(57)【要約】  本発明は、有効量の飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態の治療又は予防を必要とする対象に投与することによって、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態を治療又は予防する方法を提供する。本発明は、また、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択する方法を提供する。飽食因子の望ましくないレベルに関連する代表的な障害又は状態としては、過体重、肥満、代謝障害、高血圧症、脂質関連障害、拒食症及びII型糖尿病が挙げられる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態を治療又は予防する方法であって、前記障害又は状態を治療又は予防するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与することを含み、前記対象は、前記飽食因子の望ましくないレベルを有する、前記方法。
【請求項２】
前記障害又は状態が、過体重、肥満、代謝障害、高血圧症、脂質関連障害、拒食症及びII型糖尿病から選択される、請求項1記載の方法。
【請求項３】
前記障害又は状態が過体重である、請求項2記載の方法。
【請求項４】
前記障害又は状態が肥満である、請求項2記載の方法。
【請求項５】
前記障害又は状態がII型糖尿病である、請求項2記載の方法。
【請求項６】
前記対象がヒトである、請求項1記載の方法。
【請求項７】
前記対象が、25kg/m2を超える肥満度指数(「BMI」)を有する、請求項6記載の方法。
【請求項８】
前記対象が、30kg/m2を超える肥満度指数(「BMI」)を有する、請求項6記載の方法。
【請求項９】
前記対象が、35kg/m2を超える肥満度指数(「BMI」)を有する、請求項6記載の方法。
【請求項１０】
前記対象が、25kg/m2未満の肥満度指数(「BMI」)を有する、請求項6記載の方法。
【請求項１１】
前記対象が、22kg/m2未満の肥満度指数(「BMI」)を有する、請求項6記載の方法。
【請求項１２】
前記対象が、20kg/m2未満の肥満度指数(「BMI」)を有する、請求項6記載の方法。
【請求項１３】
前記飽食因子がペプチドである、請求項1記載の方法。
【請求項１４】
前記飽食因子がアジポネクチン、アグーチ関連タンパク質(AGRP)、アミリン、アポリポタンパク質A-IV、ビーコン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、脳由来神経因子(BDNF)、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、βカソモルフィン、コレシストキニン(CCK)、毛様体神経栄養因子(CNTF)、コカイン及びアンフェタミン調節転写物(CART)、コルチコトロピン放出ホルモン(CRH)、シクロ-his-pro、ダイノルフィン、β-エンドルフィン、エンテロスタチン、ガラニン、ガラニン様ペプチド(GALP)、グレリン、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、ヒポクレチン/オレキシン、インシュリン、インシュリン様成長因子I及びII(IGF-I及びIGF-II)、レプチン、メラニン濃縮ホルモン(MCH)、メラノサイト刺激ホルモン(α-MSH)、モチリン、ネスファチン、ニューロメディンB及びニューロメディンU、神経ペプチドB(NPB)及び(NPW)、神経ペプチドK(NPK)、神経ペプチドY(NPY)、ニューロテンシン(NT)、オベスタチン、オキシトシン、膵臓ペプチド、ペプチドYY、プログルカゴン由来ペプチド、プロラクチン放出ペプチド、プロオピオメラノコルチン(POMC)、プロトポルフィリン、QRFP43(RFアミドペプチド、26Rfa)、ソマトスタチン、チロトロピン放出ホルモン(TRH)、ウロコルチン及びバソプレシンからなる群から選択される、請求項1記載の方法。
【請求項１５】
前記プログルカゴン由来ペプチドがグルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド又は主要プログルカゴン断片である、請求項14記載の方法。
【請求項１６】
前記飽食因子が非消化管ペプチドである、請求項1記載の方法。
【請求項１７】
前記飽食因子が消化管ペプチドである、請求項1記載の方法。
【請求項１８】
前記飽食因子がアミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYからなる群から選択される、請求項17記載の方法。
【請求項１９】
前記対象からのサンプル中の前記飽食因子の量が正常値未満である場合に、前記対象が望ましくないレベルの前記飽食因子を有する、請求項1記載の方法。
【請求項２０】
前記飽食因子がアミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYからなる群から選択される、請求項19記載の方法。
【請求項２１】
前記障害又は状態を治療又は予防するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニストを前記対象に投与する、請求項19記載の方法。
【請求項２２】
前記対象からのサンプル中の前記飽食因子の量が正常値を超える場合に、前記対象が望ましくないレベルの前記飽食因子を有する、請求項1記載の方法。
【請求項２３】
前記障害又は状態を治療又は予防するのに有効な量の前記飽食因子のアンタゴニストを前記対象に投与する、請求項22記載の方法。
【請求項２４】
前記投与が経口投与、鼻内投与、肺内投与、静脈内投与、皮下投与、経皮投与、胃内投与、腹腔内投与、脳室内投与又は直腸投与である、請求項1記載の方法。
【請求項２５】
前記飽食因子の前記アゴニスト又はアンタゴニストを食事前に投与する、請求項1記載の方法。
【請求項２６】
前記飽食因子の前記アゴニスト又はアンタゴニストを食事時間の前後に投与する、請求項1記載の方法。
【請求項２７】
前記飽食因子の前記アゴニスト又はアンタゴニストを連続的に投与する、請求項1記載の方法。
【請求項２８】
消化管ペプチド飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを、非消化管ペプチド飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストとともに投与する、請求項1記載の方法。
【請求項２９】
飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択する方法であって、前記対象からのサンプル中の前記飽食因子の量を測定する工程を含み、前記対象は、前記対象のサンプル中の前記飽食因子の量が正常値を超える、又は正常値未満である場合に治療に対して選択される、前記方法。
【請求項３０】
前記対象がヒトである、請求項29記載の方法。
【請求項３１】
前記サンプルが、血液サンプル、血漿サンプル、唾液サンプル、血清サンプル、痰サンプル、尿サンプル、細胞サンプル、細胞抽出物サンプル及び組織生検サンプルから選択される、請求項29記載の方法。
【請求項３２】
前記対象からのサンプル中の前記飽食因子の量が、分光光度法、クロマトグラフィー、免疫アッセイ法又は電気泳動によって測定される、請求項29記載の方法。
【請求項３３】
前記対象が絶食しているときに前記飽食因子の量が測定される、請求項29記載の方法。
【請求項３４】
前記対象が摂食しているときに前記飽食因子の量が測定される、請求項29記載の方法。
【請求項３５】
前記飽食因子がペプチドである、請求項29記載の方法。
【請求項３６】
前記飽食因子がアジポネクチン、アグーチ関連タンパク質(AGRP)、アミリン、アポリポタンパク質A-IV、ビーコン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、脳由来神経因子(BDNF)、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、βカソモルフィン、コレシストキニン(CCK)、毛様体神経栄養因子(CNTF)、コカイン及びアンフェタミン調節転写物(CART)、コルチコトロピン放出ホルモン(CRH)、シクロ-his-pro、ダイノルフィン、β-エンドルフィン、エンテロスタチン、ガラニン、ガラニン様ペプチド(GALP)、グレリン、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、ヒポクレチン/オレキシン、インシュリン、インシュリン様成長因子I及びII(IGF-I及びIGF-II)、レプチン、メラニン濃縮ホルモン(MCH)、αメラノサイト刺激ホルモン(MSH)、モチリン、ネスファチン、ニューロメディンB及びニューロメディンU、神経ペプチドB(NPB)及び(NPW)、神経ペプチドK(NPK)、神経ペプチドY(NPY)、ニューロテンシン(NT)、オベスタチン、オキシトシン、膵臓ペプチド、ペプチドYY、プログルカゴン由来ペプチド、プロラクチン放出ペプチド、プロオピオメラノコルチン(POMC)、プロトポルフィリン、QRFP43(RFアミドペプチド、26Rfa)、ソマトスタチン、チロトロピン放出ホルモン(TRH)、ウロコルチン及びバソプレシンからなる群から選択される、請求項29記載の方法。
【請求項３７】
前記プログルカゴン由来ペプチドがグルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド又は主要プログルカゴン断片である、請求項36記載の方法。
【請求項３８】
前記飽食因子が非消化管ペプチドである、請求項29記載の方法。
【請求項３９】
前記飽食因子が消化管ペプチドである、請求項29記載の方法。
【請求項４０】
前記飽食因子がアミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYからなる群から選択される、請求項39記載の方法。
【請求項４１】
前記対象からのサンプル中の前記飽食因子の量が正常値未満である場合に、前記対象が治療に対して選択される、請求項29記載の方法。
【請求項４２】
前記飽食因子がアミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYからなる群から選択される、請求項41記載の方法。
【請求項４３】
前記対象からのサンプル中の前記飽食因子の量が正常値を超える場合に、前記対象が治療に対して選択される、請求項29記載の方法。
【請求項４４】
対象における飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態を治療又は予防する方法であって、(a)飽食因子の望ましくないレベルを有する対象を治療に対して選択すること、及び(b)前記障害又は状態を治療又は予防するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項４５】
前記障害又は対象が、過体重、肥満、代謝障害、高血圧症、脂質関連障害、拒食症及びII型糖尿病から選択される、請求項44記載の方法。
【請求項４６】
前記障害又は状態が過体重である、請求項45記載の方法。
【請求項４７】
前記障害又は状態が肥満である、請求項45記載の方法。
【請求項４８】
前記障害又は状態がII型糖尿病である、請求項45記載の方法。
【請求項４９】
前記対象がヒトである、請求項44記載の方法。
【請求項５０】
前記対象が、25kg/m2を超える肥満度指数を有する、請求項49記載の方法。
【請求項５１】
前記対象が、30kg/m2を超える肥満度指数を有する、請求項49記載の方法。
【請求項５２】
前記対象が、35kg/m2を超える肥満度指数を有する、請求項49記載の方法。
【請求項５３】
前記対象が、25kg/m2未満の肥満度指数を有する、請求項49記載の方法。
【請求項５４】
前記対象が、22kg/m2未満の肥満度指数を有する、請求項49記載の方法。
【請求項５５】
前記対象が、20kg/m2未満の肥満度指数を有する、請求項49記載の方法。
【請求項５６】
前記飽食因子がペプチドである、請求項49記載の方法。
【請求項５７】
