(57)【要約】  本発明は非ホジキンリンパ腫等のＢ細胞悪性病変を処置するための方法及び組成物であって、ＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬの増殖誘発機能を抑制するのに十分な量のＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を、処置の必要な患者に投与することを含んでなる方法及び組成物を提供する。【選択図】図１
2009507777.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者の非ホジキンリンパ腫（Hodgkin's lymphoma）を処置する方法であって、
融合分子（fusion molecule）を含んでなる組成物を、当該リンパ腫を処置するのに有効な量、患者に投与する工程を含んでなるとともに、
融合分子が：
（ｉ）ＢｌｙＳに結合するＴＡＣＩ細胞外ドメイン又はその断片；及び
（ii）ヒト免疫グロブリン定常ドメイン
を含んでなる、方法。
【請求項２】
当該ＴＡＣＩ細胞外ドメインが、配列番号１に記載の配列を有する、請求項１記載の方法。
【請求項３】
当該ＴＡＣＩ細胞外ドメインが、配列番号１と少なくとも５０％同一である、請求項１記載の方法。
【請求項４】
当該ヒト免疫グロブリン定常ドメインが、配列番号２に記載の配列を有する、請求項１記載の方法。
【請求項５】
当該組成物を、患者の体重１ｋｇ当たり０．０１ｍｇから、患者の体重１ｋｇ当たり１０ｍｇまでの量で投与する、請求項１記載の方法。
【請求項６】
当該量の当該組成物を４週の期間内に５回投与する、請求項５記載の方法。
【請求項７】
当該量の当該組成物を４週の期間内に５回投与した後、更に当該量の当該組成物を毎週投与する、請求項５記載の方法。
【請求項８】
当該量の当該組成物を毎週１回、２から３０週に亘って投与する請求項５記載の方法。
【請求項９】
当該方法が、薬剤を投与する工程を更に含んでなる、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
当該薬剤が、ビスフォスフォネート、エリスロポエチン、顆粒球増殖因子、顆粒球コロニー刺激因子、疼痛管理薬、メルファラン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、サリドマイド及びヌクレオシド類似体からなる群より選択される、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
当該組成物が皮下、経口又は静脈内投与される、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
前記患者がヒトである、請求項１記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は２００５年８月９日出願の米国仮出願番号第６０／７０６，９１２号に基づく利益を請求する。その内容は援用により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、各種の疾病や障害（例えば過剰増殖障害、ガン、炎症性疾患、又は免疫系の障害）を処置するための方法及び組成物であって、ＴＮＦファミリーの増殖因子の機能を遮断するＴＡＣＩ−Ｉｇ融合タンパク質の投与を含んでなる方法及び組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
ＢｌｙＳリガンド／受容体ファミリー
ＴＡＣＩ（膜貫通活性化因子且つカルシウム調節シクロフィリンリガンド相互作用因子：transmembrane activator or Calcium-Modulating Cyclophylin Ligand-interactor）、ＢＤＭＡ（Ｂ細胞成熟抗原：B-cell maturation antigen）、及びＢＡＦＦ−Ｒ（ＴＮＦファミリーに属するＢ細胞活性化因子の受容体：receptor for B-cell activating factor）という３種の受容体は、２種の増殖因子（ＢｌｙＳ（Ｂリンパ球刺激因子：B-lymphocyte stimulator）及びＡＰＲＩＬ（増殖誘発リガンド：a proliferation-inducing ligand）に特異的な結合親和性を有することが同定されている（Marsters et al. Curr Biol 2000; 10(13): 785-788; Thompson et al. Science 2001; 293:21 08-211l）。ＴＡＣＩ及びＢＤＭＡは、ＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬの双方に結合するのに対し、ＢＡＦＦ−Ｒが高い親和性をもって結合し得るのはＢｌｙＳのみであると考えられている（Marsters et al. Curr Biol 2000; 10(13):785-788; Thompson et al. Science 2001; 293:21 08-2111）。結果として、ＢｌｙＳは３種の受容体全てを通じて情報伝達を行なうことが可能であるのに対し、ＡＰＲＩＬはＴＡＣＩ及びＢＤＭＡを通じてしか、情報伝達を行なうことができないものと考えられる。加えて、循環するＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬのヘテロ三量複合体（ＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬを各々１又は２コピー含有する、３種のタンパク質の組合せ）が、全身性免疫によるリウマチ性疾患の患者から採られた血清サンプル内で同定されており、また、インビトロでＢ細胞増殖を誘導することが示されている（Roschke et al. J Immuno1 2002; 169: 4314-4321）。これら３種の受容体全てのＩｇ融合タンパク質の中で、ヘテロ三量複合体の生物活性を阻害することができたのは、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５のみであった（Roschke et al. J Immuno1 2002; 169: 4314-4321）。
【０００４】
ＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬは、Ｂ細胞の成熟、増殖及び生存の強力な刺激因子である（Gross et al. Nature 2000; 404: 995-999. Gross et al. Immunity 2001; 15(2): 289-302. Groom et al. J Clin Invest 2002; 109(1): 59-68）。ＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬは自己免疫疾患、特にＢ細胞が関与する疾患の持続に必須である可能性がある。高レベルのＢｌｙＳを発現するよう遺伝子操作されたトランスジェニックマウスは、免疫細胞障害を示し、全身性紅斑性狼瘡（systemic lupus erythematosus）の患者に見られる症状に類似した症状を示す（Cheson et al. Revised guidelines for diagnosis and treatment. Blood 1996; 87:4990-4997. Cheema et al. Arthritis Rheum 2001; 44(6):1313-1319）。同様に、ＳＬＥ患者やその他の様々な自己免疫疾患（関節リウマチ等）の患者から採られた血清サンプルで、ＢｌｙＳ／ＡＰＲＩＬレベルの上昇が観測されたことから（Roschke et al. J Immuno1 2002; 169:4314-4321; Mariette X., Ann Rheum Dis 2003; 62(2):168-171; Hahne et al. J Exp Med 1998; 188(6):1185-1190）、ＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬとＢ細胞媒介性疾患との関連性は、動物モデルからヒトへと拡張された。
【０００５】
Ｂ細胞新生物
