(57)【要約】  α−Ｃ−フェニル−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルニトロンに由来する化合物、それらの調製プロセス及び酸化ストレス関連疾患を予防又は処置することにおいて使用するための薬剤の調製のためのそれらの使用。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2009530252.tif 000029
（式中、
Ｘは、単糖又は多糖、並びに単糖及び多糖のアミノ化誘導体、ポリエチレンオキシド鎖、ペプチド鎖、並びに第四級アンモニウム、アミンオキシド、カルニチン基、ホスフェート基、コリン基、下記の基
【化２】
2009530252.tif 000030
及び下記の基
【化３】
2009530252.tif 000031
から選択されるイオン性極性基から選択される親水性基を表し、
ｍは、１、２又は３に等しい整数を表し、
Ｙは、芳香環と親水性置換基Ｘを連結することを意図されるスペーサーアーム又は結合を表し、
Ｙは、エステル、アミド、ウレア、ウレタン、エーテル、チオエーテル及びアミン官能基並びに１つ又は複数のエステル、アミド、ウレア又はウレタン官能基によって及び１つ又は複数のエーテル、アミン又はチオエーテル架橋によって必要に応じて割り込まれるＣ１〜Ｃ６炭化水素ベース鎖から選択され、
Ｙ’は、エステル官能基、アミド官能基、ウレア官能基、ウレタン官能基、エーテル架橋、チオエーテル架橋、１つ又は複数のアミノ酸及びセリノールから選択される基を表し、
ｍ’は、１又は２に等しい整数を表し、
ｎは、０、１又は２に等しく、
Ｘ’は、水素原子、或いは１つ又は複数のフッ素原子で必要に応じて置換されるＣ４〜Ｃ１４アルキル鎖を表す）
に対応することを特徴とする化合物。
【請求項２】
Ｘは、グルコース、ラクトース、フルクトース、マンノース、ガラクトース、リボース、マルトース、グルコサミン、スクロース及びラクトビオナミドから選択される基を表すことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘは、３０〜１００のエチレンオキシド単位、好ましくは５０〜６０単位を含むポリエチレンオキシド鎖から選択される基を表すことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘは、
【化４】
2009530252.tif 000032
から選択される基を表すことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
以下の要件：
Ｘは、ラクトビオナミド、カルニチン又はポリオキシエチレン鎖から選択される基を表すこと、
ｍは１を表すこと、
ｍ’は１又は２を表すこと、
ｎは１に等しいこと、
Ｘ’は、オクチル、デシル、ドデシル及びＣＦ３（ＣＦ２）ｒＣＨ２ＣＨ２−（８≧ｒ≧６）であること
の少なくとも１つが満たされることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
請求項１ないし５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）に対応する化合物を調製するプロセスであって、このプロセスは、以下のスキーム２：
【化５】
2009530252.tif 000033
に従って、式（ＩＩ）に対応するアルデヒドが式（ＩＩＩ）に対応するヒドロキシルアミンと反応されることを特徴とするプロセス。
【請求項７】
前記式（ＩＩＩ）の化合物は、スキーム３：
【化６】
2009530252.tif 000034
に記載されるプロセスに従って調製されることを特徴とする、請求項６に記載のプロセス。
【請求項８】
薬学的に許容される担体中に請求項１ないし５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）に対応する少なくとも１つの化合物を含む薬学的組成物。
【請求項９】
フリーラジカルの影響を予防及び／又は処置することにおいて使用するための薬剤の調製のための請求項１ないし５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）に対応する化合物の使用。
【請求項１０】
酸化ストレス及びフリーラジカル酸素種の形成に関連する病状の予防又は処置において使用するための薬剤の調製のための請求項１ないし５のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１１】
免疫性疾患及び炎症性疾患、虚血再灌流症候群、アテローム性動脈硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、紫外線及び電離放射線に起因する障害、ハンチントン病、癌並びに細胞老化から選択される病状の予防又は処置のための請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
美容的に許容される担体中に請求項１ないし５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）に対応する少なくとも１つの化合物を含むことを特徴とする化粧品組成物。
【請求項１３】
