(57)【要約】  本発明は、患者における治療剤の製造のための、治療有効量の６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（以下、化合物Ｉという）または医薬的に許容されるその塩の使用を提供する。本発明は、さらにインテグラーゼ活性の阻害剤のための、化合物Ｉまたはその塩の使用を提供する。化合物Ｉまたはその塩はまた、少なくとも一種の抗レトロウイルス薬に耐性であるレトロウイルスの複製を阻害するのに効果的である。本発明の使用において、化合物Ｉまたはその塩は、単独または化合物Ｉまたはその塩以外の少なくとも一種の抗レトロウイルス薬との併用で投与されうる。本発明はまた、化合物Ｉまたはその塩を含んでなるキットを提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者における、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症の治療剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩の使用であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、使用。
【請求項２】
少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、請求項１記載の使用。
【請求項３】
プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、請求項２記載の使用。
【請求項４】
逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、請求項２記載の使用。
【請求項５】
当該剤が患者に経口投与される、請求項１記載の使用。
【請求項６】
患者における、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症の治療剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩の使用であって、患者が少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、使用。
【請求項７】
少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、請求項６記載の使用。
【請求項８】
プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）、およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、請求項７記載の使用。
【請求項９】
逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）、およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、請求項７記載の使用。
【請求項１０】
当該剤が患者に経口投与される、請求項６記載の使用。
【請求項１１】
患者において含むヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症の治療剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物の使用であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、使用。
【請求項１２】
少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが同じである、請求項１１記載の使用。
【請求項１３】
少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが異なる、請求項１１記載の使用。
【請求項１４】
少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、請求項１１記載の使用。
【請求項１５】
抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、請求項１１記載の使用。
【請求項１６】
プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、請求項１４または１５記載の使用。
【請求項１７】
逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、請求項１４または１５記載の使用。
【請求項１８】
（ｉ）および（ｉｉ）が患者に経口投与される、請求項１１記載の使用。
【請求項１９】
（ｉ）および（ｉｉ）が患者に同時投与される、請求項１１記載の使用。
【請求項２０】
（ｉ）および（ｉｉ）が患者に連続投与される、請求項１１記載の使用。
【請求項２１】
患者における、ＨＩＶインテグラーゼ活性阻害剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩の使用であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、使用。
【請求項２２】
少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、請求項２１記載の使用。
【請求項２３】
プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、請求項２２記載の使用。
【請求項２４】
逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、請求項２２記載の使用。
【請求項２５】
患者における、ＨＩＶインテグラーゼ活性阻害剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物の使用であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、使用。
【請求項２６】
少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが同じである、請求項２５記載の使用。
【請求項２７】
少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが異なる、請求項２５記載の使用。
【請求項２８】
少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、請求項２５記載の使用。
【請求項２９】
抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、請求項２５記載の使用。
【請求項３０】
プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、請求項２８または２９記載の使用。
【請求項３１】
逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、請求項２８または２９記載の使用。
【請求項３２】
（ｉ）および（ｉｉ）が患者に経口投与される、請求項２５記載の使用。
【請求項３３】
（ｉ）および（ｉｉ）が患者に同時投与される、請求項２５記載の使用。
【請求項３４】
（ｉ）および（ｉｉ）が患者に連続投与される、請求項２５記載の使用。
【請求項３５】
ＨＩＶインテグラーゼ活性を阻害するための、（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩の使用であって、有効量の（ｉ）と、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に対するＨＩＶ耐性株とを接触させることを含む、使用。
【請求項３６】
少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、請求項３５記載の使用。
【請求項３７】
患者へのＨＩＶ感染の治療剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物の使用であって、抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物が、Ｔｒｕｖａｄａ（登録商標）（テノホビル＋エムトリシタビン）、エルブシタビン、ＧＷ２０４９３７、ＧＷ６７８２４８、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ１８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ５３８１５８およびＬ−９００５６４から選択される、使用。
【請求項３８】
（ｉ）および（ｉｉ）が患者に経口投与される、請求項３７記載の使用。
【請求項３９】
（ｉ）および（ｉｉ）が患者に同時投与される、請求項３７記載の使用。
【請求項４０】
（ｉ）および（ｉｉ）が患者に連続投与される、請求項３７記載の使用。
【請求項４１】
（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩、（ｉｉ）Ｔｒｕｖａｄａ（登録商標）（テノホビル＋エムトリシタビン）、エルブシタビン，ＧＷ２０４９３７、ＧＷ６７８２４８、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ１８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ５３８１５８およびＬ−９００５６４から選択される、抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物；ならびに（ｉｉｉ）医薬的に許容される担体を含んでなる、医薬組成物。
【請求項４２】
（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）  Ｔｒｕｖａｄａ（登録商標）（テノホビル＋エムトリシタビン）、エルブシタビン，ＧＷ２０４９３７、ＧＷ６７８２４８、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ１８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ５３８１５８およびＬ−９００５６４から選択される、抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物を含んでなる、キット。
【請求項４３】
請求項４１の医薬組成物を含んでなる、キット。
【請求項４４】
（ｉ）および（ｉｉ）が患者に同時投与される、請求項４２記載のキット。
【請求項４５】
（ｉ）および（ｉｉ）が患者に連続投与される、請求項４２記載のキット。
【請求項４６】
（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩を含んでなる抗ＨＩＶ剤であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であることを特徴とする、抗ＨＩＶ剤。
【請求項４７】
（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩を含んでなる抗ＨＩＶ剤であって、当該剤を投与される患者が、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性を有することを特徴とする、抗ＨＩＶ剤。
【請求項４８】
（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物を含んでなる抗ＨＩＶ剤であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であることを特徴とする、抗ＨＩＶ剤。
【請求項４９】
（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩を含んでなるＨＩＶインテグラーゼ阻害剤であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であることを特徴とする、ＨＩＶインテグラーゼ阻害剤。
【請求項５０】
（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物を含んでなるＨＩＶインテグラーゼ阻害剤であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、ＨＩＶインテグラーゼ阻害剤。
【請求項５１】
ＨＩＶ抵抗薬との併用で、（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩を含んでなるＨＩＶインテグラーゼ阻害剤であって、ＨＩＶが、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であることを特徴とする、ＨＩＶインテグラーゼ阻害剤。
【請求項５２】
（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物であって、Ｔｒｕｖａｄａ（登録商標）（テノホビル＋エムトリシタビン）、エルブシタビン、ＧＷ２０４９３７、ＧＷ６７８２４８、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ１８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ５３８１５８およびＬ−９００５６４から選択される少なくとも一種の薬物；ならびに（ｉｉｉ）医薬的に許容される担体を含んでなる、抗ＨＩＶ剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術背景
本発明は、レトロウイルス感染症の治療剤、治療用組成物およびキットの製造のための、６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
レトロウイルスはＲＮＡウイルスであって、通常、αレトロウイルス属、βレトロウイルス属、δレトロウイルス属、εレトロウイルス属、γレトロウイルス属、レンチウイルス属およびスプマウイルス属に分類される。レトロウイルスの例としては、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトＴ細胞白血球ウイルス（ＨＴＬＶ）、ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）およびトリ白血病ウイルスが挙げられるが、特に限定されない。
【０００３】
