(57)【要約】  本発明は、薬剤、特に向精神抗うつ、抗不安、老化保護、神経保護、抗低酸素脳保護及び向知性作用を示すＮ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミニン酸の一価及び二価の塩に関する。この新規化合物は、Ｎ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミニン酸塩基（ノウグルコチル）の形の最も近い従来技術を含む公知の調製物とは、卒中発作により引き起こされた病巣が減少し、加齢特異的な神経的欠如並びに知的及び身体的作業能力を改善するような方法で向精神効果、すなわち抗うつ、抗不安、神経保護及び老化保護作用を生じる点で異なる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式
【化１】
2009545589.tif 000014
［式中、
ｘ＝ＣａＯＨ、ｙ＝Ｈ（Ｉ）又は
ｘ＝ｙ＝Ｎａ（ＩＩ）又は
ｘ＝ｙ＝Ｋ（ＩＩＩ）である］
であり、抗うつ、抗不安、神経保護、脳保護、老化保護、向知性、抗低酸素活性を示し、向精神（抗うつ、抗不安）及び神経保護効果、高い有効性並びに広い治療範囲の存在の点で、最も近いアナログＮ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミン酸、Ｎ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミン酸塩基（ノウグルチル）とは異なるＮ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミニン酸の一価及び二価の塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬、すなわち新規の生物活性化合物、より具体的にはＮ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミニン酸の一価及び二価の塩に関し、これは、向精神（抗うつ、抗不安）、老化保護（ｈｅｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ）、神経保護、脳保護作用を引き起こし、うつ、虚血性及び出血性脳卒中、年齢依存性欠乏症並びに不安、うつ、認識機能障害及び神経変性に関連する他の疾患の治療に使用されうる。
【背景技術】
【０００２】
現在、うつ及び不安は最もよく見られる精神疾患であり、しばしば加齢、脳卒中、癌、アルツハイマー病及びパーキンソン病などを含む他の状態と関連する。
【０００３】
脳卒中（脳血管疾患）は、ロシア及び世界中でそれぞれ死亡原因の第２位及び第３位である。虚血性脳卒中（脳への血液供給の不足）の罹患率は７０〜８０％を占め、出血性脳卒中（脳出血）の罹患率は２０〜３０％である。これら２つの脳卒中の形態は、発症機序の点で異なり、異なる治療アプローチを必要とするが、脳卒中のすべての形態で神経発生（ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ）プロセスが観察される。これら２つの脳卒中の形態の鑑別診断は疾患の初期段階では困難であり、２５％を超える場合において、全く実施困難である。これに関連して、両方の脳卒中の形態を有する患者において効果のある薬物を作製することが望ましい。現在、カルシウムチャネルアンタゴニストが脳卒中に使用されているが、これらの薬物は、重大な副作用及び不都合、例えば、脳のスチール現象に至る心臓血管系への作用を有する。
【０００４】
認識機能障害及び低酸素状態は、小児及び自然の加齢プロセスの間の両方における多くの疾患、神経変性に関連するストレス及び疾患に伴って観察される。抗低酸素及び向知性薬剤は、加齢によって生じた精神機能の障害、アルツハイマー病、脳外傷後、出産前低酸素症、アルコール依存中の患者、植物神経症及び他の疾患を有する患者における治療に使用されうる。これらの状態のために使用されるピラセタム（Ｐｙｒａｃｅｔａｍ）は、効力の低い薬剤である。
【０００５】
ノウグルチル（ｎｏｏｇｌｕｔｙｌ）（Ｎ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミニン酸塩基）の化学構造が新規に示した化合物に最も類似している。しかしながら、ノウグルチルは、向精神（抗うつ及び抗不安）及び神経保護効果を示さない（１９８８年、ＢＩ  Ｎｏ３で刊行されたＲＦ特許第１３６８３１４号及び「抗低酸素及び抗健忘活性を有するＮ−ニコチノイルアミノ酸（Ｎ−ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ  ｗｉｔｈ  ａｎｔｉｈｙｐｏｘｉｃ  ａｎｄ  ａｎｔｉａｍｎｅｓｔｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ）」；Ｖｏｒｏｎｉｎａ  Ｔ．Ａ．ら、「向知性活性を有する新規化合物Ｎ−（５−オキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミン酸（Ｎｅｗ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ  ｗｉｔｈ  ｎｏｏｔｒｏｐｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｎ−（５−ｏｘｙｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ）−Ｌ−ｇｌｕｔａｍｉｃ  ａｃｉｄ）」Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉａ  Ｉ  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉａ，１９９０年、ｖ．５３、Ｎｏ４、ｐ．１３〜１６）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、向精神（抗不安、抗うつ）効果と神経保護、脳保護、老化保護（ｇｅｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ）、抗低酸素効果を合わせ持ち、学習能力の改善し、それにより公知の薬物に勝る新規の高い有効性及び低毒性の化合物の作製を目的とした。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本目的は、新規化合物、具体的には一般式