請求項１２に記載の組成物が、皮膚又は付属物に塗布されることを特徴とする、加齢の影響を予防及び／又は処置する美容処理プロセス。
【請求項１４】
フリーラジカル反応におけるフリーラジカルを吸収するための作用物質としての有機合成における請求項１ないし５のいずれか１項に記載の式（Ｉ）に対応する化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、α−Ｃ−フェニル−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルニトロンに由来する新規化合物、それらの調製プロセス及び酸化ストレス関連疾患の予防又は処置に使用するための薬剤の調製のためのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
酸化ストレス及び酸素フリーラジカル種の形成に関連する病状は、Croos C.E., Arch. Intern. Med. (1987) 107, 526-545により、及びAnderson K.M., Ellis G., Bonomi P., Harris J.E., Medical Hypotheses (1999) 52, 53-57により列挙されている。
【０００３】
病状は多数ある：このタイプの７０を超える病状がこのリストで言及されており、特に、免疫性疾患及び炎症性疾患、虚血再灌流症候群、アテローム性動脈硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、紫外線及び電離放射線に起因する障害、化学発癌及び細胞老化の或る特定の形態を含む。
【０００４】
酸素フリーラジカル種及び窒素フリーラジカル種（ＲＯＳ及びＲＮＳ）は、生物体で自然に産生され、それらの調節は、可溶性スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）のような或る特定の特殊酵素により保証されている。これらの極めて反応性のフリーラジカル種の捕捉は、それらが細胞において不可逆的な損傷をもたらすため必須である。これらのフリーラジカル種の正常な産生は細胞により容易に調節される一方で、外部酸化ストレス（炎症性ショック、虚血再灌流症候群等）又は遺伝的欠陥（特にミトコンドリア異常）に関連するフリーラジカルの過剰産生は迅速な細胞分解を招く。そこで、ヒト又は動物生物体が、この大流量のラジカルに対処することが不可能となる。
【０００５】
細胞の酸化ストレスに対して幾つかの防御メカニズムが存在し、これらは様々なレベルの酸化的カスケードで作動することが可能である。このカスケードは概して、ミトコンドリアにおける分子状酸素の部分的還元に関連するスーパーオキシドラジカルの過剰生産（典型的な虚血再灌流症候群）により開始される。このスーパーオキシドラジカルは、過酸化水素への不均化を受け得る。これらの２つの種は、第一鉄の存在下でフェントン反応によってヒドロキシルラジカルを与えることができ、これらは、Stadtman H.R., Berlett B.S. J. Biol. Chem. (1991) 266, 17201-17211、Floyd R.A. Carcinogenesis (1990) 11, 1447-1450、Gille J.J., Van Berkel C.G., Joenge H. Carcinogenesis (1994) 15, 2695-2699、Halliwell B. Mutat. Res. (1999) 443, 37-52に記載されているように、脂質、ＤＮＡ又はタンパク質のような細胞構成要素のいずれかと非常に迅速に且つ非特異的に反応するという特殊性を有し、その中で不可逆的損傷を引き起こす。これらのフリーラジカル種はまた、ＮＦ−κＢ因子を介して或る特定の自殺遺伝子（Ｂｅｌ遺伝子又はｐ５３遺伝子）を活性化することにより、Siebenlist U., Franzoso G., Brown K., Annu. Rev. Cell. Biol. (1994) 10, 405-455により記載されている細胞アポトーシスの現象に関与する。
【０００６】
可溶性ＳＯＤは、スーパーオキシドラジカルを過酸化水素に変換することに関与し、続いて後者は、グルタチオン依存ペルオキシダーゼ又はカタラーゼにより処理される。
【０００７】
酸化剤に対する他の細胞レベルの保護は、特に膜レベルで存在し、これにより、不飽和膜リン脂質の酸化を制限することが可能となる。α−トコフェロール及びβ−カロテンは、脂質抗酸化防止剤の主要な例である。
【０００８】
酸化ストレス関連疾患を予防又は処置することにおいて使用するための療法に関する研究において最も見込みのある戦略は、フリーラジカル種の非常に高い反応性に関連する損傷を非常に初期の段階で予防するために、できるだけ上流でこの酸化的カスケードに介入することにある。
【０００９】
このため、「スピントラップ」分子を用いてこれらの非常に反応性のフリーラジカルを捕捉することが求められており、その中でもニトロンが最も有効的であるようである。
【００１０】
生物系におけるフリーラジカルにより引き起こされる損傷の低減及び予防におけるニトロンの治療効果は、Oliver C., Starke-Read P., Stadman E., Liu G., Carney J., Floyd R. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1990) 87, 5144-5147により１９９０年に実証された。
