(57)【要約】  本発明は、抗菌活性を有する陽イオン金属が付随する酸化金属を含むナノ材料に関する。特に、本発明は、式（Ｉ）のナノ結晶性化合物に関する：ＡＯＸ−（Ｌ−Ｍｅｎ＋）ｉ，（Ｉ）、ここにおいて、ＡＯＸは、Ｘ＝１または２である、酸化金属または酸化メタロイドを意味し；Ｍｅｎ＋は、ｎ＝１または２である、抗菌活性を有する金属イオンを意味し；Ｌは、有機または有機金属の何れかであり、酸化金属または酸化メタロイドおよび金属イオンＭｅｎ＋に同時に結合できる二官能性分子であり；およびｉは、ＡＯＸナノ粒子に結合するＬ−Ｍｅｎ＋基の数を意味する。【選択図】図１
2009535326.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）のナノ結晶性化合物：
ＡＯＸ−（Ｌ−Ｍｅｎ＋）ｉ，  （Ｉ）
ここにおいて、
ＡＯＸは、Ｘ＝１または２である、酸化金属または酸化メタロイドを意味し；
Ｍｅｎ＋は、ｎ＝１または２である、抗菌活性を有する金属イオンを意味し；
Ｌは、有機または有機金属の何れかであり、酸化金属または酸化メタロイドと金属イオンＭｅｎ＋とに同時に結合できる二官能性分子であり；および
ｉは、ＡＯＸナノ粒子に結合するＬ−Ｍｅｎ＋基の数を意味する。
【請求項２】
請求項１に記載のナノ結晶性化合物であって、Ｍｅｎ＋がＡｇ＋およびＣｕ＋＋から選択されるナノ結晶性化合物。
【請求項３】
請求項１または２に記載のナノ結晶性化合物であって、前記酸化金属または酸化メタロイドＡＯＸが、コロイド状シリカ、二酸化チタン、二酸化ジルコニウム、二酸化スズおよび酸化亜鉛から選択されるナノ結晶性化合物。
【請求項４】
請求項１から３の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物であって、前記Ｌが、金属中心に配位し、かつ、ホウ素（−Ｂ（ＯＨ）２）、ホスホニック（−ＰＯ３Ｈ２）、またはカルボキシル（−ＣＯＯＨ）基を有する有機リガンド、および、抗菌活性を有する金属イオンに結合可能で金属中心に配位する基を含む有機金属複合体であるナノ結晶性化合物。
【請求項５】
請求項４に記載のナノ結晶性化合物であって、抗菌活性を有する金属イオンに結合可能な前記基が、Ｃｌ−、Ｂｒ−、Ｉ−、ＣＮＳ−、ＮＨ２、ＣＮ−およびＮＣＳ−から選択されるナノ結晶性化合物。
【請求項６】
請求項４または５に記載のナノ結晶性化合物であって、金属中心に配位する前記有機リガンドが、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、ホウ素（−Ｂ（ＯＨ）２）、またはホスホニック（−ＰＯ３Ｈ２）の基で官能化されたジピリジルおよび／またはテルピリジルであるナノ結晶性化合物。
【請求項７】
請求項６に記載のナノ結晶性化合物であって、前記ジピリジルおよび／またはテルピリジル基が、好ましくはピリジン窒素に対してパラの位置で、カルボキシル基で置換され；１を超えるジピリジルおよび／またはテルピリジル基が有機金属複合体Ｌに存在する場合に、前記基の１つが任意に非置換の状態であるナノ結晶性化合物。
【請求項８】
請求項４から７の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物であって、前記有機リガンドが配位し、かつ、抗菌活性を有した金属イオンに結合可能な基が配位した前記金属が、元素の周期表において第１、第２、または第３列の遷移金属であって、記述されるタイプの安定な二官能性分子を生じ得る金属であり；前記金属が、好ましくはＣｒ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｒｕ、Ｒｈ、Ｐｄ、Ｒｅ、Ｏｓ、Ｉｒ、およびＰｔから選択されるナノ結晶性化合物。
【請求項９】
請求項４から８の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物であって、前記有機金属複合体が、八面体、四面体、長方形平面もしくは正方形平面、三方両錐形、または正方形もしくは長方形の底面を有する錐体のタイプの、および好ましくは八面体タイプの配置構造を有するナノ結晶性化合物。
【請求項１０】
請求項４から９の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物であって、前記化合物が、［（Ｈ３Ｔｃｔｅｒｐｙ）Ｍ（ＣＮ）３］ＴＢＡ、［（Ｈ３Ｔｃｔｅｒｐｙ）Ｍ（ＮＣＳ）３］ＴＢＡ、［Ｍ（Ｈ３ｔｃｔｅｒｐｙ）（ｂｐｙ）ＮＣＳ］ＴＢＡ、およびＭ（Ｈ２ｄｃｂ）２（ＮＣＳ）２から選択され、
ここにおいて、
Ｈ３Ｔｃｔｅｒｐｙは、４，４’，４’’−トリカルボキシテルピリジルを意味し、
ＴＢＡは、テトラブチルアンモニウム陽イオンを意味し、
ｂｐｙは、２，２’−ジピリジルを意味し、および
Ｈ２ｄｃｂは、２，２’−ジピリジル−４，４’−ジカルボン酸を意味する、
ナノ結晶性化合物。
【請求項１１】
請求項１から３の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物であって、前記Ｌが、酸化物ＡＯＸへの吸着に寄与しうる官能基カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、ホスホニル（−ＰＯ３Ｈ２）、またはホウ素（−Ｂ（ＯＨ）２）；および抗菌活性を有する金属イオンに結合し得る基＞Ｎ、−ＮＨ２、ＣＮ−、ＮＣＳ−、ＣＮＳ−またはＳＨを含む有機分子であるナノ結晶性化合物。
【請求項１２】
請求項１１に記載のナノ結晶性化合物であって、ここにおいて、前記リガンドＬが以下から選択されるナノ結晶性化合物：
−カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、ホウ素（−Ｂ（ＯＨ）２）、ホスホニック（−ＰＯ３Ｈ２）、メルカプタン（−ＳＨ）およびヒドロキシル（−ＯＨ）から選択される１以上の置換基で置換される、６から１８員を有する窒素含有ヘテロ環；
−カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、ホウ素（−Ｂ（ＯＨ）２）、ホスホニック（−ＰＯ３Ｈ２）、メルカプタン（−ＳＨ）およびヒドロキシル（−ＯＨ）から選択される１以上の置換基で置換される、好ましくはフェニル、ナフチルおよびビフェニルから選択される、Ｃ６からＣ１８アリール；
−１以上のメルカプタン基（−ＳＨ）および／またはヒドロキシル基（−ＯＨ）で置換されるＣ２からＣ１８のモノカルボン酸およびジカルボン酸。
【請求項１３】
請求項１２に記載のナノ結晶性化合物であって、前記リガンドＬが以下から選択されるナノ結晶性化合物：
−カルボキシル基、ホウ素基またはホスホニック基で官能化されるピリジン、ジピリジルまたはテルピリジル；
−メルカプトコハク酸、メルカプトウンデカン酸、メルカプトフェノール、メルカプトニコチン酸、５−カルボキシペンタンチオール、メルカプト酪酸、および４−メルカプトフェニルホウ酸。
【請求項１４】
請求項１から１３の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物であって、前記ナノ結晶性化合物が、４０ｎｍ未満、好ましくは３０ｎｍ未満の粒子サイズを有するナノ結晶性化合物。
【請求項１５】
請求項１４に記載のナノ結晶性化合物であって、前記ナノ結晶性化合物が１５ｎｍ未満の粒子サイズを有するナノ結晶性化合物。
【請求項１６】
