(57)【要約】式Ｉ：2009536946.tif 000013        （Ｉ）［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は本明細書で定義されたものである］に従った構造を有する化合物は、キナーゼ阻害剤として有用である。
2009536946.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2009536946.tif 000009
（Ｉ）
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、またはＣ２−Ｃ４アルキニルであり；
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、保護ヒドロキシル、ＯＲ１２、ＳＲ１２、ＮＲ１２Ｒ１３、−Ｘ１（ＣＨ２）ｐＸ２−Ｒ１４であるか、またはヒドロキシル、保護ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、保護アミノ、もしくは−Ｘ１（ＣＨ２）ｐＸ２−Ｒ１４で適宜置換されたアルキルであり；その中で
Ｒ１２およびＲ１３の各々は独立して、Ｈまたは適宜置換された脂肪族基、適宜置換された脂環式基、適宜置換されたヘテロ脂環式基、適宜置換されたアリール、または適宜置換されたヘテロアリール部分またはＮもしくはＳ保護基であるか、あるいはＲ１２およびＲ１３は一緒になって、１〜４個の炭素原子および１〜３個の窒素もしくは酸素原子を含む飽和もしくは不飽和環を形成し；Ｒ１２およびＲ１３の各々は、ヒドロキシル、保護ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、保護アミノ、−ＮＨ（アルキル）、アミノアルキル、またはハロゲンの一つ以上で適宜置換されており；
Ｘ１およびＸ２は各々独立して、不存在、酸素、ＮＨ、または−Ｎ（アルキル）であるか、あるいは、Ｘ２−Ｒ１４は一緒になって、Ｎ３となるか、またはヘテロ脂環式部分となり；
ｐは、１〜１０（両端を含む）の整数であるが、但し、Ｘ１およびＸ２の少なくとも一つが不存在である場合のみ、ｐは１であってもよく；並びに
Ｒ１４は、Ｈもしくはアリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルヘテロアリール部分であるか、または−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨＲ１５、−（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ１５、もしくは−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ１５であり、Ｒ１５の各々は独立して、Ｈまたは脂肪族基、脂環式基、ヘテロ脂環式基、アリール、またはヘテロアリール部分であるか；あるいはＲ１４は、−ＳＯ２（Ｒ１６）であり、Ｒ１６は脂肪族部分であり；Ｒ１４、Ｒ１５、およびＲ１６のうち一つ以上は、一つ以上のヒドロキシル、保護ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、保護アミノ、−ＮＨ（アルキル）、アミノアルキル、またはハロゲンで適宜置換されており；
Ｒ３は、Ｈ、ヒドロキシル保護基、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニル、ＣＯ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、ＣＯ（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、またはＣＯ（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）であり；
Ｒ４は、Ｈまたはハロゲンであり；並びに
Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、もしくはＣ２−Ｃ４アルキニルであるか、あるいはＲ１およびＲ５は一緒になって、（ＣＨ２）ｎを形成し、ｎは、１、２、３、または４である］
によって表される構造を有する化合物、並びにその医薬的に許容されるエステル、塩、溶媒和物、および水和物。
【請求項２】
Ｒ１が、ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルであり；
Ｒ２が、ＯＨ、保護ヒドロキシル、Ｏ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、Ｏ（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、Ｏ（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、またはＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）であり；
Ｒ３が、Ｈ、ヒドロキシル保護基、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニル、ＣＯ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、ＣＯ（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、またはＣＯ（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）であり；
Ｒ４がＨであり；並びに
Ｒ５がＭｅである、請求項１の化合物。
【請求項３】
式（ＩＩ）：
【化２】
2009536946.tif 000010
（ＩＩ）
によって表される構造を有する、請求項１の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルであり、Ｒ２が、ＯＨ、保護ヒドロキシル、Ｏ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、Ｏ（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、Ｏ（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、またはＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）である、請求項３の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が、ＨまたはＭｅであり、Ｒ２が、Ｈ、Ｏ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、またはＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ１−Ｃ４アルキル）である、請求項４の化合物。
【請求項６】
式ＩＩＩ：
【化３】
2009536946.tif 000011
によって表される構造を有する、請求項１の化合物。
【請求項７】
式ＩＶ：
【化４】
2009536946.tif 000012
によって表される構造を有する、請求項１の化合物。
【請求項８】
請求項１の化合物の治療上の有効量を患者に投与することを特徴とする、少なくとも一つのキナーゼの活性が異常に上昇した細胞の増殖の特徴を有する疾患の患者の治療方法。
【請求項９】
該疾患が、メラノーマ、大腸癌、または乳癌である、請求項８の方法。
【請求項１０】
該疾患がメラノーマまたは大腸癌である、請求項９の方法。
【請求項１１】
該増殖細胞が変異Ｂ−Ｒａｆの特徴を有する、請求項８の方法。
【請求項１２】
該変異Ｂ−ＲａｆがＶ６００Ｅ変異を有する、請求項８の方法。
【請求項１３】
該投与段階の前に該患者をスクリーニングして、該増殖細胞が変異Ｂ−Ｒａｆを有するかどうかを決定する段階をさらに含むことを特徴とする、請求項８の方法。
【請求項１４】
該細胞を請求項１の化合物に接触させることを特徴とする、少なくとも一つのキナーゼの活性が異常に上昇した細胞の増殖の阻害方法。
【請求項１５】
該細胞が変異Ｂ−Ｒａｆを有する、請求項１４の方法。
【請求項１６】
該変異Ｂ−ＲａｆがＶ６００Ｅ変異を有する、請求項１５の方法。
【請求項１７】
該キナーゼを請求項１の化合物に接触させることを特徴とする、活性部位システイン残基を有するキナーゼの阻害方法。
【請求項１８】
該活性部位システイン残基が、該キナーゼのＡＴＰ結合部位における２つのアスパラギン酸残基の間に位置し、かつそのうちの一つに直接隣接している、請求項１７の方法。
【請求項１９】
該キナーゼが、変異Ｂ−Ｒａｆによって活性化される細胞シグナル経路におけるキナーゼである、請求項１７の方法。
【請求項２０】
該キナーゼが、ＡＡＫ１、キナーゼドメイン（ＳＰＥＧ）を有するＡＰＥＧ１スプライスバリアント、ＢＭＰ２Ｋ（ＢＩＫＥ）、ＣＤＫＬ１、ＣＤＫＬ２、ＣＤＫＬ３、ＣＤＫＬ４、ＣＤＫＬ５（ＳＴＫ９）、ＥＲＫ１（ＭＡＰＫ３）、ＥＲＫ２（ＭＡＰＫ１）、ＦＬＴ３、ＧＡＫ、ＧＳＫ３Ａ、ＧＳＫ３Ｂ、ＫＩＴ（ｃＫＩＴ）、ＭＡＰ３Ｋ１４（ＮＩＫ）、ＭＡＰ３Ｋ７（ＴＡＫ１）、ＭＡＰＫ１５（ＥＲＫ８）、ＭＡＰＫＡＰＫ５（ＰＲＡＫ）、ＭＥＫ１（ＭＫＫ１、ＭＡＰ２Ｋ１）、ＭＥＫ２（ＭＫＫ２、ＭＡＰ２Ｋ２）、ＭＥＫ３（ＭＫＫ３、ＭＡＰ２Ｋ３）、ＭＥＫ４（ＭＫＫ４、ＭＡＰ２Ｋ４）、ＭＥＫ５（ＭＫＫ５、ＭＡＰ２Ｋ５）、ＭＥＫ６（ＭＫＫ６、ＭＡＰ２Ｋ６）、ＭＥＫ７（ＭＫＫ７、ＭＡＰ２Ｋ７）、ＭＫＮＫ１（ＭＮＫ１）、ＭＫＮＫ２（ＭＮＫ２、ＧＰＲＫ７）、ＮＬＫ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＰＲＫＤ１（ＰＲＫＣＭ）、ＰＲＫＤ２、ＰＲＫＤ３（ＰＲＫＣＮ）、ＰＲＰＦ４Ｂ（ＰＲＰ４Ｋ）、ＲＰＳ６ＫＡ１（ＲＳＫ１、ＭＡＰＫＡＰＫ１Ａ）、ＲＰＳ６ＫＡ２（ＲＳＫ３、ＭＡＰＫＡＰ１Ｂ）、ＲＰＳ６ＫＡ３（ＲＳＫ２、ＭＡＰＫＡＰ１Ｃ）、ＲＰＳ６ＫＡ６（ＲＳＫ４）、ＳＴＫ３６（ＦＵＳＥＤ＿ＳＴＫ）、ＳＴＹＫ１、ＴＧＦＢＲ２、ＴＯＰＫ、ＶＥＧＦＲ１（ＦＬＴ１）、ＶＥＧＦＲ２（ＫＤＲ）、ＶＥＧＦＲ３（ＦＬＴ４）およびＺＡＫからなる群から選択される、請求項１７の方法。
【請求項２１】
該キナーゼが、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＭＥＫ１、またはＭＥＫ２である、請求項１７の方法。
【請求項２２】
該キナーゼがＥＲＫ２である、請求項１７の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、キナーゼ阻害剤として有用な化合物、並びにその製造方法および使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質キナーゼ（「キナーゼ」）は、リン酸供給源としてのアデノシン三リン酸（「ＡＴＰ」）を用いて他のタンパク質をリン酸化する酵素の大きなファミリーを構成する。これらは、その標的タンパク質において、それぞれセリンおよびチロシン残基におけるヒドロキシル基をリン酸化する、セリンキナーゼおよびチロシンキナーゼを含む。キナーゼはまた、二重機能を発揮することもでき、それはセリンおよびチロシン残基をリン酸化することを意味する。標的タンパク質は、酵素、膜チャネル、または他のタンパク質でありうる。
【０００３】
細胞の活動は、しばしば外部のシグナル分子（例えば、ホルモンまたは分裂促進因子）によって制御され、細胞表面での同族受容体への結合によって、様々な細胞内事象が刺激または阻害される。最初のシグナル分子−受容体相互作用は、細胞内の別のタンパク質相互作用のシグナルカスケード、または細胞−シグナル経路を引き起こし、それはタンパク質のキナーゼ媒介リン酸化（シグナル伝達）に関与することが多い。したがって、分子レベルで、細胞の活動は、関連するキナーゼおよび他のタンパク質（例えば転写因子）のリン酸化（および脱リン酸化）によって制御される。そのように制御される細胞の活動には、細胞増殖、細胞分裂、およびアポトーシスが含まれる。
【０００４】
好ましくない細胞増殖の多くの疾患（例えば、癌、乾癬、再狭窄）は、シグナルカスケードにおける破壊の特徴を有しており、それによって細胞増殖が抑制されなくなる。多くの場合、該破壊は、シグナルカスケードにおいて上流に位置しているタンパク質における単一変異から生じ、それは下流の多数のキナーゼの制御に作用する。したがって、その作用されるキナーゼの阻害は、癌の治療のための基礎として発展してきた。Sausville et al., Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2003, 43, 199-231, 「Signal Transduction-Directed Cancer Treatments」.
