(57)【要約】  本発明は、アプタマーの制御放出又は持続放出のためのゲル状医薬組成物、及び、必要としている動物に対してその医薬組成物を投与することによって動物の状態を治療又は予防する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
リン脂質又はスフィンゴミエリン；
少なくとも１つの有機溶媒；及び
アプタマー又は医薬として許容されるその塩
を含む医薬組成物であって、ここで、前記リン脂質又はスフィンゴミエリン及び少なくとも１つの有機溶媒が、ゲルを形成するのに十分な量で存在する医薬組成物。
【請求項２】
前記少なくとも１つの有機溶媒が、極性非プロトン性有機溶媒と極性プロトン性有機溶媒との組み合わせである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記プロトン性有機溶媒と前記非プロトン性有機溶媒との比が、９０：１０〜１０：９０の範囲である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記プロトン性有機溶媒がグリセロールホルマールであり、前記非プロトン性有機溶媒がプロピレンカーボネートである、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記リン脂質が、一般構造：
【化１】
2009515961.tif 000032
（式中、Ｒ2及びＲ3が、それぞれ、独立して、ステアロイル基又はパルミトイル基であり、ここで、ステアロイル基とパルミトイル基との比は約８５：１５であり、Ｒ1はＯ-である）
を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
２５℃における医薬組成物の粘度が、約１，０００ｃＰ〜７５，０００ｃＰの範囲である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記リン脂質が、医薬組成物に対して約０．１重量パーセント〜１０重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記リン脂質が、医薬組成物に対して約１重量パーセント〜４重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
さらにポリマーを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記ポリマーが、医薬組成物に対して約０．１重量パーセント〜１０重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記ポリマーが、ヒドロキシプロピルセルロース又はヒドロキシプロピルメチルセルロースである、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記リン脂質が、一般構造：
【化２】
2009515961.tif 000033
（式中、Ｒ2及びＲ3が、それぞれ、独立して、ステアロイル基又はパルミトイル基であり、ここで、ステアロイル基とパルミトイル基との比は約８５：１５であり、Ｒ1はＯ-である）
を有する、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
２５℃における医薬組成物の粘度が、約１，０００ｃＰ〜７５，０００ｃＰの範囲である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、医薬組成物に対して約１重量パーセントを超える量で存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、医薬組成物に対して約１〜１５重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）プロトン化アプタマーと（ｉｉ）医薬として許容される有機塩基との間で形成される塩を含むアプタマー組成物として存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記医薬として許容される有機塩基が、シクロヘキシルアミン；シクロペンチルアミン；シクロヘキシルアミン；ジシクロヘキシルアミン；トリブチルアミン；Ｎ−メチルアミン；Ｎ−エチルアミン；ジエチルアミン；ジメチルアミン；トリエチルアミン；モノ−、ビス−、若しくはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン；２−ヒドロキシ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン；トリス−（ヒドロキシメチル）メチルアミン；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アミン；Ｎ，Ｎ−ジアルキル−Ｎ−トリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン；ピリジン；ベンジルアミン；フェネチルアミン；Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン；Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン；クロロプロカイン；コリン；プロカイン、アミノ酸、並びにアミノ酸のエステル及びアミドから成る群より選択される、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）プロトン化アプタマーと（ｉｉ）アミノ酸のエステル又はアミドとの間で形成される塩を含むアプタマー組成物として存在し、
ここで、前記アミノ酸エステルが、構造：
【化３】
2009515961.tif 000034
（式中、
Ｒは、アミノ酸の側鎖を表し；
Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22の炭化水素基を表す）
を有し、又は、
及び、前記アミノ酸アミドが、構造：
【化４】
2009515961.tif 000035
（式中、
Ｒは、アミノ酸の側鎖を表し；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ22の炭化水素基を表し；及び
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ22の炭化水素基を表す）
を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記アミノ酸のエステル又はアミドが、リジンのエステル又はアミドである、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
さらにカルボン酸を含む、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記カルボン酸が脂肪酸である、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）プロトン化アプタマーと（ｉｉ）ポリリジンとの間で形成される塩を含むアプタマー組成物として存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）アプタマーと（ｉｉ）二価の金属カチオンとを含むアプタマー組成物として存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記アプタマー組成物が、さらにカルボキシレートを含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記少なくとも１つの有機溶媒が、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマール、及びそれらの混合物から成る群より選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記溶媒が、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールである、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記有機溶媒が、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールである、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記有機溶媒が、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールと実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールとの混合物である、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記リン脂質が、一般構造：
【化５】
2009515961.tif 000036
（式中、Ｒ2及びＲ3が、それぞれ、独立して、ステアロイル基又はパルミトイル基であり、ここで、ステアロイル基とパルミトイル基との比が約８５：１５であり、Ｒ1はＯ-である）
を有する、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
２５℃における医薬組成物の粘度が、約１，０００ｃＰ〜７５，０００ｃＰの範囲である、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
前記リン脂質又はスフィンゴミエリンが、医薬組成物に対して約０．１重量パーセント〜１０重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
前記リン脂質又はスフィンゴミエリンが、医薬組成物に対して約１重量パーセント〜４重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
さらにポリマーを含む、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記ポリマーが、医薬組成物に対して約０．１〜１０重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記ポリマーが、ヒドロキシプロピルセルロース又はヒドロキシプロピルメチルセルロースである、請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、医薬組成物に対して約１重量パーセントを超える量で存在する、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、医薬組成物に対して約１〜１５重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）プロトン化アプタマーと（ｉｉ）医薬として許容される有機塩基との間で形成される塩を含むアプタマー組成物として存在する、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記医薬として許容される有機塩基が、シクロヘキシルアミン；シクロペンチルアミン；シクロヘキシルアミン；ジシクロヘキシルアミン；トリブチルアミン；Ｎ−メチルアミン；Ｎ−エチルアミン；ジエチルアミン；ジメチルアミン；トリエチルアミン；モノ−、ビス−、若しくはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン；２−ヒドロキシ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン；トリス−（ヒドロキシメチル）メチルアミン；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アミン；Ｎ，Ｎ−ジアルキル−Ｎ−トリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン；ピリジン；ベンジルアミン；フェネチルアミン；Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン；Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン；クロロプロカイン；コリン；プロカイン；アミノ酸、及びアミノ酸のエステル若しくはアミドから成る群より選択される、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）プロトン化アプタマーと（ｉｉ）アミノ酸のエステル又はアミドとの間で形成される塩を含むアプタマー組成物として存在し、
ここで、前記アミノ酸エステルが、構造：
【化６】
2009515961.tif 000037
（式中、
Ｒは、アミノ酸の側鎖を表し；及び
Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22の炭化水素基を表す）
を有し、又は、
前記アミノ酸アミドが、構造：
【化７】
2009515961.tif 000038
（式中、
Ｒは、アミノ酸の側鎖を表し；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ22の炭化水素基を表し；及び
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ22の炭化水素基を表す）
を有する、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記アミノ酸のエステル又はアミドが、リジンのエステル又はアミドである、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
さらにカルボン酸を含む、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記カルボン酸が脂肪酸である、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）プロトン化アプタマーと（ｉｉ）ポリリジンとの間で形成される塩を含むアプタマー組成物として存在する、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）該アプタマーと（ｉｉ）二価の金属カチオンとを含むアプタマー組成物として存在する、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記アプタマー組成物が、さらにカルボキシレートを含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
前記カルボキシレートが、脂肪酸のカルボキシレートである、請求項４６に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
前記少なくとも１つの有機溶媒が：（ａ）実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される第１溶媒、並びに（ｂ）Ｎ−メチルピロリドンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
前記第１溶媒が、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールである、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
前記第１有機溶媒が、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールである、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
前記第１溶媒が、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールと実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールとの混合物である、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
前記リン脂質が、一般構造：
【化８】
2009515961.tif 000039
（式中、Ｒ2及びＲ3が、それぞれ、独立して、ステアロイル基又はパルミトイル基であり、ここで、ステアロイル基とパルミトイル基との比が約８５：１５であり、Ｒ1はＯ-である）
を有する、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
２５℃における医薬組成物の粘度が、約１，０００ｃＰ〜７５，０００ｃＰの範囲である、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５４】
前記リン脂質又はスフィンゴミエリンが、医薬組成物に対して約０．１重量パーセント〜１０重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５５】
前記リン脂質又はスフィンゴミエリンが、医薬組成物に対して約１重量パーセント〜４重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項５６】
さらにポリマーを含む、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５７】
前記ポリマーが、医薬組成物に対して約０．１〜１０重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項５６に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
前記ポリマーが、ヒドロキシプロピルセルロース又はヒドロキシプロピルメチルセルロースである、請求項５６に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、医薬組成物に対して約１重量パーセントを超える量で存在する、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項６０】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、医薬組成物に対して約１〜１５重量パーセントの範囲の量で存在する、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）プロトン化アプタマーと（ｉｉ）医薬として許容される有機塩基との間で形成される塩を含むアプタマー組成物として存在する、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項６２】
前記医薬として許容される有機塩基が、シクロヘキシルアミン；シクロペンチルアミン；シクロヘキシルアミン；ジシクロヘキシルアミン；トリブチルアミン；Ｎ−メチルアミン；Ｎ−エチルアミン；ジエチルアミン；ジメチルアミン；トリエチルアミン；モノ−、ビス−、若しくはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン；２−ヒドロキシ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン；トリス−（ヒドロキシメチル）メチルアミン；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アミン；Ｎ，Ｎ−ジアルキル−Ｎ−トリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン；ピリジン；ベンジルアミン；フェネチルアミン；Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン；Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン；クロロプロカイン；コリン；プロカイン；アミノ酸、及びアミノ酸のエステル若しくはアミドから成る群より選択される、請求項６１に記載の医薬組成物。
【請求項６３】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）プロトン化アプタマーと（ｉｉ）アミノ酸のエステル又はアミドとの間で形成される塩を含むアプタマー組成物として存在し、
ここで、前記アミノ酸エステルが、構造：
【化９】
2009515961.tif 000040
（式中、
Ｒは、アミノ酸の側鎖を表し；及び
Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22の炭化水素基を表す）
を有し、又は、
前記アミノ酸アミドが、構造：
【化１０】
2009515961.tif 000041
（式中、
Ｒは、アミノ酸の側鎖を表し；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ22の炭化水素基を表し；及び
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ22の炭化水素基を表す）
を有する、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項６４】
前記アミノ酸のエステル又はアミドが、リジンのエステル又はアミドである、請求項６３に記載の医薬組成物。
【請求項６５】
さらにカルボン酸を含む、請求項６４に記載の医薬組成物。
【請求項６６】
前記カルボン酸が、脂肪酸である、請求項６５に記載の医薬組成物。
【請求項６７】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）プロトン化アプタマーと（ｉｉ）ポリリジンとの間で形成される塩を含むアプタマー組成物として存在する、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項６８】
前記アプタマー又は医薬として許容されるその塩が、（ｉ）該アプタマーと（ｉｉ）二価の金属カチオンとを含むアプタマー組成物として存在する、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項６９】
前記アプタマー組成物が、さらにカルボキシレートを含む、請求項６８に記載の医薬組成物。
【請求項７０】
前記カルボキシレートが、脂肪酸のカルボキシレートである、請求項６８に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
１．関連出願への相互参照
本出願は、２００５年１１月１６日に出願された米国仮特許出願第６０／７３６，８６３号の利益を主張するものであり、この内容は参照により本明細書中に援用される。
【０００２】
２．発明の背景
２．１  発明の分野
本発明は、アプタマーの制御放出若しくは持続放出のためのゲル状医薬組成物、及び必要としている動物にその医薬組成物を投与して動物の状態を治療若しくは予防する方法に関する。この医薬組成物は、経口投与、局所投与、耳投与、注射投与、及び眼投与に適している。
【背景技術】
【０００３】
例えば血中レベルなど、薬物の少なくとも最低限の治療レベルを長時間にわたって維持することができる制御放出又は持続放出製剤を用いて薬物を投与することが望まれる場合は多い。これらの制御放出又は持続放出製剤により、投与の回数が減ることで利便性及び服用遵守が向上し、さらに副作用の重症度及び回数も減少する。例えば、血中レベルを実質的に一定に維持し、一日あたり数回投与される従来の速放性製剤などに伴う薬物の血中レベルの変動を回避することにより、制御放出又は持続放出製剤は、従来の速放性製剤で得ることができるよりも優れた治療特性を提供することができる。
【０００４】
薬物の制御放出又は持続放出のための公知の方法としては、浸透圧ポンプなどの移植デバイス、及び移植、経口投与、又は注射投与が可能な生体適合性ポリマーマトリックス中に分散した薬物が挙げられる。このような用途に用いられる生体適合性ポリマーの例としては、ポリ乳酸及び乳酸−グリコール酸共重合ポリマーが挙げられる。このポリマーは、通常インビボでゆるやかな加水分解を受け、内部に取り込まれた薬物を連続的に徐々に放出する。ポリマーの分解物は無毒性であり、生体によって吸収又は代謝される。例えば、生体適合性ポリマーがポリ乳酸又は乳酸−グリコール酸共重合ポリマーの場合、分解物は出発物質の酸である乳酸とグリコール酸であり、これらは生体に吸収される。
【０００５】
Ｗａｎｇらによる米国特許第５，１１０，８０９号には、イミダゾール、ステロイド、一価及び二価アルコールを含む共溶媒系、並びにヒドロキシアルキルセルロースゲル化剤を含有する外用抗真菌剤用途の安定な無水ゲル製剤が開示されている。
【０００６】
国際公開ＷＯ００／０９１１７には、水溶性の低い非ステロイド系抗炎症剤であるニメスルフィド（ｎｉｍｅｓｕｌｆｉｄｅ）を含有する外用医薬組成物が開示されている。
【０００７】
Ｐｅｌｌｉｃｏによる米国特許第６，２１４，３３９号には、液体又は流動性ゲルキャリア中の実質的に非水性である二酵素系治療用組成物（ｄｉｅｎｚｙｍａｔｉｃ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）を投与することを含む、イヌ及びネコの外耳炎の治療方法が開示されている。例示組成物は、グルコース、グルコースオキシダーゼ、ヨウ化カリウム、及びラクトペルオキシダーゼを、グリセロールとプロピレングリコールとの流体混合物中に含有する。
【０００８】
ユーラシア特許ＥＡ０００２９７８Ｂ１には、第一独立請求項にリン脂質懸濁液を調製するプロセスが請求されている。
【０００９】
米国特許出願ＵＳ２００４／０２２０２６４には、酸性医薬物と機能性物質との分子複合体を含有する組成物、その組成物の作製方法、及びその組成物の使用が開示されている。機能性物質としては、アルカリ性アミノ酸、アミノ酸アミド、アミノ酸エステル、又は関連アミノ酸を用いることができる。この組成物は薬物を皮膚組織へ送達するのに有用であるとされている。
【００１０】
米国特許出願ＵＳ２００４／０１９７４０８には、疎水性ブロックと親水性ブロックとを有するジブロック共重合ポリマー、並びにアミノ酸及びオリゴペプチドから選択される添加剤を含む製剤が開示されている。この製剤は、水と混合することでミセル状の薬物送達媒体を形成する。
【００１１】
アプタマーはタンパク質又は代謝物などの特定の標的分子と結合するオリゴヌクレオチドであり、合成したものでも天然のものでもよい。通常、この結合は従来のワトソン−クリック塩基対以外の相互作用による。
【００１２】
アプタマーは、現在の前臨床開発及び臨床開発において有望な治療薬に分類される。例えばペプチド又はモノクローナル抗体などの生物製剤（ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ）のように、アプタマーは分子標的と特異的に結合することができ、結合を通して標的の機能を阻害する。典型的なアプタマーはサイズが１０〜１５ｋＤａ（すなわち、３０〜４５ヌクレオチド）であり、サブナノモルの親和性で標的と結合して、関連性の高い標的を区別する（例えば、同一の遺伝子ファミリーの他のタンパク質とは通常結合しない）（Ｇｒｉｆｆｉｎら，（１９９３），Ｇｅｎｅ  １３７（１）：２５−３１；Ｊｅｎｉｓｏｎら，（１９９８）,Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．８（４）：２６５−７９；Ｂｅｌｌら，（１９９９），Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｃｅｌｌ．Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．Ａｎｉｍ．３５（９）：５３３−４２；Ｗａｔｓｏｎら，（２０００），Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．１０（２）：６３−７５；Ｄａｎｉｅｌｓら，（２００２），Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３０５（２）：２１４−２６；Ｃｈｅｎら，（２００３），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１００（１６）：９２２６−３１；Ｋｈａｔｉら，（２００３），Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７７（２３）：１２６９２−８；Ｖａｉｓｈら，（２００３），Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４２（２９）：８８４２−５１）。
【００１３】
アプタマーは、米国特許第５，４７５，０９６号及び第５，２７０，１６３号に記載のように、ランダム配列オリゴヌクレオチドのライブラリーからの完全にインビトロでの選別プロセス（試験管内進化法（Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌｉｇａｎｄｓ  ｂｙ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ）、いわゆるＳＥＬＥＸ（商標））によって作り出すことができる。アプタマーは、増殖因子、酵素、免疫グロブリン、及び受容体を含む治療に関係する数多くのタンパク質に対して作製されている（Ｅｌｌｉｎｇｔｏｎ及びＳｚｏｓｔａｋ（１９９０），Ｎａｔｕｒｅ  ３４６（６２８７）：８１８−２２；Ｔｕｅｒｋ及びＧｏｌｄ（１９９０），Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９（４９６８）：５０５−５１０）。
