(57)【要約】  本発明は、植物中の殺虫剤残留物の分析方法に関する。本発明の方法は、学術文献中でTOTADインターフェース(加熱炉を通した移動吸着脱着）と呼ばれる、液体クロマトグラフィーおよびガスクロマトグラフィーを直接連結するためのインターフェース装置を使用する。この方法は、クロマトグラフィー分析の前に、単に抽出工程を必要とするだけである。殺虫剤は、試料から有機溶剤により抽出される。抽出物の予備濃縮または浄化工程を必要とせずに、通常使用される量よりはるかに多い量の抽出物がガスクロマトグラフィー中に直接注入される。TOTADインターフェースにより、ガスクロマトグラフィー中に通常注入される量よりはるかに多い量の抽出物を注入することができる。
2009500638.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．試料から殺虫剤を抽出する工程、および
ｂ．前記抽出された殺虫剤をクロマトグラフィー分析する工程
を含んでなる、植物試料中の殺虫剤残留物を分析するための方法であって、
TOTAD(加熱炉を通した移動吸脱着）インターフェースを使用することを特徴とする、方法。
【請求項２】
前記抽出工程ａ）において使用する溶剤が、極性または非極性でよい、請求項１に記載の分析方法。
【請求項３】
非常に大量の抽出物を注入できる、請求項１または２に記載の分析方法。
【請求項４】
前記注入される抽出物量が５０μＬである、請求項３に記載の分析方法。
【請求項５】
前記工程ａ）において得られる前記抽出物が、さらなる分配、浄化または濃縮工程を一切必要としない、請求項１〜４のいずれか一項に記載の分析方法。
【請求項６】
前記工程ａ）において得られる前記抽出物が、ガスクロマトグラフに自動的に送られる、請求項１〜５のいずれか一項に記載の分析方法。
【請求項７】
前記分析工程ｂ）が完全に自動的に行われる、請求項１〜６のいずれか一項に記載の分析方法。
【請求項８】
前記インターフェースの内管が吸着材で充填されている、請求項１〜７のいずれか一項に記載の分析方法。
【請求項９】
前記抽出物を前記ガスクロマトグラフィーカラム中に導入する前に、溶剤が除去される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の分析方法。
【請求項１０】
単一の分析により殺虫剤の複合残留物分析が可能である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の分析方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の分野】
【０００１】
分析化学、食品技術。
【発明の背景】
【０００２】
植物栽培で病気や害虫を抑制するには、植物保護物質を使用する必要があるが、これらの物質は植物中に残留することがある。これらの殺虫剤は、とりわけ油溶性殺虫剤の場合、植物を定期的に摂取すると人体中に濃縮されることがある。したがって、残留物を抑制することができる、迅速で、敏感な、信頼性のある方法が求められている。
【０００３】
ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）は、植物中にある殺虫剤残留物を、様々な選択的な検出器で測定するのに最も頻繁に使用されている分析技術であり(L.V. Podhorniak, J,F., Negron, F.D. Griffith Jr., J. Assoc. Off Anal. Chem. Int. 2001, 84, 873-890、E. Ueno, H. Oshima, I. Saito, H. Matsumoto, J. Assoc. Off Anal. Chem. Int. 2003, 86, 1241-1251)、最近では、質量分光測定法と組み合わされている(E. Ueno, H. Oshima, I. Saito, H. Matsumoto, Y. Yoshimura, H. Nakazawa J. Assoc. Off Anal. Chem. Int. 2004, 87, 1003-1015、J.L. Martinez-Vidal, F.J. Arrebola, M. Mateu-Sanchez, J. Chromatogr. A, 2002, 959, 203-213)。ＧＣを使用するには、被分析物が高い揮発性を有する必要がある。