(57)【要約】  本発明は、中枢神経系（ＣＮＳ）の状態を治療する際に有用な置換アザシクロアルカン化合物、これを含む医薬組成物、このような状態の治療およびベータ−セクレターゼの阻害が適応となる状態の治療方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
2009516734.tif 000081
［式中、
Ｚは、水素、（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）０〜１（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）−、（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）０〜１（Ｃ２〜Ｃ６アルケニル）、（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）０〜１（Ｃ２〜Ｃ６アルキニル）、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル（Ｃ６〜Ｃ１０）アリール、−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキレン（Ｃ６〜Ｃ１０）アリールまたは（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）−であり、ここで、前記基はそれぞれ独立に、１、２または３個のＲＺ基で置換されていてもよく、
ＲＺはそれぞれ存在する場所で独立に、ハロゲン、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル、（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルコキシまたは−ＮＲ１００Ｒ１０１であり、
Ｒ１００およびＲ１０１は独立に、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、フェニル、ＣＯ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたはＳＯ２（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであり、
Ｘは、−（Ｃ＝Ｏ）−または−（ＳＯ２）−であり、
Ｒ１は、ハロゲン、−ＯＨ、＝Ｏ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、−ＮＲ１００Ｒ１０１、（Ｃ６〜Ｃ１０）アリール、（５員から９員）ヘテロアリールおよび（５員から９員）ヘテロシクロから独立に選択される１、２または３個の基で置換されていてもよい（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルであり、ここで、アリール基はそれぞれ、１、２または３個のＲ５０基で置換されていてもよく、
Ｒ５０は、ハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、−ＣＯ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、−ＮＲ７Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）１〜２−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシおよび（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキルから選択され、ここで、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシおよびシクロアルキル基は、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、ハロゲン、ＯＨ、−ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、（Ｃ１〜Ｃ４）ハロアルコキシ、ＮＲ７Ｒ８および（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ５およびＲ６は独立に、Ｈまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであるか、
Ｒ５およびＲ６ならびにそれらが結合している窒素は、５員または６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、
Ｒ７およびＲ８は、Ｈ；−ＯＨ、−ＮＨ２およびハロゲンからなる群から独立に選択される１、２または３個の基で置換されていてもよい−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル；−（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル；−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）；−（Ｃ２〜Ｃ４）アルケニル；および−（Ｃ２〜Ｃ４）アルキニルからなる群から独立に選択され、
Ｒ１のヘテロアリールはそれぞれ、１または２個のＲ５０基で置換されていてもよく、Ｒ１のヘテロシクロ基はそれぞれ、独立にＲ５０または＝Ｏである１または２個の基で置換されていてもよく、
Ｒ２およびＲ３は、Ｈ；Ｆ；−Ｆ、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＣＦ３、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシおよび−ＮＲ５Ｒ６からなる群から選択される置換基で置換されていてもよい−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルから独立に選択されるか、Ｒ２およびＲ３は、−（ＣＨ２）０〜２−Ｒ１７、−（ＣＨ２）０〜２−Ｒ１８、−（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニルまたは−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニルから独立に選択され、ここで、基はそれぞれ、−Ｆ；−ＯＨ；−ＣＮ；−ＣＦ３；（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ；−Ｆ、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＣＦ３、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシおよび−ＮＲ５Ｒ６からなる群から選択される独立した置換基で置換されていてもよい−（ＣＨ２）０〜２−（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキルからなる群から選択される置換基で置換されていてもよいか、
Ｒ２、Ｒ３およびそれらが結合している炭素は、３から７個の炭素原子からなる−（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル環を形成し、ここで、１個の炭素原子は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−または−ＮＲ７−から選択される基により置き換えられていてもよく、
Ｒ１７はそれぞれ存在する場所で、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、インダニル、インデニル、ジヒドロナフチルおよびテトラリニルから選択されるアリール基であり、ここで、前記アリール基は、独立に−（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、ＣＦ３である１または２個の基で置換されていてもよいか、Ｒ１７はそれぞれ存在する場所で、それぞれＦ、ＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい−（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニルまたは−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニルであるか、Ｒ１７はそれぞれ存在する場所で、
−ハロゲン、
−ＯＨ、
−ＣＮ、
−（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル、
−ＣＯ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、
−ＳＯ２−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）
から選択され、
Ｒ１８は、ピリジニル、ピリミジニル、キノリニル、インドリル、プリダジニル、ピラジニル、イソキノリル、キナゾリニル、キノキサリニル、フタラジニル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、フラニル、チエニル、ピロリル、オキサジアゾリルまたはチアジアゾリルから選択されるヘテロアリール基であり、ここで、前記ヘテロアリール基はそれぞれ、独立にＯＨ、ＣＮ、ＣＦ３、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシおよび−ＮＲ５Ｒ６からなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルである１または２個の基で置換されていてもよく、
Ｒｃは、
【化２】
2009516734.tif 000082
であり、
ＷおよびＹはそれぞれ独立に、−ＣＨ２−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ＊は、
【化３】
2009516734.tif 000083
であり、
Ｍは、−（ＣＨ２）ｐ−またはＣ＝Ｏであり、Ｘ１は、Ｃ、Ｓ＝Ｏであるか、存在せず、ｐは、０〜３であるが、ただし、ＭがＣ＝Ｏである場合、Ｘ１は、Ｃであり、
Ｒ＊１は、水素；３個までのハロゲンまたはＯＨ基で置換されていてもよい（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル；フェニル；（５員から９員）ヘテロアリールおよび（５員から９員）ヘテロシクロであり、ここで、前記ヘテロアリールは、チアゾリル、オキサゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−および１，２，４−チアジアゾリル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、ピリジニル、ピリミジニルからなる群から選択され、ここで、前記ヘテロアリールまたはヘテロシクロは、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシＣＨ２−、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＮＨ２、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ−ＮＨ−または（Ｃ６〜Ｃ１０）アリール（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、前記フェニルは、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたは３個までの−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ＊５で置換されていてもよく、ここでＲ＊５は、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたはＯＨ、ＮＲ＊２Ｒ＊３または（Ｃ＝Ｏ）（Ｏ）０〜１Ｒ＊４であり、ここで、Ｒ＊２、Ｒ＊３およびＲ＊４はそれぞれ独立に、Ｈまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであり、
Ｒ＊＊は、（Ｃ６〜Ｃ１０）アリール、（Ｃ５〜Ｃ９）ヘテロアリール、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニルまたは−（Ｃ２〜Ｃ８）アルキレン−（Ｃ６〜Ｃ１０）アリールであり、
Ｒ＊＊の（Ｃ６〜Ｃ１０）アリールはそれぞれ、フェニルまたはナフチルであり、（５員から９員）ヘテロアリール環はそれぞれ、ベンゾ基に縮合していてもよく、酸素、窒素およびイオウから選択される１から４個のヘテロ原子を含有するが、ただし、前記ヘテロアリール環は、２個の隣接する酸素原子および２個の隣接するイオウ原子を含有することはできず、前記フェニル、ナフチル、ヘテロアリールまたはベンゾ縮合ヘテロアリール環はそれぞれ、（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル、クロロ、ブロモ−、ヨード、フルオロ−、（Ｃ１〜Ｃ８）ヒドロキシアルキル−、（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル−、（Ｃ３〜Ｃ８）ヒドロキシシクロアルキル−、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル−、（３員〜８員）ヘテロシクロ、ヒドロキシ（３員〜８員）ヘテロシクロおよび（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（３員〜８員）ヘテロシクロから独立に選択される１から３個の置換基で置換されていてもよく、ここで、前記アルキル、アルコキシおよびシクロアルキルは、１から３個のハロで置換されていてもよく、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキルまたはヘテロシクロ部分はそれぞれ、１から３個の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、フェニルまたはベンジル基で独立に置換されていてもよいか、
Ｒ＊＊の（Ｃ５〜Ｃ９）ヘテロアリール環はそれぞれ、イミダゾ、ピリド、ピリミド、ピラゾ、ピリダゾまたはピロロ基に縮合していてもよく、このヘテロアリールは、酸素、窒素およびイオウから選択される１から４個のヘテロ原子を含有するが、ただし、前記ヘテロアリール環は、２個の隣接する酸素原子および２個の隣接するイオウ原子を含有することはできず、前記縮合ヘテロアリール環はそれぞれ、（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル、クロロ−、ブロモ−、ヨード、フルオロ−、ハロ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル−、（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル−ハロ、ヒドロキシ（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル−、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルコキシ−、（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル−、（５員から９員）ヘテロシクロ、ヒドロキシル（５員〜９員）ヘテロシクロおよび（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（５員から９員）ヘテロシクロから独立に選択される１から３個の置換基で置換されていてもよく、ここで、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキルまたはヘテロシクロ部分はそれぞれ、１から３個の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたはベンジル基で独立に置換されていてもよいが、
ただし、Ｘが−（Ｃ＝Ｏ）であり、Ｚがメチルであり、Ｒ１がジフルオロベンジルであり、Ｒ２およびＲ３がそれぞれ水素である場合、Ｒｃは
【化４】
2009516734.tif 000084
であり、ＷおよびＹがそれぞれ、−ＣＨ２−であり、Ｒ＊＊が（Ｃ３〜Ｃ４）アルキル置換フェニルである場合、
Ｍ、Ｘ１およびＲ＊１と組み合わされるＲ＊は、Ｈ、−Ｃ２Ｈ５、（−ＣＨ３）２、−Ｃ２Ｈ４ＯＨ、−Ｃ２Ｈ４ＣＮ、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２、ＣＨ３−ＳＯ２−、Ｃ２Ｈ５−ＳＯ２−、−Ｈ（Ｃ＝Ｏ）、−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ３および−（Ｃ＝Ｏ）ＣＦ３であることはできず、
さらに、Ｘが−（Ｃ＝Ｏ）であり、Ｚがメチルであり、Ｒ１がジフルオロベンジルであり、Ｒ２およびＲ３がそれぞれ水素である場合、Ｒｃは
【化５】
2009516734.tif 000085
であり、ＷおよびＹがそれぞれ、−ＣＨ２−であり、Ｒ＊＊が（Ｃ３〜Ｃ４）アルキル置換フェニルである場合、
Ｍ、Ｘ１およびＲ＊１と組み合わされるＲ＊は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、−ＣＮ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル−ＳＯ２−、−（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル−ＣＨＯ、−（Ｃ＝Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルまたは−（Ｃ＝Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであることはできず、ここで、前記アルキルは、３〜５個のフルオロ原子で置換されている］。
【請求項２】
式Ｉａ
【化６】
2009516734.tif 000086
を有する請求項１に記載の化合物
［式中、Ｒｃは前記定義と同じ意味を有する］。
【請求項３】
Ｒｃが、
【化７】
2009516734.tif 000087
である請求項２に記載の化合物
［式中、Ｗ、Ｙ、Ｒ＊およびＲ＊＊はそれぞれ前記定義と同じ意味を有する］。
【請求項４】
ＷおよびＹがそれぞれ、−ＣＨ２−であり、Ｒ＊が−ＣＯＯＣＨ３または−ＣＯＯ−ＣＨ２−フェニルであり、Ｒ＊＊が（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル置換フェニルである請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｗが−ＣＨ２−であり、ＹがＣ＝Ｏであり、Ｒ＊がＨ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＯＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ３−ＣＨ２−フェニルまたは−ＣＨ２−ＣＨ２ＯＨであり、Ｒ＊＊がＣ１〜Ｃ４アルキル置換フェニルである請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
ピペリドン環４位に位置する炭素原子がＳ立体配置のキラル炭素原子である請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
ＷおよびＹがそれぞれ、Ｃ＝Ｏである請求項３に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒｃが
【化８】
2009516734.tif 000088
である請求項２に記載の化合物
［式中、ＷおよびＹはそれぞれ−ＣＨ２−であり、Ｒ＊＊は（Ｃ３〜Ｃ４）アルキル置換フェニルであり、Ｒ＊は
【化９】
2009516734.tif 000089
である（式中、ｐは０であり、Ｘ１はＣであり、Ｒ＊１は−ＣＨ３、−ＯＣＨ３または−ＣＨ２−ＣＯ−ＯＣＨ３である）］。
【請求項９】
Ｘ１が存在せず、Ｒ＊１がヘテロアリールである請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ＊１が２−チアゾリルまたは２−ピリミジニルである請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒｃが
【化１０】
2009516734.tif 000090
である請求項２に記載の化合物
［式中、Ｒ＊は、
【化１１】
2009516734.tif 000091
である（式中、Ｒ３０は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキレン−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ＣＦ３、ＮＯ２またはハロゲンである）］。
【請求項１２】
請求項１に記載の化合物および薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１３】
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［１−（２−ヒドロキシ−アセチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
［（２Ｒ，３Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−イル］−オキソ−酢酸；
［（２Ｒ，３Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−イル］−オキソ−酢酸メチルエステル；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［４−（３−イソプロピル−フェニル）−１−（２，２，２−トリフルオロ−エタンスルホニル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルアミド；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−ブチリル−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−（３−メチル−ブチリル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ジメチルアミド；
［（２Ｒ，３Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸メチルエステル；
［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸メチルエステル；
［（２Ｒ，３Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸；
［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸；
［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸メチルエステル；
［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［１−ベンジル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−３−［１−ベンジル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）−３−［１−ベンジル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［１−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［１−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［１−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−（１Ｓ，２Ｒ）−［３−［１−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−［３−［１−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）−［３−［１−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
（２Ｒ，３Ｓ）−［４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸イソプロピルエステル；
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−［４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸イソプロピルエステル；
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−［４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸イソプロピルエステル；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［１−アセチル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
３−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−カルボン酸メチルエステル；
３−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−カルボン酸メチルエステル；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−メタンスルホニル−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−メタンスルホニル−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
３−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−イル］−３−オキソ−プロピオン酸メチルエステル；
３−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−イル］−３−オキソ−プロピオン酸メチルエステル；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−ピリジン−２−イル−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［１−ベンゾオキサゾール−２−イル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−チアゾール−２−イル−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−ピリミジン−２−イル−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［１−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピロリジン−３−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−（４−メトキシ−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−カルボン酸ベンジルエステル；
３−［３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−イル］−３−オキソ−プロピオン酸メチルエステル；
３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−カルボン酸メチルエステル；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［１−アセチル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−３−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−ピリミジン−２−イル−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；および
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−チアゾール−２−イル−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド
からなる群から選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
式
【化１２】
2009516734.tif 000092
の化合物を調製する方法であって、
前記化合物Ｉを形成するために有効な条件下に、式
【化１３】
2009516734.tif 000093
の化合物を式
【化１４】
2009516734.tif 000094
の化合物と反応させるステップを含む方法
［式中、Ｚ、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ＲｃおよびＲ１５は前記と同様に定義される］。
【請求項１５】
請求項１に記載の化合物および薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１６】
アルツハイマー病、軽度認識障害、ダウン症候群、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血、脳アミロイド血管障害、他の変性性認知症、血管性および変性性の混合由来の認知症、パーキンソン病に随伴する認知症、進行性核上性麻痺に随伴する認知症、皮質基底変性に随伴する認知症、汎発性レーヴィ小体型アルツハイマー病からなる群から選択される障害または状態を治療する方法であって、前記方法が、このような治療を必要とする哺乳動物に請求項１に記載の化合物を投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、中枢神経系（ＣＮＳ）の状態を治療する際に有用な置換アザシクロアルカン化合物、前記化合物を含む医薬組成物、このような状態を治療する方法およびベータ−セクレターゼの阻害が適応となる状態を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
中枢神経系に影響を及ぼす状態には、アルツハイマー病などの神経変性状態が包含される。様々なこれらの状態は、脳における物理的変化により特徴づけられる。例えば、ある種のこのような異常は、神経原線維濃縮体および／またはプラーク沈着物の存在により証明され、これらは、進行するにつれて、認識、運動、知覚および他の障害を複数面でもたらす。一般に、前記プラークは、蓄積して、細胞の損傷および死を最終的にもたらしうる不溶性の沈着物を形成する傾向のある高凝集性タンパク質であるベータ−アミロイドから主になる。ベータ−アミロイド（Ａβ）は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）に由来し、これは、複数のアイソフォームで存在する膜貫通タンパク質であり、これらのうちのより優勢なものは、６９５、７１４、７５１または７７１アミノ酸を含有する（それぞれＡＰＰ６９５、ＡＰＰ７１４、ＡＰＰ７５１およびＡＰＰ７７１と表示される）。ベータ−アミロイドの発生は、様々なプロテアーゼによるＡＰＰの連続切断により、ベータ−セクレターゼはＡＰＰをＮ末端で切断する一方で、ガンマ−セクレターゼはこれをＣ末端で切断する。生じる断片が、ベータ−アミロイド、３８、４０、４２または４３アミノ酸のタンパク質である（それぞれＡβ１−３８、Ａβ１−４０、Ａβ１−４２、Ａβ１−４３と表示される）。この断片が、細胞外空間に放出され、そこで、他のこのような不溶性断片と共に蓄積して、ニューロンに毒性な前記のタンパク質沈着物を形成する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
