(57)【要約】一つの態様によれば、本発明によってインスリン抵抗性障害の患者のスクリーニング方法、およびさらに場合によりその治療方法も提供され、その方法はインスリン抵抗性障害の患者について、インスリン感作物質に対する応答の素因を示す一個または複数の遺伝子変異をスクリーニングして行なわれ、さらに治療の場合にはそのスクリーニング結果に基づき、患者にインスリン感作物質が投与されるか、または投与されない。被験者スクリーニング用のインスリン感作物質、ならびに投与または非投与対象のインスリン感作物質は、同一または異なり得る。別の態様によれば、本発明では、インスリン感作物質投与時に反応性を示す複数の被験者亜集団と反応性を示さない複数の被験者亜集団との間についての少なくとも部分的な差異を示す一個または複数の遺伝子変異、たとえば一個または複数の一塩基多型の同定を含めた方法が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
血糖調節の障害に罹患する個体をスクリーニングする方法であって、インスリン感作物質に対する応答の素因を示す一種または複数の遺伝子変異について該個体をスクリーニングする工程を含む、方法。
【請求項２】
前記血糖調節の障害が、インスリン抵抗性障害である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記個体のスクリーニングの結果に基づき、該個体にインスリン感作物質を投与するか、または投与しない工程もさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記個体がスクリーニングされた前記インスリン感作物質が、該個体に投与されるか、または投与されないインスリン感作物質と同じである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記個体がスクリーニングされた前記インスリン感作物質が、該個体に投与されるか、または投与されないインスリン感作物質とは異なる、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記個体にインスリン感作物質が投与される場合に、該個体のスクリーニングの結果に基づき、該インスリン感作物質の投与を調節する工程をさらに含む、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
前記調節工程が、前記インスリン感作物質に加えてさらに別の治療薬を投与することも含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記調節工程は、前記スクリーニングが未実施の場合に得られたものと比較しつつ、前記インスリン感作物質の用量、該インスリン感作物質の投与経路、該インスリン感作物質の投与頻度、該インスリン感作物質の担体のタイプ、該インスリン感作物質の治療期間、該インスリン感作物質の鏡像異性体の型、前期インスリン感作物質の結晶型、またはそれらの組み合わせの調整を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記個体にインスリン感作物質が投与されない場合に、前記方法が、該個体の前記スクリーニング結果に基づき、前記血糖調節の障害の処置を施す工程もさらに含む、請求項３に記載の方法。
【請求項１０】
前記インスリン感作物質を投与すること、または投与しないことが、該インスリン感作物質の治験の一部として実施される、請求項３に記載の方法。
【請求項１１】
前記血糖調節の障害が、糖尿病、肥満、およびＸ症候群から成る群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記血糖調節の障害が糖尿病である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記糖尿病がＩＩ型糖尿病である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記一種または複数の遺伝子変異が、一塩基多型（ＳＮＰ）または複数のＳＮＰである、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記一種または複数の遺伝子変異が、表９に示されるものから選択されるＳＮＰである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記一種または複数の遺伝子変異が、ＲｅｆＳＮＰ  ＩＤ番号２２３２７００，９４１５９１，９４１５９０，３８２７８９６，８０１５９２９、および９４１６０１に対応するものから選択されるＳＮＰを含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記個体がスクリーニングされる前記インスリン感作物質に対する応答が、治療応答である、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記個体がスクリーニングされる前記インスリン感作物質に対する応答が、副作用である、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記副作用が、末梢性浮腫、依存性浮腫、全身性浮腫、陥没浮腫、体重増加、貧血、低血糖、頭痛、排尿頻度の増加、下痢、食欲亢進、一過性虚血性発作、肝酵素の上昇、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記個体がスクリーニングされ、該個体に投与されるか、または投与されない前記インスリン感作物質が、チアゾリジンジオンＰＰＡＲモジュレーターである、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記個体がスクリーニングされる前記チアゾリジンジオンＰＰＡＲモジュレーターが、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、ネトグリタゾン、および５−ＢＴＺＤからなる群から選択され；該個体に投与されるか、または投与されない前記インスリン感作物質が、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、ネトグリタゾン、および５−ＢＴＺＤから成る群から選択される請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記個体がスクリーニングされ、該個体に投与されるか、または投与されない前記インスリン感作物質が、ネトグリタゾンである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記ネトグリタゾンが、Ｅ結晶型で存在する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記個体がスクリーニングされる前記インスリン感作物質が、チアゾリジンジオンＰＰＡＲモジュレーターであり、該個体に投与されるか、または投与されない前記インスリン感作物質が、ネトグリタゾンである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】
前記個体がスクリーニングされる前記インスリン感作物質が、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、ネトグリタゾン、および５−ＢＴＺＤから成る群から選択されるチアゾリジンジオンＰＰＡＲモジュレーターであり、該個体に投与されるか、または投与されない前記インスリン感作物質が、ネトグリタゾンである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２６】
前記血糖調節の障害がＩＩ型糖尿病であり、前記遺伝子変異が一種のＳＮＰまたは複数のＳＮＰであり、前記インスリン感作物質がネトグリタゾンであり、前記応答が治療応答である、請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
前記血糖調節の障害がＩＩ型糖尿病であり、前記遺伝子変異が一種のＳＮＰまたは複数のＳＮＰであり、前記インスリン感作物質がネトグリタゾンであり、前記応答が副作用である、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
前記スクリーニングが、前記個体の少なくとも１個の遺伝子変異の遺伝子型解析を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２９】
前記スクリーニングが、前記個体の少なくとも１０個の遺伝子変異の遺伝子型解析を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
前記スクリーニングが、前記個体の少なくとも１００個の遺伝子変異の遺伝子型解析を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３１】
前記スクリーニングが、前記個体の少なくとも１０００個の遺伝子変異の遺伝子型解析を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３２】
前記スクリーニングが、前記個体の少なくとも１００００個の遺伝子変異の遺伝子型解析を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３３】
前記スクリーニングが、少なくとも約１０００００個の遺伝子変異の遺伝子型解析を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３４】
前記スクリーニングが、前記素因を示す前記個体の一種または複数の表現型の同定もさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３５】
前記一種または複数の表現型が、性別、ＩＩ型糖尿病罹患年数、およびチオゾリジンジオン療法の用量から成る群から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記スクリーニング結果を伝達可能なデータに変換する工程もさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３７】
前記データが作製された場所から、異なる場所に前記データを伝達することもさらに含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
血糖調節の障害の診断、予後、予防、処置、または研究に使用され、インスリン感作物質応答性の核酸の上流側１０ｋｂから下流側１０ｋｂまでのゲノム配列に特異的にハイブリダイズする、単離核酸。
【請求項３９】
前記インスリン感作物質が、ＰＰＡＲモジュレーターである、請求項３８に記載の核酸。
【請求項４０】
前記インスリン感作物質が、チアゾリジンジオンＰＰＡＲモジュレーターである、請求項３８に記載の核酸。
【請求項４１】
前記チアゾリジンジオンＰＰＡＲモジュレーターが、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、ネトグリタゾン、および５−ＢＴＺＤから成る群から選択される、請求項４０に記載の核酸。
【請求項４２】
前記インスリン感作物質がネトグリタゾンである、請求項３８に記載の核酸。
【請求項４３】
前記血糖調節の障害がＩＩ型糖尿病である、請求項３８に記載の核酸。
【請求項４４】
個体におけるインスリン感作物質に対する応答の素因の有無を予測する方法であって、該個体から得られた試料を請求項３８に記載の核酸と接触させる工程；およびハイブリダイゼーション複合体の有無を検出する工程を含み、ハイブリダイゼーション複合体の有無によって、該個体における該インスリン感作物質に対する応答の素因の有無が予測される、方法。
【請求項４５】
前記ハイブリダイゼーション複合体の有無に基づき、有効量のインスリン感作物質を患者へ投与するか、または投与しない工程もさらに含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記個体がスクリーニングされる前記インスリン感作物質が、該個体に投与されるか、または投与されない前記インスリン感作物質と同じである、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記個体がスクリーニングされる前記インスリン感作物質が、該個体に投与されるか、または投与されない前記インスリン感作物質とは異なる、請求項４５に記載の方法。
【請求項４８】
インスリン感作物質に対する応答のスクリーニング、診断、予後、予防、処置、または研究に使用するための、請求項３８に記載の核酸でコードされる単離ポリペプチド。
【請求項４９】
インスリン感作物質に対する応答の診断、予後、予防、処置、または研究に使用される、請求項４８に記載のポリペプチドに選択的に結合する抗体、またはその抗原結合断片。
【請求項５０】
請求項３８に記載の核酸、および請求項４９に記載の抗体から成る群から選択される分子を含む、インスリン感作物質に対する応答の診断、予後、予防、処置、または研究に使用されるキット。
【請求項５１】
インスリン感作物質に対する応答を予測する方法であって、患者からの試験試料における、請求項４４に記載のポリペプチドの発現または活性のレベルを、対照試料における該ポリペプチドの発現または活性のレベルと比較する工程を含み、該試験試料における発現または活性のレベルと該対照試料における発現または活性のレベルとの間の差によって、該インスリン感作物質に対する応答が予測される、方法。
【請求項５２】
（ａ）インスリン感作物質に対する応答への感受性に関連した研究において、ヒトゲノムの一種または複数の遺伝子変異を用いる工程；および
（ｂ）該インスリン感作物質に関係した製品を共同または単独で売買するために、工程（ａ）から得られた関連性を用いる工程
を含む、商業的方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
この出願は、米国仮出願第６０／７２２，３５７号および同第６０／７２２，６３６号（共に２００５年９月３０日に出願された）の本出願であり、それらの利益を主張する。これらの両方は、全ての目的のために、それらの全体において参考として本明細書に援用される。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
遺伝子解析、たとえば遺伝子型分類における近年の進歩によって、様々な疾患の自然な進行、ならびに薬物療法を含めた治療に対する反応性の両方における変動性が個体間の遺伝子変異に結びついていることが示されている。たとえばインスリン抵抗性障害を含めた血糖調節性の病気は、世界中で重要かつ増大しつつある健康上の関心事である。それらの病気にはＩ型およびＩＩ型の糖尿病、Ｘ症候群、ならびに肥満が含まれ、種々の生活習慣の改善、および薬物によって治療可能である。薬物については、最も有効な範疇の一つがペルオキシソーム増殖活性化受容体（ＰＰＡＲ）モジュレーター、特にＰＰＡＲのγアゴニストまたは部分的なアゴニストである。しかしながら、血糖調節性の病気の治療用薬物の最適な使用に対する障害としては、薬物の使用が継続できないくらいの重篤な症例も存在する副作用の発生が挙げられる。たとえば米国で１９９７年４月からＩＩ型糖尿病の治療用に販売されたトログリタゾンについては、特異体質による肝障害の発生によって２０００年の３月に自主的な回収がなされた。それら症例の発生頻度は１０万人あたり１人程度にすぎなかったが、その重篤度は薬物の回収が行われるほど高かった。浮腫または体重増加のようなより一般的な副作用、ならびに脂質組成に対する副作用については、特異体質による肝障害ほどは重篤なものではないが、それにもかかわらずインスリン抵抗性モジュレーターの治療上のポテンシャルを限定する可能性がある。
【０００３】
一般的には特定の患者亜集団において、投与薬物に対して所定の副作用を伴う反応が見られる。ほかの薬物に関する副作用特性の経験から、発生した副作用の表現型での傾向については、遺伝子型の反映であることが示されている。病因および治療反応性に関しての遺伝子型の表現型への関連づけについては、最近目覚しい進歩が見られた。たとえば２００５年１月２４日出願の米国特許出願第１１／０４３６８９号“Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅ  ａｎｄ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ”；２００１年３月３０日提出の米国特許仮出願第６０／２８０５３０号“Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｈｕｍａｎ  ＳＮＰ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｖｅ  ＳＮＰｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”；２００１年８月１７日提出の米国特許仮出願第６０／３１３２６４号“Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  ＳＮＰ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｖｅ  ＳＮＰｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”；２００１年１０月５日提出の米国特許仮出願第６０／３２７００６号“Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  ＳＮＰ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｖｅ  ＳＮＰｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”；２００２年１１月２６日仮出願の米国特許仮出願第６０／３３２５５０号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”；２００５年５月２４日登録の特許文献１“Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”；および２００２年１０月３１日出願の米国特許出願第１０／２８４４４４号“Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ”、２００５年１月３１日提出の米国特許仮出願第６０／６４８９５７号“Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｉｎｇ，Ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ，ａｎｄ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ”、２００４年９月３０日出願の米国特許出願第１０  ６２２４号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｇｅｎｅｔｉｃ  ａｎａｌｙｓｉｓ”、２００５年２月１６日提出の米国特許仮出願第６０／６５３６７２号“Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”、２００４年１月３０日出願の米国特許出願第１０／７６８７８８号“Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｎｇ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ”、２００３年１月２７日出願の米国特許出願第１０／５１９７３号“Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ”、２００４年１１月２０日出願の米国特許出願第１０／９７０７６１号“Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”、２００４年２月２４日出願の米国特許出願第１０／７８６４７５号“Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｇ”、および２００５年１月１１日提出の米国特許仮出願第６０／６４３���０６号、２００４年１２月９日提出の米国特許仮出願第６０／６３５２８１号“Ｍａｒｋｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  Ｉｎｓｕｌｉｎ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ”が参照され、上記すべての開示情報は本明細書において特別に参照されたものとする。本発明は、上記特許内容をもとに、さらに進捗させたものである。
【特許文献１】米国特許第６８９７０２５号明細書
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
（発明の要旨）
本出願は血糖調節性の病気、たとえばインスリン抵抗性障害の患者のスクリーニング方法を開示し、その方法には被験者のインスリン感作物質（ｉｎｓｕｌｉｎ  ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒ）に対する応答の素因を示す遺伝子変異についてのスクリーニング工程が含まれる。いくつかの実施形態では、被験者はインスリン感作物質に対する応答の素因を示す表現型でもスクリーニングされる。いくつかの実施形態では、さらに本発明にはスクリーニング結果を伝達可能なデータに変換する工程も含まれ、いくつかの場合ではデータ作製が行われる場所とは異なる場所にデータを伝達する工程も含まれる。さらに本方法には、被験者のスクリーニング結果に基づき、その被験者にインスリン感作物質の投与または非投与を行う工程も含めることができ、いくつかの場合では、インスリン感作物質の臨床投与試験の一部としてインスリン感作物質の投与または非投与の工程が行われる。被験者スクリーニング用のインスリン感作物質は、被験者への投与または非投与用のインスリン感作物質と同一または異なっても良い。本方法にインスリン感作物質の投与工程が含まれる場合は、被験者のスクリーニング結果に基づき、インスリン感作物質の投与を調節する工程も含まれ得る。投与の調節にはたとえば、インスリン感作物質のほかにさらに別の治療薬剤の投与、あるいはインスリン感作物質の投与量、投与経路、投与頻度、担体のタイプ、治療期間、鏡像異性体、結晶型、またはそれらを組み合わせた調整も含めることができ、それらはスクリーニングが行われなかった場合と比較される。本方法でインスリン感作物質の非投与の場合は、被験者のスクリーニング結果に基づき、血糖調節性の病気の治療薬の投与工程もさらに含み得る。ある実施形態では、血糖調節性の病気は糖尿病（たとえばＩＩ型糖尿病）、肥満、またはＸ症候群である。遺伝的変異としては一塩基多型（ＳＮＰ）とすることができる。いくつかの実施形態では、インスリン感作物質に対する応答は治療応答であり、いくつかの実施形態ではインスリン感作物質に対する応答は、末梢浮腫、依存性浮腫、全身性浮腫、陥没浮腫、体重増加、貧血、低血糖、頭痛、排尿回数の増加、下痢、食欲増大、一過性虚血発作、肝酵素の上昇、およびそれらの組み合わせのような副作用である。
【０００５】
いくつかの実施形態では、被験者スクリーニング用のインスリン感作物質、および／または被験者への投与または非投与用のインスリン感作物質は、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、ネトグリタゾンおよび５−ＢＴＺＤのようなチオゾリジンジオン系のＰＰＡＲモジュレーターであり、被験者への投与または非投与用のインスリン感作物質はネトグリタゾンである。いくつかの実施形態では、被験者スクリーニング用のインスリン感作物質、および被験者への投与または非投与用のインスリン感作物質はネトグリタゾンである。本方法のインスリン感作物質がネトグリタゾンの場合、ある実施形態ではネトグリタゾンはＥ結晶型のものである。本発明の方法のいくつかの実施形態では、血糖調節の障害がＩＩ型糖尿病であり、遺伝子変異がＳＮＰであり、スクリーニング用、ならびに投与または非投与用のインスリン感作物質のいずれもがネトグリタゾンであり、反応が医療上の反応である。いくつかの実施形態では、血糖調節の障害がＩＩ型糖尿病であり、遺伝子変異がＳＮＰであり、スクリーニング用および投与または非投与用のインスリン感作物質がネトグリタゾンであり、反応が副作用である。本方法のいくつかの実施形態では、スクリーニングには少なくとも約１，１０，１００，１０００，１００００，１０００００，５０００００，１００００００，２００００００種、あるいは被験者の遺伝子変異の実質的にすべての遺伝子型解析工程が含まれる。
【０００６】
本発明は、インスリン感作物質に反応性のある核酸の上流部および下流部にまで延長したゲノム配列域に特異的にハイブリダイズする単離核酸も提供し、その単離核酸は血糖調節の障害の診断、予後判定、予防、治療または研究に用いられる。いくつかの実施形態では、ゲノム配列域はインスリン感作物質反応性核酸の上流部１０ｋｂから下流部１０ｋｂまで、または上流部５ｋｂから下流部５ｋｂまで、または上流部１ｋｂから下流部１ｋｂまで延長している。インスリン感作物質については、ＰＰＡＲモジュレーターとすることができ、たとえばネトグリタゾン、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、イサグリタゾン、５−ＢＴＺＤおよびＲ１１９７０２のようなチアゾリジンジオン系のＰＰＡＲモジュレーターが挙げられる。血糖調節の障害は、ＩＩ型糖尿病があり得る。
【０００７】
さらに本発明は、被験者におけるインスリン感作物質に対する応答の素因の有無の予測方法も提供し、その方法はインスリン感作物質に反応性のある核酸の上流部および下流部に延びたゲノム配列域に特異的にハイブリダイズする核酸に、被験者から得られた試料を接触させる工程；およびハイブリダイゼーション複合体の有無を検出する工程によって行われ、ハイブリダイゼーション複合体の有無によって、個体におけるインスリン感作物質に対する応答の素因の有無が予測される。いくつかの実施形態では、ゲノム配列域はインスリン感作物質反応性核酸の上流部１０ｋｂから下流部１０ｋｂまで、または上流部５ｋｂから下流部５ｋｂまで、または上流部１ｋｂから下流部１ｋｂまで延長している。いくつかの実施形態では、さらに本方法はハイブリダイゼーション複合体の有無に基づき、有効量のインスリン感作物質を対象患者に投与または非投与する工程も含み、その場合の投与されるか、または投与されないインスリン感作物質については、被験者スクリーニング用のインスリン感作物質と同一または異なり得る。
【０００８】
さらに本発明は、インスリン感作物質に反応性のある核酸の上流部および下流部まで延びたゲノム配列域に特異的にハイブリダイズする核酸によって部分的または完全にコードされる単離ポリペプチドも提供し、その単離ポリペプチドはインスリン感作物質に対する応答のスクリーニング、診断、予後予測、予防、治療または研究に用いられる。いくつかの実施形態では、ゲノム配列域はインスリン感作物質反応性核酸の上流部１０ｋｂから下流部１０ｋｂまで、または上流部５ｋｂから下流部５ｋｂまで、または上流部１ｋｂから下流部１ｋｂまで延長している。また本発明は前述のようなポリペプチドに選択的に結合する抗体またはその抗原結合断片も提供し、その抗体または抗原結合断片は、インスリン感作物質への反応の診断、予後予測、予防、治療または研究に用いられる。
【０００９】
また本発明によってインスリン感作物質への反応の診断、予後予測、予防、治療または研究用のキット類も提供され、それらのキット類にはインスリン感作物質応答性の核酸の上流部および下流部まで延びたゲノム配列域に特異的にハイブリダイズする核酸、あるいはインスリン感作物質応答性の核酸の上流部および下流部にまで延びたゲノム配列域に特異的にハイブリダイズする核酸によって部分的または完全にコードされるポリペプチドに選択的に結合する抗体またはその抗原結合断片が含まれる。いくつかの実施形態では、ゲノム配列域はインスリン感作物質応答性の核酸の上流部１０ｋｂから下流部１０ｋｂまで、または上流部５ｋｂから下流部５ｋｂまで、または上流部１ｋｂから下流部１ｋｂまで延長している。
【００１０】
さらに本発明は、インスリン感作物質に対する応答の予測方法も提供し、その方法はインスリン感作物質応答性の核酸の上流部および下流部にまで延びたゲノム配列域に特異的にハイブリダイズする核酸によって部分的または完全にコードされるポリペプチドの発現レベルまたは活性を比較する工程を含む。いくつかの実施形態では、ゲノム配列域はインスリン感作物質応答性の核酸の上流部１０ｋｂから下流部１０ｋｂまで、または上流部５ｋｂから下流部５ｋｂまで、または上流部１ｋｂから下流部１ｋｂまで延長している。
【００１１】
さらに本発明は、インスリン感作物質に対する応答性が関わる研究におけるヒトゲノムの一個または複数の遺伝的変異の使用；ならびにインスリン感作物質に関係した共同または単独の商品化ステップで見出された付随事項の使用を含む商業的な方法も提供する。
【００１２】
（参照による引用）
本明細書に記載の刊行物および出願特許書類のすべてについては、本明細書において参照によって完全に取り込まれたものとし、同様にその刊行物または出願特許書類の各々についても、参照によって取込まれることを意味する。例を挙げると、本発明に特に関連性のある刊行物および出願特許書類には、２００４年９月３０日出願の米国特許出願第１０／９５６２２４号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”および２００５年１月２４日出願の米国特許出願第１１／０４３６８９号“Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｕｓｉｎｇ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ”が含まれる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
Ｉ．諸言
本発明は方法、組成物、およびキットを提供する。本発明の方法には、第一の薬物に対する応答の素因を示す一個または複数の遺伝子変異に関する被験者のスクリーニング工程、ならびにそのスクリーニング結果に基づいた被験者への第二の薬物の投与または非投与工程を含めた被験者のスクリーニング法および治療法が含まれる。いくつかの実施形態では、被験者は病気に罹患している。いくつかの実施形態では、第一の薬物と第二の薬物とは同一であり、ほかの実施形態ではそれらは異なり、たとえばあるクラスの異なる薬物種である。そのようなスクリーニングについては、たとえば薬物治療が有益であり得る（または有益でない）被験者、臨床試験に登録され得る被験者、および／または薬物による副作用を受け得る被験者を同定するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、一種または複数の表現型についても、スクリーニング工程に含めることができる。本発明で用いられる組成物およびキットについても、本発明によって提供される。
【００１４】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は血糖調節性の病気、たとえばインスリン抵抗性障害に罹患した患者のスクリーニング法および治療法を含み、そのスクリーニング法および治療法には、血糖調節性の病気、たとえばインスリン抵抗性障害の治療の必要がある患者について、インスリン感作物質に対する応答の素因を示す遺伝子変異に関するスクリーニングを行う工程、ならびにそのスクリーニング結果に基づいた対象患者へのインスリン感作物質の投与または非投与の工程が含まれる。被検者スクリーニング用のインスリン感作物質については、投与されるか、または投与されないインスリン感作物質と同一または異なり得る。そのようなスクリーニングは、たとえばインスリン感作物質での治療が有益であり得る（または有益でない）被験者、臨床試験に登録され得る被験者、および／またはインスリン感作物質による副作用を受け得る被験者を同定するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、一種または複数の表現型についても、スクリーニング工程に含めることができる。
【００１５】
一つの態様によれば、本発明の方法は薬物、たとえばインスリン感作物質の投与時に特定の反応が見られる複数の被験者の亜集団、ならびに薬物、たとえばインスリン感作物質の投与時に特定の反応が見られない複数の被験者の亜集団の間の違いを少なくとも部分的に明確にする一種または複数の遺伝子変異を同定する工程を含む。いくつかの実施形態では、さらに本発明は薬物、たとえばインスリン感作物質の投与時に特定の反応が見られる亜集団、ならびに薬物、たとえばインスリン感作物質の投与時に特定の反応が見られない亜集団の間の違いを少なくとも部分的に明確にする一種または複数の表現型を同定する工程も含む。さらに本方法は同定された一種または複数の遺伝子変異および／または表現型に基づき、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する特定の応答の素因が個体で見られるかどうかの予測も含み、その予測用の薬物は、一種または複数の遺伝子変異の同定用の薬物と同一または異なり得る。その薬物が異なる場合の実施形態では、本方法は第一の薬物、たとえばインスリン感作物質について同定された一種または複数の遺伝子変異および／または表現型に基づき、同じクラス、たとえばインスリン感作物質のクラスの第二の薬物に対して特定の応答の素因が個体に見られるかどうかの予測を含む。
【００１６】
いくつかの実施形態では、薬物に対する反応を表示する一種または複数の遺伝子変異に関するスクリーニングに基づき、薬物、たとえばインスリン感作物質が個体に投与される場合、さらに本方法はそのスクリーニング結果に基づき、薬物、たとえばインスリン感作物質の投与の調節も含む。ほかの実施形態でも、調節が実施される対象薬物は、遺伝子変異が反応を示す対象薬物と同一または異なり得る。投与の調節には、薬物、たとえばインスリン感作物質の投与量、投与の頻度、治療期間、剤形、またはそれらを組み合わせた調節が含まれるが、それらに限定されない。いくつかの実施形態では、被験者が薬物、たとえばインスリン感作物質の投与を受けない場合、さらに本方法は病気、たとえば血糖調節性の病気に対する別の治療薬の投与も含む。いくつかの実施形態では、本方法は血糖調節性の病気に罹患した患者のスクリーニング法および治療法を含み、そのスクリーニング法および治療法は、第一のインスリン感作物質に対する特定の応答の素因を示す遺伝子変異に関する被験者をスクリーニングする工程、ならびにそのスクリーニング結果に基づいた個体への第二のインスリン感作物質の投与、投与調節または非投与の工程によって行われる。それらの実施形態のいくつかでは、第二のインスリン感作物質は研究、たとえば臨床試験の主テーマである。
【００１７】
一つの態様によれば、本発明の組成物は薬物反応核酸、たとえばインスリン感作物質応答性の核酸の上流部および下流部に延びたゲノム配列域に特異的にハイブリダイズする単離核酸を含み、病気、たとえば血糖調節性の病気の診断、予後予測、予防、治療または研究に用いられる。一つの態様によれば、本発明の組成物は薬物反応核酸、たとえばインスリン感作物質応答性の核酸と不均衡連結したゲノム配列域に特異的にハイブリダイズする単離核酸を含み、病気、たとえば血糖調節性の病気の診断、予後予測、予防、治療または研究に用いられる。病気の治療には、反応が核酸に伴って起こる対象薬物と同じクラスの別の薬物での治療も含めることができる。いくつかの実施形態では、核酸領域は対象核酸の上流部１０ｋｂから下流部１０ｋｂまで、または上流部５ｋｂから下流部５ｋｂまで、または上流部１ｋｂから下流部１ｋｂまで延びている。
【００１８】
別の態様によれば、本発明の組成物は薬物、たとえばインスリン感作物質に対して反応性を有する核酸の上流部および下流部に延びたゲノム配列域に特異的にハイブリダイズする単離核酸によって少なくとも部分的にコードされる単離ポリペプチドを含み、病気、たとえば血糖調節性の病気の診断、予後予測、予防、治療または研究に用いられる。その疾患の治療には、反応が核酸に伴って起こる対象薬物と同じクラスの別の薬物による治療も含めることができる。いくつかの実施形態では、核酸領域は対象核酸の上流部１０ｋｂから下流部１０ｋｂまで、または上流部５ｋｂから下流部５ｋｂまで、または上流部１ｋｂから下流部１ｋｂまで延びている。
【００１９】
さらに別の態様によれば、本発明は薬物反応核酸、たとえばインスリン感作物質に反応核酸の上流部および下流部に延びるゲノム配列域に特異的にハイブリダイズする単離核酸によって少なくとも部分的にコードされる単離ポリペプチドに選択的に結合する抗体またはその抗原結合断片を提供し、病気、たとえば血糖調節性の病気の診断、予後予測、予防、治療または研究に用いられる。病気の治療には、反応が核酸に伴って起こる対象薬物と同じクラスの別の薬物による治療も含めることができる。いくつかの実施形態では、核酸領域は対象核酸の上流部１０ｋｂから下流部１０ｋｂまで、または上流部５ｋｂから下流部５ｋｂまで、または上流部１ｋｂから下流部１ｋｂまで延びている。
【００２０】
さらに本発明は、本発明の一種または複数の核酸、ポリペプチド、および／または抗体を含むキットも提供する。
【００２１】
さらに本発明は、試料中の核酸、たとえばインスリン感作物質応答性の核酸の存在のアッセイ方法も提供し、その方法は病気、たとえば血糖調節性の病気の診断、予後予測、予防、治療または研究に用いられ、試料を厳格なハイブリダイゼーション条件下で本発明の核酸と接触させる工程；およびハイブリダイゼーション複合体の存在を検出する工程によって行われる。いくつかの実施形態では、本方法には核酸、たとえばインスリン感作物質応答性の核酸によってコードされるＲＮＡの、試料中での発現レベルをアッセイする工程が含まれ、病気、たとえば血糖調節性の病気の診断、予後予測、予防、治療または研究に用いられ、試料を厳格なハイブリダイゼーション条件下で本発明の核酸と接触させる工程；およびハイブリダイゼーション複合体の存在を検出する工程によって行われる。いくつかの実施形態では、本方法には薬物、たとえばインスリン感作物質に対する被検者における応答の素因の有無の予測工程が含まれ、その工程はハイブリダイゼーション複合体の有無の検出によって行われる。薬物については、反応が核酸に伴って起こる対象薬物と同一または異なり得る。さらに本発明は、本発明のポリペプチドの存在またはその量のアッセイ方法も提供し、その方法は病気、たとえば血糖調節性の病気の診断、予後予測、予防、治療または研究に用いられ、結合に適した条件下で試料を本発明の抗体と接触させる工程；およびポリペプチドへの抗体の結合の存在またはその量をアッセイする工程によって行われる。さらに本発明は、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答の予測方法も提供し、本発明のポリペプチドの発現レベルまたはその活性について、患者からの試験試料における値を対照試料における値と比較することで行なわれ、試験試料と対照試料との間に発現レベルまたは活性の差がある場合は、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答を予測できる。
【００２２】
本発明は商業上の方法も提供し、その方法はインスリン感作物質に対する応答性に関連した研究でヒトゲノム中に見出された遺伝子変異を用いる工程；発見プロセスに関連した工程から得られた関連性を用いる工程；およびその発見プロセスから得られた製品の共同または単独でのマーケッティング工程を含む。さらに本発明は商業上の方法も提供し、その方法はある薬物クラスに属する第一の薬物に対する反応性に関連した研究でヒトゲノム中に見出された遺伝子変異を用いる工程；その薬物クラスの少なくとも一種の第二の薬物に伴う発見プロセスに関連した工程から得られた関連性を用いる工程；およびその発見プロセスから得られた製品の共同または単独でのマーケッティング工程を含む。
【００２３】
ＩＩ．血糖制御性の病気
本発明は、インスリン抵抗性障害を含めた血糖制御の病気の診断、予後予測、予防、治療または研究用の方法および組成物に関する。
【００２４】
本明細書で用いられる「血糖調節の障害」とは、血糖値を最適限度内に調節できないことに伴う病気（それらはしばしばでインスリン抵抗性障害に起因するが、必ずしもそうとは限らない）、ならびに関連した表現型（たとえばインスリン抵抗性の結果生じる合併症）を包含する。血糖調節の障害には、糖尿病（Ｉ型およびＩＩ型とも）、Ｘ症候群、ならびにグルコース耐性障害（ＩＧＴ）、空腹時グルコース障害（ＩＦＧ）、肥満、腎症、神経症、網膜症、動脈硬化症、多嚢胞性卵巣症候群、高血圧、狭心症、脳卒中、心臓病、過敏性腸症候群、炎症および白内障のような病態を含めた関連症状または合併症が含まれるが、それらに限定されない。前糖尿病状態の例にはＩＧＴおよびＩＦＧが挙げられる。
【００２５】
血糖値の変化に反応して膵臓から産生されるインスリンは、組織のグルコース取込みを調節する。本明細書で用いられる「インスリン抵抗性障害」には、正常組織のインスリンに対する反応性が障害を受けた生理学的状態が存在する病気が含まれる。ほとんどの症例では、インスリン抵抗性の代償として膵臓のインスリン産生が亢進する経過を辿ることになる。本明細書で用いられる「インスリン抵抗性障害」は、血糖値を最適限度内に調節することができないことがすでに顕在化または潜在化した血糖調節の障害の亜集団とみなされる。
【００２６】
糖尿病は血糖調節の障害のうちで主要なものである。糖尿病は動物における炭水化物、脂肪および蛋白質の代謝に影響を及ぼす慢性の病気である。糖尿病の全症例のおよそ１０％を占めるＩ型糖尿病については、これまでインスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）または若年発症糖尿病のことを指してきた。この疾患は、膵臓のβ細胞によるインスリン分泌機能の進行性の欠失の特徴を有する。この特徴については、膵臓疾患が起源の非特発性または「二次的な」糖尿病にもあてはまる。Ｉ型糖尿病は、以下の臨床上の徴候または症状、すなわち血漿中のグルコース濃度の持続的な亢進または高血糖；多尿、煩渇多飲および／または摂食亢進；網膜症、腎症および神経症のような慢性の微小血管合併症；ならびに高脂血症および高血圧症のような大血管性の合併症を伴い、それらは失明、末期の腎臓病、四肢の切断および心筋梗塞に進行し得る。
【００２７】
ＩＩ型糖尿病（インスリン非依存性糖尿病すなわちＮＩＤＤＭ）は、グルコース代謝の制御不全およびインスリン感受性障害を含めた代謝性の病気である。ＩＩ型糖尿病は通常、成人で発症し、人体で充分なインスリンの利用または産生ができないことに伴う。標的組織において見られるインスリン抵抗性のほかに、ＩＩ型糖尿病患者では相対的なインスリンの欠乏、つまり実際のインスリンレベルが患者では、得られる血漿中グルコース濃度に対するインスリンの予測レベルよりも低いことが見られる。ＩＩ型糖尿病は、臨床上の徴候または症状、すなわち血漿中のグルコース濃度の持続的な亢進または高血糖；多尿、煩渇多飲および／または摂食亢進；網膜症、腎症および神経症のような慢性の微小血管合併症；ならびに高脂血症および高血圧症のような大血管性の合併症を伴い、それらは失明、末期の腎臓病、四肢の切断および心筋梗塞に進行し得る。
【００２８】
Ｘ症候群は、インスリン抵抗性症候群（ＩＲＳ）、代謝性症候群または代謝性Ｘ症候群とも呼ばれ、グルコース耐性障害（ＩＧＴ）、空腹時グルコース障害（ＩＦＧ）、高インスリン血症、インスリン抵抗症、異常脂肪血症（たとえば高トリグリセリド血症、低ＨＤＬ血症）、高血圧症および肥満を含めたＩＩ型糖尿病および心血管系疾患の発症に関する徴候またはリスク因子を示す。
【００２９】
Ｉ型糖尿病患者に対する治療は、種々のソース（たとえばヒト、ウシ、ブタのインスリン）から得られる外因性インスリンの投与に対してこれまで一貫して主眼が置かれてきた。異種由来物質を用いると抗インスリン抗体が形成され、その抗体は活性を限定する効果があり、所望の血糖降下効果を達成するためには次第に用量を増やしてゆく必要が生じる。
【００３０】
ＩＩ型糖尿病の一般的な治療は、食餌および運動に関連したライフスタイルの修正によって血糖値をできるだけ正常値に近づけ維持することに主眼が置かれ、必要に応じて抗糖尿病薬剤、インスリンまたはそれらの併用による治療が行われる。
【００３１】
Ｘ症候群のすべてにおいてはインスリン抵抗性の治療は必ずしも行われないが、空腹時血糖値が正常値より高いながらも糖尿病診断基準にはあてはまらないような前糖尿病状態（たとえばＩＧＴ、ＩＦＧ）を示す患者については、いくつかの国（たとえばドイツ）で糖尿病の予防のためにメトホルミンによる治療が行われる。抗糖尿病薬剤については、付随した同時罹患疾患の治療用の医療薬剤（たとえば高血圧に対する降圧剤、脂肪血症に対する脂質低下剤）と併用することができる。
【００３２】
ＩＩＩ．本発明における使用薬物
本発明の方法および組成物には、薬物、たとえばインスリン感作物質の研究および使用が含まれ、さらに薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答性に伴う遺伝子型および／または表現型の形質の決定、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答の素因、たとえば副作用についての被験者のスクリーニング、および／またはそのスクリーニングに基づいた個体への薬物、たとえばインスリン感作物質の投与または非投与のための関連研究の実施が含まれる。本セクションでは本発明の実施例で用いられるある薬物について記載する。本発明にとってさらに有用な薬物については、セクションＩＶＣ「種々の薬物クラスに関連した研究および方法」に記載する。
【００３３】
Ａ．Ａ．インスリン感作物質
本発明のある実施形態に含まれる薬物クラスの一つがインスリン感作物質である。本明細書で用いられる「インスリン感作物質」または「インスリン感作物質剤」という用語は、インスリンの分泌、あるいはさらに一般的にはインスリンに対する組織感受性のいずれかを増大させることが可能な薬剤のいずれかを指す。インスリン感作物質の非限定的な例としては、メトホルミン、スルホニルウレア系薬剤、α−グルコシダーゼ阻害剤、ならびにチアゾリジンジオン類を含めたＰＰＡＲモジュレーターが挙げられる。インスリン感作物質の例については、さらに以下に述べる。
【００３４】
チアゾリジンジオン類は、本発明で用いられるインスリン感作物質のうちの一つの薬物クラスに属するＰＰＡＲモジュレーターの例である。本明細書で用いられる「ＰＰＡＲモジュレーター」という用語は、ペルオキシソーム増殖因子で活性化した受容体のアゴニスト、部分アゴニストおよびアンタゴニストを指す。そのモジュレーターは、ＰＰＡＲα、ＰＰＡＲγ、またはその両方の受容体に選択的または優先的に影響を及ぼし得る。このモジュレーターは一般的にインスリン抵抗性を改善させる。一つの態様によれば、モジュレーターはＰＰＡＲγアゴニストである。本発明の実施形態で用いられるＰＰＡＲγアゴニストの一つは、５−［｛６−（２−フルオロベンジル）オキシ−２−ナフチル｝メチル］−２，４−チアゾリジンジオン；（ＭＣＣ−５５５すなわち「ネトグリタゾン」）である。
【００３５】
Ｂ．Ｂ．インスリン感作物質−ＰＰＡＲモジュレーター
本発明のインスリン感作物質のクラスの一つがＰＰＡＲモジュレーター、特にＰＰＡＲ−γモジュレーター、たとえばＰＰＡＲ−γアゴニストである。ＰＰＡＲモジュレーターにはＰＰＡＲ−α、ＰＰＡＲ−δ（ＰＰＡＲ−βとも呼ばれる）、およびＰＰＡＲ−γアゴニストが含まれる。とりわけチアゾリジンジオン類（ＴＺＤ類）が有用であり、それらは糖尿病ネズミにおいて血糖低化能を示すように新規合成された化合物のスクリーニングによって１９７０年代および１９８０年代に開発された。このクラスに属する３種類の分子、すなわちトログリタゾン、ロシグリタゾンおよびピオグリタゾンについては、結局ＩＩ型糖尿病患者の治療に認可された。それらの化合物は、その活性の分子メカニズムが理解されないまま開発されたが、１９９０年代初頭までにチアゾリジンジオン類が核の受容体ＰＰＡＲ−γに連結する証拠が蓄積され始めた。究極的には、それらの分子がＰＰＡＲ−γの高親和性リガンドであって、受容体の転写活性を増大させることが分かった。この理論にとらわれなくとも、現在では多くの系統の証拠によって、チアゾリジンジオン類の抗糖尿病活性には受容体、およびＰＰＡＲ−γの標的遺伝子発現の二次的調節による直接的な相互作用が介在することが示されている。
【００３６】
本発明の方法で用いられるチアゾリジンジオン類には、（１）ロシグリタゾン；（２）ピオグリタゾン；（３）トログリタゾン；（４）ネトグリタゾン（ＭＣＣ−５５５またはイサグリタゾンまたはネオグリタゾンとしても知られる）；および（５）５−ＢＴＺＤが含まれる。
【００３７】
したがって、いくつかの実施形態では、本発明は血糖調節の障害に罹患した患者のスクリーニング法を提供し、その方法にはインスリン感作物質に対する応答の素因を示す遺伝子変異についての被験者のスクリーニング工程が含まれ、その患者スクリーニング用のインスリン感作物質は、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、ネトグリタゾンまたは５−ＢＴＺＤのようなチアゾリジンジオンＰＰＡＲモジュレーターであり；いくつかの実施形態では、本発明は血糖調節性の病気に罹患した患者のスクリーニング法を提供し、その方法にはインスリン感作物質に応答の素因を示す遺伝的変異についての被験者のスクリーニング工程が含まれ、患者に投与されるか、または投与されないインスリン感作物質は、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン、ネトグリタゾンまたは５−ＢＴＺＤから成る群から選択される。本発明の方法に含めることも可能な非チアゾリジンジオン系のＰＰＡＲモジュレーターには、ムラグリタザールおよびファルグリタザールが含まれ、それらについては以下に述べる。
【００３８】
本発明で用いられるほかのＰＰＡＲモジュレーターには、近年臨床試験が行われてきたモジュレーター、すなわち（１）ムラグリタザール（ＰＰＡＲγおよびαアゴニスト、ブリストール−マイヤーズ／メルク社）；（２）ガリダテサグリタザール（ＰＰＡＲγおよびαアゴニスト、アストラゼネカ社）；（３）６７７９５４（ＰＰＡＲγ、αおよびδアゴニスト、グラクソスミスクライン社）；（４）ＭＢＸ−１０２（ＰＰＡＲγ部分的アゴニスト／アンタゴニスト、メタボレックス社）；（５）Ｔ１３１（ＰＰＡＲγ選択的モジュレーター、ツラリック／アムジェン社）；（６）ＬＹ８１８（ＰＰＡＲγおよびα部分的アゴニスト、イーライリリー／リガンド社）；（７）ＬＹ９２９（ＰＰＡＲγおよびαアゴニスト、イーライリリー／リガンド社）；ならびに（８）ＰＬＸ２０４（ＰＰＡＲγ、αおよびδアゴニスト、プレキシコン社）が含まれる。それらについては、たとえばＢｉｏＣｅｎｔｕｒｙ，２００４年６月１４日付けが参照される。ＰＰＡＲモジュレーターにはさらにＬＹ５１９８１８、Ｌ−７８３４８３、Ｌ−１６５４６１およびＬ−１６５０４１も含まれる。
【００３９】
