(57)【要約】本発明は、式Ｉの化合物に関し、かつ、疾患、特に腫瘍、および／またはその生成もしくは進行過程においてプロテインキナーゼが関与する疾患の治療用の医薬品のためのその調製および使用に関する。
2009535300.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
【化１】
2009535300.tif 000036
（式中、
Ｒ1'は、Ｈ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ2、ＮＨ2、Ａ、Ａｒを表し、
Ｒ2'、Ｒ2"は、それぞれ互いに独立に、Ｈ、１、２、３、４、５または６個のＣ原子を有するＡを表し、ここで、Ｒ2'およびＲ2"は、それらが結合しているＮ原子と一緒に、さらなるＮ、ＯもしくはＳ原子を有するかまたはそれらを有さない飽和もしくは不飽和単環式複素環を形成することができ、
Ａは、１、２、３、４、５または６個のＣ原子を有する非分枝、分枝もしくは環状アルキルを表し、そのアルキルの１個もしくは２個のＣＨ基はＮで置き換えられていてよく、さらに、そのアルキルの１個もしくは２個のＣＨ2基はＯ、ＮもしくはＳ原子および／またはＮＨ、ＮＡ、ＣＯＮＨ、Ｓｉ（ＣＨ3）2、ＮＨＣＯ、ＳＯ2、−ＣＨ＝ＣＨ−もしくは−Ｃ≡Ｃ−基で置き換えられていてよく、かつ／または、さらに１〜７個のＨ原子はＨａｌで置き換えられていてよく、そのアルキルの１個もしくは２個のＣＨ3基はＮＨ、ＮＨ2、ＮＡＨ、ＮＡ2、ＮＨＣＯＯＡ、ＮＨＣＯＮＨＡ、Ｓｉ（ＣＨ3）3、ＣＮもしくはＡｒで置き換えられていてよく、
Ａｒは、１〜４個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子と５〜１２個の骨格原子を有する単環式または二環式芳香族単環または複素環を表し、それらは置換されていなくても、あるいはカルボニル酸素、Ｈａｌ、Ａ、ＯＨ、ＯＡ、ＮＨ2、ＮＨＡ、ＮＡ2、ＮＯ2、ＣＮ、ＯＣＮ、ＳＣＮ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＡ、ＣＯＮＨ2、ＣＯＮＨＡ、ＣＯＮＡ2、ＮＨＣＯＡ、ＮＨＣＯＯＡ、ＮＨＣＯＮＨ2、ＮＨＳＯ2Ａ、ＣＨＯ、ＣＯＡ、ＳＯ2ＣＨ3および／またはＳＯ2ＮＨ2によって一置換、二置換または三置換されていてもよく、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを表し、
ｎは、０、１、２または３を表す）、
ならびに薬剤として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）。
【請求項２】
式ＩＩに相当する、請求項１に記載の化合物
【化２】
2009535300.tif 000037
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびｎは、式Ｉで示した意味を有する）、
ならびに薬剤として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）。
【請求項３】
請求項１または２に記載の化合物であって、より詳しく指定されていない基は請求項１に記載の式Ｉで示した意味を有し、
ただし、下位式Ａにおいて、
Ｒ1は、Ａ、あるいはフェニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリル−２−オン、フリル、チエニル、チアゾリル、ピリジルまたはピリミジニルを表し、そのそれぞれは、置換されていないか、あるいは、Ａ、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、ニトロ、シアノ、ホルミル、アセチル、プロピオニル、トリフルオロメチル、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ベンジルオキシ、メタンスルホニル、スルホンアミド、メチルスルホンアミド、エチルスルホンアミド、プロピルスルホンアミド、ブチルスルホンアミド、ジメチルスルホンアミド、フェニルスルホンアミド、カルボキシル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはアミノカルボニルによって一置換または二置換されており、
Ｒ2およびｎは、式Ｉで示した意味を有し、
下位式Ｂにおいて、
Ｒ1は、Ａ、あるいはフェニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリル−２−オン、フリル、チエニル、チアゾリル、ピリジルまたはピリミジニルを表し、そのそれぞれは、置換されていないか、あるいは、Ａ、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、ニトロ、シアノ、ホルミル、アセチル、プロピオニル、トリフルオロメチル、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ベンジルオキシ、メタンスルホニル、スルホンアミド、メチルスルホンアミド、エチルスルホンアミド、プロピルスルホンアミド、ブチルスルホンアミド、ジメチルスルホンアミド、フェニルスルホンアミド、カルボキシル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはアミノカルボニルによって一置換または二置換されており、
Ｒ2'、Ｒ2"は、Ｈであるか、または一緒にブチレン単位を形成しており、
ｎは１を表し、
下位式Ｃにおいて、
Ｒ1は、Ａ、あるいはフェニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリル−２−オン、フリル、チエニル、チアゾリル、ピリジルまたはピリミジニルを表し、そのそれぞれは、置換されていないか、あるいは、Ａ、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、ニトロ、シアノ、ホルミル、アセチル、プロピオニル、トリフルオロメチル、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ベンジルオキシ、メタンスルホニル、スルホンアミド、メチルスルホンアミド、エチルスルホンアミド、プロピルスルホンアミド、ブチルスルホンアミド、ジメチルスルホンアミド、フェニルスルホンアミド、カルボキシル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはアミノカルボニルによって一置換または二置換されており、
Ｒ2'、Ｒ2"は互いに独立に、Ｈであるか、あるいは１、２、３または４個のＣ原子を有する非分枝または分枝アルキルであり、Ｒ2'およびＲ2"は一緒に、エチレン、プロピレン、ブチレンまたはペンチレン単位を形成しており、
ｎは１を表し、
下位式Ｄにおいて、
Ｒ’は、プロパン−１−オリル、プロペン−１−オリル、プロピン−１−オリル、またはフェニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイミダゾリル−２−オン、ベンゾオキサゾリル−２−オン、フリル、チエニル、チアゾリル、ピリジルまたはピリミジニルを表し、そのそれぞれは、置換されていないか、あるいはヒドロキシル、アミノ、フッ素、ブトキシ、アセトアミド、ｔ−ブトキシカルボニルアミノ、ニトロ、ベンジル、（ジメチルフェニルシラニル）メトキシ、ジメチルフェニルシラニルオキシ、メタンスルホニル、スルホンアミド、メタンスルホンアミド、メチル、２−プロピル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンジルアミノ、Ｎ−ベンジルプロパン−１，３−ジアミノによって一置換または二置換されており、
Ｒ2およびｎは、式Ｉで示した意味を有し、
下位式Ｅにおいて、
Ｒ1は、プロパン−１−オリル、プロペン−１−オリル、プロピン−１−オリル、またはフェニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイミダゾリル−２−オン、ベンゾオキサゾリル−２−オン、フリル、チエニル、チアゾリル、ピリジルまたはピリミジニルを表し、そのそれぞれは、置換されていないか、あるいはヒドロキシル、アミノ、フッ素、ブトキシ、アセトアミド、ｔ−ブトキシカルボニルアミノ、ニトロ、ベンジル、（ジメチルフェニルシラニル）メトキシ、ジメチルフェニルシラニルオキシ、メタンスルホニル、スルホンアミド、メタンスルホンアミド、メチル、２−プロピル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンジルアミノ、Ｎ−ベンジルプロパン−１，３−ジアミノによって一置換または二置換されており、
Ｒ2'、Ｒ2"は、Ｈであるか、または一緒にブチレン単位を形成しており、
ｎは１を表す
化合物、ならびに薬剤として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）。
【請求項４】
式ＶＩの化合物
【化３】
2009535300.tif 000038
を式Ｖの化合物
【化４】
2009535300.tif 000039
と縮合させて、式ＩＶの化合物
【化５】
2009535300.tif 000040
を生成させ、これを所望の基Ｒ1とさらに結合させて式ＩＩＩの化合物
【化６】
2009535300.tif 000041
を生成させ、これを最後にＮＨ3と反応させて式Ｉの化合物を得る方法であって、所望により、式Ｉの塩基または酸をその塩の１つに転換させることを特徴とする、式Ｉの化合物ならびに生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体の調製方法。
【請求項５】
医薬品としての、請求項１から３の一項または複数項に記載の化合物、ならびに／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）。
【請求項６】
請求項１から３の一項または複数項に記載の少なくとも１つの化合物、ならびに／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）、ならびに任意選択の賦形剤および／または補助剤を含む医薬品。
【請求項７】
請求項１から３の一項または複数項に記載の少なくとも１つの化合物、ならびに／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）、ならびに少なくとも１つの他の医薬活性成分を含む医薬品。
【請求項８】
ａ）有効量の、請求項１から３の一項または複数項に記載の化合物、ならびに／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）と、
ｂ）有効量の他の医薬活性成分
の別個のパックからなるセット（キット）。
【請求項９】
プロテインキナーゼの阻害剤としての、請求項１から３の一項または複数項に記載の化合物、ならびに生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）。
【請求項１０】
プロテインキナーゼの阻害が臨床像の改善をもたらす、疾患の予防または治療用の医薬品の調製のための請求項１から３の一項または複数項に記載の化合物、ならびに／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）の使用。
【請求項１１】
癌、腫瘍増殖、腫瘍血管形成、動脈硬化症、糖尿病性網膜症および炎症性疾患の予防または治療用の医薬品の調製のための、請求項１から３の一項または複数項に記載の化合物、ならびに／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）の使用。
【請求項１２】
乳癌、脳腫瘍、前立腺癌、結腸直腸癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫ならびに腎細胞癌および子宮内膜癌の予防または治療用の医薬品の調製のための、請求項１から３の一項または複数項に記載の化合物、ならびに／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は式Ｉの化合物
【０００２】
【化１】
2009535300.tif 000003
【０００３】
（式中、
Ｒ1'は、Ｈ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ2、ＮＨ2、Ａ、Ａｒを表し、
Ｒ2'、Ｒ2"は、それぞれ互いに独立に、Ｈ、１、２、３、４、５または６個のＣ原子を有するＡを表し、ここで、Ｒ2'およびＲ2"は、それらが結合しているＮ原子と一緒に、さらなるＮ、ＯもしくはＳ原子を有するかまたはそれらを有さない飽和もしくは不飽和単環式複素環を形成することができ、
Ａは、１、２、３、４、５または６個のＣ原子を有する非分枝、分枝もしくは環状アルキルを表し、そのアルキルの１個もしくは２個のＣＨ基はＮで置き換えられていてよく、さらに、そのアルキルの１個もしくは２個のＣＨ2基はＯ、ＮもしくはＳ原子および／またはＮＨ、ＮＡ、ＣＯＮＨ、Ｓｉ（ＣＨ3）2、ＮＨＣＯ、ＳＯ2、−ＣＨ＝ＣＨ−もしくは−Ｃ≡Ｃ−基で置き換えられていてよく、かつ／または、さらに１〜７個のＨ原子はＨａｌで置き換えられていてよく、そのアルキルの１個もしくは２個のＣＨ3基はＮＨ、ＮＨ2、ＮＡＨ、ＮＡ2、ＮＨＣＯＯＡ、ＮＨＣＯＮＨＡ、Ｓｉ（ＣＨ3）3、ＣＮもしくはＡｒで置き換えられていてよく、
Ａｒは、１〜４個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子と５〜１２個の骨格原子を有する単環式または二環式芳香族単環または複素環を表し、それらは置換されていなくても、あるいはカルボニル酸素、Ｈａｌ、Ａ、ＯＨ、ＯＡ、ＮＨ2、ＮＨＡ、ＮＡ2、ＮＯ2、ＣＮ、ＯＣＮ、ＳＣＮ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＡ、ＣＯＮＨ2、ＣＯＮＨＡ、ＣＯＮＡ2、ＮＨＣＯＡ、ＮＨＣＯＯＡ、ＮＨＣＯＮＨ2、ＮＨＳＯ2Ａ、ＣＨＯ、ＣＯＡ、ＳＯ2ＣＨ3および／またはＳＯ2ＮＨ2によって一置換、二置換または三置換されていてもよく、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを表し、
ｎは、０、１、２または３を表す）、
ならびに薬剤として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）に関する。
【０００４】
式Ｉの化合物は、プロテインキナーゼによって媒介されるシグナル伝達を阻害し、制御しかつ／または調節することができることが分かっている。したがって、本発明による医薬品および医薬組成物は、プロテインキナーゼによって、かつ／またはキナーゼ媒介シグナル伝達によって引き起こされ、媒介され、かつ／または伝播する疾患の治療に効果的に用いることができる。したがって、本発明による化合物は、血管形成、癌、腫瘍の形成、増殖および広がり、動脈硬化症、加齢による黄斑変性症、脈絡膜血管新生および糖尿病性網膜症などの眼疾患、炎症性疾患、関節炎、血栓症、線維症、糸球体腎炎、神経変性、乾癬、再狭窄、創傷治癒、移植片拒絶反応、免疫系の代謝および疾患、また自己免疫疾患、肝硬変、糖尿病および血管の疾患の予防または治療に適しており、また哺乳動物における不安定性や浸透性等の予防または治療にも適している。
【背景技術】
【０００５】
例えばＷＯ９７／２８１６１またはＷＯ０２／９２５９９による他のタンパク質キナーゼ阻害剤が知られている。
【０００６】
癌は、その原因が、とりわけ、シグナル伝達が妨害されると見られる疾患である。具体的には、チロシンキナーゼを介して調節が解除されたシグナル伝達は、癌の増殖や広がりにおいて中心的役割を果たす（Ｂｌｕｍｅ−Ｊｅｎｓｅｎ，Ｐ．およびＴ．Ｈｕｎｔｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ  ４１１：３５５〜３６５頁、２００１年；Ｈａｎａｈａｎ  Ｄ．およびＲ．Ａ．Ｗｅｉｎｂｅｒｇ、Ｃｅｌｌ  １００：５７〜７０頁、２０００年）。したがって、チロシンキナーゼ、特に受容体チロシンキナーゼと、それらと結合する増殖因子は、調節が解除されたアポトーシス、組織浸潤、転移に関与し、かつ、一般に癌をもたらすシグナル伝達機序に関与する可能性がある。
【０００７】
