(57)【要約】【課題】  複数の試料を測定できるようにした際にも、各流路形状のばらつきを抑えることができる全反射減衰を利用した測定装置に用いられるセンサユニットを提供する。【解決手段】  センサユニット１２は、上面に金属膜１３が形成されたプリズム１４と、金属膜１３に液体を送液する流路１６が形成された流路部材４１と、流路部材４１をプリズム１４に圧接させた状態で保持する保持部材４２とから構成されている。金属膜１３の表面には、リガンドを固定化するリンカー膜２２が複数設けられている。流路部材４１は、このリンカー膜２２毎に用意され、流路１６とリンカー膜２２とが対面するように配置される。各流路部材４１、及びその流路１６は、同一の金型で成形することができるので、各流路１６の形状のばらつきが抑えられる。【選択図】        図２
2006242857.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
光の全反射減衰を利用して試料の反応状況を検知するための複数のセンサセルを備えたセンサユニットにおいて、
前記センサセルは、透光性を有する誘電体ブロックの一面に形成され、表面が前記試料の反応状況を検知するためのセンサ面となる薄膜層と、前記センサ面と対面して配置され、前記試料を含む試料溶液を前記センサ面に接触させながら流す流路とからなり、この流路を形成する流路部材を、前記各センサセル毎に設け、それぞれを前記薄膜層上に並べて配置したことを特徴とするセンサユニット。
【請求項２】
前記流路と前記センサ面とが対面した状態で、前記各流路部材を前記誘電体ブロックに保持する保持部材を設けたことを特徴とする請求項１記載のセンサユニット。
【請求項３】
透光性を有する誘電体ブロックの一面に形成され、表面が光の全反射減衰を利用して試料の反応状況を検知するためのセンサ面となる薄膜層と、前記センサ面と対面して配置され、前記試料を含む試料溶液を前記センサ面に接触させながら流す流路とからなる複数のセンサセルを備えたセンサユニットの製造方法において、
前記流路を形成する流路部材を、同一の金型で成形し、
成形された前記流路部材を、前記流路と前記センサ面とが対面するように前記各センサセルのそれぞれに配置して、前記誘電体ブロックに取り付けることを特徴とするセンサユニットの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、全反射減衰を利用した測定装置に用いられるセンサユニットと、その製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質やＤＮＡなどの生化学物質間における相互作用の測定や、薬品のスクリーニングなどを行う際に、全反射減衰を利用して試料の反応を測定する測定装置が知られている。
【０００３】
このような全反射減衰を利用した測定装置の１つに、表面プラズモン共鳴（Surface Plasmon Resonance）現象を利用した測定装置（以下、ＳＰＲ測定装置と称す）がある。なお、表面プラズモンとは、金属中の自由電子が集団的に振動することによって生じ、その金属の表面に沿って進む自由電子の粗密波である。
【０００４】
例えば、特許文献１などで知られるＫｒｅｔｓｃｈｍａｎｎ配置を採用したＳＰＲ測定装置では、透明な誘電体（以下、プリズムと称す）上に形成された金属膜の表面をセンサ面として、このセンサ面上で試料を反応させた後、プリズムを介してセンサ面の裏面側から全反射条件を満たすように金属膜を照射し、その反射光を測定している。
【０００５】
全反射条件を満たすように金属膜に照射された光のうち、エバネッセント波と呼ばれるわずかな光は、反射せずに金属膜内を透過してセンサ面側に染み出す。この際、エバネッセント波の振動数と表面プラズモンの振動数とが一致するとＳＰＲが発生し、反射光の強度を大きく減衰させる。ＳＰＲ測定装置は、この反射光の減衰を捉えることにより、センサ面上の試料の反応状況を測定する。
【０００６】
