(57)【要約】  低血漿レプチンレベルに関連した障害を治療、予防、及び/又は管理する方法を開示する。特定の方法は、免疫調節性化合物を単独で又は第二活性剤と組み合わせて投与することを包含する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
低レプチン状態に関連した障害又はその症状を治療、管理、又は予防する方法であって、前記治療、管理、又は予防を必要とする患者に、治療的又は予防的有効量の免疫調節性化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは立体異性体を投与することを含む、前記方法。
【請求項２】
前記障害が、代謝障害又は摂食障害、低レプチン症関連神経内分泌機能不全、低レプチン症関連免疫不全、視床下部性無月経、末端肥大症、低レプチン症関連不妊症、皮膚損傷、外傷、長期的血液透析、又は脱毛である、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記代謝障害又は摂食障害が、リポジストロフィー症候群、又は拒食症である、請求項２記載の方法。
【請求項４】
前記症状が、神経内分泌欠陥、免疫不全、高グルコース及びトリグリセリドレベル、肝臓肥大、無月経、思春期遅発症、甲状腺機能低下症、副腎皮質機能亢進症、骨代謝異常、又は成長ホルモン軸の変化である、請求項１記載の方法。
【請求項５】
前記免疫調節性化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは立体異性体が、治療的又は予防的有効量の第二活性剤と組み合わせて投与される、請求項１記載の方法。
【請求項６】
前記第二活性剤が、抗生物質、チアゾリジンジオン、デキサメタゾン、インスリン、血糖降下薬、脂質降下薬、フルオキセチン、クエン酸クロミフェン、性腺刺激ホルモン、GnRH、コルチコステロイド、ミノキシジル、フィナステリド、アミリン、プラムリンチド、又はクロミプラミンである、請求項５記載の方法。
【請求項７】
前記抗生物質が、クロラムフェニコール、テトラサイクリン、クロルテトラサイクリン、スルファサラジン、アンピシリン、ペニシリン、又はトリメトプリム-スルファメトキサゾールである、請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記血糖降下薬が、メトホルミン又はTZDである、請求項６記載の方法。
【請求項９】
前記脂質降下薬が、フィブラート又はスタチンである、請求項６記載の方法。
【請求項１０】
前記コルチコステロイドが、ベタメタゾン、クロベタゾール、アムシノニド、デソキシメタゾン、ジフロラゾン、フルオシノニド、ハルシノニド、モメタゾン、アムシノニド、フルチカゾン、トリアムシノロン、フルオシノロン、フルランドレノリド、ヒドロコルチゾン、アルクロメタゾン、デソニド、フルメタゾン、又はプラモキシンである、請求項６記載の方法。
【請求項１１】
前記第二活性剤がデキサメタゾンである、請求項６記載の方法。
【請求項１２】
前記免疫調節性化合物が、4-(アミノ)-2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-イソインドリン-1,3-ジオンである、請求項１記載の方法。
【請求項１３】
前記免疫調節性化合物が、鏡像異性的に純粋な(R)又は(S)異性体である、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記免疫調節性化合物が、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンである、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
前記免疫調節性化合物が、鏡像異性的に純粋な(R)又は(S)異性体である、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
前記免疫調節性化合物が下記式(I)のものである、請求項１のいずれか１項記載の方法：
【化１】
2009507836.tif 000029
(式中、
XとYのうちの一方はC=Oであり、X及びYのうちの他方はC=O又はCH2であり、
R2は、水素又は低級アルキルである。）。
【請求項１７】
前記免疫調節性化合物が、鏡像異性的に純粋である、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
前記免疫調節性化合物が下記式(II)のものである、請求項１のいずれか１項記載の方法：
【化２】
2009507836.tif 000030
(式中、
XとYのうちの一方はC=Oであり、他方はCH2又はC=Oであり；
R1はH、(C1〜C8)アルキル、(C3〜C7)シクロアルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、ベンジル、アリール、(C0〜C4)アルキル-(C1〜C6)ヘテロシクロアルキル、(C0〜C4)アルキル-(C2〜C5)ヘテロアリール、C(O)R3、C(S)R3、C(O)OR4、(C1〜C8)アルキル-N(R6)2、(C1〜C8)アルキル-OR5、(C1〜C8)アルキル-C(O)OR5、C(O)NHR3、C(S)NHR3、C(O)NR3R3'、C(S)NR3R3'又は(C1〜C8)アルキル-O(CO)R5であり；
R2はH、F、ベンジル、(C1〜C8)アルキル、(C2〜C8)アルケニル又は(C2〜C8)アルキニルであり；
R3及びR3'は独立して(C1〜C8)アルキル、(C3〜C7)シクロアルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、ベンジル、アリール、(C0〜C4)アルキル-(C1〜C6)ヘテロシクロアルキル、(C0〜C4)アルキル-(C2〜C5)ヘテロアリール、(C0〜C8)アルキル-N(R6)2、(C1〜C8)アルキル-OR5、(C1〜C8)アルキル-C(O)OR5、(C1〜C8)アルキル-O(CO)R5又はC(O)OR5であり；
R4は(C1〜C8)アルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、(C1〜C4)アルキル-OR5、ベンジル、アリール、(C0〜C4)アルキル-(C1〜C6)ヘテロシクロアルキル又は(C0〜C4)アルキル-(C2〜C5)ヘテロアリールであり；
R5は(C1〜C8)アルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、ベンジル、アリール又は(C2〜C5)ヘテロアリールであり；
R6は出現するごとに、独立してH、(C1〜C8)アルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、ベンジル、アリール、(C2〜C5)ヘテロアリール若しくは(C0〜C8)アルキル-C(O)O-R5であるか、又はR6基は互いに結合してヘテロシクロアルキル基を形成し；
nは0又は1であり；かつ
*はキラル炭素中心を表す。)。
【請求項１９】
前記免疫調節性化合物が鏡像異性的に純粋である、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
免疫調節性化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、若しくは立体異性体、及び第二活性成分を含む医薬組成物であって、該第二活性成分が、抗生物質、チアゾリジンジオン、デキサメタゾン、インスリン、血糖降下薬、脂質降下薬、フルオキセチン、クエン酸クロミフェン、性腺刺激ホルモン、GnRH、コルチコステロイド、ミノキシジル、フィナステリド、アミリン、プラムリンチド、又はクロミプラミンである、前記医薬組成物。
【請求項２１】
前記抗生物質が、クロラムフェニコール、テトラサイクリン、クロルテトラサイクリン、スルファサラジン、アンピシリン、ペニシリン、又はトリメトプリム-スルファメトキサゾールである、請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記血糖降下薬が、メトホルミン又はTZDである、請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記脂質降下薬が、フィブラート又はスタチンである、請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記コルチコステロイドが、ベタメタゾン、クロベタゾール、アムシノニド、デソキシメタゾン、ジフロラゾン、フルオシノニド、ハルシノニド、モメタゾン、アムシノニド、フルチカゾン、トリアムシノロン、フルオシノロン、フルランドレノリド、ヒドロコルチゾン、アルクロメタゾン、デソニド、フルメタゾン、又はプラモキシンである、請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記第二活性剤が、デキサメタゾンである、請求項２０記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
(1．本発明の分野)
本発明は、１以上の免疫調節性化合物の投与による、低血漿レプチンレベルに関連した疾患又は障害を治療、予防、及び/又は管理する方法に関する。また、本発明は、前記疾患又は障害を治療するための特定の組合わせ、すなわち免疫調節性化合物、薬剤、及び他の療法の「カクテル」の使用を包含する。さらに、本発明は、医薬組成物、及び投与計画に関する。
【０００２】
(2．本発明の背景)
(2.1．低レプチン状態に関連した障害)
レプチンは、主に脂肪細胞により分泌されるタンパク質ホルモンである。レプチンは、体重、代謝及び内分泌機能、免疫、炎症、及び造血の調節において重要な役割を担うことが報告されている。例えば、Fantuzziらの論文, Journal of Leukocyte Biology, 68: 437-446 (2000)を参照されたい。
【０００３】
また、レプチンが、皮膚修復及び発毛の役割を果たすと考えられている。組換え型レプチンの全身及び局所適用が、ob/obマウスにおいて、外傷の上皮形成を改善し、かつ野生型マウスにおいて、正常な外傷治癒状態を促進することが報告されている。Frankらの論文, J Invest. Clin., 106: 501-509 (2000)、及びRingらの論文, Endocrinology, 141: 446-449 (2000)。皮膚修復時に、レプチンは、ケラチノサイトの増殖を誘発することにより分裂促進剤として作用する。例えば、Gorenらの論文, Biochem. Biophys. Res. Comm., 303: 1080-1085 (2003)、及びStallmeyerらの論文, J. Invest. Dermatol., 117: 98-105 (2001)を参照されたい。また、レプチンは、ヒトの髪生物学(hair biology)に関与している。Iguchiらの論文, J. Invest. Dermatol., 117: 1349-1356 (2001)。
【０００４】
多くの場合、レプチン欠乏症に関連した障害は、深刻な代謝障害を示す。一例には、グルコース及びトリグリセリドレベルの低下及び/又は肝臓サイズの減少により特徴付けられる、リポジストロフィー症候群がある。リポジストロフィーを特徴付けるインスリン抵抗性及び高トリグリセリド血症は、治療抵抗性であることが報告されている。例えば、Garg, Am J. Med., 108: 143-152 (2000)を参照されたい。近年、レプチン療法が、リポジストロフィー症候群から主要な代謝機能の改善を生じることが報告された。Oralらの論文, New England Journal of Medicine, 346: 570-578 (2002)、及びPetersonらの論文, JCI, 109: 1345-1350 (2002)。
【０００５】
拒食症において、慢性的な飢餓は、アディポカイン循環の変化に伴って生じる貯蔵脂肪の減少を引き起こす。拒食症状態において、血漿レプチンレベルは低下し、かつアディポネクチンレベルが増加する。さらに、拒食症患者は、無月経, 思春期遅発症, 甲状腺機能低下症、副腎皮質機能亢進症、及び成長ホルモン(GH)軸、骨代謝、及び免疫機能の変化などの内分泌異常及び代謝異常を患う。Munozらの論文, J. Pediatr. Endocrinol. Metab., suppl. 3: 478-480 (2004)、及びBrichardらの論文, Horm. Metab. Res., 35: 337-342 (2003)。レプチン代償療法は、血漿甲状腺ホルモンレベル、性腺刺激ホルモン分泌の年齢依存性作用、及び青春期発育の増加、並びに免疫不全の改善を生じることが報告されている。Farooqlらの論文, JCI, 110: 1093-11030 (2002)。また、血清レプチンレベルの増加が、長期的血液透析患者において好ましい効果を有し、よりよい栄養状態及びエリスロポエチン応答を生じることが報告された。Hungらの論文, American Journal of Kidney Diseases, 45(6): 1073-1083 (2005)。
【０００６】
一般的に、これらの障害は、例えば、インスリン、経口血糖降下薬(例えば、メトホルミン及びチアゾリジンジオン("TZD"))、及びフィブラート及びスタチンなどの脂質降下薬を含む、薬剤の組合せを用いて処置されている。しかし、公知の療法は、限られた有用性しかない。例えば、リポジストロフィーの場合、患者は、急性膵炎の再発性発作、深刻な高血糖症、及びそれに潜在的に関連した糖尿病性網膜症及び腎症、並びに非アルコール性脂肪性肝炎及び潜在的肝硬変を生じる、深刻な高グリセリド血症を有し続ける。
【０００７】
さらに、レプチン代償療法は、多くの改善された効果を有することが報告されているが、多くの問題も有する。例えば、該処置は、苦痛を生じ、かつ現在のレプチン療法は、毎日の組換えレプチンの静脈内投与を必要とするので厄介である。さらに、組換えレプチンを使用することにより、現在のレプチン代償療法は、一定用量のレプチンを提供することができるのみである。これは、体内のレプチンレベルの自然変動、及びレプチンレベルの性別による相違と極めて異なる可能性がある。従って、低レプチン状態に関連した障害に有効であり、かつ簡便な療法の必要性が存在する。
【０００８】
(2.2 IMID(商標))
