(57)【要約】  透過性支持体の部類の設計が提供され、ここで、この設計の原理は、底部で付着したウェルまたはマルチウェルプレートの２つのアレイの中間で結合された膜などの透過性支持層を含み、両面マルチウェルプレートを形成する。それゆえ、透過性支持層のいずれの面の対向するウェルは、両面マルチウェルプレートの反転によりアクセスできる。ウェル内の流体は、アライメントされた上側と下側のウェルアレイの場合には、毛管力によって、または透過性膜層のパターン形成されたウェル領域の表面張力によって、新規のウェルプレート内に適所に保持される。流体保持のための区画を形成するために、追加の構成部材は必要ない。これらの新規のプレート設計によって、透過性支持層の表面積を最大にすることができ、多数の構成部材の側壁から生じるであろう潜在的な灯心現象および交差汚染の問題がなくなり、表面張力または毛管力の影響を活用することにより、流体を保持するために小さなウェルの直径がうまく利用される。
2009542208.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
マルチウェルプレート装置において、
第１のアレイを形成する複数の第１のウェル、および
前記第１のアレイの第１のウェルにアライメントされた、第２のアレイを形成する複数の第２のウェル、
を備え、
前記第１と第２のアレイのウェルの底部が、結合され、それらの界面に透過性膜を有し、前記第１のアレイの各ウェルが、該各ウェルの上部にそれぞれのウェル開口を有し、該それぞれのウェル開口が上向きであり、前記第２のアレイの各ウェルが、該各ウェルの上部にそれぞれのウェル開口を有し、該それぞれのウェル開口が下向きであることを特徴とするマルチウェルプレート装置。
【請求項２】
前記透過性膜が照射−エッチング膜であることを特徴とする請求項１記載のマルチウェルプレート装置。
【請求項３】
前記第１または第２のアレイのウェルの少なくとも１つを覆うための少なくとも１つのガス透過性蓋をさらに備えることを特徴とする請求項１記載のマルチウェルプレート装置。
【請求項４】
前記ガス透過性蓋が、前記マルチウェルプレートの凹部に嵌るエラストマーガスケットをさらに備えることを特徴とする請求項３記載のマルチウェルプレート装置。
【請求項５】
前記ガス透過性蓋がスリーブ形の蓋であることを特徴とする請求項３記載のマルチウェルプレート装置。
【請求項６】
前記第１と第２のアレイのウェルが、細胞結合を可能にするように前記透過性膜上にパターン形成されていることを特徴とする請求項１記載のマルチウェルプレート装置。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の説明】
【０００１】
本出願は、２００６年６月３０日に出願された、「ハイスループット・スクリーニングのための高密度透過性支持体」と題する米国特許出願第１１／４７９５３３号の恩恵を主張するものである。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、広く、マルチウェルプレートなどの細胞培養実験器具に関し、より詳しくは、ハイスループット・スクリーニングにとって有用なマルチウェルプレート内のＴｒａｎｓｗｅｌｌｓ（登録商標）Ｐｅｒｍｅａｂｌｅ  Ｓｕｐｐｏｒｔｓすなわち透過性支持体のための設計の種類に関する。
【背景技術】
【０００３】
Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）「Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ」Ｐｅｒｍｅａｂｌｅ  Ｓｕｐｐｏｒｔｓ内に見られるものなどの透過性支持体（または膜）を含むマルチウェルプレートシステムは、ハイスループット・スクリーニングを使用した新たな化学的存在物の評価を容易にしている。透過性支持体を有するこれらのマルチウェルプレートシステムは、薬物輸送および細胞移動を含む多くの種類の研究に用いられている。薬物輸送研究において、腸細胞（例えば、ＣａＣＯ2）が、分化して緻密な接合部を形成するまで、透過性支持体上で密集単層に増殖させられる。次いで、関心のある分子が細胞シートの一方の面に導入されて、このシートを、その分子が検出される他方の面まで横切って活性的に輸送され得るかが調べられる。
