(57)【要約】本発明は、次の一般式（ＡおよびＢ）で表示される、イミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体およびインダン-1-オン誘導体ならびにそれらの塩を提供する。2009508839.tif 000034
2009508839.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（ＡおよびＢ）で表示されるイミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体およびインダン-1-オン誘導体、ならびにそれらの塩。
【化１】
2009508839.tif 000028
【請求項２】
次の一般式で表示される16-置換アンドロスト-5-エン・ステロイド誘導体である、請求項１に記載の化学式Ａで表示されるイミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体。
【化２】
2009508839.tif 000029
【請求項３】
次の一般式で表示される16-置換アンドロスト-4-エン-3,17-ジオンである、請求項１に記載の化学式Ａで表示されるイミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体。
【化３】
2009508839.tif 000030
【請求項４】
次の一般式で表示される7-置換アンドロスト-5-エン・ステロイド誘導体である、請求項１に記載の化学式Ａで表示されるイミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体。
【化４】
2009508839.tif 000031
【請求項５】
次の構造式で表示される16-置換型ステロイド化合物である、請求項１に記載の化学式Ａで表示されるイミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体。
【化５】
2009508839.tif 000032
【請求項６】
次に例示されるイミダゾリル基で置換されたステロイド誘導体である、請求項１に記載の化学式Ａで表示されるイミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体：
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロスト-エン-3β-オル（化合物１２）（DPJ-RG-1151）、
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-イル・アセテート（化合物１３）（DPJ-RG-1196）、
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物１４）（DPJ-RG-1219）、
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物１５）（DPJ-RG-1227）、
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物１６）（DPJ-RG-1177）、
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロ-ステン-3β-オル（化合物１８）（DPJ-RG-1307）、
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロ-ステン-3β-イル・アセテート（化合物１９）（DPJ-RG-1309）、
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２０）（DPJ-RG-1310）、
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２１）（DPJ-RG-1311）、
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物２２）（DPJ-RG-1308）、
7-[Ｏ-{3-(イミダゾル-1-イル)プロピル}オキシミノ]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２５）（DPJ-RG-1223）、
16β-(イミダゾル-1-イル)-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物２７）（DPJ-RG-1240）、
16β-(イミダゾル-1-イル)-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２８）（DPJ-RG-1317）、
16β-(イミダゾル-1-イル)-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２９）（DPJ-RG-1318）、
16β-(イミダゾル-1-イル)-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物３０）（DPJ-RG-1241）。
【請求項７】
次の一般式で表示されるインダン-1-オン誘導体である、請求項１に記載の化学式Ｂで表示されるイミダゾリル基で置換された新規なインダン-1-オン誘導体。
【化６】
2009508839.tif 000033
【請求項８】
次に例示されるインダン-1-オン誘導体である、請求項１に記載のイミダゾリル基で置換された新規なインダン-1-オン誘導体：
2-[3-(3-イミダゾル-1-イル-プロポキシ)- ベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物２）（DPJ-RG-1088）、
2-[2-(3-イミダゾル-1-イル-プロポキシ)-ベンジリジン]-インダン-1-オン（化合物４）（DPJ-1055）、
2-[3-(3-イミダゾル-1・イル・プロポキシ)-4-メトキシベンジリデン)インダン-1-オン（化合物６）（DPJ-RG-1090）、
2-[4-(3-イミダゾル-1・イル・プロポキシ)-3-メトキシベンジリデン)インダン-1-オン（化合物８）（RG-DPJ-195）、
2-[3-(2-イミダゾル-1・イル・エトキシ)-ベンジリジン]インダン-1-オン（化合物１０）（RG-DPJ-325）、
2-(1Ｈ-1-イミダゾリル)-1-インダノン（化合物３２）。
【請求項９】
医薬として許容される塩から選ばれる塩である、請求項１に記載のイミダゾリル基で置換された新規なインダン-1-オン誘導体。
【請求項１０】
請求項１に記載された一般式ＡおよびＢで表示される化合物がアロマターゼ阻害活性を示す当該化合物の使用。
【請求項１１】
アロマターゼ阻害活性についてのＩＣ50値が0.18〜12μＭであり、標準的な試薬であるアミノグルテチミドに比べて相対効力が2.5倍〜165.3倍の範囲にある、強力な化合物２、４、６、８、１４、１６、２０、２２、２４、２５、２７および３０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
抗癌剤として有用な化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
請求項１に記載された化学式Ａで表示される16-置換アンドロステン化合物の製造方法であって、
化学式Ｃで表示されるクロロアルキル化されたアルデヒドとＤＨＡとを室温下において塩基で触媒させてアルドール縮合させ、ハロゲン化されたアルドール付加体を得ることと、
これらＤＨＡのクロロアルコキシベンジリデン誘導体とイミダゾールとを130〜140℃の温度範囲で熱融合させ、イミダゾリル基で置換されたアルドール反応生成物を得ることと、
得られた前記アルドール反応生成物を、公知の方法により、対応する5-アンドロステン-3,17-ジアセテート化合物へと転換する、または対応する4-アンドロステン-2,17-ジオン化合物、5-アンドロステン-3-アセオキシ-17-オンもしくは5-アンドロステン-3,17-ジオール化合物へと酸化することと、
を含む製造方法。
【請求項１４】
3-ヒドロキシ前駆体を蒸気浴中で約2時間、無水酢酸およ乾燥ピリジンで処理することによって、3-アセトキシ-17-オン-5-アンドロステン・ステロイドを得る、請求項１３に記載の製造方法。
【請求項１５】
3-ヒドロキシ-17-オン-5-アンドロステン・ステロイドを水素化ホウ素ナトリウムにより室温下で還元して得たアンドロスト-5-エン-3,17-ジオールを、蒸気浴中で約2時間、無水酢酸およびピリジンで処理することによって、3,17-ジアセトキシ-5-アンドロステン・アルドール反応生成物を得る、請求項１３に記載の製造方法。
【請求項１６】
5-アンドロステン-3-ヒドロキシ-17-オン・アルドール反応生成物をオッペナウアー酸化することによって、4-アンドロステン-3,17-ジオン・ステロイド系アルドール反応生成物を得る、請求項１３に記載の製造方法。
【請求項１７】
請求項１に記載された化学式Ａで表示されるイミダゾール環を有する7-置換-5-アンドロステン・ステロイド誘導体の製造方法であって、公知の方法によって調製された7-ヒドロキシミノ-5-アンドロステン誘導体を1-ブロモ-3-クロロプロパンで処理した後、イミダゾールと熱融合させ、さらには加水分解させることを含む、製造方法。
【請求項１８】
請求項１に記載された16-イミダゾリルアンドロステン・ステロイドの製造方法であって、臭化銅を含有するメタノールおよびベンゼンで還元することによってＤＨＡを臭化させて16−ブロモ誘導体を得た後、130〜140℃の温度範囲で粉末イミダゾールと熱融合させることを含む、製造方法。
【請求項１９】
請求項１に記載された化学式Ｂで表示される2-アミノアルコキシベンジリデン1-インダノンの製造方法であって、
化学式Ｃで表示されるクロロアルキル化されたアルデヒドと1-インダノンとを室温下において塩基で触媒させてアルドール縮合させ、ハロゲン化されたアルドール付加体を得ることと、
1-インダノンのクロロアルコキシベンジリデン誘導体とイミダゾールとを80〜90℃の温度範囲で熱融合させ、化学式Ｂで表示されるイミダゾリル基で置換されたアルドール反応生成物を得ることと、
を含む、製造方法。
【請求項２０】
請求項１に記載された2-イミダゾリル-1-インダノンの製造方法であって、当該化合物を、2-ブロモ-1-インダノンと粉末イミダゾールとを80〜90℃の温度範囲で熱融合させることによって得る、製造方法。
【請求項２１】
アロマターゼ阻害活性についてのＩＣ50値が0.18〜12μＭであり、標準的な試薬であるアミノグルテチミドに比べて相対効力が2.5倍〜165.3倍の範囲にある、強力な化合物２、４、６、８、１４、１６、２０、２２、２４、２５、２７および３０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
請求項１に記載されたイミダゾリル基で置換されたステロイド誘導体およびインダン-1-オン誘導体、ならびにそれらの塩を有効量含有し、医薬として許容される担体、補剤、賦形剤および／または希釈剤を随意に含有する、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体およびインダン-1-オン誘導体に関する。また、本発明は、イミダゾール環で置換された新規なステロイド系、非ステロイド系アロマターゼ阻害剤に関する。本発明は、さらに、こうした誘導体の製造方法の提供、および強力なアロマターゼ阻害剤としてのこれらの生物学的活性に関する。
【背景技術】
【０００２】
アロマターゼは、アンドロステンジオン、テストステロンといったアンドロゲンが、それぞれエストロン、エストラジオールといったエストロゲンに変換される反応を媒介する酵素である（Simpson E Rら、Endocrine Reviews、1994年、15：342-355）。シトクロムP-450酵素のようなアロマターゼを阻害することは、男性の精子生成や前立腺の細胞増殖を制御すること、さらには骨形成、免疫Ｔ細胞、サイトカインバランスといった非生殖性機能を制御することと同様（Simpson ERら、Recent progress in Hormone research、1997年、52：185-213）、雌性化、排卵、着床、乳房および子宮内膜の細胞増殖といった正常または異常なエストロゲン誘因性もしくはエストロゲン依存性の生物学的過程を妨害するための、そしてエストロゲン依存性である広汎性の乳癌の過去３０年間にわたる治療における、選択肢の一つになっている（Tomera J.F.、Drugs of Today、1994年、30、565-574；Howell AとDowsett M、BMJ、1997年）。
【０００３】
現在のところ、アロマターゼを阻害することによってエストロゲンの生合成に影響を及ぼすステロイド系および非ステロイド系の化合物のいくつかは市販されており、残りの化合物は乳癌治療のための臨床試験についての種々のステージにある（Njar, V.C.O；Brodie, A.M.H、Drugs、1999、58、233-255；Seralini GE、Moslemi, S.、Mol. Cell. Endocrinol、2001年、178、117-131）。
【０００４】
ステロイド系阻害剤は、通常、かなり特異的なものではあるが、不要なアゴニスト作用が生じ得る。他方、非ステロイド系阻害剤は、Ｐ450が媒介する種々のステロイドの転換を妨害し得るものであるため特異性は有しないものの、ステロイドによる不要なアゴニスト作用が生じにくい。
