(57)【要約】  本発明の目的は、式Ｉの化合物及びそれらの医薬として許容される塩、鏡像異性体型、ジアステレオマー及びラセミ体、上文で言及した化合物、それらを含む薬物及びそれらの製造並びに疾病、例えば癌の制御又は予防における、あるいは相当の薬物の製造における上文で言及した化合物の使用、である。
2009525292.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
【化１】
2009525292.tif 000045
（式中、
Ｒ１はハロゲン、アルキル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル又はハロゲン化アルコキシであり；
Ｒ２は水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル又はハロゲン化アルコキシであり；
Ｒ３は、アルキルであって、シアノ、−ＯＲ、−ＮＲＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、−ＮＲ−Ｃ（Ｏ）−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲＲ’、−ＮＲ−Ｓ（Ｏ）２−アルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、置換されていないフェニル又は、ハロゲン、アルキル、アルコキシ若しくはシアノで１又は複数回置換されたフェニル、で１又は複数回置換されたアルキルであり；
Ｒ４は、ａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；
ｂ）アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、−ＮＲ−Ｃ（Ｏ）−アルキル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキル又は−ＮＲ−Ｓ（Ｏ）２−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル；又は
ｃ）ヘテロシクリル
であり、
Ｒ及びＲ’は水素又はアルキルである）
及び医薬として許容されるその全ての塩。
【請求項２】
Ｒ１がハロゲン又はアルキルであり；
Ｒ２が水素であり；
Ｒ３が−ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、置換されていないフェニル又は、アルコキシで１又は複数回置換されたフェニル、で１又は複数回任意に置換されたアルキルであり；
Ｒ４が、ａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；
ｂ）アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル；又は
ｃ）ヘテロシクリル
である、
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ４がａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；又は
ｂ）ヘテロシクリル
である、
請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ４が、アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル、である、
請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項５】
２−（２−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−エチルアミノ）−７−メチル−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−（２−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−エチルアミノ）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
３−［６−（２−クロロ−フェニル）−２−（２−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−エチルアミノ）−８−オキソ−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−プロピオンアミド；
７−メチル−２−(４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ)−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
２−（３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−７−メチル−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−メチル−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
２−｛２−［４−（２−ヒドロキシ−エチルスルファモイル)−フェニルアミノ］−８−オキソ−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル｝−アセトアミド；
Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−（７−メチル−８−オキソ−６−ｏ−トリル−７，８−ジヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミノ）−ベンゼンスルホンアミド；
２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−７−メチル−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
２−［２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−８−オキソ−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］ −アセトアミド；
２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−７−メチル−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−(４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ)−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−［７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−８−オキソ−６−ｏ−トリル−７，８−ジヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；
２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］-７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（３−メトキシ−ベンジル）−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−［７−（３−メトキシ−ベンジル）−８−オキソ−６−ｏ−トリル−７，８−ジヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；
２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−７−（３−メトキシ−ベンジル）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−７−（３−メトキシ−ベンジル）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
３−［２−（３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−８−オキソ−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−プロピオンアミド；
３−｛２−［４−（２−ヒドロキシ−エチルスルファモイル)−フェニルアミノ］−８−オキソ−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル｝−プロピオンアミド；
３−［２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−８−オキソ−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−プロピオンアミド；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（３−メトキシ−ベンジル）−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
４−［６−（２−クロロ−フェニル）−７−（３−メトキシ−ベンジル）−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−７−（３−メトキシ−ベンジル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−７−（３−メトキシ−ベンジル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−（３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
４−［６−（２−クロロ−フェニル）−８−オキソ−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−７，８−ジヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
２−［８−オキソ−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−アセトアミド；
７−メチル−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（３−メトキシ−ベンジル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
３−［８−オキソ−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−プロピオンアミド；
２−［６−（２−クロロ−フェニル）−８−オキソ−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−アセトアミド；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（３−メトキシ−ベンジル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；及び６−（２−クロロ−フェニル）−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン、
から成る群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
請求項１に記載の式Ｉの化合物の製造方法であって、
（ａ）式ＶＩＩＩの化合物
【化２】
2009525292.tif 000046
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は式Ｉについて請求項１で記載した意味を有しており、Ｌはアルキルスルホニル又はアルキルスルフィニルから成る群から選択される脱離基である）と
式ＶＩＩＩａ
Ｒ４−ＮＨ２
（式中、Ｒ４は式Ｉについて請求項１で記載した意味を有している）
の化合物とを反応させ、式Ｉの各化合物
【化３】
2009525292.tif 000047
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は式Ｉについて上述した意味を有している）を生成させる工程、
（ｂ）式Ｉの前記化合物を反応混合物から単離する工程、及び
