(57)【要約】  本発明は、生理学的ｐＨ値で可溶性であり、長時間にわたる作用プロファイルを有する、新規のヒトインスリン誘導体に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式：
【化１】
2009536178.tif 000032
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｘ１-Ｘ２-Ｘ３-Ｗ-[ＣＨ２]ｍ-Ｘ-Ｙ-Ｑ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＸ１、Ｘ２又はＸ３中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
Ｘ１は：
・ｎが１、２、３、４、５又は６である、-ＣＯ-(ＣＨ２)ｎ；
・-ＣＯ-((ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、また各ｑ値も独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒが水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１―６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、アリール基が-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、無電荷側鎖を持つアミノ酸、又は負電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミド残基であって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド結合を形成する残基；
・残基が上に特定したα-アミノ酸アミド残基及びアミノ酸残基からなる群から選択され、アミド結合を介して、鎖が、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、アミド結合を介して結合した２、３又は４の残基からなる鎖、又は
・結合；
であり；
Ｘ２は：
・-ＣＯ-
・-ＣＯＣＨ(Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
で、Ｒ８がＣＯＯＨ又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；
・-ＣＯ-((ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４−；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-；
で、Ｒ９がＨ、-ＣＯＯＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又はＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ１０がＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３又は-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・結合；
であり；
但し、Ｘ１又はＸ２中のアミンが残りの置換基と結合を形成するならば、アミンはカルボニル基を介して残りの置換基に結合しなければならず；
Ｘ３は-Ｃ=Ｏであり、但し、Ｘ１及びＸ２が結合であるならば、Ｘ３のみが存在し；
Ｗは：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１、２、３又は４の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；又は
・結合；
であり；
ｍは０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｘは：
・-Ｏ-；
・-Ｃ=Ｏ；
・-Ｓ-；
・-Ｓ=Ｏ；
・-ＳＯ２；
・次の式：
【化２】
2009536178.tif 000033
又は
【化３】
2009536178.tif 000034
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルである)
のもの；又は
・結合；
であり；
Ｙは：
・-(ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ１-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、Ｈ、-ＣＯＯＨ、又はＯＨとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒ１が水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、ここでアリール基が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は複数の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・Ｒ１が上述したものである-ＮＣＯＲ１；又は
・結合；
であり；
Ｑは、式-(ＣＨ２)ｓ１-Ｑ１-(ＣＨ２)ｓ２-Ｑ２-(ＣＨ２)ｓ３-Ｑ３-(ＣＨ２)ｓ４-Ｑ４-(ＣＨ２)ｓ５-の鎖であり；ここでＱ１-Ｑ３が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、Ｐ(Ｏ２Ｈ)、-Ｏ-Ｐ(Ｏ２Ｈ)-Ｏ-、-Ｎ(ＣＯＲ２)-、又は結合とすることができ；Ｒ２が水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニルであり；
Ｑ４が：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；又は
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；
とすることができ、ここで、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４は互いに独立して、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４の合計が４〜２２の範囲になるような、０又は１〜１０の整数とすることができ；ｓ５は０又は１〜３の整数であり、但し；
−Ｑ１、Ｑ２及びＱ３は互いに結合を形成しなくてもよく、
−ｓ１、ｓ２及びｓ３が０又は１であるならば、いずれの-ＣＨ２-も、次の原子：Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰの２つに結合できず、
−Ｑ４がアリーレン又はヘテロアリーレンであるならば、酸素原子を介して脂肪族鎖に結合せず；
−Ｑ４がＣ６Ｈ４であるならば、硫黄を介して脂肪族鎖に結合せず；
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＰＯ３Ｈ２；
Ｏ-ＳＯ３Ｈ；
Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；又は
テトラゾ-５-リル；
である]
を有するインスリン誘導体及びその任意のＺｎ２＋錯体。
【請求項２】
次の式：
【化４】
2009536178.tif 000035
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｘ１-Ｘ２-Ｘ３-Ｑ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＸ１、Ｘ２又はＸ３中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
Ｘ１は：
・ｎが１、２、３、４、５又は６である、-ＣＯ-(ＣＨ２)ｎ；
・-ＣＯ-((ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、また各ｑ値も独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒが水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１―６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、アリール基が-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、無電荷側鎖を持つアミノ酸、又は負電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミド残基であって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド結合を形成する残基；
・残基が上に特定したα-アミノ酸アミド残基及びアミノ酸残基からなる群から選択され、アミド結合を介して、鎖が、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、アミド結合を介して結合した２、３又は４の残基からなる鎖、又は
・結合；
であり；
Ｘ２は：
・-ＣＯ-
・-ＣＯＣＨ(Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
で、Ｒ８がＣＯＯＨ又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；
・-ＣＯ-((ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-；
で、Ｒ９がＨ、-ＣＯＯＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又はＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ１０がＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３又は-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・結合；
であり；
但し、Ｘ１又はＸ２中のアミンが残りの置換基と結合を形成するならば、アミンはカルボニル基を介して残りの置換基に結合しなければならず；
Ｘ３は-Ｃ=Ｏであり、但し、Ｘ１及びＸ２が結合であるならば、Ｘ３のみが存在し；
Ｑは、式-(ＣＨ２)ｓ１-Ｑ１-(ＣＨ２)ｓ２-Ｑ２-(ＣＨ２)ｓ３-Ｑ３-(ＣＨ２)ｓ４-Ｑ４-(ＣＨ２)ｓ５-の鎖であり；ここでＱ１-Ｑ３が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、Ｐ(Ｏ２Ｈ)、-Ｏ-Ｐ(Ｏ２Ｈ)-Ｏ-、-Ｎ(ＣＯＲ２)-、又は結合とすることができ；Ｒ２が水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニルであり；
Ｑ４が：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；又は
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；
とすることができ、ここでｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４は互いに独立して、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４の合計が４〜２２の範囲になるような、０又は１〜１０の整数とすることができ；ｓ５は０又は１〜３の整数であり、但し；
−Ｑ１、Ｑ２及びＱ３は互いに結合を形成しなくてもよく、
−ｓ１、ｓ２及びｓ３が０又は１であるならば、いずれの-ＣＨ２-も、次の原子：Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰの２つに結合できず、
−Ｑ４がアリーレン又はヘテロアリーレンであるならば、酸素原子を介して脂肪族鎖に結合せず；
−Ｑ４がＣ６Ｈ４であるならば、硫黄を介して脂肪族鎖に結合せず；
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＰＯ３Ｈ２；
Ｏ-ＳＯ３Ｈ；
Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；又は
テトラゾ-５-リル；
である]
を有する、請求項１に記載のインスリン誘導体、及びその任意のＺｎ２＋錯体。
【請求項３】
Ｘ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、請求項１又は２に記載のインスリン誘導体。
【請求項４】
Ｘ２が結合である、請求項１ないし３のいずれか１項に記載のインスリン誘導体。
【請求項５】
Ｘ２が、-(ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＮＨ-ＣＯ)１-、又は-(ＣＯ-(ＣＨ２)３-ＮＨ-ＣＯ)１-、-ＣＯ-又は-ＣＯＣＨ(ＣＯＯＨ)-からなる群から選択される、請求項１ないし３のいずれか１項に記載のインスリン誘導体。
【請求項６】
Ｘ１が結合である、請求項１又は２又は５のいずれか１項に記載のインスリン誘導体。
【請求項７】
Ｘが-ＣＯ-又は結合である、請求項１ないし６のいずれか１項に記載のインスリン誘導体。
【請求項８】
Ｑ１、Ｑ２及びＱ３が全て結合であり、Ｑ４がＣ６Ｈ４であり、ｓ２、ｓ３及びｓ４が全て１であり、ｓ１が５、６、７又は８であり、ｓ５が０、１又は２である、請求項１ないし７のいずれか１項に記載のインスリン誘導体。
【請求項９】
Ｚが-ＣＯＯＨである、請求項１ないし８のいずれか１項に記載のインスリン誘導体。
【請求項１０】
親インスリンがｄｅｓＢ３０ヒトインスリンである、請求項１ないし９のいずれか１項に記載のインスリン誘導体。
【請求項１１】
請求項１ないし１０のいずれか１項に記載のインスリン誘導体の治療的有効量を、場合によっては薬学的に許容可能な担体と共に含有する、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための薬学的組成物。
【請求項１２】
請求項１ないし１０のいずれか１項に記載のインスリン誘導体の治療的有効量を、場合によっては薬学的に許容可能な担体と共に、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における糖尿病の治療方法。
【請求項１３】
糖尿病の肺処置用である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ＮεＢ２９-(１２-(４-カルボキシフェニル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(−１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイル-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(１２-(３-カルボキシフェニル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(９-[４-(２-カルボキシエチル)フェニル]ノナノイル)-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリル)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-[１２-(５-カルボキシチオフェン-２-イル)ドデカノイル]ｄｅｓＢ３０インスリン、又は
ＮεＢ２９-[１２-(５-カルボキシチオフェン-２-イル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ]ｄｅｓＢ３０インスリン、
からなる群から選択される、請求項１ないし１３のいずれか１項に記載のインスリン誘導体。
【請求項１５】
実施例に記載したインスリン誘導体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生理学的ｐＨ値で可溶性であり、長時間にわたる作用プロファイルを有する、新規のヒトインスリン誘導体に関する。また、本発明は、このような誘導体を含有する薬学的組成物、本発明のインスリン誘導体を使用する糖尿病及び高血糖症を治療する方法、及び糖尿病及び高血糖症の処置におけるこのようなインスリン誘導体の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、１型糖尿病及び２型糖尿病の双方の糖尿病の処置は、いわゆる強化インスリン処置に、かなりの程度で頼っている。この治療法によれば、患者は、基礎インスリン必要量を補うための持続型インスリンの１日１又は２回の注射を含む複数回の毎日のインスリン注射に、食事に関連したインスリン必要量を補うための速効型インスリンのボーラス注射が補填された治療を受ける。
持続型インスリン組成物は当該分野でよく知られている。しかして、持続型インスリン組成物の主要な一タイプは、インスリン結晶又は非晶質インスリンの注入可能な水性懸濁液を含む。これらの組成物において、典型的に利用されるインスリン化合物は、プロタミンインスリン、亜鉛インスリン又はプロタミン亜鉛インスリンである。
【０００３】
インスリン懸濁液の使用に関しては、ある種の欠点がある。よって、正確な投与を確実にするためには、定められた量の懸濁液がバイアルから抜き出されるか、又はカートリッジから放出される前に、穏やかに振揺して、インスリン粒子を均質に懸濁させなければならない。また、インスリン懸濁液の保管においては、凝集体形成又は凝固を避けるために、温度を、インスリン溶液の場合よりもより狭い範囲内で保持しなければならない。
【０００４】
ＷＯ９５／０７９３１(Novo Nordisk A/S)には、ＬｙｓＢ２９のε-アミノ基が脂質親和性置換基を有している、ヒトインスリン誘導体が開示されている。これらのインスリン誘導体は長時間にわたる作用プロファイルを有しており、生理学的ｐＨ値で可溶性である。
ＷＯ２００５／０１２３４７(Novo Nordisk A/S)で公開されている国際特許出願は、Ｂ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基のいずれかに結合する側鎖を有するインスリン誘導体に関連している。
国際特許出願ＥＰ２００６／０５０５９３(Novo Nordisk A/S)には、側鎖に少なくとも一の芳香族基を有するインスリン誘導体が開示されている。
【０００５】
しかしながら、現在までに知られているインスリン誘導体より長時間にわたる作用プロファイルを有するインスリンが、なおも必要とされている。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、次の式：
【化１】
2009536178.tif 000002
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｘ１-Ｘ２-Ｘ３-Ｗ-[ＣＨ２]ｍ-Ｘ-Ｙ-Ｑ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＸ１、Ｘ２又はＸ３中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
Ｘ１は：
・ｎが１、２、３、４、５又は６である、-ＣＯ-(ＣＨ２)ｎ；
・-ＣＯ-((ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、また各ｑ値も独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒが水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１―６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、アリール基が-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、無電荷側鎖を持つアミノ酸、又は負電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミド残基であって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド結合を形成する残基；
・残基が上に特定したα-アミノ酸アミド残基及びアミノ酸残基からなる群から選択され、アミド結合を介して、鎖が、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、アミド結合を介して結合した２、３又は４の残基からなる鎖、又は
・結合；
であり；
Ｘ２は：
・-ＣＯ-
・-ＣＯＣＨ(Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
で、Ｒ８がＣＯＯＨ又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；
・-ＣＯ-((ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４−；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-；
で、Ｒ９がＨ、-ＣＯＯＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又はＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ１０がＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３又は-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・結合；
であり；
但し、Ｘ１又はＸ２中のアミンが残りの置換基と結合を形成するならば、アミンはカルボニル基を介して残りの置換基に結合しなければならず；
Ｘ３は-Ｃ=Ｏであり、但し、Ｘ１及びＸ２が結合であるならば、Ｘ３のみが存在し；
Ｗは：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１、２、３又は４の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；又は
・結合；
であり、
ｍは０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｘは：
・-Ｏ-；
・-Ｃ=Ｏ；
・-Ｓ-；
・-Ｓ=Ｏ；
・-ＳＯ２；
・次の式：
【化２】
2009536178.tif 000003
【化３】
2009536178.tif 000004
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルである)
のもの；又は
・結合；
であり；
Ｙは：
・-(ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ１-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、Ｈ、-ＣＯＯＨ、又はＯＨとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒ１が水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、ここでアリール基が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は複数の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・Ｒ１が上述したものである-ＮＣＯＲ１；又は
・結合；
であり；
Ｑは、式-(ＣＨ２)ｓ１-Ｑ１-(ＣＨ２)ｓ２-Ｑ２-(ＣＨ２)ｓ３-Ｑ３-(ＣＨ２)ｓ４-Ｑ４-(ＣＨ２)ｓ５-の鎖であり；ここでＱ１-Ｑ３が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、Ｐ(Ｏ２Ｈ)、-Ｏ-Ｐ(Ｏ２Ｈ)-Ｏ-、-Ｎ(ＣＯＲ２)-、又は結合とすることができ；Ｒ２が水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニルであり；
Ｑ４が：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；
とすることができ、ここでｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４は互いに独立して、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４の合計が４〜２２の範囲になるような、０又は１〜１０の整数とすることができ；ｓ５は０又は１〜３の整数であり、但し；
−Ｑ１、Ｑ２及びＱ３は互いに結合を形成しなくてもよく、
−ｓ１、ｓ２及びｓ３が０又は１であるならば、いずれの-ＣＨ２-も、次の原子：Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰの２つに結合できず、
−Ｑ４がアリーレン又はヘテロアリーレンであるならば、酸素原子を介して脂肪族鎖に結合せず；
−Ｑ４がＣ６Ｈ４であるならば、硫黄を介して脂肪族鎖に結合せず；
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＰＯ３Ｈ２；
Ｏ-ＳＯ３Ｈ；
Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；又は
テトラゾ-５-リル；
である]
を有するインスリン誘導体、及びその任意のＺｎ２＋錯体に関する。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
(定義)
ここで使用される「インスリンアナログ（類似体）」とは、天然に生じるインスリン中に生じる少なくとも一つのアミノ酸残基を欠失させ、及び／又は交換することにより、及び／又は少なくとも一つのアミノ酸残基を付加することによって、天然に生じるインスリン、例えばヒトインスリンの構造から形式的には誘導することができる分子構造を有するポリペプチドを意味する。付加された及び／又は交換されたアミノ酸残基は、コード可能なアミノ酸残基又は他の天然に生じるアミノ酸残基又は純粋に合成のアミノ酸残基の何れかとすることができる。本発明の態様においては、最大１７のアミノ酸が修飾される。インスリンアナログは、Ｂ鎖の２８位が、天然Ｐｒｏ残基から、Ａｓｐ、Ｌｙｓ又はＩｌｅの一つに修飾され得るものであってよい。また、Ａ２１位のＡｓｎは、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ又はＶａｌ、特にＧｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、又はＴｈｒ、好ましくはＧｌｙに修飾されてもよい。さらに、Ｂ３位のＡｓｎはＬｙｓ又はＡｓｐに修飾されてよい。インスリンアナログのさらなる具体例は、ｄｅｓ(Ｂ３０)ヒトインスリン；ｄｅｓ(Ｂ３０)ヒトインスリンアナログ；ＰｈｅＢ１が欠失しているインスリンアナログ；Ａ鎖及び／又はＢ鎖がＮ-末端伸長を有しているインスリンアナログ、及びＡ鎖及び／又はＢ鎖がＣ-末端伸長を有しているインスリンアナログである。例えば、１又は２のＡｒｇが、Ｂ１位に付加されていてもよい。
本発明の態様においては、最大１５のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大１０のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大８のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大７のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大６のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大５のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大４のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大３のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、最大２のアミノ酸が修飾される。本発明の態様においては、１のアミノ酸が修飾される。
【０００８】