【０００４】
透過性支持体は細胞移動研究にとっても有用である。ここでは、化学吸引物質が、細胞の単層に隣接している区画に配置され、化学吸引物質に向かう細胞の移動が検出される。化学的存在物は一般に、移動を妨げる能力を決定するためにテストされる。
【０００５】
あるいは、透過性は、人工膜透過性評価（ＰＡＭＰＡ）または固定化人工膜（ＩＡＭ）などの当該技術分野に公知の技法を用いて評価できる。これらの用途には細胞培養は必要ない。その代わりに、透過性支持体は一般に、不活性有機溶媒中の脂質溶液で被覆される。関心のある分子が、被覆された透過性支持体の一方の面に置かれ、他方の面への通過がモニタされる。
【０００６】
９６ウェルテストが並行して行われるハイスループット・スクリーニング透過性支持体システムが、現在利用されており、このシステムには、「Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ」プレートまたは「Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ」が入れられる受け皿または貯蔵プレートを含む多数の構成部材が必要である。スループットを増加させるために、この業界では、マルチウェルプレートのウェル密度を、例えば、３８４ウェルおよび１５３６ウェルの形式などのより高い密度に増加させることに関心が寄せられている。現行の技術において、透過性支持体は一般に、ウェルの底部で吊り下げられる。次いで、透過性支持体を備えたウェルまたはマルチウェルプレートが、しっかりとした底面を持つ別のウェルまたはマルチウェルプレートの内部に入れられ、流体の保持が可能になる。ウェルの数が増加すると、これらのより高密度の形式にあるウェルが小型化されることとなる。したがって、ウェル内の細胞増殖のための膜の総面積が制限され、多数の構成部材の側壁が緊密に近接することにより、灯心現象または交差汚染問題が生じ得る。
【０００７】
９６ウェルに見られる設計および製造の課題は、３８４および１５３６ウェルの形式に進むに連れて、さらにより著しくなり、難しくなる。それゆえ、マルチウェルプレートにおける灯心現象または汚染の問題を克服することが望ましい。さらに、透過性支持体の別個の部品の数を減少させることが望ましい。
【０００８】
当該技術分野に公知の上述した所望の能力を達成するための従来技術の手法には以下のものがある。
【０００９】
異なる種類の濾過装置が、「Multi Well Test Plate」と題する特許文献１、「Harvesting Material from Micro-Culture Plates」と題する特許文献２、および「Method of Making a Multi Well Test Plate」と題する特許文献３に見られる。
【００１０】
上述した従来技術には、欠点がいくつかある濾過装置が開示されている。これらの従来技術の特許文献は、フィルタ材のシートを熱可塑性トレイの間で封止することによってマイクロタイタ濾過プレートを製造する方法を開示しているか、またはマイクロタイタプレートからのフィルタ材を、分析用の別個のディスクに切断することを必要とする。フィルタ材が未切断シートとして残されている場合、フィルタ材は、横に延在する細孔構造を持っているので、灯心現象および交差汚染が生じてしまう。
【００１１】
したがって、第１に、これらの従来技術の装置には、交差汚染および灯心現象の問題を解決する上で大きな難点がある。第２に、シートが未切断の場合に生じる問題のために、これらの従来技術の設計には、多くの別個の構成部材を使用する必要がある。第３に、そうする場合、それらは、容易には製造できない。第４に、それらの装置は、透過性支持体の表面積を最大にもせず、またウェル密度の増加した形式を可能にするように小型化もしない。
【００１２】
