(57)【要約】  本発明は、置換ピリジンカルボキサミド、それらの製造のための方法、およびヒトおよび動物における疾患、とりわけ血栓症の処置および／または予防のための薬剤の製造のためのそれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
2009501740.tif 000057
〔式中、
Ｘは式
【化２】
2009501740.tif 000058
｛ここで、
＊はカルボニル基に結合する位置であり、
＃は酸素原子に結合する位置であり、
そして
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は互いに独立して水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニルまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルである｝の基であり、
Ｙはフェニルまたはピリジルであり
｛ここで、フェニルおよびピリジルは１から３個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニルおよびＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルからなる群から選択される）｝、
ｎは０、１、２または３の数であり、
Ｒ１はフェニルまたは５−もしくは６−員ヘテロアリールである
｛ここで、フェニルおよびヘテロアリールは１から３個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ６−アルキルスルホニルアミノからなる群から選択される）｝〕
で示される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物の１つ。
【請求項２】
Ｘが式
【化３】
2009501740.tif 000059
｛ここで、
＊はカルボニル基に結合する位置であり、
＃は酸素原子に結合する位置であり、
そして
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は互いに独立して水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニルまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルである｝の基であり、
Ｙがフェニルであり
｛ここで、フェニルは１から３個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニルおよびＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルからなる群から選択される）｝、
ｎが０の数であり、
Ｒ１がフェニルである
｛ここで、フェニルは１から３個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ６−アルキルスルホニルアミノからなる群から選択される）｝
ことを特徴とする請求項１に記載の化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物の１つ。
【請求項３】
Ｘが式
【化４】
2009501740.tif 000060
｛ここで、
＊はカルボニル基に結合する位置であり、
＃は酸素原子に結合する位置であり、
そして
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は水素である｝の基であり、
Ｙがフェニルであり
｛ここで、フェニルは１から２個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲンおよびＣ１−Ｃ４−アルコキシからなる群から選択される）｝、
ｎが０の数であり、
Ｒ１がフェニルである
｛ここで、フェニルは１から３個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびメチルスルホニルアミノからなる群から選択される）｝
ことを特徴とする請求項１または請求項２に記載の化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物の１つ。
【請求項４】
式
【化５】
2009501740.tif 000061
〔式中、ＸおよびＲ１は請求項１で示された意味を有する〕
で示される化合物を、
式
【化６】
2009501740.tif 000062
〔式中、Ｘおよびｎは請求項１で示された意味を有する〕
で示される化合物と反応させることを特徴とする、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物の１つの製造方法。
【請求項５】
疾患の処置および／または予防のための請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
疾患の処置および／または予防のための薬剤の製造のための請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項７】
血栓性疾患の処置および／または予防のための薬剤の製造のための請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項８】
少なくとも１種の請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の化合物をさらなる活性成分と一緒に含む薬剤。
【請求項９】
少なくとも１種の請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の化合物を少なくとも１種の不活性な、非毒性の、薬学的に適当な補助剤と一緒に含む薬剤。
【請求項１０】
血栓性疾患の処置および／または予防のための請求項８または請求項９に記載の薬剤。
【請求項１１】
薬学的有効量の少なくとも１種の請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の化合物または請求項８ないし請求項１０のいずれかに記載の薬剤の投与を介してヒトおよび動物における血栓性疾患を制御する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は置換ピリジンカルボキサミド、それらの製造法、およびヒトおよび動物の疾患、とりわけ血栓症の処置および／または予防のための薬剤の製造のためのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
プラスミノーゲン活性化因子阻害因子−１（ＰＡＩ−１）はプラスミノーゲン−プラスミン系のもっとも重要な調節成分である。線溶系はｔＰＡおよびｕＰＡの２種のプラスミノーゲン活性化因子により活性酵素プラスミンに変換されるプロ酵素のプラスミノーゲンを含む。ＰＡＩ−１は組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）およびウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ）の両方の主な生理的阻害因子である。線溶系におけるプラスミンの主な働きの１つは血管損傷の部位でフィブリンを分解することである。線溶系は、しかしながら、血液循環からフィブリンを除去することに関与するだけでなく、排卵、胚形成、内膜の増殖、血管形成、腫瘍形成およびアテローム性動脈硬化を含む様々な他の過程にも関与する。
【０００３】
上昇した血漿ＰＡＩ−１レベルは線溶系の障害を引き起こす多くの疾患および状態と関連する。したがって、例えば、上昇した血漿ＰＡＩ−１レベルは、例えば、血管の血流を局所的に減少させるか、または、分離し塞栓形成して下流の血流を妨害する血栓の発生により特徴付けられる血栓性疾患と関連がある（Krishnamurti, Blood, 69, 798 (1987); Reilly, Arteriosclerosis and Thrombosis, 11, 1276 (1991); Carmeliet, Journal of Clinical Investigations, 92, 2756 (1993); Rocha, Fibrinolysis, 8, 294, 1994; Aznar, Haemostasis, 24, 243 (1994)）。ＰＡＩ−１活性の中和抗体は内在性線維素溶解およびかん流の速い速度をもたらす（Biemond, Circulation, 91, 1175 (1995); Levi, Circulation, 85, 305 (1992)）。
【０００４】
したがって、本発明の１つの目的は、ヒトおよび動物の血栓性疾患の処置のための新規ＰＡＩ−１阻害剤を提供することである。
【０００５】
本発明の化合物に類似している構造は血栓性疾患の処置のためのＰＡＩ−１阻害剤としてＷＯ０３／０８００６０およびＷＯ０３／０８０５６４に記載されている。ＷＯ９５／３３７５０は中枢神経系の疾患の処置のためのコルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ）アンタゴニストとしてとりわけ置換ピリジンカルボキサミドを記載しており、そしてＷＯ０３／０６１３８７は置換ピリジンカルボキサミドを使用することによる藻類を制御するための方法を記載している。
【発明の開示】
【０００６】
本発明は、式
【化１】
2009501740.tif 000002
〔式中、
Ｘは式
【化２】
2009501740.tif 000003
｛ここで、
＊はカルボニル基に結合する位置であり、
＃は酸素原子に結合する位置であり、
そして
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は互いに独立して水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニルまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルである｝の基であり、
Ｙはフェニルまたはピリジルであり
｛ここで、フェニルおよびピリジルは１から３個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニルおよびＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルからなる群から選択される）｝、
ｎは０、１、２または３の数であり、
Ｒ１はフェニルまたは５−もしくは６−員ヘテロアリールである
｛ここで、フェニルおよびヘテロアリールは１から３個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ６−アルキルスルホニルアミノからなる群から選択される）｝〕
で示される化合物およびそれらの塩、水和物、塩の水和物および溶媒和物に関する。
【０００７】
本発明の化合物は式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物、下記の式の式（Ｉ）により包含される化合物およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物、ならびに式（Ｉ）により包含され典型的な実施態様として後述する化合物、およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物である（後述する式（Ｉ）に包含される化合物が、既に塩、溶媒和物および塩の溶媒和物でない場合に）。
【０００８】
構造によっては本発明の化合物は立体異性体形（エナンチオマー、ジアステレオマー）で存在し得る。したがって本発明はエナンチオマーまたはジアステレオマーおよびそれらのそれぞれの混合物を含む。立体異性的に純粋な構成物が、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマーのこのような混合物から既知の方法で単離できる。
【０００９】
本発明の化合物が互変異性体を生じることができるとき、本発明はすべての互変異性体形を包含する。
【００１０】
本発明の目的のために好ましい塩は、本発明の化合物の生理学的に許容される塩である。しかしながら、医薬的適用に不適当であるが、例えば、本発明の化合物を単離または精製するために使用され得る塩もまた含まれる。
【００１１】
本発明の化合物の生理学的に許容される塩は鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩を含む。
【００１２】
本発明の化合物の生理学的に許容される塩はまた慣用の塩基の塩、例えば、好ましくは、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウムおよびマグネシウム塩）およびアンモニアまたは１から１６個のＣ原子を含む有機アミン、例えば、好ましくは、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、アルギニン、リシン、エチレンジアミンおよびＮ−メチルピペリジン由来のアンモニウム塩を含む。
【００１３】
溶媒和物は、本発明の目的上、溶媒分子との配位を介して固体または液体状態の錯体を形成している本発明の化合物の形態を意味する。水和物は配位が水とで起こっている溶媒和物の特定の形態である。
【００１４】