タンパク質やＤＮＡなどの生体試料は、乾燥による変性や失活を防ぐため、生理的食塩水や純水、または各種のバッファ液などの溶媒に溶かされた試料溶液として扱われることが多い。特許文献１記載のＳＰＲ測定装置は、こうした生体試料の相互作用などを調べるものであり、センサ面の上には試料溶液を送液するための流路が設けられる。また、センサ面にはリガンドとなる試料を固定させるためのリンカー膜が設けられており、流路にリガンド溶液を注入してリンカー膜にリガンドを固定（固定工程）させた後、アナライト溶液を注入してリガンドとアナライトとを接触（測定工程）させることにより、その相互作用を調べている。
【０００７】
また、特許文献１記載のＳＰＲ測定装置には、装置本体にプリズムと流路とが配置された測定ステージが設けられており、ガラス基板上に金属膜を形成したチップ型のセンサユニットを測定ステージに装着することで、前述の測定が行われる。
【０００８】
通常、リガンドの固定が完了するまでには１時間程度を有し、数分程度で終了する測定と比べて非常に時間がかかる。特許文献１記載のＳＰＲ測定装置では、固定工程と測定工程とを同一の測定ステージ上で行うため、固定工程を行っている間は測定ステージが占有されてしまい、他のセンサユニットの測定工程を行うことができないなど、作業が滞りがちになってしまうという問題があった。
【０００９】
また、作業効率を上げるために、複数のセンサユニットの固定工程を先に行っておき、測定工程をまとめて行うことも考えられるが、センサユニットは、センサ面を露出させており、固定工程を行ったものを保存しておくと、センサ面が乾燥して試料が変性や失活を起こしたり、センサ面に不純物が付着するなどして、正確な測定を行うことができなくなってしまうことがあった。
【００１０】
これらの問題を解決するため、本出願人は、流路が形成された流路部材と、上面に金属膜が形成されたプリズムと、流路部材の底面とプリズムの上面とを接合させた状態（流路と金属膜とを対面させた状態）で保持する保持部材とからなるセンサユニットを用いたＳＰＲ測定装置を提案している（例えば、特願２００４−２８７６１５号明細書参照）。
【００１１】
このＳＰＲ測定装置では、センサユニット自体に流路とプリズムとが設けられているので、複数のセンサユニットの固定工程と測定工程とを並列に行うことが可能となり、作業効率を向上させることができる。また、流路が設けられたことにより、固定工程を行ったものを保存しておく際に、液体を注入した状態で保存することができ、センサ面の乾燥などを防ぐことができる。
【００１２】
また、このセンサユニットの各部材は、長尺状に成形されている。流路部材には、その長手方向に沿って複数の流路が連設されており、一つのセンサユニットで各流路に応じた複数の試料を測定できるようにしている。
【特許文献１】特許第３２９４６０５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
金属膜との密着性を高めるため、流路部材には、例えば、ゴムなどといった弾性を有する樹脂材料が用いられている。こうした樹脂材料は、溶融した樹脂を金型内で固化させることによって成形（例えば、射出成形）されるのであるが、金型の加工精度などによって、各流路の形状にばらつきが生じてしまうという問題があった。こうした流路形状のばらつきは、試料溶液の送液量や送液速度に影響し、測定誤差に直結してしまう。
【００１４】
また、長尺状の流路部材は、樹脂の注入不足などによる成形不良が発生しやすく、上述したばらつきも起きやすい。さらに、流路部材の両端に位置する流路は、隣り合う流路が片側にしかなく、隣り合う流路が両側にある他の流路と比較して変形しやすい。そのため、保持部材でプリズムに圧接させる際に、両端に位置する流路と、他に位置する流路とでは、弾性変形の具合が異なり、この差異によっても各流路の形状にばらつきが生じてしまう。
【００１５】
本発明は、上記課題を鑑みてなされたものであって、複数の試料を測定できるようにした際にも、各流路の形状にばらつきが生じることのないセンサユニットと、その製造方法とを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
