(57)【要約】  本発明は、非天然デスアミノアミノ酸化合物、作成方法、およびそれらのＮ末端部分としてこれらの化合物を含有するペプチドに関する。好ましい一例は、Ｎ末端がαデスアミノＮ，Ｎジメチルホモリシン残基であるニューロテンシン（８−１３）である。
2009519945.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ若しくはＩＶよりなる群から選択される式で表される非天然のデスアミノアルキルアミノ酸化物：
（ａ）式Ｉは
【化１】
2009519945.tif 000042
であり、かつ、式中
ｎは０から５までの整数であり；
ｍは０若しくは１の整数であり；
ＲはＨであり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立して、水素、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の分枝状若しくは直鎖アルキル、アルケニル若しくはアルキニル、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基であり、かつ、但し、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の最大２個が、芳香族、置換芳香族、ヘテロ芳香族若しくは置換ヘテロ芳香族基であるように選択されることができ、また、但し、ｍが０若しくは１でありかつｎが０ないし５である場合に、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が全部Ｈではなく；
そして、ＣαはＲ若しくはＳいずれかの立体化学を有する炭素原子であり；
あるいは、そのカルボン酸基のエステル、アミド、アルキルアミドまたは金属陽イオン若しくはアンモニウム塩、あるいはそのアミン基の有機若しくは無機酸塩、あるいはそれらのいずれかの組合せであり；
（ｂ）式ＩＩは
【化２】
2009519945.tif 000043
でありかつ、式中、
ｎは０から６までの整数であり；
破線ａが存在しない場合、ＸおよびＹは、独立して、水素、またはＣ１−Ｃ６の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、アルケニル若しくはアルキニルであり；
破線ａが存在する場合、Ｘ−Ｙは（ＣＨ２）Ｚであり、式中Ｚは１−８からの整数であり；
ＲはＨであり；
Ｒ４は、水素、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、アルケニル若しくはアルキニル、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基であり、そして；
Ｃαは炭素原子でありかつＣαの立体化学はＲ若しくはＳいずれかであり；
あるいは、そのカルボン酸基のエステル、アミド、アルキルアミドまたは金属陽イオン若しくはアンモニウム塩、あるいはそのアミン基の有機若しくは無機酸塩、あるいはそれらのいずれかの組合せであり；
（ｃ）式ＩＩＩは
【化３】
2009519945.tif 000044
でありかつ、式中、
ｎは０から５までの整数であり；
Ｘ−Ｙは（ＣＨ２）Ｚであり、式中ｚは０から６までの整数であり；
ＲはＨであり；
Ｒ６およびＲ７は、独立して、水素、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、アルケニル若しくはアルキニル、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基であり；そして
Ｃαは炭素原子でありかつＣαの立体化学はＲ若しくはＳいずれかであり；
あるいは、そのカルボン酸基のエステル、アミド、アルキルアミドまたは金属陽イオン若しくはアンモニウム塩、あるいはそのアミン基の有機若しくは無機酸塩、あるいはそれらのいずれかの組合せであり；
（ｄ）式ＩＶは、
【化４】
2009519945.tif 000045
でありかつ、式中
ｎは０から５までの整数であり；
ＲはＨであり；
Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、水素、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、アルケニル若しくはアルキニル、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基であり、かつ、但し、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１の最大２個が、芳香族、置換芳香族、ヘテロ芳香族若しくは置換ヘテロ芳香族基であるように選択されることができ；そして
Ｃαは炭素原子でありかつＣαの立体化学はＲ若しくはＳいずれかであり；
あるいは、そのカルボン酸基のエステル、アミド、アルキルアミドまたは金属陽イオン若しくはアンモニウム塩、あるいはそのアミン基の有機若しくは無機酸塩、あるいはそれらのいずれかの組合せであり；
さらに、
（ｅ）式Ｖは：
【化５】
2009519945.tif 000046
でありかつ、式中
ｎは０から５までの整数であり；
Ｒは、Ｈ、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の直鎖若しくは分枝状鎖アルキル基、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基のような有機置換基であり；そして
Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４は、独立して、水素、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、アルケニル若しくはアルキニル、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基であり、かつ、但し、Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４の最大２個が、芳香族、置換芳香族、ヘテロ芳香族若しくは置換ヘテロ芳香族基であるように選択されることができ；
あるいは、そのカルボン酸基のエステル、アミド、アルキルアミドまたは金属陽イオン若しくはアンモニウム塩、あるいはそのアミン基の有機若しくは無機酸塩、あるいはそれらのいずれかの組合せである。
【請求項２】
化合物が式Ｖの構造を有する場合にはＣαの立体化学がＳである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が、独立して、水素若しくはメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
（ａ）化合物が式Ｉのものである場合にはｎが２から５までの整数であり；（ｂ）化合物が式ＩＩ若しくはＩＩＩのものである場合には、ｎが２から５までの整数であり、かつ、Ｚが２から４までの整数であり；そして（ｃ）化合物が式ＩＶのものである場合には、ｎが２から４までの整数である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
側鎖アミノ基、側鎖カルボキシル基、若しくは側鎖アミノ基およびカルボキシル基双方が、アミノ基、カルボキシル基若しくは双方の基の望ましくない反応を予防しかつ他の基の切断もまた引き起こさない化学的方法により除去可能であるそれぞれの保護基により保護されている、請求項１、２、３若しくは４に記載の化合物。
【請求項６】
保護基が、ＢＯＣ（ｔ−ブトキシカルボニル）、ＦＭＯＣ（フルオレニルメトキシカルボニル）、Ａｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）、ＣＢＺ（ベンジルオキシカルボニル）、Ｐｂｆ（２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル）、ＮＯ２（ニトロ）、Ｐｍｃ（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル）、Ｍｔｒ（４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル）若しくはＴｏｓ（トシル）である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
請求項１、２、３、４、５若しくは６に記載の非天然アミノ酸化合物を含んでなる半合成ペプチド。
【請求項８】
非天然アミノ酸化合物が半合成ペプチドのＮ末端部分である、請求項７に記載の半合成ペプチド。
【請求項９】
半合成ペプチドが、（ｉ）ニューロテンシン（８−１３）、（ｉｉ）転写因子、（ｉｉｉ）細胞受容体のリガンド、（ｉｖ）ホルモン、（ｖ）細胞外結合ペプチド、（ｖｉ）オフェンケフリン（ｏｆｅｎｋｅｐｈｌｉｎ）、（ｖｉｉ）ＬＨＲＨ若しくはそのアナログ、（ｖｉｉｉ）ニューロペプチド、（ｉｘ）グリコインクレチン、（ｘ）インテグリン若しくはそのアナログ、（ｘｉ）グルカゴン、（ｘｉｉ）グルカゴン様ペプチド、（ｘｉｉｉ）抗血栓ペプチド、（ｘｉｖ）サイトカイン、（ｘｖ）インターロイキン、（ｘｖｉ）トランスフェリン、（ｘｖｉｉ）インターフェロン、（ｘｖｉｉｉ）エンドセリン、（ｘｉｘ）ナトリウム利尿ホルモン、（ｘｘ）細胞外キナーゼリガンド、（ｘｘｉ）アンジオテンシン酵素阻害剤、（ｘｘｉｉ）ペプチド性抗ウイルス化合物、（ｘｘｉｉｉ）トロンビン、（ｘｘｉｖ）サブスタンスＰ、（ｘｘｖ）サブスタンスＧ、（ｘｘｖｉ）ソマトトロピン、（ｘｘｖｉｉ）ソマトスタチン、（ｘｘｖｉｉｉ）ＧｎＲＨ若しくはそのアナログ、（ｘｘｉｘ）セクレチン、（ｘｘｘ）ブラジキニン、（ｘｘｘｉ）バソプレッシン若しくはそのアナログ、（ｘｘｘｉｉ）インスリン若しくはそのアナログ、（ｘｘｘｉｉｉ）プロインスリン、または（ｘｘｘｉｖ）成長因子の半合成ペプチドである、請求項８に記載の半合成ペプチド。
【請求項１０】
ＡＢＳ２０５、ＡＢＳ２０７、ＡＢＳ２０８、ＡＢＳ２１０、ＡＢＳ２１１、ＡＢＳ２１２、ＡＢＳ２２０、ＡＢＳ２２５、ＡＢＳ２２６、ＡＢＳ２２７、ＡＢＳ２２８、ＡＢＳ２３０、ＡＢＳ２３２、ＡＢＳ２３４若しくはＡＢＳ２３９である、請求項９に記載の半合成ペプチド。
【請求項１１】
半合成ペプチドが、該半合成ペプチドと同一のアミノ酸配列を有するがしかしそのＮ末端部分として置換された非天然アミノ酸化合物を有しないペプチドと比較した場合に、ｉｎ  ｖｉｖｏおよび／若しくはｉｎ  ｖｉｔｒｏで延長された半減期を有する、請求項７、８、９若しくは１０に記載の半合成ペプチド。
【請求項１２】
請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載のペプチドおよび製薬学的担体を含んでなる製薬学的組成物。
【請求項１３】
ペプチドが単位投薬形態物にある、請求項２１に記載の製薬学的組成物。
【請求項１４】
化粧品用基剤製剤、および（ａ）請求項１、２、３、４、５若しくは６に記載のデスアミノアルキルアミノ酸化合物；または（ｂ）請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載のペプチドを含んでなる化粧品用製剤。
【請求項１５】
化粧品用基剤製剤が水性若しくは油性基剤である、請求項１４に記載の化粧品用製剤。
【請求項１６】
医学的治療での使用のための、請求項１、２、３、４、５若しくは６に記載の化合物、または請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載のペプチド。
【請求項１７】
哺乳動物における精神病、疼痛、癌、肥満、糖尿病若しくは覚醒剤濫用を処置するのに有用な医薬品の製造のための、請求項１、２、３、４、５若しくは６に記載の化合物または請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載のペプチドの使用。
【請求項１８】
精神病が統合失調症である、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
患者の体温を低下させるように、（ａ）有効量の請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載のペプチド、または（ｂ）有効量の請求項１２若しくは１３に記載の組成物を患者に投与することを含んでなる、患者の体温の低下方法。
【請求項２０】
癌を処置するように、（ａ）有効量の請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載のペプチド、または（ｂ）有効量の請求項１２若しくは１３に記載の組成物を患者に投与することを含んでなる、癌の処置方法。
【請求項２１】
疼痛を処置するように、（ａ）有効量の請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載のペプチド、または（ｂ）有効量の請求項１２若しくは１３に記載の組成物を患者に投与することを含んでなる、疼痛の処置方法。
【請求項２２】
疼痛が神経因性疼痛である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
精神病を処置するように、（ａ）有効量の請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載のペプチド、または（ｂ）有効量の請求項１２若しくは１３に記載の組成物を患者に投与することを含んでなる、精神病を伴う患者の処置方法。。
【請求項２４】
肥満を処置するように、（ａ）有効量の請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載のペプチド、または（ｂ）有効量の請求項１２若しくは１３に記載の組成物を患者に投与することを含んでなる、肥満の処置方法。
【請求項２５】
ａ）既知のアミノ酸配列を有する第一のペプチドの生物学的活性を測定する段階（該第一のペプチドは非天然アミノ酸化合物を有さず）；および
ｂ）請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載の半合成ペプチドの同一の生物学的活性を測定する段階（該半合成ペプチドは第一のペプチドと同一のアミノ酸配列を有するか、若しくは第一のペプチドの切断型バージョンである）
を含んでなる、非天然アミノ酸化合物を含有するペプチドの活性についてのスクリーニング方法。
【請求項２６】
生物学的活性が、選択性、ポトーシス（ｐｏｐｔｏｓｉｓ）、アポトーシス、細胞シグナリング、リガンド結合、転写、翻訳、代謝、細胞成長、細胞分化、恒常性、半減期、溶解性、輸送若しくは安定性である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
生物学的活性が、生物学的障壁を通過する半合成ペプチドの能力の直接若しくは間接的評価を包含する、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載の半合成ペプチドを患者に投与することを含んでなり、該半合成ペプチドは、非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドと同一の配列を有するか、若しくは非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドの切断型バージョンである、既知の第一のペプチドの患者への投与により影響を及ぼされる疾患を伴う患者の処置方法。
【請求項２９】
疾患が脳の疾患であるか、若しくは既知の第一のペプチドが身体障壁を横断する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載の半合成ペプチドを既知のペプチドの代わりに用いることを含んでなり、該半合成ペプチドは、非天然アミノ酸化合物を除き、既知のペプチドと同一の配列を有するか若しくは既知のペプチドの切断型バージョンである、生物学的障壁を横断する既知のペプチドの能力の増大、既知のペプチドの選択性の増大、若しくはペプチダーゼによる消化に対する既知のペプチドの抵抗性の増大方法。
【請求項３１】
障壁が、血液脳関門、細胞膜、腸上皮、皮膚若しくは血液眼を含んでなる、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
障壁が血液脳関門である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
請求項７、８、９、１０若しくは１１に記載の半合成ペプチドを既知のペプチドの代わりに用いることを含んでなり、該半合成ペプチドは、非天然アミノ酸化合物を除き、第一のペプチドと同一の配列を有するか若しくは第一のペプチドの切断型バージョンである、ｉｎ  ｖｉｖｏで延長された半減期をもつ半合成ペプチドの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本特許文書は、２００５年１２月１６日出願の米国仮出願第６０／７５１，１６５号；２００６年６月１６日出願の米国仮出願第６０／８１４，２４０号；および２００６年６月１６日出願の米国仮出願第６０／８１４，３５５号（それらの全部は引用することにより本明細書に組み込まれる）に対する優先権の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
数種の非天然アミノ酸がペプチドの構造的および生物学的活性に対し有する影響は簡潔に研究された。例えば、Ｍｏｏｒｅら（非特許文献１）は、カルボキシリックペプチダーゼ（ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃｐｅｐｔｉｄａｓｅ）Ｂ１（ＣＰＢ）によるベンゾイルジペプチドの加水分解に対する塩基性アミノ酸側鎖の長さおよび最後から２番目の残基の影響を開示した。ホモリシンおよびホモアルギニンを包含する非天然アミノ酸を小型ペプチド鎖に組み込み、そして該ペプチドのＣＰＢに触媒される加水分解について動態パラメータを測定した。また、Ｌｉｎｄｅｂｅｒｇら（非特許文献２）は、非天然アミノ酸を組み込んだ１−デアミノ−４−Ｌ−バリン−８−ＤＬ−ホモリシン−バソプレッシンおよび保護された１−デアミノ−４−Ｌ−バリン−８−Ｄ−リシン−バソプレッシンの合成を開示した。非天然アミノ酸は、それぞれ非天然アミノ酸ホモリシンおよびホモアルギニンを生成するためのリシンおよびアルギニンへのメチレン基の付加により形成した。該研究は、ホモリシンおよびホモアルギニンをもつペプチドが該ペプチドの抗利尿活性を低下させたことを示した。
【０００３】
天然に存在する内因性ペプチドは、生物学的過程を促進および調節することにおけるそれらの無数の活性のおかげで理想的な薬物候補リードである。しかしながら、それらを不十分な薬物候補にもまたするいくつかの因子はペプチドの化学および生物学に固有である。ペプチドは、最もしばしば、限局性の効果を発揮しかつ体内で迅速に分解される。加えて、大多数のペプチドは、小腸および血液脳関門（ＢＢＢ）を包含する生物学的膜を横断することが不可能である。最後に、ペプチドはしばしば１種以上の受容体若しくは受容体サブタイプに結合し、従って実現可能な薬物候補の必要とされる選択性をまれに示す。従って、ペプチドが実現可能な薬物候補となるために、固有の結合アフィニティーを除去することなく、血液安定性、受容体選択性および障壁横断の改良がなされるべきである。
【０００４】
エキソペプチダーゼ活性を予防するためのＮおよびＣ末端修飾、アミドバックボーン修飾、ならびにペプチダーゼ分解からペプチドを隠すためのコンホメーションの制約の導入を包含する多数の戦略が、ペプチド安定性の改良方法として開発された。他の治療的化合物は、その全体的疎水性を改変することを意図しているプロドラッグ部分を使用し、それは生物学的膜を横断する化合物をもたらし得る。この場合、化合物は内因性酵素によりその活性成分に切断される。これらの戦略のそれぞれはペプチドを薬物候補として改良するために使用されている一方、生物学的障壁を横断する安定な受容体選択的ペプチドを創製するための普遍的解決策は発見されていない。
【０００５】
結果として、例えば改良された診断的若しくは疾患と闘う活性のような優れた効果を達成するためにこうした酸を組み込む非天然のアミノ酸およびペプチドに対する当該技術分野での必要性が存在する。従って、非天然アミノ酸の概念は、新たなペプチド医薬品の開発に応用し得る。こうした開発の一例はニューロテンシンのようなニューロペプチドへの応用である。ニューロテンシン（ＮＴ）は主に脳で見出される１３アミノ酸残基のペプチドである。それは２種のニューロテンシン受容体（ＮＴＲ）、ＮＴＲ−１およびＮＴＲ−２の結合および活性化により明示される多機能的活性を有する（非特許文献３を参照され
たい）。ＮＴの完全な活性はそのＣ末端の６アミノ酸配列（ＮＨ２−Ａｒｇ（８）−Ａｒｇ（９）−Ｐｒｏ（１０）−Ｔｒｙ（１１）−Ｉｌｅ（１２）−Ｌｅｕ（１３）−ＣＯＯＨ、ＮＴ［８−１３］と呼称される、非特許文献４を参照されたい）に存するとは言え、該Ｃ末端の６アミノ酸配列は、血液中でのその不安定性、ならびに血液脳関門および／若しくは腸関門を横断することの不能により、ＩＰ若しくは経口で投与される場合に活性を有しない。
【非特許文献１】Ｃａｎ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９７８、５６、３１５
【非特許文献２】Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．１９７７、１０、２４０
【非特許文献３】ＣａｒｒａｗａｙとＬｅｅｍａｎ、Ｊ．ｏｆ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２４８：６８５４（１９７３）
【非特許文献４】ＣａｒｒａｗａｙとＬｅｅｍａｎ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５０：１９０７（１９７５）
【発明の開示】
【０００６】
［発明の要約］
本発明は、正に荷電した側鎖を保有することが可能であるα−デスアミノアミノ酸化合物（デスアミノアミノ酸化合物）、それらの合成、生物学的に活性のペプチドの天然のアミノ酸部分の代替物としてのそれらの応用、および、同様に、生じるペプチドに関する。とりわけ、α−デスアミノアルギニン、リシンおよびオルニチン、ならびにそれらの置換および誘導体化した側鎖アナログが本発明の好ましい態様を構成する。これらのデスアミノアミノ酸化合物は、置換されたペプチドが置換位置で切断されることができるような、いずれかの既知の生物学的に活性のペプチドのアルギニンおよび／若しくはリシン部分の代わりに用いることができる。あるいは、これらのデスアミノアミノ酸化合物は、いずれかの既知の生物学的に活性のペプチドのＮ末端のアミノ基にカップリングして伸長されたペプチドを生じ得る。切断型および伸長型ペプチドは、アミノペプチダーゼ分解に対するそれらの抵抗性のおかげで、有意の生物学的選択性および生物学的半減期を有する。
【０００７】
第一のアスペクトにおいて、本発明は、式Ｉ：
【０００８】
【化１】
2009519945.tif 000003
【０００９】
式中
ｎは０から５まで、好ましくは２ないし５の整数であり；
ｍは０若しくは１の整数であり；
ＲはＨ、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の直鎖若しくは分枝状鎖アルキル基、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基のような有機置換基であり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立して、水素、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の分枝状若しくは直鎖
アルキル、アルケニル若しくはアルキニル、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基であり、かつ、但し、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の最大２個が、芳香族、置換芳香族、ヘテロ芳香族若しくは置換ヘテロ芳香族基であるように選択されることができ、また、但し、ｍが０若しくは１でありかつｎが０ないし５である場合は、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が全部Ｈではなく；
Ｃαは、Ｒの置換基が有機置換基である場合にＲ若しくはＳいずれかの立体化学を有する炭素原子であり；
あるいは、そのカルボン酸基のエステル、アミド、アルキルアミドまたは金属陽イオン若しくはアンモニウム塩、あるいはそのアミン基の有機若しくは無機酸塩、あるいはそれらのいずれかの組合せ
を有する非天然のデスアミノアミノ酸化合物に関する。
【００１０】
第二のアスペクトにおいて、本発明は、式ＩＩ：
【００１１】
【化２】
2009519945.tif 000004
【００１２】
式中、
ｎは０から６まで、好ましくは２ないし５の整数であり；
破線ａが存在しない場合、ＸおよびＹは独立して水素、またはＣ１−Ｃ６の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、アルケニル若しくはアルキニルであり；
破線ａが存在する場合、Ｘ−Ｙは（ＣＨ２）Ｚであり、式中Ｚは１−８から、好ましくは２ないし４の整数であり；
Ｒは、Ｈ、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の直鎖若しくは分枝状鎖アルキル基、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基のような有機置換基であり；
Ｒ４は、水素、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、アルケニル若しくはアルキニル、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基であり、ならびに；
Ｃαは炭素原子であり、かつ、Ｒの置換基が有機置換基である場合、Ｃαの立体化学はＲ若しくはＳいずれかであり；
あるいは、そのカルボン酸基のエステル、アミド、アルキルアミドまたは金属陽イオン若しくはアンモニウム塩、あるいはそのアミン基の有機若しくは無機酸塩、あるいはそれらのいずれかの組合せ
の非天然のデスアミノアミノ酸化合物に関する。
【００１３】
本発明の第三のアスペクトは、式ＩＩＩ：
【００１４】
【化３】
2009519945.tif 000005
【００１５】
式中、
ｎは０から５まで、好ましくは２ないし５の整数であり；
Ｘ−Ｙは（ＣＨ２）Ｚであり、式中ｚは０から６まで、好ましくは２ないし４の整数であり；
ＲはＨ、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の直鎖若しくは分枝状鎖アルキル基、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基のような有機置換基であり；
Ｒ６およびＲ７は、独立して、水素、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、アルケニル若しくはアルキニル、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基であり；ならびに
Ｃαは炭素原子であり、かつ、Ｒの置換基が有機置換基である場合、Ｃαの立体化学はＲ若しくはＳいずれかであり；
あるいは、そのカルボン酸基のエステル、アミド、アルキルアミドまたは金属陽イオン若しくはアンモニウム塩、あるいはそのアミン基の有機若しくは無機酸塩、あるいはそれらのいずれかの組合せ
の非天然のデスアミノアミノ酸化合物に関する。
【００１６】
本発明の第四のアスペクトは、式ＩＶ：
【００１７】
【化４】
2009519945.tif 000006
【００１８】
式中
ｎは０から５まで、好ましくは２ないし４の整数であり；
ＲはＨ、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の直鎖若しくは分枝状鎖アルキル基、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基のような有機置換基であり；
Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、水素、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、アルケニル若しくはアルキニル、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基であり、かつ、但し、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１の最大２個が、芳香族、置換芳香族、ヘテロ芳香族若しくは置換ヘテロ芳香族基であるように選択されることができ；ならびに
Ｃαは炭素原子であり、かつ、Ｒの置換基が有機置換基である場合、Ｃαの立体化学はＲ若しくはＳいずれかであり；
あるいは、そのカルボン酸基のエステル、アミド、アルキルアミドまたは金属陽イオン若しくはアンモニウム塩、あるいはそのアミン基の有機若しくは無機酸塩、あるいはそれらのいずれかの組合せ
の非天然のデスアミノアミノ酸化合物に関する。
【００１９】
本発明の第五のアスペクトは、式Ｖ：
【００２０】
【化５】
2009519945.tif 000007
【００２１】
式中
ｎは０から５まで、好ましくは２ないし４の整数であり；
Ｒは、Ｈ、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の直鎖若しくは分枝状鎖アルキル基、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基のような有機置換基であり；
Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４は、独立して、水素、あるいは、Ｃ１−Ｃ６の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、アルケニル若しくはアルキニル、あるいはＣ６−Ｃ１８の芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換芳香族基、あるいは、Ｃ４−Ｃ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族基、またはいずれかの組合せのハロゲン、アルキルオキシ、カルボキシ、アミド若しくはアルキルから選択される１若しくは２個の置換基をもつ対応する置換ヘテロ芳香族基であり、かつ、但し、Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４の最大２個が、芳香族、置換芳香族、ヘテロ芳香族若しくは置換ヘテロ芳香族基であるように選択されることができ；ならびに
Ｃαは炭素原子であり、かつ、Ｒの置換基が有機置換基である場合、Ｃαの立体化学はＲ若しくはＳいずれかであり；
あるいは、そのカルボン酸基のエステル、アミド、アルキルアミドまたは金属陽イオン若しくはアンモニウム塩、あるいはそのアミン基の有機若しくは無機酸塩、あるいはそれらのいずれかの組合せ
の非天然のデスアミノアミノ酸化合物に関する。
【００２２】
本発明のさらなる一局面は、生物学的に活性のペプチドのＮ末端アミノ基への本発明の非天然のデスアミノアミノ酸化合物の付加、若しくは生物学的に活性のペプチドの天然に存在する同種アミノ酸部分の代わりのそれらの使用に関する。好ましい同種部分はアルギニンおよび／若しくはリシンを包含する。
【００２３】
既知の生物学的に活性のペプチドのＮ末端アミノ基への付加は、該既知の生物学的に活性のペプチドと同一種類の選択的な持続性の生物学的活性を有する伸長されたペプチドを提供する。該付加は、アシルアジドカップリング、カルボジイミドカップリング、酸イオン交換樹脂、トリアミノボランおよび酵素カップリングの使用を包含する、アミド結合を形成するための酸およびアミン基の一緒の既知のカップリング方法により達成し得る。好ましい一方法は、ペプチド結合形成を促進する条件下でのアミノエキソペプチダーゼの使用を必要とする。本発明のいくつかの態様において、半合成ペプチドは、ＮＴ（８−１３）のＮ末端アルギニン残基の代わりに非天然アミノ酸化合物を使用することにより製造する（例えばＡＢＳ２０５、ＡＢＳ２０７、ＡＢＳ２０８、ＡＢＳ２１０、ＡＢＳ２１１、ＡＢＳ２１２、ＡＢＳ２２０、ＡＢＳ２２５、ＡＢＳ２２６、ＡＢＳ２２７、ＡＢＳ２２８、ＡＢＳ２３０、ＡＢＳ２３２、ＡＢＳ２３４若しくはＡＢＳ２３９）。
【００２４】
伸長されるペプチドが基づくペプチドの好ましい態様は、異常状態（ｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の処置若しくは予防に有用な生物学的に活性のペプチドを包含する。好ましい範疇および例の一覧を下の節に包含する。いくつかの好ましい範疇は、限定されるものでないが、転写因子、細胞受容体のリガンド、ホルモンおよび細胞外結合ペプチドを挙げることができる。いくつかの好ましい例は、限定されるものでないが、エンケフリン（ｅｎｋｅｐｈｌｉｎ）、ＬＨＲＨおよびアナログ、ニューロペプチド、グリコインクレチン（ｇｌｙｃｏｉｎｃｒｅｔｉｎ）、インテグリンおよびアナログ、グルカゴンおよびグルカゴン様ペプチド、抗血栓ペプチド、サイトカインおよびインターロイキン、トランスフェリン、インターフェロン、エンドセリン、ナトリウム利尿ホルモン、細胞外キナーゼリガンド、アンジオテンシン酵素阻害剤、ペプチド性抗ウイルス化合物、トロンビン、サブスタンスＰ、サブスタンスＧ、ソマトトロピン、ソマトスタチン、ＧｎＲＨおよびアナログ、セクレチン、ブラジキニン、バソプレッシンおよびアナログ、インスリンおよびそのアナログ、成長因子ならびに他者を挙げることができる。伸長されたペプチドは、本発明のデスアミノアミノ酸化合物のカルボキシル基に基礎ペプチドのＮ末端アミノ基を結合することにより形成する。
【００２５】
生物学的に活性のペプチドのアルギニン若しくはリシン部分の代わりのデスアミノアミノ酸部分の使用は、選択的な持続性の生物学的活性を有する切断型（ｔｒｕｎｃａｔｅｄ）ペプチドを提供する。そのアミノ酸配列内にアルギニンおよび／若しくはリシン部分を有するいかなる既知の生物学的に活性のペプチドも、対応する切断型ペプチドの基礎としてはたらくことができる。そのＡＲＧ若しくはＬＹＳ部分で開始して、切断型ペプチドは、既知の生物学的に活性のペプチドと同一の下流配列を有することができるが、しかし上流配列は非存在であることができる。加えて、そのＡＲＧ若しくはＬＹＳ部分は、デスアミノアミノ酸部分と交換することができ、従って切断型ペプチドを提供する。数種の既知の生物学的に活性のペプチドは、プロペプチドすなわち前駆体の切断位置にアルギニン若しくはリシン部分をもつプロペプチドとして最後から２番目に形成されるか、または、切断されて活性の切断型ペプチドを提供し得る位置にアルギニン若しくはリシン部分を含有する最終的なペプチドとして形成される。トリプシンはこうした切断位置に特異的な酵素である。例は、グルカゴン様ペプチド、ニューロテンシン、プロインスリンおよびトロンビンを包含する。アルギニン若しくはリシン部分の代わりに用いられるデスアミノアミノ酸化合物を伴うこれらの例の切断型バージョンは、選択的な持続性の生物学的活性を提供する。
【００２６】
本発明のさらなる一つのアスペクトは、デスアミノアミノ酸化合物、伸長若しくは切断されたペプチド、およびそれらの組合せの製薬学的および化粧品用組成物を包含する。該製薬学的組成物の単位投薬形態物および生物学的に有効な製剤が包含される。化粧品用製剤は、適切な油、クリーム、蝋若しくは水性基剤の化粧品用担体を包含する。
【００２７】
本発明のなお別の局面は、本発明のデスアミノアミノ酸化合物および／または付加若しくは切断型ペプチドを使用するスクリーニング、診断および処置方法を包含する。
【００２８】
本発明の一態様は、そのＮ末端アミノ酸部分としてデスアミノアミノ酸を有する切断型ニューロテンシンペプチドである。
【００２９】