【化１】
2009545589.tif 000002
［式中、
ｘ＝ＣａＯＨ、ｙ＝Ｈ（Ｉ）又は
ｘ＝ｙ＝Ｎａ（ＩＩ）又は
ｘ＝ｙ＝Ｋ（ＩＩＩ）である］
であり、抗うつ、抗不安、神経保護、脳保護、老化保護、向知性、抗低酸素活性を示すＮ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミニン酸（化合物Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩ）の一価及び二価の塩の作製を通して達成された。
【０００８】
請求の範囲の化合物は、基本的には向精神（抗うつ及び抗不安）及び神経保護の薬理学的効果の存在、並びに高い向精神力の点でノウグルチルとは異なる。
【０００９】
請求の範囲の化合物は、白い結晶化合物であり、メチル、エチル及びイソプロピルアルコールに不溶であり、ベンゼン、トリクロロメタン、酢酸エチル及び他の有機溶媒にもほぼ不溶である。これらの化合物は、水、希酸及びアルカリ溶液に可溶である。
【００１０】
本特許において請求される化合物は、新規であり、文献には記載されていない。
【発明を実施するための形態】
【実施例】
【００１１】
（実施例１）
５０ｍｌの水中２．６８ｇ（０．０１Ｍ）のＮ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミン酸の懸濁液を６０〜７０℃まで加熱し、０．６８ｇ（０．０１２Ｍ）の酸化カルシウムを少量ずつ加える。この沈殿物は徐々に溶解する。この懸濁液を完全に溶解するまで加熱する。水溶液を２０ｍＬになるまで蒸発させる。得られた溶液を２００ｍＬのエタノールに滴下する。形成された混合物を０．５時間沈殿させ、これを１２時間室温で放置する。沈殿物を濾過し、アルコールで洗浄し、１００℃で一定重量乾燥させる（３時間）。カルシウムＮ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタメート（Ｉ）が得られ、回収物は２．７ｇ（８３％）、［α］Ｄ２０＋１１０（ｃ１、水）である。
実測値、％：С４０．８０；Н３．６４；Ｎ８．８０。キレートとしてС１１Н１２СаＮ２Ｏ７又はС１１Н１０СаＮ２Ｏ６・１Ｈ２Ｏ。プロトン磁気共鳴を使用して修正する。
理論値、％：С４０．７６；Н３．７０；Ｎ８．６４。
ＩＲ−スペクトル（ＫＢｒ中）、ｃｍ−１。
ＵＶ−スペクトル（水中）：λｍａｘ。
ＰＭＲスペクトル（Ｄ２Ｏ中）、内部標準：ヘキサメチルジシロキサン。
【００１２】
（実施例２）
５ｍｌの水中０．２７ｇ（０．００１Ｍ）のＮ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミン酸の懸濁液を５０〜６０℃まで加熱し、０．２ｇ（０．００２４Ｍ）の重炭酸ナトリウムを少量ずつ慎重に加える。この懸濁液を完全に溶解するまで加熱し、真空下蒸発乾固する。エタノールを残留物に添加し、真空下再度蒸発する。残留物を乾燥エーテルで粉砕し、沈殿物を濾過する。次いで沈殿物を６０℃／１ｍｍＨｇで乾燥し、Ｎ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミン酸（ＩＩ）のジナトリウム塩を回収物０．２５ｇ（８０．６％）として得る。
［α］Ｄ２０＋１３．７０（ｃ１、水）。
実測値、％：С４２．５１；Н３．４６；Ｎ９．１５。С１１Н１０Ｎａ２Ｎ２Ｏ６。
理論値、％：С４２．３１；Н３．２３；Ｎ８．９７。
ＩＲ−スペクトル（ＫＢｒ中）、ｃｍ−１。
ＵＶ−スペクトル（水中）：λｍａｘ。
ＰＭＲスペクトル（Ｄ２Ｏ中）、内部標準：ＨＭＤＳ。
【００１３】
（実施例３）
５ｍｌの水中０．２７ｇ（０．００１Ｍ）のＮ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミン酸の懸濁液を５０〜６０℃まで加熱し、０．２４ｇ（０．００２４Ｍ）の重炭酸ナトリウムを少量ずつ慎重に加える。この懸濁液を完全に溶解するまで加熱し、真空下蒸発乾固する。エタノールを残留物に添加し、真空下再度蒸発する。残留物を乾燥エーテルで粉砕し、沈殿物を濾過し、乾燥エーテルで洗浄し、沈殿物を６０℃／１ｍｍＨｇで乾燥し、Ｎ−（５−ヒドロキシニコチノイル）−Ｌ−グルタミン酸（ＩＩＩ）のジカリウム塩を回収物０．２７ｇ（７９．４％）として得る。
［α］Ｄ２０＋１０．５０（ｃ１、水）。
実測値、％：С３８．６４；Н３．１５；Ｎ８．３５。С１１Н１０Ｋ２Ｎ２Ｏ６。
理論値、％：С３８．３６；Н２．９３；Ｎ８．１４。
ＩＲ−スペクトル（ＫＢｒ中）、ｃｍ−１。
ＵＶ−スペクトル（水中）：λｍａｘ。
ＰＭＲスペクトル（Ｄ２Ｏ中）、内部標準：ＨＭＤＳ。
【００１４】
さらに、脳保護、抗低酸素、抗うつ、抗不安作用を示し、記憶及び学習能力の両方を改善するＮ−ニコチノイルアミノ酸の塩の有効性を例示する例を示す。
【００１５】
（実施例４）
Ｎ−ニコチノイルアミノ酸の塩の抗低酸素活性についての研究
抗低酸素効果を２つの手順の条件下：ヘルモ容量（ｈｅｒｍｏｖｏｌｕｍｅ）における高圧低酸素状態及び高炭酸での低酸素状態で試験した（Ｖｏｒｏｎｉｎａ  Ｔ．Ａ．ら、「新規薬理学的化合物の実験（前臨床試験）のためのテキスト（Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｆｏｒ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ（Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｔｕｄｙ）ｏｆ  ｎｏｖｅｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ）」モスクワ、Ｍｅｄｉｃｉｎａ。２００５、ｐ．３０８〜３２０）。体重２２〜２８ｇの普通の白色雄性マウスを実験に使用した。各々の用量レベルを１０匹の動物で試験した。コントロール動物に蒸留水を同量与えた。ノウグルチルを対照薬物として使用した。実験化合物を実験前４０分に腹腔内投与した。
【００１６】
急性高圧低酸素状態を流入−排出チャンバーでシミュレートした。圧力を高度計で、上昇速度を昇降計で測定した。動物を１１０００ｍのステージに２０ｍ／ｓのスピードで「上昇」させた。曝露を１０分間継続した。次いで動物を５分間ベースラインまで下に移動した。ヘルモ容量における高炭酸状態を有する低酸素状態を、動物を２００ｍｌの密閉されたガラス容器に移すことにより作製した。低酸素状態下の動物の寿命を記録した。各々の群は１０匹の動物を含んだ。
