(57)【要約】  本発明は、４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン（又は、４―ヒドロキシテストステロンと記載する）の新規な使用法、これらの調整方法、これらを含む医薬組成物、及び腫瘍のエストロゲン受容体の状態に関係なくこれらの化合物の哺乳動物の乳癌に対する予防及び／又は治療における使用法に関する。  【選択図】    なし
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン又はこの塩若しくはエステルの、乳癌（特に、乳房粘液腺管癌、乳房髄様癌及び乳房小葉癌）、子宮内膜癌、子宮頸癌、上皮性卵巣癌、子宮（卵管）癌、乳房の良性の増殖性変化又は変質、繊維腺腫、小乳房症（更年期周辺）、乳腺症、子宮筋腫、及びこれら疾患由来の二次的又は転移性腫瘍に対する予防又は治療用の医薬組成物の調製における使用。
【請求項２】
乳癌（特に、乳房粘液腺管癌、乳房髄様癌及び乳房小葉癌）、子宮内膜癌、子宮頸癌、上皮性卵巣癌、子宮（卵管）癌、乳房の良性の増殖性変化又は変質、繊維腺腫、小乳房症（更年期周辺）、乳腺症、子宮筋腫、及びこれら疾患由来の二次的又は転移性腫瘍に対する予防又は治療用の４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン又はこの塩若しくはエステル。
【請求項３】
乳癌（特に、乳房粘液腺管癌、乳房髄様癌及び乳房小葉癌）、子宮内膜癌、子宮頸癌、上皮性卵巣癌、子宮（卵管）癌、乳房の良性の増殖性変化又は変質、繊維腺腫、小乳房症（更年期周辺）、乳腺症、子宮筋腫、及びこれら疾患由来の二次的又は転移性腫瘍に対する予防又は治療の方法であって、このような治療を必要とする患者に、有効量の４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オンを投与することから成る予防又は治療の方法。
【請求項４】
４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オンが、有効量の、単数若しくは複数のエストロゲン受容体拮抗薬及び／又は単数若しくは複数のアロマターゼ阻害剤及び／又は単数若しくは複数の細胞増殖抑制剤及び／又は単数若しくは複数のHer2neuに対する抗体、と共に投与される請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記投与が局所的である請求項３又は４に記載の方法。
【請求項６】
活性成分として４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オンを含み、かつ適切な担体及び／又は稀釈剤を含む、女性又は男性の患者の予防及び／又は治療のための医薬組成物。
【請求項７】
さらに有効量の、単数若しくは複数のエストロゲン受容体拮抗薬及び／又は単数若しくは複数のアロマターゼ阻害剤及び／又は単数若しくは複数の細胞増殖抑制剤及び／又は単数若しくは複数のHer2neuに対する抗体を含む請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
局所的投与用に処方された請求項６又は７に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン（以後、４−ヒドトキシテストステロンと記載する）及びこの塩及びエステルの新規な使用法、これらの調整方法、これらを含む医薬組成物、及びこれらの化合物の哺乳動物のある種の疾患、特に癌腫に対する予防及び治療における使用法に関する。
【０００２】
乳癌は殆ど女性のみに関係するが、結腸直腸癌に次いで、乳癌は西欧諸国において最も頻度の高い癌疾患である。ドイツにおいて、乳癌は、女性において診断された全ての癌種の中統計上約２０％になる。大部分の症例の治療は、腫瘍の外科的な除去（乳腺腫癌摘出）、又は、もし腫瘍のサイズが乳房保存療法を妨げるならば、冒された乳房の完全除去からなる。両者の場合共に、手術後、薬剤療法が続く。乳癌の特に厄介な問題は、他の臓器、特に、肝臓、脳、骨、及び皮膚へ広がる転移能が大きいことである。従って、手術は薬剤療法（アジュバント療法）を伴う。この治療法は、またこの疾患の局所的再発を防ぐことを目的とする。
【０００３】
もし除去した腫瘍が、エストロゲン受容体を発現するならば、抗エストロゲンが用いられる（Tamoxifen（タモキシフェン）又はアロマターゼ阻害剤）エストロゲン受容体が欠失している場合は、細胞増殖抑制試薬を用いた術後化学療法ということとになる。
Tamoxifen（タモキシフェン）はエストロゲン受容体（ＥＲ）に結合し、エストロゲンの増殖促進効果を阻害する。アロマターゼ阻害剤は、アンドロゲン前駆体（Ｃ１９−ステロイド）からエストロゲン産生の最終段階を阻害する。これらは、酵素の活性部位に不可逆的に結合する｛アロマターゼ−不活性化剤、即ち、ステロイド性アロマターゼ阻害剤：４−ヒドロキシアンドロステンジオン（Formestan＝Lentaron(R)）又はエクゼメスタン（Exemestan（Aromasin(R)））、又は酵素のチトクロムｐ４５０部分｛非ステロイド性アロマターゼ阻害剤：アナストロゾール（Anastrozol（Arimidex(R)））及びレントロゾール（Letrozol（Femara(R)）｝を競合的に阻害する。
もし乳癌がHer2neu遺伝子を過剰発現するならば、この細胞表面タンパク質に対する抗体を、例えばトラスツヅマブ（Trastuzumab (Herceptin(R))を、静脈内に投与する。
【０００４】