陽イオン界面活性剤とともに、請求項１から１５の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物を含む組成物。
【請求項１７】
請求項１６に記載の組成物であって、前記陽イオン界面活性剤が、好ましくは四級アンモニウム化合物、ベンジルＣ１２−Ｃ１４、Ｃ１−アルキルアンモニウム塩化物または塩化ベンザルコニウムから選択されるアルキルアンモニウム塩である組成物。
【請求項１８】
請求項１６または１７に記載の組成物であって、前記組成物が透明な溶液である組成物。
【請求項１９】
請求項１から１５の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物であって、前記ナノ結晶性化合物分子の表面に、好ましくは四級アンモニウム化合物、ベンジルＣ１２−Ｃ１４、Ｃ１−アルキルアンモニウム塩化物または塩化ベンザルコニウムから選択される、アルキルアンモニウム塩が吸着されているナノ結晶性化合物。
【請求項２０】
医薬的にまたは美容学的に（ｃｏｓｍｅｔｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ）許容可能な賦形剤とともに、請求項１から１５または１９の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物を少なくとも１つ含む皮膚科学的組成物。
【請求項２１】
請求項２０に記載の皮膚科学的組成物であって、前記組成物がゲルまたはクリームの形体である皮膚科学的組成物。
【請求項２２】
請求項２１に記載の皮膚科学的組成物であって、前記組成物が親水性ゲルの形体である場合、前記賦形剤が、グリセリン、アミドプロピレングリコール、ケイ酸マグネシウム、およびケイ酸アルミニウムから選択され；および、前記組成物が親水性クリームの形体である場合、前記賦形剤が、例えばワセリン、流動パラフィン、ステアリルアルコール、ポリエチレングリコールステアレート、カルボキシポリメチレン、およびエデト酸ナトリウムを含む界面活性剤および乳化剤から選択される皮膚科学的組成物。
【請求項２３】
抗菌活性および／または抗ウイルス活性を有する医薬の製造のための、請求項１から１５または１９の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物の使用。
【請求項２４】
抗菌剤および／または抗ウイルス剤としての、請求項１から１５または１９の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物の非医学的使用。
【請求項２５】
建物内装、家具の要素、ガラス表面および手術室のためのコーティングとしての、並びに、空気または水の浄化のためのフィルターのための、請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
請求項１から１５または１９の何れか１項に記載のナノ結晶性化合物の再生のための方法であって、前記ナノ結晶性化合物を、銀（Ｉ）塩の溶液または銅（ＩＩ）塩の溶液に接触させる工程を含む方法。
【請求項２７】
医薬的にまたは美容学的に許容可能な賦形剤とともに、式ＡＯＸのナノ結晶性化合物を少なくとも１つ含む皮膚科学的組成物であって、ＡＯＸがＸ＝１または２である酸化金属または酸化メタロイドを意味する皮膚科学的組成物。
【請求項２８】
請求項２７に記載の皮膚科学的組成物であって、前記酸化金属または酸化メタロイドＡＯＸが、コロイド状シリカ、二酸化チタン、二酸化ジルコニウム、二酸化スズ、および酸化亜鉛から選択される皮膚科学的組成物。
【請求項２９】
請求項２７または２８に記載の皮膚科学的組成物であって、前記組成物がゲルまたはクリームの形体である皮膚科学的組成物。
【請求項３０】
請求項２９に記載の皮膚科学的組成物であって、前記組成物が親水性ゲルの形体である場合、前記賦形剤が、グリセリン、アミドプロピレングリコール、ケイ酸マグネシウム、およびケイ酸アルミニウムから選択され；および、前記組成物が親水性クリームの形体である場合、前記賦形剤が、例えばワセリン、流動パラフィン、ステアリルアルコール、ポリエチレングリコールステアレート、カルボキシポリメチレン、およびエデト酸ナトリウムを含む界面活性剤および乳化剤から選択される皮膚科学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌活性を有する陽イオン金属が結合する酸化金属を含むナノ材料に関する。
【背景技術】
【０００２】
特定の金属イオンの抗菌活性が知られており、これは、「微量作用効果（ｏｌｉｇｏｄｙｎａｍｉｃ  ｅｆｆｅｃｔ）」とも呼ばれている。
【０００３】
最も大きい抗菌活性を有する金属イオンは、効力が減少する順番に並べて、以下の金属イオンである：：
Ｈｇ＞Ａｇ＞Ｃｕ＞Ｚｎ＞Ｆｅ＞Ｐｂ＞Ｂｉ。
【０００４】
プラスチック、セラミックおよび繊維またはカーボンに基づく材料における、そのような金属（特に銀イオン）の取り込みは、細菌コロニーの成長の消失または低下を可能とする。この効果は、ヒト生物とのＡｇ＋の適合性、および多くの細菌における抗生物質に対する抵抗性の増大という観点から特に利点がある。従って、銀を含む材料の使用は、細菌の増殖を避けるまたは制限することに役立つ。
【０００５】
銀の作用の機構に関して、抗菌活性は、一価の陽イオン、Ａｇ＋により発揮されることが知られている。銀との混合物における白金の存在は、ガルバニック効果によりＡｇからＡｇ＋への酸化を促進することが明らかになっている；このことは、白金および銀から成るフィルムの抗菌活性において、相応の増強をもたらす。さらに、重篤なやけどにおける感染を予防するために使用される、例えばスルファジアジン銀といった銀に基づく医薬は、Ａｇ＋イオンの徐放とともに機能し、当該イオンは、細胞壁に存在する細菌性タンパク質のシステインのＳＨ基と関係することで、細菌細胞に可逆的に吸収され得る。Ａｇ＋の細胞毒性作用は、必須イオン(例えばカルシウム（Ｃａ２＋）および亜鉛（Ｚｎ２＋）)を細胞から排除するというこのイオンの能力にも関係する。先行する研究（Ｃａｒｒ，  Ｈ．Ｓ．，  Ｗｌｏｄｋｏｗｓｋｉ，  Ｔ．Ｊ．，  ａｎｄ  Ｒｏｓｅｎｋｒａｎｚ，  Ｈ．Ｓ．，  １９７３，  “Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ”，  ｖｏｌ．  ４，  ｐ．  ５８５）では、Ａｇ＋イオンの抗菌活性は、その濃度に直接的に比例し、および非常に多くの細菌の種に対して有効であることが示されている。農業における抗菌剤として知られる銅イオン（Ｃｕ２＋）についても同様なことが考えられる。
【０００６】
現在の技術に関して、酸化金属（ＭＯＸ）（例えば、二酸化チタン、酸化亜鉛、酸化スズ（ＳｎＯ２）、二酸化ジルコニウム、およびコロイド状シリカ）に基づく、高い表面積を有するナノ結晶材料の製造が知られており、当該酸化金属は、様々な基体に沈着しおよび安定に接着できる。銀イオンを含む二酸化チタンに基づくナノ材料もまた知られており、それは、ナノ材料の懸濁物とＡｇ＋イオンを含む溶液とを混合することで得られる。酸化金属のナノ結晶構造へのＡｇ＋イオンの接着は、ナノ結晶中へのイオンの挿入が関与する可能性が大いにある。
【０００７】
効果的な抗菌作用を示す均質なフィルムを製造するために、しかしながら、ナノ材料の表面にわたって均一な様式で伝播し、かつ、高濃度の銀イオンの均一な蓄積を可能とする相互作用の使用が必要である。
