(57)【要約】  式(I)：2009529028.tif 000016［式中、Xはハロ、または中性もしくは負に荷電したO-、N-またはS-供与配位子であり；Yは対イオンであり；mは0または1であり；qは1、2または3であり；Aは以下のいずれかであり：(i)(Ru)-NRN1RN2-RN3-(N)（ここで、RN1およびRN2は独立してH、場合により置換されていてもよいC1-7アルキル、C3-20ヘテロシクリルおよびC5-20アリールから選択され、RN3はC1-2アルキレンである）；または(ii)窒素含有C5-6芳香環（ここで、窒素環原子はルテニウム原子に結合しており、該環はまたアゾ窒素に単結合（該結合は窒素環原子に対してαもしくはβである）または-CH2-基（該結合は窒素環原子に対してαである）によって結合している）；Bは場合により置換されていてもよいC1-7アルキル、C3-20ヘテロシクリルもしくはC5-20アリールである］で表されるルテニウム(II)化合物。【選択図】なし
2009529028.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)：
【化１】
2009529028.tif 000015
[式中、
R1、R2、R3、R4、R5およびR6は独立してH、C1-7アルキル、C5-20 アリール、C3-20ヘテロシクリル、ハロ、エステル、アミド、アシル、スルホ、スルホンアミド、エーテル、チオエーテル、アゾ、アミノから選択されるか、または
R1およびR2は、それらが結合する環と一緒になって、3個までの3員〜8員の炭素環もしくは複素環を含む飽和または不飽和の炭素環基または複素環基を形成しており、ここで、それぞれの炭素環または複素環は1以上の他の炭素環または複素環に縮合していてもよく；
Xはハロ、または中性もしくは負に荷電したO-、N-またはS-供与配位子であり；
Yは対イオンであり；
mは0または1であり；
qは1、2または3であり；
Aは以下のいずれかであり：
(i)(Ru)-NRN1RN2-RN3-(N)（ここで、RN1およびRN2は独立してH、場合により置換されていてもよいC1-7アルキル、C3-20ヘテロシクリルおよびC5-20アリールから選択され、RN3はC1-2アルキレンである）；もしくは
(ii)窒素含有C5-6芳香環（ここで、窒素環原子はルテニウム原子に結合しており、該環はまたアゾ窒素に単結合（該結合は窒素環原子に対してαもしくはβである）または-CH2-基（該結合は窒素環原子に対してαである）によって結合している）；
Bは場合により置換されていてもよいC1-7アルキル、C3-20ヘテロシクリルもしくはC5-20アリールである］
で表されるルテニウム(II)化合物またはその溶媒和物もしくはプロドラッグ、あるいは以下の二量体の形態である式(I)の化合物：
(a)各成分のB基が単結合、-O-、-NH-、C1-6アルキレンもしくはC5-20アリーレンである連結基を介して連結している；
(b)1つの基が双方の成分に対してB基として機能している；または
(c)各成分上のR1が一緒になって単結合、-O-、C1-6アルキレンまたはC5-20アリーレンである連結基を形成している。
【請求項２】
Aが窒素含有芳香環であり、該窒素環原子はルテニウム原子に結合し、該環が更に窒素環原子に対してαもしくはβの単結合によって、または窒素環原子に対してαの-CH2-基によってアゾ窒素に結合している、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Aが窒素環原子に対してαの単結合によってアゾ窒素に結合している、請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Aがピリジンまたはピラゾール環である、請求項３記載の化合物。
【請求項５】
Aが置換されていない、請求項４記載の化合物。
【請求項６】
Bが、-ORO1、-NRN1RN2、-NO2、-C1-7アルキル、-C5-20アリール（ここで、RO1、RN1およびRN2は独立してHもしくはC1-7アルキルから選択される）から選択される基で置換されていてもよいフェニルである、請求項１〜５のいずれか１項記載の化合物。
【請求項７】
Bが置換されていないフェニルである、請求項６記載の化合物。
【請求項８】
Bがp-ジメチルアミノフェニルまたはp-ヒドロキシフェニルである、請求項６記載の化合物。
【請求項９】
Xがハロである、請求項１〜８のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１０】
Xがクロロまたはヨードである、請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
R1およびR2が、それらが結合する環と一緒になって、3〜8員の炭素環または複素環を含む飽和もしくは不飽和の炭素環基または複素環基を形成しており、それぞれの炭素環または複素環が1以上の他の炭素環または複素環に縮合していてもよい、請求項１〜１０のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１２】
R3、R4、R5およびR6がHである、請求項１１記載の化合物。
【請求項１３】
R1、R2、R3、R4、R5およびR6が独立してC1-7アルキル、C5-20アリール、C3-20ヘテロシクリル、ハロ、エステル、アミド、アシル、スルホ、スルホンアミド、エーテル、チオエーテル、アゾおよびアミノから選択される、請求項１〜１０のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１４】
R1、R2、R3、R4、R5およびR6が独立してHおよびC1-7アルキルから選択される、請求項１３記載の化合物。
【請求項１５】
R1、R2、R3、R4、R5およびR6の少なくとも4個が水素である、請求項１３または１４記載の化合物。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか１項記載の化合物、および製薬上許容される担体もしくは希釈剤を含有する組成物。
【請求項１７】
請求項１〜１５のいずれか１項記載の化合物の、治療方法における使用。
【請求項１８】
癌治療用の医薬の製造における、請求項１〜１５のいずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項１９】
治療に有効な量の請求項１〜１５のいずれか１項記載の化合物を被験体に投与することを含む、癌に罹患している被験体の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ルテニウム(II)化合物、特に癌の治療および／または予防のための医薬におけるその使用、ならびにその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
国際公開WO 01/30790、WO 02/02572、WO 2004/005304およびWO 2004/096819は、癌の治療に使用するためのルテニウム(II)化合物を開示している。これらの化合物は、ルテニウムに結合したアレーン環と、他の非アレーン配位子を有するハーフサンドイッチ化合物として記載することができる。これらの出願に例示されている化合物は、配位子の1つとしてハロ原子を有する。ハロ原子の加水分解によって錯体が活性化され、DNAに結合することが可能になると考えられる。比較的近年になって、より長い加水分解時間を有する配位子を含む錯体でも抗腫瘍活性を示すことが見いだされた（Sadlerら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2005, 102, 18269）。
【発明の開示】
【０００３】
本発明者らは、新規なクラスのルテニウム(II)サンドイッチ錯体がやはり抗腫瘍活性を示すことを見いだした。
【０００４】
本発明の第一の態様において、下記の式(I)のルテニウム(II)化合物、またはその溶媒和物もしくはプロドラッグが提供される：
【化１】
2009529028.tif 000003
【０００５】
[式中、
R1、R2、R3、R4、R5およびR6は独立してH、C1-7アルキル、C5-20 アリール、C3-20ヘテロシクリル、ハロ、エステル、アミド、アシル、スルホ、スルホンアミド、エーテル、チオエーテル、アゾ、アミノから選択されるか、または
R1およびR2は、それらが結合する環と一緒になって、3個までの3員〜8員の炭素環もしくは複素環を含む飽和または不飽和の炭素環または複素環基を形成しており、ここで、それぞれの炭素環または複素環は1以上の他の炭素環または複素環に縮合していてもよく；
Xはハロ、または中性もしくは負に荷電したO-、N-またはS-供与配位子であり；
Yは対イオンであり；
mは0または1であり；
qは1、2または3であり；
Aは以下のいずれかであり：
(i)(Ru)-NRN1RN2-RN3-(N)（ここで、RN1およびRN2は独立してH、場合により置換されていてもよいC1-7アルキル、C3-20ヘテロシクリルおよびC5-20アリールから選択され、RN3はC1-2アルキレンである）；もしくは
(ii)窒素含有C5-6芳香環（ここで、窒素環原子はルテニウム原子に結合しており、該環はまたアゾ窒素に単結合（該結合は窒素環原子に対してαもしくはβである）または-CH2-基（該結合は窒素環原子に対してαである）によって結合している）；
Bは場合により置換されていてもよいC1-7アルキル、C3-20ヘテロシクリルもしくはC5-20アリールであり；
式(I)の化合物は場合によって以下の二量体の形態である；
(a)各成分のB基が単結合、-O-、-NH-、C1-6アルキレンもしくはC5-20アリーレンである連結基を介して連結している；
(b)1つの基が双方の成分に対してB基として機能している、すなわちC1-7アルキレン、C3-20ヘテロシクリレンもしくはC5-20アリーレンである；または
(c)各成分上のR1が一緒になって単結合、-O-、C1-6アルキレンまたはC5-20アリーレンである連結基を形成している］。
【０００６】
説明目的のために、上記の(ii)の場合（Aがピリジン）に提供される錯体の型のいくつかの例を下記の表に示す：
2009529028.tif 000004
【０００７】
どのような理論によっても拘束されないことを望むが、これらの錯体の溶液化学は、癌の治療に活性であるとしてこれまでに開示されたものとはまったく異なって、ほとんどの場合に基Xは容易には加水分解されない。従って、本発明の錯体は、異なる作用機序を有し、錯体そのものが活性種であると考えられる。
【０００８】
本発明の第二の態様は、第一の態様の化合物および製薬上許容される担体または希釈剤を含有する組成物を提供する。
【０００９】
本発明の第三の態様は、治療方法における第一の態様の化合物の使用を提供する。
【００１０】
本発明の第四の態様は、癌治療用の医薬の製造における、第一の態様の化合物の使用を提供する。
【００１１】
本発明の第五の態様は、治療に有効な量の第一の態様の化合物を、好ましくは医薬組成物の形態で、被験体に投与することを含む、癌に罹患した被験体の治療方法を提供する。
【００１２】
定義
N-供与配位子：  N-供与配位子は、窒素原子を介して金属原子に結合する配位子である。これらは当分野において周知であり、ニトリル配位子 (N≡C-R)；アゾ配位子 (N=N-R)；芳香族N-供与配位子；アミン配位子(NRN4RN5RN6)；アジド(N3-)；シアン化物(N≡C-)；イソチオシアネート(NCS-)が挙げられる。ニトリルおよびアゾ配位子の双方において、RはC1-7アルキルおよびC5-20アリールから選択され得る。芳香族N-供与配位子としては、置換されていてもよいピリジン、ピリダジン、ピリミジン、プリンおよびピラジンが挙げられる。任意の置換基は、シアノ、ハロおよびC1-7アルキルから選択され得る。RN4、RN5およびRN6は独立してHおよびC1-7アルキルから選択され得る。
【００１３】
S-供与配位子：  S-供与配位子は、硫黄原子を介して金属原子に結合する配位子である。これらは当分野において周知であり、チオスルフェート(S2O32-)；イソチオシアネート(NCS-)；チオシアネート(CNS-)；スルホキシド配位子(RS1RS2SO)；チオエーテル配位子(RS1RS2S)；チオレート配位子(RS1S-)；スルフィネート配位子(RS1SO2-)；およびスルフェネート配位子(RS1SO-)が挙げられ、ここでRS1およびRS2は独立して、置換されていてもよいC1-7アルキルおよびC5-20アリールから選択される。
【００１４】
O-供与配位子：  O-供与配位子は、酸素原子を介して金属原子に結合する配位子である。これらは当分野において周知であり、水(H2O)、カーボネート(CO3-)；カルボキシレート配位子(RCCO2-)；ニトレート (NO3-)；スルフェート(SO42-)およびスルホネート(RS1O3-)が挙げられ、ここでRCはC1-7アルキルおよびC5-20アリールから選択され、RS1は先に定義した通りである。
【００１５】
C1-7アルキル：  本明細書中で用いる用語「C1-7アルキル」は、脂肪族もしくは脂環式であってよく、また飽和もしくは不飽和(例えば部分的不飽和、完全不飽和)であってよい、1〜7個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から1個の水素原子を取ることによって得られる1価の基をさす。従って、用語「アルキル」には、以下に記載するサブクラスのアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル等が含まれる。
【００１６】
飽和C1-7アルキル基の例としては、限定するものではないが、メチル(C1)、エチル(C2)、プロピル(C3)、ブチル(C4)、ペンチル(C5)、ヘキシル(C6)およびヘプチル(C7)が挙げられる。
【００１７】
飽和直鎖C1-7 アルキル基の例としては、限定するものではないが、メチル(C1)、エチル(C2)、n-プロピル(C3)、n-ブチル(C4)、n-ペンチル(アミル)(C5)、n-ヘキシル(C6)、およびn-ヘプチル(C7)が挙げられる。
【００１８】
飽和分岐C1-7アルキル基の例としては、イソプロピル(C3)、イソブチル(C4)、sec-ブチル(C4)、tert-ブチル(C4)、イソペンチル(C5)、およびネオペンチル(C5)が挙げられる。
【００１９】
C2-7アルケニル：  本明細書中で用いる用語「C2-7アルケニル」は、1以上の炭素−炭素二重結合を有するアルキル基をさす。C2-7アルケニル基の例としては、限定するものではないが、エテニル(ビニル、-CH=CH2)、1-プロペニル(-CH=CH-CH3)、2-プロペニル(アリル、-CH-CH=CH2)、イソプロペニル(1-メチルビニル、-C(CH3)=CH2)、ブテニル(C4)、ペンテニル(C5)、およびヘキセニル(C6)が挙げられる。
【００２０】
C2-7アルキニル：  本明細書中で用いる用語「C2-7アルキニル」は、1以上の炭素−炭素三重結合を有するアルキル基をさす。C2-7アルキニル基の例としては、限定するものではないが、エチニル（-C≡CH）および2-プロピニル(プロパルギル、-CH2-C≡CH)が挙げられる。
【００２１】
C3-7 シクロアルキル：  本明細書中で用いる用語「C3-7 シクロアルキル」は、シクリル基でもあるアルキル基；すなわち、飽和もしくは不飽和（例えば部分的不飽和、完全不飽和）であってよい炭素環式化合物の炭素環の脂環式環原子から1個の水素原子を取ることによって得られ、3〜7個の炭素原子を有する1価の基をさす。従って、用語「C3-7シクロアルキル」には、サブクラスのシクロアルケニルおよびシクロアルキニルが含まれる。シクロアルキル基の例としては、限定するものではないが、以下から誘導されるものが挙げられる：
