(57)【要約】  本発明は、１つまたは複数の遺伝形質を、前記遺伝形質を有する紫花のトウガラシ属（Ｃａｐｓｉｃｕｍ）種の植物から白花のトウガラシ属種の植物へ転移させるための方法であって、（ａ）前記遺伝形質を有する紫花のトウガラシ属種の第１の植物と、別の紫花のトウガラシ属種の第２の植物とを交雑させ、前記遺伝形質を有する植物を選択することによって、前記遺伝形質を有する第１の雑種植物を作成する工程と、（ｂ）前記遺伝形質を有する前記第１の雑種植物と白花のトウガラシ属種の第１の植物とを交雑させることによって、第２の雑種植物を作成する工程と、（ｃ）前記第２の雑種植物と前記遺伝形質を有する前記紫花のトウガラシ属種の前記第１の植物とを交雑させ、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択する工程と、（ｄ）工程（ｃ）において入手された植物と前記白花のトウガラシ属種の第２の植物とを交雑させ、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択することによって第３の雑種植物を作成する工程とを含む方法に関する。本発明は、植物自体、ならびに前記植物に由来する果実、種子および他の植物部分にもさらに関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
１つまたは複数の遺伝形質を、前記遺伝形質を有する紫花のトウガラシ属（Ｃａｐｓｉｃｕｍ）種の植物から、白花のトウガラシ属種の植物へ転移させるための方法であって、
（ａ）前記遺伝形質を有する紫花のトウガラシ属種の第１の植物と、別の紫花のトウガラシ属種の第２の植物とを交雑させて、前記遺伝形質を有する植物を選択することによって、前記遺伝形質を有する第１の雑種植物を作成する工程と、
（ｂ）前記遺伝形質を有する前記第１の雑種植物と、白花のトウガラシ属種の第１の植物とを交雑させることによって、第２の雑種植物を作成する工程と、
（ｃ）前記第２の雑種植物と、前記遺伝形質を有する紫花のトウガラシ属種の前記第１の植物とを交雑させて、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択する工程と、
（ｄ）工程（ｃ）において入手された植物と、白花のトウガラシ属種の第２の植物とを交雑させて、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択することによって第３の雑種植物を作成する工程と
を含む方法。
【請求項２】
（ｅ）工程（ｄ）において入手された、前記遺伝形質を有さない植物を選択し、これらの植物と、前記遺伝形質を有する紫花のトウガラシ属種の前記第１の植物とを交雑させ、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択する工程と、
（ｆ）工程（ｅ）において入手された植物と、白花のトウガラシ属種の第２の植物とを交雑させ、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択することによって、第４の雑種植物を作成する工程と
をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
（ｅ）前記遺伝形質を有する第４の雑種植物と、前記白花のトウガラシ属種の第２の植物とを交雑させ、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択することによって、第５の雑種植物を作成する工程をさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
工程（ｂ）の後に、前記第２の雑種植物は自家受粉しており、その子孫が工程（ｃ）において使用される、請求項１、２または３に記載の方法。
【請求項５】
工程（ｃ）において入手された前記植物は自家受粉しており、その子孫が工程（ｄ）において使用される、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
工程（ｄ）において入手された前記植物は自家受粉しており、その子孫が工程（ｅ）において使用される、請求項２〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
工程（ｅ）において入手された前記植物は、自家受粉しており、その子孫が工程（ｆ）において使用される、請求項２〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記紫花のトウガラシ属種の前記第１の植物は、Ｃ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｃ．ｅｘｉｍｉｕｍ、およびＣ．ｃａｒｄｅｎａｓｉｉからなる群から選択される、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
