【０００６】
即ち、本発明の目的は、細菌、かび、酵母、藻などの微生物に対して優れた抗菌力を有する化合物であり、かつ水に対する溶解度が高く、殺菌処理後に加水分解して毒性の低い化合物に分解される、環境や人体に対し安全性の高いビス四級アンモニウム塩化合物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は下記構成からなる。
１．下記一般式（１）で表されるビス四級アンモニウム塩化合物。
【０００８】
【化８】
2006151942.tif 000002
｛式中、Ｒ１およびＲ４は、炭素数１〜４の直鎖もしくは分岐のアルキレン基であり、Ｒ２およびＲ５は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基または低級アルコキシ基であり、Ｒ３は、炭素数２〜１２の直鎖もしくは分岐のアルキレン基であり、Ｒ６は、炭素数１〜１８の直鎖もしくは分岐のアルキル基であり、Ｚは、塩素原子、臭素原子、沃素原子または式：ＯＳＯ２Ｒ７（Ｒ７は、低級アルキル基または置換もしくは無置換のフェニル基である。）で示される有機基である。｝
【０００９】
２．一般式（１）で表されるビス四級アンモニウム塩化合物が、下記一般式（２）で表されるビス四級アンモニウム塩化合物である上記１に記載のビス四級アンモニウム塩化合物。
【００１０】
【化９】
2006151942.tif 000003
（式中、Ｒ８は、オクチル基、デシル基、ドデシル基、テトラデシル基、ヘキサデシル基またはオクタデシル基である。）
【００１１】
３．下記一般式（３）
【００１２】
【化１０】
2006151942.tif 000004
（式中、Ｒ１は、炭素数１〜４の直鎖もしくは分岐のアルキレン基であり、Ｒ２は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基または低級アルコキシ基である。）
で表されるピリジン化合物と、下記一般式（４）
【００１３】
【化１１】
2006151942.tif 000005
（式中、Ｒ３は、炭素数２〜１２の直鎖もしくは分岐のアルキレン基である。）
で表されるジイソシアナート類とを反応させることにより、下記一般式（５）
【００１４】
【化１２】
2006151942.tif 000006
（式中、Ｒ１およびＲ４は、炭素数１〜４の直鎖もしくは分岐のアルキレン基であり、Ｒ２およびＲ５は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基または低級アルコキシ基である。）
で表されるビスカーバメート化合物を製造し、次いで、該ビスカーバメート化合物と下記一般式（６）
【００１５】
【化１３】
2006151942.tif 000007
｛式中、Ｒ６は、炭素数１〜１８の直鎖もしくは分岐のアルキル基であり、Ｚは、塩素原子、臭素原子、沃素原子または式：ＯＳＯ２Ｒ７（Ｒ７は、低級アルキル基または置換もしくは無置換のフェニル基である。）で示される有機基である。｝
で表されるハロゲン化合物またはスルホン酸エステル化合物とを反応させることを特徴とする、上記１に記載のビス四級アンモニウム塩化合物の製造方法。
【００１６】
４．一般式（５）で表されるビスカーバメート化合物が下記式（７）で表されることを特徴とする前記３に記載のビス四級アンモニウム塩化合物の製造方法。
【００１７】
【化１４】
2006151942.tif 000008
【００１８】
５．上記１または２に記載のビス四級アンモニウム塩化合物を有効成分として含有する抗菌剤。
【００１９】
６．上記１または２に記載のビス四級アンモニウム塩化合物を有効成分として含有する殺菌剤。
【００２０】
７．上記１または２に記載のビス四級アンモニウム塩化合物を有効成分として含有する防黴剤。
【００２１】
８．上記１または２に記載のビス四級アンモニウム塩化合物を有効成分として含有する消毒剤。
【発明の効果】
【００２２】
前記一般式（１）で表される本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、種々の細菌、真菌に対して、非常に広い静菌スペクトルを有しているため、抗菌剤、殺菌剤、防黴剤および消毒剤として、非常に有用である。
【００２３】
また、本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、従来の市販の四級アンモニウム塩である塩化ベンザルコニウムと比較して、１／１０〜１／１００程度の濃度でも優れた抗菌効果を示す。従って、本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、従来の市販の抗菌剤よりもはるかに少ない使用濃度で、従来と同等の抗菌効果を発揮することができる。
【００２４】