【００１４】
アプタマーは治療用として数多くの魅力的な特性を有している。標的への高い親和性及び特異性に加えて、アプタマーは、標準的なアッセイでは毒性も免疫原性もほとんど又はまったく示さない（Ｗｌｏｔｚｋａら，（２００２），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９（１３）：８８９８−９０２）。確かに、いくつかの治療用アプタマーが、薬物動態分析、細胞及び動物疾患モデルにおける生物的効力の特定、並びに予備安全性薬理評価を含む様々な前臨床開発の段階を通じて最適化され進歩してきた（Ｒｅｙｄｅｒｍａｎ及びＳｔａｖｃｈａｎｓｋｙ（１９９８），Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １５（６）：９０４−１０；Ｔｕｃｋｅｒら，（１９９９），Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ｂ．７３２：２０３−２１２；Ｗａｔｓｏｎら，（２０００），Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．１０（２）：６３−７５）。
【００１５】
アプタマーを含むオリゴヌクレオチドを主体とした治療薬はすべて、所望する医薬用途に適合するようにその薬物動態特性を調節することが重要である。細胞外の標的に対するアプタマーは（アンチセンス治療やＲＮＡｉ治療では問題となるような）細胞内送達に付随する問題が生ずることはないが、アプタマーは標的器官及び組織に分配され、所望の投与計画と合致する期間の間、体内で（未修飾の形で）保持されなければならない。核酸主体の治療薬に関する初期の研究によると、未修飾のオリゴヌクレオチドがヌクレアーゼによって急速に分解されるのに対して、糖の２’位を保護基で修飾し、例えば［３’−３’ｄＴ］のような末端逆位キャップ構造（ｉｎｖｅｒｔｅｄ  ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｃａｐ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）とすることで、インビトロ及びインビボでの核酸の安定性が飛躍的に向上する（Ｇｒｅｅｎら，（１９９５），Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．２（１０）：６８３−９５；Ｊｅｌｌｉｎｅｋら，（１９９５），Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３４（３６）：１１３６３−７２；Ｒｕｃｋｍａｎら，（１９９８），Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７３（３２）：２０５５６−６７；Ｕｈｌｍａｎｎら，（２０００），Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．３１３：２６８−８４）。ＳＥＬＥＸ法による選別方法（すなわち、ＳＥＬＥＸ実験又はセレクション（ＳＥＬＥＸｉｏｎ））の中には、アプタマーを選別する核酸の初期プールが、例えば２’−フルオロピリミジン（２’−Ｆ）置換ヌクレオチドの取り込みなどの化学修飾によって通常あらかじめ安定化され、アプタマーのヌクレアーゼ分解に対する耐性が高められているものがある。ＳＥＬＥＸ法後の修飾工程を通して、又はより最近ではＳＥＬＥＸ法そのものに不可欠な構成要素として２’−ＯＭｅを含むランダム配列ライブラリーを合成可能とすることによって、２’−Ｏ−メチルプリン（２’−ＯＭｅプリン）置換ヌクレオチドを取り込んだアプタマーも開発されている。
【００１６】
オリゴヌクレオチド治療薬は、ヌクレアーゼによって排除されるのに加えて、腎臓のろ過によっても除去される。従って、ろ過を防ぐことができない限り、静脈投与されたヌクレアーゼ耐性を有するオリゴヌクレオチドのインビボでの半減期は１０分未満となる。これは、血流から組織内への素早い分配を促進するか、又はオリゴヌクレオチドの見かけ分子量を糸球体の有効カットオフサイズよりも大きくすることによって実現することができる。ＰＥＧポリマーへの抱合（ペグ化）によって、アプタマーの循環血液中での耐性時間を飛躍的に伸ばすことができ、それによって投与回数が減り標的への効果が高まる（Ｒｅｙｄｅｒｍａｎ及びＳｔａｖｃｈａｎｓｋｙ（１９９８），Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １５（６）：９０４−１０；Ｗａｔｓｏｎら，（２０００），Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．１０（２）：６３−７５）。修飾部位と抱合体形成されたもの、又は修飾ヌクレオチドを含有するものを含むアプタマー治療薬の血管外遊出を定量すること、及び、特には、アプタマー又はその修飾された形が疾患組織（例えば炎症部位、若しくは腫瘍内部）へ到達する能力を定量することによって、アプタマー処置による治療の可能性の範囲が明らかとなる。
【００１７】
通常、治療用アプタマーは、例えば皮下注射などの注射投与が行われる。従って、アプタマーは投与のための液状媒体に溶解しなければならない。しかしながら、アプタマー、特に例えばペグ化などによって誘導体化されたアプタマーは比較的分子量が高く、動物への投与に対して臨床的に有用な医薬組成物を提供するのに十分な濃度で医薬として許容される溶媒中にアプタマーが溶解された医薬として許容される組成物を得ることが困難であることが多い。
【００１８】
米国特許出願公開第２００５／０１７５７０８号には、哺乳類においてアプタマーの持続的な送達が可能となる物質の組成物が開示されている。アプタマーは、アプタマーの対象部位への持続放出が可能で、そのためアプタマーの生物活性を長い時間にわたって発揮することができるマイクロスフェアとして投与される。アプタマーとしては抗ＶＥＧＦアプタマーを用いることができる。
【００１９】
Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，（２００４），Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：１５，２５−３３には、血管内皮増殖因子と結合し良好な安定性を示す２’−Ｏ−メチルアプタマー（ＡＲＣ２４５）を作製する方法が開示されている。
【００２０】
従って、当該技術分野において、治療剤としてアプタマーを用いた医薬組成物の改良が必要とされている。特に、動物への投与に対して臨床的に有用でありアプタマーの制御放出又は持続放出を行う医薬組成物を提供するのに十分な濃度で、及び医薬として許容される剤形で、アプタマーを含有することができる医薬組成物が求められている。本発明はこれらの、及びその他の要求に対応するものである。
【００２１】
本出願におけるいずれの参考文献の引用も、その参考文献が本出願の先行技術であることを承認するものとして解釈されるべきではない。
【発明の開示】
【００２２】
３．発明の概要
本発明のこれらの、及びその他の特徴及び利点は、本開示の残りの部分、特にすべて本発明の原理を例示する形で示している以下の好適な態様の詳細な説明から明らかとなるであろう。
【００２３】
本発明は、アプタマー又は医薬として許容されるその塩を含む医薬組成物に関する。医薬組成物はゲル状である。一つの態様では、医薬組成物はアプタマーの制御放出又は持続放出を行う。
【００２４】
一つの態様では、医薬組成物は、リン脂質若しくはスフィンゴミエリン；少なくとも１種類の有機溶媒；及びアプタマーを含み、この場合リン脂質若しくはスフィンゴミエリン及び少なくとも１種類の有機溶媒はゲルを形成するのに十分な量で存在する。
【００２５】
一つの態様では、医薬組成物は、リン脂質；少なくとも１種類の有機溶媒；及びアプタマーを含み、この場合リン脂質及び少なくとも１種類の有機溶媒はゲルを形成するのに十分な量で存在する。
【００２６】
一つの態様では、医薬組成物は、（ｉ）リン脂質若しくはスフィンゴミエリン；（ｉｉ）極性非プロトン性有機溶媒；（ｉｉｉ）極性プロトン性有機溶媒；及び（ｉｖ）アプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質若しくはスフィンゴミエリン、極性非プロトン性有機溶媒、及び極性プロトン性有機溶媒はゲルを形成するのに十分な量で存在する。
【００２７】
一つの態様では、医薬組成物は、（ｉ）リン脂質；（ｉｉ）極性非プロトン性有機溶媒；（ｉｉｉ）極性プロトン性有機溶媒；及び（ｉｖ）アプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質、極性非プロトン性有機溶媒、及び極性プロトン性有機溶媒はゲルを形成するのに十分な量で存在する。
【００２８】
一つの態様では、医薬組成物は、（ｉ）リン脂質若しくはスフィンゴミエリン；（ｉｉ）プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される溶媒；並びに（ｉｉｉ）アプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合、リン脂質若しくはスフィンゴミエリン、並びに、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される溶媒は、ゲルを形成するのに十分な量で存在する。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールである。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールである。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールと実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールとの混合物である。
【００２９】
一つの態様では、医薬組成物は、（ｉ）リン脂質；（ｉｉ）プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される溶媒；並びに（ｉｉｉ）アプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質若しくはスフィンゴミエリン並びに、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される溶媒は、ゲルを形成するのに十分な量で存在する。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールである。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールである。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールと実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールとの混合物である。
【００３０】
一つの態様では、医薬組成物は、（ｉ）（ａ）プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される第１溶媒と（ｂ）Ｎ−メチルピロリドンとを含む溶媒；（ｉｉ）リン脂質若しくはスフィンゴミエリン；並びに（ｉｉｉ）アプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質若しくはスフィンゴミエリン及び溶媒はゲルを形成するのに十分な量で存在する。一つの態様では、第１溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールである。一つの態様では、第１溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールである。一つの態様では、第１溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールと実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールとの混合物である。
【００３１】
本発明は、さらに、必要としている動物に本発明の医薬組成物を投与することを含む、動物の状態を治療する方法に関する。
【００３２】
４．図面の簡単な説明
該当図なし。
【００３３】
５．発明の詳細な説明
本発明は、ゲルであり、アプタマーを含む医薬組成物に関する。一つの態様では、医薬組成物はアプタマーの制御放出又は持続放出を行う。
【００３４】
一つの態様では、医薬組成物は、リン脂質若しくはスフィンゴミエリン及び少なくとも１種類の有機溶媒；及びアプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質若しくはスフィンゴミエリン及び少なくとも１種類の有機溶媒はゲルを形成するのに十分な量で存在する。
【００３５】
一つの態様では、医薬組成物は、リン脂質；少なくとも１種類の有機溶媒；及びアプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質及び少なくとも１種類の有機溶媒はゲルを形成するのに十分な量で存在する。
【００３６】
一つの態様では、医薬組成物は、（ｉ）リン脂質若しくはスフィンゴミエリン；（ｉｉ）極性非プロトン性有機溶媒；（ｉｉｉ）極性プロトン性有機溶媒；及び（ｉｖ）アプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質若しくはスフィンゴミエリン、極性非プロトン性有機溶媒、及び極性プロトン性有機溶媒はゲルを形成するのに十分な量で存在する。
【００３７】
一つの態様では、医薬組成物は、（ｉ）リン脂質；（ｉｉ）極性非プロトン性有機溶媒；（ｉｉｉ）極性プロトン性有機溶媒；及び（ｉｖ）アプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質、極性非プロトン性有機溶媒、及び極性プロトン性有機溶媒はゲルを形成するのに十分な量で存在する。
【００３８】
一つの態様では、医薬組成物は、（ｉ）リン脂質若しくはスフィンゴミエリン、（ｉｉ）実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される溶媒、並びに（ｉｉｉ）アプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質若しくはスフィンゴミエリン、並びに、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される溶媒は、ゲルを形成するのに十分な量で存在する。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールである。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールである。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールと実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールとの混合物である。
【００３９】
一つの態様では、医薬組成物は、（ｉ）リン脂質、（ｉｉ）実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される溶媒、並びに（ｉｉｉ）アプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質、並びに、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される溶媒は、ゲルを形成するのに十分な量で存在する。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールである。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールである。一つの態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールと実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールとの混合物である。
【００４０】
一つの態様では、医薬組成物は、（ｉ）（ａ）実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される第１溶媒と（ｂ）Ｎ−メチルピロリドンとを含む溶媒；（ｉｉ）リン脂質若しくはスフィンゴミエリン；並びに（ｉｉｉ）アプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質若しくはスフィンゴミエリン及び溶媒はゲルを形成するのに十分な量で存在する。一つの態様では、第１溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールである。一つの態様では、第１溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールである。一つの態様では、第１溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールと実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールとの混合物である。
【００４１】
一つの態様では、医薬組成物は、（ｉ）（ａ）実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される第１溶媒と（ｂ）Ｎ−メチルピロリドンとを含む溶媒；（ｉｉ）リン脂質；並びに（ｉｉｉ）アプタマー若しくは医薬として許容されるその塩を含み、この場合リン脂質及び溶媒はゲルを形成するのに十分な量で存在する。一つの態様では、第１溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールである。一つの態様では、第１溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールである。一つの態様では、第１溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコールと実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールとの混合物である。
【００４２】
本発明は、さらに、必要としている動物に本発明の医薬組成物を投与することを含む、動物の状態を治療する方法に関する。
【００４３】
７．１  定義
本明細書中で使用するとき、用語「ゲル」は、２０℃における平均粘度が少なくとも約１０００センチポアズ（「ｃＰ」）、好ましくは少なくとも約２０００ｃＰ、より好ましくは少なくとも約５０００ｃＰ、さらに好ましくは少なくとも約７５００ｃＰ，最も好ましくは少なくとも約１００００ｃＰであるが、約１０００００ｃＰ未満、好ましくは約７５０００ｃＰ未満である物質を意味する。通常、ゲルはその成分間で、例えば会合複合体などの形で静的な及び／又は動的な相互作用を示し、それは一般に可逆的で、力（例えばせん断力）及び／又は温度をかけることで流動状態となる。
【００４４】
本明細書中で使用するとき、用語「リン脂質」は、一般式：
【００４５】
【化１】
2009515961.tif 000002
【００４６】
を有する化合物を意味し、
式中、
Ｒ1は、−ＯＨ、又は−Ｏ-を表し；
Ｒ2は：
（ｉ）−Ｈ、又は
（ｉｉ）Ｃ2−Ｃ36の飽和若しくは不飽和、直鎖若しくは分岐のアシル基、
を表し；
Ｒ3は：
（ｉ）−Ｈ、
（ｉｉ）Ｃ2−Ｃ36の飽和若しくは不飽和、直鎖若しくは分岐のアシル基；又は、
（ｉｉｉ）−Ｃ＝Ｃ−Ｒ9を表し、ここで、Ｒ9は任意に１以上の窒素含有基で置換されていてもよいＣ1−Ｃ22の飽和若しくは不飽和、直鎖若しくは分岐の炭化水素基であり；
Ｒ2又はＲ3の少なくとも１つは−Ｈではなく；
【００４７】
Ｒ4は：
（ｉ）−Ｈ；
（ｉｉ）−（ＣＨ2）n−Ｒ5、ここで、Ｒ5は−Ｎ（Ｒ6）（Ｒ7）若しくは−Ｎ+（Ｒ6）（Ｒ7）（Ｒ8）を表し、Ｒ6、Ｒ7、及びＲ8は各々独立して−Ｈ若しくはＣ1−Ｃ3のアルキル基を表すか、又はＲ6とＲ7が結合して５員環若しくは６員環の窒素含有複素環を形成し、ｎは１から４までの整数を表し、好ましくは２である；
（ｉｉｉ）
【００４８】
【化２】
2009515961.tif 000003
【００４９】
（ｉｖ）
【００５０】
【化３】
2009515961.tif 000004
【００５１】
式中、Ｒ10は、独立して、−Ｈ若しくは−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）2である；又は、
（ｖ）−ＣＨ2ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ2（ＯＨ）
を表す。
【００５２】
本明細書中で使用するとき、「飽和又は不飽和、直鎖又は分岐のＣ2−Ｃ36のアシル基」とは、式−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒで表される基であり、式中、Ｒは飽和又は不飽和、直鎖又は分岐であってよいＣ1−Ｃ35の炭化水素基である。
【００５３】
本明細書中で使用するとき、用語「スフィンゴミエリン」は、一般式：
【００５４】
【化４】
2009515961.tif 000005
【００５５】
を有する化合物を意味し、
式中、
Ｒ1は、−ＯＨ、又は−Ｏ-を表し；
Ｒ4は：
（ｉ）−Ｈ；又は
（ｉｉ）−（ＣＨ2）n−Ｒ5を表し、ここで、Ｒ5は−Ｎ（Ｒ6）（Ｒ7）若しくは−Ｎ+（Ｒ6）（Ｒ7）（Ｒ8）を表し、Ｒ6、Ｒ7、及びＲ8は各々独立して−Ｈ若しくはＣ1−Ｃ3のアルキル基を表すか、又はＲ6とＲ7が結合して５員環若しくは６員環の窒素含有複素環を形成し、ｎは１から４までの整数を表し、好ましくは２である；
Ｒ11は、任意に１若しくは２種類以上の窒素含有基で置換されていてもよいＣ1−Ｃ22の飽和若しくは不飽和、直鎖若しくは分岐の炭化水素基を表す。
【００５６】
本明細書中で使用するとき、用語「脂肪酸」は、式Ｒ−Ｃ（Ｏ）ＯＨで表されるカルボン酸を意味し、式中、ＲはＣ6−Ｃ22の直鎖若しくは分岐、飽和若しくは不飽和の炭化水素基を表す。代表的な脂肪酸としては、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、パルミン酸、パルミトオレイン酸、オレイン酸、リノール酸、及びリノレン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５７】
本明細書中で使用するとき、用語「ポリカルボン酸」は、１個超の−Ｃ（Ｏ）ＯＨ基を有するポリマー化合物を意味する。当業者であれば、１個超の−Ｃ（Ｏ）ＯＨ基を有するポリマー化合物を容易に認識するであろう。代表的なポリカルボン酸としては、ヒアルロン酸、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、及びポリアクリル酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
本明細書中で使用するとき、用語「有機溶媒」は、約２０℃若しくはそれより高温で、好ましくは約１０℃若しくはそれより高温で、より好ましくは０℃若しくはそれより高温で、最も好ましくは−１０℃若しくはそれより高温で流体である、有機化合物又は有機化合物の混合物を意味する。典型的な有機溶媒の分子量は約５００ｇ／ｍｏｌ以下、好ましくは１００ｇ／ｍｏｌ以下である。有機溶媒を動物へ投与する場合は、有機溶媒が、適度な効果／リスク比に対応する、過剰な毒性、刺激、又はアレルギー反応などの過度な有害作用を実質的に誘起しない化合物であることが好ましい（すなわち、「医薬として許容される有機溶媒」）。
【００５９】
本明細書中で使用するとき、用語「極性非プロトン性有機溶媒」は、誘電率が約２０超、好ましくは約３０超、より好ましくは約５０超であり、−ＯＨ官能基を持たない有機溶媒を意味する。
【００６０】
本明細書中で使用するとき、用語「極性プロトン性有機溶媒」は、誘電率が約２０超、好ましくは約３０超、より好ましくは約５０超であり、−ＯＨ官能基を持つ有機溶媒を意味する。
【００６１】
本明細書中で使用するとき、用語「アプタマー」は、タンパク質又は代謝物などの特定の標的分子とワトソン−クリック塩基対以外の形で結合することができ、動物に対して薬理学的効果を有する、合成したものでも天然のものでもよいオリゴヌクレオチドを意味する。アプタマーは従来のリン酸ジエステルで結合したヌクレオチドを用いて合成することができ、当業者に公知の標準的な固相又は液相合成技術を用いて合成することができる（例えば、米国特許第５４７５０９６号、第５２７０１６３号を参照のこと）。アプタマーと標的ポリペプチドとの結合は、当業者に公知のアッセイにより容易に分析することができる。
【００６２】
通常、薬理学的効果とは、動物の状態を治療又は予防することである。
本明細書で用いられる「状態」という用語は、体の機能、システム、若しくは器官の中断、停止、又は異常を意味する。代表的な状態としては、ガン、炎症、糖尿病、及び臓器不全が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６３】
本明細書中で使用するとき、用語「動物」は、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ヒツジ、ブタ、両生類、爬虫類、及び鳥類を含むが、これらに限定されない。代表的な動物には、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、有蹄動物、チンパンジー、サル、ヒヒ、ニワトリ、シチメンショウ、マウス、ウサギ、ラット、モルモット、イヌ、ネコ、及びヒトが挙げられるが、これらに限定されない。一つの態様では、動物は哺乳類である。一つの態様では、動物はヒトである。一つの態様では、動物はイヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ヒツジ、又はブタである。
【００６４】
本明細書中で使用するとき、用語「効果量」及び「治療効果量」は、動物の状態を治療又は予防するのに十分な量を意味する。
【００６５】
「治療する」、「治療」などの表現は、特定の状態の改善又は停止を含む。
「予防する」、「予防」などの表現は、状態が発生してしまうことの回避を含む。
【００６６】
本明細書中で使用するとき、「実質的に含有しない」という表現は、約５重量パーセント未満であることを意味する。例えば、「実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール（又はグリセロールホルマール）」という表現は、プロピレングリコール（又はグリセロールホルマール）中の他の有機溶媒の量が約５重量パーセント未満であることを意味する。
【００６７】
「Ｃ1−Ｃ22の炭化水素基」とは、１〜２２個の炭素原子を有する、直鎖若しくは分岐、飽和若しくは不飽和、環式若しくは非環式、芳香族若しくは非芳香族、炭素環式若しくはヘテロ環式の基を意味する。同様に、「Ｃ1−Ｃ22の炭化水素基」、「Ｃ1−Ｃ16の炭化水素基」、「Ｃ1−Ｃ10の炭化水素基」、「Ｃ1−Ｃ5の炭化水素基」、「Ｃ1−Ｃ3の炭化水素基」、「Ｃ16−Ｃ22の炭化水素基」、「Ｃ8−Ｃ18の炭化水素基」、「Ｃ10−Ｃ18の炭化水素基」、及び「Ｃ16−Ｃ18の炭化水素基」などの表現は、それぞれ１〜２１個の炭素原子を有する、１〜１６個の炭素原子を有する、１〜１０個の炭素原子を有する、１〜５個の炭素原子を有する、１〜３個の炭素原子を有する、１６〜２２個の炭素原子を有する、８〜１８個の炭素原子を有する、１０〜１８個の炭素原子を有する、及び１６〜１８個の炭素原子を有する、直鎖若しくは分岐、飽和若しくは不飽和、環式若しくは非環式、芳香族若しくは非芳香族、炭素環式若しくはヘテロ環式の基を意味する。従って、「式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1のアシル基で、式中、Ｒ1はＣ1〜Ｃ21の基を表す」という表現は、式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1のアシル基であって、式中、Ｒ1は１〜２１個の炭素原子を有する、直鎖若しくは分岐、飽和若しくは不飽和、環式若しくは非環式、芳香族若しくは非芳香族、炭素環式若しくはヘテロ環式の炭化水素基を表す、ということを意味する。式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1で表され、式中、Ｒ1がＣ1〜Ｃ21の置換されていない基である代表的なアシル基としては、アセチル、プロパノイル、ブタノイル、ヘキサノイル、カプロイル、ラウロリル、ミリストイル、パルミトイル、ステアロイル、パルミオレオイル（ｐａｌｍｉｏｌｅｏｙｌ）、オレオイル、リノレオイル、リノレノイル、及びベンゾイルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６８】