本発明はまた、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶおよび／若しくはＶの化合物ならびにこうした化合物を含有するペプチドのような本発明の化合物を製造するのに有用である、本明細書に開示される方法および中間体も提供する。こうした中間体の一分類は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶおよびＶのＮ−保護若しくはカルボキシル保護またはＮ−およびカルボキシル保護された化合物を包含する。これらの保護された中間体は、本出願の以下の節に詳細に記述される。こうした中間体の別の分類は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶおよびＶの化合物のカルボン酸塩、それらの化合物の有機若しくは無機酸のアミン塩および複塩（カルボン酸塩、アミン塩）を包含する。
【００３０】
［発明の詳細な記述］
本発明の定義
本明細および付随する請求の範囲で使用されるところの単数形「ある」（「ａ」、「ａｎ」）および「該（ｔｈｅ）」は、文脈が別の方法で明瞭に指図しない限り、複数の指示物を包含する。
【００３１】
本出願を通じてのＲ１−Ｒ３、ｎ、ｚ、Ｘ、Ｙ、ＣαおよびＣβのような変数は、それと反対に述べられない限り、本明細書で定義されると同一の変数である。
【００３２】
本明細書で使用されるところの「アルキル」という用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、デシル、テトラデシル、ヘキサデシル、エイコシル、テトラコシルなどのような、１ないし２４個の炭素原子の分枝状若しくは非分枝状の飽和炭化水素基を指す。本明細書で好ましいアルキル基は１から６個までの炭素原子を含有する。
【００３３】
本明細書で使用されるところの「アルケニル」という用語は２ないし２４個の炭素原子の炭化水素基を指し、この分類内の好ましい基は２ないし６個の炭素原子含有し、また、構造式は１個の炭素−炭素二重結合を含有する。
【００３４】
本明細書で使用されるところの「アルキニル」という用語は２ないし２４個の炭素原子の炭化水素基を指し、この分類内の好ましい基は２ないし６個の炭素原子を含有し、また、構造式は１個の炭素−炭素三重結合を含有する。
【００３５】
別の方法で定義されない限り、とりわけアルキル、アルケニルおよびアルキニルに言及して本明細書で使用されるところの「低級」という用語は、１から６個までの炭素原子、好ましくは１ないし４個の炭素原子、より好ましくは１ないし２個の炭素原子を有する部分を指す。
【００３６】
本明細書で提供されるところの「アルキル化剤」という用語は、構造式ＲＸ（式中Ｒは以前に記述されたところのアルキル、アルケニル若しくはアルキニル基であり、また、Ｘは好ましくは塩化物、臭化物若しくはヨウ化物のようなハロゲン化物である）をもつ化合物である。
【００３７】
本明細書で使用されるところの「非天然アミノ酸」という用語は、それが天然のアミノ酸の構造および反応性を模倣するように天然のアミノ酸に類似の構造をそれが有するために天然のアミノ酸の同種物である有機化合物を指す。本明細書で定義されるところの非天然のアミノ酸は、該非天然のアミノ酸がペプチドの天然のアミノ酸単位の代わりに用いられるか若しくはペプチドに別の方法で組み込まれるかのいずれかである場合に、ペプチドの特性（例えば選択性、安定性）を全般に増大するすなわち高める。
【００３８】
本明細書で使用されるところの「ペプチド」という用語は、一緒に化学結合されたアミノ酸から構成される化合物の一分類を指す。一般に、アミノ酸はアミド結合（−ＣＯＮＨ−）を介して一緒に化学結合されるが；しかしながらアミノ酸は当該技術分野で既知の他の化学結合により一緒に結合されてもよい。例えば、アミノ酸はアミン結合により結合されうる。本明細書で使用されるところのペプチドは、アミノ酸のオリゴマー、ならびにポリペプチドを包含する小型および大型ペプチドを包含する。
【００３９】
本明細書で使用されるところの「活性」という用語は生物学的活性を指す。
【００４０】
本明細書で使用されるところの「薬理学的活性」という用語は、ペプチド若しくはポリペプチドの固有の物理特性を指す。これらの特性は、限定されるものでないが半減期、溶解性、および安定性、ならびに他の薬物動態特性を挙げることができる。
【００４１】
本明細書で使用されるところの「有機酸塩」という用語は、アルキル若しくはアリールＣ１−Ｃ９カルボン酸、スルホン酸若しくはリン酸とアミン基の塩の形態を指す。
【００４２】
本明細書で使用されるところの「無機酸塩」という用語は、塩酸、硫酸、スルホン酸、リン酸、硝酸、亜硝酸若しくは臭化水素酸のような無機酸とアミン基の塩の形態を指す。
【００４３】
本明細書で使用されるところの「Ｃ６ないしＣ１８の芳香族」という用語は、フェニル、ナフチル、アントラセニルのような芳香族炭化水素、またはベンジル、フェネチル若しくはナフチルメチレニルのようなアリールアルキル炭化水素を指す。
【００４４】
本明細書で使用されるところの「Ｃ４ないしＣ１８ならびにいずれかの組合せの酸素、イオウおよび窒素から選択される１若しくは２個のヘテロ原子のヘテロ芳香族」という用語は、チエニル、フリル、ピロリル、アザチエニル、アザフリル、ピリジニル、チアピリジニル、ピラジニル、メチレニルピリジニル、エチレニルピリジニル、メチレニルピロリルなどのような１若しくは２個のヘテロ原子を含有するヘテロ芳香族炭化水素またはアルキルヘテロ芳香族炭化水素を指す。
【００４５】
立体化学に関しての「Ｒ若しくはＳ」という用語は、選択された炭素の光学異性を呼称する通常の意味を有する。この文脈でのＲは置換基としてのＲと混同されるべきでない。本明細書で使用される化学的、製薬学的および生物学的用語は、当該分野のＰｈ．Ｄ．研究者のような当業者がそれらに帰すとみられる通常のかつ通例の意味に従う。こうした意味は、限定されるものでないが、“Ｈａｗｌｅｙ’ｓ  Ｃｏｎｄｅｎｓｅｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ”、第１１版、編者ＳａｘとＬｅｗｉｓ、Ｖａｎ  Ｎｏｓｔｒａｎｄ  Ｒｅｉｎｈｏｌｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ニューヨーク州ニューヨーク  １９８７；“Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ”、増補第４版、編者Ｂｅｎｎｅｔｔ、Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｉｎｃ．、ニューヨーク州ニューヨーク、１９８６、“Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ”第１１および後続の版、Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．ニュージャージー州ローウェイ  １９８９およびより最近；“Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”第４版、Ｊ．Ｍａｒｃｈ、Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、ニューヨーク州ニューヨーク  １９９２；“Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ”、Ｐｅｉ−Ｓｈｏｗ  Ｊｕｏ編、ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク州ニューヨーク  １９９６；“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ”、Ｄａｒｎｅｌｌ、Ｌｏｄｉｓｈ、Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｂｏｏｋｓ、ニューヨーク州ニューヨーク  １９８６（これらの辞書及び協定文書の全部の開示は引用することにより本明細書に組み込まれる）を挙げることができる適切な技術的辞書および協定文書に見出しうる。
【００４６】
本発明は、ある種のデスアミノアミノ酸化合物、既知の生物学的に活性のペプチド中の伸長体（ｅｘｔｅｎｄｅｒ）若しくは同種体としてのそれらの組み込み、ならびに医学的診断、処置およびスクリーニングにおける該化合物およびペプチドの使用に向けられる。本発明のいくつかの局面は、デスアミノアミノ酸化合物の天然のアミノ酸アルギニンおよび／若しくはリシンの模倣に関する。既知の生物学的に活性のペプチドでのこれらの天然のアミノ酸部分の同種体としてのそれらの使用により、生物学的活性が既知のペプチドのものより選択的かつ持続性である該ペプチドの切断型バージョンを製造し得る。伸長体としてのそれらの使用により、既知の生物学的に活性のペプチドのＮ末端部分付加物としてのそれらの位置が、既知のペプチドのものより持続性の生物学的活性もまた提供することができる。
【００４７】
切断型ペプチド中の本発明のデスアミノアミノ酸化合物の使用の一例がニューロテンシンにより提供される。ニューロテンシン（ＮＴ）は神経学的特性を有する１３アミノ酸の
ペプチドである。切断型ニューロテンシン（８−１３）を生じるためのＡＡ７でのその切断は選択的生物学的活性を有するペプチドを提供する。本発明により、ＡＡ８アルギニンのデスアミノアミノ酸部分への転化は、有意かつ選択的な生物学的活性もまた有するペプチドをもたらす。ＮＴおよび転化されたバージョンの例を図１に示す。
【００４８】
本発明の生物学的に活性のペプチドはそれらのＮ末端部分としてデスアミノアミノ酸部分を有する。これらのペプチドは、デスアミノアミノ酸が既知ペプチドのＮ末端アミン基とアミド結合により共有結合されている（伸長型ペプチド）か、若しくは該ペプチド内のその対応する同種部分（類似の天然のアミノ酸部分）の代わりに用いられる（切断型バージョン）のいずれかである、生物学的に活性のアミノ酸の既知のアミノ酸配列を有する。別の代替において、該ペプチドは、デスアミノアミノ酸部分が新たなＮ末端となりかつこの位置の上流のアミノ酸残基がもはや該配列の一部でないように、置換の位置で切断されたようになる（切断型ペプチド）。伸長型および切断型ペプチドはｉｎ  ｖｉｖｏでより長い寿命を有し得、また、活性がより選択的になることができることを除き、天然のペプチドのもののような生物学的活性を有し得る。
【００４９】
本発明のデスアミノアミノ酸化合物の一局面は上で示された式Ｉにより提供される。式Ｉの好ましい態様は、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が、独立して、水素、またはＣ１−Ｃ５の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、より好ましくは水素若しくはメチルであるが、但し、ｍが０若しくは１でありかつｎが０ないし５である場合に、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は全部がＨではないものを包含する。別の態様において、ｎは４である。なおさらなる一態様において、ＲはＨ、メチル、エチル若しくはプロピルである。付加的な好ましい態様は、ＲがＨ、メチル、エチル、プロピル若しくはブチルであり、ならびに
ａ）ｎが４であり、ｍが０であり、Ｒ１が水素であり、Ｒ２がメチルであり、式Ｉの化合物が酸であり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｂ）ｎが４であり、ｍが１であり、Ｒ１およびＲ２がメチルであり、Ｒ３が水素若しくはメチルであり、式Ｉの化合物が酸であり、Ｃαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｃ）ｎが４であり、ｍが１であり、Ｒ１がメチルであり、Ｒ２およびＲ３が水素であり、式Ｉの化合物が酸であり、Ｃαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｄ）ｎが４であり、ｍが１であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が水素であり、式Ｉの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｅ）ｎが３であり、ｍが０であり、Ｒ１およびＲ２がメチルであり、式Ｉの化合物が酸であり、Ｃαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｆ）ｎが３であり、ｍが０であり、Ｒ１およびＲ２がエチルであり、式Ｉの化合物が酸であり、Ｃαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｇ）ｎが３であり、ｍが０であり、Ｒ１およびＲ２がプロピルであり、式Ｉの化合物が酸であり、Ｃαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｈ）ｎが３であり、ｍが０であり、Ｒ１およびＲ２がブチルであり、式Ｉの化合物が酸であり、Ｃαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｉ）ｎが２であり、ｍが０であり、Ｒ１およびＲ２がメチルであり、式Ｉの化合物が酸であり、Ｃαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場
合にＲ若しくはＳである；
ｊ）ｎが２であり、ｍが０であり、Ｒ１およびＲ２がエチルであり、式Ｉの化合物が酸であり、Ｃαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｋ）ｎが２であり、ｍが０であり、Ｒ１およびＲ２がプロピルであり、式Ｉの化合物が酸であり、Ｃαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｌ）ｎが２であり、ｍが０であり、Ｒ１およびＲ２がブチルであり、式Ｉの化合物が酸であり、Ｃαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである
ものを包含する。
【００５０】
前述の好ましい態様ａ〜ｌのいずれのエステル若しくは塩もまた好ましい。
【００５１】
本発明のデスアミノアミノ酸化合物の別の局面は上に示される式ＩＩにより具体的に説明される。式ＩＩの好ましい態様は、ｎが３である場合に破線が存在しないものを包含する。付加的な好ましい態様は、Ｘが水素であり、ならびに、ＹおよびＲ４が同一の低級分枝状若しくは直鎖アルキルであるものを包含する。なお別の好ましい態様において、Ｒ４およびＲ５は独立して水素若しくはメチルである。別の好ましい態様において、破線ａは存在せず、Ｘは水素、またはＣ１−Ｃ５の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、好ましくはメチル若しくはエチルであり、およびＹは水素、またはＣ１−Ｃ５の低級分枝状若しくは直鎖アルキル、好ましくはメチルであるか、あるいは破線ａが存在しかつｚが２であり、そして好ましくはｎは３である。付加的な好ましい態様は、ＲがＨ、メチル、エチル、プロピル若しくはブチルであり、かつ
ａ）ｎが３であり、破線ａが存在せず、式ＩＩの化合物が酸であり、Ｒ４が水素であり、Ｘが水素であり、Ｙがメチルであり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｂ）ｎが３であり、破線ａが存在せず、式ＩＩの化合物が酸であり、Ｒ４がメチルであり、Ｘが水素であり、Ｙがメチルであり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｃ）ｎが３であり、破線ａが存在し、式ＩＩの化合物が酸であり、ｚが２であり、Ｒ４が水素であり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｄ）ｎが３であり、破線ａが存在し、式ＩＩの化合物が酸であり、ｚが２であり、Ｒ４がメチルであり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｅ）ｎが３であり、破線ａが存在せず、式ＩＩの化合物が酸であり、Ｒ４が水素であり、Ｘがメチルであり、Ｙが水素であり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｆ）ｎが３であり、破線ａが存在せず、式ＩＩの化合物が酸であり、Ｒ４が水素であり、Ｘがエチルであり、Ｙが水素であり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｇ）ｎが２であり、破線ａが存在せず、式ＩＩの化合物が酸であり、Ｒ４が水素であり、Ｘが水素であり、Ｙがメチルであり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｈ）ｎが２であり、破線ａが存在せず、式ＩＩの化合物が酸であり、Ｒ４がメチルであり、Ｘが水素であり、Ｙがプロピルであり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｉ）ｎが４であり、破線ａが存在し、式ＩＩの化合物が酸であり、ｚが２であり、Ｒ４が水素であり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブ
チルである場合にＲ若しくはＳである；
ｊ）ｎが３であり、破線ａが存在し、式ＩＩの化合物が酸であり、ｚが２であり、Ｒ４がメチルであり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｋ）ｎが２であり、破線ａが存在し、式ＩＩの化合物が酸であり、ｚが３であり、Ｒ４がメチルであり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｌ）ｎが３であり、破線ａが存在せず、式ＩＩの化合物が酸であり、Ｒ４がメチルであり、Ｘが水素であり、Ｙがエチルであり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ものを包含する。
【００５２】
前述の好ましい態様ａ〜ｌのいずれのエステル若しくは塩もまた好ましい。
【００５３】
本発明のデスアミノアミノ酸化合物の第三の局面は式ＩＩＩにより具体的に説明される。式ＩＩＩの好ましい態様は、Ｒ６およびＲ７が独立して水素またはＣ１−Ｃ５の低級アルキル若しくは直鎖アルキル、好ましくは水素若しくはメチルであり、なおより好ましくは全部が水素であるものを包含する。別の態様において、ｚは２若しくは３、好ましくは３である。好ましい一態様においてｎは３である。付加的な好ましい態様は、ＲがＨ、メチル、エチル、プロピル若しくはブチルであり、かつ
ａ）ｎが３であり、ｚが２であり、Ｒ６およびＲ７が水素であり、式ＩＩＩの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｂ）ｎが３であり、ｚが３であり、Ｒ６およびＲ７が水素であり、式ＩＩＩの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｃ）ｎが２であり、ｚが２であり、Ｒ６およびＲ７が水素であり、式ＩＩＩの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｄ）ｎが４であり、ｚが２であり、Ｒ６およびＲ７が水素であり、式ＩＩＩの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｅ）ｎが２であり、ｚが３であり、Ｒ６およびＲ７が水素であり、式ＩＩＩの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｆ）ｎが４であり、ｚが３であり、Ｒ６およびＲ７が水素であり、式ＩＩＩの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｇ）ｎが２であり、ｚが２であり、Ｒ６およびＲ７がメチルであり、式ＩＩＩの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｈ）ｎが４であり、ｚが２であり、Ｒ６およびＲ７がメチルであり、式ＩＩＩの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｉ）ｎが２であり、ｚが３であり、Ｒ６およびＲ７がメチルであり、式ＩＩＩの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｊ）ｎが４であり、ｚが３であり、Ｒ６およびＲ７がメチルであり、式ＩＩＩの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである
ものを包含する。
【００５４】
好ましい前述の態様ａ〜ｊのエステル若しくは塩もまた好ましい。
【００５５】
本発明の第四の局面は式ＩＶのデスアミノアミノ酸化合物により提供される。式ＩＶの化合物の好ましい態様は、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１が、独立して、水素、またはＣ１−Ｃ５の低級直鎖若しくは分枝状鎖アルキル、好ましくは水素、メチル若しくはエチルであるものを包含する。別の態様において、Ｒ１０はメチルである。なお別の好ましい態様において、Ｒ９は水素であり、Ｒ１０はメチルであり、Ｒ１１は水素であり、そしてｎは３である。付加的な好ましい態様は、ＲがＨ、メチル、エチル、プロピル若しくはブチルであり、ならびに
ａ）ｎが３であり、Ｒ９およびＲ１１が水素であり、Ｒ１０がメチルであり、式ＩＶの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｂ）ｎが３であり、Ｒ９が水素であり、Ｒ１０およびＲ１１がメチルであり、式ＩＶの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｃ）ｎが３であり、Ｒ９が水素であり、Ｒ１０がメチルであり、Ｒ１１がエチルであり、式ＩＶの化合物が酸であり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｄ）ｎが２であり、Ｒ９およびＲ１１が水素であり、Ｒ１０がメチルであり、式ＩＶの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｅ）ｎが２であり、Ｒ９が水素であり、Ｒ１０およびＲ１１がメチルであり、式ＩＶの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｆ）ｎが４であり、Ｒ９が水素であり、Ｒ１０がメチルであり、Ｒ１１がエチルであり、式ＩＶの化合物が酸であり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである
ものを包含する。
【００５６】
前述の好ましい態様ａ〜ｆのエステル若しくは塩もまた好ましい。
【００５７】
本発明の第五の局面は式Ｖのデスアミノアミノ酸化合物により提供される。式Ｖの化合物の好ましい態様は、Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４が、独立して、水素またはＣ１−Ｃ５の低級直鎖若しくは分枝状鎖アルキル、好ましくは水素、メチル若しくはエチルであるものを包含する。別の態様において、Ｒ１２はメチルである。なお別の好ましい態様において、Ｒ１３は水素であり得、Ｒ１４はメチル、エチル若しくはプロピルであり得、Ｒ１３およびＲ１４は水素、メチル、エチル若しくはプロピルのいずれの組合せでもあり得、ならびにｎは２若しくは３である。付加的な好ましい態様は、ＲがＨ、メチル、エチル、プロピル若しくはブチルであり、ならびに
ａ）ｎが３であり、Ｒ１２およびＲ１３が水素であり、Ｒ１４がメチルであり、式Ｖの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｂ）ｎが３であり、Ｒ１２がメチルであり、Ｒ１３およびＲ１４がメチルであり、式Ｖの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｃ）ｎが３であり、Ｒ１２がメチルであり、Ｒ１３がメチルであり、Ｒ１４がエチルであり、式Ｖの化合物が酸であり、およびＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｄ）ｎが２であり、Ｒ１２がメチルであり、Ｒ１３が水素であり、およびＲ１４がメチルであり、式Ｖの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｅ）ｎが２であり、Ｒ１２がメチルであり、Ｒ１３およびＲ１４がメチルであり、式Ｖの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである；
ｆ）ｎが４であり、Ｒ１２がメチルであり、Ｒ１３がメチルであり、およびＲ１４がエチルであり、式Ｖの化合物が酸であり、ならびにＣαの立体化学はＲの置換基がメチル、エチル、プロピル若しくはブチルである場合にＲ若しくはＳである
ものを包含する。
【００５８】
前述の好ましい態様ａ〜ｆのエステル若しくは塩もまた好ましい。
【００５９】
本発明のとりわけ好ましい非天然のデスアミノアミノ酸化合物は、ＲがＨ、メチル若しくはエチルである図２に提供される式を包含する。
【００６０】
本発明のある態様は、本発明の保護された中間体および保護された非天然アミノ酸を提供する。ある態様は、アミノ基の望ましくない反応を予防しかつアミド基切断もまた引き起こさない化学的方法により除去可能である保護基により側鎖アミン基が保護されている、本発明の保護された中間体および保護された非天然アミノ酸を提供する。ある態様は、カルボキシル基の望ましくない反応を予防しかつカルボキシル基切断もまた引き起こさない化学的方法により除去可能である保護基により側鎖カルボキシル基が保護されている、本発明の保護された中間体および保護された非天然アミノ酸を提供する。ある態様において保護基はｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）若しくはフルオレニルメトキシカルボニル（ＦＭＯＣ）である。ある態様において、保護基は、ＢＯＣ、ＦＭＯＣ、Ａｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）、ＣＢＺ（ベンジルオキシカルボニル）、Ｐｂｆ（２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル）、ＮＯ２（ニトロ）、Ｐｍｃ（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル）、Ｍｔｒ（４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル）若しくはＴｏｓ（トシル）である。
【００６１】
一態様において、式Ｉ〜Ｖの非天然のデスアミノアミノ酸の構造は、天然に存在するアミノ酸リシン、アルギニン、ならびに天然に存在するグルタミン酸生合成中間体オルニチンのものに類似である。好ましい態様において、本発明の化合物は、とりわけ（ｉ）ペプチド中の隣接アミノ酸単位とＮ末端結合を形成するカルボキシル末端、（ｉｉ）αアミノ基の代わりの−Ｈ若しくはアルキル基の存在、および（ｉｉｉ）アミン側鎖の有機基置換の間のより長い若しくはより短いメチレン架橋により、対応する天然のアミノ酸と異なる。好ましくは、天然のアミノ酸架橋と比較して本発明の伸長された架橋は１炭素長さより長い若しくはより短い（すなわちホモ若しくはデス体）。他の好ましい態様において、本発明の化合物は、とりわけより長い、より短い、若しくは同等なメチレン架橋長さを有し、そして、比較可能な天然のアミノ酸に比較して、多様な部分で置換を有し、異なる部分を形成し、若しくは部分を連結して環構造を形成する。
【００６２】
本発明の化合物のそれぞれは酸、アミド、塩若しくはエステルとして製造し得る。水中で、本発明の非天然アミノ酸は荷電することができるが、しかしながら、細胞膜および細胞の他の非極性領域で、非天然アミノ酸は荷電していないことがある。一態様において、本発明の非天然アミノ酸のエステル基は、メチル、エチル、ｔ−ブチル、ベンジル若しくはアリルである。別の態様において、非天然アミノ酸の塩の対イオンは、ナトリウム、カリウム、アンモニウムおよびテトラアルキルアンモニウムである。
【００６３】
本発明のいくつかの態様は、本発明の非天然アミノ酸化合物を含んでなる半合成ペプチドを提供する。いくつかの態様において、半合成ペプチドはそのＮ末端部分として非天然アミノ酸化合物を含んでなる。いくつかの態様において、半合成ペプチドは、ニューロテンシン（８−１３）の半合成ペプチドのＮ末端部分として非天然アミノ酸化合物を含んでなる。一態様において、半合成ペプチドは、ＡＢＳ２０１、ＡＢＳ２０２、ＡＢＳ２０５、ＡＢＳ２０７、ＡＢＳ２０８、ＡＢＳ２１０、ＡＢＳ２１１、ＡＢＳ２１２、ＡＢＳ２２０、ＡＢＳ２２５、ＡＢＳ２２６、ＡＢＳ２２７、ＡＢＳ２２８、ＡＢＳ２３０、ＡＢＳ２３２、ＡＢＳ２３４若しくはＡＢＳ２３９である。いくつかの態様において、半合成ペプチドは、そのＮ末端部分として置換された非天然アミノ酸化合物を含まない半合成ペプチドと同一配列を有するペプチドと比較して、ｉｎ  ｖｉｖｏで延長された半減期を有する。いくつかの態様において、半合成ペプチドは鎮痛および／若しくは抗精神病活性を有する。抗精神病および／若しくは鎮痛活性を有する半合成ペプチドの例を下の表に示す。
【００６４】
【表１】
2009519945.tif 000008
【００６５】
【表２】
2009519945.tif 000009
【００６６】
【表３】
2009519945.tif 000010
【００６７】
【表４】
2009519945.tif 000011
【００６８】
本発明のある態様は、本発明のペプチドおよび製薬学的担体を含んでなる製薬学的組成物を提供する。ある態様において、ペプチドは単位投薬形態物中に存在する。
【００６９】
本発明のある態様は、本発明の非天然アミノ酸化合物および化粧品用基剤製剤を含んでなる化粧品用製剤を提供する。本発明のある態様は、本発明の半合成ペプチドおよび化粧品用基剤製剤を含んでなる化粧品用製剤を提供する。ある態様において、化粧品用基剤製剤は水性若しくは油性基剤である。
【００７０】
本発明のある態様は、医学的治療での使用のための本発明の非天然アミノ酸化合物を提供する。
【００７１】
本発明のある態様は、哺乳動物の精神病を処置するのに有用な医薬品の製造のための本発明の非天然アミノ酸化合物の使用を提供する。本発明のある態様は、哺乳動物の精神病を処置するのに有用な医薬品の製造のための本発明の半合成ペプチドの使用を提供する。ある態様において、精神病は統合失調症である。
【００７２】
本発明のある態様は、哺乳動物の癌、肥満、パーキンソン病若しくは覚醒剤濫用を処置するのに有用な医薬品の製造のための本発明の化合物の使用を提供する。
【００７３】
本発明のある態様は、哺乳動物の疼痛を処置するのに有用な医薬品の製造のための本発明の化合物の使用を提供する。
【００７４】
本発明のある態様は、医学的治療での使用のための本発明の半合成ペプチドを提供する。
【００７５】
本発明のある態様は、患者の体温を低下させるように、有効量の本発明の半合成ペプチドを患者に投与することを含んでなる、患者の体温の低下方法を提供する。
【００７６】
本発明のある態様は、患者の体温を低下させるように、有効量の本発明の組成物を患者に投与することを含んでなる、患者の体温の低下方法を提供する。
【００７７】
本発明のある態様は、精神病を治療するように、有効量の本発明のペプチドを患者に投与することを含んでなる、精神病を伴う患者の処置方法を提供する。
【００７８】
本発明のある態様は、精神病を治療するように、有効量の本発明の組成物を患者に投与することを含んでなる、精神病を伴う患者の処置方法を提供する。
【００７９】
本発明のある態様は、癌を処置するように、有効量の本発明のいずれかのペプチドを患者に投与することを含んでなる、癌の処置方法を提供する。
【００８０】
本発明のある態様は、癌を処置するように、有効量の本発明の組成物を患者に投与することを含んでなる、癌の処置方法を提供する。
【００８１】
本発明のある態様は、疼痛を処置するように、有効量の本発明のペプチドを患者に投与することを含んでなる、疼痛の処置方法を提供する。
【００８２】
本発明のある態様は、疼痛を処置するように、有効量の本発明の組成物を患者に投与することを含んでなる、疼痛の処置方法を提供する。
【００８３】
本発明のある態様は、ａ）既知のアミノ酸配列を有する第一のペプチドの生物学的活性を測定する段階；およびｂ）本発明のいずれかの半合成ペプチドの同一の生物学的活性を測定する段階を含んでなる、非天然アミノ酸化合物を含有するペプチドの活性についてのスクリーニング方法を提供し、該半合成ペプチドは、非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドと同一配列を有するか、若しくは非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドの切断型バージョンである。本発明のある態様において、生物学的活性は、ポトーシス、アポトーシス、細胞シグナル伝達、リガンド結合、転写、翻訳、代謝、細胞成長、細胞分化、恒常性、半減期、溶解性若しくは安定性である。本発明のある態様において、生物学的活性は、生物学的障壁を通過する半合成ペプチドの能力の直接若しくは間接的評価を包含する。本発明のある態様において、生物学的活性は選択性である。
【００８４】
本発明のある態様は、本発明の半合成ペプチドを患者に投与することを含んでなる，既知の第一のペプチドの患者への投与により影響を及ぼされる疾患を伴う患者の処置方法を提供し、該半合成ペプチドは、非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドと同一配列を有するか、若しくは非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドの切断型バージョンである。
【００８５】
本発明のある態様は、本発明の半合成ペプチドを代用することを含んでなる、被験体の生物学的障壁を横断する既知の第一のペプチドの能力の増大方法を提供し、該半合成ペプチドは、非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドと同一配列を有するか、若しくは非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドの切断型バージョンである。ある態様において、障壁は、血液脳関門、細胞膜、腸上皮、皮膚若しくは血液眼を含んでなる。
【００８６】
本発明のある態様は、本発明の半合成ペプチドを既知のペプチドの代わりに用いることを含んでなる、既知のペプチドの選択性の増大方法を提供し、該半合成ペプチドは、非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドと同一配列を有するか、若しくは非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドの切断型バージョンである。
【００８７】
本発明のある態様は、本発明の半合成ペプチドを既知のペプチドの代わりに用いることを含んでなる、ペプチダーゼによる消化に対する既知のペプチドの抵抗性の増大方法を提供し、該半合成ペプチドは、非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドと同一配列を有するか、若しくは非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドの切断型バージョンである。
【００８８】
本発明のある態様は、本発明の半合成ペプチドを患者に投与することを含んでなる、身体障壁を横断する既知の第一のペプチドの患者への投与により影響を及ぼされる疾患を伴う患者の処置方法を提供し、該半合成ペプチドは、非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドと同一配列を有するか、若しくは非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドの切断型バージョンである。
【００８９】
本発明のある態様は、本発明のいずれかの半合成ペプチドを患者に投与することを含んでなる、既知の第一のペプチドの患者への投与により影響を及ぼされる脳の疾患を伴う患者の処置方法を提供し、該半合成ペプチドは、非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドと同一配列を有するか、若しくは非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドの切断型バージョンである。
【００９０】