「Reversible Membrane Insert for Growing Tissue Cultures」と題する、その譲受人に譲渡された特許文献４の別の従来技術には、膜の内部およびその底部にあるウェルが開示されており、ここでは、後にウェルは別の貯蔵ウェル内に配置される。この種の装置において、当該技術分野において公知の「Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ」とよく似た、膜収容ウェルおよび貯蔵ウェルの２つの別の容器が必要である。細胞は、膜の上向き面上の膜収容ウェル内に供給することができ、ここで、上述したように、膜はウェルの底部に位置している。これらの細胞が着生した後、膜収容ウェルを貯蔵ウェルから取り出し、次いで、ジグ器具を用いて、膜自体を、膜収容ウェルの反対の端部に移動させることができる。膜収容ウェルを貯蔵ウェル中にひっくり返して配置し、それによって、細胞を、まだ細胞が供給されていない、膜の他方の面に供給することができる。したがって、これにより、細胞を膜の両面に供給することが可能になる。
【００１３】
この設計に関する主な欠点の１つは、取り外される別個のウェルまたは容器が必要とされることであり、１つは膜収容ウェルであり、１つは貯蔵ウェルである。さらに、逆さにし、細胞を供給する前に、膜を一端から他端に移動させるために、ジグなどの追加の器具が必要とされる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】米国特許第５０４７２１５号明細書
【特許文献２】米国特許第４３０４８６５号明細書
【特許文献３】米国特許第４９４８４４２号明細書
【特許文献４】米国特許第５７５９８５１号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
したがって、上述した従来技術の解決策の欠点を好ましくは克服し、必要であれば、膜の両面への細胞の供給を可能にしながら、交差汚染および灯心現象の問題に対する解決策を提供し、透過性支持体の表面積を最大にし、増加したウェル密度の形式への小型化を可能にし、必要な構成部材の数を減少し、製造／作製を単純にする新たな装置および製造方法が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
両面マルチウェルプレートの部類の設計が提供され、ここで、この設計の原理は、透過性支持層または膜のいずれの面にも対面ウェルを含み、各面が、両面マルチウェルプレートの反転によりアクセスできる。ウェルの流体は、上面と下面がアライメントされたアレイウェルまたはマルチウェルプレートの場合には毛管力により、もしくは透過性膜のパターンの形成されたウェル領域の表面張力により、適所に保持される。
【００１７】
本発明のある実施の形態は、第１のアレイを形成する複数の第１のウェル、第１のアレイの第１のウェルにアライメントされた、第２のアレイを形成する複数の第２のウェル、および互いに連結され、それらの界面に透過性膜を有する第１と第２のアレイのウェルの底部に関する。
【００１８】
さらに、第１のアレイの各ウェルは、各ウェルの上部にそれぞれのウェル開口を有し、これらのそれぞれのウェル開口は上向きであり、第２のアレイの各ウェルは、各ウェルの上部にそれぞれのウェル開口を有し、これらのそれぞれのウェル開口は下向きである。
【００１９】
本発明の別の実施の形態は、マルチウェルプレートをひっくり返し、それによって、各ウェルの上部のそれぞれのウェル開口が上向きであるように第２のアレイを配置し、各ウェルの上部のそれぞれのウェル開口が下向きであるうよに第１のアレイを配置することによって、アクセス可能な第２のアレイのウェル開口に関する。第１と第２のアレイの両方のウェル内の流体は、表面張力または毛管力のために、ウェル内に保持される。
【００２０】
本発明のある実施の形態は、第１と第２のアレイのウェルの中間にある透過性膜の結合に関し、その透過性膜は照射−エッチング(track-etch)膜であることが好ましい。
【００２１】
