(57)【要約】式(I)の化合物は、p38 MAPキナーゼの阻害剤であり、よって、特にリウマチ性関節炎及びCOPDを含む炎症性状態の治療において有用である：(I)の式中：Gは、-N=又は-CH=であり；Dは、任意に置換されていてもよい二価の単環若しくは二環式の5〜13員環のアリール又はヘテロアリール基であり；R6は、水素又は任意に置換されていてもよいC1〜C3アルキルであり；Pは水素を表し、かつUは式(IA)の基を表すか；又はUは水素を表し、かつPは、式-A-(CH2)z-X1-L1-Y-NH-CHR1R2 (式中、Aは、任意に置換されていてもよい二価の単環若しくは二環式の5〜13員環の炭素環式又は複素環式の基であり；z、Y、L1及びX1は、明細書で定義されるとおりであり；R1はカルボン酸基(-COOH)、又は1若しくは複数の細胞内エステラーゼ酵素によりカルボン酸基に加水分解され得るエステル基であり；R2は天然又は非天然のアルファアミノ酸の側鎖である)の基を表す。2009535385.tif 000203【選択図】なし
2009535385.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)：
【化１】
2009535385.tif 000199
(式中：
Gは、-N=又は-CH=であり；
Dは、任意に置換されていてもよい二価の単環若しくは二環式で5〜13員環のアリール又はヘテロアリール基であり；
R6は、水素、又は任意に置換されていてもよいC1〜C3アルキルであり；
Pは水素を表し、かつUは式(IA)の基を表すか；又はUは水素を表し、かつPは式(IA)の基を表す；
-A-(CH2)z-X1-L1-Y-NH-CHR1R2                (IA)
(式中、
Aは、任意に置換されていてもよい二価の単環若しくは二環式で5〜13員環の炭素環式又は複素環式の基であり；
zは0又は1であり；
Yは、結合手、-C(=O)-、-S(=O)2-、-C(=O)NR3-、-C(=S)-NR3、-C(=NH)NR3、又は-S(=O)2NR3- (式中、R3は、水素又は任意に置換されていてもよいC1〜C6アルキルである)であり；
L1は、式-(Alk1)m(Q)n(Alk2)p-の二価の基
(式中、m、n及びpは、独立して0又は1であり、
Qは、(i) 任意に置換されていてもよい二価の単環若しくは二環式で5〜13員環の炭素環式又は複素環式の基であるか、又は(ii) m及びpがともに0である場合は、式-X2-Q1-又は-Q1-X2- (式中、X2は、-O-、S-又はNRA- (式中、RAは、水素又は任意に置換されていてもよいC1〜C3アルキルである)であり、Q1は、任意に置換されていてもよい二価の単環若しくは二環式で5〜13員環の炭素環式又は複素環式の基である)の二価の基であり；
Alk1及びAlk2は、独立して、任意に置換されていてもよい二価のC3〜C7シクロアルキル基、又は任意に置換されていてもよい直鎖状又は分岐鎖状のC1〜C6アルキレン、C2〜C6アルケニレン若しくはC2〜C6アルキニレン基を表し、これらの基は、エーテル(-O-)、チオエーテル(-S-)又はアミノ(-NRA-)(式中、RAは、水素又は任意に置換されていてもよいC1〜C3アルキルである)結合を任意に含むか又は該結合が末端をなしていてもよい)
であり；
X1は、結合手；-C(=O)；又は-S(=O)2-；-NR4C(=O)-、-C(=O)NR4-、-NR4C(=O)NR5-、-NR4S(=O)2-、又は-S(=O)2NR4- (式中、R4及びR5は、独立して、水素又は任意に置換されていてもよいC1〜C6アルキルである)であり；
R1は、カルボン酸基 (-COOH)、又は1若しくは複数の細胞内エステラーゼ酵素によりカルボン酸基に加水分解され得るエステル基であり；
R2は、天然又は非天然のアルファアミノ酸の側鎖である)）
の化合物。
【請求項２】
Dが、任意に置換されていてもよいフェニル又はピリジニルである請求項1に記載の化合物。
【請求項３】
R6が、水素又はメチルである請求項1又は2に記載の化合物。
【請求項４】
Pが水素であり、Uが請求項1で定義される式(IA)の基である請求項1〜3のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項５】
Aが、任意に置換されていてもよい1,4 フェニレンであるか、又は任意に置換されていてもよい式A〜Xのもの：
【化２】
2009535385.tif 000200
(式中、Z1は、NH、S又はOである)
から選択される請求項1〜4のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項６】
式(IIA)、(IIB)及び(IIC)：
【化３】
2009535385.tif 000201
(式中、R11 = F、R12 = H、R13 = H及びR14 = H；又は
R11 = F、R12 = F、R13 = H及びR14 = H；又は
R11 = F、R12 = H、R13 = F及びR14 = F；又は
R11 = F、R12 = F、R13 = F及びR14 = F；又は
R11 = F、R12 = F、R13 = F及びR14 = Hであり、
z、X1、L1、Y、R1及びR2は、請求項1で定義されたとおりである)
を有する請求項1に記載の化合物。
【請求項７】
zが0である請求項1〜6のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項８】
Yが-C(=O)、-S(=O)2-、-C(=S)-NR3、-C(=NH)-NR3又は-S(=O)2NR3- (式中、R3は、水素又はC1〜C6アルキルである)である請求項1〜7のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項９】
Yが、結合手である請求項1〜7のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項１０】
L1基において、Alk1及びAlk2が、存在する場合に、-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、並びに二価のシクロプロピル、シクロペンチル及びシクロヘキシル基から選択される請求項1〜9のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項１１】
L1基において、m及びpが0である請求項1〜10のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項１２】
L1基において、n及びpが0であり、mが1である請求項1〜10のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項１３】
L1基において、m、n及びpが全て0である請求項1〜10のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項１４】
基-Y-L1-X1-[CH2]z-が、-C(=O)-、-C(=O)NH-、-(CH2)v-、-(CH2)vO-、-C(=O)-(CH2)v-、-C(=O)-(CH2)vO-、-C(=O)-NH-(CH2)w-、-C(=O)-NH-(CH2)wO-
【化４】
2009535385.tif 000202
(式中、vは1、2、3又は4であり、wは1、2又は3である)
から選択される請求項1〜13のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項１５】
基-Y-L1-X1-[CH2]z-が、-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2-、-CH2O-、-CH2CH2O-、-CH2CH2CH2O-、-CH2CH2CH2CH2O-、-C(=O)-CH2-、-C(=O)-CH2O-、-C(=O)-NH-CH2-、又は-C(=O)-NH-CH2O-である請求項1〜10のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項１６】
R1が、式-(C=O)OR14 (式中、R14は、R8R9R10C- (式中：
(i)   R8は、水素、又は任意に置換されていてもよい(C1〜C3)アルキル-(Z1)a-[(C1〜C3)アルキル]b-、若しくは(C2〜C3)アルケニル-(Z1)a-[(C1〜C3)アルキル]b- (式中、a及びbは、独立して0又は1であり、Z1は、-O-、-S-又は-NR11- (式中、R11は、水素又は(C1〜C3)アルキルである)である)であり；R9及びR10は、独立して水素、又は(C1〜C3)アルキル-であるか；
(ii)  R8は、水素、又は任意に置換されていてもよいR12R13N-(C1〜C3)アルキル- (式中、R12は、水素又は(C1〜C3)アルキルであり、R13は、水素又は(C1〜C3)アルキルであるか；又はR12及びR13は、それらが結合している窒素と一緒に、任意に置換されていてもよい単環式の5〜6環原子の複素環式環、又は二環式の8〜10環原子の複素環式環系を形成する)であり；R9及びR10は、独立して、水素又は(C1〜C3)アルキル-であるか；或いは
(iii) R8及びR9は、それらが結合している炭素原子と一緒に、任意に置換されていてもよい単環式の3〜7環原子の炭素環式環、又は8〜10環原子の二環式の炭素環式環系であり、R10は水素である）
である)のエステル基である請求項1〜15のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項１７】
R14が、メチル、エチル、n-若しくはイソ-プロピル、n-、sec-若しくはtert-ブチル、シクロヘキシル、アリル、フェニル、ベンジル、2-、3-若しくは4-ピリジルメチル、N-メチルピペリジン-4-イル、テトラヒドロフラン-3-イル又はメトキシエチルである請求項16に記載の化合物。
【請求項１８】
R14がシクロペンチルである請求項16に記載の化合物。
【請求項１９】
R2が水素である請求項1〜18のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項２０】
R2が、フェニルエチル、tert-ブトキシメチル、シクロヘキシルメチル、ピリジン-3-イルメチル、sec-ブチル、tert-ブチル、1-ベンジルチオ-1-メチルエチル、1-メチルチオ-1-メチルエチル、又は1-メルカプト-1-メチルエチルである請求項1〜18のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項２１】
R2が、フェニル、ベンジル、イソ-ブチル、シクロヘキシル又はt-ブトキシメチルである請求項1〜18のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項２２】
R1が、式-(C=O)OR14 (式中、R14はシクロペンチルである)のエステル基であり、R2が、フェニル、ベンジル、イソ-ブチル、シクロヘキシル又はt-ブトキシメチルである請求項1〜15のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項２３】
実施例20  シクロペンチル (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)フェニル アセテート
実施例22 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチル ペンタノエート
実施例42  シクロペンチル (2R)-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ](フェニル)アセテート
実施例47  2-モルホリン-4-イルエチル N-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)-L-ロイシネート
実施例46  2-(ジメチルアミノ)エチル N-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)-L-ロイシネート
実施例57  シクロペンチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
実施例53  シクロペンチル N-(5-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]ペンチル)-L-ロイシネート
実施例67  シクロペンチル N-[3-(4-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)プロピル]-L-ロイシネート
実施例52  シクロペンチル (2S)-4-アミノ-2-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ]ブタノエート
実施例55  シクロペンチル N-(5-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]ペンチル)-L-ロイシネート
実施例59  シクロペンチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(2,4-ジフルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
実施例60  tert-ブチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(2,4-ジフルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
実施例61  シクロペンチル (2S)-[[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]アミノ](フェニル) エタノエート
実施例63  シクロペンチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-メチルフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
実施例65  シクロペンチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-クロロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
からなる群より選択される請求項1に記載の化合物。
【請求項２４】
医薬的に許容される塩の形である請求項1〜23のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項２５】
請求項1〜24のいずれか1項に記載の化合物を、医薬的に許容される担体とともに含む医薬組成物。
【請求項２６】
p38 MAPキナーゼ酵素の活性をインビトロ又はインビボで阻害するための組成物の製造における請求項1〜24のいずれか1項に記載の化合物の使用。
【請求項２７】
自己免疫又は炎症性疾患の治療のための組成物の製造における請求項1〜24のいずれか1項に記載の化合物の使用。
【請求項２８】
p38 MAPキナーゼ酵素の活性の阻害に有効量の請求項1〜24のいずれか1項に記載の化合物を、該酵素と接触させることを含む、p38 MAPキナーゼ酵素の活性を阻害する方法。
【請求項２９】
自己免疫又は炎症性疾患に罹患している対象に、請求項1〜24のいずれか1項に記載の化合物の有効量を投与することを含む、自己免疫又は炎症性疾患を治療する方法。
【請求項３０】
前記疾患が、乾癬、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、慢性閉塞性肺疾患、喘息、多発性硬化症、糖尿病、アトピー性皮膚炎、移植片対宿主疾患、又は全身性エリテマトーデスである請求項27に記載の使用又は請求項29に記載の方法。
【請求項３１】
前記疾患が、リウマチ性関節炎である請求項27に記載の使用又は請求項29に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一連のアミノ酸及びアミノ酸エステル化合物、それらを含有する組成物、それらの製造方法、並びにリウマチ性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、慢性閉塞性肺疾患、喘息、多発性硬化症、糖尿病、アトピー性皮膚炎、移植片対宿主疾患、全身性エリテマトーデスなどを含む自己免疫及び炎症性疾患の治療のための、p38 MAPキナーゼ阻害剤としての医薬品におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
TNF-α、IL1-β及びIL-8のようなサイトカインの産生レベルの上昇を導く、単球、マクロファージ及び好中球を含む白血球の不適切な活性化は、リウマチ性関節炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、慢性閉塞性肺疾患(COPD)、喘息及び乾癬を含むいくつかの炎症性疾患の病因の特徴である。炎症性細胞によるサイトカインの産生は、種々の外部刺激に対する応答の結果であり、いくつかの細胞内シグナル伝達機構の活性化を導く。これらのうち顕著なものは、細胞成長、分化及びストレス応答を調節する高度に保存されたシグナル伝達キナーゼからなるマイトジェン活性化タンパク質キナーゼ (MAPK)スーパーファミリーである。哺乳動物細胞は、MAPKの少なくとも3つのファミリーを含む：p42/44細胞外シグナル調節キナーゼ(ERK) MAPK、c-Jun NH2-末端キナーゼ (JNKs)、及びp38 MAPK (p38a/Mpk2/RK/SAPK2a/CSBP1/2ともよばれる)。p38 MAPKは、リポ多糖(LPS)による単球の刺激の後にチロシンリン酸化されるキナーゼとして同定された後に、最初にクローニングされた[Hanら, Science 1994,265,808]。哺乳動物p38のさらなるホモログは、記載されており、p38β[Jiangら, J.Biol.Chem, 1996, 271, 17920]、p38γ[Liら, Biochem. Biophys. Res. Commun., 1996, 228, 334]、及びp38δ[Jiangら, J.Biol.Chem. 1997, 272, 30122]を含む。p38α及びp38βは遍在して発現されるが、p38γは骨格筋に主に限定され、p38δは肺及び腎臓において主に発現される。
【０００３】
宿主の防御細胞によるサイトカインの放出、並びにサイトカイン及び他の炎症誘発性ストレスに対する白血球の応答は、種々の程度でp38 MAPKにより調節される程度を変動させる[Cuendaら, FEBS Lett, 1995, 364, 229〜233]。他の細胞タイプにおいて、p38 MAPKは、TNF-αにより刺激された気管支上皮細胞によるIL-8の産生、及びLPS-刺激内皮細胞における細胞接着分子ICAM-1のアップレギュレーションのようなストレス応答を制御する。二重特異性キナーゼMKK3及びMKK6によるTGYモチーフの二重リン酸化による活性化により、p38 MAPKは、転写因子及びその他のキナーゼのリン酸化によりその効果を発揮する。MAPキナーゼ-活性化タンパク質キナーゼ-2 (MAPKAPK-2)は、p38リン酸化についての標的であると同定されている。MAPKAP-K2欠損マウス[Kotlyarovら, Nat. Cell Biol. 1999, 1, 94〜97]では、LPS/ガラクトサミン媒介内毒素性ショックに応答してTNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10及びIFN-γの放出レベルが低下した。これらのサイトカイン、及びCOX-2のレベルの調節は、mRNAレベルで行われる。TNF-αレベルは、TNF-α mRNAの3'-UTRのAUリッチエレメントを介して、転写制御により調節され、MAPKAP-K2シグナル伝達がTNF-α mRNA翻訳を増加させる。MAPKAP-K2シグナル伝達は、COX-2、IL-6及びマクロファージ炎症性タンパク質についてのmRNAの安定性の増加を導く。MAPKAP K2は、p38 MAPKの細胞内位置を決定するとともに、p38 MAPKシグナル伝達を変換し、そのカルボキシ末端に核局在化シグナルと、その自己抑制ドメインの一部分として核外輸送シグナルとを保持する[Engelら, EMBO J. 1998, 17, 3363〜3371]。ストレスが負荷された細胞では、MAPKAP-K2及びp38 MAPKが核から細胞質に移動し、この移動は、p38 MAPKが触媒活性である場合にのみ起こる。この事象は、p38 MAPKによるリン酸化の結果としてのMAPKAP-K2核外輸送シグナルの曝露により駆動されると考えられている[Mengら, J. Biol. Chem. 2002, 277, 37401〜37405]。さらに、p38 MAPKは、ATF1/2 (活性化転写因子(activating transcription factors) 1/2)、CHOP-10/GADD-153 (成長停止及びDNA損傷誘導性遺伝子(growth arrest and DNA damage inducible gene) 153)、SAP-1 (血清応答因子アクセサリータンパク質(serum response factor accessory protein)-1)、及びMEF2C (筋細胞エンハンサー因子(myocyte enhancer factor)-2)を含む炎症を媒介すると考えられるいくつかの転写因子のリン酸化を直接又は間接的に導く[Fosterら, Drug News Perspect. 2000, 13, 488〜497]。
【０００４】
小分子によるp38 MAPK活性の阻害が、リウマチ性関節炎、COPD、喘息及び脳虚血を含む、不適切なサイトカイン産生により媒介されるいくつかの疾患の状態の治療に有用であることが、いくつかの場合において示されている。この様相は、いくつかの総説の主題である[Salituroら, Current Medicinal Chemistry, 1999, 6, 807〜823及びKumarら, Nature Reviews Drug Discovery 2003, 2, 717〜726]。
【０００５】
p38 MAPKの阻害剤は、ラットにおけるコラーゲン誘導関節炎[Reveszら, Biorg. Med. Chem. Lett., 2000, 10, 1261〜1364]、及びラットにおけるアジュバント誘導関節炎[Wadsworthら, J. Pharmacol. Exp. Ther., 1999, 291, 1685〜1691]のようなリウマチ性関節炎の動物モデルにおいて、効果があることが示されている。膵炎誘導肺損傷のマウスモデルにおいて、p38 MAPK阻害剤による前処理が、気道及び肺浮腫におけるTNF-α放出を減少させた[Denhamら, Crit. Care Med., 2000, 29, 628及びYangら, Surgery, 1999, 126, 216]。オボアルブミン(OVA)感作マウスにおけるOVA攻撃の前のp38 MAPKの阻害は、炎症のアレルギー性気道モデルにおける気道でのサイトカイン及び炎症性細胞の蓄積を低下させた[Underwoodら, J. Pharmacol. Exp. Ther., 2000,293, 281]。p38 MAPキナーゼの活性の増加は、炎症性腸疾患に罹患している患者において観察されている[Waetzigら, J. Immunol, 2002,168, 5432〜5351]。p38 MAPK阻害剤は、心臓肥大のラットモデル[Behrら, Circulation, 2001, 104, 1292〜1298]、及び局所脳虚血[Baroneら, J. Pharmacol. Exp. Ther., 2001, 296, 312〜321]において効果があることが示されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
我々は、p38 MAPK (p38α、β、γ及びδ)、並びにそのアイソフォーム及びスプライスバリアント、特にp38α、p38β及びp38β2の強力で選択的な阻害剤である化合物の群を、今回、見出した。これらの化合物は、医薬品、例えば本明細書に記載される免疫及び炎症性障害の治療及び予防において有用である。上記の化合物は、アミノ酸モチーフ又は細胞内カルボキシルエステラーゼにより加水分解され得るアミノ酸エステルモチーフが分子内に存在することを特徴とする。親油性アミノ酸エステルモチーフを有する本発明の化合物は、細胞膜を通過し、細胞内カルボキシルエステラーゼにより酸に加水分解される。極性加水分解産物は、細胞膜を容易に通過しないので、細胞内に蓄積する。よって、この化合物のp38 MAPキナーゼ活性は、細胞内で持続し、増強される。本発明の化合物は、国際特許出願WO03076405の開示に含まれるp38 MAPキナーゼ阻害剤に関連するが、本発明の化合物は、上記のアミノ酸エステルモチーフを有する点で、これらとは異なる。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明によると、式(I)：
【化１】
2009535385.tif 000003
(式中：
Gは、-N=又は-CH=であり；
Dは、任意に置換されていてもよい二価の単環若しくは二環式で5〜13員環のアリール又はヘテロアリール基であり；
R6は、水素、又は任意に置換されていてもよいC1〜C3アルキルであり；
Pは水素を表し、かつUは式(IA)の基を表すか；又はUは水素を表し、かつPは式(IA)の基を表す；
【０００８】
-A-(CH2)z-X1-L1-Y-NH-CHR1R2                (IA)
(式中、
Aは、任意に置換されていてもよい二価の単環若しくは二環式で5〜13員環の炭素環式又は複素環式の基であり；
zは0又は1であり；
Yは、結合手、-C(=O)-、-S(=O)2-、-C(=O)NR3-、-C(=S)-NR3、-C(=NH)NR3、又は-S(=O)2NR3- (式中、R3は、水素又は任意に置換されていてもよいC1〜C6アルキルである)であり；
L1は、式-(Alk1)m(Q)n(Alk2)p-の二価の基
(式中、m、n及びpは、独立して0又は1であり、
Qは、(i) 任意に置換されていてもよい二価の単環若しくは二環式で5〜13員環の炭素環式又は複素環式の基であるか、又は(ii) m及びpがともに0である場合は、式-X2-Q1-又は-Q1-X2- (式中、X2は、-O-、S-又はNRA- (式中、RAは、水素又は任意に置換されていてもよいC1〜C3アルキルである)であり、Q1は、任意に置換されていてもよい二価の単環若しくは二環式で5〜13員環の炭素環式又は複素環式の基である)の二価の基であり；
Alk1及びAlk2は、独立して、任意に置換されていてもよい二価のC3〜C7シクロアルキル基、又は任意に置換されていてもよい直鎖状又は分岐鎖状のC1〜C6アルキレン、C2〜C6アルケニレン若しくはC2〜C6アルキニレン基を表し、これらの基は、エーテル(-O-)、チオエーテル(-S-)又はアミノ(-NRA-)(式中、RAは、水素又は任意に置換されていてもよいC1〜C3アルキルである)結合を任意に含むか又は該結合が末端をなしていてもよい)
であり；
【０００９】
X1は、結合手；-C(=O)；又は-S(=O)2-；-NR4C(=O)-、-C(=O)NR4-、-NR4C(=O)NR5-、-NR4S(=O)2-、又は-S(=O)2NR4- (式中、R4及びR5は、独立して、水素又は任意に置換されていてもよいC1〜C6アルキルである)であり；
R1は、カルボン酸基 (-COOH)、又は1若しくは複数の細胞内エステラーゼ酵素によりカルボン酸基に加水分解され得るエステル基であり；
R2は、天然又は非天然のアルファアミノ酸の側鎖である)）
の化合物が提供される。
【００１０】
上記の式(I)は、その塩、特に医薬的に許容される塩、N-オキシド、水和物及び溶媒和物の形で製造し得る。本明細書における化合物についてのいずれの請求項、又は本明細書で用いる場合「本発明の化合物」、「本発明に係る化合物」、「式(I)の化合物」などの記載は、このような化合物の塩、N-オキシド、水和物及び溶媒和物を含む。
【００１１】
