(57)【要約】式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容できる塩並びにそのプロドラッグは、キナーゼにより媒介される様々な障害の治療及び予防に有用である。特に望ましい特性を有する化合物は、Ｎ１置換基として第一級アルコール基−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、及び３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル基を含む５位の特定の置換基を選択することによって得ることができることが今回見いだされた。本発明は、１つ又は複数のキナーゼ並びにサイトカイン産生、血管新生又は細胞増殖などのキナーゼ媒介性事象を阻害する化合物を提供する。そのような化合物は、キナーゼシグナリング経路の阻害によって治療することができる疾患の治療薬としての実用性を有する。2009525330.tif 000036
2009525330.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
2009525330.tif 000028
を有する化合物又は製薬上許容できるその塩。
【請求項２】
（ａ）式ＩＩ
【化２】
2009525330.tif 000029
の化合物又はその塩［式中、Ｐ１は、水素原子又はヒドロキシル保護基を表す］を式ＩＩＩ
【化３】
2009525330.tif 000030
［式中、Ｚは、脱離基又は対応するイソシアナートを表す］の化合物とカップリングさせること、或いは
（ｂ）式ＩＶ
【化４】
2009525330.tif 000031
［式中、Ｒｅは、水素原子又はアルコールの残基を表す］の化合物を還元し、
その後、任意の保護基を除去し、所望ならば、製薬上許容できる塩を生成させることを含む、請求項１に記載の化合物を製造する方法。
【請求項３】
請求項１に記載の化合物及び製薬上許容できる担体又は希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項４】
薬剤として使用するための、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
哺乳動物におけるキナーゼ媒介性状態の治療用の薬剤の製造における、請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項６】
前記キナーゼ媒介性状態が、炎症性疾患、自己免疫疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染症、ウイルス性疾患又は神経変性疾患である、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
哺乳動物におけるキナーゼ媒介性状態を治療する方法であって、前記キナーゼ媒介性状態を治療するのに有効な量で請求項１に記載の化合物を哺乳動物に投与することを含む、方法。
【請求項８】
前記キナーゼ媒介性状態が、炎症性疾患、自己免疫疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染症、ウイルス性疾患又は神経変性疾患である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
式ＩＩ
【化５】
2009525330.tif 000032
の化合物又はその塩［式中、Ｐ１は、水素原子又はヒドロキシル保護基を表す］。
【請求項１０】
式ＩＶの化合物
【化６】
2009525330.tif 000033
［式中、Ｒｅは、水素原子又はアルコールの残基を表す］。
【請求項１１】
哺乳動物におけるキナーゼ媒介性状態の請求項１に記載の化合物による治療のための薬剤の製造における、請求項１に記載の化合物のプロドラッグの使用。
【請求項１２】
前記プロドラッグが、２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチル二水素ホスフェート又は製薬上許容できるその塩である、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
前記キナーゼ媒介性状態が、炎症性疾患、自己免疫疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染症、ウイルス性疾患又は神経変性疾患である、請求項１１又は請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
請求項１に記載の化合物により哺乳動物におけるキナーゼ媒介性状態を治療する方法であって、前記キナーゼ媒介性状態を治療するのに有効な量で請求項１に記載の化合物のプロドラッグを哺乳動物に投与することを含む、方法。
【請求項１５】
前記キナーゼ媒介性状態が、炎症性疾患、自己免疫疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染症、ウイルス性疾患又は神経変性疾患である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記プロドラッグが、２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチル二水素ホスフェート又は製薬上許容できるその塩である、請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチル二水素ホスフェート又は製薬上許容できるその塩。
【請求項１８】
請求項１に記載の化合物をリン酸化することを含む、請求項１７に記載の化合物を製造する方法。
【請求項１９】
請求項１７に記載の化合物及び製薬上許容できる担体又は希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項２０】
Ｚが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＮＯ２から選択される１つ又は複数の基で場合によって置換されているアリールオキシ基である、請求項２に記載の方法。
【請求項２１】
式（ＩＩ）の前記化合物が、
（ｉ）式（Ｖ）
【化７】
2009525330.tif 000034
［式中、Ｐ２は、水素又はヒドロキシル保護基を表す］の化合物を接触水素化条件下で、又はホウ化ニッケルの存在下で還元するステップ
を含む方法により製造された、請求項２に記載の方法。
【請求項２２】
式ＩＩＩの化合物
【化８】
2009525330.tif 000035
［式中、Ｚは非置換又は置換アリールオキシ基を表す］。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２００６年１月３１日に出願された米国仮特許出願第６０／７６３，７１２号の利益を主張する。米国仮特許出願第６０／７６３，７１２号は、本明細書中にその全体が援用される。
【０００２】
１．発明の分野
本発明は、キナーゼ阻害剤、該阻害剤を含む医薬組成物及びこれらの阻害剤を製造する方法に関する。本発明のキナーゼ阻害剤は、炎症、骨関節症、慢性関節リウマチ、癌、自己免疫疾患及び他のサイトカイン媒介性疾患の治療に有用である。
【背景技術】
【０００３】
２．当該分野の状況の説明
多くの慢性及び急性炎症状態は、先行性炎症サイトカインの過剰産生に関連づけられた。そのようなサイトカインは、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ−１β）、インターロイキン８（ＩＬ−８）及びインターロイキン６（ＩＬ−６）を含むが、これらに限定されない。慢性関節リウマチ（ＲＡ）は、ＴＮＦ−α及びＩＬ−１βが疾患の発症及びこの衰弱性状態に伴って認められる骨及び関節の破壊の進行に関連づけられる慢性疾患である。ＲＡに対する最近承認された治療法は、可溶性ＴＮＦ−α受容体（ＥＮＢＲＥＬ（商標））及びＩＬ−１受容体拮抗薬（ＡＮＡＫＩＮＲＡ（商標））を含んでいた。これらの治療法は、それらの各サイトカインがそれらの天然受容体に結合する能力を遮断することにより効果を現す。サイトカイン媒介性疾患を治療する別の方法は、現在研究中である。そのような１つの方法は、ｐ３８などの前炎症性サイトカインの合成及び産生を調節するシグナリング経路の阻害を含む。
【０００４】
ｐ３８（ＣＳＢＰ又はＲＫとしても知られている）は、前炎症性サイトカインを調節することが示されたセリン／トレオニンマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）である。ｐ３８ＭＡＰＫは、リポ多糖（ＬＰＳ）で処理した後にマウス単球においてリン酸化されたチロシンになるキナーゼとして最初に同定された。ｐ３８ＭＡＰＫとサイトカインに対する細胞の反応との関連性は、Ｓａｋｌａｔｖａｌａら（Ｃｅｌｌ、１９９４年、第７８巻、１０３９〜１０４９頁）により最初に立証された。彼らは、ＩＬ−１が、おそらくマイトジェン活性化タンパク質活性化プロテインキナーゼ２（ＭＡＰＫＡＰキナーゼ−２）による小熱ショックタンパク質Ｈｓｐ２７のリン酸化をもたらすプロテインキナーゼカスケードを活性化することを示した。精製キナーゼから得られたペプチドの分析により、それがマウス単球においてＬＰＳにより活性化されたｐ３８ＭＡＰＫに関連していたことが示された（Ｈａｎ  Ｊ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、１９９４年、第２６５巻、８０８〜８１１頁）。同時に、ｐ３８ＭＡＰＫはそれ自体、ＵＶ放射線への曝露及び浸透性ショックを含む様々な細胞ストレスに反応して上流キナーゼにより活性化されることが示され、Ｈｓｐ２７を直接リン酸化するキナーゼの本体はＭＡＰＫＡＰキナーゼ−２と確認された（Ｒｏｕｓｅ  Ｊ．ら、Ｃｅｌｌ、１９９４年、第７８巻、１０２７〜１０３７頁）。その後、ｐ３８ＭＡＰＫは、ＬＰＳチャレンジヒト単球からのＴＮＦの産生を抑制する一連のピリジニルイミダゾール化合物の分子標的であったことが示された（Ｌｅｅ  Ｊ．ら、Ｎａｔｕｒｅ、第３７２巻、７３９〜７４６頁）。これは、重要な発見であり、ｐ３８ＭＡＰＫの多くの選択的阻害剤の開発及びサイトカインシグナリングにおけるその役割の解明につながった。
【０００５】
それぞれが別個の遺伝子によってコードされる複数の形のｐ３８ＭＡＰＫ（α、β、γ、δ）が、浸透性ストレス、ＵＶ光及びサイトカイン媒介性事象を含む様々な刺激に対する細胞の反応に関与するキナーゼカスケードの一部を構成することは現在よく知られている。ｐ３８のこれらの４つのイソ型は、細胞内シグナリングの異なる側面を調節すると考えられている。ｐ３８の活性化は、ＴＮＦ−αのような前炎症性サイトカインの合成及び産生につながるシグナリング事象のカスケードの一部である。ｐ３８は、他のキナーゼ及び転写因子を含む下流基質をリン酸化することによって機能する。ｐ３８ＭＡＰＫを阻害する物質は、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−８及びＩＬ−１βｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏモデルを含むが、これらに限定されないサイトカインの産生を阻止することが示された（Ａｄａｍｓ  Ｊ．  Ｌ．ら、Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００１年、第３８巻、１〜６０頁）。
【０００６】
Ａｂｌ（アブレソンとしても知られている）は、造血細胞中で発現し、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）を含む様々な液性腫瘍の進行に関連づけられている。トランスフォーメーションは、フィラデルフィア染色体として知られている染色体転座の結果である。これは、アブレソンと切断点クラスター領域（ＢＣＲ）との間の構成的に活性化されたキメラ、すなわち、Ａｂ１−ＢＣＲタンパク質を生じさせる。イマチニブ（Ｉｍａｔｉｎｉｂ）としても知られているＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）は、Ａｂｌの強力な阻害薬であり、ＣＭＬ患者を治療するために現在用いられている（Ｎ．  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．、２００１年、第３４４巻、１０３１〜１０３７頁）。この薬物は、この致命的な疾患の治療基準となっており、胃腸支質腫瘍（ＧＩＳＴ）を含む他の様々な癌の状況においても注目されている。
【０００７】
線維芽細胞がＡｂ１経路を刺激することにより成長因子タンパク質ＴＧＦ−βに反応し、線維症を示唆する形態の変化をもたらすという証拠が存在し、したがって、Ａｂ１は、特発性肺線維症のような線維症性疾患の病院において役割を果たしている可能性がある。Ｌｅｏｆら（Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．、２００４年、第１１４巻（９号）、１３０８〜１３１６頁）は、マウスにおける肺線維症のブレオマイシン媒介性モデルにおけるＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）の前臨床有効性を実証した。ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）は、肺線維症を有する患者において評価されつつある
ＴＥＫ（Ｔｉｅ−２としても知られている）は、血管新生において役割を果たしていることが示された内皮細胞上においてのみ発現する他の受容体チロシンキナーゼである。アンジオポエチン−１因子の結合は、ＴＥＫのキナーゼドメインの自己リン酸化をもたらし、内皮細胞と内皮周囲支持細胞（ｐｅｒｉ−ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｓｕｐｐｏｒｔ  ｃｅｌｌｓ）との相互作用を媒介し、それにより、新たに形成された血管の成熟を促進すると思われるシグナル伝達過程をもたらす。他方で、アンジオポエチン−２因子は、ＴＥＫに対するアンジオポエチン−１の作用に拮抗し、血管新生を妨害すると思われる（Ｍａｉｓｏｎｐｉｅｒｒｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、１９９７年、第２７７巻、５５〜６０頁）。Ｔｉｅ２は、腫瘍脈管由来血管においてアップレギュレートされ（Ｔｒｏｇｅｎ  Ｅ．  Ｂｒ．、Ｊ．  Ｃａｎｃｅｒ、１９９８年、第７７巻、５１〜５６頁）、また、それが造血癌において支持の役割を果たす可能性があるという証拠がある（Ｌ．  Ｎａｌｄｉｎｉら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ、２００５年、第８巻、２１１〜２２６頁；Ｓｕｄａ  Ｔ．ら、Ｃｅｌｌ、２００４年、第１１８巻、１４９〜１６１頁）。癌におけるその可能な役割に加えて、血管新生は、慢性関節リウマチ（ＲＡ）、乾癬のような疾患及び炎症推進性病状の進行にも関連性を有する。関節炎の進行の原因である破壊的病変であるパンヌスの形成は、一部は新たな血管形成によって推進され、Ｌｉｎ  Ｃ．らによる最近の論文（Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ、２００５年、第５２巻（５号）、１５８５〜１５９４頁）は、ＲＡのマウスコラーゲン誘発性関節炎モデルにおけるＴｉｅ２の病理学的役割を立証している。したがって、Ｔｉｅ２の阻害は、増殖性及び炎症性疾患に対する有用な効果をもたらす可能性がある。
【０００８】
他のいくつかのキナーゼは、癌のような増殖性疾患の進行に関連づけられた。これらのうち、多くのＳｒｃファミリーメンバータンパク質は、Ｓｒｃと同様な役割を果たすことが示されており、制御されていない細胞増殖時に平行シグナリング経路を提供する可能性がある。主要な例としては、チロシンキナーゼＬｙｎ、Ｆｙｎ、Ｌｃｋ及びＨｃｋなどがある。Ｌｙｎ及びＨｃｋは、Ｂ細胞の造血癌であるＢ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）の進行に関連づけられた（Ｌｉ  Ｓ．ら、Ｎａｔ  Ｇｅｎｅｔ．、２００４年、第３６巻（５号）、４５３〜４６１頁）。
【０００９】
チロシンキナーゼ受容体のＥｐｈ（エリスロポエチン産生肝癌増幅配列）ファミリーは、多くの細胞過程をもたらすエフリンに結合する。Ｅｐｈは、腫瘍細胞の付着及び運動性及び浸潤性を変調する役割を果たしているように思われ、いくつかの証拠により、病的過程における新血管新生におけるＥｐｈ及びエフリンの能動的役割が実証されている。ＥｐｈＡ受容体は、肺、腎臓及び胃腫瘍血管系において過剰発現しており、優性阻害可溶性ＥｐｈＡ２又はＡ３タンパク質は、腫瘍血管新生及び進行をｉｎ  ｖｉｖｏで変調することが示された（Ｌａｃｋｍａｎｎ  Ｍ．ら、ＩＵＢＭＢ  ｌｉｆｅ、２００５年、第５７巻（６号）、４２１〜３１頁）。
【００１０】
血管内皮成長因子並びにそれらの同族受容体、例えば、ＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ２）及びＦＬＴ１（ＶＥＧＦＲＲ１）は、血管新生の重要な調節因子である。タンパク質治療薬ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）は、結腸癌において有望であることが示され、ＶＥＧＦＲ経路を介して作用する。ＳＵＴＥＮＴ／ＳＵ１１２４８（マレイン酸スニチニブ）（Ｐｆｉｚｅｒ）は、強力なＫＤＲ阻害薬であり、ＧＩＳＴ及び腎細胞癌に対する有望な結果を示した。
【００１１】
末梢血単球（ＰＢＭＣ）は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでリポ多糖（ＬＰＳ）で刺激したとき、前炎症性サイトカインを発現させ、分泌することが示された。Ｐ３８阻害薬は、ＬＰＳによる刺激の前にＰＢＭＣをそのような化合物で前処理するとき、この作用を効率よく妨げる（Ｌｅｅ  Ｊ．  Ｃ．ら、Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．、１９８８年、第１０巻、８３５〜８４３頁）。炎症性疾患の動物モデルにおけるＰ３８阻害薬の有効性がこれらの阻害薬の作用の説明となり得る基礎をなすメカニズムの研究を促すものとなった。ＩＬ−１及びＴＮＦに対する細胞の反応におけるｐ３８の役割は、ピリジニルイミダゾール阻害薬を用いて、炎症反応に関連する多くの細胞系、すなわち、内皮細胞及びＩＬ−８（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ  Ｓ．ら、Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｅｘｐ．  Ｔｈｅｒ．、２００１年、第２９３巻、３７０〜３７５頁）、線維芽細胞及びＩＬ−６／ＧＭ−ＣＳＦ／ＰＧＥ２（Ｂｅｙａｅｒｔ  Ｒ．ら、ＥＭＢＯ  Ｊ．、１９９６年、第１５巻、１９１４〜１９２３頁）、好中球及びＩＬ−８（Ａｌｂａｎｙａｎ  Ｅ．  Ａ．ら、Ｉｎｆｅｃｔ．  Ｉｍｍｕｎ．、２０００年、第６８巻、２０５３〜２０６０頁）、マクロファージ及びＩＬ−１（Ｃａｉｖａｎｏ  Ｍ．及びＣｏｈｅｎ  Ｐ．、Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２０００年、第１６４巻、３０１８〜３０２５頁）並びに平滑筋細胞及びＲＡＮＴＥＳ（Ｍａｒｕｏｋａ  Ｓ．ら、Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．、１９９９年、第１６１巻、６５９〜６６８頁）において検討された。多くの疾患状態の破壊的影響は、前炎症性サイトカインの過剰産生によって引き起こされる。ｐ３８阻害薬にこの過剰産生を調節する能力があるので、ｐ３８阻害薬は疾患修飾薬の優れた候補である。
【００１２】
ｐ３８ＭＡＰＫの既知の阻害薬は、広く認識されている様々な疾患モデルにおいて有効である。ｐ３８ＭＡＰＫの阻害薬は、ラットコラーゲン誘発性関節炎（非特許文献１）、ラットアジュバント誘発性関節炎（非特許文献２、非特許文献３）及びマウスにおけるカラゲエニン誘発性足蹠浮腫（非特許文献４）などの炎症の多くの標準的動物モデルにおいて正の効果を示す。ｐ３８の機能を遮断する分子は、これらの動物モデルにおける骨吸収、炎症並びに他の免疫及び炎症に基づく病状の抑制に有効であることが示された。
【００１３】
したがって、安全かつ有効なキナーゼ阻害剤は、１つ又は複数のキナーゼの変調によって制御することができる衰弱性疾患を治療する手段を提供すると思われる。
【００１４】
特許文献１は、キナーゼ阻害剤としての特定の化合物を開示している。特にこれらの化合物は、ピラゾール−５−イル尿素基を含む５位における置換基を有する特定のＮ１置換インダゾール誘導体である。そのような化合物の例としては、Ｎ１置換基がそれぞれメチル基及び２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル基である例９４及び１３８などである。
【特許文献１】国際公開第２００４／０７８１１６号パンフレット
【非特許文献１】Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｊ．  Ｒ．ら、Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｅｘｐ．  Ｔｈｅｒ．、１９９８年、第２８４巻、６８７〜６９２頁
【非特許文献２】Ｂａｄｇｅｒ  Ａ．  Ｍ．ら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．、２０００年、第４３巻、１７５〜１８３頁
【非特許文献３】Ｂａｄｇｅｒ  Ａ．  Ｍ．ら、Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｅｘｐ．  Ｔｈｅｒ．、（１９９６年）第２７９巻、１４５３〜１４６１頁
【非特許文献４】Ｎｉｓｈｉｋｏｒｉ  Ｔ．ら、Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．、２００２年、第４５１巻、３２７〜３３３頁
