(57)【要約】【課題】カンピロバクター・ジェジュニに対して有効なワクチンの提供をする。【解決手段】１つ以上のカンピロバクター・ジェジュニ菌株からのカンピロバクター・ジェジュニ莢膜多糖ポリマーからなる免疫原組成物。該多糖は、ホモポリマー、二糖または三糖からなる反復構造からなる。抗カンピロバクター・ジェジュニ免疫を生成するには、１投与あたり０．１μｇから１０ｍｇの投与量範囲でアジュバントとともにまたはなしで該免疫原組成物を投与する段階、１投与あたり０．１μｇから１０ｍｇの投与量範囲でアジュバントとともにまたはなしで効果増強量の該免疫原組成物を投与する段階からなる方法による。【選択図】なし
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
組成物が１つ以上のカンピロバクター・ジェジュニ菌株からのカンピロバクター・ジェジュニ莢膜多糖ポリマーからなることを特徴とする免疫原組成物。
【請求項２】
該多糖が、ホモポリマー、二糖または三糖からなる反復構造からなる請求項１記載の免疫原組成物。
【請求項３】
該多糖ポリマーが、式［→３］−α−Ｄ−Ｇａｌ−（１→２）−６ｄ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−Ｍｅ−Ｈｅｐ−（１→３）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→）ｎを有する反復三糖構造である請求項２記載の免疫原組成物。
【請求項４】
該多糖ポリマーが、式→３）−α−６−デオキシ−Ｄ−イド−ヘプトース（１→４）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→を有する反復二糖構造である請求項２記載の免疫原組成物。
【請求項５】
該組成物が、担体分子に複合したカンピロバクター・ジェジュニの１つ以上の菌株からのカンピロバクター・ジェジュニ莢膜多糖ポリマーからなることを特徴とする免疫原組成物。
【請求項６】
該莢膜が、ホモポリマー、二糖または三糖からなる反復構造である多糖ポリマーからなる請求項５記載の免疫原組成物。
【請求項７】
該担体分子がＣＲＭ１９７である請求項５記載の免疫原組成物。
【請求項８】
該担体分子が還元的アミノ化により複合される請求項７記載の免疫原組成物。
【請求項９】
該莢膜多糖が、式［→３］−α−Ｄ−Ｇａｌ−（１→２）−６ｄ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−Ｍｅ−Ｈｅｐ−（１→３）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→）ｎを有する反復構造からなる請求項５記載の免疫原組成物。
【請求項１０】
該莢膜多糖が、式→３）−α−６−デオキシ−Ｄ−イド−ヘプトース（１→４）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→を有する反復構造からなる請求項５記載の免疫原組成物。
【請求項１１】
該莢膜多糖が、式［→３］−α−Ｄ−Ｇａｌ−（１→２）−６ｄ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−Ｍｅ−Ｈｅｐ−（１→３）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→）ｎを有する反復構造からなる請求項７記載の免疫原組成物。
【請求項１２】
該莢膜多糖が、式→３）−α−６−デオキシ−Ｄ−イド−ヘプトース（１→４）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→を有する反復構造からなる請求項７記載の免疫原組成物。
【請求項１３】
ａ．１投与あたり０．１μｇから１０ｍｇの投与量範囲でアジュバントとともにまたはなしで１つ以上のカンピロバクター・ジェジュニ菌株からのシー・ジェジュニ莢膜多糖ポリマーを含む請求項１の免疫原組成物を投与する段階、
ｂ．１投与あたり０．１μｇから１０ｍｇの投与量範囲でアジュバントとともにまたはなしで効果増強量の該免疫原組成物を投与する段階
からなることを特徴とする抗カンピロバクター・ジェジュニ免疫を生成する方法。
【請求項１４】
該莢膜多糖が担体に複合している請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
該担体がＣＲＭ１９７である請求項１３記載の方法。
【請求項１６】
該莢膜多糖ポリマーが、ホモポリマー、二糖または三糖からなる反復構造からなる請求項１３記載の方法。
【請求項１７】
該莢膜多糖が、式［→３］−α−Ｄ−Ｇａｌ−（１→２）−６ｄ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−Ｍｅ−Ｈｅｐ−（１→３）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→）ｎを有する反復構造からなる請求項１３記載の方法。
【請求項１８】
該莢膜多糖が、式→３）−α−６−デオキシ−Ｄ−イド−ヘプトース（１→４）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→を有する反復構造からなる請求項１３記載の方法。
【請求項１９】
該莢膜多糖が、式［→３］−α−Ｄ−Ｇａｌ−（１→２）−６ｄ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−Ｍｅ−Ｈｅｐ−（１→３）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→）ｎを有する反復構造からなる請求項１４の方法。
【請求項２０】
該莢膜多糖が、式→３）−α−６−デオキシ−Ｄ−イド−ヘプトース（１→４）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→を有する反復構造からなる請求項１４記載の方法。
【請求項２１】
該莢膜多糖が、式［→３］−α−Ｄ−Ｇａｌ−（１→２）−６ｄ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−Ｍｅ−Ｈｅｐ−（１→３）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→）ｎを有する反復構造からなる請求項１５記載の方法。
【請求項２２】
該莢膜多糖が、式→３）−α−６−デオキシ−Ｄ−イド−ヘプトース（１→４）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→を有する反復構造からなる請求項１５記載の方法。
【請求項２３】
該アジュバントが、ＬＴＲ  １９２Ｇ、水酸化アルミニウム、ＲＣ５２９Ｅ、ＱＳ２１、Ｅ２９４、オリゴデオキシヌクレオチド（ＯＤＮ）、ＣｐＧ−含有オリゴデオキシヌクレオチド、リン酸アルミニウムからなる群から選ばれる請求項１３記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カンピロバクター・ジェジュニ（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ）により生ずる下痢に対する保護を与えることのできる免疫原組成物、および該組成物に対する免疫反応を誘発する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
シー・ジェジュニ（Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ）は、世界中で下痢の疾患の主要な原因であり、そして米国の軍人に対する論文で証明された脅威をあたえるものである（非特許文献１、非特許文献２）。カンピロバクター・エンテリティス（ｃａｎｐｙｌｏｂａｃｔｏｒ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｓ）の症状は、下痢、腹部の痛み、発熱を含み、そしてしばしば嘔吐を伴う。水様の下痢も観察されるが、大便は、粘液、大便の白血球および血液を通常含む（非特許文献３）。しかし、ヒトの疾患に対するこの細菌の重要性にかかわらず、シー・ジェジュニに対する承認されたワクチンは存在しない。
【０００３】
【非特許文献１】Ｔａｙｌｏｒ，Ｄ．Ｎ．（１９９２）ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  Ｉｎ  ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ  ｃｏｕｎｔｒｉｅｓ．Ｉｎ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  ｆｕｔｕｒｅ  ｔｒｅｎｄｓ（Ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｎａｃｈａｍｋｉｎ  Ｌ，Ｂｌａｓｅｒ  Ｍ．Ｊ．ａｎｄ  Ｔｏｍｐｋｉｎｓ  Ｌ．Ｓ．），Ｐ．２０．Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．
