(57)【要約】【課題】水溶液に可溶性の電解重合性単量体、及び、上記単量体により得ることができる電気活性プローブの提供。【解決手段】本発明は、水溶液中で重合させることを目的とする、１つの電解重合性単位及び電子供与性基を含む電解重合性単量体であって、水溶液中でイオン化する少なくとも１本のアームも含む電解重合性単量体に関する。さらに本発明は、重合方法、それにより得られる電気活性プローブ、及び、生体試料中の標的リガンドの検出法にも関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
水溶液中で重合させることを目的とする、１つの電解重合性単位、電子供与性基、及び、水溶液中でイオン化する少なくとも１本のアームも含む電解重合性単量体。
【請求項２】
少なくとも上限１ｍＭの濃度、好ましくは少なくとも上限１０ｍＭの濃度、そして好ましくは少なくとも上限３０ｍＭの濃度で蒸留水に溶解することを特徴とする、請求項１に記載の単量体。
【請求項３】
イオン化アームとして、電解重合性単位と電子供与性基との間の結合を提供する、水溶液中でイオン化する結合アームを含むことを特徴とする、請求項１又は２に記載の単量体。
【請求項４】
イオン化アームとして、電子供与性基のみと結合した、水溶液中でイオン化するフリーアームを含むことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項５】
電子供与性基のみと結合したフリーアームを含むことを特徴とする、請求項３に記載の単量体。
【請求項６】
フリーアームは、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、タンパク質、抗原、抗体、ハプテン、オリゴ糖及びビオチンから選択される生体リガンド（Ｌ１）を、好ましくはポリヌクレオチドを保持することを特徴とする、請求項４又は５のいずれかに記載の単量体。
【請求項７】
電解重合性単位は、アセチレン、ピロール、チオフェン、インドール、アニリン、アジン、ｐ−フェニレンビニレン、ｐ−フェニレン、ピレン、フラン、セレノフェン、ピリダジン、カルバゾール、アクリレート、メタクリレート、及び、それらの誘導体から選択されることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項８】
電解重合性単位はピロールであり、イオン化結合アームとの結合は、好ましくは該ピロールの３位に提供されることを特徴とする、請求項７に記載の単量体。
【請求項９】
電子供与基は、メタロセン、キノン又はそれらの誘導体のうちの１つであり、好ましくはフェロセンであることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項１０】
以下の式（Ｉ）：
【化１】
2009500507.tif 000048
式中、
−Ｍは、遷移金属、好ましくはＦｅ、Ｒｕ又はＯｓであり、
−Ａ１は以下の配列を含むイオン化結合アームであり、
・−Ａ２−Ｘ−Ａ３、ここで、
・Ｘは、−ＮＲ１−、−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−又は−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７−を表し、
・Ｙは、Ｏ又はＮＨを表し、
・Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−、−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、
・Ａ３は、−（ＣＨ２）ｎ１−、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、
・ｍ１及びｎ１は、それぞれ独立して、１〜６の範囲の整数を表し；Ｘが−ＮＲ１−であり、基Ａ２及びＡ３がそれぞれ−（ＣＨ２）ｍ１−及び−（ＣＨ２）ｎ１−を表すならば、ｍ１＋ｎ１の合計は２〜６の範囲に入ることが理解され、
・ｍ２及びｎ３は、それぞれ独立して、０〜３の範囲、好ましくは１〜３の範囲の整数を表し、
・ｍ３、ｎ２、ｍ４、ｎ４、ｍ５及びｎ５は、それぞれ独立して、０〜６の範囲、好ましくは１〜６の範囲の整数を表し、
・Ｒ１、Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、水素原子又は（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基を表し、かつ、
・Ｒ２は、水素原子、又は（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、シアノエチル基、若しくは２−クロロフェニル基を表すか、
・又は−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−Ａ５−、ここで、
・Ａ４は、−（ＣＨ２）ｐ１−又は−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）−を表し、
・Ａ５は、−（ＣＨ２）ｑ１−又は−ＮＲ５−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ２−を表し、
・ｎは、２〜６の範囲の整数を表し、
・ｐ１、ｑ１、ｐ２及びｑ２は、それぞれ独立して、１〜６の範囲の整数を表し、
・Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基を表し、
・Ｒ６、Ｒ７は、それぞれ独立して、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基を表し、
−Ｒは、水素原子、又は、例えばモノメトキシトリチル基、ジメトキシトリチル基、トシル基、トリイソプロピルシリル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、９−フルオレニル−オキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、トリフェニルメタンスルフェニル基及びアセチル基から選択されるアミン官能基の保護基を表す；
である単量体。
【請求項１１】
以下の式（Ｉａ）：
【化２】
2009500507.tif 000049
ここで、Ｍ、Ａ２、Ａ３及びＲは請求項１０で定義されるとおりであり、配列Ａ２及びＡ３の少なくとも１つは単位−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ−を含み、ここでｍは請求項１０で定義されるとおりのｍ３、ｍ５、ｎ２又はｎ４を表すことが理解される；
に対応することを特徴とする、請求項１０に記載の単量体。
【請求項１２】
以下の式（Ｉｃ）：
【化３】
2009500507.tif 000050
ここで、Ｍ、Ａ２、Ａ３、Ｒ、Ｒ６及びＲ７は請求項１０で定義されるとおりであり、配列Ａ２及びＡ３の少なくとも１つは単位−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ−を含み、ここでｍは請求項１０で定義されるとおりのｍ３、ｍ５、ｎ２又はｎ４を表すことが理解される；
に対応することを特徴とする、請求項１０に記載の単量体。
【請求項１３】
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ−（ＣＨ３）を表すことを特徴とする、請求項１２に記載の単量体。
【請求項１４】
Ａ２は−（ＣＨ２）ｍ１−を表し、かつ、Ａ３は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、ここで、ｍ１、ｎ４、ｎ５及びＲ４は請求項１０で定義されるとおりであることを特徴とする、請求項１１〜１３のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項１５】
ｍ１＝１、ｎ４＝２、ｎ５＝１、そしてＲ４＝Ｈであることを特徴とする、請求項１４に記載の単量体。
【請求項１６】
以下の式（Ｉｂ）：
【化４】
2009500507.tif 000051
ここで、Ｍ、Ａ２、Ａ３、Ｒ２及びＲは請求項１０で定義されるとおりである；
に対応することを特徴とする、請求項１０に記載の単量体。
【請求項１７】
Ｙ＝Ｏであることを特徴とする、請求項１６に記載の単量体。
【請求項１８】
Ｒ２は水素原子を表すことを特徴とする、請求項１６及び１７のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項１９】
Ａ２及びＡ３がそれぞれ−（ＣＨ２）ｍ１−及び−（ＣＨ２）ｎ１−を表し、ここで、ｍ１及びｎ１は請求項１０で定義されるとおりであることを特徴とする、請求項１６〜１８のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項２０】
ｍ１＝３かつ、ｎ１＝２であることを特徴とする、請求項１９に記載の単量体。
【請求項２１】
イオン化結合アームとピロール単位との間の結合が、該ピロールの３位にあることを特徴とする、請求項１０〜２０のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項２２】
Ｍは鉄であることを特徴とする、請求項１０〜２１のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項２３】
Ｒは水素原子であることを特徴とする、請求項１０〜２２のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項２４】
以下の式（ＩＩ）：
【化５】
2009500507.tif 000052
式中、
−Ｍ、イオン化結合アームＡ１及びＲは、請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ６は、以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ１が、配列−Ａ２−ＮＲ１−Ａ３−又はＡ２−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７−Ａ３−であって、式中Ｒ１、Ａ２、Ａ３、Ｒ６及びＲ７が請求項１０で定義されるとおりであり、かつ、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＲ１−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＲ１は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−ＮＲ１−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＲ１は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＲ１−又は−Ａ２−ＮＲ１−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、Ｒ４、ｎ５及びＲ１は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−ＮＲ１−又は−Ａ２−ＮＲ１−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５、Ｒ４及びＲ１は請求項１０で定義されるとおりであるか
・Ａ１が配列−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−Ａ３−であって、式中Ｒ２、Ａ２、Ａ３及びＹが請求項１０で定義されるとおりであり、かつ、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、ｎ５、Ｙ、Ｒ４及びＲ２は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５、Ｒ２、Ｒ４及びＹは請求項１０で定義されるとおりであるか
・Ａ１が配列−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−Ａ５−であって、式中Ａ４、ｎ及びＡ５が請求項１０で定義されるとおりであり、
・Ａ４が−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）−を表す場合、Ａ５が−（ＣＨ２）ｑ１−を表すならばＡ６は配列−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、Ａ５が−ＮＲ５−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ２−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−ＮＲ５−又は−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｐ２、Ｒ５、ｑ１、ｑ２及びｎは請求項１０で定義されるとおりであり、ｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であるか、
・Ａ４が−（ＣＨ２）ｐ１−を表す場合、Ａ５が−（ＣＨ２）ｑ１−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であり、Ａ５が−ＮＲ５−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ２−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−ＮＲ５−又は−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｐ１、ｑ１、ｑ２、ｎ及びＲ５は請求項１０で定義されるとおりであり、ｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であり、
−Ｚ１は、水素原子、又は、Ｚ１が結合した該スペーサーアームＡ６のアミン、アルコキシ又はカルボキシル末端官能基それぞれの官能性としての、アルコール、アミン又はカルボン酸の保護基又は活性化基を表す；
である単量体。
【請求項２５】
以下の式（ＩＩａ）：
【化６】
2009500507.tif 000053
式中、
−Ｍ及びＲは、請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−、−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、ここでｍ１〜ｍ５及びＲ３は請求項１２で定義されるとおりであり、
−Ａ３は、−（ＣＨ２）ｎ１−、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、ここでｎ１〜ｎ５及びＲ４は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ６は、以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２及びｎ３は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２及びｎ３は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、Ｒ４及びｎ５は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５及びＲ４は請求項１０で定義されるとおりであり、かつ、
−Ｚ１は、水素原子、又は、Ｚ１が結合した該スペーサーアームＡ６のアミン又はカルボキシル末端官能基それぞれの官能性としての、アミン又は酸の保護基又は活性化基を表す；
に対応することを特徴とする、請求項２４に記載の単量体。
【請求項２６】
以下の式（ＩＩｃ）：
【化７】
2009500507.tif 000054
式中、
−Ｍ、Ｒ、Ｒ６及びＲ７は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−、−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、ここでｍ１〜ｍ５及びＲ３は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ３は、−（ＣＨ２）ｎ１−、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、ここでｎ１〜ｎ５及びＲ４は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ６は、以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２及びｎ３は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２及びｎ３は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、Ｒ４及びｎ５は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５及びＲ４は請求項１０で定義されるとおりであり、かつ、
−Ｚ１は、水素原子、又は、Ｚ１が結合した該スペーサーアームＡ６のアミン又はカルボキシル末端官能基それぞれの官能性としての、アミン又は酸の保護基又は活性化基を表す；
に対応することを特徴とする、請求項２４に記載の単量体。
【請求項２７】
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ−（ＣＨ３）を表すことを特徴とする、請求項２６に記載の単量体。
【請求項２８】
Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでＡ２、ｎ４及びＲ４は請求項１０で定義されるとおりであり、かつ、Ｚ１はそれが結合したアミン官能基の活性化基を表し、アミン官能基とホスホルアミデートモノエステル、ホスホルアミデートジエステル、Ｈ−ホスホルアミデート又はホスホルアミダイトを形成することを特徴とする、請求項２４〜２７のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項２９】
配列Ａ２及びＡ３の少なくとも１つは単位−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ−を含み、ここでｍは請求項１０で定義されるとおりのｍ３、ｍ５、ｎ２又はｎ４を表すことを特徴とする、請求項２４〜２８のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項３０】
式中：
−Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−を表し、
−Ａ３は、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、
−Ａ６は、−（ＣＨ２）ｍ１−ＮＨ−又は、−（ＣＨ２）ｍ１−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｎ４、Ｒ４及びｎ５は請求項１０で定義されるとおりであり、かつ、
−Ｚ１は、水素原子、又は、例えば、トリフルオロアセチル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基及び９−フルオレニルメトキシカルボニル基から選択されるアミンの保護基であるか又はＺ１はそれが結合したアミン官能基の活性化基を表し、アミン官能基とホスホルアミデートモノエステル、ホスホルアミデートジエステル、Ｈ−ホスホルアミデート又はホスホルアミダイトを形成する；
請求項２４〜２９のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項３１】
ｍ１＝１、ｎ４＝２、ｎ５＝１及びＲ４＝Ｈであることを特徴とする、請求項３０に記載の単量体。
【請求項３２】
以下の式（ＩＩｂ）：
【化８】
2009500507.tif 000055
式中、
−Ｍ、Ｒ、Ａ２、Ｙ、Ｒ２及びＡ３は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ６は、以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２及びＹは請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、Ｒ４、ｎ５、Ｙ及びＲ２は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５、Ｒ２、Ｒ４及びＹは請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ｚ１は、水素原子、又は、Ｚ１が結合した該スペーサーアームＡ６のアミン、アルコキシ又はカルボキシル末端官能基それぞれの官能性としての、アルコール、アミン又はカルボン酸の保護基又は活性化基を表す；
に対応することを特徴とする、請求項２４に記載の単量体。
【請求項３３】
Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでＡ２、Ｙ、Ｒ２、ｎ４及びＲ４は請求項１２で定義されるとおりであり、かつ、Ｚ１はＺ１が結合したスペーサーアームＡ６のアミン又はアルコキシ官能基の活性化基を表し、それが結合したアミン官能基とはホスホルアミデートモノエステル、ホスホルアミデートジエステル、Ｈ−ホスホルアミデート又はホスホルアミダイトを、それが結合したアルコキシ官能基とはホスホジエステル、ホスホトリエステル、Ｈ−ホスホネート又はホスホルアミダイトを、それぞれ形成することを特徴とする、請求項３２に記載の単量体。
【請求項３４】
Ｙ＝Ｏであることを特徴とする、請求項３２及び３３のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項３５】
Ｒ２は水素原子を表すことを特徴とする、請求項３２〜３４のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項３６】