揮発性が低いか、または熱に敏感な殺虫剤（例えばカルバメート）の測定においては、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）(C. Sanchez-Brunete, B. Albero, J.L. Tadeo, J. Food Protec. 2004, 67, 2565-2569)および液体クロマトグラフィーと質量分光測定法との組合せ（ＬＣ−ＭＳ）(D. Ortelli, P. Edder, C. Corvi, Ana. Chim. Acta, 2004, 520, 33-45、C. Jansson, T. Pihlstroem, B.G. Oesterdahl, K.E. Markides, J. Chromatogr. A, 2004, 1023, 93-104)による方法が使用されている。
【０００４】
殺虫剤残留物は、通常、アセトンにより抽出し、次いで石油エーテルおよびジクロロメタンにより分配し、得られた抽出物の濃縮を行い、種々の検出器を備えたガスクロマトグラフィー（ＧＣ−ＥＣＤ、ＧＣ−ＮＰＤおよびＧＣ−ＭＳ）により分析を行う公式な方法(AOAC Official Method 985.22)により分析される(Official Methods of Analysis, 2000 17th Ed., AOAC INTERNATIONAL, Gaithersburg, MD)。
【０００５】
マトリックスから殺虫剤を抽出するのに、アセトンとは異なる溶剤、例えばアセトニトリル(S.M. Lee, M.L. Papathakis, C.F.Hisiao-Ming, J.E. Carr, J. Anal. Chem., 1991, 339, 376-383、W. Liao, T. Joe, W.G. Cusick, J. Assoc. Off Anal. Chem. Int., 1991, 74, 554-565)または酢酸エチル(D.M. Holstege, D.L. Scharberg, E.R. Tor, L.C. Hart, F.D. Galey, J. Assoc. Off Anal. Chem. Int., 1994, 77, 1263-1274、A.R. Fernandez Alba, A. Valverde, A. Agueera, M. Contreras, J. Chromatogr. A, 1994, 686, 263-274)、が使用されている。水と部分的に混和し得る溶剤を使用するには、植物マトリックス由来の含水量を抽出物から除去するための分配工程を行う必要がある。種々の溶剤、例えば石油エーテルまたはジクロロメタン、ならびにそれらの混合物、例えば酢酸エチル−シクロヘキサン(A. Sannino, M. Bandini, L. Bonzoni, J. Assoc. Off Anal. Chem. Int. 2003, 86(1), 101-108、L.V. Podhorniak, J.F. Negron, F.D. Griffith Jr., J. Assoc. Off Anal. Chem. Int. 2001, 84(3), 873-890、W. Specht, S. Pelz, W. Gilsbach, J. Anal. Chem., 1995, 353, 183-190)またはジクロロメタン−石油エーテル(M. Gamon, C. Lieo, A. Ten, F. Mocholi, J. Assoc. Off Anal. Chem. Int. 2001, 84(4), 1209-1216)、が使用されている。クロマトグラフィー分析の前には、抽出物を浄化する必要が場合が多い。浄化工程は、フロリジル、アルミナまたはシリカゲルを使用す
る吸着クロマトグラフィー(A. Sannino, M. Bandini, L. Bonzoni, J. Assoc. Off Anal. Chem. Int. 2003, 86(1), 101-108)、ゲル透過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）(A. Sannino, M. Bandini, L. Bonzoni, J. Assoc. Off Anal. Chem. Int. 1999, 82, 1229-1238)、および固相抽出（ＳＰＥ）(L.V. Podhorniak, J.F. Negron, F.D. Griffith Jr., J. Assoc. Off Anal. Chem. Int., 2001, 84(3), 873-890)により行うことができる。
【０００６】