上記課題を解決するため、本発明のセンサユニットは、透光性を有する誘電体ブロックの一面に形成され、表面が光の全反射減衰を利用して試料の反応状況を検知するためのセンサ面となる薄膜層と、前記センサ面と対面して配置され、前記試料を含む試料溶液を前記センサ面に接触させながら流す流路とからなる複数のセンサセルを備え、前記流路を形成する流路部材を、前記各センサセル毎に設け、それぞれを前記薄膜層上に並べて配置したことを特徴とする。
【００１７】
なお、前記流路と前記センサ面とが対面した状態で、前記各流路部材を前記誘電体ブロックに保持する保持部材を設けることが好ましい。
【００１８】
さらに、本発明のセンサユニットの製造方法は、透光性を有する誘電体ブロックの一面に形成され、表面が光の全反射減衰を利用して試料の反応状況を検知するためのセンサ面となる薄膜層と、前記センサ面と対面して配置され、前記試料を含む試料溶液を前記センサ面に接触させながら流す流路とからなる複数のセンサセルを備え、前記流路を形成する流路部材を、同一の金型で成形し、成形された前記流路部材を、前記流路と前記センサ面とが対面するように前記各センサセルのそれぞれに配置して、前記誘電体ブロックに取り付けることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１９】
本発明のセンサユニットによれば、センサ面と対面して配置された際に、試料を含む試料溶液をセンサ面に接触させながら流す流路が形成される流路部材を、各センサセル毎に設けるようにしたので、各流路部材、及びその流路を同一の金型で成形することが可能となり、複数の試料を測定できるようにした際にも、各センサセル毎に生じる流路形状のばらつきを抑えることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
図１は、全反射減衰を利用した測定装置としてのＳＰＲ測定装置２の概略構成を示すブロック図である。ＳＰＲ測定装置２は、リガンドの固定（固定工程）を行う固定機４と、固定化したリガンドにアナライトを加えて両者の反応状況を測定（測定工程）する測定機６と、この測定機６によって得られたデータの解析（データ解析工程）を行うデータ解析機８とから構成されている。また、固定工程と測定工程とは、別体となったセンサユニット１２に対して行われ、複数の試料の測定が円滑に行われるようにされている。
【００２１】
図２は、センサユニット１２の概略構成を示す分解斜視図である。センサユニット１２は、上面に金属膜（薄膜層）１３が形成されたプリズム（誘電体ブロック）１４と、金属膜１３に液体を送液する流路１６が形成された流路部材４１と、プリズム１４の上面と流路部材４１の底面とを圧接させた状態で保持する保持部材４２と、この保持部材４２の上方に配置される蓋部材４３とから構成されている。また、金属膜１３の表面には、リガンドを固定化するリンカー膜２２が複数（本例では３つ）設けられている。各リンカー膜２２は、長尺状のプリズム１４と金属膜１３との長手方向に沿って所定の間隔を隔てて設けられており、流路部材４１は、このリンカー膜２２毎に別体に用意され、各流路１６と各リンカー膜２２とが対面するように金属膜１３上に並べて配置されている。なお、本例では、リンカー膜２２及び流路部材４１の数が３つの例を示しているが、これらの数は、３つに限らず、１つ又は２つでもよいし、４つ以上でもよい。
【００２２】
各流路部材４１に形成された流路１６は、略コの字型に屈曲された送液管であり、液体を注入する注入口１６ａと、それを排出する排出口１６ｂとを有している。流路１６の管径は約１ｍｍ程度であり、注入口１６ａと排出口１６ｂとの間隔は、約１０ｍｍ程度である。また、流路１６の底部は開放されており、この開放部位は、プリズム１４と圧接した際に、金属膜１３によって覆われて密閉される。以下、金属膜１３のうち、この開放部位で囲まれた部分（図４参照）を、センサセル１７と称す。すなわち、センサユニット１２は、リンカー膜２２の数に応じて３つの試料の測定を行えるようにしたマルチチャンネル型のセンサユニットである。
【００２３】