飽和炭化水素化合物：
シクロプロパン(C3)、シクロブタン(C4)、シクロペンタン(C5)、シクロヘキサン(C6)、シクロヘプタン(C7)、メチルシクロプロパン(C4)、ジメチルシクロプロパン(C5)、メチルシクロブタン(C5)、ジメチルシクロブタン(C6)、メチルシクロペンタン(C6)、ジメチルシクロペンタン(C7)、メチルシクロヘキサン(C7)；ならびに
不飽和炭化水素化合物：
シクロプロペン(C3)、シクロブテン(C4)、シクロペンテン(C5)、シクロヘキセン(C6)、メチルシクロプロペン(C4)、ジメチルシクロプロペン(C5)、メチルシクロブテン(C5)、ジメチルシクロブテン(C6)、メチルシクロペンテン(C6)、ジメチルシクロペンテン(C7)。
【００２２】
本発明の化合物中のアルキル基は、場合によって置換されていてもよい。置換基としては、1以上の更なるアルキル基および／または1以上の更なる置換基、例えばC5-20アリール（例えばベンジル）、C3-20ヘテロシクリル、アミノ、シアノ(-CN)、ニトロ(-NO2)、ヒドロキシル(-OH)、エステル、ハロ、チオール(-SH)、チオエーテルおよびスルホネート(-S(=O)2)OR［式中Rはスルホネート置換基、例えばC1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、もしくはC5-20アリール基、好ましくはC1-7アルキル基である］が挙げられる。
【００２３】
C1-12アルキレン：  用語「C1-12アルキレン」は、用語「アルキル」の定義と同様に定義され、脂肪族もしくは脂環式であってよく、また飽和もしくは不飽和（例えば部分的不飽和、完全に不飽和）であってよい、1〜12個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から2個の水素原子を取ることで得られる2価の化学種である。ラジカルは、ラジカルが同じ炭素原子上にあるC1 アルキレン（すなわち-CH2-基）の場合を除き、鎖に連結された1以上の炭素原子で分離されていてもよい。好ましくは、アルキレン基は直鎖の基である。C1-12アルキレン基は、場合によってアルキレン鎖上で置換されていてもよい。
【００２４】
C3-20ヘテロシクリル：  本明細書中で用いる用語「C3-20ヘテロシクリル」は、複素環式化合物の環原子から1個の水素原子を取ることによって得られる1価の基であって、3〜20個の環原子を有し、そのうち1〜10個が環ヘテロ原子である基をさす。好ましくは、それぞれの環は3〜7個の環原子を有し、そのうち1〜4個が環ヘテロ原子である。
【００２５】
この文脈において、接頭辞(例えばC3-20、C3-7、C5-6等)は、炭素原子であるかヘテロ原子であるかによらず、環原子の数、または環原子の数の範囲を示す。例えば、本明細書中で用いる用語「C5-6ヘテロシクリル」は、5個または6個の環原子を有するヘテロシクリル基に関する。ヘテロシクリル基の例としては、C3-20ヘテロシクリル、C5-20ヘテロシクリル、C5-20ヘテロアリール、C3-15ヘテロシクリル、C5-15ヘテロシクリル、C3-12ヘテロシクリル、C5-12ヘテロシクリル、C3-10ヘテロシクリル、C5-10ヘテロシクリル、C3-7ヘテロシクリル、C5-7ヘテロシクリル、およびC5-6ヘテロシクリルが挙げられる。
【００２６】
単環式ヘテロシクリル基の例としては、限定するものではないが、以下から誘導されるものが挙げられる：
N1：  アジリジン(C3)、アゼチジン(C4)、ピロリジン(テトラヒドロピロール)(C5)、ピロリン(例えば3-ピロリン、2,5-ジヒドロピロール)(C5)、2H-ピロールもしくは3H-ピロール(イソピロール、イソアゾール)(C5)、ピペリジン(C6)、ジヒドロピリジン(C6)、テトラヒドロピリジン(C6)、アゼピン(C7)；
O1：  オキシラン(C3)、オキセタン(C4)、オキソラン(テトラヒドロフラン)(C5)、オキソール(ジヒドロフラン)(C5)、オキサン(テトラヒドロピラン)(C6)、ジヒドロピラン(C6)、ピラン(C6)、オキセピン(C7)；
S1：  チイラン(C3)、チエタン(C4)、チオラン(テトラヒドロチオフェン)(C5)、チアン(テトラヒドロチオピラン)(C6)、チエパン(C7)；
O2：  ジオキソラン(C5)、ジオキサン (C6)、およびジオキセパン(C7)；
O3：  トリオキサン(C6)；
N2：  イミダゾリジン(C5)、ピラゾリジン(ジアゾリジン)(C5)、イミダゾリン(C5)、ピラゾリン(ジヒドロピラゾール)(C5)、ピペラジン(C6)；
N1O1：  テトラヒドロオキサゾール(C5)、ジヒドロオキサゾール(C5)、テトラヒドロイソキサゾール(C5)、ジヒドロイソキサゾール(C5)、モルホリン(C6)、テトラヒドロオキサジン(C6)、ジヒドロオキサジン(C6)、オキサジン(C6)；
N1S1：  チアゾリン(C5)、チアゾリジン(C5)、チオモルホリン(C6)；
N2O1：  オキサジアジン(C6)；
O1S1：  オキサチオール(C5)およびオキサチアン(チオキサン)(C6)；
N1O1S1：  オキサチアジン(C6)。
【００２７】
C3-20ヘテロシクリル基は、場合によって、例えばC1-7アルキル、C5-20アリール、C3-20ヘテロシクリル、アミノ、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、エステル、ハロ、チオール、チオエーテルおよびスルホネートを含む、1以上の置換基で置換されていてもよい。
【００２８】
C3-20ヘテロシクリレン：  用語「C3-20ヘテロシクリレン」は、用語「ヘテロシクリル」の定義と同様に定義され、複素環式化合物の環原子から2個の水素原子を取ることによって得られる2価の化学種であって、3〜20個の環原子を有する。ラジカルは1以上の環原子によって分離されていてもよく、異なる環中にあってもよい。
【００２９】
C5-20アリール：  本明細書中で用いる用語「C5-20アリール」は、芳香族化合物の芳香環原子から1個の水素原子を取ることによって得られる1価の基であって、3〜20個の環原子を有する基をさす。好ましくは、それぞれの環は5〜7個の環原子を有する。
【００３０】
この文脈において、接頭辞（例えばC3-20、C5-7、C5-6等）は、炭素原子であるかヘテロ原子であるかによらず、環原子の数、または環原子の数の範囲を示す。例えば、本明細書中で用いる用語「C5-6 アリール」は、5個または6個の環原子を有するアリール基に関する。
【００３１】
環の原子は、「カルボアリール基」のように、全て炭素原子であってもよい。カルボアリール基の例としては、C3-20カルボアリール、C5-20カルボアリール、C5-15カルボアリール、C5-12カルボアリール、C5-10カルボアリール、C5-7カルボアリール、C5-6カルボアリール、C5カルボアリール、およびC6カルボアリールが挙げられる。
【００３２】
カルボアリール基の例としては、限定するものではないが、ベンゼン(すなわちフェニル)(C6)、ナフタレン(C10)、アズレン(C10)、アントラセン(C14)、フェナントレン(C14)、ナフタセン(C18)、およびピレン(C16)から誘導されるものが挙げられる。
【００３３】
縮合環を含み、少なくともその一方が芳香環であるアリール基の例としては、限定するものではないが、インダン(例えば2,3-ジヒドロ-1H-インデン)(C9)、インデン(C9)、イソインデン(C9)、テトラリン(1,2,3,4-テトラヒドロナフタレン）(C10)、アセナフテン(C12)、フルオレン(C13)、フェナレン(C13)、アセフェナントレン(C15)、およびアセアントレン(C16)から誘導される基が挙げられる。
【００３４】
あるいはまた、環の原子は「ヘテロアリール基」のように1個以上のヘテロ原子を含んでいてもよい。ヘテロアリール基の例としては、C3-20ヘテロアリール、C5-20ヘテロアリール、C5-15ヘテロアリール、C5-12ヘテロアリール、C5-10ヘテロアリール、C5-7ヘテロアリール、C5-6ヘテロアリール、C5ヘテロアリール、およびC6ヘテロアリールが挙げられる。
【００３５】
単環式ヘテロアリール基の例としては、限定するものではないが、以下から誘導されるものが挙げられる：
N1：  ピロール(アゾール)(C5)、ピリジン(アジン)(C6)；
O1：  フラン(オキソール)(C5)；
S1：  チオフェン(チオール)(C5)；
N1O1：  オキサゾール(C5)、イソキサゾール(C5)、イソキサジン(C6)；
N2O1：  オキサジアゾール(フラザン)(C5)；
N3O1：  オキサトリアゾール(C5)；
N1S1：  チアゾール(C5)、イソチアゾール(C5)；
N2：  イミダゾール(1,3-ジアゾール)(C5)、ピラゾール(1,2-ジアゾール)(C5)、ピリダジン(1,2-ジアジン)(C6)、ピリミジン(1,3-ジアジン)(C6)(例えばシトシン、チミン、ウラシル)、ピラジン(1,4-ジアジン)(C6)；
N3：  トリアゾール(C5)、トリアジン(C6)；
N4：  テトラゾール(C5)。
【００３６】
縮合環を含むヘテロアリール基の例としては、限定するものではないが、以下のものが挙げられる：
以下から誘導されるC9ヘテロアリール基(2個の縮合環を有する)：ベンゾフラン(O1)、イソベンゾフラン(O1)、インドール(N1)、イソインドール(N1)、インドリジン(N1)、インドリン(N1)、イソインドリン(N1)、プリン(N4)(例えばアデニン、グアニン)、ベンズイミダゾール(N2)、インダゾール(N2)、ベンズオキサゾール(N1O1)、ベンズイソキサゾール(N1O1)、ベンゾジオキソール(O2)、ベンゾフラザン(N2O1)、ベンゾトリアゾール(N3)、ベンゾチオフラン(S1)、ベンゾチアゾール(N1S1)、ベンゾチアジアゾール(N2S)；
以下から誘導されるC10ヘテロアリール基（2個の縮合環を有する）：クロメン(O1)、イソクロメン(O1)、クロマン(O1)、イソクロマン(O1)、ベンゾジオキサン(O2)、キノリン(N1)、イソキノリン(N1)、キノリジン(N1)、ベンズオキサジン(N1O1)、ベンゾジアジン(N2)、ピリドピリジン(N2)、キノキサリン(N2)、キナゾリン(N2)、シノリン(N2)、フタラジン(N2)、ナフチリジン(N2)、プテリジン(N4)；
ベンゾジアゼピン(N2)から誘導されるC11ヘテロアリール基（2個の縮合環を有する）；
以下から誘導されるC13ヘテロアリール基（3個の縮合環を有する）：カルバゾール(N1)、ジベンゾフラン(O1)、ジベンゾチオフェン(S1)、カルボリン(N2)、ペリミジン(N2)、ピリドインドール(N2)；
以下から誘導されるC14ヘテロアリール基（3個の縮合環を有する）：アクリジン(N1)、キサンテン(O1)、チオキサンテン(S1)、オキサントレン(O2)、フェノキサチイン(O1S1)、フェナジン(N2)、フェノキサジン(N1O1)、フェノチアジン(N1S1)、チアントレン(S2)、フェナントリジン(N1)、フェナントロリン(N2)、フェナジン(N2)。
【００３７】
C5-20アリール基は、場合によって、例えばC1-7アルキル、C5-20アリール、C3-20ヘテロシクリル、アミノ、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、エステル、ハロ、チオール、チオエーテルおよびスルホネートを含む1以上の置換基で置換されていてもよい。
【００３８】
C5-20アリーレン：  用語「C5-20アリーレン」は、用語「アリール」の定義と同様に定義され、芳香族化合物の芳香環原子から2個の水素原子を取ることによって得られる2価の化学種であり、5〜20個の環原子を有する。ラジカルは1個以上の環原子によって隔てられていてもよく、また異なる環にあってもよい。
【００３９】
ハロ：  -F、-Cl、-Br、および-I。
【００４０】
エステル(カルボキシレート、カルボン酸エステル、オキシカルボニル)：  -C(=O)OR[式中Rはエステル置換基、例えばC1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である]。エステル基の例としては、限定するものではないが、-C(=O)OCH3、-C(=O)OCH2CH3、-C(=O)OC(CH3)3、および-C(=O)OPhが挙げられる。
【００４１】
アミノ：  -NR1R2[式中、R1およびR2は独立してアミノ置換基、例えば水素、C1-7アルキル基(C1-7アルキルアミノもしくはジ-C1-7アルキルアミノともいう)、C3-20ヘテロシクリル基、もしくはC5-20アリール基であり、好ましくはHもしくはC1-7アルキル基であるか、または「環状」アミノ基の場合、R1およびR2はそれらが結合する窒素原子と一緒になって4〜8個の環原子を有する複素環を形成する]。アミノ基は一級(-NH2)、二級(-NHR1)、または三級(-NHR1R2)であってよく、またカチオンの形態で四級(-+NR1R2R3)であってよい。アミノ基の例としては、限定するものではないが、-NH2、-NHCH3、-NHC(CH3)2、-N(CH3)2、-N(CH2CH3)2、-NHCH2Phおよび-NHPhが挙げられる。環状アミノ基の例としては、限定するものではないが、アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノ、およびチオモルホリノが挙げられる。
【００４２】
アミド(カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキシアミド)：  -C(=O)NR1R2[式中、R1およびR2は独立してアミノ基について定義したアミノ置換基である］。アミド基の例としては、限定するものではないが、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3、-C(=O)N(CH3)2、-C(=O)NHCH2CH3、および-C(=O)N(CH2CH3)2、並びにR1およびR2が、それらが結合する窒素原子と一緒になって複素環構造を形成するアミド基、例えばピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニル、およびピペラジノカルボニルが挙げられる。
【００４３】
アシル（ケト）：  -C(=O)R[式中、Rはアシル置換基、例えばC1-7アルキル基（C1-7アルキルアシルもしくはC1-7アルカノイルともいう）、C3-20ヘテロシクリル基(C3-20ヘテロシクリルアシルともいう)、またはC5-20アリール基(C5-20アリールアシルともいう)であり、好ましくはC1-7アルキル基である]。アシル基の例としては、限定するものではないが、-C(=O)CH3(アセチル)、-C(=O)CH2CH3(プロピオニル)、-C(=O)C(CH3)3(t-ブチリル)、および-C(=O)Ph(ベンゾイル、フェノン)が挙げられる。
【００４４】
スルホ：  -S(=O)2OH、-SO3H。
【００４５】
スルホンアミド(スルフィナモイル；スルホン酸アミド；スルホンアミド)：  -S(=O)2NR1R2[式中、R1およびR2は独立して、アミノ基で定義するアミノ置換基である]。スルホンアミド基の例としては、限定するものではないが、-S(=O)2NH2、-S(=O)2NH(CH3)、-S(=O)2N(CH3)2、-S(=O)2NH(CH2CH3)、-S(=O)2N(CH2CH3)2、および-S(=O)2NHPhが挙げられる。
【００４６】
