(57)【要約】本発明は式(I)：2009507909.tif 000033［式中、n、Y、Z、R、R1、R2およびR3は明細書に定義されている］で示される化合物、それらの製法、それらを含む医薬組成物および治療におけるそれらの使用を提供する。
2009507909.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2009507909.tif 000025
［式中、
R1はC1-C6アルキル基であり；
ZはC2-C6アルキレン基であり；
YはC1-C3アルキレン基であり；
R2はC1-C6アルキル基であり；
nは0〜2の整数であり；
Rはそれぞれ、独立してハロゲン、C1-C3アルキル、C1-C3アルコキシまたはC1-C3ハロアルキルであり；
R3は-(CH2)m-NR4R5であり；
mは2〜6の整数であり；
R4およびR5のいずれかはそれぞれ、独立して水素もしくはC1-C6アルキルであるか、またはR4およびR5はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、適宜環ヘテロ基NR6を含んでいてもよい3〜8員飽和ヘテロ環を形成し；
R6は水素またはC1-C6アルキルである］
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
R1がC1-C4アルキル基である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
ZがC2-C4アルキレン基である、請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
Yがメチレンである、請求項１〜３のいずれか記載の化合物。
【請求項５】
R4およびR5がそれぞれ、独立して水素またはC1-C3アルキルである、上記請求項のいずれか記載の化合物。
【請求項６】
R4およびR5がそれらが結合している窒素原子と一緒になって、適宜さらに環ヘテロ基NR6を含んでいてもよい5〜6員飽和ヘテロ環を形成する、請求項１〜４のいずれか記載の化合物。
【請求項７】
R2がC1-C3アルキル基である、上記請求項のいずれか記載の化合物。
【請求項８】
R1がn-ブチルであり；
Zがn-プロピレンまたはn-ブチレンであり；
Yがメチレンであり；
R2がメチルであり；
nが0であり；
R3が-(CH2)m-NR4R5であり；
mが2または3であり；
R4およびR5がそれぞれ、独立して水素もしくはメチルであるか、またはR4およびR5がそれらが結合している窒素原子と一緒になって、適宜さらに環ヘテロ基NR6を含んでいてもよい5〜6員飽和ヘテロ環を形成し；
R6がメチルである、請求項１記載の化合物。
【請求項９】
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][3-(ジメチルアミノ)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート、
メチル (3-{[[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル](3-ピロリジン-1-イルプロピル)アミノ]メチル}フェニル)アセテート、
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート、
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][2-(ジメチルアミノ)エチル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート、
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][3-(メチルアミノ)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート、
メチル [3-({[4-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)ブチル][3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテートおよびそのいずれかの医薬的に許容される塩から選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
(a)適切な還元剤の存在下における式：
【化２】
2009507909.tif 000026
［式中、Z、R1およびR3は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物を式：
【化３】
2009507909.tif 000027
［式中、Y1は結合またはC1-C2アルキレン基であり、n、RおよびR2は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物と反応させること；または
(b)適切な塩基の存在下における上記(a)に定義されている式(II)の化合物を式：
【化４】
2009507909.tif 000028
［式中、L1は脱離基であり、n、Y、RおよびR2は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物と反応させること；または
(c)式：
【化５】
2009507909.tif 000029
［式中、L2は脱離基であり、m、n、Y、Z、R、R1およびR2は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物を式(VI)：
HNR4R5
［式中、R4およびR5は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物と反応させること；または
(d)式：
【化６】
2009507909.tif 000030
［式中、n、Y、Z、R、R1およびR2は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物を式：
【化７】
2009507909.tif 000031
［式中、L3は脱離基であり、m、R4およびR5は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物と反応させること；または
(e)適切な還元剤の存在下における上記(d)に定義されている式(VII)の化合物を式：
【化８】
2009507909.tif 000032
［式中、m、R4およびR5は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物と反応させて；
適宜(a)、(b)、(c)、(d)または(e)の後に以下の処理：
・得られた化合物を式(I)の化合物にさらに変換すること
・化合物の医薬的に許容される塩を形成すること
のうち１以上を行ってもよい、請求項１に定義されている式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩の製造方法。
【請求項１１】
請求項１〜９のいずれか記載の式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩を医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体とともに含む、医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１〜９のいずれか記載の式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩を医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体と混合することを含む、請求項１１記載の医薬組成物の製造方法。
【請求項１３】
治療における使用のための請求項１〜９のいずれか記載の式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１４】
TLR7活性の調節が有益であるヒト疾患または病態の治療のための医薬の製造における、請求項１〜９のいずれか記載の式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
【請求項１５】
アレルギー性疾患もしくはウイルス性疾患または癌の治療のための医薬の製造における、請求項１〜９のいずれか記載の式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
【請求項１６】
喘息、COPD、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、癌、B型肝炎、C型肝炎、HIV、HPV、細菌性感染症および皮膚病の治療における使用のための医薬の製造における、請求項１〜９のいずれか記載の式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
【請求項１７】
治療的有効量の請求項１〜９のいずれか記載の式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩をそれを必要とする患者に投与することを含む、TLR7活性の調節が有益である疾患または病態の治療方法またはその危険性の軽減方法。
【請求項１８】
治療的有効量の請求項１〜９のいずれか記載の式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩をそれを必要とする患者に投与することを含む、アレルギー性疾患もしくはウイルス性疾患または癌の治療方法またはその危険性の軽減方法。
【請求項１９】
治療的有効量の請求項１〜９のいずれか記載の式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩をそれを必要とする患者に投与することを含む、閉塞性気道疾患もしくは病態の治療方法またはその危険性の軽減方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アデニン誘導体、それらの製造方法、それらを含む医薬組成物および治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
免疫系は先天免疫および後天免疫からなり、これらはともに細菌感染からホストを保護するために協力して働く。先天免疫は免疫細胞の細胞表面に発現されるトール様レセプター（TLR）を通して保存病原体関連分子パターンを認識することができることが示されている。次いで侵入した病原体の認識は、サイトカイン生成（インターフェロンアルファ（IFNα）など）および食細胞における副刺激分子の上方調節を引き起こし、T細胞機能の調節をもたらす。従って、先天免疫は後天免疫に密接に関連しており、獲得反応の発症および調整に影響しうる。
