(57)【要約】  本発明は、流体の成分を分離する遠心分離機に用いるのに適当なシステム及び該システム用の容器（２３，２９，３１，３９，４３）及び配管（５３，５７，６５）のセット（２１）に関する。遠心分離中に、容器に設けたピストン（２７，３３，３５，４７）により流体を容器から容器に移動する。ピストンの質量を内部をピストンが移動する容器の断面積で割った比がピストン（２７，３３，３５，４７）毎に異なる。遠心分離中に流体を質量／断面積比の高いピストンの容器から質量／断面積比の低いピストンの容器へ移動することができる。【選択図】      図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
流体をフラクションに加工・分離するシステムにおいて、
分離すべき流体を受けとる流体受容容器（２３）であって、円筒壁（２５）及び断面積ＡＦのボアを有する流体受容容器（２３）と、
分離された流体成分を受けとる第１分離フラクション受容容器（２９）と、
添加剤溶液を貯蔵する第１添加剤収容容器（４３）であって、円筒壁（４５）及び断面積ＡＡのボアを有する第１添加剤収容容器（４３）と、
前記容器（２３，４３）それぞれの長さ方向軸線が遠心分離機（１）の回転中心に向いている状態で、容器（２３，４３）を受け入れかつ保持する少なくとも１つの遠心分離チャンバ（９）を含む遠心分離機（１）と、
前記流体受容容器（２３）と前記第１添加剤収容容器（４３）間に選択的連通を確立する配管（５３）及び弁（７５）と、
前記流体受容容器（２３）と前記第１分離フラクション受容容器（２９）間に選択的連通を確立する配管（５７，６５）及び少なくとも１つの弁（７７，８１）と、
前記システムの運転中前記容器（２３，２９，４３）の画像を撮影し、容器の画像を表す信号を生成する撮像手段（１１）と、
前記信号を受けとり解析することができ、さらに前記システムにおける流体の流れを制御するために前記遠心分離機（１）及び前記弁（７５，７７，８１）の作動を制御することができるコントロール手段（１９）とを備え、
前記流体受容容器（２３）には前記円筒壁（２５）と密封接触関係にある質量ＭＦの可動ピストン（２７）が設けられ、前記ピストン（２７）には、前記流体受容容器（２３）の流体受け入れキャビティ（２８）を、前記流体受容容器（２３）と前記第１分離フラクション受容容器（２９）間に選択的連通を確立する配管（５７，６５）及び弁（７７，８１）に連結する貫通通路（５９）が設けられ、
前記第１添加剤収容容器（４３）には前記円筒壁（４５）と密封接触関係にある質量ＭＡの可動ピストン（４７）が設けられ、
前記第１添加剤収容容器（４３）についてのピストン質量ＭＡをボア断面積ＡＡで割った比が前記流体受容容器（２３）についてのピストン質量ＭＦをボア断面積ＡＦで割った比より大きい、
流体をフラクションに加工・分離するシステム。
【請求項２】
さらに、前記第１添加剤収容容器（４３）と前記流体受容容器（２３）の間に流体連通関係に配列された少なくとも１つの他の添加剤収容容器（５１）を備える、請求項１記載のシステム。
【請求項３】
前記他の添加剤収容容器（５１）の少なくとも１つにミキサ（５２）が設けられている、請求項２記載のシステム。
【請求項４】
さらに、流体受け入れキャビティ（２８）に選択的に連結可能な第２分離フラクション受容容器（４９）を備える、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載のシステム。
【請求項５】
さらに、円筒壁（３３）及び断面積ＡＳのボアを有する分離フラクション清浄化シリンダ（３１）であって、前記シリンダ（３１）は質量ＭＳの可動ピストン（３５）を円筒壁と密封接触関係で収容しており、ピストン（３５）及び前記容器（３１）の基部（３２）間のボアの容積がキャビティ（３４）を形成する、分離フラクション清浄化シリンダ（３１）と、
円筒壁（３９）及び断面積ＡＢのボアを有する洗浄バッファ収容容器（３７）であって、前記容器（３７）は質量ＭＢの可動ピストン（４１）を円筒壁（３９）と密封接触関係で収容しており、ピストン（４１）及び前記容器（３７）の基部（３８）間のボアの容積がキャビティ（４０）を形成する、洗浄バッファ収容容器（３７）とを備え、
