(57)【要約】  新規な１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル化合物、かかる化合物のプロテインキナーゼＢ活性の阻害剤としての使用、および癌および関節炎の治療における使用が見出された。【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（３Ｓ）−３−ピペリジニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−チオモルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−モルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；および
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（２Ｒ）−６−メチル−２−モルホリニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグから選択される化合物。
【請求項２】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（３Ｓ）−３−ピペリジニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグである請求項１記載の化合物。
【請求項３】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−チオモルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグである請求項１記載の化合物。
【請求項４】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−モルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグである請求項１記載の化合物。
【請求項５】
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（２Ｒ）−６−メチル−２−モルホリニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグである請求項１記載の化合物。
【請求項６】
請求項１記載の化合物、および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグおよび医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項７】
請求項２記載の化合物、および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグおよび医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項８】
医薬上許容される担体および有効量の請求項１記載の化合物、および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを含有する医薬組成物の製法であって、請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを医薬上許容される担体中と結合させることを特徴とする方法。
【請求項９】
治療の必要のある哺乳動物に治療上有効量の請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを特徴とする、該哺乳動物において癌および関節炎から選択される疾患または病態を治療あるいは該疾患または病態の重篤度を軽減する方法。
【請求項１０】
哺乳動物がヒトである請求項９記載の方法。
【請求項１１】
治療の必要のある哺乳動物に治療上有効量の請求項２記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを特徴とする、該哺乳動物において癌および関節炎から選択される疾患または病態を治療あるいは該疾患または病態の重篤度を軽減する方法。
【請求項１２】
哺乳動物がヒトである請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
癌が脳腫瘍（神経膠腫）、神経膠芽腫、Ｂａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ症候群、コーデン病、Ｌｈｅｒｍｉｔｔｅ−Ｄｕｃｌｏｓ病、乳癌、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫および甲状腺癌から選択される請求項９記載の方法。
【請求項１４】
癌が脳腫瘍（神経膠腫）、神経膠芽腫、Ｂａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ症候群、コーデン病、Ｌｈｅｒｍｉｔｔｅ−Ｄｕｃｌｏｓ病、乳癌、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫および甲状腺癌から選択される請求項１１記載の方法。
【請求項１５】
癌および関節炎から選択される疾患または病態の治療あるいは該疾患または病態の重篤度の軽減において有用な医薬の製造における請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグの使用。
【請求項１６】
治療の必要な哺乳動物に治療上有効量の請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを特徴とする、該哺乳動物においてＡｋｔ活性を阻害する方法。
【請求項１７】
哺乳動物がヒトである請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
治療の必要な哺乳動物に治療上有効量の
ａ）請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグ、および
ｂ）少なくとも１つの抗新生物剤
を同時投与することを特徴とする、該哺乳動物において癌を治療する方法。
【請求項１９】
少なくとも１つの抗新生物剤が、本質的に、抗微小管剤、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似物、シグナル変換経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ脈管形成阻害剤、免疫治療剤、プロアポトーシス剤、および細胞周期シグナル伝達阻害剤からなる群から選択される請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
少なくとも１つの抗新生物剤がジテルペノイドおよびビンカアルカロイドから選択される抗微小管剤である請求項１８記載の方法。
【請求項２１】
少なくとも１つの抗新生物剤がジテルペノイドである請求項１８記載の方法。
【請求項２２】
少なくとも１つの抗新生物剤がビンカアルカロイドである請求項１８記載の方法。
【請求項２３】
少なくとも１つの抗新生物剤が白金配位錯体である請求項１８記載の方法。
【請求項２４】
少なくとも１つの抗新生物剤がパクリタキセル、カルボプラチンまたはビノレルビンである請求項１８記載の方法。
【請求項２５】
少なくとも１つの抗新生物剤がパクリタキセルである請求項１８記載の方法。
【請求項２６】
少なくとも１つの抗新生物剤がカルボプラチンである請求項１８記載の方法。
【請求項２７】
少なくとも１つの抗新生物剤がビノレルビンである請求項１８記載の方法。
【請求項２８】
少なくとも１つの抗新生物剤がシグナル変換経路阻害剤である請求項１８記載の方法。
【請求項２９】
シグナル変換経路阻害剤がＶＥＧＦＲ２、ＴＩＥ２、ＰＤＧＦＲ、ＢＴＫ、ＩＧＦＲ−１、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣおよびｃ−ｆｍｓからなる群から選択される成長因子受容体キナーゼの阻害剤である請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
シグナル変換経路阻害剤がｒａｆｋ、ａｋｔおよびＰＫＣ−ｚｅｔａからなる群から選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤である請求項２８記載の方法。
【請求項３１】
シグナル変換経路阻害剤がキナーゼのｓｒｃファミリーから選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤である請求項２８記載の方法。
【請求項３２】
シグナル変換経路阻害剤がｃ−ｓｒｃの阻害剤である請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
シグナル変換経路阻害剤がファルネシルトランスフェラーゼおよびゲラニルゲラニルトランスフェラーゼの阻害剤から選択されるＲａｓオンコジーンの阻害剤である請求項２８記載の方法。
【請求項３４】
シグナル変換経路阻害剤がＰＩ３Ｋからなる群から選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤である請求項２８記載の方法。
【請求項３５】
少なくとも１つの抗新生物剤が細胞周期シグナル伝達阻害剤である請求項１８記載の方法。
【請求項３６】
細胞周期シグナル伝達阻害剤がＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６群の阻害剤から選択される請求項３５記載の方法。
【請求項３７】
治療において有用な請求項１８記載の医薬の組み合わせ。
【請求項３８】
癌の治療において有用な医薬の製造のための請求項１８記載の医薬の組み合わせの使用。
【請求項３９】
治療の必要のある哺乳動物に治療上有効量の４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（３Ｓ）−３−ピペリジニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オールおよび／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを特徴とする、該哺乳動物において癌および関節炎から選択される疾患または病態を治療あるいは該疾患または病態の重篤度を軽減する方法。
【請求項４０】
治療の必要のある哺乳動物に治療上有効量の４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−チオモルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オールおよび／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを特徴とする、該哺乳動物において癌および関節炎から選択される疾患または病態を治療あるいは該疾患または病態の重篤度を軽減する方法。
【請求項４１】
治療の必要のある哺乳動物に治療上有効量の４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−モルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オールおよび／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを特徴とする、該哺乳動物において癌および関節炎から選択される疾患または病態を治療あるいは該疾患または病態の重篤度を軽減する方法。
【請求項４２】
治療の必要のある哺乳動物に治療上有効量の４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（２Ｒ）−６−メチル−２−モルホリニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールおよび／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを特徴とする、該哺乳動物において癌および関節炎から選択される疾患または病態を治療あるいは該疾患または病態の重篤度を軽減する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、新規な１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル化合物、係る化合物のプロテインキナーゼＢ（以下、ＰＫＢ／Ａｋｔ、ＰＫＢまたはＡｋｔという）活性の阻害剤として、ならびに癌および関節炎の治療における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
本発明は、１以上のセリン／スレオニンキナーゼ、Ａｋｔ（プロテインキナーゼＢとしても知られる）の１以上のイソ型の活性の阻害剤である１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル含有化合物に関する。本発明は、また、かかる化合物を含む医薬組成物、および癌および関節炎の治療において本化合物を用いる方法に関する（Ｌｉｕら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ３：３１７−２２（２００３））。
アポトーシス（プログラムされた細胞死）は、胚発生および変性ニューロン疾患、心血管疾患および癌などの種々の疾患の病因において重要な役割を果たす。近年の研究は、プログラムされた細胞死の調節または実行に関与する種々のプロ−および抗−アポトーシス遺伝子産物の同定に至った。抗−アポトーシス遺伝子、例えば、Ｂｃｌ２またはＢｃｌ−ｘＬの発現は、種々の刺激によって誘導されるアポトーシス細胞死を阻害する。一方、プロ−アポトーシス遺伝子、例えば、ＢａｘまたはＢａｄの発現は、プログラムされた細胞死をもたらす（Ａｄａｍｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１：１３２２−１３２６（１９９８））。プログラムされた細胞死の実行は、カスパーゼ−３、カスパーゼ−７、カスパーゼ−８およびカスパーゼ−９等を包含するカスパーゼ−１関連プロテイナーゼによって媒介される（Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１：１３１２−１３１６（１９９８））。
【０００３】
ホスファチジルイノシトール３’−ＯＨキナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／Ａｋｔ／ＰＫＢ経路は、細胞生存／細胞死の調節に重要なようである（Ｋｕｌｉｋら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１７：１５９５−１６０６（１９９７）；Ｆｒａｎｋｅら、Ｃｅｌｌ，８８：４３５−４３７（１９９７）；Ｋａｕｆｆｍａｎｎ−Ｚｅｈら、Ｎａｔｕｒｅ  ３８５：５４４−５４８（１９９７）Ｈｅｍｍｉｎｇｓ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７５：６２８−６３０（１９９７）；Ｄｕｄｅｋら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７５：６６１−６６５（１９９７））。血小板由来の成長因子（ＰＤＧＦ）、神経生長因子（ＮＧＦ）およびインスリン様生長因子−１（ＩＧＦ−ｌ）などの生存因子は、ＰＩ３Ｋの活性を誘導することによる種々の条件下での細胞生存を促進する（Ｋｕｌｉｋら、１９９７，Ｈｅｍｍｉｎｇｓ  １９９７）。活性化されたＰＩ３Ｋは、ホスファチジルイノシトール（３，４，５）−トリホスフェート（ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）−Ｐ３）の産生を誘導し、次いで、それは、プレクストリン相同（ＰＨ）−ドメインを含有するセリン／スレオニンキナーゼＡｋｔに結合し、その活性化を促進する（Ｆｒａｎｋｅら、Ｃｅｌｌ，８１：７２７−７３６（１９９５）；Ｈｅｍｍｉｎｇｓ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７７：５３４（１９９７）；Ｄｏｗｎｗａｒｄ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１０：２６２−２６７（１９９８），Ａｌｅｓｓｉら、ＥＭＢＯ  Ｊ．１５：６５４１−６５５１（１９９６））。ＰＩ３Ｋの特異的阻害剤またはドミナント・ネガティブＡｋｔ／ＰＫＢ変異体は、これらの成長因子またはサイトカインの生存促進活性を破壊する。ＰＩ３Ｋの阻害剤（ＬＹ２９４００２またはウォートマニン（ｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ））は、上流のキナーゼによるＡｋｔ／ＰＫＢの活性化を阻害した。さらに、構成的に活性なＰＩ３ＫまたはＡｋｔ／ＰＫＢ変異体の導入は、細胞が通常はアポトーシス細胞死を受ける条件下で細胞生存を促進する（Ｋｕｌｉｋら、１９９７，Ｄｕｄｅｋら、１９９７）。
【０００４】
ヒト腫瘍におけるＡｋｔレベルの分析は、Ａｋｔ２が有意数の卵巣癌（Ｊ．Ｑ．Ｃｈｅｕｎｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８９：９２６７−９２７１（１９９２））および膵臓癌（Ｊ．Ｑ．Ｃｈｅｕｎｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９３：３６３６−３６４１（１９９６））において過剰発現することを示した。同様に、Ａｋｔ３は、乳癌および前立腺癌細胞系統において過剰発現することが見出された（Ｎａｋａｔａｎｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：２１５２８−２１５３２（１９９９））。Ａｋｔ−２が卵巣癌腫の１２％で過剰発現すること、およびＡｋｔの増幅が未分化腫瘍の５０％において特に頻繁であることが明らかにされ、また、Ａｋｔが腫瘍攻撃に関連しうることが示唆された（Ｂｅｌｌａｃｏｓａら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６４，ｐｐ．２８０−２８５，１９９５）。Ａｋｔ１キナーゼ活性の増加は、乳癌、卵巣癌および前立腺癌において報告された（Ｓｕｎら、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５９：４３１−７（２００１））。
【０００５】
腫瘍抑制因子ＰＴＥＮ（ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）−Ｐ３の３’ホスフェートを特異的に除去するタンパク質および脂質ホスファターゼ）は、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路の負のレギュレーターである（Ｌｉら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７５：１９４３−１９４７（１９９７），Ｓｔａｍｂｏｌｉｃら、Ｃｅｌｌ  ９５：２９−３９（１９９８），Ｓｕｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｉ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．  Ｕ．Ｓ．Ａ．  ９６：６１９９−６２０４（１９９９））。ＰＴＥＮの生殖細胞系統変異は、コーデン（Ｃｏｗｄｅｎ）病などのヒトの癌症候群の原因となる（Ｌｉａｗら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  １６：６４−６７（１９９７））。ＰＴＥＮは、ヒトの腫瘍の大きな割合において欠失しており、機能的ＰＴＥＮを持たない腫瘍細胞系統は、高レベルの活性化Ａｋｔを示す（Ｌｉら、上掲、Ｇｕｌｄｂｅｒｇら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５７：３６６０−３６６３（１９９７）、Ｒｉｓｉｎｇｅｒら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５７：４７３６−４７３８（１９９７））。
【０００６】
これらの観察は、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路が腫瘍形成における細胞生存またはアポトーシスの調節に重要な役割を果たすことを明らかにする。
セカンドメッセンジャーによって調節されるセリン／スレオニンプロテインキナーゼのＡｋｔ／ＰＫＢサブファミリーの３つのメンバーが同定され、各々、Ａｋｔ１／ＰＫＢα、Ａｋｔ２／ＰＫＢβおよびＡｋｔ３／ＰＫＢγと称された。該イソ型は、特に、触媒ドメインをコードしている領域において相同である。Ａｋｔ／ＰＫＢは、ＰＩ３Ｋシグナル伝達に対する応答において起こるリン酸化事象によって活性化される。ＰＩ３Ｋは、膜イノシトールリン脂質をリン酸化し、それにより、セカンドメッセンジャーホスファチジル−イノシトール３，４，５−トリホスフェートおよびホスファチジルイノシトール３，４−ビスホスフェートを生じ、それらは、Ａｋｔ／ＰＫＢのＰＨドメインに結合することが分かった。Ａｋｔ／ＰＫＢ活性化の現在のモデルは、３’−リン酸化ホスホイノシチドによって膜に対して該酵素が補充され、ここで、上流キナーゼによるＡｋｔ／ＰＫＢの調節部位のリン酸化が起こることを提唱する（Ｂ．Ａ．Ｈｅｍｍｉｎｇｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７５：６２８−６３０（１９９７）；Ｂ．Ａ．Ｈｅｍｍｉｎｇｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７６：５３４（１９９７）；Ｊ．Ｄｏｗｎｗａｒｄ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７９：６７３−６７４（１９９８））。
【０００７】
Ａｋｔ１／ＰＫＢαのリン酸化は、２つの調節部位、触媒ドメイン活性化ループにおけるＴｈｒ３Ｏ８およびカルボキシ末端付近のＳｅｒ４７３において起こる（Ｄ．Ｒ．Ａｌｅｓｓｉら、ＥＭＢＯ  Ｊ．１５：６５４１−６５５１（１９９６）およびＲ．Ｍｅｉｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：３０４９１−３０４９７（１９９７））。同等の調節リン酸化部位は、Ａｋｔ２／ＰＫＢβおよびＡｋｔ３／ＰＫＢγにおいて起こる。Ａｋｔ／ＰＫＢを活性化ループ部位でリン酸化する上流キナーゼがクローン化され、３’―ホスホイノシチド依存性プロテインキナーゼ１（ＰＤＫ１）と命名された。ＰＤＫ１は、Ａｋｔ／ＰＫＢだけでなく、ｐ７０リボソームＳ６キナーゼ、ｐ９０ＲＳＫ、血清およびグルココルチコイド−調節性キナーゼ（ＳＧＫ）、およびプロテインキナーゼＣもリン酸化する。カルボキシ末端付近のＡｋｔ／ＰＫＢの調節部位をリン酸化している上流キナーゼはまだ同定されていないが、近年の報告では、インテグリン−結合型キナーゼ（ＩＬＫ−１）、セリン／スレオニンプロテインキナーゼ、または自己リン酸化のための役割が示唆される。
【０００８】
Ａｋｔ活性化および活性の阻害は、ＰＩ３ＫをＬＹ２９４００２およびウォートマニン等の阻害剤で阻害することによって達成することができる。しかしながら、ＰＩ３Ｋ阻害は、３つのＡｋｔイソ酵素の全てだけでなく、ＰｄｔＩｎｓ（３，４，５）−Ｐ３に依存する他のＰＨドメイン含有シグナル伝達分子、例えば、チロシンキナーゼのＴｅｃファミリーにも無差別に影響を及ぼす可能性がある。さらに、ＡｋｔがＰＩ３Ｋに無関係の成長シグナルによって活性化できることが開示された。
【０００９】
別法では、Ａｋｔ活性は、上流キナーゼＰＤＫ１の活性を遮断することによって阻害することができる。化合物ＵＣＮ−０１は、報告されたＰＤＫ１の阻害剤である（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３７５（２）：２５５（２００３））。また、ＰＤＫ１の阻害は、その活性がＰＤＫ１に依存する複数のプロテインキナーゼ、例えば、不定型ＰＫＣイソ形、ＳＧＫおよびＳ６キナーゼの阻害をもたらすであろう（Ｗｉｌｌｉａｍｓら、Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．１０：４３９−４４８（２０００））。
【００１０】
