(57)【要約】  本発明は、抗菌性アミドマクロサイクルおよびその製造方法、疾患の処置および／または予防のためのその使用、ならびに疾患、特に、細菌性感染症を処置および／または予防する薬剤を製造するためのその使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2009501173.tif 000090
《式中、
Ｒ２６は、水素、ハロゲン、ヒドロキシまたはメチルを表し、
Ｒ７は、式：
【化２】
2009501173.tif 000091
（ここで、
Ｒ１は、水素またはヒドロキシを表し、
＊は、炭素原子との結合部位である）
の基を表し、
Ｒ２は、水素またはメチルを表し、
Ｒ３は、式：
【化３】
2009501173.tif 000092
〈ここで、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ａは、結合またはフェニルを表し、
Ｒ４は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５は、式：
【化４】
2009501173.tif 000093
［式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ２３は、水素または式＊−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨまたは＊−（ＣＨ２）ｏ−ＮＨ２
（式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
ｎおよびｏは、互いに独立して、数１、２、３または４である）
の基を表し、
ｍは、数０または１である］
の基を表し、
Ｒ８およびＲ１２は、互いに独立して、式＊−ＣＯＮＨＲ１４または
＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５
｛式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ１４およびＲ１５は、互いに独立して、式：
【化５】
2009501173.tif 000094
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ａは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ａは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ａは、水素またはアミノエチルを表すか、
または、
Ｒ５ａおよびＲ６ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって
ピペラジン環を形成し、
Ｒ８ａおよびＲ１２ａは、互いに独立して、＊−（ＣＨ２）Ｚ１ａ−ＯＨ、
＊−（ＣＨ２）Ｚ２ａ−ＮＨＲ１３ａ、＊−ＣＯＮＨＲ１４ａまたは
＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５ａ
〔式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｚ１ａおよびＺ２ａは、互いに独立して、数１、２または３であり、
Ｒ１３ａは、水素またはメチルを表し、
そして、
Ｒ１４ａおよびＲ１５ａは、互いに独立して式：
【化６】
2009501173.tif 000095
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｃは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｃは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｃは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｃは、数０または１であり、
そして、
ｌｃは、数１、２、３または４である）
の基を表す〕
を表し、
Ｒ９ａおよびＲ１１ａは、互いに独立して、水素またはメチルを表し、
Ｒ１０ａは、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ１６ａは、式：
【化７】
2009501173.tif 000096
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｄは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｄは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｄは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｄは、数０または１であり、
そして、
ｌｄは、数１、２、３または４である）
の基を表し、
ｋａは、数０または１であり、
そして、
ｌａ、ｗａ、ｘａおよびｙａは、互いに独立して、数１、２、３または４である］
の基を表す｝
の基を表し、
Ｒ９は、水素、メチル、＊−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨまたは式：
【化８】
2009501173.tif 000097
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ２０は、水素または＊−（ＣＨ２）ｉ−ＮＨＲ２２
（式中、
Ｒ２２は、水素またはメチルを表し、
そして、
ｉは、数１、２または３である）
を表し、
Ｒ２１は、水素またはメチルを表し、
ｆは、数０、１、２または３であり、
ｇは、数１、２または３であり、
そして、
ｈは、数１、２、３または４である］
の基を表し、
Ｒ１６およびＲ１７は、互いに独立して、式：
【化９】
2009501173.tif 000098
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｂは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｂは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｂは、水素またはアミノエチルを表すか、
または、
Ｒ５ｂおよびＲ６ｂは、それらが結合している窒素原子と一緒になって
ピペラジン環を形成し、
Ｒ８ｂおよびＲ１２ｂは、互いに独立して、＊−（ＣＨ２）Ｚ１ｂ−ＯＨ、
＊−（ＣＨ２）Ｚ２ｂ−ＮＨＲ１３ｂ、＊−ＣＯＮＨＲ１４ｂまたは
＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５ｂ
〔式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ１３ｂは、水素またはメチルを表し、
そして、
Ｚ１ｂおよびＺ２ｂは、互いに独立して、数１、２または３であり、
そして、
Ｒ１４ｂおよびＲ１５ｂは、互いに独立して式：
【化１０】
2009501173.tif 000099
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｇは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｇは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｇは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｇは、数０または１であり、
そして、
ｌｇは、数１、２、３または４である）
の基を表す〕
を表し、
Ｒ９ｂおよびＲ１１ｂは、互いに独立して、水素またはメチルを表し、
Ｒ１０ｂは、アミノまたはヒドロキシを表し、
ｋｂは、数０または１であり、
ｌｂ、ｗｂ、ｘｂおよびｙｂは、互いに独立して、数１、２、３または４である］
の基を表し、
Ｒ１８は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ１９は、水素、メチルまたは式：
【化１１】
2009501173.tif 000100
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ２５は、水素または＊−（ＣＨ２）ｕ−ＮＨＲ２９
（式中、
Ｒ２９は、水素またはメチルを表し、
そして、
ｕは、数１、２または３である）
を表し、
Ｒ２８は、水素またはメチルを表し、
ｓは、数０、１、２または３であり、
そして、
ｔは、数１、２または３である］
の基を表し、
Ｒ２４は、水素またはアミノエチルを表し、
ｄは、数１、２または３であり、
ｋおよびｑは、互いに独立して数０または１であり、
ｌ、ｒ、ｗおよびｙは、互いに独立して、数１、２、３または４であり、
【化１２】
2009501173.tif 000101
は、ｗ、ｒまたはｙが、３である場合は、互いに独立してヒドロキシ基を持つことがで
きる〉
の基を表す》
の化合物、またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物の一つ。
【請求項２】
式：
【化１３】
2009501173.tif 000102
（式中、
Ｒ２６は、水素、ハロゲン、ヒドロキシまたはメチルを表し、
Ｒ１は、水素またはヒドロキシを表し、
Ｒ２は、水素またはメチルを表し、
Ｒ３は、請求項１に定義されている通りである）
に該当することを特徴とする、請求項１に記載の化合物、またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物の一つ。
【請求項３】
式中、Ｒ２６が、水素、塩素、ヒドロキシまたはメチルを表すことを特徴とする、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
式中、
Ｒ２６が、水素またはヒドロキシを表し、
Ｒ１が、水素またはヒドロキシを表し、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、式：
【化１４】
2009501173.tif 000103
〈ここで、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５は、式：
【化１５】
2009501173.tif 000104
［式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ２３は、水素または式＊−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨまたは＊−（ＣＨ２）ｏ−ＮＨ２
（式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
ｎおよびｏは、互いに独立して、数１、２、３または４である）
の基を表し、
ｍは、数０または１である］
の基を表し、
Ｒ８は、式＊−ＣＯＮＨＲ１４または＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５
｛式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ１４およびＲ１５は、互いに独立して、式：
【化１６】
2009501173.tif 000105
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ａは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ａは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ａは、水素またはアミノエチルを表すか、
または、
Ｒ５ａおよびＲ６ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって
ピペラジン環を形成し、
Ｒ８ａおよびＲ１２ａは、互いに独立して、＊−（ＣＨ２）Ｚ１ａ−ＯＨ、
＊−（ＣＨ２）Ｚ２ａ−ＮＨＲ１３ａ、＊−ＣＯＮＨＲ１４ａまたは
＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５ａ
〔式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｚ１ａおよびＺ２ａは、互いに独立して、数１、２または３であり、
Ｒ１３ａは、水素またはメチルを表し、
そして、
Ｒ１４ａおよびＲ１５ａは、互いに独立して式：
【化１７】
2009501173.tif 000106
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｃは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｃは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｃは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｃは、数０または１であり、
そして、
ｌｃは、数１、２、３または４である）
の基を表す〕
を表し、
Ｒ９ａおよびＲ１１ａは、互いに独立して、水素またはメチルを表し、
Ｒ１０ａは、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ１６ａは、式：
【化１８】
2009501173.tif 000107
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｄは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｄは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｄは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｄは、数０または１であり、
そして、
ｌｄは、数１、２、３または４である）
の基を表し、
ｋａは、数０または１であり、
そして、
ｌａ、ｗａ、ｘａおよびｙａは、互いに独立して、数１、２、３または４である］
の基を表す｝
の基を表し、
Ｒ９は、水素、メチル、＊−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨまたは式：
【化１９】
2009501173.tif 000108
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ２０は、水素または＊−（ＣＨ２）ｉ−ＮＨＲ２２
（式中、
Ｒ２２は、水素またはメチルを表し、
そして、
ｉは、数１、２または３である）
を表し、
Ｒ２１は、水素またはメチルを表し、
ｆは、数０、１、２または３であり、
ｇは、数１、２または３であり、
そして、
ｈは、数１、２、３または４である］
の基を表し、
Ｒ１７は、式：
【化２０】
2009501173.tif 000109
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｂは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｂは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｂは、水素またはアミノエチルを表すか、
または、
Ｒ５ｂおよびＲ６ｂは、それらが結合している窒素原子と一緒になって
ピペラジン環を形成し、
Ｒ８ｂおよびＲ１２ｂは、互いに独立して、＊−（ＣＨ２）Ｚ１ｂ−ＯＨ、
＊−（ＣＨ２）Ｚ２ｂ−ＮＨＲ１３ｂ、＊−ＣＯＮＨＲ１４ｂまたは
＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５ｂ
〔式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ１３ｂは、水素またはメチルを表し、
そして、
Ｚ１ｂおよびＺ２ｂは、互いに独立して、数１、２または３であり、
そして、
Ｒ１４ｂおよびＲ１５ｂは、互いに独立して式：
【化２１】
2009501173.tif 000110
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｇは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｇは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｇは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｇは、数０または１であり、
そして、
ｌｇは、数１、２、３または４である）
の基を表す〕
を表し、
Ｒ９ｂおよびＲ１１ｂは、互いに独立して、水素またはメチルを表し、
Ｒ１０ｂは、アミノまたはヒドロキシを表し、
ｋｂは、数０または１であり、
ｌｂ、ｗｂ、ｘｂおよびｙｂは、互いに独立して、数１、２、３または４である］
の基を表し、
Ｒ１８は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ１９は、水素、メチルまたは式：
【化２２】
2009501173.tif 000111
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ２５は、水素または＊−（ＣＨ２）ｕ−ＮＨＲ２９
（式中、
Ｒ２９は、水素またはメチルを表し、
そして、
ｕは、数１、２または３である）
を表し、
Ｒ２８は、水素またはメチルを表し、
ｓは、数０、１、２または３であり、
そして、
ｔは、数１、２または３である］
の基を表し、
Ｒ２４は、水素またはアミノエチルを表し、
ｄは、数１、２または３であり、
ｋおよびｑは、互いに独立して数０または１であり、
ｌ、ｒおよびｗは、互いに独立して、数１、２、３または４であり、
【化２３】
2009501173.tif 000112
は、ｗまたはｒが、３である場合は、互いに独立してヒドロキシ基を持つことができる
〉
の基を表す、
ことを特徴とする、請求項２に記載の化合物、またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物の一つ。
【請求項５】
式中、
Ｒ２６が、水素またはヒドロキシを表し、
Ｒ１が、水素またはヒドロキシを表し、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、式：
【化２４】
2009501173.tif 000113
〈式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５は、式：
【化２５】
2009501173.tif 000114
［ここで、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ２３は、水素または式＊−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨまたは＊−（ＣＨ２）ｏ−ＮＨ２
（式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
ｎおよびｏは、互いに独立して、数１、２、３または４である）
の基を表し、
ｍは、数０または１である］
の基を表し、
Ｒ８は、式＊−ＣＯＮＨＲ１４または＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５
｛式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ１４およびＲ１５は、互いに独立して、式：
【化２６】
2009501173.tif 000115
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ａは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ａは、水素を表し、
Ｒ６ａは、水素を表し、
Ｒ１２ａは、＊−（ＣＨ２）Ｚ１ａ−ＯＨまたは＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５ａ
〔式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｚ１ａは、数１、２または３であり、
そして、
Ｒ１５ａは、式：
【化２７】
2009501173.tif 000116
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｃは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｃは、水素を表し、
Ｒ６ｃは、水素を表し、
ｋｃは、数０または１であり、
そして、
ｌｃは、数１、２、３または４である）
の基を表す〕
を表し、
ｋａは、数０または１であり、
そして、
ｌａおよびｙａは、互いに独立して、数１、２、３または４である］
の基を表す｝
の基を表し、
Ｒ９は、水素を表し、
Ｒ１７は、式：
【化２８】
2009501173.tif 000117
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｂは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｂは、水素を表し、
Ｒ６ｂは、水素を表し、
ｋｂは、数０または１であり、
ｌｂは、数１、２、３または４である］
の基を表し、
Ｒ１８は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ１９は、水素を表し、
Ｒ２４は、水素を表し、
ｄは、数１、２または３であり、
ｋおよびｑは、互いに独立して数０または１であり、
ｌ、ｒおよびｗは、互いに独立して、数１、２、３または４であり、
【化２９】
2009501173.tif 000118
は、ｗまたはｒが、３である場合は、互いに独立してヒドロキシ基を持つことができる
〉
の基を表す、
ことを特徴とする請求項２または請求項３に記載の化合物、またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物の一つ。
【請求項６】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその塩、溶媒和物またはその塩の溶媒和物の一つの製造方法であって、
［Ａ］式：
【化３０】
2009501173.tif 000119
（式中、Ｒ２、Ｒ７およびＲ２６は、請求項１に示されている意味を有し、そして、ｂｏｃは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルを表す）
の化合物を、二段階工程における第一段階で、一つまたはそれ以上の脱水剤の存在下で、式：
【化３１】
2009501173.tif 000120
（式中、Ｒ３は、請求項１に示されている意味を有する）
の化合物と反応せしめ、
そして、引き続いて、酸と反応させ、かつ／または、水素化分解反応させる、
または、
［Ｂ］式：
【化３２】
2009501173.tif 000121