【０００５】
4-ヒドロキシアンドロステンジオン（フォルメスタン）（Carlini, P.ら、Ann. Oncol.、2001年、12、1539-1543）、アタメスタン（Traina, TA.ら、Curr. Opin. Invest. Drugs.、2004年、605-610）といったステロイド系阻害剤は、酵素の活性部位に対してアンドロステンジオンおよびテストステロンのような内因性の基質と競合し、偽基質として振る舞うと共に、当該活性部位に不可逆的に結合して不可逆的な酵素抑制を誘導する中間体として作用する。
【０００６】
【化１】
2009508839.tif 000003
【０００７】
非ステロイド系阻害剤も、内因性の基質と競合して活性部位に接近した後、ヘム鉄原子に配位結合する。こうして、天然基質と、酵素に由来する酸素とが効果的に排除される。
【０００８】
抗真菌剤としてアゾール誘導体の多くが以前から知られている。酵素であるアロマターゼの阻害剤としてイミダゾールおよびトリアゾールの誘導体のいくつかが既に知られている。イミダゾリル基およびトリアゾール基は、EP-A-293-987に記載されているように、通常、レトロゾール（Buzdar Aら、Proc. Am. Soc. Clin. Oncol.、1996年；Lamb HMとAdkins JC、Drugs、1998年、56：1125-1140）およびアナストロゾール（Wiseman LRとAdkins JC、Drugs Aging、1998、13、321-332）においてみられるように芳香環に結合したり、メチレン基を介してベンゾトリアゾールに結合したりする。イミダゾールの誘導体であるファドロゾールは、in vitroおよびin vivoでのアロマターゼの強力な競合阻害剤であり、アミノグルテチミドに比べて特異性が高い。
【０００９】
【化２】
2009508839.tif 000004
【００１０】
ピリジル基で置換されたインダノンおよびテトラロンも、標準的な試薬であるアミノグルテチミドに比べて強力でありかつ特異性が高い非ステロイド系抗アロマターゼ剤であることが、Hartmannらによって報告されている（J. Med. Chem.、1994年、37、1275-1281）。
【００１１】
【化３】
2009508839.tif 000005
【００１２】
さらに、それらの５位および６位でのヒドロキシ誘導体ならびにメトキシ誘導体も、アミノグルテチミドに比べて150倍〜200倍の活性を有することが知られている。
【発明の開示】
【００１３】
本発明の主目的は、イミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体およびインダノン誘導体の提供にある。本発明の別の目的は、こうした新規なステロイド系および非ステロイド系アロマターゼ阻害剤の製造方法の提供にある。
【００１４】
本発明のさらに別の目的は、標準的な試薬であるアミノグルテミチドに比べてより強力である、イミダゾリル基で置換されたステロイド誘導体およびインダノン誘導体の提供にある。
【００１５】
本発明は、次の一般式（ＡおよびＢ）で表示される、イミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体およびインダン-1-オン誘導体ならびにそれらの塩を提供する。
【００１６】
【化４】
2009508839.tif 000006
【００１７】
本発明の実施形態の一例は、化学式Ａで表示される、イミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体であって、次の一般式で表示される16-置換アンドロスト-5-エン・ステロイド誘導体である。
【００１８】
【化５】
2009508839.tif 000007
【００１９】
本発明の実施形態の別例は、化学式Ａで表示される、イミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体であって、次の一般式で表示される16-置換アンドロスト-4-エン-3,17-ジオンである。
【００２０】
【化６】
2009508839.tif 000008
【００２１】
本発明の実施形態のまた別の例は、化学式Ａで表示される、イミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体であって、次の一般式で表示される7-置換アンドロスト-5-エン・ステロイド誘導体である。
【００２２】
【化７】
2009508839.tif 000009
【００２３】
本発明の実施形態のまた別の例は、化学式Ａで表示される、イミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体であって、次の構造式で表示される16-置換型ステロイド化合物である。
【００２４】
【化８】
2009508839.tif 000010
【００２５】
本発明の実施形態のまた別の例は、化学式Ａで表示される、イミダゾリル基で置換された新規なステロイド誘導体であって、次に例示されるイミダゾリル基で置換されたステロイド誘導体である：
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロスト-エン-3β-オル（化合物１２）（DPJ-RG-1151）、
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-イル・アセテート（化合物１３）（DPJ-RG-1196）、
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物１４）（DPJ-RG-1219）、
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物１５）（DPJ-RG-1227）、
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物１６）（DPJ-RG-1177）、
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロ-ステン-3β-オル（化合物１８）（DPJ-RG-1307）、
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロ-ステン-3β-イル・アセテート（化合物１９）（DPJ-RG-1309）、
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２０）（DPJ-RG-1310）、
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２１）（DPJ-RG-1311）、
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物２２）（DPJ-RG-1308）、
7-[Ｏ-{3-(イミダゾル-1-イル)プロピル}オキシミノ]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２５）（DPJ-RG-1223）、
16β-(イミダゾル-1-イル)-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物２７）（DPJ-RG-1240）、
16β-(イミダゾル-1-イル)-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２８）（DPJ-RG-1317）、
16β-(イミダゾル-1-イル)-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２９）（DPJ-RG-1318）、
16β-(イミダゾル-1-イル)-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物３０）（DPJ-RG-1241）。
【００２６】
本発明の実施形態のまた別の例は、化学式Ｂで表示される、イミダゾリル基で置換された新規なインダン-1-オン誘導体であって、次の一般式で表示されるインダン-1-オン誘導体である。
【００２７】
【化９】
2009508839.tif 000011
【００２８】
本発明の実施形態のまた別の例は、イミダゾリル基で置換された新規なインダン-1-オン誘導体であって、次に例示されるインダン-1-オン誘導体である：
2-[3-(3-イミダゾル-1-イル-プロポキシ)- ベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物２）（DPJ-RG-1088）、
2-[2-(3-イミダゾル-1-イル-プロポキシ)-ベンジリジン]-インダン-1-オン（化合物４）（DPJ-1055）、
2-[3-(3-イミダゾル-1・イル・プロポキシ)-4-メトキシベンジリデン)インダン-1-オン（化合物６）（DPJ-RG-1090）、
2-[4-(3-イミダゾル-1・イル・プロポキシ)-3-メトキシベンジリデン)インダン-1-オン（化合物８）（RG-DPJ-195）、
2-[3-(2-イミダゾル-1・イル・エトキシ)-ベンジリジン]インダン-1-オン（化合物１０）（RG-DPJ-325）、
2-(1Ｈ-1-イミダゾリル)-1-インダノン（化合物３２）。
【００２９】
本発明の実施形態のまた別の例は、イミダゾリル基で置換された新規なインダン-1-オン誘導体であって、医薬として許容される塩から選ばれる塩であってよい。
【００３０】
本発明の実施形態のまた別の例は、一般式ＡおよびＢで表示される化合物がアロマターゼ阻害活性を示す当該化合物の使用である。
【００３１】
本発明の実施形態のまた別の例は、アロマターゼ阻害活性についてのＩＣ50値が0.18〜12μＭであり、標準的な試薬であるアミノグルテチミドに比べて相対効力が2.5倍〜165.3倍の範囲にある、強力な新規の化合物２、４、６、８、１４、１６、２０、２２、２４、２５、２７および３０である。
【００３２】
これら新規の化合物は、抗癌剤として有用である。
【００３３】
また、本発明は、化学式Ｃで表示されるクロロアルキル化されたアルデヒドとＤＨＡとを室温下において塩基で触媒させてアルドール縮合させ、ハロゲン化されたアルドール付加体を得ることと、これらＤＨＡのクロロアルコキシベンジリデン誘導体とイミダゾールとを130〜140℃の温度範囲で熱融合させ、イミダゾリル基で置換されたアルドール反応生成物を得ることと、得られた当該アルドール反応生成物を、公知の方法により、対応する5-アンドロステン-3,17-ジアセテート化合物へと転換する、または対応する4-アンドロステン-2,17-ジオン化合物、5-アンドロステン-3-アセオキシ-17-オンもしくは5-アンドロステン-3,17-ジオール化合物へと酸化することとを含む、化学式Ａで表示される16-置換アンドロステン化合物の製造方法を提供する。
【００３４】
本発明の実施形態のまた別の例は、3-ヒドロキシ前駆体を蒸気浴中で約2時間、無水酢酸およ乾燥ピリジンで処理することによって、3-アセトキシ-17-オン-5-アンドロステン・ステロイドを得る、新規な製造方法である。
【００３５】
本発明の実施形態のまた別の例は、3-ヒドロキシ-17-オン-5-アンドロステン・ステロイドを水素化ホウ素ナトリウムにより室温下で還元して得たアンドロスト-5-エン-3,17-ジオールを、蒸気浴中で約2時間無水酢酸およびピリジンで処理することによって、3,17-ジアセトキシ-5-アンドロステン・アルドール反応生成物を得る、新規な製造方法である。
【００３６】
本発明の実施形態のまた別の例は、5-アンドロステン-3-ヒドロキシ-17-オン・アルドール反応生成物をオッペナウアー酸化することによって、4-アンドロステン-3,17-ジオン・ステロイド系アルドール反応生成物を得る、新規な製造方法である。
【００３７】
また、本発明は、公知の方法によって調製された7-ヒドロキシミノ-5-アンドロステン誘導体を1-ブロモ-3-クロロプロパンで処理した後、イミダゾールと熱融合させ、さらには加水分解させることを含む、化学式Ａで表示されるイミダゾール環を有する7-置換-5-アンドロステン・ステロイド誘導体の新規な製造方法を提供する。
【００３８】
本発明の実施形態のまた別の例は、臭化銅を含有するメタノールおよびベンゼンで還元することによってＤＨＡを臭化させて16−ブロモ誘導体を得た後、130〜140℃の温度範囲で粉末イミダゾールと熱融合させることを含む、16-イミダゾリルアンドロステン・ステロイドの新規な製造方法である。
【００３９】
また、本発明は、化学式Ｃで表示されるクロロアルキル化されたアルデヒドと1-インダノンとを室温下において塩基で触媒させてアルドール縮合させ、ハロゲン化されたアルドール付加体を得ることと、1-インダノンのクロロアルコキシベンジリデン誘導体とイミダゾールとを80〜90℃の温度範囲で熱融合させ、化学式Ｂで表示されるイミダゾリル基で置換されたアルドール反応生成物を得ることとを含む、化学式Ｂで表示される2-アミノアルコキシベンジリデン1-インダノンの新規な製造方法を提供する。
【００４０】
本発明による2-イミダゾリル-1-インダノンの製造方法の実施形態の一例では、当該化合物を、2-ブロモ-1-インダノンと粉末イミダゾールとを80〜90℃の温度範囲で熱融合させることによって得る。
【００４１】