【００１７】
この実験は、高圧低酸素状態に１０分間曝露した後のすべてのコントロール動物が死んだことを示し、平均寿命は３．６分だった。すべての試験化合物１ａ〜１ｃは、圧力チャンバーにおける急性酸素欠乏の状態下マウスの寿命を増加させることができ、化合物Ｉは最も強力だった。化合物Ｉはノウグルチルと比べ低用量で効果を示した。同用量３０及び６０ｍｇ／ｋｇを使用した場合、化合物Ｉはノウグルチルと比べより顕著な効果を発揮した（表１）。
【００１８】
ヘルモ容量における高炭酸状態を有する低酸素状態の条件下、コントロール動物の平均寿命は１４．３分であった。すべての試験化合物Ｉ〜ＩＩＩはヘルモ容量における高炭酸状態を有する低酸素状態の条件下、マウスの寿命を延長することができ、化合物Ｉは最も強力だった。化合物Ｉの効果はノウグルチルよりも低用量で実現された。同用量３０及び６０ｍｇ／ｋｇを使用した場合、化合物Ｉはノウグルチルと比べより顕著な効果を示した（表１）。
【００１９】
（実施例５）
Ｎ−ニコチノイルアミノ酸の塩の抗健忘活性に関する研究
体重２５０〜２８０ｇの普通の白色雄性ラットを実験に使用した。各々の用量レベルを１０匹の動物で試験した。コントロール動物に同量の蒸留水を与えた。ノウグルチルを対照薬物として使用した。試験化合物を実験４０分前に腹腔内投与した。実験は、Ｌａｆａｙｅｔｔｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏ．，（ＵＳＡ）により提供された受動回避反応（受動回避）のための標準自動ユニットで実施された（Ａｄｅｒら、「電気ショックの強度及び持続の関数としての受動回避反応の記憶（Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｐａｓｓｉｖｅ  ａｖｏｉｄａｎｃｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ａｓ  ａ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ  ａｎｄ  ｄｕｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｌｅｃｔｒｉｃ  ｓｈｏｃｋ）」Ｐｓｙｃｈｏ  Ｓｃｉ．１９７２、ｖ．２６、ｐ．１２５〜１２８；Ｖｏｒｏｎｉｎａ  Ｔ．Ａ．ら、「新規薬理学的化合物の実験（前臨床試験）のためのテキスト（Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｆｏｒ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ（Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｔｕｄｙ）ｏｆ  ｎｏｖｅｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ）」モスクワ、Ｍｅｄｉｃｉｎａ．２００５、ｐ．２５３〜２６３及び３０８〜３２０）。ユニットを床から１ｍに位置づけられた小プラットホームとして設計し、これを専用のランプで照らし、電極床を備える暗いチャンバーをプラットホームと接続した。ラットを暗いチャンバーの入口前の照らされたプラットホームに尾を入口に向けて配置した；動物は暗いチャンバーを好み、すぐにその中に走って入った。暗いチャンバーにおいて動物は、電流（０．４５ｍＡ）で単回痛み刺激を与えられ、暗いチャンバーに入ることは危険であることを記憶した。刺激の持続時間は動物が暗いチャンバーから走り出ることで決定された。健忘を得るために最大電気ショックを使用し（５０Ｈｚ、０．２秒）、これは学習後直ちに角膜電極を通して行われた。電気ショックは、記憶痕跡の喪失を引き起こした。受動回避反応の再生（ＰＡＲ）に関する（記憶痕跡の保持に関する）試験を学習セッション及び電気ショックの２４時間後に実施した。動物を再度照らされたプラットホームに配置し、照らされたプラットホーム及び暗い危険チャンバーに居る時間を記録した（ＰＡＲ再生の間、床に電流を流さなかった）。
【００２０】
電気ショックなしのＰＡＲの再生で訓練されたコントロールの動物は、照らされたプラットホームにとどまることを好んだ。電気ショックによる訓練の喪失は動物における健忘を引き起こし、結果として短い潜伏時間を有する動物は、暗いチャンバーに入り、健忘ではない動物よりかなり長くそこにとどまる（表２）。
【００２１】
すべての試験された化合物は顕著な抗健忘活性を示し、これは動物が安全な照らされたプラットホームに居る時間が健忘のコントロール動物に比べ有意に長いことにより明らかにされた。最も高い抗健忘力は化合物Ｉで見出され、これはノウグルチルより優れていた（表２）。ノウグルチルの統計学的に有意な効果は５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで見出されたが、同じ強度の効果が用量レベル２５ｍｇ／ｋｇの化合物Ｉにより達成され、化合物Ｉのノウグルチルより高い有効性を示している。
【００２２】
（実施例６）
広範囲の皮質虚血モデルにおけるＮ−ニコチノイルアミノ酸（化合物Ｉ）の塩及びノウグルチルの効果に関する研究
抱水クロラール（４００ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）で麻酔された体重３５０〜４５０ｇの普通の白色雄性ラットを実験に使用した。大脳動脈の左頸動脈閉塞（ＯＭＣＡ）の結紮を顕微鏡下（倍率１４．０×３．３）、前頭及び頭頂分岐の分岐点近くで行った（Ｓ．Ｔ．Ｃｈｅｎら、Ｓｔｒｏｋｅ、１９８６、ｖ．１７、Ｎｏ４、ｐ．７３８〜７４３）。
【００２３】
手術後動物を３群に無作為に分けた。実験動物には、化合物１ａ又はノウグルチルを手術３０分、２、２４及び４８時間後に腹腔内に与えた。同じ時点でコントロール動物には生理食塩水（０．９％塩化ナトリウム溶液）を与えた。ＯＭＣＡから７２時間後、動物を屠殺した。−２０℃で凍結された材料を厚さ２．５ｍｍの５枚の前頭スライスの調製のために使用し、これを２，３，５−トリフェニルテトラゾリウム溶液（ＴＰＴＺ）で染色した。Ａｕｃ１形態計測プログラムを面積測定、病変部範囲及び同側半球の容積に対する病変部範囲のパーセンテージの決定を実施するために使用した。手術は大脳皮質の広大な虚血性損傷の作製をもたらし、これは前頭−頭頂及び背側−側部帯内に局在する。異なるスライスにおける変化の強度を比較するために、脳半球の７５％、６０％、４５％、２０％、５％及び０％の病変をそれぞれ２．５ポイント、２ポイント、１．５ポイント、１ポイント、０．５ポイント及び０ポイントと算定する任意の尺度を使用した。
