(57)【要約】  本発明は、リソバクチンアミド類、それらの製造方法、並びに、疾患、特に細菌感染疾患の処置および／または予防に利用される医薬を製造するためのそれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
2009533371.tif 000465
［式中、
Ｒ１は、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルまたは１,３−チアゾール−４−イルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルおよび１,３−チアゾール−４−イルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチル、メチルおよびメトキシからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ２は、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルまたは１,３−チアゾール−４−イルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルおよび１,３−チアゾール−４−イルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチル、メチルおよびメトキシからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ３は、水素、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、または、５員または６員のヘテロアリールメチルを表し
｛ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルおよび窒素を介して結合している５員または６員の複素環からなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ４は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ５は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ６は、Ｃ１−Ｃ６−アルキルを表し
｛ここで、アルキルは、アミノ、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノ、［アミノ−（イミノ）メチル］アミノ、２−ピリジル、３−ピリジルおよび４−ピリジルからなる群から選択される１個の置換基により置換されている｝、
Ｒ７は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチルまたはトリメチルシリルメチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ８は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ９は、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ１０は、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチル、２−アミノ−２−オキソエチル、２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル、（アミノスルホニル）（ヒドロキシ）メチル、２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−２−オキソエチルまたは２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ１１は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチル、２−アミノ−２−オキソエチル、２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル、（アミノスルホニル）（ヒドロキシ）メチル、２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−２−オキソエチルまたは２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝］
の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ、
但し、式
【化２】
2009533371.tif 000466
［式中、
Ｒ１は、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルまたは１,３−チアゾール−４−イルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルおよび１,３−チアゾール−４−イルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチル、メチルおよびメトキシからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ２は、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルまたは１,３−チアゾール−４−イルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルおよび１,３−チアゾール−４−イルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチル、メチルおよびメトキシからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
そして、
Ｒ１２は、水素またはメチルを表す］
の化合物またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つを除く。
【請求項２】
式中、
Ｒ１０が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチル、２−アミノ−２−オキソエチル、２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル、（アミノスルホニル）（ヒドロキシ）メチル、２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−２−オキソエチルまたは２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表す
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝
請求項１に記載の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項３】
式中、
Ｒ１が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチルおよび３−ピリジルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびメチルからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ２が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチルおよび３−ピリジルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびメチルからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ３が、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、フェニル、ベンジル、２−ピリジル、３−ピリジルまたは４−ピリジルを表し
｛ここで、フェニル、ベンジル、２−ピリジル、３−ピリジルおよび４−ピリジルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ４が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリールメチルまたはトリメチルシリルメチルを表し
｛ここで、アルキルは、ヒドロキシ置換基で置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルメチル、ベンジルおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ５が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリールメチルまたはトリメチルシリルメチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジルおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ６が、Ｃ１−Ｃ６−アルキルを表し
｛ここで、アルキルは、アミノ、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノ、［アミノ−（イミノ）メチル］アミノ、２−ピリジル、３−ピリジルおよび４−ピリジルからなる群から選択される１個の置換基により置換されている｝
Ｒ７が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリールメチルまたはトリメチルシリルメチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジルおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ８が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリールメチルまたはトリメチルシリルメチルを表し
｛ここで、アルキルは、１個のヒドロキシ置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルメチル、ベンジルおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ９が、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、フェニル、トリメチルシリルメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、メチルは、ヒドロキシ、アミノおよびメルカプトからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルおよびフェニルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ１０が、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、フェニル、トリメチルシリルメチル、２−アミノ−２−オキソエチル、２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル、（アミノスルホニル）（ヒドロキシ）メチル、２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−２−オキソエチルまたは２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルおよびフェニルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ１１が、メチルまたはエチルを表す
｛ここで、メチルおよびエチルは、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよい｝
請求項１または請求項２に記載の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ、
但し、式中、
Ｒ１が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチルおよび３−ピリジルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびメチルからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ２が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチルおよび３−ピリジルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびメチルからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
そして、
Ｒ１２が、水素またはメチルを表す、
式（Ｉａ）の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つを除く。
【請求項４】
式中、
Ｒ１が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチルまたはベンジルを表す
｛ここで、ベンジルは、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびメチルからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
請求項３に記載の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項５】
式中、
Ｒ３が、フェニル、ベンジル、２−ピリジル、３−ピリジルまたは４−ピリジルを表す
｛ここで、フェニル、ベンジル、２−ピリジル、３−ピリジルおよび４−ピリジルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝
請求項３または請求項４に記載の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項６】
式中、
Ｒ１０が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、フェニル、トリメチルシリルメチル、２−アミノ−２−オキソエチル、２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル、（アミノスルホニル）（ヒドロキシ）メチル、２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−２−オキソエチルまたは２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表す
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルおよびフェニルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝
請求項３ないし請求項５のいずれかに記載の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項７】
式中、
Ｒ１が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し、
Ｒ２が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し、
Ｒ３が、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、３−ピリジルまたはフェニルを表し
｛ここで、３−ピリジルまたはフェニルは、ハロゲン、シアノ、メチル、メトキシ、ジメチルアミノおよびジエチルアミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ４が、−ＣＨ（ＯＨ）−Ｃ１−Ｃ５−アルキルまたは−ＣＨ（ＯＨ）フェニルを表し
｛ここで、−ＣＨ（ＯＨ）フェニルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−ジアルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ５が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、ベンジルまたはトリメチルシリルメチルを表し、
Ｒ６が、直鎖Ｃ２−Ｃ４−アルキルを表し
｛ここで、アルキルは、アミノ、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されている｝
Ｒ７が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、ベンジルまたはトリメチルシリルメチルを表し、
Ｒ８が、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）−Ｃ１−Ｃ５−アルキルまたは−ＣＨ（ＯＨ）フェニルを表し
｛ここで、−ＣＨ（ＯＨ）フェニルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１Ｃ４−ジアルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ９が、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、ヒドロキシメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し、
Ｒ１０が、水素、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、２−アミノ−２−オキソエチルまたは２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、Ｃ１−Ｃ４−アルキルは、アミノおよびヒドロキシからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく（但し、Ｒ１０は４−アミノブト−１−イルではない）｝、
Ｒ１１がメチルを表す
｛ここで、メチルは、ヒドロキシおよびアミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されている｝
請求項１ないし請求項６のいずれかに記載の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ、
但し、式中、
Ｒ１が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し、
Ｒ２が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し、
そして、
Ｒ１２が、水素またはメチルを表す、
式（Ｉａ）の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つを除く。
【請求項８】
式中、
Ｒ１が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イルまたはトリメチルシリルメチルを表す、
請求項７に記載の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項９】
式中、
Ｒ２が、２,２−ジメチルプロプ−１−イルまたは３−ピリジルメチルを表す、
請求項７または請求項８に記載の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項１０】
式中、
Ｒ３が、フェニルを表す
｛ここで、フェニルは、ハロゲン、シアノ、メチル、メトキシ、ジメチルアミノおよびジエチルアミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよい｝
請求項７ないし請求項９のいずれかに記載の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項１１】
式中、
Ｒ８が、−ＣＨ（ＯＨ）−Ｃ１−Ｃ５−アルキルまたは−ＣＨ（ＯＨ）フェニルを表す
｛ここで、−ＣＨ（ＯＨ）フェニルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−ジアルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよい｝
請求項７ないし請求項１０のいずれかに記載の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項１２】
式中、
Ｒ１０が、メチル、エチル、２−アミノ−２−オキソエチルまたは２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表す
｛ここで、メチルおよびエチルは、１個のヒドロキシ置換基により置換されていてもよい｝
請求項７ないし請求項１１のいずれかに記載の化合物、または、その塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項１３】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、
［Ａ］式
【化３】
2009533371.tif 000467
（式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、請求項１に記載の意味を有する）
の化合物を、先ず、式
【化４】
2009533371.tif 000468
（式中、Ｒ１およびＲ２は、請求項１に記載の意味を有し、
Ｙ１は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニルを表し、そして、
Ｘ１は、ハロゲン、好ましくは臭素、塩素もしくはフッ素、または、ヒドロキシを表す）
の化合物と反応させ、続いて酸と、および／または、水素化分解により反応させる、
または、
［Ｂ］式
【化５】
2009533371.tif 000469
（式中、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、請求項１に記載の意味を有する）
の化合物を、先ず、式
【化６】
2009533371.tif 000470
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、請求項１に記載の意味を有し、そして、
Ｙ１は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニルを表す）
の化合物と反応させ、
続いて、４段階の合成で、
ａ）テトラブチルアンモニウムフロリドなどのフッ化物の反応物と、
ｂ）酸と、
ｃ）必要に応じて塩基の存在下で、脱水剤と、そして、
ｄ）水素化分解により、
反応させる、
を特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項１３に記載の方法であって、式
【化７】
2009533371.tif 000471
（式中、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、請求項１に記載の意味を有する）
の化合物を、先ず、式
【化８】
2009533371.tif 000472
（式中、Ｒ３は、請求項１に記載の意味を有し、そして、
Ｒ１３は、シアノメチル、ｐ−ニトロフェニル、ｏ−ニトロフェニル、２,４−ジニトロフェニル、２,４,５−トリクロロフェニル、ペンタクロロフェニル、ペンタフルオロフェニル（Ｐｆｐ）、Ｎ−ヒドロキシフタルイミジル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（Ｏ−Ｓｕ）、１−ヒドロキシピペリジニルまたは５−クロロ−８−ヒドロキシキノリニルを表す）
の化合物と反応させ、続いて、３段階の合成で、
ａ）酸と、
ｂ）必要に応じて塩基の存在下、脱水剤と、そして、
ｃ）水素化分解により、
反応させることにより、式（ＩＩ）の化合物を製造することを特徴とする、方法。
【請求項１５】
疾患の処置および／または予防のための、請求項１ないし請求項１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１６】
疾患の処置および／または予防用の医薬を製造するための、請求項１ないし請求項１２のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１７】
細菌感染の処置および／または予防用の医薬を製造するための、請求項１ないし請求項１２のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１８】
請求項１ないし請求項１２のいずれかに記載の化合物を、不活性、非毒性の医薬的に許容し得る補助剤と組み合わせて含む、医薬。
【請求項１９】
細菌感染の処置および／または予防用の請求項１８に記載の医薬。
【請求項２０】
抗菌的に有効な量の少なくとも１種の請求項１ないし請求項１２のいずれかに記載の化合物、請求項１８に記載の医薬、または請求項１６もしくは請求項１７に従って得られる医薬を投与することによる、ヒトおよび動物における細菌感染の制御方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、リソバクチン（lysobactin）アミド類およびそれらの製造方法、並びに疾患、特に細菌感染疾患の処置および／または予防用の医薬を製造するためのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
細菌の細胞壁は、数々の酵素により合成され（細胞壁生合成）、微生物の生存および生殖に必須である。この巨大分子の構造およびその合成に関与するタンパク質は、細菌類内で高度に保存されている。その必須の性質および均一性のために、細胞壁生合成は新規抗生物質の理想的な攻撃点である（D.W.Green, The bacterial cell wall as a source of antibacterial targets, Expert Opin. Ther. Targets, 2002, 6, 1-19)。
【０００３】
バンコマイシンおよびペニシリン類は、細菌の細胞壁生合成の阻害剤であり、この作用原理による抗菌力の成功例である。それらは、特にグラム陽性病原体による細菌感染の処置のために、数十年間臨床的に用いられてきた。例えばメチシリン耐性ブドウ球菌、ペニシリン耐性肺炎球菌およびバンコマイシン耐性腸球菌（F. Baquero, Gram-positive resistance: challenge for the development of new antibiotics, J. Antimicrob. Chemother., 1997, 39, Suppl A: 1-6; A.P. Johnson, D.M. Livermore, G.S. Tillotson, Antimicrobial susceptibility of Gram-positive bacteria: what's current, what's anticipated ?, J. Hosp. Infect., 2001, (49), Suppl A: 3-11）、並びに、最近初めてのバンコマイシン耐性ブドウ球菌（B. Goldrick, First reported case of VRSA in the United States, Am. J. Nurs., 2002, 102, 17）などの耐性微生物の発生が増えているために、これらの物質はそれらの治療効力を次第に失いつつある。
【０００４】
本発明は、既知の抗生物質のクラスと交差耐性のない、新規のクラスの細胞壁生合成阻害剤に関する。
【０００５】
天然産物のリソバクチンおよびいくつかの誘導体は、抗菌活性を有するとＵＳ４,７５４,０１８に記載されている。リソバクチンの単離および抗菌活性は、ＥＰ−Ａ−１９６０４２およびＪＰ０１１３２６００にも記載されている。ＷＯ０４／０９９２３９は、抗菌活性を有するリソバクチンの誘導体を記載している。
【０００６】
リソバクチンおよびカタノシン（katanosin）Ａの抗菌作用は、O'Sullivan, J. et al., J. Antibiot. 1988, 41, 1740 - 1744, Bonner, D. P. et al., J. Antibiot. 1988, 41, 1745 - 1751, Shoji, J. et al., J. Antibiot. 1988, 41, 713 - 718 および Tymiak, A. A. et al., J. Org. Chem. 1989, 54, 1149 - 1157 にさらに記載されている。
【０００７】
有効成分の安定性は、医薬としてのその適合性にとって重要なパラメーターである。安定性は、とりわけ、医薬の保管および投与において重要である。多くの天然産物は、医薬にとって不十分な安定性を示す。
【０００８】
抗菌活性を有するデプシペプチドのリソバクチンは、水性の中性ないし塩基性の媒体（ｐＨ＞７）中で数日のうちに加水分解される。その結果は、ラクトンで開環され、抗菌活性を有さない「開環リソバクチン」である。従って、より高い環の安定性を有するリソバクチンの活性な類似体があるのが望ましい。
【０００９】
本発明のある目的は、匹敵するか、または改善された抗菌作用、より良好な耐容性、例えば、より低い腎毒性、および、水性の中性ないし塩基性媒体中での改善された安定性を有する、ヒトおよび動物における細菌性疾患の処置用の、リソバクチンの代替的化合物を提供することである。
【００１０】
驚くべきことに、本発明に関し、リソバクチンアミド類（環状ノナペプチドアミド類）が、リソバクチンと類似の抗菌作用を有し、水性の中性ないし塩基性媒体中での加水分解に対して安定であることが見出された。リソバクチンアミド類は、中心のラクトン官能基がラクタム官能基により置き換えられた、過去に記載されていないリソバクチンのアザ類似体である。
【発明の開示】
【００１１】
本発明は、式
【化１】
2009533371.tif 000002
［式中、
Ｒ１は、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルまたは１,３−チアゾール−４−イルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルおよび１,３−チアゾール−４−イルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチル、メチルおよびメトキシからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ２は、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルまたは１,３−チアゾール−４−イルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルおよび１,３−チアゾール−４−イルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチル、メチルおよびメトキシからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
【００１２】
Ｒ３は、水素、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、または、５員または６員のヘテロアリールメチルを表し
｛ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルおよび窒素を介して結合している５員または６員の複素環からなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ４は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
【００１３】
Ｒ５は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ６は、Ｃ１−Ｃ６−アルキルを表し
｛ここで、アルキルは、アミノ、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノ、［アミノ−（イミノ）メチル］アミノ、２−ピリジル、３−ピリジルおよび４−ピリジルからなる群から選択される１個の置換基により置換されている｝、
Ｒ７は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチルまたはトリメチルシリルメチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
【００１４】
Ｒ８は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ９は、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
【００１５】
Ｒ１０は、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチル、２−アミノ−２−オキソエチル、２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル、（アミノスルホニル）（ヒドロキシ）メチル、２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−２−オキソエチルまたは２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ１１は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチル、２−アミノ−２−オキソエチル、２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル、（アミノスルホニル）（ヒドロキシ）メチル、２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−２−オキソエチルまたは２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝］
の化合物、並びに、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物に関し、
【００１６】
但し、式
【化２】
2009533371.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルまたは１,３−チアゾール−４−イルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルおよび１,３−チアゾール−４−イルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチル、メチルおよびメトキシからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ２は、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルまたは１,３−チアゾール−４−イルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチルおよび１,３−チアゾール−４−イルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチル、メチルおよびメトキシからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
そして、
Ｒ１２は、水素またはメチルを表す］
の化合物並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物を除く。
【００１７】
本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグ、式（Ｉ）に包含され、後述の式のものである化合物およびそれらの塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグ、並びに、式（Ｉ）に包含され、例示的実施態様として後述する化合物およびそれらの塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグ（式（Ｉ）に包含され、後述する化合物が既に塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグでない場合に）である。
【００１８】
本発明の化合物は、それらの構造に依存して、立体異性体（エナンチオマー、ジアステレオマー）で存在し得る。従って、本発明は、エナンチオマーまたはジアステレオマー、およびそれらの各々の混合物に関する。そのようなエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの混合物から、立体異性的に均一な成分を既知方法で単離できる。
本発明の化合物が互変異性体で存在できるならば、本発明は、全ての互変異性体を含む。
【００１９】
本発明の目的上、好ましい塩は、本発明の化合物の生理的に許容し得る塩である。しかしながら、それら自体は医薬適用に適さないが、例えば本発明の化合物の単離または精製に使用できる塩または混合塩も含まれる。混合塩は、本発明に関して、２種またはそれ以上の異なる酸または塩基を含む付加塩、例えば、トリフルオロ酢酸塩−メシレート塩を意味する。
【００２０】
本発明の化合物の生理的に許容し得る塩には、鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩が含まれる。
【００２１】
本発明の化合物の生理的に許容し得る塩には、常套の塩基の塩、例えば、そして好ましくは、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウムおよびマグネシウム塩）およびアンモニアまたは１個ないし１６個のＣ原子を有する有機アミン類（例えば、そして好ましくは、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、アルギニン、リジン、エチレンジアミンおよびＮ−メチルピペリジン）から誘導されるアンモニウム塩も含まれる。
【００２２】
本発明の目的上、溶媒和物は、溶媒分子との配位により固体または液体状態で錯体を形成する本発明の化合物の形態を表す。水和物は、配位が水と起こる、溶媒和物の特別な形態である。
【００２３】
本発明の目的上、断りの無い限り、置換基は以下の意味を有する：
アルキル自体、並びに、アルコキシ、アルキルアミノ、アルコキシカルボニルおよびアルキルアミノカルボニル中の「アルコ（alk）」および「アルキル」は、一般的には１個ないし６個、好ましくは１個ないし４個、特に好ましくは１個ないし３個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキルラジカル、例えば、そして、好ましくは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルを表す。
【００２４】
アルコキシは、例えば、そして、好ましくは、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシおよびｎ−ヘキソキシを表す。
【００２５】
アルコキシカルボニルは、例えば、そして、好ましくは、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ｎ−ペントキシカルボニルおよびｎ−ヘキソキシカルボニルを表す。
【００２６】
アルキルアミノは、１個または２個のアルキル置換基（相互に独立して選択される）を有するアルキルアミノラジカル、例えば、そして、好ましくは、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ｎ−ペンチルアミノ、ｎ−ヘキシルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−ｎ−ペンチルアミノおよびＮ−ｎ−ヘキシル−Ｎ−メチルアミノを表す。例えば、Ｃ１−Ｃ３−アルキルアミノは、１個ないし３個の炭素原子を有するモノアルキルアミノラジカル、または、各アルキル置換基につき１個ないし３個の炭素原子を有するジアルキルアミノラジカルを表す。
【００２７】
アルキルアミノカルボニルは、１個または２個のアルキル置換基（相互に独立して選択される）を有するアルキルアミノカルボニルラジカル、例えば、そして、好ましくは、メチルアミノカルボニル、エチルアミノカルボニル、ｎ−プロピルアミノカルボニル、イソプロピルアミノカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルアミノカルボニル、ｎ−ペンチルアミノカルボニル、ｎ−ヘキシルアミノカルボニル、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノカルボニル、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノカルボニル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノカルボニル、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノカルボニル、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノカルボニル、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノカルボニル、Ｎ−エチル−Ｎ−ｎ−ペンチルアミノカルボニルおよびＮ−ｎ−ヘキシル−Ｎ−メチルアミノカルボニルを表す。例えば、Ｃ１−Ｃ３−アルキルアミノカルボニルは、１個ないし３個の炭素原子を有するモノアルキルアミノカルボニルラジカル、または、各アルキル置換基につき１個ないし３個の炭素原子を有するジアルキルアミノカルボニルラジカルを表す。
【００２８】
シクロアルキルは、一般的に３個ないし７個の炭素原子を有するシクロアルキル基、例えば、そして、好ましくは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルを表す。
【００２９】
複素環は、５個または６個の環原子およびＮ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２の群から３個までのヘテロ原子および／またはヘテロ基を有し、窒素原子はＮ−オキシドを形成していてもよい単環式の複素環式ラジカルを表す。複素環ラジカルは、飽和または部分不飽和であり得、例えば、そして、好ましくは、ピロリジン−２−イル、ピロリジン−３−イル、ピロリニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、ピラニル、ピペリジン−１−イル、ピペリジン−２−イル、ピペリジン−３−イル、ピペリジン−４−イル、チオピラニル、モルホリン−１−イル、モルホリン−２−イル、モルホリン−３−イルを表す。
【００３０】
ヘテロアリールは、５個または６個の環原子およびＳ、ＯおよびＮの群から４個までのヘテロ原子を有する芳香族性単環式ラジカル、例えば、そして、好ましくは、チエニル、フリル、ピロリル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジルおよびピリダジニルを表す。
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素、好ましくはフッ素および塩素を表す。
【００３１】
好ましいのは、式中、
Ｒ１が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチルおよび３−ピリジルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびメチルからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ２が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチルおよび３−ピリジルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびメチルからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ３が、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、フェニル、ベンジル、２−ピリジル、３−ピリジルまたは４−ピリジルを表し
｛ここで、フェニル、ベンジル、２−ピリジル、３−ピリジルおよび４−ピリジルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ４が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリールメチルまたはトリメチルシリルメチルを表し
｛ここで、アルキルは、ヒドロキシ置換基で置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルメチル、ベンジルおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ５が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリールメチルまたはトリメチルシリルメチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジルおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ６が、Ｃ１−Ｃ６−アルキルを表し
｛ここで、アルキルは、アミノ、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノ、［アミノ−（イミノ）メチル］アミノ、２−ピリジル、３−ピリジルおよび４−ピリジルからなる群から選択される１個の置換基により置換されている｝
【００３２】
Ｒ７が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリールメチルまたはトリメチルシリルメチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジルおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ８が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリールメチルまたはトリメチルシリルメチルを表し
｛ここで、アルキルは、１個のヒドロキシ置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルメチル、ベンジルおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ９が、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、フェニル、トリメチルシリルメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、メチルは、ヒドロキシ、アミノおよびメルカプトからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルおよびフェニルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ１０が、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、フェニル、トリメチルシリルメチル、２−アミノ−２−オキソエチル、２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル、（アミノスルホニル）（ヒドロキシ）メチル、２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−２−オキソエチルまたは２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルおよびフェニルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ１１が、メチルまたはエチルを表す
｛ここで、メチルおよびエチルは、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよい｝
式（Ｉ）の化合物、並びに、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物であり、
【００３３】
但し、式中、
Ｒ１が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチルおよび３−ピリジルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびメチルからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ２が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチル、ベンジル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
｛ここで、ベンジル、２−ピリジルメチルおよび３−ピリジルメチルは、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびメチルからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
そして、
Ｒ１２が、水素またはメチルを表す、
式（Ｉａ）の化合物、並びに、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物を除く。
【００３４】
好ましいのは、また、式中、
Ｒ１が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し、
Ｒ２が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し、
Ｒ３が、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、３−ピリジルまたはフェニルを表し
｛ここで、３−ピリジルまたはフェニルは、ハロゲン、シアノ、メチル、メトキシ、ジメチルアミノおよびジエチルアミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ４が、−ＣＨ（ＯＨ）−Ｃ１−Ｃ５−アルキルまたは−ＣＨ（ＯＨ）フェニルを表し
｛ここで、−ＣＨ（ＯＨ）フェニルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−ジアルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ５が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、ベンジルまたはトリメチルシリルメチルを表し、
Ｒ６が、直鎖Ｃ２−Ｃ４−アルキルを表し
｛ここで、アルキルは、アミノ、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されている｝
Ｒ７が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、ベンジルまたはトリメチルシリルメチルを表し、
Ｒ８が、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）−Ｃ１−Ｃ５−アルキルまたは−ＣＨ（ＯＨ）フェニルを表し
｛ここで、−ＣＨ（ＯＨ）フェニルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１Ｃ４−ジアルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよい｝、
Ｒ９が、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、ヒドロキシメチルまたは２−アミノ−２−オキソエチルを表し、
Ｒ１０が、水素、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、２−アミノ−２−オキソエチルまたは２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表し
｛ここで、Ｃ１−Ｃ４−アルキルは、アミノおよびヒドロキシからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく（但し、Ｒ１０は４−アミノブト−１−イルではない）｝、
Ｒ１１がメチルを表す
｛ここで、メチルは、ヒドロキシおよびアミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されている｝
式（Ｉ）の化合物、並びに、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物であり、
但し、式中、
Ｒ１が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し、
Ｒ２が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し、
そして、
Ｒ１２が、水素またはメチルを表す、
式（Ｉａ）の化合物、並びに、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物を除く。
【００３５】
好ましいのは、また、式中、
Ｒ１が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、トリメチルシリルメチルまたはベンジルを表す
｛ここで、ベンジルは、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびメチルからなる群から相互に独立して選択される１個または２個の置換基により置換されていてもよい｝、
式（Ｉ）の化合物、または、それらの塩、それらの溶媒和物、または、それらの塩の溶媒和物の１つである。
【００３６】
好ましいのは、また、式中、
Ｒ１が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イルまたはトリメチルシリルメチルを表す、
式（Ｉ）の化合物、または、それらの塩、それらの溶媒和物、または、それらの塩の溶媒和物の１つである。
【００３７】
好ましいのは、また、式中、
Ｒ２が、２,２−ジメチルプロプ−１−イルまたは３−ピリジルメチルを表す、
式（Ｉ）の化合物、または、それらの塩、それらの溶媒和物、または、それらの塩の溶媒和物の１つである。
【００３８】
好ましいのは、また、式中、
Ｒ３が、フェニル、ベンジル、２−ピリジル、３−ピリジルまたは４−ピリジルを表す
｛ここで、フェニル、ベンジル、２−ピリジル、３−ピリジルおよび４−ピリジルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝
式（Ｉ）の化合物、または、それらの塩、それらの溶媒和物、または、それらの塩の溶媒和物の１つである。
【００３９】
好ましいのは、また、式中、
Ｒ３が、フェニルを表す
｛ここで、フェニルは、ハロゲン、シアノ、メチル、メトキシ、ジメチルアミノおよびジエチルアミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよい｝
式（Ｉ）の化合物、または、それらの塩、それらの溶媒和物、または、それらの塩の溶媒和物の１つである。
【００４０】
好ましいのは、また、式中、
Ｒ８が、−ＣＨ（ＯＨ）−Ｃ１−Ｃ５−アルキルまたは−ＣＨ（ＯＨ）フェニルを表す
｛ここで、−ＣＨ（ＯＨ）フェニルは、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−ジアルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし３個の置換基により置換されていてもよい｝
式（Ｉ）の化合物、または、それらの塩、それらの溶媒和物、または、それらの塩の溶媒和物の１つである。
【００４１】
好ましいのは、また、式中、
Ｒ１０が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、５員または６員のヘテロアリール、５員または６員のヘテロアリールメチル、トリメチルシリルメチル、２−アミノ−２−オキソエチル、２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル、（アミノスルホニル）（ヒドロキシ）メチル、２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−２−オキソエチルまたは２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表す
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキル、シクロアルキルメチル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールメチルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノカルボニルからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝
式（Ｉ）の化合物、または、それらの塩、それらの溶媒和物、または、それらの塩の溶媒和物の１つである。
【００４２】
好ましいのは、また、式中、
Ｒ１０が、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル、フェニル、トリメチルシリルメチル、２−アミノ−２−オキソエチル、２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル、（アミノスルホニル）（ヒドロキシ）−メチル、２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−２−オキソエチルまたは２−（Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノ）−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表す
｛ここで、アルキルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、１,４,５,６−テトラヒドロピリミジン−２−イルアミノおよび［アミノ（イミノ）メチル］アミノからなる群から選択される１個の置換基により置換されていてもよく、
そして、ここで、シクロアルキルおよびフェニルは、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシおよびＣ１−Ｃ４−アルキルアミノからなる群から相互に独立して選択される１個ないし４個の置換基により置換されていてもよい｝
式（Ｉ）の化合物、または、それらの塩、それらの溶媒和物、または、それらの塩の溶媒和物の１つである。
【００４３】
好ましいのは、また、式中、
Ｒ１０が、メチル、エチル、２−アミノ−２−オキソエチルまたは２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチルを表す
｛ここで、メチルおよびエチルは、１個のヒドロキシ置換基により置換されていてもよい｝
式（Ｉ）の化合物、または、それらの塩、それらの溶媒和物、または、それらの塩の溶媒和物の１つである。
【００４４】
本発明は、さらに、式（Ｉ）の化合物の製造方法に関し、その方法では、
［Ａ］式
【化３】
2009533371.tif 000004
（式中、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、上記の意味を有する）
の化合物を、先ず、式
【化４】
2009533371.tif 000005
（式中、Ｒ１およびＲ２は、上記の意味を有し、
Ｙ１は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニルを表し、そして、
Ｘ１は、ハロゲン、好ましくは臭素、塩素もしくはフッ素、または、ヒドロキシを表す）
の化合物と反応させ、続いて酸と、および／または、水素化分解により反応させるか、
【００４５】
または、
［Ｂ］式
【化５】
2009533371.tif 000006
（式中、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、上記の意味を有する）
の化合物を、先ず、式
【化６】
2009533371.tif 000007
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、上記の意味を有し、そして、
Ｙ１は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニルを表す）
の化合物と反応させ、
続いて、４段階の合成で、
ａ）テトラブチルアンモニウムフロリドなどのフッ化物の反応物と、
ｂ）酸と、
ｃ）必要に応じて塩基の存在下で、脱水剤と、そして、
ｄ）水素化分解により、
反応させる。
【００４６】
方法［Ａ］：
Ｘ１がハロゲンであるならば、第１段階の反応は、一般的に、不活性溶媒中、必要に応じて塩基の存在下、好ましくは−３０℃ないし５０℃の温度範囲で、大気圧下で行う。
【００４７】
不活性溶媒の例は、テトラヒドロフラン、塩化メチレン、ピリジン、ジオキサン、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリジンまたはジメチルホルムアミドであり、ピリジンまたはジメチルホルムアミドが好ましい。
【００４８】
塩基の例は、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンまたはＮ−メチルモルホリンであり、ジイソプロピルエチルアミンが好ましい。
【００４９】
Ｘ１がヒドロキシであるならば、第１段階の反応は、一般的に、不活性溶媒中、脱水剤の存在下、必要に応じて塩基の存在下、好ましくは−３０℃ないし５０℃の温度範囲で、大気圧下で行う。
【００５０】
不活性溶媒の例は、ジクロロメタンまたはトリクロロメタンなどのハロ炭化水素類、ベンゼン、ニトロメタン、ジオキサン、ジメチルホルムアミドまたはアセトニトリルなどの炭化水素類である。これらの溶媒の混合物を用いることも同様に可能である。ジクロロメタンまたはジメチルホルムアミドが特に好ましい。
【００５１】
ここで、適する脱水剤の例は、カルボジイミド類、例えば、Ｎ,Ｎ'−ジエチル−、Ｎ,Ｎ'−ジプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−（３−ジメチルアミノイソプロピル）−Ｎ'−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、Ｎ−シクロヘキシルカルボジイミド−Ｎ'−プロピルオキシメチルポリスチレン（ＰＳ−カルボジイミド）、またはカルボニル化合物、例えばカルボニルジイミダゾール、または、１,２−オキサゾリウム化合物、例えば２−エチル−５−フェニル−１,２−オキサゾリウム−３−サルフェート、または、２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチルイソオキサゾリウムパークロレート、または、アシルアミノ化合物、例えば２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１,２−ジヒドロキノリン、またはプロパンホスホン酸無水物、または、イソブチルクロロホルメート、または、ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）−ホスホリルクロリド、または、ベンゾトリアゾリルオキシトリ（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、または、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、２−（２−オキソ−１−（２Ｈ）−ピリジル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＰＴＵ）、Ｏ−（１Ｈ−６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ）、または、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、または、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、または、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）、または、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）、または、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、またはこれらの塩基との混合物である。
【００５２】
塩基の例は、アルカリ金属炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウムまたはカリウム、または、重炭酸塩、または、有機塩基、例えば、トリエチルアミンなどのトリアルキルアミン類、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、４−ジメチルアミノピリジンまたはジイソプロピルエチルアミンである。
【００５３】
縮合は、好ましくは、ＨＡＴＵを用いて、または、ＥＤＣを用いてＨＯＢｔの存在下で、実施する。
【００５４】
この方法の第２段階の酸との反応は、好ましくは、０℃ないし４０℃の温度範囲で、大気圧下で行う。
【００５５】
ここで適する酸は、ジオキサン中の塩化水素、酢酸中の臭化水素または塩化メチレン中のトリフルオロ酢酸である。
【００５６】
この方法の第２段階の水素化分解は、一般的に、溶媒中、水素およびパラジウム／活性炭の存在下、好ましくは０℃ないし４０℃の温度範囲で、大気圧下で行う。
【００５７】
溶媒の例は、水および酢酸または水性塩酸との混合物中の、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノールまたはイソプロパノールなどのアルコール類であり、エタノール、水および酢酸の混合物またはイソプロパノールおよび水性塩酸の混合物が好ましい。
【００５８】
方法［Ｂ］：
式（ＩＶ）の化合物の式（Ｖ）の化合物との反応は、一般的に、不活性溶媒中、脱水剤の存在下、必要に応じて塩基の存在下、好ましくは−３０℃ないし５０℃の温度範囲で、大気圧下で行う。
【００５９】
不活性溶媒の例は、ジクロロメタンまたはトリクロロメタンなどのハロ炭化水素類、ベンゼンなどの炭化水素、ニトロメタン、ジオキサン、ジメチルホルムアミドまたはアセトニトリルである。これらの溶媒の混合物を用いることも同様に可能である。ジクロロメタンまたはジメチルホルムアミドが特に好ましい。
【００６０】
ここで、適する脱水剤の例は、カルボジイミド類、例えば、Ｎ,Ｎ'−ジエチル−、Ｎ,Ｎ'−ジプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−（３−ジメチルアミノイソプロピル）−Ｎ'−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、Ｎ−シクロヘキシルカルボジイミド−Ｎ'−プロピルオキシメチルポリスチレン（ＰＳ−カルボジイミド）、またはカルボニル化合物、例えばカルボニルジイミダゾール、または、１,２−オキサゾリウム化合物、例えば２−エチル−５−フェニル−１,２−オキサゾリウム３−サルフェート、または、２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチルイソオキサゾリウムパークロレート、または、アシルアミノ化合物、例えば２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１,２−ジヒドロキノリン、またはプロパンホスホン酸無水物、または、イソブチルクロロホルメート、または、ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）−ホスホリルクロリド、または、ベンゾトリアゾリルオキシトリ（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、または、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、２−（２−オキソ−１−（２Ｈ）−ピリジル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＰＴＵ）、Ｏ−（１Ｈ−６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ）、または、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、または、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、または、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）、または、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）、または、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、またはこれらの塩基との混合物である。
【００６１】
塩基の例は、アルカリ金属炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウムまたはカリウム、または、重炭酸塩、または、有機塩基、例えば、トリエチルアミンなどのトリアルキルアミン類、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、４−ジメチルアミノピリジンまたはジイソプロピルエチルアミンである。
【００６２】
縮合は、好ましくは、ＨＡＴＵを用いて、または、ＥＤＣおよびＨＯＢｔの混合物を用いて実施する。
【００６３】
さらなる方法の第１段階（ａ）におけるテトラブチルアンモニウムフロリドとの反応は、一般的に、不活性溶媒中、好ましくは０℃ないし４０℃の温度範囲で、大気圧下で行う。
【００６４】
不活性溶媒の例は、ジクロロメタンまたはトリクロロメタンなどのハロ炭化水素類、テトラヒドロフランまたはジオキサンなどのエーテル類である。テトラヒドロフランが特に好ましい。
【００６５】
この方法の第２段階（ｂ）における酸との反応は、好ましくは、０℃ないし４０℃の温度範囲で、大気圧下で行う。
【００６６】
ここで適する酸は、ジオキサン中の塩化水素、酢酸中の臭化水素または塩化メチレン中のトリフルオロ酢酸である。
【００６７】
この方法の第３段階（ｃ）の反応は、式（ＩＶ）の化合物の式（Ｖ）の化合物との反応と同様に行う。
【００６８】
この方法の第４段階（ｄ）の水素化分解は、一般的に、溶媒中、水素およびパラジウム／活性炭の存在下、好ましくは０℃ないし４０℃の温度範囲で、大気圧下で行う。
【００６９】
溶媒の例は、水および酢酸または水性塩酸との混合物中のメタノール、エタノール、ｎ−プロパノールまたはイソプロパノールなどのアルコール類であり、エタノール、水および酢酸の混合物、または、イソプロパノールと水性塩酸の混合物が好ましい。
【００７０】
式（ＩＩ）の化合物は、知られているか、または、式
【化７】
2009533371.tif 000008
（式中、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、上記の意味を有する）
の化合物を、先ず、式
【化８】
2009533371.tif 000009
（式中、Ｒ３は、上記の意味を有し、そして、
Ｒ１３は、シアノメチル、ｐ−ニトロフェニル、ｏ−ニトロフェニル、２,４−ジニトロフェニル、２,４,５−トリクロロフェニル、ペンタクロロフェニル、ペンタフルオロフェニル（Ｐｆｐ）、Ｎ−ヒドロキシフタルイミジル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（Ｏ−Ｓｕ）、１−ヒドロキシピペリジニルまたは５−クロロ−８−ヒドロキシキノリニルを表す）
の化合物と反応させ、続いて、３段階合成で、
ａ）酸と、
ｂ）必要に応じて塩基の存在下、脱水剤と、そして、
ｃ）水素化分解により、
反応させることにより、製造できる。
【００７１】
式（ＶＩ）の化合物の式（ＶＩＩ）の化合物との反応は、一般的に、不活性溶媒中、必要に応じて塩基の存在下、好ましくは−３０℃ないし５０℃の温度範囲で、大気圧下で行う。
【００７２】
不活性溶媒の例は、テトラヒドロフラン、塩化メチレン、ピリジン、ジオキサン、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリジンまたはジメチルホルムアミドであり、ピリジンまたはジメチルホルムアミドが好ましい。
【００７３】
この方法の第１段階（ａ）における酸との反応は、好ましくは、０℃ないし４０℃の温度範囲で、大気圧下で行う。
【００７４】
ここで適する酸は、ジオキサン中の塩化水素、酢酸中の臭化水素または塩化メチレン中のトリフルオロ酢酸である。
【００７５】
この方法の第２段階（ｂ）における反応は、式（ＩＶ）の化合物の式（Ｖ）の化合物との反応と同様に行う。
【００７６】
この方法の第３段階（ｃ）の水素化分解は、一般的に、溶媒中、水素およびパラジウム／活性炭の存在下、好ましくは０℃ないし４０℃の温度範囲で、大気圧下で行う。
【００７７】
溶媒の例は、水および酢酸または水性塩酸との混合物中のメタノール、エタノール、ｎ−プロパノールまたはイソプロパノールなどのアルコール類であり、エタノール、水および酢酸の混合物またはイソプロパノールおよび水性塩酸の混合物が好ましい。
【００７８】
式（ＩＩＩ）、（Ｖ）および（ＶＩＩ）の化合物は、知られているか、既知方法により、または、後述する方法により、対応する出発物質から、合成できる。
【００７９】
式（ＩＶ）および（ＶＩ）の化合物は、知られているか、または、溶液中で適切な保護基を使用して、または、固相で既知のペプチド合成法により、または、後述する方法により、対応する出発物質から合成できる。
【００８０】
本発明の化合物の製造は、以下の合成スキームにより例示説明できる。
合成スキーム１：
【化９】
2009533371.tif 000010
【００８１】
合成スキーム２：
【化１０】
2009533371.tif 000011
【００８２】
合成スキーム３：
【化１１】
2009533371.tif 000012
【００８３】
本発明の化合物は、予測し得なかった価値ある範囲の薬理的効果を示す。それらは、抗菌作用を示す。
従って、それらは、ヒトおよび動物の疾患の処置および／または予防用の医薬としての使用に適する。
【００８４】
本発明の化合物は、リソバクチンと比較して低い腎毒性により、卓越している。
本発明の化合物は、水性の中性ないし塩基性媒体中での改善された安定性により卓越している。この特性は、本発明の化合物の保管および医薬としての投与を改善する。
【００８５】
記載したノナデプシペプチドは、細菌の細胞壁生合成の阻害剤として作用する。
本発明の製剤は、細菌およびバクテロイド微生物に対して特に有効である。従って、それらは、ヒトの医学および獣医学におけるこれらの病原体に起因する局所および全身の感染の予防および化学療法に特に適する。
【００８６】
原則として、本発明の製剤は、細菌細胞壁（ムレイン小嚢（murein sacculus））および関連する酵素系を有する全ての細菌およびバクテロイド微生物に対して、例えば以下の病原体または以下の病原体の混合物に対して使用できる：
グラム陰性球菌（淋菌）並びにグラム陰性桿菌、例えば腸内細菌科、例えば大腸菌、インフルエンザ菌、シュードモナス属、クレブシエラ属、シトロバクター属（Ｃ.フロインデイ、Ｃ.ジベルニス（divernis））、サルモネラ属および赤痢菌属；さらに、エンテロバクター属（Ｅ.アエロゲネス、Ｅ.アグロメランス（agglomerans））、ハフニア属、セラチア属（Ｓ.マルセセンス）、プロビデンシア属、エルシニア属、並びにアシネトバクター属、ブランハメラ属およびクラミジア属。加えて、抗菌範囲には、厳密に嫌気性の細菌、例えば、バクテロイデス・フラジリス、ペプトコッカス属、ペプトストレプトコッカス属およびクロストリジウム属の代表例；さらに、ミコバクテリア、例えば結核菌が含まれる。本発明の化合物は、グラム陽性球菌、例えばブドウ球菌（黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、Ｓ.ヘモリティクス（haemolyticus）、Ｓ.カルノサス（carnosus））、腸球菌（フェカリス菌、Ｅ.フェシウム）および連鎖球菌（Ｓ.アガラクチア、肺炎連鎖球菌、化膿性連鎖球菌）に対して、特に明白な作用を示す。
【００８７】
上記の病原体のリストは、単なる例示であり、決して限定的に解釈すべきではない。上述の病原体または混合感染に起因し得ると言える、そして本発明の製剤により予防、改善または治癒できる疾患の例は、以下のものである：
ヒトの感染性疾患、例えば、非複雑性および複雑性尿路感染、非複雑性皮膚および表在性感染、複雑性皮膚および軟部組織感染、病院および共同体で獲得される肺炎、院内肺炎、慢性気管支炎の急性増悪および二次的細菌感染、急性中耳炎、急性副鼻腔炎、連鎖球菌性咽頭炎、細菌性髄膜炎、非複雑性淋菌性および非淋菌性尿道炎／子宮頚管炎、急性前立腺炎、心内膜炎、非複雑性および複雑性腹腔内感染、婦人科の感染、骨盤内炎症性疾患、細菌性膣炎、急性および慢性骨髄炎、急性細菌性関節炎、熱性好中球減少性患者の経験的治療、さらに菌血症、ＭＲＳＡ感染、急性感染性下痢、ヘリコバクター・ピロリ感染、術後感染、歯性感染、眼科の感染、術後感染（直腸周囲膿瘍、創傷感染、胆道感染、乳腺炎および急性虫垂炎を含む）、嚢胞性線維症および気管支拡張症。
【００８８】
ヒトの他に、他の種でも細菌感染を処置できる。言及し得る例には、以下のものがある：
ブタ：下痢、腸毒血症、敗血症、赤痢、サルモネラ症、子宮炎−乳腺炎−アガラクチア症候群、乳腺炎；
反芻動物（ウシ、ヒツジ、ヤギ）：下痢、敗血症、気管支肺炎、サルモネラ症、パスツレラ症、性器感染；
ウマ：気管支肺炎、関節の病気、産褥性および産褥後感染、サルモネラ症；
イヌおよびネコ：気管支肺炎、下痢、皮膚炎、耳炎、尿路感染、前立腺炎；
家禽（ニワトリ、シチメンチョウ、ウズラ、ハト、観賞用鳥類など）：大腸菌感染、慢性呼吸器障害、サルモネラ症、パスツレラ症、オウム病。
【００８９】
生産用および観賞用の魚類の飼育および維持における細菌性疾患の処置も同様に可能であり、その場合、抗菌スペクトルは前述した病原体を超えて、例えば、パスツレラ属、ブルセラ属、カンピロバクター属、リステリア属、エリシペロスリス属（Erysipelothris）、コリネバクテリウム属、ボレリア属（Borellia）、トレポネーマ属、ノカルジア属、リケッチア属、エルシニア属などのさらなる病原体に及ぶ。
【００９０】
本発明はさらに、疾患、特に細菌感染疾患の処置および／または予防のための、本発明の化合物の使用に関する。
本発明はさらに、疾患、特に上述の疾患の処置および／または予防のための、本発明の化合物の使用に関する。
本発明はさらに、疾患、特に上述の疾患の処置および／または予防用の医薬を製造するための、本発明の化合物の使用に関する。
本発明の化合物は、好ましくは、細菌性疾患の予防および／または処置に適する医薬の製造に使用する。
本発明はさらに、本発明の化合物の抗菌的有効量を使用する、疾患、特に上述の疾患の処置および／または予防方法に関する。
【００９１】
本発明はさらに、特に上述の疾患の処置および／または予防のための、少なくとも１種の本発明の化合物および少なくとも１種またはそれ以上のさらなる有効成分を含む医薬に関する。組合せに好ましい有効成分は、抗菌活性を有し、異なる効果の範囲、特に、補足的な効果の範囲を有し、かつ／または、本発明の化合物に対して相乗的である化合物である。
【００９２】
本発明の化合物は、全身的および／または局所的に作用できる。この目的で、それらは、適する方法で、例えば、経口で、非経腸で、肺に、鼻腔に、舌下に、舌に、頬側に、直腸に、皮膚に、経皮で、結膜に、もしくは、耳に、または、インプラントもしくはステントとして、投与できる。
【００９３】
これらの投与経路のために、本発明の化合物を適する投与形で投与できる。
経口投与に適するのは、先行技術に準じて機能し、本発明の化合物を、迅速に、かつ／または、修飾された様式で送達し、そして、本発明の化合物を結晶形および／または無定形および／または溶解形で含有する投与形、例えば、錠剤（非被覆または被覆錠剤、例えば、腸溶性被覆、または、遅れて溶解するか、もしくは、不溶であり、本発明の化合物の放出を制御する被覆を有するもの）、口腔中で迅速に崩壊する錠剤またはフィルム／オブラート、フィルム／凍結乾燥剤、カプセル剤（例えば、ハードまたはソフトゼラチンカプセル剤）、糖衣錠、顆粒剤、ペレット剤、散剤、乳剤、懸濁剤、エアゾール剤または液剤である。
【００９４】
非経腸投与は、吸収段階を避けて（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、脊髄内または腰椎内）、または、吸収を含めて（例えば、筋肉内、皮下、皮内、経皮または腹腔内）、行うことができる。非経腸投与に適する投与形は、とりわけ、液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥剤または滅菌散剤の形態の、注射および点滴用製剤である。
【００９５】
他の投与経路に適するのは、例えば、吸入用医薬形（とりわけ、散剤吸入器、噴霧器）、点鼻薬、液、スプレー；舌に、舌下に、または頬側に投与するための、錠剤、フィルム／オブラートまたはカプセル剤、坐剤、耳または眼用製剤、膣カプセル剤、水性懸濁剤（ローション、振盪混合物）、親油性懸濁剤、軟膏、クリーム、経皮治療システム（例えばパッチなど）、ミルク、ペースト、フォーム、散布用粉末剤（dusting powder）、インプラントまたはステントである。
【００９６】
本発明の化合物は、上述の投与形に変換できる。これは、不活性、非毒性、医薬的に適する補助剤と混合することにより、それ自体既知の方法で行うことができる。これらの補助剤には、とりわけ、担体（例えば微結晶セルロース、ラクトース、マンニトール）、溶媒（例えば液体ポリエチレングリコール類）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（例えばドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート）、結合剤（例えばポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えばアルブミン）、安定化剤（例えばアスコルビン酸などの抗酸化剤）、着色料（例えば酸化鉄などの無機色素）および味および／または臭気の隠蔽剤が含まれる。
【００９７】
本発明はさらに、少なくとも１種の本発明の化合物を、通常１種またはそれ以上の不活性、非毒性、医薬的に許容し得る補助剤と共に含む医薬、および上述の目的のためのそれらの使用に関する。
【００９８】
静脈内投与で約０.００１ないし１００ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは約０.１ないし１０ｍｇ／体重ｋｇの量を投与するのが、有効な結果を達成するために有利であり、経口投与では、投与量は、約０.０１ないし５０ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは０.５ないし１０ｍｇ／体重ｋｇであると一般的に明らかになった。
【００９９】
それにも拘わらず、必要に応じて、特に体重、投与経路、有効成分に対する個体の応答、製剤の性質および投与を行う時間または間隔に応じて、上述の量から逸脱することが必要であり得る。従って、上述の最小量より少なくても十分な場合があり、一方上述の上限を超えなければならない場合もある。大量に投与する場合、これらを１日に亘る複数の個別用量に分割するのが望ましいことがある。
【０１００】
以下の試験および実施例における百分率のデータは、断りの無い限り、重量パーセントである；部は、重量部である。液体／液体溶液の溶媒比、希釈比および濃度のデータは、各場合で体積に基づく。
