(57)【要約】  哺乳動物における免疫寛容を増強するための薬剤の製造のためのフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの使用；ならびに使用、方法ならびにこのようなフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンを含む医薬組合せおよび組成物。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における免疫寛容を増強するための薬剤の製造のためのフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの使用。
【請求項２】
細胞治療において使用するための薬剤の製造のためのフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの使用。
【請求項３】
哺乳動物における免疫寛容を増強するための方法、または哺乳動物における免疫寛容を誘導するための方法、または細胞治療法であって、
ａ）哺乳動物から単球および／または樹状細胞を単離し、
ｂ）単球が存在するならば、所望によりフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンの存在下で未成熟な樹状細胞（ｉＤＣ）に分化させ、
ｃ）工程ａ）および／またはｂ）で得られた未成熟な樹状細胞および樹状細胞を成熟剤でフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンの存在下で処置し、そして
ｄ）有効量の工程ｃ）で得られた成熟樹状細胞を該哺乳動物に投与する
工程を含む方法。
【請求項４】
哺乳動物の体外でフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの存在下で成熟され、処置された成熟樹状細胞を、薬学的に許容される賦形剤と共に含む医薬組成物。
【請求項５】
ａ）フェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの存在下で哺乳動物の体外で樹状細胞を成熟させ、
ｂ）工程ａ）で得られた細胞を単離し、そして
ｃ）所望により薬学的に許容される賦形剤と混合する
ことを含む医薬組成物を製造するための方法。
【請求項６】
低免疫寛容が介在する疾患の処置のための、請求項４または６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
医薬組成物が静脈内投与に適当である、請求項４から６のいずれかに記載の医薬組成物またはそれを製造するための方法。
【請求項８】
請求項４から７のいずれかに記載の医薬組成物を製造することを含む、低免疫寛容が介在する疾患の処置のための薬剤を製造するための方法。
【請求項９】
請求項４、６または７のいずれかに記載の医薬組成物と、少なくとも１種の第２の薬剤との組合せ。
【請求項１０】
治療有効量の請求項４、６または７のいずれかに記載の医薬組成物を必要とする対象に投与することを含む、それを必要とする対象における低免疫寛容が介在する障害を処置するための方法。
【請求項１１】
治療有効量の少なくとも１種の第２の薬剤をさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
フェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンが遊離形または塩形の式
【化１】
2009509995.tif 000017
［式中、
Ｒ１はハロゲンまたはハロ（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ２は水素、ハロゲンまたはハロ（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ３はハロゲンまたはハロ（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ４は水素、（Ｃ１−８）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−６）アルキルまたは式
−ＣＯ−Ｒ５、
−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−ＯＲ６、
−ＣＯ−ＣＯ−Ｒ７、
−ＣＯ−ＣＯ−ＯＲ８、
−ＣＯ−Ｎ（Ｒ９Ｒ１０）、
−ＣＯ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−Ｒ１１、
−ＣＯ−（ＣＨＲ１５）−Ｏ−（ＣＨ２）ｏ−ＣＯ−Ｒ１１、
−ＣＯ−（ＣＨ２）ｐ−Ｏ−（ＣＨ２）ｑ−Ｏ−（ＣＨ２）ｒ−Ｒ１６、
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｓ−Ｏ−ＣＯ−Ｒ１７、
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｔ−Ｎ（Ｒ１８Ｒ１９）、
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｕ−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ（ＮＨ２）−Ｒ２０、もしくは
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｗ−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ１７の基であり、
Ｒ５は水素、（Ｃ１−８）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、アミノ、（Ｃ１−４）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４）アルキルアミノ、アリール、例えば、（Ｃ６−１８）アリール、または、例えば、５または６個の環員および１から４個のＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子を有するヘテロシクリルであり、
Ｒ６は水素、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、アリール、例えば、（Ｃ６−１８）アリール、５または６個の環員および１から４個のＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子を有するヘテロシクリルにより置換されている（Ｃ１−４）アルキル、アミノ（Ｃ１−６）アルキル、（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキル、ジ（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキルまたはアミノ酸残基、例えば、式−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＯＯＨのアミノ酸残基、または、例えば、Ｒ６が−ＣＯ−（ＣＨ２）ｖ−ＣＯ−Ｃｌである式Ｉの化合物とアミノ酸を反応させることにより得られるアミノ酸残基、アミノ酸モノ（Ｃ１−６）アルキルエステルまたはアミノ酸ジ（Ｃ１−６）アルキルエステルであり、
Ｒ７およびＲ８は互いに独立して（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、アリールまたは５または６個の環員および１から４個のＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子を有するヘテロシクリルであり、
Ｒ９およびＲ１０は互いに独立して水素もしくは（Ｃ１−４）アルキルであるか、または
Ｒ９およびＲ１０の一方が水素であり、もう一方が（Ｃ３−８）シクロアルキル、（Ｃ１−４）アルキル、アリール、例えば、（Ｃ６−１８）アリール、または５または６個の環員および１から４個のＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子を有するヘテロシクリルであり、
Ｒ１１は（Ｃ１−４）アルキル、−ＯＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、アミノ酸残基、例えば、Ｒ１１が−ＣＯ−（ＣＨＲ１５）−Ｏ−（ＣＨ２）ｏ−ＣＯ−Ｃｌである式Ｉの化合物とアミノ酸を反応させることにより得られるアミノ酸残基、アミノ酸モノ（Ｃ１−６）アルキルエステルまたはアミノ酸ジ（Ｃ１−６）アルキルエステルであり、
Ｒ１２は水素または（Ｃ１−４）アルキル、例えば、結合がアミン基を介して生じているアミノ酸残基であり；
Ｒ１３およびＲ１４は互いに独立して水素、（Ｃ１−４）アルキル、アミノ（Ｃ１−６）アルキル、（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキル、ジ（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキルであり、
Ｒ１５は水素または（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ１６は水素、（Ｃ１−４）アルキル、カルボキシルまたは、例えば、カルボニル基を介して結合しているカルボン酸エステル残基であり；