（式中、Ｒ２、Ｒ７およびＲ２６は、請求項１に示されている意味を有し、そして、Ｚは、ベンジルオキシカルボニルを表す）
の化合物を、二段階工程における第一段階で、一つまたはそれ以上の脱水剤の存在下で、式：
【化３３】
2009501173.tif 000122
（式中、Ｒ３は、請求項１に示されている意味を有する）
の化合物と反応せしめ、
そして、引き続いて、酸と反応させるか、または、水素化分解反応させる、
ことを特徴とする、方法。
【請求項７】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物の一つの製造方法であって、当該化合物の塩または当該化合物の塩の溶媒和物を、塩基を添加してクロマトグラフィーによって当該化合物に変換させることを特徴とする、方法。
【請求項８】
疾患の処置および／または予防のための請求項１ないし請求項５のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項９】
疾患を処置および／または予防する薬剤の製造のための請求項１ないし請求項５のいずれか一つに記載の化合物の使用。
【請求項１０】
細菌性疾患を処置および／または予防する薬剤の製造のための請求項１ないし請求項５のいずれか一つに記載の化合物の使用。
【請求項１１】
請求項１ないし請求項５のいずれか一つに記載の少なくとも一種の化合物と、少なくとも一種の不活性な、非毒性の薬学的に許容される賦形剤を含んでなる薬剤。
【請求項１２】
細菌性感染症の処置および／または予防のための請求項１１に記載の薬剤。
【請求項１３】
抗菌的有効量の少なくとも一種の請求項１ないし請求項５のいずれか一つに記載の化合物または請求項１１または請求項１２に記載の薬剤を投与することによってヒトおよび動物の細菌性感染症を制御する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌性アミドマクロサイクルおよびその製造方法、疾患の処置および／または予防のためのその使用、ならびに疾患、特に、細菌性感染症を処置および／または予防する薬剤を製造するためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＷＯ ０３／１０６４８０、ＷＯ ０４／０１２８１６、ＷＯ ０５／０３３１２９およびＷＯ ０５／０５８９４３には、抗菌活性を有し、それぞれアミドおよびエステル置換基を有するビフェノマイシンＢ系のマクロサイクルが述べられている。
【０００３】
米国特許第３,４５２,１３６号、R.U.Meyer, Stuttgart University, Germany 1991の論文、V. Leitenberger, Stuttgart University, Germany 1991の論文、Synthesis (1992), (10), 1025-30、J. Chem.Soc., Perkin Trans.1 (1992), (1), 123-30、J.Chem. Soc., Chem. Commun.(1991), (10), 744、Synthesis (1991), (5), 409-13、J.Chem. Soc., Chem. Commun. (1991), (5), 275-7、J. Antibiot. (1985), 38(11), 1462-8、J. Antibiot. (1985), 38(11), 1453-61には、天然物ビフェノマイシンＢ(biphenomycin B)が抗菌活性を有していると述べられている。ビフェノマイシンＢの合成のいくつかの工程が、Synlett(2003), 4, 522-526 およびOrg. Lett. (2005), (7), 2981-2984 に述べられている。
【０００４】
Chirality(1995), 7(4),181-92、J.Antibiot. (1991) , 44(6), 674-7、J. Am. Chem. Soc. (1989), 111(19), 7323-7、J. Am. Chem. Soc. (1989), 111(19), 7328-33、J. Org. Chem. (1987), 52(24), 5435-7、Anal. Biochem. (1987), 165(1), 108-13、J.  Org.Chem. (1985), 50(8), 1341-2、J. Antibiot. (1993), 46(3), C-2、J. Antibiot. (1993), 46(1), 135-40、Synthesis(1992), (12), 1248-54、Appl. Environ. Microbiol. (1992), 58(12), 3879-8、J. Chem.Soc., Chem. Commun. (1992), (13), 951-3には、更にマクロサイクルがヒドロキシ基で置換されている、構造的に関連する天然物、ビフェノマイシンＡが述べられている。
【０００５】
天然物は、その特性の点からは、抗菌性薬剤の要件を満たしていない。抗菌活性を有する構造的に異なる薬剤は、市場で利用可能であるが、耐性の出現は、常に起こり得る。したがって、優れたより効果のある治療のための新規薬剤が望まれる。
【０００６】
それ故、本発明の目的の一つは、ヒトおよび動物の細菌性疾患を処置するために同じかまたは改善された抗菌活性を有する新規でかつ代替的な化合物を提供することにある。
【０００７】
驚くべきことに、天然物のカルボキシ基が、塩基性基を含むメチレンアミド基で置き換えられているそうした天然物のある誘導体が、抗菌活性を有していることがわかった。
【０００８】
加えて、この誘導体は、ビフェノマイシン耐性Ｓ.アウレウス株(ＲＮ４２２０ＢｉＲおよびＴ１７）に対する抗菌活性、およびビフェノマイシンおよび先行技術で知られているビフェノマイシン誘導体と比較して優れているかまたは同等のＳ.アウレウス野生型株およびビフェノマイシン耐性Ｓ.アウレウス株に対する改善された自然発生耐性率を示す。
【発明の開示】
【０００９】
本発明は、式：
【化１】
2009501173.tif 000002
《式中、
Ｒ２６は、水素、ハロゲン、ヒドロキシまたはメチルを表し、
Ｒ７は、式：
【化２】
2009501173.tif 000003
（ここで、
Ｒ１は、水素またはヒドロキシを表し、
＊は、炭素原子との結合部位である）
の基を表し、
Ｒ２は、水素またはメチルを表し、
【００１０】
Ｒ３は、式：
【化３】
2009501173.tif 000004
〈ここで、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ａは、結合またはフェニルを表し、
Ｒ４は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５は、式：
【化４】
2009501173.tif 000005
［式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ２３は、水素または式＊−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨまたは＊−（ＣＨ２）ｏ−ＮＨ２
（式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
ｎおよびｏは、互いに独立して、数１、２、３または４である）
の基を表し、
ｍは、数０または１である］
の基を表し、
【００１１】
Ｒ８およびＲ１２は、互いに独立して、式＊−ＣＯＮＨＲ１４または
＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５
｛式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ１４およびＲ１５は、互いに独立して、式：
【化５】
2009501173.tif 000006
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ａは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ａは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ａは、水素またはアミノエチルを表すか、
または、
Ｒ５ａおよびＲ６ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって
ピペラジン環を形成し、
【００１２】
Ｒ８ａおよびＲ１２ａは、互いに独立して、＊−（ＣＨ２）Ｚ１ａ−ＯＨ、
＊−（ＣＨ２）Ｚ２ａ−ＮＨＲ１３ａ、＊−ＣＯＮＨＲ１４ａまたは
＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５ａ
〔式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｚ１ａおよびＺ２ａは、互いに独立して、数１、２または３であり、
Ｒ１３ａは、水素またはメチルを表し、
そして、
Ｒ１４ａおよびＲ１５ａは、互いに独立して式：
【化６】
2009501173.tif 000007
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｃは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｃは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｃは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｃは、数０または１であり、
そして、
ｌｃは、数１、２、３または４である）
の基を表す〕
を表し、
【００１３】
Ｒ９ａおよびＲ１１ａは、互いに独立して、水素またはメチルを表し、
Ｒ１０ａは、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ１６ａは、式：
【化７】
2009501173.tif 000008
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｄは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｄは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｄは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｄは、数０または１であり、
そして、
ｌｄは、数１、２、３または４である）
の基を表し、
ｋａは、数０または１であり、
そして、
ｌａ、ｗａ、ｘａおよびｙａは、互いに独立して、数１、２、３または４である］
の基を表す｝
の基を表し、
【００１４】
Ｒ９は、水素、メチル、＊−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨまたは式：
【化８】
2009501173.tif 000009
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ２０は、水素または＊−（ＣＨ２）ｉ−ＮＨＲ２２
（式中、
Ｒ２２は、水素またはメチルを表し、
そして、
ｉは、数１、２または３である）
の基を表し、
Ｒ２１は、水素またはメチルを表し、
ｆは、数０、１、２または３であり、
ｇは、数１、２または３であり、
そして、
ｈは、数１、２、３または４である］
の基を表し、
【００１５】
Ｒ１６およびＲ１７は、互いに独立して、式：
【化９】
2009501173.tif 000010
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｂは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｂは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｂは、水素またはアミノエチルを表すか、
または、
Ｒ５ｂおよびＲ６ｂは、それらが結合している窒素原子と一緒になって
ピペラジン環を形成し、
Ｒ８ｂおよびＲ１２ｂは、互いに独立して、＊−（ＣＨ２）Ｚ１ｂ−ＯＨ、
＊−（ＣＨ２）Ｚ２ｂ−ＮＨＲ１３ｂ、＊−ＣＯＮＨＲ１４ｂまたは
＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５ｂ
〔式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ１３ｂは、水素またはメチルを表し、
そして、
Ｚ１ｂおよびＺ２ｂは、互いに独立して、数１、２または３であり、
そして、
Ｒ１４ｂおよびＲ１５ｂは、互いに独立して式：
【化１０】
2009501173.tif 000011
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｇは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｇは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｇは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｇは、数０または１であり、
そして、
ｌｇは、数１、２、３または４である）
の基を表す〕
を表し、
Ｒ９ｂおよびＲ１１ｂは、互いに独立して、水素またはメチルを表し、
Ｒ１０ｂは、アミノまたはヒドロキシを表し、
ｋｂは、数０または１であり、
ｌｂ、ｗｂ、ｘｂおよびｙｂは、互いに独立して、数１、２、３または４である］
の基を表し、
【００１６】
Ｒ１８は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ１９は、水素、メチルまたは式：
【化１１】
2009501173.tif 000012
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ２５は、水素または＊−（ＣＨ２）ｕ−ＮＨＲ２９
（式中、
Ｒ２９は、水素またはメチルを表し、
そして、
ｕは、数１、２または３である）
を表し、
Ｒ２８は、水素またはメチルを表し、
ｓは、数０、１、２または３であり、
そして、
ｔは、数１、２または３である］
の基を表し、
Ｒ２４は、水素またはアミノエチルを表し、
ｄは、数１、２または３であり、
ｋおよびｑは、互いに独立して数０または１であり、
ｌ、ｒ、ｗおよびｙは、互いに独立して、数１、２、３または４であり、
【化１２】
2009501173.tif 000013
は、ｗ、ｒまたはｙが、３である場合は、互いに独立してヒドロキシ基を持つことがで
きる〉
の基を表す》
の化合物、およびその塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物に関する。
【００１７】
本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物、およびその塩、溶媒和物およびその塩の溶媒和物、並びに、式（Ｉ）によって含まれており、かつ下記に代表的実施態様として言及されている化合物、および塩、溶媒和物およびその塩の溶媒和物である（式（Ｉ）によって含まれており、かつ下記に言及されている化合物が、塩、溶媒和物および塩の溶媒和物でない限り）。
【００１８】
本発明化合物は、その構造によっては、立体異性体の形（エナンチオマー、ジアステレオマー）で存在し得る。それ故、本発明は、そのエナンチオマーまたはジアステレオマーならびにそれぞれの混合物に関連する。立体異性的に純粋な構成物は、キラル相でのクロマトグラフィーまたはキラルアミンまたはキラル酸を用いる結晶化のような公知の方法によって、公知の手法でエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーのそうした混合物から単離することができる。
本発明はまた、その化合物の構造によっては、こうした化合物の互変異性体に関する。
【００１９】
本発明の目的のために好ましい塩は、本発明化合物の生理学的に許容される塩である。
化合物（Ｉ）の生理学的に許容される塩には、鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、たとえば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、トリフルオロ酢酸および安息香酸の塩が含まれる。
【００２０】
化合物（Ｉ）の生理学的に許容される塩には、また、例証かつ好ましいものとして、アルカリ金属塩（たとえば、ナトリウム塩およびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（たとえば、カルシウム塩およびマグネシウム塩）およびアンモニアから誘導されるアンモニウム塩または、例証かつ好ましいものとして、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ジヒドロアビエチルアミン（dihydroabietylamine)、アルギニン、リジン、エチレンジアミンおよびメチルピペリジンのような１から１６個までの炭素原子を有する有機アミンのような通例の塩基の塩が含まれる。
【００２１】
本発明では、溶媒和物は、溶媒分子と配位結合して（coordination)、固体または液体状態の複合体を形成する化合物のそれらの形態を意味する。水和物は、配位結合が、水との間でおこなわれる溶媒和物の特定の形態である。
【００２２】
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を意味する。
【００２３】
炭素原子の記号＃は、化合物がこの炭素原子における立体配置に関して、エナンチオピュアな形態(enantiopure form)であることを意味し、本発明では、９０％を超える（＞９０％ｅｅ）エナンチオマー過剰率を意味する。
【００２４】
Ｒ３が表し得る基の式中、それぞれの場合において、近くに＊がある線の端点は、炭素原子あるいはＣＨ２基を表すのではなく、Ｒ３が結合している窒素原子に結合する部分を形成している。
【００２５】
Ｒ７が表し得る基の式中、それぞれの場合において、近くに＊がある線の端点は、炭素原子あるいはＣＨ２基を表すのではなく、Ｒ７が結合している炭素原子に結合する部分を形成している。
【００２６】
本発明では、式：
【化１３】
2009501173.tif 000014
（式中、
Ｒ２６は、水素、ハロゲン、ヒドロキシまたはメチルを表し、
Ｒ１は、水素またはヒドロキシを表し、
Ｒ２は、水素またはメチルを表し、
Ｒ３は、上記に定義されている通りである）
の化合物、およびその塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物もまた優先される。
【００２７】
本発明では、式（Ｉ）または（Ｉａ）において、Ｒ２６が水素、塩素、ヒドロキシまたはメチルを表す式（Ｉ）または式（Ｉａ）の化合物もまた優先される。
【００２８】
本発明では、式（Ｉ）または（Ｉａ）において、Ｒ２６が水素を表す式（Ｉ）または式（Ｉａ）の化合物もまた優先される。
【００２９】
本発明では、式（Ｉａ）において、
Ｒ２６が、水素またはヒドロキシを表し、
Ｒ１が、水素またはヒドロキシを表し、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、式：
【化１４】
2009501173.tif 000015
〈ここで、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５は、式：
【化１５】
2009501173.tif 000016
［式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ２３は、水素または式＊−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨまたは＊−（ＣＨ２）ｏ−ＮＨ２
（式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
ｎおよびｏは、互いに独立して、数１、２、３または４である）
の基を表し、
ｍは、数０または１である］
の基を表し、
【００３０】
Ｒ８は、式＊−ＣＯＮＨＲ１４または＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５
｛式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ１４およびＲ１５は、互いに独立して、式：
【化１６】
2009501173.tif 000017
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ａは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ａは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ａは、水素またはアミノエチルを表すか、
または、
Ｒ５ａおよびＲ６ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって
ピペラジン環を形成し、
【００３１】
Ｒ８ａおよびＲ１２ａは、互いに独立して、＊−（ＣＨ２）Ｚ１ａ−ＯＨ、
＊−（ＣＨ２）Ｚ２ａ−ＮＨＲ１３ａ、＊−ＣＯＮＨＲ１４ａまたは
＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５ａ
〔式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｚ１ａおよびＺ２ａは、互いに独立して、数１、２または３であり、
Ｒ１３ａは、水素またはメチルを表し、
そして、
Ｒ１４ａおよびＲ１５ａは、互いに独立して式：
【化１７】
2009501173.tif 000018
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｃは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｃは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｃは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｃは、数０または１であり、
そして、
ｌｃは、数１、２、３または４である）
の基を表す〕
を表し、
【００３２】
Ｒ９ａおよびＲ１１ａは、互いに独立して、水素またはメチルを表し、
Ｒ１０ａは、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ１６ａは、式：
【化１８】
2009501173.tif 000019
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｄは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｄは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｄは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｄは、数０または１であり、
