(57)【要約】【化１】2009530345.tif 000052  本発明は、式（Ｉ）（ここでｎ、ｍ、ｐ、ｔ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｑ、Ｙ及びＺは定義された意味をもつ）の化合物、ｐ５３−ＭＤＭ２相互作用のインヒビターとしてのそれらの使用並びに前記式（Ｉ）の化合物を含んでなる製薬学的組成物を提供する。
2009530345.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2009530345.tif 000043
の化合物、そのＮ−オキシド形態、付加塩又は立体化学的異性体形態であって、
式中、
ｍは０、１又は２であり、そしてｍが０である時は直接結合が意図され、
ｎは０、１、２又は３であり、そしてｎが０である時は直接結合が意図され、
ｐは０又は１であり、そしてｐが０である時は直接結合が意図され、
ｔは０又は１であり、そしてｔが０である時は直接結合が意図され、
【化２】
2009530345.tif 000044
は−ＣＲ８＝Ｃ＜であり、そしてそこで点線は１結合、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ＜、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ＜、−ＣＨＲ８−ＣＨ＜又−ＣＨＲ８−Ｎ＜であり、ここで
Ｒ８はそれぞれ、独立して、水素又はＣ１−６アルキルである、
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ、独立して、水素、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールＣ１−６アルキルオキシ、ヘテロアリールＣ１−６アルキルオキシ、フェニルチオ、ヒドロキシＣ１−６アルキルカルボニル、アミノ、アリール及びヘテロアリールから選択される置換基で置換されたＣ１−６アルキル又は、アミノ、アリール及びヘテロアリールから選択される置換基で置換されたＣ３−７シクロアルキルから選択され、
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ、独立して、水素、ハロ、Ｃ１−６アルキル、ポリハロＣ１−６アルキル、シアノ、シアノＣ１−６アルキル、ヒドロキシ、アミノ又はＣ１−６アルキルオキシから選択されるか、あるいは
Ｒ４及びＲ５が一緒になって、場合により、メチレンジオキシ又はエチレンジオキシから選択される２価の基を形成してもよく、
Ｒ５は水素、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル又はＣ１−６アルキルであり、
Ｒ６及びＲ７はそれぞれ、独立して、水素、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル又はＣ１−６アルキルから選択されるか、あるいは、
Ｒ６及びＲ７が一緒になって、場合により、
−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−          （ｂ−１）、
−（ＣＨ２）２−ＮＲ９−（ＣＨ２）２−      （ｂ−２）
から選択される２価の基を形成してもよく、ここで
Ｒ９は水素、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル又はＣ１−６アルキルである、
Ｚは
【化３】
2009530345.tif 000045
から選択される基であり、ここで
Ｒ１０及びＲ１１はそれぞれ、独立して、水素、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル，ニトロ、ポリハロＣ１−６アルキル、シアノ、シアノＣ１−６アルキル、テトラゾロＣ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリールＣ１−６アルキル、アリール（ヒドロキシ）Ｃ１−６アルキル、ヘテロアリール（ヒドロキシ）Ｃ１−６アルキル、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、アリールＣ１−６アルキルカルボニル、ヘテロアリールＣ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルキルオキシ、Ｃ３−７シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−７シクロアルキル（ヒドロキシ）Ｃ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニルＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニルＣ２−６アルケニル、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、ヒドロキシＣ１−６アルキル、アミノＣ１−６アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニルＣ１−６アルキル及び−（ＣＨ２）ｖ−（Ｃ（＝Ｏ）ｒ）−（ＣＨＲ１７）ｕ−ＮＲ１３Ｒ１４から選択され、ここで
ｖは０、１、２、３、４、５又は６であり、そしてｖが０である時は直接結合が意図され、
ｒは０又は１であり、そしてｒが０である時は直接結合が意図され、
ｕは０、１、２、３、４、５又は６であり、そしてｕが０である時は直接結合が意図され、
Ｒ１７は水素又はＣ１−６アルキルであり、
Ｒ１２は水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル；ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキルオキシ及びアリールから選択される置換基で置換されたＣ１−６アルキル又は、ヒドロキシ、アミノ、アリール及びＣ１−６アルキルオキシから選択される置換基で置換されたＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ１３及びＲ１４はそれぞれ、独立して、水素、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ１−６アルキ
ルカルボニル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、アリールＣ１−６アルキルカルボニル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキルカルボニル、−（ＣＨ２）ｋ−ＮＲ１５Ｒ１６；ヒドロキシ、ヒドロキシカルボニル、シアノ、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリール又はヘテロアリールから選択される置換基で置換されたＣ１−１２アルキルあるいは、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリール、アミノ、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール又はヘテロアリールＣ１−６アルキルから選択される置換基で置換されたＣ３−７シクロアルキルから選択されるか、あるいは、
Ｒ１３及びＲ１４が、それらが結合されている窒素と一緒になって、場合により、モルホリニル、ピペリジニル、ピロリジニル、ピペラジニル又は、Ｃ１−６アルキル，アリールＣ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルキルオキシカルボニル、ヘテロアリールＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル及びＣ３−７シクロアルキルＣ１−６アルキルから選択される置換基で置換されたピペラジニルを形成してもよく、ここで
ｋは０、１、２、３、４、５又は６であり、そしてｋが０である時は、直接結合が意図される、
Ｒ１５及びＲ１６はそれぞれ、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−７シクロアルキル；ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリール及びヘテロアリールから選択される置換基で置換されたＣ１−１２アルキル並びにヒドロキシ、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールＣ１−６アルキルから選択される置換基で置換されたＣ３−７シクロアルキルから選択されるかあるいは、
Ｒ１５及びＲ１６が、それらが結合されている窒素と一緒になって、場合により、モルホリニル、ピペラジニル又は、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニルで置換されたピペラジニルを形成してもよく、
アリールはフェニル又はナフタレニルであり、
フェニル又はナフタレニルはそれぞれ、場合により、それぞれ、独立して、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、アミノ、ポリハロＣ１−６アルキル及びＣ１−６アルキルオキシから選択される１、２又は３個の置換基で置換されてもよく、そして
フェニル又はナフタレニルはそれぞれ、場合により、メチレンジオキシ及びエチレンジオキシから選択される２価の基で置換されてもよく、
ヘテロアリールはピリジニル、インドリル、キノリニル、イミダゾリル、フラニル、チエニル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、ベンゾフラニル又はテトラヒドロフラニルであり、
ピリジニル、インドリル、キノリニル、イミダゾリル、フラニル、チエニル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、ベンゾフラニル又はテトラヒドロフラニルはそれぞれ、場合により、独立して、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、アミノ、ポリハロＣ１−６アルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル又はＣ１−６アルキルオキシから選択される１、２又は３個の置換基で置換されてもよく、そして
ピリジニル、インドリル、キノリニル、イミダゾリル、フラニル、チエニル、ベンゾフラニル又はテトラヒドロフラニルはそれぞれ、場合により、メチレンジオキシ又はエチレンジオキシから選択される２価の基で置換されてもよい。
【請求項２】
式中のｍが０であり、ｎが０であり、ｐが１であり、ｔが０であり、Ｒ１及びＲ２がそれぞれ独立して水素であり、Ｒ３及びＲ４がそれぞれ独立して水素であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ６及びＲ７がそれぞれ独立して水素又はＣ１−６アルキルであり、Ｚが（ａ−１）、（ａ−２）又は（ａ−４）から選択される基であり、あるいはＲ１０及びＲ１１がそれぞれ独立して水素、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル又はヒドロキシＣ１−６アルキルから選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
式中のｍが０であり、ｎが０であり、ｐが１であり、ｔが０であり、Ｒ１及びＲ２がそ
れぞれ独立して水素であり、Ｒ３及びＲ４がそれぞれ独立して水素であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ６及びＲ７がそれぞれ独立して水素であり、Ｚが（ａ−２）又は（ａ−４）から選択される基であり、あるいはＲ１０及びＲ１１がそれぞれ独立して水素、ヒドロキシ又はヒドロキシＣ１−６アルキルから選択される、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】
化合物が、化合物Ｎｏ．１、化合物Ｎｏ．４又は化合物Ｎｏ．５である、請求項１、２又は３記載の化合物。
【表１】
2009530345.tif 000046
【請求項５】
医薬としての使用のための請求項１、２、３又は４記載の化合物。
【請求項６】
製薬学的に許容されうる担体及び、有効成分として治療的有効量の請求項１〜４に請求される化合物を含んでなる製薬学的組成物。
【請求項７】
製薬学的に許容されうる担体及び請求項１〜４に請求される化合物が密接に混合される、請求項６に請求される製薬学的組成物を調製する方法。
【請求項８】
ｐ５３−ＭＤＭ２相互作用により仲介される障害の処置のための医薬の製剤のための、請求項１、２、３又は４記載の化合物の使用。
【請求項９】
抗ガン剤及び請求項１、２、３又は４記載の化合物の組み合わせ物。
【請求項１０】
ａ）式（ＩＩ）の中間体を、式（ＩＩＩ）（ここでＷは例えばハロのような適当な離脱基である）の中間体と反応させる方法、
【化４】
2009530345.tif 000047
ｂ）適当な溶媒中でリチウムアルミニウム水素化物の存在下で、式（ＩＶ）の中間体を、そのｐが１であり、本明細書中で式（Ｉ−ａ）の化合物と呼ばれる式（Ｉ）の化合物に転化させる方法、
【化５】
2009530345.tif 000048
ｃ）適当な溶媒中で、適当な試薬の存在下で、式（ＶＩ）の適当なカルボキシアルデヒドを式（Ｖ）の中間体と反応させる方法、又は
【化６】
2009530345.tif 000049
ｄ）式（ＩＩ）の中間体を、式（ＶＩＩ）の適当なカルボキシアルデヒドと反応させて、そのｔが１であり、本明細書で式（Ｉ−ｂ）の化合物と呼ばれる式（Ｉ）の化合物を形成する方法、
【化７】
2009530345.tif 000050
【化８】
2009530345.tif 000051
を特徴とする、請求項１に請求の化合物を調製する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は，ＭＤＭ２及びｐ５３間の相互作用のインヒビターとして働く化合物及び該化合物を含有する組成物を対象とする。更に、本発明は．開示されたインヒビター、それらを含んでなる組成物の調製法並びに例えば医薬としてのそれらを使用する方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
Ｐ５３は、細胞増殖及び細胞増殖停止／アポトーシス間の平衡の制御において中心的役割を果たす腫瘍抑制タンパク質である。正常な条件下では、ｐ５３の半減期は非常に短く、その結果、細胞中のｐ５３の濃度は低い。しかし、細胞のＤＮＡ損傷又は細胞のストレス（例えば、腫瘍遺伝子の活性化、テロメアの侵食、低酸素症）に反応して、ｐ５３のレベルは増加する。ｐ５３レベルのこの増加が多数の遺伝子の転写の活性化をもたらし、それが増殖停止又はアポトーシスの過程へのいずれかに細胞を導く。従って、ｐ５３の重要な機能は、損傷細胞の制御されない増殖を抑制し、それにより癌発生から生物を保護することである。
【０００３】
ＭＤＭ２はｐ５３機能の重要な抑制的制御物質である。それは、ｐ５３のアミノ末端転写促進ドメインに結合することにより抑制的自動制御ループを形成し、それによりＭＤＭ２がｐ５３の転写活性化能を妨げ、そしてタンパク質分解的分解のためにｐ５３を標的にする。正常な条件下では、この制御ループはｐ５３の低いレベルを維持するために寄与する。しかし野生型ｐ５３をもつ腫瘍においては、活性ｐ５３の平衡濃度が、ＭＤＭ２とｐ５３間の相互作用に拮抗することにより、増加され得る。これは、このような腫瘍細胞においてｐ５３を仲介するアポトーシス促進効果及び抗増殖効果の回復をもたらすであろう。
【０００４】
ＭＤＭ２は細胞のプロト癌遺伝子である。ＭＤＭ２の過剰発現は様々な癌において認められている。ＭＤＭ２は遺伝子増殖又は増加した転写又は翻訳のために種々の腫瘍において過剰発現される。ＭＤＭ２増殖が腫瘍形成を促進する機序は、少なくとも一部はｐ５３とのその相互作用に関連する。細胞の過剰発現ＭＤＭ２においてはｐ５３の保護機能が妨げられ、従って、細胞が、ｐ５３レベルを増加することによりＤＮＡ損傷又は細胞ストレスに反応することができず、細胞増殖停止及び／又はアポトーシスに導く。従って、ＤＮＡ損傷及び／又は細胞ストレス後に、細胞の過剰発現ＭＤＭ２は自由の増殖し続け、腫瘍発生表現型を採る。これらの条件下では、ｐ５３及びＭＤＭ２の相互作用の崩壊がｐ５３を放出し、従って、増殖停止及び／又はアポトーシスの正常な信号を機能させると考えられる。
【０００５】
ＭＤＭ２はまた、ｐ５３の抑制の外に別の機能も有する可能性がある。例えば、ＭＤＭ２は、ｐＲｂ−制御転写因子Ｅ２Ｆ１／ＤＰ１と直接相互作用することが示されている。この相互作用はＭＤＭ２のｐ５３と独立した腫瘍発生作用に不可欠であると考えられる。Ｅ２Ｆ１のドメインはｐ５３のＭＤＭ２結合ドメインに著しい相同性を示す。ＭＤＭ２のＰ５３及びＥ２Ｆ１双方との相互作用はＭＤＭ２上の同一結合部位に位置するので、ＭＤＭ２／ｐ５３アンタゴニストは細胞のｐ５３を活性化するのみならずまた、一般に腫瘍細胞中で制御を解除（ｄｅｒｅｇｕｌａｔｅ）されるＥ２Ｆ１の活動をもモジュレートするであろうことが期待できる。
【０００６】
更に、近年使用されるＤＮＡ損傷物質の治療的効果（化学療法及び放射線療法）は、Ｍ