エーテル：  -OR[式中、Rはエーテル置換基、例えばC1-7アルキル基（C1-7アルコキシ基ともいう）、C3-20ヘテロシクリル基（C3-20ヘテロシクリルオキシ基ともいう）、またはC5-20アリール基（C5-20アリールオキシ基ともいう）であり、好ましくはC1-7アルキル基である]。
【００４７】
チオエーテル(スルフィド)：  -SR[式中、Rはチオエーテル置換基、例えばC1-7アルキル基（C1-7アルキルチオ基ともいう）、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である]。C1-7アルキルチオ基の例としては、限定するものではないが、-SCH3および-SCH2CH3が挙げられる。
【００４８】
アゾ：  -N=N-R[式中、Rはアゾ置換基、例えばC1-7アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、またはC5-20アリール基であり、好ましくはC1-7アルキル基である]。アゾ基の例としては、限定するものではないが、-N=N-CH3および-N=N-Phが挙げられる。
【００４９】
複素環：  本明細書中で用いる用語「複素環」とは、独立してN、OおよびSから選択される1〜3個のヘテロ原子を含む、芳香族もしくは非芳香族であってよい、3-、4-、5-、6-、7-、または8-(好ましくは5-、6-または7-)員の飽和または不飽和の環、例えばインドールをいう(上記も参照のこと)。
【００５０】
炭素環：  本明細書中で用いる用語「炭素環」とは、3〜8個の炭素原子(好ましくは5〜7個の炭素原子)を含む、芳香族または非芳香族であってよい飽和または不飽和の環をいい、例えばシクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサンおよびシクロヘプタンを含む(上記も参照のこと)。
【００５１】
α、β、γ：  これらの語は、その伝統的な意味で使用され、分子内の結合、原子または置換基の相対位置をいう。カルボニル化合物を用いて下記に説明するように、特定の原子もしくは基に対してαとして記載された位置はそれから1結合離れており、βは2結合離れており、以下同様である。
【化２】
2009529028.tif 000005
【００５２】
包含する他の形態
他に特定しない限り、上記には、これらの置換基の周知のイオン、溶媒和物、保護形態が含まれる。例えば、カルボン酸(-COOH)への言及は、そのアニオン(カルボキシレート)形態(-COO-)もしくは溶媒和物、並びに従来の保護形態をも含む。同様に、アミノ基への言及は、アミノ基のプロトン化形態(-N+HR1R2)もしくは溶媒和物、並びにアミノ基の従来の保護形態をも含む。同様に、ヒドロキシル基への言及は、そのアニオン形態(-O-)もしくは溶媒和物、並びに従来の保護形態をも含む。
【００５３】
異性体
ある種の化合物は、限定するものではないが、シスおよびトランス型；EおよびZ型；c、t、およびr型；エンドおよびエキソ型；R、S、およびメソ型；DおよびL体；dおよびl体；(+)および(-)型；ケト、エノール、およびエノレート型；シンおよびアンチ型；シンクリナルおよびアンチクリナル型；αおよびβ型；アキシャルおよびエカトリアル型；ボート、チェア、ツイスト、エンベロープ、およびハーフチェア型；およびこれらの組み合わせを含む、1以上の特定の幾何学的、光学的、エナンチオマー、ジアステレオマー、エピマー、アトロピー、立体異性体、互変異性体、コンフォメーション、またはアノマー形態で存在することができ、以下集合的に「異性体」という。
【００５４】
互変異性体について下記で述べるものを除き、本明細書中で用いる用語「異性体」から特に除外されるものは構造（または構成）異性体（すなわち、単に空間における原子の位置によってではなく、原子間の結合において異なる異性体）であることに留意されたい。例えば、メトキシ基-OCH3への言及は、その構造異性体であるヒドロキシメチル基-CH2OHへの言及と解釈されるべきでない。同様に、o−クロロフェニルへの言及は、その構造異性体であるm−クロロフェニルへの言及と解釈されるべきではない。しかしながら、あるクラスの構造体についての言及は、そのクラスに入る構造異性体を含み得る(例えばC1-7アルキルはn-プロピルおよびイソプロピルを包含し；ブチルはn-、iso-、sec-、およびtert-ブチルを包含し；メトキシフェニルはo-、m-、およびp-メトキシフェニルを包含する)。
【００５５】
上記の除外は、互変異性体、例えば以下の互変異性体の対：ケト／エノール(下記に図示)、イミン／エナミン、アミド／イミノアルコール、アミジン／アミジン、ニトロソ／オキシム、チオケトン／エネチオール、N-ニトロソ／ヒドロキシアゾ、およびニトロ/aci-ニトロにおけるような、例えばケト-、エノール-、およびエノラート型には関係しない。
【化３】
2009529028.tif 000006
【００５６】
特に、本発明のアゾ含有配位子が2以上の互変異性形態で存在することができ、優勢の形態が金属への配位によって変化し得ることは理解されるであろう。例えば、以下の例のような配位子は、2つの異なる形態で表現することができる：
【化４】
2009529028.tif 000007
【００５７】
用語「異性体」に特に含まれるのは、１以上の同位体置換を有する化合物であることに留意されたい。例えば、Hは1H、2H(D)、および3H(T)を含むいずれの同位体の形態であってもよい；Cは12C、13C、および14Cを含むいずれの同位体の形態であってもよい；Oは16Oおよび18Oを含むいずれの同位体の形態であってもよい；等である。
【００５８】
他に特定しない限り、特定の化合物への言及は、その（完全もしくは部分的）ラセミ体および他の混合物、例えば一方のエナンチオマーに富む混合物を含む、全てのこうした異性体形態を包含する。このような異性体形態の調製(例えば不斉合成)および分離(例えば分別結晶およびクロマトグラフィー手段)のための方法は、当分野において公知であるか、あるいは本明細書に教示した方法、もしくは公知の方法を公知のやり方で適合させて容易に得られる。
【００５９】
溶媒和物
活性化合物の対応する溶媒和物を調製、精製、および／または取り扱うことが都合がよかったり、望ましい場合がある。用語「溶媒和物」は、本明細書中では通常の意味で用いられ、溶質(例えば活性化合物、活性化合物の塩)と溶媒の複合体をいう。溶媒が水である場合、溶媒和物を便宜的に水和物、例えば一水和物、二水和物、三水和物等と言ってもよい。
【００６０】
他に特定しない限り、特定の化合物への言及は、その溶媒和物形態も包含する。
【００６１】
化学的保護形態
活性化合物を化学的保護形態で調製、精製、および／または取り扱うことが都合がよかったり、望ましい場合がある。用語「化学的保護形態」は、本明細書中で通常の化学的な意味で用いられ、1以上の反応性官能基が特定の条件（例えばpH、温度、放射線、溶媒等）下での望ましくない化学反応から保護されている化合物に関する。実際には、周知の化学的方法を用いて、特定の条件下で、さもなければ反応性であろう官能基を可逆的に不活性にする。化学的保護形態においては、１以上の反応性官能基が保護された基、または保護基の形態である(マスクされた基もしくはマスキング基、あるいはブロックされた基もしくはブロッキング基としても知られる)。反応性官能基を保護することによって、保護された基に影響せずに、他の保護されていない反応性官能基の関与する反応を行うことができ；保護基は、通常は次の段階で、分子の他の部分に実質的に影響を及ぼすことなく除去することができる。例えば、「有機合成における保護基（Protective Groups in Organic Synthesis）」 (T. GreenおよびP. Wuts; 第三版; John Wiley and Sons, 1999)を参照のこと。
【００６２】
他に特定しない限り、特定の化合物への言及は、その化学的保護形態をも包含する。
【００６３】
こうした「保護」、「ブロッキング」、または「マスキング」の様々な方法が有機合成において広く用いられ、周知である。例えば、2つの非等価な反応性官能基を有し、その双方が特定の条件下で反応性である化合物を、その官能基の一方が「保護」され、従って特定の条件下で反応しないように誘導体化することができる。保護されているため、化合物は、効果的に一方の反応性官能基のみを有する反応体として用いることができる。(他の官能基が関わる)望ましい反応が完了した後、保護された基は「脱保護」されて、その本来の機能性を回復することができる。
【００６４】
例えば、ヒドロキシ基は、エーテル(-OR)またはエステル(-OC(=O)R)として、例えばt-ブチルエーテル；ベンジル、ベンズヒドリル(ジフェニルメチル)、もしくはトリチル(トリフェニルメチル)エーテル；トリメチルシリルもしくはt-ブチルジメチルシリルエーテルとして、またはアセチルエステル(-OC(=O)CH3、-OAc)として保護することができる。
【００６５】
例えば、アルデヒドまたはケトン基は、例えば第一級アルコールとの反応によってカルボニル基（＞C=O）がジエーテル（＞C(OR)2）に変換したアセタール（R-CH(OR)2）またはケタール（R2C(OR)2）としてそれぞれ保護することができる。アルデヒドまたはケトン基は、酸の存在下で大過剰の水を使用した加水分解によって容易に再生される。
【００６６】
例えば、アミン基は、例えばアミド(-NRCO-R)もしくはウレタン(-NRCO-OR)として、例えばメチルアミド(-NHCO-CH3)として；ベンジルオキシアミド(-NHCO-OCH2C6H5、-NH-Cbz)として；t-ブトキシアミド (-NHCO-OC(CH3)3、-NH-Boc)として；2-ビフェニル-2-プロポキシアミド(-NHCO-OC(CH3)2C6H4C6H5、-NH-Bpoc)として；9-フルオレニルメトキシアミド(-NH-Fmoc)として；6-ニトロベラトリルオキシアミド(-NH-Nvoc)として；2-トリメチルシリルエチルオキシアミド(-NH-Teoc)として；2,2,2-トリクロロエチルオキシアミド(-NH-Troc)として；アリルオキシアミド(-NH-Alloc)として；2(-フェニルスルホニル)エチルオキシアミド(-NH-Psec)として；または、適切な場合には(例えば環状アミン)、ニトロキシドラジカル (>N-O・)として保護することができる。
【００６７】
例えば、カルボン酸基は、エステル、例えばC1-7アルキルエステル(例えばメチルエステル；t-ブチルエステル)；C1-7ハロアルキルエステル(例えばC1-7トリハロアルキルエステル)；トリC1-7アルキルシリル-C1-7アルキルエステル；またはC5-20アリール-C1-7アルキルエステル(例えばベンジルエステル；ニトロベンジルエステル)として、あるいはアミド、例えばメチルアミドとして保護することができる。
【００６８】
例えば、チオール基は、チオエーテル(-SR)として、例えばベンジルチオエーテルとして；アセトアミドメチルエーテル(-S-CH2NHC(=O)CH3)として保護することができる。
【００６９】
プロドラッグ
活性化合物をプロドラッグの形態で調製、精製、および／または取り扱うことが都合がよかったり、望ましい場合がある。本明細書中で用いる用語「プロドラッグ」は、（例えばin vivoで）代謝されると所望の活性化合物を生成する化合物をさす。典型的には、プロドラッグは不活性であるか、または活性化合物よりも活性が低いが、有利な取扱い性、投与性、あるいは代謝特性を提供し得る。
【００７０】
他に特定しない限り、特定の化合物への言及は、そのプロドラッグをも包含する。
【００７１】
例えば一部のプロドラッグは活性化合物のエステル(例えば生理的に許容される、代謝的に不安定なエステル)である。代謝の間にエステル基(-C(=O)OR)が開裂して、活性薬物をもたらす。このようなエステルは、例えば、親化合物中のカルボン酸基(-C(=O)OH)のいずれかのエステル化によって形成させることができ、適切な場合には、予め親化合物中に存在する任意の他の反応基の保護を行い、必要であればその後に脱保護する。
【００７２】
このような代謝的に不安定なエステルの例としては、Rが以下のものである式-C(=O)ORのものが挙げられる：
C1-7アルキル
(例えば-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-sBu、-iBu、-tBu)；
C1-7アミノアルキル
(例えばアミノエチル；2-(N,N-ジエチルアミノ)エチル；2-(4-モルホリノ)エチル)；
アシルオキシ-C1-7アルキル
(例えばアシルオキシメチル；
アシルオキシエチル；
ピバロイルオキシメチル；
アセトキシメチル；
1-アセトキシエチル；
1-(1-メトキシ-1-メチル)エチル-カルボニルオキシエチル；
1-(ベンゾイルオキシ)エチル；イソプロポキシ-カルボニルオキシメチル；
1-イソプロポキシ-カルボニルオキシエチル；シクロヘキシル-カルボニルオキシメチル；
1-シクロヘキシル-カルボニルオキシエチル；
シクロヘキシルオキシ-カルボニルオキシメチル；
1-シクロヘキシルオキシ-カルボニルオキシエチル；
(4-テトラヒドロピラニルオキシ) カルボニルオキシメチル；
1-(4-テトラヒドロピラニルオキシ)カルボニルオキシエチル；
(4-テトラヒドロピラニル)カルボニルオキシメチル；および
1-(4-テトラヒドロピラニル)カルボニルオキシエチル)。
【００７３】
また、ある種のプロドラッグは酵素的に活性化されて活性化合物を生じるか、あるいは更なる化学反応の後に活性化合物を生じる化合物である(例えばADEPT、GDEPT、LIDEPT等に見られるようなもの)。例えば、プロドラッグは糖誘導体または他のグリコシドコンジュゲートであってもよく、あるいはアミノ酸エステル誘導体であってもよい。
【００７４】
本発明の化合物の使用
本発明は、ヒトもしくは動物体の治療方法において使用するための、式(I)の化合物、またはその溶媒和物もしくはプロドラッグ（「活性化合物」）を提供する。このような方法は、治療に有効な量の活性化合物を、好ましくは医薬組成物の形態で、そのような被験体に投与することを含み得る。
【００７５】
症状の治療に関して本明細書中で用いる用語「治療」は、一般的に、何らかの望ましい治療効果、例えば症状の進行の抑制が達成される、ヒトもしくは動物(例えば家畜)の治療および治療法に関し、進行速度の低下、進行速度の停止、症状の改善、および症状の治癒が含まれる。予防的手段としての治療（すなわち予防）も含まれる。
【００７６】
本明細書中で用いる用語「治療に有効な量」は、合理的な便益／リスク比にてらして、何らかの望まれる治療効果をもたらすために有効な、活性化合物、または活性化合物を含む物質、組成物もしくは剤形の量をさす。
【００７７】
投与
活性化合物、または活性化合物を含有する医薬組成物は、被験体に、任意の都合のよい投与経路で、限定するものではないが、経口(例えば摂取)；局所(例えば経皮、鼻内、口内、バッカル、および舌下を含む)；経肺(例えば口もしくは鼻からのエアゾールを用いた吸入治療)；直腸；膣内；非経口、例えば皮下、皮内、筋肉内、静脈内、動脈内、心臓内、くも膜下、髄腔内、脊髄内、嚢内、被膜下、眼窩内、腹腔内、気管内、上皮下、関節内、くも膜下、および胸骨内を含む注射；例えば皮下もしくは筋肉内へのデポー剤の埋め込みを含めて、全身的／末梢的に、または所望の作用部位に投与することができる。
【００７８】
被験体は、真核生物、動物、脊椎動物、哺乳動物、げっ歯類（例えばモルモット、ハムスター、ラット、マウス）、ネズミ科動物(例えばマウス)、イヌ科動物(例えばイヌ)、ネコ科動物 (例えばネコ)、ウマ（equine）(例えばウマ)、霊長類、サル（simian）(例えばサルもしくは類人猿)、サル(例えばマーモセット、ヒヒ)、類人猿(例えばゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザル)、またはヒトであってよい。