「ｄｅｓＢ３０インスリン」、「ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン」とは、Ｂ３０アミノ酸残基を欠く天然インスリン又はそのアナログを意味する。同様に、「ｄｅｓＢ２９ｄｅｓＢ３０インスリン」又は「ｄｅｓＢ２９ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン」とは、Ｂ２９及びＢ３０アミノ酸残基を欠く天然インスリン又はそのアナログを意味する。
「Ｂ１」、「Ａ１」等とは、それぞれインスリンのＢ鎖の１位(Ｎ-末端から数える)のアミノ酸残基及びインスリンのＡ鎖の１位(Ｎ-末端から数える)のアミノ酸残基を意味する。特定の位置にあるアミノ酸残基は、例えばＢ１位のアミノ酸残基がフェニルアラニン残基であることを意味する、ＰｈｅＢ１として表される。
【０００９】
ここで使用される「インスリン」とは、ＣｙｓＡ７とＣｙｓＢ７の間と、ＣｙｓＡ２０とＣｙｓＢ１９の間にジスルフィド架橋を、またＣｙｓＡ６とＣｙｓＡ１１の間に内部ジスルフィド架橋を有するヒトインスリン、ブタインスリン、又はウシインスリンを意味する。
「親インスリン」とは、天然に生じるインスリン、例えばヒトインスリン又はブタインスリンを意味する。また親インスリンはインスリンアナログであってもよい。
【００１０】
「非荷電」なる表現は、４と９の間のｐＨで帯電していると思われる基又は基類が存在していないことを意味する。例えば、遊離のカルボン酸は存在していない。
「負に帯電」なる表現は、４と９の間のｐＨで負に帯電していると思われる少なくとも一の基が存在することを意味する。
【００１１】
本発明のインスリン誘導体が「生理学的ｐＨ値で可溶性である」と記載されている場合は、インスリン誘導体が生理学的ｐＨ値で十分に溶解するインスリン組成物を調製するのに使用可能であることを意味する。このような好ましい溶解度は、インスリン誘導体単独の固有の特性、又はインスリン誘導体と、ビヒクルに含まれる一又は複数の成分との好ましい相互作用の結果のいずれかによるものである。
「アミノ酸アミド残基」とは、アミノ酸のアルファ-カルボキシアミドを意味するか、もしくはアミノ酸が側鎖にカルボン酸を有しているならば、「アミノ酸アミド」とは、特定されるようにアルファ-カルボキシ基のアミド、又は側鎖カルボキシ基のアミドを意味する。
【００１２】
ここで使用される場合、「アリーレン」なる用語は、二価の炭素環式芳香環系、例えばフェニレン、ビフェニリレン、ナフチレン、アントラセニレン、フェナントレニレン、フルオレニレン、インデニレン、ペンタレニレン、アズレニレン等を含むことを意図している。またアリーレンは、上述にて列挙した炭素環系の部分的に水素化された誘導体を含むことも意図している。このような部分的に水素化された誘導体の非限定的例は、１,２,３,４-テトラヒドロナフチレン、１,４-ジヒドロナフチレン等である。本発明の一実施態様において、「アリーレン」はフェニレンを表す。
【００１３】
ここで使用される場合、「ヘテロアリーレン」とは、窒素、酸素及び硫黄から選択される一又は複数のヘテロ原子を有する複素環式芳香族環系、例えばフリル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、１,２,３-トリアゾリル、１,２,４-トリアゾリル、ピラニル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、１,２,３-トリアジニル、１,２,４-トリアジニル、１,３,５-トリアジニル、１,２,３-オキサジアゾリル、１,２,４-オキサジアゾリル、１,２,５-オキサジアゾリル、１,３,４-オキサジアゾリル、１,２,３-チアジアゾリル、１,２,４-チアジアゾリル、１,２,５-チアジアゾリル、１,３,４-チアジアゾリル、テトラゾリル、チアジアジニル、インドリル、イソインドリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズイソオキサゾリル、プリニル(purinyl)、キナゾリニル、キノリジニル、キノリニル、イソキノリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル(naphthyridinyl)、プテリジニル、カルバゾリル、アゼピニル、ジアゼピニル、アクリジニル等を含むことを意図している。またヘテロアリールは、上述にて列挙された複素環系の部分的に水素化された誘導体を含むことを意図している。このような部分的に水素化された誘導体の非限定的例は、２,３-ジヒドロベンゾフラニル、ベンゾジオキサニル、ベンゾオキサニル、メチレンジオキシベンゼン、ジフェニレンオキシド、ピロリニル、ピラゾリニル、インドリニル、オキサゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゼピニル等である。
本発明の一実施態様において、「ヘテロアリール」とは、フリル、チエニル、チアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、オキサゾリル、２,３-ジヒドロベンゾフラニル、ベンゾジオキサニル、ベンゾオキサニル、メチレンジオキシベンゼン、ジフェニレンオキシド、ピロリニル、ピラゾリニル、インドリニル、オキサゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゼピニルを表す。
【００１４】
「ハロゲン」とは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩからなる群から選択される原子である。
ここで使用される場合「Ｃ１−６-アルキル」なる用語は、１〜６の炭素原子を有する、飽和した分枝状又は直鎖状の炭化水素基を表す。代表例には、限定されるものではないが、メチル、エチル、ｎ-プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ｎ-ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、tert-ペンチル、ｎ-ヘキシル、イソヘキシル等が含まれる。
【００１５】
ここで使用される場合、「Ｃ２−６-アルケニル」なる用語は、２〜６の炭素原子と少なくとも一の二重結合を有する、分枝状又は直鎖状の炭化水素基を表す。このような基の例には、限定されるものではないが、ビニル、１-プロペニル、２-プロペニル、イソ-プロペニル、１,３-ブタジエニル、１-ブテニル、２-ブテニル、３-ブテニル、２-メチル-１-プロペニル、１-ペンテニル、２-ペンテニル、３-ペンテニル、４-ペンテニル、３-メチル-２-ブテニル、１-ヘキセニル、２-ヘキセニル、３-ヘキセニル、２,４-ヘキサジエニル、５-ヘキセニル等が含まれる。
ここで使用される場合、「Ｃ２−６-アルキニル」なる用語は、２〜６の炭素原子と少なくとも一の三重結合を有する、分枝状又は直鎖状の炭化水素基を表す。このような基の例には、限定されるものではないが、エチニル、１-プロピニル、２-プロピニル、１-ブチニル、２-ブチニル、３-ブチニル、１-ペンチニル、２-ペンチニル、３-ペンチニル、４-ペンチニル、１-ヘキシニル、２-ヘキシニル、３-ヘキシニル、４-ヘキシニル、５-ヘキシニル、２,４-ヘキサジニル等が含まれる。
【００１６】
以下の略語が、明細書及び実施例で使用される：
ＣＶ            カラム容量
ＥＤＴＡ        エチレンジアミン四酢酸
ＨＩ            ヒトインスリン
ＨＰＬＣ        高速液体クロマトグラフィー
ＨＳＡ          ヒト血清アルブミン
ＬＣ            液体クロマトグラフィー
ＭＡＬＤＩ      マトリックス支援レーザー脱離イオン化
ＭＳ            質量分析
ＮＭＰ          Ｎ-メチル-２-ピロリドン
ＲＴ            室温
ＳＥＣ          サイズ排除クロマトグラフィー
ＳＰＡ          シンチレーション近接アッセイ
Ｔｒｉｓ        トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン
ｖｏｌ％        容量パーセンテージ
Ｏ.Ｄ.          光学密度＝吸光度
Ｘ２モノマー    ＡｓｐＢ９ ＧｌｕＢ２７ヒトインスリン
ｈＧｌｕ        ホモ-グルタミン酸
Ａａｄ          アルファ-アミノ-アジピン酸(ホモグルタミン酸)
Ｂｚｌ＝Ｂｎ    ベンジル
ＤＩＥＡ        Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ          Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド
ＩＤＡ          イミノ二酢酸
Ｓａｒ          サルコシン(Ｎ-メチル-グリシン)
ｔＢｕ          tert-ブチル
ＨＳＴＵ        Ｏ-(Ｎ-スクシンイミジル)-１,１,３,３-テトラメチルウロニウム-ヘ                  キサフルオロホスファート
ＴＳＴＵ        Ｏ-(Ｎ-スクシンイミジル)-１,１,３,３-テトラメチルウロニウム-テ                  トラフルオロボラート
ＴＨＦ          テトラヒドロフラン
ＥｔＯＡｃ      酢酸エチル
ＤＩＰＥＡ      ジイソプロピルエチルアミン
ＨＯＡｔ        １-ヒドロキシ-７-アザベンゾトリアゾール
ＴＥＡ          トリエチルアミン
Ｓｕ            Ｎ-スクシンイミジル=２,５-ジオキソ-ピロリジン-１-イル
ＴＦＡ          トリフルオロ酢酸
ＤＣＭ          ジクロロメタン
ＤＭＳＯ        ジメチルスルホキシド
ＴＣＬ          薄層クロマトグラフィー
ＲＴ            室温
【００１７】
ここに引用された刊行物、特許出願及び特許を含む全ての参照は、各文献が、出典明示により個々にかつ特に援用され、その全内容がここに記載されているかの如く、その全体が出典明示によりその全内容がここに援用される(法律により許容される最大範囲)。
全ての表題及び副題は、ここでは便宜的に使用され、決して本発明を限定するものと解すべきではない。
ここに提供される任意かつ全ての例、又は例示的言語(例えば「等」)の使用は、単に本発明をより明らかにすることを意図しており、特に請求項に記載がない限り、本発明の範囲に限定をもたらすものではない。明細書中の如何なる語句も請求項に記載していない要素が本発明の実施に必須であることを示しているものと解すべきではない。
ここでの特許文献の引用及び援用は単に便宜上なされているもので、そのような特許文献の有効性、特許性、及び／又は権利行使性についての見解を反映させるものではない。
この発明は、適用される法律に容認される場合、ここに付加される請求項に列挙された主題事項の全ての修正点及び等価物を含む。
【００１８】
(発明の記載)
本発明は、インスリン誘導体分子中の置換基に末端芳香族基を設けることが、持続型インスリンの作用のインビボ持続時間と、鈍化させることのない速効型インスリンと持続型インスリンとの混合可能性について重要な役割を担っているとの知見に基づいている。
有利には、本発明のインスリン誘導体は生理学的ｐＨ値で可溶性であり、ヒトインスリンのものに匹敵する有効性を有し、鈍化させることなく速攻型インスリンと混合可能である。混合された基礎及びボーラスインスリンの個々の作用プロファイルは、インスリン六量体当たり３を越えるＺｎ(ＩＩ)を含有する製剤と比較して、製剤中での沈殿リスクを制限するＺｎ(ＩＩ)をインスリン六量体当たり約３まで又はそれ未満のＺｎ(ＩＩ)濃度で含む製剤において保持される。
【００１９】
本発明は、次の式：
【化４】
2009536178.tif 000005
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｘ１-Ｘ２-Ｘ３-Ｗ-[ＣＨ２]ｍ-Ｘ-Ｙ-Ｑ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＸ１、Ｘ２又はＸ３中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
Ｘ１は：
・ｎが１、２、３、４、５又は６である、-ＣＯ-(ＣＨ２)ｎ；
・-ＣＯ-((ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、また各ｑ値も独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒが水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１―６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、アリール基が-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、無電荷側鎖を持つアミノ酸、又は負電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミド残基であって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド結合を形成する残基；
・残基が上に特定したα-アミノ酸アミド残基及びアミノ酸残基からなる群から選択され、アミド結合を介して、鎖が、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、アミド結合を介して結合した２、３又は４の残基からなる鎖、又は
・結合；
であり；
Ｘ２は：
・-ＣＯ-
・-ＣＯＣＨ(Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
で、Ｒ８がＣＯＯＨ又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；
・-ＣＯ-((ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４−；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-；
で、Ｒ９がＨ、-ＣＯＯＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又はＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ１０がＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３又は-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・結合；
であり；
但し、Ｘ１又はＸ２中のアミンが残りの置換基と結合を形成するならば、アミンはカルボニル基を介して残りの置換基に結合しなければならず；
Ｘ３は-Ｃ=Ｏであり、但し、Ｘ１及びＸ２が結合であるならば、Ｘ３のみが存在し；
Ｗは：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１、２、３又は４の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；又は
・結合；
であり；
ｍは０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｘは：
・-Ｏ-；
・-Ｃ=Ｏ；
・-Ｓ-；
・-Ｓ=Ｏ；
・-ＳＯ２；
・次の式：
【化５】
2009536178.tif 000006
【化６】
2009536178.tif 000007
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルである)
のもの；又は
・結合；
であり；
Ｙは：
・-(ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ１-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、Ｈ、-ＣＯＯＨ、又はＯＨとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒ１が水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、ここでアリール基が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は複数の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・Ｒ１が上述したものである-ＮＣＯＲ１；又は
・結合；
であり；
Ｑは、式-(ＣＨ２)ｓ１-Ｑ１-(ＣＨ２)ｓ２-Ｑ２-(ＣＨ２)ｓ３-Ｑ３-(ＣＨ２)ｓ４-Ｑ４-(ＣＨ２)ｓ５-の鎖であり；ここでＱ１-Ｑ３が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、Ｐ(Ｏ２Ｈ)、-Ｏ-Ｐ(Ｏ２Ｈ)-Ｏ-、-Ｎ(ＣＯＲ２)-、又は結合とすることができ；Ｒ２が水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニルであり；
Ｑ４が：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；又は
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；
とすることができ、ここで、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４は互いに独立して、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４の合計が４〜２２の範囲になるような、０又は１〜１０の整数とすることができ；ｓ５は０又は１〜３の整数であり、但し；
−Ｑ１、Ｑ２及びＱ３は互いに結合を形成しなくてもよく、
−ｓ１、ｓ２及びｓ３が０又は１であるならば、いずれの-ＣＨ２-も、次の原子：Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰの２つに結合できず、
−Ｑ４がアリーレン又はヘテロアリーレンであるならば、酸素原子を介して脂肪族鎖に結合せず；
−Ｑ４がＣ６Ｈ４であるならば、硫黄を介して脂肪族鎖に結合せず；
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＰＯ３Ｈ２；
Ｏ-ＳＯ３Ｈ；
Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；又は
テトラゾ-５-リル；
である]
を有するインスリン誘導体、及びその任意のＺｎ２＋錯体に関する。
【００２０】
一態様において、本発明は、次の式：
【化７】
2009536178.tif 000008
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｘ１-Ｘ２-Ｘ３-Ｑ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＸ１、Ｘ２又はＸ３中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
Ｘ１は：
・ｎが１、２、３、４、５又は６である、-ＣＯ-(ＣＨ２)ｎ；
・-ＣＯ-((ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、また各ｑ値も独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒが水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１―６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、アリール基が-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、無電荷側鎖を持つアミノ酸、又は負電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミド残基であって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド結合を形成する残基；
・残基が上に特定したα-アミノ酸アミド残基及びアミノ酸残基からなる群から選択され、アミド結合を介して、鎖が、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、アミド結合を介して結合した２、３又は４の残基からなる鎖、又は
・結合；
であり；
Ｘ２は：
・-ＣＯ-
・-ＣＯＣＨ(Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
で、Ｒ８がＣＯＯＨ又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；
・-ＣＯ-((ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４−；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-；
で、Ｒ９がＨ、-ＣＯＯＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又はＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ１０がＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３又は-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・結合；
であり；
但し、Ｘ１又はＸ２中のアミンが残りの置換基と結合を形成するならば、アミンはカルボニル基を介して残りの置換基に結合しなければならず；
Ｘ３は-Ｃ=Ｏであり、但し、Ｘ１及びＸ２が結合であるならば、Ｘ３のみが存在し；
Ｑは、式-(ＣＨ２)ｓ１-Ｑ１-(ＣＨ２)ｓ２-Ｑ２-(ＣＨ２)ｓ３-Ｑ３-(ＣＨ２)ｓ４-Ｑ４-(ＣＨ２)ｓ５-の鎖であり；ここでＱ１-Ｑ３が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、Ｐ(Ｏ２Ｈ)、-Ｏ-Ｐ(Ｏ２Ｈ)-Ｏ-、-Ｎ(ＣＯＲ２)-、又は結合とすることができ；Ｒ２が水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニルであり；
Ｑ４が：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；又は
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；
とすることができ、ここでｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４は互いに独立して、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４の合計が４〜２２の範囲になるような、０又は１〜１０の整数とすることができ；ｓ５は０又は１〜３の整数であり、但し；
−Ｑ１、Ｑ２及びＱ３は互いに結合を形成しなくてもよく、
−ｓ１、ｓ２及びｓ３が０又は１であるならば、いずれの-ＣＨ２-も、次の原子：Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰの２つに結合できず、
−Ｑ４がアリーレン又はヘテロアリーレンであるならば、酸素原子を介して脂肪族鎖に結合せず；
−Ｑ４がＣ６Ｈ４であるならば、硫黄を介して脂肪族鎖に結合せず；
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＰＯ３Ｈ２；
Ｏ-ＳＯ３Ｈ；
Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；又は
テトラゾ-５-リル；
である]
を有するインスリン誘導体、及びその任意のＺｎ２＋錯体に関する。
【００２１】
一態様において、本発明のインスリン誘導体は、
ＮεＢ２９-(１２-(４-カルボキシフェニル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(−１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイル-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(１２-(３-カルボキシフェニル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(９−[４-(２-カルボキシエチル)フェニル]ノナノイル)-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリル)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９−[１２-(５-カルボキシチオフェン-２-イル)ドデカノイル]ｄｅｓＢ３０インスリン、又は
ＮεＢ２９-[１２-(５-カルボキシチオフェン-２-イル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ]ｄｅｓＢ３０インスリン、
からなる群から選択される。
【００２２】
本発明を次の段落に要約する：
１．親インスリンと置換基を有し、該置換基が生理学的ｐＨで負に帯電している末端基；芳香族基と末端基との間に０、１、２又は３の炭素原子を有する芳香族基；少なくとも４のＣＨ２基を有する脂肪族鎖；及びリンカーを有し、脂肪族鎖がリンカーを介して親インスリンに結合しており、但し１）芳香族基がアリーレン又はヘテロアリーレンであるならば、酸素を介して脂肪族鎖に結合せず、また２）芳香族基がＣ６Ｈ４であるならば、硫黄を介して脂肪族鎖に結合しないインスリン誘導体。
２．芳香族基がアリーレン又はヘテロアリーレンである、第１項に記載のインスリン誘導体。
３．置換基が１以上の芳香族基を有する、第１又は２項に記載のインスリン誘導体。
４．末端基が-ＣＯＯＨである、第２項に記載のインスリン誘導体。
【００２３】
５．アリーレンが、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルである、第２項に記載のインスリン誘導体。
６．アリーレンが、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル、Ｃ２−３-アルキニル、又は-ＯＲ２から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ２がＣ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル、又はＣ２−３-アルキニルとすることができる、第５項に記載のインスリン誘導体。
【００２４】
７．ヘテロアリーレン基が、窒素、硫黄又は酸素を有している、第２項に記載のインスリン誘導体。
８．炭素又は窒素原子が置換されていてもよい、第７項に記載のインスリン誘導体。
９．ヘテロアリーレンが、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されており、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択される、第８項に記載のインスリン誘導体。
【００２５】
１０．リンカーが、次の：負電荷側鎖を有するアミノ酸、又は無電荷側鎖を有するアミノ酸、又は側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミド残基から選択されるアミド結合を介して互いに結合している、１-４の残基を含む、第１−１０項に記載のインスリン誘導体。
１１．リンカーが、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第１０項に記載のインスリン誘導体。
１２．リンカーがアミド結合を介して結合している１-４のアミノ酸残基を含む、第１−１１項に記載のインスリン誘導体。
１３．リンカーが、少なくとも一の遊離のカルボン酸基又は中性のｐＨで負に帯電している基を含む、第１２項に記載のインスリン誘導体。
１４．リンカーがアミド結合を介して結合している１-４のアミノ酸アミド残基を含む、第１−１１項に記載のインスリン誘導体。
１５．リンカーがアミドを含む、第１−１１に記載のインスリン誘導体。
【００２６】