すでに述べたように、それによって細胞制御が行われる主な機序の１つは、膜を通る細胞外シグナルの伝達であり、これは続いて細胞内の生化学的経路を調節する。タンパク質リン酸化は、それによって細胞内シグナルが分子から分子へと伝播し、最終的に細胞応答をもたらす１つのコースを表している。これらのシグナル伝達カスケードは高度に制御されており、しばしば重複している。それは多くのプロテインキナーゼならびにホスファターゼの存在から明らかである。タンパク質のリン酸化は主にセリン、トレオニンまたはチロシン残基において発生し、したがってプロテインキナーゼは、リン酸化部位の特異性にしたがって分類される。すなわちセリン／トレオニンキナーゼとチロシンキナーゼである。リン酸化は細胞内での広範囲に及ぶプロセスであり、かつ、細胞表現型はこれらの経路の活性に非常に影響されるので、最近では、多くの状態および／または疾患は、キナーゼカスケードの分子成分中での異常活性化かまたは機能変異に起因すると考えられている。その結果として、その活性を調節することができるこれらのタンパク質および化合物の特定評価に大きな注目が向けられている（総論文献：Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ−Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍｅｒら、Ｐｈａｒｍａ．＆．Ｔｈｅｒａｐ．８８：２２９〜２７９頁、２０００年を参照されたい）。阻害、制御および調節についてのプロテインキナーゼの様々な可能性には、例えば抗体、アンチセンスリボザイムおよび阻害剤の提供が含まれる。腫瘍学的研究において、特に、チロシンキナーゼは非常に期待される目標である。したがって、多くの合成小分子について、癌治療のためのチロシンキナーゼ阻害剤として臨床開発がなされている（例えばＩｒｅｓｓａ（登録商標）またはＧｌｅｅｖｅｃ（登録商標））。しかし、副作用、投薬量、腫瘍の耐性、腫瘍の特異性および患者選定などの多くの問題が解決されなければならない。
【０００８】
チロシンキナーゼは、タンパク性基質におけるアデノシン三リン酸の末端リン酸塩のチロシン残基への移動の触媒作用をする酵素の部類である。チロシンキナーゼは、基質リン酸化を介して、いくつかの細胞機能のためのシグナル伝達において重要な役割を果たすと考えられる。シグナル伝達の正確な機序は依然はっきりしないが、チロシンキナーゼは、細胞増殖、発癌および細胞分化における重要な因子であることが分かっている。チロシンキナーゼは、受容体チロシンキナーゼと細胞質チロシンキナーゼに分けられる。受容体チロシンキナーゼは、細胞外部分、膜貫通部分および細胞内部分を有しているが、細胞質チロシンキナーゼはもっぱら細胞内のみである。
【０００９】
受容体チロシンキナーゼは、異なる生物活性を有する多くの膜貫通受容体からなる。すなわち、受容体チロシンキナーゼの約２０個の異なるサブファミリーが確認されている。ＥＧＦＲまたはＨＥＲサブファミリーとして知られている１つのチロシンキナーゼサブファミリーはＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３およびＨＥＲ４からなる。受容体のこのサブファミリーからのリガンドには、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、組織増殖因子（ＴＧＦ−αおよびβ）、アンフィレギュリン、ＨＢ−ＥＧＦ、ベータセルリンならびにヘレグリンが含まれる。これらの受容体チロシンキナーゼの別のサブファミリーはＩｎｓ−Ｒ、ＩＧＦ−ＩＲおよびＩＲ−Ｒを含むインスリンサブファミリーである。ＰＤＧＦサブファミリーにはＰＤＧＦ−αおよびβ受容体、ＣＳＦＩＲ、ｃ−ｋｉｔならびにＦＬＫ−ＩＩが含まれる。さらに、キナーゼインサートドメイン受容体（ＫＤＲ）またはＶＥＧＦＲ−２、胎児肝臓キナーゼ−１（ＦＬＫ−１）、胎児肝臓キナーゼ−４（ＦＬＫ−４）およびｆｍｓチロシンキナーゼ−１（ｆｌｔ−１）またはＶＥＧＦＲ−１からなるＦＬＫファミリーがある。ＰＤＧＦおよびＦＬＫファミリーは、２つのグループが類似しているため、通常、分割キナーゼドメイン受容体チロシンキナーゼのグループに組み込まれる（Ｌａｉｒｄ，Ａ．Ｄ．およびＪ．Ｍ．Ｃｈｅｒｒｉｎｇｔｏｎ，Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  １２（１）：５１〜６４頁、２００３年）。受容体チロシンキナーゼの詳細な考察については、Ｐｌｏｗｍａｎ等による報文、ＤＮ  ＆  Ｐ７（６）：３３４〜３３９頁、１９９４年）を参照されたい。
【００１０】
受容体チロシンキナーゼには、ＴＩＥ２ならびにそのリガンドであるアンジオポエチン１および２も含まれる。今のところ、これらのリガンドの相同物がますます見出されているが、その作用は依然として詳しく判明していない。ＴＩＥ２の既知の相同物はＴＩＥ１である。ＴＩＥ受容体チロシンキナーゼは内皮細胞において選択的に発現し、血管形成や血管の成熟の過程に関与している。したがって、これらは特に、脈管系の疾患や、血管が活用されるか、さらには再形成される病理において価値のある目的である。新血管形成および成熟の防止に加えて、新血管形成の刺激も活性成分の価値ある目的である。
【００１１】
他の受容体チロシンキナーゼはＭＥＴである。ヒト腫瘍形成におけるその役割、およびＨＧＦ（肝細胞増殖因子）依存性Ｍｅｔ活性化の阻害の可能性は、Ｓ．Ｂｅｒｔｈｏｕ等（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ２３（３１）：５３８７〜５３９３頁、２００４年）によって記載されている。
【００１２】
同じように、細胞質チロシンキナーゼは、ＳＲＣ、ＦＲＫ、ＢＴＫ、ＣＳＫ、ＡＢＬ、ＺＡＰ７０、ＦＥＳ／ＦＰＳ、ＦＡＫ、ＪＡＫ、ＡＣＫおよびＬＩＭＫを含む多くのサブファミリーからなる。これらのサブファミリーのそれぞれは種々の下位グループに分けられる。例えば、Ｓｒｃサブファミリーは、最も大きなサブファミリーの１つである。それには、ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＦＹＮ、ＬＹＮ、ＬＣＫ、ＢＬＫ、ＨＣＫ、ＦＧＲおよびＹＲＫが含まれる。ＳＲＣ酵素のサブファミリーは腫瘍形成と関連付けられている。細胞質チロシンキナーゼのさらに詳細な考察については、Ｂｏｌｅｎの報文、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、８：２０２５〜２０３１頁、１９９３年を参照されたい。
【００１３】
受容体チロシンキナーゼと細胞質チロシンキナーゼはどちらも細胞シグナル伝達経路に関与しており、それは癌、乾癬および過免疫反応などの上記状態をもたらす。
【００１４】
プロテインキナーゼの他の大きなグループであるセリン／トレオニンキナーゼには、例えばチェックポイントキナーゼＣＨＫ１およびＣＨＫ２ならびにＳＧＫ（ヒト血清−およびグルココルチコイド依存性キナーゼ）が含まれる。そのうちのサブタイプＳＧＫ−１、−２および−３が知られている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
ここで、本発明は、医薬品の調製のために用いることができる有利な治療特性を有する新規な化合物を見出すという目的を有するものである。
【００１６】
すなわち、様々なキナーゼのシグナル伝達を阻害し、制御しかつ／または調節する化合物を特定しそれを提供することが望まれており、したがって、それが本発明の目的であった。
【００１７】
驚くべきことに、本発明による式Ｉの化合物は以下の３つの特性のため際立ったものである。すなわち、
１．これらは、特定のキナーゼだけに特異的に作用するのではなく、多くのプロテインキナーゼを阻害することができる。特定のカスケードが阻止された場合、腫瘍細胞は一般に、増殖の際に代替のシグナル伝達カスケードへそれるので、この広範な活性は腫瘍疾患の治療において非常に重要である。
【００１８】
２．これらは、ＩｎｓＲを阻害しないか、またはわずかな程度にしか阻害しない。これらの２つの受容体は構造的に互いに関連しているので、ＩＧＦ１Ｒを阻害する物質はしばしばＩｎｓＲも阻害する。しかし、それが副作用（例えば、糖尿病の進行）をもたらすので、ＩｎｓＲの比較的強い阻害は一般に望ましくない。ＷＯ０２／０９２５９９（実施例６４）に記載されている化合物、トランス−５−（３−ベンジルオキシフェニル）−７−（３−ピロリジン−１−イルメチルシクロブチル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミン（これは後で、ＮＶＰ−ＡＤＷ７４２というコード名のもとで、特に効果的であるということが示された（Ｍｉｔｓｉａｄｅｓら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ５：２２１〜２３０頁、２００４年））では、例えば、ＩｎｓＲ（ＩＣ50（ＥＬＩＳＡ）ＩＧＦＲ＝０．１６５μＭ、ＩｎｓＲ＝０．７６）に対するＩＧＦ１Ｒの選択性は約５倍しかないが、本発明による化合物ではその比は約１０である。
【００１９】
３．遊離塩基としてでも、これらは、水性緩衝液系において、従来の化合物と比べて予想外に高い溶解性を有している。生理学的条件下での高い溶解性、したがって高い生物学的利用能は医薬活性成分に非常に重要である。
【００２０】
本発明による化合物を用いて治療することができる重要なタイプの癌には、乳癌、前立腺癌、結腸直腸癌、脳腫瘍、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫、腎細胞癌、子宮内膜癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、肝臓癌、慢性白血病および急性白血病が含まれる。
【００２１】
したがって、本発明は、制御されていないかまたはかく乱されたキナーゼ活性に関連する疾患の防止および／または治療のための式Ｉの化合物の使用に関する。
【００２２】
さらに、本発明の化合物は、ある種の既存の癌の化学療法および放射線治療において追加的または相乗的効果を実現するか、ならびに／または、ある種の既存の癌の化学療法および放射線治療の効能を回復させることができる。
【００２３】
発明の説明
式Ｉの化合物およびその塩は非常に有益な薬理学的特性を有しており、同時に良好な耐容性を示すことが分かった。具体的には、良好な溶解性を有する本発明による式Ｉの化合物は、非常に広範な活性を示す効果的なキナーゼ阻害剤であることが分かった。
【００２４】
一般に、１回を超えて出現するすべての基は同じであっても異なっていてもよい。すなわち、互いに独立である。上記および以下において、別段の指定のない限り、基およびパラメータは式Ｉについて示した意味を有する。
【００２５】
したがって、本発明は具体的には、前記基の少なくとも１つが以下に示す好ましい意味のうちの１つを有する式Ｉの化合物に関する。
【００２６】
Ｈａｌはフッ素、塩素、臭素またはヨウ素、特にフッ素または塩素を表す。
【００２７】
Ａはアルキルを表し、非分枝（直鎖）、分枝または環状であり、１、２、３、４、５または６個のＣ原子を有し、Ａｒによって置換されていてよい。
【００２８】
すなわち、Ａは、例えばメチルを表し、さらには、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルを表し、さらには、ペンチル、１−、２−または３−メチルブチル、１，１−、１，２−または２，２−ジメチルプロピル、１−エチルプロピル、ヘキシル、１−、２−、３−または４−メチルペンチル、１，１−、１，２−、１，３−、２，２−、２，３−または３，３−ジメチルブチル、１−または２−エチルブチル、１−エチル−１−メチルプロピル、１−エチル−２−メチルプロピル、１，１，２−または１，２，２−トリメチルプロピルも表す。
【００２９】
Ａはさらに好ましくはアルキルを表し、そのアルキルの１個もしくは２個のＣＨ基はＮで置き換えられていてよく、さらに、そのアルキルの１個もしくは２個のＣＨ2基はＯ、ＮまたはＳ原子、および／またはＮＨ、ＮＡ、ＳＯ2、ＣＯＮＨ、Ｓｉ（ＣＨ3）2、ＮＨＣＯ、−Ｃ＝Ｃ−もしくは−ＣＨ＝ＣＨ−基で置き換えられていてよく、かつ／または、さらに１〜７個のＨ原子はＦおよび／またはＣｌで置き換えられていてよく、そのアルキル例としては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、１，１−ジフルオロメチル、１，１，１−トリフルオロエチル、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシまたはｔｅｒｔ−ブトキシであり、そのアルキルの１個もしくは２個のＣＨ3基はＯＨ、ＮＨ2、ＮＡＨ、Ｓｉ（ＣＨ3）3、ＮＡ2またはＣＮで置き換えられていてよい。
【００３０】
シクロアルキルは好ましくはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチルを表す。
【００３１】
Ａｒは例えば非置換のフェニル、ナフチルまたはビフェニルを表し、さらに好ましくは、例えばフェニル、ナフチルまたはビフェニルを表し、そのそれぞれは、Ａ、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、ニトロ、シアノ、ホルミル、アセチル、プロピオニル、トリフルオロメチル、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ベンジルオキシ、メタンスルホニル、スルホンアミド、メチルスルホンアミド、エチルスルホンアミド、プロピルスルホンアミド、ブチルスルホンアミド、ジメチルスルホンアミド、フェニルスルホンアミド、カルボキシル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、アミノカルボニルによって一置換、二置換または三置換されている。
【００３２】
Ａｒはさらには、フェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−トリル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−エチルフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−プロピルフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−イソプロピルフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−ヒドロキシフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−ニトロフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐアミノフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−（Ｎ−メチルアミノ）フェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−（Ｎ−メチルアミノカルボニル）フェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−アセトアミドフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−メトキシフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−エトキシフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−エトキシカルボニルフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノカルボニル）−フェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−（Ｎ−エチルアミノ）フェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）−フェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−フルオロフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−ブロモフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−クロロフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−（メチルスルホンアミド）フェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−（メチルスルホニル）フェニルを表し、さらに好ましくは、２，３−、２，４−、２，５−、２，６−、３，４−もしくは３，５−ジフルオロフェニル、２，３−、２，４−、２，５−、２，６−、３，４−もしくは３，５−ジクロロフェニル、２，３−、２，４−、２，５−、２，６−、３，４−もしくは３，５−ジブロモフェニル、２，４−もしくは２，５−ジニトロフェニル、２，５−もしくは３，４−ジメトキシフェニル、３−ニトロ−４−クロロフェニル、３−アミノ−４−クロロ−、２−アミノ−３−クロロ−、２−アミノ−４−クロロ−、２−アミノ−５−クロロ−もしくは２−アミノ−６−クロロフェニル、２−ニトロ−４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ−もしくは３−ニトロ−４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニル、２，３−ジアミノフェニル、２，３，４−、２，３，５−、２，３，６−、２，４，６−もしくは３，４，５−トリクロロフェニル、２，４，６−トリメトキシフェニル、２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロフェニル、ｐ−ヨードフェニル、３，６−ジクロロ−４−アミノフェニル、４−フルオロ−３−クロロフェニル、２−フルオロ−４−ブロモフェニル、２，５−ジフルオロ−４−ブロモフェニル、３−ブロモ−６−メトキシフェニル、３−クロロ−６−メトキシフェニル、３−クロロ−４−アセトアミドフェニル、３−フルオロ−４−メトキシフェニル、３−アミノ−６−メチルフェニル、３−クロロ−４−アセトアミドフェニルまたは２，５−ジメチル４−クロロフェニル、（４−メトキシフェニル）メチル、（３−メトキシフェニル）メチル、（４−メトキシフェニル）エチル、（３−メトキシフェニル）エチルを表す。