（ｃ）所望により、医薬として許容される塩に変換する工程、
を含んで成る、方法。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の１又は複数の化合物と、医薬として許容される佐剤とを一緒に含む、医薬組成物。
【請求項８】
癌の治療のための請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
癌の治療のための相当の医薬の製造のための請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、７Ｈ−ピリド［３，４−Ｄ］ピリミジン−８−オン誘導体、それらの製造方法、それらを含む医薬組成物及びそれらの製造並びに医薬活性剤としてのこれらの化合物の使用、に関する。
【背景技術】
【０００２】
プロテインキナーゼは、ＡＴＰからタンパク質上のアミノ酸残基、例えば、チロシン、セリン、トレオニン、又はヒスチジンへのリン酸基の伝達を触媒する酵素である。これらのプロテインキナーゼの制御は、増殖及び遊走を含む多様な細胞のイベントの制御に必要不可欠である。
【０００３】
チロシンキナーゼの不適当な活性化は、炎症、免疫、ＣＮＳ障害、又は腫瘍障害、又は骨疾患を含む多様な疾患状態に関係することが知られている。例えば、 Susva, M., et al., Trends Pharmacol. Sci. 21 (2000) 489-495； Biscardi, J.S., et al., Adv. Cancer Res. 76 (2000) 61-119を参照のこと。
【０００４】
チロシンキナーゼは、プロテインキナーゼ類に属する。多様なシグナル伝達経路に関与する少なくとも８つのメンバー（Ｓｒｃ，Ｆｙｎ，Ｌｙｎ，Ｙｅｓ，Ｌｃｋ，Ｆｇｒ，Ｈｃｋ及びＢｌｋ）から成るＳｒｃファミリーは、細胞質プロテインチロシンキナーゼの主要なファミリーを代表する(Schwartzberg, P.L., Oncogene 17 (1998) 1463-1468)。チロシンキナーゼファミリーのプロトタイプメンバーはＳｒｃであり、これは多くの細胞種における増殖及び遊走応答に関与する(Sawyer, T., et al., Expert Opin. Investig. Drugs 10 (2001) 132７−1344)。Ｓｒｃ活性は、種々の癌、例えば、乳、結腸（＞９０％）、膵臓（＞９０％）及び肝臓（＞９０％）の腫瘍において上昇することが示されている。極めて増加したＳｒｃ活性はまた、転移（＞９０％）及び悪い予後に関係する。アンチセンスＳｒｃメッセージは、ヌードマウス中の結腸腫瘍細胞の成長を阻害し(Staley, C.A., Cell Growth Differ. 8 (1997) 269-274)、Ｓｒｃ阻害剤が腫瘍成長を遅くできることを示唆する。更に、細胞増殖におけるその役割に追加して、Ｓｒｃはまた、低酸素応答を含むストレス応答経路において作用する。アンチセンスＳｒｃメッセージを発現する結腸腫瘍細胞を有するヌードマウス実験は、血管新生を低下し（Ellis, L.M., et al., J. Biol. Chem. 273 (1998) 1052-1057)、これはＳｒｃ阻害剤が抗血管新生並びに抗増殖性であることを示唆する。
【０００５】
Ｓｒｃは、Ｅ−カドヘリン関連細胞間相互作用を破壊する(Avizienyte, E., et al., Nature Cell Bio. 4 (2002) 632-638)。低分子量のＳｒｃ阻害剤は、この破壊を防止し、これにより癌細胞転移を低下させる(Nam, J.S., et al., Clin Cancer Res. 8 (2002) 2430-2436)。
【０００６】
Ｓｒｃ阻害剤は、血管透過性のＶＥＧＦ−媒介増加からもたらされる、例えば、後の脳卒中として見られる二次傷害を予防することができる(Eliceiri, B.P., et al., MoI. Cell. 4 (1999) 915-924； Paul, R., et al., Nat. Med. 7 (2001) 222-227)。
【０００７】
Ｓｒｃの遮断は、同じキネティクスを有するＦｌｋ、ＶＥ−カドヘリン、及びβ−カテニンを含む複合体の解離を防止し、ＶＥＧＦ−媒介ＶＰ／浮腫を防ぎ、そしてＶＥＧＦ−媒介透過性におけるＳｒｃの必要性を説明し、そして急性心筋梗塞を伴う患者のための治療的見解としてのＳｒｃ阻害についての基礎を供する(Weis, S., et al., J. Clin. Invest. 113 (2004) 885-894)。
【０００８】
Ｓｒｃはまた、骨粗鬆症における役割を果たす。Ｓｒｃが欠損するように遺伝子改変したマウスは、骨の再吸収不全である大理石骨病を示すことが明らかとなった(Soriano, P., et al., Cell 64 (1991) 693-702； Boyce, B.F., et al., J. Clin., Invest. 90 (1992) 1622-1627)。欠損症は破骨細胞の欠乏を特徴としていた。破骨細胞は通常高レベルのＳｒｃを発現し、Ｓｒｃキナーゼ活性の阻害は骨粗鬆症の治療において有用となりうる(Missbach, M., et al., Bone 24 (1999) 437-449)。
【０００９】
プロテインキナーゼについての低分子量阻害剤は当業界で広く知られている。ｓｒｃ及び他のキナーゼの阻害のためのそのような阻害剤は、すなわち、８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−オン誘導体（例えば、WO 96/34867, WO 96/15128, US 5,733,914, WO 02/018379, WO 02/018380, WO 2005/034869, Klutchko, S.R, et al., J. Med. Chem. 41 (1998) 3276-3292又はBlankley, C.J., J. Med. Chem. 41 (1998) 1752-1763を参照のこと）又は３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ピリミド［４，５−ｄ］ピリミジン−２−オン誘導体（例えば、WO 99/61444, WO 00/024744, WO 01/029041, WO 01/029042, WO 2004/011465, WO 2004/041821, WO 2004/041823, WO 2004/075852, WO 2004/089955又はWO 2005/011597を参照のこと）に基づいている。幾つかのピリド−ピリミジノン誘導体は、クロスカップリング反応の研究によって知られている (Sakamoto, T., et al., Chemical & Pharmaceutical Bulletin 30 (1982) 2410-2416)。
【００１０】
本発明の概要
本発明は、一般式Ｉの７Ｈ−ピリド［３，４−Ｄ］ピリミジン−８−オン誘導体
【化１】
2009525292.tif 000003
（式中、
Ｒ１はハロゲン、アルキル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル又はハロゲン化アルコキシであり；
Ｒ２は水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル又はハロゲン化アルコキシであり；
Ｒ３は、アルキルであって、シアノ、−ＯＲ、−ＮＲＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、−ＮＲ−Ｃ（Ｏ）−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲＲ’、−ＮＲ−Ｓ（Ｏ）２−アルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、置換されていないフェニル又は、ハロゲン、アルキル、アルコキシ若しくはシアノで１又は複数回置換されたフェニル、で１又は複数回置換されたアルキルであり；
Ｒ４は、ａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；
ｂ）アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、−ＮＲ−Ｃ（Ｏ）−アルキル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキル又は−ＮＲ−Ｓ（Ｏ）２−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル；又は
ｃ）ヘテロシクリル
であり、
Ｒ及びＲ’は水素又はアルキルである）
及びその全ての医薬として許容される塩、に関する。
【００１１】
本発明の化合物は、プロテインキナーゼ阻害剤、特にｓｒｃファミリーチロシンキナーゼ阻害剤としての（特にｓｒｃ及びｌｃｋ阻害剤としての）活性、そして更にＡｂｌ、ＰＤＧＦＲの阻害剤、Ｒａｆチロシンキナーゼ阻害剤としての活性を示し、それ故に、前記チロシンキナーゼが媒介する疾患の治療に有用であると考えられる。
【００１２】
チロシンキナーゼファミリーは、ペプチド及びタンパク質のチロシン残基をリン酸化することで細胞のシグナル伝達及び細胞の増殖を制御するという重要な役割を果たしている。チロシンキナーゼの不適切な活性化は、炎症、免疫学、ＣＮＳ障害、又は腫瘍学的な障害、あるいは骨疾患のような種々の病状に関与していることが知られている。例えば、 Susva, M., et al., Trends Pharmacol. Sci. 21 (2000) 489-495； Biscardi, J.S., et al., Adv. Cancer Res. 76 (2000) 61-119を参照のこと。
【００１３】
Ｓｒｃ、Ａｂｌ、ＰＲＧＦＲ及びＲａｆキナーゼの阻害は、腫瘍細胞系における抗増殖効果を発揮する。このことは、Ｓｒｃ、Ａｂｌ、ＰＤＧＦＲ及びＲａｆキナーゼの阻害が、すなわち、過剰増殖性の疾患、例えば癌、特に結腸直腸癌、乳癌、肺癌、前立腺癌、膵臓癌、胃癌、膀胱癌、卵巣癌、黒色腫、神経芽細胞腫、子宮頸癌、腎臓癌又は腎癌、白血病又はリンパ腫の治療に有用であろうことを示唆している。
【００１４】
Ｓｒｃファミリーキナーゼは更に、種々の他の病状に関与していることが知られている。本発明の化合物は、Ｓｒｃファミリーキナーゼ阻害剤として、特にＳｒｃキナーゼ阻害剤として、例えば、移植片拒絶、炎症性腸症候群、関節リウマチ、乾癬、再狭窄、アレルギー性喘息、アルツハイマー病、パーキンソン病、脳卒中、骨粗鬆症及び良性腫瘍(benign)の予防及び治療に使用してもよい。
【００１５】
Ａｂｌファミリーキナーゼは更に、種々の他の病状に関与していることが知られている。本発明の化合物は、Ａｂｌファミリーキナーゼ阻害剤として、特にＡｂｌキナーゼ阻害剤として、例えば神経変性疾患、関節リウマチ及び糖尿病、例えばＩ型又はＩＩ型糖尿病の予防及び治療に使用してもよい。
【００１６】
ＰＤＧＦＲファミリーキナーゼは更に、種々の他の病状に関与していることが知られている。本発明の化合物は、ＰＤＧＦＲファミリーキナーゼ阻害剤として、特にＰＤＧＦＲキナーゼ阻害剤として、例えばＩ型又はＩＩ型糖尿病等の糖尿病、再狭窄（例えば、バルーン障害誘導型の再狭窄）、アテローム性動脈硬化症又は肺線維症の予防及び治療に使用してもよい。
【００１７】
本発明の目的は、式Ｉの化合物及びそれらの医薬として許容される塩、鏡像異性体型、ジアステレオマー及びラセミ体、上文で言及した化合物、それらを含む薬物及びそれらの製造並びに疾病、特に癌、例えば結腸直腸癌、乳癌、肺癌、前立腺癌、膵臓癌、胃癌、膀胱癌、卵巣癌、黒色腫、神経芽細胞腫、子宮頸癌、腎臓癌又は腎癌、白血病又はリンパ腫のの制御又は予防における、あるいは相当の医薬組成物の製造における上文で言及した化合物の使用、である。
【００１８】
本発明の詳細な説明
１．定義：
用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素又は臭素、好ましくはフッ素又は塩素、特に塩素を意味する。
【００１９】
本明細書で使用する用語「アルキル」は、１〜４個、好ましくは１〜３個の炭素原子を含む、直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素を意味する。かかるアルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、２−ブチル、及びｔ−ブチル、特にメチルが含まれる。
