(57)【要約】β−グルクロニド系リンカーを含むリガンド薬物結合体化合物と、そのような化合物を用いる方法とを提供する。本発明は、標的型薬物投与のためのリガンド薬物結合体およびリンカー−薬物結合体を提供する。本リガンド薬物結合体は、標的細胞または標的組織を結合体の標的とするための、抗体などのリガンドを含む。本結合体は、さらに、β−グルクロニダーゼ活性を有する酵素によって開裂させることができる部位を含むβ−グルクロニド系リンカーを含む。本リンカーは、リガンドと薬物とに結合られる。本発明は、さらに、β−グルクロニド系リンカーを含むリガンド薬物結合体を用いて癌、免疫疾患、感染症およびその他の疾患または障害を治療する方法を提供する。驚くべきことに、本リガンド薬物結合体は、さらに、血清安定性を顕わして結合薬物の標的細胞への標的型送達を提供する。
2009501800.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
2009501800.tif 000070
を有し、式中、
Ｌ−は、リガンド単位であり、
−Ａａ−Ｗｗ−Ｙｙ−は、リンカー単位（ＬＵ）であり、
−Ａ−は、任意選択の伸長体単位であり、
ａは、０、１または２であり、
各−Ｗ−は、独立して、グルクロニド単位であり、
ｗは、１から２の範囲の整数であり、
−Ｙ−は、任意選択の自己犠牲スペーサー単位であり、
ｙは、０、１または２であり、
ｐは、１から２０の範囲にあり、
−Ｄは、薬物単位である、
リガンド薬物結合体化合物、または薬学的に許容されるその塩または溶媒和化合物。
【請求項２】
Ｌは抗体である、請求項１に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項３】
前記抗体は、ヒト化、キメラ、またはヒト抗体もしくは抗体の抗原結合抗体フラグメントである、請求項２に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項４】
前記抗体は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２８、ＣＤＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ７９、ＣＤ９０、ＣＤ１５２／ＣＴＬＡ４、ＰＤ１またはＩＣＯＳに結合する、請求項３に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項５】
前記抗体は、ＣＤ２０、ＣＤ３０またはＣＤ７０に結合する、請求項４に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項６】
式
【化２】
2009501800.tif 000071
を含み、Ｓｕは糖部分であり、−Ｏ’−はグリコシド結合であり、Ｚは自己犠牲基であり；Ｚは、ｙ＝１または２の場合はＹと、あるいはｙ＝０の場合はＤと、第１の共有結合を形成し、そしてＺは、ａ＝１または２の場合はＡと、あるいはａ＝０の場合はＬと、第２の共有結合を形成する、請求項１に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項７】
以下の式
【化３】
2009501800.tif 000072
のうちの１つを有し、各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮまたは−ＮＯ２である、請求項６に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項８】
式
【化４】
2009501800.tif 000073
を有する、請求項７に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項９】
式
【化５】
2009501800.tif 000074
を有する、請求項８に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項１０】
式
【化６】
2009501800.tif 000075
を有する、請求項９に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項１１】
式
【化７】
2009501800.tif 000076
を有し、ｍＡｂはモノクローナル抗体である、請求項１０に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項１２】
前記薬物部分は、式ＤＥおよびＤＦ
【化８】
2009501800.tif 000077
から選択され、各位置で独立して、
Ｒ２は、ＨおよびＣ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環、アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環、アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、
Ｒ５は、Ｈおよびメチルから選択されるか、
または、Ｒ４とＲ５とは一緒になって炭素環を形成し、式−（ＣＲａＲｂ）ｎ−を有し、ここでＲａおよびＲｂは、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよびＣ３〜Ｃ８炭素環から選択され、ｎは、２、３、４、５および６から選択され、
Ｒ６は、ＨおよびＣ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環、アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、
各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環およびＯ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）から選択され、
Ｒ９は、ＨおよびＣ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ１０は、アリールおよびＣ３〜Ｃ８複素環から選択され、
Ｚは、Ｏ、Ｓ、ＮＨまたはＮＲ１２であり、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８複素環、−（Ｒ１３Ｏ）ｍ−Ｒ１４および−（Ｒ１３Ｏ）ｍ−ＣＨ（Ｒ１５）２から選択され、
ｍは、１〜１０００の範囲の整数であり、
Ｒ１３は、Ｃ２〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１４は、ＨまたはＣ１〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１５の各位置は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（Ｒ１６）２、−（ＣＨ２）ｎ−ＳＯ３Ｈまたは−（ＣＨ２）ｎ−ＳＯ３−Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１６の各位置は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキルまたは、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨであり、
Ｒ１８は、−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−アリール、−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）、および−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）から選択され、
Ｘ１は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンであり、
ｎは、０から６の範囲の整数である
請求項に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項１３】
Ｄは、式ＤＦ
【化９】
2009501800.tif 000078
である、請求項１２に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項１４】
Ｄは、式
【化１０】
2009501800.tif 000079
である、請求項１２に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項１５】
Ｄは、式ＤＥ
【化１１】
2009501800.tif 000080
である、請求項１２に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項１６】
Ｄは、式
【化１２】
2009501800.tif 000081
である、請求項１５に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項１７】
ｐは、約２から約６である、請求項１に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項１８】
ｐは、約２から約４である、請求項１に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項１９】
式
【化１３】
2009501800.tif 000082
を有し、
Ｒ１７は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−ＣＨ２−であり、ｒは、１〜１０の範囲の整数である
請求項６に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項２０】
式
【化１４】
2009501800.tif 000083
を有する、請求項６に記載のリガンド薬物結合体化合物であって、
Ｓは、該リガンドのスルフヒドリル基である、化合物。
【請求項２１】
Ｄは、ドキソルビシン、カリケアマイシン、スタウロスポリン、アミノＣＢＩ副溝バインダーＳＮ２６５９７またはＤＭ１である、請求項１に記載のリガンド薬物結合体化合物。
【請求項２２】
請求項１に記載の前記リガンド薬物結合体化合物または薬学的に許容されるその塩の有効な量と、薬学的に許容される希釈剤、キャリアまたは賦形剤とを含む、医薬品組成物。
【請求項２３】
治療的に有効な量の化学治療剤をさらに含む、請求項２２に記載の医薬品組成物。
【請求項２４】
腫瘍細胞または癌細胞を死滅させるかあるいは腫瘍細胞または癌細胞の増殖を阻害するための方法であって、該腫瘍細胞または癌細胞を死滅させるかあるいは該腫瘍細胞または癌細胞の増殖を阻害するのに有効な量の、請求項１に記載のリガンド薬物結合体化合物あるいは薬学的に許容されるその塩または溶媒和物で、腫瘍細胞または癌細胞を処理することを含む、方法。
【請求項２５】
請求項４に記載の前記抗体−薬物結合体化合物あるいは薬学的に許容されるその塩または溶媒和物のある量を患者に投与することを含む、癌を治療するための方法であって、該量は、癌を治療するために有効である、方法。
【請求項２６】
追加の抗癌剤、免疫抑制剤または抗感染因子の有効な量を投与することをさらに含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
請求項１に記載のリガンド薬物結合体化合物あるいは薬学的に許容されるその塩または溶媒和物のある量を患者に投与することを含む、自己免疫疾患を治療するための方法であって、該量は、該自己免疫疾患を治療するのに有効である、方法。
【請求項２８】
請求項１に記載のリガンド薬物結合体化合物あるいは薬学的に許容されるその塩または溶媒和化合物のある量を患者に投与することを含む、感染症を治療するための方法であって、該量は、該感染症を治療するのに有効である、方法。
【請求項２９】
前記リガンド薬物結合体化合物は、薬学的に許容される希釈剤、キャリアまたは賦形剤を含む製剤である、請求項２４から２８の任意の１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記患者に投与されるリガンド薬物結合体化合物の前記量は、患者体重１ｋｇ当たり約０．１から約１５ｍｇの範囲である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記リガンド薬物結合体化合物は約３週間の間隔で投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記リガンド薬物結合体化合物は非経口または静脈内投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
前記リガンド薬物結合体化合物は薬学的に許容される非経口ベヒクルを用いて製剤化される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記リガンド薬物結合体化合物は単位用量注射可能形態に製剤化する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３５】
式
【化１５】
2009501800.tif 000084
を有し、
−Ａ−は、伸長体単位であり、
ａは、１または２であり、
各−Ｗ−は、独立して、グルクロニド単位であり、
ｗは、１から２の範囲の整数であり、
−Ｙ−は、任意選択の自己犠牲スペーサー単位であり、
ｙは、０、１または２であり、
−Ｄは、薬物単位である
薬物リンカー結合体化合物、または薬学的に許容されるその塩または溶媒和物。
【請求項３６】
式
【化１６】
2009501800.tif 000085
を有し、
Ｓｕは、糖部分であり、−Ｏ’−は、グリコシド結合であり、Ｚは、自己犠牲基であり；Ｚは、ｙ＝１または２の場合はＹと、あるいはｙ＝０の場合はＤと、第１の共有結合を形成し、そしてＺはＡと第２の共有結合を形成する、
請求項３５に記載の薬物リンカー結合体化合物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
（関連出願）
本願は、２００５年６月１８日に出願された米国仮特許出願第６０／７００，４２２号、および２００６年３月４日に出願された米国仮特許出願第６０／７７９，０７６号の利益を主張し；それらの開示は本明細書中に参考として援用される。
【０００２】
（背景）
モノクローナル抗体療法は、癌の補助治療および第一線治療として本格化しつつある。結腸癌用アバスチン（抗ＶＥＧＦ）、非ホジキンリンパ腫用リツキサン（リツキシマブ、抗ＣＤ２０）、および乳癌用ハーセプチン（抗Ｈｅｒ２）が成功したことによって、非結合体化抗体が毒性をそれほど高めないで患者生存率を改善することが実証された。
【０００３】
モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、治療薬と結合体化して抗体薬物結合体（ＡＤＣ）を形成することができる。ＡＤＣは、非結合体化抗体と比較すると増大した効力を示すことができる。抗体を薬物に結合するときは直接でもよく、リンカーを介して間接でもよい。効能があり、認容性に優れたＡＤＣを開発するために重要と思われる要素の１つは、リンカーの組成および安定性である。ＡＤＣの種類によっては、リンカーによって望ましくは血清安定性が得られ、さらに、標的細胞においてまたは標的細胞内で薬物を選択的に放出する。
【０００４】
リンカーのｍＡｂへの結合は、表面リシン仲介、酸化型炭水化物への還元カップリング、および鎖間ジスルフィド結合を還元して遊離化したシステイン残基仲介など、さまざまな方法で実現することができる。文献には、ヒドラゾン系、ジスルフィド系およびペプチド系結合を含む、さまざまなＡＤＣ結合システムが記載されている。いくつかのヒドラゾン系およびジスルフィド系リンカーは、循環時に不安定化し、その結果、標的組織外で薬物を放出することがある。この早すぎる薬物放出によって、全身毒性または器官特異毒性および／または非最適治療効能を生じる可能性があると考えられる。ペプチド系リンカー戦略によれば、高安定性リンカーを得ることができるが、リンカーによっては同時に疎水性が増加するため、特に、疎水性の強い薬物では凝集を起こすことがある。そのような凝集の結果、非標的組織へのＡＤＣの非特異的摂取が起こり、非標的毒性に影響を及ぼす可能性がある。
【０００５】
β−グルクロニドは、肝臓および腎臓でＵＤＰ−グルクロノシルトランスフェラーゼとして知られる種類の酵素によって産生される代謝産物である。これらのトランスフェラーゼは、生体異物を体内から排除する代謝変換に関与する。グルクロン酸化によって基質化合物の溶解性が劇的に増加し、腎クリアランスの効率を高くすることができる。
【０００６】
β−グルクロニダーゼは、基本的にすべてのヒト組織のリソソーム中に存在するＵＤＰ−グルクロノシルトランスフェラーゼである。この酵素は、β−配置を有するグルクロニドのグリコシド結合の加水分解を触媒し、広い基質特異性を有すると報告されている。この酵素は、低ｐＨで最も活性が高く、酵素効率は中性ｐＨでは約１０％低下する。β−グルクロニダーゼは、腫瘍周辺組織と比べると乳癌組織中で過剰発現すると報告された。この酵素はどこにでもあるが、事実上細胞リソソームの内部に隔離され、正常組織試料の細胞外空間では最小限の免疫組織化学的染色しか観測されない。１つの例外は、腸管中で見られるβ−グルクロニダーゼ活性であり、大腸菌が存在すると生じる。
【０００７】
正常組織とは異なり、壊死腫瘍組織の間質腔は、高水準のβ−グルクロニダーゼ活性を示す。この源は、炎症細胞であり、腫瘍組織から直接ではないと考えられる。この観察を根拠として、単剤療法における研究のためにβ−グルクロニドプロドラッグ（主にドキソルビシンの）が調製された。この手法の論拠は、β−グルクロニドプロドラッグは細胞に入ることができないので、遊離薬物より毒性が低いということである。プロドラッグには２つの主な消長経路がある。すなわち、腫瘍近傍のプロドラッグは遊離薬物に変換されるが、残余のプロドラッグは腎臓を通って速やかに排除される。ＡＤＥＰＴ（抗体指向酵素プロドラッグ療法）に用いられるβ−グルクロニドプロドラッグが報告された。しかし、β−グルクロニドプロドラッグ利用治療には高い全身レベルのプロドラッグが必要であり、その結果、望ましくない毒性を伴うことがある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
従って、標的細胞を消滅させるが、非標的細胞への毒性を低くする結果となるプロドラッグを標的に投与することへの求めが依然存在する。
【０００９】
さらに、高い水準のリンカー血清安定性と溶解性の増加とをもたらし、効率的な疎水性薬物の結合体化を可能にし、薬物の細胞内送達を実現する、リンカーシステムを有するＡＤＣへの求めがある。
【００１０】
本発明は、これらおよびその他の弱点、ならびに過去の問題点を解決する。（本願中でいかなる参考文献を挙げたとしても、その参考文献が本願の先行技術であると認めるものではない。）
【課題を解決するための手段】
【００１１】
（簡単な要旨）
本発明は、標的型薬物投与のためのリガンド薬物結合体およびリンカー−薬物結合体を提供する。本リガンド薬物結合体は、標的細胞または標的組織を結合体の標的とするための、抗体などのリガンドを含む。本結合体は、さらに、β−グルクロニダーゼ活性を有する酵素によって開裂させることができる部位を含むβ−グルクロニド系リンカーを含む。本リンカーは、リガンドと薬物とに結合られる。本発明は、さらに、β−グルクロニド系リンカーを含むリガンド薬物結合体を用いて癌、免疫疾患、感染症およびその他の疾患または障害を治療する方法を提供する。驚くべきことに、本リガンド薬物結合体は、さらに、血清安定性を顕わして結合薬物の標的細胞への標的型送達を提供する。
【００１２】
一態様では、以下の式
【００１３】
【化１７】
2009501800.tif 000003
を有するリガンド薬物結合体化合物、あるいは薬学的に許容されるその塩または溶媒和物。式中、
Ｌ−は、リガンド単位、
−Ａａ−Ｗｗ−Ｙｙ−は、リンカー単位（Ｌｕ）、
−Ａ−は、任意選択の伸長体（Ｓｔｒｅｔｃｈｅｒ）単位、
ａは、０、１または２、
各−Ｗ−は、独立して、グルクロニド単位、
ｗは、１から２の範囲の整数、
−Ｙ−は、任意選択の自己犠牲（ｓｅｌｆ−ｉｍｍｏｌａｔｉｖｅ）スペーサー単位、
ｙは、０、１または２、
ｐは、１から約２０の範囲にあり、
−Ｄは、薬物単位である。
【００１４】
実施態様によって、リガンドは、キメラ抗体、ヒト化抗体またはヒト抗体などの抗体、あるいは抗原結合抗体フラグメントである。
【００１５】
実施態様によって、グルクロニド単位（−Ｗ−）は、式
【００１６】
【化１８】
2009501800.tif 000004
を含む。式中、Ｓは糖部分、−Ｏ’−はグリコシド結合（例えば、β−グルクロニダーゼによって開裂可能）、Ｚは自己犠牲基である。式中、Ｚは、ＹまたはＤと第１の共有結合を形成し、ＬまたはＡと第２の共有結合を形成する。
【００１７】
実施態様によって、グルクロニド単位（−Ｗ−）は、式
【００１８】
【化１９】
2009501800.tif 000005
を含む。式中、Ｓは糖部分、−Ｏ’−はβ−グルクロニダーゼによって開裂可能な結合、Ｚは自己犠牲基である。式中、ＺはＹまたはＤと共有結合を形成し、Ｓｕは、ＬまたはＡと共有結合を形成する。
【００１９】
実施態様によって、薬物単位は、式ＤＥおよびＤＦ’
【００２０】
【化２０】
2009501800.tif 000006
から選択される。式中、
Ｒ２は、ＨおよびＣ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環、アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環、アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、
Ｒ５は、Ｈおよびメチルから選択され、
あるいは、Ｒ４とＲ５とは一緒になって炭素環を形成し、式−（ＣＲａＲｂ）ｎ−を有し、ＲａおよびＲｂは、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよびＣ３〜Ｃ８炭素環から選択され、ｎは、２、３、４、５および６から選択され、
Ｒ６は、ＨおよびＣ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環、アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、
各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環およびＯ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）から選択され、
Ｒ９は、ＨおよびＣ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ１０は、アリールおよびＣ３〜Ｃ８複素環から選択され、
Ｚは、Ｏ、Ｓ、ＮＨまたはＮＲ１２であり、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８複素環、−（Ｒ１３Ｏ）ｍ−Ｒ１４および−（Ｒ１３Ｏ）ｍ−ＣＨ（Ｒ１５）２から選択され、
ｍは、１〜１０００の範囲の整数であり、
Ｒ１３は、Ｃ２〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１４は、ＨまたはＣ１〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１５の各部位は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（Ｒ１６）２、−（ＣＨ２）ｎ−ＳＯ３Ｈまたは−（ＣＨ２）ｎ−ＳＯ３−Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１６の各部位は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキルまたは−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨであり、
Ｒ１８は、−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−アリール、−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）および−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）から選択され、
Ｘ１は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンであり、
ｎは、０から６の範囲の整数である。
【００２１】
実施態様によって、薬物単位は、式ＤＦ
【００２２】
【化２１】
2009501800.tif 000007
である。
【００２３】
実施態様によって、薬物単位は、式
【００２４】
【化２２】
2009501800.tif 000008
を有する。
【００２５】
実施態様によって、薬物単位は、式ＤＥ
【００２６】
【化２３】
2009501800.tif 000009
を有する。
【００２７】
実施態様によって、薬物単位は、式
【００２８】
【化２４】
2009501800.tif 000010
を有する。
【００２９】
実施態様によって、リガンド薬物結合体化合物は、以下の式
【００３０】
【化２５】
2009501800.tif 000011
を有する。
【００３１】
式中、Ｒ１７は、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−または−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−ＣＨ２−の直接結合であり、ｒは、１〜１０の範囲の整数である。
【００３２】
実施態様によって、リガンド薬物結合体化合物は、式
【００３３】
【化２６】
2009501800.tif 000012
を有する。
【００３４】
本リガンド薬物結合体化合物は、有効量の本リガンド薬物結合体化合物または薬学的に許容されるその塩と、薬学的に許容される希釈剤、キャリアまたは賦形剤とを含む医薬品組成物として製剤化してよい。本医薬品組成物は、任意選択として、治療有効量の化学療法剤を含んでよい。
【００３５】
別の態様では、腫瘍細胞または癌細胞を殺すか、あるいは増殖阻害する方法が提供される。本方法は、全体として、腫瘍細胞または癌細胞を殺すか増殖阻害するのに有効な量のリガンド薬物結合体化合物または薬学的に許容されるその塩または溶媒和物で腫瘍細胞または癌細胞を処理することを含む。
【００３６】
別の態様では、癌を治療するための方法が提供される。本方法は、全体として、ある量の本抗体薬物結合体化合物または薬学的に許容されるその塩または溶媒和物を患者に投与することを含む。その量は、癌を処理するのに有効である。本方法は、任意選択として、有効な量の追加の抗癌剤、免疫抑制剤または抗感染症剤を投与することを含んでよい。
【００３７】
別の態様では、自己免疫疾患を治療するための方法が提供される。本方法は、ある量のリガンド薬物結合体化合物または薬学的に許容されるその塩または溶媒和物を患者に投与することを含む。その量は、自己免疫疾患を治療するのに有効である。
【００３８】
別の態様では、感染症を治療するための方法が提供される。本方法は、全体として、ある量のリガンド薬物結合体化合物または薬学的に許容されるその塩または溶媒和物を患者に投与することを含む。その量は、感染症を治療するのに有効である。
【００３９】
本発明のこれらの態様およびその他の態様は、添付の図面とともに、以下の好ましい実施態様の詳細な説明を参照すれば最もよく理解される。下記の考察は、記載し、説明し、例を示すものであり、添付のいかなる請求項によって定義される範囲をも限定すると理解するべきでない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４０】
（詳細な説明）
開示を分りやすくするためであるが限定を目的とすることなく、本発明の詳細な説明を以下の副次的な節に分ける。
【００４１】
（定義）
特に断らない限り、本明細書で用いられる以下の用語および句は、以下の意味を有するものとする。本明細書で商標名を用いるとき、商標名は、特に断らない限り、商標名製品製剤、商標名製品の後発薬剤および活性医薬品成分（単数または複数）を含む。
【００４２】
本明細書における用語「抗体」は、最も広い意味で用いられ、原形のモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、および所望の生物活性（例えば抗原結合）を示す抗体フラグメントを指す。抗体は、任意の型または種類（例えばＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤおよびＩｇＡ）または亜種（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）であってよい。
【００４３】
「原形」抗体は、抗原結合可変領域、ならびに抗体の種類として適切である軽鎖不変分域（ＣＬ）および重鎖不変分域、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３および／またはＣＨ４を含む抗体である。不変分域は、野生型配列不変分域（例えば、ヒト野生型配列不変分域）またはそのアミノ酸配列変化形であってよい。
【００４４】
抗体は、１つ以上の「エフェクター機能」を有してよい。エフェクター機能とは、抗体のＦｃ領域（野生型配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列変化形Ｆｃ領域）に帰せられる生物活性を指す。抗体エフェクター機能の例は、Ｃ１ｑ結合、補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞媒介細胞毒性（ＡＤＣＣ）、食細胞作用、細胞表面受容体の下方調節（例えば、Ｂ細胞受容体、ＢＣＲ）等を含む
「単鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体フラグメントは、抗体のＶＨ分域およびＶＬ分域を含み、これらの分域は、単一ポリペプチド鎖中に存在する。Ｆｖポリペチドは、通常、さらに、ＶＨ分域とＶＬ分域との間のポリペチドリンカーを含、み、ｓｃＦｖは、ポリペプチドリンカーによって抗体結合のための所望の構造を形成することができる。ｓｃＦｖの概要については、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，  ｖｏｌ．  １１３，  Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ，  ｅｄｓ．，  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ｐｐ．  ２６９−３１５（１９９４）のＰｌｕｅｃｋｔｈｕｎを参照すること。
【００４５】
用語「ダイアボディー」は、２つの抗原結合部位を有する小型抗体フラグメントを指す。このフラグメントは、同じポリペプチド鎖中の可変軽分域（ＶＬ）に結合した可変重分域（ＶＨ）を含む。短すぎて同じ鎖の２つの分域の間の対形成（ＶＨ−ＶＬ）が可能にならないリンカーを用いることによって、これらの分域は、別の鎖の相補分域と対形成するしかなく、２つの抗原結合部位が発生する。例えば、欧州特許第０  ４０４  ０９７号、国際特許第９３／１１１６１号、およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８にダイアボディーがもっと詳しく記載されている。２つの抗原結合部位は、同じであっても異なっていてもよい。
【００４６】
「単離された」抗体は、特定され、分離され、および／またはその自然環境の成分から回収された抗体である。その自然環境の汚染成分は、抗体のための診断使用または治療使用を妨害する物質であり、酵素、ホルモンおよびその他の蛋白質溶質または非蛋白質溶質を含んでよい。実施態様によって、抗体は、（１）ローリー法で測定して抗体の９５重量％を超え、または９９重量％を超え、（２）スピニングカップシークエネーターを用いてＮ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度に、または（３）クーマシーブルーまたは銀染色を用いて還元条件下または非還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥによって均一に精製される。単離された抗体は、組み換え細胞内のインサイチュ抗体を含む。抗体の自然環境の少なくとも１つの成分が存在しないからである。しかし、普通は、単離された抗体は、少なくとも１つの精製ステップによって調製される。
【００４７】
対象となる抗原と「結合する」抗体は、抗原を発現する細胞を標的とするとき抗体が有用であるように十分な親和力で抗原と結合することができる抗体である。
【００４８】