本発明による実施形態の一例では、これら化合物のアロマターゼ阻害活性を、［1β、2β-3Ｈ］テストステロンの芳香化に伴って形成される3Ｈ2Ｏを測定することによってモニターする。これら化合物は、多くの場合、標準的な試薬であるアミノグルテチミドに比べて有意に強い、濃度に依存したアロマターゼ阻害性を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４２】
本発明による化合物は、次の一般式（ＡおよびＢ）で表示される構造を有している。
【００４３】
【化１０】
2009508839.tif 000012
【００４４】
本発明による特に注目すべき好適な化合物は次である：2-[3-(3-イミダゾル-1-イル-プロポキシ)- ベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物２）（DPJ-RG-1088）；2-[2-(3-イミダゾル-1-イル-プロポキシ)-ベンジリジン]-インダン-1-オン（化合物４）（DPJ-1055）；2-[3-(3-イミダゾル-1・イル・プロポキシ)-4-メトキシベンジリデン)インダン-1-オン（化合物６）（DPJ-RG-1090）；2-[4-(3-イミダゾル-1・イル・プロポキシ)-3-メトキシベンジリデン)インダン-1-オン（化合物８）（RG-DPJ-195）；2-[3-(2-イミダゾル-1・イル・エトキシ)-ベンジリジン]インダン-1-オン（化合物１０）（RG-DPJ-325）；2-(1Ｈ-1-イミダゾリル)-1-インダノン（化合物３２）；16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシ-ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物１２）（DPJ-RG-1151）；16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシ-ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-イル・アセテート（化合物１３）（DPJ-RG-1196）；16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物１４）（DPJ-RG-1219）；16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物１５）（DPJ-RG-1227）；16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物１６）（DPJ-RG-1177）；16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物１８）（DPJ-RG-1307）；16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロ-ステン-3β-イル・アセテート（化合物１９）（DPJ-RG-1309）；16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２０）（DPJ-RG-1310）；16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２１）（DPJ-RG-1311）；16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物２２）（DPJ-RG-1308）；7-[Ｏ-{3-(イミダゾル-1-イル)プロピル}オキシミノ]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２５）（DPJ-RG-1223）；16β-(イミダゾル-1-イル)-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物２７）（DPJ-RG-1240）；16β-(イミダゾル-1-イル)-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２８）（DPJ-RG-1317）；16β-(イミダゾル-1-イル)-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２９）（DPJ-RG-1318）；16β-(イミダゾル-1-イル)-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物３０）（DPJ-RG-1241）。
【００４５】
本発明による一般式（Ａ）および（Ｂ）で表示されるステロイド系化合物および非ステロイド系化合物（式中、Ｒは
【００４６】
【化１１】
2009508839.tif 000013
【００４７】
であり、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は上記に定義したとおりである。）は、ステロイド核または□ndanones核と種々のアルキルアルデヒドとをアルドール縮合させることによって得ている。そして、所望の生成物を得るために、こうしたアルドール反応生成物をイミダゾールに融合させた。
【００４８】
下記の一般式(c)で表示されるアルキルアルデヒド（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、独立して、Ｈ、−ＯＣＨ3または−Ｏ(ＣＨ2)nＣｌであり、ｎは２または３である。）を、対応する次のアルデヒド：サリチルアルデヒド、3-ヒドロキシベンズアルデヒド、4-ヒドロキシベンズアルデヒド、イソバニリンまたはバニリンを、無水炭酸カリウムの存在下で、3-ブロモ-1-クロロプロパンまたは2-ブロモ-1-クロロエタンを用いて処理することによって調製した。
【００４９】
【化１２】
2009508839.tif 000014
【００５０】
続いて、一般式(c)で表示されるこうしたアルデヒドとデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＡ）またはインダン-1-オンとをアルドール縮合［Nielsen, A.T.とHoulihan, W.J、The aldol Condensation、Organic Reactions、第16編（John Wiley：New York）、1968年、1-438］させることによって種々のアルドール反応生成物を得た後、これらと、アロマターゼ阻害能を有する複素環化合物であることが文献［Adje, N.ら、アロマターゼ阻害剤である1-N-フェニルアミノ-1H-イミダゾール誘導体およびそれを含有する薬剤、（Laboratoire Thermax）、US6,737,433B1、2004年］で報告されているイミダゾールとを熱融合させることによって、一般式（Ａ）および（Ｂ）で表示され、式中、Ｒが、
【００５１】
【化１３】
2009508839.tif 000015
【００５２】
であり、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3が上記に定義したとおりであり、ステロイド誘導体においてＲ4が−ＯＨでありＲ5が＝ＯでありＲ6がＨでありステロイド核の５位と６位との間に二重結合が位置する、アロマターゼを阻害する新規な誘導体を得た。
【００５３】
本発明による、一般式（Ａ）で表示され、式中、Ｒ4が独立して−ＯＣＯＣＨ3基であり、Ｒ5が独立して＝Ｏ基であり、Ｒ6がＨであり、５位と６位との間に二重結合が位置するステロイド誘導体については、無水酢酸を用い乾燥ピリジン中で17-ケト-3-ヒドロキシＤＨＡ・アルドール反応生成物をアセチル化することによって調製した。
【００５４】
本発明による、一般式（Ａ）で表示され、式中、Ｒ4およびＲ5が独立して−ＯＨ基であるステロイド系アルドール反応生成物については、水素化ホウ素ナトリウムを含有するメタノールを用いて17-ケト-3-ヒドロキシＤＨＡ・アルドール反応生成物を還元することによって調製した。
【００５５】
本発明による、一般式（Ａ）で表示され、式中、Ｒ4およびＲ5が独立して−ＯＣＯＣＨ3基である誘導体については、無水酢酸を用い乾燥ピリジン中で前述の3,17-ジヒドロキシ・アルドール反応生成物をアセチル化することによって調製した。
【００５６】
本発明による、一般式（Ａ）で表示され、式中、Ｒ4およびＲ5が＝Ｏ基であり、ステロイド核の４位と５位との間に二重結合が位置する誘導体については、アルミニウムイソプロポキシド-シクロヘキサノン-トルエン系中で17-ケト-3-ヒドロキシＤＨＡ・アルドール反応生成物をオッペナウアー酸化［Eastham, J.F.とTeranishi, R.、Organic Synthesis、Cairns, T.L.編、（John Wiley：New York）、1995年、39］することによって調製した。
【００５７】
本発明による、一般式（Ａ）で表示され、式中、Ｒが、独立して水素であり、Ｒ6が、独立して、
【００５８】
【化１４】
2009508839.tif 000016
【００５９】
基であり、Ｒ4およびＲ5が−ＯＣＯＣＨ3または−ＯＨである誘導体については、文献（Heusler, K.ら、Helv. Chim. Acta、1952年、35、284-294）に記載の方法によりクロム酸ｔ−ブチルを用いてＣＣｌ4中でデヒドロエピアンドロステロン・アセテートのジアセチル誘導体をアリル位酸化することによって式中のＲ6が＝Ｏである反応生成物を形成し、これを塩酸ヒドロキシルアミンで処理することによってＲ6が＝ＮＯＨである誘導体を形成した後（Singh Hら、Indian J. Chem.、1969年、1084-1087）、1-ブロモ-3-クロロプロパンで処理し、さらにイミダゾールに熱融合させた後に加水分解することによって得た。
【００６０】
文献（Glazier ER、J. Org. Chem.、1962年、2937-2938）に記載の方法により臭化銅を用いＤＨＡまたはインダン1-オンを臭化し、さらに粉末状のイミダゾールに熱融合させることによって、一般式（Ａ）および（Ｂ）で表示され、式中のＲが、
【００６１】
【化１５】
2009508839.tif 000017
【００６２】
である誘導体を得た。Ｒ4およびＲ5は、上述のステロイド系誘導体と同様にして制御した。
【００６３】
生物学的活性
文献（Graves, PEら、Endocrinology、1979年、52-57）に記載の方法により、ヒト胎盤ミクロソームおよび［1β,2β-3Ｈ］テストステロンを用い、in vitroでのアロマターゼ阻害活性を調べた。イミダゾリル基で置換された□ndanones誘導体である化合物２、４、６および８は良好なアロマターゼ阻害活性を示し、化合物８（RG-DPJ-195）のＩＣ50は0.55μＭでありアミノグルテチミドに比べて50倍を超える活性があった。これら□ndanonesとイミダゾールとの混成分子では活性が増強されており、乳癌の治療に効果を発揮し得る。イミダゾリル基で置換されたステロイド誘導体である化合物１４、１６、２０、２２、２４、２５、２７および３０は有意なアロマターゼ阻害活性を有する。化合物３０（DPJ-RG-1241）は、これらのなかで最も有用な化合物であり、ＩＣ50が0.18μＭでありアミノグルテチミドの165倍もの相対効力を有していた。
【００６４】
以降の実施例は、本発明の一例を示すものであり、本発明の範囲を制限するものではない。
【００６５】
実施例−１
ａ）3-(3-クロロプロポキシ)ベンズアルデヒド
3-ヒドロキシベンズアルデヒド（1.0g、8.19ミリモル）および炭酸カリウム（2g）をこれらが撹拌された状態で含有するエチルメチルケトンの還流用検査液に、1-ブロモ-3-クロロプロパンを添加し、油浴中で6時間撹拌することによって反応混合物を還流した。反応の完了はＴＬＣによってモニターした。得られたスラリーを減圧下で濾過して溶媒を除去することによって、さらなる反応に使用する油性残渣を得た［Naruto Sら、J. Med. Chem、1982年、25、1240-1245］。
【００６６】
2-(3-クロロプロポキシ)ベンズアルデヒド、3-(3-クロロプロポキシ)4-メトキシベンズアルデヒドおよび4-(3-クロロプロポキシ)-3-メトキシベンズアルデヒドを、サリチルアルデヒド、イソバニリンおよびバニリンといった対応するアルデヒドを用いて得た。3-(2-クロロエトキシ)-ベンズアルデヒドを、上記と同様の方法により1-ブロモ-2-クロロエタンで3-ヒドロキシバンズアルデヒドを処理することによって調製した。
【００６７】
ｂ）2-[3-(3-クロロプロポキシ)ベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物１）（DPJ-RG-1054）
インダン-1-オン（0.4g、3.03ミリモル）と水酸化ナトリウム（0.6g、15ミリモル）とを含有するメタノール（25ml）を、3-(3-クロロプロポキシ)ベンズアルデヒドのメタノール溶液（10ml）に添加した。こうして得た溶液を、30分間振とうし、さらに間欠的に振とうしつつ室温下で静置した。反応の完了はＴＬＣによってモニターした。反応完了後、余分なメタノールを除去し；破砕氷を加えた状態で一晩静置した。これにより得られた沈殿物を、濾過し、蒸留水で念入りに洗浄し、乾燥させた。アセトンと石油エーテルとの混合液から粗生成物を結晶化させることによって、融点73-75℃である2-[3-(3-クロロプロポキシ)ベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物１）の白色結晶（0.21g、33.5%）を得た。