【００２０】
本明細書で使用する用語「アルコキシ」は、アルキル−Ｏ−基を意味し、当該アルキルは上文で定義されたとおりである。かかるアルコキシ基の例には、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ及びイソプロポキシ、好ましくはメトキシが含まれる。
【００２１】
本明細書で使用する用語「ハロゲン化アルキル」は、上文で定義したアルキル基であって、１又は複数回、好ましくは１〜６回、特に１〜３回、ハロゲン、好ましくはフッ素又は塩素、特にフッ素で置換されているアルキル基を意味する。例として、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、２，２−２−トリフルオロエチル、ペルフルオロエチル(perfluorethyl)等、特にトリフルオロエチルがある。
【００２２】
本明細書で使用する用語「ハロゲン化アルコキシ」は、上文で定義したアルコキシ基であって、１又は複数回ハロゲン、好ましくはフッ素又は塩素、特にフッ素で置換されているアルコキシ基を意味する。例として、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、２，２−２−トリフルオロエトキシ、ペルフルオロエトキシ等、特に、トリフルオロメトキシがある。
【００２３】
用語「ヘテロアリール」は、５〜１０、好ましくは５又は６個の環原子を有する単環又は二環式の芳香環であって、Ｎ，Ｏ又はＳから独立して選択される最大３個、好ましくは１又は２個のヘテロ原子を含み、且つ、残りの原子が炭素原子である芳香環を意味する。そのようなヘテロアリール基は、１〜３回、好ましくは１又は２回、アルキル、好ましくはメチルで任意に置換することができる。かかるヘテロアリール基の例には、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、メチルピラゾリル、ジメチルピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フラニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チエニル、メチルチエニル、チアゾリル、メチルチアゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジニル、インドリル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、キノリル、イソキノリル、キナゾリニル等、好ましくはピラゾリル、メチルピラゾリル又はジメチルピラゾリル、特にジメチルピラゾリルがある。
【００２４】
用語「ヘテロシクリル」は、５又は６個の環原子を有する飽和単環式炭化水素環であって、Ｎ、Ｏ又はＳから独立して選択される最大３個、好ましくは１又は２個のヘテロ原子を含み、残りの環原子が炭素原子である、環を意味する。かかる飽和複素環式基は、１〜３回、好ましくは１又は２回、アルキル、好ましくはメチルで置換することができる。かかる飽和複素環式基の例として、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、モルホリニル、ピペラジニル、Ｎ−メチル−ピペラジニル、ピペリジル、ピロリジニル等、好ましくはテトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、モルホリニル又はＮ−メチル−ピペラジニルがある。
【００２５】
本明細書で使用する場合、化合物の用語「治療上有効量」は、疾患の症候を予防し、緩和し又は緩解し、あるいは処置される被験者の生存を延長させるのに有効な量を意味する。治療上有効量の決定は当業者の技術範囲内である。
【００２６】
本発明の化合物の治療上有効量又は投与量は、広い制限の範囲内で変化することがあり、これは、当業界で知られている様式で決定されうる。かかる投与量は、各個別の症例における個々の要件、例えば投与される具体的な化合物、投与経路、処置される症状、並びに処置される患者、に調節される。通常、約70Kgの体重の成人への経口又は非経口投薬の場合に、約10mg〜約10,000mg、好ましくは約200mg〜約1,000mgの1日投与量が適切なはずであるが、指示があれば、上限を超えてもよい。前記1日投与量は、単回投与又は分割投与で投与されるか、又は非経口投与において、連続点滴として与えることができる。
【００２７】
２．詳細な説明
Ｒ１はハロゲン、アルキル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル又はハロゲン化アルコキシであり、好ましくはハロゲン、アルキル又はアルコキシ、より好ましくはハロゲン又はアルキルである。
【００２８】
Ｒ２は水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、ハロゲン化アルキル又はハロゲン化アルコキシであり、好ましくは水素である。
【００２９】
Ｒ３は、アルキルであって、シアノ、−ＯＲ、−ＮＲＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、−ＮＲ−Ｃ（Ｏ）−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲＲ’、−ＮＲ−Ｓ（Ｏ）２−アルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、置換されていないフェニル又は、ハロゲン、アルキル、アルコキシ若しくはシアノで１又は複数回、好ましくは１又は２回置換されたフェニル、で１又は複数回置換されたアルキルである。Ｒ３の定義中のアルキルが置換されている場合、これは、好ましくは、−ＯＲ又は−ＮＲＲ’、ヘテロアリール（好ましくはジメチルピラゾリル）、ヘテロシクリル（好ましくはテトラヒドロフラニル）又は、１又は複数回アルコキシで置換されたフェニルである。
【００３０】
Ｒ４は、ａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回、好ましくは１又は２回任意に置換されているアルキル；ｂ）アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル（好ましくは、モルホリニル又はＮ−メチル−ピペラジニル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、−ＮＲ−Ｃ（Ｏ）−アルキル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキル又は−ＮＲ−Ｓ（Ｏ）２−アルキル、好ましくはアルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回、好ましくは１又は２回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回、好ましくは１又は２回任意に置換されている、フェニル；又はｃ）ヘテロシクリル、好ましくはテトラヒドロフラニル、である。
【００３１】
Ｒ及びＲ’は水素又はアルキルである。
【００３２】
本発明の態様として、
Ｒ１がハロゲン又はアルキルであり；
Ｒ２が水素であり；
Ｒ３が−ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、置換されていないフェニル又は、アルコキシで１又は複数回置換されたフェニル、で１又は複数回任意に置換されたアルキルであり；
Ｒ４が、ａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；
ｂ）アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル；又は
ｃ）ヘテロシクリル
である、
式Ｉの化合物がある。
【００３３】
本発明の別の態様として、Ｒ１がハロゲンである式Ｉの化合物がある。
【００３４】
本発明の別の態様として、Ｒ１がアルキルである式Ｉの化合物がある。
【００３５】
本発明の別の態様として、Ｒ４がａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；又は
ｂ）ヘテロシクリル
である、式Ｉの化合物がある。
【００３６】
本発明の別の態様として、Ｒ４が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキルである、式Ｉの化合物がある。
【００３７】
本発明の別の態様として、
Ｒ１がハロゲン又はアルキルであり；
Ｒ２が水素であり；
Ｒ３が−ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、置換されていないフェニル又は、アルコキシで１又は複数回置換されたフェニル、で１又は複数回任意に置換されたアルキルであり；
Ｒ４が、−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキルである、
式Ｉの化合物がある。
【００３８】
前記化合物は、例えば
２−（２−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−エチルアミノ）−７−メチル−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−（２−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−エチルアミノ）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；及び
３−［６−（２−クロロ−フェニル）−２−（２−ヒドロキシ−１−ヒドロキシメチル−エチルアミノ）−８−オキソ−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−プロピオンアミド
から成る群から選択してもよい。
【００３９】
本発明の別の態様として、Ｒ４が、アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル、である式Ｉの化合物がある。
【００４０】
本発明の別の態様として、
Ｒ１がハロゲン又はアルキルであり；
Ｒ２が水素であり；
Ｒ３が−ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、置換されていないフェニル又は、アルコキシで１又は複数回置換されたフェニル、で１又は複数回任意に置換されたアルキルであり；
Ｒ４が、アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニルである、
式Ｉの化合物がある。
【００４１】
前記化合物は、例えば
７−メチル−２−(４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ)−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
２−（３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−７−メチル−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−メチル−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
２−｛２−［４−（２−ヒドロキシ−エチルスルファモイル)−フェニルアミノ］−８−オキソ−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル｝−アセトアミド；
Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−（７−メチル−８−オキソ−６−ｏ−トリル−７，８−ジヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミノ）−ベンゼンスルホンアミド；
２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−７−メチル−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
２−［２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−８−オキソ−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］ −アセトアミド；