用語「特異性結合する」および、「特異性結合」は、予め定められた抗原に結合する抗体を指す。通常、抗体は、少なくとも約１×１０７Ｍ−１の親和力で結合し、予め定められた抗原または密接に関連する抗原以外の非特異性抗原（例えば、ＢＳＡ、カゼイン）への結合の親和力より少なくとも２倍大きな親和力で予め定められた抗原に結合する。
【００４９】
用語「治療有効量」は、哺乳類における疾患または障害を治療するのに有効な薬物（例えばリガンド薬物結合体またはリンカー薬物結合体）の量を指す。癌の場合、治療有効量の薬物は、癌細胞の数を減らし、腫瘍サイズを小さくし、癌細胞の周辺器官への侵入を抑制し（すなわち、ある程度遅くし、好ましくは停止させ）、腫瘍転移を抑制し（すなわち、ある程度遅くし、好ましくは停止させ）、腫瘍成長をある程度抑制し、および／または癌に関連する症状の１つ以上をある程度軽減させることができる。薬物は、既存癌細胞の成長を妨げ、および／または死滅させる程度に応じて、細胞増殖抑制性および／または細胞毒性であってよい。癌療法の場合、例えば、効力は、無憎悪期間（ＴＴＰ）を評価し、および／または奏功率（ＲＲ）を求めて測定することができる。
【００５０】
用語「標的ポリペチド」、「標的蛋白質」および「標的抗原」は、蛋白質、ポリペチドを指し、さらに、「標的抗原」の場合には、標的細胞の表面にあるかまたは標的細胞と会合している別の分子を指す。
【００５１】
用語「式の化合物」、「式の化合物」および類似用語における「化合物」は、化合物それ自体、ならびに、明示的に言明されているか否かにかかわらず、状況によって除外されることが明らかな場合を除いて、以下のものを指し、包含する。多形を含む、化合物の非晶質および結晶の形。これらの形は、混合物の一部であってもよく、単離されていてもよい。化合物の遊離酸および遊離塩基の形。これらの形は、通常、本明細書に提供される構造物において示される形である。化合物の異性体。これらの異性体は、光学異性体および互変異性体を指し、光学異性体は、エナンチオマーおよびジアステレオマー、キラル異性体および非キラル異性体を含む。これらの光学異性体は、単離された光学異性体、ならびにラセミ混合物および非ラセミ混合物を含む光学異性体の混合物を含む。異性体は、単離された形または１つ以上の異性体との混合物であってよい。重水素および三重水素含有化合物を含む化合物の同位体。これらは、ラジオアイソトープを含む化合物を含み、治療に有効な、および診断に有効な放射性元素を含む。二量体、三量体等の形を含む化合物の多量体の形。化合物の塩、好ましくは、薬学的に許容される塩。これらは、酸付加塩および塩基付加塩を含み、有機対イオンおよび無機対イオンを有する塩を含み、双性イオン形を含む。化合物が２つ以上の対イオンと会合するなら、２つ以上の対イオンは同じであってよく、または異なっていてよい。化合物の溶媒和物。これらは、半溶媒和物、一溶媒和物、二溶媒和物等を含む。これらは、有機溶媒和物および無機溶媒和物を含み、前記無機溶媒和物は、化合物が２つ以上の溶媒分子と会合する場合、２つ以上の溶媒分子は同じであってよく、または異なっていてよい水和物を含む。場合によって、本明細書で本発明の化合物を参照するとき、１つ以上の上記の形、例えば、塩および溶媒和物への明示的な参照を含む。しかし、この参照は、強調だけを目的とし、上記で特定した上記の形の他のものを除外すると解釈するべきではない、
用語「アルキル」は、表示炭素原子数を有する直鎖または分岐、飽和または不飽和の炭化水素を指す（例えば、「Ｃ１〜Ｃ８アルキル」は、１から８の炭素原子を有するアルキル基を指す）。炭素原子数が表示されていないとき、アルキル基は１から８の炭素原子を有する。代表的な「Ｃ１〜Ｃ８アルキル」基は、メチル（Ｍｅ、−ＣＨ３）、エチル（Ｅｔ、−ＣＨ２ＣＨ３）、１−プロピル（ｎ−Ｐｒ、ｎ−プロピル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−プロピル（ｉ−Ｐｒ、ｉ−プロピル、−ＣＨ（ＣＨ３）２）、１−ブチル（ｎ−Ｂｕ、ｎ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−メチル−１−プロピル（ｉ−Ｂｕ、ｉ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２−ブチル（ｓ−Ｂｕ、ｓ−ブチル、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、２−メチル−２−プロピル（ｔ−Ｂｕ、ｔ−ブチル、−Ｃ（ＣＨ３）３）、１−ペンチル（ｎ−ペンチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２−メチル−２−ブチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３）、３−メチル−２−ブチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２）、３−メチル−１−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２−メチル−１−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、１−ヘキシル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−ヘキシル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−ヘキシル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３））、２−メチル−２−ペンチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−メチル−２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、４−メチル−２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、３−メチル−３−ペンチル（−Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２−メチル−３−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）−ＣＨ（ＣＨ３）２）、２，３−ジメチル−２−ブチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ（ＣＨ３）２）、および３，３−ジメチル−２−ブチル（−ＣＨ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）３を含むがそれらに限定されない。アルキル基は、非置換であってよく、または−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ’、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、−ＳＯ３Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＨ、−ハロゲン、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｒ’）、−Ｎ（Ｒ’）２および−ＣＮを含むがそれらに限定されない１つ以上の基で置換されていてよい。式中、各Ｒ’は、独立して、Ｈ、非置換Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよびアリールから選択される。
【００５２】
用語「アルケニル」は、少なくとも１つの不飽和部位、すなわち炭素−炭素、ｓｐ２二重結合を有するノルマル、２級、３級または環状炭素原子を含むＣ２〜Ｃ１８炭化水素を指す。例は、エチレンまたはビニル（−ＣＨ＝ＣＨ２）、アリル（−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）、シクロペンテニル（−Ｃ５Ｈ７）および５−ヘキセニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）を含むがそれらに限定されない。
【００５３】
用語「アルキニル」は、少なくとも１つの不飽和部位、すなわち炭素−炭素、ｓｐ三重結合を有するノルマル、２級、３級または環状炭素原子を含むＣ２〜Ｃ１８炭化水素を指す。例は、アセチレン（−Ｃ≡ＣＨ）およびプロパルギル（−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）を含むがそれらに限定されない。
【００５４】
用語「アルキレン」は、１〜１８の炭素原子の飽和、分枝、直鎖または環状炭化水素ラジカルを指し、親アルカンの同じ炭素原子または２つの異なる炭素原子から２つの水素原子を除去して誘導された２つの一価ラジカル中心を有する。典型的なアルキレンは、メチレン（−ＣＨ２−）、１，２−エチル（−ＣＨ２ＣＨ２−）、１，３−プロピル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、１，４−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）および類似物を含むがそれらに限定されない。
【００５５】
用語「アルケニレン」は２〜１８の炭素原子の不飽和、分枝、直鎖または環状炭化水素ラジカルを指し、親アルケンの同じ炭素原子または２つの異なる炭素原子から２つの水素原子を除去して誘導された２つの一価ラジカル中心を有する。典型的なアルケニレンラジカルは、１，２−エチレン（−ＣＨ＝ＣＨ−）を含むがそれらに限定されない。
【００５６】
用語「アルキニレン」は、２〜１８の炭素原子の不飽和、分枝、直鎖または環状炭化水素ラジカルを指し、親アルキンの同じ炭素原子または２つの異なる炭素原子から２つの水素原子を除去して誘導された２つの一価ラジカル中心を有する。典型的なアルキニレンラジカルは、アセチレン（−Ｃ≡Ｃ−）、プロパルギル（−ＣＨ２Ｃ≡Ｃ−）および４−ペンチニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ≡Ｃ−）を含むがそれらに限定されない。
【００５７】
用語「アリール」は、親の芳香環系の１つの炭素原子から１つの水素原子を除去して誘導された６〜２０の炭素原子の一価芳香族炭化水素ラジカルを指す。構造の例で、いくつかのアリール基は「Ａｒ」と表される。アリール基は置換されていなくてよく、または置換されていてよい。典型的なアリール基は、ベンゼン、置換ベンゼン、フェニル、ナフタレン、アントラセン、ビフェニルおよび類似物から誘導されたラジカルを含むがそれらに限定されない。アリールは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ’、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＨ、−ハロゲン、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｒ’）、−Ｎ（Ｒ’）２および−ＣＮを含むがそれらに限定されない１つ以上の基で置換されていてよい。式中、各Ｒ’は、独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよび非置換アリールから選択される。
【００５８】
用語「アリールアルキル」は、炭素原子、通常は末端炭素原子またはｓｐ３炭素原子に結合した水素原子の１つがアリールラジカルで置換された非環式アルキルラジカルを指す。典型的なアリールアルキル基は、ベンジル、２−フェニルエタン−１−イル、２−フェニルエテン−１−イル、ナフチルメチル、２−ナフチルエタン−１−イル、２−ナフチルエテン−１−イル、ナフトベンジル、２−ナフトフェニルエタン−１−イルおよび類似基を含むがそれらに限定されない。アリールアルキル基は、６から２０の炭素原子を含み、例えば、アルカニル基、アルケニル基またはアルキニル基を含むアリールアルキル基のアルキル部分は、１から６の炭素原子であり、アリール部分は、５から１４の炭素原子である。
【００５９】
用語「ヘテロアリールアルキル」は、炭素原子、通常は末端炭素原子またはｓｐ３炭素原子に結合した水素原子の１つがヘテロアリールラジカルで置換された非環式アルキルラジカルを指す。典型的なヘテロアリールアルキル基は、２−ベンゾイミダゾリルメチル、２−フリルエチルおよび類似基を含むがそれらに限定されない。ヘテロアリールアルキル基は、６から２０の炭素原子を含み、例えば、アルカニル基、アルケニル基またはアルキニル基を含むヘテロアリールアルキル基のアルキル部分は、１から６の炭素原子であり、ヘテロアリール部分は、５から１４の環原子、通常１から３のＮ、０、ＰおよびＳから選ばれたヘテロ原子であり、他は炭素原子である。ヘテロアリールアルキル基のヘテロアリール部分は、３から７の環原子（２から６の炭素原子）を有する単環、または７から１０の環原子（４から９の炭素原子）とＮ、０、ＰおよびＳから選ばれた１から３のヘテロ原子とを有する二環、例えば、ビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］または［６，６］系であってよい。
【００６０】
用語「アリーレン」は、２つの共有結合を有し、以下の構造式：
【００６１】
【化２７】
2009501800.tif 000013
に示されるパラ、メタまたはオルト配置であってよいアリール基を指す。フェニル基は、置換されていなくてよく、または−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ’、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＨ、−ハロゲン、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｒ’）、−Ｎ（Ｒ’）２および−ＣＮを含むがそれらに限定されない最大４つの基で置換されていてよい。式中、各Ｒ’は、独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよびアリールから選択される。
【００６２】
用語「置換アルキル」、「置換アリール」および「置換アリールアルキル」は、１つ以上の水素原子がそれぞれ独立に置換基で置換されたアルキル、アリールおよびアリールアルキルをそれぞれ指す。典型的な置換基は、−Ｘ、−Ｒ、−Ｏ−、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｓ−、−ＮＲ２、−ＮＲ３、＝ＮＲ、−ＣＸ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−ＮＣＳ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、ＮＲＣ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２、−ＳＯ３−、−ＳＯ３Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＲ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）２、−ＰＯ−３、−ＰＯ３Ｈ２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、−ＣＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ２および−Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲ２を含むがそれらに限定されない。式中、各Ｘは、独立して、ハロゲン、すなわち、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり、各Ｒは、独立して、−Ｈ、Ｃ２〜Ｃ１８アルキル、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ３〜Ｃ１４複素環、保護基またはプロドラッグ部分である。上記に記載したアルキレン、アルケニレンおよびアルキニレン基も、同様に置換されていてよい。
【００６３】
用語「ヘテロアリール」および「複素環」は、１つ以上の環原子がヘテロ原子、例えば窒素、酸素、リン酸塩および硫黄である環系を指す。複素環ラジカルは、１から２０の炭素原子と、Ｎ、Ｏ、ＰおよびＳから選ばれた１から３のヘテロ原子とを含む。複素環は、３から７の環原子（２から６の炭素原子と、Ｎ、Ｏ、ＰおよびＳから選ばれた１から３のヘテロ原子）を有する単環、または７から１０の環原子（４から９の炭素原子と、Ｎ、Ｏ、ＰおよびＳから選ばれた１から３のヘテロ原子）を有する二環、例えば、ビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］または［６，６］系であってよい。複素環は、Ｐａｑｕｅｔｔｅ，  ”Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”（Ｗ．Ａ．  Ｂｅｎｊａｍｉｎ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９６８）、特に第１、３、４、６、７および９章；”Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，  Ａ  ｓｅｒｉｅｓ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｓ”（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９５０から現在まで）、特に第１３、１４、１６、１９および２８巻、およびＪ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  ８２：５５６６（１９６０）に記載されている。
【００６４】
複素環化合物の例は、例えば、ピリジル、ジヒドロキシピリジル、テトラヒドロピリジル（ピペリジル）、チアゾリル、テトラヒドロチオフェニル、硫黄酸化テトラヒドロチオフェニル、ピリミジニル、フラニル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、テトラゾリル、ベンゾフラニル、チアナフタレニル、インドリル、インドレニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリル、ピペリジニル、４−ピペリドニル、ピロリジニル、２−ピロリドニル、ピロリニル、テトラヒドロフラニル、ビス−テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ビス−テトラヒドロピラニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オクタヒドロイソキノリニル、アゾシニル、トリアジニル、６Ｈ−１，２，５−チアジアジニル、２Ｈ，６Ｈ−１，５，２−ジチアジニル、チエニル、チアントレニル、ピラニル、イソベンゾフラニル、クロメニル、キサンテニル、フェノキサンテニル、２Ｈ−ピロリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリジニル、イソインドリル、３Ｈ−インドリル、１Ｈ−インダゾリル、プリニル、４Ｈ−キノリジニル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、プテリジニル、４ａＨ−カルバゾリル、カルバゾリル、β−カルボリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、ピリミジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フラザニル、フェノキサジニル、イソクロマニル、クロマニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピペラジニル、インドリニル、イソインドリニル、キヌクリジニル、モルホリニル、オキサゾリジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、オキサインドリル、ベンゾオキサゾリニル、およびイサチノイルを含むがそれらに限定されない。
【００６５】
例えば、炭素結合複素環は、以下の位置、すなわち、ピリジンの２、３、４、５または６位；ピリダジンの３、４、５または６位；ピリミジンの２、４、５または６位；ピラジンの位２、３、５または６；フラン、テトラヒドロフラン、チオフラン、チオフェン、ピロールまたはテトラヒドロピロールの２、３、４または５位；オキサゾール、イミダゾールまたはチアゾールの２、４または５位；イソオキサゾール、ピラゾールまたはイソチアゾールの３、４または５位；アジリジンの２または３位；アゼチジンの２、３または４位；キノリンの２、３、４、５、６、７または８位；またはイソキノリンの１、３、４、５、６、７または８位で結合されるがそれらに限定されない。さらにより一般的には、炭素結合複素環は、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、５−ピリジル、６−ピリジル、３−ピリダジニル、４−ピリダジニル、５−ピリダジニル、６−ピリダジニル、２−ピリミジニル、４−ピリミジニル、５−ピリミジニル、６−ピリミジニル、２−ピラジニル、３−ピラジニル、５−ピラジニル、６−ピラジニル、２−チアゾリル、４−チアゾリルおよび５−チアゾリルを含む。
【００６６】
例えば、窒素結合複素環は、アジリジン、アゼチジン、ピロール、ピロリジン、２−ピロリン、３−ピロリン、イミダゾール、イミダゾリジン、２−イミダゾリン、３−イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、２−ピラゾリン、３−ピラゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドール、インドリンまたは１Ｈ−インダゾールの１位、イソインドールまたはイソインドリンの２位、モルホリンの４位およびカルバゾールまたはβ−カルボリンの９位を含むがそれらに限定されない位置に結合する。さらにより一般的には、窒素結合複素環は、１−アジリジル、１−アゼテジル、１−ピロリル、１−イミダゾリル、１−ピラゾリルおよび１−ピペリジニルを含む。
【００６７】
用語「炭素環」は、３から７の炭素原子を単環として有するか、７から１２の炭素原子を二環として有する飽和または不飽和環を指す。単環炭素環化合物は、３から６の環原子を有し、さらに一般的には５または６の環原子を有する。二環炭素環は、例えば、ビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］または［６，６］系として配置された７から１２の環原子、あるいはビシクロ［５，６］または［６，６］系として配置された９または１０の環原子を有する。単環炭素環の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、１−シクロペント−１−エニル、１−シクロペント−２−エニル、１−シクロペント−３−エニル、シクロヘキシル、１−シクロヘキス−１−エニル、１−シクロヘキス−２−エニル、１−シクロヘキス−３−エニル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルを含む。
【００６８】
「Ｃ３〜Ｃ８炭素環」は、３、４、５、６、７または８員飽和または不飽和非芳香族である。代表的なＣ３〜Ｃ８炭素環式化合物は、−シクロプロピル、−シクロブチル、−シクロペンチル、−シクロペンタジエニル、−シクロヘキシル、−シクロヘキセニル、−１，３−シクロヘキサジエニル、−１，４−シクロヘキサジエニル、−シクロヘプチル、−１，３−シクロヘプタジエニル、−１，３，５−シクロヘプタトリエニル、−シクロオクチルおよび−シクロオクタジエニルを含むがそれらに限定されない。Ｃ３〜Ｃ８炭素環基は、置換されていなくてよく、または−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ’、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＨ、−ハロゲン、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｒ’）、−Ｎ（Ｒ’）２および−ＣＮを含むがそれらに限定されない１つ以上の基で置換されていてよい。式中、各Ｒ’は、独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよびアリールから選択される。
【００６９】
「Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ」は、炭素環基の水素原子の１つが結合によって置換された、上記で定義されるＣ３〜Ｃ８炭素環基を指す。
【００７０】
「Ｃ１〜１０アルキレン」は、直鎖、飽和炭化水素基−（ＣＨ２）１〜１０−である。Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンの例は、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン、ヘプチレン、オクチレン、ノニレンおよびデカレンを含む。
【００７１】
「Ｃ３〜Ｃ８複素環」は、環炭素原子の１つから４つが、独立して、Ｏ、ＳおよびＮからなる群からのヘテロ原子で置換された芳香族または非芳香族Ｃ３〜Ｃ８炭素環を指す。Ｃ３〜Ｃ８複素環の代表的な例は、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェン、インドリル、ベンゾピラゾリル、クマリニル、イソキノリニル、ピロリル、チオフェニル、フラニル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、キノリニル、ピリミジニル、ピリジニル、ピリドニル、ピラジニル、ピリダジニル、イソチアゾリル、イソオキサゾリルおよびテトラゾリルを含むがそれらに限定されない。Ｃ３〜Ｃ８複素基は、置換されていなくてよく、または−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ’、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＨ、−ハロゲン、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｒ’）、−Ｎ（Ｒ’）２および−ＣＮを含むがそれらに限定されない最大７つの基で置換されていてよい。式中、各Ｒ’は、独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよびアリールから選択される。
【００７２】
「Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ」は、複素環基の水素原子の１つが結合によって置換された、上記で定義されるＣ３〜Ｃ８複素環基を指す。Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロは、置換されていなくてよく、または−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ’、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−ＯＨ、−ハロゲン、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｒ’）、−Ｎ（Ｒ’）２および−ＣＮを含むがそれらに限定されない最大６つの基で置換されていてよい。式中、各Ｒ’は、独立して、Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよびアリールから選択される。
【００７３】
句「薬学的に許容される塩」は、リガンド薬物結合体またはリンカー薬物結合体の薬学的に許容される有機または無機塩を指す。結合体は、少なくとも１つのアミノ基を含んでよく、従って、アミノ基との酸付加塩を形成させることができる。塩の例は、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩およびパモ酸塩（すなわち１，１’メチレンビス−（２ヒドロキシ３ナフトエ酸塩））塩を含むがそれらに限定されない。薬学的に許容される塩は、酢酸塩イオン、コハク酸塩イオンまたはその他の対イオンなど、別の分子の包接を含んでよい。対イオンは、親化合物上の電荷を安定化させる任意の有機または無機部分であってよい。さらに、薬学的に許容される塩は、その構造中に２つ以上の荷電原子を有してよい。複数の荷電原子が薬学的に許容される塩の一部である例は、複数の対イオンを有してよい。従って、薬学的に許容される塩は、１つ以上の荷電原子および／または１つ以上の対イオンを有してよい。
【００７４】
句「薬学的に許容される溶媒和物」または「溶媒和物」は、１つ以上の溶媒分子とリガンド薬物結合体またはリンカー薬物結合体との会合を指す。薬学的に許容される溶媒和物を形成する溶媒の例は、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸およびエタノールアミンを含むがそれらに限定されない。
【００７５】
「患者」または「被験者」の例は、ヒト、ラット、マウス、モルモット、サル、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマ、イヌ、ネコ、鳥類および家禽類を含むがそれらに限定されない。実施態様の例においては、患者または被験者は、ヒトである。
【００７６】
用語「治療する」または「治療」は、状況によって別の意味を示さない限り、治療上の処置と予防対策または再発防止策との療法を指し、目的は、癌の発症または広がりなどの望ましくない生理的変化または障害を防ぐか、または遅らせる（軽減させる）ことである。有益な臨床成績または所望の臨床成績は、症状の緩和、疾患の度合いの低下、疾患の状態の安定化（すなわち、悪化しない）、疾患の憎悪を遅らせ、または遅らせること、疾患状態の回復または寛解、および検出可能または検知不可能によらず鎮静（部分的または全体的によらず）、を含むがそれらに限定されない。「治療」は、また、治療を受けない場合に予想される生存率と比較して生存率を長くすることを意味してよい。治療を必要とするものは、既に病態または障害を有するもの、ならびに病態または障害を有する傾向のあるもの、あるいは病態または障害を防ぐことになるものを含む。
【００７７】
癌の場合、用語「治療する」は、腫瘍細胞、癌細胞または腫瘍の成長を防ぐこと、腫瘍細胞または癌細胞の複製を妨げること、腫瘍の負担全体の軽減または癌細胞の数を減少させること、および癌に関連する１つ以上の症状を改善することの任意のものまたはすべてを含む。
【００７８】
自己免疫疾患の場合、用語「治療する」は、自己免疫抗体を産生する細胞を含むがそれらに限定されない自己免疫疾患状態に関連する細胞の複製を妨げること、自己免疫抗体負荷を軽減することおよび自己免疫疾患の１つ以上の症状を改善することの任意のものまたはすべてを含む。
【００７９】
感染症の場合、用語「治療する」は、感染症を引き起こす病原体の成長、増殖または複製を防ぐこと、および感染症の１つ以上の症状を改善することの任意のものまたはすべてを含む。
【００８０】
本明細書では、以下の省略形を用いる。ＭＭＡＥは、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＷ７１８）、ＭＭＡＦは、Ｎ−メチルバリン−バリン−ドライソロイシン−ドラプロイン−フェニルアラニン（ＭＷ７３１．５）、ＡＥＶＢは、ＡＥのＣ末端による酸不安定リンカー（ＭＷ７３２）であるアウリスタチンＥバレリルベンジルヒドラゾンで、ＤＭＳＯは、ジメチルスルホキシド、ＤＭＦは、Ｎ、Ｎジメチルホルムアミド、ＨＰＬＣは、高速液体クロマトグラフィー、ＴＨＦは、テトラヒドロフラン、Ｍｃ−ＯＳｕは、マレイミドカプロイルＮ−ヒドロキシスクシミジルエステルである。
【００８１】
（リガンド薬物結合体）
本発明は、薬物化合物（−Ｄ）と、グルクロニド単位（−Ｗ−）を含むリンカー単位とを含む、一連の薬物リンカー化合物および結合体化合物を目的とする。薬物−リンカー化合物は、個別の実体として有用であり、あるいはリガンド（Ｌ、実施態様によっては抗体）に結合体化させてよい。リンカー単位は、適当な、標的を定めた薬物化合物（単数または複数）の放出を提供するように機能させることができる。さらに、リンカー単位によっては、複数の薬物を結合することができる（例えば、１つから４つの薬物を結合させ、−ＬＵ−（Ｄ）１〜４で表してよい）。
【００８２】
１群の実施態様では、リガンド薬物結合体化合物は、全体として、以下の式Ｉ、
【００８３】
【化２８】
2009501800.tif 000014
または薬学的に許容されるその塩または溶媒和物を含む。
【００８４】
式中、
Ｌ−は、リガンド単位、