そして、
ｌｄは、数１、２、３または４である）
の基を表し、
ｋａは、数０または１であり、
そして、
ｌａ、ｗａ、ｘａおよびｙａは、互いに独立して、数１、２、３または４である］
の基を表す｝
の基を表し、
【００３３】
Ｒ９は、水素、メチル、＊−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨまたは式：
【化１９】
2009501173.tif 000020
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ２０は、水素または＊−（ＣＨ２）ｉ−ＮＨＲ２２
（式中、
Ｒ２２は、水素またはメチルを表し、
そして、
ｉは、数１、２または３である）
を表し、
Ｒ２１は、水素またはメチルを表し、
ｆは、数０、１、２または３であり、
ｇは、数１、２または３であり、
そして、
ｈは、数１、２、３または４である］
の基を表し、
【００３４】
Ｒ１７は、式：
【化２０】
2009501173.tif 000021
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｂは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｂは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｂは、水素またはアミノエチルを表すか、
または、
Ｒ５ｂおよびＲ６ｂは、それらが結合している窒素原子と一緒になって
ピペラジン環を形成し、
Ｒ８ｂおよびＲ１２ｂは、互いに独立して、＊−（ＣＨ２）Ｚ１ｂ−ＯＨ、
＊−（ＣＨ２）Ｚ２ｂ−ＮＨＲ１３ｂ、＊−ＣＯＮＨＲ１４ｂまたは
＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５ｂ
〔式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ１３ｂは、水素またはメチルを表し、
そして、
Ｚ１ｂおよびＺ２ｂは、互いに独立して、数１、２または３であり、
そして、
Ｒ１４ｂおよびＲ１５ｂは、互いに独立して式：
【化２１】
2009501173.tif 000022
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｇは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｇは、水素、メチルまたはアミノエチルを表し、
Ｒ６ｇは、水素またはアミノエチルを表し、
ｋｇは、数０または１であり、
そして、
ｌｇは、数１、２、３または４である）
の基を表す〕
を表し、
【００３５】
Ｒ９ｂおよびＲ１１ｂは、互いに独立して、水素またはメチルを表し、
Ｒ１０ｂは、アミノまたはヒドロキシを表し、
ｋｂは、数０または１であり、
そして、
ｌｂ、ｗｂ、ｘｂおよびｙｂは、互いに独立して、数１、２、３または４である］
の基を表し、
Ｒ１８は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ１９は、水素、メチルまたは式：
【化２２】
2009501173.tif 000023
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ２５は、水素または＊−（ＣＨ２）ｕ−ＮＨＲ２９
（式中、
Ｒ２９は、水素またはメチルを表し、
そして、
ｕは、数１、２または３である）
を表し、
Ｒ２８は、水素またはメチルを表し、
ｓは、数０、１、２または３であり、
そして、
ｔは、数１、２または３である］
の基を表し、
Ｒ２４は、水素またはアミノエチルを表し、
ｄは、数１、２または３であり、
ｋおよびｑは、互いに独立して数０または１であり、
ｌ、ｒおよびｗは、互いに独立して、数１、２、３または４であり、
【化２３】
2009501173.tif 000024
は、ｗまたはｒが、３である場合は、互いに独立してヒドロキシ基を持つことができる
〉
の基を表す、
式（Ｉａ）の化合物、およびその塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物もまた優先される。
【００３６】
本発明では、式（Ｉａ）において、
Ｒ２６が、水素またはヒドロキシを表し、
Ｒ１が、水素またはヒドロキシを表し、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、式：
【化２４】
2009501173.tif 000025
〈ここで、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５は、式：
【化２５】
2009501173.tif 000026
［式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ２３は、水素または式＊−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨまたは＊−（ＣＨ２）ｏ−ＮＨ２
（式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
ｎおよびｏは、互いに独立して、数１、２、３または４である）
の基を表し、
ｍは、数０または１である］
の基を表し、
【００３７】
Ｒ８は、式＊−ＣＯＮＨＲ１４または＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５
｛ここで、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｒ１４およびＲ１５は、互いに独立して、式：
【化２６】
2009501173.tif 000027
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ａは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ａは、水素を表し、
Ｒ６ａは、水素を表し、
Ｒ１２ａは、＊−（ＣＨ２）Ｚ１ａ−ＯＨまたは
＊−ＣＨ２ＣＯＮＨＲ１５ａ
〔式中、
＊は、炭素原子との結合部位であり、
Ｚ１ａは、数１、２または３であり、
そして、
Ｒ１５ａは、式：
【化２７】
2009501173.tif 000028
（式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｃは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｃは、水素を表し、
Ｒ６ｃは、水素を表し、
ｋｃは、数０または１であり、
そして、
ｌｃは、数１、２、３または４である）
の基を表す〕
の基を表し、
ｋａは、数０または１であり、
そして、
ｌａおよびｙａは、互いに独立して、数１、２、３または４である］
の基を表す｝
を表し、
【００３８】
Ｒ９は、水素を表し、
Ｒ１７は、式：
【化２８】
2009501173.tif 000029
［式中、
＊は、窒素原子との結合部位であり、
Ｒ４ｂは、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ５ｂは、水素を表し、
Ｒ６ｂは、水素を表し、
ｋｂは、数０または１であり、
ｌｂは、数１、２、３または４である］
の基を表し、
Ｒ１８は、水素、アミノまたはヒドロキシを表し、
Ｒ１９は、水素を表し、
Ｒ２４は、水素を表し、
ｄは、数１、２または３であり、
ｋおよびｑは、互いに独立して数０または１であり、
ｌ、ｒおよびｗは、互いに独立して、数１、２、３または４であり、
【化２９】
2009501173.tif 000030
は、ｗまたはｒが、３である場合は、互いに独立してヒドロキシ基を持つことができる
〉
の基を表す、
式（Ｉ）の化合物、およびその塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物もまた優先される。
【００３９】
本発明は、更に、方法、
［Ａ］式：
【化３０】
2009501173.tif 000031
（式中、Ｒ２、Ｒ７およびＲ２６は、上記に示されている意味を有し、そして、ｂｏｃは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルを表す）
の化合物を、二段階工程における第一段階で、一つまたはそれ以上の脱水剤の存在下で、式：
【化３１】
2009501173.tif 000032
（式中、Ｒ３は、上記に示されている意味を有する）
の化合物と反応せしめ、
そして、引き続いて、酸と反応させ、かつ／または、水素化分解反応させる、
または、
【００４０】
［Ｂ］式：
【化３２】
2009501173.tif 000033
（式中、Ｒ２、Ｒ７およびＲ２６は、上記に示されている意味を有し、そして、Ｚは、ベンジルオキシカルボニルを表す）
の化合物を、二段階工程における第一段階で、一つまたはそれ以上の脱水剤の存在下で、式：
【化３３】
2009501173.tif 000034
（式中、Ｒ３は、上記に示されている意味を有する）
の化合物と反応せしめ、
そして、引き続いて、酸と反応させるか、または、水素化分解反応させる、
ことによって式（Ｉ）の化合物またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物を製造する方法に関する。
【００４１】
塩の遊離塩基は、たとえば、塩基を加えてアセトニトリル−水グラジエントを用いる逆相カラムによるクロマトグラフィーによって、特にＲＰ１８ Phenomenex Luna Ｃ１８（２）カラムおよび塩基としてジエチルアミンを用いることによって得ることができる。
【００４２】
本発明は、更に請求項１による式（Ｉ）の化合物またはその溶媒和物の製造方法に関し、その方法において化合物の塩または化合物の塩の溶媒和物は、塩基を添加してクロマトグラフィーによってその化合物に変換する。
【００４３】
Ｒ１のヒドロキシ基は、式（ＩＩＩ）の化合物と反応させる間、必要に応じて、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基で保護される（この基は、第二反応工程で除去される）。
【００４４】
式（ＩＩＩ）の化合物のラジカルＲ３における反応官能性は、酸に不安定の保護基（たとえば、ｂｏｃ）を優先して、すでに保護されている合成に取り入れられる。式（Ｉ）の化合物を生じさせるためにこの反応が行われた後、この保護基は脱保護反応によって除去することができる。これは、保護基化学の標準的な方法で行われる。酸性条件下、または水素化分解による脱保護反応が好ましい。
【００４５】
方法［Ａ］および［Ｂ］の第一段階の反応は、通例、適宜塩基の存在下で、好ましくは大気圧下で０℃から４０℃までの温度範囲で、不活性溶媒中で行われる。
【００４６】
ここで適切な脱水剤の例としては、たとえば、Ｎ,Ｎ'−ジエチル−、Ｎ,Ｎ'−ジプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−（３−ジメチルアミノイソプロピル）−Ｎ'−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、Ｎ−シクロヘキシルカルボジイミド−Ｎ'−プロピルオキシメチル−ポリスチレン（ＰＳ−カルボジイミド）のようなカルボジイミド類、または、カルボニルジイミダゾールのようなカルボニル化合物、または２−エチル−５−フェニル−１,２−オキサゾリウム  ３−スルファートのような１,２−オキサゾリウム化合物、または２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチルイソキサゾリウム過塩素酸塩、または２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１,２−ジヒドロキノリンのようなアシルアミノ化合物、またはプロパンホスホニックアンヒドリド（propanephosphonic anhydride)、またはクロロギ酸イソブチル、またはビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスホリルクロリド、またはベンゾトリアゾリルオキシトリ（ジメチルアミノ）ホスホニウム  ヘキサフルオロホスファート（benzotriazolyloxytri(dimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate)、またはＯ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ）、２−（２−オキソ−１−（２Ｈ）−ピリジル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム  テトラフルオロボラート(ＴＰＴＵ)またはＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロフォスファート(ＨＡＴＵ)、または１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、またはベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム  ヘキサフルオロホスファート（ＢＯＰ）、またはこの混合物、または塩基とこれらの混合物が挙げられる。
【００４７】
塩基の例としては、たとえば、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウム、または重炭酸ナトリウム若しくは重炭酸カリウムのようなアルカリ金属の炭酸塩、または、トリアルキルアミン、たとえば、トリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、４−ジメチルアミノピリジンまたはジイソプロピルエチルアミンのような有機塩基が挙げられる。
【００４８】
縮合は、塩基、特にジイソプロピルエチルアミンの存在下で、ＨＡＴＵと共にあるいは、塩基、特にトリエチルアミンの存在下でＥＤＣおよびＨＯＢｔと共に行うのが好ましい。
【００４９】
不活性な溶媒の例には、ジクロロメタンまたはトリクロロメタンのようなハロゲン化炭化水素、ベンゼンのような炭化水素、またはニトロメタン、ジオキサン、ジメチルホルムアミドまたはアセトニトリルが挙げられる。同様に、溶媒の混合物を使用することも可能である。特に好ましいのは、ジメチルホルムアミドである。
【００５０】
方法［Ａ］および［Ｂ］の第二段階での酸との反応は、大気圧下で０℃から４０℃までの温度範囲で行うのが好ましい。
【００５１】
ここで適切な酸は、ジオキサン中の塩化水素、酢酸中の臭化水素またはメチレンクロリド中のトリフルオロ酢酸が挙げられる。
【００５２】
方法［Ｂ］の第二段階での水素化分解は、通例、溶媒中で水素およびパラジウム・活性炭の存在下、好ましくは、大気圧下で０℃から４０℃までの温度範囲で行われる。
【００５３】
溶媒の例には、水および氷酢酸と混合する、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノールまたはイソプロパノールのようなアルコール類が（エタノール、水および氷酢酸の混合物が優先される）挙げられる。
【００５４】
式（ＩＩＩ）の化合物は公知であるか、あるいは公知の方法に準じて製造することができる。
【００５５】
式（ＩＩ）の化合物は公知であるか、あるいは式：
【化３４】
2009501173.tif 000035
（式中、Ｒ２、Ｒ７およびＲ２６は、上記に示される意味を有する）の化合物をジ（ｔｅｒｔ−ブチル）ジカルボナート(di(tert-butyl)dicarbonate)と、塩基の存在下で反応させることによって製造することができる。
【００５６】
この反応は、通例、溶媒中、好ましくは大気圧下、０℃から４０℃までの温度範囲で行う。
【００５７】
塩基の例には、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムのようなアルカリ金属の水酸化物、または炭酸セシウム、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムのようなアルカリ金属炭酸塩、またはＤＢＵ、トリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンのような他の塩基類が挙げられる（水酸化ナトリウムまたは炭酸ナトリウムが優先される）。
【００５８】
溶媒の例には、メチレンクロリドまたは１,２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素、メタノール、エタノールまたはイソプロパノールのようなアルコール類、または水が挙げられる。
【００５９】
この反応は、水の中で水酸化ナトリウムと共に、あるいはメタノール中で炭酸ナトリウムと共に行われるのが好ましい。
【００６０】
式（Ｖ）の化合物は公知であるか、あるいは式：
【化３５】
2009501173.tif 000036
（式中、Ｒ２、Ｒ７およびＲ２６は、上記に示される意味を有し、そして、
Ｒ２７は、ベンジル、メチルまたはエチルを表す）
の化合物を酸と反応させるか、あるいは、方法［Ｂ］の第二段階で述べられたような水素化分解によって反応させ、必要に応じて、続いて塩基と反応させ、メチルまたはエチルエステルを加水分解することによって製造することができる。
【００６１】
加水分解は、たとえば、式（ＶＩ）の化合物の反応に述べられたように行い、式（ＩＶ）の化合物を生じせしめる。
【００６２】
式（ＩＶ）の化合物は、公知であるか、あるいは、式（ＶＩ）の化合物のベンジル、メチルまたはエチルエステルを加水分解することによって製造することができる。
【００６３】
この反応は、通例、好ましくは大気圧下、０℃から４０℃までの温度範囲で、塩基の存在下、溶媒中で行われる。
【００６４】
塩基の例には、水酸化リチウム、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムのようなアルカリ金属水酸化物が挙げられる（水酸化リチウムが優先される）。
【００６５】
溶媒の例には、ジクロロメタンまたはトリクロロメタンのようなハロゲン化炭化水素類、テトラヒドロフランまたはジオキサンのようなエーテル類、メタノール、エタノール、またはイソプロパノールのようなアルコール類、またはジメチルホルムアミドが挙げられる。この溶媒類を混合して使用するか、またはこの溶媒類と水との混合物を使用することも同様に可能である。テトラヒドロフランまたはメタノールと水の混合物が特に好ましい。
【００６６】
式（ＶＩ）の化合物は公知であるか、あるいは式：
【化３６】
2009501173.tif 000037
（式中、Ｒ２、Ｒ７、Ｒ２６およびＲ２７は、上記に示される意味を有する）
の化合物を、第一段階で方法［Ａ］および［Ｂ］の第二段階で述べられたように酸と、そして第二段階で塩基と反応せしめることによって製造することができる。
【００６７】
第二段階における塩基との反応は、通例、溶媒中、好ましくは、大気圧下、０℃から４０℃までの温度範囲で行われる。
【００６８】
塩基の例には、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムのようなアルカリ金属水酸化物、または炭酸セシウム、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムのようなアルカリ金属炭酸塩、またはＤＢＵ、トリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンのような他の塩基類が挙げられる（トリエチルアミンが優先される）。
【００６９】
溶媒の例には、クロロホルム、メチレンクロリドまたは１,２−ジクロロエタン、またはテトラヒドロフランのようなハロゲン化炭化水素類、またはこの溶媒類の混合物が挙げられる（メチレンクロリドまたはテトラヒドロフランが優先される）。
【００７０】
式（ＶＩＩ）の化合物は公知であるか、あるいは式：
【化３７】
2009501173.tif 000038
（式中、Ｒ２、Ｒ７、Ｒ２６およびＲ２７は、上記に示される意味を有する）
の化合物を方法［Ａ］および［Ｂ］の第一段階で述べられたように脱水剤の存在下でペンタフルオロフェノールと反応させることによって製造することができる。
【００７１】
この反応は、大気圧下、−４０℃から４０℃までの温度範囲でジクロロメタン中でＤＭＡＰおよびＥＤＣと共に行うのが好ましい。
【００７２】
式（ＶＩＩＩ）の化合物は公知であるか、あるいは式：
【化３８】
2009501173.tif 000039
（式中、Ｒ２、Ｒ７、Ｒ２６およびＲ２７は、上記に示される意味を有する）
の化合物をフッ化物、特に、テトラブチルアンモニウムフルオリドと反応させることによって、製造することができる。
【００７３】
この反応は、通例、好ましくは、大気圧下、−１０℃から３０℃までの温度範囲で溶媒中で行われる。
【００７４】
不活性溶媒の例には、ジクロロメタンのようなハロゲン化炭化水素類、またはベンゼンまたはトルエンのような炭化水素類、またはテトラヒドロフランまたはジオキサンのようなエーテル類、またはジメチルホルムアミドが挙げられる。この溶媒類を混合して使用することも同様に可能である。テトラヒドロフランおよびジメチルホルムアミドが好ましい溶媒である。
【００７５】
式（ＩＸ）の化合物は公知であるか、あるいは式：
【化３９】
2009501173.tif 000040
（式中、Ｒ２、Ｒ２６およびＲ２７は、上記に示される意味を有する）
の化合物を式：
【化４０】
2009501173.tif 000041
（式中、Ｒ７は、上記に示される意味を有する）
の化合物と、方法［Ａ］および［Ｂ］の第一段階で述べられたような脱水剤の存在下で、反応させることによって製造することができる。
【００７６】
式（Ｘ）の化合物は公知であるか、あるいは実施例部分で述べられた方法に準じて製造することができる。
【００７７】
式（ＸＩ）の化合物は、公知であるか、あるいは公知の方法に準じて製造することができる。
【００７８】
本発明化合物は、予測できなかった有用な範囲の薬理学的かつ薬物動態学的な効果を示す。
【００７９】
それ故、これらはヒトおよび動物の疾患の処置および／または予防のための薬剤として使用するのに適切である。
【００８０】
本発明化合物は、その薬理学的特性のため、感染性疾患、特に細菌感染症の処置および／または予防のために、単独あるいは他の活性成分と組み合わせて使用することができる。
【００８１】
たとえば、次の病原菌あるいは次の病原菌の混合物：