【０１０１】
添付の図面は、選択された例示的化合物および比較例としてのリソバクチンの安定性の図を示す。これらは、以下を示す：
図１：水性のわずかにアルカリ性の溶液における経時的なリソバクチンおよびリソバクチンの分解産物の濃度の変化のプロット。
図２：水性のわずかにアルカリ性の溶液における経時的な実施例１９の化合物の濃度の変化のプロット。
図３：水性のわずかにアルカリ性の溶液における経時的な実施例２３の化合物の濃度の変化のプロット。
図４：水性のわずかにアルカリ性の溶液における経時的な実施例２５の化合物の濃度の変化のプロット。
図５：水性のわずかにアルカリ性の溶液における経時的な実施例４０の化合物の濃度の変化のプロット。
【実施例】
【０１０２】
Ａ.実施例
略号
【表１】
2009533371.tif 000013
【０１０３】
【表２】
2009533371.tif 000014
【０１０４】
参考文献
ペプチドおよびシクロデプシペプチドの命名法について、以下を参照：
１. A Guide to IUPAC Nomenclature of Organic Compounds (Recommendations 1993), 1993, Blackwell Scientific publications.
２. Nomenclature and symbolism for amino acids and peptides. Recommendations 1983. IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature, UK. Biochemical Journal 1984, 219, 345-373. および引用文献。
【０１０５】
材料および方法
分析方法
方法１：HPLC 装置タイプ: HP 1100 Series; UV DAD；カラム：Phenomenex Synergi 2 μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分。２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０６】
方法２：ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1050 Series; UV DAD；カラム：Phenomenex Synergi 2 μ Max-RP Mercury 20 mm x 4 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋０.０５％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分.２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０７】
方法３：ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1050/1100 Series; UV DAD 1100 Series；カラム：Kromasil C18, 60 x 2.1 mm, 3.5 μm；溶離剤Ａ：水／０.５％過塩素酸、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−０.５分２％Ｂ、０.５−４.５分２−９０％Ｂ、４.５−６.５分９０％Ｂ、６.５−６.７分９０−２％Ｂ、６.７−７.５分２％Ｂ；流速：０.７５ｍｌ／分,オーブン：３０℃、ＵＶ検出２１０ｎｍ。
【０１０８】
方法４：装置：DAD 検出を備えた HP 1100；カラム：Kromasil 100 RP-18, 60 mm x 2.1 mm, 3.5 μm；溶離剤Ａ：過塩素酸（７０％）５ｍｌ／水１ｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０分２％Ｂ、０.５分２％Ｂ、４.５分９０％Ｂ、９分９０％Ｂ、９.２分。２％Ｂ、１０分２％Ｂ；流速：０.７５ｍｌ／分；カラム温度：３０℃；検出：ＵＶ２１０ｎｍ。
【０１０９】
方法５：装置：DAD (G1315B)、バイナリーポンプ (G1312A)、オートサンプラー (G1313A)、溶媒脱気装置 (G1379A) およびカラムサーモスタット (G1316A) を備えた Agilent 1100；カラム：Agilent Zorbax Eclipse XDB-C8 4.6 x 150 x 5 mm；カラム温度：３０℃；溶離剤Ａ：水中０.０５％の７０％過塩素酸；溶離剤Ｂ：アセトニトリル；流速：２.００ｍｌ／分；グラジエント：０−１分１０％Ｂ、勾配、４−５分９０％Ｂ、勾配、５.５分１０％Ｂ。
【０１１０】
方法６：装置：DAD (G1315B)、バイナリーポンプ (G1312A)、オートサンプラー (G1313A)、溶媒脱気装置 (G1379A) およびカラムサーモスタット (G1316A) を備えた Agilent 1100；カラム：Agilent Zorbax Eclipse XDB-C8 4.6 x 150 x 5 mm；カラム温度：３０℃；溶離剤Ａ：水中０.０１％ＴＦＡ；溶離剤Ｂ：アセトニトリル中０.０１％ＴＦＡ；流速：２.００ｍｌ／分；グラジエント：０−１分１０％Ｂ、勾配、４−５分９０％Ｂ、勾配、５.５分１０％Ｂ。
【０１１１】
方法７：DAD (G1315B)、バイナリーポンプ (G1312A)、オートサンプラー (G1313A)、脱気装置 (G1379A) およびカラムサーモスタット (G1316A) を備えた Agilent 1100；カラム：Synergi 4  Hydro-RP 80A、 4.6 x 150 x 5 mm；オーブン温度：３０℃；溶離剤Ａ：水＋０.０５％の７０％過塩素酸；溶離剤Ｂ：アセトニトリル；流速：２.００ｍｌ／分；グラジエント：０−１分１０％Ｂ、勾配、４−５分９０％Ｂ、勾配、５.５分１０％Ｂ。
【０１１２】
方法８：装置：DAD (G1315B)、バイナリーポンプ (G1312A)、オートサンプラー (G1313A)、溶媒脱気装置 (G1379A) およびカラムサーモスタット (G1316A) を備えた Agilent 1100；カラム：Agilent Eclipse XDB-C8 4.6 x 150 x 5 mm；カラム温度：４０℃；溶離剤Ａ：水中０.０５％の７０％過塩素酸；溶離剤Ｂ：メタノール；流速：２.００ｍｌ／分；均一溶媒：０−７分５５％Ｂ。
【０１１３】
方法９：ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1050 Series; UV DAD；カラム：Zorbax 300 mSB-C18 3.5 μ, 4.6 mm x 150 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋０.１％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル４００ｍｌ／水６００ｍｌ＋０.１％ＴＦＡ；グラジエント：０.０分１００％Ａ、１.３分１０％Ｂ、１８.０分８０％Ｂ、２０.０分８０％Ｂ、２１.０分１００％Ｂ、２５.０分１００％Ｂ、２６.０分０％Ｂ、３０.０分０％Ｂ。流速：１ｍｌ／分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１１４】
方法１０：ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1050 Series; UV DAD；カラム：Zorbax 300 mSB-C18 3.5 μ, 4.6 mm x 150 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋０.１％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０.０分１００％Ａ、１５.０分１００％Ｂ、１７.０分１００％Ｂ、１８.０分１００％Ａ。流速：１ｍｌ／分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１１５】
方法１１：ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1050 Series; UV DAD；カラム：Zorbax 300 mSB-C18 3.5 μ, 4.6 mm x 150 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋０.１％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル４００ｍｌ／水６００ｍｌ＋０.１％ＴＦＡ；グラジエント：０.０分１００％Ａ、２.０分１０％Ｂ、５０.０分８０％Ｂ、５２.０分１００％Ｂ、５５.０分１００％Ａ、６０.０分１００％Ａ。流速：１ｍｌ／分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１１６】
方法１２：ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1050 Series；カラム SymmetryPrepTMC18, Waters, 50 x 2.1 mm, 3.5 μm；溶離剤Ａ：水／０.１％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−３分０％Ｂ、３.０１−９分１００％Ｂ、９.０１−１１分１００％Ｂ、１１.０１−１２分０−１００％Ａ；オーブン：４０℃；流速：０.４ｍｌ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１１７】
方法１３：ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1100 Series; UV DAD；カラム：Chromolith Speed ROD RP18；溶離剤Ａ：水１ｌ＋０.０５％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ；グラジエント：０.０−０.５分９５％Ａ、０.５１−３.０分５−９５％Ｂ、３.０１−３.８０分９５％Ａ；流速：５ｍｌ／分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１１８】
方法１４：カラム（鋼カラム、寸法２５０ｘ４.６ｍｍ）；固定相（キラルシリカ／ポリアミド複合体KBD 5326、セレクターポリ（Ｎ−メタクリロリル−Ｌ−ロイシンジシクロプロピルメチルアミド）をベースとする；溶離剤：酢酸エチル、均一溶媒；流速：１ｍｌ／分；温度：２５℃；ＵＶ検出：２２０ｎｍ；サンプル：１０μｌ注入。
【０１１９】
方法１５：固定相（Chiralcel OD）；溶離剤：ｉ−ヘキサン／ｉ−ＰｒＯＨ：９／１、均一溶媒；流速：２ｍｌ／分；温度：２５℃；ＵＶ検出：２５４ｎｍ
【０１２０】
方法１６：ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1100 Series；カラム：Chiralpack AD-H 250 mm x 4.6 mm；溶離剤Ａ：イソヘキサン、溶離剤Ｂ：エタノール＋０.２％ＴＦＡ＋１％Ｈ２Ｏ；均一溶媒；流速：１ｍｌ／分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２３０ｎｍ。
【０１２１】
方法１７：Daicel Chiralpak AD-H 5 μm 250 mm x 4.6 mm、ヘキサン／２−プロパノール／メタノール８５／６／９、流速：２.０ｍｌ／分、２５４ｎｍでＵＶ検出。
【０１２２】
方法１８：ＭＳ装置タイプ：Micromass ZQ；ＨＰＬＣ装置タイプ：Waters Alliance 2795/HP 1100；カラム：Phenomenex Synergi 2 μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２３】
方法１９：ＭＳ装置タイプ：Micromass ZQ；ＨＰＬＣ装置タイプ：Waters Alliance 2795/HP 1100；カラム：Phenomenex Gemini 3 μ C-18 100 Å、30 mm x 3 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２４】
方法２０：ＵＶ検出：２１０ｎｍ。ＭＳ装置タイプ：Micromass ZQ；ＨＰＬＣ装置タイプ：Waters Alliance 2795；カラム：Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２５】
方法２１：装置：HPLC Agilent Series 1100 を備えた Micromass Quattro LCZ；カラム：Phenomenex Synergi 2 μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２０８−４００ｎｍ。
【０１２６】
方法２２：装置：HPLC Agilent Series 1100 を備えた Micromass Platform LCZ；カラム：Thermo Hypersil GOLD 3μ 20 mm x 4 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分１００％Ａ→０.２分１００％Ａ→２.９分３０％Ａ→３.１分１０％Ａ→５.５分１０％Ａ；オーブン：５０℃；流速：０.８ｍｌ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２７】
方法２３：ＭＳ装置タイプ：Micromass LCT (ESI pos./neg.)；ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1100 Series; UV DAD 1100 Series; カラム SymmetryPrepTMC18, Waters, 50 x 2.1 mm, 3.5 μm；溶離剤Ａ：水／０.１％ギ酸、溶離剤Ｂ：アセトニトリル／０.１％ギ酸；グラジエント：０−１分０％Ｂ、１−６分０−９０％Ｂ、６−８分９０−１００％Ｂ、８−１０分１００％Ｂ、１０−１０.１分１００−０％Ｂ、１０.１−１２分０％Ｂ、次いで、クロマトグラフィーカラムの再生。オーブン：４０℃、流速：０.５ｍｌ／分（短時間、１０.１分で１ｍｌ／分まで）、ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２８】
方法２４：ＴＯＦ−ＨＲ−ＭＳ−ＥＳＩ＋スペクトルを、Micromass LCT 装置（キャピラリー電圧：３.２ＫＶ、コーン電圧：４２Ｖ、ソース温度：１２０℃、脱溶媒和温度：２８０℃）で記録する。シリンジポンプ（Harvard Apparatus）を、この目的でのサンプル供給に使用する。ロイシン−エンケファリン（Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ）を標準として使用する。
【０１２９】
方法２５：ＴＯＦ／ＴＯＦイオン光学系および 200 Hz Nd:YAG レーザー（３５５ｎｍ）を備えた 4700 Proteomics Analyzer (Applied Biosystems, Framingham, MA、 USA) で、ＭＡＬＤＩ−ＭＳ／ＭＳ調査を実施する。８ｋＶでイオン源中の準分子イオンを加速し、電気的デフレクター（ＭＳ１）で選択し、ＭＳ１とＭＳ２との間に配置された衝突セル内でアルゴン原子と衝突させる。得られる分離片イオンを１５ｋＶで再加速し、第２の飛行時間型質量分析機（ＭＳ２）で特徴解析する。
【０１３０】
分取クロマトグラフィー
方法２６：装置：Gilson Abimed HPLC；バイナリーポンプシステム；カラム：Nucleodur C18 Gravity,  Macherey-Nagel, 5 μm; 250 x 21 mm；溶離剤Ａ：水／０.０５％−０.１％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−８分５％Ｂ、８−４０分５−６０％Ｂ、４０−６０分６０％Ｂ、６０−７５分６０−１００％Ｂ、７５−８０分１００％Ｂ、次いで、クロマトグラフィーカラムの再生；流速：７−１５ｍｌ／分；ＵＶ検出器２１０ｎｍ。
【０１３１】
方法２７：装置：Gilson Abimed HPLC；バイナリーポンプシステム；カラム：Nucleodur C18 Gravity, Macherey-Nagel, 5 μm; 250 x 21 mm；溶離剤Ａ：水／０.０５％−０.１％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−８分５％Ｂ、８−４０分５−６０％Ｂ、４０−６０分６０％Ｂ、６０−７５分６０−１００％Ｂ、７５−８０分１００％Ｂ、次いで、クロマトグラフィーカラムの再生；流速：７−１５ｍｌ／分；ＵＶ検出器２１０ｎｍ。
【０１３２】
方法２８：装置：Gilson Abimed HPLC；バイナリーポンプシステム；カラム：Nucleodur C18 Gravity, Macherey-Nagel, 5 μm; 250 x 40 mm；溶離剤Ａ：水／０.０５−０.１％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル／０.０５−０.１％ＴＦＡ；グラジエント：０−１０分１０％Ｂ、１０−２４分１０−３０％Ｂ、２４−２８分３０−５０％Ｂ、２８−３５分５０％Ｂ、３５−４５分５０−６０％Ｂ、４５−５３分６０−７０％Ｂ、５３−６０分６０−９０％Ｂ、６０−７０分１００％Ｂ、次いで、クロマトグラフィーカラムの再生；流速：１５−４５ｍｌ／分；ＵＶ検出器２１０ｎｍ。
【０１３３】
方法２９：装置：Gilson Abimed HPLC；バイナリーポンプシステム；カラム：Nucleodur C18 Gravity, Macherey-Nagel, 5 μm; 250 x 21 mm；溶離剤Ａ：水／０.２％酢酸、溶離剤Ｂ：アセトニトリル／０.２％酢酸；グラジエント：０−１０分１０％Ｂ、１０−２４分１０−３０％Ｂ、２４−２８分３０−５０％Ｂ、２８−３５分５０％Ｂ、３５−４５分５０−６０％Ｂ、４５−５３分６０−７０％Ｂ、５３−６０分６０−９０％Ｂ、６０−７０分１００％Ｂ、次いで、クロマトグラフィーカラムの再生；流速：７−１５ｍｌ／分；ＵＶ検出器２１０ｎｍ。
【０１３４】
方法３０：装置：Gilson Abimed HPLC；バイナリーポンプシステム；カラム：Nucleodur C18 Gravity, Macherey-Nagel, 5 μm; 250 x 40 mm；溶離剤Ａ：水／０.２％酢酸、溶離剤Ｂ：アセトニトリル／０.２％酢酸；グラジエント：０−１０分１０％Ｂ、１０−２４分１０−３０％Ｂ、２４−２８分３０−５０％Ｂ、２８−３５分５０％Ｂ、３５−４５分５０−６０％Ｂ、４５−５３分６０−７０％Ｂ、５３−６０分６０−９０％Ｂ、６０−７０分１００％Ｂ、次いで、クロマトグラフィーカラムの再生；流速：１５−４５ｍｌ／分；ＵＶ検出器２１０ｎｍ。
【０１３５】
方法３１：装置：Gilson Abimed HPLC；バイナリーポンプシステム；カラム：Kromasil-100A C18, 5 μm; 250 x 30 mm；溶離剤Ａ：水／０.２５％酢酸、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−３分５％Ｂ、３−３０分５−１００％Ｂ、３０−３８分１００％Ｂ、次いで、クロマトグラフィーカラムの再生；流速：２５ｍｌ／分；ＵＶ検出器２１０ｎｍ。
【０１３６】
方法３２：装置：Gilson Abimed HPLC；バイナリーポンプシステム；カラム：Kromasil-100A C18, 5 μm; 250 x 30 mm；溶離剤Ａ：水／０.０５−０.５％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−５分５％Ｂ、５.０１−１０分１０％Ｂ、１０.０１−２０分４０％Ｂ、２０.０１−２７分５０％Ｂ、２７.０１−４０分６０％Ｂ、４０.０１−４５分９０％Ｂ、４５.０１−６０分１００％Ｂ；流速：１５−６０ｍｌ／分；ＵＶ検出器２１０ｎｍ。
【０１３７】
方法３３：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器２１０ｎｍ；カラム：Kromasil RP-18 5 μm, 100 Å, 250 x 20 mm；溶離剤Ａ：水＋０.０５％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル＋０.０５％ＴＦＡ：流速：１０ｍｌ／分；０−３分１０％Ｂ、勾配、３０−３８分９０％Ｂ、３８−４５分１０％Ｂ。
【０１３８】
方法３４：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器２１０ｎｍ；カラム：Gromsil ODS-4HE 10 μm, 250 x 40 mm; 溶離剤 A：水＋０.０５％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル＋０.０５％ＴＦＡ：流速：２０ｍｌ／分；０−３分１０％Ｂ、勾配、３０−３５分９０％Ｂ、３５−４０分９０％Ｂ。
【０１３９】
方法３５：装置: Gilson Abimed HPLC；バイナリーポンプシステム；カラム：Waters Symmetry-PrepTM C18, 7 μm, 300 x 19 mm；溶離剤Ａ：水／０.２％氷酢酸、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−８分５％Ｂ、８−２５分５−１００％Ｂ、２５.０１−４０分１００％Ｂ、次いでクロマトグラフィーカラムの再生；流速：１５ｍｌ／分；ＵＶ検出器２１０ｎｍ。
【０１４０】
方法３６：装置：Gilson Abimed HPLC；バイナリーポンプシステム；カラム：Waters Symmetry-PrepTM C18, 7 μm, 300 x 19 mm；溶離剤Ａ：水／０.１％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−５分５％Ｂ、５.０１−３２分５−１００％Ｂ、３２.０１−３５分１００％Ｂ、次いで、クロマトグラフィーカラムの再生；流速：１５ｍｌ／分；ＵＶ検出器２１０ｎｍ。
【０１４１】
方法３７：カラム：Kromasil-100 C18, 5 μm; 250 x 20 mm；溶離剤：２５％水＋０.２ＴＦＡ／７５％アセトニトリル；均一溶媒；０−８.５分；流速：２５ｍｌ／分；ＵＶ検出器２２０ｎｍ；温度３０℃。
【０１４２】
方法３８：カラム（鋼カラム、寸法２５０ｘ３０ｍｍ）；固定相（キラルシリカ／ポリアミド複合体KBD 5326、セレクターポリ（Ｎ−メタクリロリル−Ｌ−ロイシンジシクロプロピルメチルアミド）をベースとする；溶離剤酢酸エチル、均一溶媒；流速：２５ｍｌ／分；温度：２４℃；ＵＶ検出：２２５ｎｍ；サンプル：２０００μｌの反復的注入。
【０１４３】
方法３９：カラム（鋼カラム、寸法４３０ｘ７５ｍｍ）；固定相（キラルシリカ／ポリアミド、セレクターポリ（Ｎ−メタクリロイル−Ｄ−ロイシンジシクロプロピルメチルアミドをベースとする）；溶離剤イソヘキサン（８０％）／ＴＨＦ（２０％）、均一溶媒；流速：２００ｍｌ／分；温度：２４℃；ＵＶ検出：２５４ｎｍ；サンプル：１００００μｌの反復的注入。
【０１４４】
方法４０：カラム（鋼カラム、寸法２５０ｘ２０ｍｍ）；固定相（Daicel Chiralpak AD-H, 5 μm)；溶離剤：イソヘキサン（７０％）／２−プロパノール＋０.２％酢酸＋１％水（３０％）、均一溶媒；流速：１５ｍｌ／分；温度：２９℃；ＵＶ検出：２２０ｎｍ；サンプル：７５０μｌの反復的注入。
【０１４５】
方法４１：Gilson Abimed HPLC；カラム：Daicel Chiralpak AD-H 5 μm; 250 x 20 mm；溶離剤Ａ：イソヘキサン、溶離剤Ｂ：０.２％酢酸／１％水／２−プロパノール；均一溶媒；流速：１５ｍｌ／分；ＵＶ−検出器２１２ｎｍ。
【０１４６】
方法４２：カラム（鋼カラム、寸法５００ｘ４０ｍｍ）；固定相（Daicel Chiralpak AD 20 μm）、イソヘキサン／イソプロパノール／メタノール９５／２／３、流速：１００ｍｌ／分、ＵＶ検出：２３０ｎｍ。
【０１４７】
方法４３：装置：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器２１０ｎｍ；バイナリーポンプシステム；カラム：SymmetryPrepTMC18, Waters, 7 μm; 300 mm x 19 mm；流速：２５ｍｌ／分；溶離剤Ａ：水／０.２％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−１０分１５−６５％Ｂ、次いで、クロマトグラフィーカラムの再生。
【０１４８】
方法４４：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器２１０ｎｍ；カラム：Waters Symmetry-PrepTM C-18, 7 μm, 300 x 19 mm；溶離剤Ａ：水＋０.０５％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル＋０.０５％ＴＦＡ：流速：１０ｍｌ／分；０−３分１０％Ｂ、勾配、３０−３８分９０％Ｂ、３８−４５分１０％Ｂ。
【０１４９】
方法４５：Sephadex LH-20 (Pharmacia) に圧力をかけずにゲルクロマトグラフィーを実施する。ＵＶ活性（２５４ｎｍ用のＵＶ検出機、Knauer) に従い、分別を実施する（ISCO Foxy 200 フラクションコレクター）。カラム寸法：３２ｘ７ｃｍ（１０００−１００μｍｏｌスケール）；３０ｘ４ｃｍ（１００−１０μｍｏｌスケール）；２５ｘ２ｃｍ（１０１μｍｏｌスケール）。メタノールを溶離剤として使用する。
【０１５０】
方法４６：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器２１０ｎｍ；カラム：Biotage Flash40 RP-18 または、互換性モジュール Varian Metaflash C18 40M, 35 μm, 150 x 40 mm；溶離剤Ａ：水＋０.０５％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル＋０.０５％ＴＦＡ：流速：４０ｍｌ／分；０−３分１０％Ｂ、勾配、３０−３８分９０％Ｂ、３８−４５分１０％Ｂ。
【０１５１】
方法４７：ジヒドロリソバクチンのフラグメント１−３および４−１１のキモトリプシン切断物の逆相クロマトグラフィーによる分取的分離。カラム：Source 15-RPC (GE-HealthCare)、直径５ｃｍ、長さ１２ｃｍ、容積２３５ｍｌ。溶離剤Ａ：水中の０.１％酢酸。溶離剤Ｂ：メタノール中の０.１％酢酸。流速：３０ｍｌ／分。ＵＶ検出：２１５ｎｍ、２８０ｎｍ。負荷：総タンパク質約６−７ｍｇ／樹脂１ｍｌ。サンプル負荷：カラムを溶離剤Ａで平衡化し、０.２μｍで濾過した切断混合物溶液を載せ、カラムを溶離剤Ａで洗浄する。溶出：カラム容積の約１８倍で０−４５％、続いてカラム容積の約１.３倍の１００％Ｂで洗浄する。分画：溶出の開始時から５０ｍｌの画分を集める。ＣＩＰ：カラム容積の２倍の１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で、遅い流速（５ｍｌ／分）でカラムを洗浄する。
【０１５２】
アミノ酸およびペプチドを分析するための特別な方法
方法４８：Eppendorf/Biotronik の LC 3000 アミノ酸分析機を使用して、アミノ酸分析を実施する。わずかに改変した標準的 Eppendorf/Biotronik 分離プログラムを使用する。分離プログラムおよび分析機の機能は、装置の手引き書に詳細に記載されている (Handbuch des aminosaeurenanalysators LC 3000, Wissenschaftliche Geraete GmbH Biotronik, Maintal, 1996)。
【０１５３】
方法４９：キャピラリー電気泳動は、ペプチドおよびタンパク質を電界におけるそれらの電荷に基づいて分離させる。それによる分離の質は、バッファー、ｐＨ、温度および使用する添加剤に依存する。用いるキャピラリーは、内直径５０−１００μｍの、いわゆる溶融石英カラムである。この方法は、ペプチドの純度を評価し、酵素的切断産物の形成を監視するために、非常に良好な基準である。ペプチドのジヒドロリソバクチンおよびオクタヒドロリソバクチンは約２１分で、フラグメント４−１１は約１８分で、１−３（ＬＬＦ）は約２４分で、１−３（ＬＬＡ（３−シクロヘキシル））は約２２分で、脱アミド化形態は二重ピークとして約３０分（１−１１）および２４分（４−１１）で、キャピラリーカラムから溶出する。バッファー中で２４時間後の脱アミド化産物の大幅な増加が明確に見られる。約４ｎｇの酵素的切断産物または出発化合物のジヒドロリソバクチンおよびオクタヒドロリソバクチンまたは混合物を、キャピラリー電気泳動によりガラスカラム（長さ７２ｃｍ、内直径５０μｍ）で調べる。条件：電流９０μＡ、カラム温度２５℃、ｐＨ３.０の１００ｍＭリン酸バッファー、ＵＶ検出２１０ｎｍ、圧力下３秒で負荷。
【０１５４】
方法５０：６０％アセトニトリル／０.１％ＴＦＡに溶解したフラグメント３ｎｍｏｌを、予め Polybren（登録商標）でインキュベートしたシークエンサーシートに負荷する。通常のシークエンサーのサイクルを使用して、タンパク質を配列決定する。４０ｐｍｏｌＰＴＨ標準を利用するオンラインＨＰＬＣを用いて、ＰＴＨ−アミノ酸を同定する。標準アミノ酸に対するそれらの位置により、非タンパク新生アミノ酸を同定する。第１ＰＴＨサイクルのアミノ酸により、ペプチドの純度を見積もる。様々なペプチドを４ないし１２段階で配列決定する。
【０１５５】
さらなる分析および分取方法
方法５１：装置：HPLC Agilent Series 1100 を備えた Micromass Quattro LCZ; カラム: Phenomenex Onyx Monolithic C18, 100 mm x 3 mm。溶離剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２分６５％Ａ→４.５分５％Ａ→６分５％Ａ；流速：２ｍｌ／分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２０８−４００ｎｍ。
【０１５６】
方法５２：ＭＳ装置タイプ：Micromass ZQ；ＨＰＬＣ装置タイプ：Waters Alliance 2795；カラム：Phenomenex Synergi 2.5 μ MAX-RP 100A Mercury 20 mm x 4 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→０.１分９０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.０分５％Ａ→４.０１分９０％Ａ；流速：２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１５７】
方法５３：装置：DAD (G1315B)、バイナリーポンプ (G1312A)、オートサンプラー (G1313A)、溶媒脱気装置 (G1379A) およびカラムサーモスタット (G1316A) を備えた Agilent 1100；カラム：Agilent Zorbax Eclipse XDB-C8 4.6 x 150 x 5 mm；カラム温度：３０℃；溶離剤Ａ：水中０.０１％ＴＦＡ；溶離剤Ｂ：アセトニトリル中０.０１％ＴＦＡ；流速：２.００ｍｌ／分；グラジエント：０−１分１０％Ｂ、勾配、１０−１４分９０％、再生。
【０１５８】
方法５４：装置：DAD (G1315B)、バイナリーポンプ (G1312A)、オートサンプラー (G1313A)、溶媒脱気装置 (G1379A) およびカラムサーモスタット (G1316A) を備えた Agilent 1100；カラム：Agilent Zorbax Eclipse XDB-C8 4.6 x 150 x 5 mm；カラム温度：３０℃；溶離剤Ａ：水中０.０１％ＴＦＡ；溶離剤Ｂ：アセトニトリル中０.０１％ＴＦＡ；流速：１.４０ｍｌ／分；グラジエント：０分１０％Ｂ、勾配、２.５−５分９０％、再生。
【０１５９】
方法５５：カラム（鋼カラム、寸法２５０ｘ２０ｍｍ）；固定相（Daicel Chiralpak AD-H, 5 μm）；溶離剤：イソヘキサン（９０％）／エタノール＋０.２％ＡｃＯＨ＋１％Ｈ２Ｏ（１０％）、均一溶媒；流速：１５ｍｌ／分；温度：３０℃；ＵＶ検出：２２０ｎｍ；サンプル：５００μｌの反復的注入。
【０１６０】
方法５６：カラム（鋼カラム、寸法２５０ｘ４.６ｍｍ）；固定相（Daicel Chiralpak AD-H, 5 μm)；溶離剤：イソヘキサン（９０％）／エタノール＋０.２％ＡｃＯＨ＋１％Ｈ２Ｏ（１０％）、均一溶媒；流速：１.０ｍｌ／分；温度：３０℃；ＵＶ検出：２２０ｎｍ；サンプル：１０μｌの注入。
【０１６１】
方法５７：カラム：カラム：Kromasil 100 C18, 60 x 2.1mm 3.5 μm、カラムオーブン３０℃、流速：０.７５ｍｌ／分、検出器：２１０ｎｍ、実行時間：１５分；溶離剤Ａ：ＨＣｌＯ４５ｍｌを含む水／水１ｌ）、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−１分２％Ｂ、勾配、９−１３分、９８％Ｂ、再生。
【０１６２】
方法５８：（キラル分取ＨＰＬＣ、Chiralpak AD-H 40-60）；カラム（鋼カラム、寸法２５０ｘ２０ｍｍ）；固定相（Daicel Chiralpak AD-H, 5 μm）；溶離剤：イソヘキサン（４０％）／エタノール＋０.２％ＡｃＯＨ＋１％Ｈ２Ｏ（６０％）、均一溶媒；流速：１５ｍｌ／分；温度：３０℃；ＵＶ検出：２２０ｎｍ；サンプル：５００μｌの反復的注入。
【０１６３】
方法５９：（キラル分析ＨＰＬＣ、Chiralpak AD-H 40-60)；カラム（鋼カラム、寸法２５０ｘ４.６ｍｍ）；固定相（Daicel Chiralpak AD-H, 5 μm）；溶離剤：イソヘキサン（４０％）／エタノール＋０.２％ＡｃＯＨ＋１％Ｈ２Ｏ（６０％）、均一溶媒；流速：１.０ｍｌ／分；温度：３０℃；ＵＶ検出：２２０ｎｍ；サンプル：１０μｌの注入。
【０１６４】
一般的手順
手順１（ＴＦＡによるＢｏｃ保護基の除去）：Ｂｏｃ−保護化合物を、ジクロロメタン（反応溶液の１／５−１／１０）に懸濁し、続いて、アルゴン保護気体雰囲気下、ジクロロメタン中の３０％ＴＦＡ（１００−１ミリモル濃度の規模で約１ｍｌ／出発物質１０ｍｇ、１００−１マイクロモル濃度の規模で約１ｍｌ／１ｍｇ）を添加し、混合物を室温で、ＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換を示すまで（例えば方法１）撹拌する。次いで、溶媒を真空で留去し、その間に浴温度は３０℃を超えるべきではない。粗生成物をトルエンに懸濁し、再度ロータリーエバポレーターで濃縮し、高真空下で乾燥する。この方法を数回（２ないし５回）繰り返す。生成物の純度が不十分であれば、それを必要に応じてクロマトグラフィーにより、例えば分取ＨＰＬＣにより、またはゲルクロマトグラフィーにより、精製する。
【０１６５】
手順２（ジクロロメタン中の３０％ＴＦＡによるＢｏｃ保護基の除去）：出発物質を３０％ＴＦＡ（ジクロロメタン中の溶液）に取り、室温で３０分間撹拌する。次いで、溶媒を真空で留去し、その間、浴温度は３０℃を超えるべきではない。次いで、生成物をオイルポンプによる真空下で一定重量まで乾燥する。
【０１６６】
手順３（ジオキサン中の４Ｎ塩酸によるＢｏｃ保護基の除去）：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−保護化合物（１ｍｍｏｌ）を、アルゴン保護気体雰囲気下でジオキサン（２−３ｍｌ）中に提供する。室温で、または氷冷しながら、そして激しく撹拌しながら、ジオキサン中（３０ｍｌ）の４Ｎ塩酸を滴下して添加する。分析ＨＰＬＣ（方法１）が完全な変換を示すまで（約３０分間ないし２時間）、撹拌を継続する。反応混合物を室温、真空で蒸発させる。粗生成物を少量のジクロロメタンに取り、再度溶媒を真空で除去する。この手順をトルエン（２回）およびジクロロメタン（２回）で数回繰り返す。最後に、粗生成物を凍結乾燥するか、または、高真空下で乾燥した後、直ちにさらに反応させる。生成物の純度が不十分であるならば、それを必要に応じてクロマトグラフィーにより、例えば分取ＨＰＬＣにより、または、ゲルクロマトグラフィーにより精製する。
【０１６７】
手順４（水素化分解的エステル切断１）：ペプチド性ベンジルエステルを、メタノールまたはジオキサンに溶解し（約３・１０−４−２・１０−３ｍｏｌ／ｌ）、続いて水性０.１％ＴＦＡまたは０.１Ｎ塩酸（６−１０当量）を添加し、アルゴン保護気体雰囲気下、１０％パラジウム−炭素（１０ｍｏｌ％）を添加する。室温で、大気圧下で、分析的ＨＰＬＣ（例えば方法１）が完全な変換を示すまで、水素化を実施する。反応混合物を濾過し（例えば珪藻土、Celite（登録商標）を通して）、真空で濃縮し、高真空下で乾燥する。生成物の純度が不十分であるならば、それを必要に応じてクロマトグラフィーにより、例えば分取ＨＰＬＣにより、または、ゲルクロマトグラフィーにより精製する。
【０１６８】
手順５（水素化分解的エステル切断２）：ペプチド性ベンジルエステルをメタノール（約３・１０−４−２・１０−３ｍｏｌ／ｌ）に溶解し、アルゴン保護気体雰囲気下、１０％パラジウム−炭素（２−１０ｍｏｌ％）を添加する。室温で、大気圧下で、分析的ＨＰＬＣ（例えば方法１）が完全な変換を示すまで、水素化を実施する。反応混合物を濾過し（例えば珪藻土、Celite（登録商標）を通して）、真空で濃縮し、高真空下で乾燥する。生成物の純度が不十分であるならば、それを必要に応じてクロマトグラフィーにより、例えば分取ＨＰＬＣにより、または、ゲルクロマトグラフィーにより精製する。
【０１６９】
手順６（加水分解的エステル切断、加水分解）：カルボン酸エステル（３ｍｍｏｌ）をアルゴン保護気体雰囲気下、ＴＨＦ／水／ＤＭＦ２００／１００／２.５（２０ｍｌ）中に提供する。０℃で、温度を厳密に制御しながら、粉末水酸化リチウム（３.６ｍｍｏｌ、１.２当量）を、激しく撹拌した溶液に少しずつ添加する。分析的ＨＰＬＣ（方法１３）により変換が２時間後に完全ではないと観察されたら、固体の水酸化リチウムを再度添加する（３.３ｍｍｏｌ、１.１当量）。変換が完了するまでこの手順を繰り返し、その後、反応混合物を０.１Ｎ水性塩酸を使用して０℃でｐＨ３−４に調節し、真空で濃縮し、続いて凍結乾燥する。次いで、粗生成物をゲルクロマトグラフィー（例えば、方法４５）でき、かつ／または、分取ＨＰＬＣ（例えば方法３１）により入念に精製できる。
【０１７０】
手順７（樹脂でのペプチドカップリング）：クロロトリチル樹脂に結合したＦｍｏｃ−保護アミノ酸を、ＤＭＦ中の２０％ピペリジン溶液と混合し、３０分間振盪する。次いで、フリットを通して溶液を吸引濾過し、ピペリジン溶液を再度添加し、振盪をさらに３０分間継続する。溶液を吸引濾過し、樹脂をＤＭＦ、メタノール、ＴＨＦおよびジクロロメタンで洗浄する。
【０１７１】
脱保護されたポリマーをＤＭＦに懸濁し（溶媒１ｍｌ／樹脂１００ｍｇ）、ＤＭＦに溶解したＦｍｏｃ−保護アミノ酸（１.３−２.０当量）、ＤＩＥＡ（２.０−３.０当量）およびＴＢＴＵ（１.５−２.０当量）を添加する。樹脂を室温で終夜振盪する。後処理に、フリットでの吸引濾過によりポリマーを回収し、続いてＤＭＦ、ＴＨＦおよびジクロロメタンで洗浄する。
【０１７２】
酢酸／トリフルオロエタノール／ジクロロメタン１：１：３中のサンプルを取り出した後、得られたペプチドを分析により確認できる。
【０１７３】
手順８（Chemspeed ロボットでの自動固相合成）：
装置：
７５ｍｌの反応器および溶媒廃棄物への直接吸引濾過を備えた Chemspeed ASW 2000。ボルテックスにより混合。
反応物：
Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］保護基（Ｆｍｏｃ基）をＮ２の位置に有するアミノ酸を用いる。
Ｎ２の位置のＦｍｏｃ保護基に加えて、以下のアミノ酸の側鎖でさらに保護基を使用する：アルギニンおよびＤ−アルギニンの各々は、［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル基（ＰＭＣ基）をグアニジン官能基に有する；セリンおよびスレオニンは、各々Ｏ３−ｔｅｒｔ−ブチルセリンおよび−スレオニンとして側鎖で保護される。リジン、オルニチン、２,４−ジアミノ酪酸および２,３−ジアミノ酪酸の側鎖のアミノ基は、は、ベンジルオキシカルボニル基（Ｃｂｚ基）で保護される。
【０１７４】
手順：
２−クロロトリチルクロリド−樹脂（Iris Biotech, CAS No 42074-68-0）（α−Ｆｍｏｃ−保護アミノ酸を予め負荷する、０.８５ｍｍｏｌ／ｇ）１.７ｇを、乾燥状態で各反応器に提供し、ＤＭＦ１７ｍｌを添加し、混合物を３０分間振盪する。ＤＭＦを吸引濾過により除去する。
【０１７５】
記載したオクタペプチド類を合成するために、７回の脱保護−カップリングサイクルを実施し、その各々は以下の段階からなる：
１.）Ｆｍｏｃの除去
−ＤＭＦ１２.７５ｍｌおよびピペリジン４.２５ｍｌを添加する。
−混合物を３０分間振盪する。
−ＤＭＦ／ピペリジン混合物を吸引濾過により除去する。
−ＤＭＦ１２.７５ｍｌおよびピペリジン４.２５ｍｌを添加する。
−混合物を１０分間振盪する。
−ＤＭＦ／ピペリジン混合物を吸引濾過により除去する。
【０１７６】
２.）洗浄段階（５回繰り返す）
−ＤＭＦ１７ｍｌを添加する。
−混合物を３０分間振盪する。
−ＤＭＦを吸引濾過により除去する。
【０１７７】
３.）アミノ酸カップリング
−ＤＭＦに溶解した対応するＦｍｏｃ−アミノ酸（１.５当量）１０.２ｍｌを添加する。
−ＤＭＦに溶解したＴＢＴＵ（２当量）６.８ｍｌを添加する。
−ジイソプロピルエチルアミン（３当量）を添加する。
−反応混合物を２時間振盪し、次いで吸引濾過により除去する。
【０１７８】
４.）洗浄段階（３回繰り返す）
−ＤＭＦ１７ｍｌを添加する。
−混合物を３０分間振盪する。
−ＤＭＦを吸引濾過により除去する。
【０１７９】
最後の反応段階の後、吸引濾過により回収した生成物樹脂をジクロロメタン１０ｍｌと共にフィルターに移し、濾過により回収し、各回ジクロロメタン５ｍｌで２回洗浄する。
【０１８０】
手順９（完全な脱保護による除去）：ペプチドを伴う樹脂を、フリットベース備えた反応容器中でＤＣＭ中の５０％ＴＦＡと混合し（手順８に記載したサイズの混合物に対して、溶液２０ｍｌ）、トリイソプロピルシラン（１００μｌ）および水（１００μｌ）を添加し、混合物を室温で終夜振盪する。次いで、暗色の溶液を吸引濾過により除去し、樹脂を４回に分けてＤＣＭで洗浄し、各回２分間振盪し、再度吸引濾過により回収する。濾液を合わせ、溶媒を留去する。残渣をＭＴＢＥと撹拌し、吸引濾過により回収し、メタノールに取る。最後に、メタノールを真空で留去する。
【０１８１】
手順１０（橋頭の活性なエステルとのカップリング）：オクタペプチドおよび活性エステル（化合物１７Ａまたは化合物２７７Ａ（１.１当量）を、ＤＭＦ（２０−４０μｌ／オクタペプチド１μｍｏｌ）に０℃で溶解し、ＤＩＥＡ（４−５当量）を添加する。反応混合物を室温でさらに９０分間ないし２時間撹拌する。混合物をアセトニトリルに取り、クロマトグラフィーにより精製する。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥する。
【０１８２】
手順１１（環化）：出発化合物をＤＭＦに溶解し（約５０μｌ／μｍｏｌ）、溶液を０℃に冷却する。４−メチルモルホリン（６当量）およびＨＡＴＵ（３当量）を添加し、混合物を０℃で２時間撹拌する。後処理は、完成した反応混合物を負荷し、方法４５または上述のＨＰＬＣ方法の１つに従い分離することにより、直接行う。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥するか、または、ロータリーエバポレーターで濃縮する。
【０１８３】
手順１２（ピペリジンを使用するＦｍｏｃ基の除去）：ペプチドを０℃でＴＨＦおよびピペリジン（４＋１、約２０μｌ／μｍｏｌ）の混合物と混合する。続いて混合物をこの温度で１時間撹拌する。反応混合物を方法４５に従い直接精製し、生成物含有画分を合わせ、濃縮する。
【０１８４】
手順１３（液相でＨＡＴＵを使用するペプチドカップリング）：非保護Ｎ末端を有する環状ペプチド（例えば、例示的化合物４０７、４０８、４０９など）およびジペプチド（例えば化合物８Ａ、１０Ａなど）（１.５当量）を、ＤＭＦ（約３０−８０μｌ／シクロペプチド１μｍｏｌ）に溶解し、溶液を０℃に冷却する。４−メチルモルホリン（４当量）およびＨＡＴＵ（１.６当量）を添加し、混合物を室温で２時間撹拌する。次いで、反応をメタノール３ｍｌで停止し、方法４５に従いクロマトグラフィーにより精製する。生成物含有画分を合わせ、濃縮する。
【０１８５】
出発化合物
実施例１Ａ
Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニル−［（３Ｒ）−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−アスパラギニル］−セリントリフルオロ酢酸塩（ジヒドロリソバクチン）
および
実施例２Ａ
Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシル−［３−シクロヘキシル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−アスパラギニル］−セリントリフルオロ酢酸塩（オクタヒドロリソバクチン）
【化１２】
2009533371.tif 000015
【０１８６】
発酵によるリソバクチンビストリフルオロ酢酸塩の製造およびその単離は、ＷＯ２００４／０９９２３９に記載されている。リソバクチンビストリフルオロ酢酸塩（２０ｇ、１３.２９ｍｍｏｌ）を２回に分けてイソプロパノール／水９：２（各１１０ｍｌ）に溶解する。アルゴン保護気体雰囲気下、パラジウム／炭素（１０％；各場合で５ｇ）を添加する。反応混合物を（脱気後に）水素圧８０−７０ｂａｒ下、４０℃、加圧オートクレーブ中で１２時間撹拌する。パラジウム／炭素（１０％；５ｇ）を再度反応に添加する。反応混合物を（脱気後に）、再度水素圧８０−７０ｂａｒ下、４０℃、加圧オートクレーブ中、１２時間撹拌する。反応混合物を（脱気後に）もう一度水素圧８０−７０ｂａｒ下、４０℃、加圧オートクレーブ中、１２時間撹拌する。ここで、リソバクチンはもはや分析ＨＰＬＣ（方法１０）により検出可能ではない。反応混合物を珪藻土で濾過し、真空で濃縮し、高真空下で乾燥する。生成物（ジヒドロリソバクチン６０％、オクタヒドロリソバクチン４０％）２０.１０ｇ（理論値の９９％）を得る。
【０１８７】
実施例３Ａ
［（３Ｒ）−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−アスパラギニル］−セリントリフルオロ酢酸塩
【化１３】
2009533371.tif 000016
【０１８８】
ジヒドロ／オクタヒドロリソバクチン混合物の製造的キモトリプシン切断、基質濃度５ｍｇ／ｍｌ
ジヒドロ−（約４０％）およびオクタヒドロリソバクチン（約６０％）２０ｇを、メタノール４００ｍｌに溶解し、次いで切断バッファー（０.１Ｍ重炭酸アンモニウム／０.５Ｍ尿素ｐＨ８）３４００ｍｌを添加する。酵素を添加する前に、溶液を乾燥オーブン中で３７℃に温める。キモトリプシン８００ｍｇ（１００ｍｌのキモトリプシン溶液、水／エチレングリコール１：１、４ｍｇ／ｍｌ；１：２５；予め３７℃に温める）を添加し、反応を３７℃で実施する。０.５、１時間後に２００μｌのアリコートを取り、３０％アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ２００μｌで酵素切断を停止する。酵素切断と並行してサンプルをＨＰＬＣにより１５分以内に分析する（フラグメント４−１１の保持時間約３.６分、フラグメント１−３（ＬＬＦ）約９.６分、フラグメント１−３（ＬＬＡ（３−シクロヘキシル））約１１.３分）（溶媒Ａ０.１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ６０％アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ、グラジエント０分３０％Ｂ、１０分８０％Ｂ、１１分１００％Ｂ、１２分３０％Ｂ、１５分３０％Ｂ；流速：０.７ｍｌ／分、温度：４０℃、ＵＶ検出２１０ｎｍ）。酵素反応を６０分後にアセトニトリル１５０ｍｌおよびＴＦＡ約３０ｍｌで停止する。溶液のｐＨは、１ないし２であるべきである。製造的分離まで、溶液を−２０℃で保存できる。
【０１８９】
使用するキモトリプシンバッチの活性（７０Ｕ／ｍｇ）を、タンパク質インターロイキン−４二重変異タンパク質Ａｒｇ（１２１）→Ａｓｐ（１２１）／Ｔｙｒ（１２４）→Ａｓｐ（１２４）（Bayer Healthcare AG, D-Wuppertal) を用いる対照切断により試験する。
【０１９０】
製造的精製：上記の切断混合物の溶液５００ｍｌ分を、最初に Celite 層を通して真空下で、次いで、圧力フィルター漏斗（４５０μｍ、プレフィルター付き）を通して濾過する。濾液を Varian Metaflash C-18 40M カートリッジに負荷する。次いで、以下のプログラムで溶出を実施する：溶媒Ａ：水中０.０５％ＴＦＡ、溶媒Ｂ：アセトニトリル中０.０５％ＴＦＡ。流速：５０ｍｌ／分；０−３分５％Ｂ；勾配；３０分９０％Ｂ、３３分。９０％Ｂ。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥する。表題化合物１１.８ｇ（理論値の８７％）を、合わせた生成物含有画分から得る。
【０１９１】
実施例４Ａ
メチル（Ｚ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４,４−ジメチルペント−２−エノエート
【化１４】
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ピバルアルデヒド（３０３.２ｇ、３.４１ｍｏｌ、１０当量）およびメチル｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（ジメトキシホスホリル）アセテート（１０１.５ｇ、０.３４１ｍｏｌ、１.０当量）を、ＴＨＦ（８００ｍｌ）に溶解し、−７０℃に冷却する。−７０℃で、ＴＭＧ（７８.７ｇ、０.６８３ｍｍｏｌ、６.９５ｍｌ、２.０当量）をゆっくりと滴下して添加し、次いで、混合物を−７０℃で４時間、続いて室温で４日間撹拌する。反応混合物を濃縮し、次いで、酢酸エチル（２回、５００ｍｌ）および水と振盪することにより抽出し、合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液（１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥する。濃縮後、粗生成物をクロマトグラフィーする（シリカゲル１.５ｋｇ、溶離剤：シクロヘキサン／酢酸エチル５：１）。表題化合物６７ｇ（理論値の７６％）を得る。
【０１９２】
あるいは、水性後処理後の粗生成物を、シクロヘキサン／酢酸エチルからの結晶化により精製できる。
Ｒｆ（シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル４：１）＝０.５
ＬＣ−ＭＳ（方法１８）：Ｒｔ＝２.５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ.）：ｍ／ｚ（％）＝１５８（１００）［Ｍ−Ｃ４Ｈ８−ＣＯ２＋Ｈ］＋、２８０（５）［Ｍ＋Ｎａ］＋
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 1.08 (s, 9H, C(CH3)3), 1.38 (s, 9H, OC(CH3)3), 3.61 (s, 3H, CO2CH3), 6.40 (s, 1H, Hβ), 8.14 (s, 1H, NH).
13C NMR (126 MHz, d6-DMSO): δ 28.46 (3C), 29.53 (3C), 33.28, 52.22, 78.89, 125.62, 147.05, 154.67, 166.25.
HR-TOF-MS (方法 24): C13H23NO4 [M+H]+ 実測値 258.1696, 計算値 258.1700.
【０１９３】
実施例５Ａ
Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニンメチルエステル
【化１５】
2009533371.tif 000018
メチル（２Ｚ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４,４−ジメチルペント−２−エノエート（実施例４Ａ、６０ｇ、２３３.２ｍｍｏｌ）を、エタノールｐ.ａ.／ジオキサン３：１（１０００ｍｌ）に溶解する。アルゴン保護気体雰囲気を針で通す（〜１０分）。溶液を超音波浴に置き（約５分）、（＋）−１,２−ビス［（２Ｒ,５Ｒ）−ジエチルホスホラノ］ベンゼン（シクロオクタジエン）ロジウム（Ｉ）トリフレート（６００ｍｇ、１重量％）を添加する。混合物を３.５ｂａｒの水素圧下、室温で３日間水素化する。珪藻土を通して反応混合物を濾過し、溶出液を濃縮する。粗生成物をクロマトグラフィーする（シリカゲル、溶離剤：シクロヘキサン／酢酸エチル４：１）。表題化合物６０ｇ（理論値の９９％）を得る。°
[α]20Na = +5°(c=0.33, CHCl3中)
DCI-MS (NH3): m/z (%) = 221 (100), 260 (40) [M+H]+, 277 (100) [M + NH4]+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 0.93 (s, 9H, C(CH3)3), 1.40 (m, 10H, OC(CH3)3), 1.68 ("d", J = 14.5 Hz, 2H, Hβ), 3.68 (s, 3H, OCH3), 4.30 (t, J = 7.9 Hz, 1H, Hα), 4.81 (d, br, J = 7.7 Hz, 1H, NH).
13C NMR (126 MHz, CDCl3): δ 28.30 (3C, CH2C(CH3)3), 29.52 (3C, OC(CH3)3), 30.61 (CH2C(CH3)3), 46.27 (CβH2), 51.19 (Hα), 52.17 (OCH3), 79.79 (OC(CH3)3), 155.11 (NHCO2), 174.39 (CO2CH3).
HR-TOF-MS (方法24) :C26H51N2O8 計算値 519.3640, 実測値 519.3634[M+H]+
【０１９４】
実施例６Ａ
Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニン
【化１６】
2009533371.tif 000019
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニンメチルエステル（実施例５Ａ、６０ｇ、２３１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦｐ.ａ.（４６３ｍｌ）に溶解する。室温で、水（４６３ｍｌ）中の水酸化リチウム一水和物（１９.４ｇ、４６２.７ｍｍｏｌ）の溶液を、ゆっくりと滴下して添加する。ＨＰＬＣクロマトグラム（方法１）が完全な変換を示したら（約２０時間）、１Ｎ水性塩酸を使用して、氷中で冷却しながら、反応混合物を注意深くｐＨ３−４に調節する。固体の塩化ナトリウム（１５０ｇ）を反応混合物に添加し、次いでそれを酢酸エチル（５００ｍｌ）で２回抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過する。濾液をロータリーエバポレーターで濃縮し、高真空下で乾燥する。表題化合物５５.４ｇ（理論値の９８％）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法3): Rt= 4.2分
DCI-MS (NH3): m/z (%) = 263 (100) [M + NH4]+, 280 (5) [M + N2H7]+.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 0.96 (s, 9H, C(CH3)3), 1.42 (m, 10H, OC(CH3)3, Hβ), 1.79 ("d", J = 14.4 Hz, 2H, Hβ), 4.31 (t, J = 8.0 Hz, 1H, Hα), 4.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H, NH).
13C NMR (126 MHz, CDCl3): δ = 28.32 (3C), 29.54 (3C), 30.74, 45.92, 51.24, 80.19, 155.41, 178.93.
HR-TOF-MS (方法24): C24H47N2O8 計算値 491.3327, 実測値 491.3328 [2M+H]+
【０１９５】
実施例７Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル）］−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン）メチルエステル
【化１７】
2009533371.tif 000020
ＨＯＢｔ（３当量、３９.４ｇ、２９２ｍｍｏｌ）、ＮＭＭ（３当量、３２.１ｍｌ、２９１.８ｍｍｏｌ）、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニン（実施例６Ａ、１.０当量、９７.３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（２当量、３７.３ｇ、１９４.６ｍｍｏｌ）および再度ＮＭＭ（２当量、２１.４ｍｌ、１９４.５ｍｍｏｌ）を、連続的にジクロロメタンｐ.ａ.（１.４ｌ）中の３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニンメチルエステル塩酸塩（１.１当量、２１ｇ、１０７ｍｍｏｌ）の溶液に−２０℃で添加する。反応混合物はゆっくりと室温に温まり（約１２時間）、そこでアミン成分の完全な変換がＨＰＬＣにより観察される。次いで、反応混合物を飽和水性重炭酸ナトリウム溶液（３００ｍｌ）、５％水性クエン酸（５００ｍｌ）、飽和水性重炭酸ナトリウム溶液（５００ｍｌ）および飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄する。反応混合物を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過する。反応混合物を真空で蒸発乾固し、次いで高真空下で乾燥する。表題化合物３６ｇ（理論値の９６％）を得、それをさらに精製せずに反応させる。
[α]20Na= +24°(c=0.10, CH2Cl2中)
DCI-MS (NH3): m/z(%)= 387 (40) [M+H]+, 404 (100) [M+NH4]+
LC-MS (方法 20): Rt= 2.6分; MS (ESIpos.): m/z(%)= 287 (100) [M-C5O2H8+H]+, 387 (60) [M+H]+
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 0.95 (s, br, 18H, tBu), 1.35 (dd, 1H), 1.45 (s, 9H, OtBu), 1.50 (dd, 1H), 1.65 (dd, 1H), 1.95 (dd, br, 1H), 3.70 (s, 3H, OCH3), 4.15 ("t", br, 1H), 4.55 ("t", br, 1H), 4.80 (d, 1H), 6.65 (d, br, 1H).
13C NMR (126 MHz, d6-DMSO): δ 28.39 (3C, C(CH3)3), 29.49 (3C, C(CH3)3), 29.67 (3C, C(CH3)3), 30.40 (C(CH3)3), 30.44 (C(CH3)3), 44.25, 45.12, 49.56, 52.06, 52.21, 78.17, 154.93, 173.00, 173.35.
HR-TOF-MS (方法 24): C20H39N2O5 [M+H]+ 実測値 387.2860, 計算値 387.2859
【０１９６】
実施例８Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン
【化１８】
2009533371.tif 000021
実施例７Ａの化合物（３６ｇ、９３.１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦｐ.ａ.（２７９ｍｌ）に溶解する。約１０℃で、水（１８７ｍｌ）中の水酸化リチウム一水和物（７.８２ｇ、１８６.３ｍｍｏｌ、２当量）の溶液を、ゆっくりと滴下して添加する。ＨＰＬＣクロマトグラム（方法１）が完全な変換を示したら（約２０時間）、反応混合物から２００ｍｂａｒ下でＴＨＦを除去し、次いでＭＴＢＥ（２００ｍｌ）で抽出する。有機相を酢酸エチル（５００ｍｌ）で希釈し、次いで水と混合し、続いて１Ｎ水性塩酸を使用してｐＨ３−４に注意深く調節する。合わせた有機相を飽和塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空で蒸発させ、高真空下で乾燥する。表題化合物９７.４ｇ（理論値の９７％）を得る。
LC-MS (方法 18): Rt = 2.26 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 373 (100) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 0.83 (s, br, 18H, tBu), 1.31 (s, 9H, OtBu), 1.40 (m, 2H, β-CH2), 1.48 (dd, J = 14.1, 9.4 Hz, 1H, β-CH), 1.59 (dd, J = 14.1, 2.7 Hz, 1H, β-CH'), 3.98 (m, 1H, α-CH), 4.12 (m, 1H, α-CH), 6.73 (d, J = 9.1 Hz, 1H, NH), 7.72 (d, J = 7.9 Hz, 1H, NH), 12.42 (s, br, 1H, CO2H).
13C NMR (126 MHz, d6-DMSO): δ 28.49 (3C), 29.66 (3C), 29.78 (3C), 30.52, 30.58, 44.63 (β-CH2), 45.24 (β-CH2), 49.67 (α-CH), 52.40 (α-CH), 78.29, 155.05, 172.97, 174.61.
HR-TOF-MS (方法 24): C19H37N2O5 計算値 373.2702、実測値 373.2717 [M+H]+.
【０１９７】
実施例９Ａ
（３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン塩酸塩
【化１９】
2009533371.tif 000022
実施例８Ａの化合物（４.５ｇ、１２.１ｍｍｏｌ）を、ジオキサン（３ｍｌ）に予め溶解する。室温で、ジオキサン中の塩酸の４Ｎ溶液（３０.２ｍｍｏｌ、１２０ｍｍｏｌ、１０当量）を滴下して添加する。反応混合物を３０分間撹拌し、真空で蒸発させ、高真空下で乾燥する。表題化合物を無色固体として得る（３.５ｇ、理論値の９９％）。
LC-MS (方法 18): Rt = 1.52 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 273.6 (100) [M+H]+; ESIneg: m/z = 271.5 (100) [M - H]-.
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO): δ 0.85 (s, 9H, tBu), 0.86 (s, 9H, tBu), 1.49 (dd, J = 14.3, 1.6 Hz, 1H, β-CH), 1.50 (d, J = 13.8 Hz, 1H, β-CH), 1.64 (dd, J = 14.3, 4.0 Hz, 1H, β-CH), 1.71 (dd, J = 14.3, 6.9 Hz, 1H, β-CH), 3.77 ("t", J = 6.5 Hz, 1H, α-CH), 4.14 (m, 1H, α-CH), 8.27 (s, br, 3H), 8.94 (d, J = 8.2 Hz, 1H, NH), 12.58 (s, br, 1H, CO2H).
13C NMR (126 MHz, d6-DMSO): δ 28.41 (3C), 29.50 (3C), 30.08, 30.38, 44.46, 44.80, 50.03, 50.30, 169.10, 173.98.
