(57)【要約】  本開示は診断剤を対象とする。より具体的には、本開示は、冠動脈プラーク、頚動脈プラーク、大動脈プラーク、動脈血管のプラーク、動脈瘤、血管炎および動脈壁のその他の疾患に関連した病的障害を検出および／またはイメージングおよび／またはモニターするための化合物、診断剤、組成物およびキットを対象とする。さらに、本開示は、拡張的および収縮的再構築、血管壁の総領域、内腔サイズおよび動脈の外周を含む動脈壁の変化を検出および／またはイメージングおよび／またはモニターする方法を対象とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）： 
【化１】
2009500410.tif 000281
（Ｉ）
［式中、
Ａは、Ｄ−アミノ酸残基、またはＤ−アミノ酸残基および第２のＤ−アミノ酸からなるペプチドであり、
Ｄ1およびＤ2は、独立して、水素、キレーターおよびイメージング部分から選択され、
Ｌ1はリンカーであるが、但しＬ１はアミノ酸残基を含まず、または
Ｌ1とＤ2は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５員から７員環を形成し、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、水素およびアルキルから選択される］
の化合物または薬学的に許容できるその塩。
【請求項２】
Ｄ1およびＤ2の少なくとも一方がイメージング部分である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
イメージング部分が非金属アイソトープを含む、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
非金属アイソトープが、14Ｃ、13Ｎ、18Ｆ、123Ｉまたは125Ｉである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｌ1が、アルキレン、アルケニレン、アリーレン、ヘテロアルキレン、アリールアルキレンおよびヘテロシクリレンから選択されるリンカーである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｌ1がアルキレンである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｌ1がアリールアルキレンである、請求項５に記載の化合物。
【請求項８】
ＡがＤ−アミノ酸残基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ａが、
【化２】
2009500410.tif 000282
［式中、
ｎは０〜６であり、
Ａｒはアリール基であり、
ＲxおよびＲyは、独立して、水素、アルケニル、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニル、アルキル、アリールおよびアリールアルキルから選択される］
である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
ｎが２であり、Ａｒがフェニルであり、ＲxおよびＲyが水素である、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｄ1およびＤ2の一方が水素であり、他方がキレーターである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
イメージング剤をさらに含む、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｄ1およびＤ2の一方が水素であり、他方が式（ＩＩ）：
【化３】
2009500410.tif 000283
（ＩＩ）
［式中、ｏ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔおよびｕは、各々独立して、１〜６である］
のキレーターである、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１４】
ｏ、ｒ、ｓ、ｔおよびｕが各々１であり、ｐおよびｑが各々２である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
ａ．式（ＩＩＩ）：
【化４】
2009500410.tif 000284
（ＩＩＩ）
［式中、
Ａは、Ｄ−アミノ酸残基、またはＤ−アミノ酸残基および第２のＤ−アミノ酸からなるペプチドであり、
Ｄ1およびＤ2は、独立して、水素およびキレーターから選択され、
Ｌ1はリンカーであり、または
Ｌ1とＤ2は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５員から７員環を形成し、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、水素およびアルキルから選択される］
の化合物または薬学的に許容できるその塩；および
ｂ．イメージング剤
を含む診断剤。
【請求項１６】
イメージング剤が、エコー源性物質、光学レポーター、ホウ素中性子吸収材、常磁性金属イオン、強磁性金属、γ放射性ラジオアイソトープ、陽電子放射性ラジオアイソトープまたはＸ線吸収材である、請求項１５に記載の診断剤。
【請求項１７】
イメージング剤が常磁性金属イオンである、請求項１６に記載の診断剤。
【請求項１８】
常磁性金属イオンがＧｄ（ＩＩＩ）である、請求項１７に記載の診断剤。
【請求項１９】
イメージング剤が、99mＴｃ、95Ｔｃ、111Ｉｎ、62Ｃｕ、64Ｃｕ、67Ｇａ、68Ｇａおよび153Ｇｄから選択されるγ放射性ラジオアイソトープまたは陽電子放射性ラジオアイソトープである、請求項１６に記載の診断剤。
【請求項２０】
γ放射性ラジオアイソトープが99mＴｃである、請求項１９に記載の診断剤。
【請求項２１】
γ放射性ラジオアイソトープが111Ｉｎである、請求項１９に記載の診断剤。
【請求項２２】
【化５】
2009500410.tif 000285
である化合物または薬学的に許容できるその塩。
【請求項２３】
【化６】
2009500410.tif 000286
または薬学的に許容できるその塩である診断剤。
【請求項２４】
【化７】
2009500410.tif 000287
［式中、Ａｒは、フェニル、ｍ−フェニルスルホン酸またはｐ−フェニルスルホン酸から選択される］
または薬学的に許容できるその塩である診断剤。
【請求項２５】
【化８】
2009500410.tif 000288
または薬学的に許容できるその塩である診断剤。
【請求項２６】
（ａ）請求項１に記載の化合物、および
（ｂ）薬学的に許容できる担体
を含む組成物。
【請求項２７】
（ａ）請求項１５に記載の診断剤、および
（ｂ）薬学的に許容できる担体
を含む組成物。
【請求項２８】
患者の冠動脈プラーク、頚動脈プラーク、大動脈プラーク、任意の動脈血管のプラーク、動脈瘤、血管炎および／または動脈壁のその他の疾患の存在を検出、イメージングおよび／またはモニターするためのキットであって、
ａ．式（ＩＩＩ）：
【化９】
2009500410.tif 000289
（ＩＩＩ）
［式中、
Ａは、Ｄ−アミノ酸残基、またはＤ−アミノ酸残基および第２のＤ−アミノ酸からなるペプチドであり、
Ｄ1およびＤ2は、独立して、水素およびキレーターから選択され、
Ｌ1はリンカーであり、または
Ｌ1とＤ2は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５員から７員環を形成し、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、水素およびアルキルから選択される］
の化合物または薬学的に許容できるその塩；
ｂ．イメージング剤；
ｃ．薬学的に許容できる担体；および
ｄ．患者の冠動脈プラーク、頚動脈プラーク、大動脈プラーク、任意の動脈血管のプラーク、動脈瘤、血管炎および／または動脈壁のその他の疾患の存在を検出、イメージングおよび／またはモニターするための診断剤を含む組成物を調製するための指示書
を含むキット。
【請求項２９】
患者の冠動脈プラーク、頚動脈プラーク、大動脈プラーク、任意の動脈血管のプラーク、動脈瘤、血管炎および／または動脈壁のその他の疾患の存在を検出、イメージングおよび／またはモニターするための方法であって、
ａ．患者に請求項１に記載の化合物を投与する工程と、
ｂ．患者における化合物の濃縮部位のイメージを診断イメージング技術によって得る工程とを含む方法。
【請求項３０】
患者の冠動脈プラーク、頚動脈プラーク、大動脈プラーク、任意の動脈血管のプラーク、動脈瘤、血管炎および／または動脈壁のその他の疾患の存在を検出、イメージングおよび／またはモニターするための方法であって、
ａ．患者に請求項１５に記載の診断剤を投与する工程と、
ｂ．患者における化合物の濃縮部位のイメージを診断イメージング技術によって得る工程とを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は診断剤を対象とする。より具体的には、本開示は、冠動脈プラーク、頚動脈プラーク、大動脈プラーク、動脈血管のプラーク、動脈瘤、血管炎および動脈壁のその他の疾患に関連した病的障害を検出および／またはイメージングおよび／またはモニターするための化合物、診断剤、組成物およびキットを対象とする。さらに、本開示は、拡張的および収縮的再構築、血管壁の総領域、内腔サイズおよび動脈の外周を含む動脈壁の変化を検出および／またはイメージングおよび／またはモニターする方法を対象とする。
【背景技術】
【０００２】
心疾患は米国における第１位の死因であり、年間１００万人超を占める。アテローム性動脈硬化症は冠動脈心臓疾患の主要な原因であり、欧米における非事故死の主因である。アテローム性動脈硬化症、ならびに心筋梗塞、狭心症、臓器不全および卒中を含むその帰結の病因および潜在的な治療の定義についてかなりの努力がなされてきた。この努力にも拘らず、アテローム性動脈硬化病変がどのように、およびいつ影響を受けやすく、命にかかわるようになるのか、介入の最善の時点、ならびに病変の進行をどのように検出およびモニターするかを含む多くの疑問が残っている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
過去２０年間、アテローム性動脈硬化症に関わるいくつかの分子および細胞タイプに基づいて多くの放射性トレーサーが開発されてきた。一般に、放射性標識タンパク質および血小板は、アテローム性動脈硬化症のイメージング剤としていくつかの臨床的潜在性を示してきたが、標的／背景比および標的／血液比が乏しいために、これらの薬剤は冠動脈病変または頚動脈病変でさえイメージングするのに理想的ではなかった。放射性標識ペプチド、抗体断片およびＦＤＧのような代謝トレーサーは、アテローム血栓症の非侵襲的イメージングにおける核シンチグラフィー技術の新たな機会を提示しているように思われる。しかし、種々の心疾患を診断およびモニターする非侵襲的方法が求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本開示の一態様では、式（Ｉ）：
【化１】
2009500410.tif 000002
（Ｉ）
［式中、
Ａは、Ｄ−アミノ酸残基、またはＤ−アミノ酸残基および第２のＤ−アミノ酸からなるペプチドであり、
Ｄ1およびＤ2は、独立して、水素、キレーターおよびイメージング部分から選択され、
Ｌ1はリンカーであり、または
Ｌ1とＤ2は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５員から７員環を形成し、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、水素およびアルキルから選択される］
の化合物または薬学的に許容できるその塩を提供する。
【０００５】
本開示の第１の態様の第１の実施形態では、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩を提供し、ここで、Ｄ1およびＤ2の少なくとも一方はイメージング部分である。本開示の第１の態様の第２の実施形態では、イメージング部分は非金属アイソトープを含む。本開示の第１の態様の第３の実施形態では、非金属アイソトープは、14Ｃ、13Ｎ、18Ｆ、123Ｉまたは125Ｉである。
【０００６】
本開示の第１の態様の第４の実施形態では、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩を提供し、ここで、Ｌ1は、アルキレン、アルケニレン、アリーレン、ヘテロアルキレン、アリールアルキレンおよびヘテロシクリレンから選択されるリンカーである。本開示の第１の態様の第５の実施形態では、Ｌ1はアルキレンである。本開示の第１の態様の第６の実施形態では、Ｌ1はアリールアルキレンである。
【０００７】
本開示の第１の態様の第７の実施形態では、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩を提供し、ここで、ＡはＤ−アミノ酸残基である。本開示の第１の態様の第８の実施形態では、Ａは、
【化２】
2009500410.tif 000003
［式中、
ｎは０〜６であり、
Ａｒはアリール基であり、
ＲxおよびＲyは、独立して、水素、アルケニル、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニル、アルキル、アリールおよびアリールアルキルから選択される］
である。
【０００８】
本開示の第１の態様の第９の実施形態では、ｎは２であり、Ａｒはフェニルであり、ＲxおよびＲyは水素である。
【０００９】
本開示の第１の態様の第１０の実施形態では、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩を提供し、ここで、Ｄ1およびＤ2の一方は水素であり、他方はキレーターである。本開示の第１の態様の第１１の実施形態では、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩を提供し、ここで、Ｄ1およびＤ2の一方は水素であり、他方はキレーターであり、ここで、化合物はイメージング剤をさらに含む。
【００１０】
本開示の第１の態様の第１２の実施形態では、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩を提供し、ここで、Ｄ1およびＤ2の一方は水素であり、他方は式（ＩＩ）：
【化３】
2009500410.tif 000004
（ＩＩ）
［式中、ｏ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔおよびｕは、各々独立して、１〜６である］
のキレーターである。
【００１１】
本開示の第１の態様の第１３の実施形態では、ｏ、ｒ、ｓ、ｔおよびｕは、各々１であり、ｐおよびｑは、各々２である。
【００１２】
本開示の第２の態様では、
ａ．式（ＩＩＩ）：
【化４】
2009500410.tif 000005
（ＩＩＩ）
［式中、
Ａは、Ｄ−アミノ酸残基、またはＤ−アミノ酸残基および第２のＤ−アミノ酸からなるペプチドであり、
Ｄ1およびＤ2は、独立して、水素およびキレーターから選択され、
Ｌ1はリンカーであり、または
Ｌ1とＤ2は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５員から７員環を形成し、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、水素およびアルキルから選択される］
の化合物または薬学的に許容できるその塩；および
ｂ．イメージング剤
を含む診断剤を提供する。
【００１３】
本開示の第２の態様の第１の実施形態では、イメージング剤は、エコー源性物質、光学レポーター、ホウ素中性子吸収材、常磁性金属イオン、強磁性金属、γ放射性ラジオアイソトープ、陽電子放射性ラジオアイソトープ、またはＸ線吸収材である。本開示の第２の態様の第２の実施形態では、イメージング剤は常磁性金属イオンである。本開示の第２の態様の第３の実施形態では、常磁性金属イオンはＧｄ（ＩＩＩ）である。本開示の第２の態様の第４の実施形態では、イメージング剤は、99mＴｃ、95Ｔｃ、111Ｉｎ、62Ｃｕ、64Ｃｕ、67Ｇａ、68Ｇａおよび153Ｇｄから選択されるγ放射性ラジオアイソトープまたは陽電子放射性ラジオアイソトープである。本開示の第２の態様の第５の実施形態では、イメージング剤は99mＴｃである。本開示の第２の態様の第６の実施形態では、イメージング剤は111Ｉｎである。
【００１４】
本開示の第３の態様では、
【化５】
2009500410.tif 000006
である化合物または薬学的に許容できるその塩を提供する。
【００１５】
本開示の第４の態様では、
【化６】
2009500410.tif 000007
である化合物または薬学的に許容できるその塩を提供する。
【００１６】
本開示の第５の態様では、
【化７】
2009500410.tif 000008
［式中、Ａｒは、フェニル、ｍ−フェニルスルホン酸またはｐ−フェニルスルホン酸から選択される］
である化合物または薬学的に許容できるその塩を提供する。
【００１７】
本開示の第６の態様では、
【化８】
2009500410.tif 000009
である化合物または薬学的に許容できるその塩を提供する。
【００１８】
本開示の第７の態様では、
（ａ）式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容できるその塩、および
（ｂ）薬学的に許容できる担体
を含む組成物を提供する。
【００１９】
本開示の第８の態様では、
ａ．式（ＩＩＩ）：
【化９】
2009500410.tif 000010
（ＩＩＩ）
［式中、
Ａは、Ｄ−アミノ酸残基、またはＤ−アミノ酸残基および第２のＤ−アミノ酸からなるペプチドであり、
Ｄ1およびＤ2は、独立して、水素およびキレーターから選択され、
Ｌ1はリンカーであり、または
Ｌ1とＤ2は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５員から７員環を形成し、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、水素およびアルキルから選択される］
の化合物または薬学的に許容できるその塩；
ｂ．イメージング剤；および
ｃ．薬学的に許容できる担体
を含む組成物を提供する。
【００２０】
本開示の第９の態様では、患者における、拡張的および収縮的再構築、血管壁の総領域、内腔サイズおよび動脈の外周を含む動脈壁の変化を検出、イメージングおよび／またはモニターするキットであって、
ａ．式（ＩＩＩ）： 
【化１０】
2009500410.tif 000011
（ＩＩＩ）
［式中、
Ａは、Ｄ−アミノ酸残基、またはＤ−アミノ酸残基および第２のＤ−アミノ酸からなるペプチドであり、
Ｄ1およびＤ2は、独立して、水素およびキレーターから選択され、
Ｌ1はリンカーであり、または
Ｌ1とＤ2は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５員から７員環を形成し、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、水素およびアルキルから選択される］
の化合物または薬学的に許容できるその塩；
ｂ．イメージング剤；
ｃ．薬学的に許容できる担体；および
ｄ．患者における、拡張的および収縮的再構築、血管壁の総領域、内腔サイズおよび動脈の外周を含む動脈壁の変化を検出、イメージングおよび／またはモニターする診断剤を含む組成物を調製するための指示書
を含むキットを提供する。
【００２１】
本開示の第１０の態様では、患者における、拡張的および収縮的再構築、血管壁の総領域、内腔サイズおよび動脈の外周を含む動脈壁の変化を検出、イメージングおよび／またはモニターする方法であって、
ａ．患者に式（Ｉ）の化合物を投与する工程と、
ｂ．患者における化合物の濃縮部位のイメージを診断イメージング技術によって得る工程とを含む方法を提供する。
【００２２】
本開示の第１１の態様では、患者における、拡張的および収縮的再構築、血管壁の総領域、内腔サイズおよび動脈の外周を含む動脈壁の変化を検出、イメージングおよび／またはモニターする方法であって、
ａ．患者に
ｉ．式（ＩＩＩ）：
【化１１】
2009500410.tif 000012
（ＩＩＩ）
［式中、
Ａは、Ｄ−アミノ酸残基、またはＤ−アミノ酸残基および第２のＤ−アミノ酸からなるペプチドであり、
Ｄ1およびＤ2は、独立して、水素およびキレーターから選択され、
Ｌ1はリンカーであり、または
Ｌ1とＤ2は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５員から７員環を形成し、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、水素およびアルキルから選択される］
または薬学的に許容できるその塩の化合物；および
ｉｉ．イメージング剤
を含む診断剤を投与する工程；および
ｂ．患者における化合物の濃縮部位のイメージを診断イメージング技術によって得る工程とを含む方法を提供する。
【００２３】
本発明のその他の態様は、本明細書で開示した実施形態および態様の適切な組合せを含んでよい。
【００２４】
さらにその他の態様および実施形態は、本明細書で提供した記載に見い出すことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
本明細書で別段の記載がない限り、以下に挙げた用語は以下の定義を有する。
【００２６】
場合によっては、任意の特定の基の炭素原子の数は、その基を挙げる前に示される。例えば、用語「Ｃ6~10アリール」は、炭素原子６から１０個を含有するアリール基を示し、用語「Ｃ6~10アリール−Ｃ1~10アルキル」は、親分子部分に炭素原子１から１０個のアルキル基を介して結合した炭素原子６から１０個のアリール基を指す。これらの呼称が存在する場合、それは本明細書にあるその他の定義全てに取って代わる。
【００２７】
本明細書で使用する単数形態「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに複数を含まない限り、複数も含む。
【００２８】
本明細書で使用する用語「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含有する炭素原子２から１４個の直鎖または分枝鎖炭化水素を指す。
【００２９】
本明細書で使用する用語「アルケニレン」は、炭素原子２から１４個、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含有する直鎖または分枝鎖炭化水素から誘導した二価の基を指す。
【００３０】
本明細書で使用する用語「アルコキシ」は、親分子部分に酸素原子を介して結合したアルキル基を指す。
【００３１】
本明細書で使用する用語「アルコキシアルキル」は、親分子部分にアルキル基を介して結合したアルコキシ基を指す。
【００３２】
本明細書で使用する用語「アルコキシカルボニル」は、親分子部分にカルボニル基を介して結合したアルコキシ基を指す。
【００３３】
本明細書で使用する用語「アルキル」は、直鎖または分枝鎖飽和炭化水素から誘導した基を指す。
【００３４】
本明細書で使用する用語「アルキルアリール」は、親分子部分にアリール基を介して結合したアルキル基を指す。
【００３５】
本明細書で使用する用語「アルキルカルボニル」は、親分子部分にカルボニル基を介して結合したアルキル基を指す。
【００３６】
本明細書で使用する用語「アルキレン」は、炭素原子１から１４個の直鎖または分枝鎖飽和炭化水素から誘導した二価の基を指す。
【００３７】
本明細書で使用する語句「アミノ酸残基」は、アミノ基（−ＮＨ2）、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）および種々の側基のいずれかを含有する天然または合成の有機化合物、特に、基本的な式ＮＨ2ＣＨＲＣＯＯＨを有し、ペプチド結合によって一緒に結合してタンパク質を形成し、または代謝において化学メッセンジャーおよび中間体として機能する２０個の化合物のいずれかから誘導した部分を意味する。例えば、化合物Ｘでは、
【化１２】
2009500410.tif 000013
（Ｘ）、
「Ａ」として表された分子の部分は、アミノ酸Ｄ−ロイシンの残基である。
【００３８】
本明細書で使用する用語「補助」および「共リガンド（ｃｏ−ｌｉｇａｎｄ）」は、試薬のキレーターと共に放射性核種の配位圏を完成させるのに役立つリガンドを指す。二元リガンド系を含む放射性医薬品では、放射性核種配位圏は、合計２タイプのリガンドまたはキレーターがあるという条件で、１種または複数の試薬からの１種または複数のキレーター、および１種または複数の補助または共リガンドを含む。例えば、１種の試薬からの１種のキレーターおよび同じ補助または共リガンドの２つからなる放射性医薬品、ならびに１種または２種の試薬からの２種のキレーターおよび１種の補助または共リガンドを含む放射性医薬品はいずれも二元リガンド系を含むと考えられる。三元リガンド系を含む放射性医薬品では、放射性核種配位圏は、合計３タイプのリガンドまたはキレーターがあるという条件で、１種または複数の試薬からの１種または複数のキレーター、および２つの異なるタイプの補助または共リガンドの１種または複数を含む。例えば、１種の試薬からの１種のキレーターおよび２種の異なる補助または共リガンドからなる放射性医薬品は三元リガンド系を含むと考えられる。
【００３９】
放射性医薬品の調製、および前記放射性医薬品の調製に有用な診断キットに有用な補助または共リガンドは、１個または複数の酸素、窒素、炭素、硫黄、リン、ヒ素、セレンおよびテルルドナー原子を含む。リガンドは、放射性医薬品の合成のトランスファーリガンドであることができ、別の放射性医薬品の補助または共リガンドとしても役立つ。リガンドが移動、補助または共リガンドと呼ばれるかは、リガンドが放射性医薬品の放射性核種配位圏に残るかに依存しており、これは放射性核種の配位化学および試薬（複数可）のキレーターによって決定される。
【００４０】
本明細書で使用する用語「アリール」は、フェニル基、または環の１個もしくは複数がフェニル基である二環縮合環系を指す。二環縮合環系は、単環シクロアルケニル基、単環シクロアルキル基または別のフェニル基に縮合したフェニル基からなる。本発明のアリール基は、親分子部分にその基の任意の置換可能な炭素原子を介して結合できる。アリール基の代表的な例としては、これらだけに限定するものではないが、アントラセニル、アズレニル、フルオレニル、インダニル、インデニル、ナフチル、フェニルおよびテトラヒドロナフチルがある。
【００４１】
本明細書で使用する用語「アリールアルキル」は、親分子部分にアルキル基を介して結合したアリール基を指す。
【００４２】
本明細書で使用する用語「アリールアルキレン」は、親分子部分への結合点の一方がアリール部分にあり、他方がアルキル部分にある二価のアリールアルキル基を指す。
【００４３】
本明細書で使用する用語「アリーレン」は、二価のアリール基を指す。
【００４４】
本明細書で使用する用語「静菌剤」は、製剤中の細菌の増殖をその使用前の貯蔵中、または診断キットを使用して診断剤を合成した後のいずれかで阻害する成分を意味する。
【００４５】
本明細書で使用する用語「バッファー」は、反応混合物のｐＨを約３から約１０に維持するのに使用する物質を指す。
【００４６】
本明細書で使用する用語「カルボニル」は−Ｃ（Ｏ）−を指す。
【００４７】
本明細書で使用する用語「シアノ」は−ＣＮを指す。
【００４８】
本明細書で使用する用語「担体」は、この開示の化合物および／または診断剤と共に患者に投与できるアジュバントまたはベヒクルを指し、これは、有効量の診断剤および／または化合物を送達するのに十分な量で投与した場合に、その活性を損わず、非毒性である。
【００４９】
本明細書で使用する用語「キレーター」は、金属イオンに１種または複数のドナー原子を介して結合する分子上の部分または基を指す。キレーターは、親分子部分にリンカー、Ｌ2を介して所望により結合する。適切なＬ2基の例としては、これらだけに限定するものではないが、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ2−Ａｒ−ＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）−（Ａｒはアリーレン基である）；−Ｃ（Ｏ）−；−Ｃ（Ｏ）−Ｈｅｔ−ＮＨＮＨＣ（Ｏ）−（Ｈｅｔはヘテロアリーレンである）；および−Ｃ（Ｏ）−Ｈｅｔ−がある。開示の化合物および／または診断剤の一定の実施形態では、キレーターは、エコー源性物質入りの脂質球または微小気泡を形成できる界面活性剤である。
【００５０】
一定の他の実施形態では、キレーターは、以下から選択された式を有する。
【化１３】
2009500410.tif 000014
2009500410.tif 000015
2009500410.tif 000016
2009500410.tif 000017
2009500410.tif 000018
2009500410.tif 000019
および
2009500410.tif 000020
式中、
各Ａ1は、独立して、−ＮＲ19Ｒ20、−Ｎ（Ｒ26）2、−ＳＨ、−Ｓ（Ｐｇ）、−ＯＨ、−ＰＲ19Ｒ20、−Ｐ（Ｏ）Ｒ21Ｒ22、−ＣＯ2Ｈ、親分子部分への結合およびＬ2への結合から選択され、
各Ａ2は、独立して、Ｎ（Ｒ26）、Ｎ（Ｒ19）、Ｓ、Ｏ、Ｐ（Ｒ19）および−ＯＰ（Ｏ）（Ｒ21）Ｏ−から選択され、
Ａ3はＮであり、
Ａ4は、ＯＨおよびＯＣ（＝Ｏ）Ｃ1~20アルキルから選択され、
Ａ5はＯＣ（＝Ｏ）Ｃ1~20アルキルであり、
各Ｅは、独立して、０〜３個のＲ23で置換されたＣ1~16アルキレン、０〜３個のＲ23で置換されたＣ6~10アリーレン、０〜３個のＲ23で置換されたＣ3~10シクロアルキレン、０〜３個のＲ23で置換されたヘテロシクリル−Ｃ1~10アルキレン、０〜３個のＲ23で置換されたＣ6~10アリール−Ｃ1~10アルキレン、０〜３個のＲ23で置換されたＣ1~10アルキル−Ｃ6~10アリーレンおよび０〜３個のＲ23で置換されたヘテロシクリレンから選択され、
Ｅ1は結合およびＥから選択され、
各Ｅ2は、独立して、０〜３個のＲ23で置換されたＣ1~16アルキル、０〜３個のＲ23で置換されたＣ6~10アリール、０〜３個のＲ23で置換されたＣ3~10シクロアルキル、０〜３個のＲ23で置換されたヘテロシクリル−Ｃ1~10アルキル、０〜３個のＲ23で置換されたＣ6~10アリール−Ｃ1~10アルキル、０〜３個のＲ23で置換されたＣ1~10アルキル−Ｃ6~10アリールおよび０〜３個のＲ23で置換されたヘテロシクリルから選択され、
Ｅ3は、１〜３個のＲ32で置換されたＣ1~10アルキレンであり、
Ｐｇはチオール保護基であり、
Ｒ19およびＲ20は、各々独立して、Ｌ2への結合、親分子部分への結合、水素、０〜３個のＲ23で置換されたＣ1~10アルキル、０〜３個のＲ23で置換されたアリール、０〜３個のＲ23で置換されたＣ3~10シクロアルキル、０〜３個のＲ23で置換されたヘテロシクリル−Ｃ1~10アルキル、０〜３個のＲ23で置換されたＣ6~10アリール−Ｃ1~10アルキルおよび０〜３個のＲ23で置換されたヘテロシクリルから選択され、
Ｒ21およびＲ22は、各々独立して、Ｌ2への結合、親分子部分への結合、−ＯＨ、０〜３個のＲ23で置換されたＣ1~10アルキル、０〜３個のＲ23で置換されたアリール、０〜３個のＲ23で置換されたＣ3~10シクロアルキル、０〜３個のＲ23で置換されたヘテロシクリル−Ｃ1~10アルキル、０〜３個のＲ23で置換されたＣ6~10アリール−Ｃ1~10アルキルおよび０〜３個のＲ23で置換されたヘテロシクリルから選択され、
各Ｒ23は、独立して、Ｌ2への結合、親分子部分への結合、＝Ｏ、ハロ、トリフルオロメチル、シアノ、−ＣＯ2Ｒ24、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ24、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ24）2、−ＣＨＯ、−ＣＨ2ＯＲ24、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ24、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ24、−ＯＲ24、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ24）2、−ＮＲ24Ｃ（＝Ｏ）Ｒ24、−ＮＲ24Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ24、−ＮＲ24Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ24）2、−ＮＲ24ＳＯ2Ｎ（Ｒ24）2、−ＮＲ24ＳＯ2Ｒ24、−ＳＯ3Ｈ、−ＳＯ2Ｒ24、−ＳＲ24、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ24、−ＳＯ2Ｎ（Ｒ24）2、−Ｎ（Ｒ24）2、−ＮＨＣ（＝Ｓ）ＮＨＲ24、＝ＮＯＲ24、ＮＯ2、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＲ24、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＮＲ24Ｒ24、−ＯＣＨ2ＣＯ2Ｈ、２−（１−モルホリノ）エトキシ、Ｃ1~5アルキル、Ｃ2~4アルケニル、Ｃ3~6シクロアルキル、Ｃ3~6シクロアルキルメチル、Ｃ2~6アルコキシアルキル、０〜２個のＲ24で置換されたアリールおよびヘテロシクリルから選択され、
各Ｒ24は、独立して、Ｌ2への結合、親分子部分への結合、水素、Ｃ1~6アルキル、フェニル、ベンジルおよびＣ1~6アルコキシから選択され、
各Ｒ26は、独立して、金属への配位結合またはヒドラジン保護基であり、
各Ｒ32は、Ｒ34、＝Ｏ、−ＣＯ2Ｒ33、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ33、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ33）2、−ＣＨ2ＯＲ33、−ＯＲ33、−Ｎ（Ｒ33）2およびＣ2〜Ｃ4アルケニルから選択され、
各Ｒ33は、独立して、Ｒ34、水素、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、フェニル、ベンジルおよびトリフルオロメチルから選択され、
Ｒ34はＬ2への結合であり、
ここで、Ａ1、Ｒ19、Ｒ20、Ｒ21、Ｒ22、Ｒ23、Ｒ24およびＲ34の少なくとも１つは、Ｌ2または親分子部分への結合である。
【００５１】
本開示のある実施形態では、キレート剤は次式を有する。
【化１４】
2009500410.tif 000021
式中、
Ａ1cはＬ2への結合であり、
Ａ1a、Ａ1b、Ａ1dおよびＡ1eは、各々−ＣＯ2Ｈであり、
Ａ3a、Ａ3bおよびＡ3cは、各々Ｎであり、
ＥbおよびＥcはＣ2アルキレンであり、
Ｅa、Ｅd、Ｅe、ＥfおよびＥgはＣＨ2である。
【００５２】
本開示の別の実施形態では、キレート剤は次式を有する。
【化１５】
2009500410.tif 000022
式中、
Ａ3a、Ａ3b、Ａ3cおよびＡ3dは、各々Ｎであり、
Ａ1aはＬ2への結合であり、
Ａ1b、Ａ1cおよびＡ1dは、各々−ＣＯ2Ｈであり、
Ｅa、Ｅc、ＥgおよびＥeは、各々ＣＨ2であり、
Ｅb、Ｅd、ＥfおよびＥhは、各々Ｃ2アルキレンである。
【００５３】
本開示の別の実施形態では、キレート剤は次式を有する。
【化１６】
2009500410.tif 000023
式中、
Ａ1aは−Ｎ（Ｒ26）2であり、
Ａ1bはＮＨＲ19であり、
Ｅは結合であり、
Ｒ19はＬ2への結合であり、
各Ｒ26は金属への配位結合である。
【００５４】
本明細書で使用する用語「シクロアルキル」は、炭素原子３から１４個およびヘテロ原子０個を有する飽和の単環式、二環式、または三環式炭化水素環系を指す。シクロアルキル基の代表的な例としては、これらだけに限定するものではないが、シクロプロピル、シクロペンチル、ビシクロ［３．１．１］ヘプチルおよびアダマンチルがある。
【００５５】
本明細書で使用する用語「シクロアルキレン」は、二価のシクロアルキル基を指す。
【００５６】
本明細書で使用する用語「シクロアルキルメチル」は、親分子部分に−ＣＨ2−基を介して結合したシクロアルキル基を指す。
【００５７】
本明細書で使用する用語「診断剤」は、状態、病的障害および／または疾患の存在および／または進行を検出、イメージングおよび／またはモニターするのに使用できる化合物を指す。イメージング剤を含有する本発明の化合物全てが診断剤であることを理解すべきである。例えば、Ｄ1およびＤ2の一方がイメージング剤である式（Ｉ）の化合物は診断剤である。
【００５８】
本明細書で使用する用語「診断イメージング技術」は、診断剤を検出するのに使用する手順を指す。
【００５９】
本明細書で使用する用語「診断キット」および「キット」は、臨床または薬局の設定で実施する最終使用者によって診断剤を合成するのに使用される、１個または複数のバイアル中の成分の集まりを指す。キットは、イメージング剤の溶液またはその前駆体、診断剤の合成中に加熱するための器具、注射器およびシールド（必要に応じて）など、診断剤を患者に投与するのに必要な器具、ならびにイメージング器具など、診断剤を合成し使用するのに必要な成分全てを提供する（水または注射用生理食塩水など、実施する最終使用者が一般に入手可能なものは除く）。
【００６０】
本明細書で使用する語句「ドナー原子」は、化学結合によって金属に直接結合した原子を指す。
【００６１】
本明細書で使用する用語「ハロ」は、Ｂｒ、Ｃｌ、ＦまたはＩを指す。
【００６２】
本明細書で使用する用語「ヘテロアルキレン」は、炭素原子の１から７個が、Ｏ、ＮＨおよびＳから選択されるヘテロ原子で置換されたアルキレン基を指す。
【００６３】
本明細書で使用する用語「ヘテロシクリル」は、窒素、酸素および硫黄からなる群から独立して選択された１、２または３個のヘテロ原子を含有する５員、６員または７員環を指す。５員環は０から２個の二重結合を有し、６員から７員環は０から３個の二重結合を有する。用語「ヘテロシクリル」はまた、ヘテロシクリル環がフェニル基、単環シクロアルケニル基、単環シクロアルキル基または別の単環ヘテロシクリル基に縮合した二環式基を含む。本発明のヘテロシクリル基は、親分子部分に、その基の炭素原子または窒素原子を介して結合できる。ヘテロシクリル基の例としては、これらだけに限定するものではないが、ベンゾチエニル、フリル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、モルホリニル、オキサゾリル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジニル、ピロリジニル、ピロロピリジニル、ピロリル、チアゾリル、チエニルおよびチオモルホリニルがある。
【００６４】
本明細書で使用する用語「ヘテロシクリルアルキル」は、親分子部分にアルキル基を介して結合したヘテロシクリル基を指す。
【００６５】
本明細書で使用する用語「ヘテロシクリルアルキレン」は、親分子部分への結合点の一方がヘテロシクリル部分にあり、他方がアルキル部分にある二価のヘテロシクリルアルキル基を指す。
【００６６】
本明細書で使用する用語「ヘテロシクリレン」は、二価のヘテロシクリル基を指す。
【００６７】
本明細書で使用する用語「イメージング部分」は、イメージング剤を含有する分子の部分（複数可）を指す。本明細書で使用する用語「イメージング剤」は、状態、病的障害および／または疾患の存在および／または進行を検出、イメージングおよび／またはモニターするのを可能にする診断剤中の元素または官能基を指す。イメージング部分はリンカー、Ｌ3を含有し、これはイメージング剤を親分子部分に結合する。適切なＬ3基の例としては、直鎖または分枝鎖アルキレン基、−Ｃ（Ｏ）−などがある。
【００６８】
イメージング剤は、エコー源性物質（液体または気体のいずれか）、非金属アイソトープ、光学レポーター、ホウ素中性子吸収材、常磁性金属イオン、強磁性金属、γ放射性ラジオアイソトープ、陽電子放射性ラジオアイソトープまたはＸ線吸収材であってよい。
【００６９】
適切なエコー源性ガスとしては、六フッ化硫黄またはパーフルオロカーボンガス、例えばパーフルオロメタン、パーフルオロエタン、パーフルオロプロパン、パーフルオロブタン、パーフルオロシクロブタン、パーフルオロペンタンまたはパーフルオロヘキサンがある。
【００７０】
適切な非金属アイソトープとしては、11Ｃ、14Ｃ、13Ｎ、18Ｆ、123Ｉ、124Ｉおよび125Ｉがある。
【００７１】
適切な光学レポーターとしては、蛍光レポーターおよび化学発光基がある。
【００７２】
適切なラジオアイソトープとしては、99mＴｃ、95Ｔｃ、111Ｉｎ、62Ｃｕ、64Ｃｕ、67Ｇａ、68Ｇａおよび153Ｇｄがある。本開示の特定の実施形態では、適切なラジオアイソトープとしては、99mＴｃ、111Ｉｎ、68Ｇａ、153Ｇｄがある。
【００７３】
適切な常磁性金属イオンとしては、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）およびＭｎ（ＩＩ）がある。
【００７４】
適切なＸ線吸収材としては、Ｒｅ、Ｓｍ、Ｈｏ、Ｌｕ、Ｐｍ、Ｙ、Ｂｉ、Ｐｄ、Ｇｄ、Ｌａ、Ａｕ、Ａｕ、Ｙｂ、Ｄｙ、Ｃｕ、Ｒｈ、ＡｇおよびＩｒがある。
【００７５】
本明細書で使用する用語「リンカー」は、分子の２個の他の部分間のスペーサーとして役立つ分子の部分を指す。リンカーは、本明細書で記載した通りのその他の機能を果たしてもよい。
【００７６】
本明細書で使用する用語「凍結乾燥助剤」は、ガラス転移温度など、凍結乾燥に好ましい物理的特性を有し、凍結乾燥のために製剤の成分全ての組合せの物理的特性を改良するために製剤に添加する成分を意味する。
【００７７】
本明細書で使用する用語「メタロファーマシューティカル」は、金属を含む薬剤を意味する。この金属は、診断適用でのイメージングシグナル源、および放射性治療適用での細胞毒性放射線源である。
【００７８】
本明細書で使用する語句「薬学的に許容できる」は、健全な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応またはその他の問題もしくは合併症なしに、妥当な利益／危険比に見合ってヒトおよび動物の組織と接触して使用するのに適切な化合物、診断剤、材料、組成物および／または剤形を指す。
【００７９】
本開示の化合物および／または診断剤は、薬学的に許容できる塩として存在できる。本明細書で使用する用語「薬学的に許容できる塩」は、本開示の化合物および／または診断剤の塩または両性イオン形態を表し、これは、水溶性または脂溶性または分散性であり、健全な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応またはその他の問題もしくは合併症なしに、妥当な利益／危険比に見合って患者の組織と接触して使用するのに適切であり、それらの意図した使用に有効である。塩は、化合物および／または診断剤の最終分離および精製中に、または適切な窒素原子を適切な酸と反応させることによって別個に調製できる。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩；ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パルモエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロプリオネート（3-phenylproprionate）、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、パラトルエンスルホン酸塩およびウンデカン酸塩がある。薬学的に許容できる付加塩を形成するのに使用できる酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸およびリン酸などの無機酸、ならびにシュウ酸、マレイン酸、コハク酸およびクエン酸などの有機酸がある。
【００８０】
塩基性付加塩は、化合物および／または診断剤の最終分離および精製中に、カルボキシ基を金属カチオンの水酸化物、炭酸塩もしくは重炭酸塩などの適切な塩基、あるいはアンモニアまたは有機第１級、第２級もしくは第３級アミンと反応させることによって調製できる。薬学的に許容できる塩のカチオンとしては、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムおよびアルミニウム、ならびにアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン、エチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルフェネチルアミンおよびＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンなどの非毒性第４級アミンカチオンがある。塩基性付加塩の形成に有用なその他の代表的な有機アミンとしては、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、メグルミン、ピペリジンおよびピペラジンがある。
【００８１】
本明細書で使用する用語「放射性医薬品」は、金属がラジオアイソトープであるメタロファーマシューティカルを指す。
【００８２】
本明細書で使用する用語「試薬」は、この開示の診断剤に直接変換できるこの開示の化合物を意味する。試薬は、この開示の診断剤の調製に直接利用できるか、この開示のキットの成分であってよい。
【００８３】
本明細書で使用する用語「還元剤」は、放射性核種（比較的非反応性で高酸化状態の化合物として典型的に得られる）と反応して、電子を放射性核種に移し、それによってより反応性にすることによりその酸化状態を低下させる化合物を指す。
【００８４】
本明細書で使用する語句「溶解助剤」は、製剤に必要とされる媒体中の１種または複数のその他の成分の溶解性を改良する成分である。
【００８５】
本明細書で使用する語句「安定化助剤」は、メタロファーマシューティカルの安定化、または使用時前のキットの保存寿命の延長のいずれかのためにメタロファーマシューティカルまたは診断キットに加える成分を意味する。安定化助剤は、酸化防止剤、還元剤または遊離基捕捉剤であることができ、その他の成分またはメタロファーマシューティカルを分解する化学種と反応させることによって改良した安定性を提供することができる。
【００８６】
本明細書で使用する用語「安定な」は、製造を可能にする能力を有し、本明細書で詳述した目的のために有用な十分な時間完全性を維持する化合物および／または診断剤を指す。典型的には、本開示の化合物および／または診断剤は、温度４０℃以下、湿気またはその他の化学的に反応性の条件なしで、少なくとも１週間安定である。
【００８７】
本明細書で使用する用語「滅菌」は、病原菌を含まない、または病原菌を含まないことを維持する方法を使用することを意味する。
【００８８】
本発明の化合物および／または診断剤には不斉中心が存在する。これらの中心は、キラル炭素原子の周りの置換基の配置に依存して記号「Ｒ」または「Ｓ」で指定される。別段の記載がない限り、本発明は、本化合物および／もしくは診断剤の立体化学異性体の全て、またはそれらの混合物を包含することを理解すべきである。化合物および／または診断剤の個々の立体異性体は、キラル中心を含有する市販の出発物質から合成的に調製できるか、またはエナンチオマー生成物の混合物を調製し、次いでジアステレオマーの混合物への変換などの分離、次いで分離または再結晶、クロマトグラフィー技術、またはキラルクロマトグラフィーカラムでのエナンチオマーの直接分離によって調製できる。特定の立体化学の出発化合物は、市販されているか、または当技術分野で既知の技術によって作製し分割できる。
【００８９】
本開示の一定の化合物および／または診断剤はまた、分離可能であり得る異なる安定な立体配座形態で存在し得る。不斉単結合の周りの束縛回転によるねじれ不斉は、例えば立体障害または環ひずみのため、異なる配座異性体の分離を可能にし得る。本開示は、これらの化合物および／または診断剤の各配座異性体、ならびにそれらの混合物を含む。
【００９０】
任意の変数が１回を超えて任意の置換基または任意の式で生じる場合、各場合の定義は、全てのその他の場合のその定義とは独立である。したがって、例えば、基が０〜２個のＲ23で置換されていることが示されるならば、前記基は最大２個のＲ23で適宜置換され、Ｒ23は各々、可能なＲ23を定義したリストから独立して選択される。また、例として、基−Ｎ（Ｒ24）2では、窒素上の２個のＲ24置換基の各々は、可能なＲ24を定義したリストから独立して選択される。置換基および／または変数の組合せは、そのような組合せが安定な化合物および／または診断剤となる場合のみ許容される。置換基への結合が環の２個の原子をつなぐ結合を横断するように示されている場合、そのような置換基は環の任意の原子に結合してよい。
【００９１】
イメージング剤がラジオアイソトープである場合、化合物は、ラジオアイソトープを安定化できる第１の補助リガンドおよび第２の補助リガンドをさらに含んでよい。多くのリガンドは、補助または共リガンドとして役立つことができ、その選択は、放射性医薬品の合成の容易さ、補助リガンドの化学的および物理的特性、形成率、収率、得られた放射性医薬品の異性体の数、前記補助または共リガンドを患者に、前記患者に生理学的悪影響を与えずに投与する能力、およびリガンドの凍結乾燥したキット製剤への適合性など、種々の考慮事項により決定される。補助リガンドの電荷および親油性は、放射性医薬品に電荷および親油性をもたらす。例えば、４，５−ジヒドロキシ−１，３−ベンゼンジスルホネートを使用すると、さらなる２個のアニオン性基を有する放射性医薬品となる。なぜなら、スルホネート基が生理学的状態下でアニオン性だからである。Ｎ−アルキル置換された３，４−ヒドロキシピリジノンを使用すると、アルキル置換基のサイズに応じて様々な程度の親油性を有する放射性医薬品となる。
【００９２】
この開示の化合物および／または診断剤は、溶液中、医薬組成物中およびインビボで種々の配置形態およびイオン形態を採り得ることも理解すべきである。この開示の特定の化合物および／または診断剤の本明細書での記述は、特定の配置およびイオン形態のものであるが、それらの化合物および／または診断剤のその他の配置およびイオン形態もそれらの記述により想定され、包含される。
【００９３】
この開示の医薬組成物で使用してよい薬学的に許容できる担体、アジュバントおよびベヒクルとしては、これらだけに限定するものではないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えばヒト血清アルブミン、バッファー基質、例えばホスフェート、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ＴＲＩＳ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノ−メタン）、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイダルシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系基質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレンブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂がある。
【００９４】
この開示によれば、医薬組成物は滅菌注射製剤、例えば滅菌注射水性または油性懸濁液の形態であってよい。この懸濁液は、当技術分野で知られた技術に従って、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を使用して製剤してよい。この滅菌注射製剤はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射溶液または懸濁液、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液であってよい。用い得る許容されるベヒクルおよび溶媒としては、水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌不揮発性油は溶媒または懸濁媒体として慣用的に用いられる。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む、任意の無菌不揮発性油を用いてよい。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体などの脂肪酸は、注射可能物質の調製に、天然の薬学的に許容される油、例えばオリーブ油またはヒマシ油、特にそれらのポリオキシエチル化されたものとして有用である。これらの油溶液または懸濁液は、長鎖アルコール希釈剤または分散剤も含有してもよい。
【００９５】
ある場合には、注射の用量および速度に応じて、血漿タンパク質の結合部位がプロドラッグおよび活性化剤で飽和されることがある。これは、タンパク質に結合した薬剤の割合の低下につながり、薬剤の半減期または許容性、ならびに有効性を低下させることになり得る。これらの状況において、プロドラッグ剤を滅菌アルブミンまたは血漿代替溶液と共に注射することは望ましい。あるいは、造影剤を含有し、それを注射器に採取した血液と混合し、次いでこれを患者に再び注射する装置／注射器を使用できる。
【００９６】
本開示の化合物、診断剤および医薬組成物は、経口的に、非経口的に、吸入スプレーにより、局所的に、経直腸的に、鼻内に、口腔内に、経膣的に、または慣用の非毒性の薬学的に許容される担体、アジュバントおよびベヒクルを含有する剤形の埋め込みレザーバーを介して投与してよい。本明細書で使用する用語「非経口」は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液嚢内、胸骨内、鞘内、肝内、病巣内および頭蓋内注射または注入技術を含む。
【００９７】
経口投与する場合、この開示の医薬組成物は、これらだけに限定するものではないが、カプセル、錠剤、水性懸濁液または溶液を含む任意の経口的に許容される剤形で投与してよい。経口使用のための錠剤の場合、一般に使用される担体としては、乳糖およびトウモロコシデンプンがある。ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤も通常加える。カプセル形態の経口投与では、有用な希釈剤としては、乳糖および乾燥トウモロコシデンプンがある。経口使用に水性懸濁液が求められる場合、活性成分は乳化剤および懸濁化剤と合わせる。所望により、一定の甘味剤、香味剤または着色剤も加えてよい。
【００９８】
あるいは、直腸投与用の坐薬の形態で投与する場合、この開示の医薬組成物は、室温で固体であるが直腸温度では液体であり、したがって直腸で溶融して薬物を放出する適切な非刺激性賦形剤と薬剤を混合することによって調製してよい。そのような材料としては、カカオ脂、蜜蝋およびポリエチレングリコールがある。
【００９９】
上記の通り、特に治療の標的が眼、皮膚または下部腸管を含む局所適用によって容易に対処可能な領域または器官を含む場合、この開示の医薬組成物は局所的に投与してもよい。これらの領域または器官のそれぞれに適切な局所製剤は容易に調製される。
【０１００】
下部腸管の局所適用は、直腸坐薬製剤（上記参照）または適切な浣腸製剤で実施できる。局所経皮パッチも使用してよい。
【０１０１】
局所適用では、医薬組成物は、１種または複数の担体に懸濁または溶解させた活性成分を含有する適切な軟膏に製剤してよい。この開示の化合物および／または診断剤の局所投与のための担体としては、これらだけに限定するものではないが、鉱油、流動パラフィン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックスおよび水がある。あるいは、医薬組成物は、１種または複数の薬学的に許容できる担体に懸濁または溶解させた活性成分を含有する適切なローションまたはクリームに製剤できる。適切な担体としては、これらだけに限定するものではないが、鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水がある。
【０１０２】
眼科使用では、医薬組成物は、等張のｐＨ調整した滅菌生理食塩水中の微粉化懸濁液として、または典型的には等張のｐＨ調整した滅菌生理食塩水中の溶液として、塩化ベンジルアルコニウムなどの防腐剤ありまたはなしのいずれでも製剤してよい。あるいは、眼科使用では、医薬組成物は、ワセリンなどの軟膏で製剤してよい。
【０１０３】
鼻用エアゾルまたは吸入による投与では、この開示の医薬組成物は、製剤の技術分野でよく知られた技術に従って調製され、ベンジルアルコールまたはその他の適切な防腐剤、バイオアベイラビリティーを高める吸収促進剤、フルオロカーボン、および／またはその他の慣用の可溶化剤または分散剤を使用して生理食塩水中の溶液として調製してよい。
【０１０４】
単回投与形態を製造する担体材料と合わせることができる活性成分の量は、治療を受ける受容者および具体的な投与方式に応じて変化する。典型的な製剤は、約５％から約９５％の活性化合物（ｗ／ｗ）を含有する。典型的には、そのような製剤は、約２０％から約８０％の活性化合物を含有する。
【０１０５】
静脈内およびその他のタイプの投与では、許容される用量範囲は体重１ｋｇ当たり約０．００１から約１．０ｍｍｏｌであり、活性成分化合物の典型的な用量は体重１ｋｇ当たり約０．００１から約０．５ｍｍｏｌの範囲である。より典型的には、約０．０１から約０．１ｍｍｏｌ／ｋｇであり、活性成分化合物の最も典型的な用量は約０．０００１から約０．０５ｍｍｏｌ／ｋｇである。
【０１０６】
当業者ならば理解する通り、上記の量よりも少量または多量が求められることもある。任意の特定の患者の特定の用法・用量は、用いる具体的な化合物の活性、年齢、体重、全般的健康状態、性別、食事、投与時間、排泄率、薬物の組合せ、および治療する医師の判断を含む種々の要因に依存する。
【０１０７】
本開示の別の態様は、マトリックスメタロプロテイナーゼ活性に関連した病的障害を検出、イメージングおよび／またはモニターする診断剤を調製するための診断キットである。本開示の診断キットは、所定量の本開示の試薬、ならびに所望により、トリシンおよび３−［ビス（３−スルホフェニル）ホスフィン］ベンゼンスルホン酸（ＴＰＰＴＳ）、還元剤、トランスファーリガンド、バッファー、凍結乾燥助剤、安定化助剤、溶解助剤および静菌剤などの１種または２種の補助リガンドなどのその他の成分を含む、滅菌のパイロジェン不含有製剤を含有する１個または複数のバイアルを含む。
【０１０８】
１種または複数の任意選択の成分を製剤に含めることは、実施する最終使用者による診断剤の合成の容易さ、キット製造の容易さ、キットの保存寿命、またはイメージング剤の安定性および保存寿命をしばしば改良する。１つまたは２つの補助リガンドを含めることが、ヒドラジンまたはヒドラゾン結合部分を含む試薬を含む診断キットに求められている。製剤の全てまたは一部を含有する１個または複数のバイアルは、独立して、滅菌溶液または凍結乾燥固体の形態であることができる。
【０１０９】
本開示の別の態様は、心疾患、感染症、炎症性疾患および癌の診断用の診断剤を調製する診断キットである。本開示の診断キットは、この開示で記載した所定量のキレート剤、安定化用共リガンド、還元剤、ならびに所望により、バッファー、凍結乾燥助剤、安定化助剤、溶解助剤および静菌剤などのその他の成分を含む滅菌のパイロジェン不含有製剤を含有する１個または複数のバイアルを含有する。
【０１１０】
１種または複数の任意選択の成分を製剤に含めることは、実施する最終使用者による診断剤の合成の容易さ、キット製造の容易さ、キットの保存寿命、またはイメージング剤の安定性および保存寿命をしばしば改良する。任意選択の成分を製剤に含めることによって達成された改良は、製剤に加えられた複雑さ、およびキットの製造に加えられたコストに対して評価しなければならない。製剤の全てまたは一部を含有する１個または複数のバイアルは、独立して、滅菌溶液または凍結乾燥固体の形態であることができる。
【０１１１】
診断剤およびそのキットの調製に有用なバッファーとしては、これらだけに限定するものではないが、リン酸塩、クエン酸塩、スルホサリチル酸塩および酢酸塩がある。より完全なリストは米国薬局方に見い出すことができる。
【０１１２】
診断剤およびそのキットの調製に有用な凍結乾燥助剤としては、これらだけに限定するものではないが、マンニトール、乳糖、ソルビトール、デキストラン、Ｆｉｃｏｌｌおよびポリビニルピロリジン（ＰＶＰ）がある。
【０１１３】
診断剤およびそのキットの調製に有用な安定化助剤としては、これらだけに限定するものではないが、アスコルビン酸、システイン、モノチオグリセロール、亜硫酸水素ナトリウム、メタ亜硫酸水素ナトリウム、ゲンチシン酸およびイノシトールがある。
【０１１４】
診断剤およびそのキットの調製に有用な溶解助剤としては、これらだけに限定するものではないが、エタノール、グリセリン、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノオレエート、ポリソルベート、ポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシプロピレン）ポリ（オキシエチレン）ブロックコポリマー（Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ）およびレシチンがある。典型的な溶解助剤は、ポリエチレングリコールおよびＰｌｕｒｏｎｉｃｓコポリマーである。
【０１１５】
診断剤およびそのキットの調製に有用な静菌剤としては、これらだけに限定するものではないが、ベンジルアルコール、塩化ベンザルコニウム、クロルブタノールおよびメチル、プロピルまたはブチルパラベンがある。
【０１１６】
診断キット中の成分はまた、１種を超える機能を果たすことができる。還元剤は安定化助剤としても役立つことができ、バッファーはトランスファーリガンドとしても役立つことができ、凍結乾燥助剤はトランスファー、補助または共リガンドなどとしても役立つことができる、などである。
【０１１７】
製剤中の各成分の所定量は、ある場合にはその成分に特定であり、その他の場合には別の成分の量または任意選択の成分の存在および量に依存する種々の検討事項によって決定する。一般に、製剤の所望の効果を与える各成分の最少量を使用する。製剤の所望の効果とは、実施する最終使用者が診断剤を合成でき、診断剤を患者に安全に注射できること、およびその患者の疾患状態の診断情報を提供することについて高い確実性を有するということである。
【０１１８】
本開示の診断キットは、実施する最終使用者がそれに従って診断剤を合成するための指示書を含むこともできる。これらの指示書は、バイアルの１個もしくは複数または１個もしくは複数のバイアルが配送用にパッケージされた容器に貼られていてよく、あるいは添付文書と呼ばれる別個の文書であってよい。
【０１１９】
磁気共鳴イメージング造影剤として使用するための、Ｘ線造影剤、超音波造影剤およびメタロファーマシューティカルは、最終使用者に、典型的には１個のバイアル中に凍結乾燥固体または水溶液のいずれかとして入った製剤の最終形態で提供される。最終使用者は、凍結乾燥固体を水または生理食塩水で再構成し、患者用量を引き出すか、提供された水溶液製剤から用量を単に引き出す。
【０１２０】
これらの診断剤は、γシンチグラフィー、陽電子放射断層法、ＭＲＩ、超音波またはＸ線画像強調のいずれでも、とりわけ、心疾患の経時的変化を検出およびモニターするのに有用である。
【０１２１】
本開示の化合物および／または診断剤は、本明細書で記載の手順に従って調製できる。一般に、ペプチド、ポリペプチドおよびペプチド模倣物は、Ｃ末端残基のαアミンを脱保護し、次の適切に保護されたアミノ酸をペプチド結合を介して記載の方法を使用してカップリングさせることによって伸長する。この脱保護およびカップリング手順は、所望の配列が得られるまで繰り返す。このカップリングは、構成アミノ酸で段階的に、もしくは断片（２個から数個のアミノ酸）の濃縮、または両方のプロセスの組合せで、またはJ.Am.Chem.Soc., 1963, 85, 2149-2154で最初に記載された方法に従って固相ペプチド合成によって実施できる。
【０１２２】
ペプチド、ポリペプチドおよびペプチド模倣物はまた、自動化合成装置を使用して合成できる。上記に加え、ペプチド、ポリペプチドおよびペプチド模倣物合成の手順は、Stewart and Young, Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd ed, Pierce Chemical Co., Rockford IL (1984); Gross, Meienhofer, Udenfriend, Eds. The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 1, 2, 3, 5, and 9, Academic Press, New York, (1980-1987); Bodanszky, Peptide Chemistry: A Practical Textbook, Springer-Verlag, New York (1988); and Bodanszky et al., The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, New York (1984)に記載されている。
【０１２３】
２つのアミノ酸誘導体の間、アミノ酸とペプチド、ポリペプチドまたはペプチド模倣物との間、２つのペプチド、ポリペプチドまたはペプチド模倣物断片の間のカップリング、またはペプチド、ポリペプチドもしくはペプチド模倣物の環化は、アジド法、混合炭酸無水物（クロロギ酸イソブチル）法、カルボジイミド（ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミドまたは水溶性カルボジイミド）法、活性エステル（ｐ−ニトロフェニルエステル、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル）法、ウッドワード試薬Ｋ法、カルボニルジイミダゾール法、ＢＯＰ−Ｃｌなどのリン試薬、または酸化還元法などの標準のカップリング手順を使用して実施できる。これらの方法のいくつか（特にカルボジイミド法）は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールまたは１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾールの添加によって強めることができる。これらのカップリング反応は、溶液（液相）またはポリスチレンもしくは適切な樹脂（以下参照）などの固相のいずれかで実施してよい。
【０１２４】
構成アミノ酸またはアミノ酸模倣物の官能基は、望ましくない結合の形成を避けるために、カップリング反応の間、典型的には保護されている。使用できる保護基は、Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York (1981) and The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 3, Academic Press, New York (1981)に挙げられている。
【０１２５】
Ｃ末端残基のα−カルボキシル基は、切断してカルボン酸を与えることができるエステルによって保護されてよい。これらの保護基には、
（１）アルキルエステル、例えばメチルおよびｔ−ブチル、
（２）アリールエステル、例えばベンジルおよび置換ベンジル、または
（３）温和な塩基処理または温和な還元手段で切断できるエステル、例えばトリクロロエチルエステルおよびフェナシルエステル
がある。
【０１２６】
固相の場合、Ｃ末端アミノ酸は不溶性担体（通常ポリスチレン）に結合している。これらの不溶性担体は、カルボキシル基と反応して、鎖延長条件に対しては安定であるが、後で容易に切断する結合を形成する基を含有する。例としては、オキシム樹脂（DeGrado and Kaiser (1980) J. Org. Chem. 45, 1295-1300）クロロまたはブロモメチル樹脂、ヒドロキシメチル樹脂およびアミノメチル樹脂がある。これらの樹脂の多くは、所望のＣ末端アミノ酸を既に組み込んで市販されている。
【０１２７】
各アミノ酸のα−アミノ基は一般に保護されている。当技術分野で知られている任意の保護基を使用してよい。これらの例は、
（１）アシルタイプ、例えばホルミル、トリフルオロアセチル、フタリルおよびｐ−トルエンスルホニル、
（２）芳香族カルバメートタイプ、例えばベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）および置換ベンジルオキシカルボニル、１−（ｐ−ビフェニル）−１−メチルエトキシカルボニルおよび９−フルオレニル−メチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、
（３）脂肪族カルバメートタイプ、例えばｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、エトキシカルボニル、ジイソプロピルメトキシカルボニルおよびアリルオキシカルボニル、
（４）環状アルキルカルバメートタイプ、例えばシクロペンチルオキシカルボニルおよびアダマンチルオキシカルボニル、
（５）アルキルタイプ、例えばトリフェニルメチルおよびベンジル、
（６）トリアルキルシラン、例えばトリメチルシラン、および
（７）チオール含有タイプ、例えばフェニルチオカルボニルおよびジチアスクシノイル
である。
【０１２８】
典型的なα−アミノ保護基は、ＢｏｃまたはＦｍｏｃのいずれかである。ペプチド合成用に適切に保護された多くのアミノ酸またはアミノ酸模倣物誘導体は市販されている。
【０１２９】
α−アミノ保護基は、次のアミノ酸のカップリングの前に切断される。Ｂｏｃ基を使用する場合、選択される方法は、未希釈のもしくはジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸、またはジオキサン中のＨＣｌである。次いで、得られたアンモニウム塩はカップリング前またはインシトゥーのいずれかで、水性バッファーもしくはジクロロメタン中の第３級アミン、またはジメチルホルムアミドなどの塩基性溶液によって中和する。Ｆｍｏｃ基を使用する場合、選択される試薬はジメチルホルムアミド中のピペリジンまたは置換ピペリジンであるが、任意の第２級アミンまたは塩基性水溶液を使用できる。脱保護は０℃から室温の間の温度で実施する。
【０１３０】
側鎖官能基を有する任意のアミノ酸またはアミノ酸模倣物は、任意の上記の基を使用して、ペプチドの調製の間一般に保護される。当業者は、これらの側鎖官能基に対する適切な保護基の選択および使用がアミノ酸またはアミノ酸模倣物、およびペプチド、ポリペプチドまたはペプチド模倣物中の他の保護基の存在に依存することを認識するであろう。そのような保護基の選択は、α−アミノ基の脱保護およびカップリングの間に除かれてはならないという点において重要である。
【０１３１】
例えば、Ｂｏｃがα−アミン保護として選択される場合、以下の保護基：アルギニンについてｐ−トルエンスルホニル（トシル）部分およびニトロ；リシンについてベンジルオキシカルボニル、置換ベンジルオキシカルボニル、トシルまたはトリフルオロアセチル；グルタミン酸およびアスパラギン酸についてベンジルまたはアルキルエステル、例えばシクロペンチル；セリンおよびトレオニンについてはベンジルエーテル；チロシンについてはベンジルエーテル、置換ベンジルエーテルまたは２−ブロモベンジルオキシカルボニル；システインについてはｐ−メチルベンジル、ｐ−メトキシベンジル、アセトアミドメチル、ベンジルまたはｔ−ブチルスルホニルが許容され、トリプトファンのインドールは、保護されないままであるか、ホルミル基で保護されているかのいずれかであることができる。
【０１３２】
Ｆｍｏｃがα−アミン保護に選択される場合、通常ｔｅｒｔ−ブチルベースの保護基が許容される。例えば、Ｂｏｃはリシンについて、ｔｅｒｔ−ブチルエーテルはセリン、トレオニンおよびチロシンについて、ｔｅｒｔ−ブチルエステルはグルタミン酸およびアスパラギン酸について使用できる。
【０１３３】
ペプチド、ポリペプチドまたはペプチド模倣物の伸長、または環状ペプチドもしくはペプチド模倣物の伸長および環化が完了したら、保護基は全て除去する。液相合成では、保護基は保護基の選択によって決定される通りに除去する。これらの手順は当業者によく知られている。
【０１３４】
固相合成を使用して環状ペプチドまたはペプチド模倣物を合成する場合、ペプチドまたはペプチド模倣物は、環化プロセスに干渉する可能性のある官能基から保護基を同時に除去することなく樹脂から除去されるべきである。したがって、ペプチドまたはペプチド模倣物を溶液中で環化する場合、切断条件は、他の保護基を同時に除去することなく遊離のα−カルボキシレートおよび遊離のα−アミノ基が生成されるように選択される必要がある。あるいは、ペプチドまたはペプチド模倣物は、樹脂からヒドラジン分解で除去され、次いでアジド法でカップリングしてよい。別の非常に好都合な方法は、オキシム樹脂上でのペプチドまたはペプチド模倣物の合成、次いで樹脂からの分子内求核置換を伴い、これは環状ペプチドまたはペプチド模倣物を生成する（Tetrahedron Letters, 1990, 43, 6121-6124）。オキシム樹脂が用いられる場合、Ｂｏｃ保護スキームが一般に選択される。したがって、側鎖保護基を除去する典型的な方法は、硫化ジメチル、アニソール、チオアニソールまたはｐ−クレゾールなどの添加剤を含有する無水ＨＦで０℃において処理することを一般に伴う。ペプチドまたはペプチド模倣物の切断はまた、トリフルオロメタンスルホン酸／トリフルオロ酢酸混合物などの他の酸試薬によって達成できる。
【０１３５】
この開示で使用した独特なアミノ酸は、当業者によく知られている標準の方法で合成できる (The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, Vol.5、342-449、Academic Press, New York (1981))。N−アルキルアミノ酸は、以前に記載された手順を使用して調製できる (Cheung et al., Can. J. Chem., 1977, 55, 906; Freidinger et al., J.Org. Chem., 1982, 48, 77)。
【０１３６】
特定の用途のために選択した金属イオンと適切な錯体を形成するようにキレーターを選択する。99mＴｃ、95Ｔｃ、111Ｉｎ、62Ｃｕ、60Ｃｕ、64Ｃｕ、67Ｇａ、68Ｇａ、86Ｙなどのイメージング可能なγ線または陽電子放射を有するラジオアイソトープと適切な錯体を形成するように診断用放射性医薬品のためのキレーターを選択する。
【０１３７】
テクネチウム、銅およびガリウムアイソトープのキレーターは、ジアミンジチオール、モノアミン−モノアミドジチオール、トリアミド−モノチオール、モノアミン−ジアミド−モノチオール、ジアミンジオキシムおよびヒドラジンから選択する。キレーターは一般に、窒素、酸素および硫黄から選択されたドナー原子を有する四座性である。チオール硫黄原子およびヒドラジンは、試薬を使用して放射性医薬品を合成する前、またはより多くの場合、放射性医薬品の合成中インシトゥーのいずれかで置換できる保護基を担持していてよい。