たとえば、スタフィロコッカス属（（ブドウ球菌属：ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）（スタフィロコッカス・アウレウス（黄色ブドウ球菌：Ｓｔａｐｈ.ａｕｒｅｕｓ）、スタフィロコッカス・エピデルミディス（表皮ブドウ球菌：Ｓｔａｐｈ.ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ））およびストレプトコッカス属（（連鎖球菌属：ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）（ストレプトコッカス・アガラクティー（Ｓｔｒｅｐｔ.ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、ストレプトコッカス・ファエカリス（糞便連鎖球菌：Ｓｔｒｅｐｔ.ｆａｅｃａｌｉｓ）、ストレプトコッカス・ニューモニアエ（肺炎連鎖球菌：Ｓｔｒｅｐｔ.ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ピオジェネス（化膿性連鎖球菌：Ｓｔｒｅｐｔ.ｐｙｏｇｅｎｅｓ））であるグラム陽性球菌（ｇｒａｍ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｃｏｃｃｉ）；たとえば、エシェリキア・コーリ（大腸菌：Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）、ヘモフィルス・インフルエンゼ（インフルエンザ菌：Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、シトロバクター属（Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ）（シトロバクター・フレウンデー（Ｃｉｔｒｏｂ.ｆｒｅｕｎｄｉｉ）、シトロバクター・デヴェルニス（Ｃｉｔｒｏｂ.ｄｉｖｅｒｎｉｓ））、サルモネラ菌属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）および赤痢菌属（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）である腸内細菌科（ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）のようなグラム陰性球菌（ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｃｏｃｃｉ）（ナイセリア・ゴノッロエアエ（ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ：淋菌））およびグラム陰性桿菌（ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｒｏｄｓ）；また、クレブシエラ属（ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｓ）（クレブシエラ・ニューモニアエ（肺炎桿菌：Ｋｌｅｂｓ.ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、クレブシエラ・オキシトシ（Ｋｌｅｂｓ.ｏｘｙｔｏｃｙ））、エンテロバクター（腸内細菌属：Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）（エンテロバクター・エロゲネス（Ｅｎｔ.ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）、エンテロバクター・アグロメランス（Ｅｎｔ.ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ））、ハフニア属（Ｈａｆｎｉａ）、セラチア属（Ｓｅｒｒａｔｉａ）（セラチア・マルセッセンス（Ｓｅｒｒ.ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ））、プロテウス属（Ｐｒｏｔｅｕｓ）（プロテウス・ミラビリス（Ｐｒ.ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、プロテウス・レットゲリ（Ｐｒ.ｒｅｔｔｇｅｒｉ）、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒ.ｖｕｌｇａｒｉｓ））、プロビデンシア属（Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ）、エルジニア属（Ｙｅｒｓｉｎｉａ）、およびアシネトバクター属（ｇｅｎｕｓ  Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）によって、引き起こされる局所および／または全身性の疾患を処置および／または予防することが可能である。抗菌範囲には、また、シュードモナス属（ｇｅｎｕｓ  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）（シュードモナス・アエルギノーザ（緑膿菌：Ｐｓ.ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、シュードモナス・マルトフィリア（Ｐｓ.ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ））および、たとえば、ペプトコッカス属（ｇｅｎｕｓ Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス属（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）を代表するバクテロイデス・フラジリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｆｒａｇｉｌｉｓ）のような厳密な意味��の嫌気性菌、およびクロストリジウム属（ｇｅｎｕｓ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）；また、マイコプラズマ属（ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｓ）（マイコプラズマ・ニューモニアエ（Ｍ.ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、マイコプラズマ・ホミニス（Ｍ.ｈｏｍｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ウレアリチカム（Ｍ.ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ））および,たとえば、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）であるマイコバクテリア（ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ）が含まれる。
【００８２】
上記の病原菌の列挙は、単なる例示にすぎないものあって、決して限定的に解釈されない。言及した病原菌もしくは、その混合感染によって引き起こされる疾患であって、局所的に使用することができる、本発明製剤によって、予防、改善、または処置することができる疾患について、言及することが可能な例は、たとえば、敗血性感染症、骨・関節感染症、皮膚感染症、術後創傷感染症、膿瘍、蜂窩織炎（phlegmon)、創傷感染症、熱傷感染(infected burns)、熱傷創（burn wounds)、口腔領域感染症（infections in the oral region)、歯科手術後感染症、敗血性関節炎、乳腺炎、扁桃炎、生殖器感染症および眼感染症のようなヒトにおける感染症である。
【００８３】
ヒトに加えて、他の種の細菌性感染症も、処置することができる。次の例が言及できる。
ブタ：大腸菌性下痢（coli diarrhea）、腸毒血症、敗血症、赤痢、サルモネラ症、子宮炎−乳房炎−乳汁分泌不全症候群（metritis-mastitis-agalactiae syndrome）、乳房炎；
反芻動物（畜牛、ヒツジ、ヤギ）：下痢、敗血症、気管支肺炎、サルモネラ症、パスツレラ病、マイコプラズマ病、生殖器感染症；
馬：気管支肺炎、関節症（joint ill）、産褥感染（puerperal and postpuerperal infections）、サルモネラ病；
イヌおよびネコ：気管支肺炎、下痢、皮膚炎、中耳炎、尿路感染症、前立腺炎；
家禽（ニワトリ、七面鳥、ウズラ、ハト、鑑賞用鳥およびその他）：マイコプラズマ病、大腸菌感染症、慢性気管疾患、サルモネラ症、パスツレラ病、オウム病。
【００８４】
同様に、営利・商業的な魚および観賞魚を育てる際および管理する際の、細菌性の病気を処置することが可能であり、この場合、抗菌スペクトルは上記に述べた細菌を超えて、更に、たとえば、パスツレラ属（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ）、ブルセラ属（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）、カンピロバクター属（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）、リステリア属（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）、エリジペロスリス属（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｓ）、コリネバクテリア（ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉａ）、ボレリア属（Ｂｏｒｅｌｌｉａ）、トレポネーマ属（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ）、ノカルジア属（Ｎｏｃａｒｄｉａ）、リケッチエ属（Ｒｉｋｅｔｔｓｉｅ）、エルジニア属（Ｙｅｒｓｉｎｉａ）ような他の細菌にまで拡張される。
【００８５】
本発明は、更に、疾患、好ましくは細菌性疾患、特に細菌性感染症の処置および／または予防のための本発明化合物の使用に関する。
【００８６】
本発明は、更に、疾患、特に上記に言及した疾患の処置および／または予防のための本発明化合物の使用に関する。
【００８７】
本発明は、更に、疾患、特に上記に言及した疾患を処置および／または予防する薬剤を製造するための本発明化合物の使用に関する。
【００８８】
本発明は、更に、抗菌的に有効な量の本発明化合物を用いる、疾患、特に上記に言及した疾患の処置および／または予防方法に関する。
【００８９】
本発明化合物は、全身および／または局所に作用することができる。この目的のために、それは、たとえば、経口、非経口、肺、鼻内、舌下、舌、口内、直腸、皮膚、経皮、結膜、または耳のような適切な方法で、またはインプラントまたはステントとして投与することができる。
【００９０】
本発明化合物は、こうした投与ルートに適切な投与形態で投与することができる。
【００９１】
たとえば、錠剤（コーティングを施していない錠剤、または、たとえば胃液に耐えるか、または遅延溶解であるか、不溶性であるか、および本発明化合物の放出を制御するコーティングを施した錠剤）、口腔で急速に崩壊する錠剤またはフィルム・ウェハ(wafers)、フィルム／凍結乾燥物(lyophilisates)、カプセル剤（たとえば、ハードまたはソフトゼラチンカプセル）、糖衣錠、顆粒剤、ペレット、散剤、乳剤、懸濁剤、エアゾール剤または溶液のような、先行技術に従って機能を果たし、本発明化合物を急速および／または改変された方法で送達し、そして結晶および／または非晶および／または溶解形で本発明化合物を含んでいる投与形態が経口投与に適切である。
【００９２】
非経口投与は、吸収ステップを回避するか（たとえば、静脈内、動脈内、心臓内、髄腔内、または腰椎内）、または吸収を介在（たとえば、筋肉内、皮下、皮内、経皮的または腹腔内）しておこなうことができる。非経口投与に適した投与形態には、とりわけ、溶液、懸濁液、乳化液、凍結乾燥剤、または無菌散剤の形態での注射および点滴製剤がある。
【００９３】
他の投与ルートでは、たとえば、吸入医薬形態（とりわけ、粉末吸入器、ネブライザ）、点鼻用滴剤、液剤、スプレー；舌、舌下、または口内へ投与する錠剤、フィルム／ウェハまたはカプセル剤、坐剤、耳または眼用製剤、膣用カプセル、水溶性懸濁液（ローション、振蕩剤（shaking mixtures)）、脂肪親和性懸濁液（lipophilic suspensions)、軟膏、クリーム、経皮治療系（たとえば、貼付剤）、ミルク、ペースト、発泡剤、ダスティングパウダー（dusting powders）、インプラントまたはステントが適切である。
【００９４】
本発明化合物は、上述した投与形態に変換することができる。これは、不活性な非毒性の薬学的に好適な賦形剤と混和することによって、それ自体公知の方法で行うことができる。こうした賦形剤には、とりわけ、担体（たとえば、微結晶セルロース、乳糖、マンニトール）、溶媒（たとえば、液体ポリエチレングリコール）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（たとえば、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート)、結合剤（たとえば、ポリビニルピロリドン）、合成および天然高分子(たとえば、アルブミン）、安定化剤（たとえば、アスコルビン酸のような抗酸化剤）、着色剤（たとえば、酸化鉄のような無機色素）および矯味および／または矯臭剤が含まれる。
【００９５】
本発明は、更に、通例、一つまたはそれ以上の不活性な、非毒性の薬学的に適切な賦形剤と一緒に、本発明の少なくとも一つの化合物を含んでなる薬剤に関し、そして上記に言及した目的のためのその使用に関する。
【００９６】
一般的に、有効な結果を達成するためには、２４時間につき、体重あたり約５〜２５０ｍｇ／ｋｇまでの投与量を非経口的に投与することが、有利であることが立証されている。経口投与の量は、２４時間につき、体重あたり、約５〜１００ｍｇ／ｋｇである。
【００９７】
しかしながら、適切な場合には、特に、体重、投与ルート、活性化合物に対するそれぞれ個々の応答、製剤の特質および投与がなされる時間または間隔いかんによって、上述した量を逸脱することも必要であり得る。したがって、上述の最小量より少ない量で済ますことで十分である場合もあり得ることであり、一方、他の場合では、上述の上限を超えなければならないこともあり得る。より多い量を投与する場合は、それらの量を一日にわたり、複数回のそれぞれ個々の投与量に分割することが望ましいといえる。
【００９８】
以下の試験および実施例におけるパーセンテージデータは、特に述べない限り、重量によるパーセンテージであり、部（パート）は重量による部である。溶媒比、希釈比、および液体／液体溶液（liquid／liquid solutions）の濃度データは、それぞれの場合、容積（volume）に基づくものである。
【実施例】
【００９９】
実施例
使用される略語：
【表１】
2009501173.tif 000042
【表２】
2009501173.tif 000043
【０１００】
ＬＣ−ＭＳおよびＨＰＬＣ方法：
方法１（ＬＣ−ＭＳ）：機器：HPLC Agilent series 1100付Micromass Quattro LCZ; カラム：Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶出剤Ａ：水 １ｌ＋５０％ギ酸 ０.５ｍｌ、溶出剤Ｂ：アセトニトリル １ｌ＋５０％ギ酸 ０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分 ９０％Ａ→２.５分 ３０％Ａ→３.０分 ５％Ａ→４.５分 ５％Ａ;流速：０.０分 １ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分 ２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２０８−４００ｎｍ。
【０１０１】
方法２（ＬＣ−ＭＳ）：MS 機器型: Micromass ZQ; HPLC 機器型: Waters Alliance 2795; カラム: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶出剤Ａ：水 １ｌ＋５０％ギ酸 ０.５ｍｌ、溶出剤Ｂ：アセトニトリル １ｌ＋５０％ギ酸 ０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分 ９０％Ａ→２.５分 ３０％Ａ→３.０分 ５％Ａ→４.５分 ５％Ａ；流速：０.０分 １ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分 ２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０２】
方法３（ＬＣ−ＭＳ）：MS 機器型: Micromass ZQ; HPLC 機器型: HP1100 series ; ＵＶ ＤＡＤ;カラム: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶出剤Ａ：水 １ｌ＋５０％ギ酸 ０.５ｍｌ、溶出剤Ｂ：アセトニトリル １ｌ＋５０％ギ酸 ０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分 ９０％Ａ→２.５分 ３０％Ａ→３.０分 ５％Ａ→４.５分 ５％Ａ；流速：０.０分 １ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分 ２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０３】
方法４（ＬＣ−ＭＳ）：機器：HPLC Agilent series 1100付Micromass Platform LCZ ; カラム：Thermo Hypersil GOLD 3μ ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶出剤Ａ：水 １ｌ＋５０％ギ酸 ０.５ｍｌ、溶出剤Ｂ：アセトニトリル １ｌ＋５０％ギ酸 ０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分 １００％Ａ→０.２分 １００％Ａ→２.９分 ３０％Ａ→３.１分 １０％Ａ→５.５分 １０％Ａ；流速：０.８ｍｌ／分：オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０４】
出発物質
実施例１Ａ
４−（３−ブロモフェニル）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ブタン酸
【化４１】
2009501173.tif 000044
６２ｍｌの１Ｎ水酸化ナトリウム溶液を、１００ｍｌの水の中の３−アミノ−４−（３−ブロモフェニル）ブタン酸８.０ｇ（３１.１ｍｍｏｌ）の溶液に加える。撹拌しながら、１００ｍｌのメタノール中の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル２０ｇ（９３ｍｍｏｌ）の溶液を室温でこれに加え、次にこの混合物を２時間撹拌する。ｐＨを０.１Ｎ塩酸を加えることによって３に調整し、次にこの混合物を酢酸エチルで２回抽出する。有機相を集め、硫酸マグネシウムで乾燥し、そして真空下で蒸発・乾燥する。この残存している固形物は更に精製することなく使用する。
収量: 7.0 g (理論量の56%)
LC-MS (方法 3): Rｔ = 2.55 分
MS (EI): m／z = 359 (M+H)＋
【０１０５】
実施例２Ａ
メチル  ４−（３−ブロモフェニル）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ブタノアート
【化４２】
2009501173.tif 000045
ＥＤＣ ５.６８ｇ（３０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ０.７１ｇ（５.２３ｍｍｏｌ）を１００ｍｌのメタノール中の４−（３−ブロモフェニル）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ブタン酸（実施例１Ａ）７.１ｇ（１７.４ｍｍｏｌ）の溶液に０℃に冷却して、加える。この混合物を室温までゆっくり暖め、室温で１２時間撹拌する。この溶液を真空中で濃縮し、次にこの残渣を酢酸エチル中に加える。有機相を飽和重炭酸ナトリウムおよび塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で蒸発させる。残存する固形物をアセトニトリルで撹拌し、ろ過によって回収し、高真空下で乾燥する。
収量: 4.0 g (理論量の60%)
LC-MS (方法 3): Rｔ = 2.70 分
MS (EI): m/z = 373 (M+H)＋
【０１０６】
実施例３Ａ
メチル  ４−（４'−（ベンジルオキシ）−３'−｛（２Ｓ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−オキソ−３−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］プロピル｝ビフェニル−３−イル）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ブタノアート
【化４３】
2009501173.tif 000046
１３ｍｌの１−メチル−２−ピロリドンおよび１ｍｌの水中のメチル  ４−（３−ブロモフェニル）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ブタノアート（実施例２Ａ）１.０ｇ（２.６６ｍｍｏｌ）および２−（トリメチルシリル）エチル−２−（ベンジルオキシ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−５−（４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル）−Ｌ−フェニルアラニナート２.５１ｇ（３.０ｍｍｏｌ）（ＷＯ ０３／１０６４８０の実施例８４Ａ）の溶液を不活性化し、アルゴンで飽和させる。続いて、ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンパラジウム（ＩＩ）クロリド  （ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ））０.２ｇ（０.２７ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム１.７ｇ（５.３ｍｍｏｌ）を加える。穏やかな流れのアルゴンを、反応混合物上を通過させて、この反応混合物を５０℃で６時間撹拌する。この混合物を冷却し、酢酸エチル中に加え、次に数回水で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、次に溶媒を真空下で濃縮する。この残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シクロヘキサン：酢酸エチル ２０：１→１０：１）によって精製する。
収量: 1.84 g (理論量の83%).