２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−７−メチル−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−(４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ)−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−［７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−８−オキソ−６−ｏ−トリル−７，８−ジヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；
２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］-７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（３−メトキシ−ベンジル）−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−［７−（３−メトキシ−ベンジル）−８−オキソ−６−ｏ−トリル−７，８−ジヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；
２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−７−（３−メトキシ−ベンジル）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−７−（３−メトキシ−ベンジル）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
３−［２−（３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−８−オキソ−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−プロピオンアミド；
３−｛２−［４−（２−ヒドロキシ−エチルスルファモイル)−フェニルアミノ］−８−オキソ−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル｝−プロピオンアミド；
３−［２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−８−オキソ−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−プロピオンアミド；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（３−メトキシ−ベンジル）−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
４−［６−（２−クロロ−フェニル）−７−（３−メトキシ−ベンジル）−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−７−（３−メトキシ−ベンジル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−７−（３−メトキシ−ベンジル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−（３−ヒドロキシメチル−フェニルアミノ)−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−［４−（４−メチル-ピペラジン−１−イル)−フェニルアミノ］−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
４−［６−（２−クロロ−フェニル）−８−オキソ−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−７，８−ジヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−ベンゼンスルホンアミド；
６−（２−クロロ−フェニル）−２−［４−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−フェニルアミノ］−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；及び
６−（２−クロロ−フェニル）−２−（３−メタンスルフィニル−フェニルアミノ)−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン、
から成る群から選択してもよい。
【００４２】
本発明の別の態様として、Ｒ４がヘテロシクリルである式Ｉの化合物がある。
【００４３】
本発明の別の態様として、
Ｒ１がハロゲン又はアルキルであり；
Ｒ２が水素であり；
Ｒ３が−ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、置換されていないフェニル又は、アルコキシで１又は複数回置換されたフェニル、で１又は複数回任意に置換されたアルキルであり；
Ｒ４がヘテロシクリルである、
式Ｉの化合物がある。
【００４４】
前記化合物は、例えば、
２−［８−オキソ−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−アセトアミド；
７−メチル−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
７−（３−メトキシ−ベンジル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
３−［８−オキソ−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−６−ｏ−トリル−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−プロピオンアミド；
２−［６−（２−クロロ−フェニル）−８−オキソ−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−８Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−７−イル］−アセトアミド；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（１，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルメチル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（３−ヒドロキシ−プロピル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；
６−（２−クロロ−フェニル）−７−（３−メトキシ−ベンジル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン；及び６−（２−クロロ−フェニル）−７−（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−２−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン、
から成る群から選択してもよい。
【００４５】
本発明の別の態様として、
Ｒ１がハロゲン又はアルキルであり；
Ｒ２が水素であり；
Ｒ３がアルキルであり；
Ｒ４が、ａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；
ｂ）アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル；又は
ｃ）ヘテロシクリル
である、
式Ｉの化合物がある。
【００４６】
本発明の別の態様として、Ｒ３が−ＯＨで一回置換されているアルキルである、式Ｉの化合物がある。
【００４７】
本発明の別の態様として、
Ｒ１がハロゲン又はアルキルであり；
Ｒ２が水素であり；
Ｒ３が−ＯＨで一回置換されているアルキルであり；
Ｒ４が、ａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；
ｂ）アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル；又は
ｃ）ヘテロシクリル
である、
式Ｉの化合物がある。
【００４８】
本発明の別の態様として、
Ｒ３が−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’で一回置換されているアルキルであり；且つ
Ｒ及びＲ’が水素である、
式Ｉの化合物がある。
【００４９】
本発明の別の態様として、
Ｒ１がハロゲン又はアルキルであり；
Ｒ２が水素であり；
Ｒ３が−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’で一回置換されているアルキルであり；
Ｒ４が、ａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；
ｂ）アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル；又は
ｃ）ヘテロシクリル
であり、
Ｒ及びＲ’が水素である、
式Ｉの化合物がある。
【００５０】
本発明の別の態様として、Ｒ３がヘテロアリールで一回置換されているアルキルである、式Ｉの化合物がある。
【００５１】
本発明の別の態様として、
Ｒ１がハロゲン又はアルキルであり；
Ｒ２が水素であり；
Ｒ３がヘテロアリールで一回置換されているアルキルであり；
Ｒ４が、ａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；
ｂ）アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル；又は
ｃ）ヘテロシクリル
である、
式Ｉの化合物がある。
【００５２】
本発明の別の態様として、Ｒ３がヘテロシクリルで一回置換されているアルキルである、式Ｉの化合物がある。
【００５３】
本発明の別の態様として、
Ｒ１がハロゲン又はアルキルであり；
Ｒ２が水素であり；
Ｒ３がヘテロシクリルで一回置換されているアルキルであり；
Ｒ４が、ａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；
ｂ）アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル；又は
ｃ）ヘテロシクリル
である、
式Ｉの化合物がある。
【００５４】
本発明の別の態様として、Ｒ３がアルコキシで１又は複数回置換されたフェニルで一回置換されているアルキルである、
式Ｉの化合物がある。
【００５５】
本発明の別の態様として、
Ｒ１がハロゲン又はアルキルであり；
Ｒ２が水素であり；
Ｒ３がアルコキシで１又は複数回置換されたフェニルで一回置換されているアルキルであり；
Ｒ４が、ａ）−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されているアルキル；
ｂ）アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）−アルキル又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−アルキルで１又は複数回任意に置換されているフェニルであって、全てのアルキル及びアルコキシ基が−ＯＲ又は−ＮＲＲ’で１又は複数回任意に置換されている、フェニル；又は
ｃ）ヘテロシクリル
である、
式Ｉの化合物がある。
【００５６】
本発明の別の態様として、式Ｉの化合物の製造方法であって
（ａ）式ＶＩＩＩの化合物
【化２】
2009525292.tif 000004
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は式Ｉについて上述した意味を有しており、Ｌはアルキルスルホニル又はアルキルスルフィニルから成る群から選択される脱離基であり、好ましくはＬはアルキルスルホニル、より好ましくはメチルスルホニルである）と
式ＶＩＩＩａ