ＤＭ２によるｐ５３の抑制的制御により限定される可能性がある。従って、ｐ５３のＭＤＭ２のフィードバック抑制が妨げられると、機能的ｐ５３レベルの増加が、アポトーシス及び／又はｐ５３関連薬剤耐性の逆転をもたらす野生型ｐ５３機能を回復することにより、このような物質の治療的効果を増加するであろう。インビボにおけるＭＤＭ２抑制及びＤＮＡ損傷処置を組み合わせると、相乗的抗腫瘍効果をもたらしたことが示された（非特許文献１参照）。
【０００７】
従って、ＭＤＭ２及びｐ５３の相互作用の崩壊は、野生型ｐ５３を含む腫瘍における治療的介入のアプローチを提供し、機能的ｐ５３をもたない腫瘍細胞中で抗増殖効果をすら示すかも知れず、そして更に、化学療法及び放射線療法に対して発癌性細胞を増感化させることができる。
【０００８】
１９９９年５月１８日公開の特許文献１はなかでも、５−ＨＴ受容体アンタゴニストとしての置換フェニルアミノカルボニルインドリル誘導体を記載している（特許文献１参照）。２０００年５月１８日公開の特許文献２は、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）のインヒビターとして、そして脈管形成障害の処置に有用なアントラニル酸アミドを記載している（特許文献２参照）。２００２年３月２１日公開の特許文献３はヒトの免疫不全ウイルス及びネコ免疫不全ウイルスを処理するためのケモカイン受容体ＣＸＣＲ４又はＣＣＲ５モジュレーターとして有用な３環式ｔｅｒｔ−アミン誘導体を開示している（特許文献３参照）。２００２年１０月１０日に公開された特許文献４は、５−ＨＴ６受容体のアンタゴニストとしてのＮ−（２−アリールエチル）ベンジルアミンを開示している（特許文献４参照）。２０００年３月２３日公開の特許文献５は、ＭＤＭ２とｐ５３間の相互作用のインヒビターとしてのピペラジン−４−フェニル誘導体を提供する（特許文献５参照）。２０００年６月８日公開の特許文献６は、ｐ５３族の１タンパク質の立体構造の安定性を回復するための３環式化合物を提供する（特許文献６参照）。２００３年５月２２日に公開の特許文献７は、ＭＤＭ２−ｐ５３相互作用のインヒビターとしての置換１，４−ベンゾジアゼピン及びそれらの使用を記載している（特許文献７参照）。２００３年６月２６に公開の特許文献８は、ＭＤＭ２タンパク質のｐ５３様ペプチドとの相互作用を阻害し、抗増殖作用をもつシス−２，４，５−トリフェニル−イミダゾロンを提供する（特許文献８参照）。２００４年１月１５に公開の特許文献９は、ＭＤＭ２に結合し、癌治療に使用することができるビスアリールスルホンアミド化合物を開示している（特許文献９参照）。ＭＤＭ２とｐ５３間の相互作用を阻害する有効で強力な小分子が続けて必要とされる。
【０００９】
本発明の化合物は構造、それらの薬理学的作用及び／又は薬理学的強度において先行技術と異なる。
【特許文献１】特開平１１−１３０７５０号公報
【特許文献２】欧州特許第１１２９０７４号明細書
【特許文献３】欧州特許第１３１７４４３号明細書
【特許文献４】欧州特許第１３７９２３９号明細書
【特許文献５】国際公開出願第００／１５３５７号パンフレット
【特許文献６】欧州特許第１１３７４１８号明細書
【特許文献７】欧州特許第１４４３９３７号明細書
【特許文献８】欧州特許第１４５８３８０号明細書
【特許文献９】欧州特許第１５１９９３２号明細書
【非特許文献１】Ｖｏｕｓｄｅｎ  Ｋ．Ｈ．，Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．１０３，６９１−６９４，２０００
【発明の開示】
【００１０】
本発明は、癌を処置するための、ＭＤＭ２とｐ５３間の相互作用を抑制する化合物、組
成物及びその方法を提供する。更に本発明の化合物及び組成物は、化学療法及び放射線療法の効果を高めるために有用である。
【００１１】
本発明は、式（Ｉ）
【００１２】
【化１】
2009530345.tif 000003
【００１３】
の化合物、それらのＮ−オキシド形態、付加塩又は立体化学的異性体形態を対象とし、
式中、
ｍは０、１又は２であり、そしてｍが０である時は直接結合が意図され、
ｎは０、１、２又は３であり、そしてｎが０である時は直接結合が意図され、
ｐは０又は１であり、そしてｐが０である時は直接結合が意図され、
ｔは０又は１であり、そしてｔが０である時は直接結合が意図され、
【００１４】
【化２】
2009530345.tif 000004
【００１５】
は−ＣＲ８＝Ｃ＜であり、そしてそこで点線は１結合、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ＜、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ＜、−ＣＨＲ８−ＣＨ＜又ＣＨＲ８−Ｎ＜であり、ここで
Ｒ８はそれぞれ、独立して水素又はＣ１−６アルキルである、
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ、独立して、水素、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールＣ１−６アルキルオキシ、ヘテロアリールＣ１−６アルキルオキシ、フェニルチオ、ヒドロキシＣ１−６アルキルカルボニル；アミノ、アリール及びヘテロアリールから選択される置換基で置換されたＣ１−６アルキル又は、アミノ、アリール及びヘテロアリールから選択される置換基で置換されたＣ３−７シクロアルキルから選択され、
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ、独立して、水素、ハロ、Ｃ１−６アルキル、ポリハロＣ１−６アルキル、シアノ、シアノＣ１−６アルキル、ヒドロキシ、アミノ又はＣ１−６アルキルオキシから選択されるか、あるいは
Ｒ４及びＲ５が一緒になって、場合により、メチレンジオキシ又はエチレンジオキシから選択される２価の基を形成してもよく、
Ｒ５は水素、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル又はＣ１−６アルキルであり、
Ｒ６及びＲ７はそれぞれ、独立して水素、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル又はＣ１−６アルキルから選択されるか、あるいは、
Ｒ６及びＲ７が一緒になって場合により、
−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２−          （ｂ−１）、
−（ＣＨ２）２−ＮＲ９−（ＣＨ２）２−      （ｂ−２）
から選択される２価の基を形成してもよく、ここで
Ｒ９は水素、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル又はＣ１−６アルキルである、
Ｚは
【００１６】
【化３】
2009530345.tif 000005
【００１７】
から選択される基であり、ここで
Ｒ１０及びＲ１１はそれぞれ、独立して、水素、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル，ニトロ、ポリハロＣ１−６アルキル、シアノ、シアノＣ１−６アルキル、テトラゾロＣ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリールＣ１−６アルキル、アリール（ヒドロキシ）Ｃ１−６アルキル、ヘテロアリール（ヒドロキシ）Ｃ１−６アルキル、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、アリールＣ１−６アルキルカルボニル、ヘテロアリールＣ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルキルオキシ、Ｃ３−７シクロアルキルカルボニル、Ｃ３−７シクロアルキル（ヒドロキシ）Ｃ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニルＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニルＣ２−６アルケニル、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、ヒドロキシＣ１−６アルキル、アミノＣ１−６アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニルＣ１−６アルキル及び−（ＣＨ２）ｖ−（Ｃ（＝Ｏ）ｒ）−（ＣＨＲ１７）ｕ−ＮＲ１３Ｒ１４から選択され、ここで
ｖは０、１、２、３、４、５又は６であり、そしてｖが０である時は直接結合が意図され、
ｒは０又は１であり、そしてｒが０である時は直接結合が意図され、
ｕは０、１、２、３、４、５又は６であり、そしてｕが０である時は直接結合が意図され、
Ｒ１７は水素又はＣ１−６アルキルである、
Ｒ１２は水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル；ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキルオキシ及びアリールから選択される置換基で置換されたＣ１−６アルキル
又は、ヒドロキシ、アミノ、アリール及びＣ１−６アルキルオキシから選択される置換基で置換されたＣ３−７シクロアルキルであり、
Ｒ１３及びＲ１４はそれぞれ、独立して、水素、Ｃ１−１２アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、アリールＣ１−６アルキルカルボニル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ｃ３−７シクロアルキルカルボニル、−（ＣＨ２）ｋ−ＮＲ１５Ｒ１６；ヒドロキシ、ヒドロキシカルボニル、シアノ、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリール又はヘテロアリールから選択される置換基で置換されたＣ１−１２アルキルあるいは、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリール、アミノ、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール又はヘテロアリールＣ１−６アルキルから選択される置換基で置換されたＣ３−７シクロアルキルから選択されるか、あるいは、
Ｒ１３及びＲ１４が、それらが結合されている窒素と一緒になって、場合により、モルホリニル、ピペリジニル、ピロリジニル、ピペラジニル又は、Ｃ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルキルオキシカルボニル、ヘテロアリールＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル及びＣ３−７シクロアルキルＣ１−６アルキルから選択される置換基で置換されたピペラジニルを形成してもよく、ここで
ｋは０、１、２、３、４、５又は６であり、そしてｋが０である時は、直接結合が意図され、
Ｒ１５及びＲ１６はそれぞれ、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルキルオキシカルボニル、Ｃ３−７シクロアルキル；ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリール及びヘテロアリールから選択される置換基で置換されたＣ１−１２アルキル並びにヒドロキシ、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールＣ１−６アルキルから選択される置換基で置換されたＣ３−７シクロアルキルから選択されるか、あるいは、
Ｒ１５及びＲ１６がそれらが結合されている窒素と一緒になって、場合により、モルホリニル、ピペラジニル又は、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニルで置換されたピペラジニルを形成してもよく、
アリールはフェニル又はナフタレニルであり、
フェニル又はナフタレニルはそれぞれ、場合により、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、アミノ、ポリハロＣ１−６アルキル及びＣ１−６アルキルオキシからそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で置換されてもよく、そして
フェニル又はナフタレニルはそれぞれ、場合により、メチレンジオキシ及びエチレンジオキシから選択される２価の基で置換されてもよく、
ヘテロアリールはピリジニル、インドリル、キノリニル、イミダゾリル、フラニル、チエニル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、ベンゾフラニル又はテトラヒドロフラニルであり、
ピリジニル、インドリル、キノリニル、イミダゾリル、フラニル、チエニル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、ベンゾフラニル又はテトラヒドロフラニルはそれぞれ、場合により、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、アミノ、ポリハロＣ１−６アルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル又はＣ１−６アルキルオキシからそれぞれ独立して選択される１、２又は３個の置換基で置換されてもよく、そして
ピリジニル、インドリル、キノリニル、イミダゾリル、フラニル、チエニル、ベンゾフラニル又はテトラヒドロフラニルはそれぞれ、場合により、メチレンジオキシ又はエチレンジオキシから選択される２価の基で置換されてもよい。
【００１８】
式（Ｉ）の化合物はまた、それらの互変異性体形態で存在することができる。このような形態は前記の式中に明白には示されていないが、本発明の範囲内に包含されることが意図される。
【００１９】
以上の定義中そして以後に使用される幾つかの用語が以下に説明される。これらの用語
は時々そのままで又は複合用語として使用される。
【００２０】
以上の定義中に、そして以後に使用されるハロは、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードを包含し、Ｃ１−６アルキルは、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、１−メチルエチル、２−メチルプロピル、２−メチル−ブチル、２−メチルペンチル等のような、１〜６個の炭素原子を有する直鎖及び分枝鎖飽和炭化水素基と規定され、ヒドロキシＣ１−６アルキルは、１〜６個の炭素原子を有する直鎖及び分枝鎖飽和炭化水素基上のヒドロキシ置換基と規定され、トリハロメチルは、３個の同一の又は異なるハロ置換基を含有するメチル、例えばトリフルオロメチルと規定され、Ｃ３−７シクロアルキルはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル等のような、３〜１０個の炭素を有する環式炭化水素基を包含する。
【００２１】
用語「付加塩」は、式（Ｉ）の化合物が、アミン、アルカリ金属塩基及びアルカリ土類金属塩基又は第四級アンモニウム塩基のような有機又は無機塩基と、あるいは鉱酸、スルホン酸、カルボン酸又はリン含有酸のような有機酸又は無機酸とともに形成することができる塩を含んでなる。
【００２２】
用語「付加塩」は更に、式（Ｉ）の化合物が形成することができる製薬学的に許容されうる塩、金属錯体及び溶媒和及びそれらの塩を含んでなる。
【００２３】
用語「製薬学的に許容されうる塩」は製薬学的に許容されうる酸又は塩基の付加塩を意味する。前記に言及された製薬学的に許容されうる酸又は塩基付加塩は、式（Ｉ）の化合物が形成することができる治療的に有効な無毒の酸及び無毒の塩基付加塩形態を含んでなることを意味する。塩基性を有する式（Ｉ）の化合物は、該塩基形態を適当な酸で処理することにより、それらの製薬学的に許容されうる酸付加塩に転化させることができる。適当な酸は、例えば、ハロゲン化水素酸（例えば塩酸又は臭化水素酸）、硫酸、硝酸、リン酸等の酸のような無機酸、あるいは例えば酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、蓚酸、マロン酸、コハク酸（すなわち、ブタンジオン酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモエ酸等の酸のような有機酸、を含んでなる。酸性を有する式（Ｉ）の化合物は、前記の酸形態を適当な有機又は無機塩基で処理することにより、それらの製薬学的に許容されうる塩基付加塩に転化させることができる。適当な塩基塩形態は例えば、アンモニウム塩、アルカリ及びアルカリ土類金属塩（例えばリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム塩等）、有機塩基との塩（例えばベンザチン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミン塩）及び例えばアルギニン、リシン等のようなアミノ酸との塩、を含んでなる。用語の酸又は塩基付加塩はまた、式（Ｉ）の化合物が形成することができる水和物及び溶媒付加形態を含んでなる。このような形態の例は例えば、水和物、アルコラート等である。
【００２４】
用語「金属錯体」は、式（Ｉ）の化合物と１種又は複数の有機又は無機金属塩間に形成される錯体を意味する。該有機又は無機塩の例は、周期系の第２主要群の金属（例えばマグネシウム又はカルシウム）、第３又は第４主要群（例えばアルミニウム、鈴、鉛）並びに周期系の第１〜第８遷移群の金属（例えばクロム、マンガン、鉄、コバルト、ニッケル、銅、亜鉛等のような）の、ハロゲン化物、ナイトレート、スルフェート、ホスフェート、アセテート、トリフルオロアセテート、トリクロロアセテート、プロピオネート、タルトレート、スルホネート、例えばメチルスルホネート、４−メチルフェニルスルホネート、サリチレート、ベンゾエート等を含んでなる。