多くの研究がTNF-αの異常産生に関連した疾患の治療に安全かつ効果的に使用することができる化合物を提供する目的で行われている。例えば、Marriott, J.B.らの論文, Expert Opin. Biol. Ther. 1(4):1-8 (2001); G.W. Mullerらの論文, Journal of Medicinal Chemistry, 39(17): 3238-3240 (1996);及びG.W. Mullerらの論文, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 8: 2669-2674 (1998)を参照されたい。一部の研究は、LPS刺激PBMCによるTNF-α産生を強力に阻害する能力のために選択された化合物群に焦点を置いている。L.G. Corralらの論文, Ann. Rheum. Dis. 58:(Suppl I) 1107-1113 (1999)。IMiD(商標)(Celgene Corporation)と称されるこれらの化合物、又はは免疫調節薬は、TNF-αの強力な阻害だけではなく、LPS誘発単球IL1β及びIL12産生の顕著な阻害をも示す。また、LPS誘発IL6は、部分的であるが、免疫調節性化合物により阻害される。これらの化合物は、LPS誘発IL10の強力な刺激剤である（同上論文）。IMiD(商標)の特定の例をあげると、制限されないが、米国特許第6,281,230号及び第6,316,471号(両方ともG.W. Mullerら)に記載されている置換2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)フタルイミド、及び置換2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-1-オキソイソインドールがある。
【発明の開示】
【０００９】
(3.本発明の要旨)
本発明は、低レプチン状態(hypoleptinemic state)、例えば低血漿レプチンレベルに関連した疾患又は障害を治療、予防、及び/又は管理する方法を包含する。該方法は、そのような治療、予防、及び/又は管理を必要とする患者に、免疫調節性化合物、及びその医薬として許容し得る塩、溶媒和物(例えば水和物)、立体異性体、及びプロドラッグを投与することを含む。
幾つかの実施態様において、免疫調節性化合物は、低レプチン状態に関連した障害を治療、予防、及び/又は管理するために従来使用される療法又は薬剤と組み合わせて投与される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
(5.本発明の詳細な説明)
本発明の第一実施態様は、低レプチン状態に関連した疾患又は障害を治療、管理、及び/又は予防する方法を包含し、該方法は、そのような治療又は予防を必要とする患者に、治療的又は予防的有効量の本発明の免疫調節性化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物(例えば水和物)、立体異性体、若しくはプロドラッグを投与することを含む。
【００１１】
この実施態様に包含される特定の方法において、免疫調節性化合物は、他の薬剤(「第二活性剤」)、又は低レプチン状態に関連した障害を治療、管理、及び/又は予防する他の方法と組み合わせて投与される。第二活性剤は、小分子及び大分子(例えば、タンパク質、抗体、ポリヌクレオチド、及びオリゴ糖)(これらの例は本明細書中に提供される。)、並びに幹細胞を含む。
【００１２】
低レプチン状態に関連した障害の例を挙げると：制限されないが、リポジストロフィー症候群及び拒食症などの代謝障害及び摂食障害；低レプチン症(hypoleptinemia)関連神経内分泌機能不全；低レプチン症関連免疫不全；視床下部性無月経；制限されないが、末端肥大症(下垂体腺腫)などのCNS障害；低レプチン症関連不妊症；皮膚損傷；外傷；長期的血液透析；及び脱毛があるが、これらに制限されない。
【００１３】
(5.1 定義)
本明細書において使用される用語「医薬として許容し得る塩」は、他に特に指定しない限り、無機酸及び有機酸を含む、医薬として許容し得る無毒の酸から調製された塩を意味する。適当な無毒の酸は、酢酸、アルギン酸、アントラニル酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エテンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、フロ酸、グルコン酸、グルタミン酸、グルコレン酸(glucorenic acid)、ガラクツロン酸、グリシド酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、プロピオン酸、リン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、硫酸、酒石酸、及びp-トルエンスルホン酸などの無機酸及び有機酸を含むが、これらに限定されない。適切なものは、塩酸、臭化水素酸、リン酸及び硫酸である。
【００１４】
本明細書において使用される用語「溶媒和物」は、他に特に指定しない限り、非共有分子間力により結合された溶媒の化学量論的又は非-化学量論的な量を更に含む、本発明の化合物又はその塩を意味する。溶媒が水である場合、この溶媒和物は水和物である。
本明細書において使用される用語「プロドラッグ」は、他に特に指定しない限り、生物学的条件(インビトロ又はインビボ)下で加水分解、酸化、又はそれ以外に反応し、本化合物を提供することができる化合物の誘導体を意味する。プロドラッグの例は、生加水分解可能な部分、例えば生加水分解可能なアミド、生加水分解可能なエステル、生加水分解可能なカルバマート、生加水分解可能なカルボネート、生加水分解可能なウレイド、及び生加水分解可能なホスフェートアナログなどを含む化合物を含むが、これらに限定されるものではない。他のプロドラッグの例は、-NO、-NO2、-ONO、又は-ONO2部分を含む化合物である。プロドラッグは典型的には、「バーガーの医化学及び創薬（Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery）」、172-178, 949-982(Manfred E. Wolff編集, 第5版 1995)、及び「プロドラッグのデザイン（Design of Prodrugs）」(H. Bundgaard編集、Elselvier, ニューヨーク 1985)に記載されたもののような、周知の方法を使用し、調製することができる。
【００１５】
本明細書において使用される用語「生加水分解可能なカルバマート」、「生加水分解可能なカルボネート」、「生加水分解可能なウレイド」及び「生加水分解可能なホスフェート」は、他に特に指定しない限り、それぞれ、以下のいずれかの化合物のカルバマート、カルボネート、ウレイド、及びホスフェートを意味する：1)化合物の生物学的活性を妨害しないが、例えば取り込み、作用期間、もしくは作用開始などの、有利なインビボ特性をその化合物に与えることができる；又は、2)生物学的に不活性であるが、インビボにおいて生物学的活性化合物へ転換される。生加水分解可能なカルバマートの例は、低級アルキルアミン、置換されたエチレンジアミン、アミノ酸、ヒドロキシアルキルアミン、複素環式及び複素環式芳香族アミン、並びにポリエーテルアミンを含むが、これらに限定されるものではない。
本明細書において使用される用語「立体異性体」は、他に特に指定しない限り、全ての鏡像異性的/立体異性的に純粋な及び鏡像異性的/立体異性的に豊富な本発明の化合物を包含している。
【００１６】
本明細書において使用される用語「立体異性的に純粋」又は「鏡像異性的に純粋」は、他に特に指定しない限り、化合物が、1つの立体異性体を含むこと、及びその対抗する立体異性体又は鏡像異性体を実質的に含まないことを意味する。例えば、化合物が、80％、90％、もしくは95％以上の1つの立体異性体及び20％、10％、もしくは5％以下の対抗する立体異性体を含む場合、その化合物は立体異性的又は鏡像異性的に純粋である。場合によっては、本発明の化合物は、化合物がキラル中心に関して約80％ee(鏡像異性体過剰率)以上の場合、好ましくは特定のキラル中心に関して90％ee以上の場合、及びより好ましくは特定のキラル中心に関して95％eeである場合に、光学的に活性又は立体異性的/鏡像異性的に純粋 (すなわち実質的にR-型又は実質的にS-型)であると考えられる。
本明細書において使用される用語「立体異性的に豊富」又は「鏡像異性的に豊富」は、他に特に指定しない限り、ラセミ混合物以外の混合物、例えば本発明の化合物の立体異性体の混合物(例えば、R/S＝30/70、35/65、40/60、45/55、55/45、60/40、65/35及び70/30)を包含している。
【００１７】
本明細書において使用される用語「治療する」、「治療している」及び「治療」は、他に特に指定しない限り、疾患又は障害の重症度を軽減するか、或いは疾患又は障害の進行を遅延もしくは緩徐するような、患者が特定の疾患又は障害に罹患している間に生じる働きを意図している。
本明細書において使用される用語「予防する」、「予防している」及び「予防」は、他に特に指定しない限り、疾患又は障害を阻害又はその重症度を軽減するような、患者が特定の疾患又は障害に罹患し始める前に生じる働きを意図している。
【００１８】
本明細書において使用される用語「管理する」、「管理している」及び「管理」は、他に特に指定しない限り、既に疾患もしくは障害に罹患した患者において特定の疾患又は障害の再発を防止すること、並びに／又は疾患もしくは障害に罹患した患者が寛解である期間を延長することを包含している。これらの用語は、疾患又は障害の閾値、発症及び／又は期間を変更すること、或いは患者が疾患又は障害に反応する方法を変更することを包含している。
【００１９】
本明細書において使用される用語化合物の「治療的有効量」は、他に特に指定しない限り、疾患又は状態の治療又は管理において治療的恩恵を提供するのに十分な量、或いは疾患又は状態に関連した1種以上の症状を遅延又は最小化するのに十分な量である。用語「治療的有効量」は、全般的療法を改善する量、疾患又は状態の症状又は原因を軽減もしくは回避する量、或いは別の治療物質の治療効果を増強する量を包含し得る。
【００２０】
本明細書において使用される用語化合物の「予防的有効量」は、他に特に指定しない限り、疾患又は状態、或いは疾患又は状態に関連した1種以上の症状を予防するのに十分な量、又はその再発を防止するのに十分な量である。用語「予防的有効量」は、全般的予防を向上又は別の予防的物質の予防効果を増強する量を包含する。
【００２１】
(5.2 免疫調節性化合物)
一実施態様において、本発明は、免疫調節性化合物を使用する、例えば、低血漿レプチンレベルなどの低レプチン状態(hypoleptinemic state)に関連した疾患又は障害を治療、予防、及び/又は管理する方法に関する。本明細書で使われるように、特に指定のない限り、用語「免疫調節性化合物」及び「IMiD(商標)」(Celgene Corporation)は、TNF-α、LPS誘発単球IL 1β及びIL 12を阻害し、またIL 6の産生も阻害することができる有機小分子を包含する。具体的な免疫調節性化合物については後に記載する。
【００２２】
TNF-αは、急性炎症時に、マクロファージ及び単球によって産生される炎症性サイトカインである。TNF-αは、細胞内の多様なシグナル伝達事象に関与する。理論に束縛されるものではないが、本発明の免疫調節性化合物が発揮する生物学的効果の1つは、TNF-α産生の低減である。本発明の免疫調節性化合物は、TNF-α mRNAの分解を亢進することができる。
【００２３】
さらに、理論に束縛されるものではないが、本発明に使用される免疫調節性化合物は、T細胞の有力な共刺激分子であって、細胞増殖を用量依存的に劇的に高めることができる。本発明の免疫調節性化合物はまた、CD4＋Ｔ細胞サブセットに対してよりもCD8＋T細胞サブセットに対してより大きな共刺激効果を発揮することができる。さらに、同化合物は、好ましくは、抗炎症特性を有し、効率的にT細胞を共刺激する。また、特定の理論に束縛されるのではないが、本発明に使用される免疫調節性化合物は、サイトカイン活性化を介して間接的に、また直接的にナチュラルキラー(「NK」)細胞に作用することができ、IFN-γ(ただしこれらに限定されない)などの有益なサイトカインを産生するNK細胞の能力を高める。
【００２４】
免疫調節性化合物の具体例としては、例えば米国特許第5,929,117号に開示されている置換スチレンのシアノ誘導体及びカルボキシ誘導体；例えば米国特許第5,874,448号及び同第5,955,476号に記載されている1-オキソ-2-(2,6-ジオキソ-3-フルオロピペリジン-3-イル)イソインドリン及び1,3-ジオキソ-2-(2,6-ジオキソ-3-フルオロピペリジン-3-イル)イソインドリン；米国特許第5,798,368号に記載されている四置換2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-1-オキソイソインドリン；例えば米国特許第5,635,517号、同第6,476,052号、同第6,555,554号及び同第6,403,613号に開示されているものを含む(ただしこれらに限定されない)、1-オキソ及び1,3-ジオキソ-2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)イソインドリン(例えば、サリドマイドの4-メチル誘導体)；例えば米国特許第6,380,239号に記載されているインドリン環の第4位又は第5位で置換されている1-オキソ及び1,3-ジオキソインドリン(例えば、4-(4-アミノ-1,3-ジオキソイソインドリン-2-イル)-4-カルバモイルブタン酸)；例えば米国特許第6,458,810号に記載されている第2位が2,6-ジオキソ-3-ヒドロキシピペリジン-5-イルで置換されているイソインドリン-1-オン及びイソインドリン-1,3-ジオン(例えば、2-(2,6-ジオキソ-3-ヒドロキシ-5-フルオロピペリジン-5-イル)-4-アミノイソインドリン-1-オン)；米国特許第5,698,579号及び同第5,877,200号に開示されている非ポリペプチド環状アミド類；アミノサリドマイド、並びにアミノサリドマイドのアナログ、加水分解物、代謝物、誘導体及び前駆体、並びに例えば米国特許第6,281,230号及び同第6,316,471号に記載されている置換2-(2,6-ジオキシピペリジン-3-イル)フタルイミド及び置換2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-1-オキソイソインドール；並びに2003年3月6日公開の米国特許公開第2003/0045552号、2003年3月22日公開の米国特許公開第2003/0096841号及び国際特許出願第PCT/US01/50401号(国際公開WO02/059106)に開示されているイソインドール-イミド化合物が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書で確認した各特許及び特許出願の全体は、引用によって本明細書に取り込まれている。免疫調節性化合物に、サリドマイドは含まれない。
【００２５】
本発明のその他の具体的な免疫調節性化合物は、引用によって本明細書に取り込まれている米国特許第5,635,517号に記載されている、ベンゾ環においてアミノで置換されている1-オキソ-及び1,3-ジオキソ-2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)イソインドリンが挙げられるが、これらに限定されない。これらの化合物は下記構造Iを有する：
【化１】
2009507836.tif 000003
(式中、XとYのうちの一方はC=Oであり、XとYのうちの他方はC=O又はCH2であり、R2は水素又は低級アルキル、特にメチルである。)。具体的な免疫調節性化合物は：
1-オキソ-2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリン;
1-オキソ-2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-5-アミノイソインドリン;