【０００５】
レゾルシン酸ラクトン（「ＲＡＬ」）は、レゾルシン酸残基を組み入れた１４員ラクトン環を有する天然物のファミリーであり、その例は、ハイポセマイシン(hypothemycin)：
【化１】
2009536946.tif 000003
である。
【０００６】
ＲＡＬ（およびその半合成もしくは合成類縁体もしくは誘導体）がキナーゼ阻害剤であり、それゆえ、異常なキナーゼ活性の特徴を有する疾患の治療に有用であるという開示がいくつか存在する。例えば、Giese et al., US 5,795,910 (1998); Chiba et al., US 2004/0224493 A1 (2004); およびSanti  et al., US 2006/0079494 A1 (2006)を参照せよ。
【０００７】
本発明は、有効なキナーゼ阻害剤であって、キナーゼの阻害による治療の影響を受けやすい疾患または症状を治療するのに有用である、ＲＡＬ類縁体とみなされうる新規化合物を提供する。
【０００８】
発明の概要
一つの態様において、本発明は、式Ｉ：
【化２】
2009536946.tif 000004
（Ｉ）
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、またはＣ２−Ｃ４アルキニルであり；
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、保護ヒドロキシル、ＯＲ１２、ＳＲ１２、ＮＲ１２Ｒ１３、−Ｘ１（ＣＨ２）ｐＸ２−Ｒ１４であるか、またはヒドロキシル、保護ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、保護アミノ、もしくは−Ｘ１（ＣＨ２）ｐＸ２−Ｒ１４で適宜置換されたアルキルであり；その中で
Ｒ１２およびＲ１３の各々は独立して、Ｈまたは適宜置換された脂肪族基、適宜置換された脂環式基、適宜置換されたヘテロ脂環式基、適宜置換されたアリール、または適宜置換されたヘテロアリール部分またはＮもしくはＳ保護基であるか、あるいはＲ１２およびＲ１３は一緒になって、１〜４個の炭素原子および１〜３個の窒素もしくは酸素原子を含む飽和もしくは不飽和環を形成し；Ｒ１２およびＲ１３の各々は、ヒドロキシル、保護ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、保護アミノ、−ＮＨ（アルキル）、アミノアルキル、またはハロゲンの一つ以上で適宜置換されており；
Ｘ１およびＸ２は各々独立して、不存在、酸素、ＮＨ、または−Ｎ（アルキル）であるか、あるいは、Ｘ２−Ｒ１４は一緒になって、Ｎ３となるか、またはヘテロ脂環式部分となり；
ｐは、１〜１０（両端を含む）の整数であるが、但し、Ｘ１およびＸ２の少なくとも一つが不存在である場合のみ、ｐは１であってもよく；並びに
Ｒ１４は、Ｈもしくはアリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルヘテロアリール部分であるか、または−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨＲ１５、−（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ１５、もしくは−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ１５であり、Ｒ１５の各々は独立して、Ｈまたは脂肪族基、脂環式基、ヘテロ脂環式基、アリール、またはヘテロアリール部分であるか；あるいはＲ１４は、−ＳＯ２（Ｒ１６）であり、Ｒ１６は脂肪族部分であり；Ｒ１４、Ｒ１５、およびＲ１６のうち一つ以上は、一つ以上のヒドロキシル、保護ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、保護アミノ、−ＮＨ（アルキル）、アミノアルキル、またはハロゲンで適宜置換されており；
Ｒ３は、Ｈ、ヒドロキシル保護基、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニル、ＣＯ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、ＣＯ（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、またはＣＯ（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）であり；
Ｒ４は、Ｈまたはハロゲンであり；並びに
Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、もしくはＣ２−Ｃ４アルキニルであるか、あるいはＲ１およびＲ５は一緒になって、（ＣＨ２）ｎを形成し、ｎは、１、２、３、または４である］
によって表される構造を有する化合物、並びにその医薬的に許容されるエステル、塩、溶媒和物、および水和物を提供する。
【０００９】
別の態様において、本発明は、本発明の化合物の治療上の有効量を患者に投与することを特徴とする、少なくとも一つのキナーゼの活性が異常に上昇した細胞の増殖の特徴を有する疾患の患者の治療方法を提供する。好ましくは、そのように治療される疾患は、メラノーマ、大腸癌、または乳癌、特にメラノーマまたは大腸癌である。
【００１０】
別の態様において、本発明は、該細胞を本発明の化合物に接触させることを特徴とする、少なくとも一つのキナーゼの活性が異常に上昇した細胞の増殖の阻害方法を提供する。
【００１１】
別の態様において、本発明は、該キナーゼを本発明の化合物に接触させることを特徴とする、活性部位システイン残基を有するキナーゼの阻害方法を提供する。
【００１２】
別の態様において、本発明は、少なくとも一つのキナーゼの活性が異常に上昇した細胞の増殖の特徴を有する疾患治療剤の製造のための、本発明の化合物の使用を提供する。
【００１３】
発明の詳細な説明
定義
「脂肪族基」とは、特定の数の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖、飽和もしくは不飽和、非芳香族炭化水素部分（例えば、「Ｃ３脂肪族基」、「Ｃ１−Ｃ５脂肪族基」、または「Ｃ１〜Ｃ５脂肪族基」であり、後の２つの用語は、１〜５個の炭素原子を有する脂肪族部分について同義である）を意味するか、または炭素原子の数が特定されていない場合、１〜４個の炭素原子（不飽和脂肪族部分の例では２〜４個の炭素）を意味する。
【００１４】
「アルキル」とは飽和脂肪族部分を意味し、炭素原子の数を示すために同様の慣行(convention)が適用されうる。例として、Ｃ１−Ｃ４アルキル部分には、これらに限らないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｔ−ブチル、１−ブチル、２−ブチルなどが含まれる。
【００１５】
「アルケニル」とは、少なくとも一つの炭素−炭素二重結合を有する脂肪族部分を意味し、炭素原子の数を示すために同様の慣行が適用されうる。例として、Ｃ２−Ｃ４アルケニル部分には、これらに限らないが、エテニル（ビニル）、２−プロペニル（アリルまたはプロパ−２−エニル）、ｃｉｓ−１−プロペニル、ｔｒａｎｓ−１−プロペニル、Ｅ−（またはＺ−）−２−ブテニル、３−ブテニル、１，３−ブタジエニル（ブタ−１，３−ジエニル）などが含まれる。
【００１６】
「アルキニル」とは、少なくとも一つの炭素−炭素三重結合を有する脂肪族部分を意味し、炭素原子の数を示すために同様の慣行が適用されうる。例として、Ｃ２−Ｃ４アルキニル基には、エチニル（アセチレニル）、プロパルギル（プロパ−２−イニル）、１−プロピニル、ブタ−２−イニルなどが含まれる。
【００１７】
「脂環式基」とは、各環が３〜８個（好ましくは、３〜６個）の炭素原子を有する１〜３個の環を有する飽和もしくは不飽和、非芳香族炭化水素部分を意味する。「シクロアルキル」とは、各環が飽和した脂環式部分を意味する。「シクロアルケニル」とは、少なくとも一つの環が少なくとも一つの炭素−炭素二重結合を有する脂環式部分を意味する。「シクロアルキニル」とは、少なくとも一つの環が少なくとも一つの炭素−炭素三重結合を有する脂環式部分を意味する。例として、脂環式部分には、これらに限らないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロオクチル、およびアダマンチルが含まれる。好ましい脂環式部分は、シクロアルキル類、特にシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルである。
【００１８】
「ヘテロ脂環式基」とは、その少なくとも一つの環において、３つまで（好ましくは１〜２個）の炭素が、Ｎ、Ｏ、またはＳから独立して選択されるヘテロ原子で置換されている脂環式部分を意味し、この場合、ＮおよびＳは適宜酸化されていてもよく、Ｎは適宜四級化されていてもよい。同様に、「ヘテロシクロアルキル」、「ヘテロシクロアルケニル」、および「ヘテロシクロアルキニル」とは、それぞれ、その少なくとも一つの環がそのように改変されているシクロアルキル、シクロアルケニル、またはシクロアルキニル部分を意味する。ヘテロ脂環式部分の例には、アジリジニル、アゼチジニル、１，３−ジオキサニル、オキセタニル、テトラヒドロフリル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロチオピラニルスルホン、モルホリニル、チオモルホリニル、チオモルホリニルスルホキシド、チオモルホリニルスルホン、１，３−ジオキソラニル、テトラヒドロ−１，１−ジオキソチエニル、１，４−ジオキサニル、チエタニルなどが含まれる。
【００１９】
「アルコキシ」、「アリールオキシ」、「アルキルチオ」、および「アリールチオ」とは、それぞれ、−Ｏ（アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｓ（アルキル）、および−Ｓ（アリール）を意味する。例は、それぞれ、メトキシ、フェノキシ、メチルチオ、およびフェニルチオである。
【００２０】
「ハロゲン」または「ハロ」とは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
【００２１】
「アリール」とは、各環が３〜７個の炭素原子を有しており、少なくとも一つの環が芳香族である、単環式、二環式、または三環式環構造を有する炭化水素部分を意味する。環構造中の環は、互いに縮合（例えばナフチル）するか、または互いに結合（例えばビフェニル）していてもよく、非芳香族環（例えばインダニルまたはシクロヘキシルフェニル）に縮合または結合していてもよい。さらなる例として、アリール部分には、これらに限らないが、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、フェナントリル、アントラセニル、およびアセナフチルが含まれる。