【００２５】
前記で使用された用語「式（Ｉ）の化合物の立体化学的異性体形態」は、式（Ｉ）の化合物が所有することができる、同一配列の結合により結合された同一原子より構成されるが、しかし互換性ではない異なる三次元構造を有するすべての可能な化合物と規定される。別に述べられ又は別記されない限り、化合物の化学名は該化合物が有することができるすべての可能な立体化学的異性体形態の混合物を包含する。該混合物は該化合物の基礎的分子構造のすべてのジアステレオマー及び／又はエナンチオマーを含有することができる。純粋形態の又は相互の混合物としての双方の式（Ｉ）の化合物のすべての立体化学的異性体形態が本発明の範囲内に包含されることが意図される。
【００２６】
特に興味深いものは立体化学的に純粋な式（Ｉ）の化合物である。
【００２７】
本明細書に記載の化合物及び中間体の純粋な立体異性体形態は、該化合物又は中間体の同一基礎分子構造の他のエナンチオマー又はジアステレオマー形態を実質的に包含しない異性体と規定される。とりわけ、用語「立体異性体として純粋な」は、少なくとも８０％の立体異性体過剰（すなわち最少９０％の一方の異性体及び最高１０％の他方の可能な異性体）から１００％の立体異性体過剰（すなわち１００％の一方の異性体及び他方の異性体を全く含まない）までを有する化合物又は中間体、より具体的には、９０％〜１００％までの立体異性体過剰を有する、更により具体的には、９４％〜１００％までの立体異性体過剰を有する、そしてもっとも具体的には、９７％〜１００％までの立体異性体過剰を有する化合物又は中間体を対象とする。用語「エナンチオマーとして純粋な」及び「ジアステレオマーとして純粋な」は、同様な方法で理解されるべきであるが、その場合は、問題の混合物のエナンチオマー過剰又はジアステレオマー過剰に関連して理解しなければならない。
【００２８】
式（Ｉ）の化合物の互変異性体形態は、例えばエノール基がケト基に転化される（ケト−エノール互変異性）式（Ｉ）の化合物を含んでなることを意味する。
【００２９】
式（Ｉ）の化合物のＮ−オキシド形態は、その１種又は複数の窒素原子が、いわゆるＮ−オキシド、特に、１種又は複数のピペリジン−、ピペラジン又はピリダジニル−窒素がＮ−酸化されているＮ−オキシドに酸化されている、式（Ｉ）の化合物を含んでなることを意味する。
【００３０】
式（Ｉ）の化合物は、３価の窒素をそのＮ−オキシド形態に転化するための当該技術分野で知られた方法に従って、対応するＮ−オキシド形態に転化させることができる。該Ｎ−酸化反応は概括的に、式（Ｉ）の出発物質を適当な有機又は無機過酸化物と反応させることにより実施することができる。適当な無機過酸化物は、例えば過酸化水素、アルカリ金属又はアルカリ土類金属過酸化物、例えば過酸化ナトリウム、過酸化カリウムを含んでなり、適当な有機過酸化物は、例えばベンゼンカルボペルオキソ酸又はハロ置換ベンゼンカルボペルオキソ酸（例えば３−クロロベンゼンカルボペルオキソ酸）、ペルオキソアルカン酸（例えばペルオキソ酢酸）、アルキルヒドロペルオキシド（例えばｔ−ブチルヒドローペルオキシド）を含んでなることができる。適当な溶媒は、例えば、低級アルコール（例えばエタノール等）、炭化水素（例えばトルエン）、ケトン（例えば２−ブタノン）、ハロゲン化炭化水素（例えばジクロロメタン）並びにこのような溶媒の混合物である。
【００３１】
本発明はまた、本発明の化合物中に存在する原子のあらゆる同位元素を包含することが意図される。例えば、水素の同位元素はトリチウム及びジューテリウムを包含し、炭素の同位元素はＣ−１３及びＣ−１４を包含する。
【００３２】
以後使用される時は常に、用語「式（Ｉ）の化合物」はまた、Ｎ−オキシド形態、製薬学的に許容されうる酸又は塩基付加塩及びすべての立体異性体形態を包含することが意味
される。
【００３３】
興味深い化合物の第１群は、１種又は複数の以下の制約が適用される式（Ｉ）の化合物よりなる：
ａ）ｍは０である、
ｂ）ｎは２である、
ｃ）ｐは１である、
ｄ）ｔは０である、
ｅ）
【００３４】
【化４】
2009530345.tif 000006
【００３５】
は−ＣＨ＝Ｃ＜である、
ｆ）Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立して水素である、
ｇ）Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して水素である、
ｈ）Ｒ５は水素である、
ｉ）Ｒ６及びＲ７はそれぞれ独立して水素又はＣ１−６アルキルである、
ｊ）Ｚは（ａ−１）、（ａ−２）又は（ａ−４）から選択される基である、あるいは
ｋ）Ｒ１０及びＲ１１はそれぞれ独立して水素、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル又はヒドロキシＣ１−６アルキルから選択される。
【００３６】
興味深い化合物の第２群は、１種又は複数の以下の制約が適用される式（Ｉ）の化合物及び興味深い化合物の第１群の化合物よりなる：
ａ）ｍは０である、
ｂ）ｎは２である、
ｃ）ｐは１である、
ｄ）ｔは０である、
ｅ）
【００３７】
【化５】
2009530345.tif 000007
【００３８】
は−ＣＨ＝Ｃ＜である、
ｆ）Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立して水素である、
ｇ）Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して水素である、
ｈ）Ｒ５は水素である、
ｉ）Ｒ６及びＲ７はそれぞれ独立して水素である、
ｊ）Ｚは（ａ−２）又は（ａ−４）から選択される基である、あるいは
ｋ）Ｒ１０及びＲ１１はそれぞれ独立して水素、ヒドロキシ又はヒドロキシＣ１−６アルキルから選択される。
【００３９】
好ましい化合物の１つの群は、そのｍが０である、ｎが０である、ｐが１である、ｔが０である、Ｒ１及びＲ２がそれぞれ独立して水素である、Ｒ３及びＲ４がそれぞれ独立して水素である、Ｒ５が水素である、Ｒ６及びＲ７がそれぞれ独立して水素又はＣ１−６アルキルである、Ｚが（ａ−１）、（ａ−２）又は（ａ−４）から選択される基である、あるいはＲ１０及びＲ１１がそれぞれ独立して水素、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル又はヒドロキシＣ１−６アルキルから選択される、式（Ｉ）の化合物又はそれ
らのあらゆるサブグループよりなる。
【００４０】
より好ましい化合物の１つの群は、そのｍが０である、ｎが０である、ｐが１である、ｔが０である、Ｒ１及びＲ２がそれぞれ独立して水素である、Ｒ３及びＲ４がそれぞれ独立して水素である、Ｒ５が水素である、Ｒ６及びＲ７がそれぞれ独立して水素である、Ｚが（ａ−２）又は（ａ−４）から選択される基である、あるいはＲ１０及びＲ１１がそれぞれ独立して水素、ヒドロキシ又はヒドロキシＣ１−６アルキルから選択される、式（Ｉ）の化合物又はそれらのあらゆるサブグループよりなる。
【００４１】
もっとも好ましい化合物は化合物Ｎｏ．１、化合物Ｎｏ．４及び化合物Ｎｏ．５である。
【００４２】
【表１】
2009530345.tif 000008
【００４３】
式（Ｉ）の化合物、それらの製薬学的に許容されうる塩及びＮ−オキシド及び立体化学的異性体形態は従来の方法で調製することができる。出発物質及び幾つかの中間体は知られた化合物であるか、市販品を購入することができるか又は当該技術分野で一般に知られた従来の反応法に従って調製することができる。
【００４４】
幾つかのこのような調製法は、以後に、より詳細に説明されるであろう。式（Ｉ）の最終化合物を得る他の方法は実施例中に説明される。
【００４５】
式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩ）の中間体を、そのＷが例えばハロ（例えばフルオロ、クロロ、ブロモ又はヨード）あるいはスルホニルオキシ基（メチルスルホニルオキシ、４−メチルフェニルスルホニルオキシ、等のような）のような適当な離脱基である式（ＩＩＩ）の中間体と反応させることにより調製することができる。反応は例えば、アルコール（例えばメタノール、エタノール、２−メトキシ−エタノール、プロパノール、ブタノール等）、エーテル（例えば４，４−ジオキサン、１、１’−オキシビスプロパン等）、ケトン（例えば４−メチル−２−ペンタノン）あるいはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ニトロベンゼン、アセトニトリル、酢酸等のような反応不活性溶媒中で実施することができる。反応の経過中に放出される酸を捕捉するために、例えばアルカリ又はアルカリ土類金属炭酸塩又は炭酸水素塩のような適当な塩基（例えばトリエチルアミン又は炭酸ナトリウム）の添加を使用することができる。反応を促進するために、少量の適当な金属ヨー化物、例えばヨー化ナトリウム又はカリウムを添加することができる。反応は好都合には、室
温と反応混合物の還流温度の間の温度で実施することができ、そして所望される場合は、反応は増圧下で実施することができる。
【００４６】
【化６】
2009530345.tif 000009
【００４７】
式中のｐが１であり、本明細書で式（Ｉ−ａ）の化合物と呼ばれる式（Ｉ）の化合物は、テトラヒドロフランのような適当な溶媒中で、リチウムアルミニウム水素化物により式（ＩＶ）の中間体を転化することにより調製することができる。
【００４８】
【化７】
2009530345.tif 000010
【００４９】
式（Ｉ−ａ）の化合物はまた、アルコール（例えばメタノール）のような適当な溶媒中で、ホウ水素化ナトリウム（例えばテトラヒドロホウ水素化ナトリウム）又はポリマー支持シアノトリヒドロボレートのような適当な試薬の存在下で、式（ＶＩ）の適当なカルボキシアルデヒドを式（Ｖ）の中間体と反応させることにより調製することができる。
【００５０】
【化８】
2009530345.tif 000011
【００５１】
同様な方法で、式中ｔが１であり、本明細書で式（Ｉ−ｂ）と呼ばれる式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩ）の中間体を式（ＶＩＩ）の適当なカルボキシアルデヒドと反応させることにより調製することができる。
【００５２】
【化９】
2009530345.tif 000012
【００５３】
式（Ｉ）の化合物はまた、当該技術分野で知られた反応又は官能基変換により相互に変換させることができる。幾つかのこのような変換はすでに前記に説明されている。他の例は、カルボン酸エステルの、対応するカルボン酸又はアルコールへの加水分解；アミドの、対応するカルボン酸又はアミンへの加水分解；ニトリルの対応するアミドへの加水分解であり；イミダゾール又はフェニル上のアミノ基は当該技術分野で知られたジアゾ化反応及び次の、水素によるジアゾ基の置換により、水素により置換することができ；アルコールはエステル及びエーテルに転化させることができ；第一級アミンは第二級又は第三級ア
ミンに転化させることができ；二重結合を対応する単結合に水素化することができ；フェニル基上のヨード基は、適当なパラジウム触媒の存在下で一酸化炭素の挿入によりエステル基に転化させることができる。
【００５４】
式中のｍが０であり、本明細書で式（Ｖ−ａ）の中間体と呼ばれる式（Ｖ）の中間体は、メタノールのような適当な溶媒中で、式（ＶＩＩＩ）のような中間体をヒドラジン水和物により転化させることにより調製することができる。
【００５５】
【化１０】
2009530345.tif 000013
【００５６】
式（Ｖ−ａ）の中間体はまた、メタノール又はエタノールのような適当な溶媒中で、ラネーニッケルのような金属触媒及び水素のような適当な還元剤の存在下で、式（ＸＶＩ）の中間体で出発するニトロのアミンへの還元反応により調製することができる。
【００５７】
【化１１】
2009530345.tif 000014
【００５８】
式（Ｘ）の中間体は、Ｎ’−（エチルカルボンイミドイル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン、一塩酸（ＥＤＣ）及び１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）のような適当な試薬の存在下で、式（ＸＩ）の中間体を式（ＸＩＩ）の中間体と反応させることにより調製することができる。反応は、ジクロロメタン及びテトラヒドロフランの混合物のような適当な溶媒中で、トリエチルアミンのような塩基の存在下で実施することができる。
【００５９】
【化１２】
2009530345.tif 000015
【００６０】
式（ＶＩ）の中間体は、テトラヒドロフランのような適当な溶媒中で、式（ＸＩＩＩ）の中間体をリチウムアルミニウム水素化物と反応させることにより調製することができる。
【００６１】
【化１３】
2009530345.tif 000016
【００６２】
式中ｔが０であり、本明細書で式（ＶＩＩＩ−ａ）の中間体と呼ばれる、式（ＶＩＩＩ）の中間体（式（ＸＶＩ）の中間体と同じ）は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような反応不活性溶媒中で、２−プロパノール中塩化水素溶液の存在下で、式（ＩＸ）の中間体を、そのＬが例えばハロ（例えばフルオロ、クロロ、ブロモ又はヨード）あるいはＣ１−６アルキルオキシ（例えばメチルオキシ）のような適当な離脱基である式（ＸＩＶ）の中間体と反応させることにより調製することができる。
【００６３】
【化１４】
2009530345.tif 000017
【００６４】
式中Ｒ６及びＲ７が双方とも水素であり、本明細書で式（ＩＸ−ａ）の中間体と呼ばれる式（ＩＸ）の中間体は、シアノホウ水素化ナトリウムの存在下で、式（ＸＶ）の中間体を転化させることにより調製することができる。反応は、例えば酢酸のような反応不活性溶媒中で実施することができる。
【００６５】
【化１５】
2009530345.tif 000018
【００６６】
式（Ｉ）の化合物及び幾つかの中間体はそれらの構造中に少なくとも１個のステレオジェン中心をもつことができる。このステレオジェン中心はＲ又はＳ配置で存在することができる。
【００６７】
本発明の幾つかの式（Ｉ）の化合物及び幾つかの中間体は１個の非対称炭素原子を含有することができる。該化合物及び該中間体の純粋な立体化学的異性体形態は当該技術分野で知られた方法の適用により得ることができる。例えば、ジアステレオマーは、選択的結晶化又はクロマトグラフィー法、例えば向流分配、液体クロマトグラフィー等の方法のような物理的方法により分離することができる。エナンチオマーは、最初に、例えばキラル酸のような適当な分離剤により、該ラセミ混合物をジアステレオマー塩又は化合物の混合物に転化させ、次に、例えば、選択的結晶化、超臨界液体クロマトグラフィー又はクロマトグラフィー法、例えば液体クロマトグラフィー等の方法により、ジアステレオマー塩又は化合物の該混合物を物理的に分離し、そして最後に該分離ジアステレオマー塩又は化合物を対応するエナンチオマーに転化させることによりラセミ混合物から得ることができる。純粋な立体化学的異性体形態はまた、介入反応が立体特異的に起る場合は、適当な中間体及び出発物質の純粋な立体化学的異性体形態から得ることができる。
【００６８】
式（Ｉ）の化合物、それらの製薬学的に許容されうる酸付加塩及び立体異性体形態は、それらがｐ５３とＭＤＭ２間の相互作用を抑制するという、貴重な薬理学的特性を有する。
【００６９】
用語「ＭＤＭ２」は本明細書ではｍｄｍ２遺伝子の発現の結果として得られるタンパク質を意味するために使用される。この用語の意味の範囲内のＭＤＭ２は、ｍｄｍ２によりコードされるすべてのタンパク質、それらの変異体、それらの代りのスライスタンパク質及びそれらのリン酸化タンパク質を包含する。更に、本明細書で使用される「ＭＤＭ２」はＭＤＭ２類似体、例えば、ＭＤＭ４としても知られるＭＤＭＸ、及び他の動物のＭＤＭ２相同体及び類似体、例えばヒト相同体のＨＤＭ２又はヒト類似体のＨＤＭＸを包含する。
【００７０】
用語「相互作用を抑制する方法」又は「相互作用のインヒビター」は本明細書では、１種又は複数の分子、ペプチド、タンパク質、酵素又は受容体の直接の又は間接的結合を妨げる又は減少させる方法、あるいは１種又は複数の分子、ペプチド、タンパク質、酵素又は受容体の正常な活性を抑制又は減少させる方法を意味するために使用される。
【００７１】
用語「ｐ５３のＭＤＭ２との相互作用のインヒビター」又は「ｐ５３−ＭＤＭ２インヒビター」は本明細書では、Ｃ．１に記載の論文中でｐ５３の発現を増加する物質を説明するために使用される。この増加は、限定はされないが、以下の１種又は複数の作用機序により誘起される可能性がある：
―ｐ５３とＭＤＭ２間の相互作用を抑制する、
―ＭＤＭ２又はｐ５３タンパク質いずれかとの直接の結合、
―上流又は下流の標的、例えばキナーゼとの相互作用、あるいはユビキチン化又はＳＵＭＯ修飾に関与する酵素活性、
―ＭＤＭ２及びｐ５３の、異なる細胞コンパートメント中への隔離又は運搬、
―ＭＤＭ２と結合するタンパク質、例えば（限定はされないが）ｐ７３、Ｅ２Ｆ−１、Ｒｂ、ｐ２１ｗａｆ１又はｃｉｐ１のモジュレーション、
―ＭＤＭ２発現及び／又はＭＤＭ２活性のダウンレギュレーション又は干渉、例えば（限定はしないが）その細胞の局在化、翻訳後の修飾、核外輸送又はユビキチンリガーゼ活性に影響を与える、