本発明のある態様は、本発明の半合成ペプチドを既知のペプチドの代わりに用いることを含んでなる、ｉｎ  ｖｉｖｏでの延長された半減期をもつ半合成ペプチドの製造方法を提供し、該半合成ペプチドは、非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドと同一配列を有するか、若しくは非天然アミノ酸化合物を除き第一のペプチドの切断型バージョンである。
本明細書で使用されるところの化合物指示子ＡＢＳ２０１、ＡＢＳ４８、ＫＨ４８およびペプチド２８は、別の方法で示されない限り同一化合物を表す。
【００９１】
デスアミノアミノ酸化合物の製造法
本発明のデスアミノアミノ酸化合物の製造法は図３に描かれる全体的合成スキームに従う。この方法の第一段階は、式ＩからＶのｎに対応するメチレン単位鎖長を有するωハロゲンカルボン酸の製造である。以下の論考および図３において、この中間体は化合物２７と称される。化合物２７の製造後に、そのω−ハロ基は過剰の求核剤で容易に置換されて式Ｉ〜Ｖのデスアミノアミノ酸化合物を生じ得る。
【００９２】
Ｒ＝Ｈである場合、ωハロゲン化合物は後に続く段階で直接使用し得る。Ｒが有機置換基である場合、Ｒ基は後に続く合成により付加される。Ｒが有機置換基である場合、化合物２７の製造のための反応条件は、アシルオキサゾロンの形成によるωカルボン酸のカルボキシル基の保護を必要とする。アシルオキサゾロンはエノラートに転化され、そして該エノラートはアルキルヨウ化物若しくはアルキルメシラートのようなアルキル化剤と組合されて化合物２７を形成する。大過剰のアルキル化剤および長い反応時間の使用が化合物２７の大きな収量を促進する。
【００９３】
図３の合成スキームに示されるとおり、ωハロカルボン酸化合物２５は、適切な側鎖部分および化合物２５のωハロ基をカップリングすることにより、側鎖修飾のいずれかに転化し得る。カルボキシル基の適切な保護もまた有利に使用される。これらの反応の条件、
ならびに適切なアルキル化剤および置換剤は、“Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”第４版、Ｊ．Ｍａｒｃｈ、Ｗｉｌｅｙ  ＩｎｔｅｒＳｃｉｅｎｃｅ、ニューヨーク州ニューヨーク  １９９２（その開示全体は引用することにより本明細書に組み込まれる）に示される教示に従う。
【００９４】
とりわけ、式Ｉの化合物を製造するために（図３および４の合成スキームを参照されたい）、ωハロカルボン酸化合物２７を、アンモニア、一級アミン若しくは二級アミンのような適切なアミン求核剤と組み合わせ得る。アミン求核剤の式は式Ｉの側鎖部分に対応する。反応条件は、上で引用されかつ完全に反復されるかのように本明細書に組み込まれる“Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”に開示されるところのアミン求核置換に適切なものに従うことができる。これらの化合物はその後のペプチド合成で直接使用し得るが、但し、側鎖アミン基は適切に保護されるか若しくはカルボキシル縮合から別の方法で阻害される。
【００９５】
同様に、式ＩＩの化合物を製造するために（図３および５の合成スキームを参照されたい）、ωハロ化合物２７を最初にカルボキシル位置で保護することができ、そしてその後ジアミンおよび臭化シアンと連続して反応させ得る。脱保護および精製が式ＩＩのデスアミノアミノ酸化合物を提供することができる。これらの化合物は、適切な側鎖保護を伴いペプチド合成で直接使用し得る。
【００９６】
式ＩＩＩおよびＩＶの化合物（図３および６の合成スキームを参照されたい）もまた、ωハロカルボン酸化合物２７への側鎖部分の付加により製造し得る。この例ではカルボキシル基の保護は不必要である。適切なチオ尿素化合物の製造は、チオ尿素、Ｎ−置換チオ尿素若しくはＮ，Ｎ−二置換チオ尿素（商業的に入手可能）へのアルキル、アルケニル若しくはアルキニルハロゲン化物のようなアルキル化剤の付加により達成し得る。生じる適切なチオ尿素化合物の塩基性条件下での化合物２７のωハロ位置での求核置換が、式ＩＶのデスアミノアミノ酸化合物を提供する。同様に、塩基性条件下でのωハロ化合物２７への適切な環状チオ尿素化合物の付加は、式ＩＩＩのデスアミノアミノ酸化合物を提供する。適切な環状チオ尿素化合物は、アルキル、アルケニル若しくはアルキニルハロゲン化物のようなアルキル化剤を、対応する未置換、Ｎ−置換若しくはＮ，Ｎ−二置換環状ジアザチオン（商業的に入手可能）と結合することにより製造し得る。粗反応生成物は、イオン交換クロマトグラフィーのような既知の方法により精製して式ＩＩＩおよびＩＶのデスアミノアミノ酸化合物を生じ得、それらは適切な側鎖保護を伴いペプチド合成で直接使用し得る。
【００９７】
式Ｖの化合物は、アシルオキサゾロンのようなカルボキシル基の第一の保護により製造し得る。保護されたカルボン酸の形成の後、α炭素の有機置換基（Ｒ）を、所望の場合は上で示された手順に従って付加し得る。次の段階で、ωハロ基をシアン化物と反応させてωシアノ保護カルボン酸を形成し得る。この中間体をアルカリ金属有機アミン（ＸＮＲ１３Ｒ１４）と反応させてアミジン陰イオンを形成し得る。該アミジン陰イオンを酸、水若しくはアルカリハロゲン化物でクエンチして、それぞれアミジンの未置換イミン部分若しくはアミジンのアルカリ置換イミン部分いずれかを形成しうる。このアミジン保護カルボン酸をその後、所望のペプチドの製造のための上述された合成スキームで使用しうる。
【００９８】
ペプチド合成でのそれらの使用前に、式Ｉ〜Ｖの化合物の側鎖は、適切に保護しうるか、若しくはそれらがペプチド縮合反応に進入することができないように十分に障害されていることを決定しうるかのいずれかである。例えば、式Ｉの化合物の側鎖が一級アミン基である場合、それはペプチド合成に関連する当該技術の教示に従って適切に保護しうる。例えば、”Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”、Ｉ＆Ｓ  Ｈａｒｒｉｓｏｎ、Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、ニューヨーク州ニューヨーク、１９７１（その開示は引用することにより本明細書に組み込まれる）に提供されるアミン保護基の総説を参照されたい。これらの例で、適切な保護基は、頭字語ＢＯＣを有するｔ−ブトキシカルボニル若しくは頭字語ＦＭＯＣを有するフルオレニルメトキシカルボニルであり得る。ＢＯＣおよびＦＭＯＣ保護基は、それぞれ水性トリフルオロ酢酸のような酸およびピペリジンのような塩基での穏やかな処理により除去し得る。
【００９９】
あるいは、ωハロカルボン酸化合物２７を、最後から２番目のペプチドとカップリングして、最後から２番目のペプチドのＮ末端にωハロアシル部分を形成し得る。ωハロカルボン酸化合物２７はその側鎖にアミノ部分を含有しないため、保護および誤ったペプチド形成はより小さい懸念である。この代替において、アミノ部分は、式Ｉ〜Ｖの化合物の形成について上述されたところのアシル化された最後から２番目のペプチドのωハロ基との求核反応を受け得る。そのＮ末端に式Ｉ〜Ｖの化合物の残基を有する所望のペプチドが製造される。この代替において、カルボキシルおよびアミノ側鎖の適切な保護ならびにＣ末端の適切な保護を、これらの基の望ましくない反応を予防するために使用しうる。
【０１００】
ペプチド合成および精製
本発明は、それらのＮ末端部分として式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ若しくはＶの化合物の残基を含有する切断型および伸長型ペプチドを包含する。これらのペプチドは、当業者にとって確立されたペプチド製造方法であるＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ固相法により合成し得る。Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ固相ペプチド合成の説明およびその条件については、Ｒ．Ｂ．Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２３２、３４１−３４７（１９８６）（その開示は引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。あるいは、Ｎ末端アミノ酸単位を除くペプチドすなわち最後から２番目のペプチドを、既知の生物学的方法により組換え発現し得、そして、式Ｉ〜Ｖのデスアミノアミノ酸化合物を、アミノペプチダーゼを使用する酵素的縮合によりＮ末端として付加し得る。ペプチドの組換え発現の説明およびその条件については、“Ｅｎｚｙｍｅ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ”、Ａｌａｎ  Ｆｅｒｓｈｔ、Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ、ニューヨーク州ニューヨーク（１９８５）（その開示は引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。式Ｉ〜Ｖの化合物は、側鎖アミノ基で標準的保護基で適切に保護し得る。好ましい一態様において、保護基はＢＯＣおよび／若しくはＦＭＯＣである。
【０１０１】
簡潔には、固相合成のため、最後から２番目のペプチドを大量に製造し得、そしてその後、保護およびＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ固相合成のカップリング技術を使用して、式Ｉ〜Ｖの化合物のいずれかにカップリグし得る。アミノ基露出のため設計された適切なアンカー樹脂で出発して、ＦＭＯＣ基のようなアミノ保護基を有するペプチドのカルボキシ末端アミノ酸単位を、選択的に切断可能なカルボキシルカップリング連結により樹脂に固定する。固定されたカルボキシ末端単位のアミノ基をその後脱保護し、そして付加的なアミノ保護されたアミノ酸単位をその後、適正な順序で順次カップリグする。各カップリング段階は、固定されたペプチド鎖の保護されたアミノ基の脱保護、次いでその脱保護されたアミノ基と次のアミノ酸単位のカルボキシル基の間のペプチド縮合を必要とする。該縮合は、カルボジイミドカップリング、Ｓｃｈｏｔｔｅｎ  Ｂａｕｍａｎ反応若しくは活性化アシル基縮合によりたやすく得ることができる。これらの縮合反応は、上で引用された“Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”に記述されている。ペプチド縮合に進入するαアミノ基の保護基と異なる適切な保護基を使用するアミンおよびカルボキシル側鎖の保護は、連続するアミノ酸単位の選択的ペプチド縮合を可能にすることができる。固相ペプチド合成のための適切な保護基および条件の選択は、上で引用されたＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄの参考文献に記述されている。
【０１０２】
最後から２番目のペプチドはまた組換え発現によっても製造しうる。この生物学的方法
は、最後から２番目のペプチドを発現するための微生物の再工作を必要とする。最後から２番目のペプチド配列をコードするＤＮＡセグメントを、プラスミド、若しくはＤＮＡの微生物発現を引き起こすことが可能な他のベクターに適正な読み枠で挿入し得る。ベクターはまた適切な制御、プロモーターおよび選択ＤＮＡセグメントも含有することができる。大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）若しくは枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｕｓ）のような微生物への挿入に際して、対応する選択剤での処理により、適切なトランスフェクションについて微生物の混合物を選択し得る。典型的には、該剤は抗生物質であることができ、また、ベクターは該抗生物質の対応する解毒酵素をコードする配列を含有することができる。クロラムフェニコールおよびペニシリンはこうした剤の２種である。トランスフェクトした微生物を培養すること、および、発現されたペプチドを、培地の分泌された物質として若しくは微生物細胞を溶解することによるかのいずれかで収集することが、最終製品から２番目前の生原料ペプチドを提供することができる。最終製品から２番目前のペプチドは凍結乾燥、クロマトグラフィーなどのような既知技術により精製しうる。ペプチド発現のためのこれらの組換え技術は、“Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ−Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ”、Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、コールドスプリングハーバー（２００３）（その開示は引用することにより本明細書に組み込まれる）に完全に示されている。
【０１０３】
固相ペプチド製造の一例が、一組のニューロテンシン（８−１３）化合物（ＮＴペプチド）の開発により提供される。これらの化合物はそれらのＮ末端として式Ｉ〜Ｖのデスアミノアミノ酸化合物を組み込む。それらは新規分類の抗精神病薬であり、それらの生物学的研究および背景を下の節に記述する。
【０１０４】
ＮＴペプチド合成−概略。
該ペプチドの最後から２番目の配列すなわちＮＴ（９−１３）は、ｐ−アルコキシベンジルアルコールの固相の方法論（６５）を使用して大量で合成し得、そして完全に保護された形態で保存し得る。
【０１０５】
出発原料。ｐ−アルコキシベンジルアルコール樹脂に結合したＮα−Ｆｍｏｃ−ロイシン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−イソロイシン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−ｔｅｒｔ−ロイシン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−（Ｂｕｔ）−チロシン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−（Ｂｏｃ）−トリプトファン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−プロリンおよびＮα−Ｆｍｏｃ−（Ｐｂｆ）−アルギニンは、Ａｄｖａｎｃｅｄ
Ｃｈｅｍｔｅｃｈ（ケンタッキー州ルイビル）から購入した。ＰｙＢＯＰ（Ｒ）はＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ（カリフォルニア州サンディエゴ）から購入した。Ｎ−ヒドロキシベンゾリアゾール（Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｒｉａｚｏｌｅ）（ＨＯＢｔ）、無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、トリイソプロピルシラン（ＴＩＳ）およびトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）はＡｌｄｒｉｃｈ（ウィスコンシン州ミルウォーキー）から購入した。非天然アミノ酸アナログは製造したとおり使用した。略語。Ｆｍｏｃ、フルオレニルメトキシカルボニル；ＮＨ３、アンモニア；ＮＨ２ＣＨ３、メチルアミン；ＮＨ（ＣＨ３）２、ジメチルアミン；Ｎ（ＣＨ３）３、トリメチルアミン；ＥｔＯＨ、エタノール。
【０１０６】
簡潔には、樹脂に結合したＮα−Ｆｍｏｃ−ロイシンを、ピペリジン（ＤＭＦ中２０％）でのＦｍｏｃ切断前にＤＭＦ中で膨潤し得る。ピペリジン溶液を真空濾過で除去し、そして樹脂に結合したアミノ酸をＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２で洗浄する。アミノ酸（４等量）をＤＭＦ中でＨＯＢｔ（４等量）、ＰｙＢＯＰ（４等量）およびＤＩＰＥＡ（１０等量）で活性化し得、そしてペプチド反応容器に直接添加し得る。アミノ酸カップリングはおよそ６時間実施し得、樹脂をＤＭＦおよびＣＨ２Ｃｌ２で洗浄し得、そして遊離アミンの存在についてＫａｉｓｅｒ試験（６６）でモニターし得る。必要な場合は残基を再カップリングし得る。
【０１０７】
この手順を後のアミノ酸を用いて反復して最後から２番目のペプチド配列を生じる。樹脂に結合した五量体のアリコートをその後、式Ｉ〜Ｖの化合物と上述されたとおりカップリングして所望のペプチドを生じ得る。酸で触媒される脱保護を、適切なスカベンジャーを含有するＴＦＡ溶液を用いて実施し得、そして、粗ペプチドを氷冷エーテル中で沈殿させ得る。
【０１０８】
ペプチド精製−全般
逆相高速液体クロマトグラフィーを使用して前述の粗ペプチドを精製し得る。例えば、Ｗａｔｅｒｓ  Ｃ１８ラジアル圧縮カラムと組合せのＷａｔｅｒｓデュアルポンプ系をこの目的上使用し得る。流出液を２８０ｎｍのＵＶ吸光度によりモニターし得る。
【０１０９】
非天然アミノ酸含有ペプチドのスクリーニング
本発明は、活性若しくは薬理学的活性についてのペプチドのスクリーニング方法を提供する。該方法は：ａ）選択された天然のアミノ酸配列を有するペプチドの活性若しくは薬理学的活性を測定する段階、およびｂ）Ｎ末端が上述された式Ｉ〜Ｖを有する非天然アミノ酸である、前述のペプチドと同一のアミノ酸配列に基づき伸長若しくは切断されたペプチドの同一の活性若しくは薬理学的活性を測定する段階；ならびにｃ）段階ａ）およびｂ）からのペプチドの測定された活性若しくは薬理学的活性を比較して、段階ｂ）のペプチドが所望の活性若しくは薬理学的活性を有するかどうかを決定する段階を包含する。
【０１１０】
本発明がスクリーニングする活性は、生物学的に活性のペプチド若しくはペプチド模倣物と関連するいかなる活性も包含し得る。以下は、本スクリーニング方法で測定し得る多くの活性の部分的一覧である。
１．受容体アゴニスト／アンタゴニスト活性：これらの活性を測定するための特異的スクリーニングの例の一覧表は、“Ｔｈｅ  ＲＢＩ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ”Ｋ．Ｊ．Ｗａｔｌｉｎｇ、Ｊ．Ｗ．Ｋｅｂｅｂｉａｎ、Ｊ．Ｌ．Ｎｅｕｍｅｙｅｒ編
Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，マサチューセッツ州ナティック、１９９５、およびその中の参考文献に見出し得る。分析方法は、Ｔ．Ｋｅｎａｋｉｎ“Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ−Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ”第２版  Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク、１９９３、およびその中の参考文献に見出し得る。
２．酵素阻害：これらの活性を測定するための特異的スクリーニングの例の一覧表は、Ｈ．Ｚｏｌｌｎｅｒ“Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”、第２版  ＶＣＨ  Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、ＦＲＧ、１９８９およびその中の参考文献に見出し得る。
３．中枢神経系、自律神経系（心血管系および胃腸管）、抗ヒスタミン、抗炎症、麻酔、細胞傷害性および避妊活性：これらの活性を測定するための特異的スクリーニングの例の一覧表は、Ｅ．Ｂ．Ｔｈｏｍｐｓｏｎ、“Ｄｒｕｇ  Ｂｉｏｓｃｒｅｅｎｉｎｇ：Ｄｒｕｇ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ”、ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、ニューヨーク、１９９０、およびその中の参考文献に見出し得る。
４．抗癌活性：これらの活性を測定するための特異的スクリーニングの例の一覧表は、Ｉ．Ｊ．ＦｉｄｌｅｒとＲ．Ｊ．Ｗｈｉｔｅ“Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ”、Ｖａｎ  Ｎｏｓｔｒａｎｄ  Ｒｅｉｎｈｏｌｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ、ニューヨーク、１９８２およびその中の参考文献に見出し得る。
５．抗生物質および抗ウイルス（とりわけ抗ＨＩＶ）活性：これらの活性を測定するための特異的スクリーニングの例の一覧表は、“ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ｉｎ  Ｌａｂｏｒ
ａｔｏｒｙ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ”、第３版、Ｖ．Ｌｏｒｉａｎ編  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｅｎｓ、ボルチモア、１９９１、およびその中の参考文献に見出し得る。これらの活性を測定するための抗ＨＩＶスクリーニングの一覧表は、“ＨＩＶ  Ｖｏｌｕｍｅ  ２：Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ”、Ｊ．Ｋａｒｎ編、ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ、オックスフォード、１９９５およびその中の参考文献に見出し得る。
６．免疫調節活性：これらの活性を測定するための特異的スクリーニングの例の一覧表は、Ｖ．Ｓｔ．Ｇｅｏｒｇｉｅｖ（１９９０）“Ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｓｍａｌｌ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１１、３７３−３７８に見出し得る。
７．薬物動態特性：該スクリーニング方法でアッセイされる薬理学的活性は、とりわけ半減期、溶解性若しくは安定性を包含する。例えば、薬物動態特性の分析および測定方法は、Ｊ．−Ｐ．Ｌａｂａｕｎｅ“Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ：Ｔｏｘｏｃｉｔｙ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ”、Ｅｌｌｉｓ  Ｈｏｒｗｏｏｄ  Ｌｔｄ．、チチェスター、１９８９およびその中の参考文献に見出し得る。
【０１１１】
スクリーニング方法において、段階ａ）のペプチドは天然のアミノ酸からなることができる。あるいは、段階ａ）のペプチドは主として天然のアミノ酸を含有し得るが、しかし１個若しくは少数の非天然アミノ酸もまた含有し得る。こうしたペプチドは天然のアミノ酸より本質的になるとみなされる。
【０１１２】
スクリーニング方法において、段階ｂ）のペプチドは上述されたところの本発明の切断若しくは伸長されたペプチドであることができる。一態様において、式Ｉ〜Ｖの非天然アミノ酸の構造は、天然に存在するアミノ酸リシンおよびアルギニンのものに類似であることができる。
【０１１３】
従って、本明細書で企図しているスクリーニング方法において、いかなる伸長若しくは切断されたペプチドも、該伸長若しくは切断されたペプチドが同一若しくは異なるレベルの同一若しくは類似の活性若しくは薬理学的活性を有するかどうかを決定するように、同一の下流の配列を有しかつ既知の活性若しくは薬理学的活性を有するいずれかのペプチドと比較し得る。測定段階をどのように実施するかという詳細に依存して、本スクリーニング方法は、伸長若しくは切断されたペプチドにより表される活性若しくは薬理学的活性を検出するのにもまた使用し得る。また、該スクリーニング方法は、同一若しくは類似の活性若しくは薬理学的活性の質的および量的差違を検出かつ測定するのに使用し得る。
【０１１４】
従って、本発明の方法は、伸長若しくは切断されたペプチドの活性の変化の評価を提供する。典型的には、該ペプチドの疎水性が増大され、それは結合にデスアミノアミノ酸部分が関与する場合（例えば受容体−リガンド結合、酵素−補助因子結合、酵素−基質結合）に増大された結合活性を間接的にもたらし得、そして、結合強さは活性と相関するために、ペプチドのより高い効力（より高い測定される活性レベル）が生じ得る。
【０１１５】
さらに、本発明のデスアミノアミノ酸はペプチドの薬理学的活性もまた高め得るすなわち増大させ得る。例えば、デスアミノアミノ酸はより疎水性（すなわちより親油性）であるため、非天然アミノ酸を含有するペプチドは身体障壁（例えば血液脳、血液眼、皮膚、腸上皮）を通過することがより可能である。加えて、デスアミノアミノ酸は増大された選択性および安定性をペプチドに賦与するため、他のペプチドと比較した場合に薬理学的活性もまたスクリーニングし得る。
【０１１６】
処置
本発明はさらに、式Ｉ〜Ｖを有するアミノ酸をそのＮ末端として有する伸長若しくは切断されたペプチドを被験体に投与することを含んでなる、異常状態の被験体における処置若しくは予防方法に関する。伸長若しくは切断されたペプチドがそれから形成される基礎ペプチドは、処置若しくは予防されるべき異常状態と生化学的、生理学的、薬理学的若しくは生物学的関係を有することができるか、若しくは有すると考えることができる。異常状態は、疾患、生物学的すなわち器質の機能異常、または限定されるものでないが皮膚発疹、ざ瘡などのような化粧上の異常状態を挙げることができる、通常は疾患若しくは機能異常とみなされない望ましくない生物学的状態でありうる。被験体は、ヒトのような哺乳動物、およびイヌ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ブタのようなヒト以外の哺乳動物ならびに鳥類を包含する、医学的若しくは獣医学的患者でありうる。
【０１１７】
本発明の方法において、処置若しくは予防し得る異常状態および使用し得るペプチドは多数である。例えば、本発明の非天然アミノ酸を組み込むニューロテンシンペプチドアナログを合成し得る。本発明のこうした合成ＮＴペプチドは、肥満、糖尿病、性機能障害、パーキンソン病、アテローム硬化症、インスリン抵抗性、耐糖能異常、高コレステロール血症若しくは高トリグリセリド血症を処置するのに使用し得る。本発明の合成ＮＴペプチドは、血管拡張、筋弛緩を誘発するため若しくは食欲を低下させるためにもまた使用し得る。
【０１１８】
加えて、本発明の合成ＮＴペプチドは、高体温状態；低体温状態；胃腸潰瘍；物質濫用；うつ；アルツハイマー病；晩発性ジスキネジー；パニック発作；胃腸逆流性障害；炎症性腸症候群；下痢；胆汁（ｃｈｏｌｉｃ）；消化不良；膵炎；食道炎；胃不全麻痺；統合失調症、精神病、不安、躁鬱病、せん妄性認知症、重症精神遅滞のような神経学的疾患、ならびにハンチントン病およびトゥーレット症候群のようなジスキネジー；ＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２感染症を包含する真菌およびウイルス感染症；疼痛（すなわち鎮痛剤）；癌（胃腸腫瘍を包含する）；食思不振；過食症；喘息；パーキンソン病；急性心不全；低血圧；高血圧；尿遺残；骨粗鬆症；狭心症；心筋梗塞；アレルギー；炎症；若しくは良性前立腺肥大を処置するのに使用し得る。
【０１１９】
本発明の処置方法は、肥満若しくは他の疾患の処置に有用な他の製薬学的有効成分を本発明の合成ＮＴペプチドとともに使用する併用療法もまた包含し得る。
【０１２０】
肥満患者は、アテローム硬化症、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、高血圧、性機能障害（勃起不全を包含する）、インスリン抵抗性、耐糖能異常、糖尿病［とりわけインスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭすなわち２型糖尿病）］のようなある種の疾患、ならびに腎症、ニューロパシー、網膜症、心筋症、白内障および多嚢胞性卵巣症候群のような糖尿病と関連する疾患のより高い発生率を有することが既知である。これらの疾患は、本発明の合成ＮＴペプチドを使用して肥満を処置することにより間接的に、若しくは、本発明の合成ＮＴペプチドを使用して特定の疾患それ自身を処置することにより直接的に処置し得る。これらの疾患は、肥満の非存在下で、本発明の合成ＮＴペプチドを使用して処置し得る。
【０１２１】
本発明の一態様において、肥満患者、若しくは肥満になるという危険にさらされている患者は、１）本発明の合成ＮＴペプチド；ならびに２）肥満、糖尿病［（ＮＩＤＤＭ）ならびに腎症、ニューロパシー、網膜症、心筋症、白内障および多嚢胞性卵巣症候群のような糖尿病と関連する状態および／若しくは疾患を包含する］、アテローム硬化症、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、性機能障害（勃起不全を包含する）、インスリン抵抗性または耐糖能異常を処置するのに有用な付加的な化合物、あるいはこれらの疾患を処置するのに有用な化合物の組合せの組合せを投与され得る。
【０１２２】
肥満を処置するのに使用し得る化合物の分類の例は、Ａｄｉｐｅｘ（Ｒ）、Ｂｏｎｔｒｉｌ（Ｒ）、Ｄｅｓｏｘｙｎ  Ｇｒａｄｕｍｅｔ（Ｒ）、Ｆａｓｔｉｎ（Ｒ）、Ｉｏｎａｍｉｎ（Ｒ）およびＭｅｒｉｄｉａ（Ｒ）のような食欲抑制剤、ならびにＸｅｎｉｃａｌ（Ｒ）のようなリパーゼ阻害剤中の有効成分（１種若しくは複数）を包含する。本発明の合成ＮＴペプチドとともに使用し得る付加的な抗肥満剤は、β３−アドレナリン受容体アゴニスト、コレシストキニン−Ａアゴニスト、モノアミン再取り込み阻害剤、交感神経興奮剤、セロトニン作動薬、ドーパミンアゴニスト、メラノサイト刺激ホルモン受容体アゴニスト若しくは模倣物、メラノサイト刺激ホルモン受容体アナログ、カンナビノイド受容体アンタゴニスト、メラニン濃縮ホルモンアンタゴニスト、レプチン、レプチンアナログ、レプチン受容体アゴニスト、ガラニンアンタゴニスト、ボンベシンアゴニスト、ニューロペプチド−Ｙアンタゴニスト（ＮＰＹ−１およびＮＰＹ−５を包含する）、甲状腺様作用薬（ｔｈｙｒｏｍｉｍｅｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）、デヒドロエピアンドロステロン若しくはそのアナログ、グルココルチコイド受容体アゴニスト若しくはアンタゴニスト、オレキシン受容体アンタゴニスト、ウロコルチン結合タンパク質アンタゴニスト、グルカゴン様ペプチド−１受容体アゴニスト、ならびに毛様体神経栄養因子を包含する。
【０１２３】
本発明の別の局面において、本発明の合成ＮＴペプチドは、高血圧を処置することが既知である化合物と組合せで投与し得る。高血圧を処置するのに使用し得る化合物の分類の例は、カルシウム拮抗薬、ＡＣＥ阻害薬、利尿薬、アンジオテンシンＩＩ受容体阻害薬、β−遮断薬およびα−アドレナリン遮断薬を包含する。加えて、上で列挙された分類の化合物の組合せが高血圧を処置するのに使用されている。本発明の合成ＮＴペプチドと組合せで使用し得る特定の化合物のいくつかの例は、キナプリル；ベシル酸塩を包含するアムロジピン；ニフェジピン；メシル酸塩を包含するドキサゾシン；および塩酸塩を包含するプラゾシンを包含する。
【０１２４】
別の局面において、本発明の合成ＮＴペプチドは、耐糖能異常、インスリン抵抗性、インスリン依存性糖尿病（１型）およびインスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭすなわち２型）を包含する糖尿病の処置に有用な化合物と組合せで使用し得る。ニューロパシー、腎症、網膜症、心筋症若しくは白内障のような糖尿病合併症もまた糖尿病の処置に包含されることを意図している。
【０１２５】
本発明の合成ＮＴペプチドはアルドース還元酵素阻害剤と組合せでもまた使用し得る。アルドース還元酵素阻害剤は、糖尿病性ニューロパシーおよび腎症のような糖尿病の合併症から生じる状態を処置することにおけるそれらの利用性について広範に知られるようになった化合物の一分類を構成する。こうした化合物は当業者に公知であり、そして標準的生物学的試験により容易に同定される。
【０１２６】
本発明の合成ＮＴペプチドは、ソルビトール脱水素酵素阻害剤と組合せでもまた使用し得る。ソルビトール脱水素酵素阻害剤は果糖濃度を低下させ、そしてニューロパシー、網膜症、腎症、心筋症、微小血管症および大血管症のような糖尿病合併症を処置若しくは予防するのに使用されている。
【０１２７】
本発明の合成ＮＴペプチドは、グルココルチコイド受容体アンタゴニストと組合せでもまた使用し得る。グルココルチコイド受容体（ＧＲ）はグルココルチコイド応答性細胞に存在し、そこでそれはそれがアゴニストにより刺激されるまで不活性状態でサイトゾル中に存する。刺激に際して、グルココルチコイド受容体は細胞核に転移し、そこでそれはＤＮＡおよび／若しくはタンパク質（１種若しくは複数）と特異的に相互作用しかつグルココルチコイド応答性の様式で転写を調節する。ＧＲアンタゴニストは、身体中のグルココルチコイドの過剰若しくは欠乏と関連した疾患の処置に使用し得る。であるから、それらは、以下、すなわち、肥満、糖尿病、心血管系疾患、高血圧、シンドロームＸ、うつ、不
安、緑内障、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）若しくは後天的免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、神経変性（例えばアルツハイマー病およびパーキンソン病）、認知増強、クッシング症候群、アジソン病、骨粗鬆症、虚弱（ｆｒａｉｌｔｙ）、炎症性疾患（変形性関節症、関節リウマチ、喘息および鼻炎のような）、副腎機能障害、ウイルス感染症、免疫不全、免疫調節、自己免疫疾患、アレルギー、創傷治癒、強迫性行動、多剤耐性、嗜癖、精神病、食思不振、悪液質、心的外傷後ストレス症候群、術後骨折、医学的異化作用、ならびに筋虚弱の予防を処置するのに使用しうる。
【０１２８】
加えて、本発明の合成ＮＴペプチドは、コレステロール生合成阻害剤およびコレステロール吸収阻害剤、とりわけＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤およびＨＭＧ−ＣｏＡ合成酵素阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素および合成酵素遺伝子発現阻害剤、ＣＥＴＰ阻害剤、胆汁酸封鎖剤、フィブラート類、ＡＣＡＴ阻害剤、スクアレン合成酵素阻害剤、抗酸化剤ならびにナイアシンのような他の製薬学的剤とともに投与し得る。本発明の合成ＮＴペプチドはまた、血漿コレステロール濃度を低下させるよう作用する天然に存在する化合物と組合せでも投与しうる。これらの天然に存在する化合物は栄養補給食品と一般に呼ばれ、そして例えばニンニク抽出液、Ｂｅｎｅｃｏｌ（Ｒ）およびナイアシンを包含する。
【０１２９】
本発明の合成ＮＴペプチドを、とりわけ肥満、高脂血症、高リポタンパク質血症、シンドロームＸなどを包含する、過剰のトリグリセリド、遊離脂肪酸、コレステロール、コレステロールエステル若しくはブドウ糖の存在から生じる状態の処置で典型的に使用される、リパーゼ阻害剤および／若しくはグルコシダーゼ阻害剤とともに投与することもまた企図している。
【０１３０】
いかなるリパーゼ阻害剤若しくはグルコシダーゼ阻害剤も本発明の合成ＮＴペプチドとともに使用しうる。好ましいリパーゼ阻害剤はオルリスタットのような胃若しくは膵リパーゼ阻害剤を含んでなる。好ましいグルコシダーゼ阻害剤はアミラーゼ阻害剤を含んでなる。リパーゼ阻害剤は、食事のトリグリセリドの遊離脂肪酸およびモノグリセリドへの代謝的切断を阻害する化合物である。正常な生理学的条件下で、脂質分解は、リパーゼ酵素の活性化されたセリン部分のアシル化を必要とする２段階過程を介して起こる。これが脂肪酸−リパーゼヘミアセタール中間体の産生に至り、これがその後切断されてジグリセリドを遊離する。さらなる脱アシル化後に、リパーゼ−脂肪酸中間体が切断されて遊離リパーゼ、モノグリセリドおよび脂肪酸をもたらす。結果として生じる遊離脂肪酸およびモノグリセリドは、胆汁酸−リン脂質のミセルに取り込まれ、それがその後小腸の刷子縁の水準で吸収される。該ミセルはついにはカイロミクロンとして末梢循環に進入する。従って、摂取された脂肪前駆体の吸収を選択的に制限若しくは阻害するリパーゼ阻害剤を包含する化合物は、肥満、高脂血症、高リポタンパク質血症、シンドロームＸなどを包含する状態の処置で有用である。多様なリパーゼ阻害剤が当業者に既知である。
【０１３１】