【００２２】
「ヘテロアリール」とは、各環が３〜７個の炭素原子を有しており、少なくとも一つの環が、Ｎ、Ｏ、またはＳから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含む芳香族環である、単環式、二環式、または三環式環構造を有する部分を意味し、この場合、ＮおよびＳは適宜酸化されていてもよく、Ｎは適宜四級化されていてもよい。このような少なくとも一つのヘテロ原子を含む芳香族環は、他の型の環と縮合（例えばベンゾフラニルまたはテトラヒドロイソキノリル）するか、または他の型の環と直接結合（例えばフェニルピリジルまたは２−シクロペンチルピリジル）していてもよい。さらなる例として、ヘテロアリール部分には、ピロリル、フラニル、チオフェニル（チエニル）、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、Ｎ−オキソピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリニル、イソキノリニル(isoquinolynyl)、キナゾリニル、シンノリニル、キノザリニル(quinozalinyl)、ナフチリジニル、ベンゾフラニル、インドリル、ベンゾチオフェニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、フェノチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ジベンゾフラニル、カルバゾリル、ジベンゾチオフェニル、アクリジニルなどが含まれる。
【００２３】
例えば「置換もしくは無置換」または「適宜置換された」を使用して、「置換もしくは無置換Ｃ１−Ｃ５アルキル」または「適宜置換されたヘテロアリール」のように表現することによって、部分が置換されうることを示す場合、このような部分は、一つ以上、好ましくは１〜５個、より好ましくは１または２個の独立して選択された置換基を有していてもよい。置換基および置換パターンは、置換基が結合する部分を考慮しながら当業者によって選択されて、化学的に安定で、かつ当該技術分野における公知技術によって合成されうる化合物、並びに本明細書で示される方法を提供しうる。
【００２４】
「アリールアルキル」、「（ヘテロ脂環式基）アルキル」、「アリールアルケニル」、「アリールアルキニル」、「ビアリールアルキル」などは、場合によっては、アリール、ヘテロ脂環式基、ビアリールなどで置換されたアルキル、アルケニル、またはアルキニル部分、場合によっては、アルキル、アルケニル、またはアルキニル部分で開いた（満たされていない）原子価を有する部分、例えばベンジル、フェネチル、Ｎ−イミダゾイルエチル、Ｎ−モルホリノエチルなどを意味する。逆に、「アルキルアリール」、「アルケニルシクロアルキル」などは、場合によっては、アルキル、アルケニルなどで置換されたアリール、シクロアルキルなどの部分、場合によっては、例えばメチルフェニル（トリル）またはアリルシクロヘキシルのような部分を意味する。「ヒドロキシアルキル」、「ハロアルキル」、「アルキルアリール」、「シアノアリール」などは、場合によっては、一つ以上の特定された置換基（場合によっては、ヒドロキシル、ハロなど）で置換されたアルキル、アリールなどの部分を意味する。
【００２５】
例として、許容される置換基には、これらに限らないが、アルキル（特にメチルまたはエチル）、アルケニル（特にアリル）、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、脂環式基、ヘテロ脂環式基、ハロ（特にフルオロ）、ハロアルキル（特にトリフルオロメチル）、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル（特にヒドロキシエチル）、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）（特に−ＯＣＦ３）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、−Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ（アルキル）、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（シクロアルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２などが含まれる。
【００２６】
置換される部分が脂肪族部分である場合、好ましい置換基は、アリール、ヘテロアリール、脂環式基、ヘテロ脂環式基、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、−Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ（アルキル）、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（シクロアルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、および−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２である。より好ましい置換基は、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（アリール）、＝Ｏ、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、および−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２である。
【００２７】
置換される部分が、脂環式基、ヘテロ脂環式基、アリール、またはヘテロアリール部分である場合、好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、−Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（シクロアルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、および−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２である。より好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、および−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２である。
【００２８】
「保護ヒドロキシル」または「ヒドロキシル保護基」のような保護基は、化合物上のヒドロキシル基に選択的に結合して、化合物が曝される特定の化学反応条件に対してヒドロキシル基を不活性にし、そのように曝された後、選択的に除去されうる基である。ヒドロキシル保護基の多くの例が知られている。例えば、Greene and Wuts、Protective Groups in Organic Synthesis、3rd edition、pp.17-245 (John Wiley & Sons, New York, 1999)（その開示は本明細書に引用される）を参照せよ。本発明の化合物とともに使用するための適当なヒドロキシル保護基の例には、ｔ−ブチルジメチルシリル（「ＴＢＤＭＳ」または「ＴＢＳ」）、トリエチルシリル（「ＴＥＳ」）およびトリフェニルシリル（「ＴＰＳ」）が含まれる。
【００２９】
「Ｃ１〜Ｃ５アルキル」または「５〜１０％」のように範囲が記載される場合、このような範囲には、範囲の終点または境界が含まれる。
【００３０】
特定の立体異性体が具体的に（例えば、構造式における適切な立体中心での太線もしくは破線の結合により、構造式におけるＥもしくはＺ配置を有する二重結合の描写により、または立体化学を指定する命名法を用いることにより）示されなければ、すべての立体異性体は、純粋な化合物、並びにその混合物として本発明の範囲に含まれる。特に断りがなければ、個々のエナンチオマー、ジアステレオマー、幾何異性体、並びにその組合せおよび混合物は、すべて本発明に含まれる。
【００３１】
「医薬的に許容される塩」とは、医薬製剤に適した化合物の塩を意味する。化合物が一つ以上の塩基性の官能性を有する場合、その塩は、酸付加塩、例えば、硫酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、酢酸塩、パモ酸塩（エンボン酸(embonate)）、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、塩酸塩、乳酸塩、メチル硫酸塩、フマル酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、メシル酸塩、ラクトビオン酸塩、スベリン酸塩、トシル酸塩(tosylate)などでありうる。化合物が一つ以上の酸性部分を有する場合、その塩は、塩、例えば、カルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、アンモニウム塩、亜鉛塩、ピペラジン塩、トロメタミン塩、リチウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、４−フェニルシクロヘキシルアミン塩、ベンザチン塩、ナトリウム塩、テトラメチルアンモニウム塩などでありうる。多形の結晶形および溶媒和物もまた、本発明の範囲内に含まれる。
【００３２】
「治療上の有効量」とは、研究者、獣医、医師または他の臨床医が求めている、組織系、動物またはヒトにおける生物学的応答または医薬的応答を引き出す活性化合物または医薬品の量を意味し、その応答には、治療される疾患または障害の症状の軽減が含まれる。生物学的応答または医薬的応答を引き出すのに必要な活性化合物または医薬品の特定の量は、多数の要因、例えば、これらに限らないが、治療される疾患または障害、投与される活性化合物または医薬品、投与方法、並びに患者の症状に依存する。
【００３３】
化合物および方法
式Ｉによって表される構造を有する化合物の好ましい態様において、Ｒ１は、ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキル（最も好ましくはＨまたはＭｅ）であり；Ｒ２は、ＯＨ、保護ヒドロキシル、Ｏ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、Ｏ（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、Ｏ（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、またはＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）であり；Ｒ３は、Ｈ、ヒドロキシル保護基、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニル、ＣＯ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、ＣＯ（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、またはＣＯ（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）であり；Ｒ４はＨであり；並びにＲ５はＭｅである。