【０１３８】
代表的なチオール保護基としては、Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York (1991)に挙げられたものを含む。当技術分野で知られた任意のチオール保護基を使用してよい。チオール保護基の例としては、これらだけに限定するものではないが、アセトアミドメチル、ベンズアミドメチル、１−エトキシエチル、ベンゾイルおよびトリフェニルメチルがある。
【０１３９】
ヒドラジンキレーターの代表的な保護基は、水素、アルキル、アリールおよび複素環から選択される置換基を有するアルデヒドヒドラゾンまたはケトンヒドラゾンであることができるヒドラゾンである。ヒドラゾンの例はＵＳ−Ａ−５，７５０，０８８に記載されている。
【０１４０】
金属放射性核種に結合した場合、ヒドラジンキレーターはヒドラジドまたはジアゼニド基と呼ばれ、放射性核種の放射性医薬品の残部への結合点として役立つ。ジアゼニド基は末端（基の１個のみの原子が放射性核種に結合している）またはキレート性であってよい。キレートジアゼニド基を有するには、基の少なくとも１個の他の原子も放射性核種に結合していなくてはならない。金属に結合した原子はドナー原子と呼ばれる。
【０１４１】
インジウム（例えば111Ｉｎ）、イットリウム（例えば86Ｙおよび90Ｙ）およびランタニド（例えばＥｕ（ＩＩＩ）、Ｇｄ（ＩＩＩ）およびＤｙ（ＩＩＩ））のような金属のキレーターは、環状および非環状ポリアミノカルボキシレート、例えばＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、２−ベンジル−ＤＯＴＡ、α−（２−フェネチル）１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−酢酸−４，７，１０−トリス（メチル酢酸）、２−ベンジル−シクロヘキシルジエチレントリアミン五酢酸、２−ベンジル−６−メチル−ＤＴＰＡおよび６，６”−ビス［Ｎ，Ｎ，Ｎ”，Ｎ”−テトラ（カルボキシメチル）アミノメチル）−４’−（３−アミノ−４−メトキシフェニル）−２，２’：６’，２”−テルピリジンから選択される。市販されていないこれらのキレーターを合成する手順は、J. Chem. Soc. Perkin Trans., 1992, 1, 1175; Bioconjugate Chem., 1991, 2, 187; J.Nucl.Med., 1990, 31, 473; ＵＳ−Ａ−５，０６４，９５６およびＵＳ−Ａ−４，８５９，７７７に見い出すことができる。
【０１４２】
金属イオンの配位圏としては、金属に結合した全てのリガンドまたは基がある。遷移金属錯体を安定化するには、それは一般に、４以上８以下の整数からなる配位数（ドナー原子の数）を有し、すなわち、金属に結合した４から８個の原子があり、それは完全な配位圏を有しているといわれる。ランタニド系またはアクチニド系金属錯体では、金属は一般に、４以上１０以下の整数からなる配位数（ドナー原子の数）を有し、すなわち、金属に結合した４から１０個の原子があり、それは完全な配位圏を有しているといわれる。安定なメタロファーマシューティカル錯体に要求される配位数は元素が何であるか、その酸化状態、およびドナー原子のタイプによって決まる。キレーターがその配位圏を完成することによって金属錯体を安定化するのに必要な原子の全てを提供しないならば、配位圏は、補助または共リガンドと呼ばれ、また末端またはキレート性のいずれかであることができる他のリガンドからのドナー原子によって完成する。
【０１４３】
多くのリガンドは補助または共リガンドとして役立つことができ、その選択は、放射性医薬品の合成の容易さ、補助リガンドの化学的および物理的特性、形成率、収率、得られた放射性医薬品の異性体の数、前記補助または共リガンドを患者に、前記患者に生理学的悪影響を与えずに投与する能力、およびリガンドの凍結乾燥したキット製剤への適合性などの種々の考慮事項により決定される。補助リガンドの電荷および親油性は、放射性医薬品の電荷および親油性をもたらす。例えば、４，５−ジヒドロキシ−１，３−ベンゼンジスルホネートを使用すると、さらなる２個のアニオン性基を有する放射性医薬品となる。なぜなら、スルホネート基が生理学的状態下でアニオン性だからである。Ｎ−アルキル置換された３，４−ヒドロキシピリジノンを使用すると、アルキル置換基のサイズに応じて様々な程度の親油性を有する放射性医薬品となる。
【０１４４】
本開示の一定のテクネチウム放射性医薬品は、ヒドラジドもしくはジアゼニドキレーターおよび補助リガンド、ＡL1、またはキレーターおよび２つのタイプの補助リガンドＡL1およびＡL2、または２個の窒素および２個の硫黄原子からなる四座キレーターからなる。補助リガンドＡL1は、酸素およびアミン窒素（ｓｐ3混成）などの２個以上のハードドナー原子からなる。そのドナー原子は放射性核種金属の配位圏の部位の少なくとも２個を占め、補助リガンドＡL1は三元リガンド系の３つのリガンドの１つとして役立つ。補助リガンドＡL1の例としては、これらだけに限定するものではないが、二酸素リガンドおよび官能性アミノカルボキシレートがある。多くのそのようなリガンドが商業源から入手可能である。
【０１４５】
補助二酸素リガンドには、金属イオンに少なくとも２個の酸素ドナー原子を介して配位するリガンドがある。例としては、これらだけに限定するものではないが、グルコヘプトネート、グルコネート、２−ヒドロキシイソブチレート、ラクテート、タータレート、マンニトール、グルカレート、マルトール、コウジ酸、２，２−ビス（ヒドロキシメチル）プロピオン酸、４，５−ジヒドロキシ−１，３−ベンゼンジスルホネート、または置換もしくは非置換１，２−もしくは３，４−ヒドロキシピリジノンがある。（これらの例のリガンドの名称はリガンドのプロトン化形態または非プロトン化形態のいずれも指す）。
【０１４６】
官能性アミノカルボキシレートには、アミン窒素と酸素ドナー原子の組合せを有するリガンドがある。例としては、これらだけに限定するものではないが、イミノ二酢酸、２，３−ジアミノプロピオン酸、ニトリロ三酢酸、Ｎ，Ｎ’−エチレンジアミン二酢酸、Ｎ，Ｎ，Ｎ’−エチレンジアミン三酢酸、ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸およびＮ，Ｎ’−エチレンジアミンビス−ヒドロキシフェニルグリシンがある。（これらの例のリガンドの名称はリガンドのプロトン化形態または非プロトン化形態のいずれも指す）。
【０１４７】
一連の官能性アミノカルボキシレートはＵＳ−Ａ−５，３５０，８３７で開示されており、これは結果としてテクネチウム標識ヒドラジノ修飾タンパク質の形成の改良された速度につながる。本発明者らは、一定のこれらのアミノカルボキシレートは結果として本開示の放射性医薬品の改良された収率につながることを解明した。補助リガンドＡL1の例としては、グリシンの誘導体である官能性アミノカルボキシレート、例えばトリシン（トリス（ヒドロキシメチル）メチルグリシン）がある。
【０１４８】
本開示のテクネチウム診断剤の例としては、ヒドラジドもしくはジアゼニドキレーター、ならびにＡL1およびＡL2と指定した２つのタイプの補助リガンド、またはジアミンジチオールキレーターがある。第２のタイプの補助リガンドＡL2には、ホスフィン性リン、アルシン性ヒ素、イミン窒素（ｓｐ2混成）、硫黄（ｓｐ2混成）および炭素（ｓｐ混成）；ｐ酸の特徴を有する原子から選択される１種または複数のソフトドナー原子がある。リガンドＡL2は、単座、二座または三座であることができ、配座数はリガンドのドナー原子の数によって決定される。二座リガンドの２個のドナー原子の１個、および三座リガンドの３個のドナー原子の１個は、ソフトドナー原子でなければならない。ＵＳ−Ａ−５，７４４，１２０およびＵＳ−Ａ−５，７３９，７８９は、１種または複数の補助リガンド、ＡL2を含まない放射性医薬品と比較してより安定な、すなわち、最少数の異性体形態を有し、その相対比は経時的にあまり変化せず、希釈しても実質的にそのままである、１種または複数の補助または共リガンドＡL2を含む放射性医薬品を開示している。
【０１４９】
ホスフィンまたはアルシンドナー原子を含むリガンドＡL2は、三置換ホスフィン、三置換アルシン、四置換ジホスフィンおよび四置換ジアルシンである。イミン窒素を含むリガンドＡL2は、不飽和または芳香族窒素含有の５員または６員複素環である。硫黄（ｓｐ2混成）ドナー原子を含むリガンドはチオカルボニルであり、Ｃ＝Ｓ部分を含む。炭素（ｓｐ混成）ドナー原子を含むリガンドはイソニトリルであり、ＣＮＲ部分を含み、ここでＲは有機基である。そのようなリガンドの多くは商業源から入手可能である。イソニトリルは、ＵＳ−Ａ−４，４５２，７７４およびＵＳ−Ａ−４，９８８，８２７で記載の通りに合成できる。
【０１５０】
補助リガンドＡL2の例は三置換ホスフィンおよび不飽和または芳香族５員または６員複素環である。
【０１５１】
補助リガンドＡL2は、アルキル、アリール、アルコキシ、ヘテロシクリル、アリールアルキル、アルキルアリールおよびアリールアルキルアリール基で置換されていてよく、酸素、窒素、リンまたは硫黄などのヘテロ原子を含む官能基を担持していてもしていなくてもよい。そのような官能基の例としては、これらだけに限定するものではないが、ヒドロキシル、カルボキシル、カルボキサミド、ニトロ、エーテル、ケトン、アミノ、アンモニウム、スルホネート、スルホンアミド、ホスホネートおよびホスホンアミドがある。官能基は、非標的組織、細胞または液体への分布、ならびに身体からの排出の機序および速度を変えるなど、放射性医薬品の生物学的特性に影響を与え得るリガンドの親油性および水溶性を変えるように選択してよい。
【０１５２】
磁気共鳴イメージング造影剤のキレーターは、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）およびＭｎ（ＩＩ）などの常磁性金属イオンと安定な錯体を形成するように選択され、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、２−ベンジル−ＤＯＴＡ、α−（２−フェネチル）１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−酢酸−４，７，１０−トリス（メチル酢酸）、２−ベンジル−シクロヘキシルジエチレントリアミン五酢酸、２−ベンジル−６−メチル−ＤＴＰＡおよび６，６”−ビス［Ｎ，Ｎ，Ｎ”，Ｎ”−テトラ（カルボキシメチル）アミノメチル）−４’−（３−アミノ−４−メトキシフェニル）−２，２’：６’，２”−テルピリジンなどの環状および非環状ポリアミノカルボキシレートから選択される。
【０１５３】
血液からのクリアランス速度は、心臓のイメージング手順では特に重要である。なぜなら、心血液プールは、イメージングを望む病巣と比較して大きいからである。効果的な心臓イメージング剤では、標的対背景比（病巣対血液および病巣対筋肉）は、典型的には約１．５以上、典型的には約２．０以上、より典型的にはさらにそれ以上である。本開示の一定の薬剤は、マウスモデルで測定して注射後２時間で約１０％ｉ．ｄ．／ｇ未満、イヌモデルで測定して注射後２時間で約０．５％ｉ．ｄ．／ｇ未満になる血液クリアランス速度を有する。一実施形態では、本開示の診断剤は、マウスモデルで測定して注射後２時間で約３％ｉ．ｄ．／ｇ未満、イヌモデルで測定して注射後２時間で約０．０５％ｉ．ｄ．／ｇ未満になる血液クリアランス速度を有する。
【０１５４】
テクネチウムを含有し、ヒドラジドまたはジアゼニドキレーター単位をさらに含む開示の診断剤は、放射性核種の塩、本開示の試薬、補助リガンドＡL1、補助リガンドＡL2および還元剤を水溶液に約０℃から約１００℃の温度で混合することによって容易に調製できる。テクネチウムを含有し、２個の窒素および２個の硫黄原子を有する四座キレーターを含む開示の診断剤は、放射性核種の塩、本開示の試薬および還元剤を水溶液に約０℃から約１００℃の温度で混合することによって容易に調製できる。
【０１５５】
本開示の試薬中のキレーターがヒドラゾン基として存在する場合、それは最初に典型的にはプロトン化されていてもされていなくてもよいヒドラジンに、金属放射性核種と錯体形成する前に変換される。ヒドラゾン基のヒドラジンへの変換は、放射性核種との反応の前でも（この場合、放射性核種および補助または共リガンド（複数可）は試薬とではなく、キレーターを担持する試薬の加水分解形態と結合する）、放射性核種の存在下でも（この場合、試薬自体は放射性核種および補助または共リガンド（複数可）と結合する）起こり得る。後者の場合、反応混合物のｐＨは通常、中性または酸性である。
【０１５６】
あるいは、ヒドラジドまたはジアゼニドキレーターを含む本開示の診断剤は、まず、放射性核種の塩、補助リガンドＡL1および還元剤を水溶液に約０℃から約１００℃の温度で混合して補助リガンドＡL1との中間体放射性核種錯体を形成し、次いで本開示の試薬および補助リガンドＡL2を加え、約０℃から約１００℃の温度でさらに反応させることによって調製してよい。
【０１５７】
あるいは、ヒドラジドまたはジアゼニドキレーターを含む本開示の診断剤は、まず、放射性核種の塩、補助リガンドＡL1、本開示の試薬および還元剤を水溶液に約０℃から約１００℃の温度で混合して中間体放射性核種錯体を形成し、次いで補助リガンドＡL2を加え、約０℃から約１００℃の温度でさらに反応させることによって調製してよい。
【０１５８】
テクネチウム放射性核種は典型的には、過テクネチウム酸または過レニウム酸の化学形態および薬学的に許容できるカチオンである。過テクネチウム酸塩の形態は典型的には、市販の99mＴｃジェネレーターから得られたものなどの過テクネチウム酸ナトリウムである。本開示の放射性医薬品の調製に使用する過テクネチウム酸の量は、約０．１ｍＣｉから約１Ｃｉ、またはより典型的には約１から約２００ｍＣｉの範囲であることができる。
【０１５９】
本開示のテクネチウム診断剤の調製に使用する本開示の試薬の量は、約０．０１μｇから約１０ｍｇ、またはより典型的には約０．５μｇから約２００μｇの範囲であってよい。使用量は、他の反応物の量および調製する本開示の放射性医薬品が何であるかによって決まる。
【０１６０】
使用する補助リガンドＡL1の量は、約０．１ｍｇから約１ｇ、またはより典型的には約１ｍｇから約１００ｍｇの範囲であってよい。特定の放射性医薬品の厳密な量は、調製する本開示の放射性医薬品が何であるか、使用する手順、ならびに他の反応物の量およびそれが何であるかの関数である。ＡL1の量が多すぎると、生物学的活性分子なしのテクネチウム標識ＡL1を含む副生成物、または補助リガンドＡL1を有するが補助リガンドＡL2なしのテクネチウム標識生物学的活性分子を含む副生成物の形成につながる。ＡL1の量が少なすぎると、補助リガンドＡL2を有するが補助リガンドＡL1なしのテクネチウム標識生物学的活性分子などの他の副生成物、または加水分解したテクネチウムの減少、またはテクネチウムコロイドにつながる。
【０１６１】
使用する補助リガンドＡL2の量は、約０．００１ｍｇから約１ｇ、またはより典型的には約０．０１ｍｇから約１０ｍｇの範囲であってよい。特定の放射性医薬品の厳密な量は、調製する本開示の放射性医薬品が何であるか、使用する手順、ならびに他の反応物の量およびそれが何であるかの関数である。ＡL2の量が多すぎると、生物学的活性分子なしのテクネチウム標識ＡL2を含む副生成物、または補助リガンドＡL2を有するが補助リガンドＡL1なしのテクネチウム標識生物学的活性分子を含む副生成物の形成につながる。
【０１６２】
本開示のインジウム、銅、ガリウムおよびイットリウム診断剤は、放射性核種の塩および本開示の試薬を水溶液に約０℃から約１００℃の温度で混合することによって容易に調製できる。これらの放射性核種は、塩酸、硝酸または硫酸などの鉱酸中の希釈水溶液として典型的に得られる。放射性核種は、水溶液に溶解させた本開示の試薬１から約１０００当量と合わせる。バッファーは、反応混合物のｐＨを約３から約１０に維持するために一般に使用する。
【０１６３】
本開示のガドリニウム、ジスプロシウム、鉄およびマンガン診断剤は、常磁性金属イオンの塩および本開示の試薬を水溶液に約０℃から約１００℃の温度で混合することによって容易に調製できる。これらの常磁性金属イオンは、塩酸、硝酸または硫酸などの鉱酸中の希釈水溶液として典型的に得られる。常磁性金属イオンは、水溶液に溶解させた本開示の試薬１から約１０００当量と合わせる。バッファーは、反応混合物のｐＨを約３から約１０に維持するために一般に使用する。
【０１６４】
調製の総時間は、調製に使用する金属イオンが何であるか、反応物が何であるかおよびその量、ならびに手順に応じて変化する。調製は、約１分間で放射性医薬品約８０％超の収率で完了してよく、またはそれを超える時間を要してよい。より高純度のメタロファーマシューティカルが必要または所望ならば、生成物は、液体クロマトグラフィー、固相抽出、溶媒抽出、透析または限外濾過など、当業者によく知られた多くの技術のいずれかによって精製できる。
【０１６５】
診断用放射性医薬品は、通常、生理食塩水溶液中の静脈内注射によって、体重７０ｋｇ当たり約１から約１００ｍＣｉの用量で、または典型的には約５から約５０ｍＣｉの用量で投与する。イメージングは既知の手順を使用して実施する。
【０１６６】
磁気共鳴イメージング造影成分を含有する開示の診断剤は、ＵＳ−Ａ−５，１５５，２１５；ＵＳ−Ａ−５，０８７，４４０；Magn.Reson.Med., 1986, 3, 808; Radiology, 1988, 166, 835; およびRadiology, 1988, 166, 693で記載の通りの他のＭＲＩ剤として同様に使用してよい。一般に、造影剤の滅菌水溶液は、患者に静脈内で体重１ｋｇ当たり約０．０１から約１．０ｍｍｏｌの範囲の用量で投与する。
【０１６７】
Ｘ線造影剤としての使用では、本開示の診断剤は、約１ｍＭから約５Ｍ、典型的には約０．１Ｍから約２Ｍの重原子濃度を一般に有するべきである。静脈内注射で投与する用量は典型的には、約０．５ｍｍｏｌ／ｋｇから約１．５ｍｍｏｌ／ｋｇ、典型的には約０．８ｍｍｏｌ／ｋｇから約１．２ｍｍｏｌ／ｋｇの範囲である。イメージングは、既知の技術、典型的にはＸ線コンピュータ断層撮影法を使用して実施する。
【０１６８】
超音波造影成分を含有する開示の診断剤は、体重１ｋｇ当たり約１０から約３０μＬのエコー源性ガスの量の静脈内注射により、または約３μＬ／ｋｇ／分の速度の注入により投与する。イメージングは、超音波造影術の既知の技術を使用して実施してよい。
【０１６９】
開示のその他の特徴は、開示を例示するためであって限定する意図のない代表的な実施形態の以下の記載の過程で明らかになろう。次に、本開示を以下の具体的、非限定的な実施例を参照することによって例示する。有機合成の当業者は、開示の化合物および／または診断剤のさらに別の合成経路を知っていることもある。本明細書で使用した試薬および中間体は、別段の記載がない限り、市販されているか、標準の文献手順に従って調製する。
【０１７０】
この開示は、合成プロセスで、あるいはヒトもしくは動物の体内（インビボ）で生じたものを含む代謝プロセスまたはインビトロで生じたプロセスで調製した式（Ｉ）を有する化合物を包含することを意図する。例えば、ＡがＤ−アミノ酸残基および第２のアミノ酸からなるペプチドである本開示の化合物は、合成またはインビボのいずれかによる、より大きな配列（例えば、３個のアミノ酸およびＤ−アミノ酸残基からなるペプチド）の切断によって生じ得る。
【０１７１】
一般事項。1Ｈ  ＮＭＲスペクトルはＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＤＲＸ（６００ＭＨｚ）分光計で記録した。化学シフトはテトラメチルシランからのｐｐｍで報告しており、不完全な重水素化から生じる残存の溶媒共鳴を内部標準とする（ＣＤＣｌ3：δ７．２５ｐｐｍ、Ｃ6Ｄ6：δ７．１６ｐｐｍ、ＤＭＳＯ−ｄ6：δ２．５０ｐｐｍ）。データは以下の通り報告する：化学シフト、積分値、多重度（ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｑｕｉｎ＝五重線、ｂまたはｂｒ＝広幅、ｍ＝多重線）およびカップリング定数。13Ｃ  ＮＭＲスペクトルはＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＤＲＸ（１５０ＭＨｚ）で、完全なプロトンデカップリングで記録した。化学シフトは、テトラメチルシランからのｐｐｍで報告しており、溶媒を内部基準とする（ＣＤＣｌ3：δ７７．０ｐｐｍ、Ｃ6Ｄ6：δ１２８．４ｐｐｍ、ＤＭＳＯ−ｄ6：δ３９．５ｐｐｍ）。19Ｆ  ＮＭＲスペクトルはＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＤＲＸ（５６５ＭＨｚ）で記録した。化学シフトはｐｐｍで、外部標準に対して報告される（ＣＣｌ3Ｆ；δ＝０．００ｐｐｍ）。
【０１７２】
エナンチオマー比はキラルＧＬＣ分析（Ａｌｌｔｅｃｈ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  Ｃｈｉｒａｌｓｉｌ−Ｖａｌカラム（２５ｍ×０．２５ｍｍ））により真正のラセミ物質と比較して決定した。低分解能質量分析はＡｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ  ＬＣ／ＭＳ  ＥＳＩ−ＭＳ（イオン化モード）で実施した。高分解能質量分析はＩｏｎｓｐｅｃ  Ｕｌｔｉｍａ  ＦＴＭＳ；ＥＳＩ−ＭＳ（イオン化モード）で実施した。
【０１７３】
別段の記載がない限り、全ての反応は、オーブン（１５０℃）および火炎乾燥したガラス器具で乾燥窒素の不活性雰囲気下で実施した。示した温度は反応浴の温度を指し、一方、周囲実験室温度は２２℃である。無水溶媒はＡｌｄｒｉｃｈから入手し、そのまま使用した。アミノ酸誘導体およびアミノ酸樹脂は、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｔｅｃｈ、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂａｃｈｅｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、ＲＳＰ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ、またはＰｅｐＴｅｃｈ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓから入手した。各実験内では、一定の出発物質の調製に関する脚注がある。４−シアノ桂皮酸はＲｙａｎ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから入手した。４−（アミノメチル）フェニル酢酸はＴｙｇｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから入手した。Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ３５０（商標）スクシンイミジルエステルはＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓから購入した。ＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステルはＭａｃｒｏｃｙｃｌｉｃｓから購入した。全てのその他の試薬は、Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｆｌｕｋａ、ＬａｎｃａｓｔｅｒまたはＳｔｒｅｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓから入手し、そのまま使用した。
【０１７４】
略語
広く使用されている試薬および溶媒の一般に受け入れられている略語を本特許中で使用する。２１種の天然アミノ酸は一般に受け入れられている３文字の略語を使用して記載する。その他の略語は下記の通りである。
Ａｈｘ＝６−アミノヘキサン酸
Ａｉｂ＝α−アミノイソ酪酸
Ａｍｂ＝４−アミノメチル安息香酸
Ｂｉｐ＝ビフェニルアラニン
ＤＣＨＡ＝Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルアミン
ＤＥＡ＝ジエチルアミン
ＤＩＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン
ＥＤＣ＝１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＥＥＤＱ＝２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリン
ＨＢＴＵ＝２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＡｔ＝１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＯＢｔ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
Ｈｐｈｅ＝ホモフェニルアラニン
Ｎａｌ＝ナフチルアラニン
ＮＬｅｕ＝Ｎ−ロイシン
ＮＬｙｓ＝Ｎ−リシン
Ｓｔｙａ＝スチリルアラニン
ＴＡＥＡ＝トリス（２−アミノエチル）アミン
ＴＥＡ＝トリエチルアミン
Ｔｉｃ＝１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸
ＴＩＳ＝トリイソプロピルシラン
ＴＭＰ＝２，４，６−トリメチルピリジン
【実施例】
【０１７５】
実施例１
２−（（１Ｅ）−２−｛［５−（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）（２−ピリジル）］アミノ｝−２−アザビニル）ベンゼンスルホン酸の合成
【化１７】
2009500410.tif 000024
パートＡ  −  Ｎ−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化１８】
2009500410.tif 000025
ＤＭＦ２００ｍＬ中のＦｍｏｃ−６−Ａｈｘ−ＯＨ（１５．０ｇ、４２．４ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２０．９ｇ、５５．１２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８．４４ｇ、５５．１２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１８．５ｍＬ、１０６ｍｍｏｌ）の溶液をＤＭＦ５０ｍＬ中のカルバジン酸ｔ−ブチル（６．７３ｇ、５０．８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３．７ｍＬ、２１．２ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。追加のＤＩＥＡを必要に応じて加えてｐＨ＝１０に維持した。４５分後、溶液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解した。溶液を０．１ＮのＨＣｌ（２×２５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×２５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮して標題化合物を淡黄色の固体（２０．７ｇ、９８％）として得た。MS (ESI): 368.3 (100, M+H-Boc).
【０１７６】
パートＢ  −  ６−アミノ−Ｎ−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化１９】
2009500410.tif 000026
パートＡの生成物（１．４４ｇ、３．１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４．０ｍＬ）中の２０％のピペリジンで室温において窒素下で２０分間処理した。溶液を減圧濃縮し、得られた固体をメタノール、１００：３のメタノール：ＴＥＡおよび１００：６のメタノール：ＴＥＡで連続的に溶離するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製すると、標題化合物が無色の固体（０．７９ｇ、１０４％）として得られた。1H NMR (CDCl3): δ4.12 (bs, 2H), 2.80-2.68 (m, 2H), 2.24 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.72-1.60 (m, 2H), 1.58-1.46 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.43-1.33 (m 2H).  MS (ESI): 246.3 (M+H).
【０１７７】
パートＣ  −  ナトリウム２−［（１Ｅ）−２−アザ−２−（｛５−［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］（２−ピリジル）｝アミノ）ビニル］ベンゼンスルホネートの調製
【化２０】
2009500410.tif 000027
無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のパートＢの生成物（０．７２ｇ、２．９ｍｍｏｌ）、ナトリウム２−［（１Ｅ）−２−アザ−２−（｛５−［（２，５−ジオキソピロリジニル）オキシカルボニル］（２−ピリジル）｝アミノ）ビニル］ベンゼンスルホネート（Bioconjugate Chemistry (1999), 10 (5), 808-814で記載の手順に従って調製、１．２９ｇ、２．９ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（０．４０ｇ、２．９ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．０２ｍＬ、５．９ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で撹拌した。２時間後、追加のナトリウム２−［（１Ｅ）−２−アザ−２−（｛５−［（２，５−ジオキソピロリジニル）オキシカルボニル］（２−ピリジル）｝アミノ）ビニルベンゼンスルホネート（０．２７ｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．１ｍＬ、０．６ｍｍｏｌ）を加え、反応を終夜撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した。得られた残渣を８５：１５のジクロロメタン：メタノールで溶離するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製すると、標題化合物が無色の固体（０．８１ｇ、５０％、ＨＰＬＣ純度＞９５％）として得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ11.32 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.59 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.34-8.23 (m, 1H), 8.08-7.97 (m, 2H), 7.78 (dd, J = 1.4, 7.5 Hz, 1H), 7.40-7.18 (m, 3H), 3.28-3.17 (m, 2H), 2.07 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.60-1.45 (m, 4H), 1.45-1.21 (m, 11H).  MS (ESI): 449.2 (M-Boc+H).
【０１７８】
パートＤ  −  ２−｛（１Ｅ）−２−［（５−｛Ｎ−［５−（Ｎ−アミノカルバモイル）ペンチル］カルバモイル｝（２−ピリジル））アミノ］−２−アザビニル｝ベンゼンスルホン酸の調製
【化２１】
2009500410.tif 000028
パートＣの生成物（０．３７ｇ、０．７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）中の５０％のＴＦＡで１０分間、室温において窒素下で処理した。溶液を減圧濃縮し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｊｕｐｉｔｅｒ  Ｃ１８カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０から２７％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１８．９分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（０．２４ｇ、８０％）として得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ10.75 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.64-8.54 (m, 1H), 8.53 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.29-8.11 (m, 2H), 7.80 (dd, J = 1.9, 7.0 Hz, 1H), 7.47-7.32 (m, 2H), 7.23 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 4.50 (bs, 3H), 3.26 (q, J = 6.4 Hz, 2H), 2.23 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.66-1.45 (m, 4H), 1.40-1.22 (m, 2H).  MS (ESI): 449.1 (M+H).
【０１７９】
パートＥ  −  ２−（（１Ｅ）−２−｛［５−（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）−カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）（２−ピリジル）］アミノ｝−２−アザビニル）ベンゼンスルホン酸の調製
【化２２】
2009500410.tif 000029
無水ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（１６．０ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）、パートＤの生成物（２０．３ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１２．１ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）の溶液をコリジン（３７．０μＬ、０．２８０ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１３．８μＬ、０．０９０ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で２時間撹拌した。次いで、ピペリジン（０．２５ｍＬ）を反応に加え、１０分後、反応を減圧濃縮した。得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａカラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０から２７％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２５．４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（８．６ｍｇ、３４％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ10.41 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 9.24 (bs, 1H), 8.60 (bs, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.31-8.16 (m, 3H), 7.81 (dd, J = 1.8, 7.2 Hz, 1H), 7.46-7.37 (m, 2H), 7.22 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.78 (bs, 1H), 3.25 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 2.17 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.78-1.69 (m, 1H), 1.62-1.49 (m, 6H), 1.48-1.30 (m, 2H), 0.94-0.87 (m, 6H).  MS (ESI): 562.2 (100, M+H), 1123.3 (15, 2M+H).  HRMS: C25H35N7O6S (M+H)の計算値: 562.2442, 実測値: 562.2434.
【０１８０】
実施例２
２−｛（１Ｅ）−２−アザ−２−［（５−｛Ｎ−［５−（Ｎ−｛２−［（２−メチルプロピル）アミノ］−アセチルアミノ｝−カルバモイル）ペンチル］カルバモイル｝（２−ピリジル））アミノ］ビニル｝ベンゼンスルホン酸の合成
【化２３】
2009500410.tif 000030
無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中のＦｍｏｃ−ＮＬｅｕ−ＯＨ（１９．８ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ、Kruijtzer, J. A. W.; Hofmeyer, L. J. F.; Heerma, W.; Verslius, C.; Liskamp, R. M. J. Chem. Eur. J. 1998, 8, 1570-1580の手順で調製）およびＨＯＡｔ（７．６ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）の溶液をコリジン（３７．０μＬ、０．２８０ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１７．４μＬ、０．１１２ｍｍｏｌ）で処理し、１５分間予備活性化した。実施例１Ｄの生成物を加え、反応を室温において窒素下で撹拌した。４時間後、追加の実施例１Ｄの生成物（２５．１ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１７．４μＬ、０．１１２ｍｍｏｌ）を加え、反応をさらに１８時間撹拌した。溶媒を減圧除去し、残渣をＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の２０％のピペリジンに溶解した。３０分後、反応を減圧濃縮した。得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａカラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０から３１．５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２４．７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１７．７ｍｇ、５６％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 562.2 (100, M+H), 1123.4 (10, 2M+H).HRMS: C25H35N7O6S (M+H)の計算値: 562.2442, 実測値: 562.2441.
【０１８１】
実施例３
Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミドの合成
【化２４】
2009500410.tif 000031
パートＡ  −  Ｎ−アミノ−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化２５】
2009500410.tif 000032
実施例１Ａの生成物（１９．５ｇ、４１．７５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン中の５０％のＴＦＡ５０ｍＬで３０分間、周囲温度において窒素下で処理した。溶液を減圧濃縮して淡黄色の油を得た。油を３０：７０のアセトニトリル：水（１５０ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥すると、オフホワイトの固体（１８．８９ｇ、９９％）が得られた。1H NMR (CDCl3): δ10.36 (s, 1H), 7.89 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.67 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.41 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.33 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.25 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.30 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 4.20 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 2.96 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 2.158 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.51 (quin, J = 7.8 Hz, 2H), 1.39 (quin, J = 7.8 Hz, 2H), 1.26 (m, 2H).  MS (ESI): 368.2 (100, M+H).
【０１８２】
パートＢ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化２６】
2009500410.tif 000033
ＤＭＦ（２５ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（２．９９ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４．５５ｇ、１２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．８４ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（５．１７ｍＬ，、４０．０ｍｍｏｌ）の溶液を２０分間、周囲温度において撹拌し、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のパートＡの生成物（４８．１３ｇ、１０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２．８６ｍＬ、２０．０ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。追加のＤＩＥＡを必要に応じて加えてｐＨ＝１０に維持した。追加のＨＢＴＵ（２．２７ｇ、５．００ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．２９ｍＬ、１０．０ｍｍｏｌ）を６時間後に加えた。次いで、１２時間後、溶液を迅速に撹拌しながら水４Ｌにゆっくりと加えた。沈殿を粗フリット漏斗での濾過によって集め、水で洗浄し、真空デシケーターで乾燥すると、標題化合物が無色の固体（５．８３１ｇ、１００％）として得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ9.76 (s, 1H), 9.72 (s, 1H), 7.89 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.41 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.33 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.38-7.32 (m, 1H), 6.98-6.83 (m, 1H), 4.29 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 4.20 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 4.06-3.98 (m, 1H), 3.00-2.91 (m, 2H), 2.14-2.03 (m, 2H), 1.70-1.19 (m, 18H), 0.93-0.80 (m, 6H).  MS (ESI): 481.3 (100, M+H-Boc).  HRMS: C32H45N4O6 (M+H)の計算値: 581.3334, 実測値: 581.3342.
【０１８３】
パートＣ  −  Ｎ−アミノ−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化２７】
2009500410.tif 000034
パートＢの生成物（０．４０５ｇ、０．７００ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）中の２０％のピペリジンに溶解し、窒素下で３０分間、周囲温度において撹拌した。溶液を減圧濃縮して淡黄色の固体を得た。固体をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｃ−１８  Ｌｕｎａカラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１３．５から４０．５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１５．２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物がオフホワイトの吸湿性の固体（０．２８９ｇ、８１％）として得られた。MS (ESI): 359.4 (100, M+H).
【０１８４】
５０：５０のアセトニトリル：水（１０ｍＬ）中の上記固体（０．２９８ｇ、０．６１０ｍｍｏｌ）の溶液をＢｉｏ−Ｒａｄ  ＡＧ  ３−Ｘ４イオン交換樹脂（遊離塩基形態）１０ｇで処理し、５分間穏やかに混合した。溶液をデカント除去し、凍結乾燥すると、標題化合物が白色の非吸湿性粉末（０．２００ｇ、１００％）として生成した。1H NMR (CDCl3): δ5.05 (s, 1H), 4.23 (s, 1H), 2.90-2.81 (m, 2H), 2.35-2.23 (m, 2H), 1.77-1.39 (m, 18H), 1.00-0.87 (m, 6H).  MS (ESI): 359.4 (100, M+H); HRMS: C17H35N4O4 (M+H)の計算値: 359.2653; 実測値: 359.2657.
【０１８５】
実施例４
（２Ｒ）−Ｎ−｛２−［４−（アミノメチル）フェニル］アセチルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２８】
2009500410.tif 000035
パートＡ  −  Ｎ−アミノ−２−（４−｛［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］−メチル｝フェニル）アセトアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化２９】
2009500410.tif 000036
無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の２−（４−｛［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）酢酸（４７０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）（Yum C.; Taylor, J. W. Tetrahedron Letters, 1996, 11, 1731-1734に従って調製）、ＨＢＴＵ（５５２ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．２１２ｍＬ、２．４２ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度において窒素下で２０分間撹拌し、カルバジン酸ｔ−ブチル（１６０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を１時間撹拌し、溶媒を減圧除去した。得られた残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）中の５０％のＴＦＡで処理し、室温において３０分間撹拌した。溶媒を減圧除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２７から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１６．３分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（４８７ｍｇ、９５％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (2:1 CD3CN:D2O): δ7.80 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.62 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.48 (br s, 0.5H), 7.40 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.31 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.20 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 6.90 (br s, 0.5H), 4.47 (br s, 0.5H), 4.35 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 4.20 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 4.19 (s, 2H), 3.95 (s, 2H), 3.51 (s, 2H).  MS (ESI): 402.3 (65, M+H), 803.4 (100, M+H).
【０１８６】
パートＢ  −  Ｎ−アミノ−２−（４−｛［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］−メチル｝フェニル）アセトアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（２８ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＴＭＰ（８０μＬ、０．６０ｍｍｏｌ）の溶液をＤＩＣ（３０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）で処理した。反応を周囲温度において窒素下で２０分間撹拌し、パートＡの生成物（４８．５ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を３時間撹拌し、ＴＡＥＡ（トリス−（２−アミノエチル）アミン、J. Org. Chem. (1990), 55 (5), 1673-5で記載の手順に従って調製）（０．２５ｍＬ）で処理した。反応を室温において３０分間撹拌し、減圧濃縮した。残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む９から３６％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２３．９分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２５．７ｍｇ、９４％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CD3CN): δ8.87 (br s, 1H), 8.53 (br s, 1H), 7.80 (br s, 1H), 7.38 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.68 (br s, 1H), 4.09 (s, 2H), 3.54 (s, 2H), 1.68 (m, 1H), 1.51 (m, 2H), 1.40 (s, 9H), 0.98-0.85 (m, 6H).  MS (ESI): 785.5 (100, 2M+H), 393.4 (90, M+H); HRMS: C20H33N4O4 (M+H)の計算値: 393.2496; 実測値: 393.2499. キラル分析: 99.0% D-Leu.
【０１８７】
実施例５
（２Ｒ）−Ｎ−アミノ−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化３０】
2009500410.tif 000037
パートＡ  −  （２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−Ｎ−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミドの調製
【化３１】
2009500410.tif 000038
無水ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（１３４ｍｇ、０．５３６ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（７３ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）およびＴＭＰ（０．８７ｍＬ、２．７ｍｍｏｌ）の溶液をＤＩＣ（１３５ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）で処理し、周囲温度において窒素下で２０分間撹拌した。溶液をカルバジン酸９−フルオレニルメチル（１３６ｍｇ、０．５３６ｍｍｏｌ）で処理し、５時間撹拌した。溶液をジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸（３×２０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、粗製の標題化合物が粘稠な油（２７１ｍｇ、１０８％）として得られた。MS (ESI): 368.3 (95, M+H), 490.2 (100, M+Na).
【０１８８】
パートＢ  −  （２Ｒ）−Ｎ−アミノ−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物およびＴＡＥＡ（１．６ｍＬ）をＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解し、室温において３０分間撹拌した。ＤＭＦを減圧除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１１．９分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（７６．７ｍｇ、５８％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (1:1 CD3CN:D2O): δ4.03-3.93 (m, 1H), 1.63-1.52 (M, 1H), 1.52-1.49 (M, 2H), 1.35 (s, 9H), 0.90-0.81 (m, 6H).  MS (ESI): 513.3 (20, 2M+Na), 268.2 (100, M+Na); HRMS: C11H23NaN3O3 (M+Na)の計算値: 268.1632; 実測値: 268.1635.
【０１８９】
実施例６
（２Ｒ）−Ｎ−［３−（２−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパノイルアミノ］−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化３２】
2009500410.tif 000039
無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の３−｛２−［２−（２−｛２−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］エトキシ｝−エトキシ）エトキシ］エトキシ｝プロパン酸（ChemBioChem (2002), 3 (2-3), 238-242、４３．８ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４１ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３１μＬ、０．１８ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度において窒素下で２０分間撹拌し、実施例５Ｂの生成物（２２ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を２時間撹拌し、ＴＡＥＡ（０．１５ｍＬ）で処理した。反応を室温においてさらに３０分間撹拌し、ＤＭＦを減圧除去した。得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１４．８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（３０ｍｇ、６９％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CD3CN)δ4.08-3.97 (m, 1H), 3.69 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.64 (t, J = 5.1 Hz, 2H) 3.62-3.50 (m, 12H), 3.08 (t, J = 3.7 Hz, 2H), 2.48 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.67-1.56 (m, 1H), 1.56-1.43 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 0.91-0.81 (m, 6H); 13C NMR (CDCl3): δ173, 171, 161 (q, J = 34.6 Hz), 156, 116 (q, J = 290 Hz), 79.9, 69.1, 69.0, 69.0, 68.9, 68.9, 51.2, 39.9, 38.6, 33.3, 27.0, 23.8, 21.7, 20.1.  MS (ESI): 493.4 (100, M+H); HRMS: C22H45N4O8 (M+H)の計算値: 493.3232; 実測値: 493.3225.
【０１９０】
実施例７
（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−Ｎ−（ヒドラジノカルボニルアミノ）−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化３３】
2009500410.tif 000040
カルボヒドラジド（８２ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液をＤＭＦ（１ｍＬ）中のＢｏｃ−ＤＬｅｕ−ＯＨ（５７ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ（１４３ｍｇ、０．２７５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（８０μＬ、０．４６ｍｍｏｌ）の溶液に滴下した。反応を室温において窒素下で３時間撹拌し、溶媒を減圧除去した。得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む９から３６％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１９．５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（６１ｍｇ、８７％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ8.60 (bs, 1H), 7.62 (bs, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.10 (s, 1H), 1.73-1.62 (m, 1H), 1.61-1.48 (m, 2H), 1.42 (s, 9H), 0.96-0.88 (m, 6H); 13C NMR (CDCl3): δ174, 160, 157, 52.9, 41.6, 28.8, 25.4, 23.6, 22.1.  MS (ESI): 607.4 (10, 2M+H), 248.4 (100, M-tBu+H), 204.4 (60, M-Boc+H); HRMS: C12H26N5O4 (M+H)の計算値: 304.1979; 実測値: 304.1975.
【０１９１】
実施例８
Ｎ−［（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−アミノヘキサンアミド、ビス−酢酸塩の合成
【化３４】
2009500410.tif 000041
パートＡ  −  Ｎ−［（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化３５】
2009500410.tif 000042
ジクロロメタン（２ｍＬ）中の実施例３Ｂの生成物（４９ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）の５０％のＴＦＡ溶液を室温において２０分間撹拌し、減圧濃縮して固体を得た。この固体をアセトニトリル（１ｍＬ）に溶解し、３７％のホルムアルデヒド溶液（６２μＬ、８．３ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｃ（１０μＬ）で処理した。反応を室温において窒素下で１時間撹拌し、蒸発乾固した。得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２２．５から４９．５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２５．１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１８．５ｍｇ、４３％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CD3CN)δ9.59 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.84 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.66 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.35 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 5.69 (s, 1H), 4.33 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.23 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.91-3.84 (m, 1H), 3.08 (q, J = 6.6 Hz, 2H), 2.88 (s, 6H), 2.21 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.68-1.43 (m, 7H), 1.38-1.31 (m, 2H), 0.91-0.89 (m, 6H).  MS (ESI): 509.4 (100, M+H).
【０１９２】
パートＢ  −  Ｎ−［（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−アミノヘキサンアミド、ビス−酢酸塩の調製
パートＡの生成物をＤＭＦ（２ｍＬ）中の２０％のピペリジンに溶解し、室温において窒素下で３０分間撹拌した。溶媒を減圧除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで１５ｍＭのＮＨ4ＯＡｃ（ｐＨ＝７）を含む０から１８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１２．７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（３．１ｍｇ、４２％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CD3CN: D2O)δ3.09-3.06 (m, 1H), 2.88 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.28 (s, 6H), 2.22 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.81 (s, 6H), 1.65-1.48 (m, 6H), 1.41-1.32 (m, 3H), 0.90-0.86 (m, 6H); 13C NMR (CDCl3): δ179, 174, 171, 64.6, 41.0, 39.2, 37.0, 32.9, 26.3, 25.1, 24.8, 24.2, 23.0, 22.6, 21.3.  MS (ESI): 287.4 (100, M+H); HRMS: C14H31N4O2 (M+H)の計算値: 287.2442; 実測値: 287.2443.
【０１９３】
実施例９
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４，Ｎ−ジメチルペンタノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化３６】
2009500410.tif 000043
パートＡ  −  Ｎ−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−Ｎ−メチルカルボニルアミノ］−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化３７】
2009500410.tif 000044
無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ａｈｘ−ＯＨ（４．８４ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２．７２ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（６．７５ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）の溶液をＤＩＥＡ（５．００ｍＬ、２８．７ｍｍｏｌ）で処理し、室温において２０分間撹拌した。溶液をＢｏｃ−Ｎ（Ｍｅ）−ＮＨ2（Malachowski, M. P.; Tie, C.; Wang, K.; Broadrup R. L. J. Org. Chem. 2002, 67, 8962-8969）で処理し、窒素下で室温において１８時間撹拌した。反応を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸（３×５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）および飽和ＬｉＣｌ（２×２５ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、高真空下で濃縮すると、標題化合物が無色の固体（５．２５７ｇ、８０％）として得られた。1H NMR (CDCl3)δ7.77 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.59 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.41 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.32 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 4.41 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.23 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 3.26-3.15 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.33-2.22 (m, 2H), 1.74-1.63 (m, 2H), 1.52-1.38 (m, 13H).  MS (ESI): 382.2 (100, M-Boc+H), 504.3 (15, M+Na).
【０１９４】
パートＢ  −  Ｎ−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４，Ｎ−ジメチルペンタノイルアミノ｝−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化３８】
2009500410.tif 000045
パートＡの生成物（１２２．９ｍｇ、０．２５５ｍｍｏｌ）を５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタン（２．０ｍＬ）に溶解し、室温において２０分間撹拌し、減圧を使用して濃縮した。得られた琥珀色の油をＤＭＦ（２．０ｍＬ）にＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（７６．４ｍｇ、０．３０６ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１１６．２ｍｇ、０．３０６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．０８９ｍＬ、０．５１０ｍｍｏｌ）と共に溶解した。反応溶液を室温において窒素下で３時間撹拌した。反応を酢酸エチル（５．０ｍＬ）で希釈し、０．１ＮのＨＣｌ（２×５．０ｍＬ）、１０％のＮａＨＣＯ3（５．０ｍＬ）、水（５．０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５．０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１：２のペンタン：酢酸エチル）で精製すると、標題化合物が粘稠な油（７１．２ｍｇ、４７％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CDCl3): δ8.84 (bs, 1H), 7.75 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.56 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.39 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.30 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 5.02-4.93 (m, 1H), 4.85 (bs, 1H), 4.61-4.51 (m, 1H), 4.44-4.35 (m, 2H), 4.25-4.17 (m, 1H), 3.20 (bs, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.29-2.20 (m, 2H), 1.73-1.58 (m, 3H), 1.58-1.46 (m 2H), 1.46-1.34 (m, 13H), 0.89-0.83 (m, 6H); 13C NMR (CDCl3): δ174.24, 171.08, 156.51, 156.29, 143.97, 141.33, 127.67, 127.03, 125.00, 119.97, 80.34, 66.55, 60.39, 47.75, 47.30, 40.91, 40.71, 35.62, 33.94, 29.58, 28.30, 26.24, 24.55, 22.88, 22.01.  MS (ESI): 617.4 (100, M+Na), 495.3 (70, M-Boc+H); HRMS: C33H47N4O6 (M+H)の計算値: 595.3490; 実測値: 595.3495.
【０１９５】
パートＣ  −  Ｎ−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４，Ｎ−ジメチルペンタノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化３９】
2009500410.tif 000046
パートＢの生成物（３５．０ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）をＴＡＥＡ（０．２２ｍＬ、１．４７１ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で３０分間撹拌した。揮発物を減圧真空下で除去し、得られた粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１７．７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２５．９ｍｇ、９１％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CD3CN): δ9.01 (s, 1H), 7.20 (bs, 3H), 5.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.48 (bs, 1H), 3.02 (s, 3H), 2.96 (bs, 2H), 2.24 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.75-1.58 (m, 5H), 1.50-1.28 (m, 13H), 0.89 (d, J = 6.6 Hz, 6H).  MS (ESI): 373.5 (100, M+H); HRMS: C18H37N4O4 (M+H)の計算値: 373.2809; 実測値: 373.2810.  キラル分析: 99.9% L-Leu.