流路部材４１は、金属膜１３との密着性を高めるため、例えば、ゴムやＰＤＭＳ（ポリジメチルシロキサン）などの樹脂材料で成形されている。これにより、流路部材４１は、プリズム１４の上面と圧接された際に、弾性変形して金属膜１３との接触面の隙間を埋め、流路１６の開放された底部をプリズム１４とともに水密に覆う。樹脂材料の成形には、例えば、射出成形法や圧縮成形法などが用いられる。複数のセンサセル１７のそれぞれに対応した各流路部材４１は、上述の成形法において、図３に示すように、同一の金型５０で成形される。
【００２４】
各流路１６と対面する長尺状の金属膜１３は、例えば、蒸着によって形成される。この金属膜１３には、例えば、金や銀が用いられ、その膜厚は、例えば、５０ｎｍである。なお、この膜厚は、金属膜１３の素材や、照射される光の波長などに応じて適宜選択される。また、これ以降においては、金属膜１３のうち、リンカー膜２２が形成された側の面をセンサ面１３ａ、この裏面（プリズム１４に接触している面）を光入射面１３ｂと称す。プリズム１４は、入射した光を光入射面１３ｂに向けて集光するものであり、金属膜１３は、全反射条件を満たすように光入射面１３ｂに光が入射した際に、センサ面１３ａでＳＰＲを発生させる。
【００２５】
プリズム１４の長辺側の両側面には、保持部材４２の係合部４２ａと係合する係合爪１４ａが設けられている。これらの係合により、各流路部材４１が保持部材４２とプリズム１４とによって挟み込まれ、その底面とプリズム１４の上面とが圧接した状態で保持される。さらに、プリズム１４の両端部には、突部１４ｂが設けられている。センサユニット１２は、図示を省略したホルダに収納された状態で、固定が行われる。突部１４ｂは、ホルダに形成されたスリットに嵌り込むことにより、センサユニット１２をホルダ内の所定の収納位置に位置決めする。
【００２６】
なお、プリズム１４には、例えば、ホウケイクラウン（ＢＫ７）やバリウムクラウン（Ｂａｋ４）などに代表される光学ガラスや、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）、ポリカーボネイト（ＰＣ）、非晶性ポリオレフィン（ＡＰＯ）などに代表される光学プラスチックなどを用いることができる。
【００２７】
保持部材４２の上面には、各流路１６の注入口１６ａ及び排出口１６ｂに対応する位置に、ピペットなどの送液手段の先端部を進入させる受け入れ口４２ｂが形成されている。これらの受け入れ口４２ｂは、ピペットから吐出された液体が各注入口１６ａに導かれるように漏斗状に成形されている。また、各受け入れ口４２ｂは、保持部材４２が各流路部材４１を挟み込んでプリズム１４と係合した際に、それぞれの注入口１６ａ及び排出口１６ｂと当接して、流路１６と連結する。
【００２８】
また、各受け入れ口４２ｂの両脇には、円柱状のボス４２ｃが設けられている。これらのボス４２ｃは、蓋部材４３に形成された穴４３ａと嵌合して、蓋部材４３を位置決めする。蓋部材４３は、各受け入れ口４２ｂ及び各ボス４２ｃに対応する位置に穴が空けられた両面テープ４４によって、保持部材４２の上面に貼り付けられる。
【００２９】
蓋部材４３は、各流路１６に通じる各受け入れ口４２ｂを覆うことで、各流路１６内に注入された液体の蒸発を防止する。この蓋部材４３は、例えば、ゴムやプラスチックなどの弾性材料で成形されており、各受け入れ口４２ｂに対応する位置には、十字型のスリット４３ｂが形成されている。これにより、蓋部材４３は、スリット４３ｂを弾性変形させてピペットの挿入を可能にするとともに、ピペットが抜かれた状態では初期状態を保持して受け入れ口４２ｂを塞ぐ。
【００３０】
図４に示すように、金属膜１３上に形成された各リンカー膜２２には、リガンドが固定されてアナライトとリガンドとの反応が生じる測定領域２２ａと、リガンドが固定されず、測定領域２２ａの信号測定に際しての参照信号を得るための参照領域２２ｂとが設けられている。この参照領域２２ｂは、リンカー膜２２を製膜する際に形成される。その形成方法としては、例えば、リンカー膜２２に対して表面処理を施し、リンカー膜２２の半分程度の領域について、リガンドと結合する結合基を失活させることにより、リンカー膜２２の半分が測定領域２２ａとなり、残りの半分が参照領域２２ｂとなる。
【００３１】