Ｂ細胞新生物は、治療に対して様々なパターンの臨床的挙動及び応答を示す、リンパ球増殖性ガンの混成群を構成している。全体的な予後は、腫瘍の組織型、疾病の段階、及び過去に受けた処置に基づき、十分な精度で予測することができる。臨床成績は一般的に、疾病の全段階に関連している。Ｂ細胞新生物が占める疾病スペクトルは、何年もかかって進行する緩慢性の慢性リンパ性白血病から、時間経過が遥かに短い高侵襲性のリンパ腫まで及ぶ。緩慢性Ｂ細胞新生物は、最終的には不治であるが、比較的良好な予後を伴う傾向があり、生存期間の中央値は１０年の範囲である。
【０００６】
侵襲性がより強い型のＢ細胞新生物は、集中的な多剤併用化学療法によって治療することが可能であり、約半数の患者が最短でも５年は生存する。リツキシマブ（登録商標）を治療計画に追加すると臨床成績は概して向上するが、初期治療後の最初の２年間にＢ細胞新生物が高頻度で再発する。疾病組織学が低悪性度に留まっていれば、再治療によって寛解する場合が多い。残念ながら、侵襲型のＢ細胞新生物を示す患者や、侵襲型に転換した患者が示す予後はより不良であり、その医学的な要求は満たされていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
従って、本技術分野には、ホジキン及び非ホジキンリンパ腫等のＢ細胞新生物を処置する上でより有効な方法を開発するという、長年に亘る要求があった。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、Ｂ細胞新生物を処置する方法を含有する。本発明の方法は、ヒト免疫グロブリン定常ドメイン及びＴＡＣＩ細胞外ドメイン、又はＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合するそれらの断片を含んでなる組成物を、患者に投与する工程を含む。
【０００９】
一実施形態によれば、本発明は、ＴＡＣＩ細胞外ドメイン、又はＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合する能力を保持するその断片を含んでなるＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を用いて、非ホジキンリンパ腫（Hodgkin's lymphoma）等のＢ細胞新生物を処置する方法を包含する。
【００１０】
別の実施形態によれば、本発明は、非ホジキンリンパ腫を処置する方法であって、ヒト免疫グロブリン定常鎖と、ＴＡＣＩ細胞外ドメイン、或いはＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合するＴＡＣＩ細胞外ドメインの断片とを含んでなる融合分子を、患者に投与する工程を含んでなる方法を包含する。ＴＡＣＩの細胞外ドメインの好ましい断片としては、１つ又は２つのシステイン反復モチーフを含んでなる断片が挙げられる。別の好ましい断片としては、ＴＡＣＩの細胞外ドメインのアミノ酸３０〜１１０を含んでなる断片が挙げられる。更に別の好ましい断片としては、ＴＡＣＩの細胞外ドメインのアミノ酸１〜１５４（配列番号１）を含んでなる断片が挙げられる。
【００１１】
別の実施形態によれば、本発明は、配列番号２に記載の配列を有するヒト免疫グロブリン定常ドメインＦｃ５と、配列番号１に記載の配列を有するＴＡＣＩ細胞外ドメインとを含んでなる融合ポリペプチドＴＡＣＩ−Ｆｃ５を含んでなる組成物を患者に投与することにより、非ホジキンリンパ腫を処置する方法を包含する。
【００１２】
更に別の実施形態によれば、本発明は、配列番号２に記載の配列を有するヒト免疫グロブリン定常ドメインと、ＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合し、配列番号１と少なくとも５０％同一、好ましくは６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％同一であるポリペプチドとを含んでなる融合ポリペプチドを含んでなる組成物を患者に投与することにより、非ホジキンリンパ腫を処置する方法を包含する。
【００１３】
本発明の方法によって、ヒト免疫グロブリン定常鎖と、ＴＡＣＩ細胞外ドメイン、或いはＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合するＴＡＣＩ細胞外ドメインの断片とを含んでなる融合ポリペプチドを患者に投与することにより処置され得る、その他のＢ細胞悪性病変としては、これらに制限されるものではないが、急性白血病、急性リンパ性白血病、急性骨髄球性白血病、骨髄芽球性白血病、前骨髄球性白血病、骨髄単球性白血病、単球性赤血白血病、慢性白血病、慢性骨髄球性（顆粒球性）白血病、慢性リンパ性白血病、真性多血症、ホジキン病、多発性骨髄腫、及びワルデンストローム・マクログロブリン血症（Waldenstrom's macroglobulinemia）が挙げられる。
【００１４】
好ましい一実施形態によれば、本発明の方法は、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を、患者の体重１ｋｇ当たり０．０１ｍｇから患者の体重１ｋｇ当たり１０ｍｇまでの量、非ホジキンリンパ腫の患者に投与する工程を含んでなる。このＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を、所定の間隔を置いて繰り返し投与してもよい。中でも、本分子を４週間の期間内に少なくとも５回投与することが好ましい。このＴＡＣＩ−Ｉｇ融合ポリペプチドを用いた初期治療の後に、本ポリペプチドの投与を毎週１回、少なくとも更に２週間続けてもよい。更に２週から３０週間に亘って、本ポリペプチドを毎週１回投与するのがより好ましい。
【００１５】
本発明の方法によれば、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合ポリペプチドは、非ホジキンリンパ腫患者に対し、皮下、経口又は静脈内経由で投与することができる。また、任意により他の薬剤との組合せで投与してもよく、かかる薬剤としては、これらに制限されるものではないが、ビスフォスフォネート、エリスロポエチン、顆粒球増殖因子、顆粒球コロニー刺激因子、疼痛管理薬、メルファラン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、サリドマイド及びヌクレオシド類似体が挙げられる。
【００１６】
本発明の一実施形態によれば、ＴＡＣＩ−Ｉｇはボルテゾミブと組み合わせて投与される。ＴＡＣＩ−Ｉｇの用量は上述の通りとすればよく、ボルテゾミブは約１．３ｍｇ／ｍ2の用量で毎週２回、２週間に亘って投与した後、１０日間の休息期間を設ける。これが処置の１サイクルに相当する。任意により、ボルテゾミブを静脈内投与してもよい。ＴＡＣＩ−Ｉｇ単独の場合について上述したのと同様にして、処置に対する応答を監視した上で、更にＴＡＣＩ−Ｉｇ及び／又はボルテゾミブの処置サイクルを投与してもよい。ＴＡＣＩ−Ｉｇは上述した用量で投与してもよいが、より低い用量のＴＡＣＩ−Ｉｇを、本明細書に記載の用量のボルテゾミブ、又はより低い用量のボルテゾミブと共に投与してもよい。ＴＡＣＩ−Ｉｇ及びボルテゾミブの投薬は同時に行なってもよいが、交互の投薬として、ＴＡＣＩ−Ｉｇの後にボルテゾミブのサイクルを行ない、或いはボルテゾミブのサイクルの後にＴＡＣＩ−Ｉｇのサイクルを行なってもよい。この投薬を繰り返してもよい。
【００１７】
ＴＡＣＩ−Ｉｇは、他の処置方法に対して抵抗性となった患者や、応答を示さない患者に対して投与することができる。かかる他の処置方法としては、ボルテゾミブによる処置が挙げられるが、これに制限されるものではない。
【００１８】
上述の実施形態、並びに他の本発明の実施形態について、以下に詳細に説明する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
本発明は様々な形態で実施することが可能であるが、次の点を了解の上で、以下に幾つかの実施形態の説明を示す。即ち、本開示は本発明を例示するものと判断すべきであり、本発明を例示の特定の実施形態に限定するものではない。見出しは単に便宜上付したものであり、如何なる形でも本発明を限定するものと解釈してはならない。何れかの見出しの下に例示する実施形態を、他の見出しの下に例示する実施形態と組み合わせてもよい。