LC-MS (方法 3): Rｔ = 3.72 分
MS (EI): m／z = 797 (M+H)＋
【０１０７】
実施例４Ａ
メチル  ３−アミノ−４−（４'−（ベンジルオキシ）−３'−｛（２Ｓ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−オキソ−３−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］プロピル｝ビフェニル−３−イル）ブタノアート・塩酸塩
【化４４】
2009501173.tif 000047
ジオキサン中の４Ｍ 塩化水素溶液２０ｍｌを、０℃に冷却して、２０ｍｌの無水ジオキサン中の実施例３Ａからの化合物１.８４ｇ（２.２２ｍｍｏｌ）の溶液に滴下する。室温で３時間撹拌した後、この溶媒を真空下で蒸発させ、数回ジクロロメタンで共蒸発させ、次に高真空下で一定重量まで乾燥する。この粗生成物は、更に精製することなく反応させる。
収量: 定量的
LC-MS (方法 3): Rｔ = 2.38 分. 
MS (EI): m／z = 733 (M-HCl+H)＋
【０１０８】
実施例５Ａ
メチル  ４−（４'−（ベンジルオキシ）−３'−｛（２Ｓ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−オキソ−３−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］プロピル｝ビフェニル−３−イル）−３−（｛（２Ｓ）−５−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンタノイル｝アミノ）ブタノアート
【化４５】
2009501173.tif 000048
ＨＡＴＵ ０.９３ｇ（２.４４ｍｍｏｌ）およびヒュニグの塩基(Huenig's base)１.０ｍｌ（６.２ｍｍｏｌ）を、２０ｍｌの無水ＤＭＦ中の実施例４Ａからの化合物１.６３ｇ（２.２２ｍｍｏｌ）およびＮ５−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−オルニチン０.９０ｇ（２.４４ｍｍｏｌ）の溶液に０℃（浴温度）で加える。この温度で３０分間撹拌した後、更に０.３ｍｌ（１.５ｍｍｏｌ）のヒュニグの塩基を加え、次に温度を室温に上げる。終夜反応させた後、すべてのものを真空中で濃縮し、乾燥し、次にこの残渣をジクロロメタン中に加える。有機相を水および飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮する。この粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（溶出剤：ジクロロメタン／酢酸エチル ２０：１→５：１）によって精製する。
収量: 1.80 g (理論量の78%)
LC-MS (方法 1): Rｔ = 3.42 分
MS (EI): m／z = 1045 (M+H)＋
【０１０９】
実施例６Ａ
（２Ｓ）−３−［４−（ベンジルオキシ）−３'−（２−｛［（２Ｓ）−５−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−２−（カルボキシアミノ）ペンタノイル］アミノ｝−４−メトキシ−４−オキソブチル）ビフェニル−３−イル］−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸
【化４６】
2009501173.tif 000049
ＴＨＦ中の１Ｎ テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド溶液３.４４ｍｌを、３０ｍｌの無水ＤＭＦ中の実施例５Ａからの化合物１.８０ｇ（１.７２ｍｍｏｌ）溶液に滴下する。室温で１時間後、この混合物を０℃に冷却し、次に氷水と１Ｎ塩酸の数滴を加える。この混合物をすぐに酢酸エチルで抽出する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下で濃縮し、高真空下で乾燥する。この粗生成物は、さらに精製することなく反応させる。
収量: 定量的
LC-MS (方法 3): Rｔ = 3.06 分.
MS (EI): m／z = 945 (M+H)＋
【０１１０】
実施例７Ａ
メチル  ４−｛４'−（ベンジルオキシ）−３'−［（２Ｓ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−オキソ−３−（ペンタフルオロフェノキシ）プロピル］ビフェニル−３−イル｝−３−（｛（２Ｓ）−５−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンタノイル｝アミノ）ブタノアート
【化４７】
2009501173.tif 000050
５５ｍｌの無水ジクロロメタン中の実施例６Ａからの化合物１.６３ｇ（１.７２ｍｍｏｌ）の溶液を−２５℃に冷却し、そして撹拌しながら、ペンタフルオロフェニル０.９５ｇ（５.２ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ ０.０２１ｇ（０.１７ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ ０.４３ｇ（２.２４ｍｍｏｌ）を加える。温度をゆっくり室温まで上げ、次にこの混合物を終夜撹拌する。この混合物を真空下で濃縮し、次にこの粗生成物を高真空下で一定重量になるまで乾燥する。
収量: 定量的
LC-MS (方法 2): Rｔ = 3.24 分.
MS (EI): m／z = 1111 (M+H)＋
【０１１１】
実施例８Ａ
メチル  ３−［（（２Ｓ）−２−アミノ−５−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝ペンタノイル）アミノ］−４−｛４'−（ベンジルオキシ）−３'−［（２Ｓ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−オキソ−３−（ペンタフルオロフェノキシ）プロピル］ビフェニル−３−イル｝ブタノアート・塩酸塩
【化４８】
2009501173.tif 000051
ジオキサン中の４Ｎ塩化水素溶液２６ｍｌを、０℃で撹拌しながら、１０ｍｌのジオキサン中の実施例７Ａからの化合物１.９１ｇ（１.７２ｍｍｏｌ）の溶液に加える。この混合物を０℃で４５分間撹拌し、温度を室温まで上げ、次にすべてのものを真空下で濃縮・乾燥する。高真空下で一定の重量になるまで乾燥後、この生成物を得る。
収量: 定量的
LC-MS (方法 2): Rｔ = 2.32 分.
MS (EI): m／z = 1011 (M-HCl+H)＋
【０１１２】
実施例９Ａ
メチル  ［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１７−（ベンジルオキシ）−１４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−１１−（３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝プロピル）−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセタート
【化４９】
2009501173.tif 000052
２００ｍｌのジクロロメタン中のトリエチルアミン４.８ｍｌ（３４.４ｍｍｏｌ）の溶液を、６００ｍｌの無水ジクロロメタン中の実施例８Ａからの化合物１.８ｇ（１.７２ｍｍｏｌ）の溶液に２０分にわたって、激しく撹拌しながら滴下する。撹拌は、終夜継続し、そしてすべてのものを真空下（浴温度≦４０℃）で蒸発させる。この残渣をアセトニトリルと共に撹拌し、次に残存する固形物をろ過によって回収し、そして高真空下で一定重量になるまで乾燥する。
収量: 0.71 g (理論量の49%)
LC-MS (方法 2): Rｔ = 3.02 分.
MS (EI): m／z = 827 (M+H)＋
【０１１３】
実施例１０Ａ
メチル  ［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−アミノ−１１−（３−アミノプロピル）−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセタート・ジヒドロアセタート
【化５０】
2009501173.tif 000053
実施例９Ａからの化合物０.６９ｇ（０.８３４ｍｍｏｌ）を、酢酸／水／エタノール（４：１：１）５０ｍｌの混合液に加える。パラジウム・活性炭（１０％）７０ｍｇを加え、続いてこの混合物を大気圧下、室温で２４時間水素添加する。この反応混合物を事前に洗浄したキーゼルグールに通してろ過し、エタノールで洗浄し、次にろ液を真空下ロータリーエバポレーターで濃縮する。この残渣を高真空下で一定の重量になるまで乾燥する。
収量: 定量的
LC-MS (方法 4): Rｔ = 2.30 分.
MS (EI): m／z = 469 (M-2HOAc+H)＋.
１H NMR (400 MHz, D２O): δ = 1.5-1.9 (m, 4H), 2.61 (mｃ, 1H), 2.78 (mｃ, 1H), 2.85-3.2 (m, 4H), 3.56 (mｃ, 1H), 3.64 (s, 3H), 4.38-4.5 (m, 2H), 4.57 (mｃ, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.98 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.31 (t, 1H), 7.36-7.46 (m, 2H)
【０１１４】
実施例１１Ａ
［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１１−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアゾトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］酢酸
【化５１】
2009501173.tif 000054
１Ｎ水酸化ナトリウム溶液５ｍｌを１０ｍｌの水中の実施例１０Ａからの化合物０.５８ｇ（０.９９ｍｍｏｌ）の溶液に加える。撹拌しながら、３.７ｍｌのメタノール中の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル０.６５ｇ（２.９６ｍｍｏｌ）の溶液を室温で加え、次にこの混合物を２時間撹拌する。この混合物を２５ｍｌの水に加え、０.１Ｎ塩酸を用いてｐＨを３に調整し、次にこの混合物を酢酸エチルで３回抽出する。有機相を集め、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下で蒸発・乾燥する。残存する固形物を高真空下で一定の重量になるまで精製する。
収量: 0.46 ｇ (理論量の71%)
LC-MS (方法 1): Rｔ = 2.15 分. 
MS (EI): m／z = 655 (M+H)＋
【０１１５】
実施例１２Ａ
ベンジル  ｛（１Ｓ）−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１−［（｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アミノ]エチル}アミノ)カルボニル]ブチル}カルバマート
【化５２】
2009501173.tif 000055
アルゴン下で、Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−オルニチン３００ｍｇ（０.８２ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル−（２−アミノエチル）カルバマート１７１ｍｇ（１.０６ｍｍｏｌ）を６ｍｌのジメチルホルムアミド中に溶解する。次いで、０℃（氷浴）で、ＥＤＣ ２０４ｍｇ（１.０６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ ３３ｍｇ（０.２５ｍｍｏｌ）を加える。この混合物をゆっくり室温に暖め、次に室温で１２時間撹拌する。この溶液を真空下で濃縮し、この残渣を酢酸エチル中に加える。有機相を飽和重炭酸ナトリウムと塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、次に真空下で蒸発させる。残存する固形物を高真空下で乾燥する。
収量: 392 mg (理論量の94%)
LC-MS (方法 2): Rｔ = 2.36 分
MS (ESI): m／z = 509 (M+H)＋
【０１１６】
実施例１３Ａ
Ｎ５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エチル｝−Ｌ−オルニチンアミド
【化５３】
2009501173.tif 000056
５０ｍｌのエタノール中のベンジル  ｛（１Ｓ）−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１−［（｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エチル｝アミノ）カルボニル］ブチル｝カルバマート（実施例１２Ａ）３９０ｍｇ（０.７７ｍｍｏｌ)の溶液を、パラジウム・活性炭（１０％）４０ｍｇを添加した後、室温で大気圧下、４時間水素添加する。この混合物をキーゼルグールに通してろ過し、次にこの残渣をエタノールで洗浄する。このろ液を真空下で濃縮・乾燥する。この生成物は、更に精製することなく反応させる。
収量: 263 mg (理論量の91%)
MS (ESI): m／z = 375 (M+H)＋; 397 (M+Na)＋.
【０１１７】
実施例１４Ａ
ベンジル  ｔｅｒｔ−ブチル［（２Ｓ）−３−（｛（２Ｓ）−２,５−ビス［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝アミノ）−３−オキソプロパン−１,２−ジイル］ビスカルバマート
【化５４】
2009501173.tif 000057
アルゴン下、Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−アラニン０.１２７ｇ（０.３７ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル｛（４Ｓ）−５−アミノ−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝カルバマート（ＷＯ ０５／０３３１２９からの実施例１４０Ａ）０.１９３ｇ（０.４９ｍｍｏｌ）を６ｍｌのジメチルホルムアミド中に溶解する。次いで０℃（氷浴）で、ＥＤＣ ０.０９３ｇ（０.４９ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ ０.０１５ｇ（０.１１ｍｍｏｌ）を加える。この混合物をゆっくり室温に暖め、室温で１２時間撹拌する。この溶液を真空下で濃縮し、この残渣を酢酸エチル中に加える。有機相を飽和重炭酸ナトリウムおよび塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下で蒸発させる。残存する固形物を分取ＨＰＬＣ(Kromasil、溶出剤 アセトニトリル／０.２５％トリフルオロ酢酸水溶液 ５：９５→９５：５）によって精製する。
収量: 0.126 g (理論量の53%)
LC-MS (方法 1): Rｔ = 2.65 分.