Ａｋｔの小型分子阻害剤は、腫瘍の治療、特に、活性化されたＡｋｔを伴う腫瘍（例えば、ＰＴＥＮ  ｎｕｌｌ腫瘍およびｒａｓ変異を有する腫瘍）の治療において有用である。ＰＴＥＮは、Ａｋｔの重要な負のレギュレーターであり、その機能は、乳癌および前立腺癌腫、神経膠芽腫、ならびにＢａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ症候群（Ｍａｅｈａｍａ，Ｔ．ら、Ａｎｎｕａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７０：２４７（２００１））、コーデン病（Ｐａｒｓｏｎｓ，Ｒ．；Ｓｉｍｐｓｏｎ，Ｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ）、２２２（Ｔｕｍｏｒ  Ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ  Ｇｅｎｅｓ，Ｖｏｌｕｍｅ  １）：１４７（２００３））およびＬｈｅｒｍｉｔｔｅ−Ｄｕｃｌｏｓ病（Ｂａｃｋｍａｎ，Ｓ．ら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１２（５）：５１６（２００２））を包含するいくつかの癌症候群を包含する多くの癌において喪失している。Ａｋｔの阻害は、また、白血病の治療に関係している（Ｊ．Ｃ．Ｂｙｒｄ，Ｓ．Ｓｔｉｌｇｅｎｂａｕｅｒ  ａｎｄ  Ｉ．Ｗ．Ｆｌｉｎｎ”Ｃｈｒｏｎｉｃ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ”  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ／ｔｈｅ  Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ（２００４），１６３−８３）。Ａｋｔ３は、エストロゲン受容体欠失乳癌およびアンドロゲン独立性前立腺癌系統においてアップレギュレートされ、Ａｋｔ２は、膵臓および卵巣癌腫において過剰発現している。Ａｋｔ１は、胃癌において増幅し（Ｓｔａａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８４：５０３４−７（１９８７））、乳癌においてアップレギュレートされる（Ｓｔａｌら、Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５：Ｒ３７−Ｒ４４（２００３））。したがって、小型分子Ａｋｔ阻害剤は、これらの型の癌ならびに他の型の癌の治療に有用であることが予想される。Ａｋｔ阻害剤は、また、さらなる化学療法剤と組み合わせて有用である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、Ａｋｔ／ＰＫＢの阻害剤である新規な化合物を提供することである。
また、本発明の目的は、医薬担体および本発明の方法において有用な化合物を含む医薬組成物を提供することである。
また、本発明の目的は、かかるＡｋｔ／ＰＫＢ活性の阻害剤を投与することを特徴とする癌の治療のための方法を提供することにある。
また、本発明の目的は、かかるＡｋｔ／ＰＫＢ活性の阻害剤を投与することを特徴とする関節炎を治療するための方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
発明の概要
本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
2009516653.tif 000002
（Ｉ）
【００１３】
［式中、
Ｘは、存在しないか、またはＯ、ＳおよびＣＲ２０Ｒ２１からなる群から選択され、
ここに、Ｒ２０Ｒ２１は独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択されるか、または
Ｒ２０Ｒ２１は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチルまたは置換されたシクロペンチルを形成し、
Ｒ２Ｒ２’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または
Ｒ２Ｒ２’は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチルまたは置換されたシクロペンチルを形成し、
Ｒ３は、水素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、シクロプロピルメチル、置換されたシクロプロピルメチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ４Ｒ４’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または
Ｒ４Ｒ４’は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチルまたは置換されたシクロペンチルを形成し、
Ｒ５Ｒ５’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または
Ｒ５Ｒ５’は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチルまたは置換されたシクロペンチルを形成し、
Ｒ１は、水素、−Ｃ１−Ｃ４アルキルおよび置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｘが存在しないか、またはＣＲ２０Ｒ２１のとき、Ｒ１は、さらにフッ素であることができる］
で示される化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグに関する。
【００１４】
本発明は、式（Ｉ）のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の有効量を必要とする対象に投与することを特徴とする、癌の治療方法に関する。
本発明は、式（Ｉ）のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の有効量を必要とする対象に投与することを特徴とする、関節炎の治療方法に関する。
【００１５】
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物がＡｋｔ／ＰＫＢの阻害剤として活性であるという知見に関する。
本発明のさらなる態様において、本発明のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の調製において有用な新規な製法が提供される。
【００１６】
本発明には、医薬担体および本発明の方法において有用な化合物を含む医薬組成物が包含される。
また、本発明には、本発明のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物とさらなる活性成分を同時投与する方法も包含される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
発明の詳細な説明
出願日２００４年７月２８日、国際公開第ＷＯ２００５／０１１７００号および国際公開日２００５年２月１０日であり、そのスキーム、方法およびアッセイが出典明示により、本明細書の一部とされる国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号は、１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル含有化合物、ならびにその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグを、特に癌および関節炎の治療において、セリン／スレオニンキナーゼ、Ａｋｔ（プロテインキナーゼＢともいう）の阻害剤として有用であるとして開示し、請求する。国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号は、特に、本発明の範囲内の化合物のいずれも開示しない。
【００１８】
今回、式（Ｉ）の化合物が、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において開示された最も構造的に関連のある化合物であると考えられるものを越える利益を示すことを見出した。
【００１９】
例えば、本発明の実施例１、３、４および９の化合物は、一般に、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において開示された最も構造的に関連のある化合物と考えられるものと比較した場合、正常細胞成長の阻害を越える腫瘍細胞成長の阻害に対する活性増加および選択性増加を示す。該活性増加および選択性増加は、より幅広い治療領域をもたらすことが予想される。さらに、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において開示される化合物は、一般に、貧水溶性を示す。該貧溶性の一態様は、これらの化合物が静脈内（以下、ＩＶという）投与に適した医薬投与形態に処方される能力に悪影響を及ぼすことである。一般に、正常細胞成長の阻害を越える腫瘍細胞成長の阻害に対する増加した活性および増加した選択性を有することに加え、本発明の実施例１、３、４および９の化合物は、ＩＶ投与用投与形態に処方するのに適当であると考えられる溶解性を示す。静脈内投与は、本発明の化合物を投与するための有益な方法である。
【００２０】
国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の化合物は、セリン／スレオニンキナーゼ、ＡＫＴ（プロテインキナーゼＢともいう）の阻害剤として有用であるが、式（Ｉ）の化合物、特に、実施例１、３、４および９の化合物は、有益な特性、例えば、適当な溶解性、活性、選択性、クリアランスおよび曝露を示し、それらは全て該化合物を、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号に開示される最も構造的に関連した化合物であると考えられるものを越えて有益にする。
【００２１】
本発明は、上記の式（Ｉ）の化合物に関する。
式（Ｉ）の本発明の化合物は、Ａｋｔ／ＰＫＢ活性を阻害する。特に、本明細書中に開示される化合物は、３つのＡｋｔ／ＰＫＢイソ型の各々を阻害する。
【００２２】
本発明の式（Ｉ）の化合物のなかには、式中、
Ｘは、存在しないか、またはＯ、ＳおよびＣＲ２０Ｒ２１からなる群から選択され、
ここに、Ｒ２０Ｒ２１は独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよび−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または
Ｒ２０Ｒ２１は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチルまたはシクロペンチルを形成し、
Ｒ２Ｒ２’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または
Ｒ２Ｒ２’は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルを形成し、
Ｒ３は、水素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ４Ｒ４’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または
Ｒ４Ｒ４’は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルを形成し、
Ｒ５Ｒ５’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または
Ｒ５Ｒ５’は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルを形成し、
Ｒ１は、水素および−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｘが存在しないか、またはＣＲ２０Ｒ２１である場合、Ｒ１はさらにフッ素であることができる
化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグが包含される。
【００２３】
本発明の式（Ｉ）の化合物のなかには、式中、
Ｘは、存在しないか、またはＯ、ＳおよびＣＲ２０Ｒ２１からなる群から選択され、
ここに、Ｒ２０Ｒ２１は独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択されるか、または
Ｒ２０Ｒ２１は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチルまたは置換されたシクロペンチルを形成し、
Ｒ２Ｒ２’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または
Ｒ２Ｒ２’は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチルまたは置換されたシクロペンチルを形成し、
Ｒ３は、水素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ４Ｒ４’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または
Ｒ４Ｒ４’は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチルまたは置換されたシクロペンチルを形成し、
Ｒ５Ｒ５’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または
Ｒ５Ｒ５’は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチルまたは置換されたシクロペンチルを形成し、
Ｒ１は、水素、−Ｃ１−Ｃ４アルキルおよび置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｘが存在しないか、またはＣＲ２０Ｒ２１である場合、Ｒ１はさらにフッ素であることができる
化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグが包含される。
【００２４】
本発明の式（Ｉ）の化合物のなかには、式中、
Ｘは、存在しないか、またはＯ、ＳおよびＣＲ２０Ｒ２１からなる群から選択され、
ここに、Ｒ２０Ｒ２１は独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ２Ｒ２’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択され、
Ｒ３は、水素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ４Ｒ４’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択され、
Ｒ５Ｒ５’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択され、
Ｒ１は、水素および−Ｃ１−Ｃ４アルキルルからなる群から選択され、
Ｘが存在しないか、またはＣＲ２０Ｒ２１である場合、Ｒ１はさらにフッ素であることができる
化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグが包含される。
【００２５】
本発明の式（Ｉ）の化合物のなかには、式中、
Ｘは、存在しないか、またはＯ、ＳおよびＣＲ２０Ｒ２１からなる群から選択され、
ここに、Ｒ２０Ｒ２１は独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ２Ｒ２’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択され、
Ｒ３は、水素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ４Ｒ４’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択され、
Ｒ５Ｒ５’は、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、置換されたシクロプロピル、シクロブチル、置換されたシクロブチル、シクロペンチル、置換されたシクロペンチル、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、および置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択され、
Ｒ１は、水素、−Ｃ１−Ｃ４アルキルおよび置換された−Ｃ１−Ｃ４アルキルからなる群から選択され、
Ｘが存在しないか、またはＣＲ２０Ｒ２１である場合、Ｒ１はさらにフッ素であることができる
化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグが包含される。
【００２６】
本発明の式（Ｉ）の化合物のなかには、
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（３Ｓ）−３−ピペリジニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（２−モルホリニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−チオモルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−モルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（３−ピロリジニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（３Ｓ）−１−メチル−３−ピペリジニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（２Ｓ）−４−メチル−２−チオモルホリニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（２Ｓ）−４−メチル−２−モルホリニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（２Ｒ）−６−メチル−２−モルホリニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；および
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（２Ｓ）−４−エチル−２−モルホリニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグが包含される。
【００２７】
式（Ｉ）の化合物は、本発明の医薬組成物中に含まれ、本発明の方法において使用される。
【００２８】
本明細書中で使用される場合、置換基シクロプロピル、シクロプロピルメチル、シクロブチル、シクロペンチルおよび−Ｃ１−Ｃ４アルキルは、１個のフッ素原子から、該置換基が過フッ素化される数までのフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該置換基は、１〜８個のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該置換基は、１〜５個のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該置換基は、１〜３個のフッ素原子で置換されていてもよい。
【００２９】
本明細書中で使用される場合、「過フッ素化された」なる語は、全ての水素原子がフッ素原子で置き換わった置換基を意味する。
【００３０】
本明細書中で使用される場合、「置換された」なる語は、別記しない限り、目的の化学基が１個のフッ素原子から、該化学基が過フッ素化される数までのフッ素原子で置換されていることを意味する。適当には、該化学基は、１〜８個のフッ素原子で置換されている。適当には、該化学基は、１〜５個のフッ素原子で置換されていている。適当には、該化学基は、１〜３個のフッ素原子で置換されている。
【００３１】
本明細書中で使用される場合、「−Ｃ１−Ｃ４アルキル」なる語は、１〜４個の炭素原子を含有している直鎖または分枝鎖の飽和または不飽和炭化水素鎖を意味する。本明細書中で使用される場合、−Ｃ１−Ｃ４アルキルの例は、−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２−ＣＦ３、−Ｃ（ＣＨ３）３、−（ＣＨ２）３−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ２、および−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ３を包含する。
【００３２】
別記しない限り、本明細書中に開示される化合物は、また、該構造の立体化学的形態、すなわち、各不斉中心についてＲおよびＳ配置の全てを包含する。したがって、本発明の化合物の単一の立体化学異性体ならびにエナンチオマーおよびジアステレオマー混合物は、本発明の範囲内である。
【００３３】
本明細書中で使用される場合、「治療」なる語およびその派生語は、予防的および治療的療法を意味する。
【００３４】
本明細書中で使用される場合、「有効量」なる語およびその派生語は、例えば、研究者または臨床医によって、探求されている組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を顕在化するであろう薬物または医薬の量を意味する。さらに、「治療上有効量」なる語およびその派生語は、かかる量を服用していない対応する対象と比べて、疾患、障害または副作用の改善された治療、治癒、予防または緩和、あるいは疾患または障害の進行速度の減少をもたらすいずれかの量を意味する。該用語は、また、正常な生理学的機能を増加するのに有効な量をその範囲に包含する。
【００３５】
式Ｉの新規化合物は、下記スキーム１において示されるように、または類似の方法によって調製される。出発材料は全て、市販品であるか、または当業者によって市販の出発材料から容易に調製される。
【００３６】
スキーム１
【化２】
2009516653.tif 000003
（ａ）Ｂｒ２，ＮａＯＡｃ；（ｂ）ＥｔＮＨ２；（ｃ）ＳｎＣｌ２，ＨＣｌ；（ｄ）シアノ酢酸エチル，１９０℃；（ｅ）ＮａＮＯ２，ＨＣｌ；（ｆ）ＮＨ２ＯＨ；（ｇ）Ｅｔ３Ｎ，ジオキサン；（ｈ）ｎ−ＢｕＬｉ，ＴＨＦ；（ｉ）Ｂ（ＯＭｅ）３；（ｊ）Ｈ２Ｏ２，ＮａＯＨ；（ｋ）３−（ヒドロキシメチル）−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル，ＤＥＡＤ，ポリマー結合型ＰＰｈ３，ＣＨ２Ｃｌ２；（ｌ）Ｐｄ（ＰＰｈ３）４，ｉＰｒ２ＮＨ，ジオキサン，１００℃；（ｍ）ＴＦＡ，ＣＨ２Ｃｌ２
【００３７】
式（Ｉ）の化合物は、スキーム１に示される方法と類似の方法において調製することができる。酢酸ナトリウム中において緩衝化された臭素を用いる３−ニトロ−４−エトキシピリジン（１−スキーム  １）の臭素化により、３−ブロモ−４−（エチルオキシ）−５−ニトロピリジンを得る（２−スキーム  １）。該変換を実施するための別法が存在し、当業者に既知である。これらの方法は、標準的な有機合成テキスト、例えば、Ｌａｒｏｃｋ，”Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ”，ＶＣＨ，Ｎ．Ｙ．（１９８９）において編集されている。次いで、エトキシ基をエタノールなどの極性溶媒中、第１アミン、例えば、エチルアミンで置き換えて、３−スキーム１のような化合物を得る。液状アミンを用いる場合、該反応は、溶媒の不在下で実施することができる。ニトロ基の還元および付随するクロロ基の導入は、塩化スズ（ＩＩ）を用いて、Ｋｅｌｌｅｙら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９５，３８（２０），４１３１−３４によって記載された方法にしたがって達成される。対応する５−ブロモ−２−クロロジアミノピリジンは、適当な酸またはエステル、例えば、シアノ酢酸エチルと共に濃縮する。加熱を継続して脱水環化反応に影響を及ぼして、４−スキーム１のようなイミダゾピリジンを得る。濃ＨＣｌ中におけるＮａＮＯ２との反応、続く、ヒドロキシルアミンとの反応によりビス−オキシムを得、それがトリエチルアミンなどの適当な塩基の存在下で脱水環化して５−スキーム１のようなアミノフラザンを得る。該ヒドロキシル基は、ｎ−ブチルリチウムなどの適当な塩基を用いるハロゲン−金属交換によってアリールアニオンを生じ、該アニオンをホウ酸トリメチルなどの適当なホウ素親電子物質と反応させ、得られたアリールボロネートを水性塩基中、過酸化水素などの適当な酸化剤で酸化することによって導入されて、６−スキーム１のようなイミダゾピリジノールを得る。グリニャール試薬などの他の塩基もまた、ハロゲン金属交換に影響を及ぼすために使用できる。該イミダゾピリジノールのエーテル化を、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９８１，１）によって記載された方法を用い、３−（ヒドロキシメチル）−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチルなどの適当なアルコールを用いて行って、７−スキーム１のようなエーテルを得る。別法では、該エーテル化は、炭酸カリウムなどの適当な塩基の存在下、３−（クロロメチル）−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチルなどの適当なハロゲン化物を６−スキーム１などの適当なアルコールと反応させることによって行うことができる。７−スキーム１のような適当なハロゲン化アリールをジオキサン等の適当な溶媒中、ジ−イソプロピルアミンなどの適当な塩基の存在下、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウムなどの適当な触媒および末端アルキンで処理して、８−スキーム１のような対応するアリールアルキンを得る。保護基の除去は、塩化メチレンなどの極性溶媒中、プロトン酸またはルイス酸、例えば、トリフルオロ酢酸を用いて達成され、それにより、９−スキーム１のような式（Ｉ）の化合物を得る。