【００１１】
これらの著者らは、アレチネズミにおいてα−Ｃ−フェニル−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルニトロン（ＰＢＮ）の注入後に、脳虚血により引き起こされる損傷が減少することについて実証することが可能であった。脳虚血はフリーラジカルの産生の大いなる増加を伴い、これらはＰＢＮにより捕捉され、その結果遥かに安定であり、したがって遥かに反応性が低く且つ遥かに毒性が低いスピン付加物を形成した。ＰＢＮは、ほとんどの生物学的研究の対象となっているスピントラップである。
【００１２】
例えば、Hensley K., Carney J.M., Stewart C.A., Tabatabaie T., Pye Q.N., Floyd R.A. Int. Rev. Neurobiol.（1997） 40, 229−317が参照され得る。
【００１３】
ＰＢＮは、おそらくその高い疎水性に起因して脳における作用の非常な特異性を有し、Cheng H.Y,, Liu T., Feuerstein G., Barone F.C. Free Radic. Biol. Med. (1993) 14, 243-250により示されるように、ＰＢＮが血液−脳関門を横切ることを可能にする。
【００１４】
ニトロンの中で最もよく知られ、且つ最も効果的なものは、α−Ｃ−フェニル−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルニトロン（ＰＢＮ）、５，５−ジメチルピロリジン−Ｎ−オキシド（ＤＭＰＯ）及びより最近になって発見された分子：Ｎ−ベンジリデン−１−ジエトキシホスホリル−１−メチルエチルアミンＮ−オキシド（ＰＢＮＰ）及び５−ジエチルホスホノ−５−メチルピロリン−Ｎ−オキシド（ＤＥＰＭＰＯ）である。
【００１５】
ＰＢＮよりも神経保護活性が高く、且つ薬理学的研究及び臨床開発が為されているＰＢＮのジスルホネート誘導体、ＮＸＹ−０５９（ジソジウム４−［（ｔｅｒｔ−ブチルイミノ］メチル−ベンゼン−１，３−ジスルホネートＮ−オキシド）の言及も為され得る：Kuroda S., Tsuchidate R., Smith M.L., Maples K.R., Siesjo B.K. J. Cereb. Blood Flow Metab.（1999） 19, 778−787；Lees K.R., Sharma A.K., Barer D., Ford G.A., Kostulas V., Cheng Y.F., Odegren T. Stroke（2001） 32, 675−680。
【００１６】
しかしながら、上述する分子はいずれも、それらの細胞毒性濃度が非常に高くても、低用量ではｉｎ  ｖｉｖｏ又はｅｘ  ｖｉｖｏで満足な有効性を有さない：Almli L.M., Hamrick S.E.G., Koshy A.A., Taeuber M.G., Ferriero D.M. Dev. Brain Res. (2001) 132, 121-129、Nakano N., Grasbon-Frodl E.M., Widner H., Brundin P. Neuroscience (1996) 73, 185-200。有効性のこの欠如は、おそらく薬物の乏しい生物学的利用能及び細胞透過の問題に関連している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
したがって、フリーラジカルを捕捉することが可能であり、また細胞内レベルでヒト又は動物生物体によりその標的へ運搬されることが可能であるスピントラップ型の分子が依然として必要とされる。
【００１８】
特に、細胞膜、及びより一層重要で且つより困難な挑戦であるスーパーオキシドラジカルが産生される区画へ進入するためのミトコンドリア膜を横切ることができる分子である。
【００１９】
この目的で、Ouari O., Polidori A., Pucci B., Tordo P., Chalier F. J. Org. Chem. (1999) 64, 3554-3556及びGeromel V., Kadhom N., Cebalos-Picot I., Ouari O., Polidori A., Munnich A., Rotig A., Rustin P. Hum. Mol. Genet. (2001) 10, 1221-1228は、ＰＢＮのペルフルオロカーボンベースの両親媒性誘導体：ＴＡ１ＰＢＮを提唱している。
【００２０】
【化１】
2009530252.tif 000002
【００２１】
この分子は、重篤な呼吸鎖複合体Ｖ（ＡＴＰａｓｅ）欠乏症を患う線維芽細胞の細胞系に関して試験されており、有望な結果をもたらしている。
【００２２】
しかしながら、ＴＡ１ＰＢＮの合成は、工業的規模でのその生産を想定困難なものにさせる困難性を呈する。
【００２３】