本明細書中で使用するとき、用語「低級アルキル」は、Ｃ1−Ｃ6の炭化水素基を意味する。
【００６９】
本明細書中で使用するとき、用語「塩」は、共有結合ではなくイオン間相互作用によって化学的に結合している２個の化合物を意味する。
【００７０】
本明細書中で使用するとき、用語「医薬として許容される」とは、医薬組成物の成分を示す場合、動物へ投与した時に、適度な効果／リスク比に対応して、その成分が過剰な毒性、刺激、又はアレルギー反応などの過度な有害作用を持たないことを意味する。従って、本明細書中で使用するとき、用語「医薬として許容される有機溶媒」は、動物へ投与した時に、適度な効果／リスク比に対応して、過剰な毒性、刺激、又はアレルギー反応などの過度な有害作用を持たない有機溶媒を意味する。医薬として許容される有機溶媒は、米国食品医薬品局（「ＦＤＡ」）によって一般に安全と認められる（「ＧＲＡＳ」）溶媒であることが好ましい。同様に、本明細書中で使用するとき、用語「医薬として許容される有機塩基」は、動物へ投与した時に、適度な効果／リスク比に対応して、過剰な毒性、刺激、又はアレルギー反応などの過度な有害作用を持たない有機塩基を意味する。
【００７１】
本明細書中で使用するとき、「注射液」又は「注射組成物」という表現は、シリンジによって吸い上げることができ、有害作用を起こすことなく動物の皮下、腹腔内、又は筋肉内へ注入することができる組成物を意味する。通常、製剤を０．２２μｍのフィルターによって９８°Ｆでろ過した時、フィルター上の残渣が製剤の約１５％以下、好ましくは約１０％以下、より好ましくは約５％以下、さらに好ましくは約２％以下、最も好ましくは約１％以下である場合に、製剤又は組成物が注射液であるとみなされる。一つの態様では、本明細書で用いられる「注射液」という用語は、約４０℃の温度まで温めた後に０．２２μｍのフィルターによってろ過した時、フィルター上の残渣が製剤の約１５％以下、好ましくは約１０％以下、より好ましくは約５％以下、さらに好ましくは約２％以下、最も好ましくは約１％以下である組成物を含む。しかしながら、ゲルである本発明の組成物の中には、容易にシリンジから投与することができるが、０．２２μｍのフィルター上に残るものもある。本明細書で用いられる「注射液」という用語は、このようなゲル組成物を含む。
【００７２】
本明細書中で使用するとき、「薬物デポー（ｄｒｕｇ  ｄｅｐｏｔ）」という表現は、アプタマーを含有し、そのアプタマーを徐々に放出して薬理学的効果量のアプタマーを供給する、治療を受けた動物の体内で形成される析出物を意味する。析出物とは、インビトロ又は生理的（インビボ）環境下で、室温において溶媒中で形成される不溶性の固体のことである。析出物は、例えば固体、結晶、粘着性の塊、又はゲルなど、多くの形を取り得る。析出物は、粘着性の塊又はゲルであることが好ましい。
【００７３】
本明細書中で使用するとき、値の範囲を表す「約」という用語は、その範囲の上限及び下限の両方に適用される。例えば、「約９０：１０〜１０：９０の範囲」という表現は、「約９０：１０〜約１０：９０の範囲」と同じ意味である。
【００７４】
５．２  ゲル
本発明の医薬組成物はゲル状である。理論に束縛されるものではないが、リン脂質又はスフィンゴミエリンがゲルを形成するのに十分な量の溶媒と混合された場合にゲルが形成されると考えられる。リン脂質又はスフィンゴミエリンは加熱しながら溶媒と混合され、続いて冷却されることが好ましい。
【００７５】
５．２．１  リン脂質
本発明の医薬組成物には、医薬として許容されるいかなるリン脂質も使用することができる。
【００７６】
代表的な医薬として許容されるリン脂質としては、これらに限定されないが：
一般式：
【００７７】
【化５】
2009515961.tif 000006
【００７８】
で表されるホスファチジン酸が挙げられ、式中、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は上記で定義される。本発明の組成物及び方法に使用するのに適した適切なホスファチジン酸としては、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ  Ｉｎｃ．社、アラバマ州、アラバスター、より市販されている１−アシル−２−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェート、及び１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスフェートが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７９】
一般式：
【００８０】
【化６】
2009515961.tif 000007
【００８１】
で表されるホスファチジルエタノールアミンが挙げられ、式中、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は上記で定義される。本発明の組成物及び方法に使用するのに適した適切なホスファチジルエタノールアミンとしては、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ  Ｉｎｃ．社、アラバマ州、アラバスター、より市販されている１−アシル−２−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、及び１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８２】
一般式：
【００８３】
【化７】
2009515961.tif 000008
【００８４】
で表されるホスファチジルコリンが挙げられ、式中、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は上記で定義される。本発明の組成物及び方法に使用するのに適した適切なホスファチジルコリンとしては、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ  Ｉｎｃ．社、アラバマ州、アラバスター、より市販されている１−アシル−２−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（飽和系）、及び１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（不飽和系）、並びに、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  ＧｍｂＨ社、ドイツ、ケルン、より市販されているＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）−５０ＰＧ、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）−５３ＭＣＴ、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）−７５ＳＡ、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）−８０、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）−９０ＮＧ、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）−９０Ｈ、及びＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）−１００Ｈが挙げられるが、これらに限定されない。一つの態様では、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）−９０Ｈである。
【００８５】
一般式：
【００８６】
【化８】
2009515961.tif 000009
【００８７】
で表されるホスファチジルセリンが挙げられ、式中、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は上記で定義される。本発明の組成物及び方法に使用するのに適した適切なホスファチジルセリンとしては、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ  Ｉｎｃ．社、アラバマ州、アラバスター、より市販されている１−アシル−２−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−［ホスホ−Ｌ−セリン］、及び１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−［ホスホ−Ｌ−セリン］が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８８】
一般式：
【００８９】
【化９】
2009515961.tif 000010
【００９０】
で表されるプラズマロゲンが挙げられ、式中、Ｒ1及びＲ2は上記で定義され、Ｒ3は−Ｃ＝Ｃ−Ｒ9で表され、式中、Ｒ9は上記で定義される。本発明の組成物及び方法に使用するのに適した適切なプラズマロゲンとしては、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ  Ｉｎｃ．社、アラバマ州、アラバスター、より市販されているＣ１６（Ｐｌａｓｍ）−１２：０  ＮＢＤ  ＰＣ、Ｃ１６（Ｐｌａｓｍ）−１８：１  ＰＣ、Ｃ１６（Ｐｌａｓｍ）−２０：４  ＰＣ、Ｃ１６（Ｐｌａｓｍ）−２２：６  ＰＣ、Ｃ１６（Ｐｌａｓｍ）−１８：１  ＰＣ、Ｃ１６（Ｐｌａｓｍ）−２０：４  ＰＥ、及びＣ１６（Ｐｌａｓｍ）−２２：６  ＰＥ、が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９１】
一般式：
【００９２】
【化１０】
2009515961.tif 000011
【００９３】
で表されるホスファチジルグリセロールが挙げられ、式中、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は上記で定義される。本発明の組成物及び方法に使用するのに適した適切なホスファチジルグリセロールとしては、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ  Ｉｎｃ．社、アラバマ州、アラバスター、より市販されている１−アシル−２−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−［ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）］、及び１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−［ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）］が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９４】
一般式：
【００９５】
【化１１】
2009515961.tif 000012
【００９６】
で表されるホスファチジルイノシトールが挙げられ、式中、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は上記で定義される。本発明の組成物及び方法に使用するのに適した適切なホスファチジルイノシトールとしては、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ  Ｉｎｃ．社、アラバマ州、アラバスター、より市販されているホスファチジルイノシトール、ホスファチジルイノシトール−４−ホスフェート、及びホスファチジルイノシトール−４，５−ビスホスフェートが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９７】
医薬組成物中のリン脂質の量は、通常、医薬組成物に対して約０．１重量パーセント〜１０重量パーセントの範囲である。
【００９８】
一つの態様では、医薬組成物中のリン脂質の量は、医薬組成物に対して約０．５重量パーセント〜７重量パーセントの範囲である。
【００９９】
一つの態様では、医薬組成物中のリン脂質の量は、医薬組成物に対して約１重量パーセント〜４重量パーセントの範囲である。
【０１００】
一つの態様では、医薬組成物中のリン脂質の量は、医薬組成物に対して約２重量パーセント〜４重量パーセントの範囲である。
【０１０１】
一つの態様では、医薬組成物中のリン脂質の量は、医薬組成物に対して約１重量パーセント超である。
【０１０２】
一つの態様では、医薬組成物中のリン脂質の量は、医薬組成物に対して約２重量パーセント超である。
【０１０３】
通常、医薬組成物中のリン脂質濃度が上がると、医薬組成物の粘度も上昇する。従って、医薬組成物中に存在するリン脂質の量を変えることによって、医薬組成物の粘度を変化させることが可能である。
【０１０４】
しかしながら、当業者であれば、本発明の医薬組成物中に存在するリン脂質の量が、医薬組成物中に存在する有機溶媒、アプタマー、及び／又はその他の追加成分によって大きく変化し得ることが認識されるであろう。
【０１０５】
リン脂質は市販されており、又は当業者に公知の方法によって得ることができる。リン脂質を得る代表的な方法は、Ｓａｎｄｒａ  Ｐｅｓｃｈら，Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｕｎｕｓｕａｌ  Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ  Ｂｅａｒｉｎｇ  Ａｃｅｔｙｌｅｎｉｃ  Ｆａｔｔｙ  Ａｃｉｄｓ，Ｔｅｔｔｒａｈｅｄｒｏｎ，ｖｏｌ．１５，ｎｏ．４３，１４６２７−１４６３４（１９９７）；Ｓｅｐｐ  Ｄ．Ｋｏｈｌｗｅｉｎ，Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｓｏｒｔｉｎｇ，Ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｔｒａｆｆｉｃ−Ｔｈｅ  Ｙｅａｓｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．６，２６０−２６６（１９９６）、Ｓｅｒｇｕｅｉ  Ｖ．Ｖｉｎｏｇｒａｄｏｖ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ−Ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ，Ｔｅｔｔ．Ｌｅｔｔ．，ｖｏｌ．３６，ｎｏ．１４，２４９３−２４９６（１９９５）、及びこれらに引用されている文献に記載されている。
【０１０６】
７．２．２  スフィンゴミエリン
医薬として許容されるいかなるスフィンゴミエリンも本発明の医薬組成物に使用することができる。
【０１０７】
一つの態様では、スフィンゴミエリンは、
【０１０８】
【化１２】
2009515961.tif 000013
【０１０９】
であり、式中、Ｒ11はＣ1−Ｃ24の飽和若しくは不飽和の直鎖炭化水素基を表し、Ｒ4は−ＣＨ2ＣＨ2Ｎ（ＣＨ3）3+を表す。別の態様では、Ｒ11はＣ8−Ｃ24の飽和若しくは不飽和の直鎖炭化水素基を表し、Ｒ4は−ＣＨ2ＣＨ2Ｎ（ＣＨ3）3+を表す。別の態様では、Ｒ11はＣ16−Ｃ24の飽和若しくは不飽和の直鎖炭化水素基を表し、Ｒ4は−ＣＨ2ＣＨ2Ｎ（ＣＨ3）3+を表す。
【０１１０】
適切なスフィンゴミエリンとしては、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ  Ｉｎｃ．社、アラバマ州、アラバスター、より市販されているＣ２−スフィンゴミエリン、Ｃ６−スフィンゴミエリン、Ｃ１８−スフィンゴミエリン、Ｃ６−ＮＢＤ−スフィンゴミエリン、及びＣ１２−ＮＢＤスフィンゴミエリンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１１】
医薬組成物中のスフィンゴミエリンの量は、通常、医薬組成物に対して約０．１重量パーセント〜１０重量パーセントの範囲である。
【０１１２】
一つの態様では、医薬組成物中のスフィンゴミエリンの量は、医薬組成物に対して約０．５重量パーセント〜７重量パーセントの範囲である。
【０１１３】
一つの態様では、医薬組成物中のスフィンゴミエリンの量は、医薬組成物に対して約１重量パーセント〜４重量パーセントの範囲である。
【０１１４】
一つの態様では、医薬組成物中のスフィンゴミエリンの量は、医薬組成物に対して約２重量パーセント〜４重量パーセントの範囲である。
【０１１５】
一つの態様では、医薬組成物中のスフィンゴミエリンの量は、医薬組成物に対して約１重量パーセント超である。
【０１１６】
一つの態様では、医薬組成物中のスフィンゴミエリンの量は、医薬組成物に対して約２重量パーセント超である。
【０１１７】
通常、医薬組成物中のスフィンゴミエリン濃度が上がると、医薬組成物の粘度も上昇する。従って、医薬組成物中に存在するスフィンゴミエリンの量を変えることによって、医薬組成物の粘度を変化させることが可能である。
【０１１８】
しかしながら、当業者であれば、本発明の医薬組成物中に存在するスフィンゴミエリンの量が、医薬組成物中に存在する有機溶媒、アプタマー、及び／又はその他の追加成分によって大きく変化し得ることが認識されるであろう。
【０１１９】
７．２．３  溶媒
リン脂質又はスフィンゴミエリンとゲルを形成する、医薬として許容されるいかなる有機溶媒も本発明の医薬組成物に使用することができる。
【０１２０】
適切な有機溶媒には、少量の不純物が含まれていてもよい。通常、有機溶媒の純度は９５重量パーセント超であり、好ましくは９７重量パーセント超であり、より好ましくは９８重量パーセント超であり、最も好ましくは９９重量パーセント超である。
【０１２１】
一つの態様では、有機溶媒は、動物による使用又は摂取に対してＦＤＡによりＧＲＡＳ（「一般に安全と認められる」）に指定されている。
【０１２２】
別の態様では、有機溶媒は、ヒトによる使用又は摂取に対してＦＤＡによりＧＲＡＳに指定されている。
【０１２３】
一つの態様では、溶媒は、第１有機溶媒と第二の有機溶媒の混合物である。しかしながら、第１有機溶媒と第二の有機溶媒は相溶性でなければならない。
【０１２４】
一つの態様では、第１有機溶媒は、極性非プロトン性溶媒であり、第二の有機溶媒は、極性プロトン性溶媒である。
【０１２５】
本発明の組成物及び方法に有用な代表的な極性非プロトン性溶媒としては、プロピレンカーボネート、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、トリアセチン、及びＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２６】
本発明の組成物及び方法に有用な代表的な極性非プロトン性溶媒としては、グリセロールホルマール並びにプロピレングリコール及び１，４−ブタンジオールなどのジオールが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２７】
第１有機溶媒が極性非プロトン性溶媒であり、第二の有機溶媒が極性プロトン性溶媒の場合、第１有機溶媒の第二の有機溶媒に対する比は約９０：１０〜１０：９０の範囲とすることができる。一つの態様では、第１有機溶媒の第二の有機溶媒に対する比は約８０：２０〜２０：８０の範囲である。一つの態様では、第１有機溶媒の第二の有機溶媒に対する比は約７０：３０〜３０：７０の範囲である。一つの態様では、第１有機溶媒の第二の有機溶媒に対する比は約６０：４０〜４０：６０の範囲である。一つの態様では、第１有機溶媒の第二の有機溶媒に対する比は約５０：５０である。
【０１２８】
一つの態様では、第１有機溶媒及び第二の有機溶媒は各々実質的に水を含有しない。一つの態様では、第１有機溶媒及び第二の有機溶媒の水の含有量は各々約２重量パーセント未満である。一つの態様では、第１有機溶媒及び第二の有機溶媒の水の含有量は各々約１重量パーセント未満である。一つの態様では、第１有機溶媒及び第二の有機溶媒の水の含有量は各々約０．５重量パーセント未満である。一つの態様では、第１有機溶媒及び第二の有機溶媒の水の含有量は各々約０．２重量パーセント未満である。実質的に水を含有しない有機溶媒は、バクテリアの増殖に寄与しないため有利である。従って、通常、実質的に水を含有しない医薬組成物は保存剤を含む必要はない。しかしながら、ある態様では、本発明の非水性医薬組成物は保存剤を含むことができる。実質的に水を含有しないことが好ましい医薬として許容される有機溶媒を溶媒として使用した医薬組成物の別の利点としては、アプタマーの加水分解が最小限に抑えられることが挙げられる。通常、溶媒中に存在する水が多いほど、アプタマーはより容易に加水分解され得る。従って、医薬として許容される有機溶媒を溶媒として使用したアプタマー含有医薬組成物は、水を溶媒として使用したアプタマー含有医薬組成物よりも安定であることができる。
【０１２９】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールである。
【０１３０】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はプロピレングリコールである。
【０１３１】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールグリコール又はプロピレングリコールであり、第１有機溶媒の第二の有機溶媒に対する比は約８０：２０〜約２０：８０の範囲である。
【０１３２】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマール又はプロピレングリコールであり、第１有機溶媒の第二の有機溶媒に対する比は約７５：２５〜約２５：７５の範囲である。
【０１３３】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマール又はプロピレングリコールであり、第１有機溶媒の第二の有機溶媒に対する比は約６０：４０〜約４０：６０の範囲である。
【０１３４】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマール又はプロピレングリコールであり、第１有機溶媒の第二の有機溶媒に対する比は約５０：５０の範囲である。
【０１３５】
医薬組成物中の有機溶媒の総量（すなわち第１有機溶媒及び第二の有機溶媒）は、通常、医薬組成物に対して約２０〜約９９重量パーセントの範囲である。
【０１３６】
一つの態様では、医薬組成物中の有機溶媒の総量は、医薬組成物に対して約３５〜約９０重量パーセントである。
【０１３７】
一つの態様では、医薬組成物中の有機溶媒の量は、医薬組成物に対して少なくとも約３５重量パーセントである。
【０１３８】
一つの態様では、医薬組成物中の有機溶媒の量は、医薬組成物に対して少なくとも約５０重量パーセントである。
【０１３９】
一つの態様では、医薬組成物中の有機溶媒の量は、医薬組成物に対して少なくとも約７５重量パーセントである。
【０１４０】
一つの態様では、医薬組成物中の有機溶媒の量は、医薬組成物に対して少なくとも約８５重量パーセントである。
【０１４１】
一つの態様では、医薬組成物中の有機溶媒の量は、医薬組成物に対して少なくとも約９０重量パーセントである。
【０１４２】
別の態様では、溶媒は、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される。
【０１４３】
プロピレングリコールは、式：
ＣＨ3−ＣＨ2（ＯＨ）−ＣＨ2−ＯＨ  又は  ＯＨ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＨ
で表される有機溶媒である。
【０１４４】
一つの態様では、プロピレングリコールは、１，２−プロピレングリコールである。別の態様では、プロピレングリコールは、１，３−プロピレングリコールである。一つの態様では、プロピレングリコールは、１，２−プロピレングリコールと１，３−プロピレングリコールとの混合物である。
【０１４５】
グリセロールホルマールは、式Ｃ4Ｈ8Ｏ3の有機溶媒であり、５−ヒドロキシ−１，３−ジオキサンと４−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソランとの約６０：４０の比の混合物として存在する。溶媒グリセロールホルマールは２種類の化合物から成り、この２種類の化合物は約６０：４０という特定の比率で存在しているが、通常は化合物の混合物ではなく「溶媒」とみなされる。これは、５−ヒドロキシ−１，３−ジオキサンと４−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソランとが互いに平衡の関係にあるからである。従って、本明細書で用いるグリセロールホルマール（すなわち、５−ヒドロキシ−１，３−ジオキサンと４−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソランとの約６０：４０の比の混合物）という用語は、実質的に他の有機溶媒を含有しない有機溶媒である。
【０１４６】
プロピレングリコールとグリセロールホルマールは、少量の不純物を含んでいてもよい。通常、プロピレングリコールとグリセロールホルマールの純度は、それぞれ９５重量パーセント超であり、好ましくは９８重量パーセント超であり、より好ましくは９９重量パーセント超である。溶媒、特にグリセロールホルマールは安定剤を含んでいてもよい。通常、安定剤は０．５重量パーセント又はそれ未満の量で存在し、好ましくは０．２５重量パーセント又はそれ未満の量、最も好ましくは０．５重量パーセント又はそれ未満の量である。例えば、市販されているグリセロールホルマールは、通常、エチレンジアミンテトラアセテート（ＥＤＴＡ）、チオジプロピオン酸、及び没食子酸プロピルを安定剤として含有している。
【０１４７】
一つの態様では、プロピレングリコール及びグリセロールホルマールは、それぞれ実質的に水を含有しない。一つの態様では、プロピレングリコール及びグリセロールホルマールの水の含有量は、それぞれ約２重量パーセント未満である。一つの態様では、プロピレングリコール及びグリセロールホルマールの水の含有量は、それぞれ約１重量パーセント未満である。一つの態様では、プロピレングリコール及びグリセロールホルマールの水の含有量は、それぞれ約０．５重量パーセント未満である。一つの態様では、プロピレングリコール及びグリセロールホルマールの水の含有量は、それぞれ約０．２重量パーセント未満である。実質的に水を含有しないプロピレングリコール及びグリセロールホルマールは、バクテリアの増殖に寄与しないため有利である。従って、通常、実質的に水を含有しない医薬組成物は保存剤を含む必要はない。しかしながら、ある態様では、本発明の非水性医薬組成物は保存剤を含むことができる。
【０１４８】
一つの態様では、医薬組成物はプロピレングリコールとグリセロールホルマールとの混合物を含む。プロピレングリコールのグリセロールホルマールに対する比は、約２：９８〜９８：２の範囲とすることができる。一つの態様では、プロピレングリコールのグリセロールホルマールに対する比は、約５：９５〜９５：５の範囲である。一つの態様では、プロピレングリコールのグリセロールホルマールに対する比は、約１０：９０〜９０：１０の範囲である。一つの態様では、プロピレングリコールのグリセロールホルマールに対する比は、約２５：７５〜７５：２５の範囲である。一つの態様では、プロピレングリコールのグリセロールホルマールに対する比は、約５５：４５〜４５：５５の範囲である。一つの態様では、プロピレングリコールのグリセロールホルマールに対する比は、約５０：５０である。
【０１４９】
プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物の医薬組成物中の量は、通常、医薬組成物に対して約２０〜約９９重量パーセントの範囲である。
【０１５０】
一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物の医薬組成物中の量は、医薬組成物に対して約３５〜約９０重量パーセントの範囲である。
【０１５１】
一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物の医薬組成物中の量は、医薬組成物に対して少なくとも約３５重量パーセントである。
【０１５２】
一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物の医薬組成物中の量は、医薬組成物に対して少なくとも約５０重量パーセントである。
【０１５３】
一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物の医薬組成物中の量は、医薬組成物に対して少なくとも約７５重量パーセントである。
【０１５４】
一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物の医薬組成物中の量は、医薬組成物に対して少なくとも約８５重量パーセントである。
【０１５５】
別の態様では、溶媒は、（ｉ）プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される第１有機溶媒と、（ｉｉ）Ｎ−メチルピロリドンとの混合物である。一つの態様では、溶媒は、（ｉ）実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール、実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマール、及びこれらの混合物から成る群より選択される第１有機溶媒と、（ｉｉ）実質的に他の有機溶媒を含有しないＮ−メチルピロリドンとの混合物である。