−Ａａ−Ｗｗ−Ｙｙ−は、リンカー単位（Ｌｕ）、
−Ａ−は、任意選択の伸長体単位、
ａは、０、１または２、
各−Ｗ−は、独立にグルクロニド単位、
ｗは、１から２の範囲の整数、
−Ｙ−は、任意選択の自己犠牲スペーサー単位、
ｙは、０、１または２、
ｐは、１から２０の範囲にあり、
−Ｄは、薬物単位である。
【００８５】
実施態様によって、ａは０または１、ｗは１、ｙは０、１または２である。実施態様によって、ａは０または１、ｗは１、ｙは０または１である。実施態様によって、ａは０、ｗは１、ｙは０である。実施態様によって、ａは０または１、ｗは１、ｙは１である。実施態様によって、ａは１、ｗは１、ｙは０である。実施態様によって、ａは１、ｗは１、ｙは１である。実施態様によって、ｐは１から１０、１から８、１から６、１から４、６、４または２である。本明細書では、これらの単位のそれぞれについて、さらに詳細に記載する。
【００８６】
（リンカー単位）
「リンカー単位」（ＬＵ）は、薬物単位とリガンド単位とに結合してリガンド薬物結合体化合物（リガンド−リンカー−薬物体結合体化合物とも呼ばれる）を形成するか、薬物単位に結合してリンカー−薬物単位を形成するために用いることができ、あるいは、免疫結合体の形成において有用な、二官能化合物である。実施態様によって、リンカー単位は、式：
【００８７】
【化２９】
2009501800.tif 000015
を有する。
【００８８】
式中、−Ａ−は、任意選択の伸長体単位、
ａは  ０、１または２、
各−Ｗ−は、独立して、グルクロニド単位、
ｗは、１から２の範囲の整数、
−Ｙ−は、任意選択の自己犠牲スペーサー単位、
ｙは、０、１または２である。
実施態様によって、ａは０または１、ｗは１、ｙは０、１または２である。実施態様によって、ａは０または１、ｗは１、ｙは０または１である。
【００８９】
（グルクロニド単位）
グルクロニド単位（−Ｗ−）は、伸長体単位とスペーサー単位とが存在する場合は伸長体単位をスペーサー単位に結合させ、スペーサー単位が存在しない場合は伸長体単位を薬物部分に結合させ、伸長体もスペーサー単位も存在しない場合はリガンド単位を薬物単位に結合させる。グルクロニド単位は、β−グルクロニダーゼ酵素によって開裂させることができる部位を含む。
【００９０】
実施態様によって、グルクロニド単位は、式：
【００９１】
【化３０】
2009501800.tif 000016
のグリコシド結合（−Ｏ’−）を介して自己犠牲基（Ｚ）に結合した糖部分（Ｓｕ）を含む。通常、グリコシド結合（−Ｏ’−）は、ヒト、リソソームβ−グルクロニダーゼによって開裂可能な結合など、β−グルクロニダーゼ開裂部位である。
【００９２】
グルクロニド単位に関する場合、用語「自己犠牲基」は、２つまたは３つの離間した化学的部分（すなわち、糖部分（グリコシド結合を介して）、薬物単位（直接的に、またはスペーサー単位を介して間接的に）、実施態様によってリガンド単位（直接的に、または伸長体を介して間接的に）を共有結合によって一緒に結合させて安定な分子とすることができる、二官能または三官能の化学的部分を指す。自己犠牲基は、糖部分との結合が開裂すれば、第一の化学的部分（例えばスペーサーまたは薬物単位）から自発的に分離することになる。
【００９３】
実施態様によって、糖部分（Ｓｕ）は、ピラノースなどの環状ヘキソース、またはフラノースなどの環状ペントースである。実施態様によって、ピラノースは、グルクロニドまたはヘキソースである。糖部分は、通常、β−Ｄ立体配座である。特定の実施態様では、ピラノースは、β−Ｄ−グルクロニド部分（すなわちβ−グルクロニダーゼで開裂可能なグリコシド結合を介して自己犠牲基−Ｚ−に結合したβ−Ｄ−グルクロン酸）である。実施態様によって、糖部分は、非置換（例えば天然環状ヘキソースまたは環状ペントース）である。他の実施態様では、糖部分は、置換β−Ｄ−グルクロニド（すなわち、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、硫黄、窒素または低級アルキルなど、１つ以上の基で置換されたグルクロン酸であってよい。
【００９４】
実施態様によって、自己犠牲基Ｚは、ｐ−アミノベンジルアルコール（ＰＡＢ）単位であり、本明細書でさらに説明する。当分野では、その他の適当な自己犠牲基が知られている。
【００９５】
実施態様によって、グルクロニド単位は、以下の式
【００９６】
【化３１】
2009501800.tif 000017
の１つを有する。式中、Ｓｕは、糖部分であり、グリコシド結合は、Ｓｕと自己犠牲基Ｚとの間の酸素結合を含み、グルクロニド単位（および特にＺ）がグリコシド結合の開裂によって自己犠牲を行うとすると、各Ｒは、独立して、水素、ハロ（例えばクロロ、ブロモ、フルオロ等）、−ＣＮ、−ＮＯ２またはその他の電子吸引基または電子供与基である。実施態様によって、各Ｒは、独立して、水素、ハロ（例えばクロロ、ブロモ、フルオロ等）、−ＣＮまたは−ＮＯ２である。
【００９７】
実施態様によって、グルクロニド単位は、以下の式
【００９８】
【化３２】
2009501800.tif 000018
の１つを有する。式中、Ｓｕは、糖部分であり、グリコシド結合（−Ｏ’−）は、Ｓｕと自己犠牲基Ｚとの間の酸素結合を含み、各Ｒは、独立して、水素である。
【００９９】
実施態様によって、自己犠牲基（Ｚ）は、共有結合によって糖部分、薬物単位（直接的に、またはスペーサー単位（単数または複数）を介して間接的に）、およびリガンド単位（直接的に、またはスペーサー単位（単数または複数）を介して間接的に）に結合される。実施態様によって、薬物リンカー結合体は、以下の式
【０１００】
【化３３】
2009501800.tif 000019
を有する。式中、Ｓｕ、Ｏ’、Ｚ、Ｙ、ｙ、Ｄ、Ａおよびａは、上記と同じく定義される。通常、１から２０のそのような薬物−リンカー結合体をリガンド単位に結合することができる。
【０１０１】
実施態様によって、グルクロニド単位を含むリガンド薬物結合体化合物（例えば抗体薬物結合体（ＡＤＣ））は、以下の式
【０１０２】
【化３４】
2009501800.tif 000020
の１つを有する。式中、Ｓｕ、Ｙ、ｙ、Ｄ、Ａ、ａ、ＲおよびＬは、上記と同じく定義される。
【０１０３】
実施態様によって、グルクロニド単位を含むリガンド薬物結合体化合物は、以下の式
【０１０４】
【化３５】
2009501800.tif 000021
を有する。式中、Ｓｕ、Ｙ、ｙ、Ｄ，Ａ，ａおよびＬは、上記と同じく定義される。
【０１０５】
実施態様によって、グルクロニド単位を含むリガンド薬物結合体化合物は、以下の式
【０１０６】
【化３６】
2009501800.tif 000022
を有する。式中、Ｙ、ｙ、Ｄ，Ａ，ａおよびＬは、上記と同じく定義される。
【０１０７】
実施態様によって、グルクロニド単位を含むリガンド薬物結合体化合物は、以下の式
【０１０８】
【化３７】
2009501800.tif 000023
を有する。式中、Ｙ、ｙ、ＤおよびＬは、上記に記載したと同じく定義される。
【０１０９】
実施態様によって、グルクロニド単位を含むリガンド薬物結合体化合物は、以下の式
【０１１０】
【化３８】
2009501800.tif 000024
を有する。式中、Ｄは、上記に記載したと同じであり、ｍＡｂは、モノクローナル抗体である。
【０１１１】
別の実施態様の群では、以下の式：
【０１１２】
【化３９】
2009501800.tif 000025
によって、リガンド単位は糖部分（単数または複数）に結合（直接または間接に）され、糖部分は自己犠牲基（Ｚ）に結合され、自己犠牲基は薬物単位に結合（直接または間接に）される。式中、Ａ、ａ、Ｓｕ、Ｏ’、Ｚ、ｗ、Ｙ、ｙ、ＤおよびＬは、上記に記載したと同じく定義される。例えば、糖部分（Ｓｕ）は、直接的に、または伸長体単位を介して間接的にリガンド単位に接続してよい。自己犠牲基（Ｚ）は、直接的に、またはスペーサー単位を介して間接的に薬物単位に結合してよい。
【０１１３】
関連実施態様では、薬物−リンカー化合物は、以下の式：
【０１１４】
【化４０】
2009501800.tif 000026
を有する。式中、Ａ、ａ、Ｓｕ、Ｏ’、Ｚ、ｗ、Ｙ、ｙおよびＤは、上記と同じく定義される。通常、１から２０のそのような薬物−リンカー化合物をリガンド単位に連結してよい。
【０１１５】
（伸長体単位）
存在するとき、伸長体単位（−Ａ−）は、リガンド単位をグルクロニド単位（−Ｗ−）に結合させてよい。このため、リガンド単位（Ｌ）は、伸長体の官能基と結合を形成することができる官能基を有する。天然にまたは化学操作によるかのどちらかによってリガンド単位上に存在してよい有用な官能基は、スルフヒドリル（−ＳＨ）、アミノ、ヒドロキシル、カルボキシ、炭水化物のアノマーヒドロキシル基およびカルボキシルを含むがそれらに限定されない。実施態様によって、リガンド単位官能基は、スルフヒドリルおよび／またはアミノである。スルフヒドリル基は、リガンドの分子内ジスルフィド結合の還元によって発生させてよい。スルフヒドリル基は、２−イミノチオラン（Ｔｒａｕｔの試薬）または別のスルフヒドリル発生試薬を用いるリガンドのリシン部分のアミノ基の反応によって発生させてよい。
【０１１６】
一実施態様では、伸長体単位は、リガンド単位の硫黄原子と結合を形成する。硫黄原子は、リガンドのスルフヒドリル基から誘導してよい。この実施態様の代表的な伸長体単位は、式ＩＩＩａおよびＩＩＩｂの角括弧内に示される。式中、Ｌ−、−Ｗ−、−Ｙ−、−Ｄ、ｗおよびｙは、上記で定義され、Ｒ１７は、直接結合、または−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−ＣＨ２−から選択され、ｒは、１〜１０の範囲の整数である。ＩＩＩ〜ＶＩなどの式Ｉの実施態様のすべての例から、明示されていない場合でも、１から２０の薬物部分がリガンドに結合している（ｐ＝１〜２０）と理解するべきである。
【０１１７】
【化４１】
2009501800.tif 000027
伸長体単位の説明例は、式ＩＩＩａにおいてＲ１７が−（ＣＨ２）５−のもの
【０１１８】
【化４２】
2009501800.tif 000028
である。
【０１１９】
伸長体単位の別の例示は、式ＩＩＩａにおいてＲ１７が−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、ｒが２のもの
【０１２０】
【化４３】
2009501800.tif 000029
である。
【０１２１】
伸長体単位の別の例示は、式ＩＩＩａにおいてＲ１７が−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−ＣＨ２−、ｒが２のもの
【０１２２】
【化４４】
2009501800.tif 000030
である。
【０１２３】
伸長体単位の別の例示は、式ＩＩＩａにおいてＲ１７が−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−ＣＨ２−、ｒが２のもの
【０１２４】
【化４５】
2009501800.tif 000031
である。
【０１２５】
伸長体単位のさらに別の例示は、式ＩＩＩｂにおいてＲ１７が−（ＣＨ２）５−のもの
【０１２６】
【化４６】
2009501800.tif 000032
である。
【０１２７】
別の実施態様では、伸長体単位は、リガンド単位の硫黄原子と伸長体単位の硫黄原子との間のジスルフィド結合を介してリガンド単位に結合される。式ＩＶ
【０１２８】
【化４７】
2009501800.tif 000033
の角括弧の中に、この実施態様の代表的な伸長体単位を示す。式中、Ｒ１７、Ｌ−、−Ｗ−、−Ｙ−、−Ｄ、ｗおよびｙは、上記で定義したと同じである。
【０１２９】
さらに別の実施態様では、伸長体の反応基は、リガンドの第一アミノ基または第二アミノ基と結合を形成することができる反応部位を含む。これらの反応部位の例は、スクシンイミドエステル、４−ニトロフェニルエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、テトラフルオロフェニルエステルなどの活性化エステル、無水物、酸塩化物、塩化スルホニル、イソシアネートおよびイソチオシアネートを含むがそれらに限定されない。式ＶａおよびＶｂ
【０１３０】
【化４８】
2009501800.tif 000034
の角括弧の中に、この実施態様の代表的な伸長体単位を示す。式中、−Ｒ１７−、Ｌ−、−Ｗ−、−Ｙ−、−Ｄ、ｗおよびｙは、上記で定義したと同じである。
【０１３１】
実施態様によって、伸長体の反応基は、リガンド上に存在してよい被修飾炭水化物（−ＣＨＯ）基に対して反応する反応部位を含む。例えば、炭水化物は、過ヨウ素酸ナトリウムなどの試薬を用いて穏やかに酸化することができ、その結果得られる酸化された炭水化物（−ＣＨＯ）単位を、Ｋａｎｅｋｏ  ｅｔ  ａＬ，  １９９１，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  ２：１３３  ４１が記載しているようなヒドラジド、オキシム、第一アミンまたは第二アミン、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレートおよびアリールヒドラジドなどの官能基を含む伸長体と縮合させてよい。別の例によれば、還元アミノ化によって被修飾炭水化物を調製してよい。式ＶＩａ、ＶＩｂ、ＶＩｃ
【０１３２】
【化４９】
2009501800.tif 000035
【０１３３】
【化５０】
2009501800.tif 000036
の角括弧の中に、この実施態様の代表的な伸長体単位を示す。式中、−Ｒ１７−、Ｌ−、−Ｗ−、−Ｙ−、−Ｄ、ｗおよびｙは、上記で定義したと同じである。
【０１３４】
（スペーサー単位）
存在するとき、スペーサー単位（−Ｙ−）は、グルクロニド単位を薬物部分に結合させる。実施態様によって、スペーサー単位（単数または複数）は、自己犠牲スペーサーである。この場合、用語「自己犠牲スペーサー」は、共有結合によって２つの離間した化学部分を結合させて通常は安定な３つ組分子を形成させることができる二官能化学部分を指す。この部分は、第１の部分との結合が切断されると、第２の化学部分から自発的に分離する。
【０１３５】
実施態様によって、−Ｙ−は、自己犠牲基のメチレン炭素原子を介して−Ｗｗ−に結合し、カーボネート、カルバメートまたはエーテル基を介して−Ｄに直接結合され、接続する。いかなる特定の理論または機構にも拘泥しないが、スキーム１は、カーボネート基を介して−Ｄと直接的に結合されたグルクロニド系リンカーの薬物放出の機構を示す。
【０１３６】
実施態様によって、−Ｙｙ−は、ｐ−アミノベンジルアルコール（ＰＡＢ）単位（例えば、下記のスキーム１および２を参照すること）である。フェニレン部分はＱｍで置換され、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ニトロまたは−シアノであり、ｍは、０〜４の範囲の整数である。別の実施態様では、−Ｙｙ−は、カーボネート基であってよい。
【０１３７】
自己犠牲スペーサーの他の例は、２−アミノイミダゾール−５−メタノール誘導体およびオルトまたはパラ−アミノベンジルアセタールなどのＰＡＢ基に電子的に類似の芳香族化合物（Ｈａｙ  ｅｔ  ａｔ，  １９９９，  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｆｔ．  ９：２２３７を参照すること）を含むがそれらに限定されない。置換および非置換４−アミノ酪酸アミド（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５，  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２：２２３を参照すること）、適切に置換されたビシクロ［２．２．１］およびビシクロ［２．２．２］環系（Ｓｔｏｒｍ  ｅｔ  ａｌ．，  １９７２，  Ｊ．  Ａｍｅｒ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  ９４：５８１５を参照すること）および２−アミノフェニルプロピオン酸アミド（Ａｍｓｂｅｒｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９０，  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ５５：５８６７を参照すること）など、アミド結合を加水分解すると環化するスペーサーを用いてよい。グリシンのａ−位置換アミン含有薬物の脱離（Ｋｉｎｇｓｂｕｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８４，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２７：１４４７を参照すること）も、自己犠牲スペーサーの例である。
【０１３８】
一実施態様では、スペーサー単位は、次のスキーム
【０１３９】
【化５１】
2009501800.tif 000037
に示される、複数の薬物を組み込み、放出するために用いることができる分枝ビス（ヒドロキシメチル）スチレン（ＢＨＭＳ）単位である。式中、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ニトロまたは−シアノ、ｍは、０から４の範囲の整数、ｎは、０または１、ｐは、１から２０の範囲にある。一実施態様では、−Ｄ部分は、同じである。さらに別の実施態様では、−Ｄ部分は、異なっている。
【０１４０】
米国特許出願公開第２００５−０２３８６４９号に、他の適当なスペーサー単位が開示されている。この公開特許の開示は、参照によって本明細書に組み込まれる。
【０１４１】
（リガンド単位）
リガンド単位は、所定の標的細胞または細胞集団と会合する受容体、抗原またはその他の受容部分と結合、反応会合または複合体形成する任意の分子を適用範囲に含む。一態様では、リガンド単位は、リガンド単位が反応する特定の標的細胞または細胞集団に薬物単位を送達する（下記参照）ように作用する。そのようなリガンド単位は、例えば全長抗体などの大分子量蛋白質、抗体フラグメント、小分子量蛋白質、ポリペチドまたはペプチド、レクチン、糖蛋白質、非ペプチド、ビタミン、栄養輸送分子および任意のその他の細胞結合分子または物質を含むがそれらに限定されない。
【０１４２】
有用な非免疫反応蛋白質、ポリペチドまたはリガンドペプチドは、トランスフェリン、上皮細胞成長因子（「ＥＧＦ」）、ボンベシン、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、血小板由来成長因子、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＴＧＨ−αおよびＴＧＦ−βなどの形質転換成長因子（「ＴＧＦ」）、牛痘成長因子（「ＶＧＦ」）、インシュリンおよびインシュリン様成長因子ＩおよびＩＩ、レクチン、ソマトスタチンおよび低密度リボ蛋白質由来のアポ蛋白質を含むがそれらに限定されない。
【０１４３】
有用なポリクローナル抗体は、免疫化動物の血清由来のものなどの、抗体分子の不均一集団である。当分野において既知のさまざまな手順を用いて対象抗原に対するポリクローナル抗体を作り出してよい。例えば、ポリクローナル抗体を作り出すために、対象抗原またはその誘導体を注射して、ウサギ、マウス、ラットおよびモルモットを含むがそれらに限定されないさまざまな宿主動物を免疫化してよい。宿主種に依存して、フロインドの（完全および不完全）アジュバント、水酸化アルミニウムなどの鉱物ゲル、リソレシチンなどの表面活性物質、プルロニック（ｐｌｕｒｏｎｉｃ）ポリオール、ポリアニオン、ペプチド、油乳化物、キーホールリンペットヘモシニアン、ジニトロフェノール、およびＢＣＧ（ｂａｃｉｌｌｅ  Ｃａｌｍｅｔｔ−Ｇｕｅｒｉｎ）およびＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｕ  ｐａｒｖｕｍなどの潜在的に有用なヒトアジュバントを含むがそれらに限定されない、さまざまなアジュバントを用いて免疫応答を増加させてよい。そのようなアジュバントも、当分野では公知である。
【０１４４】
有用なモノクローナル抗体は、特定の抗原決定基（例えば、細胞抗原（癌または自己免疫細胞抗原）、ウイルス抗原、微生物抗原、蛋白質、ペプチド、炭水化物、化学物質、核酸またはそれらの抗原結合フラグメント）に対する抗体の均一な集団である。当分野において既知の任意の技法を用いて対象抗原に対するモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を調製してよい。これらは、Ｋｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５，  Ｎａｔｕｒｅ  ２５６，  ４９５−４９７）が最初に記載したハイブリドーマ技法、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技法（Ｋｏｚｂｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８３，  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ４：７２）およびＥＢＶ−ハイブリドーマ技法（Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８５，  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  Ａｌａｎ  Ｒ．  Ｌｉｓｓ，  Ｉｎｃ．，  ｐｐ．  ７７−９６）を含むがそれらに限定されない。そのような抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡおよびＩｇＤを含む任意の免疫グロブリンの種類およびそれらの任意の亜種であってよい。本発明において用いられるｍＡｂを産生するハイブリドーマは、インビトロまたはインビボで培養してよい。
【０１４５】
有用なモノクローナル抗体は、ヒトモノクローナル抗体、ヒト化モノクローナル抗体、キメラモノクローナル抗体および機能活性抗体フラグメントを含むがそれらに限定されない。ヒトモノクローナル抗体は、当分野で既知の多数の技法のうちの任意のもの（例えば、Ｔｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８３，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ．  ８０：７３０８−７３１２、Ｋｏｚｂｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８３，  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ４：７２−７９、Ｏｌｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８２，  Ｍｅｔｈ．  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  ９２：３−１６、および米国特許第５，９３９，５９８号および第５，７７０，４２９号を参照すること）によって作ってよい。
【０１４６】
さらに、ヒト部分と非ヒト部分との両方を含む、キメラモノクローナル抗体およびヒト化モノクローナル抗体などの組み換え抗体は、標準的な組み換えＤＮＡ技法を用いて作ることができ、有用な抗体である。（例えば、参照によって本明細書に全体として組み込まれるＣａｂｉｌｌｙらの米国特許第４，８１６，５６７号およびＢｏｓｓらの米国特許第４，８１６，３９７号を参照のこと。）ヒト化抗体は、１つ以上の非ヒト種由来の相補性決定領域（ＣＤＲ）とヒト免疫グロブリン分子由来の骨格領域とを有する非ヒト種由来の抗体分子である。（Ｑｕｅｅｎの米国特許第５，５８５，０８９号を参照のこと。参照によってこの特許を本明細書に全体として組み込む。）例えば、国際特許出願公開第８７／０２６７１号、欧州特許出願公開第０  １８４  １８７号、欧州特許出願公開第０  １７１  ４９６号、欧州特許出願公開第０  １７３  ４９４号、国際特許出願公開第８６／０１５３３号、米国特許第４，８１６，５６７号、欧州特許出願公開第０１２  ０２３号、Ｂｅｒｔｅｒ  ｅｔ  ａＬ，  １９８８，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０：１０４１−１０４３、Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８７，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８４：３４３９−３４４３、Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８７，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １３９：３５２１−３５２６、Ｓｕｎ  ａｔ  ａｌ．，  １９８７，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８４：２１４−２１８、Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ  ｅｔ  ａｔ．，  １９８７，  Ｃａｎｃｅｒ．  Ｒｅｓ．  ４７：９９９−１００５、Ｗｏｏｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８５，  Ｎａｔｕｒｅ  ３１４：４４６−４４９、Ｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８８，  Ｊ．  Ｎａｔｌ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．  ８０：１５５３−１５５９、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，  １９８５，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：１２０２−１２０７、Ｏｉ  ｏｆ  ａｌ．，  １９８６，  ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ４：２１４、米国特許第５，２２５，５３９号、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｔ．，  １９８６，  Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５５２−５２５、Ｖｅｒｈｏｅｙａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８８，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４およびＢｅｉｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８８，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １４１：４０５３−４０６０に記載されている方法を用いる当分野で既知の組み換えＤＮＡ技法によって、そのようなキメラモノクローナル抗体およびヒト化モノクローナル抗体を産生させることができる。これらの文献を参照によって本明細書に全体としてそれぞれ組み込む。
【０１４７】
トランスジェニックマウスを用いて、内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子および軽鎖遺伝子を発現することはできないが、ヒト重鎖遺伝子および軽鎖遺伝子を発現することはできる完全ヒト抗体を産生させることができる。選択された抗原、例えば、本発明のポリペチドのすべてまたは一部によって通常の方法でトランスジェニックマウスを免疫化する。通常のハイブリドーマ技法を用いて、抗原に対するモノクローナル抗体を得ることができる。トランスジェニックマウスに宿されたヒト免疫グロブリン導入遺伝子は、Ｂ細胞分化時に再構成され、続いてクラススイッチ動作および体細胞変異する。従って、そのような技法を用いると、治療効力のあるＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭおよびＩｇＥ抗体を作り出すことができる。ヒト抗体を製造するためのこの技法の概要については、Ｌｏｎｂｅｒｇ  ａｎｄ  Ｈｕｓｚａｒ（１９９５，  Ｉｎｔ．  Ｒｅｖ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １３：６５−９３）を参照すること。ヒト抗体およびヒトモノクローナル抗体を作り出すためのこの技法と、そのような抗体を作り出すためのプロトコルとの詳細な考察について（例えば、米国特許第５，６２５，１２６号、第５，６３３，４２５号、第５，５６９，８２５号、第５，６６１，０１６号および第５，５４５，８０６号を参照すること。これらの特許は、参照によって本明細書に全体としてそれぞれ組み込まれる）。例えば、Ａｂｇｅｎｉｘ，  Ｉｎｃ（Ｆｒｅｅｍｏｎｔ，  ＣＡ）およびＭｅｄａｒｅｘ（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，  ＣＡ）から、他のヒト抗体が市販されている。
【０１４８】
「誘導選択」と呼ばれる技法を用いて、選択されたエピトープを認識する完全ヒト抗体を作り出すことができる。この手法では、選択された非ヒトモノクローナル抗体、例えばマウス抗体を用いて同じエピトープを認識する完全ヒト抗体の選択を誘導する。（例えば、Ｊａｓｐｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９４，  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １２：８９９−９０３を参照すること）。ファージ提示ライブラリ（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，  １９９１，  Ｊ．  Ｍｏｔ．  Ｂｉｏｌ．  ２２７：３８１、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９１，  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２２２：５８１、Ｑｕａｎ  ａｎｄ  Ｃａｒｔｅｒ，  ２００２．  Ｔｈｅ  ｒｉｓｅ  ｏｆ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｓ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  Ｉｎ  Ａｎｔｉ−１９Ｅ  ａｎｄ  Ａｌｌｅｒｇｉｃ  Ｄｉｓｅａｓｅ，  Ｊａｒｄｉｅｕ  ａｎｄ  Ｆｉｃｋ  Ｊｒ．，  ｅｄｓ．，  Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ，  Ｃｈａｐｔｅｒ  ２０，  ｐｐ．  ４２７−４６９）を含む、当分野で既知のさまざまな技法を用いて、ヒト抗体を作り出すことができる。
【０１４９】
実施態様によって、抗体は、単一特異的である。抗体は、二重特異性抗体であってもよい。二重特異性抗体を作るための方法は、当分野で既知である。従来の完全長二重特異性抗体の作製方法は、２つの鎖が異なる特異性を有する場合の２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の同時発現を利用している（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８３，  Ｎａｔｕｒｅ  ３０５：５３７−５３９を参照すること）。免疫グロブリン重鎖と軽鎖とはランダムに並んでいるので、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は、可能性として１０の異なる抗体分子の混合物を産生し、うち１つだけが正しい二重特異性構造を有する。国際特許出願公開第９３／０８８２９号およびＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９１，  ＥＭＢＯ  Ｊ．  １０：３６５５−３６５９に同様な手順が開示されている。
【０１５０】
別の手法によると、所望の結合特異性（抗体−抗原結合部位）を有する抗体可変分域を免疫グロブリン不変分域配列と融合させる。通常、融合は、ヒンジ分域、ＣＨ２分域およびＣＨ３分域の少なくとも一部を含む免疫グロブリン重鎖不変領域と行われる。軽鎖結合に必要な部位を含む第１の重鎖不変領域（ＣＨ１）が融合体の少なくとも１つの中に存在すると好ましい。免疫グロブリン重鎖融合体、および望むなら、免疫グロブリン軽鎖をコード化する配列を有する核酸を、別々の発現ベクターに挿入し、適当な宿主生物に同時形質移入する。構築に用いられる３つのポリペプチド鎖の等しくない比が最適な収率を提供する実施態様では、これによって、３つのポリペチドフラグメントの相互比率を調節する上で大きな柔軟性が得られる。しかし、少なくとも２つのポリペプチド鎖を等比で発現させると高い収率の結果が得られるとき、２つまたは３つすべてのポリペプチド鎖のコード化配列を１つの発現ベクターに挿入することが可能である。