本発明の目的上、置換基は、特に記載のない限り、下記の意味を有する：
アルキル自体ならびにアルコキシ、アルキルアミノ、アルキルカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アルコキシカルボニルおよびアルキルスルホニルアミノの“アルコ（alk）”および“アルキル”は通常１から６個、好ましくは１から４個、特に好ましくは１から３個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖アルキル基、例えば、好ましくはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルを表す。
【００１５】
アルコキシは、例えば、好ましくは、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシおよびｎ−ヘキソキシを表す。
【００１６】
アルキルアミノは、１個または２個のアルキル置換基（互いに独立して選択される）、例えば、好ましくは、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ｎ−ペンチルアミノ、ｎ−ヘキシルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−ｎ−ペンチルアミノおよびＮ−ｎ−ヘキシル−Ｎ−メチルアミノを有するアルキルアミノ基を表す。Ｃ１−Ｃ４−アルキルアミノは、それぞれのアルキル置換基において、例えば、１から４個の炭素原子を有するモノアルキルアミノ基または各アルキル置換基中に１から４個の炭素原子を有するジアルキルアミノ基を表す。
【００１７】
アルキルカルボニルは、例えば、好ましくは、メチルカルボニル、エチルカルボニル、ｎ−プロピルカルボニル、イソプロピルカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルカルボニル、ｎ−ペンチルカルボニルおよびｎ−ヘキシルカルボニルを表す。
【００１８】
アルキルアミノカルボニルは、１個または２個のアルキル置換基（互いに独立して選択される）を有するアルキルアミノカルボニル基を表す。Ｃ１−Ｃ３−アルキルアミノカルボニルは、それぞれのアルキル置換基において、例えば、１から３個の炭素原子を有するモノアルキルアミノカルボニル基または各アルキル置換基中に１から３個の炭素原子を有するジアルキルアミノカルボニル基を表す。例えば、好ましくは：メチルアミノカルボニル、エチルアミノカルボニル、ｎ−プロピルアミノカルボニル、イソプロピルアミノカルボニル、ｎ−ブチルアミノカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルアミノカルボニル、ｎ−ペンチルアミノカルボニル、ｎ−ヘキシルアミノカルボニル、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノカルボニル、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノカルボニル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノカルボニル、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノカルボニル、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノカルボニル、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノカルボニル、Ｎ−エチル−Ｎ−ｎ−ペンチルアミノカルボニルおよびＮ−ｎ−ヘキシル−Ｎ−メチルアミノカルボニルが挙げられる。
【００１９】
アルコキシカルボニルは、例えば、好ましくは、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ｎ−ペントキシカルボニルおよびｎ−ヘキソキシカルボニルを表す。
【００２０】
アルキルスルホニルアミノは、例えば、好ましくは、メチルスルホニルアミノ、エチルスルホニルアミノ、ｎ−プロピルスルホニルアミノ、イソプロピルスルホニルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルスルホニルアミノ、ｎ−ペンチルスルホニルアミノおよびｎ−ヘキシルスルホニルアミノを表す。
【００２１】
ヘテロアリールは、通常５または６個の環原子および４個までの、好ましくは３個までの、一群Ｓ、ＯおよびＮからのヘテロ原子を有する芳香族性単環式基、例えば、好ましくは、チエニル、フリル、ピロリル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジルおよびピリダジニルを表す。
【００２２】
ハロゲンはフッ素、塩素、臭素およびヨウ素を表す。
【００２３】
Ｘを表す基の式において、傍に＊または＃が各々存在する線の末端は炭素原子またはＣＨ２基を意味せず、Ｘが結合しているカルボニル基、または酸素原子の一部を形成する。
【００２４】
本発明の化合物の基が置換されているとき、該基は、特に記載のない限り、１個またはそれ以上の置換基で、同一または異なって置換されていてもよい。３個までの同一または異なっている置換基による置換が好ましい。１個の置換基による置換がさらに特に好ましい。
【００２５】
好ましくは、
Ｘが式
【化３】
2009501740.tif 000004
｛ここで、
＊はカルボニル基に結合する位置であり、
＃は酸素原子に結合する位置であり、
そして
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は互いに独立して水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシカルボニルまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルである｝の基であり、
Ｙがフェニルであり
｛ここで、フェニルは１から３個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニルおよびＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルからなる群から選択される）｝、
ｎが０の数であり、
Ｒ１がフェニルである
｛ここで、フェニルは１から３個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルおよびＣ１−Ｃ６−アルキルスルホニルアミノからなる群から選択される）｝
式（Ｉ）の化合物、およびそれらの塩、水和物、塩の水和物および溶媒和物である。
【００２６】
好ましくはまた、
Ｘが式
【化４】
2009501740.tif 000005
｛ここで、
＊はカルボニル基に結合する位置であり、
＃は酸素原子に結合する位置であり、
そして
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は水素である｝の基であり、
Ｙがフェニルであり
｛ここで、フェニルは１から２個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲンおよびＣ１−Ｃ４−アルコキシからなる群から選択される）｝、
ｎが０の数であり、
Ｒ１がフェニルである
｛ここで、フェニルは１から３個の置換基により置換されていてもよい（ここで、置換基は互いに独立してハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびメチルスルホニルアミノからなる群から選択される）｝
式（Ｉ）の化合物、およびそれらの塩、水和物、塩の水和物および塩の溶媒和物である。
【００２７】
好ましくはまた、
Ｘが式
【化５】
2009501740.tif 000006
｛ここで、
＊はカルボニル基に結合する位置であり、
＃は酸素原子に結合する位置であり、
そして
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は水素である｝の基である
式（Ｉ）の化合物である。
【００２８】
好ましくはまたＲ２およびＲ３が水素である式（Ｉ）の化合物である。
好ましくはまたＲ４およびＲ５が水素である式（Ｉ）の化合物である。
好ましくはまたＹがフェニルである式（Ｉ）の化合物である。
好ましくはまたｎが０の数である式（Ｉ）の化合物である。
好ましくはまたＲ１がフェニルである（ここで、フェニルはトリフルオロメチルにより１回置換されている）式（Ｉ）の化合物である。
【００２９】
本発明はさらに式
【化６】
2009501740.tif 000007
〔式中、ＸおよびＲ１は上記の意味を有する〕
で示される化合物を
式
【化７】
2009501740.tif 000008
〔式中、Ｘおよびｎは上記の意味を有する〕
で示される化合物と反応させることを特徴とする、式（Ｉ）の化合物を製造するための方法に関する。
【００３０】
反応は一般に塩基の存在下で、好ましくは大気圧下で室温から溶媒の還流温度で不活性溶媒中で行う。
【００３１】
不活性溶媒の例はエーテル、例えば、ジオキサン、テトラヒドロフランもしくは１,２−ジメトキシエタン、または他の溶媒、例えば、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシドもしくはアセトニトリルであり、ジメチルスルホキシドが好ましい。
【００３２】
塩基の例はアルコラート、例えば、ナトリウムもしくはカリウムメタノラート、またはナトリウムもしくはカリウムエタノレートまたはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、またはアミド、例えば、ナトリウムアミド、リチウムビス（トリメチルシリル）アミドもしくはリチウムジイソプロピルアミド、または有機金属化合物、例えば、ブチルリチウムもしくはフェニルリチウム、または他の塩基、例えば、水素化ナトリウムもしくはＤＢＵであり、水素化ナトリウムが好ましい。
【００３３】
式（ＩＩ）の化合物は既知であるかまたは式
【化８】
2009501740.tif 000009
〔式中、Ｒ１は上記で示される意味を有する〕
で示される化合物を式
【化９】
2009501740.tif 000010
〔式中、Ｘは上記で示される意味を有する〕
で示される化合物と反応させる事により製造することができる。
【００３４】
反応は一般に不活性溶媒中で、脱水剤の存在下で、適当なとき、塩基の存在下で、好ましくは大気圧下で−３０℃から５０℃の温度で行う。
【００３５】
不活性溶媒の例はハロ炭化水素、例えば、ジクロロメタンまたはトリクロロメタン、炭化水素、例えば、ベンゼン、ニトロメタン、ジオキサン、ジメチルホルムアミドまたはアセトニトリルである。溶媒の混合物を使用することが同様に可能である。ジクロロメタンまたはジメチルホルムアミドが特に好ましい。
【００３６】
塩基の例はアルカリ金属の炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウムもしくはカリウム、または重炭酸塩、または有機塩基、例えば、トリアルキルアミン、例えば、トリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、４−ジメチルアミノピリジンまたはジイソプロピルエチルアミンである。
【００３７】
これに関連する適当な脱水剤の例は、カルボジイミド、例えば、Ｎ,Ｎ'−ジエチル−、Ｎ,Ｎ'−ジプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピル、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−（３−ジメチルアミノイソプロピル）−Ｎ'−エチルカルボジイミドヒドロクロライド（ＥＤＣ）、Ｎ−シクロヘキシルカルボジイミド−Ｎ'−プロピルオキシメチルポリスチレン（ＰＳ−カルボジイミド）またはカルボニル化合物、例えば、カルボニルジイミダゾール、または１,２−オキサゾリウム化合物、例えば、２−エチル−５−フェニル−１,２−オキサゾリウム  ３−スルフェートまたは２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチルイソキサゾリウム過塩素酸、またはアシルアミノ化合物、例えば、２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１,２−ジヒドロキノリン、またはプロパンホスホン酸無水物、またはイソブチルクロロホルメート、またはビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスホリルクロライドまたはＯ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、２−（２−オキソ−１−（２Ｈ）−ピリジル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（ＴＰＴＵ）、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（ＴＢＴＵ）またはＯ−（７−アザベンゾトリアゾール１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、または１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、またはベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）、またはベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）、またはＮ−ヒドロキシスクシンイミド、またはそれらの混合物、と塩基である。