インスリン感作物質として作用する非チアゾリジンジオン類にはさらに、（１）ＪＴ−５０１（ＪＴＴ５０１、ＰＮＵ−１８２７、ＰＮＵ−７１６−ＭＥＴ−００９６、またはＰＮＵ１８２７１６：４−（４−２−（５−メチル−２−フェニル−オキザゾール−４−イル）エトキシ）ベンジル）イソキサゾリジン−３，５−ジオン；（２）ＫＲＰ−２９７（５−（２，４−ジオキソチアゾリジン−５−イルメチル）−２−メトキシ−Ｎ−（（４−（トリフルオロメチル）ベンジル）ベンズアミド、あるいは５−（（２，４−ジオキソ−５−チアゾリジニル）メチル）−２−メトキシ−Ｎ−（（４−（トリフルオロメチル）フェニル）メチル）ベンズアミド；ならびに（３）ファルギリタザール（Ｌ−チロシン、Ｎ−（２−ベンゾイルフェニル）−Ｏ−（２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキザゾリル）エチル）、あるいはＮ−（２−ベンゾイルフェニル）−Ｏ−（２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキザゾリル）エチル）−Ｌ−チロシン、あるいは（Ｓ）−２−（２−ベンゾイルフェニルアミノ）−３−（４−１２−（５−メチル−２−フェニル−２−オキザゾ−４−イル）エトキシフェニル）プロピオン酸、またはＧＷ２５７０またはＧＩ−２６２５７０）も含まれるが、それらに限定されない。
【００４０】
ほかの薬剤についても、ＰＰＡＲ−γ、ＳＰＰＡＲ−γ、および／またはＰＰＡＲ−α／δアゴニスト活性のようにＰＰＡＲモジュレーター活性を持つことが分かっているものがある。その例としては、（１）ＡＤ５０７５（５−（４−（２−ヒドロキシ−２−（５−メチル−２−フェニルオキシ−４−イル）エトキシ）ベンジル）−チアゾリジン−２，４−ジオン）；（２）Ｒ１１９７０２（またはＣＩ１０３７またはＣＳ０１１）；（３）ＣＬＸ−０９４０（ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体αアゴニスト／ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γアゴニスト）；（４）ＬＲ−９０（２，５，５−トリス（４−クロロフェニル）−１，３−ジオキサン−２−カルボン酸、ＰＰＡＲα／γアゴニスト）；（５）ＣＬＸ−０９２１（ＰＰＡＲγアゴニスト）；（６）ＣＧＰ−５２６０８（ＰＰＡＲアゴニスト）；（７）ＧＷ−４０９８９０（ＰＰＡＲアゴニスト）；（８）ＧＷ−７８４５（２（（Ｓ）−１−カルボキシ−２−（４−（２−（５−メチル−２−フェニル−オキザゾール−４−イル）−エトキシ）−フェニル）−エチルアミノ）−安息香酸メチルエステル、ＰＰＡＲアゴニスト）；（９）Ｌ−７６４４０６（２−ベンゼンスルホニルメチル−３−クロロキノキサリン、ＰＰＡＲアゴニスト）；（１０）ＬＧ−１０１２８０（ＰＰＡＲアゴニスト）；（１１）ＬＭ−４１５６（ＰＰＡＲアゴニスト）；（１２）リザレスタート（ＣＴ−１１２、（±）−５−（３−エトキシ−４−（ペンチルオキシ）フェニル−２，４−チアゾリジンジオン、アルドースレダクターゼ阻害剤）；（１３）ＹＭ４４０（ＰＰＡＲアゴニスト）；（１４）ＡＲ−Ｈ０４９０２０（ＰＰＡＲアゴニスト）；（１５）ＧＷ−００７１（（±）＋（２Ｓ，５Ｓ）−４−（４−（５−（（ジベンジルカルバモイル）−メチル）−２−ヘプチル−４−オキソチアゾリジン−３−イル−ブチル）安息香酸）；（１６）ＧＷ４０９５４４（ＧＷ−５４４またはＧＷ−４０９５４４）；（１７）ＮＮ２３４４（ＤＲＦ２５９３）；（１８）ＮＮ６２２（ＤＲＦ２７２５）；（１９）ＡＲ−Ｈ０３９２４２（ＡＺ−２４２）；（２０）ＧＷ９８２０（フィブラート）；（２１）ＧＷ１９２９（Ｎ−（２−ベンゾイルフェニル）−Ｏ−（２−（メチル−２−ピリジニルアミノ）エチル）−Ｌ−チロシン、ＧＷ２３３１として知られる、ＰＰＡＲアゴニスト）；（２２）ＳＢ２１９９９４（（Ｓ）−４−（２−（２−ベンゾキサゾイルメチルアミノ）エトキシ）−α−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）ベンゼンプロピオン酸、または３−（４−（２−（Ｎ−（２−ベンゾキサゾリル）−Ｎ−メチルアミノ）エトキシ）フェニル）−２−（Ｓ）−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−プロピオン酸、または４−（２−（２−ベンゾキサゾリルメチルアミノ）エトキシ）−α−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−α−（Ｓ）−ベンゼンプロピオン酸、ＰＰＡＲα／γアゴニスト）；（２３）Ｌ−７９６４４９（ＰＰＡＲα／γアゴニスト）；（２４）フェノフィブラート（２−（４−（４−クロロベンゾイル）フェノキシ−２−メチル−プロピオン酸−１−メチルエチルエステル、ＴＲＩＣＯＲ、ＬＩＰＣＯＲ、ＬＩＰＡＮＴＩＬ、ＬＩＰＩＤＩＬ−ＭＩＣＲＯとして知られる、ＰＰＡＲαアゴニスト）；（２５）ＧＷ−９５７８（ＰＰＡＲαアゴニスト）；（２６）ＧＷ−２４３３（ＰＰＡＲα／γアゴニスト）；（２７）ＧＷ−０２０７（ＰＰＡＲγアゴニスト）；（２８）ＬＧ−１００６４１（ＰＰＡＲγアゴニスト）；（２９）ＬＹ−３００５１２（ＰＰＡＲγアゴニスト）；（３０）ＮＩＤ５２５−２０９（ＮＩＤ−５２５）；（３１）ＶＤＯ−５２（ＶＤＯ−５２）；（３２）ＬＧ１００７５４（ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体アゴニスト）；（３３）ＬＹ−５１０９２９（ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体アゴニスト）；（３４）ベキサロテン（４−（１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフタレニル）エテニル）安息香酸、ＴＡＲＧＲＥＴＩＮ、ＴＡＲＧＲＥＴＹＮ、ＴＡＲＧＲＥＸＩＮとして知られ、ＬＧＤ１０６９、ＬＧ１０００６９、ＬＧ１０６９、ＬＤＧ１０６９、ＬＧ６９、ＲＯ２６４４５５としても知られる）；ならびに（３５）ＧＷ−１３５６（ＰＰＡＲα／γアゴニスト）が挙げられる。
【００４１】
本発明で用いられるほかのチアゾリジンジオン系および非チアゾリジンジオン系のインスリン感作物質については、たとえばＬｅｆｆおよびＲｅｅｄ、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−Ｉｍｕｎ．Ｅｎｄｏｃ．＆Ｍｅｔａｂ．Ａｇｅｎｔｓ，２：３３−４７（２００２）；Ｒｅｇｉｎａｔｏら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７８：３２６５４−３２６７９（１９９８）；Ｗａｙら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７６：２５６５１−２５６５３（２００１）；Ｓｈｉｒａｋｉら、ＪＢＣ，原稿、２００５／０２／０４出稿中、ならびに米国特許第４７０３０５２号、第６００８２３７号、第５５９４０１６号、第６８３８４４２号、第６３２９４２３号、第５９６５５８９号、第６６７７３６３号、第４５７２９１２号、第４２８７２００号、第４３４０６０５号、第４４３８１４１号、第４４４４７７９号、第４５７２９１２号、第４６８７７７７号、４７２５６１０号、第５２３２９２５号、第５００２９５３号、第５１９４４４３号、第５２６０４４５号、第６３００３６３号、第６０３４１１０号、および第６５４１４９３号；米国特許出願第２００２／００４２４４１号、および第２００３／００４５５５３号；欧州特許出願公開第０１３９４２１号および第０３３２３３２号；ならびに国際公開第９５／３５３１４号、第００／３１０５５号および第０１／３６４０号に記載されており、それらのすべては参照により全体が本明細書に組込まれる。
【００４２】
Ｃ．ネトグリタゾン
本発明の方法で用いられるチアゾリジンジオン系のＰＰＡＲモジュレーターの一つが、ネトグリタゾン（５−［｛６−（２−フルオロベンジル）オキシ−２−ナフチル｝メチル］−２，４−チアゾリジンジオン；ＭＣＣ−５５５）である。ネトグリタゾンの構造および製法、ならびに本発明で用いられるネトグリタゾンの種々の型については、たとえば米国特許第５５９４０１６号、第６５４１４９３号、第６８３８４４２号；米国特許出願第２００４／０１９８７７４号および第２００３／０４５５５３号；国際公開第００／３１０５５号、第０１／３６４０１号、第０３／０１８０１０号および第００／７３２５２号；日本特開平６−２４７９４５／１９９４号および平１０−１３９７６８／１９９８号、日本特許第２００１／１７２１７９号および第２００３／０４０８７７号；ならびにＲｅｇｉｎａｔｏら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７３：３２６７９−３２６８４（１９９８）  に記載されており、それらのすべては参照により全体が本明細書に組込まれる。
【００４３】
ネトグリタゾンは、血糖、インスリンおよびトリグリセリドのレベルを下げる効果がピオグリタゾンおよびトログリタゾンよりも高く、ロシグリタゾンよりも約３倍高いことがすでに報告されている。ネトグリタゾンの活性については、いくつかのタイプの細胞ではＰＰＡＲ−γの完全なアゴニストとして挙動し、ほかのタイプの細胞では部分アゴニストまたはアンタゴニストとして挙動することから、特異的と考えられる。さらに、ＰＰＡＲ−αおよびδも同様に調節すると考えられる。このことについては、米国特許出願第２００４／０１９８７７４号が参照される。
【００４４】
Ｄ．薬物の型
本発明で有用ないくつかの化合物には、ネトグリタゾンのようなＴＺＤ系ＰＰＡＲモジュレーターが含まれ、化合物構造中に一個または複数の不斉炭素原子を持ち得る。本発明には、化合物の純粋な立体異性体の型、ならびにラセミ化合物が視野のうちに含まれる。純粋な立体異性体の型は、既知の原理を適用することで得ることができる。ジアステレオマーについては、分別晶出技法およびクロマトグラフィー技法のような物理的分離方法によって分離でき、鏡像異性体については、光学活性を有する酸または塩基を用いるジアステレオマー塩の選択的結晶化による相互分離、またはキラルクロマトグラフィーによって分離できる。純粋な立体異性体についても、立体化学的に純粋な適当な出発物質から調製でき、あるいは立体特異的反応によっても調製できる。
【００４５】
本発明で有用な化合物のいくつかには、トランス型およびシス型のようなそれぞれに多様な異性体、ならびに様々なα型およびβ型の結合形態（延伸平面の下側および上側）のものがあり得る。さらに、本発明による化合物の製法で立体異性体混合物が生成する場合、それらの異性体は調製用クロマトグラフィーのような一般的な技法で分離できる。化合物については、単一の立体異性体として、あるいは可能性のあるいくつかの立体異性体の混合物のようなラセミ型で調製できる。非ラセミ型については、合成または分割のいずれの方法でも得られる。化合物はたとえば、塩を形成させることによるジアステレオマー対の形成のような標準的な技法でそのラセミ成分に分割できる。また化合物は、キラル補助物質に共有結合させた後、クロマトグラフィーおよび／または結晶学的な分離、およびそのキラル補助物質の除去によっても分割できる。あるいは化合物はキラルクロマトグラフィーを用いても分割できる。ほかに特に記載がない場合、本発明の視野によって、異性体または立体異性体のすべては、シスおよびトランス異性体の混合物、ジアステレオマー混合物、ならびに鏡像異性体（光学異性体）のラセミ混合物と同様に本質的に網羅されるものとする。
【００４６】
さらに本発明の化合物は、種々の多型のものも調製され得る。たとえば、本発明で用いられるインスリン感作物質は多型が存在する可能性があり、インスリン感作物質の多型のいずれかまたはすべては、本発明での使用が企図される。薬物における多型現象によって、薬物の安定性、溶解性および溶出速度が変化し、その結果、薬物の多型によって異なる治療効果が生じる。「多型」という用語は、異なる物理的形態、結晶型、および／または結晶／液晶／非結晶（アモルホス）型を含むものとする。多くの抗生物質、抗菌剤、トランキライザーなどで多型が存在し、薬物の多型のうちのいくつか／一種がほかの多型と比較してバイオアベイラビリティーが高く、その結果、高い活性を示すことが観察されて明らかになっており、医療上用いられる化合物の多型についても、同様なことがいえる。たとえば、セルトラリン、フレンチゾール、ラニチジン、スルファチアゾールおよびインドメタシンでは多型を示すいくつかの製剤が存在する。
【００４７】
本発明のいくつかの実施形態には、一種の多型でのネトグリタゾールの使用が含まれる。ネトグリタゾールについては、種々の多型のものが調製可能である。当業者に既知のネトグリタゾールの多型のいずれかは、別々にまたは組み合わせて本発明の方法で使用できる。したがって、本発明の方法にはネトグリタゾールの多型のいずれかまたはすべてを用いる関連研究、ならびにネトグリタゾンの多型のいずれかまたはすべて、それらの多型に基づく組成物およびキットなどを用いるスクリーニングおよび治療が含まれる。
【００４８】
ネトグリタゾンの多型にはＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅおよびアモルホスの結晶型が含まれ、それらについては国際公開第０１／３６４０１号、および米国特許第６５４１４９３号に記載されており、たとえばＥ型結晶については国際公開第０１／３６４０１号に記載されている。
【００４９】
本明細書に記載の化合物のいくつかは、二重結合のシフトに伴う異なる水素結合位置、すなわち互変異体が存在し得る。例を挙げると、カルボニル型（たとえばケトン）およびそのエノール型があり、しばしばケト−エノール互変異体として知られている。それぞれの互変異体ならびにその混合物は、本発明に含まれる。
【００５０】
プロドラッグは、患者に投与される際または投与後に本発明の請求項の化合物に変換する化合物である。プロドラッグは本発明の化合物であり、プロドラッグの活性代謝物も本発明の化合物である。
【００５１】
Ｅ．薬物に対する反応
本発明の方法で観察または予測される薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答には治療応答および治療以外の反応（たとえば逆効果のような副作用）が含まれる。本明細書で用いられる「反応」および「反応性」という用語には、無反応または検出不能な反応が含まれる。したがっていくつかの場合では、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した遺伝子変異または表現型は、その薬物が投与される際の効果（反応）に関連するのに対し、ほかの場合では薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した遺伝子変異または表現型は、その薬物が投与される際の検出可能な効果（反応）には関連しない。
【００５２】
治療応答には、薬物投与によって状態が改善または向上、および／または薬物投与の結果、状態が悪化するという、薬物に対する反応のいずれかが含まれる。たとえば、薬物がインスリン感作物質である場合、「治療応答」にはインスリンに対する抵抗性の改善または向上、および／またはインスリン感受性が見られないことによる悪化の結果となる反応のいずれかが含まれる。一つの治療応答は、インスリンに対する抵抗性の改善であり、そのことは外因性インスリンの投与または非投与のいずれかで血糖値が下がることによって証明できる。薬物、たとえばインスリン感作物質に対する治療応答については、さらに反応の度合いで分類でき、その反応の度合いはいずれか適当な階級づけが使用でき、それには比較的広域な階級づけ（たとえば強度反応者、中程度反応者、および弱反応者）および比較的狭い階級づけ（たとえば観察された最大値のパーセンテージで示した反応ランキング法、および反応をたとえば１０等分、４等分などに分ける方法が含まれる。
【００５３】
薬物に対する治療効果以外の反応には、副作用が含まれ得る。たとえばＰＰＡＲモジュレーターについては、副作用を含めた治療以外の効果を示すことが知られている。あるＰＰＡＲモジュレーターがＦＤＡの試験で安全かつ有効であることが分かっていても、すべてのＰＰＡＲモジュレーターで副作用の度合いは変動し、いくつかの副作用が重篤なために臨床試験の中止、または認可薬の使用停止に至ることがある。たとえば、米国でＩＩ型糖尿病の治療用に１９９７年４月に販売が開始されたトログリタゾンについては、特発的な肝障害の発生のために２０００年３月に自発的に回収された。その発生は患者１０万人あたり約１人の頻度で起きたのにすぎなかったが、その重篤度は薬物の回収に相当した。浮腫のようなより一般的な副作用、体重増加、および脂質プロフィールに対する副作用については、特発的肝障害ほど重篤ではないが、それにもかかわらずインスリン抵抗性モジュレーターの治療能を限定し得る。
【００５４】
本発明の付随事項および診断方法では、薬物、たとえばＰＰＡＲモジュレーターの「副作用」には、薬物使用者に対する副作用が含まれる。インスリン感作物質の副作用の例には末梢浮腫、依存性浮腫、全身性浮腫、陥没浮腫、体重の増加または減少、．貧血、低脂血症、頭痛、排尿頻度の増加、下痢、食欲の増加または減少、一過性虚血発作、肝臓酵素レベルの上昇、およびそれらの組み合わせが挙げられる。治療以外の効果、たとえば副作用については、当業者に既知または自明の手段のいずれかによって評価できる。薬物、たとえばインスリン感作物質に対する治療応答と同様に、治療以外の反応、たとえば副作用についても、反応の度合いでさらに分類でき、反応の度合いのいずれか適当な等級づけを用いることができる。
【００５５】
Ｆ．本発明において用いられるそのほかの薬剤
本発明の方法には、薬物、たとえばインスリン感作物質を被験者に投与するか否かを決める前に行なわれる、その薬物に対する反応性を示す遺伝子変異および／または表現型の変異についての個体のスクリーニングが含まれる。
【００５６】
そのようなスクリーニングが可能な使用目的の例としては、薬物、たとえばインスリン感作物質による治療によって有益性を受ける（または受けない）患者の同定、臨床試験に登録（または臨床試験から除外）できる患者の同定、および／または薬物、たとえばインスリン感作物質に対する副作用を患う（または患わない）患者の同定が挙げられる。いくつかの実施形態では、スクリーニング結果によって薬物、たとえばインスリン感作物質の特定の患者への投与または非投与のいずれかが決められる。薬物、たとえばインスリン感作物質が投与されるいくつかの実施形態では、個体のスクリーニング結果に基づき薬物の投与が変更される。そのような変更には、薬物投与の調節が含まれる。投与の変更にはたとえば、薬物の用量、薬物の投与経路、薬物治療期間または薬物の投与頻度の調節；薬物担体のタイプ、薬物の鏡像異性体、薬物の結晶型、薬物の互変異型の入替わり；薬物の断片、類似体および／または変異体の投与；あるいはそれらの組み合わせを含めることができる。
【００５７】
薬物、たとえばインスリン感作物質の投与の変更には、被験者スクリーニング対象の薬物以外の一種または複数のほかの治療薬剤の投与、さらに被検者スクリーニング対象薬物の投与も含み得る。非インスリン感作物質として、それら薬物が属する薬物クラスの中の別の薬物を投与できる。薬物クラスについては以下に記載する。インスリン感作物質の場合、ほかの治療薬剤はたとえば、別のインスリン感作物質、あるいはインスリン感作物質以外の薬剤であり得る。したがっていくつかの場合、本発明の方法には、被験者スクリーニング対象の一種または複数の薬剤またはそれ以外の薬剤の投与が含まれる。いくつかの実施形態では、本発明の方法には、被験者スクリーニング対象の一種または複数の薬剤またはそれ以外の薬剤を、被験者スクリーニング対象のインスリン感作物質と併用する投与が含まれる。
【００５８】
被験者スクリーニング対象のインスリン感作物質が投与されないいくつかの実施形態では、被検者スクリーニング対象のインスリン感作物質の替わりに別の治療薬剤を投与できる。たとえば、ネトグリタゾンに対する反応性に関して被験者をスクリーニングでき、そのスクリーニング結果が被験者に対してネトグリタゾンの副作用性向が見られることを示す場合、ロシグリタゾン、ピオグリタゾンまたはトログリタゾンのような別のＰＰＡＲモジュレーターを代替投与できる。あるいは、ＴＺＤ系ＰＰＡＲモジュレーター以外の別のインスリン感作物質を、スクリーニング結果に基づいて個体に投与できる。
【００５９】
ほかの治療薬剤には、前述のインスリン感作物質、または非インスリン感作物質が含まれる。それらについては、たとえばＬｅｆｆおよびＲｅｅｄ、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−Ｉｍｕｎ．Ｅｎｄｏｃ．＆Ｍｅｔａｂ．Ａｇｅｎｔｓ，２：３３−４７（２００２）；Ｒｅｇｉｎａｔｏら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２４８：３２６５４−３２６７９［１９９８］；Ｗａｙら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：２５６５１−２５６５３（２００１）；Ｓｈｉｒａｋｉら、ＪＢＣ投稿中、２００５年２月４日原稿Ｎｏ．Ｍ５００９０１２００、ならびに米国特許第４７０３０５２号、第６００８２３７号、第５５９４０１６号および第６５４１４９３号；米国特許出願第２００４／０１９８７７４号および第２００３／００４５５５３号；および国際公開第００  １０５５号，第０１／３６４０号が参照され、そのすべてはここで参照されることによって全体が取込まれる。
【００６０】
本明細書の方法で有用なほかの薬剤には、以下のものが含まれるが、それらに限定されない。
【００６１】
１．ビグアニド類、これらは肝臓でのグルコースの生成を低下させ、グルコースの取込みを増やす。例としては、（１）１，１−ジメチルビグアニド（たとえばＭｅｔｆｏｒｍｉｎ−Ｂｉｏｖａｉｌ社製のＭｅｔｆｏｒｍｉｎ−ＤｅｐｏＭｅｄ（商品名）、またはＭＥＴＦＯＲＭＩＮ  ＧＲ（商品名）（メトホルミン胃内滞留製ポリマー））；（２）塩酸メトホルミン（Ｎ，Ｎ−ジメチルインドジカルボンイミド−ジアミド−一塩酸塩、ＬＡ６０２３、ＢＭＳ２０７１５０、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ（商品名）、またはＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ  ＸＲ（商品名）としても知られる）のようなメトホルミンが挙げられる。
【００６２】
２．α−グルコシダーゼ阻害剤、これらはα−グルコシダーゼを阻害し、それによって炭水化物の消化を遅らせる。非消化の炭水化物は次第に腸内で分解され、食後のピーク血糖値が低下する。例として（１）アカルボーズ（Ｏ−４，６−ジデオキシ−４−（（（１Ｓ−（１α，４α，５β，６α））−４，５，６−トリヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）−２−シクロヘキセン−１−イル）アミノ）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１−４）−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１−４）−Ｄ−グルコース、あるいはＡＧ−５４２１、Ｂａｙ−ｇ−５４２、ＧＬＵＣＯＢＡＹ（商品名）、ＰＲＥＣＯＳＥ（商品名）、ＧＬＵＣＯＲ（商品名）、ＰＲＡＮＤＡＳＥ（商品名）、ＧＬＵＭＩＤＡ（商品名）またはＡＳＣＡＲＯＳＥ（商品名）としても知られる）；（２）ミグリトール（１−（２−ヒドロキエチル）−２−（ヒドロキシメチル）−３，４，５−ピペリジントリオール、または（２Ｒ（２α，３β、４α，５β））−１−（２−ヒドロキエチル）−２−（ヒドロキシメチル）−３，４，５−ピペリジントリオール、または（２Ｒ、３Ｒ、４Ｒ、５Ｓ）−１−（２−ヒドロキエチル）−２−（ヒドロキシメチル）−３，４，５−ピペリジントリオール、あるいはＢＡＹ１０９９、ＢＡＹ−Ｍ−１０９９、ＢＡＹ−ｍ−１０９９、ＢＡＹＧＬＩＴＯＬ（商品名）、ＤＩＡＳＴＡＢＯＬ（商品名）、ＧＬＹＳＥＴ（商品名）、ＭＩＧＬＯＢＡＹ（商品名）、ＭＩＴＯＬＢＡＹ（商品名）、ＰＬＵＭＡＲＯＬ（商品名）としても知られる）；（３）ＣＫＤ−７１１（Ｏ−４−デオキシ−４−（（２，３−エポキシ−３−ヒドロキシメチル−４，５，６−トリヒドロキシシクロヘキサン−１−イル）アミノ）−α−ｂ−グルコピラノシル−（１−４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１−４）−Ｄ−グルコピラノース）；（４）エミグリタート（４−（２−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−３，４，５−トリヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−１−ピペリジニル）エトキシ）安息香酸エチルエステル、あるいはＢＡＹ−ｏ−１２４８またはＭＫＣ５４２としても知られる）；（５）ＭＯＲ１４（２−（ヒドロキシメチル）−１−メチル−３，４，５−ピペリジントリオール、または（２Ｒ−（２α，３β，４α，５β）−２−（ヒドロキシメチル）−１−メチル−３，４，５−ピペリジントリオール、あるいはＮ−メチルデオキシノジリマイシンまたはＮ−メチルモラノリンとしても知られる）、ならびに（６）ボグリボーズ（３，４−ジデオキシ−４−（（２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル）アミノ）−２−Ｃ−（ヒドロキシメチル）−Ｄ−エピイノシトール、あるいはＡ７１１００、ＡＯ１２８、ＢＡＳＥＮ（商品名）、ＧＬＵＳＴＡＴ（商品名）、ＶＯＧＬＩＳＴＳＴ（商品名）としても知られる）が挙げられるが、それらに限定されない。
【００６３】
３．インスリン類、これらにはレギュラータイプ、すなわち短時間作用型、作用時間中間型、および長時間作用型、ならびに注射剤、および非注射剤、すなわち吸入剤、経皮剤によるインスリン、さらに組織選択的インスリン、グルコホスホキニン（Ｄ−カイロイノシトール）、あるいはインスリンの天然型アミノ酸配列とわずかに異なるインスリン分子、およびインスリンに似せた小分子（インスリン擬似分子）のようなインスリン類縁物質、ならびにエンドソームモジュレーターが含まれる。それらの例としては（１）Ｂｉｏｔａ（商品名）；（２）ＬＰ１００；（３）（ＳＰ−５−２１）−オキソビス（１−ピロリジンカルボジチオアト−Ｓ，Ｓ’）バナジウム；（４）インスリン−アスパルト（ヒトインスリン（２８Ｂ−Ｌ−アスパラギン酸）またはＢ２８−Ａｓｐ−インスリン、あるいはインスリンＩＮＡ−Ｘ１４、ＮＯＶＯＲＡＰＩＤ（商品名）、ＮＯＶＯＭＩＸ（商品名）またはＮＯＶＯＬＯＧ（商品名）としても知られる）；（５）インスリン−デテミル（ヒト２９Ｂ−（Ｎ６−（１−オキソテトラデシル）−Ｌ−リシン）−（１Ａ−２１Ａ），（１Ｂ−２９Ｂ）−インスリン、またはＮＮ３０４）；（６）インスリン−リスプロ（２８Ｂ−Ｌ−リシン−２９Ｂ−Ｌ−プロリン−ヒトインスリン、またはＬｙｓ（Ｂ２８），Ｐｒｏ（Ｂ２９）ヒトインスリン類縁体、あるいはｌｙｓ−ｐｒｏインスリン、ＬＹ２７５５８５、ＨＵＭＡＬＯＧ（商品名）、ＨＵＭＡＬＯＧ  ＭＩＸ７５／２５（商品名）またはＨＵＭＡＬＯＧ  ＭＩＸ５０／５０（商品名）としても知られる）；（７）インスリン−グルアルギン（ヒト（Ａ２１−グリシン，Ｂ３１−アルギニン，Ｂ３２−アルギニン）インスリンまたはＨＯＥ９０１、あるいはＬＡＮＴＵＳ（商品名）、ＯＰＴＩＳＵＬＩＮ（商品名）としても知られる）；（８）インスリン−亜鉛懸濁液、持効化（Ｕｌｔｒａｌｅｎｔｅ）、あるいはＨＵＭＵＬＩＮ（商品名）またはＵＬＴＲＡＬＥＮＴＥ（商品名）；（９）インスリン−亜鉛懸濁液（Ｌｅｎｔｅ）、結晶型７０％とアモルホス型３０％とのインスリン懸濁液、あるいはＬＥＮＴＥ  ＩＬＥＴＩＮ  ＩＩ（商品名）、ＨＵＭＵＬＩＮ  Ｌ（商品名）またはＮＯＶＯＬＩＮ  Ｌ（商品名）としても知られる）；（１０）ＨＵＭＵＬＩＮ５０／５０（イソファン−インスリン５０％とインスリン５０％との注射剤）；（１１）ＨＵＭＵＬＩＮ７０／３０（イソファン−インスリンＮＰＨ７０％とインスリン３０％との注射剤、あるいはＮＯＶＯＬＩＮ７０／３０（商品名）、ＮＯＶＯＬＩＮ７０／３０ＰｅｎＦｉｌｌ（商品名）、ＮＯＶＯＬＩＮ７０／３０Ｐｒｅｆｉｌｌｅｄ（商品名）としても知られる）；（１２）インスリン−イソファン懸濁液、たとえばＮＰＨ  ＩＬＥＴＩＮ  ＩＩ（商品名）、ＮＯＶＯＬＩＮ  Ｎ（商品名）、ＮＯＶＯＬＩＮ  Ｎ  ＰｅｎＦｉｌｌ（商品名）、ＮＯＶＯＬＩＮ  Ｎ  Ｐｒｅｆｉｌｌｅｄ（商品名）、ＨＵＭＵＬＩＮ  Ｎ（商品名）；（１３）レギュラー型インスリン注射剤、たとえばＩＬＥＴＩＮ  ＩＩ  Ｒｅｇｕｌａｒ（商品名）、ＮＯＶＯＬＩＮ  Ｒ（商品名）、ＶＥＬＯＳＵＬＩＮ  ＢＲ（商品名）、ＮＯＶＯＬＩＮ  Ｒ  ＰｅｎＦｉｌｌ（商品名）、ＮＯＶＯＬＩＮ  Ｒ  Ｐｒｅｆｉｌ���ｅｄ（商品名）、ＨＵＭＵＬＩＮ  Ｒ（商品名）またはＲｅｇｕｌａｒ  Ｕ−５００（Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄ）（商品名）；（１４）ＡＲＩＡＤ；（１５）ＬＹ１９７５３５；（１６）Ｌ−７８３２８１、ならびに（１７）ＴＥ−１７４１１が挙げられるが、それらに限定されない。
【００６４】
４．インスリン分泌モジュレーター、これらの例としては（１）グルカゴン様ペプチド−Ｉ（ＧＬＰ−１）およびその擬似物質；（２）向グルコース−インスリン性ペプチド（ＧＩＰ）およびその擬似物質；（３）エキセンジンおよびその擬似物質；（４）ジペプチルプロテアーゼ（ＤＰＰまたはＤＰＰＩＶ）阻害剤、たとえば（４ａ）ＤＰＰ−７２８またはＬＡＦ２３７（１−（（（２−（（５−シアノ−２−ピリジニル）アミノ）エチル）アミノ）アセチル−２−ピロリジンカルボニトリル、あるいはＮＶＰ−ＤＰＰ−７２８、ＤＰＰ−７２８Ａ、ＬＡＦ−２３７としても知られる）；（４ｂ）Ｐ３２９８またはＰ３２／９８（ジ−（３Ｎ−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル）−１，３−チアゾリジン・フマル酸塩）；（４ｃ）ＴＳＬ２２５（トリプトフィル−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸）；（４ｄ）バリンピロリジン（バルピール）；（４ｅ）１−アミノアルキルイソキノリノン−４−カルボキシラート類およびそれらの類似体；（４ｆ）ＳＤＺ２７２−０７０（１−（Ｌ−バリル）ピロリジン）；（４ｇ）ＴＭＣ−２Ａ、ＴＭＣ−２ＢまたはＴＭＣ−２Ｃ；（４ｈ）ジペプチドニトリル類（２−シアノピロロジド類）；（４ｉ）ＣＤ２６抑制剤；および（４ｊ）ＳＤＺ−２７４−４４４；（５）ＡＹ−２７９９５５のようなグルカゴンアンタゴニスト；ならびに（６）プラムリンチド（ＡＣ−１３７、シムリン、トリポ−アミリンまたは酢酸プラムリンチド）を含めるが、それに限定されないアミリンアゴニストが挙げられる。
【００６５】
５．インスリン分泌促進剤、これらは膵臓のβ細胞を刺激してインスリンの分泌を増加させるもので、例としては（１）アスミチグリニド（（２（Ｓ）−シス）−オクタヒドロ−γ−オキソ−α−（フェニルメチル）−２Ｈ−イソインドール−２−酪酸カルシウム塩、あるいはミツグルミド・カルシウム・水和物、ＫＡＤ１２２９またはＳ２１４０３としても知られる）；（２）Ｒｏ３４５６３；（３）ナテグリニド（トランス−Ｎ−（（４−（１−メチルエチル）シクロヘキシル）カルボニル）−Ｄ−フェニルアラニン、あるいはＡ４１６６、ＡＹ４１６６、ＹＭ０２６、ＦＯＸ９８８、ＤＪＮ６０８、ＳＤＺＤＪＮ６０８、ＳＴＡＲＬＩＸ（商品名）、ＳＴＡＲＳＩＳ（商品名）、ＦＡＳＴＩＣ（商品名）、ＴＲＡＺＥＣ（商品名）としても知られる）；（４）ＪＴＴ６０８（トランス−４−メチル−γ−オキソシクロヘキサン酪酸）；（５）スルホニルウレア類：たとえば（５ａ）クロルプロパミド（１−［（ｐ−クロロフェニル）スルホニル］−３−プロピルウレア、あるいはＤＩＡＢＩＮＥＳＥ（商品名）としても知られる）；（５ｂ）トラザミド（ＴＯＬＩＮＡＳＥ（商品名）またはＴＯＬＡＮＡＳＥ（商品名）；（５ｃ）トルブタミド（ＯＲＩＮＡＳＥ（商品名）またはＲＡＳＴＩＮＯＮ（商品名）；（５ｄ）グリブリド（１−［［ｐ−［２−（５−クロロ−Ｏ−アニスアミド）エチル］フェニル］スルホン−イル］−３−シクロヘキシルウレア、あるいはグリベンクラミド、ＤＩＡＢＥＴＡ（商品名）、ＭＩＣＲＯＮＡＳＥ（商品名）、ＧＬＹＮＡＳＥ  ＰｒｅＴａｂ（商品名）またはＤＡＯＮＩＬ（商品名）としても知られる）；（５ｅ）グリピジド（１−シクロヘキシル−３−［［ｐ−［２−（５−エチルピラジンカルボキシアミド）−エチル］フェニル］スルホニル］ウレア、あるいはＧＬＵＣＯＴＲＯＬ（商品名）、ＧＬＵＣＯＴＲＯＬ  ＸＬ（商品名）、ＭＩＮＯＤＩＡＢ（商品名）またはＧＬＩＢＥＮＥＳＥ（商品名）；（５ｆ）グリメピリド（３−エチル−２，５−ジヒドロ−４−ｍ−エチル−Ｎ−［２−［４−［［［［（４−メチルシクロヘキシル）アミノ］カルボニル］アミノ］スルホニル］フェニル］エチル］−２−オキソ−トランス−１Ｈ−ピロール−１−カルボキシアミド、あるいはＨｏｅ−４９０またはＡＭＡＲＹＬ（商品名）としても知られる）；（５ｇ）アセトヘキサミド（ＤＹＭＥＬＯＲ（商品名））；（５ｈ）グリクラジド（ＤＩＡＭＩＣＲＯＮ（商品名））；（５ｉ）グリペンチド（ＳＴＡＴＩＣＵＭ（商品名）；（５ｊ）グリキドン（ＧＬＵＲＥＮＯＲＭ）；および（５ｋ）グリソルアミド（ＤＩＡＢＥＮＯＲ（商品名））；（６）メグリチニド類が含まれるが、それに限定されないＫ＋チャンネルブロッカー：メグリチド類の例として（６ａ）レパグリニド（（Ｓ）−２−エトキシ−４−（２−（（３−メチル−１−（２−（１−ピペリジニル）フェニル）ブチル）アミノ）−２−オキソエチル）安息香酸、あるいはＡＧＥＥ６２３、ＡＧＥＥ６２３ＺＷ、ＮＮ６２３、ＰＲＡＮＤＩＮ（商品名）またはＮｏｖｏＮｏｒｍ（商品名）としても知られる）；（６ｂ）イミダゾリン類；および（６ｃ）α２アドレナリン受容体アンタゴニスト；（７）下垂体アデニルシクラーゼ活性���大性ポリペプチド（ＰＡｃＡＰ）；（８）血管作動性腸間ポリペプチド（ＶＩＰ）；（９）アミノ酸類似体；ならびに（１０）グルコキナーゼ活性化剤が挙げられる。
【００６６】
６．成長因子、これらの例としては（１）インスリン様成長因子（ＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２）；（２）小分子型ニューロトロフィン；（３）ソマトスタチン；（４）成長ホルモン放出性ペプチド（ＧＨＲＰ）；（５）成長ホルモン放出因子（ＧＨＲＦ）；および（６）ヒトセイチョウホルモンの断片が挙げられる。
【００６７】
７．免疫調節物質、これらの例としては（１）ワクチン、（２）Ｔ細胞抑制物質；（３）モノクローナル抗体；（４）インターロウキン−１（ＩＬ−１）アンタゴニスト；および（５）ＢＤＮＦが挙げられる。
【００６８】
８．グルコース吸収抑制剤、これらについてはたとえば、米国特許出願第２００３／００４５５５３号に記載されている。
【００６９】
９．そのほかの抗糖尿病薬剤：（１）組換えヒト型グルカゴン；（２）ＤＨＥＡ類似物質；（３）カルニチン−パルミトイル−トタンスフェラーゼ（ＣＰＴ）阻害剤；（４）膵島神経組織形成物質；（５）膵Ｐアミロイド抑制剤；ならびに（６）ＵＣＰ（脱共役性蛋白質）−２およびＵＣＰ−３モジュレーター。
【００７０】
さらに本発明で用いられるそのほかの薬剤には、血糖調節の障害および／またはその合併症の治療用の、当業者に既知である薬剤のいずれかが含まれる。そのような薬剤にはコレステロール低下剤が含まれるが、それらに限定されない。その例としては（ｉ）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤（ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、リバスタチン、ピタバスタチン、およびそのほかのスタチン類）、（ｉｉ）脂質封鎖剤（コレスチラミン、コレスチポール、および架橋化デキストランのジアルキルアミノアルキル誘導体）、（ｉｉｉ）ニコチニルアルコール、ニコチン酸、またはそれらの塩、（ｉｖ）ＰＰＡＲαアゴニスト、たとえばフェノフィブリン酸誘導体（ゲムフィブロジル、クロフィブラート、フェノフィブラートおよびベンザフィブラート）、（ｖ）コレステロール吸収抑制剤、たとえばβ−シトステロール、およびアシルＣｏＡ−コレステロール−アシルトランスフェラーゼ阻害剤、たとえばメリナミド、ならびに（ｖｉ）プロブコール；国際公開第９７／２８１４９号に記載されているようなＰＰＡＲδアゴニスト；抗肥満性化合物、たとえばフェンフルラミン、デキスフェンフルラミン、フェンチラミン、スルビトラミン、オルリスタット、ニューロペプチドＹ５抑制剤、およびβ３アドレナリン受容体アゴニスト；ならびに回腸胆汁酸トランスポーター抑制剤が挙げられる。
【００７１】
ＩＶ．関連する方法
一つの態様によれば、本発明は薬物、たとえばインスリン感作物質が投与されると反応を示すか、またはそうとみなされる複数の被験者の亜集団、およびインスリン感作物質の投与で反応が見られないか、またはそうであるとみなされる複数の被験者の亜集団の差を少なくとも部分的に区別する一個または複数の遺伝子変異の同定方法を提供する。いくつかの実施形態では、本発明の方法には、インスリン感作物質が投与されると反応を示すか、またはそのようにみなされる亜集団、およびインスリン感作物質の投与で反応が見られないか、またはそのようにみなされる亜集団の差を少なくとも部分的に区別する一個または複数の表現型の同定工程も含まれる。また本方法には、同定された一種または複数の遺伝子型および／または表現型に基づき、特定の被験者のインスリン感作物質に対する応答の素因の有無を予測する工程も含み得る。
【００７２】
薬物、たとえばインスリン感作物質に対する「反応」とは、本明細書に記載の反応のいずれかであり得、例としては治療応答および非治療応答（たとえば本明細書に記載されたような逆効果などの副作用）が挙げられる。いくつかの実施形態では、遺伝子変異はＳＮＰであり、それらの実施形態のいくつかでは、ＳＮＰには本明細書に記載のような少なくとも一個の情報提供性のＳＮＰが含まれる。いくつかの実施形態では、薬物はチアゾリジンジオンＰＰＡＲモジュレーターのようなインスリン感作物質であり、この例としてネトグリタゾンが挙げられる。
【００７３】
本明細書に記載の関連方法は、いずれかの薬物とともに用いるのが適しているが、詳細説明のいくつかでは、便宜的にインスリン感作物質について記述される。そのことはあくまで便宜的と理解され、薬物のいずれかがそれらの方法によって研究され得るものと理解される。本方法はゲノム学、特に薬物ゲノム学の技法を用いる。
【００７４】
本明細書で用いられる「少なくとも部分的な区別を行う」および「少なくとも部分的に区別する」という用語は、対照との差がある場合に使用でき、少なくとも約５０％が感受性、または少なくとも約６０％が感受性、または少なくとも約７０％が感受性、または少なくとも約８０％が感受性、または少なくとも約９０％が感受性、または少なくとも約９５％が感受性、または少なくとも約９９％が感受性である臨床上有用な結果、あるいは対照との差がある場合に使用でき、少なくとも約５０％が特異的、または少なくとも約６０％が特異的、または少なくとも約７０％が特異的、または少なくとも約８０％が特異的、または少なくとも約９０％が特異的、または少なくとも約９５％が特異的、または少なくとも約９９％が特異的である臨床上有用な結果を意味する。
【００７５】
ヒト染色体を構成するＤＮＡは、人体のすべての蛋白質の生成の指令を下す。それらの蛋白質は生物の生命機能を担う。ＤＮＡにおける変化は、感染症、癌、遺伝病および自己免疫病を含めたヒトのほぼすべての疾患に直接関係している。疾患または病気のような表現型の変化を引き起こすＤＮＡにおける変化は、数個の遺伝子の複雑な相互作用を混乱させる単一の変化、または単一遺伝子内の数個の変異から生じ得る。たとえばＩ型およびＩＩ型糖尿病では、多数の遺伝子が関わっていることが分かっており、それぞれの遺伝子で独自の変異のパターンが存在する。これに対して嚢胞性線維症では、単一遺伝子における３００個以上の異なる変異のうちのいずれか一つで生じ得る。また表現型は、ゲノムの非コード領域における変異によっても変わり得る。たとえば、規則的領域における一塩基変異によって、遺伝子発現のアップレギュレーションまたはダウンレギュレーションが起こる可能性があり、遺伝子の活性も変わり得る。
【００７６】
ヒトゲノム学の領域における技術的な発展によって、薬物ゲノム学の発展、その際のヒトＤＮＡ配列の多様性の使用、および薬物の処方が可能となる。薬物ゲノム学は、得られた遺伝子型とその結果生じる表現型との間の関連性または付随性に基づいている。薬物の副作用が二種類の薬物代謝酵素（血漿中のコリンエステラーゼおよびグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ）におけるアミノ酸の変化にリンクしているという半世紀以上にわたる初期の関連研究がなされて以来、ほかの相関性の研究においても、薬物代謝酵素、薬物標的組織および薬物輸送体における配列多型が、薬物の有効レベルまたは安全レベルの障害発生にリンクしていることが示されてきた。薬物ゲノム学の情報は、関連情報が薬物毒性発現を防ぐ目的で用いられる臨床場面で特に有用である。たとえば、６−メルカプトプリンまたはアザチオプリンの代謝を低下させるチオプリン−メチルトランスフェラーゼ遺伝子の違いで患者をスクリーニングできる。
【００７７】
本明細書における方法の特定の実施形態で用いることができる工程については、以下の特許明細書にさらに詳細に記載され、それらのすべては参照によって特にここに取込まれる。２００５年１月２４日出願の米国特許出願第１１／０４３６８９号“Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｕｓｉｎｇ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ”；２００１年３月３０日提出の米国特許仮出願第６０／２８０５３０号“Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  ＳＮＰ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｖｅ  ＳＮＰｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”；２００１年８月１７日提出の米国特許仮出願第６０／３１３２６４号“Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  ＳＮＰ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｖｅ  ＳＮＰｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”；２００１年１０月５日提出の米国特許仮出願第６０／３２７００６号“Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  ＳＮＰ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｖｅ  ＳＮＰｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”；２００２年１１月２６日提出の米国仮特許出願第６０／３３２５５０号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”；２００５年５月２４日登録の米国特許第６８９７０２５号“Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”；および２００２年１０月３１日出願の米国特許出願第１０／２８４４４４号“Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ”；２００５年１月３１日提出の米国特許仮出願第６０／６４８９５７号“Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｉｎｇ，Ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ，ａｎｄ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ  Ａｒｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ”；２００４年９月３０日出願の米国特許出願第１０／９５６２２４号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｇｅｎｅｔｉｃ  ａｎａｌｙｓｉｓ”；２００５年２月１６日提出の米国特許仮出願第６０／６５３６７２号“Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  Ｄｅｓｅａｓｅ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”；２００４年１月３０日出願の米国特許出願第１０／６８７８８号“Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ａｎａｌｙｚｉｎｇ  ａｎｄ  Ｃｈｒａｃｔｅｒｉｚｉｎｇ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ”；２００３年１月２７日出願の米国特許出願第１０／３５１９７３号“Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ”；２００４年１１月２０日出願の米国特許出願第１０／９７０７６１号“Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”；２００４年２月２４日出願の米国特許出願第１０／７８６４７５号“Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”、ならびに２００５年１月１１日提出の米国特許仮出願第６０／６４３００６号および２００４年１２月９日提出の米国特許仮出願第６０／６３５２８１号“Ｍａｒｋｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  Ｉｎｓｕｌｉｎ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ”。尚、これらのすべての開示事項は、参照によってここに特に取込まれる。
【００７８】
ヒトゲノムの配列決定によって、個人間の遺伝情報での類似度が高いことが明らかになった。特にいずれか二人のヒトではＤＮＡ配列の約９９．９％が同一であり、２３対の染色体の一つに同じように位置する約２万から約３万、またはそのくらいの遺伝子が存在している。しかしながらいすれか二人の個人の間には、なおもゲノムの多様性が存在する。たとえば、およそ０．１％、すなわちＤＮＡ１０００文字ごとに一文字が、ヒト集団で変わり得る。
【００７９】
個人間の遺伝子変異は、多くの形式で起こる可能性がある。遺伝子変異の例としては、一個または複数の核酸の欠失または挿入、繰返しＤＮＡエレメントの数の変化、ならびに単一の窒素性塩基の位置の変動、すなわち「一塩基多型」または「ＳＮＰ」としても知られているものが挙げられるが、それらに限定されない。本明細書での遺伝子変異はいずれも、ＤＮＡおよびＲＮＡで現われ得ることに注意を有する。
【００８０】
本発明の方法および組成物で使用され得るＳＮＰには、Ｈｉｎｄｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，３０７：１０７２−１０７９に記載のＳＮＰ、ならびにｇｅｎｏｍｅ．ｐｅｒｌｅｇｅｎ．ｃｏｍ．；ｒｅｓｅａｒｃｈ．ｃａｌｉｔ２．ｎｅｔ／ｈｅｐ／ｗｇｈａ／；ｈａｐｍａｐ．ｏｒｇ／ｃｇｉ／ｃｏｎｔｅｎｔ／ｆｕｌｌ／３０７／５７１２／１０７２／ＤＣＩ；ｄｂＳＮＰ；およびｇｅｎｅｗｉｎｄｏｗ．ｎｃｉ．ｎｉｈ．ｇｏｖ．のインターネットサイトで利用可能なＳＮＰが含まれる。
【００８１】
一般的なＳＮＰは３００−４００万種存在すると概算されている。ＳＮＰは通常、二種の形式で生じる二対立遺伝子型、主動対立遺伝子型、および副動対立遺伝子型であり、主動対立遺伝子型の見られる頻度は、副動対立遺伝子型のそれよりも高い。主動対立遺伝子型については通常、集団の５０％超で起こるが、副動対立遺伝子型は集団の５０％未満で起こる。一般的なＳＮＰは、少なくとも１０％の頻度での主動対立遺伝子型を有するＳＮＰであり、そのことは対象の集団内で副動対立遺伝子型が少なくとも１０％の頻度でＳＮＰ遺伝子座に存在することを意味する。さらに、一般的ＳＮＰは独立して起こるが、ほかのＳＮＰとともに遺伝子非平衡的に世代から世代に受継がれ、ゲノムのＤＮＡおよびＲＮＡに跨るパターンを形成する。互いに連鎖非平衡の状態であるＳＮＰのグループは、本明細書ではハプロタイプブロックのことを指すゲノム領域の意味である。
【００８２】
本明細書で用いられる「ハプロタイプブロック」という用語は、対象となる表現型の形質ともに受継がれるようになっている（言換えれば、連鎖非平衡である）（Ｐａｔｉｌら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９４：１７１９−１７２３（２００１）；および米国特許出願第２００３／０１８６２４４号参照）か、または対象となる表現型の形質に伴う一個または複数の多型サイト（たとえば１−１０個）を含む染色体領域を指す。換言すれば、あるブロック内に限った多型サイトでの多型の形式の組み合わせは、異なるハプロタイプブロックに生じる多型サイトの組み合わせよりも、高頻度で集団（たとえば対象の表現型の形質を持つ集団）内で相互に分離する。いくつかの実施形態では、隣接するハプロタイプブロックは互いに重複しない（すなわち、「非重複的」である）。いくつかの実施形態では、ハプロタイプブロックは、連鎖非平衡の貯蔵器でもあり得る（Ｈｉｎｄｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，３０７：１０７２−１０７９（２００５）参照）。さらにハプロタイプブロックについては、一種または複数のハプロタイプパターンで特性解析される。ハプロタイプパターンは、単一のハプロタイプブロック内の単一の核酸鎖（たとえば一個人の単一染色体）に存在するＳＮＰ対立遺伝子の集合である。対象集団における頻度が約１０％未満のＳＮＰ対立遺伝子、ハプロタイプパターン、および対立遺伝子変異については、ほとんど記載できない。したがって、対立遺伝子の頻度が約１０％未満とわずかであるＳＮＰについては、本明細書では「稀なＳＮＰ」のことを指すことができ、集団における頻度が１０％未満であるハプロタイプパターンおよび対立遺伝子変異については各々、本明細書では「稀なハプロタイプパターン」および「稀な対立遺伝子変異」のことを指すことができる。
【００８３】
以下の表１は、３名の個人から得られたＤＮＡ分子中の６個の位置におけるヌクレオチド塩基を説明している。それらのヌクレオチド塩基の位置については、ゲノムのＤＮＡまたはＲＮＡ（ＲＮＡではＴがＵに入替わる）に存在可能なものである。
【００８４】
（表１）
【００８５】
【表１】
2009509539.tif 000002
ヌクレオチド位置が１−２位および４−５位では、３人の個人のすべてが同じ塩基を持つ。ヌクレオチド位置が３位および６位では、Ｎｏ．２の個人が下線のヌクレオチド塩基、各々ＡおよびＣを持つが、これに対してＮｏ．１およびＮｏ．３の個人は、同位置でＧおよびＧのＳＮＰ対立遺伝子を持つ。
【００８６】
３位および６位で見られるＳＮＰの主動および副動の両方の対立遺伝子が、対象集団において少なくとも約１０％の頻度を有する場合（たとえば、主動および副動のＳＮＰ対立遺伝子が各々、９０％と１０％との比率、または７０％と３０％との比率の場合、但し、９５％と５％との比率は除く）、そのようなＳＮＰは一般的なＳＮＰを指す。さらに、３位および６位における２個のＳＮＰ対立遺伝子（たとえばＡおよびＣ）が共に一致して見られる（すなわち、相互に連鎖不平衡状態にある）場合、それらは一つのハプロタイプパターンの一部を成す。ハプロタイプパターンとは、偶然による頻度予測よりも高頻度で共に見られる遺伝子型ごとのＳＮＰ対立遺伝子を指す。ハプロタイプパターンにおけるＳＮＰ対立遺伝子のＳＮＰ配置は、ハプロタイプブロックを形成する。ハプロタイプブロックには、既知のＳＮＰならびに現時点で未知のＳＮＰも含めることができる。遺伝子型が一つのハプロタイプブロック内の一個または複数のほかのＳＮＰの遺伝子型から予測できるＳＮＰは、しばしば「情報提供性ＳＮＰ」を指す。対象の表現型を予測するのに伴う研究の実施のためには、一項または複数のハプロタイプブロック由来の情報提供性ＳＮＰのわずか一個、わずか二個、またはわずか数個をスキャンするだけで充分といえる。