【００７９】
製剤
活性化合物は単独で投与することが可能であるが、上記で定義した少なくとも1種の活性化合物を、1以上の製薬上許容される担体、助剤、賦形剤、希釈剤、増量剤、緩衝剤、安定化剤、防腐剤、滑沢剤、または当業者に周知の他の物質、および場合によって他の治療薬もしくは予防薬と共に含有する医薬組成物（例えば製剤）として提供することが好ましい。
【００８０】
従って、本発明は更に、上記で定義する医薬組成物、ならびに上記で定義する少なくとも1種の活性化合物を、本明細書に記載する1以上の製薬上許容される担体、賦形剤、緩衝剤、助剤、安定化剤、もしくは他の物質と共に混合することを含む、医薬組成物の調製方法を提供する。
【００８１】
本明細書中で用いる用語「製薬上許容される」は、信頼できる医学的判断の範囲内で、合理的な便益／リスク比にてらして、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症なしに被験体（例えばヒト）の組織と接触させて使用するために好適な化合物、材料、組成物、および／または剤形に関する。それぞれの担体、賦形剤等はまた、製剤中の他の成分と適合し得るという意味で「許容される」ものでなければならない。
【００８２】
適切な担体、賦形剤等は、標準的な調剤のテキスト、例えばRemington’s Pharmaceutical Sciences, 第18版, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1990に見ることができる。
【００８３】
製剤は、単位投与剤形で提供することが便利であり、製薬分野で周知の任意の方法により調製することができる。そのような方法は、活性化合物を、1以上の補助成分を構成する担体と共に会合させる段階を含む。一般に、製剤は、活性化合物を液状担体もしくは微細な固形担体またはその双方と均一かつ密接に会合させ、次いで必要であれば生成物を成型することによって調製する。
【００８４】
製剤は、液体、溶液、懸濁液、エマルジョン、エリキシル、シロップ、錠剤、ロゼンジ、顆粒、粉末、カプセル、カシェ、丸薬、アンプル、座剤、ペッサリー、軟膏、ゲル、ペースト、クリーム、スプレー、ミスト、フォーム、ローション、油、ボーラス、舐剤、またはエアゾールの形態であり得る。
【００８５】
経口投与（例えば摂取による）に適した製剤は、それぞれが既定量の活性化合物を含有するカプセル剤、カシェ剤または錠剤等の個別の単位として；粉末もしくは顆粒として；水性もしくは非水性の液体中の溶液または懸濁液として；または水中油型液体エマルジョンもしくは油中水型液体エマルジョンとして；ボーラスとして；舐剤として；またはペーストとして、提供することができる。
【００８６】
錠剤は、場合によって１種以上の補助成分を用いて、慣用手段、例えば圧縮または成型により製造することができる。圧縮錠剤は、粉末もしくは顆粒等の自由流動形態にある活性化合物を、場合によって1種以上の結合剤（例えばポビドン、ゼラチン、アカシアガム、ソルビトール、トラガカントガム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）；増量剤もしくは希釈剤（例えばラクトース、微結晶セルロース、リン酸水素カルシウム）；滑沢剤（例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ）；崩壊剤（例えばデンプングリコレートナトリウム、架橋型ポビドン、架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウム）；界面活性剤もしくは分散剤もしくは湿潤剤（例えばラウリル硫酸ナトリウム）；および防腐剤（例えばp-ヒドロキシ安息香酸メチル、p-ヒドロキシ安息香酸プロピル、ソルビン酸）と混合し、適切な機械で圧縮することによって製造することができる。成型錠剤は、不活性の液体希釈剤で湿らせた粉末状にした化合物の混合物を適切な機械で成型することによって製造することができる。錠剤はコーティングを施したり刻み目を入れたりしてもよく、また、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロースを所望の放出プロファイルを提供するために比率を変えて用い、そこに含まれる活性化合物の徐放もしくは制御放出をもたらすように製剤化してもよい。錠剤は腸溶性コーティングを施すことができ、胃以外の消化管の部分で放出されるようにしてもよい。
【００８７】
局所投与（例えば経皮、鼻内、眼、口内、および舌下）に適した製剤は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エアゾール、またはオイルとして製剤化することができる。あるいはまた、製剤は、活性化合物と、場合によって１以上の賦形剤もしくは希釈剤とを含浸させた包帯または絆創膏等のパッチあるいはドレッシングを含み得る。
【００８８】
口内への局所投与に適した製剤としては、風味をつけた基剤（通常はスクロースおよびアカシアガムもしくはトラガカントガム）中に活性化合物を含有するロゼンジ；ゼラチンやグリセリン、もしくはスクロースやアカシアガム等の不活性基剤中に活性化合物を含有するトローチ；および適切な液体担体中に活性化合物を含有する洗口剤が挙げられる。
【００８９】
眼への局所投与に適した製剤としては、活性化合物を適切な担体、特に活性化合物のための水性溶媒に溶解または懸濁した点眼剤が挙げられる。
【００９０】
担体が固体である、鼻内投与に適した製剤は、吸い込むことで、すなわち鼻の近くに保持した粉末の容器から鼻内経路を通して急速吸入することで投与される、例えば約20〜約500μの範囲の粒子サイズを有する粗い粉末を含む。担体が液体である、例えば鼻内スプレー、点鼻薬として、あるいはネブライザーによるエアゾール投与で投与するのに適した製剤としては、活性化合物の水性もしくは油性の溶液が挙げられる。
【００９１】
吸入による投与に適した製剤としては、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロ−テトラフルオロエタン、二酸化炭素、または他の適切な気体等の適切な噴射剤を使用して、加圧したパックからエアゾールスプレーとして提供されるものが挙げられる。
【００９２】
皮膚を介した局所投与に適した製剤としては、軟膏、クリーム、およびエマルジョンが挙げられる。軟膏として製剤化する場合は、活性化合物を、場合によってパラフィン性または水混和性の軟膏基剤と共に用いてもよい。あるいはまた、活性化合物は、水中油型クリーム基剤と共にクリームに製剤化してもよい。必要に応じて、クリーム基剤の水相には、例えば少なくとも約30重量％の多価アルコール、すなわち、プロピレングリコール、ブタン-1,3-ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロールおよびポリエチレングリコールおよびこれらの混合物等の、2個以上のヒドロキシル基を有するアルコールが含まれる。局所製剤は、望ましくは皮膚もしくは他の罹患部位を通した活性化合物の吸収または浸透を増大させる化合物を含む。このような皮膚浸透促進剤の例としては、ジメチルスルホキシドおよび関連類似体が挙げられる。
【００９３】
局所エマルジョンとして製剤化する場合、油相は単に1種の乳化剤（あるいはエマルジェントとして知られている）を含んでいてもよく、あるいは少なくとも1種の乳化剤と脂肪もしくは油、または脂肪および油の双方との混合物を含んでいてもよい。好ましくは、親水性の乳化剤を、安定化剤として作用する親油性の乳化剤と共に含める。また、油および脂肪の双方を含めることが好ましい。同時に、乳化剤は、安定化剤と共に、もしくは安定化剤なしに、いわゆる乳化ワックスを構成し、該ワックスは油および／または脂肪と共に、クリーム製剤の油性分散相を形成する、いわゆる乳化軟膏基剤を構成する。
【００９４】
適切なエマルジェントおよびエマルジョン安定化剤としては、Tween 60、Span 80、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアレートおよびラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。製剤のために適切な油脂の選択は、医薬エマルジョン製剤に用いられるであろうほとんどの油への活性化合物の溶解性が非常に低い可能性があるため、所望の化粧特性を達成することに基づく。従って、クリームは好ましくは、チューブまたは他の容器からの漏れを避けるために適切な稠度を有し、あぶらっぽくなく、染色性がなく、洗い落としできる製品であるべきである。直鎖もしくは分岐鎖の一塩基性または二塩基性アルキルエステル、例えばジイソアジペート、イソセチルステアレート、ヤシ油脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、イソプロピルミリステート、デシルオレエート、イソプロピルパルミテート、ブチルステアレート、2-エチルヘキシルパルミテート、またはCrodamol CAPとして知られる分岐鎖エステルの混合物を用いることができ、最後に挙げた3種のものが好ましいエステルである。これらは必要とされる特性に応じて単独で、または組み合わせて用いることができる。
【００９５】
あるいはまた、白色軟パラフィンおよび／もしくは液体パラフィンまたは他の鉱油等の高融点脂質を用いることができる。
【００９６】
直腸投与に適した製剤は、例えばカカオ脂またはサリチル酸塩を含む適切な基剤を有する座薬として提供され得る。
【００９７】
膣内投与に適した製剤は、活性化合物に加え、当分野で適切であることが公知である担体を含有する、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームもしくはスプレー製剤として提供され得る。
【００９８】
非経口投与（例えば皮膚、皮下、筋肉内、静脈内および皮内を含む注射によるもの）に適した製剤としては、抗酸化剤、緩衝剤、防腐剤、安定化剤、静菌剤、および製剤を意図される受容者の血液と等張にする溶質を含み得る、水性および非水性の等張で、発熱物質フリーの無菌注射液；および懸濁化剤および増粘剤を含み得る水性および非水性の無菌懸濁液、および化合物を血液成分もしくは1以上の器官を標的とするように設計されるリポソームもしくは他の微粒子系が挙げられる。このような製剤において用いるために好適な等張性ビヒクルの例として、塩化ナトリウム注射液、リンガー溶液、または乳加リンガー液が挙げられる。典型的には、溶液中の活性化合物の濃度は、約1ng/ml〜約10μg/ml、例えば約10ng/ml〜約1μg/mlである。製剤は、単回投与量または複数回投与量を密閉した容器、例えばアンプルおよびバイアルで提供するものであってもよく、また使用直前に無菌の液体担体、例えば注射用水の添加のみを必要とする凍結乾燥状態で保存されていてもよい。即時注射液および懸濁液は、無菌の粉末、顆粒、および錠剤から調製することができる。製剤は、活性化合物を血液成分または1以上の器官を標的とするように設計されたリポソームまたは他の微粒子系の形態であり得る。
【００９９】
投与量
活性化合物、および活性化合物を含有する組成物の適切な投与量が患者によって異なり得ることは理解されるであろう。最適な投与量の決定は一般に、本発明の治療の何らかのリスクまたは有害な副作用に対する治療効果のレベルのバランスが関係するであろう。選択される投与量のレベルは、限定するものではないが、個々の化合物の活性、投与経路、投与時間、化合物の排出速度、治療期間、併用される他の薬物、化合物、および／または物質、患者の年齢、性別、体重、症状、全身の健康状態、既往歴を含む、様々な要因に依存するであろう。化合物の量および投与経路は、最終的には医師の裁量となるが、一般的には、投与量は、作用部位において実質的に有害もしくは有毒な副作用を引き起こさずに所望の効果を達成する局所濃度を達成し得るものであろう。
【０１００】
in vivoにおける投与は、治療の過程を通じて単回投与で、連続的もしくは断続的に（例えば適当な間隔をおいた分割用量で）実施することができる。最も効果的な投与手段および投与量の決定方法は、当業者に周知であり、治療に用いる製剤、治療の目的、治療される標的細胞、および治療される被験体によって異なるであろう。単回または複数回投与は、治療する医師によって選択される投与レベルおよびパターンで実施することができる。
【０１０１】
一般に、活性化合物の適切な投与量は、約100μg〜約250mg／kg（被験体の体重）／日の範囲である。活性化合物が塩、エステル、プロドラッグ等である場合、投与される量は親化合物に基づいて計算され、従って用いるべき実際の量は比例して増加する。
【０１０２】
癌
活性化合物で治療し得る癌の例としては、限定するものではないが、以下のものが挙げられる：癌腫、例えば膀胱、乳房、結腸(例えば結腸腺癌および結腸腺腫等の結腸直腸癌)、腎臓、表皮、肝臓、肺（例えば腺癌、小細胞肺癌および非小細胞肺癌）、食道、胆嚢、卵巣、膵臓（例えば膵外分泌腺癌）、胃、子宮頸部、甲状腺、前立腺、もしくは皮膚（例えば扁平上皮癌）の癌腫；リンパ系の造血系腫瘍、例えば白血病、急性リンパ性白血病、B細胞リンパ腫、T細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、毛様細胞リンパ腫、もしくはバーキットリンパ腫；骨髄系の造血系腫瘍、例えば急性および慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、もしくは前骨髄性白血病；甲状腺濾胞腺癌；間葉系の腫瘍、例えば線維肉腫または横紋筋肉腫；中枢もしくは末梢神経系の腫瘍、例えば星状細胞腫、神経芽細胞腫、神経膠腫もしくは神経鞘腫；黒色腫；精上皮腫；奇形癌；骨肉腫；色素性乾皮症（xenoderoma pigmentoum）；角質化棘細胞腫（keratoctanthoma）；甲状腺濾胞腺癌；またはカポジ肉腫が挙げられる。
【０１０３】
式(I)の化合物と共に（同時、もしくは異なる時間間隔で）投与し得る他の治療薬の例としては、限定するものではないが、トポイソメラーゼ阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、DNA結合剤および微小管阻害剤（チューブリン標的薬）、例えばシスプラチン、シクロフォスファミド、ドキソルビシン、イリノテカン、フルダラビン、5FU、タキサン、マイトマイシンCまたは放射線療法が挙げられる。活性化合物を他の治療と組み合わせる場合、2種以上の治療を個々に異なる投与スケジュールで、かつ異なる経路で投与することができる。
【０１０４】
上記の薬剤と本発明の化合物との併用は、一般的な技術常識および熟練した医師に知られた投与計画を用いて、投与量を選択するであろう医師の裁量に任される。
【０１０５】
式(I)の化合物を、1種、2種、3種、4種またはそれ以上、好ましくは1種または2種、好ましくは1種の他の治療薬との併用治療で投与する場合、これらの化合物を同時に、または連続して投与することができる。連続して投与する場合、それらは短い間隔で（例えば5〜10分間）、またはより長い間隔で（例えば1、2、3、4時間もしくはそれ以上あけて、または必要な場合はそれよりずっと長い時間をあけて）投与することができ、正確な投与計画は治療薬の性質に合わせる。
【０１０６】
本発明の化合物は、放射線療法、光力学的療法、遺伝子治療；外科手術および食事療法等の非化学療法的治療と組み合わせて投与してもよい。
【０１０７】
好適な化合物