1-オキソ-2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-6-アミノイソインドリン;
1-オキソ-2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-7-アミノイソインドリン;
1,3-ジオキソ-2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリン;
1,3-ジオキソ-2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-5-アミノイソインドリン；及び
1,3-ジオキソ-2-(3-メチル-2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２６】
本発明のその他の具体的な免疫調節性化合物は、それぞれ引用によって本明細書に取り込まれている、米国特許第6,281,230号、同第6,316,471号、同第6,335,349号及び同第6,476,052号、並びに国際特許出願第PCT/US97/13375号(国際公開WO98/03502)に記載されている、置換2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)フタルイミド及び置換2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-1-オキソイソインドールの類に属する。代表的な化合物は下記式で表される：
【化２】
2009507836.tif 000004
(式中、
XとYのうちの一方はC=Oであり、XとYのうちの他方はC=O又はCH2であり；
(i)R1、R2、R3及びR4はそれぞれ他のものとは独立してハロ、炭素原子数1から4のアルキル、若しくは炭素原子数1から4のアルコキシであるか、又は(ii)R1、R2、R3及びR4の1つは-NHR5であり、R1、R2、R3及びR4の残りは水素であり；
R5は水素又は炭素原子数1から8のアルキルであり；
R6は水素、炭素原子数1から8のアルキル、ベンジル若しくはハロであり；
ただし、XとYがC=Oであり、(i)R1、R2、R3及びR4のそれぞれがフルオロであるか、又は(ii)R1、R2、R3又はR4の1つがアミノである場合、R6は水素以外の基である。)。
【００２７】
この類を代表する化合物は下記式で表される：
【化３】
2009507836.tif 000005
(式中、R1は水素又はメチルである。)。別の実施態様においては、本発明は、これら化合物の鏡像異性的に純粋な形態(例えば、光学的に純粋な(R)又は(S)鏡像異性体)の使用を包含する。
【００２８】
本発明のその他の具体的な免疫調節性化合物は、それぞれ引用によって本明細書に取り込まれている、米国特許出願公開第2003/0096841号、同第2003/0045552号、及び国際特許出願第PCT/US01/50401号(国際公開WO02/059106)に記載されている、イソインドール-イミドの類に属する。代表的な化合物は下記式IIで表される化合物、並びにその医薬として許容し得る塩、水和物、溶媒和物、クラスレート、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ体、及び立体異性体混合物である：
【化４】
2009507836.tif 000006
(式中、
XとYのうちの一方はC=Oであり、他方はCH2又はC=Oであり；
R1はH、(C1〜C8)アルキル、(C3〜C7)シクロアルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、ベンジル、アリール、(C0〜C4)アルキル-(C1〜C6)ヘテロシクロアルキル、(C0〜C4)アルキル-(C2〜C5)ヘテロアリール、C(O)R3、C(S)R3、C(O)OR4、(C1〜C8)アルキル-N(R6)2、(C1〜C8)アルキル-OR5、(C1〜C8)アルキル-C(O)OR5、C(O)NHR3、C(S)NHR3、C(O)NR3R3'、C(S)NR3R3'又は(C1〜C8)アルキル-O(CO)R5であり；
R2はH、F、ベンジル、(C1〜C8)アルキル、(C2〜C8)アルケニル又は(C2〜C8)アルキニルであり；
R3及びR3'は独立して(C1〜C8)アルキル、(C3〜C7)シクロアルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、ベンジル、アリール、(C0〜C4)アルキル-(C1〜C6)ヘテロシクロアルキル、(C0〜C4)アルキル-(C2〜C5)ヘテロアリール、(C0〜C8)アルキル-N(R6)2、(C1〜C8)アルキル-OR5、(C1〜C8)アルキル-C(O)OR5、(C1〜C8)アルキル-O(CO)R5又はC(O)OR5であり；
R4は(C1〜C8)アルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、(C1〜C4)アルキル-OR5、ベンジル、アリール、(C0〜C4)アルキル-(C1〜C6)ヘテロシクロアルキル又は(C0〜C4)アルキル-(C2〜C5)ヘテロアリールであり；
R5は(C1〜C8)アルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、ベンジル、アリール又は(C2〜C5)ヘテロアリールであり；
R6は出現するごとに、独立してH、(C1〜C8)アルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、ベンジル、アリール、(C2〜C5)ヘテロアリール若しくは(C0〜C8)アルキル-C(O)O-R5であるか、又はR6基は互いに結合してヘテロシクロアルキル基を形成することができ；
nは0又は1であり；かつ
*はキラル炭素中心を表す。)。
【００２９】
式IIで表される具体的な化合物において、nが0の場合、R1は(C3〜C7)シクロアルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、ベンジル、アリール、(C0〜C4)アルキル-(C1〜C6)ヘテロシクロアルキル、(C0〜C4)アルキル-(C2〜C5)ヘテロアリール、C(O)R3、C(O)OR4、(C1〜C8)アルキル-N(R6)2、(C1〜C8)アルキル-OR5、(C1〜C8)アルキル-C(O)OR5、C(S)NHR3又は(C1〜C8)アルキル-O(CO)R5であり；
R2はH又は(C1〜C8)アルキルであり；かつ
R3は(C1〜C8)アルキル、(C3〜C7)シクロアルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、ベンジル、アリール、(C0〜C4)アルキル-(C1〜C6)ヘテロシクロアルキル、(C0〜C4)アルキル-(C2〜C5)ヘテロアリール、(C5〜C8)アルキル-N(R6)2、(C0〜C8)アルキル-NH-C(O)O-R5、(C1〜C8)アルキル-OR5、(C1〜C8)アルキル-C(O)OR5、(C1〜C8)アルキル-O(CO)R5又はC(O)OR5であり、その他の可変のものは、同じ定義を有する。
式IIで表される他の具体的な化合物において、R2はH又は(C1〜C4)アルキルである。
式IIで表される他の具体的な化合物において、R1は(C1〜C8)アルキル又はベンジルである。
【００３０】
式IIで表される他の具体的な化合物において、R1はH、(C1〜C8)アルキル、ベンジル、CH2OCH3、CH2CH2OCH3又は下記式である：
【化５】
2009507836.tif 000007
。
【００３１】
式IIで表される化合物の別の実施態様において、R1は下記式である：
【化６】
2009507836.tif 000008
(式中、
QはO又はSであり、R7は出現するごとに、独立してH、(C1〜C8)アルキル、(C3〜C7)シクロアルキル、(C2〜C8)アルケニル、(C2〜C8)アルキニル、ベンジル、アリール、ハロゲン、(C0〜C4)アルキル-(C1〜C6)ヘテロシクロアルキル、(C0〜C4)アルキル-(C2〜C5)ヘテロアリール、(C0〜C8)アルキル-N(R6)2、(C1〜C8)アルキル-OR5、(C1〜C8)アルキル-C(O)OR5、(C1〜C8)アルキル-O(CO)R5若しくはC(O)OR5であるか、又は隣接して出現するR7が一緒になって二環式アルキル若しくはアリール環を形成することができる。)。
【００３２】
式IIで表される他の具体的な化合物において、R1はC(O)R3である。
式IIで表される他の具体的な化合物において、R3は(C0〜C4)アルキル-(C2〜C3)ヘテロアリール、(C1〜C8)アルキル、アリール又は(C0〜C4)アルキル-OR5である。
式IIで表される他の具体的な化合物において、ヘテロアリールは、ピリジル、フリル又はチエニルである。
式IIで表される他の具体的な化合物において、R1はC(O)OR4である。
式IIで表される他の具体的な化合物において、C(O)NHC(O)のHは、(C1〜C4)アルキル、アリール又はベンジルで置換することができる。
【００３３】
この類の化合物の例としては、さらに下記のものが挙げられるが、これらに限定されない：[2-(2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジオキソ-2,3-ジヒドロ-1H-イソインドール-4-イルメチル]-アミド;(2-(2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジオキソ-2,3-ジヒドロ-1H-イソインドール-4-イルメチル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル;4-(アミノメチル)-2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-イソインドリン-1,3-ジオン;N-(2-(2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジオキソ-2,3-ジヒドロ-1H-イソインドール-4-イルメチル)-アセトアミド;N-{(2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル)-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル)メチル}シクロプロピル-カルボキサミド;2-クロロ-N-{(2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル)メチル}アセトアミド;N-(2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル)-3-ピリジルカルボキサミド;3-{1-オキソ-4-(ベンジルアミノ)イソインドリン-2-イル}ピペリジン-2,6-ジオン;2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-4-(ベンジルアミノ)イソインドリン-1,3-ジオン;N-{(2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル)メチル}プロパンアミド;N-{(2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル)メチル}-3-ピリジルカルボキサミド;N-{(2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル)メチル}ヘプタンアミド;N-{(2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル)メチル}-2-フリルカルボキサミド;{N-(2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル)カルバモイル}メチルアセテート;N-(2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル)ペンタンアミド;N-(2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル)-2-チエニルカルボキサミド;N-{{2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル]メチル}(ブチルアミノ)カルボキサミド;N-{[2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル]メチル}(オクチルアミノ)カルボキサミド;及びN-{[2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-1,3-ジオキソイソインドリン-4-イル]メチル}(ベンジルアミノ)カルボキサミド。
【００３４】
本発明のその他の具体的な免疫調節性化合物は、それぞれ引用によって本明細書に取り込まれている、米国特許出願公開第2002/0045643号、国際公開WO98/54170及び米国特許第6,395,754号に開示されている、イソインドール-イミドの類に属する。代表的な化合物は下記式IIIで表される化合物、並びにその医薬として許容し得る塩、水和物、溶媒和物、クラスレート、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ体、及び立体異性体混合物である：
【化７】
2009507836.tif 000009
(式中、
XとYのうちの一方はC＝Oであり、他方はCH2又はC＝Oであり；
RはH又はCH2OCOR'であり；
(i)R1、R2、R3又はR4はそれぞれ他のものとは独立してハロ、炭素原子数1から4のアルキル、若しくは炭素原子数1から4のアルコキシであるか、又は(ii)R1、R2、R3又はR4の1つはニトロ若しくは-NHR5であり、R1、R2、R3又はR4の残りは水素であり；
R5は水素又は炭素原子数1から8のアルキルであり；
R6は水素又は炭素原子数1から8のアルキル、ベンゾ、クロロ若しくはフルオロであり；
R'はR7-CHR10-N(R8R9)であり；
R7はm-フェニレン又はp-フェニレン又は-(CnH2n)-であり、ここでnは0から4のいずれかの値であり；
R8及びR9はそれぞれ他のものとは独立して水素若しくは炭素原子数1から8のアルキルであるか、又はR8及びR9は一緒になってテトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン若しくは-CH2CH2X1CH2CH2-であり、ここでX1は-O-、-S-若しくは-NH-であり；
R10は水素、炭素原子数〜8のアルキル又はフェニルであり；かつ
*はキラル炭素中心を表す。)。
【００３５】
その他の代表的な化合物は下記式で表される：
【化８】
2009507836.tif 000010
(式中、
XとYのうちの一方はC＝Oであり、XとYのうちの他方はC＝O又はCH2であり；
(i)R1、R2、R3又はR4はそれぞれ他のものとは独立してハロ、炭素原子数1から4のアルキル、若しくは炭素原子数1から4のアルコキシであるか、又は(ii)R1、R2、R3及びR4の1つは-NHR5であり、R1、R2、R3及びR4の残りは水素であり；