【００３８】
本明細書中で使用される場合、「同時投与」なる語およびその派生語は、本明細書中に記載されるＡＫＴ阻害化合物と、化学療法および放射線治療を包含する癌の治療に有用であることが知られている、または関節炎の治療に有用であることが知られているさらなる活性成分とを同時に投与すること、またはいずれかの方法で別々に連続的に投与することを意味する。本明細書中で使用される場合、「さらなる活性成分」なる語は、癌または関節炎の治療が必要な患者に投与した場合に有益な特性を示すことが知られている、または有益な特性を示すことが立証されたいずれかの化合物または治療剤を包含する。好ましくは、同時に投与しない場合、該化合物は互いに密接した時間間隔で投与される。さらに、該化合物が同じ投与形態で投与されるかどうかは問題ではなく、例えば、１の化合物を局所投与し、他方の化合物を経口投与してもよい。
【００３９】
典型的には、治療されている感受性腫瘍に対する活性を有するいずれかの抗新生物剤を本発明における癌の治療において同時投与してもよい。かかる薬剤の例は、Ｖ．Ｔ．ＤｅｖｉｔａおよびＳ．Ｈｅｌｌｍａｎ（編集者）によるＣａｎｃｅｒ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，第６版（２００１年２月１５日），Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓにおいて見出すことができる。当業者は、関与する薬物および癌の特徴に基づき、どの薬剤の組み合わせが有用であるかを認識することができるであろう。本発明において有用な典型的な抗新生物剤は、限定するものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドなどの抗微小管剤、白金配位錯体、ナイトロジェンマスタード、オキサザホスホリン、アルキルスルホネート、ニトロソウレアおよびトリアゼンなどのアルキル化剤、アントラサイクリン、アクチノマイシンおよびブレオマイシンなどの抗生物質、エピポドフィロトキシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤、プリンおよびピリミジン類似体および抗葉酸化合物などの代謝拮抗物質、カムプトテシンなどのトポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似物、シグナル変換経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ脈管形成阻害剤、免疫治療剤、プロアポトーシス剤、および細胞周期シグナル伝達阻害剤を包含する。
【００４０】
本発明のＡＫＴ阻害化合物と組み合わせて使用される、または同時に投与されるさらなる活性成分（抗新生物剤）の例は、化学療法剤である。
抗微小管または抗有糸分裂剤は、細胞周期のＭ期または有糸分裂期の間の腫瘍細胞の微小管に対して活性な周期特異性薬剤である。抗微小管剤の例は、限定するものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドを包含する。
天然資源に由来するジテルペノイドは、細胞周期のＧ２／Ｍ期で作動する周期特異性抗癌剤である。ジテルペノイドは、微小管のβ−チュービュリンサブユニットと結合することによって、該タンパク質を安定化すると考えられる。次いで、該タンパク質の分解は、有糸分裂が阻止されること、および続く細胞死によって阻害されるようである。ジテルペノイドの例は、限定するものではないが、パクリタキセルおよびその類似物ドセタキセルを包含する。
【００４１】
パクリタキセル、（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−ベンゾイル−３−フェニルイソセリンとの５β，２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサ−ヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４，１０−ジアセテート２−ベンゾエート１３−エステルは、タイヘイヨウイチイの木Ｔａｘｕｓ  ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａから単離された天然ジテルペン産物であり、注射溶液ＴＡＸＯＬＲ（登録商標）として市販されている。それは、テルペン類のタキサンファミリーの一員である。１９７１年に、Ｗａｎｉらによって初めて単離され（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ，Ｓｏｃ．，９３：２３２５．１９７１）、彼らは、その構造を化学的およびＸ線結晶学的方法によって特徴付けた。その活性の一メカニズムは、チュービュリンに結合することのできるパクリタキセルの能力に関連し、それにより、癌細胞成長を阻害する（Ｓｃｈｉｆｆら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ，Ａｃａｄ，Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：１５６１−１５６５（１９８０）；Ｓｃｈｉｆｆら、Ｎａｔｕｒｅ，２７７：６６５−６６７（１９７９）；Ｋｕｍａｒ，Ｊ．Ｂｉｏｌ，Ｃｈｅｍ，２５６：１０４３５−１０４４１（１９８１））。いくつかのパクリタキセル誘導体の合成および抗癌活性の概説については、Ｄ．Ｇ．Ｉ．Ｋｉｎｇｓｔｏｎら、Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｖｏｌ．２６，タイトル”Ｎｅｗ  ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９８６”，Ａｔｔａｕｒ−Ｒａｈｍａｎ，Ｐ．Ｗ．Ｌｅ  Ｑｕｅｓｎｅ，Ｅｄｓ．（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，１９８６）ｐｐ２１９−２３５を参照のこと。
【００４２】
パクリタキセルは、米国において難治性の卵巣癌の治療（Ｍａｒｋｍａｎら、Ｙａｌｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，６４：５８３，１９９１；ＭｃＧｕｉｒｅら、Ａｎｎ．ｌｎｔｅｍ，Ｍｅｄ．，１１１：２７３，１９８９）、および乳癌の治療（Ｈｏｌｍｅｓら、Ｊ．Ｎａｔ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．，８３：１７９７，１９９１）における臨床的使用が認可されている。それは、皮膚における新生物（Ｅｉｎｚｉｇら、Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，２０：４６）および頭頚部癌腫（Ｆｏｒａｓｔｉｒｅら、Ｓｅｍ．Ｏｎｃｏｌ．，２０：５６，１９９０）の治療に対する可能性のある候補物質である。該化合物は、また、多嚢胞性腎臓病（Ｗｏｏら、Ｎａｔｕｒｅ，３６８：７５０．１９９４）、肺癌およびマラリアの治療に対する可能性も示す。パクリタキセルでの患者の処理は、閾値濃度（５０ｎＭ）（Ｋｅａｒｎｓ，Ｃ．Ｍ．ら、Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，３（６）  ｐ．１６−２３，１９９５）を越えて投与する期間に関連した骨髄抑制（多細胞系統，Ｉｇｎｏｆｆ，Ｒ．Ｊ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｐｏｃｋｅｔ  Ｇｕｉｄｅ，１９９８）をもたらす。
【００４３】
ドセタキセル、５β−２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４−アセテート２−ベンゾエートとの（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−カルボキシ−３−フェニルイソセリン，Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル，１３−エステル三水和物は、注射溶液ＴＡＸＯＴＥＲＥＲとして市販されている。ドセタキセルは、乳癌の治療に必要とされる。ドセタキセルは、ヨーロッパイチイの木の針葉から抽出された天然前駆体１０−デアセチル−バッカチンＩＩＩを用いて調製される、パクリタキセル（上を参照）の半合成誘導体である。ドセタキセルの用量規定毒性は、好中球減少である。
【００４４】
ビンカアルカロイドは、ツルニチニチソウ由来の周期特異性抗新生物剤である。ビンカアルカロイドは、チュービュリンに特異的に結合することによって、細胞周期のＭ期（有糸分裂）で作用する。結果として、結合型チュービュリン分子は、微小管中に重合することができない。有糸分裂は、中期に阻止されると考えられ、その後に細胞死がもたらされる。ビンカアルカロイドの例は、限定するものではないが、ビンブラスチン、ビンクリスチンおよびビノレルビンを包含する。
【００４５】
ビンブラスチン、硫酸ビンカロイコブラスチンは、注射溶液ＶＥＬＢＡＮＲとして市販されている。それは、第一に、睾丸癌およびホジキン病を包含する種々のリンパ腫ならびにリンパ球性および組織球性リンパ腫の治療において必要とされるが、種々の充実性腫瘍の二次治療としての可能性が示される。骨髄抑制は、ビンブラスチンの用量規定副作用である。
【００４６】
ビンクリスチン、ビンカロイコブラスチン，２２−オキソ−，サルフェートは、注射溶液ＯＮＣＯＶＩＮＲとして市販されている。ビンクリスチンは、急性白血病の治療に必要とされ、また、ホジキンおよび非ホジキン悪性リンパ腫の治療方針において使用が見出された。脱毛および神経学的影響は、ビンクリスチンの最も一般的な副作用であり、それほどではないが、骨髄抑制および胃腸粘膜炎影響が起こる。
【００４７】
ビノレルビン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−Ｃ’−ノルビンカロイコブラスチン［Ｒ−（Ｒ＊，Ｒ＊）−２，３−ジヒドロキシブタンジオエート（１：２）（塩）］は、酒石酸ビノレルビンの注射溶液（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥＲ）として市販されており、半合成ビンカアルカロイドである。ビノレルビンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤、例えば、シスプラスチンと組み合わせて、種々の充実性腫瘍、特に、非小細胞肺癌、進行した乳癌、およびホルモン難治性前立腺癌の治療において必要とされる。骨髄抑制は、ビノレルビンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００４８】
白金配位錯体は、非周期特異性抗癌剤であり、ＤＮＡと相互作用する。白金錯体は、腫瘍細胞に侵入し、アクア化し、ＤＮＡと鎖内および鎖間架橋を形成し、それにより、腫瘍に対し不利益な生物学的影響を引き起こす。白金配位錯体の例は、限定するものではないが、シスプラチンおよびカルボプラチンを包含する。
【００４９】
シスプラチン、シス−ジアミンジクロロ白金は、注射溶液ＰＬＡＴＩＮＯＬＲとして市販されている。シスプラチンは、主に、転移性睾丸および卵巣癌ならびに進行性膀胱癌の治療に必要とされる。シスプラチンの一次用量規定副作用は、水和および利尿によって調節されうる腎臓毒性、および内耳神経毒性である。
【００５０】
カルボプラチン、白金ジアミン［１，１−シクロブタン−ジカルボキシレート（２−）−Ｏ，Ｏ’］は、注射溶液ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮＲとして市販されている。カルボプラチンは、主として進行性卵巣癌腫の一次および二次治療において必要とされる。骨髄抑制は、カルボプラチンの用量規定毒性である。
【００５１】
アルキル化剤は、非周期特異性抗癌剤であり、強い親電子物質である。典型的には、アルキル化剤は、アルキル化によって、リン酸基、アミノ基、スルフヒドリル基、ヒドロキシル基、カルボキシル基およびイミダゾール基などのＤＮＡ分子の求核性基を介してＤＮＡに対する共有結合を形成する。かかるアルキル化は、核酸機能を崩壊し、それにより、細胞死に導く。アルキル化剤の例は、限定するものではないが、シクロホスファミド、メルファランおよびクロラムブシルなどのナイトロジェンマスタード、ブスルファンなどのスルホン酸アルキル、カルムスチンなどのニトロソウレア、およびダカルバジンなどのトリアゼンを包含する。
【００５２】
シクロホスファミド、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキサザホスホリン２−オキシド一水和物は、注射溶液または錠剤として、ＣＹＴＯＸＡＮＲとして市販されている。シクロホスファミドは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫および白血病の治療において必要とされる。脱毛、吐き気、嘔吐および白血球減少は、シクロホスファミドの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５３】
メルファラン、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニンは、注射溶液または錠剤として、ＡＬＫＥＲＡＮＲとして市販されている。メルファランは、多発性骨髄腫および卵巣の切除不能上皮癌腫の待機的治療に必要とされる。骨髄抑制は、メルファランの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５４】
クロラムブシル、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゼンブタン酸は、ＬＥＵＫＥＲＡＮＲ錠剤として市販されている。クロラムブシルは、慢性リンパ球性白血病、およびリンパ肉腫、巨大濾胞性リンパ腫およびホジキン病などの悪性リンパ腫の待機的治療に必要とされる。骨髄抑制は、クロラムブシルの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５５】
ブスルファン、１，４−ブタンジオールジメタンスルホネートは、ＭＹＬＥＲＡＮＲ錠剤として市販されている。ブスルファンは、慢性骨髄性白血病の待機的治療に必要とされる。骨髄抑制は、ブスルファンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５６】
カルムスチン、１，３−［ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソウレアは、単一バイアルの凍結乾燥製品として、ＢｉＣＮＵＲとして市販されている。カルムスチンは、単一薬剤として、または脳腫瘍、多発性骨髄腫、ホジキン病、および非ホジキンリンパ腫のための他の薬剤と組み合わせて、待機的治療に必要とされる。骨髄抑制の遅延は、カルムスチンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５７】
ダカルバジン、５−（３，３−ジメチル−１−トリアゼノ）−イミダゾール−４−カルボキサミドは、単一バイアル製品として、ＤＴＩＣ−ＤｏｍｅＲとして市販されている。ダカルバジンは、転移性悪性黒色腫の治療に必要とされ、ホジキン病の二次治療のための他の薬剤と組み合わせて使用される。吐き気、嘔吐および食欲不振は、ダカルバジンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５８】
抗生物質抗新生物剤は、周期特異性薬剤であり、ＤＮＡに結合または介在する。典型的には、かかる作用は、安定なＤＮＡ複合体または鎖分解をもたらし、それが核酸の通常の機能を崩壊し、その結果、細胞死に導く。抗生物質抗新生物剤の例は、限定するものではないが、ダクチノマイシンなどのアクチノマイシン、ダウノルビシンおよびドキソルビシンなどのアントラサイクリン、およびブレオマイシンを包含する。
【００５９】
ダクチノマイシンは、アクチノマイシンＤとしても知られ、ＣＯＳＭＥＧＥＮＲとして注射可能形態で市販されている。ダクチノマイシンは、Ｗｉｌｍ腫瘍および横紋筋肉腫の治療に必要とされる。吐き気、嘔吐および食欲不振は、ダクチノマイシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００６０】
ダウノルビシン、（８Ｓ−シス−）−８−アセチル−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−ｌｙｘｏ−ヘキソピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、リポソーム注射可能形態としてＤＡＵＮＯＸＯＭＥＲまたは注射液としてＣＥＲＵＢＩＤＩＮＥＲとして市販されている。ダウノルビシンは、急性非リンパ球性白血病および進行性ＨＩＶ関連カポジ肉腫の治療において軽減誘導のために必要とされる。骨髄抑制は、ダウノルビシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００６１】
ドキソルビシン（８Ｓ，１０Ｓ）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−ｌｙｘｏ−ヘキソピラノシル）オキシ］−８−グリコロイル，７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、注射可能形態として、ＲＵＢＥＸＲまたはＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ  ＲＤＦＲとして市販されている。ドキソルビシンは、主として、急性リンパ芽球性白血病および急性骨髄芽急性白血病の治療に必要とされるが、いくつかの充実性腫瘍およびリンパ腫の治療においても有用な成分である。骨髄抑制は、ドキソルビシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００６２】
ブレノマイシン、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｓの株から単離された細胞毒性グリコペプチド抗生物質の混合物は、ＢＬＥＮＯＸＡＮＥＲとして市販されている。ブレオマイシンは、単一薬剤として、または他の薬剤と組み合わせて、扁平上皮細胞癌腫、リンパ腫、および睾丸癌腫の待機的治療として必要とされる。肺および皮膚毒性は、ブレオマイシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００６３】
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、限定するものではないが、エピポドフィロトキシンを包含する。
エピポドフィロトキシンは、マンドレーク植物に由来する周期特異性抗新生物剤である。エピポドフィロトキシンは、典型的には、トポイソメラーゼＩＩおよびＤＮＡと三重複合体を形成し、ＤＮＡ鎖崩壊を引き起こすことによって、細胞周期のＳおよびＧ２期において細胞に影響を及ぼす。鎖崩壊が蓄積し、次いで細胞死が起こる。エピポドフィロトキシンの例は、限定するものではないが、エトポシドおよびテニポシドを包含する。
【００６４】
エトポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン  ９［４，６−０−（Ｒ）−エチリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射溶液またはカプセルとして、ＶｅＰＥＳＩＤＲとして市販されており、一般に、ＶＰ−１６として知られている。エトポシドは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、睾丸癌および非小細胞肺癌の治療において必要とされる。骨髄抑制は、エトポシドの最も一般的な用量規定副作用である。白血球減少の発生は、血小板減少より重篤な傾向にある。
【００６５】
テニポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン  ９［４，６−０−（Ｒ）−テニリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射溶液として、ＶＵＭＯＮＲとして市販されており、一般に、ＶＭ−２６として知られている。テニポシドは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、子供の急性白血病の治療において必要とされる。骨髄抑制は、テニポシドの最も一般的な用量規定副作用である。テニポシドは、白血球減少および血小板減少の両方を誘導することができる。
【００６６】
代謝拮抗抗新生物剤は、ＤＮＡ合成を阻害することによって、またはプリンもしくはピリミジン塩基合成を阻害し、それによりＤＮＡ合成阻害することによって、細胞周期のＳ期（ＤＮＡ合成）に作用する周期特異性抗新生物剤である。結果として、Ｓ期が進行せず、その結果、細胞死が起こる。代謝拮抗抗新生物剤の例は、限定するものではないが、フルオロウラシル、メトトレキサート、シタラビン、メカプトプリン、チオグアニンおよびゲムシタビンを包含する。
【００６７】
５−フルオロウラシル、５−フルオロ−２，４−（１Ｈ，３Ｈ）ピリミジンジオンは、フルオロウラシルとして市販されている。５−フルオロウラシルの投与は、チミジレート合成の阻害を導き、また、ＲＮＡおよびＤＮＡの両方に組み込まれる。その結果、典型的には、細胞死が起こる。５−フルオロウラシルは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、胸部、結腸、直腸、胃および膵臓の癌腫の治療において必要とされる。骨髄抑制および粘膜炎は、５−フルオロウラシルの用量規定副作用である。他のフルオロピリミジン類似体は、５−フルオロデオキシウリジン（フロクスウリジン）および５−フルオロデオキシウリジン一リン酸を包含する。
【００６８】
シタラビン、４−アミノ−１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−２（１Ｈ）−ピリミジノンは、ＣＹＴＯＳＡＲ−ＵＲとして市販されており、一般に、Ａｒａ−Ｃとして知られている。シタラビンは、成長しているＤＮＡ鎖中へのシタラビンの末端組み込みによって、ＤＮＡ鎖伸長を阻害することにより、Ｓ期での細胞周期特異性を示すと考えられる。シタラビンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療において必要とされる。他のシチジン類似体は、５−アザシチジンおよび２’，２’−ジフルオロデオキシシチジン（ゲムシタビン）を包含する。シタラビンは、白血球減少、血小板減少および粘膜炎を誘導する。
【００６９】
メルカプトプリン、１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオン一水和物は、ＰＵＲＩＮＥＴＨＯＬＲとして市販されている。メルカプトプリンは、今だ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期での細胞周期特異性を示す。メルカプトプリンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療において必要とされる。骨髄抑制および胃腸粘膜炎は、高用量でのメルカプトプリンの予想される副作用である。有用なメルカプトプリン類似体は、アザチオプリンである。
【００７０】
チオグアニン、２−アミノ−１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオンは、ＴＡＢＬＯＩＤＲとして市販されている。チオグアニンは、今だ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期での細胞周期特異性を示す。チオグアニンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療において必要とされる。白血球減少、血小板減少および貧血を包含する骨髄抑制は、チオグアニン投与の最も一般的な用量規定副作用である。しかしながら、胃腸の副作用が起こり、用量が制限されることがある。他のプリン類似体は、ペントスタチン、エリスロヒドロキシノニルアデニン、フルダラビンホスフェート、およびクラドリビンを包含する。