【非特許文献２】Ｔａｕｘｅ，Ｒ．Ｖ．（１９９２）Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌｉｚｅｄ  ｎａｔｉｏｎｓ．Ｉｎ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  ｆｕｔｕｒｅ  ｔｒｅｎｄｓ（Ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｎａｃｈａｍｋｉｎ  Ｌ，Ｂｌａｓｅｒ  Ｍ．Ｊ．ａｎｄ  Ｔｏｍｐｋｉｎｓ  Ｌ．Ｓ．），Ｐ．９．Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．
【非特許文献３】Ｃｏｖｅｒ，Ｔ．Ｌ．ａｎｄ  Ｍ．Ｊ．Ｂｌａｓｅｒ．１９９９．ｔｈｅ  ｐａｔｈｏｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎｓ．Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．４０：２６９−１８５．
【０００４】
シー・ジェジュニの医学的な重要性のために、多くの研究が、この病原菌を理解するために行われている。しかしながら、この努力にかかわらず、シー・ジェジュニがヒトの疾患を起こす原因について、驚くべきことに殆ど知られていない。１つの菌株ＮＣＴＣ１１１６８（非特許文献４）のゲノムは、シー・ジェジュニの生態について、いくつかの異常な点を明らかにしている。１つの顕著な特徴は、糖および／または多糖の合成に関与する推定酵素をエンコードする意外に多数の遺伝子の存在である（非特許文献５）。配列そして配列を利用することにより主として促進された得られる研究は、これらの遺伝子が、シー・ジェジュニの生態に対するいくつかの異常な炭水化物の構造の重要性を強調する４つの主な官能性群に入ることを明らかにしている。これらの群は、リポオリゴ糖（ＬＯＳ）合成、フラゲリングリコシル化の遺伝的コントロール、Ｎ−結合グリコシル化の遺伝的コントロールおよび莢膜（ｃａｐｓｕｌｅ）の生合成およびアセンブリのコントロールを含む。
【０００５】
【非特許文献４】Ｐａｒｋｈｉｌｌ，Ｊ．，Ｂ．Ｗ．Ｗｒｅｎ，Ｋ．Ｍｕｎｇａｌｌ，Ｊ．Ｍ．Ｋｅｔｌｅｙ，Ｃ．Ｃｈｕｒｃｈｅｒ，Ｄ．Ｂａｓｈａｍ，Ｔ．Ｃｈｉｌｌｉｎｇｗｏｒｔｈ，Ｒ．Ｍ．Ｄａｖｉｅｓ，Ｔ．Ｆｅｌｔｗｅｌｌ，Ｓ．Ｈｏｌｒｏｙｄ，Ｋ．Ｊａｇｅｌｓ，Ａ．Ｖ．Ｋａｒｌｙｓｈｅｖ，Ｃｈｕｒｃｈｅｒ，Ｄ．Ｂａｓｈａｍ，Ｔ．Ｃｈｉｌｌｉｎｇｗｏｒｔｈ，Ｒ．Ｍ．Ｄａｖｉｅｓ，Ｔ．Ｆｅｌｔｗｅｌｌ，Ｓ．Ｈｏｌｒｏｙｄ，Ｋ．Ｊａｇｅｌｓ，Ａ．Ｖ．Ｋａｒｌｙｓｈｅｖ，Ｓ．Ｍｏｕｌｅ，Ｍ．Ｊ．Ｐａｌｌｅｎ，Ｃ．Ｗ．Ｐｅｎｎ，Ｍ．Ａ．Ｑｕａｉｌ，Ｍ．Ａ．Ｒａｊａｎｄｒｅａｍ，Ｋ．Ｍ．Ｒｕｔｈｅｒｆ  Ｓ．Ｍｏｕｌｅ，Ｍ．Ｊ．Ｐａｌｌｅｎ，Ｃ．Ｗ．Ｐｅｎｎ，Ｍ．Ａ．Ｑｕａｉｌ，Ｍ．Ａ．Ｒａｊａｎｄｒｅａｍ，Ｋ．Ｍ．Ｒｕｔｈｅｒｆｏｒｄ，Ａ．Ｈ．Ｍ．ｖａｎ  Ｖｌｉｅｔ，Ｓ．Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ，ａｎｄ  Ｂ．Ｇ．Ｂａｒｒｅｌｌ．２０００．ｔｈｅ  ｇｅｎｏｍｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｆｏｏｄ−ｂｏｒｎｎｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ  ｔｒａｃｔｓ．Ｎａｔｕｒｅ  ４０３：６６５−６６８．
【非特許文献５】Ｐａｒｋｈｉｌｌ，Ｊ．，Ｂ．Ｗ．Ｗｒｅｎ，Ｋ．Ｍｕｎｇａｌｌ，Ｊ．Ｍ．Ｋｅｔｌｅｙ，Ｃ．Ｃｈｕｒｃｈｅｒ，Ｄ．Ｂａｓｈａｍ，Ｔ．Ｃｈｉｌｌｉｎｇｗｏｒｔｈ，Ｒ．Ｍ．Ｄａｖｉｅｓ，Ｔ．Ｆｅｌｔｗｅｌｌ，Ｓ．Ｈｏｌｒｏｙｄ，Ｋ．Ｊａｇｅｌｓ，Ａ．Ｖ．Ｋａｒｌｙｓｈｅｖ，Ｓ．Ｍｏｕｌｅ，Ｍ．Ｊ．Ｐａｌｌｅｎ，Ｃ．Ｗ．Ｐｅｎｎ，Ｍ．Ａ．Ｑｕａｉｌ，Ｍ．Ａ．Ｒａｊａｎｄｒｅａｍ，Ｋ．Ｍ．Ｒｕｔｈｅｒｆｏｒｄ，Ａ．Ｈ．Ｍ．ｖａｎ  Ｖｌｉｅｔ，Ｓ．Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ，ａｎｄ  Ｂ．Ｇ．Ｂａｒｒｅｌｌ．２０００．ｔｈｅ  ｇｅｎｏｍｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｆｏｏｄ−ｂｏｒｎｎｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ  ｔｒａｃｔｓ．Ｎａｔｕｒｅ  ４０３：６６５−６６８．
【０００６】
シー・ジェジュニに対するワクチンの戦略は、シー・ジェジュニの多くの菌株のリポオリゴ糖（ＬＯＳ）の核とヒトのガングリオシドとの間の分子の類似性により非常に制限されてきた（非特許文献６）。この類似性は、ギラン・バレ症候群（ＧＢＳ）、感染後多発性神経障害とのシー・ジェジュニ感染の強い連合における主なファクターであると考えられる（非特許文献７）。従って、ＬＯＳの核に対して生ずる抗体は、ヒトの神経性組織に対する自己免疫を生ずる。カンピロバクター・エンテリティスの患者３千人の内約１人がＧＢＳを発症すると推測される。そのため、ＧＢＳを発症する可能性は、ガングリオシドの類似性を含むシー・ジェジュニに対するすべての全細胞ワクチンに関係するものと思われる。
【０００７】
【非特許文献６】Ｍｏｒａｎ，Ａ．Ｐ．，Ｂ．Ｊ．Ａｐｐｅｌｍｅｌｋ，ａｎｄ  Ｇ．Ｏ．Ａｓｐｉｎａｌｌ．１９９６．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｍｉｍｉｃｒｙ  ｏｆ  ｈｏｓｔ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｂｙ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ａｎｄ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｊ．Ｅｎｄｏｔｏｘ．Ｒｅｓ．３（６）：５２１−５３１．２０．Ｍｏｒａｎ，Ａ．Ｐ．ａｎｄ  Ｊ．Ｌ．Ｐｅｎｎｅｒ．１９９９．Ｓｅｒｏｔｙｐｉｎｇ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｂａｓｅｄ  ｏｎ  ｈｅａｔ−ｓｔａｂｌｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ：ｒｅｌｅｖａｎｃｅ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｂａｓｉｓ  ａｎｄ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．８６：３６１−３７７．
【非特許文献７】Ａｌｌｏｓ，Ｂ．Ｍ．１９９７．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｇｕｉｌｌａｉｎ  Ｂａｒｒｅ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ．Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１７６（Ｓｕｐｐｌ  ２）：Ｓ１２５−１２８．
【０００８】
カンピロバクターにおけるＬＯＳ合成は、多数の遺伝子によりコントロールされ、それらは、ＬＯＳ中に配合されるシアル酸の生合成に関係する酵素をエンコードする遺伝子を含む。従って、シー・ジェジュニは、多くの哺乳動物の細胞に見いだされる９個の炭素の糖であるシアル酸を内因的に合成できる限られた数の細菌の１つである。これは、ＧＢＳにおいて重要なＬＯＳとヒトガングリオシドとの観察された分子の類似性と一致する（非特許文献８、９、１０および１１）。
【０００９】
【非特許文献８】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，Ａ．Ｇ．ＭａｃＤｏｎａｌｄ，Ｔ．Ｓ．Ｒａｊｕ，Ｈ．Ｐａｎｇ，Ｌ．Ａ．Ｋｕｒｊａｎｃｚｙｋ，Ｊ．Ｌ．Ｐｅｎｎｅｒ  ａｎｄ  Ａ．Ｐ．Ｍｏｒａｎ．１９９３．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｃｏｒｅ  ｒｅｇｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｓｅｒｏｔｙｐｅ  ０：２  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２１３：１０２９−１０３７．
【非特許文献９】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，Ｓ．Ｆｕｊｉｍｏｔｏ，Ａ．Ｇ．ＭａｃＤｏｎａｌｄ，Ｈ．Ｐａｎｇ，Ｌ．Ａ．Ｋｕｒｙｊａｎｃｚｙｋ  ａｎｄ  Ｊ．Ｌ．Ｐｅｎｎｅｒ．１９９４ａ．Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｇｕｉｌｌａｉｎ  Ｂａｒｒｅ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｍｉｍｉｃ  ｈｕｍａｎ  ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅｓ  ｉｎ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６２：２１２２−２１２５．