前記洗浄バッファ収容容器（３７）についてのピストン質量ＭＢをボア断面積ＡＢで割った比が前記分離フラクション清浄化シリンダ（３１）についてのピストン質量ＭＳをボア断面積ＡＳで割った比より大きく、
前記流体受容容器（２３）についてのピストン質量ＭＦをボア断面積ＡＦで割った比が前記分離フラクション清浄化シリンダ（３１）についてのピストン質量ＭＳをボア断面積ＡＳで割った比より大きい、
請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載のシステム。
【請求項６】
分離すべき流体を受けとる流体受容容器（２３）であって、円筒壁（２５）及び断面積ＡＦのボアを有する流体受容容器（２３）と、
分離された流体成分を受けとる第１分離フラクション受容容器（２９）と、
前記流体受容容器（２３）と前記第１添加剤収容容器（４３）間に選択的連通を確立する配管（５３）及び弁（７５）と、
前記流体受容容器（２３）と前記第１分離フラクション受容容器（２９）間に選択的連通を確立する配管（５７，６５）及び少なくとも１つの弁（７７，８１）とを備え、
前記流体受容容器（２３）には前記円筒壁（２５）と密封接触関係にある質量ＭＦの可動ピストン（２７）が設けられ、前記ピストン（２７）には、前記流体受容容器（２３）の流体受け入れキャビティ（２８）を、前記流体受容容器（２３）と前記第１分離フラクション受容容器（２９）間に選択的連通を確立する配管（５７，６５）及び弁（７７，８１）に連結する貫通通路（５９）が設けられ、
前記第１添加剤収容容器（４３）には前記円筒壁（４５）と密封接触関係にある質量ＭＡの可動ピストン（４７）が設けられ、
前記第１添加剤収容容器（４３）についてのピストン質量ＭＡをボア断面積ＡＡで割った比が前記流体受容容器（２３）についてのピストン質量ＭＦをボア断面積ＡＦで割った比より大きい、
流体の複数フラクションを収集するセット（２１）。
【請求項７】
さらに、前記第１添加剤収容容器（４３）と前記流体受容容器（２３）の間に流体連通関係に配列された少なくとも１つの他の添加剤収容容器（５１）を備える、請求項６記載のセット。
【請求項８】
前記他の添加剤収容容器（５１）の少なくとも１つにミキサ（５２）が設けられている、請求項６又は請求項７記載のセット。
【請求項９】
さらに、流体受け入れキャビティ（２８）に選択的に連結可能な第２分離フラクション受容容器（４９）を備える、請求項６乃至請求項８のいずれか１項記載のセット。
【請求項１０】
さらに、円筒壁（３３）及び断面積ＡＳのボアを有する分離フラクション清浄化シリンダ（３１）であって、前記シリンダ（３１）は質量ＭＳの可動ピストン（３５）を円筒壁と密封接触関係で収容しており、ピストン（３５）及び前記容器（３１）の基部（３２）間のボアの容積がキャビティ（３４）を形成する、分離フラクション清浄化シリンダ（３１）と、
円筒壁（３９）及び断面積ＡＢのボアを有する洗浄バッファ収容容器（３７）であって、前記容器（３７）は質量ＭＢの可動ピストン（４１）を円筒壁（３９）と密封接触関係で収容しており、ピストン（４１）及び前記容器（３７）の基部（３８）間のボアの容積がキャビティ（４０）を形成する、洗浄バッファ収容容器（３７）とを備え、
前記洗浄バッファ収容容器（３７）についてのピストン質量ＭＢをボア断面積ＡＢで割った比が前記分離フラクション清浄化シリンダ（３１）についてのピストン質量ＭＳをボア断面積ＡＳで割った比より大きく、
前記流体受容容器（２３）についてのピストン質量ＭＦをボア断面積ＡＦで割った比が前記分離フラクション清浄化シリンダ（３１）についてのピストン質量ＭＳをボア断面積ＡＳで割った比より大きい、
請求項６乃至請求項９のいずれか１項記載のセット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、流体中の密度の異なる成分の分離を行うシステム及びセットに関する。
【背景技術】
【０００２】