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
特に望ましい特性を有する化合物は、Ｎ１置換基として第一級アルコール基−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、及び３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル基を含む５位の特定の置換基を選択することによって得ることができることが今回見いだされた。
【００１６】
発明の概要
本発明は、１つ又は複数のキナーゼ並びにサイトカイン産生、血管新生又は細胞増殖などのキナーゼ媒介性事象を阻害する化合物を提供する。そのような化合物は、キナーゼシグナリング経路の阻害によって治療することができる疾患の治療薬としての実用性を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
発明の詳細な説明
１つの態様において、本発明は、式Ｉ
【００１８】
【化９】
2009525330.tif 000003
を有する化合物又は製薬上許容できるその塩を提供する。
【００１９】
該化合物は、化学名１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）ベンジル）尿素によっても記述することができる。
【００２０】
式Ｉの化合物は特定のキナーゼに対する改善された有効性を有することが見いだされた。さらに、Ｎ１置換基が式−ＣＨ２ＣＨ２ＯＰＯ３Ｈのホスフェート基で置換された対応する化合物の溶解度が式Ｉの化合物の溶解度より数桁大きいことが認められた。したがって、式Ｉの化合物は、可溶性のプロドラッグを創製するための特有の位置を有する。より詳細には、下の試験データにより示されるように、式Ｉの化合物はＷＯ２００４／０７８１１６の例９４及び１３８の化合物よりＡｂ１及びＴｉｅ２の有意に強力な阻害剤であることが見いだされた。さらに、ＷＯ２００４／０７８１１６の実施例９４及び１３８の化合物は、プロドラッグを得るために誘導体化することができる第一級アルコール基を有さない。
【００２１】
式Ｉの化合物に加えて、本発明は、化合物の製薬上許容できる塩、並びに化合物の溶媒和物及び製薬上許容できるその塩も含む。
【００２２】
「製薬上許容できる」という句は、物質又は組成物が製剤を含む他の成分に化学的かつ／又は毒性学的に適合し、かつ／又はそれにより哺乳動物が治療されることを示す。
【００２３】
「溶媒和物」は、１つ又は複数の溶媒分子と本発明の化合物との会合又は複合体を意味する。溶媒和物を形成する溶媒の例は、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸及びエタノールアミンを含むが、これらに限定されない。「水和物」という用語は、溶媒分子が水である複合体を意味する。
【００２４】
他の態様によれば、本発明は、哺乳動物におけるキナーゼ媒介性状態の治療用の薬剤の製造における式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００２５】
他の態様において、本発明は、キナーゼ媒介性状態を治療又は予防するために式Ｉの化合物を有効な量で投与することを含むキナーゼ媒介性状態を治療又は予防する方法を提供する。
【００２６】
式Ｉの化合物のプロドラッグも本明細書に記載する。
【００２７】
「プロドラッグ」は、生理的条件下又は加溶媒分解により、指定の化合物又はそのような化合物の塩に変換させることができる化合物である。
【００２８】
本発明の化合物の遊離ヒドロキシ基は、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、１９９６年、第１９巻、１１５頁に掲載されているように、ヒドロキシ基をホスフェート、ヘミスクシナート、ジメチルアミノアセタート又はホスホリルオキシメチルオキシカルボニル基など（これらに限定されない）の基に変換することによりプロドラッグとして誘導体化することができる。ヒドロキシ基の炭酸エステルプロドラッグ、スルホン酸エステル及び硫酸エステルと同様に、ヒドロキシ基のカルバミン酸エステルプロドラッグも含まれる。アシル基がエーテル、アミン及びカルボン酸官能性を含むが、これらに限定されない基で場合によって置換されているアルキルエステルであってもよく、或いはアシル基が上述のようなアミノ酸エステルである、ヒドロキシ基の（アシルオキシ）メチル及び（アシルオキシ）エチルエーテルとしての誘導体化も含まれる。この種のプロドラッグは、Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．、１９９６年、第３９巻、１０頁に記載されている。より具体的な例は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイルオキシメチル、１−（（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイルオキ）エチル、１−メチル−１−（（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイルオキ）エチル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシカルボニルオキシメチル、Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシカルボニルアミノメチル、スクシノイル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイル、α−アミノ（Ｃ１〜Ｃ４）アルカノイル、アリールアシル及びα−アミノアシル又はα−アミノアシル−α−アミノアシルなどの基によるアルコール基の水素原子の置換を含み、各α−アミノアシル基は、天然に存在するＬアミノ酸、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）２又はグリコシル（炭水化物のヘミアセタール形のヒドロキシ基の除去により生ずる基）から選択される。
【００２９】
したがって、他の態様によれば、本発明は、哺乳動物におけるキナーゼ媒介性状態の請求項１に記載の化合物による治療のための薬剤の製造における式Ｉの化合物のプロドラッグの使用を提供する。１つの実施形態において、プロドラッグはホスフェートプロドラッグである。
【００３０】
他の態様において、本発明は、キナーゼ媒介性状態を治療又は予防するのに有効な量の式Ｉの化合物のプロドラッグを哺乳動物に投与することを含む、式Ｉの化合物による哺乳動物におけるキナーゼ媒介性状態を治療又は予防する方法を提供する。１つの実施形態において、プロドラッグはホスフェートプロドラッグである。
【００３１】
他の態様によれば、したがって、本発明は、２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）−メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチル二水素ホスフェート又は製薬上許容できるその塩を提供する。
【００３２】
理論により拘束されることを望むことなく、ホスフェート化合物は対応する第一級アルコールのプロドラッグとして機能すると考えられる。
【００３３】
上記の通り、式Ｉの化合物のホスフェートは特に良好な溶解度を有することがわかっている。
【００３４】
「製薬上許容できる塩」は、特に断らない限り、指定の化合物の対応する遊離酸又は塩基の生物学的有効性を保持し、生物学的又は他の点で望ましくないことがない塩を含む。本発明の化合物は、十分に酸性の基、十分に塩基性の基又は両官能基を有し、それに応じて、多くの無機又は有機塩基若しくは酸のいずれかと反応して製薬上許容できる塩を形成することができる。製薬上許容できる塩の例は、本発明の化合物と鉱物若しくは有機酸又は無機塩基との反応により調製される塩を含み、そのような塩は、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、一水素リン酸塩、二水素リン酸塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオル酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン１，４−二酸塩、ヘキシン−１，６−二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩及びマンデル酸塩を含むが、これらに限定されない。本発明の単一化合物は、１つを超える酸又は塩基部分を含んでいてもよいので、本発明の化合物は、単一化合物にモノ、ジ又はトリ塩を含んでいてもよい。
【００３５】
本発明の化合物が塩基である場合、望ましい製薬上許容できる塩は、当技術分野で利用可能な適切な方法、例えば、酸性化合物、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸による、又は酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、グルクロン酸若しくはガラクツロン酸などのピラノシジル酸、クエン酸若しくは酒石酸などのα−ヒドロキシ酸、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸などのアミノ酸、安息香酸若しくはケイ皮酸などの芳香族酸、ｐ−トルエンスルホン酸若しくはエタンスルホン酸などのスルホン酸などの有機酸による遊離塩基の処理により製造することができる。
【００３６】
本発明の化合物が酸である場合、望ましい製薬上許容できる塩は、適切な方法、例えば、無機又は有機塩基による遊離酸の処理により製造することができる。適切な無機塩の例としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、バリウム及びカルシウムなどのアルカリ及びアルカリ土類金属を用いて形成されるものなどがある。適切な有機塩基塩の例としては、例えば、アンモニウム、ジベンジルアンモニウム、ベンジルアンモニウム、２−ヒドロキシエチルアンモニウム、ビス（２−ヒドロキシエチル）アンモニウム、フェニルエチルベンジルアミン、ジベンジルエチレンジアミン及び同様な塩などがある。酸部分の他の塩は、例えば、プロカイン、キニーネ及びＮ−メチルグルコサミンを用いて形成される塩、並びにグリシン、オルニチン、ヒスチジン、フェニルグリシン、リシン及びアルギニンなどの塩基性アミノ酸を用いて形成される塩を含んでいてもよい。
【００３７】
式Ｉの化合物は、必ずしも製薬上許容できる塩でないような化合物の他の塩も含み、これらは、式Ｉの化合物を製造し、かつ／又は精製するための、かつ／又は式Ｉの化合物の鏡像異性体を分離するための中間体として有用である可能性がある。
【００３８】
本発明はまた、本明細書に列挙するものと同じであるが、１個又はそれ以上の原子が天然に通常見いだされる原子質量又は質量数と異なる原子質量又は質量数を有する原子で置換されているという事実のため本発明の同位体標識化合物を含む。本発明の同位体標識化合物は、本明細書の下のスキーム及び／又は実施例に開示するのと同様な手順に従って、非同位体標識試薬の代わりに同位体標識試薬を用いることによって一般に製造することができる。
【００３９】
本発明の化合物の合成
本発明の化合物は、化学技術分野でよく知られているものと同様な方法を含む合成経路により、或いは特に本明細書に含まれている記述に照らして、国際特許出願公開番号ＷＯ２００４／０７８１１６に記載されているように製造することができる。出発物質は、一般にＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（ウィスコンシン州、ミルウォーキー）などの商業供給源から入手可能であるか、又は当業者によく知られている方法を用いて容易に製造される（例えば、Ｌｏｕｉｓ  Ｆ．  Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｍａｒｙ  Ｆｉｅｓｅｒ、Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、ｖ．１〜１９頁、Ｗｉｌｅｙ、Ｎ．  Ｙ．（１９６７〜１９９９年編）、又は増刊を含む、Ｂｅｉｌｓｔｅｉｎｓ  Ｈａｎｄｂｕｃｈ  ｄｅｒ  ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ、４頁、Ａｕｆｌ．編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ（Ｂｅｉｌｓｔｅｉｎオンラインデータベースによっても入手可能）に一般に記載されている方法により製造される）。
【００４０】
他の態様によれば、本発明は、式Ｉの化合物又は製薬上許容できるその塩を製造する方法であって、
（ａ）式ＩＩ
【００４１】
【化１０】
2009525330.tif 000004
の化合物又はその塩［式中、Ｐ１は、水素原子又はヒドロキシル保護基を表す］を式ＩＩＩ
【００４２】
【化１１】
2009525330.tif 000005
［式中、Ｚは、脱離基又は対応するイソシアナートを表す］の化合物とカップリングさせること、或いは
（ｂ）式ＩＶ
【００４３】
【化１２】
2009525330.tif 000006
［式中、Ｒｅは、水素原子又はアルコールの残基を表す］の化合物を還元し、
その後、任意の保護基を除去し、所望ならば、製薬上許容できる塩を生成させること
を含む方法を提供する。
【００４４】
Ｐ１により表される都合のよいヒドロキシル保護基の例としては、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルなどの環状ヘミケタールなどがある。
【００４５】
Ｚにより表される脱離基は、例えば、非置換若しくは置換ヒドロカルビルオキシ基、例えば、２，２，２−トリクロロエトキシなどのハロ（１〜６Ｃ）アルコキシ基、ＣＨ２＝Ｃ（ＣＨ３）Ｏ−などのアルケニルオキシ基、又は例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＮＯ２から選択される１つ又は複数の基で場合によって置換されたアリールオキシ基であってもよい。場合によって置換されたアリールオキシ基の特定のものは、フェノキシ、４−クロロフェノキシ、４−ブロモフェノキシ、４−フルオロフェノキシ、４−ニトロフェノキシ及び２−ニトロフェノキシなどである。特定の実施形態において、Ｚはフェノキシである。
【００４６】
化合物ＩＶは、化合物ＩＩＩのＺがフェノキシ基などの場合によって置換されているアリールオキシ基である場合にクロマトグラフィーステップを用いずに十分な収率で、高純度で有利に分離することができることが見いだ出されてきた。
【００４７】
式（ＩＩ）の化合物とＺが場合によって置換されているフェノキシ基である場合の式（ＩＩＩ）の化合物とのカップリングは、０℃から１００度までの温度で、特に周囲温度で都合よく実施することができる。都合のよい溶媒は、エーテル（例えば、テトラヒドロフラン又はｐ−ジオキサン）、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ又はアセトニトリルなどの中性溶媒を含む。カップリング反応は、第三級アミン（例えば、トリエチルアミン又はＤＭＡ）などの塩基の存在下で都合よく実施される。
【００４８】
アルコールの残基により表される場合のＲｅの特定のものは、エトキシなどの（１〜６Ｃ）アルコキシ基などである。
【００４９】
式（ＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物は、新規であると考えられ、本発明のさらなる態様として提供される。
【００５０】
Ｚが、場合によって置換されているアリールオキシ基である場合の式（ＩＩＩ）の化合物も、新規であると考えられ、本発明のさらなる態様として提供される。
【００５１】
他の態様において、本発明は、式Ｉの化合物のホスフェートプロドラッグ、すなわち、２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチル二水素ホスフェート又は製薬上許容できるその塩を製造する方法を提供し、この方法は、１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（５−フルオロ−２−（１−（２−ヒロドキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）ベンジル）尿素又はその塩をリン酸化することを含む。
【００５２】
したがってリン酸化は、アルコールとジ−ｔｅｒｔ−ブチルジイソプロピルホスフィンアミダイト又はジフェニルジイソプロピルホスフィンアミダイトなどのジアルキル又はジアリールジアルキルホスフィンアミダイトとを反応させた後、ホスフェート生成物上のアルキル又はアリール基を加水分解又は接触水素化により除去することによって都合よく実施される。
【００５３】
説明の目的のために、スキーム１及び２並びに実施例で、本発明の化合物並びに重要な中間体を製造する方法を説明する。当業者は、本発明の化合物を合成するのに用いることができる他の合成経路を理解するであろう。特定の出発物質及び試薬はスキームに示し、下で述べるが、様々な誘導体及び／又は反応条件を得るために他の出発物質及び試薬を代わりに容易に用いることができる。さらに、下記の方法により製造される化合物の多くは、この開示に照らして当業者によく知られている従来の化学を用いてさらに修飾することができる。
【００５４】
【化１３】
2009525330.tif 000007
【００５５】
【化１４】
2009525330.tif 000008
２に示すような化合物７７のニトリル還元は、二量体の生成を最小限にするために高濃度の酸（例えば、ＨＣｌ又は酢酸）を必要とする。しかし、より高い濃度の酸は、エステル化合物７８の一部の対応する酸への加水分解も引き起こすことがあり得る。スキーム３では、二量体及び酸性不純物の生成が少ない、式Ｉの化合物の改善された製造方法を説明する。
【００５６】
【化１５】
2009525330.tif 000009
スキーム３では、酸不純物を含まず、二量体不純物の生成が最小限である化合物７９Ａを得るためのニトリル基の還元の前の化合物７７のエステル基の対応するアルコールへの還元の方法を説明する。
【００５７】
より詳細には、化合物７７を、エステル基を適切な溶媒中で水素化ホウ素ナトリウムで還元することにより段階的に還元して、対応するアルコール化合物７８Ａを得ることができる。次いで、化合物７８Ａのニトリル基を標準的接触水素化条件下で、又は適切な有機溶媒中でホウ化ニッケルを用いて還元して、対応するメチルアミン化合物７９Ａを得る。
【００５８】
スキーム３に示す経路は、式Ｉの化合物の生成に関してスキーム２に示す経路と比較していくつかの利点がある。スキーム３に示す経路を用いることにより、ニトリル基の還元を、生成する二量体不純物の量を有利なことに低くするより高い濃度のＨＣｌを用いて実施することができる。さらに、スキーム３に示す経路は、最終段階において水素化ホウ素ナトリウムの使用を避け、それにより、最終生成物からホウ素不純物を除去するための追加の精製ステップを避けることができる。したがって、水素化ホウ素ナトリウム還元段階を反応系列におけるより早期に含めることによって、残存ホウ素は、中間段階において容易に除去することができる。さらに、アミノアルコール化合物７９Ａと化合物６９Ａとのカップリングは、低温で実施することができ、それにより、生成物７２の純度が改善される。したがって、スキーム３に示す経路は、式Ｉの化合物の合成の量の改善を可能にし、したがって、大規模製造により適用できる、又は適する式Ｉの化合物の製造のための効率のよい合成経路を提供する。
【００５９】
したがって、式（ＩＩ）の化合物を製造する方法であって、
（ｉ）式（Ｖ）
【００６０】
【化１６】
2009525330.tif 000010
［式中、Ｐ２は、水素又はヒドロキシル保護基を表す］の化合物を接触水素化条件下で、又はホウ化ニッケルの存在下で還元するステップを含む方法も提供する。
【００６１】
ステップ（ｉ）に関して、水素化触媒は、炭素上に担持されたＰｄ（ＯＨ）２又はパラジウムなどのあらゆる適切なパラジウム触媒などである。水素化は、酸性条件下（酸、例えば、ＨＣｌ若しくは酢酸の添加によるなど）で、又はアンモニアの添加により起る。接触水素化は、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール）、エステル（例えば、酢酸エチル）又はエーテル（例えば、ＴＨＦ）などの適切な溶媒系中で行わせることができる。混合溶媒、例えば、アルコール及びＴＨＦも水素化ステップに適している。水素圧は、１．７２×１０５〜６．８９×１０５Ｐａ（２５〜１００ｐｓｉ）、例えば２．７６×１０５Ｐａ（４０ｐｓｉ）であってよい。還元は、一般的に２０〜１００℃の温度で行う。
【００６２】
ステップ（ｉ）に関して、ホウ化ニッケルは、遷移金属塩、好ましくはＮｉ（ＩＩ）塩と水素化ホウ素ナトリウムからｉｎ  ｓｉｔｕで調製することができる。好ましい実施形態において、ホウ化ニッケルを塩化ニッケル（ＩＩ）と水素化ホウ素ナトリウムから調製する。反応は、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール）などの適切な溶媒中で都合よく行わせる。還元は、一般に周囲温度で行わせる。
【００６３】
式（Ｖ）の化合物は、式（ＶＩ）
【００６４】
【化１７】
2009525330.tif 000011
［式中、Ｐ３はＰ２について定義した通りである］の化合物をアルコール（例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール）などの適切な溶媒中で都合のよいエステル還元条件（例えば、水素化ホウ素ナトリウム）を用いて還元することにより製造することができる。
【００６５】
