(57)【要約】Ｒ３が好ましくはヒドロキシラジカルであり、サザン環が好ましくはフェニル環である、式（Ｉ）のピロロ-イソキノリン化合物。これらの化合物およびそれらの薬学的に許容される塩は、疼痛、炎症性疾患、神経系障害、あるいは泌尿生殖器または胃腸系と関連した疾患を治療するための、依存性イオンチャンネルの調製に使用される。2009516712.tif 000030
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
依存性イオンチャネルを発現する細胞を、式１に示される化合物およびその薬学的に許容される塩、光学異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ジアステレオマー、またはラセミ化合物の有効量に接触させる段階を含む、依存性イオンチャネルの活性を調節する方法：
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式中
点線は、一重または二重結合を示し、
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ−アルキル、ヒドロキシ−アルキル、アルコキシ−カルボニル−アルキル、アルキル−カルボニル−オキシ−アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、スルホンアミド、アミノ、スルホニル、スルホン酸、尿素、フェニルまたはベンジル基がハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシ−アルキル、アルコキシ、スルホンアミド、アルケニル、アルキニル、アミノ、スルホニル、スルホン酸、および尿素で置換されてもよいフェニルまたはベンジルから成る群から選択され、
Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、−（ＣＨ２）１−４Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、および−Ｓ（Ｏ）２Ｃ１−４アルキルから成る群から選択され
Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、アルキル、アシル、フェニル、ベンジル、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｏ−フェニル、−ＯＣＦ３、アルコキシ、−Ｏ（ＣＨ２）０−４ＯＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、
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から成る群から選択され、ならびに
Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群、またはＲ’およびＲ’’が互いに独立して水素またはアルキルである、式−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ’’の群からそれぞれ独立に選択される。
【請求項２】
化合物は式２で示され、およびその薬学的に許容される塩、光学異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ジアステレオマー、またはそのラセミ化合物である、請求項１記載の方法：
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式中
Ｒ１は、水素、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニル、およびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニルおよびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群からそれぞれ独立に選択される。
【請求項３】
Ｒ１は、水素およびＣ１−４−アルキルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニルおよびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群から、それぞれ独立に選択される、請求項２記載の方法。
【請求項４】
Ｒ１は、Ｃ１−４−アルキルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素およびＣ１−４−アルキルから成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群から、それぞれ独立に選択される、請求項２記載の方法。
【請求項５】
Ｒ１は、−ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択され、Ｒ２は、水素から成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、Ｃ１−４−アルキルおよびＣ１−４−アルコキシから成る群から、それぞれ独立に選択される、請求項２記載の方法。
【請求項６】
化合物は式３で示されるか、または、その薬学的に許容される塩である、請求項１記載の方法：
2009516712.tif 000028
式中
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ−アルキル、アルコキシ−カルボニル−アルキル、アルキル−カルボニル−オキシ−アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、スルホンアミド、アミノ、スルホニル、スルホン酸、尿素、フェニルまたはベンジル基がハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシ−アルキル、アルコキシ、スルホンアミド、アルケニル、アルキニル、アミノ、スルホニル、スルホン酸、および尿素で置換されてもよいフェニルまたはベンジルから成る群から選択され、ならびに
Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、フェノキシ、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、およびフェニルから成る群、またはＲ’およびＲ’’が互いに独立して水素またはアルキルである、式−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ’’の群からそれぞれ独立に選択される。
【請求項７】
Ｒ５がアリール環の２位にあり、かつＲ４がアリール環の５位にあるか、またはＲ４がアリール環の３位にあり、かつＲ５がアリール環の５位にある、請求項６記載の方法。
【請求項８】
Ｒ１は水素、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニル、およびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群からそれぞれ独立に選択される、請求項６記載の方法。
【請求項９】
Ｒ１は、水素およびＣ１−４−アルキルから成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群からそれぞれ独立に選択される、請求項６記載の方法。
【請求項１０】
Ｒ１は、Ｃ１−４−アルキルから成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群からそれぞれ独立に選択される、請求項６記載の方法。
【請求項１１】
Ｒ１は、−ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群からそれぞれ独立に選択される、請求項６記載の方法。
【請求項１２】
Ｒ１がＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３である、請求項６記載の方法。
【請求項１３】
Ｒ４がハロゲンである、請求項６記載の方法。
【請求項１４】
Ｒ５がアルコキシである、請求項６記載の方法。
【請求項１５】
Ｒ４がフルオロまたはクロロである、請求項１３記載の方法。
【請求項１６】
Ｒ５が−ＯＣＨ３である、請求項１４記載の方法。
【請求項１７】
Ｒ４およびＲ５が両方アルキルである、請求項６記載の方法。
【請求項１８】
Ｒ４およびＲ５が両方ＣＨ３である、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
Ｒ４がフルオロであり、かつＲ５が−ＯＣＨ３であるか、Ｒ４がクロロであり、かつＲ５が−ＯＣＨ３であるか、またはＲ４およびＲ５が両方ＣＨ３である、請求項６記載の方法。
【請求項２０】
化合物は、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，３−ジメチル−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、および５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンから成る群から選択される、請求項６記載の方法。
【請求項２１】
５−フェニル−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、８−エチル−５−（２−メトキシ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、および５−（２−エトキシ−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシムから成る群から選択される化合物の有効量に、依存性イオンチャネルを発現する細胞を接触させる段階を含む、依存性イオンチャネルの活性を調節する方法。
【請求項２２】
化合物の有効量に、細胞を接触させることが、依存性イオンチャネルの活性を抑制する、請求項１〜２１のいずれか一項記載の方法。
【請求項２３】
依存性イオンチャネルが、ＤＥＧ／ＥＮａＣ、Ｐ２ＸおよびＴＲＰＶ遺伝子スーパーファミリーのメンバーから成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを含む、請求項１〜２２のいずれか一項記載の方法。
【請求項２４】
依存性イオンチャネルが、αＥＮａＣ、βＥＮａＣ、γＥＮａＣ、δＥＮａＣ、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ４、ＢＬＩＮａＣ、ｈＩＮａＣ、Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６、Ｐ２Ｘ７、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５、およびＴＲＰＶ６から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを含む、請求項１〜２２のいずれか一項記載の方法。
【請求項２５】
依存性イオンチャネルがホモマルチマーである、請求項２３または２４記載の方法。
【請求項２６】
依存性イオンチャネルがヘテロマルチマーである、請求項２３または２４記載の方法。
【請求項２７】
ＤＥＧ／ＥＮａＣ依存性イオンチャネルが、αＥＮａＣ、βＥＮａＣ、γＥＮａＣ、δＥＮａＣ、ＢＬＩＮａＣ、ｈＩＮａＣ、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３、およびＡＳＩＣ４から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを含む、請求項２３〜２６のいずれか一項記載の方法。
【請求項２８】
ＤＥＧ／ＥＮａＣ依存性イオンチャネルが、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３、およびＡＳＩＣ４から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを含む、請求項２３〜２６のいずれか一項記載の方法。
【請求項２９】
依存性イオンチャネルがＡＳＩＣ１および／またはＡＳＩＣ３を含む、請求項２３〜２６のいずれか一項記載の方法。
【請求項３０】
Ｐ２Ｘ依存性イオンチャネルが、Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６およびＰ２Ｘ７から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを含む、請求項２３〜２６のいずれか一項記載の方法。
【請求項３１】
ＴＲＰＶ依存性イオンチャネルが、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５およびＴＲＰＶ６の群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを含む、請求項２３〜２６のいずれか一項記載の方法。
【請求項３２】
ヘテロマルチマー依存性イオンチャネルが、以下の依存性イオンチャネルの組み合わせを含む、請求項２６記載の方法：αＥＮａＣ、βＥＮａＣおよびγＥＮａＣ；αＥＮａＣ、βＥＮａＣおよびδＥＮａＣ；ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ３；ＡＳＩＣ１ｂおよびＡＳＩＣ３；ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ３；ＡＳＩＣ２ｂおよびＡＳＩＣ３；ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ３；Ｐ２Ｘ１およびＰ２Ｘ２；Ｐ２Ｘ１およびＰ２Ｘ５；Ｐ２Ｘ２およびＰ２Ｘ３；Ｐ２Ｘ２およびＰ２Ｘ６；Ｐ２Ｘ４およびＰ２Ｘ６；ＴＲＰＶ１およびＴＲＰＶ２；ＴＲＰＶ５およびＴＲＰＶ６；ならびにＴＲＰＶ１およびＴＲＰＶ４。
【請求項３３】
ヘテロマルチマー依存性イオンチャネルが、以下の依存性イオンチャネルの組み合わせを含む、請求項２６記載の方法：ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ２ａ；ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ２ｂ；ＡＳＩＣ１ｂおよびＡＳＩＣ３；ならびにＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ２ｂ。
【請求項３４】
依存性イオンチャネルの活性が疼痛に関わる、請求項１〜２１のいずれか一項記載の方法。
【請求項３５】
依存性イオンチャネルの活性が炎症性疾患に関わる、請求項１〜２１のいずれか一項記載の方法。
【請求項３６】
依存性イオンチャネルの活性が神経障害に関わる、請求項１〜２１のいずれか一項記載の方法。
【請求項３７】
疼痛が、皮膚痛覚、体性痛、内臓痛、および神経障害性疼痛から成る群から選択される、請求項３４記載の方法。
【請求項３８】
疼痛が、急性疼痛または慢性疼痛である、請求項３４記載の方法。
【請求項３９】
皮膚痛覚が傷害、外傷、傷口、裂傷、穿刺、火傷、外科的切開、感染症または急性炎症に関わる、請求項３７記載の方法。  
【請求項４０】
体性痛が、筋骨格および結合系の傷害、疾患または障害に関わる、請求項３７記載の方法。
【請求項４１】
傷害、疾患または障害が、ねんざ、骨折、関節炎、乾癬、湿疹および虚血性心疾患から成る群から選択される、請求項４０記載の方法。
【請求項４２】
内臓痛が、循環系、呼吸器系、胃腸系、もしくは泌尿生殖系の傷害、疾患または障害に関わる、請求項３７記載の方法。
【請求項４３】
循環系の疾患または障害が、虚血性心疾患、狭心症、急性心筋梗塞，心不整脈、静脈炎、間欠性跛行、静脈瘤および痔核から成る群から選択される、請求項４２記載の方法。
【請求項４４】
呼吸器系の疾患または障害が、喘息、呼吸器感染、慢性気管支炎および肺気腫から成る群から選択される、請求項４２記載の方法。
【請求項４５】
胃腸系の疾患または障害が、胃炎、十二指腸炎、過敏性腸症候群、大腸炎、クローン病、胃腸の逆流性疾患、潰瘍および憩室炎から成る群から選択される、請求項４２記載の方法。
【請求項４６】
泌尿生殖系の疾患または障害が、膀胱炎、尿路感染症、糸球体腎炎（ｇｌｏｍｕｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ）、多発性嚢胞腎、腎結石および泌尿生殖系の癌から成る群から選択される、請求項４２記載の方法。
【請求項４７】
体性痛が、関節痛、筋肉痛、慢性腰痛、幻肢痛、癌関連の疼痛、歯痛、線維筋痛、特発性疼痛障害、慢性非特異性疼痛、慢性骨盤痛、術後疼痛、および関連痛から成る群から選択される、請求項４２記載の方法。
【請求項４８】
神経障害性疼痛が、神経系の傷害、疾患または障害に関わる、請求項４２記載の方法。
【請求項４９】
神経系の傷害、疾患または障害が、神経障害性疼痛、神経障害、頭痛、片頭痛、心因性疼痛、慢性の頭部痛および脊髄損傷から成る群から選択される、請求項４８記載の方法。
【請求項５０】
依存性イオンチャネルの活性が、筋骨格および結合組織系、呼吸器系、循環系、泌尿生殖系、胃腸系または神経系の炎症性疾患から選択される、請求項１〜２１のいずれか一項記載の方法。
【請求項５１】
筋骨格および結合組織系の炎症性疾患が、関節痛、乾癬、筋炎、皮膚炎および湿疹から成る群から選択される、請求項５０記載の方法。
【請求項５２】
呼吸器系の炎症性疾患が、喘息、気管支炎、静脈洞炎、咽頭炎、喉頭炎、気管炎、鼻炎、嚢胞性線維症、呼吸器感染および急性呼吸窮迫症候群から成る群から選択される、請求項５０記載の方法。
【請求項５３】
循環系の炎症性疾患が、血管炎、血尿症候群、アテローム性動脈硬化、動脈炎、静脈炎、心臓炎および冠状動脈性心疾患から成る群から選択される、請求項５０記載の方法。
【請求項５４】
胃腸系の炎症性疾患が、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、憩室炎、ウイルス感染、細菌感染、消化性潰瘍、慢性肝炎、歯肉炎、歯膜炎（ｐｅｒｉｏｄｅｎｔｉｔｉｓ）、口内炎、胃炎および胃腸の逆流性疾患から成る群から選択される、請求項５０記載の方法。
【請求項５５】
泌尿生殖系の炎症性疾患が、膀胱炎、多発性嚢胞腎、腎炎症候群、尿路感染症、シスチン症、前立腺炎、卵管炎、子宮内膜症および泌尿生殖系の癌から成る群から選択される、請求項５０記載の方法。
【請求項５６】
神経障害が、統合失調症、双極性障害、鬱病、アルツハイマー病、てんかん、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、依存症、脳虚欠、神経障害、網膜色素変性、緑内障、心不整脈、帯状疱疹、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、不安障害、パニック障害、恐怖症、不安性ヒステリー、全般性不安障害および神経症から成る群から選択される、請求項３６記載の方法。
【請求項５７】
式１、式２、式３または式４の化合物の有効量を対象に投与する段階を含む、治療が必要な対象の疼痛を治療する方法。
【請求項５８】
化合物は、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，３−ジメチル−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、および５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンから成る群から選択される、請求項５７記載の方法。
【請求項５９】
５−フェニル−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、８−エチル−５−（２−メトキシ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、５−（２−エトキシ−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシムから成る群から選択される化合物の有効量を対象に投与する段階を含む、治療が必要な対象の疼痛を治療する方法。
【請求項６０】
対象が哺乳動物である、請求項５７〜５９のいずれか一項記載の方法。
【請求項６１】
哺乳動物がヒトである、請求項６０記載の方法。
【請求項６２】
疼痛が、皮膚痛覚、体性痛、内臓痛、および神経障害性疼痛から成る群から選択される、請求項５７〜５９のいずれか一項記載の方法。
【請求項６３】
疼痛が、急性疼痛または慢性疼痛である、請求項５７〜５９のいずれか一項記載の方法。
【請求項６４】
式１、式２、式３または式４の化合物の有効量を対象に投与する段階を含む、治療が必要な対象の炎症性疾患を治療する方法。
【請求項６５】
化合物は、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，３−ジメチル−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、および５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンから成る群から選択される、請求項６４記載の方法。
【請求項６６】
５−フェニル−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、８−エチル−５−（２−メトキシ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、および５−（２−エトキシ−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシムから成る群から選択される化合物の有効量を対象に投与する段階を含む、治療が必要な対象の炎症性疾患を治療する方法。
【請求項６７】
対象が哺乳動物である、請求項６３〜６６のいずれか一項記載の方法。
【請求項６８】
哺乳動物がヒトである、請求項６７記載の方法。
【請求項６９】
炎症性疾患が、筋骨格および結合組織系、呼吸器系、循環系、泌尿生殖系、胃腸系または神経系の炎症性疾患である、請求項６４〜６６のいずれか一項記載の方法。
【請求項７０】
式１、式２、式３または式４の化合物の有効量を投与する段階を含む、治療が必要な対象の神経障害を治療する方法。
【請求項７１】
化合物は、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，３−ジメチル−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、および５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンから成る群から選択される、請求項７０記載の方法。
【請求項７２】
５−フェニル−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、８−エチル−５−（２−メトキシ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、および５−（２−エトキシ−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシムから成る群から選択される化合物の有効量を対象に投与する段階を含む、治療が必要な対象の神経障害を治療する方法。
【請求項７３】
対象が哺乳動物である、請求項７０〜７２のいずれか一項記載の方法。
【請求項７４】
哺乳動物がヒトである、請求項７３記載の方法。
【請求項７５】
神経障害が、統合失調症、双極性障害、鬱病、アルツハイマー病、てんかん、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、依存症、脳虚欠、神経障害、網膜色素変性、緑内障、心不整脈、帯状疱疹、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、不安障害、パニック障害、恐怖症、不安性ヒステリー、全般性不安障害および神経症から成る群から選択される、請求項７０〜７２のいずれか一項記載の方法。
【請求項７６】
式１、式２、式３または式４の化合物の有効量を対象に投与する段階を含む、治療が必要な対象の泌尿生殖および／または胃腸系に関連した疾患または障害を治療する方法。
【請求項７７】
化合物は、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，３−ジメチル−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、および５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンから成る群から選択される、請求項７６記載の方法。
【請求項７８】
治療が必要な対象の泌尿生殖および／または胃腸系に関連した疾患または障害を治療する方法であって、５−フェニル−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、８−エチル−５−（２−メトキシ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、および５−（２−エトキシ−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシムから成る群から選択される化合物の有効量を対象に投与する段階を含む、治療方法。
【請求項７９】
対象が哺乳動物である、請求項７６〜７８のいずれか一項記載の方法。
【請求項８０】
哺乳動物がヒトである、請求項７９記載の方法。
【請求項８１】
胃腸系の疾患または障害が、胃炎、十二指腸炎、過敏性腸症候群、大腸炎、クローン病、潰瘍および憩室炎から成る群から選択される、請求項７６〜７８のいずれか一項記載の方法。
【請求項８２】
泌尿生殖系の疾患または障害が、膀胱炎、尿路感染症、糸球体腎炎、多発性嚢胞腎、腎結石および泌尿生殖系の癌から成る群から選択される、請求項７６〜７８のいずれか一項記載の方法。
【請求項８３】
アジュバント化合物を投与する段階をさらに含む、請求項１、５７、６４、７０または７６のいずれか一項記載の方法。
【請求項８４】
アジュバント化合物が、オピロイド鎮痛薬、非オピロイド鎮痛薬、局部麻酔薬、コルチコステロイド、非ステロイド性抗炎症薬、非選択的ＣＯＸ阻害剤、非選択的ＣＯＸ２阻害剤、選択的ＣＯＸ２阻害剤、抗てんかん薬、バルビツール酸系睡眠薬、抗うつ剤、マリファナおよび局所鎮痛薬から成る群から選択される、請求項８３記載の方法。
【請求項８５】
式２に示される化合物、およびその薬学的に許容される塩、光学異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ジアステレオマー、またはラセミ化合物：
2009516712.tif 000029
式中
Ｒ１は、水素、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニル、およびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニルおよびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群からそれぞれ独立に選択される。
【請求項８６】
Ｒ１は、水素およびＣ１−４−アルキルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニルおよびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群から、それぞれ独立に選択される、請求項８５記載の化合物。
【請求項８７】
Ｒ１は、Ｃ１−４−アルキルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素およびＣ１−４−アルキルから成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群から、それぞれ独立に選択される、請求項８５記載の化合物。
【請求項８８】
Ｒ１は、−ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択され、Ｒ２は、水素から成る群から選択され、ならびにＲ４およびＲ５は、ハロゲン、Ｃ１−４−アルキルおよびＣ１−４−アルコキシから成る群から、それぞれ独立に選択される、請求項８５記載の化合物。
【請求項８９】
Ｒ１がＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３である、請求項８５記載の化合物。
【請求項９０】
Ｒ４がハロゲンである、請求項８５記載の化合物。
【請求項９１】
Ｒ５がアルコキシである、請求項８５記載の化合物。
【請求項９２】
Ｒ４がフルオロまたはクロロである、請求項９０記載の化合物。
【請求項９３】
Ｒ５が−ＯＣＨ３である、請求項９１記載の化合物。
【請求項９４】
Ｒ４およびＲ５が両方アルキルである、請求項８５記載の化合物。
【請求項９５】
Ｒ４およびＲ５が両方ＣＨ３である、請求項８５記載の化合物。
【請求項９６】
Ｒ４がフルオロであり、かつＲ５が−ＯＣＨ３であるか、Ｒ４がクロロであり、かつＲ５が−ＯＣＨ３であるか、またはＲ４およびＲ５が両方ＣＨ３である、請求項８５記載の化合物。
【請求項９７】
５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（３，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，５−ジメチルフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、５−（２，３−ジメチル−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、および５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンから成る群から選択される、請求項８５記載の化合物。
【請求項９８】
５−フェニル−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン、８−エチル−５−（２−メトキシ−フェニル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシム、および５−（２−エトキシ−フェニル）−８−エチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン３−オキシムから成る群から選択される化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、依存性イオンチャネルを調節する組成物およびその方法と用途に関する。
【０００２】
関連出願
本願は、２００５年１１月２３日付申請、代理人整理番号ＰＣＩ−０３４−１、「依存性イオンチャネルを調節するための組成物および方法」と称される米国仮特許出願第６０／７３９，６００号に対して優先権を主張する。本願中のいずれの特許、特許申請および参考文献の内容も、参照することによりその全体が本願に組み込まれる。
【背景技術】
【０００３】
背景
哺乳動物の細胞膜は、多くの細胞および組織の構造的完全性および活性に重要なものである。特に興味深いのは、直接および間接的に様々な薬理的、生理学的、および細胞の過程を制御する役割を果たす膜貫通型依存性イオンチャネルの研究である。数々の依存性イオンチャネルが発見され、細胞機能におけるその役割を究明するために研究されている。