―例えば、ｐ５３タンパク質をその機能的構造形態に維持し、又はミスフォールディングを避けることによる、ｐ５３タンパク質の直接の又は間接的安定化、
―ｐ５３の発現又はｐ５３ファミリーメンバー（例えばｐ６３及びｐ７３）の発現の促進、
―例えば（限定はしないが）その転写活性を促進することによりｐ５３活性を増加、及び／又は
―ｐ５３−シグナル伝達経路の遺伝子及びタンパク質、例えば（限定はしないが）ｐ２１ｗａｆ１、ｃｉｐ１、ＭＩＣ−１（ＧＤＦ−１５）、ＰＩＧ−３及びＡＴＦ−３の発現増加。
【００７２】
従って、本発明は医薬としての使用のための式（Ｉ）の化合物を開示する。
【００７３】
更に、本発明はまた、化合物が式（Ｉ）の化合物である、ｐ５３−ＭＤＭ２相互作用により仲介される障害の処置のための医薬の製造のための化合物の使用を対象とする。
【００７４】
本明細書で使用される用語「処置すること」又は「処置」は、動物、特にヒトにおける疾患及び／又は状態のあらゆる処置を網羅し、（ｉ）疾患及び／又は状態にかかり易い素因をもつかも知れないが、まだそれをもつことを診断されていない被験体において、疾患及び／又は状態が発症することを予防し、（ｉｉ）疾患及び／又は状態を抑制し、すなわちその進行を停止させ、（ｉｉｉ）疾患及び／又は状態を緩和し、すなわち疾患及び／又は状態の退行を誘発する方法を包含する。
【００７５】
用語「ｐ５３−ＭＤＭ２相互作用により仲介される障害」により、ＭＤＭ２タンパク質及びｐ５３又は、アポトーシスを誘発し、細胞死を誘発する、又は細胞周期を制御する他の細胞タンパク質間の相互作用の抑制をもたらす又は抑制からもたらされる、あらゆる望ましくない又は有害な状態を意味する。
【００７６】
本発明はまた、このような処置の必要な被験体、例えば哺乳動物（そしてより具体的にはヒト）に対して有効量の本発明の化合物を投与することにより、ｐ５３−ＭＤＭ２相互作用により仲介される障害を処置する方法を提供する。
【００７７】
本発明の化合物は、たとえこのような細胞が機能的ｐ５３を含まない場合でも、腫瘍細胞において抗増殖効果をもつことができる。より具体的には、本発明の化合物は野生型ｐ５３をもつ腫瘍及び／又はＭＤＭ２を過剰発現する腫瘍において抗増殖効果をもつことができる。
【００７８】
従って、本発明はまた、このような処置の必要な被験体、例えば哺乳動物（そしてより具体的にはヒト）に対して有効量の本発明の化合物を投与することにより腫瘍の増殖を妨げる方法を提供する。
【００７９】
抑制することができる腫瘍の例は、限定せずに、肺癌（例えば腺癌、そして非小細胞肺癌を包含する）、膵臓癌（例えば外分泌膵癌のような膵癌）、結腸癌（例えば結腸腺癌及び結腸腺腫のような、例えば結腸直腸癌）、咽頭癌、口腔扁平上皮癌、舌癌、胃癌、鼻咽頭癌、
リンパ系の造血器官腫瘍（例えば急性リンパ性白血病、Ｂ−細胞リンパ腫、ブルキットリンパ腫）、非ホジキンスリンパ腫、ホジキン氏病、骨髄性白血病（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ））、甲状腺濾胞腺癌、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、間葉細胞源の腫瘍（例えば繊維肉腫及び横紋筋肉腫）、メラノーマ、奇形癌、神経芽細胞腫、脳腫瘍、神経膠腫、皮膚の良性腫瘍（例えば、角化棘細胞腫）、乳癌（例えば進行乳癌）、腎臓癌、卵巣癌、子宮頸部癌、子宮内膜癌、膀胱癌、進行疾患を包含する前立腺癌、精巣癌、骨肉腫、頭部及び頸部癌及び表皮癌を包含する。
【００８０】
本発明の化合物はまた、炎症状態の処置及び予防のためにも使用することができる。
【００８１】
従って、本発明はまた、このような処置の必要な被験体、例えば哺乳動物（そしてより具体的にはヒト）に対して有効量の本発明の化合物を投与することによる、炎症状態の処置及び予防のための方法を提供する。
【００８２】
本発明の化合物はまた、自己免疫疾患及び状態の処置のためにも使用することができる。用語「自己免疫疾患」により、動物の免疫系が自己抗原に対して不利に反応するあらゆる疾患を意味する。用語「自己抗原」により、動物体内に正常に認められるあらゆる抗体を意味する。代表的な自己免疫疾患は、限定せずに、ハシモト甲状腺炎、グレーブ病、多発性硬化症、悪性貧血、アジソン氏病、インシュリン依存性糖尿病、関節リューマチ、全身性エリテマドーデス（ＳＬＥ又は狼瘡）、皮膚筋炎、クローン病、ウエゲナー肉芽腫、抗糸球体基底膜病、抗リン脂質症候群、２５疱疹状皮膚炎、アレルギー性脳脊髄炎、糸球体腎炎、膜性糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、ランベルト−イートン筋無力症候群、重症性筋無力症、水疱性類天疱瘡、多内分泌障害、ライター病及びスティッフ−マン症候群を包含する。
【００８３】
従って、本発明はまた、このような処置の必要な被験体、例えば哺乳動物（そしてより具体的にはヒト）に対して有効量の本発明の化合物を投与することによる、自己免疫病及び状態の処置並びに構造的に不安定な又はミスフォールドされたタンパク質に関連した疾
患の処置法を提供する。
【００８４】
本発明の化合物はまた、構造的に不安定な又はミスフォールドされたタンパク質に関連する疾患の処置に有用であることができる。構造的に不安定な又はミスフォールドされたタンパク質に関連する疾患の例は、限定せずに、嚢胞性繊維症（ＣＦＴＲ）、マルファン症候群（フィブリリン）、筋無力性側索硬化症（スーパーオキシド・ジスムターゼ）、壊血病（コラーゲン）、メープルシロップ尿症（アルファ−ケト酸脱水素酵素複合体）、骨形成不全症（タイプ１プロコラーゲンプロ−アルファ）、クロイツェルト−ヤコブ病（プリオン）、アルハイマー病（ベータ−アミロイド）、家族性アミロイド沈着症（リゾチーム）、白内障（クリスタリン）、家族性高コレステロール血症（ＬＤＬ受容体）、αＩ−抗トリプシン欠乏症、テイ−サックス病（ベータ−ヘキソースアミニダーゼ）、網膜色素変性症（ロドプシン）及びレプレコン症（インスリン受容体）を包含する。
【００８５】
従って、本発明はまた、このような処置の必要な被験体、例えば哺乳動物（そしてより具体的にはヒト）に対して有効量の本発明の化合物を投与することによる、構造的に不安定な又はミスフォールドされたタンパク質に関連する疾患の処置法を提供する。
【００８６】
それらの有用な薬理学的特性を考慮すると、本化合物は、投与目的のための種々の製薬学的剤形に調合することができる。
【００８７】
本発明の製薬学的組成物を調製するためには、有効成分として有効量の、塩基又は酸付加塩形態の特定の化合物を、投与に所望される調製形態に応じて広範な形態を採ることができる、製薬学的に許容されうる担体と密接な混合物に組み合わせる。これらの製薬学的組成物は望ましくは、好ましくは経口、直腸内、経皮的又は非経口注射による投与に適した単一の投与剤形にある。例えば、経口投与剤形の組成物を調製する際に、懸濁物、シロップ、エリキシル及び液剤のような経口液体調製物の場合には、例えば水、グリコール、油、アルコール、等のようなあらゆる通常の製薬学的媒質、あるいは散剤、ピル、カプセル及び錠剤の場合にはデンプン、糖、カオリン、滑沢剤、結合剤、崩壊剤等のような固形担体を使用することができる。
【００８８】
それらの投与の容易さのために、その場合には明らかに固形の製薬学的担体が使用される錠剤及びカプセルがもっとも有利な経口投与単位剤形を表す。非経口組成物のための担体は、例えば溶解性を補助するための他の成分を包含することはできるが、通常は、少なくとも大部分は滅菌水を含んでなるであろう。例えば、その担体が生理食塩水、ブドウ糖液又は生理食塩水とブドウ糖液の混合物を含んでなる注射液を調製することができる。適当な液体担体、懸濁剤等を使用することができる注射用懸濁液もまた調製することができる。経皮的投与に適した組成物中では、担体は、場合により、皮膚に対して有意な有害効果を誘発しない、少量の、あらゆる性状の適当な添加剤と組み合わせてもよい浸透促進剤及び／又は適当な湿潤化剤を場合により含んでなる。該添加剤は皮膚に対する投与を容易にし、そして／又は所望の組成物を調製する補助になることができる。これらの組成物は種々の方法で、例えば経皮的パッチとして、スポットオン剤として又は軟膏として投与することができる。投与の容易さ及び用量の均一性のために、前記の製薬学的組成物を投与単位剤形に調合することは特に有益である。本明細書及び請求項に使用される投与単位剤形は、各単位が、必要な製薬学的担体と一緒に、所望の治療効果をもたらすように計算された、前以て決定された量の有効成分を含有する、単一用量として適した物理的に分割された単位を表す。このような投与単位剤形の例は錠剤（刻み目付き錠剤又はコート錠）、カプセル、ピル、散剤分包、ウエファー、注射液又は懸濁物、小匙１杯、大匙１杯等並びにそれらの分離された複数物である。
【００８９】
前記の製薬学的組成物を、投与の容易さ及び用量の均一性のために投与単位剤形に調合
することは特に有利である。本明細書及び請求項で使用される投与単位剤形は、各単位が必要な製薬学的担体と一緒に所望の治療効果をもたらすように計算された前以て決められた量の有効成分を含有する、単一用量として適した物理的に分割された単位を表わす。これらの投与単位剤形の例は、錠剤（刻み目の付いたまたはコート錠を含む）、カプセル、ピル、末包、ウエファー、注射液または懸濁液、小匙１杯、大匙１杯、等およびそれらの分離された複数体である。
【００９０】
本発明の化合物は、ＭＤＭ２及びｐ５３又は、アポトーシスを誘発し、細胞の死を誘発し、又は細胞周期を調節する他の細胞タンパク質間の相互作用を妨げるのに十分な量で投与される。
【００９１】
ＭＤＭ２の発癌性はｐ５３を抑制するその能力により決定されるのみならずまた、他の腫瘍抑制タンパク質、例えば、網膜芽細胞腫タンパク質ｐＲｂ及び密接に関連したＥ２Ｆ１転写因子を調節するその能力により決定される。
【００９２】
従って、本発明の化合物は、ＭＤＭ２とＥ２Ｆ転写因子間の相互作用を調節するのに十分な量を投与される。
【００９３】
当業者は、以後に提示される試験結果から、有効量を容易に決定することができるであろう。概括的に治療的有効量は０．００５ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、そしてとりわけ０．００５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重であろうと推測される。必要量を１日全体に適当な間隔を空けて１、２、３、４又は５回以上の分割量として投与することが適当かも知れない。該分割量は例えば、単位投与剤形当たり０．５〜５００ｍｇ、そしてとりわけ１０ｍｇ〜５００ｍｇの有効成分を含有する単位投与剤形として調合することができる。
【００９４】
本発明のもう１つのアスペクトとして、特に医薬としての使用のための、より具体的には癌又は関連疾患の処置における、もう１種の抗癌剤とのｐ５３−ＭＤＭ２インヒビターの組み合わせ物が想定される。
【００９５】
前記の状態の処置のために、本発明の化合物を有利には、１種又は複数の他の医薬、より具体的には他の抗癌剤と組み合わせて使用することができる。抗癌剤の例は、限定せずに、
−白金配位化合物、例えばシスプラチン、カルボプラチン又はオキサリプラチン、
−タキサン化合物、例えばパクリタキセル又はドセタキセル、
−カンプトテシン化合物のようなトポイソメラーゼＩインヒビター、例えばイリノテカン又はトポテカン、
−抗腫瘍エピポドフィロトキシン又はポドフィロトキシン誘導体のようなトポイソメラーゼＩＩインヒビター、例えばエトポシド又はテニポシド、
−抗腫瘍ビンカアルカロイド、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン又はビノレルビン、
−抗腫瘍ヌクレオシド誘導体、例えば５−フルオロウラシル、リューコボリン、ゲムシタビン又はカペシタビン、
−ナイトロジェン・マスタード又はニトロソ尿素のようなアルキル化剤、例えばシクロホスホアミド、クロランブシル、カルムスチン、チオテパ、メファラン又はロムスチン、
−抗腫瘍、アントラサイクリン誘導体、例えばダウノルビシン、ドキソルビシン、ドキシル、イダルビシン又はミトキサントロン、
−ＩＧＦ−１受容体を標的とする分子、例えばピクロポドフィリン、
−テトラカルシン誘導体、例えばテトロカルシンＡ、
−グルココルチコイデン、例えばプレドニソン、
−抗体、例えばトラストズマブ（ＨＥＲ２抗体）、リトキシマブ（ＣＤ２０抗体）、ゲムツザマブ、セトキシマブ、ペルトズマブ又はベバシズマブ、
−エストロゲン受容体アンタゴニスト又は選択的エストロゲン受容体モジュレーター、例えばタモキシフェン、フルベストラント、トレミフェン、ドロルオキシフェン、ファスロデックス又はラルオキシフェン、
−エキセメスタン、アナストロゾール、レトラゾール及びボロゾールのようなアロマターゼインヒビター、
−レチノイド、ビタミンＤ又はレチノイン酸及びレチノイン酸代謝阻害剤（ＲＡＭＢＡ）のような分化剤、例えばアキュタン、
−ＤＮＡメチルトランスフェラーゼインヒビター、例えばアザシチジン又はデシタビン、−抗葉酸剤、例えばプレメトレキセド二ナトリウム、
−抗生物質、例えばアンチノマイシンＤ、ブレオマイシン、マイトマイシンＣ、ダクチノマイシン、カルミノマイシン又はダウノマイシン、
−抗代謝物、例えばクロファラビン、アミノプテリン、シトシン・アラビノシド又はメトトレキセート、
−アポトーシス誘発剤及びＢｃｌ−２インヒビターのような抗脈管形成剤、例えばＹＣ１３７、ＢＨ３１２、ＡＢＴ７３７、ゴシポル、ＨＡ  １４−１、ＴＷ  ３７又はデカン酸、
−チューブリン結合剤、例えばコンブレスタチン、コルキシン又はノコダゾール、
−キナーゼインヒビター、例えばフラボペリドール、イマチニブメシレート、エルロチニブ又はゲフィチニブ、
−ファルネシルトランスフェラーゼインヒビター、例えばチピファルニブ、
−ヒストン・デアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）インヒビター、例えば酪酸ナトリウム、スベロイルアニリドヒドロキサミド酸（ＳＡＨＡ）、デプシペプチド（ＦＲ９０１２２８）、ＮＶＰ−ＬＡＱ８２４、Ｒ３０６４６５、ＪＮＪ−２６４８１５８５又はトリコスタチンＡ、
−ユビキチン−プロテアソム経路のインヒビター、例えばＰＳ−３４１、ＭＬＮ  ４１又はボルテゾミブ、
−Ｙｏｎｄｅｌｉｓ、
−テロメラーゼインヒビター、例えばテロメスタチン、
−マトリックスメタロプロテイナーゼインヒビター、例えばバチマスタート、マリマスタート、プリノスタート又はメタスタート、
である。
【００９６】
前記のように、本発明の化合物はまた、化学療法及び放射線療法のために腫瘍細胞を増感化にさせる際の治療的適用を有する。
【００９７】
従って、本発明の化合物は「放射線増感剤」及び／又は「化学療法増感剤」として使用することができるか、あるいは、もう１種の「放射線増感剤」及び／又は「化学療法増感剤」と組み合わせて投与することができる。
【００９８】
本明細書で使用される用語「放射線増感剤」は、電離放射線に対する細胞の感受性を増し、そして／又は電離放射線で処置可能な疾患の処置を促進する治療的有効量を動物に投与される分子、好ましくは低分子量の分子と定義される。
【００９９】
本明細書で使用される用語「化学療法増感剤」は、化合療法に対する細胞の感受性を増し、そして／又は化学療法で処置可能な疾患の処置を促進する治療的有効量を動物に投与される、分子、好ましくは低分子量の分子と定義される。
【０１００】
酸素を模倣するあるいは、低酸素下で生体還元剤様の行動をする、低酸素細胞放射線増
感剤（例えば、２−ニトロイミダゾール化合物及びベンゾトリアジネ二酸化物化合物）；非低酸素細胞放射線増感剤（例えば、ハロゲン化ピリミジン）はＤＮＡ塩基の類似物であることができ、癌細胞のＤＮＡ中に優先的に取り込まれ、それによりＤＮＡ分子の放射線誘発の破壊を促進し、そして／又は正常なＤＮＡ修復機序を妨げることができる；を包含する、放射線増感剤の作用方法の幾つかの機序が文献に示唆されており、そして種々の他の可能な作用機序が疾患の処置における放射線増感剤に対して仮定されてきた。多数の癌処置プロトコールが近年、ｘ−線の照射と一緒に放射線増感剤を使用する。ｘ−線に活性化される放射線増感剤の例は、限定せずに、以下：メトロニダゾール、ミソニダゾール、デスメチルミソニダゾール、ピモニダゾール、エタニダゾール、ニモラゾール、マイトマイシンＣ、ＲＳＵ  １０６９、ＳＲ  ４２３３、ＥＯ９、ＲＢ  ６１４５、ニコチンアミド、５−ブロモデオキシウリジン（ＢＵｄＲ）、５−ヨードデオキシウリジン（ＩＵｄＲ）、ブロモデオキシシチジン、フルオロデオキシウリジン（ＦｕｄＲ）、ヒドロキシ尿素、シスプラチン及びそれらの治療的に有効な類似体及び誘導体を包含する。癌の光線力学的治療（ＰＤＴ）は増感剤の放射線活性化剤として可視光線を使用する。光線力学的放射線増感剤の例は、限定せずに、以下：ヘマトポルフィリン誘導体、フォトフリン、ベンゾポルフィリン誘導体、錫エチオポルフィリン、フェオボルビド−ａ、バクテリオクロロフィル−ａ、ナフタロシアニン、フタロシアニン、亜鉛フタロシアニン及びそれらの治療的に有効な類似体及び誘導体を包含する。放射線増感剤は、限定せずに、標的細胞中への放射線増感剤の取り込みを促進する化合物、標的細胞への治療剤、栄養物及び／又は酸素の流れを制御する化合物、更なる照射を伴い又は伴わずに腫瘍に対して作用する化学療法剤あるいは癌又は他の疾患を処置するための治療的に有効な他の化合物、を包含する、治療的に有効量の１種又は複数の他の化合物と一緒に投与することができる。