本発明の化合物を製造するに際して、中間体の遠隔官能基（例えば、第一級又は第二級アミン、アルコール等）の保護を必要とする可能性がある。そのような保護の必要は、遠隔官能基の性質及び製造方法の条件によって異なるであろう。例えば、適切なアミノ保護基（ＮＨ−Ｐｇ）は、アセチル、トリフルオロアセチル、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢｚ）及び９−フルオレニルメチレンオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）などである。都合のよいヒドロキシル保護基は、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル、ベンジル、トリアルキルシリル及びアセタールなどである。そのような保護の必要は、当業者により容易に決定される。保護基及びそれらの使用の一般的な説明については、Ｔ．  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９１年を参照のこと。
【００６６】
治療の方法
本発明の化合物は、プロテインキナーゼの変調又は調節により媒介される疾患を治療するのに用いることができる。したがって、本発明の他の態様は、本明細書に記載する疾患又は状態を、治療上有効な量の本発明の化合物又はその溶媒和物、代謝物又は製薬上許容できる塩を前記障害を治療又は予防するのに有効な量でヒトなどの哺乳動物に投与することによって治療又は予防する方法を提供する。１つの実施形態において、該方法は、本発明の化合物を１つ又は複数のキナーゼを阻害するのに有効な量で哺乳動物に投与することを含む。
【００６７】
「有効な量」は、そのような治療を必要とする哺乳動物に投与したとき、ｐ３８ＭＡＰＫなどの１つ又は複数のプロテインキナーゼの活性、並びにサイトカイン産生などの関連するキナーゼ媒介性事象によって媒介される疾患の治療を達成するのに十分である化合物の量を意味する。したがって、例えば、本発明の化合物又はその塩、活性代謝物の治療上有効な量は、その活性によって媒介される疾患状態が減少又は軽減するように１つ又は複数のプロテインキナーゼの活性を変調、調節又は阻害するのに十分な量である。
【００６８】
「治療すること」は、１つ又は複数のプロテインキナーゼの活性により少なくとも一部罹患しているヒトなどの哺乳動物の疾患状態の少なくとも緩和を意味する。「治療する」及び「治療」という用語は、目的が望ましくない生理的変化又は障害を予防又は遅らせる（減らす）ことである治療処置及び予防処置を意味する。本発明の目的のために、有益又は望ましい臨床的結果は、検出できるか、又は検出できないかを問わず、症状の軽減、疾患の程度の減少、疾患の安定化（すなわち、悪化ではない）状態、疾患の進行の遅延又は緩徐化、疾患状態の改善又は緩和及び寛解（部分的又は完全であるかを問わず）を含むが、これらに限定されない。「治療」は、治療を受けない場合に予期される生存期間と比較して、生存期間を長くすることも意味する。治療を必要とする人は、状態又は障害を既に有する人、並びに状態又は障害を有する傾向がある人又は状態又は障害を予防しなければならない人などである。
【００６９】
哺乳動物に投与される本発明の化合物の量は、個々の化合物、疾患状態及びその重症度、治療を必要とする哺乳動物の固有性（例えば、体重）によって異なるが、それにもかかわらず、当業者が常法により決定することができる。
【００７０】
本明細書で用いるように、「哺乳動物」という用語は、本明細書に記載する疾患を有する、又は発現する危険に曝されており、モルモット、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ハムスター及びヒトを含む霊長類を含むが、これらに限定されない温血動物を意味する。
【００７１】
本発明の１つの態様において、本発明の化合物又はその医薬用塩を、キナーゼ媒介性状態を治療又は予防するために動物又はヒトに投与するための医薬組成物に製剤化することができる。「キナーゼ媒介性状態」という用語は、本明細書で用いるように、ｐ３８が一定の役割を果たすことが知られている疾患又は他の有害な状態を意味し、ＩＬ−１、ＴＮＦ、ＩＬ−６又はＩＬ−８の過剰産生によって引き起こされることが知られている状態を含む。そのような状態は、炎症性疾患、自己免疫疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染症、ウイルス性疾患、線維症及び神経変性疾患を含むが、これらに限定されない。
【００７２】
治療又は予防することができる炎症性疾患は、急性膵炎、慢性膵炎、喘息、アレルギー及び成人呼吸促迫症候群を含むが、これらに限定されない。
【００７３】
治療又は予防することができる自己免疫疾患は、糸球体腎炎、慢性関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、強皮症、慢性甲状腺炎、グレーヴス病、自己免疫性胃炎、インスリン依存性糖尿病（Ｉ型）、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少症、血小板減少症、アトピー性皮膚炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、多発性硬化症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬又は移植片対宿主病を含むが、これらに限定されない。
【００７４】
治療又は予防することができる破壊性骨障害は、骨粗鬆症、骨関節症及び多発性骨髄腫関連骨障害を含むが、これらに限定されない。
【００７５】
治療又は予防することができる線維症は、特発性肺線維症、腎及び肝線維症を含むが、これらに限定されない。
【００７６】
治療又は予防することができる増殖性疾患は、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、転移性黒色腫、カポシ肉腫、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、星状細胞腫、骨癌、脳癌、乳癌、大腸直腸癌、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、神経膠腫、神経膠芽腫、多形頭部及び頚部癌、血液癌、造血障害、間質性肺疾患、カポシ肉腫、リンパ球性白血病、黒色腫、骨髄性白血病、非小細胞肺癌、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、皮膚癌、小細胞肺癌及び胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）を含むが、これらに限定されない。治療することができる他の患者は、骨髄移植を受ける患者などである。
【００７７】
治療又は予防することができる感染症は、敗血症、敗血症性ショック及び細菌性赤痢を含むが、これらに限定されない。
【００７８】
治療又は予防することができるウイルス性疾患は、急性肝炎感染（Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎及びＣ型肝炎を含む）、ＨＩＶ感染及びＣＭＶ網膜炎を含むが、これらに限定されない。
【００７９】
本発明の化合物により治療又は予防することができる変性状態又は疾患は、アルツハイマー病、パーキンソン病、脳虚血及び他の神経変性疾患を含むが、これらに限定されない。
【００８０】
「キナーゼ媒介性状態」という用語は、脳卒中、心臓発作、心筋虚血、臓器低酸素症、血管増殖、心臓肥大及びトロンビン誘発性血小板凝集における虚血／再潅流も含む。
【００８１】
さらに、本発明のキナーゼ阻害剤は、シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）とも呼ばれるプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２（ＰＧＨＳ−２）などの誘導性前炎症性タンパク質の発現の阻害にも有用である。したがって、他の「キナーゼ媒介性状態」は、浮腫、痛覚消失、発熱並びに神経筋痛、頭痛、癌痛、歯痛及び関節痛などの疼痛を含むが、これらに限定されない。
【００８２】
本発明のキナーゼ阻害剤により治療又は予防することができる状態及び疾患は、疾患の原因であると考えられているサイトカイン（例えば、ＩＬ−１、ＴＮＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−８）によって都合よく分類することもできる。
【００８３】
例えば、ＩＬ−１媒介性疾患又は状態としては、慢性関節リウマチ、骨関節症、脳卒中、内毒素血症及び／又は毒素性ショック症候群、内毒素により誘発される炎症反応、炎症性腸疾患、結核、アテローム性動脈硬化症、筋変性、悪液質、乾癬性関節炎、ライター症候群、通風、外傷性関節炎、風疹性関節炎、急性滑膜炎、糖尿病、膵β細胞疾患及びアルツハイマー病などがある。
【００８４】
ＴＮＦ媒介性疾患又は状態は、慢性関節リウマチ、リウマチ様脊椎炎、骨関節症、痛風性関節炎及び他の関節炎性状態、敗血症、敗血症性ショック、内毒素ショック、グラム陰性菌敗血症、毒素性ショック症候群、成人呼吸促迫症候群、大脳マラリア、慢性肺炎症性疾患、珪肺症、肺型サルコイドーシス、骨吸収疾患、再潅流傷害、移植片対宿主病、同種移植片拒絶反応、感染に起因する発熱及び筋痛、感染続発性悪液質、ＡＩＤＳ、ＡＲＣ又は悪性腫瘍、ケロイド形成、瘢痕組織形成、クローン病、潰瘍性大腸炎又は発熱を含むが、これらに限定されない。ＴＮＦ媒介性疾患は、ＨＩＶ、ＣＭＶ、インフルエンザ及びヘルペスなどのウイルス感染、並びにウマ伝染性貧血ウイルス、ヤギ関節炎ウイルス、ビスナウイルス若しくはマエディウイルスを含むが、これらに限定されないレンチウイルス感染、又はネコ免疫不全ウイルス、ウシ免疫不全ウイルス若しくはイヌ免疫不全ウイルスを含むレトロウイルス感染などの動物ウイルス感染も含む。
【００８５】
ＩＬ−８媒介性疾患又は状態は、乾癬などの大量好中球浸潤、炎症性腸疾患、喘息、心及び腎再潅流傷害、成人呼吸促迫症候群、血栓症並びに糸球体腎炎によって特徴づけられる疾患を含むが、これらに限定されない。
【００８６】
さらに、本発明の化合物は、ＩＬ−１又はＴＮＦにより引き起こされる、又は悪化する状態を治療又は予防するために局所的に用いることができる。そのような状態は、炎症性関節、湿疹、乾癬、日焼けなどの炎症性皮膚状態、結膜炎などの炎症性眼状態、発熱、疼痛及び炎症に関連する他の状態を含むが、これらに限定されない。
【００８７】
本発明の化合物は、温血動物（ヒトを含む）用の治療薬として主として有用であるが、同様にサイトカインの作用を抑制することが必要である場合にはいつでも有用である。したがって、新たな生物学的試験の開発及び新たな薬剤の研究用の薬理学的標準として有用である。
【００８８】
本発明の化合物の治療又は予防目的のための用量の大きさは、状態の性質及び重症度、並びに医学のよく知られている原理により動物又は患者の年齢と性別及び投与経路に応じて当然異なる。
【００８９】
本発明の他の態様は、本明細書に記載する疾患又は状態に罹患した哺乳動物、例えば、ヒトにおけるそのような疾患又は状態の治療における薬剤として用いるための本発明の化合物を提供する。そのような障害に罹患した哺乳動物、例えば、ヒトなどの温血動物における本明細書に記載する疾患又は状態の治療用の薬剤の調製における本発明の化合物の使用も提供する。
【００９０】
併用療法
本発明の化合物は、キナーゼ及びＩＬ−１、ＴＮＦ、ＩＬ−６又はＩＬ−８などの関連サイトカインの阻害から利益を得ると思われる疾患状態の治療に用いられる他の薬物及び療法と併用することができる。第二の薬物の用量は、臨床で用いられる用量に基づいて適切に選択することができる。本発明の化合物と第二の薬物との比は、投与対象、投与経路、標的疾患、臨床状態、組合せ及び他の因子に応じて適切に決定することができる。例えば、投与対象がヒトである場合には、第二の薬物は、本発明の化合物の重量部当たり０．０１〜１００重量部の量で用いることができる。
【００９１】
配合製剤の第二の薬物又は投与方法は、例えば、それらが互いに有害な影響を及ぼさないように本発明の化合物に対する補足的活性を有する。そのような薬物は、意図する目的に対して有効である量で配合されて適切に存在する。したがって、本発明の他の態様は、本明細書に記載するような第二の薬物と配合されている本発明の化合物を含む組成物を提供する。
【００９２】
本発明の化合物及び追加の薬剤学的に活性な薬物は、一体型医薬組成物で一緒に、又は別個に投与することができ、別個に投与する場合には、これを同時に、又は任意の順序で逐次的に行うことができる。そのような逐次投与は、時間的に接近していても離れていてもよい。所望の併用療法効果を達成するために、本発明の化合物及び第二の薬物の量並びに投与の相対的な時機を選択する。
【００９３】
併用療法は、「相乗効果」を与えることができ、「相乗的」である、すなわち、有効成分を併用した場合に達成される効果が化合物を別個に使用することによって生ずる効果の和より大きいことがわかっている。相乗効果は、本発明の化合物及び第二の薬物が（１）共調合され、配合単位用量製剤として同時に投与又は送達され、（２）別個の製剤として交互又は同時に送達される、或いは（３）他の投与方法により投与される場合に達成することができる。交替療法で送達する場合、相乗効果は、本発明の化合物及び第二の薬物を、例えば、別個の注射器での異なる注射により、逐次的に投与又は送達する場合に達成することができる。例えば、交替療法中、各有効成分の有効量を逐次的、すなわち、連続的に投与することができるが、併用療法においては、２つ又はそれ以上の有効成分の有効量を一緒に投与する。
【００９４】
例えば、サイトカインを阻害するそれらの能力により、本発明の化合物は、現在、インドメタシンケトロラク、アセチルサリチル酸、イブプロフェン、スリンダク、トルメチン及びピロキシカムなどのシクロオキシゲナーゼ阻害非ステロイド抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）により治療されている特定の炎症性及び非炎症性疾患の治療に有用である。本発明の化合物とＮＳＡＩＤとの併用投与は、治療効果をもたらすのに必要な後者の薬剤の量の減少をもたらすことができ、それにより、胃腸に対する作用などのＮＳＡＩＤによる有害な副作用の可能性が低減する。したがって、本発明のさらなる特徴によれば、シクロオキシゲナーゼ阻害非ステロイド抗炎症薬と組み合わされた又は混合された本発明の化合物若しくは製薬上許容できるその塩、及び製薬上許容できる希釈剤又は担体を含む医薬組成物を提供する。
【００９５】
本発明の化合物はまた、金、メトトレキサート、ステロイド及びペニシリナミンなどの抗関節炎薬との併用による慢性関節リウマチなどの状態の治療、及びステロイドとの併用による骨関節症などの状態の治療に用いることができる。
【００９６】
本発明の化合物はまた、ジアセルヘイン（Ｄｉａｃｅｒｈｅｉｎ）、ヒアラン（Ｈｙａｌａｎ）などのヒアルロン酸製剤、ルマロン（Ｒｕｍａｌｏｎ）、アルテパロン（Ａｒｔｅｐａｒｏｎ）及びアントリル（Ａｎｔｒｉｌ）などのグルコサミン塩などの軟骨保護抗変性及び／又は修復薬との併用による変性疾患、例えば、骨関節症の治療に用いることができる。
【００９７】
本発明の化合物はまた、気管支拡張薬及びロイコトリエン拮抗薬などの抗喘息薬との併用による喘息の治療に用いることができる。
【００９８】
本発明の化合物の投与
本発明の化合物は、治療する状態に適切な任意の経路により投与することができる。適切な経路としては、経口、非経口（皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、皮内、髄腔内及び硬膜外など）、経皮、直腸、鼻、局所（頬及び舌下など）膣、腹腔内、肺内及び鼻腔内などがある。用いる経路は、例えば、受容者の状態によって異なることは理解されるであろう。化合物を経口投与する場合には、製薬上許容できる担体又は賦形剤を用いて化合物を丸剤、カプセル剤、錠剤等に製剤化することができる。化合物を非経口投与する場合には、下で詳述するように、製薬上許容できる非経口用媒体を用いて化合物を単位用量注射剤に製剤化することができる。
【００９９】
製剤
ヒトを含む哺乳動物の治療処置（予防処置を含む）のために本発明の化合物を用いるために、本発明の化合物を通常、標準製薬業務に従って、医薬組成物として製剤化する。本発明のこの態様によれば、製薬上許容できる希釈剤又は担体とともに本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。
【０１００】
本発明の医薬組成物を、医療規範に従った方法、すなわち、量、濃度、スケジュール、コース、媒体及び投与経路で製剤化し、適量に分け、投与する。この状況における考慮する因子としては、治療する個々の障害、治療する個々の哺乳動物、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与スケジュール、及び開業医に知られている他の因子などが挙げられる。投与する化合物の治療上有効な量は、そのような考慮により決定されるものであり、障害を予防、改善又は治療するのに必要な最小量である。本発明の化合物は一般に、薬物の容易に調節できる用量を提供し、処方された療法への患者の遵守を可能にするための剤形に製剤化する。
【０１０１】
ここで使用する組成物は、好ましくは無菌性である。特に、ｉｎ  ｖｉｖｏ投与に用いる製剤は無菌性でなければならない。そのような滅菌は、例えば、無菌ろ過膜によるろ過により容易に遂行される。化合物は、通常、固体組成物、凍結乾燥製剤又は水溶液として保存することができる。
【０１０２】
本発明の化合物の製剤は、様々な投与経路及び種類用に製造することができる。例えば、所望の純度を有する本発明の化合物を、凍結乾燥製剤、粉砕粉末又は水溶液の形で、製薬上許容できる希釈剤、担体、賦形剤又は安定化剤と場合によって混合することができる（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９８０年）第１６版、Ｏｓｏｌ  Ａ．編）。製剤化は、周囲温度で、適切なｐＨで、所望の純度で、生理学的に許容できる担体、すなわち、用いる用量及び濃度で受容者に対して無毒性である担体と混合することにより行うことができる。製剤のｐＨは、主として特定の用法及び化合物の濃度に依存するが、例えば、約３〜約８であってよい。ｐＨ５の酢酸緩衝液中製剤は、適切な実施形態である。製剤は、従来の溶解及び混合手順を用いて製造することができる。例えば、原薬（すなわち、本発明の化合物又は化合物の安定化形（例えば、シクロデキストリン誘導体又は他の既知の錯化剤との錯体）を１つ又は複数の賦形剤の存在下で適切な溶媒に溶解する。
【０１０３】
用いる個々の担体、希釈剤又は賦形剤は、本発明の化合物を適用する手段及び目的に依存するであろう。溶媒は、一般に哺乳動物に投与するのに安全であると当業者により認識されている溶媒（ＧＥＡＳ）に基づいて選択される。一般に、安全な溶媒は、水及び水に可溶性又は混和性である他の無毒性溶媒などの無毒性の水性溶媒である。適切な水性溶媒としては、水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ３００）等及びその混合物などが挙げられる。許容できる希釈剤、担体、賦形剤及び安定化剤は、用いる用量及び濃度で受容者に対して無毒性であり、リン酸塩、クエン酸塩及び他の有機酸などの緩衝剤、アスコルビン酸及びメチオニンなどの抗酸化剤、保存剤（塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチル又はベンジルアルコール、メチル又はプロピルパラベンなどのアルキルパラベン、カテコール、レゾールシノール、シクロヘキサノール、３−ペンタノール及びｍ−クレゾール）、低分子量（約１０未満の残基）ポリペプチド、血清アルブミン、ゼラチン若しくは免疫グロブリンなどのタンパク質、ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン若しくはリシンなどのアミノ酸、単糖、二糖及びグルコース、マンノース若しくはデキストリンなどの他の炭水化物、ＥＤＴＡなどのキレート化剤、ショ糖、マンニトール、トレハロース若しくはソルビトールなどの糖、ナトリウムなどの塩形成対イオン、金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質錯体）及び／又はＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）若しくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤などである。製剤はまた、１つ又はそれ以上の安定化剤、界面活性剤、湿潤剤、滑沢剤、乳化剤、懸濁化剤、保存剤、抗酸化剤、不透明化剤、流動促進剤、加工助剤、着色剤、甘味剤、芳香剤、着香剤、及び薬物（すなわち、本発明の化合物又はその医薬組成物）の簡潔な表現を可能にするための他の既知の添加剤又は医薬品（すなわち、薬剤）の製造における補助剤を含んでいてもよい。医薬品有効成分は、コロイド状薬物送達システム（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）中又はマクロエマルジョン中のコアセルベーション法又は界面重合により調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれヒドロキシメチルセルロース若しくはゼラチンマイクロカプセル及びポリ（メチルメタクリレート）マイクロカプセル中に封じ込めることもできる。そのような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ第１６版、Ｏｓｏｌ  Ａ．編（１９８０年）に開示されている。「リポソーム」は、哺乳動物への薬物の送達に有用な様々な種類の脂質、リン脂質及び／又は界面活性剤から構成されている小胞である。リポソームの成分は、一般に生物学的膜の脂質の配置と同様に二層構成で配置されている。
【０１０４】