本発明の実施の形態の別の態様は、マルチウェルプレートのウェル開口を覆うための剛性蓋であって、ロボット式取扱いに適合できる蓋に関する。さらに別の態様は、その蓋が、蓋の少なくとも一部でガス透過性であり、ガス交換が可能な薄いポリマーシートまたはディスクを含む蓋である。蓋はさらに、マルチウェルプレートの凹部に嵌るエラストマー製ガスケットを備えている。
【００２２】
本発明の別の態様は、マルチウェルプレートの第１と第２のアレイのウェル開口を覆うスリーブ形の蓋であって、ポリマーから成形または熱成形され、スリーブ形の蓋の上面と底面の把持部切抜き区域でマルチウェルプレートにアクセスするための手段を備えた蓋に関する。本発明のさらに別の態様において、スリーブ形の蓋は、剛性であり、蓋の少なくとも一部でガス透過性である。
【００２３】
本発明の別の実施の形態は、細胞結合を可能にするように透過性膜にパターンが形成された第１と第２のアレイのウェルに関し、そのパターン形成は、透過性膜上の、親水性相互作用、特定の分子の相互作用、脂質溶液による被覆、または積層であってよい。
【００２４】
本発明のさらに別の態様は、細胞結合または脂質溶液による被覆を防ぐための透過性膜上の第１と第２のウェルアレイの周りにパターン形成された非ウェル領域を含む透過性膜に関し、ここで、パターン形成は、親水性材料による被覆または積層であってよい。本発明の別の態様は、実質的に平らな、パターン形成された透過性膜に関する。
【００２５】
本発明の追加の特徴および利点は、以下の詳細な説明に述べられており、その一部は、その説明から当業者には容易に明らかであるか、またはその説明および特許請求の範囲、並びに添付の図面に記載されたように本発明を実施することによって認識されるであろう。
【００２６】
先の一般的な説明および以下の詳細な説明は、本発明の単なる例示であり、特許請求の範囲に記載された発明の性質および特徴を理解する上での概要または構成を提供することが意図されている。
【００２７】
添付の図面は、本発明をさらに理解するために含まれており、本明細書に包含され、その一部を構成する。これらの図面は、本発明の１つ以上の実施の形態を示しており、説明と共に、本発明の原理および動作を説明するように働く。
【００２８】
本発明を、以下の図面を参照して、以下に説明する。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】本発明の好ましい実施の形態によるマルチウェルプレート形式の斜視図
【図２】図１の断面図
【図３】図１の断面図
【図４】本発明の好ましい実施の形態による透過性膜による分離を示す、図２の１つのウェルの断面図
【図５】本発明の代わりの好ましい実施の形態によるマルチウェルプレートの斜視図
【図６】図５の１つのウェル領域の断面図
【図７】本発明の好ましい実施の形態によるマルチウェルプレートの蓋の斜視図
【図８】図７に示されたマルチウェルプレートの蓋の下側からの斜視図
【図９】本発明の好ましい実施の形態によるガス透過性のマルチウェルプレートの蓋の斜視図
【図１０】図９に示されたマルチウェルプレートの蓋の下側からの斜視図
【図１１】本発明の好ましい実施の形態による上側と下側両方のウェル開口を覆うスリーブ形のマルチウェルプレートの蓋を示す斜視図
【図１２】本発明の好ましい実施の形態による上側と下側両方のウェル開口を覆うスリーブ形のマルチウェルプレートの蓋を示す斜視図
【発明を実施するための形態】
【００３０】
ここで、その実施例が添付の図面に示されている本発明の現在好ましい実施の形態を詳しく参照する。できる限り、同じまたは同様の部品を指すために、全図面に亘り同じ参照番号が用いられている。
【００３１】
全体に亘り用いられる「ウェル」および「ウェル領域」という用語は、セルの供給が可能な、ここに記載された新規のマルチウェルプレートにおける区域を表すことを意図している。したがって、これらの用語は、同等であると考えられ、全体に亘り交換可能に使用してよい。
【００３２】