【００２０】
本出願で特定される様々な範囲における数値の使用は、別途明示する場合を除き、概略値として規定される。即ち、規定範囲内の最小値及び最大値は、何れもその前に「約（about）」という語が付されたものとして扱う。このように、規定範囲前後の僅かな変動値を用いても、当該範囲内の値と実質的に同様の結果を達成することが可能である。本明細書において、ある数値について「約」及び「凡そ（approximately）」という語を使用する場合、これらの語は、薬科学の当業者や、問題となる範囲や要素に関連する技術分野の当業者にとって、明白且つ通常の意味を表わす。また、範囲の開示は、明記された最小値と最大値との間の全ての値を含む連続的な範囲を意図すると同時に、こうして形成し得る何れの範囲をも意図するものとする。
【００２１】
本発明は、ＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬとその受容体との相互作用を阻害することにより、患者における造血細胞の異常増殖を改善する方法に関する。具体的に、本方法は、１）ＴＡＣＩ細胞外ドメインと少なくとも部分的に同一なドメイン、又はＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬと結合するそれらの断片を含んでなるポリペプチドと、２）ヒト免疫グロブリン定常鎖とを含んでなる阻害剤を利用する。本発明の方法は、ヒト免疫グロブリン定常鎖を含んでなるとともに、少なくとも５０％の配列がＴＡＣＩ細胞外ドメインと同一のポリペプチドであって、ＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬリガンドと結合する（そして好ましくは、ＴＡＣＩ細胞外ドメインと６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％同一の）ポリペプチドを含んでなる融合分子を使用する。米国特許第５，９６９，１０２号、第６，３１６，２２２号及び第６，５００，４２８号、並びに米国特許出願番号第０９／５６９，２４５号及び第０９／６２７，２０６号（これらの教示はその全体が援用によって本明細書に組み込まれる）は、disclose ＴＡＣＩの細胞外ドメインの配列に加えて、ＢｌｙＳやＡＰＲＩＬ等のＴＡＣＩリガンドと相互作用するＴＡＣＩ細胞外ドメインの特異的断片の配列を開示している。ＴＡＣＩの細胞外ドメインの好ましい断片としては、１つ又は２つのシステイン反復モチーフを含んでなるものが挙げられる。別の好ましい断片としては、ＴＡＣＩの細胞外ドメインのアミノ酸３０〜１１０を含んでなる断片が挙げられる。更に別の好ましい断片としては、ＴＡＣＩの細胞外ドメインのアミノ酸１〜１５４（配列番号１）を含んでなる断片が挙げられる。
【００２２】
本発明の方法に有用な他の融合分子としては、ヒト免疫グロブリン定常鎖と、完全ＴＡＣＩ細胞外ドメイン又はそのオルソログとの融合ポリペプチドや、ヒト免疫グロブリン定常鎖と、ＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬリガンドと結合し得る細胞外ＴＡＣＩドメインの断片との融合ポリペプチドが挙げられる。本発明の方法において使用される何れの融合分子も、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子と呼ぶことができる。
【００２３】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、本発明の方法に有用なＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子の１つである。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、受容体ＴＡＣＩの細胞外リガンド結合部分であるアミノ酸１付近からアミノ酸１５４付近まで（配列番号１）と、ヒトＩｇＧであるＦｃ５の修飾Ｆｃ部分（配列番号２）とを含んでなる組み換え融合ポリペプチドである。本発明の方法に有用な他のＴＡＣＩ−Ｉｇ分子としては、配列番号２のポリペプチドと、ＢｌｙＳに結合し得るポリペプチドであって、配列番号１と少なくとも５０％同一、好ましくは６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％同一であるポリペプチドとを含んでなる融合分子が挙げられる。
【００２４】
本発明の実施形態は、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を非ホジキンリンパ腫の処置に使用する方法を含んでなる。本発明の方法で処置可能な他の血液学的悪性病変としては、白血病（急性白血病、急性リンパ性白血病、急性骨髄球性白血病、骨髄芽球性白血病、前骨髄球性白血病、骨髄単球性白血病、単球性赤血白血病、慢性白血病、慢性骨髄球性（顆粒球性）白血病、慢性リンパ性白血病、真性多血症）、リンパ腫（ホジキン病、多発性骨髄腫、ワルデンストローム・マクログロブリン血症、及び重鎖病）、関節リウマチや全身性紅斑性狼瘡等の自己免疫疾患が挙げられる。或いは、かかる疾病に関連する循環成熟Ｂ細胞及び免疫グロブリン分泌細胞、並びに可溶性免疫グロブリンの数の低減も挙げられる。
【００２５】
また、実施形態には、ヒト免疫グロブリン定常ドメインと、ＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合し得るＴＡＣＩ細胞外ドメインの任意の断片を含んでなるポリペプチドとを含んでなる融合分子を、患者に投与することによる処置方法も含まれる。
【００２６】
ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子は患者に対し、経口、静脈内又は皮下投与することができる。
【００２７】
本発明の方法に有用なＴＡＣＩ−Ｉｇ製剤は、冷凍、滅菌、等張溶液として調製し、保存することができる。かかる製剤は、他の活性成分及び賦形剤を含んでいてもよい。例としては、塩化ナトリウム、リン酸緩衝液、及び水酸化ナトリウム又はＯ−リン酸（ｐＨ６．０）が挙げられる。ＴＡＣＩ−Ｉｇ製剤は、他の薬剤と組み合せて患者に投与してもよい。かかる薬剤としては、これらに制限されるものではないが、ビスフォスフォネート、エリスロポエチン、顆粒球増殖因子、顆粒球コロニー刺激因子及び疼痛管理薬が挙げられる。本発明の方法は、Ｂ細胞新生物を処置するための他の方法と組み合わせて用いてもよい。かかる他の処理方法としては、これらに制限されるものではないが、化学療法、放射線療法及び遺伝子療法が挙げられる。ＴＡＣＩ−Ｉｇ製剤の投与は、他の処置方法の前に、他の処置方法と同時に、又は（より好ましくは）他の処置方法の後に行なうことができる
【００２８】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５はインビトロにおいてＢ細胞増殖のＢｌｙＳ活性化を阻害することが示されてきた。マウスをＴＡＣＩ−Ｆｃ５で処置すると、Ｂ細胞の発生に部分的な阻害が生じるが、これは骨髄のＢ細胞前駆体や、抹消血中Ｔ細胞、単球及び好中球等の他の細胞系統には最小限の効果しか及ぼさない。血液中の可溶型のＴＡＣＩ受容体を過剰発現するよう遺伝子操作されたトランスジェニックマウスは、産生する成熟Ｂ細胞の数が少なく、循環抗体のレベルも低い。このＴＡＣＩ−Ｆｃ５トランスジェニックマウスは、胸腺、骨髄及び腸間膜リンパ節に、正常な数の細胞を有していた。胸腺、リンパ節及び脾臓のＴ細胞集団には、有意な違いは存在しなかった（Gross et al. Immunity 2001; 15(2): 289-302）。
【００２９】
更に、ＴＡＣＩ−Ｉｇは、抗原に対する一次応答時又は二次応答時の何れの際に投与した場合でも、マウスの免疫応答における抗原特異抗体の産生を阻害し得る。これらの試験では、生体外での抗原暴露に対するＴ細胞応答には、何の影響も観察されなかった。全身性紅斑性狼瘡の動物モデルでは、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合タンパク質による処置は、疾病の発症及び進行を抑えるのに有効であった（Gross et al. Nature 2000; 404: 995-999）。同様に、コラーゲン誘発性関節炎のマウスモデルでは、ＴＡＣＩ−Ｉｇによってコラーゲン特異抗体の発生を阻害し、炎症の出現及び疾病の発生率の双方を低減することができた（Gross et al. Immunity 2001; 15(2): 289-302）。