【００６８】
これは、
ＩＲ（KBr）：2960cm-1、1690cm-1、1590cm-1、1430cm-1、1230cm-1および740 cm-1であり、
1Ｈ-ＮＭＲ（CDCl3）：δ2.28（p、2H、-OCH2CH2-）、3.78（t、2H、-CH2Cl）、4.05（s、2H、3-CH2 インダノン）、4.18（t、2H、-OCH2-）、6.96（dd、1H、Jo=8.85Hz、Jm=2.43Hz、芳香族領域）、7.42（m、7H、vinylic-Hと芳香族領域）および7.91ppm（d、1H、Jo=7.59Hz、7-H □ndanones）であり、
Calcd. For Ｃ19Ｈ17Ｏ2Ｃｌ：Ｃ、72.95；Ｈ、5.47であり、Found：Ｃ、72.56；Ｈ、5.05であった。
【００６９】
2-(3-クロロプロポキシ)ベンズアルデヒドを用い、化合物１について記述した方法により、2-[2-(3-クロロプロポキシ)ベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物３）を調製した。
【００７０】
3-(3-クロロプロポキシ)4-メトキシベンズアルデヒドを用い、化合物１について記述した方法により、2-[3-(3-クロロプロポキシ)-4-メトキシベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物５）を調製した。
【００７１】
4-(3-クロロプロポキシ)-3-メトキシベンズアルデヒドを用い、化合物１について記述した方法により、2-[4-(3-クロロプロポキシ)-3-メトキシベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物７）（DPJ-1039）を調製した。
【００７２】
3-(2-クロロエトキシ)ベンズアルデヒドを用い、化合物１について記述した方法により、2-[3-(2-クロロエトキシ)ベンジリジン]インダン-1-オン（化合物９）（RG-DPJ-324）を調製した。
【００７３】
ｃ）2-[3-(3-イミダゾル-1-イル-プロポキシ)-ベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物２）（DPJ-RG-1088）
2-[3-(3-クロロプロポキシ)-ベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物１）（1g）をイミダゾール（1.5g）と共に粉砕し、撹拌しながら80-85℃で1時間加熱した。得られた反応混合物を冷却し、蒸留水をそこに添加した。その後、水をデカントし、固形物を乾燥させることによって、溶媒であるエーテルから、融点48-50℃である化合物２（0.51g、46.59％）を結晶化させた。
【００７４】
これの分析結果は：
ＩＲ（KBr）：2940cm-1、1690cm-1、1610cm-1、1240cm-1、1085cm-1および740 cm-1であり、
1Ｈ-ＮＭＲ（CDCl3）：δ2.27（p、2H、-OCH2CH2-）、3.96（t、2H、-CH2N）、4.03（s、2H、3-CH2 インダノン）、4.22（t、2H、-OCH2-）、6.94（m、2H、芳香族領域とイミダゾリル基）、7.07（s、1H、芳香族領域）、7.16（s、1H、芳香族領域）、7.35（m、3H、2つの芳香族領域と1つのイミダゾリル基）、7.50（s、1H、イミダゾリル基）、7.58（m、3H、芳香族領域（□ndanones）とvinylic-H）および7.92ppm（d、1H、Jo=7.53Hz、7-CH □ndanones）であり、
Calcd. For Ｃ22Ｈ20Ｏ2Ｎ2：Ｃ、76.72；Ｈ、5.85；Ｎ、8.16であり、Found：Ｃ、76.68；Ｈ、5.86；Ｎ、8.10であった。
【００７５】
化合物２について記述した方法により、化合物３とイミダゾールとを融合させることによって、2-[2-(3-イミダゾル-1-イル-プロポキシ)-ベンジリジン]-インダン-1-オン（化合物４）（DPJ-1055）を調製した。
【００７６】
化合物２について記述した方法により、化合物５とイミダゾールとを融合させることによって、2-[3-(3-イミダゾル-1・イル・プロポキシ)-4-メトキシベンジリデン）インダン-1-オン（化合物６）（DPJ-1090）を調製した。
【００７７】
化合物２について記述した方法により、化合物７とイミダゾールとを融合させることによって、2-[4-(3-イミダゾル-1・イル・プロポキシ)-3-メトキシベンジリデン)インダン-1-オン（化合物８）（RG-DPJ-195）を調製した。
【００７８】
化合物２について記述した方法により、化合物９とイミダゾールとを融合させることによって、2-[3-(2-イミダゾル-1・イル・エトキシ)-ベンジリジン]インダン-1-オン（化合物１０）（RG-DPJ-325）を調製した。
【００７９】
実施例−２
ａ）16-[4-(3-クロロプロポキシ)-3-メトキシベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物１１）（DPJ-RG-1150）
デヒドロエピアンドロステロン（0.75g、2.60ミリモル）と、上記で得た油性残渣である4-(3-クロロプロポキシ)-3-メトキシベンズアルデヒドと、水酸化ナトリウム（1g）との混合物を、メタノール（10ミリリットル）中で、室温で2時間撹拌した。反応の完了はＴＬＣによってモニターした。冷水を添加することによって反応物を沈殿させ、得られた沈殿物を濾過し、水洗し、乾燥させて、メタノールから結晶化させることによって、融点210-212℃である16-[4-(3-クロロプロポキシ)-3-メトキシベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物１１）（1g、76.96%）を得た。
【００８０】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
Ｕvmax（MeOH）：243.0nm（logε4.02）および331.0nm（logε4.36）であり、
ＦＴＩＲνmax（KBr）：3220.0cm-1、2922.9cm-1、2829.3cm-1、1709.1cm-1、1623.3cm-1、1593.5cm-1、1515.8cm-1、1447.7cm-1、1325.7cm-1、1260.0cm-1、1140.6cm-1、1094.1cm-1、1057.5cm-1、1023.7cm-1、916.4cm-1および806.0cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.98（s、3H、18-CH3）、1.08（s、3H、19-CH3）、2.31（m、2H、-OCH2CH2CH2Cl）、3.53（m、1H、3α-H）、3.77（t、2H、-CH2Cl）、3.89（s、3H、-OCH3）、4.21（t、2H、-OCH2-）、5.40（d、1H、6-CH）、6.95（d、1H、Jm=1.73Hz、2-CH、芳香族領域）、6.95（d、1H、Jo=8.27Hz、5-CH、芳香族領域）、7.06（d、1H、Jm=1.73Hz、2-CH、芳香族領域）、7.16（dd、1H、Jm=1.73Hz、Jo=8.45Hz、6-CH、芳香族領域）および7.38ppm（s、1H、vinylic-H、16-アリリデン基）であり、
Calcd. For Ｃ30Ｈ39Ｏ4Ｃｌ：Ｃ、72.20；Ｈ、7.88であり、Found：Ｃ、72.40；Ｈ、8.02であった。
【００８１】
ｂ）16-[3-(3-クロロプロポキシ)ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物１７）（DPJ-RG-1306）を、化合物１１について記述した方法により、3-(3-クロロプロポキシ)ベンズアルデヒドを用いて調製した。
【００８２】
ｃ）16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロスト-エン-3β-オル（化合物１２）（DPJ-RG-1151）
16-[4-(3-クロロプロポキシ)-3-メトキシベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物１１）（0.5g、1ミリモル）と粉末イミダゾール（0.75g）とを、110-120℃で5時間融合させた。反応の完了はＴＬＣによってモニターした。冷水を添加することによって反応物を沈殿させ、得られた固形物を濾過し、水洗し、乾燥させて、エチルアセテートから結晶化させることによって、融点199-201℃である化合物１２（0.38g、71.47%）を得た。
【００８３】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
ＵＶmax（MeOH）：243.4nm（logε4.04）および330.8nm（logε4.39）であり、
ＦＴＩＲνmax（KBr）：3215.3cm-1、2934.3cm-1、1700.9cm-1、1593.4cm-1、1514.3cm-1、1463.0cm-1、1329.9cm-1、1260.4cm-1、1143.7cm-1、1066.5cm-1、917.2cm-1および832.0cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.98（s、3H、18-CH3）、1.07（s、3H、19-CH3）、2.30（m、2H、-OCH2CH2CH2N＜）、3.54（m、1H、3α-H）、3.91（s、3H、-OCH3）、3.97（t、2H、-CH2N＜）、4.23（t、2H、-OCH2-）、5.39（d、1H、6-CH）、6.85（d、1H、Jo=8.33Hz、5-CH、芳香族領域）、6.93（s、1H、5-CH、イミダゾール）、7.06（d、2H、2-CH、芳香族領域と4-CH、イミダゾール）、7.13（d、1H、Jo=8.26Hz、6-CH、芳香族領域）、7.38（s、1H、vinylic-H、16-アリリデン基）および7.48ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ33Ｈ42Ｎ2Ｏ4：Ｃ、74.68；Ｈ、7.98；Ｎ、5.28であり、Found：Ｃ、74.62；Ｈ、7.82；Ｎ、5.31であった。
【００８４】
化合物１２について記述した方法により、化合物１７とイミダゾールとを融合させることによって、16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロ-ステン-3β-オル（化合物１８）（DPJ-RG-1307）を調製した。
【００８５】
ｄ）16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-イル・アセテート（化合物１３）（DPJ-RG-1196）
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物１２）（0.5g、0.94ミリモル）、無水酢酸（1ミリモル）および乾燥ピリジン（2ミリモル）を油浴中で2時間加熱した。その後、反応物を冷水中に移し、液体アンモニアで塩基性化した。得られた沈殿物を濾過し、水洗し、乾燥させて、n-ヘキサンから結晶化させることによって、融点109-111℃である化合物１３（0.27g、50.04%）を得た。
【００８６】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
ＵＶmax（MeOH）：249.0nm（logε4.06）および331.0nm（logε4.30）であり、
ＦＴＩＲνmax（KBr）：2942.1cm-1、1729.7cm-1、1628.3cm-1、1596.2cm-1、1513.2cm-1、1465.7cm-1、1371.4cm-1、1325.6cm-1、1248.5cm-1、1139.4cm-1、1095.7cm-1、1029.7cm-1、915.1cm-1および812.7cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.98（s、3H、18-CH3）、1.09（s、3H、19-CH3）、2.04（s、3H、-OCOCH3）、2.29（m、2H、-OCH2CH2CH2N＜）、3.91（s、3H、-OCH3）、3.98（t、2H、-CH2N＜）、4.23（t、2H、-OCH2-）、4.61（m、1H、3α-H）、5.42（d、1H、6-CH）、6.85（d、1H、Jo=8.48Hz、5-CH、芳香族領域）、6.93（s、1H、5-CH、イミダゾール）、7.07（m、2H、2-CH、芳香族領域と4-CH、イミダゾール）、7.12（dd、1H、Jm=1.44Hz、Jo=8.26Hz、6-CH、芳香族領域）、7.38（s、1H、vinylic-H、16-アリリデン基）および7.50ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ35Ｈ44Ｎ2Ｏ5：Ｃ、73.40；Ｈ、7.74；Ｎ、4.89であり、Found：Ｃ、73.52；Ｈ、7.95；Ｎ、5.01であった。
【００８７】