【００２４】
生理食塩水で処置されたコントロール患者において、総病変域は２０．１７±３．１２％だった。最大の虚血性損傷は、第２及び第３のスライスのレベルで観察された（表３）。
【００２５】
虚血−誘導曝露後使用される４０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｉは、最初の３枚のスライスのレベルで損傷の範囲を有意に減少した（表３）。化合物Ｉの使用後の総病変部位は、１０．５４±１．８４％（コントロール群では１０．１７±３．１２％）に減少し、従って、この化合物は総病変部位を４７．３％（ｐ＜０．０５）減少する。ノウグルチルの効果は高用量レベル（５０ｍｇ／ｋｇ）で観察され、改善はあまりはっきりしなかった（表３）。ノウグルチル投与後の総病変部位は１４．３±２．１４％に減少した。
【００２６】
従って、虚血−誘導曝露後に投与された化合物Ｉは、同側頸動脈の結紮により引き起こされる大脳皮質の形態学的変化の強さを有意に弱める。これらの結果は、化合物Ｉの神経保護効果を示す。
【００２７】
別の一連の実験において、動物は、帯電床を備える暗いチャンバーに接続された明るく照らされた吊り下げプラットホームを含むＬａｆａｙｅｔｔｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏ．（ＵＳＡ）により提供される装置で形成される受動回避反応（ＰＡＲ）の試験で学習した。学習の過程において、ラットは本来備わっているホール反射（ｈｏｌｅ  ｒｅｆｌｅｘ）により暗いチャンバーに入り、痛み電気刺激を与えられた。記憶の評価は、学習セッション後２４時間以内に実施し、１８０秒間暗いチャンバーに入らなかった動物の数の記録、チャンバーに来た動物に関して進入の潜伏時間を含んだ。
【００２８】
何もしないラットを用いる以前の多くのコントロール実験は、通常危険なチャンバーに入らなかったか又は試験の最後の最後にチャンバーに入った（平均潜伏時間１４５±１０．１秒）ことを証明した。誘導虚血を有する動物のコントロール群において、暗いチャンバーに入るまでの潜伏時間は３１．２±８．３秒に減少した（ほとんどの動物は前日獲得した刺激を記憶しておらず、危険なチャンバーにすぐに入った）。ノウグルチル又は化合物Ｉで処置された虚血を有する動物は、暗い危険チャンバーに入るまでの潜伏時間がより長いことから明らかなように記憶の改善を示した。すなわち、潜伏時間は、ノウグルチル処置動物で５６．２±８．３秒及び化合物Ｉ処置動物で６２．３±７．２秒あった。これらノウグルチル及び化合物Ｉａの効果は、コントロールに比べｐ＜０．０５で有意であった。
【００２９】
（実施例７）
大脳内外傷後血腫（出血性脳卒中）モデルにおけるＮ−ニコチノイルアミノ酸（化合物Ｉ）の塩及びノウグルチルの効果に関する研究
動物施設で、餌（標準の固形飼料）及び制約なしに水を与え、昼及び夜の自然な交代で生活した体重２００〜２５０ｇの普通の白色雄性ラットを実験に使用した。出血性脳卒中（局所の脳出血）は、Ａ．Ｎ．Ｍａｋａｒｅｎｋｏら（「実験動物の脳の種々の構造における局所出血シミュレーション（Ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  ｌｏｃａｌ  ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ  ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ  Ｉ  ｖａｒｉｏｕｓ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂｒａｉｎ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｉｍａｌｓ．）」Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｖｉｓｓｈｅｉ  Ｎｅｒｖｎｏｙ  Ｄｅｙａｔｅｌｎｏｓｔｉ−Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｉｇｈｅｒ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ、２００２、ｖ．５２、Ｎｏ６、ｐ．７６５−〜７６８）による方法に従ってシミュレートされた。ネンブタール麻酔されたラット（４０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｍ．）において、内包領域の脳組織の破壊を専用デバイス（マンダリンナイフ）の使用により作製し、続いて舌下から採血した血液（０．０２〜０．０３ｍｌ）を損傷部位に適用した（２〜３分以内）。偽手術動物は、頭皮を剥ぎ、開頭術を受けた。動物を５群に分けた：何もしないラット、偽手術ラット、２０ｍｇ／ｋｇでノウグルチルを投与された出血性脳卒中を有する動物及び２０ｍｇ／ｋｇで化合物Ｉを投与された出血性脳卒中を有する動物。効果を手術後２４時間及び１４日以内に記録した。ラットの学習能力及び記憶を受動回避反応（ＰＡＲ、Ｌａｆａｙｅｔｔｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏ．，ＵＳＡにより提供される受動回避）のモデルで試験した。動物で神経学的欠損を決定するために、Ｉ．Ｖ．Ｇａｎｎｕｓｈｋｉｎａ（「脳の機能構成（Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｒｃｈｉｔｅｃｔｏｎｉｃｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂｒａｉｎ）」モスクワ、Ｍｅｄｉｃｉｎａ、１９７７、２２４ｐ．）により改変された脳卒中−インデックスＭｃＧｒｏｗスケールを使用した。状態の重篤度はポイントの合計により決定された。脳卒中−インデックススケールの２．５ポイントまでの軽度の症状（無動、四肢の衰弱、片側の半下垂（ｓｅｍｉｐｔｏｓｉｓ）、振せん、輪回運動）及び神経疾患の重篤症状（３〜１０ポイント）−四肢の感覚異常、下肢のまひ、側臥位のラットの数。動物に、手術後３〜３．５時間以内にノウグルチル及び化合物Ｉを同用量２０ｍｇ／ｋｇで腹腔内に単回投与した。コントロール動物は生理食塩水で処置した。実験開始時、各群は１５〜２０匹の動物を含んだ。ラットの死亡率を、観察期間（１４日）を通して記録した。統計解析は、パラメトリック及びノンパラメトリック法並びにＢｉｏｓｔａｔソフトウエアを使用して行われた。上のスキームにより０．１ｍｇ／ｋｇで投与されたニモジピンを標準とした。