国際出願ＷＯ  ２００４／０４９８２号は、α−Ｃ−フェニル−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルニトロン誘導体について記載している。これらのスピントラップ型分子は、合成しやすく、フリーラジカルを捕捉することが可能であり、それらは良好な生物学的利用能を有する。これらの化合物の１つであるＮ−［４−（オクタ−Ｏ−アセチルラクトビオナミドメチレン）ベンジリデン］−Ｎ−［１，１−ジメチル−２−（Ｎ−オクタノイル）アミド］エチルアミン  Ｎ−オキシド、即ちＬＰＢＮＡＨは、酸化老化試験においてＰＢＮの生物活性よりも優れた生物活性を示している(B. Poeggeler et al., Journal of Neurochemistry, 2005, 95, 962-973)。しかしながら、より一層高い活性を有し、且つさらに高められた生物学的利用能を伴う化合物が依然として必要とされている。
【００２４】
本出願人は、スピントラップ活性を有し、従来技術の分子と比較して高められた生物学的利用能を示し、またその調製が簡素であり且つ工業的規模での生産を想定することを可能にする新規分子を設計及び生産するという目的を設定した。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
本発明の主題は、以下の式（Ｉ）：
【００２６】
【化２】
2009530252.tif 000003
【００２７】
（式中、
Ｘは、単糖又は多糖、並びに単糖及び多糖のアミノ化誘導体、ポリエチレンオキシド鎖、ペプチド鎖、並びに第四級アンモニウム、アミンオキシド、カルニチン基、ホスフェート基、コリン基、下記の基
【００２８】
【化３】
2009530252.tif 000004
【００２９】
及び下記の基
【００３０】
【化４】
2009530252.tif 000005
【００３１】
から選択されるイオン性極性基から選択される親水性基を表し、
ｍは、１、２又は３に等しい整数を表し、
Ｙは、親水性置換基Ｘを分子の残りに連結することを意図されるスペーサーアーム又は結合を表し、
Ｙは、エステル、アミド、ウレア、ウレタン、エーテル、チオエーテル及びアミン官能基並びに１つ又は複数のエステル、アミド、ウレア又はウレタン官能基によって及び１つ又は複数のエーテル、アミン又はチオエーテル架橋によって必要に応じて割り込まれるＣ１〜Ｃ６炭化水素ベース鎖から選択され、
Ｙ’は、エステル官能基
【００３２】
【化５】
2009530252.tif 000006
【００３３】
、アミド官能基
【００３４】
【化６】
2009530252.tif 000007
【００３５】
、ウレア官能基
【００３６】
【化７】
2009530252.tif 000008
【００３７】
、ウレタン官能基
【００３８】
【化８】
2009530252.tif 000009
【００３９】
、エーテル架橋−Ｏ−、チオエーテル架橋−Ｓ−、１つ又は複数のアミノ酸及びセリノールから選択される基を表し、
ｎは、０、１又は２に等しい整数であり、
ｍ’は、１又は２に等しい整数を表し、
Ｘ’は、水素原子、或いは１つ又は複数のフッ素原子で必要に応じて置換されるＣ４〜Ｃ１４アルキル鎖を表す）
に対応することを特徴とする新規な化合物である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４０】
芳香環上に配置される置換基（Ｘ’）ｍ’−Ｙ−（ＣＨ２）ｎ−は、オルト位、メタ位又はパラ位に存在してもよい。
【００４１】
本発明で使用することができる単糖については、グルコース、ラクトース、フルクトース、マンノース、ガラクトース、リボース、マルトース及びスクロースが言及され得る。また、開鎖(open-chain)単糖も言及され得る。アミノ糖誘導体については、特にグルコサミン及びガラクトサミンが言及され得る。本発明で使用することができる多糖については、幾つかの単糖単位、例えばスクロース、マルトース及びラクトビオン酸からなる鎖が言及され得る。
【００４２】
式（Ｉ）の分子の親水性部分Ｘがポリエチレンオキシド鎖である場合、後者は有利には、３０〜１００のエチレンオキシド単位、好ましくは５０〜６０単位を含む。
【００４３】
好ましくは、ペプチド鎖は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン又はバリンのような天然アミノ酸からなる。
【００４４】
本発明で使用することができるイオン性親水性基又は非イオン性親水性基の例は以下のスキーム１に示される。
【００４５】
【化９】
2009530252.tif 000010
【００４６】
【化１０】
2009530252.tif 000011
【００４７】
スペーサーアームＹが単官能性であるか、或いは多官能性であるかどうかに依存して、スペーサーアームＹは、Ｘ基で一度又は二度置換される。
【００４８】
Ｘ’基は、例えば以下の基から選択され得る：
−オクチル基、
−炭化水素ベース基：ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル、ｎ−ウンデシル、ｎ−ドデシル、ｎ−トリデシル、ｎ−テトラデシル等、
−フッ素化炭化水素ベースの基：式−（ＣＨ２）ｔ−（ＣＦ２）ｒＦ（式中、ｒ及びｔは、１４≧ｒ＋ｔ≧４の場合の２つの整数を表す）に対応する基、例えば、次に記載するようなもの：