ある種の流体、特に血液のような生物学的流体は、多数の価値のある及び／又は医学的もしくは薬学的に有用な成分を含有する。このような有価・有用成分を比較的純粋な濃度で効率よく分離し収集することができる方法と装置を求めて多大な努力が払われてきた。血液のサンプルから成分を分離するこの種の方法が米国特許第６７３３４３３号（特許文献１）に開示されている。同特許に記載された生物学的流体の遠心分離システムでは、サンプルを軸線方向に可動なピストンの設けられた可変容積円筒チャンバ内に入れる。シリンダをその長さ方向軸線のまわりに急速回転し、これにより生物学的流体中の諸成分を複数同心リング内の複数フラクションに、密度の最も高いフラクションがチャンバの円周にもっとも近く、密度の最も低いフラクションがチャンバの中心にくるように、分離する。圧縮空気を用いてピストンをチャンバの頂部に向けて移動することにより、異なるフラクションを順次チャンバからチャンバの頂部にある中心開口を通して抜き出すことができる。中心開口は回転シールにより弁、チューブ及び収集バッグを有するシステムに連結されており、異なるフラクションをそれぞれの収集バッグに送ることができる。中心開口から延びているチューブ上の光センサによりチューブ内の吸光度を測定する。コントロール装置は、光検出器からの信号の変化を利用して、異なるフラクションが光センサを通過する時点を判定し、そのフラクションを正しい収集バッグに送るように弁を制御する。
【特許文献１】米国特許第６７３３４３３号明細書
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明によれば、流体、特に生物学的流体を複数フラクションに分離するシステム及びセット、特定すると特許請求の範囲の請求項１に記載の構成要素を有するシステム及び請求項６に記載の構成要素を有するセットが提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００４】
図１は本発明による遠心分離機１を線図的に示す平面図であり、但し当業者に周知の部分は省略してある。遠心分離機は中心回転シャフト５を支持する本体３を有し、複数の、本例では４つの遠心分離チャンバ支持アーム７が中心シャフト５に取り付けられている。各アームはそれぞれの遠心分離チャンバ９を支持する。撮像装置１１、例えばビデオカメラ１３及び高速カメラフラッシュ１５が、中心シャフト５のまわりに回転されるとき遠心分離チャンバ９が通る通路の所定部分の画像を撮影するように配置されている。各遠心分離チャンバ９は、撮像装置１１に面する透明な壁又は窓１７を有する。遠心分離機１は、マイクロプロセッサもしくはコンピュータのようなコントロール装置により制御可能で、コントロール装置により遠心分離機の回転速度を制御するとともに、フラッシュ１５及び弁（後述）を制御し、また撮像装置１１からの画像を制御、加工する。各遠心分離チャンバ９の擬似静止、即ち「スチル」画像を得るために、各遠心分離チャンバ９がカメラ１３の視野内の同一位置を通過するときに遠心分離チャンバ９を照射するように、フラッシュ１５を制御する。コントロール装置９と遠心分離機１、弁、撮像装置１１及びフラッシュ１５との接続はワイヤを介してもよいし、ワイヤレス接続、例えば赤外もしくは無線周波通信による接続でもよいし、その両方でもよい。
【０００５】
図２は、生物学的流体の諸成分を分離し収集するための遠心分離チャンバ９及び容器及び配管のセット２１を線図的に示す。セット２１は、分離すべき生物学的流体を受けとる生物学的流体受容容器２３を備え、容器２３は円筒壁２５及び断面積ＡＦのボアを有し、円筒壁２５と密封接触関係にて質量ＭＦの可動ピストン２７を収納し、ピストン２７及び容器２３の基部５５間のボアの容積が生物学的流体受け入れキャビティ２８を形成し；分離されたフラクションを受けとる第１分離フラクション受容容器２９を備え、容器２９は可変容積の可撓性バッグ又はシリンダの形態であるのが好ましく；所望に応じて、円筒壁３３及び断面積ＡＳのボアを有する分離フラクション清浄化シリンダ３１を備え、シリンダ３１は質量ＭＳの可動ピストン３５を円筒壁３３と密封接触関係で収容しており、ピストン３５及び容器３１の基部３２間のボアの容積が分離フラクション及び洗浄バッファを受け入れるのに十