HR-TOF-MS (方法 24): C14H29N2O3 計算値 273.2173, 実測値 273.2167 [M+H]+.
【０１９８】
実施例１０Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン
【化２０】
2009533371.tif 000023
ジペプチド（実施例９Ａ、３.７３ｇ、１２.１ｍｍｏｌ）を、アルゴン保護気体雰囲気下でＴＨＦ（１７０ｍｌ）中に溶解する。水（１７０ｍｌ）、ベンジルオキシカルボニルオキシスクシンイミドエステル（４.５２ｇ、１８.１ｍｍｏｌ、１.５当量）およびＮＭＭ（４.２８ｇ、４.２３ｍｍｏｌ、３.５当量）を０℃で添加した後、続いて、全ての出発物質が反応するまで、室温で激しく撹拌する（数時間、ＨＰＬＣ監視、方法１）。混合物を氷酢酸でクエンチする。ＴＨＦを真空で除去する。残りの水相を酢酸エチル層で覆い、４Ｎ塩酸を使用してｐＨ＜３に酸性化し、次いで酢酸エチルで数回抽出する。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮する。得られる泡状物をアセトニトリルと撹拌し、そこで無色固体が形成され、それを濾過により回収し、次いで少量のアセトニトリルで洗浄する。この方法を濃縮後の濾液で再度数回繰り返すことができる。合わせた固体を高真空下で乾燥し、それにより表題化合物を固体として得る。残りの母液を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法２６）により精製する。表題化合物（合わせた固体およびＨＰＬＣ分離からの精製生成物）を、無色固体（３.４９ｇ、理論値の７１％）として得る。
HPLC/UV-Vis (方法 1): Rt = 2.6 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 2.46 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 363 (60), 407 (100) [M+H]+. ESIneg: m/z = 297 (100), 405.5 (40) [M - H]-.
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO): δ 0.81 (s, 9H, tBu), 0.83 (s, 9H, tBu), 1.40-1.44 (m, 2H, β-CH2), 1.49 (dd, J = 14.3, 9.7 Hz, 1H, β-CH), 1.58 (dd, J = 13.5, 1.4 Hz, 1H, β-CH), 4.07 (m, 1H, α-CH), 4.13 (m, 1H, α-CH), 4.94 (d, J = 12.3 Hz, 1H, CHHPh), 4.99 (d, J = 12.5 Hz, 1H, CHHPh), 7.25-7.32 (m, 5H, ArH), 7.92 (d, J = 8.5 Hz, 1H, NH).
13C NMR (126 MHz, d6-DMSO): δ 29.49 (3C), 29.75 (3C), 30.41, 30.46, 44.52, 45.11, 49.55, 52.73, 65.49, 127.70 (2C), 127.91, 128.48 (2C), 137.31, 155.59, 172.52, 174.50.
HR-TOF-MS (方法 24): C22H34N2O5 計算値 407.2541, 実測値 407.2531 [M+H]+.
【０１９９】
実施例１１Ａ
メチル−（２Ｒ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニネート
【化２１】
2009533371.tif 000024
アルゴン保護気体雰囲気下、ＴＨＦ中のリチウムヘキサメチルジシラジド（１５７.５ｍｍｏｌ、１５７.５ｍｌ、２.２当量）の１Ｎ溶液を、反応溶媒ＴＨＦ（３００ｍｌ）中に提供する。−７８℃で、メチル（ｒａｃ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−フェニルプロパノエート（A. V. Rao Rama, A. K. Singh, Ch. V. N. S. Varaprasad, Tetrahedron Lett., 1991, 32, 4393-4396）（２０ｇ、７１.２ｍｍｏｌ）の溶液を、ゆっくりと滴下して添加する。混合物を−２５℃で１０分間撹拌し、次いで再度−７８℃に冷却する。ジベンジルアザジカルボキシレート（３４.２ｇ、１１４.６ｍｍｏｌ、１.６当量）を一度に反応混合物に添加する。混合物を−６０ないし−４５℃で３時間撹拌する。反応を停止するために、混合物を再度−７８℃に冷却し、酢酸（２０.５ｍｌ、３５８ｍｍｏｌ、５当量）を添加し、次いで、混合物を０℃に、最後に室温に、温める。反応混合物を真空で蒸発させ、酢酸エチル（１０００ｍｌ）に取る。懸濁液を飽和水性重炭酸ナトリウム溶液で２回、水で１回、５％水性クエン酸で２回、そして飽和水性塩化ナトリウム溶液で１回洗浄する。全ての水相を別々に酢酸エチルで再抽出する。全ての有機相を真空で蒸発させ、再度ジクロロメタン（２０００ｍｌ）に取り、濾過し、硫酸ナトリウムで乾燥し、再度濾過し、真空で蒸発させ、高真空下で乾燥する。表題化合物７.２ｇ（理論値の１８％）を固体として得る。ジクロロメタン相（上記参照）の濾液を濃縮し、次いで再度メタノールから再結晶し、それにより表題化合物１３.２ｇ（理論値の２６％）を得る。
LC-MS (方法 23): Rt = 6.8 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 578 (40) [M+H]+, 1156 (100) [2M+H]+.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 576 (100) [M - H]-.
【０２００】
実施例１２Ａ
メチル（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニネート
【化２２】
2009533371.tif 000025
アルゴン保護気体雰囲気下、ＴＭＧ（５０ｍｌ、３９９ｍｍｏｌ）を、乾燥ＤＭＦｐ.ａ.（７５０ｍｌ）中のメチル−（２Ｒ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニネート（実施例１１Ａ、２０.５ｇ、３５.５ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で添加する。反応混合物を解凍し、ＨＰＬＣクロマトグラム（方法１）が完全な変換（生成物約６０％）を示すまで（約１２時間）撹拌し、次いで反応を酢酸（ｐＨ４−６）の添加により停止する。反応混合物を室温、真空で蒸発させ、酢酸エチルに取る。有機相を水で２回、５％クエン酸で２回、水で１回、飽和水性重炭酸ナトリウム溶液で２回、飽和水性塩化ナトリウム溶液で１回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空で蒸発させ、高真空下で乾燥する。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法３０）またはフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル３：１）により精製する。表題化合物７.７ｇ（理論値の３７％）および出発化合物５ｇ（理論値の２５％）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法 1): Rt = 3.0 分.
LC-MS (方法 10): Rt = 3.0 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 478 (100) [M -Boc + H]+, 578 (30) [M+H]+.
LC-MS (方法 23): Rt = 7.0 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 578 (40) [M+H]+, 1156 (100) [2M+H]+.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 576 (100) [M - H]-.
【０２０１】
実施例１３Ａ
メチル−（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニネート
【化２３】
2009533371.tif 000026
アルゴン保護気体雰囲気下、ラネーニッケル（６１ｍｇ、約１０ｍｏｌ％）を、メタノール／ジクロロメタン１：１（４２ｍｌ）中のメチル（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニネート（実施例１２Ａ、７０５mg、１.２２ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。反応混合物を、加圧オートクレーブ中、水素圧８０ｂａｒ下、室温で水素化する（４０時間）。ＨＰＬＣクロマトグラムは、完全な変換を示す。反応混合物をアルゴン保護気体雰囲気下でガラスフリットを通して濾過し、ガラスフリットを数回メタノール／水／０.２％酢酸で洗浄する。濾液を真空で蒸発させ、高真空下で乾燥する。固体（約３ｇ）を得、次いでそれを超音波浴中で酢酸エチルに懸濁する。懸濁液を７％水性重炭酸ナトリウム溶液（４００ｍｌ）中のＥＤＴＡ（４００ｍｇ）の溶液と混合する。水相を酢酸エチルで抽出する（１００ｍｌ、３回）。次いで、合わせた有機相を飽和水性重炭酸ナトリウム溶液で１回、飽和水性塩化ナトリウム溶液で２回洗浄する。全ての水相を別々に酢酸エチルで再抽出する。次いで、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、高真空下で乾燥する。得られる生成物は固体（１.２６ｇ、定量的）であり、それをこれ以上入念に精製せずに、さらに反応させる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rt = 1.7 分.
LC-MS (方法 23): Rt = 4.1 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 239 (100), 295 (80) [M+H]+.
【０２０２】
実施例１４Ａ
メチル（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニネート
【化２４】
2009533371.tif 000027
アルゴン保護気体雰囲気下、ＮＭＭ（２６０ｍｇ、２.６ｍｍｏｌ、２.１当量）を、ＴＨＦ（２５ｍｌ）中のメチル（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニネート（実施例１３Ａ、３６０mg、１.２ｍｍｏｌ）およびＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシスクシンイミドエステル（６１０ｍｇ、２.４４ｍｍｏｌ、２当量）の溶液に０℃で添加する。反応混合物はゆっくりと温まり（１２時間）、それにより完全な変換がＨＰＬＣ（方法２）により観察される。酢酸（０.７ｍｌ）を添加し、続いて、混合物を真空で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法３１）により精製する。表題化合物３９６ｍｇ（理論値の７６％）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rt = 2.7 分.
LC-MS (方法 23): Rt = 6.4 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 329 (100) [M - C4H8 - CO2 + H]+, 429 (80) [M+H]+, 858 (60) [2M+H]+.
【０２０３】
実施例１５Ａ
（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニン
【化２５】
2009533371.tif 000028
アルゴン保護気体雰囲気下、ＴＨＦ／水２：１（３０ｍｌ）中のメチル（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニネート（実施例１５Ａ、７５５mg、１.７６ｍｍｏｌ）の溶液を提供する。０℃で、激しく撹拌しながら、脱気した水酸化リチウム一水和物の１％水性溶液（８６.５ｍｇ、３.６ｍｍｏｌ、２当量）を、ゆっくりと滴下して添加する。混合物を室温でＨＰＬＣクロマトグラム（方法１）が完全な変換を示すまで（約１時間）撹拌する。続いて酢酸（０.５ｍｌ）を添加し、反応混合物を真空で濃縮し、酢酸エチル層（１００ｍｌ）で覆う。次いで、５％クエン酸（ｐＨ２−３）を使用して水相を酸性化し、次いで酢酸エチル（５０ｍｌ）で３回抽出する。合わせた有機相を飽和水性塩化ナトリウム溶液（２０ｍｌ）で２回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空で濃縮し、高真空下で乾燥する。表題化合物の粗生成物７５０ｍｇ（定量的）を得、それを分取ＨＰＬＣ（方法３１）により入念に精製する。
HPLC/UV-Vis (方法 1): Rt = 2.4 分.
LC-MS (方法 23): Rt = 6.1 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 359 (100), 415 (60) [M+H]+, 829 (60) [2M+H]+.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 413 (100) [M - H]-.
【０２０４】
実施例１６Ａ
（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン
【化２６】
2009533371.tif 000029
（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニン（実施例１５Ａ、７５０ｍｇ、１.８ｍｍｏｌ）のエナンチオマーの混合物を、分取ＨＰＬＣ（方法３８）により分離する。（２Ｓ,３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニン（表題化合物）３３４ｍｇ（９８％ｅｅ、理論値の４５％）および（２Ｒ,３Ｓ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）−カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニン（さらなるエナンチオマー）２７５ｍｇ（９８％ｅｅ、理論値の３７％）を得る。
方法１４によるエナンチオマー決定。
［α］２０Ｎａ＝＋２２°（ｃ＝０.５０、クロロホルム中）（表題化合物）
［α］２０Ｎａ＝−２０°（ｃ＝０.４９、クロロホルム中）（さらなるエナンチオマー）  
【０２０５】
実施例１７Ａ
ペンタフルオロフェニル（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニネート
【化２７】
2009533371.tif 000030
実施例１６Ａの化合物（２.０ｇ、４.８３ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（３０ｍｌ）中に提供し、ペンタフルオロフェノール（４.４ｇ、２４.１３ｍｍｏｌ、５当量）およびＥＤＣ（１.４ｇ、７.２４ｍｍｏｌ、１.５当量）を０℃で添加する。反応をゆっくりと室温にし、この温度で終夜撹拌する。後処理のために、溶媒をロータリーエバポレーターで、最高浴温度３０℃で完全に除去し、分取ＨＰＬＣ（方法２８）による残渣の入念な精製の後、生成物２.３ｇ（理論値の８３.３％）を単離する。
HPLC (方法 1) Rt = 3.44 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.23 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 581 (13) [M+H]+, 525 (100) [M - C4H8 + H]+. 
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO): δ = 1.36 (s, 9H, 3 CH3), 4.97 (d, J = 7.1 Hz, 2H, PhCH2O), 5.15 (dd, J = 9.7, 4.8 Hz, 1H), 5.49 (dd, J = 10.2, 4.6 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 10.4 Hz, 1H, ArH), 7.25-7.42 (m, 8H, ArH), 7.68 (d, J = 10.4 Hz, 1H, NH), 7.90 (d, J = 9.8 Hz, 1H, NH).
13C NMR (126 MHz, d6-DMSO): δ = 27.97, 54.33, 58.72, 65.75, 78.65, 124.10, 126.48, 127.37 127.46, 127.82, 128.23 (2C), 136.40/138.36 (C-F), 136.54, 138.49/140.27 (C-F), 139.34/141.40 (C-F), 154.72, 156.04, 167.10.
HR-TOF-MS (方法 24): C28H26N2O6 [M+H]+ 実測値 581.1719, 計算値 581.1706.
【０２０６】
実施例１８Ａ
２,５−ジオキソピロリジン−１−イル（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニネート
【化２８】
2009533371.tif 000031
アルゴン保護気体雰囲気下、（３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン（実施例１６Ａ、１００.０ｍｇ、２４１.２８μｍｏｌ）を塩化メチレン（１０ｍｌ）中に提供し、溶液を０℃に冷却し、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（３３.３ｍｇ、２８９.５３μｍｏｌ、１.２当量）およびＥＤＣ（５５.５ｍｇ、２８９.５３μｍｏｌ、１.２当量）を添加し、混合物を０℃で終夜撹拌する。後処理に、溶媒をロータリーエバポレーターで、浴温度３０℃で完全に除去し、分取ＨＰＬＣ（方法３２）による入念な精製の後、生成物９６.０ｍｇ（理論値の７７.８％）を単離する。
HPLC (方法 1) Rt = 2.53 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.58 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 529 (28) [M + NH4]+, 412 (100). 
【０２０７】
実施例１９Ａ
メチル［Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニネート］
【化２９】
2009533371.tif 000032
アルゴン保護気体雰囲気下、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−保護ジペプチド（実施例１０Ａ、５８.４ｍｇ、０.１４ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（５ｍｌ）中に提供し、続いて溶液を−１０℃に冷却し、ＨＯＢｔ（７７.７ｍｇ、０.５７ｍｍｏｌ、４当量）、ＮＭＭ（４７μｌ、４３.７ｍｇ、０.４３ｍｍｏｌ、３当量）およびＥＤＣ（５５.１ｍｇ、０.２９ｍｍｏｌ、２当量）を連続的に添加し、最後に例示的化合物１３Ａ（９４.０ｍｇ、０.１４ｍｍｏｌ、１当量）およびＮＭＭ（３２μｌ、２９.１ｍｇ、０.２９ｍｍｏｌ、２当量）を添加する。反応をゆっくりと室温に温め、ここで終夜撹拌する。後処理のために、沈殿を濾過し、濾液をロータリーエバポレーターで、浴温度３０℃で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法３１）による残渣の入念な精製の後、生成物７７.９ｍｇ（理論値の７９.４％）を得る。
HPLC (方法 1) Rt = 3.12 分.
LC-MS (方法 23): Rt = 7.05 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 683 (100) [M+H]+, 1366 (75) [2M + 2H]2+.
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 0.89 (d, J = 4.6, 9H, CH2C(CH3)3), 0.96 (d, J = 2.9, 9H, CH2C(CH3)3), 1.23-1.49 (m, 11H: including 1.39 (s, 9H, OC(CH3)3), 1.85 (m, 2H, CH2C(CH3)3), 3.59/3.68 (2s, 3H, OCH3), 4.04 (m, 1H, αCH), 4.41 (m, 1H, αCH), 4.88-5.42 (m, 6H), 5.99 (m, 1H, NH), 6.22 (m, 1H, NH), 7.13-7.42 (m, 10H, ArH).
HR-TOF-MS (方法 24): C37H55N4O8 計算値 683.4015, 実測値 683.4033 [M+H]+.
【０２０８】
実施例２０Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニン］
【化３０】
2009533371.tif 000033
エステル（実施例１９Ａ、１.０ｇ、１.４６ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１００ｍｌ）および水（５０ｍｌ）の混合物中に提供し、０℃で、０.５％水酸化リチウム溶液（１２ｍｌ、５９.６ｍｇ、２.４９ｍｍｏｌ、１.７当量）を滴下して添加する。変換が完了するまで、溶液を０℃で４時間撹拌する。後処理に、反応をリン酸二水素カリウム（９９６.４ｍｇ、７.３２ｍｍｏｌ）と混合し、溶媒をロータリーエバポレーターで、浴温度３０℃で完全に除去し、残渣を分取ＨＰＬＣ（方法２８）により精製する。生成物７３７.０ｍｇ（理論値の７５.３％）を得る。
HPLC (方法 1) Rt = 2.86 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 2.89 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 669 (20) [M+H]+, 569 (100) [M - C4H8 -CO2 + H]+. 
HR-TOF-MS (方法 24): C36H53N4O8 [M+H]+ 実測値 669.3881, 計算値 669.3858.
【０２０９】
実施例２１Ａ
２,５−ジオキソピロリジン−１−イル［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニネート］
【化３１】
2009533371.tif 000034
アルゴン保護気体雰囲気下、例示的化合物２０Ａ（３０.０ｍｇ、４４.８５μｍｏｌ）を、ジクロロメタン（６ｍｌ）に溶解し、溶液を０℃に冷却し、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（６.２ｍｇ、５３.８３μｍｍｏｌ、１.２当量）、ＥＤＣ（１０.３ｍｇ、５３.８３μｍｏｌ、１.２当量）および４Åモレキュラー・シーブを添加し、混合物を０℃で終夜撹拌する。溶媒をロータリーエバポレーターで、最高浴温度３０℃で除去し、残渣を酢酸エチルに取り、連続的に５％クエン酸溶液で２回、飽和塩化ナトリウム溶液で２回洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで、浴温度３０℃で濃縮し、ＲＰカートリッジでの入念な精製（溶離剤：酢酸エチル）の後に、生成物３４.０ｍｇ（理論値の９８.７％）を残渣から単離する。
HPLC (方法 1) Rt = 2.99 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.88 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 766 (57) [M+H]+, 666 (100) [M+H - C4H8 - CO2]+.
【０２１０】
実施例２２Ａ
Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アロスレオニン
【化３２】
2009533371.tif 000035
Ｌ−アロ−スレオニン（３.１５ｇ、２６.４４ｍｍｏｌ）を水−ジオキサン（１＋２、７５ｍｌ）に溶解し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（６.３５ｇ、２９.０９ｍｍｏｌ、１.１当量）およびトリエチルアミン（４.７９ｍｌ、３４.３８ｍｍｏｌ、１.３当量）を添加し、混合物を室温で終夜撹拌する。次いで、溶媒を真空で除去する。残渣を酢酸エチルに取り、１Ｍクエン酸で抽出する。水相を、生成物がもうその中に検出できなくなるまで（ＨＰＬＣ、方法５）、さらに数回酢酸エチルで抽出する。次いで、合わせた有機抽出物を、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、オイルポンプによる真空下で一定重量まで乾燥する。生成物をこれ以上精製せずに、さらに反応させる。収量：粗生成物６.５ｇ。
HPLC (方法 5): Rt = 3.23 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.51 分, MS (ESIneg): m/z (%) = 217.8 (100) [M-H]-.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 1.08 (d, J = 5.4 Hz, 3H), 1.38 (s, 9H), 3.72-3.84 (m, 2H), 6.77 (d, J = 7.4 Hz, 1H).
【０２１１】
実施例２３Ａ
ベンジルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アロスレオニネート
【化３３】
2009533371.tif 000036
この方法は、以下の文献と同様に実施した: S. B. Cohen, R. Halcomb, J. Am. Chem. Soc 2004, 124, 2534-25M 43. W. Jiang, J. Wanner, R. J. Lee, P.-Y. Bounaud, D. L. Boger, J. Am. Chem. Soc 2003, 125, 1877-1887。
【０２１２】
実施例２２Ａの化合物（粗生成物６.８ｇ、２６.４４ｍｍｏｌ）を、メタノール（１７７ｍｌ）に取り、炭酸セシウム（５.５６ｇ、１７.０６ｍｍｏｌ、０.６３当量）を添加し、溶解が完了するまで混合物を撹拌する。次いで、溶媒を蒸留により除去し、ＤＭＦ（４２ｍｌ）、次いで臭化ベンジル（４.０６ｍｌ、３４.１２ｍｍｏｌ、１.２６当量）を添加する。混合物を１６時間撹拌し、次いでＤＭＦを真空で実質的に除去する。残渣を水に取り、３回に分けてジクロロメタンで抽出する。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空で濃縮する。粗生成物を Biotage RP18-Flash （水−アセトニトリルグラジエント：０−５分。１０％アセトニトリル、３−３０分。１０−９０％アセトニトリル、３０−３５分。９０％アセトニトリル；流速：２０ｍｌ／分。）で精製する。収量：５.００ｇ（１６.１６ｍｍｏｌ、理論値の５２％）
HPLC (方法 5): Rt = 4.36 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.39 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 332.6 (25) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 1.09 (d, J = 6.4, 3H), 1.37 (s, 9H), 3.82 (m, 1H), 3.95 (dd, J = 6.4, J = 8.1 Hz), 4.98 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 5.09 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.31-7.37 (m, 5H).
【０２１３】
実施例２４Ａ
ベンジルＬ−アロスレオニネートトリフルオロ酢酸塩
【化３４】
2009533371.tif 000037
実施例２３Ａの化合物５３０ｍｇを、ＴＦＡ溶液８.０ｍｌと手順２に従い反応させる。粗生成物（５８９ｍｇ、定量的）を、これ以上精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.18 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.24 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 210.0 (100) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 1.15 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 4.09-4.10 (m, 2H), 5.26 (s, 2H), 7.36-7.44 (m, 5H), 8.34 (br. S, 2H).
【０２１４】
実施例２５Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−イソロイシル］−Ｌ−アロスレオニネート
【化３５】
2009533371.tif 000038
実施例２４Ａの化合物（２.３０ｇ、７.１２ｍｍｏｌ）およびＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−イソロイシン（２.１４ｇ、９.２５ｍｍｏｌ、１.３当量）を、ＤＭＦ（２１.０ｍｌ）に溶解する。４−メチルモルホリン（１.３ｍｌ、１２.０２ｍｍｏｌ、１.７当量）およびＨＡＴＵ（３.５２ｇ、９.２５ｍｍｏｌ、１.３当量）を添加し、混合物を室温で１６時間撹拌する。次いで、完全な混合物をクロマトグラフィーにより、最初に方法４５に従い、続いて方法４６に従い精製する。収量：淡いベージュ色の無定形固体として、１.７５ｇ（４.１４ｍｍｏｌ、理論値の５８％）
HPLC (方法 5): Rt = 4.59 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.56 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 423.8 (70) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.74-0.78 (m, 6H), 1.01-1.07 (m, 2H), 1.10 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 1.37 (s, 9H), 1.64-1.66 (m, 1H), 3.86-3.94 (m, 1H), 4.28 (dd, J = 7.3, J = 7.3 Hz, 1H), 5.05 (d, J = 5.6 Hz), 5.09 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 5.13 (d, J= 12.7 Hz 1H), 6.70 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.31-7.36 (m, 5H), 8.11 (d, J = 8.1 Hz).
HR-TOF-MS (方法 24): C22H35N2O6 計算値 423.2490, 実測値 423.2489 [M+H]+.
【０２１５】
実施例２６Ａ
ベンジルＬ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニネートトリフルオロ酢酸塩
【化３６】
2009533371.tif 000039
実施例２５Ａの化合物（２２４ｍｇ、０.５３ｍｍｏｌ）を、ＴＦＡ溶液８.０ｍｌで手順２に従い処理する。実施例２６Ａの粗生成物２５３ｍｇ（純度約９１％、０.５３ｍｍｏｌ、定量的）を得、これ以上精製せずに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.51 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.58 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 323.6 (100) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.77-0.86 (m, 6H), 1.02 (m, 1H), 1.15 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.45 (m, 1H), 1.77 (m, 1H), 3.97 (m, 1H), 4.34 (m, 1H), 5.11 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 7.37-7.39 (m, 5H), 7.47 (m, 1H), 8.07-8.08 (m, 3H), 8.69 (d, J = 7.3 Hz, 1H).
【０２１６】
実施例２７Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アルギニル］−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニネート
【化３７】
2009533371.tif 000040
実施例２６Ａの化合物（２５３ｍｇ、純度９１％、０.５３ｍｍｏｌ）およびＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アルギニン（１４５ｍｇ、０.５３ｍｍｏｌ、１当量）を、ＤＭＦ（３.０ｍｌ）に溶解する。４−メチルモルホリン（７６μｌ、０.７０ｍｍｏｌ、１.３当量）およびＨＡＴＵ（２２１ｍｇ、０.５８ｍｍｏｌ、１.１当量）を添加し、混合物を室温で１６時間撹拌する。次いで、完全な混合物をＨＰＬＣカラムに載せ、クロマトグラフィー（方法３４）により精製する。収量：３６４ｍｇ（０.５３ｍｍｏｌ、理論値の９９％）。
HPLC (方法 5): Rt = 3.91 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.04 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 579.9 (100) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.72-1.16 (m, 8H), 1.37 (s, 9H), 1.46 (m, 2H), 1.60 (m, 1H), 1.69 (m, 1H), 3.06 (m, 2H), 3.93-4.01 (m, 2H), 4.25 (m, 1H), 4.33 (m, 1H), 5.07-5.14 (m, 2H), 6.96 (d, J = 7.8, 1H), 7.35 (m, 5H), 7.45 (m, 1H), 7.66 (d, J = 8.8), 8.33 (m, 1H).
【０２１７】
実施例２８ＡベンジルＤ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニネートビストリフルオロ酢酸塩
【化３８】
2009533371.tif 000041
実施例２７Ａの化合物（２３７ｍｇ、０.３４ｍｍｏｌ）を、ＴＦＡ溶液２.０ｍｌで手順２に従い処理する。実施例２８Ａの粗生成物２５５ｍｇ（純度９４％、０.３４ｍｍｏｌ、定量的）を得、これ以上精製せずに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.42 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.42 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 479.3 (50) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.73-0.81 (m, 5H), 1.11-1.19 (m, 5H), 1.33-1.49 (m, 3H), 1.74 (m, 3H), 3.10 (m, 2H), 3.88-3.95 (m, 2H), 4.25 (dd, J = 6.8, J= 7.1 Hz, 1H), 4.46 (dd, J = 7.3, J = 8.8 Hz, 1H), 5.09 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 5.15 (dd, J = 12.5 Hz), 7.36 (m, 5H), 7.61 (m, 1H), 8.10 (m, 2H), 8.51 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 9.0 Hz, 1H).
【０２１８】
実施例２９Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシル］−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニネートトリフルオロ酢酸塩
【化３９】
2009533371.tif 000042
実施例２８Ａの化合物（２４０ｍｇ、０.３４ｍｍｏｌ）およびＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシン（７９ｍｇ、０.３４ｍｍｏｌ、１当量）を、ジクロロメタン−ＤＭＦ（５＋１、６ｍｌ）に溶解する。ジイソプロピルエチルアミン（２９６μｌ、１.７０ｍｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（１９４ｍｇ、０.５１ｍｍｏｌ、１.５当量）を添加し、混合物を室温で２４時間撹拌する。次いで、完全な混合物をゲルクロマトグラフィーカラムに載せ、クロマトグラフィー（方法４５、溶離剤はメタノールである）により精製する。収量：１４６ｍｇ（０.１８ｍｍｏｌ、理論値の５３％）
HPLC (方法 5): Rt = 4.15 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.92 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 692.8 (100), [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.72-1.23 (m, 22H), 1.37 (s, 9H), 1.38-1.71 (m, 3H), 3.08 (m, 2H), 3.91-4.00 (m, 2H), 4.26 (m, 1H), 4.33-4.42 (m, 2H), 5.07-5.15 (m, 2H), 6.92 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.35 (m, 5H), 7.47 (m, 1H), 7.88 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 7.3 Hz, 1H).
【０２１９】
実施例３０Ａ
ベンジルＬ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニネートビストリフルオロ酢酸塩
【化４０】
2009533371.tif 000043
実施例２９Ａの化合物（２２０ｍｇ、０.２７ｍｍｏｌ）を、ＴＦＡ溶液２.０ｍｌで手順２に従い処理する。実施例２８Ａの粗生成物２２３ｍｇ（０.２７ｍｍｏｌ、定量的）を得、これ以上精製せずに反応させる。
HPLC (方法 4): Rt = 3.80.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.54 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 592.4 (2) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.73-1.11 (m, 13H), 1.22-1.74 (m, 12H), 3.11 (m, 4H), 3.60 (m, 2H), 3.87 (m, 1H), 3.95 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 7.8, J = 8.6 Hz, 1H), 4.64 (dd, J = 7.8, J = 13.7 Hz, 1H), 5.09 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 7.35 (m, 5H), 7.58 (m, 1H), 8.07 (m, 2H), 8.25 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.77 (d, J = 8.3 Hz, 1H).
【０２２０】
実施例３１Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニネートトリフルオロ酢酸塩
【化４１】
2009533371.tif 000044
実施例３０Ａの化合物（２２３ｍｇ、０.２７ｍｍｏｌ）およびＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシン（８９ｍｇ、０.３３ｍｍｏｌ、１.２２当量）を、ＤＭＦ（６ｍｌ）に溶解し、溶液を−２０℃に冷却する。４−メチルモルホリン（１５０μｌ、１.３６ｍｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（１６５ｍｇ、０.４４ｍｍｏｌ、１.６当量）を添加し、混合物を室温で１６時間撹拌する。次いで、完全な混合物をゲルクロマトグラフィーカラムに載せ、クロマトグラフィー（方法４５、溶離剤はメタノールである）により精製する。収量：１８８ｍｇ（０.２０ｍｍｏｌ、理論値の７４％）
HPLC (方法 5): Rt = 4.24 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.99 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 821.9 (100) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.71-0.90 (m, 15H), 1.00 (m, 1H), 1.10 (d, J= 6.4 Hz, 3H), 1.24-1.26 (m, 3H), 1.38 (s, 9H), 1.42-1.71 (m, 6H), 3.06-3.17 (m, 3H), 3.45 (m, 1H), 3.61 (m, 1H), 3.93 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.35 (m, 2H), 4.54 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.07-5.15 (m, 2H), 5.45 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.35 (m, 5H), 7.46 (m, 1H), 7.85 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 7.6 Hz, 1H).
【０２２１】
実施例３２Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニントリフルオロ酢酸塩
【化４２】
2009533371.tif 000045
実施例３１Ａの化合物（１００ｍｇ、０.１１ｍｍｏｌ）を、氷酢酸（４.３ｍｌ）に溶解し、１０％パラジウム／活性炭（２２ｍｇ）を添加し、混合物を大気圧下、室温で２時間水素化する。触媒を濾過により除去し、濾液を凍結乾燥する。粗生成物をクロマトグラフィー（方法３３）により精製する。表題化合物５８ｍｇ（６０μｍｏｌ、理論値の５５％）を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.75 分.
LC-MS (方法 1 方法 19): Rt = 1.80 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 731.8 (100) [M+H]+.
【０２２２】
実施例３３Ａ
Ｏ４−メチル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパルテート
【化４３】
2009533371.tif 000046
（３Ｓ）−３−ヒドロキシアスパラギン酸を、G. Cardillo, L. Gentilucci, A. Tolomelli, C. Tomasini, Synlett 1999, 1727-1730 の方法により製造し、密閉反応容器中でのマイクロ波照射を使用して、P. G. Mattingly, M. J. Miller, J. Org. Chem. 1983, 48, 3556-3559 と同様に（２Ｓ,３Ｓ）−２−アミノ−３−ヒドロキシ−４−メトキシ−４−オキソ酪酸塩酸塩に変換する。（２Ｓ,３Ｓ）−２−アミノ−３−ヒドロキシ−４−メトキシ−４−オキソ酪酸塩酸塩（４４７ｍｇ、２.２４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（９ｍｌ）に溶解する。溶液を０℃に冷却し、Ｂｏｃ−グリシン−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（７６３ｍｇ、２.９１ｍｍｏｌ、１.３当量）、ＤＭＡＰ（１４ｍｇ、０.１１ｍｍｏｌ、０.０５当量）および最後にＤＩＰＥＡ（１１７０μｌ、６.７２ｍｍｏｌ、３当量）を添加する。混合物をゆっくりと室温に温まらせ、次いで２時間撹拌する。混合物を氷酢酸で酸性化し、アセトニトリルと混合し、Sephadex LH 20 でクロマトグラフィーする（方法４５）。生成物含有画分を合わせ、濃縮し、再度クロマトグラフィーする（方法４６）。得られる生成物（７６１ｍｇ、定量的）をこれ以上精製せずにさらに反応させる。分析目的で、純粋なサンプルをＨＰＬＣ（方法４４）により得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.15 分 
LC-MS (方法 1): Rt = 1.17 分, MS (ESIpos) = 321.2 [M+H]+.
[α]20Na = + 39°(c = 0.55, MeOH).
1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 1.40 (s, 9 H), 3.49 - 3.60 (m, 2 H), 3.61 (s, 3 H), 4.29 (m, 1 H), 4.73 (d, J = 6.6 Hz, 1 H), 7.01 (m, 1 H), 7.49 (d, J = 6.99 Hz, 1 H).
13C-NMR (d6-アセトン, 126 MHz, DEPT) δ (ppm) = 28.5 (CH3), 42.2 (CH2), 51.8 (CH3), 53.7 (CH), 56.0 (CH), 79.2 (四重線), 169.6 (四重線), 169.7 (四重線), 172.8 (四重線), 173.8 (四重線).
HR-TOF-MS (方法 24): C12H22N2O8 [M+H]+ 計算値: 321.1298, 実測値: 321.1299.
【０２２３】
実施例３４Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｏ４−メチル−Ｌ−アスパルチル］−Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリネート
【化４４】
2009533371.tif 000047
実施例３３Ａの化合物（３９０ｍｇ、１.２２ｍｍｏｌ）およびベンジルＯ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリネート（４４５.１４ｍｇ、１.２２ｍｍｏｌ、１当量）を、ＤＭＦ（９ｍｌ）に溶解する。溶液を０℃に冷却し、次いでＤＭＦ中の４−メチルモルホリンの１Ｍ溶液２.４４ｍｌ（２当量）を添加し、続いてＨＡＴＵ（９２５ｍｇ、２.４４ｍｍｏｌ、２当量）を添加する。混合物を０℃で約１５分間撹拌し、さらに２.４４ｍｌ（２当量）の４−メチルモルホリン溶液を添加し、混合物を室温で２時間撹拌する。次いで、水を添加し、混合物を酢酸エチルで２回に分けて抽出する。合わせた有機抽出物を１Ｍクエン酸、濃重炭酸ナトリウムおよび濃塩水で洗浄する。次いで有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去し、残渣をクロマトグラフィーする（方法４６）。収量：固体として４１３ｍｇ（理論値の６１％）。
HPLC: Rt = 4.46 分. 
LC-MS: Rt = 2.37 分. MS (ESIpos): 554.4 [M+H]+. 
[α]20Na = -1.7 (c = 0.57, CH3CN).
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 1.09 (s, 9 H), 1.45 (s, 9 H), 3.17 (br s, 1 H), 3.50 - 3.56 (dd, J = 2.85 Hz, J = 8.8 Hz, 1 H), 3.59 (s, 3 H), 3.61 - 3.67 (m, 3 H), 4.66 (s, 1 H), 4.70 - 4.72 (m, 1 H), 4.97 (dd, J = 2.7 Hz, J = 8.65 Hz, 1 H), 5.14 (d, J = 12.3 Hz, 1 H), 5.19 (br s, 1 H), 5.23 (d, J = 12.3 Hz, 1 H), 7.11 (d, J = 7.45 Hz, 1 H), 7.19 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 7.46 (m, 5 H).
13C-NMR-DEPT (126 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 28.5 (CH3), 29.6 (CH3), 45.5 (CH2), 54.4 (CH3), 54.5 (CH), 55.9 (CH), 62.8 (CH2), 68.6 (CH2), 71.7 (CH), 75.0 (四重線), 81.8 (四重線), 129.6 (CH), 129.7 (CH), 129.9 (CH), 136.7 (四重線), 157.3 (四重線), 169.9 (四重線), 171.2 (四重線), 173.4 (四重線).
HR-TOF-MS: C26H40N3O10 [M+H]+ 計算値: 554.2714, 実測値: 554.2707.
【０２２４】
実施例３５Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリネート
【化４５】
2009533371.tif 000048
化合物３４Ａ（４３０ｍｇ、０.７８ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３０ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却する。濃アンモニア（１５ｍｌ）を添加し、混合物を約１５分間撹拌する。反応が完了したらすぐに（ＨＰＬＣにより検出、方法５）、酸性化のために酢酸を添加し、混合物を水で希釈する。混合物を酢酸エチルで２回に分けて抽出する。合わせた有機抽出物を濃塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、ＨＰＬＣにより精製する。収量：固体として１５８ｍｇ（理論値の３８％）。
[α]20Na = - 16°(c = 0.53, MeOH).
HPLC: Rt = 4.18 分. LC-MS: Rt = 2.14 分, MS (ESIpos) m/z = 539.4 [M+H]+. 
HR-TOF-MS: C25H39N4O9 [M+H]+ calcd: 539.2717, 実測値: 539.2709.
1H NMR (300 MHz, d6DMSO) δ (ppm) = 1.05 (s, 9 H), 1.38 (s, 9 H), 3.50 - 3.56 (m, 2 H), 3.61 - 3.67 (m, 2 H), 4.33 (s, 1 H), 4.48 (m, 1 H), 4.71 (m, 1 H, 5.10 (d, J = 12.7 Hz, 1 H), 5.19 (d, J = 12.7 Hz, 1 H), 7.07 (m, 1 H), 7.17 (br s, 1 H), 7.33 - 7.46 (m, 6 H), 7.65 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.83 (d, J = 7.7 Hz, 1 H).
13C-NMR-DEPT (126 MHz, d6-アセトン) δ (ppm) = 27.54 (CH3), 28.58 (CH3), 44.73 (CH2), 54.06 (CH), 55.67 (CH), 62.61 (CH2), 67.08 (CH2), 71.64 (CH), 73.90 (四重線), 79.70 (四重線), 128.75 (CH), 128.82 (CH), 129.25 (四重線), 137.20 (四重線), 157.04 (四重線), 170.56, 170.62 (四重線), 170.72 (四重線), 174.13 (四重線).
【０２２５】
実施例３６Ａ
ベンジルグリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化４６】
2009533371.tif 000049
例示的化合物３５Ａ５５ｍｇ（１００μｍｏｌ）を反応物溶液２ｍｌ中で手順２に従い反応させる。生成物をこれ以上精製せずに反応させる。収量：５０ｍｇ（定量的）。
HPLC (方法 3): Rt = 3.05 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.22 分; MS (ESIpos) m/z (%) = 383.0 (100) [M+H]+.
【０２２６】
実施例３７Ａ
｛（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニル｝−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化４７】
2009533371.tif 000050
実施例３Ａの分解産物（２.８ｇ、２.５３ｍｍｏｌ）および実施例１７Ａの化合物（１.５ｇ、２.５３ｍｍｏｌ、１当量）を、ＤＭＦ（７０ｍｌ）中に提供する。溶液を０℃に冷却し、ＤＩＥＡ（２.６４ｍｌ、２.０ｇ、１５.１４ｍｍｏｌ、６当量）を添加し、反応混合物をゆっくりと室温に温まらせ、この温度で３時間撹拌する。溶媒をロータリーエバポレーターで部分的に除去し、その間、浴温度は３０℃を超えるべきではない。分取ＨＰＬＣ（方法２８）による入念な精製の後、生成物２.２ｇ（理論値の６１.４％）を単離する。
HPLC (方法 9) Rt = 17.03 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.79 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1301 (28) [M+H]+, 601 (100) [M - C4H8 - CO2 + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1300 (100) [M - H]-.
【０２２７】
実施例３８Ａ
｛（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル｝−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化４８】
2009533371.tif 000051
Ｂｏｃ保護基を実施例３７Ａの化合物（２.２ｇ、１.５５ｍｍｏｌ）から手順１に従い除去する。クロマトグラフィー（方法２８）後、生成物１.８ｇ（理論値の８７.１％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 12.37 分. 
LC-MS (方法 20): Rt = 1.17 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1201 (8) [M+H]+, 601 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1199 (100) [M - H]-.
【０２２８】
実施例３９Ａ
｛（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル｝−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化４９】
2009533371.tif 000052
アルゴン保護気体雰囲気中、実施例３８Ａの化合物（１.３ｇ、０.８９ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（７００ｍｌ）中に提供し、溶液を０℃に冷却し、次いでＨＡＴＵ（１.０ｇ、２.６８ｍｍｏｌ、３当量）およびＮＭＭ（０.８ｍｌ、０.７ｇ、７.１４ｍｍｏｌ、８当量）を続いて添加する。アルゴンの穏やかな気流下、０℃で３時間撹拌した後、変換は完了する。後処理に、反応をメタノール（３０ｍｌ）と混合し、溶媒をロータリーエバポレーターで、浴温度３０℃で除去する。残渣をメタノール（３０ｍｌ）に超音波浴中で懸濁し、析出した沈殿を濾過により除去する。濾液をロータリーエバポレーターで、最高浴温度３０℃で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法２８）による入念な精製の後、標的化合物９０５.６ｍｇ（理論値の７８.３％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 15.09 分. 
LC-MS (方法 18): Rt = 1.75 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1183 (100) [M+H]+.
【０２２９】
実施例４０Ａ
ペンタフルオロフェニル｛Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル｝−｛３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル｝−［（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニネート］
【化５０】
2009533371.tif 000053
アルゴン保護気体雰囲気下、酸（実施例２０Ａ、１７０.０ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（５ｍｌ）中に提供し、０℃に冷却し、続いてペンタフルオロフェニルジフェニルホスフィネート（１４６,５ｍｇ、０.３８ｍｍｏｌ、１.５当量）およびＮＭＭ（１４０μｌ、１２８.５ｍｇ、１.２７ｍｍｏｌ、５当量）を添加する。反応をゆっくりと室温に温め、この温度で終夜撹拌する。後処理に、溶媒をロータリーエバポレーターで、浴温度３０℃で除去し、残渣を分取ＨＰＬＣ（方法３２）により精製し、濃縮した生成物画分を再度トルエンおよびジクロロメタンと混合し、続いて溶媒を完全に再度ロータリーエバポレーターで、浴温度３０℃で除去し、残渣を２時間凍結乾燥し、生成物を−２５℃で保存する。生成物１３０.８ｍｇ（理論値の６１.６％）を得る。
HPLC (方法 1) Rt = 3.30 分. 
LC-MS (方法 18): Rt = 3.42 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 835 (100) [M+H]+, 735 (54) [M - C4H8 - CO2 + H]+, MS (ESIneg.): m/z (%) = 833 (60) [M - H]-, 183 (100).
【０２３０】
実施例４１Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−セリン
【化５１】
2009533371.tif 000054
クロロトリチルクロリド−樹脂（４.０ｇ、５.９６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４０ｍｌ）中に提供し、Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−セリン（８.０ｇ、２０.８６ｍｍｏｌ、３.５当量）およびＤＩＥＡ（１０.３ｍｌ、７.７ｇ、５９.６０ｍｏｌ、１０当量）を続いて添加する。室温で２０時間振盪した後、ポリマーを吸引濾過によりフリット上に回収し、続いて連続的にジクロロメタン／メタノール／ＤＩＥＡ１７／２／１で３回、ジクロロメタンで３回、ＤＭＦで２回、ジクロロメタンで３回洗浄する。
酢酸／トリフルオロエタノール／ジクロロメタン１：１：３でサンプルを取り出し、対応するｆｍｏｃ−保護アミノ酸を得る。
HPLC (方法 13) Rt = 1.95 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.38 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 384 (35) [M+H]+, 767 (10) [2M+H]+, 105 (100); MS (ESIpos): m/z (%) = 382 (25) [M - H]-, 765 (10) [2M - H]-, 160 (100).
【０２３１】
実施例４２Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合｛Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ４−トリチル−Ｌ−アスパラギニル｝−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化５２】
2009533371.tif 000055
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例４１Ａ、２.０ｇ、２.９８ｍｍｏｌ）から、手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護アミノ酸を、続いてＮ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ−トリチル−Ｌ−アスパラギン（３.６ｇ、５.９６ｍｍｏｌ、２当量）、ＤＩＥＡ（１.５ｍｌ、１.２ｇ、８.９４ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（１.９ｇ、５.９６ｍｍｏｌ）と、終夜反応させ、Ｆｍｏｃ−保護ジペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ジペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
HPLC (方法 13) Rt = 2.43 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.10 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 740 (5) [M+H]+, 243 (100); MS (ESIpos): m/z (%) = 738 (40) [M - H]-, 516 (85) [M -Fmoc- H]-, 542 (100).
HR-TOF-MS (方法 24): C45H46N3O7 [M+H]+ 実測値 740.3342, 計算値 740.3331.
【０２３２】
実施例４３Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合｛Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］グリシル｝−（Ｎ４−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化５３】
2009533371.tif 000056
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例４２Ａ、２.０ｇ、２.９８ｍｍｏｌ）から、手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護ジペプチドを、続いてＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］グリシン（１.８ｇ、５.９６ｍｍｏｌ、２当量）、ＤＩＥＡ（１.５ｍｌ、１.２ｇ、８.９４ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（１.９ｇ、５.９６ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆｍｏｃ−保護トリペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護トリペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
HPLC (方法 13) Rt = 2.33 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 2.99 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 797 (5) [M+H]+, 243 (100); MS (ESIpos): m/z (%) = 795 (40) [M - H]-, 573 (100) [M - Fmoc - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C47H49N4O8 [M+H]+ 実測値 797.3556, 計算値 797.3545.
【０２３３】
実施例４４Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合｛Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−アロスレオニル｝−グリシル−（Ｎ４−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化５４】
2009533371.tif 000057
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例４３Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から、手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護トリペプチドを、続いてＯ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アロスレオニン（１１８４.５ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）、ＤＩＥＡ（７７２μｌ、５７７.７ｍｇ、３当量）およびＴＢＴＵ（９５６.６ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆｍｏｃ−保護テトラペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護テトラペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
HPLC (方法 13) Rt = 2.48 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 3.02 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 954 (100) [M+H]+; MS (ESIpos): m/z (%) = 752 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C55H64N5O10 [M+H]+ 実測値 954.4663, 計算値 954.4648.
【０２３４】
実施例４５Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合｛Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］｝−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）］−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−（Ｎ３−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化５５】
2009533371.tif 000058
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例４４Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護テトラペプチドを、続いてＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−イソロイシン（１０５３.２ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）、ＤＩＥＡ（７７２μｌ、５７７.７ｍｇ、４.４７ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（９５６.６ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆ−ｍｏｃ−保護ペンタペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ペンタペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
HPLC (方法 13) Rt = 2.57 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 3.23 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1067 (13) [M+H]+, 243 (100).
HR-TOF-MS (方法 24): C61H75N6O11 [M+H]+ 実測値 1067.5488, 計算値 1067.5489.
【０２３５】
実施例４６Ａ
Ｎ５−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−｛Ｎ５−［｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（イミノ）メチル］−Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｄ−オルニチン｝
【化５６】
2009533371.tif 000059
Ｎ５−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ５−［｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（イミノ）メチル］−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−オルニチン（４.９０ｇ、９.０３ｍｍｏｌ）［M. Jetten et al., Tetrahedron Lett. 1991, 32, 6025-6028］を、ジオキサン（１５０ｍｌ）およびジクロロメタン（１５０ｍｌ）中の４Ｍ塩酸中、室温で終夜撹拌する。溶媒を完全に蒸発させ、残渣を真空で乾燥する。脱保護アミンを続いてジクロロメタン（１８０ｍｌ）中に提供し、ＤＩＥＡ（４.５ｍｌ、３.５ｇ、２７.０９ｍｍｏｌ、３当量）およびクロロトリメチルシラン（２.３ｍｌ、２.０ｇ、１８.０６１ｍｍｏｌ、２当量）を添加し、混合物を還流下で終夜撹拌する。溶液を冷却し（０℃）、ＤＩＥＡ（３.０ｍｌ、２.３ｇ、１８.０６ｍｍｏｌ、２当量）および（９−フルオレニルメチル）クロロホルメート（２.３ｇ、９.０３ｍｍｏｌ、１当量）を添加し、混合物を室温に温め、この温度で終夜撹拌する。後処理に、反応をジクロロメタンで希釈し、１０％水性クエン酸溶液で洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去し、残渣を真空で乾燥する。粗生成物の入念な精製（方法３７）の後、表題化合物２.０ｇ（理論値の３２.４％）を単離する。
LC-MS (方法 21): Rt = 2.99 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 665 (100) [M+H]+;
MS (ESIneg): m/z (%) = 663 (30) [M - H]-, 333 (100). 
【０２３６】
実施例４７Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合［Ｎ５−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ５−（｛［ベンジルオキシカルボニル］アミノ｝−｛イミノ｝メチル）−Ｎ２−（｛９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ｝カルボニル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アロスレオニル］−グリシル−（Ｎ３−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化５７】
2009533371.tif 000060
Ｆｍｏｃ保護基を、ポリマー（実施例４５Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護ペンタペプチドを、続いてＦｍｏｃ−保護アミノ酸（実施例４６Ａ、１９８０.９ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）、ＤＩＥＡ（７７２μｌ、５７７.７ｍｇ、４.４７ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（９５６.６ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆ−ｍｏｃ−保護ヘキサペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。ポリマー−結合ヘキサペプチドを、分析的確認をせずに直ちにさらに処理する。
【０２３７】
実施例４８Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合｛Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝−［Ｎ５−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ５−（｛［ベンジルオキシカルボニル］アミノ｝｛イミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アロスレオニル］−グリシル−（Ｎ３−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化５８】
2009533371.tif 000061
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例４７Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護ヘキサペプチドを、続いてＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシン（１０５３.２ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）、ＤＩＥＡ（７７９μｌ、５７７.７ｍｇ、４.４７ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（９５６.７ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆ−ｍｏｃ−保護ヘプタペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ヘプタペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
LC-MS (方法 18): Rt = 3.51 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1605 (100) [M+H]+.
【０２３８】
実施例４９Ａ
｛Ｎ２−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］｝−Ｌ−ロイシル｝−［Ｎ５−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ５−（｛［ベンジルオキシカルボニル］アミノ｝｛イミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アロスレオニル］−グリシル−（Ｎ３−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化５９】
2009533371.tif 000062
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例４８Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護ヘプタペプチドを、続いて（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシン（５５２.７ｍｇ、２.２４ｍｍｏｌ、１.５当量）、ＤＩＥＡ（５９７μｌ、４４２.９ｍｇ、３.４３ｍｍｏｌ、２.３当量）およびＴＢＴＵ（７１７.６ｍｇ、２.２４ｍｍｏｌ、１.５当量）と終夜反応させ、Ｆ−ｍｏｃ−保護オクタペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。
【０２３９】
オクタペプチドをポリマーから、酢酸、トリフルオロエタノールおよびジクロロメタン（１：１：３）の溶液中で完全に除去する。後処理に、樹脂をフリットでの濾過により除去し、濾液を真空で濃縮し、最後にクロマトグラフィー（方法３２）により精製する。表題化合物５６ｍｇ（理論値の１６％）を得る。
LC-MS (方法 18): Rt = 3.48 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1613 (15) [M+H]+, 806 (60) [M + 2H]2+, 243 (100); MS (ESIneg): m/z (%) = 1611 (100) [M+H]+.
【０２４０】
実施例５０Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−｛Ｎ５−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｎ５−［｛［ベンジルオキシカルボニル］アミノ｝（イミノ）メチル］−Ｄ−オルニチル｝−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリン
【化６０】
2009533371.tif 000063
ペプチド（実施例４９Ａ、２２.０ｍｇ、１３.６５μｍｏｌ）をＴＦＡ（５.２５ｍｌ）および水（０.２５ｍｌ）中に提供し、ｐ−クレゾール（１０.０ｍｇ、９２.４８μｍｏｌ）を続いて添加し、溶液を室温で１時間撹拌する。後処理に、溶媒をロータリーエバポレーターで、浴温度３０℃で除去する。分取ＨＰＬＣ（方法２６）による残渣の入念な精製の後、生成物４.４ｍｇ（理論値の２７.９％）を得る。
HPLC (方法 1) Rt = 2.07 分
LC-MS (方法 18): Rt = 2.12 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1158 (5) [M+H]+, 579 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1156 (100) [M - H]-.
【０２４１】
実施例５１Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−｛（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニル｝−｛（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル｝−Ｌ−ロイシル−｛Ｎ５−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｎ５−［｛［ベンジルオキシカルボニル］アミノ｝（イミノ）メチル］−Ｄ−オルニチル｝−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリン
【化６１】
2009533371.tif 000064
アミン（実施例５０Ａ、４.０ｍｇ、３.４６μｍｏｌ）および活性化された酸（実施例４０Ａ、３.２ｍｇ、３.８２μｍｏｌ、１.１当量）を、ＤＭＦ（５００μｌ）中に提供し、溶液を０℃に冷却し、ＤＩＥＡ（４μｌ、２.７ｍｇ、２０.７４ｍｍｏｌ、６当量）を続いて添加し、反応を室温に温め、ここで終夜撹拌する。後処理に、溶媒をロータリーエバポレーターで、浴温度３０℃で除去し、残渣をゲルクロマトグラフィー（方法４５、溶離剤：メタノール）により予精製し、分取ＨＰＬＣ（方法２６）による入念な精製の後、生成物３.０ｍｇ（理論値の２４.０％）を得る。
HPLC (方法 10) Rt = 11.37 分
LC-MS (方法 18): Rt = 3.37 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 904 (100) [M + 2H]2+.