前記紫花のトウガラシ属種の前記第１の植物は、Ｃ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記紫花のトウガラシ属種の前記第２の植物は、Ｃ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｃ．ｅｘｉｍｉｕｍ、およびＣ．ｃａｒｄｅｎａｓｉｉからなる群から選択される、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記紫花のトウガラシ属種の前記第２の植物は、Ｃ．ｅｘｉｍｉｕｍである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記白花のトウガラシ属種の前記第１の植物は、Ｃ．ｂａｃｃａｔｕｍ、Ｃ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅおよびＣ．ａｎｎｕｕｍからなる群から選択される、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記白花のトウガラシ属種の前記第１の植物は、Ｃ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記白花のトウガラシ属種の前記第２の植物は、Ｃ．ｂａｃｃａｔｕｍ、Ｃ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅおよびＣ．ａｎｎｕｕｍからなる群から選択される、請求項１〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記白花のトウガラシ属種の前記第２の植物は、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅおよびＣ．ａｎｎｕｕｍの雑種である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記遺伝形質は、トウガラシ属の病害に対する耐性遺伝子である、請求項１〜１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
前記耐性遺伝子は、細菌性病害であるＸａｎｔｈｏｍａｎａｓ  ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ  ｐｖ．ｖｅｓｉｃａｔｏｒｉａのレースＩ、ＩＩＩおよびＩＶに対する耐性を運ぶＢｓ４遺伝子である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれかの方法によって入手可能な植物。
【請求項１９】
前記紫花のトウガラシ属種の植物に由来する遺伝形質を有する、白花のトウガラシ属種の植物。
【請求項２０】
Ｃ．ｂａｃｃａｔｕｍ、Ｃ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ、Ｃ．ａｎｎｕｕｍ、およびそれらの雑種からなる群から選択される、請求項１８または１９に記載の植物。
【請求項２１】
前記植物は、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ、Ｃ．ａｎｎｕｕｍおよび／またはそれらの雑種である、請求項１８、１９または２０に記載の植物。
【請求項２２】
前記遺伝形質は、トウガラシ属の病害に対する耐性遺伝子である、請求項１８〜２１のいずれかに記載の植物。
【請求項２３】
前記耐性遺伝子は、細菌性病害であるＸａｎｔｈｏｍａｎａｓ  ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ  ｐｖ．ｖｅｓｉｃａｔｏｒｉａのレースＩ、ＩＩＩおよびＩＶに対する耐性を運ぶＢｓ４遺伝子である、請求項２２に記載の植物。
【請求項２４】
請求項１８〜２３に記載の植物に由来する果実、種子および植物部分。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、１つまたは複数の遺伝形質を、前記遺伝形質を有する紫花のトウガラシ属（Ｃａｐｓｉｃｕｍ）種の植物から、白花のトウガラシ属種の植物へ転移させるための方法に関する。本発明はさらに、植物自体、ならびに前記植物に由来する果実、種子および他の植物部分にも関する。
【背景技術】
【０００２】
トウガラシ属は、ナス科（Ｓｏｌａｎａｃｅａｅ）の大きな科に属する。トウガラシ属群のいくつかの種は、世界中の多数の国々において露地または保護された条件下で栽培されている貴重な作物である。辛みのある果実を含むトウガラシ属の種類は、一般に、生で、乾燥もしくは抽出してのいずれかで香辛料として使用されている。一般に甘唐辛子として知られている極めて様々な形状および色がある辛みのない果実を含む種は、野菜として広範囲に使用されている。
【０００３】
トウガラシ属は、花の色に基づいて２つの別個の群：例えば、近縁種であるＣ．ａｎｎｕｕｍ（トウガラシ；カプシカム・アンヌム）、Ｃ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ（キダチトウガラシ；カプシカム・フルテセンス）、Ｃ．ｂａｃｃａｔｕｍ（アヒ・アマリージョ；カプシカム・バカタム）、Ｃ．ｃｈａｃｏｅｎｓｅ、Ｃ．ｇａｌａｐａｇｏｅｎｓｅ、Ｃ．ｐｒａｅｔｅｒｍｉｓｓｕｍおよびＣ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ（カプシカム・シネンセ）を含む白花群と、例えばＣ．ｔｏｖａｒｉｉ、Ｃ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ（ロトコ；カプシカム・パブセンス）、Ｃ．ｅｘｉｍｉｕｍ（カプシカム・エキシミウム）およびＣ．ｃａｒｄｅｎａｓｉｉ（ウルピカ；カプシカム・カルデナシ）を含む紫花群とに分類することができる。白花群の中では、Ｃａｐｓｉｃｕｍ  ａｎｎｕｕｍ、およびその近縁種であるＣ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓが最もよく知られている栽培化された種類であり、これらは主として加工用および消費用の甘唐辛子や唐辛子を生産するために使用されている。