Ｒ１７はアミノ（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−４）アルキルまたはジ（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ１８は水素または（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ１９はヒドロキシ（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ２０は（Ｃ１−４）アルキルまたはヒドロキシ（Ｃ１−４）アルキルであり、
ｍは０から４であり、ｎは２から８であり、ｏは０から４であり、ｐは０から４であり、ｑは１から８であり、ｒは０から４であり、ｓは１から４であり、ｔは１から４であり、ｕは１から６であり、そしてｗは１から６である］
で示される化合物である、請求項１から１１のいずれかに記載の使用、方法、または医薬組成物。
【請求項１３】
フェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンが、Ｒ１がクロロであり、Ｒ２が水素であり、Ｒ３がトリフルオロメチルであり、そしてＲ４が式−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｎ［（Ｃ２Ｈ５ＯＨ）（ＣＨ３）］の基である遊離形または塩形の式Ｉの化合物である、請求項１２に記載の使用、方法または医薬組成物。
【請求項１４】
フェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンが、Ｒ１がクロロであり、Ｒ２が水素であり、Ｒ３がトリフルオロメチルであり、そしてＲ４が水素である遊離形または塩形の式Ｉの化合物である、請求項１２に記載の使用、方法または医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、例えば、細胞治療において、免疫寛容を増強するためのフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
単球から生じる樹状細胞（ＤＣ）は、様々な抗原に対するＴ細胞応答を促進および刺激することができる非常に有効な抗原提示細胞である。ＤＣはそれ自身、免疫および寛容耐性の両方のエフェクター機能を有し、ＤＣは腫瘍ならびに多数の細菌および他の病原体に対する免疫応答において重要な役割を果たす。ＤＣの詳細な記載ならびに多数の他の関連ある記載として、例えばPaul (1998) Fundamental Immunology, 4th edition, Lippincott-Raven, Philadelphia参照。
【発明の開示】
【０００３】
我々は驚くべきことに、フェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンが細胞治療において有用であり得て、該細胞治療は、例えば、処置の前の免疫寛容状態と比較して哺乳動物における免疫寛容を増強するために有用であり得て、例えば、フェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンが免疫抑制剤として有用であり得ることを見いだした。
【０００４】
いくつかの局面において、本発明は、下記を提供する：
１．１  哺乳動物における免疫寛容を増強するための薬剤の製造のためのフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの使用。
１．２  哺乳動物における免疫寛容を、例えば、長期間誘導するため、例えば、活性を誘導するための、薬剤の製造のためのフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの使用。
１．３  免疫抑制剤として使用するための薬剤の製造のためのフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの使用。
１．４  細胞治療において使用するための薬剤の製造のためのフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの使用。
【０００５】
本発明にしたがって、フェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの存在下で成熟したときに哺乳動物から単離した単球および／または樹状細胞は、例えば、処置の前の免疫寛容状態と比較して、哺乳動物における免疫寛容を増強するために有用であり得ることを見いだした。
【０００６】
他の局面において、本発明は、下記を提供する：
２．１  哺乳動物における免疫寛容を増強するための方法、または
２．２  哺乳動物における免疫寛容を、例えば、長期間誘導、例えば能動的に誘導するための方法
２．３  ａ）哺乳動物から単球および／または樹状細胞を単離し、
ｂ）単球が存在するならば、所望によりフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンの存在下で未成熟な樹状細胞（ｉＤＣ）に分化させ、
ｃ）工程ａ）および／またはｂ）で得られた未成熟な樹状細胞および樹状細胞を成熟剤でフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンの存在下で処置し、そして
ｄ）有効量の工程ｃ）で得られた成熟樹状細胞を該哺乳動物に投与する
工程を含む細胞治療。
【０００７】
本発明の工程ａ）からｄ）の方法は、慣用のとおり、例えば、慣用の方法にしたがって、例えば、準じて実施し得る。
【０００８】
例えば、機能性単球および／または樹状細胞（ＤＣ）を、哺乳動物から、例えば、このような哺乳動物の血液サンプルから単離するための方法は既知であり、そして慣用の方法により、例えば、準じて実施され得る。例えば、単球および／または樹状細胞（ＤＣ）の単離は、例えば、Miltenyi Biotechからの、例えば、市販のキットに存在する電磁ビーズの使用により対応するプロトコールにしたがって、または、例えば、慣用の方法による、例えば、準じた他のなんらかの細胞選別法により実施され得る。
【０００９】
単球をＩＬ−４およびＧＭ−ＣＳＦで数日間、例えば、４から８日間処置することにより未成熟な樹状細胞（ｉＤＣ）に分化させることができ、分化は、所望により本発明にしたがって（約）１ｎＭから（約）３０ｎＭの量で細胞／分化細胞混合物中に存在し得るフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンの存在下で実施できる。このような分化工程で得られたｉＤＣまたは工程ａ）で、例えば、血液から単離されたｉＤＣまたはＤＣを工程ｂ）で、例えば、適当な培養培地中で、成熟ＤＣを得るために成熟剤で処置する。適当な成熟剤は、例えば、慣用の薬剤を使用し得る。成熟剤は、例えば、能動的成熟剤としてＧＭ−ＣＳＦ、ＬＰＳ、ＩＬ−１−β、ＩＬ−４、アゴニストＣＤ４０−抗体ＴＮＦ−α、ＴＳＬＰ（胸腺間質性リンホポエチン）、または１種またはそれ以上のこのような記載の活性成熟剤の組合せを含み得る。ｉＤＣを成熟剤と適当な培地中で処置することにより、ｉＤＣを成熟ＤＣに、例えば、数時間、例えば、（約）４から（約）３６時間、例えば、（約）６から（約）２４時間処置することにより分化させる。単球またはｉＤＣから成熟ＤＣを得るための適当な分化および成熟培養（条件）は既知であるか、または当業者により見いだされ得る。
【００１０】
ＤＣの成熟（およびＤＣの処置）はフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンの存在下で実施される。このようなフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンは（約）１ｎＭから（約）３０ｎＭの量で細胞／成熟細胞の混合物に含まれ得る。
【００１１】
成熟剤およびフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンでの処置は、得られたＤＣから成熟剤およびフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンを除去するために、得られたＤＣの精製工程、例えば、適当な洗浄液、例えば、ＰＢＳでの洗浄が続くべきである。
【００１２】
工程ｃ）で得られたＤＣは、未処置単球および／またはＤＣを単離した哺乳動物に投与され、例えば、工程ｃ）で処置されたこのようなＤＣは医薬組成物の形態で、静脈内投与により、例えば、適当なデバイスを使用する適当な方法、例えば、注射、注入により哺乳動物に投与される。
【００１３】
静脈内投与のために、工程ｃ）で得られたＤＣを、例えば、上記定義のとおりに精製し、精製されたＤＣを静脈内投与のために適当な水性媒体中で、例えば、水性媒体は、例えば、生理学的媒体と類似の水性媒体を得るために、生理学的に許容されるアジュバントを含み得る。細胞を哺乳動物に静脈内に投与するための水性媒体は既知であるか、または当業者により見いだされ得る。投与のために本発明にしたがい水性媒体で処置されるＤＣの濃度は生理学的条件と類似であり得るが、一般に生理学的条件下より高い濃度がインビボで効果を改善するために推奨され得る。
【００１４】
他の局面において、本発明は、下記を提供する：
３．１  哺乳動物の体外でフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの存在下で成熟され、処置された成熟樹状細胞を、薬学的に許容される賦形剤と共に含む、例えば、静脈内投与のための医薬組成物。
【００１５】
