(57)【要約】  本発明は皮膚疾患（例：乾癬）を改善させるための外用剤組成物に関する。前記組成物は、アデノシルコバラミン（補酵素Ｂ１２）、又は、その他のコバラミンとの混合物から選択されるものを含有する。前記組成物は、リン脂質およびコレステロールで製造されたリポソーム剤形の形態で存在するのが好ましい。【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分としてアデノシルコバラミンを含有する皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項２】
前記組成物は０．０１〜７重量％のアデノシルコバラミンを含有する、請求項１記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項３】
前記組成物はメチルコバラミン、ヒドロキシコバラミンおよびシアノコバラミンからなる群から選択される少なくとも一つの有効成分を更に含有する、請求項１記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項４】
前記組成物はステロイド、ビタミンまたは免疫抑制剤を更に含有する、請求項１または３記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項５】
前記アデノシルコバラミンはリン脂質とコレステロールを含有するリポソームに組み込まれている、請求項１記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項６】
前記リン脂質とコレステロールの重量比は１−１０：１である、請求項５記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項７】
前記リン脂質はジアシル基の炭素数が３〜２４であるホスホコリンである、請求項５記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項８】
前記リン脂質は１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２−ジステロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、Ｌ−ａ−ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、１−パルミトイル−２−グルタロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＧＰＣ）、１，２−ジラウロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＭＰＣ）及び１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＯＰＣ）からなる群から選択された少なくとも一つである、請求項７記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項９】
前記組成物は炭素数８〜１６のアルキル基を有する界面活性剤を、有効成分１重量部に対して５０〜５００重量部含有する、請求項１記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項１０】
前記界面活性剤はラウリルエーテル系化合物またはポリエチレンオキシド系化合物である、請求項９記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項１１】
前記ラウリルエーテル系化合物はミリスチン酸イソプロピル、Ｂｒｉｊ３０、ラウリル硫酸ナトリウム、プロピレングリコールモノラウレート、モノラウリン、モノステアリン、モノオレイン、モノミリスチン、ラウリルアルコールおよびポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテルからなる群から選択される少なくとも一つの化合物である、請求項１０記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項１２】
前記ポリエチレンオキシド系化合物はＢｒｉｊ９０、プルロニック、ソルビタンモノパルミテートおよびソルビタントリオレートからなる群から選択される少なくとも一つの化合物である、請求項１０記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項１３】
前記組成物はヒドロゲル、エマルジョンクリーム、リポソーム含有ヒドロゲル、軟膏、液剤、懸濁剤、貼付剤、含水性貼付剤、スキンローションまたはローションからなる群から選択される一つの製剤に剤形化される、請求項１記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【請求項１４】
前記皮膚疾患はアトピー性皮膚炎、湿疹および乾癬からなる群から選択される、請求項１記載の皮膚疾患治療用外用剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は皮膚疾患改善用外用剤組成物に関し、特に、飲作用時、コバラミンの補酵素（ｃｏｅｎｚｙｍｅ）を構成するアデノシルコバラミン（補酵素 Ｂ１２）を有効成分（ａｃｔｉｖｅ  ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）として含有し、それ故に、既存のコバラミンおよびその誘導体含有製剤の改良を可能にする組成物に関する。そして、既存の製剤はコバラミン又はその誘導体が高分子量であるが故に、投与量１００％に対して、コバラミン又はその誘導体の９０％以上が排泄されてしまうため、薬効の発現が遅く、また、生体利用効率が非常に低いものである。
【背景技術】
【０００２】
皮膚炎は様々な外的要因または内的要因により引き起こされる炎症反応であり、通常は湿疹と呼ばれ、アトピー性皮膚炎、感染性皮膚炎および脂漏性皮膚炎を含む。
【０００３】