特に、このような状態のために研究されている治療戦略は、ベータ−セクレターゼおよびまたはそのＡＰＰのプロセシングを特に効果的に阻害して、Ａβの形成を低減し、プラーク沈着および関連する病因を改善する化合物の開発である。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、下記でより詳細に定義される式Ｉの化合物に関する：
【０００５】
【化１】
2009516734.tif 000002
【０００６】
さらに本発明は、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物ならびにＣＮＳ状態および／またはベータ−セクレターゼの阻害が適応となる状態を治療する方法であって、そのような治療を必要とするか、そのような阻害が適応となる患者に有効量の前記化合物を投与することを含む方法に関する。
【０００７】
式Ｉに関して：
Ｚは、水素、（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）０〜１（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）−、（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）０〜１（Ｃ２〜Ｃ６アルケニル）、（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）０〜１（Ｃ２〜Ｃ６アルキニル）、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル（Ｃ６〜Ｃ１０）アリール、−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキレン（Ｃ６〜Ｃ１０）アリールまたは（Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル）−であり、ここで、前記基はそれぞれ独立に、１、２または３個のＲＺ基で置換されていてもよく、
ＲＺはそれぞれ存在する場所で独立に、ハロゲン、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル、（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルコキシまたは−ＮＲ１００Ｒ１０１であり、
Ｒ１００およびＲ１０１は独立に、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、フェニル、ＣＯ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたはＳＯ２（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであり、
Ｘは、−（Ｃ＝Ｏ）−または−（ＳＯ２）−であり、
Ｒ１は、ハロゲン、−ＯＨ、＝Ｏ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、−ＮＲ１００Ｒ１０１、（Ｃ６〜Ｃ１０）アリール、（５員から９員）ヘテロアリールおよび（５員から９員）ヘテロシクロから独立に選択される１、２または３個の基で置換されていてもよい（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルであり、ここで、アリール基はそれぞれ、１、２または３個のＲ５０基で置換されていてもよく、
Ｒ５０は、ハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、−ＣＯ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、−ＮＲ７Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）１〜２−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシおよび（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキルから選択され、ここで、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシおよびシクロアルキル基は、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、ハロゲン、ＯＨ、−ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、（Ｃ１〜Ｃ４）ハロアルコキシ、ＮＲ７Ｒ８および（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ５およびＲ６は独立に、Ｈまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであるか、
Ｒ５およびＲ６ならびにそれらが結合している窒素は、５員または６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、
Ｒ７およびＲ８は、Ｈ；−ＯＨ、−ＮＨ２およびハロゲンからなる群から独立に選択される１、２または３個の基で置換されていてもよい−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル；−（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル；−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）；−（Ｃ２〜Ｃ４）アルケニル；および−（Ｃ２〜Ｃ４）アルキニルからなる群から独立に選択され、
Ｒ１のヘテロアリールはそれぞれ、１または２個のＲ５０基で置換されていてもよく、Ｒ１のヘテロシクロ基はそれぞれ、独立にＲ５０または＝Ｏである１または２個の基で置換されていてもよく、
Ｒ２およびＲ３は、Ｈ；Ｆ；−Ｆ、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＣＦ３、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシおよび−ＮＲ５Ｒ６からなる群から選択される置換基で置換されていてもよい−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルから独立に選択されるか、Ｒ２およびＲ３は、−（ＣＨ２）０〜２−Ｒ１７、−（ＣＨ２）０〜２−Ｒ１８、−（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニルまたは−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニルから独立に選択され、ここで、基はそれぞれ、−Ｆ；−ＯＨ；−ＣＮ；−ＣＦ３；（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ；−Ｆ、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＣＦ３、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシおよび−ＮＲ５Ｒ６からなる群から選択される独立した置換基で置換されていてもよい−（ＣＨ２）０〜２−（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキルからなる群から選択される独立した置換基で置換されていてもよいか、
Ｒ２、Ｒ３およびそれらが結合している炭素は、３から７個の炭素原子からなる−（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル環を形成し、ここで、１個の炭素原子は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−または−ＮＲ７−から選択される基により置き換えられていてもよく、
Ｒ１７はそれぞれ存在する場所で、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、インダニル、インデニル、ジヒドロナフチルおよびテトラリニルから選択されるアリール基であり、ここで、前記アリール基は、独立に−（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、ＣＦ３である１または２個の基で置換されていてもよいか、Ｒ１７はそれぞれ存在する場所で、それぞれＦ、ＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい−（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニルまたは−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニルであるか、Ｒ１７はそれぞれ存在する場所で、
−ハロゲン、
−ＯＨ、
−ＣＮ、
−（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル、
−ＣＯ−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）、
−ＳＯ２−（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）
から選択され、
Ｒ１８は、ピリジニル、ピリミジニル、キノリニル、インドリル、プリダジニル（ｐｒｙｉｄａｚｉｎｙｌ）、ピラジニル、イソキノリル、キナゾリニル、キノキサリニル、フタラジニル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、フラニル、チエニル、ピロリル、オキサジアゾリルまたはチアジアゾリルから選択されるヘテロアリール基であり、ここで、前記ヘテロアリール基はそれぞれ、独立にＯＨ、ＣＮ、ＣＦ３、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシおよび−ＮＲ５Ｒ６からなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルである１または２個の基で置換されていてもよく、
Ｒｃは、
【０００８】
【化２】
2009516734.tif 000003
であり、
ＷおよびＹはそれぞれ独立に、−ＣＨ２−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ＊は、
【０００９】
【化３】
2009516734.tif 000004
であり、
Ｍは、−（ＣＨ２）ｐ−またはＣ＝Ｏであり、Ｘ１は、Ｃ、Ｓ＝Ｏであるか、存在せず、ｐは、０〜３であるが、ただし、ＭがＣ＝Ｏである場合、Ｘ１は、Ｃであり、
Ｒ＊１は、水素；３個までのハロゲンまたはＯＨ基で置換されていてもよい（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル；フェニル；（５員から９員）ヘテロアリールおよび（５員から９員）ヘテロシクロであり、ここで、前記ヘテロアリールは、チアゾリル、オキサゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−および１，２，４−チアジアゾリル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、ピリジニル、ピリミジニルからなる群から選択され、ここで、前記ヘテロアリールまたはヘテロシクロは、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシＣＨ２−、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＦ３、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＮＨ２、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ−ＮＨ−または（Ｃ６〜Ｃ１０）アリール（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、前記フェニルは、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたは３個までの−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ＊５で置換されていてもよく、ここでＲ＊５は、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたはＯＨ、ＮＲ＊２Ｒ＊３または（Ｃ＝Ｏ）（Ｏ）０〜１Ｒ＊４であり、ここで、Ｒ＊２、Ｒ＊３およびＲ＊４はそれぞれ独立に、Ｈまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであり、
Ｒ＊＊は、（Ｃ６〜Ｃ１０）アリール、（Ｃ５〜Ｃ９）ヘテロアリール、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニルまたは−（Ｃ２〜Ｃ８）アルキレン−（Ｃ６〜Ｃ１０）アリールであり、
Ｒ＊＊の（Ｃ６〜Ｃ１０）アリールはそれぞれ、フェニルまたはナフチルであり、（５員から９員）ヘテロアリール環はそれぞれ、ベンゾ基に縮合していてもよく、酸素、窒素およびイオウから選択される１から４個のヘテロ原子を含有するが、ただし、前記ヘテロアリール環は、２個の隣接する酸素原子および２個の隣接するイオウ原子を含有することはできず、前記フェニル、ナフチル、ヘテロアリールまたはベンゾ縮合ヘテロアリール環はそれぞれ、（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル、クロロ、ブロモ−、ヨード、フルオロ−、（Ｃ１〜Ｃ８）ヒドロキシアルキル−、（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル−、（Ｃ３〜Ｃ８）ヒドロキシシクロアルキル−、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル−、（３員〜８員）ヘテロシクロ、ヒドロキシ（３員〜８員）ヘテロシクロおよび（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（３員〜８員）ヘテロシクロから独立に選択される１から３個の置換基で置換されていてもよく、ここで、前記アルキル、アルコキシおよびシクロアルキルは、１から３個のハロで置換されていてもよく、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキルまたはヘテロシクロ部分はそれぞれ、１から３個の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、フェニルまたはベンジル基で独立に置換されていてもよいか、
Ｒ＊＊の（Ｃ５〜Ｃ９）ヘテロアリール環はそれぞれ、イミダゾ、ピリド、ピリミド、ピラゾ、ピリダゾまたはピロロ基に縮合していてもよく、このヘテロアリールは、酸素、窒素およびイオウから選択される１から４個のヘテロ原子を含有するが、ただし、前記ヘテロアリール環は、２個の隣接する酸素原子および２個の隣接するイオウ原子を含有することはできず、前記縮合ヘテロアリール環はそれぞれ、（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル、クロロ−、ブロモ−、ヨード、フルオロ−、ハロ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル−、（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル−ハロ、ヒドロキシ（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル−、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルコキシ−、（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル−、（５員から９員）ヘテロシクロ、ヒドロキシル（５員〜９員）ヘテロシクロおよび（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシ−（５員から９員）ヘテロシクロから独立に選択される１から３個の置換基で置換されていてもよく、ここで、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキルまたはヘテロシクロ部分はそれぞれ、１から３個の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたはベンジル基で独立に置換されていてもよいが、
ただし、Ｘが−（Ｃ＝Ｏ）であり、Ｚがメチルであり、Ｒ１がジフルオロベンジルであり、Ｒ２およびＲ３がそれぞれ水素である場合、Ｒｃは
【００１０】
【化４】
2009516734.tif 000005
であり、ＷおよびＹがそれぞれ、−ＣＨ２−であり、Ｒ＊＊が（Ｃ３〜Ｃ４）アルキル置換フェニルである場合、
Ｍ、Ｘ１およびＲ＊１と組み合わされるＲ＊は、Ｈ、−Ｃ２Ｈ５、（−ＣＨ３）２、−Ｃ２Ｈ４ＯＨ、−Ｃ２Ｈ４ＣＮ、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２、ＣＨ３−ＳＯ２−、Ｃ２Ｈ５−ＳＯ２−、−Ｈ（Ｃ＝Ｏ）、−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ３および−（Ｃ＝Ｏ）ＣＦ３であることはできない。
【００１１】
他の実施形態では、本発明は、Ｘが−（Ｃ＝Ｏ）であり、Ｚがメチルであり、Ｒ１がジフルオロベンジルであり、Ｒ２およびＲ３がそれぞれ水素である場合、Ｒｃは
【００１２】
【化５】
2009516734.tif 000006
であり、ＷおよびＹがそれぞれ、−ＣＨ２−であり、Ｒ＊＊が（Ｃ３〜Ｃ４）アルキル置換フェニルである場合、
Ｍ、Ｘ１およびＲ＊１と組み合わされるＲ＊は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ヒドロキシル（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、−ＣＮ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル−ＳＯ２−、−（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル−ＣＨＯ、−（Ｃ＝Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルまたは−（Ｃ＝Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであることはできず、ここで、前記アルキルは、３〜５個のフルオロ原子で置換されているという追加的条件を有する。
【００１３】
本発明はさらに、
式Ｉａ
【００１４】
【化６】
2009516734.tif 000007
の構造を有する化合物を提供する［式中、Ｒｃは前記と同様に定義される］。
【００１５】
本発明の特定の実施は、Ｒｃが、
【００１６】
【化７】
2009516734.tif 000008
である式Ｉａに関する［式中、Ｗ、Ｙ、Ｒ＊およびＲ＊＊はそれぞれ前記定義と同じ意味を有する］。
【００１７】
好ましい実施形態は、Ｒｃが前記と同様であり、ＷおよびＹがそれぞれ、−ＣＨ２−であり、Ｒ＊が−ＣＯＯＣＨ３または−ＣＯＯ−ＣＨ２−フェニルであり、Ｒ＊＊が（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル置換フェニルである式Ｉａの化合物に関する。
【００１８】
他の好ましい実施形態は、Ｗが−ＣＨ２−であり、ＹがＣ＝Ｏであり、Ｒ＊がＨ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、−ＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＯＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ３ＣＨ２−フェニルまたは−ＣＨ２−ＣＨ２ＯＨであり、Ｒ＊＊が（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル置換フェニルである式Ｉａの化合物に関する。最も好ましくは、ピペリジン環４位に位置する炭素原子は、Ｓ立体配置のキラル炭素原子である。
【００１９】
本発明の他の実施は、Ｒｃが
【００２０】
【化８】
2009516734.tif 000009
である式Ｉａに関する［式中、Ｗ、Ｙ、Ｒ＊およびＲ＊＊はそれぞれ、前記定義と同じ意味を有する］。
【００２１】
好ましい実施形態では、ＷおよびＹはそれぞれ、−ＣＨ２−であり、Ｒ＊＊は、（Ｃ３〜Ｃ４）アルキル置換フェニルであり、Ｒ＊は、
【００２２】
【化９】
2009516734.tif 000010
である［式中、ｐは０であり、Ｘ１はＣであり、Ｒ＊１は−ＣＨ３、−ＯＣＨ３または−ＣＨ２−ＣＯ−ＯＣＨ３である］。
【００２３】
他の好ましい実施形態では、Ｘ１は存在せず、Ｒ＊１は（５員〜６員）ヘテロアリール環である。最も好ましくは、Ｒ＊１は、２−チアゾリルまたは２−ピリミジニルである。
【００２４】
他の実施形態は、Ｒｃが
【００２５】
【化１０】
2009516734.tif 000011
である式Ｉａに関する［式中、Ｒ＊は、
【００２６】
【化１１】
2009516734.tif 000012
である（式中、Ｒ３０は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキレン−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ＣＦ３、ＮＯ２またはハロゲンである）］。
【００２７】
本発明の他の実施は、Ｒｃが
【００２８】
【化１２】
2009516734.tif 000013
である式Ｉａの化合物に関する［式中、Ｗ、Ｙ、Ｒ＊、およびＲ＊＊はそれぞれ前記定義と同じ意味を有する］。
【００２９】
好ましい実施形態では、ＷおよびＹはそれぞれ、−ＣＨ２−であり、Ｒ＊＊は、（Ｃ３〜Ｃ４）アルキル置換フェニルであり、Ｒ＊は、
【００３０】
【化１３】
2009516734.tif 000014
である［式中、ｐは０であり、Ｘ１はＣであり、Ｒ＊１は−ＣＨ２−ＣＯ−ＯＣＨ３である］。
【００３１】
本発明はさらに、式
【００３２】
【化１４】
2009516734.tif 000015
の化合物を調製する方法を提供し、この方法は、
前記化合物（Ｉ）を形成するために有効な条件下に、式
【００３３】
【化１５】
2009516734.tif 000016
の化合物を式
【００３４】
【化１６】
2009516734.tif 000017
の化合物と反応させるステップを含む［式中、Ｚ、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ＲｃおよびＲ１５は前記と同様に定義される］。
【００３５】
この実施の代表的な化合物には：
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［１−（２−ヒドロキシ−アセチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
［（２Ｒ，３Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−イル］−オキソ−酢酸；
［（２Ｒ，３Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−イル］−オキソ−酢酸メチルエステル；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［４−（３−イソプロピル−フェニル）−１−（２，２，２−トリフルオロ−エタンスルホニル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルアミド；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−ブチリル−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−（３−メチル−ブチリル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
４−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ジメチルアミド；
［（２Ｒ，３Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸メチルエステル；
［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸メチルエステル；
［（２Ｒ，３Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸；
［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸；
［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸メチルエステル；
［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［１−ベンジル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−３−［１−ベンジル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）−３−［１−ベンジル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［１−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［１−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［１−（２−ヒドロキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−（１Ｓ，２Ｒ）−［３−［１−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）−［３−［１−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）−［３−［１−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−エチル）−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
（２Ｒ，３Ｓ）−［４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸イソプロピルエステル；
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−［４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸イソプロピルエステル；
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−［４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸イソプロピルエステル；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［１−アセチル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
３−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−カルボン酸メチルエステル；
３−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−カルボン酸メチルエステル；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−メタンスルホニル−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−メタンスルホニル−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
３−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−イル］−３−オキソ−プロピオン酸メチルエステル；
３−［（２Ｓ，３Ｒ）−３−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−イル］−３−オキソ−プロピオン酸メチルエステル；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−ピリジン−２−イル−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［１−ベンゾオキサゾール−２−イル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−チアゾール−２−イル−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−ピリミジン−２−イル−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［１−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピロリジン−３−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［３−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−（４−メトキシ−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−カルボン酸ベンジルエステル；
３−［３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−イル］−３−オキソ−プロピオン酸メチルエステル；
３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−カルボン酸メチルエステル；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［１−アセチル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−３−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−ピリミジン−２−イル−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；および
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−チアゾール−２−イル−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド
が包含される。
【００３６】
本発明はさらに、
本明細書に開示されている方法で使用するための、このような前記式Ｉのベータ−セクレターゼ阻害剤または薬学的に許容できるその塩および薬学的に許容できる担体を含有する医薬組成物、
ベータ−セクレターゼを阻害することにより治療することができる障害または状態の治療法であって、このような治療を必要とする哺乳動物に治療有効量の式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩を投与することを含む治療法、