分な容積のキャビティ３４を形成し；所望に応じて、円筒壁３９及び断面積ＡＢのボアを有する洗浄バッファ収容容器３７を備え、容器３７は質量ＭＢの可動ピストン４１を円筒壁３９と密封接触関係で収容しており、ピストン４１及び容器３７の基部３８間のボアの容積が洗浄バッファを収容するキャビティ４０を形成し；円筒壁４５及び断面積ＡＡのボアを有する第１添加剤収容容器４３を備え、容器４３は質量ＭＡの可動ピストン４７を円筒壁４５と密封接触関係で収容しており、ピストン４７及び容器４３の基部４４間のボアの容積が添加剤溶液を貯蔵するキャビティ４８を形成し；さらに第２分離フラクション受容容器４９を備える。所望に応じて、本セット内に第２添加剤収容容器５１が含まれ、下記の通りに配置されている。即ち、第１添加剤収容容器４３から出てくる添加剤が第２添加剤収容容器５１にその一端又は一端近くに位置する入口５０から流入し、第２添加剤収容容器５１の内容物と混合し、混合を所望に応じてミキサ５２により促進し、そして混合した添加剤が第２添加剤収容容器５１からその反対端又は反対端近くに位置する出口５４を通って出て行く。
【０００６】
本セット２１はさらに、第１添加剤収容容器４３の基部４４を（装備した場合には、第２添加剤収容容器５１を介して）流体受容容器２３の基部５５に連結する（好ましくは可撓性の）第１配管５３、並びにピストン２７の通路５９からＴ接合部６１の脚部につながる（好ましくは可撓性の）第２配管５７を備え、Ｔ接合部６１は、第１アーム及び（好ましくは可撓性の）第３配管６３を介して第２分離フラクション受容容器４９に、また第２アーム及び（好ましくは可撓性の）第４配管６５を介して第１分離フラクション受容容器２９に通じている。任意の分離フラクション清浄化シリンダ３１及び任意の洗浄バッファ収容シリンダ３７が存在する場合、それらの基部３２及び３８はそれぞれ枝管６７及び６９により配管６５に連結されている。
【０００７】
遠心分離チャンバ９はキャビティ７１を有し、キャビティ７１には、セット２１をキャビティ７１内に、容器２３，３１，３７，４３の基部が反対端よりも遠心分離機の回転中心から遠くなる所定の配向で、受け入れ、保持するよう構成された凹所７３が予め形成されている。第１遠隔制御弁７５が、配管５３を通る流体流れを通すか阻止できるように配置されている。第２遠隔制御弁７７が、配管５７を通る流体流れを通すか阻止できるように配置されている。第３遠隔制御弁７９が、配管６３を通る流体流れを通すか阻止できるように配置されている。第４遠隔制御弁８１が、配管６５を通る流体流れを通すか阻止できるように配置されている。第５遠隔制御弁８３が、枝管６７を通る流体流れを通すか阻止できるように配置されている。第６遠隔制御弁８５が、枝管６９を通る流体流れを通すか阻止できるように配置されている。
【０００８】
所望容量の生物学的流体を生物学的流体受容容器２３に簡単に導入できるようにするため、好ましくは密封可能な入口ポート８９を有する入口ライン８７をセット２１の任意適当な位置に、例えば弁７５と生物学的流体受容容器２３の間、又は弁７７と生物学的流体受容容器２３の間に設けることができる。
【０００９】
図３〜９は、生物学的流体のサンプルから所定の成分を分離する本発明の方法で、添加剤としての密度勾配媒体９１及び所定成分を洗浄するための洗浄バッファ９３を用いる実施形態における諸工程を示す。この実施形態では、生物学的流体は血液９５であり、密度勾配媒体９１の密度は、血液中のモノヌクレオチド細胞の密度より高く、赤血球の密度より低くなるように選択する。第１添加剤容器４３及び第２添加剤容器５１に密度勾配媒体９１を満たし、洗浄バッファ収容容器３７に洗浄バッファ９３を満たす。図３は、血液のサンプル９５を入口ポート８９及び入口ライン８７から生物学的流体受容容器２３に充填する工程を示す。この充填工程を行うには、ピストン２７を容器２３の基部に配置し、弁７５及び７７を閉じ、血液サンプル９５を入口ポート８９から入口ライン８７に注入する。弁７５及び７７が閉じていると血液サンプルが配管５３及び５７に入ることができず、その結果、血液サンプル９５が導入されるにつれて、ピストン２７が容器２３の基部５５から離れ押し上げられる。血液サンプル９５の容器２３への導入は、セット２１が遠心分離チャンバ９内部にあるとき行ってもよいが、好ましくはセット２１を遠心分離チャンバ９に入れる前に行うことができる。