それ故多種のレトロウイルスが同定されているにも関わらず、全てのレトロウイルスはそれらのゲノムの構成、全体的なビリオン構造、および複製の様式が類似している。当該ゲノムは二つの同一の一本鎖ＲＮＡ分子からなり、７〜１１ｋｂの長さである。ウイルス遺伝子は構造タンパク質および酵素タンパク質をｇａｇ−ｐｏｌ−ｅｎｖの不変の順でコードするが、レンチウイルスのようないくつかのレトロウイルスは、さらに調節タンパク質をコードする。ビリオンはエンベローブ糖タンパク質（ｅｎｖ遺伝子の産物）に包まれており、直径約１００ｎｍであって、表面から突き出ている。ｇａｇ遺伝子産物は、通常３つまたは４つの、内部構造コアを含む。コア中に含まれるものはｐｏｌ遺伝子からコードされるウイルス酵素：プロテアーゼ、逆転写酵素、インテグラーゼ：である。
【０００４】
レトロウイルスの複製は、二つの異なる段階で起こる。第一の段階は、宿主細胞からの援助が殆どまたは全く無く起こる。ウイルス表面の糖タンパク質の細胞受容体への結合に続いて、受容体を介したエンドサイトーシス、またはウイルス膜と宿主細胞膜の直接的な融合によって、レトロウイルスは宿主細胞に侵入する（Ｍａｒｓｈ  ａｎｄ  Ｈｅｌｅｎｉｕｓ，Ａｄｖ．Ｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ．３６：１０７−１５１，１９８９）。二本の一本鎖ＲＮＡゲノムを含むウイルスコアが細胞質に放出され、ウイルスの逆転写酵素がＲＮＡゲノムを転写して線状の二本鎖ＤＮＡを形成する（Ｇｉｌｂｏａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  １８：９３−１００，１９７９）。線状ＤＮＡは核に輸送され、ウイルスインテグラーゼの作用により宿主ゲノムに組み込まれる（Ｂｒｏｗｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：２５２５−２５２９，１９８９；Ｆｕｊｉｗａｒａ  ａｎｄ  Ｍｉｚｕｕｃｈｉ，Ｃｅｌｌ  ５４：４９７−５０４，１９８８）。インテグレーションは宿主クロモソームのランダム位置で起こり、感染したウイルス粒子あたりたった一つの、組み込まれたウイルスＤＮＡのコピーを産生する。組み込まれたＤＮＡはプロウイルスと呼ぶ。
【０００５】
第二の段階においては、プロウイルスが細胞の転写および翻訳に関する細胞機能に依存するようになる。ウイルスコアの集積、当該コアと細胞膜との連携、そしてこれに続いて起こる非溶解性機構を通じた膜からの発芽によって新たなウイルス粒子が産生される。
【０００６】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）は、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の原因因子である（Ｂａｒｒｅ−Ｓｉｎｏｓｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２０：８６８−８７０，１９８３）。ＣＤ４＋リンパ球はＨＩＶの主要な標的細胞であり（Ｄａｌｇｌｅｉｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３１２：７６７−７６８，１９８４）、ヒト生体でのＨＩＶ感染によってＣＤ４＋リンパ球が破壊され、生体はその免疫機能を失い始める。ＨＩＶ感染の結果として、ＡＩＤＳの人はそれゆえ、種々の感染、神経機能障害、腫瘍ならびにその他の疾患、障害、および状態に対して非常に脆弱である。
【０００７】
その重篤な症状や高い死亡率により、ＡＩＤＳの伝染が人類の健康を脅かす主要な死因の一つになっている。ＵＮＡＩＤＳは、２００５年に、全世界で４０３０万人がＨＩＶ保有者であると推算した。２００５年単独では、約４９０万人が新たにＨＩＶに感染したと報告されている。また２００５年単独では、３１０万人がＡＩＤＳを原因として死亡している。ＵＮＡＩＤＳ／ＷＨＯ「ＡＩＤＳ  Ｅｐｉｄｅｍｉｃ  Ｕｐｄａｔｅ：Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２００５」，Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｒｅｐｏｒｔ，ｐ．７６−８０を参照のこと。
【０００８】
少なくとも二つのタイプのＨＩＶが同定されている：ＨＩＶ−１（Ｇａｌｌｏ  ｅｔ．ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２４：５００−５０３，１９８４）およびＨＩＶ−２（Ｃｌａｖｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２３：３４３−３４６，１９８６）である。しかしながら、それぞれは高度な遺伝学的多様性を有している。ＨＩＶ−１は単独で少なくとも１１の異なる遺伝子型（Ａ−Ｊ、およびＯサブタイプ）を表す（Ｊｏｎａｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｖｉｒｏｌ．２３１：４３−４７，１９９７）。
【０００９】
科学界の多大な努力にもかかわらず、ＨＩＶまたはＡＩＤＳに対する有効なワクチンや治療方法は未だ見つかっていない。ＨＩＶの複雑さと遺伝的な多様性が、ワクチンや治療法の開発を困難にしている（Ｂｌｏｏｍ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７２：１８８８−１９００，１９９６）。
【００１０】
しかし、主として二つのカテゴリーの薬剤が、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳの治療用に認可されている：逆転写酵素阻害剤およびプロテアーゼ阻害剤である。ともにＨＩＶ感染の後期の段階−転写および新しいウイルスの集積、を標的としている。よく知られている「カクテル療法」は、両タイプの阻害剤を用いる併用療法である（Ｌａｆｅｕｉｌｌａｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１７５：１０５１−５５，１９９７）。
【００１１】
薬剤耐性は、両タイプの薬剤に関連している。薬剤耐性は、薬剤に対してウイルスの感受性が低くなったとき、また同じ阻害効果を生み出すためにより高濃度の薬剤が要求されるときに生ずる。逆転写酵素阻害剤（ＡＺＴ、ｄｄＩ、ｄｄＣ、３ＴＣおよびｄ４Ｔを含む）に対しては、薬剤の有効な阻害濃度が報告されており、数倍から実に十倍の増加である（Ｖｅｌｌａ  ａｎｄ  Ｆｌｏｒｉｄｉａ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＩＤＳ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ＵＳＡ  ４（３）：１５，１９９６）。薬剤耐性は、現在ＡＩＤＳ治療に用いられている全てのプロテアーゼ阻害剤に関連している。
【００１２】
この薬剤耐性はＨＩＶの高い突然変異率と関連している。ヒト生体中において、一つのＨＩＶは一日あたり１０８〜１０１０個の新しいウイルスを産生することができるが、この際の変異率は、一複製サイクルあたり３×１０５個である。いくつかのＨＩＶ株では、あるタンパク質のアミノ酸配列の４０％がその遺伝子の変異により変化している（Ｍｙｅｒｓ  ａｎｄ  Ｍｏｎｔａｎｅｒ，Ｔｈｅ  Ｒｅｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ  Ｖｏｌ．１，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐ．５１−１０５，１９９２）。さらに、ウイルスプロテアーゼ遺伝子の変異は、現在用いられている全てのプロテアーゼ阻害剤における薬剤耐性の原因であることが知られている（Ｃｏｎｄｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３７４：５６９−７１，１９９５）。
【００１３】
それゆえ、レトロウイルス感染症、特に薬剤耐性株によるＨＩＶ感染に対する、効果的な治療方法の必要性が存在している。さらに、ヒト生体における薬剤耐性ＨＩＶの増加を阻害する必要性もある。
【発明の開示】
【００１４】
発明の開示
本発明は、患者における、レトロウイルス感染症の治療剤の製造のための、治療有効量の６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（以下、化合物Ｉという）またはその塩の使用を提供する。また化合物Ｉまたはその塩が、少なくとも一種の抗レトロウイルス薬に耐性であるレトロウイルスの複製を阻害するのに有効であることも発見されている。化合物Ｉまたはその塩は、単独または化合物Ｉまたはその塩以外の少なくとも一種の抗レトロウイルス薬との併用で投与され得る。
【００１５】
本発明は、治療有効量の化合物Ｉまたはその塩を患者に投与することによってヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症を治療する方法を提供する。化合物Ｉまたはその塩は、単独または化合物Ｉまたはその塩以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物との併用で投与され得る。本発明の一つの実施態様では、ＨＩＶは、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であり得る。他の実施態様では、患者は、抗ＨＩＶ薬に耐性であり得る。抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物と、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬とは同じであるか、または異なっている可能性があり、またプロテアーゼ阻害剤、ヌクレオシドもしくは非ヌクレオシドの逆転写酵素阻害剤またはインテグラーゼ阻害剤であり得る。
【００１６】
本発明は、治療有効量の化合物Ｉまたはその塩を患者に投与することによって、ＨＩＶインテグラーゼ活性を阻害する方法も提供する。化合物Ｉまたはその塩は、単独または化合物Ｉまたはその塩以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物との併用で投与され得る。さらに、ＨＩＶは少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であり得る。抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物と少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬とは同じであるか、または異なっている可能性があり、またプロテアーゼ阻害剤、ヌクレオシドもしくは非ヌクレオシドの逆転写酵素阻害剤またはインテグラーゼ阻害剤であり得る。
【００１７】
本発明はさらに、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であるＨＩＶのＨＩＶインテグラーゼ活性を阻害する方法を提供する。当該方法は、有効量の化合物Ｉまたはその塩を、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であるＨＩＶと接触させることを含む。
【００１８】
本発明はまた、化合物Ｉまたはその塩と、抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とを含む、医薬組成物およびキットを提供する。抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物は、プロテアーゼ阻害剤、ヌクレオシドもしくは非ヌクレオシドの逆転写酵素阻害剤またはインテグラーゼ阻害剤であり得る。
【００１９】
本発明は、治療有効量の化合物Ｉまたはその塩を含む、抗レトロウイルス感染症剤を提供する。化合物Ｉまたはその塩が、少なくとも一種の抗レトロウイルス薬に耐性であるレトロウイルスの複製を阻害するのに有効であることも発見されている。当該剤は、単独で、あるいは化合物Ｉまたはその塩以外の少なくとも一種の抗レトロウイルス性薬物との併用で、化合物Ｉまたはその塩を含む。
【００２０】
本発明は、治療有効量の化合物Ｉまたはその塩を含む、抗ＨＩＶ剤を提供する。当該剤は、単独で、あるいは化合物Ｉまたはその塩以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物との併用で、化合物Ｉまたはその塩を含んでいてもよい。本発明の一つの実施態様では、ＨＩＶは少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であり得る。他の実施態様では、当該剤は、抗ＨＩＶ薬に耐性を有する患者に投与され得る。抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物と、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬とは、同じであるかまたは異なっている可能性があり、またプロテアーゼ阻害剤、ヌクレオシドもしくは非ヌクレオシドの逆転写酵素阻害剤またはインテグラーゼ阻害剤であり得る。
【００２１】
本発明は、治療有効量の化合物Ｉまたはその塩を含んでなるＨＩＶインテグラーゼ阻害剤も提供する。当該阻害剤は、単独で、あるいは化合物Ｉまたはその塩以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物との併用で、化合物Ｉまたはその塩を含んでいても良い。さらにＨＩＶは、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であり得る。抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物と少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬とは同じであるか、または異なっている可能性があり、またプロテアーゼ阻害剤、ヌクレオシドもしくは非ヌクレオシドの逆転写酵素阻害剤またはインテグラーゼ阻害剤であり得る。
【００２２】
従って、本発明の実施態様の例としては以下が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２３】
［１］患者における、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症の治療剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩の使用であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、使用。
［２］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［１］記載の使用。
［３］プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、［２］記載の使用。
［４］逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、［２］記載の使用。
［５］当該剤が、患者に経口投与される、［１］記載の使用。