ＣＮＳ状態、例えば、アルツハイマー病（ＡＤ）、軽度認識障害、ダウン症候群、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血、脳アミロイド血管障害、血管性および変性性の混合由来の認知症、パーキンソン病に随伴する認知症、進行性核上性麻痺に随伴する認知症、皮質基底変性に随伴する認知症、多発梗塞性認知症、アルコール性認知症もしくは他の薬物関連認知症、頭蓋内腫瘍もしくは脳外傷に随伴する認知症、ハンチントン病に随伴する認知症またはＡＩＤＳ関連認知症、汎発性レーヴィ小体型アルツハイマー病、パーキンソン症候群に伴う前頭側頭骨認知症（ＦＴＤＰ）、封入体筋炎、核上白内障、加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）、ハンチントン病、パーキンソン病、不穏下肢症候群、脳卒中、頭部外傷、脊髄損傷、神経系の脱髄疾患、末梢神経疾患、ピン、脳アミロイド血管障害、筋萎縮側索硬化症、多発性硬化症、ドーパミンアゴニスト療法に随伴する運動障害、精神薄弱、読書障害、数学障害もしくは筆記表現の障害を包含する学習障害、加齢性認識低下、健忘障害、神経弛緩剤誘発パーキンソン症候群、遅発性ジスキネジア、トゥーレット症候群、多発性硬化症ならびに急性および慢性神経変性障害からなる群から選択される障害または状態を治療するための医薬組成物であって、式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩および薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物、
本明細書に列記された障害または状態からなる群から選択される障害または状態を治療する方法であって、このような治療を必要とする哺乳動物に、式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩を投与することを含む方法、
ＡＤの発症の予防もしくは遅延、そうしなければ軽度認識障害（ＭＣＩ）からＡＤへと進行すると予測される患者におけるＡＤの発症の予防もしくは遅延または単発性または再発性葉性出血などの脳アミロイド血管障害の起こりうる結果の予防のための医薬組成物であって、式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩および薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物、および
ＡＤの発症の予防もしくは遅延、そうしなければＭＣＩからＡＤへと進行すると予測される患者におけるＡＤの発症の予防もしくは遅延または単発性または再発性葉性出血などの脳アミロイド血管障害の起こりうる結果の予防のための方法であって、このような治療を必要とする患者に式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩を投与することを含む方法
を対象とする。
【００３７】
本発明はさらに、医薬品を製造するための式Ｉによる化合物または塩の使用を提供する。
【００３８】
本発明はさらに、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）、タンパク質のベータ−セクレターゼを介した切断を阻害するための化合物、医薬組成物、キットおよび方法を提供し、この方法は、このような治療を必要とする患者に式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩を投与することを含む。特に、本発明の化合物、組成物および方法は、Ａ−ベータの産生を阻害して、Ａ−ベータの病的形態に随伴する任意のヒトまたは動物疾患または状態を治療または予防するために有効である。
【００３９】
本発明の化合物は、光学中心を有することがあり、したがって、様々な鏡像異性立体配置で生じうる。前記のような式Ｉは、構造式Ｉで示される化合物の全ての鏡像異性体、ジアステレオ異性体および他の立体異性体、さらに、それらのラセミ混合物および他の混合物を包含する。最終生成物またはその中間体を製造する際の光学分割、光学的選択反応またはクロマトグラフィー分離などの既知の方法により、個々の異性体を得ることもできる。
【００４０】
ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴにより検出可能であるように同位体標識された式Ｉの化合物を包含する同位体標識された式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩も、本発明の範囲内である。
【００４１】
式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩のシスおよびトランス異性体も、本発明の範囲内である。
【００４２】
式Ｉの化合物または薬学的に許容できるその塩の互変異性体も、本発明の範囲内である。
【００４３】
初めの基または置換基が２個以上の基または置換基で置換されている場合、本発明は、制限ではないが、このような基または置換基の組合せが存在する実施形態を包含する。
【００４４】
初めの基または置換基が２個以上の基または置換基で置換されている場合、このような置換基の数は、置換のために利用可能な初めの基または置換基内の位置の数を超えることはできないことは理解される。
【００４５】
「ハロゲン」および「ハロ」などは独立に、フルオロ（Ｆ）、クロロ（Ｃｌ）、ブロモ（Ｂｒ）およびヨード（Ｉ）を包含する。
【００４６】
「アルコキシ」、「チオアルコキシ」および「アルキオキシ」などの用語に現れうるものを包含する「アルキル」は、直鎖または分枝鎖部分を有する飽和一価炭化水素基を包含する。アルキル基の例には、これらに限られないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピルおよびｔ−ブチルが包含される。
【００４７】
「アルケニル」および「アルキニル」は、少なくとも１個の炭素−炭素二重または三重結合をそれぞれ有するアルキル部分を包含する。
【００４８】
「シクロアルキル」は、アルキルが前記のように定義される非芳香族飽和環式アルキル部分を包含する。制限ではないが、例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルならびにそれぞれ２個または３個の環からなり、前記環が少なくとも１個の炭素原子を共有している非芳香族飽和炭素環基であるビシクロアルキルおよびトリシクロアルキル基が包含される。本明細書で他に示されていない限り、ビシクロアルキル基には、スピロ基および縮合環基、例えばビシクロ−［３．１．０］−ヘキシル、ビシクロ−［２．２．１］−ヘプト−１−イル、ノルボルニル、スピロ［４．５］デシル、スピロ［４．４］ノニル、スピロ［４．３］オクチルおよびスピロ［４．２］ヘプチルが包含される。トリシクロアルキル基の例は、アダマンタニルである。シクロアルキル基はさらに、１個または複数のオキソ部分で置換されている基、例えばオキソシクロペンチルおよびオキソシクロブチルを包含する。
【００４９】
認められているように、（ＣＨ２）０〜５などの用語は、示されている炭素数（この場合は５）までのメチレン結合の追加的な存在を示していて、これへの結合置換基は、通常または分枝鎖立体配置であってよい。例えば、（ＣＨ２）０〜５（Ｃ６〜１０アリール）では、アリールは、メチレン鎖に分枝または通常位置で存在してよい。
【００５０】
本明細書で定義され使用される「アルキル」、「アルコキシ」、「チオアルコキシ」、「アルキオキシ」、「アルケニル」、「アルキニル」、「シクロアルキル」の用語はさらに、そのような置換が任意選択として特に述べられている、いないに関わらず、３個までのフルオロ（Ｆ）でそれぞれ置換されていてもよいそれらの部分を包含することを意図されている。
【００５１】
「治療」および「治療する」とは、このような用語が適用される障害もしくは状態またはこのような状態もしくは障害の１つもしくは複数の症状の進行を逆転、緩和、阻害するか、予防することを指している。本明細書で使用される場合、該用語はさらに、患者の状態に応じて、障害に随伴する任意の症状の発症および／または再発の予防を包含する障害の予防、さらに障害の重度または発症前のその任意の症状の低減を内包する。
【００５２】
「哺乳動物」は、これらに限られないが、ヒト、イヌおよびネコを包含する「哺乳動物」群の任意のメンバーを指している。
【００５３】
「患者」は、ヒトを包含する哺乳動物群のメンバーを指している。
【００５４】
「状態」は、疾患または障害を指している。
【００５５】
「ヘテロアリール」は、１個または複数のヘテロ原子（Ｏ、ＳまたはＮ）、好ましくは１個から４個のヘテロ原子を含有する１個または複数の芳香族基からなるヘテロアリール基を指している。本明細書で使用する場合、基の少なくとも１個の環が芳香族である１個または複数のヘテロ原子を含有する多環式基も、「ヘテロアリール」基である。本発明のヘテロアリール基はさらに、１種または複数の互変異性形態（例えばケト、エノールなどの形態）で存在し、および／または１個または複数のオキソ部分で置換されている環系を包含しうる。ヘテロアリール基の例は、これらに限られないが、キノリル、イソキノリル、１，２，３，４−テトラヒドロキノリル、１，２，４−トリザイニル（ｔｒｉｚａｉｎｙｌ）、１，３，５−トリアジニル、１−オキソイソインドリル、フラザニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチオフェニル、ジヒドロキノリル、ジヒドロイソキノリル、ベンゾフリル、フロピリジニル、ピロロピリミジニルおよびアザインドリル、ピリジニル、ピリミジニル、キノリニル、ベンゾチエニル、インドリル、インドリニル、プリダジニル、ピラジニル、イソインドリル、イソキノリル、キナゾリニル、キノキサリニル、フタラジニル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、インドリジニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、フラニル、チエニル、ピロリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾロピリジニル、イミダゾピリジニル、イソチアゾリル、ナフチリジニル、シノリニル、カルバゾリル、ベータ−カルボリニル、イソクロマニル、クロマニル、テトラヒドロイソキノリニル、イソインドリニル、イソベンゾテトラヒドロフラニル、イソベンゾテトラヒドロチエニル、イソベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、ピリドピリジニル、ベンゾテトラヒドロフラニル、ベンゾテトラヒドロチエニル、プリニル、ベンゾジオキソリル、トリアジニル、フェノキサジニル、フェノチアジニル、プテリジニル、ベンゾチアゾリル、イミダゾピリジニル、イミダゾチアゾリル、ジヒドロベンゾイソオキサジニル、ベンゾイソオキサジニル、ベンゾオキサジニル、ジヒドロベンゾイソチアジニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、クマリニル、イソクマリニル、クロモニル、クロマノニル、ピリジニル−Ｎ−オキシド、テトラヒドロキノリニル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロキノリノニル、ジヒドロイソキノリノニル、ジヒドロクマリニル、ジヒドロイソクマリニル、イソインドリノニル、ベンゾジオキサニル、ベンゾオキサゾリノニル、ピロリルＮ−オキシド、ピリミジニルＮ−オキシド、ピリダジニルＮ−オキシド、ピラジニルＮ−オキシド、キノリニルＮ−オキシド、インドリルＮ−オキシド、インドリニルＮ−オキシド、イソキノリルＮ−オキシド、キナゾリニルＮ−オキシド、キノキサリニルＮ−オキシド、フタラジニルＮ−オキシド、イミダゾリルＮ−オキシド、イソオキサゾリルＮ−オキシド、オキサゾリルＮ−オキシド、チアゾリルＮ−オキシド、インドリジニルＮ−オキシド、インダゾリルＮ−オキシド、ベンゾチアゾリルＮ−オキシド、ベンズイミダゾリルＮ−オキシド、ピロリルＮ−オキシド、オキサジアゾリルＮ−オキシド、チアジアゾリルＮ−オキシド、トリアゾリルＮ−オキシド、テトラゾリルＮ−オキシド、ベンゾチオピラニルＳ−オキシド、ベンゾチオピラニルＳ，Ｓ−ジオキシドである。
【００５６】
「ヘテロシクロアルキル」および「ヘテロシクロ」は、Ｏ、ＳおよびＮからそれぞれ選択される１個または複数のヘテロ原子、好ましくは１から４個のヘテロ原子を含有する１個または複数の非芳香族環式基のヘテロシクロアルキル基を指している。複素環式基はさらに、１個または複数のオキソ部分で置換されている環系を包含する。限定ではないが、複素環式基の例には、アジリジニル、アゼチジニル、アゼピニル、１，２，３，６−テトラヒドロピリジニル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロチオピラニル、モルホリノ、チオモルホリノ、インドリニル、２Ｈ−ピラニル、４Ｈ−ピラニル、ジオキサニル、１，３−ジオキソラニル、ピラゾリニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、ピラゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、キノリジニル、キヌクリジニル、１，４−ジオキサスピロ［４．５］デシル、１，４−ジオキサスピロ［４．４］ノニル、１，４−ジオキサスピロ［４．３］オクチルおよび１，４−ジオキサスピロ［４．２］ヘプチル、モルホリニル、チオモルホリニル、チオモルホリニルＳ−オキシド、チオモルホリニルＳ，Ｓ−ジオキシド、ピペラジニル、ホモピペラジニル、ピロリジニル、ピロリニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、ホモピペリジニル、ホモモルホリニル、ホモチオモルホリニル、ホモチオモルホリニルＳ，Ｓ−ジオキシド、オキサゾリジノニル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロピロリル、ジヒドロピラジニル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロピリミジニル、ジヒドロフリル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロチエニルＳ−オキシド、テトラヒドロチエニルＳ，Ｓ−ジオキシド、ホモチオモルホリニルＳ−オキシドが包含される。
【００５７】
前記で列挙した化合物に由来する前記の基は、可能であればＣ−結合またはＮ−結合していてよい。例えば、ピロールに由来する基は、ピロール−１−イル（Ｎ−結合）またはピロール−３−イル（Ｃ結合）であってよい。基を指す用語はさらに、可能な互変異性体を全て内包する。
【００５８】
本明細書で使用する場合、Ａｃ＝アセチル、ＢＯＣ＝ｔ−ブトキシカルボニル、ＥＤＣ＝塩酸１，（３，ジメチルアミノプロピル）−３−エチル−カルボジイミド、ＣＢＺ＝ベンジルオキシカルボニル、ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン、ＤＰＰＰ＝１，３−ビス（ジフェニルホスファニル）プロパン、ｄｂａ＝ジベンジリデンアセトン、Ｅｔ＝エチル、Ｍｅ＝メチル、ｎ−Ｂｕ＝ｎ−ブチル；ｎ−Ｈｅｘ＝ｎ−ヘキシル、ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド、ＤＣＭ＝ジクロロメタン、ＣＨＣＬ３＝クロロホルム、ＣＤＣｌ３＝ジューテロクロロホルム、ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸、ＥＳ＝エレクトロスプレー、ＬＣ＝液体クロマトグラフィー、ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー、ＭＳ＝質量分析、ＣＤ３ＯＤ＝ジューテロメタノール、ＦＭＯＣ＝フルオレネイル（ｆｌｕｏｒｅｎｅｙｌ）メチルオキシカルボニル、ｎＢｕＬｉ＝ｎ−ブチルリチウム、ＭｅＯＨ＝メチルアルコール、ＤＩＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン、ＬＣＭＳ＝液体クロマトグラフィー質量分析およびＭｓＣｌ＝塩化メタンスルホニル。
【００５９】
本発明のＣＮＳ状態対象は、当分野で知られている対象であり、限定ではないが、ベータ−セクレターゼに対する阻害剤が適応となる対象を包含する。
【００６０】
本発明の化合物はさらに、他の薬物と、例えば、本明細書に記載されている任意のＣＮＳ状態を治療するために従来使用されているものと組み合わせて使用することができる。例えば、本発明の化合物は、アルツハイマー病などの神経変性疾患を治療するためのドネペジルおよび同様の化合物と、またはうつ病を治療するための選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）および同様の化合物と組み合わせて使用することができる。
【００６１】
実際に、本明細書に記載されているＢＡＣＥアッセイにおける本発明の化合物のＩＣ５０値は、約１ナノモルから約１０マイクロモルである。
【００６２】
合成ＡＰＰ基質を利用する無細胞ＢＡＣＥ１阻害アッセイ
ベータ−セクレターゼが切断することができ、Ｎ−末端ビオチンを有し、Ｃｙｓ残基でのＯｒｅｇｏｎグリーンの共有結合により蛍光性になっている合成ＡＰＰ基質を使用して、阻害化合物の存在下または不在下にベータ−セクレターゼ活性をアッセイする。基質は、ビオチン−ＧＬＴＮＩＫＴＥＥＩＳＥＩＳＹＡＥＶＥＦＲ−Ｃ［オレゴングリーン］ＫＫ−ＯＨである。酵素（０．１ナノモル）および試験化合物（０．００００２〜２００マイクロモル）を、予備遮断されている低親和性黒色プレート（３８４ウェル）中、室温で３０分間インキュベーションする。１５０ミリモルの基質を１ウェル当たり３０マイクロリットルの最終体積になるまで加えることにより、反応物を開始する。最終アッセイ条件は、０．００００２〜２００マイクロモルの化合物阻害剤、０．１モルの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．５）、１５０ナノモルの基質、０．１ナノモルの可溶性ベータ−セクレターゼ、０．００１％のＴｗｅｅｎ２０および２％のＤＭＳＯである。アッセイ混合物を３７℃で３時間インキュベーションし、飽和濃度の免疫純粋なストレプトアビジン（０．７５マイクロモル）を加えることにより、反応物を終了させる。ストレプトアビジンと共に室温で１５分間インキュベーションした後に、蛍光偏光を例えば、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｅｎｖｉｓｉｏｎ（Ｅｘ４８５ｎｍ／Ｅｍ５３０ｎｍ）を使用して測定する。ベータ−セクレターゼ酵素の活性を、酵素により基質が切断されると生じる蛍光偏光の変化により検出する。化合物阻害剤の存在下でのインキュベーションにより、合成ＡＰＰ基質のベータ−セクレターゼ酵素切断の特異的阻害が証明される。
【００６３】
次の方法および実施例は、限定ではないが、本発明の化合物を製造するための代表的な方法を説明している。
【００６４】
剤形および量
本発明の化合物は、経口、非経口（ＩＶ、ＩＭ、デポ−ＩＭ、ＳＱおよびデポＳＱ）、舌下、鼻腔内（吸入）、クモ膜下、局所または直腸で投与することができる。当業者に知られている剤形が、本発明の化合物を送達するために適している。
【００６５】
治療有効量の本発明の化合物を含有する組成物を提供する。化合物を好ましくは、経口投与用の錠剤、カプセルまたはエリキシルなどの適切な医薬製剤に、または非経口投与用の無菌液剤または懸濁剤に製剤する。典型的には、前記の化合物を、当分野でよく知られている技術および手順を使用して医薬組成物に製剤する。
【００６６】
本発明の化合物もしくは本発明の化合物の混合物または生理学的に許容できる塩約１から５００ｍｇを、生理学的に許容できる媒体、担体、賦形剤、結合剤、防腐剤、安定剤、香料などと配合して、認められている医薬慣行で要求される単位剤形にする。組成物または製剤中での活性物質の量は、示されている範囲の適切な用量が得られるような量である。組成物を好ましくは、各用量が活性成分約２から約１００ｍｇ、さらに好ましくは約１０から約３０ｍｇを含有する単位剤形に製剤する。「単位剤形」との用語は、ヒト対象または他の哺乳動物のための単位用量として適している物理的に別々の単位を指しており、各単位は、適切な医薬賦形剤と関連して所望の治療効果をもたらすように算出され予め決定された量の活性物質を含有する。
【００６７】
組成物を調製するために、１種または複数の本発明の化合物を適切な薬学的に許容できる担体と混合する。化合物を混合または添加すると生じる混合物は、溶液、懸濁液、エマルションなどであってよい。リポソーム懸濁液も、薬学的に許容できる担体として適切でありうる。これらは、当業者に知られている方法に従い調製することができる。生じる混合物の形態は、意図される投与様式および選択された担体または媒体への化合物の可溶性を包含するいくつかのファクターに左右される。有効な濃度は、治療される疾患、障害または状態の少なくとも１つの症状を低減または緩和するために十分であり、経験的に決定することができる。
【００６８】
本明細書で提供される化合物を投与するために適している医薬担体または媒体には、特定の投与様式に適していると当業者に知られている任意の担体が包含される。加えて、活性物質を、所望の作用を損なわない他の活性物質と、または所望の作用を補足するか、他の作用を有する物質と混合することもできる。化合物を、組成物中唯一の薬学的活性成分として製剤することもできるし、他の活性成分と組み合わせることもできる。
【００６９】
化合物が不十分な溶解性を示す場合、可溶化するための方法を使用することもできる。このような方法は知られており、これらに限られないが、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などの補助溶媒の使用、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）などの界面活性剤の使用および炭酸水素ナトリウム水溶液への溶解が包含される。塩またはプロドラッグなどの化合物の誘導体を、有効な医薬組成物を製剤する際に使用することもできる。
【００７０】
化合物の濃度は、投与すると、化合物がそのために投与される障害の少なくとも１つの症状を低減または緩和する量を送達するために有効である。典型的には、組成物を単一用量投与のために製剤する。
【００７１】
本発明の化合物を、体からの迅速な排泄に対して本発明の化合物を保護する時間放出製剤またはコーティングなどの担体と共に調製することができる。このような担体には、これらに限られないが、マイクロカプセル化送達系などの制御放出製剤が包含される。活性化合物は、治療される患者に対して望ましくない副作用なしに、治療的に有用な作用を発揮するのに十分な量で、薬学的に許容できる担体中に包含される。治療有効濃度は、治療される障害に関して知られているｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏモデル系で化合物を試験することにより、経験的に決定することができる。
【００７２】
本発明の化合物および組成物を、多回または単回用量容器に密封することができる。密封された化合物および組成物を、例えば、使用のために組み立てることができる構成部品を包含するキットで提供することができる。例えば、凍結乾燥された形態の化合物阻害剤および適切な希釈剤を、使用前に組み合わせるための別々の構成部品として提供することができる。キットは、化合物阻害剤および第２の治療剤を同時投与するために包含してもよい。阻害剤および第２の治療剤を、別々の構成部品として提供することができる。キットは、複数の容器を包含してよく、各容器は、本発明の化合物の１つまたは複数の単位用量を保持している。容器を好ましくは、これらに限られないが、経口投与のための錠剤、ゲルカプセル、持続放出カプセルなど、非経口投与のためのデポー製品、予備充填シリンジ、アンプル、バイアルなどおよび局所投与のためのパッチ、メディパッド、クリームなどを包含する所望の投与様式に適合させる。
【００７３】
薬物組成物中での活性化合物の濃度は、活性化合物の吸収、不活性化および排泄速度、投与スケジュールならびに投与される量、さらに当業者に知られている他のファクターに左右される。
【００７４】
活性成分を、１回で投与することもできるし、または時間を空けて投与するためにいくつかのより小さい用量に分割することもできる。治療の正確な用量および期間は、治療される疾患の関数であり、知られている試験プロトコルを使用して経験的に、またはｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験データから補外することにより決定することができることは理解される。濃度および用量値は、緩和される状態の重度に伴っても変動しうることは特記すべきである。さらに、任意の特定の対象では、特定の用量計画は、個々の必要および組成物を投与しているか、組成物の投与を管理している人の専門的判断に従って経時的に調節されるべきであること、本明細書に記載の濃度範囲は、例に過ぎず、請求されている組成物の範囲または実施を制限する意図はないことは理解されるべきである。
【００７５】
経口投与が望ましい場合、胃の酸性環境から化合物を保護する組成物で、化合物を提供すべきである。例えば、組成物を、その完全性を胃で維持し、腸で活性化合物を放出する腸溶コーティングで製剤することができる。組成物を、制酸剤または他のこのような成分と組み合わせて製剤することもできる。
【００７６】
経口組成物は通常、不活性希釈剤または可食性担体を包含し、錠剤に圧縮するか、ゼラチンカプセルに封入することができる。経口治療投与のために、１種または複数の活性化合物を、賦形剤と混和し、錠剤、カプセルまたはトローチの形態で使用することもできる。薬学的に相容性な結合剤および補助物質が、組成物の一部として包含されていてもよい。
【００７７】
錠剤、ピル、カプセル、トローチなどは、同様の特性の次の成分または化合物のうちのいずれかを含有することができる。これらに限られないが、トラガカントゴム、アラビアゴム、コーンスターチまたはゼラチンなどの結合剤；微結晶性セルロース、デンプンまたはラクトースなどの賦形剤；これらに限られないがアルギン酸およびコーンスターチなどの崩壊剤；これらに限られないが、ステアリン酸マグネシウムなどの滑剤；これらに限られないが、コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤；スクロースまたはサッカリンなどの甘味剤およびペパーミント、サリチル酸メチルまたは果実香料などの香料。
【００７８】
投与単位形態がカプセルである場合、これは、前記のタイプの物質に加えて、脂肪油などの液体担体を含有してもよい。加えて、投与単位形態は、投与単位の物理的形態を変更する様々な他の物質、例えば、糖および他の腸溶剤のコーティングを含有してもよい。化合物をさらに、エリキシル、懸濁剤、シロップ、ウェハ、チューイングガムなどの成分として投与することもできる。シロップは、活性化合物に加えて、甘味料としてのスクロースおよびある種の防腐剤、染料および着色剤ならびに香料を含有してもよい。
【００７９】
活性物質を、所望の作用を損なわない他の活性物質と、または所望の作用を補足する物質と混合することもできる。
【００８０】
非経口、皮内、皮下または局所適用で使用される液剤または懸濁剤は、任意の次の成分を含有することができる。注射のための水などの無菌希釈剤、食塩水、固定油、ゴマ油、ココナッツ油、落花生油、綿実油などの天然に生じる植物油またはオレイン酸エチルなどの合成脂肪媒体、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒；ベンジルアルコールおよびメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸および亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；エチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）などのキレート化剤；酢酸塩、クエン酸塩およびリン酸塩などの緩衝剤；ならびに塩化ナトリウムおよびデキストロースなどの張性を調節するための薬剤。非経口製剤を、ガラス、プラスチックまたは他の適切な材料から製造されたアンプル、使い捨てシリンジまたは多回投与用バイアルに封入することができる。緩衝剤、防腐剤、抗酸化剤などを、必要ならば混和することができる。
【００８１】
静脈内投与する場合、適切な担体には、生理食塩水、リン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）ならびにグルコース、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびこれらの混合物などの増粘剤および可溶化剤を含有する溶液が包含される。組織をターゲットとするリポソームを包含するリポソーム懸濁剤も、薬学的に許容できる担体として適しうる。これらは、例えば米国特許第４５２２８１１号明細書に記載されているような知られている方法に従い調製することができる。
【００８２】
活性化合物は、該化合物を体からの迅速な排出に対して保護する時間放出製剤またはコーティングなどの担体と共に調製することができる。このような担体には、これらに限られないが、インプラントおよびマイクロカプセル化送達系ならびにコラーゲン、エチレン酢酸ビニル、ポリアンヒドリド、ポリグリコール酸、ポリオルトエステル、ポリ乳酸などの生分解性生体親和性ポリマーなどの制御放出製剤が包含される。このような製剤を調製する方法は、当業者に知られている。
【００８３】
本発明の化合物は、経口、非経口（ＩＶ、ＩＭ、デポ−ＩＭ、ＳＱおよびデポ−ＳＱ）、舌下、鼻腔内（吸入）、クモ膜下、局所または直腸で投与することができる。当業者に知られている剤形が、本発明の化合物を送達するために適している。
【００８４】
本発明の化合物は、腸内または非経口で投与することができる。経口投与する場合には、本発明の化合物を、当業者によく知られているような経口投与のための通常の剤形で投与することができる。これらの剤形には、錠剤およびカプセルの通常の固体単位剤形、さらに、液剤、懸濁剤およびエリキシルなどの液体剤形が包含される。固体剤形を使用する場合、これらが持続放出型であって、本発明の化合物を１日１回または２回のみ投与すればよいようにすることが好ましい。
【００８５】
経口剤形を患者に、１日１、２、３または４回投与する。本発明の化合物を、１日３回以下、さらに好ましくは１回または２回投与することが好ましい。したがって、本発明の化合物を経口剤形で投与することが好ましい。どのような経口剤形を使用する場合でも、本発明の化合物を胃の酸性環境から保護するように設計することが好ましい。腸溶コーティング錠剤が、当業者にはよく知られている。加えて、酸性の胃から保護するようにそれぞれコーティングされている小さな球体を充填されたカプセルも、当業者にはよく知られている。
【００８６】
経口投与する場合、ベータ−セクレターゼ活性を阻害するか、Ａベータ産生を阻害するか、Ａベータ沈着を阻害するか、ＡＤを治療または予防するために治療的に有効な投与量は、約０．１ｍｇ／日から約１０００ｍｇ／日である。経口用量が、約１ｍｇ／日から約１００ｍｇ／日であることが好ましい。経口用量が約５ｍｇ／日から約５０ｍｇ／日であることがさらに好ましい。患者は１回用量で始めることができる一方で、患者の状態が変化するにつれて、用量を経時的に変化させることができることを理解されたい。
【００８７】
本発明の化合物はさらに、ナノ結晶分散製剤で有利に送達することもできる。このような製剤の調製は例えば、米国特許第５１４５６８４号明細書に記載されている。ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤のナノ結晶分散物およびその使用法が、米国特許第６０４５８２９号明細書に記載されている。ナノ結晶製剤は典型的には、薬物化合物のより大きな生物学的利用率をもたらす。
【００８８】
本発明の化合物は、非経口で、例えばＩＶ、ＩＭ、デポ−ＩＭ、ＳＣまたはデポ−ＳＣで投与することができる。非経口で投与する場合、約０．５から約１００ｍｇ／日、好ましくは１日約５から約５０ｍｇの治療有効量を送達すべきである。１カ月に１回または２週ごとに１回、注射するためにデポー製剤を使用する場合、用量は、約０．５ｍｇ／日から約５０ｍｇ／日または約１５ｍｇから約１５００ｍｇの１カ月用量であるべきである。一部では、アルツハイマー病を伴う患者の健忘性により、非経口剤形は、デポー製剤であることが好ましい。
【００８９】
本発明の化合物は、舌下で投与することができる。舌下で与える場合、本発明の化合物を、ＩＭ投与のために前記された量で１日１回から４回与えるべきである。
【００９０】