上記の定義は、高分子量の分子を潜在的に含むが、医薬品化学のプラクティスの通常の原理に従って、本発明に係る化合物は、600以下の分子量を有することが好ましい。
【００１２】
別の広い態様において、本発明は、上記で定義される式(I)の化合物、又はそれらのN-オキシド、塩、水和物若しくは溶媒和物の、p38 MAPキナーゼ酵素の活性を阻害するための組成物の製造における使用を提供する。
本発明に係る化合物は、インビトロ又はインビボでのp38 MAPキナーゼ酵素活性の阻害のために用い得る。
【００１３】
本発明のある態様において、本発明の化合物は、自己免疫疾患又は炎症性疾患、特にp38 MAPキナーゼ活性が役割を演じる上記のものの治療用の組成物の製造において用い得る。
【００１４】
別の態様において、本発明は、上記のタイプの疾患に罹患している患者に、上記で定義される式(I)の化合物の有効量を投与することを含む、上記のタイプの疾患の治療方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
用語
用語「エステル」又は「エステル化されたカルボキシ基」は、基RXO(C=O)- (式中、RXは、アルコールRXOHに概念的に由来するエステルに特徴的な基である)を意味する。
本明細書で用いる場合、用語「(Ca〜Cb)アルキル」(ここで、a及びbは整数である)は、a〜b個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖のアルキル基のことである。よって、例えばaが1でありbが6である場合、この用語は、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、t-ブチル、n-ペンチル及びn-ヘキシルを含む。
【００１６】
本明細書で用いる場合、用語「二価の(Ca〜Cb)アルキレン基」(ここで、a及びbは整数である)は、a〜b個の炭素原子と2つの不飽和原子価(unsatisfied valences)を有する飽和炭化水素鎖のことをいう。
本明細書で用いる場合、用語「(Ca〜Cb)アルケニル」(ここで、a及びbは整数である)は、a〜b個の炭素原子を有し、適用可能である場合にE又はZの立体化学の少なくとも1つの二重結合をする直鎖又は分岐鎖のアルケニル部分のことである。この用語は、例えばビニル、アリル、1-及び2-ブテニル及び2-メチル-2-プロペニルを含む。
本明細書で用いる場合、用語「二価の(Ca〜Cb)アルケニレン基」は、a〜b個の炭素原子、少なくとも1つの二重結合、及び2つの不飽和原子価を有する炭化水素鎖のことである。
【００１７】
本明細書で用いる場合、用語「Ca〜Cbアルキニル」(ここで、a及びbは整数である)は、a〜b個の炭素原子を有し、さらに1つの三重結合を有する直鎖又は分岐鎖の炭化水素基のことである。この用語は、例えばエチニル、1-プロピニル、1-及び2-ブチニル、2-メチル-2-プロピニル、2-ペンチニル、3-ペンチニル、4-ペンチニル、2-ヘキシニル、3-ヘキシニル、4-ヘキシニル及び5-ヘキシニルを含む。
本明細書で用いる場合、用語「二価の(Ca〜Cb)アルキニレン基」(ここで、a及びbは整数である)は、a〜b個の炭素原子及び少なくとも1つの三重結合を有する二価の炭化水素鎖である。
【００１８】
本明細書で用いる場合、用語「炭素環式」は、全て炭素の16個までの環原子を有する単環式、二環式又は三環式の基のことであり、アリール及びシクロアルキルを含む。
本明細書で用いる場合、用語「シクロアルキル」は、3〜8個の炭素原子を有する単環式の飽和炭素環式基のことであり、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル及びシクロオクチルを含む。
【００１９】
本明細書で用いる場合、限定されていない用語「アリール」は、単環式、二環式又は三環式の炭素環式芳香族基のことであり、共有結合により直接連結された2つの単環式の炭素環式芳香族環を有する基を含む。このような基の例は、フェニル、ビフェニル及びナフチルである。
【００２０】
本明細書で用いる場合、限定されていない用語「ヘテロアリール」は、S、N及びOから選択される1又は複数のヘテロ原子を含む単環式、二環式又は三環式の芳香族基のことであり、そのような単環式環を2つ有する基、又はそのような単環式環1つと1つの単環式アリール環とが共有結合により直接連結された基を含む。そのような基の例は、チエニル、ベンズチエニル、フリル、ベンズフリル、ピロリル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、チアゾリル、ベンズチアゾリル、イソチアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、ベンズオキサゾリル、イソキサゾリル、ベンズイソキサゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、ベンズトリアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリル及びインダゾリルである。
【００２１】
本明細書で用いる場合、限定されていない用語「ヘテロシクリル」又は「複素環式」は、上記で定義される「ヘテロアリール」を含み、その非芳香族の意味は、S、N及びOから選択される1又は複数のヘテロ原子を含む単環式、二環式又は三環式の非芳香族基、及びこのような1又は複数のへテロ原子を含む単環式の非芳香族基からなり、該非芳香族基が別のそのような基又は単環式の炭素環式基に共有結合した基に関する。そのような基の例は、ピロリル、フラニル、チエニル、ピペリジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピロリジニル、ピリミジニル、ピペラジニル、インドリル、モルホリニル、ベンズフラニル、ピラニル、イソキサゾリル、ベンズイミダゾリル、メチレンジオキシフェニル、エチレンジオキシフェニル、マレイミド及びスクシンイミド基である。
【００２２】
「二価のフェニレン、ピリジニレン、ピリミジニレン又はピラジニレン基」は、2つの不飽和原子価を有するベンゼン、ピリジン、ピリミジン又はピラジン環であり、1,3-フェニレン、1,4-フェニレン及び以下のものを含む。
【化２】
2009535385.tif 000004
【００２３】
その用語を用いるときの関係において特に言及しない限りは、いずれの部分に適用される用語「置換」は、4つまでの適合性の置換基で置換されることを意味する。該置換基はそれぞれ独立して、例えば(C1〜C6)アルキル、(C1〜C6)アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシ(C1〜C6)アルキル、メルカプト、メルカプト(C1〜C6)アルキル、(C1〜C6)アルキルチオ、フェニル、ハロ (フルオロ、ブロモ及びクロロを含む)、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ニトロ、ニトリル(-CN)、オキソ、-COOH、-COORA、-CORA、-SO2RA、-CONH2、-SO2NH2、-CONHRA、-SO2NHRA、-CONRARB、-SO2NRARB、-NH2、-NHRA、-NRARB、-OCONH2、-OCONHRA、-OCONRARB、-NHCORA、-NHCOORA、-NRBCOORA、-NHSO2ORA、-NRBSO2OH、-NRBSO2ORA、-NHCONH2、-NRACONH2、-NHCONHRB、-NRACONHRB、-NHCONRARB、又は-NRACONRARB （ここで、RA及びRBは独立して(C1〜C6)アルキル、(C3〜C6)シクロアルキル、フェニル又は5若しくは6個の環原子を有する単環式ヘテロアリールである）であり得る。「任意の置換基」は、上記の置換基の1つであり得る。
【００２４】
用語「天然又は非天然のアルファアミノ酸の側鎖」は、式NH2-CH(RY)-COOHの天然又は非天然アミノ酸中のRY基のことをいう。
天然のアルファアミノ酸の側鎖の例は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチン、グルタミン酸、ヒスチジン、5-ヒドロキシリジン、4-ヒドロキシプロリン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、α-アミノアジピン酸、α-アミノ-n-酪酸、3,4-ジヒドロキシフェニルアラニン、ホモセリン、α-メチルセリン、オルニチン、ピペコリン酸(pipecolic acid)及びチロキシンのものを含む。
【００２５】
その特徴的な側鎖に官能性置換基、例えばアミノ、カルボキシル、ヒドロキシ、メルカプト、グアニジル、イミダゾリル又はインドリル基を含む天然のアルファ-アミノ酸は、アルギニン、リジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、トリプトファン、ヒスチジン、セリン、スレオニン、チロシン及びシステインを含む。本発明の化合物においてR2がこれらの側鎖の1つである場合、官能性置換基は、任意に保護され得る。
【００２６】
天然のアルファ-アミノ酸の側鎖における官能性置換基の関係において用いる場合、用語「保護された(る)」は、実質的に非官能性であるこのような置換基の誘導体を意味する。例えば、カルボキシ基はエステル化でき(例えばC1〜C6アルキルエステルとして)、アミノ基はアミド(例えば、NHCOC1〜C6アルキルアミドとして)又はカルバメート(例えばNHC(=O)OC1〜C6アルキル又はNHC(=O)OCH2Phカルバメートとして)に変換でき、ヒドロキシ基は、エーテル(例えばOC1〜C6アルキル又はO(C1〜C6アルキル)フェニルエーテル)又はエステル(例えばOC(=O)C1〜C6アルキルエステル)に変換でき、チオール基は、チオエーテル(例えばtert-ブチル又はベンジルチオエーテル)又はチオエステル(例えばSC(=O)C1〜C6アルキルチオエステル)に変換できる。
【００２７】
非天然アルファアミノ酸の側鎖の例は、本発明の化合物で用いるための適切なR2基の説明において以下に述べるものを含む。
【００２８】
本明細書で用いる場合、用語「塩」は、塩基付加塩、酸付加塩及び第4級塩を含む。酸性である本発明の化合物は、医薬的に許容される塩を含む塩を、例えばアルカリ金属水酸化物、例えば水酸化ナトリウム及びカリウム；アルカリ土類金属水酸化物、例えば水酸化カルシウム、バリウム及びマグネシウムのような塩基と；例えばN-メチル-D-グルカミン、コリントリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン、L-アルギニン、L-リジン、N-エチルピペリジン、ジベンジルアミンのような有機塩基と形成できる。塩基性であるこれらの化合物(I)は、医薬的に許容される塩を含む塩を、例えばハロゲン化水素酸、例えば塩化水素酸又は臭化水素酸、硫酸、硝酸又はリン酸などの無機酸と、酢酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、サリチル酸、クエン酸、メタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、安息香酸、ベンゼンスルホン酸、グルタミン酸、乳酸及びマンデル酸などの有機酸とともに形成できる。適切な塩の総説のために、Stahl及びWermuthによるHandbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)を参照されたい。
【００２９】
用語「溶媒和物」は、本明細書で用いられる場合、本発明の化合物と、1又は複数の医薬的に許容される溶媒分子、例えばエタノールの化学量論量とを含む分子複合体のことである。用語「水和物」は、該溶媒が水のときに用いられる。
【００３０】
不斉炭素原子の存在のために1又は複数の実際の又は潜在的なキラル中心を含む本発明の化合物は、鏡像異性体又は各キラル中心にてR若しくはSの立体化学を有するいくつかのジアステレオ異性体として存在し得る。本発明は、全てのこのような鏡像異性体及びジアステレオマー、並びにその混合物を含む。
【００３１】
上記のように、本発明のエステルは、細胞内エステラーゼにより、カルボン酸に変換される。エステル及びカルボン酸はともに、それ自体でp38 MAPキナーゼ阻害活性を有し得る。よって、本発明の化合物は、エステルだけでなく、対応するカルボン酸加水分解生成物も含む。
【００３２】
本発明に係る化合物において：
基D
Dは、任意に置換されていてもよい二価の単環若しくは二環式の5〜13員環のアリール又はヘテロアリール基である。現在のところ、Bは任意に置換されていてもよいフェニル、又は任意に置換されていてもよいピリジニルであることが好ましい。Bにおける好ましい任意の置換基は、クロロ、フルオロ、メチル、メトキシ及びトリフルオロメチルを含み、例えばBが2,4-ジフルオロフェニルのときである。
【００３３】
置換基R6
R6は、水素又は任意に置換されていてもよいC1〜C3アルキルである。現在のところ、R6が水素又はメチルであるのが好ましい。
【００３４】
P/U位置異性体
現在のところ、Pが水素であり、Uが上記で定義される式(IA)の基であるのが好ましい。
【００３５】
基A
式(IA)の基において、現在のところ、Aは任意に置換されていてもよい1,4 フェニレンであるのが好ましい。この場合、好ましい任意の置換基は、フルオロ及びクロロを含む。Aは、例えば、任意に置換されていてもよい以下のいずれかでもあり得る：
【００３６】
【化３】
2009535385.tif 000005
(式中、Z1は、NH、S又はOである)。
【００３７】
本発明の化合物の特に好ましい部分群は、式(IIA)、(IIB)及び(IIC)のものからなる：
【化４】
2009535385.tif 000006
(式中、R11 = F、R12 = H、R13 = H及びR14 = H；又は
R11 = F、R12 = F、R13 = H及びR14 = H；又は
R11 = F、R12 = H、R13 = F及びR14 = F；又は
R11 = F、R12 = F、R13 = F及びR14 = F；又は
R11 = F、R12 = F、R13 = F及びR14 = Hであり、
z、X1、L1、Y、R1及びR2は、式(I)に関して上記で定義し、以下にさらに説明するとおりである)。
【００３８】
基-Y-L1-X1-[CH2]z-
この基(又は結合手)は、アミノ酸エステルモチーフR1CH(R2)NH-を、環系Aに連結する際に選択される具体的な化学的方策から生じる。この結合のための化学的方策は、明らかに、広く変動可能であり、可変部Y、L1、X1及びzの多くの組み合わせが可能である。アミノ酸エステルモチーフと環系Aとの間の連結化学を構成する可変部の厳密な組み合わせは、全体としての化合物の最初の結合形態とはしばしば無関係である。一方、連結化学は、酵素とのさらなる結合相互作用を採用する場合がある。
【００３９】
アミノ酸エステルモチーフの利点(細胞内への侵入、細胞内でのエステラーゼ加水分解、及び活性なカルボン酸加水分解産物の細胞内での蓄積が容易)は、アミノ酸エステルモチーフと環系Aとの間の連結が、細胞内のペプチダーゼ活性(分子からのアミノ酸の切断をもたらし得る)の基質でない場合に、最もよく成就されることにも注目すべきである。もちろん、細胞内ペプチダーゼへの耐性は、化合物を、破砕細胞内容物とインキュベートし、いずれかのこのような切断を分析することにより容易に試験される。
【００４０】
上記の一般的な考察を念頭において、基-Y-L1-X1-[CH2]z-を構成する可変部を順番に採用する：
zは、0又は1であり得、よって、環系Aに連結するメチレン基は任意である；
マクロファージ選択性が要求されない場合のYの好ましい具体例は、-(C=O)-、-(C=O)NH-、及び-(C=O)O-である。マクロファージ選択性が要求される場合は、Yが結合手である場合を含む、Yについてのいずれのその他の選択肢が適切である。
【００４１】
基L1において、存在する場合、Alk1及びAlk2基の例は：
-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2-、-CH=CH-、-CH=CHCH2-、-CH2CH=CH-、CH2CH=CHCH2-C≡C-、-C≡CCH2-、CH2C≡C-、及びCH2C≡CCH2
を含む。Alk1及びAlk2のさらなる例は、-CH2W-、-CH2CH2W-、-CH2CH2WCH2-、-CH2CH2WCH(CH3)-、-CH2WCH2CH2-、-CH2WCH2CH2WCH2-、及び-WCH2CH2- (式中、Wは、-O-、-S-、-NH-、-N(CH3)-、又は-CH2CH2N(CH2CH2OH)CH2-である)を含む。Alk1及びAlk2のさらなる例は、二価のシクロプロピル、シクロペンチル及びシクロヘキシル基を含む。
【００４２】
L1において、nが0である場合、この基は炭化水素鎖である(任意に置換されていてもよく、おそらくエーテル、チオエーテル又はアミノ結合を有する)。現在のところ、L1には任意の置換基は存在しないのが好ましい。m及びpがともに0である場合、L1は、二価の単環若しくは二環式の5〜13環原子を有する炭素環式又は複素環式の基である(任意に置換されていてもよい)。nが1でありかつm及びpの少なくとも一方が1である場合、L1は、炭化水素鎖、及び単環若しくは二環式の5〜13環原子を有する炭素環式又は複素環式の基(任意に置換されていてもよい)を含む二価の基である。存在する場合、Qは、例えば、二価のフェニル、ナフチル、シクロプロピル、シクロペンチル若しくはシクロヘキシル基、又は単環若しくは二環式の5〜13員環の複素環式基、例えばピペリジニル、ピペラジニル、インドリル、ピリジル、チエニル若しくはピロリル基であり得るが、現在のところ、1,4-フェニレンが好ましい。
【００４３】
具体的に、本発明、L1のいくつかの実施形態において、m及びpは0、かつnは1であり得る。別の実施形態において、n及びpは0、かつmは1であり得る。さらなる実施形態において、m、n及びpは全て0であり得る。さらなる実施形態において、mは0であり得、nは1、かつQは単環式の複素環式の基であり得、かつpは0又は1であり得る。Alk1及びAlk2は、存在する場合、-CH2-、-CH2CH2-、及び-CH2CH2CH2-から選択され、Qは1,4-フェニレンであり得る。
【００４４】
基-Y-L1-X1-[CH2]z-の具体的な例は、-C(=O)-及び-C(=O)NH-、並びに-(CH2)v-、-(CH2)vO-、-C(=O)-(CH2)v-、-C(=O)-(CH2)vO-、-C(=O)-NH-(CH2)w-、-C(=O)-NH-(CH2)wO-、
【化５】
2009535385.tif 000007
【００４５】
(式中、vは1、2、3又は4であり、wは1、2又は3である)を含み、例えば-Y-L1-X1-[CH2]z-が、-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2-、-CH2O-、-CH2CH2O-、-CH2CH2CH2O-、-CH2CH2CH2CH2O-、-C(=O)-CH2-、-C(=O)-CH2O-、-C(=O)-NH-CH2-、又は-C(=O)-NH-CH2O-である。
【００４６】
基R1
本発明の化合物のあるクラスにおいて、R1は、カルボン酸基である。このクラスの化合物は、カルボン酸又はその塩として投与され得るが、これらが、細胞内で、R1がエステル基である対応する化合物に対する細胞内エステラーゼの作用により生じることが好ましい。
【００４７】
エステル基R1は、本発明の化合物において、1又は複数の細胞内カルボキシルエステラーゼ酵素によりカルボン酸基に加水分解され得るものでなければならない。本発明の化合物のエステル基を対応する酸に加水分解可能な細胞内カルボキシルエステラーゼ酵素は、3つの既知のヒト酵素アイソタイプhCE-1、hCE-2及びhCE-3を含む。これらが主要な酵素であると考えられるが、ビフェニルヒドロラーゼ(BPH)のような他の酵素も、エステルの加水分解において役割を有し得る。通常、カルボキシルエステラーゼが遊離のアミノ酸エステルを親の酸に加水分解するならば、阻害剤に共有的にコンジュゲートされているエステルモチーフも加水分解するであろう。よって、本明細書に記載される破砕細胞アッセイ及び／又は単離されたカルボキシルエステラーゼアッセイは、要求される加水分解プロフィールを有するエステルの直接的で、迅速かつ単純な最初のスクリーニングを提供する。この方法で選択されたエステルモチーフは、次いで、選択されたコンジュゲーション化学により阻害剤にコンジュゲートされた場合に、同じカルボキシルエステラーゼアッセイにおいて再アッセイされ、それがそのバックグラウンドにおいてもまだカルボキシルエステラーゼの基質であることが確認される。
【００４８】
それらが細胞内カルボキシルエステラーゼ酵素により加水分解可能であるという要件に従って、具体的なエステル基R1の例は、式-(C=O)OR14 (式中、R14は、R8R9R10C- (式中、
(i)   R8は、水素、又は任意に置換されていてもよい(C1〜C3)アルキル-(Z1)a-[(C1〜C3)アルキル]b-、又は(C2〜C3)アルケニル-(Z1)a-[(C1〜C3)アルキル]b- (式中、a及びbは、独立して0又は1であり、Z1は、-O-、-S-又は-NR11- (式中、R11は、水素又は(C1〜C3)アルキルである)であり；R9及びR10は、独立して、水素又は(C1〜C3)アルキル-であるか；
(ii)  R8は、水素、又は任意に置換されていてもよいR12R13N-(C1〜C3)アルキル- (式中、R12は、水素又は(C1〜C3)アルキルであり、R13は、水素又は(C1〜C3)アルキルであるか；又はR12及びR13は、それらが結合している窒素と一緒に、任意に置換されていてもよい単環式の5〜6環原子の複素環式環、又は二環式の8〜10環原子の複素環式環系を形成する)であり、R9及びR10は、独立して水素又は(C1〜C3)アルキル-であるか；或いは
(iii) R8及びR9は、それらが結合する炭素と一緒に、任意に置換されていてもよい単環式の3〜7環原子の炭素環式環、又は二環式の8〜10環原子の炭素環式環系を形成し、R10は水素である)
である)のものを含む。
【００４９】
これらのクラス内で、R10は、しばしば水素である。R14の具体的な例は、メチル、エチル、n-若しくはイソ-プロピル、n-、sec-若しくはtert-ブチル、シクロヘキシル、アリル、フェニル、ベンジル、2-、3-若しくは4-ピリジルメチル、N-メチルピペリジン-4-イル、テトラヒドロフラン-3-イル又はメトキシエチルを含む。現在好ましいものは、R14がシクロペンチルであるものである。
【００５０】
マクロファージは、サイトカイン、特にTNFα及びIL-1の放出により炎症性障害において重要な役割を演じていることが知られている(van Roonら, Arthritis and Rheumatism, 2003, 1229〜1238)。リウマチ性関節炎において、これらは、関節の炎症及び関節の破壊の維持に主に寄与する。マクロファージは、腫瘍の成長及び発達にも関与する(Naldini及びCarraro, Curr Drug Targets Inflamm Allergy, 2005, 3〜8)。よって、マクロファージ細胞増殖を選択的に標的にする薬剤は、癌及び自己免疫疾患の治療において価値があるだろう。特定の細胞のタイプを標的することは、副作用の低減を導くことが期待される。本発明者らは、p38キナーゼ阻害剤にマクロファージを標的にさせる方法を見出し、これは、エステラーゼモチーフがp38キナーゼ阻害剤に連結する様式が、それが加水分解されるかを決定し、よって、それが異なる細胞のタイプにおいて蓄積するか否かを決定するという観察に基づく。具体的に、マクロファージが、ヒトカルボキシルエステラーゼhCE-1を含有するが、他のタイプの細胞は含有しないことが見出されている。一般式(I)において、エステラーゼモチーフR1CH(R2)NH-の窒素がカルボニル(-C(=O)-)に直接連結していない場合、すなわちYが-C(=O)、-C(=O)O-又は-C(=O)NR3-基でない場合、エステルは、hCE-1のみによって加水分解され、よって、阻害剤は、マクロファージにおいてのみ蓄積する。本明細書で用いる場合、「単球」と特定しない限り、マクロファージの用語は、マクロファージ(腫瘍関連マクロファージを含む)及び／又は単球のことをいうために用いられる。
【００５１】
アミノ酸側鎖R2
エステル基R1が細胞内カルボキシルエステラーゼ酵素により加水分解され得るという要件に従って、側鎖基R2の同定(identity)は重要でない。
アミノ酸側鎖の例は、以下のものを含む。
C1〜C6アルキル、フェニル、2-、3-若しくは4-ヒドロキシフェニル、2-、3-若しくは4-メトキシフェニル、2-、3-若しくは4-ピリジルメチル、ベンジル、フェニルエチル、2-、3-又は4-ヒドロキシベンジル、2-、3-若しくは4-ベンジルオキシベンジル、2-、3-若しくは4- C1〜C6アルコキシベンジル、及びベンジルオキシ(C1〜C6アルキル)-基；
【００５２】
いずれの官能基が保護されていてもよい天然のαアミノ酸の特徴的な基；
基-[Alk]nR6 (式中、Alkは、1又は複数の-O-若しくは-S-原子又は-N(R7)-基[式中、R7は、水素原子又は(C1〜C6)アルキル基である]が任意に介在していてもよい(C1〜C6)アルキル又は(C2〜C6)アルケニル基であり、nは0又は1であり、R6は、任意に置換されていてもよいシクロアルキル又はシクロアルケニル基である)；
フェニル環において、式-OCH2COR15 (式中、R15は、ヒドロキシル、アミノ、(C1〜C6)アルコキシ、フェニル(C1〜C6)アルコキシ、(C1-C6)アルキルアミノ、ジ((C1〜C6)アルキル)アミノ、フェニル(C1〜C6)アルキルアミノ、アミノ酸又は酸ハロゲン化物の残基、そのエステル又はアミド誘導体(該残基は、アミド結合を介して連結され、該アミノ酸は、グリシン、α若しくはβアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、アスパラギン、グルタミン、リジン、ヒスチジン、アルギニン、グルタミン酸及びアスパラギン酸から選択される)で置換されたベンジル基；
【００５３】
非置換であるか、又は複素環式環においてハロ、ニトロ、カルボキシ、(C1〜C6)アルコキシ、シアノ、(C1〜C6)アルカノイル、トリフルオロメチル (C1〜C6)アルキル、ヒドロキシ、ホルミル、アミノ、(C1〜C6)アルキルアミノ、ジ-(C1〜C6)アルキルアミノ、メルカプト、(C1〜C6)アルキルチオ、ヒドロキシ(C1〜C6)アルキル、メルカプト(C1〜C6)アルキル又は(C1〜C6)アルキルフェニルメチルで1若しくは2置換された複素環式(C1〜C6)アルキル基；並びに
【００５４】
基-CRaRbRc
(式中：
Ra、Rb及びRcはそれぞれ独立して、水素、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、フェニル(C1〜C6)アルキル、(C3〜C8)シクロアルキルであるか；
Rcは水素であり、Ra及びRbは独立して、フェニル又はヘテロアリール、例えばピリジルであるか；
Rcは、水素、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、フェニル(C1〜C6)アルキル又は(C3〜C8)シクロアルキルであり、Ra及びRbは、それらが結合する炭素原子と一緒に、3〜8員のシクロアルキル又は5若しくは6員の複素環式環を形成するか；
Ra、Rb及びRcは、それらが結合する炭素原子と一緒に、3環式の環(例えばアダマンチル)を形成するか；
【００５５】