【０００４】
依存性イオンチャネルは、細胞（例えば神経または筋細胞）内のシグナルの受信、統合、変換、伝導および送信に関与する。依存性イオンチャネルは、膜興奮性を決定することができる。また、依存性イオンチャネルは、膜静止電位、波形、および活動電位の周波数、さらに興奮閾値に影響を及ぼすことができる。依存性イオンチャネルは、通常、電気的に興奮性細胞（例えば神経細胞）内に発現し、多量体である。依存性イオンチャネルは、非興奮性細胞（例えば脂肪細胞または肝細胞）内においても見られ、例えばシグナル変換の役割を果たすことができる。
【０００５】
今までに確認された多くの依存性イオンチャネルの中に、例えば、電圧、気温、化学環境、ｐＨ，リガンド濃度および／または機械的刺激の調節に対応するチャネルがある。特定のモジュレーターの例には以下が含まれる：ＡＴＰ、カプサイシン、神経伝達物質（例えばアセチルコリン）、イオン（例えばＮａ＋、Ｃａ＋、Ｋ＋、Ｃｌ−、Ｈ＋、Ｚｎ＋、Ｃｄ＋、および／またはペプチド（例えばＦＭＲＦ）。これらの刺激に反応する依存性イオンチャネルの例は、ＤＥＧ／ＥＮａＣ、ＴＲＰＶおよびＰ２Ｘ遺伝子スーパーファミリーのメンバーである。
【０００６】
ＤＥＧ／ＥＮａＣ遺伝子スーパーファミリーのメンバーは、上皮および神経興奮性組織の輸送を含む広範囲に細胞分布する高度な機能的多様性を示す。ＤＥＧ／ＥＮａＣタンパク質は、細胞内Ｎ−およびＣ−末端、および高システイン細胞外ループの２つの膜貫通ドメインで特徴付けられる膜タンパク質である。細胞内のそれらの機能によって、ＤＥＧ／ＥＮａＣチャネルは、ナトリウムの恒常性に関与する上皮性ナトリウムチャネル（ＥＮａＣ）のように構造的に活性である、またはＣ．ｅｌｅｇａｎｓ  ｄｅｇｎｅｒｉｎｓを想定するように機械的刺激により、または、ＦＭＲＦアミドペプチド活性化チャネルであり、神経伝達に関与するＨｅｌｉｘ  ａｓｐｅｒｓａのＦａＮａＣの場合のようにペプチドなどのリガンドにより、または酸感受性イオンチャネル（ＡＳＩＣｓ）の場合のようにプロトンにより活性される。これまでに知られるこの遺伝子ファミリーの哺乳動物のメンバーは、αＥＮａＣ（ＳＣＮＮ１Ａまたはｓｃｎｎ１Ａとしても知られる）、βＥＮａＣ（ＳＣＮＮ１Ｂまたはｓｃｎｎ１Ｂとしても知られる），γＥＮａＣ（ＳＣＮＮ１Ｇまたはｓｃｎｎ１Ｇとしても知られる）、δＥＮａＣ（ＥＮａＣｄ、ＳＣＮＮ１Ｄ、ｓｃｎｎ１ＤおよびｄＮａＣｈとしても知られる）、ＡＳＩＣ１ａ（ＡＳＩＣ，ＡＳＩＣ１，ＢＮａＣ２，ｈＢＮａＣ２、ＡＳＩＣａｌｐｈａ、ＡＣＣＮ２、およびＡｃｃｎ２としても知られる）、ＡＳＩＣ１ｂ（ＡＳＩＣｂｅｔａとしても知られる）、ＡＳＩＣ２ａ（ＢＮＣ１，ＭＤＥＧ１，ＢＮａＣ１およびＡＣＣＮ１としても知られる）、ＡＳＩＣ２ｂ（ＭＤＥＧ２、ＡＳＩＣ２ｂとしても知られる）、ＡＳＩＣ３（ｈＡＳＩＣ３、ＤＲＡＳＩＣ、ＴＮａＣ１、ＳＬＮＡＣ１、ＡＣＣＮ３、およびＡｃｃｎ３としても知られる）、ＡＳＩＣ４（ＢＮａＣ４、ＳＰＡＳＩＣ、ＡＣＣＮ４、およびＡｃｃｎ４としても知られる）、ＢＬＩＮａＣ（ｈＩＮａＣ、ＡＣＣＮ５およびＡｃｃｎ５としても知られる）およびｈＩＮａＣである。この遺伝子スーパーファミリーにおける近年の検討については、参照することにより本願に組み込まれるＫｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒ、  Ｓ．  および  Ｓｃｈｉｌｄ、  Ｌ．  （２００２）  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｒｅｖ．  ８２：７３５を参照する。
【０００７】
現在周知のＰ２ＸＺ遺伝子スーパーファミリーのメンバーは、Ｐ２Ｘ１（Ｐ２ＲＸ１としても知られる）、Ｐ２Ｘ２（Ｐ２ＲＸ２としても知られる）、Ｐ２Ｘ３（Ｐ２ＲＸ３としても知られる）、Ｐ２Ｘ４（Ｐ２ＲＸ４としても知られる）、Ｐ２Ｘ５（Ｐ２ＲＸ５としても知られる）、Ｐ２Ｘ６（Ｐ２ＲＸ６としても知られる）、Ｐ２Ｘ７（Ｐ２ＲＸ７としても知られる）の７個がある。Ｐ２Ｘタンパク質構造は、細胞内Ｎ−およびＣ−端末、および高システイン細胞外ループの２つの膜貫通ドメインを有する点において、ＡＳＩＣタンパク質構造と類似する。全てのＰ２Ｘ受容体は、細胞外ＡＴＰの放出に反応して開口し、小さなイオンを透過させ、中には、有意なカルシウム透過性を有するものもある。Ｐ２Ｘ受容体は、ニューロン、神経膠、上皮、内非、骨、筋肉、および造血組織に多量に分布される。この遺伝子スーパーファミリーにおける近年の検討については、参照することにより本願に組み込まれるＮｏｒｔｈ、  Ｒ．Ａ．  （２００２）  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｒｅｖ．  ８２：１０１３を参照する。
【０００８】
唐辛子の辛味成分に反応して灼熱痛を生じる知覚ニューロンに発現する受容体は、カプサイシン（ＴＲＰＶまたはバニロイド）受容体であり、ＴＲＰＶ１（ＶＲ１、ＴＲＰＶ１ａｌｐｈａ、ＴＲＰＶ１ｂｅｔａとしても知られる）で表示される。ＴＲＰＶ１受容体は、プロトン（例えば：Ｈ＋イオン）で促進された誘発反応で、カプサイシンおよびレシニフェラトキシン（ＲＴＸ）さらには侵害的熱（＞４３℃）で活性化された非選択性陽イオンチャネルを形成する。酸ｐＨは、後根神経節内の自然プロトン感受性電流に似た、徐々に不活性する電流を誘発することもできる。感受ＴＲＰＶ１の発現は、主に一次知覚ニューロン内であるが、様々な脳核および脊髄においても見られる（Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ４：１６５−１７４、  ２００１）。
【０００９】
２つの構造的に関連した受容体であるＴＲＰＶ２（ＶＲＬ１およびＶＲＬとしても知られる）およびＴＲＰＶ４（ＶＲＬ−２、Ｔｒｐ１２、ＶＲＯＡＣ，ＯＴＲＰＣ４としても知られる）は、カプサイシン、酸、および中熱には反応しないが、高温で活性化される（Ｃａｔｅｒｉｎａ，Ｍ．Ｊら、（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ．３９８（６７２６）：４３６−４１）。さらに、この受容体ファミリー（例えば：ＴＲＰＶまたはバニロイドファミリー）には、カルシウム選択性チャネルであるＥＣＡＣ−１（ＴＲＰＶ５およびＣＡＴ２、ＣａＴ２としても知られる）およびＥＣＡＣ−２（ＴＲＰＶ６、ＣａＴ、ＥＣａＣ、ＣＡＴ１、ＣＡＴＬ、およびＯＴＲＰＣ３としても知られる）受容体が含まれる（Ｐｅｎｇ，  Ｊ．Ｂ．  ら  （２００１）  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ７６（１−３）：９９−１０９）。ＴＲＰＶ（バニロイド）受容体の近年の検討については、参照することにより本願に組み込まれるＳｚａｌｌａｓｉ，  Ａ．とＢｌｕｍｂｅｒｇ，  Ｐ．Ｍ．  （１９９９）のＰｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｒｅｖ．  ５１：１５９を参照する。
【００１０】
依存性イオンチャネルのメンバーが、例えば化学的（例えば：イオン）、熱および機械的刺激など様々な刺激、および後根神経節および三叉神経節の小径一次知覚ニューロンなど、全身のその位置に反応する能力、さらにはｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏモデルから得られたデータは、多くの神経系の疾患、障害および病気におけるこれらのチャネルを関連付ける。例えば、ラットのＡＳＩＣ２ａチャネルはＣ．  ｅｌｅｇａｎｓの神経変性を引き起こすものと同様の突然変異体により活性化されることが明らかになっている。さらに、これらの受容体は、細胞外プロトン（例えば：Ｈ＋濃度）の増加により活性化される。低ｐＨ溶液を皮膚または筋肉へ注入し、さらには低ｐＨ溶液の持続性皮内注入により、慢性痛の痛覚過敏を再現する細胞外ｐＨ内に変化が生じる。さらに、遺伝子導入マウス、例えばＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ３、Ｐ２Ｘ３遺伝子導入マウスは全て、侵害および非侵害刺激への反応が調整されている。したがって、依存性イオンチャネルの生物物理学的、解剖学的、および薬理的特性は、侵害受容への関与と一致する。
【００１１】
ＡＳＩＣが、疼痛、神経系疾患および障害、胃腸疾患および障害、泌尿生殖器疾患および障害、および炎症に影響を及ぼすことが研究で明らかになった。例えば、ＡＳＩＣが、痛覚に影響を及ぼすことが分かっており（Ｐｒｉｃｅ、  Ｍ．Ｐ．ら、Ｎｅｕｒｏｎ．  ２００１；  ３２（６）：  １０７１−８３；  Ｃｈｅｎ、  Ｃ．Ｃ．ら、  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ２００２；  ９９（１３）  ８９９２−８９９７）、それには、内臓および体性痛（Ａｚｉｚ、  Ｑ．、  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．  Ｈｅｐａｔｏｌ．  ２００１；  １３（８）：８９１−６）、心虚血に伴う胸痛（Ｓｕｔｈｅｒｌａｎｄ、  Ｓ．Ｐ．ら、（２００１）  Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  米国９８：７１１−７１６）、および慢性痛覚過敏（Ｓｌｕｋａ、  Ｋ．Ａ．ら、Ｐａｉｎ．  ２００３；  １０６（３）：２２９−３９）が含まれる。中枢ニューロンのＡＳＩＣは、恐らく脳虚血およびてんかんに伴う神経細胞死の一因になることが明らかになった（Ｃｈｅｓｌｅｒ、  Ｍ．、  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｒｅｖ．  ２００３；  ８３：  １１８３−１２２１；  Ｌｉｐｔｏｎ、  Ｐ．、  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｒｅｖ．  １９９９；  ７９：１４３１−１５６８）。ＡＳＩＣは、恐怖条件付け、シナプス可塑性、学習、および記憶の神経機構の一因となっていることも明らかになった（Ｗｅｍｍｉｅ、  Ｊ．ら、Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  ２００３；  ２３（１３）：５４９６−５５０２；  Ｗｅｍｍｉｅ、  Ｊ．ら、Ｎｅｕｒｏｎ．  ２００２；  ３４（３）：４６３−７７）。ＡＳＣＩは、炎症に伴った持続性の痛みおよび炎症を起こした腸（Ｗｕ、  Ｌ．Ｊ．ら、Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２００４；  ２７９（４２）：４３７１６−２４；  Ｙｉａｎｇｏｕ、  Ｙ．、ら、Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．  Ｈｅｐａｔｏｌ．  ２００１；  １３（８）：  ８９１−６）、および消化管の通過停滞（Ｈｏｌｚｅｒ、  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｐｈａｒｍ．  ２００３；  ３：  ６１８−３２５）に関与することが明らかになった。ヒトで行われた最近の研究は、ＡＳＩＣが、酸誘導の痛みの一次センサーであることを示唆する（Ｕｇａｗａら、Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ２００２；  １１０：  １１８５−９０；  Ｊｏｎｅｓら、Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  ２００４；  ２４：  １０９７４−９。さらに、ＡＳＩＣは、ショウジョウバエの配偶子形成および胚発生初期に影響を及ぼすことも考えられ（Ｄａｒｂｏｕｘ、  Ｉ．ら、Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  １９９８；  ２７３（１６）：９４２４−９）、腸内の機械知覚作用の基礎となり（Ｐａｇｅ、  Ａ．Ｊ．ら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．  ２００４；  １２７（６）：１７３９−４７）、内分泌腺に関与することが明らかになっている（Ｇｒｕｎｄｅｒ、  Ｓ．ら、Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ．  ２０００；  １１（８）：  １６０７−１１）。したがって、これらの依存性イオンチャネルを調節する化合物は、そのような疾患および障害の治療に有用である。
【００１２】
発明の開示
一側面において、本発明は、式１、式２、式３、式４、または式５の化合物、さらには５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンと、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンと、５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンと、５−（３、５−ジメチルフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンと、５−（３、５−ジメチルフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンと、５−（２，５−ジメチルフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンと、５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンと、５−フェニル−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンと、５−（２、３−ジメチル−フェニル）−８−エチル−６、７、８、９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２、３−ジオン３−オキシムと、８−エチル−５−（２−メトキシ−フェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２、３−ジオン３−オキシムと、５−（２−エトキシ−フェニル）−８−エチル−６、７、８、９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２、３−ジオン３−オキシムからなる群から選択される化合物を提供する。
【００１３】
一側面において、本発明は、本発明の化合物の有効量に、依存性イオンチャネルを発現する細胞を接触させるステップを含む、依存性イオンチャネルの活性を調節する方法を提供する。
【００１４】
本発明の別の実施態様において、本発明の化合物の有効量に細胞を接触させることにより、依存性イオンチャネルの活性が抑制される。さらに別の実施態様において、前記依存性イオンチャネルは、ＤＥＧ／ＥＮａＣ、Ｐ２ＸおよびＴＲＰＶ遺伝子スーパーファミリーのメンバーから成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する。さらに別の実施態様において、前記依存性イオンチャネルは、αＥＮａＣ、βＥＮａＣ、γＥＮａＣ、δＥＮａＣ、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ４、ＢＬＩＮａＣ、ｈＩＮａＣ、Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６、Ｐ２Ｘ７、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５、およびＴＲＰＶ６から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する。別の実施態様において、前記依存性イオンチャネルはホモ多量体である。別の実施態様において、前記依存性イオンチャネルはヘテロ多量体である。さらに別の実施態様において、前記ＤＥＧ／ＥＮａＣ依存性イオンチャネルは、αＥＮａＣ、βＥＮａＣ、γＥＮａＣ、δＥＮａＣ、ＢＬＩＮａＣ、ｈＩＮａＣ、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３、およびＡＳＩＣ４から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する。別の実施態様において、前記ＤＥＧ／ＥＮａＣ依存性イオンチャネルは、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ４から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する。さらに別の実施態様において、前記依存性イオンチャネルは、ＡＳＩＣ１ａおよび／またはＡＳＩＣ３を有する。さらに別の実施態様において、前記Ｐ２Ｘ依存性イオンチャネルは、Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６およびＰ２Ｘ７から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する。別の実施態様において、前記ＴＲＰＶ依存性イオンチャネルは、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５およびＴＲＰＶ６の群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する。さらに別の実施態様において、前記ヘテロ多量体依存性イオンチャネルは、以下の依存性イオンチャネルの組み合わせを含む。αＥＮａＣ、βＥＮａＣおよびγＥＮａＣと、αＥＮａＣ、βＥＮａＣおよびδＥＮａＣと、ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ１ｂおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ２ｂおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ３と、Ｐ２Ｘ１およびＰ２Ｘ２と、Ｐ２Ｘ１およびＰ２Ｘ５と、Ｐ２Ｘ２およびＰ２Ｘ３と、Ｐ２Ｘ２およびＰ２Ｘ６と、Ｐ２Ｘ４およびＰ２Ｘ６と、ＴＲＰＶ１およびＴＲＰＶ２と、ＴＲＰＶ５およびＴＲＰＶ６と、ＴＲＰＶ１およびＴＲＰＶ４。さらに別の実施態様において、前記オヘテロマルチマー依存性イオンチャネルは、以下の依存性イオンチャネルの組み合わせを含む。ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ２ａと、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ２ｂと、ＡＳＩＣ１ｂおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ２ｂ。
【００１５】
本発明の別の実施態様において、前記依存性イオンチャネルの活性は、疼痛に関連する。さらに別の実施態様において、前記依存性イオンチャネルの活性は、炎症性疾患に関連する。さらに別の実施態様において、前記依存性イオンチャネルの活性は、神経障害に関連する。
【００１６】
別の実施態様において、前記疼痛は、皮膚痛覚、体性痛、内臓痛、および神経因性疼痛から成る群から選択される。さらに別の実施態様において、疼痛は急性疼痛または慢性疼痛である。さらに別の実施態様において、皮膚痛覚は傷害、外傷、傷口、裂傷、穿刺、火傷、外科的切開、感染または急性炎症に伴う。別の実施態様において、前記体性痛は、筋骨格および結合系の傷害、疾患または障害に伴う。さらに別の実施態様において、前記傷害、疾患または障害は、ねんざ、骨折、関節炎、乾癬、湿疹および虚血性心疾患から成る群から選択される。さらに別の実施態様において、前記内臓痛は、循環系、呼吸器系、胃腸系、および泌尿生殖系の傷害、疾患または障害に伴う。別の実施態様において、前記循環系の疾患または障害は、虚血性心疾患、狭心症、急性心筋梗塞，心不整脈、静脈炎、間欠性跛行、静脈瘤および痔核から成る群から選択される。さらに別の実施態様において、前記呼吸器系の疾患または障害は、喘息、呼吸器感染、慢性気管支炎および肺気腫から成る群から選択される。さらに別の実施態様において、前記胃腸系の疾患または障害は、胃炎、十二指腸炎、過敏性腸症候群、大腸炎、クローン病、胃腸の逆流性疾患、潰瘍および憩室炎から成る群から選択される。
【００１７】
別の実施態様において、前記泌尿生殖系の疾患および障害は、膀胱炎、尿路感染、糸球体腎炎（ｇｌｏｍｕｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ）、多発性嚢胞腎、腎結石および泌尿生殖系の癌から成る群から選択される。さらに別の実施態様において、前記体性痛は、関節痛、筋肉痛、慢性腰痛、幻肢痛、癌関連の疼痛、歯痛、線維筋痛、特発性疼痛障害、慢性非特異性疼痛、慢性骨盤痛、術後疼痛、および関連痛から成る群から選択される。さらに別の実施態様において、前記神経因性疼痛は、神経系の傷害、疾患または障害に伴う。別の実施態様において、前記神経系の傷害、疾患または障害は、神経痛、神経障害、頭痛、片頭痛、心因性疼痛、慢性の頭部痛および脊髄損傷から成る群から選択される。
【００１８】
本発明の別の実施態様において、前記依存性イオンチャネルの活性は、筋骨格および結合組織系、呼吸器系、循環系、泌尿生殖系、胃腸系または神経系の炎症性疾患から選択される。別の実施態様において、前記筋骨格および結合組織系の炎症性疾患は、関節痛、乾癬、筋炎、皮膚炎および湿疹から成る群から選択される。さらに別の実施態様において、前記呼吸器系の炎症性疾患が、喘息、気管支炎、静脈洞炎、咽頭炎、喉頭炎、気管炎、鼻炎、嚢胞性線維症、呼吸器感染および急性呼吸窮迫症候群から成る群から選択される。さらに別の実施態様において、前記循環系の炎症性疾患は、血管炎、血尿症候群、アテローム性動脈硬化、動脈炎、静脈炎、心臓炎および冠状動脈性心臓病から成る群から選択される。別の実施態様において、前記胃腸系の炎症性疾患は、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、憩室炎、ウイルス感染、細菌感染、消化性潰瘍、慢性肝炎、歯肉炎、歯膜炎（ｐｅｒｉｏｄｅｎｔｉｔｉｓ）、口内炎、胃炎および胃腸の逆流性疾患から成る群から選択される。さらに別の実施態様において、前記泌尿生殖系の炎症性疾患は、膀胱炎、多発性嚢胞腎、腎炎症候群、尿路感染、シスチン症、前立腺炎、卵管炎、子宮内膜症および泌尿生殖系の癌から成る群から選択される。
【００１９】
別の実施態様において、前記神経障害は、統合失調症、双極性障害、鬱病、アルツハイマー病、てんかん、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、依存症、脳虚欠、神経障害、網膜色素変性、緑内障、心不整脈、帯状疱疹、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、不安障害、パニック障害、恐怖症、不安性ヒステリー、全般性不安障害および神経症から成る群から選択される。
【００２０】
別の実施態様において、本発明は、本発明の化合物の有効量を対象に投与するステップを含む、治療が必要な対象の疼痛を治療する方法を提供する。一実施態様において、前記対象は哺乳動物である。さらに別の実施態様において、前記哺乳動物はヒトである。
【００２１】
さらに別の実施態様において、前記疼痛は、皮膚痛覚、体性痛、内臓痛、および神経因性疼痛から成る群から選択される。別の実施態様において、前記疼痛は急性疼痛または慢性疼痛である。
【００２２】
別の側面において、本発明は、本発明の化合物の有効量を対象に投与するステップを含む、治療が必要な対象の炎症性疾患を治療する方法を提供する。一実施態様において、前記対象は哺乳動物である。さらに別の実施態様において、前記哺乳動物はヒトである。
【００２３】
さらに別の実施態様において、前記炎症性疾患は、筋骨格および結合組織系、呼吸器系、循環系、泌尿生殖系、胃腸系または神経系の炎症性疾患である。
【００２４】
別の側面において、本発明は、本発明の化合物の有効量を対象に投与するステップを含む、治療が必要な対象の神経障害を治療する方法を提供する。一実施態様において、前記対象は哺乳動物である。さらに別の実施態様において、前記哺乳動物はヒトである。
【００２５】
さらに別の実施態様において、前記神経障害は、統合失調症、双極性障害、鬱病、アルツハイマー病、てんかん、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、依存症、脳虚欠、神経障害、網膜色素変性、緑内障、心不整脈、帯状疱疹、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、不安障害、パニック障害、恐怖症、不安性ヒステリー、全般性不安障害および神経症から成る群から選択される。
【００２６】
別の側面において、本発明は、本発明の化合物の有効量を対象に投与するステップを含む、治療が必要な対象の泌尿生殖および／または胃腸系に関連した疾患または障害を治療する方法を提供する。別の実施態様において、前記対象は哺乳動物である。さらに別の実施態様において、前記哺乳動物はヒトである。
【００２７】
さらに別の実施態様において、前記胃腸系の疾患または障害は、胃炎、十二指腸炎、過敏性腸症候群、大腸炎、クローン病、潰瘍および憩室炎から成る群から選択される。別の実施態様において、前記泌尿生殖系の疾患および障害は、膀胱炎、尿路感染、糸球体腎炎、多発性嚢胞腎、腎結石および泌尿生殖系の癌から成る群から選択される。
【００２８】
本発明の別の実施態様において、方法には、さらにアジュバント化合物を投与するステップが含まれる。別の実施態様において、前記アジュバント化合物は、オピロイド鎮痛薬、非オピロイド鎮痛薬、局部麻酔薬、コルチコステロイド、非ステロイド性抗炎症薬、非選択的ＣＯＸ阻害剤、非選択的ＣＯＸ２阻害剤、選択的ＣＯＸ２阻害剤、抗てんかん薬、バルビツール酸系睡眠薬、抗うつ剤、マリファナおよび局所鎮痛薬から成る群から選択される。
【００２９】
発明の詳細な説明
本発明は、少なくとも部分的に、依存性イオンチャネルの調節に有用な化合物の同定に基づく。依存性イオンチャネルは、細胞（例えば神経または筋細胞の電気的興奮性細胞）内のシグナルの受信、統合、変換、伝導および送信に関与する。依存性イオンチャネルは、膜興奮性を決定することができる（例えば、細胞が刺激物に反応し、それを知覚刺激に変換する能力）。依存性イオンチャネルは、また、膜静止電位、活動電位の波形および周波数、さらに興奮閾値に影響を及ぼすことができる。依存性イオンチャネルは、一般的に、神経細胞など電気的興奮性細胞に発現し、多量体である。それらはホモ多量体構造（例えば１種のサブユニットから成る）またはへテロ多量体構造（例えば１種以上のサブユニットから成る）を形成することができる。依存性イオンチャネルは、非興奮性細胞（例えば脂肪細胞または肝細胞）内においても見られ、例えばシグナル変換の役割を果たすことができる。
【００３０】
本発明の焦点である依存性イオンチャネルは、通常、ＤＥＧ／ＥＮａＣ、ＴＲＰＶおよび／またはＰ２Ｘ遺伝子スーパーファミリーの少なくとも１つのサブユニットを含む、サブユニットから成るホモメリックまたはヘテロメリック錯体である。ＤＥＧ／ＥＮａＣ受容体遺伝子スーパーファミリーの非限定実施例には、上皮Ｎａ＋チャネル（例えばαＥＮａＣ、βＥＮａＣ、γＥＮａＣおよび／またはδＥＮａＣ）および酸感受性イオンチャネル（ＡＳＩＣ）（例えばＡＳＩＣ１、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３および／またはＡＳＩＣ４）が含まれる。Ｐ２Ｘ受容体遺伝子スーパーファミリーの非制限実施例には、Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６、およびＰ２Ｘ７が含まれる。ＲＲＰＶ受容体遺伝子スーパーファミリーの非制限実施例には、ＴＲＰＶ１（ＶＲ１とも呼ばれる）、ＴＲＰＶ２（ＶＲＬ−１とも呼ばれる）、ＴＲＰＶ３（ＶＲＬ−３とも呼ばれる）、ＴＲＰＶ４（ＶＲＬ−２とも呼ばれる）、ＴＲＰＶ５（ＥＣＡＣ−１とも呼ばれる）および／またはＴＲＰＶ６（ＥＣＡＣ−２とも呼ばれる）が含まれる。
【００３１】
ヘテロ多量体依存性イオンチャネルの非制限実施例には、αＥＮａＣ、βＥＮａＣおよびγＥＮａＣと、αＥＮａＣ、βＥＮａＣおよびδＥＮａＣと、ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ２ａと、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ２ｂと、ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ１ｂおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ２ｂと、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ２ｂおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ３およびＰ２Ｘ（例えばＰ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６、およびＰ２Ｘ７）、望ましくはＡＳＩＣおよびＰ２Ｘ２と、ＡＳＩＣ３およびＰ２Ｘ３と、ＡＳＩＣ３、Ｐ２Ｘ２およびＰ２Ｘ３と、ＡＳＩＣ４および少なくとも１つのＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂおよびＡＳＩＣ３と、ＢＬＩＮａＣ（またはｈＩＮａＣ）および少なくとも１つのＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ４と、δＥＮａＣおよびＡＳＩＣ（例えばＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ４）と、Ｐ２Ｘ１およびＰ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ１およびＰ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ２およびＰ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ２およびＰ２Ｘ６、Ｐ２Ｘ４およびＰ２Ｘ６、ＴＲＰＶ１およびＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ５およびＴＲＰＶ６、ＴＲＰＶ１およびＴＲＰＶ４が含まれる。
【００３２】
上記を踏まえ、イオンチャネルの活性を調節する化合物および、疼痛、炎症、神経系、胃腸系、および泌尿生殖系に関する病気、疾患および障害を治療するためのその使用方法が必要とされる。
【００３３】
定義
本願において、用語「酸」とは、カルボン酸、スルホン酸、スルフィン酸、スルファミン酸、ホスホン酸、およびボロン酸官能基をいう。
【００３４】