【０２４２】
実施例５２Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−｛（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル｝−｛（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル｝−Ｌ−ロイシル−｛Ｎ５−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｎ５−［｛［ベンジルオキシカルボニル］アミノ｝（イミノ）メチル］−Ｄ−オルニチル｝−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化６２】
2009533371.tif 000065
Ｂｏｃ保護基を例示的化合物５１Ａ（２.５ｍｇ、１.３８μｍｏｌ）から、一般的手順１に従い除去する。分取ＨＰＬＣ（方法２６）による入念な精製の後、生成物２.２ｍｇ（理論値の８７.３％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 24.14 分
LC-MS (方法 18): Rt = 2.63 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 854 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1706 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C84H123N16O22 [M+H]+ 実測値 1707.8989, 計算値 1707.8993.
【０２４３】
実施例５３Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−｛（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル｝−｛（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル｝−Ｌ−ロイシル−｛Ｎ５−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｎ５−［｛［ベンジルオキシカルボニル］アミノ｝（イミノ）メチル］−Ｄ−オルニチル｝−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム
【化６３】
2009533371.tif 000066
アルゴン保護気体雰囲気下、脱保護アミン（実施例５２Ａ、２.０ｍｇ、１.１０μｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１ｍｌ）中に提供し、溶液を０℃に冷却し、ＨＡＴＵ（１.３ｍｇ、３.２９μｍｏｌ、３当量）およびＮＭＭ（０.７μｌ、０.７ｍｇ、６.５８μｍｏｌ、６当量）を添加し、反応をゆっくりと室温にし、この温度で終夜撹拌する。後処理に、溶液を分取ＨＰＬＣ（方法２６）により精製する。標的化合物１.９ｍｇ（理論値の９０.１％）を得る。
HPLC (方法 10) Rt = 10.70 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.25 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1691 (53) [M+H]+, 846 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1688 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C84H121N16O21 [M+H]+ 実測値 1689.8929, 計算値 1689.8887.
【０２４４】
実施例５４Ａ
｛（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル｝−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−｛Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アロスレオニル｝−グリシル−｛Ｎ４−トリチル−Ｌ−アスパラギニル｝−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化６４】
2009533371.tif 000067
ベンジルエステル−保護化合物（実施例４９Ａ、６２.０ｍｇ、３８.４６μｍｏｌ）を、メタノール（２０ｍｌ）中での水素化分解により、１時間で生成物に変換する。分取ＨＰＬＣ（方法２６）によるクロマトグラフィーの後、標的化合物（３４.３ｍｇ、理論値の６１.２％）を得る。
HPLC (方法 1) Rt = 2.51 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.36 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1343 (38) [M+H]+, 243 (100); MS (ESIneg.): m/z (%) = 1341 (100) [M - H]-.
【０２４５】
実施例５５Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化６５】
2009533371.tif 000068
例示的化合物５４Ａ（３２.０ｍｇ、２１.９５μｍｏｌ）を、ＴＦＡ（７.３ｍｌ）、水（２５０μｌ）およびトリイソプロピルシラン（３２３μｌ）の溶液中、室温で２時間撹拌する。後処理に、溶媒をロータリーエバポレーターで、浴温度３０℃で除去し、残渣を真空で、トルエンと１回、塩化メチレンと１回、浴温度３０℃で濃縮する。高真空下で乾燥した後、粗生成物を０.１％水性ＴＦＡに溶解し、ＭＴＢＥで抽出し、分離した水相を真空で濃縮し、続いて分取ＨＰＬＣ（方法２７）により入念に精製する。表題化合物２２.５ｍｇ（理論値の９１.８％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 8.38 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.30 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 889 (12) [M+H]+, 445 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 887 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C37H69N12O13 [M+H]+ 実測値 889.5102, 計算値 889.5102.
【０２４６】
実施例５６Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−｛（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニル｝−｛（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル｝−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化６６】
2009533371.tif 000069
例示的化合物５５Ａ（１９.０ｍｇ、１７.００μｍｏｌ）および４０Ａ（１５.６ｍｇ、１８.７０μｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１ｍｌ）中に提供し、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルアミン（１８μｌ、１３.２ｍｇ、１０２.００ｍｍｏｌ、６当量）を０℃で添加し、混合物をこの温度で２時間撹拌する。反応を室温に温め、次いで終夜撹拌する。後処理に、溶液を真空で濃縮し、最後に分取ＨＰＬＣ（方法２６）により入念に精製する。標的化合物２４.４ｍｇ（理論値の８６.７％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 23.17 分. 
LC-MS (方法 18): Rt = 2.37 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 720 (100) [M - C4H8 - CO2 + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1438 (100) [M - C4H8 - CO2 - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C73H119N16O20 [M+H]+ 実測値 1539.8772, 計算値 1539.8782.
【０２４７】
実施例５７Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−｛（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル｝−｛（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル｝−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化６７】
2009533371.tif 000070
例示的化合物５６Ａ（２３.０ｍｇ、１３.９１μｍｏｌ）を、手順１に従い脱保護アミンに変換する。入念な精製（方法２６）の後、表題化合物１９.９ｍｇ（理論値の８５.８％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 17.05 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.98 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1441 (3) [M+H]+, 720 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1438 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C68H111N16O18 [M+H]+ 実測値 1439.8271, 計算値 1439.8257.
【０２４８】
実施例５８Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−｛（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル｝−｛（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル｝−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化６８】
2009533371.tif 000071
アルゴン保護気体雰囲気下、脱保護アミン（実施例５７Ａ、１９.０ｍｇ、１１.３９μｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍｌ）中に提供し、溶液を０℃に冷却し、ＨＡＴＵ（１３.０ｍｇ、３４.１８μｍｏｌ、３当量）およびＮＭＭ（８μｌ、６.９ｍｇ、６８.３５μｍｏｌ）を添加し、反応を４℃で３日間静置する。後処理に、メタノールを混合物に０℃で添加し、混合物を真空で、最高浴温度３０℃で濃縮し、最後に分取ＨＰＬＣ（方法２６）により入念に精製する。表題化合物１４.０ｍｇ（理論値の８０.０％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 22.44 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.30 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1422 (12) [M+H]+, 711 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1420 (28) [M - H]-, 710 (100) [M - 2H]2-.
HR-TOF-MS (方法 24): C68H109N16O17 [M+H]+ 実測値 1421.8165, 計算値 1421.8152.
【０２４９】
実施例５９Ａ
（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン
【化６９】
2009533371.tif 000072
手順５に従い、例示的化合物１６Ａ（１０００.０ｍｇ、２.４１ｍｍｏｌ）を、１０％パラジウム／炭素（１００ｍｇ、９３.９８μｍｏｌ、４ｍｏｌ％）で、メタノール（１００ｍｌ）中で表題化合物に１時間で変換する。珪藻土での濾過による触媒の除去および濃縮後、粗生成物６２４.０ｍｇ（９２.３％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 10.27 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.52 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 281 (82) [M+H]+, 561 (10) [2M+H]+, 225 (100); MS (ESIneg.): m/z (%) = 279 (70) [M - H]-, 559 (5) [2M - H]-, 205 (100).
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO): δ = 1.34 (s, 9H, OC(CH3)3), 3.51 (d, J = 4.8 Hz, 1H, Hα), 4.88 (dd, J = 8.6 Hz, 4.8Hz, 1H, Hβ), 7.21-7.35 (m, 7H, ArH, NH2), 8.04 (d, J = 8.6 Hz, NH).
13C NMR (126 MHz, d6-DMSO): δ = 28.04 (3C), 53.81, 56.27, 78.06, 127.24, 127.42 (2C), 128.07 (2C), 138.99, 154.12, 167.93.
HR-TOF-MS (方法 24): C14H21N2O4 [M+H]+ 実測値 281.1506, 計算値 281.1496.
【０２５０】
実施例６０Ａ
メチル［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル］−Ｌ−ロイシネート
【化７０】
2009533371.tif 000073
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシン（BACHEM Cat No zl3351.）（６.３７ｇ、２４ｍｍｏｌ））およびメチルＬ−ロイシネート（３.４９ｇ、２４ｍｍｏｌ、１当量）を、ＤＭＦ（７５ｍｌ）に０℃で溶解し、次いでＮＭＭ（５.２８ｍｌ、４８ｍｍｏｌ、２当量）およびＨＡＴＵ（１３.６９ｇ、３６ｍｍｏｌ、１.５当量）を添加する。混合物を室温で３時間撹拌する。ＭＴＢＥおよび飽和重炭酸ナトリウム溶液を添加し、抽出を実施する。水相を第２の分量のＭＴＢＥで逆抽出し、次いで、合わせた有機相を１Ｍクエン酸で洗浄し、再度飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空で濃縮する。残渣をクロマトグラフィーにより２回に分けて精製する（Biotage 40M、シクロヘキサン／酢酸エチル３＋１）。収量：７.８５ｇ（理論値の８０％）
HPLC (方法 5): Rt = 4.82 分.
LCMS (方法 18): Rt = 2.65 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 393 (100) [M+H]+.
[α]20Na = -5.2 °(c = 0.52, MeOH).
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.77-0.92 (m, 12H), 1.31-1.66 (m, 6H), 3.60 (s, 3H), 4.10 (m, 1H), 4.28 (m, 1H), 5.02 (s, 2H), 7.25-7.38 (m, 6H), 8.23 (d, 1H).
13C-NMR (126 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 21.1 (CH3), 21.5 (CH3), 22.8 (CH3), 22.9 (CH3), 24.2 (CH), 41.0 (CH2), 50.0 (CH), 51.8 (CH3, OCH3), 52.9 (CH), 65.3 (CH2, OCH2Ph), 127.6 (CH, ar-C), 127.7 (CH, ar-C), 128.3 (CH, ar-C), 137.1 ((C 四重線, ar-C), 155.8 (C 四重線, NCOC(CH3)3), 172.4 (C 四重線, C=O), 172.9 (C 四重線, C=O).
【０２５１】
実施例６１Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル］−Ｌ−ロイシン
【化７１】
2009533371.tif 000074
化合物６０Ａ（７.７０ｇ、１９.６２ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ／水（３＋１）２００ｍｌに取り、０℃に冷却し、水酸化リチウム一水和物（１.６５ｇ、３９.２４ｍｍｏｌ、２当量）を添加する。混合物を０℃でＨＰＬＣ監視により反応が完了に進むまで（約４５分間）撹拌する。ＴＨＦの殆どを真空で留去し、次いでクエン酸の添加によりｐＨを約４に調節し、混合物を酢酸エチルで２回に分けて抽出する。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮する。生成物を無定形物質として収量６.８７ｇ（理論値の８９％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.45 分.
LCMS (方法 18): Rt = 2.39 分, MS (ESIpos.) m/z (%) = 379 (100) [M+H]+, 757 (40) [2M+H]+.
[α]20Na = +4.7°(c = 0.50, MeOH).
1H NMR (300 MHz,d6-DMSO) δ (ppm) = 0.77-0.92 (m, 12H), 1.34-1.68 (m, 6H), 4.04-4.26 (m, 2H), 5.02 (s, 2H), 7.25-7.38 (m, 6H), 8.12 (d, 1H), 12.50 (br. s, 1H).
HR-TOF-MS (方法 24): C20H31N2O5 [M+H]+ 計算値 379.2228, 実測値 379.2216.
【０２５２】
実施例６２Ａ
ペンタフルオロフェニルＮ−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシネート
【化７２】
2009533371.tif 000075
製造方法（実施例１７Ａ）に従い、例示的化合物６１Ａ（１０００.０ｍｇ、２.６４ｍｍｏｌ）、ペンタフルオロフェノール（２４３１.７ｍｇ、１３.２１ｍｍｏｌ、５当量）およびＥＤＣ（７５９.８ｍｇ、３.９６ｍｍｏｌ、１.５当量）を、表題化合物に変換する。入念な精製（方法２８）後、生成物１.３ｇ（理論値の９３.０％）を得、さらに使用するまでそれを−２５℃で保存する。
HPLC (方法 1) Rt = 3.08 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.26 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 545 (100) [M+H]+, 1089 (43) [2M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ = 0.78-0.99 (m, 12H, 2[CH(CH3)2]), 1.30-1.88 (m, 6H), 4.16 (m, 1H, Hα), 4.38-4.55 (2m, 1H, Hα), 4.95-5.11 (m, 2H, PhCH2), 7.21-7.38 (m, 5H, ArH), 7.41 (d, J = 7.4 Hz, 1H, NH), 8.69 (d, J = 7.0 Hz, 1H, NH).
【０２５３】
実施例６３Ａ
｛Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル｝−Ｌ−ロイシル−［（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン］
【化７３】
2009533371.tif 000076
アルゴン保護気体雰囲気下、アミノ酸（実施例５９Ａ、４９３.０ｍｇ、１.７６ｍｍｏｌ）およびカルボン酸−活性化ジペプチド（実施例６２Ａ、１１９７.０ｍｇ、１.７６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５０ｍｌ）中に提供し、ＤＩＥＡ（２.４ｍｌ、１８１８.４ｍｇ、１４.０７ｍｍｏｌ、８当量）を続いて溶液に０℃で添加する。塩基の添加後、反応をゆっくりと室温にし、ここで変換が完了するまで（３時間）撹拌する。後処理に、リン酸二水素カリウム（２.４ｇ、１７.５９ｍｍｏｌ、１０当量）を反応に添加し、混合物を１０分間撹拌し、固体を濾過し、濾液を真空で、浴温度３０℃で濃縮する。入念な精製（方法２８）の後、表題化合物７５０.０ｍｇ（理論値の６６.６％）を単離する。
HPLC (方法 1) Rt = 2.72 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.86 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 641 (100) [M+H]+, 541 (76) [M - C4H8 - CO2 + H]+, 1281 (42) [2M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 639 (100) [M - H]-, 1280 (92) [2M - H]-.
【０２５４】
実施例６４Ａ
ペンタフルオロフェニルＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシル−［（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニネート］
【化７４】
2009533371.tif 000077
表題化合物を実施例方法（実施例１７Ａ）に従いトリペプチド（実施例６３Ａ、２００ｍｇ、０.３１ｍｍｏｌ）およびペンタフルオロフェノール（２８７.３ｍｇ、１.５６ｍｍｏｌ、５当量）から、ジクロロメタン（１０ｍｌ）中で、ＥＤＣ（８９.８ｍｇ、０.４９ｍｍｏｌ、１.５当量）を使用して製造する。反応を０℃で２時間撹拌し、冷蔵庫中４℃で終夜静置することにより、完全な変換が達成される。入念な精製（方法３２）の後、生成物２１１.０ｍｇ（理論値の８３.８％）を得る。
HPLC (方法 1) Rt = 3.23 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 3.22 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 807 (30) [M+H]+, 707 (100) [M - C4H8 - CO2 + H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 805 (10) [M - H]-, 183 (100).
【０２５５】
実施例６５Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合｛Ｏ３−［ｔｅｒｔ−ブチル］−Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−スレオニル−グリシル−（Ｎ３−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化７５】
2009533371.tif 000078
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例４３Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護トリペプチドを、続いてＯ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−スレオニン［Echner, Hartmut; Voelter, Wolfgang; Liebigs Ann. Chem.; GE; 1988; 1095-1098］（１１８４.５ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）、ＤＩＥＡ（７７９μｌ、５７７.７ｍｇ、４.４７ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（９５６.６ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆ−ｍｏｃ−保護テトラペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
LC-MS (方法 20): Rt = 3.07 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 955 (80) [M+H]+, 243 (100); MS (ESIneg): m/z (%) = 953 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C55H64N5O10 [M+H]+ 実測値 954.4636, 計算値 954.4648.
【０２５６】
実施例６６Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合｛Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−イソロイシル｝−｛［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）］−Ｌ−スレオニル｝−グリシル−（Ｎ３−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化７６】
2009533371.tif 000079
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例６５Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護テトラペプチドを、続いてＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−イソロイシン（１０５３.２ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）（H. Echner et al., Liebigs Ann. Chem. 1988, 1095-1098）、ＤＩＥＡ（７７９μｌ、５７７.７ｍｇ、４.４７ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（９５６.６ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆ−ｍｏｃ−保護ペンタペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
HPLC (方法 13) Rt = 2.61 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 3.26 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1068 (15) [M+H]+, 243 (100); MS (ESIneg): m/z (%) = 1066 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C61H75N6O11 [M+H]+ 実測値 1067.5503, 計算値 1067.5489.
【０２５７】
実施例６７Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合｛Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−［Ｎ５−（イミノ−｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル］｝−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−スレオニル］−グリシル−（Ｎ３−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化７７】
2009533371.tif 000080
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例６６Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護ペンタペプチドを、続いてＮ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｌ−オルニチン（１２８３.９ｍｇ、１.９４ｍｍｏｌ、１.３当量）、ＤＩＥＡ（７７９μｌ、５７７.７ｍｇ、４.４７ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（９５６.６ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆｍｏｃ−保護ヘキサペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
LC-MS (方法 20): Rt = 3.24 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1490 (85) [M+H]+, 282 (100); MS (ESIpos): m/z (%) = 1488 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C81H105N10O15S [M+H]+ 実測値 1489.7456, 計算値 1489.7477.
【０２５８】
実施例６８Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合｛Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝−［Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−スレオニル］−グリシル−（Ｎ３−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化７８】
2009533371.tif 000081
Ｆｍｏｃ保護基を、ポリマー（実施例６７Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護ヘキサペプチドを、続いてＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシン（１０５３.２ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）、ＤＩＥＡ（７７９μｌ、５７７.７ｍｇ、４.４７ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（９５６.６ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆ−ｍｏｃ−保護ヘプタペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
LC-MS (方法 18): Rt = 3.54 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1602 (100) [M+H]+; MS (ESIpos): m/z (%) = 1600 (100) [M - H]-.
【０２５９】
実施例６９Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−［Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−スレオニル］−グリシル−（Ｎ３−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化７９】
2009533371.tif 000082
Ｆｍｏｃ保護基を、ポリマー（実施例６８Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護ヘプタペプチドを、続いて（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシン（５５２.７ｍｇ、２.２４ｍｍｏｌ、１.５当量）、ＤＩＥＡ（５９７μｌ、４４２.９ｍｇ、３.４３ｍｍｏｌ、２.３当量）およびＴＢＴＵ（７１７.６ｍｇ、２.２４ｍｍｏｌ、１.５当量）と終夜反応させ、Ｆｍｏｃ−保護オクタペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。
樹脂に結合したオクタペプチドを、酢酸、トリフルオロエタノールおよびジクロロメタン（１：１：３）の溶液中でポリマーから完全に除去する。後処理に、樹脂をフリットで濾過し、濾液を真空で濃縮し、最後にクロマトグラフィー（方法２８）により精製する。表題化合物４１８.０ｍｇ（理論値の１７.４％）を得る。
HPLC (方法 13) Rt = 2.85 分.
HPLC (方法 1) Rt = 3.32 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.39 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 1610 (40) [M+H]+, 806 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1608 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C83H125N12O18S [M+H]+ 実測値 1609.8971, 計算値 1609.8951.
【０２６０】
実施例７０Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−スレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化８０】
2009533371.tif 000083
アルゴン保護気体雰囲気下、例示的化合物６９Ａ（２００.０ｍｇ、０.１２ｍｍｏｌ）を、ＴＦＡ（２５.３ｍｌ）、水（６６７μｌ）およびトリイソプロピルシラン（６６７μｌ）の溶液中、室温で１時間撹拌する。後処理に、溶媒をロータリーエバポレーターで、浴温度３０℃で除去し、残渣を真空で、トルエンと１回、塩化メチレンと１回、浴温度３０℃で濃縮する。残渣を０.１％水性ＴＦＡに溶解し、ＭＴＢＥで１回抽出し、分離した水相を真空で濃縮し、続いて分取ＨＰＬＣ（方法２６）により入念に精製する。表題化合物１３８.０ｍｇ（理論値の９９.５％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 8.60 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.43 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 889 (15) [M+H]+, 445 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 887 (100) [M - H]-.
【０２６１】
実施例７１Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−［（３Ｒ）−Ｎ３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−｛（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル｝−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−スレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化８１】
2009533371.tif 000084
オクタペプチド（実施例７０Ａ、７０.０ｍｇ、６２.６６μｍｏｌ）、カルボン酸−活性化トリペプチド（実施例６４Ａ、６０.７ｍｇ、７５.１９μｍｏｌ、１.２当量）から、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルアミン（６５μｌ、４８.６ｍｇ、３７５.９６μｍｏｌ、６当量）を使用して、例示的化合物５６Ａの製造方法に示す通りに、表題化合物を製造する。反応を、室温で終夜ほぼ完全な変換に至らせる。クロマトグラフィー（方法２６）後、生成物７３.９ｍｇ（理論値の７２.５％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 22.16 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.07 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1512 (25) [M+H]+, 706 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1510 (18) [M - H]-, 700 (100).
HR-TOF-MS (方法 24): C71H115N16O20 [M+H]+ 実測値 1511.8474, 計算値 1511.8469.
【０２６２】
実施例７２Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−スレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化８２】
2009533371.tif 000085
例示的化合物７１Ａ（７０.０ｍｇ、４３.０６μｍｏｌ）を、手順１に従い脱保護アミンに変換する。入念な精製（方法２６）後、表題化合物４５.０ｍｇ（理論値の６３.７％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 16.77 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.85 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1412 (10) [M+H]+, 706 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1410 (90) [M - H]-, 650 (100).
HR-TOF-MS (方法 24): C66H107N16O18 [M+H]+ 実測値 1411.7958, 計算値 1411.7944.
【０２６３】
実施例７３Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−スレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化８３】
2009533371.tif 000086
製造方法（実施例５８Ａ）に従い、例示的化合物７３Ａ（４２.０ｍｇ、２５.６１μｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２９.２ｍｇ、７６.８３μｍｏｌ、３当量）およびＮＭＭ（１７μｌ、１５.５ｍｇ、１５３.６６μｍｏｌ）から、表題化合物を製造する。室温で撹拌することにより、３時間で完全な変換を達成する。生成物３４.１ｍｇ（理論値の８８.３％）を、入念な精製（方法２６）の後に単離する。
HPLC (方法 9) Rt = 20.29 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.06 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1393 (32) [M+H]+, 797 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1391 (100) [M - H]-, 695 (32) [M - 2H]2-.
HR-TOF-MS (方法 24): C66H105N16O17 [M+H]+ 実測値 1393.7848, 計算値 1393.7839.
【０２６４】
実施例７４Ａ
Ｎ５−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｄ−オルニチン
【化８４】
2009533371.tif 000087
Ｎ５−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｄ−オルニチン（３.８ｇ、１４.２７ｍｍｏｌ）［Ulhaq, Saraj et al.; Bioorg. Med. Chem.; EN; 7; 9; 1999; 1787 - 1796］を、ジクロロメタン（１９０ｍｌ）中に提供し、ＤＩＥＡ（２.４ｍｌ、１.８ｇ、１７.２７ｍｍｏｌ、１当量）およびクロロトリメチルシラン（３.６ｍｌ、３.１ｇ、２８.５３ｍｍｏｌ、２当量）を添加し、混合物を還流下で終夜撹拌する。反応を冷却し（０℃）、ＤＩＥＡ（４.７ｍｌ、３.７ｇ、２８.５４ｍｍｏｌ、２当量）を再度、そして（９−フルオレニルメチル）クロロホルメート（３.７ｇ、１４.２７ｍｍｏｌ、１当量）を添加し、混合物を室温に温め、この温度で終夜撹拌する。後処理に、反応をジクロロメタンで希釈し、１０％水性クエン酸溶液で洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去し、混合物を真空で乾燥する。表題化合物６.５ｇ（理論値の９３.２％）を得る。
LC-MS (方法 18): Rt = 2.57 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 489 (100) [M+H]+, 977 (100) [2M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 487 (80) [M - H]-, 975 (100) [2M - H]-.
【０２６５】
実施例７５Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合｛Ｎ５−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）−カルボニル］−Ｄ−オルニチル｝−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アロスレオニル］−グリシル−（Ｎ４−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化８５】
2009533371.tif 000088
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例４５Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護ペンタペプチドを、続いてＦｍｏｃ−保護アミノ酸（実施例７４Ａ、１４５５.９ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）、ＤＩＥＡ（７７９μｌ、５７７.７ｍｇ、４.４７ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（９５６.８ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆ−ｍｏｃ−保護ヘキサペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
HPLC (方法 13) Rt = 2.73 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.27 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1316 (100) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1314 (100) [M+H]+. 
【０２６６】
実施例７６Ａ
クロロトリチル−樹脂−結合｛Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝−｛Ｎ５−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｄ−オルニチル｝−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アロスレオニル］−グリシル−（Ｎ４−トリチル−Ｌ−アスパラギニル）−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化８６】
2009533371.tif 000089
Ｆｍｏｃ保護基を、ポリマー（実施例７５Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護ヘキサペプチドを、続いてＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシン（１０５３.２ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）、ＤＩＥＡ（７７９μｌ、５７７.７ｍｇ、４.４７ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（９５６.８ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆ−ｍｏｃ−保護ヘプタペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
HPLC (方法 13) Rt = 2.84 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.36 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1429 (95) [M+H]+, 1430 (100); MS (ESIpos): m/z (%) = 1427 (80) [M - H]-, 1428 (100). 
HR-TOF-MS (方法 24): C61H75N6O11 [M+H]+ 実測値 1067.5488, 計算値 1067.5489.
【０２６７】
実施例７７Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−［Ｎ５−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アロスレオニル］−グリシル−［Ｎ４−トリチル−Ｌ−アスパラギニル］−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン］
【化８７】
2009533371.tif 000090
Ｆｍｏｃ保護基を、ポリマー（実施例７６Ａ、１０００.０ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ）から、手順７に記載の通りに除去する。樹脂に結合した脱保護ヘプタペプチドを、次いで（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシン［Oliyai, Reza, Siahaan, Teruna J., Stella, Valentino J.; Pharm. Res.; EN; 12; 3; 1995; 323 - 328］（５５２.７ｍｇ、２.２４ｍｍｏｌ、１.５当量）、ＤＩＥＡ（５９７μｌ、４４２.９ｍｇ、３.４３ｍｍｏｌ、２.３当量）およびＴＢＴＵ（７１７.６ｍｇ、２.２４ｍｍｏｌ、１.５当量）と終夜反応させ、Ｆｍｏｃ−保護オクタペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。
樹脂に結合したオクタペプチドを、酢酸、トリフルオロエタノールおよびジクロロメタン（１：１：３）の溶液中でポリマーから完全に除去する。後処理に、樹脂をフリットで濾過し、濾液を真空で濃縮し、最後にクロマトグラフィー（方法２８）により精製する。表題化合物６０４.０ｍｇ（理論値の２８.３％）を得る。
HPLC (方法 13) Rt = 2.68 分.
HPLC (方法 1) Rt = 3.15 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.26 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 1437 (100) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1435 (100) [M - H]-.
【０２６８】
実施例７８Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−［Ｎ５−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化８８】
2009533371.tif 000091
例示的化合物７７Ａ（２００.０ｍｇ、０.１４ｍｍｏｌ）から、例示的方法（実施例７０Ａ）に記載の通りに表題化合物を製造する。室温での完全な変換（１時間）の後、溶液を真空で、浴温度３０℃で濃縮し、トルエンで１回、塩化メチレンで１回、真空で、浴温度３０℃で濃縮し、最後に分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（方法２６）により入念に精製する。生成物１２１.０ｍｇ（理論値の７９.３％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 13.26 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 3.04 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 981 (100) [M+H]+, 491 (10) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 979 (100) [M - H]-.
【０２６９】
実施例７９Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−｛（３Ｒ）−Ｎ３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル｝−｛（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル｝−Ｌ−ロイシル−［Ｎ５−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリン
【化８９】
2009533371.tif 000092
オクタペプチド（実施例７８Ａ、５９.６ｍｇ、５４.４４μｍｏｌ）、カルボン酸−活性化トリペプチド（実施例４０Ａ、５０.０ｍｇ、５９.８９μｍｏｌ、１.１当量）から、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルアミン（５７μｌ、４２.２ｍｇ、３２６.７μｍｏｌ、６当量）を例示的方法５６Ａに記載の通りに使用して、表題化合物を製造する。反応を、室温で終夜完全に変換させる。入念な精製（方法２６）の後、生成物５２.９ｍｇ（理論値の５９.５％）を得る。
HPLC (方法 10) Rt = 10.32 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.07 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1633 (40) [M+H]+, 817 (90) [M + 2H]2+, 767 (100); MS (ESIneg.): m/z (%) = 1631 (65) [M - H]-, 761 (100).
HR-TOF-MS (方法 24): C80H123N14O22 [M+H]+ 実測値 1631.8898, 計算値 1631.8931.
【０２７０】
実施例８０Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−｛（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル｝−｛（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル｝−Ｌ−ロイシル−［Ｎ５−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化９０】
2009533371.tif 000093
例示的化合物７９Ａ（５０.０ｍｇ、３０.６４μｍｏｌ）を、手順１に従い脱保護アミンに変換する。入念な精製（方法２６）の後、表題化合物２７.５ｍｇ（理論値の５４.５％）を得る。
HPLC (方法 9) Rt = 21.85 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.18 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1533 (20) [M+H]+, 766 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1531 (58) [M - H]-, 764 (12) [M - 2H]2-, 710 (100).
HR-TOF-MS (方法 24): C75H114N14O20 [M+H]+ 実測値 1531.8385, 計算値 1531.8407.
【０２７１】
実施例８１Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−｛（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル｝−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−［Ｎ５−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム
【化９１】
2009533371.tif 000094
製造方法（実施例５８Ａ）に従い、例示的化合物８０Ａ（２５.０ｍｇ、１５.１９μｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１７.３ｍｇ、４５.５７μｍｏｌ、３当量）およびＮＭＭ（１０μｌ、９.２ｍｇ、９１.１４μｍｏｌ）から表題化合物を製造する。完全な変換は、４℃で３日後に達成される。生成物２１.０ｍｇ（理論値の９１.３％）を、入念な精製（方法２６）の後に単離する。
HPLC (方法 9) Rt = 26.28 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.98 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1514 (20) [M+H]+, 758 (100) [M + 2H]2+.
HR-TOF-MS (方法 24): C75H113N14O19 [M+H]+ 実測値 1513.8298, 計算値 1513.8301.
【０２７２】
実施例８２Ａ
メチル（２Ｒ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチルチロシネート
【化９２】
2009533371.tif 000095
アルゴン保護気体雰囲気下、ＴＨＦ中の１Ｍ ＬＨＭＤＳ溶液（２１３.３ｍｍｏｌ、２１３.３ｍｌ、２.２当量）を、反応溶媒ＴＨＦ（１.３５ｌ）中に提供する。−７８℃で、メチル（ｒａｃ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−（４−メトキシフェニル）プロパノエート（D. M. Kalvin, R. W. Woodard, J. Org. Chem., 50, 13, 1985, 2259-2263）（３０ｇ、９６.９ｍｍｏｌ）の溶液を、ゆっくりと滴下して添加する。混合物を−２５℃で１０分間撹拌し、次いで再度−７８℃に冷却する。ジベンジルアザジカルボキシレート（４６.３ｇ、１５５.２ｍｍｏｌ、１.６当量）を一度に反応混合物に添加する。混合物を−６０ないし−４５℃で２時間撹拌する。反応を停止するために、混合物を再度−７８℃に冷却し、酢酸（２９.１ｍｌ、４８４.９ｍｍｏｌ、５当量）を添加し、次いで、混合物を０℃に温め、最後に室温に温める。反応混合物を真空で蒸発させ、酢酸エチル（１０００ｍｌ）に取る。懸濁液を飽和水性重炭酸ナトリウム溶液で２回、水で２回、５％水性クエン酸で２回、飽和水性塩化ナトリウム溶液で１回洗浄する。全ての水相を別々に酢酸エチルで再抽出する。全ての有機相を真空で蒸発させ、再度ジクロロメタン（２０００ｍｌ）に取り、濾過し、硫酸マグネシウムで乾燥し、再度濾過し、真空で蒸発させる。残渣をシクロヘキサンと撹拌し、濾過により回収し、高真空下で乾燥する。表題化合物２５.７ｇ（理論値の４４％）を固体として得る。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.97 分.
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rt = 5.00 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.87 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 508 (100), 608 (20) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 532 (50), 606 (100) [M - H]-.
【０２７３】
実施例８３Ａ
メチル（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシカルボニル）アミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチルチロシネート
【化９３】
2009533371.tif 000096
アルゴン保護気体雰囲気下、ＴＭＧ（５.７８ｍｌ、４６.１ｍｍｏｌ、１１.２当量）を、乾燥ＤＭＦｐ.ａ.（８７ｍｌ）中の実施例８２Ａ（２.５ｇ、４.１ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で添加する。反応混合物を解凍し、ＨＰＬＣクロマトグラム（方法５）が完全な変換（約７０％生成物）（約２４時間）を示すまで撹拌し、次いで酢酸（ｐＨ４−６）の添加により反応を停止する。反応混合物を真空で、室温で蒸発させ、酢酸エチルに取る。有機相を水で２回、５％クエン酸で２回、飽和水性重炭酸ナトリウム溶液で１回、飽和水性塩化ナトリウム溶液で１回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空で蒸発させ、高真空下で乾燥する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、トルエン／酢酸エチル２０：１）により精製する。表題化合物１.８９ｇ（理論値の７３％）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 5.11 分. 
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 5.37 分. 
LC-MS (方法 18): Rt = 3.07 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 508 (100), 608 (20) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 532 (100), 606 (30) [M - H]-.
IR νmax (NaCl, cm-1) : 3281, 2974, 1755, 1740, 1686, 1508, 1457, 1416, 1323, 1288, 1267, 1208, 1168, 1137, 1043, 1027.
1H NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ = 1.29 (s, 9H, tBu), 3.29 (s, 3H, OCH3), 3.72 (s, 3H, COOCH3), 4.80-5.20(m, 6H), 6.84 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.20-7.40 (m, 12H, ArH), 7.50-7.65 (m, 1H, NH).
HR-TOF-MS (方法 24): C32H38N3O9 [M+H]+ 計算値 608.2603, 実測値 608.2588.
【０２７４】
実施例８４Ａ
メチル（＋）−（２Ｒ,３Ｓ）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシカルボニル）アミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチルチロシネート
【化９４】
2009533371.tif 000097
実施例８３Ａ（１０.６ｇ、１７.４４ｍｍｏｌ）のエナンチオマーの混合物を、分取ＨＰＬＣ（方法３９）により分離する。表題化合物４.１８ｇ（９９.５％ｅｅ、理論値の７９％）および（−）エナンチオマー（実施例８５Ａ）５.２ｇ（９９.５％ｅｅ、理論値の９８％）を得る。
方法１５によるエナンチオマーの決定。
HPLC/UV-Vis (方法 15): Rt = 3.86 分.
[α]20Na = +54°(c = 0.24、MeOH中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 5.11 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 5.23 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.07 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 508 (100), 608 (20) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 532 (100), 606 (30) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C32H38N3O9 [M+H]+ 計算値 608.2603, 実測値 608.2592.
【０２７５】
実施例８５Ａ
メチル（−）−（２Ｓ,３Ｒ）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシカルボニル）アミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチルチロシネート
【化９５】
2009533371.tif 000098
製造は、実施例８４Ａと同様に行う。
方法１５によるエナンチオマーの決定。
HPLC/UV-Vis (方法 15): Rt = 7.20 分.
[α]20Na = -34°(c = 0.27、MeOH中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 5.11 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 5.21 分.
LC-MS (方法 23): Rt = 2.87 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 508 (100), 608 (90) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 532 (60), 606 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C32H38N3O9 [M+H]+ 計算値 608.2603, 実測値 608.2594.
【０２７６】
実施例８６Ａ
メチル（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチルチロシネート
【化９６】
2009533371.tif 000099
アルゴン保護気体雰囲気下、ラネーニッケル（約１ｇ）を、メタノール／ジクロロメタン１：１（１００ｍｌ）中の実施例８３Ａ（２.８１ｇ、４.６２ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。反応混合物を加圧オートクレーブ中、水素圧８０ｂａｒ下、室温で水素化する（１２時間）。ＨＰＬＣクロマトグラム（方法８）は、完全な変換を示す。反応混合物を、アルゴン保護気体雰囲気下、ガラスフリット／珪藻土層で濾過し、ガラスフリットをメタノールで数回洗浄する。濾液を真空で蒸発させ、高真空下で乾燥する。得られる生成物は固体（１.５０ｇ、定量的）であり、それを入念に精製せずにさらに反応させる。
HPLC/UV-Vis (方法 8): Rt = 3.66 分.
【０２７７】
実施例８７Ａ
メチル（＋）−（２Ｒ,３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチルチロシネート
【化９７】
2009533371.tif 000100
アルゴン保護気体雰囲気下、ラネーニッケル（約０.８ｇ）を、メタノール／ジクロロメタン１：１（１００ｍｌ）中の実施例８４Ａ（４.００ｇ、６.５８ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。反応混合物を加圧オートクレーブ中、水素圧８０ｂａｒ下、室温で水素化する（７２時間）。反応混合物をアルゴン保護気体雰囲気下、ガラスフリット／珪藻土層で濾過し、ガラスフリットをメタノールで数回洗浄する。濾液を真空で蒸発させ、酢酸エチルに取る。５０％水性重炭酸ナトリウム溶液（７００ｍｌ）中のＥＤＴＡ（２ｇ）の溶液をその溶液に添加する。水相を酢酸エチル（１００ｍｌ）で５回抽出する。次いで、合わせた有機相を飽和水性重炭酸ナトリウム溶液で２回、飽和水性塩化ナトリウム溶液で２回洗浄する。全ての水相を別々に酢酸エチルで再抽出する。次いで、合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、高真空下で乾燥する。得られる生成物は、固体（１.０４ｇ、理論値の４９％、９６％ｅｅ）である。
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 7.8 分.
[α]20Na = +7.7°(c = 0.34、MeOH中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.69 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 3.87 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.17 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 208 (90), 269 (100), 325 (40) [M+H]+.
IR νmax (NaCl, cm-1): 2933, 1737, 1709, 1611, 1511, 1365, 1243, 1164, 1030.
【０２７８】
実施例８８Ａ
メチル（−）−（２Ｓ,３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチルチロシネート
【化９８】
2009533371.tif 000101
アルゴン保護気体雰囲気下、ラネーニッケル（約０.７ｇ）を、メタノール／ジクロロメタン１：１（１４０ｍｌ）中の実施例８５Ａ（５.２０ｇ、８.５６ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。反応混合物を加圧オートクレーブ中、水素圧８０ｂａｒ下、室温で水素化する（７２時間）。反応混合物をアルゴン保護気体雰囲気下、ガラスフリット／珪藻土層で濾過し、ガラスフリットをメタノールで数回洗浄する。濾液を真空で蒸発させ、酢酸エチルに取る。混合物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル３：１→１：３）で予精製し、分取ＨＰＬＣ（方法３１）により分離する。表題化合物（３２４ｍｇ、９１％ｅｅ、理論値の８％）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 9.3 分. 
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.69 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 3.84 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.17 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 208 (90), 269 (100), 325 (40) [M+H]+.
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO): δ = 1.37 (s, 9H, C(CH3)3), 3.53 (s, 3H, OCH3), 3.74 (s, 3H, OCH3), 4.26 (m, 1H, β-CH), 5.00 (t, J = 9.0 Hz, 1H, β-CH), 6.93 (d, J = 8.0 Hz, 2H, ArH), 7.23 (d, J = 8.0 Hz, 2H, ArH), 7.52 (d, J = 10.0 Hz, 1H, NH), 8.45 (br. s, 2H, NH2).
【０２７９】
実施例８９Ａ
メチル（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチルチロシネート
【化９９】
2009533371.tif 000102
アルゴン保護気体雰囲気下、ＮａＨＣＯ３（０.５８ｇ、６.９４ｍｍｏｌ、１.５当量）およびテトラ−Ｎ−ブチルアンモニウムヨージド（０.１７ｇ、０.４７ｍｍｏｌ、０.１当量）を、ジクロロメタン／水（１：２、１５０ｍｌ）中の実施例８６Ａ（１.５ｇ、４.６２ｍｍｏｌ）およびＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシスクシンイミドエステル（１２６８ｍｇ、５.０９ｍｍｏｌ、１.１当量）の溶液に０℃で添加する。反応混合物をゆっくりと温め（１２時間）、それにより完全な変換がＨＰＬＣ（方法１）で観察される。クエン酸（５％）の溶液をその溶液に添加する。水相をジクロロメタン（１００ｍｌ）で３回抽出する。次いで合わせた有機相を、飽和水性重炭酸ナトリウム溶液で２回、飽和水性塩化ナトリウム溶液で２回洗浄する。次いで、合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、高真空下で乾燥する。得られる生成物は、固体としての表題化合物（２.１ｇ、理論値の９９％）である。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.73 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.68 分.
IR νmax (NaCl, cm-1) : 3356, 1737, 1680, 1514, 1242, 1161, 1026, 1004.
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO): δ = 1.36 (s, 9H, C(CH3)3), 3.61 (s, 3H, OCH3), 3.73 (s, 3H, OCH3), 4.51 (dd, J = 9.5, 4.0 Hz, 1H, α-H/β-H), 4.94 (m, 2H, PhCH2O), 5.20 (dd, J = 10.0, 4.0 Hz, 1H, α-H/β-H), 6.87 (d, J = 8.5 Hz, 2H, ArH), 7.15-7.22 (m, 4H, ArH), 7.29-7.37 (m, 3H, ArH), 7.50 (d, J = 10.0 Hz, 1H, NH), 7.57 (d, J = 10.0 Hz, 1H, NH).
13C NMR (126 MHz, d6-DMSO): δ = 27.9, 51.9, 53.8, 54.9, 58.9, 65.4, 78.3, 113.5, 126.8, 127.3, 127.5, 127.7, 128.2, 130.9, 136.6, 154.6, 155.9, 158.2, 170.6.
HR-TOF-MS (方法 24): C25H30N2O7 [M+H]+ 実測値 459.2140, 計算値 459.2126.
【０２８０】
実施例９０Ａ
メチル（＋）−（２Ｒ,３Ｓ）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチルチロシネート
【化１００】
2009533371.tif 000103
実施例８７Ａ（１.０ｇ、３.０８ｍｍｏｌ）を、実施例８９Ａの製造方法と同様に反応させる（反応時間：１２時間）。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法３２）により精製する。表題化合物１.４ｇ（理論値の６１％、９６％ｅｅ）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 7.3 分.
[α]20Na = +4.0°(c = 0.17、MeOH中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.73 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.81 分.
IR νmax (NaCl, cm-1) : 3346, 1741, 1707, 1680, 1517, 1270, 1248, 1160, 1028, 1007.
LC-MS (方法 23): Rt = 2.63 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 298 (100), 459 (30) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 383 (100), 457 (10) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C25H30N2O7 [M+H]+ 実測値 459.2128, 計算値 459.2126.
【０２８１】
実施例９１Ａ
メチル（−）−（２Ｓ,３Ｒ）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチルチロシネート
【化１０１】
2009533371.tif 000104
実施例８８Ａ（０.３２ｇ、０.９８ｍｍｏｌ）を、実施例８９Ａの製造方法と同様に反応させる（反応時間：１２時間）。得られる生成物は、固体としての表題生成物（０.３８ｇ、理論値の８５％）である。
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 6.3 分.
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.73 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.81 分.
LC-MS (方法 23): Rt = 2.60 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 298 (100), 459 (70) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 383 (100), 457 (10) [M - H]-.
【０２８２】
実施例９２Ａ
（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチルチロシン
【化１０２】
2009533371.tif 000105
アルゴン保護気体雰囲気下、実施例８９Ａ（７５９ｍｇ、１.６９ｍｍｏｌ）の溶液を、ＴＨＦ／水２：１（１２ｍｌ）中に提供する。０℃で、激しく撹拌しながら、水酸化リチウム一水和物（８１ｍｇ、３.３９ｍｍｏｌ、２.０５当量）の水性溶液を、ゆっくりと滴下して添加する。混合物を室温でＨＰＬＣクロマトグラム（方法５）が完全な変換を示すまで撹拌する（約３時間）。リン酸水素カリウム（２２５ｍｇ）を続いて添加し、反応混合物を真空で濃縮し、酢酸エチル（１００ｍｌ）の層で覆う。次いで、水相を５％クエン酸（ｐＨ２−３）で酸性化し、次いで酢酸エチル（５０ｍｌ）で３回抽出する。合わせた有機相を飽和水性塩化ナトリウム溶液（２０ｍｌ）で２回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空で濃縮し、高真空下で乾燥する。表題化合物を得る（７３５ｍｇ、定量的）。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.45 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 2.33 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 389 (100), 445 (90) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 335 (60), 443 (100) [M - H]-.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ = 1.35 (s, 9H, C(CH3)3), 3.72 (s, 3H, OMe), 4.35-4.40 (m, 1H, α-H), 4.94 (s, 2H, PhCH2O), 5.19 (dd, J = 10.0, 4.0 Hz, 1H, β-H), 6.86 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17-7.34 (m, 7H, ArH), 7.44-7.48 (m, 2H, 2 NH), 12.9 (s, br, 1H, CO2H).
【０２８３】
実施例９３Ａ
（＋）−（３Ｓ）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチル−Ｄ−チロシン
【化１０３】
2009533371.tif 000106
方法Ａ：実施例９２Ａのエナンチオマーの混合物（７３５ｍｇ、２.８３ｍｍｏｌ）を、分取ＨＰＬＣ（方法４０）により分離する。表題化合物３１９ｍｇ（９９.５％ｅｅ、理論値の４３％）および他のエナンチオマー（実施例９４Ａ）３０７ｍｇ（９９.５％ｅｅ、理論値の４２％）を得る。
方法１６によるエナンチオマーの決定。
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 10.9 分.
[α]20Na = +8°(c = 0.04、MeOH中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.45 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 2.33 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 389 (100), 445 (90) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 335 (60), 443 (100) [M - H]-.
IR νmax (NaCl, cm-1) : 3358, 2978, 1705, 1683, 1615, 1515, 1245, 1167, 1027.
HR-TOF-MS (方法 24): C23H29N2O7 [M+H]+ 実測値 445.1976, 計算値 445.1970.
【０２８４】
方法Ｂ：実施例９３Ａ（１.３０ｇ、２.８３ｍｍｏｌ）を、実施例９２Ａの製造方法と同様に反応させる（反応時間：２Ｈ）。生成物として、表題化合物を固体生成物として得る（０.６１ｇ、理論値の４８％、９５％ｅｅ）。
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 10.9 分.
[α]20Na = +15°(c = 0.23、MeOH中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.41 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.54 分.
HR-TOF-MS (方法 24): C23H28N2O7Na [M + Na]+ 実測値 467.1788, 計算値 467.1794.
【０２８５】
実施例９４Ａ
（−）−（３Ｒ）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチル−Ｌ−チロシン
【化１０４】
2009533371.tif 000107
方法Ａ：実施例９３Ａの製造方法（方法Ａ）
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 13.3 分.
[α]20Na = -10°(c = 0.12、MeOH中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.45 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 2.33 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 389 (100), 445 (90) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 335 (60), 443 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C23H29N2O7 [M+H]+ 実測値 445.1976, 計算値 445.1970.
【０２８６】
方法Ｂ：実施例９０Ａ（０.３８ｇ、０.８４ｍｍｏｌ）を、実施例９２Ａの製造方法と同様に反応させる（反応時間：２時間）。生成物として、表題化合物を固体として得る（０.１３２ｇ、理論値の３５％、９４％ｅｅ）。
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 13.3 分.
[α]20Na = -5°(c = 0.1、MeOH中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.41 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.49 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.38 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 389 (100), 445 (100) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 335 (60), 443 (100) [M - H]-.
13C NMR (126 MHz, d6-DMSO): δ = 28.0, 53.9, 54.9, 58.8, 65.2, 78.2, 113.4, 127.2, 127.3, 127.6, 128.1, 128.2, 131.7, 136.8, 154.7, 156.0, 158.1, 171.4.
HR-TOF-MS (方法 24): C23H29N2O7 [M+H]+ 実測値 445.1966, 計算値 445.1970.
【０２８７】
実施例９５Ａ
２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル（１Ｓ,２Ｒ,５Ｒ）−［（３Ｓ）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］］−Ｏ−メチル−Ｄ−チロシネート
【化１０５】
2009533371.tif 000108
アルゴン保護気体雰囲気下、ジクロロメタン中の実施例９３Ａ（３４ｍｇ、７６μｍｏｌ、１当量）および（１Ｓ,２Ｒ,５Ｓ）−（＋）−メンソール（１２ｍｇ、７６μｍｏｌ、１当量）の溶液を提供する。０℃で、ＤＭＡＰ（１７.３ｍｇ、８４μｍｏｌ、１.１当量）を添加し、ジクロロメタン（０.５ｍｌ）中のＤＣＣ（１７.３ｍｇ、８４μｍｏｌ、１.１当量）の溶液を、ゆっくりと滴下して添加する。混合物を室温でＨＰＬＣクロマトグラム（方法５）が完全な変換を示すまで撹拌する（約２時間）。続いて反応混合物を珪藻土で濾過し、真空で濃縮し、酢酸エチル／石油エーテル３：１を添加する。白色固体沈殿を濾過により除去する。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル３：１）で予精製する。精製は分取ＨＰＬＣ（方法４３）による。表題化合物（１７ｍｇ、理論値の３８％）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 5.74 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 5.72 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.46 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 483 (100), 527 (80), 583 (40) [M+H]+.
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO): δ = 0.71 (d, 3H, J =7 Hz, CH3), 0.81 (d, 3H, J =7 Hz, CH3), 0.81-0.84 (m, 3H), 0.87 (d, 3H, J =7 Hz, CH3), 1.00-1.06 (m, 1H), 1.22-1.28 (m, 1H), 1.35 (s, 9H, C(CH3)3), 1.61-1.70 (m, 3H), 1.89-1.92 (m, 1H), 3.72 (s, 3H, OMe), 4.49 (dd, 1H, J = 4.5, 9.5 Hz, β-H), 4.59 (dt, J = 4.0, 11.0 Hz, 1H, O-CH), 4.91 (d, J = 12.0 Hz, 1H, PhCH2O), 4.97 (d, J = 12.0 Hz, 1H, PhCH2O), 5.17 (dd, J = 4.5, 9.5 Hz, 1H, β-H), 6.86 (d, 2H, J = 9.0 Hz, ArH), 7.16-7.24 (m, 4H, ArH), 7.28-7.34 (m, 3H, ArH), 7.46 (d, 1H, J = 8.0 Hz, NH), 7.55 (d, 1H, J = 8.0 Hz, NH).
【０２８８】
実施例９６Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル（＋）−（３Ｓ）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチル−Ｄ−チロシネート
【化１０６】
2009533371.tif 000109
乾燥ジクロロメタンｐ.ａ.（１０ｍｌ）中の実施例９３Ａ（２６１ｍｇ、０.５９ｍｍｏｌ）、２−（トリメチルシリル）エタノール（６９４ｍｇ、５.８７ｍｍｏｌ、１０当量）および４Åモレキュラー・シーブ（約２０ｍｇ）の混合物を、アルゴン保護気体雰囲気下、室温で１０分間撹拌する。続いて、−３０℃で、ＤＣＣ（２４４ｍｇ、１.１７ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＭＡＰ（７１ｍｇ、０.５９ｍｍｏｌ、１当量）を添加する。反応混合物を解凍し（約１２時間）、室温でＨＰＬＣクロマトグラム（方法５）が完全な変換を示すまで撹拌する（１２時間）。反応混合物を真空で、室温で蒸発させ、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル３：１）により精製する。表題化合物２４４ｍｇ（理論値の７６％、９９％ｅｅ）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 8.2 分.
[α]20Na = +10°(c = 0.1、MeOH中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 5.34 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 5.42 分.
IR νmax (NaCl, cm-1): 3361, 2931, 2118, 1735, 1706, 1681, 1515, 1247, 1165, 1019.
LC-MS (方法 21): Rt = 3.16 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 166 (100), 545 (15) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C28H41N2O7Si [M+H]+ 実測値 545.2678, 計算値 545.2678.
【０２８９】
実施例９７Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル（−）−（３Ｒ）−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｏ−メチル−Ｌ−チロシネート
【化１０７】
2009533371.tif 000110
実施例９４Ａ（１３０ｍｇ、０.２９ｍｍｏｌ）を、実施例９６Ａの製造方法と同様に反応させる（反応時間：１２時間）。生成物として、表題化合物を固体として得る（１４９ｍｇ、理論値の９４％、＞９９.５％ｅｅ）。
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 7.2 分.
[α]20Na = -9°(c = 0.1、MeOH中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 5.34 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 5.32 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.24 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 545 (100) [M+H]+.
【０２９０】
実施例９８Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル（＋）−（３Ｓ）−３−アミノ−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｏ−メチル−Ｄ−チロシネートトリフルオロ酢酸塩
【化１０８】
2009533371.tif 000111
実施例９６Ａ（２２２ｍｇ、０.４１ｍｍｏｌ、１当量）を、ジクロロメタン（３ｍｌ）に懸濁し、続いて、アルゴン保護気体雰囲気下、トリフルオロ酢酸（９ｍｌ）を添加し、混合物を室温で１５分間、ＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換を示すまで撹拌する（方法５）。次いで、溶媒を真空で留去し、その間に浴温度は３０℃を超えるべきではない。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法４３）により精製する。表題化合物１７９ｍｇ（理論値の７９％、＞９９.５％ｅｅ）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 8.66 分.
[α]20Na = +20°(c = 0.22、MeOH中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.33 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.55 分.
IR νmax (NaCl, cm-1): 2956, 1672, 1613, 1518, 1251, 1181, 1138, 1029.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.18 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 225 (100), 549 (100) [M+H]+.
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO): δ = -0.07 (s, 9H, Si(CH3)3), 0.43-0.52 (m, 2H, CH2Si), 3.75 (s, 3H, OMe), 3.74-3.78 (m, 1H, CH2CH2Si), 3.82-3.88 (m, 1H, CH2CH2Si), 4.38-4.42 (m, 1H, β-H), 4.58 (tapp, J = 約9.0 Hz, 1H, α-H), 5.08 (s, 2H, PhCH2O), 6.98 (d, 2H, J = 8.5 Hz, ArH), 7.34-7.40 (m, 8H, ArH), 8.07 (d, 1H, J = 8.0 Hz, NH), 8.49 (s, br, 2H, 2 NH).