【０１５１】
例えば、二重特異性抗体は、第１の結合特異性を有するハイブリッド免疫グロブリン重鎖を一方のアームに、ハイブリッド免疫グロブリン重鎖−軽鎖対（第２の結合特異性を提供する）を他方のアームに有してよい。二重特異性分子の一方の半分にしか免疫グロブリン軽鎖が存在しないため分離が容易になるので、この非対称構造によって、所望の二重特異性化合物を望ましくない免疫グロブリン鎖結合から分離しやすくなる（国際特許出願公開第９４／０４６９０号を参照すること。この特許は、参照によって本明細書に全体として組み込まれる）。
【０１５２】
二重特異性抗体を産生させる方法のこれ以上の詳細については、Ｓｕｒｅｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  １２１：２１０、Ｒｏｄｒｉｇｕｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １５１：６９５４−６９６１、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２，  Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３−１６７、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｔ，  １９９５，  Ｊ．  Ｈｅｍａｔｏｔｈｅｒａｐｙ  ４：４６３−４７０、Ｍｅｒｃｈａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９８，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １６：６７７−６８１を参照すること。そのような技法を用いて、本明細書に定義される。疾患の治療または予防のための二重特異性抗体を調製してよい。
【０１５３】
欧州特許出願公開第０  １０５  ３６０号にも、二元機能抗体が記載されている。この参考文献が開示しているように、ハイブリッド抗体または二元機能抗体を、生物学的に、例えば細胞融合技法によるか、または化学的に、特に架橋剤またはジスルフィド橋かけ形成試薬を用いるかのどちらかによって誘導してよく、抗体全体または抗体フラグメントを含んでよい。例えば、国際特許出願公開第８３／０３６７９号および欧州特許出願公開第０  ２１７  ５７７号に、そのようなハイブリッド抗体を得るための方法が開示されている。参照によってこれらの公開特許をともに本明細書に組み込む。
【０１５４】
抗体は、所望の標的抗原（例えば、癌細胞抗原、ウイルス抗原または微生物抗原）あるいは標的細胞（単数または複数）またはマトリックスに結合したその他の抗体に免疫特異性結合する抗体の機能的に活性なフラグメント、誘導体または類縁体でもあってよい。この点で、「機能的に活性な」とは、フラグメント、誘導体または類縁体が、フラグメント、誘導体または類縁体を誘導した元の抗体が認識した同じ抗原を認識する抗−抗イディオタイプ抗体を誘発させることができることを意味する。実施態様の例では、抗原を特異的に認識するＣＤＲ配列のＣ末端である、骨格およびＣＤＲ配列を削除して、免疫グロブリン分子のイディオタイプの抗原性を強めることができる。どのＣＤＲ配列が抗原に結合するか特定するために、当分野で既知の任意の結合アッセイ法（例えばＢＩＡｃｏｒｅアッセイ）による抗原との結合アッセイで、ＣＤＲ配列を含む合成ペプチドを用いてよい（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９１，  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，  Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，  Ｂｅｔｈｅｓｄａ，  Ｍｄ、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８０，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １２５（３）：９６１−９６９を参照すること）。
【０１５５】
その他の有用な抗体は、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆｖｓ、単鎖抗体（ＳＣＡ）（例えば、米国特許第４，９４６，７７８号、Ｂｉｒｄ，  １９８８，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２、Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｔ，  １９８８，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｏｔ  ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３およびＷａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８９，  Ｎａｔｕｒｅ  ３３４：５４４−５４に記載されている）、ｓｃＦｖ、ｓｃ−Ｆｖ−Ｆｃ、ＦｖｄｓＦｖ、ミニボディー、ダイアボディー、トライアボディー、テトラボディー、およびＣＤＲを含み、抗体と同じ特異性を有する任意の他の分子など、しかしそれらに限定されない抗体のフラグメントを含む。
【０１５６】
他の実施態様では、抗体は、例えば、抗体がＮ末端またはＣ末端のどちらかで、共有結合（例えばペプチド結合）を介して、抗体でない別の蛋白質のアミノ酸配列（または一部、通常、蛋白質の少なくとも１０、２０または５０のアミノ酸部分）と融合している、抗体の融合蛋白質または機能的に活性なそのフラグメントである。実施態様によって、抗体またはそのフラグメントは、不変分域のＮ末端で、共有結合によって他の蛋白質に結合してよい。
【０１５７】
抗体は、例えば、共有結合によって結合しても抗体が抗原結合免疫特異性を保持することが許される限り、任意の種類の分子の共有結合連結によってどちらか一方を修飾した類縁体および誘導体も含んでよい。例えば、抗体の誘導体および類縁体は、例えばグリコシル化、アセチル化、ＰＥＧ化、リン酸化、アミド化、既知の保護基／遮蔽基による誘導体化、蛋白分解開裂、細胞抗体単位またはその他の蛋白質への結合等によってさらに修飾されたものを含む。特異的化学開裂、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシン存在下の代謝合成または類似法を含むがそれらに限定されない多数の化学修飾法の任意のものを既知の技法で実行してよい。さらに、類縁体または誘導体は、１つ以上の非天然アミノ酸を含んでよい。
【０１５８】
特定の実施態様では、抗体の結合親和力および／またはその他の生物的性質を改善することが望ましいことがある。例えば、米国特許出願公開第２００６／０００３４１２号および第２００６／０００８８８２号を参照すること。抗体核酸中に適切なヌクレオチド変化を導入するか、またはペプチド合成によって、抗体のアミノ酸配列変化形を調製する。そのような変更は、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基の削除、および／または挿入、および／または置換を含む。最終構築物が所望の特性を所有するものとして、削除、挿入および置換の任意の組み合わせを施して最終構築物に到達する。アミノ酸変化は、グリコシル化部位の数または位置を変化させるなど、抗体の翻訳後プロセスも変化させることがある。
【０１５９】
Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ（１９８９，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：１０８１−１０８５）によって記載された、変異に有利な位置である抗体の特定の残基または領域を特定するための有用な方法は、「アラニン走査型変異」と呼ばれる。この方法では、残基（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓおよびｇｌｕなどの荷電残基）または標的残基の群を特定し、中性または負荷電アミノ酸（通常、アラニンまたはポリアラニン）で置換し、アミノ酸と抗原との相互干渉を変化させる。次に、さらに別の変化形または他の変化形を置換部位に導入して、置換に対して機能感受性を示すアミノ酸位置を詳しく調べる。従って、アミノ酸配列変化を導入するための部位を予め決めるが、変異の性質そのものを予め決める必要はない。例えば、所定の部位における変異の働きを解析するために、標的コドンまたは領域でアラニン走査型変異またはランダム変異を実行し、発現した抗体変化形を所望の活性で検索する。
【０１６０】
アミノ酸配列挿入は、長さが１残基から１００以上の残基を含むポリペチドの範囲のアミノ末端融合および／またはＣ末端融合、ならびに単一または複数アミノ酸残基の配列内挿入を含む。末端挿入の例は、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体、または細胞毒性ポリペチドに融合した抗体を含む。
【０１６１】
別の種類の変化形は、アミノ酸置換変化形である。これらの変化形では、抗体分子中の少なくとも１つのアミノ酸残基が異なる残基によって置換されている。置換変異にとって最も重要な部位は、高頻度可変領域を含むが、骨格領域変化も包含される。
【０１６２】
（ａ）例えばシート立体配座またはヘリックス立体配座としての置換区域のポリペチド主鎖の構造、（ｂ）標的部位における分子の電荷または疎水性、あるいは（ｃ）側鎖のかさ（嵩）を維持することに対する効果が顕著に異なる置換を選べば、抗体の生物学的性質の顕著な変更が実現される。天然残基は、共通の側鎖特性によって、
（１）疎水性：ノルロイシン、ｍｅｔ、ａｌａ、ｖａｌ、ｌｅｕ、ｉｌｅ、
（２）中性親水性：ｃｙｓ、ｓｅｒ、ｔｈｒ、
（３）酸性：ａｓｐ、ｇｌｕ、
（４）塩基性：ａｓｎ、ｇｌｎ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、ａｒｇ、
（５）主鎖配向に影響する残基：ｇｌｙ、ｐｒｏ、
（６）芳香族：ｔｒｐ、ｔｙｒ、ｐｈｅ
に分類される。非保存置換は、これらの種類の１つの構成残基を別の種類に交換することになる。
【０１６３】
置換変化形の特定の種類は、親抗体（例えばヒト化抗体またはヒト抗体）の１つ以上の高頻度可変領域残基を置換することを含む。通常、さらに開発を続けるために選択される、結果として得られた変化形（単数または複数）は、元になっている親抗体と比較して、生物学的性質が改善されたものである。そのような置換変化形を発生させるための簡便な方法は、ファージ提示を用いる親和性成熟を含む。簡単に言えば、いくつかの高頻度可変領域部位（例えば６〜７部位）を変異させて各部位の可能なアミノ置換をすべて発生させる。こうして発生させた抗体変化形を、各粒子内のＭ１３パッケージ化遺伝子ＩＩＩ産物への融合体として、線維状ファージ粒子から一価法で提示させる。次に、ファージ提示変化形の生物活性（例えば結合親和力）を検索する。変更するための高頻度可変領域部位の候補を特定するために、アラニン走査変異生成を実行して抗原結合に顕著に寄与する高頻度可変領域残基を特定してよい。あるいは、さらに、抗原−抗体複合体の結晶構造を解析して抗体と抗原との間の接触点を特定すると有益なことがある。そのような接触残基および隣接残基は、本明細書の精密化技法による置換の候補である。そのような変化形を発生させたら、変化形のパネルを検索試験に付し、１つ以上の関連アッセイにおいて優れた特性を有する抗体を選び出し、さらに開発してよい。
【０１６４】
例えば、抗体の抗原依存性細胞媒介細胞毒性（ＡＤＣＣ）および／または補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）を強めるように抗体のエフェクター機能を変更すると望ましいことがある。抗体のＦｃ領域に１つ以上のアミノ酸置換を導入することによってこれを実現してよい。あるいは、さらに、Ｆｃ領域にシステイン残基（単数または複数）を導入し、それによって、この領域における鎖間ジスルフィド結合形成を可能にしてよい。こうして生成したホモ二量体抗体は、内部取り込み能力が改善され、および／または補体媒介殺細胞および抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）が増加することがある。例えば、Ｃａｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２，  Ｊ．  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．  １７６：１１９１−１１９５およびＳｈｏｐｅｓ，  １９９２，  Ｊ．  ｌｍｍｕｎｏｌ．  １４８：２９１８−２９２２を参照すること。Ｗｏｌｆｆ  ａｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５３：２５６０−２５６５に記載されているヘテロ二元機能架橋剤を用いて、抗腫瘍活性が強化されたホモ二量体抗体も調製してよい。あるいは、重複Ｆｃ領域を有し、それによって、補体溶菌作用およびＡＤＣＣ能力が改善された抗体を設計してよい。例えば、Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８９，  Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ３：２１９−２３０を参照すること。
【０１６５】
抗体の血清半減期を増加させるために、例えば米国特許第５，７３９，２７７号に記載されているように、抗体（特に抗体フラグメント）にサルベージ受容体結合エピトープを組み込んでよい。本明細書で用いられる用語「サルベージ受容体結合エピトープ」は、ＩｇＧ分子のインビボ血清半減期を増加させる原因となる、ＩｇＧ分子のＦｃ領域のエピトープ（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）を指す。
【０１６６】
抗体の不変領域中の保存位置をグリコシル化してよい（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ａｎｄ  Ｌｕｎｄ，  １９９７，  Ｃｈｅｍ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ６５：１１１−１２８、Ｗｒｉｇｈｔ  ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，  １９９７，  ＴｉｂＴＥＣＨ  １５：２６−３２を参照すること）。免疫グロブリンのオリゴ糖側鎖は、蛋白質の機能（Ｂｏｙｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６，  Ｍｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ３２：１３１１−１３１８、Ｗｉｔｔｗｅ  ａｎｄ  Ｈｏｗａｒｄ，  １９９０，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ２９：４１７５−４１８０を参照すること）と、糖蛋白質の立体配座および示される三次元表面を左右する糖蛋白質の部分間の分子内相互作用（上記のＪｅｆｆｅｒｉｓ  ａｎｄ  Ｌｕｎｄ、Ｗｙｓｓ  ａｎｄ  Ｗａｇｎｅｒ，  １９９６，  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  ７：４０９−４１６を参照すること）とに影響する。オリゴ糖は、特異的な認識構造によって、所定の糖蛋白質を特定の分子への標的とするようにも働いてもよい。例えば、ガラクトース欠損ＩｇＧでは、オリゴ糖部分は、ＣＨ２間空間から「反転して」飛び出し、末端Ｎ−アセチルグルコサミン残基がマンノース結合蛋白質と結合するために利用可能になる（Ｍａｌｈｏｔｒａ  ｅｔ  ａｌ，，  １９９５，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．  １：２３７−２４３を参照すること）ことが報告された。チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞中で産生されたＣＡＭＰＡＴＨ−１Ｈ（ヒトリンパ球のＣＤｗ５２抗原を認識する組み換えヒト化マウスモノクローナルＩｇＧ１抗体）から、グリコペプチダーゼによってオリゴ糖を除去すると、補体媒介溶菌（ＣＭＣＬ）が完全に減少する結果となった（Ｂｏｙｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６，  Ｍｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ３２：１３１１−１３１８）が、ノイラミニダーゼを用いてシアル酸残基を選択除去しても、ＣＭＣＬの低下はまったくなかった。抗体のグリコシル化が抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）に影響することも報告された。詳しくは、二分割ＧｌｃＮＡｃの形成を触媒するグリコシルトランスフェラーゼであるβ（１，４）−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ）をテトラサイクリン調節発現するＣＨＯ細胞では、ＡＤＣＣ活性が改善されることが報告された（Ｕｍａｎａ  ｅｔ  ａｔ，  １９９９，  Ｍａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  １７：１７６−１８０を参照）。
【０１６７】
抗体のグリコシル化は、通常、Ｎ−結合またはＯ−結合のどちらかである。Ｎ−結合は、炭水化物部分がアスパラギン残基の側鎖に結合することを指す。アスパラギン−Ｘ−セリンおよびアスパラギン−Ｘ−スレオニンのトリペプチド配列が炭水化物部分のアスパラギン側鎖への酵素結合のための認識配列である。ここで、Ｘは、プロリン以外の任意のアミノ酸である。従って、これらのトリペプチド配列のどちらかがポリペチド中に存在すると、グリコシル化可能な部位が作り出される。Ｏ−結合グリコシル化は、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトースまたはキシロースといった糖の１つがヒドロキシアミノ酸、最も普通にはセリンまたはスレオニンへの結合することを指すが、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリリシンも用いてよい。
【０１６８】
抗体のグリコシル化変化形は、抗体のグリコシル化パターンが変更された変化形である。変更するとは、抗体中の１つ以上の炭水化物部分を削除し、１つ以上の炭水化物部分を抗体に加え、グリコシル化の組成（グリコシル化パターン）、グリコシル化の程度または類似の変数を変化させることを意味する。
【０１６９】
グリコシル化部位を抗体へ加えることは、上記に記載のトリペプチド配列（Ｎ−結合グリコシル化部位の場合）の１つ以上を含むようにアミノ酸配列を変えることによって簡便に実現される。変更は、１つ以上のセリンまたはスレオニン残基を元の抗体（Ｏ−結合グリコシル化部位の場合）の配列へ加えること、または置換することによっても行ってよい。同様に、抗体の野生型グリコシル化部位内のアミノ酸変更によってグリコシル化部位を除去することを実現してよい。
【０１７０】
通常、根底となる核酸配列を変更することによってアミノ酸配列を変更する。これらの方法は、天然源からの単離（天然アミノ酸配列変化形の場合）またはオリゴヌクレオチド媒介（または部位指向的）変異誘発による調製、ＰＣＲ変異誘発、および既に調製済みの抗体の変化形または非変化形抗体のカセット変異誘発を含むがそれらに限定されない。
【０１７１】
抗体のグリコシル化（グリコシル化パターンを含む）は、アミノ酸配列または根底となるヌクレオチド配列を変えないで変更してもよい。グリコシル化は、抗体を発現するために用いられる宿主細胞に大いに依存する。治療薬候補としての組み換え糖蛋白質、例えば抗体の発現に用いられる細胞型は、野生型細胞であることはほとんどなく、抗体のグリコシル化パターンには顕著な変化を期待してよい。例えば、Ｈｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７２：９０６２−９０７０を参照すること。宿主細胞の選択に加えて、抗体の組み換え産生時のグリコシル化に影響を及ぼす因子は、成長モード、培地調製物、培養密度、酸素供給、ｐＨ、精製方式および類似因子を含む。オリゴ糖産生に関与する特定の酵素を導入するかまたは過剰発現させることを含む、特定の宿主生物中に実現されるグリコシル化パターンを変更するためのさまざまな方法が提案された（例えば、米国特許第５，０４７，３３５号、第５，５１０，２６１号および第５，２７８，２９９号を参照すること）。例えば、エンドグリコシダーゼＨ（Ｅｎｄｏ  Ｈ）を用いて、グリコシル化、または特定の種類のグリコシル化を糖蛋白質から酵素的に除いてよい。さらに、組み換え宿主細胞を遺伝子操作して、例えば、特定の種類の多糖類の処理を欠失させてよい。これらの技法および類似の技法は、当分野で公知である。
【０１７２】
レクチンクロマトグラフィー、ＮＭＲ、質量スペクトル分析、ＨＰＬＣ、ＧＰＣ、単糖類組成分析、逐次酵素消化、および高ｐＨ陰イオン交換クロマトグラフィーを用いて電荷によりオリゴ糖を分離するＨＰＡＥＣ−ＰＡＤを含む、通常の炭水化物分析技法によって、抗体のグリコシル化構造を容易に分析することができる。分析用にオリゴ糖を放出させるための方法も既知であり、酵素処理法（通常、ペプチド−Ｎ−グリコシダーゼＦ／エンド−β−ガラクトシダーゼを用いて実行される）、強アルカリ性環境を用いて主にＯ−結合構造を放出させる脱離法、および無水ヒドラジンを用いてＮ−結合オリゴ糖とＯ−結合オリゴ糖との両方を放出させる化学法を含むがそれらに限定されない。
【０１７３】
抗体は、Ｆｃ受容体と相互作用するアミノ酸残基を変更（例えば、置換、削除または添加）してよい。詳しくは、抗体は、抗Ｆｃ分域とＦｃＲｎ受容体との間の相互作用に関与すると特定されるアミノ酸残基を変更した抗体を含む（例えば、国際特許出願公開第９７／３４６３１号を参照すること。この特許は、参照によって本明細書に全体として組み込まれる）。
【０１７４】
癌細胞抗原に免疫特異的な抗体は、例えば、販売会社から購入するか、あるいは、例えば化学合成または組み換え発現技法などの当業者に既知の任意の方法によって作り出してよい。癌細胞抗原に免疫特異的な抗体をコード化するヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋデータベースまたは類似データベース、学術刊行物、または定型的クローン化および配列解析によって入手してよい。
【０１７５】
特定の実施態様では、癌の治療または予防のための既知の抗体を用いてよい。癌細胞抗原に免疫特異的な抗体は、購入するか、あるいは、例えば組み換え発現技法などの当業者に既知の任意の方法によって作り出してよい。癌細胞抗原に免疫特異的な抗体をコード化するヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋデータベースまたは類似データベース、学術刊行物、または定型的クローン化および配列解析によって入手してよい。
【０１７６】
発現が癌、細胞増殖障害または腫瘍の細胞上での発現と相関関係にある任意の標的蛋白質を含む、事実上すべての標的蛋白質を、抗体の標的とすることができる。実施態様によって、抗原は、１つ以上の正常な非癌細胞（単数または複数）上と比較すると、１つ以上の特定の種類（単数または複数）の癌細胞の表面上に特異的に発現されるポリペチド、蛋白質またはその他の分子などの腫瘍関連抗原である。多くの場合、そのような腫瘍関連抗原は、癌細胞の表面では非癌細胞の表面より多く発現する。そのような腫瘍関連細胞表面抗原を特定することによって、抗体利用治療による崩壊のために癌細胞を特異的に標的化することが可能になった。
【０１７７】
適当な標的蛋白質は、Ｔ細胞によって認識されるヒト腫瘍抗原（Ｒｏｂｂｉｎｓ  ａｎｄ  Ｋａｗａｋａｍｉ，  １９９６，  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ８：６２８−６３６、参照によって本明細書に全体として組み込まれる）；ｇｐ１００、ＭＡＲＴ−１／ＭｅｌａｎＡ、ＴＲＰ−１（ｇｐ７５）、チロシナーゼを含むメラニン細胞系統蛋白質；腫瘍特異性広域共有抗原、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−１、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ−Ｖ、ｐ１５；腫瘍特異性変異抗原、ベータ−カテニン、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４；乳腺、卵巣、子宮頸部およびすい臓癌腫のための非メラノーマ抗原、ＨＥＲ−２／ｎｅｕ、ヒト乳頭腫ウイルス−Ｅ６、−Ｅ７、ＭＵＣ−１；ＫＳ１／４汎癌腫抗原などの癌抗原（Ｐｅｒｅｚ  ａｎｄ  Ｗａｌｋｅｒ，  １９９０，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １４２：３６６２−３６６７、Ｂｕｍａｌ，  １９８８，  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  ７（４）：４０７−４１５）；卵巣癌腫抗原（ＣＡ１２５）（Ｙｕ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９１，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ５１（２）：４６８−４７５）；前立腺酸性リン酸塩（Ｔａｉｌｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９０，  Ｎｕｃｌ．  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  １８（１６）：４９２８）；前立腺特異性抗原（Ｈｅｎｔｔｕ  ａｎｄ  Ｖｉｈｋｏ，  １９８９，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍ．  １６０（２）：９０３−９１０、Ｉｓｒａｅｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ５３：２２７−２３０）；メラノーマ関連抗原ｐ９７（Ｅｓｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８９，  Ｊ．  Ｎａｔｌ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔ．  ８１（６）：４４５−４４６）；メラノーマ抗原ｇｐ７５（Ｖｉｊａｙａｓａｒｄａｈｌ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９０，  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．  １７１（４）：１３７５−１３８０）；高分子量メラノーマ抗原（ＨＭＷ−ＭＡＡ）（Ｎａｔａｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８７，  Ｃａｎｃｅｒ  ５９：５５−６３；Ｍｉｔｔｅｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９０，  Ｊ  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ８６：２１３６−２１４４）；前立腺特異性膜抗原；癌胎児性抗原（ＣＥＡ）（Ｆｏｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９４，  Ｐｒｏｃ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｃｌｉｎ．  Ｏｎｃｏｌ．  １３：２９４）；多形性上皮ムチン抗原；人乳脂肪球抗原；ＣＥＡ、ＴＡＧ−７２（Ｙｏｋａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ５２：３４０２−３４０８）、ＣＯ１７−１Ａ（Ｒａｇｎｈａｍｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｃａｎｃｅｒ  ５３：７５１−７５８）などの結直腸腫瘍関連抗原；ＧＩＣＡ１９−９（Ｈｅｒｌｙｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８２，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ２：１３５）、ＣＴＡ−１およびＬＥＡ；バーキットリンパ腫抗原−３８．１３；ＣＤ１９（Ｇｈｅｔｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９４，  Ｂｌｏｏｄ  ８３：１３２９−１３３６）；ヒトＢ−リンパ腫抗原−ＣＤ２０（Ｒｅｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９４，  Ｂｌｏｏｄ  ８３：４３５−４４５）；ＣＤ３３（Ｓｇｏｕｒｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｊ．  Ｎｕｃｌ．  Ｍｅｄ．  ３４：４２２−４３０）；ガングリオシ��ＧＤ２（Ｓａｌｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １５１，  ３３９０−３３９８）、ガングリオシドＧＤ３（Ｓｈｉｔａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．  ３６：３７３−３８０）、ガングリオシドＧＭ２（Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９４，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｏｎｃｏｌ．  １２：１０３６−１０４４）、ガングリオシドＧＭ３（Ｈｏｏｐ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ５３：５２４４−５２５０）などのメラノーマ特異性抗原；Ｔ抗原ＤＮＡ腫瘍ウイルスおよびＲＮＡ腫瘍ウイルスの外皮抗原を含むウイルス誘起腫瘍抗原などの腫瘍特異性移植型の細胞表面抗原（ＴＳＴＡ）；結腸のＣＥＡ、膀胱腫瘍癌胎児性抗原などの癌胎児性抗原−アルファ−胎児性蛋白質（Ｈｅｌｉｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８５，  Ｃａｎｃｅｒ．  Ｒｅｓ．  ４５：２２１０−２１８８）；ヒト肺癌腫抗原Ｌ６、Ｌ２０（Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８６，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ４６：３９１７−３９２３）などの分化抗原；繊維肉腫の抗原、ヒト白血病Ｔ細胞抗原−Ｇｐ３７（Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｙａ−Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８８，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １４１：１３９８−１４０３）；ネオ糖蛋白質、スフィンゴリピド、ＥＧＦＲ（上皮成長因子受容体）などの乳癌抗原、ＨＥＲ２抗原（ｐ１８５ＨＥＲ２）、多形性上皮ムチン（ＰＥＭ）（Ｈｉｌｋｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２，  Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｃｉ．  １７：３５９）；悪性ヒトリンパ球抗原−ＡＰＯ−１（Ｂｅｒｎｈａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８９，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４５：３０１−３０４）；胎児赤血球、初期内胚葉に見いだされるＩ抗原、成体赤血球および未着床胚に見いだされるＩ抗原、胃腺癌に見いだされるＩ（Ｍａ）、乳房上皮に見いだされるＭ１８、Ｍ３９、骨髄細胞に見いだされるＳＳＥＡ−１、結直腸癌に見いだされるＶＥＰ８、ＶＥＰ９、Ｍｙｌ、ＶＩＭ−Ｄ５、Ｄ１５６−２２、ＴＲＡ−１−８５（血液型Ｈ）、結腸腺癌に見いだされるＣ１４、肺腺癌に見いだされるＦ３、胃癌に見いだされるＡＨ６、Ｙハプテン、胎生がん細胞に見いだされるＬｅｙ、ＴＬ５（血液型Ａ）、Ａ４３１細胞に見いだされるＥＧＦ受容体、すい臓癌に見いだされるＥ１シリーズ（血液型Ｂ）、胎生癌腫細胞に見いだされるＦＣ１０．２、胃腺癌抗原、腺癌に見いだされるＣＯ−５１４（血液型Ｌｅａ）、腺癌に見いだされるＮＳ−１０、ＣＯ−４３（血液型Ｌｅｂ）、Ａ４３１細胞のＥＧＦ受容体に見いだされるＧ４９、結腸腺癌に見いだされれるＭＨ２（血液型ＡＬｅｂ／Ｌｅｙ）、結腸癌に見いだされる１９．９、胃癌ムチン、骨髄細胞に見いだされるＴ５Ａ７、メラノーマに見いだされるＲ２４、胎生癌腫細胞に見いだされる４．２、ＧＤ３、Ｄ１．１、ＯＦＡ−１、ＧＭ２、ＯＦＡ−２、ＧＤ２およびＭ１：２２：２５：８、ならびにＳＳＥＡ−３およびＳＳＥＡ−４などの分化抗原（Ｆｅｉｚｉ，  １９８５，  Ｎａｔｕｒｅ  ３１４：５３−５７）を含む。