【００８７】
いくつかの実施形態では、本発明は複数の被験者から得られたヌクレオチドの塩基の初期集合をスキャンして一種または複数の遺伝子変異（たとえば一般的なＳＮＰ）を同定する工程を企図する。そのようなスキャニング工程は、関連する研究、すなわちインスリン感作物質に対する応答性に関する研究のために選択されるような被験者についての表現型の集合についてのデータの入手と同時、またはその後に行うことができ、その反応は治療応答、または非治療応答、たとえば逆反応のような副作用であり得る。塩基の初期集合については、関連研究用に選択される被験者と同じ被検者および／または異なる被験者から得ることができる。
【００８８】
いくつかの場合では、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答を示すものとして、代用マーカーが用いられる。そのようなマーカー類については当業者に良く知られており、一般に計測を容易にするために選択され、それによってしばしば治療上または非治療上の効果が臨床上の観察から明らかになる前に示される。一例としては、心血管系の潜在的な副効果（または治療効果）に関するマーカーとしての血中脂質レベルまたは脂質比の使用が挙げられる。適当な代用マーカーのいずれについても、本発明の方法で用いることができる。有用なマーカーの一つは、治療対象の病気に関連する遺伝子でコードされる蛋白質の発現レベルであり；蛋白質発現レベルの増大および／または減少、ならびある種の蛋白質の発現比率は、治療上または非治療上の効果の有用で強力なインジケーターとなり得る。蛋白質の発現レベルの測定法については、当業者に良く知られている。
【００８９】
遺伝子変異の同定方法については、当業者に既知である。たとえば一つの代表的な染色体（たとえば第２１番染色体）を通じたＳＮＰおよびＳＮＰハプロタイプブロックの同定については、本発明の代理人に依託された２００２年１０月３１日提出の米国特許仮出願第６０／３２３０５９号“Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ”；ならびに２００２年１０月３１日出願の米国特許出願第１０／２８４４４４号“Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ”に記載されており、それらの明細書はここですべての目的のために参照することよって取込まれる。またＰａｔｉｌ，Ｎ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２９４，１７１９−１７２３（２００１）“Ｂｌｏｃｋｓ  ｏｆ  Ｌｉｍｉｔｅｄ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅ  Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｒｅｖｅａｌｅｄ  ｂｙ  Ｈｉｇｈ−Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｓｃａｎｎｉｎｇ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ  ２１”も参照され、そこでは第２１番染色体のＳＮＰおよびハプロタイプ構造が開示されている。
【００９０】
いくつかの実施形態では、全ゲノム解析の実施は完全なゲノム（ＤＮＡおよび／またはＲＮＡ）にわたる遺伝子変異の同定を目的とする。全ゲノムの解析法については、既知および／または新規の変異の両方の同定のために用いることができる。そのような方法については、２００１年１０月５日提出の米国特許仮出願第６０／３２７００６号“Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  ＳＮＰ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｖｅ  ＳＮＰ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”、および米国特許第６９６９５８９号に記載されており、両者とも本発明の代理人に依託されており、いずれもここですべての目的のために参照することよって取込まれる。ほかのゲノム解析の記載、すなわち配列決定方法については、米国特許第６７６７７０６号、第６８１８３９５号、第６８３３２４２号、第６３４４３２５号、および第６２２１６５４号で示唆され、それらのすべてはここですべての目的のために参照することよって取込まれる。
【００９１】
簡潔に述べると、全ゲノムのスキャンのためには、染色体の完全な集合は被験者の試料（たとえば１０超、２０超、３０超、４０超または５０超の被験者）から分離され得る。これによって同義の独自ゲノムが得られる。いくつかの実施形態では、単相ゲノム（すなわち染色体の単相集合から得られたゲノム）が用いられる。
【００９２】
いくつかの実施形態では、遺伝子変異を同定するためにＲＮＡ（たとえばｍＲＮＡ）がスキャンされ得る。ＲＮＡのスキャンのためには、最初に細胞、細胞群または個人からＲＮＡが単離される。ＲＮＡの単離方法については、当業者に既知である。ＲＮＡは１０人超、２０人超、３０人超、４０人超または５０人超の個人から単離可能である。ＲＮＡにおける発現パターンおよび／または遺伝子変異の差については、当業者に既知の方法または本明細書で開示された方法のいずれかを用いて同定できる。それらについては、米国特許出願第１０／４３８１８４号および第１０／８４５３１６号、ならびにＰＴＣ／ＵＳ／０４／０１０６９９が参照され、それらはここですべての目的のために参照することよって取込まれる。
【００９３】
いくつかの実施形態では、個人の遺伝子素材（たとえばＤＮＡ、ＲＮＡ，ｍＲＮＡ，ｃＤＮＡ、そのほかのヌクレオチド塩基またはそれらの誘導体）のすべてまたはその重要部分がスキャンまたは配列決定され、その際には通常のＤＮＡシーケンサー、またはチップを主体とするテクノロジーが用いられ、ＳＮＰ集合および対応する対立遺伝子が同定される。いくつかの実施形態では、単塩基の分割解析で個人のゲノムおよび／またはＲＮＡの各々を読取るために、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ社（米国、カリフォルニア州、サンタクララ市）から提供される全ウエハーテクノロジーが用いられる。
【００９４】
スキャンニング工程または診断ツール（新規の遺伝子変異の同定または個人の遺伝子型解析のいずれかを目的とする）には、少なくとも約１塩基、少なくとも約１０塩基、少なくとも約１００塩基、少なくとも約１０００塩基、少なくとも約１００００塩基、少なくとも約２００００塩基、少なくとも約５００００塩基、少なくとも約１０００００塩基、少なくとも２０００００塩基、少なくとも約５０００００塩基、少なくとも約１００００００塩基、少なくとも約２００００００塩基、少なくとも約５００００００塩基、少なくとも約１０００００００塩基、少なくとも約２０００００００塩基、少なくとも約５０００００００塩基、少なくとも約１００００００００塩基、少なくとも約２００００００００塩基、少なくとも約５００００００００塩基、少なくとも約１０００００００００塩基、少なくとも約２０００００００００塩基または少なくとも約３０００００００００塩基、あるいは一個人の遺伝子素材の実質的すべてのスキャンニングが必要となり得る。
【００９５】
いくつかの実施形態では、遺伝子変異の同定または遺伝子型解析を行うスキャンニング工程または診断ツールは、１００００００００未満の塩基、５０００００００未満の塩基、１０００００００未満の塩基、５００００００未満の塩基、約３０００００００００未満の塩基、約２０００００００００未満の塩基、約１０００００００００未満の塩基、約５０００００００００未満の塩基、約２００００００００未満の塩基、約１００００００００未満の塩基、約５０００００００未満の塩基、約２０００００００未満の塩基、約１０００００００未満の塩基、約５００００００未満の塩基、約２００００００未満の塩基、約１００００００未満の塩基、約５００００００未満の塩基、約２０００００未満の塩基、約１０００００未満の塩基、約５００００未満の塩基、約２００００未満の塩基、約１００００未満の塩基、約５０００未満の塩基、約２０００未満の塩基、約１０００未満の塩基、約５００未満の塩基、約２００未満の塩基、約１００未満の塩基、約５０未満の塩基、約２０未満の塩基、または約１０未満の塩基のスキャンを実施する。
【００９６】
個人（たとえば少なくとも約１０名の個人、少なくとも約２０名の個人、少なくとも約３０名の個人、少なくとも約４０名の個人、または少なくとも約５０名の個人）の初期集合におけるヌクレオチド塩基のスキャンニングによって、個人間の新たな遺伝子変異および／または既知の遺伝子変異が同定できる。各個人から得られた遺伝的変化のデータは、たとえば個人の初期集合内のほかの個人から得られた遺伝的変化と比較され、それによって１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０個またはそれ以上、あるいは１０，２０，３０，４０，５０，６０，７０，８０，９０，１００個またはそれ以上、あるいは１０００，５００００，１０００００、５０００００、１００００００個またはそれ以上、あるいは個人の初期集合における実質的全てまたは全ての遺伝子変異が発見される。
【００９７】
個人の初期集合において同定された変異については、それらが対象の表現型に伴うものかどうかを決める目的で解析されるような研究で引続いて用いることができる。それらの変異にはたとえば、ＳＮＰ、一般的ＳＮＰ、情報提供性のＳＮＰ、稀なＳＮＰ、欠失、挿入、フレームシフト突然変異などが含まれる。そのような遺伝子変異については、たとえばゲノムＤＮＡ、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、またはそれらの誘導体において検出できる。いくつかの実施形態では、スキャンおよび／または同定された遺伝子変異は、情報提供性ＳＮＰである。情報提供性ＳＮＰ（複数）を同定すると、単独の情報提供性ＳＮＰの遺伝子型でほかの一種または複数のＳＮＰ配置の遺伝子型の予測ができるため、関連研究のコストが下がり、能率を上げることができる。情報提供性ＳＮＰおよびその使用についてのさらに別の記載は、２００１年３月３０日提出の米国特許仮出願第６０／２８０５３０号“Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  ＳＮＰ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｖｅ  ＳＮＰｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”；２００１年８月１７日提出の米国特許仮出願第６０／３１３２６４号“Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  ＳＮＰ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｖｅ  ＳＮＰｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”；２００１年１０月５日提出の米国特許仮出願第６０／３２７００６号“Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  ＳＮＰ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｖｅ  ＳＮＰｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”；２００２年１１月２６日提出の米国特許仮出願第６０／３３２５５０号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”；米国特許第６９６９５８９号；および２００４年１０月３１日出願の米国特許出願第１０／２８４４４４号“Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ”でも考察されており、それらはここですべての目的のために参照することよって取込まれる。
【００９８】
たとえば、全ゲノム関連研究を行う場合、各々のゲノム由来の３００万個の塩基の全て、または約３００万−４００万個の一般的ＳＮＰのスキャンニングおよび読取りを実施しないかわりに、完全にゲノムをスキャンするのと同じように主要な情報が得られると考えられる約２０００００−５０００００個の情報提供性（または「タグ」）ＳＮＰの簡便なスキャンまたは読取りの実施（Ｈｉｎｄｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，３０７：１０７２−１０７９（２００５））が可能である。したがって、いくつかの実施形態では、本発明は関連研究のための全ゲノムのスキャンニングを企図するが、ほかの実施形態では、特定の染色体、ゲノム領域、ＳＮＰ、一般的ＳＮＰまたは情報提供性ＳＮＰについてのみがスキャン（たとえば遺伝子型解析）され、および／または関連研究の実施に用いられる。特定の染色体、ゲノム領域、ＳＮＰ、一般的ＳＮＰまたは情報提供性ＳＮＰについては、そのような領域が対象となる特別の表現型（たとえば、病気の状態の有無）に関係するか、関係し得るというこれまでの知識に基づき、関連研究のために選択され得る。たとえば、それらがほかの関連研究（たとえば連鎖−疾患マッピング研究）ですでに同定されているか、または機能が既知の遺伝子との相同性に基づき得る。
【００９９】
したがっていくつかの実施形態では、本発明の方法は本明細書に記載のデータベース、または当業者に既知のいずれかの適当なソースから得ることが可能な既知のＳＮＰを利用する。これらの実施形態では、完全なゲノムのスキャンは必要とされない。いくつかの実施形態では、遺伝子変異、たとえばＳＮＰに関する既知のサイトがスキャンされる。これらの実施形態では、約１５０００個；２０００００個；５０００００個；１００００００個；２００００００個、または一個人の遺伝子変異の実質的全ての遺伝子型解析が必要とされ得る。いくつかの実施形態では、遺伝子変異、たとえばＳＮＰの既知サイトがスキャンされる。これらの実施形態では、少なくとも約１００００個；１０００００個；５０００００個；１００００００個；２００００００個；または一個人の遺伝子変異の実質的全ての遺伝子型解析が必要とされ得る。いくつかの実施形態では、一個人における約１−約１０個、約１０−約１００個、約１００−約１０００個、約１０００−約１００００個、約１００００−約１０００００個、約１００００−約１００００００個、約１００００−約２００００００個、または約１０００００−約２００００００個、または約５０００００−約２００００００個、または約１００００００−約２００００００個、または約１００００−約１００００００個、または約１００００−約５０００００個、または約１００００−約１０００００個、または約１０００００−約２００００００個、または約１０００００−約１００００００個、または約１０００００−約５０００００個の遺伝子変異の遺伝子型解析が行われる。
【０１００】
本発明は、症例群および対照群の両方に属する遺伝子変異および表現型を用いる関連研究を企図する。症例群の被験者は、対象にされる表現型、たとえばインスリン感作物質のような薬物に対する反応性を発現する被験者であり、その場合の反応性は治療上または非治療応答であり得る。対照群の被験者は、対照の表現型を発現しない被験者、すなわちインスリン感作物質に反応性を示さない被験者である。いくつかの実施形態では、症例群には少なくとも２，５，１０，２０，５０，１００，２００，５００または１０００名の被験者が含まれ、対照群には少なくとも２，５，１０，２０，５０，１００，２００，５００または１０００名の被験者が含まれる。症例群および対照群を用いる遺伝子型関連の研究の実施方法については、たとえば２００３年１月２７日出願の米国特許出願第１０／３５１９７３号“Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｍｏｔｙｐｅｓ”；２００４年２月２４日出願の米国特許出願第１０／７８６４７５号“Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｓ  ｔｏ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”；２００４年１０月２０日出願の米国特許出願第１０／９７０７６１号“Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｕｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”；２００３年４月３０日出願の米国特許出願第１０／４２７６９６号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｍａｔｃｈｅｄ  Ｇｒｏｕｐｓ”；２００４年１月３０日出願の米国特許出願第１０／７６８７８８号“Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ａｎａｌｙｚｉｎｇ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｉｎｇ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ”：および２００４年９月３０日出願の米国特許出願第１０／９５６２２４号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”に記載されており、それらはここですべての目的のために参照することよって取込まれる。
【０１０１】
遺伝子型解析データの収集効率を上げるには、２００３年５月２８日出願の米国特許出願第１０／４４７６８５号“Ｌｉｖｅｒ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”；２００３年４月３０日出願の米国特許出願第１０／４２７６９６号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｍａｔｃｈｅｄ  Ｇｒｏｕｐｓ”；および２００４年１月３０日出願の米国特許出願第１０／７６８７８８号“Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ａｎａｌｙｚｉｎｇ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｉｎｇ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ”に記載されているように、スキャンニングの前に症例群および／または対照群の被験者の試料をプールすることが可能である。尚、それらの出願特許は、ここで参照されることによって取込まれる。たとえば、症例群の全てまたは数名の被験者から得られた試料は、スキャンニングの前に一緒にプールでき、および／または対照群の全てまたは数名の被験者から得られた試料は、スキャンニングの前に別々にプール（症例群のプールと対照群のプールとに分ける）できる。別の例では、症例群の数名または全ての被験者および／または対照群の数名または全ての被験者から得られた遺伝子変異および／または表現型に関するデータを一緒にプールできる。さらに、本明細書の実施形態のいずれかでは、収集された遺伝子変異データは、さらなる解析のためにコンピュータで読取り可能な媒体にも保存できる。
【０１０２】
本明細書の実施形態のいずれかでは、（変異の同定または遺伝子型解析を目的とした）スキャンニング工程には、（一種または複数の）データベースから得られる遺伝子変異に関する受入れデータが補われ、および／または代用され得る。そのようなデータベースによって、たとえば特定の個人に関して同定された遺伝子変異（たとえばＳＮＰまたはハプロタイプ）のリストまたは遺伝子型解析データのリストが提供され得る。遺伝子変異同定の、公に使用可能なデータベースの例としては、ｇｅｎｏｍｅ．ｐｅｒｌｅｇｅｎ．ｃｏｍ．；ｒｅｓｅａｒｃｈ．ｃａｌｉｔ２．ｎｅｔ／ｈｅｐ／ｗｇｈａ／；Ｈａｐｍａｐ．ｏｒｇ．；ｓｃｉｅｎｃｅｍａｇ．ｏｒｇ／ｃｇｉ／ｃｏｎｔｅｎｔ／ｆｕｌ／３０７／５７１２／１０７２／ＤＣ１；ｇｅｎｅｗｉｎｄｏｗ．ｎｃｉ．ｎｉｈ．ｇｏｖ．ＮＣＢＩ’ｓ  ｄｂＳＮＰ（ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ＳＮＰ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ）；ＭＩＴ’ｓ  ｈｕｍａｎ  ＳＮＰ  ｄａｔａｂａｓｅ（ｂｒｏａｄ．ｍｉｔ．ｅｄｕ／ｄｎｐ／ｈｕｍａｎ／）；Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｖａ’ｓ  ｈｕｍａｎ  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ  ２１  ＳＮＰ  ｄａｔａｂａｓｅ（ｃｓｎｐ．ｕｎｉｇｅ．ｃｈ／）；およびＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｔｏｋｙｏ’ｓ  ＳＮＰ  ｄａｔａｂａｓｅ（ｓｎｐ．ｉｍｓ．ｕ−ｔｏｋｙｏ．ａｃ．ｊｐ／）が挙げられるが、それらに限定されない。当業者に既知のほかのデータベースについても、本明細書の方法と併用できる。
【０１０３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態では、本発明は関連研究における個人間の一個または複数の遺伝子変異（たとえばＳＮＰ対立遺伝子、およびハプロタイプパターン）を使用して、ある個人のインスリン感作物質に対する応答性の有無の予測を企図する。ほかの実施形態では、本発明は関連研究における遺伝子型の変異のほかに、さらに表現型の変異の使用も企図する。遺伝子変異のみを用いる関連研究については、２００３年５月２８日に出願の米国特許出願第１０／４４７６８５号“Ｌｉｖｅｒ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”；２００５年１月３１日提出の米国特許仮出願第６０／６４８９５７号“Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｉｎｇ，Ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ”；および２００５年２月６日提出の米国特許仮出願第６０／６５３６７２号“Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”に記載されており、それらの特許情報はここで参照されることによって取込まれる。
【０１０４】
遺伝子変異および表現型変異を用いる関連研究については、２００５年１月２４日出願の米国特許出願第１１／０４３６８９号“Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ”に記載されており、それはここで参照されることによって取込まれる。遺伝子型解析データと同様に、被験者の表現型集合に関するデータも、症例群の被験者および対照群の被験者の両方について得られる。表現型集合に関するデータには、関連研究の複数の被験者の少なくとも約１，２，３，４，５，６，７，８，９、または１０種の異なる表現型、または少なくとも約１０，２５，３０，３５，４０，４５、または５０種の異なる表現型に関するデータが含まれ得る。表現型集合に関するデータは、遺伝子型解析データの収集／集積の前、後または同時に収集できる。収集された表現型データについては、（遺伝子型解析データと同様に）さらなる使用のために、コンピュータで読取り可能な媒体に保存することも可能である。
【０１０５】
Ａ．遺伝子型解析データ
関連研究の一つは、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答性に関連した遺伝子座の同定のために実施され得る。対象の形質に関連し得る遺伝子領域の同定のためには、プール試料集合を最初に用いる二段階アプローチが使用できる。症例群の試料プールと対照群の試料プールとの間の実際の対立遺伝子頻度の差については、それらの試料集合では計測できないが、対立遺伝子頻度の差については評価でき、さらなる評価のためのＳＮＰ亜集合の選択にも使用できる。この亜集合については、真の陽性のほかに偽陽性も含んでいる場合があるため、症例群の被検者および対照群の被験者の試料における遺伝子型解析が行われ、集団間全体の対立遺伝子頻度の差が計算される。いくつかの実施形態では、個別に遺伝子型解析が行われる集団は、プール形式の遺伝子型解析が行われる予定の集団と同一であり、ほかの実施形態では、個別に遺伝子型の解析が行われる集団は、プール形式の遺伝子型解析が行われる予定の集団とは異なり、さらにほかの実施形態では、個別の遺伝子型解析は、プール形式の遺伝子型解析が行われる予定の集団および少なくとも一個の別の集団の両方に関して実施され得る。いくつかの実施形態では、症例群および対照群についてのプール集団は、集団の構造にマッチングさせることで対象の（一種または複数の）表現型とは関連しない変異を少なくできる。そのような解析は、プール工程後に実施して対象集団のマッチングを確認することもできる。集団のマッチング方法については、たとえばＨｉｎｄｓら、Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．７４，３１７−３２５（２００４）“Ｍａｔｃｈｉｎｇ  ｓｔｒａｔａｇｉｅｓ  ｆｏｒ  ｇｅｎｅｔｉｃ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｉｎ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ”；２００３年４月３０日出願の米国特許出願第１０／４２７９６９号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｍａｔｃｈｅｄ  Ｇｒｏｕｐｓ”；およびＢａｃａｎｕ、Ｓ．Ａ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．６６，１９３３−１９４４（２０００）“Ｔｈｅ  ｐｏｗｅｒ  ｏｆ  ｇｅｎｏｍｉｃ  ｃｏｎｔｒｏｌ”に見出すことができ、それらはここで参照されることによってすべて取込まれる。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、オリジナルの試料集合においてインスリン抵抗性改善性薬物の副作用に対する感受性（または抵抗性）に重要な関連性を示すＳＮＰを、一種または複数のさらに別の試料集合においても解析し、それらの関連性を確認または実証する第三の段階が実施され得る。それらの研究は実証研究と呼ばれる。
【０１０７】
ヒトゲノムは、マイクロアレイ−テクノロジーのプラットホームを用いてスキャンし、遺伝子変異体の同定またはその遺伝子型解析が行われ、その技法については、たとえば米国特許第６５８６７５０号“Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  Ｓｃａｎｎｉｎｇ”；本特許出願と同一の代理人に依託した米国特許第６９６９５８９号；本特許出願と同一の代理人に依託し、２００２年１０月３１日に出願した米国特許出願第１０／２８４４４４号“Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ  ２１  ＳＮＰｓ、ＳＮＰ  Ｇｒｏｕｐｓ  ａｎｄ  ＳＮＰ  Ｐａｔｔｅｒｎｓ”；および本特許出願と同一の代理人に依託し、２００５年５月２４日に登録された米国特許第６８９７０２５号“Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”に記載されており、それらの全てはここで参照されることによって取込まれる。マイクロアレイは、半導体製造に適応される工程を用いて製造され、それによって対費用効果および品質向上が達成される。
【０１０８】
同定される変異体は、米国特許第６９６９５８９号で開示された方法を用い、ハプロタイプブロックに分類される。尚、その特許はここで参照されることによって取込まれる。完全なヒト染色体（第２１番染色体）から得られた代表的な変異体およびハプロタイプブロックについては、たとえば２００２年１０月３１日出願の米国特許出願第１０／２８４４４４号“Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ”；およびＰａｔｉｌ、Ｎ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２９４，１７１９−１７２３（２００１）“Ｂｌｏｃｋｓ  ｏｆ  Ｌｉｍｉｔｔｅｄ  Ｈａｐｌｏｔｙｐｅ  Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｒｅｖｅａｌｅｄ  ｂｙ  Ｈｉｇｈ−Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｓｃａｎｎｉｎｇ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ  ２１”、ならびに関連した追補データに開示されており、それらはここで参照されることによって取込まれる。
【０１０９】
症例群の試料は、薬物、たとえばインスリン感作物質の投与でこれまで反応性を示した被験者から得られる。それらの被験者については、臨床的に評価がなされる。「反応」とは本明細書で記載され、治療応答または非治療応答であり得る。非治療応答には副作用が含まれ、副作用には末梢性浮腫、依存性浮腫、全身性浮腫、体重増加、貧血、低血糖症、頭痛、排尿頻度の増加、下痢、食欲増進、一過性虚血性発作、肝酵素レベルの上昇、およびそれらの組み合わせが含まれるが、（インスリン感作物質の場合では）それらに限定されない。対照群の試料は薬物、たとえばインスリン感作物質の投与時に症例群の被験者と同じ反応性をこれまで示さなかった被験者から得られ、対照群と症例群とは反応が異なり、たとえば一方の被験者では効果が低く、他方の被験者では効果が高いなどの違いがあり得る。症例群および対照群に含めるための判断基準については、研究開始前に定められる。
【０１１０】
プール形式の遺伝子型解析  アレイは、ゲノムのＳＮＰの全てまたはその亜集合のアッセイ用にデザインされている。意味あるデータが得られる亜集合のいずれかが用いられ、たとえば多数の公的に利用可能なデータベースは、ヒトゲノム中のＳＮＰ集合について記載し、それらはたとえば本明細書のどの箇所での記載でも利用できる。
【０１１１】
オリゴヌクレオチド−アレイは、ＳＮＰの各々がプローブ集合によってインターロゲートされるようにデザインされている。たとえば、いくつかの実施形態では、アレイはＳＮＰの各々がが、たとえば４０種の異なる２５ｂｐのプローブによってインターロゲートされるようにデザインされ得る。それらの４０種の特徴は、１０種の特徴を各々持つ４個の集合から成り、それらは二個のＳＮＰ対立遺伝子の順方向および逆方向の鎖（参照の鎖および代替の鎖）に対応する。１０種の特徴の各々の集合は、２５ｂｐのプローブの中心とＳＮＰの位置との間において−２、−１、０、＋１および＋２塩基という５段階的に分かれる５種の特徴を各々持つ２個の集合から成る。それらの段階に分けるごとに、一個の完全マッチの特徴および一個のミスマッチの特徴（インターロゲート位置でのみ完全マッチが相補される）が、対象プローブの中心位置に配置される。したがって対立遺伝子ごとに、全部で１０個の完全マッチプローブおよび１０個のミスマッチプローブが存在する。それらのオリゴヌクレオチド特性は、ＳＮＰが一種または複数の別なアレイデザイン上に配列するかどうかを調べるのに必要である。そのことについては、２００４年１０月２０日出願の米国特許出願第１０／９７０７６１号“Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”もさらに参照される。
【０１１２】
試料については以下のような品質解析が可能である。（１）濃度および容積を計測し、その値が予測値に合致し、対象の研究に妥当であることを確認する；（２）試料の亜集合についてゲル電気泳動を行い、ＤＮＡが変化していないことを試験する；および（３）ＰＣＲアッセイを実施し、そのＤＮＡ試料、またはその亜集合のＰＣＲ増幅能を確かめる。
【０１１３】
試料は、ＱＣ（品質管理）通過後に適当な濃度に希釈して再度定量する。それらの試料は、適当ないずれか手法でもプール中に分割できる。得られたプール形式の分析のいずれかでも、試料の取扱いによる遺伝子型および／または変異に関する所望の情報が得られるようにプールされ得る。いくつかの実施形態では、症例群および対照群は各々、個々のプールに分割でき、個別のプールの各々を分析できる。プール数については、１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０または１０超であり得る。たとえば、試料を全部で８個のプール、すなわち症例群の試料を含む４個のプールおよび対照群の試料を含む４個のプールに分割できる。したがって各々のプールには、症例群または対照群のいずれかから無作為に選択されたたとえば１００種の試料が含まれ、各試料は一つのプール中にのみ存在する。当モル量の各試料を、８個のプールの一つに移す。次に各プールを再び定量し、ＰＣＲ用テンプレートとして用いるために標準濃度に希釈できる。あるいはいくつかの実施形態では、症例群または対照群の同一亜集合から各々成る複製物プールを分析できる。そのプール数は、１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０または１０超であり得る。たとえば、試料を全部で８個のプール、すなわち症例群の試料を含む４個のプールおよび対照群の試料を含む４個のプールに分割できる。したがって、各々のプールには、症例群または対照群のいずれかから無作為に選択されたたとえば１００種の試料が含まれるが、この実施形態では、各試料は４個の症例群プールもいずれかまたは４個の対照群プールのいずれかに存在する。当モル量の各試料を、８個のプールの一つに移す。次に各プールを再び定量し、ＰＣＲ用テンプレートとして用いるために標準濃度に希釈できる。この場合の実施形態では、分析に用いられる手順によって変異の研究が開始できる。ほかの実施形態では、全ての症例群試料の部分試料は複数の「症例群プール」中に存在し、全ての対照群試料の部分試料は複数の「対照群プール」中に存在し得る。
【０１１４】
それらのプールは、たとえば各々のＳＮＰ用の単一のプライマリー対による多重ＰＣＲを用いて独立して増幅される。それらの増幅産物は、プール化、標識化およびハイブリダイズされ、そのハイブリダイゼーションは、遺伝子型解析用に選択されたＳＮＰ集合を個別または一緒に検査する一種または複数のチップに対して行われる。そのハイブリダイズ化チップは、洗浄され、染色される。標識化試料のハイブリダイゼーションの検出も行われる。それについてはたとえば、２００６年１月３１日出願の米国特許出願第１１／３４４９７５号“Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”；２００５年１２月９日出願の米国特許出願第１１／２９９２９８号“Ｍａｒｋｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  Ｉｎｓｕｌｉｎ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ”；および２００６年９月２７日出願の米国特許代理人整理番号３００／１０８１−１０“Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｔｈｅｒｅｏｆ”が参照される。
【０１１５】
品質管理が不良のＳＮＰ測定データを除いた後（以下参照）、症例群プールと対照群プールとの間の予測される対立遺伝子頻度の差、すなわちΔＰと呼ばれる値は、対立遺伝子に特異的な２５員体へのハイブリダイゼーションに関するの比の大きさから、ＳＮＰごとに自動的に得られる。アレイ上での参照鎖および代替鎖の完全マッチ体の蛍光強度は、そのＤＮＡ試料中の対応するＳＮＰ対立遺伝子含有率と相関する。対立遺伝子の頻度、すなわちＰの推定値は、ミスマッチ体の強度を考慮して計算されたバックグランド測定値を差引いた後、完全マッチ体強度を考慮した比から計算される。症例群プールのＰおよび対照群プールのＰは、別々に平均値が求められ、ΔＰが計算される。最終的には、プール内での測定値の分散、ｔ検定におけるｐ値、およびΔＰについての経験的なｐ値（各チップデザインを通過したＳＮＰ測定値の全てによって得られ、各チップデザインに関する
Ｔ検定のＰ値のランクとして得られるもの）に基づいて、推定値の標準誤差はＱＣフィルターを通過させてＳＮＰごとに計算される。そのことについては、たとえば２００４年１月３０日出願の米国特許出願第１０／７６８７８８号“Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ａｎａｌｙｚｉｎｇ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｉｎｇ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ”が参照される。
【０１１６】
一回のアレイでのスキャンにおけるＳＮＰごとの蛍光強度特性の信頼性評価のためのデータには、以下に述べる品質管理フィルターが適用できる。それらのフィルターは、多数のこれまでの関連研究から得られた知見に基づいており、それらを適用することでフィルターを通過したＳＮＰの品質が向上し、それによって偽陽性関連ケースが低減する。ＳＮＰ測定データが以下の事項のいずれかを備える場合、それらを考察から除外する。（１）規格適合性が０．９未満である；（２）プローブが飽和している；および（３）シグナル／バックグランド比が１．５未満である。尚、それらの品質測定の実施については、２００４年１０月２０日出願の米国特許出願第１０／９７０７６１号“Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”にさらに記載されている。
【０１１７】
対立遺伝子の規格適合性は、完全マッチ体が対応ミスマッチ体よりも際立った機能性体のフラクションとして規定される。規格適合性が０．９未満では、標的ＤＮＡが存在しないことが示され得る。プローブが飽和し、かつシグナル／バックグランド比が低いと、信頼性がないｐの測定データとなり得る。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、ＳＮＰはほかの評価基準、たとえばΔＰ測定データに関するｐ値の閾値、ΔＰ測定データの標準誤差（ＳＥ）、およびほかのＱＣフィルターを通過する場合、さらに評価（個人の遺伝子型解析）のための選択が行われる。さらに個人の遺伝子型解析は、プール形式の遺伝子型解析フェーズで増幅されなかったＳＮＰ；集団の層化コントロールのためのＳＮＰ（たとえば２００３年４月３０日出願の米国特許出願第１０／４２７６９６号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  ｍａｔｃｈｅｄ  ｇｒｏｕｐｓ”参照）；および／または候補領域から得られるＳＮＰも含み得る。
【０１１９】
個人の遺伝子型解析
個人の試料で遺伝子型解析されたＳＮＰ
選択されたＳＮＰは、症例群および対照群の試料の各々で個別に遺伝子型解析が行われる。それらのＳＮＰには、プール形式の遺伝子型解析の結果に基づいて選択されたＳＮＰ、候補領域から得られるＳＮＰ、および集団の層化コントロールのためのＳＮＰを含めることができる。個別に遺伝子型解析が行われる症例群および対照群の試料については、プール形式の遺伝子型解析が行われる予定の試料と同一または異なり得る。
【０１２０】
高密度のオリゴヌクレオチド−アレイ
選択されたＳＮＰを個別に遺伝子型解析する目的で、新たなアレイのデザインが可能であり、それにはたとえば各個人のＤＮＡ試料に対して一個のシングルチップを用いることで、選択された全てのＳＮＰのアッセイが可能になるようなデザインが挙げられる。
【０１２１】
症例群および対照群の個別の遺伝子型解析
症例群および対照群の試料から得られたＳＮＰの増幅を行う。個人ごとの増幅試料はプールされ、オリゴヌクレオチド−アレイにハイブリダイズされ、それによってプール試料ごとに、単一の個人のみについて、ＳＮＰが試験される。さらに、それらの試料は増幅前においてもプールされ得る。ハイブリダイズされたチップは洗浄され、染色され、得られる蛍光が検出され、プール形式の遺伝子型解析が行われる。
【０１２２】
個別の遺伝子型解析法については、たとえば２００３年１月２７日出願の米国特許出願第１０／３５１９７３号“Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ”；２００４年２月２４日出願の米国特許出願第１０／７８６４７５号“Ａｎｅｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”；２００４年１０月２０日出願の米国特許出願第１０／９７０７６１号“Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”；および２００５年７月１日出願の米国特許出願第１１／１７３８０９号“Ａｌｇｏｒｉｔｈｍ  ｆｏｒ  Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ  Ａｃｃｕｒａｃｙ  ｏｆ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅ  Ａｓｓｉｇｎｍｅｎｔ”に記載されている。ある実施形態では、ＳＮＰごとの個人の遺伝子型解析は、全ての試料の強度測定データのクラスター解析によって求められ、それらは参照および代替の対立遺伝子に関する完全マッチ体の平均強度の、バックグランド調整後の値によって二次元空間内で規定される。このことについては、２００４年１０月２０日出願の米国特許出願第１０／９７０７６１号“Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｇ”；Ｈｉｎｄｓ，Ｄ．Ａ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．７４，３１７−３２５（２００４）“Ｍａｔｃｈｉｎｇ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｆｏｒ  ｇｅｎｅｔｉｃ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｉｎ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ”；Ｈｉｎｄｓ，Ｄ．Ａ．ら、Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ１，４２１−４３４（２００４）“Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｏｏｌｅｄ  ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ  ｔｏ  ｓｃａｎ  ｃａｎｄｉｄａｔｅ  ｒｅｇｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ＨＤＬ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ｊｅｖｅｌｓ”；およびＨｉｎｄｓ，Ｄ．Ａ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ３０７，１０７２−１０７９（２００５）“Ｗｈｏｌｅ  ｇｅｎｏｍｅ  ｐａｔｔｅｒｎｓ  ｏｆ  ｃｏｍｍｏｎ  ＤＮＡ  ｖａｒｉａｔｕｉｎ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ”が参照される。Ｋ平均アルゴリズムは、三種の可能性のある別個の複相遺伝子型、すなわちホモ接合型参照、ヘテロ接合、およびホモ接合型代替を示すクラスターに対する測定データの割り当てのために使用できる。Ｋ平均の工程およびバックグランド最適化の工程は、相互に情報の交換を行ない、クラスター構成およびバックグランド推定値を収束させる。遺伝子型のクラスターに適した数を求めるには、１，２および３個のクラスターについて解析を繰返して行い、最適と考えられる解法、データにふさわしい考察、およびクラスターパラメータを選択する。
【０１２３】
品質管理
品質管理フィルターは、あるアレイのスキャンにおけるＳＮＰごとの蛍光強度特性の信頼性を評価するため、そのデータに対して適用できる。それらのフィルターは、多数の過去の関連研究から得られた知見に基づくものであって、それらのフィルターを適用すると、通過したＳＮＰの品質が向上する。個々の遺伝子型解析の品質管理フィルターを通過したＳＮＰはさらに解析される。そのようなフィルターとしては、たとえば呼出しレートとハーディ−ワインバーグ平衡ｐ値との組み合わせに基づくものが挙げられる。特定の組み合わせの選択は、所望の通過ＳＮＰの品質の向上の度合いに依存して行われる。たとえば、あるフィルターが０．８の呼出しレートを要求する場合、その意味はＳＮＰが試料の少なくとも８０％で有意な遺伝子型を持ち；０．０００１超のハーディー−ワインバーグ平衡ｐ値を持つことである。ＳＮＰ呼出しレートについては、個別の遺伝子型解析の誤り可能性を求める規定法を用い、０．２未満のスコアとなった遺伝子型を捨てた後に計算され得る。いくつかの実施形態では、測定規定法の使用は、入力に基づき１５種のＱＣおよびＳＮＰ特性から得られるアウトサイドプラットホームと不一致である遺伝子型の可能性に近似させるアルゴリズムを学習している機械で行われる。そのことについては、たとえば２００４年１０月２０日出願の米国特許出願第１０／９７０７６１号“Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”；および２００５年７月１日出願の米国特許出願第１１／１７３８０９号“Ａｌｇｏｒｉｔｈｍ  ｆｏｒ  Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ  Ａｃｃｕｒａｃｙ  ｏｆ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅ  Ａｓｓｉｇｎｍｅｎｔ”が参照され、それらの開示事項は個々で参照されることによって取込まれる。
【０１２４】
個人の遺伝子型解析結果
偽陽性レートおよび偽発見レートの割当て
全く偶然に見られるとの予想を考慮する有意性検定ｐ値を用いると、ＳＮＰの数が計算でき、研究のプール工程における大きな対立遺伝子頻度の差が増大しないことが仮定される。その期待値は、実際の数と比較でき、異なるｐ値のカットオフ値を各々下回るＳＮＰ観測数が予測値よりも大きい場合、そのプール形式の遺伝子型解析によって、大きな対立遺伝子頻度の差を持つＳＮＰに関するＳＮＰ集合が増えることとなる。偽発見レートについても、あるカットオフ値を下回る有意性検定ｐ値を有するＳＮＰの観測数に対する偽陽性予測数の比として計算され得る。
【０１２５】
したがって高密度アレイ−テクノロジーを用いると、ある薬物または薬物クラスの一種または複数の副作用に対する感受性に関連するＳＮＰは、症例群と対照群とのＳＮＰ対立遺伝子頻度の差を計測することによって同定される。いくつかの実施形態では、そのように同定されたＳＮＰの全てまたは実質的に全てが、ほかの研究または臨床設定に使用でき、それによってインスリン感作物質に対するレスポンダーまたは非レスポンダーが予測される。いくつかの実施形態では、そのように同定されたＳＮＰの亜集合は、ほかの研究または臨床設定に使用でき、それによってインスリン感作物質に対するレスポンダーまたは非レスポンダーが予測される。
【０１２６】
Ｂ．遺伝子型および表現型の両方のデータに関連する研究
遺伝子型および表現型のデータは両方とも、本発明の方法における関連研究で使用できる。遺伝子変異および表現型変異を両方とも用いる関連研究については、２００５年１月２４日出願の米国特許出願第１１／０４３６８９号“Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ”に開示されており、それはここで参照されることで取込まれる。
【０１２７】
対象の表現型、すなわちインスリン感作物質に対する応答性を持つか、持たない複数の被験者から得られる遺伝子変異に関するデータについては、前述のように容認される。対象の表現型、すなわちインスリン感作物質に対する応答性は、本節に記載の表現型と同一ではなく、それらの表現型の一種または複数と対象の表現型との間に存在するか、または存在しないかを求めるのに前述の表現型が用いられることが分かるであろう。
【０１２８】
本発明の方法では、対象の表現型とはインスリン感作物質に対する応答のことであり、薬物の臨床試験または薬物治療の被験者を含むか、またはそれらから被験者を除外するものと考えられる。そのことについては、２００４年４月２８日提出の米国特許仮出願第６０／５６６３０２号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”；２００４年７月２２日提出の米国特許仮出願第６０／５９０５３４号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”；２００４年９月３０日出願の米国特許出願第１０／９５６２２４号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”；および２００６年８月２５日出願の米国特許出願第１１／５１０２６１号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”が参照され、それらの全てについては、全ての目的でここで参照されることで取込まれる。
【０１２９】
複数の個人の一群の表現型に関するデータについても、容認できる。表現型の群には対象の表現型が含まれる。表現型の群に関するデータは、遺伝子変異のデータ受入れの前、後、および／または同時に受入れできる。いくつかの実施形態では、表現型群に関するデータは本発明の実施者によって得られ、その例としては観察所見（たとえば大まかな表現型形質）、生化学的検査（たとえば血液または尿の分析）、またはほかの診断検査（たとえば、Ｘ線、ＭＲＩ、ＣＡＴスキャン、ＣＴスキャン、ドップラーシフトなど）による。
【０１３０】