【０１０１】
化学療法増感剤は、限定せずに、標的細胞中への化学療法増感剤の取り込みを促進する化合物、標的細胞への治療剤、栄養物及び／又は酸素の流れを制御する化合物、腫瘍に対して作用する化学療法剤あるいは癌又は他の疾患を処置するための他の治療的に有効な化合物、を包含する、治療的に有効量の１種又は複数の他の化合物と一緒に投与することができる。カルシウムアンタゴニスト、例えばベラパミルは認可された化学療法剤に耐性の腫瘍細胞において化学療法感受性を確立し、そして薬剤感受性悪性腫瘍におけるこのような化合物の効果を強化するために、抗ガン剤と組み合わせて有用であることが見いだされる。
【０１０２】
それらの有用な薬理学的特性を考慮すると、本発明に従う組み合わせ物の成分、すなわち他の医薬及びｐ５３−ＭＤＭインヒビターは、投与目的のための種々の剤形に調合することができる。成分は個々の製薬学的組成物に別個に、又は両方の成分を含有する単一の製薬学的組成物に調合することができる。
【０１０３】
従って、本発明はまた、１種又は複数の製薬学的担体と一緒に、他の医薬及びｐ５３−ＭＤＭインヒビターを含んでなる製薬学的組成物を対象とする。
【０１０４】
本発明は更に、腫瘍細胞の増殖を妨げるための製薬学的組成物の製造における本発明に従う組み合わせ物の使用を対象とする。
【０１０５】
本発明は更に、癌を罹患している患者の処置における同時の、別個の又は連続的使用のための組み合わせ調製物として、第１の有効成分としての本発明に従うｐ５３−ＭＤＭ２インヒビター及び第２の有効成分としての抗ガン剤を含有する製品を対象とする。
【０１０６】
他の医薬及びｐ５３−ＭＤＭ２インヒビターは同時に（例えば別個の又は単一の組成物中）あるいはどんな順序でも連続して投与することができる。後者の場合には、２種の化合物は有利な又は相乗的効果が確実に達成されるのに十分な期間内で、十分な量及び方法
で投与されるであろう。組み合わせ物の各成分に対する投与の好ましい方法及び順序並びにそれぞれの投与量及び計画は、投与されている特定の他の医薬及びｐ５３−ＭＤＭ２インヒビター、それらの投与経路、処置されている特定の腫瘍及び処置されている特定の宿主に左右されるであろう。投与の最適な方法及び順序並びに投与量及び計画は従来の方法を使用し、本明細書に提示された情報を考慮して、当業者により容易に決定されることができる。
【０１０７】
白金配位化合物は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき１〜５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば５０〜４００ｍｇ／ｍ２、特にシスプラチンに対しては約７５ｍｇ／ｍ２、そしてカルボプラチンに対しては約３００ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１０８】
タキサン化合物は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき５０〜４００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば７５〜２５０ｍｇ／ｍ２、特にパクリタキセルに対しては約１７５〜２５０ｍｇ／ｍ２、そしてドセタキセルに対しては約７５〜１５０ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１０９】
カンプトテシン化合物は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき０．１〜４００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば１〜３００ｍｇ／ｍ２、特にイリノテカンに対しては約１００〜３５０ｍｇ／ｍ２、そしてトポテカンに対しては約１〜２ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１１０】
抗腫瘍ポドフィロトキシン誘導体は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき３０〜３００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば５０〜２５０ｍｇ／ｍ２、特にエトポシドに対しては約３５〜１００ｍｇ／ｍ２、そしてテニポシドに対しては約５０〜２５０ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１１１】
抗腫瘍ビンカアルカロイドは有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき２〜３０ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、特にビンブラスチンに対しては約３〜１２ｍｇ／ｍ２、ビンクリスチンに対しては約１〜２ｍｇ／ｍ２、そしてビノレルビンに対しては約１０〜３０ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１１２】
抗腫瘍ヌクレオシド誘導体は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき２００〜２５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば７００〜１５００ｍｇ／ｍ２、特に５−ＦＵに対しては約２００〜５００ｍｇ／ｍ２、ゲムシタビンに対しては約８００〜１２００ｍｇ／ｍ２、そしてカペシタビンに対しては約１０００〜２５００ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１１３】
ナイトロジェンマスタード又はニトロソ尿素のようなアルキル化剤は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき１００〜５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば１２０〜２００ｍｇ／ｍ２、特にシクロホスホアミドに対しては約１００〜５００ｍｇ／ｍ２、クロランブシルに対しては約０．１〜０．２ｍｇ／ｋｇ、カルムスチンに対しては約１５０〜２００ｍｇ／ｍ２、そしてロムスチンに対しては約１００〜１５０ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１１４】
抗腫瘍アントラサイクリン誘導体は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき１０〜７５ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば１５〜６０ｍｇ／ｍ２、特にドキソルビシンに対しては約４０〜７５ｍｇ／ｍ２、ダウノルビシンに対しては約２５〜４５ｍｇ／ｍ２、そしてイダルビシンに対しては約１０〜１５ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１１５】
抗エストロゲン剤は有利には、特定の薬剤及び処置される状態に応じて１日に約１〜１００ｍｇの用量で投与される。タモキシフェンは有利には５〜５０ｍｇ、好ましくは１０〜２０ｍｇを１日２回の用量で経口投与され、治療効果を達成し、維持するために十分な期間、治療を継続する。トレミフェンは有利には１日１回約６０ｍｇの用量で経口投与され、治療効果を達成し、維持するために十分な期間治療を継続する。アナストロゾールは有利には１日１回約１ｍｇの用量で経口投与される。ドロルオキシフェンは有利には１日１回約２０〜１００ｍｇの用量で経口投与される。ラルオキシフェンは有利には１日１回約６０ｍｇの用量で経口投与される。エキセメスタンは有利には１日１回約２５ｍｇの用量で経口投与される。
【０１１６】
抗体は有利には、１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき約１〜５ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）の用量で又は異なる場合は当該技術分野で知られたように投与される。トラストズマブは有利には１コースの処置当たり、体表面積１平方メーターにつき１〜５ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、特には２〜４ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０１１７】
これらの用量は１コースの処置当たり例えば１回、２回又は３回以上投与することができ、それを例えば７、１４、２１又は２８日毎に反復することができる。
【０１１８】
式（Ｉ）の化合物、それらの製薬学的に許容されうる酸付加塩及び立体異性体形態は、それらが、標識化合物及び／又はｐ５３及び／又はＭＤＭ２及び／又は他の分子、ペプチド、タンパク質、酵素又は受容体間の複合体の形成を検出又は測定する方法を含んでなる、生体サンプル中のｐ５３−ＭＤＭ２相互作用を検出又は特定するために使用することができるという貴重な診断的特性を有することができる。
【０１１９】
検出又は特定法は、放射性同位元素、酵素、蛍光物質、発光物質、等のような標識剤で標識される化合物を使用することができる。放射性同位元素の例は１２５Ｉ、１３１Ｉ、３Ｈ及び１４Ｃを包含する。酵素は通常、順次、検出可能な反応を触媒する適当な基質の接合により検出可能にされる。それらの例は、例えば、ベータ−ガラクトシダーゼ、ベータ−グルコシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ペルオキシダーゼ及びマレートデヒドロゲナーゼ、好ましくはホースラディッシュペルオキシダーゼを包含する。発光物質は例えば、ルミノール、ルミノール誘導体、ルシフェリン、エクロリン及びルシフェラーゼを包含する。生体サンプルは体組織又は体液と定義することができる。体液の例は脳脊髄液、血液、血漿、血清、尿、痰、唾液等である。
【０１２０】
以下の実施例は本発明を具体的に示す。
【実施例】
【０１２１】
実験部門
以後、「ＤＭＦ」はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、「ＤＣＭ」はジクロロメタン、「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチル、「ＥｔＯＨ」はエタノール、「ＭｅＯＨ」はメタノールそして「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランと定義される。
【０１２２】
融点
幾つかの化合物に対する融点は、直線温度勾配をもつ加熱板、スライドする指示計及び摂氏の温度目盛よりなるＫｏｆｌｅｒホットベンチにより得た。
【０１２３】
ＬＣＭＳ
方法Ａ
ＨＰＬＣ勾配は、脱気装置をもつ４基のポンプ（ａ  ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ  ｐｕｍｐ
）、自動検体採取機及びダイオード−アレイ検出器（ＤＡＤ）を含んでなるＡｌｌｉａｎｃｅ  ＨＴ  ２７９５（Ｗａｔｅｒｓ）システムにより供給された。カラムからの流れはＭＳ検出器に分離された。ＭＳ検出器は電子スプレイイオン化源を組み込まれていた。毛細針電圧は３ｋＶであり、電源温度はＬＣＴ（ＷａｔｅｒｓからのＦｌｉｇｈｔ−Ｚ−スプレイ塊分光計の時間）上で１００℃に維持された。ネブライザーガスとして窒素を使用した。データ獲得はＷａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘデータシステムを使用して実施した。逆走ＨＰＬＣは３０℃の温度、１．０ｍｌ／分の流速でＸｔｅｒｒａ−ＲＰ  Ｃ１８カラム（５μｍ，３．９×１５０ｍｍ）上で実施した。２種の移動相（移動相Ａ：１００％７ｍＭの酢酸アンモニウム、移動相Ｂ：１００％アセトニトリル）を使用して、８５％Ａ、１５％Ｂ（３分間維持）〜２０％Ａ、８０％Ｂ（５分間）の勾配状態で走行し、２０％Ａ及び８０％Ｂで６分間維持し、最初の条件で３分間再平衡させた。２０μｌの注入容量を使用した。コーン電圧は正のイオン化モードに対し２０Ｖであった。質量スペクトルは０．０８秒のインタースキャン遅延を使用して０．８秒間に１００〜９００をスキャンすることにより獲得した。
【０１２４】
方法Ｂ
ＬＣ勾配を、２基ポンプ、サンプルオーガナイザー、カラムヒーター（５５℃に設定）及びダイオード−アレイ検出器（ＤＡＤ）を含んでなるＡｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）システムにより供給された。カラムからの流れはＭＳ検出器に分離された。ＭＳ検出器は電子スプレイイオン化光線源を組み込まれていた。質量スペクトルは０．０２秒の滞留時間を使用して０．１８秒間に１００〜１０００をスキャンすることにより獲得した。毛細針電圧は３．５ｋＶであり、電源温度は１４０℃に維持された。ネブライザーガスとして窒素を使用した。データ獲得はＷａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘデータシステムを使用して実施した。逆走ＵＰＬＣは０．８ｍｌ／分の流速で、架橋エチルシロキサン／シリカ（ＢＥＨ）Ｃ１８カラム（１．７μｍ，２．１×５０ｍｍ）上で実施した。２種の移動相（移動相Ａ：０．１％のギ酸（Ｈ２Ｏ／メタノール、９５／５中）、移動相Ｂ：メタノール）を使用して、９５％Ａ〜５％Ａ、９５％Ｂ（１．３分間）の勾配状態で走行し、０．２分間維持した。０．５μｌの注入容量を使用した。コーン電圧は正のイオン化モードに対し１０Ｖであり、負のイオン化モードに対して２０Ｖであった。
【０１２５】
Ａ．中間体化合物の調製
実施例Ａ１
ａ）中間体１の調製
【０１２６】
【化１６】
2009530345.tif 000019
【０１２７】
５−ニトロインドリン（１０．０ｇ、０．０６１モル）及び４−クロロピリジン塩酸（１１．０ｇ、０．０７３モル）の溶液（６０ｍｌのＤＭＦ中）に、０℃、アルゴン下で、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１７．０ｇ、０．１５モル）を滴下した。混合物を１００℃で１６時間加熱した。混合物を氷中に注入し、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ５０／５０／０〜０／８０／２０）により２回精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、褐色−橙色の固体として２．４９ｇ（１７％）の中間体１を生成した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４７（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．４，
Ｊ＝１．６），８．０６（ｍ，２Ｈ），７．４１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．６），７．２８（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．４，Ｊ＝１．６），４．１６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．６），３．２２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．６）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２４２（Ｍ＋１）。
ｂ）中間体２の調製
【０１２８】
【化１７】
2009530345.tif 000020
【０１２９】
中間体１（２．４ｇ、０．０１０モル）及びラネーニッケル（５ｍｌ、水中５０％スラーリ）の混合物（４５ｍｌのＥｔＯＨ及び４５ｍｌのＴＨＦ中）を室温、３０ｐｓｉの水素下で３時間撹拌した。シーライトパッドを通して濾過後、溶媒を蒸発させると、褐色の固体として２．０１ｇ（９６％）の中間体２を与えた。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．３２（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．４，Ｊ＝１．５），７．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５），６．９２（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．４，Ｊ＝１．５），６．６３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２），６．５０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３，Ｊ＝２．４），３．９２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．３），３．４４（ｂｒｓ，２Ｈ），３．０８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．３）。
ｃ）中間体３の調製
【０１３０】
【化１８】
2009530345.tif 000021
【０１３１】