【０００８】
この問題は本発明によって解決され、さらに、様々な材料に、および周囲の空気の浄化に使用されるフィルターに蓄積できるフィルムを製造することができる。
【発明の概要】
【０００９】
本発明は、酸化金属または酸化メタロイド（例えば、ＴｉＯ２、ＺｒＯ２、ＳｎＯ２、ＺｎＯおよびＳｉＯ２）に基づき、酸化物と遷移金属のイオン（例えば、Ａｇ＋またはＣｕ２＋）とに同時に結合でき有機または有機金属の性質を示す分子種で官能化された、新規の抗菌および抗ウイルスナノ粒子の製剤に関する。
【００１０】
例示の目的として、これらの新規材料の成分単位は、式（Ｉ）によって例示されてよい：
ＡＯＸ−（Ｌ−Ｍｅｎ＋）ｉ，  （Ｉ）
ここにおいて、
ＡＯＸは、Ｘ＝１または２である、酸化金属または酸化メタロイドを意味し；
Ｍｅｎ＋は、ｎ＝１または２である、抗菌活性を有する金属イオン、好ましくはＡｇ＋またはＣｕ＋＋を意味し；
Ｌは、有機または有機金属の何れかであり、酸化金属または酸化メタロイドと金属イオンＭｅｎ＋とに同時に結合できる二官能性（ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）分子であり；および
ｉは、ＡＯＸナノ粒子に結合するＬ−Ｍｅｎ＋基の数を意味する。
【００１１】
本発明における使用のための酸化金属または酸化メタロイドＡＯＸは、例えば、コロイド状シリカ、二酸化チタン、酸化ジルコニウム、酸化スズおよび酸化亜鉛である。これらは、それ自身で、または適切な開始剤の適用とともに、非常に多くの材料（木材、プラスチック、ガラス、金属、セラミックス、セメント、ならびに内部および外部建築表面を含む）に接着できる、遮断材料または半導体材料であり、および、ナノメーターのオーダーでナノ粒子の寸法（ｄｉｍｅｎｓｉｏｎｓ）で製造することができる。これらのナノ粒子は、例えば、適切な官能基を有する分子に対して、エステル結合を介した静電気的または化学的相互作用によって吸着が可能であり、当該官能基とは、例えば、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）（またはカルボキシレート）、ホスホン酸（−ＰＯ３Ｈ２）（またはホスホネート）、またはホウ素（−Ｂ（ＯＨ）２）（またはボロネート）であり、このような基が、二官能性分子Ｌに提供されてよい。リガンドＬおよび金属イオンＭｅｎ＋（例えば銀または銅のイオン）の小さな寸法（ピコメーターのオーダーであってよい）の観点から、図１の例によって模式的に例証されるように、酸化金属のそれぞれのナノ粒子はＡｇ＋またはＣｕ２＋といった金属イオンによって均一に覆うことができるという結果となる。
【００１２】
結果として、陽性に帯電したナノ粒子から成るこれらのナノ材料は、水溶液中または有機の性質の極性溶媒中の何れかにおいて、安定で透明な懸濁物を生じさせることができる。
【００１３】
別の顕著な側面は、本発明によるナノ材料の懸濁物とアルキルアンモニウム塩といった陽イオン性界面活性剤とを混合する可能性と結び付けられる。このように、本発明によるナノ粒子の殺菌活性は、アルキルアンモニウム塩の存在により増強することができる。確かに、この種の界面活性剤は、抗菌的に活性を有する金属イオンの抗菌活性を補うことができる抗菌活性を示す。驚くべきことに、我々は、塩基性培地中において、または高濃度の陰イオンの存在下において沈殿する傾向のある、例えば塩化ベンザルコニウムといったアルキルアンモニウム塩が、本発明による陽性に帯電したナノ粒子から形成される懸濁物の存在下で安定であることを発見した。
【００１４】
下記のとおり、実験的証拠は、更に、塩化ベンザルコニウムといった陽イオン界面活性剤が、中性に近いｐＨ条件下で、二酸化チタンに基づくナノ粒子への吸着を起こしうることを示す。これらが表面に適用された後、これは、アルキルアンモニウム塩の揮発性を減少させる更なる利点を与える。
【００１５】
銀および銅イオンを含む材料の広範囲な抗菌作用のために、建物内装、バスルーム、キッチン、一般に家具および取り付け品の要素、ガラス表面（例えば、ガラスドアおよび窓）、および手術室のためのコーティングとしての、および様々な環境おける空気の浄化に使用されるフィルターのためのコーティングとしての、ならびに水フィルターのためのコーティングとしてのそのような材料の使用は、疑いなく、実質的に重要な適用の分野を意味する。セラミック、ガラス、またはセルロース材料から成り、および銀イオンまたは銅イオンを含むフィルターの製造、ならびに空調設備（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ  ｐｌａｎｔｓ）または強制空気再循環装置（ｆｏｒｃｅｄ  ａｉｒ  ｒｅｃｙｃｌｉｎｇ  ａｐｐａｒａｔｕｓｅｓ）における導入は、多くの疾病の予防を可能にする。
【００１６】
そのようなフィルターの設計は、フィルターをコーティングする材料が空気の高い流速を可能にすること、および殺菌活性が短い接触時間の条件下で達成できることが要求される。
【００１７】
２０００年４月のＵＮＩ−ＥＮ１２７６および２００１年１２月のＵＮＩ−ＥＮ１３６９７の基準にて提供されるように、本発明によるナノ材料は、１０３のオーダーの表面領域増大の係数で表面領域におけるかなりの増大を引き起こし、および５分というオーダーの接触時間において殺菌作用を現実化する能力があるという点で、本発明のナノ材料によってこの問題は解決される。
【００１８】
本発明によるナノ材料でコーティングされるフィルターはまた、Ａｇ＋またはＣｕ２＋といった金属イオンに基づくアルコール溶液に浸漬することで、最初の抗菌の有効性を容易に回復することができる。
【発明の詳細な説明】
【００１９】
本発明の特徴によると、ＡＯＸを含むナノ結晶基体は、ナノ結晶基体に有機分子を結合させることができる官能基ならびに例えばＡｇ＋およびＣｕ２＋イオンといった抗菌活性を有する金属イオンに結合できる官能基を含む有機分子を含む二官能性リガンドＬで修飾して製造される。
【００２０】
本発明の第２の特徴によると、ＡＯＸを含むナノ結晶基体は、遷移金属の複合体といった有機金属分子を含む二官能性リガンドＬで修飾して製造され、前記分子は、前記複合体をナノ結晶性基体に結合させることが出来る官能基、並びに例えばＡｇ＋およびＣｕ２＋イオンといった抗菌活性を有する金属イオンに結合できる官能基を含む。
【００２１】
これらのナノ結晶性化合物は式（Ｉ）によって表され：
ＡＯＸ−（Ｌ−Ｍｅｎ＋）ｉ，  （Ｉ）
ここにおいて、
ＡＯＸは、Ｘ＝１または２である、酸化金属または酸化メタロイドを意味し；
Ｍｅｎ＋は、ｎ＝１または２である、抗菌活性を有する金属イオン、好ましくはＡｇ＋またはＣｕ＋＋を意味し；
Ｌは、有機または有機金属の何れかであり、酸化金属または酸化メタロイドと金属イオンＭｅｎ＋とに同時に結合できる二官能性分子であり；および
ｉは、ＡＯＸナノ粒子に結合するＬ−Ｍｅｎ＋基の数を意味する。
【００２２】
パラメーターｉの値は、様々な要因に依存し、例えば、ＡＯＸのナノ粒子のサイズ、リガンドＬの性質、およびそれを作製するために使用する方法に依存する。本発明の状況において、ｉは、ナノ粒子ＡＯＸが結合できるリガンドＬの数であって、１０分から７２時間の範囲、好ましくは３から７２時間の範囲の間、前記ナノ粒子がリガンドＬの溶液に接触される場合における前記数に相当する。