しかも、本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、ピリジン骨格と架橋結合構造の間にアルキル基を有するため、水に対する高い溶解度を示し、さらに分子中にカーバメート結合を有するため、殺菌処理後、加水分解によりビス型構造から毒性の低いモノマー型構造に分解されるので、従来問題となっていた残留薬剤による環境微生物や水生生物の死滅、薬剤耐性菌の出現などを防ぐことができ、人体に対する安全性も向上するという、優れた特性を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
以下に発明を実施するための最良の形態を挙げて本発明をさらに詳細に説明する。本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、下記一般式（１）で表される。
【００２６】
【化１５】
2006151942.tif 000009
【００２７】
上記式中、Ｒ１およびＲ４は、炭素数１〜４の直鎖もしくは分岐のアルキレン基であり、Ｒ１とＲ４とは同一でも異なっていてもよい。具体的には、メチレン基、エチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、ブチレン基、イソブチレン基が挙げられ、好ましくはメチレン基である。また、Ｒ１およびＲ４がピリジン環に結合する位置はどこでもよいが、好ましくはピリジン環の３または４の位置であり、さらに好ましくはピリジン環の３の位置である。
【００２８】
Ｒ２およびＲ５は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基または低級アルコキシ基であり、Ｒ２とＲ５とは同一でも異なっていてもよい。低級アルキル基としては、具体的には、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基などの直鎖または分岐のアルキル基が挙げられる。低級アルコキシ基としては、具体的には、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシ基などの直鎖または分岐のアルコキシ基が挙げられる。Ｒ２およびＲ５として、好ましくは水素原子である。
【００２９】
Ｒ３は炭素数２〜１２の直鎖もしくは分岐のアルキレン基であり、具体的には、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、テトラメチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基などが挙げられ、これらの中でも好ましくはテトラメチレン基、ヘキサメチレン基であり、さらに好ましくはテトラメチレン基である。
【００３０】
Ｒ６は炭素数１〜１８の直鎖もしくは分岐のアルキル基であり、好ましくは、炭素数８〜１８の直鎖もしくは分岐のアルキル基であり、その中でもさらに好ましくは炭素数が偶数のものであり、具体的にはオクチル基、デシル基、ドデシル基、テトラデシル基、ヘキサデシル基またはオクタデシル基を挙げることができる。
【００３１】
Ｚは、塩素原子、臭素原子、沃素原子または式：ＯＳＯ２Ｒ７（Ｒ７は、低級アルキル基または置換もしくは無置換のフェニル基である。）で示される有機基であり、好ましくは、臭素原子または沃素原子であり、さらに好ましくは臭素原子である。
【００３２】
一般式（１）で表される本発明のビス四級アンモニウム塩化合物としては、下記一般式（２）で表されるビス四級アンモニウム塩化合物が好ましい。
【００３３】
【化１６】
2006151942.tif 000010
（式中、Ｒ８は、オクチル基、デシル基、ドデシル基、テトラデシル基、ヘキサデシル基またはオクタデシル基である。）
【００３４】
上記一般式（２）で表されるビス四級アンモニウム塩化合物として、具体的には、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−オクチルピリジニウムアイオダイド）、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−デシルピリジニウムアイオダイド）、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−ドデシルピリジニウムアイオダイド）、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−テトラデシルピリジニウムアイオダイド）、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−ヘキサデシルピリジニウムアイオダイド）、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−オクタデシルピリジニウムアイオダイド）、