アルゴン下の中間体２（１．９ｇ、０．００８９モル）の溶液（２０ｍｌのＤＣＭ及び２０ｍｌのＴＨＦ中）に、インドール−３−酢酸（２．０ｇ、０．０１２モル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１．６ｇ、０．０１２モル）及び１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸（２．２ｇ、０．０１２モル）を連続して添加した。反応混合物を室温で４０時間撹拌した。反応を終結するために、インドール−３−酢酸（１．６ｇ、０．００８９モル）及び１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸（１．７ｇ、０．００８９ミリモル）を添加し、混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ  ９５／５／０．１〜８０／２０／０．１）により精製した。回収画分を蒸発させ、生成された固体をＭｅＯＨで洗浄し、乾燥すると、１．９５ｇ（６０％）の中間体３を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．９３（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０８（ｂｒｓ，１Ｈ），８．３１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．３），７．８８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１），７．５８（ｍ，２Ｈ），７．３４（ｍ，２Ｈ），７．２６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１），７．１７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．６），７．０７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．９），６．９８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．４），３．９９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．３），３．７１（ｓ，２Ｈ），３．１２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．２）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３６９（Ｍ＋１）。
【０１３２】
実施例Ａ２
ａ）中間体４の調製
【０１３３】
【化１９】
2009530345.tif 000022
【０１３４】
アルゴン下の５−ニトロインドリン（５．０ｇ、０．０３０モル）及び４−クロロキノリン（６．０ｇ、０．０３７モル）の溶液（３０ｍｌのＤＭＦ中）に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（８．４ｇ、０．０７５モル）を滴下した。混合物を１００℃で１６時間、次に室温で７０時間撹拌した。混合物を氷中に注入し、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機層を分離し、生理食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン  ５０／５０〜１００／０）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、橙色の固体として２．２６ｇ（２６％）の中間体４を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９），８．１１（ｍ，２Ｈ），７．９２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９，Ｊ＝２．５），７．８５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７），７．８２（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．０，Ｊ＝１．４），７．６０（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．８，Ｊ＝１．２），７．５４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９），６．２６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９），４．３０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．４），３．３５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．２）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２９２（Ｍ＋１）。
ｂ）中間体５の調製
【０１３５】
【化２０】
2009530345.tif 000023
【０１３６】
中間体４（２．０ｇ、０．００６９モル）及びラネーニッケル（３ｍｌ、水中５０％スラーリ）の混合物（３０ｍｌのＥｔＯＨ及び３０ｍｌのＴＨＦ中）を室温、３０ｐｓｉの水素下で４．５時間撹拌した。シーライトパッドを通して濾過後に、溶媒を蒸発させると、橙色の固体として１．８１ｇ（１００％）の中間体５を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１），８．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５），８．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５），７．６７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．０），７．４１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．１），７．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１），６．６７（ｓ，１Ｈ），６．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３），６．３８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３，Ｊ＝１．９），４．０４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．９），３．３９（ｂｒｓ，２Ｈ），３．１２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．８）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２６２（Ｍ＋１）。
ｃ）中間体６の調製
【０１３７】
【化２１】
2009530345.tif 000024
【０１３８】
アルゴン下の中間体５（１．７ｇ、０．００６４モル）の溶液（１５ｍｌのＤＣＭ及び１５ｍｌのＴＨＦ中）に、インドール−３−酢酸（１．５ｇ、０．００８４モル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１．１ｇ、０．００８４モル）及び１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸（１．６ｇ、０．００８４モル）を連続して添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ  ９０／１０／０．１）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、褐色の発泡体として１．１５ｇ（４３％）の中間体６を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．７４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１），８．６１（ｂｒｓ，１Ｈ），８．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１），７．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４），７．７０−７．６２（ｍ，２Ｈ），７．４１（ｍ，４Ｈ），７．２２（ｍ，３Ｈ），７．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１），６．７４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４，Ｊ＝１．８），６．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４），４．０４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．０），３．８９（ｓ，２Ｈ），３．１５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．９）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１９（Ｍ＋１）。
実施例Ａ３
ａ）中間体７の調製
【０１３９】
【化２２】
2009530345.tif 000025
【０１４０】
インドール−３−酢酸（２．０ｇ、０．０１３モル）及び１，１−カルボニルジイミダゾール（２．１ｇ、０．０１３モル、分割添加）の混合物（２８ｍｌのＤＣＭ中）を室温、アルゴン下で２時間撹拌した。Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸（１．３ｇ、０．０１３モル）を添加し、混合物を室温で１６時間撹拌し、次に氷及び水中に注入した。４Ｎの水酸化ナトリウム溶液でｐＨを１０に調整し、水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機層を分離し、３Ｎの塩酸溶液で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させると、ピンク色の固体として２．３７ｇ（８９％）の中間体７を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．０９（ｂｒｓ，１Ｈ），７．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５），７．３６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５），７．２２−７．１０（ｍ，３Ｈ），３．９２（ｓ，２Ｈ），３．６６（ｓ，３Ｈ），３．２３（ｓ，３Ｈ）。
実施例Ａ４
ａ）中間体８の調製
【０１４１】
【化２３】
2009530345.tif 000026
【０１４２】
５−ニトロインドリン（４．０ｇ、０．０２４モル）及び４−クロロ−２−ピリジンカルボン酸メチルエステル（５．０ｇ、０．０２９モル）の混合物（２４ｍｌの酢酸中）をＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒマイクロウエーブ装置中で１２０℃に２５分間加熱した。反応物を氷でクエンチし、炭酸カリウムの飽和溶液の添加によりｐＨ９にｐＨを調整した。混合物をＤＣＭで３回抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  １００／０〜９０／１０）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、黄色の固体として１．３７ｇ（１９％）の中間体８を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．６５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６），８．１６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９，Ｊ＝２．１），８．１１（ｓ，１Ｈ），７．９８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５），７．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９），７．３０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．７，Ｊ＝２．５），４．２３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．５），４．０５（ｓ，３Ｈ），３．３２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．４）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３００（Ｍ＋１）。
ｂ）中間体９の調製
【０１４３】
【化２４】
2009530345.tif 000027
【０１４４】
中間体８（１．２ｇ、０．００４５モル）及びラネーニッケル（４ｍｌ、水中５０％スラーリ）の混合物（２０ｍｌのＭｅＯＨ及び２０ｍｌのＴＨＦ中）を室温、１気圧の水素下で２０時間撹拌した。シーライトパッドを通して濾過後に、溶媒を蒸発させると、橙色の固体として１．０６ｇ（８８％）の中間体９を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．８），７．７７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５），７．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４），７．０５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．８，Ｊ＝２．６），６．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２），６．５２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４，Ｊ＝２．４），４．００（ｍ，５Ｈ），３．０９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．３）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２７０（Ｍ＋１）。
実施例Ａ５
ａ）中間体１０の調製
【０１４５】
【化２５】
2009530345.tif 000028
【０１４６】
５−アミノインドール（１．１ｇ、０．００８６モル）及び無水フタル酸（２．６ｇ、０．０１７モル）の混合物（２０ｍｌのＤＭＦ中）を１００℃で５時間、次に室温で６４時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ中に希釈し、塩化アンモニウムの飽和溶液で２回洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。生成された油を酢酸（１５ｍｌ）中に取り、室温で２０分間撹拌し、次に８０℃に１．５時間加熱した。氷を添加し、炭酸ナトリウムの飽和溶液でｐＨを４に調整した。混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン／  ４０／６０）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、２．０６ｇ（９１％）の中間体１０を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．３２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９７（ｍ，２Ｈ），７．７９（ｍ，２Ｈ），７．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０），７．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６），７．２７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．７，Ｊ＝２．８），７．１７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６，Ｊ＝２．０），６．６１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．１）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２６３（Ｍ＋１）。
ｂ）中間体１１の調製
【０１４７】
【化２６】
2009530345.tif 000029
【０１４８】