Ra及びRbはそれぞれ独立して、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、フェニル(C1〜C6)アルキル、又はRcについて以下で定義される水素以外の基であるか、又はRa及びRbは、それらが結合している炭素原子と一緒に、シクロアルキル又は複素環式環を形成し、Rcは、水素、-OH、-SH、ハロゲン、-CN、-CO2H、(C1〜C4)ペルフルオロアルキル、-CH2OH、-CO2(C1〜C6)アルキル、-O(C1〜C6)アルキル、-O(C2〜C6)アルケニル、-S(C1〜C6)アルキル、-SO(C1〜C6)アルキル、-SO2(C1〜C6)アルキル、-S(C2〜C6)アルケニル、-SO(C2〜C6)アルケニル、-SO2(C2〜C6)アルケニル又は-Q2-W (式中、Q2は、結合手又は-O-、-S-、-SO-又は-SO2-を表し、Wは、フェニル、フェニルアルキル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C3〜C8)シクロアルキルアルキル、(C4〜C8)シクロアルケニル、(C4〜C8)シクロアルケニルアルキル、ヘテロアリール又はヘテロアリールアルキル基を表し、基Wは、ヒドロキシル、ハロゲン、-CN、-CO2H、-CO2(C1〜C6)アルキル、-CONH2、-CONH(C1〜C6)アルキル、-CONH(C1〜C6アルキル)2、-CHO、-CH2OH、(C1〜C4)ペルフルオロアルキル、-O(C1〜C6)アルキル、-S(C1〜C6)アルキル、-SO(C1〜C6)アルキル、-SO2(C1〜C6)アルキル、-NO2、-NH2、-NH(C1〜C6)アルキル、-N((C1〜C6)アルキル)2、-NHCO(C1〜C6)アルキル、(C1〜C6)アルキル、(C2〜C6)アルケニル、(C2〜C6)アルキニル、(C3〜C8)シクロアルキル、(C4〜C8)シクロアルケニル、フェニル又はベンジルから独立して選択される1又は複数の置換基で任意に置換されていてもよい)である。
【００５６】
具体的なR2基の例は、水素(グリシンの「側鎖」)、ベンジル、フェニル、シクロヘキシルメチル、シクロヘキシル、ピリジン-3-イルメチル、tert-ブトキシメチル、イソ-ブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、1-ベンジルチオ-1-メチルエチル、1-メチルチオ-1-メチルエチル、1-メルカプト-1-メチルエチル、及びフェニルエチルを含む。現在好ましいR2基は、フェニル、ベンジル、イソ-ブチル、シクロヘキシル及びt-ブトキシメチルを含む。
【００５７】
全身投与される本発明の化合物について、カルボキシルエステラーゼ切断の速度が遅いエステルが好ましい。なぜなら、それらは、前全身性(pre-systemic)代謝に、より影響を受けにくいからである。よって、それらの標的組織に無傷で到達するそれらの能力は増加し、エステルは標的組織の細胞の内部で酸生成物に変換され得る。しかし、エステルが標的組織に直接用いられるか又は指向される局所投与のためには、エステルのエステラーゼ切断速度が迅速であり、全身への曝露、よって望ましくない副作用を最小限にすることがしばしば望ましい。本発明の化合物において、アルファアミノ酸エステルのアルファ炭素に隣接する炭素が1置換されている場合、すなわちR2がCH2Rz (Rzは1置換基である)である場合、このエステルは、R2が例えばフェニル又はシクロヘキシルである場合のように炭素が2又は3置換されている場合よりも、より迅速に切断される傾向にある。
【００５８】
上記のように、本発明に係る化合物は、p38 MAKキナーゼ活性の阻害剤であり、よって、p38 MAPキナーゼ活性が役割を有する乾癬、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、慢性閉塞性肺疾患、喘息、多発性硬化症、糖尿病、アトピー性皮膚炎、移植片対宿主疾患又は全身性エリテマトーデス及びリウマチ性関節炎のような疾患の治療において有用である。
【００５９】
いずれの特定の患者についての具体的な用量レベルが、用いられる具体的な化合物の活性、年齢、体重、全身の健康、性別、食餌、投与の時間、投与経路、排泄経路、薬物の組み合わせ及び治療を受ける特定の疾患の重篤度を含む種々の因子に依存することが理解される。最適な用量レベル及び投与の頻度は、臨床試験により決定される。
【００６０】
本発明に係る化合物は、それらの薬物動態学的特性に矛盾しないいずれの経路による投与のために製造できる。経口投与可能な組成物は、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、ロゼンジ、液剤又はゲル製剤の形であり得、例えば経口、局所若しくは滅菌非経口の溶液又は懸濁液の形であり得る。
経口投与のための錠剤及びカプセル剤は、単位用量提示形態(unit dose presentation form)であり得、通常の賦形剤、例えば結合剤、例えばシロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント又はポリビニルピロリドン；充填剤、例えばラクトース、ショ糖、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、ソルビトール又はグリシン；打錠滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、又はシリカ；崩壊剤、例えばバレイショデンプン、或いは許容される湿潤剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムを含有し得る。錠剤は、通常の製薬のプラクティスにおいて公知の方法に従って被覆できる。
経口の液体製剤は、例えば水性若しくは油性の懸濁剤、液剤、乳剤、シロップ又はエリキシル剤の形であり得るか、或いは使用前に水又はその他の適切なビヒクルを用いる再構成のための乾燥物質であり得る。このような液体製剤は、通常の添加剤、例えば懸濁剤、例えばソルビトール、シロップ、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン硬化食用油；乳化剤、例えばレクチン、ソルビタンモノオレエート、又はアカシア；非水性ビヒクル（食用油を含み得る）、例えばアーモンド油、ヤシ油、油状エステル、例えばグリセリン、プロピレングリコール又はエチルアルコール；防腐剤、例えばメチル若しくはプロピルp-ヒドロキシベンゾエート又はソルビン酸、並びに所望により通常の矯味矯臭剤又は着色剤を含み得る。
【００６１】
皮膚への局所的な塗布のために、薬剤は、クリーム、ローション又は軟膏剤として製造できる。薬剤に使用し得るクリーム又は軟膏の製剤は、例えば英国薬局方のような製薬の標準的な参考書に記載されるような当該技術における通常の製剤である。
【００６２】
吸入による局所的な使用のために、薬剤は、例えば圧力駆動噴射噴霧器又は超音波噴霧器によるか、或いは好ましくは噴射剤駆動計量供給噴霧器又は微粉末の噴射剤フリーの投与、例えば吸入カプセル若しくはその他の「乾燥粉末」送達系によるエアロソル送達用に処方できる。賦形剤、例えば噴射剤(例えば計量供給エアロソルの場合、Frigen)、界面活性剤、乳化剤、安定化剤、防腐剤、矯味矯臭剤及び充填剤(例えば粉末吸入器の場合、ラクトース)が、このような吸入製剤に存在し得る。吸入の目的のために、患者に適する吸入法を用いて、最適粒子サイズのエアロソルを発生させ投与できる多数の装置が利用可能である。アダプタ(スペーサー、エキスパンダー)及び洋ナシ形の容器(例えばNebulator（登録商標）、Volumatic（登録商標）)、及び特に粉末吸入器の場合の計量供給エアロソル用の吹きかけるスプレーを発射する自動装置(Autohaler(登録商標))に加えて、多くの技術的解決法が利用可能である(例えば、Diskhaler（登録商標）、Rotadisk（登録商標）、Turbohaler（登録商標）、又は欧州特許出願EP 0 505 321に記載されるような吸入器)。
【００６３】
眼への局所的な使用のために、薬剤は、安定で滅菌の水性又は非水性のビヒクル中の液剤又は懸濁剤として製造できる。添加剤、例えば緩衝剤、例えばメタ重硫酸ナトリウム又はエデト酸二ナトリウム；殺菌剤及び殺真菌剤を含む防腐剤、例えば酢酸-若しくは硝酸-フェニル第2水銀、塩化ベンザルコニウム又はクロルヘキシジン、及び増粘剤、例えばヒプロメロースも含まれることができる。
【００６４】
活性成分は、滅菌媒体中で非経口的に投与することもできる。用いるビヒクル及び濃度に応じて、薬剤は、ビヒクル中に懸濁又は溶解できる。有利には、アジュバント、例えば局所麻酔剤、防腐剤及び緩衝剤をビヒクル中に溶解できる。
【００６５】
合成
本発明に係る化合物(I)の合成のために多数の合成方策があるが、それらは全て、合成有機化学者に知られる既知の化学に基づく。よって、式(I)の化合物は、標準的な文献に記載され、かつ当業者に公知の手順に従って合成できる。典型的な文献の出典は、"Advanced organic chemistry", 第4版(Wiley), J March、"Comprehensive Organic Transformation", 第2版(Wiley), R.C. Larock、"Handbook of Heterocyclic Chemistry", 第2版(Pergamon), A.R. Katritzky)、"Synthesis"、"Acc. Chem. Res."、"Chem. Rev"に見出される総説文献、又はオンラインの標準的な文献検索若しくは"Chemical Abstracts"若しくは"Beilstein"のような二次的な出典により同定される一次的な文献の出典である。
【００６６】
本発明の化合物は、以下に一般的に、そして以下の実施例により具体的に記載されるいくつかの方法により調製され得る。以下に記載される反応において、反応性官能基、例えばヒドロキシル、アミノ及びカルボキシ基を、最終生成物においてそれらが所望される場合に保護して、それらの望ましくない反応への参加を避ける必要があろう[例えばGreene, T.W., "Protecting Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, 1999を参照されたい]。通常の保護基は、標準的なプラクティスに従って用い得る。一般式(I)の化合物の合成における最終工程が脱保護である場合があり、以下の本明細書に記載される本発明による方法は、保護基のそのような除去に拡張されると理解される。
【００６７】
一般式(I)の化合物の合成に用い得るそのような方法の例は、限定されないが、以下のスキーム1に示す反応に示す。
【化６】
2009535385.tif 000008
【００６８】
よって、一般式(A)のアミノエステルは、一般式(2a)のtert-ブチルカルバメートを、ジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸で処理することにより調製できる。一般式(2)の中間体は、WO 03/076405号及びその中の参考文献に記載される方法により製造できる。一般式(2b)のアミノエステルは、式(2a)の化合物の合成において副産物として形成でき、トリフルオロ酢酸で処理されて、一般式(B)の化合物が得られる。
一般式(5)の中間体エステルは、スキーム2に示す手順により調製できる。
【００６９】
【化７】
2009535385.tif 000009
【００７０】
THF中のパラジウムカーボン触媒上でのニトロベンジル中間体(6)の水素化により、一般式(5)のアミンが得られる。式(6)の中間体は、周囲温度にて、THFのような不活性溶媒中での対応するアミンのジ-tert-ブトキシカーボネートとの反応により調製できる。一般式(7)の中間体は、式(8)のアミノエステルの、4-ニトロベンジルブロミドを用いるアルキル化により製造できる。反応は、DMFのようなジアルキルアミド溶媒中で、炭酸カリウム又は炭酸セシウムのような無機塩基の存在下で行い得る。このような反応は、March's Advanced Organic Chemistry [John Wiley and Sons, 1992]に示されている。
【００７１】
ベンジル置換基のアリール環上にさらなる官能化が要求される一般式(9)のN-ベンジルアミノ酸エステルの別の一般的な合成方法は、スキーム3に示す。
【００７２】
【化８】
2009535385.tif 000010
【００７３】
本発明のさらなる態様において、一般式(9)のアミノエステルは、限定されないが、スキーム3に示す反応により調製できる。よって、市販で入手可能であるか又は当業者に知られる方法により容易に合成できる一般式(11)のベンゾニトリルは、一般式(10)の対応するベンズアルデヒドに、DIBAL-Hのような適切な金属水素化物を用いる還元と、中間体イミンの酸加水分解とにより変換できる[例えばLeBel J. Am. Chem. Soc., 1964, 86, 3759を参照]。一般式(9)のN-ベンジルアミノ酸エステルは、NaBH3CN又はNaBH(OAc)3のようなホウ化水素試薬を、メタノールのようなプロトン性溶媒中の酸性条件下で用いる還元的アルキル化の条件下で上記のベンズアルデヒドとの反応により調製できる[例えばBorschら, J.Am. Chem. Soc., 1971, 93, 2897を参照]。
【００７４】
【化９】
2009535385.tif 000011
【００７５】
本発明のさらなる態様において、一般式(C)の化合物は、スキーム4に示す方法により、一般式(12)のメシレートを用いる一般式(8)の中間体のアルキル化から調製できる。アルキル化は、THFのような不活性エーテル溶媒中で、ヨウ化ナトリウムと炭酸カリウムのような無機塩基との存在下で行い得る。当業者により、対応するアルキルブロミド又はアルキルクロリドが、この方法において有用であることが認識されるだろう。メシレート(12)の製造は、ジクロロメタンのような不活性溶媒中、かつトリエチルアミンのような有機塩基の存在下でのメタンスルホニルクロリドとの1級アルコール(13)の処理により行い得る。一般式(14)の化合物は、WO 03/076405及びその中の参考文献に記載される方法により調製できる。
【００７６】
本発明のさらなる態様において、一般式(D)の化合物は、限定されないが、スキーム5の反応により調製できる。
【００７７】
【化１０】
2009535385.tif 000012
【００７８】
よって、一般式(14)のアルコールは、適切に保護されたシクロアルカノール誘導体、例えば1,4-ジオキサスピロ[4,5]デカン-8-オールと、不活性エーテル溶媒中のトリフェニルホスフィン及びジアルキルアザジカルボキシレート、例えばDEADを用いてアルキル化できる[例えばMitsunobuら, Bull. Chem. Soc. Jpn., 1967, 40, 2380を参照]。一般式(16)のケタールは、水性酸性条件下で対応するケトンに脱保護できる。式(16)の化合物の還元的アミノ化は、シアノホウ素化水素ナトリウム及びトリアセトキシホウ素化水素ナトリウムのようなホウ化水素試薬の存在下で、酸性条件下で一般式(8)のアミノ酸エステルを用いて処理することにより達成でき、一般式(D)の化合物が得られる。
【００７９】
本発明のさらなる態様において、一般式(E)の化合物は、限定されないが、スキーム6の反応により調製できる。
【００８０】
【化１１】
2009535385.tif 000013
【００８１】
式(22)の化合物の還元的アミノ化は、シアノホウ素化水素ナトリウム及びトリアセトキシホウ素化水素ナトリウムのようなホウ化水素試薬の存在下で、酸性条件下にジベンジルアミンを用いる処理により達成でき、一般式(21)の化合物が得られる。(21)の水素化及びチオホスゲンを用いるその後の反応により、一般式(20)のイソシアネートを得ることができる。一般式(19)の化合物は、ナトリウムtert-ブトキシドを用いる対応するアセトフェノンとの(20)の反応により調製できる。(19)のヨードエタンとのアルキル化は、アセトンのような溶媒中で、炭酸カリウムのような無機塩基を用いて行い得る。一般式(18)の化合物は、環化、酸化及びその後のアンモニア置換に供することができ、一般式(17)のケタールが得られる。よって、一般式(17)のケタールは、水性酸性条件下で対応するシクロヘキサノン中間体に脱保護でき、シクロヘキサノンは、次いで、シアノホウ素化水素ナトリウム及びトリアセトキシホウ素化水素ナトリウムのようなホウ化水素試薬を用いる還元的アミノ化の条件下で、一般式(8)のアミノ酸エステルと反応させる。
【００８２】
本発明の別の態様において、一般式(F)のアミノ酸は、限定されないが、スキーム7に示す方法により調製できる。
【００８３】
【化１２】
2009535385.tif 000014
【００８４】
よって、例えば、一般式(C)のアミノ酸エステルは、メタノール又はエタノールのような共溶媒中、周囲温度での水酸化ナトリウム若しくは水酸化カリウム水溶液、又はいずれの適切な塩基の水溶液との処理により、対応するアミノ酸(F)に加水分解され得る。
【００８５】
本発明の別の態様において、一般式(G)のアミノ酸は、限定されないが、スキーム8に示す方法により調製できる。
【００８６】
【化１３】
2009535385.tif 000015
【００８７】
よって、一般式Gのアミノエステルは、一般式(23)のメシレートを用いる一般式(8)の中間体のアルキル化により調製できる。アルキル化は、THFのような不活性エーテル溶媒中で、ヨウ化ナトリウムと炭酸カリウムのような無機塩基との存在下で行い得る。メシレート(23)の調製は、ジクロロメタンのような不活性溶媒中で、トリエチルアミンのような有機塩基の存在下で、メタンスルホニルクロリドを用いる1級アルコール(24)の処理により行い得る。アルコール(24)は、HClのような酸性条件下で、中間体(25)のアセチル基の脱保護により調製できる。一般式(4)、(25)及び(26)の中間体は、WO 03/076405号及びその中の参考文献に記載されるものと同様の方法により調製できる。
【実施例】
【００８８】
以下の実施例は、本発明を説明する。全ての温度は、℃である。以下の略語を用いる。
MeOH = メタノール
EtOH = エタノール
EtOAc = 酢酸エチル
Boc = tert-ブトキシカルボニル
CDI = 1,1'-カルボニルジイミダゾール
DCM = ジクロロメタン
DMF = ジメチルホルムアミド
DMSO = ジメチルスルホキシド
TFA = トリフルオロ酢酸
THF = テトラヒドロフラン
Na2CO3 = 炭酸ナトリウム
HCl = 塩酸
DIPEA = ジイソプロピルエチルアミン
NaH = 水素化ナトリウム
NaOH = 水酸化ナトリウム
NaHCO3 = 炭酸水素ナトリウム
Pd/C = パラジウムカーボン
TME = tert-ブチルメチルエーテル
N2 = 窒素
Na2SO4 = 硫酸ナトリウム
【００８９】
Et3N = トリエチルアミン
NH3 = アンモニア
TMSCl = トリメチルクロロシラン
TBME = 第3級ブチルメチルエーテル
NH4Cl = 塩化アンモニウム
LiAlH4 = 水素化アルミニウムリチウム
MgSO4 = 硫酸マグネシウム
nBuLi = n-ブチルリチウム
CO2 = 二酸化炭素
EDCI = N-(3-ジメチルアミノプロピル)-N'-エチルカルボジイミド 塩酸塩
Et2O = ジエチルエーテル
LiOH = 水酸化リチウム
HOBt = 1-ヒドロキシベンゾトリアゾール
ELS = 蒸発光散乱
TLC = 薄層クロマトグラフィー
【００９０】
ml = ミリリットル
g = グラム
mg = ミリグラム
mol = モル
mmol = ミリモル
LCMS = 高性能液体クロマトグラフィー/質量分析
NMR = 核磁気共鳴
RT = 室温
【００９１】
マイクロ波照射は、CEM Discover集束(focused)マイクロ波反応器を用いて行った。
溶媒は、加熱せずにGeneVac Series Iを用いるか、又は30℃にてVacRampを備えるGenevac Series IIを用いるか、又はBuchiロータリーエバポレータを用いて除去した。
フラッシュクロマトグラフィーカラムによる化合物の精製は、Silicycleから得た粒子サイズ40〜63μm (230〜400メッシュ)のシリカゲルを用いて行った。分取HPLCによる化合物の精製は、逆相ThermoHypersil-Keystone Hyperprep HS C18カラム(12μm、100×21.2 mm)、9.5分かけてのグラジエント20〜100% B (A= 水/ 0.1% TFA、B= アセトニトリル/ 0.1% TFA)、流速= 30 ml/分、注入溶媒2：1 DMSO：アセトニトリル (1.6 ml)、215 nmでのUV検出を用いるGilsonシステムで行った。
【００９２】
1H NMRスペクトルは、重水素化溶媒中でのBruker 400 MHz AV又はBruker 300 MHz AV分光計で記録した。ケミカルシフト(δ)は、百万分率である。薄層クロマトグラフィー(TLC)分析は、Kieselgel 60 F254 (Merck)プレートで行い、UV光を用いて視覚化した。
【００９３】
分析HPLCMSは、Agilent HP1100, Waters 600又はWaters 1525 LCシステムで、逆相Hypersil BDS C18カラム(5μm, 2.1×50 mm)、2.10分かけてのグラジエント0〜95% B (A= 水/ 0.1% TFA, B= アセトニトリル/0.1% TFA)、流速= 1.0 ml/分を用いて行った。UVスペクトルは、215 nmにて、Gilson G1315Aダイオードアレイ検出器、G1214A単一波長UV検出器、Waters 2487二波長UV検出器、Waters 2488二波長UV検出器、又はWaters 2996ダイオードアレイUV検出器を用いて記録した。質量スペクトルは、1秒当たり2スキャン又は1.2秒当たり1スキャンのサンプリング速度にてm/z 150〜850の範囲で、Z-スプレーインターフェースを有するMicromass LCT、又はZ-スプレー若しくはMUXインターフェースを有するMicromass LCTを用いて得た。データは、OpenLynx及びOpenLynx Browserソフトウェアを用いて積分して報告した。
【００９４】
中間体
中間体 1A シクロペンチル (S)-2-[(4-アミノベンジル)-tert-ブトキシカルボニルアミノ]-4-メチルペンタノエート
【化１４】
2009535385.tif 000016
【００９５】
シクロペンチル (S)-2-[tert-ブトキシカルボニル-(4-ニトロベンジル)アミノ]-4-メチルペンタノエート(3.8g, 8.74mmol)を、EtOH (100ml)に溶解した後に、Pd/C (10%湿潤)触媒(100mg)を加え、バルーン圧の下で室温にて18時間水素化した。反応混合物を、セライトパッドを通してろ過し、蒸発乾固して、ピンク色の固体を得た(3.15g, 89%収率)。 LCMS純度 100%, m/z 405 [M+H]+。
【００９６】
この手順のためのニトロベンジルカルバメート出発物質は、以下のようにして調製した。
【化１５】
2009535385.tif 000017
【００９７】
シクロペンチル (S)-(4-ニトロベンジル)アミノ]-4-メチルペンタノエート(15.8g, 47.4mmol)を、THF (250ml)に溶解した後に、炭酸カリウム(7.58g, 56.9mmol)及び水(150ml)を加えた。ジ-tert-ブチルジカーボネート(15.5g, 71.1mmol)を加え、反応混合物を50℃にて18時間加熱した。反応混合物を、減圧下に濃縮して、揮発性物質を除去し、水性の残渣を得て、これをEtOAc (200ml)で抽出した。EtOAc層を0.1 M HCl (150ml)、飽和NaHCO3水溶液及び水(150 ml)で連続的に洗浄した。有機層を乾燥させ(Na2SO4)、ろ過し、濃縮乾燥した。フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製(10% EtOAc/ ヘキサン)の後に、生成物を単離した(9.36g, 46%収率)。LC純度 94%, m/z 435 [M+H]+。
【００９８】
この手順において用いたニトロベンジルアミノ出発物質は、次のようにして調製した。
【化１６】
2009535385.tif 000018
【００９９】
4-ニトロベンジルブロミド(11g, 50 mmol)をDMF (180ml)に溶解し、炭酸カリウム(13.6g, 99 mmol)、次いでL-ロイシンシクロペンチルエステル(中間体 8) (16g, 43 mmol)を加えた。反応物をRTにて18時間撹拌した。残渣をEtOAc (500ml)で希釈し、水(3×100ml)で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、濃縮乾燥して粗生成物(15.8g)を得て、これを、さらなる精製を行わずに次の工程で用いた。LCMS純度 60%, m/z 335 [M+H]+。
【０１００】
以下の化合物は、同様の方法で調製した。
中間体1B シクロペンチル (S)-2-[(4-アミノベンジル)-tert-ブトキシカルボニルアミノ]-3-フェニルプロピオネート
【化１７】
2009535385.tif 000019
LCMS純度 75%, m/z 439 [M+H]+。
【０１０１】
中間体1C シクロペンチル (S)-[(4-アミノベンジル)-tert-ブトキシカルボニルアミノ]-フェニルアセテート
【化１８】
2009535385.tif 000020
LCMS純度 100%, m/z 425 [M+H]+。
【０１０２】
中間体1D シクロペンチル (S)-2-[(4-アミノ-3,5-ジフルオロベンジル)-tert-ブトキシカルボニルアミノ]-4-メチルペンタノエート
【化１９】
2009535385.tif 000021
【０１０３】
シクロペンチル 2(S)-(4-アミノ-3,5-ジフルオロベンジル)アミノ]-4-メチルペンタノエート(2.54g 粗製, 推定5.73mmol)を、THF (25ml)及び水(25ml)の混液に溶解した。K2CO3 (5.15g, 37.3mmol)及びBoc2O (8.14g, 37.2mmol)を加え、RTでの撹拌を18時間継続した。揮発性物質を減圧下に除去し、残存水相をEtOAc (50ml)で抽出した。有機層を乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、減圧下に濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーによる精製(5% EtOAc/ ヘプタン)により、N-Boc-保護された生成物を得た(1.0g, 40%)。LCMS純度 89% m/z 441 [M+H]+。
【０１０４】
出発物質として用いたベンジルアミノカルバメートは、次のようにして調製した。
【化２０】
2009535385.tif 000022
【０１０５】
1/1 MeOH/ DMF (16ml)中の4-アミノ-3,5-ジフルオロベンズアルデヒド(0.90g, 5.73mmol)の溶液に、L-ロイシンシクロペンチルエステル(中間体8) (3.19g, 8.59mmol)及びK2CO3 (1.19g, 8.59mmol)を加えた。反応混合物を、氷酢酸(滴下)を用いてpH 5〜6に調整し、1時間撹拌した後にNaCNBH3 (0.72g, 11.46mmol)を加えた。撹拌を、室温にて18時間継続した。反応混合物を濃縮してMeOHを除去し、EtOAc (20ml)で希釈し、NaHCO3 (5ml)、次いで水(10ml)で洗浄した。有機層を乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、真空濃縮して、粗生成物を得て(2.54g)、これを、さらなる精製を行わずに次の工程で反応させた。LC純度= 68%。
【０１０６】
出発物質として用いたベンズアルデヒドは、次のようにして調製した。
【化２１】
2009535385.tif 000023
【０１０７】
トルエン(16ml)中の4-アミノ-3,5-ジフルオロベンゾニトリル(2.0g, 12.98mmol)の撹拌した溶液に、DIBAL (トルエン中に1.5M)を0℃にて滴下した。反応混合物をRTに温め、撹拌を2時間継続した。反応を、10%クエン酸水溶液(10ml)の滴下により停止した。EtOAc (50ml)及び飽和酒石酸カリウムナトリウム(ロッシェル塩)水溶液(30ml)を加え、混合物を20分間激しく撹拌した。有機層を単離し、水(10ml)で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、濃縮乾燥して淡黄色の固体を得た(1.9g, 93%)、LCMS純度 92%, m/z 158 [M+H]+。