図１を参照すると、本発明の好ましい実施の形態による新規の両面マルチウェルプレート１００が示されている。マルチウェルプレート１００の標準形式は、スループットを増加させるために、３８４または１５３６ウェルプレートなどの高密度ウェル形式であることが好ましい。両面マルチウェルプレート１００は、両面で利用できる１つのプレートであることが好ましい。このプレートは、上側と下側のウェルのアレイから形成されることが好ましく、上側と下側のウェルアレイを有する１つのプレートまたは１つのプレートに一緒に組み立てられる２つのマルチウェルプレートであってもよく、いずれの場合にも、それらの間に透過性支持層が配置されている（以下に説明するように）。明確にするために、また両面マルチウェルプレート１００の下側と上側とを区別するために、上側および下側のマルチウェルプレートという用語をここに用いる。したがって、マルチウェルプレートのウェル１１０は、上側のマルチウェルプレート１２０上のウェルのアレイ１１５を形成する。その上、マルチウェルプレート１００は、上側のマルチウェルプレート上のウェルとアライメントされたアレイ１４０（点線の丸により示されている）を形成する下側のマルチウェルプレート１５０上に見られるウェル１３０を備えている。簡単にするために、マルチウェルプレート１００の標準形式で実際に物理的に可能な（例えば、３８４ウェルプレート）よりも少ない総数のウェル１１０，１１５，１３０，１４０が上側と下側のマルチウェルプレート１２０および１５０上に示されている。
【００３３】
ここで図２を参照すると、それぞれ、ウェルのアレイ１１５および１４０を有する、上側マルチウェルプレート１２０および下側マルチウェルプレート１５０を備えたマルチウェルプレート１００が示されている。上側と下側のマルチウェルプレートアレイのウェルの底部２０５，２０６は、上側のウェルの各々の底部２０５が、下側のウェルの各々の底部２０６とアライメントされるように接合されている。したがって、上側アレイ１１５内のウェル１１０の開口２１０は上向きであり、下側アレイ１４０内のウェル１３０の開口２３０は下向きである。下側アレイのウェルの開口２３０は、マルチウェルプレート１００を上下反対にし、それによって、下側アレイ１４０内の各ウェル２３０の上部が今では上向きであるように下側アレイを位置させ、上側アレイ内の核ウェル２１０の上部が今では下向きであるように上側アレイ１１５を位置させることによって、アクセスできる。
【００３４】
本発明の好ましい実施の形態によれば、透過性支持層２５０、好ましくは、照射−エッチング膜（例えば、「コーニング」の「Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ」Ｐｅｒｍｅａｂｌｅ  Ｓｕｐｐｏｒｔｓに見られる支持体と一致した）などの透過性または多孔質膜が、好ましくは、上側と下側のマルチウェルプレート１２０および１５０の中間に、または上側と下側のウェルアレイの底部２０５，２０６の界面に、付着または結合される。この透過性支持層または膜２５０は、処理されていてもまたは被覆されていてもよい。被覆材料は、有機溶媒中の様々な脂質またはコラーゲンなどの生体物質を含んでよい（ＰＡＭＰＡまたはＩＡＭ用途のため）。照射−エッチング膜は、それらのサイズ、形状および細孔の密度が、細胞輸送および移動アッセイのための他の膜材料よりも有利な特徴を示すであろうから、当業者にとって望ましい設計の選択であろう。透過性支持層２５０の細孔径は、一般に、１マイクロメートルの細孔径であるが、最終用途に応じて、０．１から１２マイクロメートルに及んでも差し支えない。透過性支持層または膜２５０は静止しており、それゆえ、膜を動かすのに余計な装置は必要ない。さらに、本発明により、マルチウェルプレート１００を単に反転させて、透過性膜２５０の両面に細胞を供給することができる。
【００３５】
上側と下側のマルチウェルプレート１２０および１５０は、金型設計の一部としての成形された嵌込みにより、または接着剤の使用、オーバーモールド、溶剤結合、および溶接（超音波、ＲＦ、レーザ、プラテン、放射線等）などの公知の組立法により、結合してよい。結合された場合、マルチウェルプレート１００の厚さまたは高さは、従来のマルチウェルプレートよりもわずかに厚いまたは高くてよいが、１４から２２ミリメートルの範囲内に入ることが好ましい。