【０００４】
トウガラシ属は、他の植物と同様に、昆虫、線虫、真菌、細菌およびウイルスを含む多数の害虫や病害に攻撃される。そのような細菌性病害の１つは、細菌であるＸａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ  ｐｖ．ｖｅｓｉｃａｔｏｒｉａ（キサントモナス・カンペリストリス、病原菌型、斑点細菌病）によって誘発される細菌性斑点病である。トウガラシ属の細菌性斑点病は、葉上についた無数の角斑によって認識できる。初期には、斑点は水浸状である。初期段階で感染した葉は変形し始める。しばしば罹患した葉の辺縁は細い帯状の壊死性組織で縁取られる。感染したトウガラシ属の葉は、早期に落葉し、それによって果実は太陽に曝され、結果として日焼けが生じ、これに続発して果実腐敗や収量低下が生じることがある。トウガラシ属の果実が症状を示すことはまれであるが、早期に感染した場合は落果することがある。
【０００５】
Ｘ．ｖｅｓｉｃａｔｏｒｉａは、温暖な国々や熱帯諸国において、特に屋外栽培作物であるトウガラシ属に蔓延していて損害を与えているので、大きな経済的影響を及ぼしている。この病害の制御は、主として健全な（処理済み）種子からの植物の生産および全シーズン中に講じられる予防手段に頼っている。
【０００６】
そのような病害に対する有用な耐性、ならびに果実の品質特性などの他の形質は、固有かつ特異的な形質（例えば、細菌Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  ｖｅｓｉｃａｔｏｒｉａの特定のレースに対する、白花種には存在しない耐性など）を有する、例えばＣ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓなどのトウガラシ属の野生種もしくは他の栽培化された種に存在する可能性がある。そこで、任意の耐性遺伝子などの好都合の遺伝形質を、例えば遠縁種である紫花のＣ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓから、例えばＣ．ａｎｎｕｕｍおよび／またはＣ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓなどの一般に使用される白花種へ転移させることは有益な可能性がある。
【０００７】
しかし、トウガラシ属の相違する種間には、程度の相違する強固な交雑障壁があることは周知である。交雑が不可能であるものがあることも実証されており、他の交雑は、胚培養（ｅｍｂｒｙｏ  ｒｅｓｃｕｅ）などのインビトロ培養法を用いた場合にのみ可能である。さらに、ほとんどの場合に、前記交雑に由来する産物は、完全または部分的に無菌であるため、あらゆるその後の繁殖目的に使用することが不可能になる。
【０００８】
このため、それにより所望の遺伝形質を相違する紫花と白花のトウガラシ属種間で転移させることのできる方法に対する必要が存在する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、例えば耐性遺伝子などであるがそれには限定されない１つまたは複数の遺伝形質を、紫花のトウガラシ属種の植物から白花のトウガラシ属種の植物へ転移させるための方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
これは、
（ａ）遺伝形質を有する紫花のトウガラシ属種の第１の植物と、別の紫花のトウガラシ属種の第２の植物とを交雑させ、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択することによって、前記遺伝形質を有する第１の雑種植物を作成する工程と、
（ｂ）前記遺伝形質を有する前記第１の雑種植物と、白花のトウガラシ属種の第１の植物とを交雑させることによって、第２の雑種植物を作成する工程と、
（ｃ）前記第２の雑種植物と、前記遺伝形質を有する紫花のトウガラシ属種の前記第１の植物とを交雑させ、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択する工程と、
（ｄ）工程（ｃ）において入手された植物と、白花のトウガラシ属種の第２の植物とを交雑させ、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択することによって、第３の雑種植物を作成する工程と、を含む方法を提供することによって達成される。
【００１１】
本発明によると、最初に１つの遺伝形質が紫花のトウガラシ属種から白花のトウガラシ属種へ首尾よく転移される。本発明の方法は、数種の種間交雑の適切な組み合わせ、ならびに次の種への一種の橋として機能する交雑（図１）に基づいている。所望の遺伝形質は、例えば、当業者に知られている周知の分子生物学的手法にしたがって、分子マーカーもしくはバイオアッセイによって追跡することができる。