本発明の化合物は、鼻腔内投与することができる。この経路で与える場合、適切な剤形は、当業者に知られている鼻噴霧または乾燥粉末である。鼻腔内投与するための本発明の化合物の用量は、ＩＭ投与のために前記された量である。
【００９１】
本発明の化合物は、クモ膜下で投与することができる。この経路で与える場合、適切な剤形は、当業者に知られている非経口剤形であってよい。クモ膜下投与するための本発明の化合物の用量は、ＩＭ投与のために前記された量である。
【００９２】
本発明の化合物は、局所投与することができる。この経路で与える場合、適切な剤形は、クリーム、軟膏またはパッチである。投与される本発明の化合物の量により、パッチが好ましい。局所投与する場合、用量は、約０．５ｍｇ／日から約２００ｍｇ／日である。パッチにより送達することができる量は限られるので、２個以上のパッチを使用してもよい。パッチの数およびサイズは重要ではなく、当業者には知られているように、治療有効量の本発明の化合物が、送達されることが重要である。本発明の化合物は、当業者に知られているように、坐剤により直腸で投与することができる。坐剤により投与する場合、治療有効量は、約０．５ｍｇから約５００ｍｇである。
【００９３】
本発明の化合物は、当業者に知られているように、インプラントにより投与することもできる。本発明の化合物をインプラントにより投与する場合、治療有効量は、デポー投与のために前記した量である。
【００９４】
特定の本発明の化合物および所望の剤形を与える場合、当業者であれば、適切な剤形を調製および投与する方法を知っているであろう。
【００９５】
本発明の化合物は、前記と同様に、同様の投与経路により、同様の医薬剤形を使用して、同様の投与スケジュールで、疾患を予防するか、ＭＣＩ（軽度認識障害）を伴う患者を治療するか、ＭＣＩからＡＤへと進行するであろう患者においてアルツハイマー病の発症を予防または遅延させるか、ダウン症候群を治療または予防するか、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血を有するヒトを治療するか、脳アミロイド血管障害を治療し、その起こりうる結果、すなわち単発性および再発性葉性出血を予防するか、血管性および変性性の混合由来の認知症、パーキンソン病に随伴する認知症、進行性核上性麻痺に随伴する認知症、皮質基底変性に随伴する認知症を包含する他の変性性認知症および汎発性レーヴィ小体型アルツハイマー病を治療するために使用される。
【００９６】
本発明の化合物は、相互に、または前記で列挙された状態を治療または予防するために使用される他の治療剤もしくは手法と組み合わせて使用することができる。このような薬剤または手法には、タクリン（テトラヒドロアミノアクリジン、ＣＯＧＮＥＸ（登録商標）として市販）、塩酸ドネペジル（Ａｒｉｃｅｐｔ（登録商標）として市販、リバスチグミン（Ｅｘｅｌｏｎ（登録商標）として市販）などのアセチルコリンエステラーゼ阻害剤、ガンマ−セクレターゼ阻害剤、シクロオキシゲナーゼＩＩ阻害剤などの抗炎症剤、ビタミンＥおよびギンコリドなどの抗酸化剤、例えば、Ａベータペプチドでの免疫化または抗Ａベータペプチド抗体の投与などの免疫学的手法、スタチンならびにＣｅｒｅｂｒｏｌｙｓｉｎ（登録商標）、ＡＩＴ−０８２（Ｅｍｉｌｌｅｕ、２０００、Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．５７：４５４）などの直接的または間接的神経向性薬剤および将来の他の神経向性薬剤が包含される。
【００９７】
加えて、式（Ｉ）の化合物は、Ｐ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）の阻害剤と共に使用することもできる。Ｐ−ｇｐ阻害剤およびそのような化合物の使用は、当業者に知られている。例えば、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、５３、４５９５〜４６０２（１９９３年）、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、２、７〜１２（１９９６年）、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、５８、４１７１〜４１７９（１９９６年）、国際公開第９９／６４００１号パンフレットおよび国際公開第０１／１０３８７号パンフレット参照。重要なことは、Ｐ−ｇｐ阻害剤の血中濃度は、Ｐ−ｇｐが式（Ａ）の化合物の脳血中濃度を低下させることを阻害する際にその効果を発揮するようなレベルであることである。このために、Ｐ−ｇｐ阻害剤および式（Ａ）の化合物を、同じまたは異なる投与経路で同時に、または別々の時間に投与することができる。重要なことは、投与時間ではなく、Ｐ−ｇｐ阻害剤の有効な血中濃度を得ることである。
【００９８】
適切なＰ−ｇｐ阻害剤には、シクロスポリンＡ、ベラパミル、タモキシフェン、キニジン、ビタミンＥ−ＴＧＰＳ、リトナビル、酢酸メゲストロール、プロゲステロン、ラパマイシン、１０，１１−メタノジベンゾスベラン（ｍｅｔｈａｎｏｄｉｂｅｎｚｏｓｕｂｅｒａｎｅ）、フェノチアジン、ＧＦ１２０９１８、ＦＫ５０６、ＶＸ−７１０、ＬＹ３３５９７９、ＰＳＣ−８３３、ＧＦ−１０２９１８および他のステロイドなどのアクリジン誘導体が包含される。追加的な薬剤は、同じ機能を有し、したがって同じ結果を達成することが判明するであろうし、このような化合物も、有用と考えられることを理解されたい。
【００９９】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、経口、非経口（ＩＶ、ＩＭ、ＩＭ−デポ、ＳＱ、ＳＱ−デポ）、局所、舌下、直腸、鼻腔内、クモ膜下で、およびインプラントにより投与することができる。
【０１００】
Ｐ−ｇｐ阻害剤の治療有効量は、約０．１から約３００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは１日当たり約０．１から約１５０ｍｇ／ｋｇである。患者は１回用量で始めることができる一方で、患者の状態が変化するにつれて、用量を経時的に変化させなければならないことがあることを理解されたい。
【０１０１】
経口投与する場合には、Ｐ−ｇｐ阻害剤を、当業者に知られているような経口投与のための通常の剤形で投与することができる。これらの剤形には、錠剤およびカプセルの通常の固体単位剤形、さらに、液剤、懸濁剤およびエリキシルなどの液体剤形が包含される。固体剤形を使用する場合、これらが持続放出型であって、Ｐ−ｇｐ阻害剤を１日１回または２回のみ投与すればよいようにすることが好ましい。経口剤形を患者に、１日１から４回投与する。Ｐ−ｇｐ阻害剤を、１日３回以下、さらに好ましくは１日１回または２回投与することが好ましい。したがって、Ｐ−ｇｐ阻害剤を固体剤形で投与することが好ましく、さらに、固体剤形が１日１回または２回投与を可能にする持続放出形態であることが好ましい。どのような剤形を使用する場合でも、Ｐ−ｇｐ阻害剤を胃の酸性環境から保護するように設計することが好ましい。腸溶コーティング錠剤は、当業者にはよく知られている。加えて、酸性の胃から保護するようにそれぞれコーティングされている小さな球体を充填されたカプセルも、当業者にはよく知られている。
【０１０２】
加えて、Ｐ−ｇｐ阻害剤は、非経口で投与することができる。非経口で投与する場合、ＩＶ、ＩＭ、デポ−ＩＭ、ＳＱまたはデポ−ＳＱで投与することができる。
【０１０３】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、舌下で投与することができる。舌下で与える場合、Ｐ−ｇｐ阻害剤は、ＩＭ投与に関してと同じ量で１日１回から４回与えるべきである。
【０１０４】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、鼻腔内投与することができる。この投与経路で与える場合、適切な剤形は、当業者に知られている鼻噴霧または乾燥粉末である。鼻腔内投与するためのＰ−ｇｐ阻害剤の用量は、ＩＭ投与に関してと同じである。
【０１０５】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、クモ膜下で投与することができる。この投与経路で与える場合、適切な剤形は、当業者に知られている非経口剤形であってよい。
【０１０６】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、局所投与することができる。この投与経路で与える場合、適切な剤形は、クリーム、軟膏またはパッチである。投与する必要のあるＰ−ｇｐ阻害剤の量のため、パッチが好ましい。しかしながら、パッチにより送達することができる量は限られている。したがって、２個以上のパッチが必要なこともある。パッチの数およびサイズは重要ではなく、当業者には知られているように、重要なことは、治療有効量のＰ−ｇｐ阻害剤が、送達されることである。
【０１０７】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、当業者に知られているように、坐剤により直腸で投与することができる。
【０１０８】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、当業者に知られているように、インプラントにより投与することができる。
【０１０９】
Ｐ−ｇｐ阻害剤を投与するための投与経路、さらに剤形について新規なことは何もない。特定のＰ−ｇｐ阻害剤および所望の剤形を与える場合、当業者であれば、Ｐ−ｇｐ阻害剤のための適切な剤形を調製する方法を知っているであろう。
【０１１０】
正確な用量および投与頻度は、当業者である投与医師によく知られているように、投与される特定の本発明の化合物、治療される特定の状態、治療される状態の重度、特定の患者の年齢、体重、全身の身体的状態および個人が摂取しているかもしれない他の医薬品に左右されることは、当業者には明らかなはずである。
【０１１１】
ＡＰＰ切断の阻害
本発明の化合物は一般に、ＡＰＰ６９５アイソフォームまたはその変異体でナンバリングされたＭｅｔ５９５とＡｓｐ５９６の間での、またはＡＰＰ７５１もしくはＡＰＰ７７０またはそれらの変異体などの異なるアイソフォームの対応する部位（場合によって「ベータ−セクレターゼ部位」と称される）でのＡＰＰの切断を阻害する。特定の理論に結びつけることは望まないが、ベータ−セクレターゼ活性の阻害は、ベータアミロイドペプチド（Ａベータ）の産生を阻害すると考えられる。ベータ−セクレターゼ酵素の存在下でのＡＰＰ基質の切断を、阻害化合物の存在下に、ベータ−セクレターゼ切断部位での切断をもたらすのに通常は十分な条件下に分析することによる様々な阻害アッセイのうちのいずれかで、阻害活性は証明される。未治療または不活性対照と比較してのベータ−セクレターゼ切断部位でのＡＰＰ切断の低減は、阻害活性と関係している。本発明の化合物阻害剤の効力を証明するために使用することができるアッセイ系は知られている。
【０１１２】
天然、突然変異および／または合成ＡＰＰ基質、天然、突然変異および／または合成酵素ならびに試験化合物を使用して、ベータ−セクレターゼの酵素活性およびＡベータの産生をｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで分析することができる。分析は、天然、突然変異および／または合成ＡＰＰおよび酵素を発現する一次細胞または二次細胞、天然ＡＰＰおよび酵素を発現する動物モデルを必要としてもよいし、基質および酵素を発現するトランスジェニック動物モデルを利用してもよい。酵素活性の検出は、例えばイムノアッセイ、蛍光もしくは色素アッセイ、ＨＰＬＣまたは他の検出手段により１種または複数の切断産物を分析することによってよい。反応系でのベータ−セクレターゼを介して切断が、阻害化合物の不在下に観察および測定される対照と比較して、産生されるベータ−セクレターゼ切断産物の量を減らすことができるものとして、阻害化合物は決定される。
【０１１３】
ベータ−セクレターゼ
ベータ−セクレターゼ酵素の様々な形態が知られていて、酵素活性のアッセイおよび酵素活性の阻害に利用可能かつ有用である。これらには、酵素の天然、組換えおよび合成形態が包含される。ヒトベータ−セクレターゼは、ベータ部位ＡＰＰ切断酵素（ＢＡＣＥ）、Ａｓｐ２およびメマプシン２として知られており、例えば、ＰＣＴ特許公開国際公開第０１／２３５３３号パンフレットおよび国際公開第００／１７３６９号パンフレットにおいて、さらに文献刊行物（Ｈｕｓｓａｉｎら、１９９９年、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１４：４１９〜４２７；Ｖａｓｓａｒら、１９９９年、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８６：７３５〜７４１；Ｙａｎら、１９９９年、Ｎａｔｕｒｅ  ４０２：５３３〜５３７；Ｓｉｎｈａら、１９９９年、Ｎａｔｕｒｅ  ４０：５３７〜５４０；およびＬｉｎら、２０００年、ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  ９７：１４５６〜１４６０）において特徴づけられている。酵素の合成形態も、記載されている（国際公開第００／１７３６９号パンフレット）。ベータ−セクレターゼは、ヒト脳組織から抽出および精製することができ、細胞、例えば組換え酵素を発現する哺乳動物細胞で製造することができる。
【０１１４】
ＡＰＰ基質
ＡＰＰのベータ−セクレターゼを介して切断の阻害を証明するアッセイは、任意の知られている形態のＡＰＰを利用することができ、Ｋａｎｇら（１９８７年、Ｎａｔｕｒｅ  ３２５：７３３〜６）により記載された６９５アミノ酸「通常」アイソタイプ、キタグチら（１９８１年、Ｎａｔｕｒｅ  ３３１：５３０〜５３２）により記載された７７０アミノ酸アイソタイプおよびスウェーデン突然変異（ＫＭ８７０−１ＮＬ）（ＡＰＰ−ＳＷ）、ロンドン突然変異（Ｖ７１７６Ｆ）などの変異体が含まれる。例えば、知られている変異体突然変異の総説に関しては、Ｈａｒｄｙ、１９９２年、Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．１：２３３〜２３４参照。追加的な有用な基質には、例えば国際公開第００／１７３６９号パンフレットに開示されている二塩基性アミノ酸修飾、ＡＰＰ−ＫＫ、ＡＰＰの断片およびベータ−セクレターゼ切断部位を含有する合成ペプチド、野生型（ＷＴ）または突然変異形態例えばＳＷが包含される。
【０１１５】
ＡＰＰ基質は、ＡＰＰのベータ−セクレターゼ切断部位（ＫＭ−ＤＡまたはＮＬ−ＤＡ）、例えば、完全ＡＰＰペプチドまたは変異体、ＡＰＰ断片、組換えもしくは合成ＡＰＰまたは融合ペプチドを含有する。好ましくは、融合ペプチドには、酵素アッセイに有用な部分を有する、例えば単離および／または検出特性を有するペプチドに融合しているベータ−セクレターゼ切断部位が包含される。有用な部分は、抗体結合のための抗原エピトープ、標識または他の検出部分、結合基質などであってよい。
【０１１６】
抗体
ＡＰＰ切断に特徴的な産物を、例えばＰｉｒｔｔｉｌａら、１９９９年、Ｎｅｕｒｏ．Ｌｅｔｔ．２４９：２１〜４に記載されている様々な抗体を使用するイムノアッセイにより測定することができる。Ａベータを検出するために有用な抗体には例えば、Ａベータペプチドのアミノ酸１〜１６上のエピトープを特異的に認識するモノクローナル抗体６Ｅ１０（Ｓｅｎｅｔｅｋ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）；ヒトＡベータ１〜４０および１〜４２に対してそれぞれ特異的な抗体１６２および１６４（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ｓｔａｔｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｂａｓｉｃ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｓｔａｔｅｎ  Ｉｓｌａｎｄ、ＮＹ）ならびに米国特許第５５９３８４６号明細書に記載されているベータ−アミロイドペプチドの接合領域、残基１６および１７の間の部位を認識する抗体が包含される。ＡＰＰの残基５９１から５９６の合成ペプチドに対して上昇する抗体およびスウェーデン突然変異の５９０〜５９６に対して上昇するＳＷ１９２抗体も、ＡＰＰおよびその切断産物のイムノアッセイにおいて有用である。
【０１１７】
アッセイ系
ベータ−セクレターゼ切断部位でのＡＰＰ切断を決定するためのアッセイは、当分野でよく知られている。例示的なアッセイが例えば、米国特許第５７４４３４６号明細書および同第５９４２４００号明細書に記載されており、下記実施例において記載される。
【０１１８】
無細胞アッセイ
本発明の化合物の阻害活性を証明するために使用することができる例示的アッセイが例えば、国際公開第００／１７３６９号パンフレットに記載されている。このようなアッセイは、無細胞インキュベーションで、またはベータ−セクレターゼおよびベータ−セクレターゼ切断部位を有するＡＰＰ基質を発現する細胞を使用する細胞インキュベーションで行うことができる。
【０１１９】
ＡＰＰのベータ−セクレターゼ切断部位を含有するＡＰＰ基質、例えば完全ＡＰＰもしくは変異体、ＡＰＰ断片またはアミノ酸配列ＫＭ−ＤＡもしくはＮＬ−ＤＡを含有する組換えもしくは合成ＡＰＰ基質を、ベータ−セクレターゼ活性を有し、ＡＰＰのベータ−セクレターゼ切断部位を切断するために有効なベータ−セクレターゼ酵素、その断片または合成もしくは組換えポリペプチド変異体の存在下に、酵素の切断活性に適したインキュベーション条件下にインキュベーションする。適切な基質は、ペプチドまたはそのベータ−セクレターゼ切断産物の精製または検出を容易にするために有用な基質ペプチドおよび修飾を含有する融合タンパク質またはペプチドであってよい誘導体を任意選択で包含する。有用な修飾には、抗体結合が知られている抗原エピトープの挿入；標識または検出可能な部分の結合、結合基質の結合などが包含される。
【０１２０】
無細胞ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイのために適したインキュベーション条件には例えば、水溶液中、約ｐＨ４〜７、約３７℃、約１０分から３時間の期間での約２００ナノモルから１０マイクロモルの基質、約１０から２００ピコモルの酵素および約０．１ナノモルから１０マイクロモルの阻害剤化合物が包含される。これらのインキュベーション条件は例示に過ぎず、特定のアッセイ成分および／または所望の測定系のために必要に応じて変動させることができる。特定のアッセイ成分のためのインキュベーション条件の最適化は、使用される特異的なベータ−セクレターゼ酵素およびその最適なｐＨ、任意の追加的酵素および／またはアッセイで使用されうるマーカーなどを根拠とすべきである。このような最適化は、日常的であり、過度の実験を必要としない。
【０１２１】
１つの有用なアッセイは、ＡＰＰ−ＳＷのＣ末端１２５アミノ酸に融合しているマルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）を有する融合ペプチドを利用する。ＭＢＰ部分は、抗ＭＢＰ捕捉抗体によりアッセイ基質に捕捉されている。ベータ−セクレターゼの存在下での捕捉融合タンパク質のインキュベーションは、ベータ−セクレターゼ切断部位での基質の切断をもたらす。切断活性の分析は例えば、切断産物のイムノアッセイによってよい。このようなイムノアッセイの１つは、例えば抗体ＳＷ１９２を使用して、切断された融合タンパク質のカルボキシ末端にさらされている独特なエピトープを検出する。
【０１２２】
細胞アッセイ
数多くの細胞ベースのアッセイを使用して、Ａベータを放出するベータ−セクレターゼ活性および／またはＡＰＰのプロセシングを分析することができる。細胞内および本発明の化合物阻害剤の存在または不在下でのＡＰＰ基質とベータ−セクレターゼ酵素の接触を使用して、化合物のベータ−セクレターゼ阻害活性を証明することができる。好ましくは、有用な阻害化合物の存在下でのアッセイは、非阻害対照と比較して、酵素活性の少なくとも約３０％、最も好ましくは少なくとも約５０％の阻害をもたらす。
【０１２３】
一実施形態では、ベータ−セクレターゼを天然に発現する細胞を使用する。別法では、前記で検討した組換えベータ−セクレターゼまたは合成変異体酵素を発現するように、細胞を修飾する。ＡＰＰ基質を、培地に加えることもできるが、好ましくは、細胞中で発現させる。ＡＰＰ、ＡＰＰの変異体もしくは突然変異体を天然に発現する細胞またはＡＰＰのアイソフォーム、変異体もしくは突然変異体ＡＰＰ、組換えもしくは合成ＡＰＰ、ＡＰＰ断片もしくはベータ−セクレターゼＡＰＰ切断部位を含有する合成ＡＰＰペプチドもしくは融合タンパク質を発現するように形質転換された細胞を使用することができるが、ただし、発現されるＡＰＰが、酵素と接触することができ、酵素切断活性を分析することができることを条件とする。
【０１２４】
ＡＰＰからＡベータを通常プロセシングするヒト細胞系は、本発明の化合物の阻害活性をアッセイするための有用な手段を提供する。培地へのＡベータおよび／または他の切断産物の産生および放出は、例えば、ウェスタンブロットなどのイムノアッセイまたはＥＬＩＳＡなどによる酵素結合イムノアッセイ（ＥＩＡ）により測定することができる。
【０１２５】
ＡＰＰ基質および活性ベータ−セクレターゼを発現する細胞を、化合物阻害剤の存在下にインキュベーションして、対照と比較しての酵素活性の阻害を証明することができる。ベータ−セクレターゼの活性は、ＡＰＰ基質の１種または複数の切断産物の分析により測定することができる。例えば、基質ＡＰＰに対するベータ−セクレターゼ活性の阻害は、Ａベータなどの特異的ベータ−セクレターゼ誘発ＡＰＰ切断産物の放出を低減すると予測される。
【０１２６】
天然および非天然細胞の両方とも、Ａベータをプロセシングおよび放出するが、内因性ベータ−セクレターゼ活性のレベルは低く、往々にして、ＥＩＡによる検出が困難である。したがって、強化されたベータ−セクレターゼ活性、ＡＰＰからＡベータへの強化されたプロセシングおよび／またはＡベータの強化された産生を有することが知られている細胞タイプを使用することが好ましい。例えば、ＡＰＰのスウェーデン変異体形態（ＡＰＰ−ＳＷ）、ＡＰＰ−ＫＫまたはＡＰＰ−ＳＷ−ＫＫでの細胞の形質移入は、強化されたベータ−セクレターゼ活性を有し、容易に測定することができる量のＡベータを産生する細胞をもたらす。
【０１２７】
このようなアッセイでは例えば、ＡＰＰおよびベータ−セクレターゼを発現する細胞を、培地中、ＡＰＰ基質上のその切断部位でのベータ−セクレターゼ酵素活性に適している条件下にインキュベーションする。細胞を化合物阻害剤にさらすと、培地に放出されるＡベータの量および／または細胞溶解産物中でのＡＰＰのＣＴＦ９９断片の量が、対照と比較して低減される。ＡＰＰの切断産物は例えば、前記で検討したように特異的抗体との免疫反応により分析することができる。
【０１２８】
ベータ−セクレターゼ活性を分析するために好ましい細胞には、一次ヒトニューロン細胞、導入遺伝子がＡＰＰである一次トランスジェニック動物ニューロン細胞およびＡＰＰ、例えばＡＰＰ−ＳＷを発現する安定な２９３細胞系の細胞などの他の細胞が包含される。
【０１２９】
ｉｎ  ｖｉｖｏアッセイ：動物モデル
様々な動物モデルを使用して、前記のようにＡベータを放出するベータ−セクレターゼ活性および／またはＡＰＰのプロセシングを分析することができる。例えば、ＡＰＰ基質およびベータ−セクレターゼ酵素を発現するトランスジェニック動物を使用して、本発明の化合物の阻害活性を証明することができる。ある種のトランスジェニック動物モデルは、例えば米国特許第５８７７３９９号明細書、同第５６１２４８６号明細書、同第５３８７７４２号明細書、同第５７２０９３６号明細書、同第５８５０００３号明細書、同第５８７７０１５号明細書および同第５８１１６３３号明細書ならびにＧａｎｅｓら、１９９５年、Ｎａｔｕｒｅ  ３７３：５２３に記載されている。ＡＤの病態生理に随伴する特徴を示す動物が好ましい。本明細書に記載されているトランスジェニックマウスに本発明の化合物阻害剤を投与すると、化合物の阻害活性を証明するための別法が得られる。薬学的に有効な担体中、ターゲット組織に達する投与経路を介して、適切な治療量で化合物を投与することも好ましい。
【０１３０】
ベータ−セクレターゼ切断部位でのＡＰＰのベータ−セクレターゼを介して切断およびＡベータ放出の阻害を、これらの動物で、脳脊髄液などの動物の体液または組織中の切断断片を測定することにより分析することができる。Ａベータ沈着物またはプラークに関する脳組織の分析が好ましい。
【０１３１】
本発明の阻害化合物の存在下、ＡＰＰの酵素を介して切断および／または基質からのＡベータの放出を可能にするのに十分な条件下にＡＰＰ基質とベータ−セクレターゼ酵素を接触させると、本発明の化合物は、ベータ−セクレターゼ切断部位でのＡＰＰのベータ−セクレターゼを介して切断を低減するために有効であり、および／またはＡベータの放出量を低減するために有効である。このような接触が、例えば前記のような動物モデルへの本発明の阻害化合物の投与である場合、化合物は、動物の脳組織へのＡベータ沈着を低減し、ベータアミロイドプラークの数および／またはサイズを低減するために有効である。このような投与がヒト対象に対してである場合、化合物は、Ａベータの高い量により特徴づけられる疾患の進行を阻害または遅延させ、患者でのＡＤの進行を遅延させ、および／または疾患のリスクを有する患者でのＡＤの発症または進展を予防するのに有効である。
【０１３２】
他に定義されていない限り、本明細書で使用される科学および技術用語は全て、本発明が属する分野の当業者が一般に理解している意味と同じ意味を有する。本明細書に挙げられている特許および刊行物は全て、あらゆる目的のために参照により援用される。
【０１３３】
本明細書に挙げられている特許および刊行物は全て、あらゆる目的のために参照により援用される。
【０１３４】
構造は、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．（９０  Ａｄｅｌａｉｄｅ  Ｓｔｒｅｅｔ  Ｗｅｓｔ、Ｔｏｒｏｎｔｏ、Ｏｎｔａｒｉｏ、Ｍ５Ｈ  ３Ｖ９、カナダ）から購入可能なＮａｍｅ  Ｐｒｏ  ＩＵＰＡＣ  Ｎａｍｉｎｇ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、バージョン５．０９を使用して名付けた。
【０１３５】
次の実施例は、本発明の具体的な実施形態を表示することを意図するものであり、本発明の範囲の制限として意図されていない。
【実施例】
【０１３６】
生物学的実施例
（実施例Ａ）
合成ＡＰＰ基質を利用する無細胞阻害アッセイ
ベータ−セクレターゼによって切断することができ、Ｎ−末端のビオチンを有し、Ｃｙｓ残基でのＯｒｅｇｏｎグリーンの共有結合によって蛍光性になっている合成ＡＰＰ基質を、本発明の阻害化合物の存在下および不在下でのベータ−セクレターゼ活性をアッセイするために使用する。有用な基質には、
ビオチン−ＳＥＶＮＬ−ＤＡＥＦＲＣ［オレゴングリーン］ＫＫ［配列番号１］、
ビオチン−ＳＥＶＫＭ−ＤＡＥＦＲＣ［オレゴングリーン］ＫＫ［配列番号２］、
ビオチン−ＧＬＮＩＫＴＥＥＩＳＥＩＳＹ−ＥＶＥＦＲＣ［オレゴングリーン］ＫＫ［配列番号３］、
ビオチン−ＡＤＲＧＬＴＴＲＰＧＳＧＬＴＮＩＫＴＥＥＩＳＥＶＮＬ−ＤＡＥＦＲＣ［オレゴングリーン］ＫＫ［配列番号４］、
ビオチン−ＦＶＮＱＨＬＣｏｘＧＳＨＬＶＥＡＬＹ−ＬＶＣｏｘＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＡＣ［オレゴングリーン］ＫＫ［配列番号５］
が包含される。
【０１３７】
酵素（０．１ナノモル）および試験化合物（０．００１〜１００マイクロモル）を予備遮断された低親和性黒色プレート（３８４ウェル）中、３７℃で３０分間インキュベーションする。１ウェル当たり３０マイクロリットルの最終体積まで１５０ミリモルの基質を加えることによって、反応物を開始する。最終アッセイ条件は、０．００１〜１００マイクロモルの化合物阻害剤、０．１モルの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．５）、１５０ナノモルの基質、０．１ナノモルの可溶性ベータ−セクレターゼ、０．００１％のＴｗｅｅｎ２０および２％のＤＭＳＯである。アッセイ混合物を３７℃で３時間インキュベーションし、反応物を、飽和性濃度の免疫的に純粋なストレプトアビジンを加えることにより停止させる。ストレプトアビジンと共に室温で１５分間インキュベーションした後、例えばＬＪＬ  Ａｃｑｕｒｅｓｔ（Ｅｘ４８５ｎｍ／Ｅｍ５３０ｎｍ）を使用して蛍光偏光を測定する。ベータ−セクレターゼ酵素の活性を、基質が酵素によって切断されると生じる蛍光偏光の変化により検出する。化合物阻害剤の存在下または不在下のインキュベーションにより、合成ＡＰＰ基質のベータ−セクレターゼ酵素切断の特異的阻害が証明される。このアッセイで、本発明の好ましい化合物は、５０マイクロモル未満のＩＣ５０を示す。本発明のさらに好ましい化合物は、１０マイクロモル未満のＩＣ５０を示す。本発明のさらにいっそう好ましい化合物は、５マイクロモル未満のＩＣ５０を示す。
【０１３８】
（実施例Ｂ）
ベータ−セクレターゼ阻害：Ｐ２６−Ｐ４’ＳＷアッセイ
ＡＰＰのベータ−セクレターゼ切断部位を含有する合成基質を使用して、例えば公開されているＰＣＴ出願国際公開第００／４７６１８号パンフレットに記載されている方法を使用して、ベータ−セクレターゼ活性をアッセイする。Ｐ２６−Ｐ４’ＳＷ基質は、配列：
（ビオチン）ＣＧＧＡＤＲＧＬＴＴＲＰＧＳＧＬＴＮＩＫＴＥＥＩＳＥＶＮＬＤＡＥＦ［配列番号６］
のペプチドであり、
Ｐ２６−Ｐ１標準は、配列：
（ビオチン）ＣＧＧＡＤＲＧＬＴＴＲＰＧＳＧＬＴＮＩＫＴＥＥＩＳＥＶＮＬ［配列番号７］
を有する。
【０１３９】
簡略には、ビオチン結合合成基質を、このアッセイでは約０から約２００マイクロモルの濃度でインキュベーションする。阻害化合物を試験する場合、約１．０マイクロモルの基質濃度が好ましい。ＤＭＳＯ中で希釈された試験化合物を反応混合物に、５％の最終ＤＭＳＯ濃度で加える。対照も、５％の最終ＤＭＳＯ濃度を含有する。反応でのベータ−セクレターゼ酵素の濃度を変えて、希釈の後に、ＥＬＩＳＡアッセイの直線範囲を伴う生成物濃度、約１２５から２０００ピコモルを得る。
【０１４０】
反応混合物はさらに、２０ミリモルの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．５）、０．０６％のＴｒｉｔｏｎＸ１００を包含し、これを３７℃で約１から３時間インキュベーションする。次いで、試料をアッセイ緩衝液（例えば、１４５．４ナノモルの塩化ナトリウム、９．５１ミリモルのリン酸ナトリウム、７．７ミリモルのアジ化ナトリウム、０．０５％のＴｒｉｔｏｎＸ４０５、６ｇ／リットルのウシ血清アルブミン、ｐＨ７．４）で希釈して、反応物をクエンチし、次いで、切断産物をイムノアッセイするためにさらに希釈する。
【０１４１】
切断産物はＥＬＩＳＡによりアッセイすることができる。希釈された試料および標準を、捕捉抗体、例えばＳＷ１９２をコーティングされているアッセイプレート中、４℃で約２４時間インキュベーションする。ＴＴＢＳ緩衝液（１５０ミリモルの塩化ナトリウム、２５ミリモルのＴｒｉｓ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０、ｐＨ７．５）中で洗浄した後に、試料を、ストレプトアビジン−ＡＰと共に製造者の指示に従いインキュベーションする。室温で１時間インキュベーションした後に、試料をＴＴＢＳ中で洗浄し、蛍光基質溶液Ａ（３１．２ｇ／リットルの２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール、３０ｍｇ／リットル、ｐＨ９．５）と共にインキュベーションする。ストレプトアビジン−アルカリ性リン酸塩との反応により、蛍光による検出が可能になる。ベータ−セクレターゼ活性の有効な阻害剤である化合物は、対照と比較して、基質の切断の低減を証明する。
【０１４２】
（実施例Ｃ）
合成オリゴペプチド−基質を使用するアッセイ
ベータ−セクレターゼの知られている切断部位および任意選択で、蛍光または色素部分などの検出可能なタグが導入されている合成オリゴペプチドを調製する。このようなペプチドの例、さらにその製造および検出方法は、参照により本明細書に援用される米国特許第５９４２４００号明細書に記載されている。切断産物は、当業者によく知られている方法に従い、検出されるペプチドに適した高速液体クロマトグラフィーまたは蛍光もしくは色素検出方法を使用して検出することができる。
