(57)【要約】  本発明は、生理学的ｐＨ値で可溶性であり、長時間にわたる作用プロファイルを有する、新規のヒトインスリン誘導体に関する。また、本発明は、このような誘導体を提供するための方法、それらを含有する薬学的組成物、本発明のインスリン誘導体を使用する糖尿病及び高血糖症を処置する方法、及び糖尿病及び高血糖症の処置におけるこのようなインスリン誘導体の使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式：
【化１】
2009536179.tif 000046
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｑ１-Ｑ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ１-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ４-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ５-[ＣＨ２]ｎ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＱ１又はＱ２中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
各ｎは独立して、０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｑ１は：
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、又は無電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミドであって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基、又は
・アミド結合を介して結合した２、３又は４の上に特定したα-アミノ酸アミド又はアミノ酸残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖、又は
・結合、
であり；
Ｑ２は：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、
−Ｑ１又はＱ２の少なくとも一は結合でなく、
−ｎが０又は１であり、Ｘ１が結合であり、Ｑ３が(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-である場合、Ｑ２は-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ではなく、
−Ｑ１又はＱ２中のアミンが、残りの置換基と結合を形成するならば、アミンは、カルボニル基を介して残りの置換基に結合していなくてはならず；
Ｑ３、Ｑ４及びＱ５は互いに独立して、
・ｍが６〜３２の範囲の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜３２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・Ａｒがアリーレン又はヘテロアリーレンとすることができ、また-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＯ-(ＣＨ２)０−３-Ａｒ-(ＣＨ２)０−３-；
・ｙが１-２０である、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-；
・Ｒ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレン；
・Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
の鎖；又は
・結合；
とすることができ、但し、Ｑ３-Ｑ５の少なくとも一は結合ではなく；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は互いに独立して、
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・結合；
・Ｒ１がＨ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、ＮＣＯＲ１；又は
・次の式：
【化２】
2009536179.tif 000047
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
但し、
−Ｘ１、Ｘ２及びＸ３はＺに結合できず、
−Ｘ１、Ｘ２及びＸ３がＯである場合、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、Ｑ３、Ｑ４及びＱ５中のＯに直接結合せず；及び
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル、又は
-Ｏ-Ｗ１、
であり、
ここでＷ１は、Ｒ３及びＲ４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ３Ｒ４又は-ＳＯ２ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンであり；但し、Ｚが-Ｏ-Ｗ１である場合、Ｑ１は存在しなければならない]
を有するインスリン誘導体とその任意のＺｎ２＋錯体。
【請求項２】
Ｑ２が、
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)- 
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；又は
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４−で、Ｒ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立してＨ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
からなる群から選択される請求項１に記載のインスリン誘導体。
【請求項３】
Ｑ３が-(ＣＨ２)ｍ-であり、ここで、ｍが６〜３２又は８〜２０の範囲の整数であるか、又はｍが１２、１３、１４、１５又は１６である請求項１又は２に記載のインスリン誘導体。
【請求項４】
Ｑ１、Ｑ４、Ｑ５、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３が結合であり、ｎが０である請求項１から３のいずれか１項に記載のインスリン誘導体。
【請求項５】
Ｑ３、Ｑ４又はＱ５の一つが、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-であり、ここでｙが１-２０である請求項１に記載のインスリン誘導体。
【請求項６】
Ｑ３が、
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立してＨ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・Ａｒがアリーレン又はヘテロアリーレンとすることができ、また-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＯ-(ＣＨ２)０−３-Ａｒ-(ＣＨ２)０−３-；又は
・結合；
であり；
Ｑ４が、
・ｍが４〜２２の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜２２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・Ｒ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレン；
・Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
の鎖；
であり；
Ｘ１が、
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・Ｒ１がＨ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、ＮＣＯＲ１；又は
・次の式：
【化３】
2009536179.tif 000048
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
但し、Ｘ１がＯである場合、Ｘ１はＱ４中のＯに直接結合せず；
Ｘ２、Ｘ３及びＱ５が結合であり；
ｎの全ての値が０であり；及び
Ｚが：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル、又は
-Ｏ-Ｗ１、
であり、
ここでＷ１が、Ｒ３及びＲ４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ３Ｒ４又は-ＳＯ２ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンである、請求項１に記載のインスリン誘導体とその任意のＺｎ２＋錯体。
【請求項７】
Ｚが-ＣＯＯＨである請求項１から６のいずれか１項に記載のインスリン誘導体。
【請求項８】
親インスリンがインスリンアナログである請求項１から７のいずれか１項に記載のインスリン誘導体。
【請求項９】
親インスリンが、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＧｌｙＡ２１ヒトインスリン、ＧｌｙＡ２１ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＧｌｙＡ２１ＡｒｇＢ３１ＡｒｇＢ３２ヒトインスリン、ＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリン、ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＴｈｒＢ２９ＬｙｓＢ３０ヒトインスリンからなる群から選択される請求項８に記載のインスリン誘導体。
【請求項１０】
薬学的に許容可能な担体と共に、請求項１から９のいずれか１項に記載のインスリン誘導体の治療的有効量を含有する、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための薬学的組成物。
【請求項１１】
インスリン誘導体の６つの分子当たり約１０までの亜鉛原子が薬学的組成物に付加される請求項１０に記載の薬学的組成物の製造方法。
【請求項１２】
請求項１から１０のいずれか１項に記載のインスリン誘導体の治療的有効量を患者に投与することを含む、治療が必要な患者における糖尿病の治療方法。
【請求項１３】
糖尿病の肺処置のための請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
請求項１から９のいずれか１項に記載のインスリン誘導体と、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンからなる群から選択される速効型インスリンアナログの混合物。
【請求項１５】
インスリン誘導体が：
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-テトラデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-トリデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-β-アラニルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-アスパルチルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-ε-アミノヘキサノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-δ-アミノペンタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-１０-(４-カルボキシフェノキシ)-デカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-(３-(３-{４-[３-(７-カルボキシヘプタノイルアミノ)プロポキシ]ブトキシ}プロピルカルバモイル)-プロピオニル-γ-グルタミルアミド)ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-トリデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ウンデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-テトラデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-{４-[１０-(４-カルボキシ-フェノキシ)-デカノイルアミノ]-ブチリル}ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-{４-[(１４-カルボキシ-テトラデカノイルアミノ)-メチル]-ベンゾイル}ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-[１６-(４-カルボキシ-フェノキシ)-ヘキサデカノイル]ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-{４-[(１５-カルボキシペンタデカノイルアミノ)ベンゾイル]-ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、及び
ＮεＢ２９-{４-[(１５-カルボキシ-ペンタデカノイルアミノ)-メチル]-ベンゾイル}-ｄｅｓＢ３０インスリン、
からなる群から選択されるインスリン誘導体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生理学的ｐＨ値で可溶性であり、長時間にわたる作用プロファイルを有する、新規なヒトインスリン誘導体に関する。また、本発明は、このような誘導体を提供するための方法、それらを含む薬学的組成物、本発明のインスリン誘導体を使用する糖尿病及び高血糖症を治療する方法、及び糖尿病及び高血糖症の治療におけるこのようなインスリン誘導体の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、１型糖尿病及び２型糖尿病の双方の糖尿病の治療は、いわゆる強化インスリン療法に益々依存してきている。この治療法によれば、患者は、基礎インスリン必要量を補うための持続型インスリンの１日１又は２回の注射を含む複数回の毎日のインスリン注射に、食事に関連したインスリン必要量を補うための速効型インスリンのボーラス注射が補填された治療を受ける。
持続型インスリン組成物は当該分野でよく知られている。しかして、持続型インスリン組成物の主要な一タイプは、インスリン結晶又は非晶質インスリンの注入可能な水性懸濁液を含む。これらの組成物において、典型的に利用されるインスリン化合物は、プロタミンインスリン、亜鉛インスリン又はプロタミン亜鉛インスリンである。
【０００３】
インスリン懸濁液の使用に関しては、ある種の欠点がある。よって、正確な投与を確実にするためには、定められた量の懸濁液がバイアルから抜き出されるか、又はカートリッジから放出される前に、穏やかに振揺して、インスリン粒子を均質に懸濁させなければならない。また、インスリン懸濁液の保管においては、凝集体形成又は凝固を避けるために、温度を、インスリン溶液の場合よりもより狭い範囲内で保持しなければならない。
【０００４】
以前は、プロタミン類が非免疫原性であると考えられていたが、現在は、プロタミン類が人間においては免疫原性であり得ること、また医薬目的でそれらを使用すると、抗体の形成に至る可能性があるということがわかってきた。また、プロタミン-インスリン複合体自身が免疫原性であるという証拠も見出された。よって、幾人かの患者においては、プロタミン類を含有する持続型インスリン組成物の使用を回避しなければならない。
持続型インスリン組成物の他のタイプは、溶液の注射の際に、ｐＨ値の上昇のためにインスリンが沈殿してしまう生理学的ｐＨより低いｐＨ値の溶液である。これらの溶液の欠点は、注射時に組織内に形成される沈殿物の粒径分布、よって医薬の放出プロファイルが、注射部位の血流と他のパラメータに些か予測不能な形で依存することである。更なる欠点は、インスリンの固形粒子が局所的刺激物として作用して、注射部位に組織の炎症を引き起こすおそれがあることである。
【０００５】
ＷＯ２００５／０１２３４７(Novo Nordisk A/S)で公開されている国際特許出願は、Ｂ-鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基のいずれかに結合する側鎖を有するインスリン誘導体に関連している。
国際特許出願ＥＰ２００６／０５０５９３(Novo Nordisk A/S)には、側鎖に芳香族基を有するインスリン誘導体が開示されている。
特許出願ＥＰ２００６／０５０５９４(Novo Nordisk A/S)には、側鎖にＰＥＧを有するインスリン誘導体が開示されている。
他のインスリン誘導体は、日本国公開特許出願番号１-２５４６９９(Kodama Co., Ltd.)及びＷＯ９５／０７９３１(Novo Nordisk A/S)に開示されている。
しかしながら、現在までに知られているインスリン誘導体より長時間にわたる作用プロファイルを有するインスリンが、なおも必要とされている。
【発明の概要】
【０００６】
本発明の一態様において、インスリン誘導体は、次の式：
【化１】
2009536179.tif 000002
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｑ１-Ｑ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ１-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ４-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ５-[ＣＨ２]ｎ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＱ１又はＱ２中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
各ｎは独立して、０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｑ１は：
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、又は無電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミドであって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基、又は
・アミド結合を介して結合した２、３又は４の上に特定したα-アミノ酸アミド又はアミノ酸残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖、又は
・結合、
であり；
Ｑ２は：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、
−Ｑ１又はＱ２の少なくとも一は結合でなく、
−ｎが０又は１であり、Ｘ１が結合であり、Ｑ３が(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-である場合、Ｑ２は-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ではなく、
−Ｑ１又はＱ２中のアミンが、残りの置換基と結合を形成するならば、アミンは、カルボニル基を介して残りの置換基に結合していなくてはならず；
Ｑ３、Ｑ４及びＱ５は互いに独立して、
・ｍが６〜３２の範囲の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜３２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・Ａｒがアリーレン又はヘテロアリーレンとすることができ、また-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＯ-(ＣＨ２)０−３-Ａｒ-(ＣＨ２)０−３-；
・ｙが１-２０である、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-；
・Ｒ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレン；
・Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
の鎖；又は
・結合；
とすることができ、但し、Ｑ３-Ｑ５の少なくとも一は結合ではなく；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は互いに独立して、
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・結合；
・Ｒ１がＨ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、ＮＣＯＲ１；又は
・次の式：
【化２】
2009536179.tif 000003
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
但し、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３はＺに結合できず、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３がＯである場合、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、Ｑ３、Ｑ４及びＱ５中のＯに直接結合せず；及び
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル、又は
-Ｏ-Ｗ１、
であり、
ここでＷ１は、Ｒ３及びＲ４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ３Ｒ４又は-ＳＯ２ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンであり；但し、Ｚが-Ｏ-Ｗ１である場合、Ｑ１は存在しなければならない]
を有するもの、及びその任意のＺｎ２＋錯体である。
【０００７】
本発明の一態様において、インスリン誘導体のＱ２は、
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)- 
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；又は
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４−で、Ｒ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立してＨ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
からなる群から選択される。
【０００８】
本発明の一態様において、Ｑ３は-(ＣＨ２)ｍ-であり、ここでｍは６〜３２又は８〜２０の範囲の整数であるか、又はｍは１２、１３、１４、１５又は１６である。
本発明の一態様において、Ｑ１、Ｑ４、Ｑ５、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は結合であり、ｎは０である。
本発明の一態様において、Ｑ３は-(ＣＨ２)ｍ-であり、ここでｍは６〜３２又は８〜２０の範囲の整数であるか、又はｍは１２、１３、１４、１５又は１６であり、Ｑ１、Ｑ４、Ｑ５、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は結合であり、ｎは０であり、Ｚは-ＣＯＯＨである。
本発明の一態様において、Ｑ３、Ｑ４又はＱ５の一つは、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-であり、ここでｙは１-２０である。
【０００９】
本発明の一態様において、Ｑ３は、
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立してＨ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・Ａｒがアリーレン又はヘテロアリーレンとすることができ、また-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＯ-(ＣＨ２)０−３-Ａｒ-(ＣＨ２)０−３-；又は
・結合；
であり；
Ｑ４は、
・ｍが４〜２２の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜２２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・Ｒ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレン；
・Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
の鎖；
であり；
Ｘ１は、
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・Ｒ１がＨ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、ＮＣＯＲ１；又は
・次の式：
【化３】
2009536179.tif 000004
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
但し、Ｘ１がＯである場合、Ｘ１はＱ４中のＯに直接結合せず；
Ｘ２、Ｘ３及びＱ５は結合であり；
ｎの全ての値は０であり；及び
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル、又は
-Ｏ-Ｗ１、
であり、
ここでＷ１は、Ｒ３及びＲ４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ３Ｒ４又は-ＳＯ２ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンであり；
及び任意のそのＺｎ２＋錯体である。
本発明の一態様において、Ｚは-ＣＯＯＨである。
【００１０】
本発明の一態様において、インスリン誘導体の親インスリンはインスリンアナログ（インスリン類似体）である。
本発明の一態様において、親インスリンは、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＧｌｙＡ２１ヒトインスリン、ＧｌｙＡ２１ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＧｌｙＡ２１ＡｒｇＢ３１ＡｒｇＢ３２ヒトインスリン、ＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリン、ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＴｈｒＢ２９ＬｙｓＢ３０ヒトインスリンからなる群から選択される。
【００１１】
本発明の一態様においては、本発明のインスリン誘導体を治療的有効量含有し、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための薬学的組成物が提供される。
本発明の一態様においては、本発明のインスリン誘導体を治療的有効量含有する薬学的組成物の調製方法が提供され、ここで、インスリン誘導体の６つの分子当たり約１０までの亜鉛原子が薬学的組成物に付加される。
本発明の一態様においては、本発明のインスリン誘導体を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における糖尿病の治療方法が提供される。
本発明の一態様において、インスリン誘導体は肺に投与される。
【００１２】
本発明の一態様においては、本発明のインスリン誘導体と、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンからなる群から選択される速効型インスリンアナログの混合物が提供される。
【００１３】
本発明の一態様において、インスリン誘導体は、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-テトラデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-トリデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-β-アラニルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-アスパルチルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-ε-アミノヘキサノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-δ-アミノペンタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-１０-(４-カルボキシフェノキシ)-デカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-(３-(３-{４−[３-(７-カルボキシヘプタノイルアミノ)プロポキシ]ブトキシ}プロピルカルバモイル)-プロピオニル-γ-グルタミルアミド)ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-トリデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ウンデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-テトラデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-{４-[１０-(４-カルボキシ-フェノキシ)-デカノイルアミノ]-ブチリル}ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-{４-[(１４-カルボキシ-テトラデカノイルアミノ)-メチル]-ベンゾイル}ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-[１６-(４-カルボキシ-フェノキシ)-ヘキサデカノイル]ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-{４-[(１５-カルボキシペンタデカノイルアミノ)ベンゾイル]-ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、及び
ＮεＢ２９-{４-[(１５-カルボキシ-ペンタデカノイルアミノ)-メチル]-ベンゾイル}-ｄｅｓＢ３０インスリン、
からなる群から選択される。
【００１４】
(定義)
ここで使用される「インスリンアナログ（インスリン類似体）」とは、天然に生じるインスリン中に生じる少なくとも一つのアミノ酸残基を欠失させ、及び／又は交換することにより、及び／又は少なくとも一つのアミノ酸残基を付加することによって、天然に生じるインスリン、例えばヒトインスリンの構造から形式的には誘導することができる分子構造を有するポリペプチドを意味する。付加された及び／又は交換されたアミノ酸残基は、コード可能なアミノ酸残基又は他の天然に生じるアミノ酸残基又は純粋に合成のアミノ酸残基の何れかでありうる。
本発明の態様においては、最大１７のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大１５のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大１０のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大８のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大７のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大６のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大５のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大４のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大３のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大２のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、１のアミノ酸が修飾される。