いかなるグルコシダーゼ阻害剤も本発明の合成ＮＴペプチドとともに使用しうるが、しかしながら、一般に好ましいグルコシダーゼ阻害剤はアミラーゼ阻害剤である。アミラーゼ阻害剤は、デンプン若しくはグリコーゲンの麦芽糖への酵素的分解を阻害するグルコシダーゼ阻害剤である。こうした酵素的分解の阻害は、ブドウ糖および麦芽糖を包含する生物学的に利用可能な糖の量、ならびにそれから生じる付随する有害な状態の低下において有益である。グルコシダーゼおよびアミラーゼ阻害剤は当業者に既知である。
【０１３２】
加えて、本発明は、アポＢ分泌／ＭＴＰ阻害剤と組合せの本発明の合成ＮＴペプチドの使用を包含する。多様なアポＢ分泌／ＭＴＰ阻害剤が当業者に既知である。本発明の合成ＮＴペプチドは、ニューロテンシン受容体リガンドである１種若しくはそれ以上の付加的な化合物と組合せでもまた使用し得る。
【０１３３】
本発明の非天然アミノ酸はまた、下に示されるところの異常状態を処置するために他のペプチドにも組み込み得る。
【０１３４】
ＢおよびＴ細胞活性を誘発するペプチドを、ブドウ膜炎、コラーゲン誘発性、アジュバント関節炎および関節リウマチ、甲状腺炎、重症筋無力症、多発性硬化症ならびに糖尿病を包含する自己免疫疾患を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例はインターロイキン（Ａｕｌｉｔｚｋｙ，ＷＥ；Ｓｃｈｕｌｅｒ，Ｍ；Ｐｅｓｃｈｅｌ，Ｃ．；Ｈｕｂｅｒ，Ｃ．；Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎｓ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｒｏｇｙ
ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｕｓｅ．Ｄｒｕｇｓ．４８（５）：６６７−７７、１９９４  Ｎｏｖ．で言及される）およびサイトカイン（Ｐｅｔｅｒｓ，Ｍ．；Ａｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｉｍｍｕｎｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ａｎｄ  ｖｉｒａｌ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：ａｎ  ｏｖｅｒｖｉｅｗ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．２３（４）：９０９−１６、１９９６  Ａｐｒ．で言及される）である。
【０１３５】
エンケフリンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストを、ＡＩＤＳ、ＡＲＣおよび癌、疼痛調節、ハンチントン病、パーキンソン病を処置するのに使用し得る。
【０１３６】
ＬＨＲＨならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、前立腺腫瘍、ならびに乳癌を包含する生殖生理病理学および不妊症を処置するのに使用し得る。
【０１３７】
決定的に重要な酵素、癌遺伝子若しくは癌遺伝子産物、腫瘍抑制遺伝子およびそれらの産物、増殖因子およびそれらの対応する受容体を標的とするペプチドおよびペプチド模倣物を、癌を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｕｎｇｅｒ，Ｃ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｃｏｎｃｅｐｔｓ  ｏｆ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｉｎ  ｍｅｄｉｃａｌ  ｏｎｃｏｌｏｇｙ：ｎｅｗ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ．１２２（４）：１８９−９８、１９９６に記述されている。
【０１３８】
ニューロペプチドＹおよび他の膵ポリペプチド、ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、ストレス、不安、うつおよび関連する血管収縮活動を処置するのに使用し得る。
【０１３９】
胃阻害性ポリペプチド、グルコース依存性インスリン分泌性ポリペプチド、ＰＡＣＡＰ／グルカゴンならびにグルカゴン様ポリペプチド−１および２を包含するグルコインクレチン、ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、ＩＩ型糖尿病性高血糖症を処置するのに使用し得る。
【０１４０】
心房性ナトリウム利尿因子ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストはうっ血性心不全を処置するのに使用し得る。
【０１４１】
インテグリンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、骨粗鬆症、瘢痕形成、骨合成、血管閉塞の阻害、ならびに腫瘍浸潤および転移の阻害を処置するのに使用し得る。
【０１４２】
グルカゴン、グルカゴン様ペプチド１、ＰＡＣＡＰ／グルカゴンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、糖尿病性心血管系緊急事態を処置するのに使用し得る。
【０１４３】
抗血栓性ペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは心血管系および脳血管系疾患を処置するのに使用し得る。これらのペプチドＲＧＤ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒ
ｏ−Ａｒｇおよび命名された他者の例は、Ｏｊｉｍａ  Ｉ．；Ｃｈａｋｒａｖａｒｔｙ  Ｓ．；Ｄｏｎｇ  Ｑ．Ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ：ｆｒｏｍ  ＲＧＤ
ｔｏ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｍｉｍｅｔｉｃｓ．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．３（４）：３３７−６０、１９９５に記述されている。
【０１４４】
サイトカイン／インターロイキンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、炎症性疾患、免疫応答機能不全、造血、菌状息肉症、再生不良性貧血、血小板減少症、および悪性黒色腫を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、ＡｕｌｉｔｚｋｙらおよびＰｅｔｅｒｓらで言及されるインターロイキンである。
【０１４５】
エンドセリンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、動脈性高血圧症、心筋梗塞、うっ血性心不全、アテローム硬化症、ショック状態、腎不全、喘息および血管痙攣を処置するのに使用し得る。
【０１４６】
ナトリウム利尿ホルモンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは心血管系疾患および急性腎不全を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｅｓｐｉｎｅｒ，Ｅ．Ａ．；Ｒｉｃｈａｒｄｓ，Ａ．Ｍ．；Ｙａｎｄｌｅ，Ｔ．Ｇ．；Ｎｉｃｈｏｌｌｓ，Ｍ．Ｇ．；Ｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｃ  ｈｏｒｍｏｎｅｓ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ＆  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  Ｃｌｉｎｉｃｓ  ｏｆ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ．２４（３）：４８１−５０９、１９９５で命名かつ記述されている。
【０１４７】
チロシンキナーゼを活性化若しくは阻害する、またはＴＫを活性化若しくは阻害するペプチドに結合するペプチド、ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、慢性骨髄性および急性リンパ球性白血病、乳房および卵巣癌、ならびに他のチロシンキナーゼ関連疾患を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｓｍｉｔｈｇａｌｌ，ＴＥ．；ＳＨ２  ａｎｄ  ＳＨ３  ｄｏｍａｉｎｓ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ａｎｔｉ−ｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｄｅｓｉｇｎ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ
Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ＆  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．３４（３）：１２５−３２、１９９５に記述されている。
【０１４８】
レニン阻害剤アナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、高血圧症およびうっ血性心不全を包含する心血管系疾患を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，Ｓ．Ｈ．；Ｒｅｎｉｎ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｒｕｇｓ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｙ．９（５）：６４５−５５、１９９５に記述されている。
【０１４９】
アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、高血圧症およびうっ血性心不全を包含する心血管系疾患を処置するのに使用し得る。
【０１５０】
チロシンホスホリラーゼを活性化若しくは阻害するペプチドは心血管系疾患を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ，Ａ．Ｋ．；Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｓｙｓｔｅｍ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ＆  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．１４９−１５０：８７−９４、１９９５に記述されている。
【０１５１】
ペプチドに基づく抗ウイルス薬はウイルス性疾患を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｔｏｅｓ，Ｒ．Ｅ．；Ｆｅｌｔｋａｍｐ，Ｍ．Ｃ．；Ｒｅｓｓｉｎｇ，Ｍ．Ｅ．；Ｖｉｅｒｂｏｏｍ，Ｍ．Ｐ．；Ｂｌｏｍ，Ｒ．Ｊ．；Ｂｒａｎｄｔ，Ｒ．Ｍ．；Ｈａｒｔｍａｎ，Ｍ．；Ｏｆｆｒｉｎｇａ，Ｒ．；Ｍｅｌｉｅｆ，Ｃ．Ｊ．；Ｋａｓｔ，Ｗ．Ｍ．；Ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ａｇａｉｎｓｔ  ＤＮＡ  ｔｕｍｏｒ  ｖｉｒｕｓｅｓ：ｐｏｓｓｉｂｉｌｉｔｉｅｓ  ｆｏｒ  ｐｅｐｔｉｄｅ−ｂａｓｅｄ  ｖａｃｃｉｎｅｓ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｅ  ｅｓｃａｐｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ．２３（３）：６９２−６、１９９５に記述されている。
【０１５２】
副腎皮質刺激ホルモン放出因子ならびにペプチドアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、高ＣＲＦと関連する疾患、すなわちアルツハイマー病、神経性食思不振、抑うつ障害、関節炎および多発性硬化症を処置するのに使用し得る。
【０１５３】
血小板由来創傷治癒製剤（ｐｌａｔｅｌｅｔ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｗｏｕｎｄ−ｈｅａｌｉｎｇ  ｆｏｒｍｕｌａ）（ＰＤＷＨＦ）のペプチドアゴニストおよびアンタゴニストは、ドナー組織の制限および外科手術における創傷治癒の制約の治療として使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｒｕｄｋｉｎ，Ｇ．Ｈ．；Ｍｉｌｌｅｒ，Ｔ．Ａ．；Ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒｓ  ｉｎ  ｓｕｒｇｅｒｙ．Ｐｌａｓｔｉｃ  ＆  Ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  Ｓｕｒｇｅｒｙ．９７（２）：４６９−７６、１９９６に記述されている。
【０１５４】
フィブロネクチン、フィブリノペプチド阻害剤ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、転移（すなわち酵素阻害、腫瘍細胞移動、侵襲および転移）を処置するのに使用し得る。
【０１５５】
ケモカイン（インターロイキン−８、ＲＡＮＴＥＳおよび単球走化性ペプチドを包含するサイトカインの種類）アナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、関節炎、過敏症、血管新生、腎疾患、糸球体腎炎、炎症および造血を処置するのに使用し得る。
【０１５６】
神経エンドペプチダーゼ阻害剤ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、高血圧および炎症を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｇｒｅｇｏｉｒｅ，Ｊ．Ｒ；Ｓｈｅｐｓ，Ｓ．Ｇ；Ｎｅｗｅｒ  ａｎｔｉｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ  ｄｒｕｇｓ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ．１０（５）：４４５−９、１９９５に記述されている。
【０１５７】
サブスタンスＰならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、免疫系の機能障害、疼痛伝達／認識、ならびに自律神経反射および行動を処置するのに使用し得る。
【０１５８】
α−メラノサイト刺激ホルモンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、ＡＩＤＳ、関節リウマチおよび心筋梗塞を処置するのに使用し得る。
【０１５９】
ブラジキニン（ＢＫ）ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、炎症性疾患（浮腫など）、喘息、アレルギー反応（鼻炎など）、麻酔用途および敗血症ショックを処置するのに使用し得る。
【０１６０】
セクレチンは心血管系緊急事態を処置するのに使用し得る。
【０１６１】
ＧｎＲＨならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストはホルモン依存性の乳癌および前立腺腫瘍を処置するのに使用し得る。
【０１６２】
ソマトスタチンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは消化管神経内分泌腫瘍を処置するのに使用し得る。
【０１６３】
ガストリン、ガストリン放出ペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、小細胞肺癌および他の悪性病変における化学療法若しくは外科手術の補助療法と
して、またはアレルギー性呼吸器疾患、喘息およびアレルギー性鼻炎を処置するのに使用し得る。
【０１６４】
ラミニン、ラミニン誘導体転移抑制薬ＹＩＧＳＲペプチド、ラミニン由来合成ペプチドアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、腫瘍細胞増殖、血管新生、再生研究、糖尿病での眼の血管新生、および虚血を処置するのに使用し得る。この範疇のペプチドは白血病細胞の腫瘍増殖および転移を阻害し得、かつ、白血病性浸潤の潜在的治療的試薬として有用でありうる。この配列を含有するペプチドは実験的転移もまた阻害する。例示的参考文献は、ＭｃＧｏｗａｎ  ＫＡ．Ｍａｒｉｎｋｏｖｉｃｈ  ＭＰ．Ｌａｍｉｎｉｎｓ  ａｎｄ  ｈｕｍａｎ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．５１（３）：２６２−７９、２０００  Ｎｏｖ  １；Ｙｏｓｈｉｄａ  Ｎ．Ｉｓｈｉｉ  Ｅ．Ｎｏｍｉｚｕ  Ｍ．Ｙａｍａｄａ  Ｙ．Ｍｏｈｒｉ  Ｓ．Ｋｉｎｕｋａｗａ  Ｎ．Ｍａｔｓｕｚａｋｉ  Ａ．Ｏｓｈｉｍａ  Ｋ．Ｈａｒａ  Ｔ．Ｍｉｙａｚａｋｉ  Ｓ．Ｔｈｅ  ｌａｍｉｎｉｎ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ＹＩＧＳＲ（Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ）ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｈｕｍａｎ  ｐｒｅ−Ｂ  ｌｅｕｋａｅｍｉｃ  ｃｅｌｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｏｒｇａｎｓ  ｉｎ  ＳＣＩＤ  ｍｉｃｅ．Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ．８０（１２）：１８９８−９０４、１９９９を包含する。これらのペプチドの例は、Ｋｌｅｉｎｍａｎ，Ｈ．Ｋ．；Ｗｅｅｋｓ，Ｂ．Ｓ．；Ｓｃｈｎａｐｅｒ，Ｈ．Ｗ．；Ｋｉｂｂｅｙ，Ｍ．Ｃ．；Ｙａｍａｍｕｒａ，Ｋ．；Ｇｒａｎｔ，Ｄ．Ｓ．；Ｔｈｅ  ｌａｍｉｎｉｎｓ：ａ  ｆａｍｉｌｙ  ｏｆ  ｂａｓｅｍｅｎｔ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｉｍｐｏｒｔａｎｔ  ｉｎ  ｃｅｌｌ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒ  ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ．Ｖｉｔａｍｉｎｓ  ＆  Ｈｏｒｍｏｎｅｓ．４７：１６１−８６、１９９３にもまた記述されている。
【０１６５】
デフェンシン、コルチコスタチン（ｃｏｒｔｉｃｏｓｔａｔｉｎ）、デルマセプチン（ｄｅｒｍａｓｅｐｔｉｎ）、マンガイニン（ｍａｎｇａｉｎｉｎ）ならびに他の抗生物質（抗菌（ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ）および抗菌（ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ））ペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、感染症、組織炎症および内分泌調節を処置するのに使用し得る。
【０１６６】
バソプレッシンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは神経学的障害、ストレスおよび尿崩症を処置するのに使用し得る。
【０１６７】
オキシトシンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、神経学的障害を処置しかつ分娩を誘発するのに使用し得る。
【０１６８】
ＡＣＴＨ関連ペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、神経栄養性、神経保護性、および末梢性脱髄性ニューロパシー剤として使用し得る。
【０１６９】
アミロイドβペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストはアルツハイマー病を処置するのに使用し得る。
【０１７０】
上皮増殖因子、受容体、ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、壊死性腸炎、ゾリンジャー・エリソン症候群、胃腸潰瘍形成、大腸炎および先天性微絨毛萎縮癌腫（ａｔｒｏｐｈｙｃａｒｃｉｎｏｍａ）を処置するのに使用し得る。
【０１７１】
白血球接着分子およびそれらのリガンド、ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、アテローム硬化症、炎症を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例
は、Ｂａｒｋｅｒ，Ｊ．Ｎ．；Ａｄｈｅｓｉｏｎ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｉｎ  ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｃｉｂａ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ．１８９：９１−１０１に記述されている。
【０１７２】
主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）結合ペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、自己免疫性、免疫機能障害性、免疫調節性疾患を処置するのに使用し得、かつ、ならびにそれらの対応する治療に使用し得る。これらのペプチドの例は、Ａｐｐｅｌｌａ，Ｅ．；Ｐａｄｌａｎ，Ｅ．Ａ．；Ｈｕｎｔ，Ｄ．Ｆ；Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ｎａｔｕｒａｌｌｙ  ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｂｏｕｎｄ  ｂｙ  ｃｌａｓｓ  Ｉ  ａｎｄ  ｃｌａｓｓ  ＩＩ  ｍａｊｏｒ  ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．ＥＸＳ．７３：１０５−１９、１９９５に記述されている。
【０１７３】
副腎皮質刺激ホルモン放出因子は神経学的障害を処置するのに使用し得る。
【０１７４】
ニューロトロフィン（脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、神経成長因子およびニューロトロフィン３を包含する）ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、神経学的障害を処置するのに使用し得る。
【０１７５】
細胞傷害性Ｔ細胞活性化ペプチドは感染性疾患および癌を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｃｈｅｓｎｕｔ  Ｒ．Ｗ．；Ｓｅｔｔｅ，Ａ．；Ｃｅｌｉｓ，Ｅ．；Ｗｅｎｔｗｏｒｔｈ，Ｐ．；Ｋｕｂｏ，Ｒ．Ｔ．；Ａｌｅｘａｎｄｅｒ，Ｊ．；Ｉｓｈｉｏｋａ，Ｇ．；Ｖｉｔｉｅｌｌｏ，Ａ．；Ｇｒｅｙ，Ｈ．Ｍ；Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  ｔｅｓｔｉｎｇ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ−ｂａｓｅｄ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ｔ−ｃｅｌｌ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｔｏ  ｔｒｅａｔ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  ｄｉｓｅａｓｅｓ  ａｎｄ  ｃａｎｃｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．６：８４７−７４、１９９５に記述されている。
【０１７６】
ＨＩＶ−１およびＨＴＬＶ−Ｉレトロウイルス感染症の予防のためのペプチド免疫原はＡＩＤＳを処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｈａｒｔ，Ｍ．Ｋ．；Ｐａｌｋｅｒ，Ｔ．Ｊ．；Ｈａｙｎｅｓ，ＢＦ；Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｓ  ｆｏｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ＨＩＶ−１  ａｎｄ  ＨＴＬＶ−Ｉ  ｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．６：８２１−４５、１９９５に記述されている。
【０１７７】
ガラニンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、アルツハイマー病、うつ、摂食障害、慢性疼痛、虚血性損傷の予防、および成長ホルモン調節を処置するのに使用し得る。
【０１７８】
タキキニン（ニューロキニンＡおよびニューロキニンＢ）ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、疼痛伝達／認識、ならびに自律神経反射および行動において処置するため使用し得る。
【０１７９】
ＲＧＤ含有ペプチドは、細胞接着、抗血栓薬および急性腎不全が関与する多様な疾患を処置するのに使用し得る。
【０１８０】
骨形成性増殖ペプチド（ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ  ｇｒｏｗｔｈ  ｐｅｐｔｉｄｅ）ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは全身性骨量減少の処置として使用し得
る。これらのペプチドの例は、Ｂａｂ  ＩＡ．Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ  ｇｒｏｗｔｈ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｉｎ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ，ａｎｄ  ｈｅｍｏｐｏｉｅｓｉｓ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ
Ｏｒｔｈｏｐａｅｄｉｃｓ  ＆  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．（３１３）：６４−８、１９９５に記述されている。
【０１８１】
副甲状腺ホルモン、副甲状腺ホルモン関連ペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、カルシウム恒常性（高カルシウム血症）、骨代謝、血管疾患およびアテローム硬化症に影響を及ぼす疾患を処置するのに使用し得る。
【０１８２】
カリジンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、組織傷害若しくは炎症およびＣＮＳの病理学的状態を知らせる疼痛を処置するのに使用し得る。
【０１８３】
Ｔ細胞受容体ペプチドワクチンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは免疫療法で使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｂｒｏｓｔｏｆｆ，ＳＷ；Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｖａｃｃｉｎｅｓ  ａｓ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．Ａｇｅｎｔｓ  ＆  Ａｃｔｉｏｎｓ−Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ．４７：５３−８、１９９５に記述されている。
【０１８４】
血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、非腫瘍性過剰増殖障害、ドナー組織の制限および外科手術における創傷治癒の制約の治療を処置するのに使用し得る。
【０１８５】
アミリン、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、インスリン依存性糖尿病を処置するのに使用し得る。
【０１８６】
血管作用性小腸ポリペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、アレルギー性呼吸器疾患、喘息およびアレルギー性鼻炎、ならびに生殖機能の神経制御を処置するのに使用し得る。
【０１８７】
成長ホルモン放出ホルモンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、成長ホルモン欠乏症および免疫調節を処置するのに使用し得る。
【０１８８】
ＨＩＶプロテアーゼ阻害ペプチドはＡＩＤＳを処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｂｕｇｅｌｓｋｉ，Ｐ．Ｊ．；Ｋｉｒｓｈ，Ｒ．；Ｈａｒｔ，Ｔ．Ｋ；ＨＩＶ  ｐｒｏｔｅａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｎ  ｖｉｒａｌ  ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ．５６（３）：３７４−８０、１９９４に記述されている。
【０１８９】
サイモポエチン活性フラグメントペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、関節リウマチおよびウイルス感染症を処置するのに使用し得る。
【０１９０】
セクロピンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは抗菌薬として使用し得る。
【０１９１】
甲状腺放出ホルモンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、脊髄傷害およびショックを処置するのに使用し得る。
【０１９２】
エリスロポエチンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは貧血を処置す
るのに使用し得る。
【０１９３】
線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、受容体ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、骨形成の刺激としてであり得、ならびに、カポジ肉腫、ニューロン再生、前立腺増殖、腫瘍増殖阻害および血管新生の処置として使用し得る。
【０１９４】
幹細胞因子ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは貧血を処置するのに使用し得る。
【０１９５】
ＧＰ１２０、ＧＰ１６０、ＣＤ４フラグメントペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストはＡＩＤＳを処置するのに使用し得る。
【０１９６】
インスリン様成長因子、受容体ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、乳癌および他の癌、インスリン非依存性糖尿病、細胞増殖、アポトーシス、造血、ＡＩＤＳ、成長障害、骨粗鬆症およびインスリン抵抗性を処置するのに使用し得る。
【０１９７】
コロニー刺激因子（顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球コロニー刺激因子、およびマクロファージコロニー刺激因子ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、貧血を処置するのに使用し得る。
【０１９８】
ケントシン（ｋｅｎｔｓｉｎ）ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは免疫調節に使用し得る。
【０１９９】
リンパ球活性化ペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは免疫調節に使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｌｏｌｅｉｔ，Ｍ．；Ｄｅｒｅｓ，Ｋ．；Ｗｉｅｓｍｕｌｌｅｒ，Ｋ．Ｈ．；Ｊｕｎｇ，Ｇ．；Ｅｃｋｅｒｔ，Ｍ．；Ｂｅｓｓｌｅｒ，Ｗ．Ｇ．；Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ：ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｏｖｅｌ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｅｇｍｅｎｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｈｏｐｐｅ−Ｓｅｙｌｅｒ．３７５（６）：４０７−１２、１９９４  Ｊｕｎに記述されている。
【０２００】
タフトシンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは免疫調節に使用し得る。
【０２０１】
プロラクチンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、リウマチ性疾患、全身性エリテマトーデスおよびｈｙｐｅｒｐｒｏｌａｃｅｍｉａを処置するのに使用し得る。
【０２０２】
アンジオテンシンＩＩおよび受容体（１種若しくは複数）ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、高血圧、血行動態調節、神経学的障害、糖尿病性腎症、ａｏｒｔｏａｒｔｅｒｉｔｉｅｓ誘発性ＲＶＨ、高アルドステロン症、重金属誘発性の心血管系の影響、糖尿病および甲状腺機能障害を処置するのに使用し得る。
【０２０３】
ダイノルフィンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、神経学的障害、疼痛管理、痛覚過敏、脊髄傷害および癲癇を処置するのに使用し得る。
【０２０４】
カルシトニンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、神経学的障害、
免疫系の機能障害、カルシウム恒常性および骨粗鬆症を処置するのに使用し得る。
【０２０５】
下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ポリペプチドは、成長におけるある役割、シグナル伝達血管活性の役割、未だ決定されていない疾患でのまさにその役割を演じ得る。
【０２０６】
コレシストキニンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、摂食障害、パニック障害および抗オピオイド特性を処置するのに使用し得る。
【０２０７】
ペプスタチンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、ペプシンおよびＨＩＶプロテアーゼ阻害剤（ＡＩＤＳ）として使用し得る。
【０２０８】
ベスタチンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、筋ジストロフィー、抗癌、抗白血病、免疫応答調節物質および急性非リンパ球性白血病を処置するのに使用し得る。
【０２０９】
ロイペプチンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、プロテアーゼ阻害剤、未だ決定されていない疾患でのまさにその役割として使用し得る。
【０２１０】
黄体形成ホルモンおよび放出ホルモンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは不妊症男性避妊薬として使用し得る。
【０２１１】
ニューロテンシンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、例えば、例えば神経保護を提供するように体温下降を誘発することにより例えば卒中の犠牲者を処置するための抗精神病、鎮痛、抗癌および／若しくは神経保護剤として使用し得る。
【０２１２】
モチリンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは胃排出の制御に使用し得る。
【０２１３】
インスリンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは糖尿病を処置するのに使用し得る。
【０２１４】
トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、細胞増殖および分化、癌処置、免疫調節、ドナー組織の制限、および外科手術における創傷治癒の制約の治療に使用し得る。
【０２１５】
骨形成タンパク質（ＢＭＰ）ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、ドナー組織の制限、骨形成、および外科手術における創傷治癒の制約の治療として使用し得る。
【０２１６】
ボンベシンおよびエンテロスタチン（ｅｎｔｅｒｏｓｔａｔｉｎ）、ならびにそれらのアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、腫瘍細胞の増殖、摂食の調節および神経内分泌機能を予防するのに使用し得る。これらのペプチドは上述されたニューロメジンの上位範疇（ｓｕｐｅｒｃａｔｅｇｏｒｙ）内にある。これらのペプチドは、Ｙａｍａｄａ
Ｋ．Ｗａｄａ  Ｅ．Ｗａｄａ  Ｋ．Ｂｏｍｂｅｓｉｎ−ｌｉｋｅ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ：ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｎ  ｆｏｏｄ  ｉｎｔａｋｅ  ａｎｄ  ｓｏｃｉａｌ  ｂｅｈａｖｉｏｕｒ  ｗｉｔｈ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｋｎｏｃｋ−ｏｕｔ  ｍｉｃｅ．Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．３２（８）：５１９−２９、２０００  Ｎｏｖ．；Ｏｈｋｉ−Ｈａｍａｚａｋｉ  Ｈ．Ｎｅｕｒｏｍｅｄｉｎ  Ｂ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ．６２（３）：２９７−３１２、２０００  Ｏｃｔ．；Ｓｔｉｌｌ  ＣＤ．Ｆｕｔｕｒｅ  ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  ｗｅｉｇｈｔ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ．Ｊｏｕ
ｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｏｓｔｅｏｐｈａｔｈｉｃ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ．９９（１０  Ｓｕ  Ｐｔ  ２）：Ｓ１８−９、１９９９；Ｍａｒｔｉｎｅｚ
Ｖ．Ｔａｃｈｅ  Ｙ．Ｂｏｍｂｅｓｉｎ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｂｒａｉｎ−ｇｕｔ  ａｘｉｓ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ．２１（１１）：１６１７−２５、２０００；Ａｆｆｅｒｅｎｔ
ｓｉｇｎａｌｓ  ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ  ｆｏｏｄ  ｉｎｔａｋｅ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ．５９（３）：３７３−８４、２０００；Ｔａｋｅｎａｋａ  Ｙ．Ｎａｋａｍｕｒａ  Ｆ．Ｊｉｎｓｍａａ  Ｙ．Ｌｉｐｋｏｗｓｋｉ  ＡＷ．Ｙｏｓｈｉｋａｗａ  Ｍ．Ｅｎｔｅｒｏｓｔａｔｉｎ（ＶＰＤＰＲ）ｈａｓ  ａｎｔｉ−ａｎａｌｇｅｓｉｃ  ａｎｄ  ａｎｔｉ−ａｍｎｅｓｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＆  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．６５（１）：２３６−８、２００１  Ｊのような例示的参考文献に記述されている。
【０２１７】
グルカゴン、グルカゴン様ペプチド１ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、糖尿病の心血管系緊急事態を処置するのに使用し得る。
【０２１８】
パンクレアスタチン、クロモグラニンＡ、ＢおよびＣ、ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニスト−インスリン分泌、外分泌性膵分泌および胃酸分泌の阻害、ならびにｅｇｒａｄａｔｉ分泌の刺激。
【０２１９】
エンドルフィンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、神経学的障害、疼痛を軽減すること、オピオイド濫用の処置、肥満および糖尿病を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｄａｌａｙｅｕｎ，Ｊ．Ｆ．；Ｎｏｒｅｓ，Ｊ．Ｍ．；Ｂｅｒｇａｌ，Ｓ．；Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｂｅｔａ−ｅｎｄｏｒｐｈｉｎｓ．Ａ  ｃｌｏｓｅ−ｕｐ  ｖｉｅｗ  ａｎｄ  ａ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ．Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ＆  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ．４７（８）：３１１−２０、１９９３に命名かつ記述されている。
【０２２０】
（限定されるものでないが）副腎ペプチドＥ、αカゼインフラグメント、βカソモルフィン、デルモルフィン、キョートルフィン、メトファミド（ｍｅｔｏｐｈａｍｉｄｅ）ニューロペプチドＦＦ（ＮＰＦＦ）、メラノサイト阻害因子を挙げることができる雑多なオピオイドペプチド、ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、神経学的障害、疼痛を軽減することを処置するため、ならびにオピオイド濫用の処置に使用し得る。
【０２２１】
バソトシンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、決定されるべき臨床用途に使用し得る。
【０２２２】
タンパク質キナーゼＣおよび阻害剤ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、癌、アポトーシス、平滑筋機能およびアルツハイマー病を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｐｈｉｌｉｐ，Ｐ．Ａ．；Ｈａｒｒｉｓ，Ａ．Ｌ；Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｆｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  Ｃ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ＆  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．７８：３−２７、１９９５に命名かつ記述されている。
【０２２３】
アミロイド、アミロイド線維素、フラグメント、ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、神経変性疾患および糖尿病を処置するのに使用し得る。
【０２２４】
カルパインおよび他のカルモジュリン阻害性タンパク質、ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、神経変性障害、脳虚血、白内障、心筋虚血、筋ジストロフィーおよび血小板凝集を処置するのに使用し得る。
【０２２５】
カリブドトキシンＡ、アパミンならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、神経変性疾患、ならびに疼痛および脳虚血の処置に使用し得る。
【０２２６】
ホスホリパーゼＡ２および受容体阻害／活性化ペプチドならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、急性膵炎、膵癌、腹部外傷、ならびに炎症、例えば敗血症、感染症、急性膵炎、多様な形態の関節炎、癌、妊娠の合併症および術後状態を処置するのに使用し得る。
【０２２７】
カリウムチャンネル活性化および阻害タンパク質ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、多様な疾患を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｅｄｗａｒｄｓ，Ｇ．；Ｗｅｓｔｏｎ，Ａ．Ｈ；Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ
ｐｏｔａｓｓｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｏｐｅｎｅｒｓ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｒｕｇｓ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｙ．９  Ｓｕｐｐｌ  ２：１８５−９３、１９９５  Ｍａｒ．に記述されている。
【０２２８】
ＩｇＧ活性化物質、阻害剤ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、自己免疫疾患および免疫機能障害を処置するのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｍｏｕｔｈｏｎ，Ｌ．；Ｋａｖｅｒｉ，Ｓ．Ｖ．；Ｓｐａｌｔｅｒ，Ｓ．Ｈ．；Ｌａｃｒｏｉｘ−Ｄｅｓｍａｚｅｓ，Ｓ．；Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｃ．；Ｄｅｓａｉ，Ｒ．；Ｋａｚａｔｃｈｋｉｎｅ，Ｍ．Ｄ．；Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  ａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ  ｉｍｍｕｎｅ  ｇｌｏｂｕｌｉｎ  ｉｎ  ｉｍｍｕｎｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ＆  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１０４  Ｓｕｐｐｌ  １：３−９、１９９６に記述されている。
【０２２９】
内毒素および阻害剤ならびにアナログ、アゴニストおよびアンタゴニストは、心拍出量、全身性低血圧、組織への低下された血流およびＯ２送達、強度の肺血管収縮および高血圧、気管支狭窄、増大された浸透性、肺浮腫、換気血流不同、低酸素血症ならびに血液濃縮を低下させるのに使用し得る。これらのペプチドの例は、Ｂｕｒｒｅｌｌ，Ｒ；Ｈｕｍａｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｔｏ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｏｒｙ  Ｓｈｏｃｋ．４３（３）：１３７−５３、１９９４  Ｊｕｌ．に命名かつ記述されている。
【０２３０】
オーファン受容体リガンド（限定されるものでないがＡＤＮＦ、アドレノモジュリン、アペリン、グレリン、マストパラン（ＭＣＤペプチド）、メラニン濃縮ホルモン、ノシセプチン／ノシスタチン、オレキシン、受容体活性調節タンパク質、ウロテンシンを挙げることができる）。定義上、オーファン受容体はそれらと関連する機能を有しないが、しかし将来の薬物開発で重要な演者であると考えられる。これらのオーファン受容体リガンドは、Ｉｎ  ＤＳ．Ｏｒｐｈａｎ  Ｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓ  ａｎｄ  ｂｅｙｏｎｄ．Ｊａｐａｎｅｓｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．９０（２）：１０１−６、２００２；Ｍａｇｕｉｒｅ  ＪＪ．Ｄｉｓｃｏｖｅｒｉｎｇ  ｏｒｐｈａｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｕｓｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．３（２）：１３５−９、２００３；Ｓｚｅｋｅｒｅｓ  ＰＧ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｓｓａｙｓ  ｆｏｒ  ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ
ｌｉｇａｎｄｓ  ａｔ  ｏｒｐｈａｎ  Ｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓ．Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓ  ＆  Ｃｈａｎｎｅｌｓ．８（５−６）：２９７−３０８、２００２；Ｓｈｉａｕ  ＡＫ．Ｃｏｗａｒｄ  Ｐ．Ｓｃｈｗａｒｚ  Ｍ．Ｌｅｈｍａｎｎ  ＪＭ．Ｏｒｐｈａｎ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓ：ｆｒｏｍ  ｎｅｗ  ｌｉｇａｎｄ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ｔｏ  ｎｏｖ
ｅｌ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｐａｔｈｗａｙｓ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ
Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＆  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．４（５）：５７５−９０、２００１；Ｃｉｖｅｌｌｉ  Ｏ．Ｎｏｔｈａｃｋｅｒ  ＨＰ．Ｓａｉｔｏ  Ｙ．Ｗａｎｇ  Ｚ．Ｌｉｎ  ＳＨ．Ｒｅｉｎｓｃｈｅｉｄ  ＲＫ．Ｎｏｖｅｌ  ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ  ａｓ  ｎａｔｕｒａｌ  ｌｉｇａｎｄｓ  ｏｆ  ｏｒｐｈａｎ  Ｇ−ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓ．Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅｓ．２４（４）：２３０−７、２００１；Ｄａｒｌａｎｄ  Ｔ．Ｈｅｉｎｒｉｃｈｅｒ  ＭＭ．Ｇｒａｎｄｙ  ＤＫ．Ｏｒｐｈａｎ  ｉｎ  ＦＱ／ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ：ａ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｐａｉｎ  ａｎｄ  ａｎａｌｇｅｓｉａ，ｂｕｔ  ｓｏ  ｍｕｃｈ  ｍｏｒｅ．Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅｓ．２１（５）：２１５−２１、１９９８（それらの開示は引用することにより本明細書に組み込まれる）のような参考文献に記述されている。
【０２３１】
別の範疇は糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ阻害剤を包含する。急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）の発病における血小板豊富な血栓の中心的役割が公知である。糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ（Ｇｐ  ＩＩｂ／ＩＩＩａ）受容体アンタゴニストは、ＡＣＳの自然経過に好影響を及ぼすことが期待されうる、血小板機能の強力な阻害剤である。この範疇の例示的参考文献は、Ｂｈａｔｔ  ＤＬ．Ｔｏｐｏｌ  ＥＪ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｐｌａｔｅｌｅｔ  ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  ＩＩｂ／ＩＩＩａ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ
ｉｎ  ａｃｕｔｅ  ｃｏｒｏｎａｒｙ  ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ．ＪＡＭＡ．２８４（１２）：１５４９−５８、２０００；Ｋｅｒｅｉａｋｅｓ  ＤＪ．Ｏｒａｌ  ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｌａｔｅｌｅｔ  ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  ＩＩｂ／ＩＩＩａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ｆａｃｔ  ｏｒ  ｆａｎｃｙ？．Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｈｅａｒｔ  Ｊｏｕｒｎａｌ．１３８（１  Ｐｔ  ２）：Ｓ３９−４６、１９９９；Ｂａｓｓａｎｄ  ＪＰ．Ｌｏｗ−ｍｏｌｅｃｕｌａｒ−ｗｅｉｇｈｔ  ｈｅｐａｒｉｎ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｓｅｔｔｉｎｇ  ｏｆ  ａ  ｆａｓｔ−ｔｒａｃｋ  ｒｅｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｕｎｓｔａｂｌｅ  ｃｏｒｏｎａｒｙ  ａｒｔｅｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ．３０  Ｓｕｐｐｌ  ２：１１４−２１；ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ  １０６−７、２０００を包含する。
【０２３２】
身体障壁を通過するためのデスアミノアミノ酸（１個若しくは複数）を含有するペプチドの使用
本発明は、そのＮ末端として化合物式Ｉ〜Ｖの１残基を有する伸長若しくは切断されたペプチドの使用による、被験体の身体障壁を横断するペプチドの能力の増大方法に関する。
【０２３３】
本発明は、さらに、伸長若しくは切断されたペプチドの投与（それに際して該伸長若しくは切断されたペプチドが非天然アミノ酸を有しないペプチドより多量で身体障壁を横断する）により処置若しくは予防される疾患若しくは状態の被験体での処置若しくは予防方法に関する。
【０２３４】
本発明はまた、伸長若しくは切断されたペプチドの投与により処置若しくは予防される脳の疾患若しくは状態の被験体での処置若しくは予防方法にも関する。
【０２３５】
治療薬としてのペプチドの使用は身体障壁を横断するそれらの不能により制限される。「身体障壁」という句は、ある種の分子の自由（例えば拡散）通過を予防するように機能する細胞膜若しくは他の構造と本明細書で定義する。本発明の伸長若しくは切断されたペプチドの使用は、結果として生じるペプチドの、多様な身体障壁の通過を容易にする。身体障壁の例は、限定されるものでないが、血液脳関門、細胞膜、腸上皮、皮膚細胞若しく
は血液眼を挙げることができる。好ましい一態様において、身体障壁は血液脳関門である。
【０２３６】
非天然アミノ酸（１個若しくは複数）を含有するペプチドの選択性および安定性
本発明のある態様は、上述されたところの選ばれたペプチドの配列に基づく伸長若しくは切断されたペプチドの使用による、選ばれたペプチドの選択性の増大方法に関する。
【０２３７】
生物学的標的に対する薬物の選択性を高めることは非常に重要である。一態様において、アルギニンおよび／若しくはリシンを含有するペプチドは、ペプチドの選択性を増大するために、本発明により、伸長若しくは切断されたペプチドに転化し得る。別の態様において、本明細書に開示される非天然アミノ酸のいずれも、ペプチドの選択性を増大するために使用し得る。
【０２３８】
製薬学的組成物
本発明のペプチドは、対応する既知のペプチドが関連するいかなる疾患若しくは生理学的問題も処置するため、当業者に利用可能ないかなる治療手順でも使用し得る。
【０２３９】
本発明のペプチドは製薬学的組成物として処方し得、そして、選ばれた投与経路に適合された、すなわち経口若しくは非経口で、静脈内、筋肉内、局所若しくは皮下経路による多様な投薬形態物で、ヒト患者のような哺乳動物宿主に投与し得る。
【０２４０】
従って、該ペプチドは、例えば注入（ｉｎｆｕｓｉｏｎ）若しくは注入（ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）により静脈内で若しくは腹腔内に全身投与しうる。ペプチド若しくはペプチド複合物の溶液は、場合によっては非毒性界面活性剤と混合した水中で製造し得る。分散系もまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、トリアセチンおよびそれらの混合物ならびに油中で製造し得る。貯蔵および使用の通例の条件下で、これらの製剤は微生物の増殖を予防するための保存剤を含有する。
【０２４１】
注入（ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）若しくは注入（ｉｎｆｕｓｉｏｎ）に適する製薬学的投薬形態物は、無菌の水性溶液若しくは分散系、または、場合によってはリポソームに被包化された無菌の注入可能（ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ）若しくは注入可能（ｉｎｆｕｓｉｂｌｅ）な溶液若しくは分散系の即座の製造に適合されている有効成分（１種若しくは複数）を含んでなる無菌粉末を包含し得る。全部の場合で、最終的な投薬形態物は、製造および貯蔵の条件下で無菌、流動性かつ安定でなければならない。液体の担体若しくはベヒクルは、例えば、水、エタノール、多価アルコール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）、植物油、非毒性のグリセリルエステルおよびそれらの適する混合物を含んでなる溶媒若しくは液体の分散媒であり得る。適正な流動性は、例えばリポソームの形成、分散系の場合には必要とされる粒子径の維持若しくは界面活性剤の使用により維持し得る。微生物の作用の予防は、多様な抗菌および抗真菌剤、例えばパラベン類、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどによりもたらし得る。多くの場合に、等張剤、例えば糖類、緩衝剤若しくは塩化ナトリウムを包含することが好ましいであろう。注入可能な組成物の持続吸収は、吸収を遅延させる剤、例えばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンの組成物中での使用によりもたらし得る。
【０２４２】
無菌の注入可能な溶液は、必要とされるところの上で挙げられた多様な他の成分とともに適切な溶媒に必要とされる量のペプチド若しくはペプチド複合物を組み込むこと、次いで濾過滅菌により製造する。無菌の注入可能な溶液の製造のための無菌粉末の場合、こうした粉末の好ましい製造方法は、事前に滅菌濾過した溶液中に存在する有効成分およびいずれかの付加的な所望の成分の粉末を生じる真空乾燥および凍結乾燥技術である。
【０２４３】
いくつかの例において、本発明のペプチドは、不活性希釈剤若しくは同化できる可食性担体のような製薬学的に許容できるベヒクルとともに経口でもまた投与し得る。該ペプチドは、硬若しくは軟殻ゼラチンカプセルに封入しうるか、錠剤に圧縮しうるか、または患者の食事の食物と直接組み込みうる。経口の治療的投与のため、該ペプチド若しくはペプチド複合物は、１種若しくはそれ以上の賦形剤と組合せかつ摂取可能な錠剤、頬側錠、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、カシェ剤などの形態で使用しうる。こうした組成物および製剤は最低０．１％の有効成分を含有するべきである。組成物および製剤の割合はもちろん変動してよく、かつ、便宜的に、所定の単位投薬形態物の重量の約２ないし約６０％ないし約９０％の間でありうる。こうした治療上有用な組成物中のペプチドの量は、有効投薬量レベルを得ることができるようである。
【０２４４】
錠剤、トローチ剤、丸剤、カプセル剤などは、以下、すなわちトラガカントガム、アラビアゴム、トウモロコシデンプン若しくはゼラチンのような結合剤；第二リン酸カルシウムのような賦形剤；トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、アルギン酸などのような崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤もまた含有することができ；および、ショ糖、果糖、乳糖若しくはアスパルテームのような甘味料、またはペパーミント、冬緑油若しくはサクランボ香料のような着香料を添加しうる。単位投薬形態物がカプセル剤である場合、それは、上の型の物質に加え、植物油若しくはポリエチレングリコールのような液体担体を含有しうる。多様な他の物質が、コーティングとして、若しくは固体の単位投薬形態物の物理的形態を別の方法で改変するために存在しうる。例えば、錠剤、丸剤若しくはカプセル剤をゼラチン、蝋、セラック若しくは糖などでコーティングしうる。シロップ剤若しくはエリキシル剤は、有効成分、甘味料としてのショ糖若しくは果糖、保存剤としてのメチルおよびプロピルパラベン、染料、ならびにサクランボ若しくはオレンジ香味料のような着香料を含有しうる。もちろん、いかなる単位投薬形態物の製造において使用されるいかなる物質も、使用される量で製薬学的に許容できかつ実質的に非毒性であるべきである。加えて、本発明のペプチドは徐放製剤および装置に組み込みうる。
【０２４５】
有用な固体担体は、タルク、粘土、結晶セルロース、シリカ、アルミナなどのような微細に分割された固体を包含する。有用な液体担体は、場合によっては非毒性界面活性剤の助けを借りて本化合物を有効濃度で溶解若しくは分散し得る、水、アルコール若しくはグリコールまたは水−アルコール／グリコール配合物を包含する。香料および付加的な抗菌剤のような補助物質を、所定の使用のため特性を至適化するのに添加し得る。
【０２４６】
合成ポリマー、脂肪酸、脂肪酸塩およびエステル、脂肪アルコール、修飾セルロース若しくは改変無機物質のような増粘剤もまた、直接使用者の皮膚への塗布のための塗布性のパスタ剤、ゲル剤、軟膏剤、石鹸などを形成するために液体担体とともに使用し得る。
【０２４７】
本発明のペプチドの有用な投薬量は、それらのｉｎ  ｖｉｔｒｏ活性および本明細書に記述される動物モデルでのｉｎ  ｖｉｖｏ活性を相関させることにより決定し得る。
【０２４８】
本発明のペプチドの治療上有効な量は、被験体および処置されるべき疾患若しくは生理学的問題とともに必然的に変動し、そして、対応する既知ペプチドの有効量と相関する。例えば、体重１ｋｇあたり３０ないし１１２，０００μｇの間の治療量が静脈内投与に有効であり得る。当業者が認識するであろうとおり、該量は投与方法に依存して変動し得る。処置での使用に必要とされる本発明のペプチドの量は、投与経路、しかしまた処置されている状態の性質ならびに患者の齢および状態とともにもまた変動することができ、そして最終的には主治医若しくは臨床家の判断であることができる。
【０２４９】
該化合物は、例えば単位投薬形態物あたり１ないし１０００ｍｇ、便宜的には１０ない
し７５０ｍｇ、最も便宜的には２０ないし５００ｍｇのペプチドを含有する単位投薬形態物で便宜的に投与し得る。
【０２５０】
理想的には、該ペプチドは、約０．１から約７５μＭまで、好ましくは約１ないし５０μＭ、最も好ましくは約２ないし約３０μＭのピーク血漿濃度を達成するように投与すべきである。これは、例えば、場合によっては生理的食塩水中の該ペプチドの０．０５ないし５％溶液の静脈内注入により達成しうるか、若しくは約１〜１００ｍｇの該ペプチドを含有するボーラスとして経口投与しうる。所望の血中濃度は、約０．０１〜５．０ｍｇ／ｋｇ／時間を提供するような連続注入、若しくは約０．４〜１５ｍｇ／ｋｇの有効成分（１種若しくは複数）を含有する間欠的注入により維持しうる。
【０２５１】
所望の用量は、単一用量で、分割された用量として、若しくは連続注入として便宜的に提示しうる。所望の用量は例えば１日あたり２、３、４若しくはそれ以上の下位用量として適切な間隔で投与し得る。
【０２５２】
化粧品用製剤
メーキャップ化粧品の重要な一役割は「美化」すなわち外観をより美しくすることである。しばしば、その役割は、皮膚の粗さ、傷および色ならびに生気の補正を伴う。
【０２５３】
本発明の化粧品用組成物は、典型的かつ一般的な基礎担体ならびに本発明のデスアミノアミノ酸化合物を含有する。通常、本発明の化合物はこの目的上エステル、アミド若しくは塩の形態であることができる。一般に、化粧品用基剤は、処方されているメーキャップの種類、すなわち顔用クリーム、顔用パウダー、パンケーキメーキャップ、肌用クリーム、口紅、紅などに依存することができる。これらの基剤は、適切な非毒性の着色料、ｅｍｕｌｉａｎｔ、油、蝋、溶媒、乳化剤、脂肪酸、アルコール若しくはエステル、ガム、無機不活性ビルダーなどを含有することができる。
【０２５４】
例えば、ガムは、多様な既知の多糖化合物、例えばセルロース、ヘミセルロース、アラビアゴム、トラガカントガム、タマリンドガム、ペクチン、デンプン、マンナン、グアールガム、ローカストビーンガム、マルメロ種子ガム、アルギン酸、カラギーナン、寒天、キサンタンガム、デキストラン、プルラン、キチン、キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸などを包含することができ、多糖化合物の誘導体、例えばカルボキシメチル化誘導体、硫酸エステル誘導体、リン酸化誘導体、メチル化誘導体、エチル化誘導体、エチレンオキシド若しくはプロピレンオキシドのようなアルキレンオキシドの付加誘導体、アシル化誘導体、陽イオン化誘導体、低分子量誘導体および他の多糖誘導体を挙げることができる。
【０２５５】
本発明の外用組成物に包含しうる別の成分は粉末成分である。タルク、カオリン、雲母、絹雲母、ドロマイト、金雲母、合成雲母、鱗雲母、黒雲母、リチア雲母、バーミキュライト、炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム、ケイ酸アルミニウム、ケイ酸バリウム、ケイ酸カルシウム、ケイ酸マグネシウム、ケイ酸ストロンチウム、タングステン酸の金属塩、マグネシウム、シリカ、ゼオライト、硫酸バリウム、焼結硫酸カルシウム（焼結石膏）、リン酸カルシウム、フッ素リン灰石、ヒドロキシアパタイト、セラミック粉末、金属石鹸（ミリスチン酸亜鉛、パルミチン酸カルシウム、ステアリン酸アンモニウム）、ホウ窒化物などのような無機成分；およびポリアミド樹脂粉末（ナイロン粉末）、ポリエチレン粉末、ポリメチルメタクリレート粉末、ポリスチレン粉末、スチレンおよびアクリル酸のコポリマー樹脂粉末、ベンゾグアナミン樹脂粉末、シリコーン樹脂粉末、シリコーンゴム粉末、シリコーン樹脂被覆ゴム粉末、ポリエチレンテトラフルオリド粉末、セルロース粉末などのような有機粉末成分に基づく粉末成分を挙げることができる。
【０２５６】
さらに、シリコーン化合物、フッ素修飾シリコーン化合物、フッ素化合物、高級脂肪族酸、高級アルコール、脂肪族酸エステル、金属石鹸、アルキルリン酸塩などによりこれらの粉末成分の表面を処理することにより得られる粉末成分を、必要に依存して、本発明の外用組成物中で処方しうる。
【０２５７】
既知の染料若しくは色素を使用しうる。例えば、二酸化チタン、酸化亜鉛のような無機白色色素、酸化鉄（ベンガラ）、チタン酸鉄のような無機赤色色素、γ−酸化鉄のような無機褐色色素；黄色酸化鉄、黄色土のような無機黄色色素；黒色酸化鉄、カーボンブラック、低級酸化チタンのような無機黒色色素、および；マンゴーバイオレット、コバルトバイオレットのような無機紫色色素；酸化クロム、水酸化クロム、チタン酸コバルトのような無機緑色色素；プルシアンブルー、群青のような青色色素；酸化チタン被覆雲母、酸化チタン被覆オキシ塩化ビスマス、酸化チタン被覆タルク、着色酸化チタン被覆雲母、オキシ塩化ビスマス、魚鱗のようなパール色素；アルミニウム粉末、銅粉末のような金属粉末色素；リソールルビンＢ（赤色２０１号）、リソールルビンＢＣＡ（赤色２０２号）、レーキレッドＣＢＡ（赤色２０４号）、リソールレッド（赤色２０５号）、ディープマルーン（赤色２２０号）、ヘリドンピンクＣＮ（赤色２２６号）、パーマトーンレッド（赤色２２８号）、パーマネントレッドＦ５Ｒ（赤色４０５号）、パーマネントオレンジ（橙色２０３号）、ベンジジンオレンジ（橙色２０４号）、ベンジジンイエローＧ（黄色２０５号）、ハンザイエロー（黄色４０１号）、青色４０４号のような、ジルコニウム、バリウム若しくはアルミニウムレーキなどの有機色素、および他の有機色素；エリスロシン（赤色３号）、フロキシンＢ（赤色１０４号）、アシッドレッド（赤色１０６号）、ファーストアシッドマゲンタ（赤色２２７号）、エオシンＹＳ（赤色２３０号）、ビオラミンＲ（赤色４０１号）、オイルレッドＸＯ（赤色５０５号）、オレンジＩＩ（橙色２０５号）、タートラジン（黄色４号）、サンセットイエローＦＣＦ（黄色５号）、ウラニン（黄色２０２号）、キノリンイエロー（黄色２０３号）、ファーストグリーンＦＣＦ（緑色３号）、ブリリアントブルーＦＣＦ（青色１号）を挙げることができる。
【０２５８】
本発明の化粧品用組成物は液体とともに処方しうる。液体として、化粧品のような外用組成物で通常使用される揮発性成分を選択することが可能である。とりわけ、例えば揮発性シリコーン油、水若しくは低級アルコール（またはその混合物）を挙げることが可能である。これらの揮発性成分は、本発明の外用組成物の特定の形態（例えば、後者は「粗さを補正する組成物」若しくは「メーキャップ組成物」などを挙げる）または担体の型（例えば油基剤若しくは乳剤基剤など）に依存して適して選択しうる。これらの揮発性成分を処方することにより、本発明の外用組成物の使用時点での製品の粘度を調節すること、および皮膚上の該外用組成物の被覆の厚さを調節することが可能である。
【０２５９】
揮発性シリコーン油として、化粧品および他の外用組成物の分野で使用される揮発性シリコーン油を使用することが可能である。それはとりわけ制限されない。とりわけ、例えば、ヘキサメチルジシロキサン、オクタメチルトリシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン、ドデカメチルシクロヘキサシロキサンおよびテトラデカメチルシクロヘプタシロキサンのような低沸点直鎖状シリコーン油；オクタメチルシクロテトラシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン、ドデカメチルシクロヘキサシロキサン、およびテトラデカメチルシクロヘプタシロキサンのような低沸点環状シリコーン油などを挙げることができる。
【０２６０】
本発明の外用組成物は、本発明の所望の効果を減じない程度まで、補助成分として以下の他成分を必要に依存して含有しうる。
【０２６１】
例えば、油成分として、流動パラフィン、等流動パラフィン（ｉｓｏｌｉｑｕｉｄ  ｐａｒａｆｆｉｎ）、スクアランのような炭化水素油、オリーブ油、パーム油、ココナッツ