【００１２】
本発明の好ましい実施形態によると、本方法はさらに、
（ｅ）工程（ｄ）において入手された、前記遺伝形質を有さない植物を選択して、これらの植物と、前記遺伝形質を有する紫花のトウガラシ属種の前記第１の植物とを交雑させ、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択する工程と、
（ｆ）工程（ｅ）において入手された植物と、前記白花のトウガラシ属種の第２の植物とを交雑させ、その子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択することによって第４の雑種植物を作成する工程と
を含む。このようにすると、本発明の方法の工程（ｄ）において入手される前記遺伝形質を有さない植物も、依然として本発明の方法においてさらに使用できる。
【００１３】
さらに好ましい実施形態によると、本方法は、
（ｇ）前記遺伝形質を有する第４の雑種植物と、白花のトウガラシ属種の第２の植物とを交雑させ、そしてその子孫から前記遺伝形質を有する植物を選択することによって第５の雑種植物を作成する工程をさらに含む。そのようにして、紫花のトウガラシ属種に由来する目的とする前記遺伝形質を有するが、白花種のすべての品質態様も含む安定性の白花植物が入手される。
【００１４】
好ましくは、工程（ｂ）の後に、第２の雑種植物を自家受粉させ、その子孫は、工程（ｃ）において、前記耐性を確定するため、繁殖能力の態様を改良するため、そしてホモ接合型の、所望の形質を有する遺伝的に安定性の植物を入手するために使用される。
【００１５】
また別の好ましい実施形態によると、工程（ｃ）において入手された植物を自家受粉させ、その子孫は、工程（ｄ）において、同様に前記耐性を確定するため、繁殖能力の態様を改良するため、そしてホモ接合型の、所望の形質を有する遺伝的に安定性の植物を入手するために使用される。
【００１６】
さらに、他の好ましい実施形態によると、工程（ｄ）において入手された植物を自家受粉させ、その子孫は工程（ｅ）において使用される、および／または工程（ｅ）において入手された植物を自家受粉させ、その子孫は工程（ｆ）において使用される。
【００１７】
本発明によると、雑種植物を入手すること、またはプロセスの速度を高めることに関して本プロセスに対して胚培養法が有益である場合は、常に適用される。
【００１８】
好ましくは、紫花のトウガラシ属種の第１の植物は、Ｃ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｃ．ｅｘｉｍｉｕｍ、およびＣ．ｃａｒｄｅｎａｓｉｉからなる群から選択され、より好ましくは、紫花のトウガラシ属種の第１の植物はＣ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓである。トウガラシ属における最長の遺伝距離は、Ｃ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓとＣ．ａｎｎｕｕｍ／ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓとの間である。これらの種間の直接交雑は、今までは、胚培養法を用いた場合でさえ不可能であることが実証されていた。しかし、本発明の方法を使用することによって、完全に新規の遺伝子プールがＣ．ａｎｎｕｕｍおよび／またはＣ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓの種を利用できるようになる。
【００１９】
本発明によると、紫花のトウガラシ属種の第２の植物は、Ｃ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｃ．ｅｘｉｍｉｕｍ、およびＣ．ｃａｒｄｅｎａｓｉｉからなる群から選択され、好ましくは、紫花のトウガラシ属種の第２の植物は、Ｃ．ｅｘｉｍｉｕｍもしくはＣ．ｃａｒｄｅｎａｓｉｉ、好ましくはＣ．ｅｘｉｍｉｕｍである。好ましくは、第１の植物は、紫花のトウガラシ属種の第２の植物とは別の種から選択される。
【００２０】
本発明の好ましい実施形態では、白花のトウガラシ属種の第１の植物は、Ｃ．ｂａｃｃａｔｕｍ、Ｃ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ、Ｃ．ａｎｎｕｕｍ、およびそれらの雑種からなる群から選択される。好ましくは、白花のトウガラシ属種の第１の植物は、Ｃ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓである。
【００２１】
白花のトウガラシ属種の第２の植物は、好ましくはＣ．ｂａｃｃａｔｕｍ、Ｃ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅおよびＣ．ａｎｎｕｕｍ、ならびにそれらの雑種からなる群から選択され、より好ましくは、白花のトウガラシ属種の第２の植物は、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ、Ｃ．ａｎｎｕｕｍおよび／またはそれらの雑種である。
【００２２】