Ａ２及びＡ３がそれぞれ−（ＣＨ２）ｍ１−及び−（ＣＨ２）ｎ１−を表し、かつ、Ａ６は−（ＣＨ２）ｍ１−Ｏ−を表し、ここで、ｍ１及びｎ１は請求項１０で定義されるとおりであることを特徴とする、請求項３２〜３５のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項３７】
ｍ１＝３かつ、ｎ１＝２であることを特徴とする、請求項３６に記載の単量体。
【請求項３８】
イオン化結合アームとピロール単位との間の結合が、該ピロールの３位にあることを特徴とする、請求項２４〜３７のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項３９】
Ｍは鉄であることを特徴とする、請求項２４〜３８のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項４０】
Ｒは水素原子であることを特徴とする、請求項２４〜３９のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項４１】
以下の式（ＩＩＩ）：
【化９】
2009500507.tif 000056
式中、
−Ｍ、前記イオン化結合アームＡ１及びＲは請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ６は以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ１が配列−Ａ２−ＮＲ１−Ａ３−又は−Ａ２−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７−Ａ３−であり、式中Ｒ１、Ａ２、Ａ３、Ｒ６及びＲ７は請求項１０で定義されるとおりであり、かつ、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＲ１−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＲ１は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−ＮＲ１−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＲ１は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＲ１−又は−Ａ２−ＮＲ１−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、ｎ５、Ｒ４及びＲ１は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−ＮＲ１−又は−Ａ２−ＮＲ１−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５、Ｒ４及びＲ１は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ１が配列−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−Ａ３−であり、式中Ｒ２、Ａ２、Ａ３及びＹは請求項１０で定義されるとおりであり、かつ、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、ｎ５、Ｙ、Ｒ４及びＲ２は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５、Ｒ２、Ｒ４及びＹは請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ１が配列−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−Ａ５−であって、式中Ａ４、ｎ及びＡ５は請求項１０で定義されるとおりであり、
・Ａ４が−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）−を表す場合、Ａ５が−（ＣＨ２）ｑ１−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、Ａ５が−ＮＲ５−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ２−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−ＮＲ５−又は−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｐ２、Ｒ５、ｑ１、ｑ２及びｎは請求項１０で定義されるとおりであり、ｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であるか、
・Ａ４が−（ＣＨ２）ｐ１−を表す場合、Ａ５が−（ＣＨ２）ｑ１−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であるか、Ａ５が−ＮＲ５−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ２−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−ＮＲ５−又は−Ａ４−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｐ１、ｑ１、ｑ２、ｎ及びＲ５は請求項１０で定義されるとおりであり、ｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であり、
−Ａ７は、結合アーム又は直接の結合を表し、かつ、
−Ｌ１は、生体リガンドを表す；
である単量体。
【請求項４２】
以下の式（ＩＩＩａ）：
【化１０】
2009500507.tif 000057
式中、
−Ｍ及びＲは、請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−、−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、ここでｍ１〜ｍ５及びＲ３は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ３は、−（ＣＨ２）ｎ１−、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、ここでｎ１〜ｎ５及びＲ４は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ６は、以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２及びｎ３は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２及びｎ３は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、Ｒ４及びｎ５は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５及びＲ４は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ７は、結合アーム又は直接の結合を表し、かつ、
−Ｌ１は、生体リガンドを表す；
に対応することを特徴とする、請求項４１に記載の単量体。
【請求項４３】
以下の式（ＩＩＩｃ）：
【化１１】
2009500507.tif 000058
式中、
−Ｍ、Ｒ、Ｒ６及びＲ７は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−、−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、ここでｍ１〜ｍ５及びＲ３は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ３は、−（ＣＨ２）ｎ１−、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、ここでｎ１〜ｎ５及びＲ４は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ６は、以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２及びｎ３は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２及びｎ３は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、Ｒ４及びｎ５は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５及びＲ４は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ７は、結合アーム又は直接の結合を表し、かつ、
−Ｌ１は、生体リガンドを表す；
に対応することを特徴とする、請求項４１に記載の単量体。
【請求項４４】
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ−（ＣＨ３）を表すことを特徴とする、請求項４３に記載の単量体。
【請求項４５】
配列Ａ２及びＡ３の少なくとも１つは単位−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ−を含み、ここでｍは請求項１０で定義されるとおりのｍ３、ｍ５、ｎ２又はｎ４を表すことを特徴とする、請求項４２〜４４のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項４６】
式中：
−Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−を表し、
−Ａ３は、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、かつ、
−Ａ６は、−（ＣＨ２）ｍ１−ＮＨ−又は、−（ＣＨ２）ｍ１−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｎ４、Ｒ４及びｎ５は請求項１０で定義されるとおりである、
請求項４２〜４５のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項４７】
ｍ１＝１、ｎ４＝２、ｎ５＝１及びＲ４＝Ｈであることを特徴とする、請求項４６に記載の単量体。
【請求項４８】
以下の式（ＩＩＩｂ）：
【化１２】
2009500507.tif 000059
式中、
−Ｍ、Ｒ、Ａ２、Ｙ、Ｒ２及びＡ３は請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ６は、以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、Ｒ４、ｎ５、Ｙ及びＲ２は請求項１０で定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５、Ｒ２、Ｒ４及びＹは請求項１０で定義されるとおりであり、
−Ａ７は、結合アーム又は直接の結合を表し、かつ、
−Ｌ１は、生体リガンドを表す；
に対応することを特徴とする、請求項４１に記載の単量体。
【請求項４９】
Ｙ＝Ｏであることを特徴とする、請求項４８に記載の単量体。
【請求項５０】
Ｒ２は水素原子を表すことを特徴とする、請求項４８及び４９のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項５１】
Ａ２及びＡ３がそれぞれ−（ＣＨ２）ｍ１−及び−（ＣＨ２）ｎ１−を表し、かつ、Ａ６は−（ＣＨ２）ｍ１−Ｏ−を表し、ここで、ｍ１及びｎ１は請求項１０で定義されるとおりであることを特徴とする、請求項４８〜５０のいずれか１つに記載の式（ＩＩＩｂ）の単量体。
【請求項５２】
ｍ１＝３かつ、ｎ１＝２であることを特徴とする、請求項５１に記載の単量体。
【請求項５３】
イオン化結合アームとピロール単位との間の結合が、該ピロールの３位にあることを特徴とする、請求項４１〜５２のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項５４】
Ｍは鉄であることを特徴とする、請求項４１〜５３のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項５５】
Ｒは水素原子であることを特徴とする、請求項４１〜５４のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項５６】
生体リガンドは、ポリヌクレオチド、抗原、タンパク質、抗体、ポリペプチド、ハプテン、オリゴ糖又はビオチンから選択されることを特徴とする、請求項４１〜５５のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項５７】
生体リガンドは、ポリヌクレオチドであることを特徴とする、請求項４１〜５６のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項５８】
Ａ７は重合体又はアルキル鎖であることを特徴とする、請求項４１〜５７のいずれか１つに記載の単量体。
【請求項５９】
それぞれが生体リガンドを保持する、請求項１〜５８のいずれか１つに記載の単量体の少なくとも２種の電解重合により、導電性ホモ重合体を形成させて得ることができる電気活性プローブ。
【請求項６０】
少なくとも２種の異なる単量体の電解重合により得ることができ、単量体の少なくとも１種は請求項１〜５８のいずれか１つに記載のとおり定義され、該単量体の少なくとも１種は生体リガンドを保持し、導電性共重合体を形成する、電気活性プローブ。
【請求項６１】
請求項１０〜２３のいずれか１つに記載の単量体少なくとも１種と請求項４１〜５８のいずれか１つに記載の単量体少なくとも１種の共重合により、導電性共重合体を形成させて得ることができる電気活性プローブ。
【請求項６２】
Ｍ、Ａ１及びＲは請求項１０〜２３のいずれか１つに記載の単量体と請求項４１〜５８のいずれか１つに記載の単量体とで同一であることを特徴とする、請求項６１に記載の電気活性プローブ。
【請求項６３】
プローブリガンド／標的リガンド相互作用に適した条件下、生体試料を、該プローブリガンドを保持する請求項５９〜６２のいずれか１つに記載の電気活性プローブと接触させて、該試料との接触前後で該プローブから生じる電位又は電流における変化を示し、そして随意に定量する、生体試料中の標的リガンドの検出法。
【請求項６４】
表面の全体又は一部が請求項５９〜６２のいずれか１つに記載のプローブで覆われた導電性支持体を含む電極。
【請求項６５】
重合を、請求項１〜５８のいずれか１つに記載の単量体少なくとも１種から開始する水溶液中での電解重合により行うことを特徴とする、重合方法。
【請求項６６】
ビスメチル化反応により、請求項１０〜１１又は２４〜２５又は４１〜４２のいずれか１つに記載のイオン化単量体からイオン化した単量体を合成する方法。
【請求項６７】
請求項６５又は６６に記載の重合方法により得ることができる重合体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、電解重合の技術分野に関する。詳細には、本発明の対象は、水溶液に可溶性の電解重合性単量体である。
【背景技術】
【０００２】
電気活性高分子は、多くの分野で用いられている。例えば、電気活性高分子を用いて生体リガンドプローブと生体リガンド標的との相互作用を検出することができる。リガンドプローブとリガンド標的との特異的相互作用は、電気活性高分子の電気化学的性質に、例えばその高分子の電気活性の減少などの、実質的かつ選択的な変化をもたらす。リガンドプローブに結合したリガンド標的の濃度に依存するこの変化が、観測され、随意に測定され、またリガンド標的の結合量に直接関連づけられる。したがって、この技法の重要な適用の１つは、生体試料に存在するリガンドの検出、同定及び随意のアッセイにある。上記の変化とは、電位差型で、例えば、相互作用前後での電気活性高分子の酸化電位の変化に対応するものであるか、又は、電流差型で、例えば、あらかじめ定めた電位で求められる、ハイブリダイゼーション前後での高分子の酸化若しくは還元電流の変化に対応するものである。高分子の電気化学応答を正確に特性決定するために、後者は高い電気活性を示さなければならない。したがって、電解重合で得られる高分子は、例えば、電気活性及び電導率を向上させることが可能なフェロセンなどの電子供与性基を含むホモ重合体又は共重合体ピロールの形のものが開発されており、特に特許文献１に記載されている。
【０００３】
電解重合反応は、一般に、有機溶媒中で行われ、用いられる単量体は疎水性である。電気化学的検出については、これまで用いられていたシステムでは、用いられる単量体、例えば、フェロセン含有単量体がかなり疎水性であるため、有機溶媒中での電解重合が要求される（非特許文献１）。実際は、有機媒体中での取扱い操作は生体分子の使用には適合していない。後者はそうした媒体に不溶性であり、そして／又は、非常に頻繁に、そうした媒体中で変性してしまい、その性質が悪影響を受ける。タンパク質の場合、活性確認の失敗が一般に観測される。
【０００４】
この観測から、これまで２つの戦略が登場してきた。第１は、電極チップ上に、導電性重合体と、電極側から順に、ポリピロール層（溶媒中被着）、ピロール／ピロール−フェロセン（ｆｅｒｏｃｅｎｅ）共重合体層（溶媒中被着）及び最後に生体分子と共有結合したピロール／ピロール共重合体層（水性媒体中被着）との複数の層を作ることからなる。この戦略は、「多層」戦略と呼ばれ、例えば、特許文献２に記載される。この戦略で用いることのできる重合体は、例えば、特許文献３及び特許文献４に記載されているが、これらには、電解重合により得られる、改善された電気活性を示す重合体、例えば、フェロセンなどの電子供与基を含むピロールのホモ重合体又は共重合体の形のものなどが記載されている。この「多層」戦略は、何回かチップをすすぐ必要が出てくるたびに複数の有機溶媒／水性媒体を用いることになるため時間がかかり、完全に満足のいくものではない。
【０００５】
別の戦略は、後官能基化（ｐｏｓｔｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚａｔｉｅｎ）として既知である。これは、重合体層に反応性官能基があることにより、水性媒体中で生体分子が後重合（ｐｏｓｔｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ）共有結合することからなる。特に、非特許文献２及び非特許文献３を参照できる。この後官能基化戦略は、一方で、生体分子を標的とすることができない。さらに、この戦略は、生体分子が重合体とカップリングする効率のばらつきに関連した点対点（ｓｐｏｔ−ｔｏ−ｓｐｏｔ）の再現性の欠如を示す。
【０００６】
実際は、電気化学的経路での生体分子の検出は、有望な検出案であり、その主な利点は、例えば、蛍光による検出が必要な生体分子をあらかじめ標識化する必要がないことである。さらに、電気化学的電位の測定に必要な装置は、それほどかさばらず、操作の実用性が高いことをうかがわせる。
【特許文献１】特許出願ＷＯ０１／８１４４６号
【特許文献２】フランス国特許ＦＲ２８４９０３８号
【特許文献３】ＷＯ９５／２９１９９号
【特許文献４】ＷＯ０１／８１４４６号
【非特許文献１】Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｍｅｔａｌｓ，２００１，１１９，２６５−２６６
【非特許文献２】Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｍｅｔａｌｓ  １９９９，８９−９４
【非特許文献３】Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２００１，２，５８−６４
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
先行技術の短所のため、本発明者らは、水性媒体中での電解重合反応に完全に適した、したがって有機溶媒を使用しないことを可能にする新規単量体を提供することを目的とする。このため、本発明による単量体は、生体リガンドを保持するのに完全に適している。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
これに関連して、本発明の対象は、まず、１つの電解重合性単位及び電子供与基、ならびに水溶液中でイオン化する少なくとも１本のアームを含む、水溶液中で重合させることを意図した電解重合性単量体である。
【０００９】
有利には、上記の電解重合性単量体は、以下の特性を１つ又は複数示す：
−蒸留水に、少なくとも上限１ｍＭの濃度まで、好ましくは少なくとも上限１０ｍＭの濃度まで、そして優先的には少なくとも上限３０ｍＭの濃度まで溶解する、
−イオン化アームとして、水溶液中でイオン化する結合アームを含み、アームは電解重合性単位と電子供与基との間の結合をもたらす；好ましくは、イオン化結合アームは、アミン、カルボン酸及びホスフェートの官能基から選択される、水溶液中でイオン化する官能基を含む、
−電子供与性基のみに結合した非イオン化フリーアームを含む、
−ポリヌクレオチド、ポリペプチド、タンパク質、抗原、抗体、ハプテン、ビオチン又はオリゴ糖類から選択される生体リガンドを保持するフリーアームを含む、詳細には、生体リガンドはポリヌクレオチドである、
−電解重合性単位は、アセチレン、ピロール、チオフェン、インドール、アニリン、アジン、ｐ−フェニレンビニレン、ｐ−フェニレン、ピレン、フラン、セレノフェン、ピリダジン、カルバゾール、アクリレート、メタクリレート、及び、それらの誘導体から選択される；好ましくは、電解重合性単位はピロールであり、イオン化結合アームとの結合は、好ましくはピロールの３位に提供される、
−電子供与性基は、メタロセン、キノン、及び、それらの誘導体から選択される、好ましくは、電子供与基はフェロセンである。
【００１０】
本発明による単量体は、水溶液中でイオン化するアームが存在するため水溶液に溶解し、したがってそのような水性媒体で単量体は重合できるであろう。
【００１１】