油、マカダミアナッツ油、ホホバ油のような油および脂肪；イソステアリルアルコールのような高級アルコール；高級脂肪族油およびミリスチン酸イソプロピルのようなエステル油などを、本発明の外用組成物中に処方しうる。これらの油成分のなかで、とりわけ、本発明の外用組成物中で極性油を処方することは、時間の経過に伴う安定性の改良を可能にする。
【０２６２】
さらに、ベンゾフェノン誘導体、パラアミノ安息香酸誘導体、パラメトキシコハク酸誘導体、サリチル酸誘導体および他のＵＶ吸収剤；湿潤剤、血液循環促進剤、冷却剤、発汗抑制剤、殺菌剤、皮膚活性化物質、抗炎症剤、ビタミン、抗酸化剤、抗酸化剤補助物質、保存剤、香味および香料などを本発明の外用組成物に配合しうる。
【０２６３】
本発明の化粧品用製剤は、限定されるものでないが、パスタ、粉末、ケーキ、クリーム、油、ローション、油脂、蝋若しくは類似の化粧品用基剤を挙げることができる適切な媒体中で製造しうる。製造方法は、化粧品用成分、および好ましくはエステル、アミド若しくは塩としての式Ｉ〜Ｖのいずれかのデスアミノ酸化合物を組合せることを必要とする。該組合せは、使用のための実質的に均質な塊すなわち混合物を形成するように混合、混練、圧延、粉砕、加熱若しくは別の方法で処理する。これらの段階は、混練機、研削砥石、ローラー、ミキサー、熱交換機、押出機などの使用により達成し得る。
【０２６４】
上で説明されたとおり、本発明は天然のペプチドニューロテンシンの改変により例示される。以下の節で、ニューロテンシンおよび本発明の対応するペプチドの背景、改変および生物学的活性を論考する。
【０２６５】
ニューロテンシンの構造および生物学
ニューロテンシン（ＮＴ）は、１９７３年にＣａｒｒａｗａｙとＬｅｅｍａｎにより降圧ペプチドとしてウシ視床下部から最初に単離された。それ以来、ＮＴは中枢神経系（ＣＮＳ）および末梢で多数の異なる生理学的効果を有することが示された。体温下降、抗侵害受容、ｄ−アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進の減弱、およびバルビツール酸誘発性鎮静の増強が、脳へのＮＴの直接注入により促進される。末梢では、ＮＴは血圧低下を誘発しかつ胃酸分泌を低下させるホルモンとして作用する。構造的には、ＮＴは以下の配列：ｐＧｌｕ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−ＯＨをもつ直鎖状トリデカペプチドである。ＮＴ研究の歴史の早期に、Ｃ末端ヘキサペプチドフラグメントＡｒｇ８−Ａｒｇ９−Ｐｒｏ１０−Ｔｙｒ１１−Ｉｌｅ１２−Ｌｅｕ１３［ＮＴ（８−１３）］が、ＮＴの生理学的効果を生じることにおいてｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏで効力が等しかったことが示された。
【０２６６】
Ｔａｎａｋａらが１９９０年にラット脳からＮＴ受容体（ＮＴＲ１）を最初に同定した。それ以来、ヒトＮＴＲ１は成功裏にクローン化かつ発現されている。双方は７個の膜貫通（７ＴＭ）ドメインを含有する古典的Ｇタンパク質共役型受容体であり、そして８４％の相同性を共有する。ｃＧＭＰ産生、カルシウム動員およびホスファチジルイノシトールターンオーバーを包含するセカンドメッセンジャー系が、ＮＴＲ１活性化に際して始動される。ＮＴＲ１のｍＲＮＡはラットおよびヒトの脳および腸双方で発現される。ＮＴＲ１よりＮＴに対し実質的により低い親和性をもつ第二のＮＴ受容体（ＮＴＲ２）（それぞれＫｄ
【数１】
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２．５および０．５ｎＭ）もまたラットおよびヒトの脳で同定された（２３−２５）。ＮＴＲ２もまた７ＴＭ／Ｇタンパク質共役型受容体であるが、なお、ＮＴＲ１に比較してより短いＮ末端細胞外尾部およびより長い第三の細胞質内ループを有する。第三の受容体（
ＮＴＲ３）がヒト脳ｃＤＮＡライブラリーからクローン化され、そして以前にクローン化されたｇｐ９５／ソーティリンに同一であることが見出された。ＮＴＲ３は、ただ単一の膜貫通領域を有する非Ｇタンパク質共役型局在化タンパク質である。
【０２６７】
内因性神経遮断薬としてのＮＴ
いくつかの異なる系統の証拠が統合失調症の病理生理学にＮＴを関係させている。統合失調症のドーパミン理論の進歩が、中脳辺縁系ドーパミン系に対する多様な神経回路の集合の欠陥が該障害の発症の原因であることを裏付ける。ＮＴ系の解剖学的位置決めは、それが脳内のグルタミン作動性、ドーパミン作動性、ＧＡＢＡ作動性およびセロトニン作動性の系と相互作用するようである。とりわけ、ＮＴおよびドーパミン系は側坐核（妄想および幻覚の原因であると考えられる脳の領域）内で緊密に関係付けられる。ＮＴＲ１受容体は腹側被蓋領域（上述された神経系と緊密に関連する脳領域）で密である。ＮＴ受容体のほぼ９０％がドーパミン作動性ニューロンに位置し、また脳中のドーパミンニューロンの８０％超がＮＴＲ１を発現する。統合失調症に関係している脳領域とのＮＴ系の共局在もまたその関与を意味している。
【０２６８】
ニューロテンシンおよびその生物学的活性
ＮＴは「内因性神経遮断薬」として仮定され、また、ＮＴ（８−１３）がその活性フラグメントと同定されて以来、ＮＴ（８−１３）誘導体を潜在的抗精神病薬として開発するための努力がなされた。とりわけ２つのグループすなわちエーザイ株式会社（東京）およびＲｉｃｈｅｌｓｏｎの研究グループ（Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎｉｃ、フロリダ州ジャクソンビル）が、抗精神病薬として有望性を示したＮＴ（８−１３）アナログの多数の誘導体を製造した。とりわけ、Ａｒｇ８、Ａｒｇ９、Ｔｙｒ１１およびＩｌｅ１２のアミノ酸置換が、末梢投与後に中枢性に活性である数種のアナログを生じた。
【０２６９】
エーザイの一化合物（エーザイのヘキサペプチド）は、抹消投与後に行動的効果を導き出した最初のＮＴ（８−１３）アナログであった。しかしながら、このペプチドに組み込まれた多様な改変はＮＴＲ１での結合親和性の７００倍の喪失をもたらした。加えて、このアナログは経口投与後に中枢活性を導き出すことが可能でなかった。
【０２７０】
より最近、ＮＴ６９Ｌが、ＮＴＲ１でナノモル濃度の結合親和性（Ｋｄ＝１．５５ｎＭ）を維持し（５５）かつ１ｍｇ／ｋｇ注入後に顕著な体温下降効果（ＰＩ９０分で−５．３℃）を表す（４１）ＮＴ（８−１３）アナログとして、Ｒｉｃｈｅｌｓｏｎのグループにより開発された。ＮＴ６９Ｌはコカインおよびｄ−アンフェタミン双方により誘発される運動亢進もまた減弱する。しかしながら、その体温下降効果およびｄ−アンフェタミン誘発性の運動亢進のその抑制に対する耐性が、該化合物の慢性投与後に観察された。エーザイのヘキサペプチドでと同様、ＮＴ６９Ｌは経口投与後にわずかな体温下降応答のみを生じた。
【０２７１】
［実施例］
【実施例１】
【０２７２】
本発明のＮＴペプチドの神経学的効果の要約
本発明により製造したＮＴ（８−１３）のＮ末端αメチル、αデスアミノホモリシルおよびオリンチルアナログ（前述の全般的論考および実施例を参照されたい）を合成し、そして抗精神病能力を予測する多数の行動アッセイで活性についてスクリーニングした。これらのペプチドは経口投与後に用量依存性の様式で体温下降を誘発した。加えて、該ペプチドの経口投与は、ｄ−アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進を有意に低下させた（現在の若しくは潜在的ＡＰＤの治療的有効性の一尺度）。これらのアッセイで経口投与後に有意の応答を導き出すペプチドの低用量（１０ｍｇ／ｋｇ）は有意である。該ペプチドは
また、反復投与後に有効性を維持する能力も示す。事実、それらは、長期にわたる最大体温下降応答を増大させる能力を示し、反復投与がそれらのＣＮＳ活動を実際に改善しうることを意味している。従って、本発明のＮＴペプチドは、既知の天然に存在するペプチドＮＴのもののような生物学的活性を有することが示され、かつ、より選択的である。これらの効果の詳細は後に続くとおりである。
【０２７３】
ＣＮＳ活性の予備スクリーニングとしての体温下降。ＮＴは、ＣＮＳに直接投与される場合に体温下降を誘発する。結果として、誘発された体温下降を、末梢投与後にＢＢＢを横断する本発明のＮＴ（８−１３）ペプチドの能力を決定しかつそれらのｉｎ  ｖｉｖｏ
ＣＮＳ活性を間接的に測定するのに使用し得る。ＮＴの体温下降効果は、ＮＴＲ１（統合失調症の病理生理学で最もしばしば関係しているＮＴＲ）でのその作用に帰すことができる。ＩＰ注入後に体温下降を誘発したＮＴ（８−１３）ペプチドは従って抗精神病薬であることが示される。有意の体温下降効果は、該ペプチドが血液安定性および膜横断における顕著な改良を示したことを示すとみられる。
【０２７４】
ＩＰ注入は、ニューロテンシンアナログのＢＢＢ横断の程度を決定するための標準投与経路である。方法およびプロトコルは実施例の節に提供する。ＩＶ投与は、全身循環に完全に利用可能である用量をもたらす。対照的に、ＩＰ注入は、該ペプチドが肝で初回通過代謝に曝露されるため、安定性のより厳格な試験である。
【０２７５】
５ｍｇ／ｋｇ  ＩＰ注入後のペプチド２８〜３０の体温下降効果を表４に示す。各ペプチドは５時間の時間経過にわたり有意の効果を表した。これら３種のペプチドの体温下降の結果は、Ｎ末端アミン基の代わりのαアルキル基（すなわちα−メチル基）の使用がＮＴ（８−１３）ペプチドのｉｎ  ｖｉｖｏ活性を消失しないことを示す。抗統合失調症医薬品としての使用のため、経口投与後にＣＮＳ活性を導き出すこれらのペプチドの能力を評価した。
【０２７６】
【表５】
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【０２７７】
【表６】
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【０２７８】
経口投与。抗統合失調症医薬品としてのＮＴ（８−１３）ペプチドの開発での最終目標は、経口投与後にＣＮＳ活性を表すそれらの能力を測定することである。既知のＮＴペプチド、ＮＴ６９Ｌおよびエーザイのヘキサペプチドは、この点に関して、経口で与えられる場合に中枢活性を導き出すことに失敗する。従って、Ｎ末端メチルペプチド２８〜３０を、経口投与後に体温下降を誘発するそれらの能力について試験した。
【０２７９】
本発明のペプチドの一例ＡＢＳ２０１は、２℃以上の最大体温下降応答を示し（表６）、そして、その最大体温下降効果はＩＰ投与後のその体温下降効果に等しく（図９）、２５％のおよその経口生物学的利用率をもたらした。ペプチド２９および３０は経口でもまた活性であった一方、ＩＰ活性に対する経口活性のそれらの比は、ＡＢＳ２０１のものほど均衡が取れていなかった。ＡＢＳ２０１の経口活性は、抗精神病能力のさらなる評価のためのリードＮＴ（８−１３）アナログとしてそれを裏付けるための重要な因子であった。
【０２８０】
【表７】
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【０２８１】
【表８】
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【０２８２】
統合失調症の検討。「ＤＡアゴニスト」ｄ−アンフェタミンにより引き起こされる運動の遮断は、統合失調症の処置のための現在若しくは潜在的薬物候補の治療的有効性の標準的尺度となった。このモデルは、大脳辺縁系ＤＡ系内のＤＡ受容体の直接刺激が運動応答の原因であるという仮定で機能する。
【０２８３】
げっ歯類で緊張性静止の状態と一般に定義されるカタレプシーは、ヒトでの（錐体外路系副作用）ＥＰＳＥに類似とみなされる。結果、カタレプシーは成功裏の薬物候補で回避されるべき副作用である。同時に、薬物候補がラットでカタレプシーを引き起こす程度は、その特定の候補と関連するＥＰＳＥのありそうな発生に対する予測因子としてもまた使用しうる。
【０２８４】
体温下降分析。ＡＢＳ２０１の抗精神病特性を検査するため、ＩＰ投与後の体温下降誘導についての用量応答曲線を生成した。加えて、ＡＢＳ２０１（１０ｍｇ／ｋｇ〜３０ｍｇ／ｋｇ）の経口投与により導き出される体温下降効果を測定した。ＩＰおよび経口双方の投与後のｄ−アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進を低下させるＡＢＳ２０１の能力もまた測定した。ＡＢＳ２０１の持続的処置により引き起こされるＣＮＳ活性に対する効果を評価するため、体温下降、およびｄ−アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進の減弱を、反復連日投与後に測定した。最後に、バーテストを利用して、ヒトでのＥＰＳＥの予測因子としてのカタレプシーを測定した。
【０２８５】
０．１〜１０ｍｇ／ｋｇの濃度範囲にわたるＩＰ注入後のＡＢＳ２０１の用量応答曲線（図１１）はいくらか相反する結果を示した。第一に、５ｍｇ／ｋｇで導き出される最大効果（ＰＩ１５０分で−３．６１±０．２２℃）は、予備スクリーニング後に見られた最大効果（ＰＩ１５０分で−２．５１±０．１７℃）より完全な程度、より大きかった。この矛盾は、もっともありそうには、ラットの応答に影響を及ぼし得る環境因子（気温、直腸プローブ、ラットの大きさなど）による。最も重要なことに、ＡＢＳ２０１はこれらの差違に関係なく有意のＣＮＳ効果を導き出すことを継続した。ＡＢＳ２０１のＥＤ５０値（０．９４３ｍｇ／ｋｇ）は、ＣＮＳ活性をもつ他のＮＴ（８−１３）アナログと好都合に匹敵する（４１、６０）。
【０２８６】
ＡＢＳ２０１はまた、経口投与後にも用量依存性の様式で体温下降を誘発した（図１２）。有意の体温下降効果が試験した最低用量（１０ｍｇ／ｋｇ）で示された（ＰＩ１５０分で−１．０２±０．１０℃）。ＡＢＳ２０１の経口投与のＥＤ５０値の生成は、完全な用量応答曲線を生じるのに必要なペプチドの極端な量により、実際的でなかった。抗精神病化合物として開発中であった以前のＮＴ（８−１３）アナログはＴｒｐ１１置換を含有した。本明細書に提示される研究からの証拠は、この改変がＮＴアナログの経口活性を消失するという理論を裏付ける。ＮＴ（８−１３）アナログの経口生物学的利用性でＴｙｒ１１が何の特定の役割を演じているかを決定するためにさらなる研究が必要である。
【０２８７】
「ＤＡアゴニスト」ｄ−アンフェタミンにより引き起こされる運動の遮断は、現在若しくは潜在的な統合失調症薬物候補の治療的有効性の標準的尺度となり、そして、候補として現在検討中のＮＴ（８−１３）アナログは、ｄ−アンフェタミン誘発性の運動亢進を用量依存的様式で減少させる能力を示した。音および光を減弱した運動ケージを使用して、ｄ−アンフェタミン誘発性の運動亢進を低下させる潜在的候補の能力を測定した。
【０２８８】
変動する用量でのｄ−アンフェタミン誘発性の運動亢進に対するＡＢＳ２０１の効果もまた検査した。ＡＢＳ２０１は、試験した全用量（３ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇの用量は示されない）について自発運動の亢進を有意に低下させた。現在のＡＰＤの別の特徴は自発的運動活動を低下させる能力である。全部のＡＢＳ２０１投与群は、薬物相の間、生理的食塩水より有意により低く応答し、自発的活動を低下させるＡＢＳ２０１の能力を示した。
【０２８９】
経口投与後のｄ−アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進を減弱させる能力もまたＡＢＳ２０１により示される。薬物相の間に、１０および３０ｍｇ／ｋｇ用量のみが自発的運動活動を低下させた。２０ｍｇ／ｋｇ用量で見られた有意性の欠如は、もっともありそうには、この群のラットについての応答のわずかな変動から生じる異常である。しかしながら、用量の主効果が基礎相の間に検出され、多様な投与群にわたる基礎活性の有意の差違が存在しないことを示した。
【０２９０】
ＡＢＳ２０１は、反復連日投与後に有意のＣＮＳ効果を維持し（表６）、また、５日間にわたり絶対的体温下降応答が増大した。第１および５日のＡＢＳ２０１の誘導された体温下降の比較を行った。第５日に、最大体温下降応答は第１日（１２０分）に比較してより迅速に（９０分）達成された。第１日と対照的に、第５日に、最大体温下降効果は長時間維持されず、反復投与が最大効果を低下させない一方でそれは体温下降効果の持続時間を短縮しうることを意味した。反復連日投与は、ｄ−アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進を減弱させるＡＢＳ２０１の能力に対する影響を有しなかった。急性および慢性双方の投与群は運動亢進の低下を生じ、それはアンフェタミン投与後ほぼ２時間有意であった。注目すべきは、ＡＢＳ２０１の慢性投与は自発的運動活動に対するその阻害効果を消失した。
【０２９１】
カタレプシー分析。実験室の試験で、カタレプシーは、不自然な体勢での設置後にその位置を是正することの動物の不能を特徴とする。カタレプシー試験は多数の変数により大きく影響され得る。これらは、新たな環境により引き起こされるカタレプシーのストレス誘発性阻害、および同一動物での反復測定に際し生じ得る学習された「擬似カタレプシー」の寄与を包含する。これらの潜在的交絡因子を克服するため、試験は、静寂な制御された環境で一動物で１度のみ実施する。
【０２９２】
ＡＢＳ２０１（５ｍｇ／ｋｇ）も生理的食塩水も末梢投与後にカタレプシーを引き起こさなかった。ラットで完全なカタレプシー応答を生じることが既知の典型的抗統合失調症薬ハロペリドールは、３０秒以上持続したカタレプシーを誘発した。これらの結果は、ＡＢＳ２０１が末梢投与後にカタレプシーを誘発しない（現在臨床上有効な候補の特徴）ことを示す。
【０２９３】
ＣＡＣＯ−２細胞を用いる生物学的利用性試験。ヒト結腸直腸癌由来のＣａｃｏ−２細胞は、十分に発達した微絨毛および刷子縁酵素を表す極性化した細胞に自発的に分化する。これらの特徴は該細胞をヒト小腸の優れたモデルとする。Ｃａｃｏ−２細胞モデルでの化合物の取り込みと化合物の経口生物学的利用性の間の強い相関が同定されている。
【０２９４】
ＡＢＳ２０１はラット血清中で２４時間以上安定であるが、しかしながら細胞中でのその安定性は測定されていない。結果、取り込み実験でＣａｃｏ−２細胞に進入する無傷のペプチドの能力の測定は、経口生物学的利用性および細胞安定性を示すことができる。逆相ＨＰＬＣは、可溶化した細胞成分をＡＢＳ２０１およびＡＢＳ２０１分解生成物について分析するための理想的な方法である。この分析は経口生物学的利用性および細胞安定性を示すことができる。画分を決められた間隔で収集しかつＬＳＣを介して放射活性を計数し得る。標準的勾配を介してＡＢＳ２０１溶離時間を確立することにより、取り込み実験後のＣａｃｏ−２細胞の内容物に対し直接比較を行い得る。
【０２９５】
無傷のペプチドがＣａｃｏ−２細胞に進入していることを確認するため、および予備的な試みで細胞培養物中の該ペプチドの安定性を評価するために、細胞取り込み後のＡＢＳ２０１を分析するためのＲＰ−ＨＰＬＣアッセイを実施し得る。２分のインキュベーション後に、無傷のＡＢＳ２０１はＨＰＬＣ技術を使用して細胞内で同定され得ることがありそうである。これらの研究は、ＡＢＳ２０１がＣａｃｏ−２細胞により広範囲に取り込まれて従ってその経口生物学的利用性を示し得ることを示すことができる。
【実施例２】
【０２９６】
化合物の合成
以下の実施例およびプロトコルは、本明細書で特許請求される化合物がどのように作成かつ評価されるかの完全な開示および記述を当業者に提供するように述べられ、そして、本発明の純粋に例示であることを意図しておりかつ発明者が彼らの発明であるとみなすものの範囲を制限することを意図していない。数（例えば量、温度など）に関する正確さを確実にするために努力がなされたが、しかし何らかの誤りおよび逸脱が説明されるべきである。別の方法で示されない限り、部分は重量部分であり、温度は℃ででありかつ室温でであり、ならびに圧力は大気圧若しくはそれ近くである。
【０２９７】
出発原料。別の方法で示されない限り、溶媒はＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（ペンシルバニア州ピッツバーグ）から、また、試薬はＡｌｄｒｉｃｈ（ウィスコンシン州ミルウォーキー）からである。
【０２９８】
略語。Ｔｒｉｓｙｌ−Ｎ３、２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホニルアジド；Ｅｔ３Ｎ、トリエチルアミン；ｔ−ＢｕＣＯＣｌ、塩化トリメチルアセチル；ｎ−ＢｕＬｉ、ｎ−ブチルリチウム；Ｈ２、水素ガス；Ｐｄ−Ｃ、活性炭上パラジウム；Ｘｐｓ、（Ｓ）−（−）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン；ＫＨＭＤＳ、ビス（トリメチルシリル）アミドカリウム；ＣＨ３Ｉ、ヨウ化メチル；Ｈ２Ｏ２、過酸化水素；ＬｉＯＨ、水酸化リチウム；ＴＨＦ、テトラヒドロフラン；ＣＨ２Ｃｌ２、ジクロロメタン；ＭｇＳＯ４、硫酸マグネシウム；Ｈｅｘ、ヘキサン、ＥｔＯＡｃ、酢酸エチル；ＮａＨＣＯ３、重炭酸ナトリウム；ＨＣｌ、塩酸；Ｎ２、窒素；Ｈ２Ｏ、蒸留水。
【０２９９】
（３（２Ｓ），４Ｓ）−３−（２−メチル−５−ブロモ−１−オキソバレリル）−４−（フェニルメチル）−２−オキサゾリジノン（２４ａ）（図３）。中間体２３ａは以前に記述されたとおり（５７）製造した。１７．４ｍＬ（５等量）のビス（トリメチルシリル）アミドカリウム（ＫＨＭＤＳ）の溶液を１００ｍＬの無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）に添加し、そして陽窒素（Ｎ２）圧下で−７８℃に冷却した。Ｎ２下の１０ｍＬ  ＴＨＦ中の２３ａ（５．１８ｇ、１５．２３ｍｍｏｌ）の溶液を−７８℃に冷却し、そしてＫＨＭＤＳ溶液にカニューレ挿入した。この混合物を−７８℃で３０分間攪拌してエノレート形成を遂げた。ヨウ化メチル（ＣＨ３Ｉ）（１．９０ｍＬ、２等量）を、カニューレを介して溶液に添加し、そして−７８℃で１時間攪拌し、その時点で反応を４．０９ｍＬ（５等量）の氷酢酸でクエンチした。溶液を２時間にわたり攪拌しながら室温に加温し、そしてＴＨＦを真空中で除去した。生じる黄色スラリーを２００ｍＬの半飽和塩水に溶解しかつＣＨ２Ｃｌ２（３×１００ｍＬ）で抽出した。ＣＨ２Ｃｌ２層を合わせ、無水硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ４）で乾燥し、濾過し、そして真空中で蒸発させて黄色油状物を生じた。該粗油状物を、３：１のヘキサン：酢酸エチル（Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）で溶離するシリカゲルで精製して、２．８１ｇ（５２％収率）の純粋な２６ａを生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．３８−７．１５（ｍ、５Ｈ）、４．７１−４．６３（ｍ、１Ｈ）、４．１８−４．１５（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．７１−３．６５（ｍ、１Ｈ）、３．４１−３．３３（ｍ、２Ｈ）、３．２７−３．２０（ｄｄ、Ｊ＝４．０、１３．８Ｈｚ、１Ｈ）、２．８９−２．８１（ｄｄ、Ｊ＝１０．０、１４．２Ｈｚ、１Ｈ）、１．９０−１．５５（ｍ、４Ｈ）、１．２４−１．２０（ｄ、Ｊ＝７．４、３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７６．８、１５３．２、１３５．２、１２９．６、１２９．１、１２７．６、６６．４、５５．６、３８．３、３７．６、３３．８、３２．２、３１．８、１７．９。
【０３００】
（３（２Ｓ），４Ｓ）−３−（２−メチル−６−ブロモ−１−オキソヘキサニル）−４−（フェニルメチル）−２−オキサゾリジノン（２４ｂ）。わずかに改変した手順を使用して２４ｂを生じた。２３ｂへのＫＨＭＤＳ添加直後に、５等量のＣＨ３Ｉを添加し、そして反応をＮ２下−７８℃で１時間攪拌した。氷酢酸でのクエンチング、ならびにその後の抽出および精製プロトコルは２４ａについて上述されたとおりであった。１００％ＣＨ２Ｃｌ２で溶離する追加のシリカゲル精製が１０％収率で純粋な２４ｂを生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．３６−７．１９（ｍ、５Ｈ）、４．７２−４．６５（ｍ、１Ｈ）、４．２５−４．１６（ｄ  Ｊ＝４．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．７７−３．６７（ｍ、１Ｈ）、３．４６−３．３６（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．２９−３．２２（ｄｄ、Ｊ＝４．０、１４．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．８２−２．７４（ｄｄ、Ｊ＝９．０、１４．０Ｈｚ、１Ｈ）、１．９２−１．７４（ｍ、３Ｈ）、１．５０−１．４２（ｍ、３Ｈ）、１．２５−１．２１（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７６．９、１５３．２、１３５．３、１２９．６、１２９．１、６６．４、５５．６、３８．１、３７．８、３４．１、３２．８、３２．５、２６．１、１８．７。
【０３０１】
（３（２Ｓ），４Ｓ）−３−（２−メチル−７−ブロモ−１−オキソヘプチル）−４−（フェニルメチル）−２−オキサゾリジノン（２４ｃ）。化合物２４ｃは、化合物２６ａについて概説された手順に従い、２３ｃから５６％収率で製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．４１−７．２２（ｍ、５Ｈ）、４．７４−４．６６（ｍ、１Ｈ）、４．２５−４．１９（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．７７−３．７０（ｍ、１Ｈ）、３．４５−３．３９（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．３１−３．２３（ｄｄ、Ｊ＝３．７、１３．７Ｈｚ、１Ｈ）、２．８４−２．７７（ｄｄ、Ｊ＝１０．０、１２．５Ｈｚ、１Ｈ）、１．９１−１．７７（ｍ、３Ｈ）、１．５０−１．３２（ｍ、５Ｈ）、１．２５−１．２０（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７７．２、１５３．１、１３５．４、１２９．７、１２９．１、１２７．５、６６．４、５５．７、３８．２、３７．９、３４．３、３３．４、３２．８、２８．４、２７．７、１７，８。
【０３０２】
２（Ｓ）−メチル−５−ブロモ吉草酸（２５ａ）。１００ｍＬのＴＨＦおよび４０ｍＬのＨ２Ｏ中の２４ａ（１０．４１ｇ、２９．４ｍｍｏｌ）の溶液を攪拌しながら０℃に冷却した。この溶液に１２．１２ｍＬ（３．５等量）の３０％過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）、次いで２．４１ｇ（２等量）の水酸化リチウム（ＬｉＯＨ）を添加し、そして溶液を０℃で５０分間攪拌した。５０分後に９４ｍＬの硫酸ナトリウム（０．１８３ｇ／ｍＬ  Ｈ２Ｏ）および２８８ｍＬの０．５Ｎ重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）を添加した。ＴＨＦを真空中で除去し、そして残存する水性溶液をＣＨ２Ｃｌ２（３×１００ｍＬ）で抽出した。水層を２５％ＨＣｌでｐＨ２に酸性化しかつＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ画分を合わせ、そして真空中で濃縮して４．０１ｇ（７０％収率）の２７ａを青白色油状物として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ３．４６−３．３８（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．５６−２．４６（ｍ、１Ｈ）、１．９５−１．６０（ｍ、４Ｈ）、１．２５−１．２０（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１８３．１、３８．９、３３．６、３２．１、３０．５、１７．３。
【０３０３】
２（Ｓ）−メチル−６−ブロモヘキサン酸（２５ｂ）。化合物２５ｂは２５ａについて概説された手順に従い２４ｂから７７％収率で製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ３．４５−３．３８（ｔ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．５５−２．４５（ｍ、１Ｈ）、１．９２−１．８５（ｍ、２Ｈ）、１．７７−１．６８（ｍ、１Ｈ）、１．５５−１．４６（ｍ、３Ｈ）、１．２４−１．１９（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１８３．５、３９．５、３３．８、３２．９、３２．７、２６．０、１７．２。
【０３０４】
２（Ｓ）−メチル−７−ブロモヘプタン酸（２５ｃ）。化合物２５ｃは２５について概説された手順に従い２４ｃから７４％収率で製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ３．４３−３．３６（ｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．５１−２．４２（ｍ、１Ｈ）、１．９０−１．６４（ｍ、３Ｈ）、１．４９−１．３２（ｍ、５Ｈ）１．２０−１．１４（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１８３．６、３９．５、３４．１、３３．５、３２．７、２８．２、２６．６、１７．１。
【実施例３】
【０３０５】
αメチル、αデスアミノ、ωＮ置換ホモリシルおよびオリンチル（８）ニューロテンシン（８−１３）
αメチル、αデスアミノωＮ置換ホモリシルおよびオリンチル（８）ニューロテンシン（８−１３）を合成した（図７）。α−メチルブロモ酸２７ａおよびｃを、全般の節で概説されたとおり樹脂結合したペプチドにカップリングした。固相カップリングは後に続くとおり実施した。
【０３０６】
樹脂結合したＮαＦｍｏｃロイシンを、ピペリジン（ＤＭＦ中２０％）でのＦｍｏｃ切断前にＤＭＦ中で膨潤させた。ピペリジン溶液を真空濾過により除去し、そして樹脂結合したアミノ酸をＤＭＳおよびジクロロメタン（各５回）で洗浄した。アミノ酸（４等量）をＤＭＦ中でＨＯＢｔ（４等量）ＰｙＢＯＰ（（４等量）およびＤＩＰＥＡ（１０等量）で活性化し、そしてペプチド反応容器に直接添加した。アミノ酸を６時間カップリングし、樹脂をＤＭＦおよびジクロロメタンで洗浄し、そして遊離アミンの存在についてＫａｉｓｅｒ試験でモニターした。必要な場合は樹脂を再カップリングした。この手順をその後のアミノ酸を用いて反復して、最後から２番目のペプチド配列（五量体）を生じた。
【０３０７】
樹脂結合した五量体のアリコートをその後、上述されたとおり適切なωブロモカルボン酸とカップリングして、Ｎ−ωブロモアシル五量体を生じた。Ｎ−ωアシル五量体をその後、これらの実施例で記述されたとおりアンモニア、ジメチルアミン若しくはトリメチルアミンと反応させて、本発明の所望のペプチドを製造した。側鎖保護基の酸触媒される脱保護を、適切なスカベンジャーを含有するＴＦＡ溶液で実施した。
【０３０８】
４ｍＬ／分の一定流速で５５分にわたる１５％ないし７５％Ｂの直線的勾配を使用するＲＰ−ＨＰＬＣ精製が、純粋なωブロモペプチド５３および５４を供給した。これらのブロモペプチドを、１５０等量の水酸化アンモニウム（Ｈ２Ｏ中２９％）、メチルアミン（Ｈ２Ｏ中４０％）、ジメチルアミン（Ｈ２Ｏ中４０％）若しくはトリメチルアミン（Ｈ２Ｏ中４０％）とエタノール（ＥｔＯＨ）中４０℃で１２時間反応させた。溶媒を真空中で除去し、そして粗ペプチドを移動層に溶解しかつ４ｍＬ／分の一定流速で６５分にわたる２％ないし５０％Ｂの直線的勾配を用いて精製した。
【０３０９】
ペプチドは、Ｖｏｙａｇｅｒ  ＤＥ−ＳＴＲ装置４１１７質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ
Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、カリフォルニア州フォスターシティ）でのＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳを介して特徴付けしかつ純度について評価した。ペプチドは９５％以上純度でｉｎ  ｖｉｖｏで使用した。
【実施例４】
【０３１０】
抗精神病ＮＴペプチドアナログの同定
化合物の構造。評価されるペプチドアナログは１個の非天然アミノ酸（スキーム１）若しくはデスアミノ酸（スキーム２）を含有する。
【０３１１】
【化６】
2009519945.tif 000017
【０３１２】
【化７】
2009519945.tif 000018
【０３１３】
ベンチマーク化合物。約５０種の化合物の初期スクリーニングから、表８に列挙されるものを、抗精神病化合物としてのさらなる試験および開発のため選択した。これらの化合物はニューロテンシンフラグメントＮＴ（８−１３）に基づく。これらの化合物は、それぞれ、統合失調症に関与する脳ニューロテンシン受容体ＮＴＲ−１にｉｎ  ｖｉｔｒｏで競合的アゴニストとして結合し、中枢活性の代理物として体温下降を使用して、ラットでＩＰ注入した場合に、中枢活性を示し（ＮＴＲ−１結合によってもまた起こる）、および、統合失調症のラット行動モデルで適切な活性を導き出したような有用な特徴を有した。
【０３１４】
【表９】
2009519945.tif 000019
【０３１５】
該化合物をさらに特徴付けるため、体温下降誘発（ＮＴＲ−１受容体結合）活性を、各化合物の経口およびＩＰ双方の投与後に評価した。表９に見られるとおり、ＡＢＳ２０１を除く化合物の全部が＜１０％の経口活性を表した。興味深いことに、ＡＢＳ２０１は、
以前の最も活性の化合物を上回る経口活性の３００％増大を有した。加えて、ＡＢＳ２０１はＩＰに対して経口で投与される場合により迅速な応答を達成した。これはＮＴ（８−１３）誘導体の間で独特である。
【０３１６】
【表１０】
2009519945.tif 000020
【実施例５】
【０３１７】
ＡＢＳ２０１の神経試験のプロトコル
全般的動物プロトコル。雄性Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット（２５０〜３５０ｇ）若しくはＢｒａｔｔｌｅｂｏｒｏラット（２７０〜３１０ｇ）をＨａｒｌａｎ（インジアナ州インジアナポリス）から得、そして一定温度および湿度で維持したＡＡＡＬＡＣ承認済居住室（ｃｏｌｏｎｙ  ｒｏｏｍ）に収容した。照明は１２時間の明：暗周期で制御し、午前７時に照明を点灯した。動物はケージあたり２匹を収容し、そして実験室食および水を随意に供給した。全実験は明周期の間に実施した。
【０３１８】
動物拘束。ラットは動きを拘束するための木製だぼを装備したＰｌａｓ−Ｌａｂｓ（Ｒ）プラスチック製ケージに拘束した。鉱物油を塗った直腸温度プローブ（Ｐｈｙｓｉｔｅｍｐ（Ｒ）、ＲＥＴ−２、ニュージャージー州クリフトン）を各動物の直腸に挿入した。プローブは、熱電対セレクタ（Ｐｈｙｓｉｔｅｍｐ（Ｒ）、ＳＷＴ−５）とともにマイクロプローブ温度計（Ｐｈｙｓｉｔｅｍｐ（Ｒ）、ＢＡＴ−１２）に接続した。ラットをＩＰ注入前の１時間、ケージに馴化させた。
【０３１９】
ペプチド製剤。試験した各ペプチドは、Ｉ．Ｐ．注入の適切な最終濃度（１ｍＬの０．９％ＮａＣｌ中１０、３０若しくは１００ｍｇ  ＮＴ［８−１３］または等モル濃度のアナログの同等物）まで０．９％ＮａＣｌに溶解した。経口投与のため、試験物品は胃管栄養（ｇａｖａｇｉｎｇ）により動物の胃に直接投与した。対照は０．９％ＮａＣｌの投与を伴った。従って、ペプチドを生理的食塩水に溶解し、そして平衡期間後に、ラットにペプチド（５ｍｇ／ｋｇ）若しくは生理的食塩水（１ｍＬ／ｋｇ）のＩＰ注入を与えた。初期温度値は注入の直前および直後のラットの平均温度であった。その後の測定は３０分ごとに５時間行った。統計学的解析は、一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）、次いで有意性を測定するためのＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（Ｒ）を使用する多重比較のためのＴｕｋｅｙの事後検定を使用して実施した。結果はｐ＜０．０５について有意とみなした。
【０３２０】