【００３８】
縮合は好ましくはジイソプロピルエチルアミンの存在下でＴＢＴＵと行う。
【００３９】
式（ＩＩＩ）、（ＩＶ）および（Ｖ）の化合物はそれ自体当業者に既知であるか、または文献から既知の慣用の方法により製造することができる。
【００４０】
本発明の化合物の製造は下記の合成スキームにより明確にすることができる。
スキーム１：
【化１０】
2009501740.tif 000011
スキーム２：
【化１１】
2009501740.tif 000012
【００４１】
本発明の化合物は予測できなかった価値ある範囲の薬理学的および薬物動態的作用を示す。
【００４２】
したがってヒトおよび動物における疾患の処置および／または予防のための薬剤として使用するために適当である。
【００４３】
本発明の化合物の医薬活性はＰＡＩ−１阻害剤としての作用により説明することができる。
【００４４】
本発明は、さらに疾患の好ましくは血栓性疾患の処置および／または予防のための本発明の化合物の使用に関する。
【００４５】
本発明の化合物は血栓性疾患、例えば、静脈および動脈血栓症、肺血栓症、脳血栓症、血栓塞栓症および深部静脈血栓症、または冠動脈心疾患、心細動、肺線維症、嚢胞性線維症、血栓塞栓性合併症、または卒中、例えば、血栓性卒中および血栓塞栓性卒中、または一過性虚血性発作、冠動脈手術後の再閉塞および再狭窄（経皮冠動脈手術後の再閉塞および再狭窄、冠動脈バイパス手術後の再閉塞および再狭窄）、播種性血管内凝固症候群、または、外科手術、例えば、肺塞栓、卒中、血管手術、血管置換術、ステント設置、臓器、組織および細胞の確保（implementation）および移植、または心血管疾患、例えば、心筋梗塞、動脈硬化性プラーク形成、心梗塞、安定狭心症および不安定狭心症、または慢性閉塞性肺疾患、腎臓線維症、多嚢胞性卵巣症候群、アルツハイマー病、エストロゲン欠失により誘発される骨溶解、糖尿病、肥満、慢性歯周炎、リンパ腫、細胞外マトリックスの蓄積関連疾患、炎症性疾患、例えば、喘息、敗血症性ショック、腎臓疾患、肥満、インスリン抵抗性、血管形成関連疾患、または癌、例えば、白血病、悪性腫瘍または感染症による血管損傷、および、高ｕＰＡレベル関連疾患、例えば、乳癌および卵巣癌の予防および／または処置のために適当である。
【００４６】
本発明の化合物は、さらに、血栓溶解療法をサポートするために、創傷治癒に影響を与えるために、アテローム硬化性血管疾患、例えば、再狭窄、冠動脈心疾患、脳虚血および末梢動脈閉塞性疾患の、心不全の、高血圧の、炎症性疾患、例えば、喘息、炎症性肺疾患、糸球体腎炎、炎症性腸疾患および運動系のリウマチ性疾患の、変性疾患、例えば、神経変性疾患および骨粗鬆症の予防および処置において、使用され得る。
【００４７】
本発明の化合物は、透析および液相における血液の保存に使用される血液および血液製剤の処理に、特にエキソビボの血小板凝集のために、使用され得る。本化合物は、また、線溶能を決定する病院の条件下の血液化学分析中にヒト血漿に加えられ得る。
【００４８】
本発明の化合物は、また血栓溶解促進剤（prothrombolytic agent）、線維素溶解剤および抗血液凝固剤と組み合わせて使用され得る。
【００４９】
本発明は、さらに疾患、とりわけ上記の病状を予防および／または処置するための本発明の化合物の使用に関する。
【００５０】
本発明は、さらに疾患、とりわけ上記の病状を予防および／または処置するための薬剤を製造するための本発明の化合物の使用に関する。
【００５１】
本発明は、さらに本発明の化合物の心臓血管活性を有する量を使用することによる、疾患、とりわけ上記の疾患を予防および／または処置するための方法に関する。
【００５２】
本発明は、さらに、特に上記疾患を予防および／または処置するための、本発明の化合物を１種またはそれ以上のさらなる活性成分と組み合わせて含む薬剤に関する。
【００５３】
本発明の化合物は全身的におよび／または局所的に作用し得る。この目的のために、それらは適当な方法、例えば、経口で、非経腸で、肺に、経鼻で、舌下で、舌に、頬側で、経直腸で、皮膚に、経皮で、結膜または経耳経路により、またはインプラントもしくはステントとして投与され得る。
【００５４】
本発明の化合物はこれらの投与形路のために適当な投与形路で投与され得る。
【００５５】
経口投与に適当なのは、先行技術にしたがって機能し、本発明の化合物を迅速かつ／または改変された様式で送達し、本発明の化合物を結晶および／または無定形および／または溶解形態で含む投与形、例えば、錠剤（非被覆であるか、または、例えば、腸溶性被覆、または、不溶性であるか、もしくは遅れて溶解し、本発明の化合物の放出を制御する被覆を有する被覆錠剤）、口内ですばやく崩壊する錠剤、またはフィルム／カシュ剤、フィルム／凍結乾燥剤、カプセル剤（例えば、硬または軟ゼラチンカプセル）、糖衣錠、顆粒剤、ペレット剤、散剤、乳剤、懸濁剤、エアゾール剤または液剤である。
【００５６】
非経腸投与は吸収段階を回避（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、脊髄内または腰椎内）または吸収を包含（例えば、筋肉内、皮下、皮膚内、経皮または腹腔内）で行うことができる。非経腸投与用の適当な投与形態は、とりわけ、液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥剤または滅菌散剤の形態の注射および注入用製剤である。
【００５７】
適当な他の投与形路は、例えば、吸入（とりわけ粉末吸入器、噴霧器）用医薬形態、点鼻薬、液、スプレー；舌、舌下または頬側投与用錠剤、フィルム／オブラートまたはカプセル剤、坐薬、目または耳用製剤、膣用カプセル剤、水性懸濁剤（ローション、撹拌混合物）、親油性懸濁剤、軟膏、クリーム、経皮治療システム（例えば、パッチ）、ミルク、ペースト、フォーム、散布用粉末剤（dusting powder）、インプラントまたはステントである。
【００５８】
本発明の化合物は記載の投与形態に変換できる。これは不活性な、非毒性の、薬学的に適当な補助剤との混合によるそれ自体既知の方法で行うことができる。これらの補助剤は、とりわけ、担体（例えば、微結晶セルロース、ラクトース、マンニトール）、溶媒（例えば、液体ポリエチレングリコール）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート）、結合剤（例えば、ポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えば、アルブミン）、安定剤（例えば、抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸）、着色剤（例えば、無機色素、例えば、酸化鉄）および香味および／または臭気の隠蔽剤を含む。
【００５９】
本発明は、さらに、本発明の少なくとも１種の化合物を、好ましくは１種またはそれ以上の不活性な、非毒性の、薬学的に適当な補助剤と一緒に含む薬剤、および上記目的のためのそれらの使用に関する。
【００６０】
所望の結果を得るために、適当なとき複数の単回投与形で、２４時間ごとに全量約０.０１ないし約７００、好ましくは０.０１ないし１００ｍｇ／ｋｇ体重の本発明の化合物を投与することがヒトおよび動物用薬剤において一般に有利であることを証明した。単回投与形は好ましくは約０.１ないし約８０、特に０.１ないし３０ｍｇ／ｋｇ体重の量の本発明の化合物を含む。
【００６１】
それにもかかわらず、特に体重、投与形路、活性成分に対する個々の応答、製剤の性質および投与時間または間隔に応じて、適当なとき、記載の量からはずれることが必要なことがある。したがって、前記最小量よりも少ない用量で十分である場合があり、一方、記載の上限を超えなければならない場合がある。多量に投与する場合、これらを１日にわたり複数の個々の用量に分割することが望ましいこともあり得る。
【００６２】
特に記載のない限り、下記試験および実施例における％データは重量％である；部は重量部である。液体／液体溶液の溶媒比率、希釈比率および濃度データはそれぞれの場合に容量に基づく。
【実施例】
【００６３】
Ａ．実施例
略語：
【表１】
2009501740.tif 000013
【００６４】
出発化合物
実施例１Ａ
１−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］−４−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン
【化１２】
2009501740.tif 000014
３００ｍｇ（２.０６ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、丸底フラスコ中の１０ｍｌのジクロロメタンに入れ、９９３ｍｇ（３.０９ｍｍｏｌ）のＴＢＴＵを加える。０.５３９ｍｌ（３.０９ｍｍｏｌ）のジイソプロピルエチルアミンを滴下し、その後室温で１０分間撹拌し、次いで５３２.９６ｍｇ（２.２７ｍｍｏｌ）の３−ピペラジノベンゾトリフルオリドを加える。混合物を室温で１６時間撹拌し、溶媒を完全に除去する。分取ＨＰＬＣによる精製で６５２ｍｇ（理論値の８９％）の生成物を得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３５４（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.37 (d, 1H), 8.08 (t, 1H), 7.49 (t, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.24 (d, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.11 (d, 1H), 3.80 (t, 2H), 3.34-3.40 (m, 4H), 3.23 (t, 2H)。
【００６５】
実施例２Ａ
１−（２−フルオロイソニコチノイル）−４−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン
【化１３】
2009501740.tif 000015
１５０ｍｇ（１.０４ｍｍｏｌ）の２−フルオロ−４−ピリジンカルボン酸を丸底フラスコ中の１０ｍｌのジクロロメタンに入れ、５０２ｍｇ（１.５６ｍｍｏｌ）のＴＢＴＵを加える。０.２７２ｍｌ（１.５６ｍｍｏｌ）のジイソプロピルエチルアミンを滴下し、その後室温で１０分間撹拌し、次いで３６７ｍｇ（１.５６ｍｍｏｌ）の３−ピペラジノベンゾトリフルオリドを加える。混合物を室温で１６時間撹拌し、溶媒を完全に除去する。分取ＨＰＬＣによる精製で２７２ｍｇ（理論値の７４％）の生成物を得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３５４（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (300MHz, DMSO-d6): δ= 8.35 (d, 1H), 7.4-7.69 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.24 (d, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.11 (d, 1H), 3.78 (m, 2H), 3.39 (m, 4H), 3.26 (m, 2H)。
【００６６】
実施例３Ａ
１−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］−４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン
【化１４】
2009501740.tif 000016
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を丸底フラスコ中の８ｍｌのジクロロメタンに入れ、３３１ｍｇ（１.０３ｍｍｏｌ）のＴＢＴＵを加える。０.１８ｍｌ（１.０３ｍｍｏｌ）のジイソプロピルエチルアミンを滴下し、その後室温で１０分間撹拌し、次いで１７４.１ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の１−（４−トリフルオロメチルフェニル）ピペラジンを加える。混合物を室温で１６時間撹拌し、溶媒を完全に除去する。分取ＨＰＬＣによる精製で２２８ｍｇ（理論値の９４％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＤＣＩ、ＮＨ３）：ｍ／ｚ＝３７１（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.36 (d, 1H), 8.08 (dt, 1H), 7.53 (d, 2H), 7.48-7.51 (m, 1H), 7.08 (d, 2H), 3.80 (t, 2H), 3.39-3.43 (m, 4H), 3.30 (s, 2H)。