本発明にしたがい処置されたＤＣを含む医薬組成物は、水性媒体；および、例えば、水性媒体以外に、所望によりさらなる薬学的に許容される賦形剤、例えば、哺乳動物に細胞を投与するために適当である賦形剤を含み得る。水性媒体は適当な緩衝媒体、例えば、静脈内投与のために有用であり、薬学的に許容される緩衝媒体を含み得る。
本発明により提供される医薬組成物は慣用の方法にしたがって、例えば、準じて製造でき、例えば、哺乳動物の体外でフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの存在下で成熟され、処置され、そしてフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンおよび成熟剤を、例えば、細胞を単離することにより、例えば、細胞を洗浄することにより除去した成熟樹状細胞を含む組成物を製造し、該組成物は、例えば、ＤＣの、例えば、水性媒体、例えば、緩衝媒体中の、エマルジョンまたは懸濁液の形態での静脈内投与のために適当である。
単離された細胞に、所望によりさらなる薬学的に許容される賦形剤、例えば、担体または希釈剤を加え得る。
【００１６】
他の局面において、本発明は、下記を提供する：
４．１  ａ）フェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの存在下で哺乳動物の体外で樹状細胞を成熟させ、
ｂ）工程ａ）で得られた細胞を単離し、そして
ｃ）所望により薬学的に許容される賦形剤と混合する
ことを含む、例えば、静脈内投与のための医薬組成物を製造するための方法。
【００１７】
薬学的に許容される賦形剤は担体および希釈剤、例えば、生理学的に許容される緩衝媒体を含む水性媒体を含む。
【００１８】
本発明の処置が、驚くべきことに哺乳動物における免疫寛容を誘導する、例えば、このような処置が、哺乳動物における免疫寛容を、処置の前の免疫寛容状態と比較して増強することを見いだした。
【００１９】
例えば、インビトロでフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミン、例えば、ここで定義の化合物Ａまたは化合物Ｂで処置された骨髄由来成熟樹状細胞での細胞治療は、マウスにおいて膵島移植拒絶反応を顕著に予防する、例えば、フェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンは長期間の能動的寛容の誘導を、例えば、なんらかのさらなる免疫抑制性レジメンと関係なく促進する。
【００２０】
本発明により提供される使用または方法または医薬組成物は、本明細書で“本発明の（本発明による）使用（または方法、または医薬組成物）”としても記載されている。
【００２１】
本発明に、例えば、本発明の使用、方法または医薬組成物のために有用である適当なフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンは、例えば、ＷＯ０３０６３８７１に記載されているフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンを含む。本発明にしたがい有用であるフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンは、本明細書で“本発明の（本発明による）フェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミン”としても記載されている。
【００２２】
ある局面において、本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンは、式
【化１】
2009509995.tif 000002
［式中、
Ｒ１はハロゲンまたはハロ（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ２は水素、ハロゲンまたはハロ（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ３はハロゲンまたはハロ（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ４は水素、（Ｃ１−８）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−６）アルキルまたは式
−ＣＯ−Ｒ５、
−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−ＯＲ６、
−ＣＯ−ＣＯ−Ｒ７、
−ＣＯ−ＣＯ−ＯＲ８、
−ＣＯ−Ｎ（Ｒ９Ｒ１０）、
−ＣＯ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−Ｒ１１、
−ＣＯ−（ＣＨＲ１５）−Ｏ−（ＣＨ２）ｏ−ＣＯ−Ｒ１１、
−ＣＯ−（ＣＨ２）ｐ−Ｏ−（ＣＨ２）ｑ−Ｏ−（ＣＨ２）ｒ−Ｒ１６、
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｓ−Ｏ−ＣＯ−Ｒ１７、
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｔ−Ｎ（Ｒ１８Ｒ１９）、
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｕ−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ（ＮＨ２）−Ｒ２０、もしくは
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｗ−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ１７の基であり、
Ｒ５は水素、（Ｃ１−８）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、アミノ、（Ｃ１−４）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４）アルキルアミノ、アリール、例えば、（Ｃ６−１８）アリール、または、例えば、５または６個の環員および１から４個のＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子を有するヘテロシクリルであり、
Ｒ６は水素、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、アリール、例えば、（Ｃ６−１８）アリール、５または６個の環員および１から４個のＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子を有するヘテロシクリルにより置換されている（Ｃ１−４）アルキル、アミノ（Ｃ１−６）アルキル、（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキル、ジ（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキルまたはアミノ酸残基、例えば、式−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＯＯＨのアミノ酸残基、または、例えば、Ｒ６が−ＣＯ−（ＣＨ２）ｖ−ＣＯ−Ｃｌである式Ｉの化合物とアミノ酸を反応させることにより得られるアミノ酸残基、アミノ酸モノ（Ｃ１−６）アルキルエステルまたはアミノ酸ジ（Ｃ１−６）アルキルエステルであり、
【００２３】
Ｒ７およびＲ８は互いに独立して（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、アリールまたは５または６個の環員および１から４個のＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子を有するヘテロシクリルであり、
Ｒ９およびＲ１０は互いに独立して水素もしくは（Ｃ１−４）アルキルであるか、または
Ｒ９およびＲ１０の一方が水素であり、もう一方が（Ｃ３−８）シクロアルキル、（Ｃ１−４）アルキル、アリール、例えば、（Ｃ６−１８）アリール、または５または６個の環員および１から４個のＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子を有するヘテロシクリルであり、
Ｒ１１は（Ｃ１−４）アルキル、−ＯＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、アミノ酸残基、例えば、Ｒ１１が−ＣＯ−（ＣＨＲ１５）−Ｏ−（ＣＨ２）ｏ−ＣＯ−Ｃｌである式Ｉの化合物とアミノ酸を反応させることにより得られるアミノ酸残基、アミノ酸モノ（Ｃ１−６）アルキルエステルまたはアミノ酸ジ（Ｃ１−６）アルキルエステルであり、
Ｒ１２は水素または（Ｃ１−４）アルキル、例えば、結合がアミン基を介して生じているアミノ酸残基であり；
Ｒ１３およびＲ１４は互いに独立して水素、（Ｃ１−４）アルキル、アミノ（Ｃ１−６）アルキル、（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキル、ジ（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキルであり、
Ｒ１５は水素または（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ１６は水素、（Ｃ１−４）アルキル、カルボキシルまたは、例えば、カルボニル基を介して結合しているカルボン酸エステル残基であり；