１６．リンカーが、式-ＣＯＮＲ４Ｒ５、-ＳＯＮＲ４Ｒ５又は-ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５のアミド又はＮ-置換されたアミドを有し、ここでＲ４ 及びＲ５が互いに独立して、水素、-ＣＨ３、-ＣＨ１−６ＣＨ３、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルとすることができ、またＲ４及びＲ５が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能である、第１−１１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１７．Ｒ４及びＲ５が水素である、第１６項に記載のインスリン誘導体。
１８．置換基がＬｙｓＢ２９のε-アミノ基に結合している、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００２７】
１９．次の式：
【化８】
2009536178.tif 000009
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｘ１-Ｘ２-Ｘ３-Ｗ-[ＣＨ２]ｍ-Ｘ-Ｙ-Ｑ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＸ１、Ｘ２又はＸ３中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
Ｘ１は：
・ｎが１、２、３、４、５又は６である、-ＣＯ-(ＣＨ２)ｎ；
・-ＣＯ-((ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、また各ｑ値も独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒが水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１―６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、アリール基が-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、無電荷側鎖を持つアミノ酸、又は負電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミド残基であって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド結合を形成する残基；
・残基が上に特定したα-アミノ酸アミド残基及びアミノ酸残基からなる群から選択され、アミド結合を介して、鎖が、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、アミド結合を介して結合した２、３又は４の残基からなる鎖、又は
・結合；
であり；
Ｘ２は：
・-ＣＯ-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
で、Ｒ８がＣＯＯＨ又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；
・-ＣＯ-((ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４−；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-；
で、Ｒ９がＨ、-ＣＯＯＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又はＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ１０がＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３又は-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
但し、Ｘ１又はＸ２中のアミンが残りの置換基と結合を形成するならば、アミンはカルボニル基を介して残りの置換基に結合しなければならず；
Ｘ３は-Ｃ=Ｏであり、但し、Ｘ１及びＸ２が結合であるならば、Ｘ３のみが存在し；
Ｗは：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１、２、３又は４の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；又は
・結合；
であり；
ｍは０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｘは：
・-Ｏ-；
・-Ｃ=Ｏ；
・-Ｓ-；
・-Ｓ=Ｏ；
・-ＳＯ２；
・次の式：
【化９】
2009536178.tif 000010
【化１０】
2009536178.tif 000011
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルである)
のもの；又は
・結合；
であり；
Ｙは：
・-(ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ１-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、Ｈ、-ＣＯＯＨ、又はＯＨとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒ１が水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、ここでアリール基が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は複数の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・Ｒ１が上述したものである-ＮＣＯＲ１；又は
・結合；
であり；
Ｑは、式-(ＣＨ２)ｓ１-Ｑ１-(ＣＨ２)ｓ２-Ｑ２-(ＣＨ２)ｓ３-Ｑ３-(ＣＨ２)ｓ４-Ｑ４-(ＣＨ２)ｓ５-の鎖であり；ここでＱ１-Ｑ３が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、Ｐ(Ｏ２Ｈ)、-Ｏ-Ｐ(Ｏ２Ｈ)-Ｏ-、-Ｎ(ＣＯＲ２)-、又は結合とすることができ；Ｒ２が水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニルであり；
Ｑ４が：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；又は
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；
とすることができ、ここで、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４は互いに独立して、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４の合計が４〜２２の範囲になるような、０又は１〜１０の整数とすることができ；ｓ５は０又は１〜３の整数であり、但し；
−Ｑ１、Ｑ２及びＱ３は互いに結合を形成しなくてもよく、
−ｓ１、ｓ２及びｓ３が０又は１であるならば、いずれの-ＣＨ２-も、次の原子：Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰの２つに結合できず、
−Ｑ４がアリーレン又はヘテロアリーレンであるならば、酸素原子を介して脂肪族鎖に結合せず；
−Ｑ４がＣ６Ｈ４であるならば、硫黄を介して脂肪族鎖に結合せず；
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＰＯ３Ｈ２；
Ｏ-ＳＯ３Ｈ；
Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；又は
テトラゾ-５-リル；
である]
を有するインスリン誘導体、及びその任意のＺｎ２＋錯体。
【００２８】
２０．次の式：
【化１１】
2009536178.tif 000012
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、Ｘ１-Ｘ２-Ｘ３-Ｑ-Ｚは置換基であり、ここで、Ｉｎｓは、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と、置換基のＸ１、Ｘ２又はＸ３中のＣＯ基との間のアミド結合を介して置換基に結合しており；
Ｘ１は：
・ｎが１、２、３、４、５又は６である、-ＣＯ-(ＣＨ２)ｎ；
・-ＣＯ-((ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、また各ｑ値も独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒが水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１―６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、アリール基が-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・側鎖にカルボン酸を持つアミノ酸、無電荷側鎖を持つアミノ酸、又は負電荷側鎖を持つアミノ酸のアミノ酸アミド残基であって、そのカルボン酸基と共に、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基と共同して、アミド結合を形成する残基；
・残基が上に特定したα-アミノ酸アミド残基及びアミノ酸残基からなる群から選択され、アミド結合を介して、鎖が、ＩｎｓのＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基、又はＩｎｓのＡ又はＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基に結合している、アミド結合を介して結合した２、３又は４の残基からなる鎖、又は
・結合；
であり；
Ｘ２は：
・-ＣＯ-
・-ＣＯＣＨ(Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
で、Ｒ８がＣＯＯＨ又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；
・-ＣＯ-((ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４−；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-；
で、Ｒ９がＨ、-ＣＯＯＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又はＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ１０がＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３又は-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・結合；
であり；
但し、Ｘ１又はＸ２中のアミンが残りの置換基と結合を形成するならば、アミンはカルボニル基を介して残りの置換基に結合しなければならず；
Ｘ３は-Ｃ=Ｏであり、但し、Ｘ１及びＸ２が結合であるならば、Ｘ３のみが存在し；
Ｑは、式-(ＣＨ２)ｓ１-Ｑ１-(ＣＨ２)ｓ２-Ｑ２-(ＣＨ２)ｓ３-Ｑ３-(ＣＨ２)ｓ４-Ｑ４-(ＣＨ２)ｓ５-の鎖であり；ここでＱ１-Ｑ３が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、Ｐ(Ｏ２Ｈ)、-Ｏ-Ｐ(Ｏ２Ｈ)-Ｏ-、-Ｎ(ＣＯＲ２)-、又は結合とすることができ；Ｒ２が水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニルであり；
Ｑ４が：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；又は
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；
とすることができ、ここで、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４は互いに独立して、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４の合計が４〜２２の範囲になるような、０又は１〜１０の整数とすることができ；ｓ５は０又は１〜３の整数であり、但し；
−Ｑ１、Ｑ２及びＱ３は互いに結合を形成しなくてもよく、
−ｓ１、ｓ２及びｓ３が０又は１であるならば、いずれの-ＣＨ２-も、次の原子：Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰの２つに結合できず、
−Ｑ４がアリーレン又はヘテロアリーレンであるならば、酸素原子を介して脂肪族鎖に結合せず；
−Ｑ４がＣ６Ｈ４であるならば、硫黄を介して脂肪族鎖に結合せず；
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＰＯ３Ｈ２；
Ｏ-ＳＯ３Ｈ；
Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；又は
テトラゾ-５-リル；
である]
を有する、第１９項に記載のインスリン誘導体、及びその任意のＺｎ２＋錯体
【００２９】
２１．Ｘ１が、側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミド残基である、第１９−２０項に記載のインスリン誘導体。
２２．Ｘ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第１９−２１項の何れかに記載のインスリン誘導体。
２３．Ｘ１が、それらの側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸の、２、３又は４のアミノ酸アミド残基からなる鎖である、第１９−２０項に記載のインスリン誘導体。
【００３０】
２４．Ｘ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第１９−２０又は２３項に記載のインスリン誘導体。
【００３１】
２５．Ｘ１が２〜１０の炭素原子を有するアミノ酸残基である、第１９−２０項に記載のインスリン誘導体。
２６．Ｘ１が、α-Ａｓｐ、β-Ａｓｐ、α-Ｇｌｕ、γ-Ｇｌｕ、α-ｈＧｌｕ及びδ-ｈＧｌｕからなる群から選択される、第２５項に記載のインスリン誘導体。
２７．Ｘ１がγ-Ｇｌｕである、第２５項に記載のインスリン誘導体。
【００３２】
２８．Ｘ１が、負電荷側鎖を有するアミノ酸、無電荷側鎖を有するアミノ酸、側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミド残基からなる群から選択される、２、３又は４の残基からなる鎖である、第１９−２０項に記載のインスリン誘導体。
２９．Ｘ１が２つのα-アミノ酸残基からなる鎖であり、一方が、４〜１０の炭素原子及び遊離のカルボン酸基を有し、他方が２〜１１の炭素原子を有するが、遊離のカルボン酸基を有さない、第２８項に記載のインスリン誘導体。
【００３３】
３０．Ｘ１が、α-Ａｓｐ-Ｇｌｙ；Ｇｌｙ-α-Ａｓｐ；β-Ａｓｐ-Ｇｌｙ；Ｇｌｙ-β-Ａｓｐ；α-Ｇｌｕ-Ｇｌｙ；Ｇｌｙ-α-Ｇｌｕ；γ-Ｇｌｕ-Ｇｌｙ；Ｇｌｙ-γ-Ｇｌｕ；α-ｈＧｌｕ-Ｇｌｙ；Ｇｌｙ-α-ｈＧｌｕ；δ-ｈＧｌｕ-Ｇｌｙ；及びＧｌｙ-δ-ｈＧｌｕからなる群から選択される、第２９項に記載のインスリン誘導体。
３１．Ｘ１が２つのα-アミノ酸残基からなる鎖であり、該残基は独立して４〜１０の炭素原子を有し、また双方が遊離のカルボン酸基を有する、第２８項に記載のインスリン誘導体。
【００３４】
３２．Ｘ１が、α-Ａｓｐ-α-Ａｓｐ；α-Ａｓｐ-α-Ｇｌｕ；α-Ａｓｐ-α-ｈＧｌｕ；α-Ａｓｐ-β-Ａｓｐ；α-Ａｓｐ-γ-Ｇｌｕ；α-Ａｓｐ-δ-ｈＧｌｕ；β-Ａｓｐ-α-Ａｓｐ；β-Ａｓｐ-α-Ｇｌｕ；β-Ａｓｐ-α-ｈＧｌｕ；β-Ａｓｐ-β-Ａｓｐ；β-Ａｓｐ-γ-Ｇｌｕ；β-Ａｓｐ-δ-ｈＧｌｕ；α-Ｇｌｕ-α-Ａｓｐ；α-Ｇｌｕ-α-Ｇｌｕ；α-Ｇｌｕ-α-ｈＧｌｕ；α-Ｇｌｕ-β-Ａｓｐ；α-Ｇｌｕ-γ-Ｇｌｕ；α-Ｇｌｕ-δ-ｈＧｌｕ；γ-Ｇｌｕ-α-Ａｓｐ；γ-Ｇｌｕ-α-Ｇｌｕ；γ-Ｇｌｕ-α-ｈＧｌｕ；γ-Ｇｌｕ-β-Ａｓｐ；γ-Ｇｌｕ-γ-Ｇｌｕ；γ-Ｇｌｕ-δ-ｈＧｌｕ；α-ｈＧｌｕ-α-Ａｓｐ；α-ｈＧｌｕ-α-Ｇｌｕ；α-ｈＧｌｕ-α-ｈＧｌｕ；α-ｈＧｌｕ-β-Ａｓｐ；α-ｈＧｌｕ-γ-Ｇｌｕ；α-ｈＧｌｕ-δ-ｈＧｌｕ；δ-ｈＧｌｕ-α-Ａｓｐ；δ-ｈＧｌｕ-α-Ｇｌｕ；δ-ｈＧｌｕ-α-ｈＧｌｕ；δ-ｈＧｌｕ-β-Ａｓｐ；δ-ｈＧｌｕ-γ-Ｇｌｕ；及びδ-ｈＧｌｕ-δ-ｈＧｌｕからなる群から選択される、第３１項に記載のインスリン誘導体。
【００３５】
３３．Ｘ１が-ＣＯ-((ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ-ＣＯ)１−４-であり、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、また各ｑ値も独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒが水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１―６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリール、又はＣＨ２-アリールであり、アリール基が-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルである、第１９−２０項に記載のインスリン誘導体。
３４．Ｘ１が-ＣＯ-(ＣＨ２)２-(ＣＨＣＯＯＨ)-ＮＨ-ＣＯ-である、第３３項に記載のインスリン誘導体。
【００３６】
３５．Ｘ２が結合である、第１９−３４項の何れかに記載のインスリン誘導体。
３６．Ｘ２が：
・-ＣＯ-
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
で、Ｒ８がＣＯＯＨ又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；
・-ＣＯ-((ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４−；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-；
で、Ｒ９がＨ、-ＣＯＯＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又はＣＯＮＨ２とすることができ、Ｒ１０がＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３又は-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３とすることができるもの；
・結合；
である、第１９−２０項に記載のインスリン誘導体。
【００３７】
３７．Ｘ２が、-(ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＮＨ-ＣＯ)１-、又は-(ＣＯ-(ＣＨ２)３-ＮＨ-ＣＯ)１-からなる群から選択される、第３６項に記載のインスリン誘導体。
３８．Ｘ２が-ＣＯ-である、第３６項に記載のインスリン誘導体。
３９．Ｘ１が結合である、第３６−３８項に記載のインスリン誘導体。
【００３８】
４０．Ｗがフェニレンである、第１９及び２１−３９項に記載のインスリン誘導体。
４１．Ｗが、窒素、酸素又は硫黄を有する５-７員の複素環系である、第４０項に記載のインスリン誘導体。
４２．Ｗが、少なくとも一の酸素又は硫黄を有する５員の複素環系である、第４１項に記載のインスリン誘導体。
４３．Ｗが結合である、第１９及び２１−３９項に記載のインスリン誘導体。
４４．ｍが０、１又は２である、第１９及び２１−４３項に記載のインスリン誘導体。
４５．Ｘが-ＣＯ-又は結合である、第１９及び２１−４４項に記載のインスリン誘導体。
４６．Ｙが結合である、第１９及び２１−４５項に記載のインスリン誘導体。
【００３９】
４７．Ｑが、式-(ＣＨ２)ｓ１-Ｑ１-(ＣＨ２)ｓ２-Ｑ２-(ＣＨ２)ｓ３-Ｑ３-(ＣＨ２)ｓ４-Ｑ４-(ＣＨ２)ｓ５-の鎖であり；ここでＱ１-Ｑ３が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、Ｐ(Ｏ２Ｈ)、-Ｏ-Ｐ(Ｏ２Ｈ)-Ｏ-、-Ｎ(ＣＯＲ２)-、又は結合とすることができ；Ｒ２が水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニルであり；
Ｑ４が：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；又は
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されたヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択されるもの；
とすることができ、ここで、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４は互いに独立して、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４の合計が４〜２２の範囲になるような、０又は１〜１０の整数とすることができ；ｓ５は０又は１〜３の整数であり、但し、Ｑ１、Ｑ２及びＱ３は互いに結合を形成しなくてもよく、ｓ１、ｓ２及びｓ３が０又は１であるならば、いずれの-ＣＨ２-も、次の原子：Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰの２つに結合できない、第１９−４６項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００４０】
４８．Ｑ４がアリーレンである、第４７項に記載のインスリン誘導体。
４９．Ｑ４がＣ６Ｈ４である、第４７又は４８項に記載のインスリン誘導体。
５０．Ｑ４が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンであり、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能である、第４７又は４８項に記載のインスリン誘導体。
【００４１】
５１．Ｑ４がヘテロアリーレンである、第４７項に記載のインスリン誘導体。
５２．ヘテロアリーレン基が、窒素、硫黄又は酸素を有する、第５１項に記載のインスリン誘導体。
５３．ヘテロアリーレンが、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換され、ここでＲ２及びＲ３が独立して、炭素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、また窒素原子上の置換については、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択される、第５１項に記載のインスリン誘導体。
【００４２】
５４．Ｑ４が５-７員環系である、第４６−５３項に記載のインスリン誘導体。
５５．Ｑ４が５員環系である、第５４項に記載のインスリン誘導体。
５６．Ｑ４が二環系である、第４６−５５項に記載のインスリン誘導体。
５７．二環系が２つの５-７員環系を含む、第５６項に記載のインスリン誘導体。
５８．二環系が１つの６員環と１つの５員環を含み、５員環が窒素、酸素又は硫黄を有することができる、第５７項に記載のインスリン誘導体。
５９．二環系が６員及び５員環からなり、５員環が置換基の末端にある、第５６-５８項に記載のインスリン誘導体。
【００４３】
６０．Ｚが置換基に存在しない、第５９項に記載のインスリン誘導体。
６１．６員環が窒素を有する、第６０項に記載のインスリン誘導体。
６２．Ｑ１、Ｑ２及びＱ３が全て結合である、第４６−６１項に記載のインスリン誘導体。
【００４４】
６３．ｓ２、ｓ３及びｓ４が１である、第４６−６２項に記載のインスリン誘導体。
６４．ｓ１が５、６、７又は８であり、ｓ５が０、１又は２である、第４６−６３項に記載のインスリン誘導体。
６５．ｓ５が０である、第４６−６４項に記載のインスリン誘導体。
６６．ｓ５が１又は２である、第４６−６４項に記載のインスリン誘導体。
６７．Ｑ１及びＱ２が酸素である、第４６−６１及び６３−６６項に記載のインスリン誘導体。
【００４５】
６８．Ｚが-ＣＯＯＨである、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
６９．Ｚが-ＣＯ-Ａｓｐである、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
７０．Ｚが-ＣＯ-Ｇｌｕである、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
７１．Ｚが-ＣＯ-Ｇｌｙである、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
７２．Ｚが-ＣＯ-Ｓａｒである、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
７３．Ｚが-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２である、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
７４．Ｚが-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２である、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
７５．Ｚが-ＳＯ３Ｈである、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
７６．Ｚが-ＰＯ３Ｈ２である、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
７７．ＺがＯ-ＳＯ３Ｈである、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
７８．ＺがＯ-ＰＯ３Ｈ２である、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
７９．Ｚが-テトラゾ-５-リルである、第１９−５９及び６１−６７項に記載のインスリン誘導体。
【００４６】
８０．親インスリンがヒトインスリン又はブタインスリン又はインスリンアナログである、第１−７９項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８１．親インスリンのＢ３０位にあるアミノ酸残基がＬｙｓであるか、又は欠失している、第７９−８０項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８２．親インスリンがｄｅｓＢ３０ヒトインスリンである、第８１項に記載のインスリン誘導体。
【００４７】
８３．親インスリンのＢ１位にあるアミノ酸残基が欠失している、第７９−８２項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８４．親インスリンのＡ２１位にあるアミノ酸残基がＧｌｙ又はＡｓｎである、第７９−８３項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８５．親インスリンのＢ３位にあるアミノ酸残基がＬｙｓである、第７９−８４項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８６．親インスリンのＢ２８位にあるアミノ酸残基がＡｓｐ又はＬｙｓである、第７９−８５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８７．親インスリンのＢ２９位にあるアミノ酸残基がＰｒｏ又はＴｈｒである、第７９−８６項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【００４８】
８８．親インスリンがＡｓｐＢ２８ヒトインスリンである、第８６項に記載のインスリン誘導体。