MS (ESI): m／z = 638 (M+H)＋
【０１１８】
実施例１５Ａ
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（２Ｓ）−２−アミノ−３−（｛（２Ｓ）−２,５−ｂｉｓ［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝アミノ）−３−オキソプロピル］カルバマート
【化５５】
2009501173.tif 000058
パラジウム・活性炭（１０％）２０ｍｇを、５０ｍｌのエタノール中の実施例１４Ａからの化合物０.１２２ｇ（０.１９ｍｍｏｌ）の混合物に加え、続いてこの混合物を大気圧下４時間水素添加する。この反応混合物をキーゼルグールに通してろ過し、次にこのろ液を真空下で濃縮し、そして高真空下で乾燥する。この粗生成物は、更に精製することなく反応させる。
収量: 定量的
MS (ESI): m／z = 504 (M+H)＋
【０１１９】
実施例１６Ａ
ベンジル  ｛（４Ｓ）−６−（｛（２Ｓ）−２,５−ビス［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝アミノ）−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバマート
【化５６】
2009501173.tif 000059
アルゴン下で、（３Ｓ）−６−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ヘキサンカルボン酸 (Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998, 8, 1477-1482) ０.１ｇ（０.２６３ｍｍｏｌ）および ｔｅｒｔ−ブチル  ｛（４Ｓ）−５−アミノ−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝カルバマート (ＷＯ ０５／０３３１２９からの実施例１４０Ａ)０.１０８ｇ（０.３４２ｍｍｏｌ）を６ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解する。次いで、０℃（氷浴）で、ＥＤＣ ０.０６６ｇ（０.３４２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ ０.０１１ｇ（０.０７９ｍｍｏｌ）を加える。この混合物をゆっくり室温に暖め、次に室温で１２時間撹拌する。この溶液を真空下で濃縮し、そしてこの残渣を酢酸エチル中に加える。有機相を飽和重炭酸ナトリウムおよび塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で蒸発させる。この残存する固形物を高真空下で一定重量になるまで乾燥する。
収量: 0.127 g (理論量の71%)
LC-MS (方法 1): Rｔ = 2.36 分.
MS (ESI): m／z = 680 (M+H)＋
【０１２０】
実施例１７Ａ
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛（１Ｓ）−４−アミノ−１−［２−（｛（２Ｓ）−２,５−ビス［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝アミノ）−２−オキソエチル］ブチル｝カルバマート
【化５７】
2009501173.tif 000060
パラジウム・活性炭（１０％）２０ｍｇを、１０ｍｌのエタノール中の実施例１６Ａからの化合物０.１２７ｇ（０.１９ｍｍｏｌ）の混合物に加え、続いてこの混合物を大気圧下１２時間水素添加する。この反応混合物をキーゼルグールに通してろ過し、次にこのろ液を真空下で濃縮し、そして高真空下で乾燥する。この粗生成物は、更に精製することなく反応させる。
収量:定量的.
MS (ESI): m／z = 546 (M+H)＋
【０１２１】
実施例１８Ａ
ベンジル  （（１Ｓ,７Ｓ,１２Ｓ）−７,１２−ビス［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−１９,１９−ジメチル−２,９,１７−トリオキソ−１８−オキサ−３,１０,１６−トリアザイコサ−１−イル）カルバマート
【化５８】
2009501173.tif 000061
アルゴン下で、Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−オルニチン４４ｍｇ（０.１２ｍｍｏｌ）および実施例１７Ａからの化合物８５ｍｇ（０.１６ｍｍｏｌ）を８ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解する。次いで０℃（氷浴）で、ＥＤＣ ３０ｍｇ（０.１６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ ４.９ｍｇ（０.０３６ｍｍｏｌ）を加える。この混合物をゆっくり室温に暖め、次に室温で１２時間撹拌する。この溶液を真空下で濃縮し、そしてこの残渣を酢酸エチル中に加える。有機相を飽和重炭酸ナトリウムおよび塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で蒸発させる。この残存する固形物を高真空下で乾燥する。
収量: 91 mg (理論量の85%)
LC-MS (方法 1): Rｔ = 2.35 分.
MS (ESI): m／z = 894 (M+H)＋
【０１２２】
実施例１９Ａ
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛（４Ｓ,１０Ｓ,１５Ｓ）−４−アミノ−１０,１５−ｂｉｓ［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２２,２２−ジメチル−５,１２,２０−トリオキソ−２１−オキサ−６,１３,１９−トリアザトリコサ−１−イル｝カルバマート
【化５９】
2009501173.tif 000062
１０ｍｌのエタノール中の実施例１８Ａからの化合物９１ｍｇ（０.１０ｍｍｏｌ)の溶液を、パラジウム・活性炭（１０％）１０ｍｇを添加した後、室温で大気圧下、１２時間水素添加する。この混合物をキーゼルグールに通してろ過し、次にこの残渣をエタノールで洗浄する。このろ液を真空下で濃縮・乾燥する。この生成物は、更に精製することなく反応させる。
収量：定量的
MS (ESI): m／z = 760 (M+H)＋.
【０１２３】
実施例２０Ａ
ベンジル  ｛（１Ｓ）−１−［２−（｛（２Ｓ）−２,５−ビス［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ブチル｝カルバマート
【化６０】
2009501173.tif 000063
アルゴン下で、（３Ｓ）−３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ヘキサンカルボン酸 (J. Med. Chem. 2002, 45, 4246-4253) ０.１ｇ（０.２６ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル｛（４Ｓ）−５−アミノ−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝カルバマート (ＷＯ ０５／０３３１２９からの実施例１４０Ａ)０.１１ｇ（０.３４ｍｍｏｌ）を６ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解する。次いで、０℃（氷浴）で、ＥＤＣ ０.０６５ｇ（０.３４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ ０.０１１ｇ（０.０７９ｍｍｏｌ）を加える。この混合物をゆっくり室温に暖め、次に室温で１２時間撹拌する。この溶液を真空下で濃縮し、そしてこの残渣を酢酸エチル中に加える。有機相を飽和重炭酸ナトリウムおよび塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で蒸発させる。この残存する固形物を高真空下で一定重量になるまで乾燥する。
収量: 0.146 g (理論量の82%)
LC-MS (方法 2): Rｔ = 2.5 分.
MS (ESI): m／z = 680 (M+H)＋
【０１２４】
実施例２１Ａ
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（４Ｓ）−４−アミノ−６−（｛（２Ｓ）−２,５−ビス［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝アミノ）−６−オキソヘキシル］カルバマート
【化６１】
2009501173.tif 000064
パラジウム・活性炭（１０％）２２ｍｇを、１０ｍｌのエタノール中の実施例２０Ａからの化合物０.１４６ｇ（０.２２ｍｍｏｌ)の混合物に加え、続いてこの混合物に大気圧下、１２時間水素添加する。この反応混合物をキーゼルグールに通してろ過し、ろ液を真空下で濃縮し、次に高真空下で乾燥する。この粗生成物は更に精製することなく反応させる。
収量: 定量的
MS (ESI): m／z = 546 (M+H)＋
【０１２５】
実施例２２Ａ
ベンジル  ｛（１Ｓ）−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１−［（｛（４Ｓ）−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−ヒドロキシペンチル｝アミノ）カルボニル］ブチル｝カルバマート
【化６２】
2009501173.tif 000065
アルゴン下で、Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−オルニチン０.１５５ｇ（０.４２ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ）−４−アミノ−１−（ヒドロキシメチル）ブチル］カルバマート（ＷＯ ０５／０３３１２９からの実施例１７２Ａ）０.１２ｇ（０.５５ｍｍｏｌ）を６ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解する。次いで、０℃（氷浴）で、ＥＤＣ ０.１０５ｇ（０.５５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ ０.０１７ｇ（０.１３ｍｍｏｌ）を加える。この混合物をゆっくり室温に暖め、次に室温で１２時間撹拌する。この溶液を真空下で濃縮し、そしてこの残渣を酢酸エチル中に加える。有機相を飽和重炭酸ナトリウムおよび塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で蒸発させる。この残存する固形物を分取ＨＰＬＣ(Kromasil、溶出剤 アセトニトリル／０.２５％トリフルオロ酢酸水溶液５：９５→９５：５）によって精製する。
収量: 0.164 g (理論量の69%)
LC-MS (方法 2): Rｔ = 2.05 分.
MS (EI): m／z = 567 (M+H)＋
【０１２６】
実施例２３Ａ
Ｎ５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−｛（４Ｓ）−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−ヒドロキシペンチル｝−Ｌ−オルニチンアミド
【化６３】
2009501173.tif 000066
１０ｍｌのエタノール中の実施例２２Ａからの化合物０.１６４ｇ（０.２９ｍｍｏｌ)の混合物にパラジウム・活性炭（１０％）３０ｍｇを加え、続いてこの混合物に大気圧下、１２時間水素添加する。この反応混合物をキーゼルグールに通してろ過し、ろ液を真空下で濃縮し、次に高真空下で乾燥する。この粗生成物は更に精製することなく反応させる。
収量: 0.125 g (定量的)
MS (EI): m／z = 433 (M+H)＋
【０１２７】
実施例２４Ａ
ベンジル  ｛（１Ｓ）−４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−１−［（｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−ヒドロキシプロピル｝アミノ）カルボニル］ブチル｝カルバマート
【化６４】
2009501173.tif 000067
アルゴン下で、Ｎ２,Ｎ５−ビス［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−オルニチン０.２０ｇ（０.５０ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル−（３−アミノ−２−ヒドロキシプロピル）カルバマート０.１２４ｇ（０.６５ｍｍｏｌ）を６ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解する。次いで、０℃（氷浴）で、ＥＤＣ ０.１２４ｇ（０.６５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ ０.０２ｇ（０.１５ｍｍｏｌ）を加える。この混合物をゆっくり室温に暖め、次に室温で１２時間撹拌する。この溶液を真空下で濃縮し、そしてこの残渣を酢酸エチル中に加える。有機相を飽和重炭酸ナトリウムおよび塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で蒸発させる。この残存する固形物を高真空下で一定の重量になるまで乾燥する。
収量: 0.245 g (理論量の86%)
LC-MS (方法 2): Rｔ = 2.15 分.
MS (EI): m／z = 573 (M+H)＋
【０１２８】
実施例２５Ａ
ベンジル  （（４Ｓ）−５−［（３−アミノ−２−ヒドロキシプロピル）アミノ］−４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−５−オキソペンチル）カルバマート・塩酸塩
【化６５】
2009501173.tif 000068
ジオキサン中の４Ｎ 塩化水素溶液６.８ｍｌを、１ｍｌのジオキサン中の実施例２４Ａからの化合物０.２６３ｇ（０.４６ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で加える。室温で２時間後、この反応溶液を真空下で濃縮し、数回ジクロロメタンで共蒸発させる。残存する固形物を高真空下で一定の重量になるまで乾燥する。
収量: 0.205 g (理論量の88%)
LC-MS (方法 2): Rｔ = 1.47 分.
MS (EI): m／z = 473 (M-HCl+H)＋
【０１２９】
実施例２６Ａ
ベンジル  ［３−（｛（２Ｓ）−２,５−ビス［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝アミノ）−３−オキソプロピル］カルバマート
【化６６】
2009501173.tif 000069
アルゴン下で、Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−ベータ−アラニン０.１０ｇ（０.４５ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル  ｛（４Ｓ）−５−アミノ−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝カルバマート(ＷＯ ０５／０３３１２９からの実施例１４０Ａ)０.１８５ｇ（０.５８ｍｍｏｌ）を６ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解する。次いで、０℃（氷浴）で、ＥＤＣ ０.１１２ｇ（０.５８ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ ０.０１８ｇ（０.１３４ｍｍｏｌ）を加える。この混合物をゆっくり室温に暖め、次に室温で１２時間撹拌する。この溶液を真空下で濃縮し、そしてこの残渣を酢酸エチル中に加える。有機相を飽和重炭酸ナトリウムおよび塩化ナトリウム溶液で順に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で濃縮させる。この残存する固形物を高真空下で一定重量になるまで乾燥する。
収量: 0.215 g (理論量の92%)
LC-MS (方法 2): Rｔ = 2.19 分.
MS (EI): m／z = 523 (M+H)＋
【０１３０】
実施例２７Ａ
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛（４Ｓ）−５−［（３−アミノプロパノイル）アミノ］−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝カルバマート
【化６７】
2009501173.tif 000070
パラジウム・活性炭（１０％）４０ｍｇを、１０ｍｌのエタノール中の実施例２６Ａからの化合物０.２１５ｇ（０.４１ｍｍｏｌ)の混合物に加え、続いてこの混合物に大気圧下、１２時間水素添加する。この反応混合物をキーゼルグールに通してろ過し、ろ液を真空下で濃縮し、次に高真空下で乾燥する。この粗生成物は更に精製することなく反応させる。
収量: 0.160 g (定量的)
MS (EI): m／z = 389 (M+H)＋
【０１３１】
実施例２８Ａ
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（４Ｓ）−６−（｛（２Ｓ）−２,５−ビス［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝アミノ）−４−（｛［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１１−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセチル｝アミノ）−６−オキソヘキシル］カルバマート
【化６８】
2009501173.tif 000071
［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１１−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］酢酸（実施例１１Ａ）３０ｍｇ（０.０４６ｍｍｏｌ）および実施例２１Ａからの化合物３２.５ｍｇ（０.０６ｍｍｏｌ）を、２.０ｍｌのＤＭＦに溶解し、次に０℃に冷却する。ＥＤＣ １１.４ｍｇ（０.０６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ １.９ｍｇ（０.０１４ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温で１２時間撹拌する。この反応混合物を真空下でロータリーエバポレーターで濃縮し、そしてSephadex LH20(溶出剤：メタノール／酢酸 ０.２５％）でのクロマトグラフィーによって精製する。
収量: 21 mg (理論量の38%)
LC-MS (方法 3): Rｔ = 2.79 分.
MS (ESI): m／z = 1182 (M+H)＋
【０１３２】
実施例２９Ａ
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−８−［２−（｛（２Ｓ）−２,５−ビス［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−１４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−１１−イル］プロピル｝カルバマート
【化６９】
2009501173.tif 000072
［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１１−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］酢酸（実施例１１Ａ）３０ｍｇ（０.０４６ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル  ｛（４Ｓ）−５−アミノ−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンチル｝カルバマート(ＷＯ ０５／０３３１２９からの実施例１４０Ａ)１８.９ｍｇ（０.０６ｍｍｏｌ）を２.０ｍｌのＤＭＦに溶解し、０℃に冷却する。ＥＤＣ １１.４ｍｇ（０.０６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ １.９ｍｇ（０.０１４ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温で１２時間撹拌する。この反応混合物を真空下、ロータリーエバポレーターで濃縮し、そしてSephadex LH20(溶出剤：メタノール／酢酸 ０.２５％）でのクロマトグラフィーによって精製する。
収量: 21 mg (理論量の48%)
LC-MS (方法 1): Rｔ = 2.63 分.
MS (ESI): m／z = 954 (M+H)＋
【０１３３】
実施例３０Ａ
ベンジル  ［（１Ｓ）−４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−１−（｛［３−（｛［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１１−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセチル｝アミノ）−２−ヒドロキシプロピル］アミノ｝カルボニル）ブチル］カルバマート
【化７０】
2009501173.tif 000073
［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１１−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］酢酸（実施例１１Ａ）３５ｍｇ（０.０５３ｍｍｏｌ）および実施例２５Ａからの化合物３５.４ｍｇ（０.０６９ｍｍｏｌ）を、２.０ｍｌのＤＭＦに溶解し、０℃に冷却する。ＰｙＢＯＰ ３０.６ｍｇ（０.０６ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン０.０３ｍｌを加え、次にこの混合物を室温で１２時間撹拌する。この反応混合物を真空下、ロータリーエバポレーターで濃縮し、そしてこの残渣をアセトニトリル／水（１：１）と共に撹拌し、ろ過によって回収し、高真空下で一定の重量になるまで乾燥する。
収量: 16 mg (理論量の27%)
LC-MS (方法 3): Rｔ = 2.58 分.