上記化合物群の分析には、抽出、分配および抽出物浄化工程に実質的に影響を及ぼす欠点がある。第一に、試料の調製に長時間を要し、これは、特定の場合には欠点となる。さらに、比較的大量の毒性有機溶剤を使用する必要があり、分析者に対する健康上の危険性および環境に対する有害な影響が生じることがある。さらに、使用する溶剤または材料由来の不純物が処理全体の中で混入することがあり、これらの不純物が被分析物と共に濃縮され、干渉および分析誤差を引き起こし、最終的には分析の選択性および感度に関する分析欠陥につながる。
【０００７】
大量の有機溶剤を使用することに対する幾つかの代替方法として、例えばクロマトグラフィー分析の前に浄化工程を行う必要がない、より選択性の高い抽出を行うように抽出条件を選択することができる超臨界流体抽出（ＳＦＥ）、(S.J. Lehotay, J. Chromatogr. A, 1997, 785, 289-312、A. Valverde-Garcia, A.R. Fernandez Alba, A. Agueera, M. Contreras, J. Assoc. Off Anal. Chem. Int., 1995, 78, 867-873)、マトリックス固相分散抽出(E. Viana, J.C. Molto, G. Font J. Chromatogr. A, 1996, 754,437-444、M. Anastassiades, S.J. Lehotay, D. Stajnbaher, F.J. Schenk, J. Assoc. Off Anal. Chem. Int., 2003, 86(2), 412-431)、または攪拌棒収着抽出(P. Sandra, B. Tienpont, F. David., J. Chromatogr. A, 2003, 1000, 299-309)がある。
【０００８】
欧州法 (European Council Directives 76/895 EEC, 86/363/EECおよび90/642/EEC)における最大残留物限界が益々低くなっており、使用する複合残留物方法の検出限界を改良する必要がある。大容量注入技術の使用は、これらの益々厳しくなる検出限界に到達し得るための代替方法である。ガスクロマトグラフィーで数百マイクロリットルまでの注入を可能にし、同時に、良好なクロマトグラフィー特性を維持するいくつかの技術が開発されている(F.J. Lopez, J. Beltran, M. ForcadaおよびF. Hernandez, J. Chromatogr. A, 1998, 823, 25-33)。植物中の殺虫剤の分析において、フロースプリットを備えた／備えていない従来の注入装置で１０μＬの試料が注入されている(A. Agueera, M. Contreras, J. Crespo, A.R. Fernandez-Alba, Analyst, 2002, 127(3), 347-354、A. Agueera, L. Piedra, M.D. Hernando, A.R. Fernandez Alba, M. Contreras, Analyst, 2000, 125(8), 1397-1402)。プログラム化温度蒸発装置注入器（ＰＴＶ）においても、ガラス管にカーボフリット(carbofrit)を充填することにより使用されている(M. Gamon, C. Lleo, A. Ten, F. Mocholi, J. Assoc. Off Anal. Chem. Int., 2001, 84(4), 1209-1216)。この場合、注入器の初期温度は、フロースプリットが開いている間、溶剤の沸騰温度に維持する必要がある。一定時間の後、フロースプリットを閉じ、被分析物がガスクロマトグラフカラムに通るように注入器を加熱する。この技術では、溶剤は、フロースプリットを通して蒸発するように除去され、したがって、揮発性の高い溶質は蒸発により溶剤と共に失われるので、このＰＴＶを作動させる方法は、高沸点を有する溶質を測定することにのみ推奨される。このＰＴＶによる操作方法の変形が開示されているが、そこでは、試料を導入する前にガスクロマトグラフカラムを注入器の本体から切り離し、溶剤を、蒸発による、および蒸発によらない両方の方式で、注入器の後部を通して除去する(J. Villen, F.J. Senorans, M. Herraiz, G. Reglero, J. Tabera, J. Chromatogr. Sci., 1992, 30, 261-266)。
【０００９】