アトピー性皮膚炎は免疫グロブリン（ＩｇＥ）と関係していることが知られているが、現在まで、何がアトピー性皮膚炎を発症させるかは明確ではない。アトピー性皮膚炎は個体が特定物質に対して過敏すぎるアトピー性特性を有するため、外的要因、即ち、多様な抗原により症状が表れる。アトピー性皮膚炎の症状の出る部位は、幼少期には顔面の発赤、滲出性炎症および落屑のように、主に顔に集中する。そしてそれと共に非常な痒みを伴う。幼少期には症状の出る部位は通常主に顔に限られるが、次第に四肢に拡大し、毛孔性丘疹（すなわちアトピー性皮膚）が発現する。皮膚炎は１２歳までには治癒されることが多いが、成人で皮膚炎に罹患していると、四肢以外に顔や胸、首筋などにも苔癬症状が発症する。アトピー性皮膚炎は小児喘息を発現することもあり、皮膚炎が完治するまで長期間を要する可能性がある。また一方、皮膚炎は再発し、完治に至らない場合が多い。
【０００４】
アトピー性皮膚炎を含む皮膚炎の治療に、抗ヒスタミン剤とステロイドが現在は使用されている。抗ヒスタミン剤は主に痒みを抑制するのに使用され、例えば、プロメタミン塩酸塩（ｐｒｏｍｅｔｈａｍｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、マレイン酸クロルフェニラミン、塩酸ジフェンヒドラミンおよびメキタジンが含まれる。ステロイドは顕著な臨床効果を持つにもかかわらず、多様な副作用を有し、その例として、酪酸ヒドロコルチゾン、吉草酸デキサメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、プロピオン酸クロロベタゾール（ｃｈｌｏｒｏｂｅｔａｓｏｌ ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）およびプレドニゾロンがある。治療の効果においては、前記薬剤の外用剤（例えば軟膏剤）を塗布するのが最も効果的であり、これを代替し得るものは無い。更に、前記薬剤は治療効果を表すと共に、これらは誘導感染、二次性副腎皮質不全、糖尿病、消化性潰瘍、多毛症、脱毛症および色素沈着などの副作用を有することが知られている。特に、軟膏剤などの外用剤は、薬剤の皮膚への直接的な影響のため、皮膚の菲薄化または萎縮および顔面紅潮などの重大な副作用が現れる。従って、既存の皮膚炎治療剤より副作用が小さく、安定な薬剤が切実に要望されている。
【０００５】
コバラミンまたはビタミンＢ１２は食品中に存在するビタミンＢ群の一部である複雑な構造を有し、水溶液に溶解する。コバラミンの基本的な化学構造は二つの部分、すなわち、ポルフィリン環状構造とα−グリコシド結合を有するヌクレオチドから成っている。前記ポルフィリン環状構造は、４個の窒素原子がコバルトイオンに配位共有結合してキレート化合物を形成している４個の５，６−ジメチルベンズイミダゾール環を有している。コバルト原子にシアノ基が結合したコバラミンをシアノコバラミンと言い、このシアノ基の無い構造が生化学的にも栄養学的（ｎｕｔｒｉｔｉｏｎｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ）にも重要である。即ち、生体内で活性化の前にシアノ基は除去され、コバラミンは補酵素およびコバラミン酵素に変化する。
【０００６】
ヒトはポルフィリン環状構造を合成することができないため、ビタミンＢ１２の摂取は食物摂取に全面的に依存する。基本的なコバラミン分子は微生物によってのみ合成されるが、全ての哺乳動物の細胞はコバラミンを補酵素であるアデノシルコバラミンとメチルコバラミンに変換することができる。ヒドロキシルコバラミン、メチルコバラミンおよびアデノシルコバラミンは哺乳動物の組織から最も頻繁に分離されるコバラミンの３つの形態である。しかしながら、ヒト型酵素の中でメチルコバラミンとアデノシルコバラミンのみが補足因子（ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｌ  ｆａｃｔｏｒ）として働き得る。アデノシルコバラミンは細胞中の成分を構成し、ミトコンドリア内に存在し、一方、メチルコバラミンは通常、漿液と脳脊髄液のような体液または細胞質内に見い出される。コバラミンおよびその誘導体は皮膚炎、特に、インターロイキン（ＩＬ）−１α、ＩＬ−２、ＩＬ−６およびインターフェロン（ＩＦＮ）−γのような炎症性サイトカインの生成により引き起こされることが知られている、アトピー性湿疹の炎症の抑制活性を有することが報告されている［Yamashiki M.，Nishimura A.，Kosaka Y.；J．Clin．Lab．Immunol．；1992；37；173−182］。また、コバラミンとその誘導体は、アトピー性皮膚炎における発赤と痒みの主原因であり、炎症性サイトカインにより誘発される一酸化窒素（ＮＯ）の発生を効果的に抑制することが報告されている［Stucker M.，Pieck C.，Stoerb C.，Niedner R.，Hartung J.，Altmeyer P.；Br．J．Dermatol.；2004；150；977−983］。前述した通り、コバラミンおよびその誘導体の皮膚炎に対する治療効果を基に、外用剤として応用する試みがある。
【０００７】
しかしながら、コバラミンとその誘導体を皮膚炎、特にアトピー性皮膚炎の治療に利用しようとする従来技術は、以下に示す通り、効果を最大化させることに部分的に失敗した。第１に、有効成分として主にシアノコバラミン誘導体が使用されたが、シアノコバラミン誘導体が生体内でアデノシルコバラミンに変換されるまで効果を維持できなかった。第２に、コバラミンが光と熱に対して敏感で不安定であるため、薬剤効果が容易に減少し得る。第３に、皮膚浸透率が低く、治療効率も低い。
【０００８】
前記のような問題点を解決するため、有効成分の皮膚浸透性を増加させるために皮膚加速剤（ｓｋｉｎ  ａｃｃｅｌｅｒａｔｏｒ）を加え、有効成分としてアデノシルコバラミンを用いて、リポソーム、クリームまたはゲル形態の外用剤を調製する他の試みが行われてきている。
【０００９】