【０１４３】
例えば、このようなペプチドの１種は、配列ＳＥＶＮＬ−ＤＡＥＦ［配列番号８］を有し、切断部位は、残基５と８の間である。他の好ましい基質は、配列ＡＤＲＧＬＴＴＲＰＧＳＧＬＴＮＩＫＴＥＥＩＳＥＶＮＬ−ＤＡＥＦ［配列番号９］を有し、切断部位は、残基２６と２７の間である。
【０１４４】
これらの合成ＡＰＰ基質を、ベータ−セクレターゼの存在下、基質のベータ−セクレターゼを介して切断をもたらすのに十分な条件下に、インキュベーションする。化合物阻害剤の存在下での切断結果と対照結果とを比較すると、化合物の阻害活性の測定が得られる。
【０１４５】
（実施例Ｄ）
ベータ−セクレターゼ活性の阻害−細胞アッセイ
ベータ−セクレターゼ活性の阻害を分析するための例示的アッセイは、米国特許第５６０４１０２号明細書に記載されているスウェーデン突然変異と一般に称され、Ａベータの過剰産生が判明している（Ｃｉｔｒｏｎら、１９９２年、Ｎａｔｕｒｅ  ３６０：６７２〜６７４）、Ｌｙｓ６５１Ｍｅｔ５２からＡｓｎ６５１Ｌｅｕ６５２への天然に生じる二重突然変異（ＡＰＰ７５１でナンバリング）を含有するＡＰＰ７５１を形質移入されているヒト胚腎臓細胞系ＨＥＫｐ２９３（ＡＴＣＣ受入番号ＣＲＬ−１５７３）を利用する。
【０１４６】
細胞を、阻害化合物（ＤＭＳＯ中で希釈）の存在／不在下に、所望の濃度、通常は１０マイクログラム／ｍｌまでの濃度でインキュベーションする。処理期間の終了時に、ならし培地を、例えば切断断片の分析によりベータ−セクレターゼ活性に関して分析する。Ａベータは、特異的検出抗体を使用して、イムノアッセイにより分析することができる。酵素活性を、化合物阻害剤の存在下および不在下に測定して、ＡＰＰ基質のベータ−セクレターゼを介して切断の特異的阻害を証明する。
【０１４７】
（実施例Ｅ）
ＡＤの動物モデルでのベータ−セクレターゼの阻害
様々な動物モデルを使用して、ベータ−セクレターゼ活性の阻害をスクリーニングすることができる。本発明で有用な動物モデルの例には、これらに限られないが、マウス、モルモット、イヌなどが包含される。使用される動物は、野生型、トランスジェニック動物またはノックアウトモデルであってよい。加えて、哺乳動物モデルは、本明細書に記載のＡＰＰ６９５−ＳＷなどのＡＰＰにおける突然変異を発現してもよい。トランスジェニック非ヒト哺乳動物モデルの例は、米国特許第５６０４１０２号明細書、同第５９１２４１０号明細書および同第５８１１６３３号明細書に記載されている。
【０１４８】
Ｇａｍｅｓら、１９９５年、Ｎａｔｕｒｅ  ３７３：５２３〜５２７に記載されているように調製されたＰＤＡＰＰマウスは、推定阻害化合物の存在下でのＡベータ放出のｉｎ  ｖｉｖｏ抑制を分析するために有用である。米国特許第６１９１１６６号明細書に記載されているように、４カ月齢ＰＤＡＰＰマウスに、トウモロコシ油などの媒体に配合されている化合物を投与する。マウスに、化合物（１〜３０ｍｇ／ｍｌ；好ましくは１〜１０ｍｇ／ｍｌ）を投与する。時間、例えば３〜１０時間の後に、動物をと殺し、脳を分析のために取り出す。
【０１４９】
トランスジェニック動物に、選択された投与様式に適した担体に配合されている化合物阻害剤の量を投与する。対照動物は処置しないか、媒体で処置するか、不活性な化合物で処置する。投与は急性で、すなわち、１日での単一投与または複数回投与であってもよいし、慢性であってもよい、すなわち、投与を毎日、数日間繰り返す。０時点で開始する際に、脳組織または脳脊髄液を選択された動物から得て、Ａベータを包含するＡＰＰ切断ペプチドの存在に関して、例えばＡベータ検出のための特異的抗体を使用するイムノアッセイにより分析する。試験期間の終了時に、動物をと殺し、脳組織または脳脊髄液を、Ａベータおよび／またはベータ−アミロイドプラークの存在に関して分析する。組織をさらに、壊死に関して分析する。
【０１５０】
本発明の化合物阻害剤を投与された動物は、未処置対照と比較して、脳組織または脳脊髄液におけるＡベータの低減および脳組織におけるベータアミロイドプラークの低減を証明すると予測される。
【０１５１】
（実施例Ｆ）
ヒト患者でのＡベータ産生の阻害
アルツハイマー病（ＡＤ）を患っている患者は、脳中に高い量のＡベータを示す。ＡＤ患者に、選択された投与様式に適した担体に配合されている化合物阻害剤の量を投与する。投与を毎日、試験期間の間繰り返す。０日目に開始して、認識および記憶試験を例えば１カ月に１回行う。
【０１５２】
化合物阻害剤を投与された患者は、次の疾患パラメーターのうちの１つまたは複数の変化により分析されるように、対照の未治療患者と比較して、疾患進行の遅延または安定化を示すと予測される：ＣＳＦまたは血漿中に存在するＡベータ；脳または海馬体積；脳中のＡベータ沈着物；脳中のアミロイドプラーク；ならびに認識および記憶機能のスコア。
【０１５３】
（実施例Ｇ）
ＡＤのリスクを有する患者でのＡベータ産生の予防
ＡＤになる素因があるか、そのリスクを有する患者は、家族性遺伝パターン、例えば、スウェーデン突然変異の存在の認識により、および／または診断パラメーターのモニタリングにより同定される。ＡＤになる素因があるか、そのリスクを有すると同定された患者に、選択された投与様式に適した担体に配合されている化合物阻害剤の量を投与する。投与を毎日、試験期間の間繰り返す。０日目に開始して、認識および記憶試験を例えば１カ月に１回行う。
【０１５４】
化合物阻害剤を投与された患者は、次の疾患パラメーターのうちの１つまたは複数の変化により分析されるように、対照の未治療患者と比較して、疾患進行の遅延または安定化を示すと予測される：ＣＳＦまたは血漿中に存在するＡベータ；脳または海馬体積；脳中のアミロイドプラーク；ならびに認識および記憶機能のスコア。
【０１５５】
本発明を、様々な具体的かつ好ましい実施形態および技術を参照しつつ記載した。しかしながら、本発明の意図および範囲内にとどまりながら、多くの変化および変更をなすことができることは理解されるべきである。
【発明を実施するための最良の形態】
【０１５６】
【化１７】
2009516734.tif 000018
【０１５７】
スキーム１に図示されているようなピペリジン阻害剤８の合成を、市販のＮ−カルボベンジルオキシピペリド−４−オンで開始する。アリールハロゲン化物のグリニャール試薬を、エーテル中でマグネシウム金属と反応させることにより形成し、ケトンと反応させて、第３級カルビノール１を得る。別法では、アリールリチウム試薬を、アリールハロゲン化物から金属ハロゲン交換により調製し、次いで、Ｎ−カルボベンジルオキシピペリド−４−オンの溶液に加えて、１を得る。カルビノール１を、クロロホルムおよびトリフルオロ酢酸の冷混合物中でアジ化ナトリウムと反応させることにより、アジ化物２に変換する。Ｈ．Ｓａｊｉｋｉら（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９８年、６３、７９９０）により記載されている被毒化パラジウム触媒を使用して水素化することにより、アジ化物を第１級アミン３に選択的に還元する。第１級アミン３をキラルエポキシド４（ＣＡＳ３８８０７１−２７−０、Ｒｅｅｄｅｒ，Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｒ．国際公開第２００２０８５８７７Ａ２号パンフレット）と反応させて、ＢｏｃおよびＣｂｚ保護されているトリアミン５を得る。化合物５を、トリフルオロ酢酸で処理することにより、ｔＢｏｃ脱保護する。溶媒を蒸発させると、ＴＦＡ塩が得られ、これを、数当量の第３級アミン塩基の存在下にＤＣＭ中の１．０当量の無水酢酸を使用して、第１級窒素上で選択的にアセチル化して、Ｃｂｚ保護されているアミン６を得る。６基のＣｂｚ保護を、接触水素化により除去して、主要中間体７を得る。７と、アルキルハロゲン化物、アリールハロゲン化物、カルボン酸、カルボン酸塩化物、カルボン酸の活性エステル、塩化スルホニル、アルデヒドなどの適切な求電子試薬との還元アミノ化の方法による反応、ケトンとの還元アミノ化の方法による反応などにより、一般に８により示される幅広い化合物を製造する。
【０１５８】
【化１８】
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【０１５９】
スキーム１ａは、ピペリジン中間体７の後期段階誘導体化が、スキーム１においてのように実行可能でない場合に、スキーム１の置換ピペリジン化合物（８）を調製するための別の一般的手順を詳述している。したがって、化合物３の第１級アミンを、ＢＯＣ基で保護して、化合物９を得て、次いで、ピペリジン窒素を、炭素に担持されているパラジウムを用いてエタノール中で水素化することにより脱保護して、化合物１０を得て、これを、スキーム１に記載されている方法により、または当業者に知られている他の標準的な方法により誘導体化すると、化合物１２を得ることができ、次いでこれを、スキーム１に記載されているような８タイプの化合物にする。
【０１６０】
【化１９】
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【０１６１】
スキーム１ｂは、ピペリドン阻害剤２２の合成を詳述している。出発物質は、ｍ−イソプロピルベンゾニトリル１４であり、これは、市販の３−イソプロピルブロモベンゼン１３から、ＮｅｗｍａｎおよびＥａｓｔｅｒｂｒｏｃｋ（Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．７７、１９５５年、３７６３）の手順により合成した。ニトリル１４を、ＹｕおよびＺｈａｎｇ（Ｓｙｎ．Ｃｏｍｍ．（１９９７年）、２７（９）、１４９５）により記載された有機サマリウム試薬を使用するアリル求核試薬の二重付加に掛けて、第１級アミン１５を得た。アミンをこの時点で精製することもできるし、これを、標準的な条件下にクロロギ酸ベンジルを使用してＣｂｚ基で保護して、中間体１６を得ることもでき、次いでこれを、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製する。塩化メチレンおよび酢酸中、−７８℃で、オゾンを用いて処理することにより、１６の末端オレフィンを酸化させると、ジアルデヒド、アルデヒド酸１７および二酸２８の混合物が得られる。二酸２８は、２９〜３１などのグルタルイミドベースの化合物の合成で使用することができる（スキーム１ｄ参照）。通常、アルデヒド酸１７が、主な生成物であり、これを、Ｃ１８カラムを使用する分取逆相クロマトグラフィーにより単離する。１７のメチルエステルの別の好ましい合成を、スキーム１ｃに記載する。アルデヒド酸１７を直ちに、第１級アミンでの還元アミノ化に掛けて、第２級アミン酸１８を得る。反応物を監視するために、ＬＣＭＳを使用するが、反応後処理の間に、アミン酸１８は自然に環化して、ピペリドン１９になりうることを特記する。実際に、後処理生成物は、環式および生成物の両方を含有するので、精製前に、生成物の多くをピペリドンにしておくことが最良である。このことは、ＣＨＣｌ３などの溶媒中で１５〜３０分間還流することにより行うことができる。精製されたピペリドン１９を、接触水素化により脱保護して、第１級アミン２０にし、これをそのまま、キラルエポキシド４と反応させて、Ｂｏｃ保護阻害剤２１をジアステレオ異性体の１：１混合物として得る。Ｂｏｃ基を除去し、第１級アミンをスキーム１においてのようにアセチル化して、ピペリジン４位でのジアステレオ異性体の１：１混合物である阻害剤２２を得る。
【０１６２】
クロマトグラフィーを包含する当分野でよく知られている技術を使用して、ジアステレオ異性体を分割することができる。例には、Ｃ１８カラムでの分取逆相クロマトグラフィーまたはシリカゲルカラムでの順相クロマトグラフィーが包含される。通常、一方のジアステレオ異性体が、他方よりも活性である。異なる立体異性体は、異なる生物学的活性を有しうることが、薬学ではよく知られている。これらの活性は、様々なよく知られている分割技術を使用して立体異性体を分離し、別々の実体として立体異性体を試験することにより、決定することができる。活性立体異性体内の各部位での絶対立体化学は、Ｘ線結晶学または立体選択的合成を包含する様々な方法により決定することができる。これらの方法は、当業者であれば行うことができる。本発明は、ジアステレオ異性体の混合物および分割されたホモキラル種を包含する。分割された単一の鏡像異性体が、本発明の好ましい実施形態である。一方の分割された立体異性体が、ＢＡＣＥに対して他方よりも大きな効力を有することが判明した場合、その異性体が特に好ましい。
【０１６３】
分割されたジアステレオ異性体が、実施例に包含されている（実施例２参照）。予測されるように、分割されると、２種のジアステレオ異性体は、ＢＡＣＥ酵素を阻害するのに異なる能力を示す。一例では、より効力のあるジアステレオ異性体の絶対立体化学が結晶学により決定されていて、ＩＵＰＡＣ  Ｓ立体配置を有することが判明している。同じ絶対立体化学が、ピペリドン系を通してより高い効力を有し、したがって、これらのジアステレオ異性体が好ましい実施形態であると結論することが妥当である。
【０１６４】
【化２０】
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【０１６５】
【化２１】
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【０１６６】
スキーム１ｃは、化合物２２（スキーム１ｂ）の別の好ましい合成を概説している。この手順では、ｍ−イソプロピルベンゾニトリルを、エタノールなどのアルコールに溶かし、続いて、これらに限られないが、塩酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸またはトリフルオロメタンスルホン酸を包含する酸で処理することにより、これらに限られないがエチルエステルを包含するアルキルエステル２３に変換する。好ましい酸は、硫酸である。反応は、溶媒の還流点までの室温で実行することができる。好ましい条件には、還流エタノール中での反応の実行が包含される。生じたエステルを、アリル有機金属化合物で、エーテル溶媒中、−１００℃から溶媒の還流点までの温度で処理する。典型的なアリル有機金属化合物には、臭化アリルマグネシウム、ヨウ化アリルマグネシウム、塩化アリルマグネシウムまたはアリルリチウムが包含され、臭化アリルマグネシウムが好ましい。適切な溶媒には、ジエチルエーテル、ＴＨＦ、ジオキサンが包含され、ＴＨＦが好ましい。反応物を好ましくは、室温で実行するが、ＴＨＦ中、還流で実行することもできる。生じる第３級アルコール２４を、酸の存在下にアジ化塩で処理して、第３級アジ化物２５を形成する。適切なアジ化塩には、アジ化ナトリウム、カリウム、リチウムまたはテトラブチルアンモニウム、さらにアジドイオンの他の源が包含される。アジ化ナトリウムが、最も好ましい。典型的な酸には、トリフルオロ酢酸、酢酸、トリフル酸、メタンスルホン酸、塩酸、硫酸または他の同様の酸が包含される。トリフルオロ酢酸が最も好ましい。反応物を、塩化メチレン、クロロホルム、ジクロロエタンなどの不活性溶媒中で実行する。最も好ましい溶媒は、クロロホルムである。反応物を典型的には、室温未満で実行し、好ましくは−２０から−１０℃で実行する。第３級アジ化物を、様々な方法で還元することができる。適切な条件には、パラジウム、白金またはニッケル、例えばラネーニッケルなどに由来する不均一系触媒を使用する、水素圧１〜５０ａｔｍでの水素化が包含される。反応は、様々な、メタノールもしくはエタノールなどのアルコールを包含する不活性溶媒または酢酸エチルもしくはＴＨＦなどの不活性溶媒中で実行することができる。反応は、酢酸などの酸性溶媒中で、または任意の前述の溶媒と組み合わされている酢酸の存在下に実行することができる。水素化を典型的には、室温または室温未満で実行する。第３級アジ化物を、ホスフィンまたはスルフィドとの反応物を介して還元することもできる。例えば、水を含有する適切な不活性溶媒中、よく知られているシュタウジンガー反応条件下でのアジ化物とトリフェニルホスフィンまたはトリメチルホスフィンとの反応に加水分解を続けて、その場で、必要なアミン、酸化ホスフィンおよび窒素ガスにする。この反応は、溶媒の還流点までの室温で実行することができる。最も好ましい条件には、水含有ＴＨＦ中、室温でのアジ化物とトリメチルホスフィンとの反応が包含される。生じるアミンを、ｔ−ＢＯＣ、ＦＭＯＣ、ＴｒＯＣまたはＣＢｚを包含する様々なウレタンベースの保護基で保護することができる。最も好ましい基、Ｃｂｚを、塩化ＣＢｚから、様々な溶媒または溶媒の組合せ中で導入して、保護アミン１６を生じさせることができる。水を単独で、または他の不活性溶媒と組み合わせて使用する場合、これは通常、炭酸もしくは炭酸水素ナトリウムもしくはカリウムまたは水酸化ナトリウムもしくはカリウムなどの無機塩基を含有する。不活性有機溶媒を単独で使用する場合、通常これらは、トリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンなどの第３級アミン塩基を含有する。適切な不活性有機溶媒には、ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム、トルエンまたはジオキサンが包含される。好ましい条件には、塩基として炭酸水素ナトリウムを使用するジオキサン−水混合物中でのＣＢｚ−Ｃｌが包含される。反応物を最適には、室温で実行するが、５０℃から溶媒混合物の還流点までで実行することができる。環式オレフィン２６へのジオレフィンの閉環複分解を、Ｇｒｕｂｂｓ（Ａｃｃｏｕｎｔｓ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２８（１９９５年）４４６〜４５２）により開拓された条件下に、次の参照文献に記述されている彼の第１世代ルテニウム触媒を使用して実施する：Ｓ．Ｋｏｔｈａら、Ｂｉｏｒｇ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  １１（２００１年）１４２１〜１４２３、Ｓ．Ｋｏｔｈａら、Ｂｉｏｒｇ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ８（１９９８年）、２５７〜２６０、Ｋ．Ｕｎｈｅｉｍ  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ５３（１９９７年）、２３０９〜２３２２。２７を得るための酸化炭素の識別を伴う選択的オレフィンオゾン分解を、Ｓ．Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２３（１９８２年）、３８６７〜３８７０の手順で行った。化合物２７を、化合物１７の代わりにすることができ、スキーム１ｂに記述されているようにそのまま使用することができる。
【０１６７】
【化２２】
2009516734.tif 000023
【０１６８】
スキーム１ｄに図示されているグルタルイミドベースの阻害剤の合成は、ジエン１６のオゾン分解（スキーム１ａ参照）の間に生じる副産物である二酸２８で開始する。二酸２８は、実施例に記載されているように酸アルデヒド１７を精製する間に回収することができる。脱水条件下に２８と第１級アミンとを反応させると、グルタルイミド２９が得られる。２９を接触水素化すると、第１級アミン３０が得られ、これを、スキーム１に記載されているようにキラルエポキシド４と反応させることができる。Ｎ−末端Ｂｏｃ基を脱保護し、続いてアセチル化すると、阻害剤化合物３１が生じる。
【０１６９】
【化２３】
2009516734.tif 000024
【０１７０】
４４タイプのアゼチジン構造は、スキーム２に示されているように調製することができる。アゼチジノン３３は、アゼチジノール３２から、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペリオジナン、三酸化イオウ−ピリジン錯体などの試薬で酸化させることにより、好ましくはＳｗｅｒｎ酸化により調製することができる。ジエチルエーテルまたはＴＨＦなどの適切に不活性な溶媒中でアリールリチウム種または好ましくはアリールグリニャールを２３に加えると、カルビノール３４が得られる。Ｂａｃｑｕｅら（Ｓｙｎ．Ｃｏｍｍ、２５（６）、８０３〜８１２（１９９５年））の一般的な手順に従い、１，２−ジクロロエタン、塩化メチレンまたは好ましくはクロロホルムなどのハロゲン化溶媒中、Ｈｕｎｉｇ塩基またはトリエチルアミンなどの非求核性有機塩基の存在下に、塩化メタンスルホニルで処理することにより、３４を塩化物３５に変換し、次いで、その後極性非反応性溶媒（ＤＭＦが好ましい）中で、アジ化ナトリウムでの処理を介して、アジ化物３６に変換する。メタノールまたは好ましくはエタノールなどのアルコール溶媒中、水酸化パラジウムまたは好ましくは炭素に担持されているパラジウムなどのパラジウム触媒を使用する水素化により、第１級アミン３７が得られる。ベンジルヒドリルアミン保護基を除去して、ジアミン３３を調製することは、アミン３７とＨＢｒまたは好ましくはＨＣｌとの酸性塩を初めに調製し、次いで、エタノールまたは好ましくはメタノールなどのアルコール中で水酸化パラジウムを用いて水素化することにより達成される。より不安定なカルボキシベンジル（Ｃｂｚ）基で第２級アミンを選択的に再保護して、アミン３９を得ることは、エーテル、塩化メチレンまたは好ましくはＴＨＦなどの不活性溶媒中、Ｈｕｎｉｇ塩基またはトリエチルアミンなどの非求核性アミンの存在下に、アミン３８をカルボキシベンジル無水物または好ましくはクロロギ酸ベンジルで処理することにより達成される。そのままか、メタノール、エタノール、ｔ−ブタノールまたは好ましくはイソプロパノールなどのアルコール溶媒中、５０℃から１５０℃の範囲の温度で（７０〜１３０℃が好ましい）、エポキシド４およびアミン３０を組み合わせることにより、化合物４０を得ることができる。塩化メチレンまたは１，４−ジオキサンなどの非反応性溶媒中、ＴＦＡまたは好ましくはＨＣｌなどの酸で３５を処理することを介して、ＢＯＣ保護基を除去すると、アミン４１が得られる。無水酢酸もしくはカルボニルジイミダゾールでの処理などのアセチル化条件により、またはＢＯＰ、ＨＢＴＵ／ＨＯＢＴもしくは好ましくはＥＤＣ／ＨＯＢＴなどのアミドカップリング剤の存在下、Ｈｕｎｉｇ塩基もしくはトリエチルアミンの存在下、ＴＨＦ、ジオキサンもしくは好ましくは塩化メチレンなどの適切な不活性溶媒中で、酢酸で処理することにより、アミン４１から、アセトアミド４２を得る。次いで、炭素に担持されているパラジウムが好ましい適切な触媒の存在下、メタノールまたは好ましくはエタノールなどのアルコール溶媒中で、化合物４２を水素化して、アミン４３を得て、次いでこれを、トリエチルアミンまたはＨｕｎｉｇ塩基などの非求核性塩基の存在下に、酸塩化物またはイソシアネートで処理することにより、化合物４４に変換することができる。
【０１７１】
【化２４】
2009516734.tif 000025
【０１７２】
スキーム３は、ピロリジン化合物（５６）の合成を記載している。ＴＨＦ、クロロホルムまたは好ましくは塩化メチレンなどの適切に非反応性の溶媒中で３−ヒドロキシピロリジン４５をクロロギ酸ベンジルで処理して、化合物４６を得て、次いでこれを、ＰＣＣ、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペリオジナンなどの薬剤を用いて、または好ましくはＳｗｅｒｎ酸化条件を使用して酸化することにより化合物４７に変換することができることにより、保護ピロリジノン４７を調製することができる。ジエチルエーテルまたはＴＨＦなどの適切に不活性な溶媒中でアリールリチウム種または好ましくはアリールグリニャールを４７に加えることにより、カルビノール４８が得られる。溶媒を用いずに、またはクロロホルム、塩化メチレンまたは好ましくは水などの適切な溶媒中、−１０℃から５０℃の範囲の温度で（０℃から２５℃が好ましい）、アジ化ナトリウムおよびトリフルオロ酢酸を使用して、化合物４８をアジ化物４９に初めに変換し、次いで、メタノールまたは好ましくはエタノールなどのアルコール溶媒中、炭素に担持されているパラジウムの存在下に水素化して、化合物５０を得ることにより、ジアミン５０の調製を達成する。化合物５０の第２級アミンを選択的に再保護してアミン５１を得ることは、エーテル、塩化メチレンまたは好ましくはＴＨＦなどの不活性溶媒中、Ｈｕｎｉｇ塩基またはトリエチルアミンなどの非求核性アミンの存在下に、カルボキシベンジル無水物または好ましくは塩化カルボキシベンジルで処理することにより達成される。化合物３９をアゼチジン４４に変換するためにスキーム２で記載された一般的な方法を使用して、化合物５１から５６タイプの化合物への変換を達成することができる。
【０１７３】
【化２５】
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【０１７４】
ピロリジンの誘導体化が、スキーム３においての最終ステップのように実行可能でない場合、先に、スキーム３ａに記載されているシークエンスで誘導体化ピロリジンアミンを調製し、次いで、スキーム１および２に記載されている一般的な方法に従い、化合物５６にすることができる。こうして、アリール酢酸５７をけん化して、エステル５８を得て、続いて、Ｊｅｆｆｏｒｄら、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ  Ａｃｔａ、６９、２０４８、１９８６年により記載された一般的手順に従い、５９を形成するためのエーテル中、グリコール酸エチルおよびナトリウムメトキシドでの処理および次いで、ホルムアルデヒドおよびＫ２ＣＯ３水溶液での処理を介して、アリールプロペノエート６０に変換する。次いで、化合物６０を、ＣＨ２Ｃｌ２中、Ｎ−（メチルオキシメチル）−Ｎ−（トリメチルシリルメチル）−ベンジルアミンおよびトリフルオロ酢酸で処理して、Ｎ−ベンジルピロリジン６１を得る。水およびアルコール（メタノールが好ましい）の混合物中、ＮａＯＨ、ＫＯＨまたは好ましくはＬｉＯＨなどのアルカリで、化合物６１をけん化して、酸６２を得ることができ、これを、アジ化ジフェニルホスホリルおよびＨｕｎｉｇ塩基または好ましくはトリエチルアミンなどの非求核性塩基を用いて、ｔ−ブタノール中で、Ｃｕｒｔｉｕｓ転位条件に掛けると、ＢＯＣ保護アミン６２が得られる。エタノール中、炭素に担持されているパラジウムを用いる水素化により、ピロリジンアミンの脱保護を達成して、化合物６４を得る。スキーム２に記載されている方法により、または当業者に知られている他の標準的な方法により、６５９のピロリジン窒素の誘導体化を達成すると、化合物６８が得られ、次いでこれを、スキーム１および２に記載されているように５６タイプの化合物にする。
【０１７５】
実験
反応は全て、簡便さと、収率を最大化するために窒素雰囲気下に実行した。融点は未補正である。クロマトグラフィーは、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーを指している。ＮＭＲはプロトン［１Ｈ］ＮＭＲを指している。ＮＭＲスペクトルを４００ＭＨｚで得て、規定溶媒の重水素ロックシグナルに対する百万分率（δ）で報告する。蒸発または濃縮は、回転蒸発装置の使用を含意している。
【０１７６】
（実施例１）
（２Ｒ，３Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル、トリフルオロ酢酸塩の合成
ステップ１
４−ヒドロキシ−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
滴下漏斗および還流凝縮器および窒素入口を備えた乾燥５００ｍＬネックフラスコに、Ｍｇ１．２ｇおよびヨウ素結晶を装入した。フラスコを加温して、ヨウ素を気化させ、次いで、ＴＨＦ２５ｍＬを加えた。ｍ−イソプロピルブロモベンゼン９．７ｇ（４９ミリモル）のＴＨＦ３０ｍＬ溶液を滴加し、大部分のＭｇが消費されるまで（約１時間）、混合物を還流させた。生じたグリニャール試薬を、５℃に冷却し、Ｎ−Ｃｂｚ−ピペリド−４−オン（Ｎ−（カルボベンジルオキシ）−４−オキソ−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル）１０ｇ（４３ミリモル）のＴＨＦ５０ｍＬ溶液を１５分かけて滴加した。反応物を加温して室温に２時間し、次いで、飽和塩化アンモニウム溶液１５０ｍＬを徐々に加えることによりクエンチした。混合物をエーテル１００ｍＬで希釈し、層を分離した。エーテル層を再び、飽和ＮａＣｌで洗浄し、乾燥させ、蒸発させた。オイルを、シリカゲルクロマトグラフィー（２：１のヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により精製し、生成物は放置すると結晶化した。収量＝８．２ｇ（５４％）。エレクトロスプレー  ＭＳ  ｍ／ｚ＝３５４．１（ＭＨ＋，予想値３５４．２）ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）７．２〜７．４ｐｐｍ（ｍ，８Ｈ）５．１５（ｓ，９Ｈ）、７．１５（ｄ，１Ｈ）、５．１５（ｓ，１Ｈ）、４．１（ｂｍ，２Ｈ）、３．３（ｂｍ，２Ｈ）、２．９０（ｍ，１Ｈ）、２．０（ｂｍ，２Ｈ）、１．７５（ｄ，２Ｈ）、１．２５（ｄ，６Ｈ，８Ｈｚ）
【０１７７】
ステップ２
４−アジド−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ステップ１で調製されたカルビノール４．０ｇを、ＣＨＣｌ３６ｍＬに溶かした。ＮａＮ３１．５ｇを加え、混合物を−５℃で、塩氷浴中で攪拌した。ＴＦＡ１２ｍＬのＣＨＣｌ３２４ｍｌ溶液を、反応温度が０℃を超えないように、混合物に、冷反応混合物に滴加した（約２５分）。添加の後に、氷浴を外し、反応物を室温で一晩攪拌した。反応物をＥｔＯＡｃ６０ｍｌで希釈し、水２×６０ｍｌおよびブライン１×５０ｍｌで洗浄した。ＥｔＯＡｃ層を蒸発させ、粗製生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサンと０〜１０％のＥｔＯＡｃ）により精製した。収量＝４．２ｇ（９８％）。エレクトロスプレー  ＭＳ  ｍ／ｚ＝７５７．３（Ｍ２Ｈ＋，予想値７５７．４）７．２〜７．４（ｍ，９Ｈ）；５．１０（ｓ，２Ｈ）；４．０６（ｄｔ，２Ｈ）；３．２５（ｂｓ，□ＨＮＭＲ（ＣＤＣＬ３，４００ＭＨｚ）２Ｈ）；２．８８（ｍ，１Ｈ）；１．９８（ｍ，４Ｈ）；１．２３（ｄ，６．５Ｈｚ，６Ｈ）
【０１７８】
ステップ３
４−アミノ−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ＴＨＦ５０ｍｌ中に、ステップ２で調製された化合物１．０ｇを溶解し、２００ｍｇのエチレンジアミン、被毒化１０％Ｐｄ／Ｃを加え（Ｈ．Ｓａｊｉｉｄら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９８年、６３、７９９０）、混合物を水素５０ｐｓｉ下に一晩振盪した。反応溶液をＣｅｌｉｔｅで濾過し、回転蒸発および高真空で蒸発させた。収量＝０．９８ｇ（１０５％）。エレクトロスプレー  ＭＳ  ｍ／ｚ＝７０５．４（Ｍ２Ｈ＋，予想値７０５．４）
【０１７９】
ステップ４
４−［３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ステップ３で調製された化合物１．５ｇ（４．１ミリモル）を、２−プロパノール３ｍｌに溶かし、穏やかに還流させた。１回のアリコットの添加よりも良好な収率が得られるので、式４の化合物１．３ｇ（４．３ミリモル）を少量ずつ３０分ごとに加えた（４×２００ｍｇ、３×１００ｍｇ、４×５０ｍｇ）。反応溶液をＥｔＯＡｃ２００ｍｌで希釈し、０．１ＭのＮａＨＣＯ３２×２００ｍｌおよびブライン１×５０ｍｌで洗浄した。ＥｔＯＡｃ層を蒸発させ、ヘキサン中５０％のＥｔＯＡｃを使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。収量＝１．４ｇ（５１％）、エレクトロスプレー  ＭＳ：ｍ／ｚ＝６６６．２（ＭＨ＋，予想値６６６．４）
【０１８０】
ステップ５