【０１７８】
実施態様によって、抗体は、癌の治療に有用である。癌の治療に利用可能な抗体の例は、非ホジキンリンパ腫を有する患者の治療のためのキメラ抗ＣＤ２０モノクローナル抗体であるリツキサン（登録商標）（リツキシマブ、ジェネンテック）、卵巣癌の治療のためのマウス抗体であるオバレックス（アルタレックス社、マサチューセッツ州）、結直腸癌の治療のためのマウスＩｇＧ２ａ抗体であるパノレックス（グラクソウェルカム、ノースカロライナ州）、頭部癌および頚部癌などの上皮細胞成長因子陽性癌の治療のための抗ＥＧＦＲ  ＩｇＧキメラ抗体であるセツキシマブエルビツクス（イムクローンシステムズ社、ニューヨーク州）、肉腫の治療のためのヒト化抗体であるビタキシン（メドイミューン社、メリーランド州）、慢性リンパ球白血病（ＣＬＬ）の治療のためのヒト化ＩｇＧ１抗体であるキャンパスＩ／Ｈ（ロイコサイト、マサチューセッツ州）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の治療のためのヒト化抗ＣＤ３３  ＩｇＧ抗体であるスマートＭ１９５（プロテインデザインラブズ社、カリフォルニア州）、非ホジキンリンパ腫の治療のためのヒト化抗ＣＤ２２  ＩｇＧ抗体であるリンフォサイド（イムノメディックス社、ニュージャージー州）、非ホジキンリンパ腫の治療のためのヒト化抗ＨＬＡ−ＤＲ抗体であるスマートＩＤ１０（プロテインデザインラブズ社、カリフォルニア州）、非ホジキンリンパ腫の治療のための放射性元素標識化マウス抗ＨＬＡ−Ｄｒ１０抗体であるオンコリム（テクニクローン社、カリフォルニア州）、ホジキン氏病または非ホジキンリンパ腫の治療のためのヒト化抗ＣＤ２  ｍＡｂであるアロミューン（バイオトランスプラント、カリフォルニア州）、肺癌および結直腸癌の治療のための抗ＶＥＧＦヒト化抗体であるアバスチン（ジェネンテック社、カリフォルニア州）、非ホジキンリンパ腫の治療のための抗ＣＤ２２抗体であるエプラツザマブ（イムノメディックス社、ニュージャージー州およびアムジェン、カリフォルニア州）、および結直腸癌の治療のためのヒト化抗ＣＥＡ抗体であるシーサイド（イムノメディックス社、ニュージャージー州）を含むがそれらに限定されない。
【０１７９】
実施態様によって、抗体は、以下の抗原に対する抗体である（癌の例は括弧の中に示される）。ＣＡ１２５（卵巣癌）、ＣＡ１５−３（癌腫）、ＣＡ１９−９（癌腫）、Ｌ６（癌腫）、ルイスＹ（癌腫）、ルイスＸ（癌腫）、アルファフェト蛋白質（癌腫）、ＣＡ２４２（結直腸癌）、胎盤アルカリホスファターゼ（癌腫）、前立腺特異性膜抗原（前立腺癌）、ＥｐｈＢ２、ＴＭＥＦＦ２、前立腺酸性ホスファターゼ（前立腺癌）、上皮増殖因子（癌腫）、ＭＡＧＥ−１（癌腫）、ＭＡＧＥ−２（癌腫）、ＭＡＧＥ−３（癌腫）、ＭＡＧＥ−４（癌腫）、抗トランスフェリン受容体（癌腫）、ｐ９７（メラノーマ）、ＭＵＣ１−ＫＬＨ（乳癌）、ＣＥＡ（結直腸癌）、ｇｐ１００（メラノーマ）、ＭＡＲＴ１（メラノーマ）、前立腺特異性抗原（前立腺癌）、ＩＬ−２受容体（Ｔ細胞白血病およびリンパ腫）、ＣＤ２０（非ホジキンリンパ腫）、ＣＤ５２（白血病）、ＣＤ３３（白血病）、ＣＤ２２（リンパ腫）、ヒト絨毛膜ゴナドトロピン（癌腫）、ＣＤ３８（多発性骨髄腫）、ＣＤ４０（リンパ腫）、ムチン（癌腫）、Ｐ２１（癌腫）、ＭＰＧ（メラノーマ）およびＮｅｕ癌遺伝子産物（癌腫）。いくつかの特異的な有用抗体は、ＢＲ９６  ｍＡｂ（Ｔｒａｉｌ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６１：２１２−２１５）、ＢＲ６４（Ｔｒａｉｌ  ｅｔ  ａｔ，  １９９７，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５７：１００−１０５）、Ｓ２Ｃ６  ｍＡｂ（Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ６０：３２２５−３２３１）などのＣＤ４０抗原に対するｍＡｂ、または米国特許出願公開第２００３−０２１１１００号および第２００２−０１４２３５８号に開示されているようなその他の抗ＣＤ４０抗体、１Ｆ６  ｍＡｂおよび２Ｆ２  ｍＡｂなどのＣＤ７０抗原に対するｍＡｂ、およびＡＣ１０（Ｂｏｗｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １５１：５８９６−５９０６、Ｗａｈｌ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ，  ６２（１３）：３７３６−４２）またはＭＤＸ−００６０（米国特許出願公開第２００４−０００６２１５号）などのＣＤ３０抗原に対するｍＡｂを含むがそれらに限定されない。腫瘍関連抗原に結合するその他の内在化抗体を用いてよく、概説されている（Ｆｒａｎｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｔｈｅｒ．  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．  １５：４５９  ７６、Ｍｕｒｒａｙ，  ２０００，  Ｓｅｍｉｎ．  Ｏｎｃｏｌ．  ２７：６４  ７０；Ｂｒｅｉｔｌｉｎｇ，  Ｆ．，  ａｎｄ  Ｄｕｂｅｌ，  Ｓ．，  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ，  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９８）。
【０１８０】
別の特定の実施態様では、自己免疫疾患の治療または予防のために既知の抗体を用いる。自己免疫抗体の産生を担当する細胞の抗原に免疫特異性の抗体は、任意の組織（例えば大学の科学者または会社）から入手することができ、あるいは、例えば化学合成法または組み換え発現技法など、当業者に既知の任意の方法によって作り出してよい。
【０１８１】
自己免疫疾患の治療に免疫特異的である有用な抗体は、抗核抗体、抗ｄｓＤＮＡ抗体、抗ｓｓＤＮＡ抗体、抗カルジオリピン抗体ＩｇＭ、ＩｇＧ、抗リン脂質抗体ＩｇＭ、ＩｇＧ、抗ＳＭ抗体、抗ミトコンドリア抗体、甲状腺自己抗体、抗マイクロゾーム抗体、抗チログロブリン抗体、抗ＳＣＬ−７０抗体、抗Ｊｏ抗体、抗Ｕ１ＲＮＰ抗体、抗Ｌａ／ＳＳＢ抗体、抗ＳＳＡ抗体、抗ＳＳＢ抗体、抗壁細胞抗体、抗ヒストン抗体、抗ＲＮＰ抗体、抗Ｃ−ＡＮＣＡ抗体、抗Ｐ−ＡＮＣＡ抗体、抗セントロメア抗体、抗フィブリラリン抗体および抗ＧＢＭ抗体を含むがそれらに限定されない。
【０１８２】
特定の実施態様では、有用な抗体は、標的細胞上に発現した受容体または受容体複合体と結合してよい。受容体または受容体複合体は、免疫グロブリン遺伝子スーパーファミリーメンバー、ＴＮＦ受容体スーパーファミリーメンバー、インテグリン、サイトカイン受容体、ケモカイン受容体、主要組織適合蛋白質、レクチンまたは補体制御蛋白質を含んでよい。適当な免疫グロブリンスーパーファミリーメンバーの非限定的な例は、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ２８、ＣＤ７９、ＣＤ９０、ＣＤ１５２／ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１およびＩＣＯＳである。適当なＴＮＦ受容体スーパーファミリーメンバーの非限定的な例は、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＣＤ９５／Ｆａｓ、ＣＤ１３４／ＯＸ４０、ＣＤ１３７／４−１ＢＢ、ＴＮＦ−Ｒ１、ＴＮＦＲ−２、ＲＡＮＫ、ＴＡＣＩ、ＢＣＭＡ、破骨細胞分化抑制因子、Ａｐｏ２／ＴＲＡＩＬ−Ｒ１、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２、ＴＲＡＩＬ−Ｒ３、ＴＲＡＩＬ−Ｒ４およびＡＰＯ−３である。適当なインテグリンの非限定的な例は、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１８、ＣＤ２９、ＣＤ４１、ＣＤ４９ａ、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ４９ｄ、ＣＤ４９ｅ、ＣＤ４９ｆ、ＣＤ１０３およびＣＤ１０４である。適当なレクチンの非限定的な例は、Ｃ型、Ｓ型およびＩ型レクチンである。
【０１８３】
ある実施態様では、リガンドは、自己免疫疾患に関連する活性化リンパ球と結合する。
【０１８４】
別の特定の実施態様では、ウイルス抗原または微生物抗原に免疫特異的な有用なリガンドは、モノクローナル抗体である。本明細書で用いられる用語「ウイルス抗原」は、免疫応答を誘発することができる任意のウイルスペプチド、ポリペチド蛋白質（例えばＨＩＶ  ｇｐ１２０、ＨＩＶ  ｎｅｆ、ＲＳＶ  Ｆ糖蛋白質、インフルエンザウイルスノイラミニダーゼ、インフルエンザウイルスヘムアグルチニン、ＨＴＬＶ  ｔａｘ、単純ヘルペスウイルス糖蛋白質（例えばｇＢ、ｇＣ、ｇＤおよびｇＥ）およびＢ型肝炎表面抗原）を含むがそれらに限定されない。本明細書で用いられる用語「微生物抗原」は、免疫応答を誘発することができる任意の微生物ペプチド、ポリペチド、蛋白質、糖、多糖類または脂質分子（例えば、細菌、真菌、病原性原生動物、あるいは例えばＬＰＳおよび莢膜多糖５／８を含む酵母ポリペチド）を含むがそれらに限定されない。
【０１８５】
ウイルス抗原または微生物抗原に対して免疫特異的な抗体は、購入してよく、または、例えば化学合成技法または組み換え発現技法などの当業者に既知の任意の方法によって作り出してよい。ウイルス抗原または微生物抗原に対して免疫特異的な抗体をコード化するヌクレオチド配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋデータベースまたは類似データベース、学術刊行物、または定型的クローン化および配列解析によって入手してよい。
【０１８６】
特定の実施態様では、有用なリガンドは、本明細書に開示されている方法によるウイルス感染または微生物感染の治療または予防に有用なリガンドである。ウイルス感染または微生物感染の治療に有用な入手可能な抗体の例は、ヒト化抗呼吸系発疹ウイルス（ＲＳＶ）モノクローナル抗体であり、ＲＳＶ感染を有する患者の治療に有用なＳＹＮＡＧＩＳ（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ，  Ｉｎｃ．，  ＭＤ）、ＨＩＶ感染症の治療に有用なＣＤ４融合抗体であるＰＲＯ５４２（Ｐｒｏｇｅｎｉｃｓ）、Ｂ型肝炎ウイルスの治療に有用なヒト抗体であるＯＳＴＡＶＩＲ（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，  Ｉｎｃ．，  ＣＡ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の治療に有用なヒト化ＩｇＧ１抗体であるＰＲＯＴＯＶＩＲ（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，  Ｉｎｃ．，  ＣＡ）および抗ＬＰＳ抗体を含むがそれらに限定されない。
【０１８７】
感染症の治療において有用なその他の抗体は、細菌（例えば、化膿連鎖球菌、肺炎連鎖球菌、淋菌、髄膜炎菌、ジフテリア菌、ボツリヌス菌、ウェルシュ菌、破傷風菌、インフルエンザ菌、肺炎桿菌、クレブシエラオツェーナ、鼻硬腫菌、黄色ブドウ球菌、コレラ菌、大腸菌、緑膿菌、カンピロバクター（ビブリオ）フィタス、アエロモナスハイドロフィラ、セレウス菌、エドバルシエラタルダ、エルシニアエンテロコリチカ、ペスト菌、偽結核エルシニア菌、志賀赤痢菌、フレキシネル赤痢菌、ソンネ赤痢菌、ネズミチフス菌、梅毒トレポネーマ、トレポネーマペルテヌエ、トレポネーマカラテネウム、ボレリアビンセンチイ、ボレリアブルグドルフェリ、レプトスピライクテロヘモラギアエ、ヒト結核菌、ニューモシスチスカリニ、野兎病菌、ウシ流産菌、ブタ流産菌、ブルセラメリテンシス、マイコプラズマ属、リケッチアプロワゼキ、ツツガムシ病リケッチア、およびクラミジア属）の病原性株、病原性真菌類（例えば、コクシジオイデスイミティス、アスペルギルスフミガーツス、鵞口瘡カンジダ、ブラストミセスデルマチチジス、クリプトコッカスネオフォルマンス、ヒストプラスマカプスラーツム）、原生動物（エントモエーバヒストリチカ、トキソプラズマ原虫、トリコモナステナス、トリコモナスホミニス、膣トリコモナス、トリパノソーマガンビエンセ、トリパノソーマローデシエンセ、クルーズトリパノソーマ、ドノバンリーシュマニア、熱帯リーシュマニア、ブラジルリーシュマニア、ニューモシスチス肺炎、三日熱マラリア、熱帯熱マラリア原虫またはマラリア病原虫）、または蠕虫（ヒトギョウチュウ、ヒト鞭虫、回虫、旋毛虫、糞線虫、日本住血吸虫、マンソン住血吸虫、ビルハルツ住血吸虫、および十二指腸虫）由来の抗原に対する抗体を含むがそれらに限定されない。
【０１８８】
本発明においてウイルス疾患の治療に有用なその他の抗体は、例えば、プロクスウイルス科、ヘルペスウイルス科、１型単純ヘルペスウイルス、２型単純ヘルペスウイルス、アデノウイルス科、パポバウイルス科、エンテロウイルス科、ピコルナウイルス科、パルボウイルス科、レオウイルス科、レトロウイルス科、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、おたふくかぜ、はしか、呼吸系発疹ウイルス、風疹、アルボウイルス科、ラブドウイルス科、アレナウイルス科、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、非Ａ型／非Ｂ型肝炎ウイルス、ライノウイルス科、コロナウイルス科、ロトウイルス科、およびヒト免疫不全ウイルスなどの病原性ウイルスの抗原に対する抗体を含むがそれらに限定されない。
【０１８９】
薬物単位
薬物単位は、任意の細胞毒性薬物、細胞増殖抑制薬物または免疫調節薬物であってよい。Ｄは、ｙ＝１または２のときにはスペーサー単位と、あるいはｙ＝０のときにはグルクロニド部分と結合を形成することができる原子を有する薬物単位（部分）である。実施態様によって、薬物単位Ｄは、スペーサー単位と結合を形成することができる窒素原子を有する。本明細書で用いられる用語「薬物単位」および「薬物部分」は、同義語であり、区別なく用いられる。
【０１９０】
有用な細胞毒性剤または免疫調節剤の種類は、例えば、抗チューブリン剤、アウリスタチン類、ＤＮＡ副溝結合剤、ＤＮＡ複製阻害剤、アルキル化剤（例えば、シス−プラチン、モノ（白金）、ビス（白金）および三核白金錯体およびカルボプラチンなどの白金錯体）、アンスラサイクリン類、抗生物質、抗葉酸剤、抗代謝剤、カルモジュリン阻害剤、化学療法増感剤、デュオカルマイシン類、エトポシド類、フッ素化ピリミジン類、イオノフォア、レキシトロプシン類、メイタンシノイド、ニトロソ尿素類、プラチノール類、細孔形成化合物、プリン抗代謝剤、ピューロマイシン類、放射線増感剤、ラパマイシン類、ステロイド、タキサン、トポイソメラーゼ阻害剤、ビンカアルカロイドまたは類似化合物を含む。
【０１９１】
個々の細胞毒性剤または免疫調節剤は、例えば、アンドロゲン、アントラマイシン（ＡＭＣ）、アスパラギナーゼ、５−アザシチジン、アザチオプリン、ブレオマイシン、ブスルファン、ブチオニンスルホキシミン、カリケアマイシン、カリケアマイシン誘導体、カンプトセシン、カルボプラチン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）、ＣＣ−１０６５、クロラムブシル、シスプラチン、コルヒチン、シクロホスファミド、シタラビン、シチジンアラビノシド、サイトカラシンＢ、デカルバジン、ダクチノマイシン（以前はアクチノマイシン）、ダウノルビシン、デカルバジン、ＤＭ１、ＤＭ４、ドセタキセル、ドキソルビシン、エトポシド、エストロゲン、５−フルオルデオキシウリジン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、グラミシジンＤ、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、イリノテカン、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、メイタンシン、メクロレタミン、メルファラン、６−メルカプトプリン、メトトレキセート、ミトラマイシン、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン、ニトロイミダゾール、パクリタキセル、パリトキシン、プリカマイシン、プロカルビジン、リゾキシン、ストレプトゾトシン、テノポシド、６−チオグアニン、チオテパ、トポテカン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ＶＰ−１６およびＶＭ−２６を含む。
【０１９２】
いくつかの一般的な実施態様では、適当な細胞毒性剤は、例えば、ＤＮＡ副溝結合剤（例えばエンジイン類およびレキシトロプシン類、ＣＢＩ化合物、米国特許第６，１３０，２３７号も参照すること）、デュオカルマイシン類、タキサン類（例えばパクリタキセルおよびドセタキセル）、ピューロマイシン類、ビンカアルカロイド、ＣＣ−１０６５、ＳＮ−３８、トポテカン、モルホリノ−ドキソルビシン、リゾキシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、エキノマイシン、コンブレスタスタチン、ネトロプシン、エポチロンＡおよびＢ、エストラムスチン、クリプトフィシン、セマドチン、メイタンシノイド、ディスコデルモリド、エリューセロビンおよびミトキサントロンを含む。
【０１９３】
実施態様によって、薬物は、抗チューブリン剤である。抗チューブリン剤の例は、タキサン類（例えばタキソール（登録商標）（パクリタキセル）、タキソテール（登録商標）（ドセタキセル））、Ｔ６７（ツラリク）およびビンカアルカロイド（例えばビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシンおよびビノレルビン）を含むがそれらに限定されない。その他の抗チューブリン剤は、例えば、バッカチン誘導体、タキサン類縁体、エポチロン（例えばエポチロンＡおよびＢ）、ノコダゾール、コルヒチンおよびコルシミド、エストラムスチン、クリプトフィシン、セマドチン、メイタンシノイド、コンブレスタスタチン、ディスコデルモリドおよびエリューセロビンを含む。
【０１９４】
特定の実施態様では、細胞毒性剤は、別の種類の抗チューブリン剤であるメイタンシノイドである。例えば、特定の実施態様では、メイタンシノイドは、メイタンシンまたはＤＭ−１であってよい（ＩｍｍｕｎｏＧｅｎ，  Ｉｎｃ．、Ｃｈａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ５２：１２７−１３１も参照すること）。
【０１９５】
実施態様によって、薬物は、アウリスタチンＥまたはその誘導体などのアウリスタチンである。例えば、アウリスタチンＥ誘導体は、アウリスタチンＥとケト酸との間で形成されたエステルであってよい。例えば、アウリスタチンＥをパラアセチル安息香酸またはベンゾイル吉草酸と反応させてＡＥＢおよびＡＥＶＢを作り出してよい。その他の一般的なアウリスタチン誘導体は、ＡＦＰ、ＭＭＡＦおよびＭＭＡＥを含む。アウリスタチン誘導体の合成および構造は、米国特許出願公開第２００３−００８３２６３号、第２００５−０２３８６４９号および第２００５−０００９７５１号、国際特許出願公開第０４／０１０９５７号、国際特許出願公開第０２／０８８１７２号、および米国特許第６，３２３，３１５号、第６，２３９，１０４号、第６，０３４，０６５号、第５，７８０，５８８号、第５，６６５，８６０号、第５，６６３，１４９号、第５，６３５，４８３号、第５，５９９，９０２号、第５，５５４，７２５号、第５，５３０，０９７号、第５，５２１，２８４号、第５，５０４，１９１号、第５，４１０，０２４号、第５，１３８，０３６号、第５，０７６，９７３号、第４，９８６，９８８号、第４，９７８，７４４号、第４，８７９，２７８号、第４，８１６，４４４号、および第４，４８６，４１４号に記載されている。
【０１９６】
実施態様によって、−Ｄは、式ＤＥまたはＤＦ
【０１９７】
【化５２】
2009501800.tif 000038
のどちらかである。式中、各位置において独立して、
Ｒ２は、ＨおよびＣ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環、アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環、アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、
Ｒ５は、Ｈおよびメチルから選択され、
または、Ｒ４とＲ５とは一緒になって炭素環を形成し、式−（ＣＲａＲｂ）−を有し、式中、ＲａおよびＲｂは、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよびＣ３〜Ｃ８炭素環から選択され、ｎは、２、３、４、５および６から選択され、
Ｒ６は、ＨおよびＣ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環、アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、
各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ８炭素環およびＯ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）から選択され、
Ｒ９は、ＨおよびＣ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ１０は、アリールおよびＣ３〜Ｃ８複素環から選択され、
Ｚは、Ｏ、Ｓ、ＮＨまたはＮＲ１２であり、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８複素環、−（Ｒ１３Ｏ）ｍ−Ｒ１４および−（Ｒ１３Ｏ）ｍ−ＣＨ（Ｒ１５）２から選択され、
ｍは、１〜１０００の範囲の整数であり、
Ｒ１３は、Ｃ２〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１４は、ＨまたはＣ１〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１５の各位置は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（Ｒ１６）２、−（ＣＨ２）−ＳＯ３Ｈまたは−（ＣＨ２）ｎ−ＳＯ３−Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１６の各位置は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキルまたは−（ＣＨ２）−ＣＯＯＨであり、
Ｒ１８は、−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−アリール、−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）および−Ｃ（Ｒ８）２−Ｃ（Ｒ８）２−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）から選択され、
Ｘ１は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンであり、
ｎは、０から６の範囲の整数である。
【０１９８】
一実施態様では、Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、独立して、イソプロピルまたはｓｅｃ−ブチルであり、Ｒ５は−Ｈである。ある実施態様の例では、Ｒ３およびＲ４はそれぞれイソプロピルであり、Ｒ５はＨであり、Ｒ７はｓｅｃ−ブチルである。
【０１９９】
別の実施態様では、Ｒ２およびＲ６はそれぞれメチルであり、Ｒ９はＨである。
【０２００】
さらに別の実施態様では、Ｒ８の各位置は−ＯＣＨ３である。
【０２０１】
実施態様のある例では、Ｒ３およびＲ４はそれぞれイソプロピルであり、Ｒ２およびＲ６はそれぞれメチルであり、Ｒ５はＨであり、Ｒ７はｓｅｃ−ブチルであり、Ｒ８の各位置は−ＯＣＨ３であり、Ｒ９はＨである。
【０２０２】
一実施態様では、Ｚは−Ｏ−または−ＮＨ−である。
【０２０３】
一実施態様では、Ｒ１０はアリールである。
【０２０４】
ある実施態様の例では、Ｒ１０は−フェニルである。
【０２０５】
ある実施態様の例では、Ｚが−Ｏ−のとき、Ｒ１１はＨ、メチルまたはｔ−ブチルである。
【０２０６】
一実施態様では、ＺがＮＨ−のとき、Ｒ１１はＣＨ（Ｒ１５）２であり、−Ｒ１５は−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（Ｒ１６）２、Ｒ１６は−Ｃ１〜Ｃ８アルキルまたは−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨである。
【０２０７】
別の実施態様では、Ｚが−ＮＨのとき、Ｒ１５は−ＣＨ（Ｒ１５）２であり、Ｒ１５は−（ＣＨ２）ｎ−ＳＯ３Ｈである。
【０２０８】
薬物単位（−Ｄ）の例示は、以下の構造式
【０２０９】
【化５３】
2009501800.tif 000039
【０２１０】
【化５４】
2009501800.tif 000040
を有する薬物単位および薬学的に許容されるその塩または溶媒和化合物を含む。
【０２１１】
一態様では、上記に示したトリエチレングリコールエステル（ＴＥＧ）などであるがそれらに限定されない親水基をＲ１１のところで薬物単位に結合させてよい。理論に拘泥するわけではないが、親水基は、薬物単位の内部取り込みおよび凝塊防止に役立つ。
【０２１２】
別の態様では、薬物単位は、以下の式
【０２１３】
【化５５】
2009501800.tif 000041
のアウリスタチンのアミノ安息香酸誘導体である。式中、各位置で独立して、
Ｒ２は、−水素、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＯＯＨおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１から選択され、
各Ｒ３は、独立して、−水素および−Ｃ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
ｌは、０〜１０の範囲の整数であり、
Ｒ４は、−水素、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ３〜Ｃ８炭素環、−アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環から選択され、Ｒ５は、−Ｈおよび−メチルから選択され、または、Ｒ４とＲ５とは一緒になって、式−（ＣＲａＲｂ）ｎ−を有し、ＲａおよびＲｂは、独立して、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよび−Ｃ３〜Ｃ８炭素環から選択され、ｎは、２、３、４、５および６から選択され、結合する先の炭素原子と環を形成し、
Ｒ６は、−Ｈおよび−Ｃ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ７は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ３〜Ｃ８炭素環、アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、−Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、
各Ｒ８は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ３〜Ｃ８炭素環、−Ｏ−アルキル−（Ｃ１〜Ｃ８）炭素環）および−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）から選択され、
Ｒ９は、−Ｈおよび−Ｃ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ１０は、アリールおよび−Ｃ３〜Ｃ８複素環から選択され、
Ｚは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−または−ＮＲ１２−であり、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ８アルキルまたはアリールであり、
Ｒ１１は、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリール、−Ｃ３〜Ｃ８複素環、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−Ｈ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ３および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＨから選択され、ｒは、１〜１０の範囲の整数であり、
Ｘ１は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンである。
【０２１４】
実施態様によって、薬物単位は、以下の式
【０２１５】
【化５６】
2009501800.tif 000042
のものであり、式中、各位置で独立して、
Ｒ４は、−水素、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ３〜Ｃ８炭素環、−アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、−Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、Ｒ５は、−Ｈおよび−メチルから選択され、または、Ｒ４とＲ５とは一緒になって、式−（ＣＲａＲｂ）ｎ−を有し、ＲａおよびＲｂは、独立して、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキルおよび−Ｃ３〜Ｃ８炭素環から選択され、ｎは、２、３、４、５および６から選択され、結合先の炭素原子と環を形成し、
Ｒ６は、−Ｈおよび−Ｃ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ７は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ３〜Ｃ８炭素環、アリール、Ｘ１−アリール、Ｘ１−（Ｃ３〜Ｃ８炭素環）、−Ｃ３〜Ｃ８複素環およびＸ１−（Ｃ３〜Ｃ８複素環）から選択され、
各Ｒ８は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｃ３〜Ｃ８炭素環、−Ｏ−アルキル−（Ｃ１〜Ｃ８）炭素環）および−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）から選択され、
Ｒ９は、−Ｈおよび−Ｃ１〜Ｃ８アルキルから選択され、
Ｒ１０は、アリールおよび−Ｃ３〜Ｃ８複素環から選択され、
Ｚは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−または−ＮＲ１２−であり、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ８アルキルまたはアリールであり、
Ｒ１１は、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリール、−Ｃ３〜Ｃ８複素環、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−Ｈ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ３および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＨから選択され、ｒは、１〜１０の範囲の整数であり、