【００２３】
本発明によるナノ材料は、４０ｎｍ未満、好ましくは３０ｎｍ未満、より好ましくは１５ｎｍ未満の粒子サイズを有する。１５ｎｍ未満の粒子サイズは、一般に、相対的に広い適用範囲を有する透明な懸濁物をもたらす。
【００２４】
本発明によって使用してよい酸化金属または酸化メタロイドＡＯＸは、例えば、コロイド状シリカ、二酸化チタン、二酸化ジルコニウム、二酸化スズ、および酸化亜鉛である。
【００２５】
本発明の一般的特徴によると、記載されるナノ材料の抗菌および抗ウイルス活性は、光の照射がない場合でさえ認められる。
【００２６】
本発明の更なる特徴によると、本発明によるナノ結晶性材料、またはＡＯＸ酸化物のみを含むナノ結晶性材料は、ＡＯＸのナノ粒子の表面に吸着され得る、または長い間安定な混合物（当該混合物は記載されるナノ材料の懸濁物を含む）をもたらし得る、抗菌活性を有した陽イオン界面活性剤と混合される。
【００２７】
本発明の更に別の特徴によると、抗菌性金属イオン（Ａｇ＋またはＣｕ２＋）の欠乏の場合には、特定の金属イオンを含むアルコール溶液に基体を単に浸漬させることによって、最初の値まで、基体の最初の抗菌活性を回復させることができる。
【００２８】
本発明による別の特徴によると、細菌により仲介される皮膚科学的障害、例えばにきびおよび褥瘡の治療のための皮膚科学的組成物が提供される。
【００２９】
[遷移金属の複合体に基づく二官能性リガンドＬ]
記述される目的のために使用してよい遷移金属複合体は、以下の官能基の１つを有する、金属中心に配位する有機リガンドを含んでいなければならない：ホウ素（−Ｂ（ＯＨ）２）、ホスホニル（−ＰＯ３Ｈ２）、またはカルボキシル（−ＣＯＯＨ）。これらの官能基は、複合体をナノ結晶基体ＡＯＸに結合させるのに役立つ。金属中心に配位するその他の基は、抗菌活性を有する金属イオンに結合する能力がある。これらの基の例は、Ｃｌ−、Ｂｒ−、Ｉ−、ＣＮＳ−、ＮＨ２、ＣＮ−およびＮＣＳ−の種のリガンドである。
【００３０】
本発明による有機金属複合体Ｌは、好ましくは、金属中心（Ｍ）に配位し且つＡＯＸを含むナノ材料に結合できる以下の基：ホウ素（−Ｂ（ＯＨ）２）、ホスホニル（−ＰＯ３Ｈ２）、またはカルボキシル（−ＣＯＯＨ）にて官能化される、ジピリジルおよび／またはテルピリジルの種の有機リガンドを含み；および更に、前記金属中心（Ｍ）に配位し且つＡｇ＋またはＣｕ２＋イオンに結合できる以下の基：Ｃｌ−、Ｂｒ−、Ｉ−、ＣＮＳ−、ＮＨ２、ＣＮ−またはＮＣＳ−で官能化される。好ましくは、前記ジピリジルまたはテルピリジル基は、カルボキシル基で置換され、より好ましくはピリジン窒素に対してパラの位置で置換される。１より多いジピリジン基またはテルピリジン基が前記有機金属複合体Ｌに存在する場合、任意にこれらの基の１つは置換されなくてよい。
【００３１】
八面体配置の配位を有する、または、四面体配置、長方形平面もしくは正方形平面配置、三方両錐形配置、または正方形または長方形の底面を有する錐体配置に相当するその他の型の配位を有する、Ｌに存在する金属イオン（Ｍ）に関して、候補は、元素の周期表において第１、第２、または第３列の遷移金属であって、記載されるタイプの安定な二官能性分子を生じ得る金属の何れかである。
【００３２】
より好ましくは、記載される有機金属複合体Ｌは、八面体型の配位を有する。好ましくは、これらの複合体によって配位される遷移金属は、以下から選択される：Ｃｒ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｒｕ、Ｒｈ、Ｐｄ、Ｒｅ、Ｏｓ、Ｉｒ、およびＰｔ。
【００３３】
本発明による有機金属複合体Ｌは、あるいは、負の電荷を有し、陽イオンと、好ましくは有機陽イオン（例えばテトラアルキルアンモニウム陽イオン）と塩を形成してよい。そのような陽イオンは、有機溶媒中におけるこれらの種の可溶化を可能にし、このことは、酸化金属または酸化メタロイドに基づくナノ材料の吸着の工程に寄与する。
【００３４】
従って、これらの分子は、ＡＯＸナノ粒子の均一に吸着された層をもたらし得る二官能性リガンドとしての役割を果たすことができ、同時に、抗菌活性を有する金属イオンに結合できる。
【００３５】
八面体配位を有するそのような複合体の例は、下記に示される。
【化１】
2009535326.tif 000003
【００３６】
ＴＢＡ基は、有機溶媒中での複合体の可溶化を可能とするその他のアルキルアンモニウム陽イオンによって置換されてよい。
【化２】
2009535326.tif 000004
【００３７】
[有機化合物に基づく二官能性リガンドＬ]
本発明の状況において使用できる有機型の二官能性リガンドＬは、ＡＯＸナノ粒子との相互作用を生じさせることができる基を含む分子種を含み、更に抗菌活性を有するイオンに結合できる官能基を含む。そのような分子種の例は、酸化物ＡＯＸの表面への吸収に寄与できる官能基カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、ホスホニック（−ＰＯ３Ｈ２）、およびホウ素（−Ｂ（ＯＨ）２）；およびＡｇ＋またはＣｕ２＋といった抗菌活性を有する金属イオンに結合できる官能基＞Ｎ、＞ＮＨ２、−ＣＮ、−ＮＣＳ、または−ＳＨを含む有機分子を含む。
【００３８】
これらの有機リガンドは好ましくは以下から選択される：
−カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、ホウ素（−Ｂ（ＯＨ）２）、ホスホニック（−ＰＯ３Ｈ２）、メルカプタン（−ＳＨ）およびヒドロキシル（−ＯＨ）から選択される１以上の置換基で置換される、６から１８員を有する窒素含有ヘテロ環、好ましくはピリジン、ジピリジル、またはテルピリジル；
−カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、ホウ素（−Ｂ（ＯＨ）２）、ホスホニック（−ＰＯ３Ｈ２）、メルカプタン（−ＳＨ）およびヒドロキシル（−ＯＨ）から選択される１以上の置換基で置換される、好ましくはフェニル、ナフチルおよびビフェニルから選択される、Ｃ６からＣ１８アリール；
−１以上のメルカプタン基（−ＳＨ）および／またはヒドロキシル基（−ＯＨ）で置換されるＣ２からＣ１８のモノカルボン酸およびジカルボン酸。
【００３９】
より好ましくは、これらの二官能性有機リガンドの例は、以下を含む：
−カルボキシル基、ホウ素基またはホスホニック基で官能化されるピリジン、ジピリジルまたはテルピリジル；メルカプトコハク酸、メルカプトウンデカン酸、メルカプトフェノール、メルカプトニコチン酸、５−カルボキシペンタンチオール、メルカプト酪酸、および４−メルカプトフェニルホウ酸。
【００４０】
[実験的方法]
本発明の開発に使用したナノ材料であるＡＯＸを含むナノ材料の製造に関する実験的方法、前記ナノ材料の特性、および前記ナノ材料の抗菌特性は、ここに記述されるだろう。
【００４１】
二酸化チタンおよび二酸化ジルコニウムに基づくナノ材料の透明懸濁物の製造：
