(57)【要約】  本発明は、癌の処置用の医薬を製造するための、少なくとも１種のさらなる抗癌剤と組み合わせたパラポックスウイルスオヴィスの使用に関する。本発明は、さらに、少なくとも１種のさらなる抗癌剤と組み合わせて癌を処置するための医薬を製造するためのパラポックスウイルスオヴィスの使用に関する。
2009517347.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌の処置用の医薬を製造するための、少なくとも１種のさらなる抗癌剤と組み合わせたパラポックスウイルスオヴィスの使用。
【請求項２】
少なくとも１種のさらなる抗癌剤と組み合わせて癌を処置するための医薬を製造するための、パラポックスウイルスオヴィスの使用。
【請求項３】
癌が、黒色腫、乳癌、前立腺癌、肺癌、結腸直腸癌、肝臓癌、膀胱癌、内分泌系の癌、神経系の癌、リンパ腫またはこれらの各々の原発性癌の転移性疾患である、請求項１および請求項２のいずれかに記載の使用。
【請求項４】
パラポックスウイルスオヴィスが、パラポックスウイルスオヴィス株Ｄ１７０１、ＮＺ−２、ＮＺ−７、ＮＺ−１０もしくはｏｒｆ−１１、または、これらの株の植え継ぎにより得られるパラポックスウイルスである、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の使用。
【請求項５】
パラポックスウイルスオヴィスが不活性化形態で存在する、請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の使用。
【請求項６】
抗癌剤が細胞傷害性物質である、請求項１ないし請求項５のいずれかに記載の使用。
【請求項７】
医薬が腫瘍の大きさまたは質量の低減をもたらす、請求項１ないし請求項６のいずれかに記載の使用。
【請求項８】
抗癌剤が、アスパラギナーゼ、ブレオマイシン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、コラスパーゼ、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エピルビシン、エトポシド、５−フルオロウラシル、ヘキサメチルメラミン、ヒドロキシウレア、イホスファミド、イリノテカン、ロイコボリン、ロムスチン、メクロレタミン、６−メルカプトプリン、メスナ、メトトレキサート、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、プロカルバジン、ラロキシフェン、ストレプトゾシン、タモキシフェン、チオグアニン、トポテカン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、アムノグルテチミド、Ｌ−アスパラギナーゼ、アザチオプリン、５−アザシチジンクラドリビン、ブスルファン、ジエチルスチルベストロール、２',２'−ジフルオロデオキシシチジン、ドセタキセル、エリスロヒドロキシノニルアデニン、エチニルエストラジオール、５−フルオロデオキシウリジン、５−フルオロデオキシウリジンモノホスフェート、リン酸フルダラビン、フルオキシメステロン、フルタミド、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、イダルビシン、インターフェロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、メルファラン、ミトタン、パクリタキセル、ペントスタチン、ＰＡＬＡ、プリカマイシン、セムスチン、テニポシド、プロピオン酸テストステロン、チオテパ、トリメチルメラミン、ウリジンおよびビノレルビン、オキサリプラチン、ゲムシタビン、カペシタビン、エポシロンおよびその天然または合成誘導体、トシツモマブ、トラベデクチンおよびテモゾロミド、トラスツズマブ、セツキシマブ、ベバシズマブ、ペルツズマブ、ＺＤ−１８３９（イレッサ）、ＯＳＩ−７７４（タルセバ）、ＣＩ−１０３３、ＧＷ−２０１６、ＣＰ−７２４、７１４、ＨＫＩ−２７２、ＥＫＢ−５６９、ＳＴＩ−５７１（グリーベック）、ＰＴＫ−７８７、ＳＵ−１１２４８、ＺＤ−６４７４、ＡＧ−１３７３６、ＫＲＮ−９５１、ＣＰ−５４７、６３２、ＣＰ−６７３、４５１およびソラフェニブからなる群から選択される、請求項１ないし請求項７のいずれかに記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
既存の処置と共に使用できる新規の癌の治療法の探索において、ウイルスを基礎とする治療法の使用には、いくらかの将来性がある（１）。ウイルスは細胞に感染するように進化し、しばしばこれらの細胞を様々なメカニズムで破壊する。今までに数々のウイルスが臨床で使用されてきたが、このアプローチは、毒性、無関係な組織の感染、免疫的副作用をこうむり、従って、放棄された（２）。しかしながら、組換えＤＮＡ技術は、ウイルスを治療的アプローチにおいて使用することに新しい可能性を与えた。現在の試みは、複製選択的ウイルスの使用である（１で概説される）。そのようなウイルスは、分裂している細胞において選択的に複製すべきである（３）。しかしながら、これらのウイルスは容易に細胞培養単層中に拡散し得るが、固体腫瘍内での拡散は、未解決な問題のままである（１）。