８９．親インスリンが、ＧｌｙＡ２１ヒトインスリン、又はＧｌｙＡ２１ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、又はＧｌｙＡ２１ＡｒｇＢ３１ＡｒｇＢ３２ヒトインスリンである、第８４項に記載のインスリン誘導体。
９０．親インスリンがＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンである、第８５項に記載のインスリン誘導体。
９１．親インスリンがＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリンである、第８６−８７項に記載のインスリン誘導体。
９２．親インスリンがＴｈｒＢ２９ＬｙｓＢ３０ヒトインスリンである、第８１及び８７項に記載のインスリン誘導体。
【００４９】
９３．インスリン誘導体が、６つのインスリン誘導体当たり、２つの亜鉛イオン、３つの亜鉛イオン、４つの亜鉛イオン、５つの亜鉛イオン、６つの亜鉛イオン、７つの亜鉛イオン、８つの亜鉛イオン、９つの亜鉛イオン、又は１０の亜鉛イオンに結合している、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体の亜鉛錯体。
【００５０】
９４．薬学的に許容可能な担体と共に、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体を治療的有効量含有する、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための薬学的組成物。
９５．薬学的に許容可能な担体と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体を治療的有効量含有する、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための薬学的組成物。
【００５１】
９６．薬学的に許容可能な担体と共に、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための方法。
９７．薬学的に許容可能な担体と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための方法。
９８．糖尿病の肺処置用である、第９８又は９９項に記載の方法。
【００５２】
９９．第１−９５項の何れかに記載のインスリン誘導体と、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンからなる群から選択される速攻型インスリンアナログとの混合物。
１００．ＮεＢ２９-(１２-(４-カルボキシフェニル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(−１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイル-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(１２-(３-カルボキシフェニル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(９-[４-(２-カルボキシエチル)フェニル]ノナノイル)-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリル)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-[１２-(５-カルボキシチオフェン-２-イル)ドデカノイル]ｄｅｓＢ３０インスリン、又は
ＮεＢ２９-[１２-(５-カルボキシチオフェン-２-イル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ]ｄｅｓＢ３０インスリン、
からなる群から選択される、第１−９５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１０１．実施例に記載するようなインスリン誘導体。
【００５３】
本発明の一態様において、Ｘ１は、負電荷側鎖を有するアミノ酸、無電荷側鎖を有するアミノ酸、側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミド残基からなる群から選択される、２、３又は４の残基からなる鎖である。Ｘ１は、側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミド残基であってよい。またＸ１は、２、３又は４の、側鎖にカルボン酸を有するアミノ酸のアミノ酸アミド残基からなる鎖であってもよい。よって、例えばＸ１は、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択可能である。
本発明の一態様において、Ｘ１は、独立して４〜１０の炭素原子を有する、３つのアミノ酸残基からなる鎖であり、ここで鎖の少なくとも一のアミノ酸残基は、アミドを有する残基の群から選択される。３つのアミノ酸アミドの組合せは、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドの任意の組合せとすることができ、６４の異なる組合せが可能であることを意味している。
【００５４】
さらなる態様において、Ｘ１は、独立して４〜１０の炭素原子を有する、４つのアミノ酸残基からなる鎖であり、ここで鎖の少なくとも一のアミノ酸残基は、アミドを有する残基の群から選択される。４つのアミノ酸アミドの組合せは、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドの任意の組合せとすることができ、２５６の異なる組合せが可能であることを意味している。
本発明の一態様において、Ｘ１は、４〜１０の炭素原子を有するアミノ酸残基である。アミノ酸残基は、α-Ａｓｐ、β-Ａｓｐ、α-Ｇｌｕ、γ-Ｇｌｕ、α-ｈＧｌｕ及びδ-ｈＧｌｕからなる群から選択されてよい。一態様において、Ｘ１はγ-Ｇｌｕである。
一態様において、Ｘ１はアミノ酸残基の鎖である。
【００５５】
アシル化のための出発生成物、親インスリン又はインスリンアナログ又はそれらの前駆体は、よく知られているペプチド合成、又は適切に形質転換された微生物中でのよく知られている組換え生産のいずれかにより生産することができる。よって、インスリン出発生成物は、ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列を含み、ペプチドの発現を可能にする条件下で適切な栄養培地中でポリペプチドを発現することができる宿主細胞を培養し、その後、得られたペプチドを培地から回収することを含む方法により生産することができる。
【００５６】
細胞を培養するのに使用される培地は、宿主細胞の増殖に適した任意の一般的な培地、例えば適切な栄養補助剤を含む複合培地又は最少培地でありうる。適切な培地は市販供給者から入手可能であり、また刊行されている処方(例えば、American Type Culture Collectionのカタログ)に従い調製することができる。ついで、細胞により産生されたペプチドを、遠心分離又は濾過により培地から宿主細胞を分離し、塩、例えば硫酸アンモニウムにより上清又は濾液のタンパク質様成分を沈殿させ、例えばイオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー等、当該ペプチドの種類に応じて様々なクロマトグラフィー手順により精製することを含む一般的な手順により、培養培地から回収され得る。
【００５７】
親インスリンをコードするＤＮＡ配列は、適切には、例えばゲノム又はｃＤＮＡライブラリを調製し、標準的な技術に従い合成オリゴヌクレオチドプローブを使用するハイブリダイゼーションによりポリペプチドの全て又は一部をコードするＤＮＡ配列をスクリーニングすることにより得られる、ゲノム又はｃＤＮＡ由来のものでありうる(例えば、Sambrook, J, Fritsch、EF及びManiatis, T, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York、1989を参照)。また、親インスリンをコードするＤＮＡ配列は、確立された標準的な方法、例えばBeaucage及びCaruthers, Tetrahedron Letters 22 (1981), 1859-1869に記載されているホスホアミジト(phosphoamidite)法、又はMatthesら, EMBO Journal 3 (1984), 801-805に記載されている方法により、合成的に調製されてもよい。またＤＮＡ配列は、例えばUS4683202、又はSaikiら, Science 239 (1988),487-491に記載されているように、特定のプライマーを使用するポリメラーゼ連鎖反応により調製されてもよい。
【００５８】
ＤＮＡ配列は、便宜的に、組換えＤＮＡ手順にかけられている任意のベクターに挿入されてよく、ベクターの選択は、多くの場合、導入される宿主細胞に依存する。例えば、ベクターは自己複製ベクター、すなわち染色体外実体として存在するベクターであってよく、その複製は染色体複製とは無関係、例えばプラスミドである。また、ベクターは、宿主細胞に挿入された場合に、宿主細胞のゲノムに組み込まれ、組み込まれた内部の染色体と共に複製されるものであってよい。
【００５９】
ベクターは、例えば、親インスリンをコードするＤＮＡ配列が、プロモータ等、ＤＮＡの転写に必要な付加的なセグメントに作用可能に結合している発現ベクターである。プロモータは、選択された宿主細胞において転写活性を示す任意のＤＮＡ配列であってよく、宿主細胞に対して同族又は異種であるタンパク質をコードする遺伝子から誘導されてもよい。種々の宿主細胞において親インスリンをコードするＤＮＡの転写を指向するのに適切なプロモータの例は当該技術でよく知られている。例えば上掲のSambrookらを参照。
また、親インスリンをコードするＤＮＡ配列は、必要ならば、適切なターミネーター、ポリアデニル化シグナル、転写エンハンサー配列、及び翻訳エンハンサー配列に作用可能に結合していてもよい。本発明の組換えベクターは、当該宿主細胞においてベクターの複製を可能にするＤＮＡ配列をさらに含みうる。
さらに、ベクターは選択可能なマーカー、例えばその産物が宿主細胞における欠損を補完する遺伝子、または、例えばアンピシリン、カイナマイシン、テトラサイクリン、クロラムフェニコール、ネオマイシン、ハイグロマイシン、又はメトトレキセートのような薬剤に対して耐性を付与するものをさらに含んでいてもよい。
【００６０】
宿主細胞の分泌経路に本発明のペプチドを向かわせるために、分泌シグナル配列(リーダー配列、プロプレ配列又はプレ配列としても知られている)が、組換えベクター中に提供されてもよい。分泌シグナル配列は、正しいリーディングフレームでペプチドをコードするＤＮＡ配列に結合している。分泌シグナル配列は、通常、ペプチドをコードするＤＮＡ配列に対し５'に位置している。分泌シグナル配列は、通常ペプチドに関連しているもの、又は他の分泌タンパク質をコードする遺伝子由来のものであってもよい。
【００６１】
親インスリンをコードするＤＮＡ配列、プロモータ及び場合によってはターミネーター及び／又は分泌シグナル配列をそれぞれライゲーションし、複製に必要な情報を含む適切なベクター中にそれらを挿入するのに使用される手順は、当業者にはよく知られている(例えば、上掲のSambrookらを参照)。
【００６２】
ＤＮＡ配列又は組換えベクターが導入される宿主細胞は、本ペプチドを生成可能な任意の細胞であってよく、細菌、酵母、真菌及び高等真核細胞を含む。当該分野でよく知られ使用される適切な宿主細胞の例は、限定されるものではないが、大腸菌、出芽酵母、又は哺乳類ＢＨＫ又はＣＨＯ細胞系である。
【００６３】
ついで、親インスリン分子は、Ａ又はＢ鎖の選択されたＬｙｓ位又はＢ１位のいずれかに、関連置換基を導入することにより、本発明のインスリン誘導体に転換される。置換基は任意の簡便な方法により導入可能で、アミノ基をアシル化するための多くの方法が従来技術に開示されている。さらなる詳細は、以下の実施例により明らかになるであろう。
【００６４】
本発明は、場合によっては、薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、本発明のインスリン誘導体の又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を治療的有効量含有する薬学的組成物に関し、該組成物は、治療が必要な患者における、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するのに提供可能である。
【００６５】
本発明の一態様においては、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を含有する薬学的組成物を治療的有効量患者に投与することを含む、治療が必要な患者における、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するための方法が提供される。
【００６６】
本発明の一態様においては、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するのに使用される薬学的組成物を製造するための方法が提供され、該組成物は、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を含有している。
【００６７】
本発明の一態様においては、治療が必要な患者における、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するための薬学的組成物が提供され、該組成物は、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は添加剤と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を含有している。
【００６８】
本発明の一態様においては、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を含有する薬学的組成物を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するための方法が提供される。
【００６９】
本発明の一態様においては、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するのに使用される薬学的組成物を製造するための方法が提供され、該組成物は、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を治療的有効量含有している。
【００７０】
本発明の一態様においては、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンからなる群から選択される、速攻型インスリンアナログ、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体の混合物である、薬学的組成物が提供される。
【００７１】
本発明の一態様は、場合によっては薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を治療的有効量含有し、治療が必要な患者における、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状の肺処置用に提供可能な薬学的組成物に関する。
【００７２】
本発明の一態様は、治療が必要な患者における、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を肺治療するための薬学的組成物の適用に関し、該薬学的組成物は、薬学的に許容可能な担体及び／又は添加剤と共に、場合によっては速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を治療的有効量含有する。
【００７３】
本発明の一態様においては、１型糖尿病、２型糖尿病、及び高血糖症を引き起こす他の症状を治療するのに使用される薬学的組成物を製造するための方法が提供され、該組成物は肺に使用され、薬学的に許容可能な担体及び／又は薬学的に許容可能な添加剤と共に、場合によっては速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、本発明のインスリン誘導体又はインスリン誘導体の亜鉛錯体を治療的有効量含有している。
【００７４】
本発明のインスリン誘導体及び速攻型インスリンアナログは、約９０／１０％；約７０／３０％又は約５０／５０％の比率で混合することができる。
【００７５】
一態様において、本発明は、生理学的ｐＨ値で可溶性である、本発明のインスリン誘導体を含有する薬学的組成物に関する。
一態様において、本発明は、約６．５〜約８．５の間のｐＨ値で可溶性である、本発明のインスリン誘導体を含有する薬学的組成物に関する。
一態様において、本発明は、本発明のインスリン誘導体を含有する、長時間にわたる作用プロファイルを有する薬学的組成物に関する。
一態様において、本発明は、約１２０ｎｍｏｌ／ｍｌ〜２４００ｎｍｏｌ／ｍｌ、約４００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約２４００ｎｍｏｌ／ｍｌ、約４００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約１２００ｎｍｏｌ／ｍｌ、約６００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約２４００ｎｍｏｌ／ｍｌ、又は約６００ｎｍｏｌ／ｍｌ〜約１２００ｎｍｏｌ／ｍｌの本発明のインスリン誘導体、又は速攻型インスリンアナログと本発明のインスリン誘導体との混合物を含有する溶液である薬学的組成物に関する。
【００７６】
薬学的組成物
請求項記載の式のこのインスリン誘導体は、例えば、皮下、経口又は肺に投与することができる。
皮下投与用には、該式の化合物は、既知のインスリンの製剤と同じようにして製剤化される。さらに、皮下投与用には、該式の化合物は、既知のインスリンの投与と同じように投与され、一般的に医師はこの手順に通じている。
【００７７】
この発明のインスリン誘導体は、循環インスリン濃度を増加させ、及び／又は循環グルコース濃度を低下させるための用量効果的な方式で、吸入により投与されうる。このような投与は、糖尿病又は高血糖症等の疾患の治療に効果的である。インスリンの効果的な投与を達成するには、この発明のインスリン誘導体を約０．５μｇ／ｋｇ〜約５０μｇ／ｋｇの吸入用量で投与することが必要である。治療的有効量は、インスリンレベル、血中血糖値、患者の健康状態、患者の肺の状態等を含む要因を考慮に入れて、博学な実施者により決定することができる。
吸入による投与は、インスリンの皮下投与に匹敵する程の薬物動態に帰する可能性がある。同様の粒径及び同レベルの肺沈着レベルで比較する場合、典型的には、様々な吸入装置で同様の薬学動態が提供される。
【００７８】
本発明において、この発明のインスリン誘導体は、吸入による治療剤の投与について、当該分野で既知の任意の種々の吸入装置により送達されてよい。これらの装置には、定量吸入器、噴霧器、乾燥パウダー発生器、スプレー等が含まれる。この発明のインスリン誘導体は、乾燥パウダー吸入器又はスプレーにより送達せしめられる。この発明のインスリン誘導体を投与するための吸入装置には、いくつかの好ましい特徴がある。例えば、吸入装置による送達には、有利には信頼性、再現性及び正確性がある。吸入装置は、良好な呼吸のためには、例えば約１０μｍ未満、例えば約１-５μｍの小さな粒子を送達させるべきである。この発明の実施に適した商業的に入手可能な吸入装置のいくつかの特定の例は、TurbohalerTM(Astra)、Rotahaler(登録商標)(Glaxo)、Diskus(登録商標)(Glaxo)、SpirosTM吸入器(Dura)、Inhale Therapeuticsから市販されている装置、AERxTM(Aradigm)、Ultravent(登録商標)噴霧器(Mallinckrodt)、Acorn II(登録商標)噴霧器(Marquest Medical Products)、Ventolin(登録商標)定量吸入器(Glaxo)、及びSpinhaler(登録商標)パウダー吸入器(Fisons)等である。
【００７９】
当業者であれば、この発明のインスリン誘導体の処方、送達される製剤の量、及び単一用量の投与による持続時間が、使用される吸入装置の種類に依存することを認識しているであろう。いくつかのエアゾール送達システム、例えば噴霧器において、投与頻度及びシステムが活性化する時間の長さは、主として、エアゾールにおけるインスリンコンジュゲートの濃度に依存するであろう。例えば、より短い期間での投与では、噴霧溶液中、インスリンコンジュゲートをより高い濃度で使用することができる。定量吸入器等の装置は、より高いエアゾール濃度を作り出すことができ、所望される量のインスリンコンジュゲートを送達させるために、より短い期間で操作することができる。パウダー吸入器等の装置は、付与された充填量の薬剤が装置から出されるまで、活性剤を送達する。この種の吸入器において、付与された量のパウダーでのこの発明のインスリン誘導体の量により、単一投与で投与される用量が決定される。
【００８０】
吸入装置により送達される製剤中におけるこの発明のインスリン誘導体の粒子径は、肺、及び下気道又は肺胞に入るインスリンの能力に関して重要である。この発明のインスリン誘導体は、送達されるインスリンコンジュゲートの少なくとも約１０％、例えば約１０〜約２０％、又はそれ以上が肺に沈着するように処方することができる。口呼吸するヒトにとって、肺沈着の最大効率は、約２μｍ〜約３μｍの粒子径で得られることが知られている。粒子径が約５μｍを越えると、肺沈着はかなり低減する。約１μｍ以下の粒子径では肺沈着は低減し、治療的に有効な十分な質量を有する粒子を送達することが困難になる。よって、吸入により送達されるインスリン誘導体の粒子は、約１０μｍ未満、例えば約１μｍ〜約５μｍの範囲の粒子経を有する。インスリン誘導体の処方は、選択される吸入装置に所望される粒子径を生じるように選択される。
【００８１】
有利には、乾燥パウダーとして投与されるために、この発明のインスリン誘導体は、約１０μｍ未満、例えば約１〜約５μｍの粒子径を有する粒状形態に調製される。この粒子径により、患者の肺の肺胞への送達が効果的になされる。乾燥パウダーは、多くの粒子が所望の範囲のサイズを有するように製造された粒子から主としてなる。有利には、少なくとも約５０％の乾燥パウダーが、約１０μｍ未満の直径を有する粒子から作製される。このような処方は、インスリンコンジュゲート及び他の所望する成分を含有する溶液の噴霧乾燥、製粉又は臨界点濃縮により達成可能である。また本発明に有用な粒子を製造するのに適した他の方法は、当該分野で知られている。
【００８２】
粒子は、通常、容器中において、乾燥パウダー製剤から分離され、運搬気流を介して、患者の肺に移送される。典型的には、現在の乾燥パウダー吸入器において、固形物を破壊する力は、患者の吸入のみによりもたらされる。他の種類の吸入器では、患者の吸入により生じる空気流で、粒子を崩壊させるインペラモータが起動される。
【００８３】
乾燥パウダー吸入器から投与されるこの発明のインスリン誘導体の製剤は、誘導体を含有する微細に分割された乾燥パウダーを典型的には含んでいるが、パウダーは、増量剤、担体、賦形剤、他の添加剤等をさらに含有可能である。添加剤は、例えば特定のパウダー吸入器からの送達に要求されているようにパウダーを希釈し、製剤のプロセシングを容易にし、製剤に有利なパウダー特性を提供し、吸入装置からのパウダーの分散を容易にし、製剤を安定化させ(例えば酸化防止剤又はバッファー)、製剤に風味を付与するために、インスリンコンジュゲートの乾燥パウダー製剤に含有せしめることができる。有利には、添加剤は、患者の気道に悪影響を与えないものである。インスリン誘導体は分子レベルで添加剤と混合することもできるし、又は固体製剤は、添加剤の粒子と混合させるか、又は該粒子上をコートするインスリンコンジュゲートの粒子を含有可能である。典型的な添加剤には、単糖類、二糖類及び多糖類；糖アルコール及び他のポリオール、例えばラクトース、グルコース、ラフィノース、メレジトース、ラクチトール(lactitol)、マルチトール、トレハロース、スクロース、マンニトール、デンプン、又はそれらの組合せ；界面活性剤、例えばソルビトール類、ジホスファチジルコリン、又はレシチン等が含まれる。典型的には、添加剤、例えば増量剤は、上述した目的に対して有効な量、多くの場合は製剤の重量に対して約５０％〜約９０％の量で存在している。インスリンアナログタンパク質等のタンパク質の製剤に対して当該分野で知られている添加剤も本製剤に含めることができる。
【００８４】
この発明のインスリン誘導体を収容するスプレーは、インスリンコンジュゲートの懸濁液又は溶液を、加圧下にて、強いてノズルを通過させることにより製造することができる。ノズルサイズ及び構造、適用圧力、及び液体供給量は、所望する出量及び粒子径が達成されるように選択することができる。例えば、キャピラリー又はノズルフィード部に接続した電場により、電気スプレーを製造することができる。有利には、スプレーにより送達されるインスリンコンジュゲートの粒子は、約１０μｍ未満、例えば約１μｍ〜約５μｍの範囲の粒子径を有する。
【００８５】
スプレーを用いて使用するのに適したこの発明のインスリン誘導体の製剤は、典型的には、溶液１ｍｌ当たり、約１ｍｇ〜約２０ｍｇのインスリンコンジュゲート濃度で、水溶液中にインスリン誘導体を含有している。製剤は、賦形剤、バッファー、等張剤、防腐剤、界面活性剤、及び例えば亜鉛等の薬剤を含有することができる。また製剤は、賦形剤、又はインスリン誘導体を安定化させるための薬剤、例えばバッファー、還元剤、バルクタンパク質、又は炭水化物をさらに含有可能である。インスリンコンジュゲートの処方に有用なバルクタンパク質には、アルブミン、プロタミン等が含まれる。インスリンコンジュゲートの処方に有用な典型的な炭水化物には、スクロース、マンニトール、ラクトース、トレハロース、グルコース等が含まれる。またインスリン誘導体製剤は、エアゾールの形成において、溶液の噴霧化により生じるインスリンコンジュゲートの表面誘起凝集を低減又は防止可能な界面活性剤を、さらに含有することができる。種々の従来からの界面活性剤、例えばポリオキシエチレン脂肪酸エステル及びアルコール類、及びポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルを使用することもできる。量は、一般的には、製剤の重量に対して約０．００１〜約４％の範囲である。
【００８６】
本発明のインスリン誘導体を含有する薬学的組成物は、治療が必要な患者に非経口的に投与されてよい。非経口投与は、シリンジ、場合によってはペン状シリンジにより、皮下、筋肉内又は静脈内注射することにより実施されてよい。または、非経口投与は、輸液ポンプにより実施することもできる。さらなる選択肢は、目的に対して特異的に考案された組成物、パウダー又は液体等において、インスリンを鼻又は肺に投与することである。
【００８７】
本発明のインスリン誘導体の注射用組成物は、所望する最終生成物を得るために必要に応じて成分を溶解及び混合することを含む、製薬工業の常套的な技術を使用して調製することができる。よって、一手順において、本発明のインスリン誘導体は、調製される組成物の最終容量よりも幾分少ない量の水に溶解される。必要に応じて、等張剤、防腐剤及びバッファーが添加され、必要ならば、塩酸等の酸、又は水酸化ナトリウム水等の塩基を使用して、溶液のｐＨが調節される。最後に、溶液の容量は、所望の濃度の成分が付与されるように、水を用いて調節される。
【００８８】
本発明の他の態様において、バッファーは酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、シタラート、グリシルグリシン、ヒスチジン、グリシン、リジン、アルギニン、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸ナトリウム、及びトリス(ヒドロキシメチル)-アミノメタン、ビシン(bicine)、トリシン、リンゴ酸、スクシナート、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、アスパラギン酸、又はそれらの混合物からなる群から選択される。これらの特定のバッファーの各一が、本発明の別の態様を構成する。
【００８９】