本発明をより詳細に説明する前に、本発明の文脈で用いられるいくつかの用語及び表現についてここで定義する。
【００１２】
用語「電解重合性単量体」は、１つの電解重合性単位を含む単量体を意味するものとし、該単量体は他の単量体と電気化学的重合により反応して重合体を形成することができる。電解重合性単位は、一重結合と二重結合との交代を示す。電解重合性単位の例として、アセチレン、ピロール、チオフェン、インドール、アニリン、アジン、ｐ−フェニレンビニレン、ｐ−フェニレン、ピレン、フラン、セレノフェン、ピリダジン、カルバゾール、アクリレート、メタクリレート、及び、それらの誘導体が挙げられる。導電性重合体をもたらす、アセチレン、ピロール、チオフェン、インドール、アニリン、アジン、ｐ−フェニレンビニレン、ｐ−フェニレン、ピレン、フラン、セレノフェン、ピリダジン、カルバゾール、及び、それらの誘導体から選択される１つの電解重合性単位を含む単量体が好ましいだろう。
【００１３】
用語「水溶液中でイオン化するアーム」は、水溶液中でカチオン又はアニオンを形成できる親水性化学基を意味するものとする。水溶液中でイオン化した形は、加水分解又は分解型の化学反応を用いることなく、第１の実施形態に従って得られる。イオン化した形は、例えば、プロトン交換により又は塩から始めて溶液中でイオン対を形成することにより得られる。そうしたイオン化アームは、特に、アミン基、ポリアミン基、カルボン酸（−ＣＯＯＨ）基、ホスフェート基又はスルホネート基を含む。イオン化アームの親水性を、ひいてはアームが結合した単量体の溶解性を向上させるために、ポリエーテル基を含むこともできる。イオン化アームは、ｐＨ５〜８の水溶液中にある場合にイオン性の形で見られる。有利には、イオン化アームは蒸留水中でイオン化した形で見られる。
【００１４】
第２の実施形態にしたがって、水溶液中でイオン化した形は化学反応により得られる。この場合、イオン化した単量体は、以下のスキームにしたがって、単量体Ｉａ、ＩＩａ又はＩＩＩａから開始してアルキル化反応により得られる：
【００１５】
【化１】
2009500507.tif 000002
【００１６】
【化２】
2009500507.tif 000003
【００１７】
【化３】
2009500507.tif 000004
【００１８】
Ａ２、Ａ３、Ｌ１、Ｒ、Ｒ６、Ｒ７及びＺ１は、以下に定義されるとおりである。好ましくは、アルキル化反応はビスメチル化反応である。
【００１９】
用語「水溶液に溶解する単量体」は、重合条件下で、すなわち単量体が電気化学的経路による重合反応に用いられる場合に用いられる温度、ｐＨ及びイオン強度条件下で、水溶液に溶解する単量体を意味するものとする。電解重合は、一般に、ｐＨ３〜８の水溶液中、２０℃〜３０℃のオーダーの温度で行われる。好ましくは、本発明による単量体の溶解性は、２５℃の温度で、少なくとも上限１ｍＭの濃度まで、好ましくは少なくとも上限１０ｍＭの濃度まで、そして好ましくは少なくとも上限３０ｍＭの濃度までこの単量体を蒸留水に導入できるほどであり、結果として裸眼では透明で沈殿のない均一な溶液になる。
【００２０】
用語「重合」は、ある数の単量体を組立てて重合体（ｒｘＭ→（Ｍ）ｒ、ｒは２以上）を形成することを可能にする、同じ化学的性質を持つ単位の化学的又は電気化学的経路による反応を意味するものとする。用語「重合」は、共重合及びホモ重合を包含する。本発明の文脈において、有利には、これはピロール単位が縮合してポリピロールを形成することに関係する。用語「共重合」は、異なる単量体の同時重合、例えば、生体リガンドを保持する置換単量体と生体リガンドを含まない可溶性単量体との混合物の同時重合などを意味するものとする。
【００２１】
用語「電解重合」、「電解共重合」、「電気化学的共重合」及び「電気化学的重合」は、電気化学的経路による重合を示し、電解重合方法は当業者に既知である。例えば、サイクリックボルタンペロメトリー（ｃｙｃｌｉｃ  ｖｏｌｔａｍｐｅｒｏｍｅｔｒｙ）、クロノポテンショメトリー（ｃｈｒｏｎｏｐｏｔｅｎｔｉｏｍｅｔｒｙ）（電流印加）及びクロノアンペロメトリー（ｃｈｒｅｎａｍｐｅｒｅｍｅｔｒｙ）（電位印加）技法が挙げられる。本発明の特定の実施形態において、重合は、クロノアンペロメトリーによる被着又は制御電位被着により行われる。この方法は、平衡電位（０電流）から電極で反応が起こる設定値まで電位をジャンプさせることと、時間の関数として電流を測定することにある。
【００２２】
「重合条件」は、重合の間用いられる水溶液の、ｐＨ、温度及びイオン強度を示す。ピロールの場合、電解重合はＤｉａｚ機構で行われ（Ｓａｄｋｉ，ら、Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．，２９，２８３−２９３，２０００）、ポリピロールの形成をもたらす。この重合は、ピロール単量体の２位及び５位で起こる。したがって、ピロール核の３位又は４位で置換されたピロールは、他のピロールと２位及び５位で重合又は共重合することができる。３位で置換されたピロール単位が好ましい。
【００２３】
用語「導電体重合体」は、通常は一重結合及び二重結合（共役結合）の配列に沿って、大きく非局在化した電子を有する重合体を意味するものとし、これはマイクロエレクトロニクス半導体のように振る舞う。
【００２４】
用語「電子供与基」は、メタロセン、例えば、フェロセン、キノン、及び、それらの誘導体など、狭く迅速でかつ、可逆的な酸化波を示す酸化還元対に相当する化学基を意味するものとする。
【００２５】
アルコール、アミン及びカルボン酸の保護基は当業者に既知である。特に、「有機合成の保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  Ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）：２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｔ．Ｗ．ａｎｄ  Ｗｕｔｓ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．，ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  ｂｙ  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９１」を参照してよい。
【００２６】
アルコールの保護基の例として、アシル基、トリチル基、シリル基及びテトラヒドロフラニル基が挙げられる。
【００２７】
カルボン酸の保護基の例として、エステル、特にアルキルエステル、アシルエステル、シリルエステル又はチオエステルをもたらす化学基が挙げられる。
【００２８】
アミンの保護基の例として、トリフルオロアセチル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基及び９−フルオレニルメトキシカルボニル基が挙げられる。
【００２９】
カルボン酸の活性化基の例として、スクシンイミジル基又はフタルイミジル基、あるいは活性エステルの形成を可能にする任意の基が挙げられる。
【００３０】
アルコール又はアミンの活性化基の例として、アルコールの場合には、ホスホジエステル、ホスホトリエステル、Ｈ−ホスホネート又はホスホルアミダイトをもたらす基が、アミンの場合には、ホスホルアミデートモノエステル、ホスホルアミデートジエステル、Ｈ−ホスホルアミデート又はホスホルアミダイトをもたらす基が挙げられる。そうした基は、特に以下から選択される：
【００３１】
【化４】
2009500507.tif 000005
【００３２】
式中、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’は、例えば、アルキル又はアリール基を表す。
【００３３】
用語「生体リガンド」は、生物学的に興味深い標的分子と相互作用することを可能にする認識部位を少なくとも１つ有する化合物を意味するものとする。生体リガンドの例として、ポリヌクレオチド、抗原、抗体、ポリペプチド、タンパク質、ハプテン、ビオチン、オリゴ糖などが挙げられる。特異的に相互作用して接合体を形成することができるリガンド／抗リガンド対も、本発明ではプローブリガンド／標的リガンドとして既知である。
【００３４】
用語「ポリヌクレオチド」は、少なくとも２つのデオキシリボヌクレオチド又はリボヌクレオチドの配列を意味し、修飾ヌクレオチドを少なくとも１つ、例えば、イノシン、５−メチルデオキシシチジン、５−（ジメチルアミノ）デオキシウリジン、デオキシウリジン、２，６−ジアミノプリン、５−ブロモデオキシウリジンなどの修飾塩基又はハイブリダイゼーションを可能にする任意の他の修飾塩基などを含むヌクレオチドを少なくとも１つ随意に含む。このポリヌクレオチドは、例えば、ホスホロチオエート、Ｈ−ホスホネート又はアルキルホスホネートなどのヌクレオチド間結合での修飾、あるいは例えば、α−オリゴヌクレオチド（ＦＲ２６０７５０７）又はＰＮＡ（Ｅｇｈｏｌｍ  Ｍ，ら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．，Ｓｏｃ．，１９９２，１１４，１８９５−１８９７）又は２−Ｏ−アルキルリボース又はＬＮＡ（鎖核酸（Ｌｏｃｋｅｄ  Ｎｕｃｌｅｌｃ  Ａｃｉｄ）、特にＷＯ００／６６６０４号で公開される特許出願に記載される）などの骨格での修飾も可能である。こうした修飾はそれぞれ組み合わせることができる。ポリヌクレオチドは、オリゴヌクレオチド、天然の核酸又はそのフラグメント、例えばＤＮＡ、リボソームＲＮＡ、メッセンジャーＲＮＡ、トランスファーＲＮＡ、酵素増幅技法により得られる核酸などでもあり得る。
【００３５】
用語「ポリペプチド」は、少なくとも２つのアミノ酸の配列を意味するものとする。用語「アミノ酸」は、タンパク質をコードする第一級アミノ酸、ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシプロリンなどの酵素作用に由来するアミノ酸、及び、ノルバリン、Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシン又はスタリン（ｓｔａｌｉｎｅ）（Ｈｕｎｔ  Ｓ．，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，Ｂａｒｅｔｔ  Ｇ．Ｃ．，ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  ｂｙ  Ｃｈａｐｍａｎ  ａｎｄ  Ｈａｌｌ，Ｌｏｎｄｏｎ，１９８５）など天然であるがタンパク質に存在しないアミノ酸、固体支持体上又は液相中での合成に用いられ得る化学官能基で保護されたアミノ酸、及び、天然ではないアミノ酸を意味するものとする。
【００３６】
用語「ハプテン」は、非免疫原性化合物、すなわちそれ自身では抗原の産生による免疫反応を起こせないが、既知の条件下で動物の免疫化により、特にハプテン−タンパク質接合体での免疫化により得られる抗体により認識され得る化合物を示す。こうした化合物は、一般に、３０００Ｄａ未満の分子量、一般に２０００Ｄａ未満の分子量を有する。ハプテンとして、例えば、グリコシル化ペプチド、代謝産物、ビタミン、ホルモン、プロスタグランジン、毒素、抗生物質又は様々な薬品、ヌクレオシド及びヌクレオチドが可能である。
【００３７】
用語「抗体」は、ポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体、遺伝子組換えにより得られる抗体及び抗体フラグメントを含む。用語「抗原」は、抗体により認識することができる化合物を示し、その合成は免疫応答により誘導される。用語「タンパク質」は、ヌクレオタンパク質、リポタンパク質、ホスホタンパク質、金属タンパク質及び糖タンパク質などのホモタンパク質及びヘテロタンパク質を、繊維状及び球状の両方で含む。
【００３８】
別の態様にしたがって、本発明の対象は、以下に定義されるとおりのピロール単位及びメタロセン単位を含む単量体の様々なシリーズである。
【００３９】
ａ）まず、式（Ｉ）の単量体：
【００４０】
【化５】
2009500507.tif 000006
【００４１】
式中、
−Ｍは、遷移金属、好ましくはＦｅ、Ｒｕ又はＯｓであり、
−Ａ１は以下の配列であり：
・−Ａ２−Ｘ−Ａ３、ここで：
・Ｘは、−ＮＲ１−、−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−又は−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７−を表し
・Ｙは、Ｏ又はＮＨを表し、
・Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−、−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、
・Ａ３は、−（ＣＨ２）ｎ１−、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、
・ｍ１及びｎ１は、それぞれ独立して、１〜６の範囲の整数を表し；Ｘが−ＮＲ１−でありＡ２基及びＡ３基がそれぞれ−（ＣＨ２）ｍ１−及び−（ＣＨ２）ｎ１−を表すならば、ｍ１＋ｎ１の合計は２〜６の範囲に入ることが理解され、
・ｍ２及びｎ３は、それぞれ独立して、０〜３の範囲、好ましくは１〜３の範囲の整数を表し、
・ｍ３、ｎ２、ｍ４、ｎ４、ｍ５及びｎ５は、それぞれ独立して、０〜６の範囲、好ましくは１〜６の範囲の整数を表し、
・Ｒ１、Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、水素原子又は（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基を表し、かつ、
・Ｒ２は、水素原子又は（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、シアノエチル基、若しくは２−クロロフェニル基を表すか、
・又は−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−Ａ５−、ここで：
・Ａ４は、−（ＣＨ２）ｐ１−又は−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）−を表し、
・Ａ５は、−（ＣＨ２）ｑ１−又は−ＮＲ５−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ２−を表し、
・ｎは、２〜６の範囲の整数を表し、
・ｐ１、ｑ１、ｐ２及びｑ２は、それぞれ独立して、１〜６の範囲の整数を表し、
・Ｒ５は、水素原子又は（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、例えば、メチル又はエチルを表し、
・Ｒ６、Ｒ７は、それぞれ独立して、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基を表し、
−Ｒは、水素原子、又は、例えばモノメトキシトリチル基、ジメトキシトリチル基、トシル基、トリイソプロピルシリル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、９−フルオレニル−オキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、トリフェニルメタンスルフェニル基及びアセチル基から選択されるアミン官能基の保護基を表す。
【００４２】
ｂ）続いて式（ＩＩ）の単量体：
【００４３】
【化６】
2009500507.tif 000007
【００４４】
式中、
−Ｍ、Ａ１及びＲは、式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
−Ａ６は、以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ１が、配列−Ａ２−ＮＲ１−Ａ３−又は−Ａ２−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７−Ａ３−であって、式中Ｒ１、Ａ２、Ａ３、Ｒ６及びＲ７が式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、かつ、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＲ１−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＲ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−ＮＲ１−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＲ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＲ１−又は−Ａ２−ＮＲ１−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、Ｒ４、ｎ５及びＲ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−ＮＲ１−又は−Ａ２−ＮＲ１−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５、Ｒ４及びＲ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ１が配列−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−Ａ３−であって、式中Ｒ２、Ａ２、Ａ３及びＹが式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、かつ、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、ｎ５、Ｙ、Ｒ４及びＲ２は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５、Ｒ２、Ｒ４及びＹは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ１が配列−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−Ａ５−であって、式中Ａ４、ｎ及びＡ５が式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
・Ａ４が−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）−を表す場合、Ａ５が−（ＣＨ２）ｑ１−を表すならばＡ６は配列−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、Ａ５が−ＮＲ５−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ２−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−ＮＲ５−又は−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｐ２、Ｒ５、ｑ１、ｑ２及びｎは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、ｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であるか、
・Ａ４が−（ＣＨ２）ｐ１−を表す場合、Ａ５が−（ＣＨ２）ｑ１−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であり、Ａ５が−ＮＲ５−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ２−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−ＮＲ５−又は−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｐ１、ｑ１、ｑ２、ｎ及びＲ５は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、ｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であり、
−Ｚ１は、水素原子、又は、Ｚ１が結合したスペーサーアームＡ６のアミン、アルコキシ又はカルボキシル末端官能基それぞれの官能性としての、アルコール、アミン又はカルボン酸の保護基又は活性化基を表す。
【００４５】
ｃ）そして式（ＩＩＩ）の単量体：
【００４６】
【化７】
2009500507.tif 000008
【００４７】
式中、
−Ｍ、Ａ１及びＲは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