【０１９６】
実施例１０
２−｛４−［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］−１，４，７，１０−テトラアザ−７，１０−ビス（カルボキシメチル）シクロドデシル｝酢酸の合成
【化４０】
2009500410.tif 000047
パートＡ  −  ６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−Ｎ−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化４１】
2009500410.tif 000048
無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のＢｏｃ−Ａｈｘ−ＯＨ（１．２９ｇ、５．５８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．０２ｇ、６．６６ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２．５４ｇ、６．６６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２．４４ｍＬ、１４．０ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度において窒素下で２０分間撹拌し、カルバジン酸９−フルオレニルメチル（１．４２ｇ、５．５８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．５ｍＬ、２．８７ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を３．５時間撹拌し、ジクロロメタン（３０ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸（５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（３×５０ｍＬ）で連続的に洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮すると、黄色の油が得られた。油を２：１の酢酸エチル：ヘキサンで溶離するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製すると、標題化合物が無色の固体（２．０６１ｇ、７９％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CDCl3): δ7,75 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.58 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.50 (br, 1H), 7.39 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.30 (dt, J = 7.0 Hz, 2H), 6.87 (br, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.44 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 4.24 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 3.08 (s, 2H), 2.23 (s, 2H), 1.68 (m, 2H), 1.42 (s, 9H), 1.47-1.35 (m, 4H); 13C NMR (CDCl3): δ172.6, 171.2, 156.2, 143.5, 141.3, 127.9, 127.8, 127.1, 125.1, 124.9, 120.0, 79.2, 68.0, 60.4, 46.9, 40.2, 33.8, 29.6, 28.4, 26.0, 24.7, 21.1, 14.2.  MS (ESI): 368.4 (100, M-Boc+H).
【０１９７】
パートＢ  −  ６−アミノ−Ｎ−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化４２】
2009500410.tif 000049
パートＡの生成物（０．７９ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を５０％のＴＦＡ／ジクロロメタン（１２．０ｍＬ）で室温において窒素下で２０分間処理した。溶液を減圧濃縮すると黄色の油（１．３８ｇ）が得られた。1H NMR (CDCl3): δ9.18 (s, 1H), 7.74 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.52 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.39 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.35 (br, 1H), 7.29 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 6.07 (br, 2H), 4.38 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 4.20 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.05 (m, 2H), 2.33 (m, 2H), 1.73 (m, 4H), 1.48 (m, 2H); 13C NMR (CDCl3): δ175.1, 160.1, 143.0, 141.3, 128.0, 127.2, 124.9, 120.1, 117.8, 115.9, 114.0, 112.1, 68.7, 46.6, 40.5, 32.0, 27.6, 25.1, 23.6, 14.1.  MS (ESI): 368.2 (100, M+H).
【０１９８】
パートＣ  −  ｔｅｒｔ−ブチル２−（１，４，７，１０−テトラアザ−４，１０−ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）−オキシカルボニル］−メチル｝−７−｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］−カルバモイル｝ペンチル）−カルバモイル］−メチル｝シクロドデシル）アセテートの調製
【化４３】
2009500410.tif 000050
無水ＤＭＦ（８．０ｍＬ）中のＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステル（０．９７２ｇ、１．７０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（０．７７２ｇ、２．０４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．３１２ｇ、２．０４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．５９ｍＬ、５．９ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。パートＢの生成物（１．３８ｇ、１．７０ｍｍｏｌ）を一度に加えた。追加のＨＢＴＵ（０．７７２ｇ、２．０４ｍｍｏｌ）を１時間後に加え、反応をさらに３時間撹拌した。反応混合物を１０％のクエン酸（２０ｍＬ）でクエンチし、ジクロロメタン（３０ｍＬ）で希釈した。水層をジクロロメタン（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を１０％のクエン酸（３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（３×３０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、黄色の油が得られた。油を酢酸エチルで溶離するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製すると、標題化合物が無色の油（０．７４６ｇ、４８％）として得られた。1H NMR (4:1 CDCl3:DMSO-d6): δ7.54 (m, 2H), 7.41 (m, 2H), 7.17 (m, 2H), 7.08 (m, 2H), 4.15 (d, 2H), 4.02 (m, 1H), 2.97 (m, 2H), 2.68-2.45 (m, 24H), 2.00 (t, 2H), 1.44 (t, 2H), 1.30-1.11 (m, 31H).  MS (ESI): 461.9 (100, M+2H), 922.5 (80, M+H).
【０１９９】
パートＤ  −  ２−｛４−［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）−カルバモイル］−ペンチル｝カルバモイル）メチル］−１，４，７，１０−テトラアザ−７，１０−ビス（カルボキシメチル）−シクロドデシル｝−酢酸の調製
【化４４】
2009500410.tif 000051
無水ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（８３．０ｍｇ、０．３３０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１６４ｍｇ、０．４３０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１１６μＬ、０．６７ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。分離フラスコにおいて、ＤＭＦ（５．０ｍＬ）中の２０％のピペリジン中のパートＣの生成物（３０７ｍｇ、０．３３０ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で４５分間撹拌し、減圧濃縮した。得られた残渣をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、活性化したＢｏｃ−ｄＬｅｕ−ＯＨの溶液に加えた。溶液を１時間後に濃縮すると、黄色の粘稠な油が得られた。この油をＴＦＡ（２ｍＬ）に溶解し、ＴＩＳ（２０μＬ）で処理し、室温において窒素下で１時間撹拌した。溶液を減圧濃縮し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０から１８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１４．４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１８．２ｍｇ、８．５％）として得られた。MS (ESI): 645.5 (90, M+H), 323.3 (100, M+2H); HRMS: C28H53N8O9 (M+H)の計算値: 645.3930; 実測値: 645.3933.キラル分析: 99.4% D-Leu.
【０２００】
実施例１１
２−（７−｛［Ｎ−（｛４−［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝−１，４，７，１０−テトラアザ−４，１０−ビス（カルボキシメチル）シクロドデシル）酢酸の合成
【化４５】
2009500410.tif 000052
パートＡ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−６−｛２−［４−（アミノメチル）フェニル］アセチルアミノ｝ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化４６】
2009500410.tif 000053
無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の２−（４−｛［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）酢酸（２９．７ｍｇ、０．０７７０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３１．７ｍｇ、０．０８４０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２４μＬ、０．１４ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度において窒素下で２０分間撹拌し、実施例３の生成物（２５．０ｍｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１０μＬ、０．０５７ｍｍｏｌ）で処理した。溶液をさらに４８時間撹拌し、ＴＡＥＡ（０．２５ｍＬ）で処理した。反応を室温において窒素下でさらに２０分間撹拌し、減圧濃縮した。残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１３．５から３６％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１９．６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１６．３ｍｇ、４６％、ＨＰＬＣ純度９５％）として得られた。1H NMR (4: 1 CD3CN: D2O): δ7.35 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.15 (m, 1H), 4.05 (s, 2H), 3.48 (s, 2H), 3.11 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.16 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.68-1.60 (m, 1H), 1.54-1.51 (m, 4H), 1.42-1.44 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.30-1.22 (m, 2H), 0.89 (dd, J = 7.2 Hz, 6H).  MS (ESI): 506.4 (100, M+H), 406.4 (10, M-Boc+H).
【０２０１】
パートＢ  −  ２−（７−｛［Ｎ−（｛４−［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）−カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］フェニル｝−メチル）カルバモイル］メチル｝−１，４，７，１０−テトラアザ−４，１０−ビス（カルボキシメチル）−シクロドデシル）酢酸の調製
無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中のＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステル（１０ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（７．８ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６．０μＬ、０．０３４ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌し、パートＡの生成物（８．７ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）で処理した。撹拌を１時間続け、溶液を減圧濃縮した。残渣をＴＦＡ（１ｍＬ）に溶解し、ＴＩＳ（１０μＬ）で処理し、４時間撹拌した。溶液を減圧濃縮し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０から１８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２０．５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（８．５ｍｇ、６２％、ＨＰＬＣ純度９６％）として得られた。MS (ESI): 793.5 (40, M+H), 396.9 (100, M+2H); HRMS: C37H62N9O10 (M+H)の計算値: 792.4620; 実測値: 792.462.
【０２０２】
実施例１２
２−｛７−［（Ｎ−｛［５−（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）（２−ピリジル）］アミノ｝カルバモイル）メチル］−１，４，７，１０−テトラアザ−４，１０−ビス（カルボキシメチル）シクロドデシル｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化４７】
2009500410.tif 000054
パートＡ  −  ６−｛［２−（１，４，７，１０−テトラアザ−４，７，１０−トリス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝シクロドデシル）アセチルアミノ］アミノ｝ピリジン−３−カルボン酸、ビス−トリフルオロ酢酸塩の調製
【化４８】
2009500410.tif 000055
５０：５０のジクロロメタン：アセトニトリル（２．０ｍＬ）中のＤＯＴＡトリ−ｔ−ブチルエステル（２２５ｍｇ、０．３９３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（６２ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度において窒素下で５分間撹拌し、６−ヒドラジンイクトイックアシッド（５０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を６０時間撹拌し、減圧濃縮した。残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む９から３６％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。３２．９分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物がオフホワイトの固体（３．０ｍｇ、１．０％）として得られた。MS (ESI): 708.4 (60, M+H).
【０２０３】
パートＢ  −  ｔｅｒｔ−ブチル２−［１０−（｛Ｎ−［（５−｛Ｎ−［５−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝カルバモイル）ペンチル］カルバモイル｝（２−ピリジル））アミノ］カルバモイル｝メチル）−１，４，７，１０−テトラアザ−４，７−ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝シクロドデシル］アセテート、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化４９】
2009500410.tif 000056
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中のパートＡの生成物（３．０ｍｇ、３．２μｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１．８ｍｇ、４．８μｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（８．１μＬ、４．８μｍｏｌ）および実施例３の生成物（２．２ｍｇ、４．８μｍｏｌ）の溶液を周囲温度において１時間撹拌した。溶液を減圧濃縮し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む９から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２４．７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（３．０ｍｇ、７３％）として得られた。MS (ESI): 1048.6 (60, M+H).
【０２０４】
パートＣ  −  ２−｛７−［（Ｎ−｛［５−（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）−カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）（２−ピリジル）］アミノ｝−カルバモイル）メチル］−１，４，７，１０−テトラアザ−４，１０−ビス（カルボキシメチル）シクロドデシル｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化５０】
2009500410.tif 000057
パートＢの生成物（３．０ｍｇ、２．４μｍｏｌ）を７５：２５のＴＦＡ：ジクロロメタン（１．０ｍＬ）に溶解し、６時間周囲温度において窒素下で撹拌した。溶液を減圧濃縮し、残渣を５０：５０のアセトニトリル：水（５．０ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥すると、標題化合物が茶色の固体（１．０ｍｇ、４７％）として得られた。MS (ESI): 780.4 (40, M+H).
【０２０５】
実施例１３
Ｎ−（（２Ｒ）−２−｛［（４−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝フェニル）メトキシ］カルボニルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化５１】
2009500410.tif 000058
パートＡ  −  （２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシメチル）−フェニル］−４−メチルペンタンアミドの調製
【化５２】
2009500410.tif 000059
１：１のトルエン：エタノール（２０ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（２．０２ｇ、８．１０ｍｍｏｌ）、４−アミノベンジルアルコール（１．００ｇ、８．１０ｍｍｏｌ）およびＥＥＤＱ（２．２１ｇ、８．９０ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で４時間撹拌した。溶液を減圧濃縮し、得られた残渣を１：４の酢酸エチル：ヘキサン、１：２の酢酸エチル：ヘキサンおよび１：１の酢酸エチル：ヘキサンで連続的に溶離するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製すると、標題化合物が無色の固体（２．６２ｇ、９６％）として得られた。1H NMR (CDCl3): δ8.46 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 4.98 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.27 (s, 1H), 1.83-1.73 (m, 2H), 1.70 (s, 1H), 1.62-1.55 (m, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.030.93 (m, 6H).  MS (ESI): 237.3 (100, M-Boc+H).  HRMS: C18H28N2O4 (M+H)の計算値: 337.2122; 実測値: 337.2118.
【０２０６】
パートＢ  −  （４−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝フェニル）メチル（４−ニトロフェノキシ）ホルメートの調製
【化５３】
2009500410.tif 000060
無水ジクロロメタン（１０ｍＬ）中のパートＡの生成物（１．００ｇ、３．０ｍｍｏｌ）および４−ニトロフェニルクロロホルメート（０．６ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し、ピリジン（０．４ｍＬ、４．９ｍｍｏｌ）で処理し、周囲温度において窒素下で２時間撹拌した。溶液をジクロロメタン（３０ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧濃縮した。得られた残渣を３：１の酢酸エチル／ヘキサンで溶離するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製すると、標題化合物が無色の結晶性の固体（１．０２ｇ、６８％）として得られた。1H NMR (CDCl3): δ8.48 (s, 1H), 8.30-8.26 (m, 2H), 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.42-7.36 (m, 4H), 5.25 (s, 2H), 4.92 (s, 1H), 4.24 (s, 1H), 1.85-1.70 (m, 2H), 1.62-1.53 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.02-0.95 (m, 6H); 13C NMR (CDCl3): δ170.9, 155.5, 152.4, 145.4, 138.6, 129.8, 129.7, 125.3, 121.8, 119.9, 80.8, 70.7, 53.8, 40.2, 28.3, 24.8, 22.9, 21.9.  MS (ESI): 524.3 (100, M+Na).  HRMS: C25H31N3O8 (M+H)の計算値: 502.2184; 実測値: 502.2183.
【０２０７】
パートＣ  −  Ｎ−（（２Ｒ）−２−｛［（４−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝フェニル）メトキシ］カルボニルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化５４】
2009500410.tif 000061
実施例３、パートＢの生成物（２９．０ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）を５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタン（２．０ｍＬ）に溶解し、室温において２０分間撹拌し、減圧濃縮して固体を得た。この固体を無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（１７μＬ、０．１０ｍｍｏｌ）、パートＢの生成物（２５．０ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（７．７ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）で処理した。反応を室温において窒素下で２４時間撹拌し、ＴＡＥＡ（０．２ｍＬ）で処理し、さらに２０分間撹拌した。溶液を減圧濃縮し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１３．５から３６％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２８．８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１８ｍｇ、５８％、ＨＰＬＣ純度９０％）として得られた。MS (ESI): 621.5 (60, M+H); HRMS: C31H53N6O7 (M+H)の計算値: 621.3970; 実測値: 621.3977.
【０２０８】
実施例１４
Ｎ−［（２Ｒ）−２−（｛［４−（（２Ｓ）−２−｛（２Ｓ）−２−［２−（（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ブチル｝−４−メチルペンタノイルアミノ）−アセチルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）フェニル］メトキシ｝−カルボニルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−アミノヘキサンアミドトリフルオロ酢酸塩の合成
【化５５】
2009500410.tif 000062
パートＡ  −  Ｎ−［（２Ｒ）−２−（｛［４−（（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）フェニル］−メトキシ｝カルボニルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）−カルボニルアミノ］ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化５６】
2009500410.tif 000063
実施例３Ｂの生成物（６５ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）を５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタン（２．０ｍＬ）に溶解し、室温において２０分間撹拌し、減圧濃縮して固体を得た。この固体を無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（３９μＬ、０．２２４ｍｍｏｌ）、実施例１３Ｂの生成物（５６．０ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１７ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）で処理した。反応を室温において窒素下で２４時間撹拌し、５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタン（２．０ｍＬ）で処理し、さらに３０分間室温において撹拌した。溶媒を減圧除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から５４％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。３３．３分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（５８ｍｇ、７０％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CD3CN)δ7.78 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.38 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.34-7.27 (m, 4H), 5.09-4.93 (m, 2H), 4.29 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.24-4.11 (m, 2H), 3.99 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.04-2.94 (m, 2H), 2.21-2.11 (m, 2H), 1.77-0.99 (m, 12H), 0.96-0.77 (m, 12H).  MS (ESI): 743.4 (100, M+H), 1485.6 (20, 2M+H).
【０２０９】
パートＢ  −  Ｆｍｏｃ−ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｌ−ＨＭＰＢ  ＢＨＡ樹脂の調製
Ｉｒｏｒｉ  ＭａｃｒｏＫａｎ（登録商標）反応器を使用して、このペプチドをペプチドライブラリーの一部として合成した。Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＨＭＰＢ  ＢＨＡ樹脂（０．２６ｇ／反応器、置換レベル＝０．５４ｍｍｏｌ／ｇ）をＤＭＦ（８ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ（登録商標））で洗浄することによって膨潤させた。以下の工程を実施した：（工程１）ＤＭＦ（８ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ）中の２０％のピペリジンを使用してＦｍｏｃ基を３分間取り出し、次いで３０分間、第２の処置をした。（工程２）樹脂をジクロロメタン（８ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ、９×３分）およびＤＭＦ（８ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ、３×３分）で完全に洗浄した。（工程３）ＤＭＦ（６ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ）中のＦｍｏｃ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（５．０モル当量）、ＨＯＢｔ（５モル当量）、ＨＢＴＵ（５モル当量）、およびＤＩＥＡ（５〜１０モル当量）を反応フラスコに加え、反応を８時間進行させた。（工程４）ＭａｃｒｏＫａｎｓをＤＭＦ（８ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ、３×３分）およびジクロロメタン（８ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ、９×３分）で完全に洗浄した。（工程５）樹脂の一部を取り出し、反応の完了をアッセイした。（工程６）工程３〜５を必要に応じて繰り返してカップリング反応を完了させた。工程１〜６を配列Ｆｍｏｃ−ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｌが得られるまで繰り返した。
【０２１０】
パートＣ  −  Ａｃ−ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｌ−ＯＨの調製
パートＢからのＭａｃｒｏＫａｎ反応器をフラスコに入れ、樹脂をＤＭＦ（８ｍＬ／ＭａｒｃｏＫａｎ）で洗浄することによって膨潤させた。ＤＭＦ（８ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ）中の２０％のピペリジンを使用してＦｍｏｃ基を３分間取り出し、次いで３０分間、第２の処置をした。（工程２）樹脂をジクロロメタン（８ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ、９×３分）およびＤＭＦ（８ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ、３×３分）で完全に洗浄した。無水酢酸（５モル当量）、ＤＩＥＡ（５モル当量）およびＤＭＦ（６ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ）を加え、反応を４時間進行させた。ＭａｃｒｏＫａｎｓをＤＭＦ（８ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ、３×３分）およびジクロロメタン（８ｍＬ／ＭａｃｒｏＫａｎ、９×３分）で完全に洗浄し、減圧下で終夜乾燥した。
【０２１１】
ペプチド−樹脂をＭａｃｒｏＫａｎｓから取り出し、焼結ガラス漏斗に入れ、ジクロロメタン（３ｍＬ）中の１％のＴＦＡで処理した。２分後、溶液を加圧することによって１０％のピリジンのメタノール（２ｍＬ）溶液に直接濾過した。切断工程を９回繰り返した。合わせた濾液をそれらの容量の５％まで蒸発させ、水（１０ｍＬ）で希釈し、氷水浴で冷却した。得られた沈殿を焼結ガラス漏斗での濾過によって集め、水で洗浄し、真空乾燥した。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２７から５４％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して精製すると、標題化合物が無色の固体（６７．７ｍｇ、７９％）として得られた。MS (ESI): 612.5 (20, M+H), 512.4 (100, M+H-Boc).
【０２１２】
パートＤ  −  Ｎ−［（２Ｒ）−２−（｛［４−（（２Ｓ）−２−｛（２Ｓ）−２−［２−（（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ブチル｝−４−メチルペンタノイルアミノ）アセチルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）フェニル］メトキシ｝カルボニルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化５７】
2009500410.tif 000064
無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中のパートＣの生成物（１９ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（２．８ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）、ＴＭＰ（１４μＬ、０．１０ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１３μＬ、０．０８４ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。パートＡの生成物（２４ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）を加え、４８時間撹拌を続けた。溶液を減圧濃縮し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで１５ｍＭのＮＨ4ＯＡｃ（ｐＨ＝７）を含む４５から７２％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２０．８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１１．４ｍｇ、２８％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 1236.7 (75, M-Boc+H), 1292.7 (100, M-44+H), 1336.8 (40, M+H).
【０２１３】
パートＥ  −  Ｎ−［（２Ｒ）−２−（｛［４−（（２Ｓ）−２−｛（２Ｓ）−２−［２−（（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ブチル｝−４−メチルペンタノイルアミノ）アセチルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）フェニル］メトキシ｝−カルボニルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化５８】
2009500410.tif 000065
パートＤの生成物（１３．４ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．０ｍＬ）溶液をＴＡＥＡ（０．２ｍＬ）で処理し、室温において２０分間撹拌した。溶液を減圧濃縮し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４９．５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。３３．１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１０．０ｍｇ、９０％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 1114.7 (100, M+H), 507.9 (40, 2M+H); HRMS: C56H96N11O12 (M+H)の計算値: 1114.7234; 実測値: 1114.7223.キラル分析: 75.2% L-Leu.
【０２１４】
実施例１５
Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−６−（２−ブロモプロパノイルアミノ）ヘキサンアミドの合成
【化５９】
2009500410.tif 000066
ＤＭＦ（１．０ｍＬ）中の２０％のピペリジン中の実施例３、パートＢの生成物（１１２ｍｇ、０．１９３ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌し、減圧濃縮した。得られた残渣をＤＭＦ（０．８ｍＬ）に溶解し、ＴＭＰ（５１μＬ、０．３８ｍｍｏｌ）および２−ブロモプロピオニルブロミド（２２μＬ、０．２１ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を１０分後に濃縮し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２７から４９．５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１９．１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２６．６ｍｇ、２８％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CDCl3)δ8.59 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 4.92 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.41 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 4.22 (s, 1H), 3.31-3.23 (m, 2H), 2.26 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.85 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.73-1.65 (m, 4H), 1.58-1.49 (m, 3H), 1.49-1.36 (m, 11H), 0.98-0.91 (m, 6H).  MS (ESI): 393.1 (100, M-Boc+H), 395.2 (90. M-Boc+H).
【０２１５】
実施例１６
Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−６−（２−フルオロプロパノイルアミノ）ヘキサンアミドの合成
【化６０】
2009500410.tif 000067
方法Ａ
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の実施例３の生成物（９．６ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）、ナトリウム２−フルオロプロピオネート（２．５ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１０ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７．７μＬ、０．５４ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で１０分間撹拌した。溶媒を減圧除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２４．２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（８．５ｍｇ、７３％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CD3CN)δ9.19 (s, 1H), 8.50 (m, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.14-5.05 (m, 1H), 4.96 (dd, J1 = 6.8 Hz, J2 = 49.2 Hz, 1H), 4.26 (s, 1H), 3.34-3.22 (m, 2H), 1.73-1.61 (m, 4H), 1.59-1.50 (m, 6H), 1.47-1.34 (m, 11H), 0.97-0.89 (m, 6H).  MS (ESI): 455.3 (10, M+Na), 333.3 (100, M-Boc+H); HRMS: C20H37FN4O5 (M+H)の計算値: 433.2821; 実測値: 433.2824.
【０２１６】
方法Ｂ
ＫＦ（水中の０．１ｍｇ／μＬ溶液３．９μＬ、０．００７ｍｍｏｌ）およびＫｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）（５．０ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（０．５ｍＬ）溶液を、フラスコを９０℃に加温しながら窒素流下で蒸発させた。この共沸乾燥工程を５回繰り返し、得られた残渣を高真空下で１５分間さらに乾燥した。残渣を実施例１５の生成物（１．１ｍｇ、０．００２０ｍｍｏｌ）の無水アセトニトリル０．２５ｍＬ溶液に溶解した。溶液を９０℃、窒素下で５分間撹拌した。ＬＣ／ＭＳでの分析によりブロミドの約１５％が標題化合物に変換したことが示された。
【０２１７】
実施例１７
Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−６−［（２，５−ジニトロフェニル）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの合成
【化６１】
2009500410.tif 000068
２，５−ジニトロ安息香酸（０．２１２ｇ、１．００ｍｍｏｌ）、塩化オキサリル（９６μＬ、１．１ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１０μＬ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液を周囲温度において４５分間撹拌した。溶液を減圧濃縮すると黄色の油（２２５ｍｇ）が得られた。この油（８０ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２．０ｍＬ）に実施例３の生成物（６２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６０μＬ、０．３４ｍｍｏｌ）と共に溶解した。溶液を周囲温度において２時間撹拌し、真空濃縮してオレンジ色の固体を生成した。化合物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２７から５４％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２５．０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物がオフホワイトの固体（２５ｍｇ、２７％）として得られた。1H NMR (CDCl3/CD3CN)δ8.38 (s, 1H), 8.27-8.22 (m, 2H), 8.01-7.90 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 4.98 (m, 1H), 3.25 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 2.10 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.58-1.23 (m, 18H), 0.81-0.74 (m, 6H).  MS (ESI): 451.4 (100, M+H-Boc).
【０２１８】
実施例１８
Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−６−［（２−フルオロ−５−ニトロフェニル）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの合成
【化６２】
2009500410.tif 000069
実施例１７の生成物（８．０ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）、ＫＦ（２．５ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）およびＫｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）（１６ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１．０ｍＬ）溶液を、フラスコを７５℃で加温しながら窒素流下で蒸発させた。この共沸乾燥工程を５回繰り返し、得られた残渣を高真空下で１５分間さらに乾燥した。残渣をアセトニトリル（１．０ｍＬ）に溶解し、８５℃で５分間加熱し、減圧濃縮してオレンジ／赤色油を得た。油をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２７から５４％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２４．６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１．６ｍｇ、２１％）として得られた。1H NMR (CDCl3)δ8.97-8.93 (m, 1H), 8.70 (bs, 1H), 8.36-8.31 (m, 1H), 7.92 (bs, 1H), 7.29 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.18 (s, 1H), 3.53-3.47 (m, 2H), 2.28 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.78-1.38 (m, 18H), 0.98-0.86 (m, 6H).  MS (ESI): 426.2 (100, M+H-Boc).
【０２１９】
実施例１９
２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化６３】
2009500410.tif 000070
実施例３Ｂの生成物（１１６．１ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）を５ｍＬの丸底フラスコに入れ、ピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、４．００ｍＬ）で２２℃において処理した。０．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去した。得られた固体物質をＤＭＦ（２．００ｍＬ）に溶解し、ＨＢＴＵ（８３．４ｍｇ、０．２２０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３３．７ｍｇ、０．２２０ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１０５μＬ、０．６００ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（２．００ｍｍｏｌ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（１３６ｍｇ、０．２２０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に移した。得られた溶液を２２℃において１時間維持し、次いで真空濃縮し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む５０〜８０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体が得られた。塊全体をＣＨ2Ｃｌ2（３．００ｍＬ）に溶解し、ＴＦＡ（７５０μＬ、９．７４ｍｍｏｌ）で処理した。７時間２２℃において撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．１×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜４０％のアセトニトリルの２．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１０１ｍｇ、０．０９２８ｍｍｏｌ；４６．４％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.39 (1H, s), 9.99 (1H, s), 8.42 (1H, t, J = 5.4 Hz), 8.19 (3H, br s), 4.14 (2H, s), 3.77 (1H, br s), 3.50 (8H, s), 3.36 (4H, brt, J = 5.4 Hz), 3.11 (2H, td, J = 6.8, 6.1 Hz), 3.04 (4H, brt, J = 5.6 Hz), 2.16 (2H, t, J = 7.4 Hz), 1.76-1.71 (1H, m), 1.63 (4H, m), 1.47-1.42 (2H, m), 1.32-1.27 (2H, m), 0.92 (3H, d, J = 6.5 Hz), 0.90 (3H, d, J = 6.5 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 150 MHz)δ172.7, 170.8, 167.6, 164.4, 54.3, 53.9, 52.1, 49.6, 48.6, 40.4, 38.7, 32.9, 28.5, 25.9, 24.6, 23.4, 22.5, 21.9.  MS (ESI): 634.4 (61.2, M+H), 317.9 (100).
【０２２０】
実施例２０
Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−フェニルプロパノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化６４】
2009500410.tif 000071
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ（１０ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（５．２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）溶液をコリジン（３５μＬ、０．２６ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（５．９μＬ、０．０３８ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（１８．０ｍｇ、３７．４μｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を１時間２２℃において撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をピペリジンのＤＭＦ（１：４ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）溶液で処理した。溶液を０．５時間撹拌し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む５〜３５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２３分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（７．７ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ；４０％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz)δ9.97 (1H, s), 9.83 (1H, s), 7.64 (3H, br s), 7.31-7.26 (4H, m), 7.19 (1H, t, J = 7.0 Hz), 6.91 (1H, d, J = 8.7 Hz), 4.23 (1H, ddd, J = 10.8, 8.9, 3.8 Hz), 2.99 (1H, dd, J = 13.9, 3.5 Hz), 2.80-2.73 (3H, m), 2.14 (2H, t, J = 7.3 Hz), 1.54 (4H, tt, J = 7.6, 7.5 Hz), 1.33 (2H, tt, J = 8.0, 7.3 Hz), 1.29 (9H, s).  MS (ESI): 393.4 (100, M+H).  HRMS: C20H33N4O4の計算値: 393.2496; 実測値: 393.2500.
【０２２１】
実施例２１
６−アミノ−Ｎ−｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−２−メチルプロパノイルアミノ｝ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化６５】
2009500410.tif 000072
Ｂｏｃ−Ａｉｂ−ＯＨ（２５．０ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１４．０ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）溶液をコリジン（７５．５μＬ、０．５７１ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１６μＬ、０．１０２ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（３０．０ｍｇ、６２．３μｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を１．５時間２２℃において撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む４５〜７５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体が得られ、次いでピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．５時間撹拌し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む０〜３０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１１．４ｍｇ、２５．６μｍｏｌ；４１．２％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.68 (1H, br s), 9.38 (1H, d, J = 1.7 Hz), 7.65 (3H, br s), 2.77 (2H, tq, J = 7.4, 5.7 Hz), 2.10 (2H, t, J = 7.4 Hz), 1.55-1.49 (4H, m), 1.37 (9H, s), 1.35 (6H, s), 1.31 (2H, m).  MS (ESI): 331.4 (100, M+H).  HRMS: C15H31N4O4 (M+H)の計算値: 331.2340; 実測値: 331.2339.
【０２２２】
実施例２２
Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−５−［（イミノ｛［（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）アミノ］ペンタノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化６６】
2009500410.tif 000073
Ｂｏｃ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ（６６．２ｍｇ、０．１２２ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１４．０ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）溶液をコリジン（７５．５μＬ、０．５７１ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１６．０μＬ、０．１０２ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（３０．０ｍｇ、６２．３μｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を１．５時間２２℃において撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、４．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．５時間撹拌し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む２５〜５５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２５．７ｍｇ、３２．９μｍｏｌ；５２．７％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.80 (1H, s), 9.79 (1H, s), 7.62 (3H, br s), 6.87 (1H, d, J = 8.2 Hz), 3.94 (1H, dt, J = 8.0, 7.8 Hz), 3.03 (2H, m), 2.77 (2H, tq, J = 6.1, 5.9 Hz), 2.59 (2H, t, J = 7.5 Hz), 2.03 (3H, s), 1.78 (2H, t, J = 6.8 Hz), 1.61-1.44 (7H, m), 1.37 (9H, s), 1.34-1.30 (2H, m), 1.26 (3H, s).  MS (ESI): 1335.6 (18.5, 2M+H), 668.4 (100, M+H).  HRMS: C31H54N7O7S (M+H)の計算値: 668.3800; 実測値: 668.3799.
【０２２３】
実施例２３
ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−４−［Ｎ−（６−アミノヘキサノイルアミノ）カルバモイル］−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ブタノエート、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化６７】
2009500410.tif 000074
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｇｌｕ（Ｂｕｔ）−ＯＨ（３７．２ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１４．０ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）溶液をコリジン（７５．５μＬ、０．５７１ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１６．０μＬ、０．１０２ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（３０．０ｍｇ、６２．３μｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を１．５時間２２℃において撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をトリス（２−アミノエチル）アミンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、４．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．５時間撹拌し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１５〜４５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２４．３ｍｇ、４４．６μｍｏｌ；７１．６％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ8.77 (1H, s), 8.68 (1H, s), 7.32 (3H, br s), 5.76 (1H, br s), 4.11 (1H, br s), 2.96 (2H, t, J = 6.8 Hz), 2.22 (2H, t J = 6.8 Hz), 2.02-1.97 (1H, m), 1.85-1.80 (1H, m), 1.70 (2H, tt, J = 7.6, 7.5 Hz), 1.65 (2H, tt, J = 7.0, 6.9 Hz), 1.54 (2H, m), 1.44 (9H, s), 1.42 (9H, s).  MS (ESI): 431.3 (100, M+H).
【０２２４】
実施例２４
６−アミノ−Ｎ−（｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］シクロペンチル｝カルボニルアミノ）ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化６８】
2009500410.tif 000075
パートＡ  −  Ｎ−（｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］シクロペンチル｝カルボニルアミノ）−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化６９】
2009500410.tif 000076
１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロペンタンカルボン酸（７２．０ｍｇ、０．３１４ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（３５．６ｍｇ、０．２６２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３．５０ｍＬ）溶液をコリジン（１９３μＬ、１．４６ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（４０．２μＬ、０．２５７ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（１００ｍｇ、０．２０８ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を３時間２２℃において撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む４０〜９０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（５０．０ｍｇ、８６．４μｍｏｌ；４１．６％）が得られた。1H NMR (C6D6, 600 MHz): δ9.50 (1H, br s), 8.62 (1H, br s), 7.59 (2H, d, J = 7.4 Hz), 7.50 (2H, br d, J = 7.1 Hz), 7.23 (2H, t, J = 7.3 Hz), 7.19 (2H, t, J = 7.1 Hz), 4.47 (2H, br d, J = 5.8 Hz), 4.40 (1H, br s), 4.05 (1H, br s), 2.88 (2H, m), 2.45-2.25 (2H, m), 2.02-1.69 (4H, m), 1.62-1.33 (4H, m), 1.43 (9H, s), 1.14-1.03 (4H, m).  MS (ESI): 601.3 (58.5, M+Na), 479.4 (100, M-Boc).  HRMS: C32H43N4O6 (M+H)の計算値: 579.3177;  実測値: 579.3180.
【０２２５】
パートＢ  −  ６−アミノ−Ｎ−（｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］シクロペンチル｝カルボニルアミノ）ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（４０．０ｍｇ、６９．１μｍｏｌ）をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．５時間維持し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む５〜３５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２４．０ｍｇ、５１．０μｍｏｌ；７３．８％）が得られた。1H NMR (C6D6, 600 MHz): δ10.29 (1H, br s), 9.66 (1H, br s), 8.63 (3H, br s), 6.69 (1H, br s), 2.71 (2H, t, J = 7.2 Hz), 2.49 (2H, dt, J = 13.4, 7.5 Hz), 2.27 (2H, t, J = 7.1 Hz), 2.17 (2H, br s), 1.67-1.57 (8H, m), 1.47 (9H, s), 1.29 (2H, tt, J = 7.6, 7.4 Hz).  MS (ESI): 357.4 (100, M+H).  HRMS: C17H33N4O4の計算値: 357.2502 (M+H); 実測値: 357.2491.
【０２２６】
実施例２５
Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］プロパノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化７０】
2009500410.tif 000077
Ｂｏｃ−Ｄ−Ａｌａ−ＯＨ（２３．２ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１４．０ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）溶液をコリジン（７５．５μＬ、０．５７１ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１６．０μＬ、０．１０２ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（３０．０ｍｇ、６２．３μｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を２時間２２℃において撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をトリス（２−アミノエチル）アミンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、４．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．５時間撹拌し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜３０％のアセトニトリルの１．５％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２１．３ｍｇ、４９．５μｍｏｌ；７９．４％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.76 (1H, s), 9.73 (1H, s), 7.62 (3H, br s), 6.90 (1H, d, J = 7.4 Hz), 4.02 (1H, dq, J = 7.2, 7.1 Hz), 2.77 (2H, tq, J = 5.9, 5.8 Hz), 2.11 (2H, t, J = 7.4 Hz), 1.55-1.50 (4H, m), 1.34-1.29 (2H, m), 1.37 (9H, s), 1.20 (3H, d, J = 7.1 Hz).  MS (ESI): 317.4 (100, M+H), 261.3 (9.5).  HRMS: C14H29N4O4の計算値: 317.2183; 実測値: 317.2186.
【０２２７】
実施例２６
（３Ｓ）−Ｎ−（６−アミノヘキサノイルアミノ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−５−メチルヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化７１】
2009500410.tif 000078
Ｂｏｃ−β−ｈｏｍｏＬｅｕ−ＯＨ（６６．５ｍｇ、０．２７１ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（３６．９ｍｇ、０．２７１ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３．６０ｍＬ）溶液をコリジン（１１９μＬ、０．９００ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（４２．０μＬ、０．２６８ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（８７．０ｍｇ、０．１８１ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を２時間２２℃において撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、３．６０ｍＬ）で処理した。溶液を０．５時間維持し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む５〜３５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（３１．４ｍｇ、６４．５μｍｏｌ；３５．７％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.68 (1H, s), 7.68 (2H, br s), 6.59 (1H, d, J = 8.9 Hz), 3.85-3.80 (1H, m), 2.77 (2H, tq, J = 6.0, 5.8 Hz), 2.21 (2H, ABXX', JAB = 14.3 Hz, JAX = JBX = 8.3 Hz, JAX' = JBX' = 5.3 Hz), 2.11 (2H, t, J = 7.4 Hz), 1.59-1.49 (5H, m), 1.37 (9H, s), 1.34-1.29 (3H, m), 1.20 (1H, ddd, J = 13.3, 9.2, 3.9 Hz), 0.84 (3H, d, J = 6.9 Hz), 0.83 (3H, d, J = 7.0 Hz).  13C NMR (DMSO-d6, 150 MHz)δ170.6, 168.8, 154.8, 77.3, 45.5, 44.1, 42.9, 38.5, 32.7, 28.1 (3), 26.6, 25.2, 24.3, 24.2, 23.2, 21.5.  MS (ESI): 373.4 (100, M+H).  HRMS: C18H37N4O4の計算値: 373.2809; 実測値: 373.2808.
【０２２８】
実施例２７
（２Ｒ）−６−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−Ｎ−（６−アミノヘキサノイルアミノ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化７２】
2009500410.tif 000079
パートＡ  −  （２Ｒ）−６−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサン酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化７３】
2009500410.tif 000080
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ（２６０ｍｇ、０．５５５ｍｍｏｌ）をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、４．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．５時間維持し、次いで真空濃縮し、真空マニホールドで１８時間乾燥して過剰ピペリジンの完全な除去を確実にした。得られた固体物質をＤＭＦ（２．００ｍＬ）に溶解し、ＨＢＴＵ（２６３ｍｇ、０．６９４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１０６ｍｇ、０．６９２ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（４８３μＬ、２．７７ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（２．００ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（１９３ｍｇ、０．８３０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に移した。得られた溶液を２２℃において１時間維持し、次いで真空濃縮した。残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む３５〜７５％のアセトニトリルの２．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２０３ｍｇ、０．４４２μｍｏｌ；７９．６％）が得られた。MS (ESI): 482.4 (30, M+Na), 460.4 (14, M+H), 360 (100, M-Boc).この物質をさらに精製することなく次の工程で使用した。
【０２２９】
パートＢ  −  （２Ｒ）−６−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−Ｎ−（６−アミノヘキサノイルアミノ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（４５．０ｍｇ、９７．９μｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１２．３ｍｇ、９０．４μｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２．００ｍＬ）溶液をコリジン（５３．９μＬ、０．４０８ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１４．１μＬ、９０．１μｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（３０．０ｍｇ、６２．３μｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を３時間２２℃において撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をトリス（２−アミノエチル）アミンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．５時間維持し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜４０％のアセトニトリルの２．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２５．３ｍｇ、３６．１μｍｏｌ；５７．９％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.76 (1H, br s), 7.72 (1H, t, J = 5.5 Hz), 7.61 (2H, br s), 6.79 (1H, d, J = 8.2 Hz), , 6.71 (1H, d, J = 8.0 Hz), 3.94-3.89 (1H, m), 3.06-2.97 (2H, m), 2.77 (2H, td, J = 5.9, 5.8 Hz), 2.11 (2H, t, J = 7.3 Hz), 1.55-1.50 (2H, m), 1.37 (18H, s), 1.43-1.23 (13H, m), 0.87 (3H, d, J = 6.6 Hz), 0.85 (3H, d, J = 6.7 Hz).  MS (ESI): 587.4 (100, M+H).  HRMS: C28H55N6O7の計算値: 587.4127; 実測値: 587.4122.
【０２３０】
実施例２８
６−｛（２Ｒ）−２−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−Ｎ−アミノヘキサンアミド、ギ酸塩の合成
【化７４】
2009500410.tif 000081
パートＡ  −  ６−｛（２Ｒ）−２−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−Ｎ−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化７５】
2009500410.tif 000082
実施例１Ｂの生成物（１２３ｍｇ、０．３４２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（５．００ｍＬ）溶液にＦｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（１４５．０ｍｇ、０．４１０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１４３ｍｇ、０．３７７ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（５２．０ｍｇ、０．３４０ｍｍｏｌ）次いでｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１７９μＬ、１．０３ｍｍｏｌ）を２２℃において加えた。１．５時間撹拌後、溶液を酢酸エチルおよびＨ2Ｏ（各５０ｍＬ）で希釈し、分液漏斗に移した。層を分離し、水層を酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で洗浄した。合わせた酢酸エチル層を０．１ＮのＨＣｌおよびＮａＨＣＯ3とＮａＣｌ（各３０ｍＬ）の飽和溶液で連続的に洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた淡黄色の油（約２００ｍｇ）をさらに精製することなく次の工程で使用した。MS (ESI): 603.3 (90, M+Na), 581.4 (100, M+H), 481.4 (94, M-Boc).
【０２３１】
パートＢ  −  ６−｛（２Ｒ）−２−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−Ｎ−アミノヘキサンアミド、ギ酸塩の調製
パートＡの生成物（２００ｍｇ、０．３４２μｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2（３．００ｍＬ）溶液を２２℃においてＴＦＡ（３．００ｍＬ）で処理した。０．５時間撹拌後、溶液を真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈを含む２５〜７５％のアセトニトリルの２．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（９９．０ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ；２工程で５４．９％）が得られた。1H NMR (C6D6, 600 MHz): δ7.76 (1H, br s), 7.65 (2H, d, J = 7.2 Hz), 7.60 (2H, d, J = 7.3 Hz), 7.25-7.17 (4H, m), 4.57 (1H, td, J = 8.9, 5.5 Hz), 4.38 (2H, ABqd, JAB = 10.7 Hz, Jd = 7.4 Hz), 4.14 (1H, t, J = 7.3 Hz), 3.34-3.19 (2H, m), 2.30 (1H, t, J = 6.9 Hz), 2.17 (2H, t, J = 7.3 Hz), 1.86 (1H, qq, J = 6.9, 6.7 Hz), 1.82-1.75 (2H, m), 1.64 (2H, tt, J = 7.6, 7.5 Hz), 1.51-1.44 (2H, m), 1.29 (2H, tt, J = 7.6, 7.4 Hz), 0.99 (3H, d, J = 6.4 Hz), 0.97 (3H, d, J = 6.5 Hz). 13C NMR (C6D6, 150 MHz)δ172.9, 172.8, 156.8, 144.7, 144.6, 141.6, 127.4, 125.8, 120.2, 66.6, 54.1, 47.7, 42.4, 39.2, 34.0, 29.4, 26.6, 25.3, 25.1, 23.4, 22.2.  MS (ESI): 503.4 (15.5, M+Na), 481.4 (100, M+H).  HRMS: C27H37N4O4 (M+H)の計算値: 481.2809; 実測値: 481.2811.
【０２３２】
実施例２９
（２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化７６】
2009500410.tif 000083
パートＡ  −  Ｎ−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］（４−｛［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）カルボキサミドの調製
【化７７】
2009500410.tif 000084
Ｆｍｏｃ−Ａｍｂ−ＯＨ（１．００ｇ、２．６８ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１０．０ｍＬ）溶液を２２℃においてＨＢＴＵ（１．２２ｇ、３．２２ｍｍｏｌ）次いでｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２．３０ｍＬ、１３．２ｍｍｏｌ）およびカルバジン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３５４ｍｇ、２．６８ｍｍｏｌ）で処理した。反応時間の２時間後、全ての揮発物を真空除去した。得られた油を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、ＮａＨＣＯ3（２×１５ｍＬ）およびＮａＣｌ（１×１５ｍＬ）の飽和溶液で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、シリカのプラグによって濾過し、真空濃縮して淡黄色の結晶性の固体（１．２０ｇ、２．４６ｍｍｏｌ、９１．９％）を得た。この物質を次の工程で直接使用した。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ9.50 (1H, br s), 7.71 (1H, br s), 7.40 (2H, br d, J = 6.6 Hz), 7.31 (2H, d, J = 7.5 Hz), 7.20 (2H, d, J = 7.4 Hz), 6.94 (2H, t, J = 7.4 Hz), 6.90 (1H, t, J = 5.9 Hz), 6.86-6.84 (4H, m), 3.97 (2H, d, J = 6.8 Hz), 3.87 (2H, d, J = 6.0 Hz), 3.77 (1H, t, J = 6.6 Hz), 1.02 (9H, s).  MS (ESI): 875.3 (100, 2M-Boc). 388.2 (90, M-Boc).
【０２３３】
パートＢ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（１００ｍｇ、０．２０５ｍｍｏｌ）をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）で２２℃において処理した。０．２５時間後、全ての揮発物を真空除去し、残渣を乾燥ＤＭＦ（２．００ｍＬ）に溶解し、次いでコリジン（７０．０μＬ、０．５３０ｍｍｏｌ）で処理した。得られた溶液を乾燥ＤＭＦ（２．０ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（７１．０ｍｇ、０．３０７ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（３５．０ｍｇ、０．２５７ｍｍｏｌ）、コリジン（１９０μＬ、１．４４ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（４０．１μＬ、０．２５６ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に移した。０．５時間後２２℃において、追加の１．５０当量の活性化したアミノ酸溶液を反応混合物に移し、次いで４時間以内に遊離ヒドラジドが完全に消費したことが認められた。真空濃縮後、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む５０〜８０％のアセトニトリルの１．２％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体が得られた。その後、塊全体をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、３．００ｍＬ）で処理した。３時間２２℃で撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１０〜４０％のアセトニトリルの１．２％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（５０．７ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ；５０．２％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.96 (1H, br s), 8.19 (2H, br s), 7.92 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 7.55 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 6.92 (1H, d, J = 8.2 Hz), 4.13-4.09 (1H, m), 4.11 (2H, s), 1.74-1.70 (1H, m), 1.51-1.49 (2H, m), 1.39 (9H, s), 0.91 (3H, d, J = 6.6 Hz), 0.89 (3H, d, J = 6.5 Hz).  13C NMR (DMSO-d6, 150 MHz): δ172.1, 164.8, 156.7, 155.2, 137.7, 132.4, 128.7, 127.7, 77.9, 51.3, 44.2, 41.9, 41.6, 40.9.  MS (ESI): 757.3 (100, 2M+H), 379.4 (38.8, M+H).  HRMS: C19H31N4O4の計算値: 379.2340; 実測値: 379.2338.
【０２３４】
実施例３０
（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチル−Ｎ−（４−ピペリジルカルボニルアミノ）ペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化７８】
2009500410.tif 000085
パートＡ  −  フルオレン−９−イルメチル４−｛Ｎ−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］カルバモイル｝ピペリジンカルボキシレートの調製
【化７９】
2009500410.tif 000086
ピペリジン−１，４−ジカルボン酸モノ（９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル）エステル（５００ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１７９ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１０．０ｍＬ）溶液をコリジン（１．１０ｍＬ、８．３２ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（２０４μＬ、１．３０ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。カルバジン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１５７ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を１６時間２２℃で撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、粗製残渣を酢酸エチル（７０ｍＬ）に溶解し、ＮａＨＣＯ3（６×２５ｍＬ）およびＮａＣｌ（２×２５ｍＬ）の飽和溶液で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む５５〜８０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（５４１ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ；９７．９％）が得られた。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ (2.6: 1 回転異性体の混合物; 主回転異性体のデータ) 7.77 (2H, d, J = 7.5 Hz), 7.57 (2H, d, J = 7.4 Hz), 7.40 (2H, dd, J = 7.4, 7.4 Hz), 7.32 (2H, dd, J = 7.6, 7.4 Hz), 4.45 (2H, br s), 4.40 (2H, d, J = 6.8 Hz), 4.24 (1H, t, J = 6.6 Hz), 2.86 (2H. br s), 2.35 (1H, m), 1.82 (3H, br s), 1.66 (3H, br s), 1.48 (9H, s).  13C NMR (CDCl3, 150 MHz): δ (主回転異性体) 174.2, 155.4, 144.2, 141.6, 127.9, 127.3, 125.1, 120.2, 82.6, 67.6, 47.6, 43.4, 41.0, 28.2.  MS (ESI): 488.3 (100, M+Na), 301.4 (16.4).  HRMS: C26H32N3O5の計算値: 466.2336; 実測値: 466.2337.
【０２３５】
パートＢ  −  （２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチル−Ｎ−（４−ピペリジルカルボニルアミノ）ペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（５０．０ｍｇ、０．１０７ｍｍｏｌ）をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、１．５ｍＬ）で２２℃において処理した。０．２５時間後、全ての揮発物を真空除去し、残渣を乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）に溶解し、次いでコリジン（２５．０μＬ、０．１８９ｍｍｏｌ）で処理した。得られた溶液を乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（３７．３ｍｇ、０．１６１ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１８．４ｍｇ、０．１３５ｍｍｏｌ）、コリジン（５０．０μＬ、０．３７８ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（２１．０μＬ、０．１３４ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に移した。１時間後、２２℃において全ての揮発物を真空除去し、粗製残渣をトリス（２−アミノエチル）アミンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、４．００ｍＬ）で処理すると、完全な脱保護が０．５時間以内に認められた。得られた溶液を濃縮して黄色の油を得、これをＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１５．３ｍｇ、３２．５μｍｏｌ；３０．３％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.89 (1H, s), 9.82 (1H, s), 8.39 (2H, br s), 6.88 (1H, d, J = 8.3 Hz), 4.02 (1H, ddd, J = 9.9, 8.5, 5.1 Hz), 3.31-3.28 (2H, m), 2.91 (2H, brt, J = 11.8 Hz), 1.87-1.83 (2H, m), 1.77-1.62 (3H, m), 1.48-1.39 (2H, m), 1.37 (9H, s), 0.88 (3H, d, J = 6.6 Hz), 0.85 (3H, d, J = 6.6 Hz).  MS (ESI): 357.3 (100, M+H), 301.4 (16.4).  HRMS: C17H33N4O4 (M+H)の計算値: 357.2496; 実測値: 357.2496.
【０２３６】
実施例３１
２−（｛２−［（２−｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］ピペリジル｝−２−オキソエチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化８０】
2009500410.tif 000087
実施例３０Ｂの生成物（１２．０ｍｇ、２５．５μｍｏｌ）をＨＢＴＵ（１４．７ｍｇ、３８．８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５．９ｍｇ、３８．５ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２９．３μＬ、０．１６８ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（１．５０ｍｍｏｌ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝−アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（２７．０ｍｇ、４３．７μｍｏｌ）の予め調製した溶液に一度に加えた。得られた溶液を２２℃において１時間維持し、次いで真空濃縮した。次いで残渣をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（３：７ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）で１８時間処理し、次いで真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１３分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１０．３ｍｇ、９．５μｍｏｌ；４６．４％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.46 (1H, br s), 10.13 (1H, d, J = 12.7 Hz), 8.20 (3H, br s), 6.49 (1H, s), 4.60 (2H, br s), 4.32 (1H, br d, J = 13.5 Hz), 3.77 (1H, t, J = 6.7 Hz), 3.67 (1H, br d, J = 12.2 Hz), 3.67 (7H, s), 3.09-3.04 (5H, m), 2.77 (1H, brt, J = 12.1 Hz), 2.54 (1H, m), 1.79-1.71 (3H, m), 1.66-1.53 (3H, m), 1.51-1.44 (1H, m), 0.92 (3H, d, J = 6.5 Hz), 0.90 (3H, d, J = 6.5 Hz).  MS (ESI): 632.4 (78.3, M+H), 518.9 (48.4), 316.4 (100, M+2H).  HRMS: C26H46N7O11の計算値: 632.3250; 実測値: 632.3215.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−ロイシン９９．３％。
【０２３７】
実施例３２
Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）−６−（（２Ｒ）−３−フルオロ−２−ヒドロキシプロポキシ）ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化８１】
2009500410.tif 000088
パートＡ  −  メチル６−｛（２Ｒ）−２−［（２−メトキシエトキシ）メトキシ］−３−［（４−メチルフェニル）スルホニルオキシ］プロポキシ｝ヘキサノエートの調製
【化８２】
2009500410.tif 000089
６−［２−ヒドロキシ−３−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−プロポキシ］ヘキサン酸メチルエステル（１．００ｇ、２．６７ｍｍｏｌ）（Kazi, A. B.; Hajdu, J. Tetrahedron Lett. 1992, 33, 2291）の乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（９．００ｍＬ）溶液をｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１．００ｍＬ、５．７４ｍｍｏｌ）およびＭＥＭクロリド（４６０μＬ、４．０３ｍｍｏｌ）で処理すると、完全な保護が４時間後２２℃において認められた。反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍＬ）で希釈し、次いでＮａＨＣＯ3（２×１５ｍＬ）の飽和溶液、次いでＨ2Ｏ（２×１５ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。シリカのクロマトグラフィー（０．５％のＥｔ3Ｎを含有する２：３の酢酸エチル：ヘキサン；０．５％のＥｔ3Ｎを含有する１：１の酢酸エチル：ヘキサン中Ｒf＝０．６）で精製すると、無色の油（０．８７０ｇ、１．８８ｍｍｏｌ；７０．４％）が得られた。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ7.78 (2H, AB, J = 8.3 Hz), 7.34 (2H, AB, J = 8.4 Hz), 4.71 (2H, ABq, JAB = 7.1 Hz), 4.16 (1H, dd, J = 10.3, 4.2 Hz), 4.09 (1H, dd, J = 10.4, 5.8 Hz), 3.94-3.91 (1H, m), 3.66-3.65 (2H, m), 3.66 (3H, s), 3.50 (2H, td, J = 4.0, 1.6 Hz), 3.45 (2H, ABqd, JAB = 10.3 Hz, Jd = 5.0 Hz), 3.39-3.34 (2H, m), 3.36 (3H, s), 2.44 (3H, s), 2,29 (2H, t, J = 7.5 Hz), 1.61 (2H, tt, J = 7.7, 7.6 Hz), 1.50 (2H, tt, J = 7.6, 6.6 Hz), 1.33-1.28 (2H, m).  MS (ESI): 485.3 (67.3, M+Na) 480.3 (100, M+H2O), 375.3 (23.3).
【０２３８】
パートＢ  −  ６−｛（２Ｒ）−２−［（２−メトキシエトキシ）メトキシ］−３−［（４−メチルフェニル）スルホニルオキシ］プロポキシ｝ヘキサン酸の調製
【化８３】
2009500410.tif 000090
パートＡの生成物（２５０ｍｇ、０．５４０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ2Ｏ溶液（４：１ｖ／ｖ４．００ｍＬ）をＬｉＯＨ・Ｈ2Ｏ（６８．０ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ）で一度に処理し、１８時間２２℃において撹拌させた。次いで反応混合物のｐＨを０．１ＮのＨＣｌで４〜５に調整し、得られた二相を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した。層を分離し、酢酸エチル層をＮａＣｌ（５０ｍＬ）の飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して無色の油（２２３ｍｇ、０．４９７ｍｍｏｌ；９２．０％）を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程で使用した。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ12.0 (1H, br s), 7.78 (2H, AB, J = 8.3 Hz), 7.49 (2H, AB, J = 8.0 Hz), 4.62 (2H, ABq, JAB = 6.9 Hz), 4.09 (1H, dd, J = 10.5, 3.5 Hz), 4.01 (1H, dd, J = 10.4, 5.5 Hz), 3.82 (1H, qd, J = 5.5, 3.5 Hz), 3.53-3.51 (2H, m), 3.40 (2H, t, J = 4.5 Hz), 3.38 (1H, dd, J = 10.0, 5.4 Hz), 3.33 (1H, dd, J = 10.2, 5.8 Hz), 3.28 (2H, t, J = 6.5 Hz), 3.22 (3H, s), 2.42 (3H, s), 2.17 (2H, t, J = 7.4 Hz), 1.46 (2H, tt, J = 7.6, 7.5 Hz), 1.39 (2H, tt, J = 7.5, 6.6 Hz), 1.24-1.19 (2H, m).  MS (ESI): 471.2 (85.4, M+Na), 466.2 (100, M+H2O), 171.4 (80.1), 115.4 (68.7).