【００１５】
「ｄｅｓＢ３０インスリン」、「ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン」とは、Ｂ３０アミノ酸残基を欠く天然インスリン又はそのアナログを意味する。同様に、「ｄｅｓＢ２９ｄｅｓＢ３０インスリン」又は「ｄｅｓＢ２９ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン」とは、Ｂ２９及びＢ３０アミノ酸残基を欠く天然インスリン又はそのアナログを意味する。
「Ｂ１」、「Ａ１」等とは、それぞれインスリンのＢ-鎖の１位(Ｎ-末端から数える)のアミノ酸残基及びインスリンのＡ-鎖の１位(Ｎ-末端から数える)のアミノ酸残基を意味する。特定の位置にあるアミノ酸残基は、例えばＢ１位のアミノ酸残基がフェニルアラニン残基であることを意味する、例えばＰｈｅＢ１として表される。
【００１６】
ここで使用される「インスリン」とは、ＣｙｓＡ７とＣｙｓＢ７の間と、ＣｙｓＡ２０とＣｙｓＢ１９の間にジスルフィド架橋を、またＣｙｓＡ６とＣｙｓＡ１１の間に内部ジスルフィド架橋を有するヒトインスリン、ブタインスリン、又はウシインスリンを意味する。
「親インスリン」とは、天然に生じるインスリン、例えばヒトインスリン又はブタインスリンを意味する。また親インスリンはインスリンアナログであってもよい。
【００１７】
「無電荷」なる表現は、４と９の間のｐＨで荷電していると思われる基又は基類が存在していないことを意味する。例えば、遊離のカルボン酸は存在していない。
「二官能性脂肪部分」とは、カルボキシ、アミノ又はヒドロキシルから選択される２つの官能基を有する、６〜３２の炭素原子の炭素鎖を意味する。
「非結合アミド」なる用語は、側鎖に存在するアミド官能基、又は置換基に存在する残基の側基を記載することを意味しており、該アミド結合は置換基の残基の結合には使用されない。非結合アミドに加えて置換基の残基は、アミド基、例えば置換基の他の残基に結合するアミド類等をさらに含有可能である。
「アミノ酸アミド残基」とは、アミノ酸のアルファ-カルボキシアミドを意味するか、もしくはアミノ酸が側鎖にカルボン酸を有するならば、「アミノ酸アミド」とは、特定されるようにアルファ-カルボキシ基のアミド、又は側鎖カルボキシ基のアミドを意味する。
【００１８】
本発明のインスリン誘導体が「生理学的ｐＨ値で可溶性である」と記載されている場合は、インスリン誘導体が生理学的ｐＨ値で十分に溶解するインスリン組成物を調製するのに使用可能であることを意味する。このような好ましい溶解度は、インスリン誘導体単独の固有の特性、又はインスリン誘導体と、ビヒクルに含まれる一又は複数の成分との好ましい相互作用の結果のいずれかによるものである。
【００１９】
ここで使用される「非鈍化」とは、一製剤中に処方された場合における速効型インスリンとアシル化インスリンの双方が、別々の製剤として速効型インスリンとアシル化インスリンを投与する場合の作用プロファイルと、同一又は実質的に同一である作用プロファイルを有していることを意味する。
【００２０】
「高分子インスリン」又は「ｈｍｗ」なる表現は、ヒトインスリン複合体、インスリンアナログ、又はインスリン誘導体の分子量が、ヒト血清アルブミン以上、インスリンアナログ又はインスリン誘導体の１２量複合体以上、又は約７２ｋダルトン以上であることを意味する。
「中間分子量インスリン」又は「ｍｍｗ」なる表現は、ヒトインスリン複合体、インスリンアナログ、又はインスリン誘導体の分子量が、ほぼインスリン６量体から２４〜８０ｋダルトンのインスリン１２量体までであることを意味する。
「低分子量インスリン」又は「ｌｍｗ」なる表現は、ヒトインスリン、インスリンアナログ又はインスリン誘導体の分子量が、２４ｋダルトン以下であることを意味する。
【００２１】
以下の略語が、明細書及び実施例で使用される：
ＣＶ            カラム容量
ＨＰＬＣ        高速液体クロマトグラフィー
ＨＳＡ          ヒト血清アルブミン
ＬＣ            液体クロマトグラフィー
ＭＡＬＤＩ      マトリックス支援レーザー脱離イオン化
ＭＳ            質量分析
ＲＴ            室温
ＳＥＣ          サイズ排除クロマトグラフィー
ＳＰＡ          シンチレーション近接アッセイ
Ｔｒｉｓ        トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン
Ｏ.Ｄ.          光学密度＝吸光度
Ｘ２モノマー    ＡｓｐＢ９ ＧｌｕＢ２７ヒトインスリン
ＤＩＥＡ：      Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ：        Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド
Ｓａｒ：        サルコシン(Ｎ-メチル-グリシン)
ｔＢｕ：        tert-ブチル
ＴＳＴＵ：      Ｏ-(Ｎ-スクシンイミジル)-１,１,３,３-テトラメチルウロニウム-テトラフルオロボラート
ＴＨＦ：        テトラヒドロフラン
ＥｔＯＡｃ：    酢酸エチル
ＤＩＰＥＡ：    ジイソプロピルエチルアミン  ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＦＡ：        トリフルオロ酢酸
ＤＣＭ：        ジクロロメタン
ＲＴ：          室温
ＰＥＧ：        ポリエチレングリコール
ＧＩＲ：        グルコース注入速度
【００２２】
ここに引用された刊行物、特許出願及び特許を含む全ての文献は、各文献が、出典明示により個々にかつ特に援用され、その全内容がここに記載されているかの如く、その全体が出典明示によりその全内容がここに援用される(法律により許容される最大範囲)。
全ての表題及び副題は、ここでは便宜的に使用され、決して本発明を限定するものと解すべきではない。
ここに提供される任意かつ全ての例、又は例示的言語(例えば「等」)の使用は、単に本発明をより明らかにすることを意図しており、特に請求項に記載がない限り、本発明の範囲に限定をもたらすものではない。明細書中の如何なる語句も請求項に記載していない要素が本発明の実施に必須であることを示しているものと解すべきではない。
ここでの特許文献の引用及び援用は単に便宜上なされているもので、そのような特許文献の有効性、特許性、及び／又は権利行使性についての見解を反映させるものではない。
この発明は、適用される法律に容認される場合、ここに付加される請求項に列挙された主題事項の全ての修正点及び等価物を含む。
【００２３】
(発明の記載)
本発明は、末端基のみが荷電しているインスリン誘導体分子中に置換基を設けることが、持続型インスリンの作用のインビボ持続時間と、鈍化させることのない速効型インスリンと持続型インスリンとの混合可能性について重要な役割を担っているとの知見に基づいている。
有利には、本発明のインスリン誘導体は生理学的ｐＨ値で可溶性であり、ヒトインスリンのものに匹敵する効力を有し、鈍化することなく、速攻型インスリンと混合可能である。混合された基礎及びボーラスインスリンの個々の作用プロファイルは、インスリン六量体当たり３を越えるＺｎ(ＩＩ)を含む製剤と比較して、製剤中での沈殿リスクを制限するＺｎ(ＩＩ)をインスリン六量体当たり約３まで又はそれ未満のＺｎ(ＩＩ)濃度で含む製剤において保持される。
【００２４】
本発明を次の段落に要約する：
次の式：
【化４】
2009536179.tif 000005
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｑ１-Ｑ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ１-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ４-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ５-[ＣＨ２]ｎ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＱ１又はＱ２中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
各ｎは独立して、０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｑ１は：
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、又は無電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミドであって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基、又は
・アミド結合を介して結合した２、３又は４の上に特定したα-アミノ酸アミド又はアミノ酸残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖、又は
・結合、
であり；
Ｑ２は：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、
−Ｑ１又はＱ２の少なくとも一は結合でなく、
−ｎが０又は１であり、Ｘ１が結合であり、Ｑ３が(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-である場合、Ｑ２は-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ではなく、
−Ｑ１又はＱ２中のアミンが、残りの置換基と結合を形成するならば、アミンは、カルボニル基を介して残りの置換基に結合していなくてはならず；
Ｑ３、Ｑ４及びＱ５は互いに独立して、
・ｍが６〜３２の範囲の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜３２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・Ａｒがアリーレン又はヘテロアリーレンとすることができ、また-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＯ-(ＣＨ２)０−３-Ａｒ-(ＣＨ２)０−３-；
・ｙが１-２０である、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-；
・Ｒ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレン；
・Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
の鎖；又は
・結合；
とすることができ、但し、Ｑ３-Ｑ５の少なくとも一は結合ではなく；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は互いに独立して、
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・結合；
・Ｒ１がＨ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、ＮＣＯＲ１；又は
・次の式：
【化５】
2009536179.tif 000006
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
但し：
−Ｘ１、Ｘ２及びＸ３はＺに結合できず、また
−Ｘ１、Ｘ２及びＸ３がＯである場合、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、Ｑ３、Ｑ４及びＱ５中のＯに直接結合せず；及び
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル、又は
-Ｏ-Ｗ１、
であり、
ここでＷ１は、Ｒ３及びＲ４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ３Ｒ４又は-ＳＯ２ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンであり；但し、Ｚが-Ｏ-Ｗ１である場合、Ｑ１は存在しなければならない]
を有するインスリン誘導体、及び任意のそのＺｎ２＋錯体。
【００２５】
２．次の式：
【化６】
2009536179.tif 000007
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｑ１-Ｑ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ１-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ４-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ５-[ＣＨ２]ｎ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＱ１又はＱ２中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
各ｎは独立して、０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｑ１は：
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、又は無電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミドであって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基、又は
・アミド結合を介して結合した２、３又は４の上に特定したα-アミノ酸アミド又はアミノ酸残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖、又は
・結合、
であり；
Ｑ２は：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、
−Ｑ１又はＱ２の少なくとも一は結合でなく、
−ｎが０又は１であり、Ｘ１が結合であり、Ｑ３が(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-である場合、Ｑ２は-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ではなく、
−Ｑ１又はＱ２中のアミンが、残りの置換基と結合を形成するならば、アミンは、カルボニル基を介して残りの置換基に結合していなくてはならず；
Ｑ３、Ｑ４及びＱ５は互いに独立して、
・ｍが６〜３２の範囲の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜３２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・Ａｒがアリーレン又はヘテロアリーレンとすることができ、また-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＯ-(ＣＨ２)０−３-Ａｒ-(ＣＨ２)０−３-；
・ｙが１-２０である、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-；
・Ｒ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレン；
・Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
の鎖；又は
・結合；
とすることができ、但し：
−Ｑ３-Ｑ５の少なくとも一は結合ではなく；また
−Ｑ３-Ｑ５の一つがアリーレン又はヘテロアリーレン、又は式-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ｃ６Ｈ４)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ｃ６Ｈ４)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ｃ６Ｈ４)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-の鎖である場合、Ｑ２は-ＣＯ-((ＣＨ２)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４ではなく；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は互いに独立して、
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・結合；
・Ｒ１がＨ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、ＮＣＯＲ１；又は
・次の式：
【化７】
2009536179.tif 000008
(上式中、Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
但し：
−Ｘ１、Ｘ２及びＸ３はＺに結合できず、また
−Ｘ１、Ｘ２及びＸ３がＯである場合、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、Ｑ３、Ｑ４及びＱ５中のＯに直接結合せず；及び
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル、又は
-Ｏ-Ｗ１、
であり、
ここでＷ１は、Ｒ３及びＲ４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ３Ｒ４又は-ＳＯ２ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンであり；但し、Ｚが-Ｏ-Ｗ１である場合、Ｑ１は存在しなければならない]
を有するインスリン誘導体、及び任意のそのＺｎ２＋錯体。
【００２６】
３．次の式：
【化８】
2009536179.tif 000009
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｑ１-Ｑ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ１-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ４-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ５-[ＣＨ２]ｎ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＱ１又はＱ２中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
各ｎは独立して、０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｑ１は：
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、又は無電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミドであって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基、又は
・アミド結合を介して結合した２、３又は４の上に特定したα-アミノ酸アミド又はアミノ酸残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖、又は
・結合、
であり；
Ｑ２は：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、
−Ｑ１又はＱ２の少なくとも一は結合でなく、
−ｎが０又は１であり、Ｘ１が結合であり、Ｑ３が(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-である場合、Ｑ２は-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ではなく、
−Ｑ１又はＱ２中のアミンが、残りの置換基と結合を形成するならば、アミンは、カルボニル基を介して残りの置換基に結合していなくてはならず；
Ｑ３、Ｑ４及びＱ５は互いに独立して、
・ｍが６〜３２の範囲の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜３２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・Ａｒがアリーレン又はヘテロアリーレンとすることができ、また-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＯ-(ＣＨ２)０−３-Ａｒ-(ＣＨ２)０−３-；
・ｙが１-２０である、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-；
・Ｒ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレン；
・Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
の鎖；又は
・結合；
とすることができ、但し：
−Ｑ３-Ｑ５の少なくとも一は結合ではなく；また
−Ｑ３-Ｑ５の一つがアリーレン、ヘテロアリーレン、又は式-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ｃ６Ｈ４)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ｃ６Ｈ４)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ｃ６Ｈ４)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-の鎖である場合、Ｑ１又はＱ２は未結合アミドを有し；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は互いに独立して、
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・結合；
・Ｒ１がＨ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、ＮＣＯＲ１；又は
・次の式：
【化９】
2009536179.tif 000010
(上式中、Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
但し：
−Ｘ１、Ｘ２及びＸ３はＺに結合できず、また
−Ｘ１、Ｘ２及びＸ３がＯである場合、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、Ｑ３、Ｑ４及びＱ５中のＯに直接結合せず；及び
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル、又は
-Ｏ-Ｗ１、
であり、
ここでＷ１は、Ｒ３及びＲ４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ３Ｒ４又は-ＳＯ２ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンであり；但し、Ｚが-Ｏ-Ｗ１である場合、Ｑ１は存在しなければならない]
を有するインスリン誘導体、及び任意のそのＺｎ２＋錯体。
【００２７】
４．次の式：
【化１０】
2009536179.tif 000011
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｑ１-Ｑ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ１-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ２-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ４-[ＣＨ２]ｎ-Ｘ３-[ＣＨ２]ｎ-Ｑ５-[ＣＨ２]ｎ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＱ１又はＱ２中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
各ｎは独立して、０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｑ１は：
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、又は無電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミドであって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基、又は
・アミド結合を介して結合した２、３又は４の上に特定したα-アミノ酸アミド又はアミノ酸残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖、又は
・結合、
であり；
Ｑ２は：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、
−Ｑ１又はＱ２の少なくとも一は結合でなく、
−ｎが０又は１であり、Ｘ１が結合であり、Ｑ３が(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-である場合、Ｑ２は-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ではなく、
−Ｑ１又はＱ２中のアミンが、残りの置換基と結合を形成するならば、アミンは、カルボニル基を介して残りの置換基に結合していなくてはならず；
Ｑ３、Ｑ４及びＱ５は互いに独立して、
・ｍが６〜３２の範囲の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜３２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・Ａｒがアリーレン又はヘテロアリーレンとすることができ、また-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＯ-(ＣＨ２)０−３-Ａｒ-(ＣＨ２)０−３-；
・ｙが１-２０である、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-；
・Ｒ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレン；
・Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
の鎖；又は
・結合；
とすることができ、但し：
−Ｑ３-Ｑ５の少なくとも一は結合ではなく；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は互いに独立して、
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・結合；
・Ｒ１がＨ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、ＮＣＯＲ１；又は
・次の式：
【化１１】
2009536179.tif 000012
(上式中、Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
但し：
−Ｘ１、Ｘ２及びＸ３はＺに結合できず、また
−Ｘ１、Ｘ２及びＸ３がＯである場合、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は、Ｑ３、Ｑ４及びＱ５中のＯに直接結合せず；及び
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル、又は
-Ｏ-Ｗ１、
であり、
ここでＷ１は、Ｒ３及びＲ４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ３Ｒ４又は-ＳＯ２ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンであり；但し、Ｚが-Ｏ-Ｗ１である場合、Ｑ１は存在しなければならない]
を有するインスリン誘導体、及び任意のそのＺｎ２＋錯体。
【００２８】
５．Ｑ１が、無電荷側鎖を有するアミノ酸、又は側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミドであり、該アミノ酸アミド残基又はアミノ酸残基が２〜１０の炭素原子を有している、第１−４項に記載のインスリン誘導体。
【００２９】
６．Ｑ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第１−５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００３０】
７．Ｑ１が、２、３又は４のα-アミノ酸アミド残基又は無電荷側鎖を有するアミノ酸残基からなる鎖である、第１−４項に記載のインスリン誘導体。
【００３１】
８．Ｑ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第１−４項に記載のインスリン誘導体。
【００３２】
９．Ｑ２が結合である、第１−８項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１０．Ｑ２が、-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-である、第１−３又は５−８項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１１．Ｑ２が、-ＣＯ-((ＣＨ２)２-ＮＨ-ＣＯ)１-、-ＣＯ-((ＣＨ２)３-ＮＨ-ＣＯ)１-及び-ＣＯ-((ＣＨ２)４-ＮＨ-ＣＯ)１-、ＣＯ-((ＣＨ２)５-ＮＨ-ＣＯ)１-からなる群から選択される、第１０項に記載のインスリン誘導体。
１２．Ｑ１が結合である、第１、３又は１０−１１項に記載のインスリン誘導体。
【００３３】
１３．Ｑ１が：
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、又は無電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミドであって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基、又は
・アミド結合を介して結合した２、３又は４の上に特定したα-アミノ酸アミド又はアミノ酸残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖、又は
・結合、
であり；
Ｑ２が：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、Ｑ１又はＱ２の少なくとも一は結合でなく、Ｑ１又はＱ２中のアミンが、残りの置換基と結合を形成するならば、アミンは、カルボニル基を介して残りの置換基に結合していなくてはならず；
Ｑ３が：
・ｍが６〜３２の範囲の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜３２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・ｓ及びｗの合計が６〜３０の範囲になるように、ｖ及びｗが整数又はそれらのひとつが０である、式-(ＣＨ２)ｓＣ６Ｈ４(ＣＨ２)Ｗ-の二価の炭化水素鎖；
であり；
Ｘ１が-Ｃ=Ｏ又は結合とすることができ；
Ｑ４、Ｑ５、Ｘ２及びＸ３が結合であり；
ｎの全ての値が０であり；
Ｚが：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル
である、第１−３項に記載のインスリン誘導体、及び任意のそのＺｎ２＋錯体。
【００３４】
１４．Ｑ１が、無電荷側鎖を有するアミノ酸、又は側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミドであり、該アミノ酸アミド残基又はアミノ酸残基が２〜１０の炭素原子を有している、第１３項に記載のインスリン誘導体。
【００３５】
１５．Ｑ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第１３−１４項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００３６】
１６．Ｑ１が、２、３又は４のα-アミノ酸アミド残基又は無電荷側鎖を有するアミノ酸残基からなる鎖である、第１３項に記載のインスリン誘導体。
【００３７】
１７．Ｑ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第１３又は１６項に記載のインスリン誘導体。
【００３８】