Ｒ１７はアミノ（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−４）アルキルまたはジ（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ１８は水素または（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ１９はヒドロキシ（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ２０は（Ｃ１−４）アルキルまたはヒドロキシ（Ｃ１−４）アルキルであり、
ｍは０から４であり、ｎは２から８であり、ｏは０から４であり、ｐは０から４であり、ｑは１から８であり、ｒは０から４であり、ｓは１から４であり、ｔは１から４であり、ｕは１から６であり、そしてｗは１から６である］
で示される化合物である。
【００２４】
他の局面において、本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンは、
Ｒ１がクロロまたはトリフルオロメチルであり、
Ｒ２が水素またはトリフルオロメチルであり、
Ｒ３がクロロ、フルオロまたはトリフルオロメチルであり、
Ｒ４が水素、（Ｃ１−４）アルキル、例えば、メチル、ヒドロキシ（Ｃ１−４）アルキル、例えばヒドロキシエチル、または式
−ＣＯ−Ｒ５、
−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍ−ＯＲ６、
−ＣＯ−ＣＯ−Ｒ７、
−ＣＯ−ＣＯ−ＯＲ８、
−ＣＯ−Ｎ（Ｒ９Ｒ１０）、
−ＣＯ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−Ｒ１１、
−ＣＯ−（ＣＨＲ１５）−Ｏ−（ＣＨ２）ｏ−ＣＯ−Ｒ１１、
−ＣＯ−（ＣＨ２）ｐ−Ｏ−（ＣＨ２）ｑ−Ｏ−（ＣＨ２）ｒ−Ｒ１６、
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｓ−Ｏ−ＣＯ−Ｒ１７、
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｔ−Ｎ（Ｒ１８Ｒ１９）、
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｕ−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ（ＮＨ２）−Ｒ２０、または
−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）ｗ−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ１７の基であり、
Ｒ５が水素、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル、ジメチルアミノ、フェニルまたは５または６個の環員および１から４個のＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子を有するヘテロシクリル、例えば、６環員およびヘテロ原子として１個のＯを有するヘテロシクリル、例えば、テトラヒドロピラニルであり、
Ｒ６が水素、（Ｃ１−４）アルキル、５または６個の環員および１から４個のＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子を有するヘテロシクリル、例えば、５または６個の環員およびＮまたはＯから選択される１または２個のヘテロ原子を有するヘテロシクリル、例えば、非置換ピロリジン、モルホリンおよびピペラジンおよび、例えば、（Ｃ１−２）アルキルまたは（Ｃ１−２）ヒドロキシアルキルにより置換されているピペラジンにより置換されている（Ｃ１−２）アルキル；アミノ（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−２）アルキルアミノ（Ｃ１−４）アルキル、ジ（Ｃ１−２）アルキルアミノ（Ｃ１−４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−３）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−２）アルキルアミノ（Ｃ１−２）アルキルまたはアミノ酸残基、例えば、−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＯＯＨであり、
【００２５】
Ｒ７およびＲ８が互いに独立して（Ｃ１−２）アルキルまたはフェニルであり、
Ｒ９およびＲ１０が互いに独立して水素または（Ｃ１−２）アルキルであり、
Ｒ１１が（Ｃ１−２）アルキル、−ＯＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、好ましくはアラニン、フェニルアラニン、グルタミン酸およびリシンからなる群から選択されるアミノ酸から生じるアミノ酸残基、それらの（Ｃ１−２）アルキルエステルまたはそれらのジ（Ｃ１−２）アルキルエステル（ここで結合はα−アミノ基を介してか、または、例えば、リシンの場合、ε−アミノ基を介して結合している）であり、
Ｒ１２が水素または（Ｃ１−２）アルキルであり、
Ｒ１３およびＲ１４が互いに独立して水素、（Ｃ１−２）アルキル、アミノ（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−２）アルキルアミノ（Ｃ１−４）アルキル、ジ（Ｃ１−２）アルキルアミノ（Ｃ１−４）アルキルであり、
Ｒ１５が水素または（Ｃ１−２）アルキルであり、
Ｒ１６が水素、（Ｃ１−２）アルキル、カルボキシルまたは、例えば、カルボニル基を介して結合しているカルボン酸エステルであり；
Ｒ１７がアミノ（Ｃ１−２）アルキルであり、
Ｒ１８が水素または（Ｃ１−２）アルキルであり、
Ｒ１９がヒドロキシ（Ｃ１−２）アルキルであり、
Ｒ２０が（Ｃ１−２）アルキルまたはヒドロキシ（Ｃ１−２）アルキルであり、
ｍが０または１であり、ｎが２から４であり、ｏが０または１であり、ｐが０から２であり、ｑが２から５であり、ｒが０から２であり、ｓが２であり、ｔが２であり、ｕが１から３であり、そしてｗが１から３である式Ｉの化合物である。
【００２６】
Ｒ４が水素以外である式Ｉの化合物は、Ｒ４が水素である式Ｉの化合物の前駆体であると予測され、例えば、Ｒ１がクロロであり、Ｒ２が水素であり、Ｒ３がトリフルオロメチルであり、そしてＲ４が式−ＣＯ−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｎ［（Ｃ２Ｈ５ＯＨ）（ＣＨ３）］の基である式Ｉの化合物（本明細書で“化合物Ａ”としても示される）は、活性化合物であると判明したＲ１がクロロであり、Ｒ２が水素であり、Ｒ３がトリフルオロメチルであり、そしてＲ４が水素である式Ｉの化合物（本明細書で“化合物Ｂ”としても示される）の前駆体であると判明した。
【００２７】
他の局面において、本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）アミンは、
Ｎ−［４−（３−クロロ−フェニル）−ピリミジン−２−イル］−Ｎ−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−アミン、
Ｎ−［４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピリミジン−２−イル］−Ｎ−（４−フルオロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−アミン、
Ｎ−［４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピリミジン−２−イル］−Ｎ−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−アミン、
Ｎ−［４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピリミジン−２−イル］−Ｎ−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−アミン、および
Ｎ−［４−（３−クロロ−フェニル）−ピリミジン−２−イル］−Ｎ−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−アミン、
−（ここでアミン基は非置換であるか、
−アミン基はＲ４（Ｒ４は上記定義のとおりである）により置換されている）
からなる群から選択される式Ｉの化合物である。
【００２８】
他の局面において、本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンは、例えば、塩酸塩、メシル酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ベシル酸塩（一ベンゼンスルホン酸塩）またはカルシウム塩形の式
【化２】
2009509995.tif 000003
【００２９】
【化３】
2009509995.tif 000004
【００３０】
【化４】
2009509995.tif 000005
【００３１】
【化５】
2009509995.tif 000006
【００３２】
【化６】
2009509995.tif 000007
【００３３】
【化７】
2009509995.tif 000008
【００３４】
【化８】
2009509995.tif 000009
【００３５】
【化９】
2009509995.tif 000010
【００３６】
【化１０】
2009509995.tif 000011
【００３７】
【化１１】
2009509995.tif 000012