体温下降。体温下降誘発は、脳に進入しかつＮＴＲ−１（精神病に関与する受容体）に結合するニューロテンシン誘導体の簡便かつ直接的尺度である。これらの実験のため、動物を、敷きわらを伴わない個別のＰｌｅｘｉｇｌａｓ製ケージに２５℃で収容した。各ラットについて、サーミスタプローブを直腸中４．５ｃｍに設置し、化合物の注入前のケージへの慣れを可能にするように基礎温度を１時間記録した。
【０３２１】
体温下降誘発の用量応答曲線。全部の動物拘束および体温下降プロトコルは上述されたとおりであった。可変傾斜（ｖａｒｉａｂｌｅ  ｓｌｏｐｅ）用量応答曲線およびＥＤ５０値は、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（Ｒ）を使用して生成した。
【０３２２】
ｄ−アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進。実験的に、Ｉ雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを上述されたとおり収容した。ラットは、試験日に実験者が誘発する自発運動の亢進を最小限にするように、試験前３日間取り扱った。実験のため、音および光を減弱した自動光電池ビーム活動チャンバー（ＡｃｃｕＳｃａｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ，、オハイオ州コロンバス）を使用して運動を測定した。ケージを、垂直および水平活動を記録するためのＶｅｒｓａＭａｘ  １．８０−０１４６ソフトウェア（ＡｃｃｕＳｃａｎ）を使用するＩＭＢ製コンピュータとともにＶｅｒｓａＭａｘ分析装置（ＡｃｃｕＳｃａｎ）に接続した。記録された総活動値は垂直および水平活動の総和であった。
【０３２３】
各動物の活動は、動物がコンピュータ制御光電池活動チャンバー（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ
Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、カリフォルニア州サンディエゴ）の光ビームを１分あたり何回「切断する」かにより測定した。チャンバーは、別個の収容室とほぼ同一の周囲光および温度を伴う静寂な室中の４段のラックに配置した。実験は１日１回正午に６日間行った。各日に、６匹のナイーブなラットを各処置条件に割り当てた。用量は、異なるチャンバーの照明などの変動について制御する、装置全体に分配した１２個のチャンバーでそれぞれが評価されるように割り当てた。
【０３２４】
ラットを活動チャンバーに３０分間入れて慣らしかつ基礎活動レベルを確立した。その後ラットを取り出し、そしてＩＰ若しくは経口用量のペプチド（Ｎ＝７）若しくは生理的食塩水（Ｎ＝８）を与え、そして自発活動レベルに対するペプチドの影響を確立するためチャンバーに戻した。投与約３０分後にラットを取り出しかつｄ−アンフェタミン（１ｍｇ／ｋｇ）若しくはベヒクルのＩＰ注入を与え、そして誘発される自発運動の亢進に対するペプチドの影響を評価するため、さらなる１時間、チャンバーに戻した。
【０３２５】
慢性試験プロトコル。慢性体温下降試験のため、ラットにＡＢＳ２０１（５ｍｇ／ｋｇ）若しくは生理的食塩水のＩＰ注入を１日１回連続５日間与えた。誘発された体温下降をモニターし、そして上述されたとおり有意性について検定した。反復投与後のｄ−アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進を低下させるＡＢＳ２０１の能力を評価するため、ラットを３投与群（慢性、急性および対照（全群についてＮ＝７）に分割した。第１〜４日に、慢性群はＡＢＳ２０１（５ｍｇ／ｋｇ）のＩＰ注入を受領した一方、急性および対照群は生理的食塩水を受領した。試験日（第５日）に、慢性および急性動物はＡＢＳ２０１（５ｍｇ／ｋｇ）を受領した一方、対照動物は生理的食塩水を受領した。第５日の試験プロトコルは上述されたとおりであった。
【０３２６】
カタレプシー評価。ＡＢＳ２０１（５ｍｇ／ｋｇ）を生理的食塩水（１ｍｌ／ｋｇ）に溶解した。ラットにペプチド（５ｍｇ／ｋｇ）、生理的食塩水若しくはハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）のＩＰ注入を与えた。３時間後に水平バーテストを使用してカタレプシーを測定した。簡潔には、ケージ床の７．５ｃｍ上に設置した直径５ｍｍの水平バー上に直接前足を置いた。ラットをこの姿勢で３秒間維持しそしてその後開放した。開放から足がケージ床に戻るまでの時間を測定かつ記録した。３０秒のカットオフ時間を観察し、カタレプシー動物はバーに固定されるため、これは完全にカタレプシーの動物を示した。正常動物は事実上即座に引っ込める。測定は３０分ごとに４時間反復した。データは平均±ＳＥＭ（ｐ＜０．０１）である。
【実施例６】
【０３２７】
ＡＢＳ２０１の神経試験の結果
ＩＰおよびＰＯ投与によるＡＢＳ２０１による体温下降誘発。ＡＢＳ２０１は、ＩＰで投与した場合に約１ｍｇ／ｋｇ、および経口で投与した場合に１０ｍｇ／ｋｇのＥＤ５０を有する（体温下降データは示されない。下のアンフェタミン誘発性の自発運動の亢進の結果を参照されたい）。図９に見られるとおり、ＡＢＳ２０１は、各化合物のおよそのＥＤ５０の２倍で、経口で投与した場合にＩＰに対しより迅速な体温下降効果を実際に誘発する。
【０３２８】
用量応答曲線。０．１〜１０．０ｍｇ／ｋｇの濃度範囲にわたるＩＰ注入後のＡＢＳ２０１の用量応答曲線を図１１に示す。計算されたＥＤ５０値は０．９４３ｍｇ／ｋｇである。１０．０〜３０．０ｍｇ／ｋｇの濃度範囲にわたるＡＢＳ２０１の経口投与に対する体温下降応答を図１２に示す。
【０３２９】
ＩＰおよび経口投与後のｄ−アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進の減弱。図１３は、ＩＰ送達されたＡＢＳ２０１が、約１ｍｇ／ｋｇのＥＤ５０を伴い、アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進を阻害することを具体的に説明する。図１４は、経口投与により送達されたＡＢＳ２０１が、約１０ｍｇ／ｋｇのおよそのＥＤ５０を伴い、自発運動の亢進を誘発したことを具体的に説明する。より多い用量は、十分な物質の欠如によりＰＯ投与実験で試みられなかったが、しかしながら、該ＩＰデータは、自発運動の亢進の効果が完全に逆転され得ることを明瞭に具体的に説明する。
【０３３０】
用量×時間に対する別個の二元配置ＡＮＯＶＡを、アッセイの各異なる時間相について実施した。ＩＰ投与および経口投与実験の相は、慣らし（時間点１０〜６０）、薬物（時間点７０〜１２０）およびアンフェタミン（時間点１３０〜２４０）よりなった。
【０３３１】
ＩＰ投与実験のため、慣らし相の間、時間の主効果［Ｆ（５，１８５）＝２６４．３３５（ｐ＜０．００１）が存在し、用量に関係なく時間にわたる活動レベルの次第の低下を示した。用量全体で急激に低下したＴｕｋｅｙの事後検定は、時間点１０〜３０の活動レベルが時間点４０〜６０より有意により高かった（ｐ＜０．００１）ことを示した。これらの結果は新規環境と関連する初期の自発的探求活動に帰される。薬物相の間、時間の主効果［Ｆ（５，１８５＝１２．３３６（ｐ＜０．００１）］および用量の主効果［Ｆ（５，３７）＝１１．７７５（ｐ＜０．００１）］が存在した。時間の主効果は第一の時間点（７０分）に関する全用量の活動の低下から生じた。時間全体で急激に低下したＴｕｋｅｙの事後検定は、全用量が生理的食塩水と有意に異なる応答した（ｐ＜０．００１）ことを示した。アンフェタミン相の間、用量×時間の交互作用［Ｆ（５５，４０７）＝４．４７４（ｐ＜０．００１）］が存在した。Ｔｕｋｅｙの事後検定は、全ＡＢＳ２０１用量群が生理的食塩水に比較して時間点１３０〜２００について低下された運動活動（ｐ＜０．０５）を示したことを示した。
【０３３２】
経口投与実験については、慣らし相の間、時間の主効果［Ｆ（５，１２０）＝２０１．９７９（ｐ＜０．００１）］が存在し、用量に関係なく時間にわたる活動レベルの次第の低下を示した。用量全体で急激に低下したＴｕｋｅｙの事後検定は、各時間点で活動レベルが有意に低下したことを示した。薬物相の間は用量×時間の交互作用［Ｆ（１５，１２０）＝１１．５８４（ｐ＜０．０３７）］が存在した。時間全体で急激に低下したＴｕｋｅｙの事後検定は、１０ｍｇ／ｋｇおよび３０ｍｇ／ｋｇ用量群のみが生理的食塩水と有意に異なる応答した（ｐ＜０．０１）ことを示した。アンフェタミン相の間に用量×時間の交互作用［Ｆ（１１，２６４）＝３５．６１６（ｐ＜０．００１）］が存在した。Ｔｕｋｅｙの事後検定は、全用量群が生理的食塩水に比較して時間点１４０〜１８０について低下された運動活動を示した（ｐ＜０．０５）ことを示した。加えて、２０ｍｇ／ｋｇおよび３０ｍｇ／ｋｇ用量群は、時間点１９０〜２００で生理的食塩水群より有意に低く応答した。
【０３３３】
体温下降誘発の慢性ＡＢＳ２０１投与の効果。ＡＢＳ２０１は、反復連日投与後に有意のＣＮＳ効果を維持し（表６）、また５日間にわたり絶対的体温下降応答が増大した。
【０３３４】
ｄ−アンフェタミン誘発性の運動亢進に対する反復ＡＢＳ２０１投与の影響。群×時間の別個の二元配置ＡＮＯＶＡを、実験の各異なる時間相について実施した。相は上述されたものと一致した。慣らし相の間は時間の主効果［Ｆ（５，９０）＝１４６．１６４（ｐ＜０．００１）］が存在し、群に関係なく時間にわたる活動レベルの次第の低下が存在したことを示した。用量全体で急激に低下したＴｕｋｅｙの事後検定は、時間点１０〜２０の活動レベルが時間点３０〜６０より有意により高かった（ｐ＜０．００１）ことを示した。これらの結果は時間にわたる新規環境に対するラットの慣れに帰される。薬物相の間に時間の主効果［Ｆ（５，９０）＝１３．５１２（ｐ＜０．００１）］および群の主効果［Ｆ（２，１８）＝４．３７（ｐ＝０．０２８）］が存在した。時間の主効果は、最初の時間点（７０分）に関する全用量の活動の低下から生じた。時間全体で急激に低下したＴｕｋｅｙの事後検定は、急性群のみが薬物相の間に生理的食塩水と有意に異なる応答した（ｐ＜０．０５）ことを示した。アンフェタミン相の間に群×時間の交互作用［Ｆ（２２．１９８）＝４．０６９（ｐ＜０．００１）］が存在した。Ｔｕｋｅｙの事後検定は、急性および慢性双方の群が、生理的食塩水に比較して時間点１４０〜２２０について低下された運動活動を示した（ｐ＜０．０５）ことを示した。
【０３３５】
プレパルス抑制の逆転。音響驚愕のプレパルス抑制（ＰＰＩ）は、薬物投与されていない統合失調症患者で低下され、かつ、類似の欠陥を、薬理学的、環境若しくは神経解剖学的操作によりラットで誘発し得る。最近、単一遺伝子突然変異をもつＢｒａｔｔｌｅｂｏｒｏ（ＢＢ）ラット（Ｌｏｎｇ  Ｅｖａｎｓ（ＬＥ）一系統）が、統合失調症患者で観察されるものと相同なＰＰＩの固有の欠陥を有することが報告された（Ｆｅｉｆｅｌら  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ２９：７３１（２００４）を参照されたい）。非定型の抗精神病薬がこのモデルで活性である。図１５に見られるとおり、経口投与されたＡＢＳ２０１はＢｒａｔｔｌｅｂｏｒｏラットでＰＰＩを逆転する。
【０３３６】
カタレプシー評価。ＡＢＳ２０１（５ｍｇ／ｋｇ）も生理的食塩水も末梢投与後にカタレプシーを引き起こさなかった（Ｎ＝５）。ラットで完全なカタレプシー応答を生じることが既知の典型的ＡＰＤ、ハロペリドールは、３０秒間以上持続したカタレプシーを誘発した。図１６を参照されたい。
【０３３７】
用量耐性。上述されたプロトコルを使用するモニタリング方法のような体温下降の誘発およびアンフェタミン誘発性運動の阻害の双方を使用して、ＥＤ５０の５倍のＡＢＳ２０１を連続５日間動物にＩ．Ｐ．投与した。用量耐性はいずれの化合物でも観察されなかった（図１７および１８を参照されたい）。
【０３３８】
ＡＢＳ２０１の行動的効果の要約。抗精神病能力をもつ分子を評価するための「黄金基準」の動物モデルは、アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進の阻害である。ＡＢＳ２０１はＩＰで注入されるにしろ経口で注入されるにしろ用量依存性の様式で活性である（図１３および１４）。ＡＢＳ２０１の作用はＩＶおよびＰＯ双方の投与後に明らかであり、用量依存性で、かつ長時間作用性（投与後１時間に観察可能および追加の最低１時間明らか）である。
【０３３９】
カタレプシーに対するＡＢＳ２０１およびハロペリドールの効果をラットで検査した。ラット（Ｎ＝５）にＡＢＳ２０１（５ｍｇ／ｋｇ）若しくはハロペリドール（１ｍｇ／ｋｇ）のＩＰ注入を与えた。２時間後に水平バーテストを使用してカタレプシーを測定した。データは平均±ＳＥＭ（ｐ＜０．０１）である。ＡＢＳ２０１はラットでカタレプシー状態を誘発せず（図１６）、抗侵害受容性でなく、そして、複数回投与に対する耐性は、体温下降をモニターすること若しくはアンフェタミン誘発性の自発運動の亢進の阻害いずれでも起こらない（図１７および１８）。従って、ＡＢＳ２０１は、ＩＶおよびＰＯ双方投与後にげっ歯類で体温下降を確実に誘発する。ＡＢＳ２０１の作用は、用量依存性かつ長時間作用性であり、投与後３〜４時間観察可能である。体温下降を生じる用量は、ｄ−アンフェタミン応答を逆転させるものに同一でない場合は類似である。
【０３４０】
中性の生理学的生理的食塩水中で投与される５０ｍｇ／ｋｇ（ＩＶ）若しくは２５０ｍｇ／ｋｇ（ＰＯ）のＡＢＳ２０１  ＨＣｌをそれぞれ受領する３匹の雄性および３匹の雌性ラットの経口および静脈内投与を観察した。２および２４時間の投与後臨床観察期間の間、中核体温の測定を行った。
【０３４１】
以下が、ＡＢＳ２０１の静脈内投与のすぐ間および直後の期間に観察された。すなわち、投与期間の間（穏やかな圧力；尾静脈を介し＞１分＜２分）、ＡＢＳ２０１  ＨＣｌを受領する動物は身体拘束ケージ中で目に見えて穏やかになり；拘束ケージからの取り出しに際して、動物は、明らかに鎮静され、自発的卓上（ｂｅｎｃｈｔｏｐ）運動活動を欠き、取り扱いに際して巻き付く姿勢を取り、および、大きく損なわれた復元反射若しくはその喪失を表したが、にもかかわらず、眼瞼下垂は非存在であり、筋緊張は実質的に低下されたとは言え、弛緩性麻痺の証拠は存在せず、瞳孔反射が存在し、後肢挟み応答は損なわれたか若しくは非存在であり、副交感神経応答の証拠は存在せず、例えば自発的排尿、排便、唾液分泌および流涙は非存在であり、急性交感神経応答の証拠、例えば起毛の証拠は存在せず、発作（緊張性若しくは間代性いずれか）の証拠は存在しなかった。急性効果は短時間であり、復元反射は完全な投薬期間（およそ３０分）の終了までに復帰した。２時間の投与後観察期間で、全動物はほぼ正常に見えたとは言え、顕著な低体温状態が存在した。投与後２４時間の観察期間で、全動物はほぼ正常に見え、体温下降は非存在であった。ＡＢＳ２０１  ＨＣｌを経口投与した動物は全時間点でほぼ正常に見えた。従って、証拠は、ＡＢＳ２０１  ＨＣｌ（５０ｍｇ／ｋｇ）の静脈内投与後の動物の急性の行動的外見および応答（１種若しくは複数）を、急速かつ顕著な中枢神経系の効果に直接帰すことができることを示す。
【実施例７】
【０３４２】
ＡＢＳ２０１の経口生物学的利用性試験
放射活性ＡＢＳ２０１の生成のためのＦｍｏｃ−プロリン−ＯＨ＊の合成（図１９）。Ｌ−プロリン（２０．７ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｔｅｃｈ）を４５０μＬの１０％Ｎａ２ＣＯ３溶液に溶解し、それに２５０μＣｉのＬ−［Ｕ−１４Ｃ］  ｅｇｒａｄａ（Ｍｏｒａｖｅｋ、カリフォルニア州ブレア）を含有する５ｍＬのＥｔＯＨ：Ｈ２Ｏ（２：９８）を添加した。３ｍＬのジメトキシエタン（ＤＭＥ）中のＦｍｏｃ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（Ｆｍｏｃ−Ｏｓｕ）（１００ｍｇ、１．５等量）を攪拌するアミノ酸溶液に一滴ずつ添加した。反応を室温で１２時間攪拌させ、そしてＤＭＥを真空中で除去した。残存する水性溶液を１０ｍＬのＨ２Ｏで希釈し、そして飽和Ｎ−ブタノール（４×１０ｍＬ）で抽出した。ブタノール抽出液を合わせかつ濃縮して青白色油状物を生じた。残余のＦｍｏｃ−Ｏｓｕを、ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２（５０：５
０）で溶離してシリカゲルで除去した。粗Ｆｍｏｃ−プロリン−ＯＨ＊はさらなる精製を伴わずにペプチド合成で使用した。
【０３４３】
Ｃａｃｏ−２細胞モデルを使用するＡＢＳ２０１の経口生物学的利用性の研究。ヒト結腸直腸癌由来のＣａｃｏ−２細胞は、十分に発達した微絨毛および刷子縁酵素を表す極性化した細胞に自発的に分化する（７８）。これらの特徴は該細胞をヒト小腸の優れたモデルにする。Ｃａｃｏ−２細胞モデルでの取り込みと経口生物学的利用性の間の強い相関が同定されている（７９）。Ｃａｃｏ−２細胞を横断するペプチドの輸送に焦点を当てた研究は、溶質−溶媒の水素結合を該ペプチドの浸透性における主要な決定因子と同定した。非天然アミノ酸の技術を、溶質−溶媒相互作用、とりわけ水素結合により起こる水の溶媒和を低下させるよう設計し、これゆえに現在の改変はＣａｃｏ−２細胞で高められた腸吸収を賦与するはずである。下述される研究は、ＮＴ（８−１３）アナログの潜在的経口生物学的利用性およびそれらの取り込みの原因の輸送の機構を評価するように設計されている。
【０３４４】
ＡＢＳ２０１は、新規ＡＰＤとしてのＮＴ（８−１３）アナログの開発のためのリード化合物である。ＡＢＳ２０１は、従ってＮＴ（８−１３）アナログの細胞取り込みを評価するための原型として機能し得る。液体シンチレーション計数（ＬＳＣ）は、細胞単層からのペプチドの抽出が必要とされず、かつ、溶解された細胞成分を、矛盾する分析をもたらす不正確であり得る抽出プロトコルなしに直接分析し得るため、これらのアッセイの好ましい分析方法である。Ｌ−［Ｕ−１４Ｃ］αｅｇｒａｄａをこれらの研究の放射標識として使用した。プロリンは、塩基不安定性のＦｍｏｃ部分を用いるペプチド合成のためα−アミンで容易に保護される。加えて、Ｐｒｏ１０はＮＴ（８−１３）の主要切断部位と同定されていない。抗精神病能力を示すＮＴ（８−１３）アナログはＰｒｏ１０修飾を包含していない。
【０３４５】
ＮＴ（８−１３）アナログの細胞取り込みの発生および機構を検査するため、Ｃａｃｏ−２細胞（腸上皮の十分に確立されたモデル）を利用し得る。これらの研究は、該ペプチドアナログの経口活性の潜在性への洞察を提供するよう設計した。上述されたとおり、ＮＴ（８−１３）アナログは経口投与後にＣＮＳ活性を導き出す。それらは経口活性を表すためのＮＴ（８−１３）の最初のアナログであり、そして、これらの予備研究は、高められた経口活性をもつ今後のペプチドアナログの開発で補助する情報を提供するはずである。
【０３４６】
これらの取り込み試験に使用されたＡＢＳ２０１の濃度（２００μＭ）は２つの異なる理由から選ぶことができる。生理的食塩水（１ｍＬ／ｋｇ）中で送達されるペプチドの２０ｍｇ／ｋｇ用量の濃度は２４ｍＭである。胃管栄養法投与は胃への直接投与を保証するため、２４ｍＭのわずかにのみ下の濃度は小腸により見られるはずである。従って、Ｃａｃｏ−２細胞に添加される濃度はｉｎ  ｖｉｖｏで理論上見られるものより十分に下である。加えて、ラットでの標準的循環血容量は６４ｍＬ／ｋｇである（８２）。胃管栄養法投与後に、ラット全体を通じて循環する２０ｍｇ／ｋｇ用量のペプチドの濃度は３７７μＭである。これらの理由から、２００μＭが、ＡＢＳ２０１の取り込みをｉｎ  ｖｉｔｒｏで研究するための生理学的に適切な濃度であると決定される。
【実施例８】
【０３４７】
ＡＢＳ２０１の前臨床試験
受容体スクリーニング。３種の別個の濃度のＡＢＳ２０１（１０−９、１０−７、１０−５Ｍ）を、以下の１６種の受容体、すなわち、アドレナリン（α１、α２、β）、ドーパミン、ヒスタミン（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）、ムスカリン（中枢、末梢）、ニコチン、オピオイド（非選択的）、オルファニン、セロトニン（輸送体、非選択的）、モノアミンオキ
シダーゼ（Ａ、Ｂ）に対し個別にスクリーニングした。受容体の内因性基質の置換は観察されなかった。これゆえに、ＡＢＳ２０１はこれらの受容体のいずれとも結合すると思われない。対照的に、ＡＢＳ２０１は標的受容体（ＮＴＲ１）に対するｎＭの親和性を有する。
【０３４８】
肝受容体スクリーニング（スタンフォード研究所（Ｓｔａｎｆｏｒｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）研究Ｂ２１３−０６）。ＡＢＳ２０１（１０−３、１０−２、０．１Ｍ）を、以下の肝ＣＹＰすなわちＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ３Ａ４に対しスクリーニングした。これらの酵素へのいずれの濃度のＡＢＳ２０１の基質結合の阻害も観察されなかった（薬物−薬物相互作用の潜在性の欠如の表示）。
【０３４９】
血液分布および代謝の同定。ＡＢＳ２０１を、新たに単離したラット全血に１００μｇ／ｍＬの濃度まで添加し、分配させ、そして細胞画分を遠心分離により除去した。この濃度のＡＢＳ２０１は細胞と血清画分の間でほぼ等しく分布する。ＡＢＳ２０１の代謝は検出されず、非常に長い血清／血漿半減期が示された以前の実験と矛盾しなかった。
【０３５０】
最大許容薬量。ＡＢＳ２０１を、１００ｍｇ／ｋｇまでのＩＶ用量および５００ｍｇ／ｋｇまでの経口用量でラットに投与した。該化合物の副作用（体重減少、死亡、異常な臨床評価パネル）は投与後４８時間まで見られなかった。これらの実験は、従って、抗精神病および脳活動を反映する他の試験における該化合物のＥＤ５０の１００倍のＡＢＳ２０１のＭＴＤのより低い限界を規定する。
【０３５１】
遺伝毒性学。小核試験、マウスリンパ腫試験およびＡｍｅｓ試験を実施した。小核試験は、マウス骨髄細胞で誘発された小核多染性赤血球により明示されるところの遺伝子損傷を引き起こすその潜在性について、合成ＮＴペプチドを評価した。マウスリンパ腫試験は、活性化されないおよびＳ９代謝活性化条件下の双方でのＬ５１７８Ｙ  ＴＫ＋／−マウスリンパ腫細胞のチミジンキナーゼ遺伝子座で突然変異を引き起こすその潜在性について、合成ＮＴペプチドを評価した。Ａｍｅｓ試験は、活性化されないおよびＳ９代謝活性化条件下の双方での、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）株ＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１５３５およびＴＡ１５３７のヒスチジンオペロン、ならびに大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）株ＷＰ２  ｕｖｒＡのトリプトファンオペロン中で突然変異を引き起こすその潜在性について、合成ＮＴペプチドを評価した。実験プロトコルは後に続くとおりである。
【０３５２】
小核試験において、該試験で使用した９０匹のＣＤ−１マウスは、群１〜４（対照、低、中および高用量）で１０匹／性／群、ならびに陽性対照群で５匹／性よりなった。経口で投与されたところの試験ペプチド、経口で投与されるところの陽性対照（８０ｍｇ／ｋｇのシクロホスファミド）。投与のおよそ２４および４８時間後にマウスを殺し、そして双方の大腿骨から骨髄を得た。骨髄懸濁液のスライドを調製し、ライト−ギムザ染色で染色し、乾燥しかつ盲検評価した。全赤血球（多染性赤血球（ＰＣＥ）＋正常染色赤血球（ＮＣＥ））のなかのＰＣＥの数を、最低２００赤血球を計数することにより各動物について決定した。小核多染性赤血球（ＭＰＣＥ）の数をその後、動物あたり２０００ＰＣＥについて評価した。１種若しくはそれ以上の用量レベルで対照に比較してＭＣＰＥの数の正の用量応答性の傾向すなわち統計学的に有意の増加が存在する場合に、陽性の結果が得られた。
【０３５３】
マウスリンパ腫試験においては、雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−ＤａｗｌｅｙラットをＡｒｏｃｌｏｒ−１２５４またはフェノバルビタールおよび／若しくはβ−ナフトフラボンで誘導することにより、標準的ラット肝Ｓ−９を調製した。陽性対照は、代謝活性化を伴わずに
ＴＫ遺伝子座で突然変異を誘発するメタンスルホン酸ヒカントン（ＨＹＣ）、および代謝活性化を伴いＴＫ遺伝子座で突然変異を誘発する７，１２−ジメチルベンズ［α］アントラセン（ＤＭＢＡ）を包含した。範囲発見試験を実施して０〜１００％毒性を生じるＡＢＳ２０１の濃度を同定した。陽性対照（ＨＹＣおよびＤＭＢＡ）ならびに５濃度のＡＢＳ２０１を、代謝活性化を伴うおよび伴うアッセイで使用した。細胞を各ＡＢＳ用量に曝露し、そして上清を得かつ２０および４４時間インキュベートした。２日の発現期間後に、培養物を制限剤トリフルオロチミジン（ＴＫ−／−細胞のみの増殖を可能にする）若しくはベヒクル対照でクローン化した。突然変異の頻度および誘発された突然変異の頻度を計算した。最低１種の培養物が、対応する溶媒対照培養物の平均ＭＦより２倍若しくはそれ以上大きかったＭＦを有しかつ該応答が用量依存性であった場合に、陽性の結果が得られた。変異アッセイの結果を確認するため、Ｓ−９活性化を伴わずに確認アッセイを実施した。
【０３５４】
Ａｍｅｓ試験では、合成ＮＴペプチドアナログを、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）株ＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１５３５、ＴＡ１５３７のヒスチジンオペロン、および大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）株ＷＰ２  ｕｖｒＡのトリプトファンオペロン中で突然変異を引き起こすその能力について評価した。簡潔には、雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−ＤａｗｌｅｙラットをＡｒｏｃｌｏｒ−１２５４またはフェノバルビタールおよび／若しくはβ−ナフトフラボンで誘導することにより、標準的ラット肝Ｓ−９を調製した。使用した細菌株は、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）株ＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１５３５、ＴＡ１５３７、および大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）株ＷＰ２  ｕｖｒＡであった。陽性対照は２−ＡＡ、２−ＮＦ、９−ＡＡ、ＮａＡｚおよびＭＭＳを包含した。溶解性／混合可能性アッセイを実施して、選択された溶媒（水、ＤＭＳＯ、アセトン若しくはエタノール）中でのペプチドアナログの最大の達成可能な濃度を決定した。範囲発見試験を、０〜１００％毒性を生じるＡＢＳ２０１の濃度を同定するため、テスター株ＴＡ１００およびＷＰ２  ｕｖｒＡのみを使用して、Ｓ−９活性化を伴いおよび伴わずに実施した。突然変異アッセイは、プレート取り込み処理法を使用して、４種のネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）株（ＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１５３５、ＴＡ１５３７）および大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）株ＷＰ２  ｕｖｒＡ株を使用して実施した。株ＴＡ９８若しくはＴＡ  １００いずれかが、対応する溶媒対照プレートの平均復帰突然変異頻度の２倍以上若しくはそれに等しい平均復帰突然変異頻度を生じる用量を有する場合、または、株ＴＡ  １５３５、ＴＡ  １５３７若しくはＷＰ２  ｕｖｒＡのいずれかが、溶媒対照の頻度に比較して平均復帰突然変異頻度の３倍若しくはそれ以上の増大を生じる用量を有する場合に、応答を陽性とみなした。
【０３５５】
初期データはＡＢＳ２０１が全３種のアッセイで不活性であることを示す。
【０３５６】
ｈＥＲＧアッセイ。ｈＥＲＧ試験の目的は、ＨＥＫ２９３細胞株で安定に発現されるｈＥＲＧ（ヒトｅｔｈｅｒ−ａ−ｇｏ−ｇｏ関連遺伝子）チャンネルにより伝導される迅速活性化内向き整流性カリウム電流（ＩＫｒ）に対する試験物品の効果を評価することである。使用される方法は後に続くとおりである。ｈＥＲＧ  ｃＤＮＡで安定にトランスフェクトしたＨＥＫ２９３細胞を該試験で使用した。全実験は生理学的温度近く（３５±２℃）で実施した。陽性対照（６０ｎＭターフェナジン）を２細胞（ｎ≧２）に適用した。細胞を記録チャンバーに移しかつＨＢ−ＰＳ溶液で表面灌流した。記録チャンバーおよび浴溶液は、インライン溶液プレヒーター、チャンバー床ヒーターおよびフィードバック温度制御装置の組合せを使用して３５±２℃の温度で維持した。浴温度はサーミスタプローブを使用して測定した。
【０３５７】
パッチピペットは、Ｐ−９７マイクロピペットプラー（Ｓｕｔｔｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍ
ｅｎｔｓ、カリフォルニア州）を使用して、ガラス製毛細管から作成した。商業的パッチクランプ増幅器を全細胞記録に使用した。デジタル化前に、電流記録をサンプリング頻度の１／５で低域フィルタリングした。
【０３５８】
ｈＥＲＧを安定に発現する細胞を−８０ｍＶで保持した。ＡＢＳ２０１によるｈＥＲＧ電流の発生および定常状態遮断を、固定振幅（調製前パルス：＋２０ｍＶ  １秒間；５秒間隔で反復した−８０ｍＶへの再分極試験傾斜（−０．５Ｖ／秒）をもつパルスパターンを使用して測定した。各記録は、内因性電流の寄与を評価するため、参照物質の超極大濃度（Ｅ−４０３１、５００ｎＭ）の最終適用で終了した。残存する遮断されない電流はデータからオフラインでデジタルで差し引き、ｈＥＲＧ阻害に対するＡＢＳ２０１の効力を決定した。
【０３５９】
初期の結果は、ＡＢＳ２０１がｈＥＲＧ試験で不活性であることを示す。
【０３６０】
ＡＢＳ２０１の薬物動態および脳分布。ＡＢＳ２０１を１ＩＶ用量（５ｍｇ／ｋｇ）若しくは経口用量（５０ｍｇ／ｋｇ）でラットに投与した。選択した時間点で血液を取り出すか若しくは脳を収集し、そして該ペプチドアナログの濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳを使用して測定した。ＡＢＳ２０１はＩＶおよび経口双方の投与後１２０分まで、血液および脳中で検出し得たことが示された。脳中の量は観察された行動効果を生じさせるようにＮＴＲ−１を飽和するのに十分であった。
【０３６１】
ＡＢＳ２０１を、化合物が５ｍｇ／ｋｇのＩＶ投与後１２０分まで低レベルで測定可能であった初期相および第二相を伴う２相で全血から澄明にし、全血中のＡＢＳ２０１の濃度は化合物（５０ｍｇ／ｋｇ）の経口投与後全時点でＬＬＯＤより下であり、脳中のＡＢＳ２０１の濃度はＩＶ投与後全時点でＬＬＯＤより下であり、そして、測定可能な量のＡＢＳ２０１が、５０ｍｇ／ｋｇの経口投与１５分後に３動物のうち２匹の脳で検出された。
【０３６２】
ＡＢＳ２０１のＩＶおよび経口投与の血漿濃度対時間曲線を図２０および２１に示す。ＩＶ注入後、全身クリアランスの平均値は２．４５Ｌ／時間／ｋｇであり、これはラット肝血流の７４．０２％に対応した。半減期およびＶｚの平均値は０．２９時間および０．８７Ｌ／ｋｇであった。ＡＢＳ２０１は組織に十分に分布する。末期相の分布の容量は０．８７±０．２７Ｌ／ｋｇであり、これはラットの総体内水分（０．６７Ｌ／ｋｇ）に同様であった。経口投与後のＡＢＳ２０１の生物学的利用率は、０．９％生理的食塩水溶液中の場合に０．０７％であった。半減期の平均値は０．９９時間であった。
【０３６３】
脳中のＡＢＳ２０１の薬物動態研究のため、血漿サンプルおよび脳サンプルを、試験物品ＡＢＳ２０１・２ＨＣｌの静脈内注入後４時点でＳＤラットから収集した。これらのサンプルをその後、ＢＢＢ浸透および薬物動態パラメータを推定するためのＬＣ／ＭＳ／ＭＳによる血漿および脳の薬物濃度の測定に使用した。時間経過の結果を図２２に示す。１００ｍｇ／ｋｇのＡＢＳ２０１・２ＨＣｌの１５分静脈内注入後に、全身クリアランスの値は２２．７７Ｌ／時間／ｋｇであり、これはラット肝血流（３．３１Ｌ／時間／ｋｇ）の６．８８倍に対応した。ＡＢＳ２０１・２ＨＣｌの半減期（Ｔ１／２）の値は０．４９時間であった。１００ｍｇ／ｋｇの用量での静脈内注入後のＣｍａｘ（２５分で）の平均値は５４５９．７８μｇ／Ｌであった。ＡＵＣ０−∞の値は４３９１．０９時間＊μｇ／Ｌであった。
【０３６４】
ＡＢＳ２０１・２ＨＣｌは組織に十分に分布する。末期相の分布の容量は１６．１０Ｌ／ｋｇであり、これはラットの総体内水分（０．６７Ｌ／ｋｇ）より大きかった。
【０３６５】
１００ｍｇ／ｋｇのＡＢＳ２０１・２ＨＣｌの１５分静脈内注入後、Ｃｍａｘ（４５分で）および脳中ＡＵＣ０−ｔの値はそれぞれ３２．９３ｎｇ／ｇおよび６０．９６時間＊ｎｇ／ｇであった。ＡＢＳ２０１：２ＨＣｌの半減期（Ｔ１／２）の値は４．８５時間であった。静脈内注入後２５分から１３５分までの脳対血漿比は０．００１５から０．１４５３までの範囲にわたった。これらの結果は、ＡＢＳ２０１が脳に選択的に取り込まれることを示す（それが血液中より有意により長い半減期を有するため）。脳の半減期はＡＢＳ２０１について見られる行動効果の半減期と整合している。
【０３６６】
ＡＢＳ２０１の血漿および脳の薬物動態を、非絶食ラットへの１ｍｇ／ｋｇのＡＢＳ２０１のＩＶ投与および３０ｍｇ／ｋｇの経口投与後にもまた試験した。この試験の結果は、ＡＢＳ２０１がＩＶ投与後に約５分のｔ１／２で血漿から迅速に消失され、該化合物の濃度が４５分までにＬＬＯＤより下に低下し、ＡＢＳ２０１の濃度は経口投与後全時点でＬＬＯＤより下であり、そして脳中のＡＢＳ２０１濃度がＩＶおよびＰＯ双方の投与後の全時点でＬＬＯＤより下であったことを示した。
【０３６７】
ＡＢＳ２０１のｉｎ  ｖｉｔｒｏ代謝および区画化。血液中のＡＢＳ２０１の分布、血漿中のタンパク質結合の程度を評価するため、ならびに血液および血漿中のＡＢＳ２０１の代謝の予備評価を得るため。この試験の結果は、３７℃で５若しくは３０分インキュベーション後の血漿タンパク質へのＡＢＳ２０１のほとんど若しくは全くない結合、３７℃で５若しくは３０分インキュベーション後の全血若しくは血漿中のＡＢＳ２０１の代謝の証拠なし、および全血をＡＢＳ２０１と３７℃で５若しくは３０分間インキュベートした場合の血液の細胞要素へのＡＢＳ２０１の約３３パーセントの迅速な分布を示した。
【０３６８】
ＰＯ投与脳からのＡＢＳ２０１の取り込みの部位の評価。処方によりＡＢＳ２０１の全体的経口生物学的利用性を究極的に増大させるという最終目標をもって、消化管の取り込み部位を評価した。この研究の目的は、ｉｎ  ｓｉｔｕループモデルで、試験物品ＡＢＳ２０１・２ＨＣｌの胃内、十二指腸内、空腸内および結腸内投与後の多様な時間点でＳＤラットから血漿サンプルを収集することであった。これらのサンプルを、薬物動態パラメータおよび区分吸収を推定するためのＬＣ／ＭＳ／ＭＳによる血漿薬物の測定に使用した。静脈内投与および胃管栄養法に関する胃内、十二指腸内、空腸内、結腸内投与の生物学的利用率を計算した。図２３に見ることができるとおり、ＡＢＳ２０１は腸でほぼ完全に吸収され、十二指腸内が取り込みの最大量を表した。事実上、ＡＢＳ２０１は胃で取り込まれない。
【０３６９】
要約。ＡＢＳ２０１を製造するためのＡＢＳ１３のホモリシンのＮ末端α−アジド基（スキーム１）のメチルデスアミノ誘導体４３（スキーム２）での置換は、潜在的抗精神病薬の重要な特徴を有する分子をもたらした。とりわけ、ＡＢＳ２０１は、ＮＴＲ−１に対し高度に選択性であり、また、ＩＰ若しくは経口いずれで投与する場合も、精神病の重要なラットモデルで有効な抗精神病活性を表す。ＡＢＳ２０１は経口で投与される場合に中枢活性の３００％増大を表し、そしてＩＶ注入に対し経口でより迅速な応答を達成した（これらの独特の属性はデスアミノ改変に帰すことができる）。ＡＢＳ２０１はカタレプシーを引き起こさないか若しくは薬物耐性を誘導しない。初期ラット毒性および突然変異誘発実験は陰性であった。
【０３７０】
ＡＢＳ２０１の薬物動態、区画化および可能な代謝をｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏで評価した。該結果は、ほとんど若しくは全くない代謝、および、該化合物が最初に血液からの迅速な消失、次いでより持続性の深部コンパートメント現象を受けることを示す複雑な薬物動態を示唆する。