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−オクチルピリジニウムブロマイド）、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−デシルピリジニウムブロマイド）、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−ドデシルピリジニウムブロマイド）、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−テトラデシルピリジニウムブロマイド）、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−ヘキサデシルピリジニウムブロマイド）、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−オクタデシルピリジニウムブロマイド）、が挙げられる。
【００３５】
次に、本発明のビス四級アンモニウム塩化合物の製造方法について説明する。本発明の一般式（１）で表される化合物は、下記一般式（３）で表されるピリジン化合物と、下記一般式（４）で表されるジイソシアナート類とを反応させることにより、下記一般式（５）で表されるビスカーバメート化合物を製造し、次いで、該ビスカーバメート化合物と下記一般式（６）で表されるハロゲン化合物またはスルホン酸エステル化合物とを反応させることによって製造することができる。
【００３６】
【化１６】
2006151942.tif 000011
（式中、Ｒ１およびＲ２は上記と同義である。）
【００３７】
【化１７】
2006151942.tif 000012
（式中、Ｒ３は上記と同義である。）
【００３８】
【化１８】
2006151942.tif 000013
（式中、Ｒ１〜Ｒ５は上記と同義である。）
【００３９】
【化１９】
2006151942.tif 000014
（式中、Ｚは前記と同義である。）
【００４０】
上記一般式（３）のピリジン化合物と、上記一般式（４）のジイソシアナート類との反応は、適当な溶媒中にて、通常、２０〜８０℃の温度下で行われ、３〜２４時間で終了する。一般式（３）のピリジン化合物と一般式（４）のジイソシアナート類酸塩化物類との使用割合は、通常、一般式（３）の化合物１モルに対して一般式（４）の化合物を０．１〜０．５モル、好ましく０．３〜０．５モルの割合で用いれば良い。前記溶媒としては、反応に不活性なものであれば特に制限されないが、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノールなどの低級アルコール類；水とアルコールとの混合溶媒；クロロホルム、ジクロロメタン、四塩化炭素などのハロゲン化合物系溶媒；ベンゼン、トルエン、キシレンなどの芳香族化合物系溶媒；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルホルムアミドなどのアミド化合物系溶媒；ニトロメタン、ニトロエタン、アセトニトリルは挙げられる。溶媒は必要に応じ、２種類以上を併用することもできる。溶媒の使用量は、通常、一般式（３）の化合物の０．５〜５倍（重量）であり、好ましくは１〜３倍（重量）である。反応雰囲気については、大気中でも反応は可能であるが、窒素雰囲気下で行うのが好ましい。反応後、ろ過、乾燥することにより一般式（５）のビスカーバメート化合物が得られる。
【００４１】
一般式（５）のビスカーバメート化合物と、一般式（６）のハロゲン化合物またはスルホン酸エステル化合物との反応は、適当な溶媒中にて、加圧下または非加圧下で行われる。加圧下で行う場合は、１０〜１００ＭＰａの加圧下において、５０〜１００℃の温度で行われ、この反応は、通常、２〜４８時間で終了する。非加圧下で行う場合は、５０〜１００℃の温度で、通常、２４〜１２０時間反応させればよい。一般式（５）のビスカーバメート化合物と一般式（６）のハロゲン化合物またはスルホン酸エステル化合物との使用割合は、通常、一般式（５）の化合物１モルに対して一般式（６）の化合物を２〜６モル、好ましく２．１〜３モルの割合で用いれば良い。前記溶媒としては、反応に不活性なものであれば特に制限されないが、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノールなどの低級アルコール類；水とアルコールとの混合溶媒；クロロホルム、ジクロロメタン、四塩化炭素などのハロゲン化合物系溶媒；ベンゼン、トルエン、キシレンなどの芳香族化合物系溶媒；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルホルムアミドなどのアミド化合物系溶媒；ニトロメタン、ニトロエタン、アセトニトリルが挙げられる。溶媒は必要に応じ、２種類以上を併用することもできる。溶媒の使用量は特に制限されないが、通常、一般式（５）の化合物の１〜１５倍（重量）であり、好ましくは３〜１０倍（重量）である。この反応により得られる一般式（１）で表される本発明の四級アンモニウム塩化合物は、再結晶等の通常の分離精製手段により、容易に反応混合物中から単離、精製することができる。