用語「アルキル」には、直鎖アルキル基（例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル，ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルなど）、分枝鎖アルキル基（イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチルなど）、シクロアルキル（脂環式）基（シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル）、アルキル置換シクロアルキル基およびシクロアルキル置換アルキル基を含む飽和脂肪族基が含まれる。さらに、ｘが１〜５で、ｙが２〜１０である「Ｃｘ−Ｃｙ−アルキル」は、炭素の特定範囲の特定のアルキル基（直鎖または分岐鎖）をいう。例えば、Ｃ１−Ｃ４−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチルおよびイソブチルを含むがそれらに限定されない。
【００３５】
用語アルキルは、炭素水素骨格の１つ以上の炭素を置換する酸素、窒素、硫黄またはリン酸原子をさらに含むことができるアルキル基をさらに含む。一実施態様において、直鎖または分岐鎖アルキルは、骨格に１０以下の炭素原子（例えば直鎖ではＣ１−Ｃ１０、分岐鎖ではＣ３−Ｃ１０）、望ましくは６以下の炭素を有する。さらに、好ましいシクロアルキルは、その環状構造に４〜７個の炭素原子を有し、さらに好ましくは環状構造に５または６個の炭素を有する。
【００３６】
また、アルキル（例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、へクシルなど）には、「非置換アルキル」および「置換アルキル」の両方が含まれ、後者は、分子が目的とする機能を行うことができるように水素を炭素水素骨格の１つ以上の炭素に置換する置換基を有するアルキル部分をいう。用語「置換」とは、水素を１つ以上の分子（例えば分子のＣ、ＯまたはＮ）に置換する置換基を有する部分を説明することを目的とする。そのような置換基には、例えばアルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニロキシ、アリールカルボニロキシ、アルコキシカルボニロキシ、アリールロキシカルボニロキシ、カルボン酸、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、リン酸、ホスホネート、ホスフィナート、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボン酸、硫酸塩、アルキルスルフィニル、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、複素環、アルキルアリール、モルホリノ、フェノール、ベンジル、フェニール、ピペリジン、シクロペンタン、ピリジン、５Ｈ−テトラゾール、トリアゾール、ピペリジン、または芳香族または複素環芳香族部分を含むが、それらに限定されない。
【００３７】
本発明の置換基のさらなる実施例は、直鎖または分岐鎖アルキル（望ましくはＣ１−Ｃ５）、シクロアルキル（望ましくはＣ３−Ｃ８）、アルコキシ（望ましくはＣ１−Ｃ６）、チオアルキル（望ましくはＣ１−Ｃ６）、アルケニル（望ましくはＣ２−Ｃ６）、アルキニル（望ましくはＣ２−Ｃ６）、複素環、炭素環、アリール（例えばフェニール）、アリールオキシ（例えばフェノキシ）、アラルキル（例えばベンジル）、アリールオキシアルキル（例えばフェニールオキシアルキル）、アリールアセタミドイル、アルキルアリール、ヘテロアラルキル、アルキルカルボニルおよびアリールカルボニルまたはその他のアリール基、ヘテロアリールカルボニルまたはヘテロアニール基、（ＣＲ’Ｒ”）０−３ＮＲ’Ｒ”（例えば−ＮＨ２）、（ＣＲ’Ｒ”）０−３ＣＮ（例えば−ＣＮ）、−ＮＯ２、ハロゲン（例えば−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉ）、（ＣＲ’Ｒ”）０−３Ｃ（ハロゲン）３（例えば−ＣＦ３）、（ＣＲ’Ｒ”）０−３ＣＨ（ハロゲン）２、（ＣＲ’Ｒ”）０−３ＣＨ２（ハロゲン）、（ＣＲ’Ｒ”）０−３ＣＯＮＲ’Ｒ”、（ＣＲ’Ｒ”）０−３（ＣＮＨ）ＮＲ’Ｒ”、（ＣＲ’Ｒ”）０−３Ｓ（Ｏ）１−２ＮＲ’Ｒ”、（ＣＲ’Ｒ”）０−３ＣＨＯ、（ＣＲ’Ｒ”）０−３Ｏ（ＣＲ’Ｒ”）０−３Ｈ、（ＣＲ’Ｒ”）０−３Ｓ（Ｏ）０−３Ｒ’（例えば− ＳＯ３Ｈ，−ＯＳＯ３Ｈ）、（ＣＲ’Ｒ”）０−３Ｏ（ＣＲ’Ｒ”）０−３Ｈ（例えば− ＣＨ２ＯＣＨ３および−ＯＣＨ３）、（ＣＲ’Ｒ”）０−３Ｓ（ＣＲ’Ｒ”）０−３Ｈ（例えば−ＳＨおよび−ＳＣＨ３）、（ＣＲ’Ｒ”）０−３ＯＨ（例えば− ＯＨ）、（ＣＲ’Ｒ”）０−３ＣＯＲ’、（ＣＲ’Ｒ”）０−３（置換または非置換フェニール）、（ＣＲ’Ｒ”）０−３（Ｃ３−Ｃ８ シクロアルキル）、（ＣＲ’Ｒ”）０−３ＣＯ２Ｒ’（例えば− ＣＯ２Ｈ）、または（ＣＲ’Ｒ”）０−３ＯＲ’基、または、自然発生するアミノ酸のいずれかの側鎖から選択される部分を含むがそれらに限定されない。式中、Ｒ’およびＲ”は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、Ｃ２−Ｃ５アルケニル、Ｃ２−Ｃ５アルキニルまたはアリール基である。そのような置換基は、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルアルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アルールオキシカルボニルオキシ、カルボン酸、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、リン酸、ホスホネート、ホスフィナート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、オキシム、チオール、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボン酸、硫酸、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリルまたは芳香族または複素芳香族部分を含んでよい。特定の実施態様において、カルボニル部分（Ｃ＝Ｏ）は、オキシム部分でさらに誘導化することができ、例えば、アルデヒド部分はその���キシム（−Ｃ＝Ｎ−ＯＨ）アナログとして誘導化することができる。適切な場合、炭化水素鎖に置換された部分は、それ自身置換できることを当業者は理解するものである。シクロアルキルは、例えば上記に記載の置換基でさらに置換することができる。「アラルキル」部分は、アリール（例：フェニールメチル（つまりベンジル）で置換されたアルキルである。
【００３８】
用語「アミン」または「アミノ」とは、一般的にその分野において理解されるように、分子、または部分または官能基の双方に広く適用されるものと理解され、第１次、第２次または第３次であってよい。用語「アミン」または「アミノ」は、窒素原子が少なくとも１つの炭素、水素、またはヘテロ原子に共有結合する化合物を含む。その用語は、例えば、「アルキルアミノ」、「アリールアミノ」、「ジアリールアミノ」、「アルキルアリールアミノ」、「アルキルアミノアリール」、「アリールアミノアルキル」、「アルカミノアルキル」、「アミド（ａｍｉｄｅ）」、「アミド（ａｍｉｄｏ）」および「アミノカルボニル」を含むが、それらに限定されない。用語「アルキルアミノ」は、窒素が少なくとも１つの付加アルキル基に結合する基および化合物を含む。用語「ジアルキルアミノ」は、窒素原子が少なくとも２つの付加アルキル基に結合する基を含む。用語「アリールアミノ」および「ジアリールアミノ」は、それぞれ、窒素が少なくとも１つ、または、２つのアリール基に結合する基を含む。用語「アルキルアリールアミノ」、「アルキルアミノアリール」または「アリールアミノアルキル」は、少なくとも１つのアルキル基および少なくとも１つのアリール基に結合するアミノ基をいう。用語「アルカミノアルキル」は、アルキル基にも結合する窒素原子に結合するアルキル、アルケニル、またはアルキニル基をいう。
【００３９】
用語「アミド（ａｍｉｄｅ）」、「アミド（ａｍｉｄｏ）」または「アミノカルボニル」は、カルボニルまたはチオカルボニル基の炭素に結合する窒素原子を含む化合物または部分を含む。その用語には、カルボニル基に結合するアミノ基に結合するアルキル、アルケニル、アリールまたはアルキニル基を含む「アルカミノカルボニル」または「アルキルアミノカルボニル」基が含まれる。それには、カルボニルまたはチオカルボニル基の炭素に結合するアミノ基に結合するアリールまたはヘテロアニール部分を含む、アリールアミノカルボニルおよびアリールカルボニルアミノ基が含まれる。用語「アルキルアミノカルボニル」「アルケニルアミノカルボニル」、「アルキニルアミノカルボニル」、「アリールアミノカルボニル」、「アルキルカルボニルアミノ」、「アルケニルカルボニルアミノ」、「アルキニルカルボニルアミノ」および「アリールカルボニルアミノ」は、「アミド（ａｍｉｄｅ）」に含まれる。アミド（ａｍｉｄｅ）は、尿素基（アミノカルボニルアミノ）およびカルバミン（オキシカルボニルアミノ）も含む。
【００４０】
本発明の特定の実施態様において、用語「アミン」または「アミノ」とは、式Ｎ（Ｒ８）Ｒ９またはＣ１−６−Ｎ（Ｒ８）Ｒ９の置換基をいい、式中、Ｒ８およびＲ９は、それぞれ独立に、−Ｈおよび−（Ｃ１−４アルキル）０−１Ｇから成る群から選択され、Ｇは、ＣＯＯＨ、−Ｈ、−ＰＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−Ｂｒ、−Ｃ１，−Ｆ、−Ｏ−Ｃ１−４アルキル、−Ｓ−Ｃ１−４アルキル、アリール、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１−Ｃ６−アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ４−アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）−アリールから成る群から選択される、またはＮ（Ｒ８）Ｒ９がピロリル、テトラゾリル、ピロリジニル、ピロリジニル−２−オン、ジメチルピロリル、イミダゾリルおよびモルホリノであることを特徴とする。
【００４１】
用語「アリール」は、ゼロから４個のヘテロ原子を含むことができる５−および６−員単環芳香族基などの基を含み、例えば、フェニル、ピロール、フラン、チオフェン、チアゾール、イソチアゾール、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジンおよびピリミジンなどである。さらに、用語「アリール」は多環環状アリール基（例えば三環、ニ環の例えば、ナフタレン、ベンゾオキサゾール、ベンゾジオキサゾール、ベンゾチアゾール、エンゾイミダゾール、ベンゾチオフェン、メチレンジオキシフェニル、キノリン、イソキノリン、アントリル、フェナントリル、ナフチリジン、インドール、ベンゾフラン、プリン、ベンゾフラン、デアザプリンまたはインドリジン）を含む。冠状構造にヘテロ原子を有するこれらのアリール基は、「アリールへテロ環」「ヘテロ環」、「ヘテロアリール」または「ヘテロ芳香族」といってもよい。芳香族環は、上記記載の通り、例えば、アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボン酸塩、アルキルカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アラルキルアミノカルボニル、アルケニルアミノカルボニル、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アラルキルカルボニル、アルケニルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、リン酸、ホスホネート、ホスフィナート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボン酸塩、硫酸塩、アルキルスルフィニル、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、チアノ、アジド、複素環、アルキルアリール、または芳香族または複素環芳香族部分などの、１つ以上の環位置で置換することができる。アリール基は、ポリサイクル（例えばテトラリン）を形成するために芳香族ではない脂環式環で融合または架橋することも出来る。
【００４２】
本発明のある化合物の構造には不斉炭素原子が含まれることに注意する。そのような不斉から生じる異性体（例えば全ての光学異性体およびジアステレオマー）は、本発明の範囲内に含まれる。そのような異性体は、従来の分離技術および立体化学的制御合成によりほぼ純粋な形で得ることができる。さらに、本願で検討される構造およびその他の化合物および部分には、その全ての互変異性体も含まれる。本願に記載される化合物は、その技術分野で認識される合成ストラテジーで得ることができる。
【００４３】
さらに、語句「そのいかなる組み合わせ」は、いずれの数の記載されている官能基および分子は、より大きな分子構造を形成するために、組み合わせることができることを示唆する。例えば、用語「フェニル」「カルボニル」（または「＝Ｏ＝」）、「−Ｏ−」、「−ＯＨ」、およびＣ１−６（すなわち−ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）は、３−メトキシ−４−プロポキシ安息酸置換基を形成するために、組み合わせることができる。より大きな分子構造を形成するために官能基および分子を組み合わせる際、各原子の価数を満たすために必要に応じて、水素を除去または添加することができる。
【００４４】
本願に使用される、用語「依存性イオンチャネル」または「依存性チャネル」は、交互に用いられ、例えば、電圧の変化（例えば膜の脱分極または過分極）、体温（例えば３７℃以上または以下）、ｐＨ（例えば７．４以上または以下のｐｈ値）、リガンド濃度および／または機械的刺激に反応する哺乳動物（例えばラット、マウス、ヒト）の多量体を示すことを目的とする。特定のモジュレータの例には、アナンドアミド、ＡＴＰ、グルタミン酸塩、システイン、グリシン、ガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、ヒスチジン、セロトジン（５ＨＴ）、アセチルコリン、エピネフリン、ノルエピネフリン、プロトン、イオン（例えばＮａ＋、Ｃａ＋＋、Ｋ＋、Ｃ１−、Ｈ＋、Ｚｎ＋）、および／またはペプチド（例えばメト−エンケファリン、ロイシン−エンケファリン、ダイノルフィン、ニューロトロフィン）および／またはＲＦアミド関連ペプチド（例えばＦＭＲＦアミドおよび／またはＦＬＲＦアミド）などの内因性および細胞外リガンドと、環状ヌクレオチド（例えば環状ＡＭＰ、環状ＧＭＰ）、ＡＴＰ、Ｃａ＋＋および／またはＧ−タンパク質などの内因性細胞内リガンドと、α−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチル−４−イソラックスオンプロピオン酸（ＡＭＰＡ）、アミロリド、カプサイシン、カプサゼピン、エピバチジン、カドミウム、バリウム、ガドリニウム、グアニジウム、カイニン酸、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸塩（ＮＭＤＡ）などの外因性細胞外リガンドまたはモジュレーターが含まれるがそれらに限定されない。依存性イオンチャネルは、毒素に反応する錯体も含み、毒素の例はアガトキシン（例えばα−アガトキシンＩＶＡ、ＩＶＢ、ω−アガトキシンＩＶＡ、ＴＫ）、アジトキシン（アジトキシン２）、アパミン、アルジオトキシン、バトラコトキシン、ブレべトキシン（例えばブレべトキシンＰｂＴｘ−２、ＰｂＴｘ−３、ＰｂＴｘ−９）、カリブドトキシン、クロロトキシン、シガトキシン、コノトキシン（例えばα−コノトキシンＧＩ、ＧＩＡ、ＧＩＩ，ＩＭＩ、ＭＩ、ＭＩＩ、ＳＩ、ＳＩＡ、ＳＩＩおよび／またはＥＩ，β−コノトキシン、δ−コノトキシン、μ−コノトキシンＧＩＩＡ、ＧＩＩＢ、ＧＩＩＣおよび／またはＧＳ、ω−コノトキシンＧＶＩＡ、ＭＶＩＩＡ、ＭＶＩＩＣ、ＭＶＩＩＤ、ＳＶＩＡおよび／またはＳＶＩＢ）、デントロトキシン、グラモトキシン（ＧｓＭＴｘ−４、ω−グラモトキシンＳＩＡ）、グラヤノトキシン、ハナトキシン、イベリオトキシン、インペラトキシン、ジョロトキシン、カリオトキシン、クルトキシン、レイウロトキシン１、プリコトキシン、サルモトキシン（例えばサルモトキシン１（ＰｃＴｘ１））、マルガトキシン、有害性毒、フリクソトキシン、ＰＬＴＸＩＩ、サキシトキシン、ハタゴイソギンチャク毒、イソギンチャク毒（例えばＡｎｔｈｏｐｌｅｕｒａ  ｅｌｅｇａｎｔｉｓｓｉｍａのＡＰＥＴｘ２）、テトロドトキシン、ティティウストキシンＫ−α、シーラトキシンおよび／またはツボクラリンを含むがそれらに限定されない。
【００４５】
望ましい実施態様において、本発明の化合物はＡＳＩＣ１ａおよび／またはＡＳＩＣ３の活性を調節する。
【００４６】
「依存性イオンチャネル媒介活性」は、通常、依存性イオンチャネルの存在下で直接または間接的に調節される（阻害または促進される）生物活性である。依存性イオンチャネル媒介活性は、例えば、細胞（例えば神経または筋細胞）内のシグナルの受信、統合、変換、伝導および送信を含む。特定の依存性イオンチャネル（例えばＡＳＩＣ１ａまたはＡＳＩＣ３）により媒介される生物活性は、その依存性イオンチャネルを参照して、本願に言及される（例えばＡＳＩＣ１ａまたはＡＳＩＣ３活性）。化合物が依存性イオンチャネル媒介活性を阻害する能力を決定するために、本願に記載される従来のｉｎ  ｖｉｔｒｏ  分析およびｉｎ  ｖｉｖｏ分析を使用することができる。
【００４７】
本願に使用される「神経伝達」は、神経伝達物質と呼ばれる小さなシグナル伝達分子が制御された方法で、神経細胞から別の細胞へ急速に通過するプロセスである。一般的に、突入活動電位に関連した脱分極の後に、神経伝達物質は、シナプス神経細胞の末端から分泌される。それから神経伝達物質は、シナプス間隙に広がり、シナプス後細胞の特定の受容体で作用する。該シナプス後細胞は、ほとんどの場合は神経細胞であるが別の細胞型（神経筋接合部の筋線維など）であってもよい。神経伝達物質の作用は、シナプス後細胞を脱分極する興奮性、または過分極を生じる抑制性のどちらかとなり得る。神経伝達物質は、一般的にシナプス前またはシナプス後に作用する神経修飾物質により急速に増加または減少することができる。依存性イオンチャネルＡＳＩＣ１ａが、おそらく神経伝達に役立つことが明らかになっている［Ｂａｂｉｎｉ  ら、  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．  ２７７（４４）：４１５９７−６０３  （２００２）］。
【００４８】
依存性イオンチャネル媒介活性の例には、疼痛（例えば炎症性疼痛、急性疼痛、慢性悪性疼痛、慢性非悪性疼痛および神経因性疼痛）、炎症性疾患、泌尿生殖および胃腸系の疾患および障害、および神経障害（例えば神経変性または精神神経障害）を含むがそれらに限定されない。
【００４９】
「疼痛」は、急性または潜在的な組織破壊に伴う不快感および精神的な経験として定義され、またはそのような損傷に関して説明される（国際疼痛学会（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｐａｉｎ−ＩＡＳＰ））。疼痛は、ほとんどの場合、期間（つまり急性ｖｓ慢性疼痛）およびその原因となる病態生理（たとえば侵害ｖｓ神経因性疼痛）に基づき分類される。
【００５０】
急性疼痛は、組織損傷および疾患に反応して生じる感情的および認知的、さらには感覚的特徴のある不快な経験として説明することができ、防御機能としての役割を担う。急性疼痛は、通常病変（例えば外傷、手術、陣痛、医学処置、急病状態）に伴い、疼痛は、原因となる損傷の治癒とともに消失する。急性疼痛は主に侵害性であるが、神経障害性である場合もある。
【００５１】
慢性疼痛は、しばしば痛みの有無、強さおよび／程度を説明するためには弱く、また不十分である特定された病変のレベルがあり、治癒期間を超える疼痛である（国際疼痛学会（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐａｉｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ−ＡＰＳ））。急性疼痛と異なり、慢性疼痛は、適応目的を果たさない。慢性疼痛は、侵害性、神経性またはその両方である場合があり、損傷（例えば外傷または手術）、悪性疾患または様々な慢性疾患（例えば関節痛、線維筋痛および神経障害）により引き起こされ得る。場合によって、慢性疼痛は明らかな原因がなく新たに存在する。
【００５２】
「侵害性疼痛」は、組織および器官の損傷により生じる痛みである。侵害性疼痛は、身体の表面または深部組織にある疼痛受容体の継続する活性化により引き起こされる。侵害性疼痛は、「皮膚痛覚」および「深部の体性痛」を含む「体性痛」、および「内臓痛」としてさらに特徴付けられる。
【００５３】
「体性痛」には「皮膚痛覚」および「深部の体性痛」が含まれる。皮膚痛覚は、皮膚および関連器官の損傷、疾患および障害により引き起こされる。皮膚痛覚に関連する症状の例は、切り傷、火傷、感染、裂傷さらには外傷および術後または手術の疼痛（例えば切開部位）を含むがそれらに限定されない。
【００５４】
「深部の体性痛」は、靭帯、腱、骨、血管および結合組織を含む筋骨格組織の損傷、疾患または障害により生じる。深部の体性痛または深部の体性痛に伴う病状の例は、捻挫、骨折、関節痛、血管炎、筋肉痛および筋膜痛を含むがそれらに限定されない。関節痛とは、損傷（打撲傷、破損または脱臼など）および／または炎症（例えば関節炎）した関節が原因で生じる痛みをいう。血管炎とは、痛みを伴う血管の炎症をいう。筋肉痛とは、筋肉からくる痛みをいう。筋膜痛とは、筋膜および／または筋肉の損傷または炎症により生じる痛みをいう。
【００５５】
「内臓」痛は、循環器系、呼吸器系、胃腸系、泌尿生殖系、免疫系さらには耳鼻咽頭を含むがそれらに限定されない体器官および体内空洞部の損傷、炎症または疾患に伴う。内臓痛は、体器官および組織に影響を及ぼす伝染性および寄生虫性疾患に伴う場合もある。内臓痛は、場所の特定が非常に難しく、内臓組織におきる様々な損傷が、損傷部位に全く関連しない場所で知覚が局在する、「関連」痛を呈する。例えば、心筋虚血（心筋組織の一部への血流不足）が、おそらく関連痛の最も有名な例であるだろう。知覚は、胸郭上部で限局的な感覚として、または左肩、腕、さらに手に痛みとして生じることがある。幻肢痛は、すでに切断された肢または物理的シグナルを受けられない足からくる痛覚である（ほぼ例外なく報告される切断患者および四肢麻痺者の経験）。
【００５６】
「神経因性疼痛」または「神経原性疼痛」は、神経系の原発病変、機能障害または乱れにより開始または引き起こされる痛みである。「神経因性疼痛」は、末梢神経系（「末梢神経性疼痛」）および中枢神経系（「中心性疼痛」）の外傷、炎症または疾患の結果として生じることがある。例えば、神経因性疼痛は、刺激された、捕らえられた、縮んだ、切断された、または炎症を起こした（神経炎）神経または複数の神経により引き起こされることがある。糖尿病性神経障害、三叉神経痛、帯状疱疹後神経痛（「帯状疱疹」）、脳卒中後痛、および複合性局所疼痛症候群（反射性高官神経性または「ＲＳＤ」および灼熱痛ともいわれる）など、多くの神経因性疼痛症候群がある。
【００５７】
本願に使用される、用語「炎症性疾患または障害」は、少なくとも部分的に、罹患組織および器官における血流の増加、浮腫、免疫細胞の活性化（例えば増殖、サイトカイン産生、または増強した食作用）、熱、充血、腫れ、痛みおよび機能低下で一般的に特徴付けられる炎症により引き起こされる、または悪化する疾患または障害を含む。炎症は、身体的損害、化学物質、微生物、組織壊死、癌または他の薬剤が原因である場合がある。炎症性疾患には、急性炎症疾患、慢性炎症疾患および再発性炎症疾患が含まれる。急性炎症疾患は、数週間におよぶこともあるが、一般的に短期間であり、約数分から約１から２日続く。急性炎症疾患の主な特徴には、血流増加、体液および血漿タンパク（浮腫）の浸出および好中球など白血球の移動が含まれる。慢性炎症疾患は、一般的に長期間（例えば数週間から数ヶ月、数年以上）に及び、組織学的に白血球およびマクロファージの存在、および血管および結合組織の増殖に関連する。再発性炎症疾患には、ある期間後に再発、または周期的な発作を呈する障害がふくまれる。中には、１つ以上のカテゴリーに含まれる疾患がある。
【００５８】
用語「神経障害」および「神経変性障害」とは、末梢神経系および中枢神経系を含む神経系の損傷、疾患および機能不全をいう。神経障害および神経変性障害は、依存性イオンチャネル媒介生物活性に関連する疾患および障害を含むがそれらに限定されない。神経障害の例は、アルツハイマー病、てんかん、癌、神経筋疾患、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、脳虚血、神経障害（例えば化学療法誘発神経障害、糖尿病性神経障害）、網膜色素変性、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、不安障害（例えば恐怖性障害（例えば広場恐怖症、閉所恐怖症）、パニック障害、恐怖症、不安性ヒステリー、全般性不安障害および神経病）および血管拡張性失調症を含むがそれらに限定されない。
【００５９】
本願に使用される「神経障害」は、脳および脊髄へ、また脳および脊髄からの情報を運ぶ神経の障害として定義され、１つ以上の疼痛、痛覚消失および筋肉の制御不能を生じる。時には、血管、腸、および他の器官を制御する神経の障害は、血圧異常、消化傷害、および他の基本的生体プロセスの消失を引き起こす。末梢神経障害は、単一神経および神経群（単発神経炎）の損傷に関係、または複数の神経（多発性神経炎）に影響を及ぼすことがある。
【００６０】
用語「治療された」、「治療中」または「治療」は、治療中の疼痛、炎症性疾患、神経障害、泌尿生殖障害、または胃腸障害（例えば依存性イオンチャネル媒介活性に関するまたはそれが原因となる症状）に伴う、少なくとも１つの症状の減少または緩和を含む。特定の実施態様において、治療は、依存性イオンチャネル調節化合物による依存性イオンチャネル（例えばＡＳＩＣ１ａおよび／またはＡＳＩＣ３）の相互作用の調節を含み、それにより、少なくとも１つの治療中の依存性イオンチャネル媒介活性に関連する、またはそれが原因となる症状を減少または緩和する。例えば、治療は障害の１つまたは複数の症状を減少、または障害を完全に根絶することが出来る。
【００６１】
本願に使用される、化合物の「治療的有効量」の用語は、疼痛、炎症性疾患、神経障害、胃腸障害、または泌尿生殖障害の治療または予防（例えば依存性イオンチャネル媒介活性の様々な症状を予防する）に必要または十分な量である。一実施例において、化合物の有効量は、対象における障害（例えば疼痛、炎症、神経障害、胃腸障害また泌尿生殖障害）の少なくとも１つの症状を緩和するために十分な量である。
【００６２】
用語「対象」は、依存性イオンチャネル関連状態または依存性イオンチャネル関連障害、または依存性イオンチャネル活性に直接または間接的に関わるいずれかの障害を患うまたは苦しむ能力を有する動物を含むことを目的とする。対象の例には、哺乳動物（例えばヒト、犬、牛、馬、ブタ、羊、ヤギ、猫、ネズミ、ウサギ、ラット、およびトランスジェニック非ヒト動物）が含まれる。特定の実施態様において、対象は、例えば疼痛、炎症、神経障害、胃腸障害、または泌尿生殖障害（例えば依存性チャネル関連活性に関する）を患う、患う危険性のある、または潜在的に患うことができるヒトなどの、ヒトである。
【００６３】
「依存性イオンチャネルモジュレーター」とは、依存性イオンチャネルの活性を調節する、つまり阻害、促進または変更する化合物をいう。例えば、依存性イオンチャネルモジュレーターは、例えば電圧の変化（例えば膜の脱分極または過分極）、温度（例えば３７℃以上または以下）、ｐＨ（例えば７．４以上または以下のｐＨ値）、リガンド濃度および／または機械的刺激への依存性イオンチャネルの反応を阻害、促進またはそれ以外の方法で変更することができる。依存性イオンチャネルモジュレーターの例には、本発明の化合物（すなわち式１、２、３、４および５、さらに化合物Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、ＪおよびＫ）が含まれ、薬学的に許容の塩など、その塩も含まれる。特定の実施態様において、本発明の依存性イオンチャネルモジュレーターは、治療が必要な対象の疼痛、炎症、神経障害、胃腸障害または泌尿生殖障害に伴う疾患または障害を治療するために用いることができる。別の実施態様において、本発明の化合物は、治療が必要な対象の炎症性疾患を治療するために用いることができる。
【００６４】
イオンチャネル活性のモジュレーター
本発明は、依存性イオンチャネルの活性を調節する化合物を提供する。ある実施態様において、本発明の化合物は、ＤＥＧ／ＥＮａＣ、ＴＲＰＶおよび／またはＰ２Ｘ遺伝子スーパーファミリーに属する、少なくとも１つのサブユニットを有する依存性イオンチャネルの活性を調節する。ある実施態様において、本発明の化合物は、αＥＮａＣ、βＥＮａＣ、γＥＮａＣ、δＥＮａＣ、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ４、ＢＬＩＮａＣ、ｈＩＮａＣ、Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６、Ｐ２Ｘ７、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５、およびＴＲＰＶ６から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する、依存性イオンチャネルの活性を調節する。さらに別の実施態様において、本発明の化合物は、αＥＮａＣ、βＥＮａＣ、γＥＮａＣ、δＥＮａＣ、ＢＬＩＮａＣ、ｈＩＮａＣ、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ４から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する、ＤＥＧ／ＥＮａＣ依存性イオンチャネルの活性を調節する。特定の実施態様において、本発明の化合物は、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ４から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する、ＤＥＧ／ＥＮａＣ依存性イオンチャネルの活性を調節する。特定の実施態様において、本発明の化合物は、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ４から成る群から選択される、少なくとも２つのサブユニットを有する、ＤＥＧ／ＥＮａＣ依存性イオンチャネルの活性を調節する。さらに別の実施態様において、本発明の化合物は、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ４から成る群から選択される、少なくとも３つのサブユニットを有する、ＤＥＧ／ＥＮａＣ依存性イオンチャネルの活性を調節する。特定の実施態様において、本発明の化合物は、ＡＳＩＣ、すなわち、ＡＳＩＣ１ａまたはＡＳＩＣ１ｂを有する依存性イオンチャネルの活性を調節する。特定の実施態様において、本発明の化合物は、ＡＳＩＣ３を有する依存性イオンチャネルの活性を調節する。特定の実施態様において、本発明の化合物は、ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ２ａと、ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ１ｂおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ２ｂと、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ３を有する依存性イオンチャネルの活性を調節する。別の実施態様において、本発明の化合物は、Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６およびＰ２Ｘ７から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する、Ｐ２Ｘ依存性イオンチャネルの活性を調節する。特定の実施態様において、本発明の化合物は、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３またはＰ２Ｘ４を有する依存性イオンチャネルの活性を調節する。特定の実施態様において、本発明の化合物は、Ｐ２Ｘ１およびＰ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ１およびＰ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ２およびＰ２Ｘ３、��２Ｘ２およびＰ２Ｘ６、およびＰ２Ｘ４およびＰ２Ｘ６を有する依存性イオンチャネルの活性を調節する。本発明のさらに別の側面において、本発明の化合物は、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５およびＴＲＰＶ６から成る群から選択される、１つ以上のサブユニットを有するＴＲＰＶ依存性イオンチャネルの活性を調節する。特定の実施態様において、本発明の化合物は、ＴＲＰＶ１またはＴＲＰＶ２を有する依存性イオンチャネルの活性を調節する。特定の実施態様において、本発明の化合物は、ＴＲＰＶ１およびＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ１およびＴＲＰＶ４、およびＴＲＰＶ５およびＴＲＰＶ６を有する依存性イオンチャネルの活性を調節する。