【０００３】
TLRは、NH2-末端細胞外ロイシンに富む繰り返しドメイン（LRR）およびToll/IL-1レセプター（TIR）ホモロジードメインと称される保存領域を含むCOOH-末端細胞内テールにより特徴付けられるI型膜貫通レセプターのファミリーである。細胞外ドメインは種々の数のLRRを含んでおり、これはリガンド結合に関与すると考えられる。１１のTLRは現在までヒトおよびマウスにて記載されている。それらは互いにリガンド特異性、発現パターンおよび誘発されうる標的遺伝子にて異なる。
【０００４】
TLR（免疫反応調節剤（IRMS）とも称される）により作用するリガンドは、例えば生殖器疣を治療するための生成物イミキモド（Imiquimod）を含む米国特許番号4689338記載のイミダゾキノリン誘導体、および国際公開公報WO 98/01448およびWO 99/28321記載のアデニン誘導体を発展させている。
【０００５】
国際特許出願PCT/JP2005/005401は、ウイルス性またはアレルギー性疾患および癌の治療に有用なTLR7により作用する免疫調節特性を有する9-置換-8-オキソアデニン化合物のクラスを記載する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
国際特許出願PCT/JP2005/005401に一般的に開示されている化合物のサブセットは化合物を吸入療法における使用に特に適したものとする水溶性の増大などの特性を有することが現在驚くべきことに見出されている。いずれの具体的な理論にも結びつけないで、化合物の溶解性の増大（肺内）が効力の増大を引き起こし、有効性のために必要な用量の軽減をもたらすと考えられる。次いで、これは化合物の安全域を改善する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
それゆえ本発明に従って、式：
【化１】
2009507909.tif 000003
［式中、
R1はC1-C6アルキル基であり；
ZはC2-C6アルキレン基であり；
YはC1-C3アルキレン基であり；
R2はC1-C6アルキル基であり；
nは0〜2の整数であり；
Rはそれぞれ、独立してハロゲン、C1-C3アルキル、C1-C3アルコキシまたはC1-C3ハロアルキルであり；
R3は-(CH2)m-NR4R5であり；
mは2〜6の整数であり；
R4およびR5のいずれかはそれぞれ、独立して水素もしくはC1-C6アルキルであるか、またはR4およびR5はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、適宜環ヘテロ基NR6を含んでいてもよい3〜8員飽和ヘテロ環を形成し；
R6は水素またはC1-C6アルキルである］
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本明細書の文脈において、特に明記されなければ、置換基におけるアルキル置換基またはアルキル部分は直鎖または分枝鎖であることができる。C1-C6アルキル基／部分の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、tert-ブチル、n-ペンチルおよびn-ヘキシルが挙げられる。同様に、アルキレン基は直鎖または分枝鎖であることができる。C1-C6アルキレン基の例としては、メチレン、エチレン、n-プロピレン、n-ブチレン、n-ペンチレン、n-ヘキシレン、1-メチルエチレン、2-メチルエチレン、1,2-ジメチルエチレン、1-エチルエチレン、2-エチルエチレン、1-、2-または3-メチルプロピレンおよび1-、2-または3-エチルプロピレンが挙げられる。C1-C3ハロアルキル置換基は少なくとも一つのハロゲン原子、例えば、１、２、３、４または５のハロゲン原子を含み、その例としてはトリフルオロメチルまたはペンタフルオロエチルが挙げられよう。R4およびR5が一緒になって、3〜8員飽和ヘテロ環であるとき、その環は２以下の環ヘテロ部分：R4およびR5が結合している窒素環原子および適宜NR6基を含むだろうことが理解されるべきである。
R1はC1-C6またはC1-C5またはC1-C4またはC1-C3またはC1-C2アルキル基である。
【０００９】
本発明の具体的態様において、R1はC1-C4アルキル基、例えばn-ブチル基である。
ZはC2-C6アルキレン基、例えばC2-C4またはC3-C4アルキレン基である。
【００１０】
本発明の具体的態様において、Zはエチレン、n-プロピレンまたはn-ブチレンなどの直鎖C2-C4またはC3-C4アルキレン基である。
Yはメチレン、エチレンまたはn-プロピレンなどのC1-C3アルキレン基である。
R2はC1-C6またはC1-C5またはC1-C4またはC1-C3またはC1-C2アルキル基である。
【００１１】
本発明の具体的態様において、R2はC1-C2アルキル基、例えばメチル基である。
nは0、1または2の整数である。
【００１２】
本発明の具体的態様において、nは0である。
【００１３】
各R基は独立して、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素またはヨウ素など）、C1-C3アルキル（メチル、エチルまたはn-プロピルなど）、C1-C3アルコキシ（メトキシ、エトキシまたはn-プロポキシなど）またはC1-C3ハロアルキル（ジブロモメチル、ジクロロメチル、ブロモクロロメチル、トリフルオロメチルまたはペンタフルオロエチルなど）である。
【００１４】
本発明の具体的態様において、nは1または2であり、各R基はハロゲン原子、例えばフッ素である。
R3は-(CH2)m-NR4R5（ここに、mは2、3、4、5または6の整数である）である。
【００１５】
本発明の具体的態様において、mは2または3である。
本発明の具体的態様において、R4およびR5はそれぞれ、独立して水素またはC1-C6もしくはC1-C5もしくはC1-C4もしくはC1-C3もしくはC1-C2アルキルである。
【００１６】
ある具体的態様において、R4およびR5はそれぞれ、独立して水素またはメチルである。
【００１７】
別の具体的態様において、R4およびR5はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、適宜さらに環ヘテロ基NR6（ここに、R6は水素またはC1-C6もしくはC1-C5もしくはC1-C4もしくはC1-C3もしくはC1-C2アルキルである）を含んでいてもよい3、4、5、6、7または8員、例えば5〜6員飽和ヘテロ環を形成する。ヘテロ環の例としては、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニルおよび4-メチルピペラジン-1-イルが挙げられる。
【００１８】
本発明の具体的態様において、
R1はn-ブチルであり；
Zはn-プロピレン（(CH2)3）またはn-ブチレン（(CH2)4）であり；
Yはメチレンであり；
R2はメチルであり；
nは0であり；
R3は-(CH2)m-NR4R5であり；
mは2または3であり；
R4およびR5はそれぞれ、独立して水素またはメチルであるか、またはR4およびR5はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、適宜さらに環ヘテロ基NR6を含んでいてもよい5〜6員飽和ヘテロ環を形成し；
R6はメチルである。
【００１９】
本発明化合物の例としては：
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][3-(ジメチルアミノ)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート、
メチル (3-{[[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル](3-ピロリジン-1-イルプロピル)アミノ]メチル}フェニル)アセテート、
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート、
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][2-(ジメチルアミノ)エチル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート、
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][3-(メチルアミノ)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート、
メチル [3-({[4-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)ブチル][3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテートおよび
そのいずれかの医薬的に許容される塩が挙げられる。
【００２０】
本発明はさらに、(a)適切な還元剤（例えばトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム）の存在下における式：
【化２】
2009507909.tif 000004
［式中、Z、R1およびR3は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物を式：
【化３】
2009507909.tif 000005
［式中、Y1は結合またはC1-C2アルキレン基であり、n、RおよびR2は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物と反応させること；または
【００２１】
(b)適切な塩基（例えば炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウム）の存在下における上記(a)に定義されている式(II)の化合物を式：
【化４】
2009507909.tif 000006
［式中、L1は脱離基（例えばハロゲン、メシレートまたはトリフレート）であり、n、Y、RおよびR2は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物と反応させること；または
【００２２】
(c)式：
【化５】
2009507909.tif 000007
［式中、L2は脱離基（例えばハロゲン、メシレートまたはトリフレート）であり、m、n、Y、Z、R、R1およびR2は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物を式(VI)：