本発明の化合物の徐放性製剤を製造することができる。徐放性製剤の適切な例としては、マトリックスが成形物、例えば、薄膜又はマイクロカプセルの形態である、本発明の化合物を含む固形疎水性ポリマーの半透過性マトリックスなどがある。徐放性マトリックスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）若しくはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸とＬ−グルタミン酸ガンマエチルとのコポリマー、非分解性エチレン−酢酸ビニル、ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸−グリコール酸コポリマー及び酢酸ロイプロリドから構成されている注射可能マイクロスフェア）などの分解性乳酸−グリコール酸コポリマー並びにポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸などがある。
【０１０５】
本発明の医薬組成物は、無菌注射用水性又は油脂性懸濁剤などの無菌注射用製剤の形であってよい。この懸濁剤は、上述の適切な分散若しくは湿潤剤及び懸濁化剤を用いて既知の技術により調合することができる。無菌注射用製剤は、１，３−ブタンジオール液剤などの非経口で許容できる無毒性の希釈剤若しくは溶媒中無菌注射用液剤若しくは懸濁剤であってもよく、又は凍結乾燥散剤として調製してもよい。用いることができる許容できる媒体及び溶媒の主なものは、水、リンゲル液及び等張性塩化ナトリウム溶液である。さらに、無菌固定油は、従来から溶媒又は懸濁媒体として用いることができる。この目的のために、合成モノ又はジグリセリドなどのあらゆる温和な固定油を用いることができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の調製に同様に用いることができる。
【０１０６】
非経口投与に適する本発明の医薬組成物は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤及び製剤を意図する受容者の血液と等張性にする溶質を含んでいてよい水性及び非水性無菌注射液剤、並びに懸濁化剤及び粘稠化剤を含んでいてよい水性及び非水性無菌懸濁剤などである。
【０１０７】
本発明の組成物は、経口使用（例えば、錠剤、トローチ剤、硬若しくは軟カプセル剤、水性若しくは油性懸濁剤、乳剤、分散性散剤若しくは顆粒剤、シロップ剤又はエリキシル剤）、局所使用（例えば、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤又は水性若しくは油性液剤若しくは懸濁剤）、吸入による投与（例えば、微細な散剤又は液体エアゾール剤）、吹入による投与（例えば、微細な散剤）に適する形に製剤化することもできる。
【０１０８】
錠剤用の適切な製薬上許容できる賦形剤としては、例えば、ラクトース、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム又は炭酸カルシウムなどの不活性希釈剤、トウモロコシデンプン又はアルギン酸などの造粒剤及び崩壊剤、デンプンなどの結合剤、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクなどの滑沢剤、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル又はプロピルなどの保存剤、並びにアスコルビン酸などの抗酸化剤などがある。錠剤は、非被覆の状態であるか、或いは胃腸管内の有効成分の崩壊及びその後の吸収を修正するため、或いはそれらの安定性及び外観を改善するために、いずれの場合にも当技術分野でよく知られている従来の被覆剤及び手順を用いて被覆してもよい。
【０１０９】
経口用組成物は、有効成分が、不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム若しくはカオリンと混合されている硬ゼラチンカプセルの形で、或いは有効成分が、水又は落花生油、流動パラフィン若しくはオリーブ油などの油と混合されている軟ゼラチンカプセルとして製剤化することができる。
【０１１０】
水性懸濁剤は一般に、微細粉末状の有効成分並びに１つ又は複数の、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム及びアラビアゴムなどの懸濁化剤、レシチン若しくはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンステアホスフェート）、若しくはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコール、例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノールとの縮合生成物、若しくはエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトール由来の部分エステルとの縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレイン酸エステル、又はエチレンオキシドと、脂肪酸及びヘキシトール無水物から得られる部分エステル、例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレイン酸エステルとの縮合生成物などの分散又は湿潤剤を含む。水性懸濁剤は、１つ又は複数の、保存剤（ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル若しくはプロピルなど）、抗酸化剤（アスコルビン酸など）、着色剤、着香剤、及び／又は甘味剤（ショ糖、サッカリン若しくはアスパルテームなど）も含んでいてもよい。
【０１１１】
油性懸濁剤は、有効成分を植物油（落花生油、オリーブ油、ゴマ油若しくはやし油など）又は鉱油（流動パラフィンなど）に懸濁することにより調合することができる。蜜ろう、硬パラフィン又はセチルアルコールなどの粘稠化剤も含んでいてもよい。味のよい経口剤を提供するために、上述のような甘味及び着香剤を加えてもよい。これらの組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤を添加することにより保存することができる。
【０１１２】
水を加えることによる水性懸濁剤の調製に適する分散性散剤及び顆粒剤は、一般に有効成分並びに分散若しくは湿潤剤、懸濁化剤及び１つ又は複数の保存剤を含む。適切な分散若しくは湿潤剤及び懸濁化剤は、上で既に言及したものによって例示される。甘味、着香及び着色剤などの追加の添加剤も存在していてよい。
【０１１３】
本発明の医薬組成物は、水中油型乳剤の形であってもよい。油状相は、オリーブ油若しくは落花生油などの植物油又は例えば、流動パラフィンなどの鉱油又はこれらの混合物であってよい。適切な乳化剤は、例えば、アラビアゴム若しくはトラガカントゴムなどの天然ゴム、ダイズ、レシチン、脂肪酸及びヘキシトール無水物由来のエステル若しくは部分エステル（例えば、ソルビタンモノオレイン酸エステル）などの天然リン脂質並びにポリオキシエチレンソルビタンモノオレイン酸エステルなどの前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物であってよい。乳剤は、甘味、着香及び保存剤も含んでいてよい。
【０１１４】
シロップ剤及びエリキシル剤は、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、アスパルテーム又はショ糖などの甘味剤を用いて調合することができ、粘滑剤、保存剤、着香及び／又は着色剤も含んでいてよい。
【０１１５】
坐剤は、有効成分を、常温で固体であるが、直腸温で液体であり、したがって、直腸内で溶融して薬物を放出する適切な非刺激性賦形剤と混合することによって調製することができる。適切な賦形剤は、例えば、ココアバター及びポリエチレングリコールなどである。膣投与に適する製剤は、有効成分に加えて、当技術分野で適切であることが知られているような担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、発泡剤又は噴霧剤などである。
【０１１６】
クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤及び水性若しくは油性液剤又は懸濁剤などの局所製剤は、一般に、有効成分を、当技術分野でよく知られている従来の手順を用いて従来の局所的に許容できる媒体又は希釈剤で製剤化することによって得ることができる。
【０１１７】
経皮投与用組成物は、当業者によく知られている経皮皮膚貼付剤の形であってよい。
【０１１８】
吹入による投与用組成物は、例えば、３０μｍ未満の平均直径の粒子を含む微細散剤の形であってよく、散剤自体は、単独又はラクトースなどの１つ又は複数の生理的に許容できる担体で希釈された有効成分を含む。次に、吹入用散剤は、既知の薬剤クロモグリク酸ナトリウムの吹入に用いるようなターボ吸入装置と併用して用いるための例えば１〜５０ｍｇの有効成分を含むカプセルに都合よく保持される。
【０１１９】
吸入による投与用組成物は、有効成分を微細な固体又は液体小滴を含むエアゾール剤として投与するように準備された従来の加圧エアゾール剤の形であってよい。揮発性フッ素化炭化水素又は炭化水素などの従来のエアゾール噴射剤を用いることができ、エアゾール装置は、計量された量の有効成分を投与するように都合よく準備される。
【０１２０】
適用のための医薬組成物（又は製剤）は、薬物を投与するのに用いる方法によって様々な方法で包装することができる。例えば、流通用品は、適切な形態の製剤を内部に入れた容器を含むことができる。適切な容器は、当業者によく知られており、びん（プラスチック及びガラス）、サシェ、アンプル、ビニール袋、金属シリンダー及び同様なものなどである。容器は、包装の内容への無分別な侵入を防止するための不正開封防止結合部も含んでいてもよい。さらに、容器は、その上に貼付された、容器の内容物を記述するラベルを有する。ラベルは、適切な警告も含んでいてもよい。製剤はまた、単位用量又は複数回用量分包装容器、例えば、密封アンプル及びバイアルで包装してもよく、使用直前に注射用の無菌液体担体、例えば水の添加のみを必要とする凍結乾燥状態で保存することができる。即席の注射液剤及び懸濁剤は、前述の種類の無菌散剤、顆粒剤及び錠剤から調製される。好ましい単位用量製剤は、有効成分の、本明細書で上で示したような１日量若しくは単位１日分割量、又はその適切な一部を含むものである。
【０１２１】
本発明はさらに、上で定義したような少なくとも１つの有効成分並びに獣医用担体を含む獣医用組成物を提供する。獣医用担体は、組成物を投与する目的のために有用な物質であり、他の点では不活性であるか、又は獣医学技術分野で許容でき、有効成分に対して適合性のある固体、液体又は気体物質である。これらの獣医用組成物は、非経口、経口又は他の所望の経路により投与することができる。
【０１２２】
１回投与剤形を製造するための１つ又は複数の賦形剤と併用される本発明の化合物の量は、治療対象、障害若しくは状態の重症度、投与の速度、化合物の体内動態及び処方医師の判断によって必然的に異なる。１つの実施形態において、本発明の化合物の適切な量をそれを必要とする哺乳動物に投与する。１つの実施形態における投与は、１日当たり約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約６０ｍｇ／ｋｇ体重の量で行われる。他の実施形態において、投与は、１日当たり約０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜約４０ｍｇ／ｋｇ体重の量で行われる。ある場合において、前記の範囲の下限を下回る用量レベルは十分すぎるほどである可能性があるが、他の場合において、有害な副作用をもたらさずに、さらにより高い用量を用いることができる。ただし、１日を通して投与するために、そのようなより高い用量を最初にいくつかの小用量に分割することが前提条件である。投与経路及び投与方法に関するさらなる情報については、参照により特に本明細書に組み込まれているＣｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｃｏｒｗｉｎ  Ｈａｎｓｃｈ、編集委員会の委員長）、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ  １９９０年の第５巻の２５．３章を参照のこと。
【０１２３】
製品
本発明の他の実施形態において、上述の障害の治療に有用な物質を含む製品又は「キット」を提供する。１つの実施形態において、該キットは、本発明の化合物を含む容器を含む。適切な容器は、例えば、びん、バイアル、注射器、ブリスターパック等を含む。容器は、ガラス又はプラスチックなどの様々な材料により構成されていてよい。容器は、状態の治療に有効である本発明の化合物又はその製剤を保持することができ、無菌アクセスポートを有することができる（例えば、容器は、皮下注射針により刺し通すことができる栓を有する静注液剤バッグ又はバイアルであってよい。
【０１２４】
キットはさらに、容器上又は容器に添付されるラベル又は添付文書を含む。「添付文書」という用語は、治療用製品の商業用包装に通常含められ、適応、用法、用量、投与、そのような治療用製品の使用に関する禁忌及び／又は警告に関する情報を含む指示書を指すのに用いられる。１つの実施形態において、ラベル又は添付文書は、本発明の化合物を含む組成物がキナーゼ媒介性疾患又は障害を治療するのに用いることができることを示す。ラベル又は添付文書はまた、該組成物が他の障害を治療するのに用いることができることを示す。
【０１２５】
特定の実施形態において、キットは、本発明の化合物の錠剤又はカプセル剤などの固体経口剤の送達に適している。そのようなキットは、多くの単位用量を含むことが好ましい。そのようなキットは、それらの意図する使用の命令に適応する用量を記したカードを含むことができる。そのようなキットの例は、「ブリスターパック」である。ブリスターパックは、包装業界でよく知られており、医薬単位剤形を包装するのに広く用いられている。所望の場合、用量を投与することができる治療スケジュールにおける日を指定する、例えば、数字、文字若しくは他の表示の形の、又はカレンダー挿入物を用いた記憶補助を提供することができる。
【０１２６】
他の実施形態によれば、キットは、（ａ）本発明の化合物がその中に含まれる第一の容器、及び第二の医薬製剤がその中に含まれる第二の容器を含んでいてよく、該第二の医薬製剤はキナーゼ媒介性疾患又は障害の治療に有用な第二の化合物を含む。もう１つの選択肢として、又はさらに、キットはさらに、静菌性注射用水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンゲル液及びデキストロース溶液などの製薬上許容できる緩衝液を含む第三の容器を含んでいてよい。キットはさらに、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針及び注射器などの商業上及び使用者の観点から望ましい他の物質を含んでいてよい。
【０１２７】
キットはさらに、本発明の化合物の、及び存在する場合には第二の医薬製剤の投与に関する指示書を含んでいてよい。例えば、キットが本発明の化合物を含む第一の組成物及び第二の医薬製剤を含む場合、キットはさらに、第一及び第二の医薬組成物のそれを必要とする患者への同時、逐次又は別個の投与に関する指示書を含んでいてよい。
【０１２８】
キットが本発明の化合物及び第二の医薬製剤を含む他の特定の実施形態において、キットは、分割されたびん又は分割されたフォイルパケットのような別個の組成物を含む容器を含んでいてよいが、別個の組成物が単一の非分割容器中に含まれていてもよい。特定の実施形態において、キットは、別個の成分の投与に関する指示書を含む。該キットの形態は、別個の成分を異なる剤形（例えば、経口及び非経口）で投与することが好ましく、異なる投与間隔で投与する場合、組合せの個々の成分の用量調節が処方医師によって望まれる場合に特に有利である。
【０１２９】
生物学的活性
ｐ３８ＭＡＰＫ阻害
本発明の化合物の活性は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｉｎ  ｖｉｖｏ又は細胞系におけるｐ３８ＭＡＰＫ阻害について検定することができる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定法は、活性化ｐ３８ＭＡＰＫのキナーゼ活性又はＡＴＰアーゼ活性の阻害を測定する検定法を含む。別のｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定法は、ｐ３８ＭＡＰＫに結合する阻害剤の能力を定量するものであり、結合の前に阻害剤を放射性標識し、阻害剤／ｐ３８ＭＡＰＫ複合体を分離し、結合した放射性標識の量の測定することにより、又は新しい阻害剤を既知の放射性リガンドに結合したｐ３８ＭＡＰＫとともにインキュベートする競合実験を行うことにより、それを測定することができる。これら及び他の有用なｉｎ  ｖｉｔｒｏ並びに細胞培養検定法は、当業者によく知られている。
【０１３０】
本発明の化合物の阻害作用の細胞培養検定法は、阻害剤で処理した全血中又は細胞中のその細胞画分中で産生されたＴＮＦ−α、ＩＬ−１、ＩＬ−６又はＩＬ−８の量を陰性対照で処理した細胞と比較して測定するために用いることができる。これらのサイトカインのレベルは、市販のＥＬＩＳＡを用いることにより、又は下の生物学的実施例に記載するように測定することができる。
【実施例】
【０１３１】
本発明を説明するために、以下の実施例を含める。しかし、これらの実施例は本発明を限定するものではなく、本発明を実施する方法を提案することを意味するにすぎないことを理解すべきである。
【０１３２】
（生物学的実施例）
本発明の化合物の生物学的活性を以下のｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定により実証した。実施例Ｃ〜Ｍで用いた化合物は、化合物７２：１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）ベンジル）尿素（実施例１及び３）及び化合物７４：２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチル二水素ホスフェート（実施例２及び４）であった。
【０１３３】
（実施例Ａ）
ｐ３８生化学的検定法
ｐ３８活性は、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１００μＭバナジン酸塩、１ｍＭ  ＤＴＴ、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２及び１０μＭ［γ−３３Ｐ］−ＡＴＰ（０．１μＣｉ  Ｐ３３／反応）中５ｎＭ活性化ｐ３８α酵素及び基質としての１μＭ  ＡＴＦ−２（活性化転写因子２融合タンパク質）を含む１００μＬ反応において室温で検定した。反応は、３０〜４０分後に２５％ＴＣＡを加えて５分間放置することによって終了させ、次いで、ＧＦ−Ｂメンブランフィルタープレートに直接移した。フィルターを、Ｔｏｍｔｅｃ  Ｍａｃｈ  ＩＩＩ自動収集装置を用いて０．５％リン酸で３０秒間にわたり２回洗浄した。洗浄後、真空を３０秒間持続させて、フィルターを乾燥した。１ウエル当たり約３０μＬのシンチレーション液をフィルタープレートに加え、次いで、液体シンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔ  ＨＴＳ）で読み取った。
【０１３４】
（実施例Ｂ）
ＰＢＭＣ検定法
ＴＮＦ−αの産生を阻害する本発明の化合物の能力を、リポ多糖で刺激したときにＴＮＦ−αを合成し、分泌するヒト末梢血単核細胞（「ＰＢＭＣ」）を用いて検定した。
【０１３５】
化合物試験溶液は、ＤＭＳＯで５倍連続希釈を行い、次いで、希釈物を、ＭＥＭ、２％熱不活性化ウシ胎児血清（「ＦＢＳ」）、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン及び１％ペニシリン／ストレプトマイシンで希釈することにより５×保存液に希釈した。
【０１３６】
ＰＢＭＣは、次のようにヒト血液から分離した。全血を志願者からＢｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ製のＶａｃｕｔａｉｎｅｒ（商標）ＣＰＴに採取した。管を混合し、水平ローター中で室温（１８〜２５℃）で１５００〜１８００ＲＣＦ（相対遠心力）で最低限１５分間遠心分離した。各供血者について、バフィーコート層を１本の管にプールし、リン酸緩衝生理食塩水（「ＰＢＳ」）で２回洗浄した。細胞ペレットをＭＥＭ、２％熱不活性化ウシ胎児血清（「ＦＢＳ」）、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン及び１％ペニシリン／ストレプトマイシンに再懸濁した。総細胞数を血球計を用いて測定し、細胞懸濁液を２×１０６細胞／ｍＬに調節した。
【０１３７】
９６ウエル細胞培養プレートの各ウエルに０．１ｍＬの細胞懸濁液を加えた。化合物試験溶液（３０μＬ）を加え、細胞を３７℃／５％ＣＯ２インキュベーター中で１時間インキュベートし、次いで、２０μＬの７．５ｎｇ／ｍＬリポ多糖（ＬＰＳ大腸菌（Ｅ．Ｃｏｌｉ）Ｋ−２３５）を各ウエルに加え、細胞を３７℃／５％ＣＯ２インキュベーターに戻して１６〜２０時間放置した。細胞を１１００ＲＣＦで１５分間遠心分離した。約０．１２ｍＬの上清を清浄な９６ウエルポリプロピレンプレートに移した。試料を直ちに検定するか、又は検定の準備が整うまで−８０℃で保存した。下で述べるように、各試料中のＴＮＦ−αレベルをヒトＴＮＦ−αＥＬＩＳＡ検定法を用いて測定した。
【０１３８】