［６］患者における、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症の治療剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩の使用であって、患者が、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、使用。
［７］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［６］記載の使用。
［８］プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、［７］記載の使用。
［９］逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、［７］記載の使用。
［１０］当該剤が、患者に経口投与される、［６］記載の使用。
【００２４】
［１１］患者において含むヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症の治療剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物の使用であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、使用。
［１２］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが同じである、［１１］記載の使用。
［１３］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが異なる、［１１］記載の使用。
［１４］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［１１］記載の使用。
［１５］抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［１１］記載の使用。
［１６］プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、［１４］または［１５］記載の使用。
［１７］逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、［１４］または［１５］記載の使用。
［１８］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に経口投与される、［１１］記載の使用。
［１９］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に同時投与される、［１１］記載の使用。
［２０］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に連続投与される、［１１］記載の使用。
【００２５】
［２１］患者における、ＨＩＶインテグラーゼ活性阻害剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩の使用であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、使用。
［２２］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［２１］記載の使用。
［２３］プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、［２２］記載の使用。
［２４］逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、［２２］記載の使用。
［２５］患者における、ＨＩＶインテグラーゼ活性阻害剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物の使用であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、使用。
［２６］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが同じである、［２５］記載の使用。
［２７］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが異なる、［２５］記載の使用。
［２８］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［２５］記載の使用。
［２９］抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［２５］記載の使用。
［３０］プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、［２８］または［２９］記載の使用。
【００２６】
［３１］逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、［２８］または［２９］記載の使用。
［３２］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に経口投与される、［２５］記載の使用。
［３３］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に同時投与される、［２５］記載の使用。
［３４］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に連続投与される、［２５］記載の使用。
［３５］ＨＩＶインテグラーゼ活性を阻害するための、（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩の使用であって、有効量の（ｉ）と、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に対するＨＩＶ耐性株とを接触させることを含む、使用。
［３６］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［３５］記載の使用。
［３７］患者へのＨＩＶ感染の治療剤の製造のための、治療有効量の（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物の使用であって、抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物が、Ｔｒｕｖａｄａ（登録商標）（テノホビル＋エムトリシタビン）、エルブシタビン、ＧＷ２０４９３７、ＧＷ６７８２４８、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ１８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ５３８１５８およびＬ−９００５６４から選択される、使用。
［３８］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に経口投与される、［３７］記載の使用。
［３９］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に同時投与される、［３７］記載の使用。
［４０］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に連続投与される、［３７］記載の使用。
【００２７】
［４１］（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩、（ｉｉ）Ｔｒｕｖａｄａ（登録商標）（テノホビル＋エムトリシタビン）、エルブシタビン、ＧＷ２０４９３７、ＧＷ６７８２４８、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ１８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ５３８１５８およびＬ−９００５６４から選択される、抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物；ならびに（ｉｉｉ）医薬的に許容される担体を含んでなる、医薬組成物。
［４２］（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）Ｔｒｕｖａｄａ（登録商標）（テノホビル＋エムトリシタビン）、エルブシタビン、ＧＷ２０４９３７、ＧＷ６７８２４８、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ１８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ５３８１５８およびＬ−９００５６４から選択される、抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物を含んでなる、キット。
［４３］［４１］の医薬組成物を含んでなる、キット。
［４４］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に同時投与される、［４２］記載のキット。
［４５］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に連続投与される、［４２］記載のキット。
［４６］（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩を含んでなる抗ＨＩＶ剤であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であることを特徴とする、抗ＨＩＶ剤。
［４７］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［４６］記載の剤。
［４８］プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、［４７］記載の剤。
［４９］逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、［４７］記載の剤。
［５０］患者に経口投与される、［４６］記載の剤。
【００２８】
［５１］（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩を含んでなる抗ＨＩＶ剤であって、当該剤を投与される患者が、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性を有することを特徴とする、抗ＨＩＶ剤。
［５２］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［５１］記載の剤。
［５３］プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、［５２］記載の剤。
［５４］逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、［５２］記載の剤。
［５５］患者に経口投与される、［５１］記載の剤。
［５６］（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物を含んでなる抗ＨＩＶ剤であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であることを特徴とする、抗ＨＩＶ剤。
［５７］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが同じである、［５６］記載の剤。
［５８］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが異なる、［５６］記載の剤。
［５９］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［５６］記載の剤。
［６０］抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［５６］記載の剤。
【００２９】
［６１］プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、［５９］または［６０］に記載の剤。
［６２］逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、［５９］または［６０］に記載の剤。
［６３］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に経口投与される、［５６］記載の剤。
［６４］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に同時投与される、［５６］記載の剤。
［６５］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に連続投与される、［５６］記載の剤。
［６６］（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩を含んでなる、ＨＩＶ阻害剤であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、ＨＩＶ阻害剤。
［６７］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［６６］記載の阻害剤。
［６８］プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、［６６］記載の阻害剤。
［６９］逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、［６７］記載の阻害剤。
［７０］（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物、を含んでなるＨＩＶインテグラーゼ阻害剤であって、ＨＩＶが少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性である、阻害剤。
【００３０】
［７１］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが同じである、［７０］記載の阻害剤。
［７２］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬と抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物とが異なる、［７０］記載の阻害剤。
［７３］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［７０］記載の阻害剤。
［７４］抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［７０］記載の阻害剤。
［７５］プロテアーゼ阻害剤が、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビルまたはＡＴＶ）から選択される、［７３］または［７４］記載の阻害剤。