化合物１３について記述した方法により、化合物１８をアセチル化することによって、16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロ-ステン-3β-イル・アセテート（化合物１９）（DPJ-RG-1309）を調製した。
【００８８】
ｅ）16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物１４）（DPJ-RG-1219）
メタノール（100ミリリットル）中に16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシ-ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物１２）（1g、1.88ミリモル）が室温下で撹拌された状態にある検査液に、水素化ホウ素ナトリウム（1.5g）を2時間超の時間をかけて少しずつ添加した。反応混合物をさらに6時間撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、氷冷水を添加した。得られた沈殿物を濾過し、水洗し、乾燥させて、メタノールから結晶化させることによって、融点197-198℃である、化合物１４（0.85g、84.68%）を得た。
【００８９】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
ＵＶmax（MeOH）：263.6nm（logε4.02）であり、
ＦＴＩＲνmax（KBr）：3235.9cm-1、2928.7cm-1、1599.3cm-1、1514.0cm-1、1463.4cm-1、1410.2cm-1、1323.1cm-1、1258.8cm-1、1231.7cm-1、1167.5cm-1、1140.4cm-1、1079.6cm-1、1052.1cm-1、949.1cm-1、915.6cm-1および798.0cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.72（s、3H、18-CH3）、1.05（s、3H、19-CH3）、2.25（m、2H、-OCH2CH2CH2N＜）、3.53（m、1H、3α-H）、3.89（s、3H、-OCH3）、3.95（t、2H、-CH2N＜）、4.06（s、1H、17α-H）、4.23（t、2H、-OCH2-）、5.38（d、1H、6-CH）、6.45（s、1H、vinylic-H、16-アリリデン基）、6.81（m、1H、5-CH、芳香族領域）、6.93（m、3H、2-CH、6-CH、芳香族領域と5-CH、イミダゾール）、7.07（s、1H、4-CH、イミダゾール）および7.54ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ33Ｈ44Ｎ2Ｏ4：Ｃ、74.40；Ｈ、8.33；Ｎ、5.26であり、Found：Ｃ、74.27；Ｈ、8.39；Ｎ、5.39であった。
【００９０】
化合物１４について記述した方法により、化合物１８を水素化ホウ素ナトリウムで還元することによって、16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２０）（DPJ-RG-1310）を調製した。
【００９１】
ｆ）16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物１５）（DPJ-RG-1227）
16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物１４）（0.5g、0.94ミリモル）、無水酢酸（1ミリリットル）および乾燥ピリジン（2ミリリットル）を油浴中で2時間加熱した。反応混合物を冷水中に移し、液体アンモニアで塩基性化した。得られた沈殿物を濾過によって回収し、水洗し、乾燥させて、n-ヘキサンから結晶化させることによって、融点163-165℃である化合物１５（0.38g、65.64%）を得た。
【００９２】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
ＵＶmax（MeOH）：263.8nm（logε4.28）であり、
ＦＴＩＲνmax（KBr）：2938.9cm-1、1733.7cm-1、1595.9cm-1、1512.1cm-1、1443.3cm-1、1371.1cm-1、1239.5cm-1、1141.3cm-1、1034.2cm-1および804.5cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.80（s、3H、18-CH3）、1.05（s、3H、19-CH3）、2.04（s、3H、3β-OCOCH3）、2.22（s、3H、17β-OCOCH3）、2.26（m、2H、-OCH2CH2CH2N＜）、3.89（s、3H、-OCH3）、3.95（t、2H、-CH2N＜）、4.23（t、2H、-OCH2-）、4.61（m、1H、3α-H）、5.37（s、1H、17α-H）、5.40（d、1H、6-CH）、6.15（d、1H、vinylic-H、16-アリリデン基）、6.80（d、1H、Jo=8.08Hz、5-CH、芳香族領域）、6.89（s、2H、2-CH、芳香族領域と5-CH、イミダゾール）、6.93（dd、1H、Jm=1.78Hz、Jo=8.86Hz、6-CH、芳香族領域）、7.06（s、1H、4-CH、イミダゾール）および7.54ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ37Ｈ48Ｎ2Ｏ6：Ｃ、72.05；Ｈ、7.84；Ｎ、4.54であり、Found：Ｃ、72.14；Ｈ、7.72；Ｎ、4.66であった。
【００９３】
化合物１５について記述した方法により、化合物２０をアセチル化することによって、16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２１）（DPJ-RG-1311）を調製した。
【００９４】
ｇ）16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物１６）（DPJ-RG-1177）
シクロヘキサノン（10ミリリットル）と乾燥トルエン（150ミリリットル）との混合物に、16-[4-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}-3-メトキシベンジリデン]-17-オキソ-5-アンド-ロステン-3β-オル（化合物１２）（1g、1.88ミリモル）を溶解させた。共沸蒸留法によって水分を除去した。当該蒸留は、アルミニウムイソプロポキシド（1g）の乾燥トルエン（15ミリリットル）溶液を滴下しながら、ゆっくりと実施した。得られた反応混合物を4時間還元した。得られたスラリーを濾過し、反応生成物を乾燥トルエンで念入りに洗浄した。有機溶媒が除去されるまで、濾液と洗液との混合物を水蒸気蒸留した。結晶化した固形物を濾過し、水洗し、乾燥させ、ジエチルエーテルとn-ヘキサンとで処理することによって、融点107-109℃である化合物１６（0.75g、75.28%）を得た。
【００９５】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
ＵＶmax（MeOH）：242.4nm（logε4.38）および331.2nm（logε4.30）であり、
ＦＴＩＲνmax（KBr）：2936.4cm-1、1712.0cm-1、1666.1cm-1、1622.3cm-1、1595.3cm-1、1512.2cm-1、1463.2cm-1、1328.4cm-1、1260.2cm-1、1230.4cm-1、1141.7cm-1、1094.2cm-1、1027.4cm-1、917.7cm-1および810.6cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ1.01（s、3H、18-CH3）、1.25（s、3H、19-CH3）、2.26（m、2H、-OCH2CH2CH2N＜）、3.92（s、3H、-OCH3）、3.97（t、2H、-CH2N＜）、4.24（t、2H、-OCH2-）、5.76（s、1H、4-CH）、6.85（d、1H、Jo=8.30Hz、5-CH、芳香族領域）、6.94（s、1H、5-CH、イミダゾール）、7.06（m、2H、2-CH、芳香族領域と4-CH、イミダゾール）、7.13（dd、1H、Jm=1.27Hz、Jo=8.20Hz、6-CH、芳香族領域）、7.39（s、1H、vinylic-H、16-アリリデン基）および7.50ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ33Ｈ40Ｎ2Ｏ4：Ｃ、74.97；Ｈ、7.63；Ｎ、5.30であり、Found：Ｃ、74.82；Ｈ、7.66；Ｎ、5.49であった。
【００９６】
化合物１６について記述した方法により、化合物１８をオッペナウアー酸化することによって、16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物２２）（DPJ-RG-1308）を調製した。
【００９７】
実施例３
ａ）5-アンドロステン-3β,17β-ジオール
水素化ホウ素ナトリウム（0.06g）を、ＤＨＡ（1g、3.47ミリモル）の無水アルコール（50ミリリットル）溶液に、室温下で、少しずつ添加した。こうして得た溶液を冷却した後、希釈した酢酸によって中和した。得られた溶液を減圧下で濃縮した後、氷冷水で希釈した。これにより得られた乳白色の沈殿物をメタノールから結晶化させ、融点182-183℃の5-アンドロステン-3β,17β-ジオールである反応生成物（0.9g、89.11%）を得た。［Singh H.ら、Indian J. Chem.、1969年、7、1084-1087］。
【００９８】
ｂ）5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート
5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（1g、3.44ミリモル）、無水酢酸（2ミリリットル）および乾燥ピリジン（4ミリリットル）の混合物を、油浴中で2時間加熱した後、氷冷水中に移した。得られた沈殿物を濾過し、水洗し、乾燥させて、メタノールにおいて結晶化させ、融点163-165℃の5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（1g、81.3%）を得た。［Singh H.ら、Indian J. Chem.、1969年、7、1084-1087］。
【００９９】
ｃ）7-オキソ-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート
5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（5g、13.35ミリモル）が乾燥四塩化炭素（30ミリリットル）、無水酢酸（4.5ミリリットル）および氷酢酸（1.25ミリリットル）の混合物中に含有された状態にある溶液を、クロム酸ｔ−ブチルの溶液（35ミリリットル）を加えた状態で撹拌しながら処理した。得られた褐色の反応混合物を還流温度にし、さらに12時間撹拌した。その後、当該混合物を氷浴中で冷却し、10％シュウ酸溶液（75ミリリットル）で少しずつ処理した。固体のシュウ酸（5.5g）をさらに添加した後、反応混合物を室温で2時間撹拌した。有機相を除去し、水相を四塩化炭素（4x50ミリリットル）で抽出した。続いて、四塩化炭素の混合抽出物を5％炭酸ナトリウム溶液（2x25ミリリットル）および水で洗浄し、乾燥させた。溶媒を減圧下で除去することによって、淡黄色の固形物であり、融点220-221℃（文献値216-219℃）［Singh H.ら、Indian J. Chem.、1969年、7、1084-1087］の7-オキソ-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（3.2g、61.66%）である反応生成物をメタノールから結晶化させた。
【０１００】
ｄ）7-オキシミノ-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート
7-オキソ-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（1g、2.57ミリモル）および塩酸ヒドロキシルアミン（0.5g）を乾燥ピリジン（8ミリリットル）に添加し、蒸気浴中で2時間加熱した。反応混合物を水中に移し、得られた沈殿物を濾過し、水洗し、乾燥させた。メタノールから結晶化させた粗生成物から、高純度のオキシムであり、融点236-238℃（文献値226℃）［Singh H.ら、Indian J. Chem.、1969年、7、1084-1087］の7-オキシミノ-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（0.85g、86.54%）を得た。
【０１０１】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.82（s、3H、18-CH3）、1.14（s、3H、19-CH3）、2.04（s、6H、2 x -OCOCH3）、4.67（m、2H、3α-Hと17α-H）、6.46（s、1H、6-CH）および6.95ppm（br、1H、NOH、D2Oの添加により消失する）であった。
【０１０２】