−Ａ６は以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ１が配列−Ａ２−ＮＲ１−Ａ３−又は−Ａ２−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７−Ａ３−であり、式中Ｒ１、Ａ２、Ａ３、Ｒ６及びＲ７は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、かつ、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＲ１−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＲ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−ＮＲ１−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＲ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＲ１−又は−Ａ２−ＮＲ１−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、ｎ５、Ｒ４及びＲ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−ＮＲ１−又は−Ａ２−ＮＲ１−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５、Ｒ４及びＲ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ１が配列−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−Ａ３−であり、式中Ｒ２、Ａ２、Ａ３及びＹは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、かつ、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、ｎ５、Ｙ、Ｒ４及びＲ２は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５、Ｒ２、Ｒ４及びＹは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ１が配列−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−Ａ５−であって、式中Ａ４、ｎ及びＡ５は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
・Ａ４が−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）−を表す場合、Ａ５が−（ＣＨ２）ｑ１−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、Ａ５が−ＮＲ５−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ２−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−ＮＲ５−又は−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｐ２、Ｒ５、ｑ１、ｑ２及びｎは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、ｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であるか、
・Ａ４が−（ＣＨ２）ｐ１−を表す場合、Ａ５が−（ＣＨ２）ｑ１−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であるか、Ａ５が−ＮＲ５−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ２−を表すならば、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ−ＮＲ５−又は−Ａ４−（ＣＨ２）ｐ１−［ＮＨ（ＣＨ２）２］ｎ’−ＮＨ−を表し、ここでｐ１、ｑ１、ｑ２、ｎ及びＲ５は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、ｎ’は１〜ｎ−１の範囲の整数であり、
−Ａ７は、重合体又はアルキル鎖などの結合アーム、あるいは直接の結合を表し、かつ、
−Ｌ１は、生体リガンドを表す。
【００４８】
こうした単量体に存在するイオン化するアーム（結合又は遊離）は、疎水性の性質を有するメタロセン基、典型的にはフェロセン基の存在にも関わらず、水溶液に溶解する単量体を得ることを可能にする。そのうえ、このイオン化するアームの存在は、本発明の電解重合性単量体の性質にどのような形でも悪影響を及ぼさず、重合が水相で行われて、好ましくは導電性であるだろう重合体層を形成することを可能にする。
【００４９】
式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の化合物では、配列Ａ６が部分的にアームＡ１に相当していることを強調すべきである。これが、Ａ６のとる値が直接、特に、Ａ２及びＡ３の値に関連している理由である。
【００５０】
単量体（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）のアームＡ６の定義を大変にしないため、各点で何がＡ２に対応しているか記載されるものの、Ａ２という名称を、Ａ６を定義するために残してきた。例えば、Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表すと記載されていても、定義−Ａ２−Ｙ−はＡ６について残されるだろう、一方で、もちろんこれは−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−Ｙに相当する。これはＡ４についても同じである。
【００５１】
式（Ｉ）の単量体のなかで、以下に定義されるとおりの式（Ｉａ）、（Ｉｂ）及び（Ｉｃ）の単量体が好ましい。
【００５２】
以下の式（Ｉａ）に対応する単量体（Ｉａ）：
【００５３】
【化８】
2009500507.tif 000009
【００５４】
ここで、Ｍ、Ａ２、Ａ３及びＲは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、配列Ａ２及びＡ３の少なくとも１つは単位−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ−を含み、ここでｍは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりのｍ３、ｍ５、ｎ２又はｎ４を表すことが理解される。上記の式（Ｉａ）の単量体には優先式が与えられ、式中Ａ２は−（ＣＨ２）ｍ１−を表し、かつ、Ａ３は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、ここでｍ１、ｎ４、ｎ５及びＲ４は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、特にｍ１＝１、ｎ４＝２、ｎ５＝１、そしてＲ４＝Ｈである。
【００５５】
以下の式（Ｉｃ）に対応する単量体（Ｉｃ）：
【００５６】
【化９】
2009500507.tif 000010
【００５７】
ここで、Ｍ、Ａ２、Ａ３、Ｒ、Ｒ６及びＲ７は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、配列Ａ２及びＡ３の少なくとも１つは単位−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ−を含み、ここでｍは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりのｍ３、ｍ５、ｎ２又はｎ４を表すことが理解される。上記の式（Ｉｃ）の単量体には優先式が与えられ、式中Ａ２は−（ＣＨ２）ｍ１−を表し、かつ、Ａ３は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、ここでｍ１、ｎ４、ｎ５及びＲ４は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、特にｍ１＝１、ｎ４＝２、ｎ５＝１、そしてＲ４＝Ｈである。
【００５８】
以下の式（Ｉｂ）に対応する単量体（Ｉｂ）：
【００５９】
【化１０】
2009500507.tif 000011
【００６０】
ここで、Ｍ、Ａ２、Ａ３、Ｒ２及びＲは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりである。有利には、単量体（Ｉｂ）は以下の特性を１つ又は複数示す：
−Ｙ＝Ｏ；
−Ｒ２は水素原子を表す；
−Ａ２及びＡ３はそれぞれ、−（ＣＨ２）ｍ１−及び−（ＣＨ２）ｎ１−を表し、ここでｍ１及びｎ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、特にｍ１＝３、そしてｎ１＝２である。
【００６１】
同様に、式（ＩＩ）の単量体のなかで、以下に定義されるとおりの式（ＩＩａ）、（ＩＩｃ）及び（ＩＩｂ）の単量体が好ましい。これら式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｃ）及び（ＩＩｂ）の単量体はそれぞれ、メタロセンの別のシクロペンタジエン上にイオン化するフリーアームを保持するように修飾された式（Ｉ）、（Ｉａ）、（Ｉｃ）及び（Ｉｂ）の単量体に相当する。後者は、その後の特に生体リガンドの結合のため、アミン、ヒドロキシル又はカルボン酸型の反応性官能基（Ｆ）を保護された形又は活性な形で保持することができる。
【００６２】
以下の式（ＩＩａ）に対応する単量体（ＩＩａ）：
【００６３】
【化１１】
2009500507.tif 000012
【００６４】
式中、
−Ｍ及びＲは、式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
−Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−、−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、ここでｍ１〜ｍ５及びＲ３は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
−Ａ３は、−（ＣＨ２）ｎ１−、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、ここでｎ１〜ｎ５及びＲ４は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
−Ａ６は、以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２及びｎ３は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２及びｎ３は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、Ｒ４及びｎ５は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５及びＲ４は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、かつ、
−Ｚ１は、水素原子、又は、Ｚ１が結合したスペーサーアームＡ６のアミン又はカルボキシル末端官能基それぞれの官能性としての、アミン又は酸の保護基又は活性化基を表す。
【００６５】
上記の式（ＩＩａ）の単量体（式中、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、かつ、Ｚ１はアミン官能基の活性化基を表し、それが結合したアミン官能基とホスホルアミデートモノエステル、ホスホルアミデートジエステル、Ｈ−ホスホルアミデート又はホスホルアミダイトを形成する）は、本発明の特定の態様を構成する。こうした単量体は、例えば特許出願第ＷＯ０３／０６８７８７号に記載されるような、オリゴヌクレオチドのサポート合成（ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）に用いることができる。
【００６６】
式（Ｉａ）の単量体のように、上記で定義されるとおりの式（ＩＩａ）の単量体には優先式が与えられ、式中、配列Ａ２及びＡ３の少なくとも１つは単位−［（ＣＨ２）２Ｏ］−ｍを含み、ここでｍは単量体（１）について定義されるとおりのｍ３、ｍ５、ｎ２又はｎ４を表す。
【００６７】
上記の式（ＩＩａ）の単量体には特定の優先式が与えられ、式中：
−Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−を表し、ここでｍ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおり、特にｍ１＝１であり、
−Ａ３は、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、ここでｎ４、ｎ５及びＲ４は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおり、特にｎ４＝２、ｎ５＝１及びＲ４＝Ｈであり、
−Ａ６は、−（ＣＨ２）ｍ１−ＮＨ−又は、好ましくは−（ＣＨ２）ｍ１−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−ＣＨ２］２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｎ４、Ｒ４及びｎ５は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおり、特にｍ１＝１、ｎ４＝２、ｎ５＝１及びＲ４＝Ｈであり、かつ、
−Ｚ１は、水素原子、又は、例えば、トリフルオロアセチル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基及び９−フルオレニルメトキシカルボニル基から選択されるアミンの保護基であるか又はＺ１はアミン官能基の活性化基を表し、活性化基はそれが結合したアミン官能基とホスホルアミデートモノエステル、ホスホルアミデートジエステル、Ｈ−ホスホルアミデート又はホスホルアミダイトを形成する。
【００６８】
以下の式（ＩＩｃ）に対応する単量体（ＩＩｃ）：
【００６９】
【化１２】
2009500507.tif 000013
【００７０】
式中、
−Ｍ、Ｒ、Ｒ６及びＲ７は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
−Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−、−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、ここでｍ１〜ｍ５及びＲ３は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
−Ａ３は、−（ＣＨ２）ｎ１−、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、ここでｎ１〜ｎ５及びＲ４は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
−Ａ６は、以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２及びｎ３は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−ＮＨ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２及びｎ３は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、Ｒ４及びｎ５は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５及びＲ４は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、かつ、
−Ｚ１は、水素原子、又は、Ｚ１が結合したスペーサーアームＡ６のアミン又はカルボキシル末端官能基それぞれの官能性としての、アミン又は酸の保護基又は活性化基を表す。
【００７１】
上記の式（ＩＩｃ）の単量体（式中、Ａ６は配列−Ａ２−ＮＨ−又は−Ａ２−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、かつ、Ｚ１はアミン官能基の活性化基を表し、それが結合したアミン官能基とホスホルアミデートモノエステル、ホスホルアミデートジエステル、Ｈ−ホスホルアミデート又はホスホルアミダイトを形成する）は、本発明の特定の態様を構成する。こうした単量体は、例えば特許出願第ＷＯ０３／０６８７８７号に記載されるような、オリゴヌクレオチドのサポート合成に用いることができる。
【００７２】
式（Ｉｃ）の単量体のように、上記で定義されるとおりの式（ＩＩｃ）の単量体には優先式が与えられ、式中、配列Ａ２及びＡ３の少なくとも１つは単位−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ−を含み、ここでｍは単量体（１）について定義されるとおりのｍ３、ｍ５、ｎ２又はｎ４を表す。
【００７３】
上記の式（ＩＩｃ）の単量体には特定の優先式が与えられ、式中、
−Ａ２は、−（ＣＨ２）ｍ１−を表し、ここでｍ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおり、特にｍ１＝１であり、
−Ａ３は、−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表し、ここでｎ４、ｎ５及びＲ４は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおり、特にｎ４＝２、ｎ５＝１及びＲ４＝Ｈであり、
−Ａ６は、−（ＣＨ２）ｍ１−ＮＨ−又は、好ましくは−（ＣＨ２）ｍ１−ＮＨ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｎ４、Ｒ４及びｎ５は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおり、特にｍ１＝１、ｎ４＝２、ｎ５＝１及びＲ４＝Ｈであり、かつ、
−Ｚ１は、水素原子、又は、例えば、トリフルオロアセチル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基及び９−フルオレニルメトキシカルボニル基から選択されるアミンの保護基であるか又はＺ１はアミン官能基の活性化基を表し、活性化基はそれが結合したアミン官能基とホスホルアミデートモノエステル、ホスホルアミデートジエステル、Ｈ−ホスホルアミデート又はホスホルアミダイトを形成する。
【００７４】
以下の式（ＩＩｂ）に対応する単量体（ＩＩｂ）：
【００７５】
【化１３】
2009500507.tif 000014
【００７６】
式中、
−Ｍ、Ｒ、Ａ２、Ｙ、Ｒ２及びＡ３は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
−Ａ６は、以下のとおり定義されるスペーサーアームを表し：
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ１、ｎ２及びＹは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−又は−Ａ２−Ｙ−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びＹは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ１−又は−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ１、ｍ２、ｍ３、ｎ４、Ｒ４、ｎ５、Ｙ及びＲ２は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであるか、
・Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表し、かつ、Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、ここでｍ４、Ｒ３、ｍ５、ｎ４、ｎ５、Ｒ２、Ｒ４及びＹは式（Ｉ）の単量体について定義されるとおりであり、
−Ｚ１は、水素原子、又は、Ｚ１が結合したスペーサーアームＡ６のアミン、アルコキシ又はカルボキシル末端官能基それぞれの官能性としての、アルコール、アミン又はカルボン酸の保護基又は活性化基を表す。
【００７７】
上記の式（ＩＩｂ）の単量体（式中、Ａ６は配列−Ａ２−Ｙ−又は−Ａ２−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−を表し、かつ、Ｚ１はＺ１が結合したスペーサーアームＡ６のアミン又はアルコキシ官能基の活性化基を表し、それが結合したアミン官能基とはホスホルアミデートモノエステル、ホスホルアミデートジエステル、Ｈ−ホスホルアミデート又はホスホルアミダイトを、それが結合したアルコキシ官能基とはホスホジエステル、ホスホトリエステル、Ｈ−ホスホネート又はホスホルアミダイトを、それぞれ形成する）は、本発明の特定の態様を構成し、オリゴヌクレオチドのサポート合成に用いることができる。
【００７８】
有利には、式（Ｉｂ）の単量体のように、単量体（ＩＩｂ）は以下の特性（ｃａｔａｌｙｓｔｓ）を１つ又は複数示す。
−Ｙ＝Ｏ；
−Ｒ２は水素原子を表す；
−Ａ２及びＡ３はそれぞれ、−（ＣＨ２）ｍ１−及び−（ＣＨ２）ｎ１−を表し、かつ、Ａ６は配列−（ＣＨ２）ｍ１−Ｏ−を表し、ここでｍ１及びｎ１は式（Ｉ）の単量体について定義されるとおり、特にｍ１＝３、そしてｎ１＝２である。
【００７９】
同様に、式（ＩＩＩ）の単量体のなかで、以下に定義されるとおりの式（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｃ）及び（ＩＩＩｂ）の単量体が好ましい。これら式（ＩＩＩ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｃ）及び（ＩＩＩｂ）の単量体は、メタロセンを置換するイオン化フリーアームに存在する反応性官能基（Ｆ）に、随意にスペーサーアームを介して、生体リガンドを共有結合させた式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｃ）及び（ＩＩｂ）の単量体に相当する。以下の式（ＩＩＩａ）に対応する単量体（ＩＩＩａ）：
【００８０】
【化１４】
2009500507.tif 000015
【００８１】
式中、Ａ７は結合アーム又は直接の結合を表し、Ｌ１は生体リガンドを表し、かつ、Ａ２、Ａ３、Ａ６及びＲは式（ＩＩａ）の化合物について定義されるとおりであり、式（ＩＩａ）の化合物についての記載で示された好適な値はこれらにも適用される。
【００８２】
以下の式（ＩＩＩｃ）に対応する単量体（ＩＩＩｃ）：
【００８３】
【化１５】
2009500507.tif 000016
【００８４】