［７６］逆転写酵素阻害剤が、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）およびテノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）から選択される、［７３］または［７４］記載の阻害剤。
［７７］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に経口投与される、［７０］記載の阻害剤。
［７８］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に同時投与される、［７０］記載の阻害剤。
［７９］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に連続投与される、［７０］記載の阻害剤。
［８０］ＨＩＶ抵抗薬との併用で、（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩を含んでなるＨＩＶインテグラーゼ阻害剤であって、ＨＩＶが、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であることを特徴とする、阻害剤。
【００３１】
［８１］少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬が、プロテアーゼ阻害剤および逆転写酵素阻害剤から選択される、［８０］記載の阻害剤。
［８２］（ｉ）６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸または医薬的に許容されるその塩および（ｉｉ）（ｉ）以外の抗ＨＩＶ活性を有する、Ｔｒｕｖａｄａ（登録商標）（テノホビル＋エムトリシタビン）、エルブシタビン、ＧＷ２０４９３７、ＧＷ６７８２４８、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ１８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ５３８１５８およびＬ−９００５６４から選択される少なくとも一種の薬物；ならびに（ｉｉｉ）医薬的に許容される担体を含んでなる、抗ＨＩＶ剤。
［８３］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に経口投与される、［８２］記載の剤。
［８４］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に同時投与される、［８２］記載の剤。
［８５］（ｉ）および（ｉｉ）が患者に連続投与される、［８２］記載の剤。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３２】
化合物Ｉは、以下の構造式：
【００３３】
【化１】
2009525261.tif 000002
【００３４】
を有する。
【００３５】
化合物Ｉは、２００３年１１月２０日に提出された米国出願番号１０／４９２，８３３（米国特許出願公開番号２００５／０２３９８１９）および２００５年５月２０日に提出された米国出願番号１１／１３３，４６３（米国特許出願公開番号２００５／０２８８３２６）に記載されており、その内容は参照をもって全て本明細書中に組み込まれる。化合物Ｉは少なくとも３つの異なる結晶型で存在する。ＷＯ０５／１１３５０８に結晶型Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩが記載されているが、これも参照をもって全て本明細書中に組み込まれる。これら３つの型は、示差走査熱量計（ＤＳＣ）およびＸ線粉末回折計（ＸＲＤ）によって区別できる。本発明では、当該結晶型の一つが用いられうる。本発明の実施態様では、結晶型ＩＩまたはＩＩＩ、あるいはその混合結晶が患者に投与される。
【００３６】
一方で、化合物Ｉまたはその塩の投与は、一つの特定の本発明の実施態様であって、当該発明はまた、化合物Ｉを生じせしめるであろう他の化合物（例、化合物Ｉのプロドラッグ）の投与をも意図する。その様なプロドラッグとしては、例えば保護基を有しており、患者の体内（すなわち、インビボ）で常に化合物Ｉに変換する化合物が挙げられる。カルボン酸保護基としては、例えばアルキルエステルおよびベンジルエステルが挙げられ、これらはそれぞれ、酸または塩基と、水素化分解によって除去され得る。さらに、幾つかの有機残基を有し、インビボで乖離して化合物Ｉを産生する化合物Ｉは、本発明の方法に従って投与され得る。それゆえ本発明はまた、化合物Ｉを産生するための、化合物Ｉ’（式中、Ｒ’は、有機残基を示す）を表す。
【００３７】
【化２】
2009525261.tif 000003
【００３８】
本発明はさらに、化合物Ｉの医薬的に許容される塩の投与を意図する。例えば、化合物Ｉの医薬的に許容される塩は、化合物Ｉと：塩酸、硫酸、燐酸、臭化水素酸などといった無機酸；シュウ酸、マロン酸、クエン酸、フマル酸、乳酸、リンゴ酸、コハク酸、酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、アスコルビン酸、メチルスルホン酸、ベンジルスルホン酸などといった有機酸；水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化アンモニウムなどといった無機塩基；メチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、グアニジン、コリン、シンコリンなどといった有機塩基；またはリジン、アルギニン、アラニンなどといったアミノ酸とを反応させることによって得られる。本発明は、化合物Ｉなどの水和物といった、含水生成物および溶媒和物を包含する。さらに、用語「またはその塩」および「または医薬的に許容されるその塩」は、本明細書中、代替可能である。
【００３９】
それゆえ、本明細書中で用いるとき、「化合物Ｉを投与すること」または「６−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−１−［（２Ｓ）−１−ヒドロキシ−３−メチルブタン−２−イル］−７−メトキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸を投与すること」とは、化合物Ｉを提供する、化合物Ｉのある一態様をインビボで投与することをいう。
【００４０】
用語「抗レトロウイルス薬」および「抗レトロウイルス活性を有する物質」は、本明細書中で用いるとき、代替可能であって、化学療法薬、ペプチド、抗体、アンチセンス、リボゾーム、ワクチンといった薬剤、インターフェロンといった免疫賦活剤、ヌクレオシドもしくは非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、インテグラーゼ阻害剤、宿主細胞受容体（例、ＣＤ４、ＣＸＣＲ４、ＣＣＲ５）とレトロウイルスとの間の結合の阻害剤、あるいはこれらの併用のことをいい、これは、レトロウイルス複製または細胞病原性を阻害することができる。従って、「抗ＨＩＶ薬」または「抗ＨＩＶ活性を有する物質」は、本明細書中で使用するとき、ＨＩＶ複製または細胞病原性を阻害することができる抗レトロウイルス薬のことをいう。本明細書中で使用するとき、「阻害すること」とは、ウイルス、タンパク質、酵素または他の幾つかの化合物に関連した活性もしくは特徴が、少なくとも一つ減衰あるいは停止することをいう。
【００４１】
ＨＩＶ逆転写酵素阻害剤の例としては、Ｒｅｔｒｏｖｉｒ（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、Ｅｐｉｖｉｒ（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、Ｚｅｒｉｔ（登録商標）（サニルブジンまたはｄ４Ｔ）、Ｖｉｄｅｘ（登録商標）（ディダノシンまたはｄｄＩ）、Ｈｉｖｉｄ（登録商標）（ザルシタビン）、Ｚｉａｇｅｎ（登録商標）（硫酸アバカビルまたはＡＢＣ）、Ｖｉｒａｍｕｎｅ（登録商標）（ネビラピンまたはＮＶＰ）、Ｓｔｏｃｒｉｎ（登録商標）（エファビレンツまたはＥＦＶ）、Ｒｅｓｃｒｉｐｔｏｒ（登録商標）（メシル酸デラビルジンまたはＤＬＶ）、Ｃｏｍｂｉｖｉｒ（登録商標）（ジドブジン＋ラミブジン）、トリｚｉｖｉｒ（登録商標）（硫酸アバカビル＋ラミブジン＋ジドブジン）、Ｃｏａｃｔｉｎｏｎ（登録商標）（ｅｍｉｖｉｒｉｎｅ）、Ｐｈｏｓｐｈｏｎｏｖｉｒ（登録商標）、Ｃｏｖｉｒａｃｉｌ（登録商標）、アロブジン（３’−フルオロ−３’−デオキシチミジン）、Ｔｈｉｏｖｉｒ（チオホスホノギ酸）、カプラビリン（５−［（３，５−ジクロロフェニル）チオ］−４−イソプロピル−１−（４−ピリジルメチル）イミダゾール−２−メタノール  カルバミン酸）、テノホビル（ＰＭＰＡまたはＴＦＶ）、フマル酸テノホビルジソプロキシル（（Ｒ）−［［２−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−１−メチルエトキシ］メチル］リン酸  ビス（イソプロポキシカルボニルオキシメチル）  フマル酸エステル）、ＤＰＣ−０８３（（４Ｓ）−６−クロロ−４−［（１Ｅ）−シクロプロピルエテニル］−３，４−ジヒドロ−４−トリフルオロメチル−２（１Ｈ）−キナゾリノン）、ＤＰＣ−９６１（（４Ｓ）−６−クロロ−４−（シクロプロピルプロピル）−３，４−ジヒドロ−４−（トリフルオロメチル）−２（１Ｈ）−キナゾリノン）、ＤＡＰＤ（（−）−b−Ｄ−２，６−ジアミノプリン  ジオキソラン），イムノカル，ＭＳＫ−０５５、ＭＳＡ−２５４、ＭＳＨ−１４３、ＮＶ−０１、ＴＭＣ−１２０、ＤＰＣ−８１７，ＧＳ−７３４０、ＴＭＣ−１２５、ＳＰＤ−７５４、Ｄ−Ａ４ＦＣ、カプラビリン、ＵＣ−７８１、エムトリシタビン、アロブジン、Ｐｈｏｓｐｈａｚｉｄ、ＵＣ−７８１、ＢＣＨ−１０６１８、ＤＰＣ−０８３、エトラビリン、ＢＣＨ−１３５２０、ＭＩＶ−２１０，硫酸アバカビル／ラミブジン、ＧＳ−７３４０、ＧＷ−５６３４、ＧＷ−６９５６３４、Ｔｒｕｖａｄａ（登録商標）（テノホビル＋エムトリシタビン）、エルブシタビン、ＧＷ  ２０４９３７およびＧＷ  ６７８２４８が挙げられるが、特に限定されない。
【００４２】
ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤の例としては、Ｃｒｉｘｉｖａｎ（登録商標）（硫酸インジナビルエタノール付加物またはＩＤＶ）、サキナビル、Ｉｎｖｉｒａｓｅ（登録商標）（メシル酸サキナビルまたはＳＱＶ）、Ｎｏｒｖｉｒ（登録商標）（リトナビルまたはＲＴＶ）、Ｖｉｒａｃｅｐｔ（登録商標）（メシル酸ネルフィナビルまたはＮＦＶ）、ロピナビル（ＬＰＶ）、Ｐｒｏｚｅｉ（登録商標）（アンプレナビルまたはＡＰＶ）、Ｋａｌｅｔｒａ（登録商標）（リトナビル＋ロピナビル）、二メシル酸モゼナビル（ｍｏｚｅｎａｖｉｒ  ｄｉｍｅｓｙｌａｔｅ）（［４Ｒ−（４α，５α，６β）］−１−３−ビス［（３−アミノフェニル）メチル］-ヘキサヒドロ−５，６−ジヒドロキシ−４，７−ビス（フェニルメチル）−２Ｈ−１，３−ジアゼピン−２−オンジメタンスルホネート）、チプラナビル（ＴＰＶまたは３’−［（１Ｒ）−１−［（６Ｒ）−５，６−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−２−オキソ−６−フェニルエチル−６−プロピル−２Ｈ−ぴラン−３−イル］プロピル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンスルホンアミド）、ラシナビル（Ｎ−［５（Ｓ）−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４（Ｓ）−ヒドロキシ−６−フェニル−２（Ｒ）−（２，３，４−トリメトキシベンジル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリン  ２−メトキシエチレンアミド）、ＫＮＩ−２７２（（Ｒ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−３−［（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−Ｎ−［（Ｒ）−２−Ｎ−（イソキノリン−５−イルオキシアセチル）アミノ−３−メチルチオプロパノイル］アミノ−４−フェニルブタノイル］−５，５−ジメチル−１，３−チアゾリジン−４−カルボキサミド）、ＧＷ−４３３９０８、ＴＭＣ−１２６、ＤＰＣ−６８１、バックミンスターフラーレン、ＭＫ−９４４Ａ（ＭＫ９４４（Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−ヒドロキシ−５−［４−（２−ベンゾ［ｂ］フラニルメチル）−２（Ｓ）−（ｔｅｒｔ−ブチルカルバモイル）ピペラジン−１−イル］ペンタンアミド）＋硫酸インジナビル）、ＪＥ−２１４７（［２（Ｓ）−オキソ−４−フェニルメチル−３（Ｓ）−［（２−メチル−３−オキシ）フェニルカルボニルアミノ］−１−オキサブチル］−４−［（２−メチルフェニル）メチルアミノ］カルボニル−４（Ｒ）−５，５−ジメチル−１，３−チアゾール）、ＢＭＳ−２３２６３２（（３Ｓ，８Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ）−３，１２−ビス（１，１−ジメチルエチル）−８−ヒドロキシ−４，１１−ジオキソ−９−（フェニルメチル）−６−［［４−（２−ピリジニル）フェニル］メチル］−２，５，６，１０，１３−ペンタアザテトラデカン  ジカルボン酸  ジメチルエステル）、ＤＭＰ−８５０（（４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ，７Ｒ）−１−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−５−イルメチル）−４，７−ジベンジル−３−ブチル−５，６−ジヒドロキシパーヒドロ−１，３−ジアゼピン−２−オン）、ＤＭＰ−８５１、ＲＯ−０３３４６４９、Ｎａｒ−ＤＧ−３５、Ｒ−９４４、ＶＸ−３８５、ＴＭＣ−１１４、ホスアンプレナビルナトリウム、ホスアンプレナビルカルシウム、ダルナビル、ＧＷ−０３８５、Ｒ−９４４、ＲＯ−０３３−４６４９、ＡＧ−１８５９、およびＲｅｙａｔａｚ（登録商標）（アタザナビル；ＡＴＶ）が挙げられるが、特に限定されない。
【００４３】
ＨＩＶインテグラーゼ阻害剤の例としては、Ｓ−１３６０、Ｌ−８７０８１０、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ  １８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ  ５３８１５８およびＬ−９００５６４が挙げられるが、特に限定されない。
【００４４】