次に、図５に示す説明図を用いて、ＳＰＲの測定方法について説明する。リンカー膜２２にリガンドを固定する固定工程は、センサユニット１２を固定機４にセットして行われる。固定機４には、１対のピペット１９ａ、１９ｂからなるピペット対１９が設けられている。ピペット対１９の各ピペット１９ａ、１９ｂは、注入口１６ａ、排出口１６ｂのそれぞれに挿入される。各ピペット１９ａ、１９ｂは、それぞれが流路１６への液体の注入と、流路１６からの吸い出しを行う機能を備えており、一方が注入動作を行っているときには、他方が吸い出し動作を行うというように、互いに連動する。固定機４は、このピペット対１９を用いて、リガンドを溶媒に溶かしたリガンド溶液２１を、注入口１６ａから注入する。
【００３２】
固定機４は、リガンド溶液２１を注入するリガンド固定化処理を行う前の前処理として、まず、リンカー膜２２に対して固定用バッファ液を送液してリンカー膜２２を湿らせた後、リンカー膜２２にリガンドを結合しやすくするリンカー膜２２の活性化処理を施す。例えば、アミンカップリング法では、リンカー膜２２としてカルボキシメチルデキストランが使用され、リガンド内のアミノ基をこのデキストランに直接共有結合させる。この場合の活性化液としては、Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドヒドロクロリド（ＥＤＣ）と、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（ＮＨＳ）との混合液が使用される。固定機４は、この活性化処理の後、固定用バッファ液によって流路１６を洗浄する。
【００３３】
なお、固定用バッファ液や、リガンド溶液２１の溶媒（希釈液）としては、例えば、各種のバッファ液（緩衝液）の他、生理的食塩水に代表される生理的塩類溶液や、純水などが使用される。これらの各液の種類、ｐＨ値、混合物の種類及びその濃度などは、リガンドの種類に応じて適宜決められる。例えば、リガンドとして生体試料を使用する場合には、ｐＨを中性付近に調整した生理的食塩水が用いられる場合が多い。しかし、上記アミンカップリング法では、リンカー膜２２が、カルボキシメチルデキストランにより負（マイナス）に帯電するので、このリンカー膜２２と結合しやすいようにタンパク質を陽（プラス）に帯電させるため、生理的とはいえない高濃度のリン酸塩を含む緩衝作用の強いリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ：phosphatic-buffered，saline）などが使用される場合もある。
【００３４】
固定機４は、こうした活性化処理及び洗浄を行った後、流路１６にリガンド溶液２１を注入して、リガンド固定化処理を行う。リガンド溶液２１が流路１６へ注入されると、溶液中に拡散しているリガンド２１ａが徐々にリンカー膜２２に堆積して結合し、リンカー膜２２上にリガンド２１ａが固定される。なお、固定化には、通常１時間程度かかり、この間、センサユニット１２は、温度などの環境条件が所定の条件に設定された状態で保管される。また、固定化が進んでいる間、流路１６内のリガンド溶液２１を静置しておいてもよいが、流路１６内のリガンド溶液２１を攪拌して流動させることが好ましい。こうすることで、リガンド２１ａとリンカー膜２２との結合が促進され、リガンド２１ａの固定量を増加させることができる。
【００３５】
固定機４は、リンカー膜２２へのリガンド２１ａの固定化が完了すると、リガンド溶液２１をピペット１９ｂによって吸い出して流路１６から排出させた後、流路１６に洗浄液を注入して固定化が完了したリンカー膜２２の洗浄を行う。また、固定機４は、必要に応じてブロッキング液を注入し、リガンドと結合しなかったリンカー膜２２の反応基を失活させるブロッキング処理を行う。ブロッキング液としては、例えば、エタノールアミン−ヒドロクロライドが使用される。このブロッキング処理を行った場合には、再び流路１６が洗浄される。最終的な洗浄を行った後、固定機４は、流路１６に乾燥防止液を注入する。センサユニット１２は、リンカー膜２２が乾燥防止液に浸された状態で測定までの間保管される。
【００３６】