【００３４】
別の好ましい態様において、Ｒ３およびＲ４は、両方ともＨであり、Ｒ５はＭｅであり、式（ＩＩ）：
【化３】
2009536946.tif 000005
（ＩＩ）
［式中、Ｒ１およびＲ４は、上記の発明の概要の節で指定された意味を有する］
によって表される構造を有する化合物に対応する。より好ましくは、Ｒ１は、ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルであり、Ｒ２は、ＯＨ、保護ヒドロキシル、Ｏ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、Ｏ（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、Ｏ（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ２−Ｃ４アルケニル）、またはＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ２−Ｃ４アルキニル）である。さらにより好ましくは、Ｒ１は、ＨまたはＭｅであり、Ｒ２は、ＯＨ、Ｏ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、またはＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ１−Ｃ４アルキル）である。
【００３５】
本発明の特定の化合物は、式ＩＩＩおよびＩＶ（図４において、それぞれ化合物２９および３０としても描かれる）によって表される構造を有する。
【化４】
2009536946.tif 000006
【００３６】
本発明には、本発明の化合物のプロドラッグがその範囲内に含まれる。このようなプロドラッグは、一般に、インビボで必要な化合物に容易に変換されうる化合物の機能性誘導体である。したがって、本発明の治療方法において、用語「投与」には、式Ｉのパラメータの範囲内の化合物を用いるか、またはこのようなパラメータの範囲内でない化合物を用いた、本明細書に記載される様々な障害の治療が含まれるが、それは、治療が必要な患者に投与された後にインビボで特定の化合物に変換される。適当なプロドラッグ誘導体の選択および製造のための通常の手順は、例えば、Wermuth, 「Designing Prodrugs and Bioprecursors」, in Wermuth, ed., The Practice of Medicinal Chemistry, 2nd Ed., pp. 561-586 (Academic Press 2003)に記載されており、その開示は本明細書に引用される。プロドラッグには、インビボで（例えば人体において）加水分解して本発明の化合物またはその塩を生じるエステルが含まれる。適当なエステル基には、これらに限らないが、医薬的に許容される脂肪族カルボン酸、特にアルカン酸、アルケン酸、シクロアルカン酸およびアルカン二酸から誘導されるものが含まれ、その中で、各アルキルまたはアルケニル部分は、好ましくは、６個以下の炭素原子を有する。エステルの例には、これらに限らないが、一つ以上のフェノールの酸素または一つ以上の脂肪族のＯＨ基に結合した、ギ酸エステル、酢酸エステル、プロピオン酸エステル、酪酸エステル、アクリル酸エステル、クエン酸エステル、コハク酸エステル、およびエチルコハク酸エステルが含まれる。
【００３７】
本発明の化合物によって標的とされうる異常に上昇したキナーゼ活性は、多数の方法で発生しうる。キナーゼは正常量で存在しうるが、シグナル経路における上流の破壊によって、その活性が制御されなくなる。あるいは、キナーゼは異常に増加した量で存在しうる。あるいは、キナーゼは、活性であるが、制御シグナルに応答しないように変異されうる。
【００３８】
ｃｉｓ−エノン部分を有するハイポセマイシンおよび他のＲＡＬ類縁体が、キナーゼの共有結合性の阻害剤であることが、サンティ(Santi)ら、米国2006/0079494 A1 (2006)によって提案されており、その活性部位には、キナーゼのＡＴＰ結合部位における２つのアスパラギン酸残基の間に位置し、かつそのうちの一つに直接隣接しているシステイン残基が含まれる。（アスパラギン酸残基はリン酸基と相互作用し、ＡＴＰのリン酸基と複合体を形成している(complexed)Ｍｇ＋２イオンとも相互作用し、キナーゼにおける高度に保存されたモチーフを表している。）彼らは、システインスルフヒドリル基がマイケル反応でエノン二重結合に付加して、不可逆性であるかまたは非常にゆっくりとした可逆性にすぎない（ＲＡＬの代表としてハイポセマイシンを用いて下記で説明される）共有結合付加体(covalent adduct)：
【化５】
2009536946.tif 000007
を形成すると仮定している。彼らは、１２４個のキナーゼのパネル(panel)に対してハイポセマイシンをスクリーニングし、そのうち１９個はこのような活性部位のシステインを有しており、残りは有していなかった。ハイポセマイシンは、２０個のキナーゼを阻害し、そのうちの１８個は活性部位のシステインを有していた。すなわち、ハイポセマイシンは、１９個の活性部位のシステインを有するキナーゼのうち１８個を阻害するが、このような活性部位のシステインを有していない１０５個のキナーゼのうち２個だけを阻害し、これによりマイケル反応の仮説についての実験的なサポートが与えられる。
【００３９】
理論には結びついていないが、本発明の化合物は、類似のメカニズムによってキナーゼに作用しうると考えられる。したがって、一つの好ましい態様において、本発明の化合物によって阻害されるキナーゼは、キナーゼのＡＴＰ結合部位における２つのアスパラギン酸残基の間に位置し、かつそのうちの一つに直接隣接しているシステイン残基を有している。
【００４０】
別の好ましい態様において、本発明の化合物によって阻害される活性部位システインキナーゼは、ＡＡＫ１、キナーゼドメイン（ＳＰＥＧ）を有するＡＰＥＧ１スプライスバリアント、ＢＭＰ２Ｋ（ＢＩＫＥ）、ＣＤＫＬ１、ＣＤＫＬ２、ＣＤＫＬ３、ＣＤＫＬ４、ＣＤＫＬ５（ＳＴＫ９）、ＥＲＫ１（ＭＡＰＫ３）、ＥＲＫ２（ＭＡＰＫ１）、ＦＬＴ３、ＧＡＫ、ＧＳＫ３Ａ、ＧＳＫ３Ｂ、ＫＩＴ（ｃＫＩＴ）、ＭＡＰ３Ｋ１４（ＮＩＫ）、ＭＡＰ３Ｋ７（ＴＡＫ１）、ＭＡＰＫ１５（ＥＲＫ８）、ＭＡＰＫＡＰＫ５（ＰＲＡＫ）、ＭＥＫ１（ＭＫＫ１、ＭＡＰ２Ｋ１）、ＭＥＫ２（ＭＫＫ２、ＭＡＰ２Ｋ２）、ＭＥＫ３（ＭＫＫ３、ＭＡＰ２Ｋ３）、ＭＥＫ４（ＭＫＫ４、ＭＡＰ２Ｋ４）、ＭＥＫ５（ＭＫＫ５、ＭＡＰ２Ｋ５）、ＭＥＫ６（ＭＫＫ６、ＭＡＰ２Ｋ６）、ＭＥＫ７（ＭＫＫ７、ＭＡＰ２Ｋ７）、ＭＫＮＫ１（ＭＮＫ１）、ＭＫＮＫ２（ＭＮＫ２、ＧＰＲＫ７）、ＮＬＫ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＰＲＫＤ１（ＰＲＫＣＭ）、ＰＲＫＤ２、ＰＲＫＤ３（ＰＲＫＣＮ）、ＰＲＰＦ４Ｂ（ＰＲＰ４Ｋ）、ＲＰＳ６ＫＡ１（ＲＳＫ１、ＭＡＰＫＡＰＫ１Ａ）、ＲＰＳ６ＫＡ２（ＲＳＫ３、ＭＡＰＫＡＰ１Ｂ）、ＲＰＳ６ＫＡ３（ＲＳＫ２、ＭＡＰＫＡＰ１Ｃ）、ＲＰＳ６ＫＡ６（ＲＳＫ４）、ＳＴＫ３６（ＦＵＳＥＤ＿ＳＴＫ）、ＳＴＹＫ１、ＴＧＦＢＲ２、ＴＯＰＫ、ＶＥＧＦＲ１（ＦＬＴ１）、ＶＥＧＦＲ２（ＫＤＲ）、ＶＥＧＦＲ３（ＦＬＴ４）およびＺＡＫからなる群から選択される。これらのキナーゼは、上記で論じた２つのアスパラギン酸／システイン活性モチーフを有していると考えられる。
【００４１】
Ｂ−Ｒａｆは、Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ１／２−ＥＲＫ１／２−ＭＡＰ細胞シグナル経路におけるキナーゼである。変異Ｂ−Ｒａｆは、悪性メラノーマの約７０％および大腸癌の２０％に見られ、乳癌においても見られている。一般に、Ｂ−Ｒａｆ変異は、Ｖ６００Ｅ（古い文献ではＶ５９９Ｅ）として表される単一の置換であり、この場合、バリンは、アミノ酸位置６００（古い文献では５９９）でグルタミン酸に置き換えられる。Davies et al., Nature 2002, 417, 949-954, 「Mutations of the BRAF Gene in Human Cancer」。この単一変異は発癌性であり：それは下流のキナーゼＭＥＫ１／２およびＥＲＫ１／２の活性（および細胞増殖）が抑制されないように、シグナル経路を構成的に活性化する。しかしながら、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＭＥＫ１、およびＭＥＫ２は、必要な活性部位システインを有するキナーゼとして、本発明の化合物によって阻害されやすい。したがって、一つの好ましい態様において、本発明の化合物は、Ｂ−Ｒａｆ Ｖ６００Ｅ変異の特徴を有する細胞の増殖を阻害するのに用いられる。この方法において、単一の化合物は、疾患症状に関連する複数の標的分子を阻害しうる。
【００４２】
別の態様において、本発明の化合物は、変異Ｂ−Ｒａｆを有する細胞の増殖の特徴を有する疾患の治療に有用である。好ましくは、治療前に、患者は、増殖細胞でのＢ−Ｒａｆ変異（特にＶ６００Ｅ変異）の存在についてスクリーニングされ、それゆえ、患者が治療に対してポジティブに応答する可能性についてスクリーニングされる。
【００４３】
典型的には、本発明の化合物は、いずれの適当な形態、例えば固形物、半固形物、または液体形態でもありうる医薬組成物または医薬製剤の一部である。一般に、医薬製剤には、活性成分としての一つ以上の本発明の化合物および医薬的に許容される担体もしくは賦形剤が含まれる。典型的には、活性成分は、外用、腸内、または非経口の使用に適した有機または無機の担体または賦形剤との混合物中にある。活性成分は、例えば、通常の無毒の医薬的に許容される担体、例えば、錠剤、ペレット、カプセル剤、坐薬、ペッサリー、溶液、乳濁液、懸濁液、および使用に適したいずれの他の形態と混ぜ合わせてもよい。
【００４４】
用いられうる賦形剤には、担体、界面活性剤、増粘剤もしくは乳化剤、固形結合剤、分散助剤もしくは懸濁助剤、溶解剤、着色料、香料、被覆剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味料、防腐剤、等張剤、およびそれらの組合せが含まれる。適当な賦形剤の選択および使用は、Gennaro, ed., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed. (Lippincott Williams & Wilkins 2003)に記載されており、その開示は本明細書に引用される。