【非特許文献１０】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，Ａ．Ｇ．ＭａｃＤｏｎａｌｄ，Ｈ．Ｐａｎｇ，Ｌ．Ａ．Ｋｕｒｊａｎｃｚｙｋ，ａｎｄ  Ｊ．Ｌ．Ｐｅｎｎｅｒ．１９９４ｂ．Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｓｅｒｏｔｙｐｅ  ０：１９：ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｃｏｒｅ  ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｒｅｇｉｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ＴＨＥ  ｓｅｒｏｓｔｒａｉｎ  ａｎｄ  ｔｗｏ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｉｓｏｌａｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｇｕｉｌｌａｉｎ  Ｂａｒｒｅ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３３：２４１−２４９．
【非特許文献１１】Ｓａｌｌｏｗａｙ，Ｓ．，Ｌ．Ａ．Ｍｅｒｍｅｌ，Ｍ．Ｓｅａｍａｎｓ，Ｇ．Ｏ．Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｊ．Ｅ．Ｎａｍ  Ｓｈｉｎ，Ｌ．Ａ．Ｋｕｒｊａｎｃｚｙｋ，ａｎｄ  Ｊ．Ｌ．Ｐｅｎｎｅｒ．１９９６．Ｍｉｌｌｅｒ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｂｅａｒｉｎｇ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  Ｔｈａｔ  ｍｉｍｉｃ  ｈｕｍａｎ  ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅ  ＧＤ３．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６４：２９４５−２９４９．２７．Ｓｃｈｎｅｅｒｓｏｎ，Ｒ．，Ｂａｒｒｅｒａ，Ｏ．，Ｓｕｔｔｏｎ，Ａ．ａｎｄ  Ｒｏｂｂｉｎｓ，Ｊ．Ｂ．１９８０．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ  ｏｆ  Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  ｔｙｐｅ  ｂ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１５２：３６１−３７６．
【００１０】
蛋白のグリコシル化は、真核生物の形質であると従来考えられたが、原核生物の蛋白のグリコシル化も次第に知られるようになってきた（非特許文献１２）。最もよくしかも最も徹底的に調べられたグリコシル化細菌性蛋白は、カンピロバクター・フラゲリン（ｆｌａｇｅｌｌｉｎ）である。菌株８１−１７６からのフラゲリンは、Ｏ結合により１９セリンまたはスレオニン部位でグリコシル化されて、シュウドアミン酸およびシュウドアミン酸の誘導体になる（非特許文献１３）。シュウドアミン酸は、シアル酸に類似しているが、シアル酸と異なり非常に免疫原性である異常な９個の炭素の糖である。その上、フラゲリンをグリコシル化できない突然変異体は、鞭毛線維を結集できない（非特許文献１４）。鞭毛はＣ．ジェジュニの必須の病原性の決定因子であるため、グリコシル化は、それゆえまた、主要な病原性決定因子である。
【００１１】
【非特許文献１２】Ｐｏｗｅｒ，Ｐ．Ｍ．ａｎｄ  Ｊｅｎｎｉｎｇｓ，Ｍ．Ｐ．２００３．ｔｈｅ  ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｇｒａｍ  ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉａ．ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｌｅｔｔ．２１８：２１１−２２２．
【非特許文献１３】Ｔｈｉｂａｕｌｔ，Ｐ．，Ｌｏｇａｎ，Ｓ．Ｍ．，Ｋｅｌｌｙ，Ｊ．Ｆ．，Ｂｒｉｓｓｏｎ，Ｊ．−Ｒ．，Ｅｗｉｎｇ，Ｃ．Ｐ．，Ｔｒｕｓｔ，Ｔ．Ｊ．，ａｎｄ  Ｇｕｅｒｒｙ，Ｐ．（２００１）Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  ｍｏｉｅｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ  ｍｏｔｉｆｓ  ｉｎ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｆｌａｇｅｌｌｉｎ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７６：３４８６２−３４８７０．
【非特許文献１４】Ｇｏｏｎ，Ｓ．，Ｊ．Ｆ．Ｋｅｌｌｙ，Ｓ．Ｍ．Ｌｏｇａｎ，Ｃ．Ｐ．Ｅｗｉｎｇ，Ｐ．Ｇｕｅｒｒｙ．２００３．Ｐｓｅｕｄａｍｉｎｉｃ  ａｃｉｄ，ＴＨＥ  ｍａｊｏｒ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｆｌａｇｅｌｌｉｎ，ｉｓ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ  ｖｉａ  ＴＨＥ  ＣＪ１２９３  ｇｅｎｅ．
【００１２】
シー・ジェジュニの最も異常な面の一つは、多数の蛋白のＮ結合グリコシル化のための一般的なシステムの存在である（非特許文献１５および１６）。真核生物サッカロミセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）に見いだされるものと類似のオリゴ糖トランスフェラーゼを含むこのシステムは、１つのバシロスアミン残基（異常なデオキシ糖）、１つのＤ−グルコースおよび５つのＤ−ＧａｌＮＡｃ残基からなるヘプタ糖であることが最近示されたグリカンに付着する（非特許文献１７）。グリコシル化は、Ｃ．ジェジュニの多数のペリプラスム蛋白そして恐らく表面に露出した蛋白で生ずるように思われる（非特許文献１８）。また、異常なグリカンは、非常に免疫原性であるように思われ、そしてヒトの感染中に認められる（非特許文献１９および２０）。
【００１３】
【非特許文献１５】Ｓｚｙｍａｎｓｋｉ，ＣＭ．，Ｙａｏ，Ｒ．，Ｅｗｉｎｇ，Ｃ．Ｐ．，Ｔｒｕｓｔ，Ｔ．Ｊ．，ａｎｄ  Ｇｕｅｒｒｙ，Ｐ．（１９９９）Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ａ  ｓｙｓｔｅｍ  ｏｆ  ｇｅｎｅｒａｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ．ＭｏＩ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  ３２：１０２２−１０３０．
【非特許文献１６】Ｓｚｙｍａｎｓｋｉ，Ｃ．Ｍ．，Ｌｏｇａｎ，Ｓ．Ｍ．，Ｌｉｎｔｏｎ，Ｄ．，ａｎｄ  Ｗｒｅｎ，Ｂ．Ｗ．２００３．ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ−ａ  ｔａｌｅ  ｏｆ  ｔｗｏ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ  ｓｙｓｔｅｍｓ．Ｔｒｅｎｄｓ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．１１：２３３  ２３８．
【非特許文献１７】Ｙｏｕｎｇ，Ｎ．Ｍ．，Ｂｒｉｓｓｏｎ，Ｊ．−Ｒ．，Ｋｅｌｌｙ，Ｊ．，Ｗａｔｓｏｎ，Ｄ．Ｃ，Ｔｅｓｓｉｅｒ，Ｌ．，Ｌａｎｔｈｉｅｒ，Ｐ．Ｈ．，Ｊａｒｒｅｌｌ，Ｈ．Ｃ，Ｃａｄｏｔｔｅ，Ｎ．，Ｓｔ．Ｍｉｃｈａｅｌ，Ｆ．，Ａｂｅｒｇ，Ｅ．，ａｎｄ  Ｓｚｙｍａｎｓｋｉ，Ｃ．Ｍ．２００２．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ＴＨＥ  Ｎ  ｌｉｎｋｅｄ  ｇｌｙｃａｎ  ｐｒｅｓｅｎｔ  ｏｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｉｎ  ＴＨＥ  ｇｒａｍ  ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉｕｍ，ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：４２５３０−４２５３９．
【非特許文献１８】Ｙｏｕｎｇ，Ｎ．Ｍ．，Ｂｒｉｓｓｏｎ，Ｊ．−Ｒ．，Ｋｅｌｌｙ，Ｊ．，Ｗａｔｓｏｎ，Ｄ．Ｃ，Ｔｅｓｓｉｅｒ，Ｌ．，Ｌａｎｔｈｉｅｒ，Ｐ．Ｈ．，Ｊａｒｒｅｌｌ，Ｈ．Ｃ，Ｃａｄｏｔｔｅ，Ｎ．，Ｓｔ．Ｍｉｃｈａｅｌ，Ｆ．，Ａｂｅｒｇ，Ｅ．，ａｎｄ  Ｓｚｙｍａｎｓｋｉ，Ｃ．Ｍ．２００２．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ＴＨＥ  Ｎ  ｌｉｎｋｅｄ  ｇｌｙｃａｎ  ｐｒｅｓｅｎｔ  ｏｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｉｎ  ＴＨＥ  ｇｒａｍ  ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉｕｍ，ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：４２５３０−４２５３９．