【００６５】
特定の実施態様において、本発明の化合物はＡＳＩＣ１ａおよび／またはＡＳＩＣ３の活性を調節する。
【００６６】
本発明の化合物の命名法は、基準の条約に従う。「サザン」フェニル環は以下に示す通りに、番号がつけられる：
2009516712.tif 000003
【００６７】
一側面において、依存性イオンチャネルの活性を調節する化合物は式１、
2009516712.tif 000004
および薬学的に許容の塩、光学異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ジアステレオマー、およびそのラセミ化合物であって、
点線が一重または二重結合を示し、Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ−アルキル、ヒドロキシ−アルキル、アルコキシ−カルボニル−アルキル、アルキル−カルボニル−オキシ−アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、スルホンアミド、アミノ、スルホニル、スルホン酸、尿素、フェニルまたはベンジルから成る群から選択され、そこで、フェニルまたはベンジル基が、ハロゲン、ＣＦ３、アミノ、シアノ、ヒドロキシ−アルキル、アルコキシ、スルホンアミド、アルケニル、アルカニル、アミノ、スルホニル、スルホン酸および尿素で任意に置換され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、−（ＣＨ２）１−４Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキルおよび−Ｓ（Ｏ）２Ｃ１−４アルキルから成る群から選択され、Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、アルキル、アシル、フェニル、ベンジル、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｏ−フェニル、−ＯＣＦ３、アルコキシ、−Ｏ（ＣＨ２）０−４ＯＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、
2009516712.tif 000005
から成る群から選択され、
Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群、またはＲ’およびＲ”が互いに独立して水素またはアルキルを示すことを特徴とする、式−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”の群からそれぞれ独立に選択される。
【００６８】
式１の一側面において、Ｒ１は水素、アルキル、アルケニルおよびアルキニルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニルおよびアルキニルから成る群から選択され、Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、アルキル、アシル、フェニル、ベンジル、および−ＣＯＯＨから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００６９】
式１の別の実施態様において、Ｒ１は水素およびアルキルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニルおよびアルキニルから成る群から選択され、Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、アルコキシおよびアルキルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、フェノキシおよびフェニルから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００７０】
式１のさらに別の実施態様において、点線は二重結合を示し、Ｒ１は、アルキルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素およびアルキルから成る群から選択され、Ｒ３は、ヒドロキシルであり、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、フェノキシおよびフェニルから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００７１】
式１の望ましい実施態様は、式２で示され
2009516712.tif 000006
薬学的に許容の塩、光学異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ジアステレオマー、およびそのラセミ化合物であって、
式中、Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ−アルキル、アルコキシ−カルボニル−アルキル、アルキル−カルボニル−オキシ−アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、スルホンアミド、アミノ、スルホニル、スルホン酸、尿素、フェニルまたはベンジルから成る群から選択され、そこで、フェニルまたはベンジル基が、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシ−アルキル、アルコキシ、スルホンアミド、アルケニル、アルキニル、アミノ、スルホニル、スルホン酸および尿素で任意に置換され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、−（ＣＨ２）１−４Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキルおよび−Ｓ（Ｏ）２Ｃ１−４アルキルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群、またはＲ’およびＲ”が互いに独立して水素またはアルキルを示すことを特徴とする、式−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”の群から、それぞれ独立して選択される。
【００７２】
式２の一実施態様において、Ｒ１は水素、アルキル、アルケニルおよびアルキニルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニルおよびアルキニルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００７３】
式２の別の実施態様において、Ｒ１は水素およびアルキルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルケニルおよびアルキニルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、フェノキシおよびアルコキシから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００７４】
式２のさらに別の実施態様において、Ｒ１はアルキルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素およびアルキルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、フェノキシおよびアルコキシから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００７５】
式２の一実施態様において、Ｒ１は、水素、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニル、およびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニルおよびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群からそれぞれ独立に選択される。
【００７６】
式２のさらに別の実施態様において、Ｒ１は、水素およびＣ１−４−アルキルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニルおよびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群から、それぞれ独立に選択される。
【００７７】
式２のさらに別の実施態様において、Ｒ１は、Ｃ１−４−アルキルから成る群から選択され、Ｒ２は、水素およびＣ１−４−アルキルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群から、それぞれ独立に選択される。
【００７８】
式２の別の実施態様において、Ｒ１は−ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択され、Ｒ２は、水素から成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、アルキルおよびアルコキシから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００７９】
式２の別の実施態様において、Ｒ１は−ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択され、Ｒ２は、水素から成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００８０】
式２の別の実施態様において、Ｒ１は、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３である。
【００８１】
式２のさらに別の実施態様において、Ｒ２はＨである。
【００８２】
式２のさらに別の実施態様において、Ｒ４はハロゲンである。
【００８３】
式２の別の実施態様において、Ｒ５はアルコキシである。
【００８４】
式２のさらに別の実施態様において、Ｒ４はフルオロまたはクロロである。
【００８５】
式２の別の実施態様において、Ｒ５は−ＯＣＨ３である。
【００８６】
式２のさらに別の実施態様において、Ｒ４よびＲ５は、共にアルキルである。
【００８７】
式２の別の実施態様において、Ｒ４よびＲ５は、共にＣＨ３である。
【００８８】
式１の別の望ましい実施態様は、式３で示され、
2009516712.tif 000007
薬学的に許容の塩、光学異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ジアステレオマー、およびそのラセミ化合物であって、
式中、Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ−アルキル、アルコキシ−カルボニル−アルキル、アルキル−カルボニル−オキシ−アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、スルホンアミド、アミノ、スルホニル、スルホン酸、尿素、フェニルまたはベンジルから成る群から選択され、そこで、フェニルまたはベンジル基が、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシ−アルキル、アルコキシ、スルホンアミド、アルケニル、アルキニル、アミノ、スルホニル、スルホン酸および尿素で任意に置換され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、フェノキシ、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、フェニルから成る群、またはＲ’およびＲ”が互いに独立して水素またはアルキルを示すことを特徴とする、式−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”の群から、それぞれ独立して選択される。
【００８９】
式３の望ましい実施態様において、Ｒ５がアリール環の２位にあってＲ４がアリール環の５位にある、または、Ｒ４がアリール環の３位にあってＲ５がアリール環の５位にある。
【００９０】
式３の一実施態様において、Ｒ１は水素、アルキル、アルケニルおよびアルキニルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００９１】
式３の別の実施態様において、Ｒ１は水素およびアルキルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、フェノキシおよびアルコキシから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００９２】
式３のさらに別の実施態様において、Ｒ１はアルキルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、アルキル、フェノキシおよびアルコキシから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００９３】
式３のさらに別の実施態様において、Ｒ１は−ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、フェノキシおよびアルコキシから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００９４】
式３の一実施態様において、Ｒ１は水素、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニル、およびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群からそれぞれ独立に選択される。
【００９５】
式３の別の実施態様において、Ｒ１は、水素およびＣ１−４−アルキルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群からそれぞれ独立に選択される。
【００９６】
式３のさらに別の実施態様において、Ｒ１は、Ｃ１−４−アルキルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群からそれぞれ独立に選択される。
【００９７】
式３のさらに別の実施態様において、Ｒ１は−ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【００９８】
式３の別の実施態様において、Ｒ１は、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ３である。
【００９９】
式３のさらに別の実施態様において、Ｒ４はハロゲンである。
【０１００】
式３のさらに別の実施態様において、Ｒ５はアルコキシである。
【０１０１】
式３の別の実施態様において、Ｒ４はフルオロまたはクロロである。
【０１０２】
式３の別の実施態様において、Ｒ５は−ＯＣＨ３である。
【０１０３】
式３のさらに別の実施態様において、Ｒ４よびＲ５は、共にアルキルである。
【０１０４】
式４の別の実施態様において、Ｒ４よびＲ５は、共にＣＨ３である。
【０１０５】
式１の別の望ましい実施態様は、式４で示され、
2009516712.tif 000008
薬学的に許容の塩、光学異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ジアステレオマー、およびそのラセミ化合物であって、
式中、Ｒ１は、−ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、アルキルおよびアルコキシから成る群からそれぞれ独立に選択される。
【０１０６】
式４の望ましい実施態様において、Ｒ５がアリール環の２位にあってＲ４がアリール環の５位にある、または、Ｒ４がアリール環の３位にあってＲ５がアリール環の５位にある。
【０１０７】
式４の別の実施態様において、Ｒ１は−ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキルおよびＣ１−４−アルコキシから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【０１０８】
式４の一実施態様において、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、アルキルおよびアルコキシから成る群から、それぞれ独立して選択される。式４の別の実施態様において、Ｒ４およびＲ５は、ハロゲン、Ｃ１−４−アルキルおよびＣ１−４−アルコキシから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【０１０９】
式４の別の実施態様において、Ｒ４がフルオロで、Ｒ５が−ＯＣＨ３である、Ｒ４がクロロで、Ｒ５が−ＯＣＨ３である、またはＲ４およびＲ５が両方ＣＨ３である。
【０１１０】
式４の望ましい実施態様は、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ「３、２−ｈ」イソキノリン−２（３Ｈ）−オン（化合物Ａ）：
2009516712.tif 000009
およびその薬学的に許容の塩である。
【０１１１】
式４の別の望ましい実施態様は、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ「３、２−ｈ」イソキノリン−２（３Ｈ）−オン（化合物Ｂ）：
2009516712.tif 000010
およびその薬学的に許容の塩である。
【０１１２】
式４の別の望ましい実施態様は、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ「３、２−ｈ」イソキノリン−２（３Ｈ）−オン（化合物Ｃ）：
2009516712.tif 000011
およびその薬学的に許容の塩である。
【０１１３】
式４の別の望ましい実施態様は、５−（３、５−ジメチルフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ「３、２−ｈ」イソキノリン−２（３Ｈ）−オン（化合物Ｄ）：
2009516712.tif 000012
およびその薬学的に許容の塩である。
【０１１４】
式４の別の望ましい実施態様は、５−（３、５−ジメチルフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ「３、２−ｈ」イソキノリン−２（３Ｈ）−オン（化合物Ｅ）：
2009516712.tif 000013
およびその薬学的に許容の塩である。
【０１１５】
式４の別の望ましい実施態様は、５−（２、５−ジメチルフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ「３、２−ｈ」イソキノリン−２（３Ｈ）−オン（化合物Ｆ）：
2009516712.tif 000014
およびその薬学的に許容の塩である。
【０１１６】
式４の別の望ましい実施態様は、５−（５−クロロ−２−メトキシフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ「３、２−ｈ」イソキノリン−２（３Ｈ）−オン（化合物Ｇ）：
2009516712.tif 000015
およびその薬学的に許容の塩である。
【０１１７】
式４の別の望ましい実施態様は、５−（２、３−ジメチル−フェニル）−８−エチル−６、７、８、９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ「３、２−ｈ」イソキノリン−２、３−ジオン３−オキシム（化合物Ｉ）：
2009516712.tif 000016
およびその薬学的に許容の塩である。
【０１１８】
別の側面において、本発明の化合物は式５、
2009516712.tif 000017
および薬学的に許容の塩、光学異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ジアステレオマー、およびそのラセミ化合物であって、
式中、Ｒ１は、水素、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシ−Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシ−カルボニル−Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルキル−カルボニル−オキシ−Ｃ１−４−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル−Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニル、Ｃ１−４−アルキニル、Ｃ１−４−アルコキシ、スルホンアミド、アミノ、スルホニル、スルホン酸、尿素、フェニルまたはベンジルから成る群から選択され、そこで、フェニルまたはベンジル基が、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシ−Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシ、スルホンアミド、Ｃ１−４−アルケニル、Ｃ１−４−アルキニル、アミノ、スルホニル、スルホン酸および尿素で任意に置換され、Ｒ４およびＲ５は、水素、ハロゲン、フェノキシ、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシおよびフェニルから成る群、またはＲ’およびＲ”が互いに独立して水素またはＣ１−４−アルキルを示すことを特徴とする、式−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ”の群から、それぞれ独立して選択される。
【０１１９】
式５の望ましい実施態様において、Ｒ５がアリール環の３位にあってＲ４がアリール環の２位にある、または、Ｒ４がアリール環の２位にあってＲ５が水素である。
【０１２０】
式５の一実施態様において、Ｒ１は水素、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルケニル、およびＣ１−４−アルキニルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、水素、ハロゲン、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ１−４−アルコキシ、フェノキシおよびフェニルから成る群からそれぞれ独立に選択される。
【０１２１】
式５の別の実施態様において、Ｒ１は、水素およびＣ１−４−アルキルから成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、水素、ハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４−アルキル、フェノキシおよびＣ１−４−アルコキシから成る群からそれぞれ独立に選択される。
【０１２２】
式５の別の実施態様において、Ｒ４はＣ１−４−アルコキシであり、Ｒ５は水素である。
【０１２３】
式５のさらに別の実施態様において、Ｒ１は−ＣＨ３および−ＣＨ２ＣＨ３から成る群から選択され、Ｒ４およびＲ５は、水素、ＣＨ３、ＯＣＨ３およびＯＥｔから成る群から、それぞれ独立して選択される。
【０１２４】
式５の別の望ましい実施態様は、５−フェニル−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−エチル−１Ｈ−ピロロ「３、２−ｈ」イソキノリン−２（３Ｈ）−オン（化合物Ｈ）：
2009516712.tif 000018
およびその薬学的に許容の塩である。
【０１２５】
式５の別の望ましい実施態様は、８−エチル−５−（２−メトキシ−フェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ「３、２−ｈ」イソキノリン−２、３−ジオン３−オキシム（化合物Ｊ）：
2009516712.tif 000019
およびその薬学的に許容の塩である。
【０１２６】
式５の別の望ましい実施態様は、５−（２−エトキシ−フェニル）−８−エチル−６、７、８、９−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２、３−ジオン３−オキシム（化合物Ｋ）：
2009516712.tif 000020
およびその薬学的に許容の塩である。
【０１２７】
上記記載の式１、２、３、４および５の全ての化合物は、各原子の価数を満たすために必要とされる、隣接原子間の二重結合をさらに含むことを理解されるものとする。つまり、二重結合は、以下の種類の各原子への以下の総数の結合を提供するために追加される。炭素：四結合、窒素：三結合、酸素、二結合、および硫黄、二または６結合である。
【０１２８】
本発明のある化合物の構造には不斉炭素原子が含まれることに注意する。従って、そのような不斉から生じる異性体（例えば全ての光学異性体およびジアステレオマー）は、指示されない限り、本発明の範囲内に含まれると理解されるものである。そのような異性体は、従来の分離技術および立体化学的制御合成によりほぼ純粋な形で得ることができる。さらに、本願で検討される構造およびその他の化合物および部分には、その全ての互変異性体も含まれる。本願に記載される化合物は、その技術分野で認識される合成ストラテジーで得ることができる。
【０１２９】
本発明の一実施態様において、依存性イオンチャネルの活性を調節する本発明の化合物は、αＥＮａＣ、βＥＮａＣ、γＥＮａＣ、δＥＮａＣ、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ４、ＢＬＩＮａＣ、ｈＩＮａＣ、Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６、Ｐ２Ｘ７、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５、ＴＲＰＶ６を含む依存性イオンチャネルと化学的に相互作用することができる。「化学的相互作用」という表現は、限定されないが、疎水性／親水性、イオン（例えばクーロン引力／反発力、イオン−双極子、電荷移動）、共有結合、ファン・デル・ワールス、および水素結合などの可逆的相互作用を含むことを意図する。特定の実施態様において、化学的相互作用は可逆的マイケル付加である。特定の実施態様において、マイケル付加は、少なくとも部分的に、共有結合の形成に関与する。
【０１３０】
特定の実施態様において、化合物Ａは治療が必要な対象の疼痛を治療するために用いることができる。一実施態様において、対象はヒトである。
【０１３１】
別の実施態様において、化合物Ａは治療が必要な対象の炎症を治療するために用いることができる。一実施態様において、対象はヒトである。
【０１３２】
別の実施態様において、化合物Ａは、ＡＭＰＡ拮抗剤である。
【０１３３】
本発明の化合物は、当業者に周知の標準有機合成手順に従い合成することが出来る。本発明の化合物に類似する化合物の典型的合成手順は、米国特許第５，７８０，４９３号、米国特許第５，８４３，９４５号、米国特許第６，７２７，２６０号、および米国特許出願第１０／７３７、７４７および１１／２４１、８０５に記載され、それぞれ参照することにより本願に組み込まれる。
【０１３４】
以下は、有機出発物質および有機化学合成において周知の方法を用いた本発明の特定の実施態様のスキームである。
2009516712.tif 000021
【０１３５】
化合物Ａの合成の詳細は、実施例８でみられる。
【０１３６】
本願に記載される反応の最終生成物は、例えば、抽出、結晶化、蒸留、クロマトグラフィーなどの従来の技術により単離することができる。
【０１３７】
本発明の化合物の酸付加塩は、薬学的に許容の酸から最も適切に生成され、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸またはリン酸などの無機酸、およびコハク酸、マレイン酸、酢酸またはフマル酸などの有機酸から生成されたものを含む。シュウ酸塩など別の薬学的に許容されない塩は、例えば本発明の化合物の単離、実験用、またはその後薬学的に許容の酸付加塩へと変換するために使用することができる。また、本発明の溶媒和物および水和物も本発明の範囲に含まれる。
【０１３８】
特定の化合物塩の所望化合物塩への変換は、所定の塩の水溶液が、炭酸ナトリウムまたは水酸化カリウムなどの塩基の溶液で遊離塩基を遊離するために処理され、その後エーテルなど適切な溶媒へ抽出される、標準的な技術を適用することで実現される。それから、遊離塩基は、所望の塩を得るために水分分画から分離、乾燥され、必要な酸で処理される。
【０１３９】
本発明の特定の化合物のＩｎ  ｖｉｖｏ  加水分解型エーテルおよびアミドは、遊離ヒドロキシまたはアミノ官能性を有するそのような化合物を、塩化メチレンまたはクロロホルムなどの不活性溶媒中の塩基の存在化において、所望のエーテルの塩酸化物で処理することにより生成することができる。適切な塩基には、トリエチルアミンまたはピラジンが含まれる。反対に、遊離カルボキシ基を持つ本発明の化合物は、適切な塩基の存在下における所望のアルコールでの処理後の活性化を含み得る標準条件を用いてエステル化することができる。
【０１４０】