米国特許第５，７９８，３４１号（１９９８．８．２５）はシアノコバラミン、ヒドロキシコバラミンおよびメチルコバラミンを外用薬の調製に使用する方法を開示しており、Ａｌｌｅｒｇｙ社（Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）の米国特許第６，２５５，２９４号（２００１．７．３）はコバラミンおよびその誘導体を錠剤、ガム、舌下錠および粘液剤の剤形で経口または非経口によって輸送する方法について開示している。一方、Ａｕｄｒｅｙの米国特許出願公開第１０／７８２，８２７号（２００４．９．２）はビタミンＢ１２を銅、葉酸およびビタミンＣと組み合わせて使用することにより、錠剤、注射剤を調製する方法および皮膚塗布剤を開示している。更に、米国特許出願公開第０９／８５８，０３８号（２００２．１１．２１）はビタミンＢ１２をリポソームに剤形化し、その製剤を特異疾患を有する患者に投与する方法を開示している。更に、Ａｄｅｐｔｓｒｕｓ  Ｈｏｌｄｉｎｇ社（カナダ）はビタミンＢ１２を含む、皮膚の細胞保護、皮膚内の水分維持のための機能性化粧品クリームの開発を試みている。
【００１０】
しかしながら、前述した従来技術による製剤は、コバラミン誘導体としてシアノコバラミン、ヒドロキシコバラミンおよびメチルコバラミンを有効成分として含有しており、これらコバラミン誘導体は、体内で代謝を経て薬効を発現するための補酵素機能を有するアデノシルコバラミンに変換される必要があるため、迅速な薬効を示すことができない。さらに、コバラミンおよびその誘導体を経口剤、注射剤および経皮製剤に剤形化する試みは、次の理由により成功しなかった。コバラミン又はその誘導体は経口投与されたとき、非常に低い生体利用効率を示す。即ち、経口投与されたコバラミンまたはその誘導体はその９０％以上が４８時間以内に排泄されてしまい、注射剤に関しては、シアノコバラミンをリポソームに組み込んで注射剤に剤形化する技術について、具体的かつ詳細な説明が提示されていない。特に、注射投与した際、皮膚に残留するコバラミンまたはその誘導体の量が非常に少ないため、所望する結果を得るために、長期にわたる注射を必要とする。更に、コバラミンおよびその誘導体の皮膚浸透率を増加させる、言い換えれば、治療効率を向上させる技術は確立されていない。
【特許文献１】米国特許第５，７９８，３４１号
【特許文献２】米国特許第６，２５５，２９４号
【特許文献３】米国特許出願公開第１０／７８２，８２７号公報
【特許文献４】米国特許出願公開第０９／８５８，０３８号
【非特許文献１】Yamashiki M.，Nishimura A.，Kosaka Y.； J．Clin．Lab．Immunol．；1992；37；173−182
【非特許文献２】Stucker M.，Pieck C.，Stoerb C.，Niedner R.，Hartung J.，Altmeyer P.；Br．J．Dermatol.；2004；150；977−983
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
そこで、本発明者らは有効成分としてアデノシルコバラミンを含む組成物を利用し、そして、その組成物を、皮膚加速剤を加えたアデノシルコバラミン含有のリポソーム粒子を含む、エマルジョンクリーム、ヒドロゲルおよびゲル形態に剤形化し、これによって、皮膚炎の治療効果を増加させることを可能にして、本発明を完成するに至った。
【００１２】
従って、本発明はアデノシルコバラミンを有効成分として含有することにより、皮膚浸透効果が改善された外用剤組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は有効成分としてアデノシルコバラミンを含有する皮膚疾患改善用外用剤組成物に関する。アデノシルコバラミンはリン脂質とコレステロールを含有するリポソームに装填され得る。さらに、前記組成物は前述した有効成分に炭素数８〜１６のアルキル基を有する界面活性剤を更に含み得る。
【００１４】
本発明の詳細な説明を以下に示す。
【００１５】
本発明は、飲作用時、コバラミンの補酵素（ｃｏｅｎｚｙｍｅ）を構成するアデノシルコバラミン（補酵素 Ｂ１２）を有効成分として含有し、それ故に、既存のコバラミンおよびその誘導体含有製剤の改良を可能にする組成物に関する。そして、既存の製剤は投与量１００％に対してその９０％以上が排泄されてしまうため、薬効の発現が遅く、また、生体利用効率が非常に低いものである。
【００１６】
現在、皮膚炎の治療に使用されるコバラミンまたはその誘導体は、補酵素に変換されるまで薬効を示すことができず、そして皮膚浸透率が低いため、薬効の発現が遅く、治療効果が低いという欠点を持っている。他方、本発明で有効成分として用いるアデノシルコバラミンは、体内で代謝過程を経ることなく、補酵素として薬効を発揮し得るため、その結果として薬効が促進される。更に、本発明の組成物は生体親和的な皮膚加速剤を含み、それゆえ有効成分の皮膚浸透が改善されて、アトピー性皮膚炎、湿疹および乾癬に対しての治療効果に優れている。
【００１７】
本発明によるアデノシルコバラミン含有リポソームの調製方法の詳細な説明を以下に示す。
【００１８】
通常の方法により得られたリポソームに糖類を添加した後凍結乾燥し、リポソーム粒子を調製した。
【００１９】
まず、ホスホコリン系化合物（ＰＣ）の中から少なくとも一つのリン脂質を選択し、選択された少なくとも一つのリン脂質とコレステロールとを混合して水和した後、凍結乾燥してリポソーム粒子を準備した。
【００２０】
リン脂質とコレステロールは１〜１０：１（ｗ／ｖ）の混合比で混合された。コレステロールは疎水性結合を強くするのに用いられ、その混合比が前記範囲を外れた場合は、リポソーム粒子間で凝集または集塊（ａｇｇｌｏｍｅｒａｔｉｏｎ）が生じ得る。前記混合されたリン脂質の濃度は０．１〜１０ｍＭの範囲内で制御するのが好ましく、濃度がこの範囲を外れる場合は、薬剤の組み込み率が低下し、リポソーム粒子の凝集または集塊が生じる可能性があり、安定性が悪化する。
【００２１】
ホスホコリン系化合物（ＰＣ）はジアシル基の炭素数が３〜２４であり、好ましくは１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２−ジステロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、Ｌ−ａ−ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、１−パルミトイル−２−グルタロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＧＰＣ）、１，２−ジラウロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＭＰＣ）及び１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＯＰＣ）の中から選択された少なくとも一つの化合物である。