【非特許文献１９】Ｓｚｙｍａｎｓｋｉ，ＣＭ．，Ｙａｏ，Ｒ．，Ｅｗｉｎｇ，Ｃ．Ｐ．，Ｔｒｕｓｔ，Ｔ．Ｊ．，ａｎｄ  Ｇｕｅｒｒｙ，Ｐ．（１９９９）Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ａ  ｓｙｓｔｅｍ  ｏｆ  ｇｅｎｅｒａｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ．ＭｏＩ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  ３２：１０２２−１０３０．
【非特許文献２０】Ｓｚｙｍａｎｓｋｉ，Ｃ．Ｍ．，Ｌｏｇａｎ，Ｓ．Ｍ．，Ｌｉｎｔｏｎ，Ｄ．，ａｎｄ  Ｗｒｅｎ，Ｂ．Ｗ．２００３．ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ−ａ  ｔａｌｅ  ｏｆ  ｔｗｏ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ  ｓｙｓｔｅｍｓ．Ｔｒｅｎｄｓ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．１１：２３３  ２３８．
【００１４】
カンピロバクターゲノムに関する興味のある最近の研究結果は、エンテロバクテリセエ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉｃｅａｅ）のタイプＩＩ／ＩＩＩ莢膜座に見られるものと類似の完全なセットの莢膜輸送遺伝子の存在であった（非特許文献２１および２２）。部位特異性突然変異がいくつかの莢膜輸送遺伝子でなされた後続の遺伝上の研究は、莢膜がペナー（Ｐｅｎｎｅｒ）の血清型別スキームの決定因子であることを示した（非特許文献２３および２４）。ペナーのスキーム（または熱安定についてＨＳ）は、カンピロバクターの２つの主要な血清型別スキームの一つであり、そしてリポオリゴ糖Ｏ側鎖に基づくものと最初考えられた（非特許文献２５）。
【００１５】
【非特許文献２１】Ｐａｒｋｈｉｌｌ，Ｊ．，Ｂ．Ｗ．Ｗｒｅｎ，Ｋ．Ｍｕｎｇａｌｌ，Ｊ．Ｍ．Ｋｅｔｌｅｙ，Ｃ．Ｃｈｕｒｃｈｅｒ，Ｄ．Ｂａｓｈａｍ，Ｔ．Ｃｈｉｌｌｉｎｇｗｏｒｔｈ，Ｒ．Ｍ．Ｄａｖｉｅｓ，Ｔ．Ｆｅｌｔｗｅｌｌ，Ｓ．Ｈｏｌｒｏｙｄ，Ｋ．Ｊａｇｅｌｓ，Ａ．Ｖ．Ｋａｒｌｙｓｈｅｖ，Ｓ．Ｍｏｕｌｅ，Ｍ．Ｊ．Ｐａｌｌｅｎ，Ｃ．Ｗ．Ｐｅｎｎ，Ｍ．Ａ．Ｑｕａｉｌ，Ｍ．Ａ．Ｒａｊａｎｄｒｅａｍ，Ｋ．Ｍ．Ｒｕｔｈｅｒｆｏｒｄ，Ａ．Ｈ．Ｍ．ｖａｎ  Ｖｌｉｅｔ，Ｓ．Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ，ａｎｄ  Ｂ．Ｇ．Ｂａｒｒｅｌｌ．２０００．ｔｈｅ  ｇｅｎｏｍｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｆｏｏｄ−ｂｏｒｎｎｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ  ｔｒａｃｔｓ．Ｎａｔｕｒｅ  ４０３：６６５−６６８．
【非特許文献２２】Ｋａｒｌｙｓｈｅｖ，Ａ．Ｖ．，Ｌｉｎｔｏｎ，Ｄ．，Ｇｒｅｇｓｏｎ，Ｎ．Ａ．，Ｌａｓｔｏｖｉｃａ，Ａ．Ｊ．ａｎｄ  Ｗｒｅｎ，Ｂ．Ｗ．２０００．Ｇｅｎｅｔｉｃ  ａｎｄ  ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  ａ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｃａｐｓｕｌａｒ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ＴＨＡＴ  ａｃｃｏｕｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｐｅｎｎｅｒ  ｓｅｒｏｔｙｐｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ．ＭｏＩ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３５：５２９−５４１．
【非特許文献２３】Ｋａｒｌｙｓｈｅｖ，Ａ．Ｖ．，Ｌｉｎｔｏｎ，Ｄ．，Ｇｒｅｇｓｏｎ，Ｎ．Ａ．，Ｌａｓｔｏｖｉｃａ，Ａ．Ｊ．ａｎｄ  Ｗｒｅｎ，Ｂ．Ｗ．２０００．Ｇｅｎｅｔｉｃ  ａｎｄ  ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  ａ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｃａｐｓｕｌａｒ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ＴＨＡＴ  ａｃｃｏｕｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｐｅｎｎｅｒ  ｓｅｒｏｔｙｐｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ．ＭｏＩ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３５：５２９−５４１．
【非特許文献２４】Ｂａｃｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１
【非特許文献２５】Ｍｏｒａｎ，Ａ．Ｐ．ａｎｄＪ．Ｌ．Ｐｅｎｎｅｒ．１９９９．Ｓｅｒｏｔｙｐｉｎｇ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｂａｓｅｄ  ｏｎ  ｈｅａｔ−ｓｔａｂｌｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ：ｒｅｌｅｖａｎｃｅ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｂａｓｉｓ  ａｎｄ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．８６：３６１−３７７．
【００１６】
最近、Ｏ側鎖と従来記述された構造のすべてが、本当は莢膜であることが分かった。莢膜／いくつかのペナー血清型別のＯ側鎖の化学的構造が決定され、そしてこれらの構造は、以下に要約されるいくつかの異常な糖の構造を含む。従って、ゲノム菌株ＮＣＴＣ１１１６８の莢膜は、Ｌ−ｇｌｕｃｏ配座異性体としてヘプトピラノースを含み、それは天然におけるこのような構造の最初の報告である（非特許文献２６）。基準株ＨＳ２３およびＨＳ３６の莢膜は、異なる比で同一の炭水化物を含み、そして４つの異常なａｌｔｒｏ−ヘプトース（６−デオキシ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−ヘプトース、Ｄ−グリセロ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−ヘプトース、６−デオキシ−３−Ｍｅ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−ヘプトースおよび３−Ｍｅ−Ｄ−グリセロ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−ヘプトース）の混合物を含む（非特許文献２７）。
【００１７】
【非特許文献２６】Ｓｔ．Ｍｉｃｈａｅｌ，Ｆ．，Ｃ．Ｍ．Ｓｚｙｍａｎｓｋｉ，Ｊ．Ｌｉ，Ｋ．Ｈ．Ｃｈａｎ，Ｎ．Ｈ．Ｋｈｉｅｕ，Ｓ．Ｌａｒｏｃｑｕｅ，Ｗ．Ｗ．Ｗａｋａｒｃｈｕｋ，Ｊ．−Ｒ．Ｂｒｉｓｓｏｎ，ａｎｄ  Ｍ．Ａ．Ｍｏｎｔｅｉｒｏ．２００２．ｔｈｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｌｉｐｏｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ａｎｄ  ｃａｐｓｕｌｅ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｇｅｎｏｍｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ  ｓｔｒａｉｎ  ＮＣＴＣ  １１１６８．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２６９：５１１９−５１３６．
【非特許文献２７】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，ＭｃＤｏｎａｌｄ，Ａ．Ｇ．，ａｎｄ  Ｐａｎｇ，Ｈ．１９９２．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ＴＨＥ  Ｏ  ｃｈａｉｎ  ｆｒｏｍ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｓｅｒｏｔｙｐｅｓ  ０：２３  ａｎｄ  ０：３６．Ｃａｒｂｏｈｙｒ．Ｒｅｓ．２３１：１３−２０．
【００１８】
【表１】
2009508962.tif 000003
【００１９】
【非特許文献２８】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，Ｃ．Ｍ．Ｌｙｎｃｈ，Ｈ．Ｐａｎｇ，Ｒ．Ｔ．Ｓｈａｖｅｒ，Ａ．Ｐ．Ｍｏｒａｎ．１９９５．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｃｏｒｅ  ｒｅｇｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ０：３  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ａｎｄ  ａｎ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９５．２３１（３）：５７０−５７８．