受入れ／収集され得る表現型データの例としては、個人の言語発声能、ＰＴＣ味覚能、急性炎症、適応免疫、異種または複数の耽溺、脂肪組織、副腎、年齢、攻撃性、アミノ酸レベル、アミロイドーシス、肛門−性器の距離、抗原提示細胞、聴覚系、自律神経系、回避学習、軸面欠損または軸面不足、Ｂ細胞欠乏、Ｂ細胞、Ｂリンパ球（たとえば抗原提示）、好塩基球、膀胱の大きさ／形状、瞬き、血液化学、血液循環、血糖値、血液生理、血圧、体格指数、体重、骨密度、骨髄の形状／構造、骨強度、骨／骨格生理、胸部の大きさ／形状、滑液包、海綿骨質、心停止、心筋梗塞、心拍出量、心拍出容量、心筋症、心血管系／疾患、手根骨、カタレプシー、細胞異常、細胞死、細胞分化、細胞形態、細胞数、細胞性免疫、中枢神経系、中枢神経系生理、走化性因子、軟骨形成異常、染色体不安定、慢性炎症、不整脈、循環系、下顎裂溝、クローン性アネルギー、クローン欠乏、Ｔ細胞およびＢ細胞の欠損、条件情緒反応、先天性骨格奇形、状況条件づけ、骨皮質の厚さ、頭蓋骨、頭蓋欠損、リーバークーン陰窩、キュード調節、サイトカイン類、遅延骨化、樹状細胞（たとえば抗原提示細胞）、ディ・ジョルジ症候群、消化機能、消化器系、指の奇形、凹窩、識別学習、飲酒動向、薬物乱用、薬物反応、耳たぶの付き方を含めた耳の大きさ／形状、摂食動向、射精機能、胚形成、胚の死、胚の成長／重量／体サイズ、情動、酵素／補酵素のレベル、好酸球、癲癇、松果体、食道、排泄生理、四肢、瞬きの条件、眼の色／形状、眼の生理学、まゆの形状、まつげの長さ、顔の形状、顔のほり、大腿骨、受胎／生殖能、腓骨、指の長さ／形状、体液調節、泉門、前腸、虚弱骨格、そばかす、胆嚢、配偶子形成、胃腸の出血、生殖細胞（たとえば、その形態、不足）、腺の奇形、腺機能、グルカゴンのレベル、グルコースのホメオスタシス、グルコース耐性、グリコーゲンの異化、顆粒球、顆粒球の機能（たとえば、抗菌活性、走化性）、握力、身づくろい、頭髪色、頭部の毛穴の構造／向き、頭毛の生育、関節中央の体毛、髪の毛の特性、利き手、ハーダー腺、頭部、聴覚機能、心臓、心拍数、心拍動（たとえば、速度、不規則性）、身長、関節血症、血液リンパ系、肝臓系、親指外反、ホメオシタシス、上腕骨、体液性免疫反応、軸骨格形成不全、視床下部、免疫細胞、免疫系（たとえば、過敏性）、免疫系の反応／機能、免疫寛容、免疫不全、排尿不能、γ線に対する感受性の増大、炎症メディエータ、炎症反応、先天性免疫性、内耳、神経分布、インスリンレベル、インスリン抵抗性、腸出血、腸、鉄ホメオスタシス、下あご、腎出血、腎臓結石、腎臓／腎臓系、脊柱後側彎、脊柱後彎、涙腺、喉頭、学習／記憶、リンパ球、靭帯、四肢の奇形、四肢の握り、脂質化学、脂質ホメオスタシス、唇の大きさ／形状、肝臓（たとえば発育／機能）、肝臓／肝機系、運動活動度、脊柱前彎、肺、肺の発育、リンパ組織の発育、マクロファージ（たとえば抗原提示細胞）、乳腺、母性／父性行動、性交パターン、減数分裂、精神的鋭敏さ、精神安定性、精神状態、異物代謝、骨幹端、内耳、内耳骨、病的状態および死亡、運動調節／平衡性、運動学習、口、動作、民肉、筋収縮、筋変性、筋肉の発育、筋肉生理、筋再生、筋痙攣、筋肉のひき���り、筋肉組織、髄鞘形成、筋形成、神経系、神経頭蓋、神経内分泌腺、好中球、ＮＫ細胞、侵襲、鼻、栄養状態／吸収、対物認識記憶、眼屈折率、においの好み、嗅覚系、卵形成、オペラントすなわち「標的反応」、眼窩、骨形成、骨形成／発育、骨髄炎、骨粗鬆症、外耳、酸素消費、口蓋、膵臓、麻痺、副甲状腺、骨盤帯、陰茎勃起機能、周産期死、末梢神経系、指骨、咽頭、光感受性、立毛筋起立、耳介の反射、下垂体、ＰＮＳグリア、出生後死、出生後の成長／体重／体格、体位、未熟児死、前腫瘍形成、右腕と左腕との交差の癖、両手を握ったときに右の親指と左の親指との交差の癖、肺循環、瞳孔の反射、橈骨、反射反応、生殖状態、生殖系、脂肪肝増殖に対する抵抗性、高脂血症に対する抵抗性、呼吸（たとえば、呼吸数、呼吸の浅さ）、呼吸の困難または機能不全、呼吸器粘膜、呼吸器筋肉、呼吸器系、感染症に対する抵抗性、外傷に対する抵抗性、新たな環境に対する反応性（転位喚起）、肋骨、唾液腺、脊柱側弯、皮脂腺、二次骨吸収、発作、自己寛容、老衰、感覚器受容性、感覚器系の生理／反応、性、性腺、肩、皮膚、皮膚の色、皮膚のきめ細かさ／状態、頭蓋骨、頭蓋骨の異常、睡眠パターン、社会的知能、体神経系、空間学習、精子数、精子の運動性、精子形成、驚き反応、胸骨欠損、胃、縫合閉塞、汗腺、Ｔ細胞不全、Ｔ細胞（たとえばＴ細胞数）、足根骨、味覚反応、歯、体温調節、即時記憶、腱、甲状腺、脛骨、触覚／刺激、気道、震顫、腹筋運動、腫瘍の発病、腫瘍形成、尺骨、排尿系、排尿パターン、尿化学、泌尿器の状態、泌尿器系、脈管構造、血管作用性メディエータ、椎骨、膀胱尿管反射、鼻毛、鼻毛反射、内臓頭蓋、視覚系、虚弱、Ｖ字型の額の生え際またはその欠如、などに関するデータが挙げられるが、それらに限定されない。それらについては、たとえば２００５年１月２４日出願の米国特許出願第１１／０４３６８９号“Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ”が参照され、その開示情報は参照によってここで完全に取込まれる。
【０１３１】
個人について受入れ／収集され得る表現型のさらに別の例には、過去の医学的状態または医療履歴（たとえば、外科手術の有無、特別な病気の罹患歴、経産または非経産、精神病の診断歴、アレルギーの有無など）についての表現型データが含まれ得る。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、表現型は対象個人の家族の履歴に関しても受入れ／収集され得る。たとえば、禿頭、癌、糖尿病、高血圧、精神病、精神遅滞、注意力欠如、不妊、勃起不全、心血管疾患、アレルギー、薬物乱用、などの罹患または罹患のしやすさに関するデータも収集できる。
【０１３３】
対象の表現型（たとえば、インスリン感作物質に対する応答性）を持つか、または持たない個人について、一種または複数のデータが受入れられる。いくつかの実施形態では、可能な表現型のさらに大きな集合が関連研究に使用され、症例群または対照群に属すか、または属さない個人における対象表現型の同定が、最も可能性のあるように行われる。たとえば、２種超、３種超、５種超、７種超、１０種超、１５種超、２０種超、２５種超、３０種超、３５種超、４０種超、４５種超、５０種超、６０種超、７０種超、８０種超、９０種超、または１００種超の表現型に関するデータが、一つの関連研究で使用され得る。
【０１３４】
表現型の群に関するデータは、表現型−対−表現型の基本則に基づき、二元系（たとえば、０系および１系）またはその数倍の系（たとえば、３倍、または４倍などでの０系、１系、２系など）で受入れられ得る。二元系で受入れ可能な表現型データの例には、疾患の存在（または不在）が含まれる。個人がある表現型群に属する特定の表現型を持つ場合、その表現型を「１」と表わすことができる。逆に、個人がある表現型群に属する特定の表現型を持たない場合、その表現型を「０」と表わすことができる。
【０１３５】
同様に表現型群に関するデータについても、さらに数倍の系、たとえば３倍、４倍、またはそれ以上の系（たとえば、１０倍超、２０倍超、または４０倍超）で受入れることができる。さらに大きな系では、表現型の多くの形式の各々について、異なる数で表わすことができる。たとえば、個人が表現型群のうちのある表現型の第一形式（たとえば眼の色が青色）を示す場合、その表現型を「１」と表わすことができ、表現型群の表現型の第二形式（たとえば、眼の色が緑色）を「２」と表わすことができ、さらに表現型群の表現型の第三形式（たとえば、眼の色が褐色）を「３」などと表わすことができる。
【０１３６】
個人についての複数の表現型に関するデータには、その表現型または複数の表現型が個人に存在（または存在しない）度合いについてのデータも含めることができる。たとえば皮膚の色素沈着の度合いは、１から１０までの等級で示すことができ、「１」は皮膚の色が最も薄い場合を示し、「１０」は皮膚の色が最も濃い場合を示す。皮膚の色素沈着の度合いの判定は、観察者（たとえば臨床医）によって行われるか、または種々の数学的−統計学的方法を用いる複数のほかの判定者に基づいて行われ得る。尚、その数学的−統計学的方法には、多重比較（ボンフェローニ法）、分散解析、回帰・相関解析、および多変量判別解析（米国特許第４７９１９９８号参照；その開示内容は全ての目的で参照によってここで取込まれる）が含まれるが、それらに限定されない。
【０１３７】
表現型群に関する遺伝子変異およびデータは、対象の一種（または複数）の表現型に関連した研究では集合的に用いられる。相関については、言い換えるかまたは付加えると、全体のコストを下げるためにプール形式の試料で行うことができ、あるいは遺伝子型解析研究についての記載と同様に複数の個人の試料の遺伝子型解析によって行うことができる。
【０１３８】
表現型群に属する一種または複数の表現型については、インスリン感作物質に対する応答性を持つ個人と持たない個人との間の少なくとも部分的な差が提示可能であることが分かる。このことは、症例群と対照群との間に有意な頻度差を有する表現型群に属する複数の表現型を同定することで実施できる。ある実施形態では、インスリン感作物質に対する応答性を持つ個人と持たない個人との間の少なくとも部分的な差を示すことが可能な表現型および遺伝子型を同定する工程も同時に行われる。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、（症例群および対照群のいずれにも属し得ない）個人がインスリン感作物質に対する応答性を持つか持たないかが予測される。この工程は所望により行われる。さらに、医療用薬物のような治療薬が患者に投与される（または投与されない）か、あるいは前述の予測工程の結果に基いて患者は臨床試験に登録される。
【０１４０】
以下の表２は、６名の個人から得られた仮のデータの説明である。データには４種の遺伝子変異（一般的ＳＮＰ）および４種の表現型に関する情報が含まれる。ＳＮＰについては、以下の文字記号：すなわちＳＮＰ対立遺伝子を示すためのＡ）アデニン、（Ｔ）チミン、（Ｃ）シトシン、および（Ｇ）グアニンを用いている。
【０１４１】
表２．一般ＳＮＰ（ＣＳ）および表現型（Ｐｈ）を用いる関連研究
【０１４２】
【表２】
2009509539.tif 000003
表２の説明から、インスリン感作物質に対する応答性を持つ１，２および５番の個人（「１」の記号で表わす）は症例群に属し、一方、インスリン感作物質に対する応答性を持たない３，４および６番の個人（「０」の記号で表わす）は対照群に属する。ＳＮＰ１における「Ａ」対立遺伝子、ＳＮＰ３における「Ｇ」対立遺伝子、および／またはＳＮＰ４における「Ｔ」対立遺伝子の存在は、インスリン感作物質に対する応答性を持つ個人（「１」）に伴う。一方、ＳＮＰ１における「Ｔ」対立遺伝子、ＳＮＰ３における「Ｃ」対立遺伝子、および／またはＳＮＰ４における「Ａ」対立遺伝子の存在は、インスリン感作物質に対する応答性を持たない個人（「０」）に伴う。
【０１４３】
同様に、表現型１についての表現型スコア「１」、表現型２についての表現型スコア「０」、および／または表現型４についての表現型スコア「７またはそれ以上」については、インスリン感作物質に対する応答性を持つ個人（「１」）に伴い、一方、表現型１についての表現型スコア「０」、表現型２についての表現型スコア「１」、および／または表現型４についての表現型スコア「２またはそれ以下」については、インスリン感作物質に対する応答性を持たない個人（「０」）に伴う。
【０１４４】
これらのデータを単一の関連研究と組み合わせると、ＳＮＰ１における「Ａ」対立遺伝子、ＳＮＰ３における「Ｇ」対立遺伝子、および／またはＳＮＰ４における「Ｔ」対立遺伝子を持つ個人は、表現型１についての表現型スコア「１」、表現型２についての表現型スコア「０」、および／または表現型４についての表現型スコア「７またはそれ以上」を持ち、インスリン感作物質に対する応答性を持つ（「１」）であろうことが予測できる。反対に、ＳＮＰ１における「Ｔ」対立遺伝子、ＳＮＰ３における「Ｃ」対立遺伝子、および／またはＳＮＰ４における「Ａ」対立遺伝子を持つ個人は、表現型１についての表現型スコア「０」、表現型２についての表現型スコア「１」、および／または表現型４についての表現型スコア「２またはそれ以下」を持ち、インスリン感作物質に対する応答性を持たない（「０」）であろうことが予測できる。
【０１４５】
データの解析および使用  図１は、一人または複数の個人から得られた保存・処理データ１０２についてのコンピュータシステム１００の高レベルブロックダイアグラムである。そのデータには、遺伝子データ（たとえば遺伝子変異）、および所望により表現型データも含まれる。スクリーニング使用には、一種または複数の遺伝子変異および／または表現型が入力され得る。関連研究では、データにはさらに一種または複数のインスリン感作物質に対する応答に関するデータも含まれる。それらのデータは、入力デバイス１０４を経由してシステムに入る。少なくとも一個のプロセッサ１０６がバス１２２に連結していることが説明される。またメモリ１０８、ストレージデバイス１１０、入力デバイス１０４、グラフィックアダプター１１４、およびネットワークアダプター１１８もバス１２２に連結している。ディスプレイ１１６は、グラフィックアダプター１１４に結合され得る。二次情報処理および／またはディスプレイシステム１２０については、説明にあるように、たとえばコンピュータ、またはネットワーク、たとえばインターネットへのアクセスを有するほかのデバイスであり得る。前述のコンポーネントの全ては、本発明の方法および組成物の使用に必ずしも存在しなくとも良い。
【０１４６】
少なくとも一個のプロセッサ１０４は、一般的な目的に用いられるマイクロプロセッサーのいずれでもあり得る。ストレージデバイス１１０は、ハードディスク、コンパクトディスク−ロム（ＣＤ−ＲＯＭ）、ＤＶＤ、またはソリッドステートメモリデバイスのようなデータ保持が可能なデバイスのいずれでもあり得る。メモリ１０８は、プロセッサ１０６によって用いられる命令およびデータを保持する。入力デバイス１０４は、たとえばマウス、トラックボール、ライトペン、タッチ入力式ディスプレイ、またはほかのタイプのポインティングデバイスであり得、キーボードと併用することでコンピュータシステムにデータが入力される。またデータは、個人から得られる遺伝子データ、表現型データ、および／またはインスリン感作物質反応データ１０２のアッセイに用いられるデバイスまたは装置からも直接入力され得る。グラフィックアダプター１１４は、ディスプレイ１１６上に画像およびそのほかの情報を表示する。ネットワークアダプタ１１８は、コンピュータシステム１００をローカルネットワークまたは広域ネットワークに連結する。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、一人または複数の個人から得られるデータは、一つの場所でコンピュータシステムに入力され、さらに解析、表示され、または遠隔地でほかの操作が行われる。たとえば、関連研究のデータのいくつかまたは全ては、一つの域内で得られ、解析用の別の域内に送られる。別の例では、個人から得られスクリーン化されるデータは、実験室、たとえば米国臨床検査所改善勧告法（ＣＬＩＡ）準拠の実験室のような規準実験室で得ることができ、次に別の場所、たとえば診察室に送られ、そこでさらに処理および／または表示される。それらのデータは、いずれの方法、たとえばＣＤ−ＲＯＭ上でのデータ、またはネットワーク、たとえばインターネット経由によっても遠隔地に移動できる。
【０１４８】
関連した実施形態では、薬物、たとえばインスリン感作物質の効力に関係するＳＮＰは、患者集団を層化して治療に無反応な可能性のある患者を排除することによって薬物の効力を改善するのに用いることができる。一つの例では、インスリン感作物質を投与された患者の約３２％は、レスポンダーをして分類される。ある関連研究によると、レスポンダーの症例群および非レスポンダーの対照群を用いて実施され、レスポンダーの表現型には２５種のＳＮＰが伴うことが見出されている。症例群および対照群について計算されたスコアに基づくと、レスポンダーの８１％および非レスポンダーの４０％におけるスコアが１９超であることが見出されている。したがって、インスリン感作物質の投与前の患者集団を層化するための閾値として１９というスコア値を用いると、その薬物の全体的な効力が約３２％から約５０％まで改善される。その工程を実施すると、インスリン感作物質が投与された非レスポンダーの数は実質的に低下し、排除された非レスポンダーは、代替療法で直ちに治療され得る。これだけの大きさの効力変化は、新薬許認可の助けになり、すでに認可された薬物の使用がさらに拡大可能と考えられる。
【０１４９】
Ｃ．薬物クラスについての関連研究およびその方法
本発明には、第一の薬物に対する反応性の予測となり、第二の薬物による被験者の治療の調節の有無を決めるのに伴い用いられる一種または複数の遺伝子変異（たとえばＳＮＰ）および／または一種または複数の表現型変異についての被験者スクリーニングのための方法および組成物も含まれる。但し、第一の薬物と第二の薬物とは同じ薬物クラスに属する。いくつかの実施形態では、薬物クラスはインスリン感作物質類である。いくつかの実施形態では、第一の薬物と第二の薬物とは同一の薬物である。それらの実施形態のいくつかでは、第二の薬物はネトグリタゾンであり、第一の薬物は、臨床データまたはほかのデータが利用できるインスリン感作物質であり、さらに遺伝子型に関連する研究、あるいはそのような研究の実施に用いられる素材でもある。インスリン感作物質であって臨床データが利用できる薬物には、トログリタゾン、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、ムラグリタザール、ガリダテサグリタザール、６７７９５４、ＭＢＸ−１０２、Ｔ１３１、ＬＹ８１８、ＬＹ９２９およびＰＬＸ２０４が含まれる。これらの方法および組成物を用いると、第二の薬物の使用は改善され標的化し得るため、たとえば第二の薬物についての臨床試験は、薬物による利便性が増す、および／または副作用の発生が見られないような患者集団でもさらに実施できるようになる。したがって本発明の方法および組成物は、さらなる標的化を可能にし、ある薬物クラスの薬物の正確な試験および臨床使用を可能にする。
【０１５０】
本明細書で用いられる「薬物クラス」には、いくつかの特徴的または共通の特徴によって群分けされた二種またはそれ以上の薬物の群が含まれる。その「特徴」とは、薬物または薬物含有組成物にたびたび関係し得るいずれかの特性のことであって、それには構造、メカニズム、立体化学、結晶型、製剤、用量、投与経路、投与頻度および／または投与期間、動物モデルでの効果、経験的見られる特性、ほかの療法または薬物との併用、ならびにそれらの組み合わせなどが含まれるが、それらに限定されない。一種または複数の特徴は、薬物、すなわち同じクラスに属する薬物の効果の重要な予測性に関係し得る。その理由はそれらの薬物が、同じまたは同様の治療上または非治療上の効果を持つというランダムな機会よりも、共通の特徴を分かち持つためである。一種以上のクラスに属する薬物では、それらの複数のクラスについて判断規準として用いられる一種または複数の特徴に依存する。
【０１５１】
単一の薬物に焦点を当てる代わりに、本方法は個人が一連の関連薬物に対してレスポンダーまたは非レスポンダーであると思われるようなことに関する情報も提供し、レスポンダーである場合、その反応が治療上の効果、または非治療上の効果、たとえば副作用のいずれとも思われる。したがっていくつかの実施形態では、ある関連研究は一種または複数の遺伝子変異、たとえばＳＮＰおよび／または表現型の同定のために行われ、それらはある薬物クラスに属する第一の薬物に対する一種または複数の反応に伴うもので、さらにそれらの変異は、同じ薬物クラスに属する第二の薬物の投与の調節に用いられる。第二の薬物の投与は、研究設定（たとえば臨床試験）、臨床設定（たとえば疾患治療における薬物の使用）、または第二の薬物の効果を予測するのに有用なほかの設定のいずれ（たとえば、第二の薬物の商品化）でも行われ得る。投与の「調節」には、第二の薬物の非投与、第一の薬物と同様な手法（たとえば、用量、投与スケジュール、治療期間など）での第二の薬物の投与、あるいは第一の薬物の投与とは異なる第二の薬物の投与が含まれる。投与の調節については、本明細書のほかの部分でもさらに詳細に考察される。
【０１５２】
ある薬物クラスに属する第一の薬物に対する反応に関連する遺伝子変異についての個人のスクリーニングは、たとえば同じ薬物クラスに属する第二の薬物の臨床試験に登録（または除外）され得る個人の同定、および／または同じ薬物クラスに属する第二薬物で副作用が現われ得る（または現われ得ない）個人の同定に有用である。たとえば、いくつかの実施形態では、ある薬物クラスに属する第一の薬物に関連する研究の結果が、同じ薬物クラスに属する第二の薬物の臨床試験用の患者集団の個人のスクリーニングに用いられ、それによって、第二の薬物に対する副作用が現われると予測される個人が除外され、および／または第二の薬物に対して所望の反応または反応度を示すと予測される個人が採用され、および／または第二の薬物の投与のそのほかの調節が行われる。
【０１５３】
図２に、実施形態の例を挙げて説明する。たとえば、薬物クラスの構成薬物である薬物Ａの臨床試験での使用または日常的な臨床使用において（この例では、メカニズムＸで作用する複数の薬物が同じクラスに属する）は、多型遺伝子座の集合または亜集合、たとえばＳＮＰで遺伝子型解析が行われる個人から試料が採取され、本明細書で記載されるように、薬物Ａに対する個人の反応とＳＮＰ集合または亜集合の遺伝子型との間の関連性を求めるために関連研究が行われ得る。反応には、反応性の度合い（たとえば、最小レスポンダー−対−平均的レスポンダー−対−「超レスポンダー」）を含めた治療応答が含まれ得る。また反応には、非治療応答、たとえば逆効果のような副作用も含まれ得る。同じメカニズムＸで作用するか、または作用すると考えられる別の薬物Ｂについて、臨床試験が行われる場合、薬物Ａについての関連研究の結果は、調節、たとえば臨床試験のデザイン、臨床試験の登録、試験に登録された被験者の層化、および／または薬物Ｂの臨床試験の結果の予測または解析に使用できる。関連研究によって、たとえば２００５年１月２４日出願の米国特許出願第１１／０４３６８９号“Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ”に記載されているような薬物反応に関連する表現型形質についても、もちろん同定され得る。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、薬物Ａについての関連研究の結果は、薬物Ｂについての臨床試験への被験者の採用または除外のために用いられる。被験者の遺伝子型および／または表現型が副作用の感受性の欠如、反応性の欠如、またはそれらの組み合わせを示す場合、通常、それらの被験者は除外されることになる。薬物Ｂについての臨床試験から除外された被験者ぬついては、代替の薬物または方法で治療することができ、いくつかの症例では、代替の薬物および／または治療についても、薬物Ａの関連研究の結果に少なくとも部分的に基づくものであり得る（たとえば、その個人は薬物Ａおよび薬物Ｂとは異なるクラスの薬物で治療され得る）。臨床試験で複数の被験者に薬物が投与されない実施形態では、その複数の被験者でスクリーニングされた対象薬物とは異なるメカニズムで作用する別の治療用薬剤の異なる臨床試験に彼らを配置できる。
【０１５５】
いくつかの実施形態では、薬物Ａについての関連研究の結果は、薬物Ｂの投与の変更による臨床試験の調節のために用いられる。たとえば、薬物Ｂを用いる治療の種々の態様によれば、薬物Ａの関連研究に基づいて調節が行われ得る。投与の調節にはたとえば、薬物用量の加減、薬物の投与経路、薬物による治療期間、または薬物投与の頻度；薬物担体のタイプの変更、薬物の鏡像異性体の型、薬物の結晶型、薬物の互変異型；薬物の断片、類似体、および／または変異体；あるいはそれらの組み合わせが含まれ得る。したがって、たとえば薬物Ｂの用量および／または頻度は、薬物Ａの関連研究から得られる予測内容に基づき、ある個人の薬物Ｂに対する治療上および／または非治療応答性の度合いに対して加減できる。たとえば、反応性が中程度と予測され、しかも副作用がわずかまたは無いと予測される個人については、正常なレスポンダーまたは超レスポンダーと予測される個人よりも、相対的に高用量で投与され得ると考えられる。たとえば化学療法剤の用量がしばしば加減される癌の化学療法についての臨床試験における別の例では、対象個人の副作用と結びついた治療応答が基礎となる。したがって、対象の薬物クラスに属する化学療法剤から得られる関連データの下、遺伝子型データによって、関連研究では用いられない同じクラスの別の薬物に対して中程度のレスポンダーであって副作用が強いと予測される個人については、高用量の薬物を投与した場合でも副作用がわずかな超レスポンダーであると予測される個人よりも、薬物用量を下げるか、またはゼロにすることができる。
【０１５６】
薬物Ａに関連した研究は、薬物Ｂ、たとえば臨床試験中の薬物、または臨床治療中の薬物に対する個人の反応を予測するのに用いられる。得られた遺伝子型（たとえば、一種または複数のＳＮＰ）および／または表現型のいずれかについて、薬物Ａに対する反応の予測される確率は、薬物Ａの関連研究によって求めることができる。ある個人の遺伝子型および／または表現型に基づいた薬物Ｂの投与調節に関する結論は、その個人における薬物Ａに対する反応（所望の反応、所望しない反応、または両者の組み合わせ）についての予め設定された予測確率レベルに基づいて行うことができる。いくつかの実施形態では、薬物Ａに対する反応または組み合わせ反応が生じる場合の確率の程度は、薬物Ｂの使用に関する結論づけ（たとえば、臨床試験への採否）のためのカットオフ値として用いられ、約９９．９，９９．５，９９，９８，９７，９６，９５，９４，９３，９２，９１，９０，８５，８０，７５，７０，６５，６０，５５，５０，４５，４０，３５，３０，２５，２０，１５，１０，５，４，３，２，１，０．５、または０．１％より大きい。いくつかの実施形態では、薬物Ａに対する反応または組み合わせ反応が生じる場合の確率の程度は、薬物Ｂの使用に関する結論づけ（たとえば、臨床試験への採否）のためのカットオフ値として用いられ、約９９．９，９９．５，９９，９８，９７，９６，９５，９４，９３，９２，９１，９０，８５，８０，７５，７０，６５，６０，５５，５０，４５，４０，３５，３０，２５，２０，１５，１０，５，４，３，２，１，０．５、または０．１％より小さい。複数の遺伝子型および／または表現型を使用すると、薬物Ｂに対するカットオフ値として用いられる薬物Ａについての予測性を向上できる。たとえば、複数の遺伝子変異、たとえば複数のＳＮＰにおける遺伝子型を使用すると、薬物に対して生じる反応に関する予測度を向上できる。いくつかの実施形態では、薬物Ｂの使用の調節の有無を決めるためのカットオフ値として用いられる薬物Ａでの結果に対する確率を、所望のレベルにするためには、約２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１５，２０，２５，３０，３５，４０，４５，５０，６０，７０，８０，９０，１００，１５０，２００，５００，１０００，１００００，１０００００，１００００００、または約１００００００個以上の遺伝子変異、たとえばＳＮＰが用いられる。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、薬物に対する反応は副作用であり、同じ薬物クラスに属する第二の薬物が投与される患者集団を限定するのには、確率カットオフ値が用いられる。確率カットオフ値については、治療対象の患者集団のタイプによって、副作用の重篤度に対する依存性が低下または増大し得ると思われる。たとえば、致死的な副作用が起こり得るが、患者集団が終末期の患者で構成されるような癌の化学療法の臨床試験では、抗炎症薬の臨床研究の場合よりも確率カットオフ値を高めることによって忍容性が上がり、弱から中程度の炎症を患う被験者から構成される患者集団での研究で見られるのと同様に、致死的な副作用を伴う痛みおよび炎症が低減すると考えられる。したがって前者の場合、同じ薬物クラスの既知薬物の遺伝子型関連研究に基づいた致死的副作用についての確率は、約５０，４５，３５，３０，２５，２０，１５，１０、または５％未満に設定できる。後者の場合（たとえば、薬物の副作用が市場からの撤退を余儀なくさせるほど重篤であるＣＯＸ−２阻害剤およびそのほかの薬物の場合）、低い確率、たとえば約１０，５，１，０．５，０．１，０．０５，０．０１，０．００５、または０．００１％未満の確率が使用され得る。したがっていくつかの実施形態では、致死的または生命が脅かされる副作用が薬物Ａに関して得られた遺伝子型で起こると考えられる確率は、薬物Ａと同じ薬物クラスの薬物Ｂを被験者（たとえば、臨床試験の被験者）に投与するかどうかを、個人の遺伝子型に基づいて決める際に用いられる。
【０１５８】
ほかの実施形態では、新薬に対する充分な数のレスポンダーを臨床試験に採用することで充分な結果が得られる確率を上げることだけが所望され得る。この場合、ある薬物クラスに属する薬物Ａでは一定の割合の被験者でのみ治療応答が見られ、さらにそのパーセンテージが薬物の使用および／または許認可の理由づけに充分であるほど高くはない場合があり得る。同じ薬物クラスの薬物Ｂが臨床試験予定の場合、レスポンダーの数は、薬物Ｂの使用の有効性を示すのに充分なレベルまで上げることが望まれる。そのような場合、薬物Ｂの個人への投与を調整（たとえば、臨床試験への採否）するためのカットオフ確率は、約５０，６０，７０，８０，９０，９５，９８，９９％より大きくなり得る。そのような予測が有益性をもたらすと考えられる薬物の例としては、多発性硬化症の治療における改変型ペプチドリガンド類（ＡＰＬ）の使用が挙げられる。ＡＬＰについては、小数の患者亜群でのみ有効であると考えられる。本発明の方法及び組成物によって、治験医及び臨床医は新たなＡＰＬ類の臨床試験のデザイン、ならびにＡＬＰ投与対象患者の選定の確実性を高めることができ、それによってそれらの薬物の価値および有用性を高めることができる。そのように確実性を上げないと、治験医は治験を継続せず、臨床医もそれらの薬物の処方をしないと思われ、薬物有効性の予測が困難になる。
【０１５９】
薬物反応の種々の組み合わせ及び所望の結果から、薬物Ｂの投与調整のための確率カットオフ値の結果が得られ、その値は薬物Ａに対する反応についてのどのような所望の確率にもなり得ることが認識されよう。このことは、薬物Ａを用いる関連研究に基づき、薬物Ｂの臨床試験での採否と併用して行うことができる。試験対象予測には、副作用のような非治療上の効果、またはそれらの欠如（たとえば、副作用が臨床試験から除外可能と考えられる場合）が含まれ得る。また試験対象予測には反応の度合い、たとえば軽度の反応、正常な反応、または超反応も含まれ得る。
【０１６０】
ある薬物クラスの新薬についての反応の予測に加え、副作用（たとえばトログリタゾン、種々のＣＯＸ−２阻害剤の場合）、あるいは効果が平均して微弱である（たとえば、うつ病に対するでのビラゾドンおよびエプトラピゾンの場合）ことで販売または臨床試験から撤退した薬物についても、遺伝子プロフィール、および有効性および／または副作用に伴う関連性が同じ薬物クラスに属するほかの一種または複数の薬物に関して既知である場合に「再評価」できる。したがって、たとえばトログリタゾンについては、ほかのＰＰＡＲアゴニストに関する遺伝子プロフィールおよびそれらに関連する副作用が既知である場合に再試験が可能である。さらに別の例としては、ビラゾドンおよびエプタピロンについて、ほかのセロトニンアゴニストについての遺伝子プロフィールとの有効性関連性が利用できる場合のそれらの再試験が挙げられる。患者集団については、予めスクリーニングすることができ、予め設定された副作用確率に関連した遺伝子プロフィールを持つ患者集団は臨床試験から除外でき、および／または予め設定された著効確率に関連した遺伝子プロフィールを持つ患者集団は臨床試験用に選ぶことができる。この点に関連して、臨床試験での不成功または販売からの撤退によって患者に別途使用できないとされても、ある患者の亜集合では有効である（有効性が高い可能性がある）薬物は使用可能となり、選択患者集団に有益性を与え得る。
【０１６１】
本発明は、規制当局によって使用が許認可される薬物も提供する。但し、その薬物はある薬物クラスの一員であって、その薬物クラスの別の薬物に対する反応に関連する一種または複数の遺伝子変異および／または表現型に関する被験者のスクリーニング工程、およびその臨床試験に基づく薬物投与の調整または非調整の工程を含む方法で、規制当局による許認可を受けるための試験が行われる。いくつかの実施形態では、試験対象薬物の投与の調整または非調整の決定および／またはその選択される調整の決定は、個体における一種または複数の遺伝子変異に基づき、すでに試験が行われた薬物についての予め設定された反応確率をベースに行われる。いくつかの実施形態では、試験対象薬物は規制当局による許認可を受けるための試験がこれまで行われていない薬物である。いくつかの実施形態では、試験対象薬物はこれまで試験は行われたが使用の認可がなされていないか、または使用の認可がなされたが販売から撤退した薬物である。いくつかの実施形態では、規制当局は米国食品医薬品局（ＦＤＡ）である。いくつかの実施形態では、試験は第Ｉ相、第ＩＩ相、第ＩＩＩ相、または第ＩＶ相の臨床試験である。いくつかの実施形態では、薬物はインスリン感作物質、たとえばネトグリタゾンである。いくつかの実施形態では、薬物は臨床使用から撤退した薬物であり；いくつかの実施形態では薬物はアザラビン、トログリタゾン、フェンフルラミン、デキスフェンフルラミン、テルフェナジン、ミベフラジル、アステミゾール、シザプリド、アロセトロン、グレパフロキサシン、ブロフェナック、臭化ラパクロニウム、バルデコキシブ、ロフェコキシブ、サリドマイド、ジエチルスチルベルステロール、チクリナフェン、メタキノン、トラゾラム、セリバスタチン、マレイン酸フルロキサミン、ナタリズマブ、および持続放出性塩酸ヒドロモルホンから成る群から選択される。米国での使用撤退薬物にはさらに、リン酸アデノシン、アザリビン、ベノキサプロフェン、ビチオノール、非経口投与用ブタンベン、クエン酸カルベタペンタン含有経口ゲル医薬品、皮膚用のグルコン酸クロルヘキシジン、酢酸クロルマジノン、クロロホルム、ジアムタゾン、ジヒドロクロリド、ジブロムサラン、硫酸ジヒドロストレプトマイシン、ジピロン、塩酸エンカイニド、フロセキナン、塩酸メパジンまたは酢酸メパジン、メタブロムサラン、非経口投与用塩酸メタンフェタミン、メタピリレン、メトホリン、ニトロフラゾン、マレイン酸ノミフェンシン、オキシフェニサチン、酢酸オキシフェニサチン、フェナセチン、塩酸フェンホルミン、ピパマジン、亜ヒ酸カリウム、ポビドン、レセルピン（経口での１ｍｇ超）、硫酸スパルテイン、スルファジメトキシン、スルファチアゾール、スプロフェン、塩酸テマフロキサシン、３，３’，４’，５−テトラクロロサリチルアニリド、２５ｍｇ／ｍｌ超での小児用テトラサイクリン、トリブロムサラン、トリクロロエタン、およびゾメピラックナトリウムも含まれる。欧州連合での使用撤退薬物には、バルデコキシブ、パレコキシブ、シルデナルフィル、ロシグリタゾン、塩酸アポモルフィン、デスロラタジン、ドフェチリード、ビツママブ、オランザピン、フォミビルセン、イミキモド、ガニシクロビル、ロタウイルスワクチン、ジフテリア・破傷風・非細胞性百日咳配合ワクチン、ドデカフルオロペンタン、およびレブアセチルメタドールが含まれる。本方法は、これまでに撤退または臨床試験が不成功であったものに該当しないが、使用に関して警告事項を伴う薬物に対しても適用できる。本方法は撤退していないか、または警告が現在も有効である薬物に対しても適用できる。
【０１６２】
本方法は患者の治療にも使用できる。いくつかの実施形態では、病気に罹患している個人は、遺伝子変異、および／またはその病気の治療に用いられる薬物クラスに対する反応性を示す表現型に関してスクリーニングされ得る。いくつかの実施形態では、一種または複数の遺伝子変異の間の関連性、および第一の薬物クラスに対する反応性を求める研究は、同じ薬物クラスに属する第二の薬物による患者の治療を定めるのに用いることができ、あるいは異なる薬物クラスに属する薬物によって患者を治療すべきかを定めるのに用いることができる。一般的には、第二の薬物は関連する研究がこれまで実施されてこなかったか、または第一の薬物と同程度にまで実施されてこなかった薬物とされよう。いくつかの実施形態では、病気は血糖調節の障害、たとえば本明細書に記載されているようなインスリン抵抗性障害である。いくつかの実施形態では、薬物クラスはＰＰＡＲモジュレータ系のインスリン感作物質である。
【０１６３】
さらに本発明は、一種または複数の薬物に関するデータ、ならびに一種または複数の遺伝子変異および／または表現型の変異、一種または複数の薬物に対する個人の一種または複数の反応、および一種または複数の薬物特性の間の関連性を含むデータベースも包含する。そのデータベースには少なくとも約１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，２０，２５，３０，３５，４０，４５，５０，６０，７０，８０，９０，１００，１５０，２００，５００，１０００種、または１０００を越える種類の薬物に関するデータが含まれ得る。それらの薬物は、単一の薬物クラスに属するか、または複数の薬物に属し得る。いくつかの実施形態では、データが利用可能である薬物クラスに属する薬物の全てまたは実質的にすべてが、データベースに含まれる。あるいはデータベースには少なくとも約２，３，４，５，６，７，８，９，１０種、または１０種超の薬物クラスに属する薬物に関する情報が含まれ得る。いくつかの実施形態では、データベースにはデータが利用可能である全ての薬物または実質的に全ての薬物についての関連データが含まれる。データベースは最新なものに更新することができ、更新データはデータベース使用時、たとえばインターネットを通して利用できる。そのようなデータベースによって、異なるメカニズムまたは異なる構造の薬物クラスであっても治療効果に関して遺伝子変異プロフィールがなお同様であるものどうしでの経験的関連性を得ることができる。いくつかの実施形態では、一種または複数の遺伝子変異はＳＮＰである。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、データベースはコンピュータデータストレージ媒体、たとえばハードディスク、コンパクトディスクなどのような有形の媒体内に記録される。いくつかの実施形態では、本発明は本明細書に記載したようなデータベースに含まれるデータを、たとえばインターネットを介する転送のような電子的な手段によってある場所から別の場所に転送することを包含する。
【０１６５】
データは一種または複数の薬物クラスの構成薬物について累積されていて、関連性の予測力は次第に向上し、薬物のクラス分けのさらなる改善も明確になり得ることが分かるであろう。
【０１６６】
一例を挙げると、特定の薬物に属する薬物の亜集合については、薬物に対する反応と一種または複数の遺伝子変異、たとえば．ＳＮＰ、および／または表現型との間の関連プロフィールが同一または同様であることを示す場合があり、それらの関連プロフィールはその薬物クラスのほかの構成薬物とは異なり得る。いくつかの実施形態では、新たなクラス分けについては、対象の亜群には一般的であっても、その薬物クラスのほかの構成薬物のいくつか、ほとんどまたはすべてでは見られない特徴に基づいて、それらの薬物について行われる。次にその特性は、そのクラスに属する薬物がさらに新たな亜群に細かくクラス分けされる以後の関連研究に使用でき、それによってその亜群に属する新薬に対する反応性についての個人の遺伝子型および／または表現型の予測力が向上する。いくつかの実施形態では、この新たな亜群に属する薬物には一般的であっても、対象の薬物クラスの構成薬物のいくつか、ほとんどまたは全てでは見られない特徴が、ほかの薬物クラスに属する薬物でも研究され、それによってほかの薬物における特定の反応の予測力の向上との相関性を示すかどうかを求めることができる。いくつかの実施形態では、新たな一般的特性は、その特性に関連した薬物反応のいくつかまたはすべてを説明する特性を用いて、それらの薬物に一般的な新たなメカニズムをモデル化するのに使用されるであろう。いくつかの実施形態では、新たな一般的特性は、その薬物反応に関連した遺伝子型および／または表現型を持つ個人においてその特徴に伴って反応を生じさせる新薬のデザインに使用されよう。たとえば、特性Ｘを有する薬物が、遺伝子型Ａを持つ個人において反応の半減期が長くなることが見られることが発見され得る。新薬は、遺伝子型Ａを持つ個人において半減期が長くなるであろうとの予測のもとに特徴Ｘでデザインされ得る。
【０１６７】
別の例を挙げると、いくつかの実施形態では、遺伝子型および／または表現型と薬物に対する反応との間の関連性が未試験である薬物については、非試験薬物の一種または通常は複数の特徴に基づき、薬物データベース内で「最も密接な関連体」に割振られる。最も密接な関連体とは、一種または複数の特徴においてその非試験薬物と最もマッチする薬物のことである。その一種または複数の特徴は、新薬および最も密接な関連体に伴う一種または複数の特徴のいずれでもあり得る。最も密接な関連体については、個体の遺伝子型および／または表現型に基づき、新薬に対する個体の反応に関する予測関連データの提供に用いられる。新薬に対する個体の実際の反応、ならびにその個体の遺伝子型および／または表現型については、その際にモニタリングでき、最も密接な関連体の選定規準の改良に使用できる。たとえば、新薬に関するデータは、新薬に伴う一種または複数の特徴を共有するデータベース内のほかの薬物のいくつかまたは全てについての予測される反応と比較することができ、さらにその最も密接な関連体についての予測される反応と比較し、選択された最も密接な関連体が、本当にその新薬についての最大予測力を有する薬物であったか否かを判定することができる。そうでない場合では、最も密接な関連体の選定アルゴニズムは、違いを反映させるために改定される。たとえば、非試験薬物の特徴とデータベース内薬物の特徴との間の「マッチング」を構成する判定基準は、その新たなデータに基づき変えることができる。このように、および同様に、データがデータベース内に蓄積されると、薬物を薬物クラスに分類するのに用いられる種々の特徴については、分類予測力の向上、薬物作用の新たなメカニズムのモデル化、および新薬設計などのために改良・改変することが可能となる。
【０１６８】
さらに本発明は、ある薬物が一種または複数の特徴を持つか否かを定めるソフトウエアも提供し、それによって一種または複数の特徴が与えられた薬物の最も密接な関連体および／または一種または複数の薬物クラスが定まり；与えられた反応が、遺伝子型および／または表現型の存在を伴うデータベースにおけるある薬物（たとえば、非試験薬物の最も密接な関連体、あるいは非試験薬物がすでに配置された薬物クラスに属するある構成薬物）で起こる確率が予測され；個人の遺伝子型に基づく非試験薬物の投与の最良の調整が示唆され；新薬、遺伝子型、表現型または反応に基づいたデータベース改良用アルゴニズムおよびほかのアルゴニズム改良用のアルゴニズムが得られることなどが実現する。
【０１６９】
一つの態様によれば、本発明はキット類を提供する。キット類には個人における一種または複数の遺伝子変異の試験のための検査用構成物が包装されて含まれ、それによって一種または複数の変異についての個体の遺伝子型解析が行われる。いくつかの実施形態では、検査用構成物は、本明細書に記載されたような一種または複数の核酸を含む。いくつかの実施形態では、遺伝子変異はＳＮＰである。いくつかの実施形態では、検査用構成物はマイクロアレイ、たとえばＳＮＰチップである。いくつかの実施形態では、キット類にはさらにデータベースまたはデータベースへのアクセスも含まれ、そのデータベースは一種または複数の薬物を対象にし、ならびにその検査用構成物で検査され得るか、またはそのほかの手段で観察され得る遺伝子変異および／または表現型変異、と一種または複数の薬物に対する反応との間の関連性を対象にしている。さらにキット類にはソフトウエアまたはソフトウエアへのアクセスも含めることができ、そのソフトウエアによってある薬物が一種または複数の特徴を持つか否かが定まり；その一種または複数の特徴が与えられた薬物の最も密接な関連体および／または一種または複数の薬物クラスが定まり；遺伝子型および／または表現型の存在が与えられたデータベースにおいて、対象の反応がある薬物（たとえば、非試験薬の最も密接な関連体、あるいは非試験薬がすでに配置された薬物クラスの構成薬物）で起こる確率が予測され；個人の遺伝子型に基づく非試験薬物の投与の最良の調整が示唆され；新薬、遺伝子型、表現型または反応に基づいたデータベース改良用のアルゴニズム、およびほかのアルゴニズム改良用のアルゴニズムが得られることなどが実現する。キットにはさらに、キット構成物の使用説明書、ならびに核酸増幅用構成物（たとえばＰＣＲ用構成物）、グローブ、ゴーグル、洗浄用物質、緩衝液、プライマー、酵素、標識などのようなサンプリングに有用なほかの構成物および遺伝子検査手段を用いるためのほかの構成物、ならびに試料の調製に有用な構成物も含まれ得る。
【０１７０】
一つの態様によれば、本発明の方法には商業的方法が含まれる。一つの実施形態では、本発明は、一種または複数の遺伝子変異（および／または表現型）と第一の薬物に対する反応性との間の関連性を予測する関連研究の結果を用いて第二の薬物を上市する工程を含む方法を提供する。但し、その第一の薬物および第二の薬物は同じ薬物クラスの構成薬物である。たとえば新薬Ａは、関連性データが利用可能な既存薬物Ｂと同じ薬物クラスに属し得る。新薬Ａは、既存薬物Ｂでこれまでに見出され、高度の有効性があり、重篤な副作用がないか、または副作用発生率が低く、あるいはほかの所望な効果が予測される遺伝子型および／または表現型を示す個人での使用に対して上市可能である。そのような上市は、医療関係者および／または患者に向けられ得る。
【０１７１】
いくつかの実施形態では、さらに本発明はある薬物クラスに属する第一の薬物への反応に関連した核酸含有領域内のゲノム配列に特異的にハイブリダイズする単離核酸も提供し、その単離核酸は同じ薬物クラスに属する第二の薬物に対する反応の診断、予後予測、予防、治療または研究に用いられる。いくつかの実施形態では、核酸含有領域はその核酸の上流側約１０ｋｂから下流側約１０ｋｂまで延びている。いくつかの実施形態では、核酸含有量域はその核酸の上流側約５ｋｂから下流側約５ｋｂまで延びている。いくつかの実施形態では、その核酸の上流側約２ｋｂから下流側約２ｋｂまで延びている。いくつかの実施形態では、その核酸の上流側約１ｋｂから下流側約１ｋｂまで延びている。いくつかの実施形態では、本発明はその核酸配列自体に特異的にハイブリダイズする単離核酸を提供する。いくつかの実施形態では、核酸集合が提供され、その集合の核酸はある薬物クラスに属する第一の薬物に対する反応に関連した遺伝子変異のいくつかまたは全てに関連し（たとえば、相補的である）、同じ薬物クラスに属する第二の薬物に対する反応の診断、予後予測、予防、治療または研究に用いられる。いくつかの実施形態では、薬物クラスはインスリン感作物質、たとえばチアゾリジンジオン系ＰＰＡＲモジュレータのようなＰＰＡＲモジュレータ系インスリン感作物質である。いくつかの実施形態では、核酸は固体の担体に固定化されている。いくつかの実施形態では、固体の担体に固定化されている核酸の集合が提供され、その集合の核酸は、ある薬物クラスに属する薬物に対する反応に関連した遺伝子変異、たとえばＳＮＰのいくつかまたはすべてに関連する（たとえば、相補的である）。
【０１７２】
個体における遺伝子変異の同定については、本明細書に記載したような適当な手段のいずれでも実施できる。そのことについては、たとえば米国特許第６８９７０２５号；および２００３年５月２９日出願の米国特許出願第１０／４４８７７３号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”；２００３年８月２１日出願の米国特許出願第１０／０４２８１９号“Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”；２００４年１０月２１日出願の米国特許出願第１０／７８６４７５号“Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”；ならびに２００３年１月６日出願の米国特許出願第１０／８４５３１６号“Ａｌｌｅｌｅ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｐａｔｔｅｒｎｓ”が参照される。適当な手段には、ゲルに基づく遺伝子型解析、ナノフルーイディクス、核酸プローブアレイへのハイブリダイゼーション、および一塩基付加式配列決定（たとえば、米国特許第６９１１３４５号参照）も含まれる。
【０１７３】
１．薬物クラス
薬物は、メカニズムによるクラス、構造によるクラス、薬理学的効果に基づくクラス、および薬物の化学的または物理的特性に基づくか、または経験に基づくそのほかの薬物クラスにクラス分けできる。
【０１７４】
メカニズムによるクラスは、薬物の作用メカニズム、たとえば薬物の受容体標的またはほかの標的に基づく。たとえば自律神経系に対して一義的に作用する薬物については、コリン受容体活性化薬物、またはコリンエステラーゼ阻害性薬物、またはコリン受容体遮断薬、またはアドレナリン受容体活性化薬物、またはアドレナリン受容体遮断薬としてクラス分けできる。
【０１７５】
しかしながら、当業者であるならば分かるように、薬物はしばしば既知の標的が見出されないか、または確たるメカニズムを持たず、薬物の作用に重要であると考えられる化学構造の類似性のような薬物のほかの観点での類似性によってもクラス分けされ得る。そのような類似性には構造的構成要素、光学異性体の存在、結晶構造などが含まれる。
【０１７６】
また薬物は、その主要な薬理学的作用に基づき、たとえば脂質低下薬、抗うつ薬、抗不安薬などにもクラス分けできる。第二の薬物については、インビトロおよび／またはインビボでの研究によって第一の薬物と同じ薬物クラスに配置でき；いくつかの実施形態では、同じまたは類似のメカニズムによる作用が構造解析から予測できる。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、薬物は一種または複数のインビトロモデル、細胞モデル、組織モデル、臓器モデルまたは動物モデルでのその効果に基づきクラス分けできる。そのような効果は、分子での効果、超分子的な効果、細胞での効果、組織での効果、臓器での効果、または生物体全体での効果、あるいはそれらの組み合わせであり得る。いくつかの実施形態では、薬物は、一種または複数の動物モデルにおける遺伝子型と反応との間に関連したモデルでの効果に基づいてクラス分けされる。たとえば、薬物Ａは遺伝子型Ｘ（たとえば、一種または複数のＳＮＰでの遺伝子型）の哺乳類、たとえばラット、マウスまたは霊長類において反応Ｍを生じ、遺伝子型Ｙの霊長類では反応Ｎを生じ得る。薬物Ｂが遺伝子型Ｘの哺乳類では反応Ｍを生じ、遺伝子型Ｙの哺乳類では反応Ｎを生じることが見出される場合では、薬物Ｂは薬物Ａと同じ薬物クラスに属するとみなされる。そのようなクラス分けは、遺伝子型、および計測された反応の数などが含まれる遺伝子変異数に基づいてかなり改良できる。動物モデルでは、試験対象薬物の範囲を拡大でき、またさらに反応のインジケータとして計測されるパラメータもさらに侵襲的なものにでき、ヒトでの試験に比べて短時間で大規模なデータベースの確立が可能となる。
【０１７８】
ほかの実施形態では、あるモデル系における薬物に関する発現プロフィールは、その薬物のクラス分けに用いることができる。たとえば、ヒトにおいて効果を有するある薬物クラスの既知の薬物（たとえば、心疾患のリスクを下げるスタチン類）のすべて、ほとんど、またはいくつかは、動物モデルで試験できる。薬物が投与される動物は、その薬物に対する反応における一貫した遺伝子発現プロフィールを示し得る（たとえば、抗炎症活性に関連した遺伝子または遺伝子の集合の発現の増大）。ほかの薬物クラスのほかの薬物についても動物モデルで試験できる。ある特定の薬物クラスに属する薬物に関連した複数の発現プロフィールは、相互に関連し得る。ある新薬は、一種または複数の動物モデルにおけるその発現プロフィールに基づいてある薬物クラスに割振ることができる。その薬物クラスに属する一種または複数の薬物について、一種または複数の遺伝子変異と一種または複数の薬物に対する反応との間の関連性は、その新薬の使用、たとえば研究（たとえば、臨床試験）および／または臨床設定における使用の調整に用いることができる。
【０１７９】
