(57)【要約】【課題】  固定化によるリパーゼ活性の損失がなく、且つ、従来の粉末リパーゼによるエステル交換方法に比べてエステル交換活性が高く、さらには、粉末リパーゼの回収率が高く、長期にわたってエステル交換活性を高く保持することができる、油脂のエステル交換方法を提供すること。【解決手段】  粉末リパーゼを触媒として使用して油脂のエステル交換を行なう方法において、原料油脂中に粉末リパーゼが、下記ｉ）及びii）の条件を満たす粒度で分散している状態で、回分反応を行なった後、粉末リパーゼを回収、再利用する。  ｉ）粒径の平均値が０．２〜１０μｍ（個数基準）  ii）粒径０．１〜１．０μｍの粒子が２０〜１００％（個数基準）【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
粉末リパーゼを触媒として使用して油脂のエステル交換を行なう方法において、原料油脂中に粉末リパーゼが、下記ｉ）及びii）の条件を満たす粒度で分散している状態で、回分反応を行なった後、粉末リパーゼを回収、再利用することを特徴とする油脂のエステル交換方法。
ｉ）粒径の平均値が０．２〜１０μｍ（個数基準）
ii）粒径０．１〜１．０μｍの粒子が２０〜１００％（個数基準）
【請求項２】
上記粉末リパーゼの回収を、濾過助剤存在下、加圧密閉型濾過機に通液することによって行なう請求項１記載の油脂のエステル交換方法。
【請求項３】
上記粉末リパーゼの回収を、濾過助剤存在下、加圧密閉型濾過機に通液後、さらにその濾液を膜分離装置に通液することによって行なう請求項１記載の油脂のエステル交換方法。
【請求項４】
上記膜分離装置が、精密濾過膜濾過機又は限外濾過膜濾過機である請求項３記載の油脂のエステル交換方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、粉末リパーゼを用いた油脂のエステル交換方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来からリパーゼを触媒として使用した油脂のエステル交換反応によって油脂の改質を行なう方法が広く行なわれている。この油脂のエステル交換反応には、回分反応と連続反応があり、またリパーゼを固定化して使用する方法と粉末のまま使用する方法がある。
従来はリパーゼを何らかの担体、例えば陰イオン交換樹脂（特許文献１参照）、フェノール樹脂（特許文献２参照）、疎水性担体（特許文献３参照）、陽イオン交換樹脂（特許文献４参照）、キレート樹脂（特許文献５参照）等に固定化して使用する方法が行なわれてきたが、これらに記載の方法は、リパーゼを担体に固定することでリパーゼ活性が低下する欠点に加え、高価な担体を使用するため、コストが高くなる欠点があった。
【０００３】
そこで、リパーゼ活性を低下させることなく、また高価な担体を使用しない低コストの油脂のエステル交換反応として、リパーゼを固定化せずに粉末のまま使用する方法が行なわれるようになってきており、例えば、超音波処理等の方法で反応時の粉末リパーゼの粒径を９０％以上が１〜１００μｍとなるように調整して回分反応を行なう方法（特許文献６参照）や、濾過器内に粉末状リパーゼを単独又は濾過助剤とともに層を形成するように封入し、その濾過器に油脂を通油させる方法（特許文献７参照）が提案されている。
【０００４】
しかしながら、特許文献６の方法では、エステル交換反応時の粉末リパーゼの粒径を微細化することができず、粒径が１〜１００μｍと大きいため重量あたりの表面積が小さく、反応効率が低い問題があった。また、粉末リパーゼの回収・再利用についても触れられているが、回収方法として、精密濾過膜、遠心分離、不活性有機溶媒による洗浄しか挙げられておらず、これらの回収方法では、粉末リパーゼの回収率が低く、徐々に粉末リパーゼが流出し失われ、エステル交換活性が短期間で低下する問題があった。また、精密濾過膜に通液しただけでは目詰まりしやすいという問題、遠心分離や不活性有機溶媒による洗浄では大掛かりな装置を必要とするという問題、加えて不活性有機溶媒による洗浄では、有機溶剤の回収ロスを生じるという問題もあった。