基礎的及び臨床的データによると、アンドロゲンの芳香族化した代謝物、即ち、エストロゲンは、乳癌、子宮内及ぶ卵巣癌のような、いくつかのホルモン依存性癌の増殖と関係する病原性細胞変化に関与するホルモンであることが分かる。アロマターゼ（芳香族化酵素）は、腫瘍内で直接エストラジオールを合成することができる酵素として最近認知されている。
【０００５】
内因性エストロゲンは直接の前駆体としてアンドロステンジオン又はテストステロンから最終的に作られる。乳房組織、特に腫瘍細胞自体、における局所的エストロゲンの産生は、この疾患の治療に対して特別の重要性を持つと考えられてきた。この文脈において、酵素アロマターゼによって行われるステロイド環Ａの芳香族化、及びこの阻害は、抗乳癌法において主要な役割を果たすと考えられてきた。
【０００６】
本発明以前に、エストロゲン受容体拮抗薬又は治療に用いる抗体に基づく他の概念以外には、女性の乳癌に対処する従来型の治療方法は、従って、アロマターゼ阻害作用自体に焦点が当てられた。従って、アロマターゼ阻害作用を有すると報告されたステロイド性物質が記載され、例えば、Δ１−テストロラクトン［米国特許2,744,120］、４−ヒドロキシアンドロスト−４−エン−３，１７−ジオン及びこのエステル類［例えば、米国特許4,235,893を参照］、１０−（１，２−プロパジエニル）−エストロ−４−エン−３，１７−ジオン（米国特許4,289,762, １０−（２−プロピニル）−エストロ−４−エン−３，１７ジオン［J. Amer. Chem. Soc., 103, 3221 (1981)及び米国特許4,322,416］、１９−チオアンドロステン誘導体（ヨーロッパ特許出願100566）、アンドロスタ−４，６−ジエン−３，１７−ジオン、アンドロスタ−１，４，６−トリエン−３，１７−ジオン[英国特許出願2,100,601A]及びアンドロスタ−１，４−ジエン−３，１７−ジオン［Cancer Res. (Suppl.) 42, 3327(1982)］である。
【０００７】
しかしながら、エストロゲン受容体（ＥＲ）拮抗薬及びアロマターゼ阻害剤を用いて行われた臨床研究によると、これらの化合物は腫瘍増殖及び／又は生育に対して、有意で、十分な阻害効果を持たないことが分かった。例えば、タモキシフェン（Tamoxifen(R)）ベースの治療は、タキフィラキシーのような障害を被った（治療失敗）、またいくつかの細胞でエストロゲン類似の効果があるという事実（例えば、血栓症及び子宮内膜癌の危険性）を理由として、タモキシフェン（Tamoxifen(R)）は３年から５年以上の長期間投与ができない。アロマターゼ阻害剤のような新薬は、原理的に、更年期の女性のみに用いることができて、さらにまた、ＥＲ−ポジティブの腫瘍のみに効果がある。
【０００８】
ＡＲを発現する安定した遺伝子導入細胞は、アンドロゲンに対する応答能を獲得し、細胞増殖の終了を引き起こすことが報告された（J. Szelei他、"Androgen-Induced Inhibition of Proliferation in Human Breast Cancer MCF7 Cells Transfected with Androgen Receptor", Endocrinol., 138, No. 4, 1406-1412, 1997）。より最近の報告（J. Ortmann他、"Testosterone and 5α-dihydrotestosterone inhibit in vitro growth of human breast cancer cell lines", Gynecol. Endocrinol. 2002; 16: 113-120）によると、テストステロン及び５α−ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）は、ある種の細胞株で細胞増殖を阻害する。テストステロン自体は、同様な効果を有する。しかしながら、この化合物が急速に代謝されエストラジオール又はジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）になるという事実により、この臨床的な有効性は、妨げられる。乳癌組織内での、局所的アロマターゼ活性によるテストステロンからエストラジオールの局所的生成は、癌増殖を促進する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
従って、ＡＲポジティブ細胞及び組織内でテストステロン類似の効果（特別の同化作用）を発揮し、またアロマターゼにより代謝されず、又は５−アルファ−リダクターゼによりＤＨＴに変換されない、他のアンドロゲン受容体（ＡＲ）特異的化合物に対する要求が高まっている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明によれば、４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オンの治療効果は、驚くべき新文脈の下で発見され、価値のある医療上の応用を可能にした。即ち、本発明は、４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン又はこの塩若しくはエステルの、乳癌（特に、乳房粘液腺管癌、乳房髄様癌及び乳房小葉癌）、子宮内膜癌、子宮頸癌、上皮性卵巣癌、子宮（卵管）癌、乳房の良性の増殖性変化又は変質、繊維腺腫、小乳房症（更年期周辺）、乳腺症、子宮筋腫、及びこれら疾患由来の二次的又は転移性腫瘍に対する予防又は治療用の医薬組成物の調製における使用を含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明における"使用"は、この特定化合物、又は適切な担体及び／又は稀釈剤と共に活性成分としてこの化合物を含む医薬組成物の、上記の適応疾患に対する治療法又は予防法を含んでもよい。またこの語は、上記医薬組成物の調整における使用を含む。