いくつかの実施形態では、ある薬物クラスに属するある新薬は、同じ薬物クラスに属するほかの薬物がすでに試験済みであって、動物での遺伝子型がその新薬に対する反応の予測に用いられるモデル、たとえば動物モデルにおいて最初に試験される。その動物での研究結果は、ヒトでの遺伝子型と新薬への反応との間の関連性の予測を改良するのに用いることができる。動物モデルは新たに開発でき、あるいは既存の動物モデルを用いることもできる。動物モデルは、特定の生理学的、生化学的または代謝上の状態、たとえば疾患または病理の状態に対応させることができる。健康または超健康な状態（たとえば、老化がゆっくりな状態）についてもモデル化できる。
【０１８０】
さらに薬物は、その投与法（たとえば、脈管内、筋肉内、皮下、眼内、吸入、経口、舌下、経直腸、経皮、注入ポンプ経由など）、剤形（たとえば、速効性製剤、持続放出性製剤、腸溶コーティング製剤など）、作用部位への取込みおよび搬送の様式、代謝（たとえば、肝ミクロソームＰ４５０系またはそのサブクラスを介する酸化反応、非ミクロソームメカニズムまたはそのサブクラスを介する酸化反応、還元反応、加水分解系またはそのサブクラスのような第Ｉ次反応によって代謝される薬物；グルクロン産抱合、アセチル化、メルカプト酸形成、硫酸抱合、Ｎ−、Ｏ−およびＳ−メチル化、硫酸エステル化のような第ＩＩ次反応によって代謝される薬物；ならびにその両方によって代謝される薬物）、代謝産物および／または副生成物、ならびにそれらの構造および／または機能、薬物速度論、薬物動力学、排泄などに基づき、複数の薬物クラスまたは同じクラスの複数のサブクラスに配置することもできる。
【０１８１】
これらのクラス分けは例示にすぎず、対応する薬物クラスに属する薬物の効果の非ランダムな予測を可能にする薬物クラス分け手段のいずれも使用できることが理解されよう。さらに、薬物クラス分けシステムおよび各々の薬物クラスに特有な薬物についても、当業者であれば見出すことができる。このことについては、たとえばＡｎｄｅｒｓｏｎ，Ｐｈｉｌｉｐ，Ｏ．；Ｋｎｏｂｅｎ，Ｊａｍｅｓ  Ｅ．；Ｔｒｏｕｔｍａｎ，Ｗｉｌｌｉａｍ  Ｇ．編、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄａｔａ、第１１版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ社刊、２００２年；ＰｒａｔｔおよびＴａｙｌｏｒ編、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ａｃｔｉｏｎ、第３版、Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ  Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ社（米国、ニューヨーク市）刊、１９９０年；Ｋａｔｚｕｎｇ編、Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、第９版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ社刊、２００３年７月；ＧｏｏｄｍａｎおよびＧｉｌｍａｎ編、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第１０版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ社刊、２００１年；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第２０版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ社刊、２０００年；およびＭａｒｔｉｎｄａｌｅ編、Ｔｈｅ  Ｅｘｔｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第３２版、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ社（英国、ロンドン市）刊、（１９９９年）が参照され、それらのすべては、そのすべてにおいてここで参照によって取込まれる。
【０１８２】
遺伝子型解析および関連研究が対象の薬物クラスの少なくとも一種の構成薬物に対して可能である適当な薬物クラスのいずれについても、前述の本発明の方法および組成物の主題であり得る。薬物クラスには、本明細書に記載されているのようなインスリン感作物質、たとえばＰＰＡＲモジュレーターが含まれる。したがっていくつかの実施形態では、本発明はある個人の遺伝子型（および／または表現型）、ならびに遺伝子型（および／または表現型）と別のインスリン感作物質、たとえばＰＰＡＲモジュレーターに対する反応性との間の関連研究の結果に基づき、インスリン感作物質、たとえばＰＰＡＲモジュレーターに対する個体の反応性の予測方法を提供する。いくつかの実施形態では、インスリン感作物質、たとえばＰＰＡＲモジュレーターに対するある個人の反応性の予測は、臨床試験でのその個人の採否に用いられる。いくつかの実施形態では、インスリン感作物質、たとえばＰＰＡＲモジュレーターに対するある個人の反応性の予測は、別のインスリン感作物質、たとえばＰＰＡＲモジュレーターのその個人への投与の調整に用いられる。いくつかの実施形態では、そのような投与調整は臨床試験で行われる。いくつかの実施形態では、インスリン感作物質、たとえばＰＰＡＲモジュレーターに対するある個人の反応性の予測は、インスリン感作物質以外の薬物、すなわちいくつかの実施形態ではＰＰＡＲモジュレーター以外の薬物で個体を治療すべきかどうかを決めるのに用いられる。
【０１８３】
ａ．メカニズムによる薬物クラス
遺伝子型解析（および／または表現型解析）および一つの構成薬物に関連した研究が別の構成薬物の効果を予測するのに用いることができる薬物クラスの非限定的な例としては、糖尿病の治療に用いられる薬物のメカニズムによるクラス（ＰＰＡＲもジュレーターが含まれる）が挙げられる。この薬物クラスについては、たとえば投与法によって、薬物がさらにサブクラスに分けられる方法も説明される。たとえば、インスリンおよびインスリン類似体は、注入、経鼻スプレー、経皮、経口または吸入の経路による投与用に製剤化できる。それらの剤形は各々、反応および関連する遺伝子変異の独特なプロフィールを持ち得る。メカニズムによるそのような薬物のクラス分けの例を、メカニズムによる薬物クラスの代表的な構成薬物と共に表３に示す。
【０１８４】
（表３．糖尿病治療用薬物のクラス）
【０１８５】
【表３−１】
2009509539.tif 000004
【０１８６】
【表３−２】
2009509539.tif 000005
ほかの実施形態では、血中のコレステロールおよび／またはトリグリセリドの異常な値を治療するのに用いられる薬物のメカニズムによって分類されたクラスが、本発明の方法または組成物に伴って用いられる。広義のメカニズムによる薬物クラスにはスタチン類、フィブラート類、コレステロール吸収抑制剤、ニコチン酸誘導体、胆汁酸封入剤、コレステリルエステルトランスファー蛋白質抑制剤、脂質トランスポート逆経路活性化剤、抗酸化剤／血管保護剤、アシル−ＣｏＡコレステロール・アシルトランスフェラーゼ阻害剤、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体アゴニスト、ミクロソームトリグリセリド蛋白質抑制剤、スクアレン・シンターゼ阻害剤、リポ蛋白質リパーゼ活性化剤、リポ蛋白質（ａ）アンタゴニスト、および胆汁酸再吸収抑制剤が含まれる。そのような薬物のメカニズムによるクラス分けの例については、メカニズムによるクラスの代表的な構成薬物と共に表４に示す。
【０１８７】
（表４：血中のコレステロールおよび／またはトリグリセリドの異常値の治療用の薬物のクラス）
【０１８８】
【表４−１】
2009509539.tif 000006
【０１８９】
【表４−２】
2009509539.tif 000007
ほかの実施形態では、うつ病の治療に用いられる薬物のメカニズムにより分類されたクラスが、本発明の方法または組成物に伴って用いられる。現行または新規の抗うつ薬には、種々のメカニズム、たとえば選択的セロトニン再取込み抑制剤（ＳＳＲＩ）、セロトニン作動性／ノルアドレナリン作動性薬剤、セロトニン作動性／ノルアドレナリン作動性／ドパミン作動性薬剤、三環系抗うつ剤、モノアミンオキシダーゼ阻害剤（ＭＡＯＩ）、ノルアドレナリン作動性／ドパミン作動性薬剤、セロトニンアンタゴニスト、セロトニンアゴニスト、サブスタンスＰアンタゴニスト、およびβ３アドレナリン受容体アゴニストによる作用が見られる。そのような薬物のメカニズムによるクラス分けの例については、メカニズムによるクラスの代表的な構成薬物と共に表５に示す。
【０１９０】
（表５．うつ病治療用の薬物のクラス）
【０１９１】
【表５−１】
2009509539.tif 000008
【０１９２】
【表５−２】
2009509539.tif 000009
ほかの実施形態では、多発性硬化症の治療に用いられる薬物のメカニズムによって分類されたクラスが、本発明の方法および組成物に伴って用いられる。それらの薬物は、たとえば組換え型インターフェロン、改変型ペプチドリガンド、化学療法剤、免疫抑制剤、コルチコステロイド、モノクローナル抗体、ケモカイン受容体アンタゴニスト、ＡＭＰＡ受容体アンタゴニスト、組換え型ヒトグリア成長因子、Ｔ細胞受容体ワクチン、および経口免疫調節剤のように分類できる。そのような薬物のメカニズムによるクラス分けの例については、メカニズムによるクラスの代表的な構成薬物と共に表６に示す。
【０１９３】
（表６：多発性硬化症の治療用薬物のクラス）
【０１９４】
【表６−１】
2009509539.tif 000010
【０１９５】
【表６−２】
2009509539.tif 000011
ほかの実施形態では、パーキンソン病の治療で用いられる薬物のメカニズムによって分類されたクラスが、本発明の方法および組成物に伴って用いられる。それらの薬物クラスにはドパミン前駆物質、ドパミンアゴニスト、ＣＯＭＴ阻害剤、ＭＡＯ−Ｂ阻害剤、抗グルタメート剤、抗コリン剤、混合型ドパミン活性化剤、アデノシンＡ２ａアンタゴニスト、α２アドレナリンアンタゴニスト、抗アポトーシス剤、成長因子刺激剤、および細胞補充薬が含まれる。．そのような薬物のメカニズムによるクラス分けの例については、メカニズムによるクラスの代表的な構成薬物と共に表７に示す。
【０１９６】
（表７：パーキンソン病治療用薬物のクラス）
【０１９７】
【表７】
2009509539.tif 000012
前述のクラス分けについては例示にすぎない。ある薬物クラスが、単一の疾患の治療に用いられる薬物に制限される必要はないが、対象のメカニズムによる薬物クラスが、数種の疾患の治療に有用な構成薬物を有することができることが分かるであろう。たとえばＭＡＯ−Ｂ阻害剤は、パーキンソン病およびうつ病の両方の治療に有用であり、別の例では、スタチン類は脂質異常症の治療に有用であるが、炎症が主な病状を担う疾患、たとえば多発性硬化症およびほかの疾患においても、さらに一般的に用いられることが分かる。
【０１９８】
メカニズムによる薬物のさらなるクラス分けについては、当業者に知られており、それらのクラス分けはしばしば構造によってさらにクラス分けできる。本発明の方法および組成物に有用な薬物クラスの非限定的な例、ならびにそれらのクラスの代表的な構成薬物については、以下のものが含まれる。
【０１９９】
鎮静−催眠薬、これらにはＧＡＢＡＡ受容体に結合する薬物、たとえばベンゾジアゼピン類（アルプラゾラム、クロルジアゼポキシド、クロルアゼペート、クロナゼパム、ジアゼパム、エスタゾラム、フルラゼパム、ハラゼパム、ロラゼパム、ミドゾラム、オキサゼパム、クアゼパム、テマゼパム、トリアゾラムが含まれる）、バルビツレート類（アモバルビタール、ペントバルビタール、フェノバルビタール、セコバルビータのような）、および非ベンゾジアゼピン類（ゾルピデムおよびザレプロンのような）、ならびにベンゾジアゼピン−アンタゴニスト（フルマゼニルのような）が含まれる。ほかの鎮静−催眠薬については、ＧＡＢＡ作動性メカニズム以外、たとえばセロトニン受容体とドパミン作動性受容体との相互作用などで作用することが見出されており、ブスピロン、イサピロン、ゲプリロン、およびタンドスピロンが含まれる。作用メカニズムが明確に解明されていない従来薬物には抱水クロラール、エトクロルビノール、メプロバメート、およびパラルデヒドが含まれる。
【０２００】
いくつかの実施形態では、ベンゾジアゼピン類および非ベンゾジアゼピン類のようなＧＡＢＡ受容体と相互作用する鎮静−催眠薬は、一種または複数のＧＡＢＡＡ受容体サブユニットでさらにクラス分けされ、たとえばαサブユニット（α−１，２，３および５を含めた６種類のサブユニットに分類される）と相互作用するもの、βサブユニット（４種類の異なるタイプにさらに分類される）と相互作用するもの、γサブユニット（３種類の異なるタイプ）と相互作用するもの、およびδ、ε、π、ρなどの各サブユニットと相互作用するものにさらにクラス分けされる。そのようなクラス分けによって、特定のサブクラスと相互作用性を有する対象の鎮静−催眠薬に対する反応性と遺伝子変異との間の関連性をさらに精査することができ、同じ受容体サブクラスと相互作用する新たな鎮静−催眠薬についての予測も可能となる。
【０２０１】
オピオイド鎮痛薬およびオピオイドアンタゴニストは、オピオイド受容体に対して作用する。現在使用可能なオピオイド鎮痛薬の大部分は、μオピオイド受容体に一義的に作用する。しかしながら、それらはδおよびκ受容体とも相互作用する。鎮静−催眠薬と同様に、いくつかの実施形態では、オピオイド鎮痛剤は一義的に相互作用する受容体サブクラスにさらに分類され、それによって薬物反応と遺伝子変異との間の関連性のさらなる精査が可能になり、新薬について相互作用する一種または複数の受容体に基づいた予測性を向上させることができる。オピオイド鎮痛薬にはアルフェタニル、ブプレノルフィン、ブトルファノール、コデイン、デゾシン、フェンタニル、ヒドロモルフォン、酢酸レボメタジル、レボルファノール、メペリジン、メタドン、硫酸モルヒネ、ナルブフィン、オキシコドン、オキシモルフォン、ペンタゾシン、プロポキシフェン、レミフェンタニル、スフェンタニル、トラマドールが含まれ、鎮痛薬配合剤としてはたとえば、コデイン／アセトアミノフェン、コデイン／アスピリン、ヒドロコドン／アセトアミノフェン、ヒドロコドン／イブプロフェン、オキシコドン／アセトアミノフェン、オキシコドン／アスピリン、プロポキシフェン／アスピリン、またはプロポキシフェン／アセトアミノフェンが挙げられる。オピオイドアンタゴニストには、ナルメフェン、ナロキソン、ナルトレキソンが含まれる。鎮咳薬にはコデイン、デキストロメトルファンが含まれる。
【０２０２】
非ステロイド系抗炎症薬は、プロスタグランジン類の合成の抑制、たとえばＣＯＸ−１、ＣＯＸ−２、あるいはその両方の抑制によって一義的に作用する。従来からのＮＳＡＩＤ（たとえばサリチル酸類）は、ＣＯＸのタイプに非選択的に抑制する傾向があるが、それに対して近年開発されたＮＳＡＩＤは、完全に選択的（たとえば、ＣＯＸ−２阻害剤）である。非選択的なＣＯＸ阻害剤にはアスピリン、アセチルサリチル酸、サリチル酸コリン、ジクロフェナック、エトドラック、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ケトロラック、サリチル酸マグネシウム、メクロフェナメート、メフェナム酸、ナブメトン、ナプロキセン、オキザプロジン、フェニルブタゾン、ピロキシカム、サルサレート、サリチルサリチル酸、サリチル酸ナトリウム、チオサリチル酸ナトリウム、スリンダック、テノキシカム、チアプロベン、アザプロパゾン、カルプロフェン、およびトルメチンが含まれる。選択的なＣＯＸ−２阻害剤にはセレコキシブ、エトロリコキシブ、メロキシカム、ロフェコキシブ、およびバルデコキシブが含まれる。
【０２０３】
ヒスタミンアゴニストおよびヒスタミンアンタゴニストは、受容体のサブタイプによってクラス分けされる。Ｈ１アゴニストまたは部分的アゴニストには２−（ｍ−フルオロフェニル）−ヒスタミンが含まれ、Ｈ１アンタゴニストにはクロルフェニラミン、スコポラミン、メピラミン、テルフェナジン、アステミゾール、およびトリプロリジンが含まれ、Ｈ１アンタゴニストについてはさらに、（化学構造によってさらに分類可能）エタノールアミン類であるカルビノキサミン、ジメンヒドリネート、ジフェンヒドラミン、およびドキシルアミン；エチルアミンジアミン類であるピリルアミンおよびトリペレンアミン；ピペラジン誘導体であるジドロキシジン、シクリジン、フェクソフェナジン、およびメクリジン；アルキルアミン類であるブロムフェニラミンおよびクロルフェニラミン；ならびにそのほかのアンタゴニストであるシクロヘプタジン、ロラタジン、セトリジンも含まれる。Ｈ２アゴニストにはジマプリト、インプロミジン、およびアンタミンが含まれ、Ｈ２アンタゴニスト（胃酸分泌の治療に有用）にはシメチジン、ラニチジン、ニザチジン、およびファモチジンが含まれ、Ｈ３アゴニストにはＲ−α−メチルヒスタミン、イメチット、およびイメピップが含まれ、Ｈ３アンタゴニストにはチオペラミド、ヨードフェンプロピド、およびクロベンプロピドが含まれ、Ｈ４アゴニストにはクロベンプロピト、イメチット、およびクロザピンが含まれ、Ｈ４アンタゴニストにはチオペラミドが含まれる。購入可能な製剤にはＨ１ブロッカーではアゼラスチン、ブロムフェニラミン、ブクリジン、カルビノキサミン、セトリジン、クロルフェニラミン、クレマチン、シクリジン、シプロヘプタジン、デスロラチジン、ジメンヒドリネート、ジフェンヒドラミン、エメダスチン、フェキソフェナジン、ヒドロキシジン、ケトチフェン、レボカバスチン、ロラタジン、メクリジン、オロファタジン、フェニンダミン、およびプロモアタジンが含まれる。
【０２０４】
喘息で用いられる薬物には交感神経様作用薬剤（「苦痛緩和剤」または「気管支拡張剤」として用いられる）が含まれ、それにはたとえばアルブテロール、アルブテロール／イパラトロピウム配合剤、ビトルテロール、エフェドリン、エピネフリン、ホルモテロール、イソエタリン、イソプロテレノール、レバルブテロール、メタプロテレノール、ピルブテロール、サルメテロール、サルメテロール／フルチカソン配合剤、テルブタリンが挙げられ；またコルチコステロイドのエアゾル製剤（「管理薬」または抗炎症剤として用いられる）も含まれ、それにはたとえばベクロメタゾン、ブデソニド、フルニソリド、フルチカソン、フルチカソン／サルメテロール配合剤、トリアムシノロンが挙げられ；さらにモンテルカスト、ザフィルルカスト、ジリュートンのようなロイコトリエン抑制剤；コルモリンナトリウムおよびネドクロミルナトリウム；アミノフィリン、テオフィリネムジフィリン、オキシトリフィリン、ペントキシフィリンのようなメチルキサンチン類；イプラトロピウムのような抗ムスカリン薬；ならびにオマリズマブのような抗体も含まれる。
【０２０５】
勃起不全の薬物にはシルデナフィル（Ｖｉａｇｒａ（商品名））、タダラフィル、バルデナフィル、およびアルプロスタジルのようなｃＧＭＰエンハンサー、ならびにアポモルフィンのようなドパミン放出剤が含まれる。
【０２０６】
消化器疾患の治療で用いられる薬物は、多くのメカニズムで作用する。酸に対抗する薬物（制酸剤）には水酸化アルミニウムゲル、炭酸カルシウム、水酸化アルミニウム／水酸化マグネシウム配合製剤が含まれる。プロトンポンプ抑制剤として作用する薬物にはエソメプラゾール、ランソプラゾール、パントプラゾール、およびラベプラゾールが含まれる。Ｈ２ヒスタミンブロッカーにはシメチジン、ファモチジン、ニラチジン、ラニチジンが含まれる。抗コリン剤にはアトロピン、ベラドンナのアルカロイドのチンキ剤、ジシクロミン、グリコピロレート、ｌ−ヒオスサイアミン、メススコポラミン、プロパンテリン、スコポラミン、トリジヘキセチルが含まれる。粘膜保護剤にはミソプロストール、スクラルファートが含まれる。消化酵素にはパンクレリパーゼが含まれる。運動性疾患および制吐用の薬物にはアロセトロン、シザプリド、ドラセトロン、ドロナビノール、グラニセトロン、メトクロプラミド、オンダンセトロン、プロクロルペラジン、テガセロドが含まれる。消化器疾患で用いられる抗炎症薬にはバルサラジド、ブデソニド、ヒドロコルチゾン、メサラミン、メチルプレドニゾン、オルサラジン、スルファサラジン、インフリキシマブが含まれる。止瀉薬にはサブサリチル酸ビスマス、ジフェノキシン、ジフェノキシレート、カオリン／ペクチン配合剤、ロペラミドが含まれる。緩下薬にはビスアコジル、カスカラ・サグラダ（カスカラ樹脂）、ヒマシ油、ドクセート、グリセリン液、ラクツロース、水酸化マグネシウム（マグネシアミルク、Ｅｐｓｏｎ  Ｓａｌｔ（商品名））、メチルセルロース、鉱油、ポリカルボフピル、ポリエチレングリコール電解質溶液、シリウム・シエンナ（オオバコ種子）が含まれる。胆石を溶解する薬物にはモノクタノイン、ウルソジオールが含まれる。
【０２０７】
コリン受容体活性化薬物は、ムスカリン受容体および／またはニコチン受容体を活性化することで作用し、それらにはコリンエステル類（たとえばアセチルコリン、メタコリン、カルバミン酸、カルバコールおよびベタネコール）およびアルカロイド（たとえばムスカリン、ピロカルピン、ロベリン、オヨビニコチン）が含まれ；コリンエステラーゼ阻害性薬物は、コリンエステラーゼの活性部位に対して通常作用し、それらには第四級アンモニウム基を有するアルコール化合物（たとえばエドロフォニウム）、カルバメート類およびその関連薬剤（たとえばネオスチグミン、フィソスチグミン、ピリドスチグミン、アンベノニウム、およびデメルカリウム）、ならびに有機リン酸誘導体（たとえばエコチオフェート、ソマン、パルチオン、マラチオン）が含まれ；コリン受容体ブロッカーは、ニコチン受容体に対するアンタゴニストとして通常作用する（さらにクラス分けすると、ヘキサメトニウム、メクミラミン、テトラエチルアンモニウム、およびトリメタファンのようなガングリオンブロッカー；ならびに神経−筋肉接合ブロッカー（骨格筋弛緩剤など）が挙げられる）か、あるいはムスカリン受容体に対するアンタゴニストとして通常作用（たとえばアトロピン、プロパンテリン、グリコピロレート、ピレンゼピン、ジシクロミン、トロピカミド、イパトロピウム、バンズトロピン、ガラミン、メトオクトラミン、ＡＦ−ＤＸ１１６、テレンジピン、トリヘキシルフェニジル、ダリフェナシン、スコポラミン、ホマトロピン、シクロペントレート、アニソトロピン、クリジニウム、イソプロパミド、メペンゾレート、メススコポラミン、オキシフェノニウム、プロパンテリン、オキシブチニン、オキシフェンシクリミン、プロピベリン、トルテロジン、トリジヘキセチル）し、ムスカリン受容体に対して主に有効なサイトによって、さらにたとえばＭ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４またはＭ５のようにサブクラスに分けることができ、その主な有効サイトに基づき、遺伝子変異と新薬に対する反応との間の関連性についての予測性が高まり得る。購入可能な抗ムスカリン薬製剤にはアトロピン；ベラドンナのアルカロイドの抽出物またはチンキ剤；クリジニウム；シクロペントレート；ジシクロミン；フラボキサート；グリコピロレート；ホマトロピン；ｌ−ヒソシアミン；イプラトロピウム；メペンゾレート；メタンテリン；メススコポラミン；オキシブチニン；プルパンテリン；スコポラミン；トルテロジン；トリジヘキセチル；ならびにトロピカミドが含まれるが、それらに限定されない。購入可能なガングリオンブロッカー製剤にはメカミラミンおよびトリメタファンが含まれる。購入可能なコリンエステラーゼ再生成化剤にはプラリドキシムが含まれる。
【０２０８】
アドレナリン受容体活性化薬物およびほかの交感神経様作用薬物は，それらが活性化する一種または複数の受容体、たとえばα１タイプ（さらにＡ，Ｂ，Ｄのサブタイプを含む）、α２タイプ（さらににＡ，Ｂ、Ｃのサブタイプを含む）、βタイプ（さらに１，２，３のサブタイプを含む）、およびドパミンタイプ（さらに１，２，３，４，５のサブタイプを含む）によりクラス分けできる。薬物の例としてはエピネフリン、ノルエピネフリン、フェニレフリン、メトキサミン、ミロドリン、エフェドリン、キシロメタゾリン、アンフェタミン、メタンフェタミン、フェンメトラジン、メチルフェニデート、フェニルプロパノールアミン、メチルノルエピネフリン、ドブタミン、クロニジン、ＢＨＴ９２０、オキシメタゾリン、イソプロテレノール、プロカテロール、テルブタリン、メタプロテレノール、アルブテロール、リトドリン、ＢＲＬ３７３４４、ドパミン、フェノルドパム、ブロモクリプチン、キンピロール、デキスメデトミジン、チラミン、コデイン（ドパミン再取込み抑制剤）、アプラクロニジン、ブリモニジン、リトドリン、テルブタリン、およびモダフィニルが挙げられる。購入可能な製剤にはアンフェタミン、アプラクロニジン、ブリモニジン、デクスメデトミジン、デキシムチルフェニデート、デキストロアンフェタミン、ジピベフリン、ドブタミン、ドパミン、エフェドリン、エピネフリン、フェノルドパム、ヒドロキシアンフェタミン、イソプロテレノール、メフェンテルミン、メタラミノール、メタンフェタミン、メトキサミン、メチルフェニデート、ミドドリン、モダフィニル、ナファゾリン、ノルエピネフリン、オキシメトゾリン、ペモイン、フェンジメトラジン、フェニレフリン、シュードエフェドリン、テトラヒドロゾリン、およびキシロメタオリンが含まれる。
【０２０９】
アドレナリン受容体アンタゴニスト薬物は、前述のアドレナリン受容体アゴニストと同様に、受容体のタイプによってクラス分けでき、それらにはトラゾリン、ジベナミン、プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、フェノキシベンズアミン、フェントールアミン、ラウオシン、ヨヒンビン、ラベタロール、カルベジロール、メトプロロール、アセブトロール、アルプレノロール、アテノロール、ベタキソロール、セリプロロール、エスモロール、プロパノロール、カルテオロール、ペンブトロール、ピンドロール、チモロール、ブトキサミン、エルゴタミン、ジヒドロエルゴタミン、タムロシン、アルフゾシン、インドラミン、ウラピジル、ビソプロロール、ナドロール、ソタロール、オキシペノロール、ボピンドロール、メドロキサロール、およびブシンドロールが含まれる。購入可能な製剤には、αブロッカーではドキサゾシン、フェノキシベンズアミン、フェントールアミン、プラゾシン、タムスロシン、テラゾシン、およびトラゾリンが含まれ、βブロッカーではアセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、カルテオロール、カルベジロール、エスモロール、ラベトロール、レボブノロール、メチプロアノロール、ナドロール、ペンブトロール、ピノロール、プロパノロール、ソタロール、およびチモロールが含まれ、ならびにアドレナリン合成抑制剤ではメチロシンが含まれる。
【０２１０】
降圧剤には種々のメカニズムで作用する薬物が含まれるため、ほかのクラス分けと重複する。降圧剤にはチアジド系利尿剤およびカリウム保持性利尿剤のような利尿剤；メチルドーパおよびクロニジンのような中枢神経系に対して作用する薬物；ガングリオン遮断薬（上述）；グネチジン、グナドレル、ベタニジン、デブリソキン、およびレセルピンのようなアドレナリン作動性ニューロン遮断薬；プロパノロール、メトプロロール、ナドロール、カルテオロール、アテノロール、ベタクソロール、ビソプロロール、ピンドロール、アセブトロール、ペンブトロール、ラベタロール、カルベジロール、エスモロール、パゾシン、フェントールアミン、およびフェノキシベンズアミンのようなアドレナリン受容体アンタゴニスト；ヒドラルザイン、ミノキシジル、ニトロプルシドナトリウム、ジアゾキシド、およびフェノルドパムのような血管拡張剤；ベラパミル、ジルチアゼム、アムロピジン、フェロピジン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピンおよびニソルジピンのようなカルシウムチャンネルブロッカー；カプトロピル、エナラプリル、リシノプリル、ベナゼプリル、ホシノプリル、モエキシプリル、ペリンドプリル、キナプリル、ラミプリル、およびトランドラプリルのようなＡＣＥ阻害剤；ならびにロザルタン、バルサルタン、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、およびテルミサルタンのようなアンジオテンシン受容体遮断剤が含まれる。購入可能な製剤には、βアドレナリン受容体遮断薬ではアセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、カルテオロール、カルベジロール、エクスモロール、ラベタロール、メトプロロール、ナドロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロパノロール、チモロールが含まれ、中枢作用性交感神経作動薬ではクロニジン、グナベンズ、グアンファシン、メチルドーパが含まれ、ガングリオシナプス後神経末端遮断薬ではグナドレル、グアネチジン、およびレゼルピンが含まれ、α１選択的アドレナリン受容体ブロッカーではドキサゾシン、プラゾシン、テラゾシンが含まれ、ガングリオ遮断薬ではメカミルアミンが含まれ、血管拡張薬ではジアゾキシド、フェノールドパム、ヒドララジン、ミノキシジル、ニトロプルシドが含まれ、カルシウムチャンネルブロッカーではアムロジピン、ジルチアゼム、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニソルジピン、ニフェジピン、ベラパミルが含まれ、ＡＣＥ阻害剤ではベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、ペリンドプリル、キナプリル、ラミプリル、およびトランドラプリルが含まれ、さらにアンジオテンシン受容体ブロッカーではカンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルミサルタン、テルミサルタン、およびバルサルタンが含まれる。
【０２１１】
狭心症において用いられる血管拡張剤には、ニトログリセリン、二硝酸イソソルビド、硝酸アミルおよび一硝酸イソソルビドのような硝酸エステルおよび亜硝酸エステルのような一酸化窒素放出性薬物；アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニソルジピン、ニトレンジピン、ベプリジル、ジルチアゼム、およびベラパミルのようなカルシウムチャンネルブロッカー；ならびにβアドレナリン受容体遮断薬（上記参照）が含まれる。購入可能な製剤には、硝酸エステルおよび亜硝酸エステルでは硝酸アミル、二硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ニトログリセリンが含まれ、カルシウムチャンネルブロッカーではアムロジピン、ベプリジル、ジルチアゼム、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニソルジピン、およびベラパミルが含まれ、βブロッカーではアセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、カルテオロール、カルベジロール、エスモロール、ラベトロール、レボブノロール、メチプロアノロール、ナドロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロパノロール、ソタロール、チモロールが含まれる。
【０２１２】
心不全において用いられる薬物には、ジゴキシンのような配糖剤系心臓病薬；イムリノンおよびミルリノンのようなホスホジエステラーゼ阻害剤；前述のようなβアドレナリン受容体刺激剤；後述で考察されるような利尿剤；前述で考察されたようなＡＣＥ阻害剤；オマプルトリラートのようなＡＣＥおよび中性エンドペプチダーゼの両方を阻害する薬物；合成脳ナトリウム利尿ペプチド（ネシリチド）およびボセンタンのような血管拡張薬；上述のようなβアドレナリン受容体ブロッカーが含まれる。購入可能な製剤には、ジギタリス剤ではジゴキシン；ジギタリス抗体ではジゴキシン免疫Ｆａｂ；交感神経様作用薬ではドブタミンおよびドパミン；ＡＣＥ阻害剤ではカプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、キナプリル、ラミプリル、およびトランドラプリル；アンジオテンシン受容体ブロッカーではカンデサルタン、ウプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタン、テルミサルタン、およびバルサルタン；ならびにβブロッカーではビソプロロール、カルベジロールおよびメトプロロールが含まれる。
【０２１３】
抗不整脈薬には、キニジン、アミオダロン、ジソプリミド、フレカイニド、リドカイン、メキシレチン、モルシジン、プロカインアミド、プロパフェネオン、およびトカイニドのようなナトリウムチャンネルをブロックすることによって作用する薬物；プロプラノロール、エスモロール、およびソタロールのようなβアドレナリン受容体遮断薬；アミオダロン、ブレチリウム、ソタロール、ドフェチリド、およびイブチリドのような活性の持続によって有効反映時間が延長する薬物；ベラパミル、ジルチアゼム、およびベプリジルのようなカルシウムチャンネルブロッカー；ならびにアデノシン、ジキタリス剤、マグネシウム剤、およびカリウム剤のようなそのほかの種々の薬剤が含まれる。購入可能な製剤には、ナトリウムチャンネルブロッカーではジソプリアミン、フレカイニド、リドカイン、ミエキシレチン、モリシジン、プロカインアミド、プロパフェノン、硫酸キニジン、グルコン酸キニジン、およびポリガラクツロン酸キニジン；βブロッカーではアセブトロール、エスモロール、およびプロプラノロール；作用持続性薬剤ではアミオダロン、ブレチリウム、ドフェチリド、イブチリド、およびソタロール；カルシウムチャンネルブロッカーではベプリジル、ジルチアゼム、およびベラパミル；ならびにアデノシンおよび硫酸マグネシウムが含まれる。
【０２１４】
利尿剤には、アセタゾロアミド、ジクロルフェナミド、メタゾールアミドのような炭酸脱水酵素素廃材として作用する薬物；フロセミド、ブメタニド、トルセミド、エタクリン酸、および水銀含有利尿剤のようなループ利尿剤；ベンドロフルメチアジド、ベンズチアジド、クロロチアジド、クロルタリドン、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、インダパミド、メチルクロチアジド、メトラゾン、ポリチアジド、キネタゾン、およびトリクロルメタジドのような遠位曲尿細管におけるＮａＣｌ輸送の阻害、さらにいくつかの場合では炭酸脱水酵素阻害剤としても作用する薬物；スピロラクトン、トリアムテレン、エプレレノン、およびアミロリドのようなカリウム保持性利尿薬；マンニトールのような浸透性利尿薬；バソプレシンおよびデスモプレシンのような抗利尿ホルモンアゴニスト；ならびにアスリチウムおよびデメクロシクリンのような抗利尿ホルモンアンタゴニストが含まれる。購入可能な製剤には、アクテタゾールアミド、アミロリド、ベンドロフルメチアジド、ベンズチアジド、ブリンゾールアミド、ブメタニド、クロロチアジド、クロルタリドン、デメクロシクリン、ジクロルフェンアミド、ドルゾールアミド、エプレレノン、エタクリン酸、フロセミド、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、インダパミド、マンニトール、メタゾールアミド、メチクロチアジド、メトラゾン、ポリチアジド、キネタゾン、アピロノラクトン、トルセミド、トリアムテレン、およびトリクロルメチアジドが含まれる。
【０２１５】
セロトニン、およびセロトニンに影響を及ぼす薬物には、フェンフルラミン、ゲクスフェンフルラミン、ブスピロン、スマトリプタン、シサプリド、テガセロドのようなセロトニンアゴニスト；ｐ−クロロフェニルアラニン、ｐ−クロロアンフェタミン、およびレゼルピンのようなセロトニンアンタゴニスト；フェノキシベンズアミン、シプロヘプタジン、ケタンセリン、リタンセリン、およびオンダンセトロンのようなセロトニン受容体アンタゴニスト；ならびに本明細書のいずれかの箇所で記載されているようなセロトニン再取込み抑制剤が含まれる。セロトニン受容体アゴニストにはアルモトリプタン、エレトリプタン、フロバトリプタン、ナラトリプタン、リザトリプタン、スマトリプタン、およびゾルミトリプタンが含まれる。
【０２１６】
麦角アルカロイドは、たとえば片頭痛の治療に有用であり、αアドレナリン受容体、セロトニン受容体、およびドパミン受容体を含む様々な標的に対して作用する。それらにはブロモクリプチン、カベルゴリン、ペルゴリド、エルゴノビン、エルゴタミン、リゼルグ酸ジエチルアミド、およびメチゼルギドが含まれる。購入可能な製剤には、ジヒドロエルゴタミン、エルゴノビン、エルゴタミン、酒石酸エルゴタミン、およびメチルエルゴノビンが含まれる。
【０２１７】
血管作動性ペプチドには、アプレピタントおよびボセンタンが含まれる。
【０２１８】
エイコサノイドには、プロスタグランジン類、トロンボキサン類、およびロイコトリエン類が含まれる。エイコサノイド・モジュレーター薬物にはアルプロスタジル、ビマトプロスト、カルボプロスト、トロメタリン、ジノプロストン、エポプロステノール、ラタノプロスト、ミソプロストール、モンテロイカスト、トラバプロスト、トレプロスチミル、ウノプロストン、ザフィルロイカスト、ジロイトンが含まれる。エイコサノイド・モジュレーターについてはさらに、本明細書において非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）について行ったのと同様な考察が成される。
【０２１９】
急性アルコール離脱症状の治療用薬物には、ジアゼパム、ロラゼパム、オギザゼパム、サイアミンが含まれ、アルコール中毒症の予防用薬物には、ジスルフィラム、ナルトレキソンが含まれ、さらにメタノールまたはエチレングリコールの急性中毒症の治療用薬物には、エタノール、およびホメピゾールが含まれる。
【０２２０】
抗てんかん薬には、カルバマゼピン、クロナゼパム、クロラゼプ酸二カリウム、ジアゼパム、エトスキシミド、エトトイン、フェルバメート、ホスフェニトイン、ガバペンチン、ラモトリギン、レベチラセタム、ロラゼパム、メフェニトイン、メホバルビタール、オキシカルベゼピン、ペントバルビタール・ナトリウム、フェノバルビタール、フェニトイン、プリミドン、チアガビン、トピラメート、トリメタジオン、バルプロ酸が含まれる。
【０２２１】
全身麻酔剤には、デスフルラン、デクスメデトミジン、ジアゼパム、ドロペリドール、エンフルラン、エトミデート、ハロタン、イソフルラン、ケタミン、ロラゼパム、メトヘキシタール、メトキシフルラン、ミダゾラム、亜酸化窒素、プロポホール、セボフルラン、チオペンタールが含まれる。
【０２２２】
局所麻酔剤には、アルチカイン、ベンゾカイン、ブピバカイン、ピクリン酸ブタンベン、クロロプロカイン、コカイン、ジブカイン、ジクロニン、レボブピバカイン、リドカイン、リドカイン／エチドカイン共晶混合物、メピバカイン、プラモキシン、プリロカイン、プロカイン、プロパラカイン、ロピバカイン、テトラカインが含まれる。
【０２２３】
骨格筋弛緩剤には、アトラクリウム、シザトラクリム、ドキサクリウム、メトクリン、ミバクリン、パンクロニウム、ピペクロニウム、ロクロニウム、スクシニルコデイン、ツボクラリン、ベクロニウムのような神経−筋肉遮断薬；ならびにバクロフェン、Ａ型ボツリヌス毒素、Ｂ型ボツリヌス毒素、カリソプロドール、コルフェネシン、クロルゾキサゾン、シクロベンザプリン、ダントロレン、ジアゼパム、ガバペンチン、メタキサロン、メトカルバモール、オルフェナドリン、リルゾール、およびチザニジンのような筋弛緩剤（鎮痙薬）が含まれる。
【０２２４】
抗精神病剤には、アリピプラゾール、クロルプロマジン、クロザピン、フルフェナジン、フルフェナジンのエステル、ハロペリドール、ハロペリドールのエステル、ロキサピン、メソリダジン、モリンドン、オランザピン、ペルフェナジン、ピモザイド、プロクロルペラジン、プロマジン、ケチアピン、リスペリドン、チオリダジン、チオチキセン、トリフルオペラジン、トリフルプロマジン、ジプラシドンが含まれ、気分安定薬にはカルバマゼピン、ジバルプロエックス、炭酸リチウム、およびバルプロ酸が含まれる。
【０２２５】
貧血において用いられる薬剤には、ダルボポエチンα、デフェロキサミン、エポエチンα（エリスロポエチン、エポ）、フィルグラスチム（Ｇ−ＣＳＦ）、葉酸、鉄剤、オプレルベキン（インターロイキン−ＩＩ）、ペグフィルグラスチム、サルグラモスチム（ＧＭ−ＣＳＦ）、ビタミンＢ１２のようなヘマトポエチン性成長因子が含まれる。
【０２２６】
疾患修飾性候リウマチ薬には、アナキンラ、アダリムマブ、オーラノフィン、金チオグルコース、エタネルセプト、チオマレイン酸金ナトリウム、ヒドロキシクロロキン、インフィキシマブ、レフルノミド、メトトレキサート、ペニシラミン、スルファサラジンが含まれる。痛風において用いられる薬物には、アロプリノール、コルヒチン、プロベネシド、スルフィンピラゾンが含まれる。
【０２２７】
血液凝固疾患において用いられる薬物には、アブシキシマブ、組換え型アルテプラーゼ、アミノカプロン酸、アニシンジオン、抗血友病因子（第ＶＩＩＩ因子、ＡＨＦ）、抗阻害剤性凝固複合体、抗トロンビンＩＩＩ、アプロチニン、アルガトロバン、ビバリルジン、シロスタゾール、クロピドグレル、組換え型第ＶＩＩａ凝固因子、ダルテパリン、ダナパロイド、ジピリダモール、エノキサパリン、エプチフィバチド、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、ホンダパリナックス、ヘパリンナトリウム、レピルジン、フィトナジオン［Ｋ１］、プロタミン、レテプラーゼ、ストレプトキナーゼ、テネクテプラーゼ、チクロピジン、チンザパリン、チロフィバン、トラネキサム酸、ウロキナーゼ、ワルファリンが含まれる。
【０２２８】
視床下部ホルモンおよび下垂体ホルモンには、ブロモクリプチン、カベルゴリン、セトロレリックス、絨毛性ゴナドトロピン［ｈＣＧ］、卵巣性コルチコレリン、コルチコトロピン、コシントロピン、デスモプレシン、ホリトロピンα、ホリトロペンβ［ＦＳＨ］、ガニレリックス、酢酸ゴナドレリン［ＧｎＲＨ］、塩酸ゴナドレリン［ＧｎＲＨ］、酢酸ゴセレリン、ヒストレリン、リュープロリド、メノトロピン類［ｈＭＧ］、ナファレリン、オクトレオチド、オキシトシン、ペルゴリド、プロチレリン、セルモレリン、ソマトレム、ソマトロピン、サイロトロピンα、トリプトレリン、ウロホリトロピン、バソプレシンが含まれる。
【０２２９】
甲状腺薬および抗甲状腺薬には、レボチロキシン［Ｔ４］、リオサイロニン［Ｔ３］、リオトリックス［Ｔ４：Ｔ３の比が４：１］、甲状腺乾燥物［米国薬局方］のような甲状腺薬；ならびにジアトリゾ酸ナトリウム、ヨウ素剤、イオパン酸、イポド酸ナトリウム、メチナゾール、ヨウ化カリウム、プロピルチオウラシル［ＰＴＵ］、サイロトロピンのような抗甲状腺薬；ならびに組換え型ヒトＴＳＨが含まれる。
【０２３０】
副腎皮質ステロイド類および副腎皮質アンタゴニストには、ベタメタゾン、ベタメタゾンリン酸ナトリウム、コルチゾン、デキサメタゾン、酢酸デキサメタゾン、デキサメタゾンリン酸ナトリウム、ヒドロコルチゾン［コルチゾール］、酢酸ヒドロコルチゾン、サイピオン酸ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾンリン酸ナトリウム、ヒドロコルチゾンコハク酸ナトリウム、メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、メチルプレドニゾロンコハク酸ナトリウム、プレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン、プレニゾロンリン酸ナトリウム、テブト酸プレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロン二酢酸、トリアムシノロンヘキサアセトニドが含まれる。副腎皮質剤の別のクラスとしては、鉱質コルチコイド、たとえば酢酸フルドロコルチゾンが存在する。副腎ステロイドのアンタゴニストにはアミノグルテチミド、ケトコナゾール、マイトタンが含まれる。
【０２３１】
性腺ホルモンおよびその抑制剤には、エストロジェン複合剤、ジエネストール、ジエチルスチルベストール、ジフォスフェート、エステル型エストロジェン類、シピオン酸エストラジオール油セ油性製剤、エストラジオール、エストラジオール経皮製剤、吉草酸エストラジオール油性製剤、エストロン水性懸濁製剤、エストロピネート、エチニルエストラジオールのようなエストロジェン類；カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、レボノルゲストレル、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、酢酸ノルエチンドロン、ノルゲストレル、プロゲステロンのようなプロゲスチン類；メチルテストステロン、デカン酸ナンドロロン、オキサンドロロン、オキシメトロン、スタノゾロール、テストラクトン、水性テステステロン製剤、シピオン酸テステステロン油性製剤、エナント酸テストステロン油性製剤、プロピオン酸テストステロン油性製剤、経皮テストステロン送達システム、テストステロンペレット剤のようなアンドロジェン類／アナボリックステロイド類が含まれる。さらに薬物によっては、性腺ホルモンのアンタゴニストおよび抑制剤としてクラス分けできるものもあり、それらにはアナストロゾール、ビカルタミド、クロミフェン、ダナゾール、ダタステリド、エグゼメスタン、フィナステリド、フルタミド、フルベストラント、レトロゾール、ミフェプリストン、ニルタミド、ラロキシフェン、タモキシフェン、およびトレミフェンが含まれる。
【０２３２】
骨化−ミネラル化ホメオシタシスに影響を及ぼす薬剤には、ビタミンＥ；カルシフェジオール、カルシトリオール、コレカルシフェロール［Ｄ３］、ジヒドロタチステロール［ＤＨＴ］、ドキセルカルシフェロール、エルゴカルシフェロール、［Ｄ２］、およびパリカルシトールのようなビタミンＥ代謝物およびビタミンＥアナログ；酢酸カルシウム［カルシウム２５％］、炭酸カルシウム［カルシウム４０％］、塩化カルシム［カルシウム２７％］、クエン酸カルシウム［カルシウム２１％］、グルビオン酸カルシウム［カルシウム６．５％］、グルセプト酸カルシウム［カルシウム８％］、グルコン酸カルシウム［カルシウム９％］、乳酸カルシウム［カルシウム１３％］、およびリン酸三カルシウム［カルシウム３９％］のようなカルシウム剤；リン酸塩およびセベラマーのようなリン酸剤およびリン酸結合剤；ならびにアレンドロネート、サケ−カルシトニン、エチンドロネート、硝酸ガリウム、パミドロネート、プリカマイシン、リセドロネート、フッ化ナトリウム、テリパラチド、チルドロネート、ゾレドロン酸のようなそのほかの薬物が含まれる。
【０２３３】
β−ラクタム系抗生物質およびそのほかの細胞壁合成抑制剤には、アモキシシリン、アモキシシリン／クロブラン酸カリウム配合剤、アンピシリン、アンピシリン／スルバクタムナトリウム配合剤、カルベニシリン、ジクロキサシリン、メズロシリン、ナフシリン、オギザシリン、ペニシリンＧベンザシン、ペニシリンＧプロカイン、ペニシリンＶ、ピペラシリン、ピペラシリン／タゾバクタムナトリウム配合剤、チカルシリン、チカルシリン／クラブラン酸カリウム配合剤のようなペニシリン類；およびセファロスポリン系およびそのほかのβ−ラクタム系薬物が含まれ、セファロスポリン系／そのほかのβ−ラクタム系薬物には、セファドロキシル、セファゾリン、セファレキシン、セファロチン、セファピリン、およびセフラジンのような抗菌スペクトルが狭いもの（第一世代）；セファクロール、セファマンドール、セフィメタゾール、セフォニシド、セフォテタン、セフォキシチン、セフプロジル、セフロキシム、およびロラカルベフのような第二世代のセファロスポリン類（中程度の抗菌スペクトル）；ならびにセフジニル、セフジトレン、セフェパイム、セフィキシム、セフォペラゾン、セフォタキシム、セフポドキシム−プロキセチル、セフタジジム、セフチブテン、セフチゾキシム、およびセフトリアクソンのような抗菌スペクトルが広いもの（第３世代および第４世代のセファロスポリン類）が含まれる。さらにそれ以外のクラスには、アズトレオナム、エルタペネム、イミペネム／シラスタチン配合剤、およびメロペネムのようなカルバペネム類およびモノバクタム類；ならびにシクロセリン（セロマイシン微粉末剤）、ホスホマイシン、バンコマイシンのようなそのほかの薬物が含まれる。
【０２３４】
そのほかの抗生物質には、クロラムフェニコール；デメクロサイクリン、ドキシサイクリン、メタサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、およびテトラサイクリンのようなテトラサイクリン類；アジスロマイシン、クラリスロマイシン、エリスロマイシンのようなマクロライド類；クリンダマイシンのようなリンコマイシン類；キヌプリスチンおよびダルフォプリスチンのようなストレプトグラミン類；ならびにリネゾリドのようなオキサゾリドン類が含まれる。
【０２３５】
アミノグリコシド系およびストレプトマイシン系の抗生物質には、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチミシン、パロモマイシン、スペクチノマイシン、ストレプトマイシン、およびトブラマイシンが含まれる。
【０２３６】
スルホンアミド系、トリムトプリム系およびキノロン系抗菌剤には、スルファジアジン、スルファメチゾール、スルファメトキサゾール、スルファニルアミド、およびスルフィソキサゾールのような全身適用のスルホンアミド類；ならびにマフェニド、スルファジアジン銀、スルファセタミドナトリウムのような特定部位に適用されるスルホンアミド類が含まれる。トリメトプリム類にはトリメトプリム、トリメトプリム／スルファメトキサゾール配合剤［トリモキサゾールも配合される、ＴＭＰ−ＳＭＺ］が含まれ、キノロン類およびフルオロキノロン類には、シノキサシン、シプロフロキサシン、エノキサシン、ガチフロキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、モキシフロキサシン、ナリジク酸、ノルフロキサシン、オフロキサシン、スパルフロキサシン、およびトロバフロキサシンが含まれる。
【０２３７】
抗マイコバクテリア薬には、アミノサリチル酸ナトリウム、カプレオマイシン、シクロセリン、エタンブトール、エチオンアミド、イソニアジド、ピラジンアミド、リファブチン、リファンピン、リファペンチン、およびストレプトマイシンのような結核において用いられる薬物；ならびにクロファジミンおよびダプソンのようなハンセン病において用いられる薬物が含まれる。
【０２３８】
抗真菌剤には、アンホテリシンＢ、ブタコナゾール、ブテナフィン、カスポフンジン、クロトリマゾール、エコナゾール、フルコナゾール、フルシトシン、グリセオフルビン、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ミコナゾール、ナフチフィン、ナタマイシン、ニスタチン、オキシコナゾール、スルコナゾール、テルビナフィン、テルコナゾール、チオコナゾール、トルナフテート、およびボリコナゾールが含まれる。
【０２３９】
抗ウイルス剤には、アバカビル、アシクロビル、アデホビル、アマンタジン、アンプレナビル、シドホビル、デラビルジン、ジダノシン、エファビレンズ、エンフビルチド、ファンシクロビル、ホミビルセン、ホスカルネト、ガンシクロビル、イドグズリジン、インキモド、インジナビル、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロン−２ｂ、インターフェロンα−ｎ３、インターフェロンαコン−１、ラミブジン、ロピナビル／リトナビル配合剤、ネルフィナビル、ネビラピン、オセルタミビル、パリビズマブ、ペグインターフェロンα−２ａ、ペグインターフェロンα−２ｂ、ペンシクロビル、リバビリン、リマンタジン、リトナビル、サキナビル、スタブジン、テノホビル、トリフルリジン、バラシクロビル、バルガンシクロビル、ザルシタビン、ザナミビル、およびジドブジンが含まれる。