Ｒ４−ＮＨ２
（式中、Ｒ４は式Ｉについて上述した意味を有している）
の化合物とを反応させ、式Ｉの各化合物
【化３】
2009525292.tif 000005
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は式Ｉについて上述した意味を有している）を生成させる工程、
（ｂ）式Ｉの前記化合物を反応混合物から単離する工程、及び
（ｃ）所望により、医薬として許容される塩に変換する工程、
を含んで成る、方法がある。
【００５７】
一般式Ｉの化合物、又は医薬として許容されるその塩は、化学的に関連する化合物の調製に適用可能であることが当業者知られている任意の方法によって調製することができる。かかる方法は、式Ｉの化合物、又は医薬として許容される塩を調製するのに使用する場合、本発明の更なる特徴として提供され、そして以下のスキーム１からスキーム４の代表例によって例示される。ここで、特に断らない限り、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、本明細書の前文に記載の意味を有する。必要な出発材料は市販のものか、あるいは、有機化学の標準的手順により得ることができるものである。このような出発材料の調製は、以下の実施例で説明する。あるいは、必要な出発材料は、例示する手順に類似の、有機化学者の通常の技術範囲内にある手順により得られる。
【００５８】
スキーム１
【化４】
2009525292.tif 000006
【００５９】
スキーム１において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は式Ｉについて上文に記載の意味を有しており、Ｘは臭素又はヨウ素であり、そしてｎは１又は２である。
【００６０】
ステップ１
５−ブロモ−２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−カルボン酸メチルエステルは既知の化合物である。遊離カルボン酸は、ムコブロム酸及びＳ−メチルイソチオウレアから、塩基性条件下で調製することができる。これを更に、標準的な手順により、例えば無水塩酸の存在下でメタノールと縮合させることによりメチルエステルに変換することができる。
【００６１】
ステップ２
式ＩＩＩの置換フェニルアセチレンは当業界で周知であり、式ＩＩの相当のブロモアレン又はヨードアレン及び保護エチンから、いわゆる園頭反応により調製することができる。このカップリング反応は、ＣｕＩ又はＣｕＣｌのような銅触媒、及びＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２又はＰｄＣｌ２（ＰｈＣＮ）２／ＰｔＢｕ３、及びジイソプロピルアミン、ジエチルアミン又はトリエチルアミンのような、溶媒としても働くような塩基を用い、あるいは、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）又はアセトニトリルのような不活性溶媒中で実施される。この反応は、室温以上、最大１６０℃で進行する。エチン基の適当な保護基はトリメチルシリル基であり、これはその後、テトラブチルアンモニウムフルオリドのようなフッ化物含有試薬で処理し、あるいはメタノールのようなアルコール系の溶媒中の水酸化カリウムのような強塩基によって開裂することができる。この脱保護反応は、好ましくは、−３０℃〜５０℃の中低温で実施される。
【００６２】
ステップ３
５−ブロモ−２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−カルボン酸メチルエステルに対する式ＩＩＩのフェニルアセチレンのカップリングは、ステップ２に記載の所謂園頭反応の条件下で実施することができる。
【００６３】
あるいは、エチニル−アレンは、最初に、当業界で知られている手順によってより反応性のアルキニル−Ｚｎ又は−Ｓｎ誘導体に変換してもよい：このエチニルアレンは、ブチルリチウムのような強塩基で脱保護されてアルキニル−Ｌｉ中間体を形成し、これはＺｎＣｌ２又はＢｕ３ＳｎＣｌと反応して所望の亜鉛又は錫中間体を生成する。これらは、その後、標準的なクロスカップリング条件のもと、ジメチルアセトアミド、ＴＨＦ、又はトルエン中での例えばＰｄ（ＰＰｈ３）４又はＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）４又はＰｄ２（ｄｂａ）３／ＰｔＢｕ３のようなパラジウムホスフィン錯体による触媒作用によって５−ブロモ−２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−カルボン酸メチルエステルにカップリングしてもよい。
【００６４】
ステップ４
式ＩＶのエチニルピリミジン誘導体から式Ｖのピラノン誘導体への環化は、酸性条件下で、任意に水の存在下で実施することができる。これは、テトラヒドロフラン、ジオキサン、Ｎ−メチルピロリジノン又はスルホランのような溶媒中で実施してもよい。この反応に適した酸として、トリフルオロ酢酸、塩酸、硫酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、又はポリリン酸がある。この反応は、ＨｇＯのような水銀塩によって任意に触媒することができる。あるいは、ＺｎＢｒ２のようなルイス酸がテトラヒドロフランのような不活性溶媒中で利用される。
【００６５】
ステップ５
式Ｖのピラノン誘導体は、式ＶａのアミンＲ３ＮＨ２と反応して、式ＶＩの開環したピリジンカルボキサミドを生成する。これは、反応パートナーを過剰なアミン中ニートで、あるいはジクロロメタン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、エタノール、キシレン、又はＮ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）のような不活性溶媒中で、４０℃〜１７０℃の範囲の温度に加熱することで達成することができる。任意に、酸を添加して反応を促進させてもよい。
【００６６】
ステップ６
式ＶＩのピリミジンカルボキサミドは、酸の存在下で加熱することで式ＶＩＩのピリミドピリドンへと再び環化される。原理的には、ステップ４に記載のものと同じ条件が適用される。
【００６７】
ステップ６ａ
あるいは、場合によって、式ＩＶのピリミジンカルボキシラートから式ＶＩＩのピリミドピリドンへの直接変換は、式Ｖａの適切なアミンＲ３ＮＨ２をニートで、あるいはジクロロメタン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、キシレン、エタノール又はＮ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）のような不活性溶媒中で加熱することで行うことも可能である。任意に、トリフルオロ酢酸又は塩酸のような酸、あるいはパラジウムホスフィン策短のような遷移金属触媒を添加して反応を促進させてもよい。
【００６８】
ステップ７
ピリミドピリドンＶＩＩのメチルチオ基は、メチルスルフィニル又はメチルスルホニル基への酸化によって脱離基に変換される。この目的に適した酸化剤は、ジクロロメタン又はＴＨＦのような溶媒、あるいはオキソン若しくは過ヨウ素酸ナトリウム／メタノール又はＴＨＦ／水の混合物中のメタ−クロロ過安息香酸又は３−フェニル−２−（トルエン−４−スルホニル）−オキサジリジンである。この酸化反応は、−２０℃〜６０℃の範囲内の温度で実施され、そして生じた式ＶＩＩＩ（ｎ＝１又は２）のメチルスルフィニル−又はメチルスルホニル−ピリミドピリドンは任意に、ステップ８での単離を行うことなく直接使用してもよい。
【００６９】
ステップ８
式ＶＩＩＩの化合物のメチルスルフィニル又はメチルスルホニル基は、式ＶＩＩＩａのアミンＲ４ＮＨ２によって置換されて、反応物をニートで加熱することで式Ｉの最終産物を生成するか、あるいは、Ｎ−メチルピロリジオノン（methylpyrrolidionone）、ジメチルアセトアミド、スルホラン、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）又はアセトニトリルのような不活性溶媒で希釈される。トリフルオロ酢酸又は無水塩酸のような酸を添加して反応を促進させてもよい。この反応は、６０℃〜１８０℃の範囲の高温で実施される。あるいは、アミンＲ４ＮＨ２をリチウムヘキサメチルジシラジド又はリチウムジイソプロピルアミドのような強塩基で脱保護し、そして式ＶＩＩＩの化合物と−５０℃〜室温の間の温度で、ジエチルエーテル又はＴＨＦのような不活性溶媒中で反応させてもよい。
【００７０】
本発明の化合物は、医薬として許容されるそれらの塩の形態で存在してもよい。用語「医薬として許容される塩」は、式Iの化合物の生物学的有効性及び特性を維持し、且つ、好適な非毒性有機塩基又は無機塩基、あるいは有機酸又は無機酸から形成される常用の酸付加塩を表す。塩基付加塩の例には、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、水酸化第４級アンモニウム（例えば、水酸化テトラメチルアンモニウム）、特にナトリウム由来のものが含まれる。酸付加塩の例として、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、及び硝酸から得られるもの、並び有機酸、例えば、p-トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、マレイン酸、乳酸、フマル酸等から得られるものがある。医薬化合物（すなわち、薬物）を塩へと化学的に修飾することは、化合物の改善された物理的及び化学的な安定性、吸湿性、流動性、及び溶解性を得るための、薬剤師に周知の技術である。例えば、Stahl、P. H.及びWermuth、G.（編集者）、Handbook of Pharmaceutical Salts、Verlag Helvetica Chimica Acta（VHCA）、Zurich（2002年）、又はBastin、RJ.ら、Organic Proc. Res. Dev. 4（2000年）、427-435ページを参照のこと。
【００７１】
式Iの化合物は、１又は複数のキラル中心を含んでいてもよく、その上、ラセミ体又は光学的に活性な形態で存在することもできる。ラセミ体を、既知の方法により鏡像異性体に分離することができる。例えば、結晶化によって分離できるジアステレオマー塩は、例えば、D-又はL-カンファースルホン酸といった光学的に活性な酸との反応によってラセミ体混合物から形成される。あるいは、鏡像異性体の分離は、市販のキラルHPLC-相によるクロマトグラフィーを使用することによって達成できる。
【００７２】
本発明の化合物又は医薬として許容されるその塩及び医薬として不活性な担体を含む医薬もまた本発明の目的であり、また、本発明の１又は複数の化合物及び／又は医薬として許容されるその塩、及び、所望により、１又は複数のほかの治療上有益な物質を、１又は複数の治療上不活性な担体と一緒に、生薬の投与形態にすることを含んで成る、それらの製造方法についても同様である。
【００７３】
本発明の態様として、１又は複数の式Ｉの化合物を、医薬として許容される賦形剤と一緒に含む医薬組成物がある。
【００７４】
本発明の別の態様として、腫瘍増殖の阻害のための、１又は複数の式Ｉの化合物を含む医薬組成物がある。
【００７５】
本発明の別の態様として、癌の治療のための、１又は複数の式Iの化合物を含む医薬組成物がある。
【００７６】
本発明の別の態様として、結腸直腸癌、乳癌、肺癌、前立腺癌、膵臓癌、胃癌、膀胱癌、卵巣癌、黒色腫、神経芽細胞腫、子宮頸癌、腎臓癌又は腎癌、白血病又はリンパ腫の治療のための、医薬として許容される佐剤と共に有効成分として１又は複数の式Ｉの化合物を含む薬物がある。
【００７７】
本発明の別の態様として、腫瘍増殖の阻害のための相当の薬物の製造のための、式Ｉの化合物の使用がある。
【００７８】
本発明の別の態様として、癌の治療のための相当の薬物の製造のための、式Ｉの化合物の使用がある。
【００７９】
本発明の別の態様として、抗増殖剤としての式Iの化合物の使用がある。
【００８０】
本発明の別の態様として、癌の治療のための１又は複数の式Ｉの化合物の使用がある。
【００８１】
薬理活性
式Ｉの化合物及び医薬として許容されるそれらの塩は、有益な薬理学的特性を有する。前記化合物がＳｒｃファミリーのチロシンキナーゼ阻害剤としての活性を呈し、また、抗増殖作用を示すこともわかった。その結果、本発明の化合物は、増殖性疾患、例えば癌の治療、及び／又は予防に有用である。本発明の化合物の活性は、例えば、以下の生物学的アッセイによって実証する：