【０２３９】
パートＣ  −  （２Ｒ）−３−［５−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝カルバモイル）ペンチルオキシ］−２−［（２−メトキシエトキシ）メトキシ］プロピル４−メチルベンゼンスルホネートの調製
【化８４】
2009500410.tif 000091
パートＢの生成物（５０．０ｍｇ、０．１１１ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１５．３ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）に溶解し、コリジン（１０３μＬ、０．７７９ｍｍｏｌ）次いでＤＩＣ（１７．５μＬ、０．１１２ｍｍｏｌ）で処理した。５分間２２℃において撹拌後、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＭｅを熱エタノール中のヒドラジン水和物４当量で処理することによって調製したＢｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＮＨＮＨ2（２７．３ｍｇ、０．１１１ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を終夜撹拌した。２０時間の総反応時間後、全ての揮発物を真空除去し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む４５〜７５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（３７．９ｍｇ、５６．１μｍｏｌ；５０．３％）が得られた。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ8.66 (1H, br s), 7.92 (1H, br s), 7.79 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 7.34 (2H, AB, JAB = 8.0 Hz), 4.70 (2H, ABq, JAB = 7.1 Hz), 4.20 (1H, br s), 4.16 (1H, dd, J = 10.4, 4.2 Hz), 4.09 (1H, dd, J = 10.3, 5.8 Hz), 3.92 (1H, qd, J = 5.4, 4.1 Hz), 3.64 (2H, t, J = 4.6 Hz), 3.49 (2H, ddd, J = 5.8, 3.5, 1.1 Hz), 3.45 (2H, dd, J = 5.2, 4.8 Hz), 3.37 (2H, m), 3.36 (3H, s), 2,44 (3H, s), 2.24 (2H, t, J = 7.4 Hz), 1.69 (2H, m), 1.66 (2H, tt, J = 7.9, 7.5 Hz), 1.52 (2H, m), 1.43 (11H, s), 1.38-1.33 (2H, m).  MS (ESI): 698.3 (50.4, M+Na), 576.3 (100, M-Boc), 500.3 (80.1).  HRMS: C31H54N3O11Sの計算値: 676.3474; 実測値: 676.3494.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−ロイシン９９．２％。
【０２４０】
パートＤ  −  メチル６−（（２Ｒ）−３−フルオロ−２−ヒドロキシプロポキシ）ヘキサノエートの調製
【化８５】
2009500410.tif 000092
オーブン乾燥した１ドラムバイアルにＫＦ（３５．０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）およびＫｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２［４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアゾビシクロ−（８，８，８）ヘキサコサン］（２２６．０ｍｇ、０．６００ｍｍｏｌ）および無水アセトニトリル（１００μＬ）を入れた。次いで溶液を真空濃縮し、追加のアセトニトリル（３×１００μＬ）を使用して任意の残りの水を共沸した。次いでこの残渣に６−［２−ヒドロキシ−３−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−プロポキシ］ヘキサン酸メチルエステル3（７５．０ｍｇ；０．２００ｍｍｏｌ）の乾燥アセトニトリル（２００μＬ）溶液を加えた。次いでバイアルをＴｅｆｌｏｎスクリューキャップで封止し、１４０℃に加熱し、１時間撹拌した。２２℃に冷却後、溶液を酢酸エチルと水（各１ｍＬ）との間に分配し、層を分離し、水層を酢酸エチル（２×１ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮し、シリカのクロマトグラフィーで精製すると（１：１のＥｔ2Ｏ／ペンタン中Ｒf＝０．５；ＫＭｎＯ4）無色の油（１８．３ｍｇ、８２．３μｍｏｌ；４１．１％）が得られた。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ4.44 (2H, dABX, , Jd = 47.2 Hz, JAB = 9.5 Hz, JAX = 4.5 Hz, JBX = 5.4 Hz), 4.00 (1H, dtt, J = 18.2, 5.8, 4.5 Hz), 3.66 (3H, s), 3.52 (1H, ddd, J = 9.7, 4.5, 1.3 Hz), 3.49-3.44 (3H, m), 2.31 (2H, t, J = 7.4 Hz), 1.64 (2H, tt, J = 7.8, 7.7 Hz), 1.59 (2H, tt, J = 7.2, 6.5 Hz), 1.40-1.35 (2H, m). 19F NMR (CDCl3, 565 MHz)δ-232.2 (1F, td, J = 47.2, 18.1 Hz).  MS (ESI): 223.3 (100, M+H).
【０２４１】
パートＥ  −  ６−（（２Ｒ）−３−フルオロ−２−ヒドロキシプロポキシ）−Ｎ−アミノヘキサンアミドの調製
【化８６】
2009500410.tif 000093
パートＤの生成物（４０．０ｍｇ、０．１８０ｍｍｏｌ）を無水エタノール（５００μＬ）に溶解し、ヒドラジン水和物（３７．２μＬ、０．７１９ｍｍｏｌ）で処理し、次いで１００℃に加熱し、１８時間維持した。２２℃に冷却後、反応溶液をシリカゲルカラムに直接添加し、１％のＥｔ3Ｎを含有する９：１のＣＨ2Ｃｌ2／メタノールで溶離すると、濃縮後、白色の固体（３１．３ｍｇ、０．１４１ｍｍｏｌ；７８．２％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ8.91 (1H, br s), 5.11 (1H, d, J = 5.3 Hz), 4.34 (2H, dABX, Jd = 47.7 Hz, JAB = 9.5 Hz, JAX = 3.5 Hz, JBX = 5.5 Hz), 4.20 (1H, br s), 3.78 (1H, dttd, J = 21.5, 5.7, 5.6, 3.5 Hz), 3.38-3.35 (2H, m), 3.33 (2H, dd, J = 5.9, 1.5 Hz), 3.31 (2H, br s), 2.00 (2H, t, J = 7.4 Hz), 1.51-1.45 (4H, m), 1.28-1.22 (2H, m).  MS (ESI): 223.3 (52.0, M+H), 130.3 (100), 122.3 (60.0), 120.2 (67.0).
【０２４２】
パートＦ  −  Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）−６−（（２Ｒ）−３−フルオロ−２−ヒドロキシプロポキシ）ヘキサンアミド、ギ酸塩の調製
【化８７】
2009500410.tif 000094
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（３１．２ｍｇ、０．１３５ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１５．３ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）溶液をコリジン（５９．５μＬ、０．４５０ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１７．６μＬ、０．１１２ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。パートＥの生成物（２０．０ｍｇ、９０．０μｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を１時間２２℃において撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．２５時間撹拌し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（８．３ｍｇ、２２μｍｏｌ；２４％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.99 (1H, s), 5.10 (1H, d, J = 5.3 Hz), 4.35 (2H, dABX, Jd = 47.7 Hz, JAB = 9.5 Hz, JAX = 3.6 Hz, JBX = 5.5 Hz), 3.81-3.75 (1H, m), 3.73 (1H, dd, J = 7.5, 6.8 Hz), 3.38 (2H, ABqt, JAB = 9.5 Hz, Jt = 6.5 Hz), 3.34 (2H, dd, J = 5.7, 1.6 Hz), 2.15 (2H, t, J = 7.3 Hz), 1.76-1.69 (1H, m), 1.61-1.47 (6H, m), 1.33-1.28 (2H, m), 0.92 (3H, d, J = 6.5 Hz), 0.90 (3H, d, J = 6.5 Hz). 19F NMR (DMSO-d6, 565 MHz)δ-230.0 (1F, td, J = 47.9, 21.6 Hz).  MS (ESI): 336.4 (100, M+H).生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−ロイシン９９．６％。
【０２４３】
実施例３３
２−［５−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝カルバモイル）ペンチルオキシ］エチル４−メチルベンゼンスルホネートの合成
【化８８】
2009500410.tif 000095
パートＡ  −  メチル６−（２−ヒドロキシエトキシ）ヘキサノエートの調製
【化８９】
2009500410.tif 000096
乾燥アイスコンデンサを備えた１００ｍＬの丸底フラスコにカプロン酸メチル（２．００ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）（δ−カプロラクトンから新たに調製、Padwa, A.; Danca, M., D. Org. Lett. 2002, 4, 715参照）の乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（３０．０ｍＬ）溶液を入れた。反応器を−７８℃に冷却し、約１．５当量のエチレンオキシドを凝結して溶液にした。反応混合物を−１０℃に加温し、次いでＢＦ3・ＯＥｔ2（５２０μＬ、４．１０ｍｍｏｌ）で処理し、０．５時間撹拌した。次いで溶液を冷飽和ＮａＣｌ水溶液に注ぎ、層を分離した。ＣＨ2Ｃｌ2層を飽和ＮａＣｌ（２×２０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。シリカのクロマトグラフィーで精製し（１：１の酢酸エチル：ペンタン；Ｒf＝０．４）、次いで減圧蒸留すると、無色の油（５３０ｍｇ、２．７９ｍｍｏｌ；２０．３％）が得られた。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ3.70 (2H, dd, J = 4.7, 4.5 Hz), 3.65 (3H, s), 3.51 (2H, dd, J = 4.7, 4.5 Hz), 3.46 (2H, t, J = 6.5 Hz), 2.30 (2H, t, J = 7.5 Hz), 1.64 (2H, tt, J = 7.7, 7.5 Hz), 1.59 (2H, tt, J = 7.5, 6.6 Hz), 1.40-1.35 (2H, m). 13C NMR (CDCl3, 150 MHz): δ174.3, 72.0, 71.2, 62.1, 51.7, 34.2, 29.5, 25.9, 24.9.  MS (ESI): 191.2 (8.5, M+H), 159.2 (100), 141.2 (20.1), 129.2 (58.0), 115.3 (65.9).
【０２４４】
パートＢ  −  メチル６−｛２−［（４−メチルフェニル）スルホニルオキシ］エトキシ｝ヘキサノエートの調製
【化９０】
2009500410.tif 000097
パートＡの生成物（１５０ｍｇ、０．７８８ｍｍｏｌ）の乾燥ピリジン（９５７μＬ、１１．８ｍｍｏｌ）溶液を０℃に冷却し、ＴｓＣｌ（１８１ｍｇ、０．９４９ｍｍｏｌ）で一度に処理した。０．５時間撹拌後、溶液を２２℃に加温し、０．２５時間撹拌して完全な変換を確実にした。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、５％のＣｕＳＯ4水溶液（５×１０ｍＬ）、次いでＮａＣｌの飽和溶液（１５ｍＬ）で洗浄した。酢酸エチル層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。シリカのクロマトグラフィーで精製すると（１：２の酢酸エチル：ペンタン；Ｒf＝０．５）、無色の油（１７１ｍｇ、０．４９６ｍｍｏｌ；６３．０％）が得られた。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ7.79 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 7.33 (2H, AB, JAB = 8.0 Hz), 4.14 (2H, dd, J = 4.9, 4.8 Hz), 3.65 (3H, s), 3.59 (2H, dd, J = 4.9, 4.8 Hz), 3.37 (2H, t, J = 6.5 Hz), 2.44 (3H, s), 2.29 (2H, t, J = 7.5 Hz), 1.60 (2H, tt, J = 7.7, 7.6 Hz), 1.50 (2H, tt, J = 7.6, 6.6 Hz), 1.34-1.29 (2H, m).  MS (ESI): 345.2 (49.7, M+H), 313.2, (100), 199.2 (35.2).
【０２４５】
パートＣ  −  （６−｛２−［（４−メチルフェニル）スルホニルオキシ］エトキシ｝ヘキサン酸の調製
【化９１】
2009500410.tif 000098
パートＢの生成物（１５０ｍｇ、０．４３６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ2Ｏ（４：１ｖ／ｖ  ２．００ｍＬ）溶液をＬｉＯＨ・Ｈ2Ｏ（５４．８ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）で一度に処理し、１８時間２２℃において撹拌させた。次いで反応混合物のｐＨを０．１ＮのＨＣｌで４〜５に調整し、得られた二相を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。層を分離し、酢酸エチル層をＮａＣｌ（５０ｍＬ）の飽和溶液で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して無色の油（１４３ｍｇ、０．４３２ｍｍｏｌ；＞９８％）を得た。この物質を次の工程で直接使用した。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ7.80 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 7.34 (2H, AB, JAB = 8.0 Hz), 4.15 (2H, dd, J = 4.9, 4.8 Hz), 3.60 (2H, dd, J = 4.9, 4.8 Hz), 3.39 (2H, t, J = 6.5 Hz), 2.45 (3H, s), 2.35 (2H, t, J = 7.5 Hz), 1.63 (2H, tt, J = 7.7, 7.5 Hz), 1.53 (2H, tt, J = 7.5, 6.6 Hz), 1.38-1.33 (2H, m).  MS (ESI): 353.1 (12.9, M+Na), 348.2 (21.2, M+H2O), 313.2 (100, M-H2O), 199.2 (67.3), 141.1 (30.6).
【０２４６】
パートＤ  −  ２−［５−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝カルバモイル）ペンチルオキシ］エチル４−メチルベンゼンスルホネートの調製
【化９２】
2009500410.tif 000099
パートＣの生成物（４０．０ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１６．６ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）に溶解し、コリジン（１１２μＬ、０．８４８ｍｍｏｌ）次いでＤＩＣ（１９．０μＬ、０．１２１ｍｍｏｌ）で処理した。５分間２２℃において撹拌後、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＮＨＮＨ2（２９．７ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を終夜撹拌した。２０時間の総反応時間後、全ての揮発物を真空除去し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈを含む４５〜７５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１８．７ｍｇ、３３．５μｍｏｌ；２７．７％）が得られた。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ8.68 (1H, br s), 7.90 (1H, br s), 7.81 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 7.35 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 4.85 (1H, br s), 4.22 (1H, br s), 4.16-4.14 (2H, m), 3.62-3.60 (2H, m), 3.41 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.46 (3H, s), 2.26 (2H, t, J = 7.4 Hz), 1.74-1.69 (1H, m), 1.68 (2H, tt, J = 7.9, 7.6 Hz), 1.55-1.52 (4H, m), 1.45 (9H, s), 1.39 (2H, tt, J = 7.9, 6.8 Hz), 0.96 (3H, d, J = 6.4 Hz), 0.94 (3H, d, J = 6.2 Hz).  MS (ESI): 580.3 (26.8, M+Na), 502.2 (72.9, M-t-Bu), 458.3 (100, M-Boc).  HRMS: C26H44N3O8S (M+H)の計算値: 558.2844; 実測値: 558.2842.
【０２４７】
実施例３４
Ｎ−［（Ｎ−｛１−［Ｎ−（１−｛Ｎ−［（１Ｒ）−１−（Ｎ−｛（１Ｓ）−３−メチル−１−［Ｎ−（２−メチルプロピル）カルバモイル］ブチル｝カルバモイル）−３−メチルブチル］カルバモイル｝（１Ｓ）−４−（アミジノアミノ）ブチル）カルバモイル］（１Ｓ）−３−フェニルプロピル｝カルバモイル）メチル］（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化９３】
2009500410.tif 000100
パートＡ  −  Ｎ−｛（１Ｒ）−３−メチル−１−［Ｎ−（２−メチルプロピル）カルバモイル］ブチル｝（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミドの調製
【化９４】
2009500410.tif 000101
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＮＨｉ−Ｂｕ（２２０ｍｇ、０．７６８ｍｍｏｌ）（Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨおよびｉ−ＢｕＮＨ2から調製、Okuyama, A.; Naito, K. Leucine derivatives, gelatinase inhibitors, and pharmaceuticals containing them.日本国特許１００４５６９９  Ａ２、１９９８参照）をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ ｖ／ｖ、６．００ｍＬ）で２２℃において処理した。０．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣を乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）に溶解し、次いで乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（２１１ｍｇ、０．８４６ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３０６ｍｇ、０．８０６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１１８ｍｇ、０．７７０ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（５３５μＬ、３．０７ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に移した。追加量のＤＭＦ（２×０．５ｍＬ）を使用して変換を定量した。０．７５時間後、反応混合物をＨ2Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、次いで酢酸エチル（３×３０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を５％のクエン酸水溶液（２×２５ｍＬ）次いでＮａＨＣＯ3およびＮａＣｌの飽和溶液（各２５ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して白色の固体（２９７ｍｇ、０．７４３ｍｍｏｌ；９６．５％）を得た。この物質を次の工程で直接使用した。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ7.36 (1H, br s), 7.12 (1H, br s), 5.57 (1H, br s), 4.76 (1H, br s), 4.43 (1H, br s), 3.15 (1H, dt, J = 6.6, 6.5 Hz), 3.10-3.05 (1H, m), 1.89-1.67 (6H, m), 1.53-1.44 (1H, m), 1.43 (9H, s), 0.95 (6H, br d, J = 3.8 Hz), 0.91 (3H, br d, J = 5.7 Hz), 0.88 (9H, br d, J = 6.6 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 150 MHz)δ173.6, 172.2, 160.0, 79.4, 53.9, 52.3, 47.1, 41.8, 41.3, 28.9, 28.4, 25.2, 25.1, 23.1, 22.3, 22.2, 20.3.  MS (ESI): 422.4 (17.4, M+Na), 400.4 (100, M+H), 344.4 (63.2).  HRMS: C21H42N3O4 (M+H)の計算値: 400.3170; 実測値: 400.3175.
【０２４８】
パートＢ  −  Ｆｍｏｃ−Ｒ（Ｐｍｃ）−ＨＭＰＢ  ＢＨＡ樹脂の調製
ＨＭＰＢ−ＢＨＡ樹脂（１０．０ｇ、置換レベル＝０．６１ｍｍｏｌ／ｇ）を２００ｍＬのＡｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ反応器に入れ、ＤＭＦ（２×４５ｍＬ）で洗浄することによって膨潤させた。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ（１２．１ｇ、１８．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４５．０ｍＬ）溶液を反応器に加え、混合物を０．２５時間振とうした。ピリジン（２．２２ｍＬ、２７．５ｍｍｏｌ）次いでＤＭＦ（４５．０ｍＬ）中の塩化２，６−ジクロロベンゾイル（２．６２ｍＬ、１８．３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を５時間２２℃において振とうした。樹脂をＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノール、ＣＨ2Ｃｌ2およびＤＭＦ（各３×９０ｍＬ）で洗浄し、次いでＤＭＦ（９０．０ｍＬ）、ピリジン（２．４７ｍＬ、３０．５ｍｍｏｌ）および塩化ベンゾイル（２．１２ｍＬ、１８．３ｍｍｏｌ）で処理し、反応器を３時間振とうした。次いで最後の洗浄をＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノールおよびＣＨ2Ｃｌ2（各３×９０ｍＬ）で実施し、添加量（０．４４ｍｍｏｌ／ｇ）をフルベン−ピペリジンアッセイで決定した。
【０２４９】
パートＣ  −  Ｆｍｏｃ−ＰＬＧ〜Ｈｐｈｅ−Ｒ（Ｐｍｃ）−ＨＭＰＢ  ＢＨＡ樹脂の調製
パートＢのＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＨＭＰＢ  ＢＨＡ樹脂（２．００ｇ、置換レベル＝０．４５ｍｍｏｌ／ｇ）を５０ｍＬのＡｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ反応器中に入れた。ＤＭＦ（２×２０ｍＬ）で洗浄することによって樹脂を膨潤させ、以下の工程を実施した：（工程１）Ｆｍｏｃ基をＤＭＦ（２０ｍＬ）中の２０％のピペリジンを使用して３０分間除去した。（工程２）樹脂をＤＭＦ（３×）、ジクロロメタン（３×）、メタノール（３×）、ジクロロメタン（３×）、ＤＭＦ（３×）で完全に（容量２０ｍＬ）洗浄した。（工程３）１０ｍＬのＤＭＦおよび１．５ｍＬのＤＩＥＡ中のＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ（１．４４ｇ、３．６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．５５１ｇ、３．６ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１．３６ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を樹脂に加え、反応を４時間進行させた。（工程４）樹脂をＤＭＦ（３×）、ジクロロメタン（３×）、メタノール（３×）、ジクロロメタン（３×）、ＤＭＦ（３×）で完全に（容量２０ｍＬ）洗浄した。（工程５）半定量的ニンヒドリンアッセイおよび定量的ピクリンアッセイまたはフルベン−ピペリジンアッセイで評価して、カップリング反応が９５％超完了していることが見い出された。配列ＰＬＧ〜Ｈｐｈｅ−Ｒが得られるまで工程１〜５を繰り返した。
【０２５０】
パートＤ  −  Ａｃ−ＰＬＧ〜Ｈｐｈｅ−Ｒ（Ｐｍｃ）−ＯＨの調製
パートＣで調製したペプチド−樹脂をＤＭＦ（２０ｍＬ）中の２０％のピペリジンで３０分間処理し、ＤＭＦ（３×）、ジクロロメタン（３×）、メタノール（３×）、ジクロロメタン（３×）、ＤＭＦ（３×）で完全に（容量２０ｍＬ）洗浄した。樹脂を無水酢酸（０．６６６ｍＬ、６．６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．４ｍＬ、７．９２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液で２．０時間処理し、ＤＭＦ（３×）、ジクロロメタン（３×）、メタノール（３×）およびジクロロメタン（３×）で完全に（容量２０ｍＬ）洗浄し、真空乾燥した。
【０２５１】
ペプチド−樹脂を６０ｍＬのフリットガラス漏斗に入れ、ジクロロメタン（２×４０ｍＬ）で洗浄した。ペプチド−樹脂を５：１：９４のトリフルオロ酢酸：Ｅｔ3ＳｉＨ：ジクロロメタンの溶液（２０ｍＬ）で２分間処理した。溶液を加圧することによって１０：９０のピリジン：メタノールの溶液（４．０ｍＬ）に直接濾過した。切断工程を８回繰り返した。合わせた濾液を濃縮してジクロロメタンおよびメタノールを除去して、無色の油性固体を得た。水（４０ｍＬ）で磨砕して無色の乾燥固体を得、これを濾過によって集めた。この粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む３６から６３％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２８０ｍｇ、３４％；ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS: 966.5 (100, M+H), 483.8 (65, M+2H); HRMS: C45H67N8O10S (M+H)の計算値: 911.4695; 実測値: 911.4680.
【０２５２】
パートＥ  −  Ｎ−［（Ｎ−｛１−［Ｎ−（１−｛Ｎ−［（１Ｒ）−１−（Ｎ−｛（１Ｓ）−３−メチル−１−［Ｎ−（２−メチルプロピル）カルバモイル］ブチル｝カルバモイル）−３−メチルブチル］カルバモイル｝（１Ｓ）−４−（アミジノアミノ）ブチル）カルバモイル］（１Ｓ）−３−フェニルプロピル｝カルバモイル）メチル］（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（１５．０ｍｇ、３７．６μｍｏｌ）をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）で２２℃において処理した。０．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣を乾燥ＤＭＦ（２．００ｍＬ）に溶解した。溶液をパートＤの生成物（３４．２ｍｇ、３７．５μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５．７ｍｇ、３７μｍｏｌ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２６．１μＬ、０．１５０ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１４．２ｍｇ、３７．４μｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで０．７５時間２２℃において撹拌した。得られた溶液を真空濃縮し、残渣をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、４．００ｍＬ）で２２℃において処理した。１．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１０〜５０％のアセトニトリルの２．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２３分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２３．０ｍｇ、２２．１μｍｏｌ；５８．９％）が得られた。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ8.80 (1H, br d, J = 5.4 Hz), 8.67 (1H, br s), 8.06 (1H, br d, J = 5.0 Hz), 7.72 (1H, br s), 7.45 (1H, d, J = 5.4 Hz), 7.38 (1H, d, J = 7.5 Hz), 7.26 (1H, brt, J = 5.8 Hz), 7.15-7.05 (7H, m), 6.85 (2H, br s), 4.27 (1H, ddd, J = 11.8, 8.4, 3.8 Hz), 4.18 (1H, ddd, J = 9.9, 7.5, 4.6 Hz), 4.13-4.09 (2H, m), 4.01 (1H, dt, J = 6.5, 6.1 Hz), 3.93 (1H, dt, J = 8.9, 5.6 Hz), 3.74 (1H, dd, J = 15.9, 6.7 Hz), 3.62 (1H, dt, J = 9.4, 6.2 Hz), 3.57 (1H, dd, J = 15.9, 4.4 Hz), 3.35 (1H, dt, J = 9.8, 6.8 Hz), 3.23-3.17 (1H, m), 3.00 (1H, ddd, J = 16.0, 11.3, 5.8 Hz), 2.93 (1H, dt, J = 6.6, 6.6 Hz), 2.72-2.67 (2H, m), 2.59 (1H, ddd, J = 16.0, 9.6, 6.6 Hz), 2.11-1.89 (6H, m), 1.99 (3H, s), 1.86-1.79 (2H, m), 1.66-1.53 (12H, m), 0.84 (3H, d, J = 6.3 Hz), 0.84 (3H, d, J = 6.2 Hz), 0.79 (3H, d, J = 6.2 Hz), 0.78 (3H, d, J = 6.4 Hz), 0.76 (3H, d, J = 6.0 Hz), 0.75 (3H, d, J = 6.0 Hz), 0.73 (3H, d, J = 6.7 Hz).  MS (ESI): 926.7 (100, M+H), 464.0 (47.3, M+2H).  HRMS: C47H81N11O8の計算値: 463.8129 (M+2H); 実測値: 463.8131.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｌ−ロイシン６８．０％。
【０２５３】
実施例３５
Ｎ−（｛Ｎ−［１−（Ｎ−｛１−［Ｎ−（（１Ｒ）−１−｛Ｎ−［１−（Ｎ−｛（１Ｓ）−３−メチル−１−［Ｎ−（２−メチルプロピル）カルバモイル］ブチル｝カルバモイル）（１Ｓ）−３−メチルブチル］カルバモイル｝−３−メチルブチル）カルバモイル］（１Ｓ）−４−（アミジノアミノ）ブチル｝カルバモイル）（１Ｓ）−３−フェニルプロピル］カルバモイル｝メチル）（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−（４−アミノブチル）−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化９５】
2009500410.tif 000102
パートＡ  −  Ａｃ−ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）〜Ｈｐｈｅ−Ｒ（Ｐｍｃ）−Ｌ−ＯＨの調製
Ｆｍｏｃ−ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）〜Ｈｐｈｅ−Ｒ（Ｐｍｃ）−Ｌ−ＨＭＰＢ−ＢＨＡ樹脂（実施例１４Ｂで見い出された手順に従って調製；０．３１８ｇ、置換レベル＝０．４４ｍｍｏｌ／ｇ）を含有するＭａｃｒｏＫａｎ反応器をＤＭＦ（１０．０ｍＬ）に入れ、３分間撹拌した。ＤＭＦをデカントし、樹脂をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、２５．０ｍＬ）で１．５時間２２℃において処理した。溶液をデカントし、樹脂をＣＨ2Ｃｌ2（９×１０ｍＬ）およびＤＭＦ（３×１０ｍＬ）で洗浄し、次いでＤＭＦ（２０．０ｍＬ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１２３μＬ、０．７０６ｍｍｏｌ）およびＡｃ2Ｏ（６６．０μＬ、０．７００ｍｍｏｌ）で処理した。１５時間後２２℃において、溶液をデカントし、樹脂をＤＭＦ（３×１０ｍＬ）およびＣＨ2Ｃｌ2（９×１０ｍＬ）で洗浄し、次いで減圧乾燥した。樹脂をＭａｃｒｏＫａｎから取り出し、中多孔性の焼結ガラス漏斗中に入れた。樹脂をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：９９ｖ／ｖ、９×１０ｍＬ）で洗浄し、濾液を集め、真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む５０〜９５％のアセトニトリルの１．８％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、淡黄色の粉末（８０．０ｍｇ、６６．９μｍｏｌ；４７．８％）が得られた。MS (ESI): 1195.7 (100, M+H), 548.4 (33.4, M+2H-Boc).HRMS: C60H57N10O13S計算値: 1195.6795; 実測値: 1195.6799.
【０２５４】
パートＢ  −  Ｎ−（｛Ｎ−［１−（Ｎ−｛１−［Ｎ−（（１Ｒ）−１−｛Ｎ−［１−（Ｎ−｛（１Ｓ）−３−メチル−１−［Ｎ−（２−メチルプロピル）カルバモイル］ブチル｝カルバモイル）（１Ｓ）−３−メチルブチル］カルバモイル｝−３−メチルブチル）カルバモイル］（１Ｓ）−４−（アミジノアミノ）ブチル｝カルバモイル）（１Ｓ）−３−フェニルプロピル］カルバモイル｝メチル）（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−（４−アミノブチル）−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
実施例３４Ａの生成物（１５．０ｍｇ、３７．６μｍｏｌ）をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）で２２℃において処理した。０．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣を乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）に溶解した。溶液を実施例３５Ａの生成物（４４．８ｍｇ、３７．５μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５．７ｍｇ、３７μｍｏｌ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２６．１μＬ、０．１５０ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１４．２ｍｇ、３７．４μｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで０．７５時間２２℃において撹拌した。得られた溶液を真空濃縮し、残渣をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、３．００ｍＬ）で２２℃において処理した。２．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む３０〜７０％のアセトニトリルの２．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（３８．０ｍｇ、２８．４μｍｏｌ；７５．６％）が得られた。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ8.16-8.00 (3H, m), 7.74-7.60 (3H, m), 7.31-7.02 (9H, m), 4.34 (1H, dt, J = 9.6, 5.7 Hz), 4.31-4.28 (1H, m), 4.25 (1H, ddd, J = 10.1, 7.8, 4.8 Hz), 4.22-4.09 (3H, m), 4.08-4.03 (1H, m), 4.00 (1H, dt, J = 10.4, 5.8 Hz), 3.51-3.23 (4H, m), 3.13-3.00 (2H, m), 2.90-2.49 (12H, m), 2.01-1.85 (3H, m), 1.89 (3H, s), 1.81-1.41 (17H, m), 1.30-1.14 (3H, m), 0.83-0.71 (30H, m).  MS (ESI): 1110.8 (40, M+H), 556.0 (100, M+2H).  HRMS: C57H101N13O9 (M+2H)の計算値: 555.8917; 実測値: 555.8918.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｌ−ロイシン７５．１％。
【０２５５】
実施例３６
Ｎ−［（２Ｒ）−２−（（２Ｓ）−２−｛（２Ｓ）−２−［（２Ｓ）−２−（２−｛（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝アセチルアミノ）−４−フェニルブタノイルアミノ］−５−［（イミノ｛［（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）アミノ］ペンタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化９６】
2009500410.tif 000103
パートＡ  −  Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化９７】
2009500410.tif 000104
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（７７．８ｍｇ、０．３１２ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（３５．６ｍｇ、０．２６２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）溶液をコリジン（１９３μＬ、１．４６ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（４０．２μＬ、０．２５７ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（１００ｍｇ、０．２０８ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を２時間２２℃において撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、６．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．５時間維持し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２０〜５５％のアセトニトリルの１．４％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（３７．０ｍｇ、６２．２μｍｏｌ；３０．０％）が得られた。この物質を次の工程で直接使用した。
【０２５６】
パートＢ  −  Ｎ−［２−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）（２Ｓ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化９８】
2009500410.tif 000105
パートＡの生成物（３５．０ｍｇ、５８．９μｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）に溶解し、ＤＭＦ（２．００ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（２２．０ｍｇ、８８．２μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１１．３ｍｇ、７３．８μｍｏｌ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（４１．０μＬ、０．２３５ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（２７．９ｍｇ、７３．６μｍｏｌ）の予め調製した溶液に移し、次いで１時間２２℃において撹拌した。得られた溶液を真空濃縮し、残渣をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ ｖ／ｖ、６．００ｍＬ）で２２℃において処理した。０．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む３０〜６０％のアセトニトリルの１．５％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（３４．０ｍｇ、４８．０μｍｏｌ；８１．６％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.98 (1H, s), 9.73 (1H, s), 8.80 (1H, d, J = 8.6 Hz), 8.09 (3H, br s), 7.89 (2H, d, J = 7.5 Hz), 7.68 (2H, d, J = 7.4 Hz), 7.41 (2H, t, J = 7.4 Hz), 7.33 (2H, t, J = 7.3 Hz), 7.24 (1H, t, J = 5.5 Hz), 4.48 (1H, td, J = 8.6, 5.7 Hz), 4.29 (2H, d, J = 6.9 Hz), 4.20 (1H, t, J = 6.7 Hz), 3.81 (1H, br s), 2.96 (2H, td, J = 6.4, 6.3 Hz), 2.11 (2H, t, J = 7.3 Hz), 1.64-1.48 (8H, m), 1.39 (2H, tt, J = 7.4, 6.8 Hz), 1.26 (2H, tt, J = 8.0, 6.9 Hz), 0.90 (3H, d, J = 6.4 Hz), 0.90 (3H, d, J = 6.6 Hz), 0.90 (3H, d, J = 6.4 Hz), 0.85 (3H, d, J = 6.5 Hz).  MS (ESI): 594.4 (100, M+H).  HRMS: C33H48N5O5 (M+H)の計算値: 594.3650; 実測値: 594.3646.
【０２５７】
パートＣ  −  Ｎ−［（２Ｒ）−２−（（２Ｓ）−２−｛（２Ｓ）−２−［（２Ｓ）−２−（２−｛（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝アセチルアミノ）−４−フェニルブタノイルアミノ］−５−［（イミノエチル）アミノ］ペンタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＢの生成物（２１．０ｍｇ、２９．７μｍｏｌ）の溶液を実施例３４Ｄの生成物（２７．１ｍｇ、２９．７μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（４．６ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２６．０μＬ、０．１４９ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１１．３ｍｇ、２９．８μｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで２時間２２℃において撹拌した。得られた溶液を真空濃縮し、残渣をＤＭＦ中のピペリジンの予め調製した溶液（１：４ｖ／ｖ、１０．０ｍＬ）で２２℃において処理した。０．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む３０〜６０％のアセトニトリルの１．５％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（３０．０ｍｇ、２１．８μｍｏｌ；７３．３％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.83 (1H, br s), 9.72 (1H, br s), 8.22 (0.5H, d, J = 8.0 Hz), 8.18 (0.5H, t, J = 5.7 Hz), 8.11 (0.5H, d, J = 8.2 Hz), 8.07-8.01 (3H, m), 7.97 (0.5H, d, J = 8.0 Hz), 7.89-7.83 (1H, m), 7.80 (0.5H, d, J = 8.3 Hz), 7.25 (2H, t, J = 7.4 Hz), 7.17-7.15 (3H, m), 4.38-4.16 (7H, m), 3.79 (0.5H, dd, J = 16.5, 5.5 Hz), 3.72-3.69 (1.5H, m), 3.49-3.29 (2H, m), 3.07-2.99 (2H, m), 2.79-2.74 (2H, m), 2.61-2.54 (3H, m), 2.48 (6H, br s), 2.10 (2H, t, J = 7.4 Hz), 2.03 (3H, s), 1.92-1.79 (5H, m), 1.77 (2H, t, J = 6.9 Hz), 1.71-1.37 (19H, m), 1.31 (2H, tt, J = 8.0, 7.4 Hz), 1.26 (6H, s), 0.87 (3H, d, J = 6.5 Hz), 0.86 (3H, d, J = 6.5 Hz), 0.81 (3H, d, J = 6.6 Hz), 0.81 (3H, d, J = 6.6 Hz), 0.79 (3H, d, J = 6.6 Hz), 0.75 (3H, d, J = 6.5 Hz).  MS (ESI): 1264.7 (36.3, M+H), 633.3 (100, M+2H).  HRMS: C63H102N13O12Sの計算値: 632.8779; 実測値: 632.8786.
【０２５８】
実施例３７
Ｎ−［（Ｎ−｛１−［Ｎ−（１−｛Ｎ−［１−（Ｎ−｛（１Ｒ）−３−メチル−１−［Ｎ−（４−ピペリジルカルボニルアミノ）カルバモイル］ブチル｝カルバモイル）（１Ｓ）−３−メチルブチル］カルバモイル｝（１Ｓ）−４−［（イミノ｛［（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）アミノ］ブチル）カルバモイル］−（１Ｓ）−３−フェニルプロピル｝カルバモイル）メチル］（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩
【化９９】
2009500410.tif 000106
パートＡ  −  フルオレン−９−イルメチル４−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−（（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］カルバモイル｝ピペリジンカルボキシレート、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１００】
2009500410.tif 000107
実施例３０Ｂの生成物（７０．０ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）中のＦｍｏｃ−ＯＳｕ（５５．３ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（７８．０μＬ、０．４４８ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に２２℃において一度に加えた。１時間撹拌後、溶液を酢酸エチルとＨ2Ｏ（各３０ｍＬ）との間に分配し、層を分離し、水層を酢酸エチル（１５ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を５％のクエン酸水溶液（２×１５ｍＬ）次いでＮａＨＣＯ3およびＮａＣｌの飽和溶液（各１５ｍＬ）で洗浄した。得られた溶液をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮し、残渣をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、４．００ｍＬ）で２２℃において処理した。０．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む３０〜６０％のアセトニトリルの１．５％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（７３．０ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ；７０．８％）が得られた。塊全体を乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）に溶解し、ＤＭＦ（２．００ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（３７．６ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１９．３ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（７０．０μＬ、０．４０２ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（４７．８ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に移し、次いで１時間２２℃において撹拌した。得られた溶液を真空濃縮し、残渣をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、６．００ｍＬ）で２２℃において処理した。０．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む３０〜６０％のアセトニトリルの１．５％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（５８．０ｍｇ、８２．２μｍｏｌ；８１．３％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.00 (1H, s), 9.81 (1H, s), 8.80 (1H, d, J = 8.5 Hz), 8.11 (3H, br s), 7.89 (2H, d, J = 7.5 Hz), 7.62 (2H, d, J = 7.5 Hz), 7.42 (2H, t, J = 7.4 Hz), 7.33 (2H, t, J = 7.5 Hz), 4.47 (1H, td, J = 8.7, 5.9 Hz), 4.36 (2H, br d, J = 6.1 Hz), 4.27 (1H, t, J = 6.5 Hz), 4.00-3.79 (3H, m), 2.82 (2H, br s), 2.41 (1H, tt, J = 11.2, 3.8 Hz), 1.95 (3H, s), 1.65-1.50 (8H, m), 1.42-1.37 (2H, m), 0.91 (3H, d, J = 6.5 Hz), 0.90 (3H, d, J = 6.4 Hz), 0.85 (3H, d, J = 6.5 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 150 MHz): δ172.8, 170.2, 168.8, 157.8 (q, J = 151 Hz), 154.3, 143.9, 140.8, 127.6, 127.1, 124.9, 120.1, 116.9 (q, J = 299 Hz), 66.5, 50.9, 49.5, 46.7, 42.8, 41.4, 40.3, 27.9, 24.1, 23.6, 23.0, 22.6, 21.8, 21.2.  MS (ESI): 592.3 (100, M+H).  HRMS: C33H46N5O5 (M+H)の計算値: 592.3493; 実測値: 592.3479.
【０２５９】
パートＢ  −  Ｎ−［（Ｎ−｛１−［Ｎ−（１−｛Ｎ−［１−（Ｎ−｛（１Ｒ）−３−メチル−１−［Ｎ−（４−ピペリジルカルボニルアミノ）カルバモイル］ブチル｝カルバモイル）（１Ｓ）−３−メチルブチル］−カルバモイル｝−（１Ｓ）−４−［（イミノ｛［（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−イル）スルホニル］アミノ｝−メチル）−アミノ］ブチル）カルバモイル］（１Ｓ）−３−フェニルプロピル｝−カルバモイル）−メチル］（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（２１．０ｍｇ、２９．７μｍｏｌ）の溶液を実施例３４Ｄの生成物（２７．１ｍｇ、２９．７μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（４．６ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２６．０μＬ、０．１４９ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１１．３ｍｇ、２９．８μｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで２時間２２℃において撹拌した。得られた溶液を真空濃縮し、残渣をＤＭＦ中のピペリジンの予め調製した溶液（１：４ｖ／ｖ、１０．０ｍＬ）で２２℃において処理した。０．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む３０〜６０％のアセトニトリルの１．５％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（３０．０ｍｇ、２１．８μｍｏｌ；７３．３％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.88 (1H, s), 9.87 (1H, s), 8.56 (1H, br d, J = 10.0 Hz), 8.29-8.24 (1H, m), 8.22 (0.5H, d, J = 8.0 Hz), 8.18 (0.5H, t, J = 5.6 Hz), 8.11 (0.5H, d, J = 8.1 Hz), 8.08-8.01 (3H, m), 7.97 (0.5H, t, J = 8.0 Hz)7.87-7.83 (1H, m), 7.80 (0.5H, d, J = 8.2 Hz), 7.25 (2H, dd, J = 7.5, 7.4 Hz), 7.17-7.13 (3H, m), 4.38-4.16 (8H, m), 3.79 (0.5H, dd, J = 16.4, 5.4 Hz), 3.72-3.69 (2H, m), 3.51-3.28 (5H, m), 3.07-2.99 (2H, m), 2.94-2.89 (2H, m), 2.59-2.53 (4H, m), 2.47 (6H, br s), 2.03 (3H, br s), 1.95 (3H, s), 1.92-1.38 (30H, m), 1.26 (6H, s), 0.87 (3H, d, J = 6.2 Hz), 0.86 (3H, d, J = 6.2 Hz), 0.81 (3H, d, J = 6.5 Hz), 0.81 (3H, d, J = 6.6 Hz), 0.79 (3H, d, J = 6.7 Hz), 0.75 (3H, d, J = 6.6 Hz).  MS (ESI): 1262.7 (23.9, M+H), 632.0 (100, M+2H).  HRMS: C63H101N13O12S (M+2H)の計算値: 631.8701; 実測値: 631.8705.
【０２６０】
実施例３８
２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１０１】
2009500410.tif 000108
パートＡ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−フェニルプロパノイルアミノ｝−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化１０２】
2009500410.tif 000109
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ（２４２ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３４２ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１４０ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（５２５μＬ、３．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。実施例３Ａの生成物（３７１ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を反応に一度に加え、次いでＤＩＥＡ（５２５μＬ、３ｍｍｏｌ）（ｐＨ＝１０）を加えた。溶液を周囲温度において２．５時間撹拌し、水（５００ｍＬ）に滴下した。得られた沈殿を濾過によって集め、水で洗浄し、乾燥すると、オフホワイトの固体（３６０ｍｇ、６５％）が得られた。MS (ESI): 515.3 (100, M+H-Boc), 637.3 (10, M+Na).
【０２６１】
パートＢ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（３０７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を２０：８０のピペリジン：ＤＭＦ（５．０ｍＬ）に溶解し、窒素下で室温において３０分間撹拌した。溶液を減圧濃縮して、ＤＭＦ（１．０ｍＬ）に再溶解し、ＤＭＦ（４ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝−アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３７０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２２８ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（９２ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．２１ｍＬ、２．４ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に加えた。溶液を窒素下で周囲温度において３０分間撹拌し、濃縮し、得られた残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解した。溶液を１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、０．１ＮのＮａＯＨ（２×５０ｍＬ）および水（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、黄色の油が生成した。MS (ESI): 992.7 (100, M+H).
【０２６２】
上記の油を９０：９：１のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で３時間撹拌した。溶液を濃縮し、得られた油性固体をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０から２７％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２２．６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、４０．２ｍｇ（全６％）の標題化合物が無色の固体として得られた。MS (ESI): 668.4 (60, M+H), 461.2 (100, M+H-Leu).HRMS: C29H43FeN7O11 (M-2H+Fe)の計算値: 721.23645; 実測値: 721.2374; キラル分析: 98.2% D-Phe.
【０２６３】
実施例３９
（２Ｒ）−Ｎ−｛［Ｎ−（４−アミノブチル）カルバモイル］メチル｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１０３】
2009500410.tif 000110
パートＡ  −  ２−アミノ−Ｎ−｛４−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ブチル｝アセトアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１０４】
2009500410.tif 000111
Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１７５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４５４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１８３ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．６３ｍＬ、３．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．５ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１５分間撹拌した。Ｎ−（４−アミノブチル）（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボキサミド（３４６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を周囲温度において窒素下で１８時間撹拌した。溶液を濃縮し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解した。溶液を１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）および水（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、白色の粉末（４７５ｍｇ、９５％）が生成した。MS (ESI): 468.3 (100, M+H).
【０２６４】
パートＡの生成物を１：１のＴＦＡ：ジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で１０分間撹拌した。溶液を濃縮すると、標題化合物が黄／茶色の油（３７３ｍｇ、１００％）として得られた。MS (ESI): 368.3 (100, M+H), 735.3 (10, 2M+H).
【０２６５】
パートＢ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［Ｎ−（４−アミノブチル）カルバモイル］メチル｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（２９９ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（９０９ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３６７ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（４１８μＬ、２．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌し、パートＡの生成物（３６４ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）で一度に処理した。溶液を３０分間撹拌し、濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）および水（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、無色の固体７２５ｍｇが得られた。固体１００ｍｇ分を１：１のＤＭＦ：ＴＡＥＡ（２．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で３０分間撹拌した。ＤＭＦを減圧除去し、油性固体を水（０．５ｍＬ）に溶解した。次いで溶液をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む９から３６％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２１．５分を中心とする主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（４０ｍｇ、６１％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CD3CN): δ7.55 (s, 1H), 7.35 (s, 3H), 7.13 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 3.96 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 3.79 (dd, J1 = 6.6 Hz, J2 = 16.8 Hz, 1H), 3.69 (dd, J1 = 6.6 Hz, J2 = 16.8 Hz, 1H), 3.30-3.21 (m, 1H), 3.19-3.11 (m, 1H), 3.00-2.91 (m, 2H), 1.70-1.62 (m, 3H), 1.59-1.48 (m, 4H), 1.42 (s, 9H), 0.96-0.88 (m, 6H).  MS (ESI): 359.3 (60, M+H).  HRMS: C17H35N4O4 (M+H)の計算値: 359.2653; 実測値: 359.2650; キラル分析: 95.9% D-Leu.
【０２６６】
実施例４０
Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４，Ｎ−ジメチルペンタノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１０５】
2009500410.tif 000112
パートＡ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４，Ｎ−ジメチルペンタノイルアミノ｝−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化１０６】
2009500410.tif 000113
５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタン（１．５ｍＬ）中の実施例９Ａの生成物（１９４．５ｍｇ、０．４０３ｍｍｏｌ）の溶液を室温において０．５時間撹拌し、真空濃縮した。得られた粘稠な油をＤＭＦ（２．０ｍＬ）に溶解し、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（１００ｍｇ、０．４０３ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１８４ｍｇ、０．４８４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．１４１ｍＬ、０．８０６ｍｍｏｌ）で処理した。この溶液を室温において窒素下で３時間撹拌し、揮発物を真空除去した。得られた残渣を酢酸エチル（２０ｍＬ）に溶解し、１０％のクエン酸（２０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２０ｍＬ）、水（２０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮した。粗生成物を１：２のペンタン：酢酸エチルで溶離するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製すると、標題化合物が粘稠な無色の油（１１８ｍｇ、４９％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (CDCl3): δ8.78 (bs, 1H), 7.77 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.60 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.41 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.23 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 4.95 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.86 (bs, 1H), 4.60-4.54 (m, 1H), 4.41 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.26-4.19 (m, 1H).  MS (ESI): 495.3 (70, M-Boc+H), 617.4 (100, M+Na).
【０２６７】
パートＢ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４，Ｎ−ジメチルペンタノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＴＡＥＡ（０．３５ｍＬ、２．３４１ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１．０ｍＬ）中のパートＡの生成物（１１７．７ｍｇ、０．１９８ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌し、減圧濃縮した。得られた粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１７．７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（５３．６ｍｇ、７３％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ4.51-4.30 (m, 1H), 2.99 (s, 3H), 2.87 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.39-2.27 (m, 2H), 1.68-1.10 (m, 18H), 0.94-0.70 (m, 6H).  MS (ESI): 373.4 (100, M+H); HRMS: C18H37N4O4 (M+H)の計算値: 373.2809; 実測値: 373.2815.
【０２６８】
実施例４１
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１０７】
2009500410.tif 000114
パートＡ  −  ｔｅｒｔ−ブチル２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝カルバモイル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝エチル）｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ］アセテートの調製
【化１０８】
2009500410.tif 000115
２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（２３０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１５６ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１４０μＬ、０．８０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液を１０分間、室温において窒素下で撹拌し、実施例２９の生成物（１２６ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７０μＬ、０．３３ｍｍｏｌ）（ｐＨ＝１０）で処理した。溶液を３０分間撹拌し、減圧濃縮した。次いで、得られた粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む４５から７２％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２１分を中心とする主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１３０ｍｇ、４０％）として得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ10.32 (s, 1H), 9.92 (s, 1H), 9.01 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.28 (s, 2H), 4.15-4.08 (m, 1H), 3.51-3.32 (m, 12H), 3.09-3.00 (m, 4H), 1.77-1.68 (m, 1H), 1.56-1.30 (m, 38H), 0.95-0.86 (m, 6H).  MS (ESI): 978.7 (100, M+H).
【０２６９】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
９２：８のＴＦＡ：ＴＩＳ（８．０ｍＬ）中のパートＡの生成物の溶液を室温において窒素下で２時間撹拌し、減圧濃縮した。残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣにより、定組成条件で１０分間、０．１％のＴＦＡを含む１．８％のアセトニトリルで流速８０ｍＬ／分、次いで０．１％のＴＦＡを含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分からなる方法を使用して精製した。主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（７５ｍｇ、８８％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 654.3 (100, M+H), 327.6 (75, M+2H).HRMS: C28H41FeN7O11 (M-2H+Fe)の計算値: 707.2208; 実測値: 707.2202; キラル分析: 99.8%D-Leu.
【０２７０】
実施例４２
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１０９】
2009500410.tif 000116
パートＡ  −  ｔｅｒｔ−ブチル２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝カルバモイル）メチル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ）エチル］｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ｝アセテートの調製
【化１１０】
2009500410.tif 000117
２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝−アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（５３ｍｇ、９２μｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３１ｍｇ、８３μｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２６μＬ、１５２μｍｏｌ）のＤＭＦ（１．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１５分間撹拌した。実施例４の生成物（３０ｍｇ、７６μｍｏｌ）を溶液に加え、撹拌を３０分間続け、揮発物を減圧除去した。粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む４５％から７２％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２４．６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（３３ｍｇ、４３％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 992.7 (100, M+H)
【０２７１】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
９２：８のＴＦＡ：ＴＩＳ（２．０ｍＬ）中のパートＢの生成物の溶液を室温において窒素下で２．５時間撹拌し、減圧濃縮した。粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１４．８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１９ｍｇ、９５％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (1: 1 ピリジン-d5: DMSO-d6): δ10.90 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 7.54 (bs, 8H), 7.45-7.33 (m, 4H), 4.50 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 4.20 (s, 1H), 3.80-3.62 (m, 12H), 3.16-2.97 (m, 8H), 2.00-1.76 (m, 3H), 0.96-0.83 (m, 6H).  MS (ESI): 668.7 (60, M+H), 334.4 (100, M+2H).  HRMS: C29H46N7O11 (M+H)の計算値: 668.324982; 実測値: 668.3253; キラル分析: 99.0% D-Leu.
【０２７２】
実施例４３
２−［１０−（｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）−１，４，７，１０−テトラアザ−４，７−ビス（カルボキシメチル）シクロドデシル］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１１１】
2009500410.tif 000118
パートＡ  −  ｔｅｒｔ−ブチル２−（７−｛［Ｎ−（｛４−［（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝カルバモイル）メチル］フェニル｝−メチル）−カルバモイル］メチル｝−１，４，７，１０−テトラアザ−４，１０−ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝−シクロドデシル）アセテートの調製
【化１１２】
2009500410.tif 000119
ＤＯＴＡ（Ｏｔ−Ｂｕ）3−ＯＨ（６６ｍｇ、１１５μｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３７ｍｇ、１００μｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６０μＬ、３４２μｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１５分間撹拌した。実施例４の生成物（３０ｍｇ、７６μｍｏｌ）を一度に加え、溶液をさらに１５分間撹拌した。揮発物を減圧除去し、粗製物質をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２７から５４％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。約２０．８分で溶離する主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（４４ｍｇ、６２％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 947.7 (95, M+H), 446.4 (100, M+2H); キラル分析: 98.7%D-Leu.
【０２７３】
パートＢ  −  ２−［１０−（｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）−カルバモイル］−メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）−１，４，７，１０−テトラアザ−４，７−ビス（カルボキシメチル）シクロドデシル］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
９２：８のＴＦＡ：ＴＩＳ（２．０ｍＬ）中のパートＡの生成物の溶液を室温において窒素下で３時間撹拌し、真空濃縮した。粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１４．８分で溶離した生成物画分を凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１９ｍｇ、９５％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (1: 1 ピリジン-d5: DMSO-d6): δ10.89 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 7.42-7.34 (m, 4H), 5.73 (bs, 7H), 4.50-4.42 (m, 2H), 4.22-4.16 (m, 1H), 3.84-3.72 (m, 6H), 3.72-3.61 (m, 2H), 3.59-3.50 (m, 2H), 3.25-2.80 (m, 16H), 2.00-1.76 (m, 3H), 0.95-0.86 (m, 6H).  MS (ESI): 679.5 (70, M+H), 340.4 (100, M+2H).  HRMS: C31H51N8O9 (M+H)の計算値: 679.3774; 実測値: 679.378; キラル分析: 99.0% D-Leu.
【０２７４】
実施例４４
３−（｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）−７−アミノ−４−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−６−スルホン酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１１３】
2009500410.tif 000120
パートＡ  −  ３−｛［Ｎ−（｛４−［（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝カルバモイル）メチル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝−７−アミノ−４−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−６−スルホン酸の調製
【化１１４】
2009500410.tif 000121
実施例４の生成物（４．１ｍｇ、０．００８１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２．０ｍＬ）に溶解し、十分なＤＩＥＡ（１０μＬ）で処理してｐＨ＝１０の溶液を得た。溶液をＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ３５０（商標）スクシンイミジルエステル（５．１ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）で処理し、周囲温度において窒素下で３０分間撹拌した。濃縮して淡黄色の固体を得、これをＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。生成物画分を凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（３．１ｍｇ、５６％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 1275.3 (5, 2M-Boc+H), 710.2 (15, M+Na), 588.2 (100, M-Boc+H).
【０２７５】
パートＢ  −  ３−（｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）−７−アミノ−４−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−６−スルホン酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物を５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタン（３．０ｍＬ）に溶解し、窒素下、周囲温度で１０分間で放置した。揮発物を除去し、得られた油を５０：５０のアセトニトリル：Ｈ2Ｏ（６．０ｍＬ）から凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（３．１ｍｇ、９８％、ＨＰＬＣ純度９９％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.96 (s, 1H), 7.21 (AA'BB'系のa部, J = 7.9 Hz, 2H), 7.17 (AA'BB'系のb部, J = 7.9 Hz, 2H), 6.62 (s, 1H), 4.26 (s, 2H), 3.62 (bs, 1H), 3.53 (s, 4H), 2.30 (s, 3H), 1.65-1.45 (m, 3H), 0.90-0.82 (m, 6H).  MS (ESI): 1175.3 (11, 2M+H), 588.1 (100, M+H); HRMS: C27H34N5O8S (M+H)の計算値: 588.2128; 実測値: 588.2125.
【０２７６】
実施例４５
Ｎ−［（Ｎ−｛１−［Ｎ−（１−｛Ｎ−［４−（｛Ｎ−［（１Ｒ）−１−（Ｎ−アミノカルバモイル）−３−メチルブチル］カルバモイルオキシ｝メチル）フェニル］カルバモイル｝（１Ｓ）−３−メチルブチル）カルバモイル］（１Ｓ）−３−フェニルプロピル｝カルバモイル）メチル］（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ブチル｝−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１１５】
2009500410.tif 000122
パートＡ  −  Ｆｍｏｃ−Ｈｐｈｅ−ＨＭＰＢ  ＢＨＡ樹脂の調製
ＨＭＰＢ−ＢＨＡ樹脂（５．００ｇ、置換レベル＝０．８０ｍｍｏｌ／ｇ）を２００ｍＬのＡｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ反応器に入れ、ＤＭＦ（３×５０ｍＬ）で洗浄することによって膨潤させた。Ｆｍｏｃ−Ｈｐｈｅ−ＯＨ（４．８５ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０．０ｍＬ）溶液を反応器に加え、混合物を０．２５時間振とうした。ピリジン（１．６２ｍＬ、２０．０ｍｍｏｌ）次いでＤＭＦ（５０．０ｍＬ）中の塩化２，６−ジクロロベンゾイル（１．７２ｍＬ、１２．０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を８時間２２℃において振とうした。樹脂をＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノール、ＣＨ2Ｃｌ2およびＤＭＦ（各３×９０ｍＬ）で洗浄し、次いでＤＭＦ（５０．０ｍＬ）、ピリジン（１．６２ｍＬ、２０．０ｍｍｏｌ）および塩化ベンゾイル（１．４０ｍＬ、１２．１ｍｍｏｌ）で処理し、反応器を３時間振とうした。次いで最後の洗浄をＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノールおよびＣＨ2Ｃｌ2（各３×５０ｍＬ）で実施し、添加量（０．６０ｍｍｏｌ／ｇ）をフルベン−ピペリジンアッセイで決定した。
【０２７７】
パートＢ  −  Ｆｍｏｃ−ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）〜Ｈｐｈｅ−ＨＭＰＢ−ＢＨＡ樹脂の調製
パートＡのＦｍｏｃ−Ｈｐｈｅ−ＨＭＰＢ  ＢＨＡ樹脂（２．００ｇ、置換レベル＝０．６０ｍｍｏｌ／ｇ）を１００ｍＬ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ反応器中に入れた。樹脂をＤＭＦ（２×３０ｍＬ）で洗浄することによって膨潤させ、以下の工程を実施した：（工程１）Ｆｍｏｃ基をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、３０ｍＬ）に０．５時間曝露して除去した。（工程２）樹脂をＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノール、ＣＨ2Ｃｌ2およびＤＭＦ（各３×３０ｍＬ）で洗浄した。（工程３）Ｆｍｏｃ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（２．２５ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７３５ｍｇ、４．８０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１．８２ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２．０９ｍＬ、１２．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０．０ｍＬ）溶液を樹脂に加え、反応器を４時間振とうした。（工程４）樹脂をＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノール、ＣＨ2Ｃｌ2およびＤＭＦ（各３×３０ｍＬ）で洗浄した。（工程５）フルベン−ピペリジンアッセイで評価して、カップリング反応が９５％超完了していることが見い出された。各々Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨで工程１〜５を繰り返し、配列ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）〜Ｈｐｈｅを完成した。
【０２７８】
パートＣ  −  Ａｃ−ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）〜Ｈｐｈｅ−ＯＨの調製
パートＡのペプチド−樹脂（２．１２ｇ）を１００ｍＬのＡｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ反応器に入れ、ＤＭＦ（２×３０ｍＬ）で洗浄することによって膨潤させた。樹脂をＤＭＦ（３０ｍＬ）中の２０％のピペリジンで３０分間処理してＦｍｏｃ保護基を除去し、次いでＤＭＦ（３×）、ジクロロメタン（３×）、メタノール（３×）、ジクロロメタン（３×）およびＤＭＦ（３×）で洗浄した（容量３０ｍＬ）。無水酢酸（０．４０ｍＬ、４．２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０．７４ｍＬ、４．２ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（３０ｍＬ）を加え、混合物を穏やかに２時間撹拌した。ペプチド−樹脂をＤＭＦ（３×）、ジクロロメタン（３×）、メタノール（３×）およびジクロロメタン（３×）で洗浄し（容量３０ｍＬ）、真空乾燥した。ペプチド−樹脂を焼結ガラス漏斗に入れ、ジクロロメタン（１２ｍＬ）中の１％のＴＦＡで２分間処理した。窒素圧をかけることによって溶液を１：９のピリジン：メタノール（２．０ｍＬ）を含有するフラスコに直接濾過した。分離手順を１０回繰り返した。合わせた濾液を濃縮すると、無色の油性固体が得られた。この粗生成物を水（２×２５ｍＬ）で磨砕し、減圧乾燥すると乾燥固体が得られた。この固体をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２７から５４％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２２．６分で溶離する主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物２３９．１ｍｇ（４３％）がＨＰＬＣで純度１００％の無色の固体として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ8.54 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 8.36 (br, 3H), 8.22 (br, 3H), 8.14 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 8.06 (t, 6H), 5.72 (br, 3H), 5.08 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.85 (s, 2H), 4.74 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.53-2.31 (m, 6H), 2.24 (t, 3H), 1.66 (t, J = 5.4 Hz, 9H), 1.60 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.57 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.58 (m, 3H); 13C NMR (1: 1 CD3CN+D2O): δ173.7, 168.2, 161.8, 161.6, 157.0, 143.9, 141.2, 137.1, 133.6, 128.8, 128.1, 127.5, 125.4, 120.8, 120.3, 118.7, 117.9, 115.9, 67.6, 66.4, 52.7, 52.3, 46.8, 40.6, 40.1, 24.5, 24.2, 22.4, 22.1, 21.3, 20.9, 0.97, 0.83, 0.69, 0.56, 0.42, 0.28, 0.14. MS (ESI): 660.5 (30, M+H), 560.4 (100, M+H-Boc); HRMS: C34H54N5O8 (M+H)の計算値: 660.3967; 実測値: 660.3964.