【００３３】
Ａｒはさらに好ましくは、２−、３−もしくは４−フェニル、２−、３−もしくは４−フェニルメチル、２−、３−もしくは４−フェニルエチル、２−もしくは３−フリル、２−もしくは３−チエニル、１−、２−もしくは３−ピロリル、１−、２、４−もしくは５−イミダゾリル、１−、３−、４−もしくは５−ピラゾリル、２−、４−もしくは５−オキサゾリル、３−、４−もしくは５−イソキサゾリル、２−、４−もしくは５−チアゾリル、３−、４−もしくは５−イソチアゾリル、２−、３−もしくは４−ピリジル、２−、３−もしくは４−ピリジルメチル、２−、３−もしくは４−ピリジルエチル、２−、４−、５−もしくは６−ピリミジニル、２−、３−、５−もしくは６−ピラジン−１−もしくは４−イルを表し、さらに好ましくは、１，２，３−トリアゾール−１−、−４−もしくは−５−イル、１，２，４−トリアゾール−１−、−３−もしくは５−イル、１−もしくは５−テトラゾリル、１，２，３−オキサジアゾール−４−もしくは−５−イル、１，２，４−オキサジアゾール−３−もしくは−５−イル、１，３，４−チアジアゾール−２−もしくは−５−イル、１，２，４−チアジアゾール−３−もしくは−５−イル、１，２，３−チアジアゾール−４−もしくは−５−イル、３−もしくは４−ピリダジニル、１−、２−、３−、４−、５−、６−もしくは７−インドリル、２−、３−、４−もしくは５−イソインドリル、２−、３−、４−、５−もしくは６−インダゾリル、３−、４−、５−もしくは６−ベンゾトリアゾリル、２−、６、−もしくは８−プリニル、１−、２−、４−もしくは５−ベンズイミダゾリル、１−、３−、４−、５−、６−もしくは７−ベンゾピラゾリル、２−、４−、５−、６−もしくは７−ベンゾオキサゾリル、４−、５−、６−もしくは７−ベンゾオキサゾリル−２−オン、３−、４−、５−、６−もしくは７−ベンズイソキサゾリル、２−、４−、５−、６−もしくは７−ベンゾチアゾリル、２−、４−、５−、６−もしくは７−ベンズイソチアゾリル、４−、５−、６−もしくは７−ベンズ−２，１，３−オキサジアゾリル、１−、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−イソキノリニル、３−、４−、５−、６−、７−もしくは８−キノリニル、２−、４−、５−、６−、７−もしくは８−キナゾリニル、５−もしくは６−キノキサリニル、４−、５−もしくは６−フタラジニル、２−、３−、５−、６−、７−もしくは８−２Ｈ−ベンゾ−１，４−オキサジニルを表し、さらに好ましくは、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル、１，４−ベンゾジオキサン−６−イル、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−もしくは−５−イル、２，１，３−ベンズオキサジアゾール−５−イルまたはベンゾフラン−４、−５、−６もしくは−７−イルを表し、そのそれぞれは、置換されていないか、あるいは、例えば、カルボニル酸素、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、メチル、エチル、プロピル、フェニル、ベンジル、−ＣＨ2−シクロヘキシル、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、ニトロ、シアノ、カルボキシル、メトキシカルボニル、アミノカルボニル、メチルアミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、アセトアミノ、ウレ��ド、メチルスルホニルアミノ、ホルミル、アセチル、アミノスルホニルおよび／またはメチルスルホニルによって一置換、二置換または三置換されている。
【００３４】
複素環基は部分的かまたは完全に水素化されていてもよく、例えば、２，３−ジヒドロ−２−、−３−、−４−もしくは−５−フリル、２，５−ジヒドロ−２−、−３−、−４−もしくは−５−フリル、テトラヒドロ−２−もしくは−３−フリル、１，３−ジオキソラン−４−イル、テトラヒドロ−２−もしくは−３−チエニル、２，３−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−もしくは−５−ピロリル、２，５−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−もしくは−５−ピロリル、１−、２−もしくは３−ピロリジニル、テトラヒドロ−１−、−２−もしくは−４−イミダゾリル、２，３−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−もしくは−５−ピラゾリル、テトラヒドロ−１−、−３−もしくは−４−ピラゾリル、１，４−ジヒドロ−１−、−２−、−３−もしくは−４−ピリジル、１，２，３，４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−もしくは−６−ピリジル、２−、３−、５−もしくは６−ピペリジン−１もしくは４−イル、２−、３−もしくは４−モルホリニル、テトラヒドロ−２−、−３−もしくは−４−ピラニル、１，４−ジオキサニル、１，３−ジオキサン−２−、−４−もしくは−５−イル、ヘキサヒドロ−１−、−３−もしくは−４−ピリダジニル、ヘキサヒドロ−１−、−２−、−４−もしくは−５−ピリミジニル、１−、２−もしくは３−ピペラジニル、１，２，３，４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−、−６−、−７−もしくは−８−キノリル、１，２，３，４−テトラヒドロ−１−，−２−，−３−、−４−、−５−、−６−、−７−もしくは−８−イソキノリル、２−、３−、５−、６−、７−もしくは８−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−１，４−オキサジニルも表し、さらに好ましくは、２，３−メチレンジオキシフェニル、３，４−メチレンジオキシフェニル、２，３−エチレンジオキシフェニル、３，４−エチレンジオキシフェニル、３，４−（ジフルオロメチレンジオキシ）フェニル、２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−もしくは６−イル、２，３−（２−オキソメチレンジオキシ）フェニルを表し、または３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジオキセピン−６−もしくは−７−イルも表し、さらに好ましくは、２，３−ジヒドロベンゾフラニル、２，３−ジヒドロベンゾ−１，４−ジオキシン−４−、−５もしくは−６−イルまたは２，３−ジヒドロ−２−オキソフラニルを表す。
【００３５】
「置換（された）」という用語は好ましくは上記置換基による置換に関し、別段の指定のない限り、異なった程度の複数置換が可能である。
【００３６】
これらの化合物のすべての生理学的に許容される塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）も本発明によるものである。
【００３７】
式Ｉの化合物は１つまたは複数のキラル中心をもつことができる。したがって、これらは様々な鏡像異性体で出現し、ラセミ体または光学活性体で存在することができる。したがって、本発明は、これらの化合物の光学活性体（立体異性体）、鏡像異性体、ラセミ化合物、ジアステレオマーならびに水和物および溶媒和物にも関する。
【００３８】
本発明による化合物のラセミ化合物または立体異性体の薬剤としての効能は異なっている可能性があるので、鏡像異性体を用いることが望ましい。これらの場合、最終生成物（また中間体も）は、当業者に周知の化学的または物理的手段によって鏡像異性体に分離することができ、あるいはそのままで合成に用いることもできる。
【００３９】
ラセミ体アミンの場合、ジアステレオマーは、光学的に活性な分割剤との反応による混合物から形成される。適切な分割剤の例は、酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸、適切にＮ−保護されたアミノ酸（例えば、Ｎ−ベンゾイルプロリンまたはＮ−ベンゼンスルホニルプロリン）のＲ型およびＳ型、または様々な光学的に活性なカンファースルホン酸などの光学的に活性な酸である。光学的に活性な分割剤（例えば、ジニトロベンゾイルフェニルグリシン、三酢酸セルロースもしくは炭水化物の他の誘導体、またはシリカゲルに固定化されたキラル誘導によるメタクリレートポリマー）の助けを用いたクロマトグラフフィーによる鏡像異性体分割も有利である。これに適した溶離液は、例えば８２：１５：３の比のヘキサン／イソプロパノール／アセトニトリルなどの水性溶媒またはアルコール性溶媒混合物である。
【００４０】
エステル基（例えば、アセチルエステル）を含むラセミ化合物の洗練された分割方法は酵素、具体的にはエステラーゼの使用である。
【００４１】
式Ｉの化合物の好ましいグループは式ＩＩに相当する化合物
【００４２】
【化２】
2009535300.tif 000004
【００４３】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびｎは式Ｉについて示した意味を有する）、
ならびに薬剤として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）である。
【００４４】
式ＩおよびＩＩの化合物、ならびに薬剤として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）のさらに好ましい下位グループは、式ＩまたはＩＩに相当する以下の下位式Ａ〜Ｅで表すことができるが、ここで、
下位式Ａにおいて、
Ｒ1は、Ａ、あるいはフェニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリル−２−オン、フリル、チエニル、チアゾリル、ピリジルまたはピリミジニルを表し、そのそれぞれは、置換されていないか、あるいは、Ａ、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、ニトロ、シアノ、ホルミル、アセチル、プロピオニル、トリフルオロメチル、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ベンジルオキシ、メタンスルホニル、スルホンアミド、メチルスルホンアミド、エチルスルホンアミド、プロピルスルホンアミド、ブチルスルホンアミド、ジメチルスルホンアミド、フェニルスルホンアミド、カルボキシル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはアミノカルボニルによって一置換または二置換されており、
Ｒ2およびｎは、式Ｉで示した意味を有し、
下位式Ｂにおいて、
Ｒ1は、Ａ、あるいはフェニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリル−２−オン、フリル、チエニル、チアゾリル、ピリジルまたはピリミジニルを表し、そのそれぞれは、置換されていないか、あるいは、Ａ、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、ニトロ、シアノ、ホルミル、アセチル、プロピオニル、トリフルオロメチル、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ベンジルオキシ、メタンスルホニル、スルホンアミド、メチルスルホンアミド、エチルスルホンアミド、プロピルスルホンアミド、ブチルスルホンアミド、ジメチルスルホンアミド、フェニルスルホンアミド、カルボキシル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはアミノカルボニルによって一置換または二置換されており、
Ｒ2'、Ｒ2"は、Ｈであるか、または一緒にブチレン単位を形成しており、
ｎは１を表し、
下位式Ｃにおいて、
Ｒ1は、Ａ、あるいはフェニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリル−２−オン、フリル、チエニル、チアゾリル、ピリジルまたはピリミジニルを表し、そのそれぞれは、置換されていないか、あるいは、Ａ、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、ニトロ、シアノ、ホルミル、アセチル、プロピオニル、トリフルオロメチル、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ベンジルオキシ、メタンスルホニル、スルホンアミド、メチルスルホンアミド、エチルスルホンアミド、プロピルスルホンアミド、ブチルスルホンアミド、ジメチルスルホンアミド、フェニルスルホンアミド、カルボキシル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはアミノカルボニルによって一置換または二置換されており、
Ｒ2'、Ｒ2"は互いに独立に、Ｈであるか、あるいは１、２、３または４個のＣ原子を有する非分枝または分枝アルキルであり、Ｒ2'およびＲ2"は一緒に、エチレン、プロピレン、ブチレンまたはペンチレン単位を形成しており、
ｎは１を表し、
下位式Ｄにおいて、
Ｒ1は、プロパン−１−オリル、プロペン−１−オリル、プロピン−１−オリル、またはフェニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイミダゾリル−２−オン、ベンゾオキサゾリル−２−オン、フリル、チエニル、チアゾリル、ピリジルまたはピリミジニルを表し、そのそれぞれは、置換されていないか、あるいはヒドロキシル、アミノ、フッ素、ブトキシ、アセトアミド、ｔ−ブトキシカルボニルアミノ、ニトロ、ベンジル、（ジメチルフェニルシラニル）メトキシ、ジメチルフェニルシラニルオキシ、メタンスルホニル、スルホンアミド、メタンスルホンアミド、メチル、２−プロピル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンジルアミノ、Ｎ−ベンジルプロパン−１，３−ジアミノによって一置換または二置換されており、
Ｒ2およびｎは、式Ｉで示した意味を有し、
下位式Ｅにおいて、