【００２２】
前記混合物を、クロロホルム、メタノールおよびエタノールのような脂溶性溶剤に溶解させた後、蒸発凝縮器を用いて前記溶媒を除去することにより薄い脂質膜が提供される。濃度差により薬剤を装填する役割を果たし得る硫酸アンモニウム溶液を添加し、脂質膜を水和させてリポソームを形成する。前記形成されたリポソームを減圧押出しすることにより、粒径サイズが３０〜４００ｎｍ、好ましくは９０〜１２０ｎｍのリポソーム粒子が提供される。
【００２３】
アデノシルコバラミンの添加により、前記リポソーム内部にアデノシルコバラミンが装填される。装填されなかったアデノシルコバラミンは透析により除去される。リポソーム内への装填効率は７０〜１００％である。
【００２４】
次に、このようにして得られたリポソーム溶液に１〜３０分間で、糖類が０．０１〜８０ｍＭ（ｗ／ｖ）の濃度になるよう添加され、次いで凍結乾燥することにより粉末アデノシルコバラミン含有のリポソーム粒子が提供される。
【００２５】
前記糖類は単糖類、二糖類または多糖類であり、特別に限定はしないが、単糖類の代表的な例としては、マンニトール、マルトース、グルコース、マンノースおよびフルクトースを含み、二糖類の例としては、マルトース、スクロースおよびトレハロースを含み、多糖類の例としては、ソルビトール、デキストリンおよびグルコサミンを含む。前記糖類を蒸留水に溶解し、濃度０．０１〜８０ｍＭの糖溶液を調製する。前記糖の濃度が０．０１ｍＭ未満の場合、凍結乾燥工程において、リポソームの安定性が悪化し、リポソーム粒子の凝集または集塊が生じるおそれがある。一方、８０ｍＭを超過する場合は、リン脂質に比べてかなり多量に糖類が含まれるため、粘度が増加し、弱いゲル状態となる。凍結乾燥工程は、−８０〜−７０℃での凍結工程と、−５０〜−４０℃での連続乾燥工程に分けられる。
【００２６】
前記のように、本発明によって調製されたアデノシルコバラミン含有リポソーム粒子は、再分散時にリポソーム形態を維持する支持体としての機能を果たす。糖の早い分散により、最適な保管温度、特定の糖、濃度およびリポソームとの混合比を選択的に制御することで、アデノシルコバラミンを長期間保管することができ、安定性を向上させることができる。
【００２７】
本発明によるアデノシルコバラミン含有ヒドロゲルの調製方法の詳細な説明を以下に示す。
【００２８】
まず、水溶性の基剤を３〜１０重量％の濃度で蒸留水に完全に溶解した後、その溶液にアデノシルコバラミンを添加して均一な水溶液を準備する。前記水溶液に乳化剤を０．５〜２重量％、溶剤を４０〜６０重量％添加した後、製剤の総量を調整するため蒸留水をさらに添加する。前記混合物をホモミキサー（ｈｏｍｏｍｉｘｅｒ）で３，０００〜６，０００ｒｐｍで均一な状態となるまで攪拌してゲルを製造する。
【００２９】
水溶性の基剤のいくつかの例には、カーボポール（ｃａｒｂｏｐｏｌ）、カルボマー、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリアクリル酸、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、アルギン酸塩、キチンまたはキトサン誘導体、及びこれらの混合物が含まれるが、これらに限定されるわけではない。更に、乳化剤として、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、グリセリル脂肪酸エステル、またはこれらの混合物のような非イオン性界面活性剤を使用することが好ましいが、乳化剤として、他の物質も制限無く使用し得る。前記溶剤のいくつかの例には、エタノール、イソプロパノール、酢酸エチル、プロピレングリコール、エトキシジグリコール、またはこれらの混合物が含まれるが、これらに限定されるわけではない。
【００３０】
本発明によるアデノシルコバラミン含有エマルジョンクリームの調製方法の詳細な説明を以下に示す。
【００３１】
まず、水酸化ナトリウム０．１〜２．０重量％を３次蒸留水に完全に溶解した後、アデノシルコバラミンをこの水溶液に添加し、６０〜９０℃下、アデノシルコバラミンが完全に溶解するまでマグネチックスターラーで攪拌することにより、有効成分が含有された水相を製造する。油相を形成する基剤を全体の５．０〜１５．０重量％、乳化剤を全体の２．０〜１０．０重量％加えて、６０〜９０℃下、全ての成分が完全に溶解するまでマグネチックスターラーで攪拌することにより、油相を製造する。
【００３２】
この水相と油相を６０〜９０℃下、ゆっくり混合してパドルミキサー（ｐａｄｄｌｅ ｍｉｘｅｒ）で２０分間攪拌した後、恒温槽で２０〜４０℃までゆっくり冷却させながら、均一な状態になるまでホモミキサーにて３，０００〜１０，０００ｒｐｍで攪拌することにより、乳化クリームを製造し、生成した泡は真空で完全に除去する。
【００３３】
油相を形成する基剤は飽和または不飽和炭化水素系オイル、およびこれらの混合物を含む。前記飽和炭化水素系オイルのいくつかの例には、流動パラフィン、パラフィンワックス、スクアレン、ワセリンおよびその他分岐炭化水素系オイルが含まれるが、これらに限定されるわけではなく、また、前記飽和または不飽和炭化水素系オイルのいくつかの例には、動物性脂肪、植物油などの天然オイルが含まれるが、これらに限定されるわけではなく、これらは全て本発明で使用することができる。
【００３４】
特に、本発明の別の特徴は、前記外用剤組成物が、更に皮膚浸透促進剤を有効成分１重量部に対して５０〜５００重量部含み、それによって有効成分の治療効果を向上させることにある。前記皮膚浸透促進剤の含有量が５０重量部未満の場合には、有効成分の皮膚吸収が十分に促進されないおそれがあり、一方、５００重量部を超過すると、製剤の相分離や、皮膚適用時にその適用感の低下を生じうる。
【００３５】