【０２７９】
パートＤ  −  （２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−Ｎ−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミドの調製
【化１１６】
2009500410.tif 000123
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（１５０ｍｇ、０．６４９ｍｍｏｌ）、カルバジン酸９−フルオレニルメチル（１６４．９ｍｇ、０．６４９ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（８８．３ｍｇ、０．６４９ｍｍｏｌ）およびコリジン（４２８．５μＬ、３．２４３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液をＤＩＣ（２００．８μＬ、１．２９７ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で３時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２５ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸（３×２５ｍＬ）、１０％のＮａＨＣＯ3（３×２５ｍＬ）、水（２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧濃縮すると、標題化合物が無色の固体として得られた。（３０２ｍｇ、１００％）。1H NMR (CDCl3): δ8.21 (s, 1H), 7.74 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.57 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.38 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.29 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 6.79 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.43 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.18 (s, 1H), 3.96 (s, 1H), 1.72 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.25 (m, 1H), 0.94 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 3H).  MS: m/e 368.3 [M+H-Boc] (35%), 490.2 [M+Na] (100%).
【０２８０】
パートＥ  −  Ｎ−（４−｛［Ｎ−（（１Ｒ）−１−｛Ｎ−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］カルバモイル｝−３−メチルブチル）カルバモイルオキシ］メチル｝フェニル）（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１１７】
2009500410.tif 000124
パートＣの生成物（６５．０ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）を５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタン（１．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で３０分間撹拌し、減圧濃縮した。得られた残渣をＤＭＦ（０．５ｍＬ）に、ＤＩＥＡ（６０μＬ、０．３４４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２１．３ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）および実施例１３Ｂの生成物（６９．７ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）と共に溶解した。反応を室温において窒素下で１８時間撹拌し、溶媒を減圧除去した。得られた残渣を５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタン（１．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で２０分間撹拌し、真空濃縮した。得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１９．５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（５６．１ｍｇ、６４％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 1259.4 (35, 2M+H), 630.3 (100, M+H).
【０２８１】
パートＦ  −  Ｎ−［（Ｎ−｛１−［Ｎ−（１−｛Ｎ−［４−（｛Ｎ−［（１Ｒ）−１−（Ｎ−アミノカルバモイル）−３−メチルブチル］カルバモイルオキシ｝メチル）フェニル］カルバモイル｝（１Ｓ）−３−メチルブチル）カルバモイル］（１Ｓ）−３−フェニルプロピル｝カルバモイル）メチル］（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ブチル｝−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１１８】
2009500410.tif 000125
パートＤの生成物（１９．１ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）、パートＢの生成物（２０．０ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（４．１ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（０．６ｍＬ）に溶解し、コリジン（２０．０μＬ、０．１５２ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（４．５μＬ、０．０６１ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を室温において窒素下で１８時間撹拌した。ＴＡＥＡ（０．１２５ｍＬ、０．８ｍｍｏｌ）を加え、反応溶液をさらに２０分間撹拌した。揮発物を減圧除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から５４％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。３３．４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１２．１ｍｇ、３８％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN+D2O): δ8.25-8.21 (m, 2H), 8.05-7.97 (m, 4H), 7.94-7.87 (m, 3H), 5.84-5.63 (m, 2H), 5.19-4.89 (m, 3H), 4.80-4.59 (m, 2H), 4.28-3.97 (m, 4H), 3.78-3.66 (m, 2H), 3.41-3.27 (m, 2H), 2.88-2.03 (m, 33H), 1.68-1.46 (m, 18H).  MS (ESI): 1049.7 (100, M+H); HRMS: C54H85N10O11 (M+H)の計算値: 1049.6394; 実測値: 1049.6366.  キラル分析: 66.6% L-Leu, 99.4% L-Hphe.
【０２８２】
実施例４６
Ｎ−［（Ｎ−｛１−［Ｎ−（１−｛Ｎ−［４−（｛Ｎ−［（１Ｒ）−１−（Ｎ−アミノカルバモイル）−３−メチルブチル］カルバモイルオキシ｝メチル）フェニル］カルバモイル｝（１Ｓ）−４−［（イミノ｛［（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）アミノ］ブチル）カルバモイル］（１Ｓ）−３−フェニルプロピル｝カルバモイル）メチル］（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、２，２，２−トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１１９】
2009500410.tif 000126
パートＡ  −  Ｆｍｏｃ−ＰＬＧ〜Ｈｐｈｅ−ＨＭＰＢ−ＢＨＡ樹脂の調製
実施例４５ＡのＦｍｏｃ−Ｈｐｈｅ−ＨＭＰＢ  ＢＨＡ樹脂（２．００ｇ、置換レベル＝０．６０ｍｍｏｌ／ｇ）を１００ｍＬのＡｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ反応器に入れた。樹脂をＤＭＦ（２×３０ｍＬ）で洗浄することによって膨潤させ、以下の工程を実施した：（工程１）Ｆｍｏｃ基をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ ｖ／ｖ、３０ｍＬ）に０．５時間曝露して除去した。（工程２）樹脂をＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノール、ＣＨ2Ｃｌ2およびＤＭＦ（各３×３０ｍＬ）で洗浄した。（工程３）Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１．４３ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７３５ｍｇ、４．８０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１．８２ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２．０９ｍＬ、１２．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０．０ｍＬ）溶液を樹脂に加え、反応器を４時間振とうした。（工程４）樹脂をＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノール、ＣＨ2Ｃｌ2およびＤＭＦ（各３×３０ｍＬ）で洗浄した。（工程５）フルベン−ピペリジンアッセイで評価して、カップリング反応が９５％超完了していることが見い出された。各々Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨで工程１〜５を繰り返し、配列ＰＬＧ〜Ｈｐｈｅを完成した。
【０２８３】
パートＢ  −  Ａｃ−ＰＬＧ〜Ｈｐｈｅ−ＯＨの調製
パートＡのペプチド−樹脂（０．９１８ｇ）を１００ｍＬのＡｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ反応器に入れ、ＤＭＦ（２×３０ｍＬ）で洗浄することによって膨潤させた。樹脂をＤＭＦ（３０ｍＬ）中の２０％のピペリジンで３０分間処理してＦｍｏｃ保護基を除去し、次いでＤＭＦ（３×）、ジクロロメタン（３×）、メタノール（３×）、ジクロロメタン（３×）およびＤＭＦ（３×）で洗浄（容量３０ｍＬ）した。無水酢酸（０．４０ｍＬ、４．２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０．７４ｍＬ、４．２ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（３０ｍＬ）を加え、混合物を穏やかに２時間撹拌した。ペプチド−樹脂をＤＭＦ（３×）、ジクロロメタン（３×）、メタノール（３×）およびジクロロメタン（３×）で洗浄し（容量３０ｍＬ）、真空乾燥した。ペプチド−樹脂を焼結ガラス漏斗に入れ、ジクロロメタン（１２ｍＬ）中の１％のＴＦＡで２分間処理した。窒素圧をかけることによって溶液を１：９のピリジン：メタノール（２．０ｍＬ）を含有するフラスコに直接濾過した。分離手順を１０回繰り返した。合わせた濾液を濃縮すると、無色の油性固体が得られた。この粗生成物を水（２×２５ｍＬ）で磨砕し、減圧乾燥すると乾燥固体が得られた。この固体をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２３．８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物１９２．０ｍｇ（７１％）がＨＰＬＣで純度１００％の無色の固体として得られた。1H NMR (1:1 CD3CN+D2O): δ7.99 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.94-7.88 (m, 3H), 5.11-4.90 (m, 3H), 4.63-4.51 (m, 2H), 4.26-4.07 (m, 2H), 3.42-3.26 (m, 2H), 3.00-2.77 (m, 2H), 2.73-2.63 (m, 4H), 2.61-2.53 (m, 3H), 2.40-2.22 (m, 3H), 1.64-1.53 (m, 6H); 13C NMR (1: 1 CD3CN+D2O): δ173.93, 173.59, 173.55, 172.19, 170.18, 140.52, 140.42, 128.03, 125.67, 59.88, 51.86, 51.49, 47.96, 41.84, 38.76, 32.10, 30.84, 29.08, 24.01, 23.89, 21.84, 21.10, 20.08.  MS: m/e 489.4 (100, M+H).
【０２８４】
パートＣ  −  （２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］−５−［（イミノ｛［（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）アミノ］ペンタンアミドの調製
【化１２０】
2009500410.tif 000127
１：１のトルエン：エタノール（１０ｍＬ）中のＢｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ（５００ｍｇ、０．９２５ｍｍｏｌ）、ｐ−アミノベンジルアルコール（１７０．９ｍｇ、１．３８８ｍｍｏｌ）およびＥＥＤＱ（３７７．４ｍｇ、１．３８８ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で４８時間撹拌した。揮発物を減圧除去した。得られた残渣を酢酸エチル（１０ｍＬ）に溶解し、５％のＮａＨＣＯ3（３×２０ｍＬ）、１０％のクエン酸（２×２０ｍＬ）、水（２０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧濃縮すると、標題化合物が無色の固体（５５０ｍｇ、９２％）として得られた。MS (ESI): 1291.7 (20, 2M+H), 646.3 (100, M+H); HRMS: C32H48N5O7S (M+H)の計算値: 646.3269; 実測値: 646.3272.
【０２８５】
パートＤ  −  （４−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−５−［（イミノ｛［（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）アミノ］ペンタノイルアミノ｝フェニル）メチル（４−ニトロフェノキシ）ホルメートの調製
【化１２１】
2009500410.tif 000128
パートＣの生成物（５３５ｍｇ、０．８２８ｍｍｏｌ）、４−ニトロフェニルクロロホルメート（２５１ｍｇ、１．２４３ｍｍｏｌ）およびピリジン（１０５ｍｇ、１．３２５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１８時間撹拌した。追加の４−ニトロフェニルクロロホルメート（１８８ｍｇ、０．９３２ｍｍｏｌ）およびピリジン（８４ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を加え、撹拌をさらに１．５続けた。溶媒を蒸発させ、得られた粗生成物を４：１のジクロロメタン：アセトニトリル、次いで１：１のジクロロメタン：アセトニトリルで溶離するシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製した。標題化合物が無色の固体（４２４ｍｇ、６３％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS: 1621.7 (15, 2M+H), 811.3 (100, M+H).
【０２８６】
パートＥ  −  （２Ｒ）−２−｛［（４−｛（２Ｓ）−２−アミノ−５−［（イミノ｛［（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）アミノ］ペンタノイルアミノ｝フェニル）メトキシ］カルボニルアミノ｝−Ｎ−アミノ−４−メチルペンタンアミド、２，２，２−トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１２２】
2009500410.tif 000129
５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタン（５．０ｍＬ）中の実施例４５Ｃの生成物（８３ｍｇ、０．１７６ｍｍｏｌ）の溶液を２０分間、周囲温度において窒素下で撹拌し、減圧下で濃縮乾固した。得られた琥珀色の油をＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（７０μＬ、０．４０２μｍｏｌ）でｐＨを９に調整した。実施例４６Ｄの生成物（９５ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１８ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温において窒素下で４時間撹拌し、減圧濃縮した。得られた残渣を３０：７０のＴＦＡ：ジクロロメタン（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で１時間撹拌し、濃縮すると、油性固体が得られた。この油性残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から６３％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。４８．８分で溶離する主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（６５ｍｇ、８２％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 1878.9 (10, 2M+H), 939.5 (100, M+H).
【０２８７】
パートＦ  −  Ｎ−［（Ｎ−｛１−［Ｎ−（１−｛Ｎ−［４−（｛Ｎ−［（１Ｒ）−１−（Ｎ−アミノカルバモイル）−３−メチルブチル］カルバモイルオキシ｝メチル）フェニル］カルバモイル｝（１Ｓ）−４−［（イミノ｛［（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）アミノ］ブチル）カルバモイル］（１Ｓ）−３−フェニルプロピル｝カルバモイル）メチル］（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、２，２，２−トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１２３】
2009500410.tif 000130
パートＥの生成物（２５ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）、パートＢの生成物（１３ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（４ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）およびコリジン（１８μＬ、０．１３３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液をＤＩＣ（８．２μＬ、０．０５３ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で１８時間撹拌した。追加のパートＥの生成物（１３ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）を加え、撹拌をさらに１８時間続けた。ＴＡＥＡ（０．１ｍＬ、０．８ｍｍｏｌ）を反応溶液に加え、撹拌を室温において窒素下で２０分間続けた。揮発物を減圧除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む３６から４９．５％のアセトニトリルの０．４５％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２９．３分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（７．２ｍｇ、２３％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN+D2O): δ8.21-8.15 (m, 2H), 8.01-7.94 (m, 2H), 7.94-7.89 (m, 2H), 7.86-7.80 (m, 3H), 5.75 (d, J = 12 Hz, 1H), 5.60 (d, J = 12 Hz, 1H), 5.05-4.87 (m, 2H), 4.77-4.69 (m, 1H), 4.59-4.44 (m, 2H), 4.18-4.00 (m, 2H), 3.79 (bs, 2H), 3.35-3.19 (m, 4H), 3.13 (s, 3H), 3.11 (s, 3H), 2.83-2.55 (m, 11H), 2.54-2.32 (m, 7H), 2.30-2.07 (m, 8H), 1.91 (s, 6H), 1.56-1.42 (m, 12H).  MS (ESI): 1187.7 (100, M+H).  キラル分析: 97.0% L-Hphe.
【０２８８】
実施例４７
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１２４】
2009500410.tif 000131
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−フェニルプロパンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１２５】
2009500410.tif 000132
実施例２９Ａの生成物（２７９ｍｇ、０．５７３ｍｍｏｌ）を５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタン（２．０ｍＬ）に溶解し、２０分間窒素下で周囲温度において撹拌し、濃縮乾固した。得られた油性残渣をＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（０．４ｍＬ、０．２３０ｍｍｏｌ）を加えてｐＨを９に調整した。溶液をＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ（１６０ｍｇ、０．５７３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１０５ｍｇ、０．６８７ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２６１ｍｇ、０．６８７ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．１５ｍＬ、０．０８６ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で２時間撹拌した。溶液をＴＡＥＡ（０．４ｍＬ）で処理し、撹拌を２時間続けた。揮発物を真空除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１３．５から４０．５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２１．４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１４０ｍｇ、５７％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (1:1 CD3CN:D2O): δ7.83 (AA'BB'四重線のa部, J = 8.4 Hz, 2H), 7.51 (AA'BB'四重線のb部, J = 8.4 Hz, 2H), 7.33-7.20 (m, 5H), 4.43-4.37 (m, 1H), 4.14 (s, 2H), 3.22-3.14 (m, 1H), 2.88-2.76 (m, 1H), 1.27 (s, 9H); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ173.47, 168.53, 162.70 (q, J = 28 Hz), 157.38, 138.11, 137.97, 133.14, 130.34, 130.28, 129.55, 129.22, 127.86, 117.69 (q, J = 291 Hz), 81.45, 55.60, 43.53, 38.55, 28.51.  MS (ESI): 825.5 (100, 2M+H), 413.4 (65, M+H), 313.4 (70, M+H); HRMS: C22H29N4O4 (M+H)の計算値: 413.2183; 実測値: 413.2186.
【０２８９】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（１２０ｍｇ、０．２９１ｍｍｏｌ）、ＤＴＰＡ（１８０ｍｇ、０．２９１ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１３２ｍｇ、０．３４９ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１０１．４μＬ、０．５８２ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。揮発物を減圧除去し、得られた残渣を９０：９：１のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（２．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で５時間撹拌した。溶液を濃縮し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣにより、定組成で５分間１．８％のアセトニトリルで流速８０ｍＬ／分、次いで０．１％のＴＦＡを含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分の方法を使用して精製した。２０．１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（９０ｍｇ、４５％、ＨＰＬＣ純度８７％）として得られた。MS (ESI): 344.6 (100, M+2H)), 688.3 (95, M+H); HRMS: C31H42N7O11 (M+H)の計算値: 688.2937; 実測値: 688.2936.キラル分析: 99.2%D-Hphe。
【０２９０】
実施例４８
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（４−フェニルフェニル）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１２６】
2009500410.tif 000133
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−アミノ−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−（４−フェニルフェニル）プロパンアミド、２，２，２−トリフルオロ酢酸の調製
【化１２７】
2009500410.tif 000134
カルバジン酸９−フルオレニルメチル（２２３ｍｇ、０．８７９ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｂｉｐ−ＯＨ（３００ｍｇ、０．８７９ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４００ｍｇ、１．０５４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．３１ｍＬ、１．７５７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１８時間撹拌した。溶液をＴＡＥＡ（０．５ｍＬ）で処理し、撹拌を２時間続けた。揮発物を真空除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２７から５４％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分で精製した。１８．１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１７０ｍｇ、９２％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 256.4 (40, M-Boc+H), 300.3 (100, M-t-Bu+H), 378.3 (10, M+Na); HRMS: C20H26N3O3 (M+H)の計算値: 356.1969; 実測値: 356.1968.
【０２９１】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（４−フェニルフェニル）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（１６０ｍｇ、０．４５０ｍｍｏｌ）、ＤＴＰＡ（２７８ｍｇ、０．４５０ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（２０５ｍｇ、０．５４０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１５７μＬ、０．９００ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を室温において窒素下で４５分間撹拌した。溶媒を減圧真空下で除去し、得られた残渣を９０：１０：２のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解した。溶液を室温において窒素下で４時間撹拌し、濃縮して油性固体を得た。粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む９から３６％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１７．６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２０８ｍｇ、７３％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 316.3 (45, M+2H), 631.3 (100, M+H); HRMS: C29H39N6O10 (M+H)の計算値: 631.2722; 実測値: 631.2729.
【０２９２】
実施例４９
２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（（２Ｓ）ピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１２８】
2009500410.tif 000135
パートＡ  −  ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ）−２−（Ｎ−｛６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサノイルアミノ｝カルバモイル）ピロリジンカルボキシレートの調製
【化１２９】
2009500410.tif 000136
Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ（１９３ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３４２ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１４０ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（５２５μＬ、３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。実施例３Ａの生成物（３６０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を一度に加え、次いでＤＩＥＡ（５２５μＬ、３ｍｍｏｌ）を加えると、ｐＨ＝１０の溶液が得られた。溶液を室温で２時間撹拌し、水（５００ｍＬ）に滴下した。得られた沈殿を中型フリット漏斗で濾過によって集め、水（７５ｍＬ）で洗浄し、乾燥すると、標題化合物がオフホワイトの固体（１５６ｍｇ、３１％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 465.2 (100, M+H-Boc), 587.3 (10, M+Na).
【０２９３】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（（２Ｓ）ピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（１５６ｍｇ、２７５μｍｏｌ）を２０：８０のピペリジン：ＤＭＦ（５．０ｍＬ）に溶解し、窒素下、室温において３０分間撹拌し、真空下で濃縮乾固した。残渣をＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（４００μＬ、１．８０ｍｍｏｌ）で処理した。分離フラスコ中、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（２０７ｍｇ、３３０μｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１２５ｍｇ、３３０μｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（８００μＬ、３．６０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１５分間撹拌した。２つのＤＭＦ溶液を合わせ、さらに３０分間撹拌し、減圧濃縮すると、黄色の油が得られた。MS (ESI): 942.7 (100, M+H).
【０２９４】
上記の油を９０：９：１のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で３時間撹拌し、減圧濃縮すると、黄色の油が得られた。この粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣにより、定組成で１０分間０．９％のアセトニトリルで流速８０ｍＬ／分、次いで０．１％のＴＦＡを含む０．９から２７．９％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分の方法を使用して精製した。１６．８分で溶離した生成物画分を凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（７５ｍｇ、９７％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ12.02 (bs, 4H), 10.35 (s, 1H), 9.96 (s, 1H), 9.48 (bs, 1H), 8.70 (bs, 1H), 8.42 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.25-4.19 (m, 1H), 4.19-4.06 (m, 2H), 3.68-3.40 (m, 6H), 3.40-3.30 (m, 4H), 3.30-3.19 (m, 2H), 3.19-3.09 (m, 2H), 3.09-2.97 (m, 4H), 2.38-2.29 (m, 1H), 2.15 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.98-1.85 (m, 3H), 1.53 (quin, J = 7.5 Hz, 2H), 1.44 (quin, J = 7.5 Hz, 2H), 1.34-1.23 (m, 4H).  MS (ESI): 618.3 (100, M+H), 309.7 (60, M+2H).  HRMS: C25H41FeN7O11: (M-2H+Fe)の計算値: 671.2208; 実測値: 671.2202.
【０２９５】
実施例５０
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１３０】
2009500410.tif 000137
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛２−［４−（アミノメチル）フェニル］アセチルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−フェニルプロパンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１３１】
2009500410.tif 000138
実施例４Ａの生成物（３０３ｍｇ、０．７５４ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ（２００ｍｇ、０．７５４ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３４３ｍｇ、０．９０５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．２６３ｍＬ、１．５０８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２時間撹拌した。溶液をＴＡＥＡ（０．４ｍＬ）で処理し、撹拌をさらに２時間続けた。溶媒を真空除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１６．９分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２４２ｍｇ、７５％、ＨＰＬＣ純度９３％）として得られた。MS (ESI): 427.4 (100, M+H), 853.5 (60, 2M+H); HRMS: C23H31N4O4 (M+H)の計算値: 427.2340; 実測値: 427.2344.
【０２９６】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（２０２ｍｇ、０．４７３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２．０ｍＬ）に溶解し、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（２９３ｍｇ、０．４７３ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２１５ｍｇ、０．５６８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１６５μＬ、０．９４７ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を室温において窒素下で４５分間撹拌し、酢酸エチル（４０ｍＬ）で希釈した。酢酸エチル溶液を１ＮのＮａＯＨ（２×４０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（４０ｍＬ）で連続的に洗浄し、減圧濃縮した。得られた残渣を９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で２時間撹拌した。揮発物を減圧除去し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１４．５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１３５ｍｇ、４１％、ＨＰＬＣ純度９５％）として得られた。MS (ESI): 351.9 (100, M+2H), 702.4 (70, M+H); HRMS: C32H44N7O11 (M+H)の計算値: 702.3093; 実測値: 702.3092.キラル分析: 100.0% D-Hphe.
【０２９７】
実施例５１
２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（｛（２Ｒ）−１−［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］ピロリジン−２−イル｝カルボニルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１３２】
2009500410.tif 000139
パートＡ  −  ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ）−２−（Ｎ−｛６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサノイルアミノ｝カルバモイル）ピロリジンカルボキシレートの調製
【化１３３】
2009500410.tif 000140
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｒｏ−ＯＨ（３７８ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（６８２ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２７６ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７００μＬ、４．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。実施例３Ａの生成物（３６０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を一度に加え、次いでＤＩＥＡ（７００μＬ、４．０ｍｍｏｌ）を加えてｐＨを１０に上げた。溶液を２時間、周囲温度において撹拌し、減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）に溶解し、１０％のクエン酸（５００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（５００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５００ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、標題化合物がオフホワイトの固体（７６０ｍｇ、８４％）として得られた。ＭＳ（ＥＳＩ）：４６５．２（１００、Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）、５８７．３（１０、Ｍ＋Ｎａ）。
【０２９８】
パートＢ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（｛（２Ｒ）−１−［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］ピロリジン−２−イル｝カルボニルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
２０：８０のピペリジン：ＤＭＦ（５．０ｍＬ）中のパートＡの生成物（２８２ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を窒素下、室温において３０分間撹拌し、減圧濃縮した。残渣をＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（１００μＬ、０．６ｍｍｏｌ）で処理すると、ｐＨ１０の溶液が得られた。分離フラスコ中、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３７０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１８９ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２１０μＬ、２．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１５分間撹拌した。２つのＤＭＦ溶液を合わせ、周囲温度、窒素下で１時間放置し、減圧濃縮した。粗生成物を酢酸エチル（５００ｍＬ）に溶解し、１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、１ＮのＮａＯＨ（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、黄色の油が得られた。MS (ESI): 942.7 (100, M+H).
【０２９９】
上記の油を９０：９：１のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で３時間撹拌し、減圧濃縮した。生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣにより、定組成で１０分間０．９％のアセトニトリルで流速８０ｍＬ／分、次いで０．１％のＴＦＡを含む０．９から２７．９％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分の方法を使用して精製した。１６．８分で溶離した生成物画分を凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１１１ｍｇ、３６％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ12.05 (bs, 4H), 10.36 (s, 1H), 9.96 (s, 1H), 9.50 (bs, 1H), 8.70 (bs, 1H), 8.43 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.26-4.19 (m, 1H), 4.19-4.12 (m, 2H), 3.68-3.43 (m, 6H), 3.40-3.30 (m, 4H), 3.30-3.19 (m, 2H), 3.19-3.09 (m, 2H), 3.09-2.98 (m, 4H), 2.38-2.30 (m, 1H), 2.15 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.98-1.87 (m, 3H), 1.53 (quin, J = 7.5 Hz, 2H), 1.44 (quin, J = 7.5 Hz, 2H), 1.35-1.23 (m, 4H).  MS (ESI): 618.5 (100, M+H); 309.8 (60, M+2H).  HRMS: C25H41FeN7O11 (M-2H+Fe)の計算値: 671.2208; 実測値: 671.2204.
【０３００】
実施例５２
２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（フェニルメトキシ）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１３４】
2009500410.tif 000141
パートＡ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−（フェニルメトキシ）プロパノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１３５】
2009500410.tif 000142
実施例３Ａの生成物（３１１ｍｇ、０．８４７ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ（２５０ｍｇ、０．８４７ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３８５ｍｇ、１．０１６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．３０ｍＬ、１．６９３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で４５分間撹拌した。溶液をＴＡＥＡ（０．５ｍＬ）で処理し、撹拌をさらに２時間続けた。溶液を真空濃縮し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１８．５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（７５ｍｇ、２１％、ＨＰＬＣ純度９５％）として得られた。MS (ESI): 423.3 (100, M+H); HRMS: C21H35N4O5 (M+H)の計算値: 423.2602; 実測値: 423.2602.
【０３０１】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（フェニルメトキシ）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（７０ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２．０ｍＬ）に溶解し、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（１０２ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（７５ｍｇ、０．１９９ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（４６μＬ、０．３３１ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を室温において窒素下で４５分間撹拌し、酢酸エチル（４０ｍＬ）で希釈した。得られた溶液を１ＮのＮａＯＨ（２×４０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（４０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮した。得られた残渣を９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で３時間撹拌した。揮発物を減圧除去し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から１９．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１７．７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（７８ｍｇ、６７％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.92-7.85 (m, 5H), 5.10 (q, J = 10.8 Hz, 2H), 4.77 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 4.43-4.33 (m, 4H), 4.20 (s, 8H), 3.80-3.65 (m, 10H), 2.78 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.10 (quin, J = 7.5 Hz, 2H), 2.01 (quin, J = 7.5 Hz, 2H), 1.83 (quin, J = 7.5 Hz, 2H); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ176.24, 173.92, 168.41, 168.00, 162.10 (q, J = 34.5 Hz), 138.65, 130.21, 129.76, 129.68, 118.21 (q, J = 291 Hz), 74.78, 68.99, 56.82, 56.45, 53.65, 53.61, 51.95, 40.78, 34.74, 29.62, 27.24, 26.06.  MS (ESI): 349.8 (199, M+2H), 698.4 (80, M+H); HRMS: C30H48N7O12 (M+H)の計算値: 698.3355; 実測値: 698.3358.
【０３０２】
実施例５３
２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−アミノ−３−（フェニルメチルチオ）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１３６】
2009500410.tif 000143
パートＡ  −  Ｎ−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−（フェニルメチルチオ）プロパノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１３７】
2009500410.tif 000144
実施例３Ａの生成物（２９５ｍｇ、０．８０３ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−ＯＨ（２５０ｍｇ、０．８０３ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３６５ｍｇ、０．９６３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．２８ｍＬ、１．６０６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を室温において窒素下で４時間撹拌した。溶液をＴＡＥＡ（０．５ｍＬ）で処理し、撹拌をさらに４０分間続けた。溶液を真空濃縮し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２４．４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２２４ｍｇ、６４％、ＨＰＬＣ純度９５％）として得られた。MS (ESI): 439.2 (100, M+H); HRMS: C21H35N4O4S (M+H)の計算値: 439.2374; 実測値: 439.2375.
【０３０３】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−アミノ−３−（フェニルメチルチオ）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（２１４ｍｇ、０．４５６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液を２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３０１ｍｇ、０．４５６ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２２２ｍｇ、０．５４７ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１２７μＬ、０．９１２ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で４５分間撹拌した。反応を酢酸エチル（４０ｍＬ）で希釈し、１ＮのＮａＯＨ（２×４０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（４０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮した。得られた残渣を９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で３時間撹拌した。揮発物を減圧除去し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１９．６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２０４ｍｇ、５９％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 357.9 (100, M+2H), 714.4 (70, M+H); HRMS: C30H48N7O11S (M+H)の計算値: 714.3127; 実測値: 714.3126.キラル分析: 97.0%D-Cys (Bzl)。
【０３０４】
実施例５４
２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−フェニルブタノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１３８】
2009500410.tif 000145
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｈｐｈｅ−ＯＨ（５０２ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（５６８ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２３０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７５０μＬ、４．２８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。実施例３Ａの生成物（７２０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加え、次いでＤＩＥＡ（７５０μＬ、４．２８ｍｍｏｌ）を加えてｐＨを１０に上げた。溶液を１８時間、周囲温度において窒素下で撹拌し、減圧濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、黄色の油（７１５ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 529.3 (100, M+H-Boc).
【０３０５】
上記の油（３１５ｍｇ）を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（２．０ｍＬ）に溶解し、周囲温度で３０分間撹拌し、減圧濃縮した。残渣をＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（２００μＬ、１．２ｍｍｏｌ）で処理すると、ｐＨ１０の溶液が得られた。分離フラスコ中、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３７０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２０８ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２００μＬ、１．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１５分間撹拌した。２つのＤＭＦ溶液を合わせ、周囲温度で２時間撹拌し、減圧濃縮した。得られた粗生成物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、溶液を１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、黄色の油が得られた。MS (ESI): 1006.5 (100, M+H).
【０３０６】
上記の油を９０：９：１のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で４時間撹拌した。揮発物を減圧除去した。粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣにより、定組成で１０分間０．９％のアセトニトリルで流速８０ｍＬ／分、次いで０．１％のＴＦＡを含む０．９から２７．９％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分の方法を使用して精製した。２９．５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１２９ｍｇ、３８％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ12.05 (bs, 4H), 10.35 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.47-23 (m, 4H), 7.32 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.24-7.18 (m, 3H), 4.14 (s, 2H), 3.92 (s, 1H), 3.70-3.40 (m, 8H), 3.40-3.23 (m, 4H), 3.11 (q, J = 6.6 Hz, 2H), 3.04 (t, J = 5.7 Hz, 4H), 2.77-2.64 (m, 2H), 2.17 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.08-1.97 (m, 2H), 1.55 (quin, J = 7.5 Hz, 2H), 1.45 (quin, J = 7.5 Hz, 2H), 1.31 (quin, J = 7/5 Hz, 2H).  MS (ESI): 682.3 (95, M+H); 341.9 (100, M+2H).  HRMS: C30H45FeN7O11 (M-2H+Fe)の計算値: 735.2521; 実測値: 735.2519.
【０３０７】
実施例５５
２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（４−エトキシフェニル）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝メチル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１３９】
2009500410.tif 000146
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｙｒ（ＯＥｔ）−ＯＨ（５５７ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（５６８ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２３０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７５０μＬ、４．２８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。溶液を実施例４Ａの生成物（６０２ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、次いでＤＩＥＡ（７５０μＬ、４．２８ｍｍｏｌ）で処理し、撹拌を１８時間続けた。溶液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解した。酢酸エチル溶液を１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、黄色の油（２８５ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 593.4 (100, M+H-Boc).
【０３０８】
５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（５．０ｍＬ）中の上記の油（２７５ｍｇ）の溶液を窒素下、室温において３０分間放置し、真空濃縮した。得られた残渣をＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（１５０μＬ、１．０ｍｍｏｌ）で処理した。分離フラスコ中、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（２９５ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１６８ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（６７ｍｇ、０４４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１５０μＬ、１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１５分間撹拌した。２つのＤＭＦ溶液を合わせ、さらに２時間撹拌した。溶液を濃縮し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に再溶解した。酢酸エチル溶液を１ＮのＮａＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、黄−オレンジ色の油が得られた。MS (ESI): 1070.5 (100, M+H).
【０３０９】
上記の油を９０：８：２のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（１０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で４時間撹拌し、真空濃縮した。得られた粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣにより、定組成で１０分間０．９％のアセトニトリルで流速８０ｍＬ／分、次いで０．９％のアセトニトリルで１０分後、０．１％のＴＦＡを含む０．９から２７．９％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分の方法を使用して精製した。３５分で溶離した生成物画分を凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（５２ｍｇ、１４％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ12.05 (bs, 4H), 10.58 (s, 1H), 10.41 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.18 (bs, 3H), 7.30-7.15 (m, 6H), 6.87 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.33 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 4.23 (s, 1H), 4.00 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.74-3.43 (m, 12H), 3.43-3.26 (m, 4H), 3.10-2.97 (m, 5H), 2.94-2.87 (m, 1H), 1.31 (t, J = 6.9 Hz, 3H).  MS (ESI): 746.4 (100, M+H); 373.8 (100, M+H).  HRMS: C34H45FeN7O12 (M+2H-Fe)の計算値: 799.2470; 実測値: 799.2462.
【０３１０】
実施例５６
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−シクロヘキシルプロパノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１４０】
2009500410.tif 000147
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛２−［４−（アミノメチル）フェニル］アセチルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−シクロヘキシルプロパンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１４１】
2009500410.tif 000148
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｃｈａ−ＯＨのＤＣＨＡ塩（３３７ｍｇ、０．７４４ｍｍｏｌ）を分離漏斗中の酢酸エチル（２０ｍＬ）に懸濁し、氷冷２ＭのＨ2ＳＯ4（１．０ｍＬ）で洗浄した。酢酸エチル層を取り出し、廃棄した。水層を冷水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた酢酸エチル層を水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、４０℃以下で減圧濃縮すると、無色の粘稠な固体（１７９ｍｇ、収率９０％）が得られた。この固体をＤＭＦ（２．０ｍＬ）に溶解し、実施例４Ａの生成物（２６５ｍｇ、０．６６０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３００ｍｇ、０．７９２ｍｍｏｌ）および十分なＤＩＥＡで処理すると、ｐＨ＝８の溶液が得られた。溶液を室温において窒素下で２時間撹拌し、ＴＡＥＡ（０．５ｍＬ）で処理し、さらに１時間撹拌した。揮発物を真空除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２２．０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１５５ｍｇ、５４％、ＨＰＬＣ純度９３％）として得られた。MS (ESI): 433.5 (100, M+H), 865.7 (60, 2M+H); HRMS: C23H37N4O4 (M+H)の計算値: 433.2809; 実測値: 433.2806.
【０３１１】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−シクロヘキシルプロパノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（１４０ｍｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２．０ｍＬ）に溶解し、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（２００ｍｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１４７ｍｇ、０．３８８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１１３μＬ、０．６４７ｍｍｏｌ）で処理した。得られた溶液を室温において窒素下、４時間撹拌し、酢酸エチル（４０ｍＬ）で希釈した。溶液を０．５ＮのＮａＯＨ（２×４０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（４０ｍＬ）で連続的に洗浄し、濃縮した。得られた油性固体を９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で２時間撹拌し、真空濃縮した。得られた粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む６．３から２４．３％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１６．１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１５１ｍｇ、６６％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 354.9 (100, M+2H), 708.5 (60, M+H); HRMS: C32H47FeN7O11 (M+Fe-2H)の計算値: 761.2677; 実測値: 761.2679.キラル分析: 99.8% D-Cha.
【０３１２】
実施例５７
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛２−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］エチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１４２】
2009500410.tif 000149
パートＡ  −  ３−（４−｛［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）プロパン酸の調製
【化１４３】
2009500410.tif 000150
ＬｏｅｆｆｌｅｒおよびＭａｒ（J. Med. Chem. 1975, 18, 287-292）の手順に従って調製した３−［４−（アミノメチル）フェニル］プロパン酸（１２．１ｇ、０．０３０２ｍｏｌ）を５％のＮａ2ＣＯ3（１２５ｍＬ）、水（１２５ｍＬ）およびアセトン（３００ｍＬ）の溶液に溶解し、Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（１２．２ｇ、０．０３６２ｍｏｌ）で処理した。得られた溶液を周囲温度において２時間撹拌し、５ＮのＨＣｌを使用してｐＨを４〜５に調整した。混合物を約半分に減少させると多量の固体の無色の沈殿が形成した。この固体を濾過によって集め、水で洗浄し、乾燥した。水から再結晶させると、標題化合物が無色の固体として得られた。融点１６４．５〜１６６℃（４．９２７ｇ、４１％、ＨＰＬＣ純度＝９８％）。1H NMR (DMSO-d6): δ7.89 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.78 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.42 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.34 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.16 (AA'BB'四重線のa部, J = 7.8 Hz, 2H), 7.13 (AA'BB'四重線のb部, J = 7.8 Hz, 2H), 4.34 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 4.22 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 4.14 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.80 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.52 (t, J = 7.5 Hz, 2H); 13C NMR (DMSO-d6): δ173.64, 156.26, 143.84, 140.70, 139.31, 137.33, 128.04, 127.35, 126.98, 125.19, 120.03, 65.25, 46.78, 43.46, 35.23, 29.94.  MS (ESI): 402.2 (100, M+H).  HRMS: C25H24NO4 (M+H)の計算値: 402.1700; 実測値: 402.1696.
【０３１３】
パートＢ  −  Ｎ−アミノ−３−（４−｛［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）プロパンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１４４】
2009500410.tif 000151
パートＡの生成物（３．０ｇ、０．００７ｍｏｌ）、カルバジン酸ｔ−ブチル（１．０ｇ、０．００７ｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３．４ｇ、０．００９ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２．６ｍＬ、０．０１５ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で２時間撹拌した。反応を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸（３×１００ｍＬ）、０．５ＮのＮａＯＨ（３×１００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮した。得られた固体をＴＦＡ：ジクロロメタン（５０：５０）２０ｍＬに溶解し、室温において３０分間撹拌した。揮発物を減圧真空下で除去し、得られた粗生成物を６０：４０のアセトニトリル：水（１００ｍＬ）に溶解し、凍結乾燥すると、標題化合物が黄色の固体（４．２３８ｇ、１０７％、ＨＰＬＣ純度９５％）として得られた。1H NMR (DMF-d7): δ7.94 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.80 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.75 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.45 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.35 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.25 (AA'BB'四重線のa部, J = 8.4 Hz, 2H), 7.20 (AA'BB'四重線のb部, J = 8.4 Hz, 2H), 4.36 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.31 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.28 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 2.56 (t, J = 7.8 Hz, 2H),２．９２の溶媒ピークにメチレンが残る；13C NMR (DMF-d7): δ171.62, 159.58 (d, J = 34.3 Hz), 157.08, 144.67, 141.53, 140.14, 138.17, 128.59, 128.02, 127.65, 127.43, 125.66, 120.41, 119.29 (q, J = 252.7 Hz), 66.38, 47.57, 44.34, 30.96.  MS (ESI): 416.2 (100, M+H).  HRMS: C25H26N3O3 (M+H)の計算値: 416.1969; 実測値: 416.1969.
【０３１４】
パートＣ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛３−［４−（アミノメチル）フェニル］プロパノイルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１４５】
2009500410.tif 000152
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（２００ｍｇ、０．８６５ｍｍｏｌ）、パートＢの生成物（３５９ｍｇ、０．８６５ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３９４ｍｇ、１．０３８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．３０１ｍＬ、１．７２９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２時間撹拌した。溶液をＴＡＥＡ（０．５０ｍＬ）で処理し、撹拌を１時間続けた。揮発物を真空除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１５．６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２４６ｍｇ、７０％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 407.4 (100, M+H); HRMS: C21H35N4O4[M+H]計算値: 407.2653, 実測値: 407.2647.
【０３１５】
パートＤ  −  ２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛２−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］エチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１４６】
2009500410.tif 000153
ＤＴＰＡ（３０４ｍｇ、０．４９２ｍｍｏｌ）、パートＣの生成物（２００ｍｇ、０．４９２ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２２４ｍｇ、０．５９０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（ｐＨ１０にする十分量）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で４時間撹拌した。反応を酢酸エチル（４０ｍＬ）で希釈し、０．５ＮのＮａＯＨ（２×４０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（４０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、真空濃縮した。得られた残渣を９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で２時間撹拌した。揮発物を真空除去し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から１９．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１６．４分で溶離した主要生成物画分を凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１８５ｍｇ、５５％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 682.3 (50, M+H), 341.9 (100, M+2H).HRMS: C30H45FeN7O11 (M+Fe-2H)の計算値: 735.2521; 実測値: 735.2519; キラル分析: 99.6% D-Leu.
【０３１６】
実施例５８
２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−イミダゾール−４−イルプロパノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１４７】
2009500410.tif 000154
パートＡ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−イミダゾール−４−イルプロパノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、酢酸塩の調製
【化１４８】
2009500410.tif 000155
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｈｉｓ−ＯＨ（２２０ｍｇ、０．８６２ｍｍｏｌ）、実施例３Ａの生成物（３１６．７ｍｇ、０．８６２ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３９２ｍｇ、１．０３４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．３００ｍＬ、１．７２４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２時間撹拌した。溶液をＴＡＥＡ（０．５ｍＬ）で処理し、さらに２時間撹拌した。溶液を真空濃縮し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣにより、定組成で１０分間１．８％のアセトニトリルで流速８０ｍＬ／分、次いで１５ｍＭのＮＨ4ＯＡｃ（ｐＨ７）を含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分の方法を使用して精製した。２２．４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（３９ｍｇ、１０％、ＨＰＬＣ純度９５％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.84 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 4.39-4.23 (m, 1H), 3.10-3.02 (m, 1H), 2.92-2.82 (m, 3H), 2.23 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.83 (s, 3H), 1.62-1.51 (m, 4H), 1.37-1.25 (m, 11H); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ179.84, 175.52, 172.88, 157.41, 136.01, 132.57, 118.42, 81.70, 54.00, 40.23, 34.03, 29.72, 28.53, 27.35, 26.09, 25.27, 23.62.  MS (ESI): 383.4 (100, M+H), 283.4 (25, M-Boc+H).
【０３１７】
パートＢ  −  ｔｅｒｔ−ブチル２−（｛２−［（｛Ｎ−［５−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−イミダゾール−４−イルプロパノイルアミノ｝カルバモイル）ペンチル］カルバモイル｝メチル）［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ］エチル｝｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）アセテートの調製
【化１４９】
2009500410.tif 000156
２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（Journal of Organic Chemistry (1993), 58 (5), 1151-8で記載の手順に従って調製、７１ｍｇ、０．１１５ｍｍｏｌ）、パートＡの生成物（４４ｍｇ、０．１１５ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（５２ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）およびコリジン（３０μＬ、０．２２９ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２時間撹拌した。溶媒を減圧除去し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２７から５４％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２６．４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（３０ｍｇ、２７％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 982.7 (40, M+H), 492.0 (100, M+2H); HRMS: C47H84N9O13 (M+H)の計算値: 982.6183; 実測値: 982.6188.
【０３１８】
パートＣ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−イミダゾール−４−イルプロパノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）中のパートＢの生成物（２８ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で３時間撹拌し、濃縮して油性固体を得た。固体を５０：５０のアセトニトリル：Ｈ2Ｏ（５．０ｍＬ）から凍結乾燥させると、標題化合物が無色の固体（１４ｍｇ、７５％、ＨＰＬＣ純度９０％）として得られた。MS (ESI): 658.3 (70, M+H), 329.7 (100, M+2H); HRMS: C26H44N9O11 (M+H)の計算値: 658.3155; 実測値: 658.3154.
【０３１９】
実施例５９
２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−アミノ−３−（フェニルメチルチオ）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝メチル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１５０】
2009500410.tif 000157
パートＡ  −  （２Ｓ）−Ｎ−｛２−［４−（アミノメチル）フェニル］アセチルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−（フェニルメチルチオ）プロパンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１５１】
2009500410.tif 000158
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−ＯＨ（２５０ｍｇ、０．８０３ｍｍｏｌ）、実施例４Ａの生成物（３２２ｍｇ、０．８０３ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３６５ｍｇ、０．９６３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．２８０ｍＬ、１．６０６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０時間撹拌した。溶液をＴＡＥＡ（０．５ｍＬ）で処理し、撹拌をさらに４０分間続けた。揮発物を真空除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２２．８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１５１ｍｇ）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.37-7.27 (m, 8H), 7.25-7.20 (m, 1H), 4.25 (bs, 1H), 4.05 (s, 2H), 3.72 (s, 2H), 3.58 (s, 2H), 2.90-2.81 (m, 1H), 2.78-2.61 (m, 1H), 1.37 (s, 9H).  MS (ESI): 473.4 (100, M+H); HRMS C24H33N4O4S (M+H)の計算値: 473.2217; 実測値: 473.2219.
【０３２０】
パートＢ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−アミノ−３−（フェニルメチルチオ）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝メチル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（１２８ｍｇ、０．２９２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（１８０ｍｇ、０．２９２ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１３３ｍｇ、０．３５０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１０２μＬ、０．５８４ｍｍｏｌ）と共に溶解した。得られた溶液を室温において窒素下で４５分間撹拌し、酢酸エチル（４０ｍＬ）で希釈した。酢酸エチル溶液を１ＮのＮａＯＨ（２×４０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（４０ｍＬ）で連続的に洗浄し、減圧濃縮した。得られた残渣を９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で５時間撹拌した。揮発物を減圧除去し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む６．３から２４．３％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１８．０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１４２ｍｇ、６５％、ＨＰＬＣ純度９６％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.32-7.21 (m, 9H), 4.33 (s, 2H), 4.09 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.93 (s, 2H), 3.78 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.74 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.62 (s, 8H), 3.56 (s, 2H), 3.22 (t, J = 5.4 Hz, 4H), 3.15 (t, J = 5.4 Hz, 4H), 2.95 (dd, abc系のHb , Jab = Jac = 6.6 Hz, Jbc = 8.1 Hz, 1H), 2.88 (dd, abc系のHc, Jab = Jac = 6.6 Hz, Jbc = 8.1 Hz, 1H); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ173.39, 173.14, 168.10, 167.90, 162.51 (q, J = 34.8 Hz), 138.50, 137.91, 134.45, 130.63, 130.04, 129.83, 128.95, 128.52, 117.64 (q, J = 290 Hz), 56.18, 55.92, 53.30, 52.18, 51.39, 43.76, 40.69, 36.79, 32.72.  MS (ESI): 748.3 (88, M+H), 374.9 (100, M+2H); HRMS: C33H43FeN7O11S (M+Fe-2H)の計算値: 801.2085; 実測値: 801.2079; キラル分析: 97.9% D-Cys (Bzl).
【０３２１】
実施例６０
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛２−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］エチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１５２】
2009500410.tif 000159
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛３−［４−（アミノメチル）フェニル］プロパノイルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−フェニルプロパンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１５３】
2009500410.tif 000160
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ（２５０ｍｇ、０．９４２ｍｍｏｌ）、実施例５７Ｂの生成物（３９２ｍｇ、０．９４２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．３２８ｍＬ、１．８８５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（４２９ｍｇ、１．１３１ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で２０時間撹拌した。溶液をＴＡＥＡ（０．５ｍＬ）で処理し、撹拌をさらに４０分間続けた。溶媒を真空除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４０．５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１８．１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２５０ｍｇ、６０％、ＨＰＬＣ純度９５％）として得られた。MS (ESI): 441.4 (100, M+H); HRMS C24H33N4O4 (M+H)の計算値: 441.2496; 実測値: 441.2497.
【０３２２】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛２−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］エチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（２９２ｍｇ、０．４７２ｍｍｏｌ）、パートＡの生成物（２０８ｍｇ、０．４７２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１６４μＬ、０．９４４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２１５ｍｇ、０．５６７ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で４５分間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ）で希釈し、０．５ＮのＮａＯＨ（２×４０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌで連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮した。溶媒を真空除去し、得られた残渣を９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で５時間撹拌した。揮発物を真空除去し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から１９．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１６．１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２３２ｍｇ、６９％、ＨＰＬＣ純度９６％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.36-7.27 (m, 3H), 7.26-7.23 (m, 2H), 7.21-7.15 (m, 4H), 4.32 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.61 (s, 8H), 3.25 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 3.19-3.08 (m 6H), 2.84 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.53-2.46 (m, 2H), (見えないメチンはHODピークの下にあった); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ174.58, 173.65, 168.82, 167.47, 162.42 (q, J = 34.8 Hz), 140.79, 136.82, 134.64, 130.59, 130.09, 129.65, 128.92, 128.80, 117.60 (q, J = 291 Hz), 56.05, 55.80, 54.22, 53.54, 51.18, 43.79, 37.64, 35.82, 31.33.  MS (ESI): 716.4 (82, M+H), 358.8 (100, M+2H); HRMS: C33H43FeN7O11 (M+Fe-2H)の計算値: 769.2364; 実測値: 769.2367.  キラル分析: 100.0% D-Phe.
【０３２３】
実施例６１
２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（４−フェニルフェニル）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１５４】
2009500410.tif 000161
パートＡ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−（４−フェニルフェニル）プロパノイルアミノ｝−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化１５５】
2009500410.tif 000162
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｂｉｐ−ＯＨ（４０９ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４１７ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１６８ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３５０μＬ、２．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。実施例３Ａの生成物（４８１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を一度に加え、次いでＤＩＥＡ（３５０μＬ、２．０ｍｍｏｌ）を加えてｐＨを１０に上げた。溶液を周囲温度において１８時間撹拌し、揮発物を真空除去した。得られた残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）で磨砕して無色の固体を得、これを濾過によって集め、乾燥すると、標題化合物（８１４ｍｇ、９８％、ＨＰＬＣ純度１００％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ9.99 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 7.89 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.69 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.64 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.57 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.48-7.36 (m, 6H), 7.36-7.29 (m, 3H), 7.24 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.32-4.24 (m, 3H), 4.21 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 3.05 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 2.98 (q, J = 6.4 Hz, 2H), 2.82 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 2.14 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.53 (t, J = 7.2 Hz 2H), 1.41 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.36-1.12 (m, 11H).  MS (ESI): 591.3 (100, M+H-Boc), 713.3 (20, M+H).  HRMS: C41H47FeN4O6 (M+H)の計算値: 691.3496; 実測値: 691.3493.
【０３２４】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（４−フェニルフェニル）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（２０３ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（５．０ｍＬ）に溶解し、窒素下、室温において３０分間撹拌した。溶液を濃縮し、残渣をＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解した。分離フラスコ中、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（２２２ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１２５ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１００μＬ、０．６０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１５分間撹拌した。２つのＤＭＦ溶液を合わせ、撹拌をさらに１８時間続けた。揮発物を減圧を使用して除去し、得られた油性固体を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解した。酢酸エチル溶液を１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、黄色の油が得られた。MS (ESI): 1086.6 (100, M+H).
【０３２５】
上記の油を９０：８：２のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（１０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で３時間撹拌し、真空下で濃縮乾固した。粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む９から３６％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。約２１分で溶離した主要生成物画分を凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１０８ｍｇ、４９％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 744.5 (95, M+H), 372.9 (100, 2M+H).HRMS: C35H47FeN7O11 (M-2H+Fe)の計算値: 797.2678; 実測値: 797.2687.
【０３２６】
実施例６２
２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１５６】
2009500410.tif 000163
パートＡ  −  Ｎ−（｛４−［（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝カルバモイル）メチル］フェニル｝メチル）−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化１５７】
2009500410.tif 000164
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（１．１９７ｇ、４．８ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１．６６９ｇ、４．４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．６７９ｇ、４．４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７５０μＬ、４．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）溶液を室温において窒素下で３０分間撹拌した。実施例４Ａの生成物（１．０５７ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を反応に一度に加え、次いでＤＩＥＡ（７５０μＬ、４．４ｍｍｏｌ）を加えると、ｐＨ１０の溶液が得られた。溶液をさらに５時間撹拌し、水（５００ｍＬ）に滴下した。得られた沈殿を濾過によって集め、乾燥すると、オフホワイトの固体（９４０ｍｇ、７６％、ＨＰＬＣ純度８５％）が得られた。MS (ESI): 515.2 (100, M+H/-Boc), 632.3 (45, M+H); キラル分析: 99.5% D-Leu.
【０３２７】
上記の固体（２０３ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（２．０ｍＬ）に溶解し、窒素下で室温において３０分間撹拌した。溶液を真空濃縮し、残渣をＤＭＦ（１．０ｍＬ）およびＤＩＥＡ（１５０μＬ、０．９ｍｍｏｌ）に溶解した。分離フラスコ中、Ｆｍｏｃ−６−Ａｈｘ−ＯＨ（２１２ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２０８ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２００μＬ、１．２０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１５分間撹拌した。２つのＤＭＦ溶液を合わせ、さらに１８時間撹拌した。溶液を濃縮し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）で磨砕すると、オフホワイトの固体（１００ｍｇ、４６％、ＨＰＬＣ純度９５％）が得られた。MS (ESI): 628.3 (100, M+H-Boc), 750.3 (35, M+Na).HRMS: C41H54N5O7 (M+H-Boc)の計算値: 628.3493; 実測値: 628.3497; キラル分析: 99.7% D-Leu.
【０３２８】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（４−｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（７３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（３．０ｍＬ）に溶解し、３０分間窒素下において周囲温度で撹拌した。溶液を真空濃縮し、残渣をＤＭＦ（１．０ｍＬ）に再溶解した。分離フラスコ中、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（７４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（５０μＬ、０．３０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で１５分間撹拌した。２つのＤＭＦ溶液を合わせ、さらに１８時間撹拌した。溶液を濃縮し、粗生成物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解した。酢酸エチル溶液を１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、黄色の油が生成した。MS (ESI): 1105.6 (50, M+H).
【０３２９】
上記の油を９０：８：２のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（１０ｍＬ）に再溶解し、室温において窒素下で３時間撹拌した。減圧を使用して揮発物を除去した。粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣにより、定組成で１０分間０．９％のアセトニトリルで流速８０ｍＬ／分、次いで０．１％のＴＦＡを含む０．９から２７．９％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分の方法を使用して精製した。約２９分で溶離した生成物画分を凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２６ｍｇ、３３％、ＨＰＬＣ純度８５％）として得られた。MS (ESI): 628.3 (100, M+H-Boc), 750.3 (35, M+Na).HRMS: C35H54FeN8O12 (M-2H-Fe)の計算値: 834.3205; 実測値: 834.3214; キラル分析: 95.9% D-Leu.
【０３３０】
実施例６３
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−アミノ−３−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］プロパノイルアミノ｝カルバモイル）メチル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１５８】
2009500410.tif 000165
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ（ＣＦ3）−ＯＨ（４６６ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４９２ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２０３ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（４３５μＬ、２．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で３０分間撹拌した。実施例４Ａの生成物（５１５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を反応に一度に加え、次いでＤＩＥＡ（４００μＬ、２．３ｍｍｏｌ）を加えてｐＨ１０の溶液を得た。溶液をさらに５時間撹拌し、撹拌しながら水（５００ｍＬ）に滴下した。得られた沈殿を濾過によって集め、乾燥すると、淡黄色の固体（２９３ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 617.3 (35, M+H-Boc), 739.2 (20, M+Na).