Ｒ1は、プロパン−１−オリル、プロペン−１−オリル、プロピン−１−オリル、またはフェニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイミダゾリル−２−オン、ベンゾオキサゾリル−２−オン、フリル、チエニル、チアゾリル、ピリジルまたはピリミジニルを表し、そのそれぞれは、置換されていないか、あるいはヒドロキシル、アミノ、フッ素、ブトキシ、アセトアミド、ｔ−ブトキシカルボニルアミノ、ニトロ、ベンジル、（ジメチルフェニルシラニル）メトキシ、ジメチルフェニルシラニルオキシ、メタンスルホニル、スルホンアミド、メタンスルホンアミド、メチル、２−プロピル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンジルアミノ、Ｎ−ベンジルプロパン−１，３−ジアミノによって一置換または二置換されており、
Ｒ2'、Ｒ2"は、Ｈであるか、または一緒にブチレン単位を形成しており、
ｎは１を表す。
【００４５】
式ＩＩの化合物の下位式Ａ〜Ｅが特に好ましい。表１に示す化合物から選択される化合物、ならびに薬剤として許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）が非常に好ましい。
【００４６】
表１に示す融点、溶解度値およびＩＣ50値は、アニオンが示されていない場合、トランス配置の遊離塩基に関するものである。化合物が結晶形態で得られない場合、室温でのその物質の特性を示す。溶解度データは実施例Ｃに示す条件に関するものである。示したＩＣ50値は、別段の指定のない限り、フラッシュプレート法（実施例Ｂを参照）により得た（ＥＬＩＳＡ、実施例Ｂを参照されたい）。
【００４７】
【表１−１】
2009535300.tif 000005
【００４８】
【表１−２】
2009535300.tif 000006
【００４９】
【表１−３】
2009535300.tif 000007
【００５０】
【表１−４】
2009535300.tif 000008
【００５１】
【表１−５】
2009535300.tif 000009
【００５２】
【表１−６】
2009535300.tif 000010
【００５３】
【表１−７】
2009535300.tif 000011
【００５４】
【表１−８】
2009535300.tif 000012
【００５５】
【表１−９】
2009535300.tif 000013
【００５６】
【表１−１０】
2009535300.tif 000014
【００５７】
【表１−１１】
2009535300.tif 000015
【００５８】
【表１−１２】
2009535300.tif 000016
【００５９】
【表１−１３】
2009535300.tif 000017
【００６０】
【表１−１４】
2009535300.tif 000018
【００６１】
【表１−１５】
2009535300.tif 000019
【００６２】
【表１−１６】
2009535300.tif 000020
【００６３】
【表１−１７】
2009535300.tif 000021
【００６４】
【表１−１８】
2009535300.tif 000022
【００６５】
【表１−１９】
2009535300.tif 000023
【００６６】
薬剤学的にまたは生理学的に許容される誘導体は、例えば本発明による化合物の塩を意味し、また、いわゆるプロドラッグ化合物も意味する。そうした誘導体は当業界で周知である。生理学的に許容される誘導体の総説は、Ｂｕｒｇｅｒ’ｓ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、５ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｖｏｌ１：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅに記載されている。プロドラッグ化合物は、例えばアルキルもしくはアシル基、糖類またはオリゴペプチドで改変されており、有機体中で迅速に切断されるかまたは遊離して本発明による効果的な化合物を生成する式Ｉの化合物を意味する。これらには、例えばＩｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１１５：６１〜６７頁、１９９５年に記載されているような、本発明による化合物の生分解性ポリマー誘導体も含まれる。
【００６７】
適切な酸付加塩は、生理学的にまたは薬理学的に許容されるすべての酸の無機または有機塩、例えば、ハロゲン化物、具体的には塩酸塩もしくは臭化水素酸塩、乳酸塩、硫酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、シュウ酸塩、酢酸塩、リン酸塩、メチルスルホン酸塩またはｐ−トルエンスルホン酸塩である。
【００６８】
式Ｉの化合物の溶媒和物は、その相互の引力によって形成される式Ｉの化合物との不活性溶媒分子の付加体を意味する。溶媒和物は、例えば、一水和物もしくは二水和物などの水和物、またはアルコラート、すなわちアルコール、例えばメタノールもしくはエタノールとの付加化合物である。
【００６９】
「有効量」という表現は、例えば研究者または医師が求めるかまたは望む、組織、系、動物またはヒトにおいて生物学的または医学的応答を引き起こす医薬品または薬剤活性成分の量を表す。
【００７０】
さらに、「治療有効量」という表現は、この量を与えられていない対応対象と比べて、以下の結果、すなわち疾患、症候群、状態、愁訴、障害の治療、治癒、防止もしくは排除の向上、または副作用の防止という結果をもたらすか、あるいはまた、疾患、状態もしくは障害の進行の遅延という結果をもたらす量を表す。「治療有効量」という用語は、正常な生理学的機能を増進させるのに効果的な量も包含する。
【００７１】
本発明は、本発明による式Ｉの化合物の混合物、例えば、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：１０、１：１００または１：１０００などの比の２つのジアステレオマーの混合物にも関する。これらは、立体異性体化合物の混合物であることが特に好ましい。
【００７２】
さらに、本発明は、第１のステップで、式ＶＩの化合物を、
【００７３】
【化３】
2009535300.tif 000024
【００７４】
式Ｖの化合物
【００７５】
【化４】
2009535300.tif 000025
【００７６】
と縮合させて式ＩＶの化合物
【００７７】
【化５】
2009535300.tif 000026
【００７８】
を生成させ、これを所望の基Ｒ1と結合させて式ＩＩＩの化合物
【００７９】
【化６】
2009535300.tif 000027
【００８０】
を生成させ、これを最終的にＮＨ3と反応させて式Ｉの化合物を得ることを特徴とする式Ｉの化合物、ならびに生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体を調製するための方法に関する。
【００８１】
最後に、式Ｉの塩基または酸はその塩の１つに転換させることができる。
【００８２】
本発明による方法のための出発材料は一般に知られているものである。それが新規のものである場合、それらは、文献に記載のようにして、それ自体知られている方法で調製することができる（例えば、標準的な文献は、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、Ｍｅｔｈｏｄｅｎ  ｄｅｒ  Ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ［Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ］、Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ；Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋなどである）。
【００８３】
式Ｉの化合物は（またその調製のための出発材料も）、文献に記載されているそれ自体既知の方法（例えば、標準的な文献は、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、Ｍｅｔｈｏｄｅｎ  ｄｅｒ  Ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ［Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ］、Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ；Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋなどである）によって、知られておりかつその反応に適した正確な反応条件の下で調製することができる。ここではそれほど詳細に言及していない、それ自体既知である変形体も用いることができる。
【００８４】
上記の反応は一般に、不活性溶媒中で実施される。上記の反応に適した不活性溶媒は、例えば、ヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、トルエンまたはキシレンなどの炭化水素；トリクロロエチレン、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭素、クロロホルムまたはジクロロメタンなどの塩素化炭化水素；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはジオキサンなどのエーテル；エチレングリコールモノメチルまたはモノエチルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル（ダイグライム）などのグリコールエーテル；アセトンまたはブタノンなどのケトン；アセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルアセトアミドまたはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などのアミド；アセトニトリルなどのニトリル；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド；二硫化炭素；ギ酸または酢酸などのカルボン酸；ニトロメタンまたはニトロベンゼンなどのニトロ化合物；酢酸エチルなどのエステル、または前記溶媒の混合物である。ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシドが好ましい。
【００８５】
溶媒の量は決定的なものではなく、好ましくは生成物ｇ当たり５ｇ〜５００ｇの溶媒を用いることができる。
【００８６】
一般に、この方法は、１〜２００バールの圧力下で実施するが、好ましくは大気圧下で実施する。
【００８７】
用いられる条件に応じて、上記反応のための反応温度は約−１０〜２００℃、通常−５〜１００℃、好ましくは０〜８０℃である。
【００８８】
用いる条件に応じて、反応時間は数分から数日、好ましくは数時間の範囲である。
【００８９】
反応は不均一相内でも実施することができる。その場合、水相とベンゼンまたはトルエンの相を使用することが好ましい。ここでは、例えばヨウ化テトラブチルアンモニウムなどの相間移動触媒、任意選択で例えばジメチルアミノピリジンなどのアシル化触媒を使用する。
【００９０】
得られた式Ｉの塩基は、酸を用いて会合した酸付加塩に転換させることができる。この反応に適した酸は生理学的に許容される塩をもたらす酸である。したがって、無機酸、例えば硫酸、塩酸もしくは臭化水素酸などのハロゲン化水素酸、オルトリン酸などのリン酸、硝酸、スルファミン酸、さらには有機酸、詳細には、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、ピバリン酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、安息香酸、サリチル酸、２−フェニルプロピオン酸、クエン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、メタン−もしくはエタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンモノ−および−ジスルホン酸、ラウリル硫酸などの脂肪族、脂環式、アラリファティック、芳香族もしくは複素環のモノ−もしくはポリ塩基性カルボン酸、スルホン酸または硫酸を用いることができる。
【００９１】
所望により、分子中に他の酸性基が存在しない限り、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムなどの強塩基で処理して、式Ｉの遊離塩基をその塩から遊離させることができる。
【００９２】
さらに、加溶媒分解剤または水素添加分解剤で処理してその官能性誘導体の１つから遊離させることによって、式Ｉの化合物を得ることができる。
【００９３】
加溶媒分解または水素添加分解のための好ましい出発材料は、１つまたは複数の遊離アミノおよび／またはヒドロキシル基の代わりに対応する保護アミノおよび／またはヒドロキシル基を含むこと以外は式Ｉと一致するもの、好ましくはＮ原子と結合したＨ原子の代わりにアミノ保護基を担持するもの、具体的にはＨＮ基の代わりにＲ’−Ｎ基（Ｒ’はアミノ保護基を表す）を担持するもの、および／または、ヒドロキシル基のＨ原子の代わりにヒドロキシル保護基を担持するもの、例えば、−ＣＯＯＨ基の代わりに−ＣＯＯＲ”基（Ｒ”はヒドロキシル保護基を表す）を担持すること以外は式Ｉと一致するものである。
【００９４】
対応するアミジノ化合物に転換することができるオキサジアゾール誘導体も好ましい出発材料である。
【００９５】
出発材料の分子中に、複数の（同じであるか異なっている）保護アミノおよび／またはヒドロキシル基が存在していてもよい。存在する保護基が互いに異なると、多くの場合、それらは選択的に切断される。
【００９６】
「アミノ保護基」という表現は、一般に周知の用語であり、化学反応からアミノ基を保護（遮断）するのに適しており、分子内の他のどこかで所望の化学反応が実施された後に容易に取り除かれる基に関する。そうした基の典型的なものは、具体的には、非置換もしくは置換のアシル、アリール、アラルコキシメチルまたはアラルキル基である。アミノ保護基は所望の化学反応（または一連の反応）の後で取り除かれるのでそのタイプやサイズはそれほど重要ではないが、１〜２０個、特に１〜８個のＣ原子を有するものが好ましい。「アシル基」という表現は、本発明のプロセスの関連では、最も広い意味で理解すべきである。それには、脂肪族、アラリファティック、芳香族もしくは複素環のカルボン酸またはスルホン酸、具体的にはアルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、特にアラルコキシカルボニル基から誘導されるアシル基が含まれる。そうしたアシル基の例はアセチル、プロピオニル、ブチリルなどのアルカノイル；フェニルアセチルなどのアラルカノイル；ベンゾイルまたはトリルなどのアロイル；ＰＯＡなどのアリールオキシアルカノイル；メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、ＢＯＣ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）、２−ヨードエトキシカルボニルなどのアルコキシカルボニル；ＣＢＺ（「カルボベンゾキシ」）、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、ＦＭＯＣなどのアラルコキシカルボニル；Ｍｔｒなどのアリールスルホニルである。好ましいアミノ保護基はＢＯＣおよびＭｔｒ、さらには、ＣＢＺ、Ｆｍｏｃ、ベンジルおよびアセチルである。
【００９７】
さらに、遊離アミノ基は、酸塩化物または無水物を用いて従来の方法でアシル化するか、あるいは、非置換もしくは置換アルキルハライドを用いてアルキル化するか、あるいは、有利にはジクロロメタンもしくはＴＨＦなどの不活性溶媒中、かつ／またはトリエチルアミンもしくはピリジンなどの塩基の存在下、−６０〜＋３０℃でＣＨ3−Ｃ（＝ＮＨ）−ＯＥｔと反応させることができる。
【００９８】
「ヒドロキシル保護基」という表現も同じく一般に周知の用語であり、化学反応からヒドロキシル基を保護するのに適しており、分子内の他のどこかで所望の化学反応が実施された後に容易に取り除かれる基に関する。そうした基の典型的なものは、上記の非置換もしくは置換アリール、アラルキルまたはアシル基であり、さらには、アルキルまたはシリル基である。所望の化学反応または一連の反応の後で再度取り除かれるので、ヒドロキシル保護基の特性やサイズはそれほど重要ではないが１〜２０個、特に１〜１０個のＣ原子を有する基が好ましい。ヒドロキシル保護基の例は、とりわけ、ベンジル、４−メトキシベンジル、ｐ−ニトロベンゾイル、ｐ−トルエンスルホニル、ｔｅｒｔ−ブチルおよびアセチルである。とりわけベンジルおよびｔｅｒｔ−ブチルが好ましい。