ｅ）7-[Ｏ-(3-クロロプロピル)オキシミノ]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２３）（DPJ-RG-1221）
7-オキシミノ-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（1g、2.48ミリモル）および無水炭酸カリウム（2g）の混合物を、エチルメチルケトン（100ミリモル）中で110℃で3時間撹拌して還元した。得られた反応混合物に1-ブロモ-3-クロロプロパン（0.25ミリリットル、2.48ミリモル）を添加し、撹拌を20時間継続させてさらに還元した。反応の完了はＴＬＣによってモニターした。得られたスラリーを冷却し、濾過し、余分な溶媒を減圧下で除去することによって油性残渣を得た。氷冷水を油性残渣に添加した状態で一晩静置した。得られた沈殿物を濾過し、水洗し、乾燥させ、石油エーテル（60-80℃）から結晶化させて、分解点155℃の7-[Ｏ-(3-クロロプロピル)オキシミノ]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２３）（0.7g、58.82%）を得た。
【０１０３】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
ＵＶmax（MeOH）：241.4nm（logε4.16）であり、
ＦＴＩＲνmax（KBr）：2945.5cm-1、2878.1cm-1、1736.5cm-1、1640.6cm-1、1450.8cm-1、1317.7cm-1、1246.2cm-1、1033.4cm-1、953.2cm-1、909.3cm-1および840.0cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.81（s、3H、18-CH3）、1.13（s、3H、19-CH3）、2.03（s、6H、2 x -OCOCH3）、2.10（m、2H、-OCH2CH2CH2Cl）、3.60（t、2H、-CH2Cl）、4.14（t、2H、-OCH2-）、4.64（m、2H、3α-Hと17α-H）および6.43ppm（d、1H、6-CH）であり、
Calcd. For Ｃ26Ｈ38ＮＯ5Ｃｌ：Ｃ、65.05；Ｈ、7.98；Ｎ、2.92であり、Found：Ｃ、65.32；Ｈ、8.18；Ｎ、2.69であった。
【０１０４】
ｆ）7-[Ｏ-{3-(イミダゾル-1-イル)プロピル}オキシミノ]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２５）（DPJ-RG-1223）
7-[Ｏ-(3-クロロプロピル)オキシミノ]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２３）（1g、2.08ミリリットル）および粉末イミダゾール（1.5g）の混合物を110-120℃で5時間かけて融合させた。反応の完了はＴＬＣによってモニターした。反応生成物を氷冷水で急冷することによって、7-[Ｏ-{3-(イミダゾル-1-イル)プロピル}オキシミノ]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２４）を得た。
【０１０５】
還流溶液である7-[Ｏ-{3-(イミダゾル-1-イル)プロピル}オキシミノ]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテートを含有したメタノール（50ミリリットル）に水酸化カリウム（0.125g）を添加し、反応混合物をさらに45分間還元した。反応混合物を濃縮し、氷酢酸で酸性化した後、冷水中に移した。得られた沈殿物を濾過し、念入りに水洗し、乾燥して、ジエチルエーテルから結晶化させることによって、融点205-206℃の化合物２５（0.25g、23.45%）を得た。
【０１０６】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
ＵＶmax（MeOH）：258.2nm（logε4.17）であり、
ＦＴＩＲνmax（KBr）：3301.5cm-1、3107.3cm-1、2940.0cm-1、2871.2cm-1、1631.3cm-1、1511.8cm-1、1456.6cm-1、1377.7cm-1、1231.1cm-1、1187.9cm-1、1081.6cm-1、1059.7cm-1、1025.6cm-1、952.0cm-1、921.8cm-1、889.0cm-1および823.3cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.78（s、3H、18-CH3）、1.13（s、3H、19-CH3）、2.37（m、2H、-OCH2CH2CH2N＜）、3.65（m、2H、3α-Hと17α-H）、4.03（m、4H、-OCH2CH2CH2N＜）、6.39（d、1H、6-CH）、6.95（brs、5-CH、イミダゾール）、7.07（brs、4-CH、イミダゾール）および7.49ppm（brs、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ25Ｈ37Ｎ3Ｏ3：Ｃ、70.23；Ｈ、8.72；Ｎ、9.83であり、Found：Ｃ、70.19；Ｈ、8.94；Ｎ、9.76であった。
【０１０７】
実施例４
ａ）16α-ブロモ-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル
還流用溶液である17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（5g、17.33ミリモル）を含有した乾燥ベンゼン（100ミリリットル）および乾燥メタノール（100ミリリットル）に臭化銅（7g）を添加した。得られた反応混合物をさらに4時間還流すると共に、反応をＴＬＣでモニターした。得られた温溶液を濾過し、体積が約2/3になるよう減圧下で濃縮した。残存溶媒をベンゼン（50ミリリットル）で希釈し、水で2度洗浄した。ベンゼン層を回収し、乾燥させ、減圧下で溶媒を除去することによって、メタノールから結晶化させた反応生成物である融点167-168℃（文献値164-165℃）［Glazier ER、J. Org. Chem.、1962年、2937-2938］の16α-ブロモ-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（4g、62.77%）を得た。
【０１０８】
これは、1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.93（s、3H、18-CH3）、1.04（s、3H、19-CH3）、3.55（m、1H、3α-H）、4.55（t、1H、16β-CH）および5.38ppm（m、1H、6-CH）であった。
【０１０９】
Glazier ER、J. Org. Chem.、1962年、2937-2938に記載の方法により、1-インダノンを臭化銅で臭化することによって、2-ブロモ-1-インダノン（化合物３１）を調製した。
【０１１０】
ｂ）16α/β-ブロモ-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物２６）
シクロヘキサノン（10ミリリットル）および乾燥トルエン（100ミリリットル）の混合物に、16α-ブロモ-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（1g、2.72ミリモル）を溶解させた。トルエンで共沸蒸留することによって水分を除去した。当該蒸留は、アルミニウムイソプロポキシド（1g）を含有する乾燥トルエン（20ミリリットル）溶液を滴下しながら、ゆっくりと実施した。反応混合物を1時間還元した後、室温で一晩静置した。得られたスラリーを濾過し、反応生成物を乾燥トルエンで洗浄した。有機溶媒が完全に除去されるまで、濾液と洗液との混合物を水蒸気蒸留した。得られた固形物を濾過し、水洗し、乾燥させ、アセトンとn-ヘキサンの混合物から結晶化させることによって、反応生成物である融点128-130℃の16α/β-ブロモ-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物２６）（0.6g、60.33%）を得た。
【０１１１】
これのスペクトル分析結果は：
ＵＶmax（MeOH）：238.8nm（logε4.22）であり、
ＩＲ（KBr）：2930.0cm-1、1748.5cm-1、1667.2cm-1、1612.1cm-1、1453.5cm-1、1228.6cm-1および1017.9cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ1.13（s、3H、18-CH3）、1.22（s、3H、19-CH3）、4.12(t)および4.56（q）（面積比3.5:1、1H、16α-Hと16β-H）ならびに5.76ppm（s、1H、4-CH）であった。
【０１１２】
ｃ）16β-(イミダゾル-1-イル)-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物２７）（DPJ-RG-1240）
16α-ブロモ-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（1g、2.72ミリモル）とイミダゾール（1.5g）との混合物を140-145℃で1時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、氷冷水によって沈殿させた。得られた固形物を濾過し、水洗し、乾燥させ、アセトンから結晶化させることによって、融点249-251℃の化合物２７（0.5g、51.81%）を得た。
【０１１３】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
ＦＴＩＲνmax（KBr）：3303.8cm-1、2943.0cm-1、1744.8cm-1、1499.5cm-1、1456.1cm-1、1374.7cm-1、1318.3cm-1、1243.9cm-1、1065.8cm-1、1041.4cm-1および914.2cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ1.02（s、3H、18-CH3）、1.07（s、3H、19-CH3）、3.55（m、1H、3α-H）、4.47（m、1H、16α-H）、5.39（d、1H、6-CH）、6.95（s、1H、5-CH、イミダゾール）、7.12（s、1H、4-CH、イミダゾール）および7.70ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ22Ｈ30Ｎ2Ｏ2：Ｃ、74.54；Ｈ、8.53；Ｎ、7.90であり、Found：Ｃ、74.29；Ｈ、9.04；Ｎ、7.73であった。
【０１１４】
化合物２７について記述したようにイミダゾールと化合物３１とを融合させることによって2-(１H-1-イミダゾリル)-1-インダノン（化合物３２）を調製した。
【０１１５】
ｄ）16β-(イミダゾル-1-イル)-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２８）（DPJ-RG-1317）
16β-(イミダゾル-1-イル)-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物２７）（1g、2.82ミリモル）をこれが撹拌された状態で含有するメタノール（100ミリリットル）の検査液に、室温下で、水素化ホウ素ナトリウム（1.5g）を2時間を超える時間をかけて少しずつ添加した。反応混合物をさらに4時間撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、冷水を添加した。得られた沈殿物を濾過し、水洗し、乾燥させ、メタノールから結晶化させることによって、融点285-287℃の化合物２８（0.75g、74.57%）を得た。
【０１１６】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
ＦＴＩＲνmax（KBr）：3259.0cm-1、2930.9cm-1、1501.4cm-1、1459.5cm-1、1365.1cm-1、1235.8cm-1、1152.7cm-1、1083.2cm-1および955.1cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.89（s、3H、18-CH3）、1.03（s、3H、19-CH3）、3.43（m、1H、3α-H）、3.79（m、1H、17α-H）、4.59（q、1H、16α-H）、5.32（d、1H、6-CH）、6.97（s、1H、5-CH、イミダゾール）、7.04（s、1H、4-CH、イミダゾール）および7.59ppm（m、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ22Ｈ32Ｎ2Ｏ2：Ｃ、74.12；Ｈ、9.05；Ｎ、7.86であり、Found：Ｃ、74.39；Ｈ、9.62；Ｎ、8.02であった。
【０１１７】
ｅ）16β-(イミダゾル-1-イル)-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２９）（DPJ-RG-1318）