【００７１】
ゲムシタビン、２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン一塩酸塩（β−異性体）は、ＧＥＭＺＡＲＲとして市販されている。ゲムシタビンは、Ｇ１／Ｓ境界を経る細胞の進行を阻害することによって、Ｓ期での細胞周期特異性を示す。ゲムシタビンは、局所的進行性の非小細胞肺癌の治療においてシスプラチンと組み合わせて用いられ、局所的進行性の膵臓癌の治療において単独で用いられる。白血球減少、血小板減少および貧血を包含する骨髄抑制は、ゲムシタビン投与の最も一般的な用量規定副作用である。
【００７２】
メトトレキサート、Ｎ−［４［［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］メチルアミノ］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸は、メトトレキサートナトリウムとして市販されている。メトトレキサートは、プリンヌクレオチドおよびチミジレートの合成に必要なジヒドロ葉酸還元酵素の阻害によって、ＤＮＡ合成、修復および／または複製を阻害することにより、Ｓ期で特異的に細胞周期影響を示す。メトトレキサートは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、絨毛癌、髄膜白血病、非ホジキンリンパ腫、および胸部、頭部、頚部、卵巣および膀胱の癌腫の治療において必要とされる。骨髄抑制（白血球減少、血小板減少および貧血）および粘膜炎は、メトトレキサート投与の予想される副作用である。
【００７３】
カンプトテシンおよびカンプトテシン誘導体を包含するカンプトテシンは、トポイソメラーゼＩ阻害剤として入手可能であるか、または開発下にある。カンプトテシン細胞毒活性は、そのトポイソメラーゼＩ阻害活性に関連すると考えられる。カンプトテシンの例は、限定するものではないが、イリノテカン、トポテカン、および下記の７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０−カンプトテシンの種々の光学形態を包含する。
【００７４】
イリノテシンＨＣｌ、（４Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−［（４−ピペリジノピペリジノ）カルボニルオキシ］−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン塩酸塩は、注射溶液ＣＡＭＰＴＯＳＡＲＲとして市販されている。
【００７５】
イリノテカンは、その活性な代謝産物ＳＮ−３８と共に、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体に結合するカンプトテシンの誘導体である。トポイソメラーゼＩ：ＤＮＡ：イリノテカンまたはＳＮ−３８三重複合体と複製酵素との相互作用によって引き起こされる修復不可能な二重鎖崩壊の結果として、細胞毒性が起こると考えられる。イリノテカンは、結腸または直腸の転移性癌の治療のために必要とされる。イリノテカンＨＣｌの用量規定副作用は、好中球減少を包含する骨髄抑制、および下痢を包含するＧＩ影響である。
【００７６】
トポテカンＨＣｌ、（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−４，９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン一塩酸塩は、注射溶液ＨＹＣＡＭＴＩＮＲとして市販されている。トポテカンは、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体に結合するカンプトテシンの誘導体であり、ＤＮＡ分子のねじれひずみに応答してトポイソメラーゼＩによって引き起こされる一本鎖崩壊の再ライゲーションを防ぐ。トポテカンは、卵巣癌および小細胞肺癌の転移性癌腫の二次治療に必要とされる。トポテカンＨＣｌの用量規定副作用は、骨髄抑制、主として好中球減少である。
【００７７】
また、ラセミ混合物（Ｒ，Ｓ）形態ならびにＲおよびＳエナンチオマーを包含する現在開発中の下記の式Ａ：
【化３】
2009516653.tif 000004
で示されるカンプトテシン誘導体は、化学名「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｒ，Ｓ）−カンプトテシン（ラセミ混合物）」または「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｒ）−カンプトテシン（Ｒエナンチオマー）」または「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン（Ｓエナンチオマー）によって知られている。かかる化合物ならびに関連化合物は、製造法も含め、米国特許第６，０６３，９２３号、第５，３４２，９４７号、第５，５５９，２３５号、第５，４９１，２３７号および出願中の米国特許出願第０８／９７７，２１７号（１９９７年１１月２４日出願）に記載されている。
【００７８】
ホルモンおよびホルモン類似体は、ホルモンと癌の成長および／または成長不足との間に関係がある癌の治療に有用な化合物である。癌治療に有用なホルモンおよびホルモン類似体の例は、限定するものではないが、子供の悪性リンパ腫および急性白血病の治療に有用なプレドニソンおよびプレドニソロンなどのアドレノコルチコステロイド；アミノグルテチミドおよび他のアロマターゼ阻害剤、例えば、アナストロゾール、レトラゾール、ボラゾール、および副腎皮質癌およびエストロゲン受容体を含有するホルモン依存性乳癌の治療に有用なエキセメスタン；プロゲストリン（ｐｒｏｇｅｓｔｒｉｎ）、例えば、ホルモン依存性乳癌および子宮内膜癌の治療に有用な酢酸メゲストロール；エストロゲン、アンドロゲン、および抗アンドロゲン、例えば、前立腺癌および良性前立腺肥大の治療に有用なフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロンおよび５α−レダクターゼ、例えば、フィナステリドおよびデゥタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）；抗エストロゲン、例えば、ホルモン依存性乳癌および他の感受性癌の治療に有用なタモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェン、ならびに米国特許第５，６８１，８３５号、第５，８７７，２１９号および第６，２０７，７１６号に記載のような選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭＳ）；および前立腺癌の治療のための性腺刺激ホルモン放出性ホルモン（ＧｎＲＨ）および黄体形成ホルモン（ＬＨ）および／または卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の放出を刺激するその類似体、例えば、ＬＨＲＨアゴニストおよびアンタゴニスト、例えば、酢酸ゴセレリンおよびルプロリドを包含する。
【００７９】
シグナル変換経路阻害剤は、細胞内変換を喚起する化学的過程を遮断または阻害する阻害剤である。本明細書中で使用される場合、該変化は、細胞増殖または分化である。本発明において有用なシグナル変換阻害剤は、受容体チロシンキナーゼ、非受容体チロシンキナーゼ、ＳＨ２／ＳＨ３ドメインブロッカー、セリン／スレオニンキナーゼ、ホスホチジルイノシトール−３キナーゼ、ｍｙｏ−イノシトールシグナル伝達、およびＲａｓオンコジーンの阻害剤を包含する。
【００８０】
いくつかのプロテインチロシンキナーゼは、細胞成長の調節に関与する種々のタンパク質における特定のチロシル残基のリン酸化を触媒する。かかるプロテインチロシンキナーゼは、受容体または非受容体キナーゼとして幅広く分類することができる。
【００８１】
受容体チロシンキナーゼは、細胞外リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメインおよびチロシンキナーゼドメインを有する膜貫通型タンパク質である。受容体チロシンキナーゼは、細胞成長の調節に関与し、一般に、成長因子受容体と呼ばれる。例えば過剰発現または変異による、これらのキナーゼの多くの不適当または制御されない活性化、すなわち、異常型のキナーゼ成長因子受容体活性は、制御されない細胞成長をもたらすことが示された。したがって、かかるキナーゼの異常な活性は、悪性組織成長に関連している。結果として、かかるキナーゼの阻害剤は、癌治療法を提供することができた。成長因子受容体は、例えば、表皮成長因子受容体（ＥＧＦｒ）、血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦｒ）、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ４、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦｒ）、免疫グロブリン様および表皮成長因子相同ドメインを有するチロシンキナーゼ（ＴＩＥ−２）、インスリン成長因子−Ｉ（ＩＧＦＩ）受容体、マクロファージコロニー刺激因子（ｃｆｍｓ）、ＢＴＫ、ｃｋｉｔ、ｃｍｅｔ、繊維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）受容体、Ｔｒｋ受容体（ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢおよびＴｒｋＣ）、エフリン（ｅｐｈ）受容体、およびＲＥＴプロトオンコジーンを包含する。いくつかの成長受容体阻害剤は、開発中であり、リガンドアンタゴニスト、抗体、チロシンキナーゼ阻害剤およびアンチセンスオリゴヌクレオチドを包含する。成長因子受容体および成長因子受容体機能を阻害する薬剤は、例えば、Ｋａｔｈ，Ｊｏｈｎ  Ｃ．，Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ（２０００）１０（６）：８０３−８１８；Ｓｈａｗｖｅｒら、ＤＤＴ  Ｖｏｌ２，Ｎｏ．２  Ｆｅｂｒｕａｒｙ  １９９７；およびＬｏｆｔｓ，Ｆ．Ｊ．ら、”Ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｓ  ｔａｒｇｅｔｓ”，Ｎｅｗ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｗｏｒｋｍａｎ，ＰａｕｌおよびＫｅｒｒ，Ｄａｖｉｄ編，ＣＲＣ  ｐｒｅｓｓ  １９９４，Ｌｏｎｄｏｎに記載されている。
【００８２】
成長因子受容体キナーゼではないチロシンキナーゼは、非受容体チロシンキナーゼと称される。本発明において有用な非受容体チロシンキナーゼは、抗癌薬の標的または潜在的標的であり、ｃＳｒｃ、Ｌｃｋ、Ｆｙｎ、Ｙｅｓ、Ｊａｋ、ｃＡｂｌ、ＦＡＫ（焦点接着キナーゼ）、Ｂｒｕｔｏｎｓチロシンキナーゼ、およびＢｃｒ−Ａｂｌを包含する。かかる非受容体キナーゼおよび非受容体チロシンキナーゼ機能を阻害する薬剤は、Ｓｉｎｈ，Ｓ．およびＣｏｒｅｙ，Ｓ．Ｊ．，（１９９９）  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ８  （５）：４６５−８０；およびＢｏｌｅｎ，Ｊ．Ｂ．，Ｂｒｕｇｇｅ，Ｊ．Ｓ．，（１９９７）Ａｎｎｕａｌ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１５：３７１−４０４に記載されている。
【００８３】
ＳＨ２／ＳＨ３ドメインブロッカーは、ＰＩ３−Ｋ  ｐ８５サブユニット、Ｓｒｃファミリーキナーゼ、アダプター分子（Ｓｈｃ、Ｃｒｋ、Ｎｃｋ、Ｇｒｂ２）およびＲａｓ−ＧＡＰを包含する種々の酵素またはアダプタータンパク質において結合しているＳＨ２またはＳＨ３ドメインを崩壊する薬剤である。抗癌薬の標的としてのＳＨ２／ＳＨ３ドメインは、Ｓｍｉｔｈｇａｌｌ，Ｔ．Ｅ．（１９９５），Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．３４（３）１２５−３２において考察されている。
【００８４】
セリン／スレオニンキナーゼの阻害剤は、ＭＡＰキナーゼカスケードブロッカーを包含し、それは、Ｒａｆキナーゼ（ｒａｆｋ）、マイトジェンまたは細胞外調節キナーゼ（ＭＥＫｓ）、および細胞外調節キナーゼ（ＥＲＫｓ）のブロッカー；およびＰＫＣ（アルファ、ベータ、ガンマ、イプシロン、ミュー、ラムダ、イオータ、ゼータ）のブロッカーを包含するプロテインキナーゼＣファミリーメンバーのブロッカーを包含する。ＩｋＢキナーゼファミリー（ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ）、ＰＫＢファミリーキナーゼ、ａｋｔキナーゼファミリーメンバー、およびＴＧＦベータ受容体キナーゼのブロッカーを包含する。かかるセリン／スレオニンキナーゼおよびその阻害剤は、Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｔ．，Ｔａｙａ，Ｓ．，Ｋａｉｂｕｃｈｉ，Ｋ．，（１９９９），Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．１２６（５）７９９−８０３；Ｂｒｏｄｔ，Ｐ，Ｓａｍａｎｉ，Ａ．，およびＮａｖａｂ，Ｒ．（２０００），Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，６０．１１０１−１１０７；Ｍａｓｓａｇｕｅ，Ｊ．，Ｗｅｉｓ−Ｇａｒｃｉａ，Ｆ．（１９９６）Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｕｒｖｅｙｓ．２７：４１−６４；Ｐｈｉｌｉｐ，Ｐ．Ａ．，およびＨａｒｒｉｓ，Ａ．Ｌ．（１９９５），Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．  ７８：３−２７，Ｌａｃｋｅｙ，Ｋ．ら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙｌｅｔｔｅｒｓ，（１０），２０００，２２３−２２６；米国特許第６，２６８，３９１号；およびＭａｒｔｉｎｅｚ−Ｉａｃａｃｉ，Ｌ．ら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ（２０００），８８（１），４４−５２に記載されている。
【００８５】
ＰＩ３−キナーゼ、ＡＴＭ、ＤＮＡ−ＰＫおよびＫｕのブロッカーを包含するホスホチジルイノシトール−３キナーゼファミリーのメンバーの阻害剤は、また、本発明において有用でありうる。かかるキナーゼは、Ａｂｒａｈａｍ，Ｒ．Ｔ．（１９９６），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．８（３）４１２−８；Ｃａｎｍａｎ，Ｃ．Ｅ．，Ｌｉｍ，Ｄ．Ｓ．（１９９８），Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １７（２５）３３０１−３３０８；Ｊａｃｋｓｏｎ，Ｓ．Ｐ．（１９９７），Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ．２９（７）：９３５−８；およびＺｈｏｎｇ，Ｈ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  ｒｅｓ，（２０００）６０（６），１５４１−１５４５において考察されている。
【００８６】
また、本発明は、ミオイノシトールシグナル伝達阻害剤、例えば、ホスホリパーゼＣブロッカーおよびミオイノシトール類似物に関する。かかるシグナル阻害剤は、Ｐｏｗｉｓ，Ｇ．およびＫｏｚｉｋｏｗｓｋｉ  Ａ．、（１９９４）Ｎｅｗ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ｅｄ．，Ｐａｕｌ  Ｗｏｒｋｍａｎ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｄ  Ｋｅｒｒ，ＣＲＣ  ｐｒｅｓｓ  １９９４，Ｌｏｎｄｏｎにおいて記載されている。
【００８７】
シグナル変換経路阻害剤の別の群は、Ｒａｓオンコジーンの阻害剤である。かかる阻害剤は、ファルネシルトランスフェラーゼ、ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼおよびＣＡＡＸプロテアーゼの阻害剤、ならびにアンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイムおよび免疫療法を包含する。かかる阻害剤は、野生型変異体ｒａｓを含有する細胞においてｒａｓ活性化を遮断し、それにより、抗増殖剤として作用することが示された。Ｒａｓオンコジーン阻害は、Ｓｃｈａｒｏｖｓｋｙ，Ｏ．Ｇ．，Ｒｏｚａｄｏｓ，Ｖ．Ｒ．，Ｇｅｒｖａｓｏｎｉ，Ｓ．Ｉ．Ｍａｔａｒ，Ｐ．（２０００），Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ．７（４）２９２−８；Ａｓｈｂｙ，Ｍ．Ｎ．（１９９８），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｌｉｐｉｄｏｌｏｇｙ．９（２）９９−１０２；およびＢｉｏＣｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，（１９８９）１４２３（３）：１９−３０において考察されている。
【００８８】
上記のように、受容体キナーゼリガンド結合に対する抗体アンタゴニストもまた、シグナル変換阻害剤として作用しうる。該群のシグナル変換経路阻害剤は、受容体チロシンキナーゼの細胞外リガンド結合ドメインに対するヒト化抗体の使用を包含する。例えば、Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｃ２２５  ＥＧＦＲ特異的抗体（Ｇｒｅｅｎ，Ｍ．Ｃ．ら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔ．Ｒｅｖ．，（２０００），２６（４），２６９−２８６参照）、ＨｅｒｃｅｐｔｉｎＲ（登録商標）ｅｒｂＢ２抗体（Ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ  ｉｎ  Ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ：ｅｒｂＢ  Ｆａｍｉｌｙ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｔｙｒｏｓｉｎｅ  Ｋｎｉａｓｅｓ，Ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２０００，２（３），１７６−１８３参照）、および２ＣＢ  ＶＥＧＦＲ２特異的抗体（Ｂｒｅｋｋｅｎ，Ｒ．Ａ．ら、Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ＶＥＧＦＲ２  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｂｙ  ａ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉ−ＶＥＧＦ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｂｌｏｃｋｓ  ｔｕｍｏｒ  ｇｒｏｗｔｈ  ｉｎ  ｍｉｃｅ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．（２０００）６０，５１１７−５１２４参照）がある。
【００８９】
非受容体キナーゼ脈管形成阻害剤もまた、本発明において有用でありうる。脈管形成関連ＶＥＧＦＲおよびＴＩＥ２の阻害剤は、シグナル変換阻害剤に関して上記で考察されている（どちらの受容体も受容体チロシンキナーゼである）。ｅｒｂＢ２およびＥＧＦＲの阻害剤は、脈管形成、主にＶＥＧＦ発現を阻害することが示されたので、一般に、脈管形成はｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲシグナル伝達に関係する。したがって、非受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、本発明の化合物と組み合わせて使用してもよい。例えば、ＶＥＧＦＲ（受容体チロシンキナーゼ）を認識しないが、そのリガンドに結合する抗−ＶＥＧＦ抗体、脈管形成を阻害するであろうインテグリン（アルファｖ、ベータ３）の小型分子阻害剤、エンドスタチンおよびアンジオスタチン（非−ＲＴＫ）もまた、開示される化合物と組み合わせて有用であることが分かる（Ｂｒｕｎｓ  ＣＪら、（２０００），Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，６０：２９２６−２９３５；Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ  ＡＢ，Ｗｉｎｋｌｅｒ  ＭＥおよびＤｅｒｙｎｃｋ  Ｒ．（１９８６），Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３２：１２５０−１２５３；  Ｙｅｎ  Ｌら、（２０００），Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９：３４６０−３４６９参照）。
【００９０】
免疫治療方法において使用される薬剤もまた、式（Ｉ）の化合物と組み合わせて有用でありうる。免疫応答を生じるための多くの免疫学的方策がある。これらの方策は、一般に、腫瘍ワクチン化の領域にある。免疫学的アプローチの効力は、小型分子阻害剤を用いるシグナル伝達経路の組み合わせた阻害を通して大いに増強されうる。ｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲに対する免疫学的／腫瘍ワクチンアプローチの考察は、Ｒｅｉｌｌｙ  ＲＴら、（２０００），Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６０：３５６９−３５７６；およびＣｈｅｎ  Ｙ，Ｈｕ  Ｄ，Ｅｌｉｎｇ  ＤＪ，Ｒｏｂｂｉｎｓ  ＪおよびＫｉｐｐｓ  ＴＪ．（１９９８），Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５８：１９６５−１９７１において見出される。
【００９１】
プロアポトーシス管理において用いられる薬剤（例えば、ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチド）もまた、本発明の組み合わせにおいて使用されうる。タンパク質のＢｃｌ−２ファミリーのメンバーは、アポトーシスを阻害する。したがって、ｂｃｌ−２のアップレギュレーションは、化学耐性に関連する。研究により、表皮成長因子（ＥＧＦ）がｂｃｌ−２ファミリーの抗−アポトーシスメンバー（すなわち、ｍｃｌ−１）を刺激することが示された。したがって、腫瘍においてｂｃｌ−２の発現をダウンレギュレーションすることが計画された方策、すなわち、Ｇｅｎｔａ’ｓ  Ｇ３１３９  ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチドは、臨床上の利益を明らかにし、現在、第ＩＩ／ＩＩＩ相試験にある。ｂｃｌ−２に対するアンチセンスオリゴヌクレオチド法を用いるかかるプロアポトーシス法は、Ｗａｔｅｒ  ＪＳら、（２０００），Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１８：１８１２−１８２３；およびＫｉｔａｄａ  Ｓら、（１９９４），Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．４：７１−７９において考察されている。
【００９２】
細胞周期シグナル伝達阻害剤は、細胞周期の調節に関与する分子を阻害する。サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）と呼ばれるプロテインキナーゼのファミリー、およびサイクリンと名付けられたタンパク質のファミリーとのそれらの相互作用は、真核生物の細胞周期の進行を調節する。種々のサイクリン／ＣＤＫ複合体の配位活性化および不活性化は、細胞周期の正常な進行に必要である。細胞周期シグナル伝達のいくつかの阻害剤は、開発下にある。例えば、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６を包含するサイクリン依存性キナーゼの例およびその阻害剤が、例えば、Ｒｏｓａｎｉａら、Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ（２０００）１０（２）：２１５−２３０に記載されている。
【００９３】