前記飽食因子がアジポネクチン、アグーチ関連タンパク質(AGRP)、アミリン、アポリポタンパク質A-IV、ビーコン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、脳由来神経因子(BDNF)、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、βカソモルフィン、コレシストキニン(CCK)、毛様体神経栄養因子(CNTF)、コカイン及びアンフェタミン調節転写物(CART)、コルチコトロピン放出ホルモン(CRH)、シクロ-his-pro、ダイノルフィン、β-エンドルフィン、エンテロスタチン、ガラニン、ガラニン様ペプチド(GALP)、グレリン、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、ヒポクレチン/オレキシン、インシュリン、インシュリン様成長因子I及びII(IGF-I及びIGF-II)、レプチン、メラニン濃縮ホルモン(MCH)、メラノサイト刺激ホルモン(α-MSH)、モチリン、ネスファチン、ニューロメディンB及びニューロメディンU、神経ペプチドB(NPB)及び(NPW)、神経ペプチドK(NPK)、神経ペプチドY(NPY)、ニューロテンシン(NT)、オベスタチン、オキシトシン、膵臓ペプチド、ペプチドYY、プログルカゴン由来ペプチド、プロラクチン放出ペプチド、プロオピオメラノコルチン(POMC)、プロトポルフィリン、QRFP43(RFアミドペプチド、26Rfa)、ソマトスタチン、チロトロピン放出ホルモン(TRH)、ウロコルチン及びバソプレシンからなる群から選択される、請求項56記載の方法。
【請求項５８】
前記プログルカゴン由来ペプチドがグルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド又は主要プログルカゴン断片である、請求項57記載の方法。
【請求項５９】
前記飽食因子が非消化管ペプチドである、請求項56記載の方法。
【請求項６０】
前記飽食因子が消化管ペプチドである、請求項56記載の方法。
【請求項６１】
前記飽食因子がアミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYからなる群から選択される、請求項60記載の方法。
【請求項６２】
前記対象からのサンプル中の前記飽食因子の量を測定することをさらに含む、請求項44記載の方法。
【請求項６３】
前記サンプルが、血液サンプル、血漿サンプル、唾液サンプル、血清サンプル、痰サンプル、尿サンプル、細胞サンプル、細胞抽出物サンプル及び組織生検サンプルから選択される、請求項44記載の方法。
【請求項６４】
前記対象からの前記サンプル中の前記飽食因子の量が、顕微鏡法、クロマトグラフィー、免疫検定又は電気泳動によって測定される、請求項44記載の方法。
【請求項６５】
前記対象が絶食しているときに前記飽食因子の量が測定される、請求項44記載の方法。
【請求項６６】
前記対象が摂食しているときに前記飽食因子の量が測定される、請求項44記載の方法。
【請求項６７】
前記対象からのサンプル中の前記飽食因子の量が正常値未満である場合に、前記対象が治療の対象に選択される、請求項44記載の方法。
【請求項６８】
前記飽食因子がアミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYからなる群から選択される、請求項67記載の方法。
【請求項６９】
前記障害又は状態を治療又は予防するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニストを投与する、請求項67記載の方法。
【請求項７０】
前記対象からのサンプル中の前記飽食因子の量が正常値を超える場合に、前記対象が治療に対して選択される、請求項44記載の方法。
【請求項７１】
消化管ペプチド飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを、非消化管ペプチド飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストとともに投与する、請求項44記載の方法。
【請求項７２】
対象における食物摂取を低減する方法であって、(a)飽食因子の望ましくないレベルを有する対象を選択すること、及び(b)食物摂取を低減するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項７３】
前記食物が脂肪を含む、請求項72記載の方法。
【請求項７４】
前記食物が脂肪である、請求項72記載の方法。
【請求項７５】
前記食物が炭水化物を含む、請求項72記載の方法。
【請求項７６】
前記食物が炭水化物である、請求項72記載の方法。
【請求項７７】
前記食物がタンパク質を含む、請求項72記載の方法。
【請求項７８】
前記食物がタンパク質である、請求項72記載の方法。
【請求項７９】
飽食因子の1つ以上のアゴニスト又はアンタゴニストにより治療の対象を選択する方法であって、前記対象からのサンプル中の飽食因子の量を測定する工程を含み、前記対象は、前記対象からの前記サンプル中の1つ以上の飽食因子の量が、独立に、正常値を超える、又は正常値未満である場合に、治療に対して選択される、前記方法。
【請求項８０】
前記対象からのサンプル中の飽食因子のパネルの量が測定される、請求項79記載の方法。
【請求項８１】
前記パネルが、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYからなる群から選択される2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個又は10個の飽食因子を含む、請求項80記載の方法。
【請求項８２】
正常値を超える又は正常値未満の量を有する飽食因子の1つ以上のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与する工程をさらに含む、請求項79記載の方法。
【請求項８３】
2つ以上のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与する、請求項82記載の方法。
【請求項８４】
消化管ペプチドのアゴニスト又はアンタゴニストを、非消化管ペプチドのアゴニスト又はアンタゴニストとともに投与する、請求項82記載の方法。
【請求項８５】
対象における肥満を治療する方法であって、(a)飽食因子の望ましくないレベルを有する対象を選択すること、及び(b)肥満を治療するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項８６】
飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる肥満の治療の対象を選択するためのキットであって、前記対象の体液を得ることが可能な装置、及び前記体液中の前記飽食因子を検出することが可能な試薬を含む、前記キット。
【請求項８７】
対象における肥満を治療又は予防するためのキットであって、前記対象の体液における飽食因子を検出することが可能な試薬、及び有効量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを含む、前記キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
(1. 関連出願の相互参照)
本出願は、2006年7月11日に出願された米国仮出願第60/830,410号及び2007年2月2日に出願された同第60/899,223号の優先権を米国特許法第119条(e)に基づいて主張するものである。
【０００２】
(2. 発明の分野)
本発明は、飽食因子の望ましくないレベル、例えば、消化管ペプチドに関連する障害又は状態の治療又は予防を必要とする対象に、有効量の飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを投与することによって、該障害又は状態を治療又は予防する方法を提供する。本発明は、また、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択する方法を提供する。本発明は、さらに、患者に有効量の飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを投与することによって、患者集団、例えば、飽食因子の望ましくないレベルを有する患者を治療する方法を提供する。飽食因子の望ましくないレベルに関連する代表的な障害又は状態としては、過体重、肥満、代謝障害、高血圧症、脂質関連障害、拒食症及びII型糖尿病が挙げられる。
【背景技術】
【０００３】
(3. 発明の背景)
肥満は、世界中の人口に益々影響を与えている複雑な状態である。世界保健機構によれば、1995年には、世界中で肥満の成人が2億人存在すると推定され、さらに1800万人の5歳未満の子供が過体重に分類された。2000年では、肥満の成人の数が3億人以上まで増加した(Formigueraらの論文、2004、Best Practice & Research Clinical Gastroenterology、18:6、1125-1146参照)。
【０００４】
過体重又は肥満は、高血圧症、異脂肪症(高全コレステロール又は高レベルのトリグリセリド)、II型糖尿病、冠状動脈性心疾患、卒中、胆嚢病、骨関節炎、睡眠無呼吸及び呼吸障害並びにいくつかの癌(例えば、子宮体癌、乳癌及び結腸癌)を含むいくつかの疾患及び健康状態の危険性を高めることが示された(例えば、米国国立慢性疾患予防/健康増進センター参照)。その健康上の結果は、早死の危険性の増加から、生活の全体的な質を低下させる重度の慢性状態までに及ぶ。
【０００５】
過体重又は肥満のような状態をもたらし得る生理的過程の変調のための様々な療法が提案又は試験された(Orzanoらの論文、2004、J.Am.Board Fam.Pract.17(5):359-69参照)。例えば、ヒトの胃腸管によって合成及び分泌される消化管ペプチドのような多くの飽食因子は、食物摂取及び飽食シグナルを調節することが示された。したがって、特定の内因性消化管ペプチドが、肥満治療の潜在的な候補として検討されてきた。代表的な消化管ペプチドとしては、例えば、グレリン、コレシストキニン(CCK)、膵臓ペプチド(PP)、ペプチド-YY(PYY)、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)等が挙げられる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかし、たいていの飽食因子に関する臨床試験を含む調査は、不明瞭で、しばしば矛盾する結果を与えた。したがって、肥満及び関連疾患を治療する効果的な方法の必要性が当該技術分野に存在する。本発明は、そのような必要性に対応し、当該疾患の治療方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
(4. 発明の要旨)
本発明は、一部に、飽食因子、例えば、消化管ペプチドのレベルを評価することによって、他の対象集団より飽食因子治療に統計的に強く応答する、又は応答するであろう対象集団を識別することが可能になるという発見に基づく。
【０００８】
一態様において、本発明は、対象における飽食因子の望ましくないレベルを有する障害又は状態を治療又は予防する方法を提供する。望ましくないレベルは、対象、ペプチド及び障害又は状態に応じて、低すぎることも、高すぎることもあり得る。該方法は、障害又は状態を治療又は予防するのに有効な量の飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを対象に投与する工程を含む。該アゴニスト又はアンタゴニストは、当業者に応じて医薬として許容し得る投与経路により医薬として許容し得る製剤で投与される。
【０００９】