【００６７】
実施例４Ａ
１−（３,４−ジクロロフェニル）−４−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］ピペラジン
【化１５】
2009501740.tif 000017
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１７５ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の１−（３,４−ジクロロフェニル）ピペラジンと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で２３６ｍｇ（理論値の９７％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３５４（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.36 (d, 1H), 8.07 (dt, 1H), 7.47-7.51 (m, H), 7.42 (d, 1H), 7.16 (d, 1H), 6.95 (dd, 1H), 3.77 (t, 2H), 3.35-3.39 (m, 4H), 3.15-3.21 (m, 2H)。
【００６８】
実施例５Ａ
１−［３,５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］−４−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］ピペラジン
【化１６】
2009501740.tif 000018
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に２２５ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の１−［３,５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジンと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で２１５ｍｇ（理論値の７４％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４２２（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.36 (d, 1H), 8.08 (dt, 1H), 7.47-7.53 (m, 3H), 7.36 (s, 1H), 3.80 (t, 2H), 3.50 (m, 2H), 3.35-3.42 (m, 4H)。
【００６９】
実施例６Ａ
１−（２−クロロフェニル）−４−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］ピペラジン
【化１７】
2009501740.tif 000019
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１４８.７ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の１−（２−クロロフェニル）ピペラジンと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で２０８ｍｇ（理論値の９５％）の生成物を油状物として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３２０（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.35 (d, 1H), 8.08 (dt, 1H), 7.49 (m, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.18 (dd, 1H), 7.08 (t, 1H), 3.82 (t, 2H), 3.41 (t, 2H), 3.05 (t, 2H), 2.95 (t, 2H)。
【００７０】
実施例７Ａ
４−｛４−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］ピペラジン−１−イル｝ベンゾニトリル
【化１８】
2009501740.tif 000020
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１４１.６ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の４ピペラジン−１−イル−ベンゾニトリルと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で２０１ｍｇ（理論値の９４％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３１１（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.36 (d, 1H), 8.08 (dt, 1H), 7.61 (d, 2H), 7.46-7.52 (m, 1H), 7.03 (d, 2H), 3.78 (t, 2H), 3.48 (t, 2H), 3.35-3.41 (m, 4H)。
【００７１】
実施例８Ａ
１−（４−クロロフェニル）−４−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］ピペラジン
【化１９】
2009501740.tif 000021
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１４８.７ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の１−（４−クロロフェニル）ピペラジンと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で１９０ｍｇ（理論値の８６％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３２０（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.35 (d, 1H), 8.07 (dt, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.25 (d, 2H), 6.97 (d, 2H), 3.79 (t, 2H), 3.38 (t, 2H), 3.24 (t, 2H), 3.12 (t, 2H)。
【００７２】
実施例９Ａ
１−（３,５−ジクロロフェニル）−４−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］ピペラジン
【化２０】
2009501740.tif 000022
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１７４.８ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の１−（３,５−ジクロロフェニル）ピペラジンと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で２０７ｍｇ（理論値の８５％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＤＣＩ、ＮＨ３）：ｍ／ｚ＝３７１（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.35 (d, 1H), 8.07 (dt, 1H), 7.49 (m, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.91 (s, 1H), 3.76 (t, 2H), 3.34-3.39 (m, 4H), 3.21-3.26 (m, 2H)。
【００７３】
実施例１０Ａ
１−（２,３−ジクロロフェニル）−４−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］ピペラジン
【化２１】
2009501740.tif 000023
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１７４.８ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の１−（２,３−ジクロロフェニル）ピペラジンと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で２１８ｍｇ（理論値の９０％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３５４（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.35 (d, 1H), 8.08 (dt, 1H), 7.47-7.51 (m, 1H), 7.30-7.36 (m, 2H), 7.15-7.20 (m, 1H), 3.83 (t, 2H), 3.42 (t, 2H), 3.07 (t, 2H), 3.96 (t, 2H)。
【００７４】
実施例１１Ａ
１−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］−４−［２−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン
【化２２】
2009501740.tif 000024
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１７４.１ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の１−［２−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジンと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で２２３ｍｇ（理論値の９２％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３５４（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.35 (d, 1H), 8.09 (dt, 1H), 7.68 (t, 2H), 7.59 (d, 1H), 7.47-7.51 (m, 1H), 7.38 (t, 1H), 3.78 (m, 2H), 3.34-3.39 (m, 2H), 2.95 (t, 2H), 2.84 (t, 2H)。
【００７５】
実施例１２Ａ
１−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］−４−（４−メトキシフェニル）ピペラジン
【化２３】
2009501740.tif 000025
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１４５.４ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の１−（４−メトキシフェニル）ピペラジンと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で１４８ｍｇ（理論値の６７％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３１６（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.35 (d, 1H), 8.07 (dt, 1H), 7.48 (m, 1H), 6.92 (d, 2H), 6.83 (d, 2H), 3.79 (t, 2H), 3.38 (t, 2H), 3.09 (t, 2H), 3.97 (t, 2H)。
【００７６】
実施例１３Ａ
３−｛４−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］ピペラジン−１−イル｝ベンゾニトリル
【化２４】
2009501740.tif 000026
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１６９.２ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の３ピペラジン−１−イル−ベンゾニトリルヒドロクロライドと反応させ、対応するアミドを得る。しかしながら、３当量のジイソプロピルエチルアミンを塩基添加として使用する。分取ＨＰＬＣによる精製で２０１ｍｇ（理論値の９３％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３１１（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.36 (d, 1H), 8.08 (dt, 1H), 7.49 (m, 1H), 7.41 (t, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.29 (dd, 1H), 7.20 (d, 1H), 3.79 (t, 2H), 3.30-3.41 (m, 4H), 3.23 (t, 2H)。