ＴＮＦ−αレベルを次の検定法を用いて測定した。１５０μＬの炭酸塩−重炭酸酸塩緩衝液（ＢｕＰＨ（商標）炭酸塩−重炭酸酸塩緩衝液パック）中２μｇ／ｍＬ抗ＴＮＦ−α精製マウスモノクローナルＩｇＧを９６ウエルＩｍｍｕｌｏｎ４プレート（Ｉｍｍｕｌｏｎ４  ＥＬＩＳＡ平底プレート、Ｄｙｎａｘ、カタログ番号０１１−０１０−３８５５）のウエルに加え、２〜８℃で一夜インキュベートして、ＴＮＦ−α抗体被覆プレートを調製した。被覆溶液を除去し、２００μＬのブロッキング緩衝液（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、２％ＢＳＡ）を加え、使用する準備が整うまでプレートを２〜８℃で保存した。最高濃度を６０００ｐｇ／ｍＬとして試料希釈液（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４，１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、２ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１％ＢＳＡ）での１：２連続希釈により、１０ポイント組換えヒトＴＮＦ−α標準曲線を作製した。
【０１３９】
３００μＬの「洗浄緩衝液」（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、２ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．０２％Ｔｗｅｅｎ−２０）で５回洗浄して、ＴＮＦ−α  ＥＬＩＳＡプレートからブロッキング溶液を除去した。５０μＬの試料希釈剤をすべてのウエルに加え、次いで、５０μＬのＴＮＦ−α標準曲線溶液又は試験化合物上清をすべてのウエルに加えた。プレートを振とう（３００ｒｐｍ）しながら室温で１時間インキュベートした。プレートを３００μＬの洗浄緩衝液で５回洗浄した。１００μＬの「抗体希釈剤」（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、２ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１％ＢＳＡ、０．０２％Ｔｗｅｅｎ−２０）中０．２μｇ／ｍＬビオチニル化ヤギ抗ヒトＴＮＦ−αをウエルごとに加え、プレートを振とう（３００ｒｐｍ）しながら室温で１時間インキュベートした。プレートをウエルごとに３００μＬの洗浄緩衝液で５回洗浄した。１００μＬの抗体希釈剤中０．２μｇ／ｍＬストレプトアビジンアルカリホスファターゼをウエルごとに加え、プレートを振とう（３００ｒｐｍ）しながら室温で１時間インキュベートした。プレートをウエル当たり３００μＬの洗浄緩衝液で５回洗浄した。０．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２を含むジエタノールアミン緩衝液中１ｍｇ／ｍＬ  ｐＮＰＰ（リン酸ｐ−ニトロフェニル）２００μＬをウエルごとに加え、プレートを振とう（３００ｒｐｍ）しながら室温で３０〜４５分間インキュベートした。光学濃度を測定することにより、反応の進行をモニターし、最高標準（ｔｏｐ  ｓｔａｎｄａｒｄ）が２．０〜３．０のＯＤに達したとき、５０μＬの２Ｎ  ＮａＯＨをウエルごとに加えた。各ウエルの光学濃度は、４０５ｎｍに設定したマイクロタイタープレートリーダーを用いて３０分以内に測定した。データは、４パラメーター曲線適合を用いてＸＬフィットで解析した。
【０１４０】
上述の検定に次の試薬を用いた。ダルベッコのカルシウム又はマグネシウム不含有リン酸緩衝生理食塩水（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１４１９０）、イーグルの最少必須培地（ＭＥＭ、Ｇｉｂｃｏカタログ番号１１０９０）、ペニシリン−ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１５１４０）、Ｌ−グルタミン２００ｍＭ（Ｇｉｂｃｏカタログ番号２５０３０）、ＨＥＰＥＳ  １Ｍ（Ｇｉｂｃｏカタログ番号１５６３０）、ウシ胎児血清（「ＦＢＳ」、ＨｙＣｌｏｎｅカタログ番号ＳＨ３００７０．０３）、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）Ｋ−２３５からのリポ多糖（「ＬＰＳ」、Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｌ２０１８）、抗ＴＮＦ−α精製マウスモノクローナルＩｇＧ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓカタログ番号ＭＡＢ２１０）、ＢｕｐＨ（商標）炭酸塩−重炭酸塩緩衝液パック（Ｐｉｅｃｅカタログ番号２８３８２）、ＨＥＰＥＳ（ＦＷ２３８．３、Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｈ３５７５）、ＮａＣｌ（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｓ７６５３）、ウシ血清アルブミン（「ＢＳＡ」、Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈカタログ番号００１−０００−１６２）、ポリオキシエチレン２０モノラウリン酸ソルビタン（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｐ２２８７）、塩化マグネシウム六水和物（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｍ２６７０）、組換えヒトＴＮＦ−α（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓカタログ番号２１０ＴＡ０１０）、ビオチニル化ＴＮＦ−α親和精製ヤギＩｇＧ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓカタログ番号ＢＡＦ２１０）、ストレプトアビジンアルカリホスファターゼ（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈカタログ番号０１６−０５０−０８４）、ジエタノールアミン基質緩衝液（Ｐｉｅｃｅカタログ番号３４０６４）、リン酸ｐ−ニトロフェノール（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｎ２７６５）。
【０１４１】
（実施例Ｃ）
種々のキナーゼに対する化合物７２の活性
基質としてＡＴＦ−２を用いる社内ｐ３８α放射性キナーゼ検定法を用いて化合物７２のｐ３８α活性を探究した。１μＭの化合物７２の存在下で２０２種のプロテインキナーゼの活性を検定することにより、化合物７２の選択性を測定した。確立されたプロトコールに従って、最初のスクリーニング（ＡＴＰ濃度Ｋｍ）で＞８０％阻害されたキナーゼについてその後ＩＣ５０の決定を行った。
【０１４２】
表１に示すように、化合物７２は、ｐ３８αアベルソン（Ａｂｅｌｓｏｎ）細胞質チロシンキナーゼ（Ａｂｌ）、アベルソン関連遺伝子（Ａｒｇ）及びＴｉｅ−２受容体チロシンキナーゼの強力な阻害剤である。化合物７２は、これらの活性に加えて、ＢＣＲ−Ａｂｌ  Ｔ３１５Ｉのイマチニブ（Ｉｍａｔｉｎｉｂ）抵抗形、ｓｒｃファミリーチロシンキナーゼＨｃｋ、Ｌｙｎ及びＦｙｎ並びに受容体チロシンキナーゼＦＧＦＲ１（線維芽細胞成長因子受容体１；ＦＧＦＲ１）及びＶＥＧＦＲ２（血管内皮成長因子受容体２；ＫＤＲ）に対しても中等度に強力である。
【０１４３】
【表１】
2009525330.tif 000012
比較のために、ＷＯ２００４／０７８１１６の実施例９４及び１３８の化合物も試験した。
【０１４４】
【化１８】
2009525330.tif 000013
実施例９４
【０１４５】
【化１９】
2009525330.tif 000014
結果を下の表１ａに示す。
【０１４６】
【表１Ａ】
2009525330.tif 000015
結果から、化合物７２はＷＯ２００４／０７８１１６の実施例９４及び１３８の化合物よりもＡｂｌ及びＴｉｅ２の有意に強力な阻害剤であることがわかる。
【０１４７】
（実施例Ｄ）
ｐ３８経路に対する化合物７２の細胞活性
ｐ３８経路の活性化を誘導するために１μｇ／ｍＬアニソマイシンで６０分間刺激する前に、ＨｅＬａ細胞を化合物７２で６０分間処理した。細胞を、ＨＳＰ２７のリン酸化形（Ｓｅｒ７８）及び標準化対照としてのＧＡＰＤＨに対する抗体で標識した。細胞をＬＩ−ＣＯＲ  Ａｅｒｉｕｓｔｍ撮像装置を用いて撮像し、定量化した。
【０１４８】
結果から、化合物７２は細胞中のｐ３８経路の強力な阻害剤であることが実証され、見かけのＩＣ５０は２ｎＭであった。機能細胞検定法において、この化合物を、サイトカイン産生を誘導するために細菌リポ多糖（ＬＰＳ）で処理した全血中のＴＮＦ−α産生を阻害するその能力（ＥＬＩＳＡにより検出される）についても試験したところ、３０ｎＭの見かけのＩＣ５０が得られた。
【０１４９】
（実施例Ｅ）
Ｔｉｅ２受容体に対する化合物７２の細胞活性
時間経過実験のために、ＨＵＶＥＣを２時間血清欠乏処理し、次いで、２００ｎｇ／ｍＬ  Ｔｉｅ２受容体アゴニストアンギオポエチン−１（Ａｎｇ−１）で刺激した。細胞を所定の時点に収集し、ホスホＡＫＴ、ホスホＥｒｋ、ホスホＨＳＰ２７、ホスホｐ３８及びＧＡＰＤＨに対する抗体を用いてイムノブロットした。シグナルを定量化し、ＧＡＰＤＨに対して標準化して、Ｔｉｅ２受容体活性化の結果としての誘導の程度を評価した。結果は、ヒト臍帯血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）におけるＴｉｅ２受容体アゴニストＡｎｇ−１に反応してのＥｒｋ、ＡＫＴ及びｐ３８経路の活性化の時間経過を示すイムノブロット及びグラフとして示した。結果から、ＡＫＴ及びＥｒｋ経路のみがＴｉｅ２受容体の活性化に反応して活性化されることがわかる。
【０１５０】
Ｔｉｅ２活性化試験のために、ＨＵＶＥＣを２時間血清欠乏処理し、次いで、２００ｎｇ／ｍＬ  Ａｎｇ−１による１０分間の刺激の前に、様々な濃度の化合物７２で６０分間処理した。次いで、Ｔｉｅ２を免疫精製（ＩＰ）し、抗ホスホチロシン（ｐＴｙｒ）及び抗Ｔｉｅ２抗体を用いてイムノブロットして、Ｔｉｅ２自己リン酸化の程度を評価した。ライセートをそれぞれ抗ホスホＥｒｋ及び抗ホスホＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）抗体を用いてイムノブロットした。シグナルを定量化し、負荷対照としてのＧＡＰＤＨに対して標準化した。結果は、イムノブロット及びグラフに示した。化合物７２処理は、Ｔｉｅ２自己リン酸化並びにその下流エフェクターＥｒｋ及びＡＫＴの用量依存的阻害をもたらし、ＩＣ５０は前者に対して＜３３ｎＭであり、後者に対して＜１１ｎＭであった。
【０１５１】
（実施例Ｆ）
ＢＣＲ−Ａｂｌに対する化合物７２の細胞活性
ＢＣＲ−Ａｂｌ陽性慢性骨髄性白血病細胞系Ｋ５６２を、示すように様々な濃度のイマチニブ又は化合物７２で３７℃、５％ＣＯ２の条件で７２時間処理した。その後、細胞の生存能をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて測定して、各化合物のＩＣ５０値を決定した。決定されたＩＣ５０値は、イマチニブ及び化合物７２でそれぞれ２７８ｎＭ及び６２ｎＭであった。
【０１５２】
様々な濃度のイマチニブ又は化合物７２で３７℃、５％ＣＯ２の条件で２時間処理したＫ５６２細胞の抽出物を調製し、自己リン酸化Ａｂｌ（ｐ−Ａｂｌ、Ｔｙｒ２４５）並びにＡｂｌ基質ＳＴＡＴ５（ｐＳＴＡＴ５、Ｔｙｒ６９４）及びＣｒｋＬ（ｐＣｒｋＬ、Ｔｙｒ２０７）に対してイムノブロットした。結果から、化合物７２は、ＢＣＲ−Ａｂｌ誘導細胞系Ｋ５６２の増殖を抑制する点がイマチニブより４倍強力であることがわかる。イマチニブ又は化合物７２の５０００、１０００、３３３、１１１、３７及び０ｎＭの濃度でｐＢＣＲ−Ａｂｌ、ｐＳＴＡＴ５、ｐＣｒｋＬ又はＧＡＰＤＨで処理したＫ５６２抽出物のイムノブロットの結果を測定した。この検定により、化合物７２及びイマチニブは両方がＢＣＲ−Ａｂｌ並びにその基質ＳＴＡＴ５及びＣｒｋＬの自己リン酸化を阻害することがわかる。化合物７２は、増殖データによれば、これらの基質のリン酸化の阻害の点がより強力である。
【０１５３】
（実施例Ｇ）
化合物７２及び７４の物理的特性、代謝プロファイル及び安全性プロファイル
１．溶解度の測定
溶解度の測定の結果を表２に示す。
【０１５４】
【表２】
2009525330.tif 000016
比較として、ＷＯ２００４／０７８１１６の実施例９４及び１３８の化合物の溶解度は、ｐＨ６．５及び７．４で＜０．００１ｍｇ／ｍＬであることがわかった。
【０１５５】
２．ＣＹＰ阻害検定（蛍光、ＬＣ−ＭＳ）
ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ｃ１９及びＣＹＰ２Ｃ９に対するＩＣ５０は、プールしたヒト肝ミクロソーム（ｎ＝１）を用いて液体クロマトグラフィー／質量分析（ＬＣ／ＭＳ）により対照と比較して特異的基質の代謝物の生成と内部標準との比を測定することによって得た。ＣＹＰ２Ｄ６及びＣＹＰ１Ａ２に対するＩＣ５０は、市販のＰ４５０イソ型特異的蛍光プローブ及び組換えタンパク質（ｎ＝１）の対照と比較した相対蛍光を測定することによって得た。結果は、表３に示す。
【０１５６】
【表３】
2009525330.tif 000017
３．オフターゲット毒性検定
化合物７２を２８種の受容体、イオンチャンネル及びトランスポーターの次のパネルに対する１０μＭでの結合について検定した（リガンド置換検定）。
【０１５７】
スクリーニングした２８種の分子実体のうち、ナトリウムチャンネル（部位２）のみが化合物と有意に相互作用する（＞５０％置換）ことが示された。
【０１５８】
４．安全性評価検定
ｈＥＲＧ検定を標準的パッチクランププロトコールを用いて行った。エームス検定（細菌復帰突然変異試験）をプロトコールに従って行った。化合物７２をＳ９活性化の存在下／非存在下で０．５〜５０００μｇ／試験プレートで試験した。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏ小核検定をプロトコールに従って行った。結果を表４に示す。
【０１５９】
【表４】
2009525330.tif 000018
５．耐容性試験
マウス（系統ＣＤ−１、用量群当たりｎ＝５）に化合物７２（化合物７４として）を１０、３０及び１００ｍｇ／ｋｇ１日２回で１４日間投与した。試験中体重減少を評価した。臨床化学検査（アルブミン、アルカリホスファターゼ、ＡＬＴ、アミラーゼ、ＢＵＮ、カルシウム、コレステロール、クレアチニン、グルコース、リン酸塩、総ビリルビン、ＴＰ、グロブリン）のために最終日に血液を採取した。結果を表５に示す。化合物に関連した死亡は認められなかった。この試験では、１００ｍｇ／ｋｇでさえ、用量制限毒性（ＤＬＴ）は認められず、したがって、最大耐量（ＭＴＤ）は特定されなかった。
【０１６０】
【表５】
2009525330.tif 000019
（実施例Ｈ）
げっ歯類及び霊長類における化合物７２の薬物動態
非コンパートメント（モデルによらない）法を用いて、下記のようにすべての動物種から得られた血漿中濃度時間曲線を解析した。クリアランス（Ｃｌ）、計算抽出比率（ＥＲ％）、分布容積（Ｖｚ）、最高濃度の１／２までの時間（ｔ１／２）及び曝露量（ＡＵＣ、曲線下面積）値をマウス、ラット及びサルについて下に示す。
【０１６１】
１．マウス：雌Ｂａｌｂ／ｃマウス（ｎ＝３／時点）におけるボーラス静脈内（ＩＶ、１ｍｇ／ｋｇ）及び経口（ＰＯ、１０ｍｇ／ｋｇ）投与後の化合物７２の薬物動態を検討した。血液試料は、ＰＯ投与後１５及び３０分目、並びに１、２、４、８及び２４時間目に、ＩＶ投与後１５及び３０分目、並びに１、２、４及び８時間目に採取した。
【０１６２】
ＩＶ：１ｍｇ／ｋｇ          経口：１０ｍｇ／ｋｇ
Ｃｌ＝２．６ｍＬ／分／ｋｇ  ＡＵＣ＝１０．５μｇ−時間／ｋｇ
ＥＲ＝２．８％              Ｆ＝１６％
Ｖｚ＝０．０８５Ｌ／ｋｇ    Ｃｍａｘ＝１．８μｇ／ｍＬ
ｔ１／２＝３．９時間
ＡＵＣ＝６．６μｇ−時間／ｋｇ
２．ラット：ボーラスＩＶ（２ｍｇ／ｋｇ）又はＰＯ（３０ｍｇ／ｋｇ）投与後の雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（ｎ＝３／時点）における化合物７２の薬物動態を検討した。血液は、マウスＰＫ試験について示したのと同じ時点に試料採取した。
【０１６３】
ＩＶ：１ｍｇ／ｋｇ          経口：３０ｍｇ／ｋｇ
Ｃｌ＝３．２ｍＬ／分／ｋｇ  ＡＵＣ＝３５μｇ−時間／ｋｇ
ＥＲ＝４．６％              Ｆ＝１５％
Ｖｚ＝０．０４８Ｌ／ｋｇ    Ｃｍａｘ＝４．５μｇ／ｍＬ
ｔ１／２＝３．９時間
ＡＵＣ＝４．７μｇ−時間／ｋｇ
３．サル：ボーラスＩＶ（２ｍｇ／ｋｇ）又はＰＯ（１０ｍｇ／ｋｇ）投与後の雄カニクイザル（ｎ＝３／時点）における化合物７２の薬物動態を検討した。血液は、マウスＰＫ試験について示したのと同じ時点に試料採取した。
【０１６４】
ＩＶ：１ｍｇ／ｋｇ          経口：１０ｍｇ／ｋｇ  
Ｃｌ＝８．８ｍＬ／分／ｋｇ  ＡＵＣ＝７．６μｇ−時間／ｋｇ
ＥＲ＝２０％                Ｆ＝３８％
Ｖｚ＝３．２Ｌ／ｋｇ        Ｃｍａｘ＝０．２６μｇ／ｍＬ
ｔ１／２＝４．６時間
ＡＵＣ＝４．１μｇ−時間／ｋｇ
（実施例Ｉ）
コラーゲン誘発性関節炎（ＣＩＡ）のラットモデルにおける化合物７２
本試験では化合物７２をプロドラッグの形（化合物７４）で投与した。雌Ｌｅｗｉｓラット（２００ｇ）；投与群当たりｎ＝８にＩＩ型コラーゲン／フロイントの不完全アジュバント（０．６ｍｇコラーゲンの３００μＬ注射、背面、０日目及び６日目）を注射した。動物に（１）媒体：５ｍＬ／ｋｇ、ＰＯ、ＢＩＤ×７、（２）化合物７２：０．３、１、３又は１０ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ、ＢＩＤ×７又は（３）ＥＮＢＲＥＬ（登録商標）：１０ｍｇ／ｋｇ、ＳＣ、１及び４日目を投与した。ＥＮＢＲＥＬ（登録商標）を陽性対照とした。化合物は、１１〜１８日目に投与した。足根関節の直径を１１日目とその後毎日測定した（図７０）。試験終了時に、足蹠重量及び顕微鏡的組織構造を測定した。後足蹠及び膝関節を除去し、後足蹠の重量を測定し、次いで、膝とともにホルマリンに入れた。固定液に１〜２日間入れ、脱石灰剤液に４〜５日間入れた後、足根関節及び膝関節を処理し、包埋し、切片化し、トルイジンブルーで染色した。足根関節及び膝関節における炎症、パンヌス形成及び骨吸収に対して０〜５のスコアを付けた。
【０１６５】
結果から、化合物７２はこの疾患モデルに関連するパラメーターのすべてを用量依存的に改善したことがわかる。足根関節の直径及び組織構造について、化合物７２はそれぞれ１．５及び３．０ｍｇ／ｋｇの見かけのＥＤ５０を示した。１０ｍｇ／ｋｇで、化合物７２は試験終了時までに疾患の退行を引き起こした。
【０１６６】
（実施例Ｊ）
化合物７２はｉｎ  ｖｉｖｏでの血管新生を抑制する
本試験では化合物７２をプロドラッグの形（化合物７４）で投与した。雌ＣＤ−１マウス（１９〜２２ｇ）、投与群当たりｎ＝４に１５００ｎｇ／ｍＬ  ｂＦＧＦ又は陰性対照としての０ｎｇ／ｍＬ  ｂＦＧＦを含む５００μＬ成長因子減少マトリゲルを皮下に埋め込んだ。試験化合物は、示した用量及びスケジュールで強制経口投与した。動物に（１）溶媒：３０ｍＭリン酸緩衝、１０ｍＬ／ｋｇ、ＰＯ、ＢＩＤ×７、（２）化合物７２：１０、３０又は１００ｍｇ／ｋｇ活性薬物、ＰＯ、ＢＩＤ×７、又は（３）ＳＵ１１２４８：（スーテント（Ｓｕｔｅｎｔ））４０ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ、ＱＤ×７を投与した。スーテントは、ＫＤＲの阻害剤であり、この試験における陽性薬物対照とした。７日目に動物を安楽死させた。マトリゲルを収集し、重量を測定し、リン酸緩衝生理食塩水、ｐＨ７．４中でホモジナイズした。試料を遠心分離し、得られたライセートを比色反応によりヘモグロビン濃度について分析した。化合物７２は、ｂＦＧＦ誘発性血管新生を用量依存的に抑制した。１００ｍｇ／ｋｇで、血管新生は有意に７２％抑制された（ｐ＜０．０５、Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較検定）。
【０１６７】
（実施例Ｋ）
化合物７２はＢＣＲ−Ａｂｌ誘導性腫瘍を抑制する
本試験では化合物７２をプロドラッグの形（化合物７４）で投与した。雌Ｓｃｉｄ−ｂｅｉｇｅマウス（１７〜２０ｇ）、群当たりｎ＝８の右側腹部の皮下に１０７Ｋ５６２細胞を埋め込んだ。試験化合物は、腫瘍のサイズが２００±５０ｍｍ３に達したとき、示した用量及びスケジュールで強制経口投与した。動物に（１）溶媒：２０％トラプソル（Ｔｒａｐｐｓｏｌ）、１０ｍＬ／ｋｇ、ＰＯ、ＢＩＤ×７、（２）化合物７４：３０又は１００ｍｇ／ｋｇ活性薬物、ＰＯ、ＢＩＤ若しくはＱＤ×７、又は（３）イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標））：４００ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ、ＢＩＤ×７を投与した。イマチニブは、Ａｂｌの既知の阻害剤であり、この試験における陽性薬物対照とした。腫瘍サイズ及び体重を試験中モニターした。結果を表６に示す。
【０１６８】
【表６】
2009525330.tif 000020
化合物７４は、このモデルにおいて有効であった。３０ｍｇ／ｋｇＢＩＤ又は１００ｍｇ／ｋｇＱＤの投与は腫瘍静止をもたらし、用量を１００ｍｇ／ｋｇＢＩＤに増量したとき、９４％の腫瘍退行が起り、８匹中５匹の動物が完全反応（１００％腫瘍退行）を有していた。化合物７２は、耐容性が良好であり、治療中１０％未満の体重減少を引き起こした。
【０１６９】
（実施例Ｌ）
多発性骨髄腫のモデルにおける化合物７２
本試験では化合物７２をプロドラッグの形（化合物７４）で投与した。雌Ｓｃｉｄ−ｂｅｉｇｅマウス（１７〜２０ｇ）、群当たりｎ＝８の右側腹部の皮下に１５×１０６ＲＰＭＩ８２２６細胞を溶媒（２０％トラプソル（Ｔｒａｐｐｓｏｌ）、１０ｍＬ／ｋｇ、ＰＯ、ＢＩＤ×１４）又は化合物７４（１００ｍｇ／ｋｇ活性薬物、ＰＯ、ＢＩＤ×１４）と一緒に埋め込みんだ。試験化合物は、腫瘍のサイズが２００±５０ｍｍ３に達したとき、示した用量及びスケジュールで強制経口投与した。腫瘍サイズ及び体重を試験中モニターし、化合物７２を腫瘍の成長を抑制する能力（％ＴＧＩ＝（１−Ｔ／Ｃ）×１００）について評価した。結果を表７に示す。化合物７２（そのプロドラッグの形である化合物７４として投与した）は、この試験中、腫瘍の成長に対する統計的に有意な効果をもたらした。これらのデータから、この試験で観察された化合物７２の効果は、ｐ３８を阻害するその能力に付加的なものであるか、又は無関係なものであることが示唆される。化合物７２は、耐容性が良好であり、治療中１０％未満の体重減少を引き起こした。