−（ＣＦ２）４Ｆ；−（ＣＦ２）５Ｆ；−（ＣＦ２）６Ｆ；−（ＣＦ２）７Ｆ；−（ＣＦ２）８Ｆ；−（ＣＦ２）９Ｆ；−（ＣＦ２）１０Ｆ；−（ＣＦ２）１１Ｆ；−（ＣＦ２）１２Ｆ；−（ＣＦ２）１３Ｆ；−（ＣＦ２）１４Ｆ；−ＣＨ２−（ＣＦ２）３Ｆ；−ＣＨ２−（ＣＦ２）４Ｆ；−ＣＨ２−（ＣＦ２）５Ｆ；−ＣＨ２−（ＣＦ２）６Ｆ；−ＣＨ２−（ＣＦ２）７Ｆ；−ＣＨ２−（ＣＦ２）８Ｆ；−ＣＨ２−（ＣＦ２）９Ｆ；−ＣＨ２−（ＣＦ２）１０Ｆ；−ＣＨ２−（ＣＦ２）１１Ｆ；−ＣＨ２−（ＣＦ２）１２Ｆ；−ＣＨ２−（ＣＦ２）１３Ｆ；−（ＣＨ２）２−（ＣＦ２）２Ｆ；−（ＣＨ２）２−（ＣＦ２）３Ｆ；−（ＣＨ２）２−（ＣＦ２）４Ｆ；−（ＣＨ２）２−（ＣＦ２）５Ｆ；−（ＣＨ２）２−（ＣＦ２）６Ｆ；−（ＣＨ２）２−（ＣＦ２）７Ｆ；−（ＣＨ２）２−（ＣＦ２）８Ｆ；−（ＣＨ２）２−（ＣＦ２）９Ｆ；−（ＣＨ２）２−（ＣＦ２）１０Ｆ；−（ＣＨ２）２−（ＣＦ２）１１Ｆ；−（ＣＨ２）２−（ＣＦ２）１２Ｆ；−（ＣＨ２）３−（ＣＦ２）１Ｆ；・・・−（ＣＨ２）１３−（ＣＦ２）Ｆ。
が言及され得る。
【００４９】
好ましくは、以下の要件：
Ｘは、ラクトビオナミド若しくはカルニチン基又はポリオキシエチレン鎖を表すこと、
ｍは１を表すこと、
ｍ’は１又は２を表すこと、
ｎは１を表すこと、
Ｘ’は、オクチル、ヘプチル、オクチル、デシル、ドデシル及びＣＦ３（ＣＦ２）ｒＣＨ２ＣＨ２−（８≧ｒ≧６）の基から選択されること
の少なくとも１つが満たされる。
【００５０】
本発明の主題は、式（Ｉ）に対応する化合物を調製するプロセスであって、このプロセスは、以下のスキーム２：
【００５１】
【化１１】
2009530252.tif 000012
【００５２】
（式中、Ｘ、ｍ、Ｙ、Ｘ’、ｍ’、ｎ及びＹ’は上記と同じ定義を有する）に従って、式（ＩＩ）に対応するアルデヒドが式（ＩＩＩ）に対応するヒドロキシルアミンと反応されることを特徴とする。
【００５３】
式（ＩＩＩ）の化合物は、スキーム３：
【００５４】
【化１２】
2009530252.tif 000013
【００５５】
に記載されるプロセスに従って調製される。
【００５６】
親油性基のモノカテナリー(monocatenary)性又はビカテナリー(bicatenary)性に応じて、スキーム２は、以下で開示される条件下で実施される。一例として、一般的なラクトビオナミド極性頭部が選択された。
ａ−ラクトビオナミド親水性部分の合成
図１は、
ｍ＝１、
Ｘ＝ラクトビオナミド、
Ｙ＝
【００５７】
【化１３】
2009530252.tif 000014
【００５８】
である式（ＩＩＩ）の化合物の調製を示す。
【００５９】
親水性部分は、２−メチル−２−ニトロプロパノールから合成される。
【００６０】
アルコール官能基は、トシル化、続くアジ化ナトリウムによる置換によりアミンに変換される。アルキルアジドは、トリフェニルホスフィン及び水酸化ナトリウムの存在下でシュタウディンガー反応によりアミンへ変換される。
【００６１】
このアミンはラクトビオノラクトンと反応することができ、この反応により、アミド結合を介して極性頭部をグラフトすることが可能となる。
【００６２】
次に、ニトロ官能基は、塩化アンモニウムの存在下でＴＨＦ−水混合物中で４当量の亜鉛を用いてヒドロキシルアミンへ還元される。
【００６３】
還元反応により、収率８０％で化合物１を得ることが可能となる。
ｂ−炭化水素ベース又はペルフルオロカーボンベースのモノカテナリー疎水性部分の合成（図２）：
図２は、
ｎ＝０、１又は２、
Ｘ’＝（ＣＨ２）２−Ｒ（Ｒ＝Ｃ６Ｆ１３、Ｃ８Ｆ１７又はＣＨ３（ＣＨ２）ｎ（４＜ｎ＜１４）である）、
Ｙ’＝−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−（化合物２）、
【００６４】
【化１４】
2009530252.tif 000015
【００６５】
（化合物３）、
【００６６】
【化１５】
2009530252.tif 000016
【００６７】
（化合物４）、
【００６８】
【化１６】
2009530252.tif 000017
【００６９】
（化合物５）、
【００７０】
【化１７】
2009530252.tif 000018
【００７１】
（化合物６）、
【００７２】
【化１８】
2009530252.tif 000019
【００７３】
（化合物７）
である脂肪族鎖を含む式（ＩＩ）の化合物の調製を示す。
【００７４】
誘導体２は、塩基性媒体中での脂肪族チオールの直接縮合により３−ビニルベンズアルデヒドから得られる。化合物３は、４−シアノベンズアルデヒドから合成される。アルデヒド官能基は、アセタール化により保護され、ニトリル官能基はアミン官能基へ還元される。脂肪族鎖の酸官能基はその上で縮合される。生成物４は、トルエン中でのこのアミン上での脂肪族鎖のイソシアネートの縮合により得られる。これら２つの化合物のアルデヒド官能基は、アセトアルデヒド中でのトランスアセタール化により脱保護される。誘導体５、誘導体６及び誘導体７は、４−カルボキシベンズアルデヒドから合成され、そのアルデヒド官能基は、アセタール化により予め保護される。化合物５は、ジフェニルホスホリルアジドによる処理によりアジ化アシルを得た後に得られる。アジドは、トルエン中で加熱することによりイソシアネートに転位される。脂肪族アルコールは、ＤＡＢＣＯの存在下で縮合されて、その結果トランスアセタール化後に化合物５を得る。化合物６は、ペプチドカップリング剤であるジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下での脂肪族アミンのカップリング、及びアセトアルデヒド中での酸性媒体における加熱によるアルデヒドの脱保護により酸から得られる。