【０３３１】
上記の固体（１７９ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（５．０ｍＬ）に溶解し、３０分間窒素下、周囲温度で放置した。溶液を濃縮し、得られた油性残渣をシクロヘキサン（３×３０ｍＬ）で磨砕した。得られた固体を真空濾過によって集め、乾燥すると、流動性の黄色の粉末が得られた。この粉末をＤＭＦ（５．０ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（１８５ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１０４ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１７５μＬ、１．０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に一度に加えた。溶液を室温において窒素下で１時間撹拌し、揮発物を減圧除去した。得られた油性固体を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、１ＮのＮａＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、オレンジ色の油が得られた。MS (ESI): 1094.4 (100, M+H).
【０３３２】
上記の油を９０：８：２のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（１０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で６時間撹拌し、減圧濃縮した。粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む９から３６％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１６．８分で溶離した生成物画分を凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（４８ｍｇ、２５％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 770.4 (75, M+H), 385.8 (100, M+2H).HRMS: C33H40F3FeN7O11 (M-2H+Fe)の計算値: 823.2082; 実測値: 823.2088.
【０３３３】
実施例６４
２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（｛Ｎ−［（（３Ｒ）（３−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリル））カルボニルアミノ］カルバモイル｝メチル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１５９】
2009500410.tif 000166
パートＡ  −  ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ）−３−｛Ｎ−［２−（４−｛［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）アセチルアミノ］カルバモイル｝−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−２−カルボキシレートの調製
【化１６０】
2009500410.tif 000167
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｉｃ−ＯＨ（３３３ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４１７ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１６８ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３００μＬ、１．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で３０分間撹拌した。実施例４Ａの生成物（５１５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を反応に加え、次いでＤＩＥＡ（３００μＬ、１．７ｍｍｏｌ）を加えてｐＨ１０の溶液を得た。溶液をさらに２時間撹拌し、撹拌しながら水（５００ｍＬ）に滴下した。得られた沈殿を濾過によって集め、乾燥すると、標題化合物がオフホワイトの固体（５７１ｍｇ、８６％、ＨＰＬＣ純度９５％）として得られた。MS (ESI): 561.3 (70, M+H-Boc), 683.3 (30, M+Na).
【０３３４】
パートＢ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（｛Ｎ−［（（３Ｒ）（３−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリル））カルボニルアミノ］カルバモイル｝メチル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（３３０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（４．０ｍＬ）に溶解し、窒素下、室温において３０分間撹拌し、濃縮した。得られた固体をシクロヘキサン（３×３０ｍＬ）で磨砕し、得られた固体を濾過によって集め、乾燥すると、きれいな黄色の粉末が得られた。この固体をＤＭＦ（５．０ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３７０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２０８ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３５０μＬ、２．０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に加え、得られた溶液を室温において窒素下で１時間撹拌した。揮発物を減圧除去し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解した。酢酸エチル溶液を１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、０．１ＮのＮａＯＨ（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、黄色の油が得られた。MS (ESI): 1038.5 (100, M+H).
【０３３５】
上記の油を９０：８：２のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（１０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で６時間撹拌し、減圧濃縮した。粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣにより、定組成で１０分間０．９％のアセトニトリルで流速８０ｍＬ／分、次いで０．１％のＴＦＡを含む０．９から２７％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分の方法を使用して精製した。主要生成物画分を凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（３９ｍｇ、１１％、ＨＰＬＣ純度９０％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.31-7.15 (m, 8H), 4.45-4.23 (m, 5H), 3.86 (s, 2H), 3.68-3.60 (m, 8H), 3.58 (s, 2H), 3.37-3.12 (m, 10H); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ173.37, 173.07, 169.09, 168.53, 138.04, 134.52, 131.07, 130.72, 129.96, 129.38, 129.06, 128.62, 128.32, 127.72, 56.47, 56.22, 54.85, 53.07, 51.79, 45.22, 43.82, 40.83, 30.15.  MS (ESI): 714.3 (20, M+H), 357.9 (100, M+2H).  HRMS: C33H41FeN7O11 (M-2H+Fe)の計算値: 767.2208: 実測値: 767.2203.
【０３３６】
実施例６５
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−アミノ−３−（フェニルメチルチオ）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１６１】
2009500410.tif 000168
パートＡ  −  （２Ｓ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−（フェニルメチルチオ）プロパンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１６２】
2009500410.tif 000169
実施例２９Ｂの中間体生成物（４４５ｍｇ、１．１４８ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−ＯＨ（２５０ｍｇ、０．８０３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．３０ｍＬ、１．６９３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（３６５ｍｇ、０．９６３ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で１８時間撹拌した。溶液をＴＡＥＡ（０．４ｍＬ）で処理し、撹拌をさらに４５分間続けた。揮発物を真空除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２１．１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１４８ｍｇ、４０％、ＨＰＬＣ純度９０％）として得られた。MS (ESI): 917.5 (100, 2M+H), 459.3 (50, M+H), 359.2 (70, M+H-Boc); HRMS C23H31N4O4S計算値: 481.1880; 実測値: 481.1886.
【０３３７】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−アミノ−３−（フェニルメチルチオ）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（１７５ｍｇ、０．２８３ｍｍｏｌ）、パートＡの生成物（１３０ｍｇ、０．２８３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（９９μＬ、０．３３１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（１２９ｍｇ、０．３４０ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で４５分間撹拌した。反応を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１ＮのＮａＯＨ（３×１００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮した。得られた残渣を９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（１５ｍＬ）に溶解し、溶液を室温において窒素下で５時間撹拌した。溶液を減圧濃縮し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１７．７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１４０ｍｇ、６７％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.77 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.38-7.31 (m, 4H), 7.29-7.25 (m, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.91 (s, 2H), 3.84 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.81 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.64 (s, 8H), 3.23-3.13 (s, 8H), 3.03 (dd, abc系のHb, Jab = Jac = 6.0 Hz, Jbc = 14 Hz, 1H), 2.94 (dd, abc系のHc, Jab = Jac = 6.0 Hz, Jbc = 14 Hz, 1H), (見えないメチンはHODピークの下にあった); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ173.07, 168.90, 168.58, 168.42, 162.50 (q, J = 34.4 Hz), 144.09, 138.55, 131.16, 130.07, 129.84, 128.97, 128.85, 128.52, 117.66 (q, J = 291 Hz), 56.26, 55.97, 52.99, 52.25, 51.59, 43.70, 36.80, 32.82.  MS (ESI): 734.3 (100, M+H), 367.1 (80, M+2H); HRMS: C32H41FeN7O11S (M+Fe-2H)の計算値: 787.1929; 実測値: 787.1938.
【０３３８】
実施例６６
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛２−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−フェニルブタノイルアミノ）カルバモイル］エチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１６３】
2009500410.tif 000170
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｈｐｈｅ−ＯＨ（３３４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４１７ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１６８ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７００μＬ、４．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。溶液を実施例５７Ｂの生成物（５２９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、次いでＤＩＥＡ（６５０μＬ、３．７ｍｍｏｌ）で処理してｐＨ１０の溶液を得た。撹拌を１時間続け、揮発物を減圧除去した。得られた残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、０．１ＮのＮａＯＨ（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮すると、オフホワイトの固体（６２８ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 577.2 (100, M+H-Boc), 699.2 (10, M+Na).
【０３３９】
上記の固体を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（４．０ｍＬ）に溶解し、窒素下で室温において３０分間撹拌した。溶液を濃縮し、得られた残渣をシクロヘキサン（３×３０ｍＬ）で磨砕し、黄色の固体を形成した。この固体をＤＭＦ（５．０ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３７０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２０８ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３５０μＬ、２．０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に加え、撹拌をさらに３０分間続けた。溶液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解した。溶液を１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、０．１ＮのＮａＯＨ（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮すると、黄色の油が得られた。MS (ESI): 1054.6 (100, M+H).
【０３４０】
上記の油を９０：９：１のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で８時間、さらに２時間４０℃で撹拌した。揮発物を減圧除去し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣにより、定組成で１０分間０．９％のアセトニトリルで流速８０ｍＬ／分、次いで０．１％のＴＦＡを含む０．９から２７．９％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分の方法を使用して精製した。２９．５分で溶離した生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（４６ｍｇ、１２％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (9: 1 CD3CN: D2O): δ7.33-7.28 (m, 2H), 7.26-7.16 (m, 7H), 4.36 (s, 2H), 4.18 (s, 2H), 3.52 (s, 8H), 3.34 (t, J = 5.7 Hz, 4H), 3.09 (t, J = 5.7 Hz, 4H), 2.90 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.77-2.66 (m, 2H), 2.55 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.11 (q, J = 7.8 Hz, 2H); 13C NMR (9: 1 CD3CN: D2O): δ174.34, 173.77, 169.11, 166.08, 161.37 (q, J = 34.6 Hz), 141.46, 141.05, 137.04, 129.73, 129.47, 128.81, 127.48, 117.48 (q, J = 240.0 Hz), 55.97, 55.48, 54.42, 53.06, 50.48, 43.83, 35.98, 33.78, 31.46.  MS (ESI): 730.3 (60, M+H); 365.7 (100, M+2H).  HRMS: C34H45FeN7O11 (M-2H+Fe)の計算値: 783.2521; 実測値: 783.2517; キラル分析: 99.5% D-Hphe.
【０３４１】
実施例６７
２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（２−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−アミノ−３−（フェニルメチルチオ）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝エチル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１６４】
2009500410.tif 000171
パートＡ  −  （２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−Ｎ−［３−（４−｛［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）プロパノイルアミノ］−３−（フェニルメチルチオ）プロパンアミドの調製
【化１６５】
2009500410.tif 000172
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−ＯＨ（３７４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（４１７ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１６８ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７００μＬ、４．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。溶液を実施例５７Ｂの生成物（５２９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６００μＬ、３．４ｍｍｏｌ）で処理してｐＨ１０の溶液を得た。溶液をさらに１８時間撹拌し、減圧濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、０．１ＮのＮａＯＨ（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮すると、オフホワイトの固体（６０７ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 609.2 (100, M+H-Boc), 726.2 (5, M+NH4).
【０３４２】
パートＢ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（２−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−アミノ−３−（フェニルメチルチオ）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝エチル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
上記の固体を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（４．０ｍＬ）に溶解し、窒素下、室温において３０分間撹拌し、濃縮すると、黄色の油性固体が得られた。固体をシクロヘキサン（３×３０ｍＬ）で磨砕し、得られた固体を濾過によって集め、乾燥すると、きれいな黄色の粉末が得られた。この粉末をＤＭＦ（５．０ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３７０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２０８ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３５０μＬ、２．０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に加え、室温において窒素下で３０分間撹拌した。揮発物を真空除去し、得られた油性固体を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解した。酢酸エチル溶液を１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、０．１ＮのＮａＯＨ（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮すると、黄色の油が得られた。MS (ESI): 1086.5 (100, M+H).
【０３４３】
９０：９：１のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）中の上記の油の溶液を室温において窒素下で８時間、次いで２時間４０℃で撹拌した。溶液を減圧濃縮し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣにより、定組成で１０分間０．９％のアセトニトリルで流速８０ｍＬ／分、次いで０．１％のＴＦＡを含む０．９から２７．９％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配で流速８０ｍＬ／分の方法を使用して精製した。２９．５分で溶離した生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（４６ｍｇ、１２％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.34-7.30 (m, 4H), 7.29-7.23 (m, 1H), 7.20-7.15 (m, 4H), 4.31 (s, 2H), 4.09 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.76 (q, J = 11.6 Hz, 2H), 3.62 (s, 8H), 3.24 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 3.15 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 3.00-2.83 (m, 4H), 2.53 (t, J = 7.8 Hz, 2H); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ174.98, 174.08, 168.63, 168.18, 163.06 (q, J = 34.6 Hz), 141.34, 139.08, 137.39, 130.60, 130.38, 130.21, 129.35, 129.07, 118.19 (q, J = 290.9 Hz), 56.66, 56.40, 53.99, 52.74, 51.83, 44.34, 37.35, 36.39, 33.28, 31.89.  MS (ESI): 762.2 (100, M+H), 381.7 (90, M+2H).  HRMS: C34H45FeN7O11S (M-2H+Fe)の計算値: 815.2242; 実測値: 815.2243.
【０３４４】
実施例６８
２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（４−｛２−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］エチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１６６】
2009500410.tif 000173
パートＡ  −  Ｎ−（｛４−［２−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−フェニルプロパノイルアミノ｝カルバモイル）エチル］フェニル｝メチル）−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化１６７】
2009500410.tif 000174
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ（４７７ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）、実施例５７Ｂの生成物（６２２ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．８０ｍＬ、４．６０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（６８２ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）で処理し、周囲温度において窒素下で２時間撹拌した。溶液を減圧濃縮し、得られた粘稠な琥珀色の油を酢酸エチル（４００ｍＬ）に溶解し、水（１００ｍＬ）、１０％のクエン酸（１００ｍＬ）、０．５ＮのＮａＯＨ（２×１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮すると、オフホワイトの固体（１．４５ｇ）が得られた。MS (ESI): 685.2 (6, M+Na), 563.3 (100, M+H-Boc).
【０３４５】
上記の固体を１：４のピペリジン：ＤＭＦ（５．０ｍＬ）に溶解し、周囲温度において窒素下で３０分間撹拌した。溶液を減圧濃縮し、得られた残渣をシクロヘキサン（２×５０ｍＬ）で磨砕し、乾燥すると、黄褐色の固体（７９９ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 441.2 (100, M+H).
【０３４６】
上記の固体（７９０ｍｇ）およびＤＩＥＡ（０．２９１ｍＬ、１．７０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５．０ｍＬ）に溶解した。分離フラスコ中、実施例３Ａの生成物（６３５ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．８７３ｍＬ、５．１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（６４４ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ）で処理し、周囲温度において窒素下で２０分間撹拌した。２つのＤＭＦ溶液を合わせ、撹拌をさらに２時間続けた。溶液を濃縮乾固すると、油性黄褐色の固体が得られた。熱アセトニトリルから再結晶させると、オフホワイトの固体（４９３ｍｇ、４２％、ＨＰＬＣ純度８５％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ10.02 ( (s, 1H), 9.91 (s, 1H), 8.23 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.41 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.36-7.21 (m, 7H), 7.21-7.08 (m, 5H), 6.93 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.29 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.26-4.14 (m, 4H), 3.02-2.91 (m, 3H), 2.81 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.79-2.68 (m, 1H), 2.43 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.12 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.51 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.40 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.34-1.10 (m, 11H).  MS (ESI): 798.3 (7, M+Na), 776.3 (10, M+H), 676.3 (100, M+H-Boc).
【０３４７】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（４−｛２−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］エチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（４８４ｍｇ、０．６２４ｍｍｏｌ）を１：４のピペリジン：ＤＭＦ（１５ｍＬ）に溶解し、および周囲温度において窒素下で４５分間撹拌した。揮発物を減圧除去し、得られた残渣をシクロヘキサン（３×２５ｍＬ）で磨砕すると、オフホワイトの固体（３２４ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 554.2 (100, M+H).
【０３４８】
上記の固体（１１１ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３５μＬ、０．２０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３．０ｍＬ）に溶解した。分離フラスコ中、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（１４８ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７０μＬ、０．４０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（８３ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）で処理し、周囲温度において窒素下で１０分間撹拌した。２つのＤＭＦ溶液を合わせ、撹拌を３時間続けた。揮発物を減圧除去すると、粘稠な琥珀色の油が得られた。この油をＣＨＣｌ3（７５ｍＬ）に溶解し、０．５ＮのＮａＯＨ（２５ｍＬ）、水（２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮すると、粘稠な油が得られた。この油を９０：７：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（１０ｍＬ）に溶解し、５０℃、窒素下で２時間加熱した。溶液を減圧濃縮し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む４．５から３１．５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１４５ｍｇ、７７％、ＨＰＬＣ純度９９％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.35-7.27 (m, 3H), 7.23 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.20-7.13 (m. 4H), 4.23 (s, 2H), 4.18-4.12 (m, 1H), 3.92 (s, 2H), 3.65 (s, 8H), 3.26 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.20-3.07 (m, 4H), 2.84 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.54-2.47 (m, 2H), 2.18 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.53 (quin, J = 7.8 Hz, 2H), 1.45 (quin, J = 7.5 Hz, 2H), 1.25 (quin, J = 7.5 Hz, 2H); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ176.47, 174.54, 173.68, 168.78, 167.15, 162.29 (q, J = 35.0 Hz), 140.48, 137.56, 134.65, 130.59, 130.08, 129.54, 128.90, 128.56, 117.51 (q, J = 290 Hz), 55.96, 55.70, 54.22, 53.50, 51.09, 43.45, 40.26, 37.64, 36.66, 35.88, 31.34, 29.11, 26.84, 26.11.  MS (ESI): 829.5 (50, M+H), 415.4 (100, M+2H); HRMS: C39H54FeN8O12 (M+Fe-2H)の計算値: 882.3205; 実測値: 882.3199.
【０３４９】
実施例６９
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−ナフチルプロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１６８】
2009500410.tif 000175
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−ナフチルプロパンアミド、２，２，２−トリフルオロ酢酸の調製
【化１６９】
2009500410.tif 000176
実施例２９Ｂの中間体生成物（４３９ｍｇ、１．１３４ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｄ−１−Ｎａｌ−ＯＨ（２５０ｍｇ、０．７９３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．２７６ｍＬ、１．５８５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（３６１ｍｇ、０．９５１ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で１８時間撹拌した。溶液をＴＡＥＡ（０．５ｍＬ）で処理し、撹拌をさらに４５分間続けた。揮発物を真空除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１８から４５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２２．４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１９３ｍｇ、５３％、ＨＰＬＣ純度９０％）として得られた。MS (ESI): 925.5 (95, 2M+H), 463.4 (100, M+H); HRMS C26H31N4O4 (M+H)の計算値: 463.2340; 実測値: 463.2337.
【０３５０】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−ナフチルプロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（１９１ｍｇ、０．３０９ｍｍｏｌ）、パートＡの生成物（１４３ｍｇ、０．３０９ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１０７μＬ、０．６０８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（１４１ｍｇ、０．５４７ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で４５分間撹拌した。反応を酢酸エチル（８０ｍＬ）で希釈し、１ＮのＮａＯＨ（２×８０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（８０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮した。得られた残渣を９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（１０ｍＬ）に溶解し、溶液を室温において窒素下で５時間撹拌した。溶液を減圧濃縮し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む６．３から２４．３％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１８．５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１８０ｍｇ、７９％、ＨＰＬＣ純度９３％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ8.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.32 (d, AA'BB'系のAA'部, J = 8.4 Hzm 2H), 8.25-8.20 (m, 1H), 8.19-8.15 (m, 1H), 8.11-8.04 (m, 1H), 7.99, (d, AA'BB'系のBB'部, J = 8.4 Hz, 2H), 5.02 (s, 2H), 4.97 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 4.48 (s, 2H), 4.33-4.21 (m, 10H), 3.80 (s, 8H); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ172.86, 169.08, 168.99, 168.89, 162.70 (q, J = 34.6 Hz), 144.09, 134.96, 132.49, 131.10, 130.70, 130.05, 129.82, 129.77, 128.96, 128.82, 127.98, 127.31, 126.88, 124.23, 117.52 (q, J = 290 Hz), 56.38, 56.08, 53.49, 52.83, 51.78, 43.70, 34.78.  MS (ESI): 738.3 (50, M+H), 369.8 (100, M+2H); HRMS: C35H41FeN7O11 (M+Fe-2H)の計算値: 791.2208; 実測値: 791.2210.
【０３５１】
実施例７０
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛２−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−インドール−３−イルプロパノイルアミノ）カルバモイル］エチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１７０】
2009500410.tif 000177
パートＡ  −  ｔｅｒｔ−ブチル２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［２−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−インドール−３−イルプロパノイルアミノ｝カルバモイル）エチル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ）エチル］｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ｝アセテートの調製
【化１７１】
2009500410.tif 000178
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ（１２０ｍｇ、０．３９４ｍｍｏｌ）、実施例５７Ｂの生成物（１６４ｍｇ、０．３９４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．１３７ｍＬ、０．７８９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（１７９ｍｇ、０．４７３ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で２０時間撹拌した。反応溶液を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸（３×１００ｍＬ）、１ＮのＮａＯＨ（３×１００）および飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧濃縮した。得られた残渣を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（５０ｍＬ）に溶解し、溶液を室温において窒素下で４５分間撹拌した。揮発物を真空除去し、得られた残渣をシクロヘキサン（３×２５ｍＬ）で磨砕すると、無色の固体（１５８ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 480.4 (100, M+H).
【０３５２】
上記の固体（１５８ｍｇ、０．３２９ｍｍｏｌ）、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（２４４ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１１５μＬ、０．６５９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（１５０ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌ）で処理し、溶液を室温において窒素下で１８時間撹拌した。反応を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１ＮのＮａＯＨ（３×１００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、減圧濃縮した。揮発物を減圧除去し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む４５から７２％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２１．９分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（１４０ｍｇ、３９％、ＨＰＬＣ純度９２％）として得られた。MS (ESI): 1079.7 (100, M+H), 490.5 (30, M-Boc+2H); HRMS C56H87N8O13 (M+H)の計算値: 1079.6387; 実測値: 1079.6372.
【０３５３】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛２−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−インドール−３−イルプロパノイルアミノ）カルバモイル］エチル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
８０：１０：１０のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（２０ｍＬ）中のパートＡの生成物（１１０ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）の溶液を室温において窒素下で４時間撹拌した。溶媒を真空除去した後、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２５．８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（４４ｍｇ、５７％、ＨＰＬＣ純度９４％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.57 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.21-7.12 (m, 5H), 7.07 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 4.31 (s, 2H), メチンシグナルはHODピークの下にあった, 3.85 (s, 2H), 3.63 (s, 8H), 3.35 (dd, AXY系のX部, Jax = 7.5 Hz, Jxy = 14 Hz, 1H), 3.26 (dd, AXY系のY部, Jay = 7.5 Hz, Jxy = 14 Hz, 1H), 3.22-3.12 (m, 8H), 2.84 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.50 (t, J = 7.5 Hz, 2H); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ174.56, 173.00, 169.27, 168.36, 162.59 (q, J = 34.5 Hz), 140.74, 137.39, 136.91, 129.65, 128.80, 127.79, 126.30, 122.99, 120.45, 119.22, 117.67 (q, J = 291 Hz), 112.86, 107.13, 56.35, 56.07, 53.44, 52.99, 51.66, 43.74, 35.82, 31.34, 27.81.  MS (ESI): 755.4 (70, M+H), 378.3 (100, M+2H); HRMS: C35H44FeN8O11 (M+Fe-2H)の計算値: 808.2473; 実測値: 808.2479
【０３５４】
実施例７１
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−５−フェニルペンタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１７２】
2009500410.tif 000179
パートＡ  −  ｔｅｒｔ−ブチル２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−５−フェニルペンタノイルアミノ｝カルバモイル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝エチル）｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ］アセテートの調製
【化１７３】
2009500410.tif 000180
（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−５−フェニルペンタン酸（６６８ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）のＤＣＨＡ塩を酢酸エチル（５０ｍＬ）に懸濁し、氷冷２ＭのＨ2ＳＯ4（１．２当量）および氷冷水（２０ｍＬ）で処理し、固体が溶解するまで振とうした。水層を追加の酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた酢酸エチル層を水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、４０℃以下の温度で真空濃縮して油性無色の固体を得た。この固体、ＨＢＴＵ（４９２ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１９５ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．４ｍＬ、５．９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌し、実施例５７Ｂの生成物（６４４ｍｇ）で一度に処理した。撹拌をさらに２０時間続け、揮発物を減圧除去した。得られた残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）に溶解し、１０％のクエン酸（２×１００ｍＬ）、０．３ＮのＮａＯＨ（２×１００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮すると、黄色の油（２４０ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 685.2 (10, M+Na)563.3 (100, M+H-Boc).
【０３５５】
上記の固体を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（４．０ｍＬ）に溶解し、窒素下で室温において４５分間撹拌し、濃縮すると、黄色の油性固体が得られた。油性固体をシクロヘキサン（３×３０ｍＬ）で磨砕し、得られた固体を濾過によって集め、乾燥すると、きれいな黄色の粉末（１６０ｍｇ）が得られた。上記の固体（１２５ｍｇ、０．２８４ｍｍｏｌ）、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（１７５ｍｇ、０．２８４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（９９μＬ、０．５６７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（１２９ｍｇ、０．３４０ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で１８時間撹拌した。反応溶液を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１ＮのＮａＯＨ（３×１００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、減圧濃縮した。溶液を濃縮し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む４９．５から７６．５％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２３．０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（６７ｍｇ、２３％、ＨＰＬＣ純度９０％）として得られた。MS (ESI): 1040.4 (100, M+H).
【０３５６】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−５−フェニルペンタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（６７ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を８０：１０：１０のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（２０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で４時間撹拌した。揮発物を真空除去し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２３．３分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２６ｍｇ、５６％、ＨＰＬＣ純度９７％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ8.26 (d AA'BB'系のAA'部, J = 8.4 Hz, 2H), 7.91 (d AA'BB'系のBB'部, J = 8.4 Hz, 2H), 7.79 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.73 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.69 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 4.92 (s, 2H), 4.51 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 4.16 (s, 8H), 3.70 (s, 8H), 3.19-3.11 (m, 2H), 2.39 (q, J = 6.6 Hz, 2H); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ172.97, 169.86, 168.97, 168.75, 162.57 (q, J = 34.0 Hz), 144.05, 142.67, 131.24, 129.56, 129.50, 128.94, 128.86, 127.10, 117.67 (q, J = 291 Hz), 56.34, 56.04, 53.07, 52.92, 51.71, 43.72, 35.62, 31.48, 26.94.  MS (ESI): 716.4 (65, M+H), 358.8 (100, M+2H); HRMS: C33H43FeN7O11 (M+Fe-2H)の計算値: 769.2364; 実測値: 769.2368.
【０３５７】
実施例７２
［Ｈ−Ｄ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−Ａｐｐｈ］2ＥＤＴＡ［アミノプロポキシエトキシエトキシプロピルアミン−ＤＴＰＡ］2、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１７４】
2009500410.tif 000181
パートＡ  −  ２−｛｛［Ｎ−（｛４−［２−（Ｎ−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−（フェニルメチルチオ）プロパノイルアミノ｝カルバモイル）エチル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝［２−（｛［Ｎ−（｛４−［２−（Ｎ−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−（フェニルメチルチオ）プロパノイルアミノ｝カルバモイル）エチル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝（カルボキシメチル）アミノ）エチル］アミノ｝酢酸の調製
【化１７５】
2009500410.tif 000182
実施例６７Ａの生成物（１６０ｍｇ、０．２６３ｍｍｏｌ）を１：４のピペリジン：ＤＭＦ（２５ｍＬ）に溶解し、周囲温度において窒素下で３０分間撹拌した。揮発物を真空除去し、油性残渣をエーテル（２×２５ｍＬ）で磨砕してわずかに油性で黄色の固体（１５１ｍｇ）を得た。この固体およびＤＩＥＡ（４６μＬ、０．２６３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液をＥＤＴＡ二無水物（３５ｍｇ、０．１３６ｍｍｏｌ）で処理し、周囲温度において窒素下で４時間撹拌した。溶液を濃縮し、得られた残渣をエーテル（２×２．０ｍＬ）で磨砕してオフホワイトの固体（１２９ｍｇ）を得た。この固体を６０：４０のアセトニトリル：Ｈ2Ｏ（６．０ｍＬ）から再結晶させると、標題化合物が無色の固体（６４ｍｇ、３９．６％、ＨＰＬＣ純度９４％）として得られた。MS (ESI): 1229.4 (100, M+H), 515.3 (38, M+2H).
【０３５８】
パートＢ  −  ｔｅｒｔ−ブチル２−｛［２−（｛［Ｎ−（３−｛２−［２−（３−アミノプロポキシ）エトキシ］エトキシ｝プロピル）カルバモイル］メチル｝［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ）エチル］｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ｝アセテートの調製
【化１７６】
2009500410.tif 000183
２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（４９４ｍｇ、０．８００ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．４２ｍＬ、２．４０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を周囲温度において窒素下で１５分間撹拌し、Ｎ−（３−｛２−［２−（３−アミノプロポキシ）エトキシ］エトキシ｝プロピル）（フェニルメトキシ）カルボキサミド（２８３ｍｇ、０．８００ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．０ｍＬ）溶液で処理した。得られた溶液を８時間撹拌し、減圧濃縮して、粘稠な琥珀色の油を得た。この油をＣＨＣｌ3（７５ｍＬ）に溶解し、１０％のクエン酸（３５ｍＬ）、０．５ＮのＮａＯＨ（２５ｍＬ）および水（２５ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮すると、粘稠な琥珀色の油（７７６ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 954.5 (100, M+H).
【０３５９】
上記の油を無水エタノール（７５ｍＬ）に溶解し、１０％のＰｄ／Ｃ（２００ｍｇ）、Ｐａｒｒ装置で圧力６０ｐｓｉにおいて水素化した。６時間後、反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、濾液を濃縮すると、標題化合物が琥珀色の油（６８０ｍｇ）として得られた。MS (ESI): 820.5 (100, M+H); HRMS: C40H78N5O12 (M+H)の計算値: 820.5642; 実測値: 820.5636.
【０３６０】
パートＣ  −  ［Ｈ−Ｄ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−Ａｐｐｈ］2ＥＤＴＡ［アミノプロポキシエトキシエトキシプロピルアミン−ＤＴＰＡ］2、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（６３ｍｇ、０．０５１３ｍｍｏｌ）、パートＢの生成物（１３１ｍｇ、０．１６０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６６μＬ、０．３７２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１２ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（５７ｍｇ、０．１５０ｍｍｏｌ）で処理し、周囲温度において窒素下で６時間撹拌した。溶液を減圧濃縮し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む５４から８１％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１９から２６分の広幅ピークとして溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、無色の固体（４７ｍｇ）が得られた。
【０３６１】
上記の固体を９５：３：２のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（４．０ｍＬ）に溶解し、５０℃において窒素下で１時間加熱した。溶液を減圧濃縮し、得られた粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む９から２７％のアセトニトリルの０．６％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２２．８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２４ｍｇ、１９％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 1092.9 (35, M+2H), 729.0 (100, M+3H), 546.8 (10, M+4H); HRMS C98H147Fe2N20O32S2 (M+2Fe-3H)の計算値: 763.9538; 実測値: 763.9545.
【０３６２】
実施例７３
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（４Ｅ）（２Ｒ）−２−アミノ−５−フェニルペント−４−エノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１７７】
2009500410.tif 000184
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｓｔｙａ−ＯＨのＤＣＨＡ塩（４０６ｍｇ、０．８５９ｍｍｏｌ）を分離漏斗中の酢酸エチル（２０ｍＬ）に懸濁し、氷冷２ＭのＨ2ＳＯ4（１．０ｍＬ）および氷冷水（１０ｍＬ）で処理し、固体が溶解するまで振とうした。水層を追加の酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた酢酸エチル層を水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、４０℃以下の温度で真空濃縮すると、油性無色の固体（２３３ｍｇ）が得られた。上記の固体、実施例２９Ｂの中間体生成物（４４３ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．２７９ｍＬ、１．６０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（３６４ｍｇ、０．９６０ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で１時間撹拌した。反応溶液を酢酸エチル（７５ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸（３×５０ｍＬ）、１ＮのＮａＯＨ（３×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮した。得られた残渣を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（５０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で４５分間撹拌した。揮発物を真空除去し、得られた残渣をシクロヘキサン（３×５０ｍＬ）で磨砕すると、無色の固体（２５１ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 877.5 (100, 2M+H), 439.4 (90, M+H).
【０３６３】
上記の固体（２００ｍｇ、０．４５６ｍｍｏｌ）、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３３８ｍｇ、０．５４７ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１５９μＬ、０．９１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２０８ｍｇ、０．５４７ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で１時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸（３×５０ｍＬ）、０．５ＮのＮａＯＨ（３×４０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、減圧濃縮した。得られた残渣を９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で５時間撹拌した。揮発物を減圧除去し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２１．１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（８６ｍｇ、２６％、ＨＰＬＣ純度９６％）として得られた。1H NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ7.76 (d, AA'BB'系のAA'部, J = 8.4 Hz, 2H), 7.42 (d, AA'BB'系のAA'部, J = 7.8 Hz, 2H), 7.40 (d, AA'BB'系のBB'部, J = 8.4 Hz, 2H), 7.35-7.27 (m, 2H), 7.25 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 6.20 (dとtが重複, AMX系のM部, Jam = 15.6 Hz, Jmx = 7.8 Hz, 1H), 4.41 (s, 2H), 見えないメチンはHODピークの下にあった, 3.80 (s, 2H), 3.67 (s, 8H), 3.24-3.10 (m, 8H), 2.85-2.76 (m, 2H); 13C NMR (1: 1 CD3CN: D2O): δ172.50, 169.39, 169.28, 169.03, 162.65 (q, J = 35.0 Hz), 144.13, 137.62, 136.66, 131.25, 129.80, 129.04, 128.60, 128.88, 127.54, 122.33, 117.75 (q, J = 291 Hz), 56.57, 56.26, 52.83, 52.53, 52.05, 43.68, 35.35.  MS (ESI): 714.3 (90, M+H), 357.8 (100, M+2H);  HRMS: C33H41FeN7O11 (M+Fe-2H)の計算値: 767.2208; 実測値: 767.2206.
【０３６４】
実施例７４
Ｎ−（（２Ｒ）−２−｛（２Ｓ）−２−［（２Ｓ）−２−（２−｛（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−（４−アミノブチル）−４−メチルペンタノイルアミノ｝アセチルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）−６−（アセチルアミノ）ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１７８】
2009500410.tif 000185
パートＡ  −  Ａｃ−ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）−ＬＬ−ＯＨの調製
実施例１４、パートＢおよびＣの手順を使用して標題化合物を調製した。Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＨＭＰＢ  ＢＨＡ樹脂（０．２６０ｇ、置換レベル＝０．５４ｍｍｏｌ／ｇ）から標題化合物を無色の固体（６３．６ｍｇ、６３％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得た。MS (ESI): 725.4 (70, M+H), 625.3 (100, M+H-Boc); HRMS: C36H65N6O9 (M+H)の計算値: 725.4808; 実測値: 725.4809.
【０３６５】
パートＢ  −  Ｎ−［（２Ｓ）−２−（（２Ｓ）−２−｛（２Ｓ）−２−［２−（（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ブチル｝−４−メチルペンタノイルアミノ）アセチル−アミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＯＢｔ（２．１ｍｇ、１３．７μｍｏｌ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１５．４μＬ、８８．４μｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（５．１ｍｇ、１３．４μｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（１．００ｍＬ）中の実施例３４Ｄの生成物（１０．０ｍｇ、１３．８μｍｏｌ）の溶液をパート３６Ａの生成物（１１．０ｍｇ、１８．４μｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１５．４μＬ、８８．４μｍｏｌ）のＤＭＦ（１．００ｍＬ）溶液に移した。１時間後２２℃において、溶液を真空濃縮し、ピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）で処理し、０．５時間撹拌した。全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む３０〜６０％のアセトニトリルの１．５％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（８．８ｍｇ、８．２μｍｏｌ、５９％）が得られた。
【０３６６】
実施例７５
Ｎ−［（Ｎ−｛１−［Ｎ−（１−｛Ｎ−［（１Ｒ）−１−（Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［Ｎ−（２−｛４−［（アセチルアミノ）メチル］フェニル｝アセチルアミノ）カルバモイル］−３−メチルブチル｝カルバモイル）−３−メチルブチル］カルバモイル｝（１Ｓ）−３−メチルブチル）カルバモイル］（１Ｓ）−３−フェニルプロピル｝カルバモイル）メチル］（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−（４−アミノブチル）−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１７９】
2009500410.tif 000186
パートＡ  −  Ｆｍｏｃ−ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）〜Ｈｐｈｅ−Ｌ−ＨＭＰＢ−ＢＨＡ樹脂の調製
Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＨＭＰＢ  ＢＨＡ樹脂（４．３７ｇ、置換レベル＝０．５１ｍｍｏｌ／ｇ）を２００ｍＬのＡｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ反応器に入れた。樹脂をＤＭＦ（２×５０ｍＬ）で洗浄することによって膨潤させ、以下の工程を実施した：（工程１）Ｆｍｏｃ基をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、５０ｍＬ）に０．５時間曝露して除去した。（工程２）樹脂をＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノール、ＣＨ2Ｃｌ2およびＤＭＦ（各３×５０ｍＬ）で洗浄した。（工程３）Ｆｍｏｃ−Ｈｐｈｅ−ＯＨ（２．６８ｇ、６．６９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．０２ｇ、６．６９ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２．５４ｇ、６．６９ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３．８８ｍＬ、２２．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０．０ｍＬ）溶液を樹脂に加え、反応器を４時間振とうした。（工程４）樹脂をＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノール、ＣＨ2Ｃｌ2およびＤＭＦ（各３×５０ｍＬ）で洗浄した。（工程５）フルベン−ピペリジンアッセイで評価して、カップリング反応が９５％超完了していることが見い出された。各々Ｆｍｏｃ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨで工程１〜５を繰り返し、配列ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）〜Ｈｐｈｅ−Ｌｅｕを完成した。
【０３６７】
パートＢ  −  Ａｃ−ＰＬ−ＮＬｙｓ（Ｂｏｃ）〜Ｈｐｈｅ−Ｌ−ＯＨの調製
パートＡで調製したペプチド−樹脂をピペリジンのＤＭＦ（１：４ｖ／ｖ、２０ｍＬ）溶液で０．５時間処理し、次いでＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノール、ＣＨ2Ｃｌ2およびＤＭＦ（各３×２０ｍＬ）で洗浄した。樹脂をＡｃ2Ｏ（６３２μＬ、６．６９ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１．５５ｍＬ、８．９１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液で処理し、２時間振とうし、次いでＤＭＦ、ＣＨ2Ｃｌ2、メタノールおよびＣＨ2Ｃｌ2（各３×２０ｍＬ）で洗浄した。樹脂を６０ｍＬの中多孔性の焼結ガラス漏斗に移し、ＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）で洗浄し、次いでＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2（１：９９ｖ／ｖ、９×２０ｍＬ）溶液で処理した。懸濁液を加圧することによってピリジンのメタノール溶液（１：９ｖ／ｖ、１０．０ｍＬ）に直接濾過した。濾液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（４１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む４０〜７０％のアセトニトリルの１．２％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（５５３ｍｇ、０．７１５ｍｍｏｌ；３２．１％）が得られた。MS (ESI): 795.6 (11.1, M+Na), 773.6 (41.6, M+H), 673.5 (100, M-Boc).HRMS: C40H65N6O9計算値: 773.4808; 実測値: 773.4815.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｌ−ロイシン９９．５％。
【０３６８】
パートＣ  −  Ｎ−（｛Ｎ−［１−（Ｎ−｛１−［Ｎ−（１−｛Ｎ−［（１Ｒ）−１−（Ｎ−｛２−［４−（アミノメチル）フェニル］アセチルアミノ｝カルバモイル）−３−メチルブチル］カルバモイル｝（１Ｓ）−３−メチルブチル）カルバモイル］（１Ｓ）−３−メチルブチル｝カルバモイル）（１Ｓ）−３−フェニルプロピル］カルバモイル｝−メチル）（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ブチル｝−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１８０】
2009500410.tif 000187
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＤＬｅｕ−ＯＨ（５３．４ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ）（Ａｂｄｅｌ−Ｍａｇｉｄ、Ａ．Ｆ．；Ｅｇｇｍａｎｎ、Ｕ．；Ｍａｒｙａｎｏｆｆ、Ｃ．Ａ．；Ｔｈａｌｅｒ、Ａ；Ｖｉｌｌａｎｉ、Ｆ．Ｊ．Ｐｒｏｃｅｓｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＫＬ−４  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ。米国特許出願第２，１４７，３０２号、２００２）をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）で処理し、０．５時間撹拌し、次いで真空濃縮した。残渣をＤＭＦ（２．００ｍＬ）に再溶解し、次いでｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（５４．０μＬ、０．３１０ｍｍｏｌ）で処理し、ＨＯＢｔ（２３．８ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（５８．８ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１０８μＬ、０．６２０ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（５．００ｍＬ）中のパートＢの生成物（１２０ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に移した。２時間後２０℃で溶液を濃縮し、粗製油をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む４０〜７５％のアセトニトリルの１．２％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（５０．０ｍｇ、５０．０μｍｏｌ；３２．３％）が得られた。後から溶離したジアステレオマーも合わせた収量９４．０ｍｇ（９４．１μＬ、６０．７％）で単離した。所望の物質の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｌ−ロイシン７６．８％。
【０３６９】
セプタペプチド（２２．０ｍｇ、２２．０μｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（２．７５ｍｇ、２０．０μｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２．００ｍＬ）溶液をコリジン（１６．９μＬ、１２８μｍｏｌ）およびＤＩＣ（３．１μＬ、２０．０μｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。パート４Ａの生成物（９．４ｍｇ、１８μｍｏｌ）を一度に加えた。追加のＤＭＦ（２×０．５０ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。２２時間後２２℃において、ＤＩＣの第２の部分（３．１μＬ、２０．０μｍｏｌ）およびパート４Ａ（９．４ｍｇ、１８μｍｏｌ）を加え、撹拌をさらに２２時間続けた。ペプチドが完全に消費したら、次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む２０〜６０％のアセトニトリルの２．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（７．０ｍｇ、５．５μｍｏｌ；２４．９％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ (3: 2 回転異性体の混合物) 10.08 (1H, s), 9.95 (0.6H, s), 9.94 (0.4H, s), 8.34-8.29 (1H, m), 8.18 (0.6H, d, J = 8.0 Hz), 8.08 (3H, br s), 8.26-7.98 (1.6H, m), 7.95 (0.6H, d, J = 9.5 Hz), 7.91-7.87 (2H, m), 7.84 (0.4H, d, J = 7.8 Hz), 7.37 (2H, AB, JAB = 8.0 Hz), 7.33 (2H, AB, JAB = 8.1 Hz), 7.26 (2H, dd, J = 7.6, 7.5 Hz), 7.19-7.15 (3H, m), 6.78 (0.6H, br s), 6.72 (0.4H, br s), 6.49 (1H, br s), 4.78 (0.6H, br s), 4.69 (0.6H, br s) 4.58 (0.6H, br s), 4.53 (0.6H, br s), 4.46-4.42 (1.4H, m), 4.37-4.27 (5.6H, m), 4.13 (1H, d, J = 15.2 Hz), 4.02-3.99 (2.6H, m), 3.90 (0.4H, d, J = 17.2 Hz), 3.86 (0.6H, d, J = 17.2 Hz), 3.75 (0.4H, d, J = 16.1 Hz), 3.71 (0.6H, d, J = 15.9 Hz), 3.52-3.36 (4H, m), 3.47 (2H, s), 2.92 (1H, br s), 2.87 (1H, dd, J = 6.5, 6.2 Hz), 2.58-2.53 (2H, m), 2.24-2.11 (1H, m), 1.98-1.73 (11H, m), 1.57 (7H, br s), 1.48-1.36 (11H, m), 1.36 (9H, s), 1.30-1.24 (1H, m), 0.89-0.71 (24 H, m).  MS (ESI): 1160.8 (100, M+H), 531.0 (59.4).  HRMS: C61H98N11O11の計算値: 1160.7442; 実測値: 1160.7458.所望の物質の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｌ−ロイシン７７．１％。
【０３７０】
実施例７６
Ｎ−｛［Ｎ−（１−｛Ｎ−［１−（Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛Ｎ−［（１−アセチル（４−ピペリジル））カルボニルアミノ］カルバモイル｝−３−メチルブチル）カルバモイル］−３−メチルブチル｝カルバモイル）（１Ｓ）−３−メチルブチル］カルバモイル｝（１Ｓ）−３−フェニルプロピル）カルバモイル］メチル｝（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−（４−アミノブチル）−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１８１】
2009500410.tif 000188
実施例７５Ｃのセプタペプチド（２２．０ｍｇ、２２．０μｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（２．７５ｍｇ、２０．０μｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２．００ｍＬ）溶液をコリジン（１６．９μＬ、１２８μｍｏｌ）およびＤＩＣ（３．１μＬ、２０．０μｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。パート３０Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（８．８ｍｇ、１８．４μｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加え、追加のＤＭＦ（２×０．５０ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。２．５時間後２２℃において、ＤＩＣの第２の部分（３．１μＬ、２０．０μｍｏｌ）およびそのヒドラジド（８．８ｍｇ、１８．４μｍｏｌ）を加え、撹拌をさらに２４時間続け、２６時間の時点で第３の添加を実施した。さらに１８時間後、次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む２０〜６０％のアセトニトリルの２．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１５．５ｍｇ、１２．５μｍｏｌ；５６．８％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ (2: 1 回転異性体の混合物) 9.90 (0.6H, s), 9.88 (1.4H, s), 8.50 (1H, br s), 8.34-8.29 (1H, m), 8.25-8.17 (1.5H, m), 8.03 (1.2H, m), 7.96 (0.6H, dd, J = 8.5, 8.2 Hz), 7.92-7.83 (2H, m), 7.26 (2H, dd, J = 7.6, 7.4 Hz), 7.18-7.15 (3H, m), 6.78 (0.5H, br s), 6.72 (0.5H, br s), 6.49 (0.5H, br s), 4.77 (0.4H, br s), 4.68 (0.4H, br s), 4.59 (0.4H, br s), 4.52 (0.4H, br s), 4.47-4.41 (1H, m), 4.37-4.27 (4.6H, m), 4.13 (0.7H, d, J = 16.0 Hz), 3.90 (0.4H, d, J = 17.3 Hz), 3.86 (0.4H, d, J = 17.4 Hz), 3.75 (0.4H, d, J = 15.8 Hz), 3.70 (0.4H, d, J = 15.9 Hz), 3.51-3.28 (20H, m), 2.94-2.86 (4H, m), 2.59-2.53 (1.7H, m), 2.20-2.10 (0.7H, m), 1.97-1.70 (12.6H, m), 1.61-1.53 (5.7H, m), 1.50-1.36 (9H, s), 1.36 (9H, s), 1.30-1.24 (1.4H, m), 0.89-0.71 (24H, m).  MS (ESI): 1124.8 (100, M+H), 513.0 (70.6).  HRMS: C58H98N11O11の計算値: 1124.7442; 実測値: 1124.7440.所望の物質の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｌ−ロイシン７４．３％。
【０３７１】
実施例７７
Ｎ−［（２Ｒ）−３−（４−｛（２Ｓ）−２−［（２Ｓ）−２−（２−｛（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−（４−アミノブチル）−４−メチルペンタノイルアミノ｝アセチルアミノ）−４−フェニルブタノイルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝フェニル）−２−アミノプロパノイルアミノ］−６−（アセチルアミノ）ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１８２】
2009500410.tif 000189
パートＡ  −  （２Ｒ）−３−［４−（（２Ｓ）−２−｛（２Ｓ）−２−［２−（（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ブチル｝−４−メチルペンタノイルアミノ）アセチルアミノ］−４−フェニルブタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）フェニル］−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］プロパン酸の調製
【化１８３】
2009500410.tif 000190
実施例７５Ｂの生成物（７６．３ｍｇ、９８．７μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１５．９ｍｇ、０．１０４ｍｍｏｌ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（６９．０μＬ、０．３９６ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（３９．４ｍｇ、０．１０４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３．００ｍＬ）溶液をＢｏｃ−ＤＰｈｅ（４−ＮＨ2）−ＯＨ・ＴＦＡ（３５．０ｍｇ、８８．８μｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１７．０μＬ、９７．６μｍｏｌ）のＤＭＦ（１．００ｍＬ）溶液で処理した。６時間２２℃で撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈおよび１０％のＨ2Ｏを含む４５〜７０％のアセトニトリルの０．８３％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（４．０ｍｇ、３．９μｍｏｌ；３．９％）が得られた。後から溶離したジアステレオマーも合わせた収量８．０ｍｇ（７．７μＬ、７．８％）で単離した。MS (ESI): 1057.7 (26.9, M+Na), 1035.6 (33.7, M+H), 935.7 (100, M-Boc).精製した物質を次の工程で直接使用した。
【０３７２】
パートＢ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−３−［４−（（２Ｓ）−２−｛（２Ｓ）−２−［２−（（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ブチル｝−４−メチルペンタノイルアミノ）−アセチルアミノ］−４−フェニルブタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）フェニル］−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］プロパノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（１１．０ｍｇ、１０．６μｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１．３ｍｇ、９．５μｍｏｌ）のＤＭＦ（１．００ｍＬ）溶液をコリジン（８．２μＬ、６．２μｍｏｌ）およびＤＩＣ（１．５μＬ、９．７μｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（４．３ｍｇ、８．９μｍｏｌ）を一度に加えた。追加のＤＭＦ（２×０．５０ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。６時間後２２℃において、追加のＤＩＣ（１．４μＬ、８．９μｍｏｌ）およびそのヒドラジド（４．３ｍｇ、８．９μｍｏｌ）を加えた。さらに１６時間後２２℃において、次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、２．５０ｍＬ）で処理した。溶液を０．５時間維持し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む２０〜６０％のアセトニトリルの２．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（７．０ｍｇ、５．５μｍｏｌ；５１．６％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ (1: 1 回転異性体の混合物) 9.93 (1H, s), 9.81 (1H, s), 8.33 (0.4H, dd, J = 8.3, 8.1 Hz), 8.28 (0.4H, dd, J = 8.0, 5.1 Hz), 8.18 (0.4H, d, J = 7.5 Hz), 8.03-7.96 (1.5H, m), 7.61 (3H, br s), 7.49 (2H, br d, J = 7.9 Hz), 7.27-7.24 (2H, m), 7.20 (2H, br d, J = 8.0 Hz), 7.18-7.15 (3H, m), 6.84 (0.6H, d, J = 8.6 Hz), 6.77 (0.4H, br s), 6.71 (0.4H, br s), 6.48 (1.4H, s), 4.79-4.75 (0.2H, m), 4.71-4.67 (0.3H, m), 4.62-4.58 (0.2H, br s), 4.56-4.52 (0.3H, br s), 4.47-4.42 (2H, m), 4.34 (0.5H, dt, J = 8.4, 2.9 Hz), 4.21-4.17 (0.3H, m), 4.15 (0.3H, d, J = 16.0 Hz), 4.10 (0.4H, d, J = 15.8 Hz), 3.92 (0.2H, d, J = 17.7 Hz), 3.88 (0.3 H, d, J = 17.6 Hz), 3.77 (0.5H, d, J = 15.5 Hz), 3.51-3.33 (3H, m), 3.09-2.98 (0.6H, m), 2.93-2.86 (3H, m), 2.80-2.75 (2H, m), 2.70 (1H, dd, J = 12.4, 11.9 Hz), 2.59-2.55 (2H, m), 2.14 (2H, t, J = 7.3 Hz), 1.98-1.89 (3.6H, m), 1.87-1.70 (5.6H, m), 1.67-1.46 (10.6H, m), 1.41-1.25 (15H, m), 1.28 (9H, s), 0.93-0.85 (9H, m), 0.83 (0.7H, d, J = 6.2 Hz), 0.82 (0.7H, d, J = 6.6 Hz), 0.77 (0.7H, d, J = 6.2 Hz), 0.76 (0.7H, d, J = 6.5 Hz).  MS (ESI): 1162.8 (100, M+H), 532.0 (52.2).  HRMS: C60H96N11O12の計算値: 1162.7234; 実測値: 1162.7245.
【０３７３】
実施例７８
Ｎ−［（２Ｒ）−２−（（２Ｓ）−２−｛（２Ｓ）−２−［（２Ｓ）−２−（２−｛（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−（４−アミノブチル）−４−メチルペンタノイルアミノ｝アセチルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−（アセチルアミノ）ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１８４】
2009500410.tif 000191
パートＡ  −  Ｎ−［２−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）（２Ｓ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−６−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１８５】
2009500410.tif 000192
実施例３６Ｂの生成物（１０３ｍｇ、０．１４６ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）に溶解し、ＤＭＦ（３．００ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４０．４ｍｇ、０．１７５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２４．７ｍｇ、０．１６１ｍｍｏｌ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１７８μＬ、１．０２ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（６０．８ｍｇ、０．１６０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に移し、次いで２時間２２℃において撹拌した。得られた溶液を真空濃縮し、残渣をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）で２２℃において処理した。０．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１５〜４５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。３３分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２３．０ｍｇ、２８．０μｍｏｌ；１９．２％）が得られた。MS (ESI): 707.6 (100, M+H).
【０３７４】
パートＢ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（２Ｓ）−２−（（２Ｓ）−２−｛（２Ｓ）−２−［２−（（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−Ｎ−｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ブチル｝−４−メチルペンタノイルアミノ）アセチル−アミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）−４−メチルペンタノイルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩
ＨＯＢｔ（４．８ｍｇ、３１μｍｏｌ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３４．５μＬ、０．１９８ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１１．８ｍｇ、３１．１μｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（２．００ｍＬ）中の実施例１４Ｃの生成物（２０．８ｍｇ、３４．０μｍｏｌ）の溶液をＡの生成物（２０．０ｍｇ、２４．４μｍｏｌ）で処理し、次いで２時間２２℃において撹拌した。得られた溶液を真空濃縮し、残渣をＤＭＦ（１：４ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）中のピペリジンの予め調製した溶液で２２℃において処理した。０．５時間撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む２２〜５２％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１６．８ｍｇ、１４．１μｍｏｌ；５７．８％）が得られた。MS (ESI): 1264.7 (36.3, M+H), 1078.8 (100, M+H), 490.0 (45.3).
【０３７５】
実施例７９
Ｎ−［４−（（２Ｒ）−２−｛Ｎ−［６−（アセチルアミノ）ヘキサノイルアミノ］カルバモイル｝−２−アミノエチル）フェニル］（２Ｓ）−２−［（２Ｓ）−２−（２−｛（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝アセチルアミノ）−４−フェニルブタノイルアミノ］−６−（アミジノアミノ）ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１８６】
2009500410.tif 000193
パートＡ  −  （２Ｒ）−３−（４−｛（２Ｓ）−２−［（２Ｓ）−２−（２−｛（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝アセチルアミノ）−４−フェニルブタノイルアミノ］−６−［（イミノエチル）アミノ］ヘキサノイルアミノ｝フェニル）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］プロパン酸の調製
【化１８７】
2009500410.tif 000194
実施例３４Ｄの生成物（１．００×１０2ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１５．５ｍｇ、０．１０１ｍｍｏｌ）、ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１２８．０μＬ、０．７３４ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（３８．３ｍｇ、０．１０１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．００ｍＬ）溶液をＢｏｃ−ＤＰｈｅ（４−ＮＨ2）−ＯＨ・ＴＦＡ（３６．２ｍｇ、９１．８μｍｏｌ）、次いでｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（４８．０μＬ、０．２７５ｍｍｏｌ）で処理した。２４時間２２℃で撹拌後、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（４１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む４０〜７５％のアセトニトリルの１．２％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１７．０ｍｇ、１４．５μｍｏｌ；１５．８％）が得られた。ＭＳ（ＥＳＩ）：１１９５．７（１２．１、Ｍ＋Ｎａ）、１１７３．６（１００、Ｍ＋Ｈ）、５３７．５（４５．２）。精製した物質を次の工程で直接使用した。
【０３７６】
パートＢ  −  Ｎ−（４−｛（２Ｒ）−２−アミノ−２−［Ｎ−（６−アミノヘキサノイルアミノ）カルバモイル］−エチル｝フェニル）（２Ｓ）−２−［（２Ｓ）−２−（２−｛（２Ｓ）−２−［（（２Ｓ）−１−アセチルピロリジン−２−イル）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝アセチルアミノ）−４−フェニルブタノイルアミノ］−６−［（イミノ｛［（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）アミノ］ヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（１７．０ｍｇ、１４．５μｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１．８ｍｇ、１３．１μｍｏｌ）のＤＭＦ（２．００ｍＬ）溶液をコリジン（１２．０μＬ、９０．８μｍｏｌ）およびＤＩＣ（２．２μＬ、１４．２μｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（６．１ｍｇ、１２．７μｍｏｌ）を一度に加えた。追加のＤＭＦ（２×０．５０ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。６時間後２２℃において、追加のＤＩＣ（２．２μＬ、１４．２μｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１．８ｍｇ、１３．１μｍｏｌ）を加えた。さらに１６時間後２２℃において、全ての揮発物を真空除去し、得られた油をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．５時間維持し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む１０〜５０％のアセトニトリルの１．３％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（４．０ｍｇ、２．８μｍｏｌ；２２．３％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.95 (1H, s), 9.84 (1H, m), 8.25-8.20 (1H, m), 8.08-8.01 (2H, m), 7.92 (1H, dd, J = 13.9, 7.7 Hz), 7.62 (3H, br s), 7.52-7.48 (2H, m), 7.27-7.20 (4H, m), 7.17-7.15 (3H, m), 6.88 (1H, t, J = 8.9 Hz), 6.68 (1H, br s), 6.36 (2H, br s), 4.39-4.30 (3H, m), 4.24 (1H, dd, J = 8.3, 3.0 Hz), 4.20-4.15 (2H, m), 3.49-3.28 (3H, m), 3.10-3.01 (2H, m), 2.95-2.91 (1H, m), 2.80-2.68 (3H, m), 2.62-2.52 (4H, m), 2.46-2.44 (6H, m), 2.13 (2H, dd, J = 6.9, 6.7 Hz), 2.01-1.94 (6H, m), 1.85-1.70 (7H, m), 1.63-1.38 (9H, m), 1.34-1.28 (9H, m), 1.25 (3H, s), 1.24 (3H, s), 0.86-0.80 (6H, m).  MS (ESI): 1300.7 (25.1, M+H), 651.0 (100, M+2H).  HRMS: C65H98N13O13Sの計算値: 1300.7122; 実測値: 1300.7099.