１８．Ｑ２が結合である、第１３−１７項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１９．Ｑ２が：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；又は
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
からなる群から選択される、第１３−１７項に記載のインスリン誘導体。
２０．Ｑ２が、-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-、-ＣＯ-((ＣＨ２)２-ＮＨ-ＣＯ)１−、-ＣＯ-((ＣＨ２)３-ＮＨ-ＣＯ)１-、-ＣＯ-((ＣＨ２)４-ＮＨ-ＣＯ)１-及び-ＣＯ-((ＣＨ２)５-ＮＨ-ＣＯ)１-からなる群から選択される、第１９項に記載のインスリン誘導体。
【００３９】
２１．Ｑ１が結合である、第１３又は１９−２１項に記載のインスリン誘導体。
２２．Ｘ１が-Ｃ=Ｏである、第１３−２１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
２３．Ｑ３が-(ＣＨ２)ｍ-であり、ｍが６〜３２又は８〜２０の範囲の整数である、第１３−２２項の何れかに記載のインスリン誘導体。
２４．ｍが１２、１３、１４、１５又は１６である、第２３項に記載のインスリン誘導体。
２５．Ｑ３が、１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜３２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖である、第１３−２２項に記載のインスリン誘導体。
【００４０】
２６．Ｚが-ＣＯＯＨである、第１３−２５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
２７．Ｚが-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２である、第１３−２５項の何れかに記載のインスリン誘導体。２８．Ｚが-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２である、第１３−２５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
２９．Ｚが-ＳＯ３Ｈである、第１３−２５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
３０．Ｚが-ＰＯ３Ｈである、第１３−２５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００４１】
３１．インスリン誘導体が
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-テトラデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-トリデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-β-アラニルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-アスパルチルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-ε-アミノヘキサノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-δ-アミノペンタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-トリデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ウンデカノイル-δ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、及び
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-テトラデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
からなる群から選択される、第１３−３０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００４２】
３２．Ｑ３が：
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立してＨ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・Ａｒがアリーレン又はヘテロアリーレンとすることができ、また-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＯ-(ＣＨ２)０−３-Ａｒ-(ＣＨ２)０−３-；又は
・結合；
であり；
Ｑ４が：
・ｍが４〜２２の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜２２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・Ｒ１及びＲ２が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレン；
・Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
の鎖；
であり；
Ｘ１が：
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・Ｒ１がＨ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、ＮＣＯＲ１；又は
・次の式：
【化１２】
2009536179.tif 000013
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
但し、Ｘ１がＯである場合、Ｘ１はＱ４中のＯに直接結合せず；
Ｘ２、Ｘ３及びＱ５が結合であり；
ｎの全ての値が０であり；及び
Ｚが：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル、又は
-Ｏ-Ｗ１、
であり、
ここでＷ１は、Ｒ３及びＲ４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ３Ｒ４又は-ＳＯ２ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンである、第２又は４項に記載のインスリン誘導体、及び任意のそのＺｎ２＋錯体。
【００４３】
３３．Ｑ１が、無電荷側鎖を有するアミノ酸、又は側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミドであり、該アミノ酸アミド残基又はアミノ酸残基が２〜１０の炭素原子を有している、第２、４又は３２項に記載のインスリン誘導体。
【００４４】
３４．Ｑ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第２、４又は３３項に記載のインスリン誘導体。
【００４５】
３５．Ｑ１が、２、３又は４のα-アミノ酸アミド残基又は無電荷側鎖を有するアミノ酸残基からなる鎖である、第２、４又は３４項に記載のインスリン誘導体。
【００４６】
３６．Ｑ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第２、４又は３５項に記載のインスリン誘導体。
【００４７】
３７．Ｑ２が結合である、第２、４又は３２−３６項の何れかに記載のインスリン誘導体。
３８．Ｑ２が、-ＣＯ-ＣＨ２-(ＣＨＣＯＮＨ２)-ＮＨ-ＣＯ；-ＣＯ-(ＣＨ２)２-(ＣＨＣＯＮＨ２)-ＮＨ-ＣＯ)-又は-ＣＯ-(ＣＨ２)３-(ＣＨＣＯＮＨ２)-ＮＨ-ＣＯ)-である、第２、４又は３２−３６項に記載のインスリン誘導体。
３９．Ｑ１が結合である、第２、４又は３８項に記載のインスリン誘導体。
【００４８】
４０．Ｑ３が、Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
である、第３２−３９項に記載のインスリン誘導体。
【００４９】
４１．ｖ１、ｖ２又はｖ３の少なくとも２が０である、第４０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４２．Ｙ１-Ｙ６が結合である、第４０−４１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４３．Ｙ１-Ｙ６の少なくとも一がＯ又はＳである、第４０−４１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４４．Ｙ１がＯ又はＳであり、ｖ１が１である、第４０−４１又は４３項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４５．ｓが、６、７、８、９又は１０である、第４０−４４項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４６．Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｑ４及びＱ５が結合であり、ＡｒがＣ６Ｈ４である、第４０−４５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４７．ｎが０である、第３２−４６項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００５０】
４８．Ｚが-ＣＯＯＨである、第３２−４７項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４９．Ｚが-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２である、第３２−４７項の何れかに記載のインスリン誘導体。５０．Ｚが-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２である、第３２−４７項の何れかに記載のインスリン誘導体。
５１．Ｚが-ＳＯ３Ｈである、第３２−４７項の何れかに記載のインスリン誘導体。
５２．Ｚが-ＰＯ３Ｈである、第３２−４７項の何れかに記載のインスリン誘導体。
５３．Ｚが-Ｏ-Ｗ１であり、ここでＷ１が、Ｒ１３及びＲ１４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ１３Ｒ１４又は-ＳＯ２ＮＲ１３Ｒ１４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンである、第３２−４７項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００５１】
５４．インスリン誘導体が、ＮεＢ２９-１０-(４-カルボキシフェノキシ)-デカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリンである、第３２−５３項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００５２】
５５．Ｑ１が、無電荷側鎖を有するアミノ酸、又は側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミドであり、該アミノ酸アミド残基又はアミノ酸残基が２〜１０の炭素原子を有している、第１項に記載のインスリン誘導体。
【００５３】
５６．Ｑ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第１又は５５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００５４】
５７．Ｑ１が、２、３又は４のα-アミノ酸アミド残基又は無電荷側鎖を有するアミノ酸残基からなる鎖である、第１項に記載のインスリン誘導体。
【００５５】
５８．Ｑ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第１又は５７項に記載のインスリン誘導体。
【００５６】
５９．Ｑ２が結合である、第１又は５５−５８項の何れかに記載のインスリン誘導体。
６０．Ｑ２が-ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ-及び-(ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-からなる群から選択され、ここでＲ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができる、第１又は５５−５８項の何れかに記載のインスリン誘導体。
６１．Ｑ２が、-ＣＯ-((ＣＨ２)３-ＮＨ-ＣＯ)-、-ＣＯ-ＣＨ２-(ＣＨＣＯＮＨ２)-ＮＨ-ＣＯ；-ＣＯ-(ＣＨ２)２-(ＣＨＣＯＮＨ２)-ＮＨ-ＣＯ)-又は-ＣＯ-(ＣＨ２)３-(ＣＨＣＯＮＨ２)-ＮＨ-ＣＯ)-である、第１又は６０項に記載のインスリン誘導体。
６２．Ｑ１が結合である、第１又は６０−６１項に記載のインスリン誘導体。
【００５７】
６３．Ｑ３が、Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
である、第５５−６２項に記載のインスリン誘導体。
【００５８】
６４．ｖ１、ｖ２又はｖ３の少なくとも２が０である、第６３項に記載のインスリン誘導体。
６５．Ｙ１-Ｙ６が結合である、第６３−６４項の何れかに記載のインスリン誘導体。
６６．Ｙ１-Ｙ６の少なくとも一がＯ又はＳである、第６３−６４項の何れかに記載のインスリン誘導体。
６７．Ｙ１がＯ又はＳであり、ｖ１が１である、第６３−６４又は６６項の何れかに記載のインスリン誘導体。
６８．ｓが、６、７、８、９又は１０である、第６３−６７項の何れかに記載のインスリン誘導体。
６９．Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｑ４及びＱ５が結合であり、ＡｒがＣ６Ｈ４である、第５５−６８項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７０．ｎが０である、第５５−６９項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００５９】
７１．Ｚが-ＣＯＯＨである、第５５−７０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７２．Ｚが-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２である、第５５−７０項の何れかに記載のインスリン誘導体。７３．Ｚが-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２である、第５５−７０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７４．Ｚが-ＳＯ３Ｈである、第５５−７０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７５．Ｚが-ＰＯ３Ｈである、第５５−７０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７６．Ｚが-Ｏ-Ｗ１であり、ここでＷ１が、Ｒ１３及びＲ１４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ１３Ｒ１４又は-ＳＯ２ＮＲ１３Ｒ１４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンである、第５５−７０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００６０】
７７．インスリン誘導体が、ＮεＢ２９-１０-(４-カルボキシフェノキシ)-デカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９-４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンからなる群から選択される、第１又は５５−７０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００６１】
７８．Ｑ１が、２〜１０の炭素原子を有し、側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミドである、第３項に記載のインスリン誘導体。
７９．Ｑ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第３又は７７項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００６２】
８０．Ｑ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第３項に記載のインスリン誘導体。
【００６３】
８１．Ｑ２が結合である、第３又は７７−７９項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８２．Ｑ２が：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-；
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；又は
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
からなる群から選択され、但し、Ｑ１が結合である場合、Ｑ２は非結合アミドを含む、第３又は７７−８０項に記載のインスリン誘導体。
８３．Ｑ１が結合である、第３又は８２項に記載のインスリン誘導体。
【００６４】
８４．Ｑ３が、Ａｒが上述したものであり、Ｙ１-Ｙ６が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚが互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３が互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じない、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
である、第７８−８３項に記載のインスリン誘導体。
【００６５】
８５．ｖ１、ｖ２又はｖ３の少なくとも２が０である、第８４項に記載のインスリン誘導体。
８６．Ｙ１-Ｙ６が結合である、第８４−８５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８７．Ｙ１-Ｙ６の少なくとも一がＯ又はＳである、第８４−８５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８８．Ｙ１がＯ又はＳであり、ｖ１が１である、第８４−８５又は８７項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８９．ｓが、６、７、８、９又は１０である、第８４−８８項の何れかに記載のインスリン誘導体。
９０．Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｑ４及びＱ５が結合であり、ＡｒがＣ６Ｈ４である、第７８−８９項の何れかに記載のインスリン誘導体。
９１．ｎが０である、第７８−９０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００６６】
９２．Ｚが-ＣＯＯＨである、第７８−９１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
９３．Ｚが-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２である、第７８−９１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
９４．Ｚが-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２である、第７８−９１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
９５．Ｚが-ＳＯ３Ｈである、第７８−９１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
９６．Ｚが-ＰＯ３Ｈである、第７８−９１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
９７．Ｚが-Ｏ-Ｗ１であり、ここでＷ１が、Ｒ１３及びＲ１４が互いに独立して、Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、又は-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２とすることができる、テトラゾ-５-リル、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＲ１３Ｒ１４又は-ＳＯ２ＮＲ１３Ｒ１４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンである、第７８−９１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００６７】
９８．インスリン誘導体が：
ＮεＢ２９-１０-(４-カルボキシフェノキシ)-デカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、及び
ＮεＢ２９-{４-[１０-(４-カルボキシ-フェノキシ)-デカノイルアミノ]-ブチリル}ｄｅｓＢ３０インスリン、
からなる群から選択される、第３又は７８−９７項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００６８】
９９．Ｑ１が、無電荷側鎖を有するアミノ酸、又は側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミドであり、該アミノ酸アミド残基又はアミノ酸残基が２〜１０の炭素原子を有している、第１又は２項に記載のインスリン誘導体。
１００．Ｑ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第１、２又は９９項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１０１．Ｑ１が、２、３又は４のα-アミノ酸アミド又は無電荷側鎖を有するアミノ酸残基からなる鎖である、第１又は２項に記載のインスリン誘導体。
【００６９】
１０２．Ｑ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第１、２又は１０１項に記載のインスリン誘導体。
【００７０】
１０３．Ｑ２が結合である、第９９−１０２項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１０４．Ｑ２が-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)-及び-(ＣＯ-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-からなる群から選択され、ここでＲ５が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６が独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができる、第１、２又は９９−１０２項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１０５．Ｑ２が、-ＣＯ-ＣＨ２-(ＣＨＣＯＮＨ２)-ＮＨ-ＣＯ；-ＣＯ-(ＣＨ２)２-(ＣＨＣＯＮＨ２)-ＮＨ-ＣＯ)-又は-ＣＯ-(ＣＨ２)３-(ＣＨＣＯＮＨ２)-ＮＨ-ＣＯ)-である、第１、２又は９９−１０４項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１０６．Ｑ１が結合である、第１、２又は１０４−１０５項に記載のインスリン誘導体。
【００７１】
１０７．Ｑ３、Ｑ４又はＱ５一つが-(ＣＨ２)ｍ-であり、ｍが１〜３２又は１〜１２の範囲の整数である、第９９−１０６項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１０８．ｍが４、５、６、８、９、１０又は１１である、第１０７項に記載のインスリン誘導体。
１０９．Ｑ３、Ｑ４又はＱ５の一つが、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-であり、ここでｙが１-２０である、第９９−１０８項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１１０．Ｑ３、Ｑ４又はＱ５の一つが、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙであり、ここでｙが１-１２、２-４又は２-３の範囲にある、第１０９項に記載のインスリン誘導体。
１１１．ｙが１である、第１０９−１１０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００７２】
１１２．Ｘ１、Ｘ２及びＸ３が互いに独立して、
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・結合；
・Ｒ１がＨ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができる、ＮＣＯＲ１；又は
・次の式：
【化１３】
2009536179.tif 000014
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものである、第９９−１１１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００７３】
１１３．Ｘ１、Ｘ２及びＸ３が：次の式：
【化１４】
2009536179.tif 000015
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものである、第９９−１１２項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００７４】
１１４．Ｘ１が次の式：
【化１５】
2009536179.tif 000016
(上式中、ＲはＨである)
のものであり、Ｘ２が次の式：
【化１６】
2009536179.tif 000017
(上式中、ＲはＨである)
のものである、第９９−１１３項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１１５．ｎが０、１、２又は３である、第９９−１１４項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００７５】
１１６．Ｚが-ＣＯＯＨである、第９９−１１５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１１７．Ｚが-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２である、第９９−１１５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１１８．Ｚが-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２である、第９９−１１５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１１９．Ｚが-ＳＯ３Ｈである、第９９−１１５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１２０．Ｚが-ＰＯ３Ｈである、第９９−１１５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００７６】
１２１．インスリン誘導体が：
ＮεＢ２９-(３-(３-{４-[３-(７-カルボキシヘプタノイルアミノ)プロポキシ]ブトキシ}プロピルカルバモイル)-プロピオニル-γ-グルタミルアミド)ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン
である、第１−２又は９９−１２０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００７７】
本発明の一態様において、Ｑ１は、無電荷側鎖を有するアミノ酸、又は側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミドであり、該アミノ酸アミド残基又はアミノ酸残基は２〜１０の炭素原子を有している。
またＱ１は、無電荷側鎖を有するアミノ酸及び／又は側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミドが２、３又は４からなる鎖とすることができる。アミノ酸の鎖は、アミドを含む少なくとも一のアミノ酸を含有していてよい。例えば、Ｑ１は、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択されてよい。
【００７８】
一態様において、Ｑ１は、４〜１０の炭素原子を有する、２つの無電荷アミノ酸残基からなる鎖である。アミノ酸はアミドを含むことができる。このようなアミノ酸残基の例は、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドである。
【００７９】
本発明の一態様において、Ｑ１は、独立して４〜１０の炭素原子を有する、３つのアミノ酸残基からなる鎖であり、鎖の少なくとも一のアミノ酸残基は、アミドを有する残基の群から選択される。３つのアミノ酸アミドの組合せは、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドの任意の組合せとすることができ、これは６４の異なる組合せが可能であることを意味する。
さらなる態様において、Ｑ１は、独立して４〜１０の炭素原子を有する、４つのアミノ酸残基からなる鎖であり、鎖の少なくとも一のアミノ酸残基は、アミドを有する残基の群から選択される。４つのアミノ酸アミドの組合せは、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドの任意の組合せとすることができ、これは２５６の異なる組合せが可能であることを意味する。
【００８０】
１２２．ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基、又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基で、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンに結合した置換基を有するインスリン誘導体であって、該置換基が、約６〜約３２の炭素原子を有する少なくとも一の二官能性脂肪部分、及びｄｅｓＢ３０ヒトインスリンに二官能性脂肪部分が結合した、式-ＣＯ-((ＣＨ２)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４の無電荷リンカーを含み、二官能性脂肪部分が芳香族基を有するインスリン誘導体。
１２３．無電荷リンカーが：-ＣＯ-ＣＨ２-ＮＨ-ＣＯ、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＮＨ-ＣＯ、-ＣＯ-(ＣＨ２)３-ＮＨ-ＣＯ及び-ＣＯ-(ＣＨ２)１-ＮＨ-ＣＯからなる群から選択される、第１２２項に記載のインスリン誘導体。
【００８１】
１２４．二官能性脂肪部分が：
Ｔ-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ａｒ)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)ｗ-Ｙ３-(Ａｒ)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ａｒ)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-Ｔ
[上式中：
・Ａｒはアリーレン又はヘテロアリーレンとすることができ、また-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ１及びＲ２は互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３又は-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３とすることができ；
・Ｙ１-Ｙ６は互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ=Ｏ、ＳＯ２又は結合とすることができ；