【００３０】
死亡率の記録は、偽手術ラット群において死亡率は１４日目でたったの７％であったのに対し、出血性脳卒中を有する動物群において死亡率は６４％に達し、５６％を超える動物は最初の３日で死んだことを示した（表４）。ノウグルチルは、強力な正の有効性を示した。用量レベル２０ｍｇ／ｋｇでこの薬物は、観察期間を通してほぼ完全に動物の死を抑制した：２０％（２０匹中４匹）の動物が死んだ。化合物Ｉで処置された群において、１０％（２０匹中２匹）のみの動物が観察期間（１４日）を通して死んだ。ノウグルチルと対照的に化合物Ｉの投与は、脳卒中後第１日以内ですでに死亡率の有意な減少となった。これらの結果は、出血性脳卒中を経験した動物において、化合物Ｉａの高い保護活性を示唆する。
【００３１】
脳卒中−インデックススケールＭｃＧｒｏｗを使用する生存動物の神経状態の試験は、観察１日目で出血性脳卒中を有する動物群において重篤症状及び兆候は２０％の動物において観察されることを示す一方で、７日目でこのカテゴリーは５０％まで増加した（表５）。ノウグルチル及び化合物Ｉは、動物においてかなり神経学的欠損を減少させた。この効果は、１４日目で最も顕著となり、出血性脳卒中を有する動物のコントロール群において６０％のラットが重篤な神経症状を有した。ノウグルチル及び化合物Ｉの投与は、それぞれこの値を２５％及び１５％に減少させた。従って、化合物Ｉａは神経学的欠損の進行の過程において著しい有益な効果を示し、この効果はノウグルチルより優れていた。
【００３２】
ＰＡＲモデルを使用する動物における学習及び記憶プロセスの研究は、学習２４時間後の偽手術ラットによる反応の再生は、何もしない動物並びにノウグルチル及び化合物Ｉで処置又は非処置のいずれかの出血性脳卒中を有する動物による再生と有意な違いはないことを示した（表６）。７０〜８０％の動物は、暗いチャンバーにおける電気ショックを記憶し、再度暗いチャンバーに入らなかった。１４日目におけるＰＡＲの再生において、他の観察を行った。６５％の何もしないラット及び５７％の偽手術ラットは、記憶痕跡の保持を示す一方で、出血性脳卒中を経験したラットの８％のみが電気ショックを記憶した。用量レベル２０ｍｇ／ｋｇでのノウグルチル及び２０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｉでの処置は、ＨＳを有するラットにおいてそれぞれこの値を５倍及び６．５倍増加した、すなわち、記憶痕跡のより長い保持を促進した（表６）。両薬物は、暗い危険チャンバーに入るまでの潜伏時間を有意に短くした。ニモジピンは本モデルにおいてより弱い効果を証明した。
【００３３】
従って、本実験は、出血性脳卒中を有する動物の顕著な神経学的欠損、損傷した学習及び記憶プロセス、並びに死亡率を証明した。これは、観察１４日目による異常症状の悪化に付随した。ＨＳを有する動物群における症状の悪化課程及び死亡率は、手術後期間の特定の重要な日（３日目、７日目及び１４日目）に増強する生物体の代償反応の障害及び付随する合併症（浮腫、組織腫脹、乱された大脳の血行動態、高い頭蓋内圧及び脳内虚血）の発生を示しうる。
【００３４】
出血性脳卒中を生じてから３〜３．５時間以内の化合物Ｉの単回投与は、ラットの死亡率を抑制する著しい脳保護効果及びかなりの神経学的欠損の減弱、外傷後血腫−出血性脳卒中を有する動物の記憶改善を生じる。脳保護効果に関して、化合物Ｉはノウグルチルより優れている。
【００３５】
（実施例８）
加齢ラット（２４ヶ月齢）のラットにおける記憶障害及び神経学的欠損に対するＮ−ニコチノイルアミノ酸（化合物Ｉ）の塩及びノウグルチルの効果に関する研究
普通の白色雄性ラット（ウイスター系）：体重２５０〜３００ｇの３ヶ月齢成熟ラット及び体重３５０〜４５０ｇの２４ヶ月齢老齢動物を本研究に使用した。用量レベル２０ｍｇ／ｋｇのノウグルチル及び化合物Ｉを２ヶ月間加齢ラットに腹腔内投与し、続いて加齢及び神経学的欠損により傷害された学習能力における効果を評価した。スチューデントの検定を用いる分散分析、バリアントポイント法（ｖａｒｉａｎｔ  ｐｏｒｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ）及びＵ検定をデータ処理に用いた。
【００３６】
加齢ラットにおける記憶障害に対する化合物Ｉの影響。ラットにおける受動回避反応（ＰＡＲ）を発現させるために、Ｌａｆａｙｅｔｔｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏ．，（ＵＳＡ）（Ａｄｅｒら、「電気ショックの強度及び持続の関数としての受動回避反応の記憶（Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｐａｓｓｉｖｅ  ａｖｏｉｄａｎｃｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ａｓ  ａ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ  ａｎｄ  ｄｕｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｌｅｃｔｒｉｃ  ｓｈｏｃｋ）」Ｐｓｙｃｈｏ  Ｓｃｉ．１９７２、ｖ．２６、ｐ．１２５〜１２８；Ｖｏｒｏｎｉｎａ  Ｔ．Ａ．ら、「新規薬理学的化合物の実験（前臨床試験）のためのテキスト（Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｆｏｒ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ（Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｔｕｄｙ）ｏｆ  ｎｏｖｅｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ）」モスクワ、Ｍｅｄｉｃｉｎａ．２００５、ｐ．２５３〜２６３及び３０８〜３２０）により提供されるユニットを使用した。ユニットは、専用のランプで照らした、床から１ｍ上に位置する小プラットホーム及び電極床を備える暗いチャンバーとして設計した。ラットを暗いチャンバーの入口前の照らされたプラットホームに尾を入口に向けて配置し、続いて反応の潜伏時間、照らされたチャンバー内のラットの存在及び暗いチャンバーに入らなかった動物の数を記録した。照らされたチャンバーを好む動物は本実験に使用しなかった。暗いチャンバーにおいて、動物に電流（０．４５ｍＡ）で単回痛み刺激を与え、刺激の長さを暗いチャンバーから動物が走り出ることにより決定した。ＰＡＲ再生の試験は、学習２４時間後に実施されるはずであり：動物は繰り返しユニットに配置され、ラットが暗い実験チャンバーに最初に入るまでの潜伏時間及びチャンバーに入らなかった動物の数を記録する。