【００３６】
図２および３を参照すると、マルチウェルプレート１００の別の断面が示されており、ここでは、上側と下側のマルチウェルプレート１２０および１５０が、表面張力または毛管力により、それぞれ、ウェル１１０および１３０内の流体を保持できるものとして示されている。上側のウェルアレイ１１５は、各上側ウェル１１０内に上側流体区画３１０を有し、下側のウェルアレイ１４０は、各下側ウェル内に下側流体区画３２０を有している。これらの区画３１０および３２０は、透過性支持層２５０によって分割されている。上側と下側の流体区画３１０および３２０内に保持されている流体間の汚染は、透過性支持層２５０を通して起こる。上側流体区画は壁３１５を有し、下側流体区画は壁３２５を有する。これらの区画壁３１５および３２５は、透過性支持層２５０に隣接した区域における流体の保持を容易にするような様式で、処理、被覆、またはテクスチャード加工されていてもよい。
【００３７】
ここで、図４を参照すると、１つの上側ウェル１１０および１つの下側ウェル１３０の詳細図が示されている。マルチウェルプレートのウェル１１０，１３０が、上述したように、透過性支持層または膜２５０によって、半分に分割されている。透過性支持層２５０は、それぞれ、上側ウェル１１０および下側ウェル１３０の底部２０５，２０６の界面に付着または結合されている。上側流体区画３１０内の上側流体４１０および下側流体区画３２０内の下側流体４２０は、毛管力により、それぞれ、ウェル１１０および１３０内に留まっている。上側と下側の流体４１０および４２０は、膜２５０の両面で隣り合って保持されるので、本発明においては、従来技術におけるような追加の貯留部は必要ない。上述したように、ウェル開口２１０および２３０は、マルチウェルプレート１００を上下逆さまにすることにより、またはそれを反対側に反転することによって、アクセスできる。
【００３８】
特に、高密度形式を提供するために、マルチウェルプレートのウェルの小型化がこの業界において増加するにつれ、細胞増殖のための総膜面積が減少し、よって、ウェルが、サイズが小さすぎて有用ではなくなるかもしれず、また前述したように、多数の構成部材における側壁が近接すると、灯心現象または交差汚染の問題が生じ得る。したがって、本発明の代わりの好ましい実施の形態は、図５および６に示すように、流体を保持するようにパターンが形成され、代わりのマルチウェルプレート５００内の剛性フレーム内に取り付けられる、透過性膜層またはシートを提供する。
【００３９】
先の実施の形態に前述したのと同じ原理にしたがって、透過性または多孔質膜５１０は、好ましくは、プレート５００を、それぞれ、上側と下側のマルチウェル「プレート」（または面またはアレイ）５１５および５１６に分割する剛性フレーム５２０の中点に保持されている。膜５１０は照射−エッチング膜であることが好ましい。透過性膜５１０の両面は、それぞれ、上側と下側のマルチウェルプレート５１５および５１６の両方を収容する。透過性膜５１０は、透過性膜５１０の上側（図示の）と下側（図示せず）の両面に、薬物輸送および細胞移動アッセイのための細胞結合を可能にするウェル領域（またはウェル）５３０、および細胞結合を防ぐ非ウェル領域（または非ウェル）５４０のパターンが形成され、非ウェル領域５４０はウェル領域５３０の周りに配置されるように変更またはパターン形成されている。
【００４０】
透過性膜の変更またはパターン形成は、疎水性グリッドに囲まれた親水性ウェル領域５３０のアレイにより行われることが好ましい。ＰＡＭＰＡおよび／またはＩＡＭ用途について、これは、脂質または有機溶媒でスポットが付けられた単純な疎水性膜により行うことができる。脂質により、親水性スポットすなわちウェル領域が形成される。脂質が印刷またはスポット付けされていない、細胞に基づくテストにおいて、最初に、親水性膜を用い、この親水性膜に、ポリエチレンまたはポリプロピレンの穿孔シートなどの疎水性材料を積層して、それぞれ、ウェル領域５３０および非ウェル領域５４０を形成してもよい。