本発明によると、雑種は、トウガラシ属の２つの相違する種間の交雑、例えばＣ．ｃｈｉｎｅｎｓｅの種の植物とＣ．ａｎｎｕｕｍ種の植物との間の交雑から入手される植物（種間交雑）、または単一種の個体群内の交雑もしくは単一種の栽培品種内の交雑から入手される植物（種内交雑）である。
【００２３】
本発明のまた別の好ましい実施形態によると、前記遺伝形質は、トウガラシ属のすべての栽培化された種を攻撃する特定のトウガラシ属の病害に対する耐性遺伝子である。１つまたは複数の耐性遺伝子をトウガラシ属の遠縁種から一般に使用される天然にはそのような耐性遺伝子を有していない種へ転移させることによって、新規の耐性植物が提供される。結果として、例えば環境上望ましくない化学処理の使用を減らす、または放棄することさえできる。しかし、他の耐性遺伝子、例えば形状、味質および色などの果実品質特性、収量の改善、着果、および非生物的ストレス（例、低温／塩）に対する耐性などの他の遺伝形質もまた、本発明の方法を用いると転移させることができる。
【００２４】
特定の好ましい実施形態では、耐性遺伝子は、細菌性病害であるＸａｎｔｈｏｍａｎａｓ  ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ  ｐｖ．ｖｅｓｉｃａｔｏｒｉａのレースＩ、ＩＩ、ＩＶおよびＶＩに対する耐性を運ぶＢｓ４遺伝子である。
【００２５】
本発明は、上述した方法によって入手できる植物にさらに関する。
【００２６】
詳細には、本発明は、紫花のトウガラシ属種の植物に由来する遺伝形質を有する白花のトウガラシ属種の植物に関しており、前記植物は前記白花種には通常は存在しない遺伝形質を有する。
【００２７】
好ましい実施形態では、前記植物は、Ｃ．ｂａｃｃａｔｕｍ、Ｃ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ、Ｃ．ａｎｎｕｕｍ、およびそれらの雑種からなる群から選択され、好ましくは、前記植物は、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ、Ｃ．ａｎｎｕｕｍおよび／またはそれらの雑種である。
【００２８】
本発明の好ましい実施形態によると、前記遺伝形質はトウガラシ属の病害に対する耐性遺伝子であり、詳細には、前記耐性遺伝子は、細菌性病害であるＸａｎｔｈｏｍａｎａｓ  ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ  ｐｖ．ｖｅｓｉｃａｔｏｒｉａのレースＩ、ＩＩ、ＩＶおよびＶＩに対する耐性を運ぶＢｓ４遺伝子である。
【００２９】
さらに本発明は、上述した植物に由来する果実、種子、およびその他の植物部分に関するが、他の植物部分は、種子、挿し木、ほふく茎、および分裂組織からなる群から選択されてよい。
【００３０】
以下では、本発明を実施例および図面によって例示するが、これらは決して本発明の範囲を限定することを意図していない。
【実施例】
【００３１】
方法
種子をバーミキュライト（ｖｅｒｍｉｃｕｌａｔｅ）上にまき、ロックウール製ブロック内に鉢植えし、成長させ、開花するまで繁殖させた。花のつぼみから除雄し、選択した父系（ｆａｔｈｅｒｌｉｎｅ）を用いて受粉させた。受粉後２４〜２８日の間に果実を採取し、表面を殺菌し、無菌条件下で開いた。全種子からの胚を無菌的に単離し、Ｓｉｂｉ  ｅｔ  ａｌ．，（Ａｎｎ．Ａｍｅｌｉｏｒ．Ｐｌａｎｔｅｓ，２９：５８３−６０６，１９７９）によって記載されたように胚培養（ＥＲ）培地へ移した。１〜２週間後にしっかりと発育した植物を０．８％の寒天および２０ｇ／Ｌのスクロースが補給されたＭＳ培地（Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ  Ｔ．ａｎｄ  Ｓｋｏｏｇ  Ｆ．，Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｌａｎｔ  １５：４７３−４９７，１９６２）に移植した。その後にしっかりと発育した根系を備える植物を温室へ移し、その状態に慎重に適応させた。
【００３２】
４〜６週齢の植物の葉を切り取り、耐性植物を選択するためにＸａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ  ｖｅｓｉｃａｔｏｒｉａのレースＶＩを接種した。細菌クローンを冷凍庫内に保存し、１週間にわたり寒天培地上で増殖させた後に２２℃で接種した。接種用の懸濁液は、細菌を脱ミネラル水中に再懸濁させることによって作成する。細菌懸濁液は、シリンジを用いて葉に塗布した。接種した葉は、２２℃の気候室内で２日間にわたりガラスで覆った箱の中に保持する。耐性植物の葉は、過敏反応（ＨＲ）によって誘発された接種部位での炭褐色の乾燥した斑点を示す。感受性植物の葉は、接種時点に依存して接種部位での反応を示さないか、または水浸状病変を示す。そこで過敏反応の欠如は、Ｂｓ４遺伝子の不在の指標である。耐性コントロールはＣ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ  ＰＩ２３５０４７であり、感受性コントロールは感受性のＣ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓアクセッションである。
【００３３】
交雑：