【００３７】
実験は、８０％のケースにおいて学習セッション２４時間後に反応を再生するコントロール３ヶ月齢マウスは暗いチャンバーに入らないか、又は長い潜伏時間で入ったことを示した（表７）。加齢２４ヶ月齢ラットの群において３０％のみの動物が学習反応を再生した；残りのラットは、記憶障害を示す短い潜伏時間で暗い危険チャンバーに入った。化合物Ｉで処置された加齢ラットは、６０％のケースで反応を再生した。ノウグルチルもまた、同様に明確な効果を示し、６０％のラットにおいて記憶痕跡の再生を改善した。さらに、化合物Ｉ及びノウグルチルは暗い危険チャンバーに入るまでの潜伏時間を有意に延長した。
【００３８】
加齢動物において神経学的欠損を評価するために（乱れた調整及び運動反応の学習能力）、ラットを回転ロッドに配置した。２分間回転ロッドを握る技能を得るために必要とされる試みの数を記録した。実験は、１００％の若い動物が５回の配置後に２分間回転する（０．５ｒｐｍ）ロッドを握ることを学習したことを示した（表８）。同様の条件下、２５％のみの加齢ラットが開始から１１〜１４回目の試みでこの技能を獲得した。これは、加齢ラットにおける神経状態の障害を示し、運動技能を学習するための能力の減少を示す。２ヶ月間ノウグルチルで処置された加齢ラットうちの６０％及び化合物Ｉで処置された加齢ラットのうちの６６％は、１０回目の試みで技能を学習した。５０％の動物に対して学習するために必要とされた試みの数の解析は、成熟ラットが最初の試みにより、加齢ラットが１７回目の試みにより、ノウグルチル処置した加齢動物が７回目の試みにより、化合物１ａ処置した動物が６回目の試みによりこの基準に達成することを示した。
【００３９】
従ってノウグルチル及び化合物Ｉは、２４ヶ月齢の老齢ラットを用いた実験において顕著な老化保護、記憶及び学習能力の改善、並びに神経学的欠損の減弱を示した。
【００４０】
（実施例９）
ＳＡＭマウスを用いる実験におけるＮ−ニコチノイルアミノ酸（化合物Ｉ）の塩の抗うつ活性に関する研究
体重２６〜３１ｇの普通の白色マウス及びＳＡＭ  Ｐ  １０マウス（Ｔａｋｅｄａ  Ｔ．ら、老化促進マウス（Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ−Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ  Ｍｏｕｓｅ）（ＳＡＭ）：「老化促進マウスの新規のネズミモデル（Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｕｒｉｎｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ  ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ）」、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｇｅｒｉａｔｒ．Ｓｏｃ．１９９１、ｖ．３９、ｐ．９１１〜９１９）は、１１ヶ月で老化の促進を示す。この系統に属する動物は、遺伝的に決定されるうつ及び学習能力の障害により特徴付けられ、６ヶ月齢から劇的に悪化が始まる（老化促進）（Ｍｉｙａｍｏｔｏ  Ｍ．、「老化促進マウスＳＡＭＰ８及びＳＡＭＰ１０における加齢関連行動変化の特徴（Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ  ｏｆ  ａｇｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ  ｃｈａｎｇｅｓ  ｉｎ  ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ−ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ  ｍｏｕｓｅ  ＳＡＭＰ８  ａｎｄ  ＳＡＭＰ１０）」Ｅｘｐ．Ｇｅｒｏｎｔｏｌｏｌ．１９９７、ｖ．３２、ｐ．１３９〜１４８；Ｓｈｉｍａｄａ  Ａ．ら、「自然発症脳萎縮の動物モデル、ＳＡＭ−Ｐ／１０マウスの条件付き回避課題における加齢関連性の悪化（Ａｇｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｄｅｔｅｒｉｏｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎａｌ  ａｖｏｉｄａｎｃｅ  ｔａｓｋ  ｉｎ  ｔｈｅ  ＳＡＭ−Ｐ／１０  ｍｏｕｓｅ，ａｎ  ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  ｂｒａｉｎ  ａｔｒｏｐｈｙ．）」Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．，１９９３、ｖ．６０８、ｐ．２６６〜２７２）。うつ状態を評価するために、強制水泳法を使用した（Ｐｏｒｓｏｌｔ  Ｒ．Ｄ．ら、「ラットにおける絶望行動：抗うつ処置に感受性の新規モデル（Ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ  ｄｅｓｐａｉｒ  ｉｎ  ｒａｔｓ：ａ  ｎｅｗ  ｍｏｄｅｌ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｔｏ  ａｎｔｉｄｅｐｒｅｓｓａｎｔ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．）」Ｅｕｒｏｐ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、１９７８、ｖ．４７、ｐ．３７０〜３９１）。マウスを直径１０ｃｍ、２５ｃｍの高さのシリンダーに配置した。シリンダーを１／３まで水（２７℃）で満たした。水から出ようとする試みに失敗した後、動物は、典型的な無動の態度を取り、これは「絶望」の現れと見なされる。水に浸水後最初の６分以内に水から出ようとする動物の積極的な試みすべての時間を記録する。メカニズムに関わらず抗うつ剤の影響下では、動物はより積極的になり、無動時間を減少させる。