【００３８】
【化１２】
2009509995.tif 000013
【００３９】
【化１３】
2009509995.tif 000014
からなる群から選択され、例えば、Ｒ１がクロロであり、Ｒ２が水素であり、Ｒ３がトリフルオロメチルであり、そしてＲ４が水素である式Ｉの化合物（本明細書で“化合物Ｂ”としても示される）、または
Ｒ１がクロロであり、Ｒ２が水素であり、Ｒ３がトリフルオロメチルであり、そしてＲ４が式
【化１４】
2009509995.tif 000015
の基である式Ｉの化合物（本明細書で“化合物Ａ”としても示される）である。
【００４０】
特記されない限り、本明細書で定義されたアリールはフェニルを含む。ハロゲンはフルオロ、クロロ、ブロモを含む。ハロアルキルはハロが１個またはそれ以上のハロゲンであるハロ（Ｃ１−４）アルキル、好ましくはトリフルオロメチルを含む。（Ｃ３−８）シクロアルキルは、例えば、（Ｃ３−６）シクロアルキルを含む。アミノはアミノ、（Ｃ１−４）アルキルアミノおよびジ（Ｃ１−４）アルキルアミノを含む。アミノアルキルはアミノ（Ｃ１−６）アルキル、例えば、（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキル、ジ（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキル、好ましくは、置換アミノ（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−４）アルキル、例えば、ジメチル−またはジエチルアミノ（Ｃ１−４）アルキルを含む。ヒドロキシアルキルアミノはヒドロキシ（Ｃ１−６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−４）アルキルアミノ（Ｃ１−６）アルキル、好ましくはヒドロキシ（Ｃ１−３）アルキルまたはヒドロキシ（Ｃ１−２）アルキルアミノ（Ｃ１−２）アルキルを含む。アミノ酸は全ての天然および合成アミノ酸、好ましくはα−アミノ酸、例えば、アラニン、フェニルアラニン、グリシン、グルタミン酸およびリシンを含む。アミノ酸は１個またはそれ以上のアミノ酸、例えば、ジ−またはトリペプチドを含む。
【００４１】
ヘテロシクリルはＮ、ＯまたはＳから選択される１から４個のヘテロ原子を有する５または６員ヘテロ環式環系を含む。好ましくはヘテロシクリルはＮまたはＯから選択される１または２個のヘテロ原子を有する５または６員環系を含む。好ましいものはピロリジン、モルホリンおよびピペラジンである。
【００４２】
すべての基は非置換であるかまたは置換されており、例えば、有機化学において慣用の基、例えば、ハロゲン、ハロアルキル、アルキルカルボニルオキシ、アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、アルキルカルボニルアミノ、アミノアルキルカルボニルアミノ、ヒドロキシアルキルアミノ、アミノアルキルアミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、５または６環員およびＮ、Ｏ、Ｓから選択される１から４個のヘテロ原子を有するヘテロシクリル；（Ｃ１−４）アルキルヘテロシクリル（ここでヘテロシクリルは５または６環員およびＮ、Ｏ、Ｓから選択される１から４個のヘテロ原子を有する）；ヒドロキシ（Ｃ１−４）アルキルヘテロシクリル（ここでヘテロシクリルは５または６環員およびＮ、Ｏ、Ｓから選択される１から４個のヘテロ原子を有する）；カルボキシル、（Ｃ１−４）アルキルカルボニルオキシ、アミノ（Ｃ１−４）−アルキルカルボニルオキシから選択される基により置換されている。
【００４３】
本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンはなんらかの形態、例えば、遊離形、塩形、溶媒和物形ならびに塩および溶媒和物の形態のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンを含む。このような塩は、例えば、金属塩または酸付加塩を含む薬学的に許容される塩を含む。金属塩は、例えば、アルカリまたはアルカリ土類塩；例えば、カルシウム塩を含む。酸付加塩は、例えば、無機酸および有機酸、例えば、薬学的に許容される酸、例えば、塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸を含む酸との式Ｉの化合物の塩を含む。
【００４４】
遊離形の本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンは、塩形の対応する化合物に変換され得る；逆も同様である。遊離形または塩形および溶媒和物形の本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンは、遊離形または塩形および非溶媒和物形の対応する化合物に変換され得る；逆も同様である。
【００４５】
本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンは異性体、例えば、光学異性体、ジアステレオマー、シス−トランス配座異性体およびそれらの混合物の形態で存在し得る。本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンは、例えば、不斉炭素原子を含み得、したがってエナンチオマー、ジアステレオマーおよびそれらの混合物、例えば、ラセミ体の形態で存在し得る。例えば、本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンにおける不斉炭素原子に結合している置換基は、Ｒ−またはＳ−配置（それらの混合を含む）であり得る。本発明は、すべての異性体およびすべての異性体混合物の本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンを含む。
【００４６】
本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンは、必要に応じて、例えば、慣用の方法にしたがって、例えば、準じて製造でき、例えば、式Ｉの化合物は、例えば、ＷＯ０３０６３８７１に記載の方法にしたがって、例えば、準じて製造できる。
【００４７】
本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの医薬有用性は、例えば、動物モデルにおいて決定でき、例えば、本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンのインビボ効果は、同種膵臓膵島移植のマウスモデルにおいて決定された。本発明の化合物は、このようなモデルにおいて活性である。
【００４８】
例えば、このような同種膵臓膵島移植のマウスモデルにおける“試験化合物”（また例えば、図において“ＴＣ”と略されている）としても表される本明細書の化合物Ａおよび化合物Ｂの効果は、例えば、下記手段により研究された：
レシピエントＢＡＬＢ／ｃマウスはストレプトゾトシンの単回投与により糖尿病にされ、Ｃ５７Ｂｌ／６マウスから単離した膵臓膵島を移植されている。移植マウスを移植後０日から３０日まで３０ｍｇ／ｋｇまたは７．５ｍｇ／ｋｇの用量の試験化合物の水溶性誘導体で毎日処置する。試験化合物が用量依存的に長期間膵臓膵島同種移植片の許容性を顕著に促進することを見いだした。例えば、７．５ｍｇ／ｋｇの用量で、試験化合物は４０％のレシピエントにおいて長期間移植片生着を誘導し、一方、３０ｍｇ／ｋｇで、処置されたマウスの７０％が正常グルコースレベルを維持する（例えば、図１の結果、参照）。興味深いことに、長期間寛容なマウスを１００日目にドナー型脾臓細胞で再攻撃することにより実証されているように、高用量の試験化合物での処置は能動的な寛容性の誘導をもたらす（例えば、図２の結果、参照）。加えて、長期間生着した移植片を有する試験化合物処置マウスの脾臓から単離された抗原提示細胞は、新たに移植されたマウスに寛容性を移す（例えば、図３の結果、参照）。移植後７および３０日で実施されたエキソビボフローサイトメトリー分析は、試験化合物での処置がＣＤ１１ｃ＋脾臓のＤＣにおける共刺激分子（ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ４０）の発現のダウンレギュレーションをもたらすことを示す（例えば、図４の結果、参照）。移植された膵島の組織学分析は試験化合物処置がＣＤ１１ｃ＋ＤＣおよびＣＤ８＋Ｔ細胞による移植片浸潤を阻害し、膵島機能を保護することを示す（図５）。これらの結果は試験化合物が特異的にＤＣの活性および機能を阻害する寛容原性の化合物であることを示す。
【００４９】
マウスＤＣにおける試験化合物の効果をさらに研究するために、ＢＡＬＢ／ｃマウス由来骨髄細胞を試験化合物（２０ｎＭ）の存在下または非存在下で骨髄由来ＤＣ（ＢＭ−ＤＣ）にＧＭ−ＣＳＦで分化させる。ＢＭ−ＤＣは未成熟のままであるか、またはＬＰＳで活性化される。試験化合物は成熟ＢＭ−ＤＣにおいて共刺激分子、ＣＤ８０、ＣＤ８６およびＣＤ４０のアップレギュレーションを阻害する（例えば、図６の結果、参照）。興味深いことに、ＬＰＳで活性化されたが、未成熟でない試験化合物で処置されたレシピエント型ＢＭ−ＤＣのマウスへの注射は、膵島同種移植片許容性を顕著に促進する（例えば、図７の結果、参照）。
【００５０】
本発明の方法または医薬組成物または使用が、したがって低免疫寛容が障害または疾患状態の基礎である障害または疾患状態の処置または予防のために有用であることが示される。
【００５１】