【００７７】
実施例１４Ａ
１−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］−４−（４−メチルフェニル）ピペラジン
【化２５】
2009501740.tif 000027
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１８８.４ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の１−（４−メチルフェニル）ピペラジンジヒドロクロライドと反応させ、対応するアミドを得る。しかしながら、４.５当量のジイソプロピルエチルアミンを塩基添加として使用する。分取ＨＰＬＣによる精製で１７９ｍｇ（理論値の８７％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３００（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.36 (d, 1H), 8.07 (dt, 1H), 7.49 (m, 1H), 7.04 (d, 2H), 6.86 (d, 2H), 3.79 (t, 2H), 3.33-3.40 (m, 2H), 3.16 (t, 2H), 3.04 (t, 2H)。
【００７８】
実施例１５Ａ
１−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］−４−（２−メトキシフェニル）ピペラジン
【化２６】
2009501740.tif 000028
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１７３ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）の１−（２−メトキシフェニル）ピペラジンヒドロクロライドと反応させ、対応するアミドを得る。しかしながら、３当量のジイソプロピルエチルアミンを塩基添加として使用する。分取ＨＰＬＣによる精製で１９０ｍｇ（８８％理論値の）の生成物を樹脂として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３１６（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.35 (d, 1H), 8.07 (m, 1H), 7.48 (m, 1H), 6.93-7.02 (m, 2H), 6.85-6.92 (m, 2H), 3.78-3.81 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.38 (t, 2H), 3.03 (t, 2H), 2.92 (t, 2H)。
【００７９】
実施例１６Ａ
Ｎ−（２−｛４−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］ピペラジン−１−イル｝フェニル）メタンスルホンアミド
【化２７】
2009501740.tif 000029
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に２４８.２ｍｇ（０.７５６ｍｍｏｌ）のＮ−（２−ピペラジン−１−イルフェニル）メタンスルホンアミドジヒドロクロライドと反応させ、対応するアミドを得る。しかしながら、４.５当量のジイソプロピルエチルアミンを塩基添加として使用する。分取ＨＰＬＣによる精製で９８ｍｇ（理論値の２７％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３７９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００８０】
実施例１７Ａ
１−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］−４−（３−メトキシフェニル）ピペラジン
【化２８】
2009501740.tif 000030
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１４９.９ｍｇ（０.７８ｍｍｏｌ）の１−（３−メトキシフェニル）ピペラジンと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で１５７ｍｇ（理論値の６８％）の生成物を樹脂として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３１６（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.36 (d, 1H), 8.07 (dt, 1H), 7.49 (hept, 1H), 7.13 (t, 1H), 6.54 (dd, 1H), 6.48 (t, 1H), 6.41 (dd, 1H), 3.78 (t, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.37 (t, 2H), 3.23 (t, 2H), 3.11 (t, 2H)。
【００８１】
実施例１８Ａ
１−（４−フルオロフェニル）−４−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］ピペラジン
【化２９】
2009501740.tif 000031
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に１８０.２３ｍｇ（０.７８ｍｍｏｌ）の１−（４−フルオロフェニル）ピペラジンと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で１９９ｍｇ（理論値の９２％）の生成物を油状物として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.35 (d, 1H), 8.06 (hept, 1H), 7.49 (hept, 1H), 7.07 (d, 2H), 6.99 (d, 1H), 6.98 (d, 1H), 3.79 (t, 2H), 3.38 (t, 2H), 3.17 (t, 2H), 3.05 (t, 2H)。
【００８２】
実施例１９Ａ
１−［４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−［（２−フルオロピリジン−３−イル）カルボニル］ピペラジン
【化３０】
2009501740.tif 000032
１００ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチン酸を、実施例３Ａを製造するための方法と同様に２０６.３４ｍｇ（０.７８ｍｍｏｌ）の１−［４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジンと反応させ、対応するアミドを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で２７１ｍｇ（理論値の９９％）の生成物を樹脂として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３８８（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.37 (d, 1H), 8.08 (hept, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.49 (hept, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.23 (dd, 1H), 3.79 (t, 2H), 3.38 (m, 4H), 3.24 (t, 2H)。
【００８３】
典型的な実施態様
実施例１
４−｛［３−（｛４−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン−１−イル｝カルボニル）ピリジン−２−イル］オキシ｝安息香酸
【化３１】
2009501740.tif 000033
３７.５３ｍｇ（０.２７２ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸を４ｍｌの乾燥ＤＭＳＯに入れ、２２.６４ｍｇ（０.５７ｍｍｏｌ）の水素化ナトリウム（６０％）を加える。室温、アルゴン雰囲気下で１０分間撹拌後、実施例１Ａ由来の８０ｍｇ（０.２２６ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを加える。混合物を８０℃で１時間加熱し、前駆体がまだ存在するため１２０℃でさらに１６時間加熱する。約１ｍｌの水を慎重に加える。分取ＨＰＬＣによる精製で３６ｍｇ（理論値の３４％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７２（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.25 (dd, 1H), 7.97 (d, 2H), 7.94 (dd, 1H), 7.44 (t, 1H), 7.31 (dd, 1H), 7.25 (d, 2H), 7.19 (d, 2H), 7.10 (d, 1H), 3.80 (t, 2H), 3.48 (m, 2H), 3.32 (m, 2H), 3.15 (m, 2H)。
【００８４】
実施例２
４−｛［４−（｛４−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン−１−イル｝カルボニル）ピリジン−２−イル］オキシ｝安息香酸
【化３２】
2009501740.tif 000034
４６.９ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸を４ｍｌの乾燥ＤＭＳＯに入れ、２８.３ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ）の水素化ナトリウム（６０％）を加える。室温、アルゴン雰囲気下で１０分間撹拌後、実施例２Ａ由来の１００ｍｇ（０.２８ｍｍｏｌ）のイソニコチンアミドを加える。混合物を１３０℃で１６時間加熱し、冷却後、１Ｎの塩酸で中和する。分取ＨＰＬＣによる精製で５７ｍｇ（理論値の４３％）の生成物を得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７２（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (300MHz, DMSO-d6): δ = 12.88 (s, 幅広い, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.99 (d, 2H), 7.45 (t, 1H), 7.08-7.29 (m, 7H), 3.78 (m, 2H), 3.47 (m, 2H), 3.37 (m, 4H)。
【００８５】
実施例３
４−｛［３−（｛４−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン−１−イル｝カルボニル）ピリジン−２−イル］オキシ｝安息香酸
【化３３】
2009501740.tif 000035
３７.１８ｍｇ（０.２５５ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸を６ｍｌの乾燥ＤＭＳＯに入れ、２８.５ｍｇ（０.７１３ｍｍｏｌ）の水素化ナトリウム（６０％）を加える。室温、アルゴン雰囲気下で１０分間撹拌後、実施例３Ａ由来の６０ｍｇ（０.１７ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを加える。混合物を１２０℃で１６時間加熱する。ｐＨがわずかに酸性になるまで約１ｍｌの２Ｎの塩酸を慎重に加える。分取ＨＰＬＣによる精製で５８ｍｇ（理論値の７２％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７２（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 8.24 (dd, 1H), 7.97 (d, 2H), 7.94 (dd, 1H), 7.52 (d, 2H), 7.30 (dd, 1H), 7.24 (d, 2H), 7.06 (d, 2H), 3.79 (t, 2H), 3.48 (m, 2H), 3.34 (m, 4H)。
【００８６】
実施例４
４−［（３−｛［４−（３,４−ジクロロフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化３４】
2009501740.tif 000036
実施例４Ａ由来の８０ｍｇ（０.２２６ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に４６.７９ｍｇ（０.３３９ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で７７ｍｇ（理論値の７２％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７２（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.93 (s, 幅広い, 1H), 8.24 (dd, 1H), 7.98 (d, 2H), 7.94 (dd, 1H),  7.41 (d, 2H), 7.30 (dd, 1H), 7.14 (d, 2H), 6.93 (dd, 1H), 3.76 (t, 2H), 3.45 (m, 2H), 3.28 (m, 2H), 3.19 (m, 2H)。