【０２４０】
そのほかの抗菌剤、消毒剤、敗血症治療薬、および滅菌剤には、ヒプリン酸メテナミン、マンデル酸メテナミン、メトロニダゾール、ムピロシン、ニトロフラントイン、ポリミキシンＢのような種々の抗菌剤；ならびにベンザルコニウム、過酸化ベンゾイル、グルコン酸クロルヘキシジン、グルタルアルデヒド、ヘキサクロロフェン、ヨウ素水、ヨードチンキ、ニトロフラゾン、オキシクロロセンナトリウム、ポビドン−ヨード、硝酸銀、およびチメロサールのような消毒剤、敗血症治療薬、および滅菌剤が含まれる。
【０２４１】
抗原虫薬には、アルベンダゾール、アトバコン、アトバコン／プログアニル配合剤、クロロキン、クリンダマイシン、ドキシサイクリン、デヒドロエメチン、エフォロルニチン、ハロファントリン、ヨードキノール、メフロキン、メラルソプロール、メトロニダゾール、ニフルチモックス、ニタゾキサニド、パロモマイシン、ペンタミジン、プリマキン、ピリメタミン、グルコン酸キニジン、キニン、スチボグルコン酸ナトリウム、スルファドキシン／ピリメタミン配合剤、およびスラミンが含まれる。
【０２４２】
駆虫薬には、アルベンダゾール、ビチオノール、ジエチルカルバマジン、イベルメクチン、レバミゾール、メベンダゾール、メトリホネート、ニクロサミド、オキザムニキン、パモ酸オギザンテル、ピペラジン、プラジカンテル、パモ酸ピランテル、スラミン、およびチアベンダゾールが含まれる。
【０２４３】
免疫薬理学的薬剤には、アブシキシマブ、アダリムマブ、アレファセプト、アレムツズマブ、抗胸腺細胞グロブリン、アザチオプリン、バシリキシマブ、ＢＣＧ、シクロホスファミド、シクロスポリン、ダクリズマブ、エタネルセプト、ゲムツズマブ、グラチラメル、イブリツモマブ、チウキセタン、静脈内投与用免疫グロブリン、インフィキシマブ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターロイキン−２、アルデスロウキン、レフルノミド、レバミゾール、リンパ球免疫グロブリン、メチルプレドニゾロンコハク酸ナトリウム、ムロモナブ−ＣＤ３［ＯＫＴ３］、ミコフェノレートモフェチル、ウシ由来ペガデマーゼ、ペグインターフェロンα−２ａ、ペグインターフェロンα−２ｂ、プレドニゾン、微量投与用ＲＨ０（Ｄ）免疫グロブリン、リツキシマブ、シロリムス、タクロリムス［ＦＫ５０６］、サリドマイド、およびトラスツズマブが含まれる。
【０２４４】
重金属キレート剤には、デフェロキサミン、ジメルカプロール、エデト酸カルシウム［カルシウムＥＤＴＡ］、ペニシラミン、スクシメル、およびユニチオールが含まれる。
【０２４５】
ｂ．構造による薬物クラス
薬物のクラス分けの別の実施形態では、薬物はその構造によるクラスまたはファミリーによってクラス分けでき；ある種の薬物については、複数の構造またはファミリーに分類配置できる。したがっていくつかの実施形態では、薬物は構造によってクラス分けできる。共通の作用を有する薬物でも異なる構造を持ち得るし、薬物作用の類似性の予測に最善なもの一つに、しばしば構造が挙げられる。例示にすぎないが、ある薬物クラスについては、本明細書に提示された化学構造によるクラスによってさらに系統立てることができる。非限定的な例の一つに、抗生物質が挙げられる。化学構造で説明されるクラスによってさらに分類された抗生物質の非限定的な例を、以下の表８に示す。
【０２４６】
（表８：抗生物質の構造による薬物クラス）
【０２４７】
【表８】
2009509539.tif 000013
いくつかの実施形態では、薬物は光学異性体で分類され、一つのクラスには、化学式が同一のある化合物の二種またはそれ以上の光学異性体、またはラセミ体が存在する。したがって本発明は、第一の薬物に対する反応性の予測となる遺伝子変異および／または表現型変異に関して被験者をスクリーニングし、その関連性を用い、第一の薬物とは光学異性の関係にある第二の薬物による被験者治療の調整の有無を定めるための方法および組成物を含む。いくつかの実施形態では、第一の薬物がラセミ体であって、第二の薬物がそのラセミ体の一成分である立体異性体である。いくつかの実施形態では、第一の薬物が立体異性体であって、第二の薬物がその立体異性体を含むラセミ体である。いくつかの実施形態では、第一の薬物が、ある化合物の第一の立体異性体であり、第二の薬物が第二の立体異性体である。
【０２４８】
いくつかの実施形態では、薬物は同じ式の異なる結晶構造で分類される。したがって本発明は、第一の薬物に対する反応性の予測となる遺伝子変異および／または表現型変異に関して被験者をスクリーニングし、その関連性を用い、第一の薬物と化学式が同じ薬物クラスに属し、結晶構造が異なる第二の薬物による被験者治療の調整の有無を定めるための方法および組成物を含む。
【０２４９】
いくつかの実施形態では、薬物は薬物クラスの構成薬物に共通な構造的要素によってクラス分けされる。したがって本発明は、第一の薬物に対する反応性の予測となる遺伝子変異および／または表現型変異に関して被験者をスクリーニングし、その関連性を用い、第一の薬物と同じ薬物クラスに属し、同じ構造的要素を含む第二の薬物による被験者治療の調整の有無を定めるための方法および組成物を含む。例示にすぎないが、ある薬物は構造によって非環式ウレイド；アシルウレイド；アルデヒド；アミノ酸アナログ；アミノアルキルエーテル（クレマチン、ドキシルアミン）；アミノグリコシド；アントラサイクリン；アザリド；アゾール；バルビツエート；ベンゾジアザペン；カルバメート（たとえば、フェルバメート、メプロバメート、エミルカメート、フェンプロバメート）；カルバペネム；炭水化物；カルボキサミド（たとえば、カルバマゼピン、オキシカルバマゼピン）；カロテノイド（たとえば、ルテイン、ゼアキサンチン）；セファロスポリン；クリプトフィチン；シクロデキストリン；ジフェニルプロピルアミン；延長型プルフィリン（たとえば、ルビリン類、サフィリン類）；脂肪酸；グリコペプチド；高級アルコール、ヒダントイン類（たとえばフェニトピン）；ヒドロキシル化アントロキノン；リンコサミド；脂質；脂質関連化合物；マクロライド；マスタード；ニトロフラン；ニトロイミダゾール；非天然型ヌクレオチド；非天然型ヌクレオシド；オリゴヌクレオチド；有機金属化合物；オキソゾリジンジオン；ペニシリン；フェノチアジン誘導体（アリメマジン、プロメタジン）；フェニルピペリジン；フタロシアニン；ピペラジン誘導体（たとえば、セトリジン、メクロジン）；白金錯体（たとえば、シスプラチン）；ポリエン；ポリケチド；ポリペプチド；ポルフィリン；プロスタグランジン（たとえば、ミソプロストール、エンプロスチル）；プリン；ピラゾロン；ピリミジン；ピロリジン（レベチラセタム）；キノロン；キノン；レチノイド（たとえば、イソトレチノイン、トレチノイン）；サリチル酸エステル；スフィンゴリピド；ステロイド（たとえば、プレドニゾン、トリアムシノロン、ヒドロコルチゾン；置換化アルキルアミン（たとえば、タラスチン、クロルフェナミン）；置換化エチレンジアミン（メピラミン、ソンジルアミン）；スクシミド（エトスクシミド、フェンスキシミド、メスキシミド）；スルファ；スルホンアミド（スルファチアゾール、マフェニド）；スルホン；タキサン；テトラサイクリン（たとえば、クロルテトラサイクリン、オキシテトラサイクリン）；テキサフィリン（たとえば、クシトリン、アントリン）；チアジド；チアゾリジンジオン；トコフェロール、トコトリエノール、とりあじん（たとえばラモトリギン）；尿素；キサンチン（テオブロミン、アミノフィリン）；ならびに双性イオンに分類できる。
【０２５０】
ｃ．履行手段
本発明者のこれまでの認識によれば、第一の薬物に対する反応に関連する一種または複数の遺伝子変異および／または表現型は、同じクラスに属する第二の薬物に対して考えられる反応の予測に有用であり、必要であるならば、第二の薬物の投与の調整の可能性の指針に有用である。いくつかの実施形態では、第一および第二の薬物は同一の薬物であり；いくつかの実施形態では、第一および第二の薬物は異なる薬物である。そのような予測については、たとえば臨床試験または治験で用いることで、第二の薬物が適した患者に投与される蓋然性を高めることができ、および／またはプラスの反応（たとえば治療応答）の蓋然性を最大にし、マイナスの反応（たとえば、副作用）の蓋然性を最小にした投与の蓋然性を高めることができる。
【０２５１】
本発明の方法および組成物の履行は当業者に良く知られており、それは確立された情報および技法をルーチンで用いることである。遺伝子変異、たとえばＳＮＰのデータベースのいくつかは、本明細書の記載のように十分に確立しており、またさらにヒトのＳＮＰの多数はすでにマッピングされ記載されている。多数の遺伝子変異を迅速かつ正確に試験する方法については、当業者に知られており、ルーチンで用いられている。薬物に対する反応は、臨床試験のような試験研究に登録された被験者に対してあまねく記載してまとめられ、書類にされる。尚、その反応には治療応答（ならびにその反応の度合い）および非治療応答、たとえば副作用が含まれる。メカニズムおよび構造による薬物クラスについては既知であるため、各々のクラスに属する薬物を互いに関係づけることができ、またクラス分けの多くの例については、本明細書で示されている。ある因子を別の因子と関連づける（たとえば、遺伝子変異を薬物反応と関連づける）ための洗練され効果的なソフトウエアが利用でき、そのようなソフトウエアに必要な統計学的方法も利用できる。したがって本発明の方法および組成物には、その履行においてルーチンワークのみが必要とされる。
【０２５２】
Ｖ．スクリーニングおよび治療の方法ならびに組成物
本発明の方法は、第一の薬物に対する反応の予測を示す遺伝子変異に関する、病気を治療する必要がある個人のスクリーニング工程、ならびにそのスクリーニング結果に基づき、個体へ第二の薬物を投与するか、または投与しない工程を含む。いくつかの実施形態では、第一および第二の薬物は同一であり；ほかの実施形態ではそれらは異なり、たとえばある薬物クラスの異なる構成薬物である。そのようなスクリーニングは、たとえばある薬物による治療が有益（または無益）であり得る個人の同定、臨床試験に登録（または除外）され得る個人の同定、および／または薬物による副作用が生じ（または生じない）得る個人の同定に用いることができる。いくつかの実施形態では、一種または複数の表現型についてもスクリーニング工程の中に含めることができる。
【０２５３】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は血糖調節性の病気、たとえばインスリン抵抗性障害の患者のスクリーニング方法および治療方法を含み、それらの方法は血糖調節性の病気、たとえばインスリン抵抗性障害の治療が必要な患者について、第一のインスリン感作物質に対する応答についての予測を示す遺伝子変異を対象とするスクリーニング工程；ならびにそのスクリーニング結果に基づき、第二のインスリン感作物質を個体に投与または非投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、第一および第二のインスリン感作物質は同一である。いくつかの実施形態では、第一および第二のインスリン感作物質は異なり、たとえば単一の薬物クラスの異なる構成薬物である。そのようなスクリーニングは、たとえばあるインスリン感作物質による治療が有益（または無益）であり得る個人の同定、臨床試験に登録（または除外）され得る個人の同定、および／またはインスリン感作物質による副作用が生じ（または生じない）得る個人の同定に用いることができる。いくつかの実施形態では、一種または複数の表現型についてもスクリーニング工程の中に含めることができる。
【０２５４】
本発明の方法のスクリーニング工程で用いられる遺伝子変異、たとえばＳＮＰは、対象の薬物、たとえばインスリン感作物質の反応性のタイプ、たとえば薬物、たとえばインスリン感作物質についての副作用に対する感受性に関連性がすでに見出された遺伝子変異のいずれでもあり得る。いくつかの実施形態では、一種または複数の遺伝子変異は、本明細書に記載の関連研究で見出されたＳＮＰである。いくつかの実施形態では、一種または複数の遺伝子変異は、データベースで利用可能なＳＮＰであり、それらのＳＮＰは遺伝子型解析が行われている。
【０２５５】
遺伝子変異、たとえばＳＮＰがひとたび同定されると、スクリーニング、診断、予防などに有用な種々の組成物を調製することができる。それらの組成物には核酸、ポリペプチド、抗体などが含まれる。そのような組成物および方法については、２００３年５月２８日出願の米国特許出願第１０／４７６８５号“Ｌｉｖｅｒ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｒｔｈｏｄｓ”；２００５年１月３１日提出の米国特許仮出願第６０／６４８９５７号“Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｉｎｇ，Ｐｒｅｖｅｎｔｏｎｇ，ａｎｄ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ”；２００５年２月１６日提出の米国特許仮出願第６０／６５３６７２号“Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”；２００６年１月３１日出願の米国特許出願第１１／３４４９７５号“Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ａｉｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”；２００５年１２月９日出願の米国特許出願第１１／２９９２９８号“Ｍａｒｋｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  Ｉｎｓｕｌｉｎ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ”；２００６年３月１０日提出の米国特許仮出願第６０／７８１４８３号“Ｍａｒｋｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ”；２００６年１月１９日提出の米国特許仮出願第６０／７６０１９８号“Ｍａｒｋｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”；および２００６年６月６日提出の米国特許仮出願第６０／８１１３１８号“Ｍａｒｋｅｒｓ  ｆｏｒ  Ａｄｄｉｃｔｉｏｎ”に詳細に記載されており、それらのすべてはここで参照されることで取込まれる。
【０２５６】
Ａ．核酸
「薬物反応核酸」、「薬物反応に関連したゲノム領域」または「関連ゲノム領域」という用語は、ある薬物に対する反応に関連した核酸、あるいはその断片、誘導体、変異体または相補体を意味し（但し、本明細書で用いられる「反応」または「反応性」には、個体がその薬物から影響を受けない場合も含まれる）、その用語にはたとえば、関連遺伝子のコード領域および非コード領域、および／または関連遺伝子の核酸の上流域および下流域に延びた領域にわたるゲノム領域、ならびにそれらの変異体が含まれる。本明細書で用いられる「関連遺伝子」という用語は、ある薬物に対するある反応に関連する遺伝子を指す。いくつかの実施形態では、関連したゲノム領域はその関連遺伝子の約１０ｋｂの上流域から約１０ｋｂの下流域まで延びている。いくつかの実施形態では、領域は関連遺伝子の約５ｋｂの上流域から約５ｋｂの下流域まで延びている。いくつかの実施形態では、領域は関連遺伝子の約２ｋｂの上流域から約２ｋｂの下流域まで延びている。いくつかの実施形態では、領域は関連遺伝子の約１ｋｂの上流域から約１ｋｂの下流域まで延びている。いくつかの実施形態では、関連遺伝子領域には、関連遺伝子の発現を調節する制御領域が含まれる。また本発明は、関連遺伝子の産物である核酸、たとえばＲＮＡ転写物、ならびにそのスプライシング変異体、修飾体または誘導体なども企図する。また本発明は、ある遺伝子内には存在しないが、ある薬物に対するある反応に関連する核酸も企図し、それらの核酸については、「薬物反応核酸」という用語によっても包含される。本発明の核酸は、一種または複数の関連した多型（たとえばＳＮＰ）を含み得る。たとえば、ある個人におけるある関連遺伝子の配列は、ある薬物反応に関連した一種または複数の対立遺伝子、無反応に関連した一種または複数の対立遺伝子、あるいはそれらの組み合わせを含み得る。またその用語には、ある関連した遺伝子経路における遺伝子と同じように関係した核酸も含まれる。「関連した遺伝子経路」という用語は、薬物反応経路を含む遺伝子および遺伝子産物を一般には指し、その用語には薬物反応経路における関連遺伝子の上流域または下流域で作用する一種または複数の遺伝子；あるいは遺伝子産物が直接または間接的に関連遺伝子の発現または活性に対して相互作用、結合、競合、誘導、増強または抑制するいかなる遺伝子；あるいはある関連遺伝子によって発現または活性が直接または間接的に誘導、増強または抑制されるいかなる遺伝子；あるいはある関連遺伝子によって遺伝子産物が直接または間接的に誘導、増強または抑制されるいかなる遺伝子も含まれ得る。関連遺伝子経路とは、一種または複数の遺伝子を指し得る。
【０２５７】
「インスリン感作物質応答性の核酸」または「インスリン感作物質反応関連のゲノム領域」という用語は、あるインスリン感作物質に対する応答に関連した核酸、あるいはその断片、誘導体、変異体または相補体を意味し（但し、本明細書で用いられる「反応」または「反応性」には、個体がそのインスリン感作物質から影響を受けない場合も含まれる）、その用語にはたとえば、関連遺伝子のコード領域および非コード領域、および／または関連遺伝子の核酸の上流域および下流域に延びた領域にわたるゲノム領域、ならびにそれらの変異体が含まれる。いくつかの実施形態では、関連したゲノム領域はその関連遺伝子の約１０ｋｂの上流域から約１０ｋｂの下流域まで延びている。いくつかの実施形態では、領域は関連遺伝子の約５ｋｂの上流域から約５ｋｂの下流域まで延びている。いくつかの実施形態では、領域は関連遺伝子の約２ｋｂの上流域から約２ｋｂの下流域まで延びている。いくつかの実施形態では、領域は関連遺伝子の約１ｋｂの上流域から約１ｋｂの下流域まで延びている。また本発明は、ある遺伝子内には存在しないが、あるインスリン感作物質に対するある反応に関連する核酸も企図し、それらの核酸については、「インスリン感作物質応答性の核酸」という用語によっても包含される。またその用語には、ある関連遺伝子経路における遺伝子に同様に関係した核酸も含まれる。
【０２５８】
薬物反応核酸、たとえばインスリン感作物質応答性の核酸には、コード配列および／または非コード配列を含めることができる。薬物反応核酸は、エクソンまたはイントロンを包含するような位置の含有、本質的構成、または構成が可能である。その長さは様々に変わり得る。いくつかの実施形態では、そのような核酸は５０００００，１０００００，５００００，１００００，５０００，１０００，５００，１００，１０または５個のヌクレオチド長未満であり得る。いくつかの実施形態では、そのような核酸は５，１０，５０，１００，３００，６００，９００，１０００，３０００，６０００，９０００，１００００，３００００，６００００，９００００，１０００００，３０００００，６０００００または９０００００ヌクレオチド長を超え得る。
【０２５９】
一つの実施形態では、薬物反応核酸、たとえばインスリン感作物質応答性の核酸は、対象薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した遺伝子変異、たとえばＳＮＰであることが既知である核酸位置を包含する関連ゲノム領域、あるいはその核酸位置を伴うハプロタイプブロック内の核酸を含む関連ゲノム領域に特異的にハイブリダイズする可能性のあるものの一つである。一般的なハプロタイプブロック内変異体の同定方法については、本出願と同じ代理人に委任された米国特許第６９６９５８９号において提供される。
【０２６０】
「薬物反応ポリペプチド」という用語は、薬物に対する反応性に関連したペプチド、ポリペプチド、あるいはそれらの断片、誘導体または変異体のいかなるものも指し（但し、本明細書で用いられる「反応」または「反応性」には、個体が対象薬物の効果を受けない場合も含まれる）、その用語には関連遺伝子のすぐ上流または下流の関連遺伝子またはゲノム領域によって全体または一部が調節またはコードされたペプチドまたはポリペプチド、あるいはそれらの断片、変異体、誘導体、または修飾体が含まれる。またその用語には、ある関連遺伝子経路での上流域または下流域にあるのようなポリペプチドも含まれる。
【０２６１】
「インスリン感作物質反応ポリペプチド」という用語は、あるインスリン感作物質に対する応答性に関連したペプチド、ポリペプチド、あるいはそれらの断片、誘導体または変異体のどのようなものも指し（但し、本明細書で用いられる「反応」または「反応性」には、個体がインスリン感作物質から効果を受けない場合も含まれる）、その用語には関連遺伝子のすぐ上流または下流の関連遺伝子またはゲノム領域によって全体または一部が調節またはコードされたペプチドまたはポリペプチド、あるいはそれらの断片、変異体、誘導体、または修飾体が含まれる。またその用語には、ある関連遺伝子経路での上流域または下流域にあるのようなポリペプチドも含まれる。
【０２６２】
「厳格な条件」という用語は、核酸の存在が検出され得る場合における、相補的な核酸のハイビリダイゼーションについての条件を指す。反応環境が異なると、厳格性が異なる条件が用いられ得る。厳格な条件は、たとえば核酸の長さ、温度および緩衝液に依存する。一般的に、厳格な条件は規定されたイオン強度およびｐＨにおける特異的配列の融解点（Ｔｍ）よりも約５℃低く設定される。Ｔｍとは、（規定されたイオン強度、ｐＨおよび核酸濃度のもと）相補的核酸の５０％が標的核酸に平衡状態でハイブリダイズする温度のことである。標的核酸はＴｍで一般に過剰量存在し、相補的核酸の５０％が平衡状態で占有する。通常、厳格な条件はｐＨ７．０−８．３でのＮａイオン（またはほかの塩類）濃度が少なくとも約０．０１−１．０Ｍの塩濃度を含み、短鎖（たとえば、ヌクレオチド長が１０−５０）プローブに対する温度は少なくとも約３０℃である。また厳格な条件は、ホルムアミドのような脱安定化剤の添加によっても達成できる。たとえば、５×ＳＳＰＥ（７５０ｍＭのＮａＣｌ，５０ｍＭのリン酸一ナトリウム、５ｍＭのＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）で温度が２５−３０℃の条件は、対立遺伝子に特異的な核酸ハイブリダイゼーションに適している。ある実施形態では、試料核酸は標的核酸を含み、相補的核酸は基板に固定化されている。
【０２６３】
「単離された」または「精製された」という用語は、その本来の環境から実質的または本質的に取出されたか、または濃縮された素材を指す。たとえば単離核酸は、通常は周囲に存在する核酸から分離されたか、あるいは試料中のほかの核酸または成分（たとえば蛋白質、脂質など）から分離された単一の核酸であり得る。別の実施形態では、ポリペプチドはその本来の環境から実質的に取出されたか、または濃縮された場合に精製される。核酸の精製および単離の方法については、当業者に良く知られている。
【０２６４】
「核酸」という用語は、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、および／またはそれらの擬似体を指し、それらは単量体またはポリマー、天然由来または非天然由来、二本鎖または一本鎖、翻訳体（たとえば遺伝子）または非翻訳体（たとえば、調節性領域）、あるいはそれらの断片、誘導体または相補体のいずれでも存在し得る。核酸には核酸アナログ（たとえば、ホスホロチオエート体、ホスホルアミデート体、メチルリン酸エステル体、キラルメチルリン酸エステル類、２−Ｏ−メチルリボヌクレオチド体）、または核酸修飾体（たとえば、主鎖、残渣または連結部分が修飾されたもの）、あるいは炭水化物、脂質、蛋白質またはそのほかの物質と結合した核酸、またはペプチド核酸（ＰＮＡ）が含まれる。．核酸には一種または複数の多型、変異または突然変異を含めることができる。核酸の例としては、オリゴヌクレオチド、ヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核酸配列、ゲノム配列、アンチセンス核酸、プローブ、プライマー、遺伝子、調節性領域、イントロン、エクソン、転写解読枠、結合剤、標的核酸および対立遺伝子特異的核酸を挙げることができる。
【０２６５】
「ポリペプチド」、「ペプチド」、「オルゴペプチド」および「蛋白質」という用語は、互いに相互使用可能であり、アミノ酸、ＰＮＡまたは擬似体のポリマーを指し、その長さは特定されず、それらのすべての断片、イソ型、変異体、誘導体または修飾体も含まれる。ポリペプチドについては、天然由来または非天然由来のものがあり得る。「イソ型」という用語は、同一の遺伝子から生じる異なる遺伝子産物、たとえば代替スプライシングによるものを指す。「変異体」という用語は、ポリペプチドの説明の際に用いられ、アミノ酸配列が変異したものを指し、そのような変異は保存的または非保存的な置換で生じる場合、あるいはそうでない場合がある。「修飾体」という用語には、タグ、標識、翻訳後修飾、あるいはそのほかの化学的または生物学的な修飾が含まれる。ほかの実施形態では、ポリペプチドは精製されている。
【０２６６】
「薬物に対する反応」、たとえば「インスリン感作物質に対する応答」、あるいは「薬物反応」、たとえば「インスリン感作物質反応」については、本明細書に記載されており、それらの用語には治療応答および非治療応答（たとえば、副作用）が含まれる。薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した核酸は、対象薬物に対する反応についてのある表現型を持つ個人において、対象薬物に対する反応の表現型が同じではない個人と比較した場合に発現が異なるものの一つ、あるいは対象薬物に対する反応に関連した一個または複数の変異を有する核酸である。
【０２６７】
表９−１１は、薬物反応、たとえば浮腫に関して有意な関連性を有する個人の遺伝子型の解析から得られたＳＮＰについて示す（正規ｐ値＜０．００１）。表９は、薬物反応、たとえば浮腫に対する感受性または抵抗性に関連した型を持つ３４５個の変異サイトのコレクションを提供する。表９で提供された変異サイトに関するさらなる情報を表１０および表１１に示す。変異サイトは、表１０で提供された遺伝子の中または近傍で生じる。変異サイト、それらの対立遺伝子、ならびに薬物反応、たとえば浮腫に関連させて同定を行う統計解析に関するさらなる情報を表１１に示す。
【０２６８】
表９のカラム１「ｒｓＩＤ」には、変異体ごとにｄｂＳＮＰ（ＮＣＢＩ）から得られたＳＮＰ同定数が列挙されている。ＮＣＢＩ（米国立バイオテクノロジー情報センター）のｄｂＳＮＰデータベースは、公にアクセス可能である（ｎｃｂｉ．ｎｉｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｐｒｏｊｅｃｔｓ／ＳＮＰ／）。
【０２６９】
表９のカラム２「ｓｓＩＤ」には、ｄｂＳＮＰに対する本出願者の出願書類における識別名が含まれる。
【０２７０】
表９のカラム３「Ｃｈｒ」は、変異体がマッピングされている染色体が明らかにされる。
【０２７１】
表９のカラム４「Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ」は、ヒトゲノムのＮＣＢＩ−Ｂｕｉｌｄ３５による各変異体を含むコンティグについてのアクセッション数が明らかにされる。
【０２７２】
表９のカラム５「Ｐｏｓｉｔｉｏｎ」は、カラム４で同定されたコンティグ内の各変異体の位置が明らかにされる。
【０２７３】
表９のカラム６「Ａｓｓａｙｅｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ」は、試料中の変異体の、たとえばハイブリダイゼーションによる同定に用いることができる変異体を含むヌクレオチド配列である。アッセイされた配列はたとえば、ハイブリダイゼーション用アレイ上に敷詰めることができ、それによって変異体が同定される。
【０２７４】
ある個人に適した薬物治療レジメンを定めるのに使用可能なそのほかの変異体（およびそれらに関連した遺伝子領域）には、表９で同定された変異体を伴うハプロタイプブロック内の変異体が含まれるが、それらに限定されない。そのような変異体については、本発明の出願人と同じ代理人に委任された米国特許第６９６９５８９号に従い、同定することができる。ある薬物反応（たとえば、浮腫）に関連している表９の変異体を伴うハプロタイプブロック内の変異体は、その薬物反応にも関連している。さらに特定な場合、ある薬物反応（たとえば、浮腫）に関連している表１１の変異体対立遺伝子を伴うハプロタイプパターン内の変異体対立遺伝子は、その薬物反応にも関連している。
【０２７５】
表１０には、表９のｒｓＩＤおよびｓｓＩＤの遺伝子変異体、その変異体の１０ｋｂ以内の遺伝子名、ならびにその遺伝子に関する変異体の位置が列挙されており、その中での「ｕｐ」とは、その変異体が対象遺伝子のコード領域の上流に位置していることを示し；「ｄｏｗｎ」とは、その変異体が対象遺伝子のコード領域の下流に位置していることを示し；「ｉｎｔｒｏｎ」とは、その変異体が対象遺伝子のイントロン内に位置していることを示し；「ｎｏｎｓｙｎ」とは、その変異体が対象遺伝子のコード領域内に位置し、非同義多型であることを示し；ならびに「ｓｙｎ」とは、その変異体が対象遺伝子のコード領域内に位置し、同義多型であることを示す。表１０中の遺伝子はゲノムの古い注釈に対応しているため、その領域での注釈が更新されると、そのＳＮＰ遺伝子マッピングはわずかに変わり得る。たとえば、その領域に追加の遺伝子がマッピングされ得る。しかしながら、ｓｓＩＤ、ｒｓＩＤ、およびアクセッション番号に基づく位置については、ＳＮＰの位置の画定に関して一定である。そのため、ヌクレオチドの位置が変わり得るとしても、そこで提供されるＳＮＰの位置は、当業者であるならば、たとえばそのｒｓＩＤおよび／またはｓｓＩＤの数によって分かるであろう。
【０２７６】
表２には、表９のｒｓＩＤおよびｓｓＩＤの遺伝子変異体、それらの対立遺伝子（Ａｌｌｅｌｅ１およびＡｌｌｅｌ２）、症例および対照例でのＡｌｌｅｌｅ１の相対的な対立遺伝子頻度、ならびに論理回帰分析を用いて計算された確率比およびｐ値が列挙されている。それらの統計学によって、対象の変異体が薬物反応（たとえば、浮腫）に関連していることが示される。特定な場合、ヘテロ接合体の確率比については、予測対立遺伝子（「関連対立遺伝子」）のコピーを持たない個体における浮腫の確率とは異なる、予測対立遺伝子（「関連対立遺伝子」）を１コピー持つ個体における浮腫の確率として規定される。稀な形質に対しては、ヘテロ接合体の確率比は、ヘテロ接合体の相対リスクにほぼ関係し、その相対リスクとは、予測対立遺伝子のコピーを持たない個体におけるリスクに対する、その予測対立遺伝子を１コピー持つ個体における形質提示リスクの比のことである。論理的回帰分析は、遺伝子リスクの乗数モデルのもとで確率比が推計されるアクセッション解析用のツールの一つであり、浮腫形質の分散分析は、集団構造および試験変動性を示す主な要素で環境適合化され、関連性の有意性を評価するのに用いられた。ｐ値は、ＳＮＰ遺伝子型に寄与し得る偏差が、その遺伝子型と浮腫との間に真の関連性がないと観察された偏差と極端に異なるような場合を提示する。Ａｌｌｅｌｅ１の相対的な対立遺伝子頻度が、症例群において対照群よりも大きい場合、Ａｌｌｅｌｅ１は対象の薬物反応（たとえば浮腫）と関連性があるとされ、Ａｌｌｅｌｅ２はその薬物反応とは関連性がないとされる。Ａｌｌｅｌｅ１の相対的な対立遺伝子頻度が、対照群において症例群よりも大きい場合、Ａｌｌｅｌｅ１は対象の薬物反応（たとえば浮腫）と関連性がないとされ、Ａｌｌｅｌｅ２はその薬物反応に関連性があるか、または感受性があるとされる。
【０２７７】
表１２は、薬物反応（たとえば、浮腫）に関連性があることが判明したハプロタイプブロックを形成する６個のＳＮＰの集合を提供する。このハプロタイプブロックは、第１４染色体上（ＳＥＲＰＩＮＡ１０遺伝子およびＳＥＲＰＩＮＡ６遺伝子）に見出され、関連ハプロタイプ中の６個のＳＮＰのうちの３個は、ＳＥＲＰＩＮＡ１０では非同義ＳＮＰである。表１２には、６個のＳＮＰ、それらのｒｓＩＤ、ならびにＳＥＲＰＩＮＡ１０およびＳＥＲＰＩＮＡ６に関するゲノム内配置が列挙されている。
【０２７８】
（表１２．関連ハプロタイプ）
【０２７９】
【表１２】
2009509539.tif 000014
本明細書で明らかにされた変異体、多型、対立遺伝子および関連ゲノム領域については、薬物反応（たとえば、浮腫）に関連した核酸の同定、単離および増幅に用いることができる。そのような核酸は、予後予測、診断、治療、およびさらなる薬物反応研究に用いることができる。
【０２８０】
いくつかの実施形態では、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した少なくとも２個の変異体、少なくとも３個の変異体、少なくとも４個の変異体、少なくとも５個の変異体、少なくとも６個の変異体、少なくとも７個の変異体、少なくとも８個の変異体、少なくとも９個の変異体、少なくとも１０個の変異体、少なくとも１５個の変異体、少なくとも２０個の変異体、少なくとも２５個の変異体、少なくとも３０個の変異体、少なくとも３５個の変異体、少なくとも４０個の変異体、少なくとも４５個の変異体、少なくとも５０個の変異体、少なくとも６０個の変異体、少なくとも７０個の変異体、少なくとも８０個の変異体、少なくとも９０個の変異体、または少なくとも１００個の変異体、あるいはそれらの共通ハプロタイプブロック内変異体に特異的にハイブリダイズし得る核酸の集合が提供される。
【０２８１】
核酸については１本鎖または２本鎖であり得る。また核酸はコード配列（たとえばエクソン）または非コード配列（たとえば、イントロン、エクソン外のコード領域、ならびに３’−または５’−非翻訳領域）、あるいはコード性核酸と非コード性核酸との配合体でもあり得る。一つの実施形態では、コード性の薬物−核酸、たとえばインスリン感作物質応答性の核酸は、関連ゲノム領域の完全なコード領域、または関連ゲノム領域の１個または複数のエクソン、または関連ゲノム領域の１個または複数の転写解読枠、あるいはそれらの相補的配列に特異的にハイブリダイズ可能なものの一つである。
【０２８２】
本明細書で提供される核酸は、タグ配列、レポーター遺伝子または融合蛋白質のような別の分子に融合可能である。タグ配列とは、蛋白質産物の単離または精製の助けとなり得るポリペプチド（たとえばグルタミン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、またはヘマグルチニンＡ（ＨＡ）ポリペプチド）をコードする配列である。レポーター遺伝子とは、蛋白質産物のアッセイが困難な場合に、容易にアッセイされる蛋白質をコードするか、またはほかのコード領域に置換えるのにしばしば用いられる遺伝子のことである。融合蛋白質とは、２種のコード性核酸配列を組み合わせて作られたハイブリド核酸を発現させて形成された蛋白質のことである。
【０２８３】
核酸ハイブリダイゼーションの条件は、用いる緩衝液、核酸の長さ、イオン強度、温度などに依存して変わる。ハイブリダイゼーションについての「厳格な条件」という用語は、第一の核酸を第二の核酸にハイブリダイズできるようにする温置および洗浄の条件（たとえば、温度条件および緩衝液の濃度条件）を指す。その第一の核酸は、第二の核酸に対して完全な（たとえば、１００％の）相補性を持つか、または完全ではないが幾分低い（たとえば、７０％、７５％、８５％または９５％超の）相補性を持ち得る。たとえば、厳格度が高いある条件は、相補性が低い核酸から相補的な核酸を完全に識別するのに用いることができる。核酸のハイブリダイゼーションについての厳格度が高い条件、中程度の条件および低い条件については、当業者に知られている。それについては、Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．らによる、“Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ”（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ社刊、１９９８）、ｐ．１０．１−２１０．１６；６．３．１−６．３．６が参照される。ハイブリダイゼーションの厳格性が求められる厳密な条件は、イオン強度（たとえば、０．２×ＳＳＣ、０．１×ＳＳＣ）、温度（たとえば、室温、４２℃、６８℃）、ならびにホルムアミドのような脱安定化剤、またはＳＤＳのような変性剤の濃度ばかりでなく、核酸配列の長さ、塩基組成、ハイブリダイズ配列間のミスマッチ率、ならびにそのほかの未同定配列内の配列亜集合でのハイブリダイズ現象の発生頻度のような諸因子にも左右される。したがって、等価の条件については、対象の二種の核酸間の同一性または類似性の程度が同じになるようにして、前述の一種または複数のパラメーターを変えることによって求めることができる。各々互いにハイブリダイズを継続するためには、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、あるいは少なくとも約９５％またはそれ以上が同一である配列になるような条件が通常用いられる。ハイブリダイゼーションの条件を、ハイブリダイゼーションが起こらない厳格度からハイブリダイゼーションが初めて観察される厳格度に変えることによって、試料中の最も類似した配列とハイブリダイズする（たとえば、選択的にハイブリダイズする）配列が得られると思われる諸条件を求めることができる。条件の例については、Ｋｒａｕｓｅら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ，（１９９１）２００：５４６−５５６に記載されており、さらにＡｕｓｕｂｅｌら、“Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ”（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ社刊、１９９８）には、厳格度が中程度または低い条件についての洗浄条件の求め方について記載されている。洗浄工程は、通常はハイブリドの相補性レベルが最低限になるように条件が設定されている工程である。一般に、相同的なハイブリダイゼーションのみが起こる最低温度から開始し、最終洗浄温度を１℃ずつ下げていくと（但し、ＳＳＣの濃度は一定にする）、ハイブリダイズする配列間の最大ミスマッチ度が１％ずつ上昇し得る。一般に、ＳＳＣの濃度を２倍にすると、Ｔｍが約１７℃上がる。こ���らのガイドラインを用いると、厳格度が高い、中程度、または低い場合については、求められるミスマッチレベルに応じて洗浄温度を経験的に求めることができる。たとえば、厳格度が低い洗浄には、０．２×ＳＳＣ／０．１％ＳＤＳ含有溶液中での、室温１０分間の洗浄工程が含まれ；厳格度が中程度の洗浄には、予め４２℃に加熱した０．２×ＳＳＣ／０．１％ＳＤＳ中での、４２℃、１５分間の洗浄工程が含まれ；さらに厳格度が高い洗浄には、予め６８℃に加熱した０．１×ＳＳＣ／０．１％ＳＤＳ中での、６８℃、１５分間の洗浄工程が含まれ得る。さらには、洗浄を繰返しまたは連続して行うと、当業者は所望する結果を得ることができる。等価条件については、当業者であるならば、標的核酸と使用プライマーまたは使用プローブとの関係の同一性または類似性を変えずに、例示した一種または複数のパラメーターを変えることで求めることができる。ハイブリダイゼーションの条件および手順の特定な例については、２００５年１月３１日提出の米国特許仮出願第６０／６４８９５７号“Ｃｏｐｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｉｎｇ，Ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ，Ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ”；２００５年２月１６日提出の米国特許仮出願第６０／６５３６７２号“Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”；２００５年１月１１日提出の米国特許仮出願第６０／６４３００６号“Ｍａｒｋｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  Ｉｎｓｕｌｉｎ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ”；２００５年１０月３１日出願の米国特許出願第１０／２８４４４４号“Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ”；２００３年５月２８日出願の米国特許出願第１０／４４７６８５号“Ｌｉｖｅｒ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”；および２００６年９月２７日登録の米国特許出願［番号未定］、代理人整理番号３００／１０８１−１０“Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｄｉａｂｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｔｈｅｒｅｏｆ”の中で提供されている。
【０２８４】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の核酸は、同定済みのゲノム領域に対して完全に相補的である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の核酸は、本明細書で同定されたゲノム領域を含む。さらには、核酸は前述のように単離および／または精製することもできる。核酸は、当業者に知られたポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）技法を用いて単離および増幅することができる。このことについては、Ｅｒｌｉｃｈ，Ｈ．Ａ．“ＰＣＲ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｙ：Ｐｒｉｎｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ＤＮＡ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ”（Ｆｒｅｅｄｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ社刊（米国ニューヨーク州、ニューヨーク市）、１９９２）；Ｉｎｎｉｓ  Ｍ．Ａ．ら、“ＰＣＲ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ社（米国、カリフォルニア州、サンジエゴ市）刊、１９９０）；２００２年６月１７日出願の米国特許出願第１０／１７４１０１号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｓｔｏｒａｇｅ  ｏｆ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ”；２００５年５月２４登録の米国特許第６８９８５３１号“Ａｌｇｏｒｉｓｍｓ  ｆｏｒ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｉｍｅｒｓ  Ｐａｉｒｓ”；２００２年１月２日登録の米国特許第６７４０５１０号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ”；２００２年９月５日出願の米国特許出願第１０／２３６４８０号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ａｍｐｌｉｆｉ￥ｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｈｉｄｓ”；および２００３年１月１４日出願の米国特許出願第１０／３４１８３２号“Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｓｅｌｅｃｔｉｎｇ  ＰＣＲ  Ｐｒｉｍｅｒｓ  Ｐａｉｒｓ（Ｓｈｏｒｔ  Ｒａｎｇｅ  ＰＣＲ  Ｐｒｉｍｅｒ  Ｐａｃｋｉｎｇ）”が参照され、それらの開示情報はここで参照されることですべて取込まれる。
【０２８５】
いくつかの実施形態では、本発明で用いられる核酸は精製されている。精製度については様々な程度がある。同質なものまで核酸の精製が可能である一方で、核酸が同質に至るまで精製されていない調製品についても、核酸がほかの化合物の多い状態でも所望の機能を維持しているならば有用である。いくつかの実施形態では、核酸は実質的に細胞性物質を含まず、その核酸調製品には約３０％（乾燥重量あたり）未満のほかの核酸（たとえば、汚染性の核酸類）、約２０％未満のほかの核酸、約１０％未満のほかの核酸、または約５％未満のほかの核酸が含まれる。
【０２８６】
化学的な前駆物質またはそのほかの化学物質を実質的に含まない核酸には一般に、その合成工程で含まれる化学物質が分離されているものが含まれる。一つの実施形態では、核酸は前駆化学物質またはそのほかの化学物質を実質的に含まず、その核酸調製品は約３０％（乾燥重量あたり）未満の前駆化学物質またはほかの化学物質、約２０％未満の前駆化学物質またはほかの化学物質、約１０％未満の前駆化学物質またはほかの化学物質、または約５％未満の前駆化学物質またはほかの化学物質を含む。
【０２８７】
プローブおよびプライマー
本明細書では核酸は種々のアッセイでのプローブおよびプライマーとしても用いられ得る。「プローブ（単数または複数）」および「プライマー［単数または複数］」という用語は、相補的な鎖に対して、塩基特異的に一部または全体がハイブリダイズする核酸を指す。プローブおよびプライマーには、Ｎｉｅｉｓｅｎら、（１９９１）Ｓｃｉｅｎｃｅ２５４：１４９７−１５００に記載されているのようなペプチド核酸も含まれる。
【０２８８】
「プライマー」という用語は一般に、ＰＣＲのようなテンプレート指向型ＤＮＡ合成の反応開始点として作用可能な１本鎖の核酸を指す。ＰＣＲ以外の適当な単離および増幅方法には、たとえばりガーゼ連鎖反応（ＬＣＲ）（ＷｕおよびＷａｌｌａｃｅ、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，４：５６０（１９８９）；およびＬａｎｄｅｇｒｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４１：１０７７（１９８８）参照）、転写増幅法（Ｋｗｏｈら、Ｐｒｏ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１１７３（１９８９）参照）、自己継続型配列複製法（Ｇｕａｔｅｌｌｉら、Ｐｒｏ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８７：１８７４（１９９０）参照）、および核酸に基づく配列増幅法（ＮＡＳＢＡ）が挙げられる。それらのうちの後二者の増幅法については、１本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）および２本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）の両方が生成する等温転写に基づく等温反応を含み、増幅産物中のｓｓＲＮＡの量はｄｓＤＮＡの量のおよそ３０−１００倍である。そのことについては２００５年２月１４日出願の米国特許出願第１１／０５８４３２号“Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  Ｐｒｏｂｅ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ”が参照され、その開示内容は全体がここで取込まれる。
【０２８９】
ＰＣＲ反応については、ヒトのゲノム配列、および関連したケノム領域またはそれらの変異体に基づいてデザインできる。たとえば、エクソン内に変異体が存在する場合、そのようなエクソンを単離し、そのエクソンの両端部のヌクレオチド配列に相補的なプライマーを用いて増幅することができる。同様にイントロン内に変異体が存在する場合も、そのイントロン全体を単離し、そのイントロンの両端部のヌクレオチド配列に相補的なプライマーを用いて増幅することができる。それらのことについては、２００５年５月２４日登録の米国特許第６８９８５３１号“Ａｌｇｏｒｉｔｈｍｓ  ｆｏｒ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｉｍｅｒｓ  Ｐａｉｒｓ”；２００３年１月１４日出願の米国特許出願第１０／３４１８３２号“Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｓｅｌｅｃｔｉｎｇ  ＰＣＲ  Ｐｒｉｍｅｒｓ  Ｐａｉｒｓ”；および２００２年９月５日出願能米国特許出願第１０／２３６４８０号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ”が参照され、それらの開示内容はそのすべてがここで取込まれる。
【０２９０】
いくつかの実施形態では、プローブまたはプライマーは少なくとも約１０個の連続したヌクレオチド、または約１５個の連続したヌクレオチド、または約２０個の連続したヌクレオチド、または約３０個の連続したヌクレオチド、または約５０個の連続したヌクレオチド、あるいは約１０−約５０個の、または約１０−約４０個の、または約１０−約３０個の連続したヌクレオチドの領域を含み、それらの連続したヌクレオチドは相補的な核酸配列（たとえば、インスリン感作物質応答性の核酸のような薬物反応核酸）に特異的にハイブリダイズすることが可能である。さらにいくつかの実施形態では、プライマーは約１０−約１００、または約１０−約５０、または約１５−約３５、または約１６−約２４、または約１８−約２２、または約２６−約３４、または約２８−約３２、あるいは約１８，１９，２０，２１または２２のヌクレオチド長、または約２５，２９，３０，３１または３２のヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、プローブは約１０−約６０、または約１０−約５０、または約１５−約３５、または約２０−約３０、あるいは約２２，２３，２４，２５，２６，２７または２８のヌクレオチド長である。
【０２９１】
薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した核酸の単離、増幅、および／またはその存在の検出を目的とした場合、プローブ、プライマー、またはそれらのセットには、インスリン感作物質に対する応答に関連した少なくとも１個の変異体、または少なくとも２個の変異体、または少なくとも３個の変異体、または少なくとも４個の変異体、あるいはそれらの変異体と共通のハプロタイプブロック内の変異体が含まれ得る。
【０２９２】
一つの実施形態では、プローブまたはプライマーは、少なくとも１個の薬物関連変異体、たとえばインスリン感作物質関連変異体を包含する連続した薬物反応核酸、たとえばインスリン感作物質応答性の核酸に対して、少なくとも約７０％が同一、または少なくとも約８０％が同一、または少なくとも約９０％が同一、または少なくとも約９５％が同一、または約１００％が同一である。ほかの実施形態では、少なくとも１個のインスリン感作物質関連変異体を包含する連続した薬物反応核酸、たとえばインスリン感作物質応答性の核酸に対して、少なくとも約７０％が同一、または少なくとも約８０％が同一、または少なくとも約９０％が同一、または少なくとも約９５％が同一、または約１００％が同一であるヌクレオチド配列に相補的である。
【０２９３】