式中、Ａ７は結合アーム又は直接の結合を表し、Ｌ１は生体リガンドを表し、かつ、Ａ２、Ａ３、Ａ６、Ｒ６、Ｒ７及びＲは式（ＩＩｃ）の化合物について定義されるとおりであり、式（ＩＩｃ）の化合物についての記載で示された好適な値はこれらにも適用される。
【００８５】
以下の式（ＩＩＩｂ）に対応する単量体（ＩＩＩｂ）：
【００８６】
【化１６】
2009500507.tif 000017
【００８７】
式中、Ａ７は結合アーム又は直接の結合を表し、Ｌ１は生体リガンドを表し、かつ、Ａ２、Ａ３、Ａ６、Ｒ及びＲ２は化合物（ＩＩｂ）について定義されるとおりであり、式（ＩＩｂ）の化合物についての記載で示された好適な値はこれらにも適用される。
【００８８】
有利には、単量体（Ｉ）、（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩＩ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｂ）及び（ＩＩＩｃ）は以下の特性を１つ又は複数示す。
−イオン化する結合アームとピロール単位との間の結合はピロールの３位にある、
−Ｍは鉄である、
−Ｒは水素原子である。
【００８９】
これらの様々な単量体は、フェロセンの場合には以下に記載されるように調製することができ、これらの合成経路は他のメタロセンに適用することができる。以下において、Ｒ、Ｒ１〜Ｒ７、Ｙ、ｎ、ｎ１〜ｎ５、ｍ１〜ｍ５、ｐ１、ｐ２、ｑ１及びｑ２は単量体（Ｉ）について定義されるとおりである。
【００９０】
式（Ｉ）、（Ｉａ）（Ｉｃ）又は（Ｉｂ）の単量体（式中、Ａ１は配列−Ａ２−Ｘ−Ａ３−であり、ここでＸは−ＮＲ１−、−Ｙ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−又は−Ｎ＋（Ｒ６Ｒ７）−を表す）の調製をまず詳細に説明する。
【００９１】
まず、調製は実施例で与えられる単量体（Ｉａ．１）、（Ｉｃ．１）及び（Ｉｂ．１）について記載される方法と同様にして行うことができる。他の単量体については、以下の方法を用いることができる。
【００９２】
１）Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ２−Ｏ−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ３−（ＣＨ２）２−を表す場合、以下が可能である。
【００９３】
１ａ）Ｘが−Ｏ−Ｐ（Ｏ（ＯＲ２）−Ｏ−を表す場合、Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．，１９９６，２，８７７又はＪ．Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００１，６３０，２６６に記載されるように、以下の式（１）：
【００９４】
【化１７】
2009500507.tif 000018
【００９５】
の単量体を形成する。次いで、この単量体（１）を、末端ヒドロキシル官能基を保持する鎖Ａ３で置換された、対応するピロールと反応させる、ここでヒドロキシル官能基の１つ、好ましくはフェロセン側に位置するものはホスホルアミダイトの形であらかじめ活性化されている。
【００９６】
１ｂ）又は、Ｘが−ＮＲ１−、−Ｎ＋（Ｒ６Ｒ７）−又は−ＮＨ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−を表す場合、以下の方法（スキーム１）で、アルコキシド（３）と−（ＣＨ２）ｍ２−ＯＨ基（４）で置換されたフェロセン（Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００４，５２，５３１０−５３１９に従って調製）との縮合により直接ポリ（アルコキシ）アミンアームを形成して単量体（２）を形成する。
【００９７】
【化１８】
2009500507.tif 000019
【００９８】
こうして得られたフェロセン（２）は、次いで、Ｘが−ＮＲ１−を表す場合には、ハロゲン原子を保持する鎖（この鎖は所望のアームＡ３を得るように選択される）で置換された対応するピロールとカップリングさせることができ、あるいはＸが−ＮＨ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２）−Ｏ−を表す場合には、フェロセン（２）の末端アミン官能基をホスホルアミダイトの形で活性化させてアームＡ３に末端ヒドロキシルを保持するピロールとカップリングできるようにすることで、カップリングさせることができる。
【００９９】
２）Ａ２が−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−を表す場合、以下のスキーム２に示すとおり、アーム−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）ＯＨで置換したフェロセン（６）（ＷＯ０１／８１４４６に従って調製）とアミン（７）を、ＥＤＣ（１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］カルボジイミド）及びＮ−ヒドロキシスクシンイミドの存在下で縮合させることにより、アーム−（ＣＨ２）ｍ４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ３−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｍ５−（ＣＨ２）２−ＮＨ２（又はＯＨ）で置換されたフェロセン（５）を形成することが可能である。
【０１００】
【化１９】
2009500507.tif 000020
【０１０１】
３）関係する置換ピロールは、一方で、以下のように調製することができる。
【０１０２】
３ａ）Ａ３が−（ＣＨ２）ｎ１−又は−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ２−（ＣＨ２）ｎ３−を表す場合、−（ＣＨ２）ｎ１−Ｂｒ基又は−（ＣＨ２）ｎ３−［Ｏ（ＣＨ２）２］ｎ２−Ｂｒ基で置換されたピロールは、例えばＣＢｒ４及びトリフェニルホスフィンの存在下メタノール中０℃で、それぞれ、−（ＣＨ２）ｎ１−ＯＨ基で置換されたピロール（Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９９６，２６，１２８９に従って調製）又は−（ＣＨ２）ｎ３−［Ｏ（ＣＨ２）２］ｎ２−ＯＨ基で置換されたピロール（ＦＲ２８４９０３８に従って調製）から得ることができる。
【０１０３】
３ｂ）Ａ３が−［（ＣＨ２）２Ｏ］ｎ４−（ＣＨ２）２−ＮＲ４−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ５−を表す場合、−（ＣＨ２）ｎ５−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４−（ＣＨ２）２−［Ｏ（ＣＨ２）２］ｎ４−基で置換されたピロールは、−（ＣＨ２）ｎ５−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４−（ＣＨ２）２−［Ｏ（ＣＨ２）２］ｎ４−ＯＨ基で置換されたピロール（８）から得ることができる。このピロール（８）は、以下にスキーム３に示すように、活性化エステル官能基を保持するピロール（９）（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｍｅｔａｌｓ，１９９９，１００，８９に従って調製）とアミン（１０）との縮合により得られる。
【０１０４】
【化２０】
2009500507.tif 000021
【０１０５】
４）Ａ２＝−（ＣＨ２）ｍ１−、Ａ３＝−（ＣＨ２）ｎ１−であり、ここでｍ１＋ｎ１が２〜６の間であり、かつ、Ｘ＝−ＮＲ１−の場合、単量体は、以下の、ハロゲン化フェロセン（１１）及びアミノ化ピロール（１２）（例えば、ＷＯ０１／８１４４６に従って調製）から得られる。
【０１０６】
【化２１】
2009500507.tif 000022
【０１０７】
単量体（１）（式中、Ａ１は−Ａ４−［ＮＨ（ＣＨ２）２］）ｎ−Ａ５−を表す）の調製は、一方では、以下に詳細に説明するように行うことができる。
【０１０８】
１）Ａ４＝−（ＣＨ２）ｐ１−かつ、Ａ５＝−（ＣＨ２）ｑ１−の場合、調製はハロゲン化フェロセン（１３）とポリアミンで置換されたピロール（１４）との縮合により行われる。このポリアミンで置換されたピロールは、スキーム４に示すように、常套的に、ポリアミン（１５）をハロアルキル化ピロール（１６）とカップリングさせることにより得られる。
【０１０９】
【化２２】
2009500507.tif 000023
【０１１０】
ハロゲン化フェロセン（１３）は、Ｊ．Ｅｌｅｃｔｒｏａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９４，３７０，２０３に記載されるプロトコルに従って合成することができる。ハロアルキル化ピロールは、Ｈａｌ＝Ｂｒの場合は、上記のように調製することができる。
【０１１１】
２）Ａ４＝−（ＣＨ２）ｐ２−ＣＯ−の場合、調製は、スキーム５に示すように、活性化エステル官能基を保持するフェロセン（１７）（ＷＯ０１／８１４４６に従って調製）を、ポリアミンアームを保持するピロール（１８）とカップリングさせることにより行うことができる。
【０１１２】
【化２３】
2009500507.tif 000024
【０１１３】
ピロール（１６）は、Ａ５が−（ＣＨ２）ｑ１−を表すならば、スキーム４のように調製することができる。
【０１１４】
Ａ５＝−ＮＲ５−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ２−の場合、ピロール（１９）（スキーム６）は、上記のように形成してフェロセン（１３）又はフェロセン（１７）とカップリングさせることができる。ピロール（１９）はポリアミン（２０）及び活性化エステル官能基を保持するピロール（２１）から調製することができる。
【０１１５】
【化２４】
2009500507.tif 000025
【０１１６】
単量体（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｃ）及び（ＩＩｂ）は、１−１’−二置換のメタロセン基を示す。メタロセンの置換は、Ａ１及びＡ６が直面する対称性の程度を示す。
【０１１７】
メタロセンの官能基化について上記で詳細に記載された反応は、したがって、Ａ６に所望の構造に依存して、２つの官能基化、又は、必要であれば、１つの官能基化を達成するように行われる。このために、当業者に既知の選択的反応又は保護／脱保護を用いることができる。
【０１１８】
さらに、一置換又は二置換メタロセンの調製のため、当業者は、特にＷＯ０３／０６８７８７号又はＣｈｅｍ．Ｒｅｖ．，２００４，１０４，５９３１−５９８５に記載される合成法を応用する位置にいる。
【０１１９】
後に与えられる例は、そのような反応を示す。
【０１２０】
Ａ６＝−（ＣＨ２）ｎ４−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−の場合、他の合成経路のように、ＷＯ０１／８１４４５に従って調製された式（２２）のビス（活性化エステル）フェロセンを用いることも可能である：
【０１２１】
【化２５】
2009500507.tif 000026
【０１２２】
この化合物は、次いで、当業者に既知の技法に従って、所望の配列Ａ３を得るように選択された構造を持つアミノ化ピロールの等価物とカップリングすることができる。
【０１２３】
同様に、Ａ６＝−（ＣＨ２）ｍ１−Ｏ−かつ、Ａ２＝−（ＣＨ２）ｍ１−Ｏ−Ｐ（Ｏ）ＯＲ２−の場合、２つのヒドロキシル官能基（それら官能基のうち１つは、例えば、（ｔｅｒｔ−ブチル）ジメチルシリルクロリド（ＴＢＤＭＳｉＣｌ）で保護されている）を保持するフェロセン（２３）を用いて、保護フェロセン（２４）を得ることが可能である。次いで、この保護フェロセンをホスホルアミダイトクロリド（２５）とカップリングさせて、保護フェロセン（２６）を得ることができ、保護フェロセン（２６）をその後脱保護してピロール−３−アルカノールとカップリングさせてフェロセン（２７）を得ることができる。次いで、フェロセン（２７）の遊離ヒドロキシル官能基を別のホスホルアミダイトクロリドとカップリングさせて、化合物（２８）を得ることができる。
【０１２４】
Ａ６＝−（ＣＨ２）３−Ｏ−の場合について、この調製をスキーム７に示す。
【０１２５】
【化２６】
2009500507.tif 000027
【０１２６】
一方で、単量体（ＩＩＩ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｃ）及び（ＩＩＩｂ）は、リガンドを、アミン、ヒドロキシル又はカルボン酸型の反応性官能基Ｆ１（Ｚ１＝Ｈ）を保持する対応する単量体（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｃ）又は（ＩＩｂ）にカップリングさせることにより得られる。一般に、このカップリングは、例えばアルキル鎖型の重合体の、スペーサーアームＡ７を介して行われる。生体リガンドを最終的に得られる重合体鎖から遠ざけるために用いることができるスペーサーアームは、当業者に既知である。単量体の溶解性又は電気活性に悪影響を及ぼさない任意のスペーサーアームを用いることができる。例として、ジェファミン（ｊｅｆｆａｍｉｎｅ）又は無水マレイン酸の官能性誘導体が挙げられる。このスペーサーアームが反応性官能基Ｆ１とカップリングし、次いでリガンドが、スペーサーアームによって保持される、例えば活性エステル型の別の反応性官能基Ｆ２とカップリングする。重合体アームには、二官能性重合体（例えば、ポリエチレングリコールビス（活性化エステル））又は多官能性重合体、（ＭＡＭＶＥ：無水マレイン酸−コ−メチルビニルエーテル、ＮＶＰＮＡＳ：Ｎ−ビニルピロリドン−コ−Ｎ−アクリロイルオキシスクシンイミド、ＮＡＭＮＡＳ：Ｎ−アクリロイルモルホリン−コ−Ｎ−アクリロイルオキシスクシンイミド）が可能である。
【０１２７】
オリゴヌクレオチドのサポート合成に単量体（ＩＩ）を用いる場合、すなわち、上記で定義されるものの中で、Ｚ１が結合したスペーサーアームＡ６のアミン又はアルコキシ官能基の活性化基をＺ１が表し、結合したアミン官能基とはホスホルアミデートモノエステル、ホスホルアミデートジエステル、Ｈ−ホスホルアミデート又はホスホルアミダイトと形成するか、結合したアルコキシ官能基とはホスホジエステル、ホスホトリエステル、Ｈ−ホスホネート又はホスホルアミダイトをそれぞれ形成する場合、スペーサーアームＡ７は、
【０１２８】
【化２７】
2009500507.tif 000028
【０１２９】
の型のものであり、リン原子に結合したアームＡ６の末端は、酸素原子又は窒素原子、−ＮＨ−、若しくは−ＮＲ４−であることが可能である。
【０１３０】
上記のとおり、本発明による単量体の使用により、電極のある点上の生体分子を標的にすることが可能になり、さらに、この標的化は一段階で行うことができる。
【０１３１】
必然的に、本発明の別の目的は、電気活性プローブ及びそのようなプローブで少なくとも部分的に覆われた電極を提供することであり、これらは調製がより容易であり、プローブリガンド／標的リガンド相互作用の測定をより直接的にすることができる。
【０１３２】
用語「電気活性プローブ」は、標的リガンドがプローブの保持するプローブリガンドと特定の様式で相互作用したときに、そのプローブの電気化学的応答が変化するプローブを意味するものとする。そうして、分析物との特定の相互作用に従って変化した電気化学信号が観測される。
【０１３３】
用語「標的リガンド」は、本発明による単量体に結合したプローブリガンドと特異的に相互作用することができ、したがって、そうした単量体から得られる本発明による共重合体又は重合体で検出することができる任意の分子を意味するものとする。この標的リガンドは、例えば、ヌクレオチド、特にオリゴヌクレオチド、タンパク質、抗体、抗原、ペプチド、脂質、ステロイド、糖又は核酸などの生体分子などが可能である。重合体によって保持されるプローブリガンドは、検出される標的リガンドに対して特異的である。
【０１３４】
したがって、本発明の別の対象は、少なくとも２つの可溶性の本発明による単量体の電解重合により得ることができる電気活性なプローブであり、単量体はそれぞれ生体リガンドを保持して導電性ホモ重合体を形成する。詳細には、上記の式（ＩＩＩ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｂ）又は（ＩＩＩｃ）の単量体のうち少なくとも２つが用いられる。
【０１３５】
それらが好適ではないとしても、少なくとも２つの可溶性の本発明による単量体（単量体はそれぞれ、アミン、ヒドロキシル又はカルボン酸反応性官能基（Ｆ）を、随意に保護された形で、保持し、続いてこの反応性官能基（Ｆ）が生体リガンドとカップリングする）の電解重合により得ることができる導電性ホモ重合体の形の電気活性プローブは、本発明の不可欠な部分を形成する。詳細には、上記の式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）又は（ＩＩｃ）の単量体が用いられる。
【０１３６】
好ましくは、本発明の対象は、２種の異なる単量体間の共重合により得ることができる導電性共重合体の形の電気活性プローブであり、単量体の少なくとも一方は本発明によるものであり、単量体の少なくとも一方、そして好ましくは一方だけが生体リガンドを保持する。
【０１３７】
詳細には、共重合は、上記で定義されるとおりの式（ＩＩＩ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｂ）又は（ＩＩＩｃ）の単量体と、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）の単量体とから開始して行われる。そしてプローブ生体リガンドに間隔ができて、これにより感度の向上が可能になる。有利には、単量体（ＩＩＩ）／（Ｉ）又は（ＩＩＩａ）／（Ｉａ）又は（ＩＩＩｂ）／（Ｉｂ）又は（ＩＩＩｃ）／（Ｉｃ）（式中、Ｍ、Ａ１及びＲは同一である）の対で使用される。
【０１３８】
ここで再度、それらが好適ではないとしても、本発明による可溶性単量体（アミン、ヒドロキシル又はカルボン酸反応性官能基（Ｆ）を、随意に保護された形で、保持し、続いてこの反応性官能基（Ｆ）が生体リガンドとカップリングする）の少なくとも１種、そして好ましくは１種だけの電解重合により得ることができる導電性共重合体の形の電気活性なプローブは、本発明の不可欠な部分を形成する。詳細には、共重合は、上記の式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）又は（ＩＩｃ）の単量体と、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）の単量体とから開始して行われる。有利には、単量体（ＩＩ）／（Ｉ）又は（ＩＩａ）／（Ｉａ）又は（ＩＩｂ）／（Ｉｂ）又は（ＩＩｃ）／（Ｉｃ）（式中、Ｍ、Ａ１及びＲは同一である）の対で使用される。
【０１３９】
本発明の別の対象は、本発明による単量体を少なくとも１種、特に、生体リガンドを保持する単量体を少なくとも１種用いて水溶液中で行われる電解重合方法である。
【０１４０】
この電解重合はホモ重合であってよい。
【０１４１】
詳細には、上記の式（ＩＩＩ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｂ）又は（ＩＩＩｃ）の単量体でのホモ重合が行われる。本発明による可溶性単量体（単量体はそれぞれ、アミン、ヒドロキシル又はカルボン酸反応性官能基（Ｆ）を、随意に保護された形で、保持する）を少なくとも２種用いて開始されるホモ重合を行うことも可能である。次いで、このホモ重合に続いて反応性官能基（Ｆ）と生体リガンドとのカップリングが可能である。詳細には、上記の式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）又は（ＩＩｃ）の単量体が用いられる。
【０１４２】
好ましくは、電解重合は、２種の異なる単量体間で行われる共重合であり、単量体の少なくとも一方は本発明によるものである。好ましくは、単量体の少なくとも一方、そして好ましくは一方だけが生体リガンドを保持する。詳細には、共重合は、上記の式（ＩＩＩ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｂ）又は（ＩＩＩｃ）の単量体と、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）の単量体とから開始して行われる。有利には、単量体（ＩＩＩ）／（Ｉ）又は（ＩＩＩａ）／（Ｉａ）又は（ＩＩＩｂ）／（Ｉｂ）又は（ＩＩＩｃ）／（Ｉｃ）（式中、Ｍ、Ａ１及びＲは同一である）の対で使用される。
【０１４３】
少なくとも２種の異なる本発明による可溶性単量体（単量体はそれぞれ、アミン、ヒドロキシル又はカルボン酸反応性官能基（Ｆ）を、随意に保護された形で保持する）での共重合を行うことも可能である。有利には、この水相での共重合反応に、この反応性官能基（Ｆ）と生体リガンドとのカップリングが続く。詳細には、共重合は、上記の式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）又は（ＩＩｃ）の単量体と、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）の単量体とから開始して行われる。有利には、単量体（ＩＩ）／（Ｉ）又は（ＩＩａ）／（Ｉａ）又は（ＩＩｂ）／（Ｉｂ）又は（ＩＩｃ）／（Ｉｃ）（式中、Ｍ、Ａ１及びＲは同一である）の対で使用される。
【０１４４】
本発明の別の対象は、そのような重合反応と、随意に続く生体リガンドとのカップリングにより得ることができる重合体である。
【０１４５】
その別の態様に従って、本発明の別の対象は、導電性支持体を含む電極であり、その表面の全て又は一部は、上記の電気活性プローブでコーティングされている。
【０１４６】
本発明の別の対象は、生体試料中の標的リガンドの検出法であり、ここで生体試料は、プローブリガンド／標的リガンド相互作用に適切な条件下、プローブリガンドを保持する上記の電気活性プローブと接触させられ、試料との接触前後でのプローブより生じる電位差又は電流差が示され、そして随意に定量される。