【００３０】
ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を含んでなる組成物は、４週の期間に亘って、繰り返し患者に投与することができる。例えば、この期間内に、患者に対してＴＡＣＩ−Ｉｇ分子の皮下注射を５回、表５に示すスケジュールに従って行なってもよい。この４週の処置期間に続いて、更に４週の追跡期間が設けられる（表５）。このプロトコルのより詳しい内容は実施例３に示す。
【００３１】
【表１】
2009507777.tif 000003
【００３２】
症状の改善、或いは少なくとも症状の安定化が見られた患者に、更にある程度の期間、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子による処置を行なってもよい。例えば、これらの患者にＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子の週用量を、更に２週間から３０週間に亘って投与してもよい。表６に、ＴＡＣＩ−Ｉｇ分子を患者に投与するための延長スケジュールの例を示す。
【００３３】
【表２】
2009507777.tif 000004
【００３４】
【表３】
2009507777.tif 000005
【００３５】
ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子の患者への投与量は、患者の症状を処置するのに有効な量とする。この量は、患者の体重１ｋｇ当たり０．０１ｍｇから、患者の体重１ｋｇ当たり１０ｍｇまでの範囲とすればよい。ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子による処置の最適用量は、図１の図表を用いて決定することができる。これについては実施例５でより詳細に説明する。
【００３６】
融合ＴＡＣＩ−Ｉｇ分子は皮下注射により、前腹壁内に送達してもよい。１用量を投与するために注射を２回以上する必要がある場合には、これらの注射は２、３センチメートル離れたなるべく近い位置に、時間通りに行なわなければならない。繰り返し投薬を行なう場合は、投与部位を前腹壁上で回転させることが推奨される。前腹壁内に皮下注射を行なうことが可能な領域を図２に示す。例えば、右上方外側領域、左下方外側領域、右下方外側領域、左上方外側領域、正中下方領域、並びに右左の大腿及び上腕が挙げられる（図２）。或いは、本発明のＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を静脈注射で送達してもよく、錠剤、カプレット、液体組成物、又はゲルの形態で経口送達してもよい。
【００３７】
本発明の方法は、化学療法、放射線照射、又は手術等の、その他のガンの処置法と組み合わせてもよい。本発明のＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子は、ガン患者が化学療法、放射線照射及び／又は手術を完了した後に、投与することができる。本発明のＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子は、患者に有益なその他の薬物療法と併用して投与してもよい。かかる薬物療法としては、これらに制限されるものではないが、ビスフォスフォネート、エリスロポエチン、顆粒球増殖因子又は顆粒球コロニー刺激因子又は疼痛管理薬、メルファラン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、サリドマイド及びヌクレオシド類似体が挙げられる。
【００３８】
本発明の一実施形態によれば、ＴＡＣＩ−Ｉｇはボルテゾミブと組み合わせて投与される。ＴＡＣＩ−Ｉｇは上述した用量とすればよく、ボルテゾミブは約１．３ｍｇ／ｍ2を毎週２回、２週間に亘って投与した後、１０日間の休薬期間を設ける。これが一回の処置サイクルに相当する。任意により、ボルテゾミブは静脈内投与してもよい。ＴＡＣＩ−Ｉｇ単独の場合の処置に対する応答を上述のように監視した上で、ＴＡＣＩ−Ｉｇ及び／又はボルテゾミブによる追加の処理サイクルを行なってもよい。ＴＡＣＩ−Ｉｇは上述の用量で投与してもよいが、より低い用量のＴＡＣＩ−Ｉｇを、本明細書に記載の用量のボルテゾミブ又はより低い用量のボルテゾミブと組み合わせて投与してもよい。ＴＡＣＩ−Ｉｇ及びボルテゾミブの投薬は同時に行なってもよいが、交互の投薬として、ＴＡＣＩ−Ｉｇの後にボルテゾミブのサイクルを行ない、或いはボルテゾミブのサイクルの後にＴＡＣＩ−Ｉｇのサイクルを行なってもよい。この投薬を繰り返してもよい。
【００３９】
ＴＡＣＩ−Ｉｇは、他の処置方法に対して抵抗性となった患者や、応答を示さない患者に対して投与することができる。かかる他の処置方法としては、ボルテゾミブによる処置が挙げられるが、これに制限されるものではない。
【００４０】
本明細書に挙げられる米国特許及び公開特許出願公報は、何れもその全体が援用により本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【００４１】
以下の実施例は本発明の種々の実施形態について示すものであるが、如何なる意味においても、本発明を限定するものと解釈してはならない。
【００４２】
実施例１
実験動物モデルにおけるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の薬理、毒性及び薬物動態試験
【００４３】
免疫系の機能保存（functional reserve）を直接判定する機会を与える宿主抵抗性モデルで、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を評価した。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５処置の際に、マウスをインフルエンザウイルスに暴露した。正の対照としてデキサメタゾンを使用したところ、ウイルス感染の増強及び遷延という結果を招いた。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、循環Ｂ細胞、総ＩｇＧ及びＩｇＭ、並びにインフルエンザ特異的ＩｇＧ及びＩｇＭを低減したが、ウイルス感染を解消する動物の能力を損なうことはなかった。
【００４４】
主要安全薬理学（Pivotal Safety Pharmacology）試験が示すところによれば、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は最高８０ｍｇ／ｋｇまでのＳＣ用量において、マウス又はサルの神経系、呼吸器系及び心臓血管系に対し、大きな変化を引き起こさなかった。唯一、マウスにおいては、微小且つ過渡的な刺激効果を示唆すると見られる、過剰な警戒及び自発運動の僅かな亢進が、８０ｍｇ／ｋｇにおいて見られたものの、２０ｍｇ／ｋｇでは無影響量（No-observed effect level：ＮＯＥＬ）に等しかった。
【００４５】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を静脈内（intravenous：ＩＶ）又は皮下（subcutaneous：ＳＣ）経路でマウスに単回投与した場合には、技術的に可能な最高用量である１２００ｍｇ／ｋｇにおいても、動物の死亡や、感知し得るほどの全身的又は局所的な異常効果は生じなかった。
【００４６】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５をサルにＳＣ経路で、２４０ｍｇ／ｋｇの投与レベルで単回投与した場合、死亡や何らかの毒性作用を引き起こすことはなかった。