13C NMR (125 MHz, d6-DMSO): δ = -1.8 (3C, (Si(CH3)3)), 16.3 (CH2Si), 54.5 (Cβ), 55.1 (Cα), 57.7 (OMe), 62.9 (CH2CH2Si), 66.0 (PhCH2O), 113.9 (2C), 125.3, 127.8 (2C), 127.9, 128.3 (2C), 129.4 (2C), 136.4, 155.8 (CO2Bn), 159.9, 168.9 (CO2TMSE).
HR-TOF-MS (方法 24): C23H33N2O5Si [M+H]+ 実測値 445.2168, 計算値 445.2154.
【０２９１】
実施例９９Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル（−）−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ２−［ベンジルオキシカルボニル］−Ｏ−メチル−Ｌ−チロシネートトリフルオロ酢酸塩
【化１０９】
2009533371.tif 000112
実施例９６Ａ（１２０ｍｇ、０.２２ｍｍｏｌ）を、実施例９８Ａの製造方法と同様に反応させる（反応時間：５０分間）。生成物として、表題化合物を固体として得る（７１ｍｇ、理論値の５６％、＞９９.５％ｅｅ）。
HPLC/UV-Vis (方法 16): Rt = 7.49 分.
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.33 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.50 分.
IR νmax (NaCl, cm-1): 2956, 1672, 1613, 1518, 1251, 1181, 1138, 1029.
HR-TOF-MS (方法 24): C23H33N2O5Si [M+H]+ 実測値 445.2151, 計算値 445.2154.
【０２９２】
実施例１００Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化１１０】
2009533371.tif 000113
方法Ａ：アルゴン保護気体雰囲気下、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（３６９ｍｇ、１.６９ｍｍｏｌ、２.５当量）およびＮ−メチルモルホリン（６８ｍｇ、６８０μｍｏｌ、１当量）を、水−ジオキサン１：２（３０ｍｌ）中の実施例３Ａ（６９０ｍｇ、６８０μｍｏｌ）の分解産物の溶液に添加する。反応混合物をＨＰＬＣクロマトグラム（方法１）が完全な変換を示すまで撹拌する（約４８時間）。リン酸二水素カリウム（５当量）を反応混合物に添加し、混合物を真空で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法４３または方法３０、続いて、ＴＦＡ（２０００μｍｏｌ、アセトニトリル−水１：１中の０.０５％溶液として）の添加によるクロマトグラフィー生成物の塩のメタセシス）により精製する。表題化合物５３１ｍｇ（理論値の７０％）を得る。
【０２９３】
方法Ｂ：Edman3.0 前駆体トリフルオロ酢酸塩（１００ｍｇ、０.１ｍｍｏｌ、１当量）を、最初にゲルクロマトグラフィーする（方法４５、ＭｅＯＨ、０.２％ＴＦＡ）。ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（４３ｍｇ、０.２ｍｍｏｌ、２当量）を、水（１ｍｌ）およびジオキサン（２ｍｌ）中のこの物質の溶液に室温で添加し、ＮＭＭ（２１.６μｌ、０.２ｍｍｏｌ、２当量）を滴下して添加する。反応混合物を室温で、分析的ＨＰＬＣ監視（方法８）が十分な変換（＞９９％）を示すまで撹拌する（約１２時間）。リン酸二水素カリウム（６７ｍｇ、０.４９ｍｍｏｌ、５当量）を添加し、反応混合物をロータリーエバポレーターで濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（方法２６）により入念に精製する。表題化合物８３ｍｇ（理論値の７６％）を得る。
[α]20Na = -18.0°(c = 0.19 、メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rt = 1.7 分.
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.57 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 3.79 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.70 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 453 (100), 1005 (80) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1003 (100) [M - H]-.
LC-MS (方法 23): Rt = 4.6 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 453.5 (60) [M - C4H8 - CO2 + 2H]2+, 1006 (100) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1004 (100) [M - H]-.
IR νmax (NaCl, cm-1): 3288, 2966, 2359, 2341, 1645, 1520, 1368, 1160, 1137, 1054.
【０２９４】
1H NMR (500 MHz, d5-ピリジン) δ = 9.72 (br. s, 1H, NH-Glu6), 9.31 (br d, J = 約 7.0 Hz, 1H, NH-Arg3), 9.23 (d, J = 6.0 Hz, 1H, NH-Leu2), 9.19 (br. s, 1H, εNH-Arg3), 9.00 (d, J = 9.0 Hz, 1H, NH-βOH-Asn7), 8.88 (d, J = 7.0 Hz, 1H, NH-Thr5), 8.78 (d, J = 7.0 Hz, 1H, NH-Ile4), 8.64 (d, J = 7.5 Hz, 1H, NH-Ser8), 8.40 (br. s, 1H, NH2-βOH-Asn7), 8.34 (br. s, 1H, NH2-βOH-Asn7), 5.96 (d, J = 8.0 Hz, 1H, αCH-βOH-Asn7), 5.51 (s, 1H, βCH-βOH-Asn7), 5.11-5.09 (m, 1H, αCH-Ser8), 5.04 (t, J = 7.5 Hz, 1H, αCH-Thr5), 4.95-4.91 (m, 3H, αCH-Arg3 および αCH-βOH-Leu1 および αCH-Leu2), 4.82 (t, J = 7.0 Hz, 1H, αCH-Ile4), 4.71-4.66 (m, 1H, βCH-Thr5), 4.44 (dd, J = 4.5 および 10.5 Hz, 1H, βCH-Ser8), 4.31-4.26 (m, 3H, βCH-Ser8 および βCH-βOH-Leu1 および αCH-Gly6), 4.20 (dd, J = 6.0 および 16.5 Hz, 1H, αCH-Gly6), 3.43 (br d, J = 約 6.0 Hz, 2H, δCH-Arg3), 2.39-2.36 (m, 2H, βCH-Arg3 および βCH-Ile4), 2.27-2.20 (m, 1H, βCH-Arg3), 2.10-2.05 (m, 2H, γCH-βOH-Leu1 および γCH-Arg3), 1.93-1.79 (m, 4H, βCH-Leu2, γCH-Leu2, γCH-Arg3 および γCH-Ile4), 1.55 (d, J = 6.0 Hz, 3H, γCH3-Thr5), 1.45 (s, 9H, O-tBu), 約 1.47 (hidden, 1H, γCH-Ile4), 1.17-1.15 (m, 4H, δCH3-βOH-Leu1 および γCH-Ile4), 1.05 (d, J = 6.0 Hz, 3H, δCH3-βOH-Leu1), 1.05 (t, J = 7.0 Hz, 3H, δCH3-Ile4), 0.80 (d, J = 6.0 Hz, 3H, δCH3-Leu2), 0.78 (d, J = 6.0 Hz, 3H, δCH3-Leu2).
13C NMR (125 MHz, d5-ピリジン) δ = 175.58 (γCO-βOH-Asn7), 174.23 (CO-βOH-Leu1), 173.97 (CO-Arg3), 173.89 (CO-Ser8 または CO-Leu2), 173.69 (CO-Thr5), 173.55 (CO-Ser8 または CO-Leu2), 172.48 (CO-Ile4), 170.90 (CO-βOH-Asn7), 170.50 (CO-Gly6), 158.67 (ζC-Arg3), 157.06 (CO-Boc), 79.13 (C-Boc), 77.09 (βCH-βOH-Leu1), 72.29 (βCH-βOH-Asn7), 68.32 (βCH-Thr5), 63.24 (βCH-Ser8), 59.79 (αCH-Ile4), 59.60 (αCH-Thr5), 58.35 (αCH-βOH-Leu1), 57.11 (αCH-βOH-Asn7), 56.94 (αCH-Ser8), 54.06 (αCH-Arg3), 53.60 (αCH-Leu2), 44.32 (αCH2-Gly6), 41.75 (δCH2-Arg3), 40.41 (βCH2-Leu2), 36.70 (βCH-Ile4), 31.56 (γCH-βOH-Leu1), 29.47 (βCH2-Arg3), 28.48 (Me3-Boc), 26.11 (γCH-Arg3), 25.74 (γCH2-Ile4), 24.93 (γCH-Leu2), 22.94 (δCH3-Leu2), 21.71 (δCH3-Leu2), 21.20 (γCH-Thr5), 19.48 (δCH3-βOH-Leu1), 19.43 (δCH3-βOH-Leu1), 16.02 (γCH-Ile4), 11.20 (δCH3-Ile4).
HR-TOF-MS (方法 24): C42H77N12O16 [M+H]+ 実測値 1005.5560, 計算値 1005.5576.
【０２９５】
実施例１０１Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｓ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｄ−チロシン（２−（トリメチルシリル）エチル）エステルトリフルオロ酢酸塩
【化１１１】
2009533371.tif 000114
アルゴン保護気体雰囲気下、最初にＨＡＴＵ（２.５当量、７１ｍｇ、１８６μｍｏｌ）を、乾燥ジメチルホルムアミド（０.５ｍｌ）中の実施例９８Ａ（１.２当量、５０ｍｇ、８９μｍｏｌ）、オクタペプチド酸（実施例１００Ａ、１.０当量、８３ｍｇ、７５μｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（３.５当量、２９μｍｏｌ）の溶液に０℃で添加する。反応混合物を０℃で撹拌する（約３時間）。次いで、反応混合物はアミン成分の完全な変換を示す（ＨＰＬＣ監視、方法５）。固体のリン酸二水素カリウム（１０１ｍｇ、７４６μｍｏｌ、１０当量）を反応混合物に添加し、混合物を濾過し、次いで高真空下で蒸発させ、クロマトグラフィー（方法４３）により精製する。生成物９６.５ｍｇ（理論値の８４％）を得る。
[α]20Na = -6°(c = 0.04、メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.47 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.88 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.26 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 652 (100), 1432 (50) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1430 (100) [M - H]-. 
HR-TOF-MS (方法 24): C65H107N14O20Si [M+H]+ 実測値 1431.7570, 計算値 1431.7550.
【０２９６】
実施例１０２Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｌ−チロシン（２−（トリメチルシリル）エチル）エステルトリフルオロ酢酸塩
【化１１２】
2009533371.tif 000115
実施例９９Ａ（６５ｍｇ、０.１１６ｍｍｏｌ）を、実施例１０１Ａの製造方法と同様に反応させる（反応時間：１５０分間）。生成物として、表題化合物を固体として得る（１１１ｍｇ、理論値の７４％）。
[α]20Na = -17°(c = 0.09、メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.47 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.87 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.16 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 652 (100), 1432 (60) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1430 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C65H107N14O20Si [M+H]+ 実測値 1431.7509, 計算値 1431.7550.
【０２９７】
実施例１０３Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｓ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｄ−チロシントリフルオロ酢酸塩
【化１１３】
2009533371.tif 000116
実施例１０１Ａ（９６ｍｇ、６２μｍｏｌ）を、乾燥ＴＨＦ（４ｍｌ）中にアルゴン保護気体雰囲気下で提供する。室温で激しく撹拌しながら、１Ｎ ＴＢＡＦ−ＴＨＦ溶液（３１０μｌ、５当量）を滴下して添加する。さらなる分量のＴＢＡＦ（各５当量）を、３０分間の規則的な間隔で添加する。約４５当量の後、ＨＰＬＣクロマトグラム（方法５）は完全な変換を示す。次いで、反応混合物をリン酸二水素カリウム（２５３ｍｇ、約３０当量）で中和する。反応混合物を濾過し、真空で蒸発させ、分取ＨＰＬＣ（方法４３）により精製する。表題化合物８３ｍｇ（理論値の９３％）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.93 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.27 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.00 分; MS (ESIpos.): m/z (%) =616 (100), 1332 (20) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1330 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C60H95N14O20 [M+H]+ 実測値 1331.6844, 計算値 1331.6842.
【０２９８】
実施例１０４Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３アミノ−Ｏ−メチル−Ｌ−チロシントリフルオロ酢酸塩
【化１１４】
2009533371.tif 000117
実施例１０２Ａ（１０５ｍｇ、０.０６８ｍｍｏｌ）を、実施例１０３Ａの製造方法と同様に反応させる（全部で４５当量のＴＢＡＦ）。生成物として、表題化合物を固体として得る（９０ｍｇ、理論値の９９％）。
[α]20Na = -9°(c = 0.135、メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.93 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.15 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.80 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 616 (100), 1332 (40) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 664 (60), 1330 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C60H95N14O20 [M+H]+ 実測値 1331.6840, 計算値 1331.6842.
【０２９９】
実施例１０５Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｓ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｄ−チロシントリフルオロ酢酸塩
【化１１５】
2009533371.tif 000118
方法１に従い、実施例１０３Ａ（１０ｍｇ、７μｍｏｌ）をアルゴン保護気体雰囲気下で反応させる。表題化合物９.３ｍｇ（理論値の９９.９％）を、凍結乾燥後に得る。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.47 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.50 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 616 (100), 1232 (5) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1230 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C55H87N14O18 [M+H]+ 実測値 1231.6300, 計算値 1231.6318.
【０３００】
実施例１０６Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｌ−チロシン
【化１１６】
2009533371.tif 000119
手順１に従い、実施例１０４Ａ（２４０ｍｇ、１６６μｍｏｌ）をアルゴン保護気体雰囲気下で反応させる。表題化合物１１６ｍｇ（理論値の５７％）を凍結乾燥後に得る。
[α]20Na = -24°(c = 0.07、メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.47 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 3.83 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.51 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 616 (100), 1232 (5) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1230 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C55H87N14O18 [M+H]+ 実測値 1231.6361, 計算値 1231.6318.
【０３０１】
実施例１０７Ａ
Ｎ２.１−（ベンジルオキシカルボニル）−［（３Ｓ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｄ−チロシル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化１１７】
2009533371.tif 000120
ＨＡＴＵ（１.５ｍｇ、８μｍｏｌ、５当量）を、最初に乾燥ＤＭＦ（２００μｌ）中の実施例１０５Ａ（１.９ｍｇ、２μｍｏｌ、１当量）およびＮＭＭ（１.７μｌ、１５μｍｏｌ、１０当量）の溶液に、０℃、アルゴン保護気体雰囲気下で添加する。反応混合物を０℃で撹拌する（約９０分間）。次いで、反応混合物は、アミン成分の完全な変換を示す（ＨＰＬＣ監視、方法５）。固体のリン酸二水素カリウム（２０当量、４.２ｍｇ、３１μｍｏｌ）を添加し、反応混合物を濾過し、次いで高真空下で蒸発させ、クロマトグラフィー（方法４５）により精製する。生成物１.８ｍｇ（理論値の９６％）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.65 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 3.91 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.67 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 1214 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C55H85N14O17 [M+H]+ 実測値 1213.6232, 計算値 1213.6312.
【０３０２】
実施例１０８Ａ
Ｎ２.１−（ベンジルオキシカルボニル）−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｌ−チロシル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化１１８】
2009533371.tif 000121
実施例１０６Ａ（１２０ｍｇ、０.０９７ｍｍｏｌ）を、実施例１０７Ａの製造方法と同様に反応させる（反応時間１時間）。表題化合物を固体として得る（３９ｍｇ、理論値の３３％）。
[α]20Na = -58°(c = 0.07、メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.71 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 3.98 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.74 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 1214 (100) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1212 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C55H85N14O17 [M+H]+ 実測値 1213.6227, 計算値 1213.6312.
【０３０３】
実施例１０９Ａ
［（３Ｓ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｄ−チロシル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化１１９】
2009533371.tif 000122
実施例１０７Ａ（６５ｍｇ、４９μｍｏｌ）を、メタノール（５ｍｌ）に溶解し、アルゴン保護気体雰囲気下、１０パーセントパラジウム−炭素（１０ｍｇ）および水性１Ｎ塩酸（２５０μｌ）を添加する。水素化を室温、大気圧下で、分析的ＨＰＬＣ（方法５）が完全な変換を示すまで（約９０分間）実施する。反応混合物を濾過し（珪藻土、Celite（登録商標）またはシリンジフィルター、Biotage、ＰＴＦＥ）、真空で濃縮し、クロマトグラフィー（方法４３）により精製する。表題化合物４０.６ｍｇ（理論値の６３％）を得る。
[α]20Na = -21°(c = 0.06、メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.28 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 3.55 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.20 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 540 (100), 1079 (20) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1077 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C47H78N14O15 [M+H]+ 実測値 1079.5835, 計算値 1079.5844.
【０３０４】
実施例１１０Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｌ−チロシル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化１２０】
2009533371.tif 000123
実施例１０８Ａ（１２ｍｇ、９μｍｏｌ）を、実施例１０９Ａの製造方法と同様に反応させる（反応時間９０分間）。生成物として、表題化合物を固体として得る（１０.３ｍｇ、理論値の８７％）。
[α]20Na = -52°(c = 0.03、メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.18 分. 
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 3.52 分. 
LC-MS (方法 18): Rt = 1.25 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 540 (100), 1079 (5) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1077 (100) [M - H]-.
【０３０５】
実施例１１１Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｓ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｄ−チロシル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化１２１】
2009533371.tif 000124
ＨＡＴＵ（２.２ｍｇ、６μｍｏｌ、２.５当量）を、最初に乾燥ＤＭＦ（１ｍｌ）中の実施例１０９Ａ（３.０ｍｇ、２μｍｏｌ、１.０当量）、ジペプチド酸（実施例１０Ａ、２.３ｍｇ、６μｍｏｌ、２.５当量）およびＮＭＭ（１１μｍｏｌ、５当量）の溶液に、−３０℃で、アルゴン保護気体雰囲気下で添加する。反応混合物を撹拌し、ゆっくりと０℃に温める（約１時間）。ＮＭＭ（各回６μｍｏｌ、２.５当量）およびＨＡＴＵ（各回６μｍｏｌ、２.５当量）を反応混合物に規則的な間隔（３０分間）で、ＨＰＬＣ監視（方法５）がアミン成分の完全な変換を示すまで添加する。このために、全部で約２０当量のＮＭＭおよびＨＡＴＵが必要である。固体のリン酸二水素カリウム（９.４ｍｇ、６９μｍｏｌ、３０当量）を添加し、反応混合物を濾過し、次いで高真空下で蒸発させ、クロマトグラフィー（方法４３）により精製する。生成物２ｍｇ（理論値の５５％）を得る。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.2 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 4.49 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.07 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 734 (100) [M + 2H]2+, 1468 (20) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 678 (100), 732 (5) [M - 2H]2−, 1466 (10) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C69H111N16O19 [M+H]+ 実測値 1467.8228, 計算値 1467.8206.
【０３０６】
実施例１１２Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｌ−チロシル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化１２２】
2009533371.tif 000125
実施例１０９Ａの化合物（３０ｍｇ、２３μｍｏｌ）および例示的化合物１０Ａ（２３.３ｍｇ、５７μｍｏｌ、２.５当量）から、実施例１１１Ａと同様に製造。粗生成物をクロマトグラフィー（方法４３）により精製し、それにより、凍結乾燥後、生成物２５ｍｇ（理論値の６９％）を固体として得る。
[α]20Na = -62°(c = 0.06、メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 4.4 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.31 分.
MS (ESIpos.): m/z (%) = 734 (100) [M + 2H]2+, 1468 (20) [M+H]+;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 678 (70), 733 (100) [M - 2H]2−, 1466 (10) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C69H111N16O19 [M+H]+ 実測値 1467.8206, 計算値 1467.8206.
【０３０７】
実施例１１３Ａ
３−アミノ−３−（４−ブロモフェニル）プロピオン酸
【化１２３】
2009533371.tif 000126
４−ブロモベンズアルデヒド（５０.０ｇ、２７０ｍｍｏｌ）、マロン酸（２８.１ｇ、２７０ｍｍｏｌ）および酢酸アンモニウム（２７.７ｇ、３５９ｍｍｏｌ、１.３当量）を、エタノール（４００ｍｌ）に溶解する。混合物を還流で１６時間加熱する。得られる固体をガラスフィルター漏斗に回収し、吸引濾過で回収し、エタノールで洗浄する。次いで、残渣をメタノール（８０ｍｌ）から再結晶する。それを続いて酢酸エチルでトリチュレートし、吸引濾過により回収する。表題化合物４１.０ｇ（０.１６ｍｍｏｌ、理論値の６２％）を無色結晶性固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.13 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 0.97 分, MS (ESIneg.): m/z (%) = 242.0 (100) および 244.0 (80) [M - H]-.
1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ = 2.36-2.38 (m, 2H, 2-H), 4.25 ("t", J = 6.8, 7.6 Hz, 2H, 3-H), 6.56 (d, J = 16.1 Hz, 1H, N-H), 7.38 (d, J = 8.5 Hz, 1H, N-H), 7.52-7.71 (m, 4H, arom. H).
13C-NMR (126 MHz, DCOOD) δ = 36.5 (CH2, C-2), 51.9 (CH, C-3), 123.7 (C 四重線), 129.2 (CH), 132.4 (CH), 133.5 (C 四重線), 174,0 (C 四重線, C-1).
HR-TOF-MS (方法 24): C9H11NO2Br [M+H]+ 計算値 243.9968, 実測値 243.9980.
【０３０８】
実施例１１４Ａ
メチル３−アミノ−３−（４−ブロモフェニル）プロピオネート塩酸塩
【化１２４】
2009533371.tif 000127
化合物１１３Ａ４１.０ｇ（１５７ｍｍｏｌ）を、メタノール（１０００ｍｌ）にアルゴン保護気体雰囲気下で懸濁する。１,４−ジオキサン中の４Ｍ塩酸１０２ｍｌ（４１０ｍｍｏｌ、２.６当量）を添加する。出発物質は塩酸の添加で自然に溶解し、混合物を室温で終夜撹拌する。次いで、混合物を真空で濃縮乾固する。生成物（５１.８ｇ、純度約６９％、収率理論値の７７％）を固体として得、これ以上精製せずに次の段階で用いる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.35 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.24 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 240.9 (20) および 242.8 (20) [M - NH2 + H]+.
1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ = 2.99 (dd, J2,3 = 8.7 Hz, J2,2 = 16.4 Hz, 1H, 2-HA), 3.16 (dd, J2,3 = 4.0 Hz, J2,2 = 16.4 Hz, 1H, 2-HB), 3.56 (s, 3H, OCH3), 4.62 (br. s, 1H, 3-H), 7.49 (d, J = 8.5 Hz, 2H, 2'-H), 7.65 (d, J = 8.5 Hz, 2H, 2'-H), 8.64 (br. s, 2 時間, NH2).
13C-NMR (126 MHz, CDCl3) δ = 43.8 (CH2, C-2), 51.8 (CH3, OCH3), 52.1 (CH, C-3), 121.2 (C 四重線, C-4'), 128.0 (CH, C-arom.), 131.7 (CH, C-arom.), 143.6 (C 四重線, C-1'), 172.2 (C 四重線, C-1).
HR-TOF-MS (方法 24): C10H13NO2Br [M+H]+ 計算値 258.0125, 実測値 258.0119.
【０３０９】
実施例１１５Ａ
メチルＮ−ブトキシカルボニル−３−アミノ−３−（４−ブロモフェニル）プロピオネート
【化１２５】
2009533371.tif 000128
化合物１１４Ａ（５１.８ｇ、１２１ｍｍｏｌ、６９％純度）を１,４−ジオキサン／水（２：１、５４０ｍｌ）に溶解する。ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（２９.１ｇ、１３３ｍｍｏｌ、１.１当量）およびトリエチルアミン（３８.８ｍｌ、２８.２２ｇ、２.３当量）を添加し、混合物を室温で１５０分間撹拌する。ジオキサンを真空で留去し、酢酸エチル１５０ｍｌおよび飽和水性重炭酸ナトリウム溶液２００ｍｌを添加する。生成物１１５Ａの一部は自然に沈殿し、それを濾過により単離する。濾液の相を分離し、有機相を０.５Ｍクエン酸で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。さらに、メタノールでトリチュレートすることにより、画分１１５Ａを残渣から得る。総収量：固体としての表題化合物３２.９ｇ（９２ｍｍｏｌ、理論値の７６％）
HPLC (方法 5): Rt = 4.80 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.37 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 358.0 (15) および 360.0 (15) [M+H]+.
1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ = 1.34 (s, 9H, COC(CH3)3), 2.62-2.79 (m, 2H, 2-H), 3.55 (s, 3H, OCH3), 4.87 (dd, J1 = 7.9 Hz, J2 = 15.1 Hz, 1H, 3-H), 7.26 (d, J2', 3' = 8.3 Hz, 2H, 2'-H), 7.51 (d, J2', 3' = 8.3 Hz, 2H, 3'-H).
13C-NMR (126 MHz, CDCl3) δ = 28.3 (CH3, COC(CH3)3), 40.4 (CH2, C-2), 50.6 (CH, C-3), 51.9 (CH3, OCH3), 79.9 (C 四重線, COC(CH3)3), 121.4 (C 四重線, C-4'),127.9 (CH, C-arom.), 131.7 (CH, C-arom.), 140.3 (C 四重線, C-1'), 155.0 (C 四重線, COC(CH3)3, 171.2 (C 四重線, C-1).
HR-TOF-MS (方法 24): C15H21NO4Br [M+H]+ 計算値 358.0649, 実測値 358.0659.
【０３１０】
実施例１１６Ａ
メチル（Ｓ）−Ｎ−ブトキシカルボニル−３−アミノ−３−（４−ブロモフェニル）プロピオネート
【化１２６】
2009533371.tif 000129
ラセミ化合物１１５Ａを、表題化合物（９６％ｅｅ）および他方のエナンチオマー（＞９９％ｅｅ）に、キラルＨＰＬＣ（方法４２）により分離する。１１５Ａ７５０ｍｇを実施毎に負荷する。（Ｓ）エナンチオマー（実施例１１６Ａ）および（Ｒ）エナンチオマーを、各場合で理論値の５０％で定量的に単離する。
方法１７エナンチオマーの決定。
HPLC/UV-VIS (方法 17): Rt = 4.31 分. (表題化合物)
[α]20Na = -38.6 (c = 1.0, MeOH). (表題化合物)
HPLC/UV-VIS (方法 17): Rt = 3.82 分. (さらなるエナンチオマー)
[α]20Na = + 36.8 (c = 1.0, MeOH). (さらなるエナンチオマー)
【０３１１】
実施例１１７Ａ
メチル（Ｓ）−Ｎ−ブトキシカルボニル−３−アミノ−３−（４−ジメチルアミノフェニル）プロピオネート
【化１２７】
2009533371.tif 000130
この反応を実施するとき、酸素および水分を厳密に排除し、反応物を乾燥アルゴン保護気体雰囲気下に維持する注意を払わねばならない。なぜなら、そうしないと、不十分な変換しか起こらないからである。マイクロ波のサイズがバッチのサイズを限定するので、より大きい量は、実施例１１６Ａ約７ｍｍｏｌずつに分割し、連続的に処理する。
実施例１１６Ａ（２.５ｇ、６.９８ｍｍｏｌ）、ジメチルアミン（１Ｍ、ＴＨＦ中、１６ｍｌ、３２ｍｍｏｌ、４.６当量）、ＸＰＨＯＳ（０.４ｇ、０.８４ｍｍｏｌ、０.１２当量）、炭酸セシウム（３.２ｇ、９.７５ｍｍｏｌ、１.４当量）およびビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（０.２０ｇ、０.３５ｍｍｏｌ、０.０５当量）を、アルゴン保護気体雰囲気下、２０ｍｌのマイクロ波反応容器中で混合し、圧着密閉（crimp-sealed）する。混合物をマイクロ波反応器（Emrys Optimizer Single-Mode 実験用マイクロ波反応器）中で、１７０℃で１時間加熱する。冷却後、水および酢酸エチルで抽出を実施し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥する。溶媒を除去し、残渣をメタノールに溶解し、溶液を濾過し、濾液を濃縮する。１１７Ａを収量２.０ｇ（６.１９ｍｍｏｌ、理論値の８９％）で、さらなる反応に十分な純度で得る。
分析目的で、実施例１１７Ａのサンプルを分取ＨＰＬＣ（方法３３）により入念に精製する。
HPLC (方法 5): Rt = 3.60 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.84 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 323.3 (100) [M+H]+.
[α]20Na = -31.0 (c = 1.0, MeOH).
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ = 1.35 (s, 9H, COC(CH3)3), 2.63 (dd, J2,3 = 6.6 Hz, Jgem = 15.5 Hz, 1H, 2-HA), 2.72 (dd, J2,3 = 8.8 Hz, Jgem = 15.5 Hz, 1H, 2-HB), 2.93 (s, 6H, N(CH3)2), 3.54 (s, 3H, OCH3), 4.84 (m, 1H, 3-H), 6.88 (br. s, 2H, 2'-H), 7.20 (d, J2',3' = 8.3 Hz, 2H, 3'-H), 7.36 (d, J = 8.8 Hz, 1H, N-H).
13C-NMR (126 MHz, CDCl3) δ = 28.3 (CH3, COC(CH3)3), 40.3 (CH2, C-2), 44.9 (CH3, N(CH3)2), 50.3 (CH, C-3), 52.0 (CH3, OCH3), 80.1 (COC(CH3)3), 119.1 (CH, C-3'), 128.0 (CH, C-2'), 140.3 (C 四重線, C-1'), 144.1 (C 四重線, C-4'), 155.1 (C 四重線, COC(CH3)3), 171.2 (C 四重線, C-1).
HR-TOF-MS (方法 24): C17H27N2O4 [M+H]+ 計算値 322.1893, 実測値 322.1890.
【０３１２】
実施例１１８Ａ
メチル（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−（４−ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニネートと混ざったメチル（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−（４−ジメチルアミノフェニル）−Ｄ−アラニネート
【化１２８】
2009533371.tif 000131
ＴＨＦ中の１Ｍ ＬＨＭＤＳ−溶液（２１.３ｍｌ、２１.２９ｍｍｏｌ、２.２当量）を、無水ＴＨＦ７０ｍｌにアルゴン保護気体雰囲気下で添加し、−７８℃に冷却する。ＴＨＦ（３５ｍｌ）中の化合物１１７Ａ（３.１ｇ、９.６８ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、溶液を−２５℃に温め、次いでその温度でそれをさらに１０分間撹拌する。次いで混合物を再度−７８℃に冷却し、ジベンジルアザジカルボキシレート（３.２ｇ、１０.６５ｍｍｏｌ、１.１当量）を全部一度に添加し、混合物を３時間撹拌する。終了時に、反応を酢酸（２.８ｍｌ、４８.３９ｍｍｏｌ、５当量）で、−７８℃で停止し、さらに１５分間この温度で撹拌する。室温に温めた後、水性濃重炭酸ナトリウム溶液を添加し、数回に分けて酢酸エチルで抽出を実施する。合わせた有機抽出物を水性飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。無定形の橙色ないし茶色の残渣をジエチルエーテル層で覆い、数時間静置する。実施例１１８Ａの生成物の一部は、この時間中に結晶形で析出する。残りの実施例１１８Ａの生成物を、濾液からフラッシュクロマトグラフィー（Biotage 40M シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル３：１）およびジエチルエーテルの存在下での再度の結晶化により単離でき、生成物は、実施例１１９Ａのジアステレオマーと混ざっている。全ての立体異性体および混合物の総収量：１.５ｇ（２.４８ｍｍｏｌ、理論値の１８％）。
分析目的で、実施例１１８Ａの純粋なジアステレオマーのサンプルを、分取ＨＰＬＣ（方法３３）により入念に精製する。
HPLC (方法 5): Rt = 4.52 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.87 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 621.5 (50) [M+H]+.
[α]20Na = -22.8 (c = 1.0, MeOH).
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ = 1.30 (s, 9H, COC(CH3)3), 2.86 (s, 6H, N(CH3)2), 3.30 (s, 3H, OCH3), 4.74-5.11 (m, 6H), 6.62 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.15-7.51 (m, 12H, arom. H).
【０３１３】
実施例１１９Ａ
メチル（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−（４−ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニネート
【化１２９】
2009533371.tif 000132
実施例１１８Ａの化合物（１.６ｇ、１.９０ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（６０ｍｌ）に溶解する。０℃で、ＴＭＧ（２.６ｍｌ、２０.９３ｍｍｏｌ、１１当量）を添加し、反応を室温で終夜撹拌する。反応を停止するために、混合物を最初に０℃に冷却し、次いで酢酸（１.３ｍｌ、２２.８３ｍｍｏｌ、１２当量）を添加する。混合物を水で希釈し、３回に分けてジクロロメタンで抽出し、合わせた有機抽出物を濃縮する。残渣を酢酸エチル／ジエチルエーテル混合物でトリチュレートする。実施例１１９Ａの化合物が結晶化し、実施例１１８Ａの化合物は、支配的に上清に残る。後者を濃縮し、ＴＭＧ２ｍｌおよびジクロロメタン（４０ｍｌ）による異性化に付す。それにより、第２の分量の実施例１１９Ａの表題化合物を得る。結晶化の上清をクロマトグラフィーし（方法３３）、再異性化し、第３の分量の実施例１１９Ａを得る。総収量：結晶形の実施例１１９Ａ１.１ｇ（１.７２ｍｍｏｌ、理論値の９０％）。
HPLC (方法 5): Rt = 4.76 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 3.12 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 621.5 (90) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 619.5 (60) [M - H]-.
[α]20Na = -118 °(c = 1.0, CHCl3).
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ = 1.30 (s, 9H, COC(CH3)3), 2.86 (s, 6H, N(CH3)2), 3.30 (s, 3H, OCH3), 4.75-5.23 (m, 4H), 6.62 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.15-7.61 (m, 12H), 8.29 (br. s, 1H, N-H), 8.72 (br. s, 1H, N-H).
13C-NMR (126 MHz,) δ = 27.94 および 28.07 (CH3, C(CH3)3), 51.31 (CH3), 51.62 (CH3), 51.98 (CH, C-7), 61.81 (CH, C-6), 66.18 および 66.32 および 66.50 (CH2, OCH2Ph), 67.49 および 67.65 (CH2, OCH2Ph), 78.68 および 78.90 (C 四重線, C-11), 111.74 (CH, C-3'), 123.54 (CH), 124.06 (CH), 126.76 (CH), 127.18 (CH), 127.30 (CH), 127.55 (CH), 127.76 (CH), 127.83 (CH), 127.98 (CH), 128.24 (CH), 128.30 (CH), 128.79 (CH), 135.59 (C 四重線), 135.77 (C 四重線), 135.99 (C 四重線), 136.11 (C 四重線), 149.74 (C 四重線), 154.21 (C 四重線), 154.68 (C 四重線), 154.92 (C 四重線), 155.03 (C 四重線), 155.14 (C 四重線), 156.09 (C 四重線), 156.24 (C 四重線), 166.97 (C 四重線, C=O).
HR-TOF-MS (方法 24): C33H41N4O8 [M+H]+ 計算値 621.2919, 実測値 621.2922.
【０３１４】
実施例１２０Ａ
メチル（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−（ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニネート
【化１３０】
2009533371.tif 000133
実施例１１９Ａの化合物（９３８ｍｇ、１.５１ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン−メタノール１：１（３０ｍｌ）に溶解する。ラネーニッケル（約２００ｍｇ）をアルゴン保護気体雰囲気下で添加し、混合物を８０ｂａｒで４日間水素化する。出発物質がＨＰＬＣ（方法５）によりもはや検出できなくなったら、触媒を濾過により除去する。濾液を濃縮する。粗生成物（純度約７０％）０.６ｇを得、これ以上精製せずに次の段階で用いる。分析目的で、実施例１２０Ａの純粋な化合物のサンプルを分取ＨＰＬＣ（方法２７）により入念に精製する。
HPLC (方法 5): Rt = 3.25 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.34 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 338.2 (30) [M+H]+.
[α]20Na = -11.5°(c = 1.0, MeOH).
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO) δ = 1.37 (s, 9H, COC(CH3)3), 2.90 (s, 6H, N(CH3)2), 3.54 (s, 3H, OCH3), 4.24 (d, J = 5.4 Hz, 1H, β-H), 4.96 (dd, J = 8.4 Hz, J = 8.0 Hz, 1H, α-H), 6.73 (d, J2',3' = 8.0 Hz, 2H, 3'-H), 7.13 (d, J2',3' = 8.0 Hz, 2H, 2'-H), 7.46 (d, J = 9.6 Hz, 1H, NH), 8.470 (br. s, 2H, NH2).
13C-NMR (126 MHz, d6-DMSO) δ = 28.07 (CH3, COC(CH3)3), 40.19 (CH3, N(CH3)2), 52.68 (CH3, OCH3), 54.11 (CH, C-β), 56.79 (CH, C-α), 78.87 (C 四重線, COC(CH3)3), 112.53 (CH, C-3'), 127.65 (CH, C-2'), 149.87 (C 四重線), 154.61 (C 四重線, COC(CH3)3), 167.96 (C 四重線, CO2CH3).
HR-TOF-MS (方法 24): C17H28N3O4 [M+H]+ 計算値 338.2075, 実測値 338.2064.
【０３１５】
実施例１２１Ａ
メチル（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシ）カルボニル）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−（ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニネート
【化１３１】
2009533371.tif 000134
実施例１２０Ａの化合物５５０ｍｇ（１.１４ｍｍｏｌ、７０％純度）を、ジオキサン／水８：２.８に溶解する。重炭酸ナトリウム（４７９ｍｇ、５.７１ｍｍｏｌ、５当量）およびベンジルクロロホルメート（２１２μｌ、１.４８ｍｍｏｌ、１.３当量）を添加し、混合物を室温で２.５時間撹拌する。次いで、混合物を水および酢酸エチルで抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。実施例１２１Ａの表題化合物を、ジエチルエーテルでトリチュレートすることにより残渣から結晶として得ることができる。収量：４９０ｍｇ（１.０４ｍｍｏｌ、理論値の９１％）。
HPLC (方法 5): Rt = 4.14 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.52 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 472.3 (100) [M+H]+.
[α]20Na = -13.4°(c = 1.0, MeOH).
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ = 1.36 (s, 9H, COC(CH3)3), 2.86 (s, 6H, N(CH3)2), 3.30 (s, 3H, OCH3), 4.45 (dd, Jα,ββ = 4.2 Hz, J = 9.3 Hz, 1H, β-H), 4.94 (d, Jgem = 12.5 Hz, 1H, OCH2Ph), 4.99 (d, Jgem = 12.5 Hz, 1H, OCH2Ph), 5.15 (dd, Jα,ββ = 4.2 Hz, J = 10.3 Hz, 1H, α-H), 6.65 (d, J2',3' = 8.8 Hz, 2H, 3'-H), 7.10 (d, J2',3' = 8.8 Hz, 2H, 2'-H), 7.23-7.37 (m, 5H), 7.54 (d, J = 9.3 Hz, 1H, NH).
13C-NMR- (126 MHz, d6-DMSO) δ = 28.0 (CH3, COC(CH3)3), 41.1 (CH3, N(CH3)2), 52.0 (CH3, OCH3), 53.8 (CH, C-β), 59.0 (CH, C-α), 65.4 (CH2, OCH2Ph), 78.3 (C 四重線, COC(CH3)3), 113.7 (CH), 126.9 (C 四重線), 127.3 (CH), 127.5 (CH), 127.8 (CH), 128.2 (C 四重線), 128.3 (CH), 136.6 (C 四重線), 154.6 (C 四重線, NCO2), 156.0 (NCO2), 170.7 (CO2CH3).
HR-TOF-MS: C25H34N3O6 [M+H]+ 計算値 472.2443, 実測値 472.2460.
【０３１６】
実施例１２２Ａ
（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−（ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニン
【化１３２】
2009533371.tif 000135
化合物１２１Ａ（４４４ｍｇ、０.９４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ５ｍｌおよび水８３０μｌの混合物に溶解する。０℃で、水酸化リチウム一水和物９９ｍｇ（２.３５ｍｍｏｌ、２.５当量）を添加する。反応を０℃で約２時間、出発物質１２１Ａがもはや検出できなくなるまで（ＨＰＬＣ、方法５）実施する。次いで、反応を酢酸（６２０μｌ、２.８３ｍｍｏｌ、３当量）で停止する。混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去する。収量：４３０ｍｇ（定量的）。
HPLC (方法 5): Rt = 3.80 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.21 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 458.2 (100) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 456.3 (100) [M - H]-. 
[α]20Na = -16.5 (c = 1.0, MeOH).
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO) δ = 4.39 (dd, Jα,β = 3.5 Hz, J = 9.6 Hz, 1H, β-H), 4.92 (d, Jgem = 12.8 Hz, 1H, OCH2Ph), 4.97 (d, Jgem = 12.8 Hz, 1H, OCH2Ph), 5.19 (dd, Jα,β = 3.5 Hz, J = 10.0 Hz, 1H, α-H), 6.86 (br. s, 2H), 7.17 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.24 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.23-7.29 (m, 2H), 7.41 (d, J = 10.1 Hz, 1H, NH), 7.48 (d, J = 1 Hz, 1H, NH), 13.0 (br. s, 1H, COOH).
13C-NMR (126 MHz, d6-DMSO) δ = 28.0 (CH3, COC(CH3)3), 41.2 (CH3, N(CH3)2), 53.9 (CH, C-β), 58.8 (CH, C-α), 65.3 (CH2, OCH2Ph), 78.1 (C 四重線, COC(CH3)3), 113.7 (CH), 126.7 (C 四重線), 127.1 (CH), 127.3 (CH), 127.6 (CH), 128.1 (C 四重線), 128.2 (CH), 136.9 (C 四重線), 154.7 (C 四重線, NCO2), 156.1 (NCO2), 171.4 (CO2H).
HR-TOF-MS (方法 24): C24H32N3O6 [M+H]+ 計算値 458.2286, 実測値 458.2277.
【０３１７】
実施例１２３Ａ
ペンタフルオロフェニル（３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−（ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニネート
【化１３３】
2009533371.tif 000136
化合物１２２Ａ（４０８ｍｇ、０.８９ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（１１ｍｌ）に、０℃、アルゴン保護気体雰囲気下で溶解する。ペンタフルオロフェニルジフェニルホスフィネート（５１４ｍｇ、１.３４ｍｍｏｌ、１.５当量）およびＮＭＭ（３６０ｍｇ、３.５７ｍｍｏｌ、４当量）を添加し、反応混合物を室温で１６時間撹拌する。次いで溶媒を除去し、残渣をクロマトグラフィー（方法３３：改変したグラジエント：０−１０分１０％Ｂ、勾配、３０分６５％Ｂ、３６−３８分１０％Ｂ）により精製する。１２３Ａ（２５０ｍｇ、０.４０ｍｍｏｌ、理論値の４５％）の他に、未反応の出発物質（実施例１２２Ａ、４１ｍｇ、９μｍｏｌ、理論値の１０％）を単離した。
HPLC (方法 5): Rt = 3.66 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 3.23 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 624.4 (100) [M+H]+.
[α]20Na = -19.8 °(c = 0.5, CH2Cl2).
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ = 1.36 (s, 9H, COC(CH3)3, 2.90 (s, 6H, N(CH3)2), 4.96-5.04 (m, 3H, β-H and OCH2Ph), 5.39 (dd, Jα,β = 4.4 Hz, J = 10.2 Hz, 1H, α-H), 6.75 (br. s, 2H), 7.21-7.33 (m, 7H), 7.57 (d, J = 10.3 Hz, 1H, NH), 7.89 (d, J = 9.3 Hz, 1H, NH).
13C-NMR (126 MHz, d6-DMSO) δ = 28.2 (CH3, COC(CH3)3), 43.8. (CH3, N(CH3)2), 55.6 (CH, C-β), 59.1 (CH, C-α), 67.5 (CH2, OCH2Ph), 80.9 (C 四重線, COC(CH3)3), 117.8 (CH), 124.4 (C 四重線, m),128.1 (CH), 128.4 (CH), 128.6 (CH), 128.7 (CH), 132.9 (C 四重線, m), 136.8 (C 四重線, m), 138.9 (C 四重線, m), 139.9 (C 四重線, m), 141.9 (C 四重線, m), 155.7 (C 四重線, NCO2), 156.2 (NCO2), 166.2 (CO2H).
【０３１８】
実施例１２４Ａ
｛（３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−（ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニル｝−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化１３４】
2009533371.tif 000137
化合物１２３Ａ（２３７ｍｇ、０.３８ｍｍｏｌ）および化合物Ｅｄｍａｎ３.０（例示的化合物３、４６５ｍｇ、０.４６ｍｍｏｌ、１.２当量）をＤＭＦ（４０ｍｌ）に０℃で溶解し、ＤＩＥＡ（０.４０ｍｌ、２.２８ｍｍｏｌ、６当量）を添加する。反応混合物をさらに終夜撹拌し、その間にそれはゆっくりと室温に温まる。次いでＤＭＦをロータリーエバポレーターで除去し、残渣をクロマトグラフィー（方法４４）により精製する。収量：５５０ｍｇ（理論値の９２％）。
HPLC (方法 5): Rt = 3.62 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.01 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 673.3 (100) [M + 2H]2+, MS (ESIneg) m/z (%) = 1343 [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C61H98N15O19 [M+H]+ 計算値 1344.7158, 実測値 1344.7155.
【０３１９】
実施例１２５Ａ
｛（３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−４−（ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニル｝−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩トリストリフルオロ酢酸塩
【化１３５】
2009533371.tif 000138
実施例１２４Ａの化合物５５０ｍｇ（０.３５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍｌ）に溶解し、次いでジクロロメタン中の３０％ＴＦＡ１４ｍｌを添加する。混合物を室温で１５分間撹拌し、次いで濃縮し、オイルポンプによる真空下で乾燥する。粗生成物（６４４ｍｇ、純度約７０％、０.２８ｍｍｏｌ、理論値の８０％）を精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 7): Rt = 3.46 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.56 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 622.9 (100), [M + 2H]2+, MS (ESIneg.): m/z (%) = 1242.6 [M - H]-.
【０３２０】
実施例１２６Ａ
Ｎ２.１−（ベンジルオキシカルボニル）−［（３Ｒ）−３−アミノ−４−（ジメチルアミノ）−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化１３６】
2009533371.tif 000139
実施例１２５Ａ（６４４ｍｇ、０.２８ｍｍｏｌ）からの粗生成物をＤＭＦ（３０ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却する。ＨＡＴＵ（３４９ｍｇ、０.９２ｍｍｏｌ、３当量）を添加し、続いてＮＭＭ（２００μｌ、１.８４ｍｍｏｌ、６当量）を添加する。５分後、氷浴を除去し、混合物を室温で３時間撹拌する。メタノールの添加により反応を停止し、混合物を先ずゲルクロマトグラフィー（方法４５、溶離剤：メタノール）により予精製する。生成物含有画分を合わせ、分取ＨＰＬＣ（方法３３）により入念に精製する。収量：２１１ｍｇ（理論値の５２％）。
HPLC (方法 5): Rt = 3.64 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.70 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 614 (100) [M + 2H]2+, 1226.8 (20) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1224.9 (100) [M - H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C56H88N15O16 [M+H]+ 計算値 1226.6528, 実測値 1226.6534.
【０３２１】
実施例１２７Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−４−（ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９Ｎ３.１−ラクタム三塩酸塩
【化１３７】
2009533371.tif 000140
実施例１２６Ａの化合物（２０９ｍｇ、０.１４ｍｍｏｌ）をメタノール（５０ｍｌ）に溶解し、１Ｍ水性塩酸（８６０μｌ、６当量）並びに１０％パラジウム−炭素を添加する。水素化を環境気圧下、室温で９０分間実施する。次いで混合物を濾過し、触媒を除去し、濃縮する。残渣を水に取り、凍結乾燥する。表題化合物１７０ｍｇ（理論値の９８％）を得る。
HPLC (方法 7): Rt = 3.19 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.26 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 547.1 (100) [M + 2H]2+, 1092.8 (5) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C48H82N15O14 [M+H]+ 計算値 1092.6161, 実測値 1092.6133.
【０３２２】
実施例１２８Ａ
Ｎ２.１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−４−（ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム二塩酸塩
【化１３８】
2009533371.tif 000141
実施例１２７Ａの化合物（８５ｍｇ、７１μｍｏｌ）およびジペプチド（実施例９Ａ、４０ｍｇ、１０６μｍｏｌ、１.５当量）をＤＭＦ（４ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却する。次いで、ＮＭＭ（３１μｌ、２８１μｍｏｌ、４当量）およびＨＡＴＵ（４３ｍｇ、１１３μｍｏｌ、１.６当量）を添加し、次いで氷浴を除去する。混合物はゆっくりと環境温度に温まる。１時間後、メタノールの添加により反応を停止し、メタノールを移動相として使用して、クロマトグラフィーを実施する（方法４５）。溶出物をＨＰＬＣ（方法７）により確認し、生成物含有画分を合わせ、濃縮する。純度約６６％の表題化合物１０５ｍｇ（理論値の６５％）を得る。この物質をこれ以上精製せずに次の段階で用いる。
HPLC (方法 7): Rt = 4.47 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.24 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 724.3 (100) [M + 2H]2+, 1448.3 (5) [M+H]+.
【０３２３】
実施例１２９Ａ
（２Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）アラニン
および
実施例１３０Ａ
（２Ｒ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）アラニン
M. Merget, K. Guenther, M. Bernd, E. Guenther, R. Tacke, J. Organomet. Chem. 2001 628, 183-194 に従い、標的化合物を製造する。エナンチオマーの分離を、キラル相の分取ＨＰＬＣ（方法４１）により達成し、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−３−トリメチルシリルアラニンの標準サンプル（２Ｒ異性体、Mercachem AMR 39.260)とのＨＰＬＣ比較により、異性体を割り当てる。
【０３２４】
実施例１２９Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）−Ｄ−アラニン
【化１３９】
2009533371.tif 000142
キラル HPLC (方法 41): Rt = 4.16 分, e.e.> 99%.
[α]D20 = + 1.1 (c = 0.83, メタノール)
【０３２５】
実施例１３０Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）−Ｌ−アラニン
【化１４０】
2009533371.tif 000143
キラル HPLC (方法 41): Rt = 9.27 分, e.e.> 99%
[α]D20 = - 1.6 (c = 0.66, メタノール)
【０３２６】
実施例１３１Ａ
メチル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）−Ｄ−アラニル］−２−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニネート
【化１４１】
2009533371.tif 000144
メチル２−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニネートトリフルオロ酢酸塩（２１５ｍｇ、０.８２ｍｍｏｌ）［S.D. Bull, S.G. Davies, A. C. Garner, M. D. O'Shea, J. Chem. Soc. Perkin Trans.1, 2001, 3281-3287］および実施例１２９Ａ（２２５ｍｇ、０.８２ｍｍｏｌ、１当量）を、ＤＭＦ（５ｍｌ）に０℃で溶解する。次いで、ＮＭＭ（３６０μｌ、３.２９ｍｍｏｌ、４当量）およびＨＡＴＵ（４７０ｍｇ、１.２４ｍｍｏｌ、１.５当量）を添加し、混合物を室温で２時間撹拌する。ＭＴＢＥおよび飽和水性重炭酸ナトリウム溶液で２回抽出を実施し、合わせた有機相を１Ｍクエン酸で洗浄し、飽和水性重炭酸ナトリウム溶液で再度洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。クロマトグラフィー（方法３３）による精製後、表題化合物２９０ｍｇ（０.７２ｍｍｏｌ、理論値の８８％）を得る。
HPLC (方法 7): Rt = 5.37 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 3.02 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 403.5 (100) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ = 0.01 (s, 9H, Si(CH3)3), 0.89 (m, 11H), 1.37 (s, 9H, COC(CH3)3), 1.55 (dd, J = 8.8 Hz, 14.2 Hz, 1H), 1.63 (dd, J = 3.4 Hz, 14.2 Hz, 1H), 3.62 (s, 3H, OCH3), 4.04 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 6.70 (d, J = 9.0 Hz, 1H, NH), 7.96 (d, J = 8.1 Hz, 1H, NH).
【０３２７】
実施例１３２Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）−Ｄ−アラニル］−２−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン
【化１４２】
2009533371.tif 000145
実施例１３１Ａ（２７４ｍｇ、０.６８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／水（３：１、２１ｍｌ）に取り、０℃に冷却する。水酸化リチウム一水和物（５７ｍｇ、１.３６ｍｍｏｌ、２当量）を添加し、混合物を０℃で１時間撹拌する。ＴＨＦの殆どを真空で除去し、１Ｍクエン酸の添加によりｐＨを４に調節し、混合物を酢酸エチルで２回抽出する。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。クロマトグラフィー（改変したグラジエントの方法３３：０−２分３０％Ｂ、勾配、３０−３５分−９０％Ｂ）による精製後、表題化合物２３７ｍｇ（０.６１ｍｍｏｌ、理論値の９０％）を無色固体として得る。
HPLC (方法 7): Rt = 4.93 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.76 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 389.4 (100) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ = 0.00 (s, 9H, Si(CH3)3), 0.88 (m, 11H), 1.36 (s, 9H, COC(CH3)3), 1.51 (dd, J = 9.3 Hz, 14.2 Hz, 1H), 1.64 (dd, J = 3.0 Hz, 14.2 Hz, 1H), 4.02 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 6.71 (d, J = 9.3 Hz, 1H, NH), 7.80 (d, J = 8.1, 1H, NH), 12.49 (br s, 1H, COOH).
【０３２８】
実施例１３３Ａ
Ｎ２.１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−［３−トリメチルシリル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−４−（ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム二塩酸塩
【化１４３】
2009533371.tif 000146
実施例１２７Ａの化合物（１０２ｍｇ、８５μｍｏｌ）およびジペプチド（実施例１３２Ａ、５０ｍｇ、１２７μｍｏｌ、１.５当量）を、ＤＭＦ（４ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却する。次いでＮＭＭ（３７μｌ、３４０μｍｏｌ、４当量）およびＨＡＴＵ（６５ｍｇ、１７０μｍｏｌ、２.０当量）を添加し、次いで氷浴を除去する。混合物はゆっくりと環境温度に温まる。１時間後、反応をメタノールの添加により停止し、メタノールを移動相として使用して、Sephadex LH20 でクロマトグラフィーを実施する（方法４５）。溶出物をＨＰＬＣ（方法７）により確認し、生成物含有画分を合わせ、濃縮する。表題化合物１２６ｍｇ（８２μｍｏｌ、理論値の９６％）を得る。
HPLC (方法 7): Rt = 4.55 分.