【００８７】
実施例５
４−｛［３−（｛４−［３,５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン−１−イル｝カルボニル）ピリジン−２−イル］オキシ｝安息香酸
【化３５】
2009501740.tif 000037
実施例５Ａ由来の８０ｍｇ（０.１９ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に３９.３４ｍｇ（０.２８５ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で７５ｍｇ（理論値の７３％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５４０（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.92 (s, 幅広い, 1H), 8.25 (dd, 1H), 7.98 (d, 2H), 7.95 (dd, 1H),  7.48 (s, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.31 (dd, 1H), 7.25 (d, 2H), 3.80 (m, 2H), 3.47 (m, 4H), 3.37 (m, 2H)。
【００８８】
実施例６
４−［（３−｛［４−（２−クロロフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化３６】
2009501740.tif 000038
実施例６Ａ由来の８０ｍｇ（０.２５ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に５１.８ｍｇ（０.３７５ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で７８ｍｇ（理論値の７１％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４３８（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.93 (s, 幅広い, 1H), 8.24 (dd, 1H), 7.98 (d, 2H), 7.94 (dd, 1H), 7.42 (dd, 1H), 7.30 (dd, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.26 (d, 2H), 7.11 (dd, 1H), 7.07 (dt, 1H), 3.81 (m, 2H), 3.49 (m, 2H), 3.0 (m, 4H)。
【００８９】
実施例７
４−［（３−｛［４−（４−シアノフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化３７】
2009501740.tif 000039
実施例７Ａ由来の８０ｍｇ（０.２５８ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に５３.４１ｍｇ（０.３８７ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で７１ｍｇ（理論値の６４％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４２９（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.94 (s, 幅広い, 1H), 8.25 (dd, 1H), 7.97 (d, 2H), 7.95 (dd, 1H), 7.60 (d, 2H), 7.30 (dd, 1H), 7.25 (d, 2H), 7.01 (d, 2H), 3.77 (t, 2H), 3.46 (m, 4H), 3.35 (m, 2H)。
【００９０】
実施例８
４−［（３−｛［４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化３８】
2009501740.tif 000040
実施例８Ａ由来の８０ｍｇ（０.２５ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に５１.８３ｍｇ（０.３７５ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で８４ｍｇ（理論値の７７％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４３８（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.95 (s, 幅広い, 1H), 8.24 (dd, 1H), 7.97 (d, 2H), 7.94 (dd, 1H),  7.30 (dd, 1H), 7.24 (dd, 4H), 6.94 (d, 2H), 3.78 (t, 2H), 3.46 (m, 2H), 3.21 (m, 2H), 3.12 (m, 2H)。
【００９１】
実施例９
４−［（３−｛［４−（３,５−ジクロロフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化３９】
2009501740.tif 000041
実施例９Ａ由来の８０ｍｇ（０.２６６ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に４６.８ｍｇ（０.３３９ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で７０ｍｇ（理論値の６６％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７２（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.94 (s, 幅広い, 1H), 8.25 (dd, 1H), 7.98 (d, 2H), 7.94 (dd, 1H),  7.30 (dd, 1H), 7.24 (d, 2H), 6.95 (d, 2H), 6.90 (t, 1H), 3.75 (t, 2H), 3.43 (m, 2H), 3.33 (m, 2H), 3.31 (m, 2H)。
【００９２】
実施例１０
４−［（３−｛［４−（２,３−ジクロロフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化４０】
2009501740.tif 000042
実施例１０Ａ由来の８０ｍｇ（０.２６６ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に４６.８ｍｇ（０.３３９ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で７３ｍｇ（理論値の６８％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７２（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.94 (s, 幅広い, 1H), 8.24 (dd, 1H), 7.98 (d, 2H), 7.94 (dd, 1H),  7.22-7.36 (m, 5H), 7.11 (dd, 1H), 3.82 (m, 2H), 3.50 (m, 2H), 2.9-3.1 (m, 4H)。
【００９３】
実施例１１
４−｛［３−（｛４−［２−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン−１−イル｝カルボニル）ピリジン−２−イル］オキシ｝安息香酸
【化４１】
2009501740.tif 000043
実施例１１Ａ由来の８０ｍｇ（０.２２６ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に４６.９１ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で５１ｍｇ（理論値の４８％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７２（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.94 (s, 幅広い, 1H), 8.24 (dd, 1H), 7.99 (d, 2H), 7.95 (dd, 1H),  7.65 (dd, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.36 (t, 1H), 7.31 (dd, 1H), 7.26 (d, 2H), 3.77 (m, 2H), 3.44 (t, 2H), 2.73-2.98 (m, 4H)。
【００９４】
実施例１２
４−［（３−｛［４−（４−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化４２】
2009501740.tif 000044
実施例１２Ａ由来の８０ｍｇ（０.２５４ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に５２.５６ｍｇ（０.３８１ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で６３ｍｇ（理論値の５４％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４３４（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.92 (s, 幅広い, 1H), 8.24 (dd, 1H), 7.98 (d, 2H), 7.93 (dd, 1H),  7.30 (dd, 1H), 7.24 (d, 2H), 6.89 (d, 2H), 6.81 (d, 2H), 3.78 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.45 (m, 2H), 2.90-3.1 (m, 4H)。
【００９５】
実施例１３
４−［（３−｛［４−（３−シアノフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化４３】
2009501740.tif 000045
実施例１３Ａ由来の８０ｍｇ（０.２５８ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に５３.４１ｍｇ（０.３８７ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で６６ｍｇ（理論値の６０％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＤＣＩ、ＮＨ３）：ｍ／ｚ＝４４６（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.93 (s, 幅広い, 1H), 8.25 (dd, 1H), 7.98 (d, 2H), 7.94 (dd, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.26-7.36 (m, 5H), 7.19 (d, 1H), 3.78 (t, 2H), 3.46 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 3.24 (m, 2H)。
【００９６】
実施例１４
４−［（３−｛［４−（４−メチルフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化４４】
2009501740.tif 000046
実施例１４Ａ由来の８０ｍｇ（０.２６７ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に５５.３７ｍｇ（０.４ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で７６ｍｇ（理論値の６８％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＤＣＩ、ＮＨ３）：ｍ／ｚ＝４１８（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.92 (s, 幅広い, 1H), 8.23 (d, 1H), 7.97 (d, 2H), 7.93 (d, 1H), 7.30 (dd, 1H), 7.24 (d, 2H), 7.02 (d, 2H), 6.83 (d, 2H), 3.78 (m, 2H), 3.45 (m, 2H), 3.23-3.18 (m, 4H), 2.19 (s, 3H)。
【００９７】
実施例１５
４−［（３−｛［４−（２−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化４５】