【０００５】
特許文献７の方法は、連続反応法であるため回分反応に比べ反応効率が劣るため、元々エステル交換活性が低い問題があることに加え、連続反応法は回分反応法に比べエステル交換反応時の温度を高く設定する必要があるためリパーゼの熱失活が起こりやすく、さらには、粉末リパーゼが徐々に流出し失われるため、エステル交換活性が早期に失われるという問題があった。
【特許文献１】特開昭６０−９８９８４号公報
【特許文献２】特開昭６１−２０２６８８号公報
【特許文献３】特開平２−１３８９８６号公報
【特許文献４】特開平３−６１４８５号公報
【特許文献５】特開平１−２６２７９５号公報
【特許文献６】特開平７−７９７８９号公報
【特許文献７】特開２００１−１７８４８８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
従って、本発明の目的は、固定化によるリパーゼ活性の損失がなく、且つ、従来の粉末リパーゼによるエステル交換方法に比べてエステル交換活性が高く、さらには、粉末リパーゼの回収率が高く、長期にわたってエステル交換活性を高く保持することができる、油脂のエステル交換方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意研究した結果、粉末リパーゼを触媒として使用して油脂のエステル交換を行なう方法において、原料油脂中に粉末リパーゼが特定の粒径となって分散した状態で、回分反応を行ない、その後、粉末リパーゼを回収、再利用することで、上記目的を達成できることを知見した。
【０００８】
本発明は、上記知見に基づきなされたもので、粉末リパーゼを触媒として使用して油脂のエステル交換を行なう方法において、原料油脂中に粉末リパーゼが、下記ｉ）及びii）の条件を満たす粒度で分散している状態で、回分反応を行なった後、粉末リパーゼを回収、再利用することを特徴とする油脂のエステル交換方法を提供するものである。
ｉ）粒径の平均値が０．２〜１０μｍ（個数基準）
ii）粒径０．１〜１．０μｍの粒子が２０〜１００％（個数基準）
【０００９】
また、本発明は、上記の油脂のエステル交換方法において、上記粉末リパーゼの回収を、濾過助剤存在下、加圧密閉型濾過機に通液することによって行なう油脂のエステル交換方法を提供するものである。
【００１０】
また、本発明は、上記の油脂のエステル交換方法において、上記粉末リパーゼの回収を、濾過助剤存在下、加圧密閉型濾過機に通液後、さらにその濾液を膜分離装置に通液することによって行なう油脂のエステル交換方法を提供するものである。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の油脂のエステル交換方法によれば、リパーゼ活性の損失がなく、且つ、エステル交換活性が高く、さらには、粉末リパーゼの回収率が高く、長期にわたってエステル交換活性を高く保持することができるため、一定期間における、単位酵素重量あたりのエステル交換油生産重量を高めることができ、エステル交換油脂の生産性を向上させることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下、本発明の油脂のエステル交換方法について詳細に説明する。
本発明の油脂のエステル交換方法で用いる原料油脂としては、特に限定されず、脂肪酸組成が炭素数４〜２４の飽和脂肪酸又は不飽和脂肪酸からなる油脂、例えばパーム油、大豆油、菜種油、コーン油、ヒマワリ油、サフラワー油、オリーブ油、キャノーラ油、綿実油、米油、カカオ脂、サル脂、シア脂、マンゴー核油、ヤシ油、パーム核油、牛脂、豚脂、魚油、乳脂等の各種植物油脂及び動物油脂、並びにこれらを水素添加及び／又は分別処理を施した加工油脂から選ばれた１種又は２種以上を挙げることができる。
また、これらの原料油脂は、ステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸等の炭素数が６〜２４の脂肪酸又はその低級アルコールエステル及び植物ステロール等の、水酸基を有する化合物を添加した混合物とすることもできる。