他の抗ＨＩＶ薬としては、ＤＮＡポリメラーゼ阻害剤またはＤＮＡ合成阻害剤が挙げられ、Ｆｏｓｃａｖｉｒ（登録商標）、ＡＣＨ−１２６４４３（Ｌ−２’，３’−ジデヒドロ−ジデオキシ−５−フルオロシチジン）、エンテカビル（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−９−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）−２−メチレンシクロプロピル］グアニン）、カラノライドＡ（［１０Ｒ−（１０α，１１β，１２α）］−１１，１２−ジヒドロ−１２−ヒドロキシ−６，６，１０，１１−テトラメチル−４−プロピル−２Ｈ，６Ｈ，１０Ｈ−ベンゾ［１，２−ｂ：３，４−ｂ’：５，６−ｂ”］トリピラン−２−オン）、カラノライドＢ、ＮＳＣ−６７４４４７（１，１’−アゾビスホルムアミド）、Ｉｓｃａｄｏｒ（ヤドリギ抽出物）およびＲｕｂｕｔｅｃａｎが例示されるが、特に限定されない。
【００４５】
ＨＩＶアンチセンス薬としては、ＨＧＴＶ−４３およびＧＥＭ−９２が例示されるが、特に限定されない。抗ＨＩＶ抗体としては、ＮＭ−０１、ＰＲＯ−３６７、ＫＤ−２４７、Ｃｙｔｏｌｉｎ（登録商標）、ＴＮＸ−３５５（ＣＤ４抗体）、ＡＧＴ−１、ＰＲＯ−１４０（ＣＣＲ５抗体）および抗ＣＴＬＡ−４モノクローナル抗体が例示されるが、特に限定されない。ＨＩＶワクチンとしては、ＡＬＶＡＣ（登録商標）、ＡＩＤＳＶＡＸ（登録商標）、Ｒｅｍｕｎｅ（登録商標）、ＨＩＶ  ｇｐ４１ワクチン、ＨＩＶ  ｇｐ１２０ワクチン、ＨＩＶ  ｇｐ１４０ワクチン、ＨＩＶ  ｇｐ１６０ワクチン、ＨＩＶ  ｐ１７ワクチン、ＨＩＶ  ｐ２４ワクチン、ＨＩＶ  ｐ５５ワクチン、ＡｌｐｈａＶａｘ  Ｖｅｃｔｏｒ  Ｓｙｓｔｅｍ、ｃａｎａｒｙｐｏｘ  ｇｐ１６０ワクチン、ＡｎｔｉＴａｔ、ＭＶＡ−Ｆ６  Ｎｅｆワクチン、ＨＩＶ  ｒｅｖワクチン、Ｃ４−Ｖ３ペプチド、ｐ２２４９ｆ、ＶＩＲ−２０１、ＨＧＰ−３０Ｗ、ＴＢＣ−３Ｂ、ＰＡＲＴＩＣＬＥ−３Ｂおよびアンチフェロン（インターフェロン−αワクチン）が例示されるが、特に限定されない。インターフェロンまたはインターフェロン作動薬としては、Ｓｕｍｉｆｅｒｏｎ（登録商標）、ＭｕｌｔｉＦｅｒｏｎ（登録商標）、インターフェロン−τ、Ｒｅｔｉｃｕｌｏｓｅ、ヒト白血球インターフェロンαが例示されるが、特に限定されない。ＣＣＲ５拮抗薬としては、ＳＣＨ−３５１１２５が例示されるが、特に限定されない。ＨＩＶ  ｐ２４に対して作用する剤としては、ＧＰＧ−ＮＨ２（グリシル−プロリル−グリシンアミド）が例示されるが、特に限定されない。ＨＩＶ融合阻害剤としては、ＦＰ−２１３９９（１，４−ビス［３−［（２，４−ジクロロフェニル）カルボニルアミノ］−２−オキソ−５，８−硫酸２ナトリウム］ナフチル−２，５−ジメトキシフェニル−１，４−ジヒドラゾン）、Ｔ−１２４９、Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ  Ｎｏ  ３、ペンタフジド、ＦＰ−２１３９９、ＰＲＯ−５４２およびエンフビルチドが例示されるが、特に限定されない。ＩＬ−２作動薬または拮抗薬としては、インターロイキン−２、Ｉｍｕｎａｃｅ（登録商標）、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）、Ｍｕｌｔｉｋｉｎｅ（登録商標）、Ｏｎｔａｋ（登録商標）が例示されるが、特に限定されない。ＴＮＦ−α拮抗薬としては、Ｔｈａｌｏｍｉｄ（登録商標）（サリドマイド）、Ｒｅｍｉｃａｄｅ（登録商標）（インフリキシマブ）およびカードラン硫酸が例示されるが、特に限定されない。α−グルコシダーゼ阻害剤としては、Ｂｕｃａｓｔ（登録商標）であり得る。プリンヌクレオシドリン酸化酵素阻害剤としては、ペルデシン（２−アミノ−４−オキソ−３Ｈ，５Ｈ−７−［（３−ピリジル）メチル］ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン）が例示されるが、特に限定されない。アポトーシス作動薬または阻害剤としては、Ａｒｋｉｎ  Ｚ（登録商標）、Ｐａｎａｖｉｒ（登録商標）および補酵素Ｑ１０（２−デカ（３−メチル−２−ブテニレン）−５，６−ジメトキシ−３−メチル−ｐ−ベンゾキノン）が例示されるが、特に限定されない。コリンエステラーゼ阻害剤としては、Ｃｏｇｎｅｘ（登録商標）が例示されるが��特に限定されない。そして、免疫調節剤としては、Ｉｍｕｎｏｘ（登録商標）、Ｐｒｏｋｉｎｅ（登録商標）、Ｍｅｔ−エンケファリン（６−ｄｅ−Ｌ−アルギニン−７−ｄｅ−Ｌ−アルギニン−８−ｄｅ−Ｌ−バリンアミド−アドレノルフィン）、ＷＦ−１０（１０倍希釈テトラクロロデカオキシド溶液）、Ｐｅｒｔｈｏｎ、ＰＲＯ−５４２、ＳＣＨ−Ｄ、ＵＫ−４２７８５７、ＡＭＤ−０７０およびＡＫ−６０２が例示されるが、特に限定されない。
【００４６】
加えて、Ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｉｎ（登録商標）、Ｌｉｄａｋｏｌ（登録商標）、Ａｎｃｅｒ  ２０（登録商標）、Ａｍｐｌｉｇｅｎ（登録商標）、Ａｎｔｉｃｏｒｔ（登録商標）、Ｉｎａｃｔｉｖｉｎ（登録商標）、ＰＲＯ−２０００、Ｒｅｖ  Ｍ１０遺伝子、ＨＩＶ特異的障害性Ｔ細胞（ＣＴＬ免疫治療、ＡＣＴＧプロトコール０８０治療、ＣＤ４−z遺伝子治療）、ＳＣＡ結合タンパク質、ＲＢＣ−ＣＤ４複合体、モテキサフィンガドリニウム、ＧＥＭ−９２、ＣＮＩ−１４９３、（±）−ＦＴＣ、ユーシャーセル、Ｄ２Ｓ、ＢｕｆｆｅｒＧｅｌ（登録商標）、ＶｉｖａＧｅｌ（登録商標）、Ｇｌｙｍｉｎｏｘ  ｖａｇｉｎａｌ  ｇｅｌ、ラウリル硫酸ナトリウム、２Ｆ５、２Ｆ５／２Ｇ１２、ＶＲＸ−４９６、Ａｄ５ｇａｇ２、ＢＧ−７７７、ＩＧＩＶ−ＣおよびＢＩＬＲ−２５５もまた、抗ＨＩＶ薬の例である。
【００４７】
化合物Ｉまたはその塩の、化合物Ｉまたはその塩以外の少なくとも一種の抗レトロウイルス薬との特別の併用としては、化合物Ｉまたはその塩の、エファビレンツ、テノホビル、エムトリシタビン、インジナビル、ネルフィナビル、アタナザビル、リトナビル＋インジナビル、リトナビル＋ロピナビル、リトナビル＋サキナビル、ジダノシン＋ラミブジン、ジドブジン＋ジダノシン、スタブジン＋ジダノシン、ジドブジン＋ラミブジン、スタブジン＋ラミブジン、エムトリバ、テノホビル＋エムトリシタビン、エルブシタビン、ＧＷ  ２０４９３７、ＧＷ  ６７８２４８、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ  １８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ  ５３８１５８およびＬ−９００５６４との併用が挙げられる（併用は、Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  ＨＩＶ−Ｉｎｆｅｃｔｅｄ  Ａｄｕｌｔｓ  ａｎｄ  Ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｓ．Ａｕｇｕｓｔ  １３，２００１でさらに議論されている）。
【００４８】
本発明の一つの実施態様では、化合物Ｉまたはその塩の、エファビレンツ、インジナビル、ネルフィナビル、テノホビル、エムトリシタビン、ジドブジン、ラミブジン、エルブシタビン、ＧＷ  ２０４９３７、ＧＷ  ６７８２４８、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ  １８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ  ５３８１５８およびＬ−９００５６４といった化合物Ｉまたはその塩以外の一つの抗レトロウイルス薬との併用を提供する。
【００４９】
本発明の他の実施態様では、化合物Ｉまたはその塩の、ジドブジン＋ラミブジン、テノホビル＋ラミブジン、テノホビル＋ジドブジン、テノホビル＋エファビレンツ、テノホビル＋ネルフィナビル、テノホビル＋インジナビル、テノホビル＋エムトリシタビン、エムトリシタビン＋ラミブジン、エムトリシタビン＋ジドブジン、エムトリシタビン＋エファビレンツ、エムトリシタビン＋ネルフィナビル、エムトリシタビン＋インジナビル、ネルフィナビル＋ラミブジン、ネルフィナビル＋ジドブジン、ネルフィナビル＋エファビレンツ、ネルフィナビル＋インジナビル、エファビレンツ＋ラミブジン、エファビレンツ＋ジドブジン、エファビレンツ＋インジナビル、エファビレンツ＋エルブシタビン、エファビレンツ＋ＧＷ  ２０４９３７、エファビレンツ＋ＧＷ  ６７８２４８、エファビレンツ＋ＭＫ−０５１８、エファビレンツ＋ＲＳＣ  １８３８、エファビレンツ＋Ｖ−１６５、インジナビル＋エルブシタビン、インジナビル＋ＧＷ  ２０４９３７、インジナビル＋ＧＷ  ６７８２４８、インジナビル＋ＭＫ−０５１８、インジナビル＋ＲＳＣ  １８３８、インジナビル＋Ｖ−１６５、ネルフィナビル＋エルブシタビン、ネルフィナビル＋ＧＷ  ２０４９３７、ネルフィナビル＋ＧＷ  ６７８２４８、ネルフィナビル＋ＭＫ−０５１８、ネルフィナビル＋ＲＳＣ  １８３８、ネルフィナビル＋Ｖ−１６５、テノホビル＋エルブシタビン、テノホビル＋ＧＷ  ２０４９３７、テノホビル＋ＧＷ  ６７８２４８、テノホビル＋ＭＫ−０５１８、テノホビル＋ＲＳＣ  １８３８、テノホビル＋Ｖ−１６５、エムトリシタビン＋エルブシタビン、エムトリシタビン＋ＧＷ  ２０４９３７、エムトリシタビン＋ＧＷ  ６７８２４８、エムトリシタビン＋ＭＫ−０５１８、エムトリシタビン＋ＲＳＣ  １８３８、エムトリシタビン＋Ｖ−１６５、ジドブジン＋エルブシタビン、ジドブジン＋ＧＷ  ２０４９３７、ジドブジン＋ＧＷ  ６７８２４８、ジドブジン＋ＭＫ−０５１８、ジドブジン＋ＲＳＣ  １８３８、ジドブジン＋Ｖ−１６５、ラミブジン＋エルブシタビン、ラミブジン＋ＧＷ  ２０４９３７、ラミブジン＋ＧＷ  ６７８２４８、ラミブジン＋ＭＫ−０５１８、ラミブジン＋ＲＳＣ  １８３８、ラミブジン＋Ｖ−１６５、エルブシタビン＋ＧＷ  ２０４９３７、エルブシタビン＋ＧＷ  ６７８２４８、エルブシタビン＋ＭＫ−０５１８、エルブシタビン＋ＲＳＣ  １８３８、エルブシタビン＋Ｖ−１６５、ＧＷ  ２０４９３７＋ＧＷ  ６７８２４８、ＧＷ  ２０４９３７＋ＭＫ−０５１８、ＧＷ  ２０４９３７＋ＲＳＣ  １８３８、ＧＷ  ２０４９３７＋Ｖ−１６５、ＧＷ  ６７８２４８＋ＭＫ−０５１８、ＧＷ  ６７８２４８＋ＲＳＣ  １８３８、ＧＷ  ６７８２４８＋Ｖ−１６５、ＭＫ−０５１８＋ＲＳＣ  １８３８、ＭＫ−０５１８＋Ｖ−１６５およびＲＳＣ  １８３８＋Ｖ−１６５といった化合物Ｉまたはその塩以外の二つの抗レトロウイルス薬との併用を提供する。
【００５０】
ウイルス薬感受性における変化は、ウイルス株の薬物への感受性における変化によって決定されうる。感受性は、通常、野生株との比較試験における、ウイルス株のＥＣ５０またはＥＣ９０値（ウイルス集団のそれぞれ５０％または９０％の複製が阻害される薬物濃度）の割合として表される。それゆえ、ある薬物へのウイルス株の感受性は、感受性における変化倍率（ｆｏｌｄ  ｃｈａｎｇｅ）として表現されうる。ここで変化倍率は、例えば野生型ＥＣ５０値と比較した、変異ウイルス株のＥＣ５０値の割合に由来する。特に、ウイルス株またはウイルス集団の感受性はまたウイルス株の耐性として表現され得、その結果は野生型ＥＣ５０との比較で、ＥＣ５０における増加倍率（ｆｏｌｄ  ｉｎｃｒｅａｓｅ）として示される。
【００５１】
ウイルス株の抗レトロウイルス薬への耐性は、耐性と関連があることが知られているか、または示されているレトロウイルスゲノム中の変異を同定することによる、遺伝型によってもまた決定されうる。レトロウイルス中の変異は、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によるウイルスゲノム配列の最初の増幅、ウイルスゲノムのシークエンシング、および野生型ウイルスゲノムとの配列比較によって検出され得る。同定された当該変異が薬物耐性と関連があるか否かを決定するために、ｈｔｔｐ：／／ｈｉｖｄｂ．ｓｔａｎｆｏｒｄ．ｅｄｕで見られるように、当該変異を、既に薬物耐性と関連があることが知られている変異のデータベースと比較してもよい。薬物耐性に関連するＨＩＶゲノム中の公知の変異はまた、例えばＤ’Ａｑｕｉｌａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｏｐｉｃｓ  ｉｎ  ＨＩＶ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １１：９２−９６（２００３）において提供される。
【００５２】
あるいは、変異を持つレトロウイルスの細胞病原性および／または複製は、一つ以上の抗レトロウイルス薬の存在下、野生型ウイルス（または参照ウイルス）のそれと比較されうる。例として、例えばプロテアーゼ、逆転写酵素またはインテグラーゼの、関連コード領域は、患者のサンプルから、逆転写しかつＰＣＲで増幅した患者サンプルから得られる。関連コード領域は、キメラウイルスを作り出すためにウイルスコンストラクト中に挿入される。これらキメラウイルスの細胞病原性および複製は、抗レトロウイルス薬の存在下で評価され、野生型または参照ウイルスのそれと比較される。
【００５３】
レトロウイルスの薬物への感受性は、レトロウイルスの細胞への細胞病原性を決定することにより試験されうる。本発明の文脈において、細胞病原性効果とは、レトロウイルスの存在下における培養細胞の生存能力を意味する。細胞は新たな感染性ウイルス粒子を生み出すことができる細胞であり得、その様な細胞としては、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、Ｔ細胞、単球、マクロファージ、樹状細胞、ランゲルハンス細胞、造血幹細胞または造血前駆細胞、ＭＴ４細胞およびＰＭ−１細胞が挙げられるが、特に限定されない。ＭＴ４は、ＣＸＣＲ４コレセプターを含むＣＤ４＋のＴ細胞系列である。ＰＭ−１細胞系列はＣＸＣＲ４およびＣＣＲ５コレセプターの両方を発現する。細胞病原性は、例えばレポーター遺伝子を含む幾つかのレポーター分子の存在によってモニターされうる。レポーター遺伝子は、その遺伝子産物がレポート能力を有する遺伝子として定義される。適切なレポーター分子としては、テトラゾリウム塩、緑色蛍光タンパク質、βガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールトランスフェラーゼ、アルカリフォスファターゼおよびルシフェラーゼが挙げられるが、特に限定されない。表現型試験を含む細胞病原性試験の方法の幾つかは、文献（Ｋｅｌｌａｍ  ａｎｄ  Ｌａｒｄｅｒ，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐ．１９９４，３８：２３−３０，１９９４，Ｈｅｒｔｏｇｓ  ｅｔ  ａｌ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐ．４２：２６９−２７６，１９９８；Ｐａｕｗｅｌｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｖｉｒｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０：３０９−３２１，１９８８）に記載されている。