【０１５６】
プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンは少量の不純物を含んでいてもよい。通常、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンの純度は、それぞれ９５重量パーセント超であり、好ましくは９８重量パーセント超であり、より好ましくは９９重量パーセント超である。溶媒、特にグリセロールホルマールは安定剤を含んでいてもよい。通常、安定剤は０．５重量パーセント又はそれ未満の量で存在し、好ましくは０．２５重量パーセント又はそれ未満の量、最も好ましくは０．５重量パーセント又はそれ未満の量である。
【０１５７】
一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンは、それぞれ実質的に水を含有しない。一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンの水の含有量は、それぞれ約２重量パーセント未満である。一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンの水の含有量は、それぞれ約１重量パーセント未満である。一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンの水の含有量は、それぞれ約０．５重量パーセント未満である。一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンの水の含有量は、それぞれ約０．２重量パーセント未満である。実質的に水を含有しないプロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンは、バクテリアの増殖に寄与しないため有利である。従って、通常、実質的に水を含有しない医薬組成物は保存剤を含む必要はない。しかしながら、ある態様では、本発明の非水性医薬組成物は保存剤を含むことができる。
【０１５８】
プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物のＮ−メチルピロリドンに対する比は、約２：９８〜９８：２の範囲とすることができる。一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物のＮ−メチルピロリドンに対する比は、約５：９５〜９５：５の範囲である。一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物のＮ−メチルピロリドンに対する比は、約１０：９０〜９０：１０の範囲である。一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物のＮ−メチルピロリドンに対する比は、約２５：７５〜７５：２５の範囲である。一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物のＮ−メチルピロリドンに対する比は、約５５：４５〜４５：５５の範囲である。一つの態様では、プロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物のＮ−メチルピロリドンに対する比は、約５０：５０である。
【０１５９】
医薬組成物中のプロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンの量は、通常、医薬組成物に対して約２０〜約９９重量パーセントである。
【０１６０】
一つの態様では、医薬組成物中のプロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンの量は、通常、医薬組成物に対して約３５〜約９０重量パーセントの範囲である。
【０１６１】
一つの態様では、医薬組成物中のプロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンの量は、通常、医薬組成物に対して少なくとも約３５重量パーセントである。
【０１６２】
一つの態様では、医薬組成物中のプロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンの量は、通常、医薬組成物に対して少なくとも約５０重量パーセントである。
【０１６３】
一つの態様では、医薬組成物中のプロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンの量は、通常、医薬組成物に対して少なくとも約７５重量パーセントである。
【０１６４】
一つの態様では、医薬組成物中のプロピレングリコール、グリセロールホルマール、及びＮ−メチルピロリドンの量は、通常、医薬組成物に対して少なくとも約８５重量パーセントである。
【０１６５】
５．３  アプタマー
アプタマーは、当業者に公知のいかなるアプタマーであってもよい。
一つの態様では、アプタマーはＤＮＡ鎖である。一つの態様では、ＤＮＡは二本鎖ＤＮＡである。一つの態様では、ＤＮＡは一本鎖ＤＮＡである。
【０１６６】
一つの態様では、アプタマーはＲＮＡ鎖である。
一つの態様では、アプタマーは８０ｋＤまでの分子量を有する。一つの態様では、アプタマーの分子量は約１５ｋＤ〜８０Ｋｄの範囲である。一つの態様では、アプタマーの分子量は約１０ｋＤ〜８０Ｋｄの範囲である。一つの態様では、アプタマーの分子量は約５ｋＤ〜８０Ｋｄの範囲である。
【０１６７】
一つの態様では、アプタマーは６０ｋＤまでの分子量を有する。一つの態様では、アプタマーの分子量は約１５ｋＤ〜６０Ｋｄの範囲である。一つの態様では、アプタマーの分子量は約１０ｋＤ〜６０Ｋｄの範囲である。一つの態様では、アプタマーの分子量は約５ｋＤ〜６０Ｋｄの範囲である。
【０１６８】
一つの態様では、アプタマーは４０ｋＤまでの分子量を有する。一つの態様では、アプタマーの分子量は約１５ｋＤ〜４０Ｋｄの範囲である。一つの態様では、アプタマーの分子量は約１０ｋＤ〜４０Ｋｄの範囲である。一つの態様では、アプタマーの分子量は約５ｋＤ〜４０Ｋｄの範囲である。
【０１６９】
一つの態様では、アプタマーは３０ｋＤまでの分子量を有する。一つの態様では、アプタマーの分子量は約１５ｋＤ〜３０Ｋｄの範囲である。一つの態様では、アプタマーの分子量は約１０ｋＤ〜３０Ｋｄの範囲である。一つの態様では、アプタマーの分子量は約５ｋＤ〜３０Ｋｄの範囲である。
【０１７０】
一つの態様では、アプタマーは２０ｋＤ超の分子量を有する。一つの態様では、アプタマーの分子量は約１０ｋＤ〜２０Ｋｄの範囲である。一つの態様では、アプタマーの分子量は約５ｋＤ〜２０Ｋｄの範囲である。
【０１７１】
一つの態様では、アプタマーの分子量は約５ｋＤ〜１０Ｋｄの範囲である。
アプタマーを構成するヌクレオチドは、修飾されることによって、例えば安定性を向上、すなわちインビボでの半減期を伸ばしたり、及び／又は動物へ投与した時の排出速度を減少させたりすることができる。「修飾される」という用語は、共有結合によって修飾された塩基及び／又は糖を有するヌクレオチドを包含する。例えば、修飾されたヌクレオチドは、３’位にヒドロキシル基以外の、５’位にリン酸基以外の低分子量有機基が共有結合した糖を有するヌクレオチドを含む。修飾されたヌクレオチドは、２’−Ｏ−メチル−；２’−Ｏ−アルキル；２’−Ｏ−アリル；２’−Ｓ−アルキル；２’−Ｓ−アリル；２’−フルオロ−；２’−ハロ、若しくは２’−アジド−リボースなどの２’置換された糖；炭素環式糖類似体；アラビノース、キシロース、若しくはリキソースなどのα−アノマー糖；及びエピマー糖、ピラノース糖、フラノース糖、並びにセドヘプツロースも含むことができる。
【０１７２】
当該技術分野で公知の修飾されたヌクレオチドは、アルキル化されたプリン類及び／又はピリミジン類；アシル化されたプリン類及び／又はピリミジン類；又はその他の複素環を含むが、これらに限定されない。これらの種類のピリミジン類及びプリン類は当該技術分野で公知であり、シュードイソシトシン；Ｎ４，Ｎ４−エタノシトシン；８−ヒドロキシ−Ｎ６−メチルアデニン；４−アセチルシトシン、５−（カルボキシヒドロキシメチル）ウラシル；５−フルオロウラシル；５−ブロモウラシル；５−カルボキシメチルアミノメチル−２−チオウラシル；５−カルボキシメチルアミノメチルウラシル；ジヒドロウラシル；イノシン；Ｎ６−イソペンチル−アデニン；１−メチルアデニン；１−メチルシュードウラシル；１−メチルグアニン；２，２−ジメチルグアニン；２−メチルアデニン；２−メチルグアニン；３−メチルシトシン；５−メチルシトシン；Ｎ６−メチルアデニン；７−メチルグアニン；５−メチルアミノメチルウラシル；５−メトキシアミノメチル−２−チオウラシル；β−Ｄ−マンノシルキューオシン；５−メトキシカルボニルメチルウラシル；５−メトキシウラシル；２−メチルチオ−Ｎ６−イソペンテニルアデニン；ウラシル−５−オキシ酢酸メチルエステル；シュードウラシル；２−チオシトシン；５−メチル−２−チオウラシル；２−チオウラシル；４−チオウラシル；５−メチルウラシル；Ｎ−ウラシル−５−オキシ酢酸メチルエステル；ウラシル−５−オキシ酢酸；キューオシン；２−チオシトシン；５−プロピルウラシル；５−プロピルシトシン；５−エチルウラシル；５−エチルシトシン；５−ブチルウラシル；５−ペンチルウラシル；５−ペンチルシトシン；及び２，６−ジアミノプリン；メチルシュードウラシル；１−メチルグアニン；及び１−メチルシトシンが含まれる。
【０１７３】
アプタマーは、１又は２個以上のリン酸ジエステル結合を別の連結基で置換することによっても修飾することができる。別の連結基としては、Ｐ（Ｏ）ＯがＰ（Ｏ）Ｓ、Ｐ（Ｓ）Ｓ、Ｐ（Ｏ）ＮＲ2、Ｐ（Ｏ）Ｒ、Ｐ（Ｏ）ＯＲ’、ＣＯ、又はＣＨ2で置換され、ここで、Ｒ又はＲ’が各々独立してＨ又は置換若しくは非置換のＣ1−Ｃ20のアルキル基である態様が挙げられるが、これらに限定されない。Ｐ（Ｏ）ＮＲ2基の置換基Ｒの組み合わせとしては、Ｈ及びメトキシエチルが好ましい。連結基は通常、−Ｏ−結合を介して各々に隣接するヌクレオチドと結合しているが、修飾されて−Ｎ−又は−Ｓ−結合を含んでもよい。オリゴマー中の結合がすべて同一である必要はない。
【０１７４】
アプタマーは、ポリマーと抱合体形成させて修飾することにより、例えば動物へ投与された時の排出速度を抑えることもできる。例えば、アプタマーは「ペグ化」、すなわちポリエチレングリコール（「ＰＥＧ」）と抱合体形成することができる。一つの態様では、ＰＥＧの平均分子量は約２０ｋＤ〜８０ｋＤの範囲である。アプタマーをＰＥＧなどのポリマーと抱合体形成する方法は、当業者に公知である（例えば、Ｇｒｅｇ  Ｔ．Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９６６を参照されたい）。
【０１７５】
本発明の組成物及び方法に有用な修飾されたアプタマーの例は、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５を参照されたい。
【０１７６】
一つの態様では、アプタマーはポリマーと抱合体形成している。
一つの態様では、アプタマーはポリマーと抱合体形成したＲＮＡ鎖である。
【０１７７】
一つの態様では、アプタマーはポリマーと抱合体形成したＤＮＡ鎖である。
一つの態様では、アプタマーはＰＥＧと抱合体形成している。
【０１７８】
一つの態様では、アプタマーはＰＥＧと抱合体形成したＲＮＡ鎖である。
一つの態様では、アプタマーはＰＥＧと抱合体形成したＤＮＡ鎖である。
【０１７９】
一つの態様では、アプタマーはＲＮＡ鎖であり、この場合アプタマーを構成する糖の２’ヒドロキシルの少なくとも１つがＯ−メチル化されている。
【０１８０】
一つの態様では、アプタマーはＲＮＡ鎖であり、この場合アプタマーを構成する糖の２’ヒドロキシルの少なくとも１つがＯ−メチル化されており、ＲＮＡ鎖がポリマーと抱合体形成している。
【０１８１】
一つの態様では、アプタマーはＲＮＡ鎖であり、この場合アプタマーを構成するヌクレオチドの２’ヒドロキシルの少なくとも１つがＯ−メチル化されており、ＲＮＡ鎖がＰＥＧと抱合体形成している。
【０１８２】
一つの態様では、アプタマーはＶＥＧＦ（血管内皮増殖因子）と結合する。
一つの態様では、アプタマーは、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載のＡＲＣ２２４である。
【０１８３】
一つの態様では、アプタマーは、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載のＡＲＣ２４５である。
【０１８４】
一つの態様では、アプタマーは、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載のＡＲＣ２２５である。
【０１８５】
一つの態様では、アプタマーは、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載のＡＲＣ２５９である。
【０１８６】
一つの態様では、アプタマーは、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５、に記載のＡＲＣ２５９であり、この場合アプタマーの５’リン酸基が：
【０１８７】
【化１３】
2009515961.tif 000014
【０１８８】
によってペグ化されている（以降「ペグ化ＡＲＣ２５９」と称する）。
【０１８９】
一つの態様では、アプタマーの少なくともいくつかのリン酸基がプロトン化されている、すなわちアプタマーがプロトン化アプタマーとして存在する。一つの態様では、アプタマーのすべてのリン酸基がプロトン化されている。
【０１９０】
一つの態様では、アプタマーはプロトン化アプタマーの塩である。一つの態様では、アプタマーはプロトン化アプタマーの無機塩である。適切な無機塩としては、プロトン化アプタマーの酸性リン酸基と医薬として許容される無機塩基との反応によって調製される塩が挙げられるが、これらに限定されない。適切な無機塩基としては、ナトリウム、カリウム、及びリチウムなどのアルカリ金属の水酸化物；カルシウム及びマグネシウムなどのアルカリ土類金属の水酸化物；並びにアルミニウム及び亜鉛などその他の金属の水酸化物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１９１】
一つの態様では、アプタマーは、アプタマー及び１又は２種類以上の追加成分を含むアプタマー組成物として存在する。アプタマーが、アプタマー及び１又は２種類以上の追加成分を含むアプタマー組成物として存在する代表的な態様を以下に示す。
【０１９２】
７．３．１．  （ｉ）医薬として許容される有機塩基、及び（ｉｉ）プロトン化アプタマーを含む組成物
一つの態様では、アプタマーは、（ｉ）医薬として許容される有機塩基及び（ｉｉ）プロトン化アプタマーを含むアプタマー組成物として存在する。理論に束縛されるものではないが、プロトン化アプタマーの酸性リン酸基は、式塩基−ＮＨ2の医薬として許容される有機塩基とプロトン化アプタマーについて以下に概略的に示すように、医薬として許容される有機塩基のアミノ基をプロトン化して１又は２種類以上の医薬として許容される有機塩基分子とアプタマーとの塩を形成すると考えられる。
【０１９３】
【化１４】
2009515961.tif 000015
【０１９４】
式中、Ｂはヌクレオチドを表し、Ｓは糖を表し、塩基−ＮＨ3+はプロトン化された医薬として許容される有機塩基を表す。しかしながら、すべてのリン酸基が医薬として許容される有機塩基分子とイオン結合する必要はない。
【０１９５】
当業者に公知の医薬として許容されるいかなる有機塩基も本発明の医薬組成物に使用することができる。代表的な有機塩基としては、アンモニア；シクロヘキシルアミン、シクロペンチルアミン、シクロヘキシルアミン、ジシクロヘキシルアミン；トリブチルアミン、Ｎ−メチルアミン、Ｎ−エチルアミン、ジエチルアミン；ジメチルアミン、トリエチルアミン、モノ−、ビス−、又はトリス−（２−ヒドロキシ−低級アルキルアミン）（モノ−、ビス−、又はトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン、２−ヒドロキシ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン、及びトリス−（ヒドロキシメチル）メチルアミンなど）、Ｎ，Ｎ−ジ−低級アルキル−Ｎ−（ヒドロキシ−低級アルキル）アミン（Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アミン若しくはＮ，Ｎ−ジアルキル−Ｎ−トリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンなど）、などの非置換若しくはヒドロキシ置換のモノ−、ジ−、又はトリ−アルキルアミン；ピリジン；ベンジルアミン；フェネチルアミン；Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン；Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン；クロロプロカイン；クロリン；プロカインを含むがこれらに限定されない有機アミン；並びにアルギニン、リジンなどのアミノ酸が挙げられるが、これらに限定されない（Ｂｅｒｇｅら，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９７７，６６，１も参照されたい）。
【０１９６】
本明細書で述べるいかなるアプタマーも組成物に使用することができる。
医薬として許容される有機塩基の塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、通常、約２：１〜１：２の範囲である。一つの態様では、医薬として許容される有機塩基の塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．５：１〜１：１．５の範囲である。一つの態様では、医薬として許容される有機塩基の塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．２５：１〜１：１．２５の範囲である。一つの態様では、医薬として許容される有機塩基の塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．１：１〜１：１．１の範囲である。一つの態様では、医薬として許容される有機塩基の塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１：１である。しかしながら、医薬として許容される有機塩基の塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、より広い範囲とすることも可能である。例えば、医薬として許容される有機塩基の塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１５：１〜１：１５の範囲とすることができる。
【０１９７】
一つの態様では、アミンはアミノ酸エステルである。
一つの態様では、アミンはアミノ酸アミドである。
【０１９８】
一つの態様では、アミンはジアミン（例えば、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、又はリジンのエステル若しくはアミド）である。
【０１９９】
７．３．１．１  （ｉ）アミノ酸エステル又はアミノ酸アミド、及び（ｉｉ）プロトン化アプタマーを含む組成物
一つの態様では、アプタマーは、（ｉ）アミノ酸のエステル又はアミド、及び（ｉｉ）プロトン化アプタマーを含む組成物として存在する。理論に束縛されるものではないが、プロトン化アプタマーの酸性リン酸基は、アミノ酸エステルとプロトン化アプタマーについて以下に概略的に示すように、アミノ酸のエステル又はアミドのアミノ基をプロトン化して、１若しくは２種類以上のアミノ酸エステル又はアミドの分子とプロトン化アプタマーとの塩を形成すると考えられる：
【０２００】
【化１５】
2009515961.tif 000016
【０２０１】
式中、Ｂ、Ｓ、Ｒ、Ｒ1は本明細書で述べる意味を表す。しかしながら、すべてのリン酸基がアミノ酸エステル又はアミノ酸アミドとイオン結合する必要はない。
【０２０２】
本明細書で述べるいかなるアミノ酸又はアミノ酸エステルも組成物に使用することができる。
【０２０３】
本明細書で述べるいかなるアプタマーも組成物に使用することができる。
アミノ酸エステル又はアミノ酸アミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、通常、約２：１〜１：２の範囲である。一つの態様では、アミノ酸エステル又はアミノ酸アミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．５：１〜１：１．５の範囲である。一つの態様では、アミノ酸エステル又はアミノ酸アミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．２５：１〜１：１．２５の範囲である。一つの態様では、アミノ酸エステル又はアミノ酸アミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．１：１〜１：１．１の範囲である。一つの態様では、アミノ酸エステル又はアミノ酸アミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１：１である。しかしながら、アミノ酸エステル又はアミノ酸の塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、より広い範囲とすることも可能である。例えば、アミノ酸エステル又はアミノ酸の塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１５：１〜１：１５の範囲とすることができる。
【０２０４】
アミノ酸エステル
アミノ酸エステルは、いかなるアミノ酸のいかなるエステル、すなわちアミノ酸のカルボン酸基がＣ1−Ｃ22のアルコールでエステル化されたアミノ酸であってよい。従って、アミノ酸エステルは一般式（Ｉ）で表され：
【０２０５】
【化１６】
2009515961.tif 000017
【０２０６】
式中、
Ｒは、アミノ酸の側鎖を表し；及び
Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22の炭化水素基を表す。
【０２０７】
当業者であれば容易に分かるように、アミノ酸の側鎖Ｒとして広範囲にわたる基が可能である。例えば、アミノ酸側鎖は、任意に置換されていてもよい炭化水素基であってよい。適切な置換基としては、ハロ、ニトロ、シアノ、チオール、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、スルホン酸、芳香族基、及び芳香族又は非芳香族複素環基が挙げられるが、これらに限定されない。アミノ酸側鎖は、任意にチオール、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、芳香族基、又は芳香族若しくは非芳香族複素環基で置換されていてもよいＣ1−Ｃ10の直鎖又は分岐炭化水素であることが好ましい。
【０２０８】
アミノ酸エステルは、天然アミノ酸のエステルであっても、合成アミノ酸のエステルであってもよい。アミノ酸は、ｄ−アミノ酸であってもｌ−アミノ酸であってもよい。好ましくは、アミノ酸エステルは、天然アミノ酸のエステルである。より好ましくは、アミノ酸エステルは、グリジン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、アスパラギン、グルタミン、トリプトファン、プロリン、セリン、トレオニン、チロシン、ヒドロキシプロリン、システイン、メチオニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、及びヒスチジンから選択されるアミノ酸のエステルである。
【０２０９】
炭化水素基Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ22のいかなる炭化水素基であってもよい。代表的なＣ1〜Ｃ22の炭化水素基としては、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、アリル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ｃｉｓ−９−ヘキサデセニル、ｃｉｓ−９−オクタデセニル、ｃｉｓ，ｃｉｓ−９，１２−オクタデセニル、及びｃｉｓ，ｃｉｓ，ｃｉｓ−９，１２，１５−オクタデカトリエニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２１０】
一つの態様では、Ｒ1は直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1は分岐炭化水素基である。
【０２１１】
一つの態様では、Ｒ1は飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1は不飽和炭化水素基である。
【０２１２】
一つの態様では、Ｒ1は直鎖飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1は直鎖不飽和炭化水素基である。
【０２１３】
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ16の炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ10の炭化水素基である。
【０２１４】
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ5の炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ3の炭化水素基である。
【０２１５】
一つの態様では、Ｒ1はＣ6−Ｃ22の炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ6−Ｃ18の炭化水素基である。
【０２１６】
一つの態様では、Ｒ1はＣ8−Ｃ18の炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ10−Ｃ18の炭化水素基である。
【０２１７】
一つの態様では、Ｒ1はＣ16−Ｃ18の炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ16−Ｃ22の炭化水素基である。
【０２１８】
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ16の直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ10の直鎖炭化水素基である。
【０２１９】
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ5の直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ3の直鎖炭化水素基である。
【０２２０】
一つの態様では、Ｒ1はＣ6−Ｃ22の直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ6−Ｃ18の直鎖炭化水素基である。
【０２２１】
一つの態様では、Ｒ1はＣ8−Ｃ18の直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ10−Ｃ18の直鎖炭化水素基である。
【０２２２】
一つの態様では、Ｒ1はＣ16−Ｃ18の直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ16−Ｃ22の直鎖炭化水素基である。
【０２２３】
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ16の分岐炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ10の分岐炭化水素基である。
【０２２４】
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ5の分岐炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ3の分岐炭化水素基である。
【０２２５】
一つの態様では、Ｒ1はＣ6−Ｃ22の分岐炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ6−Ｃ18の分岐炭化水素基である。
【０２２６】
一つの態様では、Ｒ1はＣ8−Ｃ18の分岐炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ10−Ｃ18の分岐炭化水素基である。
【０２２７】
一つの態様では、Ｒ1はＣ16−Ｃ18の分岐炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ16−Ｃ22の分岐炭化水素基である。