好ましくは、式(I)の化合物は単量体である。式(I)の化合物が二量体の形態である場合、連結基は好ましくはフェニレン(例えばフェニル-4-エン)、C1-3アルキレン、-NH-または-O-であり、より好ましくはフェニレン(例えばフェニル-4-エン)、C1-3アルキレンまたは-O-である。連結基が2個のB基を連結する場合、これらは好ましくはC5-20アリール(例えばフェニル)であり得る。1つの基が双方の成分に対してBとして機能している場合、これは好ましくはフェニレン(例えば4-フェニレン)である。
【０１０８】
R1〜R6：
本発明の一群の実施形態において、R1およびR2は、それらが結合している環と一緒になって、3〜8員の炭素環または複素環を含む飽和もしくは不飽和の炭素環または複素環基を形成し、それぞれの炭素環または複素環は1以上の他の炭素環または複素環に縮合していてもよい。
【０１０９】
この群の実施形態において、R3、R4、R5およびR6はHであることが好ましい。
【０１１０】
R1およびR2は、式(I)の化合物においてそれらが結合している環と一緒になって、オルト-もしくはペリ-縮合した炭素環または複素環系を表すことができる。
【０１１１】
R1およびR2は、それらが結合している環と一緒になって、2もしくは3個の縮合炭素環、例えば置換されていてもよく、水素添加されていてもよいナフタレンまたはアントラセンを含む環系等の、完全に炭素環の縮合環系を表すことができる。
【０１１２】
あるいはまた、R1およびR2は、式(I)の化合物においてこれらが結合する環と一緒になって、アントラセン、またはアントラセンのモノ、ジ、トリ、テトラもしくはより多くの水素化誘導体等の、縮合三環系の環を表すこともできる。例えば、R1およびR2は、式(I)においてこれらが結合する環と一緒になって、アントラセン、1,4-ジヒドロアントラセンまたは1,4,9,10-テトラヒドロアントラセンを表す。
【０１１３】
R1およびR2は、式(I)においてこれらが結合する環と一緒になって以下を表すことができる：
【化５】
2009529028.tif 000008
【０１１４】
別の一群の実施形態において、R1、R2、R3、R4、R5およびR6は独立してH、C1-7アルキル、C5-20アリール、C3-20ヘテロシクリル、ハロ、エステル、アミド、アシル、スルホ、スルホンアミド、エーテル、チオエーテル、アゾおよびアミノから選択される。この群の実施形態において、R1、R2、R3、R4、R5およびR6は好ましくは独立してH、C1-7アルキル、C5-20アリールおよびエステルから選択される。これらのうち、HおよびC1-7アルキル(特にC1-3アルキル)が最も好ましい。
【０１１５】
この群の実施形態において、R1、R2、R3、R4、R5およびR6のうちの4つ、5つまたは6つは好ましくは水素であり、（あるとすれば）他の基はC1-7アルキル、C5-20アリール、C3-20ヘテロシクリル、ハロ、エステル、アミド、アシル、スルホ、スルホンアミド、エーテル、チオエーテル、アゾおよびアミノ、より好ましくはC1-7アルキル、C5-20アリールおよびエステル、最も好ましくはC1-7アルキル(特にC1-3アルキル)から選択される。R1、R2、R3、R4、R5およびR6のうちの2つがHでない場合、これらの基は好ましくは互いにメタまたはパラの位置にあり、より好ましくは互いにパラの位置にある。
【０１１６】
特に好ましい置換基のパターンの例としては、限定するものではないが、フェニル；1-メチル；および4-イソプロピルが挙げられる。
【０１１７】
A：
Aは窒素含有芳香環であり、この場合、該窒素環原子がルテニウム原子に結合し、該環が更に、窒素環原子に対してαもしくはβの単結合によって、または窒素環原子に対してαの-CH2-基によって、アゾ窒素に結合することが好ましい。
【０１１８】
窒素含有芳香環は、置換されていないことが好ましい。
【０１１９】
Aが-NRN1RN2-RN3-である場合、RN1およびRN2は独立してH、C1-7アルキルまたはC5-20アリールから選択されることが好ましい。RN1およびRN2の少なくとも一方がHであることがより好ましい。最も好ましくは、RN1およびRN2が共にHである。
【０１２０】
より好ましくは、環は窒素環原子に対してαの単結合によってアゾ窒素に結合する。窒素含有芳香環がピリジンまたはピラゾールであることが更に好ましい。
【０１２１】
B：
Bは、置換されていてもよいC5-20アリール、または置換されていてもよいC1-7アルキルであることが好ましい。より好ましくは、Bは置換もしくは非置換のフェニルまたはベンジルを表す。Bが置換フェニルである場合、-ORO1、-NRN1RN2、-NO2、C1-7アルキル、C5-20アリール［式中、RO1、RN1およびRN2は独立してH、C1-7アルキル、C3-20ヘテロシクリルもしくはC5-20アリールから選択される］から選択される基で置換されていることが最も好ましい。より好ましくは、Bは、-ORO1または-NRN1RN2［式中RO1、RN1およびRN2は独立してHもしくはC1-7アルキルである］で置換されたフェニルである。置換がパラ位にあることが更に好ましい。RO1はより好ましくはHである。RN1およびRN2はより好ましくはメチルである。
【０１２２】
X：
Xは好ましくはハロであり、より好ましくはIまたはClである。
【０１２３】
Yq-：
式(I)の化合物におけるYq-は対イオンであり、金属イオンを含む錯体が荷電している場合のみに化合物中に存在する。Yq-は、好ましくは例えばPF6-、BF4-、BPh4-またはCF3O2SO-等の非親核性アニオンである。それはI-であってもよい。
【０１２４】
一般的合成方法
本発明はまた、反応に好適な溶媒中で、Yq-の存在下に、もしくは後でYq-を添加して、式[(η6-C6(R1)(R2)(R3)(R4)(R5)(R6))RuX2]2の二量体ルテニウム錯体と式AN=NBの配位子とを反応させることを含む、本発明の化合物の製造方法を提供する[式中、R1、R2、R3、R4、R5、R6、X、A、BおよびYは本発明の化合物について上記で定義した通りである]。
【０１２５】
好ましい反応条件は以下を含む：
(a)  上記の出発物質の二量体ルテニウム錯体をMeOHもしくはMeOH/水の混合液中で撹拌し；
(b)  配位子をMeOHの溶液として添加し;
(c)  得られた溶液を室温で撹拌し；そして
(d)  式(NH4+)Yq-の化合物（例えばNH4PF6）のようなYq-供給源を添加して、沈殿した生成物を濾取する。
【０１２６】
二量体化合物は、当分野で開示されている技法を用い、類似の方法で製造することができる。
【０１２７】
以下の非限定的実施例によって本発明を説明する。
【実施例】
【０１２８】
一般的方法
材料：
出発物質[(η6-アレーン)RuCl2]2(アレーン＝p-シメン、テトラヒドロナフタレン(THN)、ベンゼン、ビフェニル、ヒドロキシエトキシベンゼン)は、文献(Bennett, M.A., Smith, A. K., J. Chem. Soc. Dalton Trans. 1974, (2), 233-241; Zelonka, R. A., Baird, M. C., J. Organometallic Chem., 1972, 35, (1), C43-C46; Soleimannejad, J. & White, C., 2005, Organometallics, 24, 2538-2541)に従って調製した。N,N-ジメチル-4-(2-ピリジルアゾ)アニリン(Azpy-NMe2)、アニリン、NaNO2、2-シアノエチルヒドラジン、N,N-ジメチルアニリン、オルト-リン酸、ベンゾキノン、2-ヒドラジノピリジンおよびNOHSO4はSigma-Aldrich社から購入し、そのまま使用した。使用するエタノールはMg/I2上で乾燥し、使用するメタノールはMg/I2上で乾燥するか、無水のものを使用した(Sigma-Aldrich社)。ルテニウム標準品(1000 ppm)はSigma Aldrich社から購入した。使用した他の試薬は全て、業者から入手してそのまま使用した。
【０１２９】
NMR分光法：
合成した化合物の性状解析のための1H NMR実験は全て、TBI[1H、13C、15N]プローブヘッドを備え、z磁場勾配を有するBruker社製DMX 500MHz分光計、またはBruker社製DPX 360MHz分光計のいずれかで記録した。プロトンシグナルは、残存する溶媒のピーク（δ 7.27 (クロロホルム)、2.07 (アセトン)および2.52 (DMSO)）に対して較正した。性状解析のための2D 1H-TOCSYおよび2D 1H COSY実験はBruker社製DMX 500MHz分光計で実施した。性状解析のための2D-1H ROESY実験はTXI[1H、13C、15N]プローブヘッドを備え、z磁場勾配を有するBruker社製AVA 600mHz分光計で記録した。pH滴定実験は全てBruker社製AVA 600MHz分光計で記録し、内部標準としてジオキサン(δ 3.75、100％ D2O中)を添加した。水は1D ダブルパルス磁場勾配スピンエコー（Double Pulse Field Gradient Spin Echo：DPFGSE)実験を用いて抑制した。水溶液の挙動はクリオプローブを備えたBruker社製bio 600 MHz分光計で記録し、水は1D ダブルパルス磁場勾配スピンエコー(DPFGSE)実験を用いて抑制した。化学シフトはジオキサン(内部標準δ 3.75、90% H2O/10% D2O中)との比較で測定した。他に記載しない限り、全てのスペクトルは298Kで5mmのクォーツチューブを用いて記録した。NMRデータは全てXwin-NMR (Version 2.0 Bruker UK Ltd)を使用して処理した。
【０１３０】
元素分析：
元素分析は、エディンバラ大学でExeter analytical社製の元素分析装置CE440を使用して実施した。
【０１３１】
エレクトロスプレー質量分析：
ESI-MSは、Micromass Platform II 質量分析装置で測定し、溶液を直接注入した。キャピラリー電圧を3.5 Vとし、用いたコーン電圧は溶液によって変えた(典型的には5〜15Vの間で変動)。試料の温度は約383Kであった。
【０１３２】
ICP-AES：
水溶液中のルテニウム含量は、Thermo Jarrell Ash IRIS ICP-AES装置を用いてICP-AESによって決定した。まず、ルテニウム標準品を流してキャリブレーション曲線を描き、240.272および349.549 nmでの発光を、このキャリブレーションと比較してルテニウム濃度を測定した。
【０１３３】
ヨウ化物二量体の合成
これらは、水中の過剰量のKIを添加することによって、対応する塩化物二量体から容易に合成される。
【０１３４】
[(η6-p-シメン)RuI2]2
二量体[(η6-p-シメン))RuCl2]2 (0.65g、1mmol)を水（250ml）中で1時間還流した。この溶液を熱濾過して、濾液にKI(4.45g、27mmol)を添加した。赤褐色の沈殿物が速やかに形成された。これを濾取してエタノールとエーテルで洗浄した。収量：841mg (86.0％) 1H NMR (DMSO-d6) δ 5.87 (dのd, 4H), 3.16 (七重線, 1H), 2.40 (s, 3H), 1.22 (d, 6H)。
【０１３５】
[(η6-ビフェニル)RuI2]2
二量体[(η6-ビフェニル)RuCl2]2 (0.3g、0.46mmol)を水(250ml)中で30分間、室温で撹拌した。この溶液を濾過して、濾液にKI(2.12g、13mmol)を添加した。赤褐色の沈殿物が速やかに形成された。これを濾取してエタノールとエーテルで洗浄した。収量：388mg(82.9％) 1H NMR (DMSO-d6) δ 7.84 (d, 2H), 7.54-7.46 (m, 3H), 6.66 (d, 2H), 6.38 (t, 1H), 6.12 (d, 2H)。
【０１３６】
配位子の合成
用いるキレート化剤のアゾ配位子は先に公表されている手順に従って合成し (Suminov, S. I., Zhurnal Organicheskoi Khimii, 1968, 4, (10), 1864-5; Gorelik, M. V.; Lomzakova, V. I., Zhurnal Organicheskoi Khimii, 1986, 22, (5), 1054-61; Betteridge, D.; John, D., Analyst (Cambridge, United Kingdom), 1973, 98 (1167), 377-89; Krause, R. A.; Krause, K., Inorganic Chemistry, 1980, 19, (9), 2600-3)、NMRおよびESI-MSによって性状解析した。
【０１３７】
2-フェニルアゾピリジン(1)
2-アミノピリジン(5.49g、0.0583mol)の一部を、5mlベンゼンを含む30ml水中のNaOH (27.06g、0.677mol)に添加した。混合液を油浴上で温めながら15分間かけてニトロソベンゼン(6.08g、0.0567mol)を添加した。混合液を還流しながら更に10分間加熱し、次いでトルエン100mlずつで3回抽出した。回収した有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、脱色用活性炭で処理した。ロータリーエバポレーターでトルエンを除去し、得られた固体をアルゴン下で減圧乾燥した。この固体を500mlの加温した石油エーテル(40〜60℃)に溶解し、褐色の残渣をデカンテーションで除いた。この溶液をドライアイスの容器中で一晩冷却した。再結晶工程を2回繰り返したが、これらの場合には、再結晶に用いる石油エーテルの体積を50mlまで減らした。赤色の固体が得られ、これを更に精製することなく次の合成のために用いた。収量：3.773g(36.3％)。1H NMR (CDCl3): δ 8.76 (1H, d), 8.08-8.05 (2H, m), 7.93 (1H, t), 7.85 (1H, d) (3H, m), 7.42 (1H, t,) ESI-MS: m/z 184.2 (M+)。
【０１３８】
4-フェノール-アゾピリジン(2)
ベンゾキノン(0.493g、4.56mmol)を50mlの水と3.6mlの60％過塩素酸の溶液に溶解した。8mlの水に溶解したヒドラジノピリジン(0.504g、4.62mmol)を滴下すると、溶液が次第に褐色／橙色に変化した。この溶液を室温で1時間撹拌し、濾過して橙色の結晶質沈殿物を得た。沈殿物を25mlのメタノールおよび1.5mlのギ酸に溶解し、再沈殿が生じるまで混合液中にアンモニアガスを通気した。生成物を濾取し、減圧下で一晩放置して乾燥させた。濾液の溶媒の体積を減らすことで2回目の生成物を得た。収量：213mg(23.36％)。1H NMR (DMSO-d6) δ 8.73 (d, 1H), 8.13 (t, 1H), 7.91 (d, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.61 (t, 1H), 7.01 (d, 2H)。ESI-MS: m/z 200.2 (M+)。
【０１３９】
3-アミノ-ピラゾリン塩酸(3)
金属ナトリウム(0.096g、4.17mmol)を15mlの無水エタノールに添加した。2-シアノエチルヒドラジン(2.5g、29.4mmol)を滴下し、混合液を還流しながら4時間加熱した。反応混合液を放置して冷却し、50mlの37％ HClを滴下した。反応混合液が緑／黄色に変化し、白色の沈殿がフラスコの底部に形成された。フラスコを氷で囲んで冷却状態を保ち、溶液をフリットを通して吸引濾過した。粗生成物を酸性化した水に溶解すると、不純物のNaClが析出した。これらの塩を濾過によって除去し、ロータリーエバポレーターで水分を除去して、白色固体の生成物を減圧下で一晩乾燥させた。収量：2.48g(68％)。1H NMR (DMSO-d6) δ 7.09 (br s, 1H), 3.42 (t, 2H), 2.85 (t, 2H)。