皮膚吸収性と皮膚親和性を増進させるために、炭素数８〜１６個のアルキル基を有する界面活性剤の中からラウリルエーテル系化合物またはポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）系化合物を皮膚浸透促進剤として、調製された製剤に添加する。ラウリルエーテル系化合物の代表的ないくつかの例には、ミリスチン酸イソプロピル、Ｂｒｉｊ３０、ラウリル硫酸ナトリウム、プロピレングリコールモノラウレート、モノラウリン、モノステアリン、モノオレイン、モノミリスチン、ラウリルアルコールまたはポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテルが含まれるが、これらに限定されるわけではない。ポリエチレンオキシド系化合物のいくつかの例には、Ｂｒｉｊ９０、プルロニック、ソルビタンモノパルミテートまたはソルビタントリオレートが含まれるが、これらに限定されるわけではない。
【００３６】
前記のように、本発明の発明者らは、アデノシルコバラミン含有外用剤組成物が、コバラミンまたはその誘導体が含有された既存の皮膚疾患治療用組成物に比べ、著しく優れる皮膚炎の治療効果を有することを突き止めた。このアデノシルコバラミン含有組成物は、有効成分を全組成１００重量％に対して０．０１〜７重量％含有することが好ましい。０．０１重量％未満の場合は皮膚炎の治療効果が十分ではなく、７重量％を超過する場合は皮膚のかぶれ（ｓｋｉｎ ｉｒｒｉｔａｔｉｏｎ）を生じるおそれがある。
【００３７】
更に、前記組成物はアデノシルコバラミンの他にメチルコバラミン、ヒドロキシコバラミン、およびシアノコバラミンのような既知の成分を少なくとも一つ更に含むことができ、同等、もしくはより優れた効果をもたらし得る。
【００３８】
また更に、前記組成物は、有効成分に加えて、デキサメタゾン、ベタメタゾン（ｂｅｔａｍｅｔａｓｏｎｅ）、ヒドロコルチゾン、プレドニゾロン、クロベタゾールのようなステロイド、タクロリムス、ピメクロリムスおよびシクロスポリンのような免疫抑制剤、およびトレチオニン（ｔｒｅｔｉｏｎｉｎ）、ビタミンＥ−アセテート、ビタミンＢ５のようなビタミンを更に含むことができ、効果の増大を示しうる。
【００３９】
その一方で、有効成分と薬学的に許容可能な担体または賦形剤を使用して、既存方法により、前記組成物を軟膏剤、液剤、懸濁剤、貼付剤、含水性貼付剤などの形で医薬品として、またはエマルジョン、ローション、クリーム、パック、スキンローション、石鹸などの形で化粧品として製剤化することができる。
【００４０】
前記有効成分の有効塗布量は患者の年齢はもとより、皮膚炎の重症度、部位によって決定されるが、例えば、１日２回または数回、１回当たり０．１〜５．０ｇの用量で塗布し得る。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４１】
以下、本発明を下記実施例により詳しく説明する。実施例は本発明を例証するのみであり、請求項記載の発明がこれに限定されるわけではない。
【００４２】
（実施例１）
本発明のアデノシルコバラミン含有リポソームが、遮光条件下、下記のように調製された。
【００４３】
１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）とコレステロール（ＣＨＯＬ）を各々９．５８ｍｇ／ｍＬと３．１９ｍｇ／ｍＬの濃度でクロロホルム５ｍＬに溶解させ、次いで、相転移温度４１℃以上で、回転蒸発凝縮器を使用して真空蒸留することにより、丸底フラスコの内壁に薄い脂質膜をもたらした。２４時間真空乾燥させて丸底フラスコ内に残留するクロロホルムを完全に除去した。
【００４４】
硫酸アンモニア水溶液（２５０ｍＭ）１０ｍＬを添加し、脂質膜が完全に分散されるまで水和させ、次いで、２分間隔で１０分間攪拌し、多重膜リポソームを準備した。水和が終了した後、加圧押出機を使用して２００ｎｍの空隙を有するポリカルボネート膜に５回、１００ｎｍの空隙を有するポリカルボネート膜に５回通過させて単膜リポソーム粒子を調製した。リポソームに含有されなかった硫酸アンモニウムを４℃で２４時間、膜透析除去を行うことにより、硫酸アンモニウム含有リポソームを調製した。
【００４５】
１０％（ｗ／ｖ）スクロース水溶液に、アデノシルコバラミンを１．５ｍｇ／ｍＬの濃度になるように溶解することによって、アデノシルコバラミン溶液を調製した後、アデノシルコバラミン溶液１０ｍＬを前記硫酸アンモニウム含有リポソームに添加した。次いで、６０℃で２時間攪拌した後、リポソームに含有されなかったアデノシルコバラミンを４℃で４８時間、膜透析除去を行い、アデノシルコバラミン含有リポソームを製造した。３次蒸留水を用いてマルトース水溶液（３０ｍＭ）を製造した後、その溶液を４℃で製造した同量のアデノシルコバラミン含有リポソーム溶液に添加して反応を行い、次いで、強力な冷凍庫で−７７℃下、１２時間凍結し、凍結乾燥機で−４５℃下、２４時間乾燥して微粉化した。
【００４６】
（実施例２）
本発明のアデノシルコバラミン含有ゲルが、遮光条件下、下記のように調製された。
【００４７】
有効成分として７０．０ｍｇのアデノシルコバラミンを正確に称量し、３０ｍＬの３次蒸留水に加え、次いで、マグネチックスターラーで緩やかに攪拌してアデノシルコバラミンを完全に溶解した。基剤として２．２ｇのカルボマー９４０を少量ずつ添加しながら、緩やかに攪拌して完全に溶解させた。前記溶液に５ｇのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）１０００、１．３５ｇのジエチルアミン（ＤＥＡ）、５５．０ｍＬのエタノールを、各々、基剤、乳化剤、溶剤として添加した。溶液の総量が１００ｇとなるように３次蒸留水を添加し、次いで、溶液が均一になるまで、室温下、ホモミキサーにて３，０００ｒｐｍで攪拌することによりアデノシルコバラミン含有ゲルを製造した。
【００４８】
（実施例３）
本発明のアデノシルコバラミン含有クリームが、遮光条件下、下記のように調製された。
【００４９】
１．０ｇの水酸化ナトリウムを７０ｍＬの３次蒸留水に完全に溶解させた。有効成分として７０．０ｍｇのアデノシルコバラミンを正確に称量して水酸化ナトリウム水溶液に添加し、次いで、アデノシルコバラミンが完全に溶解するまで９０℃下、マグネチックスターラーで攪拌することにより、有効成分を含有する水相を製造した。１３ｇのステアリン酸（基剤）と４ｇのラノリン、２ｇのスクロース脂肪酸エステル（乳化剤）を９０℃下、マグネチックスターラーで、２ｇのミリスチン酸イソプロピルに、完全に溶解させることにより油相を製造した。