TOTAD(加熱炉を通した移動吸着脱着(Through Oven Transfer Adsorption Desopption))インターフェース（スペイン特許第ＥＳ２１５２−１５３号、米国特許第６，４０２，９４７Ｂ１号）または改良された装置（スペイン特許第Ｐ２００５０１２８４号）では、広範囲に変形されたＰＴＶ注入器、および一連の開閉バルブならびに六方バルブが使用されている。これらの変形は、空気圧機構、試料の導入、溶剤の除去および操作方法に影響を及ぼしている(M. Perez, J. Alario, A. Vazquez, J. Villen, J. Microcol Sep., 1999, 11(8), 582-589)。TOTADインターフェースは、順相で操作する場合には液体クロマトグラフィーおよびガスクロマトグラフィーの両方と、逆相で操作する場合には液体クロマトグラフィーと、直接連結するのに効果的であることが立証されている。TOTADインターフェースは、大量の試料をガスクロマトグラフィーに導入することにも使用できる。TOTADインターフェースは、液体クロマトグラフィーおよびガスクロマトグラフィーと直接連結することにより、水中(M. Perez, J. Alario, A. Vazquez, J. Villen, J. Microcol Sep., 1999, 11(8), 582-589、M. Perez, J. Alario, A. Vazquez, J. Villen, Anal. Chem. 2000, 72, 846-852)およびオリーブ油中(R. Sanchez, A. Vazquez, J. Villen, J.C. Andini, J. Chromatogr. A, 2004, 1029, 167-172、R. Sanchez, A. Vazquez, D. RiquelmeおよびJ. Villen, J. Agric. Food Chem., 2003, 51, 6098-6102)の殺虫剤残留物の分析に使用され、また、大量の試料を導入することにより、水中の殺虫剤残留物の分析にも使用されている(J. Alario, M. Perez, A. Vazquez, J. Villen, J. Chromatogr. Sci., 2001, 39, 65-69)。
【発明の概要】
【００１０】
本発明の方法は、液体クロマトグラフィーおよびガスクロマトグラフィーを直接連結するためのインターフェース装置（KONIK-Tech社、Sant Cugat del Valles, Barcelonaにライセンス供与されたスペイン特許第ＥＳ２１５２−１５３号、米国特許第６，４０２，９４７Ｂ１号）、または学術文献中においてTOTADインターフェース(加熱炉を通した移動吸着脱着）と呼ばれる、ガスクロマトグラフ中に大容量注入するための改良された装置（スペイン特許第Ｐ２００５０１２８４号）を使用する。ガスクロマトグラフは、完全に自動化されたTOTADインターフェースを備えている。このTOTADインターフェースは、注入バルブに接続され、液体クロマトグラフィーポンプを使用して溶剤により押し進められる種々の量の試料を導入することができる。
【００１１】
殺虫剤は、予めすりつぶした植物試料から、少量の有機溶剤を使用して抽出する。この試料を濾過した後、得られた抽出物を、管を使用してTOTADインターフェースの六方バルブに直接接続した注入バルブ中に導入する。注入バルブに接続されたポンプにより、抽出物量は、注入バルブから、TOTADインターフェースにより、ガスクロマトグラフィーカラムに自動的に移動する。使用する溶剤は、極性でも非極性溶剤でもよい。ガスクロマトグラフへの移動流量は、変えることができる。インターフェースの内管中に配置された吸着材が殺虫剤を保持し、インターフェースの反対側の末端に接続された管または毛管を通るガス流に溶剤が取り込まれて除去される。被分析物吸着工程の際、TOTADインターフェースの両方のガス入口により制御されるガスが導入される。溶剤を除去した後、被分析物が熱的に脱着される。被分析物脱着工程の際、制御されたガス流が従来のガス入口のみを通り、プログラム化された温度を有する注入器（ＰＴＶ）中に入り、脱着された被分析物を取り込み、ガスクロマトグラフカラムに送られ、その中でガスクロマトグラフィー分析が行われる。TOTADインターフェースの一部を形成する様々な開閉バルブおよび六方バルブの開閉時間、ならびにTOTADインターフェースの両方のガス入口を通るガス流を制御することが、本分析方法の正しい操作に不可欠である。
【００１２】