作用の特定の理論に縛られることを意図するものではないが、過体重又は肥満のような状態を治療するための最も効果的な手法は、特定の療法を特定の患者集団に適用することであると考えられる。有利には、ある実施態様において、本発明は、本明細書に記載されている方法に従って有効量の飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストで治療するのに好適な対象の集団、例えば分集団を選択する方法を提供する。ある実施態様において、本発明の方法は、飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストの治療又は予防活性を向上させる、又はさらには有効にする。ある実施態様において、本発明の方法は、飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストを投与すべきでない対象を識別することによって飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストの潜在的な副作用を軽減又は回避することができる。
【００１０】
飽食因子の望ましくないレベルに関連する代表的な障害又は状態としては、過体重、肥満、代謝障害、高血圧症、脂質関連障害、拒食症及びII型糖尿病が挙げられるが、それらに限定されない。
【００１１】
別の態様において、本発明は、飽食因子の望ましくないレベルの治療を必要とする対象における飽食因子の望ましくないレベルを治療する方法を提供する。該方法は、治療に有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを対象に投与する工程を含む。
【００１２】
別の態様において、本発明は、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択する方法を提供する。ある実施態様において、該方法は、対象からのサンプル中の飽食因子の量を測定する工程を含む。対象は、対象のサンプル中の前記飽食因子の量が正常値未満である場合に、治療に対して選択される。正常な飽食因子の値は以下で詳細に記載する。
【００１３】
さらなる態様において、本発明は、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態を治療又は予防する方法を提供する。該方法は、飽食因子の望ましくないレベルを有する対象を選択し、障害又は状態を治療又は予防するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを対象に投与する工程を含む。飽食因子の望ましくないレベルを有する対象を選択し、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを投与する方法を以下に説明する。ある実施態様において、前記飽食因子の1つのアゴニスト又はアンタゴニストを投与する。ある実施態様において、前記飽食因子の複数のアゴニスト又はアンタゴニストを投与する。ある実施態様において、1つ以上の飽食因子の複数のアゴニスト又はアンタゴニストを投与する。ある実施態様において、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを、障害又は状態を治療又は予防するのに有用な第2の薬剤と組み合わせて投与する。
【００１４】
本発明の飽食因子は、対象によって内因的に生成される、又は生成されるであろう任意の分子であり得、食欲、食物摂取、エネルギー摂取若しくは消費又は飽食シグナルを調節することが可能である。本発明の飽食因子は、ペプチド及び非ペプチド飽食因子を含む。ペプチド飽食因子は、消化管ペプチド、即ち、例えば胃、膵臓、腸又は結腸のような胃腸管によって内因的に生成される、又は生成されるであろうペプチドであり、食欲、食物摂取、エネルギー摂取若しくは消費又は飽食シグナルを調節することが可能である。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、別の器官、例えば脳によっても生成され得る。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、インシュリン、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド又はオキシントモジュリンのようなプログルカゴン由来ペプチド、オベスタチン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYからなる群から選択される。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、エンテロスタチンである。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、エンテロスタチン以外である。
【００１５】
ペプチド飽食因子は、非消化管ペプチド、即ち、例えば脳、肝臓又は脂肪組織のような胃腸管以外の器官又は組織によって内因的に生成される、又は生成されるであろうペプチドであり得、食欲、食物摂取、エネルギー摂取若しくは消費又は飽食シグナルを調節することが可能である。
【００１６】
本発明の飽食因子としては、アジポネクチン、アグーチ関連タンパク質(AGRP)、アミリン、アポリポタンパク質A-IV、ビーコン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、脳由来神経因子(BDNF)、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、βカソモルフィン、コレシストキニン(CCK)、毛様体神経栄養因子(CNTF)、コカイン及びアンフェタミン調節転写物(CART)、コルチコトロピン放出ホルモン(CRH)、シクロ-his-pro、ダイノルフィン、β-エンドルフィン、エンテロスタチン、ガラニン、ガラニン様ペプチド(GALP)、グレリン、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、ヒポクレチン/オレキシン、インシュリン、インシュリン様成長因子I及びII(IGF-I及びIGF-II)、レプチン、メラニン濃縮ホルモン(MCH)、メラノサイト刺激ホルモン(MSH)、モチリン、ネスファチン、ニューロメディンB及びニューロメディンU、神経ペプチドB(NPB)及び(NPW)、神経ペプチドK(NPK)、神経ペプチドY(NPY)、ニューロテンシン(NT)、オベスタチン、オキシトシン、膵臓ペプチド、ペプチドYY、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)及びオキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド及び主要プログルカゴン断片を含むプログルカゴン由来ペプチド、プロラクチン放出ペプチド、プロオピオメラノコルチン(POMC)、プロトポルフィリン、QRFP43(RFアミドペプチド、26Rfa)、ソマトスタチン、チロトロピン放出ホルモン(TRH)、ウロコルチン並びにバソプレシンが挙げられるが、それらに限定されない。
【００１７】
飽食因子のアゴニストは、飽食因子の生物活性を模倣する、飽食因子の同様の生理的効果を誘発する、飽食因子の効果の持続時間を延ばす、飽食因子の生物活性を向上させる、又は飽食因子の選択性を向上させる任意の薬剤であり得る。いくつかの実施態様において、飽食因子のアゴニストは、飽食因子そのものである。他の実施態様において、飽食因子のアゴニストは、飽食因子の活性断片、類似体又は誘導体である。
【００１８】
飽食因子のアンタゴニストは、飽食因子の生物活性又は生理的効果を阻害する任意の薬剤であり得る。いくつかの実施態様において、飽食因子のアンタゴニストは、飽食因子の抗体である。いくつかの実施態様において、飽食因子のアンタゴニストは、飽食因子の阻害薬である。いくつかの実施態様において、飽食因子のアンタゴニストは、飽食因子の受容体の阻害薬である。
【００１９】
前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを、経口投与、鼻内投与、肺内投与、静脈内投与、皮下投与、経皮投与、胃内投与、腹腔内投与、脳室内投与又は直腸投与を含むが、それらに限定されない当業者に知られている経路によって投与することができる。
【００２０】
対象が飽食因子の望ましくないレベルを有するかどうかを、当業者に利用可能な任意の方法で判断することができる。代表的な方法を本明細書に記載する。ある実施態様において、対象は、コントロール対象より飽食因子の発現又は分泌量が少ない場合に、飽食因子の望ましくないレベルを有する。ある実施態様において、対象は、コントロール対象より飽食因子の発現又は分泌量が多い場合に、飽食因子の望ましくないレベルを有する。飽食因子のアゴニストは、対象がコントロール対象より飽食因子の発現又は分泌量が少ない場合に有用である。飽食因子のアンタゴニストは、対象がコントロール対象より飽食因子の発現又は分泌量が多い場合に有用である。
【００２１】
有利なことに、正常な飽食因子の値を、本発明の方法の実施者が測定する必要がない。その代わり、当業者が利用可能な知識又はデータを参照することによって、正常な飽食因子の値を特定することができる。当該データを、例えば、医療記録及び臨床試験データ等を含む当業者が利用可能な任意の情報源から得ることができる。ある実施態様において、本明細書に記載されている方法に従って当業者が収集した量の飽食因子により情報源を開発することができる。
【００２２】
ある実施態様において、正常な飽食因子量は、望ましくないレベルの1つ以上の飽食因子に関連する障害又は状態の症状を示さないコントロール対象からのものである。いくつかの実施態様において、コントロール対象は、正常体重の健常対象である。いくつかの実施態様において、コントロール対象は、正常体重の痩せ形の個体である。
【００２３】
対象における飽食因子の量は、限定することなく当業者に知られている任意の技術に従って測定することができる。ある実施態様において、飽食因子を測定するための技術は、本発明にとって重要でなく、本明細書における方法の実施者が実施する必要もない。ある実施態様において、対象からのサンプル中の飽食因子の量を本明細書に記載の技術によって測定した後、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストで治療する対象を選択すべきかどうかを判断するために、該量を正常な飽食因子値と比較する。ある実施態様において、対象からのサンプル中の飽食因子の量は、以下に詳述するように、分光光度法、クロマトグラフィー、免疫アッセイ法又は電気泳動によって測定される。いくつかの好ましい実施態様において、飽食因子の量は、免疫アッセイ法によって測定される。1つの好ましい実施態様において、免疫アッセイ法はELISAである。
【００２４】
飽食因子の量を本明細書で提示する対象の任意のサンプルで測定することができる。サンプルは、本明細書に記載されている体液又は組織サンプルであり得る。体液又は組織を調製するための方法、例えば、飽食因子を抽出又は精製するための方法を本明細書に記載する。当業者によって有用であると考えられる時に、飽食因子の量を求めることができる。ある実施態様において、該量を食物摂取後に測定する。ある実施態様において、該量を食物摂取前に測定する。ある実施態様において、対象が絶食したときの量と、対象が食物摂取したときの量との比。詳細な測定方法を以下に示す。
【００２５】
ある実施態様において、対象の複数の飽食因子の量を測定することができる。対象が望ましくない量の1つの飽食因子を有する場合は、本明細書に記載の方法に従って飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを対象に投与することができる。対象が望ましくない量の複数の飽食因子を有する場合は、本明細書に記載の方法に従って飽食因子の複数のアゴニスト又はアンタゴニストを対象に投与することができる。有益な実施態様において、対象の飽食因子のパネルの量を測定することができる。これらの量から、選択された飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストの組合せを本明細書に記載の方法に従って対象に投与することができる。特定の実施態様において、アゴニスト及びアンタゴニストの個人用カクテルを、飽食因子のパネルの量に基づいて対象に対して選択することができる。
【００２６】