【０１４０】
3-アミノ-1-ニトロソ-2-ピラゾリン(4)
3-アミノ-ピラゾリン塩酸(3)(1g、8.23mmol)を8mlの酢酸に懸濁し、フラスコを氷で囲んで冷却した。NaNO2(0.57g、8.23mmol)を1mlの水に溶解し、これを冷却した溶液中に70分間かけて滴下した。溶液を0℃で4時間撹拌した。溶媒を除去し、橙色の固体を3mlの水に再溶解した。フラスコを氷で囲んで冷却状態を保ち、混合液を吸引濾過した。得られた橙色の粉末を減圧下で一晩乾燥させた。収量：204mg(22％)。ESI-MS: m/z 114.6 (M+), 84.6 (M-NO)。
【０１４１】
3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール(5)
3-アミノ-1-ニトロソ-2-ピラゾリン(4)(353mg、3.07mmol)を3mlのo-リン酸に溶解し、25℃で撹拌した。この混合液に、温度が約313Kを超えないようにしながら、2.4mlの18M H2SO4をゆっくり添加した。混合液の泡立ちが止まったところで、0.98gのH2SO4中の0.98gの40重量％ NOHSO4の溶液を1時間かけて添加した。続いて反応液を48〜50℃で1.5時間撹拌し、次いでこれを35gの氷の上に注いだ。N,N-ジメチルアニリン(0.361g、3mmol)を20mlの水に溶解した。この溶液にジアゾ化した混合液を滴下し、炭酸ナトリウム（飽和溶液）の添加によってpHを4〜5の間に維持した。黄色の溶液を濾過し、沈殿を水で洗浄した。黄色の固体を減圧下で一晩乾燥させた。収量：375mg(57％)。1H NMR (CDCl3) 1H NMR (D2O) δ8.05 (d, 2H), 7.84 (d, 1H), 7.75 (d, 2H), 6.76 (d, 1h), 3.37 (s, 6H)。ESI-MS: m/z 215.5 (M+)。
【０１４２】
N,N-ジメチル-4-(2-ピリジルアゾ)-1-ニトロ-アニリン(6)
N,N-ジメチル-4-(2-ピリジルアゾ)アニリン(Azpy-NMe2、200mg、0.88mmol)をフラスコに入れ、氷／食塩／水中で冷却した。撹拌しながら0.42mlの18M H2SO4を滴下し、混合液を続いて1時間撹拌した。0.56mlの70％ HNO3および0.56mlの18M H2SO4の溶液を氷／食塩／水中で冷却し、混合液に滴下して、常に冷却しながら2時間撹拌した。0.06mlの氷水を添加し、続いて0.45mlの45％ NH3OHを滴下して反応を停止させた。生成物を水相からクロロホルム中に抽出した。溶媒を除去すると油性の生成物が残り、これを最小量のエーテルに溶解し、これをかきとって橙色の固体を得た。この粗生成物を、溶離用溶媒として酢酸エチル：ヘキサン50：50混合溶媒、およびシリカを用いたカラムクロマトグラフィーによって精製した。収量：60.5mg(25.34％)。1H HMR (CDCl3) δ 8.74 (s, 1H), 8.57 (d, 1H), 8.18 (dのd, 1H), 7.92 (t, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.41 (t, 1H), 7.11 (d, 1H)。ESI-MS: m/z 271.6 (M+)。
【０１４３】
ルテニウム錯体の合成
本発明の錯体のいくつかは、以下の構造(i)および(ii)によって表すことができる。
【化６】
2009529028.tif 000009
【０１４４】
[Ru(bip)(2-フェニル-アゾピリジン)I]PF6(7)
二量体[RuI2(ビフェニル)]2(100mg、0.1mmol)を80mlの75％メタノールに溶解し、2時間加熱還流した。20mlのメタノールに溶解した2-フェニルアゾピリジン(1)(37.5mg、0.2mmol)を滴下すると、溶液は次第に褐色から褐色／紫色に変化した。この溶液を更に2時間還流し、熱濾過し、次いでロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約15mlまで減らした。次にNH4PF6(160mg、1mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫に2時間置いた。黒色粉末の生成物が沈殿し、これを濾取して冷エタノール、次いでエーテルで洗浄した。収量：94.1mg(66.1％)。1H NMR (DMSO-d6) δ 9.45 (d, 1H), 8.93 (d, 1H), 8.41 (t, 1H), 7.94 (d, 2H), 7.64-7.56 (m, 3H), 7.60-7.45 (m, 5H), 7.43-7.33 (m, 2H), 6.89 (d, 1H), 6.75 (t, 1H), 6.70-6.54 (m, 3H)。ESI-MS m/z 566.1 (M+)。
【０１４５】
[Ru(p-シメン)(Azpy-NMe2)I]PF6(8)
二量体[RuI2(p-シメン)]2(54.8mg、0.051mmol)を20mlのメタノールに溶解し、溶液が透明になるまでおよそ40℃に加熱した。10mlのメタノールに溶解したAzpy-NMe2(23mg、0.102mmol)を滴下すると、溶液は速やかに褐色から暗青色に変化した。この溶液を室温で3時間撹拌した。ロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約10mlまで減らした。次にNH4PF6(83mg、0.51mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫に一晩置いた。黒色微結晶の生成物が沈殿し、これを濾取してエーテルで洗浄した。収量：40.9mg(68.2％) (実測値：C, 37.74; H, 3.25; N, 7.40。RuC23H27N4IPF6についての計算値：C, 37.66; H, 3.85; N, 7.64)。1H NMR (CDCl3) δ 9.17 (d, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.15 (d, 2H), 8.03 (t, 1H), 7.54 (t, 1H), 6.77 (d, 2H), 6.05 (d, 1H), 5.81 (t, 2H), 5.68 (d, 1H), 3.29 (s, 6H), 2.70-2.54 (m, 4H), 1.04 (dのd, 6H)。ESI-MS m/z 589.3 (M+)。
【０１４６】
[Ru(ビフェニル)(Azpy-NMe2)Cl]PF6(9)
二量体[RuCl2(ビフェニル)]2(105.1mg、0.161mmol)を40mlのメタノールおよび10mlの水の溶液に溶解した。溶液をアルゴン下で2時間還流した。5mlのメタノールに溶解したAzpy-NMe2(78.15mg、0.345mmol)を滴下すると、溶液は速やかに褐色から非常に暗い青色に変化した。混合液を熱濾過し、撹拌しながら放置して室温まで冷却させた。30分後、ロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約15mlまで減らした。次にNH4PF6(187mg、1.14mmol)を添加して溶液を冷蔵庫に一晩置いた。黒色の結晶性粉末が沈殿し、これを濾取し、濾液が青色になるまでメタノールで洗浄した。収量：130mg(61.1％) (実測値：C, 45.31; H, 3.56; N, 8.44。RuC25H24N4ClPF6についての計算値：C, 45.31; H, 3.61; N, 8.46)。1H NMR ((CD3)2CO): δ 9.25 (1H, d), 8.36 (1H, d), 8.29 (1H, t), 8.22 (2H, d), 7.75-7.71 (2H, m), 7.60-7.55 (2H, m), 7.54-7.48 (2H, t), 6.91 (2H, d), 6.75 (1H, d),  6.65 (1H, d), 6.57 (2H, dのd), 6.38 (1H, t), 3.36 (6H, s)。
【０１４７】
[Ru(ビフェニル)(Azpy-NMe2)I]PF6(10)
二量体[RuI2(ビフェニル)]2(100mg、0.1mmol)を80mlの75％メタノールに溶解し、加熱して2時間還流した。20mlのメタノールに溶解したAzpy-NMe2(44.4mg、0.2mmol)を滴下すると、溶液は速やかに褐色から暗青色に変化した。溶液を更に1時間還流し、熱濾過し、次いでロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約15mlまで減らした。次にNH4PF6(160mg、1mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫に1時間置いた。黒色粉末の生成物が沈殿し、これを濾取して冷エタノール、次いでエーテルで洗浄した。収量：121mg(80.2％)。1H NMR (DMSO-d6) δ9.35 (d, 1H), 8.37 (d, 1H), 8.15 (t, 1H), 8.07 (d, 2H), 7.51-7.34 (m, 5H), 6.86-6.78 (m, 3H), 6.68-6.48 (m, 4H), 3.27 (s, 6H)。ESI-MS m/z 602.9 (M+)。
【０１４８】
[Ru(p-シメン)(4-フェノール-アゾピリジン)Cl]PF6(11)
二量体[RuCl2(p-シメン)]2(40mg、0.048mmol)を15mlのメタノールに溶解し、溶液が透明になるまで室温で撹拌しながら放置した。10mlのメタノールに溶解した4-フェノール-アゾピリジン(2)(21mg、0.096mmol)を滴下すると、溶液は次第に褐色から黄色がかった深い褐色／赤色に変化した。溶液を室温で3時間撹拌した。ロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約10mlまで減らした。次にNH4PF6(80mg、0.49mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫に一晩置いた。黒色粉末が沈殿し、これを濾取してエーテルで洗浄した。生成物を減圧下で一晩乾燥させた。収量：50mg(84.7％)。1H NMR (DMSO-d6) δ 9.49 (d, 1H), 8.55 (d, 1H), 8.37, (t, 1H), 8.12 (d, 2H), 7.80 (t, 1H), 6.99 (d, 2H), 6.40 (d, 1H), 6.16 (t, 2H), 6.06 (d, 1H), 2.37 (七重線, 1H), 2.23 (s, 3H), 0.88 (dのd, 6H)。
【０１４９】
[Ru(ビフェニル)(4-フェノール-アゾピリジン)Cl]PF6(12)
二量体[RuCl2(ビフェニル)]2(30mg、0.05mmol)を、40mlのメタノールおよび10mlの水の溶液に溶解した。溶液をアルゴン下で2時間還流した。4mlのメタノールおよび1mlのH2Oに溶解した4-フェノール-アゾピリジン(2)(20mg、0.1mmol)を滴下すると、溶液は速やかに褐色から黄色がかった深い褐色／赤色に変化した。混合液を熱濾過し、撹拌しながら放置して室温まで冷却させた。30分後、ロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約15mlまで減少させた。次にNH4PF6(84mg、0.5mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫に一晩置いた。褐色微結晶の結晶生成物が沈殿し、これを濾取してエーテルで洗浄した。生成物を減圧下で一晩乾燥させた。収量：45mg(46％) 1H NMR (DMSO-d6) δ 9.41 (d, 1H), 8.63 (d, 1H), 8.36 (t, 1H), 7.99 (d, 2H), 7.74 (t, 1H), 7.63 (d, 2H), 7.54 (t, 1H), 7.46 (t, 2H), 6.90 (d, 2H), 6.79 (d, 2H), 6.78 (d, 2H), 6.57 (t, 1H), 6.49 (t, 1H), 6.30 (t, 1H)。
【０１５０】
[Ru(ビフェニル)(4-フェノール-アゾピリジン)I]PF6(13)
二量体[RuI2(ビフェニル)]2(100mg、0.1mmol)を80mlの75％メタノールに溶解し、加熱して2時間還流した。20mlのメタノールに溶解させた4-フェノール-アゾピリジン(2)(39.2mg、0.2mmol)を滴下すると、溶液は速やかに褐色から濃い茶色がかった黄色に変化した。溶液を更に1時間還流し、熱濾過し、次いでロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約15mlまで減らした。次にNH4PF6(160mg、1mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫に一晩置いた。黒色粉末の生成物が沈殿し、これを濾取して冷エタノール、次いでエーテルで洗浄した。収量：56.8mg(39.1％)。1H NMR (DMSO-d6) δ 9.30 (d, 1H), 8.3 (d, 1H), 8.27 (t, 1H), 7.95 (d, 2H), 7.60 (t, 1H), 7.52-7.45 (m, 3H), 7.41-7.30 (m, 2H), 6.84 (t, 3H), 6.69 (t, 1H), 6.63-6.51 (m, 3H)。ESI-MS m/z 582.1 (M+)。
【０１５１】
[Ru(p-シメン)(3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール)Cl]PF6(14)
二量体[RuCl2(p-シメン)]2(103mg、0.17mmol)を30mlのメタノールに溶解し、溶液が透明になるまで室温で撹拌しながら放置した。10mlのメタノールに溶解した3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール(5)(69mg、0.32mmol)を滴下すると、溶液は速やかに褐色から深い紫色に変化した。溶液を室温で1時間撹拌した。ロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約10mlまで減らした。次にNH4PF6(103mg、0.63mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫に一晩置いた。黒色粉末が沈殿し、これを濾取してエーテルで洗浄した。生成物を減圧下で一晩乾燥させた。収量：126mg(62.4％)。1H NMR (CDCl3) δ 8.02 (d, 2H), 7.95 (d, 1H), 7.07 (d, 1H), 6.77 (d, 2H), 6.34 (dのd, 2H), 5.68 (dのd, 2H), 3.22 (s, 6H), 2.4-2.33 (m, 4H), 0.92 (dのd, 6H)。
【０１５２】
[Ru(ビフェニル)(3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール)Cl]PF6(15)