【非特許文献２９】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，Ｓ．Ｆｕｊｉｍｏｔｏ，Ａ．Ｇ．ＭａｃＤｏｎａｌｄ，Ｈ．Ｐａｎｇ，Ｌ．Ａ．Ｋｕｒｙｊａｎｃｚｙｋ  ａｎｄ  Ｊ．Ｌ．Ｐｅｎｎｅｒ．１９９４ａ．Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｇｕｉｌｌａｉｎ  Ｂａｒｒｅ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｍｉｍｉｃ  ｈｕｍａｎ  ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅｓ  ｉｎ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６２：２１２２−２１２５．
【非特許文献３０】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，Ａ．Ｇ．ＭａｃＤｏｎａｌｄ，Ｈ．Ｐａｎｇ，Ｌ．Ａ．Ｋｕｒｊａｎｃｚｙｋ，ａｎｄ  Ｊ．Ｌ．Ｐｅｎｎｅｒ．１９９４ｂ．Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｓｅｒｏｔｙｐｅ  ０：１９：ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｃｏｒｅ  ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｒｅｇｉｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ＴＨＥ  ｓｅｒｏｓｔｒａｉｎ  ａｎｄ  ｔｗｏ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｉｓｏｌａｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｇｕｉｌｌａｉｎ  Ｂａｒｒｅ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３３：２４１−２４９．
【非特許文献３１】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，ＭｃＤｏｎａｌｄ，Ａ．Ｇ．，ａｎｄ  Ｐａｎｇ，Ｈ．１９９２．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ＴＨＥ  Ｏ  ｃｈａｉｎ  ｆｒｏｍ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｓｅｒｏｔｙｐｅｓ  ０：２３  ａｎｄ  ０：３６．Ｃａｒｂｏｈｙｒ．Ｒｅｓ．２３１：１３−２０．
【非特許文献３２】Ｍｕｌｄｏｏｎ，Ｊ．，Ａ．Ｓ．Ｓｈａｓｈｋｏｖ，Ａ．Ｐ．Ｍｏｒａｎ，Ｊ．Ａ．Ｆｅｒｒｉｓ，Ｓ．Ｎ．Ｓｅｎｃｈｅｎｋｏｖａ，ａｎｄ  Ａ．Ｖ．Ｓａｖａｇｅ．２００２．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｔｗｏ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ８１１１６．Ｃａｒｂｏ．Ｒｅｓ．３３７：２２２３−２２２９．
【非特許文献３３】Ｓｔ．Ｍｉｃｈａｅｌ，Ｆ．，Ｃ．Ｍ．Ｓｚｙｍａｎｓｋｉ，Ｊ．Ｌｉ，Ｋ．Ｈ．Ｃｈａｎ，Ｎ．Ｈ．Ｋｈｉｅｕ，Ｓ．Ｌａｒｏｃｑｕｅ，Ｗ．Ｗ．Ｗａｋａｒｃｈｕｋ，Ｊ．−Ｒ．Ｂｒｉｓｓｏｎ，ａｎｄ  Ｍ．Ａ．Ｍｏｎｔｅｉｒｏ．２００２．ｔｈｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｌｉｐｏｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ａｎｄ  ｃａｐｓｕｌｅ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｇｅｎｏｍｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ  ｓｔｒａｉｎ  ＮＣＴＣ  １１１６８．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２６９：５１１９−５１３６．
【００２０】
非常に有効な莢膜ワクチンのいくつかの例が存在する。エス・ニュウモニエ（Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）は、８３の異なる莢膜タイプを有するが、最近のエス・ニュウモニエワクチンは、米国およびヨーロッパで２３の最も普通の血清型の混合物を含む。エヌ・メニンギディティス（Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｄｉｔｉｓ）は、それより少ない血清群を有し、従ってワクチンの開発を簡単にする可能性をもち、事実、血清型Ａ、ＢおよびＣは、髄膜炎菌性髄膜炎の症例の９０％以上に関係がある（非特許文献３４）。しかし、血清型Ｂからの多糖は、恐らくそれがヒトの組織に似ているため、ヒトにおいて免疫原性が低い。莢膜ワクチンは、またエイチ・インフルエンゼ（Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｎｚａｅ）および群ビー・ストレプトコッカス（Ｂ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）に対して開発されてきた。
【００２１】
【非特許文献３４】Ｊｅｎｎｉｎｇｓ，Ｈ．Ｊ．ａｎｄ  Ｌｕｇｏｗｓｈｉ，Ｃ．１９８１．Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｇｒｏｕｐｓ  Ａ，Ｂ  ａｎｄ  Ｃ  ｍｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃａｌ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ−ｔｅｔａｎｕｓ  ｔｏｘｏｉｄ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２７：１０１１−１０１８．
【００２２】
既に述べたように、主としてシー・ジェジュニの多くの菌株のＬＯＳ核とヒトのガングリオシドとの間の分子上の類似性により、現在、カンピロバクターに対する承認されたワクチンは存在しない（非特許文献３５）。しかしながら、細菌性莢膜を配合するワクチン処方物は、多数の病原体に対して開発されてきた。一般に、莢膜ワクチンは、ヒトに免疫原性であり、無毒である（非特許文献３６）。莢膜ワクチンに伴う一般的な問題の一つは、乳児におけるすべての多糖の免疫原性が弱いこと、そして莢膜ワクチンの多くが小児に特に脅威となる疾患に向けられているという事実である。ネズミにおける研究に基づいて、精製多糖抗原は、Ｔ細胞に無関係であり、そしてＩｇＭ型の反応のみを誘発できると考えられる。逆に、成人は、多糖に対してＩｇＭおよびＩｇＡ抗体に加えて、ＩｇＧを生ずることができる。Ｂ型Ｈ．インフルエンザエ（非特許文献３７、３８および３９）、Ａ、ＢおよびＣ群ネイセリア・メニンギディティス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｄｉｔｉｓ）（非特許文献４０および４１）および６Ａ型ストレプトコッカス・ニュウモニエ（非特許文献４２）に対するワクチンへの乳児の反応は、蛋白への複合に従ってすべて改善されている。
【００２３】
【非特許文献３５】Ｍｏｒａｎ，Ａ．Ｐ．，Ｂ．Ｊ．Ａｐｐｅｌｍｅｌｋ，ａｎｄ  Ｇ．Ｏ．Ａｓｐｉｎａｌｌ．１９９６．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｍｉｍｉｃｒｙ  ｏｆ  ｈｏｓｔ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｂｙ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ａｎｄ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｐ．：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｊ．Ｅｎｄｏｔｏｘ．Ｒｅｓ．３（６）：５２１−５３１．
【非特許文献３６】Ｊｅｎｎｉｎｇｓ，Ｈ．Ｊ．Ｃａｐｓｕｌａｒ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ａｓ  ｖａｃｃｉｎｅ  ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ．１９９０．Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：９７−１２７．
【非特許文献３７】Ｓｃｈｎｅｅｒｓｏｎ，Ｒ．，Ｂａｒｒｅｒａ，Ｏ．，Ｓｕｔｔｏｎ，Ａ．ａｎｄ  Ｒｏｂｂｉｎｓ，Ｊ．Ｂ．１９８０．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ  ｏｆ  Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  ｔｙｐｅ  ｂ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１５２：３６１−３７６．