ｃ−炭化水素ベース又はペルフルオロカーボンベースのビカテナリー疎水性部分の合成（図３）：
図３は、セリノールからのビカテナリー疎水性部分の合成を示す。
【００７５】
化合物７は、４−カルボキシベンズアルデヒドから得られる。アルデヒド官能基は、アセタール化により保護される。セリノールは、ジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下でのＮ−ヒドロキシスクシンイミドのカップリングにより酸官能基が活性化された後に酸官能基上で縮合される。脂肪族鎖は、トルエン中のアルキルイソシアネートの縮合によりアルコール官能基上で縮合される。化合物８は、アセトアルデヒド中でのトランスアセタール化後に得られる。
ｄ−ラクトビオノラクトン由来のモノカテナリー及びビカテナリー両親媒性ニトロンの生産（図４）：
各種両親媒性ニトロンは、ラクトビオナミド親水性部分のヒドロキシルアミン基上での各種疎水性シントンのアルデヒド官能基のカップリングにより生産される。カップリング反応は、ＴＨＦ／酢酸混合物中でアルゴン下にて２４時間実施される。
【００７６】
ニトロンは全て、逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム／メタノール−水溶離液）により精製された。
【００７７】
本発明の主題はまた、フリーラジカルスカベンジャーとしての上記で規定されるような式（Ｉ）に対応する化合物の使用である。
【００７８】
実際に、本発明による化合物は、従来技術の化合物と等しいフリーラジカル捕捉能を有することが実証されている。
【００７９】
この特性により、様々な分野において本発明の分子の使用を想定することが可能となる：
−治療分野では、本発明の生成物は、酸化ストレス及びフリーラジカル酸素種の形成に関連する病状の予防及び／又は処置に使用され得る。
【００８０】
したがって、本発明の主題は、薬学的に許容される担体中に本発明による化合物を含む薬学的組成物である。本発明の主題は、フリーラジカルの影響を予防及び／又は処置することにおいて使用するための薬剤の調製のための本発明による化合物の使用である。
【００８１】
本発明の主題はまた、酸化ストレス及びフリーラジカル酸素種の形成に関連する病状、特に免疫性疾患及び炎症性疾患、虚血再灌流症候群、アテローム性動脈硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、紫外線及び電離放射線に起因する病変、癌並びに細胞老化を予防及び／又は処置することにおいて使用するための薬学的組成物の調製のための本発明の化合物の使用である。
【００８２】
本発明の生成物は、当業者に既知の任意の経路により、特に静脈内注射又は筋内注射により或いは経口投与又は経皮投与により投与され得る。本発明の組成物は、単独で、或いは他の活性剤と組み合わせて使用され得る。それらの投与量及び日用量は、問題となっている分子に関して測定した活性に従って、及び患者の体重に従って調節される：
−化粧品分野では、本発明の化合物は、加齢の影響、及びまた日射の影響を予防及び／又は処置するのに使用され得る。
【００８３】
したがって、本発明の主題はまた、美容的に許容される担体中に本発明の化合物を含む化粧品組成物である。
【００８４】
上記組成物は、皮膚又は付属物（爪、毛）への塗布用であり得る。
【００８５】
上記組成物は、水溶液又は油性溶液、油中水型エマルジョン又は水中油型エマルジョン、トリプルエマルジョン又は軟膏の形態で存在し得る。
【００８６】
本発明の化合物は、フリーラジカルスカベンジャー活性が望ましい任意の化粧品組成物：スキンケアククリーム、日焼け止め製品、メークアップ落とし用製品、皮膚又は毛髪用のマスク、シャンプー、メークアップ製品（例えば、口紅、おしろい、ファンデーション、マニキュア等）へ導入され得る：
−有機合成分野では、本発明の化合物は、フリーラジカル反応においてフリーラジカルを吸収するための作用物質として使用され得る。
【００８７】
多様な媒体中でのそれらの溶解性に起因して、本発明の化合物は、使用しやすく、非常に多岐にわたる条件下で用いることができる。
【実施例】
【００８８】
実験項
Ｉ−生物学的評価：
生物学的試験は、Journal of Neurochemistry, 2005, 95, 962-973に記載される手順に従って実施した。これらの新規誘導体の潜在力を評価するために、本発明者らは、化合物１０の、アポトーシス細胞死現象を低減及び防止するための能力を測定した。過酸化水素は、多くの細胞モデルにおいてアポトーシス誘導物質として非常に広く使用されている。したがって、ＳＤラットの胚皮層細胞培養物の生存度は、５０μＭ〜２００μＭの濃度での過酸化水素の処理後に大いに減じられる。ＰＢＮ（１０μＭ）の添加により、これらの培養物の生存度を非常に不完全に回復させることが可能となる。他方で、同濃度（１０μＭ）での化合物１０の添加により、かかる培養物の生存度を完全に回復させることが可能となり、したがってオキシド誘導性アポトーシス現象を低減させる際にＰＢＮの有効性よりも５倍〜１０倍高い有効性を実証している。