別の態様において、本発明は、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる肥満の治療の対象を選択するためのキットを提供する。いくつかの実施態様において、キットは、対象の体液を収容することが可能な装置及び体液中の飽食因子を検出することが可能な試薬を含む。ある実施態様において、該キットは、飽食因子を検出することが可能な試薬及び有効量の飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを含む。キットは、キットの使用説明を記した標示又はラベルをさらに含むことができる。ある実施態様において、キットは、正常な飽食因子値を記した標示又はラベルを含む。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
(5. 発明の詳細な説明)
(5.1. 定義)
本明細書に用いられているように、以下の用語が以下の意味を有する。
【００２８】
「対象」という用語は、霊長類(例えばヒト)、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット及びマウス等を含むがそれらに限定されない哺乳類などの動物を指す。好ましい実施態様において、対象はヒトである。
【００２９】
「飽食因子」という用語は、対象によって内因的に生成される、又は生成されるであろう、食欲、食物摂取、エネルギー摂取若しくは消費又は飽食シグナルを調節することが可能な任意の分子を指す。本発明の飽食因子は、ペプチド又は非ペプチド飽食因子であり得る。本発明のペプチド飽食因子は、以下に詳細に記載する消化管ペプチド又は非消化管ペプチドであり得る。
【００３０】
本発明の飽食因子としては、アジポネクチン、アグーチ関連タンパク質(AGRP)、アミリン、アポリポタンパク質A-IV、ビーコン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、脳由来神経因子(BDNF)、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、βカソモルフィン、コレシストキニン(CCK)、毛様体神経栄養因子(CNTF)、コカイン及びアンフェタミン調節転写物(CART)、コルチコトロピン放出ホルモン(CRH)、シクロ-his-pro、ダイノルフィン、β-エンドルフィン、エンテロスタチン、ガラニン、ガラニン様ペプチド(GALP)、グレリン、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、ヒポクレチン/オレキシン、インシュリン、インシュリン様成長因子I及びII(IGF-I及びIGF-II)、レプチン、メラニン濃縮ホルモン(MCH)、メラノサイト刺激ホルモン(MSH)、モチリン、ネスファチン、ニューロメディンB及びニューロメディンU、神経ペプチドB(NPB)及び(NPW)、神経ペプチドK(NPK)、神経ペプチドY(NPY)、ニューロテンシン(NT)、オベスタチン、オキシトシン、膵臓ペプチド、ペプチドYY、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド及び主要プログルカゴン断片を含むプログルカゴン由来ペプチド、プロラクチン放出ペプチド、プロオピオメラノコルチン(POMC)、プロトポルフィリン、QRFP43(RFアミドペプチド、26Rfa)、ソマトスタチン、チロトロピン放出ホルモン(TRH)、ウロコルチン並びにバソプレシンが挙げられるが、それらに限定されない。
【００３１】
「消化管ペプチド」という用語は、例えば胃、膵臓、腸又は結腸のような胃腸管によって内因的に生成される、又は生成されるであろう、食欲、食物摂取、エネルギー摂取若しくはエネルギー消費又は飽食を調節することが可能な当該技術分野で知られている任意のペプチドを指す。ある実施態様において、消化管ペプチドは、例えば脳のような別の器官でも生成され得る。本発明の消化管ペプチドとしては、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド及び主要プログルカゴン断片を含むプログルカゴン由来ペプチド、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYが挙げられるが、それらに限定されない。
【００３２】
いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド及び主要プログルカゴン断片を含むプログルカゴン由来ペプチド、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYからなる群から選択される。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、エンテロスタチンである。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、エンテロスタチン以外である。
【００３３】
いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYからなる群から選択される。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、アミリンである。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、ボムベシン又はボムベシン様ペプチドである。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、コレシストキニンである。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、グレリンである。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド及び主要プログルカゴン断片を含むプログルカゴン由来ペプチドである。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、GLP-1である。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、オキシントモジュリンである。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、オベスタチンである。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、ペプチドYYである。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、膵臓ペプチドである。
【００３４】
「非消化管ペプチド」という用語は、例えば脳、肝臓又は脂肪組織のような胃腸管以外の器官又は組織によって内因的に生成される、又は生成されるであろう、食欲、食物摂取、エネルギー摂取、エネルギー消費又は飽食を調節することが可能な当該技術分野で知られている任意のペプチドを指す。
【００３５】
いくつかの実施態様において、非消化管ペプチドは、アジポネクチン、アグーチ関連タンパク質(AGRP)、アポリポタンパク質A-IV、ビーコン、脳由来神経因子(BDNF)、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、βカソモルフィン、毛様体神経栄養因子(CNTF)、コカイン及びアンフェタミン調節転写物(CART)、コルチコトロピン放出ホルモン(CRH)、シクロ-his-pro、ダイノルフィン、β-エンドルフィン、ガラニン、ガラニン様ペプチド(GALP)、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、ヒポクレチン/オレキシン、インシュリン、インシュリン様成長因子I及びII(IGF-I及びIGF-II)、レプチン、メラニン濃縮ホルモン(MCH)、メラノサイト刺激ホルモン(MSH)、モチリン、ネスファチン、ニューロメディンB及びニューロメディンU、神経ペプチドB(NPB)及び(NPW)、神経ペプチドK(NPK)、神経ペプチドY(NPY)、ニューロテンシン(NT)、オキシトシン、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド及び主要プログルカゴン断片を含むプログルカゴン由来ペプチド、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド、主要プログルカゴン断片、プロラクチン放出ペプチド、プロオピオメラノコルチン(POMC)、プロトポルフィリン、QRFP43(RFアミドペプチド、26Rfa)、ソマトスタチン、チロトロピン放出ホルモン(TRH)、ウロコルチン並びにバソプレシンからなる群から選択される。
【００３６】
「飽食因子のアゴニスト」という用語は、飽食因子の生物活性を模倣する、飽食因子の同様の生理的効果を誘発する、或いは飽食因子の効果の持続時間を延ばし、又はその生物活性若しくは選択性を向上させる任意の薬剤であり得る。いくつかの実施態様において、飽食因子のアゴニストは、飽食因子そのものである。他の実施態様において、飽食因子のアゴニストは、飽食因子の活性断片、類似体又は誘導体である。飽食因子のアゴニストは、間接的な作用を通じて作用することもできる。例えば、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)のアゴニストは、GLP-1を不活性化する酵素ジペプチジルペプチダーゼIV(DPP IV)の阻害薬であり得る。
【００３７】
「飽食因子のアンタゴニスト」という用語は、飽食因子の生物活性又は生理的効果を阻害する任意の薬剤であり得る。いくつかの実施態様において、飽食因子のアンタゴニストは、飽食因子の生物活性又は生理的効果を完全に阻害する。他の実施態様において、飽食因子のアンタゴニストは、飽食因子の生物活性又は生理的効果を部分的に阻害する。
【００３８】
「飽食因子の望ましくないレベル」という用語は、当業者の判断により対象に対して想定されるより低量又は高量の飽食因子を発現又は分泌する対象に関することである。ある実施態様において、対象は、絶食状態で、コントロール対象より低量又は高量の飽食因子を発現又は分泌する場合に、飽食因子の望ましくないレベルを有する。ある実施態様において、対象は、食後に、コントロール対象より低量又は高量の飽食因子を発現又は分泌する場合に飽食因子の望ましくないレベルを有する。
【００３９】
ある実施態様において、対象は、当業者の判断により対象に対して想定されるより低量の飽食因子を発現又は分泌する場合に「飽食因子の望ましくないレベル」を有する。いくつかの実施態様において、対象は、当該技術分野で利用可能な技術を用いて検出可能な量の飽食因子を発現又は分泌しない場合に飽食因子の望ましくないレベルを有する。いくつかの実施態様において、対象は、前記飽食因子を発現又は分泌しない場合に、飽食因子の望ましくないレベルを有する。
【００４０】
ある実施態様において、対象は、当業者の判断により対象に対して想定されるより高量の飽食因子を発現又は分泌する場合に「飽食因子の望ましくないレベル」を有する。
【００４１】
対象が飽食因子の望ましくないレベルを有するかどうかを、当業者に知られている技術によって判断することができる。ある実施態様において、対象からのサンプル中の飽食因子の量を測定し、それを正常な飽食因子値と比較することによって判断する。いくつかの実施態様において、対象は、当業者の判断により、対象からのサンプル中の飽食因子の量が、正常な飽食因子量の95%、90%、85%、80%、75%、70%、65%、60%、55%、50%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、10%、5%、2%又は1%未満である場合に飽食因子の望ましくないレベルを有する。他の実施態様において、対象は、対象からのサンプル中の飽食因子の量が、当業者の判断により正常な飽食因子の量の約110%、120%、130%、140%、150%、160%、170%、180%、190%、200%、250%、300%、400%、500%、600%、700%、800%、900%、1000%又は1500%である場合に、飽食因子の望ましくないレベルを有する。正常な飽食因子の量を以下のセクションに記載する。
【００４２】