【００５４】
レトロウイルスの薬物への感受性はまた、野生型レトロウイルスの複製能と比較した、少なくとも一種の抗レトロウイルス薬の存在下におけるウイルスの複製能によっても決定されうる。複製能とは、培養条件下におけるウイルスの増大する能力を意味する。レトロウイルスの薬物への感受性を決定する方法はまた、ＨＩＶ感染患者の治療計画を設計するのに有用でありうる。例えば、ある方法は患者の臨床分離株の複製能を決定することと、上記複製能を利用して患者にとって適切な投薬計画を決定することを含みうる。一つのアプローチは、Ａｎｔｉｖｉｒｏｇｒａｍ（登録商標）アッセイ（Ｖｉｒｃｏ  Ｌａｂ  Ｉｎｃ．，ＵＳＡ，ＮＪ）である。
【００５５】
従って、用語「少なくとも一種の抗レトロウイルス薬に耐性」または「少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性」とは、本明細書中で使用するとき、増加倍率が１よりも大きい状態のことをいい、このときレトロウイルスは増加倍率に関連した少なくとも一種の変異を含む。本明細書中で使用するとき、「少なくとも一種の抗レトロウイルス薬に強い耐性」または「少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に強い耐性」であるレトロウイルスは、当該増加倍率が同等〜１００倍以上の状態であり、増加倍率に関連した少なくとも一種の変異を含む。同様に、「少なくとも一種の抗レトロウイルス薬に中程度の耐性」または「少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に中程度の耐性」であるレトロウイルスは、増加倍率が同等〜５０倍以上で１００倍より小さい状態であり、増加倍率に関連した変異を含む。「少なくとも一種の抗レトロウイルス薬に少し耐性」または「少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に少し耐性」であるレトロウイルスは、増加倍率が１倍以上で５０倍より小さい状態であり、増加倍率に関連した少なくとも一種の変異を含む。増加倍率が１に等しいかそれより小さい、あるいは増加倍率に関連した変異が無いことによって、抗レトロウイルス薬に対する耐性が未だ生じていないことが示唆される。
【００５６】
用語「患者」とは、本明細書中で使用するとき、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジおよびブタといった哺乳動物のことをいう。さらに本明細書中で使用するとき、用語「抗ＨＩＶ薬に耐性である患者」とは、規定の抗ＨＩＶ薬に対する標準または推奨量よりも、より多くの治療有効量の抗ＨＩＶ薬を要求する、ＨＩＶに感染した患者のことをいう。従って、市販の抗ＨＩＶ薬に対して、抗ＨＩＶ薬に耐性である患者は、ＨＩＶ量またはＨＩＶ活性を測定可能に減少させるために、推奨量よりも多量の抗ＨＩＶ薬を要求する。
【００５７】
用語「治療有効量」とは、化合物Ｉまたはその塩、抗レトロウイルス薬またはそれらの併用の量であって、列挙した疾患、傷害または状態を治療する際に有効である量をいう。従って、例えばインテグラーゼ活性を阻害するための有効量は、測定に適した実験と終点を用いて測定した場合に、結果的にウイルスインテグラーゼ活性を測定可能に減少させる量である。
【００５８】
当該量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方法に依存して変化するが、化合物Ｉまたはその塩は通常、成人一回投与あたり約１ｍｇ〜約２０００ｍｇ投与され、一日に１〜数回、経口または非経口の静脈注射といった他の方法によって与えられる。化合物Ｉまたはその塩との併用で投与するための、他の抗レトロウイルス薬の有効量は、当業者であれば刊行物源から容易に入手可能である。本発明は、他の抗レトロウイルス薬のための、臨床的に意図された効果的な投与量計画の使用を意図する。
【００５９】
併用治療において、化合物Ｉまたはその塩は、一回投与あたり約１ｍｇ〜約２０００ｍｇの範囲の用量で投与されうる。従って例えば、併用治療における化合物Ｉの単回投与は、一回投与あたり１ｍｇ、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇまたは１０００ｍｇであり得る。例えばジドブジン（ＡＺＴ）の場合、ＨＩＶ感染を治療するための、成人に対するジドブジンの推奨経口投与量は、４時間ごとに１００ｍｇである。また例えば、ジドブジンの標準的な静脈内投与量に対する推奨投与量は、４時間ごとに約１〜約２ｍｇ／ｋｇである。他の抗レトロウイルス薬は、承認された推奨投与計画に沿った量で投与され得る。そのような投与量の例は、一回投与あたり約１ｍｇ〜約２０００ｍｇの範囲の用量である。例えば、少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬の単回投与は、一回投与あたり２０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、１２００ｍｇ、１４００ｍｇ、１６００ｍｇ、１８００ｍｇまたは２０００ｍｇであり得る。
【００６０】
本発明の一つの実施態様は、臨床的に意図された効果的な投与量計画より少ない、抗レトロウイルス薬の投与量をも意図する。本発明の幾つかの実施態様では、化合物Ｉまたはその塩の有利な効果および有効性によって、臨床的に意図された有効用量または推奨用量よりも低い、少なくとも一種の抗レトロウイルス剤の有効量の投与が可能となってもよい。例えば本発明の一つの実施態様は、他の抗レトロウイルス薬に対して、抗レトロウイルス薬に対して臨床的に意図された最小の有効用量の、例えば５％、１０％、２０％、３０％、５０％、７５％または９０％といった、５％〜９９％の範囲の用量の使用を意図する。
【００６１】
一方、化合物Ｉまたはその塩および／または少なくとも一種の抗レトロウイルス薬を未加工の化合物として投与することも可能であり、医薬組成物として投与されることが望ましい。「化合物Ｉを含んでなる医薬組成物」とは、一種またはそれ以上の医薬的に許容される担体または賦形剤ならびに任意の他の治療剤および／または成分と共に、化合物Ｉまたは医薬的に許容されるその塩を含む、化合物Ｉのあらゆる型を含んでなる医薬組成物のことをいう。同様に「抗レトロウイルス活性を持つ少なくとも一種の物質を含んでなる医薬組成物」とは、抗レトロウイルス活性を持つ少なくとも一種の物質の活性型、および当該活性型のいずれかであって、一種またはそれ以上の医薬的に許容される担体または賦形剤ならびに任意の他の治療剤および／または成分と共に、抗レトロウイルス活性を持つ少なくとも一種の物質の活性型または医薬的に許容されるその塩を含んでなる医薬組成物のことをいう。
【００６２】
当該塩、担体または賦形剤は、他の成分と混合可能であるという意味で許容されなければならず、またそのレシピエントに有害なものであってはならない。経口投与における担体または賦形剤の例としては、コーンスターチ、乳糖、ステアリン酸マグネシウム、タルク、微結晶性セルロース、ステアリン酸、ボピドン、クロスポビドン、第二リン酸カルシウム、グリコール酸ナトリウムスターチ、ヒドロキシプロピルセルロース（例、低置換ヒドロキシプロピルセルロース）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（例、ヒドロキシプロピルメチルセルロース  ２９１０）およびラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。
【００６３】
該医薬組成物は、製薬学の分野で公知の方法、例えばＧｅｎｎａｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１８ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，１９９０）、特にＰａｒｔ  ８：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅに記載の方法のような、幾つかの適切な方法によって調製され得る。その様な方法としては、化合物Ｉまたはその塩、あるいは化合物Ｉまたはその塩および少なくとも一種の抗レトロウイルス薬を、担体または賦形剤ならびに任意の一種またはそれ以上の補助成分と関連付ける工程が挙げられる。そのような補助成分としては、賦形剤、結合剤、希釈剤、崩壊剤、滑剤、着色剤、香料および湿潤剤といった当該分野で標準的な成分が挙げられる。
【００６４】
該医薬組成物は、ある期間に渡って制御された、徐放または持続放出の化合物Ｉまたはその塩および抗レトロウイルス薬を提供し得る。制御された、徐放または持続放出は、通常の処方による場合よりもより長い時間、化合物Ｉまたはその塩および抗レトロウイルス薬を患者の血流内に維持しうる。医薬組成物としては、コーティング錠、ペレットおよびカプセル、ならびに生理液中で不溶性であるかその液中で機械的、化学的、酵素的活性に依存した医薬組成物の崩壊に続いて治療化合物の放出が起こる溶媒中の分散剤が挙げられるが、特に限定されない。
【００６５】
本発明の医薬組成物は、例えば、ピル、カプセルまたは錠剤の形態であってもよく、それぞれは、粉末剤または顆粒剤型で、あるいは液剤または懸濁剤型で、所定量の化合物Ｉまたはその塩および／または抗レトロウイルス薬を含み、そして好ましくは嚥下しやすいようにコーティングされる。本発明の一つの実施形態では、該医薬組成物は錠剤の剤型である。
【００６６】
経口投与のために、微粉末剤または細粒剤は、希釈剤、分散剤および／または表面活性剤を含んでもよく、また例えば水中またはシロップ中に、乾燥状態でカプセル内またはサッチェ内に、あるいは非水溶液中または懸濁剤が含まれうる懸濁液中、あるいは結合剤および滑剤が含まれうる錠剤中に存在していてもよい。該医薬組成物はまた、甘味料、香料、保存剤（例、抗菌性保存剤）、懸濁剤、増粘剤および／または乳化剤といった追加の成分を含んでいてもよい。
【００６７】
溶液の剤型または懸濁液の剤型で投与する場合、当該製剤は純水を含んでもよい。溶液または懸濁液中の任意選択の成分としては、適切な甘味料、香料、保存剤（例、抗菌性保存剤）、緩衝剤、溶剤およびそれらの混合物が挙げられる。当該製剤の成分は、一つ以上の機能に役立ちうる。例えば、適切な緩衝剤はまた、甘味料と同様に香料としても作用しうる。
【００６８】
適切な甘味料としては、例えばサッカリンナトリウム、ショ糖およびマンニトールが挙げられる。二種またはそれ以上の甘味料の混合物を用いてもよい。甘味料またはそれらの混合物は、典型的に全組成の約０．００１重量％から約７０重量％までの量で存在する。患者が医薬組成物を摂取し易くするために、チェリーの香り、綿菓子の香りまたは他の適当な香りを与える目的で、医薬組成物中に適当な香料が存在してもよい。香料またはその混合物は、典型的に全組成の約０．０００１重量％〜約５重量％の量で存在する。
【００６９】
適切な保存剤としては、例えばメチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸ナトリウムおよび塩化ベンザルコニウムが挙げられる。二種またはそれ以上の保存剤の混合物を用いてもよい。保存剤またはその混合物は、典型的に全組成の約０．０００１重量％〜約２重量％の量で存在する。
【００７０】
適切な緩衝剤としては、例えばクエン酸、クエン酸ナトリウム、リン酸、リン酸カリウムおよび種々の他の酸または塩が挙げられる。二種またはそれ以上の緩衝剤の混合物を用いてもよい。緩衝剤またはその混合物は、典型的に全組成の〜約０．００１重量％〜約４重量％の量で存在する。
【００７１】
適切な溶液または懸濁液としては、例えば、ソルビトール（sorbital）、グリセリン、プロピレングリコールおよび水が挙げられる。二種またはそれ以上の溶媒の混合物を用いてもよい。当該溶媒または溶媒系は、典型的に全組成の約１重量％〜約９０重量％の量で存在する。
【００７２】
該医薬組成物は、アジュバントと共投与されていてもよい。人為的に壁の透過性を増大させるために、例えばポリオキシエチレンオレイルエーテルおよびｎ−ヘキサデシルポリエチレンエーテルといった非イオン性界面活性剤が投与されていてもよいし、あるいは医薬組成物中に含まれていてもよい。酵素阻害剤もまた投与されてもよいし、あるいは該医薬組成物中に含まれていてもよい。
【００７３】
化合物Ｉまたはその塩および抗レトロウイルス薬の併用は、別々の組成物として処方することができ、実質的に同時に投与される。あるいは、化合物Ｉまたはその塩および抗レトロウイルス薬は、同時に一種または二種の活性剤のみがある時点で宿主内に治療有効量で存在するように、異なる時間に宿主に投与され得る。本発明の他の実施態様では、化合物Ｉまたはその塩および抗レトロウイルス薬の併用は、全ての活性剤がそれぞれの量において宿主に治療有効量で投与されるように、単一の組成物として処方され得る。従って、化合物Ｉまたはその塩および他の抗レトロウイルス剤は、連続的に、または同時に個体に投与されうる。
【００７４】
本発明の組成物および方法はまた、ＨＩＶ複製またはＨＩＶインテグラーゼ活性を阻害するために用いてもよい。例えば、有効量の化合物Ｉまたはその塩を、ＨＩＶに接触させてもよく、または少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であるＨＩＶに接触させてもよい。これに関連して「有効量」とは、あるアッセイおよび測定に適した終点を用いて測定した場合に、結果的にウイルス複製またはウイルスインテグラーゼ活性を測定可能に減少させる量のことをいう。例として、インビボでウイルス複製またはインテグラーゼ活性を阻害する有効量とは、投与に続けて、治療下において一定の疾患または状態に関連した症状を検出可能に改善する量である。インビトロアッセイにおいて、ウイルス複製またはウイルスインテグラーゼ阻害がより直接的に測定されうる。例えば、ウイルス誘発性細胞毒性の減少によってである。
【００７５】
本発明の組成物および方法はさらに、ＨＩＶ感染を治療するための、化合物Ｉまたはその塩との併用治療に有益であり得る追加の抗レトロウイルス薬を同定するために用いられうる。例えば試験化合物は、化合物Ｉまたはその塩との併用で、あるいは化合物Ｉまたはその塩と少なくとも一種の他の抗ＨＩＶ薬との併用で、ＨＩＶ感染細胞培養中に投与してもよく、そして細胞培養中におけるレトロウイルスの複製が測定され、標準サンプルと比較される。結果を比較することにより、例えば、化合物Ｉまたはその塩、あるいは化合物Ｉまたはその塩と少なくとも一種の他の公知の抗ＨＩＶ薬との併用で、有益に用いられ得る試験化合物が示されるだろう。
【００７６】