【００９９】
式Ｉの化合物は、例えば強酸を用いて、有利にはＴＦＡまたは過塩素酸を用いて、その官能性誘導体（用いる保護基に応じて）から遊離させる。また、塩酸または硫酸などの他の強い無機酸、トリクロロ酢酸などの強い有機カルボン酸、またはベンゼンスルホン酸もしくはｐ−トルエンスルホン酸などのスルホン酸も用いられる。追加の不活性溶媒を存在させることも可能であるが、必ずしも必要であるというわけではない。適切な不活性溶媒は、有機性の、例えば酢酸などのカルボン酸、テトラヒドロフランまたはジオキサンなどのエーテル、ＤＭＦなどのアミド、ジクロロメタンなどのハロゲン化炭化水素が好ましく、さらには、メタノール、エタノールまたはイソプロパノールなどのアルコールおよび水も好ましい。上記溶媒の混合物はさらに適している。ＴＦＡは他の溶媒を加えずに過剰に用いることが好ましく、過塩素酸は、９：１の比の酢酸と７０％過塩素酸の混合液の形態で用いることが好ましい。切断のための反応温度は約０〜約５０℃、好ましくは１５〜３０℃（室温、ＲＴ）が有利である。
【０１００】
ＢＯＣ、ＯＢｕｔおよびＭｔｒ基は、例えば好ましくは、１５〜３０℃で、ジクロロメタン中のＴＦＡを用いるかまたはジオキサン中の約３〜５Ｎ  ＨＣｌを用いて切り離すことができ、ＦＭＯＣ基は、１５〜３０℃で、ＤＭＦ中のジメチルアミン、ジエチルアミンまたはピペリジンの約５〜５０％溶液を用いて切り離すことができる。
【０１０１】
水素添加分解的に取り外すことができる保護基（例えばＣＢＺ、ベンジル、またはそのオキサジアゾール誘導体からのアミジノ基の遊離）は、例えば、触媒（例えば、パラジウムなどの貴金属触媒、有利には炭素などの支持体に担持させて）の存在下で水素を用いて処理することによって切り離すことができる。その適切な溶媒は上記したようなものであり、具体的には例えば、メタノールもしくはエタノールなどのアルコールまたはＤＭＦなどのアミドである。水素添加分解は一般に、約０〜１００℃、約１〜２００バール、好ましくは２０〜３０℃の温度、１〜１０バールの圧力で実施する。ＣＢＺ基の水素添加分解は、例えばメタノール中で５〜１０％Ｐｄ／Ｃを用いるか、またはメタノール／ＤＭＦ中でＰｄ／Ｃ担持のギ酸アンモニウム（水素の代わりに）を用いて２０〜３０℃で首尾よく行われる。
【０１０２】
エステルは、例えば０〜１００℃の温度で、酢酸を用いるか、あるいは水、水／ＴＨＦまたは水／ジオキサン中のＮａＯＨもしくはＫＯＨを用いてけん化することができる。
【０１０３】
保護基を取り除くための他の方法は、例えば、Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎ、Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ：Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（１９９９年）に記載されている。
【０１０４】
本発明による式Ｉの化合物は、その分子構造に起因するキラルであってよく、したがって、様々な鏡像異性体が生じ得る。したがって、これらはラセミ体または光学活性体で存在することができる。
【０１０５】
本発明の化合物のラセミ化合物または立体異性体の薬剤効能が異なるので、鏡像異性体を用いることが望ましい。これらの場合、最終生成物（また中間体も）は、当業者に周知の化学的、生物学的または物理的手段によって鏡像異性体に分離することができ、あるいはそのままで合成に用いることもできる。
【０１０６】
溶媒を除去した後、式Ｉの化合物を、例えば反応混合物への水の添加や抽出などの通常の後処理工程によって得ることができる。生成物をさらに精製するために、続いて蒸留かまたは結晶化を実施することが有利である。
【０１０７】
さらに本発明は、本発明による少なくとも１つの化合物、および／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）を含む医薬品に関する。
【０１０８】
さらに、本発明による医薬組成物は、他の賦形剤および／または補助剤、ならびに任意選択の１つまたは複数の他の医薬活性成分を含むことができる。
【０１０９】
本発明はさらに、本発明による化合物、および／またはその生理学的に許容される塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）を、固体、液体もしくは半固体の賦形剤または補助剤と一緒に適切な剤形にすることを特徴とする医薬品の調製方法に関する。
【０１１０】
本発明は、
ａ）有効量の本発明による化合物、および／またはその生理学的に許容される塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）、ならびに
ｂ）有効量の他の医薬活性成分
の別個のパックからなるセット（キット）にも関する。
【０１１１】
そのセットは箱、個別の瓶、袋またはアンプルなどの適切な容器を含む。セットは、例えば、それぞれが有効量の本発明による化合物、および／または、その混合物をすべての比で含むその薬剤学的に使用できる誘導体、溶媒和物および立体異性体と、溶解させるかまたは凍結乾燥した形態の有効量の他の医薬活性成分を含む別個のアンプルを含むことができる。
【０１１２】
医薬品は、投薬単位当たりに所定量の活性成分を含む投薬単位形態で投与することができる。そうした単位には、治療を受ける状態、投与方法、および患者の年齢、性別、体重および状態に応じて、例えば０．５ｍｇ〜１ｇ、好ましくは１ｍｇ〜７００ｍｇ、特に好ましくは５ｍｇ〜１００ｍｇの本発明による化合物を含むことができる。好ましい投薬単位製剤は、上記したような日用量もしくは部分用量、または活性成分の対応するその画分を含むものである。さらに、このタイプの医薬品は、製薬技術分野で通常知られている方法を用いて調製することができる。
【０１１３】
医薬品は、所望の適切な任意の方法、例えば経口（頬側または舌下を含む）、経直腸、経鼻、局所（頬側、舌下または経皮を含む）、経膣または非経口（皮下、筋肉内、静脈内または皮内を含む）による方法で投与されるように適合させることができる。そうした医薬品は、例えば活性成分を賦形剤または補助剤と混合することによって、製薬技術分野で知られているどの方法を用いても調製することができる。
【０１１４】
経口投与用の医薬品は、例えば、カプセル剤または錠剤；粉剤または顆粒剤；水溶液または非水溶液中の液剤または懸濁剤；食用泡状物または泡状食品；あるいは水中油型乳液または油中水型乳液などの別個の単位として投与することができる。
【０１１５】
したがって、例えば、錠剤またはカプセル剤の形態での経口投与の場合、活性成分は、例えばエタノール、グリセロール、水等の経口用の非毒性の薬剤学的に許容される不活性賦形剤と混合することができる。粉剤は、化合物を適切な細かいサイズに粉砕し、それを、例えばでんぷんまたはマンニトールのような例えば食用炭水化物などの同様に粉砕した薬剤用賦形剤と混合することによって調製することができる。香味剤、保存剤、分散剤および染料も同様に存在してよい。
【０１１６】
カプセル剤は、上記の粉末混合物を調製し、成形ゼラチンシェルに充てんすることによって作製される。例えば高度に分散させたケイ酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたはポリエチレングリコールなどの流動促進剤および滑剤を固体状態で、充てん操作の前に、その粉末混合物に加えることができる。カプセル剤が取り込まれた後でのその医薬品の利用能を高めるために、例えば寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または安定剤も同様に加えることができる。
【０１１７】
さらに、所望により、または必要なら、適切な結合剤、滑剤および崩壊剤ならびに染料も同様に混合物中に混ぜ込むことができる。
【０１１８】
適切な結合剤には、でんぷん、ゼラチン、例えばグルコースもしくはβ−ラクトースなどの天然糖、トウモロコシから作製された甘味剤、例えばアカシア、トラガカントもしくはアルギン酸ナトリウムなどの天然ゴムまたは合成ゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックス等が含まれる。これらの剤形中に用いられる滑剤には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム等が含まれる。崩壊剤には、これらに限定されないが、でんぷん、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム等が含まれる。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、その混合物を顆粒化またはドライ圧縮し、滑剤や崩壊剤を加え、混合物全体を圧縮することによって製剤して錠剤を得る。粉末混合物は、適切な仕方で微粉砕した化合物を、上記したような希釈剤またはベースと、また、任意選択の例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチンまたはポリビニルピロリドンなどの結合剤、例えばパラフィンなどの溶出遅延剤、例えば第４級塩などの吸収促進剤、および／または、例えばベントナイト、カオリンもしくは第二リン酸カルシウムなどの吸収剤と混合することによって調製する。粉末混合物は、例えばシロップ、でんぷんペースト、アカディア（ａｃａｄｉａ）粘液、またはセルロースもしくはポリマー材料の溶液などの結合剤でそれを湿潤させ、篩を通してそれを押圧することによって顆粒化することができる。顆粒化の代替法としては、粉末混合物を、タブレット成形機にかけ、不均一な形状の塊状物を作製し、それを破砕して顆粒剤にすることができる。錠剤成形用鋳型に粘着するのを防止するために、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油を加えて顆粒剤に潤滑性をもたせることができる。次いで、潤滑性をもたせた混合物を押圧して錠剤を得る。本発明による化合物は、自由流動性の不活性賦形剤と混合し、直接圧縮して、顆粒化またはドライ圧縮工程を実施することなく錠剤にすることもできる。セラック密封層、糖もしくはポリマー材料の層およびワックスの光沢層からなる透明かまたは不透明な保護層が存在してもよい。異なる投薬単位間での識別を可能にするために、これらのコーティング物に染料を加えることもできる。
【０１１９】
例えば液剤、シロップ剤およびエリキシル剤などの経口液体は、与えられた量が予め指定された量の化合物を含むような投薬単位の形態で作製することができる。シロップ剤は、化合物を適切な香味剤と水溶液中に溶解することによって調製することができるが、エリキシル剤は非毒性のアルコール性媒体を用いて調製する。懸濁剤は、化合物を非毒性の媒体中に分散させることによって製剤することができる。例えばエトキシ化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの溶解剤および乳化剤、保存剤、例えばペパーミント油などの香味用添加剤、あるいは天然甘味剤またはサッカリンもしくは他の人口甘味剤等も同様に加えることができる。
【０１２０】
経口投与のための投薬単位製剤は、所望により、マイクロカプセル剤中にカプセル化することができる。製剤は、例えば、コーティングするか、または特定の材料をポリマー、ワックス等の中に埋め込むことによって、その放出を持続または遅延させる仕方で調製することも可能である。
【０１２１】
本発明による化合物、ならびにその塩、溶媒和物および生理学的に機能性の誘導体は、例えば小さい単層ベシクル、大きい単層ベシクルおよび多層ベシクルなどのリポソーム送達系の形態で投与することもできる。リポソームは、例えばコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンなどの様々なリン脂質から作製することができる。
【０１２２】
本発明による化合物、ならびにその塩、溶媒和物および生理学的に機能性の誘導体は、化合物分子がそれと結合している個別的な担体として、モノクローナル抗体を用いて送達することもできる。化合物は、目的とする医薬品の担体としての可溶性ポリマーと結合させることもできる。そうしたポリマーは、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノールまたはパルミトイル基で置換されたポリエチレンオキシドポリリシンを包含することができる。さらに、化合物は、医薬品の制御放出を実現するのに適した生分解性ポリマーの部類、例えばポリ乳酸、ポリ−ε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロキシピラン、ポリシアノアクリレートおよびヒドロゲルの架橋性または両親媒性ブロックコポリマーと結合していてもよい。
【０１２３】
経皮投与に適合させた医薬品は、レシピエントの表皮に、延ばして密接に接触する独立した硬膏剤として塗布することができる。したがって、例えば活性成分は、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、３（６）：３１８頁、１９８６年に一般的用語として記載されているように、硬膏剤からイオン導入により送達することができる。
【０１２４】
局所投与のために適合させた医薬品は、軟膏、クリーム剤、懸濁剤、ローション剤、粉剤、液剤、ペースト、ゲル剤、噴霧剤、エアロゾルまたは油剤として製剤することができる。
【０１２５】
目または他の外部組織、例えば口および皮膚の治療のためには、製剤は局所用の軟膏剤またはクリーム剤として塗布するのが好ましい。軟膏を得るための製剤の場合、活性成分は、パラフィン系のクリームベースかまたは水混和性クリームベースのいずれかと用いることができる。あるいは、活性成分は、水中油型のクリームベースまたは油中水型ベースで製剤してクリーム剤を得ることができる。
【０１２６】
目への局所適用に適合させた医薬品には、活性成分が、適切な担体、具体的には水性溶媒中に溶解または懸濁された点眼剤が含まれる。
【０１２７】
口への局所適用に適合させた医薬品は、薬用キャンデー、トローチおよびうがい薬を包含する。
【０１２８】
経直腸投与用に適合させた医薬品は坐剤またはかん腸剤の形態で投与することができる。
【０１２９】
担体物質が固体である経鼻投与用に適合させた医薬品は、鼻から吸い込む方式で、すなわち、鼻に近接して保持された粉末を含む容器から鼻孔を通して急速に吸入することによって投与される、例えば２０〜５００ミクロンの範囲の粒径を有する粗い粉末を含む。鼻内噴霧剤、または担体物質としての液体を有する点鼻剤として投与するための適切な製剤は、活性成分溶液を水または油の中に含む。
【０１３０】
吸入により投与するように適合させた医薬品は、エアロゾル、噴霧器または吸入器を有する様々なタイプの加圧式分注器で発生させることができる、微細な粉じんまたはミストを包含する。
【０１３１】
経膣投与に適合させた医薬品は、ペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、泡状物または噴霧製剤として投与することができる。
【０１３２】
非経口投与に適合させた医薬品には、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、および、その製剤が治療を受けるレシピエントの血液との等張性を付与する溶質を含む水性および非水性の無菌性注入用液剤；ならびに懸濁媒体や増粘剤を含むことができる水性および非水性無菌性懸濁剤が含まれる。製剤は、単一用量または複数用量の容器、例えば密封アンプルおよびバイアルで投与することができ、使用の直前に、注入用に無菌性担体液体、例えば水を加えるだけで済むようにフリーズドライした（凍結乾燥した）状態で保存することができる。製剤せんにしたがって調製される注入用の液剤または懸濁剤は、無菌性粉剤、顆粒剤および錠剤から作製することができる。
【０１３３】
先に具体的に挙げた構成物に加えて、本発明による医薬品は、特定の種類の薬剤製剤に関連して当業界で一般的な他の薬剤を含むことができることは言うまでもない。したがって、例えば経口投与に適した医薬品は香味剤を含むことができる。
【０１３４】