【００４７】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５をマウスに皮下経路で、２日毎に５、２０及び８０ｍｇ／ｋｇの用量で、２週又は４週に亘って投与した後に得られた結果によれば、本化合物は最高８０ｍｇ／ｋｇの用量でも、本生物種において耐容性が良好であると結論付けることができる。何れの用量でも免疫系に限って、処置依存性の調節が見られた。これらの変化は、総Ｂ細胞数及び成熟Ｂ細胞数の減少、並びにＩｇＧ及びＩｇＭの血清濃度の減少に関与している。脾臓及びリンパ節について免疫組織化学試験を実施したところ、Ｂ細胞に限っては欠乏が確認されたのに対し、Ｔ細胞数は不変であった。これらの変化は時間及び用量依存性の場合もあり、何れも、反応性の生物種に極めて高用量のＴＡＣＩ−Ｆｃ５を投与した後に予想されるような、過大な薬理効果であると考えられた。総じて、これらの効果は処置の２週及び４週間後に現れたが、経時的な進行を示す目立った徴候は見られなかった。これらは、Ｂ細胞数の減少を除いて、処置を４週間中止した後、ほぼ完全に回復し得ることが示された。
【００４８】
Ｂ細胞調節の可逆性を確認するために、マウスを用いて更なる試験を行なった。５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇの用量を２週毎に、４週間に亘って投与し、より長い回復期間を設けた。総及び成熟循環Ｂ細胞が回復したのは、５ｍｇ／ｋｇの場合は処置中止の２ヶ月後、２０ｍｇ／ｋｇの場合は４ヶ月後であった。更に、何れの用量を注射した場合でも、ビヒクル対照の場合と比較して、注射部位の炎症性変化に僅かな亢進が生じた。
【００４９】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を５、２０又は８０ｍｇ／ｋｇの用量で、３日毎に４週間連続でサルに皮下投与したところ、試験した用量の何れにおいても、毒性を示す目立った徴候は見られなかった。
【００５０】
局所耐容性は、試験した最高用量を含む全ての用量について、申し分ない結果であった。炎症に由来する（主に血管周囲における単核球及び好酸球の細胞浸潤）用量依存性且つ可逆性の軽度又は中度の変化が誘発されたが、これらは主に外因性タンパク質が局所的に存在したことと関連していると考えられる。高用量の場合のみ、少数の動物が軽度又は中度の亜急性炎症を発症し、うち一頭にはそれに関連する嚢胞形成が見られた。
【００５１】
リンパ球サブセット決定における循環Ｂ細胞数の減少に加えて、（Ｂ細胞依存性領域として知られる）脾臓濾胞周辺帯の組織学的欠乏、更には総ＩｇＧ及びＩｇＭ血清レベルの低下が見られた。インビトロ及びインビボの薬理学実験が示すように、これらはＴＡＣＩ−ＦｃＳの薬力学的特性の結果であると考えられる。それらの程度が過剰であるのは、高用量の試験化合物を意図的に投与した動物の毒性試験において予想される通りである。血清ＩｇＧ及びＩｇＭ濃度の低下、並びに脾臓リンパ球の欠乏は、１ヶ月の処置中止期間内に明らかな回復傾向を示したが、総及び成熟循環Ｂ細胞にはこのような挙動は見られなかったことから、回復にはより長い時間が必要であることが示唆される。
【００５２】
処置期間の終了時（第４週）において、高用量群（８０ｍｇ／ｋｇ）の雄及び雌には、総タンパク質量の平均値に、対照と比べて僅かではあるが統計的に有意な減少が見られた。同用量群では第２週及び回復期間の終了時にも、僅かながら減少する傾向が見られた。
【００５３】
高用量の雌における投薬期間終了時の血清タンパク質調節には、グロブリンの減少と、アルブミン比率及びα−１−グロブリン画分の上昇が含まれていた。第３群の雌（２０ｍｇ／ｋｇ）でも、対照と比較してΑ−１−グロブリン画分の上昇が見られた。
【００５４】
ＴＡＣＩ−ＦｃＳの免疫原性は、マウス（処置期間中及び処置期間後に循環結合抗体のレベル低下が見られたのは少数の雌のみであった）及びサル（回復期間後、少数の動物にレベルの低下が見られた）の何れでも低かった。何れの生物種においても、抗体の中和を示す証拠はなかった。
【００５５】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を標準的なインビボ試験群に供し、繁殖及び受精能の毒性の検出（雄雌マウスの受精能試験。５、２０及び８０ｍｇ／ｋｇの用量を２週毎にｓｃ経路で、交尾前及び交尾中、最長で着床期間まで投与）、並びに胚胎児発生（雌マウス及びウサギの胚胎児発生試験。５、２０及び８０ｍｇ／ｋｇの用量を２週毎にｓｃ経路で、器官形成期間に投与）を行なった。
【００５６】
マウスの受精能試験によれば、２週毎に２０及び８０ｍｇ／ｋｇのＴＡＣＩ−Ｆｃ５に暴露した群では、対照群と比べて、着床前及び着床後の喪失に用量依存性の増加が見られた。
【００５７】
マウスの胚胎児発生試験で得られたデータの評価によれば、何れの用量でも胚毒性作用は見られず、また、化合物に関連する胎児奇形は生じなかった。
【００５８】
ウサギにおける胚胎児発生試験では、２０又は８０ｍｇ／ｋｇで２週毎に処置を行なった妊娠動物において、用量に依存する体重増加の低下及び食物消費の低下が生じたことが示された。上記の母体変化は、高い方の２種の用量では、吸収速度（rate of resorptions）の上昇及び胎児体重の低下に関連していた。
【００５９】
これらの結果は、マウスの子宮内における胚盤胞の着床に、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５が影響を与える可能性を示唆している。器官形成時に２０又は８０ｍｇ／ｋｇに２週毎に暴露されたウサギにおいて、母体の体重増加及び食物消費に観察されたＴＡＣＩ−Ｆｃ５の影響は、同腹仔の生存率に観察された影響の原因となっている可能性が高く、また、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は胎児に対して直接的な毒性は有しなかった。これら２種の動物において、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５処置に起因する奇形は見られなかった。
【００６０】
加えて、マウス及びサルにおいて、ｓｃ経路による２週及び１ヶ月の毒性試験を行なった上で、雄雌の生殖腺及び副性器の組織学的検査を実施した。該試験ではマウス及びサルに、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５をそれぞれ２日毎又は３日毎に投与したが、処置依存性の影響を示す証拠は見られなかった。
【００６１】
ウサギの局所耐容性試験によれば、７０ｍｇ／ｍＬ用量のＴＡＣＩ−Ｆｃ５製剤をウサギに皮下経路で注射したところ、良好な局所耐容性を示した。
【００６２】
雄マウスに対して、静脈内経路により１ｍｇ／ｋｇの用量で、又は皮下経路により１、５及び１５ｍｇ／ｋｇの用量で、ＩＶ及びＳＣ経路の単回投与薬物動態試験を実施した。
【００６３】
最大吸収までの時間（ｔmax）は４時間から１６時間の間と推測され、ｔ1/2は約４０〜５０時間と計算される。
【００６４】
ＩＶボーラス投与後の最初の３０分間に、注入時と同様のプロファイル（infusion-like profile）が観察された。その後、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は身体から排出され、排出半減期は４４時間であった。皮下投与後、１、５及び１５ｍｇ／ｋｇという３種の用量において得られたＡＵＣ（曲線下面積）間の比率は１：５：８であり、１：５：１５という用量比率と比較すると、高用量では用量との比例関係が失われることが示唆された。
【００６５】
マウスにおいて、皮下経路によるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の生体利用性は、１及び５ｍｇ／ｋｇの用量では７６及び８９％であったが、１５ｍｇ／ｋｇでは予測よりも低かった（０,４２；静脈内１ｍｇ／ｋｇ用量に対する計算）。見かけの排出半減期は変化しなかったことから、高用量において観察された生体利用性の低下は、浄化及び分配量の双方の増加によるものか、或いはより高い可能性としては、注射部位での沈着形成による吸収の減少によるものと説明することができる。
【００６６】
雄カニクイサルに対して、静脈内経路により１ｍｇ／ｋｇの用量を、或いは皮下経路により１、５及び１５ｍｇ／ｋｇの用量を投与することにより、雄サルのＩＶ及びＳＣ経路による単回投与薬物動態試験を行なった。
【００６７】
６等の雄サルを３頭ずつ２つの群に分割し、２週間の休薬期間を挟んで２回の投与を行なった。期間１の処置は１ｍｇ／ｋｇ、ＩＶ（第１群）、及び１ｍｇ／ｋｇ、ＳＣ（第２群）、期間２の処置は５ｍｇ／ｋｇ、ＳＣ（第１群）、及び１５ｍｇ／ｋｇ、ＳＣ（第２群）とした。