４−（２Ｒ，３Ｓ）−［３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ステップ４で調製された化合物１．４ｍｌ（２．１ミリモル）をそのままのＴＦＡ５ｍｌに１０分間溶かし、次いで、回転蒸発器、続いて高真空で蒸発させた。ＴＦＡ塩をＤＣＭ５０ｍｌおよびＤＩＥＡ５ｍｌに溶かした。無水酢酸０．２２ｍｌを加え、溶液を２０分間攪拌し、次いで、ＴＨＦ中のメチルアミン１．０ｍＬでクエンチした。ＤＣＭを蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃ１００ｍｌに再溶解させ、水２×１００ｍｌ、ブライン１×５０ｍｌで洗浄し、次いで、ＭｇＳＯ４上で乾燥させた。溶媒を蒸発させた後、ＬＣＭＳは、粗製生成物が、次のステップで使用するために十分に純粋であることを示した。エレクトロスプレー  ＭＳ：ｍ／ｚ＝６０８．３（ＭＨ＋，予想値６０８．３）ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）７．４３（ｓ，１Ｈ）；７．１７〜７．３５（ｍ，８Ｈ）；６．７７（ｄ，２Ｈ）；６．６８（ｔ，１Ｈ）：５．１５（ｓ，２Ｈ）、４．０７（ｍ，１Ｈ）；３．７５〜３．５（ｍ，４Ｈ）；３．４５（ｑ，１Ｈ）；３．００（ｄｄ，１Ｈ）；２．５７（ｄｄ，１Ｈ）；２．２４（ｍ，２Ｈ）；１．８〜２．０（ｍ，４Ｈ）；１．７３（ｓ，３Ｈ）；１．２９（ｓ，９Ｈ）
【０１８１】
ステップ６
Ｎ−（１Ｓ，２Ｒ）−［３−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド
ＭｅＯＨ１００ｍｌに、ステップ５で調製された化合物１．３ｇを溶かした。１０％Ｐｄ／Ｃ２５０ｍｇを加え、混合物を水素４８ｐｓｉで一晩振盪した。溶液をＣｅｌｉｔｅパッドに通し、蒸発させると、アミン７ｂが次のステップで使用するために適した純度で得られた。５ｂ１．４ｇからの収量＝１．２ｇ（１０２％）エレクトロスプレー  ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７４．２（ＭＨ＋，予想値４７４．２）。ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）７．４６（ｓ，１Ｈ）；７．２５（ｍ，３Ｈ）；６．７４（ｍ，３Ｈ）；４．０４（ｍ，１Ｈ）；３．４５（ｍ，１Ｈ）；３．１４（ｔ，２Ｈ）；２．９８（ｄ，３．３Ｈｚ，１Ｈ）；２．８（ｍ，２Ｈ）、２．５５（ｄｄ，１４Ｈｚ，１Ｈ）２．２５（ｍ，２Ｈ）；２．０８（ｍ，２Ｈ）；１．９４（ｍ，２Ｈ）；１．７３（ｓ，３Ｈ）；１．３０（ｓ，９Ｈ）
【０１８２】
ステップ７
（２Ｒ，３Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル、トリフルオロ酢酸塩
ステップ６で調製された化合物２０ｍｇを、ＴＨＦ１００μｌおよびＤＩＥＡ１５μＬに溶かした。クロロギ酸メチル６．０μＬを加えると、溶液はゲルになった。ＴＨＦ１００μＬを加え、混合物を室温で１０分間ボルテックス処理した。混合物をメタノール０．５ｍＬで希釈し、生じた溶液を、分取ＨＰＬＣ系にそのまま注入することにより精製した。ＨＰＬＣでの標準的な条件は、次の通りである：
分取カラム：ＢＩＳＣＨＯＦＦ（Ｌｅｏｎｂｅｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）Ｃ１８、ＰＲＥＰ２００５、２０×５０ｍｍ、
溶媒Ａ：０．１％ＴＦＡ、５％ＡＣＮ、Ｈ２Ｏ、
溶媒Ｂ：ＡＣＮ、
勾配：１０分で０〜８０％Ｂ
流速：１０ｍｌ／分、
フラクションサイズ：５ｍＬ、
２６０ｎｍでのＵＶ吸収率により検出。
【０１８３】
適切なフラクションをプールし、蒸発させると、（２Ｒ，３Ｓ）−４−［３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−４−（３−イソプロピル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステルがトリフルオロ酢酸塩として得られた。
エレクトロスプレー  ＭＳ：ｍ／ｚ＝５１８．２２（ＭＨ＋，予想値５１８．３）ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）７．６７（ｓ，１Ｈ）；７．５６（ｄ，１Ｈ）；７．４８（ｔ，９Ｈｚ  １Ｈ）；７．４１（ｍ，１Ｈ）；６．７７（ｍ，□３Ｈ）；３．８５（ｍ，１Ｈ）；３．７５（ｍ，２Ｈ）；３．６７（ｓ，３Ｈ）；３．５８（ｍ，１Ｈ）；３．２０（ｄｄ，１Ｈ）；２．７〜２．９（ｍ，５Ｈ）；２．６０（ｄｄ，１Ｈ）；２．５５（ｄｄ，１Ｈ）；２．５１（ｍ，１Ｈ）；２．２〜２．３５（ｄｔ，２Ｈ）；１．７８（ｓ，３Ｈ）；１．２７（ｄ，６．５Ｈｚ，６Ｈ）
【０１８４】
下記の表１に挙げられている実施例１ａ〜１ｋでは、式ＩＶにより表される化合物を、実施例１に関して前記したステップと類似のステップにより合成した。これらの化合物は、実施例Ｂに記載のＢＡＣＥ無細胞アッセイに従い試験され、約３５から約７８００ナノモルの範囲のＩＣ５０値を示した。
【０１８５】
【化２６】
2009516734.tif 000027
【０１８６】
【表１】
2009516734.tif 000028
【０１８７】
（実施例２）
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピルフェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝アセトアミドの合成
ステップ１
３−アミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ペンタ−１，４−ジエン  ｍ−イソプロピルベンゾニトリル
ＹｕおよびＺｈａｎｇ（Ｓｙｎ．Ｃｏｍｍ．（１９９７年）、２７（９）、１４９５）の手順を使用して、乾燥５００ｍＬ三つ口フラスコに、サマリウム金属（４０メッシュ）３．１ｇおよび無水ＴＨＦ１００ｍＬを装入した。臭化アリル２．９ｇを、ヨウ素のいくつかの小さな結晶と共に加えた。混合物を室温で攪拌した。１０分の後に、混合物は紫色に変わり、これは、有機サマリウム試薬が形成したことを示していた。１時間後に、ｍ−イソプロピルベンゾニトリル１．３４ｇ（ＮｅｗｍａｎおよびＥａｓｔｅｒｂｒｏｏｋ  Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．７７、１９５５、３７６３により記載された手順により合成）を２分かけて滴加した。紫茶混合物を室温で２時間攪拌した。水１００ｍＬを、続いてエーテル５０ｍＬを慎重に加えた。層を分離し、エーテル／ＴＨＦ層を飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。合わせた水性層を、エーテル５０ｍＬで再び抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、茶色のオイルに蒸発させた。生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：１のヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により精製した。収量＝０．５１ｇ。ＥＳＭＳ  ＭＨ＋＝２３０．２。（ＭＨ−ＮＨ３）＋＝２１３．２。ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）７．２５ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ）、７．０７（ｄ，１Ｈ，７Ｈｚ）、５．５２（ｍ，２Ｈ）、５．０６（ｄ，２Ｈ，１９Ｈｚ）、５．０２（ｄ，２Ｈ，８Ｈｚ）、２．９０（ｐ，１Ｈ）、２．６５（ｄｄ，２Ｈ）、２．４２（ｍ，２Ｈ）、１．２３（ｄ，６Ｈ，６．６Ｈｚ）
【０１８８】
ステップ２
［１−アリル−１−（３−イソプロピル−フェニル）−ブト−３−エニル］カルバミン酸ベンジルエステル
３−アミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ペンタ−１，４−ジエン０．４３ｇをジオキサン１０ｍＬおよび飽和Ｎａ２ＣＯ３  ３ｍＬに溶かした。溶液を５℃に冷却し、クロロギ酸ベンキシル０．４３ｇを２分かけて加えた。混合物を室温に加温し、十分に攪拌した。３０分後に、反応物をエーテル４０ｍＬおよび水４０ｍＬで希釈した。層を分離し、エーテル層を０．１ＭのＨＣｌ、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、蒸発させた。生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５：１のヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により精製した。収量＝０．５２ｇ（７７％）。ＥＳＭＳ：ＭＨ＋＝３６４．２。ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）７．３５ｐｐｍ（ｍ，５Ｈ）、７．２２（ｍ，１Ｈ）、７．１１（ｂｓ，３Ｈ）、５．５５（ｍ，２Ｈ）、５．０６（ｄ，２Ｈ）、５．０２（４Ｈ）、２．９７（ｍ，２Ｈ）、２．９３（ｐ，１Ｈ）、２．６５（ｄｄ，２Ｈ）、１．２０（ｄ，６Ｈ，７Ｈｚ）
【０１８９】
ステップ３
３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−５−オキソ−ペンタン酸および３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ペンタン二酸
［１−アリル−１−（３−イソプロピル−フェニル）−ブト−３−エニル］カルバミン酸ベンジルエステル０．６２ｇを、ＤＣＭ１５ｍＬおよびＡｃＯＨ１．５ｍＬに溶かした。溶液を無水氷アセトン浴で冷却した。金属的な青色が持続するまで、オゾンを溶液に気泡導入した。反応物を−７８℃で２０分間攪拌し、次いで、室温に加温した。ＡｃＯＨ７．５ｍＬを加え、ＤＣＭを窒素流下に蒸発させた。さらなるＡｃＯＨ７．５ｍＬを水中３０％のＨ２Ｏ２  ６．０ｍＬと共に加えた。反応物を２時間還流させた。反応物を蒸発させ、残留物をＣＨＣｌ３  ３０ｍＬに溶かし、濾過し、蒸発させた。実施例１のように、２０分での２０％アセトニトリル→６０％アセトニトリルの溶媒勾配を使用して、粗製生成物を、逆相ＨＰＬＣにより精製した。
化合物３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−５−オキソ−ペンタン酸の収量＝０．１５ｇ。ＥＳＭＳ  ＭＨ＋＝３８４．４（予想値３８４．３）ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）９．６０ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ）、７．３５（ｍ，６Ｈ）、７．１０（ｍ，３Ｈ）、５．８５（ｂｓ，１Ｈ）、５．０５（ｂｓ，２Ｈ）、３．２０（ｍ，２Ｈ）、２．９５（ｍ，１Ｈ）、２．９０（ｍ，２Ｈ）、１．２０（ｄ，６Ｈ，７Ｈｚ）。
化合物３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ペンタン二酸の収量＝０．０５９ｇ。ＥＳＭＳ  ＭＮａ＋＝４２２．２（予想値４２２．３）ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）７．４〜７．２（ｍ，６Ｈ）、７．１２（ｍ，３Ｈ）、６．６０（ｂｓ，１Ｈ）、５．０５（ｂｓ，２Ｈ）、３．３３（ｂｄ，２Ｈ，１５Ｈｚ）、３．１２（ｄ，２Ｈ，１５Ｈｚ）、２．８５（ｍ，１Ｈ）、１．２０（ｄ，６Ｈ，７Ｈｚ）。
【０１９０】
ステップ４
［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イル］−カルバミン酸ベンジルエステル
３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−５−オキソ−ペンタン酸０．１３２ｇを、ＤＣＥ１０ｍＬに溶かした。メタノール中２Ｍのエチルアミン１．０ｍＬを、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３  ０．３０ｇと共に加えた。反応物を２３℃で２．５時間攪拌し、次いで蒸発させた。残留物をＤＭＦ１０ｍＬ中でよく攪拌し、１２０℃に１時間加熱し、冷却し、ＥｔＯＡｃ５０ｍＬを含有する分離漏斗に注ぎ、次いで、０．１ＭのＨＣｌで２回、０．１のＮａＨＣＯ３で２回、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、蒸発させた。粗製物を、９：１のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するシリカフラッシュカラムにより精製した。収量＝０．０６１ｇ（４５％）。ＥＳＭＳ  ＭＨ＋＝３９５．４  ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）７．３５ｐｐｍ（ｍ，５Ｈ）、７．２９（ｍ，１Ｈ）、７．１５（ｍ，３Ｈ）、５．６０（ｓ，１Ｈ）、５．００（ｓ，２Ｈ）、３．４８（ｍ，１Ｈ）、３．２５（ｍ，２Ｈ）、３．０５（ｍ，２Ｈ）、２．８５（ｍ，３Ｈ）、２．２５（ｍ，１Ｈ）、１．２０（ｄ，６Ｈ，７Ｈｚ）、１．０５（ｔ，３Ｈ，７Ｈｚ）
【０１９１】
ステップ４ａ
［４−ベンジルオキシカルボニルアミノ−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−１−イル］−酢酸メチルエステル
３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−５−オキソ−ペンタン酸０．０．７１ｇを、ＤＣＥ２．５ｍＬに溶かした。グリシンメチルエステル塩酸塩０．０７０ｇを加え、やや濁った溶液が得られるまで、フラスコを加温した。ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３  ０．１０ｇを加え、混合物を２３℃で３時間攪拌した。反応混合物をエーテル２０ｍＬおよび０．１Ｍのクエン酸１５ｍＬに注いだ。層を分離し、エーテル層を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、蒸発させた。粗製生成物を、３：１のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するシリカフラッシュカラムにより精製した。収量＝０．０３０ｇ（３８％）。ＥＳＭＳ  ＭＨ＋＝４３９．３  ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）７．３５ｐｐｍ（ｍ，５Ｈ）、７．２９（ｍ，１Ｈ）、７．１５（ｍ，３Ｈ）、５．４０（ｓ，１Ｈ）、５．００（ｓ，２Ｈ）、４．１０（ｄｄ，２Ｈ，７Ｈｚ，１８Ｈｚ）、３．７０（ｓ，３Ｈ）、３．４０（ｍ，１Ｈ）、３．２（ｍ，１Ｈ）、３．０５（ｍ，１Ｈ）、２．８５（ｍ  ３Ｈ）、２．３５（ｍ，１Ｈ）、１．２０（ｄ，６Ｈ，７Ｈｚ）
【０１９２】
ステップ５
｛１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
Ｐａｒｒ水素化容器中で、ステップ４で調製された［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イル］−カルバミン酸ベンジルエステル０．０６１ｇをメタノール１５ｍＬおよび酢酸３０μＬに溶かした。１０％Ｐｄ／Ｃ０．０２０ｇを加え、混合物を水素ガス５０ｐｓｉ下に１時間ロックした。混合物をセライトパッドで濾過し、濾液を高真空で２時間蒸発させた。生じたアミン塩をイソプロパノール０．４０ｍＬに溶かし、スクリュートップバイアルに移した。エポキシド［２−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−１−オキシラニル−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４）０．０４７ｇを、ＤＩＥＡ０．０２ｍＬと共に加えた。バイアルを密封し、反応物を７０℃で一晩振盪した。さらなるエポキシド（４）０．０２０ｇを加え、バイアルを７５℃で２時間振盪した。反応物をメタノール１．０ｍＬで希釈し、２０％Ｂ→７０％Ｂの勾配を使用する実施例１のステップ７においてのようにＲＰＨＰＬＣに直接注入することにより、生成物を精製した。適切なフラクションをプールし、蒸発させた。収量＝０．０３４ｇ、ＥＳＭＳ  ＭＨ＋＝５８０．５。
【０１９３】
ステップ６
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド
｛１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ステップ５からの化合物）０．０３３ｇをＣＨＣｌ３  １ｍＬおよびＴＦＡ２ｍＬ中で２０分間攪拌し、次いで蒸発させ、高真空下に２時間置いた。残留物をＤＣＭ３ｍＬおよびＤＩＥＡ０．１０ｍＬに溶かした。無水酢酸８．０μＬを加え、溶液を２３℃で１５分間攪拌した。エタノールアミン１０μＬを加えて、過剰の無水酢酸をクエンチし、反応物を蒸発させた。ＣＨＣｌ３中１％のＭｅＯＨ→ＣＨＣｌ３中１０％のＭｅＯＨの移動相勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより、残留物を精製した。
【０１９４】
下記の表２に挙げられている実施例２ａ〜２ｈでは、式Ｖにより表される化合物は、実施例２に関して前記したステップと類似のステップにより合成され、実施例Ｂに記載のＢＡＣＥ無細胞アッセイで試験された。化合物は、ピペリジン位置でのジアステレオ異性体の１：１混合物である。
【０１９５】
【化２７】
2009516734.tif 000029
【０１９６】
【表２】
2009516734.tif 000030
【０１９７】
ステップ７
ピペリジン４位でのジアステレオ異性体の分割
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド２５ｍｇ（ステップ６からの化合物）をメタノール１．０ｍＬに溶かし、Ｖｙｄａｃ２０×２５０ｍｍＣ１８カラムに代え、５０分かけて１０％Ｂ→６０％Ｂの勾配を使用する実施例１のステップ７においてのようなＲＰＨＰＬＣに直接注入することにより、精製した。ジアステレオ異性体を分離し、適切なフラクションをプールし、蒸発させた。より極性で早く溶離する異性体の収量＝７．５ｍｇ。ＥＳＭＳ  ＭＨ＋＝５０２．４  ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）７．４５ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ）、７．３７（ｄ，１Ｈ，８Ｈｚ）、７．３０（ｍ，２Ｈ）、６．７０（ｄ，２Ｈ，６Ｈｚ）、６．６４（ｔ，１Ｈ）、６．４６（ｄ，１Ｈ，８Ｈｚ）、４．０８（ｍ，１Ｈ）、３．７２（ｔ，１Ｈ）、３．５３（ｍ，１Ｈ）、３．３１（ｄ，１Ｈ，１５Ｈｚ）、３．２５（ｄ，１Ｈ，６Ｈｚ）、３．１５（ｍ，１Ｈ）、３．０５（ｍ，２Ｈ）、２．７〜３．０（５Ｈ）、２．６０（ｄ，２Ｈ，１１Ｈｚ）、１．８８（ｓ，３Ｈ）、１．２０（ｄｄ，６Ｈ，６Ｈｚ）、０．９７（ｔ，３Ｈ，７Ｈｚ）。極性が劣り、遅く溶離する異性体の収量＝４．５ｍｇ。ＥＳＭＳ  ＭＨ＋＝５０２．４。ＨＮＭＲはより極性な異性体に非常に類似。
【０１９８】
下記の表３に挙げられている実施例２ｉ〜２ｎでは、式Ｖａおよび式Ｖｂにより表される化合物を、実施例２のステップ７に記載のクロマトグラフィー分割により調製した。実施例２ｎの絶対立体配置をＸ線結晶学により決定した。実施例２ｍの絶対立体配置は、２ｎの逆と指定された。実施例２Ｈの絶対立体配置は、２ｍおよび２ｎのＢＡＣＥ活性との類似、さらに逆相ＨＰＬＣでの相対溶離時間により指定された。
【０１９９】
【化２８】
2009516734.tif 000031
【０２００】
【表３】
2009516734.tif 000032
【０２０１】
（実施例３）
Ｎ−｛１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド（別の合成）
スキーム１ｃを参照して、中間体化合物１４、１６、２３、２４、２５、２６、２７および１７のＭｅエステルを次の手順に従い調製した。
【０２０２】
【化２９】
2009516734.tif 000033
還流凝縮器およびＮ２キャップを備えた２５０ｍｌ丸底フラスコ中で、１−ブロモ−３−イソプロピルベンゼン２５ｇ（１２５．６ミリモル）およびシアン化銅４５ｇ（５０２．５ミリモル）のピリジン５０ｍｌ溶液を、１５０℃オイル浴中、２時間加熱すると、暗茶色の均一な溶液が形成された。反応混合物をこの温度で１１時間加熱した。還流溶液をベンゼンで処理し、冷却した。反応混合物を濃ＮＨ４ＯＨ４００ｍｌとベンゼン２００ｍｌとに分配し、次いで３０分間攪拌した。混合物を小さいシリカパッドに通して、残留固体を除去した。有機相を除去し、水性層を塩化メチレンで複数回洗浄した。合わせた有機層を飽和ブラインで洗浄し、次いで、乾燥させ、蒸発させると、３−イソプロピルベンゾニトリル１８ｇ（１００％）が得られた。ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．５〜７．２（ｍ，３Ｈ）、２．９（ｍ，１Ｈ）、１．２（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ
【０２０３】
【化３０】
2009516734.tif 000034
３−イソプロピルベンゾニトリル１８．３ｇ（１２５．５８ミリモル）のエタノール４００ｍｌおよび濃硫酸６０ｍｌ中の溶液を還流下に４５時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ジクロロメタン３×１００ｍｌで抽出した。有機相を真空下に蒸発してオイルにした。ＮＭＲによる分析により、反応が完了していないことが示された。残留物をエタノール６００ｍｌに再び溶かし、濃硫酸６０ｍｌで処理し、還流下に２０時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ジクロロメタン３×１００ｍｌで抽出した。反応混合物を室温に冷却し、ジクロロメタン３×１００ｍｌで抽出すると、３−イソプロピル安息香酸エチル２１ｇ（８７％）がオイルとして得られた。ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．９（ｍ，２Ｈ）、７．５〜７．２（ｍ，２Ｈ）、４．４（ｑ，２Ｈ）、２．９（ｍ，１Ｈ）、１．４（ｔ，３Ｈ）、１．２（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ
【０２０４】
【化３１】
2009516734.tif 000035
Ｎ２下の３−イソプロピル安息香酸エチル４．７９ｇ（２５ミリモル）のＴＨＦ溶液を室温で、臭化アリルマグネシウムの２Ｍ溶液３１ｍｌ（６２ミリモル）で処理し、室温で３時間攪拌した。反応混合物を還流下に１．５時間加熱し、室温に冷却し、次いで、水でクエンチした。混合物をジクロロメタン（３×１００ｍｌ）で抽出し、ブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。残留物を、８／１の比のヘキサン／酢酸エチルで溶離して、シリカゲルでクロマトグラフィー処理した。４−３−イソプロピルフェニル）ヘプタ−１，６−ジエン−４−オール４．７９ｇ（８４％）が得られた。ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．２（ｍ，４Ｈ）、５．５（ｍ，２Ｈ）、５．０（ｍ，４Ｈ）、２．９（ｍ，１Ｈ）、２．７（ｍ，２Ｈ）、２．４（ｍ，２Ｈ）、１．２（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２０５】
【化３２】
2009516734.tif 000036
クロロホルム５０ｍｌ中の４−（３−イソプロピルフェニル）ヘプタ−１，６−ジエン−４−オール４．７９ｇ（２０．８ミリモル）およびアジ化ナトリウム６．５ｇ（１００ミリモル）のよく攪拌されている混合物を−１５℃に冷却した。トリフルオロ酢酸３１ｍｌ（４００ミリモル）のクロロホルム５０ｍｌ溶液を、反応温度を−１５℃付近に維持しながら１時間かけて滴加した。混合物を−１５℃でさらに２時間攪拌し、次いで、冷却浴を外し、反応混合物を室温に一晩加温した。水を加えることにより、反応をクエンチし、ジクロロメタンで３回、水性層を抽出した後に、生成物を単離した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ、蒸発させた。溶媒を蒸発させた後に、残留物を、ヘキサン／酢酸エチル（１０／１）で溶離してシリカでクロマトグラフィー処理すると、１−（４−アジドヘプタ−１，６−ジエン−４−イル）−３−イソプロピルベンゼン３．４８ｇ（６５％）が得られた。ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．２（ｍ，４Ｈ）、５．６（ｍ，２Ｈ）、５．０（ｍ，４Ｈ）、２．９（ｍ，１Ｈ）、２．７（ｍ，４Ｈ）、１．３（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２０６】
【化３３】
2009516734.tif 000037
前記で調製されたアジ化物２．０ｇ（７．８ミリモル）のＴＨＦ２０ｍｌ溶液に、水（０．２８ｍｌ（１５．５ミリモル）およびＴＨＦ中１Ｍのトリメチルホスフィン溶液９．４ｍｌ（９．４ミリモル）を加えた。反応混合物を２０時間攪拌し、その後、水（２０ｍｌ）を加え、反応混合物をさらに２時間攪拌した。混合物を塩化メチレン５０ｍｌで３回抽出した。有機層をブラインで洗浄し、次いで、乾燥させ、蒸発させた。残留物（約１．８ｇ）を次のステップでそのまま使用した。
【０２０７】
【化３４】
2009516734.tif 000038
前述のステップからの物質（約７．８ミリモル）をジオキサン−水（６０／４０）１５ｍｌに溶かし、溶液を０℃に冷却した。次いで、炭酸水素ナトリウム（５．９ｇ、７０．６ミリモル）およびｃｂｚ−ｃｌ６．７ｍｌ（４７ミリモル）を、よく攪拌されている混合物に順次加えた。反応混合物を室温で２４時間、次いで５０℃で２時間攪拌した。混合物を冷却し、次いで、塩化メチレン３×５０ｍｌで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、次いで、乾燥させ、蒸発させた。残留物を、ヘキサン／酢酸エチル（６／１）で溶離してシリカでクロマトグラフィー処理すると、４−（３−イソプロピルフェニル）ヘプタ−１，６−ジエン−４−イルカルバミン酸ベンジル２．０５ｇ（７２％）が得られた。ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．４（ｍ，２Ｈ）、７．１（ｍ，２Ｈ）、５．６（ｍ，２Ｈ）、５．０（ｍ，６Ｈ）、２．９（ｍ，３Ｈ）、２．７（ｍ，２Ｈ）、１．３（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２０８】
【化３５】
2009516734.tif 000039
三つ口丸底フラスコに、前記からの４−（３−イソプロピルフェニル）ヘプタ−１，６−ジエン−４−イルカルバミン酸ベンジル３．１５ｇ（８．６６ミリモル）、Ｇｒｕｂｂｓ触媒（第１世代）０．５ｇ（０．６１ミリモル）およびベンゼン７０ｍｌを加えた。混合物を４０℃に加熱し、窒素および真空サイクルで脱ガスした。混合物を４０℃で１４時間攪拌した。反応をｔｌｃにより監視し、かなりの量の出発物質が残っていると決定した。反応物を数回の窒素および真空サイクルで再び脱ガスし、４０℃でさらに２時間攪拌した。反応混合物を水でクエンチし、次いで、塩化メチレン３×５０ｍｌで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、次いで乾燥させ、蒸発させた。残留物を、ヘキサン／酢酸エチル（８／１）で溶離してシリカでクロマトグラフィー処理すると、所望の生成物１−（３−イソプロピルフェニル）シクロペンチ−３−エニルカルバミン酸ベンジル１．７９ｇ（５９％）が得られた。さらに、出発物質１．０９ｇ（３５％）が得られた。ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）、７．２〜７．１（ｍ，４Ｈ）、５．８（ｓ，１Ｈ）、５．３（ｓ，１Ｈ）、５．０（ｓ，２Ｈ）、２．９（ｍ，５Ｈ）、１．３（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２０９】
【化３６】
2009516734.tif 000040
ジクロロメタン−メタノール（８０／２０）１００ｍｌ中のシクロペンテン１．７ｇ（５．０７ミリモル）を炭酸水素ナトリウム１．７ｇ（２０ミリモル）と混合し、続いて−７８℃に冷却した。溶液が暗青色に変わるまで、反応混合物を酸素中のオゾン流で処理した。オゾンを、窒素で排出し、反応混合物を加温し、水でクエンチし、続いて、塩化メチレン３×５０ｍｌで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、次いで、乾燥させ、蒸発させた。残留物をジクロロメタンに再び溶かし、トリエチルアミン１．０６ｍｌ（７．６ミリモル）および無水酢酸１．４４ｍｌ（１５．２ミリモル）で処理し、１８時間攪拌した。反応混合物を水でクエンチし、次いで、塩化メチレン３×５０ｍｌで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、次いで、乾燥させ、蒸発させた。残留物をヘキサン／酢酸エチル（４／１）で溶離してシリカでクロマトグラフィー処理すると、オイル０．６２ｇ（３１％）が得られた。ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｍ  ９．７（ｓ，１Ｈ）、７．４〜７．１（ｍ，５Ｈ）、５．１（ｍ，２Ｈ）、３．５（ｓ，３Ｈ）、３．１（ｍ，４Ｈ）、２．９（ｍ，１Ｈ）、１．３（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ。この生成物は、実施例２のステップ４での３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−５−オキソ−ペンタン酸の代わりにすることができる。実施例２に従ってさらに処理すると、Ｎ−｛１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［１−エチル−４−（３−イソプロピル−フェニル）−２−オキソ−ピペリジン−４−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミドが得られる。
【０２１０】
（実施例４）
調製５および６からの４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−ピリミジン−２−イル−ピペリジン−４−イルアミンおよび４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−チアゾール−２−イル−ピペリジン−４−イルアミンを使用し、実施例１のステップ４および５に記載の方法を使用して、次の化合物を調製した。
【０２１１】
【化３７】
2009516734.tif 000041
（４ａ）Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−ピリミジン−２−イル−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド：ＡＰＣＩ＋ＭＳ−ＭＨ＋実測値５５２．５，予想値５５２．３；
【０２１２】
【化３８】
2009516734.tif 000042
（４ｂ）Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−チアゾール−２−イル−ピペリジン−４−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド：ＡＰＣＩ＋ＭＳ−ＭＨ＋実測値５５７．５，予想値５５７．３
【０２１３】
（実施例５）
３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
【０２１４】
【化３９】
2009516734.tif 000043