【００４２】
本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、細菌、かび、酵母、藻などに対する優れた抗菌活性を有する。これらの特性を生かして、抗菌剤、殺菌剤、防黴剤、消毒剤など抗菌性能を要求される各種用途において、市販されている従来の第四アンモニウム塩と同様に利用できる。例えば、防菌防臭加工繊維製品、皮革製品、建材、木材、塗料、接着剤、プラスチック、フィルム、紙、パルプ、金属加工油、食品、医薬品、化粧品、文房具、畜産分野等における抗菌剤、殺菌剤、防黴剤または消毒剤として幅広くその応用が期待される。
【００４３】
さらに、本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、化合物分子中に、加水分解性基（カーバメート結合）を有することから、使用後に適宜分解して低毒化あるいは無毒化するという特性を有するので、環境に優しい抗菌剤、殺菌剤、防黴剤および消毒剤として有用である。本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、例えば、製紙パルプ工場、冷却水循環工程などの種々の産業用水の有害微生物の防除の用途において有効に用いることができる。また、繊維、木材、医療器械、医療器具、光学機器、工作機械、精密機器、精密器材などに、洗浄殺菌剤として適用することができる。
【００４４】
本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、そのまま、粉末の状態で使用してもよい。また、本発明の化合物の粉末を適当な溶媒、例えば、水やアルコール類などに溶解または分散し、液状にして用いることもできる。このような液状組成物は、紙、セラミックス、ガラス、金属、木材、合成樹脂、繊維など様々な基材の表面に塗布または噴霧することで、基材表面の殺菌・抗菌処理を行うことができる。さらには、本発明の化合物を各種合成樹脂などに練り込み、糸、繊維、フィルム、シート、粒子など、その他任意の形状に成形することで、抗菌作用を備えた成型体とすることが可能である。
【００４５】
次に、本発明を実施例および試験例により具体的に説明する。
【実施例１】
【００４６】
下記化学構造式（８）で示されるビス四級アンモニウム塩化合物（１−Ａ）の製造
【００４７】
【化２０】
2006151942.tif 000015
【００４８】
０．２４モルの３−ヒドロキシメチルピリジンを含むアセトン溶媒中に、ヘキサメチレンジイソシアナートの０．１２モル水溶液７０ｍｌを滴下し、１８時間還流した。得られた反応物を減圧濃縮した後、真空乾燥して水を除去した。得られた残渣をアセトンで洗浄した後、無水エチルアルコールとヘキサンの混合溶媒（１：１、体積比）から再結晶を行い、３−メチルオキシカルボニルイミノピリジニウム１８ｇを得た。
【００４９】
得られた３−メチルオキシカルボニルイミノピリジニウム２．４ｇ（０．００６２モル）を無水エチルアルコール１５ｍｌに溶解した。次いで、これにｎ−オクチルアイオダイド３ｇ（０．０１２モル）を無水エチルアルコール５ｍｌに溶解した溶液を滴下した。その後、７０℃で４８時間還流した。反応後、ジエチルエーテルで洗浄し、無水エチルアルコールとヘキサンの混合溶媒（１：１、体積比）から再結晶を行い、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−オクチルピリジニウムアイオダイド）［以下、化合物（１−Ａ）という］を得た。得られた化合物（１−Ａ）の分析を行ったところ、１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ３ＯＤ）は次の通りであった。また、元素分析値、融点および収率は、後記する表１に示す通りであった。
【００５０】
１Ｈ−ＮＭＲ：０．８９ｐｐｍ（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）、１．３０−１．５０ｐｐｍ（２８Ｈ，ｍ）、２．０３ｐｐｍ（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）、３．０７−３．１２ｐｐｍ（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）、４．６６ｐｐｍ（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．３１ｐｐｍ（４Ｈ，ｓ）、８．１２ｐｐｍ（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）、８．５８ｐｐｍ（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、８．９６ｐｐｍ（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、９．０８ｐｐｍ（２Ｈ，ｓ）