本発明のさらなる態様において、製剤は、フェノール、ｏ-クレゾール、ｍ-クレゾール、ｐ-クレゾール、ｐ-ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ-ヒドロキシ安息香酸プロピル、２-フェノキシエタノール、ｐ-ヒドロキシ安息香酸ブチル、２-フェニルエタノール、ベンジルアルコール、クロロブタノール、及びチオメロサル(thiomerosal)、ブロノポール、安息香酸、イミド尿素、クロロヘキシジン、デヒドロ酢酸ナトリウム、クロロクレゾール、ｐ-ヒドロキシ安息香酸エチル、塩化ベンゼトニウム、クロルフェネシン(chlorphenesine)(３ｐ-クロルフェノキシプロパン-１,２-ジオール)又はそれらの混合物からなる群から選択され得る、薬学的に許容可能な防腐剤をさらに含有する。本発明のさらなる態様において、防腐剤は、０．１ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。本発明のさらなる態様において、防腐剤は、０．１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。本発明のさらなる態様において、防腐剤は５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。本発明のさらなる態様において、防腐剤は１０ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。これらの特定の防腐剤の各一が、本発明の別の態様を構成する。薬学的組成物に防腐剤を使用することは、当業者によく知られている。簡便には、Remington：The Science and Practice of Pharmacy, 第19版、1995が参照される。
【００９０】
本発明のさらなる態様において、製剤は、塩(例えば塩化ナトリウム)、糖又は糖アルコール、アミノ酸(例えば、グリシン、Ｌ-ヒスチジン、アルギニン、リジン、イソロイシン、アスパラギン酸、トリプトファン、スレオニン)、アルジトール(例えばグリセロール(グリセリン)、１,２-プロパンジオール(プロピレングリコール)、１,３-プロパンジオール、１,３-ブタンジオール)ポリエチレングリコール(例えばＰＥＧ４００)、又はそれらの混合物からなる群から選択され得る等張剤をさらに含有する。任意の糖、例えば単糖類、二糖類又は多糖類、又は水溶性グルカン類、例えばフルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、及びカルボキシメチルセルロース-Ｎａを使用してもよい。一態様において、糖添加剤はスクロースである。糖アルコールは、少なくとも一の-ＯＨ基を有するＣ４-Ｃ８炭化水素と定義され、例えばマンニトール、ソルビトール、イノシトール、ガラクチトール(galactitol)、ズルシトール、キシリトール、及びアラビトールを含む。一態様において、糖アルコール添加剤はマンニトールである。上述した糖又は糖アルコールは、個々に又は組合せて使用されてよい。使用される量は、糖又は糖アルコールが液状調製物に溶解し、本発明の方法を使用して得られた安定化効果に悪影響を与えない限りは、限定されて固定されるものではない。一態様において、糖又は糖アルコールの濃度は、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌである。本発明のさらなる態様において、等張剤は１ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している、本発明のさらなる態様において、等張剤は１ｍｇ／ｍｌ〜７ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。本発明のさらなる態様において、等張剤は８ｍｇ／ｍｌ〜２４ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。本発明のさらなる態様において、等張剤は２５ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している。これらの特定の等張剤の各一が、本発明の別の実施態様を構成する。薬学的組成物に等張剤を使用することは、当業者によく知られている。簡便には、Remington：The Science and Practice of Pharmacy, 第19版、1995が参照できる。   
【００９１】
典型的な等張剤は、塩化ナトリウム、マンニトール、ジメチルスルホン及びグリセロールであり、典型的な防腐剤は、フェノール、ｍ-クレゾール、ｐ-ヒドロキシ安息香酸メチル及びベンジルアルコールである。
適切なバッファーの例は、酢酸ナトリウム、グリシルグリシン、ＨＥＰＥＳ(４-(２-ヒドロキシエチル)-１-ピペラジンエタンスルホン酸)及びリン酸ナトリウムである。
【００９２】
本発明のインスリン誘導体の鼻投与用の組成物は、例えば、欧州特許第272097号(Novo Nordisk A/S)に記載されているようにして調製されうる。
【００９３】
この発明のインスリン誘導体を含有する組成物は、インスリンに対して敏感な状態の処置に使用することができる。よってそれらは、１型糖尿病、２型糖尿病及び例えば重篤に傷害を被った人及び大手術を受けた人にしばしば見られる高血糖症の処置に使用することができる。任意の患者に対する最適な用量レベルは、用いられる特定のインスリン誘導体の効能、年齢、体重、身体活動性、及び患者の食事、他の薬剤との併用の可能性、治療される状態の重篤度を含む様々な要因に依存する。この発明のインスリン誘導体の毎日の投薬量が、既知のインスリン組成物に対するものと同様の方法で当業者によって各個々の患者に対して決定されることが推奨される。
都合がよいことに、この発明のインスリン誘導体は、他のタイプのインスリン、例えばさらに速効で作用を開始するインスリンアナログと混合して使用してもよい。このようなインスリンアナログの具体例は、例えば、公開番号EP214826(Novo Nordisk A/S)、EP375437(Novo Nordisk A/S)及びEP383472(Eli Lilly & Co)を有する欧州特許出願に記載されている。
【００９４】
本発明を次の段落にさらに要約する：
１ａ．親インスリンと置換基を有し、該置換基が生理学的ｐＨで負に帯電している末端基；芳香族基と末端基との間に０、１、２又は３の炭素を有する芳香族基；少なくとも４のＣＨ２基を有する脂肪族鎖；及びリンカーを有し、脂肪族鎖がリンカーを介して親インスリンに結合しており、但し１）芳香族基がアリーレン又はヘテロアリーレンであるならば、酸素を介して結合せず、また２）芳香族基がＣ６Ｈ４であるならば、硫黄を介して結合しないインスリン誘導体。
２ａ．芳香族基がアリーレン、ヘテロアリーレン又は多環式系である、第１ａ項に記載のインスリン誘導体。
３ａ．置換基が１以上の芳香族基を有する、第１ａ又は２ａ項に記載のインスリン誘導体。
４ａ．末端基が-ＣＯＯＨである、第２ａ項に記載のインスリン誘導体。
【００９５】
５ａ．アリーレンが、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルである、第２ａ項に記載のインスリン誘導体。
６ａ．アリーレンが、Ｃ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル、Ｃ２−３-アルキニル、又は-ＯＲ２から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ２がＣ１−３-アルキル、Ｃ２−３-アルケニル、又はＣ２−３-アルキニルとすることができる、第５ａ項に記載のインスリン誘導体。
【００９６】
７ａ．ヘテロアリーレン基が、窒素、硫黄又は酸素を有している、第２ａ項に記載のインスリン誘導体。
８ａ．炭素又は窒素原子が置換されていてもよい、第７ａ項に記載のインスリン誘導体。
９ａ．炭素が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルである、第８ａ項に記載のインスリン誘導体。
１０ａ．窒素が、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ１−６-アルキル、Ｃ(Ｏ)-Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ(Ｏ)-Ｃ２−６-アルキニルからなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよい、第８ａ項に記載のインスリン誘導体。
【００９７】
１１ａ．多環式系が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルである、第２ａ項に記載のインスリン誘導体。
【００９８】
１２ａ．リンカーが、アミド結合を介して結合している、１-４のアミノ酸残基を含む、第１ａ−１１ａ項に記載のインスリン誘導体。
１３ａ．リンカーが、少なくとも一の遊離のカルボン酸基又は中性のｐＨで負に帯電している基を有する、第１２ａ項に記載のインスリン誘導体。
１４ａ．リンカーがアミド結合を介して結合している１-４のアミノ酸アミド残基を含む、第１ａ−１１ａ項に記載のインスリン誘導体。
１５ａ．リンカーがアミドを含む、第１ａ−１１ａに記載のインスリン誘導体。
【００９９】
１６ａ．リンカーが、式-ＣＯＮＲ４Ｒ５、-ＳＯＮＲ４Ｒ５又は-ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５のアミド又はＮ-置換されたアミドを含み、ここでＲ４ 及びＲ５が互いに独立して、水素、-ＣＨ３、-ＣＨ１−６ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、ＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルとすることができ、またＲ４及びＲ５が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能である、第１ａ−１１ａ項のいずれかに記載のインスリン誘導体。
１７ａ．Ｒ４及びＲ５が水素である、第１６ａ項に記載のインスリン誘導体。
１８ａ．置換基がＬｙｓＢ２９のε-アミノ基に結合している、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１００】
１９ａ．次の式：
【化１２】
2009536178.tif 000013
[上式中：
Ｉｎｓは親インスリン部分であり、インスリン部分のＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基は、アミド結合を介して、置換基のＣＯ基に結合しており；
Ｘ１は：
・ｎが１、２、３、４、５又は６である、-ＣＯ-(ＣＨ２)ｎ；
・-ＣＯ-((ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、また各ｑ値も独立して、水素、-ＣＯＯＨ、又はＯＨとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒが水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１―６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリーレンであり、アリーレンが-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・置換基にカルボン酸基を有するα-アミノ酸アミド残基又はα-アミノ酸残基で、そのカルボン酸基の一つと共に、親インスリンのＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基と共同して、アミド結合を形成する残基；
・アミド結合を介して、鎖が、親インスリンのＢ鎖に存在するＬｙｓ残基のε-アミノ基又はＢ鎖のＮ-末端アミノ酸残基のα-アミノ基に結合している、アミド結合を介して結合した２、３又は４のα-アミノ酸残基又はα-アミノ酸アミド残基からなる鎖；又は
・結合；
であり；
Ｘ２は：
・-ＣＯ-
・-ＣＯＣＨ(Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
で、Ｒ８がＣＯＯＨ又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４−；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-；
で、Ｒ９及びＲ１０が互いに独立して、Ｈ、-ＣＯＯＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；又は
・結合；
であり；
Ｗは：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；
・炭素が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；
・窒素が、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルからなる群から選択される基で置換されていてもよいヘテロアリーレン；又は
・結合；
であり；
ｍは０、１、２、３、４、５又は６であり；
Ｘは：
・-Ｏ-；
・-Ｃ=Ｏ；
・-Ｓ-；
・-Ｓ(Ｏ)-；
・-Ｓ(Ｏ)２-；
・次の式：
【化１３】
2009536178.tif 000014
【化１４】
2009536178.tif 000015
(上式中：Ｒは、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルである)
のもの；又は
・結合；
であり；
Ｙは：
・-(ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ１-ＣＯ)１−４-で、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、Ｈ、-ＣＯＯＨ、又はＯＨとすることができ、ｑが１-６であり、Ｒ１が水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリーレンであり、ここでアリーレンが、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであるもの；
・Ｒ１及びＲ２が上述したものである-ＮＲ１Ｒ２；又は
・結合；
であり；
Ｑは、式-(ＣＨ２)ｓ１-Ｑ１-(ＣＨ２)ｓ２-Ｑ２-(ＣＨ２)ｓ３-Ｑ３-(ＣＨ２)ｓ４-Ｑ４-(ＣＨ２)ｓ５-の二価の炭化水素鎖であり；ここでＱ１-Ｑ３が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、Ｐ(Ｏ２Ｈ)、-Ｏ-Ｐ(Ｏ２Ｈ)-Ｏ-、ＮＨ、ＮＲ２；-Ｎ(ＣＯＲ２)-、又は結合とすることができ；Ｒ２が水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニルであり；
Ｑ４が：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；
・炭素が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；
・窒素が、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルからなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいヘテロアリーレン；又は
・多環式系；
とすることができ、ここで、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４は互いに独立して、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４の合計が４〜２２の範囲になるような、０又は１〜１０の整数とすることができ；ｓ５は０又は１〜３の整数であり、但し；Ｑ１、Ｑ２及びＱ３は互いに結合を形成しなくてもよく、ｓ１、ｓ２及びｓ３が０又は１であるならば、いずれの-ＣＨ２-も、次の原子：Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰの２つに結合できず；
Ｚは：
-ＣＯＯＨ；
-ＣＯ-Ａｓｐ；
-ＣＯ-Ｇｌｕ；
-ＣＯ-Ｇｌｙ；
-ＣＯ-Ｓａｒ；
-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２；
-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２；
-ＳＯ３Ｈ
-ＰＯ３Ｈ２；
Ｏ-ＳＯ３Ｈ；
Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；又は
テトラゾ-５-リル；又は
生理学的ｐＨ値で負の電荷を有する５員及び６員環からなる二環式系；
である]
を有する、第１ａ項に記載のインスリン誘導体、及びその任意のＺｎ２＋錯体。
【０１０１】
２０ａ．Ｘ１が、４〜１０の炭素原子を有するアミノ酸アミド残基である、第１９ａ項に記載のインスリン誘導体。
２１ａ．Ｘ１が、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、及びγ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミドからなる群から選択される、第１９ａ−２０ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
２２ａ．Ｘ１がアミノ酸アミド残基の鎖である、第１９ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１０２】
２３ａ．Ｘ１が、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｌ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｌ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド、β-Ｄ-Ａｓｐ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド、γ-Ｄ-Ｇｌｕ-アミド-β-Ｄ-Ａｓｐ-アミドからなる群から選択される、２のアミノ酸アミド残基の鎖である、第１９ａ又は２２ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１０３】
２４ａ．Ｘ１が４〜１０の炭素原子を有するアミノ酸残基である、第１９ａ項に記載のインスリン誘導体。
２５ａ．Ｘ１が、α-Ａｓｐ、β-Ａｓｐ、α-Ｇｌｕ、γ-Ｇｌｕ、α-ｈＧｌｕ及びδ-ｈＧｌｕからなる群から選択される、第２４ａ項に記載のインスリン誘導体。
２６ａ．Ｘ１がγ-Ｇｌｕである、第２５ａ項に記載のインスリン誘導体。
２７ａ．Ｘ１がアミノ酸残基の鎖である、第１９ａ項に記載のインスリン誘導体。
２８ａ．Ｘ１が２つのα-アミノ酸残基からなる鎖であり、一方が、４〜１０の炭素原子及び遊離のカルボン酸基を有し、他方が２〜１１の炭素原子を有するが、遊離のカルボン酸基を有さない、第２７ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１０４】
２９ａ．Ｘ１が、α-Ａｓｐ-Ｇｌｙ；Ｇｌｙ-α-Ａｓｐ；β-Ａｓｐ-Ｇｌｙ；Ｇｌｙ-β-Ａｓｐ；α-Ｇｌｕ-Ｇｌｙ；Ｇｌｙ-α-Ｇｌｕ；γ-Ｇｌｕ-Ｇｌｙ；Ｇｌｙ-γ-Ｇｌｕ；α-ｈＧｌｕ-Ｇｌｙ；Ｇｌｙ-α-ｈＧｌｕ；δ-ｈＧｌｕ-Ｇｌｙ；及びＧｌｙ-δ-ｈＧｌｕからなる群から選択される、第２８ａ項に記載のインスリン誘導体。
３０ａ．Ｘ１が２つのα-アミノ酸残基からなる鎖であり、該残基は独立して４〜１０の炭素原子を有し、また双方が遊離のカルボン酸基を有する、第２７ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１０５】
３１ａ．Ｘ１が、α-Ａｓｐ-α-Ａｓｐ；α-Ａｓｐ-α-Ｇｌｕ；α-Ａｓｐ-α-ｈＧｌｕ；α-Ａｓｐ-β-Ａｓｐ；α-Ａｓｐ-γ-Ｇｌｕ；α-Ａｓｐ-δ-ｈＧｌｕ；β-Ａｓｐ-α-Ａｓｐ；β-Ａｓｐ-α-Ｇｌｕ；β-Ａｓｐ-α-ｈＧｌｕ；β-Ａｓｐ-β-Ａｓｐ；β-Ａｓｐ-γ-Ｇｌｕ；β-Ａｓｐ-δ-ｈＧｌｕ；α-Ｇｌｕ-α-Ａｓｐ；α-Ｇｌｕ-α-Ｇｌｕ；α-Ｇｌｕ-α-ｈＧｌｕ；α-Ｇｌｕ-β-Ａｓｐ；α-Ｇｌｕ-γ-Ｇｌｕ；α-Ｇｌｕ-δ-ｈＧｌｕ；γ-Ｇｌｕ-α-Ａｓｐ；γ-Ｇｌｕ-α-Ｇｌｕ；γ-Ｇｌｕ-α-ｈＧｌｕ；γ-Ｇｌｕ-β-Ａｓｐ；γ-Ｇｌｕ-γ-Ｇｌｕ；γ-Ｇｌｕ-δ-ｈＧｌｕ；α-ｈＧｌｕ-α-Ａｓｐ；α-ｈＧｌｕ-α-Ｇｌｕ；α-ｈＧｌｕ-α-ｈＧｌｕ；α-ｈＧｌｕ-β-Ａｓｐ；α-ｈＧｌｕ-γ-Ｇｌｕ；α-ｈＧｌｕ-δ-ｈＧｌｕ；δ-ｈＧｌｕ-α-Ａｓｐ；δ-ｈＧｌｕ-α-Ｇｌｕ；δ-ｈＧｌｕ-α-ｈＧｌｕ；δ-ｈＧｌｕ-β-Ａｓｐ；δ-ｈＧｌｕ-γ-Ｇｌｕ；及びδ-ｈＧｌｕ-δ-ｈＧｌｕからなる群から選択される、第３０ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１０６】
３２ａ．Ｘ１が-ＣＯ-((ＣＲ６Ｒ７)ｑ-ＮＲ-ＣＯ)１−４-であり、Ｒ６及びＲ７が互いに独立して、また各ｑ値も独立して、水素、-ＣＯＯＨ、又はＯＨとすることができ、ｑは１-６であり、Ｒは水素、-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＯＨ；-(ＣＨ２)１−６-ＣＯＮＨ２；-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ；-(ＣＨ２)１−６-ＰＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１―６-Ｏ-ＳＯ３Ｈ２；-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２；Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル；Ｃ２−６-アルキニル、又はアリーレンであり、アリーレンが-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、Ｒ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルである、第１９ａ項に記載のインスリン誘導体。
３３ａ．ｑ＝１及びｑ＝２であると、Ｒ６及びＲ７はＨであり；ｑ＝３であると、Ｒ６はＨであり、Ｒ７は-ＣＯＯＨであり；ｑは３であり、Ｒは水素である、第３２ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１０７】
３４ａ．Ｘ２が結合である、第１９ａ−３４ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
３５ａ．Ｘ２が：
・-ＣＯ-
・-ＣＯＣＨ(Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２Ｎ(ＣＨ２ＣＨ２Ｒ８)-；
・-ＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ２Ｒ８)-；
で、Ｒ８がＣＯＯＨ又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＮＨ-ＣＯ)１−４-；
・-(ＣＯ-(ＣＨ２)２−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４−；
・-(ＣＯ-(ＣＲ９Ｒ１０)１−６-ＣＯ-ＮＨ)１−４-；
で、Ｒ９及びＲ１０が互いに独立して、Ｈ、-ＣＯＯＨ、-(ＣＨ２)１−６ＣＯＯＨ、ＣＨ３、-(ＣＨ２)１−６ＣＨ３又はＣＯＮＨ２とすることができるもの；又は
・結合；
である、第１９ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１０８】
３６ａ．Ｘ２が、-(ＣＯ-(ＣＨ２)２-ＮＨ-ＣＯ)１-、又は-(ＣＯ-(ＣＨ２)３-ＮＨ-ＣＯ)１-からなる群から選択される、第３５ａ項に記載のインスリン誘導体。
３７ａ．Ｘ２が-ＣＯ-又は-ＣＯＣＨ(ＣＯＯＨ)-である、第３５ａ項に記載のインスリン誘導体。
３８ａ．Ｘ１が結合である、第３５ａ−３７ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１０９】
３９ａ．Ｗがフェニレンである、第１９ａ−３８ａ項に記載のインスリン誘導体。
４０ａ．Ｗが、窒素、酸素又は硫黄を有する５-７員の複素環系である、第３９ａ項に記載のインスリン誘導体。
４１ａ．Ｗが、少なくとも一の酸素又は硫黄を有する５員の複素環系である、第４０ａ項に記載のインスリン誘導体。
４２ａ．Ｗが結合である、第１９ａ−３８ａ項に記載のインスリン誘導体。
４３ａ．ｍが０、１又は２である、第１９ａ−４２ａ項に記載のインスリン誘導体。
４４ａ．Ｘが-ＣＯ-又は結合であり、Ｙが結合である、第１９ａ−４３ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１０】
４５ａ．Ｑが、式-(ＣＨ２)ｓ１-Ｑ１-(ＣＨ２)ｓ２-Ｑ２-(ＣＨ２)ｓ３-Ｑ３-(ＣＨ２)ｓ４-Ｑ４-(ＣＨ２)ｓ５-の鎖であり；ここでＱ１-Ｑ３が互いに独立して、Ｏ、Ｓ、Ｓ(Ｏ)、Ｓ(Ｏ)２、Ｐ(Ｏ２Ｈ)、-Ｏ-Ｐ(Ｏ２Ｈ)-Ｏ-、ＮＨ、ＮＲ２；-Ｎ(ＣＯＲ２)-、又は結合とすることができ；Ｒ２が水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニルであり；
Ｑ４が：
・-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；
・炭素が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいヘテロアリーレンで、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能なもの；
・窒素が、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルからなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいヘテロアリーレン；又は
・多環式系；
とすることができ、ここで、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４は互いに独立して、ｓ１、ｓ２、ｓ３及びｓ４の合計が４〜２２の範囲になるような、０又は１〜１０の整数とすることができ；ｓ５は０又は１〜３の整数であり、但し；Ｑ１、Ｑ２及びＱ３は互いに結合を形成しなくてもよく、ｓ１、ｓ２及びｓ３が０又は１であるならば、いずれの-ＣＨ２-も、次の原子：Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰの２つに結合できない、第１９ａ−４４ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１１１】
４６ａ．Ｑ４がアリーレンである、第４５ａ項に記載のインスリン誘導体。
４７ａ．Ｑ４がＣ６Ｈ４である、第４５ａ又は４６ａ項に記載のインスリン誘導体。
４８ａ．Ｑ４が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよいアリーレンであり、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり；Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能である、第４５ａ又は４６ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１２】
４９ａ．Ｑ４がヘテロアリーレンである、第４５ａ項に記載のインスリン誘導体。
５０ａ．ヘテロアリーレン基が、窒素、硫黄又は酸素を有する、第４９ａ項に記載のインスリン誘導体。
５１ａ．ヘテロアリーレンが窒素を有し、該窒素が、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２―６-アルケニル又はＣ２−６-アルキニルからなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよい、第５０ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１３】
５２ａ．ヘテロアリーレンが炭素を有し、該炭素が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能である、第５０ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１４】