・ｓ、ｗ、ｔ及びｚは互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり；
・ｖ１、ｖ２及びｖ３は互いに独立して、０又は１とすることができ；
但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合しておらず、構造-Ｏ-(ＣＨ２)１-Ｏ-は生じず；
・Ｔは、カルボキシ、アミノ又はヒドロキシル基から選択される官能基である]
である、第１２２又は１２３項に記載のインスリン誘導体。
【００８２】
１２５．インスリン誘導体が、ＮεＢ２９-４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンである、第１２３−１２４項に記載のインスリン誘導体。
【００８３】
１２６．親インスリン部分のＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基、又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基で、親インスリン部分に結合した置換基を有するインスリン誘導体であって、該置換基が、約６〜約３２の炭素原子を有する少なくとも一の二官能性脂肪部分、及び親インスリンに二官能性脂肪部分が結合した無電荷リンカーを含み、但し、インスリン置換基が芳香族基を含むならば、無電荷リンカーは、-(ＣＯ-(ＣＨ２)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１-４-を含まず、置換基は-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-及び-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-の群から選択される一又は複数の残基を含まないインスリン誘導体。
【００８４】
１２７．親インスリン部分のＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基、又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基で、親インスリン部分に結合した置換基を有するインスリン誘導体であって、該置換基が、約６〜約３２の炭素原子を有する少なくとも一の二官能性脂肪部分、及び親インスリンに二官能性脂肪部分で結合した無電荷リンカーを含み、但し、置換基は-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-及び-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-の群から選択される一又は複数の残基を含まないインスリン誘導体。
【００８５】
１２８．親インスリン部分のＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基、又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基で、親インスリン部分に結合した置換基を有するインスリン誘導体であって、該置換基が、約６〜約３２の炭素原子を有する少なくとも一の二官能性脂肪部分、及び親インスリンに二官能性脂肪部分で結合した無電荷リンカーを含み、但し、置換基が-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-及び-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-の群から選択される一又は複数の残基を含まず、無電荷リンカーが：
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、又は無電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミドであって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基、又は
・アミド結合を介して結合した２、３又は４の上に特定したα-アミノ酸アミド又はアミノ酸残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖、
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-；又は
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
からなる群から選択され、但し、無電荷リンカー中のアミンが、残りの置換基と結合を形成するならば、アミンは、カルボニル基を介して残りの置換基に結合しなくてはならないことを特徴とするインスリン誘導体。
【００８６】
１２９．親インスリン部分のＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基、又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基で、親インスリン部分に結合した置換基を有するインスリン誘導体であって、該置換基が、約６〜約３２の炭素原子を有する少なくとも一の二官能性脂肪部分、及び親インスリンに二官能性脂肪部分で結合した無電荷リンカーを含み、但し、インスリン置換基が芳香族基を含むならば、無電荷リンカーは、-(ＣＯ-(ＣＨ２)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１-４-を含まず、置換基は-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-及び-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-の群から選択される一又は複数の残基を含まず、無電荷リンカーが：
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、又は無電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミドであって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基、又は
・アミド結合を介して結合した２、３又は４の上に特定したα-アミノ酸アミド又はアミノ酸残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖、
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；又は
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
からなる群から選択され、但し、無電荷リンカー中のアミンが、残りの置換基と結合を形成するならば、アミンは、カルボニル基を介して残りの置換基に結合しなくてはならないことを特徴とするインスリン誘導体。
【００８７】
１３０．親インスリン部分のＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基、又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基で、親インスリン部分に結合した置換基を有するインスリン誘導体であって、該置換基が、約６〜約３２の炭素原子を有する少なくとも一の二官能性脂肪部分、及び親インスリンに二官能性脂肪部分で結合した無電荷リンカーを含み、但し、置換基が-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-及び-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-の群から選択される一又は複数の残基を含まず、無電荷リンカーが：
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、又は無電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミドであって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基、又は
・アミド結合を介して結合した２、３又は４の上に特定したα-アミノ酸アミド又はアミノ酸残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖、
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＯＣＨ２ＣＯＮＨ-
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；又は
・-ＣＯ-((ＣＲ５Ｒ６)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-で、Ｒ５は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ６は独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
からなる群から選択され、但し、無電荷リンカー中のアミンが、残りの置換基と結合を形成するならば、アミンは、カルボニル基を介して残りの置換基に結合しなくてはならないことを特徴とするインスリン誘導体。
【００８８】
１３１．親インスリン部分のＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基、又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基で、親インスリン部分に結合した置換基を有するインスリン誘導体であって、該置換基が、約６〜約３２の炭素原子を有する少なくとも一の二官能性脂肪部分、及び親インスリンに二官能性脂肪部分で結合した無電荷リンカーを含み、但し、置換基が芳香族基を含むならば、非結合アミドはリンカーに存在しており、置換基は-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)２-、-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)３-及び-ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＣＯ-ＮＨ-ＣＨ２-(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)-の群から選択される一又は複数の残基を含まないインスリン誘導体。
【００８９】
１３２．親インスリン部分のＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基、又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基で、親インスリン部分に結合した置換基を有するインスリン誘導体であって、該置換基が、約６〜約３２の炭素原子を有する少なくとも一の二官能性脂肪部分、及び親インスリンに二官能性脂肪部分で結合した無電荷リンカーを含み、但し、二官能性脂肪部分は脂肪族鎖であり、非結合アミドはリンカー中に存在しているインスリン誘導体。
【００９０】
１３３．置換基が、親インスリンのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基に結合している、第１２１−１２９項に記載のインスリン誘導体。
１３４．置換基が、親インスリンのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、第１２１−１２９項に記載のインスリン誘導体。
１３５．置換基が、親インスリンのＢ鎖に存在するＢ２９位において、Ｌｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、第１２１−１２９又は１３１項に記載のインスリン誘導体。
１３６．置換基が、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンのＢ２９位において、Ｌｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、第１３２項に記載のインスリン誘導体。
【００９１】
１３７．リンカーが、式-ＣＯＮＲ７Ｒ８のアミド又はＮ-置換アミドを含み、Ｒ７及びＲ８が互いに独立して、水素、メチル、エチル、プロピル又はイソプロピルとすることができる、第１２１−１２９項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１３８．Ｒ７及びＲ８が水素である、第１３４項に記載のインスリン誘導体。
１３９．リンカーが非結合アミドを含む、第１２１−１２９項に記載のインスリン誘導体。
【００９２】
１４０．置換基が、置換基の個々の成分を連結させるのに使用される、-ＮＨ２及び-ＣＯＯＨから選択される基を独立して各末端に有するエチレングリコール、プロピレングリコール及び／又はブチレングリコールの一又は複数の残基を含む、第１２１−１２９項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１４１．置換基が少なくとも一の芳香族基を含む、第１２１−１２９項に記載のインスリン誘導体。
【００９３】
１４２．親インスリンがヒトインスリン又はブタインスリンである、第１−１４１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１４３．親インスリンがインスリンアナログである、第１−１４１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１４４．親インスリンのＢ３０位にあるアミノ酸残基がＬｙｓであるか、又は欠失している、第１４３項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１４５．親インスリンがｄｅｓＢ３０ヒトインスリンである、第１４３−４４に記載のインスリン誘導体。
【００９４】
１４６．親インスリンのＢ１位にあるアミノ酸残基が欠失している、第１４３−１４５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１４７．親インスリンのＡ２１位にあるアミノ酸残基がＧｌｙ又はＡｓｎである、第１４３−１４６項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１４８．親インスリンのＢ３位にあるアミノ酸残基がＬｙｓである、第１４３−１４７項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１４９．親インスリンのＢ２８位にあるアミノ酸残基がＡｓｐ又はＬｙｓである、第１４３−１４８項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１５０．親インスリンのＢ２９位にあるアミノ酸残基がＰｒｏ又はＴｈｒである、第１４３−１４９項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００９５】
１５１．親インスリンがＡｓｐＢ２８ヒトインスリンである、第１４９項に記載のインスリン誘導体。
１５２．親インスリンが、ＧｌｙＡ２１ヒトインスリン、又はＧｌｙＡ２１ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、又はＧｌｙＡ２１ＡｒｇＢ３１ＡｒｇＢ３２ヒトインスリンである、第１４７項に記載のインスリン誘導体。
１５３．親インスリンがＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンである、第１４８項に記載のインスリン誘導体。
１５４．親インスリンがＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリンである、第１４９−１５０項に記載のインスリン誘導体。
１５５．親インスリンがＴｈｒＢ２９ＬｙｓＢ３０ヒトインスリンである、第１４４及び１５０項に記載のインスリン誘導体。
【００９６】
１５６．２つの亜鉛イオン、３つの亜鉛イオン、４つの亜鉛イオン、５つの亜鉛イオン、６つの亜鉛イオン、７つの亜鉛イオン、８つの亜鉛イオン、９つの亜鉛イオン、又は１０の亜鉛イオンが、インスリン誘導体の６つの分子当たりに結合している、上述した項の何れか一つに記載のインスリン誘導体の亜鉛錯体。
【００９７】
１５７．薬学的に許容可能な担体と共に、第１−１５５項に記載のインスリン誘導体又は第１５６項に記載の亜鉛錯体を治療的有効量含有する、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための薬学的組成物。
１５８．薬学的に許容可能な担体と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、第１−１５５項に記載のインスリン誘導体又は第１５６項に記載の亜鉛錯体を治療的有効量含有する、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための薬学的組成物。
【００９８】
１５９．薬学的に許容可能な担体と共に、第１−１５５項に記載のインスリン誘導体又は第１５６項に記載の亜鉛錯体を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための方法。
１６０．薬学的に許容可能な担体と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、第１−１５５項に記載のインスリン誘導体又は第１５６項に記載の亜鉛錯体を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための方法。
１６１．糖尿病の肺処置のための、第１３８又は１３９項に記載の方法。
【００９９】
１６２．１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するのに使用される薬学的組成物を製造するための、第１−１５５項に記載のインスリン誘導体又は第１５６項に記載の亜鉛錯体の使用。
１６３．１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するのに使用される薬学的組成物を製造するための、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合しての、第１−１５５項に記載のインスリン誘導体又は第１５６項に記載の亜鉛錯体の使用。
【０１００】
１６４．第１−１５５項に記載のインスリン誘導体又は第１５６項に記載の亜鉛錯体と、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンからなる群から選択される速攻型インスリンアナログとの混合物。
【０１０１】
１６５．インスリン誘導体が：
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-テトラデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-トリデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-β-アラニルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-アスパルチルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-ε-アミノヘキサノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-δ-アミノペンタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-１０-(４-カルボキシフェノキシ)-デカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-(３-(３-{４-[３-(７-カルボキシヘプタノイルアミノ)プロポキシ]ブトキシ}プロピルカルバモイル)-プロピオニル-γ-グルタミルアミド)ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-トリデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ウンデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-テトラデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、
ＮεＢ２９-{４-[１０-(４-カルボキシ-フェノキシ)-デカノイルアミノ]-ブチリル}ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-{４-[(１４-カルボキシ-テトラデカノイルアミノ)-メチル]-ベンゾイル}ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-[１６-(４-カルボキシ-フェノキシ)-ヘキサデカノイル]ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-{４-[(１５-カルボキシペンタデカノイルアミノ)ベンゾイル]-ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、及び
ＮεＢ２９-{４-[(１５-カルボキシ-ペンタデカノイルアミノ)-メチル]-ベンゾイル}-ｄｅｓＢ３０インスリン、
からなる群から選択されるインスリン誘導体。
１６６．実施例に記載されたインスリン誘導体。
【０１０２】
本発明を次の段落にさらに要約する：
１ａ．親インスリン部分のＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基、又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基で、親インスリン部分に結合した置換基を有するインスリン誘導体であって、該置換基が、約６〜約３２の炭素原子を有する少なくとも一の二官能性脂肪部分、及び親インスリンに二官能性脂肪部分が結合した無電荷リンカーを含み、但し、インスリン置換基が芳香族基を含むならば、無電荷リンカーは、-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１-４-を含まないインスリン誘導体。
２ａ．置換基が、親インスリンのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基に結合している、第１ａ項に記載のインスリン誘導体。
３ａ．置換基が、親インスリンのＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、第１ａ項に記載のインスリン誘導体。
４ａ．置換基が、親インスリンのＢ鎖に存在するＢ２９位において、Ｌｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、第１ａ又は３ａ項に記載のインスリン誘導体。
５ａ．置換基が、ＬｙｓＢ２９ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンのＢ２９位において、Ｌｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、第４ａ項に記載のインスリン誘導体。
６ａ．リンカーが-ＣＯＮＲ７Ｒ８のアミド又はＮ-置換アミドを含み、Ｒ７及びＲ８が互いに独立して、水素、メチル、エチル、プロピル又はイソプロピルとすることができる、第１ａ−５ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７ａ．Ｒ７及びＲ８が水素である、第６ａ項に記載のインスリン誘導体。
８ａ．リンカーがアミドを含む、第１項に記載のインスリン誘導体。
【０１０３】
９ａ．置換基が、-ＮＨ２及び-ＣＯＯＨから選択される基を独立して各末端に有するエチレングリコール、プロピレングリコール及び／又はブチレングリコールの一又は複数の残基を含む、第１ａ−７ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１０ａ．置換基が少なくとも一の芳香族基を含む、第１ａ−７ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１０４】
１１ａ．次の式：
【化１７】
2009536179.tif 000018
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、インスリン部分のＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基を介して、置換基中のＱ１又はＱ２に結合しており；
各ｎは独立して、０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｑ１は：
・置換基にカルボン酸を持つα-アミノ酸アミド残基であって、そのカルボン酸基の一つと共に、親インスリンのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基；
・アミド結合を介して結合した２、３又は４のα-アミノ酸アミド残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、親インスリンのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖で、Ｗが置換基にカルボン酸基を有する少なくとも一のアミノ酸残基を有するように、Ｗのアミノ酸残基が、中性置換基を有するアミノ酸残基、及び置換基にカルボン酸基を有するアミノ酸残基の群から選択されるもの；又は
・結合；
であり；
Ｑ２は：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１-４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-で、Ｒ９及びＲ１０は互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、Ｑ１又はＱ２の少なくとも一は結合でなく；
Ｑ３、Ｑ４及びＱ５は互いに独立して、
・ｍが１〜３２の範囲の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜３２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・ｙが１-２０である、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-；
・Ｒ３及びＲ４が互いに独立して、また各炭素について独立して、Ｈ、-ＣＯＯＨ又はＯＨとすることができる、-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-(ＮＨＣＯ-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-ＮＨＣＯ)１−２-(ＣＲ３Ｒ４)１−６又は-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-(ＣＯＮＨ-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-ＣＯＮＨ)１−２-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-、-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-(ＮＨＣＯ-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-ＣＯＮＨ)１−２-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-又は-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-(ＣＯＮＨ-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-ＮＨＣＯ)１−２-(ＣＲ３Ｒ４)１−６；
・Ｒ５及びＲ６が互いに独立して、また各炭素について独立して、Ｈ、-ＣＯＯＨ、(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨとすることができる、-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-；
・Ｒ１、Ｒ２及びＲ１５が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-ＣＨ１−６ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２又はＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ１５が、上述したＲ１、Ｒ２の１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンとすることができる、-((ＣＲ１Ｒ２)１−６-ＮＲ１５-ＣＯ)１-４-；
・Ｒ１５が上述したものであるＮＲ１５；
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＣＨ１−６ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)ｐ-ＳＯ３Ｈ、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよい、アリーレン又はヘテロアリーレンで、ここでＲ１及びＲ２は互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２又はＣＯＮＨ２とすることができ；
・次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ｃ６Ｈ４)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)Ｗ-Ｙ３-(Ｃ６Ｈ４)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ｃ６Ｈ４)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
[上式中、Ｙ１-Ｙ６は互いに独立して、Ｏ；Ｓ又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚは互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３は互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合していない]
の二価の炭化水素鎖；又は
・結合；
とすることができ；
但し、Ｑ３-Ｑ５は異なっており；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は互いに独立して、
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・結合；
・次の式：
【化１８】
2009536179.tif 000019
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル、又は
-Ｏ-Ｗ１、
であり、
ここでＷ１は、Ｒ１３及びＲ１４が互いに独立して、Ｈ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＨ２又はテトラゾ-５-リルとすることができる、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＣＯＮＲ１３Ｒ１４又は-ＳＯ２ＮＲ１２Ｒ１４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンである]
を有する、第１ａ項に記載のインスリン誘導体、及び任意のそのＺｎ２＋錯体。
【０１０５】
１２ａ．Ｑ１が、４〜１０の炭素原子を有するアミノ酸アミド残基である、第１１ａ項に記載のインスリン誘導体。
１３ａ．Ｑ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第１１ａ−１２ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１４ａ．Ｑ１がアミノ酸アミド残基の鎖である、第１１ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１０６】
１５ａ．Ｑ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第１１ａ又は１４ａに記載のインスリン誘導体。
【０１０７】