【００５０】
前記のようにして得られた水相と油相を９０℃下、ゆっくりと混合してパドルミキサーで２０分間攪拌し、次いで、恒温槽で４０℃までゆっくりと冷却させながら、溶液が均一になるまでホモミキサーにて３，０００ｒｐｍで攪拌した。このようにして、乳化されたクリームを製造し、生成された泡は真空で完全に除去した。
【００５１】
（実施例４）
本発明のアデノシルコバラミン含有リポソームを含むゲルが、遮光条件下、下記のように調製された。
【００５２】
本実験は、有効成分としてアデノシルコバラミンの代りに、実施例１で調製した１００ｍｇの粉末化されたアデノシルコバラミン含有リポソームを使用する以外は、実施例２と同じ方法に従って実施された。
【００５３】
（比較例１）
有効成分としてアデノシルコバラミンの代りにシアノコバラミンを使用する以外は、実施例１と同じ方法に従ってリポソームを調製した。
【００５４】
（比較例２）
有効成分としてアデノシルコバラミンの代りにシアノコバラミンを使用する以外は、実施例２と同じ方法に従ってゲルを調製した。
【００５５】
（比較例３）
有効成分としてアデノシルコバラミンの代りにシアノコバラミンを使用する以外は、実施例３と同じ方法に従ってクリームを調製した。
【００５６】
（比較例４）
有効成分としてアデノシルコバラミンの代りに粉末化されたシアノコバラミン（１００ｍｇ）を使用する以外は、実施例４と同じ方法に従ってゲルを調製した。
【００５７】
（実施例５）
アデノシルコバラミンと共に皮膚加速剤としてＬｕｔｒｏｌ７５（１．０ｇ）を添加する以外は、実施例２と同じ方法に従ってゲルを調製した。
【００５８】
（実施例６）
アデノシルコバラミンと共に皮膚加速剤としてＢｒｉｊ３０（１．５ｇ）を添加する以外は、実施例３と同じ方法に従ってクリームを調製した。
【００５９】
（実施例７）
アデノシルコバラミンと共に皮膚加速剤としてソルビタントリオレート（１．７ｇ）を添加する以外は、実施例４と同じ方法に従ってゲルを調製した。
【００６０】
（実施例８）
アデノシルコバラミン（７０ｍｇ）とメチルコバラミン（３０ｍｇ）を添加する以外は、実施例５と同じ方法に従ってゲルを調製した。
【００６１】
（実施例９）
アデノシルコバラミン（７０ｍｇ）とプロピオン酸デキサメタゾン（５０ｍｇ）を添加する以外は、実施例６と同じ方法に従ってクリームを調製した。
【００６２】
（実施例１０）
アデノシルコバラミン（７０ｍｇ）とタクロリムス水和物（１５ｍｇ）を添加する以外は、実施例６と同じ方法に従ってクリームを調製した。
【００６３】
（実施例１１）
アデノシルコバラミン（７０ｍｇ）とトレチオニン（２５ｍｇ）を添加する以外は、実施例６と同じ方法に従ってクリームを調製した。
【００６４】
（試験例１）外用薬の抗炎症活性の評価
実施例２〜４で調製されたアデノシルコバラミン含有製剤、比較例２〜４で調製されたシアノコバラミン含有製剤、実施例５〜７で調製された追加成分として皮膚加速剤を含有する製剤、および実施例８〜１１で調製された多成分含有製剤の皮膚炎治療活性の評価方法を以下に説明する。下記のように動物実験用皮膚炎発症被験固体を準備し、浮腫および発赤の抑制活性を評価した。
【００６５】
さらに、有効成分を含まない基剤対照を、基剤成分のみの添加で調製した。陽性対照として０．１％タクロリムス軟膏と０．１％デキサメタゾンクリームを調製した。
【００６６】
動物実験用皮膚炎発症被験固体の準備
被験固体としてメスの生後７週のＢＡＬＢ／Ｃマウスを使用した。オボアルブミンと水酸化アルミニウムゲルを各々最終濃度が２ｍｃｇ／ｍＬと１００ｍｇ／ｍＬとなるように生理食塩水に懸濁させた。試験初日にマウスの腹部に各懸濁液を０．５ｍＬずつ投与し、試験１４日目に各懸濁液０．５ｍＬを追加投与した。試験２８日目に、オボアルブミン２５ｍＬ（濃度：２０ｍｃｇ／ｍＬ）をマウスの右側外耳に皮下注射して浮腫を誘発した。浮腫誘発２４時間後、発赤反応が生じることを確認した。
【００６７】
浮腫抑制活性の測定
浮腫誘発部位である外耳に基剤対照、試験製剤および陽性対照を浮腫誘発１時間後と４時間後に各々皮膚面積１０ｃｍ２当り１００μＬの用量で塗布した。外耳の厚さをダイヤルシックネスゲージ（ｄｉａｌ  ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ  ｇａｕｇｅ）で測定した。外耳の厚さの増加は、浮腫誘発前の外耳の厚さを浮腫誘発後の外耳の厚さから引いた値で算出した。抑制率は下記数式により算出し、その結果を表１に表した。
【００６８】
【数１】
2009516679.tif 000002
【００６９】
【表１】
2009516679.tif 000003
【００７０】
表１記載のように、実施例２〜４のアデノシルコバラミン含有製剤は比較例２〜４のシアノコバラミン含有製剤よりも浮腫抑制において優れていた。実施例５〜７の更に皮膚加速剤を含有する製剤は実施例２〜４の製剤に比較して、より優れた活性を示した。実施例８〜１１の多成分含有製剤もまた実施例５〜７の単一成分製剤よりも優れていた。
【００７１】
浮腫抑制活性の評価
浮腫誘発部位である外耳に基剤対照、試験製剤および陽性対照を浮腫誘発２時間後と４時間後に各々皮膚面積１０ｃｍ２当り１００μＬの用量で塗布した。外耳の厚さを肉眼で評価した。発赤の程度を下記のように数値で評価した。発赤のない個体は０点、濃紅又は淡紅の小さい発赤のある個体は１点、濃紅の大きい発赤のある個体は３点、１点と３点の中間程度の発赤がある個体は２点とし、その結果を表１に表した。
【００７２】
【表２】
2009516679.tif 000004
【００７３】
表２記載のように、実施例２のアデノシルコバラミン含有製剤は比較例２のシアノコバラミン含有製剤よりも発赤抑制において優れていた。実施例５の更に皮膚加速剤を含有する製剤は実施例２の製剤に比較して、優れた活性を示した。実施例８および実施例１０の多成分含有製剤もまた実施例２の単一成分製剤よりも、よりいっそう優れていた。
【００７４】