HNR4R5
［式中、R4およびR5は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物と反応させること；または
【００２３】
(d)式：
【化６】
2009507909.tif 000008
［式中、n、Y、Z、R、R1およびR2は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物を式：
【化７】
2009507909.tif 000009
［式中、L3は脱離基（例えばハロゲン、メシレートまたはトリフレート）であり、m、R4およびR5は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物と反応させること；または
【００２４】
(e)適切な還元剤（例えばトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム）の存在下における上記(d)に定義されている式(VII)の化合物を式：
【化８】
2009507909.tif 000010
［式中、m、R4およびR5は式(I)に定義されているとおりである］
で示される化合物と反応させて；
適宜(a)、(b)、(c)、(d)または(e)の後に以下の処理：
・得られた化合物を本発明化合物にさらに変換すること
・化合物の医薬的に許容される塩を形成すること
のうち１以上を行ってもよい、上記に定義されている式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩の製造方法を提供する。
【００２５】
工程(a)において、反応は、例えば0〜150℃の範囲の温度にて1-メチル-2-ピロリジノン、1,2-ジクロロエタンまたはテトラヒドロフランなどの有機溶媒中にて都合良く行うことができる。
【００２６】
工程(b)において、反応は、例えば0〜150℃の範囲の温度にてアセトニトリル、1-メチル-2-ピロリジノンまたはN,N-ジメチルホルムアミドなどの有機溶媒中にて都合良く行うことができる。
【００２７】
工程(c)において、反応は、アセトニトリル、1-メチル-2-ピロリジノンまたはN,N-ジメチルホルムアミドなどの有機溶媒中、例えば0〜150℃の範囲の温度にて都合良く行うことができる。
【００２８】
工程(d)において、反応は、1-メチル-2-ピロリジノンまたはN,N-ジメチルホルムアミドなどの有機溶媒中、例えば0〜150℃の範囲の温度にて都合良く行うことができる。
【００２９】
工程(e)において、反応は、1-メチル-2-ピロリジノン、1,2-ジクロロエタンまたはテトラヒドロフランなどの有機溶媒中、例えば0〜150℃の範囲の温度にて都合良く行うことができる。
【００３０】
式(II)の化合物は、以下の反応式：
【化９】
2009507909.tif 000011
で示されるように製造することができる。
【００３１】
式(B)の化合物は、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、テトラヒドロフラン、1,4-ジオキサン、ジグライム、アセトニトリルなどの有機溶媒または上記溶媒のいずれかの水性混合物中、式(A)の化合物とアンモニアとの反応により製造する。反応は例えば20〜200℃の範囲の温度にてオートクレーブ中にて行うことができる。
【００３２】
式(C)の化合物は、水素化ナトリウムなどの塩基の存在下、テトラヒドロフラン、1,4-ジオキサン、ジグライム、N,N-ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシドなどの有機溶媒中、好ましくは上昇温度、例えば20〜150℃の範囲の温度にて、式(B)の化合物とC1-C6アルカノールとの反応により製造することができる。あるいは、ナトリウムなどのアルカリ金属はC1-C6アルカノールに溶解した後、好ましくは上昇温度、例えば20〜150℃の範囲の温度にて、式(B)の化合物と反応することができる。
【００３３】
式(D)の化合物は、式(C)の化合物をブロモ化することにより製造する。反応は、四塩化炭素、塩化メチレン、ジクロロエタン、ジエチルエーテル、酢酸または二硫化炭素などの有機溶媒中、臭素、過臭化水素酸（hydroperbromic acid）またはN-ブロモスクシンイミドなどのブロモ化剤を用いて行うことができる。反応温度は一般に、0℃〜溶媒の沸点の範囲であろう。
【００３４】
式(E)の化合物は、メタノールなどの有機溶媒中、例えば20〜150℃の範囲の温度にて、式(D)の化合物とナトリウムメトキシドとの反応により製造する。
【００３５】
式(F)の化合物は、式(E)の化合物をメタノールなどの有機溶媒中トリフルオロ酢酸などの酸で処理することにより得ることができる。
【００３６】
式(G)の化合物は、式(F)の化合物と式LG-Z-LG（ここに、LGはハロゲン、メシレートまたはトリフレートなどの脱離基であり、Zは式(II)に定義されているようにC2-C6アルキレン基である）の化合物との反応により製造する。反応は、N,N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドまたはアセトニトリルなどの有機溶媒中、塩基存在下、好ましくは室温（20℃）にて行うことができる。アルカリ金属炭酸塩、例えば炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウム；アルカリ土類金属炭酸塩、例えば炭酸カルシウム；金属水酸化物、例えば水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム；金属水素化物、例えば水素化ナトリウム；または金属アルコキシド、例えばカリウムt-ブトキシドなどの塩基を用いることができる。
【００３７】
式(H)の化合物は、式(G)の化合物を酸で処理することにより得ることができる。反応はメタノールなどの有機溶媒中、塩酸、臭化水素酸もしくは硫酸などの無機酸またはトリフルオロ酢酸などの有機酸を用いて行うことができる。
【００３８】
式(II)の化合物は、式(H)の化合物と式R3NH2（ここに、R3は式(II)に定義されているとおりである）のアミンとの反応により製造する。反応は、アセトニトリルまたはN,N-ジメチルホルムアミドなどの有機溶媒中、過剰のアミンを用いて、好ましくは上昇温度、例えば0〜150℃の範囲の温度にて行うことができる。
【００３９】
式(V)の化合物は、標準的手順を用いて式：
【化１０】
2009507909.tif 000012
［式中、m、n、Y、Z、R、R1およびR2は式(V)に定義されているとおりである］
で示される化合物を反応させることにより製造することができる。例えば式(V)の化合物（ここに、L2はハロゲン、例えば塩素である）は、ジクロロメタンなどの有機溶媒中、室温（20℃）における塩化チオニルなどのハロゲン化剤との反応により製造することができる。
【００４０】
式(X)の化合物は、式：
【化１１】
2009507909.tif 000013
［式中、m、ZおよびR1は式(x)に定義されているとおりである］
で示される化合物と上記に定義されている式(III)または(IV)の化合物との反応によりそれぞれ工程(a)および(b)に記載されているものと同一の条件下、製造することができる。
【００４１】
式(XI)の化合物は、アセトニトリルまたはN,N-ジメチルホルムアミドなどの有機溶媒中、過剰のアミノアルコールを用いて、好ましくは上昇温度、例えば20〜150℃の範囲の温度にて、上記に定義されている式(H)の化合物とC2-C6アミノアルコールとの反応により製造することができる。
【００４２】
式(VII)の化合物は、式：
【化１２】
2009507909.tif 000014
［式中、ZおよびR1は式(VII)に定義されているとおりである］
で示される化合物を用いて、式(X)の化合物の製造について記載されているものと同様の方法により製造することができる。
【００４３】
式(XII)の化合物は、上記に定義されている式(F)の化合物を式(XIII)の化合物L4-Z-NH-P（ここに、L4は脱離基（例えばハロゲン、メシレートまたはトリフレート）であり、Pは窒素保護基（例えばブトキシカルボニル）であり、Zは式(XII)に定義されているとおりである）と反応させた後、窒素保護基Pを除去し、-OCH3置換基の酸素保護基を除去することにより得ることができる。
【００４４】
式(F)と(XIII)の化合物の反応は、N,N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドまたはアセトニトリルなどの有機溶媒中、塩基存在下、例えば0〜150℃の範囲の温度にて行うことができる。用いられる塩基は、アルカリ金属炭酸塩、例えば炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウム；アルカリ土類金属炭酸塩、例えば炭酸カルシウム；金属水酸化物、例えば水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム；金属水素化物、例えば水素化ナトリウム；または金属アルコキシド、例えばカリウムtert-ブトキシドであることができる。保護基の除去は、当分野に知られている方法に従い行うことができる。
【００４５】
式(III)、(IV)、(VI)、(VIII)、(IX)および(XIII)の化合物は、市販されているか、文献にて知られているか、または既知の技術を用いて製造することができる。
【００４６】
式(I)の化合物は、さらに標準的な手順を用いて式(I)の化合物に変換することができる。例えば式(I)の化合物（ここに、R2＝メチル）は、例えば20〜78℃の範囲の温度にて塩化水素のエタノール溶液で処理することにより式(I)の化合物（ここに、R2＝エチル）に変換することができる。
【００４７】
本発明の方法において、試薬中のヒドロキシルまたはアミノ基などのいくつかの官能基は保護基により保護する必要があってよいことは当業者により認識されよう。従って、式(I)の化合物の製造は適当な段階における１以上の保護基の除去を含むことができる。
【００４８】
官能基の保護および脱保護は、文献（「Protective Groups in Organic Chemistry」, J.W.F. McOmie編, Plenum Press (1973)および「Protective Groups in Organic Synthesis」, 第3版, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1999)）に記載される。
【００４９】