【００８２】
Ｓｒｃ阻害剤アッセイのパラメーター：
反応混合物：
ＡＴＰ：５μＭ
ペプチド（Ro＋Ja133-Ro）：１０μＭ
Ja133-Ro 196nM
Ro 9.8μM
PT66 230ng/ml
【００８３】
アッセイ緩衝液： 4mMのMgCl2
2mMのTCEP
50mMのHEPES
0.1％Tween20 (pH7.3)
酵素： 2.5U/ml
阻害剤： 最大25μM
最少0.42nM
【００８４】
材料：
Eu−標識ホスホチロシン抗体：−Lck Cisbio Mab PT66-K用、
−Src EG & G Wallac PT66Eu-W1024用（すべて市販品）。
【００８５】
ペプチド：Ｒｏ：ＮＨ2−Ａ−Ｅ−Ｅ−Ｅ−Ｉ−Ｙ−Ｇ−Ｅ−Ｆ−Ｅ−Ａ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−ＣＯＮＨ2、及びJa133-Ro：Ja133-G-アミノカプリル酸Ａ−Ｅ−Ｅ−Ｅ−Ｉ−Ｙ−Ｇ−Ｅ−Ｆ−Ｅ−Ａ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−Ｋ−ＣＯＮＨ2、ここでJa133はLightCycler-Red 640−Ｎ-ヒドロキシスクシンイミドエステルである；ここで、両ペプチドは、Zinsser SMP350ペプチド合成機上で、最適化された固相ペプチド合成プロトコール（Merrifield, Fed. Proc. Fed. Amer. Soc. Exp. Biol. 21 (1962) 412）により合成された。手短に言及すれば、ペプチドが160mg（22.8μモル）のRink-Linker変性ポリスチレン固相上で、側鎖機能に依存して、一時的ピペリジン不安定Fmoc−及び永久的酸不安定tert-Bu-, BOC-及びOtert-Bu-基により、それぞれ保護された20倍過剰のアミノ酸を反復して接合することによりアセンブリーされた。基質配列ＡＥＥＥＩＹＧＥＦＥＡＫＫＫＫのＮ末端には、スペーサーアミノ酸アミノカプリル酸及びグリシンを更に付加した。Ｎ末端の一時的な保護基の切断の後、まだ結合され、そして保護されているペプチドが、1.5倍量のLightCycler−Red640−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（Roche Diagnostics GmbHにより市販されている）及びトリエチルアミンにより標識された。３時間後、樹脂が、青色の樹脂の溶出物が無色になるまで、ジメチルホルムアミド及びイソプロパノールにより洗浄された。十分に保護され、そして標識されたペプチドが、固相から除去され、そして80％トリフルオロ酢酸、10％エタンジチオール、５％チオアニソール及び5％水の混合物による処理により、永久保護基から開放された。最終的に、基質は、分離用逆相HPLC精製により単離された。精製は、12.2mgのRP-HPLC単一ピークの純粋な青色材料（凍結乾燥物）を生成した。同一性は、MALDI質量分光計［2720.0］により証明された。
【００８６】
酵素：Upstate Lck (p56lck, 活性)、Upstate Src (p60c-src, 一部精製された)は、UBIにより購入された。
【００８７】
時間分解蛍光アッセイ：リーダー：Perkin Elmer, Wallac Viktor 1420-040複数ラベルカウンター；液体ハンドリングシステム：Backman Coulter, Biamek 2000。ATP, Tween20, HEPESは、Roche Molecular Biochemicalsから購入し、MgCl2及びMnCl2はMerck Euralabから購入し、TCEPはPierceから購入し、384ウェル低体積蛍光プレートはFalconから購入した。
【００８８】
アッセイの説明：
最初に、酵素が、対応する量の本発明の阻害剤と共に水性溶液において15℃で15分間、プレインキュベートされる。次に、リン酸化反応が、ＡＴＰ、ペプチド及びＰＴ６６を含む反応混合物を添加し、そして続いて振盪することにより開始される。この反応の進行はすぐに、適切なウェルプレートリーダーにおいて、時間分解蛍光分光計を用いてモニターされる。
【００８９】
ＩＣ50−値は、非線形曲線カーブフィット（XLfitソフトウェア（ID Business Solution Ltd.、Guilford、Surrey、UK））を使用して反応速度から求めることができる。
【００９０】
【表１】
2009525292.tif 000007
【００９１】
Ａｂｌキナーゼ阻害剤のＩＣ５０の決定
Ａｂｌアッセイは、マウスＡｂｌ（２７位末端）、蛍光標識ペプチド基質（配列ＥＡＩＹＡＡＰＦＡＫＫＫ）に相当する融合タンパク質を用いて行い、そしてMolecular DeviceのIMAP蛍光偏光技術によって定量した。化合物は、３８４ウェルプレート内で連続希釈した濃度で試験した。キナーゼ反応は、ＫＡＢバッファー（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７、５０ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、０．１ｍＭ  ＮａＶＯ４、０．０２％ＢＳＡ）中で、２２．８μＭ  ＡＴＰの存在下で実施し、３７℃で６０分間インキュベートした。反応はＩＭＡＰビーズミックス（１：４０００希釈済み）によって停止した。室温で３時間インキュベーションした後、反応産物をLJL Acquest上で解析した（励起485nm及び発光530nm）上で解析した。
【００９２】
ＦＰの測定値（ｍＰ）を使用して反応速度を算出した。本アッセイは、Tomtec Quadraワークステーションにより半自動化されたものである。結果を表２に示す。
【００９３】
【表２】
2009525292.tif 000008
【００９４】
ＰＤＧＦＲキナーゼ阻害剤のＩＣ５０の決定
アッセイの原理
ＰＤＧＦＲアッセイは、ヒト組換えＰＤＧＦＲベータ、蛍光標識ペプチド基質（ペプチド配列がＡＬＴＳＮＱＥＹＬＤＬＳＭＰＬ）及び試験化合物（連続希釈）により、３８４ウェルプレートを用いて実施した。キナーゼ反応は、ＭＯＰＳバッファー（２ｍＭ  ＭＯＰＳ、ｐＨ７、１．５ｍＭ酢酸ナトリウム、６．２５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、０．１ｍＭ  ＮａＶＯ４、０．０２％ＢＳＡ）中で、４８μＭ  ＡＴＰの存在下で実施し、室温で６０分間インキュベートした。反応はIMAP Bead Bindingシステム(Molecular Devices)によって停止した。室温で２時間インキュベーションした後、反応産物をLJL Acquest上で解析した（励起485nm及び発光530nm）上で解析した。
【００９５】
ＦＰの測定値（ｍＰ）を使用して反応速度を算出した。本アッセイは、Tomtec Quadraワークステーションにより半自動化されたものである。結果を表３に示す。
【００９６】
【表３】
2009525292.tif 000009
【００９７】
抗増殖活性
抗増殖剤としての本発明の化合物の活性は以下の生物学的アッセイによって実証することができる：
【００９８】
HCT 116細胞におけるCellTiter-Glo（登録商標）アッセイ
CellTiter-Glo（登録商標）Luminescent Cell Viability Assay（Promega）は、代謝的に活性な細胞の存在を示す、存在するATPの定量に基づく培養内の生菌細胞数を測定する均一な方法である。
【００９９】
HCT 116細胞（ヒト結腸癌腫、ATCC-No. CC1-247）は、GlutaMAX（登録商標）I（Invitrogen、カタログ番号61870-010）、2.5%のウシ胎仔血清（FCS、Sigma カタログ番号F4135（FBS））；100ユニット/mlのペニシリン/100μg/mlのストレプトマイシン（＝Invitrogen製のPen/Strep、カタログ番号15140）を含むRPMI 1640培地中で培養された。アッセイのために、その細胞は、同じ培地中に1ウェルにつき1000細胞ずつ384ウェル・プレートに播種された。次の日に、試験化合物が、30μM〜0.0015μMの範囲にわたる様々な濃度（10種類の濃度、1：3希釈）で加えられた。5日後に、CellTiter-Glo（登録商標）アッセイを、製造業者の指示に従い行った（CellTiter-Glo（登録商標）Luminescent Cell Viability Assay、Promega製）。要するに、細胞-プレートは、約30分間、室温と均衡状態に置かれ、その後、CellTiter-Glo（登録商標）試薬が加えられた。内容物は、細胞分解を促すために15分間、慎重に混合された。45分後、発光シグナルが、Victor 2（走査型マルチウェル分光光度計、Wallac）により計測された。
【０１００】
詳細：
1日目：
‐培地：GlutaMAX（登録商標）I（Invitrogen、カタログ番号61870）、5%のFCS（Sigma、カタログ番号F4135）、Pen/Strep（Invitrogen、カタログ番号15140）を含むRPMI 1640。
‐HCT 116（ATCC-No. CC1-247）：384ウェル・プレートの1ウェルにつき60μl中、1000細胞（Greiner 781098、マイクロクリアープレートホワイト）。
‐播種した後に、プレートを、37℃、5%のCO2で24時間インキューベートする。
【０１０１】
2日目：誘導（10種類の濃度の化合物による処理）：
最高濃度である30μMの終濃度を達成するために、3.5μlの10mM化合物原液が、163μlの培地に直接加えられた。次に、以下に説明する希釈手順から成るステップe）が次に行われた。
【０１０２】
2番目に高い濃度〜最低濃度を達成するために、1：3の希釈段階による連続希釈が、本明細書中の以下に説明するように手順（a〜e）にしたがって次に行われた：
【０１０３】
a）2番目に高い濃度について、化合物の10mMの原液10μlを、20μlのジメチルスルホキシド（DMSO）に加える。
b）このDMSO希釈列で8回、1：3に希釈する（常に10μl対20μlのDMSO）（濃度で3333.3μM〜0.51μMの濃度の9つのウェルをもたらす）。
c）各濃度を1：47.6に希釈する（3.5μlの化合物希釈物対163μlの培地）。
e）全ての濃度のもの10μlを、細胞プレート内の60μlの培地に加えて、全てのウェル内のDMSO：0.3%の終濃度をもたらし、且つ、30μM〜0.0015μMの範囲にわたる10種類の化合物の終濃度をもたらす。
‐各化合物は三連で試験される。
‐37℃、5%のCO2で120時間（5日間）インキューベートする。
【０１０４】
分析：
‐1ウェルにつき30μlのCellTiter-Glo（登録商標）試薬（Promegaから購入したCellTiter-Glo（登録商標）バッファー及び（凍結乾燥された）CellTiter-Glo（登録商標）基質から調製した）を加える。
‐室温で15分間振盪する。
‐振盪することなく室温で45分間インキューベートする。
【０１０５】
計測：
‐Victor 2走査マルチウェル分光光度計（Wallac）、発光モード（0.5秒/読出し、477nm）。
‐非線形カーブフィットを使用してIC50を決定する（XLfitソフトウェア（ID Business Solution Ltd.、Guilford、Surrey、UK）。
【０１０６】
本発明の化合物及び医薬として許容されるそれらの塩は、例えば、医薬組成物の形態で、医薬品として使用されることができる。医薬組成物は、例えば、錠剤、コート錠、糖衣錠、硬ゼラチン・カプセル剤及び軟ゼラチン・カプセル剤、液剤、乳剤、又は懸濁液剤の形態で経口的に投与されることができる。しかしながら、投与は、例えば、坐剤の形態で経直腸的に、又は、例えば、注入液の形態で非経口的に行うこともできる。
【０１０７】