【０１４７】
本発明による単量体から得られる重合体は、特に、生体リガンドが標的であり固体支持体に固定されている用途全てに用いることができる。
【０１４８】
より詳細には、これらの重合体は、自己支持膜の形で又は電極上の膜の形で得ることができる。これは、電極が、反応の間に届く電流を測定することにより、重合反応の進行を制御することができるからである。電極は、重合体のその後の電気化学的応答の測定も可能にする。したがって、本発明は、本発明による生体リガンドで機能付与した少なくとも１種の電気活性導電性重合体で表面が覆われた導電性支持体を含む電極、すなわち本発明による電気活性プローブにも関する。
【０１４９】
電極用導電性支持体は当該分野で既知である。例として、特に、金属又は炭素誘導体が挙げられる。本発明による電極の製造のため、重合体は、通常、導電性支持体に被着させる。電気化学的重合は、有利には、本発明による重合体で表面がコーティングされた導電性支持体を含む電極を得る目的で、電極表面で行われる。本発明の有利な実施形態において、電極は重合体層を金又は白金製の支持体表面に被着させることにより得られる。
【０１５０】
電極で電気化学的重合反応を制限及び制御することが可能だとすると、本発明による単量体は、生体リガンドを狭い表面に固定化して標的にすることを可能にする。この標的化電解重合は、定義された生体リガンドを保持する各点が整然と並ぶ最小化されたマトリクスを製造することを可能にする。有利な実施形態において、本発明は、したがって電極のマトリクスにも関する。
【０１５１】
本発明は、したがって、本発明による電極の少なくとも１本を含む電極のマトリクスにも関する。そのような電極のマトリクスは、１つのウェルが１つの電極に対応する一連のウェルを含むテストカード又は分析チップの形で提供することができる。
【０１５２】
有利な実施形態において、マトリクスの様々な電極が異なる生体リガンドを保持する。特定の実施形態にしたがって、本発明は、固体支持体に結合した複数の電極又は微小電極に関し、これらの電極は本発明による共重合体でコーティングされていて、有利には、異なる生体リガンドを保持する。そうした電極のマトリクスは、有利には、本発明による単量体の標的化電解重合、特に少なくとも２種の単量体の共重合により得ることができ、単量体の少なくとも１種は式（ＩＩＩ）、（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｂ）又は（ＩＩＩｃ）の単量体などの生体リガンドを保持し、そして少なくとも１種は式（Ｉ）、（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）の単量体などのリガンドで機能付与されていない。
【０１５３】
本発明による電極及び電極のマトリクスは、特に、試料中に存在することができ、かつ、重合体により保持された生体リガンドと特異的に作用できる検体（ａｎａｌｙｓｅｓ）の検出に用いられる。
【０１５４】
本発明は、任意の型の試料中の標的リガンドを検出することを可能にする。本発明の特定の実施形態において、試料は生体試料である。有利には、この試料は、診断目的で患者から採取されていてよい。例えば、試料には、尿、血液、血清、プラスミド、細胞抽出物又は体液が可能である。プローブは電気活性なので、その電気化学的応答は、標的リガンドが重合体によって保持されたプローブリガンドと特異的に相互作用したときに変化する。そうして、本発明による電気活性導電性重合体は、標的リガンドとの相互作用を電気化学的信号に置き換える。標的リガンドと重合体に保持されたオリゴヌクレオチドとの特異的相互作用は、標的リガンドの導入前に得られていたものに関して研究されていた重合体の電気化学的応答に変化をもたらす。有利には、標的リガンドの検出は、こうして、電気的測定で行われる。用語「電気的測定」は、重合体の酸化電位の変化などの電位差型の変化の測定、又は、所与の電位で観測される酸化電流の変化など電流差型の変化の測定を意味するものとする。これらの変化は、当業者に既知の方法に従って、迅速、高感度、かつ、定量的様式で測定される。
【０１５５】
本発明の有利な実施形態において、電気的測定は、電位の変化又は電流の変化の測定からなる。本発明の特定の実施形態において、サイクリックボルタンメトリーが用いられる。これは、一定速度で一方向に電位範囲を、次いで他方向に電位範囲を走査することからなる電気分析法である。得られるボルタモグラムは、測定した電気化学的系の電流応答を与え、その特性決定を可能にする。
【０１５６】
電気的測定による検出法は、本発明による重合体と好適である。しかしながら、当業者に既知の他の従来の検出法を用いることもできる。
【０１５７】
本発明の特に有利な実施形態において、標的リガンドと重合体に保持されたプローブリガンドとの間の特異的相互作用が、重合体の電解重合にすでに用いられた電極で検出できる。例えば、重合体に保持されたオリゴヌクレオチドと相補的な核酸のハイブリダイゼーションが、本発明による重合体を支持する電極での電気的測定により検出できる。
【０１５８】
オリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションは、検出される電気化学的信号の変化を測定するか又は酵素的反応により直接モニタリングすることができる。この場合、標的オリゴヌクレオチドは、例えば、ビオチンを保持する。ストレプトアビジン−ペルオキシダーゼ及び酵素の基質を導入後、基質のレベルで又は電気化学的信号のレベルでのいずれかで検出を行うことができる。
【０１５９】
同様に、電気化学的信号の多様性のおかげで、抗体／抗原、特に抗体／タンパク質型のタンパク質／タンパク質相互作用をモニタリングすることが可能である。
【０１６０】
本発明による単量体で得ることができる重合体は、例えばＰＣＲのモニタリングという状況でホスフェートイオンのアッセイに、酵素の活性を研究するため、例えばＳｃｉｅｎｃｅ，２００４，３０６，２０４８−２０７４に記載されるように分子電子工学における適用で用いることも可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０１６１】
単量体の調製及びそれに続いて得られる重合体の電気化学的特性決定の実施例を例示として以下に示す。
【０１６２】
Ａ．単量体の調製の実施例
Ｉ−単量体（Ｉａ．１）
【０１６３】
【化２８】
2009500507.tif 000029
【０１６４】
単量体Ｉａ．１を以下のスキームに従って調製した（ｒｅｐａｉｒｅｄ）：
【０１６５】
【化２９】
2009500507.tif 000030
【０１６６】
Ｉ−１  （１０−アミノ−５，８−ジオキサ−２−アザデシル）フェロセンの合成：
還流冷却管を備えた２口丸底フラスコ中、１，８−ジアミノ−３，６−ジオキサオクタン（Ａｌｄｒｉｃｈ）１５８ｍｇ（１．０６ｍｍｏｌ、１．１０当量）を無水エタノール５ｍｌに加える。そこに、無水エタノール１５ｍｌに溶解させたフェロセンカルボキシアルデヒド（ＡＢＣＲ）２０７ｍｇ（０．９７ｍｍｏｌ、１当量）を、均圧滴下漏斗を用いて滴下する。加え終わったら、反応媒体をエタノールの還流状態にする（８０℃）。この温度で６時間連続撹拌後、反応媒体を室温に冷却して撹拌しながら一晩放置する。イミンを還元してアミンにする目的で、水素化ホウ素ナトリウム（Ａｌｄｒｉｃｈ）４０ｍｇ（１．０６ｍｍｏｌ、１．１０当量）を反応媒体に直接加える。室温で２時間撹拌しながら反応を進行させる。続いて、エタノールを蒸発させ、媒体をジクロロメタンに移し、次いでシリカカラムでジクロロメタン／メタノール／トリエチルアミン８０−１８−２混合物を用いて精製する。
９０ｍｇの生成物を黄色固体の形で得る（０．２６ｍｍｏｌ、２６％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）：δ  ２．９５ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ），３．１０ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），３．７２ｐｐｍ（ｍ，８Ｈ，ＮＣＨ２ＣＨ２Ｏ，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ），３．９１ｐｐｍ（ｓ，２Ｈ，ＦｃＣＨ２ＮＨ），  ４．２０ｐｐｍ（ｓ，７Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），４．４０ｐｐｍ（ｓ，２Ｈ，Ｃｐ  Ｈ）．
【０１６７】
Ｉ−２  ピロール活性化エステル／（１０−アミノ−５，８−ジオキサ−２−アザデシル）フェロセンカップリング：
（１０−アミノ−５，８−ジオキサ−２−アザデシル）フェロセン８９ｍｇ（０．２６ｍｍｏｌ、１当量）を丸底フラスコに入れ、９０／１０アセトニトリル／水混合物１ｍｌに溶解させ、あらかじめ溶媒１ｍｌに溶解させた、節１．２．ｂで得られるピロールフタルイミジル又はスクシンイミジル活性化エステル０．２６ｍｍｏｌ（１当量）をゆっくりと加える。混合物を周囲温度で３０分間（フタルイミジルエステル）〜４時間（スクシンイミジルエステル）撹拌したままにする。続いて、反応媒体を、シリカカラムでジクロロメタン／メタノール９０／１０混合物を用いて精製する。
１５ｍｇの黄色固体を得る（０．０３ｍｍｏｌ、１３％）。この固体は少なくとも上限３０ｍＭの濃度まで水に溶解する。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，ＴＭＳ）：δ  ３．０３ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２），３．３４ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ），ＣＨ２Ｐｙ），３．５０ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）），３．６０ｐｐｍ（ｓ，４Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ），３．６３ｐｐｍ（ｔ，４Ｈ，ＣＨ２ＮＣＨ２ＣＨ２Ｏ），３．９９ｐｐｍ（ｓ，２Ｈ，ＦｃＣＨ２ＮＨ），４．２０ｐｐｍ（ｓ，５Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），４．２７ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），４．３９ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），６．０１  ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ−Ｎ），６．６７ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，ＣＨ−ＣＨ）
ＭＳエレクトロスプレー：Ｍ＋Ｎ＋＝４５４、Ｍ＋Ｎａ＋＝４７５、フラグメント化＝１９９
【０１６８】
ＩＩ  単量体（Ｉｃ．１）
メチル化反応により単量体（Ｉａ、１）から単量体（Ｉｃ．１）を得る。
【０１６９】
【化３０】
2009500507.tif 000031
【０１７０】
１口丸底フラスコ中、１当量の単量体Ｉａ．１を０．１５Ｍの濃度でＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）に溶解させる。次いで、ヨードメタン２００当量を慎重に加える。ヨードメタンの蒸発を防ぐため、還流冷却系を導入する。周囲温度で１２時間撹拌しながら反応を進行させ、次いでヨードメタン２００当量を再び加える。反応を２４時間進行させる。続いて、過剰のヨードメタンを蒸発させ、順相シリカカラムで精製を行う。所望の生成物（これは極性が最小）を橙〜黄色油状物の形で集める。収率は６０％である。続いて、生成物をイオン交換カラムに通してヨウ素対イオンを塩素と交換する。
この分子は、純水に対して、２５℃で５０ｍＭより大きい溶解度を有する。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，ＴＭＳ）：δ  ２．９７ｐｐｍ（ｓ，６Ｈ，ＣＨ３），３．３４ｐｐｍ（ｍ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）），３．３９ｐｐｍ（ｓ，ＣＨ２Ｐｙ），３．４３ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋（ＣＨ３）２ＣＨ２），３．５０ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）），３．６０ｐｐｍ（ｓ，４Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ），３．６３ｐｐｍ（ｔ，４Ｈ，ＣＨ２ＮＣＨ２ＣＨ２Ｏ），３．９９ｐｐｍ（ｓ，２Ｈ，ＦｃＣＨ２ＮＨ），４．２０ｐｐｍ（ｓ，５Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），４．２７ｐｐｍ（ｓ，２Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），４．３９ｐｐｍ（ｓ，２Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），６．０１  ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ−Ｎ），６．６７ｐｐｍ（ｄ，２Ｈ，ＣＨ−ＣＨ）
ＭＳエレクトロスプレー：Ｍ＋Ｈ＋＝４８２
【０１７１】
ＩＩＩ  単量体（Ｉｂ．１）
【０１７２】
【化３１】
2009500507.tif 000032
【０１７３】
工程１：１−［３−Ｏ−（２−シアノエチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルホスホルアミジチル）プロピル］フェロセンの合成：
【０１７４】
【化３２】
2009500507.tif 000033
【０１７５】
フェロセンモノプロパノール（５３．３ｍｇ、０．２１８ｍｍｏｌ）を、３回、無水アセトニトリル１ｍｌと同時蒸発（ｃｏｅｖａｐｏｒａｔｅｄ）させる。アルゴン下、橙色油状物を、無水アセトニトリル１ｍｌに入れ、ＤＩＰＥＡ（１２０μＬ、０．４８０ｍｍｏｌ）、次いでクロロホスフィン（４２μＬ、０．２４０ｍｍｏｌ）を加える。反応の進行は、プレート上同じ溶媒であらかじめ移動させたＴＬＣ（シクロヘキサン／酢酸エチル／トリエチルアミン（４９．５／４９．５／１））でモニタリングする。１０分間反応後には、出発物質はもはや存在しない。反応媒体を半分に濃縮する。
【０１７６】
得られる粗反応生成物を、シクロヘキサン／トリエチルアミン（９９：１）混合物で中和したシリカゲルで、溶出液酢酸エチル／シクロヘキサン（５０：５０）で精製する。
生成物を含む画分を合わせて濃縮する。トリエチルアミンを除去する目的で、油状物を、３回、エタノール／アセトニトリル混合物と同時蒸発させる。
油状物をアセトニトリル１ｍｌに入れ、次いで０．４５μｍ  ＰＶＤＦフィルターを通して濾過する。生成物を濃縮する。
得られる生成物の重量：０．１１６ｇ
【０１７７】
第２段階：３−フェロセニルプロピル２−シアノエチル２−（３−ピロリル）エチルリン酸トリエステルの合成
【０１７８】
【化３３】
2009500507.tif 000034
【０１７９】
ピロール−３−エタノール（２６ｍｇ、０．２３３ｍｍｏｌ）を、２回、無水アセトニトリル１ｍｌと同時蒸発させ、それから無水アセトニトリル１ｍｌに入れる。
数個のモレキュラーシーブ（３オングストローム）の存在下、テトラゾールの０．４５Ｍアセトニトリル溶液（１ｍｌ、０．４３６ｍｍｏｌ）を加える。第１段階で得られたフェロセンホスホルアミダイト誘導体（９７ｍｇ、２１８ｍｍｏｌ）を無水アセトニトリル溶液（１ｍｌ）に加える。溶液は橙色になる。反応をＴＬＣで、展開液（ｅｌｕｅｎｔ）シクロヘキサン／酢酸エチル／トリエチルアミン（４９．５／４９．５／１）でモニタリングする。１時間反応後には、出発物質はもはや残っていないので、酸化溶液（ブタノンペルオキシド、ジクロロメタン中０．６７％）（２ｍｌ）を加える。溶液は褐色になる。
【０１８０】
３０分反応後、ジクロロメタン２０ｍｌを加えると、テトラゾールが不溶性のため溶液は曇る。溶液を濾過して、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で３回、次いで飽和ＮａＣｌ溶液で１回抽出する。
有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。
得られた粗生成物の重量：０．１５５ｇ
生成物を、あらかじめジクロロメタン／トリエチルアミン（９９：１）混合物で中和したシリカゲルで、溶出液としてジクロロメタン／メタノール（９０：１０）を用いて精製する。
予想される生成物を、橙〜黄色油状物の形で５３．３ｍｇ得る。これは、収率５２％に相当するが、純粋ではない生成物６５ｍｇも得る。
【０１８１】
【化３４】
2009500507.tif 000035
【０１８２】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）２００ＭＨｚ：
１．８（ｍ，２Ｈ，Ｈｃ），２．４２４（ｍ，２Ｈ，Ｈｂ），２．５９７−２．６７８（ｍ，４Ｈ，Ｈｊ  ａｎｄ  ＣＨ２  ＴＥＡ），２．９０８（ｍ，２Ｈ，Ｈｆ），３．８４２（ｑ，２Ｈ，Ｈｄ），４．１４７−４．０１０（ｍ，１８Ｈ，Ｈａ，Ｈｄ，Ｈｅ），６．０１２０（ｂ，１Ｈ，Ｈｇ），６．６７０（ｂ，２Ｈ，Ｈｈ）
【０１８３】
第３段階：３−フェロセニルプロピル２−（３−ピロリル）エチルリン酸ジエステル（Ｉｂ．１）の合成
【０１８４】
【化３５】
2009500507.tif 000036
【０１８５】
ウィートン管中、濃アンモニア水２ｍｌを、３−フェロセニルプロピル２−シアノエチル２−（３−ピロリル）エチルリン酸トリエステル（第２段階で得たもの）５０ｍｇの１ｍｌメタノール溶液に加える。沈殿が生じるが、メタノール１ｍｌを加えて溶解させる。反応を、ＴＬＣで、ジクロロメタン／メタノール（８５：１５）を用いて、ＵＶ（２５４ｎｍ）及びバニリンにより視覚化して、モニタリングする。周囲温度で３時間後、わずかに変化する。この管を６０℃のオーブンに２時間置く。出発物質は全て消費されてしまった。ピロールの重合を防ぐ目的で、濃縮前にＴＥＡ０．５ｍｌを反応媒体に加える。こうして得られる粗反応生成物を、ジクロロメタン／トリエチルアミン（９９：１）混合物で調整したシリカゲルで精製する。この精製には溶出勾配が必要である：ジクロロメタン／メタノール１００：０から８５：１５へ。
精製後、橙〜黄色油状物２１．１ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ、４８％）を得る。
【０１８６】
【化３６】
2009500507.tif 000037
【０１８７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）２００ＭＨｚ：
１．７８６−１．８５７（ｍ，４Ｈ，Ｈｃ）；２．４０６（ｔ，２Ｈ，Ｈｂ，Ｊ３ｂｃ＝７．２  Ｈｚ）；２．８５８（ｔ，２Ｈ，Ｈｆ，Ｊ３ｅｆ＝６．４Ｈｚ），３．８８７（ｍ，２Ｈ，Ｈｅ，Ｊ３ｅｆ＝６，４Ｈｚ），３．９６２−４．０７５（ｍ，１５Ｈ，Ｈａ，Ｈｄ，ｉｍｐｕｒｉｔｙ）；６．１１０（ｂ，１Ｈ，Ｈｇ），６．６７８（ｂ，２Ｈ，Ｈｈ）．３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）２００ＭＨｚ：
０．７２２４ｐｐｍにリンを１つ含む生成物の存在
ＭＳ（ＥＳＩ）：
［Ｍ＋Ｈ＋］＝４１７．１、［Ｍ＋Ｎａ＋］＝４３９．９、［Ｍ＋２Ｎａ＋］＝４６１．８
【０１８８】
ＩＶ  単量体（ＩＩａ．１）
【０１８９】
【化３７】
2009500507.tif 000038
【０１９０】
単量体（ＩＩａ．１）を、以下のスキームに従って調製する：
【０１９１】
【化３８】
2009500507.tif 000039
【０１９２】
ＩＶ−１  ビス（１０−アミノ−５，８−ジオキサ−２−アザデシル）フェロセンの合成
還流冷却管を備えた２口丸底フラスコ中、１，８−ジアミノ−３，６−ジオキサオクタン（Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇｅｎｉｃｓ）３０４ｍｇ（２．０５ｍｍｏｌ、２．５当量）を無水エタノール５ｍｌに加える。そこに、フェロセンジカルボキシアルデヒド（Ａｌｄｒｉｃｈ）２００ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ、１当量）を無水エタノール１５ｍｌに溶解させたものを、均圧滴下ロートを用いて滴下する。滴下が完了したら、反応媒体をエタノール還流状態にする（８０℃）。この温度で６時間連続撹拌後、反応媒体を室温に冷却して撹拌しながら一晩放置する。形成されたイミンを還元してアミンにする目的で、水素化ホウ素ナトリウム（Ａｌｄｒｉｃｈ）１８６ｍｇ（４．９２ｍｍｏｌ、６当量）を反応媒体に直接加える。室温で２時間撹拌しながら反応を進行させる。続いて、エタノールを蒸発させ、媒体を水に移し、次いで逆相シリカカラムで５０／５０水／アセトン混合物を用いて精製する。
生成物４１ｍｇ（０．０８ｍｍｏｌ、１０％）を、褐色油状物の形で得る。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ）：δ  １．９２  ｐｐｍ（ｓ，６Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），２．８３  ｐｐｍ（ｍ，８Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），３．４９ｐｐｍ（ｍ，８Ｈ，ＮＣＨ２ＣＨ２Ｏ），３．６０ｐｐｍ（ｍ，１２Ｈ，ＦｃＣＨ２ＮＨ，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ），４．０６  ｐｐｍ（ｔ，４Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），４．１５  ｐｐｍ（ｔ，４Ｈ，Ｃｐ  Ｈ）．