二酸化チタンに基づくナノ材料は、水または有機溶媒中で透明または不透明な懸濁物を生じさせるようなナノ粒子の寸法で製造することができる。１５ナノメーター未満の寸法のナノ粒子から成るＴｉＯ２の懸濁物は通常透明であり、表面に適用したとき、その色を変えない。市販の二酸化チタン製品（例えば“Ｂｉｏｓｓｉｄｏ  ｄｉ  Ｔｉｔａｎｉｏ  Ｐ２５”（Ｄｅｇｕｓｓａより供給される））は、白く不透明な懸濁を生じさせる。というのは、ＴｉＯ２ナノ粒子の平均直径が２５から３０ｎｍであるためである。不透明なナノ材料または透明なナノ材料の何れも、本発明の目的に使用してよい。しかしながら、透明なナノ材料は、それらが適用可能な範囲がより広いため、より大きな関心がある。コロイド状シリカまたは二酸化スズに基づく透明なコロイド状懸濁物は商業的に利用可能である。
【００４２】
二酸化チタンおよび二酸化ジルコニウムに基づく懸濁物を製造する方法が以下に記載されるだろう。記述される試薬の量は、本発明の新規性および範囲から離れることなく変更してよい。
【００４３】
（Ａ）ＴｉＯ２に基づく透明懸濁物
ビーカーに、３００ｍＬの蒸留水および２．１ｍＬの強酸、例えば濃硝酸（６５％ｗ／ｗ）を充填した。１０分間にわたり、滴下漏斗を用いて、撹拌しながら５０ｍＬのチタニウムイソプロポキシド（ｔｉｔａｎｉｕｍ  ｉｓｏｐｒｏｐｏｘｉｄｅ）（Ｆｌｕｋａから供給される）を添加した。すぐに、乳白色のＴｉＯ２の沈殿が形成された。その後、混合物を、撹拌および一定の温度を維持しながら、８０℃で８から１２時間加熱した。加熱の間、沈殿は再び溶解し、混合物は乳白色の外観を呈した。加熱の段階の間、最終的な体積が１００から２００ｍＬになるようにコロイド状懸濁物を濃縮させた。これは、ＴｉＯ２濃度で１５０−７５ｇ／Ｌに相当する。本方法の最後で得られる二酸化チタンのナノ粒子は６から１５ｎｍの範囲の直径を有していた。１００ｍＬに濃縮した懸濁物を、次に、蒸留水およびエタノールの添加によって希釈し、最終的な透明な溶液（ｐＨは約２）を得た。当該溶液は、１リッターの体積中、ＴｉＯ２を１．５％で含み、およびアルコールの濃度は１０から５０％の範囲、好ましくは２５％であった。
【００４４】
（Ｂ）ＺｒＯ２に基づく透明懸濁物：
ビーカーに、３００ｍＬの蒸留水および２．１ｍＬの強酸、例えば濃硝酸（６５％）を充填した。約１０分間にわたり、滴下漏斗を用いて、撹拌しながら７６ｍＬのジルコニウムテトライソプロポキシド（ｚｉｒｃｏｎｉｕｍ  ｔｅｔｒａｉｓｏｐｒｏｐｏｘｉｄｅ）（イソプロパノール中７０％）を添加した。
【００４５】
すぐに、乳白色のＺｒＯ２の沈殿が形成された。その後、混合物を、撹拌および一定の温度を維持しながら、９０℃で８から１２時間加熱した。加熱の間、沈殿は再び溶解し、混合物は乳白色の外観の懸濁物が生じた。これを１４０−２８０ｍＬまで濃縮させた。これはＺｒＯ２の濃度で１５０−７５ｇ／Ｌに相当する。１４０ｍＬに濃縮した懸濁物を、蒸留水およびエタノールで希釈し、１．４Ｌの乳白色の懸濁物（ｐＨは約２）を得た。これは、ＺｒＯ２を１．５％の濃度で含み、およびアルコールの濃度は１０から５０％の範囲、好ましくは２５％であった。
【００４６】
（Ｃ）ＴｉＯ２に基づく不透明な懸濁物：
二酸化チタンに基づく中性の水性不透明懸濁物は、「Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ  １００」（Ｆｌｕｋａから供給）の水溶液に二酸化チタンＰ２５を添加することで得ることができる。
【００４７】
二酸化チタンに基づく中性水性乳白色懸濁物はまた、文献にて報告される方法の修飾により、ペルオキシチタン酸から製造してよい（Ｉｃｈｉｎｏｓｅ，  Ｈ．，  Ｔｅｒａｓａｋｉ，  Ｍ．，  ａｎｄ  Ｋａｔｓｕｋｉ，  Ｈ．，  １９９６  Ｊ．  Ｃｅｒａｍｉｃ  Ｓｏｃ．  Ｊａｐａｎ，  １０４，  ７１５）。
【００４８】
典型的な製法において、２０％ＨＣｌにＴｉＣｌ４を含む溶液１５０ｍＬを１Ｌビーカーに充填し、ＮＨ４ＯＨを蒸留水で１：９に希釈したもの８２６ｍＬをこの溶液に添加する。得られる溶液のｐＨは中性（ｐＨ＝７）であり、チタン酸Ｔｉ（ＯＨ）４が沈殿する。この沈殿は白色であり、ゲルの密度（ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｃｙ）を有する。この沈殿は、空隙率Ｇ３のフィルターで回収し、７５−１０００ｍＬの蒸留水で洗浄する（ろ液をＡｇＮＯ３で処理して、塩化物の完全な除去が達成されたことが示されるまで）。塩化物が残っている場合、チーズ上のＡｇＣｌの沈殿が認められる。チタン酸Ｔｉ（ＯＨ）４を含む沈殿を回収し、１．５μＳ未満の伝導率を有し、５−７の間隔のｐＨを有する２００ｍＬの蒸留水に懸濁する；ここに、２０−３０分間にわたり、９２ｍＬの３０％Ｈ２Ｏ２をゆっくりと添加する。沈殿の溶解が認められ、一般式が以下のペルオキシチタン酸を含む黄色溶液の形成が認められる：
[Ｔｉ２（Ｏ）５（ＯＨ）Ｘ]（Ｘ−２）−、
ここにおいて、Ｘは３−６の範囲にある。
【００４９】
最終的に、溶液を７０℃で１時間加熱し、過剰のＨ２Ｏ２を分解し、その後１２０℃で８時間オートクレーブする。本方法のこの段階において、ペルオキシチタン酸は、主にアナターゼの同素形体で、二酸化チタンに分解する。生成されるナノ粒子の懸濁物は中性に近いｐＨおよび不透明の外観を有し、長い期間安定的である。
【００５０】
抗菌活性および抗ウイルス活性を有するナノ材料の懸濁物の製造：
ナノ材料の懸濁物における殺菌活性および抗ウイルス活性を確認するために、第１段階の吸着が行われ（ここにおいて、二官能性リガンドＬが吸着される）、続いて、Ａｇ＋またはＣｕ２＋イオンを含む水またはアルコール溶液と混合する。抗菌活性を有する陽イオン界面活性剤として作用するアンモニウム塩は、その後、Ａｇ＋またはＣｕ２＋イオンで官能化されたナノ材料の懸濁物に添加してよく、または、本発明による主題であるナノ材料に独立に添加してよく若しくは吸着させてよい；これらの調製は上記してある。
【００５１】
一般に、本発明に記載されるナノ材料ＡＯＸへの二官能性リガンドＬの吸着は、１２−３６時間のオーダーの時間を必要とし、一方、Ａｇ＋またはＣｕ２＋イオンのリガンドＬへの結合は、これらのイオンを含む溶液をリガンドＬに官能化されるナノ材料の懸濁物に添加することによって、ほとんど即座に安定化する。以下に記載されるように蓄積する実験的証拠は、アルキルアンモニウム塩といった陽イオン界面活性剤は、その上、ナノ材料の表面に部分的に吸着されてよいことを示した。
【００５２】
下記の沈殿方法は、二官能性リガンドとの、Ａｇ＋イオンとのおよび陽イオン界面活性剤とのナノ材料の懸濁物を提供するための調製方法を詳細に示す。類似した調製方法は、Ｃｕ２＋イオンとのそのような懸濁物を提供するために使用してよい。記述される試薬の量は、本発明の範囲内にて変更してよい。
【００５３】
（Ｄ）「ＴｉＯ２Ｐ２５」（Ｄｅｇｕｓｓａから供給される）への４−メルカプトフェニルホウ酸およびＡｇ＋イオンの吸着：
５０ｍＬのエタノールに溶解した２ｘ１０−５モルの４−メルカプトフェニルホウ酸を含む溶液に、１ｇのＴｉＯ２  Ｐ２５（Ｄｅｇｕｓｓａから供給される）を添加した。懸濁物を２４時間撹拌した。４−メルカプトフェニルホウ酸は、フェノール環におけるπ−π＊遷移に起因しうる、２２５ｎｍで吸収バンドを有する。この電気的吸収バンドは、時間の関数として、ナノ材料表面へのホウ酸の吸着のモニターを可能にする。吸着は、半導体の表面との、ホウ酸官能基との相互作用により生じることが既知である。図２における電気的吸収スペクトルは、「ＴｉＯ２Ｐ２５」の表面に吸着された４−メルカプトフェニルホウ酸の量が、２４時間において最初の濃度の３５％に達することを示す。
【００５４】