この分析方法により、インターフェースを形成するバルブの開閉時間を変え、種々の量の抽出物を注入することができる。
【発明の詳細な説明】
【００１３】
本発明の分析方法の目的は、ガスクロマトグラフィーにおける通常の量よりも大きな抽出物量を注入することに基づくものであり、そのために、液体クロマトグラフィーおよびガスクロマトグラフィーを直接連結するためのインターフェース装置（KONIK-Tech社、Sant Cugat del Valles, Barcelonaにライセンス供与されたスペイン特許第ＥＳ２１５２−１５３号、米国特許第６，４０２，９４７Ｂ１号）または学術文献中でTOTADインターフェース(加熱炉を通した移動吸着脱着）と呼ばれる、改良された装置（スペイン特許第Ｐ２００５０１２８４号）を使用する。
【００１４】
この方法は、抽出工程を除き完全に自動化されている。TOTADインターフェースの開閉バルブおよび六方バルブは、コンピュータソフトウエアにより制御される電気式バルブである。
【００１５】
この方法は、２つの明白に区別される段階、すなわち試料から殺虫剤を抽出する第一段階、および前記抽出された殺虫剤をクロマトグラフィー分析する第二段階からなる。
【００１６】
＜第一段階：試料から殺虫剤を少量の有機溶剤で抽出＞
均質性を得ることができる十分な量の試料をすりつぶす。すりつぶし、均質化した試料の小アリコートを採り、そこに少量の有機溶剤を加え、様々な量の、極性が最も高い殺虫剤を抽出し易くする塩も加えることができる。この混合物を、抽出に必要な時間攪拌する。次いで、２つの水相および有機相を分離させ、有機相を集め、濾過する。
【００１７】
＜第二段階：得られた抽出物中にある殺虫剤のクロマトグラフィー分析＞
この工程では、TOTADインターフェースの内管に特定の長さの吸着材を、吸着材の移動を阻止する機器と共に充填する。吸着材は、殺虫剤を保持し、キャリヤーガスおよび通り抜ける必要がある液体を通過させるものなら、どのような材料であってもよい。
【００１８】
溶剤を押し出すポンプを注入バルブに接続し、その注入バルブは六方バルブと管により接続している。六方バルブは、末端を通じて差し込まれているキャピラリーガスクロマトグラフィーのその末端よりも長く差し込まれるように、TOTADインターフェースの内管中に挿入された別の管により接続されている。
【００１９】
分析段階では、５つの工程が区別される。
１）安定化：注入を開始する前に、注入を行う温度でTOTADインターフェースを安定化させるが、この注入温度は、インターフェースの内管に充填された吸着材に殺虫剤を保持するのに、および溶剤の除去を達成するのに好適な温度である。ガスは、インターフェースの２個のガス入口に入る管を通して循環する。インターフェースのバルブＥＶ１を閉じ、ＥＶ２を開く（ＥＶ１およびＥＶ２は、スペイン特許第ＥＳ２１５２−１５３号で使用する記号に対応する）。
２）注入：分析すべき試料の抽出物を注入バルブ中に注入する。注入バルブを作動させることにより、注入された抽出物が、ポンプにより押し出される溶剤によって、六方バルブに向かって押し出される。
３）ＧＣへの抽出物の移動：六方バルブは、その位置を自動的に変化させる。吸着材を通り抜けるガス流は、吸着材を通して抽出物を押し出す。殺虫剤が保持されるのに対し、溶剤は除去され、完全にまたは部分的に、出口管を通じて蒸発する。溶剤流は、吸着材中における殺虫剤の保持を改良するために種々の値を有することができる。
４）残留溶剤の除去：ＧＣへの抽出物移動工程が終了した後、六方バルブはその位置を自動的に変え、バルブＥＶ１が開く。同時に、TOTADインターフェースの内管中にある残存溶剤は、六方バルブをTOTADインターフェースの内管と接続する毛管中に残留する溶剤とともに、除去される。これらの条件は、残留物がガスクロマトグラフィー中で妨害しないように溶剤が除去されるのに必要な時間維持される。
５）熱的脱着：溶剤除去に必要とされる時間が経過した後、TOTADインターフェースの一部を形成する開閉電気バルブ（ＥＶ１およびＥＶ２）を閉鎖する。入口を通って入り、吸着材を通り抜けるヘリウム流も閉鎖し、必要であれば、この時点で、インターフェースの外側部分に位置する入口からのみ流入するガスが、吸着材を通り抜けてガスクロマトグラフィーカラムのみを通って離れていくように、他の入口を通る流れまたは圧力を適当な値に修正する。この時点で、注入器を、殺虫剤の熱的脱着を引き起こすのに必要な温度に急速に加熱し、殺虫剤がヘリウム流に取り込まれてクロマトグラフィーカラムに運ばれ、そこで予めプログラム化された条件でクロマトグラフィー分析が行われる。