【００１２】
本発明における発見に基づき、４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オンは、女性又は男性患者の乳癌に対する予防及び／又は治療に特に適している。
【００１３】
本発明の医薬組成物はさらに、有効量の、単数若しくは複数のエストロゲン受容体拮抗薬及び／又は単数若しくは複数のアロマターゼ阻害剤（本発明に開示した化合物とは異なる）及び／又は単数若しくは複数の細胞増殖抑制剤及び／又は単数若しくは複数のHer2neuに対する抗体を含んでもよい。
【００１４】
本発明の化合物は、治療した患者に全身的に影響を及ぼすことなく、直接に標的細胞又は標的組織に、これらの効果を最も有効に働き掛けることができるので、本発明の医薬組成物は、好ましくは治療される標的位置で、局所的治療のために、局所投与として処方される。
【００１５】
本発明の化合物は、アンドロゲン受容体（ＡＲ）結合親和性を示す。乳癌細胞を除いた大部分の細胞において、ＡＲを提示する限り、これらの細胞は同化作用を誘導することができる。乳癌細胞において、これらの細胞はアポトーシスを引き起こす。これらの化合物は、アロマターゼの基質ではなく、また代謝産物でもなく、従って、アロマターゼにより代謝される化合物の負の効果を共有しない。さらに、本発明の化合物は、５α−リダクターゼの基質ではない。これらの化合物は、例えば、テストステロンの様に容易に代謝されることができないので、これらの化合物の腫瘍細胞への阻害効果は、非常に容易となり、さらに、腫瘍細胞自体にアポトーシスをもたらす効果を示す。従って、これらの化合物は、両方の型の乳癌を治療するために現在使われる一連の化合物より、乳癌細胞の治療において、恐らくより有効である。この予防又は治療概念の他の有益な効果は、エストロゲン受容体ネガティブ（ＥＲ−ネガティブ）腫瘍においてさえ、これ等の細胞がＡＲポジティブである可能性が高く、従って、現在は増殖阻害試薬のみで治療している腫瘍は、４−ヒドロキシテストステロンにより薬理学的に取り扱うことが可能であり、これにより、乳癌のホルモン療法の範囲が顕著に増加する。
【００１６】
本発明の化合物はＡＲ特異的化合物であるが、アロマターゼにより代謝されないので、これらの化合物は、ＡＲを経由する特に定義された治療上の又は予防上の使用に関連する作用及び効果を及ぼす。このことにより、現在選択した化合物の概念は、従来技術を超えて明確になっている。これはまた、４−ヒドロキシテストステロン又はこの誘導体の従来の治療上の使用を超えた、基礎的な差異を説明するものである。特に、米国特許2,762,818Aの開示は、これらの化合物のアンドロゲン性及び同化作用的特性に基づくアンドロゲン欠乏状態自体を治療するための４−ヒドロキシテストステロン及びこのエステル類の使用以上のものではない。しかしながら、乳癌細胞に対する活性、又は、そこから本発明に従う疾患状態に対する有効性を演繹できるような効果を示唆する目的も発見も存在しなかった。さらに、米国公開特許2003/0229063Aは、男性における低いアンドロゲン／エストロゲン比（内分泌障害が起こる）に対処し、またこの目的のために、主張されたアロマターゼ阻害効果だけに基づき４−ヒドロキシテストステロンの使用を試みる。
【００１７】
本発明の化合物を用いて行った実験において、これらの化合物は、優れた皮膚透過能を有し、従って、治療の必要な患者の部分に対して、治療上又は予防上効果的な量の本発明の化合物を含む、例えば、軟膏、外用水液又はクリームその他のような、単純な局所的投与により腫瘍成長（アポトーシスまで）へ十分に効果があることが示された。局所的投与の後、化合物（複数）は、皮膚を透過し、皮下の脂肪組織に濃縮される。
【００１８】
乳癌の場合、薬剤は、乳房皮膚に局所的に適用することができて、従って、好ましく脂肪親和性の強い活性化合物は、経皮的に吸収され、従って、意図した作用部位に局所的に運搬される。活性化合物は、乳管周囲脂肪組織に集まる。長期の治療において、治療した乳房の脂肪物質は、顕著に減少する。この減少により、エストロゲン形性能を持つエストロゲン形成細胞が減少する。活性化合物の脂質親和性及び疎水性により、活性化合物は脂肪組織に極度に局所的に濃縮され、従って、如何なる顕著な全身的な作用も示すことができないという結果となる。
【００１９】
本発明の好ましい実施態様によると、意図した作用部位上に直接、又は近傍に局所的に薬剤を適用することを意図する。本発明によると、得られた結果は、活性化合物が顕著に循環血流に吸収されることなく、危険な組織（予防において）又は疾病組織（治療において）において、活性化合物の十分な局所的濃度を示す。この実施態様の利点は、局所的投与それ自体に依存するだけではなく、活性化合物が危険な組織及び／又は疾患組織に直接的蓄積であり、循環血流経由の間接的蓄積ではない様な、局所的適用に依存する。
特に乳癌等の場合、上記の様に、原発の標的疾患が治療されるので、女性患者、特に女性乳房皮膚に、多くの場合局所的治療又は予防的適用が行われるが、男性乳癌の場合も同じ治療成分が適用される。
【００２０】
もし転移癌も治療を施され、及び／又は転移癌に対する予防が行われうるならば、本発明の薬剤を、付加的に循環血流に顕著な吸収が行われ、従って活性化合物を転移部位にも輸送する血清レベルが形成されるような量を、意図した作用部位に局所的に適用できる。この使用においてまた、とりわけ転移癌が存在する意図した作用部位上、又は近傍内の局所的吸収がまた、最初に行われる。
【００２１】