上記式(I)の化合物は、その医薬的に許容される塩、好ましくは塩酸塩、臭化水素酸塩、トリフルオロ酢酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、ピルビン酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、メタンスルホン酸塩またはp-トルエンスルホン酸塩などの酸付加塩に変換することができる。
【００５０】
式(I)の化合物は、立体異性体にて存在しうる。本発明は、式(I)の化合物のすべての幾何異性体および光学異性体（アトロプ異性体など）およびそのラセミ体などの混合物の使用を包含することが理解されよう。互変異性体およびその混合物の使用もまた、本発明の態様を形成する。鏡像異性的に純粋な形態が特に所望である。
【００５１】
式(I)の化合物およびそれらの医薬的に許容される塩は医薬として、具体的にはトール様レセプター（特にTLR7）活性のモジュレータとして活性を有し、従って以下の疾患の治療に用いることができる：
１．呼吸器系疾患として、間欠性および持続性のあらゆる重篤度の喘息（例えば、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、運動誘発性喘息、薬物（例えばアスピリンおよびNSAID）誘発性喘息および粉塵誘発性喘息、およびその他の原因による気道過敏症；慢性閉塞性肺疾患（COPD）；気管支炎（例えば感染性気管支炎および好酸球増加性の気管支炎）；気腫；気管支拡張症；のう胞性線維症；サルコイドーシス；農夫肺および関連疾患；過敏性肺炎；肺線維症（例えば原因不明性線維化肺胞炎、特発性の間質性肺炎、抗新生物療法、および結核菌およびアスペルギルスおよび他の真菌感染症を含む慢性感染症に起因する線維症）；肺移植による合併症；血管性および血栓性の肺脈管の疾患、および肺高血圧症；気道の炎症および分泌物による慢性の咳および医原性の咳の治療を含む鎮咳作用；薬物性鼻炎および血管運動性鼻炎を含む、急性および慢性の鼻炎；神経性の鼻炎（花粉症）を含む通年性および季節性のアレルギー性鼻炎；鼻のポリープ；感冒症および呼吸器系のシンシチウムウイルス、インフルエンザ、コロナウイルス（SARSを含む）およびアデノウイルスによる感染症を含む急性のウイルス感染；
【００５２】
２．皮膚疾患として、乾癬、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎または他の湿疹性皮膚炎、および遅発性過敏反応；植物性および光学性の皮膚炎；脂漏性皮膚炎、ヘルペス性皮膚炎、扁平苔癬、硬化性萎縮性苔癬、壊疽性膿皮症、皮膚の類肉腫、円板状エリテマトーデス、天疱瘡、類天疱瘡、表皮水疱症、蕁麻疹、血管性浮腫、血管炎、中毒性紅斑、皮膚性の好酸球増加症、円形脱毛症、男性型脱毛、スウィーツ症候群、ウェーバー−クリスチャン症候群、多形性紅斑；感染性および非感染性の蜂巣炎；皮下脂肪組織炎；皮膚リンパ腫、非メラノーマ性の皮膚癌および他の形成異常の病変；固定の薬疹を含む薬物誘発性疾患；
【００５３】
３．眼疾患として、眼瞼炎；通年性および季節性のアレルギー性結膜炎を含む結膜炎；虹彩炎；前後部ブドウ膜炎；脈絡膜炎；自己免疫、変性または炎症を伴う網膜の疾患；交感性眼炎を含む眼炎；類肉腫症；ウイルス性、真菌性および細菌性の感染症；
４．尿生殖器の疾患として、間質性および糸球体腎炎を含む腎炎；ネフローゼ症候群；急性および慢性（間質性）の膀胱炎およびハンナー潰瘍を含む膀胱炎；急性および慢性の尿道炎、前立腺炎、精巣上体炎、卵巣炎および卵管炎；外陰膣炎；ペーロニ病；勃起障害（男性および女性）；
５．同種移植の拒絶反応として、例えば腎臓、心臓、肝臓、肺、骨髄、皮膚もしくは角膜の移植後または輸血後の急性および慢性の拒絶反応；または慢性の移植片対ホスト疾患；
６．慢性関節リウマチ、過敏性腸症候群、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、橋本病、グレーヴス病、アジソン病、糖尿病、特発性血小板減少性紫斑病、好酸球性筋膜炎、高IgE症候群、抗リン脂質症候群およびセザリー症候群などの他の自己免疫疾患およびアレルギー性疾患；
【００５４】
７．癌疾患として、前立腺癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、大腸および結腸癌、胃癌、皮膚癌および脳の腫瘍、およびホジキンリンパ腫および非ホジキンリンパ腫などの骨髄（白血病を含む）およびリンパ球増殖系の悪性腫瘍などの、一般的な癌の治療；ならびに転移疾患、腫瘍再発および腫瘍随伴症候群の予防および治療；および
８．感染症として、生殖器疣、尋常性疣贅、足底疣贅、B型肝炎、C型肝炎、単純ヘルペスウイルス疾患、伝染性軟属腫、痘瘡、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、ヒトパピローマウイルス（HPV）、サイトメガロウイルス（CMV）、水痘帯状疱疹ウイルス（VZV）、リノウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルスによるウイルス性疾患；結核およびマイコバクテリウムアビウム、ハンセン病などの細菌性疾患；真菌、クラミジア、カンジダ、アスペルギルスによる感染症、クリプトコッカス髄膜炎、カリニ肺炎、クリプトスポリジウム症、ヒストプラズマ症、トキソプラズマ症、トリパノソーマによる感染症およびリーシュマニア症などの他の感染症。
【００５５】
従って本発明は、本明細書に治療における使用について定義されている式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。
さらなる態様において、本発明は本明細書に治療における使用のための医薬の製造において定義されている式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩の使用を提供する。
【００５６】
本明細書において、用語「治療」はまた、具体的に逆の示唆がなければ、「予防」も含む。用語「治療の」および「治療的」はそれに応じて解釈されるべきである。
予防は、問題の疾患または病態の前の発作に苦しんでいるか、そうでなければその危険性が増大したと考えられるヒトの治療に特に関係することが期待される。特定の疾患または病態を発症する危険性のあるヒトとしては一般に、疾患もしくは病態の家族歴を有するもの、または疾患もしくは病態を特に発症しやすいことが遺伝的な試験もしくはスクリーニングにより同定されているものが挙げられる。
【００５７】
特に本発明化合物は、喘息、COPD、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、癌、B型肝炎、C型肝炎、HIV、HPV、細菌性感染症および皮膚病の治療に用いることができる。
本発明はさらに、本明細書に定義されている治療的有効量の式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩をそれを必要とする患者に投与することを含む、閉塞性気道疾患または病態（例えば喘息またはCOPD）を治療するか、またはその危険性を軽減する方法を提供する。
【００５８】
上記治療的使用について、投与量はもちろん、用いられる化合物、投与形態、所望の治療および指示される障害に応じて変化するだろう。例えば、本発明化合物の日用量は吸入される場合には、0.05マイクログラム／体重キログラム（μg/kg）〜100マイクログラム／体重キログラム（μg/kg）の範囲であることができる。あるいは、化合物が経口投与される場合には、本発明化合物の日用量は0.01マイクログラム／体重キログラム（μg/kg）〜100ミリグラム／体重キログラム（mg/kg）の範囲であることができる。
【００５９】
式(I)の化合物およびその医薬的に許容される塩はそれ自体で用いることができるが、一般には式(I)の化合物／塩（有効成分）が医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体と関連している医薬組成物の形態にて投与されよう。適切な医薬製剤の選択および製造のための従来の手順は、例えば文献（「Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs」, M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988）に記載されている。
投与形態に応じて、医薬組成物は、好ましくは0.05〜99 %w（重量百分率）、より好ましくは0.05〜80 %w、さらにより好ましくは0.10〜70 %w、さらにより好ましくは0.10〜50 %wの有効成分を含み、すべての重量百分率は全組成物に基づく。
【００６０】
本発明はまた、本明細書に定義されている式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩を医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体とともに含む、医薬組成物も提供する。
本発明はさらに、本明細書に定義されている式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩を医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体と混合することを含む、本発明の医薬組成物の製造方法を提供する。
【００６１】
医薬組成物は、局所的（例えば皮膚または肺および／または気道）に、例えばクリーム剤、溶液剤、懸濁剤、ヘプタフルオロアルカン（HFA）エアロゾルおよび乾燥粉末製剤の形態にて、例えばTurbuhaler（登録商標）として知られている吸入装置にて投与するか；あるいは全身的に、例えば錠剤、カプセル、シロップ、散剤または顆粒の形態における経口投与により；または溶液剤もしくは懸濁剤の形態における非経口投与により；または皮下投与により；または坐剤の形態における直腸投与により；または経皮的に投与することができる。
【００６２】
本発明化合物（医薬的に許容される塩を含む）の乾燥粉末製剤および圧縮HFAエアロゾルは、経口または鼻腔吸入により投与することができる。吸入のために、化合物は、望ましくは細かく分割される。細かく分割された化合物は、好ましくは10マイクロメートル（μm）未満の中央粒径を有し、C8-C20脂肪酸またはその塩（例えばオレイン酸）、胆汁塩、リン脂質、アルキル単糖類、ペルフルオロ化もしくはポリエトキシ化界面活性剤、または他の医薬的に許容される分散剤などの分散剤を用いて、プロペラント混合物にて懸濁することができる。
本発明化合物はまた、乾燥粉末吸入器を用いて投与することもできる。吸入器は単回投与または複数回投与吸入器であることができ、呼吸で作動する乾燥粉末吸入器であることができる。