【実施例２】
【００５１】
ビス四級アンモニウム塩化合物（１−Ｂ）の製造
実施例１において、ｎ−オクチルアイオダイドの代わりにｎ−デシルアイオダイド３．２ｇ（０．０１２モル）を使用した以外は、実施例１と同様にして、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−デシルピリジニウムアイオダイド）［上記一般式（２）中、Ｒ８はデシル基であり、Ｚは沃素原子である化合物］［以下、化合物（１−Ｂ）という］を得た。得られた化合物（１−Ｂ）の元素分析値、融点および収率は、後記する表１に示す通りであった。
【実施例３】
【００５２】
ビス四級アンモニウム塩化合物（１−Ｃ）の製造
実施例１において、ｎ−オクチルアイオダイドの代わりにｎ−ドデシルアイオダイド３．６ｇ（０．０１２モル）を使用した以外は、実施例１と同様にして、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−ドデシルピリジニウムアイオダイド）［上記一般式（２）中、Ｒ８はドデシル基であり、Ｚは沃素原子である化合物］［以下、化合物（１−Ｃ）という］を得た。得られた化合物（１−Ｃ）の元素分析値、融点および収率は、後記する表１に示す通りであった。
【実施例４】
【００５３】
ビス四級アンモニウム塩化合物（１−Ｄ）の製造
実施例１において、ｎ−オクチルアイオダイドの代わりにｎ−テトラデシルアイオダイド３．９ｇ（０．０１２モル）を使用した以外は、実施例１と同様にして、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−テトラデシルピリジニウムアイオダイド）［上記一般式（２）中、Ｒ８はテトラデシル基であり、Ｚは沃素原子である化合物］［以下、化合物（１−Ｄ）という］を得た。得られた化合物（１−Ｄ）の元素分析値、融点および収率は、後記する表１に示す通りであった。
【実施例５】
【００５４】
ビス四級アンモニウム塩化合物（１−Ｅ）の製造
実施例１において、ｎ−オクチルアイオダイドの代わりにｎ−ヘキサデシルアイオダイド４．２ｇ（０．０１２モル）を使用した以外は、実施例１と同様にして、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−ヘキサデシルピリジニウムアイオダイド）［上記一般式（２）中、Ｒ８はヘキサデシル基であり、Ｚは沃素原子である化合物］［以下、化合物（１−Ｅ）という］を得た。得られた化合物（１−Ｅ）の元素分析値、融点および収率は、後記する表１に示す通りであった。。
【実施例６】
【００５５】
ビス四級アンモニウム塩化合物（１−Ｆ）の製造
実施例１において、ｎ−オクチルアイオダイドの代わりにｎ−オクタデシルアイオダイド４．６ｇ（０．０１２モル）を使用した以外は、実施例１と同様にして、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−オクタデシルピリジニウムアイオダイド）［上記一般式（２）中、Ｒ８はオクタデシル基であり、Ｚは沃素原子である化合物］［以下、化合物（１−Ｆ）いう］を得た。得られた化合物（１−Ｆ）の元素分析値、融点および収率は、後記する表１に示す通りであった。
【実施例７】
【００５６】
下記化学構造式（９）で示されるビス四級アンモニウム塩化合物（２−Ａ）の製造
【００５７】
【化２１】
2006151942.tif 000016
【００５８】
０．２４モルの３−ヒドロキシメチルピリジンを含むアセトン溶媒中に、ヘキサメチレンジイソシアナートの０．１２モル水溶液７０ｍｌを滴下し、１８時間還流した。得られた反応物を減圧濃縮した後、真空乾燥して水を除去した。得られた残渣をアセトンで洗浄して、無水エチルアルコールとヘキサンの混合溶媒（１：１、体積比）から再結晶を行い、３−メチルオキシカルボニルイミノピリジニウム１８ｇを得た。
【００５９】
３−メチルオキシカルボニルイミノピリジニウム２．４ｇ（０．００６２モル）を無水エチルアルコール１５ｍｌに、ｎ−オクチルブロマイド２．３ｇ（０．０１２モル）を無水エチルアルコール５ｍｌにそれぞれ溶解し、滴下した。その後、７０℃で７２時間還流した。反応後、ジエチルエーテルで洗浄し、無水エチルアルコールとヘキサンの混合溶媒（１：１、体積比）から再結晶を行い、１，６−ヘキサメチレンビス（３−メチルオキシカルボニルイミノ−１−オクチルピリジニウムブロマイド）［以下、化合物（２−Ａ）という］を得た。得られた化合物（２−Ａ）の元素分析値、融点および収率は、後記する表１に示す通りであった。