【０３２９】
実施例１３４Ａ
ベンジルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルアラニネート
【化１４４】
2009533371.tif 000147
ＨＯＢｔ（２.０ｇ、１５.０８ｍｍｏｌ、４当量）、ＮＭＭ（１.２ｍｌ、１.１ｇ、１１.３１ｍｍｏｌ、３当量）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニン（１.０ｇ、３.７７ｍｍｏｌ、１当量）［Anderson, McGregor; J. Am. Chem. Soc.; 79; 1957; 6180,6181］、ＥＤＣ（１.４ｇ、７.５４ｍｍｏｌ、２当量）および再度ＮＭＭ（０.８ｍｌ、０.８ｇ、７.５４ｍｍｏｌ、２当量）を、連続的にジクロロメタンｐ.ａ.（３６５ｍｌ）中のベンジルＬ−フェニルアラニネート塩酸塩（１.１ｇ、４.１５ｍｍｏｌ、１.１当量）の溶液に−１０℃で添加する。反応混合物はゆっくりと室温に温まり、それをこの温度で終夜撹拌する。溶媒を完全に除去し、残渣を酢酸エチルと混合し、続いて混合物を飽和水性重炭酸ナトリウム溶液、５％水性クエン酸、飽和水性重炭酸ナトリウム溶液（５００ｍｌ）および飽和水性塩化ナトリウム溶液で洗浄する。混合物を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過する。混合物を真空で蒸発乾固し、次いで高真空下で乾燥する。表題化合物１.８ｇ（理論値の９６％）を得、これ以上精製せずに反応させる。
HPLC (方法 12): Rt = 9.16 分.
HPLC (方法 4): Rt = 5.16 分.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ = 1.18/1.27 (2s, 9H, OtBu), 2.47-2.57 (m H-DMSO-シグナルの下, 1H, β-H), 2.66 (dd, J = 13.8, 3.7 Hz, 1H, β-CH), 2.91 (dd, J = 13.8, 9.4 Hz, 1H, β-CH), 3.09 (dd, J = 13.8, 3.1 Hz, 1H, β-CH), 4.19 (td, J = 9.3, 4.2 Hz, 1H, α-CH), 4.57 (td, J = 8.8, 5.9 Hz, 1H, α-CH), 5.12(s, 2H, OCH2Ph), 6.76 (d, J = 9.2 Hz, 1H, NH), 7.08-7.43 (m, 15H, アリール-H), 8.48 (d, J = 8.1 Hz, 1H, NH).
HR-TOF-MS (方法 24): C30H36N2O5 [M+H]+ 実測値 503.2566, 計算値 503.2546. 
【０３３０】
実施例１３５Ａ
Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルアラニン
【化１４５】
2009533371.tif 000148
実施例１３４Ａの化合物（５６３.０ｍｇ、１.１２ｍｍｏｌ）から、手順５に従い表題化合物を製造する。反応の監視（方法１２）によると、水素雰囲気下、大気圧下、室温で３時間撹拌した後、完全な変換が達成される。生成物４５２.２ｍｇ（理論値の９７.９％）を得る。
[α]20Na = +33.2°(c = 0.57、CH2Cl2中).
HPLC (方法 12): Rt = 7.64 分.
HPLC (方法 4): Rt = 4.45 分.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ = 1.19/1.26 (2s, 9H, OtBu), 2.44-2.56 (m H-DMSO-シグナルの下、1H, β-H), 2.69 (dd, J = 14.0, 3.8 Hz, 1H, β-CH), 2.86 (dd, J = 14.0, 9.5 Hz, 1H, β-CH), 3.08 (dd, J = 14.0, 4.6 Hz, 1H, β-CH), 4.18 (td, J = 9.7, 3.57 Hz, 1H, α-CH), 4.48 (td, J = 9.3, 4.5 Hz, 1H, α-CH), 6.71 (d, J = 8.7 Hz, 1H, NH), 7.08-7.32 (m, 10H, アリール-H), 8.27 (d, J = 8.0 Hz, 1H, NH), 12.77 (s br., 1H, COOH).
HR-TOF-MS (方法 24): C23H30N2O5 [M+H]+ 実測値 413.2082, 計算値 413.2076. 
【０３３１】
実施例１３６Ａ
２−（トリメチルシリル）エチルＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−アラニネート
【化１４６】
2009533371.tif 000149
Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−アラニン（１０００.０ｍｇ、２.９６ｍｍｏｌ）［Rane, F.Dinanath et al.; Tetrahedron Lett.; EN; 34; 20; 1993; 3201-3204］を、ジクロロメタン（２０ｍｌ）に溶解し、トリメチルシリルエタノール（４.２ｍｌ、３.５ｇ、２９.５５ｍｍｏｌ、１０当量）、ＤＣＣ（１.２２ｇ、５.９１ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＭＡＰ（３６１.１ｍｇ、２.９６ｍｍｏｌ、１当量）を連続的にこの溶液に−２０℃で添加する。反応を室温に温め、この温度で終夜撹拌し、完全な変換に至らせる。後処理に、混合物を濃縮し、残渣をジエチルエーテルに取り、続いて水で２回、飽和水性塩化ナトリウム溶液で１回抽出する。エーテル相を硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤をシリカゲルでの濾過により除去し、溶媒の殆どを濾液からロータリーエバポレーターで除去する。沈殿がこの濃度で析出するならば、再度必要に応じてシリカゲルを通してこれを除去できる。次いで、得られる残渣をクロマトグラフィー（方法３１）により入念に精製し、表題化合物１.１ｇ（理論値の８６.４％）を得る。
HPLC (方法 12): Rt = 9.31 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.97 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 439 (100) [M+H]+.
【０３３２】
実施例１３７Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル３−アミノ−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−アラニネートトリフルオロ酢酸塩
【化１４７】
2009533371.tif 000150
実施例１３６Ａの化合物（１００.０ｍｇ、０.２３ｍｍｏｌ）から、手順１に記載の通りに表題化合物を製造する。生成物４１ｍｇ（理論値の３９.７％）を粗生成物から入念な精製（方法３５）の後に単離する。
HPLC (方法 12): Rt = 6.33 分.
LC-MS (方法 23): Rt = 4.83 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 339 (15) [M+H]+, 311 (100).
【０３３３】
実施例１３８Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−アラニン２−（トリメチルシリル）エチルエステルトリフルオロ酢酸塩
【化１４８】
2009533371.tif 000151
オクタペプチド（実施例１００Ａ、９.０ｍｇ、８.０４μｍｏｌ）および例示的化合物１３７Ａ（１７.０ｍｇ、３９.９５μｍｏｌ、５当量）を、ＤＭＦ（９００μｌ）中にアルゴン保護気体雰囲気下、０℃で提供する。続いて、ＮＭＭ保存溶液（０.９１ｍｍｏｌ／ｍｌ、ＤＭＦ中）からの塩基（９μｌ、０.８ｍｇ、８.０４μｍｏｌ、１当量）、ＨＡＴＵ（６.１ｍｇ、１６.０８μｍｏｌ、２当量）および再度ＮＭＭ−溶液（９μｌ、０.８ｍｇ、８.０４μｍｏｌ、１当量）を連続的に混合物に添加する。１５分間撹拌した後、最後にＮＭＭ保存溶液（２２μｌ、２ｍｇ、２０.１０μｍｏｌ、２.５当量）を添加し、混合物をゆっくりと室温に温め、この温度で終夜撹拌する。溶液を分取ＨＰＬＣ（方法３６）により予精製し、ゲルクロマトグラフィー（方法４５、溶離剤：メタノール、０.２５％氷酢酸を含む）により入念に精製する。表題化合物８.０ｍｇ（理論値の６９.１％）を得る。
HPLC (方法 12): Rt = 7.21 分.
LC-MS (方法 23): Rt = 5.30 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 1325 (75) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1323 (100) [M - H]-.
【０３３４】
実施例１３９Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−アラニントリフルオロ酢酸塩
【化１４９】
2009533371.tif 000152
実施例１３８Ａの化合物（７.５ｍｇ、５.２１μｍｏｌ）を、ＴＨＦ９００μｌに提供し、ＴＨＦ中の１Ｍ ＴＢＡＦ溶液（２６μｌ、６.８ｍｇ、２６.０５μｍｏｌ、５当量）を４回に分けて添加し、塩基１５当量の後、モレキュラー・シーブ（４Å）も添加する。反応を室温で１時間撹拌し、完全な変換をＨＰＬＣ監視（方法１２）により確立する。後処理に、混合物を氷酢酸で中和し、続いて真空で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法２９）によりクロマトグラフィーする。表題化合物６.２ｍｇ（理論値の８８.９％）を得る。
HPLC (方法 12): Rt = 6.24 分.
LC-MS (方法 23): Rt = 4.88 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 1224 (80) [M+H]+, 242 (100); MS (ESIneg.): m/z (%) = 1223 (100) [M - H]-.
【０３３５】
実施例１４０Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−アラニンペンタフルオロフェニルエステルトリフルオロ酢酸塩
【化１５０】
2009533371.tif 000153
アルゴン保護気体雰囲気下、実施例１３９Ａの化合物（３.１ｍｇ、２.３１μｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍｌ）中に提供し、ペンタフルオロフェノール（４.３ｍｇ、２３.１４μｍｏｌ、１０当量）を添加する。反応を−２０℃に冷却し、最後にＥＤＣ（１.０ｍｇ、５.３２μｍｏｌ、２.３当量）を添加し、混合物を室温に温め、この温度で終夜撹拌する。後処理に、溶媒を完全に除去し、残渣を凍結乾燥する。表題化合物を粗生成物としてさらに反応させ、定量的収量を想定する。
HPLC (方法 12): Rt = 7.18 分.
LC-MS (方法 23): Rt = 5.56 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 1392 (80) [M+H]+.
【０３３６】
実施例１４１Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−アラニンペンタフルオロフェニルエステル二塩酸塩
【化１５１】
2009533371.tif 000154
表題化合物を実施例１４０Ａの化合物（３.０ｍｇ、１.９９μｍｏｌ）から手順３に従い製造する。塩酸を０℃で添加した後、完全な変換をＨＰＬＣ監視（方法１２）により３０分後に確立する。表題化合物を粗生成物として得、定量的収量を想定する。
LC-MS (方法 23): Rt = 4.47 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 1292 (3) [M+H]+, 646 (100) [M + 2H]2+, MS (ESIneg.): m/z (%) = 1290 (40) [M - H]-, 1106 (100).
【０３３７】
実施例１４２Ａ
Ｎ２.１−（ベンジルオキシカルボニル）−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−アラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９Ｎ３.１−ラクタム塩酸塩
【化１５２】
2009533371.tif 000155
アルゴン保護気体雰囲気下、実施例１４１Ａの化合物（３.０ｍｇ、２.２０μｍｏｌ）をクロロホルム（２０ｍｌ）中に提供する。トリエチルアミン（２２μｌ、１５.８ｍｇ、１３１.９４μｍｏｌ）をクロロホルム（２５ｍｌ）に溶解し、１時間かけて滴下して溶液に添加する。添加の完了後、反応を室温で終夜撹拌する。後処理に、混合物をＴＦＡで中和し、続いて真空で濃縮し、ゲルクロマトグラフィー（方法４５、溶離剤：メタノール、０.２５％氷酢酸を含む）により予精製する。生成物０.４ｍｇ（理論値の１５.９％）を、分取ＨＰＬＣ（分離相：Xterra 10 mm、溶離剤：０.１％ＴＦＡ、アセトニトリル−水グラジエント）による入念な精製の後に単離する。
HPLC (方法 12): Rt = 5.96 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.72 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 1108 (48) [M+H]+, 132 (100); MS (ESIneg.): m/z (%) = 1106 (100) [M - H]-.
【０３３８】
実施例１４３Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−アラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタム二塩酸塩
【化１５３】
2009533371.tif 000156
表題化合物（０.４ｍｇ、０.３５μｍｏｌ）を、実施例１４２Ａの化合物から、手順４に記載の通りに製造する。完全な変換は、大気圧、室温で６時間の水素化の後に達成される。表題化合物０.３ｍｇ（理論値の８１.９％）を粗生成物として得、それをさらに反応させる。
【０３３９】
実施例１４４Ａ
Ｎ２.１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−［Ｄ−フェニルアラニル］−［Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−アラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化１５４】
2009533371.tif 000157
脱保護したアミン（実施例１４３Ａ、０.３ｍｇ、０.２９μｍｏｌ）およびジペプチド（１.２ｍｇ、２.８６μｍｏｌ、１０当量）を、アルゴン保護気体雰囲気下、ＤＭＦ（１００μｌ）中に提供し、溶液を０℃に冷却する。ＮＭＭ保存溶液（９０.９μｍｏｌ／ｍｌ、ＤＭＦ中）からの塩基（１６μｌ、１４７μｇ、１.４３μｍｏｌ、５当量）、ＨＡＴＵ（１.１ｍｇ、２.９５μｍｏｌ、１０.３当量）およびさらにＮＭＭ保存溶液（１６μｌ、１４７μｇ、１.４３μｍｏｌ、５当量）を添加し、反応を１５分間撹拌する。最後に、塩基（４０μｌ、３６７μｇ、３.６２μｍｏｌ、１２.５当量）を再度混合物に添加し、それを撹拌しながら室温にする。撹拌をこの温度で終夜継続する。後処理に、混合物を真空で濃縮し、ゲルクロマトグラフィー（方法４５、溶離剤：メタノール）により入念に精製する。表題化合物０.３ｍｇ（理論値の７０.６％）を得る。
HPLC (方法 12) Rt = 7.80 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 2.17 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1368 (5) [M+H]+, 634 (100); MS (ESIneg.): m/z (%) = 1367 (30) [M - H]-, 683 (100) [M - 2H]2-.
【０３４０】
実施例１４５Ａ
ポリマー−結合［Ｎ２−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−イソロイシル］−Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン
【化１５５】
2009533371.tif 000158
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例４１Ａ、５００ｍｇ、０.７５ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。続いて、樹脂に結合した脱保護アミノ酸をＮ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−イソロイシン（１.０５ｇ、２.９８ｍｍｏｌ、４当量）、ＤＩＥＡ（０.７８ｍｌ、５７７ｍｇ、４.４７ｍｍｏｌ、６当量）およびＴＢＴＵ（９５７ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、４当量）と終夜反応させ、Ｆｍｏｃ−保護ジペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ジペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
LC-MS (方法 21): Rt = 2.68 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 497.5 (60) [M+H]+, 441.4 (100); MS (ESIneg): m/z (%) = 495.5 (5) [M - H]-, 273.4 (100).
【０３４１】
実施例１４６Ａ
ポリマー−結合［（Ｎ２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル）−Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン
【化１５６】
2009533371.tif 000159
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例１４５Ａ、５００ｍｇ、０.７５ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。続いて、樹脂に結合した脱保護アミノ酸を（Ｎ２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル）−Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチン（７４０ｍｇ、１.１２ｍｍｏｌ、１.５当量）、ＤＩＥＡ（０.３９ｍｌ、２８９ｍｇ、２.２４ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＢＴＵ（３１８ｍｇ、０.９９ｍｍｏｌ、２当量）と終夜反応させ、Ｆｍｏｃ−保護トリペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ジペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
LC-MS (方法 21): Rt = 2.89 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 919.5 (100) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 917.7 (100) [M - H]-.
【０３４２】
実施例１４７Ａ
ポリマー−結合［（Ｎ２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル）−Ｌ−ロイシル］−［Ｎ５−（イミノ−｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン
【化１５７】
2009533371.tif 000160
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例１４６Ａ、５００ｍｇ、０.７５ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。続いて、樹脂に結合した脱保護アミノ酸を、Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシン（１.０５ｇ、２.９８ｍｍｏｌ、４当量）、ＤＩＥＡ（０.７８ｍｌ、５７７ｍｇ、４.４７ｍｍｏｌ、６当量）およびＴＢＴＵ（９５６ｍｇ、２.９８ｍｍｏｌ、４当量）と終夜反応させ、Ｆｍｏｃ−保護テトラペプチドを得る。ポリマーの後処理は、手順７と同様に行う。対応する側鎖−保護ジペプチドを、サンプルを取り出した後に確認する。
LC-MS (方法 21): Rt = 3.27 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1033.3 (100) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1032.2 (100) [M - H]-.
【０３４３】
実施例１４８Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−［Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル］｝−Ｌ−イソロイシル−Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリン
【化１５８】
2009533371.tif 000161
Ｆｍｏｃ保護基をポリマー（実施例１４７Ａ、５００ｍｇ、０.７５ｍｍｏｌ）から手順７に記載の通りに除去する。続いて、樹脂に結合した脱保護アミノ酸を、（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシン（２７６ｍｇ、１.１２ｍｍｏｌ、１.５当量）、ＤＩＥＡ（０.２６ｍｌ、１９３ｍｇ、１.４９ｍｍｏｌ、２当量）およびＴＢＴＵ（３５９ｍｇ、１.１２ｍｍｏｌ、１.５当量）と終夜反応させ、Ｂｏｃ−保護ペンタペプチドを得る。次いでそれをＤＭＦ、ＴＨＦおよび最後にジクロロメタンで洗浄し、氷酢酸、トリフルオロエタノールおよびジクロロメタン（１＋１＋３）の混合物を用いて樹脂から除去する。粗製反応生成物をクロマトグラフィーにより精製する。表題化合物を収量１４５ｍｇ（理論値の１９％）で単離する。
LC-MS (方法 21): Rt = 3.17 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1040.0 (100) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1038.0 (100) [M - H]-.
【０３４４】
実施例１４９Ａ
ベンジルＬ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１５９】
2009533371.tif 000162
ベンジルＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−セリネート５００ｍｇ（１.６９ｍｍｏｌ）を、手順２に従い反応物溶液５.５０ｍｌ中で反応させる。生成物をこれ以上精製せずに反応させる。収量：５０５ｍｇ（１.６３ｍｍｏｌ、理論値の９６％）。
HPLC (方法 3): Rt = 3.10 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 1.94 分; MS (ESIpos) m/z (%) = 196.0 (100) [M+H]+.
【０３４５】
実施例１５０Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−セリル］−Ｌ−セリネート
【化１６０】
2009533371.tif 000163
実施例１４９Ａの化合物（５００ｍｇ、１.６２ｍｍｏｌ）およびＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−セリン（３３２ｍｇ、１.６２ｍｍｏｌ、１当量）をジクロロメタン（８.２ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却する。ＨＡＴＵ（９２２ｍｇ、２.４３ｍｍｏｌ、１.５当量）を添加し、次いで、１５分間かけて、ジクロロメタン（５ｍｌ）中のＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１.４１ｍｌ、８.０８ｍｍｏｌ、５当量）の溶液を滴下して添加する。次いで、混合物を室温で７２時間撹拌し、続いて重炭酸ナトリウムで洗浄し、有機相を乾燥し、濃縮する。粗生成物をクロマトグラフィー（方法３４）により精製する。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥する。収量：無色固体として、３０８ｍｇ（０.８１ｍｍｏｌ、理論値の５０％）。
HPLC (方法 4): Rt = 3.81 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.98 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 283.5 (100) [M-Boc + H]+; 383.6 (30) [M+H]+.
【０３４６】
実施例１５１Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリネート
【化１６１】
2009533371.tif 000164
実施例１５０Ａの化合物の製造方法に従い、表題化合物を、実施例１４９Ａの化合物（７８０ｍｇ、２.５２ｍｍｏｌ）およびＮ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニン（７０７ｍｇ、２.５２ｍｍｏｌ）から、収量７８０ｍｇ（理論値の６９％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.61 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.82 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 444.2 (100), [M+H]+.
【０３４７】
実施例１５２Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニル］−Ｌ−セリネート
【化１６２】
2009533371.tif 000165
実施例１５０Ａの化合物の製造方法に従い、表題化合物を、実施例１４９Ａの化合物（３５０ｍｇ、１.１３ｍｍｏｌ）およびＮ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−フェニルアラニン（３００ｍｇ、１.１３ｍｍｏｌ）から、収量２７５ｍｇ（理論値の５５％）で得る。
HPLC (方法 6): Rt = 4.50 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.23 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 443.2 (100) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 441 (50) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C24H31N2O6 計算値 443.2177, 実測値 443.2180 [M+H]+.
【０３４８】
実施例１５３Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−スレオニル］−Ｏ３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−セリネート
【化１６３】
2009533371.tif 000166
実施例１５０Ａの化合物の製造方法に従い、表題化合物を、ベンジルＯ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリネート（３２０ｍｇ、０.８８ｍｍｏｌ）およびＮ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルスレオニン（１９２ｍｇ、０.８８ｍｍｏｌ）から、収量１９６ｍｇ（理論値の４９％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.73 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.56 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 453.0 (100) [M+H]+.
【０３４９】
実施例１５４Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アロスレオニル］−Ｌ−セリネート
【化１６４】
2009533371.tif 000167
ベンジルＬ−セリネート（３１４ｍｇ、１.０２ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（３３５μｌ、３.０５ｍｍｏｌ、３当量）を、ＤＭＦ中に０℃で提供する。次いで、（Ｎ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アロスレオニン（２２３ｍｇ、１.０２ｍｍｏｌ、１当量）を添加し、続いてＴＣＴＵ（５０６ｍｇ、１.４２ｍｍｏｌ、１.４当量）を添加する。混合物を終夜撹拌し、次いで、クロマトグラフィーにより方法４５に従い後処理する。表題化合物を収量２９８ｍｇ（理論値の７３％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.89 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.91 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 397.0 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C19H29N2O7 計算値 397.1970, 実測値 397.1971 [M+H]+.
【０３５０】
実施例１５５Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリネート
【化１６５】
2009533371.tif 000168
実施例１５０Ａの化合物の製造方法に従い、表題化合物を、ベンジルＬ−セリネート（３００ｍｇ、０.９７ｍｍｏｌ）およびＮ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアラニン（２２０ｍｇ、１.１６ｍｍｏｌ）から、収量２７７ｍｇ（理論値の７８％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.05 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.81 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 367.2 (50) [M+H]+.
【０３５１】
実施例１５６Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリネート
【化１６６】
2009533371.tif 000169
実施例１５０Ａの化合物の製造方法に従い、表題化合物を、ベンジルＬ−セリネート（６１０ｍｇ、１.９７ｍｍｏｌ）およびＮ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアスパラギン（４５８ｍｇ、１.９７ｍｍｏｌ、１当量）から、収量３１３ｍｇ（理論値の３９％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.70 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.78 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 410.1 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C19H27N3O7 計算値 410.1922, 実測値 410.1914 [M+H]+.
【０３５２】
実施例１５７Ａ
ベンジルＬ−セリル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１６７】
2009533371.tif 000170
実施例１５０Ａの化合物（２９０ｍｇ、０.７６ｍｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。粗製表題化合物４５１ｍｇ（定量的）を得、これ以上精製せずにさらに反応させる。
LC-MS (方法 22): Rt = 2.16 分; MS (ESIpos) m/z (%) = 283.0 (100) [M+H]+.
【０３５３】
実施例１５８Ａ
ベンジル［３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリネートビストリフルオロ酢酸塩
【化１６８】
2009533371.tif 000171
実施例１５１Ａの化合物（４６０ｍｇ、０.９９ｍｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。粗製表題化合物５６５ｍｇ（定量的）を得、これ以上精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.03 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.23 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 344.2 (30) [M+H]+.
【０３５４】
実施例１５９Ａ
ベンジルＬ−フェニルアラニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１６９】
2009533371.tif 000172
実施例１５２Ａの化合物（２７５ｍｇ、０.６２ｍｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。粗製表題化合物２８５ｍｇ（理論値の９３％）を得、これ以上精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 6): Rt = 3.33 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.14 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 343.3 (100) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 341.3 (100) [M-H]-.
【０３５５】
実施例１６０Ａ
ベンジルＬ−スレオニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１７０】
2009533371.tif 000173
実施例１５３Ａの化合物（１９５ｍｇ、０.４３ｍｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。粗製表題化合物２３５ｍｇ（定量的）を得、これ以上精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.20 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.32 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 297 (100) [M+H]+.
【０３５６】
実施例１６１Ａ
ベンジルＬ−アロスレオニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１７１】
2009533371.tif 000174
実施例１５４Ａの化合物（２８６ｍｇ、０.７２ｍｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。粗製表題化合物３２６ｍｇ（定量的）を得、これ以上精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.16 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.38 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 297 (15) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C14H21N2O5 計算値 297.1445, 実測値 297.1436 [M+H]+.
【０３５７】
実施例１６２Ａ
ベンジルＬ−アラニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１７２】
2009533371.tif 000175
実施例１５５Ａの化合物（２７７ｍｇ、０.７６ｍｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。粗製表題化合物２８５ｍｇ（定量的）を得、これ以上精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.20 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.35 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 267 (100) [M+H]+.
【０３５８】
実施例１６３Ａ
ベンジルＬ−アスパラギニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１７３】
2009533371.tif 000176
実施例１５６Ａの化合物（３１３ｍｇ、０.７６ｍｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。粗製表題化合物４２８ｍｇ（定量的）を得、これ以上精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 6): Rt = 2.96 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.07 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 310 (100) [M+H]+.
【０３５９】
実施例１６４Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−Ｌ−セリル−Ｌ−セリネート
【化１７４】
2009533371.tif 000177
実施例１５７Ａの化合物（３６０ｍｇ、０.８５ｍｍｏｌ）およびＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグリシン（１４９ｍｇ、０.８５ｍｍｏｌ、１当量）を、ジクロロメタン（４.４ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却する。ＨＡＴＵ（４８５ｍｇ、１.２８ｍｍｏｌ、１.５当量）を添加し、次いで、１５分間かけて、ジクロロメタン（３ｍｌ）中のＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０.７４ｍｌ、４.２６ｍｍｏｌ、５当量）の溶液を滴下して添加する。次いで、混合物を室温で２４時間撹拌し、続いて重炭酸ナトリウムで洗浄し、有機相を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濃縮する。粗生成物をクロマトグラフィー（方法３４）により精製する。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥する。収量：無色固体として２２０ｍｇ（０.５０ｍｍｏｌ、理論値の５９％）。
HPLC (方法 3) Rt = 3.70 分.
LC-MS (方法 1): Rt = 1.93 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 440.7 (100).
【０３６０】
実施例１６５Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−［３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリネート
【化１７５】
2009533371.tif 000178
実施例１６４Ａの化合物の製造方法に従い、溶媒としてジクロロメタンの代わりにＤＭＦ（１.８ｍｌ）を用いて、実施例１５８Ａの化合物（５６５ｍｇ、０.９５ｍｍｏｌ）およびＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグリシン（１６６ｍｇ、０.９５ｍｍｏｌ、１当量）から、表題化合物を収量４０５ｍｇ（理論値の８５％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.52 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.49 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 501.4 (100) [M+H]+.
【０３６１】
実施例１６６Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−セリネート
【化１７６】
2009533371.tif 000179
実施例１６４Ａの化合物の製造方法に従い、溶媒としてジクロロメタンの代わりにＤＭＦ（２.０ｍｌ）を用いて、実施例１５９Ａの化合物（２８５ｍｇ、０.５８ｍｍｏｌ）およびＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグリシン（１２２ｍｇ、０.７０ｍｍｏｌ、１当量）から、表題化合物を収量２３７ｍｇ（理論値の８２％）で得る。
HPLC (方法 6): Rt = 4.28 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.29 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 500.2 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C26H34N3O7 計算値 500.2392, 実測値 500.2399 [M+H]+.
【０３６２】
実施例１６７Ａ
ベンジル［Ｎ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−グリシル］−Ｌ−スレオニル−Ｌ−セリネート
【化１７７】
2009533371.tif 000180
実施例１６４Ａの化合物の製造方法に従い、溶媒としてジクロロメタンの代わりにＤＭＦ（１.８ｍｌ）を用いて、収量８４ｍｇ（理論値の３４％）で、実施例１６０Ａの化合物（１７３ｍｇ、０.４９ｍｍｏｌ）およびＮ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグリシン（１０３ｍｇ、０.５９ｍｍｏｌ、１.２当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.45 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.38 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 510.2 (100) [M+H]+.
【０３６３】
実施例１６８Ａ
ベンジル［Ｎ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−グリシル］−Ｌ−アロスレオニル−Ｌ−セリネート
【化１７８】
2009533371.tif 000181
実施例１６１Ａの化合物（２９５ｍｇ、０.７２ｍｍｏｌ）およびＮ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグリシン（１２６ｍｇ、０.７２ｍｍｏｌ、１.０当量）をＤＭＦ中に０℃で提供する。次いで、ＴＣＴＵ（３２９ｍｇ、０.８７ｍｍｏｌ、１.２当量）およびＮＭＭ（２３８μｌ、２.１６ｍｍｏｌ、３当量）を添加する。混合物を室温で終夜撹拌し、次いで方法４５に従いクロマトグラフィーにより後処理する。生成物含有画分を合わせ、改変した方法３２（グラジエント：０−５分１０％Ｂ、５.０１−３５分勾配８５％Ｂ、３５.０１−４０分８５％Ｂ）に従い、クロマトグラフィーにより精製する。表題化合物を収量１７０ｍｇ（理論値の５２％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.73 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.82 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 454.1 (80) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C21H32N3O8 計算値 454.2184 , 実測値 454.2177 [M+H]+.
【０３６４】
実施例１６９Ａ
ベンジル［Ｎ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−グリシル］−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリネート
【化１７９】
2009533371.tif 000182
実施例１６４Ａの化合物の製造方法に従い、溶媒としてジクロロメタンの代わりにＤＭＦ（１.８ｍｌ）を用いて、収量１７２ｍｇ（理論値の４３％）で、実施例１６２Ａの化合物（２８５ｍｇ、０.７５ｍｍｏｌ）およびＮ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグリシン（１５７ｍｇ、０.９０ｍｍｏｌ、１.２当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.83 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 1.85 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 424.4 (100) [M+H]+.
【０３６５】
実施例１７０Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グリシル］−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリネート
【化１８０】
2009533371.tif 000183
実施例１６４Ａの化合物の製造方法に従い、溶媒としてジクロロメタンの代わりにＤＭＦ（２.０ｍｌ）を用いて、収量２０８ｍｇ（理論値の５６％）で、実施例１６３Ａの化合物（４２８ｍｇ、０.８０ｍｍｏｌ）およびＮ２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグリシン（１６７ｍｇ、０.９６ｍｍｏｌ、１.２当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.60 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 1.75 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 467.0 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C21H31N4O8 計算値 467.2137 , 実測値 467.2142 [M+H]+.
【０３６６】
実施例１７１Ａ
ベンジルグリシル−Ｌ−セリル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１８１】
2009533371.tif 000184
実施例１６４Ａの化合物（８８ｍｇ、０.２０ｍｍｏｌ）を、反応物溶液１.５ｍｌ中で、手順２に従い反応させる。粗生成物をこれ以上精製せずにさらに反応させる。収量：１１８ｍｇ（定量的）
HPLC (方法 3): Rt = 3.08 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.56 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 340.0 (100) [M+H]+.
【０３６７】
実施例１７２Ａ
ベンジル［グリシル］−［３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリネートビストリフルオロ酢酸塩
【化１８２】
2009533371.tif 000185
実施例１６５Ａの化合物（６０ｍｇ、０.１２ｍｍｏｌ）を、反応物溶液１.５ｍｌ中で、手順２に従い反応させる。粗生成物をこれ以上精製せずにさらに反応させる。収量：８１ｍｇ（定量的）
HPLC (方法 5): Rt = 3.05 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.36 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 401.0 (40) [M+H]+.
【０３６８】
実施例１７３Ａ
ベンジルグリシル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１８３】
2009533371.tif 000186
実施例１６６Ａの化合物（６３ｍｇ、０.１３ｍｍｏｌ）を、反応物溶液１.０ｍｌ中で、手順２に従い反応させる。粗生成物を、これ以上精製せずにさらに反応させる。収量：６５ｍｇ（理論値の９６％）。
HPLC (方法 6): Rt = 3.35 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 1.26 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 400.1 (90) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 398.1 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C21H26N3O5 計算値 400.1867, 実測値 400.1869 [M+H]+.
【０３６９】
実施例１７４Ａ
ベンジルグリシル−Ｌ−スレオニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１８４】
2009533371.tif 000187
実施例１６７Ａの化合物（８２ｍｇ、０.１６ｍｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液１.５ｍｌ中で反応させる。粗生成物をクロマトグラフィー（方法４４）により精製する。収量：４３ｍｇ（理論値の７６％）。
HPLC (方法 5): Rt = 3.16 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.35 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 354 (50) [M+H]+.
【０３７０】
実施例１７５Ａ
ベンジルグリシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１８５】
2009533371.tif 000188
実施例１６８Ａの化合物（１６９ｍｇ、０.３７ｍｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液１.５ｍｌ中で反応させる。粗生成物（１９４ｍｇ、ほぼ定量的）を、これ以上精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.16 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 0.78 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 354.3 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C16H24N4O6 計算値 354.1660 , 実測値 354.1648 [M+H]+.
【０３７１】
実施例１７６Ａ
ベンジルグリシル−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１８６】
2009533371.tif 000189
実施例１６９Ａの化合物（１７２ｍｇ、０.３２ｍｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液３.０ｍｌ中で反応させる。粗生成物を精製せずにさらに反応させる。収量：１７５ｍｇ（理論値の９９％）。
HPLC (方法 5): Rt = 3.20 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.41 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 324 (40) [M+H]+.
【０３７２】
実施例１７７Ａ
ベンジルグリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１８７】
2009533371.tif 000190
実施例１７０Ａの化合物（６０ｍｇ、０.１３ｍｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液１.０ｍｌ中で反応させる。粗生成物を精製せずにさらに反応させる。収量：６２ｍｇ（定量的）。
HPLC (方法 6): Rt = 2.89 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.14 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 367 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C16H23N4O6 計算値 367.1613 , 実測値 367.1609 [M+H]+.
【０３７３】
実施例１７８Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−セリル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１８８】
2009533371.tif 000191
実施例３２Ａの化合物（７５ｍｇ、３８μｍｏｌ）および１７１Ａ（２６ｍｇ、４５μｍｏｌ、１.２当量）を、ＤＭＦ（９５０μｌ）に溶解し、溶液を−２０℃に冷却する。４−メチルモルホリン（２９μｌ、２６３μｍｏｌ、７当量）およびＨＡＴＵ（２３ｍｇ、６０μｍｏｌ、１.６当量）を添加し、混合物を室温で１６時間撹拌する。次いで、完全な混合物をＨＰＬＣカラムに載せ、クロマトグラフィーにより方法３３に従い精製する。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥する。表題化合物１５ｍｇ（理論値の３４％）を無色固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.89 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.81 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1053 (90) [M+H]+.
【０３７４】
実施例１７９Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１８９】
2009533371.tif 000192
実施例１７８Ａの化合物の製造方法に従い、収量３４ｍｇ（理論値の３３％）で、実施例３２Ａの化合物（８０ｍｇ、８３μｍｏｌ）および実施例１７２Ａの化合物（７９ｍｇ、１２５μｍｏｌ、１.５当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.75 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.52 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 557.6 (100) [M+2H]2+; 1113.8 (10) [M+H]+.
【０３７５】
実施例１８０Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１９０】
2009533371.tif 000193
実施例１７８Ａの化合物の製造方法に従い、収量３９ｍｇ（理論値の３３％）で、実施例３２Ａの化合物（８２ｍｇ、９７μｍｏｌ）および実施例１７３Ａの化合物（６５ｍｇ、１２６μｍｏｌ、１.３当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.96 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.87 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 506.8 (90) [M+2H]2+; 1112.5 (100) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1110.5 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C54H86N11O14 計算値 1112.6351, 実測値 1112.6343 [M+H]+.
【０３７６】
実施例１８１Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−スレオニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１９１】
2009533371.tif 000194
実施例１７８Ａの化合物の製造方法に従い、実施例３２Ａの化合物（６７ｍｇ、８０μｍｏｌ）および実施例１７４Ａの化合物（３１ｍｇ、８８μｍｏｌ、１.１当量）から、表題化合物を収量２１ｍｇ（理論値の２０％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.89 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.71 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1066.7 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C49H84N11O15 計算値 1066.6143, 実測値 1066.6130 [M+H]+.
【０３７７】
実施例１８２Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１９２】
2009533371.tif 000195
実施例３２Ａの化合物（５７ｍｇ、５９μｍｏｌ）および実施例１７５Ａの化合物（４８ｍｇ、７１μｍｏｌ、１.２当量）を、実施例１７８Ａの化合物の製造方法に従い反応させる。後処理は、Sephadex LH20（方法４５）で、続いて、改変した方法４４（グラジエント：０−５分５％Ｂ、勾配、３０−３５分７５％Ｂ、３５.０１−４０分７５％Ｂ）に従うクロマトグラフィーにより行う。表題化合物を収量６５ｍｇ（理論値の９３％）で得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.70 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.70 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 483.9 (100) [M-Boc+2H]2+, 1066.6 (70) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C49H84N11O15 計算値 1066.6143, 実測値 1066.6134 [M+H]+.
【０３７８】
実施例１８３Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１９３】
2009533371.tif 000196
実施例１７８Ａの化合物の製造方法に従い、クロマトグラフィー（Kromasil RP-18 5 μm、100 Å、250 x 20 mm；溶離剤Ａ：水＋０.０５％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル＋０.０５％ＴＦＡ：流速：１０ｍｌ／分；６０％Ａ、４０％Ｂ均一溶媒）によるさらなる精製の後、表題化合物を収量４８ｍｇ（理論値の５０％）で、実施例３２Ａの化合物（８０ｍｇ、８４μｍｏｌ）および実施例１７６Ａの化合物（６０ｍｇ、１０９μｍｏｌ、１.３当量）から得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.99 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.70 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1036.6 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C48H81N11O14 計算値 1036.6038, 実測値 1036.6027 [M+H]+.
【０３７９】
実施例１８４Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−［Ｎ５−（イミノ−｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル］｝−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリル］−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリネート
【化１９４】
2009533371.tif 000197
実施例１７８Ａの化合物の製造方法に従い、そして、クロマトグラフィー（Kromasil RP-18 5 μm、100 Å、250 x 20 mm；溶離剤Ａ：水＋０.０５％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル＋０.０５％ＴＦＡ：流速：１０ｍｌ／分；６０％Ａ、４０％Ｂ均一溶媒）によるさらなる精製の後、収量６２ｍｇ（理論値の４９％）で、実施例１４８Ａの化合物（８７ｍｇ、８４μｍｏｌ）および実施例３６Ａの化合物（５０ｍｇ、１０１μｍｏｌ、１.２当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.40 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.97 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1403.7 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C66H107N12O19S 計算値 1403.7491, 実測値 1403.7517 [M+H]+.
【０３８０】
実施例１８５Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化１９５】
2009533371.tif 000198
実施例１７８Ａの化合物の製造方法に従い、収量４８ｍｇ（理論値の３１％）で、実施例３２Ａの化合物（１００ｍｇ、１１８μｍｏｌ）および実施例１７７Ａの化合物（６２ｍｇ、１３０μｍｏｌ、１.１当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.66 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 1.66 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 490.3 (100) [M-Boc +2H]2+, 1079.6 (80) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C49H83N12O15 計算値 1079.6096, 実測値 1079.6090 [M+H]+.
【０３８１】
実施例１８６Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−セリル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化１９６】
2009533371.tif 000199
実施例１７８Ａの化合物（２１ｍｇ、１８μｍｏｌ）を、酢酸７５０μｌ中、１０％パラジウム−炭素５ｍｇの存在下、室温で、大気圧下で、２時間水素化する。混合物を濾過して結晶を除去し、オイルポンプによる真空下で一定重量に乾燥する。表題化合物を定量的収量（２０ｍｇ）で得、精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.56 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.72 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 963.0 (90) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C41H76N11O15 計算値 962.5517, 実測値 962.5537 [M+H]+.
【０３８２】
実施例１８７Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化１９７】
2009533371.tif 000200
実施例１７９Ａの化合物（５５ｍｇ、４５μｍｏｌ）を、実施例１８６Ａの化合物の製造方法に従い水素化する。粗生成物の濃縮後、それを直接手順２によるＢｏｃ除去に付し、再度濃縮する。表題化合物４１ｍｇ（理論値の８８％）を得、これ以上精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.56 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.19 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 462 (40) [M+H]+; (ESIneg): m/z (%) = [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C41H71N12O12 計算値 923.5309, 実測値 923.5321 [M+H]+.
【０３８３】
実施例１８８Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化１９８】
2009533371.tif 000201
実施例１８０Ａの化合物（３９ｍｇ、３２μｍｏｌ）を、実施例１８６Ａの化合物の製造方法に従い水素化する。表題化合物３６ｍｇ（定量的）を得、これ以上精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 6): Rt = 3.55 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.75 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 462 (100) [M-Boc+2 H]2+, 1022.1 (10) [M+H]+; (ESIneg): m/z (%) = 1020.8 [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C47H80N11O14 計算値 1022.5881, 実測値 1022.5876 [M+H]+.
【０３８４】
実施例１８９Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−スレオニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化１９９】
2009533371.tif 000202
実施例１８１Ａの化合物（２１ｍｇ、１８μｍｏｌ）を、実施例１８６Ａの化合物の製造方法に従い水素化する。表題化合物１８ｍｇ（理論値の９８％）を無色固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.58 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.58 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 976.6 (80) [M+H]+.
【０３８５】
実施例１９０Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２００】
2009533371.tif 000203
実施例１９７Ａの化合物（４４ｍｇ、３７μｍｏｌ）を、メタノール（５.０ｍｌ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ）を添加し、混合物を室温、大気圧下で、２時間水素化する。混合物を濾過して触媒を除去し、濾液を濃縮する。粗製表題化合物４２ｍｇ（定量的）を得、精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.00 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.32 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 439 (100) [M+2H]2+; MS (ESIneg): m/z (%) = 875 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C37H69N11O13 計算値 876.5150, 実測値 876.5146 [M+H]+.
【０３８６】
実施例１９１Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化２０１】
2009533371.tif 000204
実施例１８３Ａの化合物（４７ｍｇ、４１μｍｏｌ）を、実施例１８６Ａの化合物の製造方法に従い水素化する。表題化合物４３ｍｇ（理論値の９９％）を固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.62 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.58 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 946.5 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C41H76N11O14 計算値 946.5568, 実測値 946.5569 [M+H]+.
【０３８７】
実施例１９２Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−［Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル］｝−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−セリル］−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン
【化２０２】
2009533371.tif 000205
実施例１８４Ａの化合物（６２ｍｇ、４１μｍｏｌ）を、実施例１８６Ａの化合物の製造方法に従い水素化する。表題化合物５６ｍｇ（理論値の９６％）を固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.57 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 3.06 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1313.7 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C59H101N12O19S 計算値 1313.7022, 実測値 1313.7020 [M+H]+.
【０３８８】
実施例１９３Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化２０３】
2009533371.tif 000206
実施例１８５Ａの化合物（４８ｍｇ、４０μｍｏｌ）を、実施例１８６Ａの化合物の製造方法に従い水素化する。表題化合物４２ｍｇ（理論値の９９％）を無色固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.40 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.57 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 445.3 (100) [M+2H]2+, 9989.6 (70) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C42H77N12O15 計算値 989.5626, 実測値 989.5619 [M+H]+.
【０３８９】
実施例１９４Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−セリル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２０４】
2009533371.tif 000207
実施例１８６Ａの化合物（２０ｍｇ、１８μｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。表題化合物２０ｍｇ（理論値の９９％）を固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 2.96 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.25 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 432 (100) [M+2H]2+, 862.6 (1) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C36H68N11O13 計算値 862.4993, 実測値 862.5027 [M+H]+.
【０３９０】
実施例１９５Ａ
［（３Ｒ）３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２０５】
2009533371.tif 000208
実施例１８８Ａの化合物（３６ｍｇ、３２μｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。表題化合物３６ｍｇ（理論値の９９％）を固体として得る。
HPLC (方法 6): Rt = 2.98 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.11 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 461.8 (100) [M+2H]2+, 922.5 (10) [M+H]+; MS (ESIpos): m/z (%) = 920.5 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C42H72N11O12 計算値 922.5357, 実測値 922.5357 [M+H]+.
【０３９１】
実施例１９６Ａ
［（３−Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−スレオニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２０６】
2009533371.tif 000209
実施例１８９Ａの化合物（１８ｍｇ、１７μｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。表題化合物１８ｍｇ（理論値の９４％）を固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 2.99 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.47 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 439 (100) [M+2H]2+.
HR-TOF-MS (方法 24): C37H70N11O13 計算値 876.5150, 実測値 876.5161 [M+H]+.
【０３９２】
実施例１９７Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｌ−セリネートビストリフルオロ酢酸塩
【化２０７】
2009533371.tif 000210
実施例１８２Ａの化合物（５７ｍｇ、４８μｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。改変した方法４４（グラジエント：０−５分５％Ｂ、勾配、３０−３５分６０％Ｂ、３５.０１−４０分６０％Ｂ）に従うクロマトグラフィーによる精製後、表題化合物４５ｍｇ（理論値の７８％）を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.40 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.12 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 483.9 (100) [M+2H]2+, 966.6 (10) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C44H75N11O13 計算値 966.5619, 実測値 966.5643 [M+H]+.
【０３９３】
実施例１９８Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２０８】
2009533371.tif 000211
実施例１９１Ａの化合物（４３ｍｇ、３８μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液２ｍｌ中で反応させる。粗製表題化合物４５ｍｇを固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 2.99 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.32 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 424 (100) [M+2H]2+.
HR-TOF-MS (方法 24): C36H67N11O12 計算値 846.5044, 実測値 846.5029 [M+H]+.
【０３９４】
実施例１９９Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−セリル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリネートビストリフルオロ酢酸塩
【化２０９】
2009533371.tif 000212
実施例１９２Ａの化合物（５６ｍｇ、３９μｍｏｌ）、水１１μｌおよびトリイソプロピルシラン１１μｌを、ＴＦＡ４.０ｍｌに取る。２時間後、混合物を濃縮し、クロマトグラフィー（方法４５）により精製する。表題化合物４０ｍｇ（理論値の９０％）を固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 2.96 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.30 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 446 (100) [M+2H]2+.
【０３９５】
実施例２００Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２１０】
2009533371.tif 000213
実施例１９３Ａの化合物（４２ｍｇ、３８μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液２ｍｌ中で反応させる。粗製表題化合物４２ｍｇ（理論値の９９％）を固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 2.77 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.16 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 446 (100) [M+2H]2+, 890 (20) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 888 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C37H69N12O13 計算値 889.5102, 実測値 889.5095 [M+H]+.
【０３９６】
実施例２０１Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−セリル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化２１１】
2009533371.tif 000214
実施例１９４Ａの化合物（１９ｍｇ、１７μｍｏｌ）および実施例１７Ａの化合物（１２ｍｇ、１９μｍｏｌ、１.１当量）を、ＤＭＦ（５３０μｌ）に０℃で溶解し、ＤＩＥＡ（１５μｌ、８７μｍｏｌ、５当量）を添加する。反応混合物をさらに終夜撹拌し、その間にそれはゆっくりと室温に温まる。混合物をアセトニトリルに取り、クロマトグラフィー（方法４４）により精製する。収量：固体としての表題化合物１４ｍｇ（１０μｍｏｌ、理論値の５９％）。
HPLC (方法 5): Rt = 3.94 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.93 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1259.1 (50) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C58H92N13O18 計算値 1258.6678, 実測値 1258.6675 [M+H]+.
【０３９７】
実施例２０２Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化２１２】
2009533371.tif 000215
実施例１８７Ａの化合物（４１ｍｇ、３６μｍｏｌ）を、実施例１７Ａの化合物（２３ｍｇ、３９μｍｏｌ、１.１当量）と、実施例２０１Ａの化合物の製造方法に従い反応させる。表題化合物３７ｍｇ（理論値の７３％）を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.87 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.72 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 660.5 (100) [M+2H]2+, 1319.7 (5) [M+H]+; (ESIneg): m/z (%) = 1317.5 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C63H95N14O17 計算値 1319.6995, 実測値 1319.6978 [M+H]+.
【０３９８】
実施例２０３Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２１３】
2009533371.tif 000216
実施例１９５Ａの化合物（３６ｍｇ、３１μｍｏｌ）を、実施例１７Ａの化合物（２２ｍｇ、３９μｍｏｌ、１.２当量）と、実施例２０１Ａの化合物の製造方法に従い反応させる。表題化合物３４ｍｇ（理論値の７０％）を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.93 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.01 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 610.1 (100) [M-Boc+2H]2+, 1318.8 (20) [M+H]+; (ESIneg): m/z (%) = 1316.7 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C64H96N13O17 計算値 1318.7042, 実測値 1318.7036 [M+H]+.
【０３９９】
実施例２０４Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−スレオニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化２１４】
2009533371.tif 000217
実施例１９６Ａの化合物（１８ｍｇ、１７μｍｏｌ）を、実施例１７Ａの化合物（１２ｍｇ、２１μｍｏｌ、１.１当量）と、実施例２０１Ａの化合物の製造方法に従い反応させる。方法４５に従う精製後、表題化合物１７ｍｇ（理論値の７６％）を単離する。
HPLC (方法 5): Rt = 3.96 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.97 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1272.8 (40) [M+H]+
HR-TOF-MS (方法 24): C59H94N13O18 計算値 1272.6835, 実測値 1272.6853 [M+H]+.
【０４００】
実施例２０５Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化２１５】
2009533371.tif 000218
実施例１９０Ａの化合物（４４ｍｇ、４０μｍｏｌ）を、実施例１７Ａの化合物（２５ｍｇ、４４μｍｏｌ、１.１当量）と、実施例２０１Ａの化合物の製造方法に従い反応させる。方法４５による精製の後、表題化合物５０ｍｇ（理論値の９０％）を単離する。
HPLC (方法 5): Rt = 3.80 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.98 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1272.7 (20) [M+H]+
HR-TOF-MS (方法 24): C59H94N13O18 計算値 1272.6835, 実測値 1272.6846 [M+H]+.
【０４０１】
実施例２０６Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化２１６】
2009533371.tif 000219
実施例１９８Ａの化合物（４５ｍｇ、４２μｍｏｌ）を、実施例１７Ａの化合物（３２ｍｇ、５４μｍｏｌ、１.３当量）と、実施例２０１Ａの化合物の製造方法に従い反応させる。方法４５に従う精製の後、表題化合物３８ｍｇ（理論値の６７％）を単離する。
HPLC (方法 5): Rt = 3.99 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.12 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 571.9 (90) [M-Boc +2H]2+; 1242.7 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C58H92N13O17 計算値 1242.6729, 実測値 1242.6691 [M+H]+.
【０４０２】
実施例２０７Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−セリル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化２１７】
2009533371.tif 000220
実施例１９９Ａの化合物（３９ｍｇ、３５μｍｏｌ）を、実施例１７Ａの化合物（２４ｍｇ、４２μｍｏｌ、１.２当量）と実施例２０１Ａの化合物の製造方法に従い反応させる。方法４５に従う精製の後、表題化合物４２ｍｇ（理論値の８０％）を単離する。
HPLC (方法 5): Rt = 3.93 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.93 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 594.4 (100) [M-Boc +2H]2+; 1287.7 (30) [M+H]+.
【０４０３】
実施例２０８Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化２１８】
2009533371.tif 000221
実施例２００Ａの化合物（４２ｍｇ、３８μｍｏｌ）を、実施例１７Ａの化合物（２６ｍｇ、４５μｍｏｌ、１.２当量）と、実施例２０１Ａの化合物の製造方法に従いと反応させる。方法４５に従う精製の後、表題化合物４６ｍｇ（理論値の８１％）を単離する。
HPLC (方法 5): Rt = 3.78 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.91 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1285.7 (40) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C59H93N14O18 計算値1285.6787, 実測値 1285.6777 [M+H]+.
【０４０４】
実施例２０９Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−セリル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２１９】
2009533371.tif 000222
実施例２０１Ａの化合物（１４ｍｇ、１０μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液０.５ｍｌと反応させる。これ以上精製せずに、表題化合物１３ｍｇ（９.３μｍｏｌ、理論値の９５％）を固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.44 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.19 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 580 (100) [M+2H]2+, 1158.6 (5) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C53H84N13O16 計算値 1158.6154, 実測値 1158.6183 [M+H]+.
【０４０５】
実施例２１０Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２２０】
2009533371.tif 000223
実施例２０２Ａの化合物（３７ｍｇ、２６μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液０.５ｍｌと反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物４６ｍｇを得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.39 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.67 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 610 (20) [M+2H]2+; (ESIneg m/z (%) = 1218 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C58H87N14O15 計算値 1219.6470, 実測値 1219.6472 [M+H]+.
【０４０６】
実施例２１１Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２２１】
2009533371.tif 000224
実施例２０３Ａの化合物（３４ｍｇ、２２μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液２.０ｍｌと反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物３４ｍｇ（定量的）を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.34 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.37 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 610.1 (100) [M+2H]2+, 1218.8 (5) [M+H]+; (ESIneg m/z (%) = 1216.8 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C59H88N13O15 計算値 1218.6518, 実測値 1218.6539 [M+H]+.
【０４０７】
実施例２１２Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−スレオニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２２２】
2009533371.tif 000225
実施例２０４Ａの化合物（１７ｍｇ、１２μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液１.０ｍｌと反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物１７ｍｇ（定量的）を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.48 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 1.49 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 587.2 (100) [M+2H]2+, 1172.7 (5) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C54H86N13O16 計算値 1172.6310, 実測値 1172.6328 [M+H]+.
【０４０８】
実施例２１３Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｌ−セリネートビストリフルオロ酢酸塩
【化２２３】
2009533371.tif 000226
実施例２０５Ａの化合物（５０ｍｇ、３６μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液４.８ｍｌと反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物５６ｍｇ（定量的）を得、精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 6): Rt = 3.22 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.32 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 586.9 (100) [M+2H]2+.
HR-TOF-MS (方法 24): C54H86N13O16 計算値 1172.6310, 実測値 1172.6323 [M+H]+.
【０４０９】
実施例２１４Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２２４】
2009533371.tif 000227
実施例２０６Ａの化合物（４９ｍｇ、３６μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液１.０ｍｌと１時間反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物４９ｍｇ（定量的）を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.46 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.49 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 572.0 (100) [M+2H]2+, 1142.6 (5) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C53H84N13O15 計算値 1142.6205, 実測値 1142.6221 [M+H]+.
【０４１０】
実施例２１５Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−セリル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリネートビストリフルオロ酢酸塩
【化２２５】
2009533371.tif 000228
実施例２０７Ａの化合物（４２ｍｇ、２８μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液１.０ｍｌと１時間反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物４３ｍｇ（定量的）を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.43 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.34 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 594.5 (100) [M+2H]2+, 1187.6 (5) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C53H83N14O17 計算値 1187.6056, 実測値 1187.6074 [M+H]+.