【００４５】
担体物質と混合されて単一製剤を生じうる活性成分の量は、治療される宿主および特定の投与方法に依存して変化する。例えば、ヒトへの経口投与用の製剤には、全組成物の約５パーセントから約９５パーセントまで変化しうる担体物質が含まれうる。一般に、単位製剤には、約５ｍｇ〜約５００ｍｇの活性成分が含まれる。
【００４６】
治療上の有効量の本発明の化合物は、単一用量または分割用量で患者に投与されうる。投与の頻度は、毎日、または他の何らかの規則的なスケジュールに従って（例えば、３日ごとに）、または不規則なスケジュールに従ってでもよい。投与量は、例えば、約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇ（体重）、またはより一般には、約０．１〜約２ｍｇ／ｋｇ（体重）の量であってもよい。
【００４７】
しかしながら、いずれの特定の患者についての特定の用量レベルも、様々な要因に依存しうることが理解される。これらの要因には、用いられる特定の化合物の活性；患者の、年齢、体重、全般的健康状態、性別、および食事；投与の時間および経路、並びに薬物の排出の速度；治療に合剤が用いられているかどうか；並びに治療が求められる特定の疾患または症状の重症度が含まれる。
【００４８】
本発明の方法は、獣医学の目的のために実施されうるが、典型的には対象はヒトであり、別の興味深い哺乳類（例えば、猫、牛、犬、馬など）については単位用量を適当に調節する。
【００４９】
本発明の実施は、限定ではなく例示のために与えられる以下の実施例を引用してさらに理解されうる。
【００５０】
実施例１−臭化ベンジル５
本実施例によって臭化ベンジル５の合成が記載され、それは化合物２９および３０のような本発明の化合物の合成における中間体である。合成反応式を、図１にまとめる。得られた生成物の１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、各々の例において、帰属された構造と一致していた。
【００５１】
ＭＯＭ保護エステル２
２，４−ジヒドロキシ−６−メチル安息香酸エチル１（１５ｇ、７６．４５ｍｍｏｌ）の乾燥ジクロロメタン溶液（「ＤＣＭ」、７５ｍＬ）に、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（「ＤＢＵ」、４５．７ｍＬ、３０５．８ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。溶液は茶色に変わった。クロロメチルメチルエーテル（「ＭＯＭＣｌ」、１４．５ｍＬ、１９１．１ｍｍｏｌ）を０℃で滴下して加えた。反応液を室温（「ＲＴ」）で１２時間攪拌した。ＤＢＵ（２２．３ｍＬ、１５３ｍｍｏｌ）およびＭＯＭＣｌ（７．２５ｍＬ、９５．６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を３５℃で２時間攪拌した。ジエチルエーテル（２００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）を加え、層を分液した。水層をジエチルエーテル（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、水（１００ｍＬ）、５％ ＮａＨＳＯ４（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）、および食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、シリカゲルパッドおよびＭｇＳＯ４を通して濾過し、乾燥するまで蒸発させた。高真空下で乾燥した後、ＭＯＭ保護エステル２を得た（１９．５ｇ）。
【００５２】
ＭＯＭ保護した酸３
ＭＯＭ保護エステル２（５．１２ｇ、１８ｍｍｏｌ）の水（２０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ（２．８８ｇ）を加えた。反応混合物を１８時間、８３℃で加熱した。ＭｅＯＨを除去し、酢酸エチル（「ＥｔＯＡｃ」、５０ｍＬ）を加えた。水相のｐＨをＮａＨＳＯ４（〜９ｇの２０ｍＬ水溶液）でｐＨ ２〜３に調整した。水層をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせて、食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、シリカゲルパッドおよびＭｇＳＯ４を通して濾過し、乾燥するまで蒸発させた。クルードのＭＯＭ保護した酸３をトルエン（２×）と共沸させて、精製することなく次の段階に用いた。
【００５３】
ＴＭＳＥエステル４
ＭＯＭ保護した酸３（〜１８ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（「Ｐｈ３Ｐ」、６．１４ｇ、２３．４ｍｍｏｌ）、およびトリメチルシリルエタノール（「ＴＭＳＥ−ＯＨ」、３．０８ｍＬ、２１．６ｍｍｏｌ）のエーテル（４０ｍＬ）およびトルエン（１２ｍＬ）溶液に、アゾジカルボン酸ジエチル(azadicarboxylate)（「ＤＥＡＤ」、１０．２ｇ、４０％ トルエン溶液）を０℃で滴下して加えた。反応混合物を室温で１２時間攪拌した。ヘキサンを加え、固形物を濾去した。母液を濃縮し、再び濾過し、さらにヘキサンで洗浄した。溶媒を除去し、ＴＭＳＥエステル４（５．０６ｇ）をシリカゲルカラム（１０〜２０％ ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）で精製した。
【００５４】
臭化ベンジル５
ＴＭＳＥエステル４（１０．１６ｇ、２８．０３ｍｍｏｌ）のＣＣｌ４溶液（３００ｍＬ）に、アゾイソブチロニトリル(azaisobutyronitirle)（「ＡＩＢＮ」、０．４６ｇ、２．８ｍｍｏｌ）およびＮ−ブロモコハク酸イミド（「ＮＢＳ」、５．４９ｇ、３０．８３ｍｍｏｌ）を加えた。生じた懸濁液を４回脱気し（窒素を流し(flushing)ながら）、強い光（３ 太陽灯、合計１０００ｗ）で照射した。攪拌した懸濁液を還流するまで急激に加熱し、１時間攪拌して、淡黄色溶液を得た（反応の進行はＮＭＲでモニターした）。室温に冷却した後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（３×３０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）および食塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を無水ＮａＳＯ４で乾燥し、シリカゲルパッドを通して濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液、０％〜２４％ グラジエント）で精製して、無色油として臭化ベンジル５を得た（８．５ｇ、純度６５〜７０％；〜２０％ 出発物質および〜１０％ フェニル臭素化生成物が混入）。
【００５５】
実施例２−テトラヒドロフラン−２−オール８
本実施例によって、テトラヒドロフラン−２−オール８の合成が記載され、それはまた、化合物２９および３０のような本発明の化合物の合成における中間体でもある。合成反応式を図２にまとめる。得られた生成物の１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、各々の例において、帰属された構造と一致していた。
【００５６】
ケタールラクトン７
２，２−ジメトキシプロパン（１２６ｍＬ）およびｐ−トルエンスルホン酸（「ＴＳＡ」、６３３ｍｇ）を、Ｌ−エリトロノ−１，４−ラクトン６（１５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液（「ＤＭＦ」、１５８ｍＬ）に加えた。混合物をＮ２下で２時間還流し、次いで室温で終夜保持した。ＤＣＭ（５００ｍＬ）を加え、有機相を飽和ＮａＨＣＯ３（５×３００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０％〜５０％ 酢酸エチルのヘキサン溶液）の後、ケタールラクトン７を得た（９．８ｇ）。
【００５７】
テトラヒドロフラン−２−オール８
水素化ジイソブチルアルミニウム（「ＤＩＢＡＬ−Ｈ」、１当量、無溶媒）を、ケタールラクトン７（９．８ｇ）のＤＣＭ溶液（１００ｍＬ）に−７８℃で滴下して加えた。反応液を−７８℃で１時間攪拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌでクエンチした。ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）を加え、有機相を飽和ＮＨ４Ｃｌ（２×３００ｍＬ）で洗浄し、食塩水（２×３００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ〜５％ ＭｅＯＨのＤＣＭ溶液）の後、テトラヒドロフラン−２−オール８を得た（７．５ｇ）。
【００５８】
実施例３−アセチレンＴＢＳエーテル１３および１４
本実施例によってアセチレンＴＢＳエーテル１３および１４の合成が記載され、それはそれぞれ化合物２９および３０のような本発明の化合物の合成における中間体である。得られた生成物の１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、各々の例において、帰属された構造と一致していた。
【００５９】
ＴＢＳエーテル１３についての合成反応式を図３ａにまとめる。
【００６０】
アセチレンアルコール１１
リチウムアセチレン−エチレンジアミン複合体（２４．９２ｇ、０．２７１ｍｏｌ）のジメチルスルホキシド溶液（ＤＭＳＯ、２５０ｍＬ）を、（Ｓ）−酸化プロピレン９（１７．３ｍＬ、０．２４６ｍｏｌ）に４℃で滴下して加えた。反応混合物を室温で２４時間攪拌し、氷水に注ぎ、エーテル（４×３６０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、飽和ＮＨ４Ｃｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。クルードのアセチレンアルコール１１（３９ｇ）を得て、精製することなく次の段階に用いた。
【００６１】
アセチレンＴＢＳエーテル１３