「コントロール対象」という用語は、当業者に認識される基準に従って、飽食因子の望ましくないレベルに関連する1つ以上の障害又は状態の症状を示さない対象である。いくつかの実施態様において、コントロール対象は、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療に対して選択される対象と類似した年齢、身長、人種及び性別を有する。いくつかの実施態様において、コントロール対象は、痩せ形の対象又は正常な体重の対象である。対象がヒトである場合は、コントロール対象は、体重指数(「BMI」)の範囲が20〜25kg/m2の個人であり得る。BMIは、体重(キログラム)を身長(メートル)の2乗で割ることによって得られる。コントロール対象は、対象が飽食因子の望ましくないレベルを有するかどうかを評価するのに用いることができる正常な飽食因子を確立するのに有用である。
【００４３】
「予防すること」又は「予防」は、疾患又は障害を生じる危険性を抑える(即ち、疾患に曝される、又はかかる恐れがあるが、疾患の症状をまだ経験していない又は示さない対象に疾患の臨床的症状の少なくとも1つを発生させない)ことを指す。好ましくは、予防は、まだ疾患又は障害の影響を受けていない、或いは疾患又は障害の症状をまだ示していない対象、例えばまだ感染していない、又は感染の症状をまだ示していない対象に化合物又は組成物を使用することを指す。
【００４４】
任意の疾患又は障害を「治療すること」又はその「治療」は、一実施態様において、対象に存在する疾患又は障害を改善する(即ち、疾患又はその臨床的症状の少なくとも1つの発生を抑制又は低減する)ことを指す。別の実施態様において、「治療すること」又は「治療」は、対象によって識別不可能であり得る少なくとも1つの物理的パラメータを改善することを指す。さらに別の実施態様において、「治療すること」又は「治療」は、物理的(例えば、識別可能な症状の安定化)又は生理的(例えば、物理的パラメータの安定化)或いはその両方で疾患又は障害を変調することを指す。さらに別の実施態様において、「治療すること」又は「治療」は、疾患又は障害の発症を遅らせることを指す。
【００４５】
「有効量」という用語は、疾患を治療する対象に投与する場合に、当該疾患の治療を行うのに十分である飽食因子のアゴニスト若しくはアンタゴニスト又はそれを含む組成物の量を意味する。有効量は、なかでも、使用される飽食因子、疾患及びその重症度、並びに治療される対象の年齢、体重等に応じて異なり得る。
【００４６】
「肥満」という用語は、特に脂肪組織の重量及び体質量が現在許容されている標準を超える対象を指す。いくつかの実施態様において、BMIが現在許容されている標準を超える対象は、肥満である。対象がヒトである場合は、「正常」として認められる男性及び女性の双方についての現在の標準は、20〜24.9kg/m2のBMIである。当該実施態様において、肥満の対象は、BMIが30kg/m2以上である。いくつかの実施態様において、肥満の対象は、BMIが40kg/m2以上である。他の実施態様において、対象は、その年齢及び身長に対する正常な体重の120%を超える体重である場合に肥満である。正常な体重は、身長、体格、骨格及び性別に基づいて、種及び個体間で異なる。
【００４７】
「過体重」という用語は、対象における中程度に過剰の脂肪を指す。いくつかの実施態様において、対象がヒトである場合は、過体重の対象は、BMIが25kg/m2以上である。
【００４８】
20種の遺伝子コード化L-アミノ酸について本明細書に用いられているアミノ酸表記法は、従来的である。好ましい実施態様において、本明細書の任意のペプチド又はアミノ酸は、特に指定がなければ、L型である。
【００４９】
(5.2. 治療又は予防方法)
作用の特定の理論に縛られることを意図するものではないが、本発明は、一部に、肥満又は過体重の個体の一定の集団が望ましくないレベルの1つ以上の飽食因子を有し、望ましくないレベルの1つ以上の飽食因子を有する肥満又は過体重の個体の分集団が、1つ以上の飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストの投与を含む、肥満又は過体重を治療するための治療方法に対する陽性応答者であり得るという発見に基づく。望ましくないレベルの1つ以上の飽食因子を有する、代謝障害又は脂質関連障害のような状態にかかっている個体の分集団も、1つ以上の飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストの投与を含む治療方法に対する陽性応答者であることがさらに発見されている。
【００５０】
よって、本発明は、飽食因子の望ましくないレベルの治療を必要とする対象における望ましくない飽食因子を治療する方法を提供する。ある実施態様において、該方法は、飽食因子の望ましくないレベルを治療するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを対象に投与する工程を含む。対象が飽食因子の望ましくないレベルを有するかどうかを、当業者に利用可能な任意の方法によって判断することができる。代表的な方法を本明細書に記載する。
【００５１】
本発明は、対象における飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態を治療又は予防する方法をさらに提供する。該方法は、障害又は状態を治療又は予防するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを対象に投与する工程を含む。
【００５２】
飽食因子の望ましくないレベルに関連する代表的な障害又は状態としては、過体重、肥満、代謝障害、高血圧症、脂質関連障害、拒食症及びII型糖尿病が挙げられるが、それらに限定されない。
【００５３】
ある実施態様において、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態は、過体重である。別の実施態様において、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態は、肥満である。ある実施態様において、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態は、代謝障害である。ある実施態様において、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態は、脂質関連障害である。ある実施態様において、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態は、II型糖尿病である。ある実施態様において、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態は、高血圧症である。ある実施態様において、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態は、拒食症である。
【００５４】
一態様において、本発明は、食欲の低減を必要とする、飽食因子の望ましくないレベルを有する対象における食欲を低減する方法を提供する。該方法は、食欲を抑えるのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与する工程を含む。
【００５５】
別の態様において、本発明は、食物摂取量の減少を必要とする、飽食因子の望ましくないレベルを有する対象における、食物摂取量を減少させる方法を提供する。該方法は、食物摂取量を減少させるのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与する工程を含む。
【００５６】
別の態様において、本発明は、脂肪摂取量の減少を必要とする、飽食因子の望ましくないレベルを有する対象における脂肪摂取量を減少させる方法を提供する。該方法は、脂肪摂取量を減少させるのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与する工程を含む。
【００５７】
別の態様において、本発明は、炭水化物摂取の低減を必要とする、飽食因子の望ましくないレベルを有する対象における炭水化物摂取を低減する方法を提供する。該方法は、炭水化物摂取を低減するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与する工程を含む。
【００５８】
別の態様において、本発明は、タンパク質摂取の低減を必要とする、飽食因子の望ましくないレベルを有する対象におけるタンパク質摂取を低減する方法を提供する。該方法は、タンパク質摂取を低減するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与する工程を含む。
【００５９】
別の態様において、本発明は、飽食因子の望ましくないレベルを有する対象において体重を減少させる、又は体重減少を促す方法を提供する。該方法は、体重を減少させる、又は体重減少を促すのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与する工程を含む。「体重減少」という用語は、以前の対象の質量と比較して、検出可能な対象の体質量の減少を指す。
【００６０】
別の態様において、本発明は、体脂肪の減少を必要とする、飽食因子の望ましくないレベルを有する対象における体脂肪を減少させる方法を提供する。該方法は、体脂肪を減少させるのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを前記対象に投与する工程を含む。
【００６１】
本発明の方法は、治療に応答する確率がより高い患者を選択し、該患者に治療薬を投与することによる、肥満の治療、食欲を低減する方法、食物摂取を低減する方法、脂肪摂取を低減する方法、タンパク質摂取を低減する方法、及び炭水化物摂取を低減する方法を包括することを認識すべきである。応答する確率がより高い患者を、1つ以上の内因性飽食因子のレベルを測定、或いは把握することによって識別又は選択する。
【００６２】
(5.2.1. 対象)
本発明のある実施態様において、対象は、動物、好ましくは哺乳類、より好ましくはヒト以外の霊長類である。最も好ましい実施態様において、対象はヒトである。対象は、男性又は女性の対象であり得る。
【００６３】
任意の対象における飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択するのに本発明の方法を用いることができる。特に有用な対象としては、飽食因子の望ましくないレベルを有する対象が挙げられる。対象が飽食因子の望ましくないレベルを有するかどうかを、当業者に利用可能な任意の方法によって判断することができる。代表的な方法を以下に説明する。
【００６４】
ある実施態様において、対象は、過体重、肥満、代謝障害、高血圧症、脂質関連障害、拒食症及びII型糖尿病を含むが、それらに限定されない、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態の危険性を有する。いくつかの実施態様において、対象は、過体重又は肥満の危険性を有する。いくつかの実施態様において、対象は、代謝障害の危険性を有する。いくつかの実施態様において、対象は、高血圧症の危険性を有する。いくつかの実施態様において、対象は、脂質関連障害の危険性を有する。いくつかの実施態様において、対象は、拒食症の危険性を有する。いくつかの実施態様において、対象は、II型糖尿病の危険性を有する。
【００６５】
ある実施態様において、対象は、健康でない。いくつかの実施態様において、対象は、糖尿病、胃腸疾患及び/又は心臓血管疾患を有する。いくつかの実施態様において、対象は、過体重、肥満、代謝障害、高血圧症、脂質関連障害、拒食症及びII型糖尿病を含むが、それらに限定されない、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態を有する、又はそれらにかかっている。いくつかの実施態様において、対象は、代謝障害を有する。いくつかの実施態様において、対象は、高血圧症にかかっている。いくつかの実施態様において、対象は、脂質関連障害を有する。いくつかの実施態様において、対象は、II型糖尿病を有する。いくつかの実施態様において、対象は、異常糖値を有する。いくつかの実施態様において、対象は、拒食症を有する。
【００６６】