測定工程は、センサユニット１２を測定機６にセットして行われる。測定機６には、固定機４のピペット対１９と同様のピペット対２６と、センサユニット１２に光を照射してリガンドとアナライトとの反応状況を測定する測定部３１とが設けられている。ピペット対２６は、固定機４のピペット対１９と同様に、注入口１６ａから流路１６へ各種の液体を注入する。
【００３７】
測定部３１は、照明部３２と検出器３３とから構成されている。リガンドとアナライトとの反応状況は、共鳴角（金属膜１３に照射された光の入射角）の変化として表れるので、照明部３２は、全反射条件を満足する様々な入射角の光を光入射面１３ｂに対して照射する。照明部３２は、例えば、光源３４と、集光レンズ、拡散板、偏光板などからなる光学系３６とから構成され、配置位置及び設置角度は、照明光の入射角が全反射条件を満足するように調整される。
【００３８】
光源３４としては、例えば、ＬＥＤ（Light Emitting Diode）、ＬＤ（Laser Diode）、ＳＬＤ（Super Luminescent Diode）などの発光素子が用いられる。光源３４は、こうした発光素子を１個使用し、この単一光源から光入射面１３ｂに向けて光を照射する。拡散板は、光源３４からの光を拡散して、発光面内の光量ムラを抑える。偏光板は、照射光のうちＳＰＲを生じさせるｐ偏光（入射面に平行な振動電場を持つ直線偏光）のみを通過させる。なお、ＬＤを使用する場合など、光源３４が発する照射光自体の偏光の向きが揃っている場合には、偏光板は不要である。また、偏光が揃っている光源を使用した場合でも、拡散板を通過したことによって偏光の向きが不揃いになってしまう場合には、偏光板を使用して偏光の向きを揃える。こうして拡散及び偏光された光は、集光レンズによって集光されてプリズム１４に照射される。これにより、光強度にバラツキがなく様々な入射角を持つ光を光入射面１３ｂに入射させることができる。
【００３９】
検出器３３は、光入射面１３ｂで反射する光を受光して、その光強度に応じたレベルの電気信号を出力する。光入射面１３ｂには、様々な角度の光が入射するので、光入射面１３ｂでは、それらの光が、それぞれの入射角に応じた反射角で反射する。検出器３３は、これらの様々な反射角の光を受光する。この検出器３３には、例えば、ＣＣＤエリアセンサやフォトダイオードアレイが用いられ、光入射面１３ｂにおいて様々な反射角で反射する反射光を受光して光電変換し、それをＳＰＲ信号としてデータ解析機８に出力する。
【００４０】
また、リンカー膜２２の上には、測定領域２２ａと参照領域２２ｂとが形成されている。検出器３３は、測定領域２２ａに対応するＳＰＲ信号を測定信号として出力し、参照領域２２ｂに対応するＳＰＲ信号を参照信号として出力する。
【００４１】
測定機６が測定工程を行う際には、まず、流路１６に測定用バッファ液を注入する。この後、アナライトを溶媒に溶かしたアナライト溶液２７を注入し、その後、再び測定用バッファ液を注入する。なお、最初に測定用バッファ液を注入する前に、一度流路１６の洗浄を行うようにしてもよい。検出器３３によるデータの読み取りは、基準となる信号レベルを検出するために、最初に測定用バッファ液を注入した直後から開始され、アナライト溶液２７を注入した後、再び測定用バッファ液が注入されるまでの間行われる。これにより、基準レベルの検出、アナライトとリガンドとの反応状況、結合したアナライトとリガンドとの測定用バッファ液注入による脱離までのＳＰＲ信号を測定することができる。
【００４２】
測定用バッファ液や、アナライト溶液２７の溶媒（希釈液）としては、例えば、各種のバッファ液（緩衝液）の他、生理的食塩水に代表される生理的塩類溶液や、純水などが使用される。これらの各液の種類、ｐＨ値、混合物の種類及びその濃度などは、リガンドやアナライトの種類に応じて適宜決められる。例えば、アナライトを溶けやすくするために、生理的食塩水にＤＭＳＯ（ジメチル−スルホ−オキシド）を含ませてもよい。このＤＭＳＯは、信号レベルに大きく影響する。上述したとおり測定用バッファ液は、基準レベルの検出に用いられるので、アナライト溶液２７中にＤＭＳＯが含まれる場合には、そのＤＭＳＯ濃度と同程度のＤＭＳＯ濃度を有する測定用バッファ液使用することが好ましい。