薬学的に許容の付加塩の例は、塩酸から得られた塩酸塩、臭化水素酸から得られた臭化水素酸塩、硝酸から得られた硝酸塩、過塩素酸から得られた過塩素酸塩、リン酸から得られたリン酸塩、硫酸から得られた硫酸塩、ギ酸から得られたギ酸塩、酢酸から得られた酢酸塩、アコニット酸から得られたアコニット塩、アスコルビン酸から得られたアスコルビン酸塩、ベンゼルスルホナート酸から得られたベンゼルスルホナート塩、安息香酸から得られた安息香酸塩、けい皮酸から得られたけい皮酸塩、クエン酸から得られたクエン酸塩、エンボン酸から得られたエンボナート塩、エナント酸から得られたエナント酸塩、フマル酸から得られたフマル酸塩、グルタミン酸から得られたグルタミン酸塩、グリコール酸から得られたグリコール酸塩、乳酸から得られた乳酸塩、マレイン酸から得られたマレイン酸塩、マロン酸から得られたマロン酸塩、マンデル酸から得られたマンデル酸塩、メタルスルホン酸から得られたメタルスルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸から得られたナフタレン−２−スルホン酸塩、フタル酸から得られたフタル酸塩、サルチル酸から得られたサルチル酸塩、ソルベート酸から得られたソルベート酸塩、ステアリン酸から得られたステアリン酸塩、コハク酸から得られたコハク酸塩、酒石酸から得られた酒石酸塩、トルエン−ｐ−スルホン酸から得られたトルエン−ｐ−スルホン酸塩などの非毒性無機および有機酸付加塩を含むがそれらに限定されない。特に望ましい塩は、本発明の化合物のナトリウム塩、リジン塩およびアルギニン塩である。そのような塩は、技術分野に周知であり記載される手順により生成することができる。シュウ酸など、薬学的に許容と見なすことができない別の酸は、本発明の化合物およびその薬学的に許容の酸付加塩を得るうえで中間体として、塩の生成に有用である場合がある。
【０１４１】
本発明の化合物の金属塩には、カルボキシ基を含む本発明の化合物のナトリウム塩などのアルカリ金属塩が含まれる。
【０１４２】
本発明の文脈中の、Ｎ−含有化合物の「オニウム塩」も、薬学的に許容の塩として検討される。望ましい「オニウム塩」には、アルキル−オニウム塩、シクロアルキル−オニウム塩、およびシクロアルキル−オニウム塩が含まれる。
【０１４３】
本発明の化合物は、水、エタノールなどの薬学的に許容の溶媒と共に、可溶性または非可溶性形態で提供されることがある。可溶性形態には、一水和物、二水和物、半水和物、三水和物、四水和物などの水和物の形も含まれる。一般的に、可溶性形態は、本発明の目的のためには、非可溶性形態と同等であると考えられる。
【０１４４】
Ａ．立体異性体
本発明の化合物は、ラセミ体と同様に（＋）および（−）体に存在することができる。これらの異性体およびそれぞれの単一異性体のラセミ化合物は、本発明の範囲内である。
【０１４５】
ラセミ体は、周知の方法と技術により光学対掌体へと分解することができる。ジアステレオマー塩を分離する１つの方法は、光学活性酸を使用し、塩基で処理することで光学活性アミン化合物を遊離する方法である。ラセミ化合物を光学対掌体へと分解する別の方法は、光学活性マトリクスのクロマトグラフィーに基づく方法である。したがって、本発明のラセミ化合物は、例えばｄ−または１−（酒石酸、マンデル酸またはショウノウスルホン酸）塩の分別結晶により、その光学対掌体へと分離する事ができる。
【０１４６】
本発明の化合物は、また、（＋）または（−）フェニルアラニン、（＋）または（−）フェニルグルシン、（＋）または（−）カンファン酸から得られた光学的活性の活性化されたカルボン酸との本発明の化合物の反応で、ジアステレオマーアミドの生成により、または、光学的に活性クロロギ酸などとの本発明の化合物の反応で、ジアステレオマーカルバミンの生成により分解することができる。
【０１４７】
光学異性体を分解するさらなる方法は、技術分野で周知である。そのような方法には、Ｊａｑｕｅｓ  Ｊ、Ｃｏｌｅｌｔ  ＡとＷｉｌｅｎ  Ｓ、「Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ、Ｒａｃｅｍａｔｅｓ、ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ（光学異性体、ラセミ化合物、および分解）」、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、ニューヨーク（１９８１）に記載される方法を含む。
【０１４８】
光学的活性化合物は、光学活性出発物質から調製することができる。
【０１４９】
また、オキシムであるいくつかの本発明の化合物は、したがって、―Ｃ＝Ｎ―２重結合の周りの置換基の配列により、合成−および抗−形（Ｚ−およびＥ−形）の２つの形に存在することができる。本発明の化合物は、したがって、シン−およびアンチ−形（Ｚ−およびＥ−形）、またはその混合物であってよい。特定の化合物の合成−および抗−形（Ｚ−およびＥ−形）の両方は、化合物が１つまたは別の形で本願に示されている場合であっても（つまり分子の用語または実際の図面で）、本発明の範囲内であると理解する。
【０１５０】
さらに別の実施態様において、本発明は、本願に記載される依存性イオンチャネル調節化合物および薬学的に許容の担体を含む薬学的化合物に関連する。
【０１５１】
別の実施態様において、本発明には、本願に記載される本発明の化合物を含む、いずれかの新しい化合物または薬学的化合物が含まれる。例えば、化合物および本願に示される化合物（例えば本発明の化合物）を含む薬学的化合物は、その塩（例えば薬学的に許容の塩）を含み、本発明の一部である。
【０１５２】
分析
本発明は依存性イオンチャネルの活性を調節する方法に関する。本願に使用される、様々な形式の用語「調節」には、刺激（例えば特定の反応または活性の増加または上方制御）および阻害（例えば特定の反応または活性の減少または下方制御）が含まれる。一側面において、本発明の方法には、依存性イオンチャネルモジュレーター化合物（例えば本発明の化合物）の有効量に細胞を接触させ、それにより依存性イオンチャネルの活性を調節するステップが含まれる。特定の実施態様において、本発明の化合物の有効量は、依存性イオンチャネルの活性を阻害する。
【０１５３】
本発明の依存性イオンチャネルは、ＤＥＧ／ＥＮａＣ、ＴＲＰＶ（バニロイドとも言われる）および／またはＰ２Ｘ遺伝子スーパーファミリーに属する少なくとも１つのサブユニットを有する。一側面において、依存性イオンチャネルは、αＥＮａＣ、βＥＮａＣ、γＥＮａＣ、δＥＮａＣ、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ４、ＢＬＩＮａＣ、ｈＩＮａＣ、Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６、Ｐ２Ｘ７、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５、およびＴＲＰＶ６から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する。一側面において、ＤＥＧ／ＥＮａＣ依存性イオンチャネルは、αＥＮａＣ、βＥＮａＣ、γＥＮａＣ、δＥＮａＣ、ＢＬＩＮａＣ、ｈＩＮａＣ、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３、およびＡＳＩＣ４から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する。特定の実施態様において、ＤＥＧ／ＥＮａＣ依存性イオンチャネルは、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ４から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する。特定の実施態様において、依存性イオンチャネルはＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂまたはＡＳＩＣ３を有する。本発明の別の側面において、Ｐ２Ｘ依存性イオンチャネルは、Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６およびＰ２Ｘ７から成る群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する。本発明のさらに別の側面において、ＴＲＰＶ依存性イオンチャネルは、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５およびＴＲＰＶ６の群から選択される、少なくとも１つのサブユニットを有する。別の側面において、依存性イオンチャネルは、ヘテロ多量体依存性イオンチャネルであって、αＥＮａＣ、βＥＮａＣおよびγＥＮａＣと、αＥＮａＣ、βＥＮａＣおよびδＥＮａＣと、ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ２ａと、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ２ｂと、ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ１ｂおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ２ｂと、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ２ｂおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ２ａおよびＡＳＩＣ３と、ＡＳＩＣ３およびＰ２Ｘ（例えばＰ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６、およびＰ２Ｘ７）、望ましくはＡＳＩＣおよびＰ２Ｘ２と、ＡＳＩＣ３およびＰ２Ｘ３と、ＡＳＩＣ３、Ｐ２Ｘ２およびＰ２Ｘ３と、ＡＳＩＣ４および少なくとも１つのＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂおよびＡＳＩＣ３と、ＢＬＩＮａＣ（またはｈＩＮａＣ）および少なくとも１つのＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ４と、δＥＮａＣおよびＡＳＩＣ（例えばＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３およびＡＳＩＣ４）と、Ｐ２Ｘ１およびＰ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ１およびＰ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ２およびＰ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ２およびＰ２Ｘ６、Ｐ２Ｘ４およびＰ２Ｘ６、ＴＲＰＶ１およびＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ５およびＴＲＰＶ６、ＴＲＰＶ１およびＴＲＰＶ４を含むがそれらに限定されない。
【０１５４】
本発明の範囲内の化合物の依存性イオンチャネルの活性を調節する能力を判断する分析は、当業者に周知であり、本願の実施例の項に記載される。化合物の依存性イオンチャネルの活性を調節する能力を判断する別の分析も、当業者が容易に使用できるものである。
【０１５５】
本発明の依存性イオンチャネル調節化合物は、以下のスクリーニング法を用いて同定することができ、その方法には、
（ｉ）依存性イオンチャネルを含有細胞に選択された活性剤の作用（例：ｐＨを酸性度に調節したプロトン、かん流バッファ中の十分な量のＡＴＰを希薄したＡＴＰまたはかん流バッファを３７℃以上の温度まで熱した温度）にさらすステップと、
（ｉｉ）依存性イオンチャネル含有細胞を化合物の作用（化合物は同時、前、または後に適用することができる）にさらすステップと
（ｉｉｉ）依存性イオンチャネル含有細胞におけるプロトンなどの活性剤により誘発された膜電位またはイオン電流を観察するステップが含まれる。あるいは、蛍光イメージングは、依存性イオンチャネル含有細胞へのプロトンなどの活性剤に誘発された効果を観察するために使用することができる。
【０１５６】
依存性イオンチャネル含有細胞は、ギ酸、酢酸、クエン酸、アスコルビン酸、２−モリホリノエタンスルホン酸（ＭＥＳ）および乳酸などの有機酸、および塩酸、臭化水素酸、硝酸、過塩素酸およびリン酸などの無機酸を含む、いずれの手軽な酸またはバッファを使用して、酸性度へのｐＨの調節によるプロトンの作用の影響を受けることができる。
【０１５７】
本発明の方法において、依存性イオンチャネル含有細胞にわたってプロトンなどの活性剤に誘発された電流束は、例えば、パッチ・ランプまたは２電極電圧クランプ法などの電気生理学的方法により観察することができる。
【０１５８】
あるいは、依存性イオンチャネル含有細胞のプロトンなどの依存性イオンチャネル活性剤により誘発された膜電位における変化は、蛍光法を用いて観察することができる。蛍光法を使用する際、依存性イオンチャネル含有細胞は、プロトンなどの添加活性剤により生じた細胞の膜電位における変化を判断することできる膜電位表示剤で培養される。そのような膜電位表示剤は、蛍光インジケーター、望ましくはＤｉＢＡＣ４（３）、ＤｉＯＣ５（３）、ＤｉＯＣ２（３）、ＤｉＳＢＡＣ２（３）、およびＦＭＰ（ＦＬＩＰＲ膜電位）染料（分子素子）を含む。
【０１５９】
別の実施例において、依存性イオンチャネルにおけるプロトンなどの活性剤により誘発された依存性イオンチャネル活性における変化は、蛍光により細胞内のカルシウム、ナトリウム、ポタシウム、マグネシウム、プロトンおよび塩素など特定のイオンの細胞内濃度を評価して測定することができる。蛍光分析は、ＦＬＩＰＲ分析（蛍光イメージプレートリーダー：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ社販売）などプレートリーダーを使用して（例えば蛍光カルシウムインジケーターを使用して）、例えばＳｕｌｌｉｖａｎ  Ｅら、（１９９９）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．１１４：１２５−３３、Ｇｅｒｍａｎ．Ｊ．Ｃら（２０００）Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １３０（４）：９１６−２２、および米国特許第６６０８６７１号に記載される通り、マルチウェルプレートで行うことができ、それらを参照することにより本願に組み込まれる。そのような蛍光法を使用する際、依存性イオンチャネル含有細胞は、プロトンなどの添加活性剤により生じた、イオンの細胞内濃度における変化を判断することできる選択性イオン表示剤で培養される。そのようなイオン表示剤は、蛍光カルシウムインジケーター、望ましくはＦｕｒａ−２、Ｆｌｕｏ−３、Ｆｌｕｏ−４、Ｆｌｕｏ４ＦＦ、Ｆｌｕｏ−５、Ｆｌｕｏ−５Ｎ、カルシウムグリーン、Ｆｕｒａ−Ｒｅｄ、Ｉｎｄｏ−１、Ｉｎｄｏ−５Ｆ、およびｒｈｏｄ−２、蛍光ナトリウムインジケーター、望ましくはＳＢＦＩ，ナトリウムグリーン、ＣｏｒｏＮａグリーン、蛍光ポタシウムインジケーター、望ましくは、ＰＢＦＩ、ＣＤ２２２、蛍光マグネシウムインジケーター、望ましくは、Ｍａｇ−Ｆｌｕｏ−４、Ｍａｇ−Ｆｕｒａ−２、Ｍａｇ−Ｆｕｒａ−５、Ｍａｇ−Ｆｕｒａ−Ｒｅｄ、Ｍａｇ−ｉｎｄｏ−１、Ｍａｇ−ｒｈｏ−２、マグネシウムグリーン、蛍光塩素インジケーター、望ましくはＳＰＱ、Ｂｉｓ−ＤＭＸＰＱ、ＬＺＱ、ＭＥＱおよびＭＱＡＥ、蛍光ｐＨインジケーター、望ましくはＢＣＥＣＦおよびＢＣＰＣＦを含む。
【０１６０】
本発明の依存性イオンチャネル拮抗化合物は、２Ｍ、１．５Ｍ、１Ｍ、５００ｍＭ、２５０ｍＭ、１００ｍＭ、７５０μＭ、５００μＭ、２５０μＭ、１００μＭ、７５μＭ、５０μＭ、２５μＭ、１０μＭ、５μＭ、２．５μＭ未満、または１μＭ未満の濃度における活性を示す。最も望ましい実施態様において、ＡＳＩＣ拮抗化合物は、低いマイクロモルおよびナノモル台の範囲における活性を示す。
【０１６１】
本願に使用される、用語「接触」（つまり神経細胞などの細胞を化合物に接触させる）は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ（例えば培地の細胞に化合物を添加する）で化合物および細胞を一緒に培養するステップ、または化合物および対象の細胞がｉｎ  ｖｉｔｒｏに接触するように対象に化合物を投与するステップを含むことを目的とする。用語「接触」は、対象内に自然に生じる得るモジュレーターまたは化合物への細胞の曝露（例えば自然の生理的過程の結果生じることがある曝露）は含めないことを意図とする。
【０１６２】
Ａ．Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ分析
本願に記載される分析で使用する依存性イオンチャネルポリペプチドは、標準物理学的技法または化学合成により、容易に生成することができる。たとえば、所望の依存性イオンチャネルをコード化するヌクレオチド配列を含んだ発現ベクターでトランスフェクトされた宿主細胞は、ペプチドの発現が生じることができる適切な条件下で培養することができる。あるいは、依存性イオンチャネルは、一次細胞株または依存性イオンチャネルを生成することができる既存細胞株を培養して得ることができる。
【０１６３】
本発明の方法は、例えば、依存性イオンチャネル機能を結合、活性化または調節する可能性のある化合物をスクリーンするための細胞に基づいた培養物スクリーニング分析などｉｎ  ｖｉｔｒｏで行うことができる。そのような方法において、調節化合物は、サンプルまたは培養物内の依存性イオンチャネルのいずれか特定の機能と相互作用し、除去することで機能する。調節化合物は、神経細胞培養の依存性イオンチャネルの活性を制御するために使用することもできる。
【０１６４】
依存性イオンチャネルが自然に存在する、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ分析で使用される細胞には、皮質神経細胞、特にマウスまたはラットの皮質神経細胞、およびヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞、特にＨＥＫ２９３細胞株など様々な細胞が含まれる。例えば、細胞は胎児の腎臓細胞、新生児のヒト細胞、および成人ヒト細胞から培養することができる。一次細胞培養は、本発明の方法において使用することもできる。例えば、知覚神経細胞は、異なる動物種から単離され、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養することもできる。もっとも広く使用されているプロトコルは、新生児（Ｅｃｋｅｒｔら、（１９９７）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ７７：１８３−１９０）および胎生（Ｖａｓｋｏら（１９９４）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  １４：４９８７−４９９７）ラットから単離した知覚神経細胞を使用する。培養中の三叉神経または後根神経節知覚神経細胞は、ｉｎ  ｖｉｖｏ知覚神経細胞の独特な特性を呈する。
【０１６５】
あるいは、例えば、依存性チャネル、プロトン依存性イオンチャネルなどの依存性イオンチャネルは、問題になっている細胞に対し外因的であり、トランスフェクション、マイクロインジェクション、またはインジェクションなどの組み換えＤＮＡ技法で特に取り込むことができる。そのような細胞には、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＨＥＫ細胞、アフリカミドリザル腎細胞株（ＣＶ−１またはＣＯＳ−１およびＣＯＳ−７などのＣＶ−１生成ＣＯＳ細胞）、アフリカツメガエル卵母細胞または依存性イオンチャネルを発現できるその他の細胞株が含まれる。
【０１６６】
本発明の依存性イオンチャネルのヌクレオチドおよびアミノ酸配列は、当業者に周知である。例えば、ヒト依存性チャネルの配列は、ジェンバンク（Ｇｅｎｂａｎｋ）  ＧＩ  アクセス番号、ＧＩ：４０５５６３８７（ＥｎａＣアルファホモサピエンス）と、ＧＩ：４５０６８１５（ＥｎａＣアルファホモサピエンス）と、ＧＩ：４５０６８１６（ＥｎａＣベータホモサピエンス）と、ＧＩ：４５０６８１７（ＥｎａＣベータホモサピエンス）と、ＧＩ：３４１０１２８１（ＥｎａＣデルタホモサピエンス）と、ＧＩ：３４１０１２８２（ＥｎａＣデルタホモサピエンス）と、ＧＩ：４２４７６３３２（ＥｎａＣガンマホモサピエンス）と、ＧＩ：４２４７６３３３（ＥｎａＣガンマホモサピエンス）と、ＧＩ：３１４４２７６０（ＨＩＮＡＣホモサピエンス）と、ＧＩ：３１４４２７６１（ＨＩＮＡＣホモサピエンス）と、ＧＩ：２１５３６３５０（ＡＳＩＣ１ａホモサピエンス）とＧＩ：２１５３６３５１（ＡＳＩＣ１ａホモサピエンス）と、ＧＩ：２１５３６３４８（ＡＳＩＣ１ｂホモサピエンス）と、ＧＩ：２１５３６３４９（ＡＳＩＣ１ｂホモサピエンス）と、ＧＩ：３４４５２６９４（ＡＳＩＣ２；転写変異１  ホモサピエンス）と、ＧＩ：３４４５２６９５（ＡＳＩＣ２；アイソフォーム１ホモサピエンス）と、ＧＩ：３４４５２６９６（ＡＳＩＣ２；転写変異２ホモサピエンス）と、ＧＩ：９９９８９４４（ＡＳＩＣ２；アイソフォーム２ホモサピエンス）と、ＧＩ：４７５７７０９（ＡＳＩＣ３；転写変異１ホモサピエンス）と、ＧＩ：４７５７７１０（ＡＳＩＣ３；アイソフォーム１ホモサピエンス）と、ＧＩ：９９９８９４５（ＡＳＩＣ３；  転写変異２ホモサピエンス）と、ＧＩ：９９９８９４６（ＡＳＩＣ３；  アイソフォーム２ホモサピエンス）と、ＧＩ：９９９８９４７（ＡＳＩＣ３；  転写変異３ホモサピエンス）と、ＧＩ：９９９８９４８（ＡＳＩＣ３；アイソフォーム３ホモサピエンス）と、ＧＩ：３３５１９４４１（ＡＳＩＣ４；転写変異１ホモサピエンス）と、  ＧＩ：３３５１９４４２（ＡＳＩＣ４；アイソフォーム  １  ホモサピエンス）と、ＧＩ：３３５１９４４３（ＡＳＩＣ４；転写変異２ホモサピエンス）と、ＧＩ：３３５１９４４４（ＡＳＩＣ４；アイソフォーム  ２  ホモサピエンス）と、ＧＩ：２７８９４２８３（Ｐ２Ｘ１ホモサピエンス）と、ＧＩ：４５０５５４５（Ｐ２Ｘ１ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９１７（Ｐ２Ｘ２；転写変異１ホモサピエンス）と、ＧＩ：２５０９２７１９（Ｐ２Ｘ２；アイソフォーム  Ａ  ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９２２（Ｐ２Ｘ２；転写変異２ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９２３（Ｐ２Ｘ２；アイソフォーム  Ｂホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９１６（Ｐ２Ｘ２；転写変異３ホモサピエンス）と、ＧＩ：７７０６６２９（Ｐ２Ｘ２；アイソフォーム  Ｃホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９１８（Ｐ２Ｘ２；転写変異４ホモサピエンス）と、ＧＩ：２５０９２７３３（Ｐ２Ｘ２；アイソフォームＤホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９２０（Ｐ２Ｘ２；転写変異５ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９２１（Ｐ２Ｘ２；アイソフォームＨホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９１９（Ｐ２Ｘ２；転写変異６ホモサピエンス）と、ＧＩ：２７８８１４２３（Ｐ２Ｘ２；アイソフォーム  Ｉホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９２４（Ｐ２Ｘ３ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９２５（Ｐ２Ｘ３ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９２６（Ｐ２Ｘ４；転写変異１ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９２７（Ｐ２Ｘ４；アイソフォーム  Ａホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９２８（Ｐ２Ｘ４；転写変異  ２ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９２９（Ｐ２Ｘ４；アイソフォームＢホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９３０（Ｐ２Ｘ４；転写変異  ３ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９３１（Ｐ２Ｘ４；アイソフォームＣホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９３２（Ｐ２Ｘ５；転写変異１ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９３３（Ｐ２Ｘ５；アイソフォームＡホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９３４（Ｐ２Ｘ５；転写変異２ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９３５（Ｐ２Ｘ５；アイソフォームＢホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９３６（Ｐ２Ｘ５；転写変異３ホモサピエンス）と、ＧＩ：２８４１６９３７（Ｐ２Ｘ５；アイソフォームＣホモサピエンス）と、ＧＩ：３８３２７５４５（Ｐ２Ｘ６ホモサピエンス）と、ＧＩ：４８８５５３５（Ｐ２Ｘ６ホモサピエンス）と、ＧＩ：３４３３５２７３（Ｐ２Ｘ７；転写変異１ホモサピエンス）と、ＧＩ：２９２９４６３１（Ｐ２Ｘ７；アイソフォームＡホモサピエンス）と、ＧＩ：３４３３５２７４（Ｐ２Ｘ７；転写変異２ホモサピエンス）と、ＧＩ：２９２９４６３３（Ｐ２Ｘ７；アイソフォームＢホモサピエンス）と、ＧＩ：１８３７５６６６（ＴＲＰＶ１；転写変異１ホモサピエンス）と、ＧＩ：１８３７５６６７（ＴＲＰＶ１；バニロイド受容体サブタイプ１ホモサピエンス）と、ＧＩ：１８３７５６６４（ＴＲＰＶ１；転写変異２ホモサピエンス）と、ＧＩ：１８３７５６６５（ＴＲＰＶ１；バニロイド受容体サブタイプ１ホモサピエンス）と、ＧＩ：１８３７５６７０（ＴＲＰＶ１；転写変異３ホモサピエンス）と、ＧＩ：１８３７５６７１（ＴＲＰＶ１；バニロイド受容体サブタイプ１ホモサピエンス）と、ＧＩ：１８３７５６６８（ＴＲＰＶ１；転写変異４ホモサピエンス）と、ＧＩ：１８３７５６６９（ＴＲＰＶ１；バニロイド受容体サブタイプ１ホモサピエンス）と、ＧＩ：７７０６７６４（ＶＲＬ−１；転写変異１ホモサピエンス）と、ＧＩ：７７０６７６５（ＶＲＬ−１；バニロイド受容体様タンパク１ホモサピエンス）と、ＧＩ：２２５４７１７８（ＴＲＰＶ２；転写変異２ホモサピエンス）と、ＧＩ：２０１２７５５１（ＴＲＰＶ２；バニロイド受容体様タンパク１ホモサピエンス）と、ＧＩ：２２５４７１８３（ＴＲＰＶ４；転写変異１ホモサピエンス）と、ＧＩ：２２５４７１８４（ＴＲＰＶ４；アイソフォームＡホモサピエンス）と、ＧＩ：２２５４７１７９（ＴＲＰＶ４；転写変異２ホモサピエンス）と、ＧＩ：２２５４７１８０（ＴＲＰＶ４；アイソフォームＢホモサピエンス）と、ＧＩ：２１３６１８３２（ＴＲＰＶ５ホモサピエンス）と、ＧＩ：１７５０５２００（ＴＲＰＶ５ホモサピエンス）と、ＧＩ：２１３１４６８１（ＴＲＰＶ６ホモサピエンス）と、ＧＩ：���１３１４６８２（ＴＲＰＶ６  ホモサピエンス）と、ＧＩ：３４４５２６９６（ＡＣＣＮ１；転移変異２；ホモサピエンス）で見つけることができる。これらの各記録の内容は、参照することにより本願に組み込まれる。さらに、当業者はその他の種のチャンネルの配列を容易に使用でき、入手することができる。
【０１６７】
本発明の方法に使用する依存性イオンチャネルをコード化する核酸分子は、標準ＰＣＲ増幅技法にしたがって、鋳型としてのｃＤＮＡ、ｍＲＮＡまたはゲノムＤＮＡおよび適切なオリゴヌクレオチドプライマーを用いて増幅することができる。そのように増幅された核酸は、適切なベクターにクローンすることができ、ＤＮＡ配列分析で特徴付けることができる。そのような核酸配列の全てまたは一部を用いて、本発明の核酸分子は、標準ハイブリダイゼーションおよびクローン技法により単離することができる（例：Ｓａｍｂｒｏｏｋら編、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（分子クローニング：実験室の手引き）、２ｎｄ  ｅｄ．  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、ニューヨーク、１９８９に記載されるとおり）。
【０１６８】
αＥＮａＣ、βＥＮａＣ、γＥＮａＣ、δＥＮａＣ、ＡＳＩＣ１ａ、ＡＳＩＣ１ｂ、ＡＳＩＣ２ａ、ＡＳＩＣ２ｂ、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ４、ＢＬＩＮａＣ、ｈＩＮａＣ、Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６、Ｐ２Ｘ７、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５およびＴＲＰＶ６プロテイン（またはその一部）など例えば依存性イオンチャネルサブユニットプロテイン等の依存性イオンチャネルをコード化する核酸を含む発現ベクターは、標準技法を使用して細胞内に取り込まれ、調節配列に動作可能に結合する。そのような調節配列は、例えばＧｏｅｄｄｅｌ、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ：Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １８５巻、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、カルフォルニア州サンフランシスコ（１９９１）に記載されている。調節配列には、多くの宿主細胞の種類のヌクレオチド配列の直接の構成的発現であるもの、および特定の宿主細胞のみのヌクレオチド配列の直接的発現であるもの（例えば組織特異調節配列）が含まれる。発現ベクターの構築は、変換される宿主細胞、所望のタンパクの発現レベルなどの選択等の要因によることができることを当業者なら理解するであろう。本発明の発現ベクターは宿主細胞に取り込まれる事ができ、それにより、本願で記載されるとおり、核酸によりコード化された融合タンパク質またはペプチドを含むタンパク質またはペプチドを生成することができる。
【０１６９】
酵母菌Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ内の発現ベクターの例には、ｐＹｅｐＳｅｃ１（Ｂａｌｄａｒｉら、１９８７、ＥＭＢＯ  Ｊ．６：２２９−２３４）、ｐＭＦａ（ＫｕｒｊａｎとＨｅｒｓｋｏｗｉｔｚ、１９８２、Ｃｅｌｌ  ３０：９３３−９４３）、ｐＪＲＹ８８（Ｓｃｈｕｌｔｚら、１９８７、Ｇｅｎｅ  ５４：１１３−１２３）、ｐＹＥＳ２（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、カルフォルニア州サンディエゴ）およびｐＰｉｃＺ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、カルフォルニア州サンディエゴ）が含まれる。
【０１７０】