【０３７７】
実施例８０
Ｎ−（（２Ｒ）−２−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝−４−メチルペンタノイルアミノ）−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１８８】
2009500410.tif 000195
実施例３６Ｂの生成物（２５．０ｍｇ、４２．１μｍｏｌ）のＤＭＦ（２．００ｍＬ）溶液をｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（５０．０μＬ、０．２８７ｍｍｏｌ）、次いでＢｏｃ2Ｏ（１１．７ｍｇ、５３．６μＬ）で処理した。１時間後２２℃において、全ての揮発物を真空除去し、残渣をＤＭＦ（１：４ ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）中のピペリジンの予め調製した溶液で処理した。溶液を０．５時間維持し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む１５〜４５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（４．０ｍｇ、６．８μｍｏｌ；１６．２％）が得られた。MS (ESI): 472.4 (100, M+H).
【０３７８】
実施例８１
２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（アミノシクロペンチル）カルボニルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１８９】
2009500410.tif 000196
実施例２４Ｂの生成物（１９４ｍｇ、０．４１２ｍｍｏｌ）をＨＢＴＵ（１７２ｍｇ、０．４５３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（６９．０ｍｇ、０．４５０ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２８７μＬ、１．６５ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（１０．０ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３１２ｍｇ、０．５０５ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に一度に加えた。得られた溶液を２２℃で０．６時間維持し、次いで真空濃縮し、残渣をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（９：１ ｖ／ｖ、４００μＬ）、次いでＴＦＡ（３．６０ｍＬ、４６．７ｍｍｏｌ）で処理した。３時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２．５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１１６ｍｇ、０．１０７ｍｍｏｌ；２６．０％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.94 (1H, br s), 9.82 (1H, s), 8.43 (1H, br t, J = 4.5 Hz), 8.37 (2H, br s), 8.21 (2H, br s), 4.12 (2H, br s), 3.50 (8H, s), 3.34 (5H, br s), 3.11 (2H, td, J = 6.9, 6.2 Hz), 3.03 (4H, br t, J = 5.5 Hz), 2.23-2.18 (2H, m), 2.15 (2H, t, J = 7.3 Hz), 1.91-1.80 (6H, m), 1.54 (2H, tt, J = 7.5, 7.5 Hz), 1.44 (2H, tt, J = 7.3, 7.3 Hz), 1.34-1.28 (2H, m).  13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.7, 171.4, 171.4, 157.7 (q, J = 30.9 Hz), 117.2 (q, J = 300 Hz), 65.2, 54.3, 52.2, 48.7, 40.1, 38.7, 36.2, 33.0, 28.5, 24.6, 24.2.  MS (ESI): 632.4 (50.9, M+H), 316.9 (100, M+2H).  HRMS: C26H43FeN7O11の計算値: 685.2365; 実測値: 685.2354.
【０３７９】
実施例８２
２−｛［２−（｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１９０】
2009500410.tif 000197
新たに調製したＢｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＮＨＮＨ2（２００ｍｇ、０．５５７ｍｍｏｌ）をＨＢＴＵ（２３３ｍｇ、０．６１４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（９４．０ｍｇ、０．６１４ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３８８μＬ、２．２３ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（１０．０ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（４１６ｍｇ、０．６７３ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に一度に加えた。得られた溶液を２２℃で０．６時間維持し、次いで真空濃縮し、残渣をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（９：１ｖ／ｖ、４００μＬ）、次いでＴＦＡ（３．６０ｍＬ、４６．７ｍｍｏｌ）で処理した。３時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。４．０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１０４ｍｇ、０．１０６ｍｍｏｌ；１９．１％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.82 (2H, br s), 8.29 (3H, br s), 4.28 (2H, ABq, JAB = 15.7 Hz), 3.84 (1H, br s), 3.53 (8H, s), 3.37 (4H, br t, J = 5.4 Hz), 3.08 (4H, br t, J = 5.9 Hz), 1.77-1.71 (1H, m), 1.60 (2H, ABqdd, JAB = 14.1 Hz, Jdd = 7.3, 7.0 Hz), 0.93 (3H, d, J = 6.5 Hz), 0.91 (3H, d, J = 6.5 Hz).  13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.6, 167.6, 163.7, 157.8 (q, J = 31.7 Hz), 116.9 (q, J = 299 Hz), 54.3, 52.2, 52.1, 49.6, 48.7, 40.3, 23.4, 22.4, 21.9.  MS (ESI): 521.3 (100, M+H), 261.4 (79.4, M+2H).  HRMS: C20H34FeN6O10の計算値: 574.1680; 実測値: 574.1678.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−ロイシン９９．３％。
【０３８０】
実施例８３
Ｎ−［（２Ｒ）−３−（４−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝フェニル）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］プロパノイルアミノ］−６−アミノヘキサンアミド、ギ酸塩の合成
【化１９１】
2009500410.tif 000198
パートＡ  −  （２Ｒ）−３−（４−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝フェニル）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］プロパン酸の調製
【化１９２】
2009500410.tif 000199
Ｂｏｃ−ＬＬｅｕ−ＯＨ（６５１ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（３５２ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１０．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（８７２ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１．４６ｍＬ、１５．２ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。Ｂｏｃ−ＤＰｈｅ（４−ＮＨ2）−ＯＨ（５８７ｍｇ、２．０９ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（８．００ｍＬ）溶液を次いで５分間滴下した。追加のＤＭＦ（２×１．００ｍＬ）を使用して移動を定量した。１．５時間後２２℃において、溶液を真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（４１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む５０〜９５％のアセトニトリルの１．８％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（３０２ｍｇ、０．６１２ｍｍｏｌ；２９．２％）が得られた。MS (ESI): 1009.6 (20.9, 2M+H), 887.5 (100), 516.4 (31.9, M+Na).HRMS: C25H39N3O7Na計算値: 516.2680; 実測値: 516.2679.
【０３８１】
パートＢ  −  Ｎ−［（２Ｒ）−３−（４−｛（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタノイルアミノ｝フェニル）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］プロパノイルアミノ］−６−アミノヘキサンアミド、ギ酸塩の調製
パートＡの生成物（７７．０ｍｇ、０．１５６ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１７．８ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）溶液をコリジン（１２６μＬ、０．９５５ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（２．０×１０1μＬ、０．１３ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（５０．１ｍｇ、０．１０４ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を５時間２２℃で撹拌し、追加のＤＭＦ（２×１．００ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をピペリジンのＤＭＦ溶液（１：４ ｖ／ｖ、４．００ｍＬ）で処理した。溶液を０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈおよび１０％のＨ2Ｏを含む２０〜６０％のアセトニトリルの１．３％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２０．０ｍｇ、３０．０μｍｏｌ；２８．８％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.94 (1H, s), 9.82 (1H, d, J = 6.0 Hz), 7.64 (3H, br s), 7.48 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 7.21 (2H, AB, JAB = 8.4 Hz), 6.95 (1H, br d, J = 7.8 Hz), 6.85 (1H, br d, J = 8.7 Hz), 4.19 (1H, br s), 4.11 (1H, br s), 2.93 (1H, dd, J = 13.8, 3.3 Hz), 2.77 (2H, br s), 2.70 (1H, dd, J = 13.2, 11.1 Hz), 2.13 (2H, dd, J = 7.4, 7.2 Hz), 1.63 (1H, br s), 1.56-1.48 (5H, m), 1.37 (9H, s), 1.35-1.25 (2H, m), 1.29 (9H, s), 0.89 (3H, d, J = 6.6 Hz), 0.88 (3H, d, J = 6.6 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ171.5, 170.7 (2), 155.4, 155.1, 137.3, 132.7, 129.4, 118.9, 78.0, 54.3, 53.5, 40.7, 38.7, 37.0, 32.8, 28.2, 28.1, 26.7, 25.3, 24.4, 24.3, 22.9, 21.6.  MS (ESI): 621.5 (100, M+H).  HRMS: C31H53N6O7の計算値: 621.3970; 実測値: 621.3900.
【０３８２】
実施例８４
２−［１０−（２−｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］ピペリジル｝−２−オキソエチル）−１，４，７，１０−テトラアザ−４，７−ビス（カルボキシメチル）シクロドデシル］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１９３】
2009500410.tif 000200
実施例３０Ｂの生成物（３０．０ｍｇ、６３．８μｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１１μＬ、６３μｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２６．６ｍｇ、７０．１μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１０．７ｍｇ、６９．９μｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（４４μＬ、０．２５ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（３．００ｍＬ）中の（４，７，１０−トリス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデク−１−イル）酢酸（４７．５ｍｇ、８２．９μｍｏｌ）の予め調製した溶液に移した。追加のＤＭＦ（２×０．５０ｍＬ）を使用して移動を定量した。得られた溶液を２２℃で３時間維持し、次いで真空濃縮し、残渣をＥｔ3ＳｉＨのＴＦＡ（９：１ｖ／ｖ、３．３０ｍＬ）溶液で処理した。２．５時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの０．６７％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。５．５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（６５．０ｍｇ、５３．６μｍｏｌ；８４．０％）が得られた。MS (ESI): 643.3 (65.2, M+H), 530.3 (36.0), 322.3 (100, M+2H), 265.7 (49.7).HRMS: C28H51N8O9計算値: 643.3774; 実測値: 643.3763.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−ロイシン９９．８％。
【０３８３】
実施例８５
Ｎ−｛（１Ｒ）−３−メチル−１−［Ｎ−（４−ピペリジルカルボニルアミノ）カルバモイル］−ブチル｝（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチルペンタンアミド、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１９４】
2009500410.tif 000201
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（５１．７ｍｇ、０．１５０ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１７．１ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）溶液をコリジン（９２．５μＬ、０．７００ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（１９．４μＬ、０．１２５ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３０Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（４８．１ｍｇ、０．１００ｍｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加え、追加のＤＭＦ（０．５０ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。２．５時間後２２℃において、全ての揮発物を真空除去し、粗製残渣をトリス（２−アミノエチル）アミンのＤＭＦ溶液（１：４ｖ／ｖ、２．５０ｍＬ）で処理すると、完全な脱保護が０．５時間以内に認められた。得られた溶液を濃縮し、粗製の黄色の油をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む１０〜４０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２３．０ｍｇ、３９．４μｍｏｌ；３９．３％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.87 (1H, s), 9.78 (1H, s), 8.44 (1H, br s), 8.21 (1H, br s), 8.00 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.70 (1H, br s), 6.91 (1H, d, J = 7.5 Hz), 4.34 (1H, ddd, J = 9.1, 5.8, 5.7 Hz), 3.96 (1H, ddd, J = 8.0, 7.8, 7.0 Hz), 2.92 (3H, br s), 2.61 (1H, dd, J = 6.2, 5.5 Hz), 1.85 (2H, dt, J = 14.2, 3.4 Hz), 1.77-1.70 (2H, m), 1.64-1.45 (4H, m), 1.40-1.37 (2H, m), 1.36 (9H, s), 0.88 (3H, d, J = 6.8 Hz), 0.87 (3H, d, J = 6.7 Hz), 0.85 (3H, d, J = 6.6 Hz), 0.82 (3H, d, J = 6.5 Hz).  MS (ESI): 470.4 (100, M+H).  HRMS: C23H44N5O5の計算値: 470.3337; 実測値: 470.3341.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｌ−ロイシン５１．２％。
【０３８４】
実施例８６
２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−メチルブタノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１９５】
2009500410.tif 000202
パートＡ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−メチルブタノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化１９６】
2009500410.tif 000203
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｖａｌ−ＯＨ（３３８ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１７８ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（５．００ｍＬ）溶液をコリジン（９６３μＬ、７．２９ｍｍｏｌ）およびＤＩＣ（５．００×１０2μＬ、１．０４ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（２．００×１０2ｍｇ、０．４１５ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を１時間２２℃において撹拌した。次いで全ての揮発物を真空除去し、得られた油をピペリジンのＤＭＦ（１：４ｖ／ｖ、５．００ｍＬ）溶液で処理した。溶液を０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮し、粗製残渣をアセトニトリル／Ｈ2Ｏ（１：１ｖ／ｖ；１０．０ｍＬ）に再懸濁し、濾過し、凍結乾燥すると、白色の固体が得られた。このように得た粗製物質をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（４１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む１０〜３５％のアセトニトリルの０．８３％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２３３ｍｇ、０．５０８ｍｍｏｌ；４８．９％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.76 (1H, s), 9.72 (1H, s), 7.65 (3H, br s), 6.66 (1H, d, J = 9.0 Hz), 3.81 (1H, dd, J = 8.4, 7.9 Hz), 2.80-2.74 (2H, m), 2.11 (2H, t, J = 7.3 Hz), 1.93-1.87 (1H, m), 1.56-1.50 (4H, m), 1.38 (9H, s), 1.34-1.29 (2H, m), 0.91 (3H, d, J = 6.8 Hz), 0.86 (3H, d, J = 6.7 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ170.7, 170.2, 157.8 (q, J = 32.2 Hz), 155.2, 116.8 (q, J = 299 Hz), 77.9, 58.2, 38.7, 32.8, 30.4, 28.1, 26.7, 25.3, 24.3, 19.1, 18.3.  MS (ESI): 345.4 (100, M+H).  HRMS: C16H33N4O4の計算値: 345.2496; 実測値: 345.2493.
【０３８５】
パートＢ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−メチルブタノイルアミノ）−カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）−（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（２．００×１０2ｍｇ、０．４３６ｍｍｏｌ）をＨＢＴＵ（１８２ｍｇ、０．４８０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７３．５ｍｇ、０．４８０ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３０３μＬ、１．７４ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（７．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３２３ｍｇ、０．５２３ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に一度に加えた。追加のＤＭＦ（２×１．５０ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。得られた溶液を２２℃で０．６時間維持し、次いで真空濃縮し、残渣をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（９：１ｖ／ｖ、４００μＬ）、次いでＴＦＡ（３．６０ｍＬ、４６．７ｍｍｏｌ）で処理した。２．５時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。８．０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２３６ｍｇ、０．２１９ｍｍｏｌ；５０．３％）が得られた。MS (ESI): 620.4 (87.4, M+H), 310.9 (100, M+2H).HRMS: C25H43FeN7O11計算値: 673.2365; 実測値: 673.2370.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−バリン１００．０％。
【０３８６】
実施例８７
２−｛［２−（｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１９７】
2009500410.tif 000204
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−アミノ−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−フェニルプロパンアミドの調製
【化１９８】
2009500410.tif 000205
Ｂｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＭｅ（６．００ｇ、２１．５ｍｍｏｌ）のヒドラジン水和物（１５．０ｍＬ、３０９ｍｍｏｌ）懸濁液を７０℃に１５分かけてゆっくりと加温した。溶解が完了したら、温度を１８時間維持し、この間に白色の沈殿が形成した。得られた懸濁液を２２℃に冷却し、メタノール（５０ｍＬ）で希釈し、真空濃縮した。このように得た白色の固体を熱酢酸エチルに再溶解して過剰ヒドラジンを消費し、冷却すると、アセチルヒドラジドの重い白色の沈殿が形成し、後でこれを濾去した。濾液をＮａＨＣＯ3（３×５０ｍＬ）およびＮａＣｌ（２×５０ｍＬ）の飽和溶液で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して白色の固体（４．２０ｇ、１５．０ｍｍｏｌ；７０．０％）を得た。この生成物をさらに精製することなく次の工程で使用した。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.09 (1H, s), 7.27-7.17 (5H, m), 6.86 (1H. br d, J = 8.7 Hz), 4.20 (2H, br s), 4.11 (1H, ddd, J = 9.8, 8.9, 4.8 Hz), 2.87 (1H, dd, J = 13.7, 4.7 Hz), 2.74 (1H, dd, J = 13.5, 10.2 Hz), 1.29 (9H, s).  MS (ESI): 180.1 (86.8, M-Boc), 163.1 (100).生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−フェニルアラニン９８．５％。
【０３８７】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］−（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（１４２ｍｇ、０．５０８ｍｍｏｌ）をＨＢＴＵ（２１２ｍｇ、０．５５９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８６．０ｍｇ、０．５６２ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３５３μＬ、２．０３ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（７．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３８３ｍｇ、０．６２０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に一度に加え、追加のＤＭＦ（２×１．５０ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。得られた溶液を２２℃で０．６時間維持し、次いで真空濃縮し、残渣をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（９：１ｖ／ｖ、４００μＬ）、次いでＴＦＡ（３．６０ｍＬ、４６．７ｍｍｏｌ）で処理した。２．５時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。８．０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２７７ｍｇ、０．２７４ｍｍｏｌ；５３．９％）が得られた。MS (ESI): 555.3, (100, M+H), 278.3 (47.0, M+2H).HRMS: C23H32FeN6O10計算値: 608.1524; 実測値: 608.1516.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−フェニルアラニン９９．０％。
【０３８８】
実施例８８
２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（４−アミノフェニル）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１９９】
2009500410.tif 000206
パートＡ  −  Ｎ−（（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］フェニル｝プロパノイルアミノ）−６−アミノヘキサンアミドの調製
【化２００】
2009500410.tif 000207
Ｂｏｃ−ＤＰｈｅ（４−ＮＨＢｏｃ）−ＯＨ（９６．６ｍｇ、０．２５４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（３５．０ｍｇ、０．２２９ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（８８．０ｍｇ、０．２３２ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１．６０×１０2μＬ、０．９１９ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（１１１ｍｇ、０．２３１ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を１時間２２℃において撹拌した。このように得た粗製反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）と１０％のクエン酸水溶液（１０ｍＬ）との間に分配し、層を分離し、酢酸エチル層を１０％のクエン酸水溶液（２×１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×１０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１０ｍＬ）で洗浄した。得られた酢酸エチル溶液をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して、白色のフォームを得、これをＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、４．００ｍＬ）で処理した。溶液を１．５時間撹拌し、次いで真空濃縮して白色のフォームを得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
【０３８９】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（５−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（４−アミノフェニル）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝ペンチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）−アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＢＴＵ（９６．０ｍｇ、０．２５３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３９．０ｍｇ、０．２５５ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（１２８μＬ、０．９１８ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（２．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（１５７ｍｇ、０．２５４ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＡの生成物（１１７ｍｇ、０．２３１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２．００ｍＬ）溶液に移し、追加のアセトニトリル（２×１．５０ｍＬ）を使用して移動を定量した。得られた溶液を２２℃で０．６時間維持し、次いで真空濃縮し、残渣をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2（４：１ｖ／ｖ、２００μＬ）溶液、次いでＴＦＡ（１．８０ｍＬ、２３．４ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。７．０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（７５．０ｍｇ、６５．９μｍｏｌ；２８．６％）が得られた。MS (ESI): 683.4 (81.8, M+H), 342 (100, M+2H).HRMS: C29H44FeN8O11計算値: 736.2474; 実測値: 736.2462.
【０３９０】
実施例８９
２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−シクロヘキシルプロパノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２０１】
2009500410.tif 000208
パートＡ  −  Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−シクロヘキシルプロパノイルアミノ｝−６−アミノヘキサンアミドの調製
【化２０２】
2009500410.tif 000209
Ｂｏｃ−ＤＣｈａ−ＯＨ・ＤＣＨＡ（５６６ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１７５ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（８．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（４３２ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（７２５μＬ、４．１６ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（５００ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を０．５時間２２℃で撹拌し、追加のＤＭＦ（２×１．００ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。このように得た粗製反応混合物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）と１０％のクエン酸水溶液（１５ｍＬ）との間に分配し、層を分離し、酢酸エチル層を１０％のクエン酸水溶液（２×１５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×１５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）で洗浄した。得られた酢酸エチル溶液を１ＭのＫＨＳＯ4（２×１５ｍＬ）Ｈ2Ｏ（１５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）でさらに洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、１０．０ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた油を後の工程で直接使用した。
【０３９１】
パートＢ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−シクロヘキシルプロパノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）−アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＢＴＵ（４３２ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１７５ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（７４１μＬ、５．３２ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（５．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（７０４ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＡの生成物（４１４ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２．００ｍＬ）溶液に移し、追加のアセトニトリル（２×１．５０ｍＬ）を使用して移動を定量した。得られた溶液を２２℃で０．６時間維持し、次いで真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（１５０ｍＬ）に再溶解し、ＮａＨＣＯ3（３×１５ｍＬ）およびＮａＣｌ（１５ｍＬ）の飽和溶液で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗製油をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（４：１ｖ／ｖ、４００μＬ）、次いでＴＦＡ（３．６０ｍＬ、４６．７ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜４０％のアセトニトリルの１．１％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（３９３ｍｇ、０．３４８ｍｍｏｌ；３３．５％）が得られた。MS (ESI): 674.5 (100, M+H), 337.9 (42.4, M+2H).HRMS: C29H49FeN7O11計算値: 727.2834; 実測値: 727.2836.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−シクロヘキシルアラニン９９．８％。
【０３９２】
実施例９０
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛Ｎ−［（アミノシクロペンチル）カルボニルアミノ］カルバモイル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝−メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２０３】
2009500410.tif 000210
パートＡ  −  Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］シクロペンチル｝カルボキサミドの調製
【化２０４】
2009500410.tif 000211
ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロペンタンカルボン酸（２．００×１０2ｍｇ、０．８７２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１２２ｍｇ、０．７９７ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（５．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（３０３ｍｇ、０．７９９ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（５０７μＬ、２．９１ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例２９Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（３６５ｍｇ、７２８ｍｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加え、追加のＤＭＦ（２×１．００ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）と１０％のクエン酸水溶液（１５ｍＬ）との間に分配し、層を分離し、酢酸エチル層を１０％のクエン酸水溶液（２×１５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×１５ｍＬ）、１ＮのＮａＯＨ（２×１５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油Ｅｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、６．００ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた油を後の工程で直接使用した。
【０３９３】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛Ｎ−［（アミノシクロペンチル）カルボニルアミノ］カルバモイル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＢＴＵ（２７６ｍｇ、０．７２８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１１１ｍｇ、０．７２５ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（３６５μＬ、２．６２ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（５．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（４４９ｍｇ、０．７２７ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＡの生成物（２７４ｍｇ、０．７２８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２．００ｍＬ）溶液に移し、追加のアセトニトリル（２×１．５０ｍＬ）を使用して移動を定量した。得られた溶液を２２℃で０．６時間維持し、次いで真空濃縮し、残渣をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（４：１ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）、次いでＴＦＡ（９．００ｍＬ、１１７ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。９．０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２１３ｍｇ、０．１９２ｍｍｏｌ；２６．４％）が得られた。MS (ESI): 652.3 (79.4, M+H), 326.3 (100, M+2H).HRMS: C28H39FeN7O11計算値: 705.2052; 実測値: 705.2038.
【０３９４】
実施例９１
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−シクロヘキシルプロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２０５】
2009500410.tif 000212
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−シクロヘキシルプロパンアミドの調製
【化２０６】
2009500410.tif 000213
Ｂｏｃ−ＤＣｈａ−ＯＨ・ＤＣＨＡ（２７２ｍｇ、０．６０１ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）の乾燥アセトニトリル（５．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７８μＬ、１．９９ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例２９Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（２５１ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加え、均質な反応混合物を維持するために、ＤＭＦ（４．００ｍＬ）のその後の追加が必要だった。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸水溶液（２×１０ｍＬ）、１ＭのＫＨＳＯ4（２×１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×１５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、５．００ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた油を後の工程で直接使用した。
【０３９５】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−シクロヘキシルプロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＢＴＵ（２５１ｍｇ、０．６６２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１０１ｍｇ、０．６６０ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７８μＬ、１．９９ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（４．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（４０８ｍｇ、０．６６０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＡの生成物（２０９ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３．００ｍＬ）溶液に移し、追加のアセトニトリル（２×０．５０ｍＬ）を使用して移動を定量した。得られた溶液を２２℃で０．５時間維持し、次いで真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）に再溶解し、ＮａＨＣＯ3（３×１０ｍＬ）およびＮａＣｌ（１０ｍＬ）の飽和溶液で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗製油をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（４：１ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）、次いでＴＦＡ（９．００ｍＬ、１１７ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１８７ｍｇ、０．１６２ｍｍｏｌ；３２．５％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.55 (1H, s), 10.52 (1H, s), 9.03 (1H, t, J = 5.9 Hz), 8.27 (3H, br s), 7.87 (2H, AA'XX', JAX = 8.3 Hz, JAA' = 1.9 Hz), 7.42 (2H, AX, JAX = 8.4 Hz), 4.44 (2H, d, J = 5.8 Hz), 4.31 (2H, s), 3.91 (1H, br s), 3.52 (8H, s), 3.40 (4H, t, J = 5.8 Hz), 3.07 (4H, t, J = 5.9 Hz), 1.79-1.74 (2H, m), 1.71-1.59 (5H, m), 1.51 (1H, br s), 1.27-1.11 (3H, m), 0.91 (2H, ABqt, JAB = 12.5 Hz, Jt = 3.4 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.6, 168.4, 165.1, 164.9, 157.9 (q, J = 32.8 Hz), 142.5, 130.8, 127.6, 127.1, 116.6 (q, J = 303 Hz), 54.3, 53.8, 52.2, 49.1, 48.7, 42.0, 32.7, 32.3, 32.0, 25.8, 25.4, 25.3.  MS (ESI): 694.4 (94.0, M+H), 347.8 (M+2H).  HRMS: C31H48N7O11の計算値: 694.3406; 実測値: 694.3407.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−シクロヘキシルアラニン９４．２％。
【０３９６】
実施例９２
２−（｛２−［（２−｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−シクロヘキシルプロパノイルアミノ）カルバモイル］ピペリジル｝−２−オキソエチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２０７】
2009500410.tif 000214
パートＡ  −  （２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−シクロヘキシル−Ｎ−（４−ピペリジルカルボニルアミノ）プロパンアミドの調製
【化２０８】
2009500410.tif 000215
Ｂｏｃ−ＤＣｈａ−ＯＨ・ＤＣＨＡ（２７２ｍｇ、０．６０１ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）の乾燥アセトニトリル（５．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７８μＬ、１．９９ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３０Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（２．４０×１０2ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加えた。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸水溶液（２×１０ｍＬ）、１ＭのＫＨＳＯ4（２×１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×１５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、５．００ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた油を後の工程で直接使用した。
【０３９７】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（２−｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−シクロヘキシルプロパノイルアミノ）カルバモイル］ピペリジル｝−２−オキソエチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７８μＬ、１．９９ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（４．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３．４０×１０2ｍｇ、０．５５０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＡの生成物（１９８ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３．００ｍＬ）溶液に移し、追加のアセトニトリル（２×０．５０ｍＬ）を使用して移動を定量した。得られた溶液を２２℃で０．５時間維持し、次いで真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）に再溶解し、ＮａＨＣＯ3（３×１０ｍＬ）およびＮａＣｌ（１０ｍＬ）の飽和溶液で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗製油をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（４：１ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）、次いでＴＦＡ（９．００ｍＬ、１１７ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１４５ｍｇ、０．１２９ｍｍｏｌ；２５．７％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.44 (1H, d, J = 9.1 Hz), 10.13 (1H, J = 10.5 Hz), 8.22 (3H, br s), 4.67 (2H, AB, JAB = 16.1 Hz), 4.32 (1H, br d, J = 12.6 Hz), 3.82 (1H, br s), 3.64 (1H, br d, J = 12.5 Hz), 3.48 (8H, s), 3.36 (4H, br s), 3.06 (5H, br t, J = 5.5 Hz), 2.77 (1H, dd, J = 12.1, 11.4 Hz), 2.55 (1H, br s), 1.79-1.41 (13H, m), 1.23-1.08 (3H, m), 0.90-0.84 (2H, m). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.7, 172.5, 167.8, 163.2, 157.9 (q, J = 33.2 Hz), 116.5 (q, J = 297 Hz), 54.2, 52.4, 49.0, 48.8, 43.4, 40.9, 38.8, 32.6, 32.3, 32.0, 28.0, 27.7, 25.8, 25.5, 25.3.  MS (ESI): 672.3 (88.9, M+H), 336.8 (100, M+2H).  HRMS: C29H50N7O11の計算値: 672.3563; 実測値: 672.3565.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−シクロヘキシルアラニン９１．２％。
【０３９８】
実施例９３
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−メチルブタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２０９】
2009500410.tif 000216
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−メチルブタンアミドの調製
【化２１０】
2009500410.tif 000217
Ｂｏｃ−ＤＶａｌ−ＯＨ（１．３０×１０2ｍｇ、０．５９８ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（５．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７８μＬ、１．９９ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例２９Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（２５１ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加えた。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸水溶液（２×３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×３０ｍＬ）、１ＮのＮａＯＨ（３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、５．００ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた油を後の工程で直接使用した。
【０３９９】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−メチルブタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７８μＬ、１．９９ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（４．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３．４０×１０2ｍｇ、０．５５０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＡの生成物（１８２ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３．００ｍＬ）溶液に移し、追加のアセトニトリル（２×０．５０ｍＬ）を使用して移動を定量した。得られた溶液を２２℃で０．５時間維持し、次いで真空濃縮した。粗製油をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（４：１ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）、次いでＴＦＡ（９．００ｍＬ、１１７ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１．０×１０1ｍｇ、９．１μｍｏｌ；１．８％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.54 (1H, s), 10.41 (1H, s), 8.99 (1H, br t, J = 5.8 Hz), 8.19 (3H, br s), 7.87 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 7.42 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 4.44 (2H, d, J = 5.8 Hz), 4.29 (2H, br s), 3.70 (1H, br s), 3.51 (8H, s), 3.38 (4H, br s), 3.06 (4H, br t, J = 4.9 Hz), 2.20-2.14 (1H, m), 1.05 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.04 (3H, d, J = 6.9 Hz).  MS (ESI): 662.3 (9.7, M+Na), 640.4 (31.0, M+H), 320.9 (100, M+H).生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−バリン９９．６％。
【０４００】
実施例９４
２−（｛２−［（２−｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］ピペリジル｝−２−オキソエチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２１１】
2009500410.tif 000218
パートＡ  −  （２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−フェニル−Ｎ−（４−ピペリジルカルボニルアミノ）プロパンアミドの調製
【化２１２】
2009500410.tif 000219
Ｂｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ（３３２ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１７７ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（５．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（４３５ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（７２７μＬ、４．１７ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３０Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（５．００×１０2ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加えた。２時間後２０℃で粗製反応混合物を酢酸エチル（１２５ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸水溶液（５×５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（５×５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×５ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた固体をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、１０．０ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた固体を後の工程で直接使用した。
【０４０１】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（２−｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］ピペリジル｝−２−オキソエチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＢＴＵ（２１４ｍｇ、０．５６４ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２８５μＬ、２．０４ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（５．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３４８ｍｇ、０．５６３ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液を、パートＡの生成物（２．００×１０2ｍｇ、０．５１２ｍｍｏｌ）を含有するフラスコに移した。得られた溶液を２２℃において１時間維持し、次いで真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む５０〜８５％のアセトニトリルの１．８％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１９分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体が得られた。次いでＴＦＡ／ＣＨ2Ｃｌ2／Ｅｔ3ＳｉＨ（９０：８：２ｖ／ｖ、２．５０ｍＬ）を使用して広範囲の脱保護を実施した。３時間後２２℃において、溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２１２．５ｍｇ、０．１８９ｍｍｏｌ；３７．０％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.10 (1H, br s), 7.31 (2H, dd, J = 7.4, 7.0 Hz), 7.28 (2H, dd, J = 6.6, 1.7 Hz), 7.25 (1H, tt, J = 7.0, 1.6 Hz), 4.30 (1H, br d, J = 12.4 Hz), 3.97 (1H, br d, J = 12.5 Hz), 3.84 (1H, dd, J = 8.0, 5.3 Hz), 3.73 (1H, s), 3.67 (2H, ABqd, JAB = 13.7 Hz, Jd = 6.2 Hz), 3.37 (8H, s), 3.08 (1H, dd, J = 13.9, 5.2 Hz), 3.01 (1H, br t, J = 12.3 Hz), 2.88-2.77 (9H, m), 2.64 (1H, br t, J = 12.5 Hz), 1.71 (2H, br s), 1.62-1.56 (1H, m), 1.49-1.41 (1H, m).  MS (ESI): 666.4 (39.3, M+H), 333.8 (100, M+2H).  HRMS: C29H43N7O11Naの計算値: 688.2913; 実測値: 688.2908.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−フェニルアラニン９８．６％。
【０４０２】
実施例９５
２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノヘキサノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２１３】
2009500410.tif 000220
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−（６−アミノヘキサノイルアミノ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］ヘキサンアミドの調製
【化２１４】
2009500410.tif 000221
Ｂｏｃ−ＤＮｌｅ−ＯＨ（１３９ｍｇ、０．６０１ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（５．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７８μＬ、１．９９ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例３Ａの生成物（２４１ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を０．５時間２２℃で撹拌した。このように得た粗製反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸水溶液（３×２０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２０ｍＬ）、１ＮのＮａＯＨ（２０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた粗製物質をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、１０．０ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた油を後の工程で直接使用した。
【０４０３】
パートＢ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノヘキサノイルアミノ）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７８μＬ、１．９９ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（４．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３．４０×１０2ｍｇ、０．５５０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＡの生成物（１７９ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３．００ｍＬ）溶液に移し、追加のアセトニトリル（２×０．５０ｍＬ）を使用して移動を定量した。得られた溶液を２２℃で０．５時間維持し、次いで真空濃縮した。粗製油をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（４：１ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）、次いでＴＦＡ（９．００ｍＬ、１１７ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。５．０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１．００×１０2ｍｇ、９１．８μｍｏｌ；１８．３％）が得られた；０．１％のＴＦＡを含むアセトニトリル／Ｈ2Ｏ（１：１、ｖ／ｖ）中での凍結乾燥の繰り返し後のＴＦＡ塩に基づいた収量。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.07 (1H, br s), 8.02 (1H, t, J = 5.7 Hz), 3.77 (1H, t, J = 6.3 Hz), 3.40 (8H, br s), 3.17 (2H, br s), 3.07 (2H, td, J = 6.6, 6.4 Hz), 2.82 (4H, br t, J = 6.3 Hz), 2.70 (4H, br t, J = 6.1 Hz), 2.16 (2H, t, J = 7.3 Hz), 1.72 (2H, dt, J = 7.9, 7.2 Hz), 1.53 (2H, tt, J = 7.4, 7.4 Hz), 1.43 (2H, tt, J = 7.2, 7.2 Hz), 1.38-1.25 (6H, m), 0.87 (3H, t, J = 7.2 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.2, 171.0, 169.3, 167.5, 56.8, 55.7, 52.0, 51.1, 51.0, 38.2, 32.9, 30.9, 28.7, 26.0, 25.7, 24.7, 21.7, 13.6.  MS (ESI): 634.4 (73.1, M+H), 317.9 (100, M+2H).  HRMS: C26H48N7O11の計算値: 634.3406; 実測値: 634.3412.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−ノルロイシン９７．７％。
【０４０４】
実施例９６
２−［（２−｛［２−（４−｛［Ｎ−（（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝ピペリジル）−２−オキソエチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、ギ酸塩の合成
【化２１５】
2009500410.tif 000222
パートＡ  −  フルオレン−９−イルメチル４−［（Ｎ−アミノカルバモイル）メチル］ピペリジンカルボキシレート、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化２１６】
2009500410.tif 000223
２−｛１−［（フルオレン−９−イルメチル）オキシカルボニル］−４−ピペリジル｝酢酸（２．０１ｇ、５．５０ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１０．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２．０８ｇ、５．４８ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１．７４ｍＬ、９．９９ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで３分間２２℃で撹拌した。カルバジン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．６６０ｇ、４．９９ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を１時間２２℃において撹拌した。粗製反応混合物を酢酸エチル（２５０ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸水溶液（３×２０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×２０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた固体をＣＨ2Ｃｌ2（５．００ｍＬ）に溶解し、ＴＦＡ（５．００ｍＬ、６４．９ｍｍｏｌ）で処理した。１時間後２２℃において、全ての揮発物を真空除去し、残渣をアセトニトリル／Ｈ2Ｏ（１：１ｖ／ｖ）に再溶解し、次いで凍結乾燥すると、オフホワイトの固体が得られ、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
【０４０５】
パートＢ  −  （２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−メチル−Ｎ−（２−（４−ピペリジル）アセチルアミノ）ペンタンアミドの調製
【化２１７】
2009500410.tif 000224
ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３１８μＬ、１．８２ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（１．００ｍＬ）中のパートＡの生成物（３．００×１０2ｍｇ、０．６０８ｍｍｏｌ）の溶液をＨＢＴＵ（２５４ｍｇ、０．６７０ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２１２μＬ、１．２２ｍｍｏｌ）を含有する乾燥ＤＭＦ（２．００ｍＬ）中のＢｏｃ−ＤＬｅｕ−ＯＨ（１５５ｍｇ、０．６７０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１０３ｍｇ、０．６７３ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に移した。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（８０ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸水溶液（５×５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（５×５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、３．００ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた固体を後の工程で直接使用した。
【０４０６】
パートＣ  −  ２−［（２−｛［２−（４−｛［Ｎ−（（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝ピペリジル）−２−オキソエチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、ギ酸塩の調製
【化２１８】
2009500410.tif 000225
ＨＢＴＵ（２１６ｍｇ、０．５６９ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２１７μＬ、１．５６ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（３．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３５２ｍｇ、０．５７０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液を、パートＢの生成物（１９２ｍｇ、０．５１８ｍｍｏｌ）を含有するフラスコに移した。得られた溶液を２２℃で０．２５時間維持し、次いで真空濃縮した。次いで、ＴＦＡ／ＣＨ2Ｃｌ2／Ｅｔ3ＳｉＨ（９０：８：２ｖ／ｖ、３．００ｍＬ）を使用して広範囲の脱保護を実施した。２．５時間後２２℃において、溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。９．５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（４８．０ｍｇ、５４．８μｍｏｌ；１０．６％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.08 (1H, br s), 4.27 (1H, br d, J = 12.5 Hz), 3.93 (1H, br s), 3.71 (1H, t, J = 7.3 Hz), 3.65 (1H, d, J = 15.1 Hz), 3.47 (1H, dd, J = 15.1, 9.3 Hz), 3.36 (8H, s), 2.96-2.92 (1H, m), 2.82 (3H, br t, J = 6.5 Hz), 2.80-2.66 (3H, m), 2.57-2.52 (1H, m), 2.13 (2H, br d, J = 6.4 Hz), 1.90 (1H, br s), 1.76-1.65 (2H, m), 1.59 (1H, tt, J = 6.9, 6.9 Hz), 1.52 (1H, tt, J = 7.6, 6.6 Hz), 1.24-1.03 (2H, m), 0.92 (3H, d, J = 6.5 Hz), 0.90 (3H, d, J = 6.6 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.7, 169.6, 168.5, 167.1, 56.9, 51.3, 50.7, 49.9, 44.6, 41.1, 40.8, 40.1, 32.8, 30.9, 23.5, 22.5, 21.9.  MS (ESI): 646.4 (100, M+H), 323.9 (952., M+2H).  HRMS: C27H45FeN7O11の計算値: 699.2521; 実測値: 699.2522.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−ロイシン９９．１％。
【０４０７】
実施例９７
２−［（２−｛［２−（４−｛［Ｎ−（（２Ｓ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝ピペリジル）−２−オキソエチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、ギ酸塩の合成
【化２１９】
2009500410.tif 000226
パートＡ  −  （２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−フェニル−Ｎ−（２−（４−ピペリジル）アセチルアミノ）プロパンアミドの調製
【化２２０】
2009500410.tif 000227
ｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３１８μＬ、１．８２ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（１．００ｍＬ）中の実施例９６Ａの生成物（３．００×１０2ｍｇ、０．６０８ｍｍｏｌ）の溶液を、ＨＢＴＵ（２５４ｍｇ、０．６７０ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（２１２μＬ、１．２２ｍｍｏｌ）を含有する乾燥ＤＭＦ（２．００ｍＬ）中のＢｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ（１７７ｍｇ、０．６６７ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１０３ｍｇ、０．６７３ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に移した。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（８０ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸水溶液（５×５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（５×５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、３．００ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた固体を後の工程で直接使用した。
【０４０８】
パートＢ  −  ２−［（２−｛［２−（４−｛［Ｎ−（（２Ｓ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］メチル｝ピペリジル）−２−オキソエチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、ギ酸塩の調製
ＨＢＴＵ（２１６ｍｇ、０．５６９ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２１７μＬ、１．５６ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（３．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３５３ｍｇ、０．５７１ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液を、パートＡの生成物（２．１０×１０2ｍｇ、０．５１９ｍｍｏｌ）を含有するフラスコに移した。得られた溶液を２２℃で０．２５時間維持し、次いで真空濃縮した。次いでＴＦＡ／ＣＨ2Ｃｌ2／Ｅｔ3ＳｉＨ（９０：８：２ｖ／ｖ、３．００ｍＬ）を使用して広範囲の脱保護を実施した。２．５時間後２２℃において、溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈを含む０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１０３ｍｇ、０．１１９ｍｍｏｌ；２３．０％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.08 (1H, br s), 7.34-7.29 (4H, m), 7.28-7.25 (1H, m), 4.29 (1H, br d, J = 13.1 Hz), 3.93 (1H, br t, J = 6.5 Hz), 3.87 (1H, br d, J = 13.0 Hz), 3.79 (1H, br d, J = 14.9 Hz), 3.68 (1H, br d, J = 14.2 Hz), 3.38 (8H, s), 3.11 (1H, dd, J = 14.0, 5.1 Hz), 2.95 (1H, br t, J = 12.2 Hz), 2.90 (1H, dd, J = 14.0, 8.0 Hz), 2.85 (8H, br s), 2.56 (1H, br t, J = 12.2 Hz), 2.14 (2H, br d, J = 6.6 Hz), 1.92 (1H, br s), 1.69 (2H, br d, J = 11.7 Hz), 1.24-1.03 (2H, m). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.7, 169.5, 168.2, 166.6, 135.6, 129.5, 128.4, 126.9, 56.2, 54.5, 52.9, 51.5, 50.5, 44.5, 38.0, 32.9, 31.6, 30.9.  MS (ESI): 680.3 (100, M+H), 340.9 (98.2, M+2H).  HRMS: C30H43FeN7O11の計算値: 733.2364; 実測値: 733.2360.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−フェニルアラニン９９．３％。
【０４０９】
実施例９８
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−フェニルブタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２２１】
2009500410.tif 000228
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−アミノ−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−フェニルブタンアミドの調製
【化２２２】
2009500410.tif 000229
１：１のＨ2Ｏ／ｔ−ＢｕＯＨ（３５０ｍＬ）中のＨ−Ｄ−Ｈｐｈｅ−ＯＨ（４４．０ｇ、２４５ｍｍｏｌ）の溶液を２２℃において粉末ＮａＯＨ（１０．８ｇ、２７０ｍｍｏｌ）、次いでＢｏｃ2Ｏ（５８．９ｇ、２７０ｍｍｏｌ）で３回同量で１０分間処理した。得られた懸濁液を１６時間撹拌し、次いでＨ2Ｏ（３００ｍＬ）で希釈し、Ｅｔ2Ｏ（３×２００ｍＬ）で洗浄した。残りの水溶液をＡｃＯＨで酸性化し（ｐＨ５）、次いで酢酸エチル（３×２５０ｍＬ）で洗浄した。注意：酢酸エチル洗浄中、追加のＡｃＯＨを水層に加えてｐＨを維持した。合わせた有機抽出物をＨ2Ｏ（２５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して、白色の固体（４７．７ｇ、１７１ｍｍｏｌ）を得た。元のＥｔ2Ｏ洗浄液をＡｃＯＨ水溶液で酸性化して反応しなかったアミノ酸（６．８ｇ、３８ｍｍｏｌ）を沈殿させた。追加のＢｏｃ保護物質（８．５１ｇ、３０．４ｍｍｏｌ）を濾液から上記の抽出手順を使用して回収した；合わせた収量５６．２ｇ（２０１ｍｍｏｌ、８２．０％）。この生成物をさらに精製することなく後の反応で使用した。
【０４１０】
３：１のＣＨ2Ｃｌ2／メタノール（４００ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｈｐｈｅ−ＯＨ（４７．７ｇ、１７１ｍｍｏｌ）の溶液を、（トリメチルシリル）ジアゾメタン（２０５ｍｍｏｌ；Ｅｔ2Ｏ中の２．０Ｍの溶液１０３ｍＬ）を１０分間２２℃で滴下して処理した。得られた黄色の溶液をさらに１５分間撹拌し、次いで真空濃縮した。粗製物質をメタノール（１７１ｍＬ）に再溶解し、ヒドラジン水和物（３３．２ｍＬ、６８４ｍｍｏｌ）で２２℃において処理した。ヒドラジドの形成が５時間後に完了した。全ての揮発物を真空除去し、粗製物質を熱酢酸エチルから再結晶化させると、白色の粉末（４５．６ｇ、１５５ｍｍｏｌ、９１．０％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ9.01 (1H, s), 7.27 (2H, dd, J = 7.6, 7.5 Hz), 7.18-7.16 (3H, m), 6.94 (1H, d, J = 8.2 Hz), 4.20 (2H, br s), 3.89 (1H, ddd, J = 8.8, 5.5, 5.0 Hz), 2.60 (1H, ddd, J = 15.1, 10.5, 5.2 Hz), 2.52-2.47 (1H, m), 1.86-1.74 (2H, m), 1.39 (9H, s). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ171.2, 155.2, 141.4, 128.2 (2), 125.7, 77.9, 52.7, 34.0, 31.6, 28.2.  MS (ESI): 238.4 (100, M-t-Bu), 194.4 (67.0, M-Boc), 177.4 (27.7).  HRMS: C11H16N3O3の計算値: 238.1186; 実測値: 238.1186.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した（Ｄ−ホモフェニルアラニン９９．８％）。
【０４１１】
パートＢ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−フェニルブタンアミドの調製
【化２２３】
2009500410.tif 000230
Ｂｏｃ−Ｄ−Ｈｐｈｅ−ＯＨ（１８２ｍｇ、０．６５２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（５．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３４９μＬ、２．００ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例２９Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（２５１ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）、次いでｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（８０μＬ、０．４５９ｍｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加え、追加のＤＭＦ（２×１．００ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチルと１０％のクエン酸水溶液（各５０ｍＬ）との間に分配し、層を分離した。酢酸エチル層を１０％のクエン酸水溶液（２×２５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２５ｍＬ）、Ｈ2Ｏ（２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、６．００ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。粗生成物を後の工程で直接使用した。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ7.82 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 7.43 (2H, AB, JAB = 8.0 Hz), 7.29 (2H, dd, J = 7.7, 7.4 Hz), 7.23 (2H, d, J = 7.1 Hz), 7.19 (1H, dd, J = 7.3, 7.3 Hz), 7.07 (1H, br d, J = 8.1 Hz), 4.08 (1H, ddd, J = 8.1, 6.1, 5.3 Hz), 3.77 (2H, s), 2.75-2.65 (2H, m), 2.01-1.95 (1H, m), 1.91-1.84 (1H, m), 1.41 (9H, s).  MS (ESI): 853.4 (100, 2M+H), 427.4 (100, M+H), 371.3 (50.2, M-t-Bu), 327.4 (88.9).
【０４１２】
パートＣ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−フェニルブタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化２２４】
2009500410.tif 000231
ＨＢＴＵ（１．９０×１０2ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７７．０ｍｇ、０．５０３ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７９μＬ、２．００ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（５．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３０９ｍｇ、０．５００ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＢの生成物（２１３ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２．００ｍＬ）溶液に移し、追加のアセトニトリル（２×０．５０ｍＬ）を使用して移動を定量した。得られた溶液を２２℃で０．５時間維持し、次いで真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に再溶解し、１０％のクエン酸水溶液（３×２５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗製油をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（４：１ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）、次いでＴＦＡ（９．００ｍＬ、１１７ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈを含む０〜３０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１９分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（８３．０ｍｇ、９３．７μｍｏｌ；１８．７％）が得られた。コンシステンシーの特性決定の目的で、０．１％のＴＦＡを含有するアセトニトリル／Ｈ2Ｏ（１：１ｖ／ｖ）中での凍結乾燥の繰り返し後、ＴＦＡ塩を調製した。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.57 (1H, s), 10.53 (1H, s), 9.02 (1H, t, J = 5.8 Hz), 8.39 (3H, br s), 7.88 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 7.43 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 7.33 (2H, dd, J = 7.6, 7.1 Hz), 7.24 (3H, m), 4.44 (2H, d, J = 5.6 Hz), 4.31 (2H, s), 4.03 (1H, br s), 3.52 (8H, s), 3.40 (4H, br t, J = 5.5 Hz), 3.07 (4H, br t, J = 5.6 Hz), 2.83-2.73 (2H, m), 2.14-2.07 (2H, m). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.7, 167.9, 165.3, 164.9, 157.9 (q, J = 32.3 Hz), 142.6, 140.6, 130.8, 128.5, 128.1, 127.7, 127.2, 126.1, 116.7 (q, J = 298 Hz), 54.3, 53.8, 52.2, 51.2, 48.6, 42.0, 33.3, 30.0.  MS (ESI): 662.3 (9.7, M+Na), 640.4 (31.0, M+H), 320.9 (100, M+H).  HRMS: C32H41FeN7O11の計算値: 755.2208; 実測値: 755.2200.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−ホモフェニルアラニン９９．７％。
【０４１３】
実施例９９
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、ギ酸塩の合成
【化２２５】
2009500410.tif 000232
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）プロパンアミドの調製
【化２２６】
2009500410.tif 000233
Ｂｏｃ−ＤＰｈｅ（Ｆ5）−ＯＨ（２３１ｍｇ、０．６５０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３４９μＬ、２．００ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例２９Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（２５１ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）、次いでｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（８０．０μＬ、０．４５９ｍｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加え、追加のＤＭＦ（２×１．００ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチルと１０％のクエン酸水溶液（各５０ｍＬ）との間に分配し、層を分離した。酢酸エチル層を１０％のクエン酸水溶液（２×２５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２５ｍＬ）、Ｈ2Ｏ（２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、６．００ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。この粗製物質を次の工程で直接使用した。
【０４１４】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛Ｎ−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）プロパノイルアミノ］カルバモイル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、ギ酸塩の調製
ＨＢＴＵ（１．９０×１０2ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７７．０ｍｇ、０．５０３ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７９μＬ、２．００ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（５．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３０９ｍｇ、０．５００ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＡの生成物（２５１ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２．００ｍＬ）溶液に移し、追加のアセトニトリル（２×０．５０ｍＬ）を使用して移動を定量した。得られた溶液を２２℃で０．５時間維持し、次いで真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に再溶解し、１０％のクエン酸水溶液（３×２５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗製油をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（４：１ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）、次いでＴＦＡ（９．００ｍＬ、１１７ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈを含む０〜３０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１９分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１．００×１０2ｍｇ、０．１０４ｍｍｏｌ；２０．８％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.43 (1H, br s), 8.68 (1H, t, J = 6.2 Hz), 7.79 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 7.36 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 4.36 (2H, br d, J = 6.0 Hz), 3.69 (1H, br t, J = 7.4 Hz), 3.38 (8H, s), 3.24 (2H, s), 3.08 (1H, dd, J = 13.7, 7.0 Hz), 2.93 (1H, dd, J = 13.4, 8.1 Hz), 2.80 (4H, br t, J = 6.4 Hz), 2.68 (4H, br t, J = 6.3 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.5, 170.6, 170.3, 165.1, 145.1 (d, J = 246 Hz), 143.9, 139.2 (d, J = 249 Hz), 136.8 (d, J = 245 Hz), 130.7, 127.5, 126.9, 111.2 (t, J = 15.9 Hz), 56.8, 55.7, 52.3, 52.0, 51.3, 41.7, 27.1.  MS (ESI): 778.3 (51.0, M+H), 389.7 (100, M+2H).  HRMS: C31H34F5FeN7O11の計算値: 831.1580; 実測値: 831.1568.
【０４１５】
実施例１００
２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−アミノ−３−［４−（フェニルカルボニルアミノ）フェニル］プロパノイルアミノ｝カルバモイル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２２７】
2009500410.tif 000234
パートＡ  −  （２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−［４−（フェニルカルボニルアミノ）フェニル］プロパン酸の調製
【化２２８】
2009500410.tif 000235
Ｂｏｃ−ＤＰｈｅ（４−ＮＨ2）−ＯＨ・ＴＦＡ（１８２ｍｇ、０．４６２ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２１２μＬ、１．５２ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ2Ｃｌ2（４．００ｍＬ）溶液を、塩化ベンゾイル（０．５１０ｍｍｏｌ；ＣＨ2Ｃｌ2中の０．５１Ｍ溶液１．００ｍＬ）の溶液を１０分間２２℃で滴下して処理した。得られた溶液を加熱還流し、３．５時間維持した。２２℃に冷却し、得られた溶液をＣＨ2Ｃｌ2（１５ｍＬ）で希釈し、２．５ＭのＨＣｌ（２×２０ｍＬ）、Ｈ2Ｏ（２×２０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して、白色の固体（４８．０ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ；２７．０％）を得た。少量の安息香酸がこの物質に混入している。
【０４１６】
パートＢ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−［４−（フェニルカルボニルアミノ）フェニル］プロパンアミド、ギ酸塩の調製
【化２２９】
2009500410.tif 000236
パートＡ（４８．０ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１９．０ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（４７．０ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（８８．０μＬ、０．５０５ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例２９Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（８２．０ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加えた。０．５時間後２２℃において、全ての揮発物を真空除去し、得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、６．００ｍＬ）で処理した。得られた溶液を０．３時間２２℃で撹拌し、次いで真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈを含む１０〜４５％のアセトニトリルの０．８８％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２５分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２４．０ｍｇ、４１．５μｍｏｌ；３３．３％）が得られた。
【０４１７】
パートＣ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−アミノ−３−［４−（フェニルカルボニルアミノ）フェニル］プロパノイルアミノ｝カルバモイル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、ギ酸塩の調製
【化２３０】
2009500410.tif 000237
ＨＢＴＵ（２８．０ｍｇ、７３．８μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１１．０ｍｇ、７１．８μｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（４１．０μＬ、０．２９４ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（１．５０ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（４６．０ｍｇ、７４．５μｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＢの生成物（４２．８ｍｇ、７４．０μｍｏｌ）のアセトニトリル（１．５０ｍＬ）溶液で処理した。得られた溶液を２２℃で０．５時間維持し、次いで真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（４５ｍＬ）に再溶解し、１０％のクエン酸水溶液（３×２０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗製油をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（４：１ｖ／ｖ、２５０μＬ）、次いでＴＦＡ（２．３０ｍＬ、２９．９ｍｍｏｌ）で処理した。１．５時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＨＣＯ2Ｈを含む０〜３０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２８．０ｍｇ、２８．３μｍｏｌ；３８．２％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.25 (1H, br s), 8.68 (1H, t, J = 6.2 Hz), 7.96 (2H, AB, JAB = 7.1 Hz), 7.84 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 7.74 (2H, AB, JAB = 8.4 Hz), 7.59 (1H, tt, J = 7.3, 1.2 Hz), 7.53 (2H, dd, J = 7.7, 7.2 Hz), 7.38 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 7.32 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 4.36 (2H, br d, J = 6.1 Hz), 3.97 (1H, br s), 3.36 (8H, s), 3.18 (2H, s), 3.18-3.15 (1H, m), 2.94 (1H, dd, J = 13.9, 7.8 Hz), 2.81 (4H, br t, J = 6.5 Hz), 2.64 (4H, br t, J = 6.4 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.5, 170.6, 169.2, 165.5, 165.4, 143.8, 138.0, 134.9, 131.5, 130.8, 130.7, 129.8, 128.3, 127.6, 127.5, 127.0, 120.3, 57.3, 56.6, 53.2, 52.3, 51.4, 41.7, 37.8.  MS (ESI): 807.3 (81.1, M+H), 404.3 (100, M+2H).  HRMS: C38H44FeN8O12の計算値: 860.2423; 実測値: 860.2420.
【０４１８】
実施例１０１
２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−アミノ−３−［４−（フェニルメトキシ）フェニル］プロパノイルアミノ｝カルバモイル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２３１】
2009500410.tif 000238
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−［４−（フェニルメトキシ）フェニル］プロパンアミドの調製
【化２３２】
2009500410.tif 000239
Ｂｏｃ−ＤＴｙｒ（Ｂｎ）−ＯＨ（２４１ｍｇ、０．６４９ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３４９μＬ、２．００ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例２９Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（２５１ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）、次いでｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（８０．０μＬ、０．４５９ｍｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加え、追加のＤＭＦ（２×１．００ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチルと１０％のクエン酸水溶液（各５０ｍＬ）との間に分配し、層を分離した。酢酸エチル層を１０％のクエン酸水溶液（２×２５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた固体をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、６．００ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。この粗製物質を次の工程で直接使用した。
【０４１９】
パートＢ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−アミノ−３−［４−（フェニルメトキシ）フェニル］プロパノイルアミノ｝カルバモイル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＢＴＵ（１．９０×１０2ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７７．０ｍｇ、０．５０３ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７９μＬ、２．００ｍｍｏｌを含有するアセトニトリル（５．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３０９ｍｇ、０．５００ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＡの生成物（２．６０×１０2ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２．００ｍＬ）溶液に移し、追加のアセトニトリル（２×０．５０ｍＬ）を使用して移動を定量した。得られた溶液を２２℃で０．５時間維持し、次いで真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に再溶解し、１０％のクエン酸水溶液（３×２５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗製油をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（４：１ｖ／ｖ、１．００ｍＬ）、次いでＴＦＡ（９．００ｍＬ、１１７ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む５〜３５％のアセトニトリルの０．８６％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（６６．０ｍｇ、５２．８μｍｏｌ；１０．５％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.61 (1H, s), 9.02 (1H, br t, J = 5.6 Hz), 8.21 (3H, br s), 7.89 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 7.45 (2H, AB, JAB = 7.4 Hz), 7.43 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 7.40 (2H, dd, J = 7.7, 7.3 Hz), 7.33 (1H, dd, J = 7.3, 7.2 Hz), 7.29 (2H, AB, JAB = 8.4 Hz), 7.00 (2H, AB, JAB = 8.5 Hz), 5.10 (2H, s), 4.44 (2H, br d, J = 5.5 Hz),. 4.30 (2H, br s), 4.10 (1H, br s), 3.52 (8H, s), 3.40 (4H, br t, J = 5.6 Hz), 3.18 (1H, dd, J = 14.0, 4.3 Hz), 3.07 (4H, br t, J = 5.8 Hz), 2.98 (1H, dd, J = 14.1, 8.2 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.7, 167.5, 165.1, 164.9, 157.8 (q, J = 32.0 Hz), 157.7, 142.6, 137.1, 130.8, 128.4, 127.8, 127.7, 127.6, 127.1, 126.5, 117.8, 114.9, 69.2, 54.3, 53.9, 52.5, 52.2, 48.7, 42.0, 36.3.  MS (ESI): 794.3 (68.6, M+H), 541.2 (23.9), 397.7 (100, M+2H).  HRMS: C38H45FeN7O12の計算値: 847.2470; 実測値: 847.2469.