R5は水素又は炭素原子数1から8のアルキルであり；
R6は水素、炭素原子数1から8のアルキル、ベンゾ、クロロ若しくはフルオロであり；
R7はm-フェニレン又はp-フェニレン又は-(CnH2n)-であり、ここでnは0から4のいずれかの値であり；
R8及びR9はそれぞれ他のものとは独立して水素若しくは炭素原子数1から8のアルキルであるか、又はR8及びR9は一緒になってテトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン若しくは-CH2CH2X1CH2CH2-であり、ここでX1は-O-、-S-若しくは-NH-であり；かつ
R10は水素、炭素原子数〜8のアルキル又はフェニルである。)。
【００３６】
その他の代表的な化合物は下記式で表される：
【化９】
2009507836.tif 000011
(式中、
XとYのうちの一方はC＝Oであり、XとYのうちの他方はC＝O又はCH2であり；
R1、R2、R3又はR4はそれぞれ他のものとは独立してハロ、炭素原子数1から4のアルキル、若しくは炭素原子数1から4のアルコキシであるか、又は(ii)R1、R2、R3及びR4の1つはニトロ若しくは保護されたアミノであり、R1、R2、R3及びR4の残りは水素であり；かつ
R6は水素、炭素原子数1から8のアルキル、ベンゾ、クロロ又はフルオロである。)。
【００３７】
その他の代表的な化合物は下記式で表される：
【化１０】
2009507836.tif 000012
(式中、
XとYのうちの一方はC＝Oであり、XとYのうちの他方はC＝O又はCH2であり；
(i)R1、R2、R3及びR4はそれぞれ他のものとは独立してハロ、炭素原子数1から4のアルキル、若しくは炭素原子数1から4のアルコキシであるか、又は(ii)R1、R2、R3及びR4の1つは-NHR5であり、R1、R2、R3及びR4の残りは水素であり；
R5は水素、炭素原子数1から8のアルキル又はCO-R7-CH(R10)NR8R9であり、ここでR7、R8、R9及びR10はそれぞれ本明細書で定義した通りであり；かつ
R6は炭素原子数1から8のアルキル、ベンゾ、クロロ又はフルオロである。)。
【００３８】
前記化合物の具体例は下記式で表される化合物である：
【化１１】
2009507836.tif 000013
(式中、
XとYのうちの一方はC＝Oであり、XとYのうちの他方はC＝O又はCH2であり；
R6は水素、炭素原子数1から8のアルキル、ベンジル、クロロ又はフルオロであり；
R7はm-フェニレン、p-フェニレン又は-(CｎH2n)-であり、ここでnは0から4のいずれかの値であり；
R8及びR9はそれぞれ他のものとは独立して水素若しくは炭素原子数1から8のアルキルであるか、又はR8及びR9は一緒になってテトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン若しくは-CH2CH2X1CH2CH2-であり、ここでX1は-O-、-S-若しくは-NH-であり；かつ
R10は水素、炭素原子数1から8のアルキル又はフェニルである。)。
【００３９】
本発明の好ましい免疫調節性化合物は、4-(アミノ)-2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-イソインドリン-1,3-ジオン及び3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンである。これら化合物は標準的な合成方法によって得ることができる(例えば、引用によって本明細書に取り込まれている米国特許第5,635,517号参照)。これら化合物は、ニュージャージー州WarrenのCelgene Corporation社から入手できる。4-(アミノ)-2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-イソインドリン-1,3-ジオンは、下記の化学構造を有する：
【化１２】
2009507836.tif 000014
。
【００４０】
化合物3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、下記の化学構造を有する：
【化１３】
2009507836.tif 000015
。
【００４１】
別の実施態様においては、本発明の具体的な免疫調節性化合物は、いずれも引用によって本明細書に取り込まれている、2005年5月5日公開の米国特許公開第2005/0096351号に開示されている、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの多形相、例えばA、B、C、D、E、F、G及びH型などを包含する。例えば、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンのA型は、非水性溶媒系から得ることができる非溶媒和結晶性物質である。A型は、2θが約8、14.5、16、17.5、20.5、24及び26度で有意なピークを含む粉末X線回折パターンを有し、示差走査熱量分析により測定される最高融点は約270℃である。A型は、わずかに吸湿性であるか又は吸湿性でなく、また、これまで発見されている3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンの無水多形相の中で熱力学的に最も安定な型のようである。
【００４２】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンのB型は、ヘキサン、トルエン及び水などを含めた(これらに限定されないが)種々の溶媒系から得ることができる半水和結晶性物質である。B型は、2θが約16、18、22及び27度で有意なピークを含む粉末X線回折パターンを有し、またDSC曲線によれば約146及び268℃に吸熱を有するが、この吸熱はホットステージ顕微鏡検査により脱水和及び融解と確認されている。相互変換研究によれば、B型は、水性溶媒系においてはE型に変換し、アセトン及びその他の無水系においては他の型に変換することが示されている。
【００４３】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンのC型は、アセトンなど(これらに限定されないが)の溶媒から得ることができる半溶媒和結晶性物質である。C型は、2θが約15.5及び25度で有意なピークを含む粉末X線回折パターンを有し、示差走査熱量分析により測定される最高融点は約269℃である。C型は、約85％RHを下回る湿度では吸湿性でないが、相対湿度が高いとB型に変換することがある。
【００４４】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンのD型は、アセトニトリルと水との混合物から調製される溶媒和結晶性多形相である。D型は、2θが約27及び28度で有意なピークを含む粉末X線回折パターンを有し、示差走査熱量分析により測定される最高融点は約270℃である。D型は、わずかに吸湿性であるか又は吸湿性でないが、通常、相対湿度が高い状態でストレスを受けるとB型に変換することがある。
【００４５】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンのE型は、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを水中でスラリー化し、次いで、アセトン：水の比が約9:1の溶媒系で3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンをゆっくり蒸発させることによって得ることができる二水和、結晶性物質である。E型は、2θが約20、24.5及び29度で有意なピークを含む粉末X線回折パターンを有し、示差走査熱量分析により測定される最高融点は約269℃である。E型は、アセトン溶媒系においてはC型に変換し、THF溶媒系においてはG型に変換することがある。水性溶媒系において、E型は最も安定した型のようである。E型に対して実施した脱溶媒和実験によって、約125℃で約5分間加熱すると、E型がB型に変換することがあることが示されている。175℃で約5分間加熱すると、B型がF型に変換することがある。
【００４６】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンのF型は、E型の脱水和によって得ることができる非溶媒和、結晶性物質である。F型は、2θが約19、19.5及び25度で有意なピークを含む粉末X線回折パターンを有し、示差走査熱量分析により測定される最高融点は約269℃である。
【００４７】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンのG型は、B型及びE型を、テトラヒドロフラン(THF)など(これらに限定されないが)の溶媒中でスラリー化することによって得ることができる非溶媒和、結晶性物質である。G型は、2θが約21、23及び24.5度で有意なピークを含む粉末X線回折パターンを有し、示差走査熱量分析により測定される最高融点は約267℃である。
【００４８】
3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンのH型は、E型を0％相対湿度に曝露することによって得ることができる一部水和した(約0.25モル)、結晶性物質である。H型は、2θが約15、26及び31度で有意なピークを含む粉末X線回折パターンを有し、示差走査熱量分析により測定される最高融点は約269℃である。
【００４９】
本発明のその他の具体的免疫調節性化合物としては、それぞれ引用によって本明細書に取り込まれている、例えば、米国特許第5,874,448号及び同第5,955,476号に記載されている、1-オキソ-2-(2,6-ジオキソ-3-フルオロピペリジン-3-イル)イソインドリン及び1,3-ジオキソ-2-(2,6-ジオキソ-3-フルオロピペリジン-3-イル)イソインドリンが挙げられるが、これらに限定されない。代表的な化合物は下記式で表される化合物である：
【化１４】
2009507836.tif 000016
(式中、
Yは酸素又はH2であり；
R1、R2、R3及びR4はそれぞれ他のものとは独立して水素、ハロ、炭素原子数1から4のアルキル、炭素原子数1から4のアルコキシ、又はアミノである。)。
【００５０】
本発明のその他の具体的な免疫調節性化合物としては、引用によって本明細書に取り込まれている、米国特許第5,798,368号に記載されている四置換2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-1-オキソイソインドリンが挙げられるが、これらに限定されない。代表的な化合物は下記式で表される化合物である：
【化１５】
2009507836.tif 000017
(式中、
R1、R2、R3及びR4はそれぞれ他のものとは独立してハロ、炭素原子数1から4のアルキル、又は炭素原子数1から4のアルコキシである。)。
【００５１】
本発明のその他の具体的免疫調節性化合物としては、引用によって本明細書に取り込まれている米国特許第6,403,613号に開示されている、1-オキソ及び1,3-ジオキソ-2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)イソインドリンが挙げられるが、これらに限定されない。代表的な化合物は下記式で表される化合物である：
【化１６】
2009507836.tif 000018
(式中、
Yは酸素又はH2であり；
R1とR2のうち第1の基はハロ、アルキル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シアノ又はカルバモイルであり、R1とR2のうち第2の基は前記第1の基から独立して水素、ハロ、アルキル、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シアノ又はカルバモイルであり；かつ
R3は水素、アルキル、又はベンジルである。)。
【００５２】
前記化合物の具体例は下記式で表される化合物である：
【化１７】
2009507836.tif 000019
(式中、
R1とR2のうち第1の基はハロ、炭素原子数1から4のアルキル、炭素原子数1から4のアルコキシ、各アルキルが炭素原子数1から4であるジアルキルアミノ、シアノ又はカルバモイルであり；
R1とR2のうち第2の基は第1の基から独立して水素、ハロ、炭素原子数1から4のアルキル、炭素原子数1から4のアルコキシ、アルキルが炭素原子数1から4であるアルキルアミノ、各アルキルが炭素原子数1から4であるジアルキルアミノ、シアノ又はカルバモイルであり；かつ
R3は水素、炭素原子数1から4のアルキル、又はベンジルである。)。具体例としては、1-オキソ-2-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-メチルイソインドリンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５３】
その他の代表的な化合物は下記式で表される化合物である：
【化１８】
2009507836.tif 000020
(式中、
R1とR2のうち第1の基はハロ、炭素原子数1から4のアルキル、炭素原子数1から4のアルコキシ、各アルキルが炭素原子数1から4であるジアルキルアミノ、シアノ又はカルバモイルであり；
R1とR2のうち第2の基は第1の基から独立して水素、ハロ、炭素原子数1から4のアルキル、炭素原子数1から4のアルコキシ、アルキルが炭素原子数1から4であるアルキルアミノ、各アルキルが炭素原子数1から4であるジアルキルアミノ、シアノ又はカルバモイルであり；かつ
R3は水素、炭素原子数1から4のアルキル、又はベンジルである。)。
【００５４】
本発明のその他の具体的な免疫調節性化合物としては、引用によって本明細書に取り込まれている、米国特許第6,380,239号及び2004年7月28日出願の米国特許同時係属出願第10/900,270号に記載されている、インドリン環の4位又は5位が置換されている1-オキソ及び1,3-ジオキソイソインドリンが挙げられるが、これらに限定されない。代表的な化合物は下記式で表される化合物及びその塩である：
【化１９】
2009507836.tif 000021
(式中、
C*で示される炭素原子はキラル中心を構成し(nがゼロでなく、R1がR2と同じでない場合)；X1とX2のうちの一方はアミノ、ニトロ、炭素原子数1から6のアルキル又はNH-Zであり、X1とX2のうちの他方は水素であり；R1とR2はそれぞれ他のものとは独立してヒドロキシ又はNH-Zであり；R3は水素、炭素原子数1から6のアルキル、ハロ又はハロアルキルであり；Zは水素、アリール、炭素原子数1から6のアルキル、ホルミル又は炭素原子数1から6のアシルであり；かつnは0、1又は2の値であり；但し、X1がアミノでありかつnが1又は2である場合、R1とR2はが同時にヒドロキシであることはない。)。
【００５５】
その他の代表的な化合物は、下記式で表される化合物である：
【化２０】
2009507836.tif 000022
(式中、