【０２２８】
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ16の直鎖不飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ10の直鎖不飽和炭化水素基である。
【０２２９】
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ5の直鎖不飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ1−Ｃ3の直鎖不飽和炭化水素基である。
【０２３０】
一つの態様では、Ｒ1はＣ6−Ｃ22の直鎖不飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ6−Ｃ18の直鎖不飽和炭化水素基である。
【０２３１】
一つの態様では、Ｒ1はＣ8−Ｃ18の直鎖不飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ10−Ｃ18の直鎖不飽和炭化水素基である。
【０２３２】
一つの態様では、Ｒ1はＣ16−Ｃ18の直鎖不飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ1はＣ16−Ｃ22の直鎖不飽和炭化水素基である。
【０２３３】
後に述べるように、Ｒ1の構造を変えることによって、医薬組成物の性質を変化させることが可能である。
【０２３４】
アミノ酸エステルは、Ｊ．Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｒｅａｃｔｉｏｎ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，４ｔｈ  ｅｄ．Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，ＮＹ，１９９２，ｐｐ．３９３−４００などに記載の当業者に公知の方法を用いて、アミノ酸を式Ｒ1−ＯＨのアルコールでエステル化することによって得ることができる。アミノ酸及び式Ｒ1−ＯＨのアルコールは市販されており、又は当業者に公知の方法によって調製することができる。アミノ酸を式Ｒ1−ＯＨのアルコールでエステル化する場合、アミノ酸又はアルコールの他のいくつかの官能基を、エステル化反応の後に引き続いて除去される保護基によって保護しなければならない場合がある。アミノ酸を式Ｒ1−ＯＨのアルコールでエステル化する前にどの官能基を保護する必要があるのかは、当業者であれば容易に認識される。適切な保護基は当業者に公知であり、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｒｄ  ｅｄ．（１９９９）などに記載されている。
【０２３５】
アミノ酸アミド
アミノ酸アミドはいかなるアミノ酸のいかなるアミド、すなわちアミノ酸のカルボン酸が式ＨＮ（Ｒ3）（Ｒ4）のアミンと反応してアミドを形成するアミノ酸でよく、ここでＲ3及びＲ4は上記で定義される。従って、アミノ酸アミドは一般式（ＩＩ）で表され：
【０２３６】
【化１７】
2009515961.tif 000018
【０２３７】
式中、
Ｒは、アミノ酸の側鎖を表し；
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ22の炭化水素基を表し；及び
Ｒ4は、水素又はＣ1〜Ｃ22の炭化水素基を表す。
【０２３８】
当業者であれば容易に分かるように、アミノ酸の側鎖Ｒとして広範囲にわたる基が可能である。例えば、アミノ酸側鎖は、任意に置換されていてもよい炭化水素基であってよい。適切な置換基としては、ハロ、ニトロ、シアノ、チオール、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、スルホン酸、芳香族基、及び芳香族又は非芳香族複素環基が挙げられるが、これらに限定されない。アミノ酸側鎖は、任意にチオール、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、芳香族基、又は芳香族若しくは非芳香族複素環基で置換されていてもよいＣ1−Ｃ10の直鎖又は分岐炭化水素であることが好ましい。
【０２３９】
アミノ酸アミドは、天然アミノ酸のアミドであっても、合成アミノ酸のアミドであってもよい。アミノ酸は、ｄ−アミノ酸であってもｌ−アミノ酸であってもよい。好ましくは、アミノ酸エステルは、天然アミノ酸のエステルである。より好ましくは、アミノ酸エステルは、グリジン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、アスパラギン、グルタミン、トリプトファン、プロリン、セリン、トレオニン、チロシン、ヒドロキシプロリン、システイン、メチオニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、及びヒスチジンから選択されるアミノ酸のエステルである。
【０２４０】
Ｒ3で表される基は、Ｃ1〜Ｃ22のいかなる炭化水素基であってもよい。Ｒ4で表される基は、水素又はＣ1〜Ｃ22のいかなる炭化水素基であってもよい。代表的なＣ1〜Ｃ22の炭化水素基としては、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、アリル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ｃｉｓ−９−ヘキサデセニル、ｃｉｓ−９−オクタデセニル、ｃｉｓ，ｃｉｓ−９，１２−オクタデセニル、及びｃｉｓ，ｃｉｓ，ｃｉｓ−９，１２，１５−オクタデカトリエニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４１】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3は直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3は分岐炭化水素基である。
【０２４２】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3は飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3は不飽和炭化水素基である。
【０２４３】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3は直鎖飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3は直鎖不飽和炭化水素基である。
【０２４４】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ16の炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ10の炭化水素基である。
【０２４５】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ5の炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ3の炭化水素基である。
【０２４６】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ6−Ｃ22の炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ6−Ｃ18の炭化水素基である。
【０２４７】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ8−Ｃ18の炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ10−Ｃ18の炭化水素基である。
【０２４８】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ16−Ｃ18の炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ16−Ｃ22の炭化水素基である。
【０２４９】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ16の直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ10の直鎖炭化水素基である。
【０２５０】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ5の直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ3の直鎖炭化水素基である。
【０２５１】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ6−Ｃ22の直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ6−Ｃ18の直鎖炭化水素基である。
【０２５２】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ8−Ｃ18の直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ10−Ｃ18の直鎖炭化水素基である。
【０２５３】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ16−Ｃ18の直鎖炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ16−Ｃ22の直鎖炭化水素基である。
【０２５４】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ16の分岐炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ10の分岐炭化水素基である。
【０２５５】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ5の分岐炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ3の分岐炭化水素基である。
【０２５６】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ6−Ｃ22の分岐炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ6−Ｃ18の分岐炭化水素基である。
【０２５７】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ8−Ｃ18の分岐炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ10−Ｃ18の分岐炭化水素基である。
【０２５８】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ16−Ｃ18の分岐炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ16−Ｃ22の分岐炭化水素基である。
【０２５９】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ16の直鎖飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ10の直鎖飽和炭化水素基である。
【０２６０】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ5の直鎖飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ1−Ｃ3の直鎖飽和炭化水素基である。
【０２６１】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ6−Ｃ22の直鎖飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ6−Ｃ18の直鎖飽和炭化水素基である。
【０２６２】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ8−Ｃ18の直鎖飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ10−Ｃ18の直鎖飽和炭化水素基である。
【０２６３】
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ16−Ｃ18の直鎖飽和炭化水素基である。
一つの態様では、Ｒ4は水素であり、Ｒ3はＣ16−Ｃ22の直鎖飽和炭化水素基である。
【０２６４】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、直鎖又は分岐、飽和又は不飽和炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２６５】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ16の炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２６６】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ10の炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２６７】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ5の炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２６８】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ3の炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２６９】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ6−Ｃ22の炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２７０】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ6−Ｃ18の炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２７１】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ8−Ｃ18の炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２７２】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ10−Ｃ18の炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２７３】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ16−Ｃ18の炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２７４】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ16−Ｃ22の炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２７５】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ16の直鎖炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２７６】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ10の直鎖炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２７７】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ5の直鎖炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２７８】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ3の直鎖炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２７９】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ6−Ｃ22の直鎖炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２８０】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ6−Ｃ18の直鎖炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２８１】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ8−Ｃ18の直鎖炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２８２】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ10−Ｃ18の直鎖炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２８３】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ16−Ｃ18の直鎖炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２８４】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ16−Ｃ22の直鎖炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２８５】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ16の分岐炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２８６】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ10の分岐炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２８７】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ5の分岐炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２８８】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ3の分岐炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２８９】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ6−Ｃ22の分岐炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２９０】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ6−Ｃ18の分岐炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２９１】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ8−Ｃ18の分岐炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２９２】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ10−Ｃ18の分岐炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２９３】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ16−Ｃ18の分岐炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２９４】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ16−Ｃ22の分岐炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２９５】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ16の直鎖飽和炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２９６】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ10の直鎖飽和炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２９７】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ5の直鎖飽和炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２９８】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ1−Ｃ3の直鎖飽和炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０２９９】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ6−Ｃ22の直鎖飽和炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０３００】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ6−Ｃ18の直鎖飽和炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０３０１】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ8−Ｃ18の直鎖飽和炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０３０２】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ10−Ｃ18の直鎖飽和炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０３０３】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ16−Ｃ18の直鎖飽和炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０３０４】
一つの態様では、Ｒ3及びＲ4は各々、Ｃ16−Ｃ22の直鎖飽和炭化水素基であり、この場合Ｒ3及びＲ4は同じでも異なっていてもよい。
【０３０５】
一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は少なくとも６である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は少なくとも８である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は少なくとも１０である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は少なくとも１２である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は少なくとも１８である。
【０３０６】
一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は６未満である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は８未満である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は１０未満である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は１２未満である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は１８未満である。
【０３０７】
一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は約１〜１６の範囲である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は約１〜１０の範囲である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は約１〜５の範囲である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は約１〜３の範囲である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は約１６〜２２の範囲である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は約１６〜１８の範囲である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は約８〜１８の範囲である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は約１０〜１８の範囲である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は約１２〜１８の範囲である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は約６〜３０の範囲である。一つの態様では、Ｒ3とＲ4の炭素原子数の合計は約２２〜３０の範囲である。
【０３０８】
後に述べるように、Ｒ3及びＲ4の構造を変えることによって、医薬組成物の性質を変化させることが可能である。
【０３０９】
アミノ酸アミドは、Ｊ．Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，４ｔｈ  ｅｄ．Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，ＮＹ，１９９２，ｐｐ.４１７−４２７、などに記載のような当業者に公知の方法により、アミノ酸のカルボン酸基をアミド基へ変換することで得ることができる。通常、アミノ酸をアミノ酸エステル又はアミノ酸の酸塩化物などのアミノ酸誘導体へ変換し、次にそのアミノ酸誘導体を式ＮＨＲ3Ｒ4のアミンと反応させてアミノ酸アミドを得る。アミノ酸及び式ＮＨＲ3Ｒ4のアミンは市販されており、又は当業者に公知の方法によって調製することができる。アミノ酸誘導体を形成する時、又はそのアミノ酸誘導体を式ＮＨＲ3Ｒ4のアミンと反応させる時に、アミノ酸誘導体又はアミンの他のいくつかの官能基を、アミド化反応の後に引き続いて除去される保護基で保護しなければならない場合がある。アミノ酸誘導体を式ＮＨＲ3Ｒ4のアミンと反応させる前にどの官能基を保護する必要があるのかは、当業者であれば容易に認識されるであろう。適切な保護基は当業者に公知であり、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｒｄ  ｅｄ．（１９９９）などに記載されている。
【０３１０】
アミノ酸エステル又はアミドがリジンのアミノ酸エステル又はアミドである組成物
一つの態様では、アプタマーは（ｉ）リジンのエステル又はアミド、及び（ｉｉ）プロトン化アプタマーを含む組成物として存在する。
【０３１１】
一つの態様では、プロトン化アプタマーの酸性リン酸基に対して、リジン分子のエステル又はアミドはモル当量未満存在する、すなわちアミノ酸エステル又はアミド分子に対して過剰のプロトン化アプタマーの酸性リン酸基が存在する。
【０３１２】
理論に束縛されるものではないが、リジンのアミノ酸エステル又はアミドは、以下に示すように２個のプロトン化アプタマー分子と架橋すると考えられており：
【０３１３】
【化１８】
2009515961.tif 000019
【０３１４】
式中、Ｂ、Ｓ、及びＲ1は本明細書で述べる意味を表す。
【０３１５】