【０００２】
癌治療のための不活性化したパラポックスウイルスオヴィス（ovis）の使用は、以前に示唆された（４）。
【０００３】
インターフェロン−α（ＩＰＮ−α）は、以前に、古典的化学療法剤、即ち、シスプラチン、ビンクレシン（vinclesine）およびダカルバシン（dacarbacine）と共に調査された。生物製剤と細胞傷害性化学療法剤の組合せは、生物化学療法と呼ばれる。生物化学療法の後、応答率は６６％に上り、従って、細胞傷害性化学療法よりも優れている（５）。
【０００４】
癌治療における生物化学療法のための不活性化したウイルスの使用は、報告されていない。
【０００５】
上述の先行技術から明らかな通り、今までに、免疫調節剤としての不活性化されたウイルスおよび古典的細胞傷害性化学療法剤を癌の生物化学療法として使用する治療方法は開示されていない。
【０００６】
従って、本発明は、患者の腫瘍負荷を細胞傷害性化学療法と比較してより効果的に低減するのみならず、細胞傷害性化学療法の後に免疫系を再構成するための治療方法も提供する治療法を提供するという技術的課題に基づく。この治療方法は、望まれない副作用を殆どまたは全く有さないべきであり、また、現行の治療よりも優れているべきである。
【発明の開示】
【０００７】
本発明は、以下のものに関する：
１．癌の処置用の医薬を製造するための、少なくとも１種のさらなる抗癌剤と組み合わせたパラポックスウイルスオヴィスの使用。本発明は、さらに、少なくとも１種のさらなる抗癌剤と組み合わせて癌を処置するための医薬を製造するための、パラポックスウイルスオヴィスの使用に関する。本発明の他の態様は、癌に罹患した患者を処置するための、パラポックスウイルスオヴィスの使用に関し、ここで、少なくとも１種のさらなる抗癌剤を癌の処置のために該患者に与える。さらに、本発明は、パラポックスウイルスオヴィスを他の抗癌剤と組み合わせて投与する、癌の処置方法に関する。
【０００８】
本発明によると、パラポックスウイルスオヴィスは、パラポックスウイルスオヴィス株Ｄ１７０１、ＮＺ−２、ＮＺ−７、ＮＺ−１０またはｏｒｆ−１１であると理解される。
【０００９】
本発明は、また、ヒトおよび動物における癌に対する医薬の製造のための、抗癌治療において有効な物質と組み合わせた、例えばヒト細胞、例えば、ＷＩ−３８、ＭＲＣ−５、サル細胞、例えばＶｅｒｏ細胞、ウシ細胞、例えばＢＬ−Ｋ１３Ａ４７／ＲｅｇまたはＭＤＢＫ、およびウシ細胞、例えばＭＤＯＫなどの適当な細胞系を使用する植え継ぎまたは順応により得られる上述のパラポックスウイルスの誘導体の使用に関する。
【００１０】
加えて、本発明は、抗癌治療で有効な物質と組み合わせた、上述のパラポックスウイルスオヴィスおよびそれらの植え継ぎおよび順応変異体の一部またはフラグメントの使用に関する。本発明によると、ウイルスの一部またはフラグメントは、ウイルス全体またはその遺伝的核酸のゲノムまたはサブゲノムのフラグメントまたは他のウイルスの成分であると理解され、それは、線維芽細胞培養などの適当な系で、ワクシニアウイルスなどの適当なベクターを利用して発現される。好ましい変法では、本発明によるパラポックスウイルスオヴィスの一部またはフラグメントは、例えば濾過またはクロマトグラフィーなどの常套法により精製される。他の好ましい変異体では、本発明によるパラポックスウイルスオヴィスの一部またはフラグメントは、当業者に知られている方法による組換えにより産生される。本発明によると、癌は、増殖または静止している腫瘍に関連する全てのヒトおよび動物の疾患である。
本発明の好ましい変法では、抗癌剤は細胞傷害剤である。
【００１１】
２．本発明は、また、癌が、黒色腫、乳癌、前立腺癌、肺癌、結腸直腸癌、肝臓癌または１種またはそれ以上の原発性癌の転移性疾患である、第１項に従う使用に関する。
【００１２】
３．本発明は、また、パラポックスウイルスオヴィスが、パラポックスウイルスオヴィス株Ｄ１７０１、ＮＺ−２、ＮＺ−７、ＮＺ−１０またはｏｒｆ−１１である、第１項または第２項に従う使用に関する。本発明のさらなる変法では、パラポックスウイルスオヴィスは、これらの株の植え継ぎにより得られるパラポックスウイルスである。
【００１３】
４．本発明は、また、パラポックスウイルスオヴィスが不活性化形態で存在する第１項ないし第３項のいずれかに従う使用に関する。パラポックスウイルスの不活性化は、当業者に知られているウイルスの不活性化法により実行する。好ましい変法では、パラポックスウイルスオヴィスは、欧州特許番号ＥＰ−Ｂ１−０３１２８３９に記載の方法により不活性化される。