2009501740.tif 000047
実施例１５Ａ由来の８０ｍｇ（０.２５４ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に５２.５６ｍｇ（０.３８１ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で２ｍｇ（理論値の２％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４３４（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.92 (s, 幅広い), 8.36 (dd), 8.24 (dd), 8.07 (t), 7.98 (d), 7.93 (d), 7.48 (t), 7.30 (dd), 7.25 (d), 6.92-7.01 (m), 6.81-6.91 (m), 3.77 (s), 3.45 (m), 3.39 (m,), 3.03 (m), 2.92 (m)。
【００９８】
実施例１６
４−（｛３−［（４−｛２−［（メチルスルホニル）アミノ］フェニル｝ピペラジン−１−イル）カルボニル］ピリジン−２−イル｝オキシ）安息香酸
【化４６】
2009501740.tif 000048
実施例１６Ａ由来の４０ｍｇ（０.１０６ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に２１.９ｍｇ（０.１５９ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で２７ｍｇ（理論値の４９％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４９７（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.92 (s, 幅広い, 1H), 8.6 (s, 1H), 8.24 (dd, 1H), 7.99 (d, 2H), 7.96 (m, 1H), 7.37 (dd, 1H), 7.30 (dd, 1H), 7.45 (d, 2H), 7.08-7.19 (m, 3H), 3.86 (m, 2H), 3.53 (m, 1H), 3.45 (m, 1H), 3.1 (s, 3H), 2.83-2.94 (m, 2H), 2.70-2.82 (m, 2H)。
【００９９】
実施例１７
４−［（３−｛［４−（３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化４７】
2009501740.tif 000049
実施例１７Ａ由来の４６ｍｇ（０.１４６ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に３０.２２ｍｇ（０.２１９ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で１７ｍｇ（理論値の２５％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４３４（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.91 (s, 幅広い, 1H), 8.24 (dd, 1H), 7.97 (d, 2H), 7.94 (dd, 1H), 7.30 (dd, 1H), 7.24 (d, 2H), 7.12 (t, 1H), 6.51 (dd, 1H), 6.45 (t, 1H), 6.39 (dd, 1H), 3.77 (t, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.45 (m, 2H), 3.20 (m, 2H), 3.11 (m, 2H)。
【０１００】
実施例１８
４−［（３−｛［４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］カルボニル｝ピリジン−２−イル）オキシ］安息香酸
【化４８】
2009501740.tif 000050
実施例１８Ａ由来の４６ｍｇ（０.１５２ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に３１.４２ｍｇ（０.２２７ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で４７ｍｇ（理論値の７４％）の生成物を得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４２２（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.92 (s, 幅広い, 1H), 8.24 (dd, 1H), 7.97 (d, 2H), 7.94 (dd, 1H), 7.30 (dd, 1H), 7.24 (d, 2H), 7.06 (t, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.95 (dd, 1H), 3.78 (t, 2H), 3.46 (m, 2H), 3.13 (m, 2H), 3.05 (m, 2H)。
【０１０１】
実施例１９
４−｛［３−（｛４−［４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン−１−イル｝カルボニル）ピリジン−２−イル］オキシ｝安息香酸
【化４９】
2009501740.tif 000051
実施例１９Ａ由来の８０ｍｇ（０.２１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に４２.７ｍｇ（０.３１ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で１００ｍｇ（理論値の９６％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５０６（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 12.94 (s, 幅広い, 1H), 8.25 (dd, 1H), 7.97 (d, 2H), 7.94 (dd, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.25 (d, 2H), 7.21 (dd, 1H), 3.78 (t, 2H), 3.47 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 3.24 (m, 2H)。
【０１０２】
実施例２０
３−フルオロ−４−｛［３−（｛４−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン−１−イル｝カルボニル）ピリジン−２−イル］オキシ｝安息香酸
【化５０】
2009501740.tif 000052
実施例１Ａ由来の４０ｍｇ（０.１１ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に２６.５ｍｇ（０.１７ｍｍｏｌ）の３−フルオロ−４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で１５ｍｇ（理論値の２６％）の生成物を固体として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４９０（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 13.28 (s, 幅広い, 1H), 8.20 (dd, 1H), 7.96 (dd, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.81 (d, 1H),  7.48 (t, 1H), 7.44 (t, 1H), 7.30 (dd, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 3.82 (t, 2H), 3.47 (m, 2H), 3.33 (m, 2H), 3.27 (m, 2H)。
【０１０３】
実施例２１
３−クロロ−４−｛［３−（｛４−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン−１−イル｝カルボニル）ピリジン−２−イル］オキシ｝安息香酸
【化５１】
2009501740.tif 000053
実施例１Ａ由来の４０ｍｇ（０.１１３ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に２９.３ｍｇ（０.１７ｍｍｏｌ）の３−クロロ−４−ヒドロキシ安息香酸と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で１８ｍｇ（理論値の３１％）の生成物を樹脂として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５０６（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 13.31 (s, 幅広い, 1H), 8.19 (dd, 1H), 8.04 (dd, 1H), 7.95 (dt, 2H), 7.44 (d, 2H), 7.30 (dd, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 3.82 (t, 2H), 3.51 (m, 2H), 3.36 (m, 2H), 3.28 (m, 2H)。
【０１０４】
実施例２２
３−メトキシ−４−｛［３−（｛４−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン−１−イル｝カルボニル）ピリジン−２−イル］オキシ｝安息香酸
【化５２】
2009501740.tif 000054
実施例１Ａ由来の４０ｍｇ（０.１１３ｍｍｏｌ）の２−フルオロニコチンアミドを、実施例３を製造するための方法と同様に２８.６ｍｇ（０.１７ｍｍｏｌ）のバニリン酸（vannilinic acid）と反応させ、対応するエーテルを得る。分取ＨＰＬＣによる精製で１２ｍｇ（理論値の２１％）の生成物を油状物として得る。
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５０１（Ｍ＋Ｈ）＋。
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 13.01 (s, 幅広い, 1H), 8.12 (dd, 1H), 8.08 (t, 1H), 7.89 (dd, 1H), 7.61 (m, 1H), 7.49 (hept, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.25 (m, 2H), 7.20 (s, 1H), 7.11 (t, 1H), 3.8 (t, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.38 (m, 2H), 3.35 (m, 2H), 3.22 (m, 2H)。
【０１０５】
Ｂ．生理学的活性の評価
略語：
【表２】
2009501740.tif 000055
本発明の化合物のインビトロ効果を下記において示すことができる：
１．血漿線維素溶解アッセイ
ラットにおけるプラスミノーゲン活性化因子阻害因子−１（ＰＡＩ−１）の阻害剤の同定および本明細書に記載されている物質の活性の定量化を血漿−ベース線維素溶解アッセイを使用して行う。線溶系の阻害をα２−アンチプラスミンもしくはα２−マクログロブリンによるプラスミンレベルまたはＰＡＩ−１によるプラスミノーゲン活性化因子レベルのいずれかで行うことができる。
【０１０６】
ヒトα−トロンビンの添加はいくつかの中間段階を介して三次元構造を有するフィブリンネットワークの発達をもたらす。このフィブリンネットワークは、あらかじめプラスミノーゲン活性化因子ｔＰＡにより不活性のプロ酵素プラスミノーゲンから形成される、セリンプロテアーゼのプラスミンで破壊される。ｔＰＡの活性はプラスミノーゲン活性化因子阻害因子−１（ＰＡＩ−１）により制御される。ＰＡＩ−１の阻害はフィブリンネットワークの破壊の速度増加をもたらす。
【０１０７】
アッセイ法：組み換えラットプラスミノーゲン活性化因子阻害因子１（ＰＡＩ−１；Molecular Innovations Inc., MI, USA）（最終濃度：８.２５ｎＭ；５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ６.２；５０ｍＭのＮａＣｌ；０.１％のＰＥＧ６０００）を１２μｌの容量において、１００μＭから１０ｎＭの濃度範囲における試験される物質または適当な溶媒と９６−ウェルマイクロタイタープレート中で室温で３分間インキュベートする。ヒト乏血小板血漿（Blutspendedienst Deutsches Rotes Kreuz, Hagen, Germany）を緩衝液と１：３の比率で希釈する（１５０ｍＭのＮａＣｌ；２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７.４）。タンパク質／物質混合物にバッチあたり１８３μｌの血漿／緩衝液混合物を加える。次いで８μｌの塩化カルシウム（最終濃度：１０ｍＭ）、ヒト組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ；最終濃度：７.５ｎＭ；Chromogenix, Moelndal, Sweden）およびα−トロンビン（最終濃度：２５ｎＭ；Kordia, Leiden, Netherlands）の混合物を加え、完全に混合し、８０μｌの２つの部分を３８４−ウェルマイクロタイタープレートに移す。フィブリン血餅の形成およびその後の溶解は、４０５ｎｍの波長での吸収測定により追跡される。反応速度を２分間隔で少なくとも３時間にわたって３７℃で測定する（Tecan Saphire, Tecan Germany GmbH, Crailsheim, Germany）。