【００６８】
最大吸収までの時間（ｔmax）は６時間から８時間の間と推測され、t1/2は約１２０〜１９０時間と算出された。
【００６９】
ＩＶボーラス投与後の最初の１５分間に、３頭のサルのうち２頭において、注入時と同様のプロファイルが観察された。その後、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は身体から排出され、排出半減期は１７９±２９時間であった。定常状態での分配量Ｖｓｓは３８２±８２ｍＬ／ｋｇであり、細胞内液の体積に近い量であった。
【００７０】
皮下投与後、ＡＵＣ対用量の比例関係は良好であった。即ち、１、５及び１５ｍｇ／ｋｇのＳＣ投与に対して、２１６、１１８２及び２７３２ｈμｇ／ｍＬであった。皮下経路によるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の生体利用性（１ｍｇ／ｋｇ ＩＶ投与に対し計算）は、低、中及び高用量について、０．９２、１.０２及び０．７７であった。従って、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５はほぼ完全に、皮下経路で吸収された。
【００７１】
期間２においては、６頭のサル全てについて、投与前サンプルに低レベルのＴＡＣＩ−Ｆｃ５が見られた（ＩＶ又はＳＣ経路による１ｍｇ／ｋｇ用量（期間１）と、それぞれ５又は１５ｍｇ／ｋｇ用量（期間２）との間）。２週間の休薬期間における経過時間は半減期の２倍に過ぎず、投与された化合物が完全に排出されるには不十分であったから（半減期の５倍が必要）。しかし、以前の投与によるＡＵＣの寄与は、期間２における総ＡＵＣの約２％相当に過ぎないものと見積もられる。
【００７２】
ＩｇＧ血清レベルはＩＶ投与後に１０．２％の低下を示した。１５ｍｇ／ｋｇのＳＣｙ投与においては僅かながらより高い効果が現れたのに対し、１及び５ｍｇ／ｋｇのＳＣ投与間では差は見られなかった（１、５及び１５ｍｇ／ｋｇ用量の投与後において、それぞれ８.６％、８.４％及び１２.３％の低下）。ＩｇＭ血清レベルはＩＶ投与後にの低下を示した。３種のＳＣ投与量間に差は見られなかった（１、５及び１５ｍｇ／ｋｇ用量の投与後において、それぞれ２３.５％、２３.０％及び２４.２％の低下）。
【００７３】
実施例２
健常志願者におけるＴＡＣＩ−Ｆｃ５耐容量の決定
【００７４】
最初のＴＡＣＩ−Ｆｃ５の第Ｉ相試験は、現在完了直前である。これは、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を健常男性志願者の皮下に単回投与した場合の安全性、薬物動態及び薬力学を検討する、二重盲検、プラセボ対照、用量漸増、系列用量による試験である。試験計画の概要を、利用可能なデータの要約と併せて以下に示す。
【００７５】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を初めてヒトに投与した。これは、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を健常男性志願者の皮下に単回投与した場合の安全性、薬物動態及び薬力学を検討する、二重盲検、プラセボ対照、用量漸増、系列用量による試験である。
【００７６】
４群の被験者を集めた。各投与群につき一人の被験者を無作為に選び、プラセボ注射に割り当てるとともに、他の全ての被験者はＴＡＣＩ−Ｆｃ５投与とした。被験者は、投与の２４時間前に治験施設から帰宅し、その後は外来として７週間の計画的な調査に参加した。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の全身及び局所耐容性を、身体検査の所見、注射部位の疼痛、（１又は２以上の）注射部位の局所的な耐容性反応（発赤、腫化、損傷及び掻痒）、生命徴候、１２誘導ＥＣＧ（心電図）、安全性の臨床評価、及び有害事象の記録により監視した。
【００７７】
投与後７週間の期間に亘って、薬物動態及び薬力学マーカーを監視した。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の薬力学効果の監視は、幾つかのマーカーを用いて行なった。例えば、ＦＡＣＳ分析によるリンパ球サブセット（形質細胞（ＣＤ１３８＋）、未成熟Ｂ細胞（ＣＤ１９＋、ＩｇＤ−）、成熟Ｂ細胞（ＣＤ１９＋、ＩｇＤ＋）、Ｔヘルパー細胞（ＣＤ５＋、ＣＤ４＋）、細胞毒性Ｔ細胞（ＣＤ５＋、ＣＤ８＋）、総Ｔ細胞（ＣＤ５＋））、遊離ＢｌｙＳ、ＢｌｙＳ／ＴＡＣＩ−Ｆｃ５複合体、ＩｇＧ、ＩｇＭ、抗ＴＡＣＩ−Ｆｃ５抗体が挙げられる。
【００７８】
試験プロトコル内の用量漸増は、投与から３週間後におけるデータの見直しに基づき、アルゴリズムに従って行なった。４群の用量としては、第１群に２.１ｍｇ、第２群に７０ｍｇ、第３群に２１０ｍｇ、及び、第４群に６３０ｍｇを投与した。
【００７９】
結果: 健常男性志願者にＴＡＣＩ−Ｆｃ５を、０．０３ｍｇ／ｋｇから９ｍｇ／ｋｇまでの用量範囲で単回皮下投与した。安全性及び耐容性のデータを、第３週におけるリンパ球サブセットのＦＡＣＳ分析と共に、コホート間の用量漸増の指針として用いた。表１に示すような４群のコホートについて試験を行なった。
【００８０】
【表４】
2009507777.tif 000006
【００８１】
コホート及び全体集団について、人口学的基本特性を纏めた。その結果を表２に示す。
【００８２】
【表５】
2009507777.tif 000007
【００８３】
全体、平均＋：ＳＤ年齢は３０．７＋７．４歳であり、平均体格指数は２４．８ｋｇ／ｍ2であった。何れの志願者も白人男性であった。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は何れの群でも耐容性良好であった。身体検査所見、生命徴候又は１２誘導ＥＣＧに、明白な作用は見られなかった。
【００８４】
【表６】
2009507777.tif 000008
【００８５】
一部被験者の投与部位に過渡的な発赤及び腫化が観察され、発赤はコホート３及び４の全被験者に及んでいた。注射部位反応の出現率は高用量群ほど増加しているように見えるものの、これは注射量（及び数）の増加に依存するものと考えられる。
【００８６】
投与後４週間で、処置により発現した有害事象が４８例報告された。これらの大半（４４例、９１．７％）は軽度であり、残り（４例、８．３％）は中度であった。重度の有害事象や重症の有害事象は、この期間内には見られなかった。投与されたＴＡＣＩ−Ｆｃ５の用量と、有害事象の出現率、強度、又は指定された関係との間に、明白な関連性は見られなかった。現在までに報告された有害事象を表３に纏めて示す。
【００８７】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、最高６３０ｍｇまでの用量において良好な耐容性を示し、安全性に関する重大な懸念は生じなかったと考えられる。これらのデータは、推奨される治験において意図される用量をサポートするものである。
【００８８】
ＴＡＣＩ血清濃度の非区画化分析を実施した。この予備的な分析は、名目上のサンプリング時間を用いて行なった。投与前の濃度が測定可能であった被験者２、６及び１３について、分析に先立ち投与後の全測定値から基線濃度を減算した。２．１、７０、２１０及び６３０ｍｇの単回皮下投与後における薬物動態パラメータを表４に纏めて示す。２．１ｍｇのＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与後、薬物濃度はアッセイの定量限界近くとなり、この投与レベルをデータの限界値とした。７０ｍｇ以上の容量では、Ｔmax（最大吸収までの時間）は１６から３６時間の間であり、（曲線の端部から計算した）全体のｔ1/2の中央値は３０３時間であった。加えて、ＡＵＣ（無限大に外挿）及びＣmaxの増加率は、用量比例値よりも大きかった。
【００８９】
【表７】
2009507777.tif 000009
【００９０】
薬力学分析によれば、７０、２１０又は６３０ｍｇの単回投与後７週間で、基線ＩｇＭレベルに低下が見られた。サンプル数が少なかったため、明らかな用量応答関係は確立できなかったものの、ＩｇＭの低下幅は、用量が最高の群で最大となった。７０ｍｇ用量群の被験者は、投与後７週間でＩｇＭレベルが基線まで回復したように見える。より高い用量の群では、この時点でもレベルが抑えられたままであった。ＩｇＧレベルにも、また、ＦＡＣＳにより測定したリンパ球亜集団にも、明白な影響は見られなかった。