【００６３】
一つの可能性は、細かく分割された本発明化合物を担体物質、例えば単糖類、二糖類または多糖類、糖アルコールまたは別のポリオールと混合することである。適切な担体は、糖、例えばラクトース、グルコース、ラフィノース、メレジトース、ラクチトール、マルチトール、トレハロース、スクロース、マンニトールおよびデンプンである。あるいは、細かく分割された化合物は別の物質によりコーティングすることができる。粉末混合物はまた、硬ゼラチンカプセルに調剤することもでき、それぞれは所望量の活性化合物を含む。
【００６４】
別の可能性は、吸入手順の間に細かく分割された粉末を砕けた球に処理することである。この球形化した粉末は、例えばTurbuhaler（登録商標）として知られている複数回投与吸入器の薬物容器（ここに、単位投与は次いで患者により吸入される所望の用量を測定する）に充填することができる。この系にて有効成分は、担体物質とともにまたはそれなしで患者に送達される。
経口投与について、本発明化合物は、アジュバントまたは担体、例えばラクトース、サッカロース、ソルビトール、マンニトール；デンプン、例えばジャガイモデンプン、トウモロコシデンプンもしくはアミロペクチン；セルロース誘導体；結合剤、例えばゼラチンもしくはポリビニルピロリドン；および／または滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ポリエチレングリコール、蝋、パラフィンなどと混合した後、錠剤に圧縮することができる。コーティングされた錠剤が必要であるときには、上記のように製造されたコアは、例えばアラビアゴム、ゼラチン、滑石および二酸化チタンを含んでよい濃縮糖溶液でコーティングすることができる。あるいは、錠剤は、揮発容易性有機溶媒に溶解した適切なポリマーでコーティングすることができる。
【００６５】
軟ゼラチンカプセルの製造について、本発明化合物は、例えば植物油またはポリエチレングリコールと混合することができる。硬ゼラチンカプセルは、錠剤についての上記いずれかの賦形剤を用いて化合物の顆粒を含むことができる。本発明化合物の液体または半固体製剤はまた、硬ゼラチンカプセルに充填することができる。
経口適用のための液体製剤は、本発明化合物を含むシロップまたは懸濁剤、例えば溶液剤の形態であることができ、糖およびエタノール、水、グリセロールおよびプロピレングリコールの混合物によりバランスを保つ。そのような液体製剤は適宜、増粘剤または当業者に知られている他の賦形剤として着色剤、着香料、サッカリンおよび／またはカルボキシメチルセルロースを含んでいてもよい。
【００６６】
本発明化合物はまた、上記病態の治療のために用いられる他の化合物と併用投与することもできる。
それゆえ、本発明はさらに、本発明化合物または本発明化合物を含む医薬組成物もしくは製剤が同時にもしくは連続して投与されるか、または別の治療剤と組み合わせた製剤として投与される、上記１以上の病態の治療のための併用療法に関する。
【００６７】
特に、炎症性疾患COPD、喘息およびアレルギー性鼻炎の治療について、本発明化合物は、抗TNFモノクローナル抗体（例えばレミケード、CDP-870およびアダリムマブ）およびTNFレセプター免疫グロブリン分子（エンブレルなど）などの腫瘍壊死因子アルファ（TNF-アルファ）阻害剤；局所的または全身的に適用される非選択性シクロ-オキシゲナーゼCOX-1/COX-2阻害剤（ピロキシカム、ジクロフェナク、ナプロキセン、フルビプロフェン、フェノプロフェン、ケトプロフェンおよびイブプロフェンなどのプロピオン酸、メフェナム酸などのフェナメート、インドメタシン、スリンダク、アザプロパゾン、フェニルブタゾンなどのピラゾロン、アスピリンなどのサリチル酸）、COX-2阻害剤（メロキシカム、セレコキシブ、ロフェコキシブ、バルデコキシブ、ルマロコキシブ（lumarocoxib）、パレコキシブおよびエトリコキシブなど）；グルココルチコステロイド（局所、経口、筋肉内、静脈内または関節内経路により投与）；メトトレキセート、レフノミド；ヒドロキシクロロキン、d-ペニシラミン、オーラノフィンまたは他の非経口もしくは経口金製剤などの薬剤と混合することができる。
【００６８】
本発明はさらに、本発明化合物とロイコトリエン生合成阻害剤、ジレウトン；ABT-761；フェンレウトン；テポキサリン；Abbott-79175；Abbott-85761；N-(5-置換)-チオフェン-2-アルキルスルホンアミド；2,6-ジ-tert-ブチルフェノールヒドラゾン；Zeneca ZD-2138などのメトキシテトラヒドロピラン；化合物SB-210661；L-739,010などのピリジニル-置換2-シアノナフタレン化合物；L-746,530などの2-シアノキノリン化合物；またはMK-591、MK-886およびBAY x 1005などのインドールもしくはキノリン化合物などの5-リポキシゲナーゼ（5-LO）阻害剤または5-リポキシゲナーゼ活性化タンパク質（FLAP）アンタゴニストとの併用に関する。
【００６９】
本発明はさらに、本発明化合物とL-651,392などのフェノチアジン-3-1；CGS-25019cなどのアミジノ化合物；オンタゾラストなどのベンズオキサラミン；BIIL 284/260などのベンゼンカルボキシミドアミド；ザフィルルカスト、アブルカスト、モンテルカスト、プランルカスト、ベルルカスト（MK-679）、RG-12525、Ro-245913、イラルカスト（CGP 45715A）およびBAY x 7195などの化合物からなる群から選択されるロイコトリエン（LT B4、LTC4、LTD4およびLTE4）についてのレセプターアンタゴニストとの併用に関する。
本発明はさらに、本発明化合物とテオフィリンおよびアミノフィリン；PDE4阻害剤、アイソフォームPDE4Dの阻害剤またはPDE5の阻害剤などの選択的PDEアイソザイム阻害剤を含むメチルキサンタニンなどのホスホジエステラーゼ（PDE）阻害剤との併用に関する。
【００７０】
本発明はさらに、本発明化合物と経口、局所的または非経口で適用される、セチリジン、ロラタジン、デスロラタジン、フェキソフェナジン、アクリバスチン、テルフェナジン、アステミゾール、アゼラスチン、レボカバスチン、クロルフェニラミン、プロメタジン、シクリジンまたはミゾラスチンなどのヒスタミン1型レセプターアンタゴニストとの併用に関する。
本発明はさらに、本発明化合物と胃保護ヒスタミン2型レセプターアンタゴニストとの併用に関する。
【００７１】
本発明はさらに、本発明化合物とヒスタミン4型レセプターのアンタゴニストとの組合せに関する。
本発明はさらに、本発明化合物とプロピルヘキセドリン、フェニルエフリン、フェニルプロパノールアミン、エフェドリン、シュードエフェドリン、塩酸ナファゾリン、塩酸オキシメタゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、塩酸キシロメタゾリン、塩酸トラマゾリンまたは塩酸エチルノルエピネフリンなどのアルファ-1／アルファ-2アドレナリン受容体アゴニスト血管収縮交感神経作動薬との併用に関する。
【００７２】
本発明はさらに、本発明化合物とアトロピン、ヒオシン、グリコピロレート、イプラトロピウムブロミド、チオトロピウムブロミド、オキシトロピウムブロミド、ピレンゼピンまたはテレンゼピンなどのムスカリンレセプター（M1、M2およびM3）アンタゴニストを含む抗コリン剤との併用に関する。
本発明はまた、本発明化合物とイソプレナリン、サルブタモール、フォルモテロール、サルメテロール、テルブタリン、オルシプレナリン、ビトールテロールメシレートおよびピルブテロールなどの、ベータ−アドレナリン受容体アゴニスト（ベータレセプターサブタイプ1-4を含む）との併用に関する。
【００７３】
本発明はまた、本発明化合物とナトリウムクロモグリケートまたはネドクロミルナトリウムなどのクロモンとの併用に関する。
本発明はまた、本発明化合物とインスリン様成長因子I型（IGF-1）模倣剤との併用に関する。
【００７４】
本発明はまた、本発明化合物とフルニソリド、トリアムシノロンアセトニド、ベクロメタゾンジプロピオネート、ブデソニド、フルチカゾンプロピオネート、シクレソニドまたはモメタゾンフロエートなどのグルココルチコイドとの併用に関する。
本発明はまた、本発明化合物とマトリックスメタロプロテアーゼ（MMP）、すなわち、ストロメリシン、コラゲナーゼおよびゼラチナーゼならびにアグリカナーゼ、特にコラゲナーゼ-1（MMP-1）、コラゲナーゼ-2（MMP-8）、コラゲナーゼ-3（MMP-13）、ストロメリシン-1（MMP-3）、ストロメリシン-2（MMP-10）およびストロメリシン-3（MMP-11）およびMMP-9およびMMP-12の阻害剤との併用に関する。
【００７５】
本発明はまた、本発明化合物とCCR1、CCR2、CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10およびCCR11（C-Cファミリー）；CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4およびCXCR5（C-X-Cファミリー）およびCX3CR1（C-X3-Cファミリー）のアンタゴニストなどのケモカインレセプター機能調節剤との併用に関する。
本発明はまた、本発明化合物とサイトカインシグナル伝達経路上で作用する薬剤を含む、サイトカインまたはサイトカイン機能調節剤、例えばアルファ-、ベータ-およびガンマ-インターフェロン；IL1〜15を含むインターロイキン（IL）およびインターロイキンアンタゴニストまたは阻害剤との併用に関する。
【００７６】
本発明はまた、本発明化合物と免疫グロブリン（Ig）またはIg製剤または抗IgE（オマリズマブ）などのIg機能を調節するアンタゴニストもしくは抗体との併用に関する。
本発明はまた、本発明化合物とサリドマイドまたはその誘導体、レチノイド、ジトラノールまたはカルシポトリオールなどの全身または局所に投与される別の抗炎症剤との併用に関する。
【００７７】
本発明はさらに、本発明化合物とペニシリン誘導体、テトラサイクリン、マクロライド、ベータ-ラクタム、フルオロキノロン、メトロニダゾール、吸入アミノグリコシドなどの抗菌剤；アシクロビル、ファムシクロビル、バラシクロビル、ガンシクロビル、シドフォビル、アマンタジン、リマンタジン、リバビリン、ザナマビルおよびオセルタマビルなどの抗ウイルス剤；インジナビル、ネルフィナビル、リトナビルおよびサクイナヴィルなどのプロテアーゼ阻害剤；ディダノシン、ラミブジン、スタブジン、ザルシタビンもしくはジドブジンなどのヌクレオシド逆転写酵素阻害剤；またはネビラピンもしくはエファビレンなどの非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤などの抗ウイルス剤との併用に関する。