一の具体例において、本発明の癌治療法は、式Ｉの化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグと、少なくとも１つの抗新生物剤、例えば、抗微小管剤、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似物、シグナル変換経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ脈管形成阻害剤、免疫治療剤、プロアポトーシス剤、および細胞周期シグナル伝達阻害剤からなる群から選択される抗新生物剤との同時投与を包含する。
【００９４】
本発明の医薬上活性な化合物は、ＡＫＴ阻害剤として活性なので、それらは、癌および関節炎の治療において治療上有用性を示す。
【００９５】
適当には、本発明は、脳腫瘍（神経膠腫）、神経膠芽腫、白血病、Ｂａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ症候群、コーデン病、Ｌｈｅｒｍｉｔｔｅ−Ｄｕｃｌｏｓ病、乳癌、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫および甲状腺癌から選択される癌を治療またはかかる癌の重篤度を軽減する方法に関する。
【００９６】
適当には、本発明は、乳癌、卵巣癌、膵臓癌および前立腺癌から選択される癌の治療またはかかる癌の重篤度を軽減する方法に関する。
【００９７】
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ  １３６−４８０）の単離および精製
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ  １３６−４８０）を発現している昆虫細胞を２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、２０ｍＭ  イミダゾール（ｐＨ７．５）中にｐｏｌｙｔｒｏｎを用いて溶解させた（５ｍＬ溶解バッファー／ｇ  細胞）。細胞破片を２８，０００ｘｇで３０分間遠心分離することによって除去した。上清を４．５ミクロンのフィルターで濾過し、次いで、予め溶解バッファーで平衡化したニッケル−キレートカラム上に負荷した。該カラムを５カラム容量（ＣＶ）の溶解バッファー、次いで、５ＣＶの２０％バッファーＢ（ここに、バッファーＢは、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，１００ｍＭ  ＮａＣｌ，３００ｍＭ  イミダゾール、ｐＨ７．５である）で洗浄した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ  １３６−４８０）は、１０ＣＶにわたるバッファーＢの２０−１００％直線勾配で溶出された。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（１３６−４８０）溶出フラクションをプールし、３倍量のバッファーＣ（ここに、バッファーＣは、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．５である）で希釈した。次いで、該試料を、バッファーＣで予め平衡化したＱ−セファロースＨＰカラム上のクロマトグラフィーに付した。該カラムを５ＣＶのバッファーＣで洗浄し、次いで、５ＣＶの１０％Ｄ、５ＣＶの２０％Ｄ、５ＣＶの３０％Ｄ、５ＣＶの５０％Ｄおよび５ＣＶの１００％Ｄ（ここに、バッファーＤは、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，１０００ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．５である）で段階溶出した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ  １３６−４８０）含有フラクションをプールし、１０−ｋＤａ分子量カットオフ濃縮器で濃縮した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ  １３６−４８０）を、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，２００ｍＭ  ＮａＣｌ，１ｍＭ  ＤＴＴ（ｐＨ７．５）で予め平衡化したＳｕｐｅｒｄｅｘ７５ゲル濾過カラム上のクロマトグラフィーに付した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ  １３６−４８０）フラクションを、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび質量分析法を用いて試験した。該タンパク質をプールし、濃縮し、−８０℃で冷凍した。
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ２（ａａ  １３８−４８１）およびＨｉｓタグ付加ＡＫＴ３（ａａ  １３５−４７９）も同様に、単離および精製した。
【００９８】
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ酵素アッセイ
本発明の化合物を基質リン酸化アッセイにおいて、ＡＫＴ１、２および３プロテインセリンキナーゼ阻害活性について試験した。該アッセイは、ペプチド基質のセリンリン酸化を阻害する小型分子有機化合物の能力について試験する。基質リン酸化アッセイは、ＡＫＴ１、２または３の触媒ドメインを利用する。ＡＫＴ１、２および３は、また、Ｕｐｓｔａｔｅ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ．から入手可能である。該方法は、ビオチン化合成ペプチド配列番号１（ビオチン−ａｈｘ−ＡＲＫＲＥＲＡＹＳＦＧＨＨＡ−アミド）のセリン残基上へのＡＴＰ由来のガンマ−ホスフェートの移動を触媒する単離酵素の能力を測定する。基質リン酸化は、下記の手法によって検出された。
アッセイは、３８４ウェルＵ底白色プレートで行った。１０ｎＭ活性化ＡＫＴ酵素を、５０ｍＭ  ＭＯＰＳ、ｐＨ７．５、２０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、４μＭ  ＡＴＰ、８μＭペプチド、０．０４μＣｉ［ｇ−３３Ｐ］ＡＴＰ／ウェル、１ｍＭ  ＣＨＡＰＳ、２ｍＭ  ＤＴＴ、および１００％ＤＭＳＯ中における１μｌの試験化合物を含有するアッセイ容量２０μｌ中、室温で４０分間インキュベートした。５０μｌのＳＰＡビーズミックス（Ｍｇ２＋およびＣａ２＋を含有しないＤｕｌｂｅｃｃｏ  ＰＢＳ、０．１％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、５ｍＭ  ＥＤＴＡ、５０μＭ  ＡＴＰ、２．５ｍｇ／ｍｌストレプトアビジンで被覆したＳＰＡビーズ）の添加によって、反応を停止した。プレートを密閉し、ビーズを一晩沈澱させ、次いで、プレートをＰａｃｋａｒｄ  Ｔｏｐｃｏｕｎｔマイクロプレートシンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）においてカウントした。
用量応答データをデータ換算式１００＊（Ｕ１−Ｃ２）／（Ｃ１−Ｃ２）
［式中、Ｕは未知の値であり、Ｃ１は、ＤＭＳＯについて得られた平均対照値であり、Ｃ２は、０．１Ｍ  ＥＤＴＡについて得られた平均対照値である］
で算出した％対照として、化合物濃度に対してプロットした。データを、
ｙ＝（（Ｖｍａｘ＊ｘ）／（Ｋ＋ｘ））
［式中、Ｖｍａｘは、上位の漸近線であり、ＫはＩＣ５０である］
によって表される曲線にフィットさせる。
【００９９】
全長ヒト（ＦＬ）ＡＫＴ１のクローニング
全長ヒトＡＫＴ１遺伝子を、ミリスチル化ＡＫＴ１−ＥＲを含有するプラスミド（Ｒｏｂｅｒｔ  Ｔ．  Ａｂｒａｈａｍ，  Ｄｕｋｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｕｎｄｅｒ  ＭＴＡからの贈呈品。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １９９８  Ｖｏｌｕｍｅ  １８  ｐ．５６９９に記載）から、５’プライマー：配列番号２
５’  ＴＡＴＡＴＡＧＧＡＴＣＣＡＴＧＡＧＣＧＡＣＧＴＧＧＣ  ３’
および３’プライマー：配列番号３
ＡＡＡＴＴＴＣＴＣＧＡＧＴＣＡＧＧＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＧＧ  ３’
を用いてＰＣＲによって増幅した。５’プライマーはＢａｍＨＩ部位を、３’プライマーはＸｈｏＩ部位をクローニング目的で含んでいた。得られたＰＣＲ産物をｐｃＤＮＡ３中で、ＢａｍＨＩ／ＸｈｏＩフラグメントとしてサブクローニングした。システイン２５をコードしている配列（ＴＧＣ）における変異を、ＱｕｉｋＣｈａｎｇｅＲ部位特異的変異誘発キット（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）を用いる部位特異的変異誘発によって、アルギニン２５をコードしている野生型ＡＫＴ１配列（ＣＧＣ）に変化させた。ＡＫＴ１変異誘発プライマー：配列番号４  
５’  ＡＣＣＴＧＧＣＧＧＣＣＡＣＧＣＴＡＣＴＴＣＣＴＣＣ
および選択プライマー：配列番号５
５’  ＣＴＣＧＡＧＣＡＴＧＣＡＡＣＴＡＧＡＧＧＧＣＣ（ｐｃＤＮＡ３のマルチプルクローニング部位におけるＸｂａＩ部位を破壊するために設計された）
を製造者の指示に従って用いた。発現／精製目的で、ＡＫＴ１をＢａｍＨＩ／ＸｈｏＩフラグメントとして単離し、ｐＦａｓｔｂａｃＨＴｂ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の
ＢａｍＨＩ  ＸｈｏＩ部位中にクローニングした。
【０１００】
ＦＬヒトＡＫＴ１の発現
発現は、ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎのＢＡＣ−ｔｏ−ＢＡＣバキュロウイルス発現システム（カタログ番号１０３５９−０１６）を用いて行った。簡単に言うと、１）ｃＤＮＡをＦａｓｔＢａｃベクターからｂａｃｍｉｄ  ＤＮＡ中へ移入させ、２）ｂａｃｍｉｄ  ＤＮＡを単離し、Ｓｆ９昆虫細胞をトランスフェクトするために用い、３）ウイルスをＳｆ９細胞中で産生させ、４）Ｔ．  ｎｉ細胞を該ウイルスに感染させ、精製に付した。
【０１０１】
ＦＬヒトＡＫＴ１の精製
全長ＡＫＴ１の精製のために、１３０ｇのｓｆ９細胞（バッチ番号４１６４６Ｗ０２）を、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ  ＮａＣｌおよび２０ｍＭイミダゾールを含有する溶解バッファー（バッファーＡ，１Ｌ，ｐＨ７．５）中に再懸濁した。細胞溶解をＡｖｅｓｔｉｎ（１５Ｋ−２０Ｋ  ｐｓｉで２回）によって行った。細胞破片を１６Ｋ  ｒｐｍで１時間遠心分離することによって除去し、上清を４℃で一晩、１０ｍｌのニッケルセファロースＨＰビーズにバッチ結合させた。次いで、ビーズをカラムに移し、結合した物質をバッファーＢ（２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、３００ｍＭ  イミダゾール、ｐＨ７．５）で溶出した。ＡＫＴ溶出フラクションをプールし、バッファーＣ（２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、５ｍＭ  ＤＴＴ、ｐＨ７．５）を用いて３倍量に希釈した。該試料を濾過し、バッファーＣで予め平衡化した１０ｍＬのＱ−ＨＰカラム上で２ｍＬ／分にてクロマトグラフィーに付した。
Ｑ−ＨＰカラムを３カラム容量（ＣＶ）のバッファーＣで洗浄し、次いで、５ＣＶの１０％Ｄ、５ＣＶの２０％Ｄ、５ＣＶの３０％Ｄ、５ＣＶの５０％Ｄおよび５ＣＶの１００％Ｄ（ここに、バッファーＤは、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１０００ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＤＴＴ、ｐＨ７．５である）を用いて段階溶出した。５ｍＬフラクションを回収した。ＡＫＴ含有フラクションをプールし、５ｍｌに濃縮した。次いで、該タンパク質を、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、２００ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＤＴＴ、ｐＨ７．５で予め平衡化した１２０ｍｌのＳｕｐｅｒｄｅｘ７５サイジングカラムに負荷した。２．５ｍＬのフラクションを回収した。
ＡＫＴ１溶出フラクションをプールし、アリコート（１ｍｌ）に分け、−８０℃で保存した。質量分析およびＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を用いて、精製した全長ＡＫＴ１の純度および同定を確認した。
全長（ＦＬ）ＡＫＴ２および（ＦＬ）ＡＫＴ３を同様に、単離および精製した。
【０１０２】
全長ＡＫＴ酵素アッセイ
本発明の化合物をＡＫＴ１、２および３プロテインセリンキナーゼ阻害活性について、基質リン酸化アッセイにおいて試験した。該アッセイは、ペプチド基質のセリンリン酸化を阻害する小型分子有機化合物の能力について試験する。基質リン酸化アッセイは、ＡＫＴ１、２または３の触媒ドメインを利用する。該方法は、ビオチン化合成ペプチド配列番号１（ビオチン−ａｈｘ−ＡＲＫＲＥＲＡＹＳＦＧＨＨＡ−アミド）のセリン残基上へのＡＴＰ由来のガンマ−ホスフェートの移動を触媒する単離酵素の能力を測定する。基質リン酸化は、下記の手法によって検出された。
アッセイは、３８４ウェルＵ底白色プレートで行った。１０ｎＭ活性化ＡＫＴ酵素を、５０ｍＭ  ＭＯＰＳ、ｐＨ７．５、２０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、４μＭ  ＡＴＰ、８μＭペプチド、０．０４μＣｉ［ｇ−３３Ｐ］ＡＴＰ／ウェル、１ｍＭ  ＣＨＡＰＳ、２ｍＭ  ＤＴＴ、および１００％ＤＭＳＯ中における１μｌの試験化合物を含有するアッセイ容量２０μｌ中、室温で４０分間インキュベートした。５０μｌのＳＰＡビーズミックス（Ｍｇ２＋およびＣａ２＋を含有しないＤｕｌｂｅｃｃｏ  ＰＢＳ、０．１％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、５ｍＭ  ＥＤＴＡ、５０μＭ  ＡＴＰ、２．５ｍｇ／ｍｌストレプトアビジンで被覆したＳＰＡビーズ）の添加によって、反応を停止した。プレートを密閉し、ビーズを一晩沈澱させ、次いで、プレートをＰａｃｋａｒｄ  Ｔｏｐｃｏｕｎｔマイクロプレートシンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）においてカウントした。
用量応答データをデータ換算式１００＊（Ｕ１−Ｃ２）／（Ｃ１−Ｃ２）
［式中、Ｕは未知の値であり、Ｃ１は、ＤＭＳＯについて得られた平均対照値であり、Ｃ２は、０．１Ｍ  ＥＤＴＡについて得られた平均対照値である］
で算出した％対照として、化合物濃度に対してプロットした。データを、
ｙ＝（（Ｖｍａｘ＊ｘ）／（Ｋ＋ｘ））
［式中、Ｖｍａｘは、上位の漸近線であり、ＫはＩＣ５０である］
によって表される曲線にフィットさせる。
【０１０３】
数回の試験後、実施例１の化合物は、上記の全長ＡＫＴ酵素アッセイにおいて、平均ＩＣ５０（μＭ）活性がＦＬ  ＡＫＴ１に対し０．００２μｍ、ＦＬ  ＡＫＴ２に対し０．０１３μｍ、ＦＬ  ＡＫＴ３に対し０．００９μｍであることが明らかになった。
【０１０４】
本発明の実施例１〜１０の化合物の腫瘍細胞系統および正常細胞系統に対する活性および溶解度を、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において調製された最も構造的に関連のある化合物であると考えられるものと比較した。詳細には、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１４０の化合物（化合物４−（１−エチル−７−｛［３−（４−モルホリニル）プロピル］オキシ｝−４−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｒという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１５１の化合物（化合物  １−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−３−（４−モルホリニル）−２−プロパノールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｓという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１５２の化合物（化合物  ４−（１−エチル−７−｛［２−（４−モルホリニル）エチル］オキシ｝−４−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｔという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１７の化合物（化合物  ４−［１−エチル−７−（ピペリジン−４−イルオキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル］−フラザン−３−イルアミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｕという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１２７の化合物（化合物  ４−｛１−エチル−４−フェニル−７−［（３−ピペリジニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ−［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｖという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例２１５の化合物（化合物  ４−［７−［（４−アミノブチル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｗという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例２２２の化合物（化合物  ４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−［（３−アミノプロピル）オキシ］−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｘという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例２２３の化合物（化合物  ４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（４−ピペリジニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｙという））、および国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実���例２６５の化合物（化合物  ４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（｛２−［４−（メチルオキシ）フェニル］エチル｝アミノ）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール（以下、化合物Ｚという））である。
化合物Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号に記載されるように調製することができる。
【０１０５】
細胞アッセイ：メチレンブルー成長阻害アッセイ
該アッセイに使用された腫瘍細胞系統は、ＢＴ４７４（ヒト乳癌）およびＬＮＣａＰ（前立腺癌のリンパ節転移）であった。ＨＦＦ（正常ヒト包皮繊維芽細胞）もまた、包含された。全細胞系統を、１０％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）を含有するＲＰＭＩ１６４０培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ  ２２４００−０７１）中３７℃にて、給湿５％ＣＯ２インキュベーター中で培養した。トリプシン／ＥＤＴＡを用いて細胞を採取し、血球計を用いてカウントし、９６ウェル組織培養プレート（Ｃｏｓｔａｒ  ３５−３０７５）中、１００μＬ／ウェルにて、下記の密度で播種した：ＢＴ４７４  １５，０００細胞／ウェル、ＬＮＣａＰ  ５，０００細胞／ウェルおよびＨＦＦ  ５，０００細胞／ウェル。ＤＭＳＯ中における化合物の１０ｍＭストックを９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ  Ｃｏｒｎｉｎｇ  ３３６３）において、９つの３倍希釈によってＤＭＳＯ中に連続希釈し、−８０℃で保存した。次の日、化合物希釈物を解凍し、各４μＬを６６２μＬのＲＰＭＩ１６４０＋１００μｇ／ｍＬゲンタマイシン中に移し、その結果、最終的に必要とされる試験濃度の２倍濃度になった。ＲＰＭＩ１６４０に希釈した化合物１００μＬを全細胞系統に加えた。対照を包含する全ウェル中におけるＤＭＳＯの最終濃度は、０．３％であった。細胞を３７℃にて、５％ＣＯ２中で３日間インキュベートした。培地を吸引によって除去した。細胞量を、８０μＬメチレンブルー（Ｓｉｇｍａ  Ｍ９１４０、５０：５０のエタノール：水中における０．５％）で細胞を染色し、室温で１時間インキュベートすることによって概算した。染料を吸引し、プレートを水に浸漬することによってリンスし、次いで、風乾した。１００μＬの可溶化溶液（ＰＢＳ中における１％  Ｎ−ラウロイルサルコシンナトリウム塩、Ｓｉｇｍａ  Ｌ５１２５）を加え、室温で少なくとも３０分間インキュベートすることによって、細胞から染色液を遊離させた。プレートを振盪し、６２０ｎｍでの光学密度をマイクロプレートリーダーにおいて測定した。細胞成長の阻害パーセントをビヒクルで処理した対照ウェルに基づいて算出した。細胞成長の５０％を阻害する化合物の濃度（ＩＣ５０）は、非線形回帰（Ｌｅｖｅｎｂｅｒｇ−Ｍａｒｑｕａｄｔ）および等式  ｙ＝Ｖｍａｘ＊（１−（ｘ＾ｎ／Ｋ＾ｎ＋ｘ＾ｎ）））＋Ｙ２を用いて求められた。［参考文献：Ｍａｇｅｒ，Ｍ．Ｅ．（１９７２）  Ｄａｔａ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ］
【０１０６】
【表１】
2009516653.tif 000005
【０１０７】
本発明の範囲内の医薬上活性な化合物は、必要とする哺乳動物、特にヒトにおいて、ＡＫＴ阻害剤として有用である。
したがって、本発明は、有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物もしくはプロドラッグを投与することを特徴とする、癌、関節炎、およびＡＫＴ阻害を必要とする他の状態を治療する方法を提供する。式（Ｉ）の化合物は、また、その明らかとなったＡｋｔ阻害剤として作用する能力のために、上記の病態を治療する方法に提供される。該薬物は、必要とする患者に、限定するものではないが、静脈内、筋内、経口、皮下、皮内および非経口を包含するいずれかの都合のよい投与経路によって投与すればよい。
【０１０８】
本発明の医薬上活性な化合物は、カプセル、錠剤、または注射製剤などの都合のよい投与形態中に組み込まれる。固形または液体医薬担体が用いられる。固形担体は、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム二水和物、白土、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸を包含する。液体担体は、シロップ、落花生油、オリーブ油、セーライン、および水を包含する。同様に、担体は、いずれかの徐放性材料、例えば、単独またはワックスと組み合わせたモノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルを包含する。固形担体の量は、幅広く変化するが、好ましくは、投与単位当たり約２５ｍｇ〜約１ｇである。液体担体を用いる場合、例えば、製剤はシロップ、エリキシル、エマルジョン、ソフトゼラチンカプセル、滅菌注射液、例えば、アンプル、または水性もしくは非水性液体懸濁の形態である。
【０１０９】
医薬製剤は、材料を適宜、錠剤形態の場合、混合、造粒、および圧縮（必要に応じ）し、または混合、充填および溶解して所望の経口または非経口製品を得ることを含む製薬分野の化学者の従来の技術にしたがって製造される。
上記の医薬投与単位中における本発明の医薬上活性な化合物の用量は、好ましくは、活性化合物量で０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．００１〜５０ｍｇ／ｋｇから選択される、効力のある非毒性の量である。Ａｋｔ阻害剤を必要とするヒト患者を治療する場合、選択された用量は、好ましくは、１日に１〜６回、経口または非経口投与される。非経口投与の好ましい形態は、局所、直腸、経皮、注射、および点滴による連続的投与を包含する。ヒトへの投与のための経口および／または非経口投与単位は、好ましくは、０．０５〜３５００ｍｇの活性化合物を含有する。