【００９１】
ＢｌｙＳ／ＴＡＣＩ−Ｆｃ５複合体のレベルは、サンプリング期間を通じて一定の比率で増加し、投与後凡そ６００時間でプラトーに達した。結論として、健常男性志願者より得られたヒトのデータから、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５が最高６３０ｍｇまでの用量において、被験者にとって安全且つ耐容性良好であることが示されたと言える。有害事象の性質、出現率及び重症度は、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５処置群とプラセボとの間で匹敵していた。身体検査所見、生命徴候、１２誘導ＥＣＧ、又は安全性実験パラメータには、臨床上有意な変化は見られなかった。投与部位での局所耐容性は良好であった。これらのデータは、ＢＣＭを有する被験者に推奨される用量をサポートしている。
【００９２】
健常男性被験者における単回投与後、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は１６時間から２０時間の間にＴmaxに達し、ＡＵＣは用量に比例して上昇したが、Ｃmax の増加率は用量比例値よりも大きかった。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の半減期の中央値は凡そ３００時間であった。７０、２１０及び６３０ｍｇの用量で、ＩｇＭレベルに薬力学効果が見られた。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回投与後に、ＩｇＧ又はリンパ球亜集団に対して、処置による明白な効果は現れなかった。特定の重症度や重篤度に関する既知の、或いは予測される危険性であって、提案された試験プロトコルにおいて未考慮のものは存在しない。
【００９３】
実施例３
非ホジキンリンパ腫患者のＴＡＣＩ−Ｆｃ５組成物による処置
【００９４】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を毎週投与する前に、患者を臨床的に検査する。一貫性を保つために、５週間の処置期間に亘り、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を計画的に凡そ同じ時間に（±６時間）、各患者に対して以下の各用量で投与する。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の初回投与の直前に検査を実施し、これを基線検査と定義する。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５投与の初日を「第１日」とする。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５薬物療法の初回用量を患者に投与する前に、以下の手順を完了する。区間病歴（interval history）、区間身体検査（interval physical examination）、ＶＳ、身長及び体重（初回投与のみ）、安全性実験室試験：血液学、血液凝固、免疫グロブリン及び化学、併用薬物療法／手順の調査、血液サンプル（タイミングはｅ−ＣＲＦに記録）及びそれを用いた：ＴＡＣＩ−Ｆｃ５血清濃度、遊離ＡＰＲＩＬ及びＢｌｙＳ、ＢｌｙＳ／ＴＡＣＩ−Ｆｃ５複合体の血清レベルのＰＫ測定、フローサイトメトリーによる細胞計数、及び抗ＴＡＣＩ抗体による測定（初回投与のみ）。
【００９５】
２ｍｇ／１ｋｇから１０ｍｇ／１ｋｇのＴＡＣＩ−Ｆｃ５製剤を、第１日目、７日目、１４日目、２１日目及び２８日目に患者に皮下投与する。
【００９６】
以下の投与後検査を完了する：生命徴候（ＴＡＣＩ−Ｆｃ５初回投与被験者については、ＶＳを投与後１、２、４及び８時間に取得する）。その後のＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与については、投与後１及び２時間に生命徴候を取得する；有害事象の継続的検査；及び併用薬物療法／手順の継続的検査。
【００９７】
特別ＰＫ／ＰＤ検査を第２日目、３日目、及び４日目に完了する。本検査では、採血、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５血清濃度のＰＫ測定、遊離ＡＰＲＩＬ及びＢｌｙＳ、ＢｌｙＳ／ＴＡＣＩ−Ｆｃ５複合体のＰＤ測定、リンパ球細胞計数及びＩｇＧ及びＩｇＭ血清濃度等を行なう。
【００９８】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の全用量を送達したら、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の最終投与から更に４週間に亘って、患者を毎週評価する：有害事象の継続的検査；併用薬物療法／手順の継続的検査；区間病歴；区間身体検査、生命徴候、安全性実験室試験：血液学、血液凝固、免疫グロブリン及び化学、血液サンプル（タイミングはｅ−ＣＲＦに記録）及びそれを用いた：ＴＡＣＩ−Ｆｃ５血清濃度、遊離ＡＰＲＩＬ及びＢｌｙＳ、ＢｌｙＳ／ＴＡＣＩ−Ｆｃ５複合体の血清レベルのＰＫ測定、並びにフローサイトメトリーによる細胞計数。
【００９９】
追跡来診第５６日目に、上述の検査に以下を追加すべきである：ＥＣＯＧ（米国東海岸癌臨床試験グループ：Eastern Cooperative Oncology Group）スコア、身長及び体重、尿分析、抗ＴＡＣＩ抗体の測定。延長試験を行なわない患者については、抗ＴＡＣＩ抗体を第８５日目に採取する。
【０１００】
最後のＴＡＣＩ−Ｆｃ５処置から凡そ２８日後の最後の来診時に併せて、疾病特異的再病期分類（disease specific restaging）を実施する。再病期分類時に疾病の進行が見られない患者は、延長処置に供してもよい。胸部、腹部、及び骨盤の関与が当初見られない場合でも、これらの領域のＣＴ及びＰＥＴスキャンを行なうことが推奨される。登録されている疾病に髄が関与している場合は、骨髄穿刺液及び生検。疾病負担の腫瘍特異指標（tumor specific indicators）（例えば、マントル細胞リンパ腫における蛍光インサイチュ・ハイブリダイゼーションによるt（Mariette X., Ann Rheum Dis 2003; 62(2):168-171. Kelly et al. Cancer Res 2001; 60(4): 1021-1027.）転座の頻度）。
【０１０１】
リンパ球及び免疫グロブリンクラスの双方が、治療前の基線レベルまで、或いは絶対リンパ球数＞８００／ｍｍ3、ＩｇＧ＞４００ｍｇ／ｄＬ、ＩｇＡ＞６５ｍｇ／ｄＬ及びＩｇＭ＞４０ｍｇ／ｄＬまで回復したことが確認された患者は、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の最終投与後、２８日の安全性追跡を完了したら、正式に試験から除外する。これらのレベル、完全血球数及びＩｇＧ、ＩｇＡ及びＩｇＭレベルを満たさなかった患者は、上記定義の回復が記録されるまで、毎月検査を行なう。
【０１０２】
実施例４
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の注射手順
【０１０３】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を送達するために皮下経路による投与を選択した場合には、分子を皮下の腹壁内に注射し、その部位は以下の図に沿って回転させる（図２）。血管内に注射しないように注意する。皮膚を健全に維持するために、注射部位の回転は極めて重要である。同一箇所に繰り返し注射を行なうと、瘢痕化や脂肪組織の硬化を招くおそれがある。注射には以下の領域を使用し、毎週以下のように回転すべきである（図２）：第１週は右上方外側領域に注射；第２週は左下方外側領域に注射；第３週は右下方外側領域に注射；第４週は左上方外側領域に注射；及び第５週は正中下方領域に注射。
【０１０４】