【０３７１】
また、ＡＢＳ２０１の薬力学応答はＩＶおよびＰＯ双方の投与後に持続性（２〜４時間
）であり、ＩＶのＡＢＳ２０１の急性効果は中枢神経系を介して媒介され、該化合物は血漿若しくは全血との共インキュベーションに際して代謝されるようでなく、ＡＢＳ２０１はｉｎ  ｖｉｔｒｏで血液の水性および細胞相の間で分配し；全血中のＡＢＳ２０１のＰＫプロファイルは二相クリアランス過程と矛盾せず、そして観察された薬力学応答は同様に二相クリアランス過程と矛盾しない。
【０３７２】
ＡＢＳ２０１は、それが血液から喪失される速度の約１０％でそれが脳から喪失するため、おそらく能動輸送過程により脳に優先的に取り込まれる。ラット脳でのＡＢＳ２０１の長い見かけの半減期（投与後６時間まで検出可能）、および該薬物が血液要素中で蓄積場所（すなわち薬物の徐放送達系）を形成するという証拠を考えれば、半合成ペプチドＡＢＳ２０１のような本発明の化合物は１日１回若しくは２回投与し得る。
【実施例９】
【０３７３】
生物活性ペプチド中の−ＣＨ３の代わりの−Ｈの使用から生じる生物学的改良
ＡｒｇおよびＬｙｓの一連のアミノ酸アナログを創製した。米国特許第６，０４３，２１８号；同第６，３５８，９２２号；同第６，５６６，３３０号；同第６，７８３，９４６号；同第６，８５８，３９６号明細書を参照されたい。ＮＴ（８−１３）のＡｒｇ８の代わりに使用される場合、抗精神病および鎮痛双方の活性を有する一連の化合物を生成した。これらの化合物の例は下の表１０に見出し得る（ＡＢＳ２０２、ＡＢＳ２０３、ＡＢＳ２０４、ＡＢＳ２０６）。非天然側鎖に加え、Ｎ末端−ＮＨ２の代わりの−ＣＨ３の使用が双方の適応症に対し最も活性の化合物をもたらしたことが示された。２００５年６月１７日出願の第ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０２１５８０号、および２００４年６月１７日出願の米国仮出願第６０／５８１，３３３号明細書を参照されたい。
【０３７４】
これらの化合物の生物学的活性における−ＣＨ３の役割を評価するために末端の−Ｈを−ＣＨ３の代わりに用いたさらなる一組の化合物を生成した（ＡＢＳ２２６、ＡＢＳ２２７、ＡＢＳ２２８、ＡＢＳ２３０、表１０）。化合物ＡＢＳ２０２およびＡＢＳ２０３の構造を表８に示す。化合物ＡＢＳ２２６およびＡＢＳ２２７は、ＡＢＳ２０２およびＡＢＳ２０３のＮ末端−ＣＨ３基がＡＢＳ２２６およびＡＢＳ２２７中で−Ｈ基により置換されているために、それぞれＡＢＳ２０２およびＡＢＳ２０３と異なる。ＡＢＳ２０４の構造は、３０−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−ｔｅｒｔＬｅｕ−ＣＯＯＨ［式中３０はスキーム２に示される非天然の残基を指す］である。ＡＢＳ２０６の構造はＮ−Ｍｅ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−ｔｅｒｔＬｅｕ−ＣＯＯＨである。化合物ＡＢＳ２２８およびＡＢＳ２３０は、ＡＢＳ２０４およびＡＢＳ２０６のＮ末端−ＣＨ３基がＡＢＳ２２８およびＡＢＳ２３０中で−Ｈ基により置換されているために、それぞれ化合物ＡＢＳ２０４およびＡＢＳ２０６と異なる。
【０３７５】
化合物ＡＢＳ２２６、ＡＢＳ２２７、ＡＢＳ２２８およびＡＢＳ２３０のそれぞれを、適切なラットモデルで、抗精神病および鎮痛活性についてそれぞれその親化合物ＡＢＳ２０２、ＡＢＳ２０３、ＡＢＳ２０４、ＡＢＳ２０６に対し評価した。前者の活性は、ＮＴＲ−１結合および受容体活性化作用ならびに従って抗精神病活性の尺度である誘発された低体温状態（中核体温低下）の程度を測定することにより最も容易にモニターされる。体温下降は、デジタル読み出しボックスに接続した温度計プローブのラットの肛門への挿入により、時間にわたり慣例に追跡する。鎮痛は、５２℃に維持される壁で囲まれた金属表面上でホットプレート測定を行うホットプレートアッセイによりモニターする。ラットを表面上に置いた時間とそれがその後足を舐める場合の間の待ち時間を測定する。動物が３０秒でその後足を舐めない場合、それを除去し、そして１００％の最大陽性効果（すなわちＭＰＥ）を記録する。中間応答は０〜１００％の間のＭＰＥを達成し、生理的食塩水対照は０％待ち時間を規定する。
【０３７６】
【表１１】
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【０３７７】
表１０に見られるとおり、−ＣＨ３の代わりの−Ｈの使用は各場合で効果を有する。ＡＢＳ２２６はＡＢＳ２０２とほぼ同一の抗精神病能力を有するが、しかしそのはるかにより小さい鎮痛活性はより乏しいＮＴＲ−２結合から生じている。従って、該化合物はＮＴＲ−１に対しより選択的かつより良好な抗精神病薬候補である。類似の効果がＡＢＳ２０
３およびＡＢＳ２２７で見られる。ＡＢＳ２２８はＡＢＳ２２４より良好な鎮痛活性を有し、これゆえにそれはＮＴＲ−２に対しより選択的である。ＡＢＳ２２６は双方の潜在的適応症でより活性である。
【０３７８】
要約するため、−Ｈをもつ非天然のＡｒｇおよびＬｙｓアミノ酸は、生物学的活性ペプチド中で−ＣＨ３若しくは−ＮＨ２の代わりに用いられる場合に、該化合物全体活性の増大された若しくは目的の受容体サブタイプに対する増大された選択性の結果として、より良好な製薬学的候補を生じ得る。
【実施例１０】
【０３７９】
ＮＴ誘導体の鎮痛活性のアッセイ
動物。Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ノースカロライナ州ローリー（２３０〜２６０ｇ）若しくはＨａｒｌａｎ、アラバマ州プラットビル（２４０〜２８０ｇ）からの実験的にナイーブな雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを、実験前およそ１週間、任意の食餌および水を伴う規則的明／暗周期（点灯６：００〜１８：００）で、動物居住区にケージあたり４匹で維持した。試験の２日の体重の範囲は２３０〜２６０グラムであった。実験は１日に行い、動物は実験を反復する前に３日間回復させた。
【０３８０】
ペプチド調製。試験物品は、各用量およびベヒクルについてＮ＝６でＩＰ注入若しくは胃管栄養法投与いずれかのため生理的食塩水中所望の濃度で調製する。モルヒネ（５ｍｇ／ｋｇ）をあるプロトコルについて対照として使用する。具体的には、試験ペプチドを０．９％ＮａＣｌに懸濁し、そして１０ｍｇ／ｋｇの用量を与えるように１ｍＬ／ｋｇ（ラット重量２３０〜２６０ｇ）の容量でＩ．Ｐ．注入した。アポモルヒネＨＣｌ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州セントルイス）を、５ｍｇ／ｋｇの用量を与えるように１ｍＬ／ｋｇ  Ｓ．Ｃ．での注入のため、投与４０分以内に５ｍｇ／ｍＬの濃度で蒸留水に溶解した。完全なＥＤ５０を決定する場合、ペプチドの投薬範囲は、２桁の対数の範囲を包括する推定ＥＤ５０の１０、３．、１、０．３、０．１であることができる。
【０３８１】
ホットプレートアッセイ。ホットプレートアッセイ（慢性疼痛の標準的ラットモデル（Ｌｅ  Ｂａｒｓら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．５３：５９７−６５２（２００１）およびＣｈａｐｍａｎら、Ｐａｉｎ  ２２：１−３１（２００２）を参照されたい））は後に続くとおり実施した。５２℃ないし５３℃に維持したホットプレートを、プレートの上に６インチ伸長したプレキシグラス製チャンバー中で４枚のスライドガラスで囲んだ。動物をプレート上に置き、そしてラットを表面上に置いた時間とそれが後足を持ち上げる若しくは舐める（痛覚を暗示する）場合の間の待ち時間を測定した。動物は３０秒のカットオフ待ち時間で即座に取り除く。アッセイは、応答なしに３０秒間ホットプレート上に留まるラットに対応する、１００％と定義する最大可能効果のパーセント（％ＭＰＥ）として評価する。従って、％ＭＰＥは以下の等式、すなわち、％ＭＰＥ＝［（薬物後待ち時間−薬物前待ち時間）／（カットオフ薬物前待ち時間）］×１００％を使用して計算する。全実験についてＮ＝６若しくはそれ以上。
【０３８２】
各組の実験の値に、因子として用量（ベヒクルおよび５レベル）を用いる分散分析を受けさせることができる。分散分析での有意の効果に従い、各用量をＮｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ検定によりベヒクルと比較することができる。効果はｐ＜０．０５の場合に有意とみなすことができる。
【０３８３】
テールフリック（ｔａｉｌ  ｆｌｉｃｋ）アッセイ。実験あたり６ラットのそれぞれをＰｌｅｘｉｇｌａｓ製拘束ボックスに入れた。標準的な実験室湯浴を４９℃に維持した。ラットの尾の遠位３ｃｍを湯に浸漬し、そして挿入から尾のはねすなわち湯からの尾の除
去までの時間を記録した。動物は１０秒のカットオフ待ち時間で即座に取り除く。ＭＰＥを計算した（１００％のＭＰＥは１０秒間湯浴中に留まるラットの尾に対応した）。これを３回反復した。試験の間に尾を乾燥しかつ２０秒間休ませた。ラットにその後適切な量のペプチドを与え、そして実験を３０および６０分に反復した。処置条件は、暦時間および投与の順序のような因子について制御するように釣り合わせたデザインで試験全体に割り振った。全実験についてＮ＝６若しくはそれ以上。
【０３８４】
ホルマリンアッセイ。６匹のナイーブなラットを単一処置条件に割り当て、上で詳述されたところの試験ペプチド若しくは生理的食塩水（対照）いずれかを与え、そして、敷きわらを伴わないＰｌｅｘｉｇｌａｓ製観察ケージ（４３ｃｍ×２４ｃｍ×２０ｃｍ）に入れ、そしてそれらの行動を１５分間モニターした。動物を、毎分、以下の段階、すなわち０＝前足が床上で平坦、１＝前足が床に触れているだけ、２＝前足が床から離れて持ち上げられている、および３＝前足を舐める若しくは噛む、で評価した。この基礎測定後に、動物に、３７％ホルムアルデヒドの５％溶液（２６Ｇ３／８針を伴う１．０ｍＬシリンジ中で調製した無菌生理的食塩水中５％ホルムアルデヒド５０ｍＬ）を右前足に皮下注入した。動物を即座に観察ケージに入れ、そしてそれらの行動を後に続く３０分にわたり記録した。各実験後に、ラットをＣＯ２、次いで頚部脱臼で安楽死させた。試験した各ペプチドについて、基礎およびホルマリンのみ対照に対する時間にわたる平均疼痛等級付けをプロットし、そして一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）を使用して統計学的解析を実施した。差違は５％信頼区間で統計学的に有意とみなした。全実験についてＮ＝６若しくはそれ以上。初期疼痛刺激を反映する初期相（注入後およそ３分）、次いで炎症過程の誘因による感作を反映する約３０分後の第二相を伴う二相行動応答を確立した。
【０３８５】
Ｃｈｕｎｇアッセイ。触覚閾値を評価するため、ラットを、個別の区画に分割した透明プラスチック製のワイヤメッシュ底のケージに入れる。動物を馴化させ、そしてその後、薬物処置前に基礎閾値を評価する。足引っ込め（ｐａｗ  ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ）の５０％機械的閾値を評価するため、隆起（足蹠）を回避して後足足底中央（ｐｌａｎｔａｒ  ｍｉｄ−ｈｉｎｄ  ｐａｗ）にｖｏｎ  Ｆｒｅｙ毛を適用する。使用した８本のｖｏｎ  Ｆｒｅｙ毛を［（ｌｏｇ（１０＊毛を曲げるのに必要とされる力（ｍｇ））］により呼称し、そして０．４〜１５．１グラムからの範囲にわたる（＃  ３．６１〜５．１８）。各毛は、わずかな曲がりを引き起こすのに十分な力で足に対し垂直に押し、そしておよそ６〜８秒間保持する。足が敏速に引っ込められる場合に陽性応答が示される。毛の除去に際して即座にひるむこともまた陽性応答とみなす。応答の非存在（「−」）は次の連続するより強い刺激を与えるための原因であり、陽性応答（「＋」）は次のより弱い刺激を与えるための原因である。６個のデータ点が収集されるか、または最大若しくは最小刺激に達するかのいずれかまで、連続して刺激を与える。最小刺激が達せられかつ陽性応答がなお起こる場合は、閾値に０．２５グラムという自由裁量の最小値を割り当て、最大刺激が与えられかつ応答が起こらない場合は、１５グラムという最大閾値を割り当てる。下降から上昇へ若しくはその逆の刺激の提示の方向の変化を引き起こす、「−」から「＋」若しくは「＋」から「−」いずれかの応答の変化が発生する場合、４個の追加のデータ点を変化の後に収集する。生じる応答パターンを表にし、そして５０％応答閾値を、式：ｌｏｇ（閾値（ｍｇ）×１０）＝Ｘｆ＋ｋｄ［式中：
・Ｘｆ＝適用した最後のｖｏｎ  Ｆｒｅｙ毛の値；
・ｋ＝応答パターンに基づく補正係数（較正表から）
・ｄ＝刺激間の平均距離（ｌｏｇ単位で）］
を使用して計算する。
【０３８６】
正常の未処置（ｕｎ−ｏｐｅｒａｔｅｄ）ラットおよび擬似処置ラットでの観察結果に基づき、１５．１ｇの毛のカットオフを試験の上限として選択する。
【実施例１１】
【０３８７】
潜在的鎮痛薬としてのＡＢＳ２０１
ＮＴおよび誘導体の抗精神病および体温下降効果はＮＴＲ−１受容体活性化作用により媒介される一方、鎮痛効果はＮＴＲ−２受容体活性化作用により媒介される。実現可能な鎮痛薬であるために、ＮＴ誘導体は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでＮＴＲ−２に高親和性で結合しかつｉｎ  ｖｉｖｏで経口で利用可能かつ安定であるべきである。ＡＢＳ２０１はこれらの要件の全部を満たす。すなわち、表１１に示されるところのマイクロモル濃度以下のＮＴＲ−２親和性延長された血漿安定性および経口生物学的利用性を有する。
【０３８８】
【表１２】
2009519945.tif 000022
【０３８９】
ＡＢＳ２０１は、程度および持続期間がモルヒネに匹敵する、ホットプレートアッセイでの％ＭＰＥにより示されるところの鎮痛活性もまた表す（図２４）。しかしながら、これらのペプチドの投与後の動物の情動の差違が興味深い。モルヒネを与えられたラットは「もうろうとした」ように見え、より硬直しかつ環境刺激に対し完全に不応答になった一方、動物はＡＢＳ２０１を与え、単純に弛緩しているようであった。５日間連続して投与されたラットは最初投与された場合と統計学的に同一の％ＭＰＥを示すため、ラットはＡＢＳ２０１の鎮痛活性に対し耐性にならない（図２５）。ラットは投与の時間経過の終了までに実験的にナイーブでなくなり、これはそれらがホットプレートを回避することを学習することをもたらしかつ鎮痛薬の能力を遮蔽し得るため、これはとりわけ注目すべきである。最後に、ＡＢＳ２０１の鎮痛活性はその体温下降効果に結び付けられない。該２者は平行したキネティクスを示さない−とりわけ、鎮痛効果が徐々に消える一方で体温下降効果はなお強いからである。これは、該効果が異なる受容体により媒介されることを明瞭に示す。全体として、これらのデータは、潜在的鎮痛薬および抗精神病薬としてのＡＢＳ
２０１の有用性を示す。
【実施例１２】
【０３９０】
側鎖グアニジニウム基を有する鎮痛性ペプチド
ＡＢＳ２０１が高親和性でＮＴＲ−１および−２双方を結合するという事実によって、ＮＴＲ−１結合と関連する効果が該ペプチドを鎮痛薬としてより少なく望ましくしうる可能性が存在する。これらの効果は、ヒトで実際に非常に小さな効果である（Ｄ．Ｆｅｉｆｅｌ、私信）ラットにおける全身体温下降の誘発、および望ましくなくないかもしれない抗精神病効力を包含する。ＡＢＳ２０１の好都合な属性の全部を維持する、ＮＴＲ−２に高度に選択的なペプチドは、「浄化体（ｃｌｅａｎｅｒ）」鎮痛薬候補であるとみられる。
【０３９１】
ＮＴＲ−２選択的リガンドを開発する過程において、図２６に示されるペプチドを評価した。これらのペプチドはＮＴＲ−１に対し高められたＮＴＲ−２結合親和性を表し、また、該２種の受容体に対する相対選択性を表１２に提供する。
【０３９２】
【表１３】
2009519945.tif 000023
【０３９３】
ＮＴ［８−１３］はＮＴＲ−２を上回るＮＴＲ−１結合に対する２０倍の好みを有する（表１２）ため、それはＮＴＲ−２選択的リガンドとしてより少なく有用である。しかしながら、ペプチドＡＢＳ１、ＡＢＳ１３およびＡＢＳ２０１のデータは、α−アミノ基を変動することにおいて構造結合効果が存在することを示す。ＡＢＳ１の極性の−ＮＨ２（生理学的ｐＨでプロトン供与され、その親水性に有意に追加する）を非極性の荷電していない−Ｎ３（ＡＢＳ１３）に変えることは、ＮＴＲ−１に対するＮＴＲ−２の選択性の約１０倍の向上をもたらした。加えて、アルギニン側鎖がより大きくかつより非極性になるため、ＮＴＲ−２への有意により良好な結合が生じた。ＮＴＲ−２のアルギニン側鎖結合部位の差違は、ＡＢＳ１５、ＡＢＳ１６、ＡＢＳ１７、ＡＢＳ１９の連続で具体的に説明される。ＡＢＳ１９はＮＴＲ−２に対する５倍の選択性、およびＮＴ［８−１３］を上回る約１００倍の全体的選択性向上を有する。加えて、受容体結合親和性の有意の喪失は、その親より５０倍より少なく効果的に結合するＡＢＳ２０１が、経口で与えられる場合にラット統合失調症モデルで飽和可能な効果をなお表したため、この系で許容される。ＡＢＳ２０１は、経口で投与される場合に統合失調症のラット行動モデルでＡＢＳ１３より約３倍生理学的に活性であり、これをα−アミノ基の最良の置換と明瞭に規定する。この理論的根拠に基づき、より良好なＮＴＲ−２選択的リガンドであるよう設計されたペプチドを創製し、そしてそれらの構造を図２７に提示する。これらのペプチドの全部はＲ＝Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−ｔｅｒｔｌｅｕ−Ｌｅｕ−ＣＯＯＨおよびＡＢＳ２０１のＮ末端メチル基を含有し、それらは経口活性の能力に必要とされる。これらのペプチドは、グアニジウム基の周囲の付加された立体的嵩（（Ｎ末端メチル基がするように）ＮＴ［８−１３］に対するＮＴＲ−１選択性に対しＮＴＲ−２を明示的に改良する要素）もまた組み込む。所望の鎮痛ペプチドは、（１）ＩＰ注入される場合にホットプレート、テールフリックおよびホルマリンアッセイでＡＢＳ２０１に匹敵する若しくはより良好な鎮痛活性を表す、（２）経口投与される場合に活性を表す、（３）所望のＮＴＲ−１およびＮＴＲ−２結合活性を有する、ならびに（４）血漿安定性を表すものである。
【実施例１３】
【０３９４】
鎮痛性ＮＴペプチドアナログ
ＡＢＳ２０１の同定の過程は、生物学的安定性および血液脳関門横断に必要な重要な構造パラメータの定義を可能にした。従って、ＩＰ若しくは経口生物学的利用性を高めうる構造要素を組み込む一群のニューロテンシン（ＮＴ）［８−１３］誘導体を創製した。これらのパラメータ内で、治療薬としての潜在的開発に適切な多様な薬理学的および行動パラメータに影響を及ぼし得る他の専有の構造変化を組み込んだ。要するに、（１）それらの受容体に対する高められた結合親和性、例えば高められた結合および選択性（例えば、脳ＮＴＲ−２に対する選択性をもつＮＴ誘導体は鎮痛活性を有する一方、ＮＴＲ−１に対する選択性をもつものは抗精神病活性を有する）；（２）高められた生物学的障壁横断；（３）高められた安定性；ならびに（４）実行可能な合成費用に対する可能性をもつペプチドを同定した。
【０３９５】
とりわけ、確立されたＮＴ［８−１３］誘導体に対する化学的変化は、位置８の非天然アミノ酸残基の組み込みを包含した。該新たなペプチドは、Ａｒｇ（８）残基およびＮ末端の部分を変動させつつ、経口活性に必要である抗精神病リードＡＢＳ２０１の構造要素を保持するよう設計した。高められた鎮痛活性をもつ、すなわちＮＴＲ−２選択性を有することが予測されるペプチドを、上述されるところの鎮痛薬のラットホットプレートモデルで、ＩＰ注入を介してスクリーニングした。上述された鎮痛活性についての３種の異なるアッセイを使用する５種のペプチドの初期スクリーニング実験は、該アッセイが比較可能な相対活性を生じ、ホットプレートアッセイが最も感受性であったことを示した。選ばれたＩＰ用量は、％ＭＰＥ（最大陽性効果）により測定されるところの有効成分から最大応答を生じるよう設計された。１００％のＭＰＥは、ラットが３０秒のカットオフを使用してホットプレート上で長時間疼痛を感じなかったことを示す。Ｔｍａｘは最大応答が観察された投与後の時間を示す。全化合物のｔｍａｘが各化合物の鎮痛効果の持続期間の指標を与えたため、これを記録した。１００％の％ＭＰＥを表した化合物は経口投与で評価した。表１３は、試験したペプチドの配列、体温下降を誘発する能力により示されるところのＮＴＲ−１若しくはＮＴＲ−２に対する選択性、およびホットプレートアッセイの結果を提供する。＊を伴う化合物はホットプレートアッセイで有意の活性を表した。
【０３９６】
【表１４】
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【０３９７】
【表１５】
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【０３９８】
【化８】
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【０３９９】
全ペプチドの初期スクリーニングは、（１）ＩＰ若しくは経口で投与される場合のそれらの鎮痛能力（ＮＴＲ−２受容体活性化作用を暗示する）を評価すること、および（２）ＩＰの場合に体温下降を誘発するそれらの能力（ＮＴＲ−１アゴニスト活性の副次的効果）を評価することを包含した。ＩＰ投与される場合に有意の鎮痛活性（すなわち設定された閾値レベルより大きい）を表したペプチドを経口投与で評価した。経口で投与した場合に高い鎮痛および低い体温下降誘発活性を有する（ＮＴＲ−２に対する高選択性を示す）ペプチドが好ましかった。しかしながら、高い体温下降活性をもつペプチドは有意により大きい経口生物学的利用性を示すことがあり、そして、ＮＴＲ−１結合の副作用が小さかった場合にとりわけ、それらがより良好な鎮痛薬候補であったために、また好ましかった。第三のパラメータは、ＩＰ鎮痛薬が経口で投与されるペプチドと異なる利用性および効力を有しうることであった。規定された用量応答曲線もまた鎮痛薬候補の選択において考慮した。従って、多様なパラメータを比較検討し、そして全体的な類似のプロファイルを示しつつ上の分析下で他者ほど「良好」でなかったペプチドは選択しなかった。経口で投与される場合に鎮痛を評価することを伴った二次スクリーニングを実施し、そして最良のペプチドを完全な用量応答分析にかけた。
【０４００】
上の基準に基づき、ペプチドＡＢＳ２０１、ＡＢＳ２０２、ＡＢＳ２０５、ＡＢＳ２０７、ＡＢＳ２０８、ＡＢＳ２１０、ＡＢＳ２１１、ＡＢＳ２１２、ＡＢＳ２２０、ＡＢＳ２２５、ＡＢＳ２３０、ＡＢＳ２３２、ＡＢＳ２３４およびＡＢＳ２３９を好ましい鎮痛ペプチドと同定した。これらのペプチドの構造を以下の表に要約する。
【０４０１】
【表１６】
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【実施例１４】
【０４０２】
選択されたＮＴアナログの鎮痛効果の評価
２０ｍｇ／ｋｇの用量で胃管栄養法により投与されたＡＢＳ２０１、ＡＢＳ２０５、ＡＢＳ２１０、ＡＢＳ２１２およびＡＢＳ２２０の鎮痛効果を図２８に示す。これらの結果は、ＡＢＳ２０１、ＡＢＳ２０５、ＡＢＳ２１０およびＡＢＳ２２０が経口で与えられる場合にＡＢＳ２１２と同じくらい若しくはより活性であったことを示す。ホットプレートアッセイを使用して測定されるところのＡＢＳ２３２およびＡＢＳ２３９の鎮痛効果を図２９ＡおよびＢに具体的に説明する。
【０４０３】
Ｉ．Ｐ．注入により投与される場合、しかしながら、最も活性のペプチドはＡＢＳ２１２であった。ＡＢＳ２１２の鎮痛特性を、ホットプレート、テールフリックおよびホルマリンアッセイを使用してモルヒネのものと比較した。ホットプレートアッセイおよびホルマリンアッセイから得た結果をそれぞれ図３０ＡおよびＢに示す一方、テ―ルフリックアッセイから得た結果を下の表１５に要約する。
【０４０４】
およそ等モル比のＡＢＳ２１２は、ホットプレートアッセイにおいて、程度および持続時間においてモルヒネに匹敵するか若しくはより良好な鎮痛活性（％ＭＰＥ）を表す（図３０Ａ）。しかしながら、これらのペプチドの投与後の動物の情動の差違が興味深い。モルヒネを与えられたラットは「もうろうとした」ように見え、より硬直しかつ環境刺激に対し完全に不応答になった一方、動物はＡＢＳ２１２を与え、単純に弛緩しているようであった。加えて、連続５日間投与されたラットは最初投与された場合と統計学的に同一の％ＭＰＥを示すため、ラットはＡＢＳ２１２の鎮痛活性に対し耐性にならない（データは示されない）。ラットは投与の時間経過の終了までに実験的にナイーブでなくなり、これはそれらがホットプレートを回避することを学習することをもたらしかつ鎮痛薬の能力を遮蔽し得るため、これはとりわけ注目すべきである。図３０ＢおよびＣはそれぞれＩＰ若しくは経口投与された場合のＡＢＳ２１２の用量応答データを示す。ＩＰおよび経口用量のおよそのＥＤ５０はそれぞれ２．５〜５ｍｇ／ｋｇおよび３０〜４０ｍｇ／ｋｇである。
【０４０５】
ホルマリンアッセイにおいて、ＡＢＳ２１２は実験の時間経過の間完全な鎮痛効果を提
供する（図３１Ａ）。ホットプレートアッセイでもまた見られるとおり、ほぼ等モル濃度のモルヒネは３０分後に活性を喪失する。ＡＢＳ２１２は、しかしながら、Ｉ．Ｐ．注入により投与される場合により顕著な鎮痛効果を有する。図３１ＢおよびＣは、それぞれＩ．Ｐ．および経口投与についてのホルマリンアッセイを使用して測定された用量応答を示す。およそのＩＰおよび経口のＥＤ５０は上で実施されたアッセイと同一範囲にある。鎮痛活性ＡＢＳ２１２は、非常にわずかの体温下降（ＮＴＲ−１結合の副次的効果）が治療的鎮痛用量でこのペプチドから導き出されるため、ＮＴＲ−２に対し高度に選択的であるようである。（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ受容体結合研究は進行中である）。
【０４０６】
テールフリックアッセイにおいて、ＡＢＳ２１２は、生理的食塩水と比較した場合に、６０分で見かけのより大きい効果を伴い、３０分で統計学的に有意の鎮痛を表した（表１５を参照されたい）。ＡＢＳ２１２は統計学上モルヒネに匹敵する。
【０４０７】
【表１７】
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【０４０８】
図３２ＡおよびＢは、テールフリックアッセイにおけるそれぞれＩ．Ｐ．および経口投与された場合のＡＢＳ２１２の用量応答データを示す。およそのＩＰおよび経口ＥＤ５０は上のアッセイで見られたと同一の範囲にある。図３３は、ＡＢＳ２１２が、Ｉ．Ｐ．注入により投与される場合に神経因性疼痛のＣｈｕｎｇモデルで高度に活性であることを示す。要するに、ＡＢＳ２１２は多様な疼痛状態、すなわち急性（ホットプレート、テールフリック）、慢性（ホルマリン）および神経因性（Ｃｈｕｎｇ）の４種の重要なラットモデルで高度に効果的に鎮痛性である。
【実施例１５】
【０４０９】
ＡＢＳ２１２の前臨床特徴付け
ＡＢＳ２１２の薬物動態を評価するため、血漿サンプルを、試験物品ＡＢＳ２１２の静脈内および経口投与後の多様な時間点でＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットから収集した。これらのサンプルを、薬物動態パラメータおよび経口生物学的利用性を推定するためのＬＣ／ＭＳ／ＭＳによる血漿親薬物濃度の測定に使用した。ＡＢＳ２１２のＩＶおよび経口投与の濃度対時間曲線を図３４ＡおよびＢに示す。
【０４１０】
５、２．５および１ｍｇ／ｋｇのＡＢＳ−２１２・２ＨＣＬのＩＶボーラス注入後の全身クリアランスの平均±ＳＤ値は０．４０±０．０５、０．４０±０．１７および１．０７±０．１５Ｌ／時間／ｋｇであり、それらはそれぞれラット肝血流（３．３１Ｌ／時間／ｋｇ）の１２．０８％、１２．０８％および３２．３３％に対応する。ＡＢＳ−２１２・２ＨＣＬの半減期（Ｔ１／２）の平均±ＳＤ値は０．２９±０．１３、０．２８±０．１１および０．２８±０．０８時間であった。ＡＢＳ−２１２・２ＨＣＬは組織中に十分に分布しない。５、２．５および１ｍｇ／ｋｇの公称用量でのＩＶ注入後の末期相の分布の容量はそれぞれ０．１６±０．０６、０．１５±０．０１および０．４３±０．１５Ｌ／ｋｇであり、それらはラットの総体内水分（０．６７Ｌ／ｋｇ）より小さかった。用量を正規化したＡＵＣ（０−∞）は、５、２．５および１ｍｇ／ｋｇのそれぞれの用量で２．６８：２．９２：１であった一方、用量を正規化したＣｍａｘは、５、２．５および１ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ２．６８：２．４６：１であり、高投薬量で与えられた場合に飽和可能な排出が存在したことを示唆した。
【０４１１】
５０ｍｇ／ｋｇの用量のＡＢＳ−２１２・２ＨＣＬの経口投与後のＡＢＳ−２１２・２ＨＣＬのＣｍａｘおよびＴｍａｘの平均±ＳＤ値はそれぞれ２７．０８±１１．５５μｇ／Ｌおよび０．１４±０．０５時間であり、ＡＵＣ（０−∞）および半減期（Ｔ１／２）の平均±ＳＤ値はそれぞれ５３．０６±３９．６５時間＊μｇ／Ｌおよび１．４２±０．８７時間であった。ＡＢＳ−２１２・２ＨＣＬの生物学的利用率の平均±ＳＤ値は、ＩＶ用量データとして１ｍｇ／ｋｇ群の選択を用い０．１１±０．０８％であった。
【０４１２】
文書の一覧
文書の以下の一覧は、背景情報、合成情報、科学的情報、プロトコルおよび関連する開示を提供する。各文書の完全な本文は、それが完全に反復されたかのように本出願の不可欠の部分として本明細書に組み込まれ、また、本明細書で引用される全部の刊行物、特許および特許出願は、引用することにより本明細書に組み込まれる。
【０４１３】
【表１８】
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【０４１４】
【表１９】
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【０４１５】
【表２０】
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【０４１６】
【表２１】
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【０４１７】
【表２２】
2009519945.tif 000033
【０４１８】
【表２３】
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【０４１９】
【表２４】
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【０４２０】
【表２５】
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【０４２１】
【表２６】
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【０４２２】
【表２７】
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【０４２３】
【表２８】
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【０４２４】
【表２９】
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【０４２５】
【表３０】
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【０４２６】
本発明の付加的な利点は、部分的に、記述から明らかであることができるか、若しくは本発明の実務により学習されうる。本発明の利点は、付随する請求の範囲にとりわけ指摘される要素および組合せによって理解かつ達成されるであろう。
【０４２７】
本出願を通じ、刊行物が言及される場合、これらの刊行物の開示は、本発明が属する従来技術をより完全に記述するために、そっくりそのまま本出願に引用することによりここに組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【０４２８】
【図１】ＮＴ（８−１３）、中間体ＮＴアナログおよびＡＢＳ２０１の構造比較。
【図２】式Ｉ〜Ｖの化合物の代表例。
【図３Ａ−３Ｃ】式Ｉ〜Ｖの化合物の合成のためのスキーム。
【図４】ω−ブロモ酸の非対称合成。
【図５】エチレン架橋（Ｎ５からＮω）アルギニンアナログの合成。
【図６】環式および非環式アルギニンアナログの合成。
【図７】本発明の代表的ペプチドのペプチド合成。
【図８Ａ−８Ｃ】α−メチルＮＴ（８−１３）アナログによる誘発された体温下降の比較。
【図９】それぞれ２ｍｇ／ｋｇおよび２０ｍｇ／ｋｇのＩＰ（黒記号）および経口投与（白記号）後のＡＢＳ２０１の体温下降効果。
【図１０Ａ−１０Ｂ】ＫＨ２９（１０Ａ）およびＫＨ３０（１０Ｂ）のＩＰおよび経口投与後の体温下降効果の比較。
【図１１Ａ−１１Ｂ】ＩＰ投与後のＡＢＳ２０１の用量応答曲線。
【図１２】経口投与後のＡＢＳ２０１に対する用量依存性の体温下降応答。
【図１３】ＡＢＳ２０１のＩＰ投与後のｄ−アンフェタミン誘発性運動亢進の減弱。
【図１４】ＡＢＳ２０１の経口投与後のｄ−アンフェタミン誘発性運動亢進の減弱。
【図１５】経口投与したＡＢＳ２０１によるＢｒａｔｔｌｅｂｏｒｏラットで誘発されるＰＰＩの逆転。
【図１６】カタレプシーに対するＡＢＳ２０１およびハロペリドールの効果。
【図１７】５ｍｇ／ｋｇ  ＡＢＳ２０１の連日投与後のＡＢＳ２０１の慢性投与の体温下降効果。
【図１８】５ｍｇ／ｋｇ  ＡＢＳ２０１の連日投与後のｄ−アンフェタミン誘発性の自発運動の亢進に対するＡＢＳ２０１の反復連日投与の効果。
【図１９】Ｆｍｏｃ−プロリン−ＯＨ＊の合成。
【図２０】５ｍｇ／ｋｇの遊離塩基の用量でのＡＢＳ２０１・ＴＦＡの静脈内投与後の雄性ＳＤラットにおける血中濃度−時間曲線（ｎ＝３）。
【図２１】５０ｍｇ／ｋｇの遊離塩基の用量でのＡＢＳ２０１・ＴＦＡの経口投与後の雄性ＳＤラットにおける血中濃度−時間曲線（ｎ＝３）。
【図２２】１００ｍｇ／ｋｇの遊離塩基の用量でのＡＢＳ２０１・ＴＦＡの静脈内投与後後の雄性ＳＤラットにおける血漿および脳の濃度−時間曲線（ｎ＝３）。
【図２３】ＧＩ管中のＡＢＳ２０１の吸収の部位の比較。
【図２４】ＡＢＳ２０１（５ｍｇ／ｋｇ）およびモルヒネ（５ｍｇ／ｋｇ）の抗侵害受容活性。
【図２５】ＭＰＥにより測定されるところの、５日間の５ｍｇ／ｋｇ  ＡＢＳ２０１を連日投与したラットにおけるＡＢＳ耐性の評価。
【図２６】ＮＴＲ−１に対し高められたＮＴＲ−２結合親和性を表すＮＴ［８−１３］ならびにペプチドＡＢＳ１、ＡＢＳ１３、ＡＢＳ２０１、ＡＢＳ１５、ＡＢＳ１６、ＡＢＳ１７およびＡＢＳ１９の構造。
【図２７】より良好なＮＴＲ−２選択的リガンドとなるよう設計したペプチドの構造。
【図２８】２０ｍｇ／ｋｇの用量で胃管栄養法により投与した（Ａ）ＡＢＳ２０１、（Ｂ）ＡＢＳ２０５、（Ｃ）ＡＢＳ２１０、（Ｄ）ＡＢＳ２１２および（Ｅ）ＡＢＳ２２０の鎮痛効果。
【図２９】２０ｍｇ／ｋｇの用量で胃管栄養法により投与した（Ａ）ＡＢＳ２３２および（Ｂ）ＡＢＳ２３９の鎮痛効果。
【図３０】ホットプレートアッセイを使用して測定したＡＢＳ２１２の鎮痛効果。ＡＢＳ２１２（１０ｍｇ／ｋｇ）およびモルヒネ（５ｍｇ／ｋｇ）の鎮痛効果の比較（Ａ）；Ｉ．Ｐ．注入により（Ｂ）若しくは経口で（Ｃ）投与したＡＢＳ２１２の用量応答データ。
【図３１】ホルマリンアッセイを使用して測定したＡＢＳ２１２の鎮痛効果。ＡＢＳ２１２（１０ｍｇ／ｋｇ）およびモルヒネ（５ｍｇ／ｋｇ）の鎮痛効果の比較（Ａ）；Ｉ．Ｐ．注入により（Ｂ）若しくは経口で（Ｃ）投与したＡＢＳ２１２の用量応答データ。
【図３２】テールフリックアッセイで測定されたところのＩ．Ｐ．（Ａ）および経口で（Ｂ）投与したＡＢＳ２１２の用量応答データ。
【図３３】神経因性疼痛のＣｈｕｎｇモデルを使用して測定した、Ｉ．Ｐ．注入により投与したＡＢＳ２１２の効果。
【図３４】５ｍｇ／ｋｇの遊離塩基の用量のＡＢＳ２１２・２ＨＣｌの静脈内投与（Ａ）および５０ｍｇ／ｋｇの遊離塩基の用量のＡＢＳ２１２・２ＨＣｌの経口投与（Ｂ）後の雄性ＳＤラットにおける濃度時間曲線（ｎ＝３）。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
2009519945.tif 000057
【図８Ｃ】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【国際調査報告】
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