５３ａ．Ｑ４が５-７員環系である、第４５ａ−４６ａ項に記載のインスリン誘導体。
５４ａ．Ｑ４が５員環系である、第５３ａ項に記載のインスリン誘導体。
５５ａ．Ｑ４が多環式系である、第４５ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１５】
５６ａ．多環式系が、-ＣＯＯＨ、-ＣＨ３、-ＳＯ３Ｈ、-(ＣＨ２)１−６-ＳＯ３Ｈ、-ＰＯ３Ｈ２、-(ＣＨ２)１−６-Ｏ-ＰＯ３Ｈ２、テトラゾ-５-リル、又はＣＯＮＨ２、Ｃ１―６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、Ｃ２−６-アルキニル、水素、ハロゲン、-ＣＮ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＦ３、-ＳＣＦ３、-ＮＯ２、-ＯＲ２、-ＮＲ２Ｒ３、-ＳＲ２、-ＮＲ２Ｓ(Ｏ)２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)２ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-Ｓ(Ｏ)Ｒ２、-Ｓ(Ｏ)２Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＮＲ２Ｃ(Ｏ)Ｒ３、-ＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＮＲ２Ｒ３、-ＯＣ(Ｏ)Ｒ２、-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)Ｒ２、-Ｃ(Ｏ)Ｒ２、又は-Ｃ(Ｏ)ＯＲ２、又は-ＯＣＨ２Ｃ(Ｏ)ＯＲ２からなる群から選択される１又は２の基で置換されていてもよく、ここでＲ２及びＲ３が独立して、水素、Ｃ１−６-アルキル、Ｃ２−６-アルケニル、又はＣ２−６-アルキニルであり、Ｒ２及びＲ３が同じ窒素原子に結合している場合、該窒素原子と共同して、窒素、酸素及び硫黄から選択される１又は２のさらなるヘテロ原子を有していてもよく、１又は２の二重結合を有していてもよい、３ないし８員の複素環を形成可能である、第５５ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１６】
５７ａ．Ｑ４が二環系である、第５５ａ−５６ａに記載のインスリン誘導体。
５８ａ．二環系が２つの５-７員環系を含む、第５７ａ項に記載のインスリン誘導体。
５９ａ．二環系が１つの６員環と１つの５員環を含む、第５７ａ−５８ａ項に記載のインスリン誘導体。
６０ａ．５員環が窒素、酸素又は硫黄を有する、第５９ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１７】
６１ａ．Ｑ１、Ｑ２及びＱ３が全て結合である、第４５ａ−６０ａ項に記載のインスリン誘導体。
６２ａ．ｓ２、ｓ３及びｓ４が１である、第４５ａ−６１ａ項に記載のインスリン誘導体。
６３ａ．ｓ１が５、６、７又は８であり、ｓ５が０、１又は２である、第４５ａ−６２ａ項に記載のインスリン誘導体。
６４ａ．ｓ５が０である、第４５ａ−６３ａ項に記載のインスリン誘導体。
６５ａ．ｓ５が２である、第４５ａ−６３ａ項に記載のインスリン誘導体。
６６ａ．Ｑ１及びＱ２が酸素である、第４５ａ−６０ａ及び６２ａ−６５ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１８】
６７ａ．Ｚが-ＣＯＯＨである、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
６８ａ．Ｚが-ＣＯ-Ａｓｐである、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
６９ａ．Ｚが-ＣＯ-Ｇｌｕである、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
７０ａ．Ｚが-ＣＯ-Ｇｌｙである、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
７１ａ．Ｚが-ＣＯ-Ｓａｒである、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
７２ａ．Ｚが-ＣＨ(ＣＯＯＨ)２である、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
７３ａ．Ｚが-Ｎ(ＣＨ２ＣＯＯＨ)２である、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
７４ａ．Ｚが-ＳＯ３Ｈである、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
７５ａ．Ｚが-ＰＯ３Ｈ２である、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
７６ａ．ＺがＯ-ＳＯ３Ｈである、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
７７ａ．ＺがＯ-ＰＯ３Ｈ２である、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
７８ａ．Ｚが-テトラゾ-５-リルである、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１１９】
７９ａ．Ｚが６員及び５員環からなる二環系であり、Ｚが６員環を介して結合している、第１９ａ−６６ａ項に記載のインスリン誘導体。
８０ａ．５員環が、６員環と共有しない、３つの窒素を有している、第７９ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１２０】
８１ａ．親インスリンがヒトインスリン又はブタインスリンである、第１ａ−８０ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８２ａ．親インスリンがインスリンアナログである、第１ａ−８０ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８３ａ．親インスリンのＢ３０位にあるアミノ酸残基がＬｙｓであるか、又は欠失している、第８１ａ−８２ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８４ａ．親インスリンがｄｅｓＢ３０ヒトインスリンである、第８３ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１２１】
８５ａ．親インスリンのＢ１位にあるアミノ酸残基が欠失している、第８１ａ−８４ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８６ａ．親インスリンのＡ２１位にあるアミノ酸残基がＧｌｙ又はＡｓｎである、第８１−８５項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８７ａ．親インスリンのＢ３位にあるアミノ酸残基がＬｙｓである、第８１ａ−８６ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８８ａ．親インスリンのＢ２８位にあるアミノ酸残基がＡｓｐ又はＬｙｓである、第８１ａ−８７ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
８９ａ．親インスリンのＢ２９位にあるアミノ酸残基がＰｒｏ又はＴｈｒである、第８１ａ−８８ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
【０１２２】
９０ａ．親インスリンがＡｓｐＢ２８ヒトインスリンである、第８８ａ項に記載のインスリン誘導体。
９１ａ．親インスリンが、ＧｌｙＡ２１ヒトインスリン、又はＧｌｙＡ２１ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、又はＧｌｙＡ２１ＡｒｇＢ３１ＡｒｇＢ３２ヒトインスリンである、第８６ａ項に記載のインスリン誘導体。
９２ａ．親インスリンがＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンである、第８７ａ項に記載のインスリン誘導体。
９３ａ．親インスリンがＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリンである、第８８ａ−８９ａ項に記載のインスリン誘導体。
９４ａ．親インスリンがＴｈｒＢ２９ＬｙｓＢ３０ヒトインスリンである、第８３ａ及び８９ａ項に記載のインスリン誘導体。
【０１２３】
９５ａ．それぞれのインスリン六量体が、２つの亜鉛イオン、３つの亜鉛イオン、４つの亜鉛イオン、５つの亜鉛イオン又は６つの亜鉛イオンに結合している、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体の亜鉛錯体。
【０１２４】
９６ａ．薬学的に許容可能な担体と共に、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体を治療的有効量含有する、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための薬学的組成物。
９７ａ．薬学的に許容可能な担体と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体を治療的有効量含有する、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための薬学的組成物。
【０１２５】
９８ａ．薬学的に許容可能な担体と共に、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための方法。
９９ａ．薬学的に許容可能な担体と共に、速攻で作用を開始するインスリン又はインスリンアナログと混合して、上述した項の何れかに記載のインスリン誘導体を治療的有効量、患者に投与することを含む、治療が必要な患者における糖尿病を治療するための方法。
１００ａ．糖尿病の肺処置用である、第９８ａ又は９９ａ項に記載の方法。
【０１２６】
１０１ａ．第１ａ−９５ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体と、ＡｓｐＢ２８ヒトインスリン；ＬｙｓＢ２８ＰｒｏＢ２９ヒトインスリン及びＬｙｓＢ３ＧｌｕＢ２９ヒトインスリンからなる群から選択される速攻型インスリンアナログとの混合物。
１０２ａ．ＮεＢ２９-(１２-(４-カルボキシフェニル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(−１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイル-ガンマ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(１２-(３-カルボキシフェニル)ドデカノイル-ガンマ-Ｇｌｕ ｄｅｓＢ３０インスリン、
ＮεＢ２９-(９-[４-(２-カルボキシエチル)フェニル]ノナノイル)-ガンマ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン、又は
ＮεＢ２９-(４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリル)ｄｅｓＢ３０インスリン、
からなる群から選択される、第１ａ−９５ａ項の何れかに記載のインスリン誘導体。
１０３ａ．実施例に記載するようなインスリン誘導体。
本発明を以下の実施例によりさらに例証するが、本発明の範囲を制限すると解釈されるものではない。
【実施例】
【０１２７】
実施例
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ａ)：
次の機器を使用した：
Hewlett Packard series 1100 G1312A Binポンプ
Hewlett Packard series 1100 カラムコンパートメント
Hewlett Packard series 1100 G1315A DADダイオードアレイ検出器
Hewlett Packard series 1100 MSD
Sedere75蒸発光散乱検出器
機器をHP Chemstationソフトウェアで制御した。
HPLCポンプを：
Ａ：水中に０．０５％のＴＦＡ
Ｂ：アセトニトリルに０．０５％のＴＦＡ
を含む２つの溶離液貯蔵所に接続した。
アセトニトリル勾配を用いて溶離されるカラムに、適量(好ましくは１μｌ)のサンプルを注入することによって、分析を４０℃で実施する。
使用されるＨＰＬＣ条件、検出器の設定及び質量分析器の設定を以下に付与する：
カラム：Waters Xterra MS C-18 X 3 mm id 5 mm
勾配：  ５％-９５％のアセトニトリル、線形、２．７ｍｌ／分で、３分間
検出    ２１０ｎｍ(ＤＡＤからのアナログ出力)
ＥＬＳ(ＥＬＳからのアナログ出力)
ＤＡＤ後、流れを分岐させてＥＬＳに約１ｍｌ／分、ＭＳに０．５ｍｌ／分とした。
【０１２８】
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：
この方法は、勾配を５０-９９％のアセトニトリルにすることを除けば、ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ａ)と同様である。
【０１２９】
ＨＰＬＣ-ＭＳ法(方法Ｃ)：
次の機器を使用する：
Hewlett Packard series 1100 G1312A Binポンプ
Hewlett Packard series 1100 G13 15A DADダイオードアレイ検出器
Sciex 3000トリプルクアドロ極質量分析計
Gilson 215 マイクロインジェクター
Sedex55蒸発光散乱検出器
ポンプ及び検出器は、Macintosh G3コンピュータで動作する、MassChrom1.1.1ソフトウェアにより制御される。Gilson Unipoint Version 1.90はオートインジェクターを制御する。
ＨＰＬＣポンプを：
Ａ：水中に０．０１％のＴＦＡ
Ｂ：アセトニトリルに０．０１％のＴＦＡ
を含む２つの溶離液貯蔵所に接続する。
アセトニトリル勾配を用いて溶離されるカラムに、適量(好ましくは１０μｌ)のサンプルを注入することによって、分析を室温で実施する。カラムからの溶離液をＵＶ検出器を通してフロースプリッターに向け、API3000スペクトロメーターのAPI Turboイオンスプレーインターフェイスまで約３０μｌ／分(１／５０)で通した。残余の１．４８ｍｌ／分(４９／５０)はＥＬＳ検出器に通す。
使用されるＨＰＬＣ条件、検出器の設定及び質量分析器の設定を以下の表にまとめる。
【表１】
2009536178.tif 000016
【０１３０】
ＨＰＬＣ(方法Ａ)：
バッファーＡ：１０ｍＭのＴｒｉｓ、１５ｍＭの(ＮＨ４)２ＳＯ４、４ＮのＨ２ＳＯ４を用いてｐＨ７．３に調節、２０％ｖ／ｖのアセトニトリル
バッファーＢ：８０％ｖ／ｖのアセトニトリル
流量：１．５ｍｌ／分
勾配：０-２０分は１０-５０％のＢ
カラム：Phenomerex, Jupiter 4.6mm x 15 mm, C4, 5μ, 300Å
カラム温度：４０℃
【０１３１】
実施例１
ＮεＢ２９-(１２-(４-カルボキシフェニル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン
【化１５】
2009536178.tif 000017
一般的手順(Ａ)：カルボン酸のtert-ブチル保護
工程１：４-ヨード安息香酸tert-ブチルエステル
４-ヨード安息香酸(１０ｇ、４０．３ｍｍｏｌ)を無水トルエン(１００ｍｌ、分子ふるい上で乾燥)に溶解させた。溶液を、窒素流下、７０℃で加熱した。トルエン(２５ｍｌ)にＮ,Ｎ-ジメチルホルムアミド-ジ-tert-ブチルアセタール(２４．６ｇ、１２１ｍｍｏｌ)が入った溶液を、約３０分以上かけて添加した。反応体を１６時間加熱した。加熱ユニットが機能しなくなった時点で、反応体を７０℃から室温まで冷却した。溶液を７０℃まで加熱し、５時間混合した。サンプルを真空下で濃縮し、ＡｃＯＥｔ(４００ｍｌ)を添加した。ついで、溶液を１：１の飽和ＮａＨＣＯ３／水(１５０ｍｌ)、及び飽和ＮａＨＣＯ３、水及び飽和ＮａＣｌ(各７５ｍｌ)で洗浄した。有機相を乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、真空下で濃縮したところ、淡褐色の油が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ａ)  ｍ／ｚ：３２７(Ｍ＋２３)。 Ｒｔ＝２．４３分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．７７(ｄ，２Ｈ)、７．６９(ｄ，２Ｈ)、１．５８(ｓ，９Ｈ)。
【０１３２】
一般的手順(Ｂ)：カルボン酸のメチルエステル保護
工程２：１２-ブロモドデカン酸メチルエステル
１２-ブロモドデカン酸(１０ｇ、３５．８ｍｍｏｌ)を、メタノール(６０ｍｌ)及びトルエン(１８０ｍｌ)と共に攪拌した。トリメチルオルトホルマート(３８ｇ、３５８ｍｍｏｌ)とＡｍｂｅｒｌｙｓｔ Ａ-１５(約１ｇ)を添加した。反応体を１６時間混合した。加熱ユニットが機能しなくなった時点で、反応体を７０℃から室温に冷却した。溶液を７０℃まで加熱し、２４時間混合した。ＴＬＣ(２：１  ヘプタン／ＡｃＯＥｔ)は、反応が完了したことを示した。トリメチルオルトホルマート(３８ｇ、３５８ｍｍｏｌ)及びＡｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ-１５(１．４ｇ)を添加し、溶液を７０℃で１６時間攪拌した。サンプルを真空下で濃縮したところ、褐色の油(９．８７ｇ)が生じた。０．０９トールで真空蒸留したところ、無色の油の２つのフラクション(１０９-１１７℃、６．９５ｇ；１１７-１２９℃、１．１７ｇ)が生じた。これらを組合せ、ＡｃＯＥｔ(１００ｍｌ)に溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３(２ｘ４０ｍｌ)で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空下で濃縮した。油を２０：１のＡｃＯＥｔ／ＴＥＡ(１０ｍｌ)に溶解させ、シリカ床(３ｃｍｘ７．５ｃｍ直径)に添加した。カラムをＡｃＯＥｔ／ＴＥＡ  ２０：１(２００ｍｌ)で溶出させ、濾液を真空下で濃縮した。油をＡｃＯＥｔ(１００ｍｌ)に溶解させ、１ＮのＨＣｌ(２×４０ｍｌ)で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空で濃縮したところ、無色の油(７．５２ｇ、収率７２％)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：２９３及び２９５(Ｍ、Ｍ＋２)、Ｒｔ＝１．６４分
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ３．６７(ｓ，３Ｈ)、３．４１(ｔ，２Ｈ)、２．３０(ｔ，２Ｈ)、１．８０-１．９０(ｍ，２Ｈ)、１．５２-１．７１(ｍ，２Ｈ)、１．３７-１．５２(ｍ，２Ｈ)、１．２８(ｓ，１２Ｈ)。
【０１３３】
一般的手順(Ｃ)：Ｂｒ-Ｉ交換
工程３：１２-ヨードドデカン酸メチルエステル
１２-ブロモドデカン酸メチルエステル(５．６５ｇ、１９．３ｍｍｏｌ)をアセトン(５０ｍｌ)に溶解させた。ヨウ化ナトリウム(１４．４ｇ、９６ｍｍｏｌ)を添加し、反応体を窒素下で２０時間還流した。サンプルを真空下で濃縮した。水(１００ｍｌ)を添加し、混合物をＡｃＯＥｔ(２ｘ１００ｍｌ)で抽出した。有機抽出物をプールし、水プラス少量の飽和ＮａＣｌ及び飽和ＮａＣｌ(各１００ｍｌ)で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濃縮したところ、淡黄色の油(６．３７ｇ、９７％)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：３４１(Ｍ＋１)、Ｒｔ＝１．８８分
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ３．６７(ｓ，３Ｈ)、３．１９(ｔ，２Ｈ)、２．３０(ｔ，２Ｈ)、１．７７-１．８７(ｍ，２Ｈ)、１．５３-１．６８(ｍ，２Ｈ)、１．１８-１．４５(ｍ，１４Ｈ)。
【０１３４】
一般的手順(Ｄ)：Ｃ-Ｃカップリング
工程４：４-(１１-メトキシカルボニルウンデシル)安息香酸-tert-ブチルエステル
使用前に、全てのガラス製品を乾燥させた。分子ふるい上でＴＨＦを乾燥させた。ＬｉＣｌを、１５０℃で１時間乾燥させ、ついで密閉ボトルに保管した。全ての反応溶液を窒素下で作製し、シリンジを介して溶液を移動した。４-ヨード安息香酸-tert-ブチルエステル(３ｇ、９．９ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(７．５ｍｌ)に溶解させ、−２０ないし−３０℃まで冷却した。イソプロピルマグネシウムクロリド(１０．９ｍｍｏｌ、ＴＨＦに２Ｍ)を５分以上かけて添加し、溶液を３０分攪拌した。７．５ｍｌのＴＨＦにＣｕＣＮ(０．９７ｇ、１０．９ｍｍｏｌ)とＬｉＣｌ(０．９２ｇ、２１．７ｍｍｏｌ)が入った溶液を添加した。反応体を冷浴から外し、室温で放置した。１５分後、亜リン酸トリメチル(０．６２ｍｌ)を添加した。５分攪拌した後、ＴＨＦ(５ｍｌ)の溶液に、-ヨードドデカン酸メチルエステル(２．６９ｇ、７．８９ｍｍｏｌ)を添加した。１６時間攪拌した後、反応体を飽和ＮＨ４Ｃｌ(６ｍｌ)でクエンチした。水(１００ｍｌ)を添加し、溶液をＡｃＯＥｔ(３ｘ１００ｍｌ)で抽出した。有機抽出物をプールし、水(１００ｍｌ)(幾ばくかの飽和ＮａＣｌ及びＭｅＯＨを添加し、相分離を補助した)及び飽和ＮａＣｌ(１００ｍｌ)で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空で濃縮したところ、二相残基(５．８５ｇ)が生じた。残留物をＡｃＯＥｔに溶解させ、ガラスフィルター(７，５ｃｍ直径ｘ３ｃｍ)において、シリカ床に滴下した。２００ｍｌのＡｃＯＥｔをシリカを通して洗浄し、濾液を濃縮したところ、残留物が生じた。これをＤＣＭ(１０ｍｌ)に溶解させ、フラッシュクロマトグラフィー(１５ｃｍｘ４０ｍｍ、９：１のヘプタン／ＡｃＯＥｔで溶出)で精製した。関連するフラクションをプールし、真空下で濃縮した。これを９：１のヘプタン／ＡｃＯＥｔ(７ｍｌ)に溶解させ、フラッシュクロマトグラフィー(１５ｃｍｘ４０ｍｍ、９：１のヘプタン／ＡｃＯＥｔで溶出)で再度精製したところ、無色の油(１８５ｍｇ)が生じた。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．９０(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、３．６６(ｓ，３Ｈ)、２．６４(ｔ，２Ｈ)、２．３０(ｔ，２Ｈ)、１．５３-１．６８(ｍ，１３Ｈ)、１．１２-１．３７(ｍ，１４Ｈ)。
【０１３５】
一般的手順(Ｅ)：鹸化
工程５：４-(１１-メトキシカルボニルウンデシル)安息香酸
４-(１１-メトキシカルボニルウンデシル)安息香酸-tert-ブチルエステル(１８５ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(２ｍｌ)に溶解させ、１ＮのＮａＯＨ(０．４９７ｍｍｏｌ)を１分以上かけて添加した。混合物を室温で１６時間攪拌した。ＡｃＯＥｔ(５０ｍｌ)を添加し、溶液を５％のＡｃＯＨ(２ｘ２５ｍｌ)で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空で濃縮したところ生成物(１５３ｍｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ａ)：ｍ／ｚ：３９９(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．８６分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．９０(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、２．６４(ｔ，２Ｈ)、２．３５(ｔ，２Ｈ)、１．５４-１．７０(ｍ，１３Ｈ)、１．１５−１．４０(ｍ，１６Ｈ(１４Ｈ理論値))。
【０１３６】
一般的手順(Ｆ)：ＥＤＡＣを用いたアミド形成
工程６：(Ｓ)-２-[１２-(４-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ドデカノイルアミノ]ペンタン二酸-５-ベンジルエステル-１-tert-ブチルエステル
４-(１１-メトキシカルボニルウンデシル)安息香酸(１５３ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ)をＤＭＦ(３ｍｌ)に溶解させた。ＨＯＢｔ(６０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ)、ＥＤＡＣ(８６ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ)及びＤＩＥＡ(１７２ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ)を添加し、溶液を窒素下、室温で３０分攪拌した。Ｈ-Ｇｌｕ-(ＯＢｚｌ)-ＯｔＢｕ塩化水素(１４１ｍｂ、０．４３ｍｍｏｌ)を溶液に添加し、室温で１６時間攪拌した。サンプルを真空下で濃縮した。ＡｃＯＥｔ(５０ｍｌ)を添加し、溶液を、水で１回、５％のＡｃＯＨ及び飽和ＮａＨＣＯ３(各２５ｍｌ)で２回洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空下で濃縮したところ、わずかに黄色がかった油(２４９ｍｇ)が生じた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー(７．５ｃｍｘ４０ｍｍ、１：２のＡｃＯＥｔ／ヘプタンで溶出)で精製したところ、無色の残留物(１７７ｍｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：６５２(Ｍ＋１)、Ｒｔ＝２．６８分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．８９(ｄ，２Ｈ)、７．３５(ｓ，５Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、６．０６(ｄ，１Ｈ)、５．１１(ｓ，２Ｈ)、４．５２(ｍ，１Ｈ)、２．６４(ｔ，２Ｈ)、２．３０-２．５４(ｍ，２Ｈ)、２．１３-２．２７(ｍ，３Ｈ)、１．９０-２．０３(ｍ，１Ｈ)、１．５３-１．６７(ｍ，１９Ｈ(１３Ｈ＋水)、１．４６(ｓ，９Ｈ)、１．１８-１．３６(ｍ，１４Ｈ)。
【０１３７】
一般的手順(Ｇ)：ベンジルエステルの除去
工程７：(Ｓ)-２-[１２-(４-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ドデカノイルアミノ]ペンタン二酸-１-tert-ブチルエステル
(Ｓ)-２-[１２-(４-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ドデカノイルアミノ]ペンタン二酸-５−ベンジルエステル-１-tert-ブチルエステル(１７５ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ)をＴＨＦに溶解させ、窒素下に配した。１０％のパラジウム炭(約２０ｍｇ)を添加し、フラスコから液体を抜き、窒素を３回充填した。フラスコに、水素を満たしたバルーンを取り付け、室温で一晩乾燥させた。セライトを通して溶液を濾過し、ＴＨＦで洗浄した。濾液を真空下で濃縮したところ、油(０．１５ｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：５８４(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝１．９５分。
【０１３８】
一般的手順(Ｈ)：カルボン酸のＨＳＴＵ活性化
工程８：(Ｓ)-２-[１２-(４-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ドデカノイルアミノ]ペンタン二酸-５-tert-ブチルエステル-１-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イル)エステル