本発明の重要な利点は、この薬剤を、また乳癌予防のために使用する可能性である。特に重要な有利な使用上の可能性は、いわゆる二次的予防である。乳癌と診断され治療を受けた女性又は男性患者において、同一部位において再発する危険性があり、及び対側乳房に更なる癌が発生する危険性も高いことである。両者の場合において、ＥＲを有する二次癌の発生は予想できない。手術を受けた乳房、及び対側乳房を、予防的に本発明の薬剤処理をすることができる。これにより、ＥＲネガティブな癌（特に、乳癌への家系的素因のある患者に一般的である）の発生も阻止できるであろう。
【００２２】
いわゆる危険度の高い女性において、一次的予防を行うことができる。このような高危険度群に対して用いられる選択基準は、例えば、母側の１親等の少なくとも１女性又は男性親族が４５歳以前に一方又は両側が乳癌である、又は乳癌にかかったことがある、又は母側において、１親等の少なくとも１女性又は男性親族及び更なる男性又は女性親族が乳癌である、又は乳癌にかかったことがある、という事実である。
これらの症例の大部分において、疾患の元となる原因は、２個の"乳癌遺伝子"として既知のBRCA1及びBRCA2の中の１個の遺伝的な欠失である。
【００２３】
本発明の好ましい態様に従う局所的な適用においては、化合物の疎水性及び高い安全性プロフィールにより、活性化合物の副作用を実際上完全に避けるので、一次的予防の指示は、比較的危険度の低い組織、又は並の危険度を持つ組織がある場合、直ぐに比較的に気前よく行うことができる。予防は、乳癌の兆候又は症状が発生するずっと以前に始めることができる。
好ましい局所的投与において、本発明の化合物又は組成物は、好ましくは比較的長期にわたって適用され（必要なら一生の間）、また投与は、例えば、１日に１又は２回行われる。局所的な（局部的）適用を意図している本発明の活性化合物は、好ましくは脂溶性の形で提供されるので、これらは容易に脂肪組織に透過することができて、またこれらの予防的及び／又は治療効果を局所的に発揮する。
【００２４】
本発明に従い局所的に投与された活性化合物は、乳房の脂肪組織への局在を保ち、また意図した作用を脂質溶解性によって示すので、全身的適用により引き起こされる如何なる副作用も除去される。この副作用を減らす又は除去できるということは、非常に広い予防上の使用を許容する。本発明の薬剤を、患者自身により適用することができる、またこの目的のために、医者を頻繁に訪問することは不要である。
【００２５】
一般的に局所的投与のために、本発明の活性化合物は脂溶性であり、また局所的適用に非常に適する。既に述べたように、乳房脂肪組織中への集積により、全身的副作用が避けられる。皮膚透過性を改善するために、これを促進する従来技術で既知の化合物、例えば、ヒアルロニダーゼ、ジメチルソルビトール又はDMSO（ジメチルスルホキシド）を、本発明の薬剤に加えることができる。
【００２６】
特に、局所的投与は主に、一次予防；乳房保存治療の後に、'原位置での腺管癌'（DCIS、通常は如何なるアジュバント治療も追随しない）に対する手術の後に様々なアジュバント薬剤治療と共に、二次予防に対して；及び対側乳癌の予防に対して指示される。
また、局所的投与は、'ネオアジュバント'治療の文脈で特に適している。このことは、乳房保存手術のために、乳癌サイズを減らすために、手術前の癌の薬剤療法を意味する。過去において、ＥＲネガティブな腫瘍に対して主に為されてきており、最近になってアロマターゼ阻害剤が、６ヶ月以内の制限のもとに、成功裏に使用された。最後に、治療は表面的損傷（例えば、皮膚転移）に対して適用できる。
【００２７】
一次的予防は、癌に罹る危険性を有する健康な個人の予防的処理に関する。本発明の化合物及び医薬的組成物は、アロマターゼの基質でなく、またエストロゲンに代謝されることができず、また男性化しないので、閉経前女性の乳癌の一次予防にもまた使うことができる。二次予防において、この化合物及び組成物は、単独でも用いることができる、又は例えば、Tamoxifen（タモキシフェン）、アロマターゼ阻害剤、ヘルセプチン及び／又は細胞増殖阻害剤と組み合わせて用いることができて、このような組合せのいずれも、治療できる細胞の種類のスペクトルを拡大するであろう。
【００２８】
本発明は、４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン（以後、４―ヒドロキシテストステロンと記載する）を成功裏に医薬的活性化合物として使用できるという発見に基づく。特に、適切な担体、及び／又は稀釈剤、及び活性成分として４−ヒドロキシテストステロンを含む医薬的組成物は、乳癌（特に、乳房粘液腺管癌、乳房髄様癌及び乳房小葉癌）、子宮内膜癌、子宮頸癌、上皮性卵巣癌、子宮（卵管）癌、乳房の良性の増殖性変化又は変質、繊維腺腫、小乳房症（更年期周辺）、乳腺症、子宮筋腫、及びこれら疾患由来の二次的又は転移性腫瘍の予防及び／又は治療に用いることができる。
【００２９】
従って、本発明は、哺乳動物における上記のホルモン依存性又はホルモン受容体調節性癌の（臨床的）予防及び／又は治療に対する医薬組成物の調整における４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン（４―ヒドロキシテストロステロン）の使用を同様に提供する。
【００３０】
一般的に、本発明の化合物及び医薬的製剤は、局所的に、経口的に、直腸経由で、非経口的に（例えば、筋肉内又は静脈内注射、又は輸液）、経皮的及び／又は持続性製剤として投与できる。
【００３１】
本発明の化合物、４−ヒドロキシテストステロンは、例えば、米国特許2,762,818Aに開示されており、また市販品が入手可能である（例えば、Bulk Nutrition, Graham, NC. USA;更なる情報はbulknutrition.comを参照；WINKOS GmbH D-79189 Bad Krozingen, DE）。
【００３２】