【００４１】
したがって、膜５１０のパターン形成は、疎水性または親水性相互作用、特定分子の相互作用、脂質または有機溶媒による被覆またはスポット形成、もしくは親水成膜の上面の積層もしくは任意の他のうまくいきそうな様式によって完成してもよい。
【００４２】
細胞結合を可能にするおよび／または脂質溶液で被覆されているウェル領域５３０は、透過性膜５１０のいずれかの面の同じ場所に位置するようにアライメントされることが好ましく、自動化適合性目的のために、業界基準のマルチウェルプレートの任意の形式に見られるウェルと同じ位置にあることが好ましいが、プレート当たりのウェルの数は、幅広く、また所望の任意の間隔で、様々であって差し支えない。
【００４３】
上述したように、透過性膜５１０の非ウェル領域５４０は、細胞結合および／または脂質溶液による被覆を防ぐために、この透過性膜への別の材料の被覆または積層によって改変またはパターン形成されていてもよい。細胞結合および／または脂質溶液による被覆を防ぐためのこの改変により、特に、積層がこれらのウェル領域を製造する方法である場合、ウェル領域５３０の周囲の輪郭を描く追加の材料５５０の境界が生成され、よって、透過性膜５１０の領域５３０および５４０の間の線引きが容易に明白になる。
【００４４】
本発明の代わりの好ましい実施の形態のさらに別の態様は、改変またはパターン形成されているにもかかわらず、透過性膜５１０は実質的に平らであることである。
【００４５】
図６において、非ウェル領域５４０の間に位置する１つのウェル領域５３０を描写した図５の代わりのマルチウェルプレート５００の断面が示されており、ここでは、多孔質または透過性膜５１０が、剛性フレーム５５０により保持されたマルチウェルプレート５００の中間地点に配置されているのが示されている。前述したように、領域５３０および５４０は、本発明の好ましい態様にしたがって、それぞれ、細胞結合を可能にするかまたは防ぐようにパターン形成されている、および／または脂質溶液で被覆されている。
【００４６】
上述した実施の形態に関して、透過性膜５１０の両面にある流体５６０は、表面張力によって適所に保持されている。代わりのマルチウェルプレート５００の剛性フレーム５５０は、業界基準のマルチウェルプレートのサイズおよびフットプリントを有し、マルチウェルプレート１００については、下側アレイ５１６における透過性膜５１０のウェル領域にアクセスするために、反転させることができる。
【００４７】
本発明の好ましい態様によれば、図７〜１２は、マルチウェルプレート１００（および／または代わりのマルチウェルプレート５００）の上側と下側のアレイを覆うための異なる種類の蓋を示しており、これらの蓋は、いくつのウェルのマルチウェルプレート形式に取り付けることもできるが、実証と明白にする目的のために、業界基準のプレートよりも少ないウェルが示されている。その上、本発明のマルチウェルプレート１００および代わりのマルチウェルプレート５００は両面で「開いている」ので、これらの蓋は、ここに開示されたマルチウェルプレートの両面を覆うために使用されることが考えられる。
【００４８】
図７は、マルチウェルプレート１００または図５のマルチウェルプレート５００の上側アレイを被覆する蓋７１０を示している。蓋７１０は、ロボット式取扱いに適合した一般的な剛性マルチウェルプレート蓋であることが好ましい。蒸発を防ぐために、本発明においては、そのような蓋７１０が２つ必要である。このとき、両面マルチウェルプレート１００または５００のいずれかの面を覆うのに１つが用いられる。図８は蓋７１０の反対側（または下側の図）を示している。本発明の好ましい態様によれば、蓋７１０の内側または内側周囲にエラストマーガスケット８２０が示されており、蓋７１０をマルチウェルプレート１００の凹部に嵌めることができる。ガスケット８２０は熱可塑性エラストマー材料から製造されることが好ましい。
【００４９】