リジンのエステル又はアミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、通常、約２：１〜１：２の範囲である。一つの態様では、リジンのエステル又はアミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．５：１〜１：１．５の範囲である。一つの態様では、リジンのエステル又はアミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．２５：１〜１：１．２５の範囲である。一つの態様では、リジンのエステル又はアミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．１：１〜１：１．１の範囲である。一つの態様では、リジンのエステル又はアミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１：１である。しかしながら、リジンのエステル又はアミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、より広い範囲とすることも可能である。例えば、リジンのエステル又はアミドの塩基性基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１５：１〜１：１５の範囲とすることができる。
【０３１６】
本発明の他の態様では、リジンのエステル又はアミドが別のジアミンに置き換えられる。
【０３１７】
５．３．１．１．ｂ．  リジンのエステル又はアミド、プロトン化アプタマー、及びカルボン酸を含む組成物
一つの態様では、アプタマーは（ｉ）リジンのエステル又はアミド、及び（ｉｉ）プロトン化アプタマーを含む組成物として存在し、その組成物はさらにカルボン酸を含む。理論に束縛されるものではないが、カルボン酸はリジンのε−アミノ基をプロトン化して以下に示すような構造を形成すると考えられており：
【０３１８】
【化１９】
2009515961.tif 000020
【０３１９】
式中、Ｂ、Ｓ、及びＲ1は本明細書で述べる意味を表し、Ｒ9はＣ1−Ｃ21の炭化水素を表す。
【０３２０】
リジンのアミノ酸エステル又はアミノ酸アミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基とカルボン酸の酸基との合計のモル比は、通常、約２：１〜１：２の範囲である。一つの態様では、リジンのアミノ酸エステル又はアミノ酸アミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基とカルボン酸の酸基との合計のモル比は、約１．５：１〜１：１．５の範囲である。一つの態様では、リジンのアミノ酸エステル又はアミノ酸アミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基とカルボン酸の酸基との合計のモル比は、約１．２５：１〜１：１．２５の範囲である。一つの態様では、リジンのアミノ酸エステル又はアミノ酸アミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基とカルボン酸の酸基との合計のモル比は、約１．１：１〜１：１．１の範囲である。一つの態様では、リジンのアミノ酸エステル又はアミノ酸アミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基とカルボン酸の酸基との合計のモル比は、約１：１である。しかしながら、リジンのアミノ酸エステル又はアミノ酸アミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基及びカルボン酸の酸基のモル比は、より広い範囲とすることも可能である。例えば、リジンのアミノ酸エステル又はアミノ酸アミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基及びカルボン酸の酸基のモル比は、約１５：１〜１：１５の範囲とすることができる。
【０３２１】
一般に、カルボン酸の酸基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約２０：１〜１：２０の範囲である。一つの態様では、カルボン酸の酸基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１５：１〜１：１５の範囲である。一つの態様では、カルボン酸の酸基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１０：１〜１：１０の範囲である。一つの態様では、カルボン酸の酸基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約５：１〜１：５の範囲である。一つの態様では、カルボン酸の酸基に対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約２：１〜１：２の範囲である。
【０３２２】
カルボン酸
カルボン酸は医薬として許容されるいかなるカルボン酸であってもよい。通常、カルボン酸はＣ1−Ｃ22のカルボン酸である。適切なカルボン酸は、酢酸、プロパン酸、ブタン酸、ペンタン酸、デカン酸、ヘキサン酸、安息香酸、カプロン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、パルミン酸、オレイン酸、リノール酸、及びリノレン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３２３】
一つの態様では、カルボン酸はＣ1−Ｃ16のカルボン酸である。
一つの態様では、カルボン酸はＣ1−Ｃ10のカルボン酸である。
【０３２４】
一つの態様では、カルボン酸はＣ1−Ｃ5のカルボン酸である。
一つの態様では、カルボン酸はＣ1−Ｃ3のカルボン酸である。
【０３２５】
一つの態様では、カルボン酸はＣ6−Ｃ22のカルボン酸である。
一つの態様では、カルボン酸はＣ6−Ｃ18のカルボン酸である。
【０３２６】
一つの態様では、カルボン酸はＣ8−Ｃ18のカルボン酸である。
一つの態様では、カルボン酸はＣ10−Ｃ18のカルボン酸である。
【０３２７】
一つの態様では、カルボン酸はＣ6−Ｃ18のカルボン酸である。
一つの態様では、カルボン酸はＣ16−Ｃ22のカルボン酸である。
【０３２８】
一つの態様では、カルボン酸は飽和又は不飽和の脂肪酸である。
一つの態様では、カルボン酸は飽和脂肪酸である。
【０３２９】
一つの態様では、カルボン酸は不飽和脂肪酸である。
一つの態様では、カルボン酸はジカルボン酸である。適切なジカルボン酸としては、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、グルタミン酸、アジピン酸、及びピメリン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３３０】
一つの態様では、カルボン酸はポリカルボン酸である。
カルボン酸は市販されており、又は当業者に公知の方法によって調製することができる。
【０３３１】
一つの態様では、カルボン酸はＮ−アシルアミノ酸である。Ｎ−アシルアミノ酸は以下の一般式（ＩＩＩ）を有し：
【０３３２】
【化２０】
2009515961.tif 000021
【０３３３】
式中：
Ｒはアミノ酸側鎖を表し、上記で定義されており；及び
Ｒ2は式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基を表し、式中、Ｒ5はＣ1〜Ｃ21の置換炭化水素基であり、すなわちアシル基Ｒ2はＣ1−〜Ｃ22のアシル基を表す。代表的な式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基としては、アセチル、プロパノイル、ブタノイル、ヘキサノイル、カプロイル、ヘプトイル（ｈｅｐｔｏｙｌ）、オクトイル（ｏｃｔｏｙｌ）、ノノイル（ｎｏｎｏｙｌ）、デコイル（ｄｅｃｏｙｌ）、ウンデコイル（ｕｎｄｅｃｏｙｌ）、ドデコイル（ｄｏｄｅｃｏｙｌ）、トリデコイル（ｔｒｉｄｅｃｏｙｌ）、テトラデコイル（ｔｅｔｒａｄｅｃｏｙｌ）、ペンタデコイル（ｐｅｎｔａｄｅｃｏｙｌ）、ヘキサデコイル（ｈｅｘａｄｅｃｏｙｌ）、ヘプタデコイル（ｈｅｐｔａｄｅｃｏｙｌ）、オクタデコイル（ｏｃｔａｄｅｃｏｙｌ）、ラウロリル、ミリストイル、パルミトイル、ステアロイル、パルミオレオイル（ｐａｌｍｉｏｌｅｏｙｌ）、オレオイル、リノレオイル、リノレノイル、及びベンゾイルが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３３４】
一つの態様では、Ｒ5はＣ1−Ｃ15の炭化水素基であり、すなわち式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基はＣ2−Ｃ16のアシル基である。
【０３３５】
一つの態様では、Ｒ5はＣ1−Ｃ9の炭化水素基であり、すなわち式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基はＣ2−Ｃ10のアシル基である。
【０３３６】
一つの態様では、Ｒ5はＣ1−Ｃ5の炭化水素基であり、すなわち式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基はＣ2−Ｃ6のアシル基である。
【０３３７】
一つの態様では、Ｒ5はＣ1−Ｃ3の炭化水素基であり、すなわち式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基はＣ2−Ｃ4のアシル基である。
【０３３８】
一つの態様では、Ｒ5はＣ5−Ｃ21の炭化水素基であり、すなわち式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基はＣ6−Ｃ22のアシル基である。
【０３３９】
一つの態様では、Ｒ5はＣ5−Ｃ17の炭化水素基であり、すなわち式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基はＣ6−Ｃ18のアシル基である。
【０３４０】
一つの態様では、Ｒ5はＣ7−Ｃ17の炭化水素基であり、すなわち式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基はＣ8−Ｃ18のアシル基である。
【０３４１】
一つの態様では、Ｒ5はＣ9−Ｃ17の炭化水素基であり、すなわち式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基はＣ10−Ｃ18のアシル基である。
【０３４２】
一つの態様では、Ｒ5はＣ15−Ｃ21の炭化水素基であり、すなわち式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基はＣ16−Ｃ22のアシル基である。
【０３４３】
一つの態様では、式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基は飽和又は不飽和の脂肪酸から得られる。
【０３４４】
一つの態様では、式−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5のアシル基は、カプロイル、ラウロリル、ミリストイル、パルミトイル、ステアロイル、パルミオレオイル（ｐａｌｍｉｏｌｅｏｙｌ）、オレオイル、リノレオイル、又はリノレノイル基である。
【０３４５】
Ｎ−アシル化アミノ酸は、当業者に公知の方法によって得ることができる。例えば、Ｎ−アシル化アミノ酸は、当業者に公知の方法を用いて、アミノ酸を式Ｔ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5の酸ハロゲン化物と反応させることによって得ることができ、式中、Ｔはハロゲン化物、好ましくは塩化物、Ｒ1は上記で定義される。アミノ酸を式Ｔ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5の酸ハロゲン化物でＮ−アシル化する場合、アミノ酸又は酸ハロゲン化物の他のいくつかの官能基を、アシル化反応の後に引き続いて除去される保護基によって保護しなければならない場合がある。アミノ酸を式Ｔ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5の酸ハロゲン化物でアシル化する前にどの官能基を保護する必要があるのかは、当業者であれば容易に認識される。適切な保護基は当業者に公知であり、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｒｄ  ｅｄ．（１９９９）などに記載されている。
【０３４６】
酸ハロゲン化物は、Ｊ．Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｒｅａｃｔｉｏｎ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，４ｔｈ  ｅｄ．  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ，１９９２，ｐｐ.４３７−８、などに記載のような当業者に公知の方法を用いて得ることができる。例えば、酸ハロゲン化物はカルボン酸を塩化チオニル、臭化チオニル、又はヨウ化チオニルと反応させることによって得ることができる。酸塩化物及び酸臭化物は、カルボン酸を、各々三塩化リン又は三臭化リンと反応させることによって得ることもできる。酸塩化物は、四塩化炭素中でカルボン酸をＰｈ3Ｐと反応させることによって得ることもできる。酸フッ化物は、カルボン酸をフッ化シアヌル酸と反応させることによって得ることができる。
【０３４７】
後に述べるように、カルボン酸の構造を変えることによって、医薬組成物の性質を変化させることが可能である。
【０３４８】
本発明の他の態様では、リジンのエステル又はアミドが別のジアミンに置き換えられる。
【０３４９】
５．３．１．１．ｃ．  アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミド、及びプロトン化アプタマーを含む組成物
別の態様では、アプタマーは（ｉ）アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のエステル又はアミド、及び（ｉｉ）プロトン化アプタマーを含む組成物として存在し、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸の側鎖カルボン酸基もエステル化若しくはアミド化されている、すなわちアスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドである。理論に束縛されるものではないが、以下に、プロトン化アプタマーによってプロトン化されて以下に示す構造を形成し：
【０３５０】
【化２１】
2009515961.tif 000022
【０３５１】
式中、Ｂ、Ｓ、及びＲ1は上記で定義され、Ｒ6は下記で定義される。
【０３５２】
アスパラギン酸及びグルタミン酸のジエステルは、それぞれ以下の構造を有し：
【０３５３】
【化２２】
2009515961.tif 000023
【０３５４】
式中、Ｒ1は上記で定義され、Ｒ6はＲ1と同義である。Ｒ1とＲ6は同じでも異なっていてもよい。しかしながら、通常Ｒ1とＲ6は同じである。
【０３５５】
アスパラギン酸及びグルタミン酸のジアミドは、各々以下の構造を有し：
【０３５６】
【化２３】
2009515961.tif 000024
【０３５７】
式中、Ｒ3及びＲ4は上記で定義され、Ｒ7はＲ3と同義であり、Ｒ8はＲ4と同義である。アミド基−Ｎ（Ｒ3）（Ｒ4）及び−Ｎ（Ｒ7）（Ｒ8）は同じでも異なっていてもよい。しかしながら、通常アミド基−Ｎ（Ｒ3）（Ｒ4）及び−Ｎ（Ｒ7）（Ｒ8）は同じである。
【０３５８】
アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、通常、約２：１〜１：２の範囲である。一つの態様では、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．５：１〜１：１．５の範囲である。一つの態様では、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．２５：１〜１：１．２５の範囲である。一つの態様では、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１．１：１〜１：１．１の範囲である。一つの態様では、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１：１である。しかしながら、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、より広い範囲とすることも可能である。例えば、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドに対するプロトン化アプタマーの酸性基のモル比は、約１５：１〜１：１５の範囲とすることができる。
【０３５９】
５．３．２．  （ｉ）プロトン化アプタマー及び（ｉｉ）ポリリジンを含む組成物
別の態様では、アプタマーは（ｉ）プロトン化アプタマー及び（ｉｉ）ポリリジンを含む組成物として存在する。
【０３６０】
上述のいずれのアプタマーも組成物に使用することができる。
いかなるポリリジン（例えば、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、ウィスコンシン州、ミルウォーキー、より臭化水素酸塩として市販されているポリリジンのいずれかで、これは後に示すようにポリリジンに変換することができる）も医薬組成物に使用することができる。一つの態様では、ポリリジンの分子量は約１０００〜４０００の範囲である。一つの態様では、ポリリジンの分子量は約４０００〜１５０００の範囲である。一つの態様では、ポリリジンの分子量は約１５０００〜３００００の範囲である。一つの態様では、ポリリジンの分子量は約３００００〜７００００の範囲である。一つの態様では、ポリリジンの分子量は約７００００〜１５００００の範囲である。一つの態様では、ポリリジンの分子量は約１５００００〜３０００００の範囲である。
【０３６１】
理論に束縛されるものではないが、ポリリジンのアミノ基がプロトン化アプタマーの酸性リン酸基によってプロトン化されると考えられる。
【０３６２】
通常、プロトン化アプタマーの量に対するポリリジンの量は、ｐＨ値が約３〜１０の範囲の組成物の溶液（例えば、メタノール溶液又は水溶液）を提供するのに十分な量である。一つの態様では、組成物の溶液のｐＨ値は約５〜９での範囲ある。一つの態様では、組成物の溶液のｐＨ値は約６〜８の範囲である。一つの態様では、組成物の溶液のｐＨ値は約７である。しかしながら、本発明の範囲内で、その他のｐＨの範囲も可能である。例えば、一つの態様では、組成物の溶液のｐＨ値は約３〜７の範囲であり、別の態様では、組成物の溶液のｐＨ値は約７〜１０の範囲である。
【０３６３】
ｐＨの測定は、組成物を溶媒中（例えばメタノール又は水）へ溶解し、得られた溶液の数マイクロリットルを取り出し、湿らせたｐＨ試験紙（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、ウィスコンシン州、ミルウォーキー、などから市販）へ付着させることで容易に行うことができ、溶液のｐＨは溶液付着後の試験紙の色で示される。
【０３６４】
５．３．３．  （ｉ）アプタマー、（ｉｉ）二価の金属カチオン、及び（ｉｉｉ）任意にカルボキシレートを含む組成物
別の態様では、アプタマーは、（ｉ）アプタマー、（ｉｉ）二価の金属カチオン、及び（ｉｉｉ）任意にカルボキシレートを含む組成物として存在する。理論に束縛されるものではないが、二価の金属カチオンがアプタマーのリン酸基と相互作用を起こして以下に示す構造を形成すると考えられ：
【０３６５】
【化２４】
2009515961.tif 000025
【０３６６】
式中、Ｍ+2は二価の金属カチオンを表し、Ｂ及びＳは上記で定義される。
【０３６７】
理論に束縛されるものではないが、組成物が任意のカルボキシレートを含む場合、二価の金属カチオンがアプタマーのリン酸基及びカルボキシレートと相互作用を起こして以下に示す構造を形成すると考えられ：
【０３６８】
【化２５】
2009515961.tif 000026
【０３６９】
式中、Ｂ、Ｓ、Ｒ9、及びＭ+2は上記で定義される。理論に束縛されるものではないが、この構造は、二価の金属カチオンがプロトン化リジンに置き換わる点以外は、上述のアプタマー、アミノ酸リジン、及びカルボン酸の間で形成される構造と類似していると考えられる。
【０３７０】
理論に束縛されるものではないが、組成物が任意のカルボキシレートを含む場合、二価の金属カチオンが１個を超えるカルボキシレートと相互作用を起こして以下の構造を形成するとも考えられており、
【０３７１】
【化２６】
2009515961.tif 000027
【０３７２】
式中、Ｍ+2及びＲ9は上記で定義される。
【０３７３】
本明細書で述べるいかなるアプタマーも組成物に用いることができる。
カルボキシレートはいかなる医薬として許容されるカルボン酸からも得ることができる。カルボキシレートを提供するために、上述のいずれのカルボン酸も用いることができる。
【０３７４】
一つの態様では、カルボキシレートは一般式（ＩＩＩ）のＮ−アシルアミノ酸から得られる。本明細書で述べる一般式（ＩＩＩ）のいずれのＮ−アシルアミノ酸も用いることができる。
【０３７５】
適切な二価の金属カチオンとしては、アルカリ土類金属カチオン、Ｍｇ+2、Ｚｎ+2、Ｃｕ+2、及びＦｅ+2が挙げられるが、これらに限定されない。好ましい二価の金属カチオンは、Ｃａ+2、Ｍｇ+2、Ｚｎ+2、Ｃｕ+2、及びＦｅ+2である。
【０３７６】
二価の金属カチオンに対するアプタマーのアニオン性基とカルボキシレートのアニオン性基との合計のモル比は、通常、約４：１〜１：４の範囲である。一つの態様では、二価の金属カチオンに対するアプタマーのアニオン性基とカルボキシレートのアニオン性基との合計のモル比は、約３：１〜１：３の範囲である。一つの態様では、二価の金属カチオンに対するアプタマーのアニオン性基とカルボキシレートのアニオン性基との合計のモル比は、約２．５：１〜１：２．５の範囲である。一つの態様では、二価の金属カチオンに対するアプタマーのアニオン性基とカルボキシレートのアニオン性基との合計のモル比は、約２：１〜１：２の範囲である。一つの態様では、二価の金属カチオンに対するアプタマーのアニオン性基とカルボキシレートのアニオン性基との合計のモル比は、約２：１である。しかしながら、二価の金属カチオンに対するアプタマーのアニオン性基及びカルボキシレートのアニオン性基のモル比は、より広い範囲とすることも可能である。例えば、二価の金属カチオンに対するアプタマーのアニオン性基及びカルボキシレートのアニオン性基のモル比は、約１５：１〜１：１５の範囲とすることができる。
【０３７７】
一般に、カルボキシレートのアニオン性基に対するアプタマーのアニオン性基のモル比は、約２０：１〜１：２０の範囲である。一つの態様では、カルボキシレートのアニオン性基に対するアプタマーのアニオン性基のモル比は、約１５：１〜１：１５の範囲である。一つの態様では、カルボキシレートのアニオン性基に対するアプタマーのアニオン性基のモル比は、約１０：１〜１：１０の範囲である。一つの態様では、カルボキシレートのアニオン性基に対するアプタマーのアニオン性基のモル比は、約５：１〜１：５の範囲である。一つの態様では、カルボキシレートのアニオン性基に対するアプタマーのアニオン性基のモル比は、約２：１〜１：２の範囲である。
【０３７８】
５．３．４．  アプタマー含有組成物の一般的性質
アミノ酸エステル若しくはアミノ酸アミドの親油性及び／又は分子量を変えることにより、これらの成分を含有する医薬組成物の性質を変化させることが可能である。アミノ酸エステル若しくはアミノ酸アミドの親油性及び／又は分子量は、アミノ酸エステル（若しくはアミノ酸アミド）を形成するのに用いるアミノ酸及び／又はアルコール（若しくはアミン）を変えることによって変化させることができる。例えば、アミノ酸エステルの炭化水素基Ｒ1を変えることによって、アミノ酸エステルの親油性及び／又は分子量を変化させることができる。通常、Ｒ1の分子量を大きくすると、アミノ酸エステルの親油性が高まる。同様に、アミノ酸アミドの基Ｒ3及び／又はＲ4を変えることによって、アミノ酸アミドの親油性及び／又は分子量を変化させることができる。
【０３７９】
同様に、さらにカルボン酸を含む医薬組成物において、カルボン酸の量及び／又は親油性及び／又は分子量を変えることによって（すなわち、カルボン酸のＲ9の親油性又は分子量を変えることによって）、医薬組成物の性質を変化させることが可能である。同様に、アミノ酸のエステル又はアミドがアスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドである医薬組成物において、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドの量及び／又は親油性及び／又は分子量を変えることによって（すなわち、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステルのＲ1及び／又はＲ6を変えることによって、又はアスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジアミドのＲ3、Ｒ4、Ｒ7、及び／又はＲ8を変えることによって）、医薬組成物の性質を変化させることが可能である。
【０３８０】
例えば、アミノ酸エステル若しくはアミノ酸アミドの親油性及び／又は分子量を変えることにより、アプタマーが医薬組成物から放出される速度を変化させることが可能である。一般に、アミノ酸エステル又はアミノ酸アミドの親油性が高いほど、医薬組成物からのアプタマーの放出速度は遅くなる。同様に、アプタマー含有組成物がさらにカルボン酸、又は、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドを含む場合、カルボン酸、又は、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸のジエステル又はジアミドの量及び／又は親油性及び／又は分子量を変えることによって、アプタマーが医薬組成物から放出される速度を変化させることが可能である。
【０３８１】
同様に、アプタマー；二価の金属カチオン；及びカルボキシレートを含む医薬組成物では、カルボキシレートの量及び／又は親油性及び／又は分子量を変えることによって（すなわち、カルボキシレートのＲ9の親油性又は分子量を変えることによって）、医薬組成物の性質（例えば、アプタマーが医薬組成物から放出される速度）を変化させることが可能である。
【０３８２】
医薬組成物からの放出速度の測定は、約５０μＬ（５０μｇ）の医薬組成物を遠心用チューブ中の脱イオン水約４ｍＬ中へ注入することによって行うことができる。医薬組成物を水へ注入した時間をＴ＝０として記録する。定められた時間Ｔの後、サンプルを約−９℃まで冷却し、遠心分離機により約１３０００ｒｍｐで約２０分間回転させる。次に、得られた上清をＨＰＬＣで分析し、水溶液中に存在するアプタマーを定量する。遠心分離で得られた沈殿物中のアプタマーの量も測定することができ、沈殿物を回収し、約１０μＬのメタノールに溶解し、そのメタノール溶液をＨＰＬＣで分析して沈殿中のアプタマーの量を定量する。水溶液中のアプタマーの量及び沈殿中のアプタマーの量は、アプタマーに対応するＨＰＬＣピークのピーク面積を、アプタマー濃度に対するアプタマーピーク面積の検量線と比較することによって定量する。適切なＨＰＬＣ条件は、当業者であれば容易に決定することができる。
【０３８３】
５．３．５．  アプタマー含有組成物の調製方法
医薬組成物の調製は、アプタマーの無機塩、通常はカリウム塩又はナトリウム塩、を、例えばメタノール又は水などのこれを可溶な溶媒中へ溶解し、得られた溶液のｐＨ値を、以下に示すようにギ酸などの有機酸で約２から３の間に調節することによって行うことができ：
【０３８４】
【化２７】
2009515961.tif 000028
【０３８５】
式中、Ｓ及びＢは上記で定義され、Ｍ+は金属イオンを表し、プロトン化アプタマーの溶液が提供される。
【０３８６】
次に、得られたプロトン化アプタマーの溶液を水に対して透析して過剰のギ酸及びギ酸の塩を除去し、もし、例えば中和をメタノール溶媒中で行った場合は、メタノールを水で置換する。次に凍結乾燥によってプロトン化アプタマーの水溶液から水を除去してプロトン化アプタマーを得ることができ、又は別の選択肢として、プロトン化アプタマーの水溶液をメタノールに対して透析して水をメタノールで置換し、その後単にメタノールを減圧留去することによってプロトン化アプタマーを得ることもできる。
【０３８７】
プロトン化アプタマーの溶液は、カチオン交換樹脂を用いて調製することもできる。当業者に公知のいかなるカチオン交換樹脂も用いることができ、例えば、Ｓｔｒａｔａ（登録商標）ＳＣＸカチオン交換樹脂（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社、カリフォルニア州、トーランス、より市販）又はＤＯＷＥＸ（登録商標）５０などのＤＯＷＥＸ（登録商標）カチオン交換樹脂（Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ社、ミシガン州、ミッドランド、より市販）を用いることができる。通常、カチオン交換樹脂を含むカラムをまず酸性溶液で洗浄して樹脂をプロトン化し、次に例えばメタノール又は水などの溶媒中の、通常はカリウム塩又はナトリウム塩であるアプタマー無機塩の溶液を樹脂へ通液し、溶出液としてプロトン化アプタマーの溶液を得る。