【実施例８】
【００６０】
ビス四級アンモニウム塩化合物（２−Ｂ）の製造
実施例７において、ｎ−オクチルブロマイドの代わりにｎ−デシルブロマイド２．７ｇ（０．０１２モル）を使用した以外は、実施例７と同様にして、４，４’−（２，９−ジオキシ−３，８−ジオキソデカメチレン）ビス（１−デシルピリジニウムブロマイド）［上記一般式（２）中、Ｒ８はデシル基であり、Ｚは臭素原子である化合物］［以下、化合物（２−Ｂ）という］を得た。得られた化合物（２−Ｂ）の元素分析値、融点および収率は、後記する表１に示す通りであった。
【実施例９】
【００６１】
ビス四級アンモニウム塩化合物（２−Ｃ）の製造
実施例７において、ｎ−オクチルブロマイドの代わりにｎ−ドデシルブロマイド３．９ｇ（０．０１２モル）を使用した以外は、実施例７と同様にして、４，４’−（２，９−ジオキシ−３，８−ジオキソデカメチレン）ビス（１−ドデシルピリジニウムブロマイド）［上記一般式（２）中、Ｒ８はドデシル基であり、Ｚは臭素原子である化合物］（以下、化合物（２−Ｃ）という）を得た。得られた化合物（２−Ｃ）の分析を行ったところ、１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ３ＯＤ）は次の通りであった。また、元素分析値、融点および収率は、後記する表１に示す通りであった。
【００６２】
１Ｈ−ＮＭＲ：０．８９ｐｐｍ（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６，５Ｈｚ）、１．２８−１．３８ｐｐｍ（４０Ｈ，ｍ）、１．７４−１．７５ｐｐｍ（４Ｈ，ｍ）、２．００−２．０１ｐｐｍ（４Ｈ，ｍ）、２．５９ｐｐｍ（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）、４．６１ｐｐｍ（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝７，６Ｈｚ）、５．４６ｐｐｍ（４Ｈ，ｓ）、８．０８ｐｐｍ（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ）、８．９７ｐｐｍ（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）
【００６３】
【表１】
2006151942.tif 000017
【００６４】
以下に試験例を挙げ、実施例で得られたビス四級アンモニウム塩化合物の静菌作用および殺菌作用を検討した。さらに、各種細菌に対する静菌スペクトルについて、下記化合物と比較を行った。
対照化合物：（１）塩化ベンザルコニウム［以下、（ＢＡＣ）という］、（２）チアベンダゾール［以下、（ＴＢＺ）という］
【００６５】
試験例１：殺菌活性に及ぼすアルキル鎖長の影響
上記実施例１〜６で得られたビス四級アンモニウム塩化合物について、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＩＦＯ  １２７１３）に対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を後記する方法で測定し、本発明のビス四級アンモニウム塩化合物におけるアルキル側鎖［上記一般式（２）のＲ８］の長さが殺菌活性に及ぼす影響を調べた。その結果を表２に示した。
【００６６】
【表２】
2006151942.tif 000018
【００６７】
［最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の測定］
この測定は、無菌フード（エアテック社製、クリーンベンチ）内で行い、特に記載のない限り、微生物は氷冷下に保った。
細菌をＬｂｒｏｔｈ［トリプトン１．０％（Ｗ／Ｖ）、酵母抽出物０．５％（Ｗ／Ｖ）、塩化ナトリウム０．５％（Ｗ／Ｖ）、ｐＨ７．０〜７．２］５ｍｌ中で、３７℃、１８時間前培養した。この前培養菌体５ｍｌをＮＢ培地（Ｂａｓｃｔｏ  ｎｕｔｒｉｅｎｔ  ｂｒｏｔｈ、Ｄｉｆｃｏ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ＵＳＡ）８０ｍｌの入った坂口フラスコに移植し、３０℃で一定時間（１．５時間）培養して、対数増殖初期の菌体を得た。その菌体を遠心分離機（株式会社佐久間製作所製、ＭＯＤＥＬ  ５０Ａ−７）を使って冷却遠心分離（０℃、６０００ｒｐｍ、１５分）により集菌した。次いで、無菌水で希釈し、分光光度計（株式会社島津製作所製、型名：ＵＶ−１６０）を用いて、菌懸濁液濃度が１０５ｃｅｌｌ／ｍｌ（ＯＤ６６０＝０．０００１）となるように調整した。殺菌試験については、８０％のエチルアルコールを用いて調整した薬剤溶液を、無菌水で５０倍希釈した後、２倍の１０段階希釈した。各薬剤０．５ｍｌに上記の菌懸濁液０．５ｍｌを接種し、３０℃のウォーターバスシェーカー（株式会社タイテック製、Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｌｔ−１０）内で３０分間振盪培養した後、試験管から試料液０．１ｍｌを分取し、ＮＢ培地２ｍｌ中に接種した。このＮＢ判定培地を３７℃で２４時間培養し、増殖の有無を肉眼で判定し、増殖の認められない最小薬剤濃度を最小殺菌濃度（Ｍｉｎｉｍｕｍ  Ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ、ＭＢＣ）とした。