１６ａ．Ｑ２が結合である、第１１ａ−１５ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１７ａ．Ｑ２が、-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１-４-；-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-からなる群から選択される、第１１ａ−１５ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１８ａ．Ｑ２が、-(ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＮＨ-ＣＯ)１-又は-(ＣＯ-(ＣＨ２)３-ＮＨ-ＣＯ)１-４-からなる群から選択される、第１７項に記載のインスリン誘導体。
【０１０８】
１９ａ．Ｑ１が結合である、第１７ａ−１８ａ項に記載のインスリン誘導体。
２０ａ．Ｑ１が：
・置換基にカルボン酸を持つα-アミノ酸アミド残基であって、そのカルボン酸基の一つと共に、親インスリンのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基；
・アミド結合を介して結合した２、３又は４のα-アミノ酸アミド残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、親インスリンのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖で、Ｗが置換基にカルボン酸基を有する少なくとも一のアミノ酸残基を有するように、Ｗのアミノ酸残基が、中性置換基を有するアミノ酸残基、及び置換基にカルボン酸基を有するアミノ酸残基の群から選択されるもの；又は
・結合；
であり；
Ｑ２が：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１-４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-で、Ｒ９及びＲ１０が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、Ｑ１又はＱ２の少なくとも一は結合でなく；
Ｑ３が：
・ｍが６〜３２の範囲の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜３２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・ｓ及びｗの合計が６〜３０の範囲になるように、ｖ及びｗが整数又はそれらのひとつが０である、式-(ＣＨ２)ｓＣ６Ｈ４(ＣＨ２)Ｗ-の二価の炭化水素鎖；
であり；
Ｘ１が-Ｃ=Ｏ又は結合とすることができ；
Ｑ４、Ｑ５、Ｘ２及びＸ３が結合であり；
ｎの全ての値が０であり；
Ｚが：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル
である、第１１ａ項に記載のインスリン誘導体、及び任意のそのＺｎ２＋錯体。
【０１０９】
２１ａ．Ｑ１が、４〜１０の炭素原子を有するアミノ酸アミド残基である、第２０ａ項に記載のインスリン誘導体。
２２ａ．Ｑ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第２０ａ−２１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
２３ａ．Ｑ１がアミノ酸アミド残基の鎖である、第２０ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１０】
２４ａ．Ｑ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第２０ａ又は２３ａに記載のインスリン誘導体。
【０１１１】
２５ａ．Ｑ２が結合である、第２０ａ−２４ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
２６ａ．Ｘ１が-Ｃ=Ｏである、第２１ａ−２５ａの何れかに記載のインスリン誘導体。
２７ａ．Ｑ２が、ＣＯ(ＣＯＮＨ２)ＣＨ-；-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１-４-；-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-からなる群から選択される、第２０ａ−２６ａ項のいずれかに記載のインスリン誘導体。
２８ａ．Ｑ２が、-(ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＮＨ-ＣＯ)１-、-(ＣＯ-(ＣＨ２)３-ＮＨ-ＣＯ)１-、-(ＣＯ-(ＣＨ２)４-ＮＨ-ＣＯ)１-又は-(ＣＯ-(ＣＨ２)５-ＮＨ-ＣＯ)１-からなる群から選択される、第２０ａ又は２７ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
２９ａ．Ｑ１が結合である、第２７ａ又は２８ａ項に記載のインスリン誘導体。
３０ａ．Ｑ３が-(ＣＨ２)ｍ-であり、ｍが６〜３２又は８〜２０の範囲の整数である、第２０ａ−２９ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
３１ａ．ｍが１２、１３、１４、１５又は１６である、第３０ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１２】
３２ａ．Ｚが-ＣＯＯＨである、第２０ａ−３１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
３３ａ．Ｚが-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２である、第２０ａ−３１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
３４ａ．Ｚが-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２である、第２０ａ−３１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
３５ａ．Ｚが-ＳＯ３Ｈである、第２０ａ−３１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
３６ａ．Ｚが-ＰＯ３Ｈである、第２０ａ−３１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１１３】
３７ａ．ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-テトラデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-トリデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-β-アラニルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-アスパルチルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-ε-アミノヘキサノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-δ-アミノペンタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンからなる群から選択される、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１１４】
３８ａ．Ｑ１が：
・置換基にカルボン酸を持つα-アミノ酸アミド残基であって、そのカルボン酸基の一つと共に、親インスリンのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基；
・アミド結合を介して結合した２、３又は４のα-アミノ酸アミド残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、親インスリンのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖で、Ｗが置換基にカルボン酸基を有する少なくとも一のアミノ酸残基を有するように、Ｗのアミノ酸残基が、中性置換基を有するアミノ酸残基、及び置換基にカルボン酸基を有するアミノ酸残基の群から選択されるもの；又は
・結合；
であり；
Ｑ２が：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１-４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-で、Ｒ９及びＲ１０が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、Ｑ１又はＱ２の少なくとも一は結合でなく；
Ｑ３が：
・Ｒ１、Ｒ２及びＲ１５が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-ＣＨ１−６ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２又はＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ１５が、上述したＲ１、Ｒ２の１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンとすることができる、-((ＣＲ１Ｒ２)１−６-ＮＲ１５-ＣＯ)１-４-；
・Ｒ１５が上述したものであるＮＲ１５；
・結合；
であり；
Ｑ４が：
・ｍが４〜２２の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜２２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＣＨｐＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)ｐ-ＳＯ３Ｈ、-ＣＯＮＲ１Ｒ２又は-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよい、アリーレン又はヘテロアリーレンで、ここでＲ１及びＲ２は互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ)１−６-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)ｐ-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２又はＣＯＮＨ２とすることができ；
・次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ｃ６Ｈ４)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)Ｗ-Ｙ３-(Ｃ６Ｈ４)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ｃ６Ｈ４)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
(上式中、Ｙ１-Ｙ６は互いに独立して、Ｏ；Ｓ又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚは互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３は互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合していない)
の二価の炭化水素鎖；
であり；
Ｘ１が：
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・結合；
・次の式：
【化１９】
2009536179.tif 000020
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
Ｘ２、Ｘ３及びＱ５が結合であり；
ｎの全ての値が０であり；及び
Ｚが：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イル、又は
-Ｏ-Ｗ１、
であり、ここでＷ１は、Ｒ１３及びＲ１４が互いに独立して、Ｈ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＨ２又はテトラゾ-５-リルとすることができる、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＣＯＮＲ１３Ｒ１４又は-ＳＯ２ＮＲ１２Ｒ１４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンである、第１１ａに記載のインスリン誘導体、及び任意のそのＺｎ２＋錯体。
【０１１５】
３９ａ．Ｑ１が、４〜１０の炭素原子を有するアミノ酸アミド残基である、第３８ａ項に記載のインスリン誘導体。
４０ａ．Ｑ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第３８ａ−３９ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４１ａ．Ｑ１がアミノ酸アミド残基の鎖である、第３８ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１６】
４２ａ．Ｑ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第３８ａ又は４１ａに記載のインスリン誘導体。
【０１１７】
４３ａ．Ｑ２が結合である、第３８ａ−４２ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４４ａ．Ｑ２が、ＣＯ(ＣＯＮＨ２)ＣＨ-；-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１-４-及び-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-からなる群から選択される、第３８ａ−４２ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４５ａ．Ｑ１が結合である、第４４ａ項に記載のインスリン誘導体。
４６ａ．Ｑ２が、-(ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＮＨ-ＣＯ)１-又は-(ＣＯ-(ＣＨ２)３-ＮＨ-ＣＯ)１-４-からなる群から選択される、第３８ａ、４４ａ又は４５ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４７ａ．Ｑ４が、次の式：
-(ＣＨ２)ｓ-Ｙ１-(Ｃ６Ｈ４)ｖ１-Ｙ２-(ＣＨ２)Ｗ-Ｙ３-(Ｃ６Ｈ４)ｖ２-Ｙ４-(ＣＨ２)ｔ-Ｙ５-(Ｃ６Ｈ４)ｖ３-Ｙ６-(ＣＨ２)ｚ-
(上式中、Ｙ１-Ｙ６は互いに独立して、Ｏ；Ｓ又は結合とすることができ；ｓ、ｗ、ｔ及びｚは互いに独立して、ｓ、ｗ、ｔ及びｚの合計が４〜３０の範囲となるような、０又は１〜１０の整数であり、ｖ１、ｖ２及びｖ３は互いに独立して、０又は１とすることができ、但し、Ｙ１-Ｙ６は互いに結合していない)
のものである、第３７ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１８】
４８ａ．ｖ１、ｖ２又はｖ３の少なくとも２が０である、第３７ａ又は４６ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
４９ａ．Ｙ１-Ｙ６が結合である、第３８ａ、４７ａ又は４８ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
５０ａ．Ｙ１-Ｙ６の少なくとも一がＯ又はＳである、第３８ａ、４７ａ又は４８ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
５１ａ．Ｙ１がＯ又はＳであり、ｖ１が１である、第３８ａ又は４７ａ−４８ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１１９】
５２ａ．Ｚが-ＣＯＯＨである、第３８ａ−５１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
５３ａ．Ｚが-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２である、第３８ａ−５１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
５４ａ．Ｚが-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２である、第３８ａ−５１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
５５ａ．Ｚが-ＳＯ３Ｈである、第３８ａ−５１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
５６ａ．Ｚが-ＰＯ３Ｈである、第３８ａ−５１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
５７ａ．Ｚが-Ｏ-Ｗ１であり、ここでＷ１が、Ｒ１３及びＲ１４が互いに独立して、Ｈ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、-ＣＯＮＨ２又はテトラゾ-５-リルとすることができる、-ＣＯＯＨ、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＣＯＮＲ１３Ｒ１４又は-ＳＯ２ＮＲ１２Ｒ１４からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレン又はヘテロアリーレンである、第３８ａ−５１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１２０】
５８ａ．インスリン誘導体が、ＮεＢ２９-１０-(４-カルボキシフェノキシ)-デカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ＮεＢ２９-４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンからなる群から選択される、第１ａ−１９ａ又は３８ａ-５７ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１２１】
５９ａ．Ｑ１が：
・置換基にカルボン酸を持つα-アミノ酸アミド残基であって、そのカルボン酸基の一つと共に、親インスリンのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド基を形成する残基；
・アミド結合を介して結合した２、３又は４のα-アミノ酸アミド残基からなる鎖であって、アミド結合を介して、親インスリンのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している鎖で、Ｗが置換基にカルボン酸基を有する少なくとも一のアミノ酸残基を有するように、Ｗのアミノ酸残基が、中性置換基を有するアミノ酸残基、及び置換基にカルボン酸基を有するアミノ酸残基の群から選択されるもの；又は
・結合；
であり；
Ｑ２が：
・-ＣＯＣＨ(ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＯＮＨ２)-
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１-４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-で、Ｒ９及びＲ１０が互いに独立して、Ｈ、-ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又は-ＣＯＮＨ２とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、Ｑ１又はＱ２の少なくとも一は結合でなく；
ｎが独立して、２又は３であり；
Ｑ３、Ｑ４又はＱ５が互いに独立して：
・ｙが１-２０である、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-；
・ｍが１〜３２の整数である-(ＣＨ２)ｍ-；
・１、２又は３の-ＣＨ=ＣＨ-基、及び鎖中の炭素原子の全数が４〜３２の範囲となるのに十分な数の-ＣＨ２-基を有する二価の炭化水素鎖；
・Ｒ３及びＲ４が互いに独立して、また各炭素について独立して、Ｈ、-ＣＯＯＨ又はＯＨとすることができる、-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-(ＮＨＣＯ-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-ＮＨＣＯ)１−２-(ＣＲ３Ｒ４)１−６又は-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-(ＣＯＮＨ-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-ＣＯＮＨ)１−２-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-、-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-(ＮＨＣＯ-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-ＣＯＮＨ)１−２-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-又は-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-(ＣＯＮＨ-(ＣＲ３Ｒ４)１−６-ＮＨＣＯ)１−２-(ＣＲ３Ｒ４)１−６；
・Ｒ５及びＲ６が互いに独立して、また各炭素について独立して、Ｈ、-ＣＯＯＨ、(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨとすることができる、-(ＣＲ５Ｒ６)１−６-；又は
・結合；
とすることができ；
但し、Ｑ３-Ｑ５は異なっており；
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は独立して、
・Ｏ；
・-Ｃ=Ｏ
・結合；又は
・次の式：
【化２０】
2009536179.tif 000021
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル又はＣ２−３-アルキニルである)
のものであり；
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＯＳＯ３Ｈ
-ＯＰＯ３Ｈ２
-ＰＯ３Ｈ２、又は
-テトラゾール-５-イルである、第１１ａ項に記載のインスリン誘導体、及び任意のそのＺｎ２＋錯体。
【０１２２】
６０ａ．Ｑ１が、４〜１０の炭素原子を有するアミノ酸アミド残基である、第５９ａ項に記載のインスリン誘導体。
６１ａ．Ｑ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第５９ａ−６０ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
６２ａ．Ｑ１がアミノ酸アミド残基の鎖である、第５９ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１２３】
６３ａ．Ｑ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第５９ａ又は６２ａに記載のインスリン誘導体。
【０１２４】
６４ａ．Ｑ２が結合である、第５９ａ−６３ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
６５ａ．Ｑ２が、ＣＯ(ＣＯＮＨ２)ＣＨ-；-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１-４-；-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１-４-からなる群から選択される、第５９ａ-６３ａの何れかに記載のインスリン誘導体。
６６ａ．Ｑ２が、-(ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＮＨ-ＣＯ)１-又は-(ＣＯ-(ＣＨ２)３-ＮＨ-ＣＯ)１-４-からなる群から選択される、第５９ａ又は６５ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。Ｑ２が、
６７ａ．Ｑ１が結合である、第６５ａ又は６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１２５】
６８ａ．Ｑ３、Ｑ４又はＱ５の一つが-(ＣＨ２)ｍ-であり、ｍが１〜３２又は１〜１２の範囲の整数である、第５９ａ−６７ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
６９ａ．Ｑ３、Ｑ４又はＱ５の一つが、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-；-(ＣＨ２ＯＣＨ２)ｙ-であり、ここでｙが１-２０である、第５９ａ−６７ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７０ａ．Ｑ３、Ｑ４又はＱ５の一つが、(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)ｙ-又は(ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)であり、ここでｙが２-１２、２-４又は２-３の範囲にある、第６９ａ項に記載のインスリン誘導体。
７１ａ．ｙが１である、第５９ａ、６０ａ又は７０ａの何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１２６】
７２ａ．Ｚが-ＣＯＯＨである、第５９ａ−７１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７３ａ．Ｚが-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２である、第５９ａ−７１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７４ａ．Ｚが-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２である、第５９ａ−７１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７５ａ．Ｚが-ＳＯ３Ｈである、第５９ａ−７１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７６ａ．Ｚが-ＰＯ３Ｈである、第５９ａ−７１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１２７】
７７ａ．ＮεＢ２９-(３-(３-{４-[３-(７-カルボキシヘプタノイルアミノ)プロポキシ]ブトキシ}プロピルカルバモイル)-プロピオニル-γ-グルタミルアミド)ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンからなる群から選択される、第１ａ−１９ａ又は５９ａ−７６ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１２８】
７８ａ．親インスリンがヒトインスリン又はブタインスリンである、第１ａ−７７ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
７９ａ．親インスリンがインスリンアナログである、第１ａ−７７ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８０ａ．親インスリンのＢ３０位にあるアミノ酸残基がＬｙｓであるか、又は欠失している、第７８ａ−７９ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８１ａ．親インスリンがｄｅｓＢ３０ヒトインスリンである、第８０ａに記載のインスリン誘導体。
【０１２９】
８２ａ．親インスリンのＢ１位にあるアミノ酸残基が欠失している、第７８ａ−８１ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８３ａ．親インスリンのＡ２１位にあるアミノ酸残基がＧｌｙ又はＡｓｎである、第７８ａ−８２ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８４ａ．親インスリンのＢ３位にあるアミノ酸残基がＬｙｓである、第７８ａ−８３ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８５ａ．親インスリンのＢ２８位にあるアミノ酸残基がＡｓｐ又はＬｙｓである、第７８ａ−８４ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８６ａ．親インスリンのＢ２９位にあるアミノ酸残基がＰｒｏ又はＴｈｒである、第７８ａ−８５ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１３０】
８７ａ．親インスリンがＡｓｐＢ２８ヒトインスリンである、第８５ａ項に記載のインスリン誘導体。
８８ａ．親インスリンが、ＧｌｙＡ２１ヒトインスリン、又はＧｌｙＡ２１ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、又はＧｌｙＡ２１ＡｒｇＢ３１ＡｒｇＢ３２ヒトインスリンである、第８３ａ項に記載のインスリン誘導体。
８９ａ．親インスリンがＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンである、第８４ａ項に記載のインスリン誘導体。
９０ａ．親インスリンがＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリンである、第８５ａ−８６ａ項に記載のインスリン誘導体。
９１ａ．親インスリンがＴｈｒＢ２９ＬｙｓＢ３０ヒトインスリンである、第８０ａ及び８６ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１３１】
９２ａ．各インスリン六量体が、２つの亜鉛イオン、３つの亜鉛イオン又は４つの亜鉛イオンに結合している、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体の亜鉛錯体。
【０１３２】
９３ａ．薬学的に許容可能な担体と共に、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体を治療的有効量含有する、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための薬学的組成物。
９４ａ．薬学的に許容可能な担体と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体を治療的有効量含有する、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための薬学的組成物。
【０１３３】
９５ａ．薬学的に許容可能な担体と共に、第１ａ−９４ａ項に記載のインスリン誘導体を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための方法。
９４ａ．薬学的に許容可能な担体と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、第１ａ−９４ａ項に記載のインスリン誘導体を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための方法。
９７ａ．糖尿病の肺処置のための、第９５ａ又は９６ａ項に記載の方法。
【０１３４】
９８ａ．第１ａ−９２ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体と、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンからなる群から選択される速攻型インスリンアナログとの混合物。
９９ａ．実施例に記載するようなインスリン誘導体。
【０１３５】
アシル化のための出発生成物、親インスリン又はインスリンアナログ又はそれらの前駆体は、よく知られているペプチド合成、又は適切に形質転換された微生物中でのよく知られている組換え生産のいずれかにより生産することができる。よって、インスリン出発生成物は、ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列を含み、ペプチドの発現を可能にする条件下で適切な栄養培地中でポリペプチドを発現することができる宿主細胞を培養し、その後、得られたペプチドを培地から回収することを含む方法により生産することができる。