Ｘ１は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンである。
【０２１６】
実施態様によって、薬物単位は、以下の式
【０２１７】
【化５７】
2009501800.tif 000043
のものであり、各位置で独立して、
Ｒ１０は、アリール基および−Ｃ３〜Ｃ８複素環から選択され、
Ｚは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−または−ＮＲ１２−であり、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ８アルキルまたはアリールであり、
Ｒ１１は、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリール、−Ｃ３〜Ｃ８複素環、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−Ｈ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ３および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＨから選択され、ｒは、１〜１０の範囲の整数である。
【０２１８】
実施態様によって、薬物単位は、以下の式
【０２１９】
【化５８】
2009501800.tif 000044
のものであり、式中、
Ｚは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−または−ＮＲ１２−であり、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ８アルキルまたはアリールであり、
Ｒ１１は、−Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、アリール、−Ｃ３〜Ｃ８複素環、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−Ｈ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ３および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＨから選択され、ｒは、１〜１０の範囲の整数である。
【０２２０】
実施態様によって、薬物単位は、以下の式
【０２２１】
【化５９】
2009501800.tif 000045
のものである。
【０２２２】
実施態様によって、薬物単位は、放射性同位元素ではない。実施態様によって、薬物単位は放射性でない。
【０２２３】
実施態様によって、薬物単位は、抗代謝剤である。抗代謝剤は、例えば、プリン拮抗薬（例えばアゾチオプリンまたはミコフェノール酸モフェチル）、ジヒドロ葉酸レダクターゼ阻害剤（例えばメトトレキセート）、アシクロビル、ガングシクロビル、ジドブジン、ビダラビン、リババリン、アジドチミジン、シチジンアラビノシド、アマンタジン、ジデオキシウリジン、ヨードデオキシウリジン、ポスカルネまたはトリフルリジンであってよい。
【０２２４】
その他の実施態様では、薬物単位は、タクロリムス、サイクロスポリン、ＦＵ５０６またはラパマイシンである。さらに別の実施態様では、薬物は、アルデスロイキン、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アルトレタミン、アミホスチン、アナストロゾール、三酸化ヒ素、ベキサロテン、ベキサロテン、カルステロン、カペシタビン、セレコキシブ、クラドリビン、ダルベポエチンアルファ、デニロイキンジフチトックス、デクスラゾキサン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピルビシン、エポエチンアルファ、エストラムスチン、エクセメスタン、フィルグラスチム、フロクスウリジン、フルダラビン、フルベストラント、ゲムシタビン、ゲムツズマブオゾガマイシン（マイロターグ）、ゴセレリン、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブメシレート、インターフェロンアルファ−２ａ、イリノテカン、レトロゾール、ロイコボリン、レバミゾール、メクロルエタミンまたはナイトロジェンマスタード、メゲストロール、メスナ、メトトレキセート、メトキサレン、マイトマイシンＣ、ミトタン、ナンドロロンフェンプロピオネート、オプレルベキン、オキサリプラチン、パミドロネート、ペグアデマーゼ、ペグアスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、ポルフィマーナトリウム、プロカルバジン、キナクリン、ラスブリカーゼ、リツキシマブ、サルグラモスチム、ストレプトゾシン、タモキシフェン、テモゾロマイド、テニポシド、テストラクトン、チオグアニン、トレミフェン、トシツモマブ、トラスツズマブ（ハーセプチン）、トレチノイン、ウラシルマスタード、バルルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビンまたはゾレドロネートである。
【０２２５】
実施態様によって、薬物部分は、免疫調節剤である。免疫調節剤は、例えば、ガングシクロビル、エタナーセプト、タクロリムス、サイクロスポリン、ラパマイシン、シクロホスファミド、アザチオプリン、ミコフェノール酸モフェチルまたはメトトレキセートであってよい。あるいは、免疫調節性剤は、例えば、糖コルチコイド（例えばコルチゾールまたはアルドステロン）または糖コルチコイド類縁体（例えばプレドニソンまたはデキサメサゾン）であってよい。
【０２２６】
実施態様によって、免疫調節性剤は、アリールカルボン酸誘導体、ピラゾール含有誘導体、オキシカム誘導体およびニコチン酸誘導体などの抗炎症剤である。抗炎症剤の種類は、例えば、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、５−リポキシゲナーゼ阻害剤およびロイコトリエン受容器拮抗剤を含む。
【０２２７】
適当なシクロオキシゲナーゼ阻害薬は、メクロフェナム酸、メフェナム酸、カルプロフェン、ジクロフェナク、ジフルニサル、フェンブフェン、フェノプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ナブメトン、スリンダック、テノキシカムおよびトルメチンを含む。
【０２２８】
適当なリポキシゲナーゼ阻害剤は、酸化還元阻害剤（例えばカテコールブタン誘導体、ノルジヒドログアヤレト酸（ＮＤＧＡ）、マソプロコール、フェニドン、ラノパレン、インダゾリノン、ナファザトロム、ベンゾフラノール、アルキルヒドロキシルアミン）、および非酸化還元阻害剤（例えば、ヒドロキシチアゾール、メトキシアルキルチアゾール、ベンゾピランおよびそれらの誘導体、メトキシテトラヒドロピラン、ボスウェリア酸およびボスウェリア酸のアセチル化誘導体、ならびにシクロアルキルラジカルで置換したキノリンメトキシフェニル酢酸）、ならびに酸化還元阻害剤の前駆体を含む。
【０２２９】
その他の適当なリポキシゲナーゼ阻害剤は、酸化防止剤（例えば、フェノール、没食子酸プロピル、フラボノイドおよび／またはフラボノイドを含む天然基質、フラボンのヒドロキシル化誘導体、フラバノール、ジヒドロクエルセチン、ルテオリン、ガランギン、オロボール、カルコンの誘導体、４，２’，４’−トリヒドロキシカルコン、オルト−アミノフェノール類、Ｎ−ヒドロキシ尿素類、ベンゾフラノール類、エブセレン、および還元性セレノ酵素の活性を増加させる化学種）、鉄キレート化剤（例えばヒドロキサム酸およびその誘導体、Ｎ−ヒドロキシ尿素類、２−ベンジル−１−ナフトール、カテコール類、ヒドロキシルアミン類、カルノソール・トロロックスＣ、カテコール、ナフトール、スルファサラジン、ザイロイトン、５−ヒドロキシアントラニル酸および４−（オメガ−アリールアルキル）フェニルアルカン酸）、イミダゾール含有化合物（例えばケトコナゾールおよびイトラコナゾール）、フェノチアジンおよびベンゾピラン誘導体を含む。
【０２３０】
さらにその他の適当なリポキシゲナーゼ阻害剤は、エイコサノイドの阻害剤（例えば、オクタデカテトラエン酸、エイコサテトラエン酸、ドコサペンタエン酸、エイコサヘキサエン酸およびドコサヘキサエン酸およびそれらのエステル、ＰＧＥ１（プロスタグランジンＥ１）、ＰＧＡ２（プロスタグランジンＡ２）、ビプロストール、１５−モノヒドロキシエイコサテトラエン酸、１５−モノヒドロキシエイコサトリエン酸および１５−モノヒドロキシエイコサペンタエン酸、ならびにロイコトリエンＢ５、Ｃ５およびＤ５）、カルシウムの流れを干渉する化合物、フェノチアジン、ジフェニルブチルアミン類、ベラパミル、フコシド、クルクミン、クロロゲン酸、コーヒー酸、５，８，１１，１４−エイコサテトライエン酸（ＥＴＹＡ）、ヒドロキシフェニルレチンアミド、ロナパレン、エスクリン、ジエチルカルバマジン、フェナントロリン、バイカレイン、プロキシクロミル、チオエーテル、ジアリルスルフィドおよびジ−（１−プロペニル）スルフィドを含む。
【０２３１】
ロイコトリエン受容体拮抗薬は、カルシトリオール、オンタゾラスト、バイエルＢａｙ−ｘ−１００５、チバガイギーＣＧＳ−２５０１９Ｃ、エブセレン、レオデンマークＥＴＨ−６１５、リリーＬＹ−２９３１１１、小野ＯＮＯ−４０５７、テルモＴＭＫ−６８８、ベーリンガーインゲルハイムＢＩ−ＲＭ−２７０、リリーＬＹ２１３０２４、リリーＬＹ２６４０８６、リリーＬＹ２９２７２８、小野ＯＮＯ  ＬＢ４５７、ファイザー１０５６９６、パーデューフレデリックＰＦ  １００４２、ローヌ−プーランロレＲＰ  ６６１５３、スミスクラインビーチャムＳＢ−２０１１４６、スミスクラインビーチャムＳＢ−２０１９９３、スミスクラインビーチャムＳＢ−２０９２４７、サールＳＣ−５３２２８、スミタモＳＭ  １５１７８、アメリカンホームプロダクツＷＡＹ  １２１００６、バイエルＢａｙ−ｏ−８２７６、ワーナーランバートＣＩ  ９８７、ワーナーランバートＣＩ−９８７ＢＰＣ−１５ＬＹ  ２２３９８２、リリーＬＹ  ２３３５６９、リリーＬＹ−２５５２８３、マクロネックスＭＮＸ−１６０、メルク社ＭＫ５９１、メルク社ＭＫ８８６、小野ＯＮＯ−ＬＢ−４４８、パーデューフレデリックＰＦ−５９０１、ローヌ−プーランロレＲＧ  １４８９３、ローヌ−プーラン・ロレＲＰ  ６６３６４、ローヌ−プーランロレＲＰ  ６９６９８、塩野義Ｓ−２４７４、サールＳＣ−４１９３０、サールＳＣ−５０５０５、サールＳＣ−５１１４６、サールＳＣ−５２７９８、スミスクラインビーチャムＳＫ＆Ｆ−１０４４９３、レオデンマークＳＲ−２５６６、田辺Ｔ−７５７および帝人ＴＥＩ−１３３８を含む。
【０２３２】
リガンド薬物単位の合成
グルクロニド単位およびグルクロニド系リンカー薬物結合体は、任意の適当な技法によって合成してよい。例えば、Ｄｅｓｂｅｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９８，  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．  １３：９５５−６８に、グルクロニド系プロドラッグの合成が開示されている。
【０２３３】
グルクロニド系リンカー−薬物結合体を含むリガンド薬物化合物結合体は、当分野における技法によって合成してよい。例えば、グルクロニド系リンカー−薬物結合体は、リガンド単位への結合体化のためのアセトアミド官能基を含んでよい。スキーム１を参照する。スキーム１に、ドキソルビシンのβ−グルクロニドプロドラッグ（３）を示す。アミン前駆体を経由してアミドを改変し、抗体などのリガンドへの結合用のブロモアセトアミドまたはマレイミドなどの反応基を持たせてよい。さらに、スキーム１に開示するように、このβ−グルクロニダーゼ−不安定薬物リンカーシステムは、β−グルクロニダーゼを作用させるとグリコシド結合開裂し、続いて１，６−脱離と二酸化炭素の放出とを行い、リガンド薬物結合体から薬物を放出する。
【０２３４】
実施態様の他の例で、スキーム２に、ＭＭＡＥおよびＭＭＡＦと、別の強力なドキソルビシン誘導体であるドキソルビシンプロピルオキサゾリン（ＤＰＯ、２）の抗体薬物結合体の例を開示する。ＤＰＯは、スキーム２に示すように、２−ピロリノドキソルビシン（４）への前駆体である。さらに、スキーム２ａに、ＭＭＡＥのβ−グルクロニドプロドラッグを示す。
【０２３５】
【化６０】
2009501800.tif 000046
【０２３６】
【化６１】
2009501800.tif 000047
【０２３７】
スキーム２ａ
【化６２】
2009501800.tif 000048
他の実施態様で、グルクロニド系リンカー−薬物結合体は、例えば、以下の式
【０２３８】
【化６３】
2009501800.tif 000049
【０２３９】
【化６４】
2009501800.tif 000050
に示す、ブロモアセトアミド−グルクロニド−ＭＭＡＥ、ブロモアセトアミド−グルクロニド−ＭＭＡＦ、グルクロニド−スタウロスポリン、またはグルクロニド−アミノＣＢＩ副溝バインダー（ＳＮ２６５９７）であってよい。
【０２４０】
組成物および投与方法
本組成物は、本組成物を患者に投与することができる任意の形であってよい。例えば、組成物は、固体、液体または気体（エーロゾル）の形であってよい。通常の投与経路は、経口、局所、非経口、舌下、直腸、膣、眼球、腫瘍内および鼻腔内を含むがそれらに限定されない。非経口投与は、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内注射または注入技法を含む。一態様では、本組成物を非経口投与する。さらに別の態様では、本化合物を静脈内投与する。実施態様によっては、β−グルクロニダーゼを投与しない状態で、リガンド薬物結合体化合物を投与する。
【０２４１】
医薬品組成物は、その組成物を患者に投与したとき化合物を生物利用可能にすることができるように調合してよい。組成物は、１つ以上の用量単位の形をとってよく、例えば、錠剤が一回分の用量単位であってよく、エーロゾル形の化合物の容器に複数の用量単位を保持させてよい。
【０２４２】
本医薬品組成物を調製する際に用いられる物質は、用いられる量で非毒性であってよい。本医薬品組成物中の活性成分（単数または複数）の最適用量がさまざまな因子に依存することは、当業者には自明である。関連する因子は、動物の種類（例えばヒト）、化合物の特定の形、投与方法および使用される組成物を含むがそれらに限定されない。
【０２４３】
薬学的に許容されるキャリアまたはベヒクルは、本組成物が例えば錠剤または粉体形の中にあるように、粒子であってよい。キャリア（単数または複数）は、液体であってよく、本組成物は、例えば、経口シロップまたは注射用液体である。さらに、キャリア（単数または複数）は、例えば吸入投与において有用なエーロゾル組成物を提供するように、気体または粒子であってよい。
【０２４４】
経口投与用を意図するときは、本組成物は、好ましくは、固体形または液体形であり、半固体、半液体で、懸濁液およびゲル形は、本明細書において固体または液体のどちらかであるとされる形の範囲に含まれる。
【０２４５】
経口投与用の固体組成物として、本組成物は、粉体、顆粒、圧縮錠剤、丸薬、カプセル、チューイングガム、ウエハまたは類似形に調合してよい。通常、そのような固体組成物は、１つ以上の不活性希釈剤を含む。さらに、以下、すなわち、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、微結晶セルロースまたはゼラチンなどのバインダー；澱粉、ラクトースまたはデキストリンなどの賦形剤、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、プリモゲル、コーンスターチおよび類似物などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムまたはステロテックスなどの潤滑剤；コロイド二酸化ケイ素などの滑剤；スクロースまたはサッカリンなどの甘味料、ペパーミントなどの香料、サリチル酸メチルまたはオレンジ香料および着色剤の一つ以上が存在してよい。
【０２４６】
本組成物は、カプセル、例えば、ゼラチンカプセルの形のとき、上記の種類の物質に加えて、ポリエチレングリコール、シクロデキストリンまたは脂肪油などの液体キャリアを含んでよい。
【０２４７】
本組成物は、液体、例えばエリキシル、シロップ、溶液、乳化液または懸濁液の形であってよい。液体は、経口投与または注射による投薬に有用なことがある。経口投与を意図するとき、組成物が甘味料、防腐剤、染料／着色剤および香味料の１つ以上を含んでよい。注射投与用の組成物では、界面活性剤、防腐剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、緩衝液、安定剤および等張剤の１つ以上も含んでよい。
【０２４８】
本液体組成物は、溶液、懸濁液または他の類似形であろうと、以下、すなわち、注射用蒸留水、食塩水、好ましくは生理的食塩水、リンゲル液、等張食塩水、溶媒または懸濁媒として働いてよい合成モノまたはジグリセリドなどの不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、シクロデキストリン、プロピレングリコールまたはその他の溶媒などの無菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなどの酸化防止剤；エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩などの緩衝剤、および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの弾力性調節用の剤の１つ以上も含んでよい。非経口組成物は、ガラス、プラスチックまたはその他の材料で作られたアンプル、使い捨て注射器または多回用量バイアル中に封入してよい。生理食塩水がアジュバントの例である。注射用組成物は、好ましくは無菌とする。
【０２４９】
特定の障害または病状の治療において有効な化合物の量は、障害または病状の性質に依存し、標準的な臨床技法によって決定してよい。さらに、任意選択として、インビトロまたはインビボアッセイを使用して最適用量範囲を特定する助けとしてよい。本組成物中に使用される精確な用量は、投与経路および疾患または障害の重さにも依存し、担当医および各患者の状況の判断による必要がある。
【０２５０】
本組成物は、適当な用量が得られるように化合物の有効な量を含む。通常、この量は、少なくとも組成物の約０．０１重量％の化合物である。経口投与を意図するとき、この量は、組成物の約０．１％から約８０重量％の範囲にあるように変化させてよい。一態様では、経口組成物は、組成物の約４％から約５０重量％の化合物を含んでよい。さらに別の態様では、非経口用量単位が約０．０１％から約２重量％の化合物を含むように本組成物を調製する。
【０２５１】
静脈内投与の場合、本組成物は、動物の体重のｋｇあたり約０．０１から約１００ｍｇの化合物を含んでよい。一態様では、本組成物は、動物の体重のｋｇあたり約１から約１００ｍｇの化合物を含んでよい。別の態様では、投与される量は、約０．１から約２５ｍｇ／ｋｇ体重の化合物の範囲とする。
【０２５２】
総体として、通常、患者に投与する化合物の用量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇから約２０００ｍｇ／ｋｇ動物体重である。実施態様によって、投与する用量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇ動物体重の間である。実施態様によって、投与する用量は、約０．１ｍｇ／ｋｇから約２５０ｍｇ／ｋｇ動物体重の間である。実施態様によって、投与する用量は、約０．１ｍｇ／ｋｇから約２０ｍｇ／ｋｇ動物体重の間である。実施態様によって、投与する用量は、約０．１ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇ動物体重の間である。実施態様によって、投与する用量は、約１ｍｇ／ｋｇから約１５ｍｇ／ｋｇ動物体重の間である。実施態様によって、投与する用量は、約１ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇ動物体重の間である。
【０２５３】
本化合物または組成物は、任意の簡便な経路、例えば、注入または急速静脈注射によって、上皮または皮膚粘膜内壁（例えば口腔粘膜、直腸および腸の粘膜等）経由吸収によって投与してよい。投与は全身投与であってよく、または局所投与であってよい。さまざまな投薬システム、例えば、リポソーム、微粒子、マイクロカプセル、カプセル等へのカプセル化が知られ、これらを用いて化合物を投与してよい。特定の実施態様では、２つ以上の化合物または組成物を患者に投与する。
【０２５４】
特定の実施態様では、治療を必要とする区域に１つ以上の化合物または組成物を局所投与することが望ましいことがある。これは、例えば、手術時の局所注入によって；例えば、手術後の創傷被覆材とともに局所塗布によって；注射によって；カテーテルによって；坐薬によって；または、シアラスチック膜などの膜を含む多孔質、非多孔、または、ゼラチン状材料または繊維のインプラントによって実現してよい。一実施態様では、投与は、癌、腫瘍または新生組織または前新生組織の部位（または前部位）に直接注射してよい。別の実施態様では、投与は、自己免疫疾患顕在化部位（または前部位）に直接注射してよいがそれらに限定されない。
【０２５５】
特定の実施態様では、心室内注射および髄腔内注射を含む任意の適当な経路によって、１つ以上の化合物または組成物を中枢神経系に導入するのが望ましいことがある。例えば、心室内注射は、Ｏｍｍａｙａリザーバなどのリザーバに取り付けられた心室内カテーテルによって容易にしてよい。
【０２５６】
例えば、吸入器または噴霧器と、エアロゾル化剤を有する製剤とを用いて、またはフルオロカーボンまたは合成肺胞界面活性剤中の潅流によって、肺投与も使用してよい。
【０２５７】
さらに別の実施態様では、ポンプまたはさまざまな重合体材料などであるがそれらに限定されない制御放出システムを用いて本化合物または組成物を送達してよい。さらに別の実施態様では、本化合物または組成物の標的、例えば脳の近傍に制御放出システムを配置してよい。こうすると、全身用量の一部しか必要でなくなる（例えば、上掲のＭｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，  ｖｏｌ．  ２，  ｐｐ．  １１５−１３８（１９８４）のＧｏｏｄｓｏｎを参照すること）。Ｌａｎｇｅｒによる総説（１９９０，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−１５３３）中で考察されている他の制御放出システムを用いてよい。
【０２５８】
用語「キャリア」は、化合物とともに投与される希釈剤、アジュバントまたは賦形剤を指す。そのような医薬品キャリアは、水、および落花生油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油および類似物など、石油、動物、植物または合成起源油を含む油などの液体であってよい。キャリアは、食塩水、アラビアゴム、ゼラチン、デンプンペースト、タルク、ケラチン、コロイドシリカ、尿素および類似物であってよい。さらに、補助剤、安定剤、増粘剤、潤滑剤および着色剤を用いてよい。一実施態様では、患者に投与するとき、本化合物または組成物および薬学的に許容されるキャリアは、無菌とする。化合物を静脈内投与するとき、水がキャリアの例である。特に注射用溶液に用いるとき、食塩水溶液ならびにデキストロースおよびグリセリン水溶液も液体キャリアとして使用してよい。適当な医薬品キャリアは、澱粉、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、モルト、米、フラワー、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールおよび類似物などの賦形剤も含む。望むなら、本組成物は、少量のぬれ剤または乳化剤、あるいはｐＨ緩衝剤を含んでよい。
【０２５９】
本組成物は、溶液、懸濁液、乳化液、錠剤、丸薬、ペレット、カプセル、液体を含むカプセル、粉体、持効性製剤、坐薬、乳化液、エーロゾル、スプレイ、懸濁液、または使用に適するその他の任意の形をとってよい。Ｅ．Ｗ．  Ｍａｒｔｉｎによる”Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”には、適当な医薬品キャリアのその他の例が記載されている。
【０２６０】
ある実施態様では、動物、特に人間への静脈内投与に適した医薬品組成物として、本化合物を定常手順によって調合する。通常、静脈内投与用のキャリアまたはベヒクルは、無菌等張緩衝水溶液である。必要な場合、本組成物は、溶解剤も含んでよい。静脈内投与用の組成物は、任意選択として、注射部位における痛みを和らげるリグノカインなどの局所麻酔剤を含んでよい。一般に、成分は、別々に、または一緒に混合して単位用量形として、例えば、活性剤の量を表示するアンプルまたは小形試料ビンなどの密封容器中の乾いた凍結乾燥粉体または無水濃縮物として、供給する。化合物を注入によって投与する場合、例えば、無菌医薬等級級水または食塩水を含む注入ビンを用いて分注してよい。化合物を注射によって投与する場合、投与前に成分を混合することができるように、注射用蒸留水または食塩水のアンプルを準備してよい。
【０２６１】
経口投与用の組成物は、例えば、錠剤、トローチ剤、水性懸濁液または油性懸濁液、顆粒、粉体、乳剤、カプセル、シロップまたはエリキシルの形であってよい。経口投与組成物は、薬学的に好ましい製剤を提供するために、任意選択として、１つ以上の剤、例えば、フラクトース、アスパルテームまたはサッカリンなどの甘味料、；ペパーミント、ウィンターグリーン油またはサクランボなどの芳香剤；着色剤；および防腐剤を含んでよい。さらに、錠剤または丸薬の形の場合、本組成物は、被膜して胃腸管中での崩壊および吸収を遅らせ、それによって、長時間にわたって持続する作用を提供してよい。浸透活性推進化合物の周囲の選択透過膜も、経口投与化合物に適する。これらの最近のプラットホームでは、カプセルの周囲の環境からの流体が推進化合物に吸収され、推進化合物を膨潤させ、剤または剤組成物が開口経由で放出される。これらの投与プラットホームは、即時放出製剤のスパイク型プロフィルと異なり、基本的にゼロ次放出プロフィルを提供することができる。グリセロールモノステアレートまたはグリセロールステアレートなどの時間遅延材料も用いてよい。
【０２６２】
本組成物は、局所投与を意図してよく、その場合、キャリアは、溶液、乳剤、軟膏またはゲル基材の形であってよい。経皮投与を意図するなら、本組成物は、経皮パッチまたはイオン泳動デバイスの形であってよい。局所用製剤は、約０．０５％から約５０％ｗ／ｖ（組成物の単位体積あたりの重量）、別の態様では０．１％から１０％ｗ／ｖの濃度の化合物を含んでよい。
【０２６３】
本組成物は、例えば、坐薬の形の直腸投与を意図してよい。座薬は、直腸中で融解して化合物を放出する。
【０２６４】
本組成物は、固体または液体の用量単位の物理的形状を変化させるさまざまな物質を含んでよい。例えば、本組成物は、活性成分の周りに塗膜殻を形成する物質を含んでよい。塗膜殻を形成する物質は、通常、不活性であり、例えば、砂糖、シェラック、およびその他の腸溶性塗膜剤から選択してよい。あるいは、活性成分をゼラチンカプセルの中に収容してよい。
【０２６５】
本組成物は、気体用量単位からなってよく、例えば、エーロゾルの形であってよい。用語エーロゾルを用いて、コロイド性のものから、加圧パッケージからなるシステムまでの範囲にある、さまざまなシステムを示す。投与は、液化ガスまたは圧縮ガスによって、あるいは有効成分を分注する適当なポンプシステムによってであってよい。
【０２６６】
固体形、液体形または気体形であろうと、本組成物は、癌、自己免疫疾患または感染症の治療において用いられる薬物を含んでよい。
【０２６７】
結合体の治療使用
本結合体は、患者の癌、自己免疫疾患、感染症またはその他の疾患を治療するために有用である。実施態様によって、本結合体は、単独投与される。他の実施態様では、本結合体は、別の治療剤とともに同時投与される。実施態様によって、本結合体は、保護化学療法剤の標準物とともに同時投与される。
【０２６８】
癌の治療
本結合体は、腫瘍細胞または癌細胞の増殖を阻害し、腫瘍細胞または癌細胞中にアポトーシスを引き起こし、または、患者の癌を治療するために有用である。従って、本化合物は、動物癌の治療のためのさまざまな環境で用いてよい。化合物によって治療してよい特定の種類の癌のいくつかの例は、表１に開示されているものを含むがそれらに限定されない。
【０２６９】
（表１）
以下を含む固形腫瘍。ただし、以下に限定されない。
【０２７０】
線維肉腫
粘液肉腫
脂肪肉腫
軟骨肉腫
骨肉腫
脊索腫
血管肉腫
内皮肉腫
リンパ管肉腫
リンパ管内皮肉腫
滑液腫瘍
中皮腫
ユーイング腫瘍
平滑筋肉腫
横紋筋肉腫
結腸癌
直腸癌
結直腸癌
腎臓癌
膵臓癌
骨癌
乳癌
卵巣癌
前立腺癌
陰茎癌腫
食道癌
胃癌
胃腸癌
胃癌
腹膜癌
肝癌腫
肝細胞癌
肝臓癌
口腔癌
鼻癌
喉頭癌
扁平細胞癌腫（例えば、上皮癌腫）
基底細胞癌腫
腺癌腫
汗腺癌腫
皮脂腺癌腫
乳頭癌腫
乳頭腺癌腫
嚢胞腺癌腫
髄様癌腫
気管支癌腫
腎細胞癌腫
肝癌
胆道癌腫
絨毛癌腫
精腫腫
胎児癌腫
ウィルムス腫瘍
子宮頸癌
子宮癌
子宮内膜癌腫または子宮癌腫
陰門癌
精巣癌
膀胱癌腫
小細胞肺癌腫、肺非小細胞癌、肺の腺癌腫および肺の扁平癌腫を含む肺癌
上皮癌腫
神経膠腫
膠芽腫
多形性膠芽腫
星状細胞腫
髄芽腫
頭蓋咽頭腫
上衣腫
松果体腫
血管芽腫
聴神経腫
乏突起膠腫
髄膜腫
皮膚癌
メラノーマ
神経芽腫
網膜芽腫
唾液腺癌腫
甲状腺癌
頭部癌
頸部癌
肛門癌
以下を含む血液系の癌。ただし、以下に限定されない。
【０２７１】
急性リンパ性白血病「ＡＬＬ」
急性リンパ性Ｂ細胞白血病
急性リンパ性Ｔ細胞白血病
急性骨髄性白血病「ＡＭＬ」
急性前骨髄性白血病「ＡＰＬ」
急性単球性白血病
急性赤白血病性白血病
急性巨核芽球性白血病
急性骨髄単球性白血病
急性非リンパ性白血病
急性未分化白血病
慢性骨髄性白血病「ＣＭＬ」
慢性リンパ球性白血病「ＣＬＬ」
有毛細胞性白血病
多発性骨髄腫
急性白血病および慢性白血病、すなわち
リンパ芽球性白血病
骨髄性白血病
リンパ性白血病
骨髄性白血病
リンパ腫、すなわち、
ホジキン病
非ホジキンリンパ腫
多発性骨髄腫
ワルデンシュトレームマクログロブリン血症
重鎖疾患
真性赤血球増加症
本結合体を用いると、結合体特異的腫瘍または癌を標的とすることができ、従って、これらの化合物の総合的な毒性が低下する。リンカーは、血中で結合体を安定化するが、細胞内の酵素（例えばリソソーム酵素）によって開裂し、薬物（単数または複数）を放出することができる。
【０２７２】
癌のための多角療法
本発明に記載の結合体の投与によって、腫瘍、転移、または制御されない細胞成長を特徴とするその他の疾患または障害を含むがそれらに限定されない癌を治療または予防することができる。
【０２７３】
実施態様によって、必要とする患者に有効な量の結合体および化学療法剤を投与することを含む、癌を治療するかまたは予防するための方法が提供される。一実施態様では、化学療法薬は、癌の治療が難治でないことが分ったものである。別の実施態様では、化学療法剤は、癌の治療が難治であると分ったものである。本結合体は、癌の治療のために手術を受けた患者にも投与してよい。
【０２７４】
一実施態様では、追加の治療方法は、放射線療法である。
【０２７５】
特定の実施態様では、本結合体は、化学療法薬とともに、または放射線療法とともに並行投与される。別の特定の実施態様では、化学療法薬または放射線療法は、本結合体の投与前、または投与後に投与される。実施態様によって、本結合体の投与の少なくとも１時間、５時間、１２時間、１日、１週間、１月、数ヶ月（例えば、最大３ヶ月）前、または後に化学療法剤または放射線療法を投与する。
【０２７６】
化学療法剤は、一連の期間にわたって投与してよい。以下の化学療法剤の任意の１つまたは組み合わせを投与してよい（下記を参照すること）。放射線については、治療する癌の種類によって、任意の放射線治療プロトコルを用いてよい。例えば、Ｘ線放射を投与してよく、詳しくは、高エネルギーメガ電圧（１ＭｅＶより大きなエネルギーの放射線）を深部腫瘍に用いてよく、電子ビームおよび常用電圧Ｘ線放射線を皮膚癌に用いてよいがそれらに限定されない。ラジウム、コバルトおよびその他の元素の放射性同位元素などのガンマ線放出放射性同位元素も投与してよい。
【０２７７】