【０１１０】
投与されるべき最適な投与量は、当業者によって容易に決定され、使用される特定のＡｋｔ阻害剤、製剤の強度、投与様式、および病態の進行度によって変化する。患者の年齢、体重、食事、および投与時間を包含する治療されている特定の患者に依存する付加的な因子は、投与量の調整の必要をもたらす。
【０１１１】
ヒトを包含する哺乳動物におけるＡｋｔ阻害活性を誘導する本発明の方法は、かかる活性を必要とする対象に、本発明の医薬上活性な化合物の有効なＡｋｔ阻害量を投与することを特徴とする。
本発明は、また、Ａｋｔ阻害剤として有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１１２】
本発明は、また、治療において有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
本発明は、また、癌の治療において有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
本発明は、また、関節炎の治療において有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体を含むＡｋｔ阻害剤として有用な医薬組成物を提供する。
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体を含む癌の治療において有用な医薬組成物を提供する。
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体を含む関節炎の治療において有用な医薬組成物を提供する。
【０１１３】
本発明の化合物を本発明にしたがって投与する場合、許容できない毒物学的影響は予想されない。
さらに、本発明の医薬上活性な化合物は、さらなる活性成分、例えば、癌または関節炎を治療することが知られている他の化合物、またはＡｋｔ阻害剤と組み合わせて使用すると有用であることが知られている化合物と同時投与することができる。
【０１１４】
さらに工夫することなく、当業者は、上記の記載を用いて、本発明をその完全な範囲まで利用することができると確信する。下記の実施例は、単なる例示として解釈されるべきものであり、いかなる方法においても、本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【０１１５】
実験詳細
実施例１〜１０の化合物は、スキーム１または類似の方法によって容易に製造される。
【０１１６】
中間体ＶＩＩ
【化４】
2009516653.tif 000006
【０１１７】
２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−オールの調製
ａ）５−ブロモ−２−クロロ−Ｎ４−エチル−ピリジン−３，４−ジアミン（ＩＩ）
３−ブロモ−５−ニトロピリジン−４−イルアミン（Ｉ，７００ｇ，２．８６ｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（７Ｌ）中に溶解し、８５℃に加熱した。塩化スズ（ＩＩ）（１６２６ｇ，８．５８ｍｏｌ）を徐々に加えた。反応物を１時間熱還流し、次いで、一晩かけて周囲温度に冷却した。得られた黄色沈殿物を濾過によって収集し、氷水（５Ｌ）中に懸濁し、混合物を１２Ｎ  ＮａＯＨでｐＨ１２に調整した。得られた溶液をＣＨ２Ｃｌ２（２ｘ４Ｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、所望の化合物（ＩＩ）を得た（５５０ｇ、７７％収率）。これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ  ２５０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１８】
ｂ）Ｎ−［５−ブロモ−２−クロロ−４−（エチルアミノ）−３−ピリジニル］−２−シアノアセトアミド（ＩＩＩ）
５−ブロモ−２−クロロ−Ｎ４−エチル−ピリジン−３，４−ジアミン（ＩＩ，５５０ｇ，２．２１ｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５．５Ｌ）中溶液に、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（６３４．５ｇ，３．３１ｍｏｌ）、シアノ酢酸（２８２ｇ，３．３１ｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（８９７ｇ，８．８４ｍｏｌ）を加えた。１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩およびシアノ酢酸の添加時に、有意な発熱（〜２０℃）が観察された。周囲温度で２時間攪拌後、溶媒を減圧下で除去した。得られた残渣を温かいＥｔＯＡｃ（４０℃，２０Ｌ）および水（４０℃，８Ｌ）で抽出した。水相をＥｔＯＡｃ（１０Ｌ）を加えて洗浄し、合わせた有機抽出物を水（１０Ｌ）で洗浄した。有機抽出物を減圧下で濃縮してスラリーを得、濾過した。固体をＥｔＯＡｃで洗浄し、乾燥させて、所望の化合物（ＩＩＩ）を白色結晶性固体として得た（５３４ｇ、７６％収率）。さらに精製することなく、これを次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）  ｍ／ｚ  ３１７（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１９】
ｃ）（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−ヒドロキシイミノ−アセトニトリル（Ｖ）
Ｎ−［５−ブロモ−２−クロロ−４−（エチルアミノ）−３−ピリジニル］−２−シアノアセトアミドＩＩＩ（４５８ｇ，１．４５ｍｏｌ）の氷酢酸（４．６Ｌ）中溶液を１００℃に加熱した。３時間後、ＬＣ／ＭＳ分析が、（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）アセトニトリル（ＩＶ）への変換が完了したことを示した。周囲温度に冷却後、反応物に硝酸ナトリウム（２３０ｇ，３．３４ｍｏｌ）を徐々に加えた。〜１０℃の発熱と共に、激しい気体発生および泡立ちが観察された。周囲温度で１６時間攪拌後、固体を濾過によって収集し、一定重量になるまで乾燥させて、所望の生成物（Ｖ）を薄黄色固体として得た（５４５ｇ）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）  ｍ／ｚ  ３２８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２０】
ｄ）４−（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン（ＶＩ）
（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−ヒドロキシイミノ−アセトニトリル（Ｖ，５４５ｇ，１．４５ｍｏｌ）のジオキサン（５Ｌ）中混合物に、トリエチルアミン（１Ｌ）およびヒドロキシルアミン（１４３ｇ，水中５５％）を加えた。反応物を６時間熱還流した。反応物を周囲温度に冷却後、混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して茶色固体を得た。固体をメタノール（１Ｌ）中に懸濁し、懸濁液を６５℃で０．５時間攪拌した。固体を濾過によって収集し、乾燥させて、所望の化合物（ＶＩ）を得た（３２１ｇ、７０％収率）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３４３（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２１】
ｅ）２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−オール（ＶＩＩ）
４−（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン（ＶＩ，５０ｇ，０．１４ｍｏｌ）のＴＨＦ（１Ｌ）中懸濁液を乾燥−氷／アセトン浴中で、内温が−７５℃以下になるまで冷却した。塩化イソプロピルマグネシウム（２２５ｍＬ，エーテル中２Ｍ，０．４５ｍｏｌ）を、反応温度が−７０℃以下に維持される速度でゆっくりと加えた。さらに１０分後、ホウ酸トリメチル（５４ｍＬ，０．４８ｍｏｌ）を加え、反応を乾燥−氷／アセトン浴中で１時間維持した。該浴を取り外し、反応物を周囲温度に戻した。１８時間後、得られた黄色懸濁液を０℃に冷却した。３０％過酸化水素（２５０ｍＬ）および３Ｎ  ＮａＯＨ（１００ｍＬ）の溶液を反応温度が４０℃以下に維持されるような速度で加えた。次いで、該氷浴を取り外し、反応物を周囲温度で２時間、激しく攪拌した。大量の有機溶媒を減圧下で除去し、水相を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ３に酸性化した。得られた懸濁液を３０分間攪拌後、酢酸エチル（２００ｍＬ）を加えた。さらに１時間攪拌後、固体を濾過によって収集した。濾過ケークを水、酢酸エチル、トルエンおよび酢酸エチルで連続的に洗浄した。固体を一定重量になるまで乾燥させて、所望の化合物（ＶＩＩ）を薄黄色固体として得た（３５．９ｇ、８８％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２８１．３（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２２】
実施例１
【化５】
2009516653.tif 000007
【０１２３】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（３Ｓ）−３−ピペリジニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）（３Ｓ）−３−（ブロモメチル）−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
（３Ｓ）−３−（ヒドロキシメチル）−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（３０．０ｇ，１３９ｍｍｏｌ）および四臭化炭素（７２．０ｇ，２１７ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１５０ｍＬ）中溶液に、トリフェニルホスフィン（４２．４ｇ，１６２ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１５０ｍＬ）中溶液を滴下した。添加の間、氷浴を用いて内温を２０〜２５℃に維持した。混合物を周囲温度で１時間攪拌後、シクロヘキサン（５００ｍＬ）を加えた。溶媒の約半分を減圧下で除去した。残りの溶液を氷浴中で冷却し、得られた沈澱を濾過によって除去した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（０％〜２５％  酢酸エチル／ヘキサン，シリカゲル）に付して、所望の生成物を固体として得た（３５．１ｇ、９１％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２７８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２４】
ｂ）３−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
中間体ＶＩＩ（２５．０ｇ，８９．１ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（４１．０ｇ，１２６ｍｍｏｌ）および実施例１（ａ）の化合物（３５．０ｇ，１２６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２００ｍＬ）中混合物を４０℃で８時間攪拌し、次いで、３５℃で１８時間攪拌した。該混合物を迅速に攪拌している氷水（８００ｍｌ）中に注ぎ入れた。１０分後、酢酸エチル（３００ｍＬ）を加え、攪拌をさらに２０分続けた。固体を濾過によって収集し、酢酸エチル（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、所望の化合物を得た（３６ｇ、８５％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４７８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２５】
ｃ）３−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
２つの厚壁圧力容器の各々に、実施例１（ｂ）の化合物（１８ｇ，３７．７ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（８．０ｍＬ，８２．５ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．５ｇ，０．４３ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．５ｇ，７．４ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（１．１ｇ，７．４ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（８ｍＬ，５３．５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（７．５ｍＬ，５４．５ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（１５０ｍＬ）を入れた。両方の容器を１０分間、アルゴンでパージした後、密閉し、８０℃で４時間加熱した。１つの反応容器由来の混合物を迅速に攪拌している氷水（１０００ｍＬ）中に注ぎ入れ、得られた混合物に残りの反応容器の内容物を加えた。１０分後、酢酸エチル（３００ｍＬ）を加え、攪拌をさらに２０分間続けた。固体を濾過によって収集し、酢酸エチル（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、所望の化合物を得た（３５．５ｇ、９０％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５２６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２６】
ｄ）４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（３−ピペリジニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１（ｃ）の化合物（３５．０ｇ，６６．６ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（塩化メチレン中２０％溶液を３５０ｍＬ，８０８ｍｍｏｌ）を周囲温度で２．５時間攪拌した。該溶液をゆっくりと、迅速に攪拌している水、ＮａＯＨ（３６ｇ，９００ｍｍｏｌ）、酢酸エチル（２００ｍＬ）およびＴＨＦ（１０００ｍＬ）の混合物中に注ぎ入れた。有機層を分離し、水層を付加的な酢酸エチル／ＴＨＦ（１：５ｖ／ｖ，１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を真空下で除去し、得られた固体を熱エタノール（１２００ｍＬ）から再結晶化して、標題化合物を白色結晶性固体として得た（２６．３ｇ、９３％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４２６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２７】
実施例２
【化６】
2009516653.tif 000008
【０１２８】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｒ）−２−モルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製
ａ）２−（ヒドロキシメチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
４−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝−２−モルホリンカルボン酸（２．０ｇ，２１．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４５ｍＬ）中溶液を０℃に冷却した。添加漏斗を介して、ボラン（３９ｍＬ，３９．０ｍｍｏｌ，ＴＨＦ中１Ｍ）を２５分かけて加えた。室温に加温後、メタノール／酢酸（１８ｍＬ，９：１ｖ／ｖ）の滴下によって反応物をクエンチした。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチルと１Ｎ  ＨＣｌの間に分配した。水層を酢酸エチルで抽出し、合わせた抽出物を水、１Ｎ  ＮａＯＨ、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、所望の物質を得た（１．８３ｇ、９７％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ  １．４９（ｓ，９Ｈ）  ２．３０（ｂｒｄ，Ｊ＝１１．３７Ｈｚ，１Ｈ）  ２．６９−２．７９（ｍ，Ｊ＝９．５１，６．４１，３．２８，３．２８Ｈｚ，１Ｈ）  ２．８４（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．７７，１０．８６，３．１６Ｈｚ，２Ｈ）  ３．２７−３．３８（ｍ，１Ｈ）  ３．４７（ｂｒｓ，１Ｈ）  ３．６３−３．７５（ｍ，２Ｈ）  ４．１０−４．１９（ｍ，１Ｈ）  ４．２７（ｂｒｓ，１Ｈ）
【０１２９】
ｂ）２−｛［（フェニルカルボニル）オキシ］メチル｝−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（エナンチオマーＥ２）
ピリジン（１２ｍＬ）および触媒ＤＭＡＰを含有する２−（ヒドロキシメチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（４．４６７ｇ，２１ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５８ｍＬ）中攪拌溶液に、０℃にて、塩化ベンゾイル（３．１８ｇ，２３ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温に温め、１８時間攪拌した。反応混合物を１Ｎ  ＨＣｌと塩化メチレンの間に分配した。水層を塩化メチレンで洗浄し、合わせた有機抽出物を水、次いでブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を、ヘキサン／酢酸エチルで溶出するシリカ上のクロマトグラフィーに付して、ラセミ化合物を得た（５．８０ｇ、８８％）。これを、移動相として９０：１０−ヘプタン：エタノールを用いるＣｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＤ−Ｈカラム（２１ｘ２５０ｍｍ；１インジェクションあたり１００ｍｇ）上のキラルＨＰＬＣによって分割して、最初に溶出するエナンチオマーＥ１（２．８５ｇ；＞９９％ｅｅ）、および２番目に溶出するエナンチオマーＥ２（２．８ｇ；＞９９％ｅｅ）を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３２２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３０】
ｃ）２−（ヒドロキシメチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（エナンチオマーＥ２）
６Ｎ  ＮａＯＨ（５．６ｍＬ，３３．６ｍｍｏｌ）を含有する２−｛［（フェニルカルボニル）オキシ］メチル｝−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（エナンチオマーＥ２）（１．０８ｇ，３．３６ｍｍｏｌ）のメタノール（３０ｍＬ）中溶液を室温で２時間攪拌した。メタノールを減圧下で除去し、得られた混合物を酢酸エチルと水との間に分配した。有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、所望の化合物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｄ  ｐｐｍ  １．４１（ｓ，５０Ｈ）  ３．２５−３．３７（ｍ，２２Ｈ）  ３．３９−３．４６（ｍ，７Ｈ）  ３．７０（ｄ，Ｊ＝１２．８８Ｈｚ，６Ｈ）  ３．７６−３．８８（ｍ，１０Ｈ）  ４．７８（ｔ，Ｊ＝５．６８Ｈｚ，５Ｈ）
【０１３１】
ｄ）２−（ブロモメチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（エナンチオマーＥ２）
実施例２（ｃ）の化合物（０．６７ｇ，３．１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３５ｍＬ）中溶液に、−２０℃にて、ＣＢｒ４（２．０６ｇ，６．１７ｍｍｏｌ）を加え、次いで、ＰＰｈ３（１．７０ｇ，６．４８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２５ｍＬ）中溶液を滴下した。反応混合物を−１５℃で１８時間維持し、次いで、室温で１．５時間攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、生成物を得（０．５５ｇ、６３％）、これを次工程に用いた。
【０１３２】
ｅ）２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（エナンチオマーＥ２）
中間体ＶＩＩの化合物（０．５５ｇ，１．９５ｍｍｏｌ）、実施例２（ｄ）の化合物（０．５４６ｇ，１．９５ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（３５ｍＬ）中における炭酸セシウム（１．９２ｇ，５．８ｍｍｏｌ）を３５℃で２２時間攪拌した。生成混合物を酢酸エチルと水の間に分配した。有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して生成物を得（０．９０ｇ、９６％）、これを次工程に用いた。
【０１３３】
ｆ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｒ）−２−モルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に、実施例２（ｅ）の化合物（０．９０ｇ，１．８７ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．８４ｍＬ，５．６ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（０．５７ｍＬ，５．６ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０８４ｇ，０．５６ｍｍｏｌ）、亜鉛粉末（０．０３６ｇ，０．５６ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．４７ｇ，５．６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．２１ｇ，０．１９ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（６０ｍＬ）を入れた。次いで、該圧力容器を密閉し、８０℃で１時間加熱した。室温に冷却後、飽和ＮＨ４Ｃｌの添加によって反応をクエンチした。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）に付して、２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチルを得た。これをエーテル性ＨＣｌを含有するメタノール中に溶解し、室温で１８時間放置した。固体が形成し、これを収集して、生成物を二塩酸塩として得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４２８（Ｍ＋Ｈ）＋。これは、実施例（４）の化合物とのキラルＨＰＬＣの比較によってＲ配置と決定された。
【０１３４】
実施例３
【化７】
2009516653.tif 000009
【０１３５】
４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（２−チオモルホリニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製（エナンチオマーＥ１）