昆虫培養細胞（例：Ｓｆ９細胞）のタンパク質の発現に使用可能であるバキュロウイルスには、ｐＡｃシリーズ（Ｓｍｉｔｈら、１９８３、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．３：２１５６−２１６５）およびｐＶＬシリーズ（ＬｕｃｋｌｏｗとＳｕｍｍｅｒｓ、１９８９、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  １７０：３１−３９）が含まれる。
【０１７１】
哺乳動物の発現ベクターの例には、ｐＣＤＭ８（Ｓｅｅｄ、１９８７、Ｎａｔｕｒｅ  ３２９：８４０）、ｐＭＴ２ＰＣ（Ｋａｕｆｍａｎら、１９８７、ＥＭＢＯ  Ｊ．６：１８７−１９５）、ｐＣＤＮＡ３が含まれる。哺乳動物の細胞に使用される場合、発現ベクターの管理機能は、大抵ウイルス性調節要素により提供される。例えば、一般的に使用されるプロモーターは、ポリオーマ、アデノウイルス２、サイトメガロ・ウイルスおよびシミアンウイルス４０から得られる。真核性細胞に適した別の発現システムについては、Ｓａｍｂｒｏｏｋらの１６章および１７章を参照する。
【０１７２】
Ｂ．    Ｉｎ  Ｖｉｖｏ分析
１つ以上の依存性イオンチャネルの活性（例えば本発明の化合物などの依存性イオンチャネルモジュレーター）を調節するための本願に記載される本発明の化合物の活性は、そのような薬剤での治療の効果、毒性または副作用を決定するために、動物モデルで分析することができる。あるいは、本願に記載される同定された薬剤は、そのような薬剤の作用機序を決定するために動物モデルで使用することができる。
【０１７３】
本発明の化合物の依存性イオンチャネルの生物学的活性を調節する能力を判断するための動物モデルは、当業者に周知であり、容易に使用できるものである。疼痛および炎症用の動物モデルの例には、図１に記載されるモデルが含まれるがそれらに限定されない。神経障害を検討するための動物モデルには、Ｍｏｒｒｉｓら（Ｌｅａｒｎ．Ｍｏｔｉｖ．１９８１；１２：２３９−６０）およびＡｂｅｌｉｏｖｉｔｃｈら、Ｃｅｌｌ１９９３；７５：１２６３−７１）に記載されるモデルが含まれるがそれらに限定されない。１２６３−７１）。精神および行動障害を検討するための動物モデルの一例は、Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（Ｂｅｒｌ）１９７９  Ａｐｒ  １１；６２（２）：１１７−２１に記載される、Ｇｅｌｌｅｒ−Ｓｅｉｆｔｅｒ型パラダイムである。
【０１７４】
泌尿生殖モデルには、硫酸プロタミンおよび塩化カリウム（Ｃｈｕａｎｇ、Ｙ．Ｃら、Ｕｒｏｌｏｇｙ６１（３）：６６４−６７０（２００３）参照）または稀酢酸（Ｓａｓａｋｉ、Ｋら、Ｊ．Ｕｒｏｌ．１６８（３）：１２５９−１２６４（２００２）参照）のどちらかを膀胱に注入して、試験動物の膀胱用量を減少する方法が含まれる。膀胱に関する尿路疾患には、Ｃｈｕａｎｇら、（２００３）Ｕｒｏｌｏｇｙ  ６１：６６４−７０に記載されるとおり、硫酸プロタミンを膀胱内投与する。６６４−７０、また、これらの方法には、Ｓａｓａｋｉら（２００２）Ｊ．Ｕｒｏｌ．１６８：１２５９−６４に記載されるとおり、膀胱内投与された拡散を使用する、膀胱に関する尿路疾患に広く受け入れられているモデルの用途も含まれる。（２００２）  Ｊ．  Ｕｒｏｌ．  １６８：１２５９−６４．脊髄が損傷した患者の治療の効果は、Ｙｏｓｈｉｙａｍａら、（１９９９）Ｕｒｏｌｏｇｙ５４：９２９−３３に記載される方法を用いて試験が行われる。
【０１７５】
神経（主に、坐骨神経）に生じた損傷に基づく神経因性疼痛の動物モデルは、Ｂｅｎｎｅｔｔら、１９８８、Ｐａｉｎ３３：８７−１０７、Ｓｅｌｔｚｅｒら、１９９０、Ｐａｉｎ  ４３：２０５−２１８、Ｋｉｍら、１９９２、Ｐａｉｎ  ５０：３５５−３６３、Ｄｅｃｏｓｔｅｒｄら、２０００、Ｐａｉｎ８７：１４９−１５８およびＤｅＬｅｏら１９９４、Ｐａｉｎ５６：９−１６に記載されている。また、糖尿病性神経障害（ＳＴＺ誘発糖尿病性神経障害−Ｃｏｕｒｔｅｉｘら、１９９４、Ｐａｉｎ５７：１５３−１６０）および薬物誘発神経障害（ビンクリスチン誘発神経障害―Ａｌｅｙら、１９９６、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ７３：２５９−２６５；ｏｎｃｏｌｏｇｙ−ｒｅｌａｔｅｄ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ、ａｎｔｉ−ＧＤ２  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ−Ｓｌａｒｔら、１９９７、Ｐａｉｎ  ６０：１１９−１２５）のモデルもある。ヒトの急性疼痛は、ネズミ科の動物の化学的刺激を使用して再生することができる。Ｍａｒｔｉｎｅｚら、Ｐａｉｎ  ８１：１７９−１８６；１９９９（ライジングテスト−マイスの腹腔内酢酸）、Ｄｕｂｕｉｓｓｏｎら、Ｐａｉｎ  １９９７；４：１６１−７４（ホルマリンの足底注入）。他の種類の急性疼痛モデルは、Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅら、２００４、Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １４１：８５−９１（疼痛の切開モデル、術後モデル）およびＪｏｈａｎｅｋとＳｉｍｏｎｅ、２００４、Ｐａｉｎ  １０９：４３２−４４２（熱傷モデル）に記載されている。完全フロインドアジュバント（足底内注入）を用いた炎症性疼痛の動物モデルは、Ｊａｓｍｉｎら、１９９８、Ｐａｉｎ  ７５：３６７−３８２に記載されている。刺激剤（完全フロインドアジュバント、ヨード酢酸、カプサイシン、尿酸結晶など）の足底内注入は、動物の関節炎モデルを展開するために使用される（Ｆｅｒｎｉｈｏｕｇｈら、２００４、Ｐａｉｎ  １１２：８３−９３；ＣｏｄｅｒｒｅとＷａｌｌ、１９８７、Ｐａｉｎ２８：３７９−３９３；Ｏｔｓｕｋｉら、１９８６、Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．３６５：２３５−２４０）。ストレス誘発痛覚過敏モデルは、Ｑｕｉｎｔｅｒｏら、２０００、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｅｈａｖｉｏｒ  ６７：４４９−４５８に記載されている。疼痛のさらなる動物モデルは、Ｗａｌｋｅｒら、１９９９  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｔｏｄａｙ  ５：３１９−３２１の論文で、急性疼痛、慢性／炎症性疼痛および慢性／神経因性疼痛など様々な種類の疼痛モデルと比較し、検討されている。うつ病の動物モデルは、Ｅ．Ｔａｔａｒｃｚｙｎｓｋａら、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１３２（７）：１４２３−１４３０（２００１）およびＰ．Ｊ．Ｍ．Ｗｉｌｌら、Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ２２（７）３３１−３７（２００１））に記載され、不安神経症のモデルは、Ｄ．Ｔｒｉｅｔの「Ａｎｉｍａｌ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ａｎｔｉ−ａｎｘｉｅｔｙ  Ａｇｅｎｔｓ：Ａ  Ｒｅｖｉｅｗ（抗不安剤の研究のための動物モデル：再検討）」、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｂｉｏｂｅｈａｖｉｏｒａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ９（２）：２０３���２２２（１９８５）に記載されている。また、疼痛のさらなる動物モデルは、本願の例示項に記載されている。
【０１７６】
胃腸モデルは、以下に見られる：Ｇａｗａｒｄ、Ｋ．Ａら、Ａｍｂｕｌａｔｏｒｙ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｐＨ  ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ  ｉｎ  ｐｉｇｓ（ブタにおける携帯型長期ｐＨ監視）、Ｓｕｒｇ  Ｅｎｄｏｓｃ、（２００３）；Ｊｏｈｎｓｏｎ、Ｓ．Ｅ．ら、Ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ  Ａｃｉｄ  Ｃｌｅａｒａｎｃｅ  Ｔｅｓｔ  ｉｎ  Ｈｅａｌｔｈｙ  Ｄｏｇｓ（健康なイヌにおける酸クリアランス試験）、Ｃａｎ．Ｊ．Ｖｅｔ．Ｒｅｓ．５３（２）：２４４−７（１９８９）およびＣｉｃｅｎｔｅ、Ｙ．ら、Ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ  Ａｃｉｄ  Ｃｌｅａｒａｎｃｅ：ＭｏｒｅＶｏｌｕｍｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｔｈａｎ  Ｍｏｔｉｌｉｔｙ  Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｉｎ  Ｈｅａｌｔｈｙ  Ｐｉｇｌｅｔｓ（食道酸クリアランス：健康な子豚においては体積依存が運動依存より多い）、Ｊ．Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｎｕｔｒ．３５（２）：１７３−９（２００２）。様々な分析モデルは、直腸拡張に反応する内臓運動および疼痛を評価するために使用することができる。例えば、Ｇｕｎｔｅｒら、Ｐｈｓｉｏｌ．Ｂｅｈａｖ．６９（３）：３７９−８２（２０００）、Ｄｅｐｏｏｒｔｅｒｅら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．ａｎｄ  Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２９４（３）：９８３−９９０（２０００）、Ｍｏｒｔｅａｕら、Ｆｕｎｄ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．８（６）：５５３−６２（１９９４）、Ｇｉｂｓｏｎら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ（Ｓｕｐｐｌ．１）、１２０（５）：Ａ１９−Ａ２０（２００１）およびＧｓｃｈｏｓｓｍａｎｎら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｇａｓｔｒｏ．Ｈｅｐａｔ．１４（１０）：１０６７−７２（２００２）を参照し、それぞれ参照することによりその全体が本願に組み込まれる。
【０１７７】
胃腸の運動性は、すべての動物における腸の筋収縮に関する機械的および電気的事象を記録するｉｎ  ｖｉｖｏまたは、オーガンバスのｉｎ  ｖｉｖｏで記録された単離胃腸の腸の筋収縮標本の活性に基づき評価することができる（例えば、Ｙａｕｎら、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１１２（４）：１０９５−１１００（１９９４）、Ｊｉｎら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２８８（１）：９３−９７（１９９９）およびＶｅｎｋｏｖａら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．３００（２）：１０４６−１０５２（２００２）を参照）。ＴａｔｅｒｓａｌｌらおよびＢｏｕｎｔｒａら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２５０：（１９９３）Ｒ５および２４９：（１９９３）Ｒ３−Ｒ４およびＭｉｌａｎｏら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２７４（２）：９５１−９６１（１９９５）。
【０１７８】
【表１】
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2009516712.tif 000023
【０１７９】
もう１つの方法として、その化合物は、１つ以上の依存性イオンチャネルをコード化する外因性配列を含む非人間遺伝子導入動物でも測定を行なうことができる。本願において、「遺伝子導入動物」は非人間動物であり、好ましくは哺乳動物であり、さらに好ましくは１つまたはそれ以上のその動物の細胞が導入遺伝子を含むラットやマウスのような齧歯動物である。遺伝子導入動物の他の例として、非人間霊長類、羊、犬、牛、やぎ、鶏、両生類等が挙げられる。胚操作および微量注入を通しての遺伝子導入動物、特にマウスのような動物を作り出すための方法は、当技術分野で慣行であり、例えば、米国特許第４，７３６，８６６号および第４，８７０，００９号、米国特許第４，８７３，１９１号およびＨｏｇａｎ、Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｍｏｕｓｅ  Ｅｍｂｒｙｏ（マウス胎児の操作）、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、ニューヨーク、１９８６に記載される。同様の手法が、他の遺伝子導入動物を作り出すために用いられる。
【０１８０】
遺伝仕組み換え動物は、本発明の化合物を分析するためにも使用されることが出来る。そのような動物は、既知の技術によって作り出されることが出来る（例えば、ＴｈｏｍａｓおよびＣａｐｅｃｃｈｉ、１９８７、Ｃｅｌｌ  ５１：５０３；Ｌｉら、１９９２、Ｃｅｌｌ  ６９：９１５；Ｂｒａｄｌｅｙ、Ｔｅｒａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａｓ  ａｎｄ  Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ（奇形癌と胎胚細胞：実用的アプローチ）、Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ編、ＩＲＬ、オックスフォード、１９８７、項１１３−１５２；Ｂｒａｄｌｅｙ（１９９１）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２：８２３−８２９およびＰＣＴ公開番号ＷＯ９０／１１３５４、ＷＯ９１／０１１４０、ＷＯ９２／０９６８、およびＷＯ９３／０４１６９を参照）。
【０１８１】
導入遺伝子の調節表現を可能にする選択されたシステムを有するその他の便利な遺伝子導入非人間動物を作り出すことが出来る（例えば、Ｌａｋｓｏら、（１９９２）米国科学アカデミー紀要８９：６２３２−６２３６を参照）。リコンビナーゼシステムのもう１つの例はＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ（Ｏ’Ｇｏｒｍａｎｔら、１９９１、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５１：１３５１−１３５５）のＦＬＰリコンビナーゼシステムである。
【０１８２】
医薬品化合物
本発明は医薬品組成物もまた提供する。そのような組成物は、治療上（または予防上に）有効な量の依存性イオンチャネルモジュレーターを含み、好ましくは、１つまたはそれ以上の上述の発明の化合物、および薬学的に許容される基剤または賦形剤を含む。適した薬学的に許容される基剤は、これらに限定されないが、生理食塩水、緩衝食塩水、Ｄ形グルコース、水、グリセロール、エタノールおよびそれらの組合せを含む。その基剤および化合物は無菌であることができる。処方は、投与方法に適合するものとする。
【０１８３】
「薬学的に許容される基剤」という用語は当分野で認められており、本発明の化合物の哺乳動物への投与に適した、薬学的に許容される物質、組成物または賦形剤を含む。その基剤は、１つの臓器または体の１部からもう１つの臓器または体の１部へ対象剤を持ち運びまたは輸送にかかわる、液体または固形の充填剤、希釈剤、賦形剤、溶剤または封入材料を含む。各基剤は、処方の他の成分と適合するという意味で「許容される」ものであり、対象に対し有害でないものでなければならない。薬学的に許容される基剤として機能する物質のいくつかの例を以下に挙げる：ラクトース、グルコース、Ｄ形グルコースおよびスクロースなどの糖類；コーンスターチおよびポテトスターチ等のデンプン類；カルボキシルメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、メチルセルロースおよびセルロースアセテート等のセルロースおよびその誘導体；トラガカント末；モルト；ゼラチン；タルク；ココアバターおよび坐剤ワックス等の賦形剤；ピーナッツ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、ヒマシ油、テトラグリコール、および大豆油等の油類、プロピレングリコール等のグリコール類；グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール等のポリオール類、オレイン酸エチル、ポリエチレングリコールエステル類およびラウリン酸エチル等のエステル類；寒天；水酸化マグネシウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸塩、トリエチラノラミン、アセテート、クエン酸カリウムおよび水酸化アルミニウム等の緩衝材；アルギン酸；無ピロゲン水；等張食塩水；リンガー溶液；エチルアルコール；リン酸緩衝液および製剤処方に採用されるその他の非毒性混合可能物質。
【０１８４】
ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム等の湿潤剤、乳化剤および潤滑剤も、着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味剤、香料添加剤、防腐剤および酸化防止剤と同様に組成物中に存在することが出来る。
【０１８５】
薬学的に許容される酸化防止剤の例には以下が含まれる：アスコルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム等の水溶性酸化防止剤；パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α‐トコフェノールおよびビタミンＥトコフェノール等の誘導体等の油性酸化防止剤；およびクエン酸、エチレンジアミン４酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸、クエン酸ナトリウム等の金属キレート剤。
【０１８６】
適した薬学的に許容される基剤は、それらに限らないが、水、食塩水（例えば、ＮａＣｌ）、アルコール、アラビアゴム、植物油、ベンジルアルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトース、アミロースまたはデンプン等の炭水化物、シクロデキストリン、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフィン、香油、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等を含む。薬学的に許容される調合剤は無菌であり、必要に応じて、例えば、有害的に活性化合物と反応しない、潤滑剤、防腐剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響する塩、緩衝剤、着色料、香料および／または芳香剤等の助剤と混合される。薬学的に許容される基剤は、Ｄ形グルコース、グリセリン、マンニトールおよび塩化ナトリウム等の等張調整剤もまた含むことが出来る。
【０１８７】
その組成物は、必要に応じて、少量の湿潤剤または乳化剤、またはｐＨ緩衝剤もまた含むことができる。その組成物は、溶液、懸濁液、乳剤、タブレット、ピル、カプセル、徐放性製剤、または粉末であることが出来る。その組成物は、トリグリセリド類等の従来の結合剤およびキャリアで、坐薬として処方することが出来る。経口処方は、医薬品グレードのマンニトール、ラクト‐ス、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウム等の標準の基剤を含むことが出来る。
【０１８８】
その組成物は、常法に従って、人間への静脈内投与に適した医薬品化合物として処方することが出来る。一般的には、静脈内投与のための化合物は無菌等張水性緩衝液である。必要に応じて、その化合物は、溶解補助剤および注射部位の痛みを緩和するための局所麻酔薬もまた含むことが出来る。一般的には、その成分は、例えば活性剤の量を表示するアンプルまたはサチェット等の密封された容器で凍結乾燥粉末または無水濃縮物として、別々または一緒に混合されたユニット投薬形態のいずれかで供給される。その化合物が点滴によって投与される場合には、無菌の医薬品グレードの純水、生理食塩水またはＤ形グルコース／水を含む点滴ボトルで投与することが出来る。その化合物が注射によって投与される場合、成分が投与の前に混合できるように、注射のための殺菌水または整理食塩水のアンプルを提供することが出来る。
【０１８９】
本発明の薬学的に許容される組成物は、それにより持続放出性または徐放性化合物を提供する、依存性イオンチャネルモジュレーター化合物の放出をコントロールする薬剤もまた含むことが出来る。
【０１９０】
本発明は、本願に開示される依存性イオンチャネルモジュレーターのプロドラッグおよび、そのようなプロドラッグを含む医薬組成物にも関連する。例えば、酸性官能基または水酸基を含む本発明の組成物は、適切なアルコールまたは酸と共に、対応するエステルとしても調合および投与されることが出来る。そのエステルは、それから対象内で内因性酵素により開裂され、活性剤を生成することが出来る。
【０１９１】
本発明の処方は、経口投与、経鼻投与、局所投与、粘膜投与、経皮投与、口腔投与、舌下投与、直腸投与、膣内投与および／または非経口的投与に適した処方を含む。その処方は、都合よく、ユニット投薬形態で提供することが出来、薬学の技術において既知であるいかなる方法によっても調合されることが出来る。１回投薬量形態を作るための、基剤物質と組み合わされることの出来る活性成分の量は、一般的に、治療効果をもたらす化合物の量になるだろう。一般的に、１００パーセント中、この量は約１パーセントから約９９パーセントの活性成分におよび、好ましくは、約５パーセントから約７０であり、最も好ましくは、約１０パーセントから約３０パーセントである。
【０１９２】
これらの処方または化合物の調合方法は、本発明の化合物をキャリアおよび、随意に、１つ以上の補助成分と結合させるステップを含む。一般的に、処方は、均一におよび密接に、本発明の化合物を液体基剤と、または微紛化した固体基剤、または両方と結合させることによって、そして必要であれば製品を形成することによって調合される。
【０１９３】
本発明の経口投与に適した処方は、それぞれは活性成分としての本発明の化合物の予め決められた量を含む、カプセル、カチェット、ピル、タブレット、ロゼンジ（通常、スクロースおよびアカシアまたはトラガカントの風味ベースを使用する）、パウダー、顆粒の形態で、または水性あるいは非水性の溶液あるいは懸濁液として、または水中油型あるいは油中水型乳濁液として、またはエリキシル剤またはシロップとして、または芳香錠（ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアのような不活性ベースを使用する）および／またはマウスウォッシュ等の形態とすることが出来る。本発明の化合物は急速静注薬、舐剤またはペーストとして投与されることが出来る。
【０１９４】
経口投与のための本発明の固形の投薬形態（カプセル、タブレット、ピル、ドラジェ、パウダー、顆粒等）において、活性成分は、クエン酸ナトリウムまたは第２リン酸カルシウム、および／または以下のような１つ以上の薬学的に許容される基剤と混合される：デンプン類、ラクト‐ス、スクロース、グルコース、マンにトール、および／またはケイ酸等の充填剤または増量剤；例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアカシア等の結合剤；グリセロール等の保湿剤；寒天、炭酸カルシウム、ポテトスターチまたはタピオカスターチ、アルギン酸、特定ケイ酸塩、および炭酸ナトリウム等の崩壊剤；パラフィン等の溶液緩染剤；第４級アンモニウム化合物等の吸収促進剤；例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレート等の潤湿剤；カオリン粘土およびベントナイト粘土等の吸収剤；タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびそれらの混合物等の潤滑剤；および着色剤。カプセル、タブレットおよびピルの場合、その医薬組成物は緩衝剤もまた含むことが出来る。同様のタイプの固形化合物もまた、高分子量ポリエチレングリコール等と同様に、ラクト‐スまたは乳糖などの添加剤を使用して軟ゼラチンカプセルまたは硬ゼラチンカプセルで充填剤として採用されることが出来る。
【０１９５】
タブレットは、随意に１つ以上の補助成分を伴い、圧縮または型で成形することによって作られる。圧縮タブレットは結合剤（例えば、ゼラチンまたはハイドロキシプロピルメチルセルロース）、潤滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシルメチルセルロースナトリウム）、表面活性剤または分散剤を使用して調合されることが出来る。成形タブレットは、不活性液体希釈剤で湿らされた化合物の粉末の混合物を適した機械で成形することによって作られることが出来る。
【０１９６】
タブレット、および、ドラジェ、カプセル、ピルおよび顆粒等の本発明の医薬組成物のその他の固形の投薬形態は、随意に、腸溶コーティングおよび製剤処方の技術において既知であるその他のコーティング等のコーティングおよびシェルで、分割または調合されることが出来る。それらはまた、その中に、例えば望ましい放出特性、その他のポリマーマトリクス、リポソームおよび／またはミクロスフェアを提供するように様々な割合でハイドロキシプロピルメチルセルロースを使用して活性成分の徐放放出または制御放出を提供するように調合されることも出来る。それらは、例えば、バクテリア保持フィルターを通してのろ過によって、または使用直前に滅菌水または滅菌注射剤溶剤で溶解することの出来る滅菌固形化合物の形態で滅菌剤を組み込むことによって殺菌することが出来る。これらの組成物はまた、随意に乳白剤を含むことができ、活性成分のみを放出する化合物であることが出来、または選択的に、胃腸管の特定の部分に、随意に遅発性の方法で存在することが出来る。使用することの出来る包埋組成物の例としては重合物質およびワックスが挙げられる。その活性成分はまたマイクロカプセルの形態であることが出来、適切な場合、１つまたはそれ以上の上述の賦形剤を有することが出来る。
【０１９７】
本発明の組成物の経口投与のための液状投薬形態は、薬学的に許容される乳剤、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤を含む。活性成分に加えて、その液状投薬形態は、例えば、水またはその他の溶剤等、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油類（具体的には、綿実油、落花生油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラハイドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタン脂肪酸エステル、およびそれらの混合物等の溶解補助剤および乳化剤等の、当技術において一般的に使用される不活性希釈剤を含む。
【０１９８】
不活性希釈剤に加えて、その経口組成物は、また潤湿剤、乳化剤および懸濁剤、甘味剤、香料、着色剤、芳香剤および防腐剤等のアジュバントを含むことも出来る。
【０１９９】
懸濁液は、活性組成物に加えて、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベンとナイト、寒天およびトラガカント、およびそれらの混合物等の懸濁化剤を含むことが出来る。
【０２００】
直腸投与または膣内投与のための本発明の医薬組成物の処方は、１つまたはそれ以上の本発明の化合物を、例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール、坐剤ワックスまたはサリチル酸塩等を含む１つまたはそれ以上の適した刺激性の少ない賦形剤または基剤と混合して調合することが出来、室温で固形であるが、体温では液体であり、すなわち、直腸内または膣腔内で溶け活性化合物を放出する、坐薬として存在することが出来る。
【０２０１】
膣内投与に適した本発明の処方はまた、当技術において既知の適切であるような基剤を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ジェル、ペースト、フォームまたはスプレーの処方を含む。
【０２０２】
本発明の化合物の局部投与または経皮投与のための投薬形態はパウダー、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ジェル、溶液、パッチおよび吸入抗原を含む。その活性化合物は、無菌状態下で、薬学的に許容される基剤と、および必要とされるすべての防腐剤、緩衝剤、または推進剤と混合されることが出来る。
【０２０３】
その軟膏、ペースト、クリームおよびジェルは、本発明の活性化合物に加えて、動物性および植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またそれらの混合物等の添加剤を含むことが出来る。
【０２０４】
パウダーおよびスプレーは、本発明の化合物に加えて、ラクト‐ス、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミドパウダー、またはそれらの薬物の混合体等の添加剤を含むことが出来る。スプレーは、加えて、クロロフルオロ炭化水素等の常用推進剤、ならびにブタンおよびプロパン等の揮発性非置換炭化水素を含むことが出来る。
【０２０５】
経皮パッチは、さらに、本発明の化合物の制御される投薬を体へ提供する利点を有する。そのような投薬形態は、適切な媒体でその化合物を溶解または分散することよって作られることが出来る。吸収促進薬はまた皮膚にわたってその化合物のフラックスを増大させるために使用されることも出来る。そのようなフラックス率は、ポリマーマトリクスまたはジェルで、律速膜を提供すること、またはその活性化合物を分散することのいずれかによって制御することが出来る。
【０２０６】
眼処方、眼軟膏、パウダー、点眼および同類のものもまた本発明の範囲内であると考えられる。
【０２０７】
非経口的投与のための本発明の医薬品化合物は、１つまたはそれ以上の薬学的に許容される無菌等張水性のまたは無菌等張非水性の溶液、分散液、懸濁液または乳濁液、または使用の直前に無菌注入可能溶液または分散液へ再構成されることの出来る無菌のパウダーとの組合せで１つまたはそれ以上の本発明の化合物を含み、それらは処方を対象とする受容体の血液、または懸濁化剤あるいは増粘剤と等張にさせる酸化防止剤、緩衝剤、静菌薬、溶質を含むことが出来る。
【０２０８】
本発明の医薬品化合物において採用される適した水性および非水性キャリアの例としては、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよび同類のもの等）、および適したそれたの混合物、オリーブ油等の植物性油、およびオレイン酸エチル等の注入有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティング物質の利用によって、分散液における必要粒度の維持によって、および界面活性剤の使用によって維持されることが出来る。