イミダゾール（１６．７ｇ、０．２４６ｍｏｌ）および塩化トリブチルシリル（「ＴＢＳＣｌ」、２５ｇ、０．１６６ｍｏｌ）の１０滴を、クルードのアセチレンアルコール１１（３９ｇ、０．１２３ｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（２５０ｍＬ）に室温で加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌した。ヘキサン（６００ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３００ｍＬ）を加え、層を分液した。有機層を水（３×４００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１００％ ヘキサン）の後、クルードのアセチレンＴＢＳエーテル１３を得た（１９ｇ）。
【００６２】
ＴＢＳエーテル１４についての合成反応式を図３ｂにまとめる。全体に、チバ(Chiba)ら，米国２００４／０２２４９３６ Ａ１（２００４）の手順に従った。２つのエナンチオマーを得て、次の段階に用いた。
【００６３】
アセチレンアルコール１２
ｎ−ＢｕＬｉ（１１０ｍＬ、２．５Ｍ）をＴＭＳ−アセチレン（３８．８ｍＬ）のＴＨＦ溶液（１Ｌ）に−６０℃で加えた。反応液を一時的に０℃に加温し、次いで冷却して−６０℃に戻した。次いでＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ（３３．８ｍＬ）をゆっくりと加え、続いてエポキシド１０（１５ｍＬ）を注射器ポンプで２時間かけて加えた。−６０℃で１．５時間攪拌した後、反応混合物を室温に加温し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（５００ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（２×２Ｌ）で抽出した。有機層を合わせて、乾燥し、濃縮した。粗生成物を、４：１ ヘキサン／ＥｔＯＡｃを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、油状物として目的のアセチレンアルコール１２を得た（１３．９ｇ）。
【００６４】
アセチレンＴＢＳエーテル１４
室温でのアルコール１２のジクロロメタン溶液（２８０ｍＬ）に、イミダゾール（１９．２ｇ）を加えた。ＴＢＳＣｌ（３２ｇ）を５滴で加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌した。ヘキサン（７００ｍＬ）を加え、有機層を食塩水（３５０ｍＬ）で洗浄し、次いで水（３×４５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン）で精製して、中間体のＴＢＳ保護ＴＭＳアセチレンを得た（８．７ｇ）。
【００６５】
ＴＢＳ保護ＴＭＳアセチレン（８．７ｇ）およびＫ２ＣＯ３（８ｇ）のメタノール混合溶液（１２０ｍＬ）を室温で５時間攪拌した。混合物を酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、乾燥し、濃縮した。粗生成物を、ヘキサン溶離液を用いたシリカゲルカラムで精製して、無色油としてエーテル１４を得た（６．１７ｇ）。２つのエナンチオマーを得て、次の段階に用いた。
【００６６】
実施例４−化合物２９
本実施例によって、本発明の化合物の一つ、すなわち化合物２９の合成が記載される。合成反応式は図４に示される。得られた生成物の１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、各々の例において、帰属された構造と一致していた。さらに、追加の分析データを化合物２９について得た。
【００６７】
イン−ジオール１５
塩化イソプロピルマグネシウム（３．１３ｍＬ、６．２５ｍｍｏｌ、２．０Ｍ テトラヒドロフラン（「ＴＨＦ」）溶液）を、アセチレンＴＢＳエーテル１３（１．２４ｇ、６．２５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３．１ｍＬ）に０℃で加えた。反応混合物を５０℃に加熱し、その温度で１時間攪拌し、０℃に冷却した。テトラヒドロフラン−２−オール８のＴＨＦ溶液（５ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で４時間攪拌し、飽和ＮａＨ２ＰＯ４（２０ｍＬ）を加えてクエンチした。水層をＥｔＯＡｃ（４×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０％〜４０％ ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）の後、単一のジアステレオマーとしてイン−ジオール１５を得た（２．３３ｇ）。
【００６８】
エン−ジオール１７
リンドラー触媒（２１０ｍｇ）およびキノリン（１０μＬ）をイン−ジオール１５（７８９ｍｇ）のヘキサン溶液（４０ｍＬ）に加えた。反応混合物を脱気し、Ｈ２で３回満たし、Ｈ２下で１時間攪拌した。反応混合物をシリカゲルパッドを通して濾過し、濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０％〜４０％ ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）の後、エン−ジオール１７を得た（７０１ｍｇ）。
【００６９】
アルコール１９
エン−ジオール１７（２．４７ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ溶液（１０ｍＬ）を、ＮａＨ（３４３ｍｇ、８．５６ｍｍｏｌ、鉱油中の６０％、ヘキサンで洗浄）のＴＨＦ懸濁液（１５ｍＬ）に−３０℃でゆっくりと加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌した。−３０℃に冷却した後、臭化ベンジル５のＴＨＦ溶液（６ｍＬ）を滴下して加え、生じた反応混合物を室温で２時間攪拌した。反応をリン酸緩衝液（ｐＨ７、１．０Ｍ、３０ｍＬ）の添加によって止めた。エチルエーテル（１００ｍＬ）を加え、層を分液した。水層をエーテル（２×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５％〜２０％ ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）の後、アルコール１９を得た（８２４ｍｇ、純度８０％）。
【００７０】
安息香酸２１
アルコール１９（４６０ｍｇ、０．６３６ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ溶液（５ｍＬ）に、ジイソプロピルエチルアミン（０．５４４ｍＬ、３．１８ｍｍｏｌ）、安息香酸無水物（２８８ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）、および４−ジメチルアミノピリジン（「ＤＭＡＰ」、７１．３ｍｇ、０．６３６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で６時間攪拌した。反応を飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）およびエチルエーテル（５０ｍＬ）の添加によって止めた。相を分離し、水層をエチルエーテル（２×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン〜１５％ ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）の後、安息香酸２１を得た（５２０ｍｇ）。
【００７１】
ビス−ＭＯＭ環状生成物２３
フッ化テトラブチルアンモニウム（「ＴＢＡＦ」、５ｍＬ、１．０Ｍ ＴＨＦ溶液）を安息香酸２１（５２０ｍｇ、０．６２８ｍｍｏｌ）に室温で加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、次いで４０℃で１５時間攪拌した。反応をＮａＨＳＯ４（３００ｍｇの３０ｍＬ水溶液）およびエチルエーテル（５０ｍＬ）の添加によって止めた。相を分離し、水層をエチルエーテル（２×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、シリカゲルパッドを通して濾過し、濃縮し、トルエン（２×２０ｍＬ）と共沸させ、ＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、４Ａ モレキュラーシーブで２時間乾燥した。粗生成物を精製することなく次の段階に用いた。
【００７２】
上記の粗生成物のＤＣＭ溶液を、ヨウ化２−クロロ−１−メチルピリジニウム（４６０ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミンの還流する乾燥ＤＣＭ溶液（６０ｍＬ）に８時間かけて加えた。反応混合物を１８時間還流した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーの後、２−ＭＯＭ基を失っている環状生成物（３６ｍｇ、「２−脱ＭＯＭ生成物」）、および２−脱ＭＯＭ生成物とビス−ＭＯＭ環状生成物２３の混合物（１１４ｍｇ）を得た。２−脱ＭＯＭ生成物をＤＣＭ中に溶解することによって生成物２３に変換し、ＤＢＵ（２０当量）およびＭＯＭＣｌ（１０当量）を加え、３５℃で５時間攪拌した。反応を、エチルエーテル（１０ｍＬ）および飽和ＮＨ４Ｃｌ（１０ｍＬ）を加えることによってクエンチした。相を分離し、水層をエチルエーテル（２×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。生成物をシリカゲルパッドを通して濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。混合物（１１４ｍｇ）を同様に生成物２３に変換した。粗生成物をさらに精製することなく次の段階に用いた。
【００７３】
脱ベンゾイル化生成物２５
生成物２３（３３ｍｇ）のＥｔＯＨ（１ｍＬ）およびＴＨＦ（１ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ溶液（１ｍＬ、１Ｎ）を加えた。反応混合物を３７℃で１６時間攪拌し、エーテル（２０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）で希釈した。相を分離し、水層をエチルエーテル（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０〜６５％ ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）の後、脱ベンゾイル化生成物２３を得た（１８．２ｍｇ）。
【００７４】
ケトラクトン２７
脱ベンゾイル化生成物２５の乾燥ＤＣＭ溶液（１ｍＬ）に、４Ａ モレキュラーシーブおよびクロロクロム酸ピリジニウム（「ＰＣＣ」）を加えた。反応混合物を室温で１時間攪拌し、ヘキサン（１ｍＬ）で希釈し、シリカゲルパッドおよびセライトを通して濾過し、エーテルで洗浄した。溶媒を除去し、生成物ケトラクトン２７をさらに精製することなく次の段階に用いた。