これらの同じ培養物をまた、ミトコンドリア選択的酸化ストレス誘導物質であるドキソルビシンに供した(Kotamraju S.; Konorev E.A.; Joseph J.; Kalyanaraman B. J. Biol. Chem. 2000, 275, 33585-33592)。観察結果は、過酸化水素による誘導に関するのと同じである。ＰＢＮは細胞死に対する部分的保護のみをもたらすのに対して、化合物１０は、細胞生存度を完全に維持させること可能である。これらの予備結果は、化合物１０の、様々な細胞レベルで誘導されるアポトーシス現象を防止する高い能力を強調している。化合物１０は、過酸化水素による処理により引き起こされる細胞内損傷を低減することができるが、ドキソルビシンに関するその有効性はまた、ミトコンドリア区画へのこの誘導体の高められた取り込みを示唆する。アポトーシスの制御において中心的な細胞小器官であるミトコンドリアの機能障害は、非常に多種多様な病的状態に関与する。ミトコンドリアへのその取り込みと組み合わせられた誘導体１０の抗アポトーシス特性は、上述の分野におけるその使用を想定することを可能にする。
ＩＩ−実施例：ラクトビオナミドモノカテナリーニトロン１０（Ｒ＝Ｃ５Ｈ１１）の合成
１−化合物１の合成
【００８９】
【化１９】
2009530252.tif 000020
【００９０】
極性頭部の化合物１前駆体は、国際公開第ＷＯ２００４／０４３９８２号で既述されている方法に従って２−メチル−２−ニトロプロパノールから容易に調製することができる：１−アルコール官能基を活性化して、塩化トシルのスルホン酸エステルを形成すること、２−このスルホニルエステルをアジド基で置換すること、３−シュタウディンガー反応によりアジド基をアミンへ選択的に還元することにある一連の３工程を用いて、２−メチル−２−ニトロプロパノールは２−メチル−２−ニトロプロピルアミンへ変換される。２−メチル−２−ニトロプロピルアミンは、塩基性媒体中でメトキシエタノール中、６０℃でラクトビオノラクトンと縮合される。この反応に続いて、無水酢酸／ピリジン混合物中でヒドロキシル基の過アセチル化の反応を行う。最終的に、ニトロ基は、文献で広範に記載される手順に従ってヒドロキシルアミンへ選択的に還元される(Janzen E.G.; Dudley R.L.; Shetty R.V. J. Am. Chem. Soc. 1979, 101, 243-245)。反応は、粉末亜鉛及び塩化アンモニウムの存在下でＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物中で周囲温度にて実施される。続いて、化合物１は、シリカゲルクロマトグラフィ（溶離液：ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン、８：２、ｖ／ｖ）により容易に精製されて、２−メチル−２−ニトロプロパノールから収率２５％で白色粉末を得る。
【００９１】
Ｒｆ＝０．５２（溶離液：ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ、９：１、ｖ／ｖ）。
【００９２】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：６．６２（１Ｈ）；５．５８−５．６３（２Ｈ）；５．３９（１Ｈ）；５．０３−５．２５（３Ｈ）；４．６８（１Ｈ）；４．５５（２Ｈ）；４．３５（１Ｈ）；３．９５−４．２１（３Ｈ）；３．２７（２Ｈ）；１．９９−２．１８（２４Ｈ）；１．０６（６Ｈ）。
【００９３】
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ（ｐｐｍ）：１６６．７−１７０．７（ＣＯ）；１０１．１（ＣＨ）；７８．４、７２．１、７０．８、７０．２、７０．０、６９．５、６９．３、６９．３、６７．６（ＣＨ）；６１．７、６１．４、５７．４（ＣＨ２）；４５．４（Ｃ）；２２．８、２０．９（ＣＨ３）。
２−化合物３の合成
【００９４】
【化２０】
2009530252.tif 000021
【００９５】
炭化水素ベースの鎖を保有する化合物３は、国際公開第ＷＯ２００４／０４３９８２号で既述されている方法に従って４−シアノベンズアルデヒドから容易に調製することができる：１−ジオキソランの形態でアルデヒド官能基を保護すること、２−シアノ基をアミンへ還元することにある一連の２工程を用いて、４−シアノベンズアルデヒドは４−（１，３−ジオキサシクロペント−２−イル）ベンジルアミンへ変換される。
【００９６】
４−（１，３−ジオキサシクロペント−２−イル）ベンジルアミンは、既述されている方法(Ouari O.,; Polidori A.; Pucci B.; Tordo P.: Chalier F. J. Org. Chem. 1999, 64, 3554-3556)に従ってＤＣＣ及びＨＯＢｔからなるペプチドカップリング系の存在下でジクロロメタン中でオクタン酸と縮合された後、ジオキソラン保護基が、１：１（ｖ／ｖ）の酢酸／水混合物中での処理により除去される。次に、化合物３は、シリカゲルクロマトグラフィ（溶離液：シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ、６：４、ｖ／ｖ）により精製されて、４−シアノベンズアルデヒドから収率４０％で白色粉末を得る。
【００９７】
Ｒｆ＝０．４７（溶離液：ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン、６／４  ｖ／ｖ)。