【００７８】
本発明化合物はまた、癌治療のための治療剤として存在するものとの併用に用いることもでき、適切な治療剤としては例えば、以下のものが挙げられる：
（ｉ）内科的腫瘍学に用いられている抗増殖性薬剤／抗腫瘍剤またはその組合せ、例えばアルキル化剤（例えばシスプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファンまたはニトロソウレア）；代謝拮抗剤（例えば5-フルオロウラシルまたはテガフールなどのフルオロピリミジン、ラルタイトレキセド、メトトレキセート、シトシンアラビノシド、ヒドロキシウレア、ゲムシタビンまたはパクリタキセルなどのアンチフォレート）；抗腫瘍性抗生物質（例えばアドリアマイシン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシン-C、ダクチノマイシンまたはミスラマイシンなどのアンスラサイクリン）；抗有糸分裂剤（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシンもしくはビノレルビンなどのビンカアルカロイドまたはタキソールもしくはタキソトーレなどのタキソイド）；またはトポイソメラーゼ阻害剤（例えばエトポシド、テニポシド、アムサクリン、トポテカンまたはカンプトテシンなどのエピポドフィロトキシン）；
【００７９】
（ｉｉ）抗エストロゲン剤（例えばタモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェンまたはヨードキシフェン）、エストロゲン受容体ダウンレギュレーター（例えばフルベストラント）、抗アンドロゲン剤（例えばビカルタミド、フルタミド、ニルタミドまたはシプロテロンアセテート）、LHRHアンタゴニストまたはLHRHアゴニスト（例えばゴセレリン、リュープロレリンまたはブセレリン）、プロゲストゲン（例えばメゲストロールアセテート）、アロマターゼ阻害剤（例えばアナストロゾール、レトロゾール、ボラゾールまたはエキセメスタン）または5α-レダクターゼ阻害剤（例えばフィナステリド）などの細胞増殖抑制剤；
（ｉｉｉ）癌細胞の浸潤を阻害する薬剤（例えばマリマスタットなどのメタロプロテイナーゼ阻害剤またはウロキナーゼプラスミノーゲン活性体受容体機能阻害剤）；
【００８０】
（ｉｖ）成長因子機能阻害剤、例えば成長因子抗体（例えば抗erbb2抗体トラスツズマブまたは抗erbb1抗体セツキシマブ［C225］）、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤またはセリン／スレオニンキナーゼ阻害剤、上皮細胞増殖因子ファミリーの阻害剤（例えばN-(3-クロロ-4-フルオロフェニル)-7-メトキシ-6-(3-モルホリノプロポキシ)キナゾリン-4-アミン（ゲフィチニブ, AZD1839）、N-(3-エチニルフェニル)-6,7-ビス(2-メトキシエトキシ)キナゾリン-4-アミン（エルロチニブ, OSI-774）または6-アクリルアミド-N-(3-クロロ-4-フルオロフェニル)-7-(3-モルホリノプロポキシ)キナゾリン-4-アミン（CI1033）などのEGFRファミリーチロシンキナーゼ阻害剤）、血小板由来増殖因子ファミリーの阻害剤、または肝細胞増殖因子ファミリーの阻害剤；
（ｖ）血管新生阻害剤、例えば血管内皮細胞増殖因子の効果を阻害するもの（例えば抗血管内皮細胞増殖因子抗体ベバシズマブ、国際公開公報WO97/22596、WO97/30035、WO97/32856またはWO98/13354に開示される化合物）、または別の機序で作用する化合物（例えばリノミド、インテグリンαvβ3機能阻害剤またはアンジオスタチン）；
【００８１】
（ｖｉ）血管損傷剤（vascular damaging agent）、例えばコンブレタスタチンA4または国際公開公報WO99/02166、WO00/40529、WO00/41669、WO01/92224、WO02/04434もしくはWO02/08213に開示される化合物；
（ｖｉｉ）アンチセンス療法に用いられる薬剤、例えばISIS2503などの、上記のターゲットの一つに対するもの、抗rasアンチセンス；
（ｖｉｉｉ）遺伝子療法アプローチに用いられる薬剤、例えば異常p53または異常BRCA1もしくはBRCA2などの異常遺伝子を置き換えるアプローチ、シトシンデアミナーゼ、チミジンキナーゼまたは細菌ニトロリダクターゼ酵素を用いるなどのGDEPT（遺伝子標的酵素プロドラッグ療法）アプローチ、および多剤耐性遺伝子療法などの化学療法または放射線療法に対する患者の耐性を増大させるアプローチ；または
（ｉｘ）免疫療法アプローチに用いられる薬剤、例えば、インターロイキン2、インターロイキン4または顆粒球マクロファージコロニー刺激因子などのサイトカインによるトランスフェクションなどの患者の腫瘍細胞の免疫原性を増大するためのex-vivoおよびin-vivoアプローチ、T細胞アネルギーを減少させるアプローチ、サイトカインでトランスフェクションされた樹状細胞などのトランスフェクションされた免疫細胞を用いるアプローチ、サイトカインでトランスフェクションされた腫瘍細胞系を用いるアプローチ、および抗イディオティピック抗体を用いるアプローチなど。
【００８２】
本発明はさらに、以下の実施例への言及により説明されよう。
【００８３】
特に明記されなければ、有機溶液は硫酸マグネシウムで乾燥した。RPHPLCは、アセトニトリルおよび必要ならば水性酢酸アンモニウム、アンモニア、ギ酸またはトリフルオロ酢酸を緩衝剤として用いたWaters Symmetry C8, XterraまたはPhenomenex Geminiカラムを用いた逆相分取用高速液体クロマトグラフィーを示す。カラムクロマトグラフィーはシリカゲルにて行った。SCXはスルホン酸吸着剤による固相抽出を示し、それにより混合物をスルホン酸吸着剤で吸収し、メタノールまたはアセトニトリルなどの適切な溶媒で溶出した後、遊離塩基生成物は水性アンモニア／メタノールまたはアセトニトリルで溶出した。
【実施例】
【００８４】
実施例1
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][3-(ジメチルアミノ)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート
【化１３】
2009507909.tif 000015
(i)  2-クロロ-9-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-9H-プリン-6-アミン
2,6-ジクロロ-9-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-9H-プリン55gをメタノール中7N水性アンモニア500mlに溶解し、封をしたフラスコ中100℃にて6時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、終夜放置した。ろ過により副題化合物を得た。収率40g.
1H NMR δ(CDCl3) 8.02 (1H, s), 5.94 (2H, brs), 5.71 (1H, dd), 4.15 - 4.22 (1H, m), 3.75 - 3.82 (1H, m), 1.27 - 2.12 (6H, m).
【００８５】
(ii)  2-ブトキシ-9-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-9H-プリン-6-アミン
工程(i)で得られた生成物40gをブタノール中19%(w/w)-ナトリウムブトキシド250mlに溶解した。反応混合物を還流下6時間撹拌した。得られた懸濁液を室温まで冷却し、水250mlで希釈し、ジエチルエーテル（200ml x 3）で抽出した。集めた有機相を水（200ml x 3）で洗浄し、乾燥し、減圧濃縮した。副題化合物をジエチルエーテル／イソヘキサン（1/1, 300ml）で結晶化し、ろ過により得た。収率19g.
1H NMR δ(CDCl3) 7.87 (1H, s), 5.56 - 5.68 (3H, m), 4.31 - 4.35 (2H, t), 4.14 - 4.17 (1H, m), 3.76 - 3.80 (1H, m), 1.49 - 2.08 (10H, m), 0.98 (3H, t).
【００８６】
(iii)  8-ブロモ-2-ブトキシ-9-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)9H-プリン-6-アミン
工程(ii)で得られた生成物30gを乾燥ジクロロメタン200mlに溶解した。溶液を室温にて撹拌し、N-ブロモスクシンアミド27gを少しずつ添加した。混合物を常温にて終夜撹拌した。20%(w/v)-硫酸ナトリウム200mlを加え、分離した水相をジクロロメタン（200ml x 3）で抽出した。集めた有機相を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（200ml x 2）および食塩水200mlで洗浄した。減圧濃縮後、残渣を酢酸エチル300mlに溶解し、水200ml、食塩水200mlで洗浄し、乾燥した。溶液をシリカゲルに通してろ過し、減圧濃縮した。残渣をジエチルエーテルおよびイソヘキサン（1/1, 200ml）でトリチュレーションした後、ろ過し、副題化合物26gを得た。ろ液を減圧濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／イソヘキサン）で精製し、さらに生成物2.5gを得た。固体を集め、副題化合物を黄色固体として得た。収率28.5g。融点: 148-150℃
1H NMR δ(CDCl3) 5.59-5.64 (3H, m), 4.32 (2H, m), 4.17 (1H, m), 3.74 (1H, m), 3.08 (1H, m), 2.13 (1H, d), 1.48 - 1.83 (8H, m), 0.98 (3H, t).
【００８７】
(iv)  2-ブトキシ-8-メトキシ-9-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル) 9H-プリン-6-アミン
ナトリウム3.7gを窒素雰囲気下、無水メタノール400mlに加えた。この溶液に工程(iii)で得られた生成物28.5gを加え、混合物を65℃にて9時間撹拌した。混合物を減圧濃縮し、水500mlを加えた。水相を酢酸エチル（300ml x 2）で抽出し、食塩水（200ml x 3）で洗浄し、乾燥した。副題化合物をジエチルエーテルで結晶化した後、得た。収率14.2g.