【０１０８】
以下の化合物は、同様の方法で調製した。
中間体1E シクロペンチル (S)-2-[(4-アミノ-3,5-ジフルオロベンジル)-tert-ブトキシカルボニルアミノ]-3-フェニルプロピオネート
【化２２】
2009535385.tif 000024
LCMS純度 86%, m/z 475 [M+H]+。
【０１０９】
中間体1F シクロペンチル (S)-2-[(4-アミノ-3,5-ジフルオロベンジル)-tert-ブトキシカルボニルアミノ]-フェニルアセテート
【化２３】
2009535385.tif 000025
LCMS純度 86%, m/z 461 [M+H]+。
【０１１０】
中間体 2A シクロペンチル (S)-[tert-ブトキシカルボニル-(-4[[3-(4-フルオロフェニル)-3-オキソプロピオンイミドイル]アミノベンジル)アミノフェニルアセテート
【化２４】
2009535385.tif 000026
【０１１１】
3-(4-フルオロフェニル)-3-オキソチオプロピオンイミド酸 4-クロロフェニルエステル[WO 03/076405] (300mg, 0.874mmol)、中間体1C (0.41g, 0.961mmol)及び氷酢酸(3 ml)の混合物を、80℃にて2時間撹拌した。反応混合物を減圧下に蒸発乾固して、濃厚な残渣を得て、これをエーテル(3ml)で粉砕した。得られた固体を吸引ろ過により回収した。生成物を、EtOAc (20ml)及び飽和NaHCO3水溶液(10ml)とに分配することにより中性にした。有機層を乾燥させ(Na2SO4)、ろ過し、真空濃縮した。収率 =305mg (59%)。LCMS純度= 75%, m/z 588 [M+H]+。生成物を、さらなる精製を行わずに次の工程で用いた。
【０１１２】
以下の出発物質は、同様の方法で調製した。
中間体2B シクロペンチル (S)-2-[tert-ブトキシカルボニル-(4-[[3-(4-フルオロフェニル)-3-オキソプロピオンイミドイル]アミノ]ベンジル)アミノ]-3-フェニルプロピオネート
【化２５】
2009535385.tif 000027
中間体1Bから、LCMS純度76%, m/z 602 [M+H]+。
【０１１３】
中間体2C シクロペンチル (S)-2-[tert-ブトキシカルボニル-(4-[[3-(4-フルオロフェニル)-3-オキソプロピオンイミドイル]アミノ]ベンジル)アミノ]-4-メチルペンタノエート
【化２６】
2009535385.tif 000028
中間体1Aから、LCMS純度55%, m/z 568 [M+H]+。
【０１１４】
中間体2D シクロペンチル (S)-[tert-ブトキシカルボニル-(-4-[3-(2,4-フルオロフェニル) -3-オキソプロピオンイミドイル]アミノベンジル)アミノフェニルアセテート
【化２７】
2009535385.tif 000029
中間体1Cから、LCMS純度76%, m/z 606 [M+H]+。
【０１１５】
中間体2E  シクロペンチル (S)-2-[tert-ブトキシカルボニル-(4-[[3-(2,4-ジフルオロフェニル)-3-オキソプロピオンイミドイル]アミノ]ベンジル)アミノ]-3-フェニルプロピオネート
【化２８】
2009535385.tif 000030
中間体1Bから、LCMS純度78%, m/z 620 [M+H]+。
【０１１６】
中間体2F シクロペンチル (S)-2-[tert-ブトキシカルボニル-(4-[[3-(2,4-ジフルオロフェニル)-3-オキソプロピオンイミドイル]アミノ]ベンジル)アミノ]-4-メチルペンタノエート
【化２９】
2009535385.tif 000031
中間体1Aから、LCMS純度76%, m/z 586 [M+H]+。
【０１１７】
中間体2G シクロペンチル (S)-[tert-ブトキシカルボニル-(-4-[3-(3-メチル-4-フルオロフェニル)-3-オキソプロピオンイミドイル]アミノベンジル)アミノフェニルアセテート
【化３０】
2009535385.tif 000032
中間体1Cから、LCMS純度77%, m/z 602 [M+H]+。
【０１１８】
中間体2H シクロペンチル (S)-2-[tert-ブトキシカルボニル-(4-[[3-(3-メチル-4-フルオロフェニル)-3-オキソプロピオンイミドイル]アミノ]ベンジル)アミノ]-3-フェニルプロピオネート
【化３１】
2009535385.tif 000033
中間体1Bから、LCMS純度77%, m/z 616 [M+H]+。
【０１１９】
中間体2I シクロペンチル (S)-2-[tert-ブトキシカルボニル-(4-[[3-(3-メチル-4-フルオロフェニル)-3-オキソプロピオンイミドイル]アミノ]ベンジル)アミノ]-4-メチル ペンタノエート
【化３２】
2009535385.tif 000034
中間体1Aから、LCMS純度77%, m/z 582 [M+H]+。
【０１２０】
中間体2J シクロペンチル (S)-[tert-ブトキシカルボニル-(3,5-ジフルオロ-4-[[3-(4-フルオロフェニル)-3-オキソ-プロピオンイミドイル]アミノ]ベンジル)アミノ]フェニルアセテート
【化３３】
2009535385.tif 000035
中間体1Fから、LCMS純度 %, m/z 624[M+H]+。
【０１２１】
中間体2K シクロペンチル (S)-2-[tert-ブトキシカルボニル-(3,5-ジフルオロ-4-[[3-(4-フルオロ-フェニル)-3-オキソプロピオンイミドイル]アミノ]ベンジル)アミノ]-4-メチル ペンタノエート
【化３４】
2009535385.tif 000036
中間体1Dから、LCMS純度 %, m/z 604 [M+H]+。
【０１２２】
中間体2L シクロペンチル (S)-2-[tert-ブトキシカルボニル-(3,5-ジフルオロ-4-[[3-(4-フルオロ-フェニル)-3-オキソ-プロピオンイミドイル]アミノ]ベンジル)-アミノ]-3-フェニル プロピオネート
【化３５】
2009535385.tif 000037
中間体1Eから、LCMS純度100%, m/z 638 [M+H]+。
【０１２３】
中間体2M シクロペンチル (S)-2-[tert-ブトキシカルボニル-(3,5-ジフルオロ-4-[[3-(2,4-ジフルオロフェニル)-3-オキソプロピオンイミドイル]アミノ]ベンジル)アミノ]-4-メチルペンタノエート
【化３６】
2009535385.tif 000038
中間体1Dから、LCMS純度86%, m/z 622 [M+H]+。
【０１２４】
中間体3A シクロペンチル (S)-([4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジニル-1-イル]ベンジル]-tert-ブトキシカルボニルアミノ)フェニルアセテート
【化３７】
2009535385.tif 000039
【０１２５】
中間体2A (305mg, 0.52mmol)のMeOH (5ml)溶液に、プロピオール酸メチル(70μl, 0.78mmol)を加えた。混合物を80℃にて3時間加熱した。反応混合物を真空濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製した(30% EtOAc/ ヘプタン)。収率= 200mg (60%)。LCMS純度80%, m/z 640 [M+H]+。
【０１２６】
以下の化合物は、同様の様式で製造した。
中間体3B シクロペンチル (S)-([4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジニル-1-イル]ベンジル]-tert-ブトキシカルボニルアミノ)フェニルアセテート
【化３８】
2009535385.tif 000040
中間体2Dから、LCMS純度71%, m/z 658 [M+H]+。
【０１２７】
中間体3C シクロペンチル (S)-([4-[6-アミノ-5-(3-メチル-4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジニル-1-イル]ベンジル]-tert-ブトキシカルボニルアミノ)フェニルアセテート
【化３９】
2009535385.tif 000041
中間体2Gから、LCMS純度73%, m/z 654 [M+H]+。
【０１２８】
中間体3D シクロペンチル (S)-2-([4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジル]-tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-フェニルプロピオネート
【化４０】
2009535385.tif 000042
中間体2Bから、LCMS純度64%, m/z 654 [M+H]+。
【０１２９】
中間体3E シクロペンチル (S)-2-([4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-ベンジル]-tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-フェニルプロピオネート
【化４１】
2009535385.tif 000043
中間体2Eから、LCMS純度59%, m/z 672 [M+H]+。
【０１３０】
中間体3F シクロペンチル (S)-2-([4-[6-アミノ-5-(3-メチル-4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-ベンジル]-tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-フェニル プロピオネート
【化４２】
2009535385.tif 000044
中間体2Hから、LCMS純度87%, m/z 668 [M+H]+。
【０１３１】
中間体3G シクロペンチル (S)-2-([4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジル]-tert-ブトキシカルボニルアミノ)-4-メチルペンタノエート
【化４３】
2009535385.tif 000045
中間体2Cから、LCMS純度82%, m/z 620 [M+H]+。
【０１３２】
中間体3I シクロペンチル (S)-2-([4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジル]-tert-ブトキシカルボニルアミノ)-4-メチルペンタノエート
【化４４】
2009535385.tif 000046
中間体2Fから、LCMS純度84%, m/z 638 [M+H]+。
【０１３３】
中間体3J シクロペンチル (S)-2-([4-[6-アミノ-5-(3-メチル-4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジル]-tert-ブトキシカルボニルアミノ)-4-メチルペンタノエート
【化４５】
2009535385.tif 000047
中間体2Iから、LCMS純度90%, m/z 634 [M+H]+。
【０１３４】
中間体3K シクロペンチル (S)-2-([4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロベンジル]-tert-ブトキシカルボニルアミノ)-3-フェニル プロピオネート
【化４６】
2009535385.tif 000048
中間体2Lから、LCMS純度92%, m/z 690 [M+H]+。
【０１３５】
中間体3L シクロペンチル (S)-2-([4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロベンジル]-tert-ブトキシカルボニルアミノ)-4-メチル ペンタノエート
【化４７】
2009535385.tif 000049
中間体2Mから、LCMS純度92%, m/z 674 [M+H]+。
【０１３６】
中間体4A メタンスルホン酸 3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチル-ベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピル エステル
【化４８】
2009535385.tif 000050
【０１３７】
6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチル-ベンゾイル)-1-[4-(3-ヒドロキシ-プロポキシ)-フェニル]-1H-ピリジン-2-オン(100mg, 0.25mmol)の無水DCM (1ml)中の懸濁物に、メタンスルホニルクロリド(21.5μl, 0.28mmol)、次いでEt3N (70μl, 0.50mmol)を0℃にて加えた。反応混合物を、RTまで温め、完了まで10〜20分間撹拌し、TLC (5% MeOH/ DCM)によりモニターした。反応混合物をDCM (10ml)で希釈し、10%クエン酸(5ml)、次いで飽和NaHCO3水溶液(5ml)及び水(5ml)で洗浄した。DCM層を乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、真空濃縮した。収率= 105mg (88%)。LCMS純度 = 79% m/z= 475 [M+H]+。この物質を、さらなる精製を行わずに次の工程で用いた。
【０１３８】
出発物質として用いたアルコールは、次のようにして調製した。
6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチル-ベンゾイル)-1-[4-(3-ヒドロキシ-プロポキシ)-フェニル]-1H-ピリジン-2-オンを、次のようにして調製した。
6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチル-ベンゾイル)-1-[4-ヒドロキシ-フェニル]-1H-ピリジン-2-オン[WO 03/076405] (0.80g, 2.37mmol)、3-ブロモ-1-プロパノール(0.23 ml, 2.60mmol)、K2CO3 (1.37g, 9.46mmol)、NaI (0.73g, 4.86mmol)のアセトン(20ml)中の混合物を、N2の下で、70℃にて18時間加熱した。反応混合物を、減圧下に濃縮し、水(20ml)に懸濁し、得られた固体をろ過し、エーテル(0.5ml)で洗浄した。収率= 0.8g (85%)。LCMS純度= 96%, m/z 397 [M+H]+
【０１３９】
以下のメタンスルホネート中間体は、対応する4-ヒドロキシフェニル中間体の合成についてWO 03/076405号に記載される方法を用いて、中間体4Aと同様にして調製した。
【０１４０】
中間体4B メタンスルホン酸 3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピル エステル
【化４９】
2009535385.tif 000051
LCMS純度 66%, m/z 461 [M+H]+。
【０１４１】
中間体4C メタンスルホン酸 3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピル エステル
【化５０】
2009535385.tif 000052
LCMS純度88%, m/z 479 [M+H]+。
【０１４２】
中間体4D メタンスルホン酸 3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチル-ベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル エステル
【化５１】
2009535385.tif 000053
LCMS純度51%, m/z 511 [M+H]+。
【０１４３】
中間体4E メタンスルホン酸 3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]-プロピル エステル
【化５２】
2009535385.tif 000054
LCMS純度72%, m/z 497 [M+H]+。
【０１４４】
中間体4F メタンスルホン酸 3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル エステル
【化５３】
2009535385.tif 000055
LCMS純度81%, m/z 515 [M+H]+。
【０１４５】
以下の中間体は、4-ヒドロキシフェニル中間体(WO03/076405号に記載される)の1-ブロモ-5-クロロペンタンを用いる直接アルキル化により調製した。
中間体4G 6-アミノ-1-[4-[(5-クロロペンチル)オキシ]-2,6-ジフルオロフェニル]-5-(2,4-ジフルオロ-ベンゾイル)ピリジン-2(1H)-オン
【化５４】
2009535385.tif 000056
【０１４６】
6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-1-(2,6-ジフルオロ-4-ヒドロキシフェニル)-ピリジン-2(1H)-オン(300 mg, 0.79 mmol)のアセトン(6 ml)溶液に、窒素雰囲気下で、1-ブロモ-5-クロロペンタン(0.115 ml, 0.87 mmol, 1.1 eq)、ヨウ化ナトリウム(238 mg, 1.59 mmol, 2 eq)及び炭酸カリウム(438 mg, 3.17 mmol, 4 eq)を加えた。混合物を、70℃にて16時間加熱した後に、室温まで冷却させ、EtOAc (50 ml)と水(50 ml)とに分配した。有機層をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下に濃縮した。カラムクロマトグラフィーによる精製(ヘプタン中30 %のEtOAc)により、表題化合物と6-アミノ-1-[4-[(5-ヨードペンチル)オキシ]-2,6-ジフルオロフェニル]-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)ピリジン-2(1H)-オン(142 mg)との3:2混合物を得て、これをさらなる精製を行わずに用いた。
LC/MS: m/z 483, 575 [M+H]+。
【０１４７】
中間体4H  6-アミノ-1-[4-[(5-クロロペンチル)オキシ]-2,6-ジフルオロフェニル]-5-(4-フルオロ-ベンゾイル)ピリジン-2(1H)-オン
【化５５】
2009535385.tif 000057
【０１４８】
6-アミノ-5-(2,4-フルオロベンゾイル)-1-(2,6-ジフルオロ-4-ヒドロキシフェニル)-ピリジン-2(1H)-オン(200 mg, 0.56 mmol)の 無水DMF (6 ml)溶液に、窒素雰囲気下で、1-ブロモ-5-クロロペンタン(0.088 ml, 0.67 mmol, 1.2 eq)及び炭酸カリウム(115 mg, 0.83 mmol, 1.5 eq)を加えた。混合物を40℃にて19時間加熱した後に、室温まで冷却させ、EtOAc (20 ml)で希釈した。溶液を水(3×20 ml)及び塩水(20 ml)で洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下に濃縮した。カラムクロマトグラフィーによる精製(ヘプタン中20〜40%のEtOAc)により、表題化合物を黄色固体として得て(104 mg)、これをさらなる精製を行わずに用いた。
LC/MS: m/z 465 [M+H]+.  1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7.60 (2H, m), 7.53 (1H, d, J=9.4 Hz), 7.33 (2H, m), 7.05 (2H, m), 5.72 (1H, d, J=9.8 Hz), 4.11 (2H, t, J=6.3 Hz), 3.68 (2H, t, J=6.5 Hz), 1.84-1.77 (4H, m), 1.56 (2H, m).
【０１４９】
中間体4J メタンスルホン酸 2-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-ベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-フェニル]-エチル エステル
【化５６】
2009535385.tif 000058
【０１５０】
6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチル-ベンゾイル)-1-[4-(2-ヒドロキシ-エチル)-フェニル]-1H-ピリジン-2-オン(150mg, 0.43mmol)の無水DCM (3ml)中の懸濁物に、0℃にて、メタンスルホニルクロリド(34μl, 0.47mmol)、続いてEt3N (120μl, 0.85mmol)を加えた。反応混合物を、RTまで温め、完了まで24時間撹拌した。反応混合物をDCM (10ml)で希釈し、10%クエン酸(5ml)、続いて飽和NaHCO3水溶液(5ml)及び水(5ml)で洗浄した。DCM層を乾燥し(MgSO4)、ろ過し、真空濃縮した。収率= 183mg (粗製)。LCMS純度 = 85% m/z= 431 [M+H]+。この物質を、さらなる精製を行わずに次の工程で用いた。出発物質として用いたアルコールは、次のようにして調製した。
【０１５１】
酢酸 2-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-ベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-フェニル]-エチル エステル(300mg)を、水(5ml)及び濃HCl (5ml)に溶解し、100℃まで1時間加熱した。反応物を次いで冷却し、10mlの水で希釈し、ろ過した。得られた固体を、次いで、減圧下に乾燥させて、264mgの生成物を得た、m/z= 353 [M+H]+。
【０１５２】
出発物質として用いた酢酸 2-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-ベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-フェニル]-エチル エステルは、次のようにして調製した。
プロピオール酸(270μl, 4.39mmol)及びCDI (712mg, 4.34mmol)のTHF (13ml)溶液を、0℃からRTまで温め、1.5時間撹拌した。この溶液に、THF (6ml)中の酢酸 2-(4-[[3-(4-フルオロ-フェニル)-3-オキソ-プロピオンイミドイル]-アミノ]-フェニル)-エチル エステル (1g, 2.92mmol)を加え、反応物を80℃まで最大2時間かけて加熱した。冷却及び減圧下での蒸発の後に、粗製残渣をメタノール(7ml)で超音波破砕し、その後、ろ過し、最少量のメタノールで洗浄した。オフホワイトの固体を回収した(350mg 粗製)。
【０１５３】
出発物質として用いた酢酸 2-(4-[[3-(4-フルオロ-フェニル)-3-オキソ-プロピオンイミドイル]-アミノ]-フェニル)-エチル エステルは、次のようにして調製した。
3-(4-フルオロ-フェニル)-3-オキソ-チオプロピオンイミド酸 4-クロロ-フェニルエステル(1g, 2.9mmol)及び4-アミノフェネチルアルコール(418mg, 3.08mmol)を、酢酸(5ml)に溶解し、80℃まで24時間の期間加熱した。反応物をRTまで冷却し、減圧下に蒸発させた。粗製残渣をDCM及びNa2CO3に分配した。DCM層を、塩水でさらに洗浄し、MgSO4で乾燥させた後に、減圧下に蒸発させた。生成物を、アセチル化生成物：アルコールの3：1混合物として単離した(1g 粗製)。これを、上記の環化反応に、未精製で用いた。生成物のm/z= 343 [M+H]+,アルコール m/z= 301 [M+H]+。
【０１５４】
中間体5  6-アミノ-1-[2,6-ジフルオロ-4-(4-オキソ-シクロヘキシルオキシ)フェニル]-5-(4-フルオロベンゾイル)-1H-ピリジン-2-オン
【化５７】
2009535385.tif 000059
【０１５５】
6-アミノ-1-[4-(1,4-ジオキサ-スピロ[4.5]デシ-8-イルオキシ)-2,6-ジフルオロ-フェニル]-5-(4-フルオロベンゾイル)-1H-ピリジン-2-オン(0.55g, 1.10mmol)の1,4-ジオキサン(10ml)溶液に、2M HCl水溶液(5ml)を室温にて加えた。撹拌を、18時間継続した。反応の完了の際に、反応混合物を水(10ml)で希釈し、その後、減圧下でジオキサンを蒸発させた。残存水溶液をEtOAc (2×10ml)で抽出した。合わせた有機層を乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、減圧下に濃縮乾燥して、所望のケトンを白色固体として得た(0.43g, 86%). LCMS純度98%, m/z 457 [M+H]+,1H NMR (400 MHz, CDCl3), δ: 2.05-2.15 (2H, m), 2.25-2.45 (4H, m), 2.55-2.70 (2H, m), 4.65-4.75 (1H, m), 5.85 (1H, d), 6.70-6.75 (2H, m), 7.05-7.15 (2H, m), 7.50-7.65 (3H, m),
【０１５６】
出発物質として用いたケタールを、次のようにして調製した。
【化５８】
2009535385.tif 000060
【０１５７】
1,4-ジオキサ-スピロ[4.5]デカン-8-オール(0.5g, 1.45mmol)のTHF (1.5ml)溶液に、撹拌しながら6-アミノ-1-(2,6-ジフルオロ-4-ヒドロキシフェニル)-5-(4-フルオロ-ベンゾイル)-1H-ピリジン-2-オン(WO 03/076405号に記載される方法により調製) (0.5g, 1.39mmol)及びトリフェニルホスフィン(0.38g, 1.45mmol)をRTにて加えた。ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(0.29ml, 1.45mmol)を滴下し、撹拌を18時間継続した。反応混合物を蒸発乾固し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の物質を白色固体として得た(0.55g, 79%)。LCMS純度99%, m/z 501 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CDCl3), δ: 1.55-1.65 (2H, m), 1.75-2.00 (6H, m), 3.85-3.90 (4H, m,), 4.35-4.40 (1H, m), 5.85 (1H, d), 6.10-6.20 (2H, m), 7.05-7.15 (2H, m), 7.45-7.60 (3H, m).
【０１５８】
中間体6  6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-1-(4-オキソ-シクロヘキシル)-1H-ピリジン -2-オン
【化５９】
2009535385.tif 000061
【０１５９】
2M HCl (14ml)を、6-アミノ-1-(1,4-ジオキサ-スピロ[4.5]デシ-8-イル)-5-(4-フルオロベンゾイル)-1H-ピリジン-2-オン(664mg, 1.78mmol)の1,4-ジオキサン(60ml)中の黄色溶液に、RTにて加えた。得られた黄色溶液を、RTにて24時間撹拌し、次いで、H2O (30ml)で希釈し、真空濃縮して1,4-ジオキサンを除去し、黄色の結晶固体を得た。固体をろ過により単離し、H2Oで洗浄し、空気乾燥して黄色の結晶固体を得た。収率 = 479mg, 82%。LCMS純度92%, m/z 329 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CDCl3), δ: 1.90-2.30 (8H, m), 5.35 (1H, m), 5.65 (1H, d), 7.05-7.15 (2H, m), 7.30 (1H, d), 7.35-7.45 (2H, m), 11.45 (1H, s).