【０４１１】
実施例２１６Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２２６】
2009533371.tif 000229
実施例２０８Ａの化合物（４６ｍｇ、３０μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液１.０ｍｌと３０分間反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物４６ｍｇ（定量的）を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.21 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.31 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 593.5 (100) [M+2H]2+, 1185.5 (5) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C54H85N14O16 計算値 1185.6263, 実測値 1185.6241 [M+H]+.
【０４１２】
実施例２１７Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−セリル−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２２７】
2009533371.tif 000230
実施例２０９Ａの化合物（１３ｍｇ、９.３μｍｏｌ）を、ＤＭＦ（４８０μＬ）に溶解し、溶液を０℃に冷却する。４−メチルモルホリン（６μｌ、５６μｍｏｌ、６当量）およびＨＡＴＵ（１１ｍｇ、２８μｍｏｌ、３当量）を添加し、混合物を０℃で２時間撹拌する。次いで、完全な混合物をＨＰＬＣカラムに載せ、方法４４に従うクロマトグラフィーにより精製する。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥する。表題化合物５ｍｇ（４.０μｍｏｌ、理論値の４３％）を固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.70 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.49 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 570.9 (80) [M+2H]2+, 1140.6 (90) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C53H82N13O15 計算値 1140.6048, 実測値 1140.6066 [M+H]+.
【０４１３】
実施例２１８Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２２８】
2009533371.tif 000231
実施例２１７Ａの化合物の製造方法に従い、収量１７ｍｇ（理論値の５１％）で、実施例２１０Ａの化合物（３７ｍｇ、２６μｍｏｌ）から表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.60 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.45 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 601.5 (100) [M+2H]2+, 1201.6 (20) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C58H85N14O14 計算値 1204.6365, 実測値 1201.6338 [M+H]+.
【０４１４】
実施例２１９Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−フェニルアラニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２２９】
2009533371.tif 000232
実施例２１７Ａの化合物の製造方法に従い、収量２８ｍｇ（理論値の９６％）で、実施例２１１Ａの化合物（３４ｍｇ、２２μｍｏｌ）から表題化合物を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.78 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.75 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 601.0 (50) [M+2H]2+, 1200.8 (100) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1198.8 (100) [M-H]-.
【０４１５】
実施例２２０Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−スレオニル−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２３０】
2009533371.tif 000233
実施例２１７Ａの化合物の製造方法に従い、収量１０ｍｇ（理論値の６５％）で、実施例２１２Ａの化合物（１７ｍｇ、１２μｍｏｌ）から表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.75 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.59 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1154.7 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C54H84N13O15 計算値 1154.6205, 実測値 1154.6194 [M+H]+.
【０４１６】
実施例２２１Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｌ−セリネートＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２３１】
2009533371.tif 000234
実施例２１３Ａの化合物（５０ｍｇ、３６μｍｏｌ）を、実施例２１７Ａの化合物の製造方法に従い環化する。次いで、方法４５をクロマトグラフィーに使用する。表題化合物を粗製物収量５２ｍｇ（純度７５％、理論値の８６％）で得、さらに精製しない。
HPLC (方法 6): Rt = 3.55 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.60 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1154.7 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C54H84N13O15 計算値 1154.6205, 実測値 1154.6171 [M+H]+.
【０４１７】
実施例２２２Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２３２】
2009533371.tif 000235
実施例２１７Ａの化合物の製造方法に従い、精製を方法４５に従って行い、収量３４ｍｇ（理論値の７７％）で、実施例２１４Ａの化合物（４９ｍｇ、３６μｍｏｌ）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.78 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.61 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1124.6 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C53H82N13O14 計算値 1154.6099, 実測値 1124.6073 [M+H]+.
【０４１８】
実施例２２３Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２３３】
2009533371.tif 000236
実施例２１７Ａの化合物の製造方法に従い、精製を方法４５に従って行い、収量２８ｍｇ（理論値の７３％）で、実施例２１５Ａの化合物（４２ｍｇ、２７μｍｏｌ）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.68 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.57 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1169.6 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C53H81N14O16 計算値 1169.5950, 実測値 1169.5939 [M+H]+.
【０４１９】
実施例２２４Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２３４】
2009533371.tif 000237
実施例２１７Ａの化合物の製造方法に従い、精製を方法４５に従って行い、収量２９ｍｇ（理論値の７５％）で、実施例２１６Ａの化合物（４５ｍｇ、３０μｍｏｌ）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.52 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.56 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1167.5 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C54H83N14O15 計算値 1167.6157, 実測値 1167.6152 [M+H]+.
【０４２０】
実施例２２５Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−セリル−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタム二塩酸塩
【化２３５】
2009533371.tif 000238
実施例２１７Ａの化合物を、１Ｍ塩酸（２４μｌ、６当量）の存在下でメタノール（７５０μＬ）に溶解し、１０％パラジウム−炭素３ｍｇの存在下、大気圧下、室温で１.５時間水素化する。溶液を濾過して触媒を除去し、濃縮する。表題化合物を４.３ｍｇ（定量的）の収量で固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.21 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 0.90 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 503.9 (100) [M+2H]2+, 1006.6 (3) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C45H76N13O13 計算値 1006.5681, 実測値 1006.5670 [M+H]+.
【０４２１】
実施例２２６Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタム二塩酸塩
【化２３６】
2009533371.tif 000239
実施例２２５Ａの化合物の製造方法に従い、収量１７ｍｇ（定量的）で、実施例２１８Ａの化合物（１７ｍｇ、１３μｍｏｌ）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.17 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.34 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 534 (20) [M+2H]2+; (ESIneg): m/z (%) = 1065 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C50H79N14O12 計算値 1067.5997, 実測値 1067.6006 [M+H]+.
【０４２２】
実施例２２７Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタム二塩酸塩
【化２３７】
2009533371.tif 000240
実施例２２５Ａの化合物の製造方法に従い、収量２４ｍｇ（理論値の９９％）で、実施例２１９Ａの化合物（２８ｍｇ、２１μｍｏｌ）から表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.17 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 1.15 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 534 (100) [M+2H]2+; (ESIneg): m/z (%) = 1064.8 (50) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C51H80N13O12 計算値 1066.6044, 実測値 1066.6013 [M+H]+.
【０４２３】
実施例２２８Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−スレオニル−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタム二塩酸塩
【化２３８】
2009533371.tif 000241
実施例２２５Ａの化合物の製造方法に従い、収量８.５ｍｇ（理論値の９９％）で、実施例２２０Ａの化合物（１０ｍｇ、８μｍｏｌ）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.25 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.49 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 511 (100) [M+2H]2+.
HR-TOF-MS (方法 24): C46H78N13O13 計算値 1020.5837, 実測値 1020.5831 [M+H]+.
【０４２４】
実施例２２９Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｌ−セリネートＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタム二塩酸塩
【化２３９】
2009533371.tif 000242
実施例２２５Ａの化合物の製造方法に従い、収量４０ｍｇ（理論値の８６％）で、実施例２２１Ａの化合物（５２ｍｇ、４１μｍｏｌ）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 2.93 分.
【０４２５】
実施例２３０Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタム二塩酸塩
【化２４０】
2009533371.tif 000243
実施例２２５Ａの化合物の製造方法に従い、収量２９ｍｇ（理論値の９９％）で、実施例２２２Ａの化合物（３４ｍｇ、２７μｍｏｌ）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.24 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.48 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 496 (100) [M+2H]2+.
HR-TOF-MS (方法 24): C45H76N13O12 計算値 990.5731, 実測値 990.5726 [M+H]+.
【０４２６】
実施例２３１Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタム二塩酸塩
【化２４１】
2009533371.tif 000244
実施例２２５Ａの化合物の製造方法に従い、収量２１ｍｇ（理論値の９５％）で、実施例２２３Ａの化合物（２８ｍｇ、２０μｍｏｌ）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.16 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.43 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 519 (100) [M+2H]2+.
HR-TOF-MS (方法 24): C45H75N14O14 計算値 1035.5582, 実測値 1035.5585 [M+H]+.
【０４２７】
実施例２３２Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタム二塩酸塩
【化２４２】
2009533371.tif 000245
実施例２２５Ａの化合物の製造方法に従い、収量２４ｍｇ（理論値の９６％）で、実施例２２４Ａの化合物（２９ｍｇ、２３μｍｏｌ）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 2.90 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.32 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 517 (100) [M+2H]2+, 1033 (5) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C46H76N14O13 計算値 1033.5790, 実測値 1033.5773 [M+H]+.
【０４２８】
実施例２３３Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−セリル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム塩酸塩
【化２４３】
2009533371.tif 000246
実施例２２５Ａの化合物（４.３ｍｇ、４μｍｏｌ）および実施例１０Ａの化合物（２.５ｍｇ、６μｍｏｌ、１.５当量）を、ＤＭＦ（３００μｌ）に溶解し、溶液を０℃に冷却する。４−メチルモルホリン（２０μｌ、１６μｍｏｌ、４当量）およびＨＡＴＵ（２.４ｍｇ、６μｍｏｌ、１.６当量）を添加し、混合物を室温で２時間撹拌する。次いで、反応をメタノール３ｍｌで停止し、方法４５に従うクロマトグラフィーにより精製する。生成物含有画分を合わせ、濃縮する。表題化合物４ｍｇ（２.８μｍｏｌ、理論値の７０％）を固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.45 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.08 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 698.6 (100) [M+2H]2+, 1395.4 (30) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C67H109N15O17 計算値 1394.8043, 実測値 1394.8070 [M+H]+.
【０４２９】
実施例２３４Ａ
［Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム塩酸塩
【化２４４】
2009533371.tif 000247
例示的化合物２３３Ａの製造方法に従い、収量１２ｍｇ（理論値の５４％）で、例示的化合物２２６Ａ（１７ｍｇ、１３μｍｏｌ）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.25 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 3.61 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 729 (100) [M+2H]2+; (ESIneg): m/z (%) = 1454 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C72H111N16O16 計算値 1455.8359, 実測値 1455.8347 [M+H]+.
【０４３０】
実施例２３５Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム塩酸塩
【化２４５】
2009533371.tif 000248
実施例２３３Ａの化合物の製造方法に従い、収量１９ｍｇ（理論値の６２％）で、実施例２２７Ａの化合物（２４ｍｇ、２１μｍｏｌ）および実施例８Ａのジペプチド（１０ｍｇ、２７μｍｏｌ、１.３当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 4.57 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.291 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 661.2 (100) [M-Boc +2H]2+, 1421.0 (30) [M+H]+; (ESIneg): m/z (%) = 1419.1 (20) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C70H113N15O16 計算値 1420.8563, 実測値 1420.8558 [M+H]+.
【０４３１】
実施例２３６Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ.−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［Ｌ−スレオニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム塩酸塩
【化２４６】
2009533371.tif 000249
実施例２３３Ａの化合物の製造方法に従い、収量１０ｍｇ（理論値の９１％）で、実施例２２８Ａの化合物（８.５ｍｇ、８μｍｏｌ）および実施例８Ａのジペプチド（４ｍｇ、１０μｍｏｌ、１.３当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.65 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.09 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1374.8 (30) [M+H]+
HR-TOF-MS (方法 24): C65H112N15O17 計算値 1374.8356, 実測値 1374.8376 [M+H]+.
【０４３２】
実施例２３７Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ.−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｌ−セリネートＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム塩酸塩
【化２４７】
2009533371.tif 000250
実施例２３３Ａの化合物の製造方法に従い、表題化合物を、収量４７ｍｇ（純度７７％、理論値の６９％）で、実施例２２９Ａの化合物（４０ｍｇ、３５μｍｏｌ）および実施例８Ａのジペプチド（１７ｍｇ、４６μｍｏｌ、１.５当量）から得る。
HPLC (方法 6): Rt = 4.31 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.08 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1374.8 (50) [M+H]+
HR-TOF-MS (方法 24): C65H112N15O17 計算値 1374.8356, 実測値 1374.8362 [M+H]+.
【０４３３】
実施例２３８Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ.−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム塩酸塩
【化２４８】
2009533371.tif 000251
実施例２３３Ａの化合物の製造方法に従い、収量３７ｍｇ（理論値の９８％）で、実施例２３０Ａの化合物（２９ｍｇ、２７μｍｏｌ）および実施例８Ａのジペプチド（１３ｍｇ、３５μｍｏｌ、１.３当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.60 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.10 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 623.0 (100) [M - Boc +2H]2+; 1344.9 (90) [M+H]+
HR-TOF-MS (方法 24): C64H109N15O16 計算値 1344.8250, 実測値 1344.8241 [M+H]+.
【０４３４】
実施例２３９Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ.−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム塩酸塩
【化２４９】
2009533371.tif 000252
実施例２３３Ａの化合物の製造方法に従い、収量２４ｍｇ（理論値の８９％）で、実施例２３１Ａの化合物（２１ｍｇ、１９μｍｏｌ）および実施例８Ａのジペプチド（９ｍｇ、２５μｍｏｌ、１.３当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.42 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.03 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 645.5 (100) [M - Boc +2H]2+; 1389.9 (40) [M+H]+
HR-TOF-MS (方法 24): C64H108N16O18 計算値 1389.8101, 実測値 1389.8105 [M+H]+.
【０４３５】
実施例２４０Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ.−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタム塩酸塩
【化２５０】
2009533371.tif 000253
実施例２３３Ａの化合物の製造方法に従い、収量３０ｍｇ（理論値の９７％）で、実施例２３２Ａの化合物（２４ｍｇ、２２μｍｏｌ）および実施例８Ａのジペプチド（１１ｍｇ、２８μｍｏｌ、１.３当量）から、表題化合物を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.26 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 2.19 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 644.7 (100) [M - Boc +2H]2+.
HR-TOF-MS (方法 24): C65H111N16O17 計算値 1387.8308, 実測値 1387.8304 [M+H]+. 
【０４３６】
実施例２４１Ａ
ベンジルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニネート
【化２５１】
2009533371.tif 000254
Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニン（１.１３ｇ、５.８３ｍｍｏｌ）を、乾燥ＤＣＭ（６ｍｌ）に溶解し、いくらかの３Åモレキュラー・シーブを添加し、次いで、混合物を０℃に冷却する。ベンジルアルコール（１.８１ｍｌ、１７.４８ｍｍｏｌ、３当量）、ＥＤＣＩ（２.２３ｇ、１１.６５ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＭＡＰ（７１ｍｇ、０.５８ｍｍｏｌ、０.１当量）を添加する。混合物を１５０分間撹拌し、その間、それをゆっくりと室温に温まらせる。次いで、混合物を濃縮乾固し、残渣をクロマトグラフィー（Biotage, シクロヘキサン−酢酸エチル９：１）により後処理する。生成物含有画分を合わせ、濃縮する。表題化合物を収量１.０３ｇ（理論値の６３％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.70 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 2.44 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 280.3 (30) [M+H]+.
【０４３７】
実施例２４２Ａ
ベンジルＬ−アラニネートトリフルオロ酢酸塩
【化２５２】
2009533371.tif 000255
実施例２４１Ａの化合物（２００ｍｇ、７１６μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液２.０ｍｌと６０分間反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物２００ｍｇ（理論値の９５％）を得る。
LC-MS (方法 22): Rt = 2.30 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 180 (100) [M+H]+.
【０４３８】
実施例２４３Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グリシル］−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｏ４−メチル−Ｌ−アスパルチル］−Ｌ−アラニネート
【化２５３】
2009533371.tif 000256
実施例３３Ａの化合物（４４１ｍｇ、８９５μｍｏｌ）および実施例２４２Ａの化合物（３１５ｍｇ、１.０７ｍｍｏｌ、１.２当量）を、ＤＭＦ（４.８ｍｌ）に溶解し、−２０℃に冷却する。次いで、４−メチルモルホリン（４９２μｌ、４.４８ｍｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（５１０ｍｇ、１.３４ｍｍｏｌ、１.５当量）を添加し、混合物をゆっくりと室温に温め、約１６時間撹拌する。次いで、混合物をクロマトグラフィーにより２段階（方法４５、次いで方法３４）で精製する。表題化合物を収量２７７ｍｇ（理論値の６４％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.06 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.13 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 482.1 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C22H32N3O9 計算値 482.2134, 実測値 482.2120 [M+H]+.
【０４３９】
実施例２４４Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グリシル］−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−アラニネート
【化２５４】
2009533371.tif 000257
実施例２４３Ａの化合物（１３９ｍｇ、２８８μｍｏｌ）をアセトニトリル５.１ｍｌ中に提供し、０℃に冷却する；濃アンモニア水溶液３.１ｍｌを添加し、撹拌を０℃で継続する。２０分後、反応を氷酢酸（２.６ｍｌ）で停止し、水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機抽出物を濃塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。収量：粗製表題化合物１２２ｍｇ（理論値の７５％）、それを精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 6): Rt = 3.78 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.69 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 467.1 (100) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 465.2 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C21H31N4O8 計算値 467.2137, 実測値 467.2137 [M+H]+.
【０４４０】
実施例２４５Ａ
ベンジルグリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−アラニネートトリフルオロ酢酸塩
【化２５５】
2009533371.tif 000258
実施例２４１Ａの化合物（１２２ｍｇ、２１７μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液２.０ｍｌと、６０分間反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物１００ｍｇ（理論値の９６％）を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.05 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.23 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 367 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C16H23N4O6 計算値 367.1613, 実測値 367.1622 [M+H]+.
【０４４１】
実施例２４６Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−アラニネートトリフルオロ酢酸塩
【化２５６】
2009533371.tif 000259
実施例３２Ａの化合物（１３３ｍｇ、１３９μｍｏｌ）および実施例２４５Ａの化合物（１００ｍｇ、２０８μｍｏｌ、１.５当量）を、ＤＭＦ（９５０μｌ）に溶解し、溶液を−２０℃に冷却する。４−メチルモルホリン（４６μｌ、４１６μｍｏｌ、３当量）およびＨＡＴＵ（８４ｍｇ、２２２μｍｏｌ、１.６当量）を添加し、混合物を室温で１６時間撹拌する。次いで、完全な混合物を方法４５に従うクロマトグラフィーにより精製する。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥する。表題化合物１５７ｍｇ（理論値の９５％）を固体として得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.66 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.71 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1079.1 (80) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C49H83N12O15 計算値 1079.6096, 実測値 1079.6094 [M+H]+.
【０４４２】
実施例２４７Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−アラニントリフルオロ酢酸塩
【化２５７】
2009533371.tif 000260
実施例２４６Ａの化合物（１９０ｍｇ、１５９μｍｏｌ）を、実施例１８６Ａの化合物の製造方法に従い水素化する。表題化合物１７２ｍｇ（理論値の９８％）を固体として得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.39 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.55 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 445.3 (100) [M+2H]2+, 989.5 (60) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 987.5 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C42H77N12O15 計算値 989.5626, 実測値 989.5651 [M+H]+.
【０４４３】
実施例２４８Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−アラニンビストリフルオロ酢酸塩
【化２５８】
2009533371.tif 000261
実施例２４７Ａの化合物（１７２ｍｇ、１５６μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液２.０ｍｌと３０分間反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物１７４ｍｇ（定量的）を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 2.78 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.17 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 889 (80) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 887 (100), [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C37H69N12O13 計算値 889.5102, 実測値 889.5096 [M+H]+.
【０４４４】
実施例２４９Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−アラニントリフルオロ酢酸塩
【化２５９】
2009533371.tif 000262
実施例２０１Ａの化合物の製造方法に従い、実施例２４８Ａの化合物（１７４ｍｇ、１５６μｍｏｌ）を、実施例１７Ａの化合物（９９ｍｇ、１７１μｍｏｌ、１.１当量）と反応させる。クロマトグラフィー（方法３６の変法、グラジエントの代わりに、分離を溶離剤Ａ：溶離剤Ｂ＝３：２の均一溶媒で実施する）による精製後、表題化合物８１ｍｇ（理論値の３４％）を単離する。
HPLC (方法 6): Rt = 3.76 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.89 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 593.4 (100) [M-Boc+2H]2+, 1285.7 (30) [M+H]+; (ESIneg): m/z (%) = 1283.5 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C59H93N14O18 計算値 1285.6787, 実測値 1285.6781 [M+H]+.
【０４４５】
実施例２５０Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−アラニンビストリフルオロ酢酸塩
【化２６０】
2009533371.tif 000263
実施例２４９Ａの化合物（８１ｍｇ、５４μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液２.０ｍｌと６０分間反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物８１ｍｇ（理論値の９９％）を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.20 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.29 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 593.7 (100) [M+2H]2+, 1185.6 (5) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1183.7 (100), [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C54H85N14O16 計算値 1185.6263, 実測値 1185.6249 [M+H]+.
【０４４６】
実施例２５１Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−アラニンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２６１】
2009533371.tif 000264
実施例２１７Ａの化合物の製造方法に従い、精製を方法４５に従って行い、収量６９ｍｇ（理論値の９３％）で、実施例２５０Ａの化合物（８１ｍｇ、５３μｍｏｌ）から表題化合物を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.56 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.67 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1167.6 (100) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1165.6 (100), [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C54H83N14O15 計算値 1167.6157, 実測値 1167.6154 [M+H]+.
【０４４７】
実施例２５２Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−アラニンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタム二塩酸塩
【化２６２】
2009533371.tif 000265
実施例２２５Ａの化合物の製造方法に従い、収量５３ｍｇ（理論値の９７％）で、実施例２５１Ａの化合物（６９ｍｇ、４９μｍｏｌ）から表題化合物を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 2.98 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 0.96 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 517.5 (100) [M+2H]2+, 1033.7 (10) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1031.7 (60) [M-H]-, 1077.7 (100) [M+HCOOH-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C46H77N14O13 計算値 1033.5790, 実測値 1033.5782 [M+H]+.
【０４４８】
実施例２５３Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ.−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−アラニンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム塩酸塩
【化２６３】
2009533371.tif 000266
実施例２３３Ａの化合物の製造方法に従い、表題化合物を、収量５８ｍｇ（理論値の８５％）で、実施例２５２Ａの化合物（５３ｍｇ、４８μｍｏｌ）および実施例８Ａのジペプチド（２３ｍｇ、６２μｍｏｌ、１.３当量）から得る。
HPLC (方法 6): Rt = 4.35 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.08 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1387.9 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C65H111N16O17 計算値 1387.8308, 実測値 1387.8314 [M+H]+.
【０４４９】
実施例２５４Ａ
ペンタフルオロフェニル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニネートトリフルオロ酢酸塩
【化２６４】
2009533371.tif 000267
実施例３２Ａの化合物（６０ｍｇ、７１μｍｏｌ）、ペンタフルオロフェノール（６５ｍｇ、３５５μｍｏｌ、５当量）およびＥＤＣＩ（２０ｍｇ、１０７μｍｏｌ、１.５当量）を、ジクロロメタン（０.９ｍｌ）に０℃、アルゴン下で溶解し、室温で終夜撹拌する。溶媒を除去し、残渣をクロマトグラフィーする（方法３４）。表題化合物を収量３２ｍｇ（理論値の４５％）で単離する。
HPLC (方法 6): Rt = 4.12 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.93 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 897.4 (100) [M+H]+.
【０４５０】
実施例２５５Ａ
ペンタフルオロフェニルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニン
【化２６５】
2009533371.tif 000268
実施例２５４Ａの化合物の製造と同様に、表題化合物を、Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニン（３９０ｍｇ、２.０６ｍｍｏｌ）から、収量４７１ｍｇ（理論値の６４％）で単離する。
HPLC (方法 5): Rt = 5.00 分.
LC-MS (方法 21): Rt = 2.74 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 356 (5) [M+H]+.
【０４５１】
実施例２５６Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニル］−（３Ｓ）−Ｏ４−メチル−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギン酸
【化２６６】
2009533371.tif 000269
実施例２５５Ａの化合物（４７０ｍｇ、１.３２ｍｍｏｌ）および（２Ｓ,３Ｓ）−２−アミノ−３−ヒドロキシ−４−メトキシ−４−オキソ酪酸塩酸塩（製造には、実施例３３Ａ参照、４０７ｍｇ、２.０４ｍｍｏｌ、１.６当量）を、ＤＭＦ（２０ｍｌ）に０℃で溶解し、ＤＩＰＥＡ（１.７８ｍｌ、１０.２０ｍｍｏｌ、７.７当量）を添加する。混合物を室温で約１６時間撹拌し、次いで方法４５に従いクロマトグラフィーし、方法３２により入念に精製する。収量：２００ｍｇ（理論値の２９％）。
HPLC (方法 5): Rt = 3.26 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.48 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 335.2 (90) [M+H]+.
【０４５２】
実施例２５７Ａ
ベンジル［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニル］−［（３Ｓ）−Ｏ４−メチル−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパルチル］−Ｌ−セリネート
【化２６７】
2009533371.tif 000270
実施例２５６Ａの化合物（１９５ｍｇ、０.５８ｍｍｏｌ）および実施例１４９Ａの化合物（１９０ｍｇ、０.６１ｍｍｏｌ、１.１当量）を、ＤＭＦ（５.０ｍｌ）に溶解し、溶液を０℃に冷却する。４−メチルモルホリン（２０３μｌ、１.８４ｍｍｏｌ、３当量）およびＴＣＴＵ（３２６ｍｇ、０.９２ｍｍｏｌ、１.５当量）を添加し、混合物を室温で２.５時間撹拌する。次いで完全な混合物をクロマトグラフィーし（方法４５）、方法３２により入念に精製する。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥する。表題化合物１４６ｍｇ（理論値の４７％）を固体として得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.89 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.94 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 511.1 (100) [M+H]+.
[α]20Na = +15.9 (c = 0.5, MeOH).
【０４５３】
実施例２５８Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニル］−［（３Ｓ）−Ｏ４−メチル−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパルチル］−Ｌ−セリン
【化２６８】
2009533371.tif 000271
実施例２５７Ａの化合物（１３５ｍｇ、２６４μｍｏｌ）を１０％パラジウム−炭素３０ｍｇの存在下、メタノール（８.０ｍｌ）中、室温で２時間水素化する。混合物を濾過して触媒を除去し、濃縮し、粗生成物をクロマトグラフィーする（方法３２）。収量：１１７ｍｇ（定量的）。
HPLC (方法 5): Rt = 3.11 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.40 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 422.1 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C16H28N3O10 計算値 422.1770, 実測値 422.1776 [M+H]+.
【０４５４】
実施例２５９Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニル］−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン
【化２６９】
2009533371.tif 000272
実施例２５８Ａの化合物（１１６ｍｇ、２７５μｍｏｌ）を、アセトニトリル５.０ｍｌ中に提供し、０℃に冷却する；濃アンモニア水溶液３.０ｍｌを添加し、撹拌を０℃で継続する。５分後、反応を氷酢酸（１.２ｍｌ）で停止し、濃縮し、クロマトグラフィーする（方法３２）。収量：６４ｍｇ（理論値の５７％）。
HPLC (方法 6): Rt = 2.82 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.12 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 407.0 (90) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 405.0 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C15H27N4O9 計算値 407.1773, 実測値 407.1781 [M+H]+.
【０４５５】
実施例２６０Ａ
［Ｄ−アラニル］−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化２７０】
2009533371.tif 000273
実施例２５９Ａの化合物（６３ｍｇ、１５５μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液２.０ｍｌと、３０分間反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物６７ｍｇ（定量的）を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 0.72 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 0.52 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 307 (100) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C10H19N4O7 計算値 307.1249, 実測値 307.1245 [M+H]+.
【０４５６】
実施例２６１Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｄ−アラニル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化２７１】
2009533371.tif 000274
実施例２５４Ａの化合物（３２ｍｇ、３２μｍｏｌ）および実施例２６０Ａの化合物（１３ｍｇ、３２μｍｏｌ、１当量）を、ＤＭＦ（１.５ｍｌ）に０℃で溶解し、ＤＩＰＥＡ（２８μｌ、１５８μｍｏｌ、５当量）を添加する。混合物を室温で約１６時間撹拌し、次いで方法４５に従いクロマトグラフィーする。収量：３０ｍｇ（理論値の８４％）。
HPLC (方法 6): Rt = 3.40 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.60 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 460.3 (100) [M-Boc+2H]2+, 1019.6 (60) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C43H79N12O16 計算値 1019.5732, 実測値 1019.5716 [M+H]+.
【０４５７】
実施例２６２Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｄ−アラニル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリネートビストリフルオロ酢酸塩
【化２７２】
2009533371.tif 000275
実施例２６１Ａの化合物（５９ｍｇ、５２μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液２.０ｍｌと３０分間反応させる。精製せずに、粗製表題化合物６４ｍｇ（定量的）を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 2.91 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.20 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 461 (100) [M+2H]2+; MS (ESIneg): m/z (%) = 918 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C38H71N12O14 計算値 919.5208, 実測値 919.5212 [M+H]+.
【０４５８】
実施例２６３Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ｝−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｄ−アラニル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリントリフルオロ酢酸塩
【化２７３】
2009533371.tif 000276
実施例２０１Ａの化合物の製造方法に従い、実施例２６２Ａの化合物（９２ｍｇ、８０μｍｏｌ）を、実施例１７Ａの化合物（５１ｍｇ、８８μｍｏｌ、１.１当量）と反応させる。クロマトグラフィー（方法４４）による精製後、表題化合物３５ｍｇ（理論値の３１％）を単離する。
HPLC (方法 6): Rt = 3.76 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.94 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 608.4 (100) [M-Boc+2H]2+, 1315.6 (30) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1313.7 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C60H95N14O19 計算値 1315.6893, 実測値 1315.6873 [M+H]+.
【０４５９】
実施例２６４Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｄ−アラニル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンビストリフルオロ酢酸塩
【化２７４】
2009533371.tif 000277
実施例２６２Ａの化合物（３５ｍｇ、２４μｍｏｌ）を、手順２に従い、反応物溶液２.０ｍｌと３０分間反応させる。これ以上精製せずに、粗製表題化合物３７ｍｇ（定量的）を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.20 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.36 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 608.3 (100) [M+2H]2+, 1215.7 (5) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1213.7 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C55H87N14O17 計算値 1215.6369, 実測値 1215.6340 [M+H]+.
【０４６０】
実施例２６５Ａ
［（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｄ−アラニル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２７５】
2009533371.tif 000278
実施例２１７Ａの化合物の製造方法に従い、精製を方法４５に従って行い、収量４６ｍｇ（理論値の４８％（純度約３４％））で、実施例２６４Ａの化合物（３６ｍｇ、２５μｍｏｌ）から表題化合物を得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.55 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.61 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 599.3 (100) [M+2H]2+; 1197.6 (30) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1195.6 (100), [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C55H85N14O16 計算値 1197.6263, 実測値 1197.6290 [M+H]+.
【０４６１】
実施例２６６Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｄ−アラニル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.９−Ｎ３.１−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２７６】
2009533371.tif 000279
実施例２６５Ａの化合物（４６ｍｇ、純度約３４％、約１２μｍｏｌ）を、スパチュラチップ量（spatula tip）の１０％パラジウム／炭素の存在下、メタノール中、大気圧下、室温で１時間水素化する。混合物を濾過して触媒を除去し、濃縮する。粗生成物（４２ｇ）を精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 6): Rt = 2.98 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.33 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 533 (100) [M+2H]2+, 1064 (10) [M+H]+; MS (ESIneg) m/z (%) = 1062 (100) [M]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C47H79N14O14 計算値 1063.5895, 実測値 1063.5869 [M+H]+.
【０４６２】
実施例２６７Ａ
［Ｎ２−（ｔｅｒｔ.−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｄ−アラニル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムトリフルオロ酢酸塩
【化２７７】
2009533371.tif 000280
実施例２３３Ａの化合物の製造方法に従い、粗製物収量２８ｍｇで、実施例２６６Ａの化合物（粗生成物３４ｍｇ、約１２μｍｏｌ）および実施例８Ａのジペプチド（１３ｍｇ、３５μｍｏｌ、約２.４当量）から、表題化合物を得る。生成物をこれ以上精製せずに次の合成段階で用いる。
HPLC (方法 6): Rt = 4.27 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.12 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 659.6 (100) [M-Boc+2H]2+ 1417.8 (50) [M+H]+.
【０４６３】
実施例２６８Ａ
ｒａｃＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）アラニン
合成は、Merget, K. Guenther, M. Bernd, E. Guenther, R. Tacke, J. Organomet. Chem. 2001 628, 183-194 に従って行う。エナンチオマーをキラル相の分取ＨＰＬＣにより分離する：
Gilson Abimed HPLC, UV 検出器 212 nm, カラム: Daicel Chiralpak AD-H 5 μm; 250 x 20 mm；流速：１５ｍｌ／分；溶離剤Ａ：イソヘキサン、溶離剤Ｂ：０.２％酢酸／１％水／２プロパノール；均一溶媒。
【０４６４】
実施例２６９Ａ
（２Ｓ化合物またはＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−３−トリメチルシリルアラニン）：
【化２７８】
2009533371.tif 000281
分取HPLC: Rt = 4.16 分
[α]D20 = +1.1 (c = 0.83, メタノール)
【０４６５】
実施例２７０Ａ
（２ＲまたはＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−３−トリメチルシリルアラニン）：
【化２７９】
2009533371.tif 000282
分取HPLC: Rt = 9.27 分 
[α]D20 = -1.6 (c = 0.66, メタノール)
【０４６６】
実施例２７１Ａ
メチルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−３−イル−Ｌ−アラニネート
【化２８０】
2009533371.tif 000283
B. Neises, W. Steglich, Org. Synth. 1985, 63, 183-187 と同様。
（２Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（３−ピリジル）アラニン（２５.００ｇ、９３.８８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン３００ｍｌにアルゴン下で溶解する。メタノール（１１.４ｍｌ、９.０２ｇ、２８１ｍｍｏｌ、３当量）および微量のＤＭＡＰを添加する。次いで、混合物を０℃に冷却する。ＥＤＣ（１９.８０ｇ、１０３ｍｍｏｌ、１.１当量）を添加する。５分後、氷浴を除去し、混合物を室温で１時間撹拌する。次いで、混合物を真空で濃縮し、残渣を酢酸エチルと混合し、濃重炭酸ナトリウムで抽出する。水相を酢酸エチルで１回逆抽出し、次いで、合わせた有機相を０.５Ｍクエン酸で洗浄し、続いてもう一度濃重炭酸ナトリウムで洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空で濃縮する。透明な油状物が残り、それは、オイルポンプによる真空下で乾燥すると結晶化する。収量：２３.６０ｇ（８４.２ｍｍｏｌ、理論値の９０％）。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.28 分. 
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 1.30 (s, 9 H), 2.86 (m, 1 H), 3.04 (m, 1 H), 3.63 (s, 3 H), 4.22 (m, 1 H), 7.28 - 7.39 (m, 2 H), 7.69 (d, 1 H), 8.43 (m, 2 H). 
LC-MS (方法 18): Rt 1.21 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 281 (100) [M + H]+. 
【０４６７】
実施例２７２Ａ
３−［（２Ｓ）−２−アンモニオ−３−メトキシ−３−オキソプロピル］ピリジニウムビス（トリフルオロ酢酸塩）
【化２８１】
2009533371.tif 000284
化合物２７１Ａ（１１.８ｇ、４２.０９ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１６０ｍｌ）中の３０％ＴＦＡに溶解し、室温で３０分間撹拌する。次いで、混合物を真空で濃縮する。残渣を少量の水に取り、凍結乾燥する。次いで、凍結乾燥物を、トルエンと混合し、真空で濃縮する。最後に、生成物を一定重量に、オイルポンプによる真空下で乾燥する。収量：１７.１５ｇ（定量的）。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 0.88 分. 
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 2.79 (dd, 1 H), 2.92 (dd, 1 H), 3.60 (s, 3 H), 3.63 (m, 1 H), 7.30 (m, 1 H), 7.62 (d, 1 H), 8.41 (m, 2 H).
LC-MS (方法 18): Rt 0.46 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 181 (100) [M + H]+. 
【０４６８】
実施例２７３Ａ
メチルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）−Ｄ−アラニル−３−ピリジン−３−イル−Ｌ−アラニネート
【化２８２】
2009533371.tif 000285
化合物２６９Ａ（１０.３１ｇ、３９.４ｍｍｏｌ）および化合物２７２Ａ（１６.１０ｇ、３９.４ｍｍｏｌ、１当量）を、ＤＭＦ（１８６ｍＬ）に０℃で溶解する。次いで、ＮＭＭ（１７.３４ｍｌ、１６.００ｇ、４当量）およびＨＡＴＵ（２２.４９ｇ、５９.１６ｍｍｏｌ、１.５当量）を添加する。混合物を室温で２時間撹拌しする。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加し、混合物を濃炭酸ナトリウムで洗浄する。水相をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで１回逆抽出し、次いで、合わせた有機相を１Ｍ水性クエン酸で、再度濃炭酸ナトリウムで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空で濃縮する。シリカゲルによる濾過を実施する（シクロヘキサン／酢酸エチル２＋１）。収量：１４.１ｇ（理論値の８４％）。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.91 分. 
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ -0.09 (s, 9 H), 0.56 - 0.75 (m, 2 H), 1.47 (s, 9 H), 2.90 (dd, 1 H), 3.09 (dd, 1 H), 3.62 (s, 3 H), 3.98 (m, 1 H), 4.49 (m, 1 H), 3.68 (d, 1 H), 7.26 (dd, 1 H), 7.61 (m, 1 H), 8.20 (d, 1 H), 8.40 (m, 2 H).
LC-MS (方法 18): Rt 1.90 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 424 (50) [M + H]+.
【０４６９】
実施例２７４Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）−Ｄ−アラニル−３−ピリジン−３−イル−Ｌ−アラニン
【化２８３】
2009533371.tif 000286
化合物２７３Ａ（７.４ｇ、１７.５６ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ／水（６＋４）に取り、０℃に冷却し、水酸化リチウム一水和物（１.４７ｇ、３５.１３ｍｍｏｌ、２当量）を添加する。混合物を０℃で撹拌する。１時間後、さらに１当量（０.７４ｇ）の水酸化リチウム一水和物を添加し、撹拌を１時間継続する。ＴＨＦの殆どを真空で除去し、次いで、クエン酸の添加によりｐＨを４に調節する。固体が沈殿する。混合物を３回に分けて酢酸エチルで抽出し、その間に固体が溶解する。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮する。粗生成物 を Sephadex LH 20 のクロマトグラフィー（方法４５）により精製する。収量：６.６７ｇ（理論値の９３％）。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.73 分. 
1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ -0.09 (s, 9 H), 0.56 - 0.75 (m, 2 H), 1.35 (s, 9 H), 2.90 (dd, 1 H), 3.09 (dd, 1 H), 3.98 (m, 1 H), 4.41 (m, 1 H), 6.70 (d, 1 H), 7.26 (dd, 1 H), 7.60 (m, 1 H), 8.00 (d, 1 H), 8.37 (m, 2 H).
LC-MS (方法 18): Rt 1.71 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 410 (100) [M + H]+.
【０４７０】
実施例２７５Ａ
（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン
【化２８４】
2009533371.tif 000287
例示的化合物１６Ａ（３.００ｇ、７.２４ｍｍｏｌ）をメタノール（６０ｍｌ）に溶解し、１０％パラジウム／活性炭素（５０ｍｇ）を添加し、混合物を水素雰囲気下、室温で、大気圧下で、６時間撹拌する。次いで、混合物を濾過して触媒を除去し、濃縮する。粗製反応生成物（２.２０ｇ、再定量的）を精製せずに次の段階で用いる。
HPLC (方法 6): Rt = 3.21 分.
LC-MS (方法 51): Rt = 1.55 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 281.3 (30) [M+H]+, MS (ESIneg): m/z (%) = 279.1 (100) [M-H] -.
[α]20Na = -23.4 (c = 1.0, MeOH).
1H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 1.34 (s, 9H), 3.52 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 4.88 (dd, J = 4.6, J = 8.4 Hz, 1H), 7.29 (m, 5H), 8.02 (d, J = 8.6 Hz, 1H).
HR-TOF-MS: C14H21N2O4 計算値 281.1496, 実測値 281.1503 [M+H]+.
【０４７１】
実施例２７６Ａ
（βＲ）−β−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニン
【化２８５】
2009533371.tif 000288
例示的化合物２７５Ａ（粗生成物２.２ｇ、７.２４ｍｍｏｌ）および（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルスクシンイミド（２.９０ｇ、８.５８ｍｍｏｌ、１.２当量）、並びに、炭酸ナトリウム（１.１８ｇ、１１.７０ｍｍｏｌ、１.５当量）を、１,４−ジオキサン−水（７＋３）に溶解し、室温で終夜撹拌する。次いで、５％水性クエン酸の添加により反応を停止し、２回に分けて酢酸エチルで抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、残渣を水およびアセトニトリルでトリチュレートする。次いで、結晶性粗生成物を、方法３４に従うクロマトグラフィーにより精製する。収量：無色固体として、２.５８ｇ（理論値の６６％）。
HPLC (方法 6): Rt = 4.86 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 2.51 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 503.2 (70) [M+H]+, MS (ESIneg): m/z (%) = 501.3 (100) [M-H] -.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 1.38 (s, 9H), 4.75 (dd, J = 3.9, J = 9.8 Hz, 1H), 5.29 (dd, J = 3.9, J = 10.0 Hz 1H), 7.21-7.60 (m, 13H), 7.87 (d, J = 7.4 Hz, 1H).
HR-TOF-MS: C29H31N2O6 計算値 503.2177, 実測値 503.2158 [M+H]+.
【０４７２】
実施例２７７Ａ
ペンタフルオロフェニル（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニネート
【化２８６】
2009533371.tif 000289
例示的化合物２７６Ａ（２.５８ｇ、５.１４ｍｍｏｌ）およびペンタフルオロフェノール（４.７２ｇ、２５.６８ｍｍｏｌ、５当量）を、ジクロロメタン（３５０ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却する。ＥＤＣＩ（１.４８ｇ、７.７０ｍｍｏｌ、１.５当量）を添加し、混合物をゆっくりと室温に温めながら６時間撹拌する。次いで、溶媒を留去し、残渣を数回に分けて方法３４に従うクロマトグラフィーにより精製する。収量：無色固体として、表題化合物２.８０ｇ（理論値の８１％）
HPLC (方法 54) Rt = 5.09 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 3.34 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 6693.0 (20) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 1.39 (s, 9H), 4.11-4.26 (m, 3H), 5.16 (dd, J = 4.4, J = 9.5 Hz, 1H), 5.52 (dd, J = 4.4, J = 10.0 Hz, 1H), 7.27-7.57 (m, 9H), 7.56 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 7.73 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.93 (d, J = 9.6 Hz, 1H).
HR-TOF-MS: C35H30N2O6 計算値 669.2019, 実測値 669.1996 [M+H]+.
【０４７３】
実施例２７８Ａ
エチル（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｎ２−（ジフェニルメチレン）−Ｌ−ロイシネート
【化２８７】
2009533371.tif 000290
マンニッヒ反応は、スルホニルイミン類への銅エノラートの付加方法をベースとする：L. Bernardi, A. Gothelf, R. G. Hazell, K. A. Jorgensen, J. Org. Chem. 2003, 68, 2583-2591。ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｅ）−フェニルメチレン］カルバメートは、文献：A. Klepacz, A. Zwierzak, Tetrahedron Lett. 2002 43; 1079 - 1080 に従い製造できる。
【０４７４】
新たに活性化した３Åモレキュラー・シーブ、テトラキス（アセトニトリル）銅（Ｉ）ヘキサフルオロホスフェート（２９３ｍｇ、０.７９ｍｍｏｌ、０.０３５当量）および（Ｒ）−（＋）−２−（２−（ジフェニルホスフィノ）フェニル）−４−イソプロピル−２−オキサゾリン（３３５ｍｇ、０.９０ｍｍｏｌ、０.０４当量）を、アルゴン下に提供し、無水ＴＨＦ（２２８ｍｌ）を添加する。トリエチルアミン（１０９μｌ、８０ｍｇ、０.７９ｍｍｏｌ、０.０３５当量）を、次いでピペットで加える。混合物を−２０℃に冷却し、この温度に達したらすぐに、エチルＮ−（ジフェニルメチレン）グリシネート（６.００ｇ、２２.４４ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｅ）−フェニルメチレン］カルバメート（６.９２ｇ、４０.４ｍｍｏｌ、１.８当量）を添加する。混合物を１６時間撹拌し、その間にそれをゆっくりと室温に到達させる。次いでシリカゲル（約１５ｇ）を添加し、溶媒を真空で留去する。シリカゲルを充填したガラスカラムに残渣を負荷し、シクロヘキサン−酢酸エチル９＋１で溶出する。表題化合物（Ｒｆ＝０.２２、ＣｙＨｅｘ−ＥｔＯＡｃ９＋１）は、Ｄ−スレオ配置のエナンチオマーおよび少量（約３６％）の２種のエリトロ配置のエナンチオマーを含有し、これらは、後の段階で除去する。生成物は非常に酸に敏感であり、ＨＰＬＣ（方法６）およびＬＣ−ＭＳ（方法１９）による調査は、クロマトグラフィー条件下で排除されたある割合のベンゾフェノンを常に示す。収量：２.６６ｇ（理論値の２７％）。
LC-MS (方法 19): Rt = 3.23 分 (21%, エリトロ), MS (ESIpos): m/z (%) = 439.4 (100) [M+H]+ および 3.23 分 (48%, スレオ), MS (ESIpos): m/z (%) = 439.3 (100) [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.62 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.13 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.38 (s, 9H), 1.61 (m, 1H), 3.74 (ddd, J1 = 2.7, J2 = J3 = 9.6 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 3.99-4.06 (m, 2H), 6.51 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 7.07 (m, 2H), 7.38-7.52 (m, 6H), 7.67-7.77 (m, 2H).
HR-TOF-MS: C26H35N2O4 計算値 439.2592, 実測値 439.2606 [M+H]+.
【０４７５】
実施例２７９Ａ
エチル（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−ロイシネートトリフルオロ酢酸塩
【化２８８】
2009533371.tif 000291
実施例２７８Ａの表題化合物（４.４４ｇ、１０.１２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（８７ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ８５７μｌ（１１.１３ｍｍｏｌ、１.１当量）および水（２７３μｌ、１５.１８μｍｏｌ、１.５当量）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌する。反応混合物の全揮発性成分を真空で留去し、残渣（５.９７ｇ）を精製せずに次の段階に用いる。
HPLC (方法 6): Rt = 3.41 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.31 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 275.2 (50) [M+H]+.
【０４７６】
実施例２８０Ａ
エチル（３Ｒ）−Ｎ２−（ベンジルオキシ）カルボニル−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−ロイシネート
【化２８９】
2009533371.tif 000292
例示的化合物２７９Ａ（粗生成物５.９７ｇ、約１０.１１ｍｍｏｌ）およびベンジルオキシカルボニルスクシンイミド（３.０２ｇ、１２.１３ｍｍｏｌ、１.２当量）をジクロロメタン−水（４＋１）に溶解し、混合物を０℃に冷却する。激しく撹拌しながら、重炭酸ナトリウム（２.５５ｇ、３０.３３ｍｍｏｌ、３当量）およびテトラブチルアンモニウムヨージド（３７３ｍｇ、１.０１ｍｍｏｌ、０.１当量）を添加し、混合物を室温で１６時間激しく撹拌する。有機相を分離し、濃ＮａＣｌで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。粗生成物を方法３４に従い数回に分けて単離し、ベンゾフェノンおよび一部のエリトロジアステレオマーを除去する。全部で、１.６５ｇ（４.０３ｍｍｏｌ、理論値の４０％）の表題化合物を得る。
Rf = 0.076 (CyHex-EtOAc 9+1).
HPLC (方法 54): Rt = 4.33 分 (エリトロジアステレオマー) および 4.52 分 (スレオジアステレオマー).
LC-MS (方法 19): Rt = 2.71 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 409.3 (30) [M+H]+, 
エリトロ異性体 および Rt = 2.75 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 409.0 (70) [M+H]+ スレオ異性体).
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.71-0.86 (m, 6H), 1.16 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.34 (s, 9H), 1.59 (m, 1H), 3.70 (ddd, J = 3.4, J1 = J2 = 10.3 Hz, 1H), 3.99-4.08 (m, 2H), 4.32 (dd, J = 3.4, J = 9.5 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 7.31-7.40 (m, 5H), 7.44 (d, J = 9.3 Hz, 1H).
HR-TOF-MS: C21H33N2O6 計算値 409.2334, 実測値 409.2329 [M+H]+.
【０４７７】
実施例２８１Ａ
（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｎ２−（ベンジルオキシ）カルボニル−Ｌ−ロイシン
【化２９０】
2009533371.tif 000293
実施例２８０Ａの表題化合物（２.７８ｇ、６.８２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ−水混合物（１＋１、４０ｍｌ）に０℃で溶解し、水酸化リチウム一水和物（６２９ｍｇ、１５.０ｍｍｏｌ、２.２当量）を添加し、混合物を０℃で３時間撹拌する。次いで、ＴＨＦを留去し、水性残渣を１Ｍクエン酸で酸性化し、２回に分けて酢酸エチルで抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。粗製残渣（２.４２ｇ、理論値の９３％）を、方法５５に従うキラル相のクロマトグラフィーにより分離する。この場合、スレオジアステレオマーのエナンチオマーおよび少ない方のエリトロジアステレオマーのエナンチオマーを、各々別個に得る。キラルクロマトグラフィー後の主要な異性体（表題化合物）のｅ.ｅ.を、方法５６により決定し、それは１００％である。表題化合物の収量は、７８０ｍｇ（出発化合物２８０Ａを基準として、理論値の３０％）である。
HPLC (方法 6): Rt = 4.51 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.44 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 381.1 (30) [M+H]+, MS (ESIneg): m/z (%) = 379.2 (100) [M-H]-.
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.82 (d, J = 9.3 Hz, 3H), 0.85 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.35 (s, 9H), 3.72 (ddd, J1 = 3.2, J2 = J3 = 10.0 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 3.2, J = 9.6 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 5.08 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 7.31-7.40 (m, 6H), 12.62 (br s, 1H).
HR-TOF-MS: C19H28N2O6Na 計算値 403.1845, 実測値 403.1832 [M+Na]+.
Chirale HPLC (方法 56): Rt = 8.97 分.
【０４７８】
実施例２８２Ａ
ペンタフルオロフェニル（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｎ２−（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ−Ｌ−ロイシネート
【化２９１】
2009533371.tif 000294
例示的化合物２８１Ａ（１００ｍｇ、２６３μｍｏｌ）およびペンタフルオロフェノール（２４２ｍｇ、１.３１ｍｍｏｌ、５当量）を、ジクロロメタン（２０ｍｌ）に室温で溶解し、次いで、ＥＤＣＩ（７６ｍｇ、３９４μｍｏｌ、１.５当量）を添加し、混合物を冷蔵庫で約１２時間静置する。続いて、溶媒を真空で留去し、残渣をクロマトグラフィー（方法３２）により精製する。表題化合物を、収量１３２ｍｇ（理論値の９２％）で、無色固体として得る。
HPLC (方法 54): Rt = 4.89 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 3.19 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 547.2 (40) [M+H]+.
【０４７９】
実施例２８３Ａ
ベンジルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリネート
【化２９２】
2009533371.tif 000295
実施例１４９Ａの化合物（２.０８ｇ、６.７３ｍｍｏｌ）およびＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｌ−アラニン（２２.７３ｇ、６.３９ｍｍｏｌ、０.９５当量）をＤＭＦ（３２ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却する。ＨＡＴＵ（３.８４ｇ、１０.０９ｍｍｏｌ、１.５当量）および４−メチルモルホリン（２.２２ｍｌ、２０.１８ｍｍｏｌ、３当量）を添加する。次いで、混合物を室温で２.５時間撹拌する。完全な混合物を、続いて、Sephadex LH20 カラムに負荷し、方法４５に従いクロマトグラフィーする。生成物含有画分を合わせ、方法３４に従い精製する。収量：無色固体として、２.４１ｇ（理論値の５９％）。
HPLC (方法 6): Rt = 4.81 分.
LC-MS (方法 51): Rt = 3.94 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 504.4 (100) [M-BOC+H+]+, 604.4 (40) [M+H]+.
[α]20Na = +1.5 (c = 0.5, MeOH).
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 1.36 (s, 9H), 3.18 (m, 1H), 3.66 (m, 1H), 3.75 (m, 1H), 4.15-4.28 (m, 4H), 4.42 (m, 1H), 5.90 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.20 (s, 2H), 6.82 (d, J = 8.04 Hz, 1H), 7.21 (m, 1H), 7.31-7.43 (m, 10H), 7.67 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 7.6 Hz, 1H).
HR-TOF-MS: C33H38N3O8 計算値 604.2654, 実測値 604.2646 [M+H]+.
【０４８０】
実施例２８４Ａ
ベンジル３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化２９３】
2009533371.tif 000296
例示的化合物２８３Ａ（２.３９ｇ、３.９６ｍｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。粗製表題化合物２.９６ｇ（定量的）を得、これ以上精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 6): Rt = 3.84 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 3.14 分; MS (ESIpos) m/z (%) = 504.0 (100) [M+H]+.
[α]20Na = -0.5 (c = 1.0, MeOH).
HR-TOF-MS: C28H30N3O6 計算値 504.2130, 実測値 504.2140 [M+H]+.
【０４８１】
実施例２８５Ａ
ベンジル［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシル］−［３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリネート
【化２９４】
2009533371.tif 000297
例示的化合物２８４Ａ（２.９０ｇ、純度〜８３％、３.８９ｍｍｏｌ）およびＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグリシン（７５１ｍｇ、４.２９ｍｍｏｌ、１当量）を、ＤＭＦ（２０ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却する。ＨＡＴＵ（２.２２ｇ、５.８５ｍｍｏｌ、１.５当量）および４−メチルモルホリン（２.１４ｍｌ、１９.４９ｍｍｏｌ、５当量）を添加する。反応混合物を０℃で２.５時間撹拌し、次いで、反応を５％水性クエン酸溶液の添加により停止し、５回に分けてＭＴＢＥにより抽出する。合わせた有機抽出物を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濃縮する。粗生成物をクロマトグラフィー（方法３４）により精製する。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥する。収量：無色固体として、１.５４ｇ（理論値の６０％）。
HPLC (方法 3) Rt = 4.64 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.65 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 661.2 (100) [M+H]+.
[α]20Na = -8.7 (c = 0.5, MeOH).
HR-TOF-MS: C35H41N4O9 計算値 661.2869, 実測値 661.2864 [M+H]+.