【０２０９】
これらの化合物はまた防腐剤、潤湿剤、乳化剤および分散剤等のアジュバントを含むことが出来る。微生物の作用の防止は、例えば、パラベン、クロロブタノール、ソルビン酸フェノール、および同類のもの等の様々な抗菌剤および抗真菌薬の包含によって確実にされる。また、糖類、塩化ナトリウム、および同類のもの等の等張剤をその化合物へ含むことも望ましい。さらに、注入製剤形態の持続的な吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンのような吸収を遅らせる薬剤の包含によってもたらされることが出来る。
【０２１０】
ある場合においては、薬剤の効果を持続させるために、皮下注射または筋肉注射から薬剤の吸収を遅くすることが望ましい。これは結晶液体懸濁液または軟水溶性を有する無形性物質を使用することによって達成されることが出来る。その薬剤の吸収率は、その結果、同様に結晶の大きさおよび結晶形態によって変わる溶解率により変わる。もう１つの方法として、非経口投与の薬剤の遅発性吸収は、油性賦形剤でその薬剤を溶解または懸濁することによって達成される。
【０２１１】
持続性の注入薬剤の形態は、対象の化合物のマイクロカプセル化マトリックスを、ポリラクチド・ポリグリコライドのような生分解性高分子で形成することにより作られる。薬剤のポリマーに対する比およびに使用される特定のポリマーの性質によって、薬剤放出の比率は制御されることが出来る。その他の生分解性高分子の例としてはポリ（オルソエステル）およびポリ（アンハイドライド）が挙げられる。持続性薬剤の注入処方もまた、体内組織と適合するリプソームまたはマイクロエマルジョンで薬剤を封入することによって調合される。
【０２１２】
投与方法
本発明は、それらに限らないが、疼痛、炎症性疾患、神経障害、消化器疾患および泌尿生殖器疾患を含む、対象物における依存性イオンチャネル活性により媒介された状態の治療方法を提供する。その方法は、対象へ依存性イオンチャネルモジュレーターの治療的に有効な量を投与するステップを含む。治療されるべき状態は、少なくとも１つの部分において、依存性イオンチャネルの活性（例えば、ＡＳＩＣ１ａおよび／またはＡＳＩＣ３）によって媒介されたであることが出来る。
【０２１３】
投薬される既定の化合物の量は個人基準で決定され、少なくとも１つの部分おいて、個人の大きさ、治療される症状の重症度および求められた結果を考慮して決定されるだろう。本願に説明される依存性イオンチャネル活性モジュレーターは単独で、または許容されるキャリアまたは賦形剤および、随意に、１つまたはそれ以上の追加薬剤を含む医薬品化合物で投与される。
【０２１４】
これらの化合物は、治療のために、すべての適した投与経路によって人間およびその他の動物に投与されることが出来る。その依存性イオンチャネルモジュレーターは、皮下に、静脈内に、非経口的に、腹腔内に、皮内に、筋肉内に、局所に、経腸的に（例えば、経口的に）、直腸内に、経鼻的に、口腔内に、舌下で、全身的に、膣腔的に、吸入噴霧によって、薬剤ポンプによって、または埋め込まれた貯留層を通じて、通常の非毒性、生理的に許容されるキャリアまたは賦形剤を含む投薬形態で投与されることが出来る。投与の好ましい方法は、経口投与である。投与される形態（例えば、シロップ、エリクシール、カプセル、タブレット、溶液、フォーム、乳濁液、ジェル、ゾル）は、投与される経路の場所により異なる。例えば、粘膜の（例えば、口腔粘膜、直腸粘膜、腸粘膜、気管支粘膜）投与、点鼻薬、エアロゾール、吸入抗原、噴霧器、点眼薬または坐薬が使用されることが出来る。本発明の化合物および薬剤は、例えばアヘン剤等の鎮痛薬、例えばＮＳＡＩＤ等の抗炎症薬、麻酔薬および、依存性イオンチャネル媒介状態の１つあるいはそれ以上の症候または要因を制御することの出来るその他の薬剤等のその他の生物学的活性薬剤と共に投与されることが出来る。
【０２１５】
具体的な実施態様において、本発明の薬剤を局所的に治療を必要とする局部へ投与することが望ましく、これは、例えば、この方法に限定されないが、外科手術中の局所注入、局所適用、経皮貼付によって、注射によって、カテーテルを用いて、坐薬を用いて、またはインプラントを用いて可能であり、前記インプラントは多孔性、非多孔性、またはシアラスチック膜あるいは繊維のような細胞膜を含むゼラチン様物質である。例えば、その薬剤は関節または膀胱に注入されることが出来る。
【０２１６】
本発明の化合物は、随意に、例えば、依存性イオンチャネル（例えば、ＡＳＩＣ１ａおよび／またはＡＳＩＣ３）で媒介された状態の症候の治療および／または緩和で知られる１つまたはそれ以上の追加の薬剤との組合せで投与されることが出来る。その追加の薬剤は、本発明の化合物と同時に、または連続的に投与されることが出来る。例えば、本発明の化合物は、少なくとも、鎮痛剤、抗炎症剤、麻酔薬、コルチコステロイド（例えば、デキサメタゾン、ジプロプリオン酸べクロメタゾン（ＢＤＰ）治療）、抗痙攣薬、抗鬱薬、抗嘔吐剤、抗精神剤、心・血管作動薬（例えば、β遮断薬）またはがん治療薬の１つとの組合せで投与されることが出来る。特定の実施態様において、本発明の化合物は、痛み止めの薬との組合せで投与される。本願において使用される、「痛み止めの薬」という用語は鎮痛剤、抗炎症薬、麻酔薬、コルチコステロイド、抗てんかん薬、バルビツール酸系睡眠薬、抗うつ剤、マリファナを示すことを目的とする。
【０２１７】
上述の組合せ治療は、本発明の化合物の投与に先立って、または同時に、または後に開始されることが出来る。従って、本発明の方法は、疾患や障害のための、またはその他の治療の副作用を改善するための第２治療等の、第２治療を投与するステップをさらに含むことが出来る。そのような第２治療は、例えば、抗炎症薬および痛みを治療するために行われるすべての治療を含むことが出来る。さらには、または代わりの方法をしては、追加治療は、さらに疾患を治療するため、または疾患あるいは他の治療（例えば、抗嘔吐剤、抗炎症薬、抗鬱剤、抗精神薬、抗痙攣薬、ステロイド、心・血管作動薬、および癌化学療法剤）の副作用を治療するための薬剤の投与を含むことが出来る。
【０２１８】
本願において、「鎮痛薬」とは、痛みまたはそのすべての兆候あるいは症候（例えば、痛覚過敏症、異痛症、感覚異常、知覚過敏、痛感過敏、知覚障害）を取り除き、または緩和し、また炎症の緩和をもたらすことの出来る、例えば、抗炎症薬等の薬剤である。鎮痛薬は、ＮＳＡＩＤ（非ステロイド抗炎症薬）、オピオイド鎮痛薬を含む麻薬性鎮痛薬、および非麻薬性鎮痛薬に分類されることが出来る。ＮＳＡＩＤはさらに非選択的ＣＯＸ（シクロオキシゲナーゼ）阻害剤、および選択的ＣＯＸ２阻害剤に分類されることが出来る。オピオイド鎮痛薬は天然、合成または準合成のオピオイド鎮痛薬になることが出来、例えば、モルヒネ、コデイン、メペリジン、プロポキシフェン、オキシコドン、ヒドロモルフォン、ヘロイン、トラマドール、およびフェンタニルを含むことが出来る。非麻薬性鎮痛薬（非オピオイド鎮痛薬とも言う）は、例えば、アセトアミノフェン、クロニジン、ＮＭＤＡ拮抗薬、バニロイド受容体拮抗薬（例えば、ＴＲＰＶ１拮抗薬）、プレガバリン、内在性カンナビノイドおよびカンナビノイドを含む。非選択的ＣＯＸ阻害剤は、それらに限定されないが、アセチルサリチル酸（ＡＳＡ）、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトプロフェン、ピロキシカム、エトドラクおよびブロムフェナクを含む。選択的ＣＯＸ２阻害剤は、それらに限定されないが、セレコキシブ、バルデコキシブ、パレコキシブ、およびエトリコキシブを含む。
【０２１９】
本願において使用される、「麻酔薬」は、局部麻酔薬の投与部位の感覚認識を妨げる、または意識変容あるいは意識消失をもたらす、例えば、全身性麻酔薬等の薬剤である。局部麻酔薬はそれらに限定されないが、リドカインおよびブビカインを含む。
【０２２０】
抗てんかん薬の非限定の例は、カルバマゼピン、フェニトインおよびガバペンチンである。抗うつ剤の非限定の例はアミトリプチリンおよびデスメチルイミプリミンである。
【０２２１】
抗炎症薬の非限定の例としてはコルチコステロイド剤（例えば、ヒドロコルチゾン、コルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾン、トリアムシノロン、フルプレドニゾロン、ベタメタゾンおよびデキサメタゾン）、サリチル酸塩、ＮＳＡＩＤ、抗ヒスタミン薬およびＨ２受容体拮抗薬が挙げられる。
【０２２２】
本願において使用される「非経口投与」および「非経口的投与される」という表現は、通常注射による、腸内投与および局所性投与以外の投与方法を意味し、それらに限定しないが、静脈内、筋肉、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内および胸骨内の注射および注入を含む。
【０２２３】
本願において使用される「全身投与」、「全身的に投与される」、「末梢投与」および「末梢投与される」という表現は、化合物、薬剤またはその他の物質の投与で、直接中枢神経系に投与される以外の、対象の組織に入り、つまり、例えば皮下投与等の代謝および同様のプロセスを対象とする投与を意味する。
【０２２４】
選択された投与の経路に関わらず、適した水和物の形で使用されることの出来る本発明の化合物、および／または本発明の医薬品化合物は、当技術の熟練者に既知の従来の方法により、薬学的に許容される投与形態に処方される。
【０２２５】
本発明の医薬品化合物における活性成分の実際の投与量レベルは、対象へ有害でなく、特定の対象、化合物、投与方法の、望ましい治療反応を達成するために有効である活性成分の量を得るように変えることが出来る。
【０２２６】
選択された投与量レベルは、採用される本発明の特定の化合物またはエステル、またはそれらの塩あるいはアミドの活性、または投与の経路、投与の時間、使用される特定の化合物の排出率、治療の期間、採用される特定の化合物と組合せで使用されるその他の薬剤、化合物および／または物質、年齢、性別、体重、症状、総体的な健康および治療される対象の事前の治療歴などの医療技術において既知の要因を含む様々な要因により異なる。
【０２２７】
当該技術において通常の技術を有する医師または獣医は、直ちに、必要とされる医薬品化合物の有効量を決定し、処方することが出来る。例えば、本発明の化合物の投与量は、治療される症状の動物モデルを使用して用量反応曲線を得ることにより決定されることが出来る。例えば、その医師または獣医は、望ましい治療効果を得るために、本発明の化合物の投与量を医薬品化合物において必要とされるレベルよりも低いレベルで開始し、徐々に、望ましい効果が得られるまで、投与量を増やしていってもよい。
【０２２８】
一般的に、本発明の化合物の適した１日の投与量は、治療効果を作り出すために有効な最も低い投与量の化合物の量になるだろう。そのような有効量は、一般的に、上述の要因によって異なるだろう。一般的に、対象への本発明の化合物の静脈内投与量および皮下投与量は、望ましい鎮痛作用に使用される時、１日に、体重１キログラムあたり約０．０００１ｍｇから約１００ｍｇに及び、さらに好ましくは、１日に１ｋｇあたり約０．０１ｍｇから約１００ｍｇに及び、さらにまた好ましくは、１日に１ｋｇあたり約１．０ｍｇから約５０ｍｇである。有効量とは、依存性イオンチャネルを伴う状態または依存性イオンチャネル疾患を治療する量である。
【０２２９】
必要に応じて、活性化合物の有効な１日の投与量は、随意にユニット投薬形態で１日を通して適切な間隔で、別々に投与される２回、３回、４回、５回、６回、またはそれ以上の副用量で投与されることが出来る。
【０２３０】
本発明の化合物が単独で投与されることは可能であるが、その化合物を医薬品化合物として投与することが好ましい。
【０２３１】
治療方法
上記の化合物は、それらに限定されないが、疼痛、炎症性疾患、神経障害疾患、および、少なくとも１部分で、依存性イオンチャネル媒介活性によって調節される細胞、臓器、または生理学的組織の全ての異常機能に関わる、依存性イオンチャネル媒介活性の調節のため、対象への投与のために使用されることが出来る。さらには、その化合物は、本願で説明される疾患または障害の１つまたはそれ以上の追加の症候を緩和または治療することも出来ると認識される。
【０２３２】
従って、１つの態様において、本発明の化合物は、急性、慢性、悪性および非悪性の体性痛（皮膚痛覚および深刻な体性痛を含む）、内臓痛、および神経痛を含む疼痛を治療するために使用されることが出来る。その化合物は、疼痛および感覚欠損の１つまたはそれ以上の追加の兆候または症候（例えば、痛覚過敏、異痛症、感覚異常、知覚過敏、痛感過敏、知覚障害）を緩和または治療することも出来るとさらに認識される。
【０２３３】
本発明のこの態様のいくつかの実施態様において、本発明の化合物は、それらに限定されないが、切り傷、火傷、裂傷、穿刺、切開、外科的疼痛、術後疼痛、口腔歯科手術、乾癬、湿疹、皮膚炎、およびアレルギーを含む、皮膚および関連する臓器の傷害、炎症、疾患および障害に伴う体性痛または皮膚痛覚を治療するために使用されることが出来る。本発明の化合物は、皮膚および関連する臓器の悪性および非悪性の腫瘍（例えば、メラノマ、基底細胞癌）に伴う体性痛を治療するためにも使用されることが出来る。
【０２３４】
本発明のこの態様のその他実施態様において、本発明の化合物は、それらに限定されないが、関節痛、筋痛症、線維筋痛症、筋筋膜疼痛症候群、歯痛、腰痛、陣痛および出産の痛み、外科的疼痛、術後疼痛、頭痛、片頭痛、特発性疼痛障害、ねんざ、骨折、骨損傷、骨粗しょう症、重度の火傷、痛風、関節炎、骨関節炎、筋炎、および脊椎障害（例えば、脊椎分離症、不全脱臼、坐骨神経痛、および斜頸）を含む、筋骨格および結合組織の損傷、炎症、疾患および障害に伴う深刻な体性痛を治療するために使用されることが出来る。本発明の化合物は、筋骨格および結合組織の悪性および非悪性の腫瘍（例えば、肉腫、横紋筋肉腫、および骨肉腫）に伴う深刻な体性痛を治療するためにも使用されることが出来る。
【０２３５】
本発明のこの態様の他の実施態様において、本発明の化合物は、循環系、呼吸器系、泌尿生殖系、胃腸系および目、耳、鼻、喉の損傷、炎症、疾患または障害に伴う内臓痛を治療するために使用されることが出来る。
【０２３６】
例えば、本発明の化合物は、それらに限定されないが、虚血性疾患、虚血性心疾患（例えば、狭心症、急性心筋梗塞、冠状動脈血栓症、冠不全）、血管およびリンパ管の疾患（例えば、末梢血管障害、間欠性跛行、静脈瘤、痔、静脈塞栓症または静脈血栓症、静脈炎、血栓性静脈リンパ節炎、リンパ管炎）を含む循環系関連の損傷、炎症および障害に伴う内臓痛、および循環系の悪性および非悪性腫瘍（例えば、リンパ腫、骨髄腫、ホジキン病）に伴う内臓痛を治療するために使用されることが出来る。
【０２３７】
もう１つの例において、本発明の化合物は、それらに限らないが、上部呼吸器感染（例えば、鼻咽頭炎、静脈洞炎、および鼻炎）、インフルエンザ、肺炎（例えば細菌性、ウィルス性、寄生性および真菌性）、下部呼吸器感染（例えば、気管支炎、細気管支炎、気管気管支炎）、間質性肺炎、肺気腫、気管支拡張症、喘息重積状態、喘息、肺線維症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肋膜の疾患を含む、呼吸器系の損傷、炎症、疾患および障害に伴う内臓痛、および呼吸器系の悪性および非悪性の腫瘍（例えば、小細胞癌、肺癌、気管、喉頭の腫瘍）に伴う内臓痛を治療するために使用されることが出来る。
【０２３８】
もう１つの例において、本発明の化合物は、胃腸系の悪性および非悪性の腫瘍（例えば食道、胃、小腸、大腸、肝臓および膵臓の腫瘍）に伴う内臓痛と同様に、それらに限定されないが、歯および口腔粘膜の損傷、炎症および障害（例えば埋伏歯、虫歯、歯周疾患、口腔アフタ、歯髄炎、歯肉炎、歯周炎、および口内炎）、食道、胃および十二指腸の損傷、炎症および障害（例えば、潰瘍、消化不良、食道炎、胃炎、十二指腸炎、憩室炎および虫垂炎）、腸の損傷、炎症および障害（例えば、クローン病、麻痺性イレウス、腸閉塞、過敏性腸症候群、神経因性腸、巨大結腸、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、および胃腸炎）、腹膜の損傷、炎症および障害（例えばス腹膜炎）、肝臓の損傷、炎症および障害（例えば、肝臓炎、肝臓の壊死、肝梗塞、肝静脈閉塞性疾患）、胆嚢、胆道および膵臓の損傷、炎症および障害（例えば、胆石症、胆嚢結石症、総胆管結石症、胆嚢炎、および膵臓炎）、機能性腹痛症候群（ＦＡＰＳ）、胃腸運動障害を含む、胃腸系の損傷、炎症および障害に伴う内臓痛を治療するために使用されることが出来る。
【０２３９】
もう１つの例において、本発明の化合物は、泌尿生殖器系の悪性および非悪性の腫瘍（例えば、膀胱、前立腺、胸、卵巣の腫瘍）に伴う痛みと同様に、それらに限定されないが、腎臓の損傷、炎症および障害（例えば、腎結石症、糸球体腎炎、腎炎、間質性腎炎、腎盂炎、腎盂腎炎）、尿路の損傷、炎症および障害（例えば、尿石症、尿道炎、尿路感染を含む）、膀胱の損傷、炎症および障害（例えば、膀胱炎、神経因性膀胱障害、神経因性膀胱機能障害、過活動膀胱、膀胱頸部閉塞）、男性器の損傷、炎症および障害（例えば、前立腺炎、精巣炎および精巣上体炎）、女性器の損傷、炎症および障害（例えば、骨盤感染症、子宮内膜症、月経困難症、卵巣嚢胞）を含む、泌尿生殖器系の損傷、炎症、疾患および障害に伴う内臓痛の治療に使用されることが出来る。
【０２４０】
本発明のこの態様のさらなる実施態様において、本発明の化合物は、中枢神経系および末梢神経系を含む、神経系の損傷、炎症、疾患または障害に伴う神経痛を治療するために使用されることが出来る。神経痛に関連するそのような損傷、炎症、疾患または障害の例としては、それらに限られないが、神経障害（例えば、糖尿病性神経障害、薬物誘発性神経障害、放射線誘発性神経障害）、神経炎、神経根障害、神経根炎、神経変性病（例えば、筋ジストロフィー）、脊髄損傷、末梢神経損傷、癌に伴う神経損傷、モートン神経腫、頭痛（例えば、非器質性慢性頭痛）、緊張性頭痛、群発性頭痛および偏頭痛）、偏頭痛、多発性の身体化症候群、ヘルペス後神経痛（帯状疱疹）、三叉神経痛複合性局所疼痛症候群（灼熱痛または反射性交感神経性としても知られる）、脊髄根痛、幻肢痛、慢性頭痛、神経幹痛、身体性疼痛障害、中心性疼痛、非心臓性胸痛、脳卒中後中枢性痛が挙げられる。
【０２４１】
もう１つの態様において、本発明の化合物は、皮膚および関連する臓器、筋骨格および結合組織系、呼吸器系、循環系、泌尿生殖器系および胃腸系の損傷、疾患または障害に関連する炎症を治療するために使用されることが出来る。
【０２４２】
本発明のこの態様のいくつかの実施態様において、本発明の化合物で治療されることの出来る皮膚および関連する臓器の炎症状態、疾患または障害の例としては、それらに限定されないが、アレルギー、アトピー性皮膚炎、乾癬および皮膚炎が挙げられる。
【０２４３】
本発明のこの態様の他の実施態様において、本発明の化合物で治療されることの出来る筋骨格および結合組織系の炎症状態、疾患または障害は、それらに限定されないが、変形性関節症および筋炎を含む。
【０２４４】
本発明のこの態様の他の実施態様において、本発明の化合物で治療されることの出来る呼吸器系の炎症状態、疾患または障害は、それらに限定されないが、アレルギー、喘息、鼻炎、神経性炎症、肺線維症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、成人呼吸窮迫症候群、鼻咽頭炎、静脈洞炎および気管支炎を含む。
【０２４５】
本発明のこの態様のさらなる他の実施態様において、本発明の化合物で治療されることの出来る循環系の炎症状態、疾患または障害は、それらに限定されないが、心内膜炎、心膜炎、心筋炎、静脈炎、リンパ節炎およびアテローム性動脈硬化症を含む。
【０２４６】
本発明のこの態様のさらなる実施態様において、本発明の化合物で治療されることの出来る泌尿生殖器系の炎症状態、疾患または障害は、それらに限定されないが、腎臓の炎症（例えば腎炎、間質性腎炎）、膀胱の炎症（例えば、膀胱炎）、尿道の炎症（例えば、尿道炎）、男性器の炎症（例えば、前立腺炎）、および女性器の炎症（例えば、骨盤感染症）を含む。
【０２４７】
本発明のこの態様のさらなる実施態様において、本発明の化合物で治療されることの出来る胃腸系の炎症状態、疾患または障害は、それらに限定されないが、胃炎、胃腸炎、大腸炎（例えば、潰瘍性大腸炎）、炎症性腸症候群、クローン病、胆嚢炎、膵臓炎および虫垂炎を含む。
【０２４８】
本発明のこの態様のまたさらなる実施態様において、本発明の化合物で治療されることの出来る炎症状態、疾患または障害は、それらに限定されないが、微生物感染（例えば、細菌性、ウィルス性および真菌性感染）、身体傷害要因（例えば、火傷、放射線および外傷）、化学的傷害要因（例えば、有毒性および腐食性物質）組織壊死および様々なタイプの免疫反応および自己免疫疾患（例えば、紅斑性狼瘡）に関連する炎症を含む。
【０２４９】
もう１つの態様において、本発明の化合物は、それらに限定されないが、神経変性病（例えば、アルツハイマー病、デュシェーヌ病）、てんかん、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、脳虚血、神経障害（例えば、化学療法誘発性神経障害、糖尿病性神経障害）、網膜色素変性、中枢神経系の外傷（例えば、脊髄損傷）、および神経系の癌（例えば、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、脳腫瘍、および神経膠腫）、およびその他の特定の癌（例えば、メラノーマ、膵臓癌）を含む、神経系の損傷、疾患または傷害の治療に使用されることが出来る。
【０２５０】
本発明のさらなる態様において、本発明の化合物は、その他の皮膚および関連する臓器の障害（例えば、抜け毛）、循環系の障害（例えば心不整脈および心細動、交感神経の過剰支配）、および泌尿生殖器系の障害（例えば、神経因性膀胱機能障害および過活動膀胱）を治療するためにも使用されることが出来る。
【０２５１】
本発明は、本発明の化合物の投与から利益を得るとされる対象を治療する方法を提供する。依存性イオンチャネルモジュレーターから利益を得るとされるすべての治療上の兆候は本発明の方法によって治療されることが出来る。その方法は、疾患または障害が思量されるように、本発明の化合物を対象へ投与するステップを含む。
【０２５２】
本発明は、対象において、本発明の化合物の投与で治療されることの出来る疾患または障害を防ぐ方法をさらに提供する。「リスクがある」対象は、発見可能な疾患を有しても、有さなくてもよく、本願に説明される治療方法に先立って発見可能な疾患を示していても、示していなくてもよい。「リスクがある」とは、従来のリスク評価方法に基づいて、症候を発現する可能性がより多くあるとされる、または本発明の方法によって治療されることの出来る疾患または障害の発現と関連がある１つ以上のリスク要因を有する個人を意味する。例えば、リスク要因は家系、薬歴、および疾患のリスクを増大させることで知られるまたは疑われる環境中の物質への曝露歴を含む。本願に記述される薬剤で治療されることの出来る疾患または状態に対するリスクがある対象は、例えば、当技術に精通した者に既知であるすべての診断分析または予後因子分析またはその組合せによっても特定される。予防薬の投与は、疾患または障害の特徴的な症状の発現に先立って、疾患または障害が予防されるように、また、あるいは、その進行を遅らされるように生じることが出来る。
【０２５３】
発明の例証
本発明は、本発明の化合物の依存性イオンチャネル調節活性の分析に使用されることの出来る、下記の例によってさらに描写される。例証は、さらに限定的であると解釈されてはならない。例証を通して使用される動物モデルは認められた動物モデルであり、これらの動物モデルにおける効果の実証は人間における効果の予測である。
【０２５４】
実施例１：カルシウム画像を使用したＡＳＩＣ拮抗薬の同定
細胞培養
ＨＥＫ２９３細胞を発現するＡＳＩＣ１ａは、５％の二酸化炭素の湿気環境で、３７℃のポリスチレン培養瓶（１７５ｍｍ２）の培養基（１０％ＦＢＳのＤＭＥＭ）で培養される。細胞の密集度は、培養日に８０〜９０％であるべきである。細胞は、１０ｍｌのＰＢＳですすがれ、培養基および粉末の追加によって２５ｍｌピペットで再懸濁される。
【０２５５】
その細胞は、約１ｘ１０６細胞／ｍｌ（１００μｌ／ウェル）の密度で、１０ｍｇ／１ポリ‐Ｄ‐リシン（７５μｌ／ウェル、≧３０分間）で前処理された、黒壁の透明な底の９６ウェルプレートに植付けされる。植付けられた細胞は、色素が導入される前に、２４時間増殖することが出来る。
【０２５６】
蛍光カルシウム色素Ｆｌｕｏ−４／ＡＭの導入
Ｆｌｕｏ−４／ＡＭ（１ｍｇ、分子プローブ）は９１２μｌＤＭＳＯに溶解される。Ｆｌｕｏ−４／ＡＭ原液（１ｍＭ）は培養基で最終濃度２μＭ（導入液）まで希釈される。
【０２５７】
その培養基はウェルから吸引され、５０μｌのＦｌｕｏ−４／ＡＭ導入液が各ウェルへ加えられる。そのセルは３７℃で３０分間培養される。
【０２５８】
カルシウム測定
導入後、その導入液は吸引され、その細胞は、１００μｌの修飾アッセイ緩衝液（１４５ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＫＣｌ、５ｍＭのＣａＣｌ２、１ｍＭのＭｇＣｌ２、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４）で２回洗浄され、細胞外色素が除去される。２回目の洗浄に続いて、１００μｌの修飾アッセイ緩衝液が各ウェルに加えられ、蛍光発生がＦＬＩＰＲ?またはＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎ?（アメリカ合衆国のモレキュラー・デバイセス社（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ））、または当技術に精通したものに既知の他の全ての適した装置で測定される。
【０２５９】
ＦＬＩＰＲ設定（ＡＳＩＣ１ａ）
温度：室温（２０〜２２℃）
第１添加：３０μｌ／秒のペースで１００μｌの開始高さの５０μｌの試験液
第２添加：３５μｌ／秒のペースで１５０μｌの開始高さの５０μｌのＭＥＳ溶液（２０ｍＭ、５ｍＭ最終濃度）
読み出し間隔：前培養−１０秒ｘ７および３秒ｘ３アンタゴニストフェーズ−３秒ｘ１７および１０秒ｘ１２
【０２６０】
追加プレート（化合物テストプレートおよびＭＥＳプレート）がそれぞれ、ＦＬＩＰＲトレーの左右の位置に置かれる。細胞プレートは真ん中の位置に置かれ、ＡＳＩＣ１ａプログラムが生じる。ＦＬＩＰＲはそこで上述の間隔設定に従って、適切な測定を行うだろう。刺激後に得られた蛍光発生は、平均基礎蛍光発生（修正アッセイ緩衝液において）に対して補正される。
【０２６１】
活性物質のヒット確認および特徴解析
試験物質の存在下のＭＥＳ誘発性ピークカルシウム反応は、ＭＥＳ反応単独にフェーズ対して表れる。ＭＥＳ誘発性カルシウム反応を阻害する試験物質は３つずつ検査される。確認されたヒットは、全用量反応曲線を実行することによりさらに特徴解析されるために集められ、ＩＣ５０値によって示されるような各ヒット化合物の可能性が測定される。（例えば、５０％のＭＥＳ誘発性カルシウム反応を抑制する試験物質の濃度、例えば、図１Ａ、図１Ｂ、図１Ｃ、図１３Ａおよび図１３Ｂを参照）。
【０２６２】
カルシウム動因アッセイで得られる本発明の化合物のＩＣ５０値の要約が以下に示される。ｎ＝３−７
2009516712.tif 000024
【０２６３】
実施例２：異種発現システムにおけるＡＳＩＣ拮抗薬のスクリーニングと生物分析
本実施例は、本発明の化合物の活性のもう１つのｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価を説明する。
【０２６４】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価方法のもう１つの例としては、当技術に精通するものに既知であり、ＣＯＳ、ＨＥＫ（例えばＨＥＫ２９３細胞および／またはＣＨＯ細胞等）のような様々な哺乳動物細胞株を含む、哺乳動物の異種発現システムの使用が挙げられる。細胞株は依存性イオンチャネルにトランスフェクトされ、以下のような電気生理学を実行するように使用される：
【０２６５】
全ての実験は、室温（２０〜２５ｏＣ）で従来のホールセルパッチクランプ法（Ｎｅｈｅｒ，  Ｅ．、ら、  （１９７８）  Ｐｆｌｕｅｇｅｒｓ  Ａｒｃｈ  ３７５：２１９−２２８）を使用した電圧固定法で行われる。
【０２６６】
使用される増幅器は、ＩＴＣ−１６インターフェイスを通じてマッキントッシュＧ３コンピュータによって実行されるＥＰＣ−９（ドイツ、ラムブレヒト社（Ｌａｍｂｒｅｃｔ）、ヘカエレクトロニクス（ＨＥＫＡ−ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ）である。実験条件は増幅器に付属するパルスソフトウェアで設定される。データはローパスでフィルタされ３倍の遮断周波数で直接ハードディスクへサンプルされる。
【０２６７】
ピペットは水平電極プラー（ドイツ、アウグスブルグ、Ｚｅｉｔｚ−Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｅ社）を使用したホウケイ酸ガラスから引き出される。ピペット耐性は、これらの実験に使用される塩溶液において２〜３Ｍｏｈｍｓである。ピペット電極は塩化銀ワイヤであり、基準は、実験室に固定された塩化銀ペレット電極（アメリカ、ヒールズバーグ、Ｉｎ  Ｖｉｖｏ  Ｍｅｔｒｉｃ）である。電極は開いたピペットで溶液内で密封する直前にゼロにあわせられる。
【０２６８】
細胞のカバースリップは、ノマルスキ光学が搭載された倒立顕微鏡（ＩＭＴ−２、オリンパス）の台へ乗せられた１５μｌ実験室へ移される。細胞は、継続的に、細胞外生理食塩水に２．５ｍｌ／ｍｉｎの速度で過融解される。ギガシール形成後、ホールセル構成が吸引により得られる。細胞は、６０ｍＶ保持電圧で保持され、各実験の開始時に電流は継続的に４５秒間計測され、安定したベースラインを確保する。低ｐＨ（＜７）の溶液は、そのチップは細胞から約５０μｍの場所に置かれる特注の重力誘導フローパイプを通じて室へ運ばれる。アプリケーションは、フローパイプに繋げられたチューブが、パルスソフトウェアによってコントロールされるバルブによって圧縮される時に引き出される。初めに、低ｐＨ（通常、ｐＨ６．５）が６０秒ごとに５秒間あてられる。アプリケーション時のサンプルの間隔は５５０μｓである。安定した反応が得られた後、低ｐＨ溶液と同様に、細胞外生理食塩水はテストされる化合物を含む溶液へ切り替えられる。その化合物は繰り返し振幅の反応が得られるまで存在する。電流振幅は反応の最高値で測定され、化合物の効果は、化合物が含まれる直前、パルスによって、誘発される電流の振幅によって分けられる化合物平衡での振幅で計算される。    
【０２６９】
以下の食塩水、細胞外溶液（ｍＭ）ＮａＣｌ（１４０）、ＫＣｌ（４）、ＣａＣｌ２（２）、ＭｇＣｌ２（４）、ＨＥＰＥＳ（１０、ｐＨ７．４）、細胞外溶液（ｍＭ）ＫＣｌ（１２０）、ＫＯＨ（３１）、ＭｇＣｌ２（１．７８５）、ＥＧＴＡ（１０）、ＨＥＰＥＳ（１０、ｐＨ７．２）が使用される。一般的に、試験用化合物は、使用最高濃度の５００倍で５０％ＤＭＳＯ中で溶解される。
【０２７０】