1H NMR δ(CDCl3) 5.51(1H, dd), 5.28 (2H, brs), 4.29 (2H, t), 4.11 - 4.14 (4H, m), 3.70 (1H, m), 2.76 - 2.80 (1H, m), 2.05 (1H, d), 1.47 - 1.81 (8H, m), 0.97 (3H, t).
【００８８】
(v)  2-ブトキシ-8-メトキシ-9H-プリン-6-アミン, トリフルオロアセテート塩
工程(iv)で得られた生成物24gを無水メタノール300mlに溶解し、トリフルオロ酢酸30mlを加えた。反応混合物を常温にて3日間撹拌し、減圧濃縮した。メタノール／酢酸エチルでトリチュレーションした後、副題化合物を白色結晶固体として得た。収率21g.
1H NMR δ(CD3OD) 4.48 (2H, t), 4.15 (3H, s), 1.80 (2H, quintet), 1.50 (2H, sextet), 0.99 (3H, t).
【００８９】
(vi)  9-(3-ブロモプロピル)-2-ブトキシ-8-メトキシ-9H-プリン-6-アミン
工程(v)で得られた生成物20gを炭酸カリウム40gおよび1,3-ジブロモプロパン34mlのN,N-ジメチルホルムアミド250ml中の急速に撹拌した混合物に常温にて10分かけて少しずつ加え、混合物を1.5時間撹拌した。混合物を水800mlで希釈し、酢酸エチル（300ml x 3）で抽出した。集めた抽出物を食塩水200mlで洗浄し、乾燥した。混合物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）により精製し、副題化合物を白色固体として得た。収率16g.
1H NMR δ(CDCl3) 5.19 (2H, s), 4.28 (2H, J = 6.7 Hz, t), 4.12 (3H, s), 4.09 (2H, J = 9.4 Hz, t), 3.37 (2H, J = 13.3Hz, t), 2.39 - 2.30 (2H, m), 1.81 - 1.72 (2H, m), 1.55 - 1.43 (2H, m), 0.96 (3H, J = 11.4 Hz, t).
【００９０】
(vii)  6-アミノ-9-(3-ブロモプロピル)-2-ブトキシ-7,9-ジヒドロ-8H-プリン-8-オン
工程(vi)の生成物35.8gをメタノール400mlに溶解し、ジオキサン中4M 塩化水素100mlで処理した。混合物を常温にて6時間撹拌し、減圧濃縮した。ジクロロメタン500mlを加え、減圧濃縮し、泡状物を得、これをさらに精製しないで次の工程に用いた。収率38g.
1H NMR δ(DMSO-d6) 10.60 (1H, s), 4.45 (2H, m), 3.84 (2H, m), 3.65 (2H, m), 2.19 (2H, m), 1.66 - 1.73 (2H, m), 1.36 - 1.47 (2H, m), 0.96 (3H, m).
【００９１】
(viii)  6-アミノ-2-ブトキシ-9-{3-[(3-ヒドロキシプロピル)アミノ]プロピル}-7,9-ジヒドロ-8H-プリン-8-オン
工程(vii)の生成物6gをアセトニトリル100mlに懸濁し、3-アミノプロパン-1-オール20mlを加えた。混合物を還流下終夜撹拌した。室温まで冷却した後、混合物を減圧濃縮し、20%(w/v)-水性炭酸水素ナトリウム100mlを加えた。懸濁液を常温にて終夜撹拌し、固体をろ過により集め、高真空下16時間貯蔵し、乾燥し、副題化合物を白色固体として得た。収率4.75g.
1H NMR δ(DMSO-d6) 6.40 (2H, brs), 4.15 (2H, J = 6.6 Hz, t), 3.70 (2H, J = 6.9 Hz, t), 3.44 (2H, m), 2.60 - 2.27 (4H, m), 1.77 - 1.23 (8H, m), 0.92 (3H, J = 7.5 Hz, t).
MS: APCI (+ve): 339 (M+H)
【００９２】
(ix)  メチル (3-{[[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル](3-ヒドロキシプロピル)アミノ]メチル}フェニル)アセテート
工程(viii)の生成物4.75gをN,N-ジメチルホルムアミド40mlに溶解した。炭酸カリウム2.00gおよびメチル [3-(ブロモメチル)フェニル]アセテート3.56gを加えた。混合物を常温にて終夜撹拌した。20%(w/v)水性炭酸水素ナトリウム20mlを加え、懸濁液を常温にて終夜撹拌した。固体をろ過により集め、高真空下16時間乾燥し、副題化合物を白色固体として得た。収率4.91g.
1H NMR δ(DMSO-d6) 7.25 - 7.09 (4H, m), 6.39 (2H, brs), 4.33 (1H, J = 4.8 Hz, t), 4.12 (2H, J = 6.6 Hz, t), 3.66 (2H, J = 7.2 Hz, t), 3.64 (2H, s), 3.60 (3H, s), 3.50 (2H, s), 3.42 - 3.65 (2H, m), 2.44 - 2.27 (4H, m), 1.83 - 1.31 (8H, m), 0.90 (3H, J = 7.2 Hz, t).
MS: APCI (+ve): 501 (M+H)
【００９３】
(x)  メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][3-(ジメチルアミノ)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート
工程(ix)の生成物200mgをジクロロメタン3mlに懸濁し、塩化チオニル0.06mlを加えた。溶液を常温にて5時間撹拌し、減圧濃縮し、トルエン100mlで共沸した。ヨウ化ナトリウム200mgおよびN,N-ジメチルアミン4mlの2Mテトラヒドロフラン溶液を加えた。混合物を封をしたチューブ中50℃にて72時間加熱した。常温まで冷却した後、混合物をSCXで処理し、RPHPLCにより精製し、標記化合物を白色固体として得た。収率96mg.
1H NMR δ(DMSO-d6) 7.25 - 7.08 (4H, m), 6.52 (2H, brs), 4.11 (1H, J = 6.6 Hz, t), 3.66 (2H, J = 6.9 Hz, t), 3.63 (2H, s), 3.59 (3H, s), 3.49 (2H, s), 2.43 - 2.32 (4H, m), 2.12 (2H, J = 6.9 Hz, t), 2.03 (6H, s), 1.66 - 1.30 (8H, m), 0.90 (3H, J = 7.2 Hz, t).
MS: APCI (+ve): 528 (M+H)
【００９４】
実施例2
メチル (3-{[[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル](3-ピロリジン-1-イルプロピル)アミノ]メチル}フェニル)アセテート
【化１４】
2009507909.tif 000016
標記化合物を上記実施例1記載のものと同様の方法によりピロリジンを用いて製造した。収率150mg.
1H NMR δ(DMSO-d6) 7.25 - 7.09 (4H, m), 6.37 (2H, brs), 4.12 (1H, J = 6.6 Hz, t), 3.66 (2H, J = 7.2 Hz, t), 3.64 (2H, s), 3.59 (3H, s), 3.49 (2H, s), 3.31 - 2.72 (2H, m), 2.72 - 2.29 (10H, m), 1.82 - 1.23 (10H, m), 0.90 (3H, J = 7.2 Hz, t).
MS: APCI (+ve): 554(M+H)
【００９５】
実施例3
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート
【化１５】
2009507909.tif 000017
標記化合物を上記実施例1記載のものと同様の方法によりN-メチルピペラジンを用いて製造した。収率50mg.
1H NMR δ(DMSO-d6) 7.24 - 7.09 (4H, m), 6.45 (2H, brs), 4.11 (1H, J = 6.4 Hz, t), 3.66 (2H, J = 7.2 Hz, t), 3.63 (2H, s), 3.59 (3H, s), 3.48 (2H, s), 3.31 (2H, m), 2.49 - 2.16 (12H, m), 2.10 (3H, s), 1.83 - 1.24 (8H, m), 0.90 (3H, J = 7.2 Hz, t).
MS: APCI (+ve): 583(M+H)
【００９６】
実施例4
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][2-(ジメチルアミノ)エチル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート
【化１６】
2009507909.tif 000018
(i)  6-アミノ-2-ブトキシ-9-(3-{[2-(ジメチルアミノ)エチル]アミノ}プロピル)-7,9-ジヒドロ-8H-プリン-8-オン
副題化合物を実施例1工程(viii)のものと同様の方法によりN,N-ジメチルエタン-1,2-ジアミンを用いて製造した。収率0.5g.
MS: APCI (+ve): 352 (M+1)
【００９７】
(ii)  メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][2-(ジメチルアミノ)エチル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート
工程(i)の生成物500mgを1,2-ジクロロエタン12mlおよび1-メチル-2-ピロリジノン3mlの混合物に溶解した。(3-ホルミル-フェニル)-酢酸メチルエステル300mgおよびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム425mgを加え、混合物を常温にて4時間撹拌した。溶媒を留去した後、残渣をジクロロメタン100mlおよび飽和水性炭酸水素ナトリウム100mlで分液し、有機層を乾燥し、減圧濃縮した。残渣をRPHPLCにより精製し、標記化合物を得た。収率260mg.