【００２０】
本発明の方法目的には、下記の利点がある。
本発明の方法目的は、単一の分析によって複合残留物分析に使用できる。
本発明の方法目的により、抽出以外の他の予備試料処理を行わずに、植物試料中の殺虫剤残留物を分析することができる。
本発明の方法目的は、分析者の健康および環境に有害な大量の有機溶剤を使用する必要がない。
本発明の方法目的は、抽出工程において分析者には試料を取り扱うこと以外のとこが必要とされないので、取扱による誤差および汚染が減少する。
本発明の方法目的は、迅速な抽出工程および完全に自動的な分析工程を包含するので、日常管理における殺虫剤残留物の分析に特に好適である。
本発明の方法目的により、通常ガスクロマトグラフィー中に注入する量よりも多量の抽出物をクロマトグラフィー装置中に注入することができ、この量は可変であり、抽出物濃縮工程を無くすことができ、感度が増大し、検出限界が改良される。
本発明の方法目的により、TOTADインターフェースの、吸着材を充填した内管を交換せずに、何度でも使用できる。
本発明の方法目的では、攻撃性の高い溶剤が予め除去されるので、そのような溶剤の導入によるガスクロマトグラフィー機構の劣化は起こらない。
本発明の方法目的により、ガスクロマトグラフィーにおける種々の検出機構を使用することができる。
本発明の方法目的における分析の総時間は、従来の方法を使用した場合に必要とされる時間よりも大幅に短縮されている。
【発明の実施態様】
【００２１】
分析を、四元(quaternary)ポンプ(HP model 1100)、５０μＬループを備えた手動式注入バルブ(model 7125 Rehodyne, CA)および窒素−リン検出器、ならびにTOTADインターフェースを取り付けたガスクロマトグラフ(Konik model HRGC 4000B)を使用して行った。
【００２２】
TOTADインターフェースをガスクロマトグラフの左側に水平に配置する。EZchromソフトウエア(Konik, Sant Cugat del Valles, Barcelona)を使用することにより、コンピュータからインターフェースを取り扱い、ガスクロマトグラフからデータを得ることができる。
【００２３】
使用したガスクロマトグラフィーカラムは、厚さ０．２５μｍのフェニルメチルシリコーン５％を充填した、長さ３０ｍ、内径０．３２ｍｍの毛管融解石英カラムである。
【００２４】
方法の第一段階
市場で購入したトマト試料をすりつぶして均質化し、この試料２．５ｇを採り、殺虫剤の１ｍｇ／Ｌメタノール溶液１２５μＬを加えて防虫処理し、Chem. Service Inc, (West Chester PA, SA)から入手した下記の殺虫剤、すなわちジメトエート、ダイアジノン、フェニトロチオン、マラチオン、フェンチオン、クロルピリフォス、クロルフェンビンフォス、メチダチオン、テトラクロルビンフォス、のそれぞれで０．０５ｍｇ／Ｌ防虫処理したトマトの試料を得た。試料を防虫処理した後、無水硫酸ナトリウム２ｇおよび酢酸エチル５ｍＬを加えた。この混合物を１分間攪拌し、沈降させ、有機相および水相を分離した。有機相（上側相）を注射器で抜き取り、０．２２μｍフィルター(Millez-GN SLGN 013 NL)を通して濾過した。
【００２５】
方法の第二段階
TOTADインターフェースの、内径２ｍｍ、長さ１０ｃｍの内管に、動かないように両端をガラスウールで固定したTenax TA 80-100メッシュ(Chrompack, Mieddelburg, Holland)を充填した。充填した後、吸着材を移動する５００ｍＬ／分のヘリウム流で調整し、５０℃から３５０℃に５０℃／１０分で加熱し、その最終温度に６０分間保持した。
【００２６】
分析段階における５工程の際、下記の条件を使用した。
１）安定化：インターフェースを１００℃で安定化させた。ヘリウム流量は、両方の入口を通して５００ｍＬ／分であった。ガスクロマトグラフ加熱炉の温度は４０℃に維持した。
２）注入：抽出物のアリコートを、５０μＬループを有する液体クロマトグラフィー注入バルブ(Rehodyne 7125 バルブ）中に導入した。溶剤流量を０．１ｍＬ／分に維持した。使用した溶剤は酢酸エチルであった。
３）抽出物をＧＣに移動：六方バルブを切り換え、溶液を液体クロマトグラフィーポンプによりインターフェースの内管に流量０．１ｍＬ／分で送り込んだ。被分析物が吸着材中に保持され、溶剤は、ヘリウムに取り込まれて除去された。