【非特許文献３８】Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｐ．Ｗ．１９８３．Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｔｏ  Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  ｔｙｐｅ  ｂ  ａｎｄ  ｄｉｐｔｈｅｒｉａ  ｔｏｘｉｎ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｏｆ  ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｔｙｐｅ  ｂ  ｃａｐｓｕｌｅ  ｗｉｔｈ  ＴＨＥ  ｎｏｎ  ｔｏｘｉｃ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ＣＲＭ１９７  Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．３９：２３３−２３８．
【非特許文献３９】Ｍａｒｂｕｒｇ，Ｓ．，Ｊｏｒｎ，Ｄ．，Ｔｏｌｍａｎ，Ｒ．Ｌ．，Ａｒｉｓｏｎ，Ｂ．，ＭｃＣａｕｌｅｙ，Ｊ．，Ｋｎｉｓｋｅｒｎ，Ｐ．Ｊ．，Ｈａｇｏｐｉａｎ，Ａ．ａｎｄ  Ｖｅｌｌａ，Ｐ．Ｐ．１９８６．Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ：ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｗｉｔｈ  Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｄｉｔｉｓ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１０８：５２８２−５２８７．
【非特許文献４０】Ｊｅｎｎｉｎｇｓ，Ｈ．Ｊ．ａｎｄ  Ｌｕｇｏｗｓｈｉ，Ｃ．１９８１．Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｇｒｏｕｐｓ  Ａ，Ｂ  ａｎｄ  Ｃ  ｍｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃａｌ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ−ｔｅｔａｎｕｓ  ｔｏｘｏｉｄ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２７：１０１１−１０１８．
【非特許文献４１】Ｊｅｎｎｉｎｇｓ，Ｈ．Ｊ．，Ｃ．Ｗ．Ｌｕｇｏｗｓｋｉ，Ｆ．Ｅ．Ａｓｈｔｏｎ，Ｊ．Ａ．Ｒｙａｎ．１９８３．ｔｈｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｃａｐｓｕｌａｒ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｏｂｔａｉｎｅｄ  ｆｒｏｍ  ａ  ｎｅｗ  ｓｅｒｏｇｒｏｕｐ（Ｌ）ｏｆ  Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ．  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．１１２（一）：１０５−１１１．
【非特許文献４２】Ｃｈｕ，Ｃ，Ｓｃｈｎｅｅｒｓｏｎ，Ｒ．，Ｒｏｂｂｉｎｓ，Ｊ．Ｂ．ａｎｄ  Ｒａｓｔｏｇｉ，Ｓ．Ｃ．１９８３．Ｆｕｒｔｈｅｒ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｎ  ＴＨＥ  ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ  ｏｆ  Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  ｔｙｐｅ  ｂ  ａｎｄ  ｐｎｅｕｍｏｃｃｏｃａｌ  ｔｙｐｅ  ６Ａ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｒｎｍｕｎ．４０：２４５−２５６．
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２４】
ワクチンは、下痢原性細菌に曝される可能性のある人々に抗下痢の保護をあたえる好ましい方法である。しかし、現在、カンピロバクター・ジェジュニに対して承認された有効なワクチンは存在しない。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
本発明の目的は、ＧＢＳを同時に誘発することなく、重要な病原性菌株シー・ジェジュニ（Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ）に対して免疫反応を誘発できる莢膜多糖ポリマーからなる抗シー・ジェジュニ免疫原性組成物である。
【００２６】
本発明の他の目的は、Ｔ依存担体分子例えばＣＲＭ１９７にシー・ジェジュニの莢膜を複合することにより細菌の重要な病原性菌株に対する増強したＴ細胞依存免疫を有する抗シー・ジェジュニ予防処方物である。
【００２７】
本発明の他の目的は、免疫反応を誘発するために担体を複合したまたは複合していない抗Ｃ．ジェジュニ莢膜多糖組成物を投与する方法である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２８】
シー・ジェジュニ（Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ）莢膜部分は、血清診断に重要である。しかし、６０を越えるペナー血清型が同定されているが、ほとんどのカンピロバクター下痢疾患は、限られた数の血清型のみを発現するシー・ジェジュニにより生ずる。血清診断における莢膜構造の重要性のために、それらは極めて免疫原性の構造であることを前提としている。さらに、それらは、リポオリゴ糖により観察される免疫類似性により生ずる望ましくない自己免疫の誘発を示そうとしない。そのため、莢膜または莢膜成分は、抗Ｃ．ジェジュニワクチンに非常に有用であると思われる。本発明で規定されるシー・ジェジュニの莢膜は、反復多糖構造からなる莢膜性ポリマーに関する一般的な名称である。反復構造は、反復する単一の糖部分として規定されるホモポリマー、または反復二糖または三糖である。莢膜性反復多糖ポリマーの多数の種が同定されている。莢膜の多糖構造の属を説明するために、以下にカンピロバクター菌株の周知の莢膜の多糖構造をリストしている。
【００２９】
シー・ジェジュニの莢膜の化学的組成は、先ずシー・ジェジュニを生長させ、次に水・フェノール抽出、超遠心分離およびゲル透過クロマトグラフィーにより分析された。特定の炭水化物の構造は、気体・液体クロマトグラフィー（ＧＬＣ）およびＧＬＣ質量分析および高速原子衝撃質量分析（ＦＡＢ−ＭＳ）により決定された。糖のアノマー性構造は、核磁気共鳴分析（ＮＭＲ）により決定された。
【００３０】
【表２】
2009508962.tif 000004
【００３１】
【非特許文献４３】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，Ｃ．Ｍ．Ｌｙｎｃｈ，Ｈ．Ｐａｎｇ，Ｒ．Ｔ．Ｓｈａｖｅｒ，Ａ．Ｐ．Ｍｏｒａｎ．１９９５．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｃｏｒｅ  ｒｅｇｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ０：３  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ａｎｄ  ａｎ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９５．２３１（３）：５７０−５７８．
【非特許文献４４】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，Ｓ．Ｆｕｊｉｍｏｔｏ，Ａ．Ｇ．ＭａｃＤｏｎａｌｄ，Ｈ．Ｐａｎｇ，Ｌ．Ａ．Ｋｕｒｙｊａｎｃｚｙｋ  ａｎｄ  Ｊ．Ｌ．Ｐｅｎｎｅｒ．１９９４ａ．Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｇｕｉｌｌａｉｎ  Ｂａｒｒｅ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｍｉｍｉｃ  ｈｕｍａｎ  ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅｓ  ｉｎ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６２：２１２２−２１２５．
【非特許文献４５】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，ＭｃＤｏｎａｌｄ，Ａ．Ｇ．，ａｎｄ  Ｐａｎｇ，Ｈ．１９９２．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ＴＨＥ  Ｏ  ｃｈａｉｎ  ｆｒｏｍ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｓｅｒｏｔｙｐｅｓ  ０：２３  ａｎｄ  ０：３６．Ｃａｒｂｏｈｙｒ．Ｒｅｓ．２３１：１３−２０．