1H NMR δ(DMSO-d6) 9.82 (1H, s), 7.24 - 7.16 (3H, m), 7.10 (1H, d), 6.38 (2H, s), 4.12 (2H, t), 3.68 (2H, t), 3.64 (2H, s), 3.59 (3H, s), 3.52 (2H, s), 2.45 - 2.41 (4H, m), 2.27 - 2.23 (2H, m), 2.04 (6H, s), 1.85 - 1.80 (2H, m), 1.65 - 1.58 (2H, m), 1.39 - 1.33 (2H, m), 0.90 (3H, t).
MS: APCI (+ve): 514
【００９８】
実施例5
メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][3-(メチルアミノ)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート
【化１７】
2009507909.tif 000019
(i)  tert-ブチル (3-{[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル]アミノ}プロピル)メチルカーバメート
副題化合物を実施例1工程(viii)のものと同様の方法によりtert-ブチル (3-アミノプロピル)メチルカーバメートを用いて製造した。収率430mg.
MS: APCI (+ve): 452
【００９９】
(ii)  メチル {3-[([3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル]{3[(tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ]プロピル}アミノ)メチル]フェニル}アセテート
副題化合物を実施例1工程(ix)のものと同様の方法により工程(i)の生成物を用いて製造した。得られた副題化合物200mgをさらに精製しないで次の工程に用いた。
MS: APCI (+ve): 614
【０１００】
(iii)  メチル [3-({[3-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)プロピル][3-(メチルアミノ)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート
工程(ii)の生成物200mgをメタノール5mlに溶解し、ジオキサン中4M塩化水素5mlを加えた。混合物を室温にて72時間撹拌し、減圧濃縮した。混合物をRPHPLCにより精製し、標記化合物を白色固体として得た。収率35mg.
1H NMR δ(DMSO-d6) 7.24 - 7.15 (3H, m), 7.10 (1H, d), 6.40 (2H, s), 4.12 (2H, t), 3.67 (2H, t), 3.64 (2H, s), 3.59 (3H, s), 3.48 (2H, s), 2.42 - 2.36 (6H, m), 2.20 (3H, s), 1.85 - 1.78 (2H, m), 1.65 - 1.58 (2H, m), 1.54 - 1.47 (2H, m), 1.41 - 1.31 (2H, m), 0.90 (3H, t).
MS: APCI (+ve): 514
【０１０１】
実施例6
メチル [3-({[4-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)ブチル][3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート
【化１８】
2009507909.tif 000020
(i)  9-(3-ブロモプロピル)-2-ブトキシ-8-メトキシ-9H-プリン-6-アミン
副題化合物を実施例1工程(vi)のものと同様の方法により1,4-ジブロモブタンを用いて製造した。収率16g.
MS: APCI (+ve): 373/375 = 1/1 (M+H) ブロミド同位体パターン
【０１０２】
(ii)  3-{[4-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-メトキシ-9H-プリン-9-イル)ブチル]アミノ}プロパン-1-オール
副題化合物を実施例1工程(viii)のものと同様の方法により工程(i)の生成物を用いて製造した。収率6g.
MS: APCI (+ve): 339 (M+H)
(iii)  メチル (3-{[[4-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-メトキシ-9H-プリン-9-イル)ブチル](3-ヒドロキシプロピル)アミノ]メチル}フェニル)アセテート
副題化合物を実施例1工程(ix)のものと同様の方法により工程(ii)の生成物を用いて製造した。収率6g.
MS: APCI (+ve): 529 (M+H)
【０１０３】
(iv)  メチル (3-{[[4-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)ブチル](3-ヒドロキシプロピル)アミノ]メチル}フェニル)アセテート
標記化合物を実施例1工程(vii)のものと同様の方法により工程(iii)の生成物を用いて製造した。収率10g.
MS: APCI (+ve): 515 (M+H)
(v)  メチル [3-({[4-(6-アミノ-2-ブトキシ-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-9H-プリン-9-イル)ブチル][3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]アミノ}メチル)フェニル]アセテート
標記化合物を実施例1工程(x)のものと同様の方法により工程(iv)の生成物を用いて製造した。収率200mg.
1H NMR δ(DMSO-d6) 9.81 (1H, s), 7.27 - 7.03 (4H, m), 6.38 (2H, s), 4.18 - 4.08 (2H, m), 3.65 - 3.60 (4H, m), 3.58 (3H, s), 3.48 - 3.40 (2H, m), 3.37 - 3.26 (4H, m), 2.39 - 2.27 (4H, m), 2.27 - 2.19 (4H, m), 2.20 - 2.14 (2H, m), 2.10 (3H, s), 1.69 - 1.57 (4H, m), 1.55 - 1.43 (2H, m), 1.44 - 1.32 (4H, m), 0.91 (3H, t).
MS: APCI (+ve): 597 (M+H)
【０１０４】
生物学的アッセイ
(1)  ラット脾臓細胞のインターフェロン誘導活性（インビトロ）
雄Sprague-Dawleyラット（およそ8〜10週齢）から脾臓を取り出し、脾細胞懸濁液を血清フリーMEM培地（改変イーグル培地）中にて調製した。試験化合物をジメチルスルホキシド（DMSO）に溶解し、0.1%の最終DMSO濃度を保ちながら脾細胞（5×106細胞/ml）でインキュベーションした。インキュベーションを5%二酸化炭素（CO2）雰囲気下37℃にて24時間行い、その時点で上清を集め、インターフェロンアルファ（IFNα）について分析した。L929細胞の水疱性口内炎ウイルス誘発細胞死のIFNα媒介阻害を測定することによりバイオアッセイにてIFNαレベルを測定した。IFNαを誘発するために必要な試験化合物の最小有効濃度（MEC）の対数値を見積もる。
【表１】
2009507909.tif 000021
【０１０５】
(2)  ヒトTLR7アッセイ
pNiFty2-SEAPレポータープラスミドをすでに安定に発現しているHEK293細胞系にて組換えヒトTLR7を安定に発現させ；レポーター遺伝子の積分を抗生物質ゼオシンによる選択により維持した。ヒトTLR7の最も一般的な変異体配列（EMBL配列AF240467により示される）を哺乳動物細胞発現ベクターpUNOにクローン化し、このレポーター細胞系にトランスフェクトした。安定な発現を有するトランスフェクタントを抗生物質ブラストサイジンを用いて選択した。このレポーター細胞系において、分泌したアルカリ性ホスファターゼ（SEAP）の発現は、近接ELAM-1プロモーターと組み合わせた５つのNFkB部位を含むNFkB/ELAM-1複合プロモーターにより制御される。TLRシグナリングはNFkBの転位を引き起こし、プロモーターの活性化はSEAP遺伝子の発現をもたらす。TLR7特異的活性化は、0.1% (v/v)ジメチルスルホキシド（DMSO）の存在下、終夜37℃にて細胞を標準的化合物でインキュベーションした後、産生されたSEAPのレベルを測定することにより評価した。化合物によるSEAP産生の濃度依存誘発を、化合物の最小有効濃度として表現し、SEAP放出を誘発した（pMEC）。
実施例2の化合物：    pMEC 7.4
実施例3の化合物：    pMEC 7.7
実施例5の化合物：    pMEC 7.2
【０１０６】
溶解度試験
溶解度を測定するための飽和溶液は、約0.3〜3.0 mlの0.1Mリン酸緩衝液をいくつかの試験化合物とともにガラスねじ蓋付チューブに入れることにより調製した。次いでチューブを一定温度（20℃）にて終夜振盪した。振盪後、未溶解物質が溶液に存在しており、そうでない場合には、さらに試験化合物を加え、振盪を続けた。次いでサンプルを遠心チューブに移し、Heraeus Biofuge Fresco遠心分離器を用いて13000 rpmにて30分間遠心分離した。次いで上清を取り出し、新しい遠心チューブに入れ、再び30分間13000 rpmにて遠心分離した。未溶解物質はチューブの底にペレット状物を形成し、ペレットの上の液体を取り出し、アッセイのために準備した。次いで溶液はUV定量化を有するHPLCを用いて分析した。試験化合物のサンプルを素早く重量を量り、完全に溶解させるのに適切な量の溶媒（典型的にDMSO、エタノールまたはメタノール）に溶解することにより、標準物も調製した。次いでこのサンプルをHPLC/UVにより分析した。
【０１０７】
結果
溶解度は、サンプルの任意の希釈および注射容積の差について修正したHPLC/UVクロマトグラムにて観察されたピーク領域から計算した。次の式を用いた：
【数１】
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【表２】
2009507909.tif 000023
【表３】
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【国際調査報告】
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