ａ）２−（ヒドロキシメチル）−４−チオモルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
４−｛２−［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］−２−オキソエチル｝−２−チオモルホリンカルボン酸（５０．０ｇ，０．２０２ｍｏｌ）のＴＨＦ（８４０ｍＬ）中溶液を０℃に冷却した。ボランの溶液（９１０ｍＬ，０．９０９ｍｏｌ，ＴＨＦ中１Ｍ）を添加漏斗によって加えた。反応を冷蔵庫中で一晩、０℃に維持した。反応を０℃にて、メタノール（４２０ｍｌ）中における１０％酢酸でクエンチした。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチルと１Ｎ  ＨＣｌとの間に分配した。水層を酢酸エチルで抽出し、合わせた抽出物を水、１Ｎ  ＮａＯＨ、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、所望の物質を得た（５１．１ｇ）。これをさらに精製することなく、直接用いた。
【０１３６】
ｂ）２−｛［（フェニルカルボニル）オキシ］メチル｝−４−チオモルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（エナンチオマーＥ１）
ピリジン（１２０ｍｌ）および触媒ＤＭＡＰを含有する２−（ヒドロキシメチル）−４−チオモルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（５１ｇ，０．２１ｍｏｌ）の塩化メチレン（５５０ｍｌ）中攪拌溶液に、０℃にて、塩化ベンゾイル（２７．６ｍｌ，０．２４ｍｏｌ）を滴下した。混合物を室温に温め、一晩攪拌した。反応物を１Ｎ  ＨＣｌと塩化メチレンとの間に分配した。水層を塩化メチレンで洗浄し、合わせた有機抽出物を水、次いでブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を、ヘキサン／酢酸エチルで溶出するシリカ上のクロマトグラフィーに付して、ラセミ化合物を得た（６０ｇ）。６０ｇのラセミ体  安息香酸（（４−｛２−［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］−２−オキソエチル｝−２−チオモルホリニル）メチルを、移動相として１００％メタノールを用いるＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ，２０ミクロン（１０１．６ｘ２５０ｍｍ，１インジェクションあたり．８ｇ）上のキラルＨＰＬＣによって分割して、最初に溶出するエナンチオマーＥ１（２４．０ｇ，５．７分，９９％ｅｅ）および二番目に溶出するエナンチオマーＥ２（１６．１ｇ，６．８分，９８％ｅｅ）を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３３８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３７】
ｃ）２−（ヒドロキシメチル）−４−チオモルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（エナンチオマー  Ｅ１）
６Ｎ  ＮａＯＨ（６５ｍｌ，０．３９ｍｏｌ）を含有する実施例３（ｂ）の化合物（１３ｇ，０．０３７ｍｏｌ）のメタノール（４１６ｍｌ）中溶液を室温で１時間攪拌した。メタノールを減圧下で除去し、得られた混合物を酢酸エチルと水との間に分配した。有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、所望の化合物を得た（７．９）。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）  ｄ  ｐｐｍ  １．５２（ｓ，９Ｈ）  ２．１２（ｓ，２Ｈ）  ２．３０（ｓ，１Ｈ）  ２．７５（ｓ，１Ｈ）  ２．８４（ｓ，１Ｈ）  ３．３４（ｓ，１Ｈ）  ３．４７（ｓ，１Ｈ）  ３．７０（ｓ，２Ｈ）  ４．１５（ｓ，１Ｈ）  ４．２７（ｓ，１Ｈ）
【０１３８】
ｄ）２−（ブロモメチル）−４−チオモルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（エナンチオマーＥ１）
実施例３（ｃ）の化合物（２．０ｇ，８．５７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（９６ｍＬ）中溶液に、−２０℃で、ＣＢｒ４（５．７４ｇ，１７．１ｍｍｏｌ）を加え、次いで、ＰＰｈ３（４．７２ｇ，１８．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（７６ｍＬ）中溶液を滴下した。混合物を室温に加温後、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって物質を得（２．５０ｇ）、これをさらに精製することなく直接用いた。
【０１３９】
ｅ）２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−４−チオモルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（エナンチオマーＥ１）
中間体ＶＩＩの化合物（２．３６ｇ，８．４０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１６０ｍＬ）中溶液に、無水炭酸セシウム（８．３２ｇ，２５．０ｍｍｏｌ）および２−（ブロモメチル）−４−チオモルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（エナンチオマーＥ１）（２．５０ｇ，８．４０ｍｍｏｌ）を加えた。周囲温度で４時間攪拌後、飽和ＮＨ４Ｃｌを加え、反応物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２，シリカゲル）に付して、７−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝テトラヒドロ−１，４−チアゼピン−４（５Ｈ）−カルボン酸１，１−ジメチルエチルが混入した所望の化合物を得た（２．３ｇ）。これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４９６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４０】
ｆ）４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（２−チオモルホリニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オール（エナンチオマーＥ１）
厚壁圧力容器に、２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−４−チオモルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（エナンチオマーＥ１）（０．１８ｇ，１．３５ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０３ｇ，０．４０ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０６ｇ，０．４０ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．６１ｍＬ，４．００ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．５６ｍＬ，４．００ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．４８ｍＬ，５．７０ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．０８ｇ，０．０８ｍｍｏｌ）およびジオキサン（３５ｍＬ）を入れた。混合物を窒素で１０分間パージした後、該容器を密閉し、８０℃で２．５時間加熱した。反応物を室温に冷却後、飽和ＮＨ４Ｃｌを加え、反応物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２，シリカゲル）に付した。該Ｂｏｃ−保護生成物を２５％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中に溶解した。３０分後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を１Ｎ  ＮａＯＨと酢酸エチルとの間に分配した。水層を付加的な酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２，シリカゲル）により、所望の化合物を得た（０．２２ｇ、３７％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４１】
ｇ）４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（２−チオモルホリニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩（エナンチオマーＥ１）
ジクロロメタン（５ｍＬ）中における２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−４−チオモルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル  エナンチオマーＥ１（０．２２ｇ，５．００ｍｍｏｌ）の化合物の溶液をジオキサン中における４Ｎ  ＨＣｌ（０．２５ｍＬ，１．００ｍｍｏｌ）で処理した。３０分後、沈澱を濾過によって単離して、標題化合物を薄黄色固体として得た（０．２１ｇ、８２％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４２】
実施例４
【化８】
2009516653.tif 000010
【０１４３】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−モルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）硫酸水素２−［（フェニルメチル）アミノ］エチル
クロロスルホン酸（１３．３ｍＬ，０．２ｍｏｌ）を氷浴中、四塩化炭素（１００ｍＬ）中における（２−［（フェニルメチル）アミノ］エタノール（３０．２ｇ，０．２ｍｏｌ）に非常にゆっくりと加えた。得られた濃厚な白色懸濁液を室温で一晩攪拌した。該懸濁液をクロロホルムおよびエタノールで希釈し、４５℃に加温し、次いで、氷浴中で冷却した。沈澱を濾過によって収集し、エタノールで洗浄し、４０℃で１６時間真空乾燥させて、所望の化合物を得た（３４ｇ，７４％）。ＭＳ（ＥＳ）＋ｍ／ｚ２３２［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１４４】
ｂ）（２Ｓ）−４−（フェニルメチル）−２−｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝モルホリン
実施例４（ａ）の化合物（２８．１ｇ，０．１１６ｍｏｌ）を氷浴中、メタノール／水（７５ｍＬ／７５ｍＬ）中における（２Ｓ）−２−｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝オキシラン（１９ｇ，０．１２２ｍｏｌ）に加えた。水酸化ナトリウム（６Ｍ，２９ｍＬ）を５分かけて加え、添加完了後すぐに氷浴を取り外し、室温で１５分間攪拌した。次いで、反応物を油浴中、４０℃で３時間攪拌した。反応物を氷浴中で急冷し、水酸化ナトリウム（２８ｇ，０．７ｍｏｌ）およびトルエン（１５０ｍＬ）を加えた。１０分後、反応物を６５℃に３時間加熱した。反応物を室温に冷却後、有機層を分離し、水層をさらにトルエンで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，勾配，ヘキサン中における１５％〜３０％酢酸エチル）によって精製して、所望の化合物を油として得た（２２．４ｇ，６５％）。ＭＳ（ＥＳ）＋ｍ／ｅ２９８［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１４５】
ｃ）（２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
実施例４（ｂ）の化合物（２２．４ｇ，０．０７５ｍｏｌ）のエタノール（４００ｍＬ）中溶液に、炭素上の１０％パラジウム（２．４ｇ）およびトリフルオロ酢酸（７．０ｍＬ，０．０９ｍｏｌ）を加えた。混合物を水素下、５０ｐｓｉで２４時間振盪した。反応物を濾過し、真空下で濃縮した。炭酸カリウム（２６ｇ）の水（２６０ｍＬ）中溶液を残渣に加え、次いで、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカルボネート（１７ｇ）の酢酸エチル（５００ｍＬ）中溶液を加えた。１時間後、水層を除去し、有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，勾配，ヘキサン中における１５％〜１００％酢酸エチル）によって精製して、所望の化合物を油として得た（８ｇ，５０％）。ＭＳ（ＥＳ）＋ｍ／ｅ２１８［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１４６】
ｄ）（２Ｓ）−２−（ブロモメチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
（２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（１８．５ｇ，０．０８０ｍｏｌ）および四臭化炭素（３４．５ｇ，０．１０４ｍｏｌ）を塩化メチレン（４００ｍＬ）中に溶解し、氷浴中で冷却した。トリフェニルホスフィン（２２ｇ，０．０８４ｍｏｌ）の塩化メチレン（１５０ｍｌ）中溶液を３０分かけて滴下した。０℃で１時間後、反応物を室温に温め、一晩攪拌した。真空下で反応容量を１／２に減らし、シリカゲルのパッド上に注ぎ、生成物をヘキサン中における１５％酢酸エチルで溶出した。濾液を真空下で濃縮して、所望の化合物を油として得た（１２ｇ，５５％）。ＭＳ（ＥＳ）＋ｍ／ｅ２８１［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１４７】
ｅ）（２Ｓ）−２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
実施例４（ｄ）の化合物（１０．９ｇ，０．０３９ｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１５０ｍＬ）中溶液に、中間体ＶＩＩ（７．８ｇ，０．０２８ｍｏｌ）および炭酸セシウム（１１ｇ，０．０３４ｍｏｌ）を加えた。４５℃で７２時間後、反応物を塩化アンモニウムおよび水（１．５Ｌ）中に攪拌しながら注ぎ入れた。得られた沈澱を濾過によって収集し、１Ｍ  ＮａＯＨおよび水で洗浄した。固体をテトラヒドロフランおよび酢酸エチル（熱）中に溶解し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で１／２に濃縮し、氷浴中で冷却した。得られた沈澱を収集し、酢酸エチルで洗浄し、４０℃で２時間真空乾燥して、所望の化合物を得た（１０．２ｇ，７６％）。ＭＳ（ＥＳ）＋ｍ／ｅ４８０［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１４８】
ｆ）（２Ｓ）−２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
厚壁圧力容器に、アルゴン下、実施例４（ｅ）の化合物（１０．１ｇ，０．０２１ｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（１０．２ｍＬ，１００ｍｍｏｌ）、亜鉛（０．２７ｇ，４．２ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（０．６３ｇ，４．２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（５．８ｍＬ，０．４２ｍｍｏｌ）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（５．８ｍＬ，４２ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１．０ｇ，０．８４ｍｍｏｌ）およびジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）を入れた。該反応容器を密閉し、８０℃で３時間加熱した。室温に冷却後、飽和塩化アンモニウム（１Ｌ）中に注ぎ入れることによって反応をクエンチし、３０分間攪拌した。固体を濾過によって収集した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，勾配，クロロホルム中における１％〜１０％メタノール）によって精製して、所望の化合物を固体として得た（１０．５ｇ，９５％）。ＭＳ（ＥＳ）＋ｍ／ｚ５２８［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１４９】
ｇ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−モルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール
（２Ｓ）−２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（１４．２ｇ，０．０２７ｍｏｌ）の塩化メチレン（１５０ｍＬ）中懸濁液に、トリフルオロ酢酸（４０ｍＬ）を加えた。１時間後、溶媒を真空下で除去した。残渣を酢酸エチル（２ｘ）から蒸発させて固体を得た。残渣を水中に懸濁し、氷浴中、混合物が塩基性（ｐＨ８）になるまで１Ｎ  ＮａＯＨで処理した。沈澱を濾過によって単離し、水、酢酸エチルで洗浄し、４０℃で４時間真空オーブン中で乾燥させた。得られた固体を酢酸エチル（２５０ｍｌ）で処理し、６５℃で攪拌し、次いで、室温に冷却し、次いで、氷浴中に置き、濾過し、固体を真空オーブン中、４０℃で乾燥させた。得られた固体を２０％テトラヒドロフラン／エタノール（１．２Ｌ）中に懸濁した。Ｄａｒｃｏ  Ｇ６０活性炭（３．９ｇ）を加え、混合物を９０分間熱還流し、温かいままでセライトによって濾過した。溶媒を除去し、エタノールで再処理し、真空下で除去した（２ｘ）。得られた固体を高真空下、４０℃で２４時間乾燥させて、標題化合物を得た（７．２４ｇ，６４％）。ＭＳ（ＥＳ）＋ｍ／ｅ４２８［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１５０】
実施例５
【化９】
2009516653.tif 000011
【０１５１】
４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（３−ピロリジニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オール，ビス−トリフルオロ酢酸塩の調製
ａ）３−（ブロモメチル）−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
四臭化炭素（１．３９ｇ，４．２ｍｍｏｌ）を含有する３−（ヒドロキシメチル）−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（０．５６ｇ，２．８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１０ｍＬ）中溶液に、トリフェニルホスフィン（０．７３ｇ，２．８ｍｍｏｌ，５ｍＬの塩化メチレン中）を滴下した。添加完了後、混合物を室温で１８時間攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を１０％酢酸エチル９０％ヘキサン中で攪拌した。混合物を濾過し、得られた溶液を、ヘキサン中における０〜２５％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出するシリカ上のクロマトグラフィーに付して、所望の化合物を得た（０．４１ｇ，５５％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２６４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５２】
ｂ）３−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
炭酸セシウム（２９０ｍｇ，０．９ｍｍｏｌ）を含有するＤＭＦ（２ｍＬ）中における中間体ＶＩＩ（１００ｍｇ，０．３５ｍｍｏｌ）および実施例５（ａ）の化合物（２９０ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ）からなる混合物を室温で２４時間攪拌した。混合物を迅速に攪拌している氷水（７ｍＬ）中に注ぎ入れ、攪拌を１０分間続けた。これに、シクロヘキサン（７ｍＬ）を加え、攪拌をさらに２０分間続けた。固体を濾過によって収集し、次いで、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、所望の化合物を得た（１１１ｍｇ，６９％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５３】
ｃ）３−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−１−ピロリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
厚壁圧力容器中に、実施例５（ｂ）の化合物（１００ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．２５ｍＬ，２．６ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（３０ｍｇ）、ジイソプロピルアミン（０．４ｍＬ）およびジオキサン（４ｍＬ）を入れた。該容器を密閉し、アルゴン雰囲気下、１００℃で６時間攪拌した。該混合物を減圧下で濃縮した後、酢酸エチル（４ｍＬ）でトリチュレートして、所望の化合物を得た（８２ｍｇ，７５％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５１２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５４】
ｄ）４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（３−ピロリジニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オール，ビス−トリフルオロ酢酸塩
実施例５（ｃ）の化合物（７５ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）をＴＦＡの塩化メチレン中２０％溶液（３ｍＬ）中、室温で２０分間攪拌した。トルエン（３ｍＬ）を加え、全ての揮発性物質を減圧下で除去した。残渣を分取逆相ＨＰＬＣによって精製して、標題化合物をジ−ＴＦＡ塩として得た（４０ｍｇ，４３％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５５】
実施例６
【化１０】
2009516653.tif 000012
【０１５６】
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（３Ｓ）−１−メチル−３−ピペリジニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール，二塩酸塩の調製
ａ）［（３Ｓ）−１−メチル−３−ピペリジニル］メタノール
水素化アルミニウムリチウム（ＴＨＦ中における１Ｍ溶液１０．５ｍｌ，１０．５ｍｍｏｌ）のエーテル（１５ｍＬ）中攪拌溶液に、２０℃で、（３Ｓ）−３−（ヒドロキシメチル）−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（１．５０ｇ，７．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）中溶液を滴下した。室温で１．５時間後、水（０．４ｍＬ）を加え、次いで、１５％水酸化ナトリウム水溶液（０．４ｍＬ）、次いで水（１．２ｍＬ）を加えた。これを２０分間攪拌した後、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して生成物を得（０．８７ｇ）、これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ１３０．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５７】