さらに、化学療法または放射線治療の毒性が強すぎることが証明されたかまたは証明することができる場合、例えば、治療を受ける被験者にとって受け入れがたいまたは耐えられない副作用を生じる結果となる場合、化学療法または放射線療法に代えて、結合体による癌の治療方法を提供する。治療を受ける動物は、任意選択として、どの治療が受け入れられるかまたは耐えられるかによって、手術、放射線療法または化学療法などの、癌治療方で治療してよい。
【０２７８】
本結合体は、白血病およびリンパ腫を含むがそれらに限定されない特定の癌の治療の場合など、インビトロまたはエクスビボ法でも用いてよく、そのような治療は、自己由来幹細胞移植を含む。これは、動物の自己由来造血幹細胞を集め、すべての癌細胞を除去し、次に、高線量の放射線療法を併用して、または併用せずに、高用量の結合体を投与して動物の残る骨髄細胞集団を根絶し、幹細胞移植片を動物中に注入して戻す多段プロセスを含んでよい。次に、骨髄機能が回復し、動物が回復する間、支援介護を提供する。
【０２７９】
癌の多薬剤治療
有効な量の結合体と、抗癌剤である別の療法剤とを、それらを必要とする患者に投与することを含む、癌を治療するための方法を開示する。
【０２８０】
化学治療剤の例は、チオテパおよびシトキサン（登録商標）シクロスフォファミドなどのアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン、ピポスルファンおよびトレオスルファンなどのアルキルスルホネート；デカルバジン；ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパおよびウレドーパなどのアジリジン；エチレンイミン類、およびアルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミドおよびトリメチロロメラミンを含むメチラメラミン類；ＴＬＫ２８６（ＴＥＬＣＹＴＡＴＭ）；アセトゲニン類（特にブラタシンおよびブラタシノン）；デルタ−９−テトラヒドロカンナビノール（ドロナビノール、マリノール（登録商標））；ベータ−ラパコン；ラパコール；コルヒチン類；ベツリン酸；カンプトセシン（合成類縁体トポテカン（ハイカムチン（登録商標））、ＣＰＴ−１１（イリノテカン、カンプトサー（登録商標））、アセチルカンプトセシン、スコポレクチンおよび９−アミノカンプトセシンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（アドゼレスチン、カルゼレスチンおよびビゼレスチン合成類縁体を含む）；ポドフィロトキシン；ポドフィリニン酸；テニポシド；クリプトフィシン類（特にクリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類縁体ＫＷ−２１８およびＣ１３１−ＴＭ１を含む）；エリューセロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン；スポンジスタチン；クロラムブシル、クロルナファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、酸化メクロレタミン塩酸塩、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニマスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチンおよびラミムヌスチンなどのニトロソ尿素；クロドロネートなどのビスホスホネート；エンジイン抗生物質などの抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特に、カリケアマイシンガンマ１ｌおよびカリケアマイシンオメガｌ１（Ａｇｎｅｗ，  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔｌ．  Ｅｄ．  Ｅｎｇｌ．  ３３：１８３−１８６（１９９４）を参照すること）、およびアンナマイシン、ＡＤ３２、アルカルビシン、ダウノルビシン、デクスラゾキサン、ＤＸ−５２−１、エピルビシン、ＧＰＸ−１００、イダルビシン、ＫＲＮ５５００、メノガリル、ダイネミシンＡを含むダイネミシン、エスペラミシン、ネオカルジノスタチン発色団および関連発色蛋白質エンジイン抗生物質発色団、アクラシノミシン類、アクチノマイシン、アウスラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン（例えばブレオマイシンＡ２、ブレオマイシンＢ２およびペプロマイシン）、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルチノフィリン、クロモマイシニ類、ダクチノマイシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、アドリアマイシン（登録商標）ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、リポソームドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシンを含む）、エソルビシン、マルセロマイ��ン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、チアゾフリン、リババリン、ＥＩＣＡＲ、ノガラマイシン、オリボマイシン類、ペプロマイシン、ポットフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチンおよびゾルビシンなどのアンスラサイクリン；デノプテリン、プテロプテリンおよびトリメトレキサートなどの葉酸類縁体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリンおよびチオグアニンなどのプリン類縁体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビンおよびフロクスウリジンなどのピリミジン類縁体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタンおよびテストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタンおよびトリロスタンなどの抗アドレナリン剤；フォリン酸（ロイコボリン）などの葉酸補助剤；アセグラトン；ＡＬＩＭＴＡＲ（登録商標）、ペメトレキセドＬＹ２３１５１４などの抗葉酸抗腫瘍薬、メトトレキセートおよびトリメトレキセートなどのジヒドロ葉酸レダクターゼ阻害剤、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）およびＵＦＴ、Ｓ−１およびカペシタビンなどのそのプロドラッグなどの抗代謝剤、およびチミジル酸シンターゼ阻害剤およびラルチトレキセド（ＴＯＭＵＤＥＸＲＭ、ＴＤＸ）などのグリシンアミドリボヌクレオチドホルミルトランスフェラーゼ阻害剤；エニルウラシルなどのジヒドロピリミジンデヒドロゲナーゼの阻害剤；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキセート；デフォファミン；デメコルチン；ジアジコン；エルフォルニチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；デスフェリオキサミン；レンチナン；ロニダイニン；メイタンシンおよびアンサミトシン類などのメイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（ＪＨＳナチュラルプロダクツ、オレゴン州ユージン）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン類（特にＴ−２トキシン、ベラクリンＡ、ロリジンＡおよびアングイジン）；ウレタン；ビンデシン（エルジシン（登録商標）、フィルデシン（登録商標））；デカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；シトシンアラビノシド（「アラ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイドおよびタキサン、例えば、タキソール（登録商標）パクリタキセル（ブリストル−マイヤーズスクイブオンコロジー、ニュージャージー州プリンストン）、パクリタキセルの無クレモフォルのアルブミン操作ナノ粒子製剤であるアブラキサン（登録商標）（アメリカンファーマシューティカルパートナーズ、イリノイ州��ョーンバーグ）およびタキソテール（登録商標）ドキセタキセル（ローヌ−プーランロレ、フランス、アントニ）；クロランブシル；ゲムシタビン（ゲムザール（登録商標）；６−チオグアニン；メルカプトプリン；白金；シスプラチン、オキサリプラチンおよびカルボプラチンなどの白金類縁体または白金系類縁体；ビンブラスチン（ベルバン（登録商標））；エトポシド（ＶＰ−１６）、テニポシド、テポテカン、９−アミノカンプトセシン、カンプトセシンおよびクリスナトールなどのエピポドフィリン類；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン（オンコビン（登録商標））、ビンデシン、ビンカアルカロイドおよびビノレルビン（ナベルビン（登録商標））などのビンカアルカロイド；ノバントロン；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセローダ；イバンドロネート；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；上記の任意のものの薬学的に許容される塩、酸または誘導体、ならびに、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチンおよびプレドニソロンの併用療法の省略形であるＣＨＯＰおよび５−ＦＵおよびロイコボリンと組み合わせたオキサリプラチン（エロキサチン（登録商標））による治療計画の省略形であるＦＯＬＦＯＸなど、上記の２つ以上の組み合わせを含む。
【０２８１】
実施態様によって、抗癌剤は、メトトレキセート、タキソール、Ｌ−アスパラギナーゼ、メルカプトプリン、チオグアニン、ヒドロキシ尿素、シタラビン、シクロホスファミド、イホスファミド、ニトロソ尿素、シスプラチン、カルボプラチン、マイトマイシン、デカルバジン、プロカルビジン、トポテカン、ナイトロジェンマスタード、シトキサン、エトポシド、５−フルオロウラシル、ＢＣＮＵ、イリノテカン、カンプトセシン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、イダルビシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、プリカマイシン、ミトキサントロン、アスパラギナーゼ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、パクリタキセルまたはドセタキセルである。
【０２８２】
実施態様によって、本抗癌剤は、表２に挙げたがそれらに限定されない薬物を含む。
【０２８３】
【化６５】
2009501800.tif 000051
【０２８４】
【化６６】
2009501800.tif 000052
【０２８５】
【化６７】
2009501800.tif 000053
自己免疫疾患の治療
本結合体は、自己免疫疾患を引き起こす細胞を死滅させるかまたは複製を阻害するため、あるいは自己免疫疾患を治療するために有用である。従って、患者の自己免疫疾患の治療のためのさまざまな状況において、本結合体を用いてよい。
【０２８６】
本結合体によって治療してよい自己免疫疾患の特定の種類は、Ｔｈ２リンパ球関連障害（例えばアトピー皮膚炎、アトピー喘息、鼻結膜炎、アレルギー性鼻炎、オーメン氏症候群、全身性硬化症および対宿主性移植片病）、Ｔｈ１リンパ球関連障害（例えばリウマチ性関節炎、多発性硬化症、乾せん症、シェーグレン症候群、橋本甲状腺炎、グレーブ疾患、原発性胆管萎縮症、ウェーゲナー肉芽腫症および結核）、活性化Ｂリンパ球関連障害（例えば全身性エリテマトーデス、グッドパスチャー症候群、リウマチ性関節炎およびＩ型糖尿病）ならびに表３に開示されている障害を含むがそれらに限定されない。
【０２８７】
（表３）
活動性慢性肝炎
アジソン病
アレルギー性肺胞炎
アレルギー性反応
アレルギー性鼻炎
アルポート症候群
過敏症
強直性脊椎炎
抗リン脂質症候群
関節炎
回虫症
アスペルギルス症
アトピーアレルギー
アトピー皮膚炎
アトピー鼻炎
ベーチェット病
鳥飼病
気管支喘息
カプラン症候群
心筋症
腹腔疾患
シャガス病
慢性糸球体腎炎
コーガン症候群
寒冷凝集疾患
先天性風疹感染
クレスト症候群
クローン病
クリオグロブリン血症
クッシング症候群
皮膚筋炎
円板状狼瘡
ドレスラー症候群
イートン−ランバート症候群
エコーウイルス感染
脳脊髄炎
内分泌眼障害
エプスティンバーウイルス感染
馬肺気腫
エリテマトーデス
エバン症候群
フェルティー症候群
線維症
フックス毛様体炎
胃萎縮症
消化管アレルギー
巨細胞性動脈炎
糸球体腎炎
グッドパスチャー症候群
移植片対宿主疾患
グレーブス病
ギラン−バー疾患
橋本甲状腺炎
溶血性貧血
ヘノッホシェーンライン紫斑病
特発性副腎萎縮症
特発性肺線維症
ＩｇＡ腎障害
炎症性腸疾患
インスリン依存型糖尿病
若年性関節炎
若年性真正糖尿病（Ｉ型）
ランバート−イートン症候群
蹄葉炎
扁平苔癬
ルポイド肝炎
狼瘡
リンパ球減少症
メニエール病
混合性結合組織病
多発性硬化症
重症筋無力症
悪性貧血
多腺性症候群
初老期痴呆
原発性無ガンマグロブリン血症
原発性胆管萎縮症
乾せん症
乾癬性関節炎
レイノー現象
反復流産
ライター症候群
リウマチ熱
リウマチ性関節炎
サンプター症候群
住血吸虫症
シュミット症候群
強皮症
シュルマン症候群
ショルゲン症候群
全身強直性症候群
交感性眼炎
全身性エリテマトーデス
高安動脈炎
側頭動脈炎
甲状腺炎
血小板減少症
甲状腺中毒症
中毒性表皮壊死症
Ｂ型インシュリン耐性
Ｉ型糖尿病
潰瘍性大腸炎
ブドウ膜炎
白斑
ワルデンストロームマクログロブリン血症
ウェーゲナー肉芽腫症
自己免疫疾患の多薬剤治療
有効な量の結合体と、自己免疫疾患の治療用に知られている別の療法剤とを、それらを必要とする患者に投与することを含む、自己免疫疾患を治療するための方法を開示する。一実施態様では、抗自己免疫疾患剤は、表４に挙げた薬剤を含むがそれらに限定されない。
【０２８８】
（表４）
サイクロスポリン
サイクロスポリンＡ
ミコフェニレートモフェチル
シロリムス
タクロリムス
エナナーセプト
プレドニソン
アザチオプリン
メトトレキセート
シクロホスファミド
プレドニソン
アミノカプロン酸
クロロキン
ヒドロキシクロロキン
ハイドロコーチゾン
デキサメサゾン
クロラムブシル
ＤＨＥＡ
ダナゾール
ブロモクリプチン
メロキシカム
インフリキシマブ
本結合体は、感染症を引き起こす細胞を死滅させるかまたは複製を阻害するため、あるいは感染症を治療するために有用である。
【０２８９】
一実施態様では、本結合体は、特定の感染症を引き起こす細胞を死滅させるかまたは増殖を阻害する。
【０２９０】
本結合体によって治療することができる特定の種類の感染症は、表５に開示されているものを含むがそれらに限定されない。
【０２９１】
（表５）
細菌性疾患：
ジフテリア
百日咳
潜在性菌血症
尿路感染症
胃腸炎
蜂巣炎
喉頭蓋炎
気管炎
アデノイド肥大症
咽頭後方膿瘍
インペチゴ
膿瘡
肺炎
心内膜炎
敗血性関節炎
肺炎球菌性
腹膜炎
菌血症
髄膜炎
急性化膿性髄膜炎
尿道炎
子宮頸炎
直腸炎
咽頭炎
耳管炎
副睾丸炎
淋病
梅毒
リステリア症
炭疽病
ノカルジア症
サルモネラ
腸チフス
赤痢
結膜炎
副鼻腔炎
ブルセラ症
ツラレミア
コレラ
腺ペスト
破傷風
壊死性腸炎
放線菌症
混合嫌気性感染
梅毒
回帰熱
レプトスピラ症
ライム病
鼠咬熱
結核
リンパ節炎
らい病
クラミジア症
クラミジア肺炎
トラコーマ
封入体結膜炎
全身性真菌疾患：
ヒストプラスマ症
コクシジオイデス症
ブラストミセス症
スポロトリクム症
クリプトコックス症
全身性カンジダ症
アスペルギルス症
ムコール菌症
菌腫
クロモミセス症
リケッチア疾患：
チフス
ロッキー山班点熱
エールリッヒ症
東部ダニ媒介リケッチア症
リケッチア痘
キュー熱
バルトネラ症
寄生虫疾患：
マラリア
バベシア症
アフリカ眠り病
シャガス病
リーシュマニア症
ダムダム熱
トキソプラズマ症
髄膜脳炎
角膜炎
アメーバ症
ジアルジア症
クリプトスポリジウム症
イソスポーラ症
シクロスポリア症
微胞子虫症
回虫症
鞭虫感染
十二指腸虫感染
線虫感染
眼幼虫移行症
旋回虫症
糸状虫疾患
リンパ管フィラリア症
ロア糸状虫症
糸状虫症
犬心糸状虫感染
住血吸虫症
沼地皮膚症
東洋肺吸虫
東洋肝吸虫
肝蛭症
肥大吸虫症
オピストルキス症
条虫感染
包虫症
多包虫症
ウイルス性疾患：
はしか
亜急性硬化性全脳炎
風邪
おたふくかぜ
風疹
バラ疹
第五病
水痘
呼吸系発疹ウイルス感染
偽膜性喉頭炎
細気管支炎
感染性単核症
ポリオ
ヘルパンギナ
手足口病
ボルンホルム疾患
性器ヘルペス
性器いぼ
無菌性髄膜炎
心筋炎
心外膜炎
胃腸炎
後天性免疫不全症候群（エイズ）
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）
ライエ症候群
川崎病
インフルエンザ
気管支炎
ウイルス性「通院可能」肺炎
急性発熱呼吸器病
急性咽頭結膜熱
流行性角結膜炎
単純ヘルペスウイルス１（ＨＳＶ−１）
単純ヘルペスウイルス２（ＨＳＶ−２）
帯状ヘルペス
巨細胞性封入体病
狂犬病
進行性多病巣性白質脳症
クールー
致死性家族性不眠症
クロイツフェルトヤコブ病
ゲルストマン−シュトラウスラー−シャインカー疾患
熱帯痙攣性対性不全麻痺
西部馬脳炎
カリフォルニア脳炎
セントルイス脳炎
黄熱病ｒ
デング熱
リンパ球性脈絡髄膜炎
ラッサ熱
出血熱
ハンタウイルス肺症候群
マールブルグウイルス感染
エボラウイルス感染
天然痘
感染症の多薬物治療
結合体と、抗感染症剤である別の療法剤とを、それらを必要とする患者に投与することを含む、感染症を治療するための方法を開示する。一実施態様では、抗感染症剤は、表６に挙げた薬剤を含むがそれらに限定されない。
【０２９２】
（表６）
β−ラクタム抗生物質：
ペニシリンＧ
ペニシリンＶ
クロキサシリン
ジクロキサシリン
メチシリン
ナフシリン
オキサシリン
アンピシリン
アモキシシリン
バカンピシリン
アズロシリン
カルベニシリン
メズロシリン
ピペラシリン
チカルシリン
アミノグリコシド：
アミカシン
ゲンタミシン
カナマイシン
ネオマイシン
ネチルミシン
ストレプトマイシン
トブラマイシン
マクロライド：
アジスロマイシン
クラリスロマイシン
エリスロマイシン
リンコマイシン
クリンダマイシン
テトラサイクリン：
デメクロサイクリン
ドキシサイクリン
ミノサイクリン
オキシテトラサイクリン
テトラサイクリン
キノロン：
シノキサシン
ナリジキシン酸
フルオロキノロン：
シプロフロキサシン
エノキサシン
グレパフロキサシン
レボフロキサシン
ロメフロキサシン
ノルフロキサシン
オフロキサシン
スパルフロキサシン
トロバフロキサシン
ポリペプチド：
バシトラシン
コリスチン
ポリミキシンＢ
スルホンアミド：
スルフイソキサゾール
スルファメトキサゾール
スルファジアジン
スルファメチゾール
スルファセタミド
雑抗菌因子：
トリメトプリム
スルファメタゾール
クロラムフェニコール
バンコマイシン
メトロニダゾール
キヌプリスチン
ダルフォプリスチン
リファンピン
スペクチノマイシン
ニトロフラントイン
抗ウイルス因子
総合抗ウイルス因子：
イドクスウリジン
ビダラビン
トリフルリジン
アシクロビル
ファムシシクロビル
ペンシシクロビル
バラシクロビル
ガンシクロビル
ホスカルネット
リバビリン
アマンタジン
リマンタジン
シドホビル
アンチセンスオリゴヌクレオチド
免疫グロブリン
インターフェロン
ＨＩＶ感染用薬物：
テノホビル
エムトリシタビン
ジドブジン
ジダノシン
ザルシタビン
スタブジン
ラミブジン
ネビラピン
デラビルジン
サキナビル
リトナビル
インジナビル
ネルフィナビル
【実施例】
【０２９３】
以下の実施例において、本発明をさらに説明するが、以下の実施例は、本発明の範囲を限定するものではない。特に明記しない限り、以下の実施例に記載される細胞系統は、アメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）またはドイツのブラウンシュバイクにあるドイッチェザムルングフォンミクロオルガニズメンウントツェルクルツーレンゲーエムベーハー（ＤＭＳＺ）が指定する条件で培養維持した。細胞培養試薬は、特に明記しない限り、カリフォルニア州カールスバッドのインビトロジェン社から入手した。
【０２９４】
特に明記しない限り、すべての無水溶媒は、市販品を入手し、シュア−シール（登録商標）のビン中に窒素下で保管した。他の試薬および溶媒は、すべて入手できる最高等級を購入し、それ以上精製せずに用いた。ＮＭＲスペクトルは、バリアンマーキュリー４００ＭＨｚ装置で記録した。化学シフト（δ）は、テトラメチルシランを０．００基準とするパーツパーミリオン（ｐｐｍ）で報告し、結合定数（Ｊ）は、Ｈｚで報告する。低分解能質量スペクトルデータは、ＬＣ−ＭＳ用のＨＰアジレント１１００高性能液体クロマトグラフィー装置と連動したマイクロマスＺＭＤ質量分析計で取得した。生成物は、フェノモネックスシナジャイの２．０×１５０ｍｍ、４μ、８０ÅのＭＡＸ  ＲＰカラム上で、Ａ（０．０５％ＨＣＯ２Ｈ水溶液）中のＢ（ＣＨ３ＣＮと０．０５％のＨＣＯ２Ｈ）の移動相の直線濃度グラジエントを０．４ｍＬ／分で用いて溶出させた。特に明記しない限り、報告する保持時間（ｔＲ）は、ＬＣＭＳによるものである。高分解能（精密質量）データは、ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ  ＣｅｎｔｅｒのブルーカエイペックスＩＩＩ４７ｅ［ＦＴ（ＩＣＲ）］ＭＳ上で得た。分析ＨＰＬＣは、ウォーターズ２６９５装置上でウォーターズ２９９６ＰＤＡとミレニアムソフトウェアとを用いて行った。
【０２９５】
分析ＨＰＬＣに用いた固定相は、フェノモネックスシナジャイの４．６×１５０ｍｍ、４μ、８０ÅのＭＡＸ  ＲＰカラムであった。生成物は、Ａ（０．０５％ＴＦＡ水溶液）中の移動相Ｂ（ＣＨ３ＣＮと０．０５％のＨＣＯ２Ｈ、８分間で１０％から９５％へ）の酸性直線グラジエント（グラジエントＡと命名）、またはＡ（５．０ｍＭのＮＨ４Ｈ２ＰＯ４）中の移動相Ｂ（ＣＨ３ＣＮ、１０分間で１０％から９０％へ、次いで９０％に５分間保持する）の１．０ｍＬ／分の流速の中性直線グラジエント（グラジエントＮと命名）のどちらかで溶出させた。調製規模ＨＰＬＣ精製は、Ｃ１２フェノメネックスシナジーＭＡＸ−ＲＰ４μ逆相カラム２５０×２１．２ｍｍを備えたバリアン社装置上で実行し、水−アセトニトリルグラジエント中の０．１％ＴＦＡで溶出させた。円盤クロマトグラフィーは、クロマトトロン（登録商標）（ハリスンリサーチ、カリフォルニア州パロアルト）装置上で順相シリカプレート（アナルテック、デラウェア州ニューアーク）を用いて実行した。調製規模薄層クロマトグラフィーは、ワットマンの２０×２０ｃｍ、５００μの６０Åシリカゲルプレート上で実行した。その他の調製規模の順相精製は、すべてワットマンサイエンスの６０Åの２３０〜４００メッシュのシリカゲルをを吸着媒として用いる標準的フラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって実行した。
【０２９６】
実施例１  合成
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−メチル−６−（２−（３−（（（９Ｈ−フルオレン−９イル）メトキシ）カルボニル−アミノ）プロパンアミド）−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−３，４，５−トリアセトキシ−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート（１１）。アニリン５（７４ｍｇ、０．１６３ミリモル）のジクロロメタン（６ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（５７μＬ、０．３３ミリモル）を加えた。酸塩化物６（６５ｍｇ、０．２０ミリモル）を加え、混合物を３０分間撹拌した。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液中に投入し、酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出した。抽出液を集め、水、および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。ろ過および濃縮して粗生成物を得た後、ジクロロメタン中５％メタノールを移動相として用いる円盤クロマトグラフィーによって組成生物を精製し、１０６ｍｇ（８７％）の１１を白色の固体として得た。
【０２９７】
【化６８】
2009501800.tif 000054
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ＋）、７４９．０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２９８】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−メチル−６−（２−（３−（（（９Ｈ−フルオレン−９イル）メトキシ）カルボニル−アミノ）プロプパンアミド）−４−（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニルオキシ）メチル）フェノキシ）−３，４，５−トリアセトキシ−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート（７）。ＤＭＦ（４ｍＬ）中のベンジルアルコール１１（１０５ｍｇ、０．１４ミリモル）の混合物に、炭酸ビスｐ−ニトロフェニル（８５ｍｇ、０．２８ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（３６μＬ、０．２１ミリモル）を加えた。混合物を常温で１６時間撹拌し、減圧で濃縮して油状残渣とした。この物質を、ジクロロメタンに溶かし、１ｍｍの円盤クロマトトロンプレート上に直接吸引し、ヘキサン中の５０％酢酸エチルとそれに続く酢酸エチルとで溶出させ、８３％の７（１０６ｍｇ）を固体として得た。
【０２９９】
【化６９】
2009501800.tif 000055
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ＋）、９１４．０３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３００】
モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）。ＭＭＡＥ（１ａ）は、オルバニーモレキュールリサーチ社（ニューヨーク州オルバニー）が合成した。ＭＭＡＥ（１ａ）の合成は、既に記載されている（Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ２１：７７８−８４（２００３）。参照によってこの開示を本明細書に組み込む）。
【０３０１】
モノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）。ＭＭＡＦ（１ｂ）合成用の中間体は、オルバニーモレキュールリサーチ社（ニューヨーク州オルバニー）が合成した。ＭＭＡＦ（１ｂ）の合成は、既に記載されている（Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ．  １７（１）：１１４−１２４（２００６）および米国特許出願公開第２００５−０２３８６４９号。参照によってこれらの開示を本明細書に組み込む）。
【０３０２】
ＭＭＡＦカーボネート（８）。ｐ−ニトロフェニルカーボネート７（３０ｍｇ、０．０３３ミリモル）とモノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）（１ｂ；２９ｍｇ、０．０３９ミリモル）との混合物にＤＭＦ（０．８ｍＬ）とピリジン（０．２ｍＬ）とを加えた。（ＭＭＡＦ（１ｂ）の合成は、既に記載されている（Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ．  １７（１）：１１４−１２４（２００６）および米国特許出願公開第２００５−０２３８６４９号。参照によってこれらの開示を本明細書に組み込む）。ＤＩＰＥＡ（７μＬ、０．０４ミリモル）、続いてＨＯＡｔ（１ｍｇ、７マイクロモル）を加えた。反応混合物を常温で１６時間撹拌した。混合物を減圧で濃縮し、１ｍｍクロマトトロンプレート上でクロマトグラフィーに付し、１％酢酸を含むジクロロメタン中の１から５％のメタノールグラジエントで溶出させた。最後に溶出するＵＶ活性（２５４ｎｍ）バンドが生成物であった。これによって、４４％（２２ｍｇ）の８を固体成分として得た。この物質は、分析キャラクタリゼーションせずにさらに処理した。
【０３０３】
ＭＭＡＦグルクロニドアミン。０℃のメタノール（１ｍＬ）中のＭＭＡＦカルバメート（２２ｍｇ、０．０１５ミリモル）の混合物に、水（１ｍＬ）中のＬｉＯＨ一水和物（５．５ｍｇ、０．１３２ミリモル）の溶液を加えた。混合物を０℃で１５分間撹拌し、酢酸（８μＬ）を用いて反応混合物を中和し、減圧濃縮した。ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ−）、１３６４．０９（Ｍ−Ｈ）＋、９．７８分。
【０３０４】
結果として得られた物質をＤＭＦ（０．８ｍＬ）に溶かし、ピペリジン（０．２ｍＬ）で処理した。混合物を５分間撹拌し、減圧で濃縮した。この物質を、水中で集め、調製規模ＨＰＬＣによって精製し、１２ｍｇ（７２％）を白色の固体として得た。
【０３０５】
【化７０】
2009501800.tif 000056
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ−）、１１４４．６６（Ｍ−Ｈ）＋。
【０３０６】
ＭＭＡＥグルクロニドマレイミド（９ａ）。ＭＭＡＥ（１ａ）と化合物７とで出発し、９ｂ（下記を参照）と同一方法で化合物９ａを調製した。化合物９ａは、白色の固体として得られた。
【０３０７】
【化７１】
2009501800.tif 000057
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ＋）１３２３．０１（Ｍ＋Ｈ）６．８８分；ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ、Ｃ６６Ｈ９７Ｎ８Ｏ２０Ｎａ２（Ｍ−Ｈ＋２Ｎａ）＋  計算値１３６７．６６１５、実測値１３６７．６６１６。
【０３０８】
ＭＭＡＦグルクロニドマレイミド（９ｂ）。ＤＭＦ（１ｍＬ）中のアミン（１２ｍｇ、０．０１１ミリモル）の混合物に、ＭＣ−ＯＳｕ（１０、５．２ｍｇ）、続いてＤＩＰＥＡ（６μＬ）を加えた。１５分後、反応混合物を減圧濃縮し、水とＤＭＳＯとの混合物（１：１、１ｍＬ）に溶かし、調製規模ＨＰＬＣによって精製した。これによって、９．４ｍｇの９ｂ（６４％）を白色の固体として得た。
【０３０９】
【化７２】
2009501800.tif 000058
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ＋）、１３３７．０３（Ｍ＋Ｈ）＋、８．５０分；ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ、Ｃ６６Ｈ９５Ｎ８Ｏ２１Ｎａ２（Ｍ−Ｈ＋２Ｎａ）＋  計算値１３８１．６４０７、実測値１３８１．６４２８。
【０３１０】
４−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブタン−１−オール。１，４−ブタンジオールの溶液に、水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散の１．０ｇ）を加えた。この混合物をそのまま１時間常温で撹拌した後、ＴＢＤＰＳＣｌ（５．０ｍＬ、１８．２ミリモル）を加えた。この混合物を常温で一夜撹拌した。反応混合物を水中に投入し、エーテル（３×１００ｍＬ）で抽出した。抽出液を集め、水、および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥した。ろ過および濃縮して油状の残渣を得た。油状残渣を、円盤クロマトグラフィーの４ｍｍプレート上でヘキサン中の２５％酢酸エチルを用いて精製し、続いてヘキサン中の５０％酢酸エチルで溶出させた。これによって、３．３６ｇの所望の生成物（５６％）を透明な油として得た。
【０３１１】
【化７３−１】
2009501800.tif 000059