いずれの実施形態でも、プローブまたはプライマーは標識化（たとえば、放射性同位体、蛍光化合物、酵素、または酵素の補因子による標識化）できる。本明細書においてプローブおよびプライマーは、場合によりたとえば放射活性、蛍光性、ビオチニル化、または化学発光性の標識で標識化可能である。標識化核酸は、ハイブリダイゼーション複合体の検出に有用であり、診断用およびスクリーニングアッセイ用のブローブとして使用できる。
【０２９４】
標識化プローブは、ｃＤＮＡまたはゲノムのライブラリーのスクリーニングによって、完全長のｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡのクローニングに使用できる。ｃＤＮＡライブラリー構築の従来法については、Ｓａｍｂｒｏｏｋらの前述の参考文献で教唆される。それらの方法によって、ｍＲＮＡからのｃＤＮＡの生成、ならびにウイルス性ベクターまたはほかの発現ベクター内への対象ｃＤＮＡの挿入が行われる。一般に、ポリ（Ａ）テール部分を含むｍＲＮＡのライブラリーについては、ポリ（Ｔ）プライマーを用いて作製できる。同様にｃＤＮＡライブラリーについても、プライマーとしての本明細書における核酸を用いて作製できる。ｃＤＮＡライブラリーは、選択した組織（たとえば、正常組織または疾患組織）、あるいはたとえば医療用薬剤で治療された組織または哺乳類のいずれかから作製できる。あるいは、ｃＤＮＡライブラリーは市販品の購入も可能である。一つの実施形態では、ｃＤＮＡライブラリーの構成ｃＤＮＡは、核酸ハイブリダイゼーション用プローブより大きく、本来のｃＤＮＡ配列の全体を含むこともできる。
【０２９５】
ゲノムＤＮＡは、完全長ｃＤＮＡの単離と同様な方法で単離できる。簡潔に言えば、本明細書における核酸、あるいはそれらの断片、誘導体または相補体は、ゲノムＤＮＡライブラリーの探索に使用できる。そのようなライブラリーは、Ｓａｍｂｒｏｏｋらの参考文献の９．４−９．３０に記載されているようなＰ１またはＹＡＣのような大きなセグメントのゲノムを運ぶのに適したベクター内に存在し得る。さらに、ゲノム配列はヒトＢＡＣライブラリーから単離することもでき、ヒトＢＡＣライブラリーは、たとえばＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ社（米国、アラスカ州、ハンツビル市）から購入できる。また完全長ｃＤＮＡ、ゲノムｃＤＮＡ、あるいはそれらの核酸、断片、誘導体または相補体のいずれについても、合成によって得ることができる。
【０２９６】
Ｂ．ポリペプチド
さらに本発明は、本明細書に記載の薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答のスクリーニング、診断、予後予測、予防、治療、または研究に有用なポリペプチドも提供する。本発明のポリペプチドには、本発明の核酸の変異体を含む関連ゲノム領域でコードされるか、または調節されるポリペプチドが含まれる。ポリペプチド、たとえば本明細書におけるインスリン感作物質反応ポリペプチドは、天然に得られるか、または当業者に知られた方法を用いた組換えによって生成させることができる。
【０２９７】
本発明のポリペプチド、たとえばインスリン感作物質のような薬物に対する反応に関連したポリペプチドは、ある反応、たとえばインスリン感作物質のような薬物に対する反応の表現型を持つ個人では、同じ反応表現型を持たない個人と比較して発現が異なるポリペプチドであり得るか、あるいは薬物反応、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した核酸によって全体または一部が調節またはコードされるポリペプチドであり得る。一つの実施形態では、薬物反応、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチドについては、薬物反応、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した非コード性調節領域を持ち、それがさらにゲノムコード領域配列、たとえばインスリン感作物質反応遺伝子のような薬物反応遺伝子に機能するように連結して包含した一つの発現ベクターを用いることで、組換えによる生成が可能になる。その発現ベクターは、発現に適した条件下で宿主細胞内に導入される。次に、標準的な精製技法を用いてその宿主細胞から対象ポリペプチドを単離できる。
【０２９８】
一つの実施形態では、薬物反応、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチドは、薬物反応、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したコード核酸を含むベクターを挿入し、さらにその宿主細胞で発現した対象ポリペプチドを精製することによって製造できる。
【０２９９】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは精製されている。精製度については種々存在する。ポリペプチドが同質にまで精製できる一方で、ポリペプチドが同質にまでは精製されていない調製品についても、ほかの成分がかなりの量で存在する状態でもなお対象ポリペプチドが所望の機能を保持している場合では、有用である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは細胞性物質を実質的に含まず、それには約３０％未満（乾燥重量当たり）のほかのポリペプチド（たとえば、汚染性のポリペプチド）、約２０％未満のほかのポリペプチド、約１０％のほかのポリペプチド、または約５％未満のほかのポリペプチドを含有するペプチド調製品が含まれる。
【０３００】
ポリペプチドは、組換えによって製造される場合も、培地を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、培地含量はポリペプチド調製品の約２０容量％未満、またはポリペプチド調製品の約１０容量％未満、またはポリペプチド調製品の約５容量％未満である。前駆化学物質またはほかの化学物質を実質的に含まないポリペプチドには一般に、その合成において包含した化学物質から分離されているポリペプチドが含まれる。一つの実施形態では、ポリペプチドは前駆化学物質またはほかの化学物質を実質的に含まず、それらには約３０％（乾燥重量あたり）未満の前駆化学物質またはほかの化学物質、または約２０％未満の前駆化学物質またはほかの化学物質、または約１０％未満の前駆化学物質またはほかの化学物質、または約５％未満の前駆化学物質またはほかの化学物質を含むようなポリペプチド調製品が挙げられる。
【０３０１】
本明細書で用いられる、二種のポリペプチドが実質的に相同であるとは、両者のアミノ酸配列が少なくとも約４５％相同、または少なくとも約７５％相同、または少なくとも約８５％相同、または約９５％超相同である場合のことである。二種のポリペプチドの相同率（％）を求めるには、それらのアミノ酸配列を最適な比較ができるように整列する。そのアミノ酸残基に対応する位置で比較が行なわれる。二種のアミノ酸配列間の相同率（％）は、それらの配列によって分割された同一位置の数の関数である（たとえば、相同率（％）＝同一位置の数／位置の総数×１００である）。
【０３０２】
いくつかのポリペプチド（たとえば保存的変異体）は、配列相同性の程度が低いが、一種または複数の同じ機能を発揮し得る。同じ機能を維持し得る保存的な置換には、脂肪族アミノ酸であるメチオニン、バリン、ロイシンおよびイソロイシン間の置換わり；セリンおよびスレオニンのヒドロキシル基の相互交換；アスパラギン酸およびグルタミン酸の酸性残基の交換；アスパラギンおよびグルタミンのアミド基間の置換；リシンおよびアルギニンの塩基性残基環の交換；ならびにフェニルアラニン、チロシンおよびトリプトファンの芳香族残基環の置換わりが含まれる。アラニンおよびグリシンについても、保存的な置換が起こり得る。
【０３０３】
一種または複数の同じ機能が発揮し得ないそのほかのポリペプチドとしては、一種または複数の非保存的なアミノ酸置換を含む変異体、あるいは一種または複数のアミノ酸残基の欠失、挿入、逆転または置換を含む変異体が挙げられる。あるペプチドの機能に必須であるアミノ酸については、部位特異的突然変異誘発法またはアラニン−スキャンニング突然変異誘発法のような、当業者に知られた種々の方法で同定できる。そのことについては、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍら、（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１−１０８５が参照される。それらの二種の手法のうちの後者では、分子内のすべての残基において、アラニンのみの突然変異を導入できる。その結果得られた変異体は、次にインビトロまたはインビボでの生物学的活性の試験が行われる。ポリペプチドの活性または不活性の評価基準となる残基は、それら二種の変異体（アラニン突然変異を持つか持たない変異体）を比較して同定される。ポリペプチドの活性は、結晶解析法、核磁気共鳴法または光親和性標識法のような構造解析法によっても求めることができる。それらについては、Ｓｍｉｔｈら、（１９７２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２４：８９９−９０４；およびＶｏｓら、（１９９２）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２５：３０６−３１２が参照される。
【０３０４】
融合蛋白質
本明細書ではいずれのポリペプチドも、融合蛋白質の一部を形成し得る。本明細書で用いられる「融合蛋白質」または「融合ポリペプチド」という用語は、第二のポリペプチドの全体または一部に、Ｎ末端またはＣ末端で連結した第一のポリペプチドの全体または実質部位を持つ蛋白質を指す。たとえば本発明の融合蛋白質には、非薬物反応ポリペプチド、たとえば非インスリン感作物質反応ポリペプチド、あるいは薬物反応アミノ酸配列、たとえばインスリン感作物質反応アミノ酸配列に対して実質的に相同ではないアミノ酸配列を持つ非相同ポリペプチドに機能するように連結している薬物反応ポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチド（薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチド）が含まれる。さらにほかの例としては、第二の薬物反応ポリペプチド、たとえば第二のインスリン感作物質反応ポリペプチドに機能するように連結した第一の薬物反応ポリペプチド、たとえば第一のインスリン感作物質反応ポリペプチド（インスリン感作物質への反応に関連したポリペプチド）が挙げられる。「機能するように連結した」とは、ポリペプチドおよび非相同蛋白質が融合していることを示し、たとえば非インスリン感作物質反応ポリペプチドは、インスリン感作物質反応ポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に融合できる。一つの実施形態では、融合蛋白質は薬物反応ポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチドの融合には影響を及ぼさない。ポリペプチドの融合に影響を及ぼさない融合ポリペプチドの例としては、薬物反応ポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチド配列がＧＳＴ配列のＣ末端に融合しているＧＳＴ−融合ポリペプチド類が挙げられる。融合ポリペプチドのほかの例としては、酵素が融合した融合ポリペプチド、たとえばβ−ガラクトシダーゼ融合体、酵母の２−ハイブリドＧＡＬ融合体、ならびにポリ−Ｈｉｓ融合体およびＩｇ融合体が挙げられる。融合ポリペプチド、特にポリ−Ｈｉｓ融合体は、組換えポリペプチドの精製を容易にすることができる。哺乳類細胞のようないくつかの宿主細胞では、薬物反応ポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチドの発現および分泌は、非相同シグナル配列を用いると増大させることができる。したがって一つに実施形態では、薬物反応ポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチドは、そのＮ末端で非相同シグナル配列に融合させ得る。別の実施形態では、融合蛋白質は、薬物反応ポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチド、およびＦｃ部位のような免疫グロブリンの定常領域の種々の部分を含み得る。Ｆｃ部位は、治療および診断で有用であり、薬物速度論的特性も改善され得る。Ｆｃ部位については、結合性分子、アゴニストおよびアンタゴニストの同定のためのハイスループットスクリーニングにも有用である。このことについては、Ｂｅｎｎｅｔら、Ｊ．  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃ．Ｒｅｃｏｇ．、（１９９５）８：５２−５８；およびＪｏｈｎｓｏｎら、（１９９５）Ｊ．ｏｆ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７０１，１６：９４５９−９４７１が参照される。一つの実施形態では、可溶性融合蛋白質は、薬物反応ポリペプチド、た���えばインスリン感作物質反応ポリペプチド、および免疫グロブリン（たとえば、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ，ＩｇＤ、ＩｇＥ）の重鎖または軽鎖の一個または複数の定常領域を含有する。
【０３０５】
融合蛋白質は、本明細書に記載されているような標準的な組換えＤＮＡ技法によって製造できる。たとえば、異なるポリペプチド配列をコードするＤＮＡ断片は、通常の技法にしたがって共に連結される。融合遺伝子は、自動化されたＤＮＡ合成装置のような一般的な技法によって合成できる。あるいは核酸断片のＰＣＲ増幅については、連続的なアニーリングおよび再増幅の工程でキメラ型核酸配列の生成を可能にする二種の連続した核酸断片の間で、相補的な重複を生じさせるアンカープライマーを用いると実施できる。さらに、融合部分（たとえば、ＧＳＴ蛋白質）がすでにコードされている多くの発現ベクターも購入できる。本明細書におけるポリペプチドをコードする核酸は、融合部位が対象ポリペプチドにインフレームで連結しているような発現ベクター内でクローニング可能である。
【０３０６】
Ｃ．抗体
本明細書におけるポリペプチド、あるいはそれらの断片、誘導体または相補体のいずれについても、ポリペプチドに特異的な抗体の生成のための免疫原（たとえばエピトープ）として用いることができる。抗体は、本発明の一種または複数のポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチドのような薬物反応ポリペプチドの検出、単離、およびその活性の抑制に用いることができる。
【０３０７】
抗体の生成のためには、それらのポリペプチドまたはその断片がエピトープとして用いられる。いくつかの実施形態では、エピトープは少なくとも６個のアミノ酸長、少なくとも９個のアミノ酸長、少なくとも２０個のアミノ酸長、少なくとも４０個のアミノ酸長、または少なくとも８０個のアミノ酸長である。エピトープまたはポリペプチド断片は、良く知られた方法を用いる分析によって同定可能なドメイン、セグメントまたはモチーフを含むことができ、たとえばシグナルポリペプチド、細胞外ドメイン、膜貫通セグメントまたはループ、リガンド結合性領域、ジンクフィンガードメイン、ＤＮＡ結合性ドメイン、アシル化サイト、グリコシル化サイト、あるいはリン酸化サイトを含むことができる。
【０３０８】
本発明によって企図される抗体の例としては、ポリクローナル、モノクローナル、ヒト化、キメラ、単鎖の抗体、ならびにＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、およびＦＡｂ発現ライブラリーによって生成する断片、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、ならびに前述のいずれのもののエピトープ結合性断片が挙げられる。
【０３０９】
ポリクローナル抗体については、所望の抗原を用いて適当な個体（たとえば、ヤギ、ウサギ、ラット、マウスまたはヒト）を免疫化することにより調製される。免疫化された個体における抗体力価は、当業者に知られた方法、たとえば酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）を用いて継時的にモニタリングできる。次に抗体を個体から（たとえば血液から）単離し、プロテインＡクロマトグラフィーのような技法を用いてさらに精製し、ＩｇＧ画分が得られる。
【０３１０】
免疫化後、抗体力価が最大になるような適当な時期に、その個体から抗体産生細胞を得て、モノクローナル抗体の調製に用いることができる。モノクローナル抗体とは、単一種の抗原結合サイトのみを含む抗体であって、インスリン感作物質反応ペプチドの一つの特定のエピトープとのみ免疫反応が可能である。したがって、モノクローナル抗体組成物は通常、それが免疫反応する特定のポリペプチドに対して単一の結合親和性を示す。
【０３１１】
モノクローナル抗体の調製には、当業者に知られた多くの方法が存在する。一つの実施形態では、モノクローナル抗体は、免疫化動物（通常はマウスまたはラット）由来の個々のリンパ球（通常は脾細胞）を不死化Ｂリンパ球腫瘍（通常はミエローマ）由来の細胞と融合させてハイブリドーマを作製することによって得ることができる。得られたハイブリドーマ細胞の培養上清をスクリーニングし、対象ポリペプチドに特異的に結合するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマを同定する。ハイブリドーマ作製のそのほかの技法には、Ｋｏｚｂｏｒら（１９８３）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ、４：７２に記載のヒトＢ細胞ハイブリドーマ技法；ＥＢＶハイブリドーマ技法；およびトリオーマ技法が含まれる。
【０３１２】
あるいはモノクローナル抗体は、抗体ファージディスプレイライブラリーのようなコンビナトリアル免疫グロブリンライブラリーをスクリーニングすることによっても、同定および単離できる。そのライブラリーは、本明細書の一種または複数のポリペプチドを用いてスクリーニングできる。同定されたライブラリー構成員は次に、当業者に既知の技法を用いて単離される。ファージディスプレイライブラリーの作製およびスクリーニング用のキットは購入可能である。そのことについてはたとえば、Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ｐｈａｒｇｅ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（商品名）カタログＮｏ．２７−９４００−０１；およびＳｔｒａｔａｇｅｎｅ  ＳｕｒｊＺＡＰＴＭ  Ｐｈａｒｇｅ  Ｄｉｓｐｌａｙ  Ｋｉｔ（商品名）カタログＮｏ．２４０６１２が参照される。抗体ディスプレイライブラリーの作製およびスクリーニングのそのほかの方法および試薬については、国際公開第９２／０１０４７号；国際公開第９０／０２８０９号；Ｆｕｃｈｓら（１９９１）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、９：１３７０−１３７２；Ｈａｙら（１９９２）Ｈｕｍ．Ａｎｔｉｂｏｄ．Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ，３：８１−８５；Ｈｕｓｅら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ２４６：１２７５−１２８１；およびＧｒｉｆｆｉｔｈら（１９９３）ＥＭＢＯ  Ｊ．１２：７２５−７３４に開示されている。
【０３１３】
モノクローナル抗体は、キメラ化およびヒト化されている。ヒト化モノクローナル抗体は、適当なヒト軽鎖および重鎖領域の遺伝子を含む哺乳類用発現ベクター内で、種々の領域の遺伝子（たとえば、げっ歯類の抗体遺伝子）をクローニングする標準的な組換えＤＮＡ技法を用いて得ることができる。この例では、得られたキメラモノクローナル抗体は、げっ歯類の可変領域由来の抗原結合能を持つが、ヒト化軽鎖および重鎖領域のために免疫原性はほとんどない。このことについては、Ｓｕｒｅｎｄｅｒ  Ｋ．Ｖａｓｗａｎｉ，Ａｎｎ（１９９８）Ａｌｌｅｒｇｙ  Ａｓｔｈｍａ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．８１：１０５−１１９が参照される。
【０３１４】
抗体のいずれについても、さらに物質（標識）を結合させてポリペプチド−抗体結合複合体を検出することもできる。標識の例には酵素、補充基、蛍光物質、発光物質、生物発光物質、または放射活性物質が挙げられる。適当な標識用酵素の例としては、セイヨウワサビのペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、またはアセチルコリンエステラーゼが挙げられる。適当な標識用補充基の例としては、ストレプトアビジン／ビオチン、およびアビジン／ビオチンが挙げられ；適当な蛍光物質の例としては、ウンベリフェロン、フルオレセイン、イソシアン酸フルオレセイン、ローダミン、ジクロロトリアジルアミンフルオレセイン、塩化ダンシル、またはフィコエリスリンが挙げられる。発光物質の例としてはルミノールが挙げられる。生物発光物質の例としては、ルシフェラーゼ、ルシフェリン、およびエコリンが挙げられる。適当な放射活性物質の例としては、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３５Ｓまたは３Ｈが挙げられる。
【０３１５】
抗体は、アフィニティークロマトグラフィーまたは免疫沈降法のような標準的な技法を用いることで、本発明の一種または複数のポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチドのような薬物反応ポリペプチドの単離に用いるころができる。また抗体は、細胞、細胞溶解物、細胞上清、組織試料またはそのほかの中の特定のポリペプチド（たとえば、インスリン感作物質のような薬物に対する反応に関連したポリペプチド）の存在の有無の検出にも用いることができる。いくつかの実施形態では、抗体はさらに、対象ポリペプチドに特異的に結合させることによって、そのポリペプチドの活性の特性または阻止のためにも使用できる。
【０３１６】
Ｄ．スクリーニングアッセイ
本明細書おける核酸、ポリペプチド、抗体およびそのほかの成分については、本発明の方法、たとえば個人への薬物、たとえばインスリン感作物質の投与の可否を決めるための事前スクリーニング方法における試薬（たとえば、プレパック型キット）としても利用できる。それらは単独または組み合わせて使用でき、あるいは相互使用または薬物反応に関する表現型情報との使用のいずれでも可能である。薬物反応に関する表現型情報は、前述のような関連研究で求めることができ、あるいは薬物反応に関連したすでに知られた表現型情報でもあり得る。そのような表現型情報の例については、前述で詳細に記載しており、たとえば個人の医療履歴および／またはその関連性（たとえば、２型糖尿病の罹患年数、治療前のレジメン（たとえば、グリタゾンによる予備的治療投薬）、臨床試験結果、および／または簡単な測定結果（たとえば、体重、身長、ウエスト、性別など）が挙げられる。そのようなスクリーニングは、たとえば薬物、たとえばインスリン感作物質による治療で有益（または無益）であり得る個人、臨床試験へ登録（または除外）できる個人、および／または薬物、たとえばインスリン感作物質による副作用が生じ得る（または生じない）個人の同定に用いることができる。
【０３１７】
薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答のスクリーニングには、種々の方法を用いることができる。以下に記載の方法は例として提供されるが、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答についてのスクリーニング手段を限定するものではない。
【０３１８】
Ｅ．薬物反応核酸の検出
本発明の方法のスクリーニング工程には、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した一種または複数の核酸、あるいはそれらの断片、誘導体、変異体または相補体の存在、高レベルまたは低レベルの検出を含めることができる。
【０３１９】
個人における核酸および遺伝子変異の検出については、当業者に知られた方法のいずれを用いても実施できる。そのような方法の例としては、サザンまたはノザン解析法、インサイチュー・ハイブリダイゼーション解析法、一本鎖高次構造多型解析法、ＰＣＲ解析法、および核酸マイクロアレイ解析法が挙げられる。そのような解析は、薬物反応ポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチドの発現パターンの定量的および定性的な状況の両方を提示できる。特にそのような解析は、薬物、たとえばインスリン感作物質の反応に関連した発現パターンまたはポリペプチドを提示できる。
【０３２０】
一つの例では、診断または予後予測は、試験対象の個人から得られたゲノムＤＮＡまたはＲＮＡを含む試験試料を用いて行われる。対象の個人については、成人、子供または胎児であり得る。また個人はヒトであり得る。試験試料は、ゲノムＤＮＡまたはＲＮＡ含有のいずれのソース由来のもの、たとえば血液、羊水、脳脊髄液、皮膚、筋肉、頬粘膜、結膜粘膜、臍帯、消化器、またはそのほかの臓器でもあり得る。胎児の細胞または組織由来のＤＮＡ試験試料は、羊水穿刺または漿膜絨毛試料採取のような適当な方法、あるいは母体から得ることができる。試験試料については、対象の核酸または対象の遺伝子変異の有無の同定のために、一種または複数の試験が行われる。
【０３２１】
一つの実施形態では、サザンブロット、ノザンブロット、または同様の解析方法は、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した相補的核酸プローブを用いることで、対象の核酸または対象の遺伝子変異の有無の同定に用いられる。核酸プローブは、試料との接触前に標識化できる。
【０３２２】
ハイブリダイゼーション解析では、試料は核酸プローブが標的の核酸に特異的にハイブリダイズできるのに充分な諸条件下に維持される。一つの実施形態では、標識化核酸プローブおよび標的核酸は、ミスマッチせずに特異的にハイブリダイズする。特異的なハイブリダイゼーションは、本明細書で開示された厳格な諸条件下で行うことができ、標準的な方法を用いて検出できる。ハイブリダイゼーションは、標的核酸の有無を示すことができる。インスリン感作物質に対する応答に関連した核酸または変異体に特異的にハイブリダイズさせることで、インスリン感作物質投与時に予測される個人の反応が分かり、そのことで個体のスクリーニングに対して同じまたは異なるインスリン感作物質のいずれが投与可能かが分かる。それには複数のプローブの使用が可能である。
【０３２３】
一つの実施形態では、核酸プローブは対立遺伝子特異的なプローブである。そのことについては、Ｓａｉｉｄ，Ｒ．ら（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ３２４：１６３ー１６６が参照される。対立遺伝子特異的プローブは、個人から得られた試験試料ＤＮＡ中の一種または複数の変異体の有無の同定に使用できる。標的核酸は、本明細書内または当業者に知られたいずれの方法を用いても増幅される。またフランキング配列についても増幅できる。サザン解析の場合では、増幅された標的核酸は標準的な方法を用いてドットブロットされ、そのブロットは次に対立遺伝子特異的な核酸プローブと接触する。そのことについては、Ａｕｓｕｂｅｌ、Ｆ．ら“Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ”（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ社刊）が参照される。薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した標的核酸に対して、対立遺伝子特異的プローブをハイブリダイズさせて検出すると、薬物、たとえばインスリン感作物質の投与時に予想される個人の反応が分かる。いくつかの実施形態では、投与薬物、たとえばインスリン感作物質は、特異的ハイブリダイゼーションの検出対象の薬物と同じである。ほかの実施形態では、投与薬物、たとえばインスリン感作物質は、特異的ハイブリダイゼーションの検出対象の薬物とは異なるが、同じ薬物クラスに属する薬物である。対立遺伝子特異的プローブの調製方法については、当業者に知られている。
【０３２４】
対立遺伝子特異的プローブは、核酸、その擬似体またはそれらの組み合わせであり、一種または複数の標的核酸に特異的にハイブリダイズするおよそ１０−５０個の塩基対またはおよそ１０−３０個の塩基対から成る。標的核酸は、本明細書の核酸のいずれでもある。
【０３２５】
一つの例では、標的核酸は薬物反応、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した核酸である。そのような標的核酸の同定に有用であり得る核酸プローブのセットは、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した１個またはそれ以上、２個またはそれ以上、３個またはそれ以上、４個またはそれ以上、あるいは５個またはそれ以上変異体に対して相補的にできる。そのような核酸プローブは、セットまたはキット（たとえば、サザン解析またはほかの技法を使用するための）の一部となり得る。そのような核酸プローブは、対立遺伝子特異的プローブであり得る。
【０３２６】
薬物に対する反応、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した核酸の別な検出方法としては、ノザン解析法がある。ノザン解析法は、薬物反応ポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチドの遺伝子発現パターン（たとえばｍＲＮＡ）の同定に使用できる。そのことについては、Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．ら、“Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ”（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ社刊、１９９９）が参照される。ノザン解析法では、試験用ＲＮＡ試料は、適当な方法によって個人から得られる。薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチドをコードするＲＮＡ配列に相補的である核酸プローブの特異的ハイブリダイゼーションを行うと、薬物、たとえばインスリン感作物質、あるいは同じ薬物クラスの別の薬物の投与によって予想される個人の反応が分かる。核酸プローブは標識化が可能である。核酸プローブは対立遺伝子特異的プローブであり得るか、あるいは核酸プローブにはそのような複数のプローブを伴うキットまたはプローブコレクションが含まれる。
【０３２７】
診断および予後予測の代替方法は、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した標的核酸の増幅、たとえばＰＣＲ法による増幅にも用いられる。これは極めて微量に存在する標的核酸に対して特に有用である。一つの実施形態では、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連した標的核酸プローブを増幅すると、薬物、たとえばインスリン感作物質、あるいは同じ薬物クラスに属する別の薬物の投与時に予想される個人の反応およびその存在が分かる。別の実施形態では、対立遺伝子特異的プライマーは、薬物、たとえば．インスリン感作物質に対する応答に関連したゲノムＤＮＡの増幅に用いられ、それによって薬物、たとえばインスリン感作物質、あるいは同じ薬物クラスに属する別の薬物のように予想される個人の反応が分かる。
【０３２８】
別の実施形態では、ｃＤＮＡは逆転写によって標的ＲＮＡ核酸から得られる。ｃＤＮＡ内の核酸配列は、さらに増幅反応用のテンプレートとして用いられる。逆転写反応および増幅反応の工程でプライマーとして用いられる核酸は、本明細書の核酸のいずれからも選ぶことができる。増幅産物の検出のために、核酸増幅は標識化核酸を用いて実施できる。あるいは充分に増幅された産物は、標準的な臭化エチジウム染色法、またはほかの適当な核酸染色方法を用いて可視化され得る産物にすることもできる。
【０３２９】
マイクロアレイについても、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答性のスクリーニングに利用できる。マイクロアレイは、個人由来の標的核酸配列に相補的であるプローブを含む。マイクロアレイのプローブは、対立遺伝子特異的であり得る。一つの実施形態では、マイクロアレイは複数の異なるプローブを含み、それらは各々、異なる既知の配置で基板表面に結合しており、各々が相補鎖に結合可能である。そのことについては、米国特許第５１４３８５４号、国際公開第９０／１５０７０号および国際公開第９２／１００９２号が参照される。それらのマイクロアレイは一般に、機械的な合成法、あるいは写真平板法と固相オリゴヌクレオチド合成法とを組み合わせて取入れた光指向合成法を用いて製造できる。そのことについては、Ｆｏｄｏｒら（１９９１）Ｓｃｉｅｎｃｅ２５１：７６７−７７７；および米国特許第５４２４１８６号が参照される。マイクロアレイの機械的な合成技法については、たとえば米国特許第５３８４２６１号に記載されている。
【０３３０】
マイクロアレイが調製されると、標的核酸または試料核酸（たとえば、ＤＮＡまたはＲＮＡ）がマイクロアレイにハイブリダイズされ、続いてマイクロアレイのスキャンが行われる。一般的なハイブリダイゼーションおよびスキャニングの手順については、国際公開第９２／１００９２号；国際公開第９５／１１９９５号；および米国特許第５４２４１８６号に記載されている。簡潔に言えば、すでに同定された一種または複数の変異体または多型を含む標的核酸配列が、ＰＣＲのような良く知られた増幅技法によって（場合により）増幅され、標識化される。その標的配列の両方の鎖（変異体または多型由来の上流側および下流側）に相補的であるプライマーが、標的領域の増幅に用いられ得る。また非対称ＰＣＲ技法も使用できる。標的核酸は、検出可能なタグで標識化した後で、適当な諸条件下でマイクロアレイを用いてハイブリダイズされる。ハイブリダイゼーション、ならびにマイクロアレイの洗浄および／または染色を完了させ、マイクロアレイをスキャンして標的配列がハイブリダイズしているマイクロアレイ上の位置が求まる。スキャンにより得られたハイブリダイゼーションデータは通常、マイクロアレイ上の配置機能としての蛍光強度の形で存在する。
【０３３１】
これまでは、単一の多型の検出のような単一の検出ブロックに関して述べてきたが、マイクロアレイには多重検出ブロックも含まれ、それによって多重特異的多型の解析が可能になる。代替配列において、検出ブロックは単一のマイクロアレイまたは多重分離型マイクロアレイ内にグループ化でき、それによって標的のマイクロアレイへのハイブリダイゼーションの際に種々の光学条件を用いることができる。たとえば、Ｇ−Ｃを多く含んで延長したゲノム配列内に整列している多型を、ハイブリダイゼーション条件最適化用のＡ−Ｔを多く含むセグメント内に整列している多型から分けて検出しようとする企画は望ましいと言える。多型検出用核酸マイクロアレイの使用についてのそのほかの記載については、たとえば米国特許第５８５８６５９号および米国特許第５８３７８３２号に見出すことができ、それらの全部の技法については個々で参照にとって取込まれる。
【０３３２】
変異型核酸のそのほかの検出方法としては、たとえば直接的なマニュアル配列決定法（ＣｈｕｒｃｈおよびＧｉｌｂｅｒｔ（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８１：１９９１−１９９５；Ｓａｎｇｅｒ，Ｆ．ら（１９７７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ７４：５４６３−５４６７；および米国特許第５２８８６４４号）；自動蛍光配列決定法；一本鎖高次構造多型アッセイ法；クランプ変性ゲル電気泳動法；変性グラジエントゲル電気泳動法（Ｓｈｅｆｆｉｅｌｄ，Ｖ．Ｃ．ら（１９８１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８６：２３２−２３６）易動性シフト解析法（Ｏｒｉｔａ，Ｍ．ら（１９８９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８６：２７６６−２７７０）；制限酵素解析法（Ｆｌａｖｅｌｌら（１９７８）Ｃｅｌｌ１５：２５；Ｇｅｅｖｅｒら（１９８１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ７８：５０８１）；ヘテロ二重鎖解析法；化学的ミスマッチ解裂法（Ｃｏｔｔｏｎら（１９８５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８５：４３９７−４４０１）；ＲＮアーゼ保護アッセイ法［Ｍｙｅｒｓ，Ｒ．Ｍ．ら（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ２３０：１２４２）；ならびに大腸菌のｍｕｔＳ蛋白質ようなヌクレオチドミスマッチ認識性のポリペプチドを用いる方法が挙げられる。
【０３３３】
Ｆ．薬物反応ポリペプチドの検出
薬物反応ポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチドの存在、発現レベル、活性、および配置の検出については、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答が個人で予想されるか否かを求めるためのスクリーニングツールとしても用いることができる。簡潔に言えば、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチドの存在、発現レベル、またはその上昇した活性の検出によって、薬物、たとえばインスリン感作物質、あるいは同じ薬物クラスの別の薬物の投与時に予想される個人の反応が分かる。蛋白質は、どのような組織または細胞のタイプからでも分析が可能である。分析はインビボまたはインビトロで実施できる。
【０３３４】
ポリペプチドの検出および単離方法は、当業者に知られており、たとえば酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）、免疫沈降法、免疫蛍光法、イムノブロッティング法、ウエスタンブロッティング法、分光法、比色法、電気泳動法、および等電点焦点法が挙げられる。それらについては米国特許第４３７６１１０号が参照され、さらにＡｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．ら、“Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ”（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ社刊、第１０章）も参照される。検出および単離方法は、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅによる記載の方法（Ｈａｒｌｏｗ，Ｅ．およびＬａｎｅ，Ｄ．、“Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ”Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ社（米国、ニューヨーク州、コールドスプリングハーバー市）刊）も使用できる。
【０３３５】
一つの実施形態では、インスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチドの存在、量および配置については、そのインスリン感作物質に対する応答に関連した一種または複数のポリペプチドに特異的に結合するプローブまたは．抗体を用いて測定できる。
【０３３６】
一つの実施形態では、プローブまたは抗体は、直接的または間接的に標識化されている。直接標識化には、抗体またはプローブへの検出性物質のカップリング（物理的連結）が含まれる。間接標識化には、直接標識される別の試薬とのプローブの反作用が含まれる。間接標識の例としては、蛍光標識化二次抗体を用いる一次抗体の検出、および蛍光標識化ストレプトアビジンで検出可能なビオチンを用いるＤＮＡプローブの末端標識が挙げられる。
【０３３７】
固体担体は、抗体またはプローブ、あるいは試料のいずれかを固定化するのに利用できる。一つの実施形態では、試料は平面、カラム、ビーズ、光ファイバーなどのような固体担体上に固定化でき、さらに細胞、細胞粒子、または可溶性蛋白質も固定化可能である。固体担体は次に、適当な緩衝液で洗浄でき、その後で検出用標識化抗体で処理される。続いて、固体担体上に結合した標識化抗体の量は、一般的な方法によって検出できる。良く知られた担体には、ガラス、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリエチレン、デキストラン、ナイロン、アミラーゼ、天然型および修飾型のセルロース、ポリアクリルアミド、斑れい岩、ニトロセルロースおよび磁鉄鉱が含まれる。
【０３３８】
本明細書の抗体は酵素に連結可能であり、酵素免疫アッセイに使用できる。そのことについては、Ｖｏｌｌｅｒ“Ｔｈｅ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｌｉｎｋｅｄ  Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  Ａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ）”、Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｈｏｒｉｚｏｎｓ２：１−７（Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  Ｑｕａｒｔｅｒｌｙ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ社（米国、メリーランド州、ウオーカーズビル市）刊、１９７８）；Ｍａｇｇｉｏ、“Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ”（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ社（米国、フロリダ州、ボカラトン市）刊、１９８０）；Ｉｓｈｉｋａｗａら、”Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ”（Ｋａｇａｋｕ  Ｓｈｏｉｎ社（日本、東京都）刊、１９８１）が参照される。抗体に結合されている酵素は、適当な基質、たとえば色素原性基質と反応することとなり、検出、たとえば分光学的、蛍光または視覚による方法での検出が可能な化学的部分を産生する。抗体標識化に使用可能な酵素としては、リンゴ酸デヒドロゲナーゼ、スタフィロコッカスのヌクレアーゼ、δ−５−ステロイドイソメラーゼ、酵母のアルコールデヒドロゲナーゼ、α−グリセロリン酸デヒドロゲナーゼ、三糖類リン酸イソメラーゼ、セイヨウワサビのペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、アスパラギナーゼ、グルコースオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、リボヌクレアーゼ、ウレアーゼ、カタラーゼ、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、グルコアミラーゼ、およびアセチルコリンエステラーゼが含まれるが、それらに限定されない。検出は、酵素に対する色素原性基質を用いる比色法で実施できる。また検出は、基質の酵素反応の程度を、同様に調製した標準品と視覚的に比較することによっても実施できる。
【０３３９】
また検出は、様々なほかの免疫アッセイのいずれを用いても実施できる。たとえば、抗体または抗体断片の放射活性標識化によって、ラジオイムノアッセイでのフィンガープリント遺伝子の野生型または変異型のペプチドの検出が可能になる。このことについては、Ｗｅｉｎｔｒａｕｂ，Ｂ．“Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ，Ｓｅｖｅｎｎｔｈ  Ｔｒａｉｎｉｎｇ  Ｃｏｕｒｓｅ  ｏｎ  Ｒａｄｉｏｌｉｇａｎｄ  Ａｓｓａｙ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ”（米国内分泌学界編、１９８６年３月）が参照される。放射性同位体は、γ線カウンターまたはシンチレーションカウンターを用いるような方法、あるいはオートラジオグラフィーによって検出できる。
【０３４０】
蛍光性化合物を用いて抗体を標識化することも可能である。蛍光標識化抗体が適当な波長の光に曝されると、その存在は蛍光によって検出され得る。最も一般的に用いられる蛍光標識用化合物には、イソシアン酸フルオレセイン、ローダミン、フィコエリスリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、ｏ−フタルデヒド、およびフルオレスカミンが存在する。蛍光標識化抗体は、光学顕微鏡、フローサイトメトリーまたは蛍光による検出と結びつけることができる。一つの例では、抗体またはその断片は、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチドのインサイチュー検出を目的とした免疫蛍光顕微鏡検査または免疫電子顕微鏡検査で組織学的に用いることができる。インサイチュー検出では、生検のように患者から組織学的試験片を採取して実施できる。その試験片は次に、本明細書に記載の標識化抗体で処理される。試料表面の標識化抗体または断片に、さらに抗体または断片を重層させることも可能である。この手順によって、対象ポリペプチドの存在の有無、量、および配置の測定が可能となる。
【０３４１】
また抗体は、１５２Ｅｕまたはそのほかのランタニド群のような蛍光放出性金属を用いても検出用標識化が可能である。それらの金属は、ジエチレントリアミンペンタセン酸（ＤＴＰＡ）またはエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）のような金属キレート基を用いて抗体に結着させることができる。
【０３４２】
また抗体は、化学発光性化合物に結合させても検出用標識化できる。その化学発光物質でタグ化された抗体の存在は、化学反応の進行で生じる発光の存在の検出によって測定される。特に有用な化学発光性標識化合物の例には、ルミノール、イソルミノール、セロム酸アクリジウムエステル、イミダゾール、アクリジウム塩、およびシュウ酸エステルが挙げられる。
【０３４３】
同様に生物発光性化合物も、本明細書の抗体の標識化に用いることができる。生物発光は、触媒性蛋白質が化学発光反応の効率を上げる生物学的システムで見出された化学発光の一タイプである。生物発光性蛋白質の存在は、発光の存在の検出によって測定される。いくつかの実施形態では、抗体標識化用の生物発光性化合物はルシフェリン、ルシフェラーゼおよびエクオリンである。
【０３４４】
一つの実施形態では、試料（たとえば、細胞、細胞溶解液、組織；インビボまたはインビトロのいずれか）中の薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチドの存在（または非存在）については、その試料を抗体に接触させ、次に結合複合体を検出することによって確認できる。試料中の薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチドの存在によって、薬物、たとえばインスリン感作物質、あるいは同じ薬物クラスの別の薬物の投与時に予想される個人の反応が分かる。
【０３４５】
別の実施形態では、試験試料中の薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチドの発現レベルまたは組成は、対照試料中の同じポリペプチドの発現レベルと比較される。対照試料については、そのポリペプチドの発現レベルが既知であるものか、または薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答が既知である個人から得られた試料における発現レベルをものとすることができる。
【０３４６】
薬物反応ポリペプチド、たとえばインスリン感作物質反応ポリペプチドの前述以外の発現レベルまたは組成によっても、薬物、たとえばインスリン感作物質、あるいは同じ薬物クラスの別の薬物の投与時に予想される個人の反応が分かる。一つの例では、個人から得られた試験試料は、薬物、たとえばインスリン感作物質に関連したポリペプチドの発現（たとえば転写レベル）および／または組成における変化（たとえばスプライシング変異体）に関する評価が行われる。薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチドの発現レベルの増加を検出すると、薬物、たとえばインスリン感作物質、あるいは同じ薬物クラスの別の薬物に対する予想される個人の反応が上がる可能性が分かる。これとは反対に、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答に関連したポリペプチドの発現レベルの減少を検出すると、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する予想される個人の反応が、たとえば下がる可能性が分かる。
【０３４７】
ＶＩ．薬物反応表現型の検出
遺伝子変異ならびに表現型変異を用いる関連研究については、２００５年１月２４日出願能米国特許出願第１１／０４３６８９号“Ａｓｓｏｃｏａｔｉｏｎｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ”に記載されており、それは個々で参照によって取込まれる。
【０３４８】
一種または複数の表現型に関するデータは、計測または入手（たとえばデータベースまたは医療記録経由）が可能である。表現型群に関するデータは、遺伝子関連データの作製の前、後、および／または同時に計測または入手できる。いくつかの実施形態では、表現型に関するデータは、本発明の実施者による、たとえば所見（たとえば、身長、体重、ＢＭＩ、性別、形成異常またはそのほかの身体異常など）、生化学検査（たとえば、血液または尿の検査）、またはそのほかの診断検査（たとえば、Ｘ線、ＭＲＩ、ＣＡＴスキャン、ＣＴスキャン、ドップラーシフトなど）によって作製される。個人について入手／収集され得る表現型データのさらに別の例には、過去の医学的状態または医療履歴（たとえば、外科手術の有無、特別な病気罹患の有無、出産経験の有無、精神病の診断の有無、アレルギーの有無など）に関する表現型データも含めることができる。いくつかの実施形態では、表現型データは、その個人の家系に関しても入手／収集できる。データは、たとえば対象の表現型（たとえば、特別な薬物反応または疾患など）の相対的な提示についても収集可能である。
【０３４９】
ＶＩＩ．治療