【非特許文献４６】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，ＭｃＤｏｎａｌｄ，Ａ．Ｇ．，ａｎｄ  Ｐａｎｇ，Ｈ．１９９２．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｏ  ｃｈａｉｎ  ｆｒｏｍ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｓｅｒｏｔｙｐｅｓ  ０：２３  ａｎｄ  ０：３６．Ｃａｒｂｏｈｙｒ．Ｒｅｓ．２３１：１３−２０．
【非特許文献４７】Ｍｕｌｄｏｏｎ，Ｊ．，Ａ．Ｓ．Ｓｈａｓｈｋｏｖ，Ａ．Ｐ．Ｍｏｒａｎ，Ｊ．Ａ．Ｆｅｒｒｉｓ，Ｓ．Ｎ．Ｓｅｎｃｈｅｎｋｏｖａ，ａｎｄ  Ａ．Ｖ．Ｓａｖａｇｅ．２００２．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｔｗｏ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ８１１１６．Ｃａｒｂｏ．Ｒｅｓ．３３７：２２２３−２２２９．
【非特許文献４８】Ｓｔ．Ｍｉｃｈａｅｌ，Ｆ．，Ｃ．Ｍ．Ｓｚｙｍａｎｓｋｉ，Ｊ．Ｌｉ，Ｋ．Ｈ．Ｃｈａｎ，Ｎ．Ｈ．Ｋｈｉｅｕ，Ｓ．Ｌａｒｏｃｑｕｅ，Ｗ．Ｗ．Ｗａｋａｒｃｈｕｋ，Ｊ．−Ｒ．Ｂｒｉｓｓｏｎ，ａｎｄ  Ｍ．Ａ．Ｍｏｎｔｅｉｒｏ．２００２．Ｔｈｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｌｉｐｏｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ａｎｄ  ｃａｐｓｕｌｅ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｇｅｎｏｍｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ  ｓｔｒａｉｎ  ＮＣＴＣ  １１１６８．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２６９：５１１９−５１３６．
【非特許文献４９】Ｈａｎｎｉｆｆｙ，Ｏ．Ｍ．，Ａ．Ｓ．Ｓｈａｓｈｋｏｖ，Ａ．Ｐ．Ｍｏｒａｎ，Ｍ．Ｍ．Ｐｒｅｎｄｅｒｇａｓｔ，Ｓ．Ｎ．Ｓｅｎｃｈｅｎｋｏｖａ，Ｙ．Ａ．Ｋｎｉｒｅｌ，ａｎｄ  Ａ．Ｖ．Ｓａｖａｇｅ．１９９９．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ａ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｆｒｏｍ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  １７６．８３（ｓｅｒｏｔｙｐｅ  ０：４１）ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｏｎｌｙ  ｆｕｒａｎｏｓｅ  ｓｕｇａｒｓ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．３１９：１２４−１３２．
【非特許文献５０】Ａｓｐｉｎａｌｌ，Ｇ．Ｏ．，Ａ．Ｇ．ＭａｃＤｏｎａｌｄ，Ｔ．Ｓ．Ｒａｊｕ，Ｈ．Ｐａｎｇ，Ｌ．Ａ．Ｋｕｒｊａｎｃｚｙｋ，Ｊ．Ｌ．Ｐｅｎｎｅｒ  ａｎｄ  Ａ．Ｐ．Ｍｏｒａｎ．１９９３．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｃｏｒｅ  ｒｅｇｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｓｅｒｏｔｙｐｅ  ０：２  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２１３：１０２９−１０３７．
【非特許文献５１】ＭｃＮａＩＩｙ，ＤＪ．，Ｈ．Ｃ．Ｊａｒｒｅｌｌ，Ｊ．Ｌｉ，Ｎ．Ｈ．Ｋｈｉｅｕ，Ｅ．Ｖｉｎｏｇｒａｄｏｖ，ＣＭ．Ｓｚｙｍａｎｓｋｉ，ａｎｄ  Ｊ．Ｒ．  Ｂｒｉｓｓｏｎ．  ２００５．  ｔｈｅ  ＨＳ：一  ｓｅｒｏｓｔｒａｉｎ  ｏｆ  ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ  ｈａｓ  ａ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ｔｅｉｃｈｏｉｃ  ａｃｉｄ−ｌｉｋｅ  ｃａｐｓｕｌａｒ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｗｉｔｈ  ｎｏｎｓｔｏｃｈｉｏｍｅｔｒｉｃ  ｆｒｕｃｔｏｆｕｒａｎｏｓｅ  ｂｒａｎｃｈｅｓ  ａｎｄ  Ｏ−  ｍｅｔｈｙｌ  ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｉｔｅ  ｇｒｏｕｐｓ．ＦＥＢＳ  Ｊ．２７２：４４０７−４４２２．
【００３２】
これらの分析に基づき、シー・ジェジュニ菌株８１−１７６の莢膜は、式α−Ｄ−Ｇａｌ（１−２）−α−６−デオキシ−３−Ｍｅ−Ｄ−ａｌｔｒｏ−ヘプトース（１，３）β−Ｄ−アセチル−グルコサミン（［→３］−α−Ｄ−Ｇａｌ−（１→２）−６ｄ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−Ｍｅ−Ｈｅｐ−（１→３）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→）ｎ）により示される３つの炭水化物の反復ポリマーであることが決定された。Ｇａｌ単位の位置Ｏ−２は、Ｏ−メチル−ホスホルアミデートにより部分的（約５０−７５％）に置換される。さらに、菌株ＣＧ８４８６の莢膜が分析されそして同様な構造からなることが示されるが、式→３）−α−６−デオキシ−Ｄ−イド−ヘプトース−（１→４）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→により示される反復二糖からなる。
【００３３】
そのため、本発明の局面は、シー・ジェジュニ（Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ）の反復多糖の莢膜ポリマーの属の１つまたは複数の種からなるワクチン処方物である。
【実施例１】
【００３４】
Ｃ．ジェジュニ菌株８１−１７６莢膜を含む抗シー・ジェジュニ組成物により誘発される免疫反応
シー・ジェジュニ莢膜の免疫原性を示すために、ＢＡＬＢ／ｃマウスを皮下でリン酸塩緩衝塩水（ＰＢＳ）またはシー・ジェジュニ８１−１７６からの精製した莢膜の何れかによって免疫化した。次の免疫反応は、コントロールとしてウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を使用して酵素結合イムノソルベント分析（ＥＬＩＳＡ）によって測定された。この分析では、抗原は精製した莢膜であった。
【００３５】
研究では、ＰＢＳまたは２５μｇの莢膜の２つの投与による免疫化は、免疫反応（糞中の分泌ＩｇＡ、血清ＩｇＧまたは血清ＩｇＭ）を生じなかった。莢膜の１００μｇの３回投与および４００μｇの２回投与による免疫化（以下参照）もｓＩｇＡ反応を生じなかった。しかし、１００μｇの３回投与を受けた５匹中１匹は、血清ＩｇＧ反応（１：１６０の力価）を示し、そして５匹中３匹は血清ＩｇＭ反応（１：４０００−１：６０００）を示した。４００μｇの２回の投与後、５匹中３匹は、血清ＩｇＧ反応（１：６４０−１：１２８０の力価）を有し、そして５匹中５匹は、血清ＩｇＭ反応（１：６０００−１：１００００に及ぶ力価）を有した。この群は、わずか２回の免疫化後の強い免疫反応のため３回目の免疫化を受けなかった。
【００３６】
この実施例の莢膜免疫原は、アジュバントなしで皮下投与されたが、アジュバントと一緒の皮下投与も考えられ、ＬＴＲ１９２Ｇ、水酸化アルミニウム、ＲＣ５２９Ｅ、ＱＳ２１、Ｅ２９４、オリゴヌクレオチド（ＯＤＮ）、ＣｐＧ含有オリゴデオキシヌクレオチド、リン酸アルミニウム、ＭＰＬ（商標）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ、Ｍｉｄｄｌｅｓｅｘ、英国）またはこれらまたは他の可能性のあるアジュバントの組み合わせを含むが、これらに限定されない。さらに、実施例は皮下投与を示しているが、アジュバントとともにまたはなしで鼻腔内投与も考えられる。
【実施例２】
【００３７】
莢膜−ＣＲＭ１９７複合物に対する免疫
顕著なＩｇＧ反応が、マウスにおいて精製した莢膜に対する反応において観察されたが、多糖に対する免疫は、しばしばＴ細胞不依存免疫反応を伴う。それゆえ、小児は、典型的に多糖の抗原に対してＩｇＭ反応を生じさせるに過ぎないが、成人はＩｇＧ、ＩｇＡおよびＩｇＭ反応を生じさせることができる。
【００３８】
莢膜部分に対する反応をさらに改善させる可能性のために、シー・ジェジュニ莢膜の免疫原性をＴ依存担体蛋白への複合物として評価した。好ましい担体は、肺炎複合ワクチンで用いて成功したジフテリア毒素の無毒なものであるＣＲＭ１９７である（非特許文献５２）。図１を参照して、莢膜・ＣＲＭ複合物は、精製したシー・ジェジュニ菌株８１−１７６を過ヨウ素酸塩により酸化し、そして酸化した生成物をＣＲＭに結合することにより製造された。図１において、複合は、莢膜多糖部分［→３］−α−Ｄ−Ｇａｌ−（１→２）−６ｄ−α−Ｄ−ａｌｔｒｏ−Ｍｅ−Ｈｅｐ−（１→３）−β−Ｄ−ＧｌｃＮＡｃ−（１→）ｎまたは多糖部分α−６−デオキシ−イド−ヘプトース（１→４）−β−ＧｌｃＮＡｃについてなされた。