例えば、上記１．１から１．４、２．１から２．３および４．１に記載されている本発明の方法または医薬組成物または使用は、例えば、低免疫寛容により介在される疾患の処置、例えば、下記の処置を含む疾患の処置のために有用であり得る：
ａ）臓器または組織移植拒絶反応後の障害の処置、例えば、心臓、肺、心臓肺複合、肝臓、腎臓、膵臓、皮膚または角膜移植のレシピエントの、例えば、処置；例えば、骨髄移植後の移植片対宿主病、例えば、移植臓器における慢性拒絶反応、例えば、慢性拒絶反応の顕在化、すなわち移植片への免疫反応によりもたらされる状態および移植臓器または組織における血管壁の反応の予防。本発明の方法または使用は、慢性拒絶反応徴候を減少するため、または慢性拒絶反応によりもたらされる状態を改善するために有用であり得る。臓器または組織移植はドナーから同じまたは異なる種のレシピエントへと実施され得る。本発明の方法または使用は、したがって臓器または組織異種移植のレシピエントにおける急性または慢性拒絶反応を予防または回復するために有用であり得る。例えば、異種臓器または組織移植を含む移植臓器は、例えば、心臓、肝臓、腎臓、脾臓、肺、小腸、膵臓（完全なまたは一部、例えば、ランゲルハンス島）、皮膚および骨髄異種移植片を含み得る。
【００５２】
ｂ）自己免疫性疾患および（悪性）炎症性状態、特に自己免疫性成分を含む病因を有する炎症性状態、例えば、関節炎（例えば、リウマチ性関節炎、慢性進行性関節炎および変形性関節炎）およびリウマチ性疾患の処置。本発明の方法または使用が有用であり得る特定の自己免疫性疾患は、自己免疫性血液疾患（例えば、溶血性貧血、再生不良性貧血、赤芽球癆および特発性血小板減少症）、全身性エリテマトーデス、多発性軟骨炎、強皮症、ウェゲナー肉芽腫、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、乾癬、スティーブン−ジョンソン症候群、特発性スプルー、消化器疾患、例えば、自己免疫性炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎およびクローン病）、内分泌腺眼症、グレーブス病、サルコイドーシス、多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、若年性糖尿病（Ｉ型糖尿病）、ブドウ膜炎（前部および後部）、乾性角結膜炎および春期角結膜炎、間質性肺線維症、乾癬性関節炎、糸球体腎炎（例えば、特発性ネフローゼ症候群または微少変化ネフロパシーを含むネフローゼ症候群を有するまたは有さない）および若年性皮膚筋炎を含む。
【００５３】
ｃ）アレルギー性疾患、例えば、自己免疫性成分を含む病因を有するアレルギー性状態、例えば、特に幼児のアトピー性皮膚炎、蕁麻疹、特に急性蕁麻疹、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、食物アレルギー、アレルギー性結膜炎、花粉症、類天疱瘡、産業的過敏化の処置。
【００５４】
本明細書で使用される処置は処置および防止（予防）を含む。
【００５５】
他の局面において、本発明は、低免疫寛容により介在される疾患、例えば、下記の疾患の処置のための、例えば、上記１．１から１．４、２．１から２．３および４．１に記載されている本発明の方法または医薬組成物または使用（例えば、下記の方法または医薬組成物または使用）を提供する：
−臓器または組織移植拒絶反応後の障害、
−自己免疫疾患、
−自己免疫性成分を含む病因を有する炎症状態、
−アレルギー疾患、
−処置を必要とする対象に治療有効量の本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンを投与することを含む低免疫寛容により介在される障害を処置する方法；
−例えば、有効量の本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンを含む低免疫寛容により介在される障害を処置するための薬剤の製造のための方法；
−低免疫寛容により介在される障害を処置するための本発明の医薬組成物の使用、または
−本発明の医薬組成物を含む、低免疫寛容により介在される障害を処置するための医薬組成物。
【００５６】
本発明の方法または使用において、低免疫寛容により介在される障害を処置するために、本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンは単一の活性成分として使用され得るか、または少なくとも１種の第２の薬剤、例えば、ここで定義の第２の薬剤を組み合わせて、例えば、連続して、または同時にのいずれかで使用できる。
【００５７】
このような第２の薬剤は、例えば、免疫調節化合物、例えば、免疫抑制剤、抗炎症性化合物または抗アレルギー性化合物を含む。
本発明の医薬組成物は、所望により哺乳動物の体外でフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミンの存在下で成熟された成熟樹状細胞および第２の薬剤の組合せを含み得て、好ましくは本発明の医薬組成物は第２の薬剤を含まない。
【００５８】
本発明の処置において、第２の薬剤の適当な用量は、もちろん、例えば、使用される第２の薬剤の化学性質および薬物動態学的データ、個々の宿主、投与経路および処置される状態の性質および重症度に依存して変化し得る。しかしながら、一般的に、大型哺乳動物、例えば、ヒトにおいて満足な結果のために示される１日用量は、例えば、１日に４回までの分割用量で投与される、
−約０．０００１ｇから約１．５ｇ、
−約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重から約２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲を含む。
【００５９】
本発明の組合せ（処置）の第２の薬剤は、例えば、被覆または非被覆錠剤、カプセル、（注射）溶液、注入溶液、固溶体、懸濁液、分散体、固体分散体の形態で；例えば、アンプル剤、バイアルの形態で、クリーム、ゲル、ペースト、吸入粉末、泡状物、チンキ剤、リップスティック、ドロップ、スプレー状の形態で、または座薬の形態で、なんらかの慣用の経路で、例えば、経鼻、経口内、経直腸、経口投与を例えば含む経腸；例えば、静脈内、動脈内、筋肉内、心臓内、皮下、骨内注入、経皮（表皮を介する拡散）、経粘膜（粘膜を介する拡散）、吸入投与を含む非経腸で；例えば、皮膚、経鼻、気管内投与を含む局所的によりで；腹腔内（腹腔への注入または注射）に；硬膜外（epidural）（硬膜上腔への注射または注入）に；髄腔内（髄液への注射または注入）に；硝子体内（眼を介する投与）に；または、例えば、局所送達のための医療デバイス、例えば、ステントを介して投与できる。
【００６０】
第２の薬剤は薬学的に許容される塩形、または遊離形；所望により溶媒和物形で、本発明の組合せ処置において投与できる。
【００６１】
一連のさらなる局面において、本発明は、下記を提供する
−少なくとも１種の第２の薬剤と組み合わせた本発明の医薬組成物の組合せ；
−少なくとも１種の第２の薬剤と組み合わせて本発明の医薬組成物を含む医薬組合せ；
−本明細書で定義のいずれかの方法において使用するための少なくとも１種の第２の薬剤と組み合わせた本発明の医薬組成物、
−例えば、組合せ処置において使用するための医薬として使用するための本発明の医薬組成物および少なくとも１種の第２の薬剤を含む医薬組合せ；
−例えば、組合せ処置において使用するための少なくとも１種の第２の薬剤と組み合わせた本発明の医薬組成物の医薬としての使用；
−第２の薬剤と組み合わせて使用するための薬剤の製造のための本発明の医薬組成物の使用；
−低免疫寛容が介在する疾患の処置のための第２の薬剤と組み合わせて使用するための薬剤の製造のための本発明の医薬組成物の使用
−例えば、医薬組合せまたは組成物形の治療有効量の本発明の医薬組成物および少なくとも１種の第２の薬剤を同時にまたは連続して共投与することを含む、処置を必要とする対象の低免疫寛容により介在される障害を処置するための方法；
−低免疫寛容が介在する疾患の処置のために使用するための薬剤の製造における使用のための少なくとも１種の第２の薬剤と組み合わせた本発明の医薬組成物。
【００６２】
組合せは、本発明の医薬組成物および少なくとも１種の第２の薬剤を別々にパッケージングするが、例えば、低免疫寛容が介在する疾患の処置のための同時にまたは連続して投与するための指示書が与えられた自由な組合せを含む。
【００６３】
他の局面において、本発明は、少なくとも１種の第２の薬剤に加えて本発明の医薬組成物との組合せのための指示書、例えば、組合せ処置のための指示書を含む医薬パッケージを提供する。
【００６４】
本発明の組合せ処置は、単剤処置と比較して改良を提供し得る。
【００６５】
他の局面において、本発明は、下記を提供する：
−例えば、同時にまたは連続して、治療有効量の本発明の化合物および第２の薬剤の共投与を含む、本発明の医薬組成物の治療的有用性を改良するための方法
−例えば、同時にまたは連続して、治療有効量の本発明の医薬組成物および第２の薬剤の共投与を含む、第２の薬剤の治療的有用性を改良するための方法。
【００６６】
本発明の医薬組成物は、慣用の方法にしたがって、例えば、準じて、例えば、混合、造粒、被覆、溶解または凍結乾燥法により製造できる。単位用量形は、例えば、約０．１ｍｇから約１５００ｍｇ、例えば、１ｍｇから約１０００ｍｇを含み得る。
【００６７】
“第２の薬剤”なる用語は化学療法剤、とりわけ本発明のフェニル−（４−フェニル−ピリミジン−２−イル）−アミン以外のすべての化学療法剤を意味する。