【０１６０】
上記の手順において出発物質として用いたピリドンアセタールは、次のようにして調製した。
【化６０】
2009535385.tif 000062
トリエチルアミン(0.74ml, 5.31mmol)を、1-(1,4-ジオキサ-スピロ[4.5]デシ-8-イル)-6-エタンスルフィニル-5-(4-フルオロベンゾイル)-1H-ピリジン-2-オン(1.046g,2.42 mmol)の1,4-ジオキサン中0.5MのNH3 (30ml)の溶液に、RTにてN2の下で加えた。得られた黄色の溶液を、RTにて一晩撹拌し、次いで真空濃縮して黄色固体を得て、これをTBMEで粉砕し、ろ過により単離し、TBMEで洗浄して、淡黄色の固体を得た。収率 = 802mg, 89%. LCMS純度100%, m/z 373 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CDCl3), δ:1.90-2.00 (6H, m), 2.60 (2H, m), 4.15 (4H, m), 5.90 (1H, d), 7.25 (2H, m), 7.55 (1H, d), 7.65 (2H, m).
【０１６１】
上記の手順で用いたスルホキシドは、次のようにして調製した。
【化６１】
2009535385.tif 000063
【０１６２】
m-クロロ過安息香酸(583mg, 2.60mmol)を、1-(1,4-ジオキサスピロ[4.5]デシ-8-イル)-6-エチルスルファニル-5-(4-フルオロベンゾイル)-1H-ピリジン-2-オン(986mg, 2.36mmol)のCH2Cl2 (30ml)中の黄色溶液に、RTにてN2の下で一度に加えた。得られた黄色溶液を、RTにて一晩撹拌し、次いでCH2Cl2 (25ml)で希釈し、飽和Na2SO3 (2×30ml)、飽和NaHCO3 (2×30ml)、H2O (30ml)で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、真空濃縮して、明黄色の油を得た。収率 = 1.046g, 102%. LCMS純度96%, m/z 434 [M+H]+。
【０１６３】
上記の手順で用いたスルフィドは、次のようにして調製した。
【化６２】
2009535385.tif 000064
【０１６４】
1-クロロ-N,N-2-トリメチルプロペニルアミン(2.03ml, 15.34mmol)を、プロピオール酸(0.94ml, 15.34mmol)の無水THF (50ml)中の無色の溶液に、0℃にてN2の下で加えた。得られた無色の溶液を、0℃にて2時間撹拌し、その後、N-(1,4-ジオキサ-スピロ[4.5]デシ-8-イル)-3-(4-フルオロフェニル)-3-オキソ-チオプロピオンイミド酸(4.667g, 12.79mmol)の無水THF (50ml)中の黄色溶液を5分かけて0℃にて加えた。得られた黄色溶液を、次いで、RTまで温め、24時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮して、暗茶色の油を得て、これをEtOAc (20ml)で希釈し、RTにて一晩放置して、結晶固体を得て、これをろ過により単離し、ヘプタン及びTBMEで洗浄した。収率 = 216mg。ろ液を真空濃縮して、茶色の固体を得て、これをCH2Cl2 (100ml)に溶解し、飽和Na2CO3 (3×100ml)、H2O (2×100ml)で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、真空濃縮して、茶色の油を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製(シリカ, 100% CH2Cl2〜30% EtOAc/CH2Cl2)により、TBMEでの粉砕の後に、環化生成物を得た。収率 = 770mg。全体の収率 = 986mg, 19%。LCMS純度100%, m/z 418 [M+H]+。
【０１６５】
上記の手順で用いたチオプロピオンイミド酸は、次のようにして調製した。
【化６３】
2009535385.tif 000065
【０１６６】
K2CO3 (16.1g, 117mmol)を、N-(1,4-ジオキサスピロ[4.5]デシ-8-イル)-3-(4-フルオロフェニル)-3-オキソ-チオプロピオンアミド(18.8g, 55.7mmol)のアセトン(200ml)溶液に、RT/N2にて加え、続いてヨウ化エチル(6.68ml, 83.6mmol)を加えた。反応混合物を、RT/N2にて2時間撹拌し、次いで真空濃縮して、茶色のペーストを得て、これをEtOAc (300ml)に採取し、H2O (250ml)で洗浄した。有機層を分離し、水相をEtOAc (2×150ml)で抽出した。合わせた有機層を乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、茶色の油を真空濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製(シリカ, 15% EtOAc/ヘプタン)により、黄色の油を得た。収率 = 9.94g, 49%. LCMS純度94%, m/z 366 [M+H]+。
【０１６７】
上記の手順で用いたチオプロピオンアミドは、次のようにして調製した。
【化６４】
2009535385.tif 000066
【０１６８】
4-フルオロアセトフェノン(6.76ml, 55.7mmol)のTHF (50ml)溶液を、ゆっくりと5分かけてKOtBu (6.56g, 58.5mmol)のTHF (40ml)溶液に撹拌しながら0℃にて加えた。8-イソチオシアネート-1,4-ジオキサスピロ[4.5]デカン(11.1g, 55.7mmol)のTHF (30ml)溶液を0℃にて5分かけて加え、得られた混合物を0℃にて90分間撹拌した。反応混合物を蒸発乾固して、暗茶色の固体を得て、これを粗製のまま次の段階に用いた。収率 = 18.8g, 100%。LCMS純度55%, m/z 338 [M+H]+。
【０１６９】
上記の手順で用いたイソチオシアネートは、次のようにして調製した。
【化６５】
2009535385.tif 000067
【０１７０】
炭酸カルシウム(13.75g, 137.4mmol)を、1,4-ジオキサスピロ[4.5]デシ-8-イルアミン(13.5g, 85.9mmol)のCH2Cl2 (675ml)及びH2O (330ml)溶液に、激しく撹拌しながらRTにて加えた。チオホスゲン(8.5ml, 111.6mmol)を5分かけて滴下し、添加の完了時に反応混合物をRTにて2時間撹拌した。反応混合物をH2O (600ml)で希釈し、CH2Cl2 (300ml)中に抽出した。有機層を乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、真空濃縮して、生成物を得た。収率 = 8.5g, 50%。LCMS純度47%, m/z 200 [M+H]+。
【０１７１】
上記の手順で用いたシクロヘキシルアミンは、次のようにして調製した。
【化６６】
2009535385.tif 000068
【０１７２】
10% Pd(OH)2/C (1g)を、N,N-ジベンジル-N-1,4-ジオキサスピロ[4.5]デシ-8-イルアミン(21.13g, 62.7mmol)のEtOH (400ml)中の微細懸濁物に、RTにて加えた。得られた混合物を、排出し、H2で3回パージし、次いでH2 (バルーン)雰囲気下に一晩保持した。反応混合物を排出し、N2で3回パージし、次いで、触媒をろ過により除去した。ろ液を真空濃縮して、アミンを無色の油として得た。収率 = 14.34g, 99%. LC-MS (ELS検出)純度100%, m/z 158 [M+H]+。
【０１７３】
上記の手順で用いたジベンジルアミンは、次のようにして調製した。
【化６７】
2009535385.tif 000069
【０１７４】
ジベンジルアミン(27.8ml, 145mmol)を、1,4-ジオキサスピロ[4.5]デカン-8-オン(21.5g, 138mmol)のDCE (350ml)溶液に、RTにてN2の下で加え、1時間撹拌した。トリアセトキシホウ素化水素ナトリウム(46.7g, 220mmol)を少しずつ10分かけて加え、添加の完了時に反応物をRT/N2にて一晩撹拌した。飽和NaHCO3 (300ml)、続いてDCM (300ml)を加え、反応混合物を30分間撹拌した。有機相を分離し、NaHCO3 (300ml)、塩水(300ml)で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、真空濃縮して、油を得て、ヘプタンでの粉砕により白色固体を得て、これをろ過により単離した。収率 = 30.95g, 67%。LCMS純度100%, m/z 338 [M+H]+。
【０１７５】
中間体7 シクロペンチル (S)-2-(tert-ブトキシカルボニル-[3,5-ジフルオロ-4-[3-(4-フルオロ-ベンゾイル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-2-イルアミノ]ベンジル]アミノ)-3-フェニル プロピオネート
【化６８】
2009535385.tif 000070
ピリドンは、中間体3Kの合成について記載した手順の副生物として形成された。LCMS純度80%, m/z 690 [M+H]+。
【０１７６】
アミノ酸エステルの調製(中間体8〜16)
【化６９】
2009535385.tif 000071
【０１７７】
調製した中間体：
【化７０】
2009535385.tif 000072
【０１７８】
図1に概説した化合物の合成
経路I (中間体9について例示)
段階1 - エステル形成
【化７１】
2009535385.tif 000073
【０１７９】
(S)-2-tert-ブトキシカルボニルアミノ-3-シクロヘキシル-プロピオン酸(5g, 19.4mmol)のDMF (50ml)溶液に、0℃にて、シクロペンタノール(8.8ml, 97.15mmol)、EDCI (4.09g, 21.37mmol)、及び最後にDMAP (237mg, 1.94mmol)を加えた。反応混合物をRTまで温め、18時間撹拌した。DMFを真空除去して、澄んだ油を得た。これを水とEtOAcに分配した。有機層を乾燥し(MgSO4)、真空濃縮した。粗抽出物をカラムクロマトグラフィーにより精製して(ヘプタン中25%のEtOAC)、所望の生成物を澄んだ油として得た(14.87g, 55%)。1H NMR (300 MHz, d6-DMSO) δ; 7.09 (1H, d), 5.08 (1H, t), 3.76 (1H, t), 1.50-1.85 (10H, br m), 1.39 (9H, s), 1.00-1.25 (9H, br m).
【０１８０】
段階2 -シクロペンチル (2S)-アミノ(シクロヘキシル)アセテート 塩酸塩(中間体9)を得るためのBoc脱保護
【化７２】
2009535385.tif 000074
【０１８１】
段階1の生成物(14.87g, 45.69mmol)を、DCM (100ml)に溶解し、4M HCl/ジオキサン(22.8ml, 91.38mmol)で処理し、反応混合物をRTにて24時間撹拌した。粗混合物を減圧下に濃縮して、橙色の油を得た。これをEt2Oで粉砕して、白色の沈殿物を得た。これをさらにEt2Oで洗浄して、所望の生成物を白色粉末として得た(7.78g, 65%)。1H NMR (300MHz, d6-DMSO) δ; 8.45 (3H, br s), 5.22 (1H, t), 3.28 (1H, d), 1.95-1.50 (10H, br m), 1.30-0.90 (9H, br m).
【０１８２】
経路II (中間体10について例示)
段階1 - (1S)-2-(シクロペンチルオキシ)-2-オキソ-1-フェニルエタンアミニウム 4-メチルベンゼンスルホネート(中間体10)を得るためのエステル形成
【化７３】
2009535385.tif 000075
【０１８３】
(S)-フェニルグリシン(5g, 33.1mmol)のシクロヘキサン(150ml)中のスラリーに、シクロペンタノール(29.84ml, 331mmol)及びp-トルエンスルホン酸(6.92g, 36.4mmol)を加えた。反応物をディーン-スターク受け器に入れ、135℃に加熱して完全に溶解させた。12時間後に、反応物をRTに冷却して、白色固体の沈殿を導いた。固体をろ過し、EtOAcで洗浄した後に減圧下で乾燥して、所望の生成物を白色粉末として得た(11.01g, 85%)。1H NMR (300MHz, d6-DMSO) δ; 8.82 (2H, br s), 8.73 (1H, br s), 7.47 (7H, m), 7.11 (2H, d), 5.25 (1H, br s), 5.18 (1H, m), 2.29 (3H, s), 1.87-1.36 (8H, m).
【０１８４】
中間体11及び12を、シクロペンタノールの代わりにそれぞれ2-インダノール及びα-ノルボルネオールを用いて調製した(経路IIを介して)。同様にして、中間体13及び14を、それぞれジメチルアミノエタノール及び4-(2-ヒドロキシエチル)-モルホリンを用いて調製した(経路Iを介して)。中間体15を、市販で入手可能なZ-Dab(Boc)-OH (N-α-Z-N-γ-Boc-L-2,4-ジアミノ酪酸)を用いて経路Iを介して調製した。
【０１８５】
上記の中間体の対応する(R)-アミノ酸エステルは、関係する市販で入手可能な(R)-アミノ酸から開始して、上記と同様の方法により調製できる。さらに、対応するロイシン及びフェニルグリシン tert-ブチルエステルは、市販で入手可能であり、適切である場合に直接用いられる。
【０１８６】
実施例
実施例1 シクロペンチル (S)-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]フェニルアセテート
【化７４】
2009535385.tif 000076
【０１８７】
中間体3A (80mg, 0.125mmol)の20% TFA/DCM溶液(5ml)中の混合物を、RTにて1時間撹拌した。反応混合物を蒸発乾固し、分取HPLCにより精製して、所望の生成物を得た、収率 = 33mg (40%), LCMS純度= 100% m/z 540 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 1.21-1.82 (8H, m), 4.01-4.14 (2H, m), 5.11-5.21 (2H, m), 5.64 (1H, d), 7.21-7.54 (13H, m), 7.62 (1H, d), 10.16 (2H, br s).
【０１８８】
以下の実施例は、実施例1と同様の方法で調製した。
実施例2 シクロペンチル (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-3-フェニルプロピオネート
【化７５】
2009535385.tif 000077
【０１８９】
中間体 3Dから。LCMS純度100%, m/z 554 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 1.22-1.83 (8H, m), 3.10 (1H, m), 4.45 (3H, m), 5.19 (1H, m), 5.85 (1H, d), 7.35-7.74 (14H, m), 7.82 (1H, br s), 9.96 (1H, br s).
【０１９０】
実施例3 シクロペンチル (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-4-メチルペンタノエート
【化７６】
2009535385.tif 000078
【０１９１】
中間体3Gから。LCMS純度100%, m/z 520 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 1.10 (6H, m), 1.70-2.11 (11H, m), 4.14-4.53 (3H, m), 5.42 (1H, m, CH), 5.90 (1H, d), 7.49-7.91 (9H, m), 9.83 (2H, br s).
【０１９２】
実施例4 シクロペンチル (S)-[4-[6-アミノ-5-(3-メチル-4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]フェニルアセテート
【化７７】
2009535385.tif 000079
【０１９３】
中間体3Cから、LCMS純度97%, m/z 554 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.30-1.81 (8H, m), 2.25 (3H, s), 3.72 (2H, s), 4.34 (1H, s), 5.08 (1H, m), 5.70 (1H, d), 7.03-7.38 (10H, m), 7.46-7.61 (3H, m).
【０１９４】
実施例5 シクロペンチル (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(3-メチル-4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-3-フェニルプロピオネート
【化７８】
2009535385.tif 000080
【０１９５】
中間体3Fから。LCMS純度100%, m/z 568 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 1.09-1.77 (8H, m), 2.30 (3H, s), 2.95 (1H, m), 3.14 (2H, s), 4.19-4.42 (3H, m), 5.02 (1H, m), 5.69 (1H, d), 7.19-7.51 (11H, m), 7.68 (2H, m), 9.79 (2H, br s).
【０１９６】
実施例6 シクロペンチル (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(3-メチル-4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-4-メチルペンタノエート
【化７９】
2009535385.tif 000081
【０１９７】
中間体3Jから。LCMS純度100%, m/z 534 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 0.71 (6H, m), 1.32-1.70 (11H, m), 2.09 (3H, s), 3.72-4.14 (3H, m), 5.03 (1H, m), 5.50 (1H, d), 7.00-7.29 (6H, m), 7.46 (2H, m), 9.40 (2H, br s).
【０１９８】
実施例7 シクロペンチル (S)-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]フェニルアセテート
【化８０】
2009535385.tif 000082
【０１９９】
中間体3Bから。LCMS純度100%, m/z 558 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 1.33-1.89 (8H, m), 3.71 (2H, m), 4.28 (1H, s), 5.04 (1H, m), 5.61 (1H, d), 6.91 (1H, br s), 7.18-7.60 (13H, m), 10.05 (1H, br s).
【０２００】
実施例8 シクロペンチル (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-3-フェニルプロピオネート
【化８１】
2009535385.tif 000083
【０２０１】
中間体3Eから。LCMS純度 100%, m/z 572 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 1.08-1.76 (8H, m), 2.95 (1H, t), 4.11-4.40 (3H, m), 4.98 (1H, m), 5.68 (1H, d), 6.89 (1H, br s), 7.13-7.50 (12H, m), 7.65 (1H, m), 9.64-10.12 (2H, br s).
【０２０２】
実施例9 シクロペンチル (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-4-メチルペンタノエート
【化８２】
2009535385.tif 000084
【０２０３】
中間体3Iから。LCMS純度 100%, m/z 538 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 0.79 (6H, m), 1.39-1.78 (11H, m), 3.84-4.22 (3H, m), 5.10 (1H, m), 5.59 (1H, d), 6.79 (1H, br s), 7.03-7.18 (2H, m), 7.21-7.42 (4H, m), 7.56 (2H, m), 9.54 (1H, br s), 9.92 (1H, br s).
【０２０４】
実施例10 シクロペンチル (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(2,4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロベンジルアミノ]-3-フェニルプロピオネート
【化８３】
2009535385.tif 000085
【０２０５】
中間体3Kから。LCMS純度94%, m/z 591 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1.20-1.90 (10H, m), 3.10 (1H, m), 3.50-3.60 (2H, m), 4.40-4.50 (4H, m), 5.20 (1H, m), 5.90 (1H, d), 7.35-7.50 (7H, m), 7.65-7.70 (5H, m), 9.50 (1H, br)
【０２０６】
実施例11 シクロペンチル (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロベンジルアミノ]-4-メチルペンタノエート
【化８４】
2009535385.tif 000086
【０２０７】
中間体3Lから。LCMS純度 96%, m/z 574 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 0.95-1.15 (6H, m), 1.65-2.05 (11H, m), 4.15-4.25 (1H, m), 4.35-4.45 (2H, m), 5.35-5.45 (1H, m), 5.85 (1H, d), 7.10-7.20 (2H, m), 7.45-7.55 (4H, m). 
【０２０８】
実施例12 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(3-メチル-4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-3-フェニル プロピオネート
【化８５】
2009535385.tif 000087
【０２０９】
L-フェニルアラニンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体16) (218mg, 0.54mmol)、K2CO3 (192mg, 1.39mmol)、NaI (108mg, 0.72mmol)の混合物に、THF (2ml)中のメシレート中間体4A (170mg, 0.35mmol)の溶液を加えた。反応混合物をDMF (2ml)で希釈し、70℃にて18時間、撹拌しながら加熱した。反応混合物をRTまで冷却し、THFを減圧濃縮により除去した。残渣をEtOAc (20ml)で希釈し、水(10ml)で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、蒸発乾固した。分取HPLCによる精製により、所望の生成物を得た、収率= 57mg, 15%。LCMS純度97%, m/z 612 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.30-2.00 (8H, m), 2.30 (2H, m), 3.10 (1H, m), 3.40 (1H, m), 4.25 (2 H, m), 4.40 (1H, m), 5.20 (1H, m), 5.85 (1H, d), 6.90 (2H, m), 7.10 (2H, d), 7.20-7.45 (7H, m), 7.65 (2H, m), 7.75 (1H, m).
【０２１０】
以下の化合物は、同様の方法で調製した。
実施例13 シクロペンチル (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)フェニルアセテート
【化８６】
2009535385.tif 000088
【０２１１】
中間体4E及びL-フェニルグリシンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体10)から、LCMS純度96%, m/z 620 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ:  1.40-1.65 (5H, m), 1.80 (2H, m), 1.95 (1H, m), 2.30 (2H, m), 3.15 (1 H, m), 3.30 (1H, m), 4.25 (2H, m), 5.25 (1H, s), 5.40 (1H, m), 5.90 (1H, d), 6.90 (2H, d), 7.30 (2H, t), 7.55-7.60 (5H, m), 7.65 (2H, m) 7.75 (1H, d).
【０２１２】
実施例14 シクロペンチル (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)フェニルアセテート
【化８７】
2009535385.tif 000089
【０２１３】
中間体4E及びL-フェニルアラニンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体16)から、LCMS純度97%, m/z 634 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.30-2.00 (8H, m), 2.30 (2H, m), 3.10 (1 H, m), 3.40 (1H, m), 4.25 (2H, m), 4.40 (1H, m), 5.20 (1H, m), 5.85 (1H, d), 6.90 (2H, m), 7.10 (2H, d), 7.20-7.45 (7H, m), 7.65 (2H, m), 7.75 (1H, m).
【０２１４】
実施例15 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシフェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチル ペンタノエート
【化８８】
2009535385.tif 000090
【０２１５】
中間体4E及びL-ロイシンシクロペンチルエステル(中間体8)から、LCMS純度96%, m/z 600 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.10 (6H, m), 1.70-2.0 (12H, m), 2.30 (2 H, m), 4.10 (1H, m), 4.25 (2H, m), 4.40 (1H, m), 5.40 (1H, m), 5.85 (1H, d), 6.90 (2H, m). 7.10 (2H, d), 7.60. (2H, m), 7.65 (2H, m), 7.75 (1H, m).
【０２１６】
実施例16 エチル N-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)-L-ロイシネート
【化８９】
2009535385.tif 000091
【０２１７】
中間体4E及びL-ロイシンエチルエステルから LCMS純度 98%, m/z 560 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.10-1.20 (6H, m), 1.45-1.55 (3H, t), 1.65-1.85 (2H, m), 1.90-2.00 (1H, m), 2.15-2.30 (2H, m), 2.85-3.05 (2H, m), 3.55 (1H, m), 4.35-4.50 (4H, m), 6.00 (1H, d), 7.10 (1H, d), 7.45-7.55 (1H, m), 7.80-7.85 (1H, m), 7.95 (1H, d).
【０２１８】
実施例17 シクロペンチル (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチルベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ) フェニルアセテート
【化９０】
2009535385.tif 000092
【０２１９】
中間体4D及びL-フェニルグリシンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体10)から、LCMS純度100%, m/z 634 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1.20-1.80 (8H, m), 2.0 (2H, m), 2.20 (3H, m), 2.80-3.00 (2H, m), 4.10 (2H, m), 5.10 (1H, m), 5.30 (1H, s), 5.60 (1H, d), 6.95 (1H, d), 7.20 (1H, m), 7.30 (1H, m), 7.40-7.50 (8H, m), 9.65 (1H, m).
【０２２０】
実施例18 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチルベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)-3-フェニルプロピオネート
【化９１】
2009535385.tif 000093
【０２２１】
中間体4D及びL-フェニルアラニンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体16)から、LCMS純度97%, m/z 648 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.20-1.90 (9H, m), 2.25 (2H, m), 2.35 (3H, s), 3.15 (1H, m), 3.45 (1H, m), 4.25 (2H, m), 4.40 (1H, d), 5.20 (2H, m), 5.82 (1H, d), 6.95 (2H, m), 7.20 (1H, m), 7.30-7.50 (7H, m), 7.75 (1H, d).
【０２２２】
実施例19 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチルベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチルペンタノエート
【化９２】
2009535385.tif 000094
【０２２３】
中間体4D及びL-ロイシンシクロペンチルエステル(中間体8)から、LCMS純度100%, m/z 614 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0.90 (6H, m), 1.60-1.70 (10H, m), 1.90 (2H, m), 2.15 (2H, m), 2.30 (3H, s), 3.00-3.20 (2H, m), 4.10 (1H, s), 4.20 (2H, m), 5.25 (1H, m), 5.70 (1H, d), 7.05 (1H, d), 7.25 (1H, m), 7.40 (1H, m), 7.50 (1H, m), 7.60 (1H, d).
【０２２４】
実施例20 シクロペンチル (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)フェニル アセテート
【化９３】
2009535385.tif 000095
【０２２５】
中間体4F及びL-フェニルグリシンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体10)から、LCMS純度91%, m/z 638 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1.50-2.10 (8H, m), 2.30 (2H, m), 3.10-3.25 (2H, m), 4.33 (2H, m), 5.40 (1H, m), 5.56 (1H, m), 5.90 (1H, d), 7.20 (1H, d) 7.40-7.75 (9H, m), 9.85 (2H, m).
【０２２６】
実施例21 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]-プロピルアミノ)-3-フェニル プロピオネート
【化９４】
2009535385.tif 000096
【０２２７】
中間体4F及びL-フェニルアラニンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体16)から。LCMS純度 100%, m/z 652 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1.10-1.80 (9H, m), 2.15 (2H, m), 2.95-3.20 (2H, m), 4.20 (2H, m), 4.40 (1H, m), 5.10 (1H, m), 5.75 (1H, d), 7.06 (2H, d), 7.25-7.58 (9H, m), 9.34 (2H, m).