【０４２０】
実施例１０２
２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛Ｎ−［（２−アミノインダン−２−イル）カルボニルアミノ］カルバモイル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２３３】
2009500410.tif 000240
パートＡ  −  Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］インダン−２−イル｝カルボキサミドの調製
【化２３４】
2009500410.tif 000241
Ｎ−Ｂｏｃ−２−アミノインダン−２−カルボン酸（１６６ｍｇ、０．５９９ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（８．００ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３４９μＬ、２．００ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで５分間２２℃において撹拌した。実施例２９Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（２５１ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）を予備活性化した溶液に一度に加え、追加のＤＭＦ（２×１．００ｍＬ）を使用して反応器の側面を洗浄した。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸水溶液（３×３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、１０．０ｍＬ）で処理し、０．５時間撹拌し、次いで真空濃縮した。この粗製物質を次の工程で直接使用した。
【０４２１】
パートＢ  −  ２−（｛２−［（｛Ｎ−［（４−｛Ｎ−［（２−アミノインダン−２−イル）カルボニルアミノ］カルバモイル｝フェニル）メチル］カルバモイル｝メチル）｛２−［ビス（カルボキシメチル）−アミノ］エチル｝アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ）酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＢＴＵ（１．９０×１０2ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７７．０ｍｇ、０．５０３ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２７９μＬ、２．００ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（６．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３０９ｍｇ、０．５００ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＡの生成物（２．６０×１０2ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（４．００ｍＬ）溶液に移した。得られた溶液を２２℃で０．５時間維持し、次いで真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）に再溶解し、１０％のクエン酸水溶液（３×３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗製油をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）、次いでＴＦＡ（８．００ｍＬ、１０４ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む５〜３５％のアセトニトリルの０．８６％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１８７ｍｇ、０．１６２ｍｍｏｌ；３２．３％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.53 (1H, s), 10.47 (1H, s), 9.02 (1H, br t, J = 5.7 Hz), 8.54 (2H, br s), 7.86 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 7.42 (2H, AB, JAB = 8.4 Hz), 7.39 (2H, dd, J = 5.3, 3.3 Hz), 7.31 (2H, dd, J = 5.5, 3.2 Hz), 4.44 (2H, br d, J = 5.4 Hz), 4.30 (2H, br s), 3.79 (2H, AB, JAB = 17.5 Hz), 3.52 (8H, s), 3.40 (4H, br t, J = 5.4 Hz), 3.31 (2H, AB, JAB = 17.6 Hz), 3.07 (4H, br t, J = 5.4 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.7, 171.0, 165.4, 164.9, 157.9 (q, J = 33.1 Hz), 142.6, 138.5, 130.8, 127.6, 127.4, 127.2, 124.8, 116.6 (q, J = 297 Hz), 64.1, 54.3, 53.9, 52.2, 48.7, 43.0, 42.0.  MS (ESI): 700.3 (100, M+H), 541.2 (82.3), 350.6 (91.8, M+2H).  HRMS: C32H39FeN7O11の計算値: 753.2052; 実測値: 753.2037.
【０４２２】
実施例１０３
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−インドール−３−イルプロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２３５】
2009500410.tif 000242
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−インドール−３−イルプロパンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化２３６】
2009500410.tif 000243
実施例２９Ａの生成物をＴＦＡのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ）で脱保護し、得られた塩（２５１ｍｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０．０ｍＬ）に溶解し、Ｂｏｃ−ＤＴｒｐ−ＯＨ（１８３ｍｇ、０．６０１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８４．０ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２０９ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（３４９μＬ、２．００ｍｍｏｌ）で連続的に処理した。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸水溶液（３×３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、１０．０ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む１５〜５０％のアセトニトリルの１．２％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１７分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２３６ｍｇ、０．３４７ｍｍｏｌ；６９．４％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.82 (1H, s), 10.49 (1H, s), 10.18 (1H, s), 8.27 (3H, br s), 7.95 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 7.69 (1H, d, J = 7.9 Hz), 7.57 (2H, AB, JAB = 8.1 Hz), 7.33 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.23 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.07 (1H, dd, J = 7.3, 7.3 Hz), 6.99 (1H, dd, J = 7.5, 7.2 Hz), 6.82 (1H, d, J = 8.4 Hz), 4.36 (1H, td, J = 9.8, 4.1 Hz), 4.12 (2H, br d, J = 4.5 Hz), 3.19 (1H, dd, J = 14.5, 3.7 Hz), 2.97 (1H, dd, J = 14.6, 10.2 Hz), 1.31 (9H, s). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ171.6, 164.8, 157.9 (q, J = 32.0 Hz), 155.1, 137.6, 136.0, 132.5, 128.7, 127.7, 127.3, 123.8, 120.8, 118.5, 118.1, 116.9 (q, J = 299 Hz), 111.2, 110.0, 77.9, 53.6, 41.9, 28.1.  MS (ESI): 903.5 (66.9, 2M+H), 452.3 (100, M+H), 396.2 (30.0, M-t-Bu), 352.3 (32.7, M-Boc).  HRMS: C24H30N5O4の計算値: 452.2292; 実測値: 452.2298.
【０４２３】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−インドール−３−イルプロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）−アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
ＨＢＴＵ（１３２ｍｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５３．０ｍｇ、０．３４６ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（１８５μＬ、１．３３ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（４．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（２２５ｍｇ、０．３６４ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＡの生成物（２２５ｍｇ、０．３３１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２．００ｍＬ）溶液に移した。得られた溶液を２２℃で０．５時間維持し、次いで真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）に再溶解し、１０％のクエン酸水溶液（３×３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ3（３×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗製油をＥｔ3ＳｉＨのＣＨ2Ｃｌ2溶液（１：１ｖ／ｖ、２．００ｍＬ）、次いでＴＦＡ（８．００ｍＬ、１０４ｍｍｏｌ）で処理した。２時間２２℃で撹拌後、得られた溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む５〜２５％のアセトニトリルの０．８％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２１分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１２４ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ；３１．７％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ11.06 (1H, s), 10.75 (1H, s), 10.65 (1H, s), 9.03 (1H, br t, J = 5.8 Hz), 8.18 (3H, br s), 7.90 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 7.78 (1H, d, J = 7.9 Hz), 7.44 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 7.39 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.33 (1H, d, J = 2.2 Hz), 7.12 (1H, td, J = 7.0, 1.1 Hz), 7.05 (1H, td, J = 7.0, 0.9 Hz), 4.45 (2H, br d, J = 5.8 Hz), 4.31 (2H, s), 4.13 (1H, br s), 3.52 (8H, s), 3.41 (4H, br t, J = 6.0 Hz), 3.38 (1H, dd, J = 15.0, 4.6 Hz), 3.16 (1H, dd, J = 15.0, 8.9 Hz), 3.07 (4H, br t, J = 5.9 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.7, 167.9, 165.1, 164.9, 157.9 (q, J = 32.7 Hz), 142.6, 136.3, 130.8, 127.7, 127.2, 127.0, 125.2, 121.2, 118.5, 118.4, 116.7 (q, J = 298 Hz), 111.5, 106.5, 54.3, 53.9, 52.2, 51.6, 48.7, 42.0, 27.7.  MS (ESI): 727.2 (83.7, M+H), 541.3 (21.0), 364.2 (61.9, M+2H), 355.7 (100).  HRMS: C33H40FeN8O11の計算値: 780.2161; 実測値: 780.2167.
【０４２４】
実施例１０４
２−｛［２−（｛［Ｎ−（４−｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝ブチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２３７】
2009500410.tif 000244
パートＡ  −  メチル４−［４−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）ブチル］ベンゾエートの調製
【化２３８】
2009500410.tif 000245
メチル４−（４−ヒドロキシブチル）ベンゾエート（２．１０ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）（Taylor, E. C.; Harrington, P. M. J. Org. Chem. 1990, 55, 3222）、フタルイミド（１．５６ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）およびＰＰｈ3（２．７８ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０．０ｍＬ）溶液を０℃においてアゾジカルボン酸ジイソプロピル（１．９５ｍＬ、９．９０ｍｍｏｌ）を０．２５時間滴下して処理した。得られた溶液を２２℃に３時間かけてゆっくりと加温し、次いで真空濃縮し、Ｅｔ2Ｏ（７５ｍＬ）で処理してＰｈ3Ｐ（Ｏ）の沈殿を誘導した。Ｅｔ2Ｏを真空除去し、得られた固体をシリカのクロマトグラフィーで精製すると（１：３の酢酸エチル／ペンタン）白色の固体（２．４０ｇ、７．１１ｍｍｏｌ；７１．８％）が得られた。精製した生成物が反応していないフタルイミド（約１０％ｗ／ｗ）を含有していたことに留意されたい。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ7.94 (2H, AA'XX', JAX = 8.3 Hz, JAA' = 1.9 Hz), 7.85 (2H, dd, J = 5.4, 3.0 Hz), 7.72 (2H, dd, J = 5.5, 3.0 Hz), 7.24 (2H, AA'XX', JAX = 8.4 Hz, JXX' = 1.9 Hz), 3.90 (3H, s), 3.73 (2H, t, J = 6.9 Hz), 2.72 (2H, t, J = 7.2 Hz), 1.77-1.67 (4H, m). 13C NMR (CDCl3, 151 MHz): δ168.4, 167.1, 147.5, 133.9, 132.1, 129.7, 128.4, 127.9, 123.2, 51.9, 37.6, 35.3, 28.2, 28.1.  MS (ESI): 360.2 (50.1, M+Na), 338.1 (9.8, M+H), 306.2 (100, M-メタノール).
【０４２５】
パートＢ  −  ２−｛Ｎ−［４−（４−カルボキシフェニル）ブチル］カルバモイル｝安息香酸の調製
【化２３９】
2009500410.tif 000246
パートＡの生成物（１．００ｇ、２．９６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ2Ｏ（４：１ｖ／ｖ、１５．０ｍＬ）溶液を２２℃においてＬｉＯＨ・Ｈ2Ｏ（０．５００ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）で一度に処理した。得られた溶液を１６時間撹拌し、次いで０．５ＭのＨＣｌで酸性化した（ｐＨ＝４〜５）。得られた懸濁液を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、５％のクエン酸水溶液および飽和ＮａＣｌ（各２×２５ｍＬ）で洗浄し、次いで焼結ガラス漏斗を使用して濾過した。このように得た白色の粉末を廃棄し、一方、濾液をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮して白色の粉末を得、集めた固体を合わせた（９５７ｍｇ、２．８０ｍｍｏｌ；９４．６％）。1H NMR (CDCl3, 600 MHz): δ7.43 (2H, AA'XX', JAX = 8.2 Hz, JAA' = 1.8 Hz), 7.39 (1H, dd, J = 7.7, 1.2 Hz), 7.37 (1H, brt, J = 5.8 Hz), 7.04 (1H, td, J = 7.5, 1.4 Hz), 6.97 (1H, td, J = 7.6, 1.3 Hz), 6.94 (1H, dd, J = 7.5, 1.3 Hz), 6.80 (2H, AA'XX', JAX = 8.3 Hz, JXX' = 1.8 Hz), 2.88 (2H, td, J = 7.0, 5.8 Hz), 2.24 (2H, t, J = 7.6 Hz), 1.28-1.23 (2H, m), 1.18-1.13 (2H, m).  MS (ESI): 342.2 (88.5, M+H), 324.2 (100, M-H2O).
【０４２６】
パートＣ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（４−アミノブチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−フェニルプロパンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化２４０】
2009500410.tif 000247
ＨＢＴＵ（４４７ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１８２ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（２９９μＬ、２．１５ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（１０．０ｍＬ）中のパートＢの生成物（１８３．ｍｇ、０．５３６ｍｍｏｌ）の溶液を実施例８７Ａの生成物（３２９ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）で２２℃において一度に処理した。０．２５時間後、溶液を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、５％のクエン酸水溶液（５×１０ｍＬ）、０．５ＭのＮａＯＨ（５×１０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をヒドラジン水和物（１５．０ｍＬ、３０９ｍｍｏｌ）で直接処理し、０．５時間２２℃で撹拌し、次いで酢酸エチル（１２５ｍＬ）で希釈し、分液漏斗に移した。酢酸エチル層をＮａＨＣＯ3（３×５ｍＬ）およびＮａＣｌ（２×５ｍＬ）の飽和溶液で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた固体をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（４１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む２０〜５０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（９３．７ｍｇ、０．１６５ｍｍｏｌ；３０．７％）が得られた。MS (ESI): 909.45 (37.4, M+2H), 455.3 (100, M+H), 399.2 (18.8, M-t-Bu), 355.2 (64.0, M-Boc).
【０４２７】
パートＤ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（４−｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−フェニルプロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝ブチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化２４１】
2009500410.tif 000248
ＨＢＴＵ（４９．３ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（３６．３μＬ、０．２６０ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（３．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（８０．５ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＣの生成物（７４．０ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）で一度に処理した。得られた溶液を２２℃で０．７５時間維持し、次いで真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）に再溶解し、５％のクエン酸水溶液（５×１０ｍＬ）、０．５ＭのＮａＯＨ（５×１０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。次いでＴＦＡ／ＣＨ2Ｃｌ2／Ｅｔ3ＳｉＨ（９０：８：２ｖ／ｖ、３．００ｍＬ）を使用して広範囲の脱保護を実施した。１．５時間後２２℃において、溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む０〜３０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２３分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（９０．３ｍｇ、７６．１μｍｏｌ；５８．５％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.62 (1H, s), 10.56 (1H, s), 8.46 (1H, br t, J = 5.3 Hz), 8.26 (3H, br s), 7.84 (2H, AB, JAB = 8.1 Hz), 7.37-7.34 (6H, m), 7.32-7.30 (1H, m), 4.16 (3H, br s), 3.50 (8H, s), 3.37 (4H, br t, J = 5.6 Hz), 3.25 (1H, br d, J = 12.5 Hz), 3.16 (2H, td, J = 6.4, 6.0 Hz), 3.04 (4H, br t, J = 5.7 Hz), 2.67 (2H, t, J = 7.6 Hz), 1.62 (2H, tt, J = 7.5, 7.3 Hz), 1.46 (2H, tt, J = 7.4, 7.3 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.7, 167.5, 165.3, 164.4, 157.9 (q, J = 32.5 Hz), 146.5, 134.5, 129.7, 129.6, 128.6, 128.4, 127.6, 127.2, 116.7 (q, J = 298 Hz), 54.3, 53.8, 52.3, 52.1, 48.6, 38.5, 37.1, 34.5, 28.4, 27.9.  MS (ESI): 730.4 (61.4, M+H), 365.8 (100, M+2H).  HRMS: C34H45FeN7O11の計算値: 783.2521; 実測値: 782.2514.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−フェニルアラニン９９．０％。
【０４２８】
実施例１０５
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛３−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−フェニルブタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２４２】
2009500410.tif 000249
パートＡ  −  Ｎ−アミノ（３−｛［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］メチル｝フェニル）カルボキサミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化２４３】
2009500410.tif 000250
３−｛［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］メチル｝安息香酸（２．５０ｇ、６．９６ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１５．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２．５１ｇ、６．６２ｍｍｏｌ）およびコリジン（２．５０ｍＬ、１８．９ｍｍｏｌ）で連続的に処理し、次いで３分間２２℃で撹拌した。カルバジン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．８４０ｇ、６．３６ｍｍｏｌ）を一度に加え、得られた溶液を０．５時間２２℃で撹拌した。粗製反応混合物を酢酸エチル（３５０ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸水溶液（５×１０ｍＬ）、０．５ＭのＮａＯＨ（５×１０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×２０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた固体をＣＨ2Ｃｌ2（１５．０ｍＬ）に溶解し、ＴＦＡ（１５．０ｍＬ、０．１９０ｍｏｌ）で処理した。０．５時間後２２℃において、全ての揮発物を真空除去し、残渣をアセトニトリル／Ｈ2Ｏ（１：１ｖ／ｖ）に再溶解し、次いで凍結乾燥すると、オフホワイトの固体が得られ、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
【０４２９】
パートＢ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［３−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−フェニルブタンアミドの調製
【化２４４】
2009500410.tif 000251
ＨＢＴＵ（２０６ｍｇ、０．５４３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８３．９ｍｇ、０．５４８ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１８１μＬ、１．０４ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（５．００ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｈｐｈｅ−ＯＨ（１５９ｍｇ、０．５６９ｍｍｏｌ）の溶液をパートＡの生成物（２．６０×１０2ｍｇ、０．５１８ｍｍｏｌ）で一度に処理した。０．５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（１２５ｍＬ）で希釈し、５％のクエン酸水溶液（５×１０ｍＬ）、０．５ＭのＮａＯＨ（５×１０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、１０．０ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた固体を後の工程で直接使用した。
【０４３０】
パートＣ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛３−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−フェニルブタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）−アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化２４５】
2009500410.tif 000252
ＨＢＴＵ（２０１ｍｇ、０．５３０ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（１４１μＬ、１．０１ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（５．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３２７ｍｇ、０．５２９ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＢの生成物（２１５ｍｇ、０．５０４ｍｍｏｌ）で処理した。０．２５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（１２５ｍＬ）で希釈し、５％のクエン酸水溶液（５×１０ｍＬ）、０．５ＭのＮａＯＨ（５×１０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。ＴＦＡ／ＣＨ2Ｃｌ2／Ｅｔ3ＳｉＨ（９０：８：２ｖ／ｖ、５．００ｍＬ）を使用して広範囲の脱保護を実施した。１．５時間後２２℃において、溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１０〜３５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（２０６．３ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ；３５．３％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.61 (1H, s), 10.57 (1H, s), 9.02 (1H, br t, J = 5.7 Hz), 8.39 (3H, br s), 7.84 (1H, br s), 7.81 (1H, dt, J = 7.3, 1.7 Hz), 7.53 (1H, dt, J = 7.7, 1.6 Hz), 7.50 (1H, dd, J = 7.7, 7.3 Hz), 7.34 (2H, dd, J = 8.2, 6.9 Hz), 7.24 (2H, d, J = 8.0 Hz), 7.23 (1H, tt, J = 7.0, 1.3 Hz), 4.43 (2H, br d, J = 5.7 Hz), 4.27 (2H, s), 4.03 (1H, br s), 3.51 (8H, s), 3.40 (4H, br t, J = 5.6 Hz), 3.06 (4H, br t, J = 5.8 Hz), 2.83-2.73 (2H, m), 2.14-2.06 (2H, m). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.6, 167.8, 165.4, 164.8, 157.8 (q, J = 32.0 Hz), 140.6, 138.8, 132.2, 130.8, 128.6, 128.5, 128.0, 126.9, 126.1, 126.0, 116.9 (q, J = 299 Hz), 54.3, 53.9, 52.2, 51.1, 48.6, 42.2, 33.3, 29.9.  MS (ESI): 072.2 (100, M+H), 351.7 (79.0, M+2H).  HRMS: C32H41FeN7O11の計算値: 755.2208; 実測値: 755.2216.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−ホモフェニルアラニン９８．０％。
【０４３１】
実施例１０６
２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−フェニルブタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２４６】
2009500410.tif 000253
パートＡ  −  （２Ｒ）−Ｎ−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−フェニルブタンアミドの調製
【化２４７】
2009500410.tif 000254
ＨＢＴＵ（２０５ｍｇ、０．５４０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８３．５ｍｇ、０．５４５ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１．８０×１０2μＬ、１．０３ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（５．００ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｈｐｈｅ−ＯＨ（１５９ｍｇ、０．５６９ｍｍｏｌ）の溶液を実施例２９Ａの生成物（２．００×１０2ｍｇ、０．５１６ｍｍｏｌ）で一度に処理した。０．７５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（１２５ｍＬ）で希釈し、５％のクエン酸水溶液（５×１０ｍＬ）、０．５ＭのＮａＯＨ（５×１０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、１０．０ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた固体を後の工程で直接使用した。
【０４３２】
パートＢ  −  Ｎ−｛［４−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−フェニルブタノイルアミノ｝カルバモイル）フェニル］メチル｝−６−アミノヘキサンアミド、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化２４８】
2009500410.tif 000255
ＨＢＴＵ（２０６ｍｇ、０．５４３ｍｍｏｌ）およびｉ−Ｐｒ2ＮＥｔ（１８０μＬ、１．０３ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（５．００ｍＬ）中の実施例３Ａの生成物（２０１ｍｇ、０．５６９ｍｍｏｌ）の溶液を実施例９８Ｂの生成物（２．２０×１０2ｍｇ、０．５１６ｍｍｏｌ）で一度に処理した。０．７５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（１２５ｍＬ）で希釈し、５％のクエン酸水溶液（５×１０ｍＬ）、０．５ＭのＮａＯＨ（５×１０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた油をＥｔ2ＮＨのアセトニトリル溶液（１：１ｖ／ｖ、１０．０ｍＬ）で処理し、０．３時間撹拌し、次いで真空濃縮した。得られた固体をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡおよび１０％のＨ2Ｏを含む１０〜３５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１８分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１２６ｍｇ、０．１９３ｍｍｏｌ；３７．５％）が得られた。
【０４３３】
パートＣ  −  ２−［（２−｛［（Ｎ−｛５−［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−フェニルブタノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］ペンチル｝カルバモイル）メチル］｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ｝エチル）（カルボキシメチル）アミノ］酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
【化２４９】
2009500410.tif 000256
ＨＢＴＵ（７３．１ｍｇ、０．１９３ｍｍｏｌ）およびＥｔ3Ｎ（５１．２δＬ、０．３６７ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（４．００ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（１１９ｍｇ、０．１９３ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液をパートＢの生成物（１．２０×１０2ｍｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）で処理した。０．２５時間後２２℃において、粗製反応混合物を酢酸エチル（１２５ｍＬ）で希釈し、５％のクエン酸水溶液（５×１０ｍＬ）、０．５ＭのＮａＯＨ（５×１０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。次いでＴＦＡ／ＣＨ2Ｃｌ2／Ｅｔ3ＳｉＨ（９０：８：２ｖ／ｖ、４．００ｍＬ）を使用して広範囲の脱保護を実施した。１．５時間後２２℃において、溶液を真空濃縮し、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１０〜３５％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。１４分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、白色の固体（１３１ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ；５６．１％）が得られた。1H NMR (DMSO-d6, 600 MHz): δ10.55 (1H, s), 10.52 (1H, s), 8.43 (1H, br t, J = 5.4 Hz), 8.38 (3H, br s), 7.85 (2H, AB, JAB = 8.2 Hz), 7.37 (2H, AB, JAB = 8.3 Hz), 7.33 (2H, dd, J = 7.7, 7.5 Hz), 7.24 (2H, d, J = 7.6 Hz), 7.24-7.22 (1H, m), 4.33 (2H, br d, J = 5.8 Hz), 4.16 (2H, s), 4.02 (1H, br s), 3.50 (8H, s), 3.37 (4H, br t, J = 5.6 Hz), 3.12 (2H, td, J = 6.8, 6.0 Hz), 3.04 (4H, br t, J = 5.6 Hz), 2.83-2.72 (2H, m), 2.16 (2H, t, J = 7.5 Hz), 2.13-2.07 (2H, m), 1.54 (2H, tt, J = 7.7, 7.5 Hz), 1.45 (2H, tt, J = 7.4, 7.0 Hz). 13C NMR (DMSO-d6, 151 MHz): δ172.6, 172.1, 167.8, 165.3, 164.3, 157.9 (q, J = 33.1 Hz), 144.0, 140.6, 130.5, 128.5, 128.0, 127.5, 127.0, 126.1, 116.5 (q, J = 297 Hz), 54.3, 53.9, 52.2, 51.2, 48.6, 41.7, 38.6, 35.1, 33.2, 29.9, 28.4, 26.0, 24.8.  MS (ESI): 815.3 (56.9, M+H), 654.2 (19.5), 408.2 (100, M+2H).  HRMS: C38H52FeN8O12の計算値: 868.3049; 実測値: 868.3038.生成物の光学純度はキラルＧＬＣ分析で確立した；Ｄ−ホモフェニルアラニン９８．６％。
【０４３４】
実施例１０７
２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−（２−ナフチル）プロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２５０】
2009500410.tif 000257
パートＡ  −  ｔｅｒｔ−ブチル２−［（２−｛［（Ｎ−｛［４−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−３−（２−ナフチル）プロパノイルアミノ｝カルバモイル）フェニル］メチル｝カルバモイル）メチル］［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝エチル）｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ］アセテートの調製
【化２５１】
2009500410.tif 000258
Ｂｏｃ−Ｄ−２−Ｎａｌ−ＯＨ（２５０ｍｇ、０．７９３ｍｍｏｌ）、実施例２９Ｂの中間体生成物（４３９ｍｇ、１．１３４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．２７６ｍＬ、１．５８５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（３６１ｍｇ、０．９５１ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で１８時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸（３×１００ｍＬ）、１ＮのＮａＯＨ（３×１００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、減圧濃縮した。得られた残渣を５０：５０のＴＥＡ：アセトニトリル（５０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で４５分間撹拌した。揮発物を真空除去し、得られた残渣をシクロヘキサン（３×２５ｍＬ）で磨砕すると、無色の固体（２４４ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 925.5 (95, 2M+H), 463.4 (100, M+H).
【０４３５】
上記の固体（２４４ｍｇ、０．５２８ｍｍｏｌ）、２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（３９１ｍｇ、０．６３３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１８４μＬ、１．０５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）溶液をＨＢＴＵ（２４０ｍｇ、０．６３３ｍｍｏｌ）で処理し、室温において窒素下で４５分間撹拌した。反応を酢酸エチル（８０ｍＬ）で希釈し、１０％のクエン酸（３×５０ｍＬ）、１ＮのＮａＯＨ（３×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（８０ｍＬ）で連続的に洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、減圧濃縮した。得られた粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む４５から７２％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２６．６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２２０ｍｇ、３９％、ＨＰＬＣ純度９０％）として得られた。MS (ESI): 1062.6 (100, M+H), 453.9 (10, M-Boc-tBu+2H).
【０４３６】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（｛４−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−３−（２−ナフチル）プロパノイルアミノ）カルバモイル］フェニル｝メチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＡの生成物（６０ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）を９０：１０：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（１０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で４時間撹拌した。溶液を濃縮し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む１．８から２８．８％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で精製した。２５．６分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（３０ｍｇ、７１％、ＨＰＬＣ純度９６％）として得られた。1H NMR (DMSO-d6): δ7.91-7.85 (m, 3H), 7.81 (s, 1H), 7.73 (d, AA'BB'系のAA'部, J = 8.4 Hz, 2H), 7.53-7.47 (m, 2H), 7.47-7.42 (m, 1H), 7.39 (d, AA'BB'系のBB'部, J = 8.4 Hz, 2H), 4.40 (s, 2H), 4.36 (t, AXY系のA部, J = 7.8 Hz, 1H), 3.82 (s, 2H), 3.66 (s, 8H), 3.41 (dd, AXY系のX部 Jax = 7.8 Hz, Jxy = 15 Hz, 1H), 3.33 (dd, AXY系のY部 Jax = 7.8 Hz, Jxy = 15 Hz, 1H), 3.23-3.13 (m, 8H); 13C NMR (1: 1 CD3C: D2O): δ173.31, 169.10, 168.92, 168.31, 162.35 (q, J = 34.4 Hz), 144.10, 134.47, 133.76, 132.41, 131.27, 129.80, 128.99, 128.87, 128.74, 128.39, 127.60, 127.41, 56.31, 55.97, 54.26, 53.22, 51.47, 43.73, 37.88.  MS (ESI): 738.3 (100, M+H), 369.9 (40, M+2H); HRMS: C35H41FeN7O11 (M+Fe-2H)の計算値: 791.2208; 実測値: 791.2216.
【０４３７】
実施例１０８
２−｛［２−（｛［Ｎ−（２−｛２−［（Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−フェニルブタノイルアミノ）カルバモイル］−２−フェニルエチル｝カルバモイル）メトキシ］エトキシ｝エチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の合成
【化２５２】
2009500410.tif 000259
パートＡ  −  ｔｅｒｔ−ブチル２−［（２−｛［（Ｎ−｛２−［２−（｛Ｎ−［（１Ｒ）−１−（Ｎ−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−４−フェニルブタノイルアミノ｝カルバモイル）−２−フェニルエチル］カルバモイル｝メトキシ）エトキシ］エチル｝カルバモイル）メチル］［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝エチル）｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ］アセテートの調製
【化２５３】
2009500410.tif 000260
Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ（６９７ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（６２５ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２５３ｇ、１．６５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６５０μＬ、３．７３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を室温において窒素下で２０分間撹拌した。溶液を実施例９８Ａの生成物（４４０ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ、純度６０％）および十分なＤＩＥＡ（３５０μＬ、２．００ｍｍｏｌ）で処理し、ｐＨを１０に上げた。溶液をさらに１８時間撹拌し、真空濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、１０％のクエン酸（２×５０ｍＬ）、１ＮのＮａＯＨ（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮すると、明るい茶色の固体（３４０ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 563.3 (100, M-Boc+H), 685.3 (10, M+Na).
【０４３８】
５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル中の上記の固体の溶液を窒素下、室温において３０分間撹拌し、減圧を使用して濃縮した。得られた固体残渣をシクロヘキサン（３×３０ｍＬ）で磨砕し、真空濾過によって集めると、きれいな黄色の粉末が得られた。この固体をＤＭＦ（６．０ｍＬ）中の２−（２−｛２−［（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルアミノ］エトキシ｝エトキシ）酢酸（２８６ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２８６ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３２ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２５０μＬ、１．５０ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に加え、溶液を室温において窒素下で２０時間撹拌した。減圧を使用して溶液を濃縮し、得られた油性混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解した。溶液を１０％のクエン酸（５０ｍＬ）、１ＮのＮａＯＨ（５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で連続的に洗浄した。酢酸エチル層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮すると、黄褐色の固体（２３０ｍｇ）が得られた。MS (ESI): 708.3 (100, M+H-Boc), 830.4 (5, M+Na).
【０４３９】
上記の固体（２０２ｍｇ、０．２５０ｍｍｏｌ）を５０：５０のＤＥＡ：アセトニトリル（１．０ｍＬ）に溶解し、窒素下で室温において３０分間撹拌した。溶液を濃縮し、得られた固体をシクロヘキサン（３×３０ｍＬ）で磨砕すると、きれいな黄色の粉末が得られた。この固体をＤＭＦ（１．０ｍＬ）中の２−｛ビス［２−（ビス｛［（ｔｅｒｔ−ブチル）オキシカルボニル］メチル｝アミノ）エチル］アミノ｝酢酸（１８５ｍｇ、０．３００ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１０４ｍｇ、０．２７５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１７４μＬ、１．００ｍｍｏｌ）の予め調製した溶液に加え、撹拌を室温において窒素下で１８時間続けた。揮発物を減圧除去し、得られた残渣をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む４５から７２％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。２７．０分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の粉末（３２ｍｇ、１１％、ＨＰＬＣ純度１００％）として得られた。MS (ESI): 1185.5 (100, M+H).
【０４４０】
パートＢ  −  ２−｛［２−（｛［Ｎ−（２−｛２−［（Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［Ｎ−（（２Ｒ）−２−アミノ−４−フェニルブタノイルアミノ）カルバモイル］−２−フェニルエチル｝カルバモイル）メトキシ］エトキシ｝エチル）カルバモイル］メチル｝｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝アミノ）エチル］（カルボキシメチル）アミノ｝酢酸、トリフルオロ酢酸塩の調製
パートＢの生成物（３２．０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）を９０：７：３のＴＦＡ：ジクロロメタン：ＴＩＳ（５．０ｍＬ）に溶解し、室温において窒素下で３時間撹拌し、減圧濃縮した。粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）カラム（４１．４×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む９から３６％のアセトニトリルの０．９％／分の勾配を使用して流速８０ｍＬ／分で精製した。１８分で溶離した生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（２４ｍｇ、９１％、ＨＰＬＣ純度９０％）として得られた。MS (ESI): 861.3 (40, M+H), 431.3 (100, M+2H).HRMS: C39H54FeN8O14 (M-2H+Fe)の計算値: 914.3103; 実測値: 914.3111; キラル分析: 99.7% D-Hphe, 97.3% L-Phe.
【０４４１】
実施例１０９〜１１７
錯体［157Ｇｄ（Ｈ−Ｄ−アミノ酸−ヒドラジド−ＤＴＰＡ）］の合成
【化２５４】
2009500410.tif 000261
実施例１１４を以下の通りに調製した：実施例１９の生成物（３．９７ｇ、３．６４ｍｍｏｌ）のＭｉｌｌｉ−Ｑ  Ｈ2Ｏ（１８．２ｍＬ）溶液をＧｄＣｌ3（１．４４ｇ、５．４６ｍｍｏｌ）で２２℃において一度に処理した。溶液のｐＨをＮａＯＨ水溶液（２５ｍｍｏｌ）で約７に調整し、ｐＨ７の移動相を使用して反応混合物を直接ＨＰＬＣ分析すると、錯体形成が完了していることが示された。反応混合物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム（２１．２×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０〜２０％のアセトニトリルの１．０％／分の勾配を使用して流速２０ｍＬ／分で直接精製し、１５ｍＭのＮＨ4ＯＡｃを水性成分として使用した。１２分で溶離した主要生成物のピークを凍結乾燥すると、標題化合物が無色の固体（３．０１ｇ、３．８２ｍｍｏｌ；＞９８％）として得られた。残りの実施例は同様に調製した。収率および特性決定データを表１で示す。
【０４４２】
【表１】
2009500410.tif 000262
【０４４３】
実施例１１８および１１９
錯体［99mＴｃ（Ｈ−Ｄ−アミノ酸−ヒドラジド−ＨＹＮＩＣ）（トリシン）（ＴＰＰＴＳ）］の合成
【化２５５】
2009500410.tif 000263
ＴＰＰＴＳ（４．４８ｍｇ）、トリシン（６．３ｍｇ）、マンニトール（４０ｍｇ）、コハク酸バッファー、ｐＨ４．８および０．１％のＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６４界面活性剤を含有するリードシールド凍結乾燥バイアルに、注射用滅菌水（１．１ｍＬ）、脱イオン水または５０％のエタノール水溶液（０．２ｍＬ）中の適切なＨ−Ｄ−アミノ酸−ヒドラジド−ＨＹＮＩＣ−コンジュゲート（２０μｇ）および生理食塩水（０．２ｍＬ）中の99mＴｃＯ4-（５０±５ｍＣｉ）を加えた。再構成したキットを９５℃の水浴中で１０分間加熱し、５分間室温で冷却させた。反応混合物の試料をＨＰＬＣで分析した。ＲＣＰ結果を表２に挙げる。
【０４４４】
ＨＰＬＣ法
検出器：ＩＮＵＳ  β−Ｒａｍ、２２０ｎｍでＵＶ
カラム：Ｚｏｒｂａｘ  Ｒｘ  Ｃ１８、２５ｃｍ×４．６ｍｍ
ガード：Ｚｏｒｂａｘ  Ｃ１８
温度：周囲温度
流速：１．０ｍＬ／分
溶媒Ａ：２５ｍＭの酢酸アンモニウム（ｐＨ調整なし）
溶媒Ｂ：１００％アセトニトリル
勾配：
ｔ（分）        ０  ２０  ２１  ２５  ２６  ３２
溶媒Ｂ（％）  １０  ４０  ６０  ６０  １０  １０
【０４４５】
【表２】
2009500410.tif 000264
【０４４６】
実施例１２０〜１５２
［14Ｃ］Ｈ−Ｄ−アミノ酸−ヒドラジド−アセチルコンジュゲートの合成
【化２５６】
2009500410.tif 000265
【０４４７】
パートＡ  −  ［14Ｃ］酢酸ナトリウム溶液の調製
２５０ミリキュリーの［１−14Ｃ］酢酸、ナトリウム塩、固体５０〜６０ｍＣｉ／ｍｍｏｌの比放射能をＧｅｎｅｒａｌ  Ｅｌｅｃｔｒｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｃａｒｅ（以前のＡｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）から得た。［１−14Ｃ］酢酸、ナトリウム塩、固体を無水アセトニトリル（２５ｍＬ）に溶解して、［14Ｃ］酢酸ナトリウムストック溶液を調製した。溶液を１０分間渦流混合した。液体シンチレーションカウンター（ＬＳＣ）法を使用するラジオアッセイ用にアリコートを取り出した。放射性溶液の測定したアリコートを、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｕｌｔｉｍａ  Ｇｏｌｄ（商標）シンチレーション液（５ｍＬ）を含有する１０ｍＬのガラスシンチレーションバイアルに分配することによりＬＳＣラジオアッセイを実施し、その後、Ｐａｃｋａｒｄモデル２５００ＴＲまたは１６００ＴＲ  ＬＳＣのいずれかを使用して放射能含有量を測定した。その後、このストック溶液を１０倍希釈して、反応で使用する溶液を調製した。各反応の前に、試薬溶液のＬＳＣラジオアッセイを実施した。
【０４４８】
パートＢ  −  ［14Ｃ］酢酸ナトリウムのアミノ酸−ヒドラジドへのコンジュゲーション
ＨＢＴＵおよびＤＩＥＡのＤＭＦ溶液中の14Ｃ含有酢酸ナトリウムにアミンを周囲温度（２５℃）でカップリングさせることにより、Ｂｏｃ−アミノ酸−ヒドラジドのアセチル化を実施した。各物質を５ｍＬの内部が円錐形のＷｈｅａｔｏｎ（商標）厚壁型反応バイアル中で合わせ、１時間反応させた。
【０４４９】
パートＣ  −  脱保護および最終精製
以下の方法の１つを使用して側鎖保護基を除去した。
方法Ａ：ＲＴにおいて１５分間５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタン。
方法Ｂ：ＲＴにおいて４５分間９５：２．５：２．５のＴＦＡ：アニソール：水。
方法Ｃ：２：１のアセトニトリル：Ｈ2Ｏ中２ｍｏｌ％のＰｄ（ＯＡｃ）2、４ｍｏｌ％のＴＰＰＴＳ、Ｅｔ2ＮＨ
Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ  Ｃ−１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ）カラムの質量分析計（ＬＣ／ＭＳ）と適合したＨＰＬＣを使用して粗製反応混合物を分析した。溶液を減圧濃縮し、粗生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（商標）ＬＵＮＡ  Ｃ１８（２）カラム（１０ｍｍ×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで０．１％のトリフルオロ酢酸を含有するＨ2Ｏ：アセトニトリル勾配を使用して流速５ｍＬ／分で精製した。生成物画分を減圧濃縮し、Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ  Ｃ−１８カラム（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ）のＬＣ／ＭＳで０．１％のギ酸を含有するＨ2Ｏ：アセトニトリル勾配を使用して分析した。放射能検出器と適合したＬＣＭＳおよびＨＰＬＣを使用してＲＣＰを確認した。純度データを表３に示す。
【０４５０】
【表３】
2009500410.tif 000266
【０４５１】
実施例１５３〜２１３
111Ｉｎ標識ＤＴＰＡおよびＤＯＴＡコンジュゲートの合成
【化２５７】
2009500410.tif 000267
Ｈ−Ｄ−アミノ酸−ヒドラジド−ＤＴＰＡコンジュゲート（５０μｇ）の０．５ＭのｐＨ６．０酢酸アンモニウム（１．０ｍＬ）溶液を、０．０５ＮのＨＣｌ中の111ＩｎＣｌ3ストック溶液（２．０ｍＣｉ）で処理した。得られた溶液を沸騰水浴で２０分間加熱した。Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ  Ｃ−１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ）カラムの質量分析計（ＬＣ／ＭＳ）と適合したＨＰＬＣを使用し、２５ｍＭのＮＨ4ＯＡｃ（ｐＨ６．８）を含有するＨ2Ｏ：アセトニトリル勾配を使用して、粗製反応混合物を分析した。生成物をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（商標）ＬＵＮＡ  Ｃ１８（２）カラム（１０ｍｍ×２５０ｍｍ）のＨＰＬＣで２５ｍＭのＮＨ4ＯＡｃ（ｐＨ６．８）を含有するＨ2Ｏ：アセトニトリル勾配を使用して精製した。生成物画分を減圧濃縮し、Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ  Ｃ−１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ）カラムの放射能検出器と適合したＨＰＬＣを使用し、２５ｍＭのＮＨ4ＯＡｃ（ｐＨ６．８）を含有するＨ2Ｏ：アセトニトリル勾配を使用して分析した。純度データを表４に示す。
【０４５２】
【表４−１】
2009500410.tif 000268
【表４−２】
2009500410.tif 000269
【０４５３】
実施例２１４〜２１６
68Ｇａ標識ＤＴＰＡおよびＤＯＴＡコンジュゲートの合成
【化２５８】
2009500410.tif 000270
Ｈ−ｄ−アミノ酸−ヒドラジド−キレーターコンジュゲート（３５０μｇ）のＮＨ4ＯＡｃバッファー（０．５Ｍ、ｐＨ６．０、４５０μＬ）溶液を68ＧａＣｌ3（１８ｍＣｉ、３３μｍｏｌ）で処理し、１００℃で３０分間加熱した。反応混合物をＢｅｒｔｈｏｌｄ  Ｘおよびγ線検出器と適合したＨＰＬＣで調べると、表５で示した通り、約１００％の純度を示した。
【０４５４】
【表５】
2009500410.tif 000271
【０４５５】
実施例２１９
Ｅｘ  Ｖｉｖｏ血管結合アッセイ
ニュージーランド白色ウサギから正常な大動脈を得た。腹大動脈に沿ってバルーンストリップし、１６〜２２週間高脂肪食（コレステロール０．５％）を摂取させたニュージーランド白色ウサギから、アテローム硬化性プラークを有する大動脈を得た。３−Ｆ  Ｆｏｇａｒｔｙカテーテルで腹大動脈および左腸骨大腿動脈に沿って血管を損傷させた。この手順は、線維性キャップで覆われた脂質に富むコアを有する複雑さが増大した病変をウサギに生じさせる。ウサギのプラーク大動脈または正常なウサギの大動脈（０．５ｃｍ）を、リン酸緩衝生理食塩水（４５０μＬ）で希釈した14Ｃ標識化合物１０ｎＣｉまたは99mＴｃ標識化合物１．５μＣｉまたは111Ｉｎ標識化合物０．１３５μＣｉまたは68Ｇａ標識化合物０．１３５μＣｉまたは153Ｇｄ標識化合物０．１３５μＣｉと共に２時間３７℃でインキュベートした。この試料からの上清を集め、ＨＰＬＣで分析して血管の存在下での化合物の安定性を決定した。次いで、血管組織をリン酸緩衝生理食塩水（３×１０ｍＬ）で洗浄した。リン酸緩衝生理食塩水（１０ｍＬ）を組織に加え、３７℃で１時間インキュベートした。次いで組織をリン酸緩衝生理食塩水（３×１０ｍＬ）で洗浄した。洗浄した組織をＣ−１４標識化合物について組織オキシダイザー中で酸化させた。酸化した組織中のカウントをβカウンターで決定した。99mＴｃ標識化合物または111Ｉｎ標識化合物または68Ｇａ標識化合物または153Ｇｄ標識化合物と共にインキュベートした血管はγカウンターでカウントした。組織に結合した化合物量はインキュベートした化合物の百分率として決定した。これは、以下の式を使用して計算した。
【数１】
2009500410.tif 000272
データを表７に示す。
【０４５６】
【表６−１】
2009500410.tif 000273
【表６−２】
2009500410.tif 000274
【表６−３】
2009500410.tif 000275
【０４５７】
実施例２２０
試験基質のアミノペプチダーゼＮ切断
パートＡ  −  基質の調製
試験化合物を５０：５０のＴＦＡ：ジクロロメタンに溶解し、周囲温度において窒素下で１０分間放置して、アミノ酸のＮ末端からＢｏｃ保護基を除去した。溶液を濃縮し、得られた油性残渣を５０：５０のアセトニトリル：水に溶解し、凍結乾燥した。得られた綿状固体をＡＰＮアッセイで直接使用した。
【０４５８】
パートＢ  −  酵素アッセイ
アミノペプチダーゼＮは、別のアミノ酸に結合したタンパク質およびペプチドのＮ末端でアミノ酸を切断する。試験基質のストック溶液を１００％のＤＭＳＯ中、濃度８ｍＭで調製した。ストック溶液（４．７μＬ）をバッファー（５０ｍＭのＨｅｐｅｓ／ｐＨ７．５、１０ｍＭのＣａＣｌ2、０．１％  Ｂｒｉｊ）に反応中０．５ｍＭの試験基質の最終濃度になるように加えた。この反応溶液に酵素（ＡＰＮ）０．０２Ｕを加え、溶液を混合し、速やかに酢酸（１５μＬ）を含有するＨＰＬＣバイアルに混合物３０μＬを移して、ｔ＝０分の測定をした。試験管内の混合物の残りを３７℃で２５分間インキュベートした。２５分の時点で、酢酸（１５μＬ）を含有するＨＰＬＣバイアルに混合物３０μＬを移して、ｔ＝２５分の測定をした。試験基質および生成物をＺｏｒｂａｘ  ＳＢ−Ｃ１８カラム（４．６×１５０ｍｍ、５ミクロン）の逆相ＨＰＬＣで０．１％のＴＦＡを含む水：アセトニトリル勾配を使用して流速１．０ｍＬ／分で、ＵＶ検出を用いて分離した。ピーク面積を合計し、基質ピーク面積を使用して以下の等式の速度定数ｋを決定した。
Ｋ＝｛（加水分解した％／１００）＊［Ｓ］｝／［Ｅ］＊［時間］
式中、Ｓ＝試験基質濃度（μｍｏｌ）
Ｅ＝アミノペプチダーゼＮ濃度（単位／ｍｌ）
Ｋ＝加水分解した基質のμｍｏｌ／分／単位酵素
試験基質の加水分解速度を表８に示す。
【０４５９】
【表７】
2009500410.tif 000276
【０４６０】
実施例２２１
ＭＭＰ基質のＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９媒介加水分解の反応速度測定
パートＡ  −  ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９の活性化および活性部位滴定
精製したＭＭＰ−２（１０μｇ）またはＭＭＰ−９（１０μｇ）をＴＣＮバッファー（５０ｍＭのトリス（ｐＨ７．５）、１０ｍＭのＣａＣｌ2、１５０ｍＭのＮａＣｌ）１００μＬ中で再構成した。精製したヒトＭＭＰ−９を１ｍＭのアミノフェニル水銀酢酸（ＡＰＭＡ）と共に１６時間３７℃でインキュベートすることによって活性化した。Ｐｒｏ−ＭＭＰ−２を１ｍＭのＡＰＭＡと共に２時間３７℃でインキュベートすることによって活性化した。インキュベーションの最後に１００％のグリセロール（１００μＬ）を活性ＭＭＰ−２および活性ＭＭＰ−９に加えた（最終濃度：グリセロール５０％）。活性ＭＭＰ−２および活性ＭＭＰ−９をアリコートし、各々−２０℃および−２０℃で保存した。
【０４６１】
パートＢ  −  ＭＭＰ−２／ＭＭＰ−９の活性部位滴定
反応速度試験の前に、活性部位滴定試験によって活性プロテアーゼのレベルを定量した。ストック濃度２．５ｍＭの１００％のＤＭＳＯに溶解したＧＭ６００１を使用して、ＭＭＰ−９およびＭＭＰ−２の活性部位を滴定した。ＧＭ６００１の希釈液（１：２）をＴＣＮバッファーで調製して、最終濃度５ｎＭから０．０８ｎＭのＧＭ６００１を活性部位滴定アッセイに与えた。活性化したＭＭＰ−２または活性化したＭＭＰ−９（２ｎＭ）を増大濃度のＧＭ６００１と共に３７℃において９６ウェル黒色マイクロタイタープレート中でインキュベートし、アッセイバッファー（５０ｍＭのトリシン／ｐＨ７．５、１００ｍＭのＣａＣｌ2、０．２％のＮａＮ3）中の蛍光基質Ｉ（Ｍｃａ−Ｐ−Ｌ−Ｇ−Ｌ−Ｄｐａ−Ａ−Ｒ−ＮＨ2）（１５０μＬ）を各ウェルに加えた。プレートを１分間室温で激しく振とうし、２７℃で１時間インキュベートした。反応を０．５ＭのＥＤＴＡ２０μＬで停止した。蛍光分光光度計で励起波長３２０ｎｍおよび発光波長３９５ｎｍにおいてプレートを読み取った。モリソン式およびＫａｌｅｉｄａｇｒａｐｈソフトウェア（Ｒｅａｄｉｎｇ、ペンシルベニア州）を使用して、活性酵素の濃度を決定した。
【０４６２】
パートＣ  −  基質加水分解の反応速度測定
放射性ＨＰＬＣアッセイを使用して、活性ＭＭＰ−２および活性ＭＭＰ−９による基質加水分解の反応速度パラメータを決定した。異なる試験基質（１ｍＭ）のストック溶液を１００％のＤＭＳＯ中で調製した。試験基質のストック溶液を６６．６倍（１５ｎＭ）にバッファー（５０ｍＭのＨｅｐｅｓ／ｐＨ７．５、１０ｍＭのＣａＣｌ2、０．１％のＢｒｉｊ）で希釈して、作用ストック溶液を得た。試験基質（１０μＬ）の作用ストック溶液を試験管中のバッファー（１１５μＬ）に加え、３７℃で２分間加温した。この溶液に活性ＭＭＰ−２（最終濃度１０ｎＭ）または活性ＭＭＰ−９（最終濃度２ｎＭ）の作用ストック１５μｌを加えた。最後に、放射性標識試験基質１０μＣｉを加え、溶液を混合し、速やかに０．５ＭのＥＤＴＡ７．５μＬを含有するＨＰＬＣバイアルに混合物６７．５μｌを移して、ｔ＝０分の測定をした。試験管内の混合物の残りを３７℃で６０分間インキュベートした。６０分の時点で、０．５ＭのＥＤＴＡ７．５μＬを含有するＨＰＬＣバイアルに混合物６７．５μｌを移して、ｔ＝６０分の測定をした。放射性標識基質および生成物をＺｏｒｂａｘ  Ｒｘ−Ｃ１８カラム（４．６×２５０ｍｍ）の逆相ＨＰＬＣでカラム温度を２５℃に維持しながら、流速１ｍＬ／分および試料サイズ６０μＬで分離した。移動相Ａ（ＭＰＡ）は２５ｍＭの酢酸アンモニウムであり、移動相Ｂ（ＭＰＢ）は１００％のアセトニトリルであった。２％のＭＰＢで３分、４０％のＭＰＢで１３分、８０％のＭＰＢで１８分の段階勾配を使用して、生成物と基質を分離した。放射性標識をＩＮ／ＵＳβｒａｍ検出器で検出した。ピーク面積を合計し、基質ピーク面積を使用して以下の等式の速度定数ｋを決定した。
ｋ＝（−ｌｎ（Ｓｔ／Ｓｏ））／ｔ
式中、Ｓｔ＝６０分の基質ピーク
Ｓｏ＝０分の基質ピーク
Ｔ＝３６００秒。
この反応において、基質濃度はＫｍよりはるかに低く、したがって
Ｋｃａｔ／Ｋｍ＝ｋ／［Ｅｔ］（Ｍ-1Ｓ-1）
種々の試験基質のＫｃａｔ／Ｋｍ値を表９に示す。
【０４６３】
【表８】
2009500410.tif 000277
【０４６４】
実施例２２２
インビボのＡｐｏＥマウス大動脈内取込み試験
アポリポタンパク質Ｅ（ａｐｏＥ）ノックアウトマウスは、腕頭動脈、大動脈弓および腹大動脈でアテローム性動脈硬化症を発症する高コレステロール血症のモデルである。マウスに高脂肪食を与えてプラーク形成を促進し、食餌３７〜４１週間のマウスで化合物を試験した。化合物を放射性標識し（上記の通り14Ｃ、99mＴｃまたは111Ｉｎ）、０．０２〜４．０ｍＣｉ／ｋｇで麻酔をかけたマウスに単回、ボーラス注射で尾静脈を介して投与した。薬物動態解析のために血液試料を尾を介して注射後０〜３０分に集め、組織採集のためにマウスをＣＯ2により６０分で安楽死させた。大動脈を生理食塩水でフラッシュし、左心室を通り大腿静脈を経て流出させた。次いで、大動脈を心臓から腎分岐部に取り出し、追加の組織試料を集めた（血液、筋肉、肝臓、腎臓、心臓、肺、脾臓および腕頭動脈）。全ての試料を計量し、放射能についてアッセイした。組織内取込みを、組織１ｇ当たりの注射用量の百分率として表す（％ＩＤ／ｇ）。大動脈対血液比は％ＩＤ／ｇデータから計算した。データを表１０に示す。
【０４６５】
【表９−１】
2009500410.tif 000278
【表９−２】
2009500410.tif 000279
【０４６６】
実施例２２３
インビボのウサギ大動脈内取込み試験
大動脈バルーン内皮傷害を有するニュージーランド白色雄性ウサギ（３ｋｇ）にアテローム性動脈硬化症を誘発させ、次いで０．５％のコレステロール食を２２週間与えた。試験化合物を放射性標識し（上記の通り14Ｃ、99mＴｃまたは111Ｉｎ）、０．０２〜１．０ｍＣｉ／ｋｇで、麻酔をかけたウサギに単回、ボーラス注射で辺縁耳静脈を介して投与した。注射後０、２、５、７、１０、１５、３０および６０分で中央耳動脈から血液試料を集めた。組織採集のために注射後６０分でウサギを安楽死させた（血液、筋肉、胆汁、尿、腎臓、肝臓、脾臓、心臓、肺、結腸、小腸、胃、精巣）。腹大動脈（上部、中部および下部）、ならびに左右腿動脈を集めた。プラークを有するウサギおよびプラークを有さないウサギの両方に化合物を投与して大動脈内取込みを比較した。全ての試料を計量し、放射能をアッセイした。組織内取込みは、組織１ｇ当たりの注射用量の百分率として表した（％ＩＤ／ｇ）。大動脈対血液比はＩＤ％／ｇデータから計算した。データを表１１に示す。
【０４６７】
【表１０】
2009500410.tif 000280
【０４６８】
実施例２２４
インビボのＡｐｏＥマウス大動脈ＭＲＩイメージング
図１から３に示したのは、この一連の化合物の１つを投与したＡｐｏＥノックアウトマウスの腹大動脈の磁気共鳴イメージの例である。マウスに高脂肪食を与えてプラーク形成を促進し、食餌３７〜４１週間のマウスで化合物を試験した。試験化合物を０．０５ｍｍｏｌ／ｋｇ（０．１ｍｍｏｌ／ｋｇ投与した実施例１１４は除く）で、麻酔をかけたマウスに単回、ボーラス注射で尾静脈を介して投与した。注射後１時間、４．７テスラで２．５ｃｍの撮像視野（約９０ミクロンの解像度）を使用して、ブラックブラッド、フロー抑制スピンエコー法でイメージを得た。図４は、Ｍａｇｎｅｖｉｓｔ（登録商標）（ガドペンテト酸ジメグルミン）、ガドリニウムのＤＴＰＡキレートから誘導した同様のイメージである。
【０４６９】
背景イメージの強度は変化するが、ガドペンテト酸ジメグルミンと比較して、一連の化合物は全て大動脈においてかなり増大した相対イメージ強度をもたらす（これらの水平断イメージの環状構造としてみられる）ことが分かる。参考までに、同じ方法を使用して造影剤の注射前に得たイメージを図５に示す。これは、周囲の筋肉組織と殆どまたは全く対比を示さず、造影剤を使用して得たイメージと比較して信号対雑音比が低下していたことを示す。
【０４７０】
本開示が上記の例示的実施例に限定されるものではなく、本開示の本質的な特性から逸脱することなくその他の特定の形をとり得ることは当業者に明らかであろう。したがって、実施例はあらゆる点で例示であって、限定するものではないと考え、上記の実施例よりも添付の請求項を参照することが望ましく、したがって請求項と等価の意味および範囲内の変化は全て本開示に包含されることを意図する。
【図面の簡単な説明】
【０４７１】
【図１】実施例１１４。
【図２】実施例１１６。
【図３】実施例１１３。
【図４】ガドペンテト酸ジメグルミン。
【図５】注射前のイメージ。
【国際調査報告】
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