また、本発明は、機能的及び／又は構造的特徴を共有する全ての誘導体に関係する（特に４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オンの塩類及びエステル類）。適切なエステル基の例としては、ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、ペンタノイル基、ヘキサノイル基、ヘプタノイル基、及びベンゾイル基のような直鎖、分枝鎖、又は環状又は芳香族アシル基があるが、これらに限られない。４及び／又は１７ヒドロキシ基、このましくは１７ヒドロキシ基を有する、これらのエステル類を作ることができる。これらの塩類、エステル類は、既知の方法で調整できる（例えば、米国特許2,762,818Aを参照）。
【００３３】
本発明の化合物及び医薬的製剤は、同化ステロイドであり、またＡＲポジティブな細胞及び組織が表わすアンドロゲン受容体に結合してテストステロン様の効果を発揮する。
【００３４】
これら治療インデックスが高いことを考えると、本発明の化合物は、医薬において安全に用いることができる。例えば、投与量を増やしながら単一投与により測定し、処理後７日目に測定した、本発明の化合物のマウスに対するおおよその急性毒性（ＬＤ５０）は無視できる。
【００３５】
本発明の化合物及び医薬的製剤又は組成物は、様々な投薬形態、；例えば、軟膏、クリーム、外用水薬、ゲル、スプレー、又はデポ製剤（小丸薬を含む）を含む経皮的膏薬として局所的に；錠剤、カプセル、砂糖又はフィルムを塗布した錠剤、溶液、又は懸濁液として経口的に：座薬として直腸経由で；例えば、筋肉内又は静脈内注射又は輸液のように非経口的に、投与することができる。好ましい態様に従うと、本発明の化合物は、局所的投与のために計画されている。
【００３６】
投与量は、年齢、体重、患者の健康状態、及び投与形態に依存する；例えば、成人において経口投与に対して適した投与量は、１投与量当たり約１０から約１５０〜１０００ｍｇで、一日に１から５回である。
【００３７】
本発明は、医薬的に許容される賦形剤（これは担体又は稀釈剤である）と共に本発明の化合物から成る医薬的製剤又は組成物を含む。
【００３８】
本発明の化合物を含む医薬組成物は、通常次の従来行われてきた方法に従い調整され、医薬的に適切な形で投与される。
【００３９】
局所的投与のために、薬剤は、好ましくは軟膏、クリーム、ゲル、乳濁液又は外用水薬として処方される。粉末又は油としての処方もまた、考えられる。処方のベースは、化粧品及び医薬業界の当業者に親しまれて居り、ここで詳細に説明する必要がない。例えば、アーモンド油、ピーナッツ油、オリーブ油、桃中心核油、振りかけ油、植物抽出物、精油のような植物性油及び脂質；さらに植物性ワックス及び合成及び動物油、脂肪又はワックス；レシチン、ラノリンアルコール、カロチン、香料、一価又は多価アルコール、尿素、保存剤、及び着色剤その他を用いることができる。水中の油、又は油中の水乳濁物としての処方は好ましい。
【００４０】
薬剤における活性化合物の適切な含有量は、４−ヒドロキシテストステロン又はこの塩又はエステルが、０．０００１〜２０重量、好ましくは０．６〜１０重量％、より好ましくは１〜５重量％であってもよい。通常は０．６〜５重量％である。
【００４１】
皮膚透過性を促進するための化合物を混合する場合に、その含有量は、ヒアルロニダーゼを用いる場合には、例えば、０．０１から１重量％、好ましくは０．０５〜０．２重量％であってもよく、ジメチルソルビトール又はＤＭＳＯを用いる場合には、１〜２５重量％、好ましくは５〜１０重量％であってもよい。
【００４２】
例えば、固体経口用形態は、活性化合物と共に、例えば、ラクトース、デクストロース、サッカロース、セルロース、コーンスターチ、又はポテトスターチの様な稀釈剤；例えば、シリカ、滑石、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム又はステアリン酸カルシウムのような潤滑剤；例えば、澱粉、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、又はポリビニルピロリドンのような結合剤；例えば、澱粉、アルギン酸塩、アルギニン、又はグリコール酸ナトリウム澱粉の様な解離剤；発泡剤；着色剤、甘味料；例えば、レシチン、ポリソルベート、ラウリルサルフェートの様な湿潤剤；及び、医薬的処方に用いる一般的に無毒で医薬的に不活性な物質を含むことができる。該医薬的調剤は、例えば、混合、粒状化、錠剤化、砂糖塗布又はフィルム塗布過程のような既知の方法で調整できる。経口投与のための液体分散は、例えば、シロップ、乳濁液、及び懸濁液がある。
【００４３】
シロップは、例えば、サッカロース、又はグリセリンを伴うサッカロース、及び／又はマンニトール、及び／又は、ソルビトールを担体として含むことができる。
【００４４】
懸濁液及び乳濁液は、例えば、天然ゴム、寒天、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース又はポリビニルアルコールを、担体として、含むことができる。
【００４５】
筋肉内注射のための懸濁液又は溶液は、活性化合物と共に、例えば、滅菌水、オリーブ油、オレイン酸エチルのような医薬的に許容された担体、例えば、プロピレングリコールの様なグリコール、及び、望むならば、適切量の塩酸リドカインを含むことができる。
【００４６】
静脈内注射又は輸液のための溶液は、担体として、例えば、滅菌水を含むことができる、又は好ましくは溶液は、滅菌された、水溶液性の、等張の塩溶液であることができる。
【００４７】
座薬類は、活性化合物と共に、例えば、カカオバター、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル界面活性剤又はレシチンの様な医薬的に許容された担体を含むことができる。