ＭＳエレクトロスプレー：Ｍ＋Ｈ＋＝５０７、Ｍ＋Ｎａ＋＝５２９、フラグメント化＝３５９
【０１９３】
ＩＶ−２  ピロール活性化（フタルイミジル又はスクシンイミジル）エステル／ビス（１０−アミノ−５，８−ジオキサ−２−アザデシル）フェロセンのカップリング：
ＩＶ−２ａ  トリフルオロアセチルモノ保護：
ビス（１０−アミノ−５，８−ジオキサ−２−アザデシル）フェロセン２８６ｍｇ（０．５６ｍｍｏｌ、１当量）を、３回無水アセトニトリルとともに、１回無水ジクロロメタンとともに、ロータリーエバポレーターで同時蒸発させる。この同時蒸発は、不活性雰囲気（アルゴン）下で行う。続いて、無水ジクロロメタン３ｍｌをこの丸底フラスコに入れ、それからトリフルオロ酢酸エチル８０ｍｇ（０．５６ｍｍｏｌ、１当量）を２時間かけてゆっくりと加える。６時間反応後、さらにトリフルオロ酢酸エチル２４ｍｇ（０．１７ｍｍｏｌ、０．３当量）を加える。反応を一晩進行させた。次いで、媒体を濃縮して、シリカカラムで、ジクロロメタン／メタノール／トリエチルアミン８０／１８／２混合物を用いて精製する。収率５０％で褐色油状物を得る。
ＭＳエレクトロスプレー：Ｍ＋Ｈ＋＝６０３、Ｍ＋Ｎａ＋＝６２５、フラグメント化＝４５４
【０１９４】
ＩＶ−２ｂ  ピロール活性化（フタルイミジル又はスクシンイミジル）エステルの合成：
Ｋｏｒｒｉ−Ｙｏｕｓｓｏｕｆｉ  Ｈ．ら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９９７，１１９（３１），７３８８−７３８９に記載のプロトコルにしたがって、以下のスキームのように合成を行った：
スクシンイミド基で活性化されたエステル官能基を保持するピロール
【０１９５】
【化３９】
2009500507.tif 000040
【０１９６】
フタルイミド基で活性化されたエステル官能基を保持するピロール
【０１９７】
【化４０】
2009500507.tif 000041
【０１９８】
ＩＶ−２ｃ  ピロール活性化（フタルイミジル又はスクシンイミジル）エステルとのカップリング：
第ＩＶ−２ａ節で得られる、トリフルオロアセチル基でモノ保護したビス（１０−アミノ−５，８−ジオキサ−２−アザデシル）フェロセン８８ｍｇ（０．１５ｍｍｏｌ、１当量）を、丸底フラスコに入れ９０／１０アセトニトリル／水混合物３７５μＬに溶解させる。第ＩＶ−２ｂ節で得られるピロールフタルイミジルエステル４８ｍｇ又はピロールスクシンイミジルエステル４０ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ、１．２当量）をあらかじめ溶媒３７５ｍｌに溶解させたものと、ゆっくりと反応させる。混合物を周囲温度で４時間撹拌したままにする。続いて、反応媒体を、シリカカラムで、８０／２０ジクロロメタン／メタノール混合物で精製する。黄〜褐色油状物１８ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ、１７％）を得るが、この油状物は少なくとも濃度１００ｍＭまで水に溶ける。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００  ＭＨｚ，ｄ−ＤＭＳＯ，ＴＭＳ）：δ  ２．８１  ｐｐｍ（ｑ，４Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２），３．３６  ｐｐｍ（ｔ，４Ｈ，Ｃ（Ｏ）ＮＣＨ２ＣＨ２Ｏ），３．４２  ｐｐｍ（ｔ，４Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＣ（Ｏ）），３．５３  ｐｐｍ（ｍ，１４Ｈ，ＣＨ２Ｐｙ，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ，ＣＨ２ＮＣＨ２ＣＨ２Ｏ）；３．６３  ｐｐｍ（ｄ，４Ｈ，ＦｃＣＨ２ＮＨ），４．１６  ｐｐｍ（ｓ，４Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），４．２４  ｐｐｍ（ｓ，４Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），５．９２  ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ−Ｎ），６．６０ｐｐｍ（ｄ，２Ｈ，ＣＨ−ＣＨ），７，４２  ｐｐｍ（ｓ（ｂｒｏａｄ），１Ｈ，ＮＨ  ｐｙ）
１９Ｆ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ｄ−ＤＭＳＯ，ＴＭＳ）：δ  −７４．７１  ｐｐｍ（Ｃ（Ｏ）ＣＦ３）
ＭＳエレクトロスプレー：Ｍ＋Ｈ＋＝７１０、Ｍ＋Ｎａ＋＝７３２、フラグメント化＝４５５、４６６
【０１９９】
Ｖ  単量体（ＩＩａ．２）
【０２００】
【化４１】
2009500507.tif 000042
【０２０１】
この単量体は単量体（ＩＩａ．１）から得られる。以下のスキームに示すとおり、第一級アミンの脱保護（トリフルオロアセチル基の除去）を十分に行う。
【０２０２】
【化４２】
2009500507.tif 000043
【０２０３】
脱保護のため、単量体（ＩＩａ．１）１当量を密閉した４ｍｌウィートン管に入れる。この管には２８％水酸化アンモニウム溶液（Ａｌｄｒｉｃｈ）が１／３入っている。管を閉じて、オーブン中６０℃で一晩放置する。続いて、アンモニア水をロータリーエバポレーターで蒸発させる。生成物約６００ｍｇを褐色油状物の形で得るが、これは水に１００ｍＭより多く溶ける。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ｄ−ＤＭＳＯ，ＴＭＳ）：δ  ２．７３  ｐｐｍ（ｍ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２，）２．９３ｐｐｍ（ｔ，Ｃ（Ｏ）ＮＣＨ２ＣＨ２Ｏ），  ３．０９ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＣ（Ｏ）），３．３５  ｐｐｍ（ｓ，４Ｈ，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ），３．５３ｐｐｍ（ｔ，？？？，ＣＨ２ＮＣＨ２ＣＨ２Ｏ，ＮＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ），３．６０ｐｐｍ（ｓ，  ２Ｈ，ＣＨ２Ｐｙ），３．７７ｐｐｍ（ｄ，４Ｈ，ＦｃＣＨ２ＮＨ），４．３０ｐｐｍ（ｓ，４Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），４．４２  ｐｐｍ（ｓ，４Ｈ，Ｃｐ  Ｈ），６．１３  ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ，ＣＨ＝ＣＨ−Ｎ），６．８２  ｐｐｍ（ｄ，２Ｈ，ＣＨ−ＣＨ），７．８７ｐｐｍ（ｓ（ｂｒｏａｄ），１Ｈ，ＮＨ  ｐｙ）
ＭＳエレクトロスプレー：Ｍ＋Ｈ＋＝６１４、Ｍ＋Ｎａ＋＝６３６、フラグメント化＝３５９、４５５
【０２０４】
ＶＩ  単量体（ＩＩｂ．１）
【０２０５】
【化４３】
2009500507.tif 000044
【０２０６】
この単量体（ＩＩｂ．１）を以下のスキームに従って調製する：
【０２０７】
【化４４】
2009500507.tif 000045
【０２０８】
ＶＩ−１  １−［３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルプロピル］−１’−［３’−ヒドロキシプロピル］−フェロセン（上記の図で中間体２）の合成。
１，１’−ジヒドロキシプロピルフェロセン（Ｅｚｕｓ，Ｌｙｏｎｓ）（０．１５ｇ、０．４９６ｍｍｏｌ）を、３回、アセトニトリル（３×２．５ｍｌ）と同時蒸発してから、無水アセトニトリル５ｍｌに溶解させた。次いで、イミダゾール０．０５ｇ（０．７４５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ４５μＬ（０．１２５ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド１５０ｍｇ（０．９９４ｍｍｏｌ）を続けて反応媒体に加えた。溶液を９０分間撹拌した。次いで、反応媒体を０℃に冷却してから、水２ｍｌを加えて反応を停止させた。次いで、減圧下、溶媒を乾固するまで蒸発させた。得られた粗反応生成物をジクロロメタン４０ｍｌに入れた。有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×２０ｍｌ）で２回洗い、それから硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下、溶媒を蒸発させた後、生成物を、シリカゲル（ＴＥＡでシリカを先に中和）のクロマトグラフィーで、ジクロロメタン中メタノール量の勾配により精製した。乾燥後、純粋な生成物に相当する橙色油状物を得た（０．１０２ｇ、収率３９％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｉｎ  ｐｐｍ）：０．０６（ｓ，６Ｈ，Ｓｉ−ＣＨ３），０．９１（ｓ，９Ｈ，ＣＨ３  ｔＢｕ），１．６８−１．８３（ｍ，４Ｈ，Ｈｃ，Ｈｃ’），２．３２−２．４４（ｍ，４Ｈ，Ｈｂ，Ｈｂ’），３．５９−３．６８（ｍ，４Ｈ，Ｈｄ，Ｈｄ’），３．９９（ｓ，８Ｈ，Ｈａ−Ｈａ’）．
【０２０９】
ＶＩ−２  １−［３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルプロピル］−１’−［３’−Ｏ−（（２−シアノ−エチル）（Ｎ、Ｎ−ジイソプロピル）ホスホルアミジチル）プロピル］フェロセン（上記の図で中間体３）の合成。
０．１０３ｇの化合物２（０．２４６ｍｍｏｌ）を、３回、無水アセトニトリル（３×３ｍｌ）と同時蒸発させてから、これと同じ溶媒３ｍｌに入れた。溶液をアルゴン流下で撹拌した。次いで、ＤＩＰＥＡ（９４μＬ、０．５４５ｍｍｏｌ）及びクロロホスフィン（６０μｌ、０．２７０ｍｍｏｌ）を、セプタムを通して反応媒体に加えた。３０分間反応後、減圧下、溶液を濃縮して容積１ｍｌにした。生成物を、シリカゲル（ＴＥＡでシリカを先に中和）のクロマトグラフィーで、ジクロロメタン中メタノール量の勾配により、直接精製した。乾燥後、純粋な生成物に相当する橙色油状物を得た（０．１２１ｇ、収率８０％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｉｎ  ｐｐｍ）：０．０６（ｓ，６Ｈ，Ｓｉ−ＣＨ３），０．９１（ｓ，９Ｈ，ＣＨ３  ｔＢｕ），１．１９（ｄ，１２Ｈ，ＣＨ３  ｉＰｒ），１．６８−１．７７（ｍ，４Ｈ，Ｈｃ，Ｈｃ’），２．３２−２．３６（ｍ，４Ｈ，Ｈｂ，Ｈｂ’），２．６３（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２−ＣＮ），３．５６−３．６５（ｍ，６Ｈ，Ｈｄ，Ｈｄ’，ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＮ），３．８３−３．９７（ｍ，２Ｈ，ＣＨ−  ｉＰｒ），３．９８（ｓ，８Ｈ，Ｈａ−Ｈａ’）．ＮＭＲ  ３１Ｐ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１４７．９２  ｐｐｍ．
【０２１０】
ＶＩ−３  ｛３−［１’−（３’−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルプロピル）フェロセン−１−イル］プロピル｝［２−（３−ピロリル）エチル］リン酸ジエステル（上記の図で中間体４）の合成。
３−（ヒドロキシエチル）ピロール０．０２４ｇ（０．２１５ｍｍｏｌ）を３回、無水アセトニトリル（３×３ｍｌ）と同時蒸発させてから、アルゴン存在下、これと同じ溶媒３ｍｌに入れた。次いで、テトラゾールの０．４５Ｍアセトニトリル溶液１．１ｍｌ（０．４８９ｍｍｏｌ）を溶液に加え、続いて０．１２１ｇの化合物３（０．２１５ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応媒体を、アルゴン下、室温で３０分間撹拌した。次いで、ブタノンペルオキシドのジクロロメタン溶液（４．５ｍｌ、０．６７％）を加えて、生成物を酸化させた。４５分間撹拌後、ジクロロメタン２５ｍｌを加えた。有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液で２回（２×１５ｍｌ）洗い、それから硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下、溶媒をエバポレートした後、残った粗生成物をアンモニア（３０％水溶液）に溶解させて、１６時間６０℃で、密閉したフラスコに置いた。減圧下、溶媒を蒸発させた後、生成物を、シリカゲル（ＴＥＡでシリカを先に中和）のクロマトグラフィーで、ジクロロメタン中メタノール量の勾配により精製した。乾燥後、純粋な生成物に相当する橙色油状物を得た（０．０４２ｇ、収率３３％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｉｎ  ｐｐｍ）：０．０６（ｓ，６Ｈ，Ｓｉ−ＣＨ３），０．９１（ｓ，９Ｈ，ＣＨ３  ｔＢｕ），１．３３（ｔ，ＣＨ３  ＴＥＡ），１．６８（ｍ，４Ｈ，Ｈｃ，Ｈｃ’），２．３１−２．４４（ｍ，４Ｈ，Ｈｂ，Ｈｂ’），２．８５（ｔ，２Ｈ，Ｈｆ），２．９９−３．０９（ｑ，ＣＨ２  ＴＥＡ），３．６２（ｔ，２Ｈ，Ｈｇ），３．８５−３．９１（ｍ，４Ｈ，Ｈｄ，Ｈｄ’），３．９６（ｓ，８Ｈ，Ｈａ−Ｈａ’），６．１１（ｓ，１Ｈ，Ｈｇ），６．６７（ｄ，２Ｈ，Ｈｈ）．３１Ｐ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｉｎ  ｐｐｍ）：０．８６５．ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ  ５８８（ｍ−Ｈ）−．
【０２１１】
ＶＩ−４  ｛３−［１’−（３’−ヒドロキシプロピル）フェロセニル］プロピル｝［２−（３−ピロリル）エチル］リン酸ジエステル（化合物ＩＩｂ．１）の合成。
上記で得られた中間体化合物４を、３回、無水ＴＨＦ（３×２．５ｍｌ）と同時蒸発させてから、アルゴン下、ＴＨＦ１ｍｌに入れて調整した。次いで、ＴＢＡＦの１Ｍ  ＴＨＦ溶液１４０μｌ（０．１４３ｍｍｏｌ）を反応媒体に加えた。３時間撹拌後、減圧下、溶液を濃縮して最終容積０．５ｍｌにした。この粗反応生成物を、シリカゲル（ＴＥＡで先に中和）のクロマトグラフィーで、ジクロロメタン中メタノール量の勾配により直接精製し、純粋な生成物を橙色油状物として得た（０．０１３ｇ、収率３９％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｉｎ  ｐｐｍ）：１．２８−１．３５（ｍ，９Ｈ，ＣＨ３  ＴＥＡ），１．８１−１．８３（ｍ，４Ｈ，Ｈｃ，Ｈｃ’），２．３７−２．４５（ｍ，４Ｈ，Ｈｂ，Ｈｂ’），２．８８（ｔ，２Ｈ，Ｈｆ），３．６６（ｔ，２Ｈ，Ｈｄ’），２．９２−３．０６（ｑ，６Ｈ，ＣＨ２  ＴＥＡ），３．９１−３．９４（ｍ，４Ｈ，Ｈｄ，Ｈｅ），４．０１（ｓ，８Ｈ，Ｈａ−Ｈａ’），６．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈｇ），６．６８（ｂ，２Ｈ，Ｈｈ）．３１Ｐ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｉｎ  ｐｐｍ）：０．４３  ｐｐｍ．（ＥＳＩ）ＭＳ  ｍ／ｚ：４７４．１（Ｍ−Ｈ）−．
【０２１２】
ＶＩＩ  単量体（ＩＩＩａ．１）
この単量体は、単量体ＩＩａ．２から得る。
【０２１３】
ＶＩＩ．１  単量体ＩＩａ．２の合成：
【０２１４】
【化４５】
2009500507.tif 000046
【０２１５】
ＶＩＩ．２  単量体ＩＩａ．２へのオリゴヌクレオチド又はペプチドの結合：
第１段階：単量体ＩＩａ．２への活性化エステルの結合
【０２１６】
【化４６】
2009500507.tif 000047
【０２１７】
単量体ＩＩａ．２（１当量）を水に溶解させる。ＤＭＦの最終割合が１０％を越えないように、グルタル酸ジスクシンイミジル（２００当量）を最小量のＤＭＦに溶解させる。撹拌しながら、３７℃で２時間、反応を進行させる。次いで、逆相シリカカラムで、水／アセトン混合物で溶出させて、クロマトグラフィーを行う。所望の生成物（その黄色で同定が可能である）を回収する。アセトンを蒸発させる。
【０２１８】
第２段階：活性化エステル単量体のペプチド又はオリゴヌクレオチドへの結合
１つ又は複数のアミン官能基を保持するペプチド又はオリゴヌクレオチド１当量を加える。オリゴヌクレオチドについては、ヘキシルアミンの結合により鎖末端にアミン官能基を作ることが可能である。ペプチドについては、Ｎ−末端位にアミンがあり、リシンタグを加えることも随意に可能であって、これにより側鎖に第一級アミン官能基を有することが可能になる。
撹拌しながら、３７℃で１時間カップリングを進行させ、次いで結合体をＨＰＬＣで精製する。
【０２１９】
Ｂ．電気化学的特性決定及び生物学的応用：
添付の図１〜図１１を参照する。
【０２２０】
図１：酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ４．２（左側実線）及びｐＨ＝７（右側点線）中、１００ｍＶ／ｓでの読み取り、単量体（Ｉｃ．１）３０ｍＭで得られるホモ重合体層、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ＝４．２中、０．６０Ｖで２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着。
【０２２１】
図２：酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％、ｐＨ＝４．２中、２００ｍＶ／ｓでの読み取り、単量体（ＩＩａ．１）１００ｍＭで得られるホモ重合体層、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｎ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％中、０．６５Ｖで３６０ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着。
【０２２２】
図３：酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ中、１００ｍＶ／ｓでの読み取り、ピロール−３−エタノール５０ｍＭ、単量体（ＩＩａ．１）２０ｍＭの共重合体層、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ中、０．６５Ｖで２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着。
【０２２３】
図４：酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍ中、２００ｍＶ／ｓでの読み取り、ピロール−３−エタノール５０ｍＭ、単量体（ＩＩａ．１）２０ｍＭの共重合体層、０．６５Ｖで被着。
【０２２４】
図５：ＭＩＣＡＭ緩衝液中、２００ｍＶ／ｓでの読み取り、ピロール−３−エタノール５０ｍＭ、単量体（ＩＩａ．１）２０ｍＭの共重合体層、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍ中、０．６５Ｖで３．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着。
【０２２５】
図６：酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％中、２００ｍＶ／ｓでの読み取り、ホモ重合体（ＩＩａ．１）の層、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％中、０．６５Ｖで２８．８ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着。
【０２２６】
図７：酢酸ナトリウム／酢酸緩衝液、０．２ＭのＬｉＣｌＯ４、ｐＨ＝４、２中、１００ｍＶ／ｓでの読み取り、ホモ重合体（ＩＩｂ．１）の層、酢酸ナトリウム／酢酸緩衝液、０．２ＭのＬｉＣｌＯ４、ｐＨ＝４、２中、２ｍＭで、３種の異なる電位０．３Ｖ、０．４Ｖ及び０．５Ｖ／ＦｅＣｐ２／ＦｅＣｐ２＋、かつ、１０．８ｍＣ／ｃｍ２の一定の荷電で被着。
【０２２７】
図８：時間の関数としてのＱ＝（Ｉｏ−Ｉ）／Ｉｏの変化、ここでＩｏは相補的配列添加のｔ＝１分後におけるフェロセンの酸化強度であり、Ｉは相補的配列添加のｔ＝ｘ分後における強度である。単量体（Ｉａ．１）の共重合体層が関係する。
【０２２８】
図９：時間の関数としてのフェロセンの酸化ピークにおける電流強度の減少割合；（■）対照（単量体Ｉｂ．１及びピロール−３−エタノールで調製した重合体）＋ＨＢＶ相補的標的の添加；（▲）＋ＨＩＶ非相補的標的の添加；（◆）＋ＨＢＶ相補的標的の添加。
【０２２９】
図１０：ＨＩＶ標的を添加した場合のハイブリダイゼーション中のフェロセンの酸化強度の減少割合。読み取りは、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ＝４．２、Ｔｗｅｅｎ  ０．００５％及びサケ精子ＤＮＡ  １０μｇ／ｍｌ中、１００ｍＶ／ｓで行う。単量体（Ｉｃ．１）３０ｍＭとピロール−オリゴヌクレオチド１２．５μＭ（それぞれｐｙ−配列番号１を１２．５μＭ及び［ｐｙ−配列番号２を６．２５μＭ＋ｐｙ−配列番号３を６．２５μＭ］）との共重合体が、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ＝４、２中、０．６０Ｖで２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着してできた層の問題である。