本発明の化合物の治療有効量は、例えば、レシピエントの年齢や体重、治療を必要とするその正確な状態、その重篤度、製剤の特性および投与方法を含むいくつかの因子に依存する。最終的には担当の医師または獣医によって決定される。しかし、疾患を治療するための本発明による式Ｉの化合物の有効量は、一般に０．１〜１００ｍｇ／レシピエント（哺乳動物）の体重ｋｇ／日の範囲、特に典型的には１〜１０ｍｇ／体重ｋｇ／日の範囲である。したがって、体重が７０ｋｇである成体哺乳動物のための１日当たりの実際量は通常７０〜７００ｍｇであり、この量は、１日当たりの単独用量として、あるいは、より一般的には、合計１日量が同じになるようにして１日に、一連の分割用量（例えば２つ、３つ、４つ、５つまたは６つなどの分割用量）として投与することができる。その塩もしくは溶媒和物またはその生理学的に機能性の誘導体の有効量は、本発明による化合物それ自体の有効量の割合で決定することができる。
【０１３５】
本発明による化合物は、酵素アッセイで容易に検出できる有利な生物活性を示す。そうした酵素をベースとしたアッセイでは、本発明による化合物は、一般にＩＣ50値で表される、適切な範囲、好ましくはミクロモルの範囲、より好ましくはナノモルの範囲の阻害効果を示し、かつ引き起こすことが好ましい。
【０１３６】
本発明は、本明細書で述べるシグナル経路のエフェクターとして、好ましくは阻害剤としての本発明の化合物に関する。したがって、本発明は特に好ましくは、セリン／トレオニンおよびチロシンキナーゼの活性化因子および阻害剤として、好ましくは細胞質および受容体チロシンキナーゼ、特に受容体チロシンキナーゼにおける阻害剤としての本発明の化合物に関する。
【０１３７】
上記で論じたように、本発明による化合物の影響を受けるシグナル経路は様々な疾患に関連する。したがって、本発明による化合物は、前記シグナル経路の１つまたは複数との相互作用を介して前記シグナル経路に依存する疾患の予防および／または治療に有用である。
【０１３８】
したがって、本発明はさらに、疾患、特にキナーゼおよび／またはキナーゼ媒介シグナル伝達によって引き起こされ、媒介され、かつ／または伝播される疾患の治療および／または予防用の医薬品を製造するための、本発明による化合物、および／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）の使用に関する。
【０１３９】
さらに、本発明の化合物は、プロテインキナーゼ誘発疾患の治療における、哺乳動物、特にヒトのための薬剤活性成分として適している。「プロテインキナーゼ誘発疾患」という表現は、１つまたは複数のプロテインキナーゼの活性に依存する病態を指す。キナーゼは、増殖、付着および遊走、ならびに分化を含む様々な細胞活性のシグナル伝達経路において直接または間接に関与する。チロシンキナーゼ活性に付随する疾患には、癌、腫瘍増殖、動脈硬化症、糖尿病性網膜症および炎症性疾患が含まれる。
【０１４０】
ここで論じる疾患は一般に、過剰増殖性疾患と非過剰増殖性疾患の２つのグループに分けられる。この関連では、乾癬、関節炎、炎症、子宮内膜症、瘢痕化、良性前立腺過形成、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全症は非癌性疾患と見なされ、そのうちの関節炎、炎症、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全症は通常、非過剰増殖性疾患と見なされる。
【０１４１】
この関連では、脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、腸癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、慢性白血病および急性白血病は癌性疾患と見なされ、そのすべては通常、過剰増殖性疾患のグループと見なされる。特に癌性細胞増殖、特にＩＧＦ−１Ｒにより直接または間接に媒介される癌性細胞増殖は本発明の目的とする疾患である。
【０１４２】
したがって、本発明は、前記疾患を治療および／または予防する医薬品の調製のための本発明による化合物の使用に関し、かつ、そうした投与を必要とする患者に本発明による１つまたは複数の化合物を投与することを含む前記疾患の治療のための方法にも関する。
【０１４３】
レシピエントまたは患者は、任意の哺乳動物種、例えば霊長類種、特にヒト；マウス、ラットおよびハムスターを含む齧歯動；ウサギ；ウマ、ウシ、イヌ、ネコ等に属しているものであってよい。動物モデルは実験的研究のために興味のあるものであり、それはヒトの疾患の治療モデルを提供する。
【０１４４】
本発明による化合物を用いた治療への特定細胞の受容性はインビトロでの試験により測定することができる。一般に、細胞の培養物を種々の濃度で、その活性成分が細胞死を誘発するかまたは遊走を阻害するのに十分な期間、通常約１時間〜１週間本発明による化合物でインキュベートする。インビトロでの試験は、生検標本からの培養細胞株を用いて実施することができる。次いで、処置した後に残留する生存細胞をカウントする。
【０１４５】
用量は、用いる具体的な化合物、具体的な疾患、患者の状態等に応じて変わる。治療用量は一般に、標的組織における望ましくない細胞集団を相当低減させるのに十分であり、同時に患者の生存率は維持される量である。治療は一般に、特定の細胞のカウント数が相当に低減されるまで、例えば少なくとも約５０％低減されるまで続行され、かつ、体内に望ましくない細胞が本質的にほとんど検出されなくなるまで続行することができる。
【０１４６】
タンパク質キナーゼ阻害剤の特定のためには、様々な検定法を利用することができる。シンチレーション近接アッセイ（Ｓｏｒｇ等、Ｊ．ｏｆ．Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ：７：１１〜１９頁、２００２年）およびフラッシュプレートアッセイでは、γＡＴＰを用いて基質としてのタンパク質またはペプチドの放射性リン酸化を測定する。阻害化合物の存在下で、放射能シグナルが低下しているか、またはそれがまったくないことを検出することができる。さらに、均一時間分解蛍光共鳴エネルギー移動法（ＨＴＲ−ＦＲＥＴ）および蛍光偏光（ＦＰ）技術が、アッセイ法として適している（Ｓｉｌｌｓ等、Ｊ．ｏｆ  Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，７：１９１〜２１４頁、２００２年）。
【０１４７】
他の非放射線式ＥＬＩＳＡアッセイ法では特定のホスホ−抗体（ホスホ−ＡＢ）を使用する。ホスホ−ＡＢはリン酸化された基質だけと結合する。この結合は第２ペルオキシダーゼ抱合抗ヒツジ抗体を用いたケミルミネッセンスによって検出することができる（Ｒｏｓｓ等、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３６６：９７７〜９８１頁、２００２年）。
【０１４８】
特にプロテインキナーゼＴＩＥ２、ＶＥＧＦ−２、ＳＧＫ１、ＴＧＦβＲ１、ＩＧＦ１Ｒ、ＰＤＧＦＲβおよびＦＡＫについての、本発明による化合物の阻害作用を試験できる検定法を実施例Ｂ１〜Ｂ７に記載する。
【０１４９】
細胞増殖の制御解除および細胞死（アポトーシス）に付随する多くの疾患および状態が存在する。本発明による化合物により治療、防止または改善することができる疾患および状態には、これらに限定されないが、以下に挙げる疾患および状態が含まれる。本発明による化合物は、血管の内膜層内へ平滑筋細胞および／または炎症細胞が増殖および／または遊走し、その結果血管を通る血流が制限される（例えば新生内膜閉塞性病変の場合）、いくつかの異なる疾患および状態の治療および／または予防に適している。対象の閉塞性移植血管疾患には、アテローム性動脈硬化症、移植後の冠血管疾患、静脈移植血管狭窄、吻合部周辺人工装具再狭窄（ｐｅｒｉ−ａｎａｓｔｏｍｏｔｉｃ  ｐｒｏｓｔｈｅｔｉｃ  ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ）、血管形成またはステント留置後の再狭窄等が含まれる。
【０１５０】
本発明は、癌を治療または防止するための本発明による化合物の使用を包含する。具体的には、本発明は、特に好ましくは、脳腫瘍、尿生殖路の腫瘍、リンパ系の腫瘍、胃腫瘍、喉頭腫瘍、肺腫瘍からなる群から選択される充実性腫瘍の治療および／または予防用の医薬品の調製のための、本発明による化合物、および／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）の使用に関する。単球性白血病、肺腺癌、小細胞肺癌および非小細胞肺癌、腎細胞癌、子宮内膜癌、多発性骨髄腫、前立腺癌、結腸直腸癌、膵臓癌、神経膠芽腫ならびに乳癌からなる群から選択される充実性腫瘍も好ましくは、本発明による化合物を含む医薬品で治療することができる。
【０１５１】
本発明による化合物は癌治療のために患者に投与することができる。本発明の化合物はプロテインキナーゼとの結合を介して腫瘍血管形成を阻害して腫瘍の増殖に影響を及ぼす。本発明による化合物の特性は網膜の新血管形成を伴うある種の形態の失明の治療に適しているようでもある。
【０１５２】
したがって本発明は、血管形成によって引き起こされ、媒介され、かつ／または伝播される疾患の治療および／または予防用の医薬品の調製のための、本発明による化合物、および／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）の使用にも関する。
【０１５３】
血管形成が関与するこの種の疾患は網膜血管新生、糖尿病性網膜症、加齢性黄斑変性症などの眼疾患である。
【０１５４】
したがって、本発明は、上記疾患の治療および／または予防用の医薬品の調製のための本発明による化合物の使用にも関する。
【０１５５】
炎症性疾患の治療および／または予防用の医薬品の調製のための、本発明による化合物、および／またはその生理学的に許容される塩および溶媒和物の使用も同様に、本発明の範囲に包含される。この種の炎症性疾患には、例えば、関節炎リウマチ、乾癬、接触皮膚炎、晩期型超過敏反応等が含まれる。
【０１５６】
好ましくは過剰増殖性および非過剰増殖性疾患の群からの疾患の治療のための使用が好ましい。それらは癌疾患または非癌性疾患である。
【０１５７】
本発明は、乾癬、関節炎、炎症、子宮内膜症、瘢痕化、良性前立腺過形成、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全症からなる非癌性疾患の群から選択される疾患の治療用の医薬品の調製のための、本発明による化合物および／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）の使用にも関する。
【０１５８】
本発明はさらに、脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、結腸直腸癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、多発性骨髄腫、慢性白血病および急性白血病からなる癌性疾患の群から選択される疾患への治療用の医薬品の調製のための、本発明による化合物および／または生理学的に許容されるその塩、誘導体、溶媒和物および立体異性体（すべての比のこれらの混合物を含む）の使用に関する。
【０１５９】
本発明の化合物は、既知の抗癌剤との併用にも適している。これらの既知の抗癌剤には、以下のもの、すなわち、エストロゲン受容体修飾因子、アンドロゲン受容体修飾因子、レチノイド受容体修飾因子、細胞毒性物質、抗増殖剤、プレニルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、逆転写酵素阻害剤、増殖因子阻害剤および血管形成阻害剤が含まれる。本発明の化合物は放射線治療と同時に投与するのに特に適している。
【０１６０】
「エストロゲン受容体修飾因子」は、その機序にかかわらず、エストロゲンと受容体の結合を妨害または阻害する化合物を指す。エストロゲン受容体修飾因子の例には、これらに限定されないが、タモキシフェン、ラロキシフェン、イドキシフェン、ＬＹ３５３３８１、ＬＹ１１７０８１、トレミフェン、フルベストラント、４−［７−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ−４−メチル−２−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル］フェニル２，２−ジメチルプロパノエート、４，４’−ジヒドロキシベンゾフェノン−２，４−ジニトロフェニルヒドラゾンおよびＳＨ６４６が含まれる。
【０１６１】
「アンドロゲン受容体修飾因子」は、その機序にかかわらず、アンドロゲンと受容体の結合を妨害または阻害する化合物を指す。アンドロゲン受容体修飾因子の例には、フィナステライドおよび他の５α−レダクターゼ阻害剤、ニルタミド、フルタミド、ビカルタミド、リアロゾールならびに酢酸アビラテロンが含まれる。
【０１６２】
「レチノイド受容体修飾因子」は、その機序にかかわらず、レチノイドと受容体の結合を妨害または阻害する化合物を指す。そうしたレチノイド受容体修飾因子の例には、ベキサロテン、トレチノイン、１３−シス−レチノイン酸、９−シス−レチノイン酸、α−ジフルオロメチルオルニチン、ＩＬＸ２３−７５５３、トランス−Ｎ−（４’−ヒドロキシフェニル）レチナミドおよびＮ−４−カルボキシフェニルレチナミドが含まれる。
【０１６３】
「細胞毒性物質」は、アルキル化剤、腫瘍壊死因子、干渉物質、ミクロツブリン阻害剤およびトポイソメラーゼ阻害剤を含む、主に細胞機能に対する直接的作用によって細胞死をもたらすか、または細胞有糸分裂を阻害するかまたは妨害する化合物を指す。細胞毒性物質の例には、これらに限定されないが、チラパジミン、セルテネフ、カケクチン、イホスファミド、タソネルミン、ロニダミン、カルボプラチン、アルトレタミン、プレドニムスチン、ジブロモズルシトール、ラニムスチン、フォテムスチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、テモゾロマイド、ヘプタプラチン、エストラムスチン、トシル酸インプロスルファン、トロホスファミド、ニムスチン、塩化ジブロスピジウム、プミテパ、ロバプラチン、サトラプラチン、プロフィロマイシン、シスプラチン、イロフルベン、デキシホスファミド、シスアミンジクロロ（２−メチルピリジン）白金、ベンジルグアニン、グルフォスファミド、ＧＰＸ１００、（トランス，トランス，トランス）ビス−ｍｕ−（ヘキサン−１，６−ジアミン）−ｍｕ−［ジアミン白金（ＩＩ）］ビス［ジアミン（クロロ）白金（ＩＩ）］テトラクロリド、ジアリジジニルスペルミン、三酸化ヒ素、１−（１１−ドデシルアミノ−１０−ヒドロキシウンデシル）−３，７−ジメチルキサンチン、ゾルビシン、イダルビシン、ダウノルビシン、ビスアントレン、ミトキサントロン、ピラルビシン、ピナフィド、バルルビシン、アムルビシン、アンチネオプラストン、３’−デアミノ−３’−モルホリノ−１３−デオキソ−１０−ヒドロキシカルミノマイシン、アンナマイシン、ガラルビシン、エリナフィド、ＭＥＮ１０７５５および４−デメトキシ−３−デアミノ−３−アジリジニル−４−メチルスルホニルダウノルビシン（ＷＯ００／５００３２を参照されたい）が含まれる。
【０１６４】
ミクロツブリン阻害剤の例には、パクリタキセル、硫酸ビンデシン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−８’−ノルビンカロイコブラスチン、ドセタキソール、リゾキシン、ドラスタチン、イセチオン酸ミボブリン、オーリスタチン、セマドチン、ＲＰＲ１０９８８１、ＢＭＳ１８４４７６、ビンフルニン、クリプトフィシン、２，３，４，５，６−ペンタフルオロ−Ｎ−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）ベンゼンスルホンアミド、アンヒドロビンブラスチン、Ｎ，Ｎ−ジメチルＬ−バリル−Ｌ−バリル−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリン−ｔ−ブチルアミド、ＴＤＸ２５８およびＢＭＳ１８８７９７が含まれる。
【０１６５】