３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−カルボン酸ベンジルエステル塩酸塩（調製１４、０．３６２ｇ、０．６９１ミリモル）およびＮ−メチルモルホリン（０．２９９ｍＬ、３．１１）のＣＨ２Ｃｌ２（３．５ｍＬ）溶液を０℃で１５分攪拌した。酢酸（０．０４４ｍＬ、０．７６０ミリモル）を加え、５分攪拌した後に、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．１０３ｇ、０．７６０ミリモル）および塩酸１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（０．１４６ｇ、０．７６０ミリモル）を加え、生じた混合物を室温で１６時間攪拌した。反応物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、粘稠性のオイル３５５ｍｇが得られた。ヘキサン２００ｍＬ、ＥｔＯＡｃ５００ｍＬおよび１０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ５００ｍＬで溶離するクロマトグラフィーにより、表題の化合物２６２ｍｇ（８７％）が得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３４〜７．２５（ｍ，６Ｈ）、７．１６〜７．１４（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．０９〜７．０５（ｍ，２Ｈ）、６．６５〜６．６０（ｍ，３Ｈ）、５．９３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、５．０９（ｓ，２Ｈ）、４．３６〜４．３０（ｍ，２Ｈ）、４．１３〜４．０２（ｍ，３Ｈ）、３．４１〜３．３９（ｍ，１Ｈ）、２．９３〜２．７２（ｍ，２Ｈ）、２．７０〜２．６６（ｍ，１Ｈ）、２．４６〜２．３８（ｂｒ  ｍ，２Ｈ）、１．８２（ｓ，３Ｈ）、１．２３（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ  ＭＨ＋＝５６６．１
【０２１５】
（実施例６）
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−３−［１−アセチル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−３−イルアミノ］−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド
【０２１６】
【化４０】
2009516734.tif 000044
塩化アセチル（０．００５ｍＬ、０．０７０ミリモル）を、Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド（調製１５、０．０３０ｇ、０．０７０ミリモル）およびジイソプロピルエチルアミン（０．０１２ｍＬ、０．０７０ミリモル）のＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中の溶液に加えた。３日間攪拌した後に、混合物を水およびブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮すると、粗製生成物２９ｍｇが得られた。５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから２０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ勾配を使用するクロマトグラフィーにより、表題の化合物２．８ｍｇが得られた：ＬＣＭＳ  ＭＨ＋＝４７４．２。
【０２１７】
実施例８に記載の一般的手順により調製された次の化合物は、３０００ｎＭ未満のＢＡＣＥ  ＩＣ５０値を有した。
【０２１８】
【化４１】
2009516734.tif 000045
【０２１９】
【表４】
2009516734.tif 000046
【０２２０】
（実施例７）
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド（調製２１）を使用して、実施例６に記載されている手順と本質的に同じ手順により、次の化合物を調製した。次いで、Ｋｒｏｍａｓｉｌ  ＤＭＢカラム（５ｃｍ×２５ｃｍ）で、９０％ヘプタン／イソプロピルアルコールまたは９２％ヘプタン／ＥｔＯＨをＴＦＡ０．１％と共に使用するクロマトグラフィーにより、ジアステレオ異性体を分割した：化合物７ａ〜７ｇは、１００００ｎＭ未満のＢＡＣＥ  ＩＣ５０値を有した。
【０２２１】
【化４２】
2009516734.tif 000047
【０２２２】
【表５】
2009516734.tif 000048
【０２２３】
（実施例８）
調製２７〜２９からの化合物を使用し、実施例６に記載の方法に従い、次の化合物８ａ〜８ｆをジアステレオ異性体の混合物として調製した。これらは、１００００ｎＭ未満のＢＡＣＥ  ＩＣ５０値を有した。
【０２２４】
【化４３】
2009516734.tif 000049
【０２２５】
【表６】
2009516734.tif 000050
【０２２６】
【化４４】
2009516734.tif 000051
調製１
４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の４−アミノ−４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（実施例１のステップ３においてのように調製）（０．５０ｇ、１．３６ミリモル）を、水素化ナトリウム（０．１５ｇ、３．７５ミリモル）のＴＨＦ（１０ｍＬ）中のスラリーに加えた。５分攪拌した後に、ＴＨＦ（５ｍＬ）中の二カルボン酸ジ−ｔ−ブチル（０．４１ｇ、１．８８ミリモル）を加え、混合物を２２時間還流した。反応物を冷却し、水でクエンチし、濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃと水とに分配し、有機物をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、麦わら色のオイルが得られた。１０〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するクロマトグラフィーにより、表題の化合物０．４６６ｇ（７４％）が白色のフォームとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．４９〜７．２７（ｍ，５Ｈ）、７．２５〜７．２１（ｍ，３Ｈ）、７．１５〜７．１１（ｍ，１Ｈ）、５．１３（ｓ，２Ｈ）、４．７８（ｓ，１Ｈ）、４．１７〜３．９３（ｍ，２Ｈ）、３．２８〜３．０８（ｍ，２Ｈ）、２．４０〜２．０８（ｂｒ  ｍ，２Ｈ）、２．００〜１．８８（ｍ，２Ｈ）、１．６０〜１．００（ｍ，１８Ｈ）。
【０２２７】
【化４５】
2009516734.tif 000052
調製２
［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＥｔＯＨ（３０ｍＬ）中の４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（調製１）（０．４６６ｇ、１．００ミリモル）および炭素に担持されている１０％パラジウム（７５ｍｇ）を、室温、水素４７ｐｓｉ下に６時間振盪した。混合物を濾過すると（Ｃｅｌｉｔｅ）、表題の化合物０．３４４ｇが粘稠性の黄色のフォームとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３９（ｓ，１Ｈ）、７．２５〜７．２３（ｍ，２Ｈ）、７．１８〜７．１３（ｍ，１Ｈ）、４．７７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、３．４２〜３．１８（ｍ，４Ｈ）、２．４６（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、１．５０〜１．００（ｍ，１８Ｈ）。
【０２２８】
【化４６】
2009516734.tif 000053
調製３
［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−ピリミジン−２−イル−ピペリジン−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−ピペリジン−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（調製２）（０．２００ｇ、０．６０２ミリモル）、２−クロロピリミジン（０．２１ｇ、１．８３ミリモル）、Ｋ２ＨＰＯ４（０．３１ｇ、１．７８ミリモル）およびＤＭＳＯ（２ｍＬ）を密閉管中、９０℃で２４時間加熱し、冷却し、半飽和ＮａＣｌ溶液で希釈し、エーテル約１００ｍＬに抽出した。抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。真空下での加熱で昇華させることにより、過剰の２−クロロピリミジンを除去すると、表題の化合物０．２１ｇ（８６％）が黄−茶色のオイルとして残った：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ８．６３（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ）、８．３０〜８．２９（ｍ，２Ｈ）、７．４１（ｓ，１Ｈ）、７．３４〜７．１４（ｍ，２Ｈ）、６．４７（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ）、４．９０（ｓ，１Ｈ）、４．６２（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，２Ｈ）、３．２９〜３．２０（ｍ，２Ｈ）、２．５０〜２．１０（ｍ，２Ｈ）、２．０３（ｄｔ，Ｊ＝１３．１，４．０Ｈｚ，２Ｈ）、１．６０〜１．０（ｍ，１８Ｈ）。
【０２２９】
【化４７】
2009516734.tif 000054
調製４
［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−チアゾール−２−イル−ピペリジン−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
調製３に記載されている方法により、２−クロロピリミジンを２−ブロモチアゾールに代えて、この化合物を調製した：収率８３％：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．５８（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．４１（ｓ，１Ｈ）、７．２８〜７．１４（ｍ，３Ｈ）、６．５６（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｈ）、４．８４（ｓ，１Ｈ）、２．８９（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，２Ｈ）、３．３６（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．４５〜２．２０（ｍ，２Ｈ）、２．１７（ｄｔ，Ｊ＝１３．１，４．６Ｈｚ，２Ｈ）、１．４５〜１．００（ｍ，１８Ｈ）。
【０２３０】
【化４８】
2009516734.tif 000055
調製５
４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−ピリミジン−２−イル−ピペリジン−４−イルアミン
ジオキサン（４ｍｌ）中４ＮのＨＣｌを、［４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−ピリミジン−２−イル−ピペリジン−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（調製３から、０．２１ｇ、０．５１ミリモル）のジオキサン（４ｍＬ）溶液に加え、生じた混合物を室温で１９時間攪拌した。エーテル（２０ｍＬ）を加えると、オレンジ色がかった固体が沈殿し、これを集め、次いで、ＥｔＯＡｃとＫ２ＣＯ３水溶液とに分配した。有機物をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、表題の化合物０．１１９ｇ（７５％）がオレンジ色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ８．２８（ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．４９（ｔ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．２９〜７．２５（ｍ，３Ｈ）、６．４３（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ）、４．４０（ｄｔ，Ｊ＝１３．７，３．７Ｈｚ，２Ｈ）、３．６１〜３．５３（対称的多重線，２Ｈ）、２．１５〜２．０８（対称的多重線，２Ｈ）、１．７７（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ，２Ｈ）、１．５５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、１．３０（ｓ，９Ｈ）。
【０２３１】
【化４９】
2009516734.tif 000056
調製６
４−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−１−チアゾール−２−イル−ピペリジン−４−イルアミン
調製５に記載されている方法により、調製４からの化合物を使用して、この化合物を調製した：収率５９％：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．４８（ｓ，１Ｈ）、７．３１〜７．２０（ｍ，３Ｈ）、７．１７（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｈ）、６．５２（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．７９〜３．７３（ｍ，２Ｈ）、３．６２〜３．５５（対称的多重線，２Ｈ）、２．２６〜２．１９（対称的多重線，２Ｈ）、１．８０（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ，２Ｈ）、１．４５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、１．３１（ｓ，９Ｈ）。
【０２３２】
【化５０】
2009516734.tif 000057
調製７
１−ベンズヒドリル−アゼチジン−３−オン
無水トリフルオロ酢酸（７．０７ｍＬ、５０．１ミリモル）を−７８℃のＤＭＳＯ（４．７５ｍＬ、６６．９ミリモル）ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）溶液に加えた。１５分後に、ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）中の１−ベンズヒドリル−アゼチジン−３−オール（２７）（８．０ｇ、３３．４ミリモル）を２０分かけて滴加した。混合物を１時間攪拌し、次いで、ジイソプロピルエチルアミン（２５．７ｍＬ、１４７．０ミリモル）を加え、混合物を１５分攪拌し、続いて、室温に加温した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、混合物をＥｔＯＡｃに抽出し、ブラインで洗浄した。濃縮すると、オレンジ色のオイルが得られ、これを、溶離剤として１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するクロマトグラフィーにより精製すると、表題の化合物５．１１ｇ（６４％）が黄色の固体として得られた：融点７０〜７３℃：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．５２〜７．４４（ｍ，４Ｈ）、７．３３〜７．２０（ｍ，６Ｈ）、４．６１（ｓ，１Ｈ）、４．００（ｓ，４Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ２０１．２８、１４２．６６、１２８．９９、１２７．７８、１２７．５２、７８．００、７４．４７。
【０２３３】
【化５１】
2009516734.tif 000058
調製８
１−ベンズヒドリル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−３−オール
マグネシウム旋削物（２．５０ｇ、１０３ミリモル）および数片のヨウ素を、ヨウ素が昇華するまで加熱した。室温に冷却した後に、３−ブロモイソプロピルベンゼン（９．３５ｇ、４６．８ミリモル）および１，２−ジブロモエタン（３滴）のエーテル（７８ｍＬ）溶液を加えた。混合物を１時間還流させ、室温に冷却した。エーテル（２３０ｍＬ）中の１−ベンズヒドリル−アゼチジン−３−オン（調製７から、５．５５ｇ、２３．３ミリモル）を１５分かけて滴加した。添加の後に、反応物を１０分間攪拌したが、この時間の間に、沈殿物が形成した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、有機物を分離し、水性相をエーテルで再抽出した。合わせた有機物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮すると、オレンジ色のオイルが得られた。１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでのクロマトグラフィーにより、表題の化合物７．２２ｇ（８７％）が黄色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．４９〜７．１９（ｍ，１４Ｈ）、４．５１（ｓ，１Ｈ）、３．６２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、３．４５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、３．１５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、２．９６（七重線，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、１．３０（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  １４９．３６、１４４．３６、１４２．４０、１２８．７６、１２７．７４、１２７．４４、１２５．８６、１２３．４３、１２２．７９、７８．２５、７１．９１、６７．６８、６６．１３、３４．５３、２４．３４、１５．５４。
【０２３４】
【化５２】
2009516734.tif 000059
調製９
１−ベンズヒドリル−３−クロロ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン
ＣＨＣｌ３（１６０ｍＬ）中の１−ベンズヒドリル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−３−オール（調製８、６．９５ｇ、１９．４４ミリモル）、トリエチルアミン（１１．１ｍＬ、７９．７ミリモル）および塩化メタンスルホニル（６．１７ｍＬ、７９．７ミリモル）を４時間還流させ、室温に冷却した。水を加え、混合物をＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出した。抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮すると、オレンジ色のオイルが得られた。１００％ヘキサンおよび５〜１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するクロマトグラフィーにより、表題の化合物３．４３ｇ（４７％）が黄色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．４５〜．７１５（ｍ，１４Ｈ）、４．４６（ｓ，１Ｈ）、３．８８（ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，２Ｈ）、３．７６（ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，２Ｈ）、２．８８（七重線，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、１．２２（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  １５０．３６、１４４．３８、１４２．７０、１２９．４４、１２８．２８、１２８．１９、１２６．９５、１２４．６８、１２３．８２、７８．２６、６６３．５６、３４．５５、２４．３０。
【０２３５】
【化５３】
2009516734.tif 000060
調製１０
１−ベンズヒドリル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−３−イルアミン
ステップ１：
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の１−ベンズヒドリル−３−クロロ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン（調製９から、３．０７ｇ、８．４１ミリモル）およびアジ化ナトリウム（２．１８ｇ、３３．６ミリモル）を１００℃で１６時間加熱した。混合物を冷却し、水とＣＨ２Ｃｌ２とに分配した。有機物を水で３回、次いでブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。残留ＤＭＦを除去するために、物質をＥｔＯＡｃに再び溶かし、水で３回、次いでブラインで洗浄し、前と同様に濃縮すると、粗製３−アジド−１−ベンズヒドリル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン（３１）２．９６ｇが黄色のオイルとして得られた。
【０２３６】
ステップ２：
ステップ１からの粗製アジ化物（１．７２ｇ、１０．８ミリモル）を、炭素に担持されている１０％パラジウム（０．３ｇ）を用いて、ＥｔＯＨ（２３ｍＬ）中、水素２５ＰＳＩ下に１６時間水素化し、濾過し（Ｃｅｌｉｔｅ）、濃縮すると、黄色のオイルが得られた。ヘキサンおよび５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでのクロマトグラフィーにより、表題の化合物７９４ｍｇ（４９％）が黄色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．５１〜７．５０（ｍ，４Ｈ）、７．４０〜７．１７（ｍ，１０Ｈ）、４．４６（ｓ，１Ｈ）、３．５５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、３．３５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ）、２．９５（七重線，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．１２（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、１．３０（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  １４９．３５、１４６．４３、１４２．６７、１２８．７３、１２７．７６、１２７．３９、１２５．１８、１２３．７０、１２３．０１、７８．２５、６８．１２、５４．５６、３４．５４、２４．３６。
【０２３７】
【化５４】
2009516734.tif 000061
調製１１
３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−３−イルアミン
ＭｅＯＨ中の１−ベンズヒドリル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−３−イルアミン（調製１０から、０．６１ｇ、１．７１ミリモル）をＨＣｌガスで飽和させ、濃縮した。この物質を、新たなＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に再び溶かし、炭素に担持されている２０％Ｐｄ（ＯＨ）２（２５０ｍｇ）と合わせ、水素４０ｐｓｉ下に室温で１４時間水素化した。混合物を濾過し（Ｃｅｌｉｔｅ）、濃縮した。生じた残留物をエーテルと共に粉砕し、濾過すると、表題化合物の塩酸塩４０６ｍｇ（９０％）がオレンジ色の固体として得られた：ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ７．４９（ｓ，１Ｈ）、７．３９〜７．３５（ｍ，２Ｈ）、７．３１〜７．２９（ｍ，１Ｈ）、４．５８（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，２Ｈ）、４．４３（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，２Ｈ）、２．８９（七重線，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）、１．１９（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）。
【０２３８】
【化５５】
2009516734.tif 000062
調製１２
３−アミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−３−イルアミン塩酸塩（調製１１、０．８６６ｍｇ、３．５３ミリモル）およびトリエチルアミン（１．３９ｍＬ、９．９８ミリモル）をＴＨＦ（１０ｍＬ）中で１０分間攪拌した。ＴＨＦ（６ｍＬ）中のクロロギ酸ベンジル（０．４７ｍＬ、３．３３ミリモル）を加え、混合物を１６時間攪拌した。濃縮した後に、混合物をＥｔＯＡｃに再び溶かし、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水およびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。初めにヘキサン、次いでＥｔＯＡｃでのクロマトグラフィーにより、表題の化合物０．４４３ｇ（４１％）がオレンジ色のオイルとして得られた。ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３４〜７．１３（ｍ，９Ｈ）、５．１０（ｓ，２Ｈ）、４．３９（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ）、４．０５（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）、２．８９（七重線，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、１．２３（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）。
【０２３９】
【化５６】
2009516734.tif 000063
調製１３
３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−シクロブタンカルボン酸ベンジルエステル
イソプロパノール（２ｍＬ）中の３−アミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（調製１２、０．４４３ｇ、１．３７ミリモル）および式４のエポキシド（０．４９０ｇ、１．６４ミリモル）を６時間還流させた。追加のエポキシド分約０．５ｇを加え、還流をさらに１６時間継続した。反応混合物を濃縮し、ヘキサン、次いで４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離してクロマトグラフィー処理すると、表題の化合物０．４２９ｇ（５０％）が白色の固体として得られた。ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３５〜７．２５（ｍ，６Ｈ）、７．１３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．０８〜７．０５（ｍ，２Ｈ）、６．６９〜６．６１（ｍ，３Ｈ）、５．１０（ｓ，２Ｈ）、４．４５（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ）、４．３６〜４．３１（ｍ，２Ｈ）、４．１４〜４．０８（ｍ，３Ｈ）、３．６８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、３．２８（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、２．９３〜２．８５（ｍ，２Ｈ）、２．７３〜２．６７（ｍ，１Ｈ）、２．４７（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、１．３２（ｓ，９Ｈ）、１．２２（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ  ＭＨ＋  ６２４．２
【０２４０】
【化５７】
2009516734.tif 000064
調製１４
３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−シクロブタンカルボン酸ベンジルエステル（調製１３、０．４２９ｇ、０．６８７ミリモル）および４ＭのＨＣｌ／ジオキサン（８ｍＬ）を室温で５時間攪拌した。粗製混合物を濃縮し、ＥｔＯＡｃに再び溶かし、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、再濃縮すると、表題の化合物３６２ｍｇ（１００％）が粘稠性のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３３〜７．２７（ｍ，６Ｈ）、７．１５〜７．０７（ｍ，３Ｈ）、６．６５〜６．６１（ｍ，３Ｈ）、５．０８（ｍ，３Ｈ）、４．３５〜４．３２（ｂｒ  ｍ，２Ｈ）、４．０９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）、３．３７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、３．０２〜２．９９（ｍ，１Ｈ）、２．８８（七重線，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．７１（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，３．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．５８（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，３．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．４７〜２．４４（ｍ，１Ｈ）、２．３７（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，９．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．２１（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ  ＭＨ＋  ５２４．２
【０２４１】
【化５８】
2009516734.tif 000065
調製１５
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド
３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−アセチルアミノ−４−（３，５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−３−（３−イソプロピル−フェニル）−アゼチジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（調製１４、０．２６２ｇ、０．４６３ミリモル）、炭素に担持されている１０％Ｐｄ（１００ｍｇ）およびエタノール（５ｍＬ）を水素４０ｐｓｉ下に室温で５．５時間振盪した。混合物を濾過し（Ｃｅｌｉｔｅ）、濃縮すると、表題の化合物１７５ｍｇが灰色の固体として得られた：ＬＣＭＳ  ＭＨ＋  ４３２．１
【０２４２】
【化５９】
2009516734.tif 000066
調製１６
３−ヒドロキシ−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