【００４８】
標的腫瘍がエストロゲン受容体（ＥＲ）ポジティブな場合、本発明の化合物を、既知のエストロゲン受容体拮抗剤（タモキシフェン(Tamoxifen(R)の様な)及び／又は既知のアロマターゼ阻害剤及び／又は既知の細胞増殖阻害剤と共に投与することができる。従って、本発明の医薬組成物は、またエストロゲン受容体拮抗的及び／又はアロマターゼ阻害活性及び／又は細胞増殖阻害活性を示す既知の有効量の（一種類／複数）化合物を含むことができる。好ましい態様に従うと、４−ヒドロキシテストステロンと適切な（一種類／複数）細胞増殖阻害剤の組合せは、特に、局所的に投与できる製剤の形（例えば、クリーム）で提供される。
【００４９】
適切なアロマターゼ阻害剤の例は、例えば、米国公開特許2004/0018991A1に開示されており、またホルメスタン及びレンタロン、エクゼメスタン、MDL 18962、７アルファー置換のアンドロステンジオン誘導体、ＡＴＤ，１０−オキシラン及び１０−チイラン−置換のアンドロゲン、アタメスタン、その他の様なステロイド性アロマターゼ阻害剤、及びボラゾール、アリミデクス、レトロゾール、ファドロゾール及びログレットイミドの様な非ステロイド性アロマターゼ阻害剤を含む。これらの化合物の記号表示及び入手可能性は、例えば、"Red List", Editio Cantor, Aulendorf (DE, 1999)を参照のこと。
【００５０】
適切な細胞増殖阻害剤及び細胞増殖阻害剤との組合せの例として、例えば、ＡＣ±Ｔ―タクソール（化学名：パクリタクセル(paclitaxel)）又はタクソテール(Taxotere)（化学名：ドセタクソール(docetaxol)）をともなう／又は伴わないシクロホスファミド（商品名：サイトクサン(Cytoxan)）を伴うアドリアマイシン（化学名：ドクソルビシン(doxorubicin)）；ＣＭＦ−シクロホスファミド、メトトレクセート及びフルオロウラシル（"5-FU"又は５−フルオロウラシル）；ＣＡＦ−シクロホスファミド、アドリアマイシン及びフルオロウラシル（"5-FU"又は５−フルオロウラシル）；ＣＥＦ−シクロホスファミド、エピルビシン（アドリアマイシン類似）及びフルオロウラシル（"5-FU"又は５−フルオロウラシル）；ＦＡＣ−フルオロウラシル（"5-FU"又は５−フルオロウラシル）、アドリアマイシン及びシクロホスファミドがある。
【００５１】
一般的に、特に標的組織がエストロゲン受容体ネガティブの場合、本発明の化合物は、また例えば、トラスツズマブ(ハーセプチン(Herceptin(R))の様なHer2neuに対する抗体と共に投与できる。従って、本発明の医薬的組成物は、また、Her2neu拮抗活性を示す有効量の既知化合物を含むことができる。
【実施例】
【００５２】
以下、実施例にて本発明を例証するが本発明を限定することを意図するものではない。
【００５３】
実施例１
本発明の化合物は以下のようにして合成することができる。
第１段階として、２．５ｇテストステロンを１００ｍｌの冷ＭｅＯＨに溶解する。９ｍｌのＮａＯＨ（２％）及び１７ｍｌのＨ２Ｏ２（３０％）を加えた後、混合物を４℃、２４時間攪拌する。得られたエポキシドを氷水で沈殿させる。
第２段階として、２ｇの乾燥エポキシドを２％のＨ２ＳＯ４を含む２００ｍｌの酢酸に溶解する。該溶液を室温で、４時間攪拌する。反応産物を氷水で沈殿させる。
その後、反応産物を１％のＮａＯＨ溶液で洗浄して、アセチルエステルを加水分解する。精製した４−ヒドロキシテストステロンの全収量は、４０〜５０％の範囲である。
【００５４】
実施例２
本発明の局所投与に対するクリームは、以下の量の成分を用いて従来の方法で処方することができる。量は１００ｇのクリーム当たりで与えられている：
４−ヒドロキシ１７β−アセチルアンドロスト−４−エン−３−オン    ４．５ｇ
セテアリルアルコール                                              ７．５ｇ
パラフィンワックス                                                ３．０ｇ
ナトリウムカルボマー                                              ２．５ｇ
ミリスチン酸イソプロピル                                          ６．０ｇ
モノステアリン酸ソルビタン                                        １．０ｇ
ポリソルベート２０                                                ３．０ｇ
ステアリルアルコール                                              ２．０ｇ
ジメチルソルビトール                                              ５．０ｇ
純水ｑｓ                                                      １００．０ｇ
得られたクリームを女性又は男性患者の病気に冒された乳房組織の上の皮膚に局所的に塗布する。
【００５５】
実施例３
本発明のゲルは、以下の量の成分を用いて従来の方法で処方することができる。量は１００ｇのゲル当たりで与えられている：
４−ヒドロキシテストステロン                      ２．５ｇ
９５度エタノール                                ７０．０ｇ
カルボポール９８０                                ０．５ｇ
ミリスチン酸イソプロピル                          ２．５ｇ