【０１３６】
細胞を培養するのに使用される培地は、宿主細胞の増殖に適した任意の一般的な培地、例えば適切な栄養補助剤を含む複合培地又は最少培地でありうる。適切な培地は市販供給者から入手可能であり、また刊行されている処方(例えば、American Type Culture Collectionのカタログ)に従い調製することができる。ついで、細胞により産生されたペプチドを、遠心分離又は濾過により培地から宿主細胞を分離し、塩、例えば硫酸アンモニウムにより上清又は濾液のタンパク質様成分を沈殿させ、例えばイオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー等、当該ペプチドの種類に応じて様々なクロマトグラフィー手順により精製することを含む一般的な手順により、培養培地から回収され得る。
【０１３７】
親インスリンをコードするＤＮＡ配列は、適切には、例えばゲノム又はｃＤＮＡライブラリを調製し、標準的な技術に従い合成オリゴヌクレオチドプローブを使用するハイブリダイゼーションによりポリペプチドの全て又は一部をコードするＤＮＡ配列をスクリーニングすることにより得られる、ゲノム又はｃＤＮＡ由来のものでありうる(例えば、Sambrook, J, Fritsch、EF及びManiatis, T, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York、1989を参照)。また、親インスリンをコードするＤＮＡ配列は、確立された標準的な方法、例えばBeaucage及びCaruthers, Tetrahedron Letters 22 (1981), 1859-1869に記載されているホスホアミジト(phosphoamidite)法、又はMatthesら, EMBO Journal 3 (1984), 801-805に記載されている方法により、合成的に調製されてもよい。またＤＮＡ配列は、例えばUS4683202、又はSaikiら, Science 239 (1988),487-491に記載されているように、特定のプライマーを使用するポリメラーゼ連鎖反応により調製されてもよい。
【０１３８】
ＤＮＡ配列は、便宜的に、組換えＤＮＡ手順にかけられている任意のベクターに挿入されてよく、ベクターの選択は、多くの場合、導入される宿主細胞に依存する。例えば、ベクターは自己複製ベクター、すなわち染色体外実体として存在するベクターであってよく、その複製は染色体複製とは無関係、例えばプラスミドである。また、ベクターは、宿主細胞に挿入された場合に、宿主細胞のゲノムに組み込まれ、組み込まれた内部の染色体と共に複製されるものであってよい。
【０１３９】
ベクターは、例えば、親インスリンをコードするＤＮＡ配列が、プロモータ等、ＤＮＡの転写に必要な付加的なセグメントに作用可能に結合している発現ベクターである。プロモータは、選択された宿主細胞において転写活性を示す任意のＤＮＡ配列であってよく、宿主細胞に対して同族又は異種であるタンパク質をコードする遺伝子から誘導されてもよい。種々の宿主細胞において親インスリンをコードするＤＮＡの転写を指向するのに適切なプロモータの例は当該技術でよく知られている。例えば上掲のSambrookらを参照。
また、親インスリンをコードするＤＮＡ配列は、必要ならば、適切なターミネーター、ポリアデニル化シグナル、転写エンハンサー配列、及び翻訳エンハンサー配列に作用可能に結合していてもよい。本発明の組換えベクターは、当該宿主細胞においてベクターの複製を可能にするＤＮＡ配列をさらに含みうる。
さらに、ベクターは選択可能なマーカー、例えばその産物が宿主細胞における欠損を補完する遺伝子、または、例えばアンピシリン、カイナマイシン、テトラサイクリン、クロラムフェニコール、ネオマイシン、ハイグロマイシン、又はメトトレキセートのような薬剤に対して耐性を付与するものをさらに含んでいてもよい。
【０１４０】
宿主細胞の分泌経路に本発明のペプチドを向かわせるために、分泌シグナル配列(リーダー配列、プロプレ配列又はプレ配列としても知られている)が、組換えベクター中に提供されてもよい。分泌シグナル配列は、正しいリーディングフレームでペプチドをコードするＤＮＡ配列に結合している。分泌シグナル配列は、通常、ペプチドをコードするＤＮＡ配列に対し５'に位置している。分泌シグナル配列は、通常ペプチドに関連しているもの、又は他の分泌タンパク質をコードする遺伝子由来のものであってもよい。
【０１４１】
親インスリンをコードするＤＮＡ配列、プロモータ及び場合によってはターミネーター及び／又は分泌シグナル配列をそれぞれライゲーションし、複製に必要な情報を含む適切なベクター中にそれらを挿入するのに使用される手順は、当業者にはよく知られている(例えば、上掲のSambrookらを参照)。
【０１４２】
ＤＮＡ配列又は組換えベクターが導入される宿主細胞は、本ペプチドを生成可能な任意の細胞であってよく、細菌、酵母、真菌及び高等真核細胞を含む。当該分野でよく知られ使用される適切な宿主細胞の例は、限定されるものではないが、大腸菌、出芽酵母、又は哺乳類ＢＨＫ又はＣＨＯ細胞系である。
【０１４３】
ついで、親インスリン分子は、Ｂ鎖のＢ１位又は選択されたＬｙｓ位のいずれかに関連置換基を導入することにより、本発明のインスリン誘導体に転換される。置換基は任意の簡便な方法により導入することができ、アミノ基をアシル化するための多くの方法が従来技術に開示されている。さらなる詳細は、以下の実施例から明らかになるであろう。
【０１４４】
本発明のインスリン誘導体は、本質的には亜鉛を含まない化合物の形態又は亜鉛錯体の形態で提供され得る。本発明のインスリン誘導体の亜鉛錯体が提供される場合、２つのＺｎ２＋イオン、３つのＺｎ２＋イオン、４つのＺｎ２＋イオン、５つのＺｎ２＋イオン、６つのＺｎ２＋イオン、７つのＺｎ２＋イオン、８つのＺｎ２＋イオン、９つのＺｎ２＋イオン、又は１０のＺｎ２＋イオンが、インスリン誘導体の６つの分子当たりに結合され得る。インスリン誘導体の亜鉛錯体の溶液は、このような種の混合物を含むであろう。
一態様では、本発明は、場合によっては、薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、治療的有効量の本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を含有する薬学的組成物に関し、該組成物は、治療が必要な患者において、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するのに提供可能である。
【０１４５】
本発明の一態様においては、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を含有する薬学的組成物を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するための方法が提供される。
本発明の一態様においては、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するのに使用される薬学的組成物を製造するための方法が提供され、該組成物は、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を含有している。
【０１４６】
本発明の一態様においては、治療が必要な患者における、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するための薬学的組成物が提供され、該組成物は、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は添加剤と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を治療的有効量含有している。
【０１４７】
本発明の一態様においては、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を含有する薬学的組成物を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するための方法が提供される。
本発明の一態様においては、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するのに使用される薬学的組成物を製造するための方法が提供され、該組成物は、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を治療的有効量含有している。
【０１４８】
本発明の一態様においては、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンからなる群から選択される、速攻型インスリンアナログ、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体の混合物である、薬学的組成物が提供される。
【０１４９】
本発明の一態様は、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を治療的有効量含有し、治療が必要な患者における、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状の肺処置用に提供可能な薬学的組成物に関する。
本発明の一態様は、治療が必要な患者における、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を肺処置するための薬学的組成物の適用に関し、該薬学的組成物は、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は添加剤と共に、場合によっては速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を治療的有効量含有している。
【０１５０】
本発明の一態様においては、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するのに使用される薬学的組成物を製造するための方法が提供され、該組成物は肺に使用され、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、場合によっては速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を治療的有効量含有している。
本発明のインスリン誘導体及び速攻型インスリンアナログは、約９０／１０％；約７０／３０％又は約５０／５０％の比率で混合することができる。
【０１５１】
一態様において、本発明は、生理学的ｐＨ値で可溶性である、本発明のインスリン誘導体を含有する薬学的組成物に関する。
一態様において、本発明は、約６．５〜約８．５の間のｐＨ値で可溶性である、本発明のインスリン誘導体を含有する薬学的組成物に関する。
一態様において、本発明は、本発明のインスリン誘導体を含有する、長時間にわたる作用プロファイルを有する薬学的組成物に関する。
一態様において、本発明は、約１２０ｎｍｏｌ／ｍｌ〜２４００ｎｍｏｌ／ｍｌ、約４００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約２４００ｎｍｏｌ／ｍｌ、約４００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約１２００ｎｍｏｌ／ｍｌ、約６００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約２４００ｎｍｏｌ／ｍｌ、又は約６００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約１２００ｎｍｏｌ／ｍｌの本発明のインスリン誘導体、又は速攻型インスリンアナログと本発明のインスリン誘導体との混合物を含有する溶液である薬学的組成物に関する。
【０１５２】
薬学的組成物
請求項記載の式のこのインスリン誘導体は、例えば、皮下、経口又は肺に投与することができる。
皮下投与用には、該式の化合物は、既知のインスリンの製剤と同じようにして製剤化される。さらに、皮下投与用には、該式の化合物は、既知のインスリンの投与と同じように投与され、一般的に医師はこの手順に通じている。
【０１５３】
この発明のインスリン誘導体は、循環インスリン濃度を増加させ、及び／又は循環グルコース濃度を低下させるための用量効果的な方式で、吸入により投与されうる。このような投与は、糖尿病又は高血糖症等の疾患の治療に効果的である。インスリンの効果的な投与を達成するには、この発明のインスリン誘導体を約０．５μｇ／ｋｇ〜約５０μｇ／ｋｇの吸入用量で投与することが必要である。治療的有効量は、インスリンレベル、血中血糖値、患者の健康状態、患者の肺の状態等を含む要因を考慮に入れて、博学な実施者により決定することができる。
吸入による投与は、インスリンの皮下投与に匹敵する程の薬物動態に帰する可能性がある。同様の粒径及び同レベルの肺沈着レベルで比較する場合、典型的には、様々な吸入装置で同様の薬学動態が提供される。
【０１５４】
本発明において、この発明のインスリン誘導体は、吸入による治療剤の投与について、当該分野で既知の任意の種々の吸入装置により送達されてよい。これらの装置には、定量吸入器、噴霧器、乾燥パウダー発生器、スプレー等が含まれる。この発明のインスリン誘導体は、乾燥パウダー吸入器又はスプレーにより送達せしめられる。この発明のインスリン誘導体を投与するための吸入装置には、いくつかの好ましい特徴がある。例えば、吸入装置による送達には、有利には信頼性、再現性及び正確性がある。吸入装置は、良好な呼吸のためには、例えば約１０μｍ未満、例えば約１-５μｍの小さな粒子を送達させるべきである。この発明の実施に適した商業的に入手可能な吸入装置のいくつかの特定の例は、TurbohalerTM(Astra)、Rotahaler(登録商標)(Glaxo)、Diskus(登録商標)(Glaxo)、SpirosTM吸入器(Dura)、Inhale Therapeuticsから市販されている装置、AERxTM(Aradigm)、Ultravent(登録商標)噴霧器(Mallinckrodt)、Acorn II(登録商標)噴霧器(Marquest Medical Products)、Ventolin(登録商標)定量吸入器(Glaxo)、Spinhaler(登録商標)パウダー吸入器(Fisons)等である。
【０１５５】
当業者であれば、この発明のインスリン誘導体の処方、送達される製剤の量、及び単一用量の投与による持続時間が、使用される吸入装置の種類に依存することを認識しているであろう。いくつかのエアゾール送達システム、例えば噴霧器において、投与頻度及びシステムが活性化する時間の長さは、主として、エアゾールにおけるインスリンコンジュゲートの濃度に依存するであろう。例えば、より短い期間での投与では、噴霧溶液中、より高い濃度のインスリンコンジュゲートを使用することができる。定量吸入器等の装置は、より高いエアゾール濃度を作り出すことができ、所望される量のインスリンコンジュゲートを送達させるために、より短い期間で操作することができる。パウダー吸入器等の装置は、付与された充填量の薬剤が装置から出されるまで、活性剤を送達する。この種の吸入器において、付与された量のパウダーでのこの発明のインスリン誘導体の量により、単一投与で投与される用量が決定される。
【０１５６】
吸入装置により送達される製剤中におけるこの発明のインスリン誘導体の粒子径は、肺、及び下気道又は肺胞中に入るインスリンの能力に関して重要である。この発明のインスリン誘導体は、送達されるインスリンコンジュゲートの少なくとも約１０％、例えば約１０〜約２０％、又はそれ以上が肺に沈着するように処方することができる。口呼吸するヒトにとって、肺沈着の最大効率は、約２μｍ〜約３μｍの粒子径で得られることが知られている。粒子径が約５μｍを越えると、肺沈着はかなり低減する。約１μｍ以下の粒子径では肺沈着は低減し、治療的に有効な十分な質量を有する粒子を送達することが困難になる。よって、吸入により送達されるインスリン誘導体の粒子は、約１０μｍ未満、例えば約１μｍ〜約５μｍの範囲の粒子経を有する。インスリン誘導体の処方は、選択される吸入装置に所望される粒子径を生じるように選択される。
【０１５７】
有利には、乾燥パウダーとして投与されるために、この発明のインスリン誘導体は、約１０μｍ未満、例えば約１〜約５μｍの粒子径を有する粒状形態に調製される。この粒子径により、患者の肺の肺胞への送達が効果的になされる。乾燥パウダーは、多くの粒子が所望の範囲のサイズを有するように製造された粒子から主としてなる。有利には、少なくとも約５０％の乾燥パウダーが、約１０μｍ未満の直径を有する粒子から作製される。このような処方は、噴霧乾燥、製粉、又はインスリンコンジュゲート及び他の所望する成分を含有する溶液の臨界点濃縮により達成可能である。また本発明に有用な粒子を製造するのに適した他の方法は、当該分野で知られている。
【０１５８】
粒子は、通常、容器中において、乾燥パウダー製剤から分離され、運搬気流を介して、患者の肺に移送される。典型的には、現在の乾燥パウダー吸入器において、固形物を破壊する力は、患者の吸入のみによりもたらされる。他の種類の吸入器では、患者の吸入により生じる空気流で、粒子を崩壊させるインペラモータが起動される。
【０１５９】
乾燥パウダー吸入器から投与されるこの発明のインスリン誘導体の製剤は、誘導体を含有する微細に分割された乾燥パウダーを典型的には含んでいるが、パウダーは、増量剤、担体、賦形剤、他の添加剤等をさらに含有可能である。添加剤は、例えば特定のパウダー吸入器からの送達に要求されているようにパウダーを希釈し、製剤のプロセシングを容易にし、製剤に有利なパウダー特性を提供し、吸入装置からのパウダーの分散を容易にし、製剤を安定化させ(例えば酸化防止剤又はバッファー)、製剤に風味を付与するために、インスリンコンジュゲートの乾燥パウダー製剤に含有せしめることができる。有利には、添加剤は、患者の気道に悪影響を与えないものである。インスリン誘導体は分子レベルで添加剤と混合することもできるし、又は固体製剤は、添加剤の粒子と混合させるか、又は該粒子上をコートするインスリンコンジュゲートの粒子を含有可能である。典型的な添加剤には、単糖類、二糖類及び多糖類；糖アルコール及び他のポリオール、例えばラクトース、グルコース、ラフィノース、メレジトース、ラクチトール(lactitol)、マルチトール、トレハロース、スクロース、マンニトール、デンプン、又はそれらの組合せ；界面活性剤、例えばソルビトール類、ジホスファチジルコリン、又はレシチン等が含まれる。典型的には、添加剤、例えば増量剤は、上述した目的に対して有効な量、多くの場合は製剤の重量に対して約５０％〜約９０％の量で存在している。インスリンアナログタンパク質等のタンパク質の製剤に対して当該分野で知られている添加剤も本製剤に含めることができる。
【０１６０】
この発明のインスリン誘導体を収容するスプレーは、インスリンコンジュゲートの懸濁液又は溶液を、加圧下にて、強いてノズルを通過させることにより製造することができる。ノズルサイズ及び構造、適用圧力、及び液体供給量は、所望する出量及び粒子径が達成されるように選択することができる。例えば、キャピラリー又はノズルフィード部に接続した電場により、電気スプレーを製造することができる。有利には、スプレーにより送達されるインスリンコンジュゲートの粒子は、約１０μｍ未満、例えば約１μｍ〜約５μｍの範囲の粒子径を有する。
【０１６１】
スプレーを用いて使用するのに適したこの発明のインスリン誘導体の製剤は、典型的には、溶液１ｍｌ当たり、約１ｍｇ〜約２０ｍｇのインスリンコンジュゲート濃度で、水溶液中にインスリン誘導体を含有している。製剤は、賦形剤、バッファー、等張剤、防腐剤、界面活性剤、及び例えば亜鉛等の薬剤を含有することができる。また製剤は、賦形剤、又はインスリン誘導体を安定化させるための薬剤、例えばバッファー、還元剤、バルクタンパク質、又は炭水化物をさらに含有可能である。インスリンコンジュゲートの処方に有用なバルクタンパク質には、アルブミン、プロタミン等が含まれる。インスリンコンジュゲートの処方に有用な典型的な炭水化物には、スクロース、マンニトール、ラクトース、トレハロース、グルコース等が含まれる。またインスリン誘導体製剤は、エアゾールの形成において、溶液の噴霧化により生じるインスリンコンジュゲートの表面誘起凝集を低減又は防止可能な界面活性剤を、さらに含有することができる。種々の従来からの界面活性剤、例えばポリオキシエチレン脂肪酸エステル及びアルコール類、及びポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルを使用することもできる。量は、一般的には、製剤の重量に対して約０．００１〜約４％の範囲である。
【０１６２】
本発明のインスリン誘導体を含有する薬学的組成物は、治療が必要な患者に非経口的に投与されてよい。非経口投与は、シリンジ、場合によってはペン状シリンジにより、皮下、筋肉内又は静脈内注射することにより実施されてよい。または、非経口投与は、輸液ポンプにより実施することもできる。さらなる選択肢は、目的に対して特異的に考案された組成物、パウダー又は液体において、インスリンを鼻又は肺に投与することである。
【０１６３】
本発明のインスリン誘導体の注射用組成物は、所望する最終生成物を得るために必要に応じて成分を溶解及び混合することを含む、製薬工業の常套的な技術を使用して調製することができる。よって、一手順において、本発明のインスリン誘導体は、調製される組成物の最終容量よりも幾分少ない量の水に溶解される。必要に応じて、等張剤、防腐剤及びバッファーが添加され、必要ならば、塩酸等の酸、又は水酸化ナトリウム水等の塩基を使用して、溶液のｐＨが調節される。最後に、溶液の容量は、所望の成分濃度が得られるように水で調節される。
【０１６４】
本発明の他の態様において、バッファーは酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、シタラート、グリシルグリシン、ヒスチジン、グリシン、リジン、アルギニン、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸ナトリウム、及びトリス(ヒドロキシメチル)-アミノメタン、ビシン(bicine)、トリシン、リンゴ酸、スクシナート、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、アスパラギン酸、又はそれらの混合物からなる群から選択される。これらの特定のバッファーの各一が、本発明の別の態様を構成する。
【０１６５】
本発明のさらなる態様において、製剤は、フェノール、ｏ-クレゾール、ｍ-クレゾール、ｐ-クレゾール、ｐ-ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ-ヒドロキシ安息香酸プロピル、２-フェノキシエタノール、ｐ-ヒドロキシ安息香酸ブチル、２-フェニルエタノール、ベンジルアルコール、クロロブタノール、及びチオメロサル(thiomerosal)、ブロノポール、安息香酸、イミド尿素、クロロヘキシジン、デヒドロ酢酸ナトリウム、クロロクレゾール、ｐ-ヒドロキシ安息香酸エチル、塩化ベンゼトニウム、クロルフェネシン(chlorphenesine)、(３ｐ-クロロフェノキシプロパン-１,２-ジオール)又はそれらの混合物からなる群から選択され得る、薬学的に許容可能な防腐剤をさらに含有する。本発明のさらなる態様において、防腐剤は、０．１ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。本発明のさらなる態様において、防腐剤は、０．１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。本発明のさらなる態様において、防腐剤は５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。本発明のさらなる態様において、防腐剤は１０ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。これらの特定の防腐剤の各一が、本発明の別の態様を構成する。薬学的組成物に防腐剤を使用することは、当業者によく知られている。簡便には、Remington：The Science and Practice of Pharmacy, 第19版、1995が参照される。
【０１６６】
本発明のさらなる態様において、製剤は、塩(例えば塩化ナトリウム)、糖又は糖アルコール、アミノ酸(例えば、グリシン、Ｌ-ヒスチジン、アルギニン、リジン、イソロイシン、アスパラギン酸、トリプトファン、スレオニン)、アルジトール(例えばグリセロール(グリセリン)、１,２-プロパンジオール(プロピレングリコール)、１,３-プロパンジオール、１,３-ブタンジオール)ポリエチレングリコール(例えばＰＥＧ４００)、又はそれらの混合物からなる群から選択され得る等張剤をさらに含有する。任意の糖、例えば単糖類、二糖類又は多糖類、又は水溶性グルカン類、例えばフルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、及びカルボキシメチルセルロース-Ｎａを使用してもよい。一態様において、糖添加剤はスクロースである。糖アルコールは、少なくとも一の-ＯＨ基を有するＣ４-Ｃ８炭化水素と定義され、例えばマンニトール、ソルビトール、イノシトール、ガラクチトール(galactitol)、ズルシトール、キシリトール、及びアラビトールを含む。一態様において、糖アルコール添加剤はマンニトールである。上述した糖又は糖アルコールは、個々に又は組合せて使用されてよい。使用される量は、糖又は糖アルコールが液状調製物に溶解し、本発明の方法を使用して得られた安定化効果に悪影響を与えない限りは、限定されて固定されるものではない。一態様において、糖又は糖アルコールの濃度は、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌである。本発明のさらなる態様において、等張剤は１ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している、本発明のさらなる態様において、等張剤は１ｍｇ／ｍｌ〜７ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。本発明のさらなる態様において、等張剤は８ｍｇ／ｍｌ〜２４ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。本発明のさらなる態様において、等張剤は２５ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。これらの特定の等張剤の各一が、本発明の別の実施態様を構成する。薬学的組成物に等張剤を使用することは、当業者によく知られている。簡便には、Remington：The Science and Practice of Pharmacy, 第19版、1995が参照できる。
【０１６７】
典型的な等張剤は、塩化ナトリウム、マンニトール、ジメチルスルホン及びグリセロールであり、典型的な防腐剤は、フェノール、ｍ-クレゾール、ｐ-ヒドロキシ安息香酸メチル及びベンジルアルコールである。
適切なバッファーの例は、酢酸ナトリウム、グリシルグリシン、ＨＥＰＥＳ(４-(２-ヒドロキシエチル)-１-ピペラジンエタンスルホン酸)及びリン酸ナトリウムである。
【０１６８】
本発明のインスリン誘導体の鼻投与用の組成物は、例えば、欧州特許第272097号(Novo Nordisk A/S)に記載されているようにして調製されうる。
【０１６９】
この発明のインスリン誘導体を含有する組成物は、インスリンに対して敏感な状態の処置に使用することができる。よってそれらは、１型糖尿病、２型糖尿病及び例えば重篤に傷害を被った人及び大手術を受けた人にしばしば見られる高血糖症の処置に使用することができる。任意の患者に対する最適な用量レベルは、用いられる特定のインスリン誘導体の効能、年齢、体重、身体活動性、及び患者の食事を含む様々な要因、他の薬剤との併用の可能性、治療される状態の重篤度に依存する。この発明のインスリン誘導体の毎日の投薬量が、既知のインスリン組成物に対するものと同様の方法で当業者によって各個々の患者に対して決定されることが推奨される。
都合がよいことに、この発明のインスリン誘導体は、他のタイプのインスリン、例えばさらに速効で作用を開始するインスリンアナログと混合して使用してもよい。このようなインスリンアナログの具体例は、例えば、公開番号EP214826(Novo Nordisk A/S)、EP375437(Novo Nordisk A/S)及びEP383472(Eli Lilly & Co)を有する欧州特許出願に記載されている。
【０１７０】
本発明を以下の実施例によりさらに例証するが、本発明の範囲を制限すると解釈されるものではない。
【図面の簡単な説明】
【０１７１】
【図１】図１は、インスリンアスパルト(Ｂ２８Ａｓｐヒトインスリン)と混合した実施例２のインスリン誘導体のサイズ排除クロマトグラフィーである。各個々のピークにおけるインスリン含有量はＨＰＬＣにより定量される。２つの別々のフラクション(それぞれ、高分子量インスリン及び中間分子量インスリン)として、六量体当たり２．１Ｚｎ(ＩＩ)又は六量体当たり６Ｚｎ(ＩＩ)のいずれかと、製剤におけるインスリン誘導体及びアスパルトが溶出する。ＳＥＣ実験は実施例２０に従い実施する。
【図２】図２は、種々の濃度の、実施例２に記載したインスリン誘導体、及び種々の濃度のＺｎ(ＩＩ)を皮下注射した後のクランプ作用プロファイルを示し、インスリン誘導体の作用プロファイルは、インスリン誘導体が、６つのインスリン当たり２．３又は６Ｚｎ(ＩＩ)と共に、又は６００μＭ又は１２００μＭ製剤として投与されるかにかかわらず類似している。クランプ実験は実施例２１に従い実施する。
【図３】図３は、インスリンアスパルトと混合して、実施例２に記載したインスリン誘導体を皮下注射、又は個々に注射した後のクランプ作用プロファイルを示し、個々のインスリン作用プロファイルには、有意の鈍化性はない。クランプ実験は実施例２１に従い実施する。
【図４】図４は、３つの用量において、実施例２のインスリン誘導体を皮下投与した後のクランプ作用プロファイルにおいて、インスリン作用が長時間効果があることを示している。クランプ実験は実施例２１に従い実施する。
【実施例】
【０１７２】
実施例１
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化２１】
2009536179.tif 000022
工程１：モノ-tert-ブチルヘキサデカンジオアート
ヘキサデカ二酸(４０．０ｇ、１４０ｍｍｏｌ)をトルエン(２５０ｍｌ)に懸濁させ、混合物を加熱還流した。Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド-ジ-tert-ブチルアセタール(７６．３ｇ、３７５ｍｍｏｌ)を４時間以上かけて滴下した。混合物を一晩還流した。溶媒を５０℃で真空にて除去し、粗物質をＤＣＭ／ＡｃＯＥｔ(５００ｍｌ、１：１)に懸濁し、１５分攪拌した。濾過により固形物を収集し、ＤＣＭ(２００ｍｌ)と共に粉状にした。真空にて濾液を蒸発させたところ、粗モノ-tert-ブチルヘキサデカンジオアート、３０グラムが付与された。この物質をＤＣＭ(５０ｍｌ)に懸濁させ、１０分間、氷で冷却し、濾過した。溶媒を真空で除去したところ、２５グラムの粗モノ-tert-ブチルヘキサデカンジオアートが残り、ヘプタン(２００ｍｌ)から再結晶させることで、モノ-tert-ブチルヘキサデカンジオアート、１５．９ｇ(３３％)が得られた。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)ｄ：２．３５(ｔ，２Ｈ)、２．２０(ｔ，２Ｈ)、１．６５-１．５５(ｍ，４Ｈ)、１．４４(ｓ，９Ｈ)、１．３４-１．２０(ｍ，２０Ｈ)。
【０１７３】
工程２：スクシンイミジル-tert-ブチルヘキサデカンジオアート
モノ-tert-ブチルエステル(２ｇ、５．８ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(２０ｍｌ)に溶解させ、ＴＳＴＵ(２．１ｇ、７．０ｍｍｏｌ)及びＤＩＥＡ(１．２ｍｌ、７．０ｍｍｏｌ)で処理し、一晩攪拌した。混合物を濾過し、濾液を真空で蒸発させた。残留物をＡｃＯＥｔに溶解させ、０．１Ｍの冷ＨＣｌ及び水で２回洗浄した。ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空で蒸発させたところ、スクシンイミジル-tert-ブチルヘキサデカンジオアート、２．０２ｇ(７９％)が得られた。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)δ：２．８４(ｓ，４Ｈ)、２．６０(ｔ，２Ｈ)、２．２０(ｔ，２Ｈ)、１．７４(ｐ，２Ｈ)、１．５６(ｍ，２Ｈ)、１．４４(ｓ，９Ｈ)、１．４０(ｍ，２Ｈ)、１．３０-１．２０(ｍ、１８Ｈ)。
工程３：ω-tert-ブチル-カルボキシ-ペンタデカノイル-Ｌ-グルタミルアミド