本発明の方法には、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する個人の反応を求めるスクリーニング工程の結果に基づいた個体の治療または非治療を含めることができる。治療には、薬物、たとえばインスリン感作物質の投与または非投与が含まれる。いくつかの実施形態では、個人のスクリーニング対象の薬物、たとえばインスリン感作物質については、投与されるか、または投与されない薬物と同じである。いくつかの実施形態では、個人のスクリーニング対象の薬物、たとえばインスリン感作物質は、異なる薬物（たとえば、投与されるか、または投与されない薬物と同じ薬物クラスの別の薬物）である。したがっていくつかの実施形態では、薬物、インスリン感作物質は、スクリーニング工程の結果に基づいて個体に投与される。ほかの実施形態では、薬物、たとえばインスリン感作物質は、スクリーニング工程の結果に基づいて個体に投与されない。投与または非投与は、別の薬物、たとえば別のインスリン感作物質、あるいはほかの薬物によるようなほかの療法と共に行われ得る。投与または非投与は、症状（たとえば、インスリン抵抗性障害）の治療の進行の一部、および／または研究、たとえば臨床試験の一部として臨床設定において行われ得る。
【０３５０】
治療に用いられるインスリン感作物質およびそのほかの治療薬剤のような薬物は、通常の担体を用い、種々の投与経路に適した種々の製剤に調合することができる。それらの薬物は、たとえば経口投与用には、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、液剤などの剤形で製剤化される。経口投与用固形製剤の調製には、一般的な賦形剤、結合剤、滑沢剤、着色剤、崩壊剤などが使用できる。
【０３５１】
賦形剤には、たとえばラクトース、澱粉、タルク、ステアリン酸マグネシウム、微結晶セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、グリセリン、アルギン酸ナトリウム、およびアラビアゴムが含まれる。使用される結合剤には、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、エチルセルロース、アラビアゴム、シェラック、およびスクロースが含まれ、使用される滑沢剤にはステアリン酸マグネシウム、およびタルクが含まれる。さらに着色剤および崩壊剤についても、当業者に既知のものが使用できる。錠剤については、良く知られた方法によってコーティングされ得る。
【０３５２】
液剤は、水性または油性の懸濁液、溶液、シロップ、エリキシルなどであり得、一般的な方法によって調製できる。注射剤の製剤化の場合、本発明の化合物にはｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤などが添加され得る。さらに一般的な方法によって、皮下注射用、筋注用または静注用製剤を調製できる。坐剤の製造の場合、カカオバター、ポリエチレングリコール、Ｗｉｔｅｐｓｏｌ．ＲＴＭ（商品名）（Ｄｙｎａｍｉｔｅ  Ｎｏｂｅｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ製）などのような油性基材を、基材として使用できる。
【０３５３】
吸入、経皮、口腔内などのようなほかの投与型製剤についても、当業者に知られており、インスリン感作物質のような、本発明の方法により投与される薬物で使用され得る。それらについては、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第２０版（．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ社刊、２０００年）が参照される。
【０３５４】
そのような製剤の用量は、患者の症状、体重、年齢などで様々に影響され、患者のすべてで同一ではない。いくつかの実施形態では、本発明の化合物の用量は、成人患者当りで約０．０１−２０００ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約０．１−１０００ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約０．１−５００ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約０．５−３００ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約１−２５０ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約１−１５０ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約５−１５０ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約１０−１２０ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約５−約２５０ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約２０−約２４０ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約４０−約２２０ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約６０−約１８０ｍｇ／日の範囲、あるいは成人患者当りで約８０−約１６０ｍｇ／日の範囲になるように設定される。製剤は、一日１−４回に分けて投与できる。いくつかの実施形態では、製剤は週に約１回、または週に約２回、または週に約３回、または週に約４回、または週に約５回、または週に約６回投与される。いくつかの実施形態では、製剤は１日約１回投与される。いくつかの実施形態では、製剤は一日約２回投与される。
【０３５５】
いくつかの実施形態では、製剤はインスリン感作物質を含有する。いくつかの実施形態では、インスリン感作物質はＴＺＤ系のＰＰＡＲモジレーターである。いくつかの実施形態では、インスリン感作物質はネトグリタゾンである。いくつかの実施形態では、インスリン感作物質は成人患者あたり、１−２００ｍｇ／日の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＴＺＤ−ＰＰＡＲモジュレーターは成人患者あたり、約１−２００ｍｇ／日の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ネトグリタゾンは成人患者あたり、約５−約２５０ｍｇ／日、または成人患者あたり、約２０−約２４０ｍｇ／日、または成人患者あたり、約４０−約２２０ｍｇ／日、または成人患者あたり、約６０−約１８０ｍｇ／日、または成人患者あたり、約８０−約１６０ｍｇ／日の用量で投与される。そのような実施形態では、インスリン感作物質、たとえばネトグリタゾンのようなＴＺＤ−ＰＰＡＲモジュレーターは、マンニトール、流動化剤、たとえばタルク、崩壊剤、たとえばクロスポビドン、滑沢剤、たとえばステアリン酸マグネシウム、およびヒドロキシプロピルセルロース、プロピレングリコール、および二酸化チタンのようなそのほかの成分を含んだ製剤で投与できる。
【０３５６】
一つの実施形態では、投与薬物はネトグリタゾンであり、１日１回、経口にて８０−１６０ｍｇ／日投与され、その調製される製剤（フィルムコート錠）は約６８−７８％のｄ−マンニトール、約０．１−約２％のタルク、約３−７％のクロスポビドン、約２−４％のヒドロキシプロピルセルロース、約１−３％のステアリン酸マグネシウムを含む素錠、およびそれにコーティングを施すためのフィルム部分が約１−３％（全重量に対して）のヒドロキシプロピルセルロース、約０．１−１％のプロピレングリコール、約０．２−２％の二酸化チタン、および約０．１−０．５％のタルクを含み、残りが活性成分ネトグリタゾンである（但し、％はすべて重量％であり、錠剤はネトグリタゾンを２０ｍｇ含有する。さらにたとえばネトグリタゾン含量が５ｍｇまたは１０ｍｇのほかのサイズになるように調整することも考えられる）。一つの実施形態では、ネトグリタゾンにおける投薬は、１日１回、経口にて８０−１６０ｍｇ／日で行われ、その調製される２０ｍｇ製剤（フィルムコート錠）は約７３％のｄ−マンニトール、約１％のタルク、約５．２％のクロスポビドン、約３．２％のヒドロキシプロピルセルロース、約２．１％のステアリン酸マグネシウムを含む素錠、およびそれにコーティングを施すためのフィルム部分が約２．４％（全重量に対して）のヒドロキシプロピルセルロース、約０．５％のプロピレングリコール、約０．７％の二酸化チタン、および約０．３％のタルクを含み、残りが活性成分ネトグリタゾンである（％は２０ｍｇ錠に対応する）。
【０３５７】
いくつかの実施形態では、薬物、たとえばインスリン感作物質の投与は、スクリーニング工程の結果に基づき調整される。そのような調整については、本明細書に記載されている。
【０３５８】
ＶＩＩＩ．キット類
また本発明は、個人が薬物、たとえばインスリン感作物質に対して反応するか否かを予測するためのキット類も企図する。たとえば、そのようなキット類は、薬物、たとえばインスリン感作物質での治療が有益（または無益）であり得る個人、臨床試験に登録（または除外）され得る個人；および／または薬物、たとえばインスリン感作物質による副作用が生じ得る個人の同定に使用できる。いくつかの実施形態では、キットの使用対象薬物、たとえばインスリン感作物質は、個人の反応の予測対象となる薬物と同一である。いくつかの実施形態では、キットの使用対象薬物、たとえばインスリン感作物質は、個人の反応の予測対象となる薬物と同じ薬物クラスに属する異なる薬物である。
【０３５９】
本明細書のキット類には、適当なパーケージング内に少なくとも１個の診断ツールを含めることができる。いくつかの実施形態では、キットはさらに使用説明書のセットも含む。スクリーニング、診断および予防に有用なキットは試薬類を含み、たとえば核酸プローブまたはプライマー（増幅用、逆転写用および検出用）、制限酵素（たとえば、ＲＦＬＰ解析用）、対立遺伝子特異的プローブ、およびアンチセンス核酸、抗体、およびそのほかの蛋白質結合性プローブ、ならびにそれらのいずれの可能な標識化体が試薬として含まれる。またキット類は、結果が核酸または蛋白質解析と組み合わせて用いることができる表現型解析を行うための取扱説明書および器具類も含み得る。
【０３６０】
いくつかの実施形態では、診断ツールは、個人における一種または複数の遺伝子変異の同定用の手段を提供する。遺伝子変異の同定に使用可能な診断ツールの例としては、プライマー、免疫アッセイ、チップ型ＤＮＡアッセイ、ＰＣＲアッセイ、Ｔａｑｍａｎ（登録商標）アッセイ、配列決定に基づくアッセイなどが挙げられるが、それらに限定されない。いくつかの実施形態では、そのようなツールは１個またはそれ以上の遺伝子変異、あるいは３個またはそれ以上の遺伝子変異、あるいは３０個またはそれ以上の遺伝子変異、あるいは３００個またはそれ以上の遺伝子変異、あるいは３０００個またはそれ以上の遺伝子変異、あるいは３００００個またはそれ以上の遺伝子変異、あるいは３０００００個またはそれ以上の遺伝子変異、あるいは３００００００個またはそれ以上の遺伝子変異を検出するための手段を提供できる。いくつかの実施形態では、そのような遺伝子変異はＳＮＰである。
【０３６１】
いくつかの実施形態では、遺伝子変異を同定する診断ツールは、一個人から得られた遺伝子素材の少なくとも約１００００個の塩基、少なくとも約２００００個の塩基、少なくとも約５００００個の塩基、少なくとも約１０００００個の塩基、少なくとも約２０００００個の塩基、少なくとも約５０００００個の塩基、少なくとも約１００００００個の塩基、または少なくとも約２００００００個の塩基、少なくとも約５００００００個の塩基、少なくとも約１０００００００個の塩基、少なくとも約２０００００００個の塩基、少なくとも約５０００００００個の塩基、少なくとも約１００００００００個の塩基、少なくとも約２００００００００個の塩基、少なくとも約５００００００００個の塩基、少なくとも約１０００００００００個の塩基、少なくとも約２０００００００００個の塩基、あるいは少なくとも約３０００００００００個の塩基をスキャンする。いくつかの実施形態では、一個人のゲノムのすべて、または実質的にすべてが、スキャン、たとえば配列決定される。ある実施形態では、すべての関連ＳＮＰは、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する個人の反応の有無を求めるためのスキャンに必ずしも必要ではない。
【０３６２】
いくつかの実施形態では、遺伝子変異を同定する診断ツールは、約１００００００００個未満の塩基、５０００００００個未満の塩基、１０００００００個未満の塩基、５００００００個未満の塩基、２００００００個未満の塩基、１００００００個未満の塩基、約５０００００個未満の塩基、２０００００個未満の塩基、１０００００個未満の塩基、約５００００個未満の塩基、２００００個未満の塩基、約１００００個未満の塩基、約５０００個未満の塩基、２０００個未満の塩基、１０００個未満の塩基、５００個未満の塩基、２００個未満の塩基、１００個未満の塩基、５０個未満の塩基、２０個未満の塩基、あるいは１０個未満の塩基をスキャンする。
【０３６３】
いくつかの実施形態では、本発明のキットを用いてゲノムの一部または全体からスキャンおよび遺伝子型解析されたＳＮＰが、関連研究で用いられる。ほかの実施形態では、スキャンされたそれらのＳＮＰ亜集合のみが、関連研究に用いられる。
【０３６４】
いくつかの実施形態では、診断ツールには、個人における一種または複数の表現型（たとえば、蛋白質の発現、臨床試験の結果、医療履歴、簡単菜測定など）を検出および／または定量する手段を提供する本発明のキットが含まれる。そのような診断ツールの例としては、血液検査（たとえば、ＰＳＡ、血糖値など）；そのほかの生化学的検査（たとえば、妊娠検査、アレルギー検査など）；自己診断検査（たとえば、乳房検査、皮膚検査、ＩＱ検査など）；医療履歴の検討（たとえば、２型糖尿病の罹患年数、予備治療レジメンなど）；ならびに簡単な測定（たとえば、体重、身長、ウエスト、性別など）が挙げられるが、それらに限定されない。
【０３６５】
いくつかの実施形態では、キットは少なくとも２個の診断ツール、すなわち個人における一種または複数の遺伝子変異の検出および／または定量用のツール；ならびに個体の一種または複数の表現型形質の検出および／または定量用のツールを含む。いくつかの実施形態では、取扱説明書は、個人が対象の表現型を持つか否かを予測するための診断ツールから得られる結果の使用についてのガイドラインを提供する。
【０３６６】
本明細書の関連研究および／またはキット類の結果については、薬物の発見、臨床試験、および関係者とのそのほかの発見試行において、直接または間接的に使用できる。いくつかの実施形態では、本発明は遺伝子変異に関するデータを含むコンピュータ読取可能なデータベースを企図し、いくつかの実施形態では、被験者の表現型群に関するデータを含むコンピュータ読取可能なデータベースを企図する。それらのデータベースは、オンラインまたはほかの媒体によってアクセス可能である。それらのデータベースは、表現型および／または遺伝子型を対象の表現型と関係づけるためのバーチャルの関連研究を行うのに使用できる。たとえばいくつかの実施形態では、本明細書のデータベースは、新たな研究において対象の表現型として、表現型のうちの一つを用いることによって、バーチャル関連研究の実施に使用できる。
【０３６７】
たとえば、本明細書の関連研究および／またはキット類は、ＳＮＰの集合またはその亜集合、および／または表現型の集合またはその亜集合での関連遺伝子型に基づき、薬物、たとえばインスリン感作物質に対する応答が個人で起こるか否かを予測するのに使用できる。
【０３６８】
いくつかの実施形態では、薬物、たとえばインスリン感作物質に対するそのような反応については、被験者の少数群での予測不能の副作用が原因で市場から撤退した薬物または製品、あるいは臨床試験において予期できない効果が見られた被験者の多数群が原因で許認可が得られなかった薬物または製品にあてはまり得る。いくつかの実施形態では、薬物、たとえばインスリン感作物質に対するそのような反応については、被験者の少数群における予測不能の副作用が原因で市場から撤退した薬物と同じ薬物クラスに属する異なる薬物または製品、あるいは臨床試験において予期できない効果が見られた被験者の多数群が原因で許認可が得られなかった薬物または製品にあてはまり得る。
【０３６９】
いくつかの実施形態では、反応は副作用であり得、その研究および／またはキット類は、副作用が起こると予測される被験者を、治療または探査研究、たとえば新薬の治験、市場から撤退した薬物の臨床試験、または許認可が得られなかった薬物の臨床試験のような臨床試験から除外するのに使用できる。あるいは、そのような個人は治療され得るか、または治験に含まれ得るが、予想される副作用に基づき、治療の際は適当な調節が行われ得る。いくつかの実施形態では、反応は副作用であり、個体の対象薬物での治療の有無の決定は、副作用の可能性、副作用のタイプ、治療個体の疾患または症状の重篤性、ならびにそのほかの臨床判定基準が含まれる因子の組み合わせに基づいて行われる。
【０３７０】
いくつかの実施形態では、反応は治療応答であり得、予測される治療効果に基づき、治療、または探査研究への参入のために個体が選定される。予想される反応に基づく予防についても、行うことができる。いくつかの実施形態では、予想される治療応答に基づき、対象薬物と共にほかの治療も用いられるか、または用いられない。
【０３７１】
いくつかの実施形態では、本明細書の関連研究および／またはキット類については、ＳＮＰの集合またはその亜集合、および／または表現型の集合またはその亜集合での対象遺伝子型に基づき、個人の治療コースの決定を支援するのに使用できる。いくつかの実施形態では、本明細書の関連研究および／またはキット類はについては、ＳＮＰの集合またはその亜集合、および／または表現型の集合またはその亜集合での対象遺伝子型に基づき、先発医薬品を用いるか、または価格の安いジェネリック医薬品に置き換えるかを評価するのに使用できる。たとえば関連研究は、ジェネリック代替医薬品に対するプラスの臨床反応に関連した遺伝子座の同定のために実施できる。
【０３７２】
たとえば、うつ病治療用には多くの薬物が販売されており、それらにはＳＳＲＩ（選択的セロトニン再．取込み抑制剤）、ＴＣＡ（三環系抗うつ薬）、ＭＡＯＩ（モノアミンオキシダーゼ阻害剤）、およびトリアゾロピリジン類が含まれる。関連研究は、それらのタイプの薬物の各々の効力に関連した多型遺伝子座の同定のために実施でき、さらにそれらの遺伝子座は、患者集団のスクリーニングに用いてどの薬物クラスが個体に最も効能を示すかを求めるのに用いられる。薬物ごとに、症例群は対象薬物に効能反応を示したうつ病患者を含み、対照群は対象薬物に効能反応を示さなかったうつ病患者を含む。関連したＳＮＰは、対照群よりも症例群において有意に異なる対立遺伝子頻度を示すＳＮＰとして同定される。薬物クラスごとに、効能反応を示す場合が高率（たとえば、８０％超、または９０％超、または９５％超、または９８％超）である個人の同定のための閾値が定められる。抗うつ治療が必要な患者は、薬物タイプごとに関連したＳＮＰについてスクリーニングされ、臨床医は個体の遺伝子型情報、および薬物クラスごとに定めた閾値に基づき、個体に適した療法選択を定める。同種の研究およびスクリーニングは、インスリン感作物質に対しても行えることが分かるであろう。
【０３７３】
ＩＸ．商業的方法
本発明は商業的方法も提供する。
【０３７４】
対象薬物、たとえばインスリン感作物質の諸特性（有効性、安全性、および効能）に関する情報は、医薬品産業にとって極めて価値があり、臨床試験における失敗による金銭的損失から会社を守ることができる。その情報は、その薬物自体に関わる決定、または同じ薬物クラスに属する別の薬物に関わる決定、あるいはその両方において用いることができる。
【０３７５】
したがっていくつかの実施形態では、共同研究者または協力者（たとえば医薬品会社）は、本明細書の関連研究またはキット類を用いて、ゲノムおよび／または表現型の違い、とインスリン感作物質反応（またはその非反応）またはインスリン感作物質忍容性との間の関連づけを行うことができる。さらにインスリン感作物質反応の予測能によって、患者をさらに種々の群に分類することも可能になる。それらの群としてはたとえば、インスリン感作物質に反応する患者群−対−反応しない患者群、あるいはインスリン感作物質に対して毒性を伴わずに反応する患者群−対−薬物毒性が観察された患者群が挙げられる。このことは、そのような製薬会社にとって、マイナスの臨床試験結果を克服し、許認可を早め、損失を回収するのに有用であり得る。またこのことは、うまくいかない臨床試験、および報われない研究・開発努力における数百万ドル規模の損失を防ぐこともできる。
【０３７６】
したがって一つの実施形態では、治療に対しては、薬物に対する許容される反応を示すか、または示さない患者の分離（たとえば、副作用が予想される患者、有益効果が中程度と予想される患者、または有益効果が見られないことが予想される患者）が可能な本明細書に記載のキット類によるマーケッティングが可能である。薬理ゲノム学についての関連研究の使用方法についてはさらに、たとえば２００４年４月２８日提出の米国特許仮出願第６０／５６６３０２号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”；２００４年７月２２日提出の米国特許仮出願第６０／５９０５３４号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”；および２００４年９月３０日出願の米国特許出願第１０／９５６２２４号“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ”に開示されており、それらはすべての目的で参照されることによってすべて個々に取込まれるものとする。
【実施例】
【０３７７】
参考文献は、本発明の種々の実施形態および特定の適用に詳細に参照されると思われる。本発明は種々の実施形態および適用と共に記載されていると思われが、そのような実施形態および適用は本発明を限定するものではないことが理解されよう。反対に本発明は、本発明の精神および視野に入る代替物、修飾物および等価物をカバーするものとも言える。
【０３７８】
グリタゾン類、特にピオグリタゾン（Ａｃｔｏｓ（商品名））およびロシグリタゾン［Ａｖａｎｄｉａ（商品名）］での治療に対する反応のうちの浮腫に関連したＳＮＰの同定のために関連研究を行った。本研究から得られた知見によって、ヒトの生物学、疾患および薬物効果の理解を深める機会が提供される。特に興味深いことには、薬物選定のガイドおよび選定された患者亜集合に対する治療の標的化のための、薬理ゲノム学に基づいた試験の開発のために同定された遺伝子座の使用が挙げられる。
【０３７９】
チアゾリジンジオン療法の際に浮腫が見られた８２３名の被験者、ならびにそれが見られなかった２１７７名の被験者（対照用）から、唾液試料を採取した。それらの被験者から得られたＤＮＡについては、チアゾリジンジオン療法に対する二次的浮腫に関連したＳＮＰの発見に関連した全ゲノム研究に用いた。
【０３８０】
２名の治験管理者によって、全ゲノム解析に用いられる浮腫症例群の調整が行われた。浮腫症例群の選定には以下の評価基準が用いられた。すなわち、浮腫の重篤度（浮腫がわずかまたは軽度の症例は除外した）、臨床評価−対−被験者の苦痛の訴え（医師の評価が求められる）、ならびに医療上の介入（特に、グリタゾン投与量を下げる、グリタゾンの投薬中止、または利尿剤の投与開始）を浮腫の治療に含めた。集めた浮腫症例のうち、６６６名を、調整規準に基づく遺伝子型解析のために選んだ。集めた対象例のうち、１７２６名について、性別、薬物および用量、民族、ならびにインスリン使用者によって、浮腫症例を（集団に基づき）マッチングし、遺伝子型解析を行った。およそ１０００個の無作為に選択したＳＮＰについては、試料における集団構造の評価、および関連解析（Ｐｒｉｃｅ，Ａ．Ｌ．、Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ，Ｎ．Ｊ．，Ｐｌｅｎｇｅ，Ｒ．Ｍ．ら（２００６）Ｐｒｉｎｃｉｐａｌ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｃｏｒｒｅｃｔｓ  ｆｏｒ  ｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｇｅｎｏｍｅ−ｗｉｄｅ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｓｔｕｄｉｅｓ；Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ３８：９０４−９０９）での家系調整に用いた。各被験者ＤＮＡ試料について個別に遺伝子型解析を行い、全ゲノムを通しての２８７１６１個のＳＮＰの精査を行った。それらのＳＮＰは、コーカサスおよびアジアの両集団については、非平衡リンクで共通のＳＮＰのタグ化のために選定し；そのようなＳＮＰ亜集合が、ケノムを通した共通の変異のほとんどを捕捉することはすでに知られている（Ｈｉｎｄｓ，Ｄ．Ａ．，Ｓｔｕｖｅ，Ｌ．Ｌ．，Ｎｉｌｓｅｎ，Ｇ．Ｂ．ら（２００５）、Ｗｈｏｌｅ−ｇｅｎｏｍｅ  ｐａｔｔｅｒｎｓ  ｏｆ  ｃｏｍｍｏｎ  ＤＮＡ  ｖａｒｉａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｒｅｅ  ｈｕｍａｎ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ；Ｓｃｉｅｎｃｅ３０７，１０７２−１０７９）。
【０３８１】
全部で６６６名の症例群および１７２６名の対照群について遺伝子型解析を行い、得られた遺伝子型を解析し、浮腫発生に関連したＳＮＰ対立遺伝子および／またはハプロタイプを同定した。試料のすべてを増幅した。試料のうち、およそ２／３は「選択プローブ増幅」（２００５年２月１４日出願の米国特許出願第１１／０５８４３２号“Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  Ｐｒｏｂｅ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ”参照）を用いて増幅した。簡潔に言えば、選択プローブ増幅とは、単一媒体中での多重ユニーク選択プローブの使用によって、核酸試料から多重配列を単離または選択する技法のことである。選択プローブの各々は、考察対象の試料中に存在し得るユニーク標的配列に相補的である配列を持つ。一本鎖（たとえば、二本鎖を変性させたもの）選択プローブは、その選択プローブ配列に特異的な（たとえば、相補的な）ユニークな標的配列を持つ試料配列とアニールまたはハイブリダイズする。それらの選択プローブとアニールまたはハイブリダイズしない試料由来配列は、適当な技法によって結合した配列から分離される。次にその結合配列を解離させ、取扱いが可能になる単離標的配列混合物を得ることができる。選択プローブ増幅された試料は、標識化の前に、ＤＮアーゼ／１×Ｏｎｅ−Ｐｈｏｒ−Ａｌｌ緩衝液（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社製）を用いて断片化した。反応液を３７℃で６分間温置後、９５℃で５分間温置した。断片化の後で、試料を標識化した。断片化ＤＮＡ試料ごとに、４μｌの０．５ｍＭビオチンミックス（ｄｄＵＴＰ／ｄＵＴＰ；Ｒｏｃｈｅ社製）および２μｌのｒＴｄＴ（４００Ｕ／ｍｌ；末端デオキシヌクレオチジル−トランスフェラーゼ；Ｒｏｃｈｅ社製）を加えた。プレートをきれいなプラスチックシールでシールし、軽くボルテックスし、ＳＯＲＶＡＬＬ遠心分離機で１０００ｒｐｍ、１５分間処理して沈降させた。そのプレートをサーマルサイクラーに入れ、３７℃で９０分間温置後、９５℃で５分間温置した。９５℃での温置後、プレートを４℃で保持した。
【０３８２】
試料のうち、残りの約１／３は、多重（約２３２重）ショートレンジＰＣＲ（ＳＲ−ＰＣＲ）を用いて増幅した。多重ウエル（３８４ウエル）プライマープレートは各々、ウエルあたりに約４６４種のプライマーを含有し、それを室温で１５分間解凍させ、ＳＯＲＶＡＬＬ遠心分離機内で１０００ｒｐｍ、１分間沈降させた。標的ＤＮＡ含有のチューブを、ＥＰＰＥＮＤＯＲＦ遠心分離機内で１４０００ｒｐｍ、２０秒間沈降させた。ショートレンジＰＣＲ（ＳＲ−ＰＣＲ）反応液は、０．０６１ＭのＴｒｉｚｍａ、０．０１７Ｍの（ＮＨ４）２ＳＯ４、３．７ｍＭのＭｇＣｌ２、０．０３ＭのＴｒｉｃｉｎｅ、０．５６×のＥｎｈａｎｃｅｒ（Ｅｐｉｃｅｎｔｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）、４％のＤＭＳＯ、０．０５ＭのＫＣｌ、０．５４２ｍＭのｄＮＴＰミックス、２．０８×のＴＩＴＡＮＩＵＭ（登録商標）ＴａｑＤＮＡポリメラーゼ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ社製）、３．３μＭの各ＰＣＲプライマー（全部で約４６４種のプライマー、または約２３２種のプライマー対）、１５ｎｇの標的ＤＮＡ、ならびに適量のＭＩＬＬＩＰＯＲＥ水を含み、最終の全容を６μｌにする。ＳＲ−ＰＣＲは３８４穴プライマープレート（ここでは「ＰＣＲプレート」と呼ぶ）で行い、シール（ＰｌａｔｅＬｏｃを用い、１７３℃で２．５秒間（Ｖｅｌｏｃｉｔｙ１１社（米国、カリフォルニア州、メンロパーク市））し、氷上に置き、卓上型ＳＯＲＶＡＬＬ遠心分離機内で１０００ｒｐｍ、１５秒間遠心分離し、６秒間ボルテックスし、再び１０００ｒｐｍ、１５秒間遠心分離して沈降させた。シールされたＰＣＲプレートは、増幅前に氷上で保管した。サーマルサイクラーを予め９０℃に加熱後に、ＰＣＲプレートを配置した。ショートレンジＰＣＲのプログラムを表１２に示す。
【０３８３】
ＰＣＲが完了したら、ＰＣＲプレートをマシーンから取り出し、直ちにプールするか、または４℃で保存した（ＰＣＲ産物を１週間以上保存する場合は、−２０℃で保存した）。
【０３８４】
（表１３）
【０３８５】
【表１３】
2009509539.tif 000015
単一のＰＣＲプレート内のＰＣＲ産物については、共にプールした。ＰＣＲプレートのシールをプレート穿刺器で穿刺し、ＰＣＲプレートの各々の頂部に一個のプール用ボートを配置した。ＰＣＲプレートプール用ボートアッセンブリを反転させ、卓上型遠心分離機のバケット内に配置した。そのＰＣＲプレートを１０００ｒｐｍ、１分間遠心分離して沈降させ、ＰＣＲ産物をＰＣＲプレートからプール用ボートに移した。ＰＣＲプレートプール用アッセンブリを遠心分離機から取り出し、アッセンブリを渦流攪拌してプール用ボートの内容物を混合した（すなわち、ＰＣＲプレートからＰＣＲ産物をプールした）。プールしたＰＣＲ産物を、プール用ボートから、予めキャップしてそばに設置したＰＣＲプールチューブ内にデカントして移した。そのプールしたＰＣＲ産物は、直ちに用いるか、または４℃で保存した（プールしたＰＣＲ産物は、１週間以上保存する場合、−２０℃で保存した）。
【０３８６】
プール後に、プールした各々のＰＣＲ産物の１２５μｌを、９６穴ＰＣＲプレート（ここでは「ＳＡＰプレート」と呼ぶ）に移し、シールし、遠心分離機で沈降させた。ＰＣＲ産物の各々に対して、１５μｌの１０×Ｏｎｅ−Ｐｈｏｒ−Ａｌｌ緩衝液（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社製）および１０μｌの１Ｕ／μｌのＳＡＰ（Ｐｒｏｇｍａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社製）を加え、内容物を数回ピペッティングして混合した。ＳＡＰプレートをシールし、サーマルサイクラー内に配置し、３７℃で３０分間温置後、８０℃で２０分間温置した。８０℃での温置後、そのＳＡＰプレートを４℃で保持した。
【０３８７】
ＳＡＰ処理したＰＣＲ産物は、減圧フィルター装置を用いて精製した。最初に、ＳＡＰプレート内のウエルごとの全内容物（１５０μｌ）を、ＰＡＬＬ  ＡＣＲＯＰＲＥＰ  ３Ｋ減圧フィルタープレート（「精製プレート」）の別々のウエルに移した。その精製プレートの空のウエルを、プラスチックシールでシールした。精製プレートを減圧マニホールドの上部に配置し、減圧マニホールドのスイッチを入れた。減圧度は２０ｍｍＨｇ超になるように保持した。試料が乾燥するまで減圧を継続した。試料乾燥後に、減圧マニホールドのスイッチを切り、各ウエルに４０μｌの分子生物実験グレードの水を加えた。精製プレートをシールし、平面上において室温で最低３０分間温置し、その間にプレートを５分ごとに１分間ずつ低速でボルテックスした。プレートは場合により４℃で一晩温置してＤＮＡの回収を高めた。ウエル内の試料を用い、そのウエル内で３回膜洗浄した後、試料を「精製したＤＮＡプレート」に移した。その精製したＤＮＡプレートをプラスチックシールでシールした。精製ＰＣＲ産物を直ちに定量するか、または４度で保存した（生製ＰＣＲ産物を１週間以上保存する場合は、−２０℃で保存した）。
【０３８８】
精製したＤＮＡプレート内の精製ＰＣＲ産物は、吸光度（ＯＤ）読取り装置を用いて定量した。初めに、１９６μｌのＭＩＬＬＩＰＯＲＥ水を、平底のきれいなＧＲＥＩＮＥＲ９６穴ＯＤプレート（「定量プレート」）の各ウエルに入れた。精製したＤＮＡプレートをボルテックス処理し、ＳＯＲＶＡＬＬ  ＬＥＧＥＮＤ遠心分離機を用いて１５００ｒｐｍ、１５秒間沈降させた。その精製したＤＮＡプレートの各ウエルから、４μｌのＰＣＲ産物を定量プレートの対応する位置に移した。両方のプレートをＣＹＣＬＥプレートシールでシールした。定量プレートを、マルチチューブ型ボルテクサーを用いて１０−１５秒間ボルテックス処理し、ＳＯＲＶＡＬＬ  ＬＥＧＥＮＤ遠心分離機を用いて１５００ｒｐｍ、１５秒間沈降させた。そのＤＮＡ濃度については、メーカー指示書に従い、ＴＥＣＡＮマイクロプレートリーダーを用い、定量プレート内の希釈試料のＯＤを計測して求めた。
【０３８９】
ＳＡＰ処理したＰＣＲ産物を標識化して、ハイブリダイゼーション後の検出を可能にした。ＤＮＡ標識プレートの各ウエルには以下の成分が含まれる。すなわち、４５μｌのビオチンミックス（ｄｄＵＴＰ／ｄＵＴＰ）（Ｒｏｃｈｅ社製）、１×Ｏｎｅ−Ｐｈｏｒ−Ａｌｌ緩衝液、２４Ｕ／μｌのＴｄＴ（末端デオキシヌクレオチジル−トランスフェラーゼ；Ｒｏｃｈｅ社製）、３２μｇのＳＡＰ処理ＰＣＲ産物、およびＭＩＬＬＩＰＯＲＥ水によって最終容量を５０μｌとする。反応混合物を、数回ピペッティングして混合し、ＤＮＡ標識プレートをプラスチックシールでシールした。そのＤＮＡ標識プレートをサーマルサイクラー内に配置し、３７℃で９０分間保持し、９９℃で１０分間加熱後、冷却して４℃に保持した。標識化後、標識化ＰＣＲ産物（すなわち「標識化標的ＤＮＡ」）を、直ちにオリゴヌクレオチドアレイにハイブリダイズさせるか、または−２０℃で保存した。
【０３９０】
すべての試料を、オリゴヌクレオチドアレイ（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ社（米国、カリフォルニア州、サンタクララ市）製）にハイブリダイズさせた。試料のＳＰＡ処理用には、ハイブリダイゼーション反応混合物の成分の最終濃度を、３．０ＭのＴＭＡＣＩ、１０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．８または８．０）、０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００、０．０５ｎＭのｂ−９４８コントロールオリゴ、３．７％のホルムアミド、１６６３μｇ／ｍｌのヘリング精子ＤＮＡ、９２．５９μｇ／ｍｌのアンチセンスオリゴ、および１８５．１９μｇ／ｍｌの標識化標的で、全容を２７０μｌとした。ＰＣＲ増幅産物用には、ハイブリダイゼーション反応混合物の成分の最終濃度を、２．８ＭのＴＭＡＣＩ、９．２ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．８または８．０）、０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００、０．０５ｎＭのｂ−９４８コントロールオリゴ、５．１％のホルムアミド、３６５．０４μｇ／ｍｌのヘリング精子ＤＮＡ、および１１７．９９μｇ／ｍｌの標識化標的で、全容を２７１．２μｌとした。その内容物を数回ピペッティングして混合した。
【０３９１】
それらの試料を、「ウエハー」と呼ばれるオリゴヌクレオチドマイクロアレイ（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ社（米国、カリフォルニア州、サンタクララ市）製）にハイブリダイズさせた。ウエハーは各々、４９アレイのオリゴヌクレオチドプローブを含み、それらの各々は単一のＤＮＡチップ（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ社（米国、カリフォルニア州、サンタクララ市）製）と当量である（実際に、チップはウエハーからアレイをカットして製造され、それぞれがパッケージングされている）。一つのハイブリダイゼーション反応混合物を、ウエハー上の第一アレイ内に移した。その工程を、ほかのすべてのハイブリダイゼーション反応混合物に対しても繰返して行った（これによって、ウエハー上のアレイの各々には、ただ一つのハイブリダイゼーション反応混合物が入る）。それらのウエハーを、ロティスリー型インキュベーター（「ハイブリダイゼーションオーブン」）内、約２０ｒｐｍで４８℃、一晩（約２２−２４時間）温置した。
【０３９２】
ロティスリ型インキュベータからウエハーを回収し、フローセル内に集め、染色用流体ステーション上に配置した。染色前にそのウエハーを、１×ＭＥＳおよび０．０１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００の溶液を用いて室温でリンスした。３種類の染色液を用い、各染色工程後にフローセルを排液させ、ウエハーを１×ＭＥＳおよび０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００の溶液でリンスした。尚、その染色およびリンス工程は室温で行った。ウエハーに適用した第一の染色溶液は、１×ＭＥＳ、０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００、２．５ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、および５μｇ／ｍｌのストレプトアビジンとした。ウエハーに適用した第二の染色溶液は、１×ＭＥＳ、０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００、２．５ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、および１．２５μｇ／ｍｌのビオチン化抗ストレプトアビジン抗体とした。ウエハーに適用した第三の染色溶液は、１×ＭＥＳ、０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００、２．５ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、および１μｇ／ｍｌのストレプトアビジン−Ｃｙ−クロームとした。染色後に、１×ＭＥＳおよび０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００の溶液で最終のリンスを行い、ウエハーを厳格に洗浄した。ウエハーを、６×ＳＳＰＥおよび０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００の溶液で、約３７℃にて２回洗浄後、０．２×ＳＳＰＥおよび０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００の溶液で、約３７℃で洗浄し、直ちに１×ＭＥＳおよび０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００の溶液でリンスした。次にフローセルを０．２×ＳＳＰＥで満たし、約３７℃の対流式オーブン内に１時間配置した。最後に、０．２×ＳＳＰＥを取除き、ウエハーを１×ＭＥＳおよび０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００の溶液でリンスした。フローセルの排液を行った後、新たに１×ＭＥＳおよび０．０１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００の溶液でフローセル内を再び満たした。ウエハーの染色および洗浄の後に、ウエハーを流体ステーションから取り出し、バックプレートをフローセルアッセンブリに付け、スキャン用のスキャナー室に持ち込んだ。
【０３９３】
レーザーを１５分間予熱後に、スキャンを開始した。ウエハーをアークスキャナーでスキャンし、収束によって画像が現われる場合、またはスキャンの調整が不良の場合にはスキャナーを調節してスキャンを再び開始した。スキャンが成功した場合、そのＤＡＴファイルをデータベースに提示させた。ウエハーをスキャナープラットホームから取り出し、不必要になるまで４℃の冷蔵庫で保存した。それらのＤＡＴファイルを分析して、ＳＮＰ配置ごとに、各個人の遺伝子型を求め、症例群（浮腫が見られた患者）における対立遺伝子頻度を、対照群のそれと比較してチアゾリジンジオン療法に対する反応における浮腫の発生の増大に関連したＳＮＰおよびハプロタイプパターンを定めた（２００４年１０月２０日出願の米国特許出願第１０／９７０７６１号“Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ”；および２００５年７月１日出願能米国特許出願第１１／１７３８０９号“Ａｌｇｏｒｉｓｍ  ｆｏｒ  Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ  Ａｃｃｕｒａｃｙ  ｏｆ  Ｇｅｎｏｔｙｐｅ  Ａｓｓｉｇｎｍｅｎｔ”参照）。
【０３９４】
浮腫に関連したＳＮＰ遺伝子型解析試験は、共通変数としての集団構造を提示する主要要素を含めた多重リスクモデルの下、遺伝子型に対する浮腫の状態の論理的回帰（Ｐｒｉｃｅ．Ａ．Ｌ．，Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ，Ｎ．Ｊ．，Ｐｌｅｎｇｅ，Ｒ．Ｍ．ら（２００６）Ｐｒｉｎｃｉｐａｌ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｃｏｒｒｅｃｔｓ  ｆｏｒ  ｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｇｅｎｏｍｅ−ｗｉｄｅ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｓｔｕｄｉｅｓ；Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ３８：９０４−９０９）に基づいて行った。全部で３４５個のＳＮＰを同定し、ＳＮＰ遺伝子型に対抗する浮腫の関連解析におけるｐ値は０．００１未満であった。それらのＳＮＰについては、前述のように表９−１１に示す。ＳＮＰごとに同定物が得られ（ＮＣＢＩｄｂＳＮＰデータベース（Ｎｃｂｉ．ｎｉｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ．／ｐｒｏｊｅｃｔｓ／ＳＮＰ）内のｒｓＩＤおよびｓｓＩＤ）、それらはヒトゲノム（ＮＣＢＩ  Ｂｕｉｌｄ３５）上に配置された。また症例群および対照群での対立遺伝子頻度、評価された選好確立比、遺伝子へのＳＮＰのマッピング、ならびに関連試験のｐ値も得られた。
【０３９５】
ヘテロ接合体の確立比については、傾向をもたらす対立遺伝子（「関連対立遺伝子」）のコピーを持たない被検者における浮腫の確率とは分けて、傾向をもたらす対立遺伝子（「関連対立遺伝子」）のコピーを１個持つ被験者における浮腫の確率として規定される。まれな形質については、ヘテロ接合体の確率比は、傾向をもたらす対立遺伝子を持たない被検者におけるリスクに対する、傾向をもたらす対立遺伝子を１コピー持つ被検者における形質提示のリスクの比である対立遺伝子ヘテロ接合体相対リスクに密接に関連している。論理的な回帰は、遺伝リスクの多重モデル下で、確率比の評価のもととなる関連解析用のツールの一つであり、浮腫形質の偏りの解析は、集団構造および実験変動性を提示する主要な要素に対する調節が行われ、関連有意性を評価するのに用いた。ｐ値は、ＳＮＰ遺伝子型に寄与し得る逸脱性が、遺伝子型と浮腫との間の真の関連性がない場合に観察される逸脱性と同じく極端であると考えられるものに類する。
【０３９６】
ハプロタイプ解析は、浮腫に大いに関連したハプロタイプパターンの発見のためにも行われた。遺伝子型データを同期させる（すなわち、各ＳＮＰのどの対立遺伝子がどの染色体上にあるかを求めること）ために、ｆａｓｔＰＨＡＳＥプログラム（Ｓｃｈｅｅｔ，Ｐ．，Ｓｔｅｐｈｅｎｓ，Ｍ．（２００６）Ａ  ｆａｓｔ  ａｎｄ  ｆｌｅｘｉｂｌｅ  ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ｌａｒｇｅ−ｓｃａｌｅ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｇｅｎｏｔｙｐｅ  ｄａｔａ：Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｉｎｆｅｒｒｉｎｇ  ｍｉｓｓｉｎｇ  ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  ｈａｐｌｏｔｙｐｉｃ  ｐｈａｓｅ；Ａｍ。Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ７８，６２９−６４４）を用いた。ハプロタイプのサンプリングから得られたハプロタイプ対立遺伝子頻度については、最大に近い推定値から得られるハプロタイプの使用に関する問題を除くための関連検定に用いた。ハプロタイプの傾向回帰検定（Ｚａｙｋｉｎ，Ｄ．Ｖ．，Ｗｅｓｔｆａｌｌ，Ｐ．Ｈ．，Ｙｏｕｎｇ，Ｓ．Ｓ．，Ｋａｒｎｏｕｂ，Ｍ．Ｃ．，Ｗａｇｎｅｒ，Ｍ．Ｊ．，Ｅｈｍ，Ｍ．Ｇ．（２００２）、Ｔｅｓｔｉｎｇ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ  ｉｎｆｅｒｒｅｄ  ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ  ｗｉｔｈ  ｄｉｓｃｒｅｔｅ  ａｎｄ  ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  ｔｒａｉｔｓ  ｉｎ  ｓａｍｐｌｅｓ  ｏｆ  ｕｎｒｅｌａｔｅｄ  ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ；Ｈｕｍａｎ  Ｈｅｒｅｄｉｔｙ５３，７９−９１）は、サイズ１−９のハプロタイプスライド性ウインドウのすべてに対して行ったが、極めて低い頻度（＜５％）のハプロタイプ対立遺伝子は無視した。表現型の置換えについては、行われた試験数に対する有意推定値を調整するために実施した。
【０３９７】
ハプロタイプの解析は、３６４の浮腫症例および７５１の対照例の中規模データ集合に関して最初に行った。有意な関連性がある（ｐ値が１．１×１０−８）ＳＮＰが６個の一つのハプロタイプについては、ハプロタイプ頻度７．２％で第１４染色体（遺伝子：ＳＥＲＰＩＮＡ１０およびＳＥＲＰＩＮＡ６）上で同定された。同じハプロタイプについて、残りの試料（２７８の浮腫症例および９２５の対照例）に対する関連性検定を行った結果、ｐ値は０．０２９であり、相対リスクは約１．４であった。その第二の試料集合では、ハプロタイプ頻度は６．８％であった。関連ハプロタイプ中の６個のＳＮＰのうちの３個は、ＳＥＲＰＩＮＡ１０中の非同義性ＳＮＰである。
【０３９８】
ＳＥＲＰＩＮＡ１０（セルピンペプチダーゼ阻害物質、クラスＡ，メンバー１０）は、活性型血液凝固因子である第Ｘ因子および第ＸＩ因子を抑制する蛋白質をコードする。この遺伝子内のナンセンス突然変異は、静脈血栓症に関連している。ＳＥＲＰＩＮＡ６（セルピンペプチダーゼ阻害物質、クラスＡ、メンバー６）は、コルチコステロイド結合特性を持つ蛋白質をコードし、インスリン抵抗性および軽度の炎症の療法のインシケータであり得る。
【０３９９】
ＳＮＰが６個のハプロタイプについては、有意な関連性を持つほかのＳＮＰ（表９−１１）と共に、たとえばチアゾリジンジオン療法に対する反応において、浮腫の傾向を有する患者の同定用の診断製品の開発、あるいは薬物反応についての生物学的基礎のさらなる研究のために使用できる。
【０４００】
本発明の好ましい実施形態については、すでに本明細書に示し、記載されているが、そのような実施形態が実施例を経由してのみ提供されることは、当業者であるならば明白であろう。多くの変更、変化および置換えについても、当業者であるならば、本発明から逸脱せずに行われるであろう。本明細書に記載の本発明の実施形態に対する種々の代替物を、本発明の実施に用いることができることがわかるであろう。以下の請求項は、本発明の視野を規定し、請求項およびその等価物の視野に入る方法および構造が、請求項によってカバーされるものとする。
【０４０１】
【表９−１】
2009509539.tif 000016
【０４０２】
【表９−２】
2009509539.tif 000017
【０４０３】
【表９−３】
2009509539.tif 000018
【０４０４】
【表９−４】
2009509539.tif 000019
【０４０５】
【表９−５】
2009509539.tif 000020
【０４０６】
【表９−６】
2009509539.tif 000021
【０４０７】
【表９−７】
2009509539.tif 000022
【０４０８】
【表１０−１】
2009509539.tif 000023
【０４０９】
【表１０−２】
2009509539.tif 000024
【０４１０】
【表１０−３】
2009509539.tif 000025
【０４１１】
【表１０−４】
2009509539.tif 000026
【０４１２】
【表１１−１】
2009509539.tif 000027
【０４１３】
【表１１−２】
2009509539.tif 000028
【０４１４】
【表１１−３】
2009509539.tif 000029
【０４１５】
【表１１−４】
2009509539.tif 000030
【０４１６】
【表１１−５】
2009509539.tif 000031
【０４１７】
【表１１−６】
2009509539.tif 000032
【０４１８】
【表１１−７】
2009509539.tif 000033
【図面の簡単な説明】
【０４１９】
本発明の新規性については、特に添付の請求項の中で述べられる。本発明の特徴および有益性をより深く理解するには、本発明の本質的事項で用いられている説明のための実施例で示される以下の詳細な記述、ならびに付随する図面を参照すると達成できる思われる。
【図１】図１は、本発明の方法および組成物において、データの入力、処理、表示、保存および転送に用いることが可能なシステムの高水準ブロックダイヤグラムである。
【図２】図２は、第一の薬物の臨床試験に併用する場合の、第二の薬物の臨床試験の調整工程を示すフローチャートである。
【図１】
2009509539.tif 000034
【図２】
2009509539.tif 000035
【配列表】
2009509539000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成20年6月20日(2008.6.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2009509539000001.app
【国際調査報告】
2009509539.tif 000036
2009509539.tif 000037