トリエタノールアミン                              ０．５ｇ
純水ｑｓ                                      １００．０ｇ
【００５６】
実施例４
本発明のスプレーとして用いられる溶液は、以下の処方を用いて従来の方法で調製することができる。量は１００ｇの溶液当たりで与えられている：
４−ヒドロキシテストステロン                      ２．５ｇ
９５度エタノール                                ７０．０ｇ
ミリスチン酸イソプロピル                          ２．５ｇ
純水ｑｓ                                      １００．０ｇ
【００５７】
実施例５
各重量が０．１５０ｇであり、２５ｍｇの活性化合物を含む錠剤は、以下のように調製することができる：
組成（10,000錠剤に対する）
４、１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン  ２５０ｇ
ラクトース                                                ８００ｇ
コーンスターチ                                            ４１５ｇ
滑石粉末                                                    ３０ｇ
ステアリン酸マグネシウム                                      ５ｇ
この４、１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン、ラクトース及び半量のコーンスターチを混合する；混合物を０．５ｍｍメッシュサイズの篩にかける。コーンスターチ（１０ｇ）を温水（９０ｍｌ）に懸濁して、得られたペーストを用いて顆粒化して粉末にする。顆粒を乾燥して、１．４ｍｍメッシュサイズの篩上で粒状化し、その後残量の澱粉、滑石、及びステアリン酸マグネシウムを加えて、注意深く混合して、錠剤に加工する。
【００５８】
実施例６
各分量が０．２００ｇで２０ｍｇの活性化合物を含むカプセルを調製することができる：
５００カプセルに対する組成：
４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン    １０ｇ
ラクトース                                                  ８０ｇ
コーンスターチ                                                ５ｇ
ステアリン酸マグネシウム                                      ５ｇ
この処方物を、２枚の硬いゼラチンカプセルに包み込み、各カプセルに対し分量は０．２００ｇである。
【００５９】
実施例７
ＭＣＦ−７細胞を、ＲＰＭＩ１６４０培地で、３７℃で、細胞数が約１×１０５細胞／ｍｌになるまで培養した。その後、４組の同一ＭＣＦ−７細胞試料に、ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）又は４−ヒドロキシテストステロン（４−ＯＨＴ）を、異なる濃度、即ち１０−７Ｍ，１０−８Ｍ，又は１０−９Ｍになるように加えて、生存細胞の測定により細胞の増殖を測定した。３７℃の培養の間、３，６及び９日後に細胞数を計数した。対照として、活性試薬を加えずに、ＭＣＦ−７細胞の増殖を計測した。
ＤＨＴ又は４−ＯＨＴの化合物濃度１０−７Ｍ，１０−８Ｍ，及び１０−９ＭによるＭＣＦ−７細胞増殖の阻害結果を、それぞれの濃度を、図１Ａ，１Ｂ及び１Ｃに示して、対照と比較した。これらの結果によると、本発明の化合物４−ヒドロキシテストステロンを用いる場合に、ＭＣＦ−７細胞増殖に対して、４−ジヒドロテストステロンより有意に強く、及び特に対照より強く、顕著な阻害効果の促進を示した。
ＤＨＴと比較して驚く程の促進効果は、４−ＯＨＴはアンドロゲン受容体（ＡＲ）に特異的に強く結合できて、またアンドロゲン性効果より同化作用／アポトーシス効果を示すという、この化合物の効果により説明することができる。これに対して、ＤＨＴは、特に、アンドロゲン性効果を示す。
【００６０】
実施例８
二重盲検臨床試験を１０名の女性患者群について行った。この臨床試験において、特に注意を払った点は、患者の標的乳癌組織の、プロゲステロン受容体（ＰＲ）及び特にエストロゲン受容体（ＥＲ）に関する、ホルモン受容体状態である；患者の癌は、大部分アンドロゲン受容体（ＡＲ）ポジティブと仮定した。この群において、６人の患者は、組織学的に悪性乳癌(C. mammae)であった。この調査した部分群の５人の腫瘍は、プロゲステロン受容体（ＰＲ）ネガティブであり、また特に、エストロゲン受容体（ＥＲ）ネガティブ（状態レベル０（ゼロ））であることが分かった。Her-2-neuに関しては、３人の患者はネガティブ状態を示し、１人は中庸（レベル１）、また他は強（レベル２）受容体状態であった。６番目の患者において、悪性乳癌が確認されたが、癌組織量は受容体状態の測定には少なすぎた。
残りの４人の患者は、悪性疾患を示さなかったが、正常又は乳腺症的乳房組織を持つようであった。
全１０名の女性患者に、活性物質として４−ヒドロキシテストステロンを用いて、局所的かつ部分的に、実施例２に記載したクリームを標的乳房間皮膚部分に投与する処置を行った。投与期間３ヶ月の毎日局所的投与を連続した後、治療効果に対する臨床検査を行った。
【００６１】
悪性乳癌を有する６人の患者の結果を、第１番目から５番目までの患者の受容体状態と共に、以下の表１に示す。