いくつかの実施態様において、対象は過体重である。特定の実施態様において、対象は、ヒトであり、BMIが25kg/m2以上である。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、BMIが25kg/m2から30kg/m2である。いくつかの実施態様において、対象は肥満である。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、BMIが30kg/m2以上である。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、BMIが30kg/m2から35kg/m2である。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、BMIが35kg/m2以上である。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、BMIが40kg/m2以上である。いくつかの実施態様において、対象は、体重がその年齢及び身長に対して正常な体重の120%を超える。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、体重が96kgを超える。
【００６７】
いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、胴囲が1.02mを超える。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、腰囲が1.06mを超える。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、胴囲:腰囲比が0.98を超える。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、40.9%を超える体脂肪を有する。
【００６８】
いくつかの実施態様において、対象は、正常な体重範囲内にある。本発明の文脈において、正常な体重の対象としては、当業者の判断による何らかの理由によって、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療を必要とする対象が含まれる。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、BMIが25kg/m2以下である。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、BMIが22kg/m2以下である。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、BMIが約20kg/m2から約25kg/m2である。いくつかの実施態様において、対象は、ヒトであり、BMIが20kg/m2以下である。当該対象は、例えば、過食症のような状態により、該対象の重量を維持しながら飽食因子の望ましくないレベルを有し得る。
【００６９】
いくつかの実施態様において、対象は、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態に対する何らかの治療をこれまで受けたことがない。他の実施態様において、対象は、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態に対する治療をこれまでに受けたことがあるか、或いは現在受けている。ある実施態様において、対象は、当該飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療をこれまで受けたことがあるか、或いは現在受けている。ある実施態様において、対象は、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニスト以外の治療をこれまで受けたことがあるか、或いは現在受けている。
【００７０】
いくつかの実施態様において、対象は、異常糖値を有する。特定の実施態様において、対象は、高血糖値を有する。いくつかの実施態様において、対象は糖尿病である。ある実施態様において、対象はII型糖尿病である。他の実施態様において、対象は、糖尿病ではない。
【００７１】
いくつかの実施態様において、対象は、21歳未満である。いくつかの実施態様において、対象は、15歳未満である。他の実施態様において、対象は、49歳を超えている。いくつかの実施態様において、対象は、15、25、35、40、45、50、55又は65歳を超えている。
【００７２】
いくつかの実施態様において、対象は、規則的に運動する。他の実施態様において、対象は、規則的に運動しない。
【００７３】
(5.2.2. 本発明の飽食因子)
本発明の飽食因子は、対象によって内因的に生成される、又は生成されるであろう、食欲、食物摂取、エネルギー摂取若しくは消費又は飽食シグナルを調節することが可能な任意の分子であり得る。いくつかの実施態様において、飽食因子は、ペプチドである。当該実施態様において、ペプチド飽食因子は、消化管ペプチド又は非消化管ペプチドであり得る。他の実施態様において、飽食因子は、ペプチドでない。
【００７４】
本発明の飽食因子としては、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBray GAの論文、1995、Obesity Research 3(supplement 4):569S〜572S;Bays HE、2004、Obesity Research 12(8):1197〜1211、Sahu Aの論文、2004、Endocrinology 145(6);2613〜20に詳細に記載されているアジポネクチン、アグーチ関連タンパク質(AGRP)、アミリン、アポリポタンパク質A-IV、ビーコン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、脳由来神経因子(BDNF)、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、βカソモルフィン、コレシストキニン(CCK)、毛様体神経栄養因子(CNTF)、コカイン及びアンフェタミン調節転写物(CART)、コルチコトロピン放出ホルモン(CRH)、シクロ-his-pro、ダイノルフィン、β-エンドルフィン、エンテロスタチン、ガラニン、ガラニン様ペプチド(GALP)、グレリン、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、ヒポクレチン/オレキシン、インシュリン、インシュリン様成長因子I及びII(IGF-I及びIGF-II)、レプチン、メラニン濃縮ホルモン(MCH)、メラノサイト刺激ホルモン(MSH)、モチリン、ネスファチン、ニューロメディンB及びニューロメディンU、神経ペプチドB(NPB)及び(NPW)、神経ペプチドK(NPK)、神経ペプチドY(NPY)、ニューロテンシン(NT)、オベスタチン、オキシトシン、膵臓ペプチド、ペプチドYY、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド及び主要プログルカゴン断片を含むプログルカゴン由来ペプチド、プロラクチン放出ペプチド、プロオピオメラノコルチン(POMC)、プロトポルフィリン、RFU43(RFUアミドペプチド、26Rfa)、ソマトスタチン、チロトロピン放出ホルモン(TRH)、ウロコルチン並びにバソプレシンが挙げられるが、それらに限定されない。
【００７５】
ある実施態様において、飽食因子は、ペプチドである。いくつかの実施態様において、飽食因子は、消化管ペプチド、即ち、例えば胃、膵臓、腸又は結腸のような胃腸管によって内因的に生成される、又は生成されるであろう、食欲、食物摂取、エネルギー摂取、エネルギー消費又は飽食を調節することが可能である当該技術分野で知られているペプチドである。好適な消化管ペプチドとしては、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、インシュリン、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド及び主要プログルカゴン断片を含むプログルカゴン由来ペプチド、膵臓ポリペプチド、並びにペプチドYYが挙げられるが、それらに限定されない。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、エンテロスタチンである。いくつかの実施態様において、消化管ペプチドは、エンテロスタチン以外である。
【００７６】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、アミリンである。島状アミロイドポリペプチドとしても知られるアミリンは、37個のアミノ酸からなり、膵臓のβ細胞によって放出される。アミリン及びプラムリンチド(合成ヒトアミリン類似体)投与は、食物摂取の減少をもたらし、体重減少を維持したことが報告された。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているRedaらの論文、2002、Obesity Res.10:1087〜91参照)。
【００７７】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、ボムベシン又はボムベシン様ペプチドである。例えば、ガストリン放出ペプチド及びニューロメディンBのようなボムベシン又はボムベシン様ペプチドは、胃腸管並びに中枢神経系に広く分布する。ボムベシン又はボムベシン様ペプチドによる摂食抑制は、ヒトを含む様々な種において報告された。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているYamamdaらの論文、2002、Euro.J.Pharm.440:281〜290参照)。
【００７８】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、コレシストキニンである。コレシストキニン(CCK)は、胆嚢、膵臓及び胃で生成され、小腸で濃縮される。それは、主に食物脂肪に応答して放出され、飽食を高め、食欲を低下させるように機能する。正常な体重のヒト対象及び肥満のヒト対象の両方を含む多くの種においてCCKの末梢投与により投与量に依存して食物摂取が抑制されることが研究によって示された。(その内容が全面的に参照により組み込まれているKissileffらの論文、1981, Am.J.Clin.Nutr. 34:154〜60参照)。
【００７９】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、エンテロスタチンである。いくつかの実施態様において、飽食因子は、エンテロスタチン以外である。エンテロスタチンは、リパーゼを生成するために腸又は胃においてプロコリパーゼのトリプシン活性により生成される5アミノ酸ペプチドである。(例えば、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているErlanson-Albertssonらの論文、1991、Physiol.Behav.49:1191〜1194参照)。プロペプチドエンテロスタチンは、齧歯類の研究で実証されたように、哺乳類における食物脂肪指向を低減すると考えられる。(例えば、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているErlanson-Albertssonらの論文、1991、Physiol.Behav.49:1191〜1194;Okadaらの論文、1991、Physiol.Behav.49:1185〜1189;Shargillらの論文、1991、Brain Res.544:137〜140参照)。