(Ｓ)-２-[１２-(４-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ドデカノイルアミノ]ペンタン二酸-１-tert-ブチルエステル(１５８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(６ｍｌ)に溶解させた。ＤＩＥＡ(４８μｌ、０．２８ｍｍｏｌ)を添加し、溶液を氷浴に置いた。ＨＳＴＵ(１０１ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ)を添加し、溶液を１６時間攪拌し、ゆっくりと室温まで温めた。溶媒を真空下で除去し、残留物をＡｃＯＥｔ(２５ｍｌ)及び５％のＡｃＯＨ(１５ｍｌ)の間に分配させた。有機相を５％のＡｃＯＨ(２ｘ１５ｍｌ)及び飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、乾燥させ、真空下で濃縮したところ、油(０．１６ｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：６８１(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．１７分。
【０１３９】
一般的手順(Ｉ)：インスリンの修飾及び官能基の脱保護
工程９：Ｂ２９Ｎ(ｅｐｓ)-１２-(４-カルボキシフェニル)ドデカノイル-ガンマ-ＧｌｕｄｅｓＢ３０インスリン
１０ｍｌの丸底フラスコにおいて、Ｄｅｓ-Ｂ３０インスリン(１２６ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ)を、１００ｍＭのＮａ２ＣＯ３(１．５ｍｌ)及びアセトニトリル(１．５ｍｌ)を添加することによって溶解させた。(Ｓ)-２-[１２-(４-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ドデカノイルアミノ]ペンタン二酸-５-tert-ブチルエステル-１-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イル)エステル(１７ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ)を、アセトニトリル(７５０  μｌ)に添加し、最終溶液が５０：５０の１００ｍＭ  Ｎａ２ＣＯ３／アセトニトリルになるように、Ｎａ２ＣＯ３(７５０μｌ)を添加した。溶液を室温で１時間攪拌した。溶液を１５ｍｌの遠心分離用チューブに移し、Ｍｉｌｌｉ-Ｑ水(６ｍｌ)で洗浄した。溶液を氷上で冷却し、１ＮのＨＣｌを添加することにより、ｐＨを５．１に調節し、沈殿に至らしめた。チューブを１０℃で１０分、５０００ｒｐｍの遠心分離にかけた。溶媒を固形物からデカントした。固形物に９５：５のＴＦＡ／水(２．５ｍｌ)を添加した。溶液をＲＢ-フラスコに注ぎ、超９５：５のＴＦＡ／水(２．５ｍｌ)で洗浄した。溶液を室温で３０分攪拌し、真空下で濃縮した。ＤＣＭを添加し、２回除去し、フラスコを室温で真空下で乾燥させた。生成物を調製用ＨＰＬＣ(２ｃｍ直径、Ｃ１８カラム、アセトニトリル／水／０．０５％のＴＦＡ)により精製した。関連するフラクションをプールし(２つのバッチ)、水を用いて１：１に希釈した。溶液を氷上で冷却し、１ＮのＮａＯＨを用い約５のｐＨに調節することによって、沈殿を誘導した。サンプルを遠心分離(５０００ｒｐｍ、１０分、５℃)した。液体をデカントし、ペレットを凍結乾燥したところ、白色の固形物(２５．９ｍｇ＋６．７ｍｇ)が生じた。２５．９ｍｇを調製用ＨＰＬＣ(１ｃｍ直径、Ｃ４カラム、アセトニトリル／水／０．０５％のＴＦＡ)を使用してさらに精製したところ、白色の固形物(１３ｍｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ(方法Ａ)：Ｒｔ＝４．６２分。
ＭＡＬＤＩ-ＭＳ：(ＣＨＣＡ)ｍ／ｚ：６１４０(Ｍ＝６１３８)。
【０１４０】
実施例２
ＮεＢ２９-(−１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイル-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン
【化１６】
2009536178.tif 000018
工程１：１１-ヨードウンデカン酸メチルエステル
１１-ブロモウンデカン酸メチルエステル(２０．２ｇ、７２．３ｍｍｏｌ)をアセトン(２００ｍｌ)に溶解させた。ヨウ化ナトリウム(５４ｇ、３６１ｍｍｏｌ)を添加し、反応体を窒素下で１６時間還流した。室温まで冷却した後、塩を濾過した。濾液を真空下で濃縮し、水(２００ｍｌ)を添加した。相分離を助けるために、幾ばくかの飽和ＮａＣｌを添加したＡｃＯＥｔ(２ｘ１００ｍｌ)を用いて、溶液を抽出した。有機抽出物をプールし、水(１００ｍｌ)＋少量の飽和ＮａＣｌ、及び飽和ＮａＣｌ(５０ｍｌ)で洗浄した。ＭｇＳＯ４上で乾燥させた。溶液は赤-オレンジの色をしていた。小さじ３杯の活性炭を添加した。混合後、セライト床を通して、溶液を濾過した。濾液を真空下で濃縮したところ、淡黄色の油(２０．９６ｇ、８９％)が生じた。．
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：３２７(Ｍ＋１)、Ｒｔ＝１．５９分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ３．６７(ｓ，３Ｈ)、３．１９(ｔ，２Ｈ)、２．３０(ｔ，２Ｈ)、１．７４-１．８９(ｍ，２Ｈ)、１．５３-１．７０(ｍ，２Ｈ)、１．３４-１．４６(ｍ，２Ｈ)、１．２８(ｂｒ，１０Ｈ)。
【０１４１】
一般的手順(Ｄ２)：ピペリジン検査を伴うＣ-Ｃカップリング
工程２：４-(１０-メトキシカルボニルデシル)安息香酸-tert-ブチルエステル
使用前に、全てのガラス製品を乾燥させた。分子ふるい上でＴＨＦを乾燥させた。ＬｉＣｌを、１５０℃で１時間乾燥させ、ついで密閉ボトルに保管した。全ての反応溶液を窒素下で作製し、シリンジを介して溶液を移動した。４-ヨード安息香酸-tert-ブチルエステル(１．２ｇ、３．９５ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(３ｍｌ)に溶解させ、−３０℃まで冷却した。イソプロピルマグネシウムクロリド(４．３４ｍｍｏｌ、ＴＨＦに２Ｍ)を５分以上かけて添加し、溶液を−１８℃〜−２５℃の温度で１時間攪拌した。溶液を−２２℃まで冷却し、ついで、ＴＨＦ(４．２ｍｌ)にＣｕＣＮ(０．３８９ｇ、４．３４ｍｍｏｌ)とＬｉＣｌ(０．３６８ｇ、８．６８ｍｍｏｌ)の混合物が入ったものを添加した。反応容器を冷却から外し、放置して室温まで温めた(約１０分)。亜リン酸トリメチル(０．９５ｍｌ)を添加し、室温で５分攪拌した後、ＴＨＦ(３ｍｌ)に１１-ヨード-ウンデカン酸メチルエステル(１．０ｇ、３．１６ｍｍｏｌ)が入った溶液を添加した。溶液を室温で１６時間混合した。飽和ＮＨ４Ｃｌ(３ｍｌ)を添加し、溶液を水(６０ｍｌ)に注いだ。溶液をＡｃＯＥｔ(３ｘ３５ｍｌ)で抽出した。有機抽出物をプールし、相分離を助けるために、幾ばくかの飽和ＮａＣｌを使用し、水(３０ｍｌ)を用いて洗浄した。溶媒を真空下で除去したところ、二相残基が生じた。ＡｃＯＥｔ(約２ｍｌ)を添加し、フラスコをゆっくりと回転させた。高粘度の白色残留物の全てが溶解したわけではなかった。溶解した部分をシリカ(５０ｇ)カラムに添加し、ＡｃＯＥｔ：ヘプタン  １：１１で溶出させた。適切なフラクションを真空下で濃縮したところ、油(１．２５ｇ)が生じた。油をアセトン(３０ｍＬ)に溶解させ、ピペリジン(１ｍＬ)を添加した。ＮａＩ(０．８ｇ)を添加し、混合物を攪拌して、１６時間還流した。混合物を真空下で濃縮し、ＡｃＯＥｔ(５０ｍＬ)と１ＮのＨＣｌ(２５ｍｌ)の間に分配させた。有機相を１ＮのＨＣｌ(２ｘ２５ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空下で濃縮したところ、無色の油(１．１ｇ)が生じた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー(溶離液：ＡｃＯＥｔ：ヘプタン  １：１１、１５０ｇのシリカ)で精製したところ、無色の油(０．７２ｇ、６１％)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：３９９(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．４６分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．９０(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、３．６６(ｓ，３Ｈ)、２．６４(ｔ，２Ｈ)、２．３０(ｔ，２Ｈ)、１．４８-１．７０(ｍ，１３Ｈ)、１．２７(ｂｒ、１２Ｈ)。
実施例１に類似した様式で残りの工程を実施した。
【０１４２】
工程３：４-(１０-カルボキシデシル)安息香酸-tert-ブチルエステル
一般的手順(Ｅ)に類似した様式で化合物を調製したところ、白色の固形物(０．６８ｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：３８５(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．０２分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．９０(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、２．６４(ｔ，２Ｈ)、２．３４(ｔ，２Ｈ)、１．５３-１．７１(ｍ，１３Ｈ)、１．２８(ｂｒ，１２Ｈ)。
【０１４３】
工程４：(Ｓ)-２-[１１-(４-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ウンデカノイルアミノ]ペンタン二酸-５-ベンジルエステル-１-tert-ブチルエステル：
一般的手順(Ｆ)に類似した様式で化合物を調製したところ、無色の油(３０３ｍｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：６６０(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．４４分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．８９(ｄ，２Ｈ)、７．３５(ｍ，５Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、６．０５(ｄ，１Ｈ)、５．１１(ｓ，２Ｈ)、４．５２(ｍ，１Ｈ)、２．６３(ｔ，２Ｈ)、２．３０-２．５３(ｍ，２Ｈ)、２．１２-２．２６(ｍ，３Ｈ)、１．８９-２．０３(ｍ，１Ｈ)、１．５２-１．６７(ｍ，１３Ｈ)、１．４６(ｓ，９Ｈ)、１．２６(ｂｒ，１２Ｈ)。
【０１４４】
工程５：(Ｓ)-２-[１１-(４-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ウンデカノイルアミノ]ペンタン二酸-１-tert-ブチルエステル：
一般的手順(Ｇ)に類似した様式で化合物を調製したところ、無色の油(２６０ｍｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：５７０(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝１．７１分。
【０１４５】
工程６：(Ｓ)-２-[１１-(４-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ウンデカノイルアミノ]ペンタン二酸-５-tert-ブチルエステル-１-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イル)エステル：
一般的手順(Ｈ)に類似した様式で化合物を調製した。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：６６７(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝１．９３分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．８９(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、６．２０(ｄ，１Ｈ)、４．６０(ｍ，１Ｈ)、２．８４(ｓ，４Ｈ)、２．６７-２．７８(ｍ，１Ｈ)、２．５６-２．６７(ｍ，３Ｈ)、２．２６-２．４０(ｍ，１Ｈ)、２．２１(ｔ，２Ｈ)、２．０５-２．１５(ｍ，１Ｈ)、１．５４-１．６７(ｍ，１３Ｈ)、１．４８(ｓ，９Ｈ)、１．２６(ｂｒ，１４Ｈ，理論値．１２Ｈ＋ＡｃＯＥｔ)
【０１４６】
工程７：ＮεＢ２９-(１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイル-ガンマ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン
一般的手順(Ｉ)に類似した様式で化合物を調製した。
ＨＰＬＣ(方法Ａ)：Ｒｔ＝６．１９分。
ＭＡＬＤＩ-ＭＳ：(ＣＨＣＡ)ｍ／ｚ：６１３２(Ｍ＝６１２４，参照標準(Ｍ＝５７０６)はｍ／ｚ＝５７１２を示した)。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｃ)：ｍ／ｚ：１５３２．４((Ｍ＋４)／４＝１５３２)、Ｒｔ＝３．４４分。
【０１４７】
実施例３
ＮεＢ２９-(１２-(３-カルボキシフェニル)ドデカノイル-γ-ＧｌｕｄｅｓＢ３０インスリン
【化１７】
2009536178.tif 000019
工程１：３-ヨード安息香酸tert-ブチルエステル：
一般的手順(Ａ)に類似した様式で化合物を調製したところ、淡褐色の油(１．８ｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ａ)：ｍ／ｚ：３２７(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．４２分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ８．３１(ｓ，１Ｈ)、７．９５(ｄ，１Ｈ)、７．８５(ｄ，１Ｈ)、７．１６(ｔ，１Ｈ)、１．５９(ｓ，９Ｈ)。
【０１４８】
工程２：３-(１１-メトキシカルボニルウンデシル)安息香酸-tert-ブチルエステル
一般的手順(Ｄ)に類似した様式で化合物を調製した。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：４１３(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．５４分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．７８-７．８２(ｍ，２Ｈ)、７．２８-７．３６(ｍ，２Ｈ)、３．６６(ｓ，３Ｈ)、２．６３(ｔ，２Ｈ)、２．３０(ｔ，２Ｈ)、１．５８-１．７１(ｍ，１３Ｈ)、１．２１-１．３７(ｍ，１４Ｈ)。
【０１４９】
工程３：３-(１１-カルボキシ-ウンデシル)安息香酸-tert-ブチルエステル
一般的手順(Ｅ)に類似した様式で化合物を調製したところ、２９０ｍｇが生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：３９９(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝１．８９分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．７３-７．８８(ｍ，２Ｈ)、７．２７-７．３８(ｍ，２Ｈ)、２．６４(ｔ，２Ｈ)、２．３５(ｔ，２Ｈ)、１．５４-１．７０(ｍ，１３Ｈ)、１．２０-１．４１(ｍ，１４Ｈ)。
【０１５０】
工程４：(Ｓ)-２-[１２-(３-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ドデカノイルアミノ]ペンタン二酸-５-ベンジルエステル-１-tert-ブチルエステル
一般的手順(Ｆ)に類似した様式で化合物を調製したところ、４００ｍｇが生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：６５２(Ｍ＋１)、Ｒｔ＝２．５６分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．７４-７．８５(ｍ，２Ｈ)、７．２７-７．４１(ｍ，７Ｈ)、６．０６(ｄ，１Ｈ)、５．１１(ｓ，２Ｈ)、４．４５-４．５８(ｍ，１Ｈ)、２．６３(ｔ，２Ｈ)、２．３０-２．５５(ｍ，２Ｈ)、２．１２-２．２７(ｍ，３Ｈ)、１．８９-２．０４(ｍ，１Ｈ)、１．５２-１．６７(ｍ，１３Ｈ)、１．４６(ｓ，９Ｈ)、１．１５-１．３７(ｍ，１４Ｈ)。
【０１５１】
工程５：(Ｓ)-２-[１２-(３-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ドデカノイルアミノ]ペンタン二酸-１-tert-ブチルエステル
一般的手順(Ｇ)に類似した様式で化合物を調製したところ、３７０ｍｇが生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：５８４(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝１．８６分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．７７-７．８３(ｍ，２Ｈ)、７．２８-７．３７(ｍ，２Ｈ)、６．２５(ｄ，１Ｈ)、４．４５-４．６３(ｍ，１Ｈ)、２．６３(ｔ，２Ｈ)、２．３２-２．５４(ｍ，２Ｈ)、２．１４-２．３２(ｍ，３Ｈ)、１．８７-１．９７(ｍ，１Ｈ)、１．５６-１．６８(ｍ，１３Ｈ)、１．４７(ｓ，９Ｈ)、１．１９-１．３７(ｍ，１４Ｈ)。
【０１５２】
工程６：(Ｓ)-２-[１２-(３-tert-ブトキシカルボニルフェニル)ドデカノイルアミノ]ペンタン二酸-５-tert-ブチルエステル-１-(２,５-ジオキソ−イロリジン-１-イル)エステル
一般的手順(Ｈ)に類似した様式で化合物を調製したところ、３９０ｍｇが生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：６８１(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．０６分。
【０１５３】
工程７：ＮεＢ２９-(１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイル-ガンマ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン
一般的手順(Ｉ)に類似した様式で化合物を調製したところ、５１ｍｇが生じた。
ＨＰＬＣ(方法Ａ)：Ｒｔ＝６．２５分。
ＭＡＬＤＩ-ＭＳ：(ＣＨＣＡ)ｍ／ｚ：６１４２(Ｍ＝６１３８，参照標準(Ｍ＝５７０６)はｍ／ｚ＝５７１１を示した)。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｃ)：ｍ／ｚ：１５３５．７((Ｍ＋４)／４＝１５３５．５)、Ｒｔ＝３．２２分。
【０１５４】
実施例４
ＮεＢ２９-(９−[４-(２-カルボキシエチル)フェニル]ノナノイル)-γ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン
【化１８】
2009536178.tif 000020
工程１：３-(４-ヨードフェニル)プロピオン酸-tert-ブチルエステル
一般的手順(Ａ)に類似した様式で化合物を調製したところ、３．９７ｇが生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ａ)：ｍ／ｚ：３５５(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．３９分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．６０(ｄ，２Ｈ)、６．９６(ｄ，２Ｈ)、２．８４(ｔ，２Ｈ)、２．５０(ｔ，２Ｈ)、１．４１(ｓ，９Ｈ)。
【０１５５】
工程２：９-ブロモノナン酸メチルエステル
一般的手順(Ｂ)に類似した様式で化合物を調製したところ、無色の油(６．５６ｇ)が生じた。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ３．６７(ｓ，３Ｈ)、３．４０(ｔ，２Ｈ)、２．３１(ｔ，２Ｈ)、１．７８-１．９３(ｍ，２Ｈ)、１．５６-１．７０(ｍ，２Ｈ)、１．３６-１．５０(ｍ，２Ｈ)、１．２６-１．３６(ｍ，６Ｈ)。
【０１５６】
工程３：９-ヨード−ノナン酸メチルエステル
一般的手順(Ｃ)に類似した様式で化合物を調製したところ、油(５．４８ｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：２９９(Ｍ＋１)、Ｒｔ＝１．１９分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ３．６７(ｓ，３Ｈ)、３．１８(ｔ，２Ｈ)、２．３１(ｔ，２Ｈ)、１．７３-１．９３(ｍ，２Ｈ)、１．５４-１．７２(ｍ，２Ｈ)、１．２４-１．４７(ｍ，８Ｈ)。
【０１５７】
工程４：９-[４-(２-tert-ブトキシカルボニルエチル)フェニル]ノナン酸メチルエステル
一般的手順(Ｄ２)に類似した様式で化合物を調製したところ、５９０ｍｇが生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：３９９(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．１０分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．０９(ｍ，４Ｈ)、３．６６(ｓ，３Ｈ)、２．８７(ｔ，２Ｈ)、２．４７-２．６０(ｍ，４Ｈ)、２．２９(ｔ，２Ｈ)、１．５０-１．６８(ｍ，４Ｈ)、１．４２(ｓ，９Ｈ)、１．２６-１．３６(ｓ-ｂｒ，８Ｈ)。
【０１５８】
工程５：９-[４-(２-tert-ブトキシカルボニルエチル)フェニル]ノナン酸
一般的手順(Ｅ)に類似した様式で化合物を調製したところ、白色の残留物(２７０ｍｇ)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：３８５(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝１．４４分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．０９(ｍ，４Ｈ)、２．８７(ｔ，２Ｈ)、２．４７-２．６１(ｍ，４Ｈ)、２．３４(ｔ，２Ｈ)、１．４９-１．７３(ｍ，４Ｈ)、１．４１(ｓ，９Ｈ)、１．２３-１．３７(ｓ-ｂｒ，８Ｈ)。
【０１５９】
工程６：(Ｓ)-２-{９-[４-(２-tert-ブトキシカルボニルエチル)フェニル]ノナノイルアミノ}ペンタン二酸-５-ベンジルエステル-１-tert-ブチルエステル
一般的手順(Ｆ)に類似した様式で化合物を調製したところ、３４０ｍｇが生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：６６０(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．２８分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、３００ＭＨｚ)δ７．２９-７．４２(ｍ，５Ｈ)、７．０９(ｍ，４Ｈ)、６．０６(ｄ，１Ｈ)、５．１１(ｓ，２Ｈ)、４．４５-４．６１(ｍ，１Ｈ)、２．８７(ｔ，２Ｈ)、２．３０-２．６１(ｍ，６Ｈ)、２．１０-２．２８(ｍ，３Ｈ)、１．８８-２．０３(ｍ，１Ｈ)、１．４９-１．７４(ｍ，５Ｈ，理論値．４Ｈ＋水)、１．４６(ｓ，９Ｈ)、１．４２(ｓ，９Ｈ)、１．２２-１．３６(ｓ-ｂｒ，８Ｈ)。
【０１６０】
工程７：(Ｓ)-２-{９-[４-(２-tert-ブトキシカルボニルエチル)フェニル]ノナノイルアミノ}ペンタン二酸-１-tert-ブチルエステル
一般的手順(Ｇ)に類似した様式で化合物を調製したところ、３３０ｍｇが生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：５４７(Ｍ＋１)、Ｒｔ＝１．４６分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．０９(ｍ，４Ｈ)、６．２５(ｄ，１Ｈ)、４．４９-４．５８(ｍ，１Ｈ)、２．８７(ｔ，２Ｈ)、２．４７-２．６０(ｍ，４Ｈ)、２．３０-２．４７(ｍ，２Ｈ)、２．１４-２．２６(ｍ，３Ｈ)、１．８２-１．９９(ｍ，１Ｈ)、１．５１-１．６８(ｍ，４Ｈ)、１．４７(ｓ，９Ｈ)、１．４１(ｓ，９Ｈ)、１．２５-１．３６(ｓ-ｂｒ，８Ｈ)。
【０１６１】
工程８：(Ｓ)-２-{９-[４-(２-tert-ブトキシカルボニルエチル)フェニル]ノナノイルアミノ}ペンタン二酸-１-tert-ブチルエステル-５-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イル)エステル
一般的手順(Ｈ)に類似した様式で化合物を調製したところ、２７０ｍｇが生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：６６７(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝１．７１分。
【０１６２】
工程９：ＮεＢ２９-(９-[４-(２-カルボキシエチル)フェニル]ノナノイル)-ガンマ-Ｇｌｕ)ｄｅｓＢ３０インスリン  
一般的手順(Ｉ)に類似した様式で化合物を調製したところ、２６ｍｇが生じた。
ＨＰＬＣ(方法Ａ)：Ｒｔ＝５．８０分。
ＭＡＬＤＩ-ＭＳ：(ＣＨＣＡ)ｍ／ｚ：６１２９(Ｍ  ＝６１２４，参照標準(Ｍ＝５７０６)はｍ／ｚ＝５７１１を示した)。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｃ)：ｍ／ｚ：１５３１．８((Ｍ＋４)／４＝１５３２)、Ｒｔ＝２．９６分。
【０１６３】
実施例５
ＮεＢ２９-(４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリル)ｄｅｓＢ３０インスリン
【化１９】
2009536178.tif 000021
工程１：４-[１０-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イルオキシカルボニル)デシル]安息香酸-tert-ブチルエステル
ＨＳＴＵの代わりにＴＳＴＵを使用した以外は、一般的手順(Ｈ)に類似した様式で化合物を調製した。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：４８２(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝２．２２分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．８９(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、２．７６-２．９３(ｍ，４Ｈ)、２．５４-２．６８(ｍ，２Ｈ)、１．６７-１．８１(Ｍ，２Ｈ)、１．５２-１．６６(ｍ，１１Ｈ)、１．３５-１．４３(Ｍ，２Ｈ)、１．１９-１．３５(ｂｒ，１０Ｈ)。
【０１６４】
工程２：４-[１０-(３-カルボキシ-プロピルカルバモイル)デシル]安息香酸-tert-ブチルエステル