（試験例２）皮膚の保水性評価
実施例２で調製されたアデノシルコバラミン含有製剤、比較例２で調製されたシアノコバラミン含有製剤、実施例５で調製されたアデノシルコバラミンおよびメチルコバラミン含有製剤、および実施例１０で調製されたアデノシルコバラミンとタクロリムス水和物含有製剤の皮膚の保水性評価方法を以下に説明する。さらに、有効成分を含まない基剤対照を、基剤成分のみの添加で調製した。陽性対照として０．１％タクロリムス軟膏と０．１％デキサメタゾンクリームを調製した。
【００７５】
動物実験用皮膚炎発症被験固体の準備
被験固体としてオスの生後７〜８週のヌードマウスを使用した。５％ドテシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を１日２回ずつ７日間処理し、皮膚角質層の機能を損傷させ、水分蒸散量測定装置（Ｔｅｗａｍｅｔｅｒ、独）を用いて、表４における製剤塗布前の水分保持値を測定した。
【００７６】
保水性評価
試験製剤、陽性対照製剤、および基剤対照製剤を皮膚面積１０ｃｍ２当り１００μＬの用量で１日２回ずつ２日間塗布した。水分保持値を測定し、表３に表した。
【００７７】
【表３】
2009516679.tif 000005
【００７８】
表３記載のように、実施例２のアデノシルコバラミン含有製剤は比較例２のシアノコバラミン含有製剤よりも保水性において優れていた。実施例５の更に皮膚加速剤を含有する製剤は実施例２の製剤に比較して、より優れた活性を示した。実施例８および実施例１０の多成分含有製剤もまた実施例２の単一成分製剤よりも、優れていた。
【００７９】
（試験例３）アデノシルコバラミンの毒性実験
アデノシルコバラミン（１００ｍｇ）の反復投与毒性試験のために、１６時間絶食させた生後４〜５週のＩＣＲマウス（群当り５匹）を実験用被験固体として選定した。  ０．５％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）に溶解したアデノシルコバラミン１００ｍｇを５日間経口で反復投与した。死亡個体がなく、臓器損傷などの異常所見も見られなかった。
【００８０】
（製剤例１）軟膏の調製
アデノシルコバラミン含有外用軟膏剤の調製方法を以下に説明する。
【００８１】
内容物（全量１００ｇ基準）
（ａ）アデノシルコバラミン；０．０７ｇ
（ｂ）ステアリン酸；１ｇ、モノステアリン酸；１０ｇ、モノステアリン酸ポリ（オキシエチレングリコール）；４ｇ、ポリ（オキシエチルセトステアリルエーテル）（２０エチレンオキサイド）；１．５ｇ、ポリ（オキシエチルセトステアリルエーテル）；１．２ｇ、セタノール；３ｇ、流動パラフィン；１０ｇ
（ｃ）１，３−ブチレングリコール；１０ｇ、グリセリン；６ｇ、蒸留水；バランス
【００８２】
調製方法
油相すなわち組成（ｂ）を正確に称量して補助タンクに入れ、次いで、溶解のため７５℃まで加熱した。水相すなわち組成（ｃ）を正確に称量して乳化タンクに入れ、次いで、溶解及び組成（ａ）の添加のため７５℃まで加熱した。乳化タンクの中に油相を真空条件下で加えて、ホモジナイザー（Ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ）（３５００ｒｐｍ）およびペダルミキサー（１００ｒｐｍ）で攪拌し、次いで、約２５℃まで冷却し、熟成（ａｇｉｎｇ）させることにより外用軟膏を提供した。
【００８３】
（製剤例２）外用液剤の調製
アデノシルコバラミン含有外用液剤の調製方法を以下に説明する。
【００８４】
内容物（全量１００ｇ基準）
アデノシルコバラミン；０．１ｇ、イソプロパノール；０．５ｇ、セタノール；  ０．５ｇ、１，３−ブチレングリコール；０．２ｇ、カルボキシメチルセルロース；０．５ｇ、蒸留水；バランス
【００８５】
調製方法
セタノールを正確に称量して補助タンクに入れ、次いで、溶解のため７０℃まで加熱した。カルボキシメチルセルロースナトリウム、１，３−ブチレングリコールおよびアデノシルコバラミンを攪拌しながら蒸留水に湿潤させ、主タンクに入れ、次いで、溶解のため７０℃まで加熱した。補助タンクの溶液を主タンクの中にゆっくりと加えて４０℃まで冷却し、次いで、イソプロパノールを添加してペダルミキサーにて５０ｒｐｍで攪拌しながら約２５℃まで冷却し、熟成させることにより外用液剤を提供した。
【００８６】
（製剤例３）外用懸濁剤の調製
アデノシルコバラミンおよびメチルコバラミンを含有する外用懸濁剤の調製方法を以下に説明する。
【００８７】
内容物（全量１００ｇ基準）
（ａ）アデノシルコバラミン；０．１ｇ、メチルコバラミン；０．０５ｇ
（ｂ）ステアリン酸；１．５ｇ、セタノール；１ｇ、白色ワセリン；３ｇ、スクアレン；３ｇ、トリ（カプリル酸／カプロン酸）グリセリン；１．５ｇ、モノオレフィンソルビタン；１．７ｇ、ポリ（エチレングリコール）；４ｇ
（ｃ）ジプロピレングリコール；４ｇ、トリエタノールアミン；０．５ｇ、蒸留水；５０ｇ
（ｄ）イソプロパノール；８．５ｇ、蒸留水；バランス
【００８８】
調製方法
組成（ｃ）を正確に称量して主タンクに入れ、次いで、溶解のため７０℃まで加熱した。組成（ｂ）を正確に称量して補助タンクに入れ、次いで、溶解のため７０℃まで加熱し、ホモジナイザーにて２０００ｒｐｍで攪拌しながら、主タンクの中にゆっくりと加えた。組成（ｃ）を主タンクの中に加え、ペダルミキサーにて１００ｒｐｍで攪拌しながら４０℃まで冷却し、次いで、組成（ｄ）を添加してペダルミキサーにて５０ｒｐｍで攪拌しながら２５℃まで冷却し、熟成させることにより外用懸濁剤を提供した。
【００８９】
（製剤例４）貼付剤の調製
アデノシルコバラミンおよびタクロリムス水和物を含有する外用貼付剤の調製方法を以下に説明する。
【００９０】
内容物（全量１００ｇ基準）
（ａ）アデノシルコバラミン；２．０ｇ、タクロリムス水和物；１ｇ
（ｂ）ミリスチン酸イソプロピル；３ｇ、流動パラフィン；５ｇ、ポリブデン（ｐｏｌｙｂｕｄｅｎｅ）；２０ｇ、１，３−ペンタジエン共重合樹脂；２５ｇ
（ｃ）酸化チタン；２ｇ、ジブチルヒドロキシトルエン；０．１ｇ、ステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン；１ｇ、酸化亜鉛；２ｇ
（ｄ）カオリン；７ｇ