なお、本発明の油脂のエステル交換方法を実施するに際しては、上記原料油脂の水分を常法により、１００〜８００ｐｐｍに調整することが好ましく、より好ましくは２００〜５００ｐｐｍに調整する。
【００１３】
本発明で用いられる粉末リパーゼは、例えば、リパーゼを含む微生物培養液をアセトン沈殿、精製、乾燥等の工程により粉末化したもので、担体に固定化していないものである。
例えば、リゾプス属、ムコール属、アスペルギルス属、シュードモナス属、アルカリゲネス属、キャンディダ属等の微生物由来のもの、及び、動植物由来のものを挙げることができる。本発明においては、エステル交換能が最も高いことからアルカリゲネス属の粉末リパーゼを使用することが最も好ましい。
【００１４】
本発明の油脂のエステル交換方法は、上記原料油脂に上記粉末リパーゼを添加してエステル交換反応させるものであるが、その際に、原料油脂中に粉末リパーゼが、上記ｉ）及びii）の条件を満たす粒度で分散していることが必要である。
例え原料油脂中に上記ｉ）及びii）の条件を満たす粒度の粉末リパーゼを添加したとしても、ただ添加、分散しただけでは、粉末リパーゼは粒径１００μｍ〜数１００μｍ、あるいはそれらが更に会合した巨大分子、いわゆるダマの状態になってしまうこともあり、その場合、本発明の効果を得ることができない。
【００１５】
すなわち、本発明の油脂のエステル交換方法における原料油脂中の粉末リパーゼの粒径の平均値は、上記ｉ）の条件の通り、０．２〜１０μｍ（個数基準）、好ましくは０．２〜５μｍ、より好ましくは０．２〜１μｍである。粒径の平均値が０．２μｍ未満であるような超微細なものであると、粉末リパーゼの回収にも超微細なメッシュの濾過装置を必要とし、その場合、すぐに目詰まりしてしまい、実質的に粉末リパーゼの回収、再利用が困難であり、１０μｍを超えると、高いエステル交換活性を得ることができない。
【００１６】
また、本発明の油脂のエステル交換方法における原料油脂中の粉末リパーゼの粒度分布において、粒径０．１〜１．０μｍの粒子の占める割合は、上記ii）の条件の通り、２０〜１００％（個数基準）、好ましくは５０％〜１００％、より好ましくは、８０％〜１００％である。粒径０．１〜１．０μｍの粒子が２０％未満であると、高いエステル交換活性を得ることができない。
【００１７】
原料油脂中に粉末リパーゼが、上記ｉ）及びii）の条件を満たす粒度で分散している状態に調製する方法としては、原料油脂に粉末リパーゼを添加、分散した後、各種均質化装置や撹拌装置を使用して均質化する方法が挙げられる。その一例として例えば、原料油脂の一部、好ましくは粉末リパーゼを２〜３０倍重量、より好ましくは５〜２０倍重量の原料油脂中に添加し、ホモミキサーを用いて好ましくは５００〜２０，０００ｒｐｍ、より好ましくは１，０００〜１５，０００ｒｐｍで、好ましくは１０〜６０分、より好ましくは１０〜３０分均質化処理し、このスラリー状とした粉末リパーゼ分散原料油脂に残余の原料油脂を添加、混合する方法を挙げることができる。
なお、粉末リパーゼの粒度は、レーザー式粒度分布測定器等を用いて簡単に測定することができる。
【００１８】
上記粉末リパーゼの添加量は、原料油脂に対し、好ましくは０．１〜１０質量％、より好ましくは０．２〜５質量％、さらに好ましくは０．２〜３質量％である。上記粉末リパーゼの添加量が０．１質量％未満であると、反応時間が長くかかりすぎ、生産効率が低下してしまう。また、１０質量％を超えると、後述の粉末リパーゼ回収の際に濾過装置の負荷が過大となるため、通液速度が低下し、また、目詰まりしやすくなってしまう。
【００１９】
本発明の油脂のエステル交換方法では、粉末リパーゼが上記ｉ）及びii）の条件を満たす粒度で分散している原料油脂を、タンク中で回分反応を行なうものである。
回分反応は連続反応に比べ、油脂温度を下げることができるため、リパーゼの熱失活が少ないという利点を有する。