本発明はまた、（ｉ）化合物Ｉまたは医薬的に許容されるその塩、および（ｉｉ）化合物Ｉまたは医薬的に許容されるその塩以外の、抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物を含んでなる、キットを提供する。本発明の一つの実施態様では、当該キットはＴｒｕｖａｄａ（登録商標）（テノホビル＋エムトリシタビン）、エルブシタビン、ＧＷ２０４９３７、ＧＷ６７８２４８、ＭＫ−０５１８、ＲＳＣ１８３８、Ｖ−１６５、Ｃ−２５０７、ＢＭＳ５３８１５８およびＬ−９００５６４から選択される抗ＨＩＶ活性を有する少なくとも一種の薬物を含む。該キットは、一種またはそれ以上の本発明の医薬組成物を含んでいてもよい。該キットはさらに、容器、および／または化合物Ｉまたはその塩が、ＨＩＶ感染の治療、ＨＩＶインテグラーゼ活性の阻害、あるいは少なくとも一種の抗ＨＩＶ薬に耐性であるＨＩＶの、ＨＩＶ感染の治療またはＨＩＶインテグラーゼ活性の阻害に用いられうることを記載した記載物、を含んでいてもよい。
【実施例】
【００７７】
本発明を、以下の実施例によって示すが、これらはいかなる方法に限定することも意図していない。
【００７８】
実施例１
様々なｐｏｌタンパク質を含む組換えＨＩＶ−１分離株のパネルに対する化合物Ｉの抗ウイルス活性を評価するために、本実験では、ＰｈｅｎｏＳｅｎｓｅＴＭ  ＨＩＶアッセイを用いた。
【００７９】
ＰｈｅｎｏＳｅｎｓｅＴＭ  ＨＩＶアッセイの詳細な方法は、Ｐｅｔｒｏｐｏｕｌｕｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４４：９２０−９２８（２０００）に記載されている。詳細には、組換えＨＩＶ−１分子クローンは、感染患者の血漿サンプルからプロテアーゼおよびＲＴ配列を増幅し、そして増幅産物を組換え分子クローンであるＨＩＶ−１  ＮＬ４−３（参照クローン）のｐｏｌ領域に挿入することによって構築される。これらのクローンはｅｎｖ領域中にルシフェラーゼ遺伝子カセットを含んでいるので、感染細胞中のルシフェラーゼ活性によりウイルス複製を測定することができる。
【００８０】
１２０個の組換えクローンが製造され、ＲＴおよびプロテアーゼ領域の変異部位を、全１２０個の組変えクローンに対して徹底して分析した。これらの組換えクローンのうち、１１２個のクローンは、プロテアーゼまたはＲＴコード領域中に一つ以上の薬物耐性関連変異を有しており、８個のクローンは、これらの領域中に重要な変異を有しておらず、それゆえ野生型クローンに指定された。
【００８１】
化合物Ｉへの抗ウイルス感受性、および１６種の認可された抗ＨＩＶ薬への抗ウイルス感受性を、Ｐｅｔｒｏｐｏｕｌｕｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４４：９２０−９２８（２０００）に記載されているように、全１２０組換えクローンに対して評価した。１０ｃｍ培養皿中で、ＨＥＫ２９３細胞に、
１）プロテアーゼ／逆転写酵素領域、およびエンベローブ領域の欠失領域中に挿入されたルシフェラーゼ標識遺伝子を含んでなるＨＩＶ−１ゲノムベクター、ならびに
２）両種性マウス白血病ウイルスエンベローブを発現するプラスミド、
をコトランスフェクションした。薬物感受性の評価のために、ＮＬ４−３（ＨＩＶ−１の実験室株）由来の薬物感知耐性試験ベクターを参照ウイルスとして用いた。プロテアーゼ阻害剤（ＰＩ）試験のために、トランスフェクトされた細胞をトランスフェクションの約２４時間後トリプシン処理し、段階希釈した薬物を含む９６穴プレートに播腫した。トランスフェクトしたＨＥＫ２９３細胞から翌日にウイルスを採取し、追加の薬物の非存在下で新鮮ＨＥＫ２９３細胞を感染させるために用いた。逆転写酵素（ＲＴ）阻害剤およびインテグラーゼ阻害剤試験のために、トランスフェクションの約４８時間後に、薬物の非存在下でウイルスをトランスフェクトした細胞から採取した。さらに、ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＲＴＩｓ）、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＮＲＴＩｓ）または化合物Ｉを、ウイルス感染の１日前に新鮮ＨＥＫ２９３細胞に加えた。標的細胞を感染させるための偽ウイルスの能力は、感染後約７２時間での感染細胞におけるルシフェラーゼの産生によって測定した。結果は、試験クローンにおけるＥＣ５０値の、参照クローン、ＮＬ４−３のＥＣ５０値との割合として表された（「増加倍率」）。
【００８２】
一種以上の薬物耐性関連変異を有する１１２個のクローンは、その表現型によって３つのクラスに分類された：ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤耐性型（ＮＲＴＩｒ）、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤耐性型（ＮＮＲＴＩｒ）およびプロテアーゼ阻害剤耐性型（ＰＩｒ）。これらは表１に示されている。これらの表現型に関する遺伝的変異（Ｄ’Ａｑｕｉｌａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｏｐｉｃｓ  ｉｎ  ＨＩＶ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １１：９２−９６，２００３）もまた、表１に示されている。１１２個のクローンにおける遺伝的変異は、さらに、遺伝子型によって１６のクラスに分類され、これらは表２に示されている。表２はまた、全１２０個の組換えクローンのＨＩＶ複製に係る、化合物Ｉと１６個の認可された抗ＨＩＶ薬の影響を集約している。それぞれの抗ＨＩＶ薬および化合物Ｉに対する各クローンの増加倍率値は、１６個の遺伝子型クラスのそれぞれに対して集計され、平均化される。
【００８３】
【表１】
2009525261.tif 000004
【００８４】
【表２−１】
2009525261.tif 000005
【００８５】
【表２−２】
2009525261.tif 000006
【００８６】
さらに、１２０個の組換えクローンの化合物Ｉへの抗ウイルス感受性は、表３に纏められている。
【００８７】
【表３】
2009525261.tif 000007
【００８８】
要約すると、化合物Ｉは、１．０６ｎＭの平均ＥＣ５０値を有するような、１２０個の組換えＨＩＶクローンに対する強い阻害活性を示した（表３）。この値は、参照クローンにおけるＥＣ５０値に匹敵するものであった（表３）。さらに、化合物ＩはＮＲＴＩｒ、ＮＮＲＴＩｒおよびＰＩｒを含む多くのタイプの薬物耐性クローンに対する強い阻害活性を維持していた。これに対して１６種の試験された抗ＨＩＶ薬の多くは、対応する薬物への耐性を与える遺伝子的変異を持つ組換えクローンに対する抗ウイルス活性の著しい減少を示した（表２）。
【００８９】
本実験は、化合物Ｉが野生型ＨＩＶ−１、ならびにＨＩＶプロテアーゼ領域およびＲＴ領域中に薬物耐性に関連した遺伝子的変異を持つ種々の組換えＨＩＶクローンに対する強い阻害活性を示すことを証明した。
【００９０】
実施例２
本実験では、化合物Ｉおよび他の抗レトロウイルス薬の抗ウイルス効果および細胞毒性が、薬物耐性のＨＩＶ−１分離株のパネルに対するのと同様に、ＨＩＶ−１サブタイプのパネルに対する、標準的な末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を基準とした抗ＨＩＶアッセイで評価した。さらに、当該化合物の、３つのＨＩＶ−１マクロファージ指向性ウイルス株に対する、マクロファージ中における抗ウイルス効果を試験した。
【００９１】
粉末形態の化合物Ｉと、希釈剤としてのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を用いて、２０ｍＭのストック溶液を調製した。化合物Ｉは、１００ｎＭと、８つの追加の連続した３．２倍（ｈａｌｆ−ｌｏｇ）希釈系列で試験した。他の抗レトロウイルス薬、ＡＺＴ、エファビレンツおよびネルフィナビルは、実施する全てのアッセイでコントロール化合物として用いた。エンフビルチド（Ｔ−２０）はまた、薬物耐性ＨＩＶ−１分離株を用いた本アッセイにおいて、コントロール化合物としても挙げられる。
【００９２】
材料
新鮮ヒト血液は、Ｉｎｔｅｒｓｔａｔｅ  Ｂｌｏｏｄ  Ｂａｎｋ，Ｉｎｃ．（Ｍｅｍｐｈｉｓ，ＴＮ）から商業的に得た。ＨＩＶ−１  Ｏ群からの１つの分離株と同様に、７つのＨＩＶ−１  Ｍ群  エンベロープサブタイプＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，ＦおよびＧからの分離株をそれぞれ表すために、１１個のＨＩＶ−１臨床分離株を本実験に選択した。３つの追加のサブタイプＢウイルスも選択した（表４）。全てのＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２ウイルス分離株は、ＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍから得た。新鮮ヒトＰＭＢＣを用いて各ウイルスの低継代ストックを調製し、液体窒素中に保存した。
【００９３】
ＨＩＶ−１分離株０５２−５２，１０６４−５２，１４４−４４および１００２−６０は、上清ウイルスとしてＭｅｒｃｋ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから得た。これらの分離株のプロテアーゼタンパク質中に観察される主要なアミノ酸置換は表５中に提供される。多剤耐性のＨＩＶ−１分離株ＭＤＲ７６９，ＭＤＲ１３８５，ＭＤＲ３７６１およびＭＤＲ８０７は、Ｔｈｏｍａｓ  Ｃ．Ｍｅｒｉｇａｎ博士（スタンフォード大学）から得た。これらのウイルスに対する薬物耐性プロファイルは表６に提供される。当初、ウイルス分離株は、各患者からの初代培養ＰＢＭＣの正常ヒト供血者ＰＢＭＣとの共培養によって得られる。
【００９４】
【表４】
2009525261.tif 000008
【００９５】
【表５】
2009525261.tif 000009
【００９６】
【表６】
2009525261.tif 000010
【００９７】
実施する全てのアッセイにおいて、各ウイルスの前滴定したアリコートは、フリーザー（−８０℃）からとり除かれ、そして生物的安全キャビネット中で、使用前速やかに室温ですばやく融解される。フィトヘムアグルチニン（ＰＨＡ−Ｐ）は、Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から得、また組換えＩＬ−２はＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）から得た。
【００９８】
新鮮ヒトＰＢＭＣにおける抗ＨＩＶ有効性評価
ＨＩＶおよびＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）に対して血清反応陰性である新鮮ヒトＰＢＭＣは、選別されたドナーから分離された（Ｉｎｔｅｒｓｔａｔｅ  Ｂｌｏｏｄ  Ｂａｎｋ，Ｉｎｃ．Ｍｅｍｐｈｉｓ，ＴＮ）。細胞をペレットにして洗浄することを低速遠心によって２〜３度行いＰＢＳ中に再懸濁することで、夾雑している血小板を除いた。次いで白血球泳道血液をＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）で１：１に希釈し、５０ｍＬの遠心チューブ中、１４ｍＬのリンパ球分離培地（ＬＳＭ；Ｃｅｌｌｇｒｏ（登録商標）  ｂｙ  Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．；密度１．０７８＋／−０．００２ｇ／ｍｌ；Ｃａｔ．＃８５−０７２−ＣＬ）上に層化して、次いで６００×ｇで３０分間遠心した。結果生じた界面から層状のＤＢＭＣを穏やかに吸引し、次いで低速遠心によってＰＢＳで２回洗浄した。最終の洗浄後、細胞をトリパンブルー排除によってカウントし、１５％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、および２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、４μｇ／ｍＬフィトヘムアグルチニン（ＰＨＡ−Ｐ，Ｓｉｇｍａ）を追加したＲＰＭＩ１６４０中、１×１０７細胞／ｍＬで再懸濁した。細胞を３７℃で４８−７２時間インキュベートした。インキュベーションの後ＰＢＭＳを遠心し、１５％ＦＢＳ、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、１０μｇ／ｍＬジェンタマイシンおよび２０Ｕ／ｍＬ組換えヒトＩＬ−２（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ）を含むＲＰＭＩ１６４０中に再懸濁した。ＰＨＡ分裂刺激によって開始する細胞分裂を維持するため、ＩＬ−２を培養液中に加えた。ＰＢＭＣはこの倍地中、アッセイプロトコールを用いるまで週２回の培地交換をして、１〜２×１０６細胞／ｍＬの濃度で維持した。細胞は、アッセイに用いるには古すぎるとみなされる前まで最大２週間培養し続け、そして廃棄された。組織培養フラスコに接着した結果として、単球は培地から欠失した。
【００９９】
Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅによって開発された標準フォーマットに基づいて、標準的なＰＢＭＣアッセイでは、少なくとも二人の正常ドナーからのＰＨＡ−Ｐ刺激細胞がプールされ（一緒に混合された）、終濃度１×１０６細胞／ｍＬで新たな培地中に希釈し、９６穴丸底マイクロプレートの内壁に５０μＬ／ウェル（５×１０４細胞／ウェル）で播種した。個々のドナー間で観察されるバラつきを最小限にするために、一人以上のドナーからの単核細胞のプール（混合）が使用されたが、これはＨＩＶ感染における量的および質的な違いや、初代培養リンパ球集団のＰＨＡおよびＩＬ−２への全体応答のためである。各プレートは、ウイルス／細胞標準ウェル（細胞＋ウイルス）、実験用ウェル（薬物＋細胞＋ウイルス）および化合物標準ウェル（薬物＋無細胞培地、下記細胞毒性のＭＴＳモニタリングに必要）を含んでいた。ＨＩＶ−１はＰＢＭＣに対しては細胞変性作用を持たないので、これによって抗ウイルス活性および細胞毒性測定のために、同じアッセイプレートを使用することができる。
【０１００】
試験薬物の希釈液をマイクロタイターチューブ内に２×濃度で調製し、各濃度（の希釈液）（１００μＬ）を各ウェルに標準フォーマットを用いて配置した。ウイルスストックの規定の希釈液（５０μＬ）を各試験ウェルに配置した（最終感染多重度（ＭＯＩ）≒０．１）。ＰＢＭＣの培養を、感染後７日間、３７℃、５％ＣＯ２で維持した。この期間の後、逆転写酵素活性の分析およびｐ２４抗原ＥＬＩＳＡのために、細胞フリーの培養上清サンプルを回収した。細胞の生存率を決定するために、上清サンプルを除去した後、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム分子内塩（ＭＴＳ）をプレートに添加して細胞毒性を測定した。ウェルはまた微視的に観察し、あらゆる異常が記録された。
【０１０１】