C*で示される炭素原子はキラル中心を構成し(nがゼロでなく、R1がR2と同じでない場合) ；X1とX2のうちの一方はアミノ、ニトロ、炭素原子数1から6のアルキル又はNH-Zであり、X1とX2のうちの他方は水素であり；R1とR2はそれぞれ他のものとは独立してヒドロキシ又はNH-Zであり；R3は炭素原子数1から6のアルキル、ハロ又は水素であり；Ｚは水素、アリール、又は炭素原子数1から6のアルキル若しくはアシルであり；かつnは0、1又は2の値である。)。
【００５６】
その具体例としては、それぞれ下記の構造を有する2-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-4-カルバモイル-酪酸及び4-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-4-カルバモイル-酪酸、並びにそれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、プロドラッグ及び立体異性体が挙げられるが、これらに限定されない：
【化２１】
2009507836.tif 000023
。
【００５７】
その他の代表的な化合物は、下記式で表される化合物及びその塩である：
【化２２】
2009507836.tif 000024
(式中、
C*で示される炭素原子はキラル中心を構成し（nがゼロでなくかつR1がR2と同じでない場合）；X1とX2のうちの一方はアミノ、ニトロ、炭素原子数1から6のアルキル又はNH-Zであり、X1とX2のうちの他方は水素であり；R1とR2はそれぞれ他のものとは独立してヒドロキシ又はNH-Zであり；R3は炭素原子数1から6のアルキル、ハロ又は水素であり；Ｚは水素、アリール、又は炭素原子数1から6のアルキル若しくはアシルであり；nは0、1又は2の値である。)。
【００５８】
その具体例としては、それぞれ下記の構造を有する4-カルバモイル-4-{4-{(フラン-2-イル-メチル)-アミノ]-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル}-酪酸、4-カルバモイル-2-{4-[(フラン-2-イル-メチル)-アミノ]-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル}-酪酸、2-{4-[(フラン-2-イル-メチル)-アミノ]-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル}-4-フェニルカルバモイル-酪酸、及び2-{4-[(フラン-2-イル-メチル)-アミノ]-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル}-ペンタン二酸、並びにそれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、プロドラッグ及び立体異性体が挙げられるが、これらに限定されない：
【化２３】
2009507836.tif 000025
。
【００５９】
前記化合物のその他の具体例は、下記式で表される化合物である：
【化２４】
2009507836.tif 000026
(式中、
X1とX2のうちの一方はニトロ又はNH-Zであり、X1とX2のうちの他方は水素であり；
R1とR2はそれぞれ他のものとは独立してヒドロキシ又はNH-Zであり；
R3は炭素原子数1から6のアルキル、ハロ又は水素であり；
Ｚは水素、フェニル、炭素原子数1から6のアシル、又は炭素原子数1から6のアルキルであり；
nは0、1又は2であり；
ただし、X1とX2のうちの一方がニトロであり、かつnが1又は2である場合、R1とR2はヒドロキシ以外の基であり；かつ
-COR2と-(CH2)nCOR1が異なる場合、C*で示される炭素原子はキラル中心を構成する。)。
【００６０】
その他の代表的な化合物は、下記式で表される化合物である：
【化２５】
2009507836.tif 000027
(式中、
X1とX2のうちの一方は炭素原子数1から6のアルキルであり；
R1とR2はそれぞれ他のものとは独立してヒドロキシ又はNH-Zであり；
R3は炭素原子数1から6のアルキル、ハロ又は水素であり；
Ｚは水素、フェニル、炭素原子数1から6のアシル、又は炭素原子数1から6のアルキルであり；
nは0、1又は2の値であり；かつ
-COR2と-(CH2)nCOR1が異なる場合、C*で示される炭素原子はキラル中心を構成する。)。
【００６１】
本発明のその他の具体的免疫調節性化合物としては、引用によって本明細書に取り込まれている米国特許第6,458,810号に記載されている、第2位が2,6-ジオキソ-3-ヒドロキシピペリジン-5-イルで置換されているイソインドリン-1-オン及びイソインドリン-1,3-ジオンが挙げられるが、これらに限定されない。代表的な化合物は下記式で表される化合物である：
【化２６】
2009507836.tif 000028
(式中、
*で示される炭素原子はキラル中心を構成し；
Xは-C(O)-又は-CH2-であり；
R1は炭素原子数1から8のアルキル又は-NHR3であり；
R2は水素、炭素原子数1から8のアルキル、又はハロゲンであり；かつ
R3は水素であり；
非置換の炭素原子数1から8のアルキル、又は炭素原子数1から8のアルコキシ、ハロ、アミノ、若しくは炭素原子数1から4のアルキルアミノで置換されている炭素原子数1から8のアルキル；
炭素原子数3から18のシクロアルキル；
非置換フェニル、又は炭素原子数1から8のアルキル、炭素原子数1から8のアルコキシ、ハロ、アミノ、若しくは炭素原子数1から4のアルキルアミノで置換されているフェニル；
非置換ベンジル、又は炭素原子数1から8のアルキル、炭素原子数1から8のアルコキシ、ハロ、アミノ、炭素原子数1から4のアルキルアミノ、若しくは-COR4で置換されているベンジルであり、ここで、R4は水素であり；
非置換の炭素原子数1から8のアルキル、又は炭素原子数1から8のアルコキシ、ハロ、アミノ、若しくは炭素原子数1から4のアルキルアミノで置換されている炭素原子数1から8のアルキル；
炭素原子数3から18のシクロアルキル；
非置換フェニル、又は炭素原子数1から8のアルキル、炭素原子数1から8のアルコキシ、ハロ、アミノ、若しくは炭素原子数1から4のアルキルアミノで置換されているフェニル；又は
非置換ベンジル、又は炭素原子数1から8のアルキル、炭素原子数1から8のアルコキシ、ハロ、アミノ、若しくは炭素原子数1から4のアルキルアミノで置換されているベンジルである。)。
【００６２】
本発明の化合物は、購入することもできるし、又は本明細書に開示の特許又は特許広報に記載されている方法に従って調製することもできる。また、光学的に純粋な化合物を不斉合成することもできるし、或いはまた知られている分割剤若しくはキラルカラムとその他の標準的有機合成化学の技術を使って分割することもできる。
【００６３】
本発明の様々な免疫調節性化合物は、１以上のキラル中心を含み、かつ鏡像異性体のラセミ混合物、又はジアステレオマーの混合物として存在することができる。本発明は、前記化合物の立体異性的に純粋な形態の使用、並びにこれらの形態の混合物の使用を包含する。例えば、本発明の特定の免疫調節性化合物の等量又は等量でない鏡像異性体を、本発明の方法、及び組成物に使用することができる。これらの異性体は、非対称的に合成されるか、或いはキラルカラム又はキラル分割剤などの標準技術を用いて分割してもよい。例えば、Jacques, Jらの文献「鏡像異性体、ラセミ化合物、及び分割(Enantiomers, Racemates and Resolutions」(Wiley-Interscience, New York, 1981))；Wilen, S.H.らの論文, Tetrahedron 33:2725 (1977)；Eliel, E.L.の文献「炭素化合物の立体化学(Stereochemistry of Carbon Compounds)」(McGraw-Hill, NY, 1962)；及びWilen, S.H.の文献「分割剤及び光学分割の表(Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions)」p.268 (E.L. Eliel編, Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN, 1972)を参照されたい。
【００６４】
本発明で使用される好ましい化合物は、分子量が約1,000g/mol未満の有機小分子であって、タンパク質、ペプチド、オリゴヌクレオチド、オリゴ糖又はその他の巨大分子ではない。
示された構造、及びその構造に与えられた名称の間に矛盾がある場合、示された構造がより重みを与えられるべきであることに注意されたい。さらに、構造又は構造の一部の立体化学が、例えば太線又は点線により示されていない場合、その構造又は構造の一部は、その全ての立体異性体を包含するとして解釈されるべきである。
【００６５】
(5.3第二活性剤)
本発明の方法において、免疫調節性化合物を、他の薬理学的活性化合物("第二活性剤")と組み合わせることができる。本発明は、低レプチン状態に関連した障害の治療、予防、及び/又は管理において相乗効果を有し得る特定の組合せを包含する。また、免疫調節性化合物は、特定の第二活性剤に関連した有害作用を緩和するように作用し得る。
また、本発明は、未変性、天然型、及び組換えタンパク質の使用を包含する。
【００６６】
さらに、本発明は、天然型タンパク質の変異体及び誘導体(例えば修飾形態)を包含する。これらは、天然型タンパク質に基づき、インビボにおいてそのタンパク質の少なくとも一部の薬理学的活性を示す。変異体の例を挙げると、1以上のアミノ酸残基が天然型形態のタンパク質の対応する残基と異なるタンパク質があるが、これらに制限されない。また、用語「変異体」に包含されるものには、天然型形態(例えば糖化形態)に通常存在する炭水化物部位を欠いたタンパク質がある。誘導体の例をあげると、ペグ化誘導体、及び融合タンパク質、例えば、対象のタンパク質又はタンパク質の活性部位にIgG1又はIgG3を融合することにより形成されるタンパク質などがあるが、これらに制限されない。例えば、Penichet, M.L. 及び Morrison, S.L.の論文, J. Immunol. Methods 248:91-101 (2001)を参照されたい。
【００６７】
本発明の一実施態様において、大分子活性剤は、免疫調節性化合物の投与に関連した有害作用を軽減、除去、又は防止する。特定の免疫調節性化合物、及び治療される疾患又は障害に依存して、有害作用は、制限されないが、眠気及び傾眠、目まい及び起立性低血圧、好中球減少、好中球減少から生じる感染、HIVウイルス量増加、徐脈、スティーヴェンズ-ジョンソン症候群、及び中毒性表皮壊死症、並びに発作(例えばけいれん大発作)を含み得る。
【００６８】
また、小分子の第二活性剤も、免疫調節性化合物の投与に関連した有害作用を軽減するように使用することができる。しかし、幾つかの大分子のように、多くのものは、免疫調節性化合物とともに投与(例えば前、後、又は同時投与)された場合に相乗効果を提供することができると考えられる。
【００６９】
特定の第二活性剤は、下記のものを含むが、これらに制限されない：制限されないが、クロラムフェニコール、テトラサイクリン、クロルテトラサイクリン、スルファサラジン、アンピシリン、ペニシリン、及びトリメトプリム-スルファメトキサゾールなどの抗生物質；制限されないが、メトホルミン、及びチアゾリジンジオン("TZD")などの血糖降下薬；制限されないが、フィブラート、及びスタチンなどの脂質降下薬；フルオキセチン；クエン酸クロミフェン；性腺刺激ホルモン；GnRH；制限されないが、ベタメタゾン、クロベタゾール、アムシノニド、デソキシメタゾン、ジフロラゾン、フルオシノニド、ハルシノニド、モメタゾン、アムシノニド、フルチカゾン、トリアムシノロン、フルオシノロン、フルランドレノリド、ヒドロコルチゾン、アルクロメタゾン、デソニド、フルメタゾン、及びプラモキシンなどのコルチコステロイド；ミノキシジル；フィナステリド；制限されないが、プラムリンチド(シムリン)などのアミリン及びその合成類似体；及びクロミプラミンである。
【００７０】
別の実施態様において、本発明の方法は、低レプチン状態に関連した障害の治療、予防、及び/又は管理に使用される他の方法と組み合わせて使用することができる。他の方法の例を挙げると、制限されないが、手術及び心理療法があるが、これらに制限されない。
本発明の特定の方法は、本発明の免疫調節性化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくはプロドラッグを、1以上の第二活性剤又は他の療法と組み合わせて投与することを含む。免疫調節性化合物、及び第二活性剤、並びに他の療法の例は、本明細書中に記載するものである。
【００７１】
患者への免疫調節性化合物及び第二活性剤の投与は、同一又は異なる投与経路により、同時に又は連続して生じ得る。特定の活性剤に対して使用される特定の投与経路の適合性は、活性剤自体(例えば、血流に入る前に分解することなく経口的に投与することができるかどうか)、及び治療される疾患に依存するであろう。本発明の免疫調節性化合物の特定の投与経路は、経口である。第二活性剤又は本発明の成分の特定の投与経路は、当業者に公知のものである。例えば、「メルクマニュアル(The Merck Manual)」, 1023-1041 (第17版, 1999)を参照されたい。
【００７２】
投与される第二活性剤の量は、特定の薬剤、治療又は管理される疾患の種類、疾患の重症度及び段階、及び本発明の免疫調節性化合物の量、並びに現在患者に投与されている任意の付加的活性剤に基づいて決定することができる。当業者は、技術的に公知の従来手順に従って具体的な量を決定することができる。初めに、療法に従来使用されている第二活性剤の量から開始し、上記要因に従ってその量を調節することができる。例えば、「医師用卓上参考書(Physician's Desk Reference)」(第60版, 2006)を参照されたい。
【００７３】
本発明の一実施態様において、第二活性剤は、約1〜約1000 mg、約5〜約500 mg、約10〜約350 mg、又は約50〜約200 mgの量で、一日に一度又は二度、静脈内又は皮下に投与される。第二活性剤の具体的な量は、使用される特定の薬剤、治療又は管理される疾患の種類、疾患の重症度及び段階、及び本発明の免疫調節性化合物の量、並びに現在患者に投与されている任意の付加的活性剤に依存するであろう。
一実施態様において、免疫調節性化合物は、約0.1〜約150 mg、好ましくは約1〜約25 mg、さらに好ましくは約2〜約10 mgの量で、従来療法の使用前、使用時、又は使用後に、単独で又は本明細書中に開示した第二活性剤と組み合わせて、経口的に毎日投与することができる。
【００７４】
(5.4 治療及び予防方法)
本発明の方法は、低レベルの血漿レプチン(低レプチン状態)に関連した様々な疾患及び/又は障害を、治療、予防、及び/又は管理する方法を包含する。他に指定のない限り、本明細書中に使用される用語「低レプチン状態に関連した疾患又は障害」は、前記疾患又は障害のない患者よりも低い血漿レプチンレベルにより特徴付けられるか、又はそれに伴って生じる疾患又は障害を意味する。また、その用語は、血漿レプチンレベルの変調(例えば増加)に対して有利に応答する疾患又は障害を包含する。
【００７５】