化合物Ａおよび化合物Ｈを使用したパッチ・クランプ試験は、図２Ａおよび２Ｂに示すように、組み換えラットＡＳＩＣ依存性チャネルを阻害する有効性を実証した。ＨＥＫ２９３細胞は、ｒＡＳＩＣ１ａまたはｒＡＳＩＣ３でトランスフェクトされ、化合物Ａ、化合物Ｈおよびアミロリドによる総用量阻害曲線を行うために使用された。結果は、試験物質の不在下で得られた制御ピーク電流の割合として表される。これらのデータは、化合物ＡおよびＨの双方とも、アミロリドと比較するとより強力な拮抗剤であることを示唆する。
【０２７１】
同様の結果を、ＣＨＯ細胞内に安定してトランスフェクトされたヒトＡＳＩＣ１ａとともに図３に示す。図３Ａは、化合物Ａとアミロリドとの間の用量反応関係を比較する［反応曲線（総電荷移動量）の下の領域を測定することで決定され、制御反応に正常化される〕。化合物Ａ（図３Ｂ）およびアミロリドは、用量依存的方法により、ヒトＡＳＩＣ１ａのｐＨ誘発反応を軽減することができた。しかしながら、化合物Ａは、約１００倍強力であった。図１４Ａおよび１４Ｂは、化合物ＪおよびＫに対して同様の結果を示す。
【０２７２】
図４Ａおよび４Ｂは、単独にｈＡＳＩＣ１ａを発現するＨＥＫ２９３細胞か、またはｈＡＳＩＣ１ａおよびｈＡＳＩＣ３を同時発現するＨＥＫ２９３細胞から記録された１０μＭの化合物Ａの有無で酸性生理食塩水に対する反応を示す［−６０ｍＶで電圧固定し、細胞周囲の細胞外溶液は、５秒間にｐＨ７．４からｐＨ６．５へ急速に変化した］（ｎ＝３）。これらの図に示されるデータは、化合物Ａが、これらの依存性イオンチャネルの活性を効果的に調節することを示す。
【０２７３】
実施例３：Ｘｅｎｏｐｕｓ  ｌａｅｖｉｓ卵母細胞におけるＡＳＩＣ拮抗剤のスクリーニングおよび生物分析
この実施例は、本発明の化合物の活性のｉｎ  ｖｉｔｒｏアセスメントを記載する。
【０２７４】
依存性イオンチャネルを発現するＸｅｎｏｐｕｓ  ｌａｅｖｉｓ卵母細胞における２電極電圧クランプ電気生理学的分析は、以下のとおり行われる。
【０２７５】
卵母細胞は、成人Ｘｅｎｏｐｕｓ  ｌａｅｖｉｓからを摘出し、軽く攪拌しながらバースの溶液中で１ｍｇ／ｍｌのＩ型コラゲナーゼ（シグマ）を使用して室温で２時間処理した。依存性イオンチャネルサブユニットタンパク質をコード化するヌクレオチド配列を含む、ｐＣＤＮＡ３などの適切な発現ベクターの２．５〜５ｎｇの核マイクロインジェクションの前に、フェーズＩＶ−Ｖでの選択された卵母細胞は手動で脱卵胞される。かかる実験では、卵母細胞は、それらの表面上にホモマルチマープロトン依存性イオンチャネルを発現する。代替の実験では、明確な依存性イオンチャネルサブユニットのためのコード配列を有する１つ、２つ、３つ以上のベクターが、卵母細胞核内に同時注入される。後者の場合には、卵母細胞は、ヘテロマルチマープロトン依存性イオンチャネルを発現する。例えば、ｐｃＤＮＡ３ベクター内のＡＳＩＣ２ａおよび／またはＡＳＩＣ３サブユニットは、１：１ｃＤＮＡの割合で同時注入される。５０ｍｇ／ｍｌのゲンタマイシンおよび１．８ｍＭのＣａＣｌ２を含有するバースの溶液中に１９℃で２〜４日発現した後に、依存性イオンチャネルは、酸性溶液（ｐＨ＜７）を適用することによって活性化され、電流は、ＯＣ−７２５Ｂ増幅器（Ｗａｒｎｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を使用して、２電極電圧クランプ構造に記録される。電流は獲得され、Ａ／Ｄ  ＮＢ−ＭＩＯ−１６ＸＬインターフェース（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）とともにＡｐｐｌｅ  Ｉｍａｃ  Ｇ３  コンピュータに５００Ｈｚでデジタル化され、記録された形跡は、Ａｘｏｇｒａｐｈ（Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）（Ｎｅｈｅｒ、  Ｅ．  ａｎｄ  Ｓａｋｍａｎｎ、  Ｂ．  （１９７６）  Ｎａｔｕｒｅ  ２６０：７９９−８０２）に１００Ｈｚでポストフィルタ処理される。微小電極で固定されると、卵母細胞は、ＮａＯＨ（制御リンガー）によりｐＨ７．４になる、９７ｍＭのＮａＣｌ、２ｍＭのＫＣｌ、１．８ｍＭのＣａＣｌ２および１０ｍＭのＨＥＰＥＳを含有する修正リンガー溶液を使用して、１０〜１２ｍｌ／分で継続的に表面かん流される。試験リンガー溶液は、ＨＥＰＥＳをＭＥＳで置換し、また所望の酸性値にｐＨを調整することによって調製される。本発明の化合物は、対照および試験リンガー溶液の双方で調製され、コンピュータ制御切り替え弁システムを介して室温で卵母細胞に適用される。すべての溶液のオスモル濃度は、塩化コリンを使用して２３５ｍＯｓｍに調整される。同様に、記録はまた、ＯｐｕｓＥｘｐｒｅｓｓ?（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、米国サニーベール）などの自動マルチチャンネル卵母細胞システムにて獲得することができる。
【０２７６】
図５Ａおよび５Ｂは、ＯｐｕｓＥｘｐｒｅｓｓ?システムにおいて、３０μＭで化合物Ａの有無でｐＨ６．５の試験リンガー溶液の適用によって誘発される内向き電流を示す。記録は、本願に記載の２電極電圧クランプ構造手順を使用して、ホモメリックｈＡＳＩＣ１ａ（図５Ａ）またはヘテロメリックｈＡＳＩＣ１ａ＋３（図５Ｂ）を発現する卵母細胞から獲得した。これらの図に示されるデータは、化合物Ａが、これらの依存性イオンチャネルの活性を効果的に調節することを示す。
【０２７７】
実施例４：一次細胞系におけるＡＳＩＣ拮抗剤のスクリーニングおよび生物分析
この実施例は、初代培養における知覚ニューロンのパッチ・クランプ電気生理学を利用して、本発明の化合物の阻害活性の別のｉｎ  ｖｉｔｒｏアセスメントを記載する。
【０２７８】
知覚ニューロンは、異なる動物種から単離され、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養することができる。もっとも広く使用されているプロトコルは、新生児（Ｅｃｋｅｒｔら、  （１９９７）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ７７：１８３−１９０）および胎生（Ｖａｓｋｏら  （１９９４）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  １４：４９８７−４９９７）ラットから単離した知覚ニューロンを使用する。培養中の三叉神経または後根神経節知覚神経細胞は、ｉｎ  ｖｉｖｏ知覚神経細胞の独特な特性を呈する。同様に、電気生理学は、上記の実施例２に記載のように行われる。電圧固定法では、膜貫通型電流は、１μＭの化合物ＡおよびＨが、ｐＨ６．５誘発内向き電流を阻害する図６Ａおよび６Ｂに示すように記録される。電流固定法では、膜貫通型電位における変化が記録される。酸性状態（例えば、ｐＨ６．５）下では、膜は脱分極し、図７Ａおよび７Ｂに示すように、活動電位の放電につながる。１μＭの化合物ＡおよびＨは、酸誘導型の膜の脱分極を阻害し、活動電位放電の次の率を減少する。これらの図に示されるデータは、化合物ＡおよびＨが、これらの自然知覚ニューロン依存性イオンチャネルの活性を効果的に調節することを示す（ｎ＝３）。
【０２７９】
実施例５：ホルマリンモデル−急性持続性疼痛のモデル
この実施例は、本発明の化合物の阻害活性のｉｎ  ｖｉｖｏアセスメントを記載する。
【０２８０】
疼痛の既知の多くのモデルは、文献に記載されており、当業者には既知である（例えば、表１を参照）。この実施例は、ホルマリン試験の使用を記載する。
【０２８１】
雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットは、食物および水へのアクセスが無制限の標準条件下で、３匹の動物の群を一緒に収容する。すべての実験は、理性のある動物における実験的疼痛の調査用の倫理指針（Ｚｉｍｍｅｒｍａｎ，１９８３）により実施した。
【０２８２】
正常で無傷のラット（体重１５０〜１８０ｇ）におけるホルマリン誘発性の尻込んだ行動のアセスメントを、Ａｕｔｏｍａｔｅｄ  Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ  Ａｎａｌｙｓｅｒ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、米国サンディエゴ）を使用して行った。手短に言えば、これは、試験するラットの後肢に小さなＣ形状の金属帯（１０ｍｍ幅×２７ｍｍ長）を載せるステップを含む。その後、ラット（４匹のラットを各試験セッションに含めた）は、従うべき実験的パラダイムにより薬剤または賦形剤が投与される前に、適応目的のために２０分間円筒プレキシガラス観察チャンバ（直径３０．５ｃｍおよび高さ１５ｃｍ）に載せた。適応後、個々のラットを静かに抑止し、２７Ｇ針を使用して、ホルマリン（生理食塩水中５％、５０μｌ、ｓ．ｃ．）を後肢の足底面に注入した。その後、ラットを別個の観察チャンバに戻し、金属帯の動きが検出できる電磁場を生じるように設計された２つの電磁石コイルから成る密封検出デバイス上に順番にそれぞれを置いた。その後、アナログ信号はデジタル化され、他の足の動きから尻込んだ行動が識別可能となるように、ソフトウェアアルゴリズム（ＬａｂＶｉｅｗ）を適用した。１分の抽出間隔を使用し、得られた反応パターンに基づいて、侵害行動の５つのフェーズを識別し、第１フェーズ（Ｐ１、０〜５分）、間期（Ｉｎｔ、６〜１５分）、第２フェーズ（Ｐ２、６０分）、フェーズ２Ａ（Ｐ２Ａ、１６〜４０分）およびフェーズ２Ｂ（Ｐ２Ｂ、４１〜６０分）と得点化した。
【０２８３】
さらに、侵害行動は、４つの行動カテゴリー、０、注入された後肢の治療が、反対側の足と区別できない、１、注入された足が、その上にかかる体重がほとんどない、または全くない、２、注入された足を持ち上げ、どの表面にも接していない、３、注入された足を舐める、噛む、または振動させる、のそれぞれに費やされた時間を測定することによって、手作業で５分おきに決定した。０から３の範囲にある加重侵害得点は、それぞれのカテゴリーに費やされた時間をカテゴリーの体重で乗じ、これらの積を合計し、それぞれの５分の一定時間に対する総時間で除することによって計算した（Ｃｏｄｅｒｒｅ  ら、Ｐａｉｎ  １９９３、５４：４３）。得られた反応パターンに基づいて、侵害行動の２つのフェーズを識別し、第１フェーズ（Ｐ１、０〜５分）、間期（Ｉｎｔ、６〜１５分）、第２フェーズ（Ｐ２、６０分）、フェーズ２Ａ（Ｐ２Ａ、１６〜４０分）およびフェーズ２Ｂ（Ｐ２Ｂ、４１〜６０分）と得点化した。
【０２８４】
Ｐｒｉｓｍ?４．０１ソフトウェアパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ、米国カリフォルニア州サンディエゴ）を使用して、統計的分析を行った。ＡＮＯＶＡ、続いて事後の一対比較のためにボンフェローニの方法を使用して、治療群と対照賦形剤群との間の反応レベルにおける差異を分析した。Ｐ値＜０．０５を有意であると見なした。
【０２８５】
図８および９は、足底内ホルマリン注射によって誘発された疼痛に関する化合物Ａの作用の典型的な例である。ホルマリンの３０分前に、化合物Ａを腹腔内に投与した。化合物Ａは、ホルマリン試験のフェーズ１および２において総疼痛スコア行動（尻込む、舐める、噛む）（図８Ａ）を軽減することができた。舐める、および噛むなど特定の疼痛行動が観察された場合のみ、フェーズ１および２の双方におけるこれらの作用が非常に顕著となる（図８Ｂ）（ｎ＝６−８）。これらの実験を形成する結果を図９に要約し、ここでは総疼痛スコアのフェーズ２に対する明らかな用量反応関係が、約１２ｍｇ／ｋｇのＥＤ５０によって見ることができる（図９Ａ）。これらの実験では、用量とプラズマ照射との間の直線関係が観察された（図９Ｂ）。上記のＡｕｔｏｍａｔｅ  Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅ  Ａｎａｌｙｚｅｒを使用して、化合物ＢおよびＨ（図１０Ａ、およびＢ）に対する同様の結果を示す（ｎ＝６−８）。これらの結果は、化合物Ａ、ＢおよびＨが、足の中のホルマリン注射によって誘発された急性持続性疼痛を阻止できることを示唆する。
【０２８６】
実施例６：ＣＦＡモデル−慢性炎症疼痛のモデル
ラットの後肢の中への完全フロインドアジュバント（ＣＦＡ）の注入は、注入部位における行動型痛覚過敏および異痛症に関連する持続的炎症状態を生じることがわかっている（Ｈｙｌｄｅｎら、Ｐａｉｎ  ３７：２２９−２４３、１９８９）（Ｂｌａｃｋｂｕｒｎ−Ｍｕｎｒｏら、２００２）。短時間のハロセン麻酔下で、後肢の足底面へＣＦＡ（生理食塩水５０％、１００μｌ、シグマ）の皮下注射をラットに投与した。Ｉｎｃａｐａｃｉｔａｎｃｅ  Ｔｅｓｔｅｒ（Ｌｉｎｔｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ、英国）、（Ｚｈｕら、２００５）を使用して評価するように、２４時間後、後肢体重負荷反応の試験を受けた。器具は、それぞれの後肢に分配される動物の体重を別個に測定する二重チャネル計量器を組み込む。正常のラットは、２つの後肢間で均等に体重を分配するが（５０５０）、損傷および非損傷の足の間での体重配分の不一致は、損傷した足の不快度の自然な反射である（防衛行動）。それぞれの後肢が別個のトランスデューサパッド上で休息できるように設計されたプラスチックチャンバにラットを載せた。５秒間の時間間隔にわたりトランスデューサ上の荷重を記録するためにアベレージャを設定し、表示される２つの番号は、それぞれの足に対するラットの体重の分配をグラム（ｇ）で表した。それぞれのラットに対して、それぞれの足から３回読み取りをし、その後平均化した。側側体重負荷の差異は、３回の試行（右足読み取り?左足読み取り）から２つの後肢間の差異の絶対値の平均として計算した。
【０２８７】
温熱性痛覚過敏のアセスメント：足底試験無痛覚症メーター（ＩＩＴＣ、カリフォルニア州ウッドランドヒル、モデル＃３３６）を使用して、Ｈａｒｇｒｅａｖｅｓ（Ｈａｒｇｒｅａｖｅｓら、１９８８）により、有害温熱性刺激に対するベースラインおよび治療後退避潜時を測定した。刺激強度を最大出力の３０％に設定し、カットオフ時間を３０秒に設定した。ラットを２８℃まで温めたガラスプレートに載せ、それぞれの試験セッションを行う前の最長１５分間試験チャンバに慣れさせた。足底面に温熱性刺激を与え、それぞれの足の３回の読み取りの平均潜時をそれぞれの時点に対する潜時値として使用した。温熱性閾値を、刺激を受けた足の防衛足退避、尻込む、噛む、および／または舐めるを含む、第１の疼痛行動に対する第２の潜時と定義した。それぞれの治療群に対する損傷した足および正常な足について、平均および標準誤差（ＳＥＭ）を決定した。
【０２８８】
図１１Ａ、１１Ｂおよび１１Ｃは、ＣＦＡで治療したラットにおける自発性疼痛行動への化合物Ａ、化合物Ｈおよびモルヒネの作用を示す。ＣＦＡの後肢注射が投与される前の２〜３日間、雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットの後肢体重負荷反応を測定した。２４時間後、ベースライン反応を測定し、その後、ラットに化合物Ａ（５、１０および２０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、化合物Ｈ（１０、３０および６０ｍｇ／ｋｇ）およびモルヒネ（３、６および１０ｍｇ／ｋｇ）を投与した。その後、薬物または賦形剤注入後３０、６０および１２０分で、体重負荷反応を測定した（データは６０分のものを示す）。モルヒネと同様に化合物ＡおよびＨは、賦形剤と比較して体重負荷でのＣＦＡ誘発変化において著しい用量依存減衰を生じた。データは平均＋／−ＳＥＭとして表される。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１対ベースライン、＋＋＋Ｐ＜０．００１対賦形剤。すべての群でｎ＝７−８である。
【０２８９】
図１２は、化合物ＡによるＣＦＡ誘発温熱性痛覚過敏の用量依存逆転を示す。化合物Ａの試験前の４８時間にＣＦＡを注入した。化合物Ａの腹腔内投与後３時間で温熱性痛覚過敏を測定した。化合物Ａは、６．５ｍｇ／ｋｇのＥＤ５０によって温熱性痛覚過敏を完全に逆転することができた。比較のために、モルヒネ（６ｍｇ／ｋｇｓｃ）およびインドメタシン（３０ｍｇ／ｋｇ  ｐｏ）の結果を示す。これらの結果は、化合物Ａは、機械的治療法および温熱性治療法の双方に効果的であることを示す。データは平均±ＳＥＭとして表される（ｎ＝１０）。＊＊Ｐ＜０．０１、対ベースライン。
【０２９０】
実施例７：ＡＳＩＣのクローニングおよび発現
ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ３のためのｃＤＮＡは、ラットポリ（Ａ）＋ｍＲＮＡからクローン化して、Ｈｅｓｓｅｌａｇｅｒら、（Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．  ２７９（１２）：１１００６−１５  ２００４）により、発現ベクターに加えることができる。すべての構築は、ＣＨＯ−Ｋ１細胞（ＡＴＣＣ  ｎｏ．ＣＣＬ６１）またはＨＥＫ２９３細胞において表現される。ＣＨＯ−Ｋ１細胞は、５％がＣＯ２および９５％が空気の湿気のある環境にて３７℃で培養され、毎週２度継代される。細胞は、１０％のウシ胎仔血清および２ｍＭＬのプロリン（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で補完されるＤＭＥＭ（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、２ｍＭ  グルタマックス）で維持される。ＣＨＯ−Ｋ１細胞は、製造業者のプロトコルによりリポフェクトアミンＰＬＵＳトランスフェクションキット（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）またはＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、ＡＳＩＣを含有するプラスミドおよびプラスミドコード化増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）とともに同時トランスフェクトされる。それぞれのトランスフェクションに対して、パッチ・クランプ増幅器（ＡＳＩＣ１ａおよびＡＳＩＣ３に対して約５０ｎｇ）の飽和を回避するために、適度な範囲（０．５ｎＡ〜１０ｎＡ）内でホールセル電流を生じるＤＮＡの量を使用することが試行される。トランスフェクションの後１６〜４８時間電気生理学的測定を行う。電気生理学的記録を行った日に、細胞はトリプシン処理され、ポリエルリジンで薄くめっきするガラスのカバースリップ上に播種される。
【０２９１】
実施例８：化合物Ａのための合成手順
５−ブロモ−８−ニトロイソキノリン（ＩＩ）
Ｗｉｌｌｉａｍ  Ｄａｌｂｙ  Ｂｒｏｗｎ  ａｎｄ  Ａｌｅｘ  Ｈａａｈｒ  Ｇｏｕｌｉａｅｖ、  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ第８１巻、ページ９８に見られる手順により、対応するイソキノリン（Ｉ）から５−ブロモ−８−ニトロイソキノリンを調製した。
【０２９２】
５−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−メチル−８−ニトロイソキノリン（ＩＩＩ）
窒素雰囲気下の無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）中で５−ブロモ−８−ニトロイソキノリン（ＩＩ，５ｇ，１９．７ｍｍｏｌ）を懸濁し、イソキノリンが完全に溶解されるまで混合物を加熱した。メチル−ｐ−トルエンスルホン酸塩（４ｇ、２１．５ｍｍｏｌ）を滴下して加え、その後２４時間８５℃で加熱した。氷浴中で冷却した後、ろ過により固体を収集し、エーテルおよびアセトンで洗浄し、イソキノリニウム塩を得た（さらに精製することなく使用された）。
【０２９３】
酢酸（３０ｍｌ）中にイソキノリニウム塩を溶解し、水素化ホウ素ナトリウム（０．８７ｇ）を加えた。反応混合物を室温で夜通し攪拌した。酢酸を真空下で除去し、その後水で希釈した。溶液を１０Ｎ  ＮａＯＨ（ｐＨ＝８）で塩基性化し、沈殿生成物をろ過により収集し、水で洗浄し、真空下で乾燥し、光に敏感な５−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−メチル−８−ニトロイソキノリン（４．７ｇ）を得た。
【０２９４】
５−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−メチルイソキノリン−８−アミン（ＩＶ）
エタノール（５０ｍｌ）中のＮ−メチル−５−ブロモ−８−ニトロ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン（ＩＩＩ、４．７ｇｍ、１７．３ｍｍｏｌ）の溶液に、ラネーニッケル（水中の溶液、１．５ｇ）を加えた。Ｈ２下で、反応混合物を室温で夜通し攪拌した。混合物はセリットを通してろ過し、溶媒を真空化で除去し、ＩＶを得た。
【０２９５】
Ｎ−（５−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−メチルイソキノリン−８−イル）−２−（ヒドロキシイミノ）アセトアミド（Ｖ）
５−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒド−２−メチルイソキノリン−８−アミン（ＩＶ、３．２５ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）、抱水クロラール（２．３ｇ）、ヒドロキシルアミン塩酸塩（２．９ｇ）、Ｈ２Ｏ中の１２ｇ  Ｎａ２ＳＯ４（１２ｇ）の混合物：ＥｔＯＨ（３：１、５０ｍＬ）を１時間還流し、その後６０℃まで冷却し、４Ｎ  ＮａＯＨでｐＨ＝７まで慎重に塩基性化し、冷ましておいた。ろ過により固体を収集し、水で洗浄し、真空化で乾燥し、Ｖを得た。
【０２９６】
５−ブロモ−６，７，８，９−テトラヒドロ−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２，−ｈ］イソキノリン−２，３−ジオン（ＶＩ）
予熱した硫酸（２０ｍＬ、７０℃）に、Ｎ−（５−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−メチルイソキノリン−８−イル−２−（ヒドロキシイミノ）アセトアミド（Ｖ、３．５ｇ）を３０分間にわたり少量ずつ加えた、さらに１時間継続して加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、氷水（１００ｍＬ）に注いで急冷し、その後水性１０Ｎ  ＮａＯＨで中和した。沈殿生成物をろ過し、水で洗浄し、イサチンＶＩを得た。
【０２９７】
５−ブロモ−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２，−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−１（ＶＩＩ）
メタノール（５０ｍｌ）中イサチンＶＩ（３．５ｇ）の溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（２．０ｇ）を加え、混合物を１時間還流した。反応混合物を室温まで冷却し、ろ過により固体を収集し、エタノールおよびエーテルで洗浄し、真空下で乾燥した。
【０２９８】
化合物Ａ
５−ブロモ−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシアミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３、２−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オン（ＶＩＩ、１００ｍｇ）、５−フルオロ−２−メトキシフェニルボロン酸（６０ｍｇ）、リン酸カリウム（７２ｍｇ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（１１ｍｇ）、水（１．５ｍＬ）およびＤＭＦ（３ｍＬ）の混合物がマイクロ波下で放射された（１２０℃、１０分）。溶媒は真空で蒸発し、残渣は、５−（５−フルオロ−２−メトキシフェニル）−６、７、８、９−テトラヒドロ−３−（ヒドロキシイミノ）−８−メチル−１Ｈ−ピロロ［３、２、−ｈ］イソキノリン−２（３Ｈ）−オンを生じるためにシリカゲルでクロマトグラフされた。
【０２９９】
同等物
当業者は、本願に記載の本発明の特定の実施形態に対する多くの同等物を認識するであろうし、または単なる日常的実験を使用して究明することができる。かかる同等物は、以下の特許請求の範囲によって含まれることが意図される。
【０３００】
参照による組み込み
本願に引用されたすべての特許、公開特許出願およびその他の文献の全内容は、参照することによりその全体が本願に明示的に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【０３０１】
【図１】図１Ａ、１Ｂおよび１Ｃは、実施例１に記載のｈＡＳＩＣ１ａの活性への化合物Ｅ、Ｆ、およびＧの阻害作用の用量反応曲線を示す。ＨＥＫ２９３細胞は、ｈＡＳＩＣ１ａでトランスフェクトされ、細胞は、化合物Ｅ、Ｆ、またはＧの上昇濃度の有無での酸性バッファで曝露された。依存性チャネルの活性は、カルシウム選択性蛍光色素を用いて細胞内のカルシウム変動を測定して決定された。化合物Ｅ、Ｆ、Ｇは、用量依存的に酸誘発ｈＡＳＩＣ１ａ活性を阻害する。
【図２】図２Ａおよび２Ｂは、実施例２に記載の通り、ラットＡＳＩＣ１ａまたはラットＡＳＩＣ３でトランスフェクトされたＨＥＫ２９３内に誘発された酸誘発のピーク内向き電流への化合物ＡおよびＨの阻害作用の用量反応曲線を示す。酸誘発内向き電流は、パッチ・クランプ法のホールセル構成（電圧固定法）を用いて、化合物Ａまたは化合物Ｈの有無で記録された。化合物ＡおよびＨは、用量依存的に、酸誘発ｒＡＳＩＣ１ａおよびｒＡＳＩＣ３活性を阻害する。
【図３】ＣＨＯ細胞内に安定してトランスフェクトされたヒトＡＳＩＣ１ａの酸誘発活性への化合物Ａの阻害作用を示す。図３Ａは、ｐＨ誘発反応の規模への化合物Ａおよびベンチマーク化合物アミロリドの用量依存作用を示す。本実施例では、ｐＨ誘発反応の規模は、反応曲線（総電荷移動量）の下の領域を測定することで決定され、制御反応に正常化された。図３Ｂは、化合物Ａの有無（３μＭ）でのｐＨ６．８のバッファー液（ｐＨ７．４から）で誘発されたｈＡＳＩＣ１ａ電流（ホールセル電圧固定、６０ｍＶ）の例を描く。
【図４】図４Ａおよび４Ｂは、実施例２に記載の通り、組み換えホモメリックｈＡＳＩＣ１ａ（図４Ａ）およびヘテロメリックｈＡＳＩＣ１ａ＋３（図４Ｂ）チャネルの酸誘発活性への化合物Ａの阻害作用を示す。ＨＥＫ２９３細胞は、ｈＡＳＩＣ１単独でトランスフェクトされた、またはｈＡＳＩＣ１ａおよびｈＡＳＩＣ３で一緒にトランスフェクトされた。酸誘発内向き電流は、パッチ・クランプ方法のホールセル構造（電圧固定法）を用いて、化合物Ａ（１０μＭ）の有無で記録された。
【図５】図５Ａおよび５Ｂは、実施例３に記載の通り、組み換えホモメリックｈＡＳＩＣ１ａ（図５Ａ）およびヘテロメリックｈＡＳＩＣ１ａ＋３（図５Ｂ）チャネルの酸誘発活性への化合物Ａの阻害作用を示す。酸誘発電流は、化合物Ａ（３０μＭ）の有無での２電極電圧クランプ法を用いてＸｅｎｏｐｕｓ  ｌａｅｖｉｓ卵母細胞から記録された。卵母細胞は、ｃＤＮＡをコード化するｈＡＳＩＣ１ａのみを微量注入、またはｃＤＮＡをコード化するｈＡＳＩＣ１ａおよびｈＡＳＩＣ３で同時注入された。これらのデータは、化合物Ａが、これらの依存性イオンチャネルの活性を効果的に調節することを示す。
【図６】図６Ａおよび６Ｂは、実施例４に記載される通り、初代培養におけるラット後根神経節で記録された自然プロトン依存性電流への化合物Ａ（図６Ａ）およびＨ（図６Ｂ）の阻害作用を示す。これらの内因性プロトン活性内向き電流は、パッチ・クランプ方法のホールセル構造（電圧固定法）を用いて、化合物Ａ（１μＭ）または化合物Ｈ（１μＭ）の有無で記録された。これらのデータは、化合物ＡおよびＨが自然ＡＳＩＣ反応を阻止することが出来ることを示唆する。
【図７】図７Ａおよび７Ｂは、実施例４に記載される通り、初代培養におけるラット後根神経節で記録された酸誘発活動電位発生への化合物Ａ（図７Ａ）およびＨ（図７Ｂ）の阻害作用を示す。酸誘発活動電位は、パッチ・クランプ方法のホールセル構造（電圧固定法）を用いて、化合物Ａ（１μＭ）または化合物Ｈ（１μＭ）の有無で記録された。図７Ａおよび７Ｂは、化合物ＡおよびＨが、それぞれｐＨ６．５および６．８で誘発された活動電位放電率を減少することを示唆する。
【図８】ラットのホルマリン誘発性疼痛への異なる濃度の化合物Ａの作用を示す。図８Ａは、ホルマリンの足底内注射後のある期間に渡る全ての疼痛行動（例えば：尻込む、舐める、噛む）を示し、図８Ｂは、舐める行動および噛む行動の発現数を示す。これらの結果は、化合物Ａが、ラットの疼痛行動の用量依存的抑制をもたらすことを示唆する。
【図９】ホルマリン誘発性疼痛への化合物Ａの用量依存性作用を示す。図９Ａは、ホルマリン試験第ＩＩａフェーズの総疼痛スコア（図８Ａ）への化合物Ａの用量反応関係である。疼痛スコアが半分（ＥＤ５０）まで減らされた有効量は１２ｍｇ／ｋｇである。図９Ｂは、化合物投与後１．５時間の化合物Ａの用量および血漿中濃度の直線関係を示す。
【図１０】図１０Ａおよび１０Ｂは、それぞれ、実施例５に記載の通り、ラットのホルマリン試験における自発性の化学的な誘発疼痛への化合物ＢおよびＨの作用を示す。これらの結果は、、双方の化合物が、尻込んだ行動で評価される疼痛強度の用量依存抑制をもたらすことを示唆する。
【図１１】図１１Ａ、１１Ｂおよび１１Ｃは、実施例６に記載の通り、それぞれ、ラットの炎症性疼痛への化合物Ａ、化合物Ｈおよびモルヒネの作用を示す。炎症は、後足に完全フロインドアジュバント（ＣＦＡ）を注入することで誘発された。これらの結果は、、化合物ＡおよびＨが、インキャパシタンスメーター（後肢体重負荷の差異）で測定される疼痛強度および生体防御行動の用量依存抑制をもたらすことを示唆する。
【図１２】慢性炎症性疼痛のＣＦＡモデルにおける化合物Ａの用量依存性鎮痛作用、すなわち、被験薬投与ラットと比較して化合物ＡによるＣＦＡ誘発温熱性痛覚過敏のＩｎ  ｖｉｖｏ用量依存性抑制を示す。このモデルでは、相対的高用量のベンチマーク化合物のモルヒネ（６ｍｇ／ｋｇ）およびインドメタシン（３０ｍｇ／ｋｇ）は、完全に効果的であった。
【図１３】図１３Ａ、および１３Ｂは、実施例１に記載のとおり、ｈＡＳＩＣ１ａの活性への化合物ＪおよびＫの阻害作用の用量反応曲線を示す。ＨＥＫ２９３細胞は、ｈＡＳＩＣ１ａでトランスフェクトされ、細胞は、濃度が増加する化合物ＪまたはＫの有無での酸性バッファで曝露された。依存性チャネルの活性は、カルシウム選択性蛍光色素を用いて細胞内のカルシウム変動を測定して決定された。化合物Ｅ、Ｆ、Ｇは、用量依存的に酸誘発ｈＡＳＩＣ１Ａ活性を阻害する。
【図１４】図１４Ａおよび１４Ｂは、実施例２に記載される通り、ｈＡＳＩＣ１ａを発現するＣＨＯ細胞から記録されたプロトン依存性電流への化合物Ｊ（図１４Ａ）およびＫ（図１４Ｂ）の阻害作用を示す。これらの内因性プロトン活性内向き電流は、パッチ・クランプ方法のホールセル構造（電圧固定法）を用いて、化合物Ｊ（１μＭ）または化合物Ｋ（１μＭ）の有無で記録された。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【国際調査報告】
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