【０２２８】
実施例22 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチル ペンタノエート
【化９５】
2009535385.tif 000097
【０２２９】
中間体4F及びL-ロイシンシクロペンチルエステル(中間体8)から、LCMS純度87%, m/z 618 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1.0 (6H, m), 1.75 (9H, m), 1.95 (2H, m), 2.20 (2H, m), 3.10-3.30 (2H, m), 4.16 (1H, m), 4.26 (2H, m), 5.33 (1H, m), 5.80 (1H, d), 7.15 (2H, d), 7.40-7.65 (4H, m), 9.13- 9.25 (2H, m).
【０２３０】
実施例23 シクロペンチル (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-フェノキシ]プロピルアミノ)フェニルアセテート
【化９６】
2009535385.tif 000098
【０２３１】
中間体4B及びL-フェニルグリシンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体10)から、LCMS純度95%, m/z 584 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.25-1.55 (5H, m), 1.60-1.85 (3H, m), 2.15 (2H, m), 3.00 (1H, m), 3.15 (1H, m), 4.05 (2H, m), 5.10 (1H, s), 5.25 (1H, m), 5.70 (1H, d), 7.00 (2H, m), 7.15 (4H, m), 7.40-7.50 (7H, m), 7.55 (1H, d).
【０２３２】
実施例24 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-3-フェニルプロピオネート
【化９７】
2009535385.tif 000099
【０２３３】
中間体4B及びL-フェニルアラニンシクロペンチルエステル(中間体16)から、LCMS純度93%, m/z 598 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.50-2.10 (8H, m), 2.50 (2H, m), 3.35-3.40 (1H, m), 3.55-3.70 (2H, m), 4.40-4.50 (2H, m), 4.60 (1H, m), 5.40-5.45 (1H, m), 6.05-6.10 (1H, d), 7.40-7.65 (11H, m), 7.85 (2H, m). 7.90 (1H, m).
【０２３４】
実施例25 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチルペンタノエート
【化９８】
2009535385.tif 000100
【０２３５】
中間体4B及びL-ロイシンシクロペンチルエステル(中間体8)から、LCMS純度97%, m/z 564 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0.90 (6H, m), 1.60-1.75 (10H, m), 1.90 (2H, m), 2.15 (2H, m), 3.10-3.30 (2H, m), 4.10 (1H, m), 4.15 (2H, m), 5.30 (1H, m), 5.70 (1H, d). 7.15 (2H, d), 7.30 (2H, d), 7.35 (2H, t), 7.50 (1H, d), 7.55 (1H, m) 9.05-30 (2H, m).
【０２３６】
実施例26 シクロペンチル (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチルベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル-フェノキシ]プロピルアミノ)フェニルアセテート
【化９９】
2009535385.tif 000101
【０２３７】
中間体4A及びL-フェニルグリシンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体10)から、LCMS純度95%, m/z 598 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1.30 2.20 (10H, m), 2.30 (3H, m), 2.90-3.10 (2H, m), 4.15 (2H, m), 5.20 (1H, m), 5.30 (1H, m), 5.70 (1H, d), 7.10 (2H, d), 7.25-7.40 (5H, m), 7.40-7.50 (3H, m), 7.55 (5H, m), 9.70 (2H, m).
【０２３８】
実施例27 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチルベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチルペンタノエート
【化１００】
2009535385.tif 000102
【０２３９】
中間体4A及びL-ロイシンシクロペンチルエステル(中間体8)から、LCMS純度89%, m/z 578 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ:  0.95 (6H, m), 1.55-2.25 (12H, m), 2.30 (3H, m), 2.75-3.30 (2H, m), 4.15 (3H, m), 5.25 (1H, m), 5.70 (1H, d). 7.15 (2H, d), 7.30-7.40 (4H, m), 7.40-7.50 (2H, m).
【０２４０】
実施例28 シクロペンチル (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-フェノキシ]プロピルアミノ)フェニル アセテート
【化１０１】
2009535385.tif 000103
【０２４１】
中間体4C及びL-フェニルグリシンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体10)から、LCMS純度99%, m/z 602 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1.35-2.15 (10H, m), 2.90-3.10 (2H, m), 4.10 (2H, m), 5.25 (1H, m), 5.40 (1H, m), 5.70 (1H, d), 7.10 (2H, d), 7.25-7.30 (4H, m), 7.40-7.50 (2H, m), 7.55 (5H, m), 9.70 (2H, m).
【０２４２】
実施例29 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-3-フェニル プロピオネート
【化１０２】
2009535385.tif 000104
【０２４３】
中間体4C及びL-フェニルアラニンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体16)から、LCMS純度99%, m/z 616 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1.10-1.80 (8H, m), 2.20 (2H, m), 2.95 (1H, m), 3.10-3.30 (2H, m), 3.40 (2H, m), 4.20 (2H, m), 4.40 (1H, m), 5.05 (1H, m), 5.70 (1H, d), 7.15 (2H, d), 7.20-7.55 (11H, m), 9.70 (2H, m).
【０２４４】
実施例30 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチル ペンタノエート
【化１０３】
2009535385.tif 000105
【０２４５】
中間体4C及びL-ロイシンシクロペンチルエステル(中間体8)から、LCMS純度99%, m/z 582 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0.95 (6H, m), 1.65-2.15 (13H, m), 3.10-3.20 (2H, m), 4.15 (3H, m), 5.30 (1H, m), 5.70 (1H, d), 7.15 (2H, d), 7.25-7.55 (6H, m), 9.24 (2H, m)
【０２４６】
実施例31 シクロペンチル (S)-2-(4-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]シクロヘキシルアミノ)-4-メチルペンタノエート トリフルオロアセテート
【化１０４】
2009535385.tif 000106
【０２４７】
中間体5 (120mg, 0.263mmol)及びL-フェニルアラニンシクロペンチルエステルトシル酸塩(中間体16) (98mg, 0.263mmol)のMeOH (1.2ml)中の懸濁物を、RTにて1時間撹拌した後に、NaCNBH3 (66mg, 1.05mmol)を加えた。撹拌をRTにて18時間継続した。反応の完了時に、反応混合物を濃縮乾燥し、EtOAc (10ml)と水(10ml)で分配した。有機層を乾燥させ(Na2SO4)、ろ過し、減圧下で濃縮乾燥し、分取HPLCにより精製した。これにより、所望の生成物をTFA塩として得た。収率= 37mg (18%)。
LCMS純度97%, m/z 674 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.10-2.20 (16H, m), 2.35-2.45 (1H, m), 2.70-3.00 (2H, m), 3.50-3.55 (1H, m), 4.25-4.35 (1H, m), 4.95-5.05 (1H, m), 5.70 (1H, d), 6.75 (2H, dd), 7.05-7.25 (7H, m), 7.45-7.55 (2H, m), 7.65 (1H, d)
【０２４８】
以下の実施例は、同様の方法で調製した。
実施例32 シクロペンチル (2S)-[(4-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]シクロヘキシル)アミノ](フェニル)アセテート
【化１０５】
2009535385.tif 000107
【０２４９】
中間体5 (120mg, 0.263mmol)及びL-フェニルグリシンシクロペンチルエステル(中間体10)から。LCMS純度97%, m/z 660 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.30-1.80 (14H, m), 1.90-2.05 (2H, m), 2.35-2.50 (1H, m), 4.35-4.45 (1H, m), 4.50-4.60 (1H, m), 5.05-5.10 (1H, m), 5.70 (1H, d), 6.75-6.85 (2H, m), 7.10-7.15 (2H, m), 7.20-7.35 (5H, m), 7.45-7.55 (2H, m), 7.55-7.60 (1H, m).
【０２５０】
実施例33 シクロペンチル (S)-2-(4-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]シクロヘキシルアミノ)-4-メチルペンタノエート
【化１０６】
2009535385.tif 000108
【０２５１】
中間体5 (120mg, 0.263mmol)及びL-ロイシンシクロペンチルエステル(中間体8)から。LCMS純度100%, m/z 640 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 0.95-1.05 (6H, m), 1.50-2.00 (16H, m), 2.10-2.35 (3H, m), 3.15-3.20 (1H, m), 4.00-4.15 (1H, m), 4.40及び4.75 (それぞれ0.5H, m), 5.25-5.35 (1H, m), 5.75 (1H, d), 6.85-6.95 (2H, m), 7.15-7.25 (2H, m), 7.55-7.65 (2H, m), 7.65-7.70 (1H, m).
【０２５２】
実施例34及び35 シクロペンチル (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]シクロヘキシル アミノ]-3-フェニルプロピオネート
【化１０７】
2009535385.tif 000109
【０２５３】
中間体6 (50mg, 0.15mmol)を、L-フェニルアラニンシクロペンチルエステル(89mg, 0.38mmol)のMeOH (10ml)中の無色の溶液に、RT/N2にて加え、RTにて1時間撹拌した。氷AcOHを滴下してpHを6に調整した後に、NaCNBH3 (38mg, 0.61mmol)を加えた。得られた無色の溶液をRTにて一晩撹拌し、次いで、飽和NaHCO3 (20ml)を用いて注意深く停止し、CH2Cl2 (3×15ml)に抽出した。合わせた有機層を2M HCl (2×20ml)、塩水(20ml)で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、ろ過し、真空濃縮して、クリーム色の固体を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製(シリカ, 勾配溶出40〜100% EtOAc/ ヘプタン)により、2つの異性体として分離可能な所望の物質、異性体1 (実施例34)を白色固体として(収率 = 39mg, 47%)、LCMS純度 100%, m/z 546 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.40-2.05 (16H, m), 2.85-3.10 (3H, m), 3.60-3.70 (1H, m), 4.55-4.65 (1H, m), 5.10-5.20 (1H, m), 5.70 (1H, d), 7.15-7.40 (7H, m), 7.45-7.50 (1H, m), 7.50-7.60 (2H, m)及び異性体2 (実施例35) LCMS純度 97%, m/z 546 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.25-1.85 (12H, m), 1.95-2.20 (2H, m), 2.45-2.95 (4H, m), 3.00-3.10 (1H, m), 3.65-3.75 (1H, m), 4.55-4.65 (1H, m), 5.05-5.15 (1H, m), 5.65 (1H, d), 7.20-7.35 (7H, m), 7.40-7.50 (1H, m), 7.50-7.60 (2H, m)を無色のフィルムとして得た(収率 = 15mg, 18%).
【０２５４】
実施例36 tert-ブチル (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)フェニル アセテート
【化１０８】
2009535385.tif 000110
【０２５５】
中間体4F及びL-フェニルグリシン tert-ブチルエステルから、LCMS純度93%, m/z 626 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.30 (9H, s), 2.15 (2H, m), 3.00-3.15 (2H, m), 4.06 (2H, m), 5.02 (1H, s), 5.70 (1H, d), 6.75 (2H, d), 7.02 (2H, m), 7.30-7.50 (7H, m).
【０２５６】
実施例37 tert-ブチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]-プロピルアミノ)-3-フェニル プロピオネート
【化１０９】
2009535385.tif 000111
【０２５７】
中間体4F及びL-フェニルアラニン tert-ブチルエステルから。LCMS純度97%, m/z 640 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.25 (9H, s), 2.16 (2H, m), 3.00 (1H, dd), 3.15-3.25 (2H, m), 3.35 (1H, dd), 4.10 (2H, m), 4.20 (1H, m), 5.71 (1H, d), 6.79 (2H, d), 7.02 (2H, t), 7.20-7.30 (5H, m), 2H (2H, m).
【０２５８】
実施例38 tert-ブチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチル ペンタノエート
【化１１０】
2009535385.tif 000112
【０２５９】
中間体4F及びL-ロイシン tert-ブチルエステルから、LCMS純度97%, m/z 606 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 0.95 (6H, m), 1.41 (9H, s), 1.61 (1H, m), 1.75 (2H, m), 2.15 (2H, m), 3.22-3.25 (2H, m), 3.88 (1H, m), 4.13 (2H, m), 4.20 (1H, m), 5.40 (1H, s), 5.75 (1H, d), 6.85 (2H, d), 7.00 (2H, t), 7.40 (2H, m).
【０２６０】
実施例39 tert-ブチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチル ペンタノエート
【化１１１】
2009535385.tif 000113
【０２６１】
中間体4C及びL-ロイシン tert-ブチルエステルから、LCMS純度91%, m/z 570 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 0.95 (6H, m), 1.45 (9H, s), 1.65 (1H, m), 2.15 (2H, m), 3.15-3.30 (2H, m), 3.85 (1H, m), 4.15 (2H, m), 5.75 (1H, d), 7.00-7.20 (6H, m), 7.35 (2H, m).
【０２６２】
実施例40 2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル (2S)-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ](フェニル) アセテート
【化１１２】
2009535385.tif 000114
【０２６３】
中間体4F及びL-フェニルグリシン インダニルエステル(中間体11)から、LCMS純度96%, m/z 686 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD), δ:  7.55-7.47 (2H, m), 7.46-7.31 (5H, m), 7.22-7.10 (6H, m), 6.85 (2H, d, J=9.6 Hz), 5.82 (1H, d, J=9.6 Hz), 5.57-5.51 (1H, m), 4.37 (1H, s), 4.13 (1H, t, J=6.0 Hz), 3.32-3.21 (2H, m), 3.05-2.98 (1H, m), 2.80-2.63 (3H, m), 2.05-1.97 (2H, m).
【０２６４】
実施例41 2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル (2R)-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ](フェニル)アセテート
【化１１３】
2009535385.tif 000115
【０２６５】
中間体4F及びD-フェニルグリシン インダニルエステルから、LCMS純度94%, m/z 686 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD), δ:  7.56-7.47 (2H, m), 7.38-7.31 (5H, m), 7.28-7.14 (6H, m), 6.85 (2H, d, J=9.6 Hz), 5.82 (1H, d, J=9.6 Hz), 5.57-5.52 (1H, m), 4.37 (1H, s), 4.13 (1H, t, J=6.0 Hz), 3.31-3.21 (2H, m), 3.09-2.99 (1H, m), 2.78-2.64 (3H, m), 2.06-1.99 (2H, m).
【０２６６】
実施例42 シクロペンチル (2R)-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ](フェニル)アセテート
【化１１４】
2009535385.tif 000116
中間体4F及びD-フェニルグリシン シクロペンチルエステルから、LCMS純度95%, m/z 638 [M+H]+.
【０２６７】
実施例43 ビシクロ[2.2.1]ヘプチ-2-イル (2S)-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ](フェニル)アセテート
【化１１５】
2009535385.tif 000117
【０２６８】
中間体4F及びL-フェニルグリシン ノルボルネイルエステル(中間体12)から、LCMS純度97%, m/z 664 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD), δ:  7.50-7.21 (7H, m), 7.02 (2H, t, J=8.6 Hz), 6.75 (2H, d, J=9.6 Hz), 5.70 (1H, d, J=9.6 Hz), 4.50 (1H, d, J=6.6 Hz), 4.32-4.26 (1H, m), 4.05 (2H, t, J=5.9 Hz), 2.71-2.56 (2H, m), 2.24-1.90 (4H, m), 1.64-1.06 (8H, m).
【０２６９】
実施例44 ビシクロ[2.2.1]ヘプチ-2-イル (2R)-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ](フェニル)アセテート
【化１１６】
2009535385.tif 000118
【０２７０】
中間体4F及びD-フェニルグリシン ノルボルネイルエステルから、LCMS純度98%, m/z 664 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD), δ:  7.42-7.17 (7H, m), 7.00 (2H, t, J=8.6 Hz), 6.74 (2H, d, J=9.1 Hz), 5.69 (1H, d, J=9.8 Hz), 4.49 (1H, d, J=6.8 Hz), 4.32-4.26 (1H, m), 4.03 (2H, t, J=6.0 Hz), 2.70-2.52 (2H, m), 2.18-1.86 (4H, m), 1.63-0.92 (8H, m).
【０２７１】
実施例45 tert-ブチル (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)フェニル アセテート
【化１１７】
2009535385.tif 000119
【０２７２】
中間体4E及びL-フェニルグリシン tert-ブチルエステルから、LCMS純度100%, m/z 608 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD), δ: 7.55-7.47 (3H, m), 7.30-7.21 (6H, m), 7.09 (1H, t, J=8.7 Hz), 6.61 (2H, d, J=9.3 Hz), 5.81 (1H, d, J=9.6 Hz), 4.18 (1H, s), 4.03 (2H, t, J=6.0 Hz), 2.75-2.69 (1H, m), 2.65-2.58 (1H, m), 1.96-1.88 (1H, m), 1.96-1.88 (2H, m), 1.32 (9H, s)
【０２７３】
実施例46 2-(ジメチルアミノ)エチル N-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)-L-ロイシネート
【化１１８】
2009535385.tif 000120
【０２７４】
中間体4F及び中間体13から、LCMS純度90%, m/z 621 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, DMSO), δ: 10.18 (1H,br s), 9.50 (1H, br s),7.57 (1H, q, J=7.8Hz), 7.39 (2H, m),7.37-7.15 (3H, m), 7.04 (2H, m), 5.73 (1H, d, J=9.6Hz), 4.59-4.46 (2H, m), 4.21 (2H, t, J=9.0Hz), 4.11 (1H, m), 3.14 (2H, m), 2.86 (6H, s), 2.14 (2H, m), 1.74 (2H, m), 0.92 (8H, m).
【０２７５】
実施例47 2-モルホリン-4-イルエチル N-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)-L-ロイシネート
【化１１９】
2009535385.tif 000121
【０２７６】
中間体4F及び中間体14から、LCMS純度90%, m/z 621 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, DMSO), δ: 7.57 (1H, q, J=7.5 Hz), 7.40 (2H, m), 7.26-7.17 (3H, m), 7.06 (2H, d, J=10.8 Hz), 5.74 (1H, d, J=9.9 Hz), 4.53 (2H, m), 4.21 (4H, m), 3.80 (4H, m), 3.37 (2H, m), 3.17 (4H, m), 2.15 (2H, m), 1.75 (3H, m), 0.94 (6H, br s).
【０２７７】
実施例48 シクロペンチル (2S)-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ](シクロヘキシル)アセテート
【化１２０】
2009535385.tif 000122
【０２７８】
中間体4F及びL-シクロヘキシルグリシン シクロペンチルエステル(中間体9)から、LCMS純度95%, m/z 664 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, DMSO), δ: 9.15 (1H, br s), 8.95 (1H, br s), 7.62-7.52 (1H, m), 7.46-7.31 (2H, m),7.27-7.20 (1H, m), 7.05 (2H, d, J=10.2Hz), 5.74 (1H, d, J=9.6Hz), 5.30-5.25 (1H, m), 4.20 (2H, t, J=5.7Hz), 4.10-3.95 (1H, m), 3.25 -2.95 (2H, m), 2.20-2.07 (2H, m), 2.00-1.50 (15H, m),1.30-1.00 (4H, m), 0.95-0.75 (1H, m)
【０２７９】
実施例49 tert-ブチル (2S)-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ](シクロヘキシル)アセテート
【化１２１】
2009535385.tif 000123
【０２８０】
中間体4F及びL-シクロヘキシルグリシン tert-ブチルエステルから、LCMS純度95%, m/z 632 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, DMSO), δ: 9.10 (1H, br s), 8.85 (1H, brs), 7.62-7.52 (1H, m), 7.45-7.31 (2H, m), 7.28-7.20 (1H, m), 7.06 (2H, d, J=10.2Hz), 5.74 (1H, d, J=9.6Hz), 4.20 (2H, t, J=5.9Hz), 3.95-3.85 (1H, m), 3.25-2.95 (2H, m),2.20-2.07 (2H, m), 2.00-1.60 (6H, m), 1.51 (9H, s),1.35-1.07 (4H, m),1.00-0.85 (1H, m).
【０２８１】
実施例50 シクロペンチル N-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)-D-ロイシネート
【化１２２】
2009535385.tif 000124
【０２８２】
中間体4F及びD-ロイシンシクロペンチルエステルから、LCMS純度95%, m/z 618 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, DMSO), δ: 10.10 (1H, br s), 9.40-9.10 (2H, m), 8.15 (1H, br s), 7.62-7.52 (1H, m), 7.47-7.31 (2H, m), 7.28-7.12 (1H, m), 7.07 (2H, d, J=10.5Hz), 5.73 (1H, d, J=9.6Hz), 5.30-5.20 (1H, m), 4.25-4.00 (3H, m), 3.30-3.00 (2H, m), 2.20-2.00 (2H, m), 1.95-1.80 (2H, m), 1.75-1.55 (10H, m), 1.00-0.90 (6H, m).
【０２８３】
実施例51 tert-ブチル N-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)-D-ロイシネート
【化１２３】
2009535385.tif 000125
【０２８４】
中間体4F及びD-ロイシン tert-ブチルエステルから、LCMS純度95%, m/z 606 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, DMSO), δ: 9.30-9.00 (2H, m), 7.62-7.52 (1H,m), 7.47-7.32 (2H, m), 7.28-7.12 (1H, m), 7.06 (2H, d, J=10.2Hz), 5.73 (1H, d, J=9.6Hz), 4.20 (2H, t, J=5.7Hz), 3.99 (1H, br s), 3.25-2.95 (2H, m), 2.20-2.05 (2H, m), 1.80-1.60 (3H, m),1.49 (9H, s), 0.95 (6H, d, J=4.8Hz).
【０２８５】
実施例52 シクロペンチル (2S)-4-アミノ-2-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ]ブタノエート
【化１２４】
2009535385.tif 000126
【０２８６】
中間体4F及び中間体15から、LCMS純度90%, m/z 605 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, CD3OD), δ: 7.46 - 7.55 (2H, m), 7.12 (2H, t, J=8.7 Hz), 6.93 (2H, d, J=9.6 Hz), 5.81 (1H, d, J=9.6 Hz), 5.37 - 5.44 (1H, m), 4.20 - 4.31 (4H, m), 3.33 - 3.42 (1H, m), 2.25 - 2.49 (4H, m), 1.91-2.08 (2H, m), 1.65 - 1.89 (7H, m).
【０２８７】
実施例53 シクロペンチル N-(5-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]ペンチル)-L-ロイシネート
【化１２５】
2009535385.tif 000127
【０２８８】
中間体4Gから。6-アミノ-1-[4-[(5-クロロペンチル)オキシ]-2,6-ジフルオロフェニル]-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)ピリジン-2(1H)-オン(138mg, 0.29mmol)の無水DMF (3ml)溶液に、窒素雰囲気下で、シクロペンチルL-ロイシネート(中間体8) (284mg, 1.43mmol, 5 eq)、ヨウ化ナトリウム(86mg, 0.57mmol, 2eq)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.052ml, 0.29mmol, 1eq)を加えた。混合物を90℃にて16時間加熱した後に、室温まで冷却させ、EtOAc (25ml)で希釈した。溶液を水(2×25ml)及び塩水(25ml)で洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下に濃縮した。カラムクロマトグラフィーによる精製(DCM中3〜4%のMeOH)の後に分取HPLCを行って、表題化合物をクリーム色の固体として得た(96mg, 52%収率)。
LC/MS: m/z 646 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7.56-7.47 (2H, m), 7.13 (2H, m), 6.88 (2H, m), 5.82 (1H, d, J=9.8 Hz), 5.23 (1H, t, J=4.1 Hz), 4.11 (2H, t, J=6.3 Hz), 3.28 (1H, m), 2.61-2.51 (2H, m), 1.95-1.41, (17H, br m), 0.98-0.93 (6H, m).
【０２８９】
実施例54 tert-ブチル N-(5-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]ペンチル)-L-ロイシネート
【化１２６】
2009535385.tif 000128
【０２９０】
中間体4Gから。6-アミノ-1-[4-[(5-クロロペンチル)オキシ]-2,6-ジフルオロフェニル]-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)ピリジン-2(1H)-オン(96mg, 0.20mmol)の無水DMF (3ml)溶液に、窒素雰囲気下で、tert-ブチルL-ロイシネート 塩酸塩(198mg, 0.99mmol, 5eq)、ヨウ化ナトリウム(60mg, 0.40mmol, 2eq)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.072ml, 0.40mmol, 2eq)を加えた。混合物を90℃にて20時間加熱した後に、室温まで冷却させ、EtOAc (20ml)で希釈した。溶液を水(2×20ml)及び塩水(20ml)で洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下に濃縮した。カラムクロマトグラフィーによる精製 (DCM中1〜3%のMeOH)、続いて分取HPLCを行うことにより、表題化合物を白色固体として得た(23mg, 18%収率).