【００８０】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、グレリンである。グレリンは、主に胃によって生成される28アミノ酸アシル化ペプチド及び成長分泌促進物質受容体(GHS-Rs)に対する内因性リガンドである。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているKojimaらの論文、1999、Nature 402(6762):656660参照)。グレリンの循環レベルは、絶食中及び食後に上昇する。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているCummingsらの論文、2001、Diabetes 50:1714〜19参照)。齧歯類及び人間において、グレリンは、食物摂取を刺激し、脂肪酸化を低下させることによって体重を増加させることが示された。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているDruceらの論文、2006、Intl.J.Obesity 30:293〜96;Druceらの論文、2005、Intl.J.Obesity 29:1130〜36;Wrenらの論文、2001、Diabetes 141:4325〜28参照)。
【００８１】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、オベスタチンである。オベスタチンは、グレリンの同じペプチド前駆体(プレプログレリン)から誘導される。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているZhangらの論文、2005、Science 310(5750):985〜86参照)。グレリンの食欲刺激効果と対照的に、オベスタチンによるラットの治療は、食物摂取を抑制し、空腸収縮を阻害し、体重増加を低減した(前出の文献参照)。
【００８２】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド及び主要プログルカゴン断片を含むプログルカゴン由来ペプチドから選択される。
【００８３】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、オキシントモジュリンである。37アミノ酸ペプチドであるオキシントモジュリンは、カロリー摂取に比例して小腸のL-細胞から食後に放出されるプログルカゴンの生成物である。それは、齧歯類及びヒトに投与されると、飽食シグナルを調節し、エネルギー摂取を低減することが示された。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているCohenらの論文、2003、J.Clin.Endocrinol Metab.88:4696〜4701;Wynneらの論文、2006(4月19日発行)、Int.J.Obesity参照)。
【００８４】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)である。グルカゴン様ペプチド1(7-36)-アミド(GLP-1)は、グルカゴン前駆体プレプログルカゴンの組織特異的翻訳後処理により腸L細胞で合成され、食事に応答して放出されて循環する。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているVarndellらの論文、1985、J.Histochem Cytochem、33:1080〜6参照)。健康な対象及び肥満の対象の両方におけるGLP-1の末梢投与は、空腹を抑制し、食物摂取を低減させることができる。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているFlintらの論文、2001、Int.J.Obes.Relat.Metab.Disord.25(6):781〜92;Gutzwillerらの論文、1999、Gut 44(1):81-86参照)。
【００８５】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、ペプチドYYである。神経ペプチドYタンパク質(NPY)族の構成要素であるペプチドYY(PYY)は、食事のカロリー含有量に比例して、小腸及び結腸を内張りする内分泌細胞によって生成及び分泌される。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているPedersen-Bjergarrdらの論文、1996、Scand.J.Clin.Lab.Invest.56:497〜503;Adrianらの論文、1985、Gastroenterology 89:1070〜77;Grandtらの論文、1994、Regul.Pept:51:151〜59参照)。蓄積及び循環するPYYの主型は、全長ペプチドのN末端切断型のPYY3-36である。PYY3-36は、主に脳で作用し、食欲刺激ホルモンNPYの放出を阻害するとともに、食欲抑制アルファ-メラノサイト刺激ホルモンの放出を刺激すると考えられる。PYY3-36は、NPYによっても認識されるG-タンパク質結合受容体であるY2受容体を介して視床下部の弓状核に直接作用することによって食欲を阻害すると思われる。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBatterhamらの論文、2002、Nature 418(698):650〜4参照)。
【００８６】
肥満の対象は、PYYの内因性レベルが低下しているだけでなく、PYYの食事誘発増加が損なわれていると報告された。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBatterhamらの論文、2003、N Eng.J.Med.349(10):941〜48参照)。ラット及びマウスにおけるPYY3-36の末梢注射により、食物摂取が阻害され、体重増加が抑えられる。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBatterhamらの論文、2002、Nature 418(698):650〜4参照)。加えて、ヒトへのPYY3-36の静脈内注入は、有意な食物摂取の低下、及び食後の正常な対象の血漿値と類似した血漿値をもたらす。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBatterhamらの論文、2003、N Eng.J.Med.349(10):941〜48参照)。
【００８７】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、膵臓ペプチド(PP)である。PYYと同様に、膵臓ペプチドは、NPY族に属する36アミノ酸ペプチドである。それは、膵島で生成され、食物消化に応答して放出される。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているAdrianらの論文、1976、Gut 17:940〜44参照)。齧歯類において、PPの慢性投与は、遺伝的に肥満のマウスにおける食物摂取及び体重増加を低減する。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているUenoらの論文、1999、Gastroenterology 117:1427〜32参照)。ヒトにおいて、PPの静脈内投与は、食欲及び食物摂取を持続的に減少させる。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBatterhamらの論文、2003、J.Clin.Endocrinol Metab.88:3989〜92参照)。
【００８８】
ある実施態様において、飽食因子は、非消化管ペプチド、即ち、例えば脳、肝臓又は脂肪組織のような胃腸管以外の器官又は組織によって内因的に生成される、又はされるであろう、食欲、食物摂取、エネルギー摂取、エネルギー消費又は飽食を調節することが可能な当該技術分野で知られているペプチドである。
【００８９】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているSaltiel ARの論文、2001、Nat Med.(8):887〜8などに記載されているように、インシュリンに対する肝細胞の感度を高めることができるアジポネクチンである。
【００９０】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているSahu Aらの論文、2004、Endocrinology 145(6);2613〜20、Katsukiらの論文、2001、J.Clin.Endocr.Metab.86:1921〜1924などに記載されているように、そのレベルが肥満の雄で高くなる、視床下部に存在するアグーチ関連タンパク質(AGRP)である。
【００９１】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBray GAの論文、1995、Obesity Research 3(supplement 4):569S〜572S、Fujimotoらの論文、1993、J.Clin.Invest.91(suppl 4):1830〜33などに記載されているように、動物における食物摂取を投与量に応じて低減することができるアポリポタンパク質A-IVである。
【００９２】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているCollier GRらの論文、2000、Diabetes 49:1766〜1771、Brailoiu GCらの論文、2002、Neurosci Lett 317(3):166〜8などに記載されているように、視床下部で発現され、投与量に応じて動物の食物摂取及び体重増加を刺激することができるビーコンである。
【００９３】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているSahu Aの論文、2004、Endocrinology 145(6);2613〜20などに記載されている脳由来神経因子(BDNF)である。
【００９４】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBray GAの論文、1995、Obesity Research 3(supplement 4):569S〜572S、Morleyらの論文、1982、Peptides 3:17〜20などに記載されているように、肥満動物及び非肥満動物の両方における食物摂取を減少させることが示されたカルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)である。
【００９５】
いくつかの実施態様において、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBray GAの論文、1995、Obesity Research 3(supplement 4):569S〜572S、Linらの論文、1994、Peptides 15(suppl 5):849〜54などに記載されているように、腸管におけるカゼインのトリプシン消化時に生成される7アミノ酸ペプチドであり、高脂肪食で動物の食物摂取を増加させ、低脂肪食で動物の食物摂取を減少させることができるβカソモルフィンである。
【００９６】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているLambertらの論文、2001、PNAS 98(8):4652〜57などに記載されているように、体重減少をもたらすことができる毛様体神経栄養因子(CNTF)である。
【００９７】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているSahu Aの論文、2004、Endocrinology 145(6);2613〜20などに記載されているコカイン及びアンフェタミン調節転写物(CART)である。
【００９８】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているKristensen Pらの論文、1998、Nature 393(6680):72〜6などに記載されているように、動物の食物摂取を低減することができるコルチコトロピン放出ホルモン(CRH)である。
【００９９】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBray GAの論文、1995、Obesity Research 3(supplement 4):569S〜572S、Bray GAの論文、1992、Am.J.Clin.Nutr.55:265S〜271Sなどに記載されているように、ディケトピペラジンであり、中枢又は末梢投与されると食物摂取を低減することができるシクロ-his-proである。