【００４３】
なお、アナライト溶液２７は、長時間（例えば、１年）保管されることも多く、そうした場合には、経時変化によって初期のＤＭＳＯ濃度と測定時のＤＭＳＯ濃度との間に濃度差が生じてしまう場合がある。厳密な測定を行う必要がある場合には、こうした濃度差をアナライト溶液２７を注入したときの参照信号のレベルから推定し、測定データに対して補正（ＤＭＳＯ濃度補正）を行うことが好ましい。
【００４４】
ＤＭＳＯ濃度補正のための補正データは、アナライト溶液２７を注入する前に、ＤＭＳＯ濃度が異なる複数種類の測定用バッファ液を流路１６に注入して、このときのＤＭＳＯ濃度変化に応じた参照信号のレベルと測定信号のレベルの、それぞれの変化量を調べることにより求められる。
【００４５】
リガンドとアナライトとの反応状況は、検出器３３の受光面内における反射光の減衰位置の推移として表れる。例えば、アナライトがリガンドと接触する前後では、センサ面１３ａ上の屈折率が異なり、ＳＰＲが発生する共鳴角が異なる。そして、アナライトがリガンドと接触して反応を開始すると、それに応じて反射光の共鳴角が変化を開始し、受光面内における反射光の減衰位置が移動し始める。測定機６は、こうして得た試料の反応状況を表すＳＰＲ信号を、データ解析機８に出力する。
【００４６】
なお、図５では、測定機６の構成が明確になるように、便宜的に光入射面１３ｂへの入射光線及びそこで反射する反射光線の向きが、流路１６内を流れる液体の方向と平行になるように、照明部３２と検出器３３とが配置されているが、図４に示すように、実際には、入射光線及び反射光線の向きが、液体の流れる方向と直交する方向（紙面に直交する方向）に照射されるように、照明部３２と検出部３３とが配置される。但し、測定部３１を、この図５に示すように配置して測定を行っても、何ら問題はない。
【００４７】
データ解析工程では、測定機６で得たＳＰＲ信号をデータ解析機８で解析して、アナライトの特性を定量分析する。データ解析機８は、例えば、パーソナルコンピュータやワークステーションなどに専用のソフトウェアをインストールしたものである。
【００４８】
データ解析機８は、測定機６が得た測定信号と参照信号との差や比を求めてデータ解析を行う。例えば、測定信号と参照信号との差分データを求め、この差分データを測定データとし、これに基づいて解析を行う。こうすることで、センサユニット１２やリンカー膜２２などの個体差や、装置の機械的な変動や、液体の温度変化などといった外乱に起因するノイズをキャンセルすることが可能となり、Ｓ／Ｎ比の良好な精度の高い測定を行うことができる。ＳＰＲ測定装置２は、これらの処理を各センサセル１７のそれぞれに対して、逐次的、あるいは同時的に行い、一つのセンサユニット１２で複数の試料の測定を行う。
【００４９】
次に、図６に示すフローチャートを参照しながら、本実施形態の作用について説明する。センサユニット１２を製造する際には、まずこれを構成する各部毎に成形がなされる。複数のリンカー膜２２のそれぞれに対応して設けられる流路部材４１は、同一の金型５０（図３参照）で成形される。なお、複数の金型で大量に流路部材４１を生産する際には、例えば、金型毎の識別番号を付与するなどして成形された各流路部材４１を管理し、センサユニット１２の製造時に同一の識別番号を有するものを用いるようにすればよい。また、この識別番号や識別記号などを、金型５０での成形時に流路部材４１に形成するようにしてもよいし、外面などにマーキングするようにしてもよい。
【００５０】
成形された流路部材４１は、金属膜１３上に複数設けられた各リンカー膜２２のそれぞれに対し、流路１６が対面するように配置（図２、３参照）される。配置された各流路部材４１は、保持部材４２とプリズム１４との係合によって、プリズム１４の上面に圧接された状態で保持される。この後、保持部材４２の上面に蓋部材４３を両面テープ４４で貼り付けることで、センサユニット１２の製造が完了する。
【００５１】