【００１０】
血液サンプル９５を導入し、（セット２１がまだ遠心分離チャンバ９内に配置されていない場合には）セット２１を遠心分離チャンバ９内に配置した後、セット２１の遠心分離を開始する。コントロール装置によりシャフトを所望の速度で回転させ、次いで密度勾配媒体９１をサンプル９５に添加する。このために弁７５を開く。密度勾配媒体９１を添加剤容器４３から容器２３に移すのにポンプは不要である。それは、可動ピストン４７の質量の容器４３の断面積に対する比がピストン２７の質量の容器２３の断面積に対する比より大きいので、両容器間に生じる差圧が密度勾配媒体９１を容器２３中に押し込むからである。この密度勾配媒体９１の流れは、差圧が等しくなるか、弁７５を閉じるまで続く。密度勾配媒体の流れが終わった後も遠心分離を継続するにつれて、血液サンプルの成分及び密度媒体が、それらの密度に依存する容器２３内のレベルに移動し、図４に示すように個別の層を形成する。この例では、血液サンプル９５が分離されて高密度な赤血球の層１０１を形成しており、その上に密度勾配媒体９１の層がある。モノヌクレオチド細胞の層１０３が密度勾配媒体９１の上にあり、さらに低密度な血漿の層１０５がモノヌクレオチド細胞層１０３の上にくる。
【００１１】
コントロール装置１９には画像処理用のソフトウェアを装備することができ、撮像装置１１からの画像信号を処理することにより、諸成分がほぼ安定な層に分離し終わった時間を同定することができる。ほぼ安定な層が同定されたら（或いは遠心分離の開始から所定の時間が経過した後）、コントロール装置１９は弁７７及び７９を開く指令を出す。これは、遠心分離チャンバ９の回転により発生する力Ａｃｃの元でピストン２７が容器２３の基部に向かって移動するのを許し、このためピストン２７にもっとも近い容器２３中の流体、即ち血漿１０５が通路５９を通って容器２３から出て行く。血漿１０５は配管５７に沿って弁７７を通過し、配管６３に沿って第２分離フラクション受容容器４９に流れる。血漿１０５全部が容器２３から出たら、図５に示すように、モノヌクレオチド細胞１０３が容器２３から通路５９を通って出て行き始める。
【００１２】
コントロール装置１９には、ピストン２７の押しのけ速度を測定し、配管５７の既知の単位長さ当たりの容積を用いることにより、配管５７を通る血漿の流量を計算できるソフトウェアを装備するのが好ましい。コントロール装置は、最後の血漿１０５及び最初のモノヌクレオチド細胞１０３がＴ接合部６１に到達する時間を計算でき、この時点で（もしくはこの時点の直前に）弁７９を閉じ、弁８３を開く指令を出し、モノヌクレオチド細胞１０３が少しでも配管６３に入るおそれを回避することにより、モノヌクレオチド細胞１０３の収量を最大限にすることができる。
【００１３】
本発明の方法のこの実施形態では、分離フラクション受容容器２９内に収集する前に、モノヌクレオチド細胞１０３を清浄化するのが望ましく、したがって、弁７９を閉じたら、弁８１を閉じたままとし、弁８３を開く。これにより、図６に示すように、モノヌクレオチド細胞１０３が配管６５及び枝管６７を経て分離フラクション清浄化容器３１に流れる。ピストン質量の容器３１の断面積に対する比が容器２３の比より小さいので、この流れはポンプの助けなしで起こる。コントロール装置１９には、ピストン２７の押しのけ速度を測定し、配管５７の既知の単位長さ当たりの容積を用いることにより、配管５７を通る密度勾配媒体９１の流量を計算できるソフトウェアを装備するのが好ましい。コントロール装置は、最後のモノヌクレオチド細胞１０３及び最初の密度勾配媒体９１が枝管６７に到達する時間を計算でき、この時点で（もしくはこの時点の直前に）弁７７及び８３を閉じる指令を出し、密度勾配媒体９１が分離フラクション清浄化容器３１への枝管６７に入るのを防止する。
【００１４】