【００７５】
化合物２９
ケトラクトン２７のアセトニトリル溶液（１ｍＬ）に、フッ化水素酸（０．３３ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１時間攪拌し、ＮａＨＣＯ３（０．９ｇ）のＴＨＦ懸濁液（１０ｍＬ）に加えることによってクエンチした。混合物を室温で１０分間攪拌し、シリカゲルパッドを通して濾過し、ＴＨＦで洗浄した。溶媒を除去し、生成物（３〜４ｍｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（２０％〜７０％ ＴＨＦのヘキサン溶液）で精製した。Ｃ１８プラグ（ＭｅＯＨで洗浄）を通して濾過することによって、非常に極性の低い不純物をいくらか除去した。ＲＡＬ類縁体２９の１Ｈ ＮＭＲおよび１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを、それぞれ図５および６に示す。質量スペクトル：（Ｍ＋Ｎａ＋）＝３７５．１０５４；（Ｍ−Ｈ＋）＝３５１．１４３８．
【００７６】
実施例５−化合物３０
本実施例によって、本発明の別の化合物、すなわち化合物３０の合成が記載される。合成反応式は、図４にも示される。得られた生成物の１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、各々の例において、帰属された構造と一致していた。さらに、追加の分析データを化合物３０について得た。
【００７７】
イン−ジオール１６
塩化イソプロピルマグネシウム（４．４８ｍＬ、８．９６ｍｍｏｌ、２．０Ｍ テトラヒドロフラン（「ＴＨＦ」）溶液）を、アセチレンＴＢＳエーテル１４（１．９ｇ、８．９６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（５ｍＬ）に０℃で加えた。反応混合物を５０℃に加熱し、その温度で１時間攪拌し、０℃に冷却した。テトラヒドロフラン−２−オール８（７３０ｍｇ、４．５６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（６ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、飽和ＮａＨ２ＰＯ４（３５ｍＬ）を加えてクエンチした。水層をＥｔＯＡｃ（４×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。２つのジアステレオマーを得て、次の段階に直接用いた。
【００７８】
エン−ジオール１８
リンドラー触媒（２９２ｍｇ）およびキノリン（１５μＬ）を、イン−ジオール１６（１．１３８ｇ）のヘキサン溶液（５６ｍＬ）に加えた。反応混合物を脱気し、Ｈ２で３回満たし、Ｈ２下で２．５時間攪拌した。反応混合物をシリカゲルパッドを通して濾過し、濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン〜３５％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン グラジエント）による２つのジアステレオマーの分離後、エン−ジオール１８を得た（６８６ｍｇ）。
【００７９】
アルコール２０
カリウムｔ−ブトキシド（１．０Ｍ ＴＨＦ溶液、０．２５１ｍＬ）を、エン−ジオール１８（９０ｍｇ、０．２５１ｍｍｏｌ、１当量）のジメトキシエタン溶液（０．５ｍＬ）に室温で滴下して加えた。混合物を室温で１０分間攪拌した。臭化ベンジル５のＴＨＦ溶液（０．６ｍＬ）を滴下して加えた。室温で３０分間攪拌した後、ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）を加えた。有機相を水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン〜２０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）の後、アルコール２０を得た（１００ｍｇ）。
【００８０】
安息香酸２２
アルコール２０（７００ｍｇ、０．９６３ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＣＭ溶液（１０ｍＬ）に、ジイソプロピルエチルアミン（０．８４ｍＬ、４．８１５ｍｍｏｌ）、安息香酸無水物（４３５ｍｇ、１．９２６ｍｍｏｌ）、および４−ジメチルアミノピリジン（「ＤＭＡＰ」、１１８ｍｇ、０．９６３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で６時間攪拌した。反応を、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）およびエチルエーテル（５０ｍＬ）の添加によって止めた。相を分離し、水層をエチルエーテル（２×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン〜１５％ ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）の後、安息香酸２２を得た（７０５ｍｇ）。
【００８１】
ビス−ＭＯＭ環状生成物２４
安息香酸２２（〜０．３６０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解した。ＴＢＡＦ（１Ｍ ＴＨＦ溶液、３ｍＬ）を加えた。反応混合物を５０℃で５時間攪拌した。ＥｔＯＡｃ（１８０ｍＬ）を加えた。有機相を飽和ＮＨ４Ｃｌ（９０ｍＬ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（２×９０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせたものにトリエチルアミン（１．５ｍＬ）を加え、次いでそれをＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。粗生成物をトリエチルアミンの存在下で３回トルエンと共沸させ、精製することなく次の段階に用いた。粗生成物のＤＣＭ溶液（６０ｍＬ）を、ヨウ化２−クロロ−１−メチルピリジニウム（２７５ｍｇ）およびトリエチルアミン（２５０μＬ）の還流するＤＣＭ溶液（６０ｍＬ）に２時間かけて加えた。反応混合物を４２時間還流した。溶媒を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５〜４５％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン グラジエント）の後、生成物を得た（６０ｍｇ）。
【００８２】
脱ベンゾイル化生成物２６
生成物２４（６０ｍｇ）のＥｔＯＨ（３ｍＬ）およびＴＨＦ（３ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ溶液（３ｍＬ、１Ｎ）を加えた。反応混合物を３７℃で１６時間攪拌し、エーテル（２０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）で希釈した。相を分離し、水層をエチルエーテル（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０〜６５％ ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）の後、脱ベンゾイル化生成物２４を得た（３７ｍｇ）。
【００８３】
ケトラクトン２８
脱ベンゾイル化生成物２６の乾燥ＤＣＭ溶液（１ｍＬ）に、４Ａ モレキュラーシーブおよびクロロクロム酸ピリジニウム（「ＰＣＣ」）を加えた。反応混合物を室温で４時間攪拌し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（３×１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５〜４５％ ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）の後、生成物ケトラクトン２８を得た（２５ｍｇ）。
【００８４】
化合物３０
ケトラクトン２８のアセトニトリル溶液（１７ｍＬ）に、フッ化水素酸（４ｍＬ、４８％）を加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌した。フッ化水素酸（１ｍＬ、４８％）を加え、反応液を室温で１時間攪拌した。反応液をＤＣＭ（３００ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）に注ぎ、気泡が観察されなくなるまで混合物を攪拌した。相を分離し、水層をＤＣＭ（３×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。次いで残渣を高真空下で終夜乾燥した。最終生成物の化合物３０を得た（１９ｍｇ）。その１Ｈ ＮＭＲおよび１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを、それぞれ図７および８に示す。質量スペクトル：（Ｍ＋Ｈ＋）＝３６７．０．
【００８５】
上記で与えられる実施例は、必要な変更を加えて、本発明の他の化合物を製造するために適用されうることを当業者は認識している。例えば、フェノールのヒドロキシル基を官能基化するための周知の技術を適用することによって、Ｒ２またはＲ３がＨである式Ｉの化合物は、これらがＨ以外である式Ｉの化合物の合成のための前駆体として用いられうる。ギーゼ(Giese)ら，米国５，７９５，９１０（１９９８）；チバら，米国２００４／０２２４４９３ Ａ１（２００４）；およびサンティ(Santi)ら，米国２００６／００７９４９４ Ａ１（２００６）に開示される技術が特に引用され、その開示は本明細書に引用され、それは本発明の化合物の製造に適用されうる。
【００８６】
実施例６−生物活性
化合物ＩＩＩおよびＩＶの生物活性を、表Ａにおいて天然物ハイポセマイシンの生物活性に対して比較する。３つの癌細胞株に対する阻害濃度が与えられる。ＣＯＬＯ８２９Ｂは、Ｂ−Ｒａｆ Ｖ６００Ｅ変異を有するヒトメラノーマ癌細胞株である。ＨＴ２９もまた、Ｂ−Ｒａｆ Ｖ６００Ｅ変異を有するヒト大腸癌細胞株である。ＳＫＯＶ３は、野生型Ｂ−Ｒａｆを有するヒト乳癌細胞株である。また、ＥＲＫ２についてのＫｉおよびＫｉｎａｃｔが与えられる。
【表１】
2009536946.tif 000008
【００８７】
ＩＣ５０データによって、本発明の化合物ＩＩＩおよびＩＶが、ＢＲａｆ Ｖ６００Ｅ変異を有する癌細胞の阻害剤として特に有効であることが示される。
【００８８】