溶液を４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して透明な溶液を取得し、固体を２０ｍＬのエタノールで洗浄し、その後撹拌しながら５０ｍＬのエタノールで再懸濁した。この懸濁液に、７．２ｘ１０−６モルの可溶性銀塩、好ましくは乳酸銀または酢酸銀を添加した。得られる懸濁物は、白色で、無臭で、およびある期間安定であった。
【００５５】
（Ｅ）方法（Ａ）によるＴｉＯ２の透明懸濁物への、およびＮＭ  Ｔｅｃｈ社の製品への、４−メルカプトフェニルホウ酸およびＡｇ＋イオンの吸着：
方法（Ａ）によって製造されおよび１５％ＴｉＯ２を含む二酸化チタンの透明な溶液１００ｍＬを、１００ｍＬの蒸留水および０．０５２ｇの４−メルカプトフェニルホウ酸をエタノールに溶解させた溶液２００ｍＬで希釈した。懸濁物は２４時間撹拌し、その期間の最後に、分光光度測定によって、ホウ酸が半導体ナノ粒子に完全に吸収されたことが明らかとなった。「ＴｉＯ２Ｐ２５」に関してナノ粒子の小さな寸法、および懸濁される物質の結果的な大きい表面積は、二官能性リガンドの完全な吸着が原因となる。透明な無臭の懸濁物に、化学量論的量（Ｌに関して）の銀の塩、例えば乳酸銀（０．０６ｇ）または酢酸銀（０．０５ｇ）を撹拌しながら添加した。１時間の連続的な撹拌の後、１０−２０ｍＬ、好ましくは１２ｍＬの、５０％（ｗ／ｖ）の塩化ベンザルコニウム水溶液を添加し、懸濁物を更に１時間撹拌した。濃縮した懸濁物を、次に、蒸留水およびエタノールで希釈し、１Ｌの乳白色の懸濁物（ｐＨは約２）を得た。この懸濁物は、１．５％の濃度でＴｉＯ２を含み、１０−５０％の範囲、好ましくは２５％のエタノールであった。
【００５６】
透明な懸濁物は、いつまでも安定的であるようであった。これ以降、この生成物は、簡略化の目的で、「バクテルクリン（Ｂａｃｔｅｒｃｌｉｎｅ）」と命名する。
【００５７】
同じ方法が、ＮＭ  Ｔｅｃｈ社から市販され「ＰＳＯ４１９」と名付けられるナノ材料の透明な懸濁物の改変のために使用してよく、これによって、二官能性リガンドおよび銀イオンの量は、生成物の二酸化チタンの量に基づいて調整される。例えば、方法（Ａ）により製造された生成物に類似し、２％のＴｉＯ２およびｐＨ約２という内容を有する生成物「ＰＳＯ−４１９  Ｄ２」は、上記した方法に類似した方法を用いて、抗菌および抗ウイルス性生物に変換することができる。
【００５８】
特に、２％のＴｉＯ２を含む５０ｍＬの「ＰＳＯ−４１９Ｄ２」溶液を、２．２ｍｇの４−メルカプトフェニルホウ酸（２．０５ｘ１０−５Ｍ）で希釈し、懸濁物を２４時間撹拌する。得られる無臭の溶液に、２．０５ｘ１０−５Ｍの乳酸銀または酢酸銀を添加する。最終的に、１時間の連続的な撹拌の後、８−２０ｍＬの、好ましくは１２ｍＬのジメチルベンジルドデシルアンモニウム塩化物の水溶液（５０％ｗ／ｖ）を添加し、懸濁物を更に１時間撹拌する。得られた透明懸濁物はいつまでも安定である。
【００５９】
ＴｉＯ２に基づく、「ＡＴ−０１」および「ＡＴ−０３」といった、ＮＭ  Ｔｅｃｈ社により市販されるその他の不透明な製品は、本発明による方法による記載される方法に従って処理することができ、抗菌活性および抗ウイルス活性を有する安定な懸濁物または粉末が得られることに留意すべきである。例えば：１．７％のＴｉＯ２を含む「ＡＴ−０１」の５０ｍｌの溶液のサンプルは、３．８ｍｇの溶解された４−メルカプトフェニルホウ酸（１．９ｘ１０−５Ｍ）を含む５０ｍＬのエタノールで希釈され、懸濁物は２４時間撹拌され、無臭の生成物が得られる。次に、１．９ｘ１０−５Ｍの乳酸銀または酢酸銀が添加される。得られる懸濁物は、一定期間後、微細な沈殿を生じた。
【００６０】
（Ｆ）二酸化チタンへの陽イオン界面活性剤の吸着：
抗菌活性を有する陽イオン界面活性剤は一般に、ＴｉＯ２、ＺｒＯ２、ＳｎＯ２、ＺｎＯおよびＳｉＯ２に基づくナノ材料に吸着可能である。吸着は、負に帯電したまたは中性のナノ粒子に対して、ほとんど即座に生じる。塩基性ｐＨのナノ材料の懸濁物の場合、ベンザルコニウム型塩（例えば、ベンジルドデシルジメチルアンモニウム塩化物またはベンジルヘキサデシルジメチルアンモニウム塩化物またはベンザルコニウム塩化物）の添加は懸濁物の沈殿をもたらす；一方、中性または酸性ｐＨを有するナノ材料の懸濁物の場合、懸濁物は安定的である。
【００６１】
中性ｐＨにおけるＴｉＯ２に基づくナノ材料におけるベンザルコニウム塩化物の吸着の間接的試験は、電導度分析測定法を利用する。ＴｉＯ２に対するベンジルジアルキルアンモニウム陽イオンの吸着による関連は、下記の実験にて検証されるとおり、予想通り電導度の低下がもたらされるべきである。
【００６２】
１：１０に希釈したベンザルコニウム塩化物の５０％（ｗ／ｖ）溶液は４．７ｍＳの電導度を有する。この溶液の体積が蒸留水の添加によって１０から１５ｍＬに増大する場合、電導度は３．９０ｍＳに減少する。代わりに、方法（Ｃ）に従ってペルオキシチタン酸から作製した二酸化チタンの中性懸濁物５ｍＬ、または中性ｐＨにおける同等な「ＡＴ−０３」製品を添加することで、溶液を希釈する場合、測定される電導度は３．６０ｍＳである。電導度における３００μＳの減少は、二酸化チタン表面に対する陽イオン界面活性剤の吸着に起因する。
【００６３】
（Ｇ）「ＴｉＯ２Ｐ２５」（Ｄｅｇｕｓｓａにより供給される）への、２，２’−ジピリジル−４−カルボキシ−４’−カルボン酸、Ａｇ＋、およびＣｕ２＋の吸着：
２−２’−ジピリジル−４−カルボキシ−４’−カルボキシレート陰イオン酸（「Ｈｄｃｂ」と省略）は、１当量のテトラブチルアンモニウム水酸化物（ＴＢＡＯＨと省略）を、２，２’−ジピリジル−４，４’ジカルボン酸（Ｈ２ｄｃｂ）に添加することで製造でき、ほとんど溶解せず、固体の形体である。モノカルボキシレート形体（「モノプロトン化形体」とも呼ぶ）における、およびテトラブチルアンモニウム形体（「ＴＢＡ（Ｈｄｃｂ）」と省略）としてのリガンドは、従って、メタノールまたはエタノールに溶解でき、二酸化チタンに吸着できる。
【００６４】
１ｘ１０−４モルのＴＢＡ（Ｈｄｃｂ）を含んだ１００ｍＬのエタノールの溶液に、５ｇの「ＴｉＯ２Ｐ２５」（Ｄｅｇｕｓｓａから提供される）を添加した。懸濁物を２４時間撹拌した。リガンドＴＢＡ（Ｈｄｃｂ）は、π−π＊遷移のために、２９４ｎｍにて吸収バンドを有しており、このことは、時間の関数として、ナノ材料へのその吸着のモニターを可能にする。
【００６５】
図３のスペクトルは、２４時間後、リガンドはナノ結晶性基体の表面に完全に吸着されたことを示している。吸着は、カルボキシル官能基と半導体の表面との相互作用により生じることが既知である。
【００６６】
懸濁物を次に４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、固体を５０ｍＬのメタノールで洗浄した。リガンドで官能化された、得られたナノ材料（ＴｉＯ２／ＴＢＡ（Ｈｄｃｂ））は、その後、最終的に外界温度にて減圧乾燥した。
【００６７】
それぞれ２ｇのＴｉＯ２／ＴＢＡ（Ｈｄｃｂ）の２つの部分を１００ｍＬのエタノールに再懸濁した。１つの懸濁物に対し、撹拌しながら８ｍｇの乳酸銀を添加し；もう一方の懸濁物に対し、７ｍｇのＣｕＣｌ２を添加した。２つの懸濁物は異なる安定性を有していた：銅イオンで官能化された懸濁物、ＴｉＯ２／ＴＢＡ［Ｈｄｃｂ］／Ｃｕ２＋は安定のままであり、一方、銀イオンで官能化されたもの、ＴｉＯ２／ＴＢＡ［Ｈｄｃｂ］／Ａｇ＋は徐々に沈殿した。
【００６８】