モノヌクレオチド細胞１０３を分離フラクション清浄化容器３１内で清浄化するには、第５遠隔制御弁８３及び第６遠隔操作弁８５を開く。可動ピストン４１の質量の容器３７の断面積に対する比がピストン３５の質量の容器３１の断面積に対する比より大きいので、両容器３１，３７間に生じる差圧が洗浄バッファ９３を容器３７から容器３１中に、平衡に達するまで、押し入れる。洗浄バッファ９３は、モノヌクレオチド血液細胞１０３の密度より小さい特定の密度を有するように選択するのが好ましい。この洗浄バッファ９３の容器３１への流れはモノヌクレオチド細胞１０３を容器３１の基部３１から押し上げ、もしも洗浄バッファ９３の流入速度が十分に高ければ、モノヌクレオチド細胞１０３を洗浄バッファ９３の流入流れ中、基部３２からある距離に懸垂する。図７に示すように、流入する洗浄バッファ９３がモノヌクレオチド細胞１０３の層を通過するので、モノヌクレオチド細胞１０３は懸垂状態に留まり、こうしてモノヌクレオチド細胞１０３を所謂「エルトリエーション」（水簸elutriation）プロセスにて洗浄する。所定の時間後、又は所定容量の洗浄バッファ９３が容器３１に入った後、又はピストン３５が所定の位置に到達したら、弁８３及び８５を閉じる。これにより、図８に示すように、モノヌクレオチド細胞１０３が容器３１の基部に集まる。
【００１５】
モノヌクレオチド細胞１０３を第１分離フラクション受容容器２９に移すには、弁８１及び８３を開く。これにより、図９に示すように、ピストン３５が容器３１の内容物に対して発揮する力が、モノヌクレオチド細胞１０３を枝管６７及び配管６５から弁８１及び８３を経て第１分離フラクション受容容器２９に送りこむように作用する。コントロール装置１９には、ピストン３５の押しのけ速度を測定し、配管６５及び６７の既知の単位長さ当たりの容積を用いることにより、配管６５及び６７を通るモノヌクレオチド細胞１０３の流量を計算できるソフトウェアを装備するのが好ましい。コントロール装置は、最後のモノヌクレオチド細胞１０３及び最初の洗浄バッファ９３が弁８１に到達する時間を計算でき、この時点で（もしくはこの時点の直前に）弁８１及び８３を閉じる指令を出し、洗浄バッファ９３が弁８１から分離フラクション受容容器２９に入るのを防止する。次に遠心分離を停止し、さらなる処理のためにセット２１を遠心分離チャンバ９から外すことができる。
【００１６】
本発明の方法の第２の実施形態では、モノヌクレオチド細胞１０３を清浄化なしで収集するのが望ましい。本発明方法の第２の実施形態は、血漿を第２フラクション受容容器４９に入れ、弁７９を閉じる時点までは、本発明方法の第１の実施形態と同じである（洗浄バッファ収容容器３７に入れた洗浄バッファを用意することがもはや不要であること以外）。弁７９を閉じた後、本発明方法の第２の実施形態では、弁８１を開くと、ピストン２７が容器２３の内容物に対して発揮する力により、モノヌクレオチド細胞１０３が配管６５を経て第１分離フラクション受容容器２９に流れる。すべてのモノヌクレオチド細胞１０３が容器２３から出たら、密度勾配媒体９１が容器２３から通路５９を通って流出し始める。コントロール装置１９には、ピストン２７の押しのけ速度を測定し、配管５７の既知の単位長さ当たりの容積を用いることにより、配管５７を通る密度勾配媒体９１の流量を計算できるソフトウェアを装備するのが好ましい。コントロール装置は、最後のモノヌクレオチド細胞１０３及び最初の密度勾配媒体９１が弁８１に到達する時間を計算でき、この時点で（もしくはこの時点の直前に）弁８１を閉じる指令を出し、密度勾配媒体９１が弁８１を経て第１分離フラクション受容容器２９に入るのを防止する。次に遠心分離を停止し、さらなる処理のためにセット２１を遠心分離チャンバ９から外すことができる。
【００１７】
上述した本発明の実施形態では、１種類の密度勾配媒体だけを使用し、この媒体が密度勾配媒体より大きい密度を有する生物学的サンプルの成分と密度勾配媒体より小さい密度を有する成分との間に層を形成した。しばしば、密度勾配媒体の層により生物学的流体を３つ以上のフラクションに分離するのが望ましく、これには密度勾配媒体の２つ以上の密度を用いる必要がある。これには、密度の異なる２つの密度勾配媒体（元の密度Ａを有する高密度媒体と密度Ｂを有する低密度媒体）を様々な割合で混合して、実質的に連続な勾配の密度勾配媒体（密度がＡからＢまでの範囲にある）を形成するか、元の密度勾配媒体それぞれを所定の割合（例えば、１０％Ａ＋９０％Ｂ、５０％Ａ＋５０％Ｂなど）で混合して、密度が高密度の元の密度勾配媒体Ａと低密度の元の密度勾配媒体Ｂの密度の間にある多数の中間密度の密度勾配媒体を形成するのが好ましい。