本発明の油脂のエステル交換方法では、回分反応の温度条件は好ましくは２０〜８０℃、より好ましくは４０〜７０℃、さらに好ましくは５０〜６０℃であり、回分時間は５分〜２４時間、好ましくは窒素雰囲気下で行なう。なお、反応温度が２０℃未満では反応速度が遅く、また８０℃超ではリパーゼの熱失活が著しいため好ましくない。
【００２０】
本発明の油脂のエステル交換方法では、回分反応終了後、密閉型加圧濾過、膜分離、遠心分離、有機溶媒による洗浄等の公知の方法により、反応液から粉末リパーゼを回収し、濾液は定法により精製処理してエステル交換油脂を得る。
【００２１】
本発明の油脂のエステル交換方法では、上記粉末リパーゼの回収方法としては、濾過助剤存在下、加圧密閉型濾過機に通液することによって行なう方法が、粉末リパーゼの回収率を向上させることが可能な点、通液速度を速く設定可能な点及び目詰まりしにくい点で好ましい。なお、加圧密閉型濾過器としては、リーフフィルター、フンダバッグフィルター等を用いることができる。
【００２２】
また、上記粉末リパーゼ回収の際に用いられる濾過助剤としては、例えば、珪藻土、パーライト、セルロース、活性炭等を挙げることができる。上記濾過助剤は１種あるいは２種以上を組み合わせて用いることができるが、粉末リパーゼの回収率を最も高めることができることから、珪藻土を使用することが好ましい。また、濾過助剤の使用量は、粉末リパーゼ添加量の０．５〜５倍量が望ましい。０．５倍未満では、粉末リパーゼの回収率が低くなるので好ましくない。また、５倍を超える添加量は、それ以上改良効果はないため好ましくない
【００２３】
また、本発明の油脂のエステル交換方法においては、濾過助剤存在下、加圧密閉型濾過機に通液後、さらにその濾液を膜分離装置に通液し、再度粉末リパーゼを回収することで、更に粉末リパーゼの回収率を向上させることができる。
なお、上記膜分離装置としては、分離対象物質の粒径により、精密濾過膜濾過機、限外濾過膜濾過機、透析膜濾過機、電気透析膜濾過機、逆浸透膜濾過機等があるが、本発明の油脂のエステル交換方法においては、精密濾過膜濾過機又は限外濾過膜濾過機を使用することが、通液速度が速く、目詰まりしにくく、粉末リパーゼ回収や洗浄が容易である点で好ましい。
なお、精密濾過膜濾過機に使用する膜としては、セラミック膜、酢酸セルロース＋ニトロセルロース混合膜、ポリビニルデンジフルオライド多孔質膜、トッラック・エッチング膜等が挙げられ、限外濾過装置に使用する膜としては、ポリアクリロニトリル膜、ポリ塩化ビニル−ポリアクリロニトリル共重合体膜、ポリスルフォン膜、ポリエーテルスルフォン膜、ポリプロピレン膜、セラミック膜等が挙げられる。
本発明においては、上記膜の中でも、洗浄の容易性、耐久性が良好なことからセラミック膜を使用することが好ましい。
【００２４】
本発明の油脂のエステル交換方法では、上記の方法により回収した粉末リパーゼは次回以降のエステル交換反応に再利用する。なお、その際に必要に応じ、粉末リパーゼ、濾過助剤の追加添加や、再均質化を行なうことができる。
そして上記のエステル交換反応を繰り返すことで、長期にわたって高いエステル交換活性を保持したままの状態とすることができる。
【実施例】
【００２５】
以下、実施例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例により何等制限されるものではない。なお、例中に示す％は、特に記載がない限り質量％を意味する。
【００２６】
〔実施例１〕
パームオレインとナタネ極度硬化油の３：１混合物を、９０℃、２０Torrで３０分間、減圧脱水を行ない、原料油脂とした。この原料油脂の水分は３００ｐｐｍであった。３００ｍｌビーカーに上記原料油脂１００ｇとアルカリゲネス属由来の粉末リパーゼ（リパーゼＱＬＭ：名糖産業（株）製：平均粒径３μｍ）１０ｇを入れ、ホモミキサーで６０℃、５分間均質化処理を行ない、粉末リパーゼ分散スラリーとした。