【００６８】
試験例２：静菌活性に及ぼすアルキル鎖長の影響
上記実施例１〜６で得られたビス四級アンモニウム塩化合物について、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＩＦＯ  １２７１３）に対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を後記する方法で測定し、本発明のビス四級アンモニウム塩化合物におけるアルキル側鎖［上記一般式（２）のＲ８］の長さが静菌活性に及ぼす影響を調べた。その結果を表３に示した。
【００６９】
【表３】
2006151942.tif 000019
【００７０】
［最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の測定］
この測定は、無菌フード（エアテック社製  クリーンベンチ）内で行い、特に記載のない限り、微生物は氷冷下に保った。
まず、細菌をＬｂｒｏｔｈ［トリプトン１．０％（Ｗ／Ｖ）、酵母抽出物０．５％（Ｗ／Ｖ）、塩化ナトリウム０．５％（Ｗ／Ｖ）、ｐＨ７．０〜７．２］５ｍｌ中で、３７℃、１８時間前培養した。この菌懸濁液を分光光度計（株式会社島津製作所製、型名：ＵＶ１６０）を用いて、菌懸濁液濃度が１０５ｃｅｌｌ／ｍｌ（ＯＤ６６０＝０．０００１）となるように調整した。
供試菌が黴の場合は、サブロー寒天培地に一白金耳植菌し、７日間、３０℃で培養した後、着生した胞子を生理食塩水［０．２％（Ｗ／Ｖ）、Ｔｗｅｅｎ８０を含む］１５ｍｌを用いてかきとった。ガーゼを詰めたチップを使用し、黴をかきとった生理食塩水溶液を濾過し、胞子懸濁液とした。この胞子懸濁液をサブロー液体培地を用いて１００倍希釈した菌体を用いた。
静菌試験については、８０％のエチルアルコールを用いて調製した薬剤溶液を、ＮＢ培地溶液（黴の場合はサブロー液体培地）で５０倍希釈した後、２倍、１０段階希釈した。次に所定濃度の希釈薬剤溶液をステンレスモルトン栓付き試験管に各々０．５ｍｌ分注後、前述した希釈菌液をそれぞれ０．５ｍｌ接種し、３７℃で２４時間（黴の場合は３０℃で２日間）静置培養後、増殖の有無により最小発育阻止濃度（Ｍｉｎｉｍｕｍ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ＭＩＣ）を決定した。
【００７１】
試験例３：静菌スペクトル
上記実施例２および実施例８で得られたビス四級アンモニウム塩化合物（１−Ｂ）（２−Ｂ）の各種細菌に対する静菌スペクトルを上記２種類の対照化合物と比較した。供試菌としては、下記表４に示すグラム陰性細菌４種、グラム陽性細菌５種およびカビ５種を使用し、静菌スペクトルを最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）で示した。なお、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の測定は試験例２で示した方法で行った。その結果を表４に示した。
【００７２】
【表４】
2006151942.tif 000020
【産業上の利用可能性】
【００７３】
本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、細菌、かび、酵母、藻などに対する優れた抗菌活性を有するため、抗菌剤、殺菌剤、防黴剤、消毒剤など抗菌性能を要求される各種用途において、市販されている従来の第四アンモニウム塩と同様に利用できる。特に、本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、化合物分子中に、加水分解性基（カーバメート結合）を有することから、使用後に適宜分解し、低毒化あるいは無毒化するので、環境に優しい抗菌剤、殺菌剤、防黴剤および消毒剤として利用できる。さらに、本発明のビス四級アンモニウム塩化合物は、例えば、製紙パルプ工場、冷却水循環工程などの種々の産業用水の有害微生物の防除の用途において有効に用いることができる。また、繊維、木材、医療器械、医療器具、光学機器、工作機械、精密機器、精密器材などにおいて、洗浄殺菌剤として適用することができる。