【００１８】
本発明の方法の第３の実施形態では、連続勾配の密度勾配媒体を用いるのが望ましい。この方法は、第１添加剤容器４３内の第１の（好ましくは最高密度の）密度勾配媒体Ａ及び第２添加剤容器５１内の第２の最低密度の密度勾配媒体Ｂで出発する点で、本発明の第１及び第２の実施形態とは異なる。密度勾配媒体の勾配は、ミキサ５２を付勢し、弁７５を開くことにより達成される。弁７５を開くことで、密度勾配媒体Ａが第１添加剤容器４３から第２添加剤容器５１に流れ、そこでミキサ５２により密度勾配媒体Ｂと混合され、ＡとＢの中間の密度を有する中間密度・密度勾配媒体を形成する。中間密度・密度勾配媒体が第２添加剤容器５１から出て、生物学的流体受容容器２３に流入するにつれて、第２添加剤容器５１における密度勾配媒体Ａ対密度媒体Ｂの割合が増加し、第２添加剤容器５１から出ていく中間密度・密度勾配媒体の密度も増加する。この結果、密度上昇勾配の中間密度・密度勾配媒体が生物学的流体受容容器２３に導入される。所望容量の密度勾配媒体を生物学的流体受容容器２３中に導入し終わったら、ミキサ５２を停止し、弁７５を閉じる。この後、本方法は前述した方法と同様に進行するが、両方法の大きな違いとして、正しい密度勾配媒体の勾配が達成されたら、生物学的流体の目標成分（１つ又は複数）がいくつかの層に分離され、このときこれらの層は密度勾配媒体の層で分離されている。
【００１９】
上述した実施形態は本発明を具体的に説明するものであり、特許請求の範囲に規定される保護範囲を限定するものではない。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】本発明による遠心分離機の第１実施形態を示す線図的平面図である。
【図２】遠心分離チャンバ内に配置される、本発明にしたがって生物学的流体の複数フラクションを分離し、収集する使い捨てセットの第１実施形態を示す線図である。
【図３】図２の使い捨てセットを用いて生物学的流体のフラクションを分離し、収集する方法の１実施形態の１工程を示す線図である。
【図４】上記分離収集方法の次の工程を示す線図である。
【図５】上記分離収集方法の次の工程を示す線図である。
【図６】上記分離収集方法の次の工程を示す線図である。
【図７】上記分離収集方法の次の工程を示す線図である。
【図８】上記分離収集方法の次の工程を示す線図である。
【図９】上記分離収集方法の次の工程を示す線図である。
【符号の説明】
【００２１】
３  本体
５  シャフト
７  支持アーム
９  遠心分離チャンバ
１１  撮像装置
１３  ビデオカメラ
１５  フラッシュ
１７  窓
１９  コントロール装置
２１  セット
２３  生物学的流体受容容器
２５  円筒壁
２７  ピストン
２８  キャビティ
２９  第１分離フラクション受容容器
３１  シリンダ
３２  容器３１の基部
３３  円筒壁
３４  キャビティ
３５  ピストン
３７  洗浄バッファ収容容器
３８  容器３７の基部
３９  円筒壁
４０  キャビティ
４１  ピストン
４３  第１添加剤収容容器
４５  円筒壁
４７  ピストン
４８  キャビティ
４９  第２分離フラクション受容容器
５０  入口
５１  第２添加剤収容容器
５２  ミキサ
５３，５７，６３，６５  配管
５４  出口
５５  容器２３の基部
５９  通路
６１  Ｔ接合部
６７，６９  枝管
７１  キャビティ
７５  第１遠隔制御弁
７７  第２遠隔制御弁
７９  第３遠隔制御弁
８７  入口ライン
８９  入口ポート
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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