上述の医薬組成物は、医薬として不活性な、無機又は有機担体と一緒に本発明の化合物を加工することによって得ることができる。ラクトース、コーンスターチ若しくはその誘導体、滑石、ステアリン酸若しくはその塩などが、例えば、錠剤、コート錠、糖衣錠、及び硬ゼラチン・カプセル剤のための前述の担体として使用されてもよい。軟ゼラチン・カプセル剤のための好適な担体は、例えば、植物油、ワックス、油脂、半固体及び液体のポリオールなどである。しかしながら、活性物質の性質によっては、担体を必要とせず、通常、軟ゼラチン・カプセル剤の場合には必要がない。液剤及びシロップ剤の製造のための好適な担体は、例えば、水、ポリオール、グリセロール、植物油などである。坐剤のための好適な担体は、例えば、天然又は硬化オイル、ワックス、油脂、半液体又は液体ポリオールなどである。
【０１０８】
医薬組成物は、加えて、防腐剤、可溶化剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、着色料、香料、浸透圧を変えるための塩、バッファー、マスキング剤、又は抗酸化剤を含むことができる。それらは、更に、他の治療的に有益な物質を含むこともできる。
【０１０９】
医薬組成物は、例えば、以下のものを含む：
a）錠剤処方（湿式造粒）：
【表４】
2009525292.tif 000010
【０１１０】
製造手順：
1．品目1、2、3、及び4を混合し、そして精製水を用いて造粒する。
2．前記顆粒剤を50℃で乾かす。
3．前記顆粒剤を好適な製粉装置に通す。
4．品目5を加え、そして3分間混合する；好適な圧縮機械により圧力をかける。
【０１１１】
b）カプセル製剤：
【表５】
2009525292.tif 000011
【０１１２】
製造手順：
1．30分間好適なミキサーで品目1、2、及び3を混ぜる。
2．品目4及び5を加え、そして3分間混合する。
3．好適なカプセル内に充填する。
【０１１３】
本発明の理解を補助するために、以下の実施例及び参考文献を提供するが、本発明の真の範囲は、添付の請求項に記載される。本発明の本質から逸脱することなく記載される手順について改良を加えることができるものと解される。
【実施例】
【０１１４】
実験手順：
実験法
１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、Bruker 250 Avance分光計を用いて記録した。ケミカルシフトは、内部標準としてのトリメチルシランに対するδのスケールで、百万分率(ppm)で報告した。同定及び純度は、以下の条件でHP1100システム上で実施した分析用ＬＣ−ＭＳにより決定した。Phenomenex Gemini C18カラム (5μm, 30mmx2.0mm)、移動相５〜９５％アセトニトリル／水（０．０５％アンモニア含有）、合計４５分、保持１．５分、流速１ｍｌ／分、２１０〜２２０ｎｍでのダイオードアレイ検出。質量分析計は、切り替え可能な正イオンと負イオンのエレクトロスプレーモードで実行されるMicromass Platform LCを使用した。分析用ＧＣは、以下の条件でAgilent 6890N GCシステム上で実施した。Z5-5カラム（１５ｍ、０．３２ｍｍｘ０．２５ｍｍ）、５０℃で２．５分間保持、１０分間５０℃〜２７５℃、１ｍｌ／分、インジェクター温度３００℃、３００℃での炎イオン検出。
【０１１５】
マイクロ波による反応は、シリコン製の隔壁を備えたアルミニウム製のクリンプキャップを有する厚肉のガラス製スミスプロセスバイアル中で実施した。マイクロ波による加熱は、Personal Chemistry Creator EXPシステム内で指定の温度になるよう指定の時間行った。全ての反応は窒素雰囲気のもと実施した。
【０１１６】
重要な中間体の合成
実施例Ａ
５−ブロモ−２−メチルスルファニルピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル
【化５】
2009525292.tif 000012
トリエチルアミン（１６１．５ｍｌ、１．１６モル）を、５−メチルイソチオウレアのヨウ化水素酸塩（８５．０ｇ、０．３９モル）とムコブロム酸（１００．０ｇ、０．３９モル）／水（５００ｍｌ）を攪拌した懸濁液に対し２５分間滴下した。この時間の間、発熱を観察した（２０℃〜５０℃）。混合物を１８時間周囲温度で攪拌し、続いて１０％塩酸を用いて０〜５℃でｐＨ２に酸性化した。生じた沈殿を濾過により回収し、そして真空で乾燥させることにより、褐色の固体としての５−ブロモ−２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−カルボン酸（７１．４ｇ）が生成し、これを更に精製することなく使用した。
【０１１７】
塩化アセチル（６．２６ｍｌ、０．０８８モル）を０〜５℃でメタノール（１００ｍｌ）に滴下した。この混合物を０〜５℃で５分間攪拌した。５−ブロモ−２−メチルスルファニルピリミジン−４−カルボン酸（２０ｇ、０．０８モル）を０〜５℃で小分けに添加し、続いてこの混合物を還流させながら１時間加熱し、この間にスラリーが溶解し、これを周囲温度に冷却して飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍｌ）に注ぎいれた。生成物をジクロロメタン（３×１００ｍｌ）に抽出し、この抽出物を水（１００ｍｌ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ４）、そして真空で蒸発させた。残渣の固体をヘキサンから結晶化させることで、５−ブロモ−２−メチルスルファニルピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル（１２．２７ｇ）がオフホワイトの結晶性固体として生成した。融点６７〜７０℃：250MHz 1H-NMR (CDCl3) δ (ppm): 2.6 (s, 3H) (-SCH3), 4.05 (s, 3H) (-OCH3), 8.7 (s, 1H) (ArH)； m/z (M+H)+ 249； HPLC純度96%； HPLC保持時間1.58分。
【０１１８】
式ＩＩの置換フェニルアセチレンは、文献公知のものか、又は以下の実施例Ｂ１及びＢ２に従い調製したものである。
【０１１９】
実施例Ｂ１
１−エチニル−２−メチルベンゼン
【化６】
2009525292.tif 000013
２−ヨードトルエン（８１．５ｍｌ、０．６４モル）及びトリメチルシリルアセチレン（９９ｍｌ、０．７１モル）をトリエチルアミン（２５０ｍｌ）に溶解した。トリフェニルホスフィン（０．４２７ｇ、１．６ミリモル）、ヨウ化銅（Ｉ）（０．３ｇ、１．６ミリモル）及び二塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（０．５３ｇ、０．７１ミリモル）を添加し、そして混合物を還流しながら１８時間加熱した。この混合物を周囲温度に冷却し、そして慎重に１０％塩酸（４８０ｍｌ）に添加し、そして生成物をヘキサン（３×２００ｍｌ）に抽出した。抽出物を１０％塩酸（２００ｍｌ）及び水（２×１００ｍｌ）で洗浄し、脱水（ＭｇＳＯ４）し、そして真空で蒸発させることで黄色い油としてトリメチル−（２−メチルフェニル）エチニルシラン（１１４．０６ｇ）が生成し、これを更に精製することなく使用した。
【０１２０】
水酸化カリウム（１００ｇ、１．８ミリモル）を四つに分けてトリメチル−（２−メチルフェニル）エチニルシラン（１１４．０ｇ、０．６１モル）／メタノール（４００ｍｌ）の攪拌溶液に０℃で添加した。この混合物を０℃で、反応が完了するまで（ＴＬＣによる。１：１酢酸エチル：ヘキサン）攪拌した。この混合物を１０％塩酸を添加することで中和し、そして生成物をジクロロメタン（２×１５０ｍｌ）に抽出した。一まとめにした抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、そして真空で蒸発させた。残渣の油を短経路蒸留(Kugelrohr)で精製することで、１−エチル−２−メチルベンゼン（５２．０３ｇ）が透明な油として生成した。B.pt. 45℃ /12mBar. 250 MHz 1H-NMR (CDCl3) δ (ppm): 2.35 (s, 3H) (ArCH3), 3.2 (s, 1H) (CH), 7.0-7.2 (m, 3H) (3 x ArH), 7.4 (m, 1H) (ArH)； GC 純度98%, GC保持時間7.94分。
【０１２１】
実施例Ｂ２
１−クロロ−２−エチニルベンゼン
【化７】
2009525292.tif 000014
２−ブロモクロロベンゼン（５４．１ｍｌ、０．４６モル）及びトリメチルシリルアセチレン（７２ｍｌ、０．５１モル）をトリエチルアミン（２５０ｍｌ）に溶解した。トリフェニルホスフィン（０．４ｇ、１．５ミリモル）、ヨウ化銅（Ｉ）（０．３ｇ、１．６ミリモル）及び二塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（０．５ｇ、０．６７ミリモル）を添加し、そして混合物を還流しながら１８時間加熱した。この混合物を周囲温度に冷却し、そして慎重に１０％塩酸（４８０ｍｌ）に添加し、そして生成物をヘキサン（３×２００ｍｌ）に抽出した。抽出物を１０％塩酸（２００ｍｌ）及び水（２×１００ｍｌ）で洗浄し、脱水（ＭｇＳＯ４）し、そして真空で蒸発させることで橙色の油として（２−クロロフェニルエチニル）−トリメチルシラン（９５．４ｇ）が生成し、これを更に精製することなく使用した。
【０１２２】
水酸化カリウム（７７．５ｇ、１．３８ミリモル）を四つに分けて（２−クロロフェニルエチニル）−トリメチルシラン（９５．０ｇ、０．４６モル）／メタノール（２５０ｍｌ）の攪拌溶液に０℃で添加した。この混合物を０℃で、反応が完了するまで（ＴＬＣによる。１：１酢酸エチル：ヘキサン）攪拌した。この混合物を１０％塩酸を添加することで中和し、そして生成物をジクロロメタン（２×１５０ｍｌ）に抽出した。一まとめにした抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、そして真空で蒸発させた。残渣の油を短経路蒸留(Kugelrohr)で精製することで、１−クロロ−２−エチニルベンゼン（４１．２３ｇ）が透明な油として生成した。B.pt. 38℃/10mBar. 250 MHz 1H-NMR (CDCl3) δ (ppm): 3.25 (s, 1H) (CH), 7.1-7.5 (m, 4H) (ArH)； GC純度89%, GC保持時間2.67分。
【０１２３】
実施例Ｃ１
２−メチルスルファニル−６−（２−メチルフェニル−ピラノ［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン
【化８】
2009525292.tif 000015
１−エチニル−２−メチルベンゼン（０．５３ｇ、４．６ミリモル）、５−ブロモ−２−メチルスルファニルピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル（１．０ｇ、３．８ミリモル）、トリエチルアミン（２．５ｍｌ）、トリフェニルホスフィン（０．１２５ｇ、０．４８ミリモル）、ヨウ化銅（Ｉ）（０．０２５ｇ、０．１３ミリモル）、二塩化ビストリフェニルホスフィンパラジウム（ＩＩ）（０．１０ｇ、０．１４ミリモル）及びジメチルホルムアミド（１ｍｌ）の混合物を厚肉のガラス製スミスプロセスバイアル中で攪拌し、そしてマイクロ波を照射して１００℃で２０分間維持した。冷却した混合物をジクロロメタン（２０ｍｌ）で希釈し、そして５％塩酸（２０ｍｌ）、水（２０ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）及び水（２０ｍｌ）で洗浄し、続いて脱水（ＭｇＳＯ４）し、そして真空で蒸発させた。残渣の油をシリカ及び溶出液としてヘキサンとジクロロメタンの１：４混合物を用いたフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を一まとめにし、そして溶媒を真空で除去することで、２−メチルスルファニル−５−（２−メチルフェニル）エチニルピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル（０．９ｇ）が橙色の油として生成した。250 MHz 1H-NMR (CDCl3) δ (ppm): 2.45 (s, 3H) (ArCH3), 2.55 (s, 3H) (-SCH3), 3.95 (s, 3H) (CO2CH3), 7.05-7.25 (m, 3H) (3 x ArH), 7.45 (m, 1H) (ArH), 8.7 (s, 1H) (ArH)； m/z (M+H)+ 299, HPLC純度96%, HPLC保持時間4.15分。
【０１２４】