MS (ESI): m／z = 1109 (M+H)＋
【０１３４】
実施例３１Ａ
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛３−［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１７−ヒドロキシ−８−（２−｛［２−ヒドロキシ−３−（Ｌ−オルニチルアミノ）プロピル］アミノ｝−２−オキソエチル）−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−１１−イル］プロピル｝カルバマート
【化７１】
2009501173.tif 000074
パラジウム・活性炭（１０％）５ｍｇを、５ｍｌのエタノール中の実施例３０Ａからの化合物１５.８ｍｇ（０.０１４ｍｍｏｌ)の混合物に加え、続いてこの混合物に大気圧下、１２時間水素添加する。この反応混合物をミリポアフィルターに通してろ過し、ろ液を真空下で濃縮し、次に高真空下で乾燥する。この粗生成物は更に精製することなく反応させる。
収量: 11.8 mg (理論量の99%)
LC-MS (方法 2): Rｔ = 1.21 分.
MS (ESI): m／z = 841 (M+H)＋
【０１３５】
実施例３２Ａ
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（４Ｓ,１０Ｓ,１５Ｓ）−１０,１５−ビス［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−（｛［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１１−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセチル｝アミノ）−２２,２２−ジメチル−５,１２,２０−トリオキソ−２１−オキサ−６,１３,１９−トリアザトリコサ−１−イル］カルバマート
【化７２】
2009501173.tif 000075
［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１１−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］酢酸（実施例１１Ａ）２７.３ｍｇ（０.０４２ｍｍｏｌ）および実施例１９Ａからの化合物３８ｍｇ（０.０５ｍｍｏｌ）を、２.０ｍｌのＤＭＦに溶解し、０℃に冷却する。ＥＤＣ １０.４ｍｇ（０.０５４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ １.７ｍｇ（０.０１３ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温で１２時間撹拌する。この反応混合物を真空下、ロータリーエバポレーターで濃縮し、そしてSephadex LH20(溶出剤：メタノール／酢酸 ０.２５％）でのクロマトグラフィーによって精製する。
収量: 19.2 mg (理論量の33%)
LC-MS (方法 3): Rｔ = 2.87 分.
MS (ESI): m／z = 1396 (M+H)＋
【０１３６】
次の表に挙げられている実施例３３Ａ〜３７Ａは、実施例２８Ａの手順に準じて製造される。
【表３】
2009501173.tif 000076
【０１３７】
代表的実施形態
実施例１
（３Ｓ）−６−アミノ−３−（｛［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−アミノ−１１−（３−アミノプロピル）−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセチル｝アミノ）−Ｎ−［（２Ｓ）−２,５−ジアミノペンチル］へキサンアミド ペンタヒドロクロリド
【化７３】
2009501173.tif 000077
ジオキサン中の４Ｎ 塩化水素溶液２ｍｌを、０℃で、１ｍｌのジオキサン中の実施例２８Ａからの化合物２０.７ｍｇ（０.０１８ｍｍｏｌ）の溶液に加える。室温で２時間後、この反応溶液を真空下で濃縮させ、数回ジクロロメタンで共蒸発させる。残存する固形物を、高真空下で一定重量になるまで乾燥する。
収量: 14 mg (理論量の93%)
MS (ESI): m／z = 682 (M-5HCl+H)＋
１H NMR (400 MHz, D２O): δ = 1.45-1.95 (m, 12H), 2.3-2.6 (m, 3H), 2.75 (mｃ, 1H), 2.9-3.2 (m, 11H), 3.3-3.7 (m, 3H), 4.13 (mｃ, 1H), 4.32 (mｃ, 1H), 4.47 (mｃ, 1H), 6.9-7.0 (m, 2H), 7.09 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.4-7.5 (m, 2H).
【０１３８】
下記に挙げられている実施例２〜９は、対応する出発物質から実施例１の方法に準じて製造される。
【０１３９】
実施例２
Ｎ２−｛［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−アミノ−１１−（３−アミノプロピル）−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセチル｝−Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｌ−オルニチンアミド テトラヒドロクロリド
【化７４】
2009501173.tif 000078
実施例３３Ａから製造される；
収量: 理論量の93%
LC-MS (方法 3): Rｔ = 0.56 分
MS (ESI): m／z = 611 (M-4HCl+H)＋.
１H NMR (400 MHz, D２O): δ = 1.55-1.95 (m, 8H), 2.48 (mc, 1H), 2.7-2.85 (m, 2H), 2.87-3.2 (m, 7H), 3.35-3.8 (m, 4H), 4.17 (mｃ, 1H), 4.40 (mｃ, 1H), 4.48 (mｃ, 1H), 4.58 (mｃ, 1H), 6.9-7.0 (m, 2H), 7.09 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.4-7.5 (m, 2H).
【０１４０】
実施例３
２−［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−アミノ−１１−（３−アミノプロピル）−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］−Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド トリヒドロクロリド
【化７５】
2009501173.tif 000079
実施例３４Ａから製造される；
収量：理論量の８１％
LC-MS (方法 4): Rｔ = 1.74 分.
MS (ESI): m／z = 497 (M-3HCl+H)＋.
１H NMR (400 MHz, D２O): δ = 1.6-1.9 (m, 4H), 2.45 (mｃ, 1H), 2.67 (mｃ, 1H), 2.7-3.2 (m, 7H), 3.34-3.62 (m, 3H), 4.38-4.50 (m, 2H), 4.57 (mｃ, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.97 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.37-7.46 (m, 2H).
【０１４１】
実施例４
Ｎ２−｛［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−アミノ−１１−（３−アミノプロピル）−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセチル｝−Ｎ−［（５Ｓ）−５−アミノ−６−ヒドロキシヘキシル］−Ｌ−オルニチンアミド テトラヒドロクロリド
【化７６】
2009501173.tif 000080
実施例３５Ａから製造される；
収量: 理論量の97%
LC-MS (方法 2): Rｔ = 0.32 分.
MS (ESI): m／z = 682 (M-4HCl+H)＋.
１H NMR (400 MHz, D２O): δ = 1.25-1.95 (m, 14H), 2.48 (mｃ, 1H), 2.62-2.83 (m, 2H), 2.85-3.30 (m, 8H), 3.45-3.8 (m, 4H), 4.12 (mｃ, 1H), 4.40 (mｃ, 1H), 4.48 (mｃ, 1H), 4.58 (mｃ, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.98 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.4-7.5 (m, 2H).
【０１４２】
実施例５
２−［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−アミノ−１１−（３−アミノプロピル）−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］−Ｎ−［（２Ｓ）−２,５−ジアミノペンチル］アセトアミド テトラヒドロクロリド
【化７７】
2009501173.tif 000081
実施例２９Ａから製造される；
収量: 理論量の97%
MS (ESI): m／z = 554 (M-4HCl+H)＋.
１H NMR (400 MHz, D２O); δ = 1.55-1.9 (m, 8H), 2.48 (mｃ, 1H), 2.67 (mｃ, 1H), 2.8-3.2 (m, 7H), 3.3-3.7 (m, 4H), 4.38-4.50 (m, 2H), 4.58 (mｃ, 1H), 6.9-7.0 (m, 2H), 6.95 (mｃ, 1H), 7.25-7.50 (m 4H).
【０１４３】
実施例６
３−アミノ−Ｎ２−｛［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−アミノ−１１−（３−アミノプロピル）−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセチル｝−Ｎ−（２,５−ジアミノペンチル）−Ｌ−アラニンアミド テトラヒドロクロリド
【化７８】
2009501173.tif 000082
実施例３６Ａから製造される；
収量: 理論量の99%
MS (ESI): m／z = 640 (M-5HCl+H)＋
１H NMR (400 MHz, D２O): δ = 1.5-1.9 (m, 8H), 2.53 (mｃ, 1H), 2.68-2.85 (m, 2H), 2.9-3.1 (m, 7H), 3.23 (mc, 1H), 3.33-3.63 (m, 4H), 4.48 (m, 2H), 4.55-4.75 (m, 2H, underneath D２O), 6.91-7.0 (m, 2H), 7.10 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.4-7.5 (m, 2H).
【０１４４】
実施例７
（３Ｓ）−３−アミノ−６−［（Ｎ２−｛［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−アミノ−１１−（３−アミノプロピル）−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２  ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセチル｝−Ｌ−オルニチル）アミノ］−Ｎ−［（２Ｓ）−２,５−ジアミノペンチル］ヘキサンアミド ヘキサヒドロクロリド
【化７９】
2009501173.tif 000083
実施例３２Ａから製造される；
収量: 理論量の99%
LC-MS (方法 3): Rｔ = 0.23 分.
MS (ESI): m／z = 796 (M-6HCl+H)＋.
１H NMR (400 MHz, D２O): δ = 1.45-1.95 (m, 16H), 2.45-2.6 (m, 2H), 2.62-2.85 (m, 3H), 2.9-3.7 (m, 15H), 4.12 (mc, 1H), 4.40 (mｃ, 1H), 4.48 (mｃ, 1H), 4.58 (mｃ, 1H), 6.91-7.0 (d, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.38-7.46 (m, 2H).
【０１４５】
実施例８
Ｎ３−｛［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−アミノ−１１−（３−アミノプロピル）−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセチル｝−Ｎ−［（２Ｓ）−２,５−ジアミノペンチル］−ベータ−アラニンアミド テトラヒドロクロリド
【化８０】
2009501173.tif 000084
実施例３７Ａから製造される；
収量: 理論量の99%
LC-MS (方法 3): Rｔ = 0.26 分
MS (ESI): m／z = 625 (M-4HCl+H)＋.
１H NMR (400 MHz, D2O): δ = 1.55-1.9 (m, 8H), 2.38-2.5 (m, 3H), 2.58 (mｃ, 1H), 2.7-3.2 (m, 8H), 3.21-3.6 (m, 5H), 4.36 (mｃ, 1H), 4.48 (mｃ, 1H), 4.58 (mｃ, 1H), 6.94 (d, 1H), 6.99 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.37-7.47 (m, 2H).
【０１４６】
実施例９
Ｎ−［３−（｛［（８Ｓ,１１Ｓ,１４Ｓ）−１４−アミノ−１１−（３−アミノプロピル）−１７−ヒドロキシ−１０,１３−ジオキソ−９,１２−ジアザトリシクロ［１４.３.１.１２,６］ヘンイコサ−１（２０）,２（２１）,３,５,１６,１８−ヘキサエン−８−イル］アセチル｝アミノ）−２−ヒドロキシプロピル］−Ｌ−オルニチンアミド テトラヒドロクロリド
【化８１】
2009501173.tif 000085
実施例３１Ａから製造される；
収量: 理論量の73%
LC-MS (方法 2): Rｔ = 0.28 分.
MS (ESI): m／z = 641 (M-4HCl+H)＋.
１H NMR (400 MHz, D2O): δ = 1.58-1.95 (m, 8H), 2.48 (mｃ, 1H), 2.64 (mｃ, 1H), 2.77 (mｃ, 1H), 2.85-3.4 (m, 9H), 3.57 (mｃ, 1H), 3.64-3.85 (m, 2H), 3.96 (mｃ, 1H), 4.35-4.51 (m, 2H), 4.58 (mｃ, 1H), 6.94 (d, 1H), 6.99 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.38-7.46 (m, 2H).