【０１７０】
【表７】
2009525330.tif 000021
多発性骨髄腫細胞系ＲＰＭＩ８２２６を様々な濃度のプロテオソーム阻害剤ＭＧ−１３２（陽性対照とするため）又は化合物７２で３７℃、５％ＣＯ２で７２時間処理した。次いで、細胞生存能をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて測定して、各化合物のＩＣ５０値を決定した（表８）。化合物７２による処理は、示した濃度範囲にわたり抗増殖性を示さなかった。ＭＧ−１３２は、社内試験の既往の範囲内にあったＩＣ５０値を示した（表８）。これらのデータは、ｉｎ  ｖｉｖｏで化合物７２について観察されたＴＧＩ効果は腫瘍外作用（ｅｘｔｒａ−ｔｕｍｏｒ  ｅｆｆｅｃｔｓ）に起因する可能性があることを示すものである。そのような役割は、ｐ３８及びＴｉｅ２の活性がｉｎ  ｖｉｖｏでのこの種の腫瘍の増殖／生存に重要であることを示唆している公表された報告と一致している。
【０１７１】
【表８】
2009525330.tif 000022
（実施例Ｍ）
ＶＥＧＦＲ２に対する化合物７２の細胞活性
ＨＵＶＥＣを２時間血清欠乏処理し、次いで、２０ｎｇ／ｍＬ  ＶＥＧＦによる５分間の刺激の前に様々な濃度の化合物７２又はＶＥＧＦＲ２阻害剤（（Ｚ）−３−［（２，４−ジメチル−３−（エトキシカルボニル）ピロール−５−イル）メチリデニル］インドリン−２−オン）で６０分間処理した。様々な処理のライセートを調製し、Ｔｙｒ１１７５においてリン酸化されたＶＥＧＦＲ２に対して特異的な抗体を用いてイムノブロットした。次いで、化合物７２及び対照阻害剤ＶＥＧＦＲ１に関する得られたブロットをＬＩ−ＣＯＲ  Ａｅｒｉｕｓｔｍ撮像装置を用いて撮像し、定量化した。ホスホＶＥＧＦＲ２シグナルを負荷対照としてのＧＡＰＤＨに対して標準化した。次いで、これらの値を用い、４パラメーター曲線適合プロトコールを用いて化合物７２及び対照ＶＥＧＦＲ２阻害剤ＶＥＧＦＲ１のＩＣ５０値を求めた。
【０１７２】
化合物７２は、ＨＵＶＥＣにおける血管内皮ＩＩ型受容体（ＶＥＧＦＲ２）自己リン酸化を抑制する。結果から、化合物７２処理はチロシン残基１１７５におけるＶＥＧＦＲ２自己リン酸化の用量依存的阻害をもたらし、ＩＣ５０は４８ｎＭであることがわかる
（製造実施例）
下記実施例において、特に断らない限り、すべての温度は℃単位で示す。試薬は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｌａｎｃａｓｔｅｒ、ＴＣＩ又はＭａｙｂｒｉｄｇなどの供給業者から購入し、特に断らない限り、さらなる精製を行わずに使用した。テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、トルエン、ジオキサン及び１，２−ジフルオロエタンは、Ｓｕｒｅ密封ビン入りのものをＡｌｄｒｉｃｈから購入し、受領したままのものを用いた。
【０１７３】
下に示す反応は、一般に無水溶媒中で窒素若しくはアルゴンの陽圧下又は乾燥管を用いて（特に断らない限り）行わせ、反応フラスコには一般に注射器による基質及び試薬の導入用のゴムセプタムを取り付けた。ガラス器具は、オーブン乾燥し、かつ／又は熱乾燥した。
【０１７４】
カラムクロマトグラフィーは、シリカゲルカラムを有するＢｉｏｔａｇｅシステム（製造業者：Ｄｙａｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）又はシリカＳｅｐＰａｋカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ）を用いて行った。
【０１７５】
１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、４００ＭＨｚで動作するＶａｒｉａｎ機器で記録した。１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、クロロホルムを比較標準（７．２５ｐｐｍ）として用いてＣＤＣｌ３溶液（ｐｐｍ単位で報告した）として得た。必要に応じて、他のＮＭＲ溶媒を用いた。ピーク多重度が報告される場合、次の略語を用いる。すなわち、ｓ（一重線）、ｄ（二重線）、ｔ（三重線）、ｍ（多重線）、ｂｒ（線幅の広がり）、ｄｄ（二重線の二重線）ｄｔ（三重線の二重線）。カップリング定数は、示す場合には、ヘルツ（Ｈｚ）単位で報告する。
【０１７６】
（実施例１）
１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）ベンジル）尿素（７２）の製造：方法１
方法１による化合物（７２）の合成は、スキーム１のステップＡ〜Ｊに示す。
【０１７７】
ステップＡ：２−（ベンジルオキシ）−５−フルオロベンゾニトリル６２の製造：機械的撹拌機及び温度プローブを装着した１２Ｌ四口丸底フラスコ中で、ＤＭＦ（１．９５Ｌ）中水素化ナトリウム（７４ｇ、１．８２モル）の懸濁液を氷浴中窒素雰囲気中で滴下漏斗によりベンジルアルコールに３０分間にわたり徐々に加えた。混合物を氷浴（０℃）中で１２０分間撹拌し、ＤＭＦ（６５０ｍＬ）中２，５−ジフルオロベンゾニトリル（１８０ｇ、１．３モル）の溶液を滴下漏斗により３５分間にわたって加えた。得られた混合物を室温に加温した。２時間後、混合物を氷浴中で冷却し（４℃）、飽和ＮＨ４Ｃｌ（１３０ｍＬ）で反応を停止させた後、水（２．６Ｌ×３）を加えた。スラリーを室温で一夜撹拌し、沈殿物をろ過し、水（６５０ｍＬ×３）で洗浄した。固体を真空中で２日間乾燥して、２９２ｇ（９９．３％）の所望の化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ７．７８  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ３．２  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ），  ７．５−７．７６  （ｍ，  １Ｈ），  ７．３５−７．４８  （ｍ，  ６Ｈ），  ５．２８  （ｓ，  ２Ｈ）。
【０１７８】
ステップＢ：５−フルオロ−２−ヒドロキシベンゾニトリル６３の製造：乾燥１０％Ｐｄ／Ｃ（２．４８ｇ）をＮ２中で５Ｌフラスコに入れた。メタノール（２．３４Ｌ）中２−（ベンジルオキシ）−５−フルオロベンゾニトリル（１４８ｇ、６５１ｍモル）の溶液をＮ２中で徐々に加えた。フラスコの空気を真空により除去し、フラスコにＨ２（バルーン）を３回充填した。混合物を室温で１時間撹拌した。上の工程をさらに２回繰り返して、反応を完結させた。混合物を室温でさらに２時間撹拌した。混合物をＮ２中でセライトパッドによりろ過し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×２）で洗浄した。パラジウム廃棄物を水（５０ｍＬ）ですすぎ、捨てた。ろ液を濃縮して、所望の化合物を黄色固体（９４．６ｇ、１０６％）を得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  −）  ｍ／ｚ  １３７  （Ｍ−１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．０７  （ｂｒ，  １Ｈ），  ７．５８  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ３．２  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ），  ７．４３  （ｍ，  １Ｈ），  ６．９１−７．０３  （ｄｄ，  １Ｈ  Ｊ  ＝  ４．５  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ）。
【０１７９】
ステップＣ：５−フルオロ−２−（４−メチル−３−ニトロフェノキシ）ベンゾニトリル６４の製造：機械的撹拌機、冷却器及びＪ−Ｋｅｍ温度プローブを装着した三口５Ｌフラスコ中で、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（５００ｍＬ）中５−フルオロ−２−ニトロトルエン（１５８ｇ、１．０２モル）の溶液をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（５７３ｍＬ）中５−フルオロ−２−ヒドロキシベンゾニトリル（１４７ｇ、１．０７モル）と炭酸カリウム（１６３ｇ、１．２モル）との混合物に室温で加えた。混合物を１００℃に加熱した。８時間後、反応混合物を室温に冷却し、氷浴中で水（３４００ｍＬ）を加えた。沈殿物をろ過し、水（１０７３ｍＬ×２）で洗浄し、真空中（４０℃）で乾燥して、所望の化合物を褐色固体（２６４ｇ、９０％）として得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  −）  ｍ／ｚ  ２７２  （Ｍ−１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ８．１０  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９  Ｈｚ），  ７．４１−７．４８  （ｍ，  １Ｈ），  ７．３８  （ｍ，  １Ｈ），  ７．０７−７．１４  （ｍ，  １Ｈ），  ６．８８−７．１０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．６３  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０１８０】
ステップＤ：２−（３−アミノ−４−メチルフェノキシ）−５−ベンゾニトリル６５の製造：機械的撹拌機、冷却器及びＪ−Ｋｅｍ温度プローブを装着した四口１２００ｍＬ丸底フラスコ中に、２−（３−アミノ−４−メチルフェノキシ）−５−ベンゾニトリル（２４７ｇ、９０７ｍモル）及びＺｎダスト（２９７ｇ、４．５モル）を入れ、１：１ＭｅＯＨ／ＴＨＦ（２．２Ｌ）に懸濁した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液（１．６Ｌ）を滴下漏斗（内部温度を６０℃以下に維持した）により４０分間にわたり徐々に加えた。反応混合物を室温に冷却し、室温で１時間撹拌した。亜鉛ダストをろ過により除去し、ケーキをＥｔＯＡｃ（４５０ｍＬ×３）で洗浄した。ＮＨ４ＯＡｃ飽和水溶液（１５００ｍＬ、２ｋｇのＮＨ４ＯＡｃと４ＬのＨ２Ｏから調製した）及びＨ２Ｏ（１５００ｍＬ）を加えた。ほとんど水が残存するまで、ろ液をロータリーエバボレーターにより濃縮した。黄褐色固体をろ過し、Ｈ２Ｏ（１５００ｍＬ×４）で洗浄し、真空中で乾燥して、２１１．５ｇ（９６％）の所望の化合物を得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ２４３  （Ｍ＋１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．３８  （ｍ，  １Ｈ），  ７．１８  （ｍ，  １Ｈ），  ６．６５−６．８５  （ｍ，  ５Ｈ），  ３．６０  （ｂｒ，  ２Ｈ），  ２．１７  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０１８１】
ステップＥ：２−（１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）−５−フルオロベンゾニトリル６６の製造：機械的撹拌機、Ｊ−ＫＥＭ温度プローブを装着した６Ｌ丸底フラスコ中で、酢酸（１．７５Ｌ）／水（８６２ｍＬ）中２−（３−アミノ−４−メチルフェノキシ）−５−ベンゾニトリル（２０９ｇ、８６２ｍモル）及びＮＨ４ＢＦ４の冷溶液（０℃）を濃ＨＣｌ（３５９ｍＬ）で１滴ずつ２分間にわたり処理した。スラリーを氷浴中で３０分間撹拌し、亜硝酸ナトリウムを加えた。反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、室温に加温した。室温で３時間撹拌した後、溶媒をロータリーエバボレーターにより除去し、トルエン（２００ｍＬ×２）で共沸した。残留物を真空中で一夜乾燥した。固体をアセトン（２００ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に懸濁し、溶媒をロータリーエバボレーターにより除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に懸濁し、ロータリーエバボレーターにより除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（１１４５ｍＬ）に懸濁し、酢酸カリウム（２５４ｇ、２．６モル）を一度に加えた。混合物を室温で２０時間撹拌し、ろ過した。ケーキをＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×６）で洗浄した。合わせたろ液を濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）及びヘプタン（５００ｍＬ）に懸濁した。黄色固体をろ過した（１４１．３ｇ）。母液を濃縮し、ＭＴＢＥ／ヘキサン（１００ｍＬ／１００ｍＬ）から再結晶して、２０．１ｇを得た。第二の母液を濃縮し、ＭＴＢＥ／ヘキサン（１００ｍＬ／１００ｍＬ）を用いて摩砕して、さらに１４．２８ｇを得た。生成物を合わせることにより１７６ｇ（収率８１％）の所望の化合物を得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ２５４  （Ｍ＋１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １３．３８  （ｂｒ，  １Ｈ），  ８．０７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９４  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ３，１  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ），  ７．６４  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９  Ｈｚ），  ７．５４  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．２１  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９  Ｈｚ），  ６．９６  （ｄｄ，  １Ｈ，  ，  Ｊ  ＝  ４．３  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ９．３  Ｈｚ）。
【０１８２】
ステップＦ：２−（１−（２，２−ジメトキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）−５−フルオロベンゾニトリル６７の製造：２−（１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）−５−フルオロベンゾニトリル（５．００ｇ、１９．７ｍモル）をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（５０ｍＬ）に懸濁し、水素化ナトリウム（０．６８４ｇ、２５．７ｍモル）を室温で少しずつ加えた。２−ブロモ−１，１−ジメトキシオキシエタン（３．４９ｍＬ、２９．６ｍモル）を一度に滴状で加え、反応混合物を８０℃に１８時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮して粗物質を得た。これをＥｔＯＡｃとＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液とに分配した。合わせた有機層を水（３×）、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、次いで、減圧下で濃縮して粗物質を得た。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離剤２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して、３．８８ｇ（５７．６％）の所望の化合物を得た。Ｎ−２異性体は分離されなかった。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ３４２  （Ｍ＋１）が検出された。  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．９８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５４  （ｄ，  １Ｈ，    Ｊ  ＝  ９  Ｈｚ），  ７．３６  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．１６  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８２  （ｄｄ，  １Ｈ，    Ｊ  ＝  ４．３  Ｈｚ，    Ｊ  ＝  ９．３  Ｈｚ），  ４．７６  （ｔ，  １Ｈ，    Ｊ  ＝  ５．３  Ｈｚ），  ４．４９  （ｄ，  ２Ｈ，    Ｊ  ＝  ５．３  Ｈｚ），  ３．４１  （ｓ，  ６Ｈ）。
【０１８３】
ステップＧ：２−（１−（２，２−ジメトキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）−５−フルオロフェニル）メタナミン６８の製造：ＴＨＦ（１００ｍＬ）中２−（１−（２，２−ジメトキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）−５−フルオロベンゾニトリル（３．８０ｇ、１１．１３ｍモル）をＴＨＦ（１００ｍＬ）中水素化アルミニウムリチウム（０．６３３８ｇ、１６．７０ｍモル）の撹拌０℃懸濁液に滴状で加えた。出発物質の完全な添加が達成されるまで、反応混合物を０℃に維持した。反応混合物を室温に加温し、ＨＰＬＣ分析により出発物質の完全な消費が認められるまで、撹拌した。反応混合物をロシェル塩の撹拌室温飽和水溶液に滴状で加えた。２相混合物を、アルミニウム塩が溶液中に存在するまで３０分間高速で撹拌した。層を分離し、水層をより多くのＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、減圧下で濃縮して、３．７３ｇ（９７％）の粗生成物を得た。これをさらに精製せずに用いた。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ３４６  （Ｍ＋１）  が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．９０  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４８  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９  Ｈｚ），  ６．９−７．１５  （ｍ，  ５Ｈ），  ４．７６  （ｔ，  １Ｈ，    Ｊ  ＝  ５．３  Ｈｚ），  ４．４９  （ｄ，  ２Ｈ，    Ｊ  ＝  ５．３  Ｈｚ），  ３．８８  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．３６  （ｓ，  ６Ｈ）。
【０１８４】
ステップＨ：１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（２−（１−（２，２−ジメトキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）−５−フルオロベンジル）尿素７０の製造：２−（１−（２，２−ジメトキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）−５−フルオロフェニル）メタナミン（２．００ｇ、５．７９１ｍモル）、２，２，２−トリクロロエチル３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イルカルバマート（３．５１６ｇ、８．６８６ｍモル）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．０２６ｍＬ、１７．３７ｍモル）をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（５０ｍＬ）に懸濁し、８０℃に一夜加熱した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃ及びＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液で希釈した。有機物を水（３×）、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、次いで、減圧下で濃縮して粗物質を得た。これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離剤３５〜４５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製した。溶媒の蒸発後、所望の生成物を淡黄色発泡体（２．５７ｇ、７４％）として得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ６０２  （Ｍ＋１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ７．８８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９  Ｈｚ），  ６．７２−７．３０  （ｍ，  ９Ｈ），  ６．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ６．０１  （ｂｒ，  １Ｈ），  ５．４７  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ６．１  Ｈｚ），  ４．７６  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．３  Ｈｚ），  ４．４４  （ｔ，  ４Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ），  ３．３８  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．３７  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３０  （ｓ，  ９Ｈ）。