２，０００ｍｌのセパラブルフラスコに上記原料油脂９００ｇをとり、これに上記粉末リパーゼ分散スラリー１１０ｇを投入し、撹拌羽根を用いて６０℃、３００ｒｐｍ、５分攪拌し、粉末リパーゼを十分に分散させた。ここで原料油脂中に存在する粉末リパーゼの粒径を、（株）島津製作所製レーザー式粒度分布計により測定し、ｉ）粒径の平均値、及び、ii）粒径０．１〜１．０μｍの粒子が占める割合を算出し、その結果を表１に記載した。次いで、濾過助剤として珪藻土（セライトハイフロー：セライト社製：平均粒径７μｍ）２０ｇを投入し、撹拌羽根を用いて６０℃、３００ｒｐｍ、窒素雰囲気下で回分反応を行なった。
反応生成物については、ＧＬＣでステアリルジベヘン含量を測定し、下記に示す式で反応率を求めた。
反応率＝（反応生成物のステアリルジベヘン含量−原料油脂のステアリルジベヘン含量）／（反応平衡組成物のステアリルジベヘン含量−原料油脂のステアリルジベヘン含量）
次いで、反応時間を横軸に、ｌｎ〔１／（１−反応率）〕を縦軸にプロットし、原点を通る一次近似式を設定して、１時間あたりのｌｎ〔１／（１−反応率）〕を読み取り、エステル交換活性能ａとした。
このエステル交換活性能ａと、原料油脂に対する粉末リパーゼ添加量（％）から、下記に示す式で算出した値を、エステル交換活性値とし、表１に記載した。
エステル交換活性値＝〔エステル交換活性能ａ／原料油脂に対する粉末リパーゼ添加量（％）〕×１００
反応率が０．９以上になったところで、反応を終了し、加圧密閉型濾過機（加圧ヌッチェ機・ＩＨＩ製：３６０メッシュ金網使用）を使用して粉末リパーゼを回収し、その濾液中の残存リパーゼ活性から粉末リパーゼ回収率を算出し、表１に記載した。
次いで、回収した粉末リパーゼの全量を、１，０００ｇの新たな原料油脂中に添加、分散し、２、０００ｍｌのセパラブルフラスコに再び投入し、上記同様の条件でエステル交換反応を再度行なった。
同一の操作を、エステル交換活性値が１／２となるまで繰り返し、その間に生産することができたエステル交換油の総生産量（ｋｇ）を、最初に投入した粉末リパーゼ量（ｇ）で除し、エステル交換活性値が１／２となるまでの期間における粉末リパーゼ１ｇあたりのエステル交換油の生産量を、エステル交換油脂の生産性の指標とし、表１に記載した。
【００２７】
〔実施例２〕
粉末リパーゼ回収時に、加圧密閉型濾過機（加圧ヌッチェ機・ＩＨＩ製：３６０メッシュ金網使用）で濾過し、粉末リパーゼを回収した後、濾過液をさらに膜分離装置（精密濾過膜濾過機・セラミック膜使用：細孔径０．１μｍ）で濾過した以外は、実施例１と同様にしてエステル交換反応を行なった。
なお、原料油脂中に存在する粉末リパーゼの粒径、エステル交換活性値、粉末リパーゼ回収率、エステル交換活性値が１／２となるまでの期間における粉末リパーゼ１ｇあたりのエステル交換油の生産量を実施例１と同一の方法で算出し、それぞれ結果を表１に記載した。
【００２８】
〔比較例１〕
粉末リパーゼの均質化処理を行なわず、原料油脂１，０００ｇ、粉末リパーゼ１０ｇ及び珪藻土（セライトハイフロー：セライト社製：平均粒径７μｍ）２０ｇを直接セパラブルフラスコに投入し、撹拌羽根を用いて６０℃、３００ｒｐｍ、窒素雰囲気下で回分反応を行ない、さらに粉末リパーゼ回収時に、加圧密閉型濾過機と膜分離装置の併用に代えて、遠心分離装置（３，０００ｒｐｍ、３０分）を使用した以外は、実施例２と同様にしてエステル交換反応を行なった。
なお、原料油脂中に存在する粉末リパーゼの粒径、エステル交換活性値、粉末リパーゼ回収率、エステル交換活性値が１／２となるまでの期間における粉末リパーゼ１ｇあたりのエステル交換油の生産量を実施例１と同一の方法で算出し、それぞれ結果を表１に記載した。
【００２９】
〔比較例２〕
粉末リパーゼの均質化処理を行なわず、原料油脂１，０００ｇ、粉末リパーゼ１０ｇ及び珪藻土（セライトハイフロー：セライト社製：平均粒径７μｍ）２０ｇを直接セパラブルフラスコに投入し、撹拌羽根を用いて６０℃、３００ｒｐｍ、窒素雰囲気下で回分反応を行なった以外は、実施例２と同様にしてエステル交換反応を行なった。