【００４１】
本実験は、ＳＡＭマウスが普通の動物に比べかなり積極的ではなく、すなわち、これら動物の積極的な水泳期間は有意に短い（表９）ことを示した。用いた方法によると、これはより顕著なＳＡＭマウスのうつ様状態を示す。すべての試験用量（５、１０、及び２０ｍｇ／ｋｇ）の化合物は、マウスの積極的行動の時間を延長した。この効果は用量２０ｍｇ／ｋｇで最も顕著であった（Ｐ≦０．０３）。得られた結果は化合物Ｉの抗うつ活性を示す。化合物Ｉａの効果はアミトリプチリンに匹敵する。
【００４２】
（実施例１０）
ＳＡＭＰ１０マウスの実験における化合物Ｉの抗不安活性に関する研究
体重２６〜３１ｇの普通の白色マウス及びＳＡＭ  Ｐ  １０マウスは１１ヶ月で老化促進を示す（Ｔａｋｅｄａ  Ｔ．ら、老化促進マウス（Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ−Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ  Ｍｏｕｓｅ）（ＳＡＭ）：「老化促進マウスの新規のネズミモデル（Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｕｒｉｎｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ  ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ）」、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｇｅｒｉａｔｒ．Ｓｏｃ．１９９１、ｖ．３９、ｐ．９１１〜９１９）。この系統に属する動物は、遺伝的に決定されるうつ及び学習能力の障害により特徴付けられ、これらの症状は６ヶ月齢から劇的に悪化が始まる（老化促進）（Ｍｉｙａｍｏｔｏ  Ｍ．、「老化促進マウスＳＡＭＰ８及びＳＡＭＰ１０における加齢関連行動変化の特徴（Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ  ｏｆ  ａｇｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ  ｃｈａｎｇｅｓ  ｉｎ  ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ−ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ  ｍｏｕｓｅ  ＳＡＭＰ８  ａｎｄ  ＳＡＭＰ１０）」Ｅｘｐ．Ｇｅｒｏｎｔｏｌｏｌ．１９９７、ｖ．３２、ｐ．１３９〜１４８；Ｓｈｉｍａｄａ  Ａ．ら、「自然発症脳萎縮の動物モデル、ＳＡＭ−Ｐ／１０マウスの条件付き回避課題における加齢関連性の悪化（Ａｇｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｄｅｔｅｒｉｏｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎａｌ  ａｖｏｉｄａｎｃｅ  ｔａｓｋ  ｉｎ  ｔｈｅ  ＳＡＭ−Ｐ／１０  ｍｏｕｓｅ，ａｎ  ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  ｂｒａｉｎ  ａｔｒｏｐｈｙ．）」Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．，１９９３、ｖ．６０８、ｐ．２６６〜２７２）。マウスの不安レベルの評価を「高いクリス−クロスラビリンス（ｅｌｅｖａｔｅｄ  ｃｒｉｓｓ−ｃｒｏｓｓ  ｌａｂｙｒｉｎｔｈ）」（ＥＣＣＬ）法の条件下実施した（Ｐｅｌｌｏｗ  Ｓ．ら、Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｏｐｅｎ：ｃｌｏｓｅｄ  ａｒｍ  ｅｎｔｒｉｅｓ  ｉｎ  ｅｌｅｖａｔｅｄ  ｐｌｕｓ−ｍａｚｅ  ａｓ  ａ  ｍｅａｓｕｒｅ  ｏｆ  ａｎｘｉｅｔｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈ  Ｊ．１９８５、Ｎｏ１４、ｐ．１４９〜１６７；Ｖｏｒｏｎｉｎａ  Ｔ．Ａ．ら、「新規薬理学的化合物の実験（前臨床試験）のためのテキスト（Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｆｏｒ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ（Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｔｕｄｙ）ｏｆ  ｎｏｖｅｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ）」モスクワ、Ｍｅｄｉｃｉｎａ。２００５、ｐ．３０８〜３２０）。ラビリンスは、３０ｃｍの垂直壁（クローズド、ダークアーム）を有する２つの向かい合ったコンパートメントで交差したバンド（５×４５ｃｍ）を含み、他の２つのコンパートメントはオープン、ライトアームである。ラビリンスは床から上３０ｃｍに位置する。中央プラットホーム５０×５０ｃｍは、面の交差に位置づけられる。マウスを、尾をライトアーム向けて中央プラットホームに配置した。オープン及びクローズドアームにおいて動物が費やした時間及びライト及びダークアームに入る数を記録した。総観察時間は、各動物で５分を有した。ユニットのオープンアームで費やされた時間を抗不安効果の測定値と見なした。
【００４３】
実験は、コントロール動物がラビリンスのクローズドアームで５分の観察期間の大部分を費やしたことを示した。すべての試験用量（５、１０、及び２０ｍｇ／ｋｇ）の化合物Ｉは、ラビリンスのオープン未保護のアームで費やした動物の行動−時間の主要測定値を増加させた。用量１０及び２０ｍｇ／ｋｇの効果は、統計的に有意であった（表１０）。最も高い効果は２０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｉで観察された。得られた結果は、化合物Ｉが高いクリス−クロスラビリンスモデルにおいて抗不安効果を生じることを示す。
【００４４】
（実施例１１）
マウスの実験におけるＮ−ニコチノイルアミノ酸（化合物Ｉ）の塩の急性の日常的な毒性に関する研究