【０１８５】
ステップＩ：１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（５−フルオロ−２−（１−（２−オキソエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）ベンジル）尿素７１の製造：１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（（２−（１−（２，２−ジメトキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）−５−フルオロフェニル）メチル）尿素（０．５００ｇ、０．８３２４ｍモル）をジクロロメタンに室温で溶解し、ヨードトリメチルシラン（０．３５５４ｍＬ、２．４９７ｍモル）を撹拌溶液に滴状で加えた。反応混合物をＨＰＬＣ分析によりモニターし、出発物質が検出されなくなったとき、混合物をジクロロメタンで希釈し、１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ４水溶液、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、減圧下で濃縮して、５３６ｍｇ（定量的収量）の粗生成物を得た。これをさらに精製せずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．７６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９７  （ｓ，  １Ｈ），  ６．７８−７．３０  （ｍ，  １０Ｈ），  ６．１７  （ｓ，  １Ｈ），  ５．９９  （ｂｒ，  １Ｈ），  ５．４４  （ｑ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ６．１  Ｈｚ），    ４．４６  （ｍ，  ４Ｈ），  Ｈ  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３４  （ｓ，  ９Ｈ）。
【０１８６】
ステップＪ：１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）ベンジル）尿素７２の製造：１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（（５−フルオロ−２−（１−（２−オキソエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）メチル）尿素（２．１７９ｇ、３．９２９ｍモル）をＭｅＯＨ（４０ｍＬ）に懸濁し、室温で水素化ホウ素ナトリウム（０．７４３２ｇ、１９．６４ｍモル）で少しずつ処理した。ＨＰＬＣ分析により出発物質の生成物への完全な変換が認められるまで、反応混合物を室温で撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、次いで、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、減圧下で濃縮して粗物質を得た。これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離剤２〜６％ｉＰｒＯＨ／ＤＣＭ）により精製して、１．２１ｇ（５５％）の所望の化合物を得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ５５７  （Ｍ＋１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．２９  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６８  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．１  Ｈｚ），  ７．３５  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８５−７．４  （ｍ，  ８Ｈ），  ６．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ４．８７  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．４  Ｈｚ），  ４．４３  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ），  ４．２８  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．９  Ｈｚ），  ３．８０  （ｑ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．５  Ｈｚ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５  （ｓ，  ９Ｈ）。
【０１８７】
（実施例２）
２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチル二水素ホスフェート（７４）の製造：方法１
方法１による化合物（７４）の合成は、スキーム１のステップＫ〜Ｌに示す。
【０１８８】
ステップＫ：ジベンジル２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−５−イル）エチルホスフェート７３の製造：１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（（５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）メチル）尿素（０．３５７ｇ、０．６４１４ｍモル）、ジフェニルジイソプロピルホスホルアミダイト（０．２９７０ｍｌ、０．９６２０ｍモル）及び２Ｈ−テトラゾール（０．０７１８９ｇ、１．０２６ｍモル）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に懸濁し、ＴＬＣ（１０：１  ＤＣＭ−Ｅｔ２Ｏ）分析により出発物質が完全に消費されたことが示されるまで、室温で撹拌した。ｔ−ブチル過酸化水素（０．４４３９ｍＬ、３．２０７ｍモル）を加え、次いで、ＨＰＬＣ分析により反応をモニターした。反応の完結時に、１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液を加え、反応混合物を１０分間撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３飽和水溶液中に注加し、ＥｔＯＡｃ中に抽出した。合わせた有機物を水（２×）及び食塩水で洗浄した。有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、減圧下で濃縮して粗物質を得た。これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離剤３０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して、４５８ｍｇ（８７％）の所望の化合物を得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ８１７  （Ｍ＋１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．８５  （ｓ，  １Ｈ），  ６．７−７．３５  （ｍ，  １０Ｈ），  ６．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ６．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ４．６２  （ｓ，  １Ｈ），  ５．３６  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ６  Ｈｚ），  ４．８１  （ｄ，  ４Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ），  ４．５４  （ｔ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．１  Ｈｚ），  ４．３９  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５  （ｓ，  ９Ｈ）。
【０１８９】
ステップＬ：２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチル二水素ホスフェート７４の製造：ジベンジル２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチルホスフェート（１．９２０ｇ、２．３５ｍモル）をＥｔＯＨ（０．０５Ｍ、５０ｍＬ）に懸濁し、シクロヘキサ−１，４−ジエン（３．５６ｍｌ、８２．１４ｍモル）及び１０％Ｐｄ／Ｃ（２０％／重量、０．３８４ｇ）を加えた。反応混合物を一夜還流した。反応混合物をＧＦ紙によりろ過し、ＭｅＯＨで洗浄した。有機層を減圧下で濃縮して、粗物質を得た。これをＭｅＯＨに溶解し、Ｇｅｌｌｍａｎ  ａｃｒｏｄｉｓｋ（０．４５μｍ）フィルターに通して微量のパラジウム混入を除去した。溶媒の蒸発後、得られたゴム状物をＣＨ３ＣＮ中で摩砕し、生成した固体をろ過により収集し、高真空中で３時間乾燥して、１．２１ｇ（８９％）の所望の化合物を得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ６３７  （Ｍ＋１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，    ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．３０  （ｓ，  １Ｈ），  ８．００  （ｓ，  １Ｈ），  ７．７１  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９  Ｈｚ），  ６．８８−７．３７  （ｍ，  １０Ｈ），  ６．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ４．６１  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．２８  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．７  Ｈｚ），  ４．１９  （ｄｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５  （ｓ，  ９Ｈ）。
【０１９０】
（実施例３）
１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（（５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）メチル）尿素（７２）の製造：方法２
方法２による化合物（７２）の合成の別の方法をスキーム２のステップＡ〜Ｆに示す。
【０１９１】
ステップＡ：２−（４−アミノ−３−メチルフェノキシ）−５−フルオロベンゾニトリル６５の製造：排気し、アルゴンを補充した３Ｌ四口フラスコ中で、２，５−ジフルオロベンゾニトリル（２９５．３ｍｌ、８１２．０ｍモル）及び４−アミノ−３−メチルフェノール（１００．０ｇ、８１２．０ｍモル）を、室温で高速で撹拌しながら乾燥ＤＭＳＯ（２．７５Ｍ）に溶解した。溶液を排気／アルゴン補充した（３×）。炭酸カリウム（１８５．２ｇ、１３４０ｍモル）（約３２５メッシュ）を加えた。反応混合物を排気／アルゴンを補充し（３×）、８０℃（内部プローブ）に１６時間加温した。ＴＬＣにより、完全変換が示された。反応混合物を室温に冷却し、高速で撹拌しながら２Ｌの氷水中に徐々に注加した。３Ｌの総容積が達成され、すべての固体が氷水中に入るまで、丸底フラスコ中の残留物を水中に繰返し取り込み、氷水中に注加した。室温になったとき、懸濁液を２時間高速で撹拌した。褐色固体をろ過により収集し、水（３Ｌ）で洗浄し、風乾し、ラテックスダムを用いて乾燥し、高真空中で４０℃で４４時間乾燥して、１９４ｇ（９９％）の所望の生成物を黄褐色固体として得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ２４３  （Ｍ＋１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．３８  （ｍ，  １Ｈ），  ７．１８  （ｍ，  １Ｈ），  ６．６５−６．８５  （ｍ，  ５Ｈ），  ３．６０  （ｂｒ，  ２Ｈ），  ２．１７  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０１９２】
ステップＢ：２−（１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）−５−フルオロベンゾニトリル６６の製造：大型磁気撹拌棒を含む５００ｍＬ一口フラスコ中で、２−（４−アミノ−３−メチルフェノキシ）−５−フルオロベンゾニトリル（２７４．５ｍｌ、２１９．６ｍモル）をクロロホルム（０．８Ｍ）中に入れ、室温で酢酸カリウム（２５．８６ｇ、２６３．５ｍモル）で処理した。反応混合物を０℃に冷却し、滴下漏斗により５分間にわたり無水酢酸（６２．２８ｍＬ、６５８．８ｍモル）で処理した。反応物に還流冷却器を取り付け、追加の１００ｍＬクロロホルムで処理し、４０℃に加熱した。亜硝酸イソアミル（５８．７４ｍＬ、４３９．２ｍモル）を滴下漏斗により滴状で加えた。追加の滴下漏斗を６０ｍＬ＋４０ｍＬのクロロホルムですすぎ、取り外し、ガラス栓を戻した。反応物を加熱して２０時間還流し、室温に冷却し、減圧下で濃縮して、褐色固体を得た。高真空中で３０分間乾燥した後、褐色固体を１Ｌの水に懸濁し、１５分間激しく撹拌し、ろ過した。得られた橙褐色固体（８３ｇ）を４００ｍＬのＭｅＯＨ中に入れ、室温で１．０Ｍ塩酸（２４１．６ｍＬ、２４１．６ｍモル）で処理した。混合物に還流冷却器を取り付け、７０℃に２０時間加温した。反応物を０℃に冷却し、１．０Ｍ水酸化ナトリウム（２５２．６ｍＬ、２５２．６ｍモル）を、次いで、水（２５０ｍＬ）を加えた。得られた黄色懸濁液を氷浴中で１０分間撹拌し、次いで、沈降させた。懸濁液をろ過し、水（１Ｌ）で洗浄し、風乾し、ラテックスダムを用いて乾燥し、高真空中で４０℃で３６時間乾燥して、５０．７ｇ（９１％）の所望の生成物を流動性黄褐色固体として得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ２５４  （Ｍ＋１）  が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １３．３８  （ｂｒ，  １Ｈ），  ８．０７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９４  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ３，１  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ），  ７．６４  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９  Ｈｚ），  ７．５４  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．２１  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９  Ｈｚ），  ６．９６  （ｄｄ，  １Ｈ，  ，  Ｊ  ＝  ４．３  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ９．３  Ｈｚ）。
【０１９３】
ステップＣ：２−（５−（２−シアノ−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）酢酸メチル７７の製造：２−（１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）−５−フルオロベンゾニトリル（４０．７ｇ、１６０．７ｍモル）を４００ｍＬのＤＭＦに溶解し、溶液を水浴（室温）中に入れた。炭酸セシウム（１５７．１ｇ、４８２．２ｍモル）を加えた。水浴中に入れてから３０分後に、２−ブロモ酢酸メチル（３３．４７ｍｌ、３５３．６ｍモル）を滴状で加えた。混合物を室温で４時間撹拌した。混合物に水（４００ｍＬ、わずかに発熱性）を加え、混合物全量を２Ｌ分液漏斗（４００ｍＬのＥｔＯＡｃを含んでいた）に移した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出液を水及び食塩水で洗浄し、層を分離した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥し、セライトパッドによりろ過し、減圧下で濃縮し、高真空中で１時間乾燥して、６６．３ｇの黄褐色固体を得た。固体を４００ｍＬの熱ＥｔＯＡｃに溶解し、還流下で木炭で１０分間処理した。混合物をセライトパッドによりろ過し、減圧下で濃縮した。不溶性物質をろ過により除去した。固体を３００ｍＬの熱ＥｔＯＡｃに溶解し、３００ｍＬのヘキサンを加えた。混合物を室温に冷却した。ろ過により３２．２４ｇ（６１．７％）の淡褐色固体が収集された。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ３２６  （Ｍ＋１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ８．０３，  １Ｈ），  ７．４１  −  ７．３６  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．２２  −  ７．１６  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ４．２９  Ｈｚ，  ９．３７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．１９  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０１９４】
ステップＤ：２−（５−（２−（アミノメチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）酢酸メチル二塩酸塩７８の製造：２−（５−（２−シアノ−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）酢酸メチル（１０．００ｇ、３０．７４ｍモル）を２５００ｍＬのＰａｒｒ水素化容器中に入れた。メタノール（０．１Ｍ、３１０ｍＬ）及び濃ＨＣｌ（２５．６２ｍｌ、３０７．４ｍモル）を加えた。１０％Ｐｄ／Ｃ（２．０ｇ、Ｄｅｇｕｓｓａタイプ）を加え、容器を水素ガスでパージした（３回、真空排気は行わなかった）。容器に２．７６×１０５Ｐａ（４０ｐｓｉ）の水素ガスを充填し、振とう機上に１８時間放置した。混合物にさらに１．０ｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加え、混合物をＰａｒｒ水素化装置中にさらに１８時間戻した。混合物をセライトパッドによりろ過し、減圧下で濃縮した（浴温度を２０℃以下に維持した）。残留物をＭｅＯＨ（３×１００ｍＬ）で共沸した。３回目の共沸後、浴温度を４０℃に上昇させた。残留物（油）を高真空中で２時間乾燥して、所望の生成物を黄色固体として得た（１１．６ｇ、９３．８％）。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ３３０  （Ｍ＋１）  が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．０８  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８４−７．７６  （ｍ，  ６Ｈ），  ５．４３  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．８  （ｂｒ，  ２Ｈ），  ４．１０５  （ｑ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ），  ３．６８  （ｓ，  ３Ｈ）。
【０１９５】