【０１４７】
Ｂ.生理活性評価
使用略語：
【表４】
2009501173.tif 000086
【０１４８】
本発明化合物のイン・ビトロにおける活性は、次のアッセイで示すことができる：
Ｅ.コーリ抽出物におけるイン・ビトロの転写−翻訳
Ｓ３０抽出物を調製するために、対数的に増殖しているエッシェリキア コーリ ＭＲＥ６００(Escherichia coli MRE600)(M.Meuller; Freiburg University)を採取し、洗浄し、そしてそれをイン・ビトロ転写−翻訳試験のために述べられているように使用する(Meuller, M. およびBlobel, G. Proc Natl Acad Sci USA (1984) 81, pp. 7421-7425)。
イン・ビトロ転写−翻訳試験用の反応混合物に、５０μｌの反応混合物あたり１μｌのｃＡＭＰ（１１.２５ｍｇ／ｍｌ）を追加して加える。この試験混合物は、５μｌの試験薬物を５％ＤＭＳＯ中に加え、総計１０５μｌになる。１μｇ／１００μｌのプラスミド ｐＢＥＳＴｌｕｃ(Promega, Germany)の混合物が、転写テンプレートとして使用される。３０℃で６０分間インキュベーションした後、５０μｌのルシフェリン溶液（２０ｍＭ トリシン、２.６７ｍＭ ＭｇＳＯ４、０.１ｍＭ ＥＤＴＡ、３３.３ｍＭ ＤＴＴ ｐＨ ７.８、２７０μＭ ＣｏＡ、４７０μＭ ルシフェリン、５３０μＭ ＡＴＰ）を加え、次にその結果生じるバイオルミネセンスをルミノメータで１分間測定する。ホタルルシフェラーゼの翻訳を５０％阻害する阻害剤の濃度がＩＣ５０として示される。
【０１４９】
Ｓ.アウレウス抽出物におけるイン・ビトロの転写−翻訳
Ｓ.アウレウスルシフェラーゼレポータープラスミドの構築
Ｓ.アウレウスからのイン・ビトロ転写−翻訳アッセイで使用することができるレポータープラスミドの構築のために、プラスミドｐＢＥＳＴｌｕｃ(Promega Corporation, USA)が使用される。このプラスミドにおいてホタルルシフェラーゼの前に存在するＥ.コーリ ｔａｃ プロモーターは、Ｓ.アウレウスからの相当するシャイン・ダルガノ(Shine-Dalgarno)配列を有しているｃａｐＡ１プロモーターによって置き換えられる。プライマー ＣＡＰＦｏｒ、
【化８２】
2009501173.tif 000087
および ＣＡＰＲｅｖ、
【化８３】
2009501173.tif 000088
がこのために用いられる。このプライマー ＣＡＰＦｏｒはｃａｐＡ１プロモーター、リボソーム結合部位およびルシフェラーゼ遺伝子の５'部分を含んでいる。テンプレートとしてｐＢＥＳＴｌｕｃを用いるＰＣＲ後、融合ｃａｐＡ１プロモーターを有しているホタルルシフェラーゼ遺伝子を含んでいるＰＣＲ生成物を単離することが可能である。これは、ＣｌａＩおよびＨｉｎｄＩＩＩを用いて制限した後、同じようにＣｌａＩおよびＨｉｎｄＩＩＩで消化されたベクターｐＢＥＳＴｌｕｃ中に連結される。この結果生じるプラスミド ｐｌａは、Ｅ.コーリ中で複製することができ、Ｓ.アウレウスのイン・ビトロ転写−翻訳試験におけるテンプレートとして使用することができる。
【０１５０】
Ｓ.アウレウスからのＳ３０抽出物の調製
６リットルのＢＨＩ培地に２５０ｍｌのＳ.アウレウス株の終夜培養液を植菌し、３７℃でＯＤ６００ｎｍが２−４になるまで増殖させる。この細胞を遠心分離によって採取し、冷却緩衝液Ａ（１０ｍＭ トリスアセテート、ｐＨ ８.０、１４ｍＭ 酢酸マグネシウム、１ｍＭ ＤＴＴ、１Ｍ ＫＣｌ）５００ｍｌ中で洗浄する。再び遠心分離後、この細胞を５０ｍＭ ＫＣｌを含んでいる２５０ｍｌの冷却緩衝液Ａ中で洗浄し、次にこの結果生じるペレットを−２０℃で６０分間凍結させる。このペレットを氷上で３０分から６０分で解凍し、緩衝液Ｂ（１０ｍＭ トリスアセテート、ｐＨ ８.０、２０ｍＭ 酢酸マグネシウム、１ｍＭ ＤＴＴ、５０ｍＭ ＫＣｌ）中に加え、全体の容量を９９ｍｌにする。緩衝液Ｂ中のリソスタフィン（０.８ｍｇ／ｍｌ）１.５ｍｌ部分を３個の予冷遠心分離カップ中に入れ、次にそれぞれを３３ｍｌの細胞懸濁液と混和する。このサンプルを時々振とうしながら、３７℃で４５分から６０分間インキュベートし、その後１５０μｌの０.５Ｍ ＤＴＴ溶液を加える。溶解した細胞を３００００×ｇ、４℃で、３０分間、遠心分離する。この細胞ペレットを緩衝液Ｂ中に加え、次いで再び同一の条件で遠心分離し、回収された上清を集める。この上清を再び同一条件の下で遠心分離し、次に０.２５容量(0.25 volumes)の緩衝液Ｃ（６７０ｍＭ トリスアセテート、ｐＨ ８.０、２０ｍＭ 酢酸マグネシウム、７ｍＭ Ｎａ３ ホスホエノールピルバート(Na3 phosphoenolpyruvate)、７ｍＭ ＤＴＴ、５.５ｍＭ ＡＴＰ、７０μＭ アミノ酸(コンプリート(Promegaから))、７５μｇのピルビン酸キナーゼ（Sigma, Germany)）／ｍｌを上清の上２／３まで加える。このサンプルを３７℃で３０分間インキュベートする。上清を２ｌ透析緩衝液（１０ｍＭ トリスアセテート、ｐＨ ８.０、１４ｍＭ 酢酸マグネシウム、１ｍＭ ＤＴＴ、６０ｍＭ 酢酸カリウム）に対して、１回緩衝液を更新して３５００ダルトン(Da)でカットオフし、４℃において一晩透析管中で透析する。この透析物を、透析チューブを冷却したＰＥＧ８０００粉末(Sigma, Germany)で覆うことによって、約１０ｍｇ／ｍｌのタンパク質濃度まで、４℃で濃縮する。このＳ３０抽出物は、−７０℃で分注し保存することができる。
【０１５１】
Ｓ.アウレウス イン・ビトロ転写−翻訳アッセイでのＩＣ５０の決定
化合物のタンパク質生合成の阻害は、イン・ビトロ転写−翻訳アッセイで示すことができる。このアッセイは、テンプレートとしてのレポータープラスミドｐ１ａをおよびＳ.アウレウスから得られる無細胞Ｓ３０抽出物を用いる、ホタルルシフェラーゼの無細胞転写および翻訳に基づいている。この結果生じるルシフェラーゼ活性は、ルミネセンス測定によって検出することができる。
【０１５２】
使用されるＳ３０抽出物またはプラスミド ｐ１ａの量は、この試験における最適な濃度を確保するために調製のたびに新たに試験されなければならない。試験される物質３μｌは、５％ＤＭＳＯに溶解し、ＭＴＰ中に入れられる。次いで１０μｌの適切に濃縮されたプラスミド溶液ｐ１ａを加える。次いで２３μｌのプレミックス（５００ｍＭ 酢酸カリウム、８７.５ｍＭ トリスアセテート、ｐＨ ８.０、６７.５ｍＭ 酢酸アンモニウム、５ｍＭ ＤＴＴ、５０μｇの葉酸／ｍｌ、８７.５ｍｇのＰＥＧ ８０００／ｍｌ、５ｍＭ ＡＴＰ、１.２５ｍＭ 各ＮＴＰ、２０μＭ 各アミノ酸、５０ｍＭ ＰＥＰ（Ｎａ３塩）、２.５ｍＭ ｃＡＭＰ、２５０μｇ 各Ｅ.コーリ ｔＲＮＡ／ｍｌ）および２３μｌの適切な量のＳ.アウレウス Ｓ３０抽出物の混合物４６μｌを加え、混和する。３０℃で６０分間インキュベーション後、５０μｌのルシフェリン溶液（２０ｍＭ トリシン、２.６７ｍＭ ＭｇＳＯ４、０.１ｍＭ ＥＤＴＡ、３３.３ｍＭ ＤＴＴ ｐＨ７.８、２７０μＭ ＣｏＡ、４７０μＭ ルシフェリン、５３０μＭ ＡＴＰ）を加え、この結果生じるバイオルミネセンスをルミノメータで１分間測定する。ホタルルシフェラーゼの翻訳を５０％阻害する阻害剤の濃度がＩＣ５０として示される。
【０１５３】
最小阻止濃度（ＭＩＣ）の決定
最小阻止濃度（ＭＩＣ）は、試験細菌の増殖を１８−２４時間にわたって阻止する抗生物質の最小濃度である。この阻止物質の濃度は、こうした場合において、標準的な微生物学的方法によって決定することができる（たとえば、米国臨床研究所標準委員会、好気下で増殖する細菌の希釈抗菌薬感受性試験(dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria)方法；承認標準第５版、ＮＣＣＬＳ文書 Ｍ７−Ａ５［ＩＳＢＮ1-56238-394-9］、ＮＣＣＬＳ, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA, 2000参照）。本発明化合物のＭＩＣは、９６ウェルマイクロタイタープレートスケールの液体希釈試験において決定される。細菌微生物は０.４％ＢＨブロスを添加した最少培地（１８.５ｍＭ Ｎａ２ＨＰＯ４、５.７ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、９.３ｍＭ ＮＨ４Ｃｌ、２.８ｍＭ ＭｇＳＯ４、１７.１ｍＭ ＮａＣｌ、０.０３３μｇ／ｍｌ 塩酸チアミン、１.２μｇ／ｍｌ ニコチン酸、０.００３μｇ／ｍｌ ビオチン、１％グルコース、フェニルアラニンを除いてそれぞれのタンパク質生成性(proteinogenic)アミノ酸２５μｇ／ｍｌ；［H. -P. Kroll; 未公開］）（試験培地）で培養される。エンテロコッカス・フェシウム L4001の場合には、熱非動化ウシ胎児血清(FCS;GibcoBRL, Germany)を終濃度１０％で試験培地に加える。試験細菌の終夜培養物は、新鮮な試験培地中で、ＯＤ５７８が０.００１まで（腸球菌(enterococci)の場合は、０.０１まで）希釈し、次に試験物質（１：２希釈ステップ）を試験培地（２００μｌの終容量）中で希釈して１：１でインキュベートする。この培養物は、３７℃で１８−２４時間インキュベートする；腸球菌（５％ＣＯ２の存在下で）。
認識できる細菌の増殖がもはや起こらない、各場合における最も低い薬物物質濃度が、ＭＩＣとして特定される。
【０１５４】
最小阻止濃度（ＭＩＣ）の決定の別法
最小阻止濃度（ＭＩＣ）は、試験細菌の増殖を１８−２４時間にわたって阻止する抗生物質の最小濃度である。この阻止物質の濃度は、こうした場合において、寒天希釈試験における変法培地を用いて標準的な微生物学的方法によって決定することができる（たとえば、米国臨床研究所標準委員会、好気下で増殖する細菌の希釈抗菌薬感受性試験(dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria)方法；承認標準第５版、ＮＣＣＬＳ文書 Ｍ７−Ａ５［ＩＳＢＮ1-56238-394-9］、ＮＣＣＬＳ,940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA, 2000参照）。細菌性微生物は、２０％脱線維馬血液を含む１.５％寒天プレートで培養される。コロンビア血液寒天プレート(Becton-Dickinson)で終夜インキュベートした試験細菌を、ＰＢＳで希釈して、約５×１０５細菌／ｍｌの細菌の個数に調整し、試験プレートに滴下する（１−３μｌ）。試験物質は、試験物質の様々な希釈を含む（１：２希釈ステップ）。この培養物は、５％ＣＯ２の存在下、３７℃で１８−２４時間インキュベートする。
認識できる細菌の増殖がもはや発現しない、各場合における最も低い薬物物質濃度が、ＭＩＣとして特定され、μｇ／ｍｌで示される。
【０１５５】
表Ａ（比較実施例（ビフェノマイシンＢ））
【表５】
2009501173.tif 000089
濃度データ：ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）；ＩＣ５０（μＭ）
【０１５６】
Ｓ.アウレウス １３３による全身性感染症
本発明化合物の細菌感染症の処置に対する適性については、様々な動物モデルで示すことができる。この目的にために、動物を通例適切な有毒な細菌で感染させ、次いで試験化合物で処置するが、この試験化合物は、特別の治療モデルに適合する製剤中に存在する。本発明化合物の適合性は、Ｓ.アウレウスに感染後のマウスの敗血症モデルにおける細菌感染症の処置に対して明確に示すことができる。
【０１５７】
本目的のために、Ｓ.アウレウス １３３細胞をＢＨブロス(Oxoid, Germany)で終夜培養する。この終夜培養物は、新しいＢＨブロス中で１：１００に希釈し、３時間増殖させる。対数増殖期中の細菌を遠心分離し、次に生理食塩水緩衝溶液で２回洗浄する。次いで５０ユニットの吸光係数(extinction)を有している生理食塩水溶液中の細胞懸濁液を、光度計(Dr Lange LP 2W)で調整する。希釈ステップ（１：１５）後、この懸濁液を１０％ムチン(mucine)懸濁液と１：１混和する。マウス２０ｇあたりこの感染溶液０.２ｍｌを腹腔内投与する。これは約１−２×１０６細菌／マウスの細胞個数に相当する。感染の３０分後、静脈治療が行われる。雌ＣＦＷ１マウスがこの感染実験のために使用される。この動物の生存が６日にわたって記録される。未処置動物が感染後２４時間以内に死に至るようにこの動物モデルを調整する。このモデルにおいて、実施例２の化合物の場合、ＥＤ１００＝１.２５ｍｇ／ｋｇの治療効果を示すことが可能であった。
【０１５８】
Ｓ.アウレウスに対する自然発生的耐性率の決定
本発明化合物の自然発生的耐性率が次のように決定される：細菌性微生物を３０ｍｌの最少培地(１８.５ｍＭ Ｎａ２ＨＰＯ４、５.７ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、９.３ｍＭ ＮＨ４Ｃｌ、２.８ｍＭ ＭｇＳＯ４、１７.１ｍＭ ＮａＣｌ、０.０３３μｇ／ｍｌ 塩酸チアミン、１.２μｇ／ｍｌ ニコチン酸、０.００３μｇ／ｍｌ ビオチン、１％グルコース、２５μｇ／ｍｌ それぞれのタンパク質生成性(proteinogenic)アミノ酸(０.４％ＢＨブロスを加える））中、３７℃で終夜培養し、６０００×ｇで１０分間遠心分離し、再度２ｍｌのリン酸緩衝生理ＮａＣｌ溶液中で懸濁する（約２×１０９細菌／ｍｌ）。５×ＭＩＣまたは１０×ＭＩＣに相当する濃度で試験する本発明化合物を含む予備乾燥した寒天プレート（ＰＢＳで希釈した１／１０Meuller-Hinton培地中の１.５％寒天、２０％脱線維馬血液、または１.５％寒天、２０％ウシ血清）に、１００μｌのこの細胞懸濁液、並びに１：１０および１：１００希釈液をそれぞれプレーティングし、３７℃で４８時間インキュベートする。この結果生じるコロニー(cfu)をカウントする。
【０１５９】
ビフェノマイシン−耐性Ｓ.アウレウス株ＲＮ４２２０ＢｉＲおよびＴ１７の単離
Ｓ.アウレウス株 ＲＮ４２２０ＢｉＲをイン・ビトロで単離する。この目的のために、１００μｌ部のＳ.アウレウス ＲＮ４２２０細胞懸濁液（約１.２×１０８ cfu／ml)を、抗生物質を含まない寒天プレート（１８.５ｍＭ Ｎａ２ＨＰＯ４、５.７ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、９.３ｍＭ ＮＨ４Ｃｌ、２.８ｍＭ ＭｇＳＯ４、１７.１ｍＭ ＮａＣｌ、０.０３３μｇ／ｍｌ 塩酸チアミン、１.２μｇ／ｍｌ ニコチン酸、０.００３μｇ／ｍｌ ビオチン、１％グルコース、それぞれのタンパク質生成性(proteinogenic)アミノ酸２５μｇ／ｍｌ（０.４％ＢＨ ブロスおよび１％アガロースを加える））および２μｇ／ｍｌ ビフェノマイシンＢ（１０×ＭＩＣ）を含んでいる寒天プレートにプレーティングし、次に３７℃で終夜インキュベートする。抗生物質を含まないプレートでは約１×１０７個の細胞が増殖し、これに対して、抗生物質を含むプレート上に約１００個のコロニーが増殖し、耐性率１×１０−５に相当する。抗生物質を含んでいるプレート上で増殖するいくつかのコロニーは、ビフェノマイシンＢ ＭＩＣ用に試験される。ＭＩＣが＞５０μＭを有している一つのコロニーは、更に使用するために選択され、この株をＲＮ４２２０ＢｉＲと呼ぶ。
【０１６０】
Ｓ.アウレウス株 Ｔ１７をイン・ビボで単離する。ＣＦＷ１マウスをマウスあたり４×１０７個のＳ.アウレウス １３３細胞で腹腔内感染させる。感染の０.５時間後、この動物を５０ｍｇ／ｋｇのビフェノマイシンＢで静脈処置する。感染後３日目に生存している動物から腎臓を取り除く。臓器を均一化した後、ホモジェネートを、抗生物質を含まない寒天プレートおよび抗生物質を含む寒天プレート上でＲＮ４２２０ＢｉＲのために述べられているようにプレーティングし、次に３７℃で終夜インキュベートする。腎臓から単離された約半分のコロニーは、抗生物質を含むプレート上で増殖を示し（２.２×１０６のコロニー）、処置動物の腎臓中のビフェノマイシンＢ−耐性Ｓ.アウレウス細胞の集積を示す。約２０個のこうしたコロニーが、ビフェノマイシンＢ ＭＩＣのために試験され、次にＭＩＣ＞５０μＭを有するコロニーが更なる培養のために選択され、この株をＴ１７と呼ぶ。
【０１６１】
製薬組成物の代表的実施形態
本発明化合物は、次の方法で製薬製剤に変換することができる:
静脈投与できる溶液：
組成：
実施例１の化合物１ｍｇ、ポリエチレングリコール４００  １５ｇおよび注射用水２５０ｇ
調製：
本発明化合物をポリエチレングリコール４００と共に撹拌しながら水の中に溶解する。この溶液をろ過（ポアー直径０.２２μｍ）によって滅菌し、無菌条件下で熱滅菌注射ボトル中に分配する。これらを注入栓および圧着キャップを用いて封鎖する。
【国際調査報告】
2009501173.tif 000123
2009501173.tif 000124
2009501173.tif 000125
2009501173.tif 000126
2009501173.tif 000127
2009501173.tif 000128
2009501173.tif 000129
2009501173.tif 000130