二量体[RuCl2(ビフェニル)]2(100mg、0.17mmol)を40mlのメタノールおよび10mlの水の溶液に溶解した。溶液をアルゴン下で2時間還流し、熱濾過して少量の黒色残渣を除去した。10mlのメタノールに溶解した3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール(5)(74mg、0.35mmol)を滴下すると、溶液は速やかに橙色／褐色から深い紫色に変化した。溶液を撹拌し、3時間放置して室温まで冷却させた。ロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約20mlまで減らした。次にNH4PF6(134mg、82mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫に一晩置いたところ、その間に暗色の粉末が沈殿し、溶液は緑色に変化した。この生成物を濾取し、エーテルで洗浄した。生成物を減圧下で一晩乾燥させた。収量：153mg(67.15％)(実測値：C, 42.97; H, 3.50; N, 11.70。RuC23H23N5ClPF6についての計算値：C, 42.36; H, 3.83; N, 11.67)。1H NMR (アセトン-d6) δ 8.21 (d, 1H), 8.04 (d, 2H), 7.71-7.34 (m, 5H), 7.29 (d, 1H), 6.81 (d, 2H), 6.71 (d, 1H), 6.66-6.55 (m, 2H), 6.52 (t, 1H), 6.31 (t, 1H), 3.25 (s, 6H)。
【０１５３】
[Ru(ビフェニル)(3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール)I]PF6(16)
二量体[RuI2(ビフェニル)]2(100mg、0.1mmol)を80mlの75％メタノールに溶解し、加熱して3時間還流した。20mlのメタノールに溶解した3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール(5)(42.4mg、0.2mmol)を滴下すると、溶液は速やかに褐色から暗い紫色に変化した。溶液を更に1時間還流し、熱濾過し、次いでロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約20mlまで減らした。次にNH4PF6(160mg、1mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫に1時間置いた。褐色粉末の生成物が沈殿し、これを濾取して冷エタノール、次いでエーテルで洗浄した。収量：134mg(90.1％)。1H NMR (DMSO-d6) δ 8.07 (s, 1H), 7.87 (d, 2H), 7.47-7.32 (m, 5H), 7.25 (s, 1H), 6.73 (d, 2H), 6.64 (s, 1H), 6.47-6.30 (m, 4H), 3.14 (s, 6H)。ESI-MS m/z 598.1 (M+)。
【０１５４】
[Ru(ベンゼン)(3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール)Cl]PF6(17)
二量体[RuCl2(ベンゼン)]2(50mg、0.1mmol)を30mlのメタノールに溶解し、溶液が透明になるまで室温で撹拌しながら放置した。15mlのメタノールに溶解した3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール(5)(42.3mg、0.2mmol)を滴下すると、溶液は速やかに褐色から深い紫色に変化した。溶液を室温で2時間撹拌した。ロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約10mlまで減らした。次にNH4PF6(117mg、0.7mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫中に一晩放置した。次いで体積を約10mlまで減らすと、黒色粉末が沈殿した。これを濾取してエーテルで洗浄した。生成物を減圧下で一晩乾燥させた。収量：92mg(80.00％)。1H NMR (アセトン-d6) δ 8.31 (d, 1H), 8.21 (d, 2H), 7.31 (d, 1H), 6.96 (d, 2H), 6.29 (s, 6H)。
【０１５５】
[Ru(THN)(3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール)Cl]PF6(18)
二量体[RuCl2(THN)]2(30mg、0.049mmol)を15mlのメタノールに溶解し、溶液が透明になるまで室温で撹拌しながら放置した。5mlのメタノールに溶解した3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール(5)(21mg、0.098mmol)を滴下すると、溶液は速やかに橙色から深い紫色に変化した。溶液を室温で1時間撹拌した。ロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約半分まで減らした。次にNH4PF6(166mg、1.020mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫中に一晩置いた。黒色粉末が沈殿し、これを濾取してエーテルで洗浄した。生成物を減圧下で一晩乾燥させた。収量：46mg(74.62％)。1H NMR (CDCl3) δ 8.15 (m, 3H), 7.21 (d, 1H), 6.93 (d, 2H), 6.35 (d, 1H), 6.0-5.8 (m, 3H), 3.0-1.5 (m, 8H)。
【０１５６】
[Ru(THN)(4-フェノール-アゾ ピリジン)Cl]PF6(19)
二量体[RuCl2(THN)]2(30.2mg、0.05mmol)を15mlのメタノールに溶解し、溶液が透明になるまで室温で撹拌しながら放置した。10mlのメタノールに溶解した4-フェノール-アゾピリジン(2)(21.4mg、0.11mmol)を滴下すると、溶液は橙色から黄色がかった深い褐色／赤色に変化した。溶液を室温で2時間撹拌した。ロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約5mlまで減らした。次にNH4PF6(40mg、0.25mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫中に一晩置いた。黒色粉末が沈殿し、これを濾取してエーテルで洗浄した。生成物を減圧下で一晩乾燥させた。収量：45mg(73.41％)。実測値：C, 40.79; H, 3.19; N, 6.78。RuC21H21N3ClOPF6についての計算値：C, 41.15; H, 3.45; N, 6.86。1H NMR (DMSO-d6) δ 9.49 (d, 1H), 8.71 (d, 1H), 8.45 (t, 1H), 8.16 (d, 2H), 7.94 (t, 1H), 7.08 (d, 2H), 6.39 (d, 1H), 6.25 (t, 1H), 6.095 (t, 1H), 6.06 (d, 1H), 2.71-2.62 (m, 1H), 2.62-2.5 (m, 1H), 2.34-2.25 (m, 1H), 2.15-2.06(m, 1H), 1.62-1.49 (m, 2H), 1.33-1.11 (m, 2H)。
【０１５７】
[Ru(p-シメン)(Azpy-NMe2NO2)I]PF6(20)
二量体[RuI2(p-シメン)]2(12.5mg、0.025mmol)を10mlのメタノールに溶解し、溶液が透明になるまで約313Kに加熱した。5mlのメタノールに溶解したN,N-ジメチル-4-(2-ピリジルアゾ)-1-ニトロ-アニリン(6)(13.4mg、0.05mmol)を滴下すると、溶液は速やかに褐色から鮮やかなピンク色に変化した。溶液を室温で3時間撹拌し、次いで1時間還流した。溶液を室温まで冷却し、濾過し、ロータリーエバポレーターでメタノールを除去して溶媒の体積を約5mlまで減らした。次にNH4PF6(40mg、0.25mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫中に一晩置いた。黒色微結晶の生成物が沈殿し、これを濾取してエーテルで洗浄した。収量：17.6mg。1H NMR (DMSO-d6) δ 9.66 (s, 1H), 8.27 (d, 2H), 8.46-8.36 (m, 2H), 7.88 (t, 1H), 7.47 (d, 1H), 6.32 (s, 6H), 3.17 (s, 6H)。
【０１５８】
[Ru(p-シメン)(4-フェノール-アゾピリジン)I]PF6(21)
二量体[RuI2(p-シメン)]2(100mg、0.1mmol)を50mlのメタノールに溶解し、溶液が透明になるまで約40℃まで穏やかに加熱した。10mlのメタノールに溶解した4-フェノール-アゾピリジン(2)(40.8mg、0.2mmol)を滴下すると、溶液は褐色から濃い褐色／黄色に次第に変化した。溶液を室温まで冷却し、3時間撹拌し、濾過して、ロータリーエバポレーターで体積を約10mlまで減らした。次にNH4PF6(160mg、0.1mmol)を添加し、溶液を冷蔵庫中に一晩置いた。濾過した後、黒色微結晶の生成物を得た。収量：12mg。1H NMR (DMSO-d6) δ 9.87 (d, 1H), 8.92 (d, 1H), 8.78-8.65 (m, 3H), 8.07 (t, 1H), 7.37 (d, 2H), 6.83 (d, 1H), 6.64-6.51 (m, 3H), 3.18 (七重線, 1H), 3.11 (s, 3H), 1.53 (dd, 6H)。ESI-MS m/z 562.2 (M+)。
【０１５９】
[(η6-C6H5OCH2CH2OH)Ru(azpy-NMe2)I]I(22)
二量体[(η6-C6H5OCH2CH2OH)RuI2]2(121mg、0.12mmol)を50mlのメタノールに溶解し、30分間撹拌した。メタノール(20ml)に溶解したAzpy-NMe2(54mg、0.24mmol)を滴下すると、溶液は速やかに深い赤色に変化した。溶液は次第に紫色、次に青色に変化した。この混合液を室温で3時間撹拌した。溶液を濾過し、ロータリーエバポレーターでメタノールを除去して体積を5mlまで減らした。溶液を冷蔵庫中に1時間置き、得られた青銅色の沈殿を濾取し、ジエチルエーテルで洗浄した。生成物を減圧下で一晩乾燥させた。収量：93.9mg。1H NMR (DMSO-d6) δ 9.45 (d, 1H), 8.45 (d, 1H), 8.20 (d, 2H), 7.60 (t, 1H), 6.95 (d, 2H), 6.35 (t, 1H), 6.25 (t, 1H), 6,20 (d, 1H), 6.05 (d, 1H), 5.0 (t, 1H), 4.15-3.95 (m, 2H), 3.65 (m, 2H), 3.25 (s, 6H)。
【０１６０】
[Cl(η6-p-cym)RuLBRu(η6-p-cym)Cl](PF6)2(23)
【化７】
2009529028.tif 000010
【０１６１】
適切な二核形成性ビズアゾピリジン配位子(25mg、0.065mmol)をメタノール(10mL)に溶解し、メタノール(20mL)中のルテニウム二量体[(η6-p-シメン)RuCl2]2(40mg、0.065 mmol)の溶液に滴下した。光を遮断し、アルゴン雰囲気下に室温で撹拌する間に、溶液は速やかに赤から青に変色した。2時間撹拌した後、溶媒の体積を減らし、NH4PF6(107mg、0.65mol)を添加した。冷蔵庫で一晩保存した後に得られる青色の微結晶沈殿物を濾取し、ジエチルエーテルで洗浄し、減圧下で一晩乾燥させた。収量：64mg(78％)(実測値：C, 38.24; H, 2.48; N, 8.00。Ru2Cl2C42H45N7P2F12についての計算値：C, 41.66; H, 3.75; N, 8.10) 1H NMR (メタノール-d4): δ 9.45 (d, 2H), 8.65 (d, 2H), 8.45 (t, 2H), 8.35 (d, 4H), 7.85 (t, 2H), 7.65 (d, 4H), 6.30 (d, 4H), 6.10 (m, 4H), 2.55 (七重線, 2H), 2.35 (s, 6H), 1.00 (m, 12H)。 ESI MS: Ru2C42H45N7Cl22+ [M2+]についての計算値 m/z 460.3, 実測値 459.7。
【０１６２】
化合物の解析
紫外および可視(UV-Vis) 分光法：
Perkin-Elmer社製 Lambda-16 UV-Vis 分光光度計を光路長1cmのクォーツ製キュベット(0.5 mL)およびPTP1 Peltier 温度制御装置と共に使用した。スペクトルは25℃の水溶液について800〜200nmで記録した。スペクトルはWindows 95用のUVWinlab ソフトウェアを用いて処理した。
【０１６３】
水溶液化学：
錯体をH2O/D2Oに溶解し、pHを測定し、multi-zg kinetic実験プログラムを用いて一定の温度で均一の時間間隔にてNMRスペクトルを記録した。測定の後、NMR用溶液の一部についてエレクトロスプレー質量分析を実施した。
【０１６４】
細胞毒性研究：
A2780およびA549癌細胞系に対する増殖阻害活性について化合物を試験した。それぞれの薬物を6種の異なる濃度(100μM、50μM、10μM、5μM、1μMおよび0.1μM)で活性について試験し、各濃度をシスプラチン対照と比較して三重反復で試験した。
【０１６５】
A2780癌細胞系は、5％ウシ胎児血清、1％ペニシリン／ストレプトマイシンおよび2mM L-グルタミンを添加したRPMI培地中で細胞を増殖させて維持した。およそ70〜80％の集密度となったところで、0.25％トリプシン／EDTAを用いて細胞をバラバラにした。細胞を37℃、5％ CO2、高湿度下でインキュベートし続けた。A549癌細胞系は、10％ウシ胎児血清、1％ペニシリン／ストレプトマイシンおよび2mM L-グルタミンを添加したDMEM培地中で細胞を増殖させて維持した。およそ70〜80％の集密度となったところで、0.25％トリプシン／EDTAを用いて細胞をバラバラにした。細胞を37℃、5％ CO2、高湿度下でインキュベートし続けた。
【０１６６】
第1日目に、A2780癌細胞を50000個／ウェル(±10％)の密度でまいた。第二日目に、A549癌細胞を20000個／ウェル(±10％)の密度でまいた。第三日目、試験化合物をDMSOに溶解して20mMのストック溶液とし、DMSOで連続希釈を実施して、DMSO中10mM、2mM、1mM、0.2mMおよび0.02mMの薬物濃度を得た。これらをウェルに添加し、薬物および培地の総体積を200μlとして6種の試験濃度、0.5％（v/v）のDMSOの最終濃度を得た。細胞を薬物に24時間曝露し、次いで薬物を除去した後、新しい培地を添加し、細胞を回復時間として96時間インキュベートした。残存するバイオマスをスルホローダミンBアッセイで評価した。次に50μlの50％(w/v) TCAを用いて細胞を固定し、4℃で1時間インキュベートした。バイオマスを1％酢酸中の0.4％(w/v) スルホローダミンB 100μlで染色した。染料をTris緩衝液で可溶化し、BMG Fluostar マイクロプレートリーダーを用い、595 nmでの吸光度を読み取った。690nmのベースライン補正値を数値から差し引いた。100％細胞生存率の吸光度は、その薬物について三重反復して投与した0.1μMについての平均吸光度に基づいた。IC50値はXL-Fit version 4.0を使用して算出した。
【０１６７】
結果
紫外および可視（UV-Vis）分光法：
【表１】
2009529028.tif 000011
【０１６８】
他に記載のない限り、溶液化学は1H NMRによって追跡した。
【０１６９】
水溶液化学：
[Ru(p-bip)(2-フェニル-アゾピリジン)I]PF6(7)