化合物２８である16β-(イミダゾル-1-イル)-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（1g、2.80ミリモル）、無水酢酸（2ミリリットル）および乾燥ピリジン（2ミリリットル）の混合物を、蒸気浴中で2時間加熱した。その後、得られた反応混合物を冷水中に移し、液体アンモニアで塩基性化した。得られた沈殿物を濾過によって回収し、水洗し、乾燥させて、アセトンから結晶化させることによって、融点197-199℃である化合物２９（0.8g、64.72%）を得た。
【０１１８】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
ＦＴＩＲνmax（KBr）：2937.5cm-1、1732.9cm-1、1494.1cm-1、1435.5cm-1、1371.8cm-1、1250.1cm-1、1072.9cm-1、1037.7cm-1および906.0cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ1.02（s、3H、18-CH3）、1.07（s、3H、19-CH3）、1.74（s、3H、17β-OCOCH3）、2.04（s、3H、3β-OCOCH3）、4.61（m、1H、3α-H）、4.79（m、2H、16α-Hと17α-H）、5.39（d、1H、6-CH）、6.89（s、1H、5-CH、イミダゾール）、7.02（s、1H、4-CH、イミダゾール）および7.48ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ26Ｈ36Ｎ2Ｏ4：Ｃ、70.88；Ｈ、8.24；Ｎ、6.36であり、Found：Ｃ、70.29；Ｈ、8.95；Ｎ、6.49であった。
【０１１９】
ｆ）16β-(イミダゾル-1-イル)-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物３０）（DPJ-RG-1241）
16α/β-ブロモ-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物２６）（1g、2.74ミリモル）およびイミダゾール（1.5g）の混合物を破砕し、130-135℃で1時間加熱した。得られた反応混合物を室温下で冷却した後、冷水を添加した。得られた反応生成物を濾過し、水洗し、乾燥させ、アセトンとn-ヘキサンとの混合物から結晶化することによって、融点179-181℃の化合物３０（0.4g、41.45%）を得た。
【０１２０】
これのスペクトル分析および元素分析の結果は：
ＵＶmax（MeOH）：238.4nm（logε4.31）であり、
ＦＴＩＲνmax（KBr）：2947.6cm-1、1748.7cm-1、1667.5cm-1、1497.7cm-1、1456.0cm-1、1229.8cm-1、1108.9cm-1および1045.0cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ1.06（s、3H、18-CH3）、1.24（s、3H、19-CH3）、4.46（m、1H、16α-H）、5.76（s、1H、4-CH）、6.95（s、1H、5-CH、イミダゾール）、7.09（s、1H、4-CH、イミダゾール）および7.66ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ22Ｈ28Ｎ2Ｏ2：Ｃ、74.97；Ｈ、8.01；Ｎ、7.95であり、Found：Ｃ、74.71；Ｈ、8.58；Ｎ、8.12であった。
【０１２１】
性状
2-[2-(3-クロロプロポキシ)-ベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物３）
歩留まりは66.46%であり、融点は130-134℃であった。
【０１２２】
これの分析結果は：
ＩＲνmax（KBr）：2970cm-1、1680cm-1、1600cm-1、1440cm-1、1230cm-1、740cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ2.31（p、2H、-OCH2CH2CH2Cl-）、3.81（t、2H、-CH2Cl）、3.98（s、2H、3-CH2 インダノン）、4.19（t、2H、-OCH2）、6.96（d、1H、Jo=8.49Hz、芳香族領域）、7.03（t、1H、Jo=7.52Hz、芳香族領域）、7.33（dd、1H、J Jo=6.83Hz、芳香族領域）、7.40（t、1H、Jo=7.34Hz、芳香族領域）、7.59（m、3H、芳香族領域 □ndanones）、7.89（d、1H、Jo=7.61Hz、7-H □ndanones）、8.11（s、1H、vinylic-H）であり、
Calcd. For Ｃ19Ｈ17Ｏ2Ｃｌ：Ｃ、72.95；Ｈ、5.47であり、Found：Ｃ、70.31；Ｈ、5.09であった。
【０１２３】
2-[2-(3-イミダゾル-1-イル-プロポキシ)-ベンジリジン]-インダン-1-オン（化合物４）（DPJ-1055）
歩留まりは60.3%であり、融点は76-78℃であった。
【０１２４】
これの分析結果は：
ＩＲνmax（KBr）：3360cm-1、1680cm-1、1600cm-1、1140cm-1、750cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ2.31（p、2H、-OCH2CH2CH2-）、3.93（t、2H、-CH2N）、4.00（s、2H、3-CH2 インダノン）、4.26（t、2H、-OCH2）、6.87（d、1H、Jo=8.18Hz、芳香族領域）、6.98（d、1H、イミダゾール）、7.39（m、8H、芳香族領域とイミダゾール）、7.92（d、1H、Jo=7.76Hz、7-H □ndanones）、8.19（s、1H、vinylic-H）であり、
Calcd. For Ｃ19Ｈ17Ｏ2Ｃｌ：Ｃ、72.95；Ｈ、5.47であり、Found：Ｃ、70.31；Ｈ、5.09であった。
【０１２５】
2-[3-(3-クロロプロポキシ)-4-メトキシベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物５）
歩留まりは42.86%であり、融点は115-118℃であった。
【０１２６】
これの分析結果は：
ＩＲνmax（KBr）：2900cm-1、1680cm-1、1600cm-1、1260cm-1、1140cm-1、730cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ2.32（p、2H、-OCH2CH2CH2-）、3.81（t、2H、-CH2Cl）、3.88（s、3H、-OCH3）、3.96（s、2H、3-CH2 インダノン）、4.23（t、2H、-OCH2）、6.95（d、1H、Jo=8.3Hz、芳香族領域）、7.21（s、1H、芳香族領域）、7.29（dd、1H、Jo=8.56Hz、Jm=1.62Hz、芳香族領域）、7.40（t、1H、Jo=7.10Hz、芳香族領域と□ndanones）、7.56（m、3H、芳香族領域と□ndanonesとvinylic-H）、7.88（d、1H、Jo=7.56Hz、7-H □ndanones）であり、
Calcd. For Ｃ19Ｈ17Ｏ2Ｃｌ：Ｃ、72.95；Ｈ、5.47であり、Found：Ｃ、70.31；Ｈ、5.09であった。
【０１２７】
2-[3-(3-イミダゾル-1・イル・プロポキシ)-4-メトキシベンジリデン)インダン-1-オン（化合物６）（DPJ-RG-1090）
歩留まりは55.49%であり、融点は176-180℃であった。
【０１２８】
これの分析結果は：
ＩＲνmax（KBr）：2900cm-1、1680cm-1、1590cm-1、1250cm-1、1070cm-1、740cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ2.30（p、2H、-OCH2CH2CH2-）、3.93（s、3H、-OCH3）、3.96（t、2H、-CH2N）、4.01（s、2H、3-CH2 インダノン）、4.26（t、2H、-OCH2）、6.96（d、1H、Jo=8.45Hz、芳香族領域とイミダゾリル基）、7.10（d、1H、芳香族領域）、7.33（m、2H、芳香族領域(□ndanones)とイミダゾリル基）、7.55（m、4H、芳香族領域(□ndanones)とイミダゾリル基とvinylic-H）および7.87ppm（d、1H、Jo=7.53Hz、7-CH □ndanones）であり、
Calcd. For Ｃ23Ｈ22Ｏ3Ｎ2：Ｃ、73.78；Ｈ、5.92、Ｎ、7.48であり、Found：Ｃ、66.90；Ｈ、5.93、Ｎ、6.66であった。
【０１２９】
2-[4-(3-クロロプロポキシ)-3-メトキシベンジリデン]-インダン-1-オン（化合物７）（DPJ-1039）
歩留まりは27.5%であり、融点は140-144℃であった。
【０１３０】
これの分析結果は：
ＩＲνmax（KBr）：2240cm-1、1700cm-1、1605cm-1、1240cm-1、1140cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ2.33（p、2H、-OCH2CH2CH2-）、3.79（t、2H、-CH2Cl）、3.95（s、3H、-OCH3）、4.04（s、2H、インダノンの3-CH2）、4.25（t、2H、-OCH2）、6.99（d、1H、Jo=8.41Hz、芳香族領域）、7.20（d、1H、Jo=1.91Hz、芳香族領域）、7.31（dd、1H、Jo=6.58Hz、Jm=1.92Hz、芳香族領域）、7.43（t、1H、Jo=6.96Hz）、7.59（m、3H、芳香族領域 □ndanonesとvinylic-H）、7.91（d、1H、Jo=7.56Hz、□ndanonesの7-H）であり、
Calcd. For Ｃ20Ｈ19Ｏ3Ｃｌ：Ｃ、70.07；Ｈ、5.58であり、Found：Ｃ、68.41；Ｈ、4.93であった。
【０１３１】
2-[4-(3-イミダゾル-1・イル・プロポキシ)-3-メトキシベンジリデン)インダン-1-オン（化合物８）（RG-DPJ-195）
歩留まりは34.28%であり、融点は123-127℃であった。
【０１３２】
これの分析結果は：
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ2.33（p、2H、-OCH2CH2CH2-）、3.98（s、3H、-OCH3）、4.01（t、2H、-OCH2CH2CH2N）、4.29（t、2H、-OCH2-）、6.89（d、1H、芳香族領域）、6.99（s、1H、イミダゾリル基のプロトン）、7.12（s、1H、芳香族領域）、7.21（s、1H、イミダゾリル基）、7.21（s、1H、芳香族領域）、7.44（s、1H、芳香族領域）、7.55（t、1H、イミダゾリル基）および7.60ppm（m、3H、芳香族領域）であった。
【０１３３】
2-[3-(2-クロロエトキシ)-ベンジリデン)インダン-1-オン（化合物９）（RG-DPJ-324）
歩留まりは36.74%であり、融点は136-138℃であった。
【０１３４】
これの分析結果は：
ＩＲ（KBr）：2955cm-1、1680cm-1、1590cm-1、1420cm-1、1225cm-1および730cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ3.88（t、2H、-CH2Cl）、4.06（s、2H、3-CH2 インダノン）、4.31（t、2H、-OCH2-）、6.96（dd、1H、Jo=8.12Hz、Jm=2.52Hz、芳香族領域）、7.22（t、1H、Jm=2.05Hz、芳香族領域）、7.32（d、1H、芳香族領域）、7.40（t、2H、芳香族領域）、7.64（d、1H、芳香族領域）、7.71（t、1H、芳香族領域）および7.91ppm（d、1H、7-H  □ndanones）であった。
【０１３５】
2-[3-(2-イミダゾル-1・イル・エトキシ)-ベンジリジン]インダン-1-オン（化合物１０）（RG-DPJ-325）
歩留まりは32.24%であり、融点は218-220℃であった。
【０１３６】
これの分析結果は：
ＩＲ（KBr）：2940cm-1、1690cm-1、1610cm-1、1240cm-1、1085cm-1および740cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ4.04（s、2H、3-CH2 インダノン）、4.30（t、2H、-CH2N）、4.42（t、2H、-OCH2-）、6.92（dd、1H、芳香族領域 Jo=8.10Hz、Jm=2.36Hz）、7.14（m、2H、芳香族領域）、7.36（m、3H、芳香族領域とイミダゾリル基）、7.51（m、3H、芳香族領域（□ndanones）とvinylic-H）、7.57（s、1H、イミダゾリル基）および7.93ppm（d、1H、7-CH  □ndanones）であった。
【０１３７】
16-[3-(3-クロロプロポキシ)ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロステン-3β-オル（化合物１７）（DPJ-RG-1306）
歩留まりは40.98%であり、融点は145-147℃であった。
【０１３８】
これの分析結果は：