中間体１０（２．１ｇ、０．００７９モル）及びシアノホウ水素化ナトリウム（９８７ｍｇ、０．０１６モル）の混合物（３０ｍｌの酢酸中）を室温で１８時間撹拌した。氷を添加し、炭酸ナトリウムの飽和溶液でｐＨを６に調整した。混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機層を分離し、生理食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン／  ３０／７０〜７０／３０）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、黄色の固体として７２６ｍｇ（３５％）の中間体１１を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９３（ｍ，２Ｈ），７．７７（ｍ，２Ｈ），７．０９（ｓ，１Ｈ），７．００（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２），６．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２），３．６２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．４），３．０９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．４）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２６５（Ｍ＋１）。
ｃ）中間体１２の調製
【０１４９】
【化２７】
2009530345.tif 000030
【０１５０】
中間体１１（５７０ｍｇ、０．００２２モル）、４−ブロモ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−［１］ピリジン−７−オール（５５４ｍｇ、０．００２６モル）及び２−プロパノール中の５Ｎの塩酸溶液（０．５７ｍｌ、０．００２９モル）の混合物（１１ｍｌのＤＭＦ中）をＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒマイクロウエーブ装置中で１２０℃まで１時間加熱した。反応物を炭酸水素ナトリウムの飽和溶液でクエンチし、ＤＣＭで３回抽出した。溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  １００／０〜８０／２０、次にＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９５／５〜９０／１０）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、黄色の固体として６５１ｍｇ（７６％）の中間体１２を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．３０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６），７．９５（ｍ，２Ｈ），７．７９（ｍ，２Ｈ），７．２３−７．１２（ｍ，３Ｈ），６．９４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４），５．２４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．０），４．１８（ｍ，１Ｈ），４．０８（ｍ，１Ｈ），３．２５（ｍ，２Ｈ），３．００（ｍ，１Ｈ），２．８５（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｍ，１Ｈ），２．０６（ｍ，１Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９８（Ｍ＋１）。
ｄ）中間体１３の調製
【０１５１】
【化２８】
2009530345.tif 000031
【０１５２】
室温のヒドラジン水和物（１３７μｌ、０．００２８モル）を中間体１２（５５７ｍｇ、０．００１４モル）の懸濁液（５．５ｍｌのＭｅＯＨ中）に添加し、生成された混合物を７０℃に４０分間加熱した。反応物を水でクエンチし、ＥｔＯＡｃで４回抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させると、褐色−橙色の固体として３９２ｍｇ（１００％）の中間体１３を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．８），７．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．８），６．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３），６．６３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１），６．４８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３，Ｊ＝２．４），５．２１（ｍ，１Ｈ），４．１９（ｂｒｓ，２Ｈ），４．０３（ｍ，３Ｈ），３．０５（ｍ，３Ｈ），２．８４（ｍ，１Ｈ），２．５０（ｍ，１Ｈ），２．０３（ｍ，１Ｈ）。
実施例Ａ６
ａ）中間体１４の調製
【０１５３】
【化２９】
2009530345.tif 000032
【０１５４】
２，３−ジヒドロ−３，３−ジメチル−５−ニトロ−１Ｈ−インドール（０．００３モル）及び４−ブロモ−ピリジン（０．００３モル）の混合物（５ｍｌの１−ブタノール中）をマイクロウエーブオーブン中、シール管中で１４０℃に３０分間加熱し、次に１０％炭酸カリウム溶液中に取り、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水、次にＮａＣｌ及び生理食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣（０．８ｇ）をシリカゲル（２０〜４５μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  １００／０〜９８／２）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させた。残渣（０．４５ｇ、６４％）をアセトニトリルから結晶化した。沈殿物を濾取し、乾燥すると、０．２１６ｇ（３１％）の中間体１４、融点２１７℃（Ｋｏｆｌｅｒ）を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．４（６Ｈ，ｓ），３．９２（２Ｈ，ｓ），７．３（２Ｈ，ｍ），７．４５（１Ｈ，ｍ），８．１０（２Ｈ，ｍ），８．４７（２Ｈ，ｍ）
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２７０（Ｍ＋１），Ｒｔ＝０．７７，方法  Ｂ
ｂ）中間体１５の調製
【０１５５】
【化３０】
2009530345.tif 000033
【０１５６】
中間体１４（０．００３モル）及びラネーニッケル（０．９ｇ）の混合物（２０ｍｌのＭｅＯＨ中）を３バール圧力下、室温で１時間水素化し、次にシーライト上で濾過した。シーライトをＭｅＯＨで洗浄した。濾液を蒸発させると、０．８ｇ（１００％）の中間体１５を生成した。
ｃ）中間体１６の調製
【０１５７】
【化３１】
2009530345.tif 000034
【０１５８】
ブロモトリス（ピロリジノ）ホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート（０．００４モル）を中間体１５（０．００３モル）、１Ｈ−インドール−３−酢酸（０．００４モル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．０４モル）及びジイソプロピルエーテル（０．００５モル）の溶液（１５ｍｌのＤＣＭ中）に室温で分割して添加した。混合物を室温で１晩撹拌した。有機層を１０％炭酸カリウム溶液で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、
濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣（３．２ｇ）をシリカゲル（１５〜４０μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ  ９５／５／０．２）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させた。残渣（０．７ｇ、５２％）をアセトニトリルから結晶化した。沈殿物を濾取し、乾燥すると、０．５５ｇ（４１％）の中間体１６、融点１５８℃（Ｋｏｆｌｅｒ）を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．２８（６Ｈ，ｓ），３．７（２Ｈ，ｓ），３．７３（２Ｈ，ｓ），６．９９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７，０７−７．１１（３Ｈ，ｍ），２．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ），７．３０−７．３９（３Ｈ，ｍ），７．５５（１Ｈ，ｂｒ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），８．３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），１０．０３（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），１０．９２（１Ｈ，ｂｒ，ｓ）
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９７（Ｍ＋１），Ｒｔ＝８．４３，方法  Ａ
Ｂ．最終化合物の調製
実施例Ｂ１  化合物１の調製
【０１５９】
【化３２】
2009530345.tif 000035
【０１６０】
リチウムアルミニウム水素化物（４２３ｍｇ、０．００１１モル）を中間体３（１．０ｇ、０．００２７モル）の懸濁液（６０ｍｌのＴＨＦ中）にアルゴン下で分割添加した。混合物を室温で２４時間撹拌し、氷及び希釈Ｒｏｃｈｅｌｌｅ塩溶液でクエンチし、ＤＣＭで３回抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ  ９５／５／０．１）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、黄色の発泡体として１７０ｍｇ（１８％）の化合物１を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．３６（ｂｒｓ，１Ｈ），８．３２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．６），７．６３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８），７．３９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５），７．２４−７．１１（ｍ，３Ｈ），７．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８），６．９３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．６），６．５８（ｓ，１Ｈ），６．４５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４，Ｊ＝２．１），３．９３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．２），３．６２（ｂｒｓ，１Ｈ），３．４６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５），３．０９（ｍ，４Ｈ）。
ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３５５（Ｍ＋１），Ｒｔ＝８．３０，方法  Ａ
実施例Ｂ２  化合物２の調製
【０１６１】
【化３３】
2009530345.tif 000036
【０１６２】
アルゴン下、室温で、リチウムアルミニウム水素化物（３９１ｍｇ、０．０１０モル）を中間体６（１．１ｇ、０．００２６モル）の溶液（５５ｍｌのＴＨＦ中）に分割添加した。混合物を室温で１８時間撹拌した。反応物を０℃でＭｅＯＨでクエンチした。氷及び
希釈Ｒｏｃｈｅｌｌｅ塩溶液を添加し、混合物をＤＣＭで３回抽出した。有機層を分離し、生理食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ  ９７／３／０．５）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、橙色の発泡体として１２１ｍｇ（１２％）の化合物２を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．１），８．１８（ｂｒｓ，１Ｈ），８．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７），８．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７），７．６６（ｍ，２Ｈ），７．４１（ｍ，２Ｈ），７．２２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．７），７．１２（ｍ，３Ｈ），６．６３（ｓ，１Ｈ），６．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４），６．３４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４，Ｊ＝２．１），４．０６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．８），３．４６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８），３．１２（ｍ，４Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０５（Ｍ＋１）。
実施例Ｂ３  化合物３の調製
【０１６３】
【化３４】
2009530345.tif 000037
【０１６４】
０℃、アルゴン下で、リチウムアルミニウム水素化物（１４ｍｇ、０．０００３６モル）を中間体７（７４ｍｇ、０．０００３６モル）の溶液（１ｍｌのＴＨＦ中）に添加した。混合物を０℃で１時間撹拌し、硫酸水素カリウムの５％溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機層を分離し、生理食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させると、橙色の油としてインドール−３−イル・アセトアルデヒドを与えた。
【０１６５】
中間体９（２００ｍｇ、０．０００７４モル）及びシアノホウ水素化ナトリウム（６４ｍｇ、０．００１０モル）の混合物（２．３ｍｌのＭｅＯＨ及び２滴の酢酸中）を前記のアルデヒド（２３６ｍｇ、０．００１５モル）の溶液（２ｍｌのＭｅＯＨ中）に滴下した。反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応物を水でクエンチし、炭酸水素ナトリウムの飽和溶液でアルカリ性にし、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機層を分離し、生理食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  １００／０〜９０／１０）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、橙色の発泡体として１９０ｍｇ（４４％）の化合物３を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．７），８．０８（ｂｒｓ，１Ｈ），７．７９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４），７．６３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８），７．４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１），７．２５−７．０７（ｍ，５Ｈ），６．５９（ｓ，１Ｈ），６．４８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７，Ｊ＝２．１），４．００（ｍ，５Ｈ），３．４８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８），３．１２（ｍ，４Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１３（Ｍ＋１）。
実施例Ｂ４  化合物４の調製
【０１６６】
【化３５】
2009530345.tif 000038
【０１６７】