トポイソメラーゼ阻害剤のいくつかの例は、トポテカン、ハイカプタミン、イリノテカン、ルビテカン、６−エトキシプロピオニル−３’，４’−Ｏ−エキソベンジリデンチャルトロイシン、９−メトキシ−Ｎ、Ｎ−ジメチル５−ニトロピラゾロ［３，４、５−ｋｌ］アクリジン−２−（６Ｈ）プロパンアミン、１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−２，３−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｈ，１２Ｈ−ベンゾ［ｄｅ］ピラノ［３’，４’：ｂ，７］インドリジノ［１，２ｂ］キノリン−１０，１３（９Ｈ，１５Ｈ）−ジオン、ルルトテカン、７−［２−（Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル］−（２０Ｓ）カンプトテシン、ＢＮＰ１３５０、ＢＮＰＩ１１００、ＢＮ８０９１５、ＢＮ８０９４２、エトポシドホスフェート、テニポシド、ソブゾキサン、２’−ジメチルアミノ−２’−デオキシエトポシド、ＧＬ３３１、Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−９−ヒドロキシ−５、６−ジメチル６Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］カルバゾール−１−カルボキサミド、アスラクリン、（５ａ，５ａＢ，８ａａ，９ｂ）−９−［２−［Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−５−［４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル］−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキソヒドロフロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６−オン、２，３−（メチレンジオキシ）−５−メチル−７−ヒドロキシ−８−メトキシベンゾ［ｃ］フェナントリジニウム、６，９−ビス［（２−アミノエチル）アミノ］ベンゾ［ｇ］イソキノリン−５，１０−ジオン、５−（３−アミノプロピルアミノ）−７，１０−ジヒドロキシ−２−（２−ヒドロキシエチルアミノメチル）−６Ｈ−ピラゾロ［４，５，１−ｄｅ］アクリジン−６−オン、Ｎ−［１−［２（ジエチルアミノ）エチルアミノ］−７−メトキシ−９−オキソ−９Ｈ−チオキサンテン−４−イルメチル］ホルムアミド、Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）アクリジン−４−カルボキサミド、６−［［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミノ］−３−ヒドロキシ−７Ｈ−インデノ−［２，１−ｃ］キノリン−７−オンおよびジメスナである。
【０１６６】
「抗増殖剤」には、アンチセンスＲＮＡおよびＤＮＡオリゴヌクレオチド、例えばＧ３１３９、ＯＤＮ６９８、ＲＶＡＳＫＲＡＳ、ＧＥＭ２３１およびＩＮＸ３００１、ならびに代謝拮抗物質、例えばエノシタビン、カルモフール、テガフール、ペントスタチン、ドキシフルリジン、トリメトレキサート、フルダラビン、カペシタビン、ガロシタビン、シタラビンオクホスファート、ホステアビンナトリウム水和物、ラルチトレキセド、パルチトレキシド、エミテフール、チアゾフリン、デシタビン、ノラトレキセド、ペメトレキセド、ネルザラビン、２’−デオキシ−２’−メチリデンシチジン、２’−フルオロメチレン−２’−デオキシシチジン、Ｎ−［５−（２，３−ジヒドロベンゾフリル）スルホニル］−Ｎ’−（３，４−ジクロロフェニル）尿素、Ｎ６−［４−デオキシ−４−［Ｎ２−［２（Ｅ），４（Ｅ）−テトラデカジエノイル］グリシルアミノ］−Ｌ−グリセロ−Ｂ−Ｌ−マンノヘプトピラノシル］アデニン、アプリジン、エクテナサイジン、トロキサシタビン、４−［２−アミノ−４−オキソ−４，６，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリミジノ［５，４−ｂ］−１，４−チアジン−６−イル−（Ｓ）−エチル］−２，５−チエノイル−Ｌ−グルタミン酸、アミノプテリン、５−フルオロウラシル、アラノシン、１１−アセチル−８−（カルバモイルオキシメチル）−４−ホルミル−６−メトキシ−１４−オキサ−１，１１−ジアザテトラシクロ−（７．４．１．０．０）テトラデカ−２，４，６−トリエン−９−イル酢酸エステル、スウェインソニン、ロメトレキソル、デクスラゾキサン、メチオニナーゼ、２’−シアノ−２’−デオキシ−Ｎ４−パルミトイル−１−Ｂ−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンおよび３−アミノピリジン−２−カルボキシアルデヒドチオセミカルバゾンが含まれる。「抗増殖剤」には、セツキシマブ、マツズマブなどの増殖因子に対するモノクローナル抗体、および組み換えウイルス媒介遺伝子導入によって送達できるｐ５３などの腫瘍抑制遺伝子（例えば、米国特許第６，０６９，１３４号を参照されたい）も含まれる。
【０１６７】
実施例
実施例Ａ１：以下の反応スキームによる４−クロロ−５−ヨードピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンの調製：
【０１６８】
【化７】
2009535300.tif 000028
【０１６９】
（ａ）１３０ｍｌ（８６０ミリモル）のブロモアセトアルデヒドジエチルアセタールを、エチルシアノアセテート（４３０ｍｌ、４．０４モル）、ヨウ化ナトリウム（８．１ｇ；５４．０４ミリモル）および炭酸カリウム（１１５．９ｇ；８３９ミリモル）と共に１０時間還流させる。室温（ＲＴ）に冷却後、そのバッチを８００ｍｌの水と攪拌し、水相をジエチルエーテルで抽出し、一緒にした有機相を乾燥し蒸発させる。クロマトグラフィーにより１２４．９９ｇ（６３％）エチル２−シアノ−４，４−ジエトキシブチラートを無色液体として得る。
【０１７０】
（ｂ）３．３ｇ（９９ミリモル）のナトリウムを０℃で７５ｍｌのエタノールに加え、ナトリウムが完全に反応したら、７．５ｇ（９９ミリモル）のチオ尿素とエチル２−シアノ−４，４−ジエトキシブチラート（２０．６ｇ；９０ミリモル）を加える。次いで混合物を１０時間還流させ、冷却した後、溶媒を真空下で除去する。残留物を水とエーテルに分配させ、相分離した後、５．７ｍｌ（９９ミリモル）の酢酸を用いて水相を酸性化させる。析出した生成物をろ別し、真空乾燥して２１．７３ｇ（９３％）の６−アミノ−５−（２，２−ジエトキシエチル）−２−メルカプト−ピリミジン−４−オールをベージュ色の粉末の形態で得る。これをさらに精製することなく、次の反応で用いる。
【０１７１】
（ｃ）３５．５ｇ（１８７ミリモル）の６−アミノ−５−（２，２−ジエトキシエチル）−２−メルカプトピリミジン−４−オールを、水および５０ｍｌのアンモニア（２６％水溶液）の中の５０ｇのラネーニッケルの懸濁液に加え、これを還流下で１時間加温する。混合物を熱時ろ過し、アンモニアを蒸発させる。１００ｍｌの３Ｎ  ＨＣｌを水性残留物に加え、混合物を室温で４８時間攪拌する。析出した生成物をろ別し、水およびエーテルで洗浄して１５．４６ｇ（８３．５％）の無色固体７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オールを得る。その融点は３００℃超である。
【０１７２】
（ｄ）５０ｍｌのＰＯＣｌ3中の５ｇ（３７ミリモル）の７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オールの混合物を、出発材料が完全な溶液になるまで加温する。次いで混合物を、熱を加えずに４５分間さらに攪拌し、最後にＰＯＣｌ3を真空下で除去する。残留物を氷水にとり、ＮａＨＣＯ3を用いてアルカリ性にしてエーテルで抽出する。有機相を乾燥し、蒸発させて５．２８ｇ（９３％）の４−クロロピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを緑色固体状物として得る。これは１８７〜１８８℃で溶融する。
【０１７３】
（ｅ）５ｇ（３２．５６ミリモル）の４−クロロピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンと１１ｇ（５０ミリモル）のＮ−ヨードスクシンイミドを６０ｍｌのＤＭＦに溶解させ、混合物を室温で１０時間攪拌する。混合物をチオ硫酸ナトリウム水溶液で処理し、エーテルで抽出する。有機相をチオ硫酸ナトリウム水溶液と塩化アンモニウム溶液で洗浄する。最終的に残留した固体をメタノールから再結晶化させて７ｇ（７７％）の４−クロロ−５−ヨードピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを淡褐色固体状物として得る。これは１９５〜１９６℃で溶融する。
【０１７４】
実施例Ａ２：以下の反応スキームによる（３−ヒドロキシシクロブチルメチル）−ｔｅｒｔ−ブチルカルバメートの調製：
【０１７５】
【化８】
2009535300.tif 000029
【０１７６】
（ａ）５０ｇ（０．５４モル）の３−メチレンシクロブタンカルボニトリルを６００ｍｌの水および５０ｍｌのエーテルの中に溶解させ、５℃に冷却し、１００ｍｇ（０．４ミリモル）の酸化オスミウム（ＩＶ）を加える。次いで２６０ｇ（１．２モル）の過ヨウ素酸ナトリウムをその温度で分割添加し、混合物を室温に加温する。有機相をジクロロメタンで抽出し、乾燥し、蒸発させた後、シリカゲルを用いてクロマトグラフィーにかけて２５ｇ（４９％）の３−オキソシクロブタンカルボニトリルを無色結晶（ｍ．ｐ．５１℃）として得る。
【０１７７】
（ｂ）２５ｇ（０．２６モル）の３−オキソシクロブタンカルボニトリルを３５０ｍｌのＴＨＦに溶解し、３５０ｍｌのＴＨＦの中の４０ｇ（１．０５モル）の水素化アルミニウムリチウムの懸濁液に滴下する。２時間後、そのバッチを０℃に冷却し、水を加え、混合物をろ過し、残留物を蒸発させて乾燥する。シリカゲルを用いたクロマトグラフィーにかけて２０ｇ（７０％）の３−アミノメチルシクロブタノールを無色油状物として得る。（このアラネート還元によって、基質制御プロセス（ｓｕｂｓｔｒａｔｅ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｐｒｏｃｅｓｓ）で、ｓｙｎ生成物だけが生成する。）
（ｃ）１０ｇ（０．１モル）の３−アミノメチルシクロブタノールを２００ｍｌのＴＨＦ中に溶解し、３３ｇ（０．１５モル）のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートおよび１４ｍｌ（０．１モル）のトリエチルアミンを加える。室温で１０時間攪拌した後、混合物を蒸発させて乾燥し、シリカゲルを用いて分画して１１ｇ（５５％）の（３−ヒドロキシシクロブチルメチル）−ｔｅｒｔ−ブチルカルバメートを無色結晶状物として得る。これは１０９〜１１０℃で溶融する。
【０１７８】
実施例Ａ３：以下の反応スキームにしたがったＭｉｔｓｕｎｏｂｕ法（任意選択）によるカルビノール中心での絶対配置の反転
【０１７９】
【化９】
2009535300.tif 000030
【０１８０】
（ａ）（３−ヒドロキシシクロブチルメチル）−ｔｅｒｔ−ブチルシス−カルバメートを、トリフェニルホスフィンおよび４−ニトロ安息香酸の存在下でＴＨＦに溶解し、０℃に冷却する。この温度で、ジイソプロピルアゾジカルボキシレートを滴下し、混合物を室温に加温する。１２時間後、そのバッチを５％炭酸水素ナトリウ溶液で処理する。相分離させ、クロマトグラフィーにかけて３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル）シクロブチル４−ニトロベンゾエートを得る。
【０１８１】
（ｂ）エステルをメタノールに溶解し、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液の存在下、室温で１２時間攪拌する。アルコールを真空下で除去し、水性残留物をジクロロメタンで十分に抽出する。有機相を乾燥して濃縮し、残留物を、シリカゲルを用いてクロマトグラフィーにかけて（３−ヒドロキシシクロブチルメチル）−ｔｅｒｔブチルトランス−カルバメートを得る。
【０１８２】
実施例Ａ４：以下の反応スキームによる７−（−３−アミノメチルシクロブチル）−５−（３−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミンの調製
【０１８３】
【化１０】
2009535300.tif 000031
【０１８４】
（ａ）最初に６０ｍｌのＴＨＦ中の１．８ｇ（５．４ミリモル）のトリフェニルホスフィンを導入し、−６５℃に冷却する。次いで１．１ｍｌ（５．６ミリモル）のジイソプロピルアゾジカルボキシレートを滴下する。１０分後、４−クロロ−５−ヨード−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを加え、さらに１５分後、５ｍｌのＴＨＦに溶解した３−ヒドロキシシクロブチルメチルｔｅｒｔ−ブチルシス−カルバメートを加える。続いてそのバッチを５０℃でさらに１０時間攪拌する。溶媒を留去した後、生成物を、シリカゲルを用いてクロマトグラフィーにかけて１．５ｇの淡い色の油状物を得る。
【０１８５】
この反応手順はカルビノール中心での反転をもたらし、それによって、４員環基が、互いにトランス位となる。その立体構造はＮＯＥ−ＮＭＲ測定により判定することができる。
【０１８６】
（ｂ）まず、６００ｍｇ（１．３ミリモル）の［３−（４−クロロ−５−ヨードピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル）−シクロブチルメチル］ｔｅｒｔ−ブチルカルバメートと３７０ｍｇ（１．７ミリモル）の２−（３−フルオロフェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロランを、１５ｍｌのＤＭＥおよび１０ｍｌの水中の４５０ｍｇの炭酸ナトリウム（５ミリモル）に加える。この懸濁液に３１ｍｇ（０．０３ミリモル）のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムを加え、混合物を還流下で１０時間加温する。シリカゲルを用いたクロマトグラフィーにより生成物｛３−［４−クロロ−５−（３−フルオロフェニル）ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル］シクロブチルメチル｝ｔｅｒｔ−ブチルカルバメートを得る。
【０１８７】
（ｃ）５００ｍｇ（１．２ミリモル）の｛３−［４−クロロ−５−（３−フルオロフェニル）ピロロ［２，３−ｄ］−ピリミジン−７−イル］シクロブチルメチル｝ｔｅｒｔ−ブチルカルバメートを３０ｍｌのアンモニア水（３２％）および１０ｍｌのＴＨＦの中に溶解し、密閉容器内で４２ｍｇ（０．２ミリモル）の硫酸銅と共に１００℃で１０時間加熱する。そのバッチを中和し、酢酸エチルで抽出する。シリカゲルを用いたクロマトグラフィーにより１３０ｍｇ（３６％）の７−（３−アミノメチルシクロブチル）−５−（３−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミンを無色固体として得る。Ｍ．ｐ．：１０１〜１０２℃。
【０１８８】
実施例Ａ５：以下の反応スキームによる５−（３−フルオロフェニル）−７−（３−ピロリジン−１−イルメチルシクロブチル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミンの調製
【０１８９】
【化１１】
2009535300.tif 000032
【０１９０】
２５０ｍｇ（ミリモル）の７−（３−アミノメチルシクロブチル）−５−（３−フルオロフェニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミンを１０ｍｌのジオキサンに溶解し、トリエチルアミンの存在下、１，４−ジブロモブタンと共に８０℃で１０時間攪拌して、５−（３−フルオロフェニル）−７−（３−ピロリジン−１−イルメチルシクロブチル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミンを５６％の収率で得る。
【０１９１】
実施例Ａ６：以下の反応スキームによる３−［４−アミノ−７−（３−ピロリジン−１−イルメチルシクロブチル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−５−イル］フェノールの調製
【０１９２】
【化１２】
2009535300.tif 000033
【０１９３】
（ａ）まず、実施例Ａ３（ｂ）および（ｃ）と同様にして、２−（３−ベンジルオキシフェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロランと［３−（４−クロロ−５−ヨードピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−７−イル）シクロブチルメチル］ｔｅｒｔ−ブチルカルバメートから、５−（３−ベンジルオキシフェニル）−７−（３−ピロリジン−１−イルメチルシクロブチル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミンを調製する。