【０１０８】
データの分析：血餅溶解時間（ＣＬＴ）は最大と最小の吸収の値の半分に到達する時間である。ＰＡＩ−１の不存在下で見いだされるＣＴＬ値は“０％のＰＡＩ−１活性”として定義され、８.２５ｎＭの存在下では“１００％の活性”として定義される。ＣＬＴ５０値は血餅溶解時間が半分に減少する試験物質の濃度を示す。
本発明の化合物の活性に対する代表的なインビトロデータを表Ａに示す：
表Ａ：
【表３】
2009501740.tif 000056
【０１０９】
２．他のセリンプロテアーゼとの選択性比較
２.１  プラスミノーゲン活性化因子  ｔ−ＰＡおよびウロキナーゼ
アッセイ法：物質はｔＰＡ（組織プラスミノーゲン活性化因子）およびウロキナーゼにおける効果の比較で特徴づけられる。この目的のため、ＰＡＩ−１阻害剤をヒトｔＰＡ（Sigma Aldrich Chemie GmbH, Taufkirchen, Germany；最終濃度：１ｎＭ）またはヒトウロキナーゼ（Sigma Aldrich Chemie GmbH, Taufkirchen, Germany；最終濃度：２.５ｎＭ）を５０ｍＭのＴＲＩＳ  ｐＨ７.５、１４０ｍＭのＮａＣｌおよび０.１％のＰＥＧ６０００を有する緩衝液中で室温で１０分間インキュベートする。酵素活性をSPECTRAFluor Plus（Tecan, Maennedorf, Switzerland）中の特異的ペプチド基質（最終濃度１０μＭ；ｔＰＡに対して４４４ＸＦおよびウロキナーゼに対して２４４ＸＦ；American Diagnostica）の開裂のための増加として測定される。最も高い濃度は１０μＭである。
【０１１０】
分析：物質の添加なしで獲得した蛍光値を１００％に合わせ、次いですべての他の値をこの１００％に関連させる。用量活性プロットおよびＩＣ５０値をGraphPad Prismコンピュータープログラムを使用して百分率から計算する。
【０１１１】
２.２.  凝固因子  ＦＸ、ＦＸａ、ＦＩＸａβ、ＦＶＩＩａ、ＦＸＩａならびにセリンプロテアーゼ  プラスミンおよびトリプシン
アッセイ法：凝固因子である因子Ｘ（ＦＸ）、因子Ｘａ（ＦＸａ）、因子ＩＸａβ（ＦＩＸａβ）、因子ＶＩＩａ（ＦＶＩＩａ）、因子ＸＩａ（ＦＸＩａ）およびトロンビン、ならびにセリンプロテアーゼであるプラスミンおよびトリプシンを試験のために使用する。一般的な蛍光発生基質はＩ−１１００（Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＡＭＣ）、Ｉ−１５７５（Ｂｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＡＭＣ  ＨＣｌ）、Ｉ−１５６０（Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＡＭＣ  ＨＣｌ）、およびＩ−１２７５（ＭｅＯＳｕｃ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＡＭＣ  ＴＦＡ）で示される基質である。これらの基質はすべてBachem（Bubendorf, Switzerland）から得ることができる。すべての実験は５０ミリモル（ｍＭ）のＴｒｉｓ、１００ｍＭの塩化ナトリウム、５ｍＭの塩化カルシウム、０.１％のＢＳＡ中、ｐＨ７.４、室温で実施する。すべての実験における最終容量は１００マイクロリットル（μｌ）である。
【０１１２】
個々の混合物において、１０ｎＭのＦＸａを５μＭの基質Ｉ−１１００と、０.３ｎＭのＦＸＩａを５μＭのＩ−１５７５、０.１ｎＭのトリプシンを５μＭのＩ−１１００と、０.００２ｎＭのトロンビンを５μＭのＩ−１５６０と、および０.０１２ｎＭのプラスミンを５０μＭのＩ−１２７５と混合する。組合せのアッセイ系のために、８.８ｎＭのＦＩＸａβまたは１ｐＭのＦＶＩＩａをそれぞれの場合に９.５ｎＭのＦＸａおよび５０μＭの基質Ｉ−１１００と混合する。試験化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の１０ミリモル（ｍＭ）の溶液として製造する。これらの１０ｍＭの貯蔵溶液をＤＭＳＯ中で最初に１：５、次いでアッセイ媒体中で１：１００に希釈する。８回の連続希釈物を初期濃度の１／３に対応するそれぞれの後の濃度でこの２０μＭの溶液から製造する。３０μｌのこれらの個々の希釈混合物を、この酵素／物質混合物の最も高い物質濃度が１０μＭ、次いで順に３.３μＭ、１.１μＭ、０.３７μＭ、０.１２μＭ、０.０４μＭ、０.０１２μＭおよび０.００４μＭに対応するように、３０μｌのセルに加える。この方法で希釈したこれらの試験物質を個々の酵素アッセイ系に加える。６０分間インキュベート後、酵素のアミド分解活性を３６０ｎｍ（励起）および４６５ｎｍ（放出）の波長でSPECTRAFluor Plus（Tecan, Maennedorf, Switzerland）で測定する。
【０１１３】
分析：物質の添加なしで獲得した蛍光値を１００％に合わせ、次いですべての他の値をこの１００％に関連させる。したがって比較実験は異なる日で行うことが可能である。用量活性プロットおよびＩＣ５０値を GraphPad Prism コンピュータープログラムを使用して百分率から計算する。
【０１１４】
２.３  セリンプロテアーゼの阻害
２.３.１  α２−アンチプラスミン
セリンプロテアーゼ阻害剤α２−アンチプラスミンはα２−マクログロブリンのほかに、セリンプロテアーゼプラスミンを阻害することができる。
【０１１５】
アッセイ法：ヒトα２−アンチプラスミン（Sigma-Aldrich Chemie GmbH, Taufkirchen, Germany；最終濃度：５０ｎＭ；５０ｍＭのＴｒｉｓＨＣｌ  ｐＨ７.３；２００ｍＭのＮａＣｌ；０.２％のＢＳＡ）を１０マイクロリットルの容量において、１００から１０μＭの濃度範囲における試験される物質または適当な溶媒と９６−ウェルマイクロタイタープレート中で室温で５分間インキュベートする。α２−アンチプラスミン／物質混合物にバッチあたり２０μｌのヒトプラスミン（Merck Biosciences, Schwalbach/Taunus, Germany；最終濃度：５ｎＭ）を加え、３７℃で１５分間インキュベートする。２０μｌの蛍光プラスミン基質Ｉ１２７５（Bachem、Weil am Rhein、Germany；最終濃度：１５μＭ；５０ｍＭのＴＲＩＳ  ｐＨ７.３、２００ｍＭのＮａＣｌ；０.０２％のＢＳＡ）を次いで加える。３７℃の温度で４０分間インキュベーション後、蛍光シグナルを測定する（Tecan Saphire, Tecan Deutschland GmbH, Crailsheim, Germany；励起：３６０ｎｍ；放出：４６５ｎｍ；ゲイン５０）。
【０１１６】
データの分析：α２−アンチプラスミンの不存在下で見いだされる蛍光値（４６５ｎｍで放出）は“０％阻害”として定義され、５０ｎＭの存在下で“１００％阻害”として定義される。ＩＣ５０値は放出された蛍光が半分に減少した試験物質の濃度を示す。
【０１１７】
２.３.２  α１−アンチトリプシン
セリンプロテアーゼ阻害剤α１−アンチトリプシンはセリンプロテアーゼトリプシンを阻害することができる。
【０１１８】
アッセイ法：ヒトα１−アンチトリプシン（Sigma-Aldrich Chemie GmbH, Taufkirchen, Germany；最終濃度：２μＭ；５０ｍＭのＴｒｉｓＨＣｌ  ｐＨ７.３；１００ｍＭのＮａＣｌ；５ｍＭの塩化カルシウム；０.５％のＢＳＡ）を１０マイクロリットルの容量において、１００から１０μＭの濃度範囲における試験される物質または適当な溶媒と９６−ウェルマイクロタイタープレート中で室温で５分間インキュベートする。α１−アンチトリプシン／物質混合物にバッチあたり２０μｌのヒトトリプシン（Sigma-Aldrich, Taufkirchen, Germany；最終濃度：５００ｎＭ）を加え、３７℃で１５分間インキュベートする。２０μｌの蛍光トリプシン基質Ｉ１１００（Bachem, Weil am Rhein, Germany；最終濃度：１μＭ；５０ｍＭのＴＲＩＳ  ｐＨ７.３、２００ｍＭのＮａＣｌ；０.０２％のＢＳＡ）を次いで加える。３７℃の温度で４０分間インキュベーション後、蛍光シグナルを測定する（Tecan Saphire, Tecan Deutschland GmbH, Crailsheim, Germany；励起：３６０ｎｍ；放出：４６５ｎｍ；ゲイン５０）。
【０１１９】
データの分析：α１−アンチトリプシンの不存在下で見いだされる蛍光値（４６５ｎｍで放出）は“０％阻害”として定義され、２μＭの存在下で“１００％阻害”として定義される。ＩＣ５０値は放出された蛍光が半分に減少した試験物質の濃度を示す。
【０１２０】
血栓症を処置するための本発明の化合物の適合性は下記動物モデルで見いだすことができる：
本発明の化合物は、線維素溶解がＰＡＩ−１−依存メカニズムにより介在される血栓症モデルにおいて研究され得る（参照： Clozel, J Cardiovasc Pharmacol 12:520-5 (1998); Levi, Circulation 85:305-12 (1992); Biemond, Circulation 91:1175-81 (1995); Friederich, Circulation 96:916-21 (1997)）。さらにインビボでのＰＡＩ−１活性における阻害または減少に関して本発明の化合物を特徴付けることができる（参照：Crandall、BBRC 311:904-908 (2003)）。
【０１２１】
本発明の化合物の半減期は下記アッセイで見いだすことができる：
インビボでの明白な半減期を測定するために、試験物質を様々な処方組成物（例えば、血漿、エタノール、ＤＭＳＯ、ＰＥＧ４００など）またはこのような可溶化剤の混合物中に溶解させ、オスウィスターラットに静脈内投与する。投与される用量は０.１から１ｍｇ／ｋｇの範囲である。血液サンプルを、２６時間までの期間にわたる様々な時点で、カテーテルの手段によるかまたは殺すことにより取り出す。試験サンプルにおける物質の定量的測定は、血漿中で調節された検定サンプルを介して血漿中で行う。血漿中に存在するタンパク質はアセトニトリルでの沈殿により除去される。サンプルを次いで２３００  ＨＴＬＣシステムで（Cohesive Technologies, Franklin, MA, USA）逆相カラムを使用してＨＰＬＣにより分画する。ＨＰＬＣシステムを、ターボイオンスプレーインターフェイスを介してAPI 3000 Triple Quadropole 質量分析計（Applied Biosystems, Darmstadt, Germany）に連結させる。血漿濃度時間変化を有効な動態解析プログラムを使用して分析する。
【０１２２】
Ｃ．医薬組成物の典型的な態様
本発明の化合物は下記の方法で医薬品に変換できる：
錠剤：
組成物：
１００ｍｇの本発明の化合物、５０ｍｇのラクトース（一水和物）、５０ｍｇのコーンデンプン（天然）、１０ｍｇのポリビニルピロリドン（ＰＶＰ２５）（BASF, Ludwigshafen, Germany）および２ｍｇのステアリン酸マグネシウム。
錠剤重量２１２ｍｇ。直径８ｍｍ、曲率半径１２ｍｍ。
製造：
本発明の化合物、ラクトースおよびデンプンの混合物を水中のＰＶＰの５％強度溶液（ｍ／ｍ）で造粒する。顆粒を乾燥させ、次いでステアリン酸マグネシウムと５分間混合する。この混合物を慣用の打錠機で打錠する（上記錠剤のフォーマット参照）。ガイドラインのとおり、１５ｋＮの打錠力を打錠のために使用する。
【０１２３】
経口懸濁剤：
組成物：
１０００ｍｇの実施例１の化合物、１０００ｍｇのエタノール（９６％）、４００ｍｇの Rhodigel（ＦＭＣ、ＵＳＡからのキサンタンゴム）および９９ｇの水。
１０ｍｌの経口懸濁剤は１００ｍｇの本発明の化合物の単回投与に相当する。
製造：
Rhodigel をエタノール中に懸濁し、本発明の化合物を懸濁液に加える。水を撹拌しながら加える。混合物を Rhodigel の膨張が完了するまで約６時間撹拌する。
【０１２４】
静脈内に投与され得る液剤：
組成物：
１ｍｇの本発明の化合物、１５ｇのポリエチレングリコール４００および２５０ｇの注射用水。
製造：
本発明の化合物をポリエチレングリコール４００と一緒に撹拌しながら水中に溶解させる。溶液を濾過（孔直径０.２２μｍ）により滅菌し、無菌条件下で加熱滅菌注入ボトルに分配する。これらは注入ストッパーおよびクリンプキャップで密閉される。
【国際調査報告】
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