ＦＴＩＲνmax（KBr）：3419.2cm-1、2932.9cm-1、1715.6cm-1、1628.7cm-1、1580.1cm-1、1445.1cm-1、1375.0cm-1、1257.2cm-1、1215.4cm-1、1163.3cm-1、1054.2cm-1、1008.0cm-1、918.4cm-1および873.6cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.90（s、3H、18-CH3）、1.00（s、3H、19-CH3）、2.19（m、2H、-OCH2CH2CH2Cl）、3.40（m、1H、3α-H）、3.67（t、2H、-CH2Cl）、4.06（t、2H、-OCH2-）、5.27（d、1H、6-CH）、6.79（d、1H、Jo=8.01Hz、4-CH、芳香族領域）、6.93（s、1H、2-CH、芳香族領域）、7.02（d、1H、Jo=7.55Hz、6-CH、芳香族領域）および7.18-7.24ppm（m、2H、5-CH、芳香族領域とvinylic-H、16-アリリデン）であり、
Calcd. For Ｃ29Ｈ37Ｏ3Ｃｌ：Ｃ、74.26；Ｈ、7.95であり、Found：Ｃ、74.64；Ｈ、8.12であった。
【０１３９】
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロ-ステン-3β-オル（化合物１８）（DPJ-RG-1307）
歩留まりは45.87%であり、融点は211-212℃であった。
【０１４０】
これの分析結果は：
ＦＴＩＲνmax（KBr）：3253.0cm-1、2932.8cm-1、2837.0cm-1、1713.9cm-1、1629.0cm-1、1576.6cm-1、1448.6cm-1、1385.6cm-1、1269.0cm-1、1160.8cm-1、1067.0cm-1、919.8cm-1、872.7cm-1および779.6cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.98（s、3H、18-CH3）、1.07（s、3H、19-CH3）、2.22（m、2H、-OCH2CH2CH2N＜）、3.49（m、1H、3α-H）、3.92（t、2H、-CH2N＜）、4.21（t、2H、-OCH2-）、5.35（s、1H、6-CH）、6.84（dd、1H、Jm=2.17Hz、Jo=8.17Hz、4-CH、芳香族領域）、6.88（s、1H、5-CH、イミダゾール）、7.02（m、2H、2-CH、芳香族領域と4-CH、イミダゾール）、7.13（d、1H、Jo=7.64Hz、6-CH、芳香族領域）、7.26-7.34（m、2H、5-CH、芳香族領域とvinylic-H、16-アリリデン）および7.44ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ32Ｈ40Ｎ2Ｏ3：Ｃ、76.77；Ｈ、8.05；Ｎ、5.59であり、Found：Ｃ、76.85；Ｈ、8.19；Ｎ、5.65であった。
【０１４１】
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-17-オキソ-5-アンドロ-ステン-3β-イル・アセテート（化合物１９）（DPJ-RG-1309）
歩留まりは47.16%であり、融点は148-150℃であった。
【０１４２】
これの分析結果は：
ＦＴＩＲνmax（KBr）：2940.6cm-1、1728.2cm-1、1631.8cm-1、1575.8cm-1、1508.0cm-1、1443.8cm-1、1374.8cm-1、1254.0cm-1、1163.7cm-1、1030.5cm-1、908.8cm-1および873.9cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.98（s、3H、18-CH3）、1.09（s、3H、19-CH3）、2.03（s、3H、-OCOCH3）、2.23（m、2H、-OCH2CH2CH2N＜）、3.91（t、2H、-CH2N＜）、4.21（t、2H、-OCH2-）、4.58（m、1H、3α-H）、5.41（d、1H、6-CH）、6.83（dd、1H、Jm=2.15Hz、Jo=8.11Hz、4-CH、芳香族領域）、6.87（s、1H、5-CH、イミダゾール）、6.97（s、1H、2-CH、芳香族領域）、7.02（s、1H、4-CH、イミダゾール）、7.13（d、1H、Jo=7.73Hz、6-CH、芳香族領域）、7.30（m、2H、5-CH、芳香族領域とvinylic-H、16-アリリデン）および7.43ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ33Ｈ42Ｎ2Ｏ4：Ｃ、74.69；Ｈ、7.98；Ｎ、5.28であり、Found：Ｃ、74.82；Ｈ、7.49；Ｎ、5.31であった。
【０１４３】
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール（化合物２０）（DPJ-RG-1310）
歩留まりは50.2%であり、融点は133-135℃であった。
【０１４４】
これの分析結果は：
ＦＴＩＲνmax（KBr）：3373.7cm-1、2936.1cm-1、1601.2cm-1、1438.1cm-1、1366.7cm-1、1252.4cm-1、1161.9cm-1、1050.8cm-1および955.5cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.72（s、3H、18-CH3）、1.04（s、3H、19-CH3）、2.25（m、2H、-OCH2CH2CH2N＜）、3.54（m、1H、3α-H）、3.91（t、2H、-CH2N＜）、4.06（s、1H、17α-H）、4.21（t、2H、-OCH2-）、5.38（d、1H、6-CH）、6.48（d、1H、vinylic-H、16-アリリデン）、6.73（dd、1H、Jm=2.29Hz、Jo=8.03Hz、4-CH、芳香族領域）、6.87（s、4H、2-CH、6-CH、芳香族領域と4-CH、5-CH、イミダゾール）、7.26（m、1H、5-CH、芳香族領域）および7.48ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ32Ｈ42Ｎ2Ｏ3：Ｃ、76.46；Ｈ、8.42；Ｎ、5.57であり、Found：Ｃ、76.42；Ｈ、8.59；Ｎ、5.41であった。
【０１４５】
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-5-アンドロステン-3β,17β-ジオール・ジアセテート（化合物２１）（DPJ-RG-1311）
歩留まりは34.48%であり、融点は97-99℃であった。
【０１４６】
これの分析結果は：
ＦＴＩＲνmax（KBr）：2939.5cm-1、1732.6cm-1、1600.5cm-1、1440.4cm-1、1372.0cm-1、1241.2cm-1、1162.1cm-1、1034.7cm-1および907.6cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ0.79（s、3H、18-CH3）、1.05（s、3H、19-CH3）、2.04（s、3H、3β-OCOCH3）、2.21（s、3H、17β-OCOCH3）、2.32（m、2H、-OCH2CH2CH2N＜）、3.91（t、2H、-CH2N＜）、4.20（t、2H、-OCH2-）、4.59（m、1H、3α-H）、5.37（s、1H、17α-H）、5.41（d、1H、6-CH）、6.17（s、1H、vinylic-H、16-アリリデン）、6.73（d、1H、Jo=7.96Hz、4-CH、芳香族領域）、6.84（s、1H、2-CH、芳香族領域）、6.93-7.06（m、3H、6-CH、芳香族領域と4-CH、5-CH、イミダゾール）、7.26（m、1H、5-CH、芳香族領域）および7.49ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ36Ｈ46Ｎ2Ｏ5：Ｃ、73.69；Ｈ、7.90；Ｎ、4.77であり、Found：Ｃ、73.51；Ｈ、7.99；Ｎ、4.94であった。
【０１４７】
16-[3-{3-(イミダゾル-1-イル)プロポキシ}ベンジリデン]-4-アンドロステン-3,17-ジオン（化合物２２）（DPJ-RG-1308）
歩留まりは50.25%であり、融点は81-83℃であった。
【０１４８】
これの分析結果は：
ＦＴＩＲνmax（KBr）：2937.9cm-1、1717.0cm-1、1663.4cm-1、1622.8cm-1、1576.0cm-1、1448.5cm-1、1256.8cm-1、1226.2cm-1、1179.0cm-1、1162.2cm-1、1080.7cm-1、1026.6cm-1、915.8cm-1および864.3cm-1であり、
1Ｈ ＮＭＲ（CDCl3）：δ1.02（s、3H、18-CH3）、1.25（s、3H、19-CH3）、2.26（m、2H、-OCH2CH2CH2N＜）、3.94（t、2H、-CH2N＜）、4.23（t、2H、-OCH2-）、5.76（d、1H、4-CH）、6.90（dd、1H、Jm=1.90Hz、Jo=8.12Hz、4-CH、芳香族領域）、6.95（s、1H、5-CH、イミダゾール）、7.02（s、1H、2-CH、芳香族領域）、7.08（s、1H、4-CH、イミダゾール）、7.16（d、1H、Jo=7.68Hz、6-CH、芳香族領域）、7.33（t、1H、Jo=7.91Hz、5-CH、芳香族領域）、7.40（s、1H、vinylic-H、16-アリリデン）および7.57ppm（s、1H、2-CH、イミダゾール）であり、
Calcd. For Ｃ32Ｈ38Ｎ2Ｏ3：Ｃ、77.08；Ｈ、7.68；Ｎ、5.62であり、Found：Ｃ、77.22；Ｈ、7.49；Ｎ、5.88であった。
【０１４９】
種々の化合物の合成経路を反応式１〜５に図示する。
【０１５０】
【化１６】
2009508839.tif 000018
【０１５１】
【化１７】
2009508839.tif 000019
【０１５２】
【化１８】
2009508839.tif 000020
【０１５３】
【化１９】
2009508839.tif 000021
【０１５４】
【化２０】
2009508839.tif 000022
【０１５５】
生物学的活性
文献［Thompson, E.A.とSiiteri, P.K.J.、Biol. Chem、1974年、249、5364-5372］に記載の方法により、ヒト正期産胎盤組織に由来するミクロソーム画分から酵素を得た。その記載に従い、単離したミクロソームを、最小量のリン酸バッファー（0.05M、Ph7.4）に懸濁し、-30℃で保存した。4ヶ月以内の保存で活性が消失することはなかった。
【０１５６】
アロマターゼ阻害についての分析は、［1β、2β-3Ｈ］テストステロンの芳香化に伴って形成された3Ｈ2Ｏを測定することによって酵素活性をモニターする方法［Foester, A.Bら、J. Med. Chem.、1983年、26、50-54；Graves, P.Eら、Endocrinology、1979年、105、52-57］に準じた方法により実施した。各培養チューブ内には、0.225μCiの［1β、2β-3Ｈ］テストステロン、5μMの非標識テストステロン、2ミリモルのＮＡＤＰＨ、20ミリモルのグルコース-6-リン酸、1EUのグルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ、および阻害剤（0-250μM）を含有するリン酸バッファー（0.05M、Ph7.4）を含有させた。試験化合物は、エタノールに溶解し、バッファーで希釈した。エタノールの終濃度は、コントロールおよび阻害剤の培養のいずれにおいても2％とした。各チューブは、振とう水槽中で、30℃で5分間、前培養した。反応は、ミクロソームタンパク質（0.5mg）の添加によって開始させた。各培養のための総量は0.5ミリリットルとした。反応は、0分後、7分後、14分後、21分後に100μLずつ培養液を抽出し、200μLの冷たい1ミリモルＨｇＣｌ2溶液に添加することによって終了させた。デキストラン被膜処理された活性炭（DCC）の水性溶液（2％）を200μL添加した後、容器を20分間振とうし、1500gで5分間遠心して、活性炭に吸着したステロイドを分離した。上清の一部を用い、ベックマン・液体シンチレーションスペクトロメータ（LS8000）にて、シンチレーション混合物における3Ｈ2Ｏの数量を検出した。
【０１５７】
【表１−１】
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【０１５８】
【表１−２】
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【０１５９】
【表１−３】
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【０１６０】
【表２−１】
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【０１６１】
【表２−２】
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【国際調査報告】
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