【００３９】
【非特許文献５２】Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｐ．Ｗ．１９８３．Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｔｏ  Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  ｔｙｐｅ  ｂ  ａｎｄ  ｄｉｐｔｈｅｒｉａ  ｔｏｘｉｎ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｏｆ  ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｏｆ  ＴＨＥ  ｔｙｐｅ  ｂ  ｃａｐｓｕｌｅ  ｗｉｔｈ  ＴＨＥ  ｎｏｎ  ｔｏｘｉｃ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ＣＲＭ１９７  Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．３９：２３３−２３８．
【００４０】
莢膜−ＣＲＭ複合物の免疫原性は、Ｂａｌｂ／ｃマウスにおいて評価された。５群のマウスを、表３に示されるように、１４日の間隔で３回の投与により皮下で免疫化された。血液を、−１日、１４日、２８日、５６日および９２日に集めた。動物が莢膜に血清反応反転したかどうかの決定は、酵素結合イムノソルベント分析（ＥＬＩＳＡ）によりＩｇＭおよびＩｇＧ反応を測定することによってなされた。図２で示されるＩｇＭおよびＩｇＧに関する終点力価は、それぞれ＞５６および＞３２であった。終点力価のデータは、ｌｏｇｅとして示される。莢膜に対するマウスの反応の％は、表４に示される。
【００４１】
【表３】
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【００４２】
【表４】
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【００４３】
表４および図２で示されるように、複合した莢膜は、莢膜に対して強い抗体反応を誘発した。莢膜に対する血清反応反転は、リン酸塩緩衝塩水のみを受けた動物では見られなかった。この実施例は、シー・ジェジュニ８１−１７６からの莢膜複合物を使用する本発明を説明しているが、本発明は、また抗ジフテリアワクチンの生成におけるシー・ジェジュニの他の菌株からの莢膜の使用を含む。
【実施例３】
【００４４】
莢膜−ＣＲＭ複合物へのマウスにおける免疫反応の有効期間
ＣＲＭ１９７へ複合化した莢膜により誘発された免疫反応の有効期間を評価するために、血清力価を長期間免疫化されたマウスについてモニターした。この検討において、マウス（ｎ＝１０）は、１４日の間隔（すなわち研究の０日、１４日および２８日）で、リン酸塩緩衝塩水（ＰＢＳ）（０μｇ）、５、１０、２５または５０μｇのＣＲＭ１９７へ複合化したシー・ジェジュニ莢膜の３回投与により皮下で免疫化された。血液サンプルを免疫化全研究３０４目前に間隔をおいて集め、抗莢膜ＩｇＧを酵素結合イムノソルベント分析（ＥＬＩＳＡ）により測定した。
【００４５】
図３に関して、ＰＢＳにより免疫化されたマウスでは、無視してもよい抗莢膜特異性抗体が検出され、それは検討中変化しないままであった。２回投与後、低いが容易に検出可能なレベルのＩｇＧがＥＬＩＳＡにより検出された。この反応は、３回目の投与後増強された。強い免疫反応が検出されたが、実験結果は、認められるワクチン投与反応を生じなかったが、恐らく投与レベルが要求されたのよりも最初高かったことを示している。血清ＩｇＧレベルは、約９０−１５０日目にピークに達し、実験中維持されたままであった。ＩｇＧレベルにおける僅かな低下は、１９６日目後顕著であった。
【実施例４】
【００４６】
莢膜−ＣＲＭ複合物の有効度
シー・ジェジュニの莢膜−ＣＲＭ１９７処方物の有効度の評価をマウスで行った。この実験では、マウスは、１４日の間隔（すなわち、０日、１４日および２８日）で５、１０または２５μｇの莢膜−ＣＲＭ１９７複合物の３回投与により免疫化された。コントロール動物は、ＰＢＳを受けた。すべての動物（ｎ＝７）は、４×１０９ｃｆｕのシー・ジェジュニ８１−１７６により１２０日目に免疫性をテストされた。免疫性のテスト後、動物は、感染による病気の進展について後続の６日間調べられた。疾患の程度に基づいて、スコアを以下のようにそれぞれの動物について割り当てた。０＝見かけの病気なし。１＝逆毛がたつ。２＝逆毛がたち、身体を丸める。３＝死亡。
【００４７】
毎日の病気のインデックスおよび群の平均のインデックスを計算した。さらに、免疫性テスト前および免疫性テスト後、体重の低下が測定された。病気に基づくワクチンの有効度および体重の低下は、以下の式に基づいて計算された。
【００４８】
（コントロール−ワクチン処理）／（コントロール）×１００
図４に関して、同様な莢膜特異性血清ＩｇＧは、５、１０または２５ｇの莢膜−ＣＲＭ１９７による免疫化後に見られた。表３に示されるように、防御免疫反応は、防御有効度について用量反応で観察された。疾病インデックスは、２５μｇの莢膜−ＣＲＭ１９７により免疫化された群で最低であり、５μｇの莢膜−ＣＲＭ１９７複合物により免疫化される群で最高であった。この用量反応は、また体重％における変化が有効度を評価するのに使用されたとき見られた。
【００４９】
体液の免疫反応のさらなる性質の特定では、莢膜特異性血清ＩｇＧサブクラス（すなわち、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａおよびＩｇＧ２ｂ）を、限られた数のサンプルについて測定した。少なくとも５０％の防御を示した動物は、ＩｇＧ２ａよりＩｇＧ２ｂのより高いレベルを有し勝ちであり、９匹の防御された動物では４．３＋／−１．８の２ｂ／２ａ比であり、非防御の動物では２．６＋／−０．８のそれであった。より高いＩｇＧ２ｂのレベルは、Ｔｈ１型免疫反応の指標である。
【００５０】
【表５】
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【実施例５】
【００５１】
ヒトにおける莢膜に対する免疫の誘発の予防例
本発明の１つの対象は、ヒトにおいて強いかつ有効な免疫反応を誘発するシー・ジェジュニ（Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ）莢膜の能力であるが、禁忌であるギラン・バレ症候群の誘発ではない。ヒトにおける防御免疫を誘発する最適の方法は、マウスおよびモンキーのような動物における検討を先に行うことである。シー・ジェジュニ菌株の単一または混合物からの莢膜を含むそれぞれのワクチン処方物について、限られた量の実験が、最適な有効投与範囲を確かめるのに必要とされる。しかし、抗シー・ジェジュニ治療下痢防御免疫を誘発する予防的方法は、以下の段階を含む。
【００５２】
ａ．初回免疫は、単一のシー・ジェジュニまたはＣ．ジェジュニ細菌の複数の菌株からのシー・ジェジュニ莢膜を含む免疫原性処方物の投与による。別の方法としてまたは精製した莢膜に加えて、処方物は、Ｔ依存担体分子例えばＣＲＭ１９７に複合したシー・ジェジュニ莢膜を含むことができる。ワクチン処方物は、経口、経鼻、皮下、皮内、経皮、筋肉内または直腸内で投与できる。投与経路に応じて、ワクチン処方物は、任意の多数のアジュバントとともにまたはなしで投与でき、それらは、ＬＴＲ  １９２Ｇ、水酸化アルミニウム、ＲＣ５２９Ｅ、ＱＳ２１、Ｅ２９４、オリゴデオキシヌクレオチド（ＯＤＮ）、ＣｐＧ−含有オリゴデオキシヌクレオチド、リン酸アルミニウム、ＭＰＬ（商標）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ、Ｍｉｄｄｌｅｓｅｘ、英国）またはこれらまたは他の可能性のあるアジュバントの組み合わせを含むが、これらに限定されない。免疫原の単位投与の範囲は、緩衝溶液の範囲中で０．１μｇから１０ｍｇである。
【００５３】
ｂ．初回免疫の投与の後で、アジュバントとともにまたはなしで緩衝水溶液中で０．１μｇから１０ｍｇの投与量範囲の免疫原による２−４回の効果増強の投与も投与できる。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１】シー・ジェジュニ菌株８１−１７６の精製した莢膜およびＣＧ８４８４のＣＲＭ１９７への複合を示す概略図である。シー・ジェジュニ８１−１７６莢膜には、Ｇａｌ単位の位置Ｏ−２は、Ｏ−メチル−ホスホルアミデートにより部分的（約５０−７５％）に置換されている。
【図２】ＣＲＭに複合したシー・ジェジュニ菌株８１−１７６の皮下投与後の抗体反応を示すＥＬＩＳＡの結果である。
【図３】ＣＲＭに複合した莢膜に対する免疫反応の有効期間を示す検討のＥＬＩＳＡの結果である。
【図４】シー・ジェジュニによる抗原投与から防御されたマウスにおけるＩｇＧ反応を示す莢膜特異性抗体の血清力価のＥＬＩＳＡの結果である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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