このように、本実施形態のセンサユニット１２によれば、流路部材４１を、複数のリンカー膜２２のぞれぞれに対応して設けるようにしたので、各流路部材４１、及びその流路１６を同一の金型５０で成形することが可能となり、複数の試料を測定できるようにした際にも、センサセル１７毎に生じる流路１６の形状のばらつきを抑えることができる。また、複数の流路１６が連設された長尺状の流路部材よりもサイズが小さくなることから、成形性が向上して樹脂の注入不足などによる成形不良の発生頻度を低下させ、成形不良による流路１６の形状のばらつきを抑えることができる。さらには、各リンカー膜２２に個別に流路部材４１が設けられるので、配置される位置によって弾性変形の具合に差異が生じることはなく、この差異による流路１６の形状のばらつきを防止することができる。
【００５２】
また、長尺状の流路部材では、連設された複数の流路のうち、いずれか一つにでも成形不良が生じると、たとえ他の流路が正常であっても、流路部材全体を不良品として取り扱わざるを得ない。これに対し、上記実施形態の流路部材４１は、個々の流路１６しか持たないので、このような不具合によるコスト増を抑えることもできる。さらには、センサユニット１２の製造後に流路１６に破損などが起きた際にも、破損した流路１６が形成された流路部材４１のみを交換すればよいので、このような不具合に対するコスト増も抑えることができる。
【００５３】
なお、上記実施形態では、一つの樹脂材料で成形される流路部材４１を示しているが、弾性変形によるリンカー膜２２との位置ズレや、流路１６の変形などが懸念される際には、例えば、２色成形法などによって、水密性の必要な箇所にのみ軟質の樹脂材料を用い、それ以外の箇所には硬質の樹脂材料を用いて弾性変形を抑えるようにしてもよい。
【００５４】
また、上記実施形態では、誘電体ブロックとしてプリズム１４を示しているが、誘電体ブロックは、プリズム１４に限らず、例えば、光学ガラスや光学プラスチックを板や棒状にしたものでもよいし、これらとプリズムとを光学マッチングオイルなどを介して接合したものなどであってもよい。
【００５５】
さらに、上記実施形態では、金属膜の表面にＳＰＲを発生させて、そのときの反射光の減衰を検出する、いわゆるＳＰＲセンサを例に説明したが、本発明のセンサユニットは、これに限ることなく、全反射減衰を利用した測定に用いられる他のセンサにも適用することができる。全反射減衰を利用するセンサとしては、ＳＰＲの他に、例えば、漏洩モードセンサが知られている。漏洩モードセンサは、誘電体と、この上に順に層設されたクラッド層と光導波層とによって構成された薄膜とからなり、この薄膜の一方の面がセンサ面となり、他方の面が光入射面となる。光入射面に全反射条件を満たすように光を入射させると、その一部が前記クラッド層を透過して前記光導波層に取り込まれる。そして、この光導波層において、導波モードが励起されると、前記光入射面における反射光が大きく減衰する。導波モードが励起される入射角は、ＳＰＲの共鳴角と同様に、センサ面上の媒質の屈折率に応じて変化する。この反射角の減衰を検出することにより、前記センサ面上の化学反応が測定される。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】ＳＰＲ測定装置の概略構成を示すブロック図である。
【図２】センサユニットの概略構成を示す分解斜視図である。
【図３】金型による流路部材の成形を概略的に説明する説明図である。
【図４】センサセルと測定部との構成を概略的に示す説明図である。
【図５】ＳＰＲを利用した測定方法の概略を説明する説明図である。
【図６】センサユニットの製造工程を概略的に示すフローチャートである。
【符号の説明】
【００５７】
２  ＳＰＲ測定装置
４  固定機
６  測定機
８  データ解析機
１２  センサユニット
１３  金属膜（薄膜層）
１３ａ  センサ面
１４  プリズム（誘電体ブロック）
１６  流路
１７  センサセル
４１  流路部材
４２  保持部材
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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