３−ピロリジノール（６．９９ｇ、６８．９ミリモル）、クロロギ酸ベンジル（１０．６６ｍＬ、７５．８ミリモル）およびＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）を２０時間攪拌し、次いで、水およびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、濃い黄色のオイルが得られた。初めに２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでフラッシュし、次いで３０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃで溶離するクロマトグラフィーにより、表題の化合物７．４０ｇ（４９％）が得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３５〜７．２６（ｍ，５Ｈ）、５．１１（ｓ，２Ｈ）、４．４６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、３．６０〜３．３８（ｍ，４Ｈ）、２．００〜２．８２（ｍ，２Ｈ）。
【０２４３】
【化６０】
2009516734.tif 000067
調製１７
３−オキソ−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
３−ヒドロキシ−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（調製１６）から、調製７で使用されたのと同じ一般的手順に従い、この化合物を調製した：収率７４％：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３４〜７．２８（ｍ，５Ｈ）、５．１４（ｓ，２Ｈ）、３．８３〜３．７８（ｍ，４Ｈ）、２．５６（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ）。
【０２４４】
【化６１】
2009516734.tif 000068
調製１８
３−ヒドロキシ−３−（３−イソプロピル−フェニル−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
マグネシウム旋削物（１．６３ｇ、６７．１ミリモル）および数片のヨウ素を、ヨウ素が昇華するまで加熱した。室温に冷却した後に、３−ブロモイソプロピルベンゼン（６．０９ｇ、３０．５ミリモル）および１，２−ジブロモエタン２滴のエーテル（５０ｍＬ）溶液を加えた。混合物を１時間還流させ、室温に冷却した。エーテル（１５０ｍＬ）中のオキソ−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（調製７、３．３４ｇ、１５．３ミリモル）を１５分かけて滴加した。添加の後に、反応物を１０分間攪拌したが、この時間の間に、白色の沈殿物が形成した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、有機物を分離し、水性相をエーテルで再抽出した。合わせた有機物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮すると、黄色のオイルが得られた。３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでのクロマトグラフィーにより、表題の化合物４．１４ｇ（８０％）が黄色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３７〜７．１５（ｍ，９Ｈ）、５．１６〜５．０４（ｍ，２Ｈ）、３．８３〜３．６３（ｍ，４Ｈ）、２．９０（七重線，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．３１〜２．１３（ｍ，２Ｈ）、１．２３（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）。
【０２４５】
【化６２】
2009516734.tif 000069
調製１９
３−アジド−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
３−ヒドロキシ−３−（３−イソプロピル−フェニル−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（調製１８、０．９０９ｇ、２．６８ミリモル）を、トリフルオロ酢酸（９．７ｍＬ）および水（１．６ｍＬ）の混合物に溶かし、０℃に冷却した。アジ化ナトリウム（１．２０ｇ、１８．５ミリモル）を加え、混合物を室温で３時間攪拌し、次いで、過剰のＮＨ４ＯＨを加え、混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、表題の化合物０．９１２ｇが得られたが、排除副産物約２５％を伴った。この物質を精製することなく使用した：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（アジド生成物）７．４３〜７．１０（ｍ，９Ｈ）、５．２０〜５．１５（ｍ，２Ｈ）、３．７７〜３．５７（ｍ，４Ｈ）、２．９７〜２．８０（ｍ，１Ｈ）、２．４８〜２．２６（ｍ，２Ｈ）、１．２５〜１．２２（ｍ，６Ｈ）。
【０２４６】
【化６３】
2009516734.tif 000070
調製２０
３−アミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ステップ１：
３−アジド−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（調製１９、５．４０ｇ、１４．８ミリモル）を、水素２０ｐｓｉ下に、炭素に担持されている１０％パラジウム（５００ｍｇ）の存在下、ＥｔＯＨ（４００ｍＬ）中で１６時間振盪した。濾過（Ｃｅｌｉｔｅ）の後に、反応物を濃縮すると、３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イルアミン３．６２ｇが黄−オレンジ色のオイルとして得られた。この物質を、精製することなく使用した。
【０２４７】
ステップ２：ステップ１からの粗製ジアミンを、ＣＨ２Ｃｌ２（７５ｍＬ）、トリエチルアミン（２．６７ｍＬ、１９．２ミリモル）およびクロロギ酸ベンジル（２．７１ｍＬ、１９．２ミリモル）と合わせ、室温で１８時間攪拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液およびブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮すると、オレンジ色のオイル（５．５１ｇ）が得られた。初めは５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでフラッシュし、次いで１０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃで溶離するクロマトグラフィーにより、表題の化合物１．６３ｇ（３２％）が黄色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．４０〜７．１４（ｍ，９Ｈ）、５．２０〜５．１１（ｍ，２Ｈ）、３．７９〜３．６５（ｍ，４Ｈ）、２．９０（七重線，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．３７〜２．２３（ｍ，１Ｈ）、２．１８〜２．０５（ｍ，１Ｈ）、１．７０（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）。
【０２４８】
【化６４】
2009516734.tif 000071
調製２１
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ）−１−（３，５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−３−［３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イルアミノ］−プロピル｝−アセトアミド
調製１３〜１５に記載の一般的な反応シークエンスに従い、３−アミノ−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（調製２０）を使用して、この化合物をジアステレオ異性体の１：１混合物として調製した：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．２５〜７．２１（ｍ，１Ｈ）、７．１１〜７．００（ｍ，３Ｈ）、６．６７〜６．５３（ｍ，３Ｈ）、５．９９〜５．９０（重複した二重線，１Ｈ）、４．１４〜３．９９（ｍ，１Ｈ）、３．３３〜３．２６（ｍ，３Ｈ）、３．１２〜２．９６（ｍ，３Ｈ）、２．８５〜２．７８（ｍ，３Ｈ）、２．７４〜２．６５（ｍ，２Ｈ）、２．３８〜２．２２（ｍ，２Ｈ）、２．１５〜２．０５（ｍ，２Ｈ）、１．８３〜１．８２（重複した一重線，３Ｈ）、１．２３〜１．１９（重複した二重線，６Ｈ）；ＬＣＭＳ  ＭＨ＋  実測値４４６．１、予想値４４６．３
【０２４９】
【化６５】
2009516734.tif 000072
調製２２
１−ベンジル−３−（３−ブロモ−フェニル）−ピロリジン−３−カルボン酸エチルエステル
ステップ１：
２−ブロモフェニル酢酸（２５．０ｇ、１１６ミリモル）のＥｔＯＨ（２００ｍＬ）溶液をＨＣｌガスで飽和させた。この混合物を室温に冷却した後に、ＨＣｌで再び飽和させ、１６時間攪拌した。反応物を濃縮し、ＥｔＯＡｃに溶かし、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液およびブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮すると、３−ブロモ−フェニル）−酢酸エチルエステル３３．１８ｇが黄色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．４２（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．３９〜７．３６（ｍ，１ｈ）、７．２１〜７．１４（ｍ，２Ｈ）、４．１３（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、３．５５（ｓ，２Ｈ）、１．２３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【０２５０】
ステップ２：
エーテル（５０ｍＬ）中の３−ブロモ−フェニル）酢酸エチルエステル（５．０ｇ、２０．６ミリモル）、ナトリウムエトキシド（１．９６ｇ、２８．８ミリモル）およびシュウ酸ジエチル（５．８ｍＬ、４２．７ミリモル）を３時間還流させ、エーテルで希釈し、１ＮのＨＣｌ、水およびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、純度約８０％の２−（３−ブロモ−フェニル）−３−オキソ−コハク酸ジエチルエステル８．９７ｇが黄色のオイルとして得られた。これを、３７％ホルムアルデヒド水溶液（４．２ｍＬ、５１．８ミリモル）および水（２５ｍＬ）と混合し、氷中で冷却した。激しく攪拌しながら、Ｋ２ＣＯ３（５．０ｇ、３６．２ミリモル）を少量ずつ約２分かけて加えた。１時間攪拌した後に、反応物を水（１００ｍＬ）で希釈し、エーテル（２×７５ｍＬ）に抽出した。抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、粗製２−（３−ブロモ−フェニル）−アクリル酸エチルエステル４．８９ｇが黄色のオイルとして得られた。この物質およびＮ−（メチルオキシメチル）−Ｎ−（トリメチルシリルメチル）−ベンジルアミン（４．９ｍＬ、１９．１５ミリモル）をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶かし、−１０℃に冷却した。ＣＨ２Ｃｌ２中１Ｎのトリフルオロ酢酸（０．９６ｍＬ、０．９６ミリモル）を加え、混合物を室温に徐々に加温し、１６時間攪拌した。反応物を濃縮し、ＥｔＯＡｃに再び溶かし、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液およびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、黄色のオイル７．５９ｇが得られ、初めに３％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでフラッシュし、次いで１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離するクロマトグラフィーにより、表題の化合物４．７６ｇが黄色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．４２（ｔ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３４〜７．１０（ｍ，８Ｈ）、４．１９〜４．０１（ｍ，２Ｈ）、３．７０（ｄ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．６０（ｄ，Ｊ＝１３．Ｈｚ，１Ｈ）、３．４９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．０２〜２．８６（ｍ，２Ｈ）、２．６８（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．６２〜２．５０（対称的多重線，１Ｈ）、２．０９〜２．００（ｍ，１Ｈ）、１．１６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）。
【０２５１】
【化６６】
2009516734.tif 000073
調製２３
１−ベンジル−３−（３−イソプロペニル−フェニル）−ピロリジン−３−カルボン酸エチルエステル
１−ベンジル−３−（３−ブロモ−フェニル）−ピロリジン−３−カルボン酸エチルエステル（調製２２、４．７５ｇ、１２．２ミリモル）、イソプロペニルトリフルオロホウ酸カリウム（Ｍｏｌａｎｄｅｒら、Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．２００３年、４（１）、１０７〜９）（２．７ｇ、１８．２ミリモル）、トリエチルアミン（２．０ｍＬ、１４．３ミリモル）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２、ＣＨ２Ｃｌ２（０．５０ｇ、０．６１ミリモル）およびｎ−プロパノール（２００ｍＬ）を９０℃で１８時間加熱し、冷却し、濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃと水とに分配し、有機物をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、赤色のオイル４．９９ｇが得られた。５〜１０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンでのクロマトグラフィーにより、表題の化合物２．８６ｇ（６７％）が薄オレンジ色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７４２〜７．１０（ｍ，９Ｈ）、５．３０（ｄ，Ｊ＝０．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．０５〜５．０４（ｍ，１Ｈ）、４．２５〜４．０３（ｍ，３Ｈ）、３．７２〜３．４８（ｍ，３Ｈ）、３．０４〜２．９４（ｍ，１Ｈ）、２．９２〜２．８８（ｍ，１Ｈ）、２．７３〜２．６６（ｍ，１Ｈ）、２．６２〜２．５２（ｍ，１Ｈ）、２．１０（ｓ，３Ｈ）、１．１５  ９ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）。
【０２５２】
【化６７】
2009516734.tif 000074
調製２４
１−ベンジル−３−（３−イソプロペニル−フェニル）−ピロリジン−３−カルボン酸
メタノール（３０ｍＬ）および水（３０ｍＬ）中の１−ベンジル−３−（３−イソプロペニル−フェニル）−ピロリジン−３−カルボン酸エチルエステル（調製２３、２．８６ｇ、８．１８ミリモル）および水酸化リチウム一水和物（１．７ｇ、４０．５ミリモル）を７０℃で１７時間加熱し、次いで冷却し、乾燥するまで濃縮した。この物質を、氷中で冷却し、ＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）およびエーテル（２０ｍＬ）を加え、激しく攪拌しながら、６ＮのＨＣｌ（６．７５ｍＬ、４０．５ミリモル）を５分かけて滴加した。さらなる攪拌約１５分の後に、濃いオレンジ色のオイルが沈殿した。溶媒をデカンテーション除去し、別の水２〜３ｍＬおよびエーテル２０ｍＬを加えた。この混合物を１時間激しく攪拌すると、白色の固体が形成し、これを集め、エーテルですすぎ、乾燥させると、表題の化合物２．２０ｇ（８５％）が得られた：ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ７．４８〜７．０９（ｍ，９Ｈ）、５．３６（ｓ，１Ｈ）、５．０８（ｔ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．８０〜２．５０（極めて広幅の多重線，８Ｈ）、２．０５（ｓ，３Ｈ）。
【０２５３】
【化６８】
2009516734.tif 000075
調製２５
［１−ベンジル−３−（３−イソプロペニル−フェニル）−ピロリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
新たに蒸留されたｔ−ブタノール中の１−ベンジル−３−（３−イソプロペニル−フェニル）−ピロリジン−３−カルボン酸（調製２４、２．２０ｇ、８．８４ミリモル）およびトリエチルアミン（０．９５ｍＬ、６．８２ミリモル）を１００℃に加熱すると、濁った黄色の溶液が得られた。室温に冷却した後に、アジ化ジフェニルホスホリル（１．５ｍＬ、６．９６ミリモル）を加え、次いで混合物を１６時間還流し、冷却し、濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃと水とに分配し、有機物をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、粘稠性のオレンジ色のゴム３．２９ｇが得られた。１０〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでのクロマトグラフィーにより、表題の化合物１．０３ｇ（３９％）がほぼ無色のオイルとして得られ、これは、排気すると、白色の固体に固化した：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７５５〜７．５０（ｍ，１Ｈ）、７．３４〜７．１２（ｍ，８Ｈ）、５．３１（ｔ，Ｊ＝０．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．１８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、５．０４（ｔ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．７２（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．６２〜３．５６（ｍ，１Ｈ）、３．００〜２．７０（ｍ，４Ｈ）、２．４７〜２．１５（ｍ，２Ｈ）、２．１１（ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ，３Ｈ）、１．３６（ｂｒ  ｓ，９Ｈ）。
【０２５４】
【化６９】
2009516734.tif 000076
調製２６
［３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
［１−ベンジル−３−（３−イソプロペニル−フェニル）−ピロリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（調製２５、１．００ｇ、２．５５ミリモル）を炭素に担持されている１０％パラジウム（１５０ｍｇ）と共に水素４５ｐｓｉ下に１６時間振盪し、濾過し（Ｃｅｌｉｔｅ）、濃縮すると、表題の化合物０．８１５ｇが濁った灰色で油性のフォームとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３７〜７．０８（ｍ，４Ｈ）、５．０３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、３．５５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、３．３７〜３．１３（ｍ，３Ｈ）、２．８７（七重線，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．７０〜２．００（ｂｒ  ｍ，６Ｈ）、１．３７（ｂｒ  ｓ，９Ｈ）、１．２２（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）。
【０２５５】
【化７０】
2009516734.tif 000077
調製２７
３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−ピリジン−２−イル−ピロリジン−３−イルアミン
ステップ１：
トルエン中の［３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（調製２６、０．０７５ｇ、０．２４６ミリモル）、２−ブロモピリジン（０．０２８ｍＬ、０．２９４ミリモル）、ＸＡＮＴＰＨＯＳ（９ｍｇ、０．０１５ミリモル）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（５ｍｇ、０．００５５ミリモル）およびナトリウムｔ−ブトキシド（０．０３５ｇ、０．３１２ミリモル）を１００℃で密封管中で２時間加熱した。反応物を冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、水およびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、黄色のオイル（１００ｍｇ）が得られ、１０〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでのクロマトグラフィーにより、［３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−ピリジン−２−イル−ピロリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル５０ｍｇ（５３％）が黄色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ８．１５（ｄｄ，Ｊ＝５．０，１，２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４６〜７．４１（ｍ，１Ｈ）、７．２５〜７．１８（ｍ，３Ｈ）、７．１０（ｄｔ，Ｊ＝７．１，１．７Ｈｚ，１Ｈ）、６．５５（ｄｄ，Ｊ＝６．６，５．２Ｈｚ，１Ｈ）、６．３７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．１２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、３．９１（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．８２（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．６７〜３．４７（ｍ，２Ｈ）、２．８９〜２．６０（ｍ，２Ｈ）、２．４３〜２．３６（ｍ，１Ｈ）、１．３２（ｂｒ  ｓ，９Ｈ）、１．１９（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）。
【０２５６】
ステップ２：
ステップ１からの化合物を、ジオキサン（１ｍＬ）に溶かし、４ＮのＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）を加え、混合物を１７時間攪拌した。黄色の沈殿物が形成し、これを集め、次いでＥｔＯＡｃとＫ２ＣＯ３水溶液とに分配した。有機物をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、純度約９０％の表題の化合物２６ｍｇ（７０％）が無色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ８．１７〜８．１５（ｍ，１Ｈ）、７．４６〜７．４１（ｍ，１Ｈ）、７．３３〜７．２３（ｍ，３Ｈ）、７．１５〜７．１２（ｍ，１Ｈ）、６．５３（ｄｄ，Ｊ＝６．２，５．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．３８（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．８４〜３．６１（ｍ，４Ｈ）、２．９０（七重線，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．４５〜２．３７（ｍ，１Ｈ）、２．２７〜２．２２（ｍ，１Ｈ）、１．７５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、１．２３（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）。
【０２５７】
【化７１】
2009516734.tif 000078
調製２８
１−ベンゾオキサゾール−２−イル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イルアミン
ステップ１：
ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中の３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（調製２６、０．０９５ｇ、０．３１２ミリモル）、２−クロロベンゾオキサゾール（０．０４０ｍＬ、０．３５０ミリモル）およびＫ２ＨＰＯ４（０．０８５ｇ、０．４８８ミリモル）を８０℃に密閉管中で２時間加熱し、冷却し、水で希釈し、エーテルで２回抽出した。抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、シリカゲル上で濃縮した。５〜２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでのクロマトグラフィーにより、［１−ベンゾオキサゾール−２−イル−３−（３−イソプロピル−フェニル）−ピロリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル８０ｍｇ（６１％）がワックス状の白色の固体として得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．２７〜７．０８（ｍ，６Ｈ）、７．００（ｄｔ，Ｊ＝７．７，１．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．０９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、４．１５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、４．０３（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、３．８９〜３．７０（ｍ，２Ｈ）、２．８７（七重線，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．４４〜２．３６（ｍ，１Ｈ）、１．３１（ｂｒ  ｓ，９Ｈ）、１．２０（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）。
【０２５８】
ステップ２：
ステップ１からの固体をジオキサン（２ｍＬ）に溶かし、４ＮのＨＣｌ／ジオキサン（２ｍＬ）を加え、混合物を１７時間攪拌した。白色の沈殿物が形成し、これを集め、次いでＥｔＯＡｃとＫ２ＣＯ３水溶液とに分配した。有機物をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮すると、純度約８５％の表題の化合物４０ｍｇ（６６％）が無色のオイルとして得られた：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．３１〜７．２１（ｍ，４Ｈ）、７．１７〜７．１１（ｍ，２Ｈ）、６．９８（ｄｔ，Ｊ＝７．９，１．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．００〜３．８６（ｍ，４Ｈ）、２．９０（七重線，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．４６〜２．３８（ｍ，１Ｈ）、２．２９〜２．２３（ｍ，１Ｈ）、１．７５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）。
【０２５９】
調製２９
調製２８で記載された一般的手順に従い、次の化合物を調製した：
【０２６０】
【化７２】
2009516734.tif 000079
調製２９ａ
３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−チアゾール−２−イル−ピロリジン−３−イルアミン：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．３０〜７．２１（ｍ，３Ｈ）、７．１９（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６〜７．１２（ｍ，１Ｈ）、６．４７（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．８４（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．８２〜３．７３（ｍ，２Ｈ）、３．６４（ｄｔ，Ｊ＝９．１，２．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．８９（七重線，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．４９〜２．４１（ｍ，１Ｈ）、２．２９〜２．２３（ｍ，１Ｈ）、１．７４（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、１．２３（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）。
【０２６１】
【化７３】
2009516734.tif 000080
調製２９ｂ
３−（３−イソプロピル−フェニル）−１−ピリミジン−２−イル−ピロリジン−３−イルアミン：ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ８．３１（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，２Ｈ）、７．３０〜７．２３（ｍ，３Ｈ）、７．１４〜７．１１（ｍ，１Ｈ）、６．４７（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．９５（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，１．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．８５〜３．８０（ｍ，３Ｈ）、２．８８（七重線，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．４２〜２．３４（ｍ，１Ｈ）、２．２７〜２．２２（ｍ，１Ｈ）、１．７１（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、１．２２（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）。
【国際調査報告】
2009516734.tif 000095
2009516734.tif 000096
2009516734.tif 000097
2009516734.tif 000098