化合物１ａの急性の日常的な毒性に関する研究を、動物施設の常用条件で餌及び制約なしに水を与えられ生活した体重２５〜２８ｇの普通の白色雄性マウスで実施した。化合物１の単回用量を腹腔内投与した。動物を投薬から２日間観察した。毒性試験に使用された化合物Ｉの用量レベルは以下のようであった：８００ｍｇ／ｋｇ、１０００ｍｇ／ｋｇ、１２００ｍｇ／ｋｇ、１５００ｍｇ／ｋｇ、１６００ｍｇ／ｋｇ。化合物Ｉを蒸留水に溶解し、用量が８００ｍｇ／ｋｇ及び１０００ｍｇ／ｋｇの場合、動物の体重１０ｇあたり０．１ｍｌ投与し、用量が１２００ｍｇ／ｋｇ、１５００ｍｇ／ｋｇ及び１６００ｍｇ／ｋｇの場合、動物の体重１０ｇあたり０．２ｍｌを使用した。コントロール動物は、蒸留水を体重１０ｇあたり容量０．２ｍｌで与えられた。
【００４５】
各用量群は、１０匹の動物を含んだ。体重１０ｇあたり０．２ｍｌの蒸留水を与えられたコントロール動物において死亡は観察されなかった。化合物Ｉで処置された動物で得られた結果は、表１１に示す。
【００４６】
本実験は、１０００ｍｇ／ｋｇ、１２００ｍｇ／ｋｇ、１５００ｍｇ／ｋｇ及び１６００ｍｇ／ｋｇで化合物Ｉが観察４８時間以内でマウスにおいて２０％、６０％、９０％及び９０％の死亡率を引き起こすことを示した。化合物ＩのＬＤ５０（５０％の動物を殺す用量）は、１１５０（１１１０±１１９６）ｍｇ／ｋｇを有する。ノウグルチルのＬＤ５０は、１２００（１０９０±１３２０）ｍｇ／ｋｇである。従って、ノウグルチル及び化合物Ｉは、同様な毒性を有する。
【００４７】
結論
Ｎ−オキシニコチノイルグルタミン酸の塩は顕著な抗健忘及び抗低酸素活性を示すことが見出された。化合物Ｉは効果に関して最も効果的であり、これは向知性及び神経プロテクターに関して重要である。化合物Ｉの抗健忘及び抗低酸素効果は５〜１２０ｍｇ／ｋｇの用量内で観察され、ノウグルチルより優れている。
【００４８】
化合物Ｉは、虚血性及び出血性脳卒中実験モデル、ラットの死亡率の抑制、神経学的欠損の減弱並びに記憶及び学習プロセスの改善において注目すべき脳保護効果を示した。化合物Ｉの脳保護効果は、ノウグルチルと比べより顕著により低用量で観察される。化合物Ｉは加齢動物に投与された場合、効果的であり：記憶及び運動機能を改善する。
【００４９】
化合物Ｉの薬理学的スペクトルにおける抗うつ及び抗不安効果の存在は、ノウグルチルに勝る化合物Ｉの重要な利点である。これらの効果は、強制水泳試験におけるうつ様状態モデル及び高いクリス−クロスラビリンスでの試験における不安モデルにおいて明らかにされうる。化合物Ｉはまた、脳卒中により傷害された脳領域元に戻す能力により示される神経保護効果並びに神経学的欠損、認知機能及び身体能力の改善により特徴付けられる老化保護効果を生じる。
表１．Ｎ−ニコチノイルグルタミニン酸（化合物Ｉ〜ＩＩＩ）の塩及びノウグルチルの抗低酸素効果
【表１】
2009545589.tif 000003
＊コントロール及び実験群間の有意差、Ｐ＜０．０５（マン−ホイットニーＵ検定）
表２．Ｎ−ニコチノイルグルタミニン酸（化合物Ｉ〜ＩＩＩ）の塩及びノウグルチルの抗健忘効果
【表２】
2009545589.tif 000004
＊健忘を伴うコントロール及び健忘を伴わないコントロール間の有意差、Ｐ＜０．０５；
＊＊健忘を伴うコントロール及び試験化合物の効果の間の有意差、Ｐ＜０．０５（マン−ホイットニーＵ検定）
表３．重篤な皮質虚血モデルにおける大脳皮質の虚血性損傷の強度（スライススコア、ポイント）に対するＮ−ニコチノイルグルタミニン酸（化合物Ｉ）の塩及びノウグルチルの効果
【表３】
2009545589.tif 000005
＊ｐ＜０．０５（スチューデント検定）
表４．出血性脳卒中を経験した動物の生存率におけるＮ−ニコチノイルグルタミニン酸（化合物Ｉ）の塩及びノウグルチルの効果
【表４】
2009545589.tif 000006
偽手術動物群及び出血性脳卒中を有する動物群間の有意差、＊Ｐ≦０．００１（χ２）；出血性脳卒中を有する動物のコントロール群及びＨＳで処置した動物群間の有意差、＃Ｐ≦０．０１（χ２）；＃＃Ｐ≦０．００１（χ２）
表５．出血性脳卒中後のラットにおける神経学的欠損に対するＮ−ニコチノイルグルタミニン酸（化合物Ｉ）の塩及びノウグルチルの効果（ＭｃＧｒｏｗスケール）
【表５】
2009545589.tif 000007
＊出血性脳卒中を有するラット（コントロール）及び処置動物間の有意差、Ｐ≦０．００１（χ２）
表６．出血性脳卒中を有するラットによる学習２４時間及び１４日後の受動回避反応の再生に対するＮ−ニコチノイルグルタミニン酸（化合物Ｉ）の塩及びノウグルチルの効果
【表６】
2009545589.tif 000008
偽手術動物及び出血性脳卒中を有する動物群間の有意差：＊＊Ｐ≦０．０１（マン−ホイットニーＵ検定）、＊Ｐ≦０．００１（χ２）；出血性脳卒中を有する動物群及びＨＳで処置した動物間の有意差：＄Ｐ≦０．０５；＄＄Ｐ≦０．００１（χ２）
表７．加齢ラット（２４ヶ月）による受動回避反応の再生に対するＮ−ニコチノイルグルタミニン酸（化合物Ｉ）の塩及びノウグルチルの効果
【表７】
2009545589.tif 000009
＊若齢及び加齢ラット群間の有意差、Ｐ≦０．０５（マン−ホイットニーＵ検定）、∧Ｐ≦０．０５（χ２）
＃  コントロールラット群及び処置動物群間の有意差、Ｐ≦０．０５（χ２）
表８．回転ロッドによる実験における加齢ラット（２４ヶ月）の運動調整におけるＮ−ニコチノイルグルタミニン酸（化合物Ｉ）の塩及びノウグルチルの効果
【表８】
2009545589.tif 000010
＊若齢及び加齢動物群間の有意差、Ｐ≦０．０５
＃  コントロール加齢ラット及び処置加齢ラット群間の有意差、Ｐ≦０．０５（χ２）
表９．ＳＡＭマウスでの実験における化合物Ｉの抗うつ活性に関する研究
【表９】
2009545589.tif 000011
＊普通のマウス及びＳＡＭマウス間の有意差、Ｐ≦０．０５（スチューデント検定）
＃  コントロールＳＡＭ群及び処置ＳＡＭ群間の有意差、Ｐ≦０．０５（スチューデント検定）
表１０．高いクリス−クロスラビリンス条件下ＳＡＭ  Ｐ  １０マウスでの実験における化合物Ｉの抗不安活性に関する研究
【表１０】
2009545589.tif 000012
＊マウスのコントロール群及び処置マウス群間の有意差、Ｐ≦０．０５（スチューデント検定）
表１１．化合物Ｉの急性毒性
【表１１】
2009545589.tif 000013
【国際調査報告】
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