ステップＥ：２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）酢酸メチル７９の製造：ジメチルアセトアミド（０．５Ｍ、８８ｍＬ）中２−（５−（２−（アミノメチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）酢酸メチル二塩酸塩（１７．５ｇ、４３．５１ｍモル）の溶液を２，２，２−トリクロロエチル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イルカルバミン酸エステル（１７．９６ｇ、４４．３８ｍモル）で、続いてジイソプロピルエチルアミン（３０．３ｍＬ、１７４ｍモル）で室温で処理した。混合物を８０℃で一夜加熱した。混合物を減圧下で濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃとＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液とに分配した。有機層を分離し、食塩水で洗浄し、１ＰＳ紙によりろ過し、真空中で蒸発して、褐色発泡体を得た。発泡体をエーテル中で摩砕し、沈殿固体をろ過により収集して、２２．５５ｇ（８９％）の所望の化合物を得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ５８５  （Ｍ＋１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６８  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．９  Ｈｚ），  ６．８５−７．３７  （ｍ，  ８Ｈ），  ６．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ５．４  （Ｓ，  ２Ｈ），  ４．２８  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ），  ３．６８  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５  （ｓ，  ９Ｈ）。
【０１９６】
ステップＦ：１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（（５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）メチル）尿素７２の製造：メタノール（０．１Ｍ、８０ｍＬ）中２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）酢酸メチル（４．６ｇ、７．８７ｍモル）の溶液を室温で水素化ホウ素ナトリウム（８９３ｍｇ、２３．６ｍモル）で少しずつ処理した。混合物を室温で１８時間撹拌し、溶媒を真空中で蒸発して、暗黄色残留物を得た。残留物をジクロロメタンとＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液とに分配した。有機層を１ＰＳ紙によりろ過し、真空中で蒸発し、２〜１０％ｉＰｒＯＨ／ＤＣＭで溶離してＢｉｏｔａｇｅで精製した。所望の画分を真空中で蒸発して、白色発泡体２．９７ｇ（６８％）を得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ５５７  （Ｍ＋１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．２９  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６８  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．１  Ｈｚ），  ７．３５  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８５−７．４  （ｍ，  ８Ｈ），  ６．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ４．８７  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．４  Ｈｚ），  ４．４３  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ），  ４．２８  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．９  Ｈｚ），  ３．８０  （ｑ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．５  Ｈｚ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５  （ｓ，  ９Ｈ）。
【０１９７】
（実施例４）
２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチル二水素ホスフェート（７４）の製造：方法２
方法２による化合物（７２）の合成の別の方法をスキーム２のステップＧ〜Ｈに示す。
【０１９８】
ステップＧ：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチルホスフェート８０の製造：ＤＭＦ（０．２Ｍ、１５ｍＬ）中１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（（５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）メチル）尿素（１．５ｇ、２．６９ｍモル）を室温でイミダゾール（１８３ｍｇ、２．６９ｍモル）及び塩酸イミダゾール（４２３ｍｇ、４．０４ｍモル）で処理した。完全な溶解が認められた後に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジイソプロピルホスホルアミダイト（１．２８ｍＬ、４．０４ｍモル）を加えた。撹拌を室温で１８時間継続した。過酸化水素（５０％水溶液、０．５３５ｍＬ、９．４３ｍモル）を室温で徐々に加え、撹拌を１時間継続した。ＬＣ及びＴＬＣにより検出されたとき、反応を終了させた。残留物をジクロロメタンと１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液とに分配した。水層をＥｔＯＡｃ（２×）で抽出した。合わせた有機抽出液を食塩水で洗浄し、１ＰＳ紙によりろ過し、真空中で蒸発して、黄色油を得た。油を、ＤＣＭ、３〜５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶離したシリカゲルプラグにより精製した。所望の画分を真空中で蒸発して、所望の生成物を白色発泡体１．５９ｇ（７９％）として得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ７４９  （Ｍ＋）が検出された。  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．２９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．７３  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．１  Ｈｚ），  ６．７９−７．３５  （ｍ，  ８Ｈ），  ６．２３  （ｓ，  １Ｈ），  ４．６２  （ｔ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ４．７  Ｈｚ），  ４．２６  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．４３，  ｓ，  ９Ｈ），  １．２５  （ｓ，  １８Ｈ）。
【０１９９】
ステップＨ：２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチル二水素ホスフェート７４の製造：ＥｔＯＨ（０．２Ｍ、２４ｍＬ）中ジ−ｔｅｒｔ−ブチル２−（５−（２−（（３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ウレイド）メチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチルホスフェート（３．６６ｇ、４．８９ｍモル）の溶液を室温で５Ｎ  ＨＣＬ／ｉＰｒＯＨ（２．９３ｍＬ、１４．７ｍモル）で処理した。室温での撹拌を一夜継続した。溶媒を真空中で蒸発し、残留物をトルエン、及びエーテル（２×）から共蒸発した。ベージュ色の発泡体をＭｅＯＨ中に吸収し、水を含むビーカーに徐々に注入した。沈殿固体をろ過により収集して、２．８３ｇ（９１％）の所望の生成物を得た。ＭＳ  （ＡＰＣＩ  ＋）  ｍ／ｚ  ６３７  （Ｍ＋１）が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，    ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．３０  （ｓ，  １Ｈ），  ８．００  （ｓ，  １Ｈ），  ７．７１  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９  Ｈｚ），  ６．８８−７．３７  （ｍ，  １０Ｈ），  ６．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ４．６１  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．２８  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．７  Ｈｚ），  ４．１９  （ｄｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ），  ２．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５  （ｓ，  ９Ｈ）。
【０２００】
（実施例５）
【０２０１】
【化２０】
2009525330.tif 000023
５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）ベンゾニトリル（７８Ａ）
ＭｅＯＨ（３７０ｍＬ）中２−（５−（２−シアノ−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）酢酸メチル７７（実施例３におけるように製造した）（６０．０ｇ、１８４．４ｍモル）の溶液に、ＮａＢＨ４（２４．４２ｇ）を９０分間にわたり５ｇずつ５回加えた。温度は２５℃からＮａＢＨ４の最終添加時の４４．７℃まで上昇した。混合物を真空中で濃縮した。濃縮物に飽和ＮＨ４Ｃｌ（６００ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（６００ｍＬ）を加え、混合物を１時間激しく撹拌した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（２×１００ｍＬ）、水（２００ｍＬ）、食塩水（５００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、ＧＦ／Ｆ紙によりろ過し、濃縮して、鮮やかなオレンジ色の固体を得た。粗固体をＣＨ２Ｃｌ２（１Ｌ）に溶解し、撹拌しながらヘキサン（２．２５Ｌ）を加えた。淡褐色の固体が生成し、３０分間撹拌した後、固体を収集し、高真空中で乾燥して、４５．５ｇを得た。ろ液を減圧下で濃縮した。この物質をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）に再溶解し、ヘキサンを加えた（２００ｍＬ）。得られた固体（６．２ｇ）をろ過により収集した。２つの生成物を合わせて、５１．７ｇ（９４．３％）の７８Ａを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．９９  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４９  （ｄ，  １Ｈ），  ７．３９  −  ７．３６  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．２１  −  ７．１６  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．９０  （ｄｄ，  １Ｈ），  ４．４９  （ｔ，  ２Ｈ），  ４．１７  −  ４．１３  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．８１  （ｔ，  １Ｈ）。
【０２０２】
（実施例６）
【０２０３】
【化２１】
2009525330.tif 000024
２−（５−（２−（アミノメチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エタノール（７９Ａ）
（方法Ａ）
２５０ｍＬの   Ｐａｒｒ振とう機に５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）ベンゾニトリル７８Ａ（実施例５におけるように製造した）（８０．０ｇ、２６９．１ｍモル）、Ｐｄ（ＯＨ）２（３２ｇ、４０％負荷）、ＥｔＯＨ（５Ｌ）及び濃ＨＣｌ（２２４ｍＬ、２６９１ｍモル）を加えた。容器を密閉し、水素でパージし、排出し、水素を１２．４×１０５Ｐａ（１８０ｐｓｉ）まで充填した。内部温度を１８℃に低下させ、２３時間撹拌した後、ＨＰＬＣにより反応が完結したと判断された。上の反応混合物を除去し、８０ｇの出発物質を用い、次に５３．２ｇの出発物質を用いて、全工程を２回繰り返した。合わせた反応混合物（４反応）をＧＦ／Ｆによりろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を１ＮＨＣｌ（３．０Ｌ）に溶解し、ＥｔＯＡｃ（３×２Ｌ）で洗浄した。水層にＥｔＯＡｃ（２Ｌ）を加え、各相を１０分間激しく撹拌し、次いで、有機層を除去した。このステップをさらに２回繰返し、水層を冷却したフラスコ（氷浴）に移した。酸性の水性混合物に、温度が３５℃以上に上昇しないようにＮａＯＨペレット（４０ｇ×１１）を加えた。ｐＨが約１４となったとき、混合物を分液漏斗に移し、ＣＨ２Ｃｌ２（４×１Ｌ）で抽出した。合わせた抽出液を水（２×１Ｌ）及び食塩水（２×１Ｌ）で洗浄した。抽出液をＭｇＳＯ４（約２５０ｇ）上で乾燥し、ＧＦ／Ｆによりろ過し、減圧下で濃縮した。濃縮物をＣＨ２Ｃｌ２（３．５Ｌ）に溶解し、ヘキサン（４Ｌ）を加えた。最初の２Ｌのヘキサンを加えた後に褐色固体が生成した。１時間撹拌した後、ろ過により固体を収集し、ケーキを１：２ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサン（５００ｍＬ）で洗浄した。ケーキを真空中で乾燥して、１６５．１ｇ（５５．６％）の７９Ａを得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．９０  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４２  （ｄ，  １Ｈ），  ７．１７−７．１２  （ｍ，  ３Ｈ），  ６．８７  （ｔｄ，  １Ｈ），  ６．８０  （ｄｄ，  １Ｈ），  ４．４６  （ｔ，  ２Ｈ），  ４．１２  （ｔ，  ２Ｈ），  ３．８６  ｓ  （２Ｈ），  １．８７  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ）。
【０２０４】
（実施例７）
【０２０５】
【化２２】
2009525330.tif 000025
２−（５−（２−（アミノメチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エタノール（７９Ａ）
（方法Ｂ）
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中（５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）ベンゾニトリル（１．０ｇ、３．３６ｍモル）及びＮｉＣｌ２・６Ｈ２Ｏ（１４８ｍｇ、０．３３６ｍモル）の溶液に、ＮａＢＨ４（６３６ｍｇ、１６．８ｍモル）を分割して（２〜３分割）加え、反応物を３時間撹拌した。Ｎａ２ＣＯ３飽和溶液（１５ｍＬ）を徐々に加え、混合物を７５分間撹拌したが、撹拌中に微細固体が生成した。反応混合物をＧＦ／Ｆによりろ過し、ケーキをＭｅＯＨ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ液を真空中で約１５ｍＬに濃縮し、酢酸イソプロピル（２０ｍＬ）を加え、混合物を濃縮した。濃縮物に酢酸イソプロピル（２０ｍＬ）を加え、混合物を５分間撹拌した。相を分離し、有機層を１０％食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。クエン酸（０．１Ｍ、２０ｍＬ）を加え、各相を激しく混合した。有機層を除去し、水層を酢酸イソプロピル（２０ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄した。水層に酢酸イソプロピル（２０ｍＬ）及び５０％ＮａＯＨ（１ｍＬ）を加えた。各相を激しく混合し、水相を除去した。有機物を１０％食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、８５０ｍｇ（８５％）に濃縮した。
【０２０６】
（実施例８）
【０２０７】
【化２３】
2009525330.tif 000026
３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イルカルバミン酸フェニル
１０．９℃のＥｔＯＡｃ（１Ｌ）中３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（１０２．９ｇ、４４８．９ｍモル）の溶液にＮａＯＨ溶液（２．５Ｍ、２６９ｍＬ）を加え、二相混合物を１５．９℃に加温し、次いで安定化した。クロロギ酸フェニル（９８．４ｇ、１５６．５ｍモル）を一度に加えた。温度は２５．５℃に上昇し、その後、安定化した。氷浴を除去し、反応をＨＰＬＣによりモニターした。１時間後に追加の２５ｍＬの２．５ＭＮａＯＨを加えた。反応混合物を一夜撹拌し、次いで、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈した。有機層を食塩水（１Ｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４（２００ｇ）上で乾燥し、約４００〜５００ｍＬのＥｔＯＡｃまで濃縮した。濃縮溶液を６０℃に加温した。固体を溶解した後、ヘプタン（２Ｌ）を徐々に加えた。添加中に固体が生成した。３０分間撹拌した後、ろ過により固体を収集し、ケーキを４００〜５００ｍＬのヘプタンで洗浄した。ケーキを真空オーブン中で室温で乾燥して、１５６．９ｇ（９５．０％）の表題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ７．３９  −  ７．３１  （ｍ，  ６Ｈ），  ７．２６−７．２２５  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．１３  （ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ），  ６．９６  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ６．４７  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ２．４２  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３４  （ｓ，  ９Ｈ）。
【０２０８】
（実施例９）
【０２０９】
【化２４】
2009525330.tif 000027
１−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−３−（５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）ベンジル）尿素（７２）：
ＤＭＡ（３５０ｍＬ）中２−（５−（２−アミノメチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エタノール（７１．５５ｇ、２３７ｍモル）の４．１℃溶液に３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−ｐ−トリル−１Ｈ−ピラゾール−５−イルカルバミン酸フェニル（８０．５ｇ、２３０ｍモル）のＤＭＡ（３５０ｍＬ）溶液を加えた。温度が１８．４℃に上昇し、安定化した。氷浴を除去し、反応物を２時間撹拌した。２−（５−（２−アミノメチル）−４−フルオロフェノキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エタノールの追加の部分を加え、反応物を２時間撹拌した。反応混合物を酢酸イソプロピル（１．６Ｌ）と水（２．４Ｌ）とに分配した。水層を除去し、有機層を０．５ＮＮａＯＨ（２×２．４Ｌ）、次いで、飽和食塩水（１×２．４Ｌ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４（３００ｇ）上で乾燥し、濃縮して、１１０．８ｇ（８６．６％）を得た。
【０２１０】
前記の記述は、本発明の原理の説明にすぎないと考えられる。さらに、多くの修正形態及び変更形態は当業者に容易に明らかになるので、本発明を上述のような正確な構成及び方法に限定することは要求されない。したがって、すべての適切な修正形態及び同等物は、続く特許請求の範囲により定義される本発明の範囲内に入るとみなすことができる。
【０２１１】
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「含むこと（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」及び」「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」という語は、本明細書及び以下の特許請求の範囲において用いるとき、述べた特徴、整数、成分又はステップの存在を明記することを意図するが、それらは、１つ又は複数の他の特徴、整数、成分、ステップ又はその群の存在又は追加を排除しない。
【国際調査報告】
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