【０３８８】
アプタマー及び医薬として許容される有機塩基（代表的な医薬として許容される有機塩基としてアミノ酸のエステル又はアミドを用いる）を含むアプタマー組成物を調製するには、プロトン化アプタマーを、通常は撹拌しながらメタノールなどの溶媒に溶解し、続いて、得られた溶液にアミノ酸のエステル又はアミドを以下に示すように添加する：
【０３８９】
【化２８】
2009515961.tif 000029
【０３９０】
式中、Ｓ、Ｂ、Ｒ、及びＲ1は上記で定義される。
【０３９１】
その後、カルボン酸など組成物のその他の成分を得られた溶液に添加する。
通常、十分なアミノ酸のエステル又はアミド、及びその他の成分を添加して、ｐＨ値が約５〜９の範囲の溶液を得る。一つの態様では、十分なアミノ酸のエステル又はアミド、及びその他の成分を添加して、ｐＨ値が約６〜８の範囲の溶液を得る。一つの態様では、十分なアミノ酸のエステル又はアミド、及びその他の成分を添加して、ｐＨ値が約７の溶液を得る。ｐＨの測定は、数マイクロリットルの溶液を取り出して湿らせたｐＨ試験紙（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、ウィスコンシン州、ミルウォーキー、などから市販）へ付着させることで容易に行うことができ、溶液のｐＨは溶液付着後の試験紙の色で示される。その後、溶媒を減圧留去することで、アミノ酸エステル又はアミノ酸アミド及びアプタマーを含む組成物が得られる。
【０３９２】
アプタマー；二価の金属カチオン；及びカルボキシレートを含むアプタマー組成物を調製するには、プロトン化アプタマーをメタノールなどの溶媒へ溶解し、得られた溶液に酢酸金属塩などの金属塩又は金属水酸化物を、好ましくは撹拌しながら添加する。次に、得られた溶液にカルボン酸を、好ましくは撹拌しながら添加する。その後、溶媒を減圧留去することで、アプタマー、二価の金属カチオン、及びカルボキシレートを含むアプタマー組成物が得られる。
【０３９３】
アプタマー及びポリリジンを含むアプタマー組成物を調製するには、ポリリジン溶液（メタノール溶液など）をプロトン化アプタマー溶液（メタノール溶液など）へ、好ましくは撹拌しながら、及び得られた溶液のｐＨをモニターしながらゆっくり添加し、所望のｐＨ値を有する溶液を得る。その後、メタノールを減圧留去することで、アプタマー及びポリリジンを含むアプタマー組成物が得られる。
【０３９４】
ポリリジンは、市販のポリリジン臭化水素酸塩（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、ミズーリ州、セントルイス、より市販）から得られ、単にポリリジン臭化水素酸塩の溶液（メタノール溶液又は水溶液など）を水酸化アンモニウムで中和することによって、ｐＨ値が約１０〜１２の溶液が得られる。次に、得られたポリリジン溶液を水に対して透析にかけて、過剰の臭化アンモニウム及び水酸化アンモニウムを除去し、もし、例えば中和をメタノール溶媒中で行った場合はメタノールを水で置換する。次に凍結乾燥によってポリリジンの水溶液から水を除去してポリリジンを得ることができ、又は別の選択肢として、ポリリジンの水溶液をメタノールに対して透析にかけて水をメタノールで置換し、その後単にメタノールを減圧留去することによってポリリジンを得ることもできる。
【０３９５】
５．４  医薬組成物
本明細書で述べるいかなるアプタマーも医薬組成物に用いることができる。
本明細書で述べるいかなるリン脂質又はスフィンゴミエリンも医薬組成物に用いることができる。
【０３９６】
本明細書で述べるいかなる溶媒も医薬組成物に用いることができる。
一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約２重量パーセントより高い。一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約５重量パーセントより高い。一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約７．５重量パーセントより高い。一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約１０重量パーセントより高い。一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約１２重量パーセントより高い。一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約１５重量パーセントより高い。一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約２重量パーセント〜５重量パーセントの範囲である。一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約２重量パーセント〜７．５重量パーセントの範囲である。一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約２重量パーセント〜１０重量パーセントの範囲である。一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約２重量パーセント〜１２重量パーセントの範囲である。一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約２重量パーセント〜１５重量パーセントの範囲である。一つの態様では、医薬組成物中のアプタマー濃度は、医薬組成物に対して約２重量パーセント〜２０重量パーセントの範囲である。
【０３９７】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約１０００ｃＰより高い。
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２０００ｃＰより高い。
【０３９８】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約５０００ｃＰより高い。
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約１００００ｃＰより高い。
【０３９９】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約１５０００ｃＰより高い。
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２００００ｃＰより高い。
【０４００】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２５０００ｃＰより高い。
通常、医薬組成物の２０℃における粘度は約１０００００ｃＰ未満である。
【０４０１】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約７５０００ｃＰ未満である。
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約１０００ｃＰ〜１０００００ｃＰの範囲である。
【０４０２】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２０００ｃＰ〜１０００００ｃＰの範囲である。
【０４０３】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約５０００ｃＰ〜１０００００ｃＰの範囲である。
【０４０４】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約１００００ｃＰ〜１０００００ｃＰの範囲である。
【０４０５】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２００００ｃＰ〜１０００００ｃＰの範囲である。
【０４０６】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２５０００ｃＰ〜１０００００ｃＰの範囲である。
【０４０７】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約１０００ｃＰ〜７５０００ｃＰの範囲である。
【０４０８】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２０００ｃＰ〜７５０００ｃＰの範囲である。
【０４０９】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約５０００ｃＰ〜７５０００ｃＰの範囲である。
【０４１０】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約１００００ｃＰ〜７５０００ｃＰの範囲である。
【０４１１】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２００００ｃＰ〜７５０００ｃＰの範囲である。
【０４１２】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２５０００ｃＰ〜７５０００ｃＰの範囲である。
【０４１３】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２０００ｃＰ〜２５０００ｃＰの範囲である。
【０４１４】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約５０００ｃＰ〜２５０００ｃＰの範囲である。
【０４１５】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２０００ｃＰ〜１８０００ｃＰの範囲である。
【０４１６】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約５０００ｃＰ〜１８０００ｃＰの範囲である。
【０４１７】
一つの態様では、医薬組成物の２０℃における粘度は約２０００ｃＰ未満である。
粘度の測定は、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＤＶ−ＩＩ−ＰＲＯ粘度計（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ社、マサチューセッツ州、マールボロ、より市販）を用い、円錐−平板型のサンプラー、ＣＰＥ−４０スピンドル、サンプル量０．５ｍＬ、回転速度３ｒｐｍ、及び２５℃に制御された温度により行った。
【０４１８】
一つの態様では、医薬組成物は１８〜２４ゲージのニードルで吐出することができ、従って注射投与が可能である。
【０４１９】
５．４．１．  任意の添加剤
本医薬組成物は、必要であれば、任意に適量の医薬として許容される保存剤を含んでもよく、これは微生物の繁殖に対する追加的な予防策となる。
【０４２０】
本発明の医薬組成物に有用な保存剤の例としては、ソルビン酸カリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸及びその塩、ブチルパラベンなどのその他のパラヒドロキシ安息香酸エステル、エチルアルコール若しくはベンジルアルコールなどのアルコール、フェノールなどのフェノール化合物、又は塩化ベンザルコニウム（例えば塩化ベンゼトニウム）などの四級化合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４２１】
一つの態様では、本発明の医薬組成物は、任意に適量の医薬として許容されるポリマーを含んでもよい。ポリマーは、医薬組成物の粘度をさらに高める。本発明の医薬組成物の多くは、４０℃より高い温度においてそのゲル特性を失う。医薬組成物にポリマーを含有することにより、医薬組成物は高温においてもそのゲル特性を保持する。
【０４２２】
本発明の組成物及び方法に用いる適切なポリマーとしては、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、キトサン、ポリアクリル酸、及びポリメタクリル酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４２３】
一つの態様では、ポリマーはＨＰＭＣである。
一つの態様では、ポリマーはヒドロキシプロピルセルロースである。
【０４２４】
一つの態様では、ポリマーはポリアクリル酸である。一つの態様では、ポリアクリル酸は、Ｃａｒｂｏｍｅｒ（登録商標）（Ｃａｒｂｏｍｅｒ，Ｉｎｃ．社、マサチューセッツ州、ウエストボロー、より市販）などの架橋ポリアクリル酸である。
【０４２５】
一つの態様では、ポリマーはポリメタクリル酸である。
通常、ポリマーは、医薬組成物に対して０より大きく１０重量パーセントまでの範囲の量で存在する。
【０４２６】
一つの態様では、ポリマーは、医薬組成物に対して約０．１〜１０重量パーセントの範囲の量で存在する。
【０４２７】
一つの態様では、ポリマーは、医薬組成物に対して約１〜７．５重量パーセントの範囲の量で存在する。
【０４２８】
一つの態様では、ポリマーは、医薬組成物に対して約１．５〜５重量パーセントの範囲の量で存在する。
【０４２９】
一つの態様では、ポリマーは、医薬組成物に対して約２〜４重量パーセントの範囲の量で存在する。
【０４３０】
医薬組成物の成分（ポリマー、溶媒、及びアプタマー、並びにその他の任意の成分）は生体適合性及び無害であって、徐々に単に体内で吸収及び／又は代謝されるだけであることが好ましい。
【０４３１】
一つの態様では、本発明の医薬組成物は実質的にポリマーを含有しない。
一つの態様では、本発明の医薬組成物に添加されるいかなる追加成分も、動物による使用又は摂取に対してＦＤＡによりＧＲＡＳに指定されている。
【０４３２】
別の態様では、本発明の医薬組成物に添加されるいかなる追加成分も、ヒトによる使用又は摂取に対してＦＤＡによりＧＲＡＳに指定されている。
【０４３３】
５．４．２  代表的な医薬組成物
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質は、
【０４３４】
【化２９】
2009515961.tif 000030
【０４３５】
であり、式中、Ｒ2及びＲ3はそれぞれステアロイル基又はパルミトイル基であり、全ステアロイル基のパルミトイル基に対する比は約８５：１５であり、Ｒ1はＯ-である（Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈ、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  ＧｍｂＨ社、ドイツ、ケルン、より市販）。
【０４３６】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約６０：４０〜４０：６０の範囲である。
【０４３７】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約５０：５０である。
【０４３８】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約６０：４０〜４０：６０の範囲であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜４重量パーセントの量で存在する。
【０４３９】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約５０：５０であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜４重量パーセントの量で存在する。
【０４４０】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約６０：４０〜４０：６０の範囲であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約３重量パーセントの量で存在する。
【０４４１】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約５０：５０であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約３重量パーセントの量で存在する。
【０４４２】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、アプタマーは、ＡＲＣ２２４、ＡＲＣ２４５、ＡＲＣ２２５、ＡＲＣ２５９（各々、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５、に記載）、及びペグ化ＡＲＣ２５９から成る群より選択される。
【０４４３】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約６０：４０〜４０：６０の範囲であり、アプタマーは、ＡＲＣ２２４、ＡＲＣ２４５、ＡＲＣ２２５、ＡＲＣ２５９（各々、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載）、及びペグ化ＡＲＣ２５９から成る群より選択される。
【０４４４】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約５０：５０であり、アプタマーは、ＡＲＣ２２４、ＡＲＣ２４５、ＡＲＣ２２５、ＡＲＣ２５９（各々、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載）、及びペグ化ＡＲＣ２５９から成る群より選択される。
【０４４５】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約６０：４０〜４０：６０の範囲であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜４重量パーセントの量で存在し、アプタマーは、ＡＲＣ２２４、ＡＲＣ２４５、ＡＲＣ２２５、ＡＲＣ２５９（各々、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載）、及びペグ化ＡＲＣ２５９から成る群より選択される。
【０４４６】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約５０：５０であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜４重量パーセントの量で存在し、アプタマーは、ＡＲＣ２２４、ＡＲＣ２４５、ＡＲＣ２２５、ＡＲＣ２５９（各々、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載）、及びペグ化ＡＲＣ２５９から成る群より選択される。
【０４４７】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約６０：４０〜４０：６０の範囲であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約３重量パーセントの量で存在し、アプタマーは、ＡＲＣ２２４、ＡＲＣ２４５、ＡＲＣ２２５、ＡＲＣ２５９（各々、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載）、及びペグ化ＡＲＣ２５９から成る群より選択される。
【０４４８】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約５０：５０であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約３重量パーセントの量で存在し、アプタマーは、ＡＲＣ２２４、ＡＲＣ２４５、ＡＲＣ２２５、ＡＲＣ２５９（各々、Ｐ．Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載）、及びペグ化ＡＲＣ２５９から成る群より選択される。
【０４４９】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、アプタマーはペグ化ＡＲＣ２５９である。
【０４５０】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約６０：４０〜４０：６０の範囲であり、アプタマーはペグ化ＡＲＣ２５９である。
【０４５１】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約５０：５０であり、アプタマーはペグ化ＡＲＣ２５９である。
【０４５２】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約６０：４０〜４０：６０の範囲であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜４重量パーセントの量で存在し、アプタマーはペグ化ＡＲＣ２５９である。
【０４５３】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約５０：５０であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜４重量パーセントの量で存在し、アプタマーはペグ化ＡＲＣ２５９である。
【０４５４】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約６０：４０〜４０：６０の範囲であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約３重量パーセントの量で存在し、アプタマーはペグ化ＡＲＣ２５９である。
【０４５５】
一つの態様では、第１有機溶媒はプロピレンカーボネートであり、第二の有機溶媒はグリセロールホルマールであり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、グリセロールホルマールに対するプロピレンカーボネートの比は約５０：５０であり、リン脂質は、医薬組成物に対して約３重量パーセントの量で存在し、アプタマーはペグ化ＡＲＣ２５９である。
【０４５６】
上述の各医薬組成物において、グリセロールホルマールはプロピレングリコールに置き換えることができる。
【０４５７】
一つの態様では、溶媒はプロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物であり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈ（Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  ＧｍｂＨ社、ドイツ、ケルン、より市販）である。一つの態様では、プロピレングリコールは実質的に他の有機溶媒を含有せず、グリセロールホルマールも実質的に他の有機溶媒を含有しない。
【０４５８】
一つの態様では、溶媒はプロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物であり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜４重量パーセントの量で存在する。一つの態様では、プロピレングリコールは実質的に他の有機溶媒を含有せず、グリセロールホルマールも実質的に他の有機溶媒を含有しない。
【０４５９】
一つの態様では、溶媒はプロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物であり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜２重量パーセントの量で存在する。一つの態様では、プロピレングリコールは実質的に他の有機溶媒を含有せず、グリセロールホルマールも実質的に他の有機溶媒を含有しない。
【０４６０】
一つの態様では、溶媒はプロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物であり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、アプタマーはペグ化ＡＲＣ２５９である。一つの態様では、プロピレングリコールは実質的に他の有機溶媒を含有せず、グリセロールホルマールも実質的に他の有機溶媒を含有しない。
【０４６１】
一つの態様では、溶媒はプロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物であり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜４重量パーセントの量で存在し、アプタマーはペグ化ＡＲＣ２５９である。一つの態様では、プロピレングリコールは実質的に他の有機溶媒を含有せず、グリセロールホルマールも実質的に他の有機溶媒を含有しない。
【０４６２】
一つの態様では、溶媒はプロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物であり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜２重量パーセントの量で存在し、アプタマーはペグ化ＡＲＣ２５９である。一つの態様では、プロピレングリコールは実質的に他の有機溶媒を含有せず、グリセロールホルマールも実質的に他の有機溶媒を含有しない。
【０４６３】
一つの態様では、溶媒はプロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物であり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、アプタマーは、ＡＲＣ２２４、ＡＲＣ２４５、ＡＲＣ２２５、ＡＲＣ２５９（各々、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載）、及びペグ化ＡＲＣ２５９から成る群より選択される。一つの態様では、プロピレングリコールは実質的に他の有機溶媒を含有せず、グリセロールホルマールも実質的に他の有機溶媒を含有しない。
【０４６４】
一つの態様では、溶媒はプロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物であり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜４重量パーセントの量で存在し、アプタマーは、ＡＲＣ２２４、ＡＲＣ２４５、ＡＲＣ２２５、ＡＲＣ２５９（各々、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載）、及びペグ化ＡＲＣ２５９から成る群より選択される。一つの態様では、プロピレングリコールは実質的に他の有機溶媒を含有せず、グリセロールホルマールも実質的に他の有機溶媒を含有しない。
【０４６５】
一つの態様では、溶媒はプロピレングリコール、グリセロールホルマール、又はこれらの混合物であり、リン脂質はＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈであり、リン脂質は、医薬組成物に対して約１〜２重量パーセントの量で存在し、アプタマーは、ＡＲＣ２２４、ＡＲＣ２４５、ＡＲＣ２２５、ＡＲＣ２５９（各々、Ｐ．Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒら，Ｄｉｒｅｃｔ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ２’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  Ａｐｔａｍｅｒ  ｔｏ  ＶＥＧＦ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１２，２５−３３，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５に記載）、及びペグ化ＡＲＣ２５９から成る群より選択される。一つの態様では、プロピレングリコールは実質的に他の有機溶媒を含有せず、グリセロールホルマールも実質的に他の有機溶媒を含有しない。
【０４６６】
５．５  動物の状態を治療する方法
本発明の医薬組成物は人間医学及び獣医学に有用である。従って、本発明はさらに、動物に本発明の医薬組成物を効果量投与することを含む、動物の状態を治療若しくは予防する方法に関する。
【０４６７】
一つの態様では、本発明は、必要としている動物に本発明の医薬組成物を効果量投与することを含む、動物の状態を治療する方法に関する。
【０４６８】
一つの態様では、本発明は、必要としている動物に本発明の医薬組成物を効果量投与することを含む、動物の状態を予防する方法に関する。
【０４６９】
投与の方法は、皮内、筋肉内、腹腔内、皮下、鼻腔内、硬膜外、経口、舌下、脳内、膣内、経皮、直腸内、及び局所投与が挙げられるが、これらに限定されない。投与の方法は医師の判断に委ねる。ほとんどの場合、投与によってアプタマーを血流中へ放出する結果となる。
【０４７０】
一つの態様では、動物の状態を治療又は予防する方法は、必要としている動物に、本発明の医薬組成物を非経口投与することによって効果量のアプタマーを投与することを含む。一つの態様では、医薬組成物は点滴注入又はボーラス注入によって投与される。一つの態様では、医薬組成物は皮下投与される。一つの態様では、医薬組成物は皮下投与され、アプタマーを徐々にゆっくり放出する薬物デポーを動物内に形成する。
【０４７１】