２−メチルスルファニル−５−（２−メチルフェニル）エチニルピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル（５．０ｇ、１６．８ミリモル）（上述したものと類似の方法で調製）、５０％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸／ジクロロメタン（１５ｍｌ）及び水（１ｍｌ）の混合物を厚肉のガラス製スミスプロセスバイアル中で攪拌し、そして１２０℃で４５分間照射した。この混合物を真空で乾燥するまで蒸発させ、そして残渣の油をシリカ及び溶出液としてヘキサンとジクロロメタンの３：７混合物を用いたフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を一まとめにし、そして溶媒を真空で除去することで、２−メチルスルファニル−６−（２−メチルフェニル−ピラノ［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン（３．７５ｇ）が橙色の油として生成した。250 MHz 1H-NMR (CDCl3) δ (ppm): 2.45 (s, 3H) (ArCH3), 2.65 (s, 3H) (-SCH3), 6.45 (s, 1H) (=CHAr), 7.15-7.45 (m, 4H) (4 x ArH), 8.85 (s, 1H) (ArH)； m/z (M+H)+ 285, HPLC純度98%, HPLC保持時間3.64分。
【０１２５】
実施例Ｃ２
６−（２−クロロフェニル）−２−メチルスルファニルピラノ［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン
【化９】
2009525292.tif 000016
１−クロロ−２−エチニルベンゼン（０．６３ｇ、４．６ミリモル）、５−ブロモ−２−メチルスルファニルピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル（１．０ｇ、３．８ミリモル）、トリエチルアミン（２．５ｍｌ）、トリフェニルホスフィン（０．１３５ｇ、０．４８ミリモル）、ヨウ化銅（Ｉ）（０．０２５ｇ、０．１３ミリモル）、二塩化ビストリフェニルホスフィンパラジウム（ＩＩ）（０．１０ｇ、０．１４ミリモル）及びジメチルホルムアミド（１ｍｌ）の混合物を厚肉のガラス製スミスプロセスバイアル中で攪拌し、そしてマイクロ波を照射して１００℃で２０分間維持した。冷却した混合物をジクロロメタン（２０ｍｌ）で希釈し、そして５％塩酸（２０ｍｌ）、水（２０ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）及び水（２０ｍｌ）で洗浄し、続いて脱水（ＭｇＳＯ４）し、そして真空で蒸発させた。残渣の油をシリカ及び溶出液としてヘキサンとジクロロメタンの１：４混合物を用いたフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を一まとめにし、そして溶媒を真空で除去することで、５−（２−クロロフェニルエチニル）−２−メチルスルファニルピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル（０．９ｇ）が黄色の油として生成した。250 MHz 1H-NMR (CDCl3) δ (ppm): 2.5 (s, 3H) (-SCH3), 3.9 (s, 3H) (-CO2CH3), 7.1-7.5 (m, 4H) (ArH), 8.65 (s, 1H) (ArH)； m/z (M+H)+ - 319, HPLC純度91%, HPLC保持時間4.08分。
【０１２６】
５−（２−クロロフェニルエチニル）−２−メチルスルファニルピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル（５．０ｇ、９．４ミリモル（上述したものと類似の方法で調製）、５０％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸／ジクロロメタン（１５ｍｌ）及び水（１ｍｌ）の混合物を厚肉のガラス製スミスプロセスバイアル中で攪拌し、そして１２０℃で４５分間照射した。この混合物を真空で乾燥するまで蒸発させ、そして残渣の油をシリカ及び溶出液としてヘキサンとジクロロメタンの３：７混合物を用いたフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を一まとめにし、そして溶媒を真空で除去することで、６−（２−クロロフェニル）−２−メチルスルファニルピラノ［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン（３．１５ｇ）が浅黄色の油として生成した。250 MHz δ (CDCl3) δ (ppm): 2.65 (s, 3H) (-SCH3), 6.95 (s, 1H) (=CHAr), 7.25-7.4 (m, 3H) (ArH), 7.65 (m, 1H) (ArH), 8.85 (s, 1H) (ArH)； m/z (M+H) +' 305, HPLC純度100%, HPLC保持時間3.66分。
【０１２７】
実施例Ｄ
２−メチルスルファニル−５−（２−オキソ−２−ｏ−トリル−エチル）−ピリミジン−４−カルボン酸アミド
【化１０】
2009525292.tif 000017
【０１２８】
２−メチルスルファニル−６−（２−メチルフェニル）−ピラノ［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン（０．５ｇ、１．８ミリモル）、適切なアミン（３．６ミリモル）及びジクロロメタン（３．５ｍｌ）の混合物を厚肉のガラス製スミスプロセスバイアル中で攪拌し、そしてマイクロ波を照射して１２０℃で１５分間維持した。この混合物をジクロロメタン（１０ｍｌ）で希釈し、水（２×１０ｍｌ）で洗浄し、脱水（ＭｇＳＯ４）し、そして真空で蒸発させることで、それぞれ暗色の所望のアミドが生成し、これを更に精製することなく使用した。
【０１２９】
合成した化合物：
【化１１】
2009525292.tif 000018
【０１３０】
【化１２】
2009525292.tif 000019
【０１３１】
実施例Ｅ
７−置換２−メチルスルファニル−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン
【化１３】
2009525292.tif 000020
【０１３２】
適切なアミド（１．８ミリモル）（（Ｄ）で調製したもの））及び１０％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸／ジクロロメタン（４ｍｌ）の混合物を厚肉のガラス製スミスプロセスバイアル中で攪拌し、そして照射して１２０℃で２０分間維持した。この混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）に注ぎ入れ、そして生成物をジクロロメタン（２×２０ｍｌ）中に抽出した。一まとめにした抽出物を脱水（ＭｇＳＯ４）し、そして真空で蒸発させることで所望のラクタムが生成し、これを更に精製することなく使用した。
【０１３３】
合成した化合物：
【化１４】
2009525292.tif 000021
【０１３４】
【化１５】
2009525292.tif 000022
実施例Ｆ
２−メタンスルホニル−７−置換−６−ｏ−トリル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン
【化１６】
2009525292.tif 000023
【０１３５】
適切なラクタム（０．７ミリモル）（（Ｅ）で調製したもの））をクロロホルム（４ｍｌ）に溶解した。３−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）（１．０ミリモル）を添加し、そして混合物を周囲温度で１時間攪拌した。第二の３−クロロ安息香酸を添加し、そして混合物を更に１８時間攪拌した。この混合物を飽和亜硫酸ナトリウム水溶液（２５ｍｌ）中に注ぎ入れ、そして生成物をジクロロメタン（２×１５ｍｌ）中に抽出した。一まとめにした抽出物を２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（２５ｍｌ）で洗浄し、続いて脱水（ＭｇＳＯ４）し、そして真空で蒸発させた。残渣の油は、溶出液としてジクロロメタンを用いる、シリカ上でのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適切な画分を一まとめにし、そして溶媒を真空で除去することで所望のスルホンが生成した。
【０１３６】
合成した化合物：
【化１７】
2009525292.tif 000024
【０１３７】
実施例Ｇ
５−［２−（２−クロロ−フェニル）−２−オキソ−エチル］−２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−カルボン酸アミド
【化１８】
2009525292.tif 000025
【０１３８】
本合成は、上文の（Ｄ）に記載の方法に従い、５−（２−クロロ−フェニルエチニル）−２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル及び適切なアミンを用いて実施した。
【０１３９】
合成した化合物：
【化１９】
2009525292.tif 000026
【０１４０】
実施例Ｈ
６−（２−クロロ−フェニル）−７−置換−２−メチルスルファニル−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン
【化２０】
2009525292.tif 000027
【０１４１】
本合成は、上文の（Ｅ）に記載の方法に従い、（Ｇ）で合成した適切なアミドを用いて実施した。
【０１４２】
合成した化合物：
【化２１】
2009525292.tif 000028
【０１４３】
【化２２】
2009525292.tif 000029
【０１４４】
実施例Ｉ
６−（２−クロロ−フェニル）−２−メチルスルホニル−７−置換−７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン
【化２３】
2009525292.tif 000030
【０１４５】
本合成は、上文の（Ｆ）に記載の方法に従い、（Ｈ）で合成した適切なラクタムを用いて実施した。
【０１４６】
合成した化合物：
【化２４】
2009525292.tif 000031
【０１４７】
最終産物の合成
【化２５】
2009525292.tif 000032
【０１４８】
実施例Ｆ又はＩ由来の適切なスルホン（０．４ミリモル）、指定のアミンＲ４ＮＨ２（０．８ミリモル）及びＮ−メチルピロリドン（０．１ｍｌ）の混合物を厚肉のガラス製スミスプロセスバイアル中で攪拌した。トリフルオロ酢酸（０．１２ミリモル）を添加し、そしてこの混合物にマイクロ波を照射して１２０℃で２時間維持した。生じた油をメタノールで希釈し、そして直接調製用ＨＰＬＣ／ＭＳ精製にかけた。生成物を含む画分をプールし、そして蒸発させ、そして任意に、酢酸エチル／ヘキサン混合物を用いたシリカ上でのクロマトグラフィーにより更に精製することで、適切な７Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−８−オン誘導体が生成した。
【０１４９】
合成した化合物：
実施例１−４７：
【化２６】
2009525292.tif 000033
【０１５０】
【化２７】
2009525292.tif 000034
【０１５１】
【化２８】
2009525292.tif 000035
【０１５２】
【化２９】
2009525292.tif 000036
【０１５３】
【化３０】
2009525292.tif 000037
【０１５４】
【化３１】
2009525292.tif 000038
【０１５５】
【化３２】
2009525292.tif 000039
【０１５６】
【化３３】
2009525292.tif 000040
【０１５７】
【化３４】
2009525292.tif 000041
【０１５８】
【化３５】
2009525292.tif 000042
【０１５９】
【化３６】
2009525292.tif 000043
【０１６０】
【化３７】
2009525292.tif 000044
【国際調査報告】
2009525292.tif 000048
2009525292.tif 000049