LC/MS: m/z 634 [M+H]+.  1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7.56-7.47 (2H, m), 7.14 (2H, m), 6.89 (2H, m), 5.81 (1H, d, J=9.6 Hz), 4.11 (2H, t, J=6.2 Hz), 3.19 (1H, m), 2.60-2.53 (2H, m), 1.89-1.84 (2H, m), 1.72-1.41 (16H, m), 0.96 (6H, m).
【０２９１】
実施例55 シクロペンチル N-(5-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]ペンチル)-L-ロイシネート
【化１２７】
2009535385.tif 000129
【０２９２】
中間体4Hから。6-アミノ-1-[4-[(5-クロロペンチル)オキシ]-2,6-ジフルオロフェニル]-5-(4-フルオロベンゾイル)ピリジン-2(1H)-オン(99 mg, 0.21 mmol)の無水DMF (3 ml)溶液に、窒素雰囲気下で、シクロペンチル L-ロイシネート(中間体8) (212 mg, 1.06 mmol, 5 eq)、ヨウ化ナトリウム(64mg, 0.43mmol, 2eq)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.039ml, 0.21mmol, 1eq)を加えた。混合物を90℃にて20時間加熱した後に、室温まで冷却させ、EtOAc (25ml)で希釈した。溶液を水(2×25ml)及び塩水(25ml)で洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下に濃縮した。カラムクロマトグラフィーによる精製(DCM中2%のMeOH)、続いて分取HPLCを行うことにより、表題化合物を黄色固体として得た(64mg, 48%収率)。
LC/MS: m/z 628 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7.71 (1H, d, J=9.6 Hz), 7.62 (2H, m), 7.26 (2H, m), 6.89 (2H, m), 5.81 (1H, d, J=9.6 Hz), 5.23 (1H, t, J=5.3 Hz), 4.11 (2H, t, J=6.4 Hz), 3.28 (1H, m), 2.55 (2H, m), 1.91-1.48 (17H, m), 0.98-0.93 (6H, m).
【０２９３】
実施例56 シクロペンチル N-([4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェノキシ]アセチル)-L-ロイシネート
【化１２８】
2009535385.tif 000130
【０２９４】
LC/MS: m/z 564 [M+H]+.  1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8.47 (1H, d, J=7.7 Hz), 7.56 (2H, m), 7.45 (1H, d, J=9.6 Hz), 7.38-7.24 (4H, m), 7.15 (2H, m), 5.69 (1H, d, J=9.8 Hz), 5.09 (1H, t, J=5.3 Hz), 4.63 (2H, m), 4.31 (1H, m), 1.84-1.79 (2H, m), 1.66-1.53 (9H, m), 0.92-0.86 (6H, m).
【０２９５】
6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-1-(4-ヒドロキシフェニル)ピリジン-2(1H)-オン [WO 03/076405] (100mg, 0.31mmol)の無水DMF (3ml)溶液に、窒素雰囲気下で、シクロペンチル N-(ブロモアセチル)-L-ロイシネート(109ml, 0.34mmol, 1.1eq)及び炭酸カリウム(51mg, 0.37mmol, 1.2eq)を加えた。混合物を40℃で16時間加熱した後に室温まで冷却させ、水(20 ml)に加えた。混合物をEtOAc (3×15ml)で抽出し、合わせた抽出物を水(2×40ml)及び塩水(40ml)で洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下に濃縮した。カラムクロマトグラフィーによる精製(DCM中の2〜3%のMeOH)に続いて最少量のMeOHでの粉砕を行うことにより、表題化合物を白色固体として得た(91mg, 52%収率)。
【０２９６】
シクロペンチル N-(ブロモアセチル)-L-ロイシネートは、シクロペンチル L-ロイシネートから1工程で合成したが、その詳細は以下に概説する。
【化１２９】
2009535385.tif 000131
【０２９７】
シクロペンチル L-ロイシネート(中間体8) (568mg, 2.84mmol)のDCM (6ml)中の溶液に、トリエチルアミン(0.24ml, 2.84mmol, 1eq)及びブロモアセチルクロリド(1.44ml, 3.13mmol, 1.1eq)を滴下した。混合物を室温にて20時間撹拌し、DCM (50ml)で希釈し、水(50ml)及び塩水(50ml)で洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下に濃縮して、表題化合物を含む粗混合物を得て(902mg)、これを、さらなる精製を行わずに用いた。LC/MS: m/z 320/322 [M+H]+。
【０２９８】
実施例57 シクロペンチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
【化１３０】
2009535385.tif 000132
【０２９９】
中間体4J及びL-ロイシン シクロペンチルエステル(中間体8)から。LC/MS: m/z 534 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8.47 (1H, d, J=7.7 Hz),    7.56 (2H, m), 7.45 (1H, d, J=9.6 Hz), 7.38-7.24 (4H, m), 7.15 (2H, m), 5.69 (1H, d, J=9.8 Hz), 5.09 (1H, t, J=5.3 Hz), 4.63 (2H, m), 4.31 (1H, m), 1.84-1.79 (2H, m), 1.66-1.53 (9H, m), 0.92-0.86 (6H, m).
【０３００】
以下の実施例は、同様の方法で合成した。
実施例58 tert-ブチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
【化１３１】
2009535385.tif 000133
【０３０１】
中間体4J及びL-ロイシン tブチルエステルから。LC/MS: m/z 522 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9.40-9.10 (2H,m), 7.59-7.44 (5H, m), 7.38-7.30 (4H, m), 5.71 (1H, d, J=9.6Hz), 4.00 (1H, br s), 3.40-3.28 (1H, m), 3.25-3.15 (1H, m), 3.10-3.00 (2H, m), 1.80-1.70 (3H, m), 0.96 (6H, d, J=5.1Hz).
【０３０２】
実施例59 シクロペンチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(2,4-ジフルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
【化１３２】
2009535385.tif 000134
【０３０３】
実施例59は、実施例57と同様の経路にて、3-(2,4-ジフルオロ-フェニル)-3-オキソ-チオプロピオンイミド酸 4-クロロ-フェニルエステルを用いて合成した。LC/MS: m/z 552 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.07 (1H, br s), 9.35 (2H, br s), 7.55-6.95 (8H, m), 5.72 (1H, d, J=9.9Hz), 5.27 (1H, t, J=5.7Hz), 4.15-4.00 (1H, m), 3.41-3.15 (2H, m), 3.10-3.00 (2H, m), 1.96-1.80 (2H, m), 1.78-1.55 (9H, m), 0.95 (6H, d, J=5.1Hz).
【０３０４】
実施例60 tert-ブチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(2,4-ジフルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
【化１３３】
2009535385.tif 000135
【０３０５】
実施例60は、実施例57と同様の経路にて、3-(2,4-ジフルオロ-フェニル)-3-オキソ-チオプロピオンイミド酸 4-クロロ-フェニルエステルを用いて合成した。LC/MS: m/z 540 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.07 (1H, br s), 9.30 (2H, br s), 7.55-6.94 (8H, m), 5.72 (1H, d, J=9.6Hz), 4.05-3.93 (1H, m), 3.40-3.10 (2H, m), 3.08-3.00 (2H, m), 1.80-1.65 (3H, m), 1.50 (9H, s), 0.96 (6H, d, J=5.1Hz).
【０３０６】
実施例61 シクロペンチル (2S)-[[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]アミノ](フェニル) エタノエート
【化１３４】
2009535385.tif 000136
【０３０７】
中間体4J及びL-フェニルグリシン シクロペンチルエステル(中間体10)から。LC/MS: m/z 554 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 10.35 (1H, br s), 7.60-7.13 (14H, m), 5.91 (1H, d, J=10.2Hz), 5.22-5.14 (1H, m), 4.36 (1H, s), 3.00-2.85 (4H, m), 2.16 (1H, br s), 1.99-1.43 (8H, m).
【０３０８】
実施例62 tert-ブチル (2S)-[[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]アミノ](フェニル) エタノエート
【化１３５】
2009535385.tif 000137
【０３０９】
中間体4J及びL-フェニルグリシン tブチルエステルから。LC/MS: m/z 542 [M+H]+.  1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 10.30 (1H, br s), 7.51-7.45 (3H, m), 7.38 (2H, d, J=6.9Hz), 7.27-7.04 (9H, m), 5.82 (1H, d, J=9.6Hz), 4.20 (1H, s), 2.86-2.75 (4H, m), 2.04 (1H, br s), 1.31 (9H, s).
【０３１０】
実施例63 シクロペンチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-メチルフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
【化１３６】
2009535385.tif 000138
【０３１１】
実施例63は、実施例59と同様の方法により、中間体4Jについて用いたのと同様の方法により調製された3-(4-メチル-フェニル)-3-オキソ-チオプロピオンイミド酸 4-クロロ-フェニルエステルを用いて調製した。 LC/MS: m/z 530 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.65 (1H, d, J=9.9Hz), 7.47 (4H, m), 7.26 (4H, m), 5.89 (1H, d, J=9.9Hz), 5.20 (1H, m), 3.25 (1H, t, J=7.2Hz), 2.87 (4H, m), 2.44 (3H, s), 1.99-1.53 (9H, m), 1.42 (2H, t, J=6.3Hz), 0.91 (6H, m).
【０３１２】
実施例64 シクロペンチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-メトキシフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
【化１３７】
2009535385.tif 000139
【０３１３】
実施例64は、実施例59と同様の方法により、中間体4Jについて用いたのと同様の方法により調製した3-(4-メトキシ-フェニル)-3-オキソ-チオプロピオンイミド酸 4-クロロ-フェニルエステルを用いて調製した。LC/MS: m/z 546 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.67 (1H, d, J=9.9Hz), 7.55 (2H, d), 7.46 (2H, d), 7.24 (2H, d, J=8.4Hz), 6.98 (2H, d, J=6.9 Hz), 5.90 (1H, d, J=9.6 Hz), 5.18 (1H, m), 3.88 (3H, s), 3.24 (1H, t, J=7.2 Hz), 2.87 (4H, m), 1.97-1.53 (9H, m), 1.43 (2H, t), 0.90 (6H, m).
【０３１４】
実施例65 シクロペンチル N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-クロロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
【化１３８】
2009535385.tif 000140
【０３１５】
実施例65は、実施例59と同様の方法により、中間体4Jについて用いたのと同様の方法により調製した3-(4-クロロ-フェニル)-3-オキソ-チオプロピオンイミド酸 4-クロロ-フェニルエステルを用いて調製した。LC/MS: m/z 551 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.40 (7H, m), 7.16 (2H, d, J=8.4Hz), 5.82 (1H, d, J=9.9 Hz), 5.11 (1H, m), 3.17 (1H, t, J=7.5 Hz), 2.78 (4H, m), 1.92-1.43 (9H, m), 1.35 (2H, t), 0.82 (6H, dd).
【０３１６】
実施例66 シクロペンチル N-[3-(4-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3-フルオロフェノキシ)プロピル]-L-ロイシネート
【化１３９】
2009535385.tif 000141
【０３１７】
実施例66は、実施例25と同様の方法により、6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチル-ベンゾイル)-1-[2-フルオロ-4-ヒドロキシ-フェニル]-1H-ピリジン-2-オン [WO 03/076405]を用いて調製した。LCMS純度 97%, m/z 582 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 7.57 (2H, m), 7.48 (1H, d, J=9.6Hz), 7.34 (3H, m), 7.10 (1H, dd, J=11.9, 2.3Hz), 7.00 (1H, dd,J= 9.7, 2.3Hz), 5.70 (1H, d, J=9.6Hz), 5.12 (1H, m), 4.11 (2H, t, J=6.2Hz), 3.14 (1H, m), 2.68 (1H, m), 1.98 (1H, m), 1.88-1.82 (4H, m), 1.67-1.57 (7H, m), 0.88 (6H, t, J=7.2Hz).
【０３１８】
実施例67 シクロペンチル N-[3-(4-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)プロピル]-L-ロイシネート
【化１４０】
2009535385.tif 000142
【０３１９】
実施例61は、実施例57と同様の経路により、3-(4-アミノ-フェニル)-プロパン-1-オールを用いて合成した。LC/MS: m/z 548 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9.13 (2H, br s), 7.59-7.52 (2H, m), 7.50-7.42 (3H, m), 7.39-7.25 (4H, m), 5.70 (1H, d, J=9.6Hz), 5.28-5.24 (1H, m), 4.04 (1H, br s), 3.35-2.85 (2H, m), 2.80-2.70 (2H, m), 2.10-1.80 (4H, m), 1.75-1.55 (10H, m), 0.93 (6H, d, J=3.4Hz).
【０３２０】
3-(4-アミノ-フェニル)-プロパン-1-オールを、4-ニトロシンナミルアルコールから、1工程で以下に示すようにして合成した。
4-ニトロシンナミルアルコール(2g, 11.1mmol)のメタノール(30ml)溶液に、窒素雰囲気下で、ラネーニッケルを加えた(水中のスラリー2ml)。反応物を、次いで、水素ガスに曝露し、水素雰囲気下で12時間、反応の完了のために撹拌した。反応混合物を、セライトを通してろ過し、メタノール及び酢酸エチルで洗浄した。ろ液を次いで減圧下に濃縮した後に、カラムクロマトグラフィーによる精製(8:2 EtOAc:ヘキサン)を行い、所望の生成物(1.68g, 95%)を黄色固体として得た。
【０３２１】
実施例68  シクロペンチル N2-[3-(4-[6-アミノ-5-[(2,4-ジフルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ)プロピル]-L-リジネート
【化１４１】
2009535385.tif 000143
【０３２２】
実施例68は、実施例52と同様の経路により、L-リジン(Z)-シクロペンチルエステルを用いて合成した。LC/MS: m/z 633 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7.45 - 7.54 (2H, m), 7.12 (2H, t, J=8.6 Hz), 6.93 (2H, d, J=9.8 Hz), 5.81 (1H, d, J=9.8 Hz), 5.33 - 5.40 (1H, m), 4.25 (2H, t, J=5.1 Hz), 4.10 - 4.16 (1H, m), 2.96 (2H, t), 2.27 - 2.35 (2H, m), 1.63 - 2.12 (16H, m).
【０３２３】
実施例69 tert-ブチル N2-[3-(4-[6-アミノ-5-[(2,4-ジフルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ)プロピル]-L-リジネート
【化１４２】
2009535385.tif 000144
【０３２４】
実施例69は、実施例52と同様の経路により、L-リジン(Z)- t-ブチルエステルを用いて合成した。LC/MS: m/z 621 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7.48 (2H, dd, J=9.7, 2.7 Hz), 7.12 (2H, t, J=8.6Hz), 6.88 (2H, d, J=9.2 Hz), 5.81 (1H, d, J=9.6 Hz), 4.18 (2H, t, J=6.2 Hz), 3.15 ( H, t, J=6.6 Hz), 2.76 - 2.87 (3H, m), 2.68 (1 H, dt, J=11.5, 6.9 Hz), 1.97 - 2.05 (4H, m), 1.64 (4H, dt, J= 6.1Hz), 1.01 (9H, s).
【０３２５】
実施例70 シクロペンチル N-[2-(3-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシネート
【化１４３】
2009535385.tif 000145
【０３２６】
実施例70は、中間体4Jと同様の方法(代わりに3-アミノフェネチルアルコールを用いる)、及びL-ロイシンシクロペンチルエステル(中間体8)を用いて合成した。LC/MS: m/z 534 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9.40-9.00 (2H, m), 7.65-7.44 (5H, m), 7.38-7.11 (4H, m), 5.72 (1H, d, J=9.9Hz), 5.30-5.20 (1H, m), 4.10-4.00 (1H, m), 3.45-3.15 (2H, m), 3.10-3.00 (2H, m), 1.95-1.80 (2H, m), 1.75-1.55 (9H, m), 9.93 (6H, d, J=4.8Hz).
【０３２７】
実施例71 シクロペンチル (S)-2-[3,5-ジフルオロ-4-[3-(4-フルオロベンゾイル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-2-イルアミノ]ベンジルアミノ]-3-フェニルプロピオネート
【化１４４】
2009535385.tif 000146
【０３２８】
中間体7 (20mg)の20% TFA/ DCM (0.5ml)溶液を、RTにて1時間放置した。完了時に、反応混合物を、N2の穏やかな流れの下で蒸発乾固した。DCM (0.5ml)を加え、N2を流した。N2の下での乾燥を一晩継続した。収率 =20mg, 98%。
LCMS純度96%, m/z 590 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0.75 -1.33 (8H, m), 2.90 (1H, m), 3.50 (2H, m), 4.25 (3H, m), 4.93 (1H, m), 5.70, (1H, m), 5.98 (1H, m), 7.15-7.62 (11H, m), 9.7 ( 1H, br s), 10.42 (0.5H br s)
【０３２９】
実施例72 (S)-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]フェニル酢酸
【化１４５】
2009535385.tif 000147
【０３３０】
実施例7 (100mg, 0.179mmol)のTHF (1ml)及びMeOH (0.5ml)中の溶液に、2M NaOH (aq, 1ml)を加えた。混合物をRTにて3時間撹拌し、ほぼ乾燥するまで蒸発させ、1M HClの滴下を用いて酸性化し、EtOAc (5ml)で抽出した。EtOAc層を真空濃縮して、粗製の酸を得た。LCMSは、80%の生成物m/z = 490 [M+H]+及び20%の不純物m/z 470 [M+H]+を示す。分取HPLCによる精製により、所望の生成物を得た。収率= 34mg, 31%)。LCMS純度 100%, m/z 490 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 3.64 (2H, m, CH2), 4.06 (1H, s, CH), 5.50 (1H, d, Ar), 6.75 (1H, br s, NH), 6.96 (13H, m, Ar), 9.84 (1H, br s, NH).
【０３３１】
以下の化合物は、同様の方法で調製した。
実施例73 (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-3-フェニルプロピオン酸
【化１４６】
2009535385.tif 000148
【０３３２】
実施例8から。LCMS純度99%, m/z 504 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 2.96-3.09 (3H, m), 3.81 (1H, d), 3.98 (1H, d), 5.76 (1H, d), 7.00 (1H, br s), 7.22-7.40 (9H, m), 7.41-7.61 (4H, m), 10.11 (1H, br s).
【０３３３】
実施例74 (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-4-メチルペンタン酸
【化１４７】
2009535385.tif 000149
【０３３４】
実施例9から。LCMS純度91%, m/z 470 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 0.71 (6H, m), 1.40 (2H, m), 1.60 (1H, m), 3.44 (1H, m), 3.89 (2H, s), 5.49 (1H, d), 6.70 (1H, br s), 6.94-7.08 (2H, m), 7.14-7.33 (4H, m), 7.46 (2H, m), 9.86 (1H, br s).
【０３３５】
実施例75 (S)-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]フェニル酢酸
【化１４８】
2009535385.tif 000150
【０３３６】
実施例1から。LCMS純度100%, m/z 472 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 4.13 (1H, d), 4.22 (1H, d), 5.18 (1H, s), 5.73 (1H, d), 7.30-7.61 (13H, m), 7.73 (1H, d), 10.09 (2H, br s).
【０３３７】
実施例76  (S)-[4-[6-アミノ-5-(3-メチル-4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]フェニル酢酸
【化１４９】
2009535385.tif 000151
【０３３８】
実施例4から。LCMS純度86%, m/z 486 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 2.20 (3H, s), 3.98 (1H, d), 4.06 (1H, d), 5.07 (1H, s), 5.62 (1H, d), 7.12-7.50 (12H, m), 7.61 (1H, d), 9.90 (2H, br s).
【０３３９】
実施例77 (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-4-メチルペンタン酸
【化１５０】
2009535385.tif 000152
実施例9から。LCMS純度91%, m/z 470 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 0.71 (6H, m), 1.40 (2H, m), 1.60 (1H, m), 3.44 (1H, m), 3.89 (2H, s), 5.49 (1H, d), 6.70 (1H, br s), 6.94-7.08 (2H, m), 7.14-7.33 (4H, m), 7.46 (2H, m), 9.86 (1H, br s).
【０３４０】
実施例78  (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-3-フェニルプロピオン酸
【化１５１】
2009535385.tif 000153
実施例2から。LCMS純度100%, m/z 486 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 3.00 (2H, m), 3.98 (3H, m), 5.65 (1H, d), 7.15-7.34 (11H, m), 7.40 (1H, d), 7.51 (2H, m).
【０３４１】
実施例79 (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-4-メチルペンタン酸
【化１５２】
2009535385.tif 000154
実施例3から。LCMS純度100%, m/z 452 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 0.81 (6H, m), 1.51 (2H, m), 1.72 (1H, m), 3.95 (2H, m), 5.61 (1H, d), 7.21-7.30 (4H, m), 7.39 (1H, d), 7.48 (2H, m), 7.52 (2H, m).
【０３４２】
実施例80 (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(3-メチル-4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-3-フェニルプロピオン酸
【化１５３】
2009535385.tif 000155
実施例5から。LCMS純度100%, m/z 500 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 2.33 (3H, s), 2.90-3.07 (3H, m), 3.76 (1H, d), 3.92 (1H, d), 5.72 (1H, d), 7.20-7.42 (9H, m), 7.49 (4H, m).
【０３４３】
実施例81 (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(3-メチル-4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]ベンジルアミノ]-4-メチルペンタン酸
【化１５４】
2009535385.tif 000156
実施例6から。LCMS純度98%, m/z 500 [M+H]+.
【０３４４】
実施例82 シクロペンチル (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-3-フェニルプロピオン酸
【化１５５】
2009535385.tif 000157
実施例24から。LCMS純度93%, m/z 530 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1.90 (2H, m), 2.80-2.90 (2H, m), 3.00 (2H, m), 3.40 (1H, m), 4.05 (2H, m), 5.70 (1H, d), 7.10 (1H, d), 7.20 (2H, d). 7.30 (5H, m), 7.35 (1H, d), 7.45 (1H, d), 7.60 (1H, d).
【０３４５】
実施例83 (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(3-メチル-4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-3-フェニル プロピオン酸
【化１５６】
2009535385.tif 000158
実施例12から。LCMS純度96%, m/z 544 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2.30 (2H, m), 2.40 (3H, s), 3.30 (1H, m), 4.30 (2H, m), 4.45 (1H, m), 5.85 (1H, d), 5.40 (1H, m), 5.85 (1H, d), 7.25 (2H, d), 7.40-7.55 (9H, m), 7.60-7.70 (2H, m).
【０３４６】
実施例84 (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-フェノキシ]プロピルアミノ)フェニル 酢酸
【化１５７】
2009535385.tif 000159
実施例28から。LCMS純度82%, m/z 534 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 2.25 (2H, m), 3.10 (1H, m), 3.25 (1H, m), 4.20 (1 H, m), 5.83 (1H, d), 7.15-7.60 (13H, d).
【０３４７】
実施例85 (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチルペンタン酸
【化１５８】
2009535385.tif 000160
実施例25から。LCMS純度100%, m/z 496 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1.00 (6H, m), 1.75-1.90 (3H, m), 2.30 (2H, m), 3.10-3.30 (2H, m), 4.00 (1H, m), 4.25 (2H, m), 5.85 (1H, d), 5.40 (1H, m), 5.85 (1H, d), 7.20 (2H, d), 7.30 (2H, d), 7.40 (2H, t), 7.55 (1H, m), 7.65 (2H, m).
【０３４８】
実施例86 (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-3-フェニル プロピオン酸
【化１５９】
2009535385.tif 000161
実施例29から。LCMS純度100%, m/z 548 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2.15 (2H, m), 3.15-3.30 (3H, m), 3.35 (1H, m), 4.10 (2H, m), 4.20 (1H, m), 5.65 (1H, d), 7.15 (2H, d), 7.20- 7.35 (11H, m)
【０３４９】
実施例87 (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチルベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル-フェノキシ]プロピルアミノ)フェニル酢酸
【化１６０】
2009535385.tif 000162
実施例26から。LCMS純度95%, m/z 530 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2.15 (3H, s) -2.35 (2H, m), 2.85 (2H, m), 3.05 (2H, m), 4.10 (2H, m),  5.25 (1H, m), 5.70 (1H, d), 4.25 (2H, m), 5.85 (1H, d), 5.40 (1H, m), 5.85 (1 H, d), 7.10 (2H, d), 7.25 (2H, d), 7.3 (1H, d), 7.35 (1H, m), 7.40-7.55 (5H, m), 7.60 (2H, m).