第１の雑種植物は、Ｂｓ４耐性遺伝子を含むＣａｐｓｉｃｕｍ  ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ  ＰＩ２３５０４７（雄性、図２Ｂ）（米国農務省）とＣａｐｓｉｃｕｍ  ｅｘｉｍｉｕｍ（雌性、図２Ａ）とを交雑させることによって作成した。前記耐性遺伝子を含む３７種の雑種植物（図３Ａ）が得られた。
【００３４】
第２の雑種植物は、その後にＣ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ  ＰＩ２３８０５９（雄性、図３Ｂ）と耐性遺伝子を含む第１の雑種植物（雌性）とを交雑させることによって作成した。この交雑に由来する第２の雑種植物は、いずれも耐性を示さなかった。
【００３５】
続いて、第２の雑種植物（雌性、図４Ａ）とＣａｐｓｉｃｕｍ  ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ  ＰＩ２３５０４７（雄性）とを交雑させた。２種の耐性植物が得られた。これらの植物は繁殖能力があったので、Ｆ２種子が得られた。
【００３６】
さらに、Ｃ．ａｎｎｕｕｍ（図４Ｂ）とＣ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ（図４Ｃ）との雑種は、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ  ＰＢＣ３０６（アジア野菜研究開発センター）の個体とＣ．ａｎｎｕｕｍ植物の個体とを交雑させることによって作製した。この交雑の産物を再びＣ．ａｎｎｕｕｍと交雑させた。その後にＦ２種子を入手した。
【００３７】
続いて、第３の雑種植物（図５）は、第２の雑種植物とＣ．ｃａｐｓｉｃｕｍもしくはそれらのＦ２種子に由来に由来する植物との交雑に由来する耐性植物とＣ．ａｎｎｕｕｍ／Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ雑種のＦ２種子に由来する植物とを交雑させる工程によって作成した。この交雑からの耐性産物をさらに純粋Ｃ．ａｎｎｕｕｍ系と交雑させた。
【００３８】
さらに、Ｘｃｖ６に対して感受性である前記交雑由来の植物を再びＣ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ  ＰＩ２３５０４７と交雑させた。次に、その交雑に由来する耐性植物を自家受粉させ、Ｆ２種子を入手した。その交雑に由来する耐性植物をその後に雑種Ａｂｄｅｒａ  ＡＭＡ１２に由来する系と交雑させた。この雑種は、Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅとＣ．ａｎｎｕｕｍとの交雑である。前記最終交雑の結果として生じた耐性植物を自家受粉させ、Ｆ２種子を入手した。さらに、最後に言及したＰＩ２３５０４７との交雑の自家受粉に由来する植物をさらにいくつかのＣ．ａｎｎｕｕｍ親系と交雑させた。
【００３９】
結果として、Ｃ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓに由来するＢｓ４耐性遺伝子を有するＣ．ａｎｎｕｕｍ植物が得られた（図６）。これらの結果は、本発明の方法を用いると、紫花のトウガラシ属種由来の形質を白花のトウガラシ属種へ導入するのが可能であることを証明している。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】本発明の方法の各工程を示している略図である。
【図２】本発明の方法の好ましい実施形態の第１工程において使用される、Ｃ．ｅｘｉｍｉｕｍ植物（Ａ）および所望の耐性遺伝子を備えるＣ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ  ＰＩ２３５０４７（Ｂ）植物の写真である。
【図３Ａ】第１の雑種植物、すなわち本発明の方法の第１工程において入手される産物の例を示した図である。
【図３Ｂ】Ｃ．ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ  ＰＩ２３８０５９の写真である。
【図４】第２の雑種植物（Ａ）の例、ならびにＣ．ａｎｎｕｕｍ（Ｂ）およびＣ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ（Ｃ）の写真である。
【図５】自家受粉（（Ｃ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ×Ｃ．ｅｘｉｍｉｕｍ）×Ｃ．ｆｒｕｔｅｃｅｎｓ）×（Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ×Ｃ．ａｎｎｕｕｍ）の産物の写真である。
【図６】Ｃ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ由来の耐性遺伝子を有するＣ．ａｎｎｕｕｍ植物を示した図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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2009508498.tif 000010
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