【表１】
2009536931.tif 000003
【００６２】
治療後検査を行った女性の中では、３人がマンモグラフィーで測定して、乳癌組織の顕著な回復を示した。
この癌部分群の６番目の患者の腫瘍の受容体状態は不明であるが、この患者の場合も明白な臨床的回復が確認された。
残り４名の非悪性疾患状態の患者に関しては、局所的投与の過程で、見かけ上、正常又は乳腺症と思える組織の明白な減少があることに注目すべきである。
これらの臨床的研究の結果、４−ヒドロキシテストステロン（４−ＯＨＴ）を含む、本発明による医薬組成物の２つの主要な重要な効果が分かった。第１に、４−ＯＨＴは、癌組織を縮小させる上で優れた効果を示し、第２にさらに驚くべきことに、ＥＲネガティブな癌細胞でさえ有効に治療できる。
まとめると、本発明で為された発見は、４−ＯＨＴはＡＲ経由で有効に働く、及びアポトーシスが結果的に実現できるという考え方を支持する。
これにより、本発明の発見は、有効な治療及び／又は予防的処置を可能にする。アジュバント治療を含む他の有用な応用の中で、次ぎに続く外科的治療計画を補助又は可能にするために、腫瘍容積の著しい減少を用いる事により、ネオアジュバント治療が特に重要である。
【００６３】
実施例９
両側の乳癌及び皮膚転移を有する４２歳の患者に、実施例２に従うクリームを毎日処置した。４週間の処置の後、皮膚転移は消失した。
【００６４】
実施例１０
大きな乳癌（直径：１２ｃｍ）、巨大な腫瘍の広がり及び転移肝疾患を有する５０歳の患者に部分的腫瘍切除を行い、その後、実施例２に従うクリームを毎日処置した。処置の間、患者は更なる腫瘍成長を示さず、切除不能な腫瘍塊の減少すら示した。
【００６５】
実施例１１
進行乳癌及びリンパ節への腫瘍拡張を有する７４歳の患者に、１０週間の間毎日処置を行った。腫瘍容積の顕著な減少が起こり、また罹患したリンパ球にはもはや腫瘍が見られなくなった。
【図面の簡単な説明】
【００６６】
【図１Ａ】ＤＨＴ又は４−ＯＨＴの化合物濃度を１０−７ＭにしたときのＭＣＦ−７細胞増殖の阻害結果を示す図である。
【図１Ｂ】ＤＨＴ又は４−ＯＨＴの化合物濃度を１０−８ＭにしたときのＭＣＦ−７細胞増殖の阻害結果を示す図である。
【図１Ｃ】ＤＨＴ又は４−ＯＨＴの化合物濃度を１０−９ＭにしたときのＭＣＦ−７細胞増殖の阻害結果を示す図である。
【図１Ａ】
2009536931.tif 000004
【図１Ｂ】
2009536931.tif 000005
【図１Ｃ】
2009536931.tif 000006
【手続補正書】
【提出日】平成21年1月14日(2009.1.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン又はこの塩若しくはエステルの、乳癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、上皮性卵巣癌、子宮（卵管）癌、繊維腺腫、小乳房症（更年期周辺）、乳腺症、子宮筋腫、又はこれら疾患由来の二次的又は転移性腫瘍に対する予防又は治療用の医薬組成物の調製における使用。
【請求項２】
前記乳癌が、乳房粘液腺管癌、乳房髄様癌又は乳房小葉癌である請求項１に記載の使用。
【請求項３】
予防又は治療において医薬組成物が局所的に投与される請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
前記４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン又はこの塩若しくはエステルが、有効量の、単数若しくは複数のエストロゲン受容体拮抗薬及び／又は単数若しくは複数のアロマターゼ阻害剤及び／又は単数若しくは複数の細胞増殖抑制剤及び／又は単数若しくは複数のHer2neuに対する抗体と共に投与される請求項１に記載の使用。
【請求項５】
乳癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、上皮性卵巣癌、子宮（卵管）癌、繊維腺腫、小乳房症（更年期周辺）、乳腺症、子宮筋腫、又はこれら疾患由来の二次的又は転移性腫瘍に対する予防又は治療に用いるための４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン又はこの塩若しくはエステル。
【請求項６】
乳房粘液腺管癌、乳房髄様癌又は乳房小葉癌に対する予防又は治療に用いるための請求項５に記載の４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オン又はこの塩若しくはエステル。
【請求項７】
活性成分として４，１７β−ジヒドロキシアンドロスト−４−エン−３−オンを含み、かつ適切な担体及び／又は稀釈剤を含む、女性又は男性の患者の予防及び／又は治療のための医薬組成物。
【請求項８】
さらに有効量の、単数若しくは複数のエストロゲン受容体拮抗薬及び／又は単数若しくは複数のアロマターゼ阻害剤及び／又は単数若しくは複数の細胞増殖抑制剤及び／又は単数若しくは複数のHer2neuに対する抗体を含む請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
局所的投与用の請求項７又は８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
乳癌に対する予防又は治療に用いるための、請求項７〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物から成る薬剤。
【国際調査報告】
2009536931.tif 000007
2009536931.tif 000008
2009536931.tif 000009
2009536931.tif 000010