一つの態様では、動物の状態を治療又は予防する方法は、必要としている動物に、本発明の医薬組成物を経口投与することによって治療効果量の薬理活性剤を投与することを含む。医薬組成物を経口投与するために、医薬組成物を、例えば硬質ゼラチンカプセル又は軟質ゼラチンカプセルなどのカプセル内に封入して、そのカプセルを動物へ経口投与することができる。本発明に用いられる適切なカプセルは、Ｓｈｉｏｎｏｇｉ  Ｑｕａｌｉｃａｐｓ（塩野義製薬、日本、大阪、より市販）である。経口投与の剤形は、薬理活性化合物が胃の内部で直ちに若しくはほとんど直ちに放出されるように、又は薬理活性化合物が胃の内部で持続的に放出されるように設計することができる。経口投与の剤形は、薬理活性化合物が腸の内部で直ちに若しくはほとんど直ちに放出されるように、又は薬理活性化合物が腸の内部で持続的に放出されるように設計することもできる。剤形が腸に到達するまで薬理活性化合物の放出を遅らせるために、カプセルに腸溶コーティングが施される。通常、腸溶コーティングは、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）Ｌ−１００（ＤｅＧｕｓｓａ  ＡＧ社、ドイツ、フランクフルト、より市販）などのｐＨ応答性ポリマーである。薬理活性化合物の放出速度は、医薬組成物中のリン脂質又はスフィンゴミエリンの量を変えることや、医薬組成物中のポリマーの存在によって変化する。
【０４７２】
一つの態様では、動物の状態を治療又は予防する方法は、必要としている動物に、本発明の医薬組成物の耳への投与によって治療効果量の薬理活性剤を投与することを含む。
【０４７３】
一つの態様では、動物の状態を治療又は予防する方法は、必要としている動物に、本発明の医薬組成物の眼への投与によって治療効果量の薬理活性剤を投与することを含む。
【０４７４】
医薬組成物は、上皮内層又は皮膚粘膜内層（ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｏｒ  ｍｕｃｏｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｌｉｎｉｎｇ）（例えば、口内粘膜、直腸粘膜、及び腸粘膜など）を通しての吸収により、局所投与することもできる。一つの態様では、動物の状態を治療又は予防する方法は、必要としている動物に、本発明の医薬組成物の局所投与によって治療効果量の薬理活性剤を投与することを含む。本発明の医薬組成物は皮膚によく付着し、従って局所投与に有用である。
【０４７５】
本発明の医薬組成物は高粘性組成物である。高粘性組成物は、動物の状態の治療又は予防において、低粘性の（薄い）液状製剤に比べて利点を有する場合がある。例えば、局所投与、耳への投与、及び眼への投与の場合、特に獣医学的用途において、薄い液状製剤は、高粘性の（濃い）製剤に比べて容易に送達の標的領域から洗い流されたり取り払われたりする。状態を治療する場合、濃い医薬組成物の利点として、アプタマーを標的領域内に長時間保持するということが挙げられる。
【０４７６】
医薬組成物は、全身投与することも局所投与することもできる。
医薬組成物は、他の生物活性剤と共に投与することができる。
【０４７７】
動物に投与される効果量は、治療を受ける動物の種類、治療する状態、状態の重症度、及び投与される具体的なアプタマーなど様々な要因に依存するが、これらに限定されない。当業者であれば、動物の状態を治療するための医薬組成物の効果量がどの程度であるかは容易に認識するであろう。
【０４７８】
本発明の医薬組成物は、アプタマーに応答するいかなる状態の治療にも用いることができる。
【０４７９】
一つの態様では、アプタマーは抗血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）アプタマーである。一つの態様では、アプタマーは抗血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）アプタマーであり、疾患は眼疾患である。代表的な眼疾患としては、加齢黄斑変性症、視神経乳頭血管新生、虹彩血管新生、網膜血管新生、脈絡膜血管新生、角膜血管新生、硝子体血管新生、緑内障、パンヌス、翼状片、黄斑浮腫、血管性網膜症、網膜変性症、ブドウ膜炎、網膜の炎症性疾患、又は増殖性硝子体網膜症が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の医薬組成物の送達には、眼に薬剤を送達するほとんどいかなる方法も使用することができる。一つの態様では、医薬組成物は、例えば硝子体内注射などによって硝子体内投与される。一つの態様では、医薬組成物は経強膜投与される。
【０４８０】
一つの態様では、アプタマーは血管新生を阻害するアプタマーである。
一つの態様では、アプタマーは血管新生を阻害するアプタマーであり、治療される疾患はガンである。一つの態様では、アプタマーは血管新生を阻害するアプタマーであり、治療される疾患は固形腫瘍である。
【０４８１】
一つの態様では、本発明にかかる医薬組成物は、少なくとも約４〜約１５日間にわたって効果量のアプタマーを制御放出又は持続放出する。しかしながら、医薬組成物の中には、１５日を超える期間にわたって効果量のアプタマーを制御放出又は持続放出することができるものもある。
【０４８２】
別の態様では、本発明にかかる医薬組成物は、少なくとも約４〜約１０日間にわたって効果量のアプタマーを制御放出又は持続放出する。
【０４８３】
別の態様では、本発明にかかる医薬組成物は、少なくとも約１週間にわたって効果量のアプタマーを制御放出又は持続放出する。
【０４８４】
別の態様では、本発明にかかる医薬組成物は、少なくとも約１〜約４日間にわたって効果量のアプタマーを制御放出又は持続放出する。
【０４８５】
別の態様では、本発明にかかる医薬組成物は、少なくとも約１〜約２日間にわたって効果量のアプタマーを制御放出又は持続放出する。
【０４８６】
状態を治療又は予防するのに効果的なアプタマーの量は、標準的な臨床技術によって決定することができる。さらに、最適な投与量の範囲を見極める手助けとして、インビトロアッセイ又はインビボアッセイを任意に行ってもよい。使用する正確な投与量は、投与経路、状態の重症度、及び治療を受ける動物にも依存し、医師の判断及び／又はそれぞれの動物の状況に応じて決定することができる。本明細書で述べる効果投与量とは、投与されるすべてのアプタマーの合計量のことである；すなわち１種類を超すアプタマーを投与する場合、効果投与量は投与される合計量に相当する。
【０４８７】
通常、医薬組成物は毎日約１回〜毎週約１回の割合で、状態が改善するまで投与される。しかしながら、医薬組成物はこれより低い頻度又は高い頻度で投与してもよい。
【０４８８】
一つの態様では、医薬組成物は、状態が改善するまで毎日１回投与される。
一つの態様では、医薬組成物は、状態が改善するまで毎日２回投与される。
【０４８９】
一つの態様では、医薬組成物は、状態が改善するまで毎週１回投与される。
一つの態様では、医薬組成物は、状態が改善するまで毎週２回投与される。
【０４９０】
一つの態様では、医薬組成物は、状態が改善するまで約１２時間ごとに投与される。
一つの態様では、医薬組成物は、状態が改善するまで約２週間ごとに投与される。
【０４９１】
一つの態様では、医薬組成物は、１回投与される。
一つの態様では、医薬組成物は、１週間、毎日投与される。
【０４９２】
一つの態様では、医薬組成物は、４週間、約７日ごとに投与される。
一つの態様では、医薬組成物は、３週間、約７日ごとに投与される。
【０４９３】
一つの態様では、医薬組成物は、２週間、約７日ごとに投与される。
一つの態様では、医薬組成物は、約２４時間の間隔をあけて、２回投与される。
【０４９４】
一つの態様では、医薬組成物は、約４８時間の間隔をあけて、２回投与される。
一つの態様では、医薬組成物は、約４週間、約２４時間ごとに投与される。
【０４９５】
一つの態様では、医薬組成物は、約４週間、約１２時間ごとに投与される。
一つの態様では、医薬組成物は、約２週間、約２４時間ごとに投与される。
【０４９６】
一つの態様では、医薬組成物は、約２週間、約１２時間ごとに投与される。
一つの態様では、医薬組成物は、約１週間、約２４時間ごとに投与される。
【０４９７】
一つの態様では、医薬組成物は、約１週間、約１２時間ごとに投与される。
別の態様では、状態が改善するまで、効果投与量が毎日投与される。総投与量は、任意に毎日の投与量に分けてもよく、及び／又は、約２〜４回分の個別の投与量に分けてもよい。
【０４９８】
理論に束縛されるものではないが、本発明の医薬組成物は、アプタマーを含有するゲル状であり、リポソーム製剤で達成される充填量（最大充填量はリポソーム含有組成物に対してわずかに約１重量パーセントと考えられる）よりも高い充填量が可能であると考えられる。確かに、本発明の組成物を用いることにより、医薬組成物に対して約１２重量パーセント程度、及びさらにそれを超える量の均一に分散されたアプタマーを含む医薬組成物を、通常の方法で作製可能である。本発明の医薬組成物は、実質的にリポソームを含有しないことが望ましい。一つの態様では、本発明の医薬組成物はリポソームを含有しない。
【０４９９】
一つの態様では、動物はヒトではない動物である。
別の態様では、動物はヒトである。
【０５００】
一つの態様では、動物は哺乳類である。
一つの態様では、動物はイヌ類、ネコ類、ウマ類、ウシ類、ヒツジ類、ブタ類、又はトリ類である。
【０５０１】
一つの態様では、動物はネコである。
一つの態様では、動物はイヌである。
【０５０２】
一つの態様では、動物はウシである。
一つの態様では、動物はブタである。
【０５０３】
一つの態様では、動物はヒツジである。
一つの態様では、動物はウマである。
【０５０４】
５．６  医薬組成物の調製
（ｉ）リン脂質又はスフィンゴミエリン；（ｉｉ）第１有機溶媒；（ｉｉｉ）第二の有機溶媒；及び（ｉｖ）アプタマーを含む本発明の医薬組成物は、例えば、単にアプタマーを第１有機溶媒と第二の有機溶媒との混合物（「混合溶媒」）（通常、最終医薬組成物で所望される混合溶媒の量の約９０％）に添加し、アプタマーが溶解するまで得られた混合物を振動又は撹拌することによって調製することができる。１若しくは２種類以上の任意の添加剤を同時に、及び／又は順に添加することができ、任意の添加剤が溶解するまで混合物を振動又は撹拌する。次に、振動又は撹拌しながら、及び任意に加熱もしながら、リン脂質を混合物に添加してリン脂質混合物を得る。通常、混合物は、リン脂質の添加前に１００℃未満の温度、好ましくは７０℃未満、より好ましくは約５０℃未満、最も好ましくは約４０℃で加熱される。その後、追加の混合溶媒を添加して医薬組成物中のアプタマーを所望の濃度とし、リン脂質混合物を室温まで冷却して医薬組成物を得る。
【０５０５】
同様に、（ｉ）リン脂質又はスフィンゴミエリンと、実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール及び実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマールから成る群より選択される溶媒と、（ｉｉｉ）アプタマーと、を含む本発明の医薬組成物は、例えば、単にアプタマーをプロピレングリコール又はグリセロールホルマール（通常、最終医薬組成物で所望される溶媒の量の約９０％）に添加し、得られた混合物を、任意に加熱した状態で、アプタマーが溶解するまで振動又は撹拌することによって調製することができる。１若しくは２種類以上の任意の添加剤を同時に、及び／又は順に添加することができ、任意の添加剤が溶解するまで混合物を振動又は撹拌する。次に、振動又は撹拌しながら、及び任意に加熱もしながら、リン脂質を混合物に添加してリン脂質混合物を得る。通常、混合物は、リン脂質の添加前に１００℃未満の温度、好ましくは７０℃未満、より好ましくは約５０℃未満、最も好ましくは約４０℃で加熱される。その後、追加のプロピレングリコール又はグリセロールホルマールを添加して医薬組成物中のアプタマーを所望の濃度とし、リン脂質混合物を室温まで冷却して医薬組成物を得る。
【０５０６】
しかしながら、当業者であれば、例えば成分を溶媒へ添加する順番を変えることができるなど、本発明の医薬組成物を調製するための上述の方法の変形が可能であることは容易に認識するであろう。例えば、プロトン化アプタマー及びリジンのエステル又はアミドを含む医薬組成物は、単にプロトン化アプタマーを第１有機溶媒及び第二の有機溶媒（若しくは実質的に他の有機溶媒を含有しないプロピレングリコール及び実質的に他の有機溶媒を含有しないグリセロールホルマール）へ添加し、次に、単にリジンのエステル又はアミドを、好ましくは撹拌しながら添加することによって調製することができる。続いて、得られた溶液にリン脂質を、好ましくは撹拌及び加熱をしながら添加する。
【０５０７】
５．７  キット
本発明は、アプタマーの動物への投与を簡便にすることができるキットを包含する。本発明の典型的なキットには、本発明の医薬組成物の単位剤形が含まれる。一つの態様では、単位剤形は、有利に殺菌したものであってよい、本発明の医薬組成物を含む容器（小瓶、小袋、チューブ、シリンジなど）である。キットはさらに、状態の治療若しくは予防のためのアプタマーの服用について説明したラベル又は印刷した説明書を有していてよい。別の態様では、キットは本発明の医薬組成物の単位剤形、及び医薬組成物を投与するための点滴器、シリンジ、又はその他の投与器具を含む。通常、例えば単位剤形及び説明書などのキットの構成物は、適切な包装材料内に収容される。
【０５０８】
以下の例は、本発明の理解を促すために示すものであり、ここで説明し請求する本発明を、特に制限するものとして解釈されるべきではない。当業者の理解の範囲内であろう現在公知の、又は後に開発されるあらゆる同等物との置き換え、及び製剤の変更若しくは実験計画の小さな変更、などを含む本発明の変形は、本明細書に組み入れられる本発明の範囲内に含まれるものであるとみなされるべきである。
【実施例】
【０５０９】
実施例６．１  アミノ酸エステルの調製
トリプトファンブタノエート：１ｇのトリプトファンブタノエート塩酸塩（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、ミズーリ州、セントルイス、より市販）を２５ｍＬのジクロロメタンに懸濁させ、撹拌しながらこの懸濁液に６００μｌのトリエチルアミンを加えた。撹拌を１５分間続け、得られた溶液を分液ロートへ移した。この有機溶液を２５ｍＬの水で２回洗浄し、続いて２５ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。次に、有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧濃縮してトリプトファンブタノエートを得た。構造は質量分析によって確認した。
【０５１０】
トリプトファンオクタノエート：４ｇのトリプトファンブタノエート塩酸塩Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、ミズーリ州、セントルイス（ｗｗｗ．ｓｉｍａ−ａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍ）、より市販）を１００ｍＬのジクロロメタンに懸濁させ、撹拌しながらこの懸濁液に３ｍｌのトリエチルアミンを加えた。撹拌を１５分間続け、得られた溶液を分液ロートへ移した。この有機溶液を２５ｍＬの水で２回洗浄し、続いて２５ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。次に、有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧濃縮してトリプトファンオクタノエートを得た。構造は質量分析によって確認した。
【０５１１】
チロシンブタノエート：冷却管及びディーンスターク装置を取り付けた５００ｍＬの丸底フラスコ中、１８．１９ｇのチロシンを、９．８ｇの濃硫酸、４０ｍＬの水、４０ｍＬのブタノール、及び２００ｍＬのトルエンから成る溶液に懸濁させた。得られた溶液を水が留去されなくなるまで還流温度で加熱した。得られた溶液を氷浴中で冷却し、溶液を２相に分離した。上相を捨て、下相の油性シラップを残した。このシラップに、十分な量の５％炭酸水素ナトリウム水溶液を混合して酸性不純物を中和し、得られた固体をろ過によって回収し冷水で洗浄した。得られた固体を酢酸エチルで再結晶した。
【０５１２】
イソロイシンブチレート：冷却管及びディーンスターク装置を取り付けた５００ｍＬの丸底フラスコ中、２６．２３ｇのイソロイシンを、２０ｇの濃硫酸、２０ｍＬの水、４０ｍＬのブタノール、及び２００ｍＬのトルエンから成る溶液に溶解させた。得られた溶液を水が留去されなくなるまで還流温度で加熱した。次に、得られた溶液を室温まで冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して酸性不純物を中和し、飽和塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた液体を真空蒸留して無色液体のイソロイシンブチレートを得た。
【０５１３】
フェニルアラニンブチレート：冷却管及びディーンスターク装置を取り付けた５００ｍＬの丸底フラスコ中、１６．５２ｇのイソロイシンを、１０ｇの濃硫酸、２０ｍＬの水、２０ｍＬのブタノール、及び２００ｍＬのトルエンから成る溶液に溶解させた。得られた溶液を水が留去されなくなるまで還流温度で加熱した。次に、得られた溶液を室温まで冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して酸性不純物を中和し、飽和塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた液体を真空蒸留してフェニルアラニンブチレートを得た。
【０５１４】
フェニルアラニンオクタノエート：冷却管及びディーンスターク装置を取り付けた５００ｍＬの丸底フラスコ中、１６．５２ｇのフェニルアラニンを、１０ｇの濃硫酸、２０ｍＬの水、２０ｍＬのオクタノール、及び１２０ｍＬのトルエンから成る溶液に溶解させた。得られた溶液を水が留去されなくなるまで還流温度で加熱した。次に、得られた溶液を室温まで冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して酸性不純物を中和し、飽和塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。次に溶媒を減圧留去することで白色固体のフェニルアラニンオクタノエートが得られ、これをシリカゲルカラムを用い、１：９のメタノール：ジクロロメタン混合溶媒で溶出して精製した。
【０５１５】
フェニルアラニンドデカノエート：冷却管及びディーンスターク装置を取り付けた５００ｍＬの丸底フラスコ中、１６．５２ｇのフェニルアラニンを、１０ｇの濃硫酸、２０ｍＬの水、２０ｍＬのドデカノール、及び１２０ｍＬのトルエンから成る溶液に溶解させた。得られた溶液を水が留去されなくなるまで還流温度で加熱した。次に、得られた溶液を室温まで冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して酸性不純物を中和し、飽和塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。次に溶媒を減圧留去することで固体のフェニルアラニンドデカノエートが得られ、これをシリカゲルカラムを用い、１：９のメタノール：ジクロロメタン混合溶媒で溶出して精製した。
【０５１６】
チロシンオクタノエート：冷却管及びディーンスターク装置を取り付けた５００ｍＬの丸底フラスコ中、９．０６ｇのチロシンを、１０ｇの濃硫酸、２０ｍＬの水、１０ｍＬのオクタノール、及び２００ｍＬのトルエンから成る溶液に溶解させた。得られた溶液を水が留去されなくなるまで還流温度で加熱した。次に、得られた溶液を室温まで冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して酸性不純物を中和し、エマルジョンを得た。約１５０ｍＬの酢酸エチルをこのエマルジョンに加えて２相に分離させた。水相を捨て、有機相を飽和塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を減圧留去することで白色固体のチロシンオクタノエートが得られ、これをシリカゲルカラムを用い、１：９のメタノール：ジクロロメタン混合溶媒で溶出して精製した。
【０５１７】
イソロイシンオクタノエート：油浴中に設置した、冷却管及びディーンスターク装置を取り付けた５００ｍＬの丸底フラスコ中、１３．１ｇのイソロイシンを、１０ｇの濃硫酸、２０ｍＬの水、２０ｍＬのオクタノール、及び２００ｍＬのトルエンから成る溶液に溶解させた。得られた溶液を水が留去されなくなるまで還流温度で加熱した。次に、得られた溶液を室温まで冷却し、１２０ｍＬの酢酸エチルで希釈し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して酸性不純物を中和し、飽和塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた液体を蒸留して無色液体のイソロイシンオクタノエートを得た。
【０５１８】
プロリンブタノエート：冷却管及びディーンスターク装置を取り付けた５００ｍＬの丸底フラスコ中、３４．５ｇのプロリンを、３５ｇの濃硫酸、４０ｍＬの水、１２０ｍＬのブタノール、及び２００ｍＬのトルエンから成る溶液に懸濁させた。得られた溶液を水が留去されなくなるまで還流温度で加熱した。次に、得られた溶液を室温まで冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して酸性不純物を中和し、飽和塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた液体を蒸留して無色液体のプロリンブタノエートを得た。
【０５１９】
リジンヘキサデカノエート：ＢＯＣ保護リジン（６．２５ｇ、０．０１８モル）を、窒素雰囲気下、約４０ｍＬのテトラヒドロフラン中に溶解した。この溶液を氷水浴を用いて約０℃まで冷却し、この冷却した溶液中へカルボニルジイミダゾール（２．９３ｇ、０．０１８モル）を加えた。次に、この反応混合物を約５℃で約５分間、続いて室温で約３０分間撹拌した。次に、得られた溶液に、約１０ｍＬのテトラヒドロフラン中のヘキサデカノール（４．３８ｇ、０．０１８モル）溶液を滴下により添加した。次に、得られた溶液を約４５℃に加熱し、約１２時間撹拌した。撹拌後、溶媒を減圧留去し；得られた残渣を酢酸エチルへ溶解し、この酢酸エチル溶液を０．１Ｎの塩酸（３回）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３回）、及び塩水（３回）で洗浄し；有機相を乾燥させた（Ｎａ2ＳＯ4）。次に、酢酸エチルを減圧留去し、得られた粗ＢＯＣ保護リジンヘキサデカノエートを、シリカゲルカラムを用いたクロマトグラフィーによりヘキサン中０〜２０パーセントの酢酸エチルで溶出して精製した。次に、溶媒を減圧留去して精製ＢＯＣ保護リジンヘキサデカノエートを得た。トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ）を精製ＢＯＣ保護リジンヘキサデカノエートに加え、得られた反応混合物を約５時間撹拌した。過剰のトリフルオロ酢酸を減圧留去した。そして得られた残渣をメタノールに溶解し、Ｄｏｗｅｘ５５０Ａ（ＯＨ）樹脂（５０ｇ）（Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ社、ミシガン州、ミッドランド、より市販）に通液し、溶媒を減圧留去し、得られたリジンヘキサデカノエートを真空乾燥して、乾燥リジンヘキサデカノエートを得た（３．６ｇ）。
【０５２０】
実施例６．２：アプタマー及びアミノ酸エステルを含むリン脂質組成物
Ａ：  １００ｍｇのペグ化ＡＲＣ２５９を１．５ｍＬのグリセロールホルマールに溶解して医薬組成物を調製した。次に、得られた混合物に１０μＬのイソロイシンブチレートを加え、得られた溶液を、間欠的に超音波処理を施しながらボルテックスミキサーにより混合し、透明溶液を得た。得られた溶液に、４０ｍｇのＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈ（Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  ＧｍｂＨ社、ドイツ、ケルン、又はＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｌｅｃｉｔｈｉｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ社、コネチカット州、オックスフォード、より市販）を加え、得られた混合物を約４０℃で３時間加熱した。この溶液を室温まで冷却し、ゲルを得た。
【０５２１】
医薬組成物は、４０℃まで加熱されると、有利に、滅菌ろ過することができる自由流動液体（ｆｒｅｅ  ｆｌｏｗｉｎｇ  ｌｉｑｕｉｄ）となる。自由流動液体はシリンジにあらかじめ充填しておくことも可能で、医薬組成物は室温まで冷却されるとゲルを形成するが、このゲルを容易にシリンジから投与することができる。
【０５２２】
Ｂ：  １００ｍｇのペグ化ＡＲＣ２５９を１ｍＬのプロピレングリコールに溶解して医薬組成物を調製した。次に、得られた混合物に５００μＬのグリセロールホルマール及び１０μＬのイソロイシンブチレートを加え、得られた溶液を、間欠的に超音波処理を施しながらボルテックスミキサーにより混合し、透明溶液を得た。得られた溶液に、４０ｍｇのＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｈ（Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  ＧｍｂＨ社、ドイツ、ケルン、又はＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｌｅｃｉｔｈｉｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ社、コネチカット州、オックスフォード、より市販）を加え、得られた混合物を約４０℃で２時間加熱した。この溶液を室温まで冷却し、ゲルを得た。
【０５２３】
医薬組成物は、４０℃まで加熱されると、有利に、滅菌ろ過することができる自由流動液体となる。自由流動液体はシリンジにあらかじめ充填しておくことも可能で、医薬組成物は室温まで冷却されるとゲルを形成するが、このゲルを容易にシリンジから投与することができる。
【０５２４】
実施例６．３  本発明の医薬組成物のＨＰＬＣ分析、及び本発明の医薬組成物からのアプタマーの放出速度を測定する方法
時間の関数としての、実施例６．２のＡ又はＢのいずれかの医薬組成物から放出されるアプタマーの量の測定は、約５０μＬ（５０μｇ）の医薬組成物を遠心チューブ中の約４ｍＬの脱イオン水へ注入し、析出物を形成させることで行うことができる。医薬組成物を水へ注入した時間をＴ＝０として記録する。定められた時間Ｔの後、任意にサンプルを約−９℃まで冷却し、遠心分離機により１３０００ｒｍｐで約２０分間回転させることで沈殿物と上清が得られ、これらは上清をデカントすることによって容易に分離することができる。次に、得られた上清を適切なＨＰＬＣ法で分析し、水溶液中に存在するアプタマーを定量する。沈殿物中のアプタマーの量も定量することができ、沈殿物を約３ｍＬのメタノールに溶解し、そのメタノール溶液を適切なＨＰＬＣ法で分析して沈殿中のアプタマーの量を定量する。水溶液中のアプタマーの量及び沈殿中のアプタマーの量は、アプタマーに対応するＨＰＬＣピークのピーク面積を、アプタマー濃度に対するアプタマーピーク面積の検量線と比較することによって定量することができる。適切なＨＰＬＣ法は、当業者であれば容易に決定することができる。例えば、上述の実験で用いたアプタマー（すなわち、ペグ化ＡＲＣ２５９）に対しては、以下のＨＰＬＣ法を使用することができる：
【０５２５】
カラム：Ｊｕｐｉｔｅｒ  ５μ  Ｃ４  ３００Ａ、３０×４．６ｍｍ（品番：００Ａ−４１６７−ＥＯ）
流速：２．０ｍＬ／分
注入量：２０μＬ
検出器設定：２５８ｎｍ
分析時間：１０分
ポンプＡ：オプション１（酸性移動相）：２５ｍＭ  酢酸アンモニア−トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、ｐＨ４．７６、又は
ポンプＡ：オプション２（塩基性移動相）：５０ｍＭ  トリエタノールアミン−ＨＣｌ、ｐＨ７．８
ポンプＢ：メタノール
初期条件：０％ポンプＢ  １００％ポンプＡ
【０５２６】
ＨＰＬＣカラムの溶出は以下の濃度勾配溶出条件を用いて行う。
【０５２７】
【表１】
2009515961.tif 000031
【０５２８】
これらの条件下におけるアプタマーの保持時間は約３分である。
本発明は、本発明の数種類の局面を示すことを意図したこれらの例によって開示された具体的態様の範囲に限定されるものではなく、機能的に同等であるいかなる態様も本発明の範囲内である。確かに、当業者にとっては、本明細書で示し、説明した変形に加えて、様々な変形が明らかとなるであろうし、それらの変形は添付の請求項の範囲内に入ることを意図している。
【０５２９】
多くの文献が引用されており、これらの開示内容のすべてが参照により本明細書中に援用される。
【国際調査報告】
2009515961.tif 000042