一用量につき２回以上の注射が必要な患者には、その週の注射領域に指定された位置（図２によれば週１〜５）を１２時の位置として注射を開始し、その後は一用量につき必要な注射回数の分だけ時計回りに回転させ、２時、４時、６時、８時及び／又は１０時の位置に注射を行なう。注射は互いに少なくとも２．５ｃｍ（１インチ）離して、できるだけ近接した位置に時間内に注射する。１．５ｍＬを超える注射を一の注射部位にしてはならない。患者の腹内への注射が困難な場合に注射可能な代替領域としては、領域６＆７（大腿前部、図２）、及び、領域８＆９（上腕、図２）が挙げられる。
【０１０５】
注射部位反応の一般的な症状としては、注射部位における掻痒、圧痛、温感、及び／又は発赤が挙げられる。
【０１０６】
実施例５
ＴＡＣＩ−Ｉｇ分子投与のための用量漸増プロトコル
【０１０７】
この用量漸増プロトコルは、Ｂ細胞悪性病変（ＢＣＭ）のＴＡＣＩを評価するためのもので、所与の用量コホート（２ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ）の２人の患者に対して、５週間に亘って毎日投与を続けた後、８日間の観察を行なう。用量規定毒性（Dose Limiting toxity：ＤＬＴ）が観察されない場合には、もう１人の患者にも現在の投与レベルで処置を行なう。この３人目の患者に所定の用量を５週間連続で投与し、２週間の観察を行なってＤＬＴが観察されなければ漸増が認められ、２人の患者を次の段階的な投与レベルで処置することが可能となる。同時に、更に別の２人の患者を以前の投与レベルで処置してもよく、そこでＤＬＴが観察されない場合に漸増を許めるようにしてもよい（図１）。この保存的な用量漸増スキームは、ＢＣＭ試験開始前において、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の前臨床及び臨床経験が制限されていることを前提とした。
【０１０８】
現在までに３人の患者をＢＣＭの用量漸増試験に登録し、用量２ｍｇ／ｋｇでの処置を行なった。また、現在は２人の患者を登録し、４ｍｇ／ｋｇ用量コホートにおける処置を行なっている。
【０１０９】
現在進行中の４つの試験において、現在までに計１１８人の患者に、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５又はプラセボの単回又は繰り返しの投与計画を実施してきた（活性薬９２例、プラセボ２６例）。これらの試験は何れも、安全審査会（Safety Review Board）又は安全監視委員会（Safety Monitoring Committee）の監督下で実施した。
【０１１０】
これらの試験において、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回及び繰り返し皮下投与を受けた、累積用量が最大６０ｍｇ／ｋｇ（５週間の処置及び４週間の休薬期間のサイクルを３回）の患者のコホートから、ＳＲＢ／ＳＭＣは計９例の審査を行なった。これらの委員会からは、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５処置の安全性に関して、何の懸念も示されていない。加えて、継続して安全性の監視を行なっているものの、現在まで臨床的に関連する安全性の問題は何ら生じていない。
【０１１１】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５多発性骨髄腫試験では、コホート１及び２の患者計６人について、用量漸増試験を完了した。本試験では、患者に２ｍｇ／ｋｇ（３患者）又は４ｍｇ／ｋｇ（３患者）の注射を５週間に亘って毎週行なった後、４週間の観察を行なった。加えて、コホート３の患者３人に、７ｍｇ／ｋｇ用量を１週間で１回投与した。コホート１の患者２人とコホート２の患者１人が、用量漸増試験で疾病が安定したことから、続いて延長試験を行なった。
【０１１２】
これらの患者の各々に対して、更に最長１０週間に亘り、毎週２ｍｇ／ｋｇ又は４ｍｇ／ｋｇの注射を行なった。ＢＣＭにおけるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の評価のために選択した用量は、上述の多発性骨髄腫試験における用量と同じである。即ち、毎週２、４、７及び１０ｍｇ／ｋｇの注射を５週間に亘って投与し、総累積用量は１０、２０、３５及び５０ｍｇ／ｋｇとした。
【０１１３】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回投与を受けた健常志願者において観測された暴露量と、ＢＣＭ患者の予測暴露量、並びに３日毎に８０ｍｇ／ｋｇ（ＮＯＡＥＬ用量）の投与を４週に亘って受けたカニクイサルにおいて観測された暴露量との比較に基づいて、暴露基準の安全限界を算出した。開始時の用量である２ｍｇ／ｋｇ、及び、提案される最高用量である１０ｍｇ／ｋｇについて算出された安全限界は、それぞれ２９１倍及び４６倍である。
【０１１４】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を、３日毎に０、４、２及び１０ｍｇ／ｋｇの用量を１３週又は３９週間に亘ってサルに送達した場合、毒性の徴候は生じなかった。成熟及び総循環Ｂ細胞の減少、並びに未成熟Ｂ細胞の減少傾向、加えて血清ＩｇＧ及びＩｇＭの減少、更には脾臓及びリンパ節のＢ細胞担当領域の欠乏は、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の薬力学的活性によるものと考えられ、１３週間の処置の後に回復させた動物においては可逆性を示した。
【０１１５】
同じ用量のＴＡＣＩ−Ｆｃ５をマウスに対し１日おきに、１３週又は２６週に亘って送達した場合、全用量における血清ＩｇＧ及びＩｇＭ並びに総及び成熟Ｂ細胞の減少や、それに伴う全用量における血清ガンマグロブリンの減少傾向等、予測されるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の薬理作用に関する、主に時間及び用量依存性の調節が生じた。組織学によれば、リンパ節の皮質及び脾臓の周辺帯におけるＢ細胞の減少、並びに注射部位における亜急性炎症の増加等、過去の研究に基づいて予想された知見の他には、毒性学的に関連する変化は見られなかった。
【０１１６】
現在のヒト及び前臨床における安全性データに基づき、そして特に、試験薬剤が多発性骨髄腫の被験者に、２、４、及び７ｍｇ／ｋｇの投薬レベルで、最大１５回の５ヶ月に及ぶ投与で耐容性良好であったことから、各投薬コホート当たり３人の被験者を、７及び１０ｍｇ／ｋｇの用量での投与に同時に参加させる計画を進めている。
【０１１７】
実施例６
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５に対して初回に有益な応答を示した患者の更なる処置
【０１１８】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５による最初の５週間の処置に対して好ましい反応を示した非ホジキンリンパ腫患者に対して、更に毎週のＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与を行なう。患者に最長で連続２４週間、毎週ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を投与する。投与は皮下（ＳＣ）に対して、必要に応じて複数回、各１．５ｍＬ以下を注射して行なう。各回の注射用に、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の液体製剤を濃度７０ｍｇ／０．５ｍＬで、バイアルに入れて供する。
【０１１９】
これらの更なる２４回の連続注射は、最初の５週間の処置において患者が許容性を示したレベルと同じ投与レベルで行なう。しかし、最初に１０ｍｇ／ｋｇのＴＡＣＩ−Ｆｃ５を投与した患者には、用量を７ｍｇ／ｋｇに減量して投与してもよい。
【図面の簡単な説明】
【０１２０】
【図１】ＴＡＣＩ−Ｆｃ５処置の用量漸増の決定木である。
【図２】ＴＡＣＩ−Ｉｇ分子の皮下注射に使用可能な、患者の身体領域の模式図である。
【図３】配列番号１である。
【図４】配列番号２である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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