前記障害の例を挙げると：制限されないが、リポジストロフィー症候群及び拒食症などの代謝障害及び摂食障害；低レプチン症(hypoleptinemia)関連神経内分泌機能不全；低レプチン症関連免疫不全；視床下部性無月経；制限されないが、末端肥大症(下垂体腺腫)などのCNS障害；低レプチン症関連不妊症；皮膚損傷；外傷；長期的血液透析；及び脱毛があるが、これらに制限されない。
別の実施態様において、本発明は、免疫調節性化合物を単独又は別の薬剤若しくは療法と組み合わせて投与することを含む、制限されないが肥満症及び糖尿病などの代謝障害を治療、予防、及び/又は管理する方法を包含する。
【００７６】
また、本発明は、これらの障害に関連した症状の治療、予防、及び/又は管理を包含する。例えば、本発明は、制限されないが、リポジストロフィーに共通して付随する、神経内分泌欠陥(neuroendocrine defect)、免疫不全、高グルコース及びトリグリセリドレベル、及び肝臓肥大などの症状を治療、予防、及び/又は管理する方法を包含する。また、本発明は、制限されないが、内分泌異常及び代謝異常(例えば、無月経、思春期遅発症、甲状腺機能低下症、副腎皮質機能亢進症、並びに成長ホルモン軸、アディポカイン循環、骨代謝、及び免疫機能の変化)などの症状を治療、予防、及び/又は管理する方法を包含する。
【００７７】
本発明により包含される方法は、1以上の本発明の免疫調節性化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくはプロドラッグを、低レプチン状態に関連した障害に罹患している、又は罹患する可能性のある患者(例えばヒト)に投与することを含む。
【００７８】
本発明の一実施態様において、本発明の免疫調節性化合物は、約0.10〜約150 mg/日の量で、単回又は分割一日用量で、経口投与することができる。他の実施態様において、免疫調節性化合物は、一日あたり約0.1〜約1 mg、一日あたり約1〜約25 mg、一日あたり約10〜約25 mg、一日あたり約50 mg、又は一日あたり約25 mgの量で投与される。他の実施態様において、免疫調節性化合物は、一日おきに約0.1〜約5 mg、又は一日おきに約10〜約50 mg投与される。他の実施態様において、免疫調節性化合物は、4-(アミノ)-2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-イソインドリン-1,3-ジオン、又は3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンである。
【００７９】
(5.4.2 サイクル療法)
特定の実施態様において、本発明の予防薬又は治療薬は、患者へ循環して投与される。サイクル療法は、ある期間の活性剤の投与、それに続くある期間の休薬、及びこの逐次的投与の反復に関連している。サイクル療法は、1種以上の療法に対する耐性の発生を低下し、一療法の副作用を避けるか若しくは軽減し、及び/又は治療の有効性を向上することができる。
【００８０】
結果的に本発明のひとつの特定の実施態様において、本発明の免疫調節性化合物は、単回用量又は分割用量で、4〜6週間サイクルで毎日投与され、約1又は2週間の休薬期間を伴う。さらに、本発明は、投薬サイクルの頻度、回数、及び長さを増大することができる。従って、別の本発明の特定の実施態様は、それが単独で投与される場合の典型よりもより多いサイクルでの本発明の免疫調節性化合物の投与を包含する。さらに別の本発明の特定の実施態様において、本発明の免疫調節性化合物は、第二活性成分も投与されていない患者において、典型的に用量制限毒性を生じるサイクルよりもより多い回数で投与される。
【００８１】
一実施態様において、本発明の免疫調節性化合物は、約0.1〜約150 mg/日で、3又は4週間継続して毎日投与され、続いて1又は2週間休薬される。一実施態様において、4-(アミノ)-2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-イソインドリン-1,3-ジオンは、開始用量0.1〜5 mgで、療法が許容される限り1〜10 mg/日の用量増加(毎週)、最大用量50 mg/日を伴って、継続して毎日投与される。別の実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、4又は6週のサイクルにおいて、3〜4週間約1、5、10、又は25 mg/日の量で投与され、続いて1〜2週間休薬される。別の実施態様において、3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンは、4又は6週のサイクルにおいて、3〜4週間約10 mg/日の量で投与され、続いて1〜2週間休薬される。
【００８２】
本発明の一実施態様において、4〜6週間のサイクル時に、本発明の免疫調節性化合物及び第二活性成分は、経口で投与され、本発明の免疫調節性化合物の投与は、第二活性成分よりも30〜60分早く行われる。別の本発明の実施態様において、本発明の免疫調節性化合物及び第二活性成分の組合せは、毎サイクルごとに約90分かけた静脈内点滴により投与される。特定の一実施態様において、一サイクルは、約1〜約25 mg/日の3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン、及び約50〜約200 mg/m2/日の第二活性成分を3〜4週間、毎日投与し、その後1又は2週間休薬することを含む。別の特定の実施態様において、各サイクルは、約5〜約10 mg/日の4-(アミノ)-2- (2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-イソインドリン-1,3-ジオン、及び約50〜約200 mg/m2/日の第二活性成分を3〜4週間投与し、その後1又は2週間休薬することを含む。典型的には、組合せ治療が患者に投与される時のサイクル数は約1〜約24サイクル、より典型的には約2〜約16サイクル、さらにより典型的には約4〜約3サイクルであろう。
【００８３】
(5.5. 医薬組成物及び剤形)
医薬組成物を個々の単位剤形の調製に使うことができる。本発明の医薬組成物及び剤形は、本発明の免疫調節性化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、若しくはプロドラッグ、及び第二活性剤を含む。本発明の医薬組成物及び剤形はさらに、1種以上の賦形剤を含むことができる。
【００８４】
本発明の医薬組成物及び剤形はまた、1種以上の追加の活性成分を含むこともできる。したがって、本発明の医薬組成物及び剤形は本明細書に開示されている活性成分(例えば、免疫調節性化合物と第二活性剤)を含む。任意選択の第二活性剤又は追加の活性成分の例は、本明細書に開示されている(例えば、5.3項参照)。
【００８５】
本発明の単位剤形は、患者に対して、経口、経粘膜(例えば、鼻腔、舌下、膣、口腔又は肛門)、非経口(例えば、皮下、静脈内、ホーラス注射、筋肉内又は動脈内)、局所(例えば、点眼又はその他の眼科用製剤)、経皮、又は皮膚投与するのに好適である。剤形の例としては、下記のものが挙げられるが、これらに限定されない：錠剤;カプレット剤;軟ゼラチンカプセル剤などのカプセル剤;カシェ剤;トローチ剤;ロゼンジ;拡散剤;坐薬;散剤;エアロゾル(例えば、経鼻スプレー剤又は吸入剤);ゲル剤;懸濁剤(例えば、水溶液又は非水溶液懸濁剤、水中油乳剤又は油中水乳剤)、液剤、及びエリキシル剤などの患者に経口又は経粘膜投与するのに好適な液状剤形;患者に非経口投与するのに好適な液状剤形;局所投与に好適な点眼液又はその他の眼科用製剤;並びに再構成によって患者に非経口投与するのに好適な液状剤形にすることができる無菌固形剤(例えば、結晶又は非晶質固形剤)。 
【００８６】
本発明の剤形の組成、形状及び種類は、概してその用途によって異なる。例えば、疾患の急性期治療に使われる剤形が含有する1種以上の活性剤の量は、同じ疾患の慢性期治療に使われる剤形に比べて多くすることができる。同様に、非経口剤形が含有する1種以上の活性剤の量は、同じ疾患の治療に使われる経口製剤に比べて少なくすることができる。本発明に包含される具体的な剤形が互いにどのように異なっているかは、上記例及びその他を含めて当業者には容易に理解できよう。一般に、Remington：「薬学の科学及び実務(The Science and Practice of Pharmacy)」, 第20版 Mack Publishing, Easton PA (2000)を参照されたい。)。
【００８７】
典型的な医薬組成物及び剤形は、1種以上のの賦形剤を含む。好適な賦形剤については薬学分野の技術者には良く知られており、好適な医薬品添加物の非限定的な例は、本明細書に記載されている。特定の賦形剤がある医薬組成物又は剤形に取り込むのに好適であるかどうかは、当技術分野で良く知られている種々の要因によって決まる。その要因の例としては剤形を患者に投与する仕方が挙げられるが、これらに限定されるわけではない。例えば、錠剤などの経口剤形は、非経口剤形に使用するには適さない医薬品添加物を含有することができる。特定の医薬品添加物の適性はまた、剤形中の具体的な活性成分によっても決めることができる。例えば、ある種の活性成分の分解は、ラクトースなどの賦形剤によって、又は水に曝露した場合に加速される可能性がある。特に、第一級又は第二級アミンを含む活性成分は、上記のように加速して分解されやすい。したがって、本発明は、ラクトース及びその他の単糖類又は二糖類を、仮に含有していたとしても、極少量しか含有しない医薬組成物及び剤形を包含する。本明細書に使用するように、用語「ラクトースフリー」とは、仮にラクトースが存在していたとしても、その量は、有効成分の分解速度を実質的に高めるには不十分な量であることを意味する。
【００８８】
本発明のラクトースフリー組成物は、当技術分野で良く知られている賦形剤を含むことができ、そのような賦形剤は、例えば米国薬局方(USP)25-NF20 (2002)に記載されている。一般に、ラクトースフリー組成物は、有効成分、結合剤/充填剤及び滑沢剤を、医薬として適合性でかつ医薬として許容し得る量で含む。好ましいラクトースフリー剤形は、有効成分、微結晶セルロース、アルファ化デンプン及びステアリン酸マグネシウムを含む。
【００８９】
本発明はさらに、有効成分を含む無水の医薬組成物及び剤形を包含する。水はある種の化合物の分解を促進することがあるためである。例えば、水の添加(例えば5％)は、有効期間又は時間の経過に対する製剤の安定性などの特性を決定するために、長期保存をシュミレートする手段として医薬品技術分野では広く容認されている(例えば、Jens T. Carstensenの文献(「薬剤安定性：原理と実際(Drug Stability: Principles & Practice), 第2版, Marcel Dekker, NY, NY, 1995, pp. 379-80)参照)。事実、水及び熱は、一部の化合物の分解を促進する。水分及び/又は湿気は、一般に製剤の製造、取り扱い、包装、保管、出荷及び使用時に遭遇するものであるから、製剤に及ぼす水の影響は非常に重大となる可能性がある。
【００９０】
本発明の無水の医薬組成物及び剤形は、無水又は低水分含量の成分を使い、低水分又は低湿度条件で調製することができる。ラクトースと、第一級又は第二級アミンを含む有効成分少なくとも1つとを含む医薬組成物及び剤形は、製造、包装、及び/又は保管時に水分及び/又は湿気との実質的な接触が予想される場合には、無水であることが好ましい。
【００９１】
無水の医薬組成物は、その無水性が保持されるように調製及び保管すべきである。したがって、無水組成物は、好適な処方キットに含むことができるように、水への曝露を予防することが知られている材料を使って包装することが好ましい。好適な包装の例としては、気密封止フォイル、プラスチック、単位用量容器(例えば、バイアル)、ブリスターパック、及びストリップパックが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９２】
本発明はさらに、有効成分の分解速度を下げるような化合物を1種以上含む医薬組成物及び剤形を包含する。このような化合物を本明細書では「安定剤」と呼び、その例としては、アスコルビン酸などの酸化防止剤、pH緩衝剤、又は塩緩衝剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９３】
賦形剤の量及び種類と同様に、剤形中の活性成分の量及びその具体的な種類も各種要因によって異なる。その要因の例としては、剤形が患者に投与される経路などが挙げられるが、これらに限定されない。しかし、本発明の典型的な剤形は、約0.10から約150mgの量の免疫調節性化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくはプロドラッグを含む。典型的な剤形は、約0.1、1、2、5、7.5、10、12.5、15、17.5、20、25、50、100、150、又は200mgの量の本発明の免疫調節性化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくはプロドラッグを含む。1つの特定の実施態様では、好ましい剤形は、約1、2、5、10、25又は50mgの量の4-(アミノ)-2-(2,6-ジオキソ(3-ピペリジル))-イソインドリン-1,3-ジオンを含む。1つの具体的な実施態様では、好ましい剤形は、約5、10、25又は50mgの量の3-(4-アミノ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオンを含む。典型的な剤形は、1〜約1,000mg、約5〜約500mg、約10〜約350mg、又は約50〜約200mgの量の第二活性成分を含む。当然、その薬剤の具体的な量は、使用する具体的な薬剤、治療又は管理される疾患又は障害の種類、並びに本発明の免疫調節性化合物及び併用して患者に投与される任意選択の追加の活性剤の量によって決まる。
【００９４】
(5.5.1 経口剤形)
経口投与に好適な本発明の医薬組成物は、例えば、これらに限定されるわけではないが、錠剤(例えば、チュアブル錠)、カプレット剤、カプセル剤及び液剤(例えば、フレーバーシロップ剤)などの個別の剤形として提供することができる。このような剤形は、所定量の有効成分を含有しており、当業者には良く知られている薬学の方法で調製することができる。例えば、一般に、Remington：「薬学の科学及び実務(The Science and Practice of Pharmacy)」, 第20版 Mack Publishing, Easton PA (2000)を参照されたい。
【００９５】
本発明の典型的な経口製剤は、有効成分を少なくとも1つの賦形剤と、従来の医薬混合技術に従って緊密な混合物の状態に組み合わせることにより調製される。賦形剤は、投与するのに望ましい製剤の形態によって、多様な形態を取り得る。例えば、経口の液剤又はエアゾール剤用に好適な賦形剤の例としては、これらに限定されないが、水、グリコール、油、アルコール、矯味矯臭剤、保存剤及び着色剤が挙げられる。固形経口製剤(例えば、散剤、錠剤、カプセル剤及びカプレット剤)用に好適な賦形剤の例としては、これらに限定されないが、デンプン、砂糖、微結晶セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤及び崩壊剤が挙げられる。
【００９６】