条件：100μM、95％ D2O、5％ MeOD、pH = 7、37℃、24時間
この実験は、錯体7の細胞試験条件を模倣するように設計された。24時間で加水分解は生じなかったが、錯体からアレーンがわずかに（約5％）消失した。
【０１７０】
[Ru(p-シメン)(Azpy-NMe2)I]PF6(8)
条件：飽和溶液(濾過後)、90％ H2O / 10％ D2O、pH = 7.2、25℃、24時間
25℃で24時間の間に変化はなく、この錯体がインタクトなルテニウム(II)アレーンヨウ化物錯体として残っていることが示された。
【０１７１】
条件：100μM、99.5％ D2O、0.5％ DMSO、115mM NaCl、pH = 7.5、37℃、24時間
この実験は、錯体8の細胞試験条件を模倣するように設計された。24時間の間に変化はなく、この錯体がインタクトなルテニウム(II)アレーンヨウ化物錯体として残っていることが示された。
【０１７２】
[Ru(ビフェニル)(Azpy-NMe2)Cl]PF6(9)
条件：100％ D2O中の飽和溶液(濾過後)、25℃、25時間
25時間にわたり、2時間ごとにスペクトルを記録した。スペクトルに経時的変化は生じなかった。
【０１７３】
条件：100μM、99.5％ D2O、0.5％ DMSO、115mM NaCl、37℃、24時間
この実験は、錯体の細胞試験条件を模倣するように設計された。起こり得る加水分解が高塩含量のために抑制され、24時間後に溶液の約40％でアレーン消失が生じ、溶液の約50％はインタクトな塩化物錯体として存在する。24時間後の錯体9の1H 2D TOCSYを図1に示す。図中、化学種aはインタクトな塩化物錯体であり、化学種bはアレーン消失後の配位子の環境であり、化学種cは遊離ビフェニルである。
【０１７４】
条件：約100μMの濃度を与えるための90％ H2O / 10％ D2O、310Kにおける初期pH6.42
24時間にわたり、1時間ごとにスペクトルを記録した。24時間後の化学種形成は、インタクトなカチオン24％、加水分解9％、アレーン消失67％であった。溶液中のインタクトなカチオンの減衰は、擬一次反応速度論に従うようであり、20.27時間の分解半減期を与えた。
【０１７５】
[Ru(ビフェニル)(Azpy-NMe2)I]PF6(10)
条件：飽和溶液、90％ H2O / 10％ D2O、37℃、24時間
37℃で24時間の間に変化はなく、この錯体がインタクトなルテニウム(II)アレーンヨウ化物錯体として残っていることが示された。
【０１７６】
[Ru(p-シメン)(4-フェノール-アゾピリジン)Cl]PF6(11)
条件：100μM、90％ H2O / 10％ D2O、pH = 約5.8、25℃および37℃、24時間
25℃では24時間後にSD010は69％が最初の塩化物形態で(MSによって確認されたm/z = 470.12、計算値m/z = 470.06)、10％が加水分解産物として(100mMとなるような過剰量のNaClの添加によって確認)、そして20％がアレーン消失後の錯体として存在した。37℃では24時間後に32％のみが最初の塩化物錯体として存在し、31％が加水分解され、36％でアレーンが消失している。310Kにおける溶液中のインタクトなカチオンの減衰は、擬一次反応速度論に従うようであり、21.03時間の分解半減期を与えた。
【０１７７】
[Ru(ビフェニル)(4-フェノール-アゾピリジン)Cl]PF6(12)
条件：約100μMの濃度を与えるための90％ H2O / 10％ D2O、310Kにおける初期pH 5.46
24時間にわたり、1時間ごとにスペクトルを記録した。24時間後、化学種形成はインタクトなカチオン31％、加水分解5％、アレーン消失64％であった。溶液中のインタクトなカチオンの減衰は、擬一次反応速度論に従うようであり、13.05時間の分解半減期を与えた。
【０１７８】
[Ru(ビフェニル)(4-フェノール-アゾピリジン)I]PF6(13)
条件：飽和溶液、90％ H2O / 10％ D2O、37℃、24時間
37℃で24時間の間に変化はなく、この錯体がインタクトなルテニウム(II)アレーンヨウ化物錯体として残っていることが示された。
【０１７９】
条件：50μM、95％ H2O、5％ MeOH、pH 2.25
620nmにおける吸光度の変化をUV-Vis分光法で経時的に追跡した。減衰は、擬一次反応速度論に従うようであり、2.14時間の加水分解半減期を与えた。
【０１８０】
[Ru(p-シメン)(3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール)Cl]PF6(14)
条件：100μM、90％ H2O / 10％ D2O、pH = 約5、25℃および37℃、24時間
25℃において、最初に（時間＝40分）塩化物種およびアクア種（およその比率60％：40％）に対応する2組のピークが存在する。24時間後、錯体は完全にアクア形態で存在する(溶液に対してMSを実施したところ、インタクトな塩化物種に対応するピークはまったく検出されなかった)。アクア種の存在は、過剰量のNaClを添加して100mMの溶液とし、アクアの減少に起因するピークおよび塩化物種の出現に起因するピークを観察することで確認した。37℃での反応の経過は同じである。
【０１８１】
条件：50μM、95％ H2O、5％ MeOH、pH 2.27
620nmにおける吸光度の変化をUV-Vis分光法で経時的に追跡した。減衰は、擬一次反応速度論に従うようであり、2.09時間の加水分解半減期を与えた。
【０１８２】
[Ru(ビフェニル)(3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール)Cl]PF6(15)
条件：100μM、99.5％ D2O、0.5％ DMSO、115mM NaCl、pH = 7.35、37℃、24時間
この実験は、錯体の細胞試験条件を模倣するように設計された。pHは最初6.4であったが、37℃でのインキュベーション前に7.35に調整した。起こり得る加水分解が高塩含量のために抑制される。遊離ビフェニルに対応する大きなピークがある。
【０１８３】
[Ru(ベンゼン)(3(5)-(4-ジメチルアミノフェニルアゾ)ピラゾール)Cl]PF6(17)
条件：飽和溶液、90％ H2O /10％ D2O、pH = 約4.5、25℃、24時間
初期に(時間＝45 分)インタクトな塩化物錯体の約77％が残存していた。24時間後、錯体17の約60％がインタクトな塩化物錯体として存在し、40％が加水分解された((不定の)過剰量のNaClを添加し、アクアピークの消失を観察することによって確認した）。
【０１８４】
条件：50μM、95％ H2O、5％ MeOH、pH 2.30
620nmにおける吸光度の変化をUV-Vis分光法で経時的に追跡した。減衰は、擬一次反応速度論に従うようであり、2.67時間の加水分解半減期を与えた。
【０１８５】
[Ru(THN)(4-フェノール-アゾピリジン)Cl]PF6(19)
条件：飽和溶液、90％ H2O / 10％ D2O、pH = 約5.8、25℃、24時間
25℃で24時間後、溶液は2組のピーク、インタクトな塩化物種と加水分解種(それぞれ87％および13％を占める)を示した。加水分解は、過剰量（不定）のNaClを添加し、アクア錯体に相当するピークの消失を観察することで確認した。
【０１８６】
[Ru(p-シメン)(4-フェノール-アゾ ピリジン)I]PF6(21)
条件：100μM、90％ H2O / 10％ D2O、pH = 約6.5、37℃、24時間
37℃で24時間の間に変化はなく、この錯体がインタクトなルテニウム(II)アレーンヨウ化物錯体として残っていることが示された。
【０１８７】
2009529028.tif 000012
【０１８８】
化合物の更なる解析
溶液化学
4種のルテニウム錯体（8、10、13および21）のMeOD溶液を10mMリン酸緩衝液／D2Oで希釈して最終濃度100μMのルテニウム(95％D2O、5％MeOD)とし、開始時（約15分間）および24時間後に310KにおけるNMRスペクトルを記録した。サンプルのpH*は7.35(8)、7.40(10)、7.31(13)および7.38(21)であった。測定の間、サンプルを310Kの水浴中に置いた。24時間後、サンプルに対してESI-MSを行った。これらの条件は、生物学的細胞試験のためのpH、濃度、曝露時間および温度を模倣するように選択した。24時間の間にスペクトル内に新たなピーク／ピークシフトは生じず、加水分解が起こらなかったことが示唆された。この仮説は、NMR溶液に対してESI-MSを実施し、インタクトなカチオンに対応する1種の質量のみが観察されたことで確認された(8 m/Z 588.75 (M+)、10 m/Z 608.71 (M+)、13 m/Z 581.65 (M+)、21 m/Z 561.70 (M+)。
【０１８９】
電気化学およびサイクリックボルタンメトリー
電気化学的研究は、PSTAT20 ポテンシオスタットを含むAutolabシステムに連結したGeneral Purpose Electrochemical System (GPES) Version 4.5 ソフトウェアを用いて実施した。電気化学的技法は全て3電極構成を用いた。用いた参照電極はDMF中の0.1M [TBA][BF4]の溶液中のAg/AgClであり、それに対してフェロシニウム／フェロセン対についての
2009529028.tif 000013
が+0.55Vとなるように測定した。作用電極および対向電極は、それぞれ白金マイクロディスク(直径0.5mm)および大表面積の白金ワイヤーとした。電量分析実験は、表面積の大きいPt作用電極および対向電極を用い、通常のH型セル中で実施した。電気化学的実験に先立って、全ての溶液に乾燥窒素をパージした。6種のルテニウム錯体全ての電気化学的還元を、DMF中でサイクリックボルタンメトリーによって調べた。観察された主要な特徴は以下の通りである：全ての錯体が2種の電気化学的還元を示し、第一は約-0.2〜-0.4V(13 -0.26V、21 -0.33V、10 -0.36V、8 -0.40V)で生じ、第二は-2V付近で生じた（これは溶媒のカットオフ値に近く、またいずれにしても生物学的に近づけないと考えられたため、更なる性状解析を行わなかった）。アレーンがp-シメンからビフェニルに変化し、キレート化剤アゾ配位子がazpy-NMe2からazpy-OHに変化するため、錯体はより正の電位で還元される。ビフェニルの場合、この最初の還元は本質的に非可逆的（復元ピークは観察されない）であって、錯体はEC型(電気化学−化学的)反応をし、この場合には再酸化型の「娘」生成物である新たなピークがリターンスウィープ（return sweep）上に見られる。同じEC型の反応がp-シメン錯体でも生じるが、最初の還元反応についてある程度の可逆性(準可逆性)が見られる。これらの結果から、錯体は生物学的に関連する電位で電気化学的に還元され得ることが示される。
【０１９０】
アスコルビン酸との反応
最初に10mMのリン酸緩衝溶液(pH 7.35)中での310Kにおける錯体8および5当量のアスコルビン酸の反応を4時間かけてUV-Vis分光法で調べたところ、ルテニウム-フェニルアゾピリジン MLCTバンドの強度の減少および等吸収点（isobestic point）(約520nm)の存在によって、出発物質から還元生成物への一段階反応が示唆された（図２）。同じ反応を10mMリン酸緩衝液/D2O（pH7.30）中での1H NMRによって追跡し、全てのプロトンピークの消失により、1電子の還元が生じていることが示唆された(すなわち反磁性のNMR活性種から常磁性のNMR不活性種への移行、図３−a：8；b：5分47秒後の8＋5当量のアスコルビン酸；c−l：その後30分毎；m：24時間後)。錯体10、13および21は同様に還元された。これらの結果から、生物学的還元剤が本発明の化合物を還元し得ることが示される。
【０１９１】
A549癌細胞における反応性酸素種（ROS）の検出
ROSの生成は、分子プローブDCFH-DAを用いて、生きた細胞内で検出することができる。このプローブは膜を通過して細胞内に入り、そこでDCFHに加水分解される。ROSの存在下で、それは高度に蛍光を発するDCFに酸化される。A549癌細胞を黒色96ウェルプレート中に20000個／ウェルの細胞密度でまき、310K、5％CO2、高湿度下で24時間インキュベートした。細胞にDCFH-DA(10μM、0.5％ DMSO(v/v))を添加し、310K、5％CO2、高湿度下で30分間インキュベートした。プローブを除去し、細胞をPBS(200μL)で2回洗浄した。次に細胞をハンクス緩衝液（Hanks Balanced Salt Solution：HBSS)中に維持し、ルテニウム化合物をHBSSで希釈してウェルに添加した(25μM、0.5％DMSO(v/v))。陽性対照として過酸化水素(25μM)を添加し、480±10nmでの励起および538±15nmでの発光によりBMGフルオスタープレートリーダー（fluostar plate reader）で310Kにおいて6.5時間にわたり200秒毎に蛍光を測定した。予めDFCH-DAをロードしておいた細胞へのルテニウム化合物の添加後6.5時間にわたる蛍光の増加を追跡するための経時的実験を行った。これにより、細胞内のルテニウムの還元によるROSの生成（あるとすれば）の評価が可能である。この研究のために選択された化合物は8、10、13および21、並びに化合物RM175（この化合物の細胞毒性作用はROS生成によるのではなく、DNAへの結合によって発揮されると考えられる）であった。
【０１９２】
2009529028.tif 000014
【０１９３】
図４は、経時的に検出した蛍光の上昇を示す。化合物8、10、13および21は全て、経時的に検出したDCF蛍光の上昇を、対照の過酸化水素よりもずっと大きな程度に引き起こす。このことから、これらの化合物がA549癌細胞内でROSを生成することが示される。対照的に、RM175はベースライン値を超えるDCF蛍光の上昇を引き起こさず、この化合物がROSを生成しないことが示される。
【０１９４】
チオールレベル上昇後の細胞生存率
細胞生存率は、A549癌細胞系で、5mMのNACと共に細胞をプレインキュベーションして細胞内チオールレベルを上昇させた後に決定した。図5は、4種のルテニウム化合物について、未処理の細胞(明るいバー)および5mMのNACで2時間前処理した細胞(暗いバー)の双方で、薬物(1μM−10；5μM−8、13、21；5μM−CDDP対照)と共に24時間のインキュベーション後、および所定の濃度での96時間の回復時間後における細胞生存率を示す。全ての場合において、チオールレベルの上昇した細胞で細胞生存率がより高い。このことから、ROSが細胞死に関与することが示される。
【図面の簡単な説明】
【０１９５】
【図１】加水分解実験中の本発明の化合物の1H 2D TOCSYを示す。
【図２】本発明の化合物とアスコルビン酸との反応での吸光度の経時変化を示す。
【図３】図２と同じ反応でのNMRスペクトルの経時変化を示す。
【図４】本発明の化合物および比較化合物への曝露後のDCF蛍光の経時変化を示す。
【図５】A549癌細胞の細胞生存率を示す。
【図１】
2009529028.tif 000017
【図２】
2009529028.tif 000018
【図３】
2009529028.tif 000019
【図４】
2009529028.tif 000020
【図５】
2009529028.tif 000021
【国際調査報告】
2009529028.tif 000022
2009529028.tif 000023
2009529028.tif 000024
2009529028.tif 000025