培養物中に適切でより整合性ある水準のウイルス感染を得るために、あるウイルス分離株（ＢＲ／９２／０２５，ＢＣＦ０１およびＭｅｒｃｋ１４４−４４）に対しては、標準的アッセイを若干修正して、薬物を添加する前にウイルスのＰＢＭＣとの予備インキュベーション工程を組み入れた。当該修正アッセイでは、プールされたドナーからの８×１０６個の細胞を１．０ｍＬのストックウイルスで１時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートし、次いで９００ｒｐｍ（２００×ｇ）で１時間遠心した。次いで細胞を穏やかに再懸濁し、追加で２時間インキュベートした。この２回目のインキュベーションの間に、プールされたドナーからの２．５×１０４個の非感染ＰＢＭＣを、丸底９６穴プレートの内側の６０ウェルに５０μＬの培地体積で添加し、次いで培地で２×濃度に希釈した化合物（１００μＬ）を適切なウェルに加えた。２回目のインキュベーションの終りに、感染細胞を培地で５×１０５細胞／ｍＬ（ウイルスの排出なし）の濃度に希釈し、５０μＬをプレートの各ウェルに添加した。本アッセイの残りの工程は標準的アッセイと同様の方法で実施された。
【０１０２】
新鮮ヒト単球／マクロファージにおける抗ＨＩＶ有効性評価
単球／マクロファージを、３７℃、５％ＣＯ２で２〜１８時間かけて、９６ウェル平底プレートの内側の６０ウェルに接着させた。培養６〜１４日後、単球／マクロファージ培養細胞を３回洗浄し、非接着細胞のいくつかを除去し、段階希釈した試験化合物を添加し、次いで前滴定量のＨＩＶを添加した。培養細胞を感染後２４時間の培地除去によって最後に一回洗浄し、未使用の化合物を添加し、そして培養を追加で６日間続けた。当該アッセイは、Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅおよび上記によって開発された、標準化したマイクロタイタープレートフォーマットを用いて実施した。市販のｐ２４ＥＬＩＳＡアッセイ（Ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いてＨＩＶｐ２４抗原量を分析されるアッセイの終結点で、細胞フリーの培養上清サンプルを回収することによってウイルス複製を測定した。上清サンプルの除去に次いで、化合物の細胞毒性を、ＭＴＳをプレートに添加して細胞生存率を決定することによって測定した。ウェルはまた微視的に観察し、あらゆる異常が記録された。ＨＩＶ逆転写酵素阻害剤であるＡＺＴを陽性対照として用い、それぞれの決定と平行して実験を行った。
【０１０３】
逆転写酵素活性アッセイ
マイクロタイタープレートをベースとした逆転写酵素（ＲＴ）反応が利用された（Ｂｕｃｋｈｅｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＩＤＳ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ  ７：２９５−３０２，１９９１）。トリチウム化したチミジン三リン酸（３Ｈ−ＴＴＰ，８０Ｃｉ／ｍｍｏｌ，ＮＥＮ）を１ｍＣｉ／ｍＬで、１：１のｄＨ２Ｏ：Ｅｔｈａｎｏｌ中で受け取った。１５０μＬのｐｏｌｙ  ｒＡ（２０ｍｇ／ｍＬ）を、０．５ｍＬのｏｌｉｇｏ  ｄＴ（２０ｕｎｉｔｓ／ｍＬ）および５．３５ｍＬの無菌ｄＨ２Ｏと混合し、次いで等分（１．０ｍＬ）し、−２０℃で保存することで、Ｐｏｌｙ  ｒＡ：ｏｌｉｇｏ  ｄＴテンプレート：プライマー（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）をストック溶液として調製した。ＲＴ反応緩衝液を新たに毎日調製した。これは１２５μＬの１．０Ｍ  ＥＧＴＡ，１２５μＬのｄＨ２Ｏ，１２５μＬの２０％ｔｒｉｔｏｎＸ  １００，５０μＬの１．０Ｍ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、５０μＬの１．０Ｍ  ＤＴＴおよび４０μＬの１．０Ｍ  ＭｇＣｌ２からなる。最終的な反応混合物は、１部の３Ｈ−ＴＴＰ、４部のｄＨ２Ｏ、２．５部のｐｏｌｙ  ｒＡ：ｏｌｉｇｏ  ｄＴストックおよび２．５部の反応緩衝液を混合することによって調製した。この反応混合物の１０μＬを丸底マイクロタイタープレートに配置し、１５μＬの培養上清を含むウイルスを添加し、混合した。プレートを３７℃で６０分間インキュベートした。インキュベーションに続いて、反応体積をＤＥ８１  ｆｉｌｔｅｒ−ｍａｔｓ（Ｗａｌｌａｃｈ）上にスポットし、５％リン酸ナトリウム緩衝液または２×ＳＳＣ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で５分間、各５回洗浄した。次いでそれぞれ１分間、蒸留水で２回洗浄し、それぞれ１分間、７０％エタノールで２回洗浄し、次いで乾燥した。一体となった放射活性（カウンツ・パー・ミニット，ＣＰＭ）は、標準的液体シンチレーション技術を利用して定量した。
【０１０４】
細胞毒性を測定するための、ＰＢＭＣ生存率用ＭＴＳ染色
アッセイの終結点において、細胞生存率を決定し、化合物毒性を定量するために、アッセイプレートを、溶解性テトラゾリウムをベースとした色素ＭＴＳ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム分子内塩）（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  Ｒｅａｇｅｎｔ，Ｐｒｏｍｅｇａ）で染色した。代謝的に活性な細胞のミトコンドリア内酵素はＭＴＳを代謝して、溶解性のホルマザン産物を生じる。これにより、細胞生存率および化合物の細胞毒性に係る迅速な定量分析が可能となる。ＭＴＳは、使用前に調合の必要がない安定な溶液である。本アッセイの終点において、２０μＬのＭＴＳ試薬をウェルごとに添加した。次いでマイクロタイタープレートを３７℃で４〜６時間インキュベートした。インキュベーションの間隔は、最適な色素減縮のために実験的に決定された時間に基づき選択した。接着プレートシーラーを蓋の代わりに用い、密閉したプレートを数回反転させて溶解性ホルマザン産物を混合した。プレートは、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＶｍａｘまたはＳｐｅｃｔｒａＭａｘＰｌｕｓプレートリーダーを用い、４９０／６５０ｎｍにおいて分光光度法で読みこんだ。
【０１０５】
ｐ２４抗原ＥＬＩＳＡ
ＥＬＩＳＡキットは、Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓから購入した。該アッセイは製造者の指示書に従って実施した。それぞれのサンプルにおけるｐ２４抗原の量を正確に定量するために、各アッセイにおいて標準曲線を描いた。データは、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ｖｍａｘプレートリーダーを用いた４５０ｎｍにおける分光光度法的分析によって得られた。終濃度は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＳＯＦＴｍａｘ  Ｐｒｏソフトウェアパッケージを用いた光学密度値から計算した。
【０１０６】
データ分析
社内のコンピュータプログラムを用いて、各ウイルスおよび化合物に対するＩＣ５０（５０％のウイルス複製の阻害）、ＴＣ５０（５０％の細胞毒性）および治療指数（ＴＩ、ＴＣ５０／ＩＣ５０）を決定した。これらを表７−１０に示す。
【０１０７】
【表７−１】
2009525261.tif 000011
【０１０８】
【表７−２】
2009525261.tif 000012
【０１０９】
【表８−１】
2009525261.tif 000013
【０１１０】
【表８−２】
2009525261.tif 000014
【０１１１】
【表９】
2009525261.tif 000015
【０１１２】
【表１０】
2009525261.tif 000016
【０１１３】
表７−１０で要約した結果に示すように、化合物Ｉは、全てのＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２および本実験で試験した薬物耐性分離株に対して広範な活性を有する、高活性な抗ＨＩＶ化合物であることが分かった。化合物Ｉは、薬物感受性の表現型を持つウイルス（すなわち野生型ウイルス；表７および９）に対して非常に有効であり、平均ＩＣ５０値はそれぞれ、ＰＢＭＣにおいて０．６２±０．４１ｎＭ（ｎ＝１１ウイルス）であり、マクロファージ培養細胞において０．３５±０．３０ｎＭ（ｎ＝３ウイルス）である。同様の抗ウイルス有効性（ＩＣ５０＝０．５３ｎＭ）がまた、単一のＨＩＶ−２分離株において観察された（表１０）。本実験で評価された、他のＦＤＡ認可された逆転写酵素およびプロテアーゼ阻害剤（すなわち、ＡＺＴ、エファビレンツおよびネルフィナビル）と比較して、化合物Ｉは最も有効な評価された化合物であった。エファビレンツおよび化合物Ｉは、本実験で評価された多くの薬物感受性ウイルスに対して同様の有効性を持っていた（表７および９）。化合物Ｉは、本実験で評価された多剤耐性ウイルスに対し、全ての標準化合物と比較して、より優れているか同等の有効性を有していた（表８）。
【０１１４】
化合物Ｉはまた、ＰＢＭＣにおいて、薬物耐性ウイルスパネルで試験した全てのウイルスに対する有効な抗ウイルス活性を保持している（表８）。よく特徴付けられたプロテアーゼ薬耐性および多剤耐性の表現型を有するウイルスを利用した場合、化合物Ｉは、ＰＢＭＣにおける０．４６±０．３９ｎＭ（ｎ＝８ウイルス）の平均ＩＣ５０値を有する、完全な抗ウイルス活性を保持していた。ＡＺＴ、エファビレンツおよびネルフィナビルは、幾つかのウイルス（例、ＭＤＲ１３８５，ＭＤＲ３７６１）に対して完全に不活性であった（ＩＣ５０＞１０００ｎＭ）一方で化合物Ｉは、これらのウイルスに対する抗ウイルス効果（ＩＣ５０＜１ｎＭ）を保持していた。
【０１１５】
本アッセイの全体的な性能は、期待した水準の抗ウイルス活性を示す陽性対照化合物によって有効性が確認された。さらに、ＭＯＩ感受性陽性対照化合物であるＡＺＴは、期待した結果をもたらした（ＩＣ５０＜１０ｎＭ）。これにより、適当なウイルス力価が報告された抗ウイルスアッセイに利用される証拠が提供された。マイクロタイタープレートの各ウェルにおける細胞の巨視的観察により、細胞毒性が、ＭＴＳ代謝色素による、引き続いて得られる細胞染色を生じさせることを立証した。
【０１１６】
実施例３
化合物Ｉと公知の抗ＨＩＶ剤との併用使用の効果は、以下に記載するように決定されうる。
【０１１７】
化合物Ｉと、ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（例、ジドブジン，ラミブジン，テノホビル）、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（例、エファビレンツ）、プロテアーゼ阻害剤（例、インジナビル，ネルフィナビル）またはインテグラーゼ阻害剤といった少なくとも一種の抗ウイルス薬との併用効果は、ＨＩＶ−１  ＩＩＩＢ−感染ＣＥＭ−ＳＳ細胞を用いた急性感染系において、ＸＴＴ法によって評価されうる（Ｗｅｉｓｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．８１：５７７−５８６，１９８９；Ｒｏｅｈｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  １４２：２５７−２６５，１９９１）。化合物Ｉと、少なくとも二種の抗レトロウイルス薬との併用効果もまた、この系を用いて評価されうる。
【０１１８】
はじめに、それぞれの抗レトロウイルス薬単独のＩＣ５０およびＣＣ５０（５０％の細胞毒性量）が決定される。次いで、種々の濃度の化合物Ｉおよび種々の濃度の他の抗レトロウイルス薬を含んでなる組成物が調製され、かつ評価される。化合物Ｉおよび少なくとも二種の抗ウイルス剤を含んでなる併用剤において、化合物Ｉ以外の抗ウイルス剤が種々の濃度の化合物Ｉと混合かつ併合され、そして評価される。実験データは、Ｐｒｉｃｈａｒｄ  ａｎｄ  Ｓｈｉｐｍａｎ  ＭａｃＳｙｎｅｒｇｙ  ＩＩ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．０１およびＤｅｌｔａ  ｇｒａｐｈ  ｖｅｒｓｉｏｎ  １．５  ｄのプログラムを用いて分析する。三回の実験から三次元プロットを９５％（または６８％、９９％）の信頼水準で作成し、そこから計算されたμＭ２％の数値に基づいて併用使用の結果が評価される。評価基準を以下に示す。
【０１１９】
【表１１】
2009525261.tif 000017
【０１２０】
本明細書中に示される、刊行物、特許出願および特許を含む全ての参考文献は、参照をもってその全体が組み込まれるものである。本明細書中に他に示さない限り、または文脈で明確に否定されない限り、本発明（特に下記特許請求の範囲）の記載の文脈における「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」なる用語ならびに同様の指示対象の使用は、単数形および複数形の両方を包含するものと解される。他に示さない限り、「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」、「ｈａｖｉｎｇ」、「ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ」および「ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ」なる用語は、オープンエンドな用語（すなわち、「含むが、それに制限されない」ことを意味する）と解される。本明細書中に他に示さない限り、本明細書中の数値範囲の記載は当該範囲内のそれぞれ独立した値を個々に説明する簡略な方法として役立つことを意図するにすぎず、それぞれの独立した値は本明細書中に個別に記載されているのと同程度に明細書に組み込まれる。本明細書中に他に示さない限り、または文脈で明確に否定されない限り、本明細書に記載の全ての方法は、任意の適切な順番で行うことができる。他に主張されない限り、本明細書中に提供される任意のおよび全ての実施例、または例示の用語（例、「ｓｕｃｈ  ａｓ」）の使用は単に本発明をより明確にすることを意図するにすぎず、発明の範囲に限定を加えることはない。明細書中のいずれの用語も、特許請求されていない要素が本発明の実施に必須であることを示すと解釈されるべきではない。本明細書中の実施態様は、本発明の実施態様の一例を提供するものであり、本発明の範囲を限定するものであると解釈されるべきではない。多くの他の実施態様が特許請求した発明によって包含されること、以下の特許請求の範囲によって示される本発明の真の範囲および精神をもって、本明細書および実施例が典型例としてのみ考慮されることを意図することを、当業者は理解する。
【０１２１】
本出願は合衆国で出願された米国仮出願番号６０／７６３，９００を基礎としており、その内容は参照をもって本明細書に含まれるものである。本明細書中に記載の刊行物、特許出願および特許を含む全ての参考文献は、参照により全体が本明細書中に組み込まれるものである。
【国際調査報告】
2009525261.tif 000018
2009525261.tif 000019
2009525261.tif 000020