【０１００】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているOlszewskiらの論文、2004、Endocrinology 146(6):2627〜2632などに記載されているように、脳によって生成され、動物における食物摂取を刺激することができるダイノルフィンである。
【０１０１】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているAppleyardらの論文、2003、Endocrinology 144:1753〜1760などに記載されているように、エネルギーホメオスタシスの調節剤であることが示されたβ-エンドルフィンである。
【０１０２】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているSahu Aの論文、2004、Endocrinology 145(6);2613〜20、Pattersonらの論文、2006、J.Neuroendocrinol 18(10):742〜747などに記載されているように、ラットにおける食物摂取を刺激することができるガラニン又はガラニン様ペプチド(GALP)である。
【０１０３】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBays HEの論文、2004、Obesity Research 12(8):1197〜1211、Sahu Aの論文、2004、Endocrinology 145(6);2613〜20などに記載されているように、食物摂取及び体重増加を刺激することができる成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)である。
【０１０４】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているSahu Aの論文、2004、Endocrinology 145(6);2613〜20、Adamらの論文、2002、Int.J.Obes.26(2):274〜276、Sakuraiらの論文、1998、Cell 92:573〜585などに記載されているように、2つの孤立G-タンパク質結合オレキシン受容体-1及び-2に対するリガンドとして識別され、摂食及び睡眠-覚醒調節において役割を果たし、ラットにおける食欲及び食物摂取を刺激することができるヒポクレチン/オレキシン(オレキシン-A及びB)である。
【０１０５】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBray GAの論文、1995、Obesity Research 3(supplement 4):569S〜572S、Sahu Aの論文、2004、Endocrinology 145(6);2613〜20などに記載されているように、食物摂取の調節剤であるインシュリン又はインシュリン様成長因子I及びII(IGF-I及びIGF-II)である。
【０１０６】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているSahu Aの論文、2004、Endocrinology 145(6);2613〜20などに記載されているように、食物摂取及び体重を減少させることができるレプチンである。
【０１０７】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているShimadaらの論文、1998、Nature 396:670〜673などに記載されているように、環式神経ペプチドであり、哺乳類における摂食挙動の刺激において役割を果たすメラニン濃縮ホルモン(MCH)である。
【０１０８】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているMacNeil DJらの論文、2002、Eur J Pharmacol.440(2〜3):141〜57などに記載されているように、下垂体で生成され、メラノコルチン受容体に対するリガンドであり、エネルギー恒常性の調節において役割を果たすメラノサイト刺激ホルモン(MSH)である。
【０１０９】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているDavidsonらの論文、1999、Phiol.Behav.66(2):309〜315などに記載されているように、小腸のMo細胞によって分泌されるポリペプチドホルモンであり、胃腸運動を増強することができるモチリンである。
【０１１０】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているShinsukeらの論文、2006、443:709〜712などに記載されているように、脳によって生成され、投与量に応じて動物における食物摂取を低減することができるネスファチンである。
【０１１１】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているHowardらの論文、2000、Nature 406、70〜75などに記載されているように、消化管及び中枢神経系に広く分布した神経ペプチドであり、摂食の中枢制御に関与するニューロメディンB及びニューロメディンUである。
【０１１２】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているShimomuraらの論文、2002、J.Biol.Chem.、277(39):35826〜32などに記載されているように、孤立G-タンパク質結合受容体に対するリガンドとして識別され、動物における食物摂取を刺激することができる神経ペプチドB(NPB)及び(NPW)である。
【０１１３】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているAchapuらの論文、1992、Brain Res.Bull 28(2):299〜303、Sahu Aの論文、2004、Endocrinology 145(6);2613〜20などに記載されているように、動物における食物摂取を阻害することができる神経ペプチドK(NPK)である。
【０１１４】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているMyersらの論文、1993、Regul Pept 47、239〜245などに記載されているように、注射すると、動物における食物摂取を刺激することができる神経ペプチドY(NPY)である。
【０１１５】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているOhinakaらの論文、2004、Peptide 25(12):2135〜2138などに記載されているように、13アミノ酸神経ペプチドであり、中枢投与後に食物摂取を減少させるニューロテンシン(NT)である。
【０１１６】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBillingsらの論文、2006、Behav.Brain Res.171(1)-134〜141などに記載されているように、動物における食物摂取を増加させることができるオキシトシンである。
【０１１７】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBray GAの論文、1995、Obesity Research 3(supplement 4):569S〜572S、Gerardo-Gettensらの論文、1989、256(2pt2):R701〜706などに記載されているように、動物における食物摂取を増加させることができるプロラクチン放出ペプチドである。
【０１１８】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBoston BA.の論文、2001、J.Pediatr Endocrinol Metab 14 Suppl 6:1409〜16などに記載されているように、摂食挙動、インシュリンレベル及び体重の調節における媒介物質であるプロ-オピオメラノコルチン(POMC)である。
【０１１９】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBray GAの論文、1995、Obesity Research 3(supplement 4):569S〜572S、Galbraithらの論文、1991、Am.J.Physiol 261:R1395〜41などに記載されているように、ヘモグロビンの代謝中に生成され、注射すると、食物摂取及び体重を減少させることができるプロトポルフィリンである。
【０１２０】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているMoriya Rらの論文、2006、Endocrinology.147(6):2916〜22などに記載されているように、食欲及びエネルギー消費の調節剤であるQRFP 43(RFアミドペプチド、26RFa)である。
【０１２１】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBays HEの論文、2004、Obesity Research 12(8):1197〜1211、Levineらの論文、1982、Pharmacol Biochem Bahav.16:897〜902などに記載されているように、動物における食物摂取を低減することが示されたソマトスタチンである。
【０１２２】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているAl-Arabiらの論文、2005、Biamedsci.Instrum.41:62〜67などに記載されているように、食物摂取及びエネルギー消費の調節剤であるチロトロピン放出ホルモン(TRH)である。
【０１２３】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているInoueらの論文、2003、J Pharmacol Exp Ther 305(1):385〜393などに記載されているように、2型コルチコトロピン放出因子に対する高親和性リガンドであり、注入すると、ラットにおける摂食及び飲水を低減するウロコルチンである。
【０１２４】
いくつかの実施態様において、飽食因子は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBray GAの論文、1995、Obesity Research 3(supplement 4):569S〜572S、Langhansらの論文、1991、Phiol.Behav 49;169〜176などに記載されているように、動物モデルにおいて食物摂取を低減することが示されたバソプレシンである。
【０１２５】
(5.2.3. 飽食因子アゴニスト及びアンタゴニスト)
飽食因子のアゴニストは、飽食因子の生物活性を模倣する、飽食因子の同様の生理的効果を誘発する、飽食因子の効果の持続時間を延ばす、又は飽食因子の生物活性若しくは選択性を向上させる任意の薬剤であり得る。いくつかの実施態様において、飽食因子のアゴニストは、飽食因子そのものである。他の実施態様において、飽食因子のアゴニストは、飽食因子の活性類似体、誘導体又は断片である。飽食因子の活性類似体、誘導体又は断片は、天然、又は非天然GLP-1類似体であるエクセナチドのような非天然であり得る。
【０１２６】
飽食因子のアンタゴニストは、飽食因子の生理的効果の生物活性を阻害する任意の薬剤であり得る。飽食因子のアンタゴニストは、飽食因子の生理的効果の生物活性を完全又は部分的に阻害することができる。
【０１２７】
ある実施態様において、飽食因子はアミリンであり、有効量のアミリンアゴニストが、それを必要とする対象に投与される。いくつかの実施態様において、アミリンアゴニストは、アミリンである。いくつかの実施態様において、アミリンアゴニストは、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれている米国特許第5,175,145号、同第5,686,411号、同第