ｂ）４−［４−クロロ−１−エチル−７−（｛［（３Ｓ）−１−メチル−３−ピペリジニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
ポリマー結合型トリフェニルホスフィン（１．６ｍｍｏｌ／ｇポリマーで１．５６ｇ，２．５ｍｍｏｌ）を含有する実施例６（ａ）の化合物（０．２６０ｇ，２ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（３５ｍＬ）中攪拌混合物に、０℃にて、アゾジカルボン酸ジエチル（０．３３ｍＬ，２．２ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５ｍＬ）中溶液を滴下した。氷浴を取り外し、攪拌を２０分間続けた。該混合物に室温で、中間体ＶＩＩの化合物（２８０ｍｇ，１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）中溶液を加えた。該混合物を室温で１８時間攪拌した後、濾過し、濾液に酢酸エチル（６０ｍＬ）を加えた。得られた溶液を水（５０ｍＬ）で洗浄し、次いでブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、粗固体を得（０．４０ｇ）、これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９２．３（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５８】
ｃ）４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（３Ｓ）−１−メチル−３−ピペリジニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に、実施例１（ｂ）の化合物（０．１４０ｇ，０．３５ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．００４ｇ，０．０６ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．００８ｇ，０．０．０５ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．０８ｍＬ，０．５４ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０７５ｍＬ，０．５３ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．０７ｍＬ，０．７５ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（２ｍＬ）中における（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．０１５ｇ，０．０１３ｍｍｏｌ）を入れた。該混合物を迅速に攪拌している酢酸エチル（５ｍＬ）およびシクロヘキサン（５ｍＬ）を含有する水（１０ｍＬ）中に注ぎ入れた。得られた固体を収集し、次いで、エタノールから結晶化した。該結晶固体を熱エタノール中に溶解し、次いで、ＨＣｌ（ジオキサン中における４Ｍ溶液で０．１７５ｍＬ，０．７０ｍｍｏｌ）を加えた。沈澱を収集し、減圧下で乾燥させて標題化合物を得た（０．１４８ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４０．３（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５９】
実施例７
【化１１】
2009516653.tif 000013
【０１６０】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（４−メチル−２−チオモルホリニル）メチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製（エナンチオマーＥ１）
４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（２−チオモルホリニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オール（エナンチオマーＥ１）（０．８８ｇ，１．９８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３８ｍＬ）中溶液に、０℃にて、ＮａＣＮＢＨ３（０．１４ｇ，２．２０ｍｍｏｌ）および酢酸（０．５７ｍＬ）を加えた。次いで、これにホルムアルデヒド（０．２５ｍＬ）を滴下した。反応物を室温に温めた。１８時間後、反応物を５０％水性ＮａＨＣＯ３中に注ぎ入れた。該溶液を０℃に冷却し、得られた沈澱を収集して、所望の化合物を得た（０．９０ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４５８．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６１】
実施例８
【化１２】
2009516653.tif 000014
【０１６２】
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（２Ｓ）−４−メチル−２−モルホリニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
メタノール（２ｍＬ）中に懸濁した４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−モルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．１３ｇ，０．３０ｍｍｏｌ）に、ホルムアルデヒド（水中３７％，０．０４５ｍＬ，０．６ｍｍｏｌ）を加えた。５分後、酢酸（０．０５１ｍＬ，０．９ｍｍｏｌ）を加え、次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．１６ｇ，０．７５ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、溶媒を真空下で除去し、残渣を１Ｎ  ＮａＯＨ中に懸濁し、酢酸エチル／テトラヒドロフランで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾液を真空下で濃縮して、所望の化合物を固体として得た（０．１０ｇ，７７％）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４２［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１６３】
実施例９
【化１３】
2009516653.tif 000015
【０１６４】
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（２Ｒ）−６−メチル−２−モルホリニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール，二塩酸塩の調製
ａ）（２Ｓ）−１−（｛［２，４−ビス（メチルオキシ）フェニル］メチル｝アミノ）−３−［（フェニルメチル）オキシ］−２−プロパノール
２，４−ジメトキシベンジルアミン（１．００ｇ，５．９９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中攪拌溶液に、室温にて、ベンジル（Ｓ）−（＋）−グリシジルエーテル（０．８８ｇ，５．４０ｍｍｏｌ）を加えた。１２時間後、反応物を真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（７５ｍＬ）中に溶解し、１Ｎ  ＨＣｌ（２５ｍＬ）およびブライン（２５ｍＬ）で連続的に洗浄した。該溶液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、粗油状物を得（１．３５ｇ）、これをさらに精製することなく次工程に用いた。（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３３２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６５】
ｂ）Ｎ−｛［２，４−ビス（メチルオキシ）フェニル］メチル｝−２−ブロモ−Ｎ−｛（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（フェニルメチル）オキシ］プロピル｝プロパンアミド
実施例９（ａ）の化合物（０．５０ｇ，１．５０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．２５ｍＬ，３．０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中攪拌溶液に、０℃にて、塩化２−ブロモプロピオニル（０．２８０ｇ，１．６５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１２時間後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチル（７５ｍＬ）中に溶解し、１Ｎ  ＨＣｌ（２５ｍＬ）およびブライン（２５ｍＬ）で連続的に洗浄した。該溶液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、粗油状物を得（０．５１ｇ）、これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６７．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６６】
ｃ）（６Ｒ）−４−｛［２，４−ビス（メチルオキシ）フェニル］メチル｝−２−メチル−６−｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝−３−モルホリノン
実施例９（ｂ）の化合物（０．４０ｇ，０．８６ｍｍｏｌ）および水素化ナトリウム（０．０６７ｇ，１．３７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）中混合物を窒素下、室温で１６時間攪拌した。反応物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３ｘ１５ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。該溶液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、所望の生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ−Ｐａｃｋ  ＯＤＳ−Ａカラム，３０ｍｍ内径ｘ７５ｍｍ，２０ｍＬ／分，勾配，Ａ：水−０．１％トリフルオロ酢酸，Ｂ：アセトニトリル−０．１％トリフルオロ酢酸，１２分間で１０−９０％アセトニトリル，ＵＶ検出２５４ｎｍ）により、標題化合物を得た（０．２４５ｇ）（７４％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３８６．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６７】
ｄ）（６Ｒ）−４−｛［２，４−ビス（メチルオキシ）フェニル］メチル｝−２−メチル−６−｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝モルホリン
実施例９（ｃ）の化合物（０．２００ｇ，０．５１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ中溶液に窒素下、０℃でＬＡＨ（１Ｍ，０．６０ｍＬ）を加えた。反応物を周囲温度に温め、１２時間攪拌した。反応物に水（０．０２ｍＬ）を加え、０℃でゆっくりと１Ｎ  ＮａＯＨ（０．０２ｍＬ）を加え、混合物を室温で１時間攪拌した。さらに水（０．０７ｍＬ）を加え、３０分間攪拌した。混合物を濾過した。固体を酢酸エチルで数回洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、粗油状物を得（０．１２ｇ）、これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３７２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６８】
ｅ）（６Ｒ）−２−メチル−６−｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝モルホリン
実施例９（ｄ）の化合物（０．１２ｇ，０．３２ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中溶液を周囲温度でクロロギ酸１−クロロエチル（０．１０ｍＬ，１．４ｍｍｏｌ）で処理した。反応物を２時間還流し、溶媒を減圧下で除去して、粗残渣を得た。残渣をＭｅＯＨ（５ｍＬ）中に溶解し、還流下で１時間攪拌した。溶媒を減圧下で除去して、粗残渣を粗油状物として得（０．５１ｇ）、これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２２２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６９】
ｆ）（６Ｒ）−２−メチル−６−｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
実施例９（ｅ）の化合物（０．２０ｇ，０．９０ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）中溶液を周囲温度で、ジカルボン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（０．２２ｇ，１．０ｍｍｏｌ）で処理した。有機物を除去して粗残渣を得た。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ−Ｐａｃｋ  ＯＤＳ−Ａカラム，３０ｍｍ内径ｘ７５ｍｍ，２０ｍＬ／分，勾配，Ａ：水−０．１％トリフルオロ酢酸，Ｂ：アセトニトリル−０．１％トリフルオロ酢酸，１２分間で１０−９０％アセトニトリル，ＵＶ検出２５４ｎｍ）により、標題化合物を得た（０．２１４ｇ，７９％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３２２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７０】
ｇ）（２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
実施例９（ｆ）の化合物（０．２０ｇ，０．６２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（５ｍＬ）中溶液を水酸化パラジウム（０．１０ｇ）で処理した。該混合物をＰａｒｒ装置中に置き、５５ｐｓｉのＨ２雰囲気下で１６時間振盪した。該混合物をセライトのパッドでろ過し、ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、粗油状物を得（０．１５ｇ）、これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２３２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７１】
ｈ）（６Ｒ）−２−メチル−６−（｛［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ｝メチル）−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
実施例９（ｇ）の化合物（０．１５ｇ，０．６５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中溶液にトリエチルアミン（０．１０ｍＬ）、ジメチルアミノピリジン（０．０２ｇ）および塩化トシル（０．１５ｇ，０．７９ｍｍｏｌ）を加えた。１２時間後、反応物を真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（７５ｍＬ）中に溶解し、１Ｎ  ＨＣｌ（２５ｍＬ）およびブライン（２５ｍＬ）で連続的に洗浄した。該溶液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、粗残渣を得た。該粗残渣をフラッシュクロマトグラフィー（２５−１００％  ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ，シリカゲル）に付して、所望の化合物を薄黄色固体として得た（０．１４ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２８６．２（Ｍ＋Ｈ−ＢＯＣ）＋。親イオンは観察されなかった。
【０１７２】
ｉ）（２Ｓ）−２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−６−メチル−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
実施例９（ｈ）の化合物（０．１４ｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、中間体ＶＩＩの化合物（０．１１ｇ，０．４０ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．２０ｇ，０．５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９ｍＬ）中混合物を窒素下、５０℃で１６時間攪拌した。反応物を周囲温度に冷却後、混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３ｘ１５ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。該溶液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して所望の生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ−Ｐａｃｋ  ＯＤＳ−Ａカラム，３０ｍｍ内径ｘ７５ｍｍ，２０ｍＬ／分，勾配，Ａ：水−０．１％トリフルオロ酢酸，Ｂ：アセトニトリル−０．１％トリフルオロ酢酸，１２分間で１０−９０％アセトニトリル，ＵＶ検出２５４ｎｍ）により、標題化合物を白色固体として得た（０．１２４ｇ、７０％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４９４．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７３】
ｊ）（２Ｓ）−２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−６−メチル−４−モルホリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル
厚壁圧力容器に、実施例９（ｉ）の化合物（０．１２４ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０２ｇ，０．３０ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０４ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．２０ｍＬ，１．３２ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．１５ｍＬ，１．０７ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．２０ｍＬ，２．０７ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（５ｍＬ）中における（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．０４ｇ，０．０３ｍｍｏｌ）を入れた。１０分間窒素でパージした後、反応容器を密閉し、８０℃で３時間加熱した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、薄黄色残渣を得た。該粗残渣をフラッシュクロマトグラフィー（０−１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３，シリカゲル）に付して、さらに所望の化合物を薄黄色固体として得た（０．１０ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７４】
ｋ）４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（２Ｓ）−６−メチル−２−モルホリニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
実施例９（ｊ）の化合物（０．１０ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）中溶液に、１，４−ジオキサン中における４Ｎ  ＨＣｌ（３．５ｍＬ，１６．０ｍｍｏｌ）を加えた。周囲温度で３時間後、溶媒を減圧下で除去した。残渣をジクロロメタンでトリチュレートし、固体を濾過によって収集して、標題化合物を薄黄色固体として得た（０．０６３ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４１（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７５】
実施例１０
【化１４】
2009516653.tif 000016
【０１７６】
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−（｛［（２Ｓ）−４−エチル−２−モルホリニル］メチル｝オキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
実施例４の化合物（０．１３ｇ，０．３０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４ｍＬ）中溶液に、０℃にて、アセトアルデヒド（０．０３４ｍＬ，０．６１ｍｍｏｌ）および酢酸（０．０５２ｍＬ，０．９０ｍｍｏｌ）を加えた。これにＮａＣＮＢＨ３（０．０４８ｇ，０．７６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温に温めた。１８時間後、反応物を５０％水性ＮａＨＣＯ３中に注ぎ入れた。該溶液を０℃に冷却し、得られた沈澱を収集して、所望の化合物を得た（０．１０ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４５６．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７７】
実施例１１  カプセル組成物
本発明の化合物を投与するための経口投与形態は、標準的な２片のハードゼラチンカプセルに下表Ｉに示される分量の成分を充填することによって製造される。
【０１７８】
【表２】
2009516653.tif 000017
【０１７９】
実施例１２  注射可能な非経口組成物
本発明の化合物を投与するための注射可能形態は、１．５重量％の４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［（２Ｓ）−２−チオモルホリニルメチル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オールを水中における１０容量％のプロピレングリコール中で攪拌することによって製造される。
【０１８０】
実施例１３  錠剤組成物
下表ＩＩに示されるシュークロース、硫酸カルシウム二水和物およびＡｋｔ阻害剤を示される分量で、１０％ゼラチン溶液と共に混合および造粒する。該湿潤顆粒をスクリーンし、乾燥させ、デンプン、タルクおよびステアリン酸と混合し、スクリーンし、打錠する。
【０１８１】
【表３】
2009516653.tif 000018
【０１８２】
本発明の好ましい具体例を上記に示したが、本発明は本明細書中に開示される正確な指示に限定されないものであり、また、特許請求の範囲の範囲内に伴う全ての変更に対する権利を保有するものと解釈されるべきである。
【配列表】
2009516653000001.xml
【手続補正書】
【提出日】平成20年7月8日(2008.7.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
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