（Ｈ）ＴｉＯ２の中性懸濁物に対する有機金属リガンド（Ｌ）およびＡｇ＋イオンの吸着：
上述のような二官能性有機金属リガンドＬは、約１０−３−１０−４Ｍの濃度の二官能性リガンドのアルコール溶液にナノ材料を懸濁させて、方法（Ｃ）により製造された二酸化チタンの中性懸濁物に固定することができる。懸濁物は１２時間撹拌し、その間に、有機金属リガンドＬはナノ材料の表面に完全に吸着された。
【００６９】
アルコール溶液中における、リガンドＬに関する化学量論的量の銀の添加は、複合体（Ｈ２ｄｃｂ）２Ｒｕ（ＮＣＳ）２（Ｈ２ｄｃｂ＝２，２’−ジピリジル−４，４’−ジカルボン酸）の場合として図４に模式的に示されるとおり、銀イオンＡｇ＋が無機リガンドに固定されるという付加物の形成に相当する。カルボキシル官能基の存在は、５０℃で２−３時間、および外界温度で１２時間のオーダーの時間において、複合体の吸着、およびナノ結晶材料の均一な被覆を可能とする。続く段階において、銀の塩、例えば、硝酸銀、乳酸銀、または酢酸銀が、メタノール溶液に対して、（Ｈ２ｄｃｂ）２Ｒｕ（ＮＣＳ）２のモルに関して、２：１の化学量論的割合で添加される。２つのＮＣＳ基の存在は、図４に示されるように、Ａｇ＋イオンが即座に結合することを可能にする。
【００７０】
本発明による特定の実施態様によると、式（Ｉ）によるナノ結晶性材料は、例えばにきびまたは褥瘡といった細菌性の皮膚科学的疾病の治療のための皮膚科学的組成物に含めてよい。
【００７１】
幾つかのそのような組成物の調製は、例示の目的のために、以下に記載される。
【００７２】
ゲルおよびクリームの製法：
本発明による、二酸化チタンに基づくナノ材料の懸濁物は、皮膚科学的使用のための親水性ゲルおよびクリームの調製における活性成分として使用できる。親水性ゲルの調製は、活性成分と賦形剤およびゼリー状化剤（例えば、グリセリン、アミドプロピレングリコール、ケイ酸マグネシウム、およびケイ酸アルミニウム）との混合を含む。親水性クリームの調製は、医薬的に有効な量の活性成分と、界面活性剤および乳化剤（例えば、ワセリン、流動パラフィン、ステアリルアルコール、ポリエチレングリコールステアレート、カルボキシポリメチレン、およびエデト酸ナトリウム）との混合を含む。当然、そのような使用が認められる何れの賦形剤も（当該賦形剤は当業者に周知である）、本発明による皮膚科学的組成物の調製に使用してよい。
【００７３】
官能化ナノ材料の抗菌活性および抗ウイルス活性：
方法（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｆ）、（Ｇ）および（Ｈ）によって得られる官能化ナノ材料は、全て、エシェリキア・コリに対して抗菌活性を有していた。試験は、様々なナノ材料を含んだフィルムを、１０４ｃｆｕ（コロニー形成単位）より大きいコロニー数と接触させてペトリカプセルに置くことによって導入される。全ての場合において、コロニーの完全な死亡が観察された。
【００７４】
方法（Ｅ）によって合成した生成物（バクテルクリンと名付けた生成物）について（当該生成物は透明であり、従って広い範囲の応用に利用できる）、２０００年４月のＵＮＩ−ＥＮ１２７６および２００１年１２月のＵＮＩ−ＥＮ１３６９７の基準により徹底的な測定が行われた。
【００７５】
懸濁物における殺菌活性の評価：
希釈および中和の方法（２０００年４月のＵＮＩ−ＥＮ１２７６）：
微生物：
以下の株を試験に使用した：
シュードモナス・アエルギノサ
スタフィロコッカス・アウレウス
スタフィロコッカス・エピデルミディス
エンテロコッカス・ファエカリス
エシェリキア・コリ
サルモネラ
リステリア。
【００７６】
試験した全ての細菌株は、フェララ大学実験および診断医薬学部微生物学課から提供された。
【００７７】
試験したバクテルクリン生成物は８０％に希釈した。
【００７８】
２０℃において、それぞれの細菌株に対して、５分の一定時間後に、少なくとも１０５ユニットの生存性の減少が生じた場合に、試験した物質に殺菌性があるとみなした。
【００７９】
得られた結果から、全ての場合において、１０５ユニットを越える生存性が得られたことが示される。
【００８０】
結論：
得られた結果および試験の有効性の基準に基づいて、試験した「バクテルクリン」物質は、２０００年４月のＵＮＩ−ＥＮ１２７６基準の方法によって、終濃度０．３％でのウシアルブミン存在下での５分間の接触の後に、濃度８０％（最大の試験可能な濃度であることが判明）で使用した場合、シュードモナス・アエルギノサ、エシェリキア・コリ、エンテロコッカス・ファエカリス、スタフィロコッカス・エピデルミディス、スタフィロコッカス・アウレウス、サルモネラ、およびリステリアに対して殺菌性を有する。
【００８１】
殺菌活性の評価：
表面試験（２００１年１２月のＵＮＩ−ＥＮ１３６９７の基準）：
微生物：
上記のように、懸濁物の試験のために使用した株に加えて、この場合、試験はレジオネラ・ニューモフィラに拡張した。
【００８２】
試験に使用した株のリストは従って、以下の通りである：
シュードモナス・アエルギノサ
スタフィロコッカス・アウレウス
スタフィロコッカス・エピデルミディス
エンテロコッカス・ファエカリス
エシェリキア・コリ
サルモネラ
リステリア
レジオネラ・ニューモフィリア。
【００８３】
それぞれの細菌株に対して、２０℃において、５分という一定時間の後、少なくとも１０４ユニットの生存性の減少が起こった場合に、試験した物質が、ヨーロッパ基準（Ｅｕｒｏｐｉａｎ  Ｓｔａｎｄａｒｄ）により提供される細菌株に対して殺菌性があるとみなした。
【００８４】
以下の表にて報告されるように、得られた結果は、全ての場合において、抗菌活性の常用対数（ｄｅｃｉｍａｌ  ｌｏｇａｒｉｔｈｍ）が４より大きいことを示した。
【表Ａ】
2009535326.tif 000005
結論：
得られた結果および試験の有効性の基準に基づいて、一定の試験条件の下で試験した「バクテルクリン」物質は、２００１年１２月のＵＮＩ−ＥＮ１３６９７基準の方法によって、終濃度０．３％でのウシアルブミン存在下での５分間の接触の後に、濃度１００％で使用した場合、シュードモナス・アエルギノサ、エシェリキア・コリ、エンテロコッカス・ファエカリス、スタフィロコッカス・エピデルミディス、スタフィロコッカス・アウレウス、サルモネラ、リステリアおよびレジオネラ・ニューモフィリアに対して殺菌性を有する。
【００８５】
希釈および中和の懸濁方法における殺真菌効果の評価（２０００年１０月のＵＮＩ−ＥＮ１６５０基準）：
微生物：
以下の株を試験に使用した：
カンジダ・アルビカンス
アスペルギルス・ニガー。
【００８６】
試験した株は、フェララ大学実験および診断医薬学部微生物学課から提供された。
【００８７】
それぞれの糸状菌株に対して、２０℃において、１５分間の一定時間の後、少なくとも１０４ユニットの生存性の減少が起こった場合に、試験した物質に殺真菌性があるとみなした。
【００８８】
結果
様々な濃度の「バクテルクリン」についての生存性における減少は以下に示される。
【表Ｂ】
2009535326.tif 000006
結果
得られた結果および試験の有効性の基準に基づいて、試験した「バクテルクリン」物質は、２０００年１０月のＵＮＩ−ＥＮ１６５０基準の方法によって、終濃度０．３％でのウシアルブミン存在下での１５分間の接触の後に、カンジダ・アルビカンスには２５％、５０％および８０％の濃度で、アスペルギルス・ニガーには５０％および８０％の濃度（最大の試験可能な濃度であることが判明）で殺真菌性を有する。