ホウ水素化ナトリウム（９２ｍｇ、０．００２４モル）を化合物３（１００ｍｇ、０．０００２４モル）の溶液（３ｍｌのＭｅＯＨ中）に緩徐に添加した。混合物を室温で１時間、次に８０℃で４時間、そして再度室温で８５時間撹拌した。反応物を水でクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、生理食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９０／１０〜８５／１５）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、黄色の発泡体として５０ｍｇ（５４％）の化合物４を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．８３（ｂｒｓ，１Ｈ），８．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．７），７．５４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８），７．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８），７．２２（ｍ，２Ｈ），７．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１），７．７０（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６，Ｊ＝１．２），６．９８（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５，Ｊ＝０．９），６．８６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．０，Ｊ＝２．４），６．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１），６．４５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７，Ｊ＝２．２），５．３９（ｂｒｓ，２Ｈ），４．４９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．０），３．９２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．２），３．３０（ｍ，２Ｈ），３．０６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．１），２．９６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３８５（Ｍ＋１）。
実施例Ｂ５  化合物５の調製
【０１６８】
【化３６】
2009530345.tif 000039
【０１６９】
０℃、アルゴン下で、リチウムアルミニウム水素化物（１４ｍｇ、０．０００３６モル）を中間体７（７４ｍｇ、０．０００３６モル）の溶液（１ｍｌのＴＨＦ中）に添加した。混合物を０℃で１時間撹拌し、硫酸水素カリウムの５％溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機層を分離し、生理食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させると，橙色の油としてインドール−３−イル・アセトアルデヒドを与えた。
【０１７０】
中間体１３（１００ｍｇ、０．０００３７モル）及びシアノホウ水素化ナトリウム（３３ｍｇ、０．０００５２モル）の混合物（１．５ｍｌのＭｅＯＨ及び２滴の酢酸中）に前記のアルデヒド（５７ｍｇ、０．０００３６モル）の溶液（０．５ｍｌのＭｅＯＨ中）を滴下した。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。反応物を炭酸水素ナトリウムの飽和溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機層を分離し、生理食塩水で洗浄し、乾
燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（４０〜６３μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  １００／０〜９０／１０）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、黄色の発泡体として７９ｍｇ（５２％）の化合物５を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．３７（ｂｒｓ，１Ｈ），８．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．８），７．６３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８），７．３７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．１），７．２１（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６，Ｊ＝１．２），７．１２（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６，Ｊ＝１．１），７．０７（ｍ，２Ｈ），６．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５），６．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０），６．４０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５，Ｊ＝２．３），５．２２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．７），４．１９（ｂｒｓ，１Ｈ），４．０４（ｍ，３Ｈ），３．４４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．７），３．０６（ｍ，５Ｈ），２．８３（ｍ，１Ｈ），２．５４（ｍ，１Ｈ），２．０８（ｍ，１Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１１（Ｍ＋１）。
実施例Ｂ６  化合物６の調製
【０１７１】
【化３７】
2009530345.tif 000040
【０１７２】
中間体１６（０．００１モル）をＮ２流下でリチウムアルミニウムテトラヒドリド（０．００２モル）の溶液（１０ｍｌのＴＨＦ中）に分割添加した。混合物を２４時間撹拌還流し、氷水中に注入し、シーライト上で濾過した。シーライトをＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣（０．４５ｇ）をシリカゲル（１０μｍ）上カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ  ９５／５／０．５）により精製した。純粋な画分を回収し、溶媒を蒸発させると、０．０４２ｇの化合物６を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．２８（６Ｈ，ｓ），２．９５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），３．２７−３．３４（２Ｈ，ｍ），３．６５（２Ｈ，ｓ），５．３８（１Ｈ，ｂｒ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），６．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，７．７Ｈｚ），６．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ），６．９６−７．０２（３Ｈ，ｍ），７．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．１５−７．５（３Ｈ，ｍ），７．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），８．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），１０．８３（１Ｈ，ｂｒ，ｓ）
ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３８３（Ｍ＋１），Ｒｔ＝９．１７，方法  Ａ
表Ｆ−１は前記の実施例の１つ中で調製された化合物を記載する。
【０１７３】
【表２】
2009530345.tif 000041
【０１７４】
Ｃ．薬理学的実施例
Ａ２７８０細胞中にｐ５３を保存する化合物の能力を、ｐ５３エンザイムイムノアッセイで測定した。ｐ５３アッセイは２種のポリクローナル抗体を使用する「サンドイッチ」酵素免疫測定である。ｐ５３タンパク質に特定なポリクローナル抗体をプラスチックウェルの表面上に固定した。測定されるサンプル中に存在するあらゆるｐ５３が捕捉抗体に結合するであろう。ビオチニル化検出ポリクローナル抗体もまたｐ５３タンパク質を認識し、捕捉抗体により保持されたあらゆるｐ５３に結合するであろう。検出抗体は順次、ホースラディッシュペルオキシダーゼ−接合ストレプトアビジンにより結合される。ホースラディッシュペルオキシダーゼは発色基質のｏ−フェニレンジアミンの転化を触媒し、その強度がプレートに対するｐ５３タンパク質結合量に比例する。着色反応生成物を分光光度計を使用して定量する。定量は精製組み換えＨＩＳ標識ｐ５３タンパク質の知られた濃度を使用する標準曲線の構成により達成される（実施例Ｃ．１参照）。
【０１７５】
式（Ｉ）の化合物の細胞活性は、細胞毒性又は生存率に対する比色測定を使用してＵ８７ＭＧ腫瘍細胞に対して決定した（実施例Ｃ．２参照）。
【０１７６】
Ｕ８７ＭＧ細胞は野生型ｐ５３をもつヒトのグリア芽腫細胞である。この細胞株において、ＭＤＭ２はｐ５３の発現を密接に制御する。
【０１７７】
実施例Ｃ．１．  ｐ５３  ＥＬＩＳＡ
Ａ２７８０細胞（ＡＴＣＣ）を、３７℃の、５％ＣＯ２を含む湿潤インキュベーター中で、１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）、２ｍＭのＬ−グルタミン及びゲンタマイシンを添加されたＲＰＭＩ  １６４０中で培養した。
【０１７８】
Ａ２７８０細胞を９６ウェルのプレート中にウェル当たり２０．０００個の細胞を播種
し、２４時間培養し、そして湿潤インキュベーター中で３７℃で１６時間、化合物で処理した。インキュベーション後に、細胞をリン酸バッファー生理食塩水で１回洗浄し、ウェル毎に、３０μｌの、低塩ＲＩＰＡバッファー（２０ｍＭのトリス、ｐＨ７．０、０．５ｍＭのＥＤＴＡ、１％のＮｏｎｉｄｅｔ  Ｐ４０、０．５％のＤＯＣ、０．０５％のＳＤＳ、１ｍＭのＰＭＳＦ、１μｇ／ｍｌのアプロチニン及び０．５μ／ｍｌのロイペプチン）を添加した。プレートを３０分間氷上において、溶解を終結させた。ｐ５３タンパク質を下記のサンドイッチＥＬＩＳＡを使用することによりｄｅ  ｌｙｓａｔｅｓにおいて検出した。
【０１７９】
高結合ポリスチレンＥＩＡ／ＲＩＡ  ９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ  ９０１８）をウェル当り５０μｌの、コートバッファー（０．１ＭのＮａＨＣＯ３、ｐＨ８．２）中１μｇ／ｍｌの濃度の捕捉抗体ｐＡＢ１８０１（Ａｂｃａｍ  ａｂ２８−１００）でコートした。抗体を４℃で１晩付着させた。コートしたプレートを、リン酸バッファー生理食塩水（ＰＢＳ）／０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０で１回洗浄し、３００μｌのブロッキングバッファー（ＰＢＳ、１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ））を室温で２時間のインキュベーション期間にわたり添加した。３〜２００ｎｇ／ｍｌの範囲の精製組み換えＨＩＳ標識ｐ５３タンパク質の希釈物をブロックキングバッファー中に調製し、標準として使用した。
【０１８０】
プレートをＰＢＳ／０．０５％Ｔｗｅｅｎ  ２０で２回洗浄し、ブロッキングバッファー又は標準物を８０μｌ／ウェルで添加した。標準物に対して２０μｌの溶解バッファーを添加した。サンプルを２０μｌ溶解液／ウェルで他のウェルに添加した。４℃で１晩のインキュベーション後、プレートをＰＢＳ／０．０５％Ｔｗｅｅｎ  ２０で２回洗浄した。ブロッキングバッファー中１μｇ／ｍｌの濃度の１００μｌの第２ポリクローナル抗体ｐ５３（ＦＬ−３９３）（Ｔｅｂｕｂｉｏ，ｓｃ−６２４３）のアリコートを各ウェルに添加し、室温で２時間付着させた。プレートをＰＢＳ／０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０で３回洗浄した。ＰＢＳ／１％ＢＳＡ中０．０４μｇ／ｍｌの検出抗体抗ウサギＨＲＰ（ｓｃ−２００４，Ｔｅｂｕｂｉｏ）を添加し、室温で１時間インキュベートした。プレートをＰＢＳ／０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０で３回洗浄し、１００μｌの基質バッファーを添加した（基質バッファーは、２５ｍｌのＯＰＤバッファー：３５ｍＭのクエン酸、６６ｍＭのＮａ２ＨＰＯ４、ｐＨ５．６に、Ｓｉｇｍａからの１０ｍｇのｏ−フェニレンジアミン（ＯＰＤ）１錠及び１２５μｌの３％Ｈ２Ｏ２を添加することにより、使用直前に調製された）。５〜１０分後に、ウェル当り５０μｌの停止バッファー（１ＭのＨ２ＳＯ４）を添加することにより着色反応を停止した。４９０／６５５ｎｍの二波長における吸収をＢｉｏｒａｄミクロプレート読み取り機を使用して測定し、次に結果を分析した。
【０１８１】
各実験につき、対照（薬剤を含まない）及びブランクインキュベーション（細胞も薬剤も含まない）を平行して実施した。ブランク値はすべての対照値及びサンプル値から差し引いた。各サンプルに対し、ｐ５３の値（吸収単位における）は対照中に存在するｐ５３の値の百分率として表された。１４０％より高い保存率が有意であると定義された。ここで、試験化合物の効果は、対照中に存在するｐ５３に対する値の少なくとも１４０％を与える最低量として表される（ＬＡＤ）（表Ｆ−２参照）。
【０１８２】
実施例Ｃ．２．  増殖アッセイ
試験されるすべての化合物をＤＭＳＯに溶解し、培養培地中に更なる希釈物を調製した。最終ＤＭＳＯ濃度は細胞増殖アッセイ中０．１％（ｖ／ｖ）を決して超えなかった。対照は化合物を含まずにＵ８７ＭＧ細胞及びＤＭＳＯを含有し、そしてブランクはＤＭＳＯを含有したが細胞を含有しなかった。
【０１８３】
Ｕ８７ＭＧ細胞を３０００細胞／ウェル／１００μｌで９６−ウェル細胞培養プレート中に播種した。２４時間後、培地を変え、化合物及び／又は溶媒を２００μｌの最終容量まで添加した。４日のインキュベーション後、培地を２００μｌの新鮮な培地により交換
し、ＭＴＴ−基剤のアッセイを使用して細胞増殖を測定した。従って、２５μｌのＭＴＴ溶液（リン酸バッファー生理食塩水中Ｓｅｒｖａからの０．５％ＭＴＴ研究等級）を各ウェルに添加し、細胞を更に、３７℃で２時間インキュベートした。次に培地を注意して吸引し、各ウェルに２５μｌの０．１Ｍのグリシン及び１００μｌのＤＭＳＯを添加することにより青色のＭＴＴ−ホルマザン製品を溶解した。プレートをミクロプレートシェーカー上で更に１０分間震盪し、次にＢｉｏｒａｄミクロプレート読み取り機により５４０ｎｍの吸収を読み取った。
【０１８４】
実験期間中、各実験条件の結果は３個の複製ウェルの平均である。最初のスクリーニングの目的のために、化合物を１０−５Ｍの単一の固定濃度で試験した。有効な化合物に対しては、完全な濃度−反応曲線を確立するための実験を反復した。各実験に対し、対照（薬剤を含まない）及びブランクインキュベート（細胞も薬剤も含まない）を平行して実施した。すべての対照及びサンプル値からブランク値を差し引いた。各サンプルに対し、細胞増殖の平均値（吸収単位における）は対照の細胞増殖の平均値の百分率として表した。適当な場合には、ＩＣ５０−値（対照の５０％まで細胞増殖を減少させるために要する薬剤の濃度）を、漸変データのｐｒｏｂｉｔ分析（Ｆｉｎｎｅｙ，Ｄ．Ｊ．，Ｐｒｏｂｉｔ
Ａｎａｌｙｓｅｓ，２ｎｄ  Ｅｄ．Ｃｈａｐｔｅｒ  １０，Ｇｒａｄｅｄ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ，Ｃａｍｐｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  １９６２）を使用して計算した。ここでは、試験化合物の効果はｐＩＣ５０（ＩＣ５０−値のマイナス対数値）として表す（表Ｆ−２参照）。
【０１８５】
幾つかの実験において、増殖アッセイは３８４−ウェル培養プレートに対して適用され、使用された（表Ｆ−２参照）。
【０１８６】
【表３】
2009530345.tif 000042
【０１８７】
実施例Ｄ．  組成物実施例：フィルムコート錠
錠剤コアの調製
１００ｇの式（Ｉ）の化合物、５７０ｇのラクトース及び２００ｇのデンプンの混合物を十分混合し、その後、５ｇのナトリウムドデシルスルフェート及び１０ｇのポリビニル−ピロリドンの溶液（約２００ｍｌの水中）で湿潤化する。湿った粉末混合物をふるい、乾燥し、再度ふるう。次いで１００ｇの微細結晶セルロース及び１５ｇの水素化植物油を添加する。全体を十分に混合し、打錠すると、各１０ｍｇの式（Ｉ）の化合物を含んでなる１０．０００錠を与える。
【０１８８】
コーティング
１０ｇのメチルセルロースの溶液（７５ｍｌの変性エタノール中）に５ｇのエチルセル
ロースの溶液（１５０ｍｌのジクロロメタン中）を添加する。次いで７５ｍｌのジクロロメタン及び２．５ｍｌの１，２，３−プロパントリオールを添加する。１０ｇのポリエチレングリコールを融解し、７５ｍｌのジクロロメタン中に溶解する。後者の溶液を前者に添加し、次に２．５ｇのマグネシウムオクタデカノエート、５ｇのポリビニルピロリドン及び３０ｍｌの濃厚色素懸濁物を添加し、全体をホモジネート化する。コーティング装置内で、錠剤のコアをこのように得た混合物でコートする。
【国際調査報告】
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