４）残留溶剤の除去：移動工程は１分４０秒で終了した。この時点で、六方バルブを切り換え、バルブの液体クロマトグラフィーポンプにより押し出される溶剤を廃棄した。移動管中に残留する溶剤もヘリウム流により押し出して廃棄した。これらの条件を２分間維持し、TOTADインターフェースの内管および移動管の中に残留する溶剤を確実に除去した。
５）熱的脱着：インターフェースの開閉バルブを３分４０秒後に閉じた。吸着材を通り抜けるヘリウム流が中断され、他の入口を通る圧力を、カラムを通して流量１．８ｍＬ／分が循環するように変化させた。インターフェースを２７５℃に加熱した。殺虫剤が脱着され、ヘリウム流によりガスクロマトグラフカラムへ押し出された。下記のプログラムによるクロマトグラフィーが４分１０秒後に開始された。
【００２７】
クロマトグラフィー分析の条件は、下記の通りである。カラムを４０℃に１分間保持し、次いで温度を２０℃／分で１７０℃に、その後３℃／分で２１０℃に、さらに５℃／分で２３０℃に増加し、最終温度に５分間保持した。窒素−リン検出器の温度は２５０℃に維持した。注入および溶剤除去工程の際、ガスクロマトグラフ加熱炉の温度は４０℃に維持した。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】各殺虫剤のクロマトグラムを示したものである。クロマトグラムは、下記の殺虫剤、すなわちジメトエート(dimethoate)、ダイアジノン(diazinon)、フェニトロチオン(fenitrothion)、マラチオン(malathion)、フェンチオン(fenthion)、クロルピリフォス(chlorpyrifos)、クロルフェンビンフォス(chlorfenvinphos)、メチダチオン(methidathion)、テトラクロルビンフォス(tetrachlorvinphos)、のそれぞれで０．０５ｍｇ／ｋｇで防虫処理したトマト試料の分析に対応する。抽出条件ならびにクロマトグラムを得た条件は、本発明の実施態様中に示す。注入された抽出物量は、５０μＬであり、移動させた溶剤流は０．１ｍＬ／分である。ガスクロマトグラムに示す時間は、ガスクロマトグラフの分析時間にのみ対応する。ピークの同定は、１）ジメトエート２）ダイアジノン３）フェニトロチオン４）マラチオン５）フェンチオン６）クロルピリフォス７）クロルフェンビンフォス８）メチダチオンおよび９）テトラクロルビンフォスである。
【図１】
2009500638.tif 000003
【手続補正書】
【提出日】平成19年3月1日(2007.3.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．試料から殺虫剤を、非極性溶剤を使用して抽出する工程、および
ｂ．前記抽出された殺虫剤をガスクロマトグラフィーにより分析する工程
を含んでなる、植物中の殺虫剤残留物を分析するための方法であって、
前記工程ａ）において得られる前記抽出物が、前記ガスクロマトグラフィーカラム中に、TOTAD(加熱炉を通した移動吸着脱着）インターフェースを使用して注入される、方法。
【請求項２】
非常に大量の抽出物を注入できる、請求項１に記載の分析方法。
【請求項３】
前記注入される抽出物量が５０μＬである、請求項２に記載の分析方法。
【請求項４】
前記工程ａ）において得られる前記抽出物が、さらなる分配、浄化または濃縮工程を一切必要としない、請求項１〜３のいずれか一項に記載の分析方法。
【請求項５】
前記工程ａ）において得られる前記抽出物がガスクロマトグラフに自動的に送られる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の分析方法。
【請求項６】
前記分析工程ｂ）が完全に自動的に行われる、請求項１〜５のいずれか一項に記載の分析方法。
【請求項７】
前記インターフェースの内管が吸着材で充填されている、請求項１〜６のいずれか一項に記載の分析方法。
【請求項８】
前記抽出物を前記ガスクロマトグラフィーカラム中に導入する前に、溶剤が除去される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の分析方法。
【請求項９】
単一の分析により殺虫剤の複合残留物分析が可能である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の分析方法。
【国際調査報告】
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