スクシンイミジル-tert-ブチルヘキサデカンジオアート(１００ｍｇ、０．２２７ｍｍｏｌ)をＤＭＦ(２ｍｌ)に溶解させ、Ｌ-グルタミルアミド(３７ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ)及びＤＩＥＡ(５８μｌ、０．３４ｍｍｏｌ)で処理し、混合物を一晩攪拌した。溶媒を真空で除去し、粗生成物をＡｃＯＥｔに溶解させ、０．２ＭのＨＣｌ、水及びブラインで２回洗浄した。ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空で蒸発させたところ、ω-tert-ブチル-カルボキシ-ペンタデカノイル-Ｌ-グルタミルアミド、８５ｍｇ(８０％)が得られた。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)δ：６．９８(ｓ，１Ｈ)、６．６０(ｄ，１Ｈ)、５．８８(ｓ，１Ｈ)、４．６９(ｍ，１Ｈ)、２．５５-２．４１(ｍ，２Ｈ)、２．２５-２．１８(ｍ，２Ｈ)、２．１４(ｍ，１Ｈ)、１．９３(ｍ，１Ｈ)、１．６５-１．５４(ｍ，４Ｈ)  １．４４(ｓ，９Ｈ)、１．２７(ｂｒ，２０Ｈ)。
【０１７４】
工程４：ω-tert-ブチル-カルボキシ-ペンタデカノイル-Ｌ-グルタミルアミド-γ-スクシンイミジルエステル
ω-tert-ブチル-カルボキシ-ペンタデカノイル-Ｌ-グルタミルアミド(８５ｇ、０．１８１ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(１ｍｌ)に溶解させ、ＴＳＴＵ(６５ｇ、０．２１７ｍｍｏｌ)及びＤＩＥＡ(３７μｌ、０．２１７ｍｍｏｌ)で処理し、一晩攪拌した。混合物を濾過し、濾液を真空で蒸発させた。残留物をＡｃＯＥｔに溶解させ、０．１Ｍの冷ＨＣｌ及び水で２回洗浄した。ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空で蒸発させたところ、ω-tert-ブチル-カルボキシ-ペンタデカノイル-Ｌ-グルタミルアミド-γ-スクシンイミジルエステル、９１ｍｇ(８９％)が得られた。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)δ：６．５９(ｓ，１Ｈ)、６．４１(ｄ，１Ｈ)、５．５６(ｓ，１Ｈ)、４．６２(ｍ，１Ｈ)、３．０２-２．９４(ｄｄ，２Ｈ)、２．８４(ｓ，４Ｈ)、２．７１-２．５８(ｍ，２Ｈ)、１．７６(ｍ，１Ｈ)、１．５３-１．６３(ｍ，４Ｈ)、１．４４(ｓ，９Ｈ)、１．２５(ｂｒ，２０Ｈ)。
【０１７５】
工程５：ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリン
ＤｅｓＢ３０ヒトインスリン(５００ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ)を、１００ｍＭのＮａ２ＣＯ３(５ｍｌ、ｐＨ１０．２)に、室温で溶解させた。ω-tert-ブチル-カルボキシ-ペンタデカノイル-Ｌ-グルタミルアミド-γ-スクシンイミジルエステル(５７ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ)をアセトニトリル(５ｍｌ)に溶解させ、続いてインスリン溶液に添加した。３０分後、０．２Ｍのメチルアミン(０．５ｍｌ)を添加した。ＨＣｌにより、ｐＨを５．５に調節し、遠心分離により等電沈殿物を収集し、真空で乾燥したところ、４２３ｍｇが付与された。カップリング収率は４２％であった(ＲＰ-ＨＰＬＣ、Ｃ４カラム；バッファーＡ：０．１％のＴＦＡ-水に１０％のＭｅＣＮが入ったもの、バッファーＢ：０．１％のＴＦＡ-水に８０％のＭｅＣＮが入ったもの；勾配２０％〜９０％のＢで１６分)。保護された生成物を９５％のＴＦＡ(１２ｍｌ)に溶解させ、３０分放置し、真空で蒸発させた。粗生成物を水に溶解させ、凍結乾燥した。
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリンを、Ｃ４-カラム、バッファーＡ：２０％のＥｔＯＨ＋０．１％のＴＦＡ、バッファーＢ：８０％のＥｔＯＨ＋０．１％のＴＦＡ；勾配１５-６０％のＢでのＲＰ-ＨＰＬＣ、続いて、Ｃ４-カラム、バッファーＡ：１０ｍＭのＴｒｉｓ＋２０％のＥｔＯＨに１５ｍＭの硫酸アンモニウムが入ったもの、ｐＨ７．３、バッファーＢ：８０％のＥｔＯＨ、勾配１５−６０％のＢでのＨＰＬＣにより精製した。収集したフラクションを７０％のアセトニトリル＋０．１％のＴＦＡを用いたＳｅｐ-Ｐａｋで脱塩し、アンモニアを添加することにより中和し、凍結乾燥した。最適化されていない収率は５０ｍｇ、１２％であった。ＨＰＬＣにより評価された純度は＞９８％であった。ＬＣＭＳ  ６１０２．８；Ｃ２７４Ｈ４１２Ｎ６６Ｏ８０Ｓ６は６１０３．１必要。
【０１７６】
実施例２
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化２２】
2009536179.tif 000023
この化合物を実施例１と同様にして、ヘキサデカン二酸とγ-アミノ酪酸から調製した。
ω-tert-ブチル-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-アミノ-酪酸スクシンイミジルエステル
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)δ：５．８０(ｍ，１Ｈ)、３．３６(ｄｄ，２Ｈ)、２．８４(ｓ，４Ｈ)、２．６５(ｔ，２Ｈ)、２．２１-２．１３(ｍ，４Ｈ)、１．９９(ｐ，２Ｈ)、１．４４(ｓ，９Ｈ)、１．６６-１．５１(ｍ，６Ｈ)、１．２５(ｂｒ，２０Ｈ)。
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン
ＬＣＭＳ  ６０５９．９；Ｃ２７３Ｈ４１１Ｎ６５Ｏ７９Ｓ６は６０６０．１必要。
【０１７７】
実施例３
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-テトラデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化２３】
2009536179.tif 000024
この化合物を実施例１と同様にして、ペンタデカン二酸とＬ-グルタミルアミドから調製した。
ＬＣＭＳ  ６０８８．２；Ｃ２７３Ｈ４１０Ｎ６６Ｏ８０Ｓ６は６０８９．１必要。
【０１７８】
実施例４
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-トリデカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化２４】
2009536179.tif 000025
この化合物を実施例１と同様にして、テトラデカン二酸とＬ-グルタミルアミドから調製した。
ＬＣＭＳ  ６０７５．３；Ｃ２７２Ｈ４０８Ｎ６６Ｏ８０Ｓ６は６０７５．１必要。
【０１７９】
実施例５
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-β-アラニルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化２５】
2009536179.tif 000026
この化合物を実施例１と同様にして、ヘキサデカン二酸とβ-アラニンから調製した。
ＬＣＭＳ  ６０４４．８；Ｃ２７２Ｈ４０９Ｎ６５Ｏ７９Ｓ６は６０４６．１必要。
【０１８０】
実施例６
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-γ-Ｌ-アスパルチルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化２６】
2009536179.tif 000027
この化合物を実施例１と同様にして、ヘキサデカン二酸とＬ-アスパルチルアミドから調製した。
ＬＣＭＳ  ６０８８．８；Ｃ２７３Ｈ４１０Ｎ６６Ｏ８０Ｓ６は６０８９．１必要。
【０１８１】
実施例７
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-ε-アミノヘキサノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化２７】
2009536179.tif 000028
この化合物を実施例１と同様にして、ヘキサデカン二酸とε-アミノ-ヘキサン酸から調製した。
ＬＣＭＳ  ６０８６．１；Ｃ２７５Ｈ４１５Ｎ６５Ｏ７９Ｓ６は６０８８．１必要。
【０１８２】
実施例８
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ペンタデカノイル-δ-アミノペンタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化２８】
2009536179.tif 000029
この化合物を実施例１と同様にして、ヘキサデカン二酸とδ-アミノ-ペンタン酸から調製した。
ＬＣＭＳ  ６０７４．２；Ｃ２７４Ｈ４１３Ｎ６５Ｏ７９Ｓ６は６０７４．１必要。
【０１８３】
実施例９
ＮεＢ２９-１０-(４-カルボキシフェノキシ)-デカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化２９】
2009536179.tif 000030
工程１：４-ヒドロキシ-安息香酸-tert-ブチルエステル
４-ヒドロキシ-安息香酸(３ｇ、２１．７ｍｍｏｌ)をトルエン(３５ｍｌ、分子ふるい上で乾燥)において攪拌した。Ｎ２下、溶液を８０℃まで加熱し、Ｎ,Ｎ'-ジメチルホルムアミド-ジ-tert-ブチルアセタール(１０．４２ｍＬ、４３．４ｍｍｏｌ)を、約５分以上かけて添加した。混合物を８０℃で１時間１０分攪拌し、室温まで冷却した。溶液を水、飽和ＮａＨＣＯ３及び飽和ＮａＣｌ(各１５ｍＬ)で２回洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、黄色の油(２．７７ｇ)が生じるまで濃縮した。生成物をフラッシュクロマトグラフィー(３８０ｇのシリカ、溶離液：４：６のＡｃＯＥｔ／ヘプタン(２Ｌ)及び１：１のＡｃＯＥｔ／ヘプタン  ７００ｍＬ)で精製したところ、白色の結晶(２．０７ｇ、収率４９％)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：２１７(Ｍ＋２３)。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)７．９０(ｄ，２Ｈ)、６．８５(ｄ，２Ｈ)、６．１０(ｓ，１Ｈ)、１．５９(ｓ，９Ｈ)。
【０１８４】
工程２：４-(９-メトキシカルボニルノニルオキシ)安息香酸-tert-ブチルエステル
４-ヒドロキシ-安息香酸-tert-ブチルエステル(５００ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌ)及び１０-ブロモデカン酸メチルエステル(６８３ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌ)をアセトニトリルに溶解させ、Ｋ２ＣＯ３(７１２ｍｇ、５．１５ｍｍｏｌ)を添加した。窒素下で１６時間、混合物を還流し、室温まで冷却した。固形物を濾過し、濾液を真空下で濃縮した。得られた残留物をＡｃＯＥｔ(５０ｍｌ)と水(２５ｍｌ)に溶解させた。相分離させ、有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、無色の油(８７４ｍｇ、収率９０％)が生じるまで濃縮した。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：４０２(Ｍ＋２３)
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)７．９２(ｄ，２Ｈ)、６．８７(ｄ，２Ｈ)、３．９９(ｔ，２Ｈ)、３．６７(ｓ，３Ｈ)、２．３１(ｔ，２Ｈ)、１．７２-１．８３(ｍ，２Ｈ)、１．５９-１．６９(ｍ，２Ｈ)、１．５８(ｓ，９Ｈ)、１．４０-１．５０(ｍ，２Ｈ)、１．２３-１．４０(ｂｒ，８Ｈ)。
【０１８５】
工程３：４-(９-カルボキシノニルオキシ)安息香酸-tert-ブチルエステル
４-(９-メトキシカルボニルノニルオキシ)安息香酸-tert-ブチルエステル(８５８ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(５ｍｌ)に溶解させ、１ＮのＮａＯＨ(２．２７ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を１６時間攪拌した。水(２５ｍｌ)にＡｃＯＥｔ(４０ｍｌ)と１ＮのＨＣｌ(２．３８ｍｌ)を添加した。相分離させ、有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、白色の固形物(７８１ｍｇ、収率９５％)が生じるまで、真空下で濃縮した。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：３８７(Ｍ＋２３)。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)７．９２(ｄ，２Ｈ)、６．８７(ｄ，２Ｈ)、３．９９(ｔ，２Ｈ)、２．３５(ｔ，２Ｈ)、１．７３-１．８４(ｍ，２Ｈ)、１．６０-１．６９(ｍ，２Ｈ)、１．５８(ｓ，９Ｈ)、１．３９-１．５１(ｍ，２Ｈ)、１．２４-１．３９(ｂｒ，８Ｈ)。
【０１８６】
工程４：４-[９-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イルオキシカルボニル)ノニルオキシ]安息香酸-tert-ブチルエステル
４-(９-カルボキシノニルオキシ)安息香酸-tert-ブチルエステル(７７９ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(１５ｍＬ)に溶解させ、ＤＩＥＡ(３６６μｌ、２．１４ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を０℃まで冷却し、窒素下に置き、ＨＳＴＵを添加した。混合物を０℃で３０分、室温で１６時間攪拌した。サンプルを真空下で濃縮し、ＡｃＯＥｔ(４０ｍｌ)を添加した。混合物を０．２ＮのＨＣｌ(２ｘ２５ｍｌ)で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、わずかに黄色がかった固形物が生じるまで、真空下で濃縮した。固形物をＡｃＯＥｔから再結晶化させたところ、白色のパウダー(２７６ｍｇ、収率２８％)が生じた。母液を濃縮したところ、結晶性の残留物(４３０ｍｇ、収率４３％)が生じた。白色パウダーについてのデータ：
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：４８４(Ｍ＋２３)。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)７．９３(ｄ，２Ｈ)、６．８８(ｄ，２Ｈ)、３．９９(ｔ，２Ｈ)、２．８３(ｓ，４Ｈ)、２．６１(ｔ，２Ｈ)、１．６７-１．８８(ｍ，４Ｈ)、１．５８(ｓ，１１Ｈ、理論値．９Ｈ＋水)、１．２７-１．５２(ｍ，１０Ｈ)。
【０１８７】
工程５：４-[９-((Ｓ)-１-カルバモイル-３-カルボキシプロピルカルバモイル)ノニルオキシ]安息香酸-tert-ブチルエステル
４-[９-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イルオキシカルボニル)ノニルオキシ]安息香酸-tert-ブチルエステル(２００ｍｇ、０．４３３ｍｍｏｌ)を、ＤＭＦ(２ｍＬ)において攪拌し、Ｈ-Ｇｌｕ-ＮＨ２(６３ｍｇ)を添加した。非均質な混合物を室温で１６時間攪拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、反応が完了したことを示した。Ｈ-Ｇｌｕ-ＮＨ２(２０ｍｇ)及びさらなるＤＭＦ(２ｍｌ)を添加し、混合物を室温で２日間攪拌した。サンプルを真空下で濃縮し、ＡｃＯＥｔ(５０ｍＬ)を添加した。溶液を０．２ＮのＨＣｌ(２ｘ２５ｍＬ)及び水(２５ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、白色の固形物(１８０ｍｇ、収率８６％)が生じるまで、真空で濃縮した。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：４９３(Ｍ＋１)。
【０１８８】
工程６：４-{９-[(Ｓ)-１-カルバモイル-３-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イルオキシカルボニル)プロピルカルバモイル]ノニルオキシ}安息香酸-tert-ブチルエステル
ＨＳＴＵ活性化を、４-[９-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イルオキシカルボニル)ノニルオキシ]安息香酸-tert-ブチルエステルについて記載しているものと同様の方式で実施した。生成物をフラッシュクロマトグラフィー(１：１のＡｃＯＥｔ：ヘプタン及びＡｃＯＥｔ)で精製したところ、１８ｍｇ生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：５９０(Ｍ＋１)。
【０１８９】
工程７：ＮεＢ２９-１０-(４-カルボキシフェノキシ)デカノイル-γ-Ｌ-グルタミルアミドｄｅｓＢ３０インスリン
ＤｅｓＢ３０インスリン(１２６ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ)を、１０ｍｌの丸底フラスコに、１００ｍＭのＮａ２ＣＯ３(１．５ｍＬ)とアセトニトリル(１．５ｍＬ)を添加することにより溶解させた。４-{９-[(Ｓ)-１-カルバモイル-３-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イルオキシカルボニル)プロピルカルバモイル]ノニルオキシ}安息香酸-tert-ブチルエステル(１４ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ)を、アセトニトリル(７５０μＬ)に添加し、Ｎａ２ＣＯ３(７５０μＬ)を、最終溶液が５０：５０  １００ｍＭのＮａ２ＣＯ３／アセトニトリルになるように添加した。溶液を室温で１時間攪拌した。溶液を、Ｍｉｌｌｉ-Ｑ水(６ｍｌ)で洗浄した、１５ｍｌの遠心分離用チューブに移した。溶液を氷上で冷却し、１ＮのＨＣｌを添加することにより、ｐＨを５．１に調節し、沈殿に至らしめた。チューブを１０℃で１０分、５０００ｒｐｍの遠心分離にかけた。溶媒を固形物からデカントした。固形物に９５：５のＴＦＡ／水(２．５ｍｌ)を添加した。溶媒を、超９５：５のＴＦＡ／水(２．５ｍｌ)で洗浄した、丸底フラスコに注いだ。溶液を室温で３０分攪拌し、真空下で濃縮した。ＤＣＭを添加し、２回除去し、フラスコを室温で真空下に配した。生成物を調製用ＨＰＬＣ(Ｃ１８カラム、アセトニトリル／水／０．０５％のＴＦＡ)により精製した。関連するフラクションをプールし(２つのバッチ)、水を用いて１：１に希釈した。溶液を氷上で冷却し、１ＮのＮａＯＨを用い約５のｐＨに調節することによって、沈殿を誘導した。サンプルを遠心分離(５０００ｒｐｍ、１０分、５℃)した。液体をデカントし、ペレットを凍結乾燥したところ、白色の固形物(２２ｍｇ＋１２ｍｇ)が生じた。
ＭＡＬＤＩ-ＭＳ(アルファ-シアノ-４-ヒドロキシケイ皮酸)  ｍ／ｚ：６１２８．７(Ｍ＝６１２５．１)。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：１５３２．８((Ｍ＋４)／４＝１５３２．２)。
【０１９０】
実施例１０
ＮεＢ２９-４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化３０】
2009536179.tif 000031
工程１：４-ヨード安息香酸-tert-ブチルエステル
４-ヨード安息香酸(１０ｇ、４０．３ｍｍｏｌ)を無水トルエン(１００ｍｌ、分子ふるい上で乾燥)に溶解させた。窒素流下、溶液を７０℃まで加熱した。トルエン(２５ｍＬ)にＮ,Ｎ'-ジメチルホルムアミド-ジ-tert-ブチルアセタール(２４．６ｇ、１２１ｍｍｏｌ)が入った溶液を、約３０分以上かけて添加した。反応体を１６時間混合した。加熱ユニットが機能しなくなった時点で、反応体を７０℃から室温まで冷却した。溶液を７０℃まで加熱し、５時間混合した。サンプルを真空下で濃縮し、ＡｃＯＥｔ(４００ｍｌ)を添加した。ついで、溶液を１：１の飽和ＮａＨＣＯ３／水(１５０ｍｌ)、及び飽和ＮａＨＣＯ３、水及び飽和ＮａＣｌ(各７５ｍｌ)で洗浄した。有機相を乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、真空下で濃縮したところ、淡褐色の油が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：３２７(Ｍ＋２３)。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．７７(ｄ，２Ｈ)、７．６９(ｄ，２Ｈ)、１．５８(ｓ，９Ｈ)。
【０１９１】
工程２：１１-ヨードウンデカン酸メチルエステル
１１-ブロモウンデカン酸メチルエステル(２０．２ｇ、７２．３ｍｍｏｌ)をアセトン(２００ｍｌ)に溶解させた。ヨウ化ナトリウム(５４ｇ、３６１ｍｍｏｌ)を添加し、反応体を窒素下で１６時間還流した。室温まで冷却した後、塩を濾過した。濾液を真空下で濃縮し、水(２００ｍｌ)を添加した。相分離を助けるために、幾ばくかの飽和ＮａＣｌを添加したＡｃＯＥｔ(２ｘ１００ｍｌ)を用いて、溶液を抽出した。有機抽出物をプールし、水(１００ｍｌ)＋少量の飽和ＮａＣｌ、及び飽和ＮａＣｌ(５０ｍＬ)で洗浄した。ＭｇＳＯ４上で乾燥させた。溶液は赤-オレンジの色をしていた。小さじ３杯の活性炭を添加した。混合後、セライト床を通して、溶液を濾過した。濾液を真空下で濃縮したところ、淡黄色の油(２０．９６ｇ、８９％)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：３２７(Ｍ＋１)。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ３．６７(ｓ，３Ｈ)、３．１９(ｔ，２Ｈ)、２．３０(ｔ，２Ｈ)、１．７４-１．８９(ｍ，２Ｈ)、１．５３-１．７０(ｍ，２Ｈ)、１．３４-１．４６(ｍ，２Ｈ)、１．２８(ｂｒ，１０Ｈ)。
【０１９２】
工程３：４-(１０-メトキシカルボニルデシル)安息香酸-tert-ブチルエステル
使用前に、全てのガラス製品を乾燥させた。分子ふるい上でＴＨＦを乾燥させた。ＬｉＣｌを、１５０℃で１時間乾燥させ、ついで密閉ボトルに保管した。全ての反応溶液を窒素下で作製し、シリンジを介して溶液を移動した。４-ヨード安息香酸-tert-ブチルエステル(１．２ｇ、３．９５ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(３ｍｌ)に溶解させ、−３０℃まで冷却した。イソプロピルマグネシウムクロリド(４．３４ｍｍｏｌ、ＴＨＦに２Ｍ)を５分以上かけて添加し、溶液を−１８℃〜−２５℃の温度で１時間攪拌した。溶液を−２２℃まで冷却し、ついで、ＴＨＦ(４．２ｍｌ)にＣｕＣＮ(０．３８９ｇ、４．３４ｍｍｏｌ)とＬｉＣｌ(０．３６８ｇ、８．６８ｍｍｏｌ)の混合物が入ったものを添加した。反応容器を冷却から外し、放置して室温まで温めた(約１０分)。亜リン酸トリメチル(０．９５ｍＬ)を添加し、室温で５分攪拌した後、ＴＨＦ(３ｍｌ)に１１-ヨード-ウンデカン酸メチルエステル(１．０ｇ、３．１６ｍｍｏｌ)が入った溶液を添加した。溶液を室温で１６時間混合した。飽和ＮＨ４Ｃｌ(３ｍｌ)を添加し、溶液を水(６０ｍＬ)に注いだ。溶液をＡｃＯＥｔ(３ｘ３５ｍｌ)で抽出した。有機抽出物をプールし、相分離を助けるために、幾ばくかの飽和ＮａＣｌを使用し、水(３０ｍＬ)を用いて洗浄した。溶媒を真空下で除去したところ、二相残基が生じた。ＡｃＯＥｔ(約２ｍｌ)を添加し、フラスコをゆっくりと回転させた。高粘度の白色残留物の全てが溶解したわけではなかった。溶解した部分をシリカ(５０ｇ)カラムに添加し、ＡｃＯＥｔ：ヘプタン  １：１１で溶出させた。適切なフラクションを真空下で濃縮したところ、油(１．２５ｇ)が生じた。油をアセトン(３０ｍＬ)に溶解させ、ピペリジン(１ｍＬ)を添加した。ＮａＩ(０．８ｇ)を添加し、混合物を攪拌して、１６時間還流した。混合物を真空下で濃縮し、ＡｃＯＥｔ(５０ｍＬ)と１ＮのＨＣｌ(２５ｍＬ)の間に分配された。有機相を１ＮのＨＣｌ(２ｘ２５ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空下で濃縮したところ、無色の油(１．１ｇ)が生じた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー(溶離液：ＡｃＯＥｔ：ヘプタン  １：１１、１５０ｇのシリカ)で精製したところ、無色の油(０．７２ｇ、６１％)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：３９９(Ｍ＋２３)。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．９０(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、３．６６(ｓ，３Ｈ)、２．６４(ｔ，２Ｈ)、２．３０(ｔ，２Ｈ)、１．４８-１．７０(ｍ，１３Ｈ)、１．２７(ｂｒ、１２Ｈ)。
【０１９３】
工程４：４-(１０-カルボキシデシル)安息香酸-tert-ブチルエステル
４-(９-カルボキシノニルオキシ)安息香酸-tert-ブチルエステルの調製に使用した手順に類似した様式で化合物を調製したところ、白色の固形物(０．６８ｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：３８５(Ｍ＋２３)。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．９０(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、２．６４(ｔ，２Ｈ)、２．３４(ｔ，２Ｈ)、１．５３-１．７１(ｍ，１３Ｈ)、１．２８(ｂｒ，１２Ｈ)。
【０１９４】
工程５：４-[１０-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イルオキシカルボニル)デシル]安息香酸-tert-ブチルエステル
４-[９-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イルオキシカルボニル)ノニルオキシ]安息香酸-tert-ブチルエステルの調製に使用した手順に類似した様式で化合物を調製した。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：４８２(Ｍ＋２３)。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．８９(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、２．７６-２．９３(ｍ，４Ｈ)、２．５４-２．６８(ｍ，２Ｈ)、１．６７-１．８１(Ｍ，２Ｈ)、１．５２-１．６６(ｍ，１１Ｈ)、１．３５-１．４３(Ｍ，２Ｈ)、１．１９-１．３５(ｂｒ，１０Ｈ)。
【０１９５】
工程６：４-[１０-(３-カルボキシ-プロピルカルバモイル)デシル]安息香酸-tert-ブチルエステル
４-[１０-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イルオキシカルボニル)デシル]安息香酸-tert-ブチルエステル(３００ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ)を、ＤＭＦ(３ｍｌ)及び４-アミノ酪酸(６７ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ)に溶解させた。混合物を窒素下で１６時間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、ＡｃＯＥｔ(３５ｍｌ)を添加した。溶液を、０．２ＮのＨＣｌ及び水(各１５ｍｌ)で洗浄した。飽和ＮａＨＣＯ３を有機相に添加した(意図しない)。ＤＣＭ(５０ｍｌ)を添加した。幾ばくかの有機相を除去し、ＤＣＭ(１００ｍｌ)を水相に添加し、一晩放置した。混合物を氷上で冷却し、４ＮのＨＣｌを用いて、ｐＨを１．９に調節した。有機相を単離し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空下で濃縮したところ、油(２２０ｍｇ、収率７６％)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：４７０(Ｍ＋２３)。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．８９(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、５．７９(ｂｒ，１Ｈ)、３．２７-３．４０(ｍ，２Ｈ)、２．６４(ｔ，２Ｈ)、２．４０(ｔ，２Ｈ)、２．１８(ｔ，２Ｈ)、１．７８-１．９１(ｍ，２Ｈ)、１．５１-１．６１(ｍ，１３Ｈ)、１．３５-１．４３(Ｍ，２Ｈ)、１．１７-１．３６(ｂｒ，１２Ｈ)。
【０１９６】
工程７：４-{１０-[３-(２,５-ジオキソ-ピロリジン-１-イルオキシカルボニル)プロピルカルバモイル]デシル}安息香酸-tert-ブチルエステル
ＨＳＴＵの代わりにＴＳＴＵを使用する以外は、４-[９-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イルオキシカルボニル)ノニルオキシ]安息香酸-tert-ブチルエステルの調製に使用した手順に類似した様式で化合物を調製した。沈殿(ＤＣＭ／ヘプタン)により白色の固体(１８０ｍｇ、収率７０％)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：５６８(Ｍ＋２３)
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．８９(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、５．８３(ｂｒ，１Ｈ)、３．３０-３．４３(ｍ，２Ｈ)、２．８５(ｂｒ，４Ｈ)、２．５７-２．７３(ｍ，４Ｈ)、２．１５(ｔ，２Ｈ)、１．９２-２．０７(ｍ，２Ｈ)、１．５６-１．６４(ｍ，１３Ｈ)、１．１８-１．３６(ｂｒ，１２Ｈ)。
【０１９７】
工程８：ＮεＢ２９-４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリルｄｅｓＢ３０ヒトインスリン
実施例９の調製に使用した手順に類似した様式で化合物を調製したところ、３０ｍｇ生じた。
ＭＡＬＤＩ-ＭＳ(アルファ-シアノ-４-ヒドロキシケイ皮酸)  ｍ／ｚ：６０６７(Ｍ＝６０８０、参照基準(Ｍ＝５７０６)はＭ-１３を示した)。
ＨＰＬＣ-ＭＳ  ｍ／ｚ：１５２０．９((Ｍ＋４)／４＝１５２１)。
【０１９８】
実施例１１
ＮεＢ２９-(３-(３-{４-[３-(７-カルボキシヘプタノイルアミノ)プロポキシ]ブトキシ}プロピルカルバモイル)-プロピオニル-γ-グルタミルアミド)ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化３１】
2009536179.tif 000032
工程１：Ｎ-{３-[４-(３-tert-ブトキシカルボニルアミノプロポキシ)-ブトキシ]−プロピル}スクシンアミド酸(succinamic acid)
【化３２】
2009536179.tif 000033
１-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-４,９-ジオキサ-１２-ドデカンアミン(５．０ｇ、１６．４５ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(３０ｍＬ)に溶解させ、アセトニトリル(１０ｍＬ)に無水コハク酸(１．８１ｇ、１８．１ｍｍｏｌ)が入ったものを添加し、混合物を６０℃で４時間加熱し、続いて室温で一晩攪拌した。
混合物を蒸発乾固させ、ＥｔＡｃ(５０ｍｌ)を添加した。
ＥｔＡｃ相をＨＣｌ(０．１Ｍ)で３回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、続いて、有機相を蒸発乾固させたところ、５．８６ｇ(８８％)の高粘度の油が得られた。
ＬＣＭＳ：Ｒｔ２．８６分；ｍ／ｚ(Ｍ＋１)４０５。算出値：４０５。
この生成物はさらなる精製をすることなく使用された。
【０１９９】
工程２：オクタン二酸-tert-ブチルエステル-２,５-ジオキソ-ピロリジン-１-イルエステル
【化３３】
2009536179.tif 000034