【００９８】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：９．９８（１Ｈ）；７．８４（２Ｈ）；７．４２（２Ｈ）；６．１８（１Ｈ）；４．５０（２Ｈ）；２．２６（２Ｈ）；１．６３（２Ｈ）；１．２９（８Ｈ）；０．８８（３Ｈ）。
【００９９】
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１９１．９、１７３．０（ＣＯ）；１３７．０、１３９．７（Ｃ）；１２７．９、１２６．８（ＣＨ）；６５．３、４３．３、３６．８、３１．７、２９．３、２９．０、２５．８、２２．６（ＣＨ２）；１４．１（ＣＨ３）。
３−化合物１０の合成
【０１００】
【化２１】
2009530252.tif 000022
【０１０１】
化合物１０は、国際公開ＷＯ２００４／０４３９８２号に既述されている方法に従って、化合物１と化合物３との縮合により得られる：ヒドロキシルアミン１及びベンズアルデヒド誘導体３は、アルゴン雰囲気下で且つモレキュラーシーブ４Ａの存在下で無水ＴＨＦ中で化学量論量で可溶化される。反応媒体は暗所で６０℃にする。ベンズアルデヒド誘導体を使い切るまで、ヒドロキシルアミンを０．２０当量ずつ分割して２４時間毎に順次添加する。すでに実証されている(Poeggeler B.; Durand G.; Polidori A.; Pappola M.A.; Vega-Naredo L.; Conto-Montes A.; Boeker J.; Hardeland R.; Pucci B. J. Neurochem. 2005, 95, 962-973)ように、共溶媒としての酢酸の使用により、反応速度論をかなり増加させることが可能となる。形成されたニトロンは、シリカゲルクロマトグラフィ（溶離液：ＥｔＯＡｃ／シクロヘキサン、７：３  ｖ／ｖ）により、続いてセファデックスＬＨ−２０樹脂上でのサイズ排除クロマトグラフィ（溶離液：ジクロロメタン／メタノール、１：１  ｖ／ｖ）により精製される。最終的に、極性頭部のアセチル基は、触媒量のナトリウムメタノレートの存在下でメタノール中でのエステル交換によりゼンプレン(Zemplen)法に従って排除される。化合物１０は、セファデックスＬＨ−２０樹脂上でのサイズ排除クロマトグラフィ（溶離液：メタノール）により精製されて、収率７０％で白色粉末を得る。
【０１０２】
Ｒｆ＝０．３８（溶離液：ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、７：２：１、ｖ／ｖ）。
【０１０３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＭｅＯＤ）δ（ｐｐｍ）：８．３５（２Ｈ）；７．８９（１Ｈ）；７．４１（２Ｈ）；４．３０−４．７１（３Ｈ）；４．１９（１Ｈ）；３．３２−３．９０（１３Ｈ）；２．２８（２Ｈ）；１．６１（８Ｈ）；１．３３（８Ｈ）；０．９３（３Ｈ）。
【０１０４】
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＭｅＯＤ）δ（ｐｐｍ）：１７４．２（ＣＯＮＨ）；１４２．４、１３５．１（Ｃ）；１２９．２、１２９．９、１２７．１、１０４．３、８１．７、７５．８、７３．３（ＣＨ）；７２．５（Ｃ）；７１．７、７１．３、７１．１、６８．９（ＣＨ）；６２．３、６１．３、４５．７、４２．４、３５．７、３１．５、２８．９、２８．７、２５．７（ＣＨ２）；２３．５、２３．４（ＣＨ３）；２２．３（ＣＨ２）；１３．０（ＣＨ３）。
【図面の簡単な説明】
【０１０５】
【図１】図１は、ｍ＝１、Ｘ＝ラクトビオナミド、Ｙ＝
【化２２】
2009530252.tif 000023
である式（ＩＩＩ）の化合物の調製を示す。
【図２】図２は、  ｎ＝０、１又は２、  Ｘ’＝（ＣＨ２）２−Ｒ（Ｒ＝Ｃ６Ｆ１３、Ｃ８Ｆ１７又はＣＨ３（ＣＨ２）ｎ（４＜ｎ＜１４）である）、  Ｙ’＝−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−（化合物２）、
【化２３】
2009530252.tif 000024
（化合物３）、
【化２４】
2009530252.tif 000025
（化合物４）、
【化２５】
2009530252.tif 000026
（化合物５）、
【化２６】
2009530252.tif 000027
（化合物６）、
【化２７】
2009530252.tif 000028
（化合物７）
である脂肪族鎖を含む式（ＩＩ）の化合物の調製を示す。
【図３】図３は、セリノールからのビカテナリー疎水性部分の合成を示す。
【図４】ｄ−ラクトビオノラクトン由来のモノカテナリー及びビカテナリー両親媒性ニトロンの生産。
【図１】
2009530252.tif 000035
【図２】
2009530252.tif 000036
【図３】
2009530252.tif 000037
【図４】
2009530252.tif 000038
【国際調査報告】
2009530252.tif 000039
2009530252.tif 000040
2009530252.tif 000041
2009530252.tif 000042
2009530252.tif 000043
2009530252.tif 000044