【０１９４】
（ｂ）５００ｍｇのこの化合物を１０ｍｌのメタノールに溶解し、１００ｍｇのパラジウム（炭素に担持）を用いて２５ｍｌの水素と反応させて２５０ｍｇ（８６％）の３−［４−アミノ−７−（３−ピロリジン−１−イルメチルシクロブチル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−５−イル］フェノールを無色固体（ｍ．ｐ．１９３〜１９４℃）として得る。
【０１９５】
３−［４−アミノ−７−（３−ピロリジン−１−イルメチルシクロブチル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−５−イル］フェノールは非常に広範な活性（ＩＣ50、μＭで）を有しており、これはこの化合物を治療上非常に重要なものにしている。阻害定数は以下に示す実施例Ｂ１〜Ｂ８によって測定することができる。
【０１９６】
ＩＣ50        キナーゼ
０．０６      ＩＧＦ
１．８        ＦＡＫ
０．５２      ＴＩＥ
０．１８      ＶＥＧＦ
０．０９７    ＰＤＧＦ
１１．６      ＳＧＫ
０．１２      ＴＧＦ
化合物の溶解度は実施例Ｃで示したようにして測定する。リン酸緩衝剤（３７℃、ｐＨ７．０）中で、溶解度は１０７１μｇ／ｍｌである。
【０１９７】
実施例Ｂ：種々のプロテインキナーゼの阻害（ＩＣ50）
Ｂ１ａ：ＩＧＦ１Ｒの阻害（フラッシュプレートアッセイ）
用いた試験プレートはＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社（ＵＳＡ）の９６ウェルのフラッシュプレートマイクロタイタープレートである。キナーゼ反応の成分をピペットでアッセイプレートにとる。ＩＧＦ１Ｒキナーゼを、１００μｌの全容積で試験物質の存在下および非存在下、室温でビオチン化ポリ（Ｇｌｕ、Ｔｙｒ）４：１と共に、放射能でラベルされた33Ｐ−ＡＴＰで１時間インキュベートする。２５μｌの２００ｍＭ  ＥＤＴＡ溶液を用いて反応を終了させる。室温でさらに３０分間インキュベーションした後、上澄みを吸引除去し、ウェルを各回１００μｌの０．９％ＮａＣｌ溶液で３回洗浄する。Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＵＳＡ）を用いて放射能を測定する。ＩＣ50の値はＲＳ１コンピュータプログラムを用いて計算する。
【０１９８】
Ｂ１ｂ：ＩＧＦ１Ｒの阻害（ＥＬＩＳＡアッセイ）
ＩＧＦ１受容体（ＩＧＦ１Ｒ）（例えば、ＭＣＦ−７またはＣａｌｕ−６）を発現する培養したヒト腫瘍細胞を、ＩＧＦ１Ｒの天然リガンドであるヒトＩＧＦ１を用いて刺激させる。この刺激は、細胞質ＩＧＦ１Ｒドメインにおけるチロシン残基の自己リン酸化を誘発し、これはシグナル伝達カスケードをトリガーし、結果として細胞のアポトーシスおよび増殖の阻害をもたらす。
【０１９９】
リン酸化されたＩＧＦ１Ｒの量は受容体特異性捕獲ＥＬＩＳＡアッセイまたは類似のＬＵＭＩＮＥＸアッセイで測定する。特異抗体（「捕獲性」）によって、細胞溶解物からのＩＧＦ１Ｒを９６ウェルのＥＬＩＳＡプレートまたはＬＵＭＩＮＥＸビーズと結合させ、化学発光法か、または蛍光標識抗ホスホチロシン抗体を用いる方法で、ビオチン標識抗ホスホチロシン抗体およびストレプトアビジン−ペルオキシダーゼ抱合体を用いて、チロシンリン酸化を検出する。
【０２００】
キナーゼ阻害剤の活性を測定するため、これらの化合物の濃度を増大させながら４５分間細胞を前処理し、続いてＩＧＦ１で５分間これに刺激を与える。内部対照として、リガンドＩＧＦ１の生物活性をチェックし、一連の濃度のＩＧＦ１Ｒ基準阻害剤を測定する。
【０２０１】
Ｂ２ａ：ＦＡＫの阻害（フラッシュプレートアッセイ）
用いた試験プレートはＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社（ＵＳＡ）の３８４ウェルフラッシュプレートマイクロタイタープレートである。キナーゼ反応の成分をピペットでアッセイプレートにとる。ＦＡＫキナーゼを、１００μｌの全容積で試験物質の存在下および非存在下、室温でビオチン化ポリ（Ｇｌｕ、Ｔｙｒ）４：１と共に、放射能標識33Ｐ−ＡＴＰで３時間インキュベートする。２５μｌの２００ｍＭ  ＥＤＴＡ溶液を用いて反応を終了させる。室温でさらに３０分間インキュベーションした後、上澄みを吸引除去し、ウェルを各回１００μｌの０．９％ＮａＣｌ溶液で３回洗浄する。Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＵＳＡ）を用いて放射能を測定する。ＩＣ50の値はＲＳ１コンピュータプログラムを用いて計算する。
【０２０２】
Ｂ２ｂ：ＦＡＫの阻害（ＥＬＩＳＡアッセイ）
ＦＡＫ（焦点接着キナーゼ）遺伝子の増幅を伴う培養ヒト細胞（例えば、Ｃａｌｕ−６またはＨＴ−２９）は、チロシン自己リン酸化の増進と関連する構成的ＦＡＫ活性化を伴う。活性化したＦＡＫは腫瘍細胞の浸潤性増殖を促進し、アノイキスを阻害する。
【０２０３】
リン酸化されたＦＡＫの量は特異性捕獲ＥＬＩＳＡアッセイまたは類似のＬＵＭＩＮＥＸアッセイで測定する。特異抗体（「捕獲性」）を用いて、細胞溶解物からのＦＡＫを９６ウェルのＥＬＩＳＡプレートまたはＬＵＭＩＮＥＸビーズと結合させ、化学発光法か、または蛍光標識抗ホスホチロシン抗体を用いる方法で、ビオチン標識抗ホスホチロシン抗体およびストレプトアビジン−ペルオキシダーゼ抱合体を用いて、チロシンリン酸化を検出する。
【０２０４】
キナーゼ阻害剤の活性を測定するため、これらの化合物の濃度を増大させながら４５分間前細胞を処理し、次いで、ＦＡＫリン酸化を測定する。内部対照として、リガンドＩＧＦ１の生物活性をチェックし、一連の濃度のＩＧＦ１Ｒ基準阻害剤を測定する。
【０２０５】
Ｂ３：ＶＥＧＦ−２の阻害（フラッシュプレートアッセイ）
用いた試験プレートはＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社（ＵＳＡ）の３８４ウェルフラッシュプレートマイクロタイタープレートである。キナーゼ反応の成分をピペットでアッセイプレートにとる。ＶＥＧＦ−２キナーゼを、１００μｌの全容積で試験物質の存在下および非存在下、室温でビオチン化ポリ（Ｇｌｕ、Ｔｙｒ）４：１と共に、放射能標識33Ｐ−ＡＴＰで３時間インキュベートする。２５μｌの２００ｍＭ  ＥＤＴＡ溶液を用いて反応を終了させる。室温でさらに３０分間インキュベーションした後、上澄みを吸引除去し、ウェルを各回１００μｌの０．９％ＮａＣｌ溶液で３回洗浄する。Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＵＳＡ）を用いて放射能を測定する。ＩＣ50の値はＲＳ１コンピュータプログラムを用いて計算する。
【０２０６】
Ｂ４：ＴＩＥ２の阻害（フラッシュプレートアッセイ）
用いた試験プレートはＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社（ＵＳＡ）の３８４ウェルフラッシュプレートマイクロタイタープレートである。キナーゼ反応の成分をピペットでアッセイプレートにとる。ＴＩＥ２キナーゼを、１００μｌの全容積で試験物質の存在下および非存在下、室温でビオチン化ポリ（Ｇｌｕ、Ｔｙｒ）４：１と共に、放射能標識33Ｐ−ＡＴＰで３時間インキュベートする。２５μｌの２００ｍＭ  ＥＤＴＡ溶液を用いて反応を終了させる。室温でさらに３０分間インキュベーションした後、上澄みを吸引除去し、ウェルを各回１００μｌの０．９％ＮａＣｌ溶液で３回洗浄する。Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＵＳＡ）を用いて放射能を測定する。ＩＣ50の値はＲＳ１コンピュータプログラムを用いて計算する。
【０２０７】
Ｂ５：ＳＧＫ１の阻害（フラッシュプレートアッセイ）
用いた試験プレートはＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社（ＵＳＡ）の３８４ウェルフラッシュプレートマイクロタイタープレートである。キナーゼ反応の成分をピペットでアッセイプレートにとる。ＳＧＫ１キナーゼを、１００μｌの全容積で試験物質の存在下および非存在下、室温でビオチン化ポリ（Ｇｌｕ、Ｔｙｒ）４：１と共に、放射能標識33Ｐ−ＡＴＰで３時間インキュベートする。２５μｌの２００ｍＭ  ＥＤＴＡ溶液を用いて反応を終了させる。室温でさらに３０分間インキュベーションした後、上澄みを吸引除去し、ウェルを各回１００μｌの０．９％ＮａＣｌ溶液で３回洗浄する。Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＵＳＡ）を用いて放射能を測定する。ＩＣ50の値はＲＳ１コンピュータプログラムを用いて計算する。
【０２０８】
Ｂ６：ＰＤＧＦＲβの阻害（フラッシュプレートアッセイ）
用いた試験プレートはＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社（ＵＳＡ）の９６ウェルのフラッシュプレートマイクロタイタープレートである。キナーゼ反応の成分をピペットでアッセイプレートにとる。ＰＤＧＦＲβキナーゼを、１００μｌの全容積で試験物質の存在下および非存在下、室温で放射能標識33Ｐ−ＡＴＰで３時間インキュベートする（ここではキナーゼの自己リン酸化）。１５０μｌの６０ｍＭ  ＥＤＴＡ溶液を用いて反応を終了させる。室温でさらに３０分間インキュベーションした後、上澄みを吸引除去し、ウェルを各回２００μｌの０．９％ＮａＣｌ溶液で３回洗浄する。Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＵＳＡ）を用いて放射能を測定する。ＩＣ50の値はＲＳ１コンピュータプログラムを用いて計算する。
【０２０９】
Ｂ７：ＴＧＦβＲ１の阻害（フラッシュプレートアッセイ）
試験は、ＩＧＦ１Ｒについて実施例Ｂ１ｂで記載したようにして実施する。ビオチン化されたものをＴＧＦβＲ１キナーゼに加える。
【０２１０】
キナーゼアッセイは３８４ウェルフラッシュプレートアッセイとして実施する。
【０２１１】
キナーゼ反応の成分をピペットでアッセイプレートにとる。ＴＧＦβＲ１キナーゼを、試験物質の存在下および非存在下、３５μｌの合計容量のビオチン化基質と共に、放射能標識33Ｐ−ＡＴＰで４５分間インキュベートする。２５μｌの２００ｍＭ  ＥＤＴＡ溶液を用いて反応を終了させ、室温で３０分間吸引除去し、ウェルを各回１００μｌの０．９％ＮａＣｌ溶液で３回洗浄する。Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＵＳＡ）を用いて放射能を測定する。ＩＣ50の値はＲＳ１コンピュータプログラムを用いて計算する。
【０２１２】
Ｂ８：ＩｎｓＲの阻害（ＥＬＩＳＡアッセイ）
インスリン受容体（ＩｎｓＲ）（例えば、ＨｅｐＧ２）を発現する培養したヒト細胞を、ＩｎｓＲの天然リガンドであるヒトインスリンを用いて刺激させる。この刺激は、細胞質ＩｎｓＲドメインにおけるチロシン残基の自己リン酸化を誘発し、これは、細胞内の様々な生物学的反応を開始させるシグナル伝達カスケードをトリガーする。
【０２１３】
リン酸化されたＩｎｓＲの量は受容体特異性捕獲ＥＬＩＳＡアッセイまたは類似のＬＵＭＩＮＥＸアッセイで測定する。細胞溶解物からのＩｎｓＲを、特異抗体（「捕獲性」）によって、９６ウェルのＥＬＩＳＡプレートまたはＬＵＭＩＮＥＸビーズと結合させ、化学発光法か、または蛍光標識抗ホスホチロシン抗体を用いる方法で、ビオチン標識抗ホスホチロシン抗体およびストレプトアビジン−ペルオキシダーゼ抱合体を用いて、チロシンリン酸化を検出する。
【０２１４】
キナーゼ阻害剤の活性を測定するため、これらの化合物の濃度を増大させながら４５分間細胞を前処理し、続いてインスリンで５分間刺激させる。内部対照として、リガンドインスリンの生物活性をチェックし、一連の濃度の基準阻害剤を測定する。
【０２１５】
本発明による化合物の他の物理化学的データおよび阻害定数を表１に示す。
【０２１６】
実施例Ｃ：振盪フラスコ法によるリン酸緩衝剤中における溶解度測定
Ｇｌｏｍｍｅ等（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．９４（１）：１〜１６頁、２００５年）が記載している手順は以下の通りである。濃度測定はＨＰＬＣを用いて、標準溶液に対するＵＶ検出により実施する。
【０２１７】
緩衝剤：３．９５４ｇのリン酸二水素ナトリウム一水和物＋６．０２４ｇの塩化ナトリウム＋９５０ｍｌの超高純度水。０．１Ｍ  ＮａＯＨまたは０．１Ｍ  ＨＣｌでｐＨ７．０に設定。
【０２１８】
手順：
試料を３７℃、４５０ｒｐｍで２４時間振盪させた。約７時間後、試料のｐＨをチェックし、必要であれば調整した。試料が依然として過剰に存在しているかどうかチェックした。２４時間の振盪時間が終了する直前に、そのｐＨと沈殿物の有無について試料をチェックした。
【０２１９】
用いた装置：
超高純度水プラント：ＭｉｌｌｉＱグラジエント、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、装置：Ｆ３ＰＮ３７４６２Ｄ
振盪機：ＴｉＭｉｘコントロール、Ｂｕｈｌｅｒ
インキュベーションフード：ＴＨ１５、Ｂｕｈｌｅｒ
ｐＨ計：７６６  Ｃａｌｉｍａｔｉｃ  Ｋｎｉｃｋの装置：ｐＨ１
ｐＨ電極：ＩｎＬａｂ  ４２３  Ｍｅｔｔｌｅｒ
ＨＰＬＣ：カラム：ＬｉＣｈｒｏＣａｒｔ  １２５−４
ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００ＲＰ−１８
流量：１．０００ｍｌ／分
溶離液：
溶離液Ａ：２ｍｌのジエチルアミン（合成用）＋
１０００ｍｌのメタノール、ＬｉＣｈｒｏｓｏｌｖ
溶離液Ｂ：５ｇの酢酸アンモニウム（分析用）＋
５ｍｌのメタノール、ＬｉＣｈｒｏｓｏｌｖ＋
９９５ｍｌの超高純度水
実施例Ｃ１；本発明による化合物の溶解度
上記方法によって以下の溶解度を得る：
【０２２０】
【表２】
2009535300.tif 000034
【０２２１】
実施例Ｃ２：従来技術による構造的に類似した化合物の溶解度（比較例）
上記方法によって以下の溶解度を得る。
【０２２２】
【表３】
2009535300.tif 000035
【０２２３】
本発明による化合物の溶解度は、従来技術の化合物の溶解度を上回っており、５〜１０００倍であることが明らかである
以下の実施例は医薬組成物に関するものである。
実施例Ｄ１：注入用バイアル
３ｌの２回蒸留水中の１００ｇの本発明の活性成分と５ｇのリン酸１水素２ナトリウムの溶液を２Ｎ塩酸でｐＨ６．５に調整し、滅菌ろ過し、注入用バイアルに移し、無菌状態で凍結乾燥し、無菌状態で密封する。各注入用バイアルは５ｍｇの活性成分を含む。
実施例Ｄ２：坐剤
２０ｇの本発明の活性成分と、１００ｇの大豆レシチンおよび１４００ｇのココアバターとの混合物を溶融し、鋳型に注入して冷却する。各坐剤は２０ｍｇの活性成分を含む。
実施例Ｄ３：液剤
１ｇの本発明の活性成分、９．３８ｇのＮａＨ2ＰＯ4・２Ｈ2Ｏ、２８．４８ｇのＮａ2ＨＰＯ4・１２Ｈ2Ｏおよび０．１ｇの塩化ベンザルコニウムの溶液を９４０ｍｌの２回蒸留水中に調製する。ｐＨを６．８に調整して溶液を１ｌにし、照射により殺菌する。この溶液は点眼剤の形態で使用することができる。
実施例Ｄ４：軟膏
５００ｍｇの本発明の活性成分を無菌状態で９９．５ｇのワセリンと混合する。
実施例Ｄ５：錠剤
１ｋｇの活性成分、４ｋｇのラクトース、１．２ｋｇのジャガイモでんぷん、０．２ｋｇのタルクおよび０．１ｋｇのステアリン酸マグネシウムの混合物を、慣用的な方式で、各錠剤が１０ｍｇの活性成分を含有するように圧縮して錠剤を得る。
実施例Ｄ６：糖衣錠
実施例５ｅと同様に圧縮して錠剤にし、続いて慣用的な方式で、スクロース、ジャガイモでんぷん、タルク、トラガカントおよび染料の被覆物でコーティングする。
実施例Ｄ７：カプセル剤
２ｋｇの活性成分を、慣用的な方式で、各カプセルが２０ｍｇの活性成分を含有するように硬質ゼラチンカプセル中に導入する。
【０２２４】
実施例Ｄ８：アンプル剤
６０ｌの２回蒸留水中の１ｋｇの本発明の活性成分の溶液を滅菌ろ過し、アンプル中に移し、無菌状態で凍結乾燥し、無菌状態で密封する。各アンプルは１０ｍｇの活性成分を含む。
【国際調査報告】
2009535300.tif 000042
2009535300.tif 000043
2009535300.tif 000044
2009535300.tif 000045