【００６８】
例えば、本明細書で使用される第２の薬剤は、例えば、抗炎症性剤および／または免疫調節剤および／または抗アレルギー剤を含む。
本発明の化合物と組み合わせて有用でありそうな抗炎症性剤および／または免疫調節剤および／または抗アレルギー剤は、例えば、下記を含む：
−ｍＴＯＲ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、例えば、式
【化１５】
2009509995.tif 000016
で示されるラパマイシンおよびラパマイシン誘導体、例えば
４０−Ｏ−アルキル−ラパマイシン誘導体、例えば、４０−Ｏ−ヒドロキシアルキル−ラパマイシン誘導体、例えば、４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）−エチル−ラパマイシン（エバロリムス）、
３２−デオキソ−ラパマイシン誘導体および３２−ヒドロキシ−ラパマイシン誘導体、例えば、３２−デオキソラパマイシン、
１６−Ｏ−置換ラパマイシン誘導体、例えば、１６−ペンタ−２−イニルオキシ−３２−デオキソラパマイシン、１６−ペンタ−２−イニルオキシ−３２（ＳまたはＲ）−ジヒドロ−ラパマイシン、１６−ペンタ−２−イニルオキシ−３２（ＳまたはＲ）−ジヒドロ−４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシン、
酸素基で４０位をアシル化されているラパマイシン誘導体、例えば、４０−［３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシ−メチル）−２−プロピオン酸メチル］−ラパマイシン（ＣＣＩ７７９としても既知）、
４０位をヘテロシクリルにより弛緩されているラパマイシン誘導体、例えば、４０−エピ−（テトラゾリル）−ラパマイシン（ＡＢＴ５７８としても既知）、
いわゆる、例えば、ＷＯ９８０２４４１、ＷＯ０１１４３８７およびＷＯ０３６４３８３に記載されているようなラパログ、例えば、ＡＰ２３５７３および
ＴＡＦＡ−９３、ＡＰ２３４６４、ＡＰ２３６７５、ＡＰ２３８４１およびバイオリムスの名の下に記載されている化合物（例えば、バイオリムスＡ９）；
【００６９】
−カルシニューリンのメディエイター、例えば、阻害剤、例えば、シクロスポリンＡ、ＦＫ５０６；
−免疫抑制特性を有するアスコマイシン、例えば、ＡＢＴ−２８１、ＡＳＭ９８１；
−コルチコステロイド；シクロホスファミド；アザチオプレン；レフルノミド；ミゾルビン；
−ミコフェノール酸または、例えば、ナトリウムの塩；ミコフェノール酸モフェチル；
−１５−デオキシスペルグアリンまたはそれらの免疫抑制性相同物、類似体もしくは誘導体；
−ｂｃｒ−ａｂｌチロシンキナーゼ活性のメディエイター、例えば、阻害剤；
−ｃ−ｋｉｔ受容体チロシンキナーゼ活性のメディエイター、例えば、阻害剤；
−ＰＤＧＦ受容体チロシンキナーゼ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、例えば、グリーベック（イマチニブ）；
−ｐ３８ＭＡＰキナーゼ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、
−ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、
−ＰＫＣ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、例えば、ＷＯ０２３８５６１またはＷＯ０３８２８５９に記載されているような、例えば、実施例５６または７０の化合物；
−ＪＡＫ３キナーゼ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、例えば、Ｎ−ベンジル−３，４−ジヒドロキシ−ベンジリデン−シアノアセトアミド□−シアノ−（３，４−ジヒドロキシ）−］Ｎ−ベンジルシンナムアミド（チルホスチンＡＧ４９０）、プロジギオシン２５−Ｃ（ＰＮＵ１５６８０４）、［４−（４’−ヒドロキシフェニル）−アミノ−６，７−ジメトキシキナゾリン］（ＷＨＩ−Ｐ１３１）、［４−（３’−ブロモ−４’−ヒドロキシルフェニル）−アミノ−６，７−ジメトキシキナゾリン］（ＷＨＩ−Ｐ１５４）、［４−（３’，５’−ジブロモ−４’−ヒドロキシルフェニル）−アミノ−６，７−ジメトキシキナゾリン］ＷＨＩ−Ｐ９７、ＫＲＸ−２１１、遊離形または薬学的に許容される塩形の、例えば、一クエン酸塩の３−｛（３Ｒ，４Ｒ）−４−メチル−３−［メチル−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−アミノ］−ピペリジン−１−イル｝−３−オキソ−プロピオニトリル（ＣＰ−６９０，５５０とも呼ばれる）、またはＷＯ２００４０５２３５９またはＷＯ２００５０６６１５６に記載されているような化合物；
−Ｓ１Ｐ受容体活性のメディエイター、例えば、アゴニストまたはモジュレーター、例えば、所望によりリン酸化されているＦＴＹ７２０またはそれらの類似体、例えば、所望によりリン酸化されている２−アミノ−２−［４−（３−ベンジルオキシフェニルチオ）−２−クロロフェニル］エチル−１，３−プロパンジオールまたは１−｛４−［１−（４−シクロヘキシル−３−トリフルオロメチル−ベンジルオキシイミノ）−エチル］−２−エチル−ベンジル｝−アゼチジン−３−カルボン酸またはその薬学的に許容される塩；
−免疫抑制性モノクローナル抗体、例えば、白血球受容体に対するモノクローナル抗体、例えば、Ｂｌｙｓ／ＢＡＦＦ受容体、ＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ５２、ＣＤ５８、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＬ−１２受容体、ＩＬ−１７受容体、ＩＬ−２３受容体またはそれらのリガンド；
−他の免疫調節化合物、例えば、ＣＴＬＡ４の少なくとも細胞外部分またはそれらの変異体を有する、例えば、非ＣＴＬＡ４タンパク質配列に結合しているＣＴＬＡ４の少なくとも細胞外ドメイン部分またはそれらの変異体を有する、組み換え結合分子、例えば、ＣＴＬＡ４Ｉｇ（例えば、ＡＴＣＣ６８６２９で示される）またはそれらの変異体、例えば、ＬＥＡ２９Ｙ；
【００７０】
−接着分子活性のメディエイター、例えば、阻害剤、例えば、ＬＦＡ−１アンタゴニスト、ＩＣＡＭ−１または−３アンタゴニスト、ＶＣＡＭ−４アンタゴニストまたはＶＬＡ−４アンタゴニスト、
−ＣＣＲ９活性のメディエイター、例えば、アンタゴニスト、
−ＭＩＦ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、
−５−アミノサリチル酸（５−ＡＳＡ）剤、例えば、スルファサラジン、アザルフィジン（登録商標）、アサコール（登録商標）、ジペンタム（登録商標）、ペンタサ（登録商標）、ロワサ（登録商標）、カナサ（登録商標）、コラザール（登録商標）、例えば、メサラジン含有薬剤；例えば、ヘパリンと組み合わせたメサラジン；
−ＴＮＦ−α活性のメディエイター、例えば、阻害剤、例えば、ＴＮＦ−αに結合する抗体、例えば、インフリキシマブ（レミケード（登録商標））、サリドマイド、レナリドマイド、
−酸化窒素放出非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、例えば、ＮＯ供与型ＣＯＸ阻害剤（ＣＩＮＯＤ）；
−ホスホジエステラーゼ、例えば、ＰＤＥ４Ｂ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、
−カスパーゼ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、
−Ｇタンパク質共役受容体、ＧＰＢＡＲ１のメディエイター、例えば、アゴニスト、
−セラミドキナーゼ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、
−‘多機能性抗炎症’剤（ＭＦＡＩＤ）、例えば、グリコサミノグリカンと関連している細胞質型ホスホリパーゼＡ２（ｃＰＬＡ２）阻害剤、例えば、膜結合型ホスホリパーゼＡ２阻害剤；
−抗生物質、例えば、ペニシリン、セファロスポリン、エリスロマイシン、テトラシクリン、スルホンアミド、例えば、スルファジアジン、スルフイソキサゾール；スルホン、例えば、ダプソーン；プレウロムチリン、フルオロキノロン、例えば、メトロニダゾール、キノロン、例えば、シプロフロキサシン；レボフロキサシン；プロバイオティクスおよび共生細菌、例えば、乳酸菌；
−抗ウイルス剤、例えば、リビビリン、ビダラビン、アシクロビア、ガンシクロビル、ザナミビル、リン酸オセルタミビル、ファムシクロビル、アタザナビル、アマンタジン、ディダノシン、エファビレンツ、フォスカルネット、インジナビル、ラミブジン、ネルフィナビル、リトナビル、サクイナビル、スタブジン、バラシクロビル、バルガンシクロビル、ジドブジン。
【００７１】