その投与しやすさから、錠剤とカプセル剤が最も有利な経口製剤の代表であり、そのような場合においては固形の賦形剤が使われる。所望であれば、錠剤を、標準的な水溶液又は非水溶液技術によってコーティングすることができる。このような剤形は、薬学の方法のいずれを用いても調製することができる。一般に、医薬組成物及び剤形は、有効成分を液状担体、微細に分割した固形担体、又はその両方と均一また緊密に混合し、次いで必要であれば、その混合物に形を付与して所望の製品とすることによって調製される。
【００９７】
例えば、錠剤は、圧縮又は成形によって調製することができる。圧縮錠剤は、場合によって賦形剤と混合した、粉末又は顆粒などの自由流動形態をした有効成分を、好適な機械で圧縮することによって調製することができる。成形錠剤は、不活性の液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を、好適な機械で成形することによって調製することができる。
【００９８】
本発明の経口剤形に使うことができる賦形剤の例としては、結合剤、充填剤、崩壊剤及び滑沢剤が挙げられるが、これらに限定されない。医薬組成物及び剤形用に好適な結合剤の例としては、下記のものが挙げられるが、これらに限定されない：トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、若しくはその他のデンプン、ゼラチン、アラビアゴムなどの天然若しくは合成ゴム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、その他のアルギン酸塩、粉末トラガント、グアーガム、セルロース及びその誘導体(例えば、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム)、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、アルファ化デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(例えば、No. 2208、2906、2910)、微結晶セルロース、並びにこれらの混合物。
【００９９】
微結晶セルロースの好適な形態の例としては、AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103、AVICEL RC-581、AVICEL-PH-105(FMC Corporation、American Viscose Division、Avicel Sales、Marcus Hook、ペンシルバニア州から入手可能)として市販の物質及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。1つの具体的な結合剤は、AVICEL RC-581として市販されている微結晶セルロースとカルボキシメチルセルロースナトリウムとの混合物である。好適な無水又は低水分賦形剤又は添加剤の例としては、AVICEL-PH-103(商標)及びStarch 1500 LMが挙げられる。
【０１００】
本明細書に開示されている医薬組成物及び剤形用に好適な充填剤の例としては、タルク、炭酸カルシウム(顆粒又は粉末)、微結晶セルロース、粉末セルロース、デキストラート、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、デンプン、アルファ化デンプン、及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の医薬組成物中の結合剤又は充填剤は、通常、医薬組成物又は製剤の約50から約99重量パーセント存在する。
【０１０１】
水溶液環境に曝露されると崩壊するような錠剤を提供するために、本発明の組成物には崩壊剤が使われる。過大量の崩壊剤を含有する錠剤は保管中に崩壊する恐れがあり、一方、過小量の崩壊剤を含有する錠剤は、所望の速度又は所望の条件下で崩壊しない恐れがある。したがって、過大量又は過小量であるために有効成分の放出を不利な形に変えてしまうことのない、十分な量の崩壊剤を使って、本発明の固形経口剤形を形成するべきである。使用される崩壊剤の量は製剤の種類によって異なるが、その量は、当業者ならば容易に見分けることができる。典型的な医薬組成物は、崩壊剤を約0.5から約15重量パーセント含み、好ましくは約1から約5重量パーセント含む。
【０１０２】
本発明の医薬組成物及び剤形に使用できる崩壊剤は、下記のものが挙げられるが、これらに限定されない：寒天、アルギン酸、炭酸カルシウム、微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポラクリリンカリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ジャガイモ又はタピオカデンプン、その他のデンプン、アルファ化デンプン、その他のデンプン、粘土、その他のアルギン、その他のセルロース、ガム、並びにそれらの混合物。
【０１０３】
本発明の医薬組成物及び剤形に使用できる滑沢剤は、下記のものが挙げられるが、これらに限定されない：ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、鉱物油、軽鉱物油、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、その他のグリコール、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、水素添加植物油(例えば、落花生油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油及び大豆油)、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル、寒天、及びそれらの混合物。追加の滑沢剤の例としては、サイロイドシリカゲル(メリーランド州ボルチモア、W.R. Grace Co.社製、AEROSIL 200)、合成シリカの凝集エアロゾル(テキサス州プラノ、Degussa Co.社販売)、CAB-O-SIL(マサチューセッツ州ボストン、Cabot Co.社販売の発熱性二酸化ケイ素製品)、及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。滑沢剤を使用する場合、通常、それが組み込まれる医薬組成物又は剤形の約1重量パーセント未満の量で使用される。
本発明の好ましい固形経口剤形は、本発明の免疫調節性化合物、無水ラクトース、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸、コロイド状無水シリカ及びゼラチンを含む。
【０１０４】
(5.5.2 放出遅延剤形)
本発明の有効成分は、当業者には良く知られている放出制御手段又は送達デバイスによって投与することができる。その例としては、いずれも引用により本明細書に取り込まれている、米国特許第3,845,770号、同第3,916,899号、同第3,536,809号、同第3,598,123号、同第4,008,719号、同第5,674,533号、同第5,059,595号、同第5,591,767号、同第5,120,548号、同第5,073,543号、同第5,639,476号、同第5,354,556号及び同第5,733,566号に記載されるものが挙げられるが、これらに限定されない。このような剤形は、例えば、ヒドロプロピルメチルセルロース、その他ポリマーマトリクス、ゲル、透過性膜、浸透圧システム、多層コーティング、微粒子、リポソーム、微小球、又はそれらの組み合わせを使って1種以上の有効成分を低速で又は制御して放出し、種々の比率で所望の放出プロファイルを提供するために使うことができる。本明細書に記載のものを含めて、当業者に知られている好適な放出制御製剤は、本発明の有効成分と一緒に使う目的で容易に選択することができる。したがって、本発明は、これらに限定されないが、制御放出に適合された錠剤、カプセル剤、ジャルキャップ剤、及びカプレット剤などの経口投与に好適な単位製剤を包含する。
【０１０５】
全ての放出制御医薬品は、非放出制御医薬品によって達成される薬剤療法を上回るように薬剤療法を改善することを共通の目的としている。理想的には、最も望ましい形に設計された放出制御製剤を医療において使用することは、最小限の薬物を使用して状態を最短の時間で治癒させる又は制御することを特徴とする。放出制御製剤の利点としては、薬剤の活性時間を長くすること、薬剤投与回数を減らすこと、患者のコンプライアンスを高めることなどが挙げられる。また、放出制御製剤は、作用発現の時間又は薬剤の血中レベルなどその他の特性に影響を及ぼすために使うことができ、したがって、副作用(例えば、有害作用)の発現に影響を及ぼすこともできる。
【０１０６】
たいていの放出制御製剤は、最初に、所望の治療効果を即座に発揮する量の薬剤を放出し、その後、長期にわたってそのレベルの治療効果又は予防効果を維持する量の薬剤を徐々にまた持続的に放出するように設計されている。体内でこの一定レベルの薬剤を維持するためには、それが代謝され、体外に排出される量に取って代わる速度で、薬剤が剤形から放出されなければならない。有効成分の放出制御は、これらに限定されるわけではないが、pH、温度、酵素、水、又はその他の生理学的条件若しくは化合物を含む種々の条件によって刺激される。
【０１０７】
(5.5.3 非経口剤形)
非経口剤形は、これらに限定されるわけではないが、皮下、静脈内(ボーラス注射を含む)、筋肉内及び動脈内を含めた種々の経路で、患者に投与される。一般に、非経口剤形の投与は、患者が生まれながら有する汚染に対する防御手段を迂回するものであるため、そのような剤形は滅菌されていることが好ましく又は患者に投与する前に殺菌できるものであることが好ましい。非経口剤形の例としては、これらに限定されるわけではないが、そのまま注射できる液剤、医薬として許容し得る注射用の媒体にそのまま溶解又は懸濁できる乾燥製剤、そのまま注射できる懸濁剤、及び乳濁剤が挙げられる。
【０１０８】
本発明の非経口剤形を提供するのに使うことができる好適な媒体は、当業者に周知である。その例としては、注射用水(米国薬局方);これらに限定されないが、食塩注射剤、リンゲル注射剤、デキストロース注射剤、デキストロース及び食塩注射剤、並びに乳酸加リンゲル注射剤などの水性媒体;これらに限定されないが、エチルアルコール、ポリエチレングリコール及びポリプロピレングリコールなどの水混和性媒体;並びに、これらに限定されないが、トウモロコシ油、綿実油、落花生油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル及び安息香酸ベンジルなどの非水性媒体などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０９】
本明細書に開示の有効成分の1種以上の溶解性を高めるような化合物もまた、本発明の非経口剤形に組み込むことができる。例えば、シクロデキストリン及びその誘導体は、本発明の免疫調節性化合物及びその誘導体の溶解性を高めるために使用することができる。例えば、引用によって本明細書に取り込まれている米国特許第5,134,127号を参照されたい。
【０１１０】
(5.5.4. 局所適用型及び粘膜適用型剤形)
本発明の局所適用型及び粘膜適用型剤形の例としては、スプレー剤、エアロゾル剤、液剤、乳濁剤、懸濁剤、点眼剤若しくはその他の眼科用製剤、又は当業者に公知のその他の形態の製剤などが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、Remington：「薬学の科学及び実務(The Science and Practice of Pharmacy)」, 第20版 Mack Publishing, Easton PA (2000)、及び「医薬剤形概論(Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms)」, 第4版, Lea & Febiger, Philadelphia (1985)を参照されたい。口腔内の粘膜組織を治療するのに好適な剤形は、口内洗剤又は経口ゲルとして製剤化することができる。
【０１１１】
本発明に包含される局所適用型及び粘膜適用型剤形を提供するのに使用することができる好適な賦形剤(例えば、担体及び希釈剤)及びその他の材料については、薬学技術分野の業者には良く知られており、それらは、所与の医薬組成物又は剤形が適用される特定の組織によって決まる。この事実を踏まえた上で、代表的な賦形剤の例としては、非毒性で医薬として許容し得る液剤、乳濁剤又はゲル剤を形成するための水、アセトン、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブタン-1,3-ジオール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、鉱油、及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。所望であれば、湿潤剤又は保湿剤も医薬組成物又は剤形に添加することができる。このような追加の成分の例は、当技術分野では周知である。例えば、Remington：「薬学の科学及び実務(The Science and Practice of Pharmacy)」, 第20版 Mack Publishing, Easton PA (2000)を参照されたい。
【０１１２】
1つ以上の有効成分の送達を改善するために、医薬組成物又は剤形のpHを調整してもよい。同様に、送達を改善するために、溶媒担体の極性、そのイオン強度、又は張度を調整してもよい。医薬組成物又は剤形にステアリン酸塩などの化合物を添加して、1種以上の有効成分の親水性又は親油性を有利に変え、それによって送達を改善することもできる。この点では、ステアリン酸塩は、製剤の脂質媒体としての役目をし、乳化剤又は界面活性剤として、また送達向上剤又は浸透向上剤としての役目を果たす。得られる組成物の特性をさらに調整するために、有効成分の各種塩、水和物又は溶媒和物も使用することができる。
【０１１３】
(5.5.5 キット)
概して、本発明の有効成分は、同時に又は同じ投与経路で患者に投与しないことが好ましい。したがって、本発明は、医療従事者が使用する場合に、適性量の有効成分を簡便に患者に投与することができるようなキットを包含する。
本発明の代表的なキットは、本発明の免疫調節性化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体、若しくはプロドラッグの剤形を含む。本発明が包含するキットは、追加の活性成分をさらに含むことができる。追加の活性成分の例としては、本明細書に記載のものが挙げられるが、これらに限定されない(5.3項参照)。
本発明のキットは、有効成分を投与するのに使われるデバイスも含むことができる。そのようなデバイスの例としては、注射器、点滴用バッグ、パッチ及び吸入器が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１４】