Δｌｏｘ／Ｉｏ＝［（標的導入のｔ＝１分後におけるフェロセンの酸化強度）−（標的導入のｔ分後におけるフェロセンの酸化強度）］／（標的導入のｔ＝１分後におけるフェロセンの酸化強度）。
【０２３０】
図１１：ＨＢＶ標的を添加した場合のハイブリダイゼーション中のフェロセンの酸化強度の減少割合。読み取りは、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ＝４、２、Ｔｗｅｅｎ  ０．００５％及びサケ精子ＤＮＡ  １０μｇ／ｍｌ中、１００ｍＶ／ｓで行う。単量体（Ｉｃ．１）３０ｍＭとピロール−オリゴヌクレオチド１２．５μＭ（それぞれｐｙ−配列番号１を１２．５μＭ及び［ｐｙ−配列番号２を６．２５μＭ＋ｐｙ−配列番号３を６．２５μＭ］）との共重合体が、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ＝４、２中、０．６０Ｖで２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着してできた層の問題である。
【０２３１】
装置：
電気化学的研究は、Ｂｉｏ−Ｌｏｇｉｃ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＳＡ（フランス国クレ）製のＶＭＰ２定電位電解装置で行った。これは弱電流ボード及びＡｐｉＴ８型チップ（ＬＥＴＩ，フランス国グルノーブル）に適したコネクタとともに、３つのチャンネルを備える。この定電位電解装置は、ＥＣＬａｂのＥｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＳｏｆｔｗａｒｅバージョンＶ８．３２で制御される。
【０２３２】
導電性支持体上、各点、参照電極及び対極に接続した電極の回路でできたチップを用いた。こうしたチップの製造方法の例は、以下の論文に記載される：Ｃｏｓｎｉｅｒ，Ｂ．Ｐ．，Ｍａｒｑｕｅｔｔｅ，Ｃ．  ａｎｄ  Ｂｌｕｍ．Ｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００５，１２７，１８３２８−１８３３２。
【０２３３】
単量体の電気化学的特性決定の間、読み取りは、生物学的相互作用の検出ですでに用いた緩衝液で行った。ＭＩＣＡＭオリゴヌクレオチドハイブリダイゼーション緩衝液（Ａｐｉｂｉｏ社，フランス国グルノーブル）を用いた。後者の緩衝液は、ホスフェート緩衝液９．５ｍＭ、ＮａＣｌ  ０．５１５Ｍ、ＫＣｌ  ２．６ｍＭ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０４８％、Ｄｅｎｈａｒｄｔ  １Ｘ、サケ精子ＤＮＡ  １０μｇ／ｍｌを含む。
【０２３４】
Ｉ−単量体（Ｉａ．１）から又は単量体（Ｉｂ．１）から得られる重合体
Ｉ．ａ−、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ４．２、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍからなる緩衝液中、濃度５０ｍＭの単量体（Ｉａ．１）に、０．６０Ｖで６１．２ｍＣ／ｃｍ２の荷電で、ホモ重合体を電極チップ上に被着させた。繰り返しになるが、形成された層の読み取りがこれと同じ緩衝液で行われる場合、フェロセンの酸化及び還元は、はっきりわかる。ＭＩＣＡＭハイブリダイゼーション緩衝液でも安定な信号が観測される。
【０２３５】
Ｉ．ｂ−単量体（Ｉｂ．１）とピロール−３−エタノールとの共重合体層も調製した。
以下の配合を用いる：ピロール−３−エタノール５０ｍＭ及び単量体（Ｉｂ．１）２０ｍＭ。酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ４．２、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍからなる緩衝液中、０．６０Ｖで２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着させる。
繰り返しになるが、被着緩衝液中２００ｍＶ／ｓで得られるボルタモグラムでは、フェロセンの酸化及び還元がはっきりわかる。
【０２３６】
ＩＩ−単量体（Ｉｃ．１）から得られる重合体
酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ中、単量体（Ｉｃ．１）に、０．６Ｖで２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で、電極チップ上にホモ重合体を被着させた。ｐＨ＝７である以外は同じ条件で、別の被着を実施した。
形成した重合体のボルタモグラムを図１に示すが、これはフェロセンの主要な電気化学的応答を明らかにする。ｐＨ＝７では電気化学的信号が大きくなり、このことは、生理学的ｐＨでの生物学的相互作用の電気化学的検出にとって有利な見通しにつながる。
【０２３７】
ＩＩＩ−単量体ＩＩａ．１から得られる重合体
ＩＩＩ．ａ−酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％中、単量体（ＩＩａ．１）（５０ｍＭ）に、０．６５Ｖで３６０ｍＣ／ｃｍ２の荷電で、電極チップ上にホモ重合体を被着させた。これと同じ緩衝液での、形成した重合体のボルタモグラムを図２に示すが、ボルタモグラムはフェロセンの酸化及び還元を明らかにする。得られるボルタモグラムは、走査速度が５０ｍＶ／ｓを越えるとかなり非対称になるが、このことは、得られた重合体層が立体的に制約を受けており、そのため電子交換が起こりにくいことを反映している。
【０２３８】
ＩＩＩ．ｂ−単量体（ＩＩａ．１）とピロール−３−エタノールとの共重合体の層も調製した。
共重合体を調製する利点は、ピロール−３−エタノールを通じて層表面の正電荷の間隔をあけることが可能になるという事実にある。濃度５０ｍＭのピロール−３−エタノールと濃度２０ｍＭの単量体（ＩＩａ．１）とを用いて、電極チップ上への被着それぞれを行う。２種の被着緩衝液が良好な結果を与えた。
−酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍからなる緩衝液、０．６５Ｖで２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着、
−酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ４．２、ＬｉＣｌＯ４    ０．２Ｍからなる緩衝液、０．６５Ｖで３．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着。
【０２３９】
これらの緩衝液で得られたボルタモグラムを図３、（ＮａＣｌ  ０．５Ｍ、走査速度＝１００ｍＶ／ｓ）及び図４（ＬｉＣｌＯ４    ０．２Ｍ、走査速度＝２００ｍＶ／ｓ）に示す（Ａｐｉｂｉｏ社，フランス国グルノーブル）。酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ４．２、ＬｉＣｌＯ４    ０．２Ｍからなる緩衝液中被着した共重合体を用いて走査速度２００ｍＶ／ｓで得られたボルタモグラム（図５に示す）からわかるとおり、ＭＩＣＡＭハイブリダイゼーション緩衝液（Ａｐｉｂｉｏ社，フランス国グルノーブル）を用いると同じく信号の安定化が観測される。
【０２４０】
ＩＶ−単量体（ＩＩａ．２）から得られる重合体
ＩＶ．ａ−酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％からなる緩衝液中、濃度１０ｍＭの単量体（ＩＩａ．２）に、０．６５Ｖで２８．８ｍＣ／ｃｍ２の荷電で、電極チップ上にホモ重合体を被着させた。図６に示すとおり、形成した層の読み取りをこれと同じ緩衝液で行う場合、フェロセンの酸化及び還元がはっきりとわかる。
【０２４１】
ＩＶ．ｂ−酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％中、ピロール−３−エタノール５０ｍＭ及び単量体（ＩＩａ．２）１０ｍＭに、０．６５Ｖで９０ｍＣ／ｃｍ２の荷電で、共重合体層を形成させる。被着は、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％からなる緩衝液で行う。
繰り返しになるが、被着緩衝液中２００ｍＶ／ｓでの読み取りは、フェロセンの酸化及び還元を明らかにする。
【０２４２】
Ｖ−単量体（ＩＩｂ．１）から得られる重合体
酢酸／酢酸ナトリウム、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ４．２からなる緩衝液（重合緩衝液でＰＢと示す）中、単量体を２ｍＭの濃度で電解重合させた。溶液２０μＬをチップ上の点領域に被着させた。
３種の異なる電位、すなわち、０．３Ｖ、０．４Ｖ及び０．５Ｖ／ＦｅＣｐ２／ＦｅＣｐ２＋で、１０．８ｍＣ／ｃｍ２の一定の荷電でのクロノアンペロメトリーにより電解重合を行った（図７）。重合後、電極表面に吸着されたものを除去する目的で、各点を連続して、ＰＢ緩衝液で洗い、次いでＰＢ＋０．０５％  Ｔｗｅｅｎ緩衝液で３回洗い、最後にＰＢ緩衝液で洗った。サイクリックボルタンメトリー測定のため、ＰＢ緩衝液３０μＬを電解溶液として用い、サイクリックボルタグラムを、−０．５Ｖ〜０．４Ｖの間で、走査速度０．１Ｖ／ｓで記録した。この分析は、各点表面上に重合体が存在すること及び酸化還元に対するフェロセンの良好な応答をはっきりと示す。
炭素チップ上での重合体のサイクリックボルタンメトリーによる分析（ＦｃのＥｏｘ＝−０．０２Ｖ；ＦｃのＥｒｅｄ＝−０．０６Ｖ）。
【０２４３】
ＶＩ−単量体Ｉａ．１由来の電気活性プローブ
ＶＩ．ａ−生体リガンドの固定化
それぞれ５’−ホスホリル化末端でピロールを導入された２２−ｍｅｒオリゴヌクレオチド配列を用いた。配列のうち１つは、ＨＩＶウイルスから得られるものである（配列番号１）。その他のものは、ＨＢＶ−１０５Ｃウイルスから得られるものである（配列番号２及び配列番号３）。ピロールの結合は、３−メチル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド−ピロールを、５’位がヘキシルアミンで修飾されたオリゴヌクレオチドとカップリングさせることにより行う。
【０２４４】
２０μＬの酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ４．２中、５０ｍＭのピロール−３−エタノール単量体、１５ｍＭの単量体Ｉａ．１及び１２．５μＭのピロール−オリゴヌクレオチド単量体に、０．５５Ｖの電位及び２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電をかけることにより共重合体を得た。電極チップ上、１つの電極はＨＩＶウイルスから得られるオリゴヌクレオチド（配列番号１）で標的化されており、別の電極はＨＢＶウイルスから得られる２種のオリゴヌクレオチド（配列番号２及び配列番号３、それぞれ６．２５μＭ）で標的化されている。
【０２４５】
ＶＩ．ｂ−ハイブリダイゼーション
ハイブリダイゼーション緩衝液は、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４    ０．２Ｍ、ｐＨ＝４．２、０．００５％Ｔｗｅｅｎ  ２０及びサケ精子ＤＮＡ  １０μｇ／ｍｌを含む。
チップをこの緩衝液に１０分間沈める。次いで、配列番号１の配列に相補的な配列（配列番号４）１００ｐＭを加える。配列番号４の配列は３３−ｍｅｒである。次いで、−０．５〜０．５Ｖの間で１００ｍＶ／ｓのサイクリックボルタンメトリーのサイクルを開始し、２０分間続ける。
図８は、時間の関数としてのＱ＝（Ｉｏ−Ｉ）／Ｉｏの変化を示す。これらの曲線の開始時の傾斜を計算すると、配列番号１（ＨＩＶ）に相補的な配列を含む点は傾斜の値が大きくなることからこれを容易に識別することが可能になる。
【０２４６】
ＶＩＩ−単量体Ｉｂ．１由来の電気活性プローブ
ＶＩＩ．ａ−生体リガンド（ＨＢＶプローブ）の固定化
ＨＢＶ捕獲プローブオリゴヌクレオチド（配列番号３）の５’位をピロールで修飾したもの（ＨＢＶ−１０５Ｃ）を、化合物Ｉｂ．１とピロール−３−エタノールとの共重合により、炭素チップの各点に固定する。ＬｉＣｌＯ４    ０．２Ｍ、酢酸ナトリウム１０ｍＭ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０２５％からなる緩衝液（ｐＨ４．２）中５０ｍＭのピロール−３−エタノール、３ｍＭの化合物Ｉｂ．１及び１２．５μＭのＯＤＮ（５’−ピロール）を含む溶液３０μＬを、点領域に被着させる。次いで、達成されるべき荷電２２ｍＣ／ｃｍ２を、０．６５Ｖに固定された電位で、標的となる点にかける。次いで、各点の表面を、同じ緩衝液、次いでＭｉｌｌｉ−Ｑ水で慎重に洗ってから、重合体層の酸化／還元信号が安定するまで、測定緩衝液中でインキュベートする。
【０２４７】
ＶＩＩ．ｂ−相補的標的（配列番号５、８６塩基長のＨＢＶ  ＤＮＡ標的を表す）及び非相補的標的（配列番号４、３３塩基長のＨＩＶ標的を表す）とのハイブリダイゼーションのモニタリング。
電解被着した重合体膜の電気化学的応答を測定することにより、ハイブリダイゼーション反応を経時的にモニタリングする。濃度１００ｎＭの標的ＤＮＡ（ＨＢＶ又はＨＩＶ）を含むＭＩＣＡＭ緩衝液３０μＬを最初にチップの点領域上に被着させ、フェロセンの酸化ピークでの電流強度の変化を測定することによりモニタリングする。捕獲オリゴヌクレオチドを含まない重合体点でブランクを作る。こうして経時的な電流の安定性を確かめる。図９に示す結果は、陽性点の場合の電流強度の著しい減少を明らかにする。抑制は顕著であり、ハイブリダイゼーションに関して重合体膜の感度が満足いくものであることを確かにする。
【０２４８】
ＶＩＩＩ−単量体（Ｉｃ．１）由来の電気活性プローブ
ＶＩＩＩ．ａ−生体リガンドの固定
単量体（Ｉｃ．１）を、０．６０Ｖ及び２１．６ｍＣ／ｃｍ２で、オリゴヌクレオチド（配列番号１、配列番号２、配列番号３；供給元ビオメリュー社Ｐｏｌｙｔｅｃｈ）で官能基導入されたピロール単量体と共重合させた。単量体の濃度は、それぞれ、１５ｍＭ及び３．７５μＭである。酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍからなる緩衝液（ｐＨ４．２）中、被着させる。
【０２４９】
２つのチップで、同一の被着を行う。それぞれが２つの重合化点を含む：１つはＨＩＶ系から得られるＯＤＮ配列（配列番号１）と共重合、もう１つはＨＢＶ系から得られる２つのＯＤＮ配列（配列番号２及び配列番号３）と共重合させる。ＨＩＶ系から得られる配列番号１と相補的な配列（配列番号４；１０ｎＭ）を１つのチップに加える（図１０）。ＨＢＶ系から得られる配列番号２及び配列番号３と相補的な配列（配列番号５；１０ｎＭ）をもう１つのチップに加える（図１１）。
相補配列が加えられると、フェロセンの酸化強度が減少することがわかる。これにより、相補配列がハイブリダイズした点とハイブリダイゼーションが起こっていない点とを容易に識別することが可能になる。
【図面の簡単な説明】
【０２５０】
【図１】酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４    ０．２Ｍ、ｐＨ４．２（左側実線）及びｐＨ＝７（右側点線）中、１００ｍＶ／ｓでの読み取り、単量体（Ｉｃ．１）３０ｍＭで得られるホモ重合体層、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ＝４．２中、０．６０Ｖで２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着。
【図２】酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４    ０．２Ｍ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％、ｐＨ＝４．２中、２００ｍＶ／ｓでの読み取り、単量体（ＩＩａ．１）１００ｍＭで得られるホモ重合体層、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｎ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％中、０．６５Ｖで３６０ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着。
【図３】酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＬｉＣｌＯ４    ０．２Ｍ中、１００ｍＶ／ｓでの読み取り、ピロール−３−エタノール５０ｍＭ、単量体（ＩＩａ．１）２０ｍＭの共重合体層、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ中、０．６５Ｖで２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着。
【図４】酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍ中、２００ｍＶ／ｓでの読み取り、ピロール−３−エタノール５０ｍＭ、単量体（ＩＩａ．１）２０ｍＭの共重合体層、０．６５Ｖで被着。
【図５】ＭＩＣＡＭ緩衝液中、２００ｍＶ／ｓでの読み取り、ピロール−３−エタノール５０ｍＭ、単量体（ＩＩａ．１）２０ｍＭの共重合体層、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍ中、０．６５Ｖで３．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着。
【図６】酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％中、２００ｍＶ／ｓでの読み取り、ホモ重合体（ＩＩａ．１）の層、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ｐＨ＝４．２、ＮａＣｌ  ０．５Ｍ、Ｔｗｅｅｎ  ０．０５％中、０．６５Ｖで２８．８ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着。
【図７】酢酸ナトリウム／酢酸緩衝液、０．２ＭのＬｉＣｌＯ４、ｐＨ＝４、２中、１００ｍＶ／ｓでの読み取り、ホモ重合体（ＩＩｂ．１）の層、酢酸ナトリウム／酢酸緩衝液、０．２ＭのＬｉＣｌＯ４、ｐＨ＝４、２中、２ｍＭで、３種の異なる電位０．３Ｖ、０．４Ｖ及び０．５Ｖ／ＦｅＣｐ２／ＦｅＣｐ２＋、かつ、１０．８ｍＣ／ｃｍ２の一定の荷電で被着。
【図８】時間の関数としてのＱ＝（Ｉｏ−Ｉ）／Ｉｏの変化、ここでＩｏは相補的配列添加のｔ＝１分後におけるフェロセンの酸化強度であり、Ｉは相補的配列添加のｔ＝ｘ分後における強度である。単量体（Ｉａ．１）の共重合体層が関係する。
【図９】時間の関数としてのフェロセンの酸化ピークにおける電流強度の減少割合；（■）対照（単量体Ｉｂ．１及びピロール−３−エタノールで調製した重合体）＋ＨＢＶ相補的標的の添加；（▲）＋ＨＩＶ非相補的標的の添加；（◆）＋ＨＢＶ相補的標的の添加。
【図１０】ＨＩＶ標的を添加した場合のハイブリダイゼーション中のフェロセンの酸化強度の減少割合。読み取りは、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ＝４．２、Ｔｗｅｅｎ  ０．００５％及びサケ精子ＤＮＡ  １０μｇ／ｍｌ中、１００ｍＶ／ｓで行う。単量体（Ｉｃ．１）３０ｍＭとピロール−オリゴヌクレオチド１２．５μＭ（それぞれｐｙ−配列番号１を１２．５μＭ及び［ｐｙ−配列番号２を６．２５μＭ＋ｐｙ−配列番号３を６．２５μＭ］）との共重合体が、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ＝４、２中、０．６０Ｖで２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着してできた層の問題である。  Δｌｏｘ／Ｉｏ＝［（標的導入のｔ＝１分後におけるフェロセンの酸化強度）−（標的導入のｔ分後におけるフェロセンの酸化強度）］／（標的導入のｔ＝１分後におけるフェロセンの酸化強度）。
【図１１】ＨＢＶ標的を添加した場合のハイブリダイゼーション中のフェロセンの酸化強度の減少割合。読み取りは、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４  ０．２Ｍ、ｐＨ＝４、２、Ｔｗｅｅｎ  ０．００５％及びサケ精子ＤＮＡ  １０μｇ／ｍｌ中、１００ｍＶ／ｓで行う。単量体（Ｉｃ．１）３０ｍＭとピロール−オリゴヌクレオチド１２．５μＭ（それぞれｐｙ−配列番号１を１２．５μＭ及び［ｐｙ−配列番号２を６．２５μＭ＋ｐｙ−配列番号３を６．２５μＭ］）との共重合体が、酢酸ナトリウム／酢酸１０ｍＭ、ＬｉＣｌＯ４    ０．２Ｍ、ｐＨ＝４、２中、０．６０Ｖで２１．６ｍＣ／ｃｍ２の荷電で被着してできた層の問題である。
【図１】
2009500507.tif 000060
【図２】
2009500507.tif 000061
【図３】
2009500507.tif 000062
【図４】
2009500507.tif 000063
【図５】
2009500507.tif 000064
【図６】
2009500507.tif 000065
【図７】
2009500507.tif 000066
【図８】
2009500507.tif 000067
【図９】
2009500507.tif 000068
【図１０】
2009500507.tif 000069
【図１１】
2009500507.tif 000070
【配列表】
2009500507000001.app
【国際調査報告】
2009500507.tif 000071
2009500507.tif 000072
2009500507.tif 000073
2009500507.tif 000074
2009500507.tif 000075
2009500507.tif 000076
2009500507.tif 000077
2009500507.tif 000078
2009500507.tif 000079
2009500507.tif 000080