本発明の化合物と組み合わせて有用でありそうな抗炎症剤は、例えば、非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、例えば、プロピオン酸誘導体（アルミノプロフェン、ベノキサプロフェン、ブクロクス酸、カルプロフェン、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドプロフェン、ケトプロフェン、ミロプロフェン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピルプロフェン、プラノプロフェン、スプロフェン、チアプロフェン酸、およびチオキサプロフェン）、酢酸誘導体（インドメタシン、アセメタシン、アルクロフェナック、クリダナク、ジクロフェナク、フェンクロフェナック、フェンクロジン酸、フェンチアザク、フロフェナック、イブフェナック、イソキセパク、オキシピナク、スリンダク、チオピナク、トルメチン、ジドメタシン、およびゾメピラック）、フェナム酸誘導体（フルフェナム酸、メクロフェナミン酸、メフェナム酸、ニフルム酸およびトルフェナム酸）、ビフェニルカルボン酸誘導体（ジフルニサルおよびフルフェニサール）、オキシカム（イソキシカム、ピロキシカム、スドキシカムおよびテノキシカン）、サリチレート（アセチルサリチル酸、スルファサラジン）およびピラゾロン（アパゾン、ベズピペリロン、フェプラゾン、モフェブタゾン、オキシフェンブタゾン、フェニルブタゾン）；シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）阻害剤、例えば、セレコキシブ；ホスホジエステラーゼＩＶ型（ＰＤＥ−ＩＶ）の阻害剤；ケモカイン受容体のアンタゴニスト、とりわけＣＣＲ−１、ＣＣＲ−２、およびＣＣＲ−３；コレステロール低下剤、例えば、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤（ロバスタチン、シンバスタチンおよびプラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、および他のスタチン）、金属イオン封鎖剤（コレスチラミンおよびコレスチポール）、ニコチン酸、フェノフィブリック酸誘導体（ジェムフィブロジル、クロフィブラート、フェノフィブレートおよびベンザフィブレート）、およびプロブコール；抗コリン剤、例えば、ムスカリン性アンタゴニスト（臭化イプラトロピウム）；他の化合物、例えば、テオフィリン、スルファサラジンおよびアミノサリチル酸、例えば、５−アミノサリチル酸およびそれらのプロドラッグ、抗リウマチ剤を含む。
【００７２】
本発明の化合物と組み合わせて有用でありそうな抗アレルギー剤は、例えば、抗ヒスタミン剤（Ｈ１−ヒスタミンアンタゴニスト）、例えば、ブロモフェニラミン、クロロフェニラミン、デクスクロフェニラミン、トリプロリジン、クレマスチン、ジフェンヒドラミン、ジフェニルピラリン、トリペレナミン、ヒドロキシジン、メトジラジン、プロメタジン、トリメプラジン、アザタジン、サイプロヘプタジン、アンタゾリン、フェニラミン、ピリラミン、アステミゾール、テルフェナジン、ロラタジン、セチリジン、フェキソフェナジン、デスカルボエトキシロラタジン、および非ステロイド系抗喘息剤、例えば、β２−アゴニスト（テルブタリン、メタプロテレノール、フェノテロール、イソエタリン、アルブテロール、ビトルテロール、サルメテロールおよびピルブテロール）、テオフィリン、クロモグリク酸ナトリウム、アトロピン、臭化イプラトロピウム、ロイコトリエンアンタゴニスト（ザフィルカスト、モンテルカスト、プランルカスト、イラルカスト、ポビルカスト、ＳＫＢ−１０６，２０３）、ロイコトリエン生合成阻害剤（ジレウトン、ＢＡＹ−１００５）；気管支拡張剤、抗喘息剤（肥満細胞安定剤）を含む。
【００７３】
好ましくは第２の薬剤は、免疫抑制剤、例えば
−ｍＴＯＲ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、
−カルシニューリンのメディエイター、例えば、阻害剤、
−免疫抑制特性を有するアスコマイシン、
−コルチコステロイド；シクロホスファミド；アザチオプレン；レフルノミド；ミゾルビン；
−ミコフェノール酸または、例えば、ナトリウムの塩；ミコフェノール酸モフェチル；
−１５−デオキシスペルグアリンまたはそれらの免疫抑制相同物、類似体もしくは誘導体；
−Ｓ１Ｐ受容体活性のメディエイター、例えば、アゴニストまたはモジュレーター、
−免疫抑制性モノクローナル抗体；
−非ＣＴＬＡ４タンパク質配列に結合している、ＣＴＬＡ４の細胞外ドメインの少なくとも部分またはそれらの変異体、例えば、ＣＴＬＡ４の少なくとも細胞外部分またはそれらの変異体を有する組み換え結合分子、
−接着分子活性のメディエイター、例えば、阻害剤、例えば、ＬＦＡ−１アンタゴニスト、
−ＣＣＲ９活性のメディエイター、例えば、アンタゴニスト、
−ＭＩＦ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、
−５−アミノサリチル酸（５−ＡＳＡ）剤、
−ＴＮＦ−α活性のメディエイター、例えば、阻害剤、
−酸化窒素放出非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、例えば、ＮＯ供与型ＣＯＸ阻害剤（ＣＩＮＯＤ）；
−Ｇタンパク質共役受容体ＧＰＢＡＲ１のメディエイター、例えば、アゴニスト、
−セラミドキナーゼ活性のメディエイター、例えば、阻害剤、
−“多機能性抗炎症”剤（ＭＦＡＩＤ）、
−抗生物質
を含む。
【００７４】
図面の説明
図１から７のすべてにおいて、“ＴＣ”は上記定義のとおりの試験化合物である。経口投与のために化合物Ａを使用し、細胞処置のために化合物Ａまたは化合物Ｂのいずれかを使用でき、好ましくは化合物Ａがまた細胞処置のために使用される。
【００７５】
図１から３
試験化合物（ＴＣ）による移植可能な能動的寛容性の誘導を示す。
【００７６】
図１
Ｃ５７Ｂｌ／６同種ドナーから単離された膵臓膵島を移植したＢＡＬＢ／ｃ雌マウスを試験化合物で移植後０から３０日処置した（３０または７．５ｍｇ／ｋｇ／日）。移植片生着を１週間の血液グルコースレベル測定によりモニタリングする。７．５ｍｇ／ｋｇで、試験化合物は４０％のレシピエントにおいて長期間移植片生着を誘導し、一方、３０ｍｇ／ｋｇで、処置されたマウスの７０％が正常グルコースレベルを維持する。
【００７７】
図２
図１で示されるとおりの処置された試験化合物（３０ｍｇ／ｋｇ／日）および長期間生着した移植片を有するコントロールマウスを、１００日目にドナー型脾臓細胞（３×１０７ｉ．ｐ．）で攻撃する。高用量の試験化合物での処置は能動的寛容性の誘導をもたらす。
【００７８】
図３
膵島同種移植片を受け入れた試験化合物処置マウス由来脾臓細胞（３０ｍｇ／ｋｇ／日）はＣＤ９０（Ｔｈｙ１）−発現細胞を激減させ、残りのＡＰＣ群を新たなレシピエントに注入する（５×１０６細胞、ｉ．ｖ．）。移植片生着を毎週の血液グルコースレベル測定によりモニタリングする（＊両側ｔ検定）。長期間生着した移植片を有する試験化合物処置マウスの脾臓から単離されたＡＰＣは新たな移植マウスに寛容性を移す。
【００７９】
図４
試験化合物処置マウスの脾臓における活性化ＤＣの低い頻度を示す。
移植後７日または３０日（時点ごとに群あたりｎ＝３）の膵島同種移植片移植マウス由来脾臓細胞を、ＣＤ１１ｃ＋ＤＣによる指示される活性化マーカーの発現に対してＦＡＣＳにより分析する（両側ｔ検定：＊＊＊Ｐ＜０．００１、＊＊Ｐ＜０．０１、＊Ｐ＜０．０５）。試験化合物での処置はＣＤ１１ｃ＋脾臓のＤＣにおける共刺激分子（ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ４０）の発現のダウンレギュレーションをもたらす。
【００８０】
図５
試験化合物処置マウスの膵島同種移植片への未成熟細胞浸潤の阻害を示す。
ＢＡＬＢ／ｃ移植マウスにＣ５７Ｂｌ／６膵島を移植し、塩水または試験化合物（３０ｍｇ／ｋｇ／日）で経口的に処置する。移植後１０日目に、腎臓を抽出し、移植片領域で低温切開し、そして示すマーカーについて染色する。
移植された膵島の組織学分析は、試験化合物処置がＣＤ１１ｃ＋ＤＣおよびＣＤ８＋Ｔ細胞による移植片浸潤を阻害し、膵島機能を保護することを示す。
【００８１】
図６および７
インビトロで試験化合物処置ＢＭＤＣでの細胞治療を示す。
図６
ＢＡＬＢ／ｃＢＭ−ＤＣを試験化合物（２０ｎＭ）の存在下または非存在下でＧＭ−ＣＳＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）と共に培養された骨髄細胞から分化させる。ＢＭ−ＤＣは未成熟（ｉＤＣ）のままであるか、またはＬＰＳ（１ｍｇ／ｍｌ、ｍＤＣ）で活性化される。ＤＣを回収し、望ましいマーカーについて染色する。試験化合物は成熟ＢＭ−ＤＣにおいて共刺激分子、ＣＤ８０、ＣＤ８６およびＣＤ４０のアップレギュレーションを阻害する。
【００８２】
図７
ＢＭ−ＤＣをＣ５７Ｂｌ／６膵島同種移植片移植１日前にＢＡＬＢ／ｃ糖尿病雌マウスに（３×１０５、ｉ．ｖ．）に注入する。移植片生着を１週間の血液グルコースレベル測定によりモニタリングする（＊両側ｔ検定）。ＬＰＳで活性化されたが、未成熟でない試験化合物処置されたレシピエント型ＢＭ−ＤＣのマウスへの注射は顕著に膵島同種移植片受け入れを促進する。
【図面の簡単な説明】
【００８３】
【図１】試験化合物（ＴＣ）による移植可能な能動的寛容性の誘導を示す。
【図２】試験化合物（ＴＣ）による移植可能な能動的寛容性の誘導を示す。
【図３】試験化合物（ＴＣ）による移植可能な能動的寛容性の誘導を示す。
【図４】試験化合物処置マウスの脾臓において活性化ＤＣの著しい低下を示す。
【図５】試験化合物処置マウスの膵島同種移植片への未成熟細胞浸潤の阻害を示す。
【図６】インビトロで試験化合物処置ＢＭＤＣでの細胞治療を示す。
【図７】インビトロで試験化合物処置ＢＭＤＣでの細胞治療を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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