本発明のキットは、移植用の細胞又は血液、及び1種以上の有効成分を投与するのに使用することができる医薬として許容し得る媒体をさらに含むことができる。例えば、ある有効成分が、非経口投与するためには再構成しなければならない固形の状態で提供される場合、キットは、その中で有効成分が溶解して非経口投与に好適な、粒子を含まない滅菌溶液を形成する、好適な媒体の密封容器を含む。医薬として許容し得る媒体の例としては、注射用水(米国薬局方);これらに限定されないが、食塩注射剤、リンゲル注射剤、デキストロース注射剤、デキストロース及び食塩注射剤、並びに乳酸加リンゲル注射剤などの水性媒体;これらに限定されないが、エチルアルコール、ポリエチレングリコール及びポリプロピレングリコールなどの水混和性媒体;並びに、これらに限定されないが、トウモロコシ油、綿実油、落花生油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル及び安息香酸ベンジルなどの非水性媒体などが挙げられるが、これらに限定されない。
【実施例】
【０１１５】
(6.実施例)
本発明の特定の実施態様を、下記の非制限的実施例に示す。
(6.1 実験手順)
(6.1.1間葉肝細胞からの脂肪細胞の産生)
ヒト間葉肝細胞(MSC)、及び脂肪細胞分化培地を、Cambrex (Walkersville, MD)から得た。MSCを、MSC Basic Medium (MSCBM)中1ウェルあたり40,000細胞で24ウェルプレートにおいて播種し、10% 血清を補充し、かつ7日間培養した。100％コンフルエントで、インキュベーション/維持の3サイクルにより、脂肪細胞分化を刺激した。各サイクルは、3日間MSCにAdipogenic Induction Medium (AIM)を供給、続いてAdipogenic Maintenance Medium (AMM)中で1日培養から構成される。AIM及びAMMは、10% 血清、Pen-Sterep、及びL-Gluを含み、インスリン、デキサメタゾン、インドメタシン、及びIBMX、又はインスリンのみを供給した。インキュベーション/維持の3サイクル終了後、MSCをAMM中でさらに3日間培養し、分析した。手順の概略図を図１に示す。
【０１１６】
脂肪細胞分化における免疫調節性化合物の効果を研究するために、MSCをDMSO、又は異なる濃度の免疫調節性化合物の存在下で分化させた。DMSO、及び免疫調節性化合物を、分化及び維持の段階で培地に加えた。細胞の表現型特徴付けを、トリグリセリド含有量及びアディポカイン分泌などの脂肪細胞標識に対して行った。
【０１１７】
(6.1.2 タンパク質分泌)
レプチン及びアディポネクチンを、クアンティカイン(quantikine)ヒトレプチン、及びヒトアディポネクチン イムノアッセイキット(R&D Systems, Minneapolis, MN)を用いて測定した。レプチン分泌測定のために、培地100μlを、分化過程の回収時間に応じて2又は5倍に希釈した細胞板から回収し、製造業者提供プロトコルに従って分析した。結果は希釈係数に対して補正した。アディポネクチン分泌については、培地50μlを回収し、直接分析した。
【０１１８】
(6.1.3 オイルレッド染色)
脂肪細胞中の脂肪含有量を、オイルレッドO(Oil Red O)染色により定量化した。細胞をPBSで洗浄し、かつ3.7%ホルムアルデヒドで15分間固定した。脂質胞を、60%イソプロパノール中の0.5%オイルレッドOで30分間、37℃で染色した。次に、細胞を水で3回洗浄し、オイルレッドO含有量を100％プロパノールに溶解した。その溶液の光学密度を510nmで測定した。
【０１１９】
(6.1.4 MSC生存度及び増殖)
MSC生存度を、細胞増殖キットII(XTT)(Roche, Indianapolis, IN)を用いて評価した。MSC増殖は、5-ブロモ-2'-デオキシ-ウリジン標識化及び検出キットIII(BrdU)(Roche, Indianapolis, IN)を用いて評価した。MSCを96ウェルプレートに播種し、かつDMSO又は異なる濃度の免疫調節性化合物の存在下で2日間培養した。XTT及びBrdUを、細胞に20時間加えた。MSCの生存度及び増殖を、製造業者提供説明書に従って評価した。
【０１２０】
(6.1.5 ノーザンブロット)
MSC誘導脂肪細胞のRNAを、RNeasy脂質組織キット(RNeasy lipid tissue kit)(Qiagen, Valencia, CA)で単離した。全RNAの10マイクログラムを、ホルムアルデヒド含有1.2％アガロース電気泳動で分離し、吸引ブロッティングによりHybond-XL膜(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ)に移した。その膜を、Express Hyb (BD Biosciences clontech, Palo Alto, CA)を用いて標識化プローブでハイブリダイズした。プローブは、鋳型としてGetLarge全長cDNAヒト胎盤ライブラリー(Genemed, San Francisco, CA)、及び下記プライマーを用いてPCRにより得た：
レプチン：          5'-cttcccactggafft-3' (フォワード); 
5'-catccctcacctccttcaaa-3' (リバース) 
アディポネクチン：  5'-cccaggactgggaacatagcat-3' (フォワード); 
5'-tcagcattcagtgtgggattgg-3' (リバース) 
GAPDH：             5'-acagtcagccgcatcttctt-3' (フォワード); 
5'-gtcttctgggtggcagtgat-3' (リバース)
プローブは、Rediprimeキット(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ)を用いてα-32P dCTPで標識化した。
【０１２１】
(6.2 結果)
(6.2.1 トリグリセリド蓄積)
トリグリセリド蓄積は、顕微鏡検査により観察し、オイルレッドO染色を用いて定量化した。図２Aに示すように、1-オキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンは、トリグリセリドを蓄積する細胞の能力を変更しない。実際、脂質胞は、DMSOで培養した細胞、及び1-オキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンで培養した細胞、双方に存在した。オイルレッドO染色を用いるトリグリセリド蓄積の定量化は、この結果を支持した。図２Bに示すように、DMSO、1-オキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリン、又は1,3-ジオキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンを用いて培養した細胞内のトリグリセリド蓄積に有意な差はないことを観察した。
【０１２２】
(6.2.2 レプチン分泌)
脂肪細胞のレプチン分泌における免疫調節性化合物の効果を試験した。図３Aに示すように、濃度2.5、10、25、又は50μMの1-オキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンの存在下で分化した脂肪細胞は、DMSO中で分化した細胞よりも高濃度のレプチンを分泌した。最大25μMで、用量依存反応を観察した。
【０１２３】
図３Bに示すように、濃度0.1、1、2.5、又は10μMの1,3-ジオキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンの存在下で分化した脂肪細胞に対して、類似の結果を観察した。また、最大10μMの1,3-ジオキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンで用量依存反応も観察した。
【０１２４】
さらに、図３Cに示すように、デキサメタゾンを分化終了時に15分間、細胞に加えた場合、1-オキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリン、及び1,3-ジオキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンの双方は、デキサメタゾン誘発レプチン分泌を増強させた。これらの結果は、免疫調節性化合物が脂肪細胞中のレプチン分泌を増強させることを示している。
【０１２５】
(6.2.3 アディポネクチン分泌)
脂肪細胞のアディポネクチン分泌を試験した。結果を図４に示す。図に示すように、1-オキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリン、又は1,3-ジオキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンの存在下で分化した脂肪細胞は、DMSO中で分化した細胞よりも低濃度のアディポネクチン分泌を示した。これらの結果は、脂肪細胞中のアディポネクチン分泌が、免疫調節性化合物により下方制御されたことを示している。
【０１２６】
(6.2.4 mRNAレベルの測定)
レプチン分泌の上方制御、及びディポネクチン分泌の下方制御が、これらのタンパク質のmRNAレベルの変化に関連しているかどうかを試験するために、レプチン及びアディポネクチンのmRNAレベルを、ノーザンブロットを用いて測定した。図５に示すように、1-オキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリン、又は1,3-ジオキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンの存在は、レプチンmRNAのレベルを用量依存的に増加させた。逆に、これらの免疫調節性化合物で処置した脂肪細胞において、アディポネクチンmRNAの用量依存的減少も観察された。GAPDH mRNA(コントロール)は、有意な変化を示さなかった。これらの結果は、レプチン及びアディポネクチン分泌の変化が、これらのタンパク質のmRNAレベルの変化に関連していることを示している。
【０１２７】
(6.2.5 MSC生存度及び増殖)
DMSO又は免疫調節性化合物で2日間処置したMSCの生存度及び増殖を試験した。生存度及び増殖は、それぞれ熱量測定アッセイ及びBrdU組込みアッセイをベースとしたXTTを用いて測定した。図６に示すように、1-オキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリン、及び1,3-ジオキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンのどちらも細胞生存度及び増殖に有意な変化を生じなかった。これらの結果は、免疫調節性化合物により生じたレプチン分泌の増加が、これらの化合物による細胞生存度又は細胞数の制御のためではないことを示唆している。
【０１２８】
本明細書中に引用した全ての引用文献は、これらの全体において引用により取り込まれている。本発明は、特定の実施態様について記載しているが、様々な変更及び改質が、添付の特許請求の範囲により具陳される本発明の精神及び範囲から逸脱することなく行われ得ることは当業者にとって明らかであろう。
上記本発明の実施態様は、単に例証を意図するものであり、当業者は、単にルーチン実験を用いて、特定の化合物、物質、及び手順の多くの均等物を認識するか、又は確認することができるであろう。前記均等物の全ては、本発明の範囲内であると考えられ、添付の特許請求の範囲に包含される。
【図面の簡単な説明】
【０１２９】
(4.図面の簡単な説明)
【図１】図１は、間葉幹細胞("MSC")からの脂肪細胞の産生の模式図である。
【図２】図２Aは、トリグリセリド蓄積における特定の免疫調節性化合物の効果を示す。図２Bは、DMSO又は免疫調節性化合物を用いて分化した細胞におけるトリグリセリド蓄積の定量化を示す。
【図３】図３Aは、脂肪細胞のレプチン分泌における1-オキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンの効果を示す。図３Bは、脂肪細胞のレプチン分泌における1,3-ジオキソ-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)-4-アミノイソインドリンの効果を示す。図３Cは、デキサメタゾン処置化脂肪細胞のレプチン分泌における特定の免疫調節性化合物の効果を示す。
【図４】図４は、脂肪細胞のアディポネクチン分泌における特定の免疫調節性化合物の効果を示す。
【図５】図５は、DMSO又は免疫調節性化合物で処置した脂肪細胞中のレプチン及びアディポネクチンのmRNAレベルを示す。
【図６】図６は、細胞増殖及び生存度における特定の免疫調節性化合物の効果を示す。
【図１】
2009507836.tif 000031
【図２】
2009507836.tif 000032
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【手続補正書】
【提出日】平成20年5月15日(2008.5.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２０】
(6.1.5 ノーザンブロット)
MSC誘導脂肪細胞のRNAを、RNeasy脂質組織キット(RNeasy lipid tissue kit)(Qiagen, Valencia, CA)で単離した。全RNAの10マイクログラムを、ホルムアルデヒド含有1.2％アガロース電気泳動で分離し、吸引ブロッティングによりHybond-XL膜(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ)に移した。その膜を、Express Hyb (BD Biosciences clontech, Palo Alto, CA)を用いて標識化プローブでハイブリダイズした。プローブは、鋳型としてGetLarge全長cDNAヒト胎盤ライブラリー(Genemed, San Francisco, CA)、及び下記プライマーを用いてPCRにより得た：
レプチン：          5'-cttcccactggattt-3' (配列番号：１) (フォワード); 
5'-catccctcacctccttcaaa-3' (配列番号：２) (リバース) 
アディポネクチン：  5'-cccaggactgggaacatagcat-3' (配列番号：３) (フォワード); 
5'-tcagcattcagtgtgggattgg-3' (配列番号：４) (リバース) 
GAPDH：             5'-acagtcagccgcatcttctt-3' (配列番号：５) (フォワード); 
5'-gtcttctgggtggcagtgat-3' (配列番号：６) (リバース)
プローブは、Rediprimeキット(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ)を用いてα-32P dCTPで標識化した。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2009507836000001.app
【国際調査報告】
2009507836.tif 000037
2009507836.tif 000038
2009507836.tif 000039
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