オクタン二酸-モノ-tert-ブチルエステル(３．１４ｇ、１３．６３ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(１００ｍＬ)に溶解させた。ＴＳＴＵ(４．９ｇ、１６．３ｍｍｏｌ)を添加し、ＤＩＰＥＡ(２．８５ｍＬ)を用いて、ｐＨを８．５に調節した。
混合物を窒素下で一晩攪拌し、蒸発乾固させ、ＥｔＡｃ(５０ｍＬ)に溶解させ、続いて、ＨＣＬ(０．１Ｍ)を用いて２回抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発させたところ、わずかに黄色がかった油(５ｇ、少量の溶媒を含有)が得られた。
ＬＣＭＳ：Ｒｔ６．５６分；ｍ／ｚ(Ｍ＋１)３２８。算出値：３２８。
【０２００】
工程３：７-(３-{４-[３-(３-カルボキシプロピオニルアミノ)プロポキシ]ブトキシ}プロピルカルバモイル)ヘプタン酸-tert-ブチルエステル
【化３４】
2009536179.tif 000035
Ｎ-{３-[４-(３-tert-ブトキシカルボニルアミノプロポキシ)-ブトキシ]-プロピル}スクシンアミド酸(４．６０ｇ、１１．３７ｍｍｏｌ)を、室温で６０分、ＴＦＡ(２０ｍＬ)と共に攪拌し、蒸発後、残留物をＤＣＭ(３０ｍＬｘ２)を用いて揮散させ、蒸発乾固させた。
得られた油をアセトニトリル(３０ｍＬ)に溶解させ、ＤＭＦ(２０ｍＬ)にオクタン二酸-tert-ブチルエステル-２,５-ジオキソ-ピロリジン-１-イルエステル(４．４６ｇ、１３．６ｍｍｏｌ)が入ったものを添加した。
ＤＩＰＥＡを用いて、ｐＨを８．５に調節し、混合物を窒素下で一晩攪拌した。続いて、混合物を蒸発乾固させ、ＥｔＯＡｃ(５０ｍＬ)に再溶解させた。ＥｔＯＡｃ相をＨＣｌ(０．１Ｍ)で３回抽出し、有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、蒸発させたところ、わずかに黄色がかった結晶性油(６．５ｇ、溶媒残留物を含有)が得られた。
ＬＣＭＳ：Ｒｔ４．３１分；ｍ／ｚ(Ｍ＋１)５１７。算出値：５１７。
粗生成物はさらなる精製をすることなく、さらなる反応に使用された。
【０２０１】
工程４：７-[３-(４-{３-[３-((Ｓ)-１-カルバモイル-３-カルボキシプロピルカルバモイル)プロピオニルアミノ]プロポキシ}ブトキシ)プロピルカルバモイル]ヘプタン酸-tert-ブチルエステル
【化３５】
2009536179.tif 000036
７-(３-{４-[３-(３-カルボキシプロピオニルアミノ)プロポキシ]ブトキシ}プロピルカルバモイル)ヘプタン酸-tert-ブチルエステル(２．４ｇ)、工程３の粗生成物を、ＴＨＦ(６０ｍＬ)に溶解させ、ＴＳＴＵ(２，１１ｇ、６．９７ｍｍｏｌ)をＤＭＦ(１０ｍＬ)と共に添加し、ＤＩＰＥＡ(０．８ｍＬ)を用いて、ｐＨを８．２に調節した。混合物を窒素下で一晩攪拌した。
混合物を蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃに溶解させ、ＨＣｌ(０．１Ｍ)で３回抽出した、有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、濾液を蒸発させたところ、３．２ｇの油が付与された。
ＬＣＭＳ：Ｒｔ４．５７分；ｍ／ｚ６１４、活性化酸に相当。
【０２０２】
この粗生成物をアセトニトリル(４０ｍＬ)に溶解させ、Ｌ-グルタミン酸アミド(０．６ｇ、４．１ｍｍｏｌ)をＤＭＦ(５ｍＬ)と共に添加し、ＤＩＰＥＡ(１．４ｍＬ)を用いて、ｐＨを８．２に調節した。
混合物を室温で一晩攪拌し；濾過し、続いて蒸発させたところ、高粘度の黄色の油が得られた。
これを、上で報告されたように、ＥｔＯＡｃとＨＣｌ(０．１Ｍ)の間で抽出し、得られたものでＥｔＯＡｃ相を乾燥させたところ、蒸発して１．６６ｇの粗生成物が得られた。
ＬＣＭＳ：Ｒｔ３．６２分；ｍ／ｚ(Ｍ＋１)６４５。Ｃ１８カラム(Jones,Kromasil RP18 5μm 15x225mm)における溶離液として、アセトニトリル／水／０．１％のＴＦＡを使用した、調製用ＨＰＬＣにより、粗生成物を精製した。勾配：０．０-１０．０分、３５％のアセトニトリルＡ；１０．０-３０．０分、３５−９０％Ａ；１６-１８分のフラクションにおける生成物を収集した。組合せたフラクションを蒸発させたところ、所望の生成物(１．０ｇ)が生じた。ＬＣＭＳ：Ｒｔ３．５９分；ｍ／ｚ(Ｍ＋１)６４５、算出値；６４５。
【０２０３】
工程５：ＮεＢ２９-(３-(３-{４-[３-(７-カルボキシヘプタノイルアミノ)プロポキシ]ブトキシ}プロピルカルバモイル)プロピオニル-γ-Ｌ-グルタミルアミド)ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン
工程４の７-[３-(４-{３-[３-((Ｓ)-１-カルバモイル-３-カルボキシプロピルカルバモイル)プロピオニルアミノ]プロポキシ}ブトキシ)-プロピルカルバモイル]ヘプタン酸-tert-ブチルエステル(１．０ｇ、１．５５ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(２０ｍＬ)に溶解させ、ＴＳＴＵ(０．５１ｇ、１．７ｍｍｏｌ)を添加し、ＤＩＰＥＡ(０．２７ｍＬ)を用いて、ｐＨを＞８に調節した。
混合物を窒素下で一晩攪拌した。蒸発させ、ＥｔＯＡｃ及びＨＣｌ(０．１Ｍ)の間で抽出し、有機相(ＭｇＳＯ４)を乾燥させ、続いて蒸発乾固させたところ、２１ｍｇの油が付与された。ＬＣＭＳ：Ｒｔ４．３４分、ｍ／ｚ７４２。
この粗生成物をアセトニトリル(１０ｍＬ)に溶解させ、Ｎａ２ＣＯ３(０．１Ｍ)を用いて、ｐＨを８に調節し、Ｎａ２ＣＯ３溶液(１５ｍＬ、ｐＨ１０．２)に溶解させたｄｅｓＢ３０ヒトインスリン(１ｇ)の溶液に添加した。
混合物を、窒素下、室温で１時間攪拌した。ついで、ＨＣｌ(２Ｍ)によりｐＨを５．４に調節することで、沈殿が生じた。混合物を濾過し、濾液を凍結乾燥し、沈殿物を真空下で一晩乾燥させた。Ｃ１８カラム(Jones, Kromasil RP18 5μm 15x225mm)における溶離液として、アセトニトリル／水／０．１％のＴＦＡを使用するＧｉｌｓｏｎにて、双方のフラクションを精製した。
勾配：０．０-５．０分、３５％のアセトニトリル(Ａ)；５．０-２５．０分、３５-９０％のＡ；生成物を１２-１５分のフラクションから収集した。組合せたフラクションを蒸発させ、水に再溶解させ、凍結乾燥したところ、２７ｍｇの所望の生成物が生じた。
ＬＣＭＳ：Ｒｔ７．７６分、ｍ／ｚ１５７０。
ＭＡＬＤＩ-ＭＳ(シンナピン酸(sinnapinic acid))：６２７７；Ｃ２８０Ｈ４２２Ｎ６８Ｏ８４Ｓ６は６２７７必要。
【０２０４】
実施例１２
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-トリデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化３６】
2009536179.tif 000037
この化合物を、実施例１と同様にして、テトラデカン二酸及びγ-アミノ-酪酸から調製した。
ＬＣＭＳ  ６０３２．１、Ｃ２７１Ｈ４０７Ｎ６５Ｏ７９Ｓ６は６０３２．０必要。
【０２０５】
実施例１３
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-ウンデカノイル-δ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化３７】
2009536179.tif 000038
この化合物を、実施例１と同様にして、ドデカン二酸及びγ-アミノ-酪酸から調製した。
ＬＣＭＳ  ６００３．８、Ｃ２６９Ｈ４０３Ｎ６５Ｏ７９Ｓ６は６００４．０必要。
【０２０６】
実施例１４
ＮεＢ２９-ω-カルボキシ-テトラデカノイル-γ-アミノ-ブタノイルｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化３８】
2009536179.tif 000039
この化合物を、実施例１と同様にして、ペンタデカン二酸及びγ-アミノ-酪酸から調製した。
ＬＣＭＳ  ６０４５．６、Ｃ２７２Ｈ４０９Ｎ６５Ｏ７９Ｓ６は６０４６．１必要。
【０２０７】
実施例１５
ＮεＢ２９-{４-[１０-(４-カルボキシ-フェノキシ)-デカノイルアミノ]-ブチリル}ｄｅｓＢ３０インスリンの合成
【化３９】
2009536179.tif 000040
この化合物を、実施例９及び１０と同様にして、４-(９-メトキシカルボニルノニルオキシ)安息香酸-tert-ブチルエステルから調製した。
ＬＣＭＳ：６０９５．６、Ｃ２７６Ｈ４０９Ｎ６５Ｏ７９Ｓ６は６０９４．１必要。
【０２０８】
実施例１６
ＮεＢ２９-{４-[(１４-カルボキシ-テトラデカノイルアミノ)-メチル]-ベンゾイル}ｄｅｓＢ３０インスリンの合成
【化４０】
2009536179.tif 000041
この化合物を、実施例１と同様にして、４-アミノメチル安息香酸から調製した。
ＬＣＭＳ：６０８２．０、Ｃ２７５Ｈ４０６Ｎ６６Ｏ８１Ｓ６は６０８２．１必要。
【０２０９】
実施例１７
ＮεＢ２９-[１６-(４-カルボキシ-フェノキシ)-ヘキサデカノイル]ｄｅｓＢ３０インスリンの合成
【化４１】
2009536179.tif 000042
工程１：１６-ブロモヘキサデカン酸メチルエステル
１６-ブロモヘキサデカン酸(６ｇ、１７．９ｍｍｏｌ)を、メタノール(３５ｍＬ)、トルエン(１００ｍＬ)及びトリメチルオルトホルマート(２０ｍＬ)に溶解させた。Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ１５を添加し、混合物を、窒素下、５５℃で１６時間攪拌した。混合物を濃縮し、メタノール(約５０ｍＬ)及びＤＣＭ(３０ｍＬ)に溶解させた。樹脂を濾過し、濾液を濃縮した。メタノールを用いて、容量を約４０ｍＬに増加させた。生成した結晶を冷却し、濾過し、冷メタノールで洗浄し、乾燥させたところ、白色の結晶(５．６１ｇ、収率９０％)が生じた。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＤＭＳＯ、３００ＭＨｚ)３．５７(ｓ，３Ｈ)、３．５２(ｔ，２Ｈ)、２．２８(ｔ，２Ｈ)、１．７８(ｍ，２Ｈ)、１．５０(ｍ，２Ｈ)、１．３７(ｍ，２Ｈ)。
残りの工程を、実施例９と同様に実施した。
ＬＣＭＳ：６０８１．２、Ｃ２７６Ｈ４１０Ｎ６４Ｏ７９Ｓ６は６０８１．１必要。
【０２１０】
実施例１８
ＮεＢ２９-{４-[(１５-カルボキシペンタデカノイルアミノ)ベンゾイル]-ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの合成
【化４２】
2009536179.tif 000043
工程１：４-(１５-tert-ブトキシカルボニルペンタデカノイルアミノ)-安息香酸
モノ-tert-ブチルヘキサデカンジオアート-ヘキサデカ二酸(４００ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ)をＮＭＰ(６ｍｌ)に溶解させた。１-(３-ジメチルアミノプロピル)-３-エチルカルボジイミドヒドロクロリド(２２３ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ)及び１-ヒドロキシ-７-アザベンゾトリアゾール(１５６ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ)を添加し、混合物を摂氏５０度で９０分加熱した。４-アミノ安息香酸(３２０ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ)及びＤＩＥＡ(０．６ｍＬ、３．５１ｍｍｏｌ)を添加し、混合物を窒素流下で一晩攪拌した。混合物を移し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液(５０ｍＬ)とジエチルエーテル(１００ｍＬ)の間に分離させた。ＮａＨＳＯ４(５０ｍＬ、水に１０％)を添加し、有機相を単離し、乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、溶媒を真空で除去した。粗生成物をエタノールから再結晶させたところ、４-(１５-tert-ブトキシカルボニルペンタデカノイルアミノ)-安息香酸が得られた。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＤＭＳＯ-ｄ６)δ：１０．１８(ｓ，１Ｈ)、７．８７(ｄ，２Ｈ)、７．６９(ｄ，２Ｈ)、２．３３(ｔ，２Ｈ)、２．１５(ｔ，２Ｈ)、１．５８(ｔ，２Ｈ)、１．４６(ｔ，２Ｈ)、１．３８(ｓ，９Ｈ)ｍ  １．３１-１．２０(ｍ，２０Ｈ)。
【０２１１】
工程２：４-(１５-tert-ブトキシカルボニル-ペンタデカノイルアミノ)-安息香酸-２,５-ジオキソ-ピロリジン-１-イルエステル
４-(１５-tert-ブトキシカルボニルペンタデカノイルアミノ)-安息香酸(２９ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ)を、上述にて記載したようにして、ＴＳＴＵを用いてスクシンイミジルエステルに転換させた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ、ｍ／ｚ＝５５９(Ｍ＋２３，Ｍ＋Ｎａ)。
【０２１２】
工程３：ＮεＢ２９-{４-[(１５-カルボキシペンタデカノイルアミノ)ベンゾイル]-ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン
ＤｅｓＢ３０ヒトインスリン(３５５ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ)をＤＭＳＯ(３．５ｍＬ)に溶解させ、トリエチルアミン(０．６２２ｍｍｏｌ，０．０８７ｍＬ)を添加した。４-(１５-tert-ブトキシカルボニル-ペンタデカノイルアミノ)-安息香酸-２,５-ジオキソ-ピロリジン-１-イルエステル(２８．３ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ)をＤＭＳＯ(０．５ｍＬ及び追加)に溶解させた。混合物を注意深く室温で３０分攪拌した。氷浴を用いて冷却することによって、混合物を凍結させ、水(７ｍＬ)を添加し、凍結した混合物が溶解するまで、混合物を室温で放置した。１ＮのＨＣｌを使用し、ｐＨをｐＨ＝５．３に調節し、沈殿物を遠心分離により単離し、水で１回洗浄して、続いて遠心分離した。トリフルオロ酢酸(１５ｍＬ)を添加し、混合物を３０分攪拌し、氷浴で冷却しつつ、ジエチルエーテル(５０ｍＬ)に注いだ。粗生成物を遠心分離により単離し、１０ｍＭのＴＲＩＳ＋１５ｍＭの(ＮＨ４)２ＳＯ４が２０％のＥｔＯＨに入ったもの、ｐＨ７．３に溶解させ、逆相ＨＰＬＣを使用するＡＫＴＡ精製器、Ｊｕｐｉｔｅｒ  ５２６９、Ｃ４  ２５０／２０ｍｍ、１５μＭ、３００Åにおいて精製した。バッファーは、Ａ-バッファー、１０ｍＭのＴＲＩＳ＋１５ｍＭの(ＮＨ４)２ＳＯ４が２０％のＥｔＯＨに入ったもの、ｐＨ７．３、及びＢ-バッファー、８０％のＥｔＯＨからなる。生成物を、勾配１５-６０％のＢを用い、８ｍｌ／分で溶出させた。生成物を含有するフラクションを収集し、ｐＨをｐＨ＝５．２に調節した。ＮεＢ２９-{４-[(１５-カルボキシペンタデカノイルアミノ)ベンゾイル]-ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンを、遠心分離により単離し、凍結乾燥した。
ＬＣＭＳ：６０９２．０、Ｃ２７６Ｈ４０９Ｎ６５Ｏ７９Ｓ６は６０９４．１必要。
【０２１３】
実施例１９
ＮεＢ２９-{４-[(１５-カルボキシ-ペンタデカノイルアミノ)-メチル]-ベンゾイル}-ｄｅｓＢ３０インスリンの合成
【化４３】
2009536179.tif 000044
工程１：４-[(１５-tert-ブトキシカルボニルペンタデカノイルアミノ)メチル]安息香酸
ヘキサデカン二酸-tert-ブチルエステル-２,５-ジオキソ-ピロリジン-１-イルエステル(３７０ｍｇ、０．８４２ｍｍｏｌ)をＮＭＰ(８ｍＬ)に溶解させ、４-アミノメチル安息香酸(１２７．２ｍｇ、０．８４２ｍｍｏｌ)を添加し、混合物を室温で一晩攪拌し、続いて、摂氏５０度で２時間加熱した。室温まで冷却した後、混合物を水に注いだ。生成物を濾過により単離し、乾燥させ、任意のさらなる精製をすることなく次の工程で使用した。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＤＭＳＯ-ｄ６)(選択シグナル)δ：７．８８(ｄ，２Ｈ)、７．３４(ｄ，２Ｈ)、４．３１(ｄ，２Ｈ)、２．１５(ｍ，４Ｈ)、１．４７(ｍ，４Ｈ)、１．３８(ｓ，９Ｈ)、１．２３(ｂｒ ｓ，２Ｈ)、１．３８(ｓ，９Ｈ)。
ＨＰＬＣ-ＭＳ：ｍ／ｚ＝４９８(Ｍ＋Ｎａ)。
【０２１４】
工程２：ＮεＢ２９-{４-[(１５-カルボキシ-ペンタデカノイルアミノ)-メチル]-ベンゾイル}-ｄｅｓＢ３０インスリン
４-[(１５-tert-ブトキシカルボニルペンタデカノイルアミノ)メチル]安息香酸をスクシンイミジルエステルに転換させ、上述にて記載したようにして、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンと反応させた。逆相ＨＰＬＣを使用するＡＫＴＡ精製器、Ｊｕｐｉｔｅｒ  ５２６９、Ｃ４  ２５０／２０ｍｍ、１５μＭ、３００Åにおいて、生成物を精製した。バッファーは、Ａ-バッファー、１０ｍＭのＴＲＩＳ＋１５ｍＭの(ＮＨ４)２ＳＯ４が２０％のＥｔＯＨに入ったもの、ｐＨ７．３、及びＢ-バッファー、８０％のＥｔＯＨからなる。生成物を、勾配１５-６０％のＢを用い、８ｍｌ／分で溶出させた。続いて、０．１％のＴＦＡを含有する、アセトニトリル／水の３６-４２％勾配を使用して、Ｗａｔｅｒｓ Ｐｒｅｐ ＬＣ２０００、Ｃ１８、５ｃｍｘ２０ｃｍ、流速２０ｍｌ／分におけるＲＰ-ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有するフラクションを収集し、凍結乾燥した。凍結乾燥した物質に水(７．２ｍＬ)を添加し、１Ｎ＋０．１ＮのＮａＯＨを用いて、ｐＨを８．９８に調節した。０．１ＮのＨＣｌを用いて、ｐＨを５．２-５．５に戻した。生成物を沈殿させ、遠心分離により単離し、凍結乾燥したところ、表題の化合物が得られた。
ＬＣＭＳ  ６１０８．０、Ｃ２７７Ｈ４１１Ｎ６５Ｏ７９Ｓ６  ６１０８．１。
【０２１５】
実施例２０：
長時間作用する及び短時間作用するインスリンの疎水性度、アルブミン親和性、自己結合特性及び混合性(mixability)
本発明のインスリン誘導体の自己結合特性の分析
大きいが可溶性の錯体における自己結合性についての、本発明のインスリン誘導体の能力を、ＳＥＣ(サイズ排除クロマトグラフィー)を使用して分析する：
カラム：SuperoseＴＭ ６ ＰＣ ３．２／３０、ＣＶ＝２．４ｍｌ
(Amerham Biosciences)
温度：３７℃
ＳＥＣバッファー：１４０ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＴｒｉｓＨＣｌ、０．０１％の                    ＮａＮ３、ｐＨ７．５
注入容量：２０μｌ
流量：０．０５ｍｌ／分
実施時間：６０分及び追加の１００分の平衡
【０２１６】
この分析用の本発明のインスリン誘導体は、０．６ｍＭの誘導体、２．１Ｚｎ２＋／六量体、１６ｍＭのフェノール、７ｍＭのホスファート、ｐＨ７．８からなる溶液である。ついで、誘導体の保持時間を、次の標準分子の保持時間と比較する：ブルーデキストラン(＞５ＭＤａ、ＫＡＶ０．０)、チログロブリン(６６９ｋＤａ、ＫＡＶ０．２８)、フェリチン(４４０ｋＤａ、ＫＡＶ０．３９)、オボアルブミン(４４．５ｋＤａ、ＫＡＶ０．５６)、リボヌクレアーゼ(１３．７ｋＤａ、ＫＡＶ０．６９)、第２の参照のアルブミン(６６ｋＤａ、ＫＡＶ０．５３)、Ｃｏ(ＩＩＩ)インスリン-六量体(３５ｋＤａ、ＫＡＶ０．６１)、及び単量体インスリンＸ２(６ｋＤａ、ＫＡＶ０．７３)。
【０２１７】
次の等式を使用し、誘導体についてのＫＡＶを決定する：
ＫＡＶ＝(ｔ−ｔ０)／(Ｖｔ／(ｆ＋ｔｄ−ｔ０))
ここで、ｔは付与されるピークに対する保持時間であり、ｔ０はブルーデキストランに対する保持時間であり、Ｖｔは全カラム容量(ここでは２．４ｍｌ)であり、ｆは流量(ここでは０．０４ｍｌ／分)であり、及びｔｄは、システムにおいてカラムのないブルーデキストランに対する保持時間である。
ＫＡＶ値は誘導体の自己結合性の度合いを示し、すなわち、Ｃｏ(ＩＩＩ)六量体及びＸ２インスリンモノマーに対するＫａｖに類似して大きなＫＡＶであることは、大きな自己結合性錯体を形成するための誘導体の傾向が低いか又は無いことを示し、これに対し、ＫＡＶが０に近い程非常に小さいか又は負であるということは、大きな溶解性錯体において自己結合する誘導体の傾向が大きいことを示す。
【０２１８】
本発明のインスリン誘導体における疎水性度データ
ヒトインスリンに対する、本発明のインスリン誘導体の疎水性度(疎水性指標)、ｋ'ｒｅｌを、溶離液としてＡ）１０％のアセトニトリルを含有する０．１Ｍのリン酸ナトリウムバッファー、ｐＨ７．３、及びＢ）水に５０％のアセトニトリルが入ったものの混合物を使用し、４０℃で定組成溶離させることにより、ＬｉＣｈｒｏｓｏｒｂ  ＲＰ１８(５μｍ、２５０ｘ４ｍｍ)ＨＰＬＣカラムにおいて測定した。２１４ｎｍでの溶出液のＵＶ吸収度を追跡することにより、溶出をモニターした。ボイド時間、ｔ０を０．１ｍＭの硝酸ナトリウムを注入することにより見出した。ヒトインスリンについての保持時間ｔヒトを、Ａ及びＢ溶液の間の比率を変えることにより、少なくとも２ｔ０に調節した。ｋ'ｒｅｌ＝(ｔ誘導体ｄ−ｔ０)／(ｔヒト−ｔ０)。本発明の多くのインスリン誘導体について見出されたｋ'ｒｅｌを、表１にまとめる。
【０２１９】
ヒト血清アルブミン親和アッセイ
Minileak粒子に固定したヒト血清アルブミンに対する１２５Ｉ-ＴｙｒＡ１４-アナログの相対結合定数を２３℃で測定した(生理食塩水バッファーにおいてデテミル＝１)。
【０２２０】
インスリン混合物のサイズ排除クロマトグラフィーにより分析された長時間作用する及び短時間作用するインスリンの混合性
ＳＥＣ：ＳＥＣ(上述にて記載)からフラクションを収集し、それぞれ高分子量フラクション(フラクション２、ＭＷ＞ＨＳＡ)及び低分子量フラクション(フラクション３、ＭＷ＝ＨＳＡ)における、長時間作用する及び速攻で作用するインスリンの存在性をＨＰＬＣにより定量することで測定して、インスリンアスパルト(３Ｚｎ／６インスリン、グリセロール１．６％、１６ｍＭのフェノール、及び１６ｍＭのｍ-クレゾール、１０ｍＭの塩化ナトリウム、７ｍＭのホスファート、ｐＨ７．４)と長時間作用するインスリン(２．１又は６Ｚｎ／６インスリン)の混合性、３０／７０。
４つのフラクションを１６分遅れのサイズで収集し、そのフラクション２[１６-３２分](ピーク１)はアルブミンより大きな会合型(３２分はＫＡＶ０．４６に相当)を含有し、フラクション３(ピーク２)はインスリンのジヘキサマー、六量体、二量体及び単量体を含有する。
ＨＰＬＣ：Ｚｏｒｂａｘ Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ-Ｃ１８ ２．１*１５ｍｍ(１．８μｍ)における逆相クロマトグラフィー、次のものを用いた勾配溶出、バッファーＡ：０．２Ｍの硫酸ナトリウム、０．０４Ｍのリン酸ナトリウム、１０％のアセトニトリル、ｐＨ７．２、及びバッファーＢ：７０％のアセトニトリル、３０℃、１９−３４％のＢ、４．５分、直線状、５分で突然開始、操作時間７分、流速０．５ｍｌ／分、注入容量１４μＬ、及び双方のアナログについて、６０９μＭのインスリンアスパルト参照を使用し、２７６ｎｍでＵＶ検出。
【０２２１】
【表１】
2009536179.tif 000045
表の説明：
ヒトインスリンに対する疎水性度：ｋ'ｒｅｌ＜１：＋＋＋、１-１０：＋＋、＞１０：＋(ＨＩ＝１)
ヒトインスリンに対するインスリンレセプター親和性：＜５％：＋、５-５０％：＋＋、＞５０％：＋＋＋
インスリンデテミルに対するヒト血清アルブミン親和性：＜０．５：＋、０．５-２：＋＋、＞２：＋＋＋
自己結合性：ＫＡＶ＜０．１：＋＋＋、ＫＡＶ＜０．５５：＋＋及びＫＡＶ≧０．５５：＋
ヒト血清アルブミンに対してＫＡＶ＝０．５５、ヒトインスリンＣｏ(ＩＩＩ)六量体に対してＫＡＶ＝０．６３、単量体インスリンアナログＸ２に対してＫＡＶ＝０．７２。
ｎ.ａ.＝分析せず。
【０２２２】
実施例２１：
ブタにインスリン調製物を皮下投与した後の正常血糖グルコースクランプ
メスのブタ、６０-９０ｋｇ、１８時間絶食させた。実験中、ブタは、その檻中で自由に移動する。多くの場合、２つの貯蔵部に分割された用量サイズに応じて、インスリン用量を皮下投与する。２０％のグルコース溶液の静脈注射の速度を変えることによって、２４時間までに、各ブタでの個々の空腹時血糖値を正常血糖に保持する。注入は、頸静脈に挿入されたカテーテルを介してなされる。血漿グルコースを頻繁にモニタリングする間に観察される、血漿グルコース濃度の変化に応じて、経験的に、グルコース注入の必要性が調節される。１５-３０分毎に、ＥＤＴＡガラスチューブに血液サンプルを収集し、グルコース及びインスリン測定用に血漿を分離した。ＹＳＩ(Yellow Springs Instruments)グルコース分析器(グルコースオキシダーゼ法)を用い、サンプリングした血液について１５分内にグルコース測定した。平均グルコース注入速度(ＧＩＲ)プロファイル及び平均血漿インスリンプロファイルを、各インスリン調製物用に作製する(図２-４は平均±ＳＥＭを示す)。
【０２２３】
薬理学的方法
アッセイ(Ｉ)
本発明のインスリンのインスリンレセプター結合性
ヒトインスリンレセプターに対する本発明のインスリンアナログの親和性を、ＳＰＡアッセイ(シンチレーション近接アッセイ)マイクロタイタープレート抗体捕捉アッセイにより測定した。ＳＰＡ-ＰＶＴ抗体-結合ビーズ、抗マウス試薬(Amersham Biosciences、カタログ番号 PRNQ0017)を、２５ｍｌの結合バッファー(１００ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．８；１００ｍＭの塩化ナトリウム、１０ｍＭのＭｇＳＯ４、０．０２５％のトゥイーン(Tween)-２０)と混合した。単一のPackard Optiplate(Packard No.6005190)用の試薬混合物は、２．４μｌの１：１５０００に希釈された精製組換えヒトインスリンレセプター−エクソン１１、１００μｌの試薬混合物当たり５０００ｃｐｍに相当するＡ１４Ｔｙｒ[１２５Ｉ]-ヒトインスリンの所定量の保存溶液、１２μｌの１：１０００に希釈されたＦ１２抗体、３ｍｌのＳＰＡ-ビーズ、及び全体を１２ｍｌにする結合バッファーからなる。ついで、全体で１００μｌ添加し、希釈群を適切なサンプルから作製する。ついで、希釈群に１００μｌの試薬混合物を加え、ゆっくりと振盪させつつ、サンプルを１６時間インキュベートした。ついで、１分間遠心分離することにより相分離させ、プレートをトップカウンターで計測した。GraphPad Prism 2.01(GraphPad Software, San Diego、CA)における非線状回帰アルゴリズムを使用し、結合データを適合させた。
【０２２４】
アッセイ(ＩＩ)
ヒトインスリンに対する本発明のインスリン誘導体の効力
実験日、２３８-３８３ｇでオスのスプラーグドーリーラットを、クランプ実験に使用した。制御された周囲条件下、ラットは餌に自由に接近し、クランプ実験の前には一晩(３ｐｍから)、絶食させた。
【０２２５】
実験プロトコル：
外科手順の少なくとも１週間前に、ラットを動物施設に慣れさせた。クランプ実験の約１週間前、ハロタン麻酔下で、頸静脈(注入のため)及び頸動脈(血液のサンプリングのため)にタイゴンカテーテルを挿入し、露出させ、頸部の後ろに固定した。外科手術後、ラットをStreptocilin vet.(Boehringer Ingelheim；０．１５ｍｌ／ラット、筋肉内)に付与し、回復期間中、動物ケアユニット(２５℃)においた。無痛覚とするために、麻酔中にアノルフィン(Anorphin)(０．０６ｍｇ／ラット、皮下)を投与し、麻酔から十分に回復した(２-３時間)後、再度２日に１回、リマダイル(Rimadyl)(１．５ｍｇ／ｋｇ、皮下)を投与した。
【０２２６】
使用したクランプ技術を、(１)実験日の７ａｍに一晩(前日の３ｐｍから)絶食させたラットを計量し、サンプリング用シリンジ及び注入システム(Harvard 22 Basic pumps，Harvard，及びPerfectum Ｈypodermicｇlass syringe，Aldrich)につなぎ、ついで個々のクランプ用ゲージに配し、実験開始前の約４５分、そこで休ませた。全実験中、それらの通常の寝具上を、ラットは自由に動くことができ、水飲み場に自由に接近することもできる。血漿血糖値を１０分間隔で測定する、３０分の基本期間後、試験されるインスリン誘導体及びヒトインスリン(ラット当たり１回の投与レベル、投与レベル当たりｎ＝６-７)を、３００分、一定の速度で注入した(静脈内)。１０分の間隔中、血漿血糖値を測定し、正常血糖を維持するために、２０％水性グルコースの注入を調節した。再懸濁させた赤血球のサンプルを各ラットからプールし、頸動脈カテーテルを介して、約１／２ｍｌ容量を戻した。
【０２２７】
各実験日において、試験される個々のインスリン誘導体溶液及びヒトインスリン溶液のサンプルを、クランプ実験の前及び終了時に取り出し、ペプチド濃度をＨＰＬＣにより確認した。ラットインスリン及びＣ-ペプチド、並びに試験されるインスリン誘導体及びヒトインスリンの血漿濃度を、研究の前及び終了の時点で測定した。ペントバルビタール過剰投与を使用し、実験の終了時にラットを殺した。
【０２２８】
被験化合物及び用量：
試験されるインスリンを、５ｍＭのホスファート、ｐＨ７．７に９７μＭのインスリン誘導体を含有する保管溶液から希釈する。使用準備が整った溶液中の最終濃度は、０．４５μＭのインスリン誘導体、５ｍＭのホスファート、１００ｍＭの塩化ナトリウム、０．００７％のポリソルバート(polysorbate)２０である。ｐＨは７．７であり、静脈内注入速度は１５及び２０ｐｍｏｌｘ分−１×ｋｇ-１であった。
参照化合物として使用されるヒトインスリンの保管溶液を、類似した媒体で処方し、６、１５又は３０ｐｍｏｌｘ分−１ｘｋｇ-１で静脈内注入した。
双方の保管溶液を−２０℃で保管し、使用前に４℃で一晩解凍した。それらを注入用シリンジに移す１５分前に、溶液を数回、ゆっくりと上下逆さまにする。
【０２２９】
アッセイ(ＩＩＩ)
本発明のインスリン誘導体のＴ５０％のブタにおける定量
Ｔ５０％は、試験されるインスリンのＡ１４Ｔｙｒ[１２５Ｉ]標識された誘導体の注射量の５０％が、外部γ計測器を用いて測定して、注射部位から消失した時間である。
実験用動物ケアの原則に従い、薬物動態及び薬力学的研究のために、特定の病原菌を持たないＬＹＹＤ、糖尿病ではないメスのブタ、デンマーク在来種、ヨークシャー及びデュロックの交雑種を使用した(Holmenlund, Haarloev, Denmark)。ブタは意識があり、４-５ヶ月の年齢、７０-９５ｋｇの体重であった。実験前に動物を１８時間、一晩絶食させた。
１２５Ｉを有するＴｙｒＡ１４で標識されたインスリン誘導体の処方された調製物を、先に記載したブタに皮下注射した(Ribel, U.,  Jorgensen, K, Brange, J, 及びHenriksen, U. The pig as a model for subcutaneous insulin absorption in man. Serrano-Rios, M and Lefebvre, P. J.  891-896. 1985. Amsterdam; New York; Oxford, Elsevier Science Publishers. 1985 (Conference Proceeding))。
【０２３０】
実験の開始時に、本発明のインスリン誘導体(被験化合物)６０ｎｍｏｌ用量とインスリンデテミル６０ｎｍｏｌ用量(双方ともＴｙｒ Ａ１４において１２５Ｉ標識された)を、各ブタの頸部の２つの別々の部位に注射する。
皮下注射部位から放射性標識が消失するのを、伝統的な外部ガンマ-計測法の修正法を使用し、モニターする(Ribel, U. Subcutaneous absorption of insulin analogues. Berger, M. 及びGries, F. A. 70-77 (1993). Stuttgart; New York, Georg Thime Verlag (Conference Proceeding))。この修正法を用いると、コードレスポータブル装置を使用して、数日間、皮下沈着物から放射活性が消失するのを連続して測定することができる(Scancys Laboratorieteknik, Varlose, DK-3500, Denmark)。測定を１分間隔で実施し、計測された値をバックグラウンド活性に対して修正する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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