なお、原料油脂中に存在する粉末リパーゼの粒径、エステル交換活性値、粉末リパーゼ回収率、エステル交換活性値が１／２となるまでの期間における粉末リパーゼ１ｇあたりのエステル交換油の生産量を実施例１と同一の方法で算出し、それぞれ結果を表１に記載した。
【００３０】
〔比較例３〕
粉末リパーゼの均質化処理を行なわず、原料油脂１，０００ｇ、粉末リパーゼ１０ｇを直接セパラブルフラスコに投入し、撹拌羽根を用いて６０℃、３００ｒｐｍ、５分攪拌後、４５ｋＨｚの超音波処理を１分間行なった後、濾過助剤として珪藻土（セライトハイフロー：セライト社製：平均粒径７μｍ）２０ｇを投入し、撹拌羽根を用いて６０℃、３００ｒｐｍ、窒素雰囲気下で回分反応を行なった以外は、実施例２と同様にしてエステル交換反応を行なった。
なお、原料油脂中に存在する粉末リパーゼの粒径、エステル交換活性値、粉末リパーゼ回収率、エステル交換活性値が１／２となるまでの期間における粉末リパーゼ１ｇあたりのエステル交換油の生産量を実施例１と同一の方法で算出し、それぞれ結果を表１に記載した。
【００３１】
〔実施例３〕
均質化処理時間を３０分間とした以外は、実施例２と同様にしてエステル交換反応を行なった。
なお、原料油脂中に存在する粉末リパーゼの粒径、エステル交換活性値、粉末リパーゼ回収率、エステル交換活性値が１／２となるまでの期間における粉末リパーゼ１ｇあたりのエステル交換油の生産量を実施例１と同一の方法で算出し、それぞれ結果を表１に記載した。
【００３２】
〔実施例４〕
均質化処理時間を６０分間とした以外は、実施例２と同様にしてエステル交換反応を行なった。
なお、原料油脂中に存在する粉末リパーゼの粒径、エステル交換活性値、粉末リパーゼ回収率、エステル交換活性値が１／２となるまでの期間における粉末リパーゼ１ｇあたりのエステル交換油の生産量を実施例１と同一の方法で算出し、それぞれ結果を表１に記載した。
【００３３】
〔実施例５〕
パームオレインとパーム核ステアリンとナタネ極度硬化油の４：１：１混合物を原料油脂とし、濾過助剤として珪藻土（セライトスタンダードハイフロー：セライト社製：平均粒径７μｍ）３０ｇを用いた以外は、実施例４と同様にしてエステル交換反応を行なった。
なお、原料油脂中に存在する粉末リパーゼの粒径、エステル交換活性値、粉末リパーゼ回収率、エステル交換活性値が１／２となるまでの期間における粉末リパーゼ１ｇあたりのエステル交換油の生産量を実施例１と同一の方法で算出し、それぞれ結果を表１に記載した。
【００３４】
（実施例６）
パームスーパーオレインとパーム核油とナタネ極度硬化油の２：３：１混合物を原料油脂とし、濾過助剤として珪藻土（セライトスーパーセル：セライト社製：平均粒径７μｍ）４０ｇを用いた以外は、実施例４と同様にしてエステル交換反応を行なった。
なお、原料油脂中に存在する粉末リパーゼの粒径、エステル交換活性値、粉末リパーゼ回収率、エステル交換活性値が１／２となるまでの期間における粉末リパーゼ１ｇあたりのエステル交換油の生産量を実施例１と同一の方法で算出し、それぞれ結果を表１に記載した。
【００３５】
【表１】
2006246808.tif 000002
【００３６】
上記［表１］に示す結果から、粉末リパーゼを触媒として使用して油脂のエステル交換を行なう方法において、原料油脂中に粉末リパーゼが、ｉ）粒径の平均値が０．２〜１０μｍ（個数基準）且つii）粒径０．１〜１．０μｍの粒子が２０〜１００％（個数基準）となるように分散させることにより、エステル交換活性値を高めることができる（実施例１〜６参照）。
ここで、粉末リパーゼ回収方法として、加圧濾過器の単独使用（実施例１）に比べ、加圧濾過器と膜濾過器を併用（実施例２〜６）することで、粉末リパーゼの回収率をさらに向上させることができるため、エステル交換油脂の生産性がさらに向上する。
これに対し、粉末リパーゼを触媒として使用して油脂のエステル交換を行なう方法において、原料油脂中の粉末リパーゼの粒径が上記範囲外であると、エステル交換活性値が低く（比較例１〜３参照）、たとえ高率で粉末リパーゼを回収することができた場合においても、エステル交換油脂の生産性は低いものであった（比較例２及び３参照）。