【０４８２】
実施例２８６Ａ
ベンジルグリシル］−［３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化２９５】
2009533371.tif 000298
実施例２８５Ａの表題化合物（８８ｍｇ、０.２０ｍｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。粗生成物を、これ以上精製せずにさらに反応させる。収量：１.８４ｇ（定量的）
HPLC (方法 3): Rt = 3.78 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.74 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 561.2 (100) [M+H]+.
[α]20Na = 0.0 (c = 1.0, MeOH).
HR-TOF-MS: C30H33N4O7 計算値 561.2344, 実測値 561.2343 [M+H]+.
【０４８３】
実施例２８７Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリネートトリフルオロ酢酸塩
【化２９６】
2009533371.tif 000299
例示的化合物３２Ａ（７０１ｍｇ、８３０μｍｏｌ）および２８６Ａ（７００ｍｇ、８３０μｍｏｌ、１当量）を、ＤＭＦ（１１.２ｍｌ）に溶解し、溶液を０℃に冷却する。４−メチルモルホリン（２７４μｌ、２.４９ｍｍｏｌ、３当量）およびＨＡＴＵ（４７３ｍｇ、１.２５ｍｍｏｌ、１.５当量）を添加し、混合物を０℃で３時間撹拌する。次いで、完全な混合物を Sephadex LH-20 カラムに載せ、方法４５に従いクロマトグラフィーする。生成物含有画分を合わせ、濃縮し、方法３４に従い精製する。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥する。表題化合物６４３ｍｇ（理論値の５６％）を無色固体として得る。
HPLC (方法 6): Rt = 4.27 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.13 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 1273.9 (30) [M+H]+ , MS (ESIneg) m/z (%) = 1317.9 (100) [M+HCOO-]-.
HR-TOF-MS: C63H93N12O16 計算値 1273.6826, 実測値 1273.6851 [M+H]+.
【０４８４】
実施例２８８Ａ
ベンジル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリネートビストリフルオロ酢酸塩
【化２９７】
2009533371.tif 000300
化合物２８７Ａ（６４３ｍｇ、４６３μｍｏｌ）を、手順２に従い反応させる。表題化合物を粗製でほぼ定量的な収量（７８３ｍｇ）で得、精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 5): Rt = 3.61 分.
LC-MS (方法 51): Rt = 2.53 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 588.1 (100) [M+2H]2+.
HR-TOF-MS: C58H85N12O14 計算値 1173.6306, 実測値 1173.6304 [M+H]+.
【０４８５】
ポリマー−結合ペプチド類
実施例２８９Ａ
ポリマー−結合Ｎ−（ｔｅｒｔ.−ブトキシカルボニル）−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−スレオニル−Ｌ−ロイシル−Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル−Ｌ−イソロイシル−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−セリル−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−セリン
【化２９８】
2009533371.tif 000301
【０４８６】
２−クロロトリチル−樹脂（Iris Biotech, CAS No 42074-68-0, 負荷 1.49 mmol/g）３４.００ｇ（５０.６６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン４００ｍｌ中に提供し、Ｏ−ｔｅｒｔ.−ブチル−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−セリン６７.９８９ｇ（１７７.３１ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）６５.４７６ｇ（５０６.６０ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。メタノール５ｍｌを添加し、混合物を室温で３０分間振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各４００ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液４００ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０４８７】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド４００ｍｌ中に提供し、Ｏ−ｔｅｒｔ.−ブチル−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−セリン４８.５６４ｇ（１２６.６５ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）−メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）４０.６６５ｇ（１２６.６５ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）２４.５５３ｇ（１８９.９７５ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各４００ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液４００ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０４８８】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド４００ｍｌ中に提供し、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−グリシン３７.６６５ｇ（１２６.６５ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）４０.６６５ｇ（１２６.６５ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）２４.５５３ｇ（１８９.９７５ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各４００ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液４００ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０４８９】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド４００ｍｌ中に提供し、Ｏ−ｔｅｒｔ.−ブチル−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−アロスレオニン５０.３４０ｇ（１２６.６５ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）４０.６６５ｇ（１２６.６５ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）２４.５５３ｇ（１８９.９７５ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各４００ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液４００ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０４９０】
かくして得られる樹脂３２ｇ（４７.６８ｍｍｏｌ；想定値：１.４９ｍｍｏｌ／ｇ負荷）を、ジメチルホルムアミド４００ｍｌ中に提供し、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−イソロイシン４２.１２８ｇ（１１９.２０ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）３８.２７３ｇ（１１９.２０ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）２３.１０９ｇ（１７８.８０ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各４００ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで３回洗浄し、吸引濾過により回収する。カップリングが不完全だったので（ＨＰＬＣによる）、ジメチルホルムアミド４００ｍｌ、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−イソロイシン２５.２７７ｇ（７１.５２ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）２２.９６４ｇ（７１.５２ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）１３.８６５ｇ（１０７.２８ｍｍｏｌ）を再度添加し、混合物を終夜振盪した。固体を吸引濾過により回収し、各４００ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液４００ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収し、真空で乾燥する。
【０４９１】
かくして得られる樹脂１４ｇ（２０.８６ｍｍｏｌ；想定値：１.４９ｍｍｏｌ／ｇ負荷）を、ジメチルホルムアミド２００ｍｌ中に提供し、Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチン３４.５６６ｇ（５２.１５ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）１６.７４５ｇ（５２.１５ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）１３.４８ｇ（１０４.３０ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各２００ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液２００ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収し、真空で乾燥する。
【０４９２】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド２００ｍｌ中に提供し、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシン１８.４３１ｇ（５２.１５ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）１６.７４５ｇ（５２.１５ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）１３.４８０ｇ（１０４.３０ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各２００ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液２００ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収し、真空で乾燥する。
【０４９３】
かくして得られる樹脂２.０ｇ（２.９８ｍｍｏｌ；想定値：１.４９ｍｍｏｌ／ｇ負荷）を、ジメチルホルムアミド２０ｍｌ中に提供し、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｏ−ｔｅｒｔ.−ブチル−Ｌ−スレオニン２.４６２ｇ（８.９４ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）２.８７０ｇ（８.９４ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）２.３１１ｇ（１７.８８ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各２０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで３回洗浄し、吸引濾過により回収する。
【０４９４】
実施例２９０Ａ
Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］グリシル−Ｌ−セリン
【化２９９】
2009533371.tif 000302
Ｏ−ｔｅｒｔ.−ブチル−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−セリンを予め負荷した Wang 樹脂 (Merck Biosciences；負荷：０.６２ｍｍｏｌ／ｇ）１ｇ（０.６２ｍｍｏｌ）を、以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］グリシン３６９ｍｇ（１.２４ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）３９８ｍｇ（１.２４ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）２４０ｍｇ（１.８６ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。ジクロロメタン中の５０％トリフルオロ酢酸溶液２０ｍｌを添加し、６０分間作用させ、樹脂をフリットでの濾過により取り出し、樹脂をジクロロメタン１０ｍｌで３回洗浄する。濾液を濃縮し、標的化合物を粗生成物として得る。
LC-MS (方法: LC-MS (方法 19): Rt = 2.10 分, MS (ESIpos): m/z (%) =): 385.0 [M+H]+.
【０４９５】
実施例２９１Ａ
ポリマー−結合［Ｎ−ｔｅｒｔブトキシカルボニル−（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−［３−ｔｅｒｔブチル−Ｌ−アラニル］−［Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝−メチル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［Ｏ３−ｔｅｒｔブチル−Ｌ−セリル］−Ｏ３−ｔｅｒｔブチル−Ｌ−セリン
【化３００】
2009533371.tif 000303
Ｏ−ｔｅｒｔ.−ブチル−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−セリンを予め負荷した Wang 樹脂 (Merck Biosciences；負荷：０.６２ｍｍｏｌ／ｇ）１ｇ（０.６２ｍｍｏｌ）を、以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。かくして得られる樹脂をジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、例示的化合物２９０Ａ４７７ｍｇ（１.２４ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）３９８ｍｇ（１.２４ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）３２０ｍｇ（２.４８ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０４９６】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｄ−アロスレオニン４２３ｍｇ（１.２４ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）３９９ｍｇ（１.２４ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）３２０ｍｇ（２.４８ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０４９７】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−イソロイシン４３８ｍｇ（１.２４ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）３９９ｍｇ（１.２４ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）２４０ｍｇ（１.８６ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０４９８】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチン８２１ｍｇ（１.２４ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）３９９ｍｇ（１.２４ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）２４０ｍｇ（１.８６ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０４９９】
かくして得られる樹脂８１２ｍｇ（０.５０３ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）−カルボニル］−４−メチル−Ｌ−ロイシン３７０ｍｇ（１.０１ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）−（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）３２３ｍｇ（１.０１ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）１９５ｍｇ（１.５１ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０５００】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシン１５７ｍｇ（０.６３３ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）２０３ｍｇ（０.６３３ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）１９６ｍｇ（１.５２ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０５０１】
実施例２９２Ａ
ポリマー−結合［Ｎ−ｔｅｒｔブトキシカルボニル−（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−［３−トリメチルシリル−Ｌ−アラニル］−［Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチル］−Ｌ−イソロイシル−［Ｏ−ｔｅｒｔブチル−Ｌ−アロスレオニル］−グリシル−［Ｏ３−ｔｅｒｔブチル−Ｌ−セリル］−Ｏ３−ｔｅｒｔブチル−Ｌ−セリン
【化３０１】
2009533371.tif 000304
Wang 樹脂１ｇ（Rapp Polymer；負荷：１.２８ｍｍｏｌ／ｇ）を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌに導入する。Ｏ−ｔｅｒｔ.−ブチル−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−セリン９８２ｍｇ（２.５６ｍｍｏｌ）、Ｎ−｛［（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）オキシ］（ジメチルアミノ）メチレン｝−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ）９１０ｍｇ（２.５６ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）４９６ｍｇ（３.８４ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０５０２】
同じ量比を使用して、記載した条件下で、Ｏ−ｔｅｒｔ.−ブチル−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−セリンとのさらなるカップリングを実施する（直前参照）。
【０５０３】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］グリシン７６１ｍｇ（２.５６ｍｍｏｌ）、Ｎ−｛［（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）オキシ］（ジメチルアミノ）メチレン｝−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ）９１０ｍｇ（２.５６ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）４９６ｍｇ（３.８４ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で５時間振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０５０４】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｄ−アロスレオニン１.０１７ｇ（２.５６ｍｍｏｌ）、Ｎ−｛［（６−クロロ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）オキシ］（ジメチルアミノ）メチレン｝−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ）９１０ｍｇ（２.５６ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）４９６ｍｇ（３.８４ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０５０５】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−イソロイシン９０４ｍｇ（２.５６ｍｍｏｌ）、Ｎ−｛［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）オキシ］（ジメチルアミノ）メチレン｝−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）８２２ｍｇ（２.５６ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）４９６ｍｇ（３.８４ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０５０６】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ５−（イミノ｛［（２,２,５,７,８−ペンタメチル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−６−イル）スルホニル］アミノ｝メチル）−Ｄ−オルニチン１.６９７ｇ（２.５６ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）８２２ｍｇ（２.５６ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）６６２ｍｇ（５.１２ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０５０７】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−３−（トリメチルシリル）−Ｌ−アラニン９８２ｍｇ（２.５６ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ（ジメチルアミノ）−メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）８２２ｍｇ（２.５６ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）６６２ｍｇ（５.１２ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。続いて、固体を以下の通りにピペリジンで連続的に２回処理する：樹脂をジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン溶液１０ｍｌと混合し、３０分間振盪し、吸引濾過により回収する。
【０５０８】
かくして得られる樹脂を、ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中に提供し、スレオＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシン２６１ｍｇ（０.７０５ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）３３９ｍｇ（１.０５７ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（ＤＩＥＡ）２７３ｍｇ（２.１１４ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で終夜振盪する。固体を吸引濾過により回収し、各１０ｍｌのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンにより３回洗浄し、吸引濾過により回収する。
【０５０９】
下表に記載の化合物２９３Ａ−４５８Ａは、示した手順に従い、示した出発物質から製造した。
【表３】
2009533371.tif 000305
【０５１０】
【表４】
2009533371.tif 000306
【０５１１】
【表５】
2009533371.tif 000307
【０５１２】
【表６】
2009533371.tif 000308
【０５１３】
【表７】
2009533371.tif 000309
【０５１４】
【表８】
2009533371.tif 000310
【０５１５】
【表９】
2009533371.tif 000311
【０５１６】
【表１０】
2009533371.tif 000312
【０５１７】
【表１１】
2009533371.tif 000313
【０５１８】
【表１２】
2009533371.tif 000314
【０５１９】
【表１３】
2009533371.tif 000315
【０５２０】
【表１４】
2009533371.tif 000316
【０５２１】
【表１５】
2009533371.tif 000317
【０５２２】
脱保護されたオクタペプチド類
【表１６】
2009533371.tif 000318
【０５２３】
【表１７】
2009533371.tif 000319
【０５２４】
【表１８】
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【０５２５】
【表１９】
2009533371.tif 000321
【０５２６】
【表２０】
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【０５２７】
【表２１】
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【０５２８】
【表２２】
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【０５２９】
【表２３】
2009533371.tif 000325
【０５３０】
【表２４】
2009533371.tif 000326
【０５３１】
【表２５】
2009533371.tif 000327
【０５３２】
【表２６】
2009533371.tif 000328
【０５３３】
【表２７】
2009533371.tif 000329
【０５３４】
保護ノナペプチド類
【表２８】
2009533371.tif 000330
【０５３５】
【表２９】
2009533371.tif 000331
【０５３６】
【表３０】
2009533371.tif 000332
【０５３７】
【表３１】
2009533371.tif 000333
【０５３８】
【表３２】
2009533371.tif 000334
【０５３９】
【表３３】
2009533371.tif 000335
【０５４０】
【表３４】
2009533371.tif 000336
【０５４１】
【表３５】
2009533371.tif 000337
【０５４２】
【表３６】
2009533371.tif 000338
【０５４３】
【表３７】
2009533371.tif 000339
【０５４４】
【表３８】
2009533371.tif 000340
【０５４５】
【表３９】
2009533371.tif 000341
【０５４６】
【表４０】
2009533371.tif 000342
【０５４７】
【表４１】
2009533371.tif 000343
【０５４８】
【表４２】
2009533371.tif 000344
【０５４９】
【表４３】
2009533371.tif 000345
【０５５０】
【表４４】
2009533371.tif 000346
【０５５１】
部分的に脱保護されたノナペプチド類
【表４５】
2009533371.tif 000347
【０５５２】
【表４６】
2009533371.tif 000348
【０５５３】
【表４７】
2009533371.tif 000349
【０５５４】
【表４８】
2009533371.tif 000350
【０５５５】
【表４９】
2009533371.tif 000351
【０５５６】
【表５０】
2009533371.tif 000352
【０５５７】
【表５１】
2009533371.tif 000353
【０５５８】
【表５２】
2009533371.tif 000354
【０５５９】
【表５３】
2009533371.tif 000355
【０５６０】
【表５４】
2009533371.tif 000356
【０５６１】
【表５５】
2009533371.tif 000357
【０５６２】
【表５６】
2009533371.tif 000358
【０５６３】
【表５７】
2009533371.tif 000359
【０５６４】
【表５８】
2009533371.tif 000360
【０５６５】
【表５９】
2009533371.tif 000361
【０５６６】
【表６０】
2009533371.tif 000362
【０５６７】
環化
【表６１】
2009533371.tif 000363
【０５６８】
【表６２】
2009533371.tif 000364
【０５６９】
【表６３】
2009533371.tif 000365
【０５７０】
【表６４】
2009533371.tif 000366
【０５７１】
【表６５】
2009533371.tif 000367
【０５７２】
【表６６】
2009533371.tif 000368
【０５７３】
【表６７】
2009533371.tif 000369
【０５７４】
【表６８】
2009533371.tif 000370
【０５７５】
【表６９】
2009533371.tif 000371
【０５７６】
【表７０】
2009533371.tif 000372
【０５７７】
【表７１】
2009533371.tif 000373
【０５７８】
【表７２】
2009533371.tif 000374
【０５７９】
【表７３】
2009533371.tif 000375
【０５８０】
【表７４】
2009533371.tif 000376
【０５８１】
【表７５】
2009533371.tif 000377
【０５８２】
【表７６】
2009533371.tif 000378
【０５８３】
【表７７】
2009533371.tif 000379
【０５８４】
環化生成物の脱保護
【表７８】
2009533371.tif 000380
【０５８５】
【表７９】
2009533371.tif 000381
【０５８６】
【表８０】
2009533371.tif 000382
【０５８７】
【表８１】
2009533371.tif 000383
【０５８８】
【表８２】
2009533371.tif 000384
【０５８９】
【表８３】
2009533371.tif 000385
【０５９０】
【表８４】
2009533371.tif 000386
【０５９１】
【表８５】
2009533371.tif 000387
【０５９２】
【表８６】
2009533371.tif 000388
【０５９３】
【表８７】
2009533371.tif 000389
【０５９４】
【表８８】
2009533371.tif 000390
【０５９５】
【表８９】
2009533371.tif 000391
【０５９６】
【表９０】
2009533371.tif 000392
【０５９７】
【表９１】
2009533371.tif 000393
【０５９８】
【表９２】
2009533371.tif 000394
【０５９９】
【表９３】
2009533371.tif 000395
【０６００】
【表９４】
2009533371.tif 000396
【０６０１】
Ｎ−末端ジペプチドフラグメントの結合
【表９５】
2009533371.tif 000397
【０６０２】
【表９６】
2009533371.tif 000398
【０６０３】
【表９７】
2009533371.tif 000399
【０６０４】
【表９８】
2009533371.tif 000400
【０６０５】
【表９９】
2009533371.tif 000401
【０６０６】
【表１００】
2009533371.tif 000402
【０６０７】
【表１０１】
2009533371.tif 000403
【０６０８】
【表１０２】
2009533371.tif 000404
【０６０９】
【表１０３】
2009533371.tif 000405
【０６１０】
【表１０４】
2009533371.tif 000406
【０６１１】
【表１０５】
2009533371.tif 000407
【０６１２】
【表１０６】
2009533371.tif 000408
【０６１３】
【表１０７】
2009533371.tif 000409
【０６１４】
【表１０８】
2009533371.tif 000410
【０６１５】
【表１０９】
2009533371.tif 000411
【０６１６】
【表１１０】
2009533371.tif 000412
【０６１７】
【表１１１】
2009533371.tif 000413
【０６１８】
【表１１２】
2009533371.tif 000414
【０６１９】
【表１１３】
2009533371.tif 000415
【０６２０】
【表１１４】
2009533371.tif 000416
【０６２１】
実施例４５９Ａ：
ｔｅｒｔ−ブチル［（フェニルスルホニル）（ピリジン−３−イル）メチル］カルバメート
【化３０２】
2009533371.tif 000417
ピリジン−３−カルボアルデヒド（５.３６ｇ、５０ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルカルバメート（１１.７ｇ、１００ｍｍｏｌ、２当量）、ナトリウムフェニルスルフィネート（２０.３６ｇ、１２４ｍｍｏｌ、２.４８当量）、ギ酸（１.８９ｍｌ、２.３０ｇ、１当量）、メタノール（５５ｍｌ）および水（１１１ｍｌ）を混合し、室温で３日間激しく撹拌する。生成物は無色結晶の形態で沈殿し、それを濾過により回収し、水および少量のＭＴＢＥで洗浄し、真空で乾燥する。収量：４.１０ｇ（理論値の２４％）。
LC-MS (方法 51): Rt = 2.51 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 349.3 (100) [M+H]+. 
【０６２２】
実施例４６０Ａ：
ｔｅｒｔ−ブチル［（ピリジン−３−イル）メチレン］カルバメート
【化３０３】
2009533371.tif 000418
炭酸カリウム（４.７８ｇ、３４ｍｍｏｌ、６当量）を、真空で加熱乾燥し、ＴＨＦ層（７０ｍＬ）で覆う。混合物を１６時間還流に加熱し、次いで冷却し、セライト層で濾過する。濾液を濃縮し、油状残渣（粗生成物１.３３ｇ、定量的）を精製せずにさらに反応させる。
【０６２３】
実施例４６１Ａ：
エチルｒａｃ−スレオ−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｎ２−（ジフェニルメチレン）−３−ピリジン−３−イル−アラニネート
【化３０４】
2009533371.tif 000419
反応は、スルホニルイミン類への銅エノラートの付加方法をベースとして行う：L. Bernardi, A. Gothelf, R. G. Hazell, K. A. Jorgensen, J. Org. Chem. 2003, 68, 2583-2591. tert-ブチル [(1E)-フェニルメチレン]カルバメートは、文献: A. Klepacz, A. Zwierzak, Tetrahedron Lett. 2002 43; 1079-1080 に従い製造できる。
【０６２４】
新たに活性化した３Åモレキュラー・シーブ、テトラキス（アセトニトリル）銅（Ｉ）ヘキサフルオロホスフェート（１７９ｍｇ、０.４８ｍｍｏｌ、０.１当量）および（Ｒ）−（＋）−２−（２−（ジフェニルホスフィノ）フェニル）−４−フェニル−２−オキサゾリン（３２９ｍｇ、０.５３ｍｍｏｌ、０.１１当量）をアルゴン下に提供し、無水ＴＨＦ（４１ｍｌ）を添加する。トリエチルアミン（６７μｌ、４９ｍｇ、０.４８ｍｍｏｌ、０.１当量）を、次いでピペットで加える。混合物を−２０℃に冷却し、この温度に達したらすぐに、エチルＮ−（ジフェニルメチレン）グリシネート（１.２９ｇ、４.８１ｍｍｏｌ）および例示的化合物４５９Ａ（１.１９ｇ、５.７７ｍｍｏｌ、１.２当量）を添加する。混合物を１６時間撹拌し、その間にそれをゆっくりと室温に到達させる。次いでシリカゲル（約１５ｇ）を添加し、溶媒を真空で留去する。残渣をシクロヘキサン−酢酸エチル９＋１（ZIF-SIM 35 を伴う Biotage 40M）でクロマトグラフィーする。表題化合物を収量１.８５ｇ（純度９５％、理論値の７７％）で得る。
LC-MS (方法 51): Rt = 3.55 分 MS (ESIpos): m/z (%) = 474.3 (100) [M+H]+.
【０６２５】
実施例４６２Ａ：
エチルｒａｃ−スレオ−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−ピリジン−３−イル−アラニネートトリフルオロ酢酸塩
【化３０５】
2009533371.tif 000420
実施例４６１Ａの表題化合物（３５０ｍｇ、０.７４ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（９.３３ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ１８７μｌ（２.４２ｍｍｏｌ、３.３当量）および水（１８７μｌ、１０.４μｍｏｌ、１４当量）を添加し、混合物を４℃で１６時間静置する。反応混合物の全ての揮発性成分を真空で留去し、残渣をクロマトグラフィー（方法３４）により精製する。収量：３６６ｍｇ（理論値の９２％）。
HPLC (方法 6): Rt = 3.03 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.32 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 310.0 (80) [M+H]+.
HR-TOF-MS: C15H24N3O4 計算値 310.1762, 実測値 310.1767 [M+H]+.
【０６２６】
実施例４６３Ａ：
エチルｒａｃ−スレオ−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｎ２−（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ−３−ピリジン−３−イル−アラニネート
【化３０６】
2009533371.tif 000421
例示的化合物４６２Ａ（３６６ｍｇ、０.６８ｍｍｏｌ）およびベンジルオキシカルボニルスクシンイミド（２０９ｍｇ、０.８２ｍｍｏｌ、１.２当量）を、ジクロロメタン−水（４＋１）５ｍｌに溶解し、混合物を０℃に冷却する。激しく撹拌しながら、重炭酸ナトリウム（８６ｍｇ、１.０３ｍｍｏｌ、１.５当量）およびテトラブチルアンモニウムブロミド（１１ｍｇ、３４μｍｏｌ、０.０５当量）を添加し、混合物を室温で１６時間激しく撹拌する。有機相を分離し、濃ＮａＣｌで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。粗生成物をクロマトグラフィーする（方法３４）。収量：表題化合物３１４ｍｇ（純度８４％、０.６０ｍｍｏｌ、理論値の８８％）
Rf = 0.076 (CyHex-EtOAc 9+1).
HPLC (方法 54): Rt = 4.33 分 (エリトロ ジアステレオマー) および 4.52 分 (スレオ
ジアステレオマー).
LC-MS (方法 19): Rt = 2.71 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 409.3 (30) [M+H]+, エリトロ異性体および Rt = 2.75 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 409.0 (70) [M+H]+ スレオ異性体).
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ (ppm) = 0.71-0.86 (m, 6H), 1.16 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.34 (s, 9H), 1.59 (m, 1H), 3.70 (ddd, J = 3.4, J1 = J2 = 10.3 Hz, 1H), 3.99-4.08 (m, 2H), 4.32 (dd, J = 3.4, J = 9.5 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 7.31-7.40 (m, 5H), 7.44 (d, J = 9.3 Hz, 1H).
HR-TOF-MS: C21H33N2O6 計算値 409.2334, 実測値 409.2329 [M+H]+.
【０６２７】
実施例４６４Ａ：
（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｎ２−（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ−３−ピリジン−３−イル−Ｌ−アラニン
【化３０７】
2009533371.tif 000422
実施例４６３Ａの表題化合物（３１４ｍｇ、０.５６ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ−水混合物（２＋１、１７ｍｌ）に０℃で溶解し、水酸化リチウム一水和物（２５ｍｇ、０.５９ｍｍｏｌ、１.１当量）を添加し、混合物を０℃で３時間撹拌する。次いで、ＴＨＦを留去し、水性残渣を凍結乾燥し、次いでクロマトグラフィー（方法４４）により精製する。生成物を、方法５８に従うキラル相のクロマトグラフィーにより分離する。それにより、スレオジアステレオマーのエナンチオマーおよび少量のエリトロジアステレオマーのエナンチオマーを、各々別々に得る。キラルクロマトグラフィー後の主要な異性体（表題化合物）のｅ.ｅ.を方法５９により決定し、それは１００％である。表題化合物の収量は、１１３ｍｇ（出発化合物４６３Ａをベースとして、理論値の３８％）である。
HPLC (方法 6): Rt = 3.53 分.
キラル HPLC (方法 59): Rt = 4.71 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.85 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 416.2 (100) [M+H]+, MS (ESIneg): m/z (%) = 414.1.2 (100) [M-H] -.
HR-TOF-MS: C21H26N3O6 計算値 416.1817, 実測値 416.1808 [M+H]+.
【０６２８】
実施例４６５Ａ：
ペンタフルオロフェニル（３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｎ２−（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ−３−ピリジン−３−イル−Ｌ−アラニネート
【化３０８】
2009533371.tif 000423
例示的化合物４６４Ａ（６３ｍｇ、１１９μｍｏｌ）およびペンタフルオロフェノール（２４ｍｇ、１３１μｍｏｌ、１.１当量）を、ジクロロメタン（０.８ｍｌ）に室温で溶解し、ＥＤＣＩ（２５ｍｇ、１３１μｍｏｌ、１.１当量）を次いで添加し、混合物を冷蔵庫中で約１２時間静置する。続いて溶媒を真空で留去し、残渣をクロマトグラフィー（方法４４）により精製する。表題化合物を収量４７ｍｇ（理論値の５１％）で無色固体として得る。
HPLC (方法 54): Rt = 4.49 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 2.74 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 582.2 (40) [M+H]+.
HR-TOF-MS: C27H25N3O6F5 計算値 582.1659, 実測値 582.1647 [M+H]+.
【０６２９】
下表に列挙する化合物４６６Ａ−４７０Ａは、示した手順により、示した出発物質から製造した。
【表１１５】
2009533371.tif 000424
【０６３０】
【表１１６】
2009533371.tif 000425
【０６３１】
【表１１７】
2009533371.tif 000426
【０６３２】
【表１１８】
2009533371.tif 000427
【０６３３】
例示的実施態様
実施例１
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３０９】
2009533371.tif 000428
ジオキサンおよび水性０.１％ＴＦＡ（１ｍｌ、１０当量）中のベンジルオキシカルボニル−保護ペプチド（実施例５３Ａ、１.５ｍｇ、０.８９μｍｏｌ）から、手順４に従う水素化分解により１時間後に保護基を除去する。分取ＨＰＬＣ（方法２６）による入念な精製後に、生成物１.３ｍｇ（理論値の９６.６％）を得る。
【０６３４】
あるいは、実施例５８Ａの化合物（１３.０ｍｇ、８.４７μｍｏｌ）から、０.１Ｎ塩酸（５０８μｌ、１.９ｍｇ、５０.７９μｍｏｌ、６当量）を使用するメタノール（５ｍｌ）中でのエステルの水素化分解的切断（手順４）の後に、アミン（実施例１）を遊離させる。クロマトグラフィー（方法２６）後、表題化合物１２.０ｍｇ（理論値の９３.５％）を単離する。
HPLC (方法 9) Rt = 14.73 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.71 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1288 (3) [M+H]+, 644 (100) [M+ 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1286 (50) [M - H]-, 642 (38) [M - 2H]2-, 1332 (100). 
HR-TOF-MS (方法 24): C60H103N16O15 [M+H]+ 実測値 1287.7810, 計算値 1287.7784.
【０６３５】
実施例２
Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシル−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−スレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３１０】
2009533371.tif 000429
表題化合物を、ベンジルオキシカルボニル−保護ペプチド（実施例７３Ａ、３３.０ｍｇ、２１.８９μｍｏｌ）から、メタノール（１０ｍｌ）および０.１Ｎ水性塩酸（２１９μｌ、０.８ｍｇ、２１.８９μｍｏｌ、１当量）中での水素化分解的エステル切断（手順４）の後に製造する。分取ＨＰＬＣ（方法２６）により入念な精製を行い、生成物１８.１ｍｇ（理論値の５６.１％）を単離する。
HPLC (方法 9) Rt = 14.15 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.52 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1259 (5) [M+H]+, 630 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1257 (100) [M - H]-, 628 (28) [M - 2H]2-. 
HR-TOF-MS (方法 24): C58H100N16O15 [M+H]+ 実測値 1259.7454, 計算値 1259.7471.
【０６３６】
実施例３
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−オルニチル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３１１】
2009533371.tif 000430
ベンジルオキシカルボニル−保護ペプチド（実施例８１Ａ、２０.０ｍｇ、１３.２１μｍｏｌ）から、メタノール（１０ｍｌ）および０.１Ｎ水性塩酸（１９８μｌ、０.７ｍｇ、１９.８μｍｏｌ、１.５当量）中での水素化分解的エステル切断（手順４）の後、表題化合物を製造する。分取ＨＰＬＣ（方法２６）により入念な精製を行い、生成物１７.９ｍｇ（理論値の９１.９％）を単離する。
HPLC (方法 9) Rt = 15.51 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.57 分; MS (ESIpos): m/z (%) = 1245 (13) [M+H]+, 623 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1243 (100) [M - H]-. 
HR-TOF-MS (方法 24): C59H102N14O15 [M+H]+ 実測値 1245.7560, 計算値 1245.7566.
【０６３７】
実施例４
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｏ−メチル−Ｌ−チロシル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３１２】
2009533371.tif 000431
実施例１１２Ａの化合物（２３ｍｇ、１４.５μｍｏｌ）を、手順５に従い反応させる。分取ＨＰＬＣ（方法４３）を利用するクロマトグラフィーによる精製後、生成物１７ｍｇ（理論値の７５％）を凍結乾燥により得る。
HPLC/UV-Vis (方法 5): Rt = 3.69 分.
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rt = 3.95 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.71 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 667 (100) [M + 2H]2+, 1333 (2) [M+H]+; MS (ESIneg.): m/z (%) = 1331 (100) [M - H]-.
【０６３８】
実施例５
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−４−（ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムトリストリフルオロ酢酸塩
【化３１３】
2009533371.tif 000432
実施例１２８Ａの化合物（１０５ｍｇ、純度６６％、４１μｍｏｌ）を、ジクロロメタン（４ｍｌ）中の３０％ＴＦＡに溶解し、室温で２０分間撹拌する。次いで、混合物を真空で濃縮し、残渣をクロマトグラフィー（グラジエントを改変した方法４４：０−２分１０％Ｂ、勾配、３８分６０％Ｂ）により精製する。表題化合物４９ｍｇ（２９μｍｏｌ、理論値の７０％）を得る。
HPLC (方法 7): Rt = 3.62 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.72 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 450.0 (100) [M + 3H]3+, 674.4 (40) [M + 2H]2+.
HR-TOF-MS (方法 24): C62H108N17O16 [M+H]+ 計算値 1346.8155, 実測値 1346.8130.
【０６３９】
実施例６
［３−トリメチルシリル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−４−（ジメチルアミノフェニル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムトリストリフルオロ酢酸塩
【化３１４】
2009533371.tif 000433
実施例１３３Ａの化合物（１２６ｍｇ、８２μｍｏｌ）を、ジクロロメタン（４ｍｌ）中の３０％ＴＦＡに溶解し、室温で２０分間撹拌する。次いで、混合物を真空で濃縮し、残渣をクロマトグラフィー（改変したグラジエントを用いる方法４４：０−２分１０％Ｂ、勾配、３８分６０％Ｂ）により精製する。表題化合物７８ｍｇ（４６μｍｏｌ、理論値の５６％）を得る。
HPLC (方法 7): Rt = 3.69 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.66 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 682.3 (100) [M + 2H]2+, 1364.1 (2) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C61H108N17O16Si [M+H]+ 計算値 1362.7924, 実測値 1362.7949.
【０６４０】
実施例７
Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルアラニル−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３１５】
2009533371.tif 000434
実施例１４４Ａの化合物（０.３ｍｇ、０.２０μｍｏｌ）から、手順１に記載の通りに標的化合物を製造する。ゲルクロマトグラフィー（方法４５、溶離剤：メタノール）による入念な精製後、生成物０.１ｍｇ（理論値の２３.３％）を単離する。
HPLC (方法 12): Rt = 5.74 分.
LC-MS (方法 18): Rt = 1.57 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 1268 (2) [M+H]+, 634 (100) [M + 2H]2+; MS (ESIpos.): m/z (%) = 1266 (50) [M - H]-, 632 (22) [M - 2H]2-, 1312 (100) [M   時間 + HCO2H]-.
MALジ-MS (方法 25): C58H92N16O16 [M+H]+ 計算値 1267.68, 実測値 1267.65.
【０６４１】
実施例８
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−セリル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３１６】
2009533371.tif 000435
実施例２３３Ａの化合物（４ｍｇ、３μｍｏｌ）を、メタノール（１ｍｌ）に溶解する。１Ｍ塩酸１７μｌおよび１０％パラジウム−炭素（２ｍｇ）を添加し、混合物を大気圧下、室温で２時間水素化する。溶液を濾過して触媒を除去し、濃縮する。クロマトグラフィー（方法４４）による精製後、表題化合物２.２ｍｇ（１.５μｍｏｌ、理論値の５３％）を得る。
HPLC (方法 5): Rt = 4.45 分.
LC-MS (方法 20): Rt = 1.45 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 631.1 (100) [M+2H]2+, 1260.9 (3) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C59H102N15O15 計算値 1260.7675, 実測値 1260.7670 [M+H]+.
【０６４２】
実施例９
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムトリストリフルオロ酢酸塩
【化３１７】
2009533371.tif 000436
実施例２３３Ａの化合物の製造方法に従い、表題化合物を収量４ｍｇ（理論値の３２％）で、実施例２２６Ａの化合物（１２ｍｇ、１３μｍｏｌ）から得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.60 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.43 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 661.5 (100) [M+2H]2+, 1321.8 (10) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C64H105N16O14 計算値 1321.7991, 実測値 1321.7955 [M+H]+.
【０６４３】
実施例１０
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３１８】
2009533371.tif 000437
実施例２３５Ａの化合物を、一般的手順２に従い、反応物溶液１ｍｌと１時間反応させ、改変した方法４４（グラジエント：０分２５％Ｂ、勾配、３５−３８分３５％Ｂ）に従い生成物を精製する。表題化合物を収量１０ｍｇ（理論値の５０％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.41 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.57 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 661.1 (100) [M+2H]2+, 1320.8 (5) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1318.6 (90) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C65H106N15O14 計算値 1320.8039, 実測値 1320.8042 [M+H]+.
【０６４４】
実施例１１
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［Ｌ−スレオニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３１９】
2009533371.tif 000438
実施例２３６Ａの化合物を、一般的手順２に従い、反応物溶液１ｍｌと３０分間反応させ、生成物を方法４４に従い精製する。表題化合物を収量３ｍｇ（理論値の２７％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.73 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.53 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 638.0 (100) [M+2H]2+.
HR-TOF-MS (方法 24): C60H103N15O15 計算値 1274.7831, 実測値 1274.7827 [M+H]+.
【０６４５】
実施例１２
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３２０】
2009533371.tif 000439
実施例２３７Ａの化合物（４７ｍｇ、２４μｍｏｌ）を、一般的手順２に従い、反応物溶液１ｍｌと３０分間反応させ、生成物を方法４４に従い精製する。表題化合物を収量２１ｍｇ（理論値の５７％）で得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.43 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.52 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 638.1 (100) [M+2H]2+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1273.6 [M] -.
HR-TOF-MS (方法 24): C60H103N15O15 計算値 1274.7831, 実測値 1274.7800 [M+H]+.
【０６４６】
実施例１３
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３２１】
2009533371.tif 000440
実施例２３８Ａの化合物を、一般的手順２に従い反応物溶液１ｍｌと３０分間反応させ、生成物を方法４４に従い精製する。次いで、さらに入念な精製を実施する：カラム：Waters Symmetry-PrepTM C-18, 7 μm, 300 mm x 19 mm；溶離剤Ａ：水＋０.０５％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル＋０.０５％ＴＦＡ：流速：１０ｍｌ／分；Ａ：Ｂ６５／３５均一溶媒。表題化合物を収量８ｍｇ（理論値の２０％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.71 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.49 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 623.2 (100) [M+2H]2+.
HR-TOF-MS (方法 24): C59H101N15O14 計算値 1244.7726, 実測値 1244.7748 [M+H]+.
【０６４７】
実施例１４
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−セリル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３２２】
2009533371.tif 000441
実施例２３９Ａの化合物を、一般的手順２に従い反応物溶液１ｍｌと１時間反応させ、生成物を方法４４に従い精製する。次いで、さらに入念な精製を実施する：カラム：Waters Symmetry-PrepTM C-18, 7 μm, 300 mm x 19 mm；溶離剤Ａ：水＋０.０５％ＴＦＡ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル＋０.０５％ＴＦＡ：流速：１０ｍｌ／分；Ａ：Ｂ６５／３５均一溶媒。表題化合物を、収量９ｍｇ（６μｍｏｌ、理論値の３５％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.63 分.
LC-MS (方法 19): Rt = 1.43 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 643.7 (100) [M+2H]2+, 1289.8 (10) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C59H101N16O16 計算値 1289.7576, 実測値 1289.7578 [M+H]+.
【０６４８】
実施例１５
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−Ｌ−アスパラギニル−Ｌ−セリン−Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム−ビス−トリフルオロ酢酸塩
【化３２３】
2009533371.tif 000442
実施例２４０Ａの化合物を、一般的手順２に従い反応物溶液１ｍｌと１時間反応させ、生成物を方法４４に従い数回精製する。表題化合物を収量１.１ｍｇ（６μｍｏｌ、理論値の３.５％）で得る。
HPLC (方法 5): Rt = 3.41 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.90 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 645 (100) [M+2H]2+, 1288 (10) [M+H]+.
HR-TOF-MS (方法 24): C60H103N16O15 計算値 1287.7784, 実測値 1287.7786 [M+H]+.
【０６４９】
実施例１６
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−アラニンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３２４】
2009533371.tif 000443
実施例２５３Ａの化合物を、一般的手順２に従い反応物溶液２ｍｌと１時間反応させ、生成物を方法４４に従い精製する。方法３４の変法（グラジエントの代わりに、溶離剤Ａ：溶離剤Ｂ３：２；均一溶媒の使用）に従い、生成物を入念に精製する。表題化合物を収量２２ｍｇ（理論値の３６％）で得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.43 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.90 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 645 (100) [M+2H]2+, 1288 (60) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1286 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C60H103N16O15 計算値 1287.7784, 実測値 1287.7800 [M+H]+.
【０６５０】
実施例１７
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロスレオニル−Ｄ−アラニル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリンＣ１.１１−Ｎ３.３−ラクタムビストリフルオロ酢酸塩
【化３２５】
2009533371.tif 000444
実施例２６７Ａの化合物（粗生成物３４ｍｇ、約６μｍｏｌ）を、一般的手順２に従い、反応物溶液１ｍｌと３０分間反応させる。方法３３に従い２回クロマトグラフィーすることにより、生成物を純粋に得る。表題化合物を収量６ｍｇ（理論値の６５％）で得る。
HPLC (方法 6): Rt = 3.42 分.
LC-MS (方法 22): Rt = 2.90 分, MS (ESIpos): m/z (%) = 660 (100) [M+2H]2+, 1317.8 (10) [M+H]+; MS (ESIneg): m/z (%) = 1315.8 (100) [M-H]-.
HR-TOF-MS (方法 24): C61H105N16O16 計算値 1317.7889, 実測値 1317.7892 [M+H]+.
【０６５１】
下表に示す化合物１９−４４は、示した手順に従い、示した出発物質から製造した。
【表１１９】
2009533371.tif 000445
【０６５２】
【表１２０】
2009533371.tif 000446
【０６５３】
【表１２１】
2009533371.tif 000447
【０６５４】
【表１２２】
2009533371.tif 000448
【０６５５】
【表１２３】
2009533371.tif 000449
【０６５６】
【表１２４】
2009533371.tif 000450
【０６５７】
【表１２５】
2009533371.tif 000451
【０６５８】
【表１２６】
2009533371.tif 000452
【０６５９】
【表１２７】
2009533371.tif 000453
【０６６０】
【表１２８】
2009533371.tif 000454
【０６６１】
【表１２９】
2009533371.tif 000455
【０６６２】
【表１３０】
2009533371.tif 000456
【０６６３】
【表１３１】
2009533371.tif 000457
【０６６４】
【表１３２】
2009533371.tif 000458
【０６６５】
【表１３３】
2009533371.tif 000459
【０６６６】
【表１３４】
2009533371.tif 000460
【０６６７】
【表１３５】
2009533371.tif 000461
【０６６８】
【表１３６】
2009533371.tif 000462
【０６６９】
【表１３７】
2009533371.tif 000463
【０６７０】
Ｂ. 生理活性の評価
本発明の化合物のインビトロの作用は、以下のアッセイで示すことができる：
最低阻害濃度（ＭＩＣ）の決定：
ＮＣＣＬＳのガイドラインに準じる液体希釈試験でＭＩＣを決定する。黄色ブドウ球菌１３３、エンテロコッカス・フェカリス２７１５９、Ｅ.フェシウム４１４７および肺炎連鎖球菌Ｇ９ａの終夜培養物を、１：２希釈系列の記載した試験物質と共に培養する。ＭＩＣの決定は、Isosensitest 培地 (Difco, Irvine/USA）中、１ｍｌ当たり微生物１０５個の細胞数で実施し、肺炎連鎖球菌は例外とし、これは１０％ウシ血清を含むＢＨＩブロス (Difco, Irvine/USA) 中、微生物１０６個の細胞数で試験する。培養物を３７℃で１８−２４時間、肺炎連鎖球菌は１０％ＣＯ２の存在下で、インキュベートする。
ＭＩＣは、もはや視認できる細菌の増殖が起こらない各物質の最低濃度と定義される。ＭＩＣ値は、μｇ／ｍｌで報告する。
【０６７１】
本発明の化合物の代表的インビトロ活性データを表Ａに示す：
表Ａ
【表１３８】
2009533371.tif 000464
【０６７２】
細菌感染の処置に対する本発明の化合物の適合性は、以下の動物モデルで示すことができる：
黄色ブドウ球菌１３３による全身感染：
黄色ブドウ球菌１３３の細胞を、ＢＨＩブロス（Oxoid, New York/USA）中で終夜増殖させる。終夜培養物を新鮮なＢＨＩブロス中で１：１００に希釈し、３時間インキュベートする。そのとき対数増殖期にある細胞を、遠心分離し、緩衝生理塩水で２回洗浄する。次いで、塩水中の細胞の懸濁液を、測光法で吸光度５０ユニットに調節する。希釈段階（１：１５）の後、この懸濁液を１０％ムチン溶液と１：１で混合する。マウス２０ｇにつき、この感染溶液０.２５ｍｌを腹腔内投与する（微生物１ｘ１０６個／マウスに相当する）。感染の３０分後に、腹腔内または静脈内で治療を行う。雌のＣＦＷ１マウスを感染実験に使用する。動物の生存を６日間にわたり記録する。
【０６７３】
腎耐性に関する本発明の化合物の特性は、以下の動物モデルで示すことができる：
腎毒性作用の測定のためのマウスモデル：
ノナデプシペプチドの腎毒性の副作用を、特定用量の複数回投与後のマウスの腎臓の組織病理学的調査により分析する。この目的で、５−６匹の動物を、静脈内（ｉ.ｖ.）または腹腔内（ｉ.ｐ.）で、水性溶液に溶解した、または Solutol を添加した物質により毎日処置する。腎臓のヘマトキシリンおよびエオジン（Ｈ＆Ｅ）染色パラフィン切片の光学顕微鏡による評価で腎毒性作用を決定する。糖タンパク質をより良好に可視化するために、過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）反応を実施することもある。各動物について腎毒性作用を、尿細管の好塩基球増加症および変性／再生の発生の重篤度（重篤度：０＝作用なし；１＝最小の作用；２＝僅かな作用；３＝中度の作用；４＝重篤な病変）として、準定量的に特定する。尿細管の変性／再生の平均重篤度および発生率（罹患動物の数）を各動物群または誘導体について算出する。尿細管の拡張並びに壊死および壊死性物質の蓄積など、これを超えて進行する腎臓の変化を同様に列挙する。
【０６７４】
腎毒性作用の測定のためのラットモデル：
ノナデプシペプチドの腎毒性の副作用を、特定用量の複数回投与後のラットの腎臓の組織病理学的調査により分析する。この目的で、５匹の動物を、静脈内（ｉ.ｖ.）で、塩水またはリンガーの乳酸塩溶液に溶解した物質により毎日処置する。腎臓のヘマトキシリンおよびエオジン（Ｈ＆Ｅ）染色パラフィン切片の光学顕微鏡による評価で腎毒性作用を決定する。糖タンパク質をより良好に可視化するために、過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）反応を実施することもある。各動物について腎毒性作用を、尿細管の好塩基球増加症および変性／再生の発生の重篤度（重篤度：０＝作用なし；１＝最小の作用；２＝僅かな作用；３＝中度の作用；４＝重篤な病変）として、準定量的に特定する。尿細管の変性／再生の平均重篤度および発生率（罹患動物の数）を各動物群または誘導体について算出する。尿細管の拡張並びに壊死および壊死性物質の蓄積など、これを超えて進行する腎臓の変化を同様に列挙する。
【０６７５】
Transil による遊離比率（free fraction）の決定の原理：
ここで説明する試験物質の遊離比率（ｆｕ）の決定方法は、２部に分けられる：
ａ）試験物質を Transil（登録商標）−バッファー（ｐＨ７.４）分散物中でインキュベートし、続いて分散物中およびバッファー上清中の濃度を決定することによる、Transil（登録商標）／バッファー分布比（ＭＡバッファー）の決定。
ｂ）試験物質を Transil（登録商標）−血漿分散物中でインキュベートし、続いて分散物中および血漿中の濃度を決定することによる、Transil（登録商標）／血漿分布比（ＭＡ血漿）の決定。
これらの２つの分布比の比率が、ｆｕとなる。
【０６７６】
タンパク質結合が多い物質の場合、血漿を、通常、等張リン酸バッファー（ｐＨ７.４）で希釈し、次いで Transil（登録商標）で懸濁する。この希釈タンパク質溶液におけるｆｕ'（希釈血漿中での遊離比率）の決定は、ｆｕの決定と同様に行う。未希釈血漿における遊離比率を、ｆｕ'および希釈率から算出する。
【０６７７】
この方法に関し、Schuhmacher, Joachim; Kohlsdorfer, Christian; Buehner, Klaus; Brandenburger, Tim; Kruk, Renate, "High-throughput determination of the free fraction of drugs strongly bound to plasma proteins." Journal of Pharmaceutical Sciences 2004, 93, 816-830 も参照。
【０６７８】
Transil（登録商標）とバッファー（ＭＡバッファー）とに分布した後の試験物質の膜親和性の測定：
全てのインキュベーションは、適するガラス容器、例えばガラスバイアル、受け口をすりガラスにした（ground-socket）試験管の中で実施する。総量は通常０.５−５ｍｌであり、Transil（登録商標）の量は１０−１００μｌである。膜親和性が高いと予測されるならば、Transil（登録商標）分散物をｐＨ７.４のリン酸バッファー、例えばダルベッコのＰＢＳで、２０倍まで希釈できる。ｐＨ７.４のリン酸バッファーをインキュベーション容器に提供し、Transil（登録商標）を、徹底的に混合した後に、ピペットで加える。例えば２００ｎｇ／ｍｌの濃度で、ｎ＝６で、試験物質をピペットで加える。有機溶媒の割合は、＜２％であるべきである。混合物を、室温で３０分間、例えば小型シェーカー上で、約４５°の角度で、約４００ｒｐｍでインキュベートする。１００％値を決定するために、例えば１００μｌの少なくとも１個のアリコートを取り出し、残りの混合物を約１８００ｇで約１０分間遠心分離する。濃度の測定のために、上清の少なくとも２個のアリコート（例えば１００μｌ）を各サンプルから取り出す。
【０６７９】
非希釈または希釈血漿におけるＭＡ血漿の測定：
総インキュベーション量および Transil（登録商標）の添加量は、予測される遊離比率に依存する。総量は通常０.５−１ｍｌであり、Transil（登録商標）の量は１０−１００μｌである。遊離比率が非常に低いならば、調査すべき種の血漿を、等張バッファー溶液、ｐＨ７.４で、例えば１０−４００倍に希釈し、次いで Transil（登録商標）を添加する。後続の手順は、ＭＡバッファー値の測定について上記した通りに行う。
【０６８０】
限外濾過による遊離比率の測定の原理：
調査すべき種の血漿を、半透膜を通して濾過する。濾液の物質濃度を測定し、そこから遊離比率ｆｕを算出する。Millipore/Amicon の Centrifree 微小分配システムを使用する。限外濾過膜は、３００００Ｄａのカットオフを有する。血漿１ｍｌに約１μｇ／ｍｌの濃度で物質を加える。溶媒の割合は、＜２％であるべきである。室温で３０分間インキュベートした後、血漿を限外濾過システムにピペットで加え、１８００ｇで１０分間遠心分離する。限外濾液中の物質濃度（Ｃｕ；非結合物質濃度）および遠心分離前の血漿中の物質濃度（Ｃ；総物質濃度）を測定する。式：ｆｕ（％）＝Ｃｕ／Ｃ＊１００に従い遊離比率を算出する。
【０６８１】
わずかにアルカリ性の水性溶液中での化学的安定性の測定：
試験物質０.３ｍｇを、アセトニトリル０.２５ｍｌ、ＤＭＳＯ０.２５ｍｌおよびｐＨ７.８の重炭酸アンモニウムのバッファー（塩化カルシウム１１１ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、重炭酸塩７.９１ｇ（１００ｍｍｏｌ）、アセトニトリル１００ｍｌ、１０００ｍｌまで）０.５ｍｌの混合物に溶解し、室温で静置する。溶液から５μｌアリコートを１時間に１回取り、ＨＰＬＣ（方法５７）により分析する。ＵＶ吸光（ＩＥ）により示される０時間の時点での試験化合物の濃度を、１００％に等しいと設定し、経時的な減少を観察する。同時に、開環分解産物の増加を観察する。
【０６８２】
このアッセイは、図１−５に示す結果をもたらす。本発明の化合物が水性アルカリ性溶液中でリソバクチンよりも顕著に安定であることが、これらの曲線から明らかである。
【０６８３】
Ｃ. 医薬組成物の例示的実施態様
本発明の化合物は、以下の方法で医薬製剤に変換できる：
錠剤：
組成：
実施例１の化合物１００ｍｇ、ラクトース（一水和物）５０ｍｇ、トウモロコシデンプン（天然）５０ｍｇ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ２５）（BASF, Ludwigshafen, Germany）１０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２ｍｇ。
錠剤重量２１２ｍｇ、直径８ｍｍ、曲率半径１２ｍｍ。
製造：
有効成分、ラクトースおよびデンプンの混合物を、５％ＰＶＰ水溶液（ｍ／ｍ）で造粒する。顆粒を乾燥し、次いで、ステアリン酸マグネシウムと５分間混合する。この混合物を常套の打錠機を使用して打錠する（錠剤の形状は上記参照）。打錠力１５ｋＮを、打錠のガイドラインとして使用する。
【０６８４】
経口投与できる懸濁液：
組成：
実施例１の化合物１０００ｍｇ、エタノール（９６％）１０００ｍｇ、Rhodigel (キサンタンゴム、FMC, Pennsylvania, USA）４００ｍｇおよび水９９ｇ。
経口懸濁液１０ｍｌは、本発明の化合物の単回用量１００ｍｇに相当する。
製造：
Rhodigel をエタノールに懸濁し、有効成分を懸濁液に添加する。撹拌しながら水を添加する。混合物を約６時間、Rhodigel の膨張が完了するまで撹拌する。
【０６８５】
静脈内投与できる液剤：
組成：
実施例１の化合物１００−２００ｍｇ、ポリエチレングリコール４００ １５ｇおよび注射用の水２５０ｇ。
製造：
実施例１の化合物をポリエチレングリコール４００と共に水に撹拌しながら溶解する。溶液を濾過滅菌し（孔の直径０.２２μｍ）、無菌条件下で加熱滅菌した点滴瓶に分配する。後者を点滴ストッパーおよびクリンプキャップで閉じる。
【図面の簡単な説明】
【０６８６】
【図１】図１は、水性のわずかにアルカリ性の溶液における経時的なリソバクチンおよびリソバクチンの分解産物の濃度の変化のプロットを示す。
【図２】図２は、水性のわずかにアルカリ性の溶液における経時的な実施例１９の化合物の濃度の変化のプロットを示す。
【図３】図３は、水性のわずかにアルカリ性の溶液における経時的な実施例２３の化合物の濃度の変化のプロットを示す。
【図４】図４は、水性のわずかにアルカリ性の溶液における経時的な実施例２５の化合物の濃度の変化のプロットを示す。
【図５】図５は、水性のわずかにアルカリ性の溶液における経時的な実施例４０の化合物の濃度の変化のプロットを示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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