【００１４】
５．本発明は、また、癌の処置が、患者の腫瘍の大きさの低減をもたらす、即ち、医薬が、各々、腫瘍の大きさ(size)または質量(mass)の低減をもたらす、第１項ないし第４項のいずれかに従う使用に関する。
【００１５】
６．本発明は、また、癌の処置が、当業者に知られている方法により測定される原発性腫瘍の転移の数および大きさを低減する、第１項ないし第５項のいずれかに従う使用に関する。
【００１６】
７．本発明は、また、抗癌剤が、アスパラギナーゼ、ブレオマイシン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、コラスパーゼ（colaspase）、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エピルビシン、エトポシド、５−フルオロウラシル、ヘキサメチルメラミン、ヒドロキシウレア、イホスファミド、イリノテカン、ロイコボリン、ロムスチン、メクロレタミン、６−メルカプトプリン、メスナ、メトトレキサート（methothrexate）、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、プロカルバジン、ラロキシフェン、ストレプトゾシン、タモキシフェン、チオグアニン、トポテカン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、アムノグルテチミド（amnogluthethimide）、Ｌ−アスパラギナーゼ、アザチオプリン、５−アザシチジンクラドリビン、ブスルファン、ジエチルスチルベストロール、２',２'−ジフルオロデオキシシチジン、ドセタキセル、エリスロヒドロキシノニルアデニン（erythrohydroxynonyl adenine）、エチニルエストラジオール、５−フルオロデオキシウリジン、５−フルオロデオキシウリジンモノホスフェート、リン酸フルダラビン、フルオキシメステロン、フルタミド、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、イダルビシン、インターフェロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、メルファラン、ミトタン、パクリタキセル、ペントスタチン（pentstatin）、ＰＡＬＡ、プリカマイシン、セムスチン、テニポシド、プロピオン酸テストステロン、チオテパ、トリメチルメラミン、ウリジンおよびビノレルビン、オキサリプラチン、ゲムシタビン、カペシタビン、エポシロンおよびその天然または合成誘導体、トシツモマブ、トラベデクチン（trabedectin）およびテモゾロミド、トラスツズマブ、セツキシマブ、ベバシズマブ、ペルツズマブ（pertuzumab）、ＺＤ−１８３９（イレッサ）、ＯＳＩ−７７４（タルセバ（Tarceva））、ＣＩ−１０３３、ＧＷ−２０１６、ＣＰ−７２４、７１４、ＨＫＩ−２７２、ＥＫＢ−５６９、ＳＴＩ−５７１（グリーベック（Gleevec））、ＰＴＫ−７８７、ＳＵ−１１２４８、ＺＤ−６４７４、ＡＧ−１３７３６、ＫＲＮ−９５１、ＣＰ−５４７、６３２、ＣＰ−６７３、４５１およびソラフェニブからなる群から選択される、第１項ないし第６項のいずれかに従う使用に関する。
【００１７】
本発明の医薬組成物は、通常および腸溶性被覆の錠剤、カプセル剤、丸剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンキ剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤、固体および液体エアゾル剤並びに乳剤など（これらに限定されない）の経口の形態で投与し得る。それらはまた、医薬分野の当業者に周知の、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、腫瘍内など（これらに限定されない）の非経腸形態などの形態で投与し得る。本発明の医薬組成物は、適当な鼻腔内媒体の局所使用により鼻腔内形態で、または、当業者に周知の経皮送達システムを使用して経皮経路で、投与できる。
【００１８】
本発明の医薬組成物の使用を伴う投薬法は、受容者の年齢、体重、性別および健康状態、処置しようとする症状の重篤度、投与経路、受容者の代謝および排出機能のレベル、用いる投与形を非限定的に含む様々な要因に鑑みて、当業者により選択される。
【００１９】
本発明の医薬組成物は、好ましくは、投与に先立ち製剤化され、１種またはそれ以上の医薬的に許容し得る補助剤を含む。補助剤は、担体、希釈剤、香味剤、甘味料、滑沢剤、可溶化剤、懸濁化剤、結合剤、錠剤崩壊剤およびカプセル化材料など（これらに限定されない）の不活性物質である。
【００２０】