【０３５０】
実施例88 (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチルベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチルペンタン酸
【化１６１】
2009535385.tif 000163
実施例27から。LCMS純度94%, m/z 510 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0.90 (6H, br s), 1.65-1.80 (3H, m), 2.1-2.30 (3H, s+ 2H, m), 3.0-3.20 (2H, m),  3.90 (1H, m), 4.15 (2H, m), 5.65 (1H, d),  7.15 (2H, d), 7.20-7.30 (3H, m), 7.30 (1H, m), 7.40 (1H, d), 7.45 (2H, s).
【０３５１】
実施例89 S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)フェニル酢酸
【化１６２】
2009535385.tif 000164
実施例13から。LCMS純度91%, m/z 552 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2.10-2.25 (2H, br m), 2.80 (1H, m), 3.00 (1H, m), 4.15 (2H, d), 5.20 (1H, s), 5.70 (1H, d), 5.65 (1H, d),  6.95 (2H, d), 7.30 (2H, t), 7.30 (1H, m), 7.40 -7.60 (8H, m).
【０３５２】
実施例90 (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)フェニル酢酸
【化１６３】
2009535385.tif 000165
実施例14から。LCMS純度98%, m/z 566 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2.35 (2H, m), 3.1-3.3 (3H, m), 3.50 (1H, m), 4.25-4.40 (3H, m), 5.80 (1H, d), 5.70 (1H, d), 7.10 (2H, d), 7.30 -7.45 (7H, m), 7.60-7.70 (3H, m).
【０３５３】
実施例91 (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシフェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチル ペンタン酸
【化１６４】
2009535385.tif 000166
実施例15から。LCMS純度92%, m/z 532 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0.95 (6H, m), 1.8 (3H, m), 2.30 (2H, m), 3.10-3.25 (2H, m), 3.95 (1H, m), 4.25 (2H, m), 5.80 (1H, d), 7.10 (2H, m), 7.40 (2H, m), 7.60 (1H, m), 7.65 (2H, m).
【０３５４】
実施例92 (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(2,4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロベンジルアミノ]-3-フェニルプロピオン酸
【化１６５】
2009535385.tif 000167
実施例10から。LCMS純度95%, m/z 522 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 3.30 (2H, m), 4.15 (1H, m), 4.25 (2H, m), 5.75 (1H, d), 7.15-7.35 (9H, m), 5.20 (1 H, m), 5.90 (1H, d), 7.35-7.50 (9H, m), 7.55 (2H, m), 7.65 (1H, d).
【０３５５】
実施例93 (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチルベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)-3-フェニルプロピオン酸
【化１６６】
2009535385.tif 000168
実施例18から。LCMS純度92%, m/z 580 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2.30 (2H, m), 2.40 (3H, s), 3.15-3.35 (4H, m), 3.50 (1H, m), 4.30 (2H, m), 4.35 (1H, m), 5.80 (1H, d), 7.10 (2H, m), 7.35-7.50 (7H, m), 7.55 (1H, m), 7.65 (1H, m).
【０３５６】
実施例94 (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-フェノキシ]プロピルアミノ)フェニル酢酸
【化１６７】
2009535385.tif 000169
実施例23から。LCMS純度87%, m/z 516 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2.25 (2H, m), 2.80 (1H, m), 3.10 (1H, m), 4.15 (2H, m), 5.30 (1H, s), 5.75 (2H, d), 7.15 (2H, d), 7.25 (2H, d), 7.40 (2H, t), 7.50-7.70 (7H, m).
【０３５７】
実施例95 (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)フェニル 酢酸
【化１６８】
2009535385.tif 000170
実施例20から。LCMS純度84%, m/z 570 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2.30 (2H, m), 2.90 (1H, m), 3.15 (1H, m), 4.23 (2H, m), 5.32 (1H, s), 5.85 (1H, d), 7.10 (2H, d), 7.50 (3H, m), 7.60-7.65 (6H, m).
【０３５８】
実施例96 (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]フェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチル ペンタン酸
【化１６９】
2009535385.tif 000171
実施例30から。LCMS純度93%, m/z 514 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0.95 (6H, m), 1.85 (3H, m), 2.30 (2H, m), 3.15-3.22 (2H, m), 3.99 (1H, m), 4.21 (2H, m), 5.77 (1H, d), 7.20 (2H, d), 7.30 (4H, m), 7.45 (1H, m), 7.55 (1H, m).
【０３５９】
実施例97 (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチル ペンタン酸
【化１７０】
2009535385.tif 000172
実施例22から。LCMS純度88%, m/z 550 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0.80-0.95 (6H, m),1.50-1.85 (3H, m), 1.95-2.10 (2H, m), 2.95-3.05 (2H, m), 3.75-3.85 (1H, m), 4.05-4.15 (2H, m), 5.65 (1H, d), 7.00 (1H, d), 7.10-7.20 (1H, m), 7.25-7.30 (1H, m), 7.30-7.40 (1H, m), 7.45-7.55 (1H, m), 7.80-8.25 (1H, br s), 9.90-10.20 (1H, br s).
【０３６０】
実施例98 (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチルベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)-4-メチルペンタン酸
【化１７１】
2009535385.tif 000173
実施例19から。LCMS純度93%, m/z 546 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0.95-1.05 (6H, m), 1.55-1.75 (2H, m), 1.80-1.90 (1H, m), 2.10-2.25 (2H, m), 2.35 (3H, s), 3.00-3.15 (2H, m), 3.70 (1H, m), 4.15-4.30 (2H, m), 5.80 (1H, d), 7.10 (1H, d), 7.25-7.35 (1H, m), 7.40-7.45 (1H, m), 7.50-7.55 (1H, m), 7.55-7.65 (1H, m), 8.90-10.70 (2H, br s).
【０３６１】
実施例99 (S)-(3-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロ-3-メチルベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ) フェニル酢酸
【化１７２】
2009535385.tif 000174
実施例17から。LCMS純度100%, m/z 566 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2.05-2.20 (2H, m), 2.30 (3H, s), 2.75-3.05 (2H, m), 4.05-4.20 (2H, m), 4.65-4.85 (1H, m), 5.70 (1H, d), 7.00 (1H, d), 7.25-7.35 (1H, m), 7.35-7.60 (8H, m).
【０３６２】
実施例100 (S)-2-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]-プロピルアミノ)-3-フェニル プロピオン酸
【化１７３】
2009535385.tif 000175
実施例21から。LCMS純度100%, m/z 584 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 2.05-2.15 (2H, m), 3.00-3.10 (3H, m), 4.00-4.25 (4H, m), 5.75 (1H, d), 7.05 (1H, d), 7.25-7.50 (8H, m), 7.55-7.65 (1H, m).
【０３６３】
実施例101 (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロベンジルアミノ]-4-メチルペンタン酸
【化１７４】
2009535385.tif 000176
実施例11から。LCMS純度92%, m/z 506 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, MeOD), δ: 0.85-1.05 (6H, m), 1.65-1.85 (3H, m), 3.95-4.05 (1H, m), 4.25-4.35 (2H, m), 5.75 (1H, d), 6.90 (1H, d), 7.00-7.10 (2H, m), 7.35-7.45 (4H, m). 
【０３６４】
実施例102 (S)-2-(4-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]シクロヘキシルアミノ)-4-メチルペンタン酸
【化１７５】
2009535385.tif 000177
実施例31から。LCMS純度91%, m/z 606 [M++H], 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.55-2.55 (8H, m), 3.20-3.40 (2H, m), 4.25-4.35 (1H, m), 4.45-4.55 (1H, m), 4.85-4.95 (1H, m), 5.95 (1H, d), 6.95-7.10 (2H, m), 7.35-7.55 (6H, m), 7.70-7.80 (2H, m), 7.80-7.85 (1H, d).
【０３６５】
実施例103 (2S)-[(4-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]シクロヘキシル)アミノ](フェニル)酢酸
【化１７６】
2009535385.tif 000178
実施例32から。LCMS純度89%, m/z 592 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.60-1.75 (2H, m), 1.80-1.95 (2H, m), 2.00-2.15 (2H, m), 2.15-2.30 (2H, m), 3.05-3.20 (1H, m), 4.65-4.75 (1H, m), 4.75-4.80 (1H, m), 5.80 (1H, d), 6.85-6.95 (2H, m), 7.20-7.30 (2H, m), 7.40-7.50 (3H, m), 7.55-7.65 (4H, m), 7.65-7.70 (1H, m).
【０３６６】
実施例104 N-(4-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]シクロヘキシル)-L-ロイシン
【化１７７】
2009535385.tif 000179
実施例33から。LCMS純度93%, m/z 572 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 0.85-1.00 (6H, m), 1.45-2.00 (9H, m), 2.05-2.25 (3H, m), 3.05-3.15 (1H, m), 3.60-3.75 (1H, m), 4.30及び4.65 (それぞれ0.5H, m), 5.70 (1H, d), 6.75-6.85 (2H, m), 7.10-7.15 (2H, m), 7.45-7.55 (2H, m), 7.55-7.65 (1H, m).
【０３６７】
実施例105 (S)-2-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]シクロヘキシル アミノ]-3-フェニルプロピオン酸
【化１７８】
2009535385.tif 000180
実施例34から。LCMS純度98%, m/z 478 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, CD3OD), δ: 1.55-1.85 (4H, m), 1.95-2.20 (2H, m), 2.30-2.75 (2H, m), 3.15-3.20 (1H, m), 3.25-3.35 (2H, m), 4.05-4.15 (1H, m), 5.60 (1H, d), 7.05-7.15 (2H, m), 7.15-7.35 (5H, m), 7.35-7.45 (3H, m).
【０３６８】
実施例106 (R)-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピルアミノ)フェニル 酢酸
【化１７９】
2009535385.tif 000181
実施例42から。LCMS純度88%, m/z 570 [M+H]+, 1H NMR (400 MHz, DMSO), δ: 2.05-2.20 (2H, m), 2.75-2.95 (2H, m), 4.10-4.20 (2H, m), 4.30-4.50 (1H, m), 5.75 (1H, d), 7.00-7.10 (2H, m), 7.20-7.30 (1H, m), 7.35-7.50 (7H, m), 7.55-7.65 (1H, m).
【０３６９】
実施例107 (2S)-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ](シクロヘキシル)酢酸
【化１８０】
2009535385.tif 000182
実施例48から、LCMS純度95%, m/z 576 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, DMSO), δ: 10.16 (1H, br s),8.78 (1H, br s), 8.12 (1H, br s), 7.62-7.53 (1H, m), 7.47-7.32 (2H, m), 7.27-7.21 (1H, m), 7.07 (2H, d, J=10.2Hz), 5.74 (1H, d, J=9.6Hz), 4.19 (2H, t, J=5.7Hz), 3.85-3.75 (1H, m),3.15-3.00 (2H, m), 2.20-2.05 (2H, m),1.95-1.60 (6H, m), 1.40-0.90 (5H, m).
【０３７０】
実施例108 N-(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)-D-ロイシン
【化１８１】
2009535385.tif 000183
実施例50から。LCMS純度90%, m/z 550 [M+H]+, 1H NMR (300 MHz, DMSO), δ: 7.63-7.52 (1H, m), 7.46-7.32 (2H, m), 7.28-7.10 (1H, m), 7.06 (2H, d, J=10.2Hz), 5.73 (1H, d, J=9.9Hz), 4.25-4.15 (2H, m), 3.90-3.80 (1H, m), 3.20-3.00 (2H, m), 2.20-2.05 (2H, m), 1.80-1.55 (3H, m), 0.98-0.90 (6H, m).
【０３７１】
実施例109 N-(5-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]ペンチル)-L-ロイシン
【化１８２】
2009535385.tif 000184
【０３７２】
実施例55から。シクロペンチル N-(5-[4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]ペンチル)-L-ロイシネート(33mg, 0.05mmol)のTHF (1ml)及び水(1ml)中の溶液に、LiOH (25mg, 1.05mmol, 20eq)を加えた。混合物を室温にて16時間撹拌し、80℃にて10時間加熱した。混合物を減圧下に濃縮して、水(5 ml)を加えた。1M HClを用いてpHを7に調整し、水相を1-ブタノール(3×5ml)で抽出した。合わせた有機抽出物を、減圧下に濃縮した。固体の残渣をEt2Oで粉砕し、ろ過により回収し、分取HPLCにより精製して、表題化合物を、モノTFA塩の白色固体として得た(7mg, 24%収率)。
LC/MS: m/z 560 [M+H]+.  1H NMR  (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7.62-7.51 (3H, m), 7.34 (2H, m), 7.05 (2H, m), 5.72 (1H, d, J=9.8 Hz), 4.09 (2H, t, J=5.7 Hz), 3.23 (1H, m), 2.80 (2H, m), 1.79-1.43 (9H, m), 0.89 (6H, t, J=6.7 Hz).
【０３７３】
実施例110  N-([4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェノキシ]-アセチル)-L-ロイシン
【化１８３】
2009535385.tif 000185
【０３７４】
実施例56から。シクロペンチル N-([4-[6-アミノ-5-(4-フルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェノキシ]アセチル)-L-ロイシネート(35mg, 0.06mmol)のTHF (1ml)及び水(1ml)中の溶液に、LiOH (30mg, 1.24mmol, 20eq)を加えた。混合物を室温にて16時間撹拌し、減圧下に濃縮して、水(5ml)を加えた。1M HClを用いてpHを7に調整し、水相を1-ブタノール(3×5ml)で抽出した。合わせた有機層を減圧下に濃縮した。固体の残渣をEt2Oで粉砕し、ろ過し、減圧下に乾燥して、表題化合物をクリームの固体として得た(11mg, 36%収率)。
LC/MS: m/z 496 [M+H]+.  1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7.58-7.53 (3H, m), 7.43 (1H, d, J=9.6 Hz), 7.36-6.98 (6H, m), 5.68 (1H, d, J=9.6 Hz), 4.58 (2H, s), 3.90 (1H, m), 1.67-1.31 (3H, m), 0.86 (6H, m).
【０３７５】
実施例111  N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシン
【化１８４】
2009535385.tif 000186
実施例58から。LC/MS: m/z 466 [M+H]+.  1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8.21 (1H, br s), 7.60-7.44 (4H, m), 7.39-7.30 (4H, m), 5.76-5.69 (1H, m), 4.00-3.85 (1H, m), 3.10-2.95 (2H, m), 1.85-1.60 (3H, m), 1.30-1.10 (2H, m), 0.95 (6H, d, J=6Hz).
【０３７６】
実施例112 N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-メチルフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシン
【化１８５】
2009535385.tif 000187
実施例63から。LC/MS: m/z 462 [M+H]+.  1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7.69 (1H, d, J=9.6Hz), 7.53 (2H, d, J=7.2 Hz), 7.45 (2H, d, J=8.1 Hz), 7.34 (2H, d, J=7.8 Hz), 7.25 (2H, d, J=8.4 Hz), 5.80 (1H, d, J=9.6 Hz), 3.15 (1H, m), 3.02-2.75 (4H, m), 2.45 (3H, s), 1.73 (1H, m), 1.56-1.22 (2H, m), 0.96 (6H, dd).
【０３７７】
実施例113  N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-メトキシフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシン
【化１８６】
2009535385.tif 000188
実施例64から。LC/MS: m/z 478 [M+H]+.  1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7.28 (2H, d, J=8.7Hz), 7.15 (2H, d, J=8.1Hz), 7.04 (1H, d, J=9.3 Hz), 6.89 (4H, m), 4.87 (1H, d, J=9.3Hz), 3.78 (1H, m), 3.41 (3H, s), 2.75 (2H, m), 1.78 (1H, m), 1.24 (2H, m),
0.86 (6H, t).
【０３７８】
実施例114  N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-クロロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシン
【化１８７】
2009535385.tif 000189
実施例65から。LC/MS: m/z 482 [M+H]+.  1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ: 7.16 (1H, d), 7.52 (6H, m), 7.23 (2H, d), 6.82 (1H, d), 3.15 (1H, t), 1.74 (1H, m), 1.44 (2H, m), 0.93 (6H, dd).
【０３７９】
実施例115  (2S)-4-アミノ-2-[(3-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]プロピル)アミノ]ブタノエート
【化１８８】
2009535385.tif 000190
実施例52から。LC/MS: m/z 537 [M+H]+.  1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7.52 - 7.75 (2H, m), 7.30 - 7.48 (2H, m), 7.20 - 7.29 (1H, m), 7.09 (2 H, d, J=9.7 Hz), 4.23 (1H, t, J=6.1Hz), 4.07 - 4.17 (2H, m), 2.14 - 2.32 (2H, m), 1.22 - 1.41 (6H, m), 0.88 (4H, t, J=7.3 Hz)
【０３８０】
実施例116 N-(5-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]ペンチル)-L-ロイシン
【化１８９】
2009535385.tif 000191
【０３８１】
実施例54から。tert-ブチル N-(5-[4-[6-アミノ-5-(2,4-ジフルオロベンゾイル)-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]-3,5-ジフルオロフェノキシ]ペンチル)-L-ロイシネート(21mg, 0.04mmol)のDCM (2.5ml)溶液に、TFA (2.5ml)を加えた。混合物を室温にて20時間撹拌した後に、減圧下に濃縮した。残渣を最少量のMeOHに溶解し、1:1 トルエン/DCMと3回共沸した。表題化合物を、モノTFA塩のクリーム色の固体として得た(21mg, 92%収率)。
LC/MS: m/z 634 [M+H]+.  1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.14 (1H, br s), 8.21 (1H, br s), 7.57 (1H, m), 7.46 (1H, m), 7.34 (1H, dd, J=9.6, 2.4 Hz), 7.21 (1H, m), 7.06 (2H, d, J=10.2 Hz), 5.73 (1H, d, J=9.9 Hz), 4.10 (2H, t, J=5.7 Hz), 3.40 (1H, m), 2.84 (2H, t, J=6.6 Hz), 1.79-1.48 (9H, m), 0.90 (6H, t, J=6.3 Hz).
【０３８２】
以下の実施例は、同様の方法で調製した。
実施例117 N-[2-(4-[6-アミノ-5-[(2,4-ジフルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]-L-ロイシン
【化１９０】
2009535385.tif 000192
実施例60から。LC/MS: m/z 484 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.06 (1H, br s), 9.17 (2H, br s), 7.55-6.94 (8H, m), 5.72 (1H, d, J=9.6Hz), 4.05-3.93 (1H, m), 3.40-3.10 (3H, m), 1.85-1.65 (4H, m), 0.95 (6H, d, J=5.7Hz).
【０３８３】
実施例118 (2S)-[[2-(4-[6-アミノ-5-[(4-フルオロフェニル)カルボニル]-2-オキソピリジン-1(2H)-イル]フェニル)エチル]アミノ](フェニル)エタン酸
【化１９１】
2009535385.tif 000193
実施例62から。LC/MS: m/z 486 [M+H]+. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9.80 (2H, br s), 7.70-7.20 (14H, m), 5.70 (1H, d, J=9.6Hz), 5.24 (1H, s), 3.20-2.90 (4H, m).
【０３８４】
生物学的活性の測定
p38 MAPキナーゼ活性
化合物がp38 MAP aキナーゼ活性を阻害する能力を、Upstate (Dundee UK)により行われるアッセイにおいて測定した。最終反応容量25μL中に、p38 MAPキナーゼ a (5〜10 mU)を、25mM Tris pH 7.5、0.002 mMEGTA、0.33 mg/mLミエリン塩基性タンパク質、10mM酢酸Mg及び[g-33p-ATP] (特異的活性約500cpm/pmol、所望の濃度)とインキュベートする。反応は、MgATPミックスの添加により開始する。室温にて40分間のインキュベートの後に、反応を、5μLの3%リン酸溶液の添加により停止する。10μLの反応物を、次いで、P30フィルタマットにスポットし、75 mMリン酸中で5分間、3回、及びメタノール中で1回洗浄した後に、乾燥してシンチレーションカウントを行う。
【０３８５】
二重のデータ点を、DMSO中のストック溶液の1/3 log希釈系列から作製する。最高濃度10μMから9つの希釈段階を作製し、「化合物なし」ブランクを含める。標準的な放射分析フィルタ結合アッセイを、Km又はそれに近いATP濃度で行う。シンチレーションカウントからのデータを回収し、Prismソフトウェアによるフリー-フィット分析に供する。作製された曲線から、50%阻害を与える濃度を決定し、報告する。
【０３８６】
THP-1細胞のLPS刺激
THP-1細胞を、100μlに4×104細胞/ウェルの密度で、V底96ウェル組織培養処理プレートに植え、37℃にて5% CO2中で16時間インキュベートした。阻害剤を100μlで組織培養培地に添加した2時間後に、細胞を1μg/mlの最終濃度のLPS (E coli 005:B5株、Sigma)で刺激し、37℃にて5% CO2中で6時間インキュベートした。TNF-αのレベルを、サンドイッチELISA (R&D Systems #QTA00B)により、無細胞上清から測定した。
【０３８７】
ヒト全血のLPS刺激
全血を、ヘパリン添加ヴァキュテイナー(Becton Dickinson)を用いて静脈穿刺により採取し、等容量のRPMI1640組織培養培地(Sigma)で希釈した。100μlを、V底96ウェル組織培養処理プレートに植えた。100μlのRPMI1640培地中の阻害剤の添加の2時間後に、血液を、100ng/mlの最終濃度のLPS (E coli 005:B5株、Sigma)で刺激し、37℃にて5% CO2中で6時間インキュベートした。TNF-αのレベルを、サンドイッチELISA (R&D Systems #QTA00B)により、無細胞上清から測定した。
【０３８８】
IC50の値は、以下のような3つの範囲の1つに割り当てた：
範囲A: IC50＜100nM
範囲B: 100nM＜IC50＜1000nM
範囲C: IC50＞1000nM
【０３８９】
【表１−１】
2009535385.tif 000194
【０３９０】
【表１−２】
2009535385.tif 000195
【０３９１】
【表１−３】
2009535385.tif 000196
【０３９２】
【表１−４】
2009535385.tif 000197
【０３９３】
破砕細胞カルボキシルエステラーゼアッセイ
R1がエステル基である本発明のいずれの所定の化合物は、細胞内エステラーゼにより加水分解されるという要件を満たすかについて、以下のアッセイにおいて試験することにより試験して決定できる。
【０３９４】
細胞抽出物の調製
U937又はHut78腫瘍細胞(約109)を、4容量のダルベッコのPBS (約1リットル)中で洗浄し、4℃、525 gにて10分間、ペレットにした。これを2回繰り返し、最終の細胞ペレットを、35 mlの冷ホモジナイズバッファー(Trizma 10 mM, NaCl 130 mM, CaCl2 0.5 mM 25℃にてpH 7.0)に再懸濁した。ホモジネートを、窒素キャビテーション(700 psi、4℃にて50分間)により調製した。ホモジネートを氷上に維持し、最終濃度：
ロイペプチン      1μM
アプロチニン      0.1μM
E64               8μM
ペプスタチン      1.5μM
ベスタチン        162μM
キモスタチン      33μM
の阻害剤のカクテルを補った。
細胞ホモジネートを、525 gで10分間の遠心分離により清澄にした後に、得られた上清を、エステラーゼ活性の供給源として用い、必要になるまで-80℃にて貯蔵した。
【０３９５】
エステル切断の測定
対応するカルボン酸へのエステルの加水分解は、上記のようにして調製した細胞抽出物を用いて測定できる。このために、細胞抽出物(約30μg / 0.5 mlの全アッセイ容量)を、37℃にて、Tris- HCl 25 mM、125 mM NaClバッファー、25℃にてpH 7.5中でインキュベートした。ゼロ時間に、エステル(基質)を、2.5μMの最終濃度で加え、試料を37℃にて適切な時間(通常、0又は80分)インキュベートした。反応を、3×容量のアセトニトリルの添加により停止した。ゼロ時間の試料のために、アセトニトリルをエステル化合物の前に加えた。12000 gで5分間の遠心分離の後に、試料をエステル及びその対応するカルボン酸について、室温にてLCMS (Sciex API 3000, HP1100バイナリポンプ, CTC PAL)により分析した。クロマトグラフィーは、AceCN (75×2.1mm)カラム、及び水/0.1%ギ酸中の5〜95%アセトニトリルの移動相に基づいた。
【０３９６】
加水分解の速度は、pg/mL/分で表す。
表1は、多くの異なるリンカー化学により種々の細胞内酵素阻害剤にコンジュゲートされた多くのアミノ酸エステルモチーフが、細胞内カルボキシエステラーゼにより、対応する酸に全て加水分解されることを示すデータを表す。
【０３９７】
【表２】
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【国際調査報告】
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