４−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブタナール。ジクロロメタン（２０ｍＬ）中の４−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブタン−１−オール（０．５ｇ、１．５ミリモル）の溶液に、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎのペルヨージナン（７７５ｍｇ、１．８３ミリモル）を加えた。混合物を１時間撹拌した。反応混合物をヘキサン中に投入し、結果として得られた白色沈澱剤をろ過によって除去した。溶液を濃縮してスラリーを形成させ、このスラリーをジクロロメタン（５ｍＬ）に溶かし、もう一度ヘキサン中に投入し、その結果、白色の固体の沈殿を得た。ろ過によって固体を除去し、結果として得られた溶液を濃縮した。これによって、４７５ｍｇの透明な油（９７％）を得た。
【０３１２】
【化７３−２】
2009501800.tif 000060
２−（３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）プロピル）オキサゾリジン（１２）。ベンゼン（３ｍｌ）中の４−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブタナール（２３ｇｍｇ、０．７２ミリモル）の混合物を、ベンゼン（３ｍＬ）中のヒドロキシエチルアミン（４４μＬ、０．７２ミリモル）の溶液に滴下して加えた。粉状のモレキュラーシーブ（４Ａ、６００ｍｇ）を加え、混合物を１．５時間撹拌した後、２０μｍミリポアシリンジフィルタを通してろ過し、濃縮した。これによって１２を得、そのまますぐに１３の合成（下記参照）に用いた。
【０３１３】
【化７４】
2009501800.tif 000061
２−（３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）プロピル）オキサゾリジン−３−カルボン酸３−（３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）プロパンアミド）−４−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ．６Ｓ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（メトキシカルボニル）−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ベンジル（１３）。ジクロロメタン（１０ｍＬ）中のベンジルアルコール（５０ｍｇ、０．０６７ミリモル）に、ピリジン（６３μＬ、０．８ミリモル）を加えた。混合物を−７８℃に冷却し、ジホスゲン（１６μＬ、０．１３４ミリモル）を加えた。混合物を１時間撹拌した。オキサゾリジン１２（６５ｍｇの４−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）ブタナールから形成された）を、ジクロロメタン溶液（３ｍＬ）として反応フラスコの冷却された内壁を流下させて滴加した。反応混合物の温度を、数時間かけてゆっくり−２０℃に上昇させた。反応混合物を、酢酸エチル中に投入し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、および食塩水で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過および濃縮した。結果として得られた残渣を円盤クロマトグラフィーによって精製し、ジクロロメタンで溶出させた。主なＵＶ活性（２５４ｎｍ）バンドを集め、濃縮して５４ｍｇの１３（７０％）を得た。
【０３１４】
【化７５】
2009501800.tif 000062
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ＋）、１１４３．８８（Ｍ＋Ｈ）＋、１３．７６分。
【０３１５】
２−（３−ヒドロキシプロピル）オキサゾリジン−３−カルボン酸３−（３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）プロパンアミド）−４−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（メトキシカルボニル）−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ベンジル。ＴＨＦ（２ｍＬ）とピリジン（２ｍＬ）との中のシリルエーテル１３（５２ｍｇ、０．０４２ミリモル）の混合物に、ＨＦ−ピリジン錯体（４００μＬ）を加えた。反応混合物を３時間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に投入し、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。抽出液を集め、水、および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、ろ過および濃縮した。結果として得られた油を、円盤クロマトグラフィーの１プレート上で精製し、ジクロロメタン中５％のメタノールで溶出させ、３６ｍｇの固体残渣（８６％）を得た。
【０３１６】
【化７６】
2009501800.tif 000063
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ＋）、９２７．８７（Ｍ＋Ｎａ＋）＋、９．７９分。
【０３１７】
２−（３−オキソプロピル）オキサゾリジン−３−カルボン酸３−（３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）プロパンアミド）−４−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（メトキシカルボニル）−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ベンジル（１４）。ジクロロメタン（３ｍＬ）中のアルコール（３６ｍｇ、０．０４ミリモル）の溶液に、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎのペルヨージナン（２０ｍｇ、０．０４８ミリモル）を加えた。１時間後、追加量のＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬（２０ｍｇ）を加え、反応混合物をさらに１時間撹拌した。反応混合物を１ｍｍの円盤クロマトトロンプレート上に吸引し、ジクロロメタン中の５％メタノールで溶出させた。これによって、定量的収量のアルデヒド１４（３６ｍｇ）を得た。
【０３１８】
【化７７】
2009501800.tif 000064
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ＋）、９０３．９６（Ｍ＋Ｈ）＋、１０．４８分。
【０３１９】
２−（３−（３−ヒドロキシ−２−メチル−６−（（３Ｓ）−３，５，１２−トリヒドロキシ−３−（２−ヒドロキシアセチル）−１０−メトキシ−６，１１−ジオキソ−１，２，３，４，６，１１−ヘキサヒドロテトラセン−１−イルオキシ）−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）プロピル）オキサゾリジン−３−カルボン酸３−（３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）プロパンアミド）−４−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（メトキシカルボニル）−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ベンジル（１６）。アセトニトリルと水との混合物（２：１、４．５ｍＬ合計）中のアルデヒド１４（３６ｍｇ、０．０４ミリモル）に０℃でドキソルビシン−ＨＣｌ（１５）を加え、続いてすべての固体が溶解するまで撹拌した。混合物を、ナトリウムシアノボロヒドリド（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液、２０μＬ、０．０２ミリモル）の溶液で処理した。反応混合物を２時間撹拌し、混合物を水中に投入し、ジクロロメタン（５×５０ｍＬ）で繰り返し抽出した。有機相を集め、水、および食塩水で洗浄し、減圧下で濃縮した。結果として得られた残渣をジクロロメタン中の５％メタノールに溶かし、１ｍｍの円盤クロマトトロンプレート上に直接吸引し、ジクロロメタン中２０％メタノールで溶出させた。最初の大きなバンドを集めて２３．６ｍｇの１６（４１％）を得た。
【０３２０】
【化７８】
2009501800.tif 000065
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ−）、１４２８．９（Ｍ−Ｈ）−、７．９分。
【０３２１】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（２−（３−アミノプロパンアミド）−４−（（２−（３−（３−ヒドロキシ−２−メチル−６−（（３Ｓ）−３，５，１２−トリヒドロキシ−３−（２−ヒドロキシアセチル）−１０−メトキシ−６，１１−ジオキソ−１，２，３，４，６，１１−ヘキサヒドロテトラセン−１−イルオキシ）−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）プロピル）オキサゾリジン−３−カルボニルオキシ）メチル）フェノキシ）−３，４，５−トリヒドロキシ−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸。メタノール（４ｍＬ）中のドキソルビシンオキサゾリジン１６（３０ｍｇ、０．０２１ミリモル）の０℃の混合物に、水（２ｍＬ）中のＬｉＯＨ一水和物（８．８ｍｇ、０．２１ミリモル）の溶液を加えた。混合物を３５分間撹拌し、酢酸（８μＬ、０．２１ミリモル）で約７のｐＨに中和した。混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣をＤＭＦ（４ｍＬ）に溶かし、ピペリジン（１ｍＬ）で処理した。反応混合物を５分間撹拌した後、減圧下で濃縮した。残渣を、調製規模ＨＰＬＣによって精製し、６．１ｍｇの生成物（２７％）を得た。ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ＋）、１０６９．１３（Ｍ＋Ｈ）＋、５．６４分。
【０３２２】
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（２−（３−（６−（２，５−ジオキソ−２Ｈ−ピロール−１（５Ｈ）−イル）ヘキサンアミド）プロパンアミド）−４−（（２−（３−（３−ヒドロキシ−２−メチル−６−（（３Ｓ）−３，５，１２−トリヒドロキシ−３−（２−ヒドロキシアセチル）−１０−メトキシ−６，１１−ジオキソ−１，２，３，４，６，１１−ヘキサヒドロテトラセン−１−イルオキシ）−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）プロピル）オキサゾリジン−３−カルボニルオキシ）メチル）フェノキシ）−３，４，５−トリヒドロキシ−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸（１７）。ＤＭＦ（０．２ｍＬ）中のアミン（６．１ｍｇ、５．７μモル）の混合物に、ＭＣ−ＯＳｕ（１０、４ｍｇ、１４μモル）、続いてＤＩＰＥＡ（３μＬ、１７μモル）を加えた。反応混合物を減圧下で濃縮し、次に、水とＤＭＳＯとの混合物（１：１、２ｍＬ）に溶かした。混合物を逆相の調製規模ＨＰＬＣによって精製し、２．１ｍｇの１７（２６％）を赤色の固体として得た。
【０３２３】
【化７９】
2009501800.tif 000066
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（ＥＳ−）、１２６０．２４（Ｍ−Ｈ）−、６．４９分。
【０３２４】
実施例２  β−グルクロン酸系リンカーおよび抗体−薬物結合体の合成
グルクロニド系リンカー単位を抗分裂剤モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ、１ａ）およびモノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ、１ｂ）ならびにドキソルビシンプロピルオキサゾリン（ＤＰＯ、２）とともに使用する薬物−リンカーを調製し、評価した。
【０３２５】
β−グルクロニド薬物−リンカー調製。ＭＭＡＦ（１ｂ）とのβ−グルクロニド薬物−リンカーを合成するための出発点は、遊離アニリンとヒドロキシ基とを有するβ−グルクロニド５であった（下のスキーム３）。この化合物を酸塩化物６でアシル化してから、ｐ−ニトロフェニル（ＰＮＰ）カーボネート７に変換した。ＭＭＡＦ（１ｂ）と反応させ、カルバメート８を得た。この分子を、まず、酢酸エステル保護基とメチルエステル保護基とを水酸化リチウムでけん化（Ｌｅｅｎｄｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９，  Ｂｉｏｏｒｇ，  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ７：１５９７−６１０）し、ピペリジンでＦｍｏｃを除去し、その結果得られた遊離アミンをマレイミドカプロイルＮ−ヒドロキシスクシミジルエステル（ＭＣ−ＯＳｕ、１０）でキャッピングして、所望のグルクロニド薬物−リンカー９ｂに変換した。最後に調製規模ＨＰＬＣ精製を行って９ｂを得た。５と１ａとで出発し、同じ方法で、グルクロニド−ＭＭＡＥ薬物リンカー（９ａ）を合成した。
【０３２６】
スキーム３
【０３２７】
【化８０】
2009501800.tif 000067
ＤＰＯ（２）とのグルクロニド系リンカー単位の構築は、違う戦略（スキーム４）を採用した。ジホスゲンで中間体１１を活性化してから、オキサゾリン１２（１，４−ブタンジオールから３段階で合成した）と反応させて所望のオキサゾリンカルバメート１３を得た。フッ化物でシリル保護基を除去した後、酸化してアルデヒド１４を得た。この化合物をドキソルビシン−ＨＣｌ（１５）との還元アルキル化反応に用いてドキソルビシン誘導体１６を得た。最後に、水酸化リチウムと、ピペリジンとによる２段階法で、β−グルクロニド保護基とＦｍｏｃ基とを除去し、その結果得られた第１アミンを１０でキャッピングして所望のβ−グルクロニドＤＰＯリンカー１７を得た。
【０３２８】
スキーム４
【０３２９】
【化８１】
2009501800.tif 000068
ＡＤＣ調製。リンカー薬物結合体９ａ（ＭＭＡＥと）、ｂ（ＭＭＡＦと）および１７（ドキソルビシンプロピルオキサゾリン（ＤＰＯ）と）と、キメラｍＡｂ  ＡＣ１０（ＣＤ３０抗原に対するＩｇＧ１（Ｗａｈｌ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ６２：３７３６−４２）および１Ｆ６（ＣＤ７０抗原に対するＩｇＧ１、国際特許出願公開第０４／０７３６５６を参照すること）との抗体薬物結合体（ＡＤＣ）を調製した。既報の方法によって、これらの抗体を調製した（Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｔ，  ２００３，  Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｔ  ２１：７７８−８４を参照すること）。
【０３３０】
５０ｍＭホウ酸ナトリウムを含むｐＨ８．０のリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）中のｍＡｂ（＞５ｍｇ／ｍｌ）を、３７℃でジチオスレイトール（ＤＴＴ）またはトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）（最終的に１０ｍＭ）で３０分間処理した。ゲルろ過（Ｇ−２５、１ｍＭのＤＴＰＡを含むＰＢＳ）後、５，５’−ジチオビス（２−ニトロ安息香酸）を用いるチオール測定によると、ｍＡｂあたり約８つのチオール（ＴＣＥＰを有するｍＡｂあたり４つのチオール）があった。還元されたｍＡｂに、氷冷ＤＭＳＯ（２０％体積／体積）中のマレイミド薬物誘導体（１．２当量／ＳＨ基）を４℃で加えた。１時間後、過剰のシステインで反応を停止させ、遠心限外ろ過、ゲルろ過（Ｇ−２５、ＰＢＳ）および無菌ろ過によって結合体を濃縮した。既報の方法（Ｈａｍｂｌｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００４，  Ｃｌｉｎ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  １０：７０６３−７０、Ｓｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００５，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．  Ｃｈｅｍ．  １６：１２８２−９０）によって、薬物置換のモル比を測定した。サイズ排除ＨＰＬＣを用いて各結合体中の単量体を測定し、ＲＰ−ＨＰＬＣによって、システインで反応停止された非結合体化薬物が０．５％より少ないことを確認した。
【０３３１】
２８０ｎｍおよび４９０ｎｍの吸光度（ドキソルビシン吸光度）を測定して、ドキソルビシン含有結合体ｃＡＣ１０−１７とｃ１Ｆ６−１７との薬物保持率を測定した。ｃＡＣ１０およびｃ１Ｆ６のＡＤＣは、それぞれ６．８および８．３薬物／ｍＡｂを有していた。薬物−リンカー９ａおよび９ｂのＵＶ吸光度が小さいため、各薬物保持率レベル（軽鎖で０〜１薬物、重鎖で０〜３薬物）での軽鎖および重鎖のクロマトグラフィー分割と、各保持率レベルでのピーク面積からの全平均の計算によって、対応するＡＤＣのｍＡｂあたり薬物比を測定した（上掲のＨａｍｂｌｅｔｔら、上掲のＳｕｎら）。レベルは、ｃＡＣ１０−９ａ結合体およびｃ１Ｆ６−９ａ結合体で３．７および４．５、ｃＡＣ１０−９ｂ結合体およびｃ１Ｆ６−９ｂ結合体でそれぞれ７．６および７．０であった。６つのＡＤＣは、主に単量体であり、ｃＡＣ１０系結合体では２％以下の凝集体、ｃ１Ｆ６系結合体では７％以下の凝集体を観測した。
【０３３２】
結果。記載のβ−グルクロニドリンカーシステムを、抗体薬物結合体（ＡＤＣ）の一部として含めることができる。β−グルクロニダーゼ（例えばリソソームβ−グルクロニダーゼ）の作用を受けると、薬物−リンカーは、グリコシド結合のところで加水分解され、１，６−脱離して二酸化炭素を失い、リンカーシステムに結合体化していた薬物を解放する（上掲のスキーム１を参照すること）。このリンカー設計を利用する３つのＡＤＣは、抗分裂剤ＭＭＡＥ（１ａ）およびＭＭＡＦ（１ｂ）、ならびに、スキーム２（上掲）に示すように、非常に強力な２−ピロリノドキソルビシン（４）の不安定前駆体であるドキソルビシンプロピルオキサゾリン（ＤＰＯ、２）を使用する。化合物４は、二本鎖ＤＮＡ（３３）のアルキル化を通じてアポトーシスに影響を及ぼす。
【０３３３】
実施例３  大腸菌β−グルクロニダーゼ反応性
化合物９ｂのシステイン付加体をβ−グルクロニダーゼで処理して、β−グルクロニドリンカーの酵素開裂に対する感受性を測定した。この試験では、市販の大腸菌β−グルクロニダーゼ（ＥＣ３．２．１．３１）をヒト酵素の代用とした。これによって、所望の薬物であるＭＭＡＦ（１ｂ）が放出され、その過程で安定な中間体が形成されれば確認することが可能になった。
【０３３４】
β−グルクロニダーゼ反応性。システイン（０．１ｍＭ溶液１２．５μＬ）とｐＨ９のホウ酸塩緩衝液（３０ｍＭ溶液１２．５μＬ）とを水（９０μＬ）に加えた。続いて９ｂ（１０ｍＭ  ＤＭＳＯ溶液１０μＬ）を加えた。５分後にＨＰＬＣで検査したところ、ｃｙｓ−９ｂへの変換は完了していた。４４０ｍＬのＰＢＳにｃｙｓ−９ｂ溶液（５０μＬ、４０ナノモル）、続いて大腸菌β−グルクロニダーゼ（シグマ、Ｅ．Ｃ．３．２．１．３１、ＩＸ−Ａ型、ＰＢＳ中１ｍｇ／ｍＬ溶液１０μＬ、３．６μｇ、１３ピコモル）の溶液を加え、反応混合物を３７℃で培養した。ｔ＝０、２５、６０および９０分に試料（５０μＬ）を採取し、ＬＣによって分析した。結果は、各時点における残存ｃｙｓ−９ｂのＡＵＣ下の面積（ＡＵＣ）の、ｔ＝０におけるｃｙｓ−９ｂのＡＵＣの百分率によった。
【０３３５】
結果。上記で説明したβ−グルクロニダーゼアッセイを実行した。ＨＰＬＣアッセイを用いて３７℃でｃｙｓ−９ｂ（ＭＭＡＦ）の減少を追跡した。ｃｙｓ−９ｂに対する大腸菌β−グルクロニダーゼの比活性は、０．１３マイクロモル／分／ｍｇであった。図１を参照すると、ｃｙｓ−９ｂからβ−グルクロニドが開裂した結果、ＭＭＡＦ（１ｂ）の迅速な１，６−脱離が起こり、ＬＣ−ＭＳによって特定された。ＬＣ−ＭＳによって、ＭＭＡＦ含有フェノール中間体を検出することはできなかった。従って、１，６−脱離は、迅速なようである。
【０３３６】
ｃｙｓ−１７を用いる同様な試験（ドキソルビシンプロピルオキサゾリン（ＤＰＯ）との）で、ＬＣ−ＭＳによって確認したところ、β−グルクロニダーゼで処理すると、２−ピロリノドキソルビシン（４）が直接得られた。対照実験で、β−グルクロニダーゼ非存在下でｃｙｓ−９ｂもｃｙｓ−１７も安定であった。これらの２つの試験によって、リンカーがβ−グルクロニダーゼ酵素の基質であること、およびβ−グルクロニド加水分解が起こると薬物が直ちに放出されることが実証された。
【０３３７】
実施例４  薬物−リンカーｃｙｓ−９ｂのラット血漿安定性
グルクロニドリンカーの血漿安定性を測定するために、９ｂ（ＭＭＡＦとの）の反応性の高いマレイミド二重結合を過剰量のＤＴＴで還元してジヒドロ−９ｂを得た。この物質をラット血漿に加え、３７℃で７日間間培養した。さまざまな時点で分析試料を採取し、血漿蛋白質を沈殿させ、遠心分離し、上清を回収した。各上清をＬＣ−ＭＳによって分析し、親化合物ジヒドロ−９ｂと放出されるＭＭＡＦ（１ｂ）との質量の全陽イオン電流（ＴＩＣ＋）クロマトグラムを調べた。７日後、ジヒドロ−９ｂのＴＩＣ＋（開環スクシンイミド加水分解付加体を含む）は、ジヒドロ−９ｂを血漿中に注入した直後に採取した試料の８８％であった。遊離薬物１ｂを検出することはできたが、定量しれなかった。一次反応を仮定し、これらのデータを外挿すると、ジヒドロ−９ｂの半減期は８１日のようである。並行した実験で、ジヒドロ−９ｂの場合とまったく同じに、マレイミド還元Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＰＡＢＡ結合ＭＭＡＦのラット血漿安定性を測定した。この薬物−リンカーは、半減期６．２５日を示した。
【０３３８】
この試験は、より短い薬物放出の半減期を有することが報告されているジスルフィドおよびヒドラゾン系システムと比べて、β−グルクロニドリンカーシステムの安定性が改善されたことを実証する。
【０３３９】
実施例５  細胞毒性剤およびＡＤＣのインビトロ評価
リンカー−薬物結合体と、ｍＡｂ  ＡＣ１０（ＣＤ３０抗原に対するＩｇＧ１）および１Ｆ６（ＣＤ７０抗原に対するＩｇＧ１）とのＡＤＣ化合物９ａ（ＭＭＡＥとの）、９ｂ（ＭＭＡＦ）および１７（ドキソルビシン・プロピル・オキサゾリン（ＤＰＯ）とを調製した。ＣＤ３０＋細胞系統（カーパス２９９）および２つのＣＤ７０＋腎細胞癌腫（ＲＣＣ）系統、７８６−ＯおよびＣａｋｉ−１に対するＡＤＣ（ｃ１Ｆ６−９ａおよびｃＡＣ１０−９ａ、ｃ１Ｆ６−９ｂおよびｃＡＣ１０−９ｂならびにｃ１Ｆ６−１７およびｃＡＣ１０−１７）の細胞毒性活性を評価した。
【０３４０】
【化８２】
2009501800.tif 000069
ＡＤＣ。上記に記載したように、ＡＤＣを調製した。
【０３４１】
インビトロ成長阻害。細胞を集め、９６ウェル側面黒色プレート中１５０μＬの培地に１０，０００細胞／ウェルの密度で接種した。ＡＤＣ（５０μＬ）の段階希釈物を加え、３７℃で９２時間培養を実行した。ＡＤＣを添加した後、培養物を３７℃で９６時間培養した。培地中のレサズリン（０．２５ｍＭ、５０μＬ、シグマ、ミズーリ州セントルイス）を加え、培養を４時間続行した。励起波長５２５ｎｍおよび発光波長５９０ｎｍを用いてフュージョンＨＴマイクロプレートリーダー（パッカード、コネチカット州メリデン）上でプレートを読み取った。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ４  ｆｏｒ  Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）（グラフパッドソフトウェア、カリフォルニア州サンディエゴ）を用いてすべてのアッセイのデータを換算した。４パラメータ曲線重ね合わせ法を用いて、無処理対照細胞と比較してＩＣ５０濃度を決定した。
【０３４２】
結果。ＭＭＡＥ（１ａ）と、１８（２−ピロリノドキソルビシン（４）のエステラーゼ不安定プロドラッグ）との両方をインビトロ評価したところ、これらの化合物は、ＣＤ７０＋細胞系統Ｃａｋｉ−１および７８６−ＯならびにＣＤ３０＋系統カーパス２９９に対して非常に細胞毒性が強かった（０．２ｎＭ未満）（表７）。化合物１８は、ドキソルビシン（１５）より３００〜６５００倍細胞毒性が強いことが証明された。これは、この種類のドキソルビシン誘導体に関する以前の知見（Ｆａｒｑｕｈａｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９８，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ４１：９６５−７２）と矛盾しない。１ａおよび１８とは対照的に、遊離カルボン酸ＭＭＡＦ（１ｂ）は、これらの細胞系統に対して著しく活性が低く、ＩＣ５０値は、１００〜２００ｎＭの範囲にあった（Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００６，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ．  １７（１）：１１４−１２４）。細胞毒性活性は、１ｂのカルボキシレート基に伴う負電荷によっておそらく細胞内アクセスが低下した結果、低くなる。
【０３４３】
９ａのｃＡＣ１０結合体およびｃ１Ｆ６結合体のインビトロ評価によって、リンカーが免疫学的特異性をもって活性薬物を標的細胞に送達することが実証された（図２）。ＣＤ３０＋系統カーパス２９９に対する２つの結合体の活性を比較する（図２Ａ）と、抗ＣＤ３０結合体ｃＡＣ１０−９ａは、ＩＣ５０値０．０６ｎＭ（薬物含量）と滴定され、非結合結合体ｃ１Ｆ６−９ａは、試験した最高濃度の３０ｎＭまで、細胞毒性活性を示さないことが明らかになった。抗ＣＤ７０結合体ｃ１Ｆ６−９ａは、ＣＤ７０＋細胞系統Ｃａｋｉ−１に対して非常に強力であった（ＩＣ５０  ０．４５ｎＭ）（図２Ｃ）。
【０３４４】
９ｂのＡＤＣは、１ｂを標的細胞に効果的に送達した。９ｂの結合体は、ＣＤ７０＋系統Ｃａｋｉ−１および７８６−Ｏに対して免疫特異性を示し、非常に有効であり（それぞれ図２Ｂおよび２Ｃ）、ＩＣ５０値は、それぞれ０．０８および０．２０ｎＭであった。対応する非結合ｃＡＣ１０−９ｂは、これらの細胞系統に対して不活性であり、＞２５０倍の特異性レベルを表した。抗ＣＤ３０結合体ｃＡＣ１０−９ｂは、ＣＤ３０＋系統カーパス２９９に対して非常に有効であり、ＩＣ５０値は、５０ｐＭであった。ドキソルビシン薬物−リンカー１７の結合体は、同じ全体的プロフィルを示し、抗原陽性細胞系統に対する効果的な細胞死滅と、＞１６倍の特異性値を示した。
【０３４５】
実施例６  ｃＡＣ１０−９ａおよびｃ１Ｆ６−９ｂのインビボ評価
インビボ評価のため、アウリスタチン誘導体９ａと９ｂとの２つのＡＤＣを選んだ。メスのＢａｌｂ／ｃマウスにおけるｃＡＣ１０−９ａ（４薬物／ｍＡｂ）の最大認容投与量（ＭＴＤ）を測定した。ｃＡＣ１０−９ａは、１００ｍｇ／ｋｇでは十分に認容性であったが、１５０ｍｇ／ｋｇでは毒性であった。結合体ｃ１Ｆ６−１ｂは、２５ｍｇ／ｋｇでは十分に認容性であったが、５０ｍｇ／ｋｇ投与量では毒性であった。従って、グルクロニドＡＤＣのＭＴＤは、既報の、対応するペプチド結合ＭＭＡＥ（Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３，  Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｔ  ２１：７７８−８４）およびＭＭＡＦ（Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００６，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．  Ｃｈｅｍ．  １７（１）：１１４−１２４）ＡＤＣに匹敵するようである。
【０３４６】
皮下カーパス２９９ＡＬＣＬ腫瘍を有するヌードマウスにおいて、ｃＡＣ１０−９ａによるインビボ治療実験を行った。腫瘍が明らかになり（平均＝７０ｍｍ３）、急速に成長中の腫瘍移植１４日後、０．５、１．０および３ｍｇ／ｋｇ（ｍＡｂ成分）のｃＡＣ１０−９ａの単回静脈内投与で動物（１群５匹）を治療した。３ｍｇ／ｋｇ用量で注射したｃ１Ｆ６−９ａを非結合対照ＡＤＣとして用いて特異性を測定した。３つの投薬レベルのそれぞれで、ｃＡＣ１０−９ａで治療したすべての動物において治癒を得た（図３Ａ）。これとは異なり、非結合ＡＤＣ  ｃ１Ｆ６−９ａは、抗腫瘍効果を示さなかった。ｃＡＣ１０−９ａのＭＴＤは、約１００ｍｇ／ｋｇなので、治療指数は、＞２００となり、少なくとも既報のＶａｌ−Ｃｉｔ  ＰＡＢＡ系ＭＭＡＥ  ＡＤＣ（Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３，  Ｎａｔ．  ＢｉｏｔｅｃｈｎｏＬ  ２１：７７８−８４）と同程度の強さである。
【０３４７】
皮下７８６−Ｏ腎細胞癌腫を移植して、マウスにおけるｃ１Ｆ６−９ｂの効果を測定した。３つの投与レベル（０．７５、１．５および３．０ｍｇ／ｋｇ）のすべてで、顕著な水準の抗腫瘍活性を得た。この場合にも、毒性または有害作用の兆候はまったくなかった（図３Ｂ）。ｃ１Ｆ６−９ａ  ＡＤＣと同じく、これは、小さなＭＴＤの比率で実現された。
【０３４８】
本発明は、本明細書に記載した特定の実施態様によって範囲を限定されないものとする。実際、上記の説明および添付の図面から、本明細書に記載のものに加えて、本発明のさまざまな変更形が当業者には自明である。そのような変更形は、添付の請求項の範囲に属するものとする。
【０３４９】
本明細書において参照し、または組み込んだいかなる特許または特許出願に対しても、明示的または非明示的に許諾を供与することはない。上記の考察は、記載、説明および例を示すものであり、いかなる添付の請求項によって定義される範囲も限定すると解釈するべきでない。
【０３５０】
本明細書では、特許出願、特許および学術刊行物を含むさまざまな参考文献を引用し、それぞれの開示は参照によって本明細書に全体として組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【０３５１】
【図１】図１は、大腸菌β−グルクロニダーゼによるシステイン不活性化グルクロニドリンカー−ＭＭＡＦ結合体の反応性を示す。システイン不活性化ｃ１Ｆ６−９ｂを酵素に加え、３７℃で培養した。３０分ごとに試料採取してＨＰＬＣ（２５４ｎｍ）によって遊離薬物への加水分解を追跡した。分解半減期は、４１分であった。
【図２】図２は、ＣＤ３０＋およびＣＤ７０＋癌細胞系統に対するＡＤＣのインビトロ細胞毒活性を示す。（Ａ）抗ＣＤ３０  ＡＤＣ  ｃＡＣ１０−９ａおよび非結合対照ｃ１Ｆ６−９ａで９６時間処理されたカーパス（Ｋａｒｐｕｓ）２９９（ＣＤ３０＋）ＡＬＣＬ細胞。（Ｂ）抗ＣＤ７０  ＡＤＣ  ｃ１Ｆ６−９ｂおよび非結合対照ｃＡＣ１０−９ｂで９６時間処理された７８６−Ｏ（ＣＤ７０＋）ＲＣＣ細胞。（Ｃ）ｃ１Ｆ６−１７および非結合対照ｃＡＣ１０−１７で処理されたＣａｋｉ−１（ＣＤ７０＋）ＲＣＣ細胞。平均±ＳＤとして結果を示す。
【図３】図３は、ＡＤＣに関するインビボ試験を示す。パネルＡは、ＣＤ３０＋  カーパス２９９（ＡＬＣＬ）皮下腫瘍を有するＳＣＩＤマウスに対するｃＡＣ１０−９ａ（ＭＭＡＥを有する）の効果を示す。マウスを０．７５（＋）、１．０（□）および３（×）ｍｇ／ｋｇで単回治療（矢印、第１４日）して、各群の５／５動物で治癒を得た。非結合対照結合体ｃ１Ｆ６−９ａ（△）を３ｍｇ／ｋｇ投与しても、非治療群（＊）と同じく、腫瘍応答は得られなかった。パネルＢは、ＣＤ７０＋  ７８６−Ｏ（ＲＣＣ）皮下腫瘍を有するＳＣＩＤマウスに対するｃ１Ｆ６−９ｂ（ＭＭＡＦを有する）の効果を示す。マウスを０．７５（▲）、１．５（△）および３．０（△）ｍｇ／ｋｇ単回投与で単回治療（矢印、第２０日）して、腫瘍緩解を得た。０．７５および３ｍｇ／ｋｇ投与群では治癒（２／７）が見られた。非治療群（×）の動物は、第４０日以前に犠牲となった。
【図１】
2009501800.tif 000086
【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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