前述の発明の詳細な説明には、本発明の特定の部分または態様に主にまたは排他的に関係している一節が含まれる。これが明確さおよび便宜のためのものであること、特定の特徴が、それが開示される一節のみではなくそれ以上に関連しうること、並びに本明細書の開示には、異なる一節に見られる情報の全ての適当な組合せが含まれることが理解されるべきである。同様に、本明細書の様々な数字および記載が本発明の特定の態様に関連しているが、特定の特徴が、特定の数字または態様との関連で開示される場合、このような特徴が、別の数字または態様との関連で、別の特徴と組み合わせて、または概して本発明の中で、適当な範囲で用いられうることもまた理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【００８９】
【図１】図１は、本発明の化合物の合成に利用される中間体を製造するための反応式を示す。
【図２】図２は、本発明の化合物の合成に利用される中間体を製造するための反応式を示す。
【図３ａ】図３ａは、本発明の化合物の合成に利用される中間体を製造するための反応式を示す。
【図３ｂ】図３ｂは、本発明の化合物の合成に利用される中間体を製造するための反応式を示す。
【００９０】
【図４】図４は、図１〜３によって製造される中間体を利用して、本発明の化合物を製造するための反応式を示す。
【００９１】
【図５】図５は、本発明の化合物の１Ｈ ＮＭＲスペクトルを示す。
【図６】図６は、本発明の化合物の１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを示す。
【００９２】
【図７】図７は、本発明の別の化合物の１Ｈ ＮＭＲスペクトルを示す。
【図８】図８は、本発明の別の化合物の１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを示す。
【図１】
2009536946.tif 000014
【図２】
2009536946.tif 000015
【図３ａ】
2009536946.tif 000016
【図３ｂ】
2009536946.tif 000017
【図４】
2009536946.tif 000018
【図５】
2009536946.tif 000019
【図６】
2009536946.tif 000020
【図７】
2009536946.tif 000021
【図８】
2009536946.tif 000022
【手続補正書】
【提出日】平成21年1月14日(2009.1.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2009536946.tif 000023
（Ｉ）
［式中、
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｃ2−Ｃ4アルケニル、またはＣ2−Ｃ4アルキニルであり；
Ｒ2は、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシル、保護ヒドロキシル、ＯＲ12、ＳＲ12、ＮＲ12Ｒ13、−Ｘ1（ＣＨ2）pＸ2−Ｒ14であるか、またはヒドロキシル、保護ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、保護アミノ、もしくは−Ｘ1（ＣＨ2）pＸ2−Ｒ14で適宜置換されたアルキルであり；その中で
Ｒ12およびＲ13の各々は独立して、Ｈまたは適宜置換された脂肪族基、適宜置換された脂環式基、適宜置換されたヘテロ脂環式基、適宜置換されたアリール、または適宜置換されたヘテロアリール部分またはＮもしくはＳ保護基であるか、あるいはＲ12およびＲ13は一緒になって、１〜４個の炭素原子および１〜３個の窒素もしくは酸素原子を含む飽和もしくは不飽和環を形成し；Ｒ12およびＲ13の各々は、ヒドロキシル、保護ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、保護アミノ、−ＮＨ（アルキル）、アミノアルキル、またはハロゲンの一つ以上で適宜置換されており；
Ｘ1およびＸ2は各々独立して、不存在、酸素、ＮＨ、または−Ｎ（アルキル）であるか、あるいは、Ｘ2−Ｒ14は一緒になって、Ｎ3となるか、またはヘテロ脂環式部分となり；
ｐは、１〜１０（両端を含む）の整数であるが、但し、Ｘ1およびＸ2の少なくとも一つが不存在である場合のみ、ｐは１であってもよく；並びに
Ｒ14は、Ｈもしくはアリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルヘテロアリール部分であるか、または−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨＲ15、−（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ15、もしくは−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ15であり、Ｒ15の各々は独立して、Ｈまたは脂肪族基、脂環式基、ヘテロ脂環式基、アリール、またはヘテロアリール部分であるか；あるいはＲ14は、−ＳＯ2（Ｒ16）であり、Ｒ16は脂肪族部分であり；Ｒ14、Ｒ15、およびＲ16のうち一つ以上は、一つ以上のヒドロキシル、保護ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、保護アミノ、−ＮＨ（アルキル）、アミノアルキル、またはハロゲンで適宜置換されており；
Ｒ3は、Ｈ、ヒドロキシル保護基、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｃ2−Ｃ4アルケニル、Ｃ2−Ｃ4アルキニル、ＣＯ（Ｃ1−Ｃ4アルキル）、ＣＯ（Ｃ2−Ｃ4アルケニル）、またはＣＯ（Ｃ2−Ｃ4アルキニル）であり；
Ｒ4は、Ｈまたはハロゲンであり；並びに
Ｒ5は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｃ2−Ｃ4アルケニル、もしくはＣ2−Ｃ4アルキニルであるか、あるいはＲ1およびＲ5は一緒になって、（ＣＨ2）nを形成し、ｎは、１、２、３、または４である］
によって表される構造を有する化合物、並びにその医薬的に許容されるエステル、塩、溶媒和物、および水和物。
【請求項２】
Ｒ1が、ＨまたはＣ1−Ｃ4アルキルであり；
Ｒ2が、ＯＨ、保護ヒドロキシル、Ｏ（Ｃ1−Ｃ4アルキル）、Ｏ（Ｃ2−Ｃ4アルケニル）、Ｏ（Ｃ2−Ｃ4アルキニル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ4アルキル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ2−Ｃ4アルケニル）、またはＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ2−Ｃ4アルキニル）であり；
Ｒ3が、Ｈ、ヒドロキシル保護基、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｃ2−Ｃ4アルケニル、Ｃ2−Ｃ4アルキニル、ＣＯ（Ｃ1−Ｃ4アルキル）、ＣＯ（Ｃ2−Ｃ4アルケニル）、またはＣＯ（Ｃ2−Ｃ4アルキニル）であり；
Ｒ4がＨであり；並びに
Ｒ5がＭｅである、請求項１の化合物。
【請求項３】
式（ＩＩ）：
【化２】
2009536946.tif 000024
（ＩＩ）
によって表される構造を有する、請求項１の化合物。
【請求項４】
Ｒ1が、ＨまたはＣ1−Ｃ4アルキルであり、Ｒ2が、ＯＨ、保護ヒドロキシル、Ｏ（Ｃ1−Ｃ4アルキル）、Ｏ（Ｃ2−Ｃ4アルケニル）、Ｏ（Ｃ2−Ｃ4アルキニル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ4アルキル）、ＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ2−Ｃ4アルケニル）、またはＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ2−Ｃ4アルキニル）である、請求項３の化合物。
【請求項５】
式ＩＩＩ：
【化３】
2009536946.tif 000025
によって表される構造を有する、請求項１の化合物。
【請求項６】
式ＩＶ：
【化４】
2009536946.tif 000026
によって表される構造を有する、請求項１の化合物。
【請求項７】
請求項１の化合物の治療上の有効量を患者に投与することを特徴とする、少なくとも一つのキナーゼの活性が異常に上昇した細胞の増殖の特徴を有する疾患の患者の治療方法。
【請求項８】
該疾患が、メラノーマ、大腸癌、または乳癌である、請求項７の方法。
【請求項９】
該増殖細胞がＶ６００Ｅ変異を有する変異Ｂ−Ｒａｆの特徴を有する、請求項７の方法。
【請求項１０】
該投与段階の前に該患者をスクリーニングして、該増殖細胞が変異Ｂ−Ｒａｆを有するかどうかを決定する段階をさらに含むことを特徴とする、請求項７の方法。
【請求項１１】
該細胞を請求項１の化合物に接触させることを特徴とする、少なくとも一つのキナーゼの活性が異常に上昇した細胞の増殖の阻害方法。
【請求項１２】
該細胞がＶ６００Ｅ変異を有する変異Ｂ−Ｒａｆを有する、請求項１１の方法。
【請求項１３】
該キナーゼを請求項１の化合物に接触させることを特徴とする、活性部位システイン残基を有するキナーゼの阻害方法。
【請求項１４】
該キナーゼが、ＡＡＫ１、キナーゼドメイン（ＳＰＥＧ）を有するＡＰＥＧ１スプライスバリアント、ＢＭＰ２Ｋ（ＢＩＫＥ）、ＣＤＫＬ１、ＣＤＫＬ２、ＣＤＫＬ３、ＣＤＫＬ４、ＣＤＫＬ５（ＳＴＫ９）、ＥＲＫ１（ＭＡＰＫ３）、ＥＲＫ２（ＭＡＰＫ１）、ＦＬＴ３、ＧＡＫ、ＧＳＫ３Ａ、ＧＳＫ３Ｂ、ＫＩＴ（ｃＫＩＴ）、ＭＡＰ３Ｋ１４（ＮＩＫ）、ＭＡＰ３Ｋ７（ＴＡＫ１）、ＭＡＰＫ１５（ＥＲＫ８）、ＭＡＰＫＡＰＫ５（ＰＲＡＫ）、ＭＥＫ１（ＭＫＫ１、ＭＡＰ２Ｋ１）、ＭＥＫ２（ＭＫＫ２、ＭＡＰ２Ｋ２）、ＭＥＫ３（ＭＫＫ３、ＭＡＰ２Ｋ３）、ＭＥＫ４（ＭＫＫ４、ＭＡＰ２Ｋ４）、ＭＥＫ５（ＭＫＫ５、ＭＡＰ２Ｋ５）、ＭＥＫ６（ＭＫＫ６、ＭＡＰ２Ｋ６）、ＭＥＫ７（ＭＫＫ７、ＭＡＰ２Ｋ７）、ＭＫＮＫ１（ＭＮＫ１）、ＭＫＮＫ２（ＭＮＫ２、ＧＰＲＫ７）、ＮＬＫ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＰＲＫＤ１（ＰＲＫＣＭ）、ＰＲＫＤ２、ＰＲＫＤ３（ＰＲＫＣＮ）、ＰＲＰＦ４Ｂ（ＰＲＰ４Ｋ）、ＲＰＳ６ＫＡ１（ＲＳＫ１、ＭＡＰＫＡＰＫ１Ａ）、ＲＰＳ６ＫＡ２（ＲＳＫ３、ＭＡＰＫＡＰ１Ｂ）、ＲＰＳ６ＫＡ３（ＲＳＫ２、ＭＡＰＫＡＰ１Ｃ）、ＲＰＳ６ＫＡ６（ＲＳＫ４）、ＳＴＫ３６（ＦＵＳＥＤ＿ＳＴＫ）、ＳＴＹＫ１、ＴＧＦＢＲ２、ＴＯＰＫ、ＶＥＧＦＲ１（ＦＬＴ１）、ＶＥＧＦＲ２（ＫＤＲ）、ＶＥＧＦＲ３（ＦＬＴ４）およびＺＡＫからなる群から選択される、請求項１３の方法。
【請求項１５】
該キナーゼが、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＭＥＫ１、またはＭＥＫ２である、請求項１３の方法。
【国際調査報告】
2009536946.tif 000027