本発明の代わりの好ましい実施の形態において、ウェルまたはウェル領域の上に重なる孔を持つ剛性蓋部分９１０およびそれらのウェルまたはウェル領域を覆い、ガス交換が可能なガス透過性材料から製造されたディスク９２０を有する、細胞に基づくアッセイのためのガス透過性マルチウェルプレート蓋９００が図９に示されている。ガス交換環境は、ディスク９２０の代わりに蓋９００の表面に亘る薄いポリマーシート（図示せず）により提供してもよい。図１０は、反転された剛性蓋９１０がディスク９２０を有している図９の蓋９００の反転図を示しており、蓋９１０の内側周囲にエラストマーガスケット１０１０も示しており、蓋９１０をマルチウェルプレート１００（または代わりのマルチウェルプレート５００）の凹部に嵌めることができる。ガスケット１０１０は、図８のガスケット８２０の構造と類似している。
【００５０】
ここで図１１を参照すると、本発明の別の代わりの好ましい実施の形態による、スリーブ形の蓋１１００が示されている。マルチウェルプレート１００（または代わりのマルチウェルプレート５００）は、スリーブ形の蓋１１００中に滑り込むことができ（図１２に示されているように）、それによって、上側と下側のウェルアレイの両方が、２つのではなく、１つの蓋だけで覆われる。図１２から分かるように、スリーブ形の蓋１１００の内部に収容されたマルチウェルプレート１００に容易にアクセスできるように、蓋１１００のどこであってもよいが、それぞれ、好ましくは（図示されているように）スリーブ形の蓋１１００の上部と底部の端部に位置する、把持部切抜き区域１１２０および１１３０も考えられる。代わりのマルチウェルプレート５００にこのスリーブ形の蓋を使用しても差し支えないが、図１２に示されていない。
【００５１】
スリーブ形の蓋１１００は、透明または不透明のポリマーから成形または熱成形されるものであってよい。スリーブ形の蓋１１００の上部と底部のポリマーは、ウェルのガス交換を可能にするためのガス透過性シートを有することが好ましく、蓋１１００の周囲に沿っておよびその両面に見られる剛性フレーム１１１０によって支持されていてよい。
【００５２】
ここに記載された様々なマルチウェルプレートおよび／または蓋は、ユーザが、上側または下側のウェルアレイのいずれが先に利用された、細胞供給されたなどを追跡できるように、それらに関連する識別子またはタグを有してもよい。これらの識別子は、どのような所望の種類のものであってもよいが、いくかの例としては、プレートの上面および下面の各々に付された番号のラベル（例えば、１番および２番）や、マルチウェルプレートのどこかまたは両面に目に見えるエッチングが挙げられる。
【００５３】
前出の全ての図面は、実際のサイズを表すものではないが、本発明の好ましい実施の形態の精密な解釈および構造のブロック図を表すことに留意すべきである。
【００５４】
いくつかの工業用途は、先に述べたように、以下に限られないが、例えば、ＰＡＭＰＡおよびＩＡＭを含む用途などの、本発明の実施の形態による使用が考えられる。
【００５５】
本発明の様々な好ましい実施の形態を記載してきたが、本発明の精神および範囲から逸脱せずに、本発明に様々な改変および変更を行えることが当業者には明らかであろう。それゆえ、本発明は、本発明の改変および変更を、それらが添付の特許請求の範囲およびその同等物に含まれるという条件で包含することが意図されている。
【符号の説明】
【００５６】
１００，５００    マルチウェルプレート
１１５，１４０    ウェル
１２０，５１５    上側マルチウェルプレート
１５０，５１６    下側マルチウェルプレート
２３０    開口
２５０    透過性支持層または膜
３１０，３２０    流体区画
３１５，３２５    区画壁
５１０    透過性膜
５２０    剛性フレーム
７１０，９００    蓋
８２０，１０１０    エラストマーガスケット
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【国際調査報告】
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