（ｅ）固形天然ゴムラテックス；１８ｇ、固形ＳＢＲ合成ゴム；１５ｇ
（ｆ）ポリアクリル酸ナトリウム；０．０７ｇ、蒸留水；１ｇ、グリセリン；０．５ｇ
【００９１】
調製方法
組成（ｂ）を正確に称量して主タンクに入れた。溶解のために温度を１１５℃まで上げ、９０℃を維持した。組成（ａ）を添加した後、温度を７０℃に制御した。組成（ｃ）および（ｄ）を補助タンクで混合し、主タンクの中に加えた。更に、７０℃で、組成（ｆ）を主タンクの中に加え、組成（ｅ）もまた主タンクの中に加えることにより外用軟膏剤を準備した。このようにして調製された軟膏剤を織布または不織布に１ｍ２当り１００ｇを塗布し、その布を１０×１４ｃｍの大きさに切断して貼付剤を提供した。
【００９２】
（製剤例５）含水性貼付剤の調製
アデノシルコバラミンおよびプロピオン酸デキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔａｓｏｎｅ  ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）を含有する外用含水性貼付剤の調製方法を以下に説明する。
【００９３】
内容物
（ａ）アデノシルコバラミン；１．０ｇ、プロピオン酸デキサメタゾン；０．４ｇ
（ｂ）Ｄ−ソルビトール；２５ｇ、蒸留水；１０ｇ、カオリン；１５ｇ、酸化チタン；１ｇ
（ｃ）ゼラチン；１ｇ、蒸留水；５ｇ
（ｄ）メタリン酸ナトリウム；０．２ｇ、蒸留水；１ｇ
（ｅ）ヒドロキシアルミン酸マグネシウム（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ  ｈｙｄｒｏｘｙａｌｕｍｉｎａｔｅ）；０．２ｇ、ポリアクリル酸ナトリウム；６ｇ、プロピレングリコール；４ｇ、アクリル酸澱粉（ａｃｒｙｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｓｔａｒｃｈ）；０．５ｇ、ヒマシ油；１ｇ、モノオレフィン酸ポリオキシエチレンソルビタン（ｍｏｎｏｏｌｅｆｉｎｉｃ  ａｃｉｄ  ｐｏｌｙｏｘｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｓｏｒｂｉｔａｎ）；０．５ｇ、モノオレフィン酸ソルビタン（ｍｏｎｏｏｌｅｆｉｎｉｃ  ａｃｉｄ  ｓｏｒｂｉｔａｎ）；０．５ｇ
（ｆ）Ｄ−ソルビトール；１５ｇ、ジブチルヒドロキシトルエン；０．１ｇ
（ｇ）メタクリル酸／アクリル酸ｎ−ブチル共重合体（ｍｅｔｈａｃｒｙｌｉｃ  ａｃｉｄ／ａｃｒｙｌｉｃ  ａｃｉｄ  ｎ−ｂｕｔｙｌ  ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ）；  ３ｇ
（ｈ）Ｄ−ソルビトール；５ｇ、酒石酸；１．２ｇ
【００９４】
調製方法
組成（ｂ）を正確に称量して主タンクに入れ、次いで、溶解のため４０℃まで加熱した。更に、補助タンク内で４０℃で加熱溶解した組成（ｄ）を主タンクの中に加え、主タンク内の組成物をペダルミキサーにて１００ｒｐｍで混合しながら、組成（ｃ）および（ｇ）もまた加えた。組成（ａ）と（ｅ）を混合して加えた後、組成（ｈ）をゆっくり添加して軟膏を生成させた。生成された軟膏１２ｇを１０×１４ｃｍの大きさの不織布に均一に塗布して貼付剤を提供した。
【００９５】
（製剤例６）スキンローションの調製
アデノシルコバラミン含有外用スキンローションの調製方法を以下に説明する。
【００９６】
内容物（全量１００ｇ基準）
（ａ）アデノシルコバラミン；０．２ｇ
（ｂ）カルボキシメチルセルロースナトリウム；０．５ｇ、ポリエチレングリコール；６ｇ、プロピレングリコール；４ｇ
（ｃ）ポリオキシエチレンオレインセチルエーテル（ｐｏｌｙｏｘｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｏｌｅｉｎｃｅｔｙｌ  ｅｔｈｅｒ）；１ｇ、ホホバオイル；０．５ｇ
（ｄ）香料；適量、エタノール；１０ｇ
（ｅ）蒸留水；バランス
【００９７】
調製方法
組成（ｅ）および（ｂ）を正確に称量して混合し、その混合物を主タンクの中に加え、次いで、溶解のため４５℃まで加熱した。更に、主タンクの組成物をペダルミキサーにて１００ｒｐｍで攪拌しながら組成（ａ）を添加して溶解し、室温まで冷却した。組成（ｄ）を補助タンクの中に加え、組成（ｃ）もまた添加して分散させ、ペダルミキサーにて３００ｒｐｍで均一に攪拌した。
【００９８】
（製剤例７）ローションの調製
アデノシルコバラミンおよびプロピオン酸デキサメタゾンを含有する外用ローション剤の調製方法を以下に説明する。
【００９９】
内容物（全量１００ｇ基準）
アデノシルコバラミン；０，４ｇ、グリセリン；５ｇ、イソプロパノール；１０ｇ、セタノール；１ｇ、ポリオキシエチレンセトステアリルエーテル（ｐｏｌｙｏｘｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｃｅｔｏｓｔｅａｒｙｌ  ｅｔｈｅｒ）；０．５ｇ、トリエタノールアミン；０．５ｇ、ステアリン酸；３ｇ、蒸留水；バランス
【０１００】
調製方法
セタノール、ポリオキシエチレンセトステアリルエーテルおよびステアリン酸を正確に称量して主タンクの中に加え、ホモジナイザーにて２０００ｒｐｍで攪拌し、次いで、溶解のため７０℃まで加熱した。更に、トリエタノールアミン、蒸留水、アデノシルコバラミンおよびグリセリンを補助タンクの中に加え、ペダルミキサーにて５０ｒｐｍで攪拌しながら、溶解のため７０℃まで加熱した。補助タンクの組成物を主タンクの中にゆっくり加え、４０℃まで冷却した。その組成物を、イソプロピルアルコールを添加し連続的に攪拌しながら２５℃まで急冷し、次いで、熟成させることによりローションを提供した。
【産業上の利用可能性】
【０１０１】
前述した通り、本発明によるアデノシルコバラミンを有効成分として含む組成物は、動物実験用皮膚炎発症被験固体で、浮腫および発赤を効果的に抑制すること、また、皮膚加速剤を含有させることにより有効成分の皮膚浸透を増加できることが確認でき、それ故、アトピー性皮膚炎の治療のための実用的な外用剤組成物を可能にした。
【国際調査報告】
2009516679.tif 000006
2009516679.tif 000007
2009516679.tif 000008