【００８９】
殺真菌活性の評価：
表面試験（２００１年１２月のＵＮＩ−ＥＮ１３６９７基準）：
微生物
以下の株を試験に使用した：
カンジダ・アルビカンス
アスペルギルス・ニガー。
【００９０】
試験した株は、フェララ大学実験および診断医薬学部微生物学課から提供された。
【００９１】
ヨーロッパ基準に従って提供される微生物に対する抗菌活性の対数が、２０℃における１５分間の接触に対して、３以上である場合に、試験した物質が殺真菌性であるとみなした。
【００９２】
結果
減少の対数は以下の表に示される。
【表Ｃ】
2009535326.tif 000007
結論
得られた結果および試験の有効性の基準に基づいて、試験条件の下で試験した「バクテルクリン」物質は、２００１年１２月のＵＮＩ−ＥＮ１３６９７基準の方法によって、終濃度０．３％でのウシアルブミン存在下での１５分間の接触の後に、濃度１００％で使用した場合、カンジダ・アルビカンスおよびアスペルギルス・ニガーに対して殺真菌性を有する。
【００９３】
殺ウイルス活性：
下記の実験から、生成物バクテルクリンは、非常に低い濃度で、ＨＳＶ−１ウイルス（単純ヘルペスウイルス−１）に対して高い殺ウイルス活性を有することが示された。
【００９４】
実験方法
様々な量のウイルス懸濁物を、１％のウシ胎児血清（ＢＦＳ）を添加した改変ダルベッコ培地（Ｄ−ＭＥＭ）にて作製した。１ｘ１０６細胞溶解プラーク形成単位（Ｐｆｕ）のウイルス濃度（ウイルスタイター）を使用した。異なる量のバクテルクリンを、１および５時間の予備処理時間とともに、異なるサンプルに添加した。未処理のウイルス懸濁物をコントロールとして維持した。外界温度でのインキュベーションの期間の後、ウイルスのタイターを決定するため、全てのサンプルを既知の体積に希釈した。コントロールのウイルスタイターおよびバクテルクリンで処理したサンプルのウイルスタイターを下記の方法で決定した。
【００９５】
ウイルスタイターの決定において、１ｍＬの溶液中における感染の数が算出される。使用される１つの方法は、十分に希釈されたウイルス懸濁物により製造され、１層の細胞に接触して位置する細菌溶解プラークの数の決定から成る。この一連の実験において、アフリカモンキー（Ａｆｒｉｃａｎ  Ｍｏｎｋｅｙ）の腎細胞を使用した（Ｖｅｒｏ）。１０％ＢＦＳ、１％Ｌ−グルタミン、および１％ペニシリン／ストレプトマイシンを添加した「Ｄ−ＭＥＭ」中において、５％のＣＯ２下で、３７℃にて細胞を培養した。タイターの決定は１２ウェルを有するプレート上で行った。培養がほぼコンフルエントの状態になったとき、ウイルスストックを２％のＢＦＳを含む培地において、既知の濃度に希釈した。それぞれの希釈のために、プレート上の２ウェルに播種した。３７℃で１時間のインキュベーションの後、菌種を引き上げ、１％ＢＦＳおよび２％ヒトガンマ−グロブリン（二次プラークの形成阻害の機能を有する）を含む培地を添加することによって感染をブロックした。
【００９６】
播種したカルチャーを３７℃で２日間インキュベートし、溶解プラークが見えるまでモニターした。このときに、細胞を固定し、メチルバイオレットで染色した。光学顕微鏡下で、ウェルに存在するプラークを数え、この計測数を希釈係数で乗算し、Ｐｆｕ／ｍＬの単位でウイルスタイターを得た。
【００９７】
結果、および考察
バクテルクリン生成物の殺ウイルス活性
１０および５０マイクロリッターの量におけるバクテルクリン生成物を、１ｘ１０６Ｐｆｕのウイルスタイターを有するＨＳＶ−１に接触させた。インキュベーションを、１％のＢＦＳを添加した１ｍＬのＤ−ＭＥＭ培地にて行った。２つの異なるインキュベーション時間を使用した：１時間および５時間。所定のインキュベーション期間の後、ウイルスを１ｘ１０３および１ｘ１０２の濃度に希釈し、ほぼコンフルエントなカルチャーに播種した。下方の表１に示されるように、バクテルクリンで予め処理したウイルスを播種した細胞は、何れの予備処理時間もおよび何れのウイルス希釈でも、溶解プラークを有さなかった。
【００９８】
表１：１μｌ／ｍＬのバクテルクリンでのＨＳＶ−１  １ｘ１０６の予備処理後における、コントロールとの比較における、Ｐｆｕの数および細胞溶解プラークの形成の阻害のパーセント。値は、１ｘ１０３および１ｘ１０２Ｐｆｕの希釈で算出した。
【表１】
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【００９９】
上記表１に記載されるコントロールのＨＳＶ−１ウイルスのタイターは、細胞溶解プラークの平均数に希釈係数（１０３）を乗じて算出した。表１から分かるように、処理したサンプルは、コントロールと比較して、細胞溶解プラーク形成において１００％の減少を経験した。
【０１００】
予備処理時間およびウイルスの希釈の両者において、存在するウイルス粒子のほとんど完全な減少があった。生成物は、存在する約３００，０００ウイルス粒子（コントロール）から１０００未満のタイターに、ウイルスタイターを減少させた。従って、１時間の接触において、１％に希釈したバクテルクリン（１０マイクロリッター／ｍＬ）は、ウイルス粒子のほとんど完全な死亡を引き起こした。
【０１０１】
結論
このバクテルクリン生成物の抗ウイルス活性の研究は、当該生成物が、生成物を極端に希釈した場合であっても、１時間の接触時間において、ＨＳＶ−１ウイルスとの直接の接触に対して抗ウイルス活性を有することを示している。
【０１０２】
実行した実験は、１：１００のオーダーの生成物の希釈レベルにおいて、ウイルス粒子のほとんど完全な死亡を達成できることを実証した。
【０１０３】
本発明による組成物は、抗菌活性および／または抗ウイルス活性の達成が望まれるあらゆる適用に用いてよく、例えば、保健医療環境（診療所、病院など）、特に床、壁、机、手術台などの表面の処理に適用してよい。本発明による組成物が有利な活性を示すその他の適用は、様々な環境、特に公共の場所および／または保健医療の場所、またはほぼ完全に無菌の空気が望ましいその他の環境、例えば医薬製造工場および食品加工工場における空気の処理である。これらの適用において、本発明による組成物は、大きなまたは小さな寸法の空間の処理のための、様々なタイプの換気システムに使用されるコーティングフィルターに使用してよい。
【０１０４】
本発明の更なる実施態様によると、細菌感染の治療のための、式（Ｉ）のナノ結晶性材料とともにまたはその代わりに、例として２００５年９月１日出願のイタリア特許出願番号ＩＳ２００５Ａ２に記載されるような、銀または銀の誘導体および／または銅または銅（ＩＩ）の誘導体との組み合わせにおけるＴｉＯ２の光学触媒作用懸濁物を含む、皮膚科学的組成物が提供される。
【図面の簡単な説明】
【０１０５】
【図１】図１は、本発明によるナノ粒子の構造を模式的に示す図である。
【図２】図２は、ＴｉＯ２への４−メルカプトフェニルホウ酸の吸着の程度を示す電気的吸収スペクトルを示す図である。
【図３】図３は、ＴｉＯ２へのＴＢＡ（Ｈｄｃｂ）の吸着の程度を示す電気的吸収スペクトルを示す図である。
【図４】図４は、本発明の特定の実施態様の模式図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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