製剤は、ヒトまたは他の哺乳動物での投与に適する単位用量を含有する物理的に分離した単位である、投薬単位形であり得る。投薬単位形は、１個のカプセル剤もしくは錠剤、または、数個のカプセル剤または錠剤であり得る。「単位用量」は、１種またはそれ以上の補助剤と協同して所望の治療効果を奏するように計算された本発明の活性医薬組成物の予め定められた量である。投薬量は、約１０３ないし約１０１２の投与毎の物理的なウイルス粒子数の範囲にあるか、または物理的な粒子数／ｋｇ／日に基づく。
【００２１】
本発明の医薬組成物は、１回の１日用量で投与し得るか、または、総１日用量を、分割された用量で、１日２回、３回またはそれ以上の回数で投与し得る。送達が経皮形態である場合、当然、投与は好ましくは継続的である。
【００２２】
図１の説明
ヌードマウスのＭＤＡＭＢ２３１乳癌モデルにおいて、パラポックスウイルスオヴィス（ＰＰＶＯ）およびタキソールの組合せの抗腫瘍活性は、タキソールまたはＰＰＶＯのいずれかによる単独治療より優れている。パクリタキセル（タキソール（登録商標）, Bristol Myers Squibb）を、７.５ｍｇ／ｋｇ／日ｉ.ｖ.で、１０日目から開始して３日連続で投与した。ＰＰＶＯの単回用量（１ｘ１０６ＴＣＩＤ５０）または各々のプラセボを、移植の後、１３日目に腹腔内投与した（ｎ＝マウス１０匹／群）。
【実施例】
【００２３】
実施例
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌細胞（ＡＴＣＣ＃ＨＴＢ２６）を、標準の一般的増殖培地（ＵＭ：ＤＭＥＭ、１０％ＦＢＳ、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン）中、３７℃、５％ＣＯ２で、加湿インキュベーター内で培養した。トリプシン処理により細胞を回収し、洗浄し、計数し、氷冷リン酸緩衝塩水（ＰＢＳ）で細胞２.５ｘ１０７個／ｍｌに調節し、その後、移植するまで氷上で保存した。総体積０.２ｍｌのＰＢＳ中の約５ｘ１０６個の細胞を、側腹部に皮下注射（ｓ.ｃ.）する。平均体重約２０−２５ｇの約８ないし１０週齢の雌ＮＣｒヌードマウス（Taconic, Germantown, NY）を実験に使用した。腫瘍の測定を、移植の１０日後に実施した。式（ａｘｂｘｂ）／２を使用して腫瘍の大きさを算出した。その後、マウスをランダム化し、異なる処置を反映するいくつかの群に分けた（ｎ＝マウス１０匹／群）。第１の群では、マウスは、対照のアプローチとして、ＰＢＳのみを受容した。第２の群では、パクリタキセル（タキソール（登録商標）, Bristol Myers Squibb）を７.５ｍｇ／ｋｇ／日ｉ.ｖ.で、１０日目から開始して３日連続で投与した。第３の群では、ＰＰＶＯ（１ｘ１０６ＴＣＩＤ５０）の単回用量を、移植の後、１３日目に腹腔内投与した。第４の群では、群２および３に適用した投薬法に準ずるパクリタキセルおよびＰＰＶＯの投与を組み合わせた。動物愛護のために、腫瘍がマウスの体重の約１０−１５％に達したら、または、腫瘍が疥癬または潰瘍化したら、動物を殺した。
【００２４】
図１でわかる通り、平均腫瘍サイズは、群２（◇）または群３（▲）と比較すると、群４（○）で明らかに低減されている。
【００２５】
よって、本発明者らは、パラポックスウイルスオヴィス（ＰＰＶＯ）と従来の抗癌剤の組合せの投与が、抗癌剤またはＰＰＶＯのいずれか単独による単独治療よりも優れていることを初めて明確に立証した。
【００２６】
参照文献
1. D. Kirn, R.J. Martuza, J. Zwiebel, Nat.Med. 7, 781 (2001)
2. C.M. Southam, NY Acad. Sci. 22, 656 (1960)
3. R.L. Martuza, A. Malick, J.M. Markert, K.L. Ruffner, D.M. Coen, Science 252, 856 (1991)
4. O. Weber et al. WO 02/04002
5. S.S. Legha J.Clin.Oncol. 14, 7 (1996)
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】図１は、ヌードマウスのＭＤＡＭＢ２３１乳癌モデルにおいて、パラポックスウイルスオヴィス（ＰＰＶＯ）およびタキソールの組合せの抗腫瘍活性は、タキソールまたはＰＰＶＯのいずれかによる単独治療より優れていることを示す。
【図１】
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【国際調査報告】
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2009517347.tif 000005
2009517347.tif 000006