４-[１０-(２,５-ジオキソピロリジン-１-イルオキシカルボニル)デシル]安息香酸-tert-ブチルエステル(３００ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ)を、ＤＭＦ(３ｍｌ)及び４-アミノ酪酸(６７ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ)に溶解させた。混合物を窒素下で１６時間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、ＡｃＯＥｔ(３５ｍｌ)を添加した。溶液を、０．２ＮのＨＣｌ及び水(各１５ｍｌ)で洗浄した。飽和ＮａＨＣＯ３を有機相に添加した(意図しない)。ＤＣＭ(５０ｍｌ)を添加した。幾ばくかの有機相を除去し、ＤＣＭ(１００ｍｌ)を水相に添加し、一晩放置した。混合物を氷上で冷却し、４ＮのＨＣｌを用いて、ｐＨを１．９に調節した。有機相を単離し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空下で濃縮したところ、油(２２０ｍｇ、収率７６％)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｃ)：ｍ／ｚ：４７０(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝５．７４分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．８９(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、５．７９(ｂｒ，１Ｈ)、３．２７-３．４０(ｍ，２Ｈ)、２．６４(ｔ，２Ｈ)、２．４０(ｔ，２Ｈ)、２．１８(ｔ，２Ｈ)、１．７８-１．９１(ｍ，２Ｈ)、１．５１-１．６１(ｍ，１３Ｈ)、１．３５-１．４３(Ｍ，２Ｈ)、１．１７-１．３６(ｂｒ，１２Ｈ)。
【０１６５】
工程３：４-{１０-[３-(２,５-ジオキソ-ピロリジン-１-イルオキシカルボニル)プロピルカルバモイル]デシル}安息香酸-tert-ブチルエステル
ＨＳＴＵの代わりにＴＳＴＵを使用した以外は、一般的手順(Ｈ)に類似した様式で化合物を調製した。沈殿(ＤＣＭ／ヘプタン)により、白色の結晶(１８０ｍｇ、収率７０％)が生じた。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｂ)：ｍ／ｚ：５６８(Ｍ＋２３)、Ｒｔ＝１．６０分。
１Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ)δ７．８９(ｄ，２Ｈ)、７．２１(ｄ，２Ｈ)、５．８３(ｂｒ，１Ｈ)、３．３０-３．４３(ｍ，２Ｈ)、２．８５(ｂｒ，４Ｈ)、２．５７-２．７３(ｍ，４Ｈ)、２．１５(ｔ，２Ｈ)、１．９２-２．０７(ｍ，２Ｈ)、１．５６-１．６４(ｍ，１３Ｈ)、１．１８-１．３６(ｂｒ，１２Ｈ)。
【０１６６】
工程４：ＮεＢ２９-(４-[１１-(４-カルボキシフェニル)ウンデカノイルアミノ]ブチリル)ｄｅｓＢ３０インスリン
一般的手順(Ｉ)に類似した様式で化合物を調製したところ、３０ｍｇが生じた。
ＨＰＬＣ(方法Ａ)：Ｒｔ＝７．８８分。
ＭＡＬＤＩ-ＭＳ：(ＣＨＣＡ)ｍ／ｚ：６０６７(Ｍ＝６０８０，参照標準(Ｍ＝５７０６)はＭ-１３を示した)。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｃ)：ｍ／ｚ：１５２０．９((Ｍ＋４)／４＝１５２１)、Ｒｔ＝３．５４分。
【０１６７】
実施例６
ＮεＢ２９-[１２-(５-カルボキシチオフェン-２-イル)ドデカノイル]ｄｅｓＢ３０インスリン
【化２０】
2009536178.tif 000022
工程１：５-メチル-チオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステルの合成
【化２１】
2009536178.tif 000023
５-メチルチオフェン-２-カルボン酸(２ｇ、１４ｍｍｏｌ)に、トルエン(６０ｍＬ)を添加し、懸濁液を８０℃まで加熱した。Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド-ジtert-ブチルアセタール(１６．８ｍＬ、７０．３ｍｍｏｌ)を添加し、混合物を８０℃で一晩加熱した。混合物を真空下で、全容量が約１０ｍＬになるまで約濃縮し、ジエチルエーテル(１００ｍＬ)を添加した。有機相を水(２ｘ５０ｍｌ)で洗浄し、続いてＮａＨＣＯ３水(１０％、２ｘ５０ｍＬ)で洗浄した。有機相を乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、真空で溶媒を除去したところ、１．３ｇの５-メチル-チオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステルが生じた。
１Ｈ ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：δ７．５２(ｄ，１Ｈ)、６．７３(ｄ，１Ｈ)、２．５０(ｓ，３Ｈ)、３．６０(ｑ，２Ｈ)、１．５６(ｓ，９Ｈ)。
【０１６８】
工程２：５-ブロモメチルチオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステルの合成
【化２２】
2009536178.tif 000024
５-メチルチオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステル(１０．８ｇ、５４．５ｍｍｏｌ)に、シクロヘキサン(１００ｍＬ)とＮ-ブロモスクインイミド(９．７ｇ、５４．５ｍｍｏｌ)を添加し、還流にて一晩加熱した。懸濁液をアミノ酸エチル(２００ｍＬ)に添加し、有機溶液を水(４ｘ１００ｍＬ)で洗浄した。溶媒を真空で除去したところ、１４．９ｇの５-ブロモメチルチオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステルが生じた。
１Ｈ ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：δ７．６１(ｄ，１Ｈ)、７．０２(ｄ，１Ｈ)、４．６６(ｓ，２Ｈ)、１．６７(ｓ，９Ｈ)。
【０１６９】
工程３：(５-tert-ブトキシカルボニル-チオフェン-２-イルメチル)-トリフェニルホスホニウムブロミドの合成
【化２３】
2009536178.tif 000025
５-ブロモメチルチオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステル(１４．９ｍｍｏｌ、４３．８ｍｍｏｌ)に、トルエン(３００ｍＬ)及びトリフェニルホスフィン(１４．１ｇ、５３．８ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を７０℃で一晩加熱した。溶媒を真空で除去したところ、(５-tert-ブトキシカルボニル-チオフェン-２-イルメチル)-トリフェニルホスホニウムブロミドが付与された。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｃ)：ｍ／ｚ＝４５９；Ｒｔ＝４．６５分。
【０１７０】
工程４：１２-オキソ-ドデカン酸メチルエステルの合成
【化２４】
2009536178.tif 000026
１２-ヒドロキシデカン酸(１５．２５ｇ、０．０７ｍｏｌ)をメタノール(７００ｍＬ)に溶解させ、ＨＣｌ水(１Ｎ、１０ｍｌ)を添加し、混合物を窒素下で１６時間攪拌し、ＮａＯＨ水(１Ｎ)を用いて、ｐＨを７．２に調節した。溶媒を真空で除去し、残った化合物を酢酸エチル(１５０ｍｌ)とＮａＨＣＯ３水(５％、１５０ｍｌ)の間に分離させた。有機相を単離し、溶媒を真空で除去したところ、固体状の化合物として１２-ヒドロキシデカン酸メチルエステルが付与された。塩化オキサリル(６．５ｍＬ、７５ｍｍｏｌ)をＤＣＭ(１６０ｍＬ)と混合し、ドライアイス／アセトンを用いて−６０ｏＣまで冷却した。ＤＭＳＯ(１０．７ｍＬ、１５１ｍｍｏｌ)をＤＣＭ(２０ｍＬ)と混合し、１０分以上かけて滴下した。１２-ヒドロキシデカン酸メチルエステルをＤＣＭ(５０ｍＬ)に溶解させ、４５分以上かけて滴下した。トリエチルアミン(４７．８ｍＬ、３４３ｍｍｏｌ)を滴下し、沈殿を観察した。トリエチルアミンを添加した後、反応混合物を、室温に達するまで放置した。反応混合物を水(２００ｍｌ)で洗浄し、水相をＤＣＭ(３ｘ２００ｍｌ)で洗浄し、全ての有機相を収集し、飽和ＮａＣｌ水(３００ｍＬ)で洗浄し、乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、溶媒を真空で除去した。残った油を、酢酸エチル／ヘプタン(２０：８０)を用いて溶出させるシリカにおいて精製したところ、１１．７ｇの１２-オキソ-ドデカン酸メチルエステルが生じた。
１Ｈ ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：δ９．７６(ｓ，１Ｈ)、３．６６(ｓ，３Ｈ)、２．４２(ｔ，２Ｈ)、２．３０(ｔ，２Ｈ)、１．６６-１．５４(ｍ，４Ｈ)、１．３７-１,２４(ｂｒ  ｓ，１４Ｈ)。
【０１７１】
工程５：５-(１２-メトキシカルボニル-ドデシル)-チオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステルの合成
【化２５】
2009536178.tif 000027
１２-オキソ-ドデンカン酸メチルエステル(１４．５ｇ、６３．４ｍｍｏｌ)及び(５-tert-ブトキシカルボニル-チオフェン-２-イルメチル)-トリフェニルホスホニウムブロミド(２９．１ｇ、６３．４ｍｍｏｌ)を、ＤＭＦ(３５０ｍＬ)に溶解させた。ＤＢＵを添加し、混合物を８０ｏＣで３５分、加熱した。反応混合物を放置して室温まで冷却し、ジエチルエーテル(３ｘ５００ｍｌ)と水(２０００ｍＬ)の間に分離させた。有機相を収集し、水(１ｘ５００ｍｌ)で洗浄した。有機相を乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、溶媒を真空で除去した。残った粗物質をヘプタン(３００ｍＬ)に添加し、３０分攪拌した、濾過し、溶媒を真空で除去したところ、１３．６ｇの粗物質である、５-(１２-メトキシカルボニル-ドデシ-１-エニル)チオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステルのＥ／Ｚ混合物が生じた。この混合物をメタノール(２００ｍＬ)に溶解させた。２ｇの１０％パラジウム炭(水で５０％湿潤)を添加し、混合物を１０バールの水素雰囲気下で、９０分攪拌し、濾過し、溶媒を真空で除去したところ、１１．６ｇの５-(１２-メトキシカルボニル-ドデシル)-チオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステル)が生じた。
１Ｈ ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３)：δ７．５４(ｄ，１Ｈ)、６．７４(ｄ，１Ｈ)、３．６６(ｓ，３Ｈ)、２．８０(ｔ，２Ｈ)、２．３０(ｔ，２Ｈ)、１．６３(ｍ，４Ｈ)、１．５６(ｓ，９Ｈ)、１．２７(ｍ，１６Ｈ)。
【０１７２】
工程６：５-(１２-カルボキシドデシル)-チオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステルの合成
【化２６】
2009536178.tif 000028
５-(１２-メトキシカルボニル-ドデシル)-チオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステル(７５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ)を、メタノール(２ｍＬ)に溶解させた。水にＮａＯＨが入った２０％溶液(０．３６ｍＬ)を添加し、混合物を室温で１時間攪拌した。水(１０ｍＬ)を添加し、混合物を、水にＮａＨＳＯ４が入った１０％溶液、２ｍＬを添加することにより酸性化させた。遠心分離により沈殿物を単離させ、真空で乾燥させたところ、５-(１２-カルボキシドデシル)-チオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステルが生じ、これは、任意のさらなる精製をすることなく、次の工程で使用される、いくつかの出発物質で汚染されている。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｃ)：ｍ／ｚ＝３９６；Ｒｔ＝６．７７分。
【０１７３】
工程７：Ｂ２９Ｎ(ｅｓｐ)[１２-(５-カルボキシチオフェン-２-イル)ドデカノイル]ｄｅｓＢ３０インスリンの合成
５-(１２-カルボキシドデシル)-チオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステルをＴＳＴＵにより活性化させ、ＤｅｓＢ３０ヒトインスリンにおいてアシル化させ、続いてＴＦＡを用いて、tert-ブチル保護基を除去し、実施例７に記載されているものと同様の手順を使用し、続いて精製を行った。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｃ)：ｍ／ｚ＝１５０８(ｍ／４)；Ｒｔ＝４．８８分。
【０１７４】
実施例７
ＮεＢ２９-[１２-(５-カルボキシチオフェン-２-イル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ]ｄｅｓＢ３０インスリン
【化２７】
2009536178.tif 000029
工程１：(Ｓ)-２-[１３-(５-tert-ブトキシカルボニルチオフェン-２-イル)-トリデカノイルアミノ]-ペンタン二酸-１-tert-ブチルエステルの合成
【化２８】
2009536178.tif 000030
５-(１２-カルボキシドデシル)-チオフェン-２-カルボン酸-tert-ブチルエステル(３１ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ)を、窒素下、室温で０．５時間、ＴＨＦ(１．３ｍＬ)にＴＳＴＵ(２８．２ｍｇ、０．０９４ｍｍｏｌ)及びＤＩＰＥＡ(０．０１６ｍＬ、０．０９４ｍｍｏｌ)が入ったもので処理した。溶媒を真空で除去し、混合物をＮＭＰ(１ｍＬ)及びＨ-Ｇｌｕ-ＯｔＢｕ(３１．３ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ)及びＤＩＰＥＡ(０．０２７ｍＬ)に添加した。混合物を室温で一晩攪拌した。混合物をジエチルエーテル(１０ｍＬ)とＮａＨＳＯ４の１０％水(２ｘ１０ｍｌ)の間に分離させ、有機相を単離し、溶媒を真空で除去したところ、次の工程で任意のさらなる精製をすることのない、粗(Ｓ)-２-[１３-(５-tert-ブトキシカルボニルチオフェン-２-イル)−トリデカノイルアミノ]-ペンタン二酸-１-tert-ブチルエステルが付与された。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｃ)：ｍ／ｚ＝５８２；Ｒｔ＝８．１分。
【０１７５】
工程２：ＮεＢ２９-[１２-(５-カルボキシチオフェン-２-イル)ドデカノイル-γ-Ｇｌｕ]ｄｅｓＢ３０インスリンの合成
ヒトＤｅｓＢ３０インスリン(２９４ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ)をＤＭＳＯ(３．５ｍＬ)に溶解させた。トリエチルアミン(０．０７１ｍＬ、０．５１ｍｍｏｌ)を添加した。  (Ｓ)-２-[１３-(５-tert-ブトキシカルボニルチオフェン-２-イル)-トリデカノイルアミノ]-ペンタン二酸-１-tert-ブチルエステル(４５．４ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ)を、上述にて記載したようにＴＳＴＵを用いて活性化させた。ＤＭＳＯ(０．５ｍＬ)に溶解させ、インスリン溶液に添加した。この混合物を室温で３０分、注意深く攪拌した。氷浴を用いて冷却した(溶液は凍結)。８ｍＬの水を添加し、凍結していた混合物が溶解するまで、溶液を放置した。１ＮのＨＣｌ水を用いて、ｐＨを５．３に調節し、遠心分離により沈殿物を単離した。単離した化合物を、９７．５％のＴＦＡと２．５％のチオフェンの混合物を用いて処理し、ジエチルエーテル(５０ｍＬ)に注いだ。粗生成物を濾過により単離し、上述にて記載したようにして精製した。
ＨＰＬＣ-ＭＳ(方法Ｃ)：ｍ／ｚ＝１５４９(ｍ／４)；１２３２(ｍ／５)Ｒｔ＝３．５分。
【０１７６】
実施例８：
疎水性度、レセプター親和性、アルブミン親和性及び自己結合特性
本発明のインスリン誘導体の自己結合特性の分析
大きいが可溶性の錯体における自己結合性についての、本発明のインスリン誘導体の能力を、ＳＥＣ(サイズ排除クロマトグラフィー)を使用して分析する：
カラム：SuperoseＴＭ 6 PC 3.2/30、CV=2.4ml
(Amerham Biosciences)
温度：３７℃
ＳＥＣバッファー：１４０ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＴｒｉｓＨＣｌ、０．０１％の                    ＮａＮ３、ｐＨ７．５
注入容量：２０μｌ
流量：０．０５ｍｌ／分
実施時間：６０分及び追加の１００分の平衡
【０１７７】
この分析用に、本発明のインスリン誘導体は、０．６ｍＭの誘導体、２．１Ｚｎ２＋／六量体、１６ｍＭのフェノール、７ｍＭのホスファート、ｐＨ７．８からなる溶液である。ついで、誘導体の保持時間を、次の標準分子の保持時間と比較する：
標準体Ｉ：  ＨＳＡ＋ＨＳＡ二量体(６６．４ｋＤａ＋１３３ｋＤａ)
Ｃｏ(ＩＩＩ)インスリン六量体(３５．０ｋＤａ)
Ｘ２インスリン単量体(５．９ｋＤａ) 
標準体ＩＩ：ブルーデキストラン(１．５ＭＤａ)
チログロブリン(６６９ｋＤａ)
フェリチン(４４０ｋＤａ)
アルドラーゼ(１５８ｋＤａ)
オボアルブミン(４４．５ｋＤａ)
リボヌクレアーゼ(１３．７ｋＤａ)
【０１７８】
次の等式を使用し、誘導体についてのＫａｖを決定する：
Ｋａｖ＝(ｔ−ｔ０)／(Ｖｔ／(ｆ＋ｔｄ−ｔ０))
ここで、ｔは付与されるピークに対する保持時間であり、ｔ０はブルーデキストランに対する保持時間であり、Ｖｔは全カラム容量(ここでは２．４ｍｌ)であり、ｆは流量(ここでは０．０４ｍｌ／分)であり、及びｔｄは、システムにおいてカラムのないブルーデキストランに対する保持時間である。
Ｋａｖ値は誘導体の自己結合性の度合いを示し、すなわち、Ｃｏ(ＩＩＩ)インスリン六量体及びＸ２インスリン単量体に対するＫａｖに類似して大きなＫａｖであることは、大きな自己結合性錯体を形成するための誘導体の傾向が低いか又は無いことを示し、これに対し、Ｋａｖが０に近い程非常に小さいか又は負であるということは、大きな溶解性錯体において自己結合する誘導体の傾向が大きいことを示す。
【０１７９】
本発明のインスリン誘導体における疎水性度データ
ヒトインスリンに対する、本発明のインスリン誘導体の疎水性度(疎水性指標)、ｋ'ｒｅｌを、溶離液としてＡ）１０％のアセトニトリルを含有する０．１Ｍのリン酸ナトリウムバッファー、ｐＨ７．３、及びＢ）水に５０％のアセトニトリルが入ったものの混合物を使用し、４０℃で定組成溶離させることにより、ＬｉＣｈｒｏｓｏｒｂ  ＲＰ１８(５μｍ、２５０ｘ４ｍｍ)ＨＰＬＣカラムにおいて測定した。２１４ｎｍでの溶出液のＵＶ吸収度を追跡することにより、溶出をモニターした。ボイド時間、ｔ０を０．１ｍＭの硝酸ナトリウムを注入することにより見出した。ヒトインスリンについての保持時間ｔヒトを、Ａ及びＢ溶液の間の比率を変えることにより、少なくとも２ｔ０に調節した。ｋ'ｒｅｌ＝(ｔ誘導体ｄ−ｔ０)／(ｔヒト−ｔ０)。本発明の多くのインスリン誘導体について見出されたｋ'ｒｅｌを、表１に付与する。
【０１８０】
ヒト血清アルブミン親和アッセイ
Ｍｉｎｉｌｅａｋ粒子に固定したヒト血清アルブミンに対する１２５Ｉ-ＴｙｒＡ１４-アナログの相対結合定数を２３℃で測定した(生理食塩水バッファーにおいてデテミル＝１)。
【０１８１】
【表２】
2009536178.tif 000031
ヒトインスリンに対する疎水性度：ｋ'ｒｅｌ＜１：＋＋＋、１-１０：＋＋、＞１０：＋(ＨＩ＝１)
ヒトインスリンに対するインスリンレセプター親和性：＜５％：＋、５-５０％：＋＋、＞５０％：＋＋＋
インスリンデテミルに対するヒト血清アルブミン親和性：＜０．５：＋、０．５-２：＋＋、＞２：＋＋＋
自己結合性：Ｋａｖ＜０．１：＋＋＋、Ｋａｖ＜０．５５：＋＋及びＫａｖ≧０．５５：＋
ヒト血清アルブミンに対してＫａｖ＝０．５５、ヒトインスリンＣｏ(ＩＩＩ)六量体に対してＫａｖ＝０．６３、
単量体インスリンアナログＸ２に対してＫａｖ＝０．７２。
ｎ.ａ.＝分析せず。
【０１８２】
薬理学的方法
アッセイ(Ｉ)
本発明のインスリンのインスリンレセプター結合性
ヒトインスリンレセプターに対する本発明のインスリンアナログの親和性を、ＳＰＡアッセイ(シンチレーション近接アッセイ)マイクロタイタープレート抗体捕捉アッセイにより測定した。ＳＰＡ-ＰＶＴ抗体-結合ビーズ、抗マウス試薬(Amersham Biosciences、カタログ番号 PRNQ0017)を、２５ｍｌの結合バッファー(１００ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．８；１００ｍＭの塩化ナトリウム、１０ｍＭのＭｇＳＯ４、０．０２５％のトゥイーン(Tween)-２０)と混合した。単一のPackard Optiplate(Packard No.6005190)用の試薬混合物は、２．４μｌの１：１５０００に希釈された精製組換えヒトインスリンレセプター−エクソン１１、１００μｌの試薬混合物当たり５０００ｃｐｍに相当するＡ１４Ｔｙｒ[１２５Ｉ]-ヒトインスリンの所定量の保存溶液、１２μｌの１：１０００に希釈されたＦ１２抗体、３ｍｌのＳＰＡ-ビーズ、及び全体を１２ｍｌにする結合バッファーからなる。ついで、全体で１００μｌ添加し、希釈群を適切なサンプルから作製する。ついで、希釈群に１００μｌの試薬混合物を加え、ゆっくりと振盪させつつ、サンプルを１６時間インキュベートした。ついで、１分間遠心分離することにより相分離させ、プレートをトップカウンターで計測した。GraphPad Prism 2.01(GraphPad Software, San Diego、CA)における非線状回帰アルゴリズムを使用し、結合データを適合させた。
【０１８３】
モノクローナルｍＩＲ抗体の調製
特定の抗体(Ｆ１２)を、モノクローナル技術により製造した：ＲＢＦマウスを、皮下的にＦＣＡに５０μｇの精製したｍＩＲを注射し、続いてＦＩＡに２０μｇのｍＩＲを２回注射することにより免疫化した。２５μｇのｍＩＲを用いて、静脈的に高レスポンダーマウスをブーストし、３日後に脾臓を摘出した。脾臓細胞を、骨髄腫キツネ細胞系を融合させた(Kohler, G & Milstein C.(1976), European J. Immunology, 6:511-19;Taggart RT ら(1983), Science 219:1228-30)。ｍＩＲ特異性ＥＬＩＳＡにおいて、上清を抗体生成についてスクリーニングした。正のウェルをクローンし、ウエスタンブロットで試験した。
【０１８４】
アッセイ(ＩＩ)
ヒトインスリンに対する本発明のインスリン誘導体の有効性
実験日、２３８-３８３ｇでオスのスプラーグドーリーラットを、クランプ実験に使用した。制御された周囲条件下、ラットは餌に自由に接近し、クランプ実験の前には一晩(３ｐｍから)、絶食させた。
【０１８５】
実験プロトコル：
外科手順の少なくとも１週間前に、ラットを動物施設に慣れさせた。クランプ実験の約１週間前、ハロタン麻酔下で、頸静脈(注入のため)及び頸動脈(血液のサンプリングのため)にタイゴンカテーテルを挿入し、露出させ、頸部の後ろに固定した。外科手術後、ラットにStreptocilin vet.(Boehringer Ingelheim；０．１５ｍｌ／ラット、筋肉内)を付与し、回復期間中、動物ケアユニット(２５℃)においた。無痛覚とするために、麻酔中にアノルフィン(Anorphin)(０．０６ｍｇ／ラット、皮下)を投与し、麻酔から十分に回復した(２-３時間)後、再度２日に１回、リマダイル(Rimadyl)(１．５ｍｇ／ｋｇ、皮下)を投与した。
【０１８６】
使用したクランプ技術を、(１)実験日の７ａｍに一晩(前日の３ｐｍから)絶食させたラットを計量し、サンプリング用シリンジ及び注入システム(Harvard 22 Basic pumps，Harvard，及びPerfectum Ｈypodermicｇlass syringe，Aldrich)につなぎ、ついで個々のクランプ用ゲージに配し、実験開始前の約４５分、そこで休ませた。全実験中、それらの通常の寝具上を、ラットは自由に動くことができ、水飲み場に自由に接近することもできる。血漿血糖値を１０分間隔で測定する、３０分の基本期間後、試験されるインスリン誘導体及びヒトインスリン(ラット当たり１回の投与レベル、投与レベル当たりｎ＝６-７)を、３００分、一定の速度で注入した(静脈内)。１０分の間隔で、血漿血糖値を測定し、正常血糖を維持するために、２０％水性グルコースの注入を調節した。再懸濁させた赤血球のサンプルを各ラットからプールし、頸動脈カテーテルを介して、約１／２ｍｌ容量を戻した。
【０１８７】
各実験日において、試験される個々のインスリン誘導体溶液及びヒトインスリン溶液のサンプルを、クランプ実験の前及び終了時に取り出し、ペプチド濃度をＨＰＬＣにより確認した。ラットインスリン及びＣ-ペプチド、並びに試験されるインスリン誘導体及びヒトインスリンの血漿濃度を、研究の前及び終了の時点で測定した。ペントバルビタール過剰投与を使用し、実験の終了時にラットを殺した。
【０１８８】
被験化合物及び用量：
試験されるインスリンを、５ｍＭのホスファート、ｐＨ７．７に９７μＭのインスリン誘導体を含有する保管溶液から希釈する。使用準備が整った溶液中の最終濃度は、０．４５μＭのインスリン誘導体、５ｍＭのホスファート、１００ｍＭの塩化ナトリウム、０．００７％のポリソルバート(polysorbate)２０であった。ｐＨは７．７であり、静脈内注入速度は１５及び２０ｐｍｏｌｘ分−１×ｋｇ-１であった。
参照化合物として使用されるヒトインスリンの保管溶液を、類似した媒体で処方し、６、１５又は３０ｐｍｏｌｘ分−１ｘｋｇ-１で静脈内注入した。
双方の保管溶液を−２０℃で保管し、使用前に４℃で一晩解凍した。それらを注入用シリンジに移す１５分前に、溶液を数回、ゆっくりと上下逆さまにする。
【０１８９】
アッセイ(ＩＩＩ)
本発明のインスリン誘導体のＴ５０％のブタにおける定量
Ｔ５０％は、試験されるインスリンのＡ１４Ｔｙｒ[１２５Ｉ]標識された誘導体の注射量の５０％が、外部γ計測器を用いて測定して、注射部位から消失した時間である。
実験用動物ケアの原則に従い、薬物動態及び薬力学的研究のために、特定の病原菌を持たないＬＹＹＤ、糖尿病ではないメスのブタ、デンマーク在来種、ヨークシャー及びデュロックの交雑種を使用した(Holmenlunｄ，Haarloev, Denmark)。ブタは意識があり、４-５ヶ月の年齢、７０-９５ｋｇの体重であった。実験前に動物を１８時間、一晩絶食させた。
１２５Ｉを有するＴｙｒＡ１４で標識されたインスリン誘導体の処方された調製物を、先に記載したように、ブタに皮下注射した(Ribel, U.,  Jorgensen, K, Brange, J, 及びHenriksen, U. The pig as a model for subcutaneous insulin absorption in man. Serrano-Rioｓ，M and Lefebvre, P. J.  89１-896. 1985. Amsterdam; New York; Oxforｄ，Elsevier Science Publishers. 1985 (Conference Proceeding))。
【０１９０】
実験の開始時に、本発明のインスリン誘導体(被験化合物)６０ｎｍｏｌ用量とインスリンデテミル６０ｎｍｏｌ用量(双方ともＴｙｒ Ａ１４において１２５Ｉ標識された)を、各ブタの頸部の２つの別々の部位に注射する。
皮下注射部位から放射性標識が消失するのを、伝統的な外部ガンマ-計測法の修正法を使用し、モニターする(Ribel, U. Subcutaneous absorption of insulin analogues. Berger, M. 及びGrieｓ，F. A. 70-77 (1993). Stuttgart; New York, Georg Thime Verlag (Conference Proceeding))。この修正法を用いると、コードレスポータブル装置を使用して、数日間、皮下沈着物から放射活性が消失するのを連続して測定することができる(Scancys Laboratorieteknik, Varlose, DK-3500, Denmark)。測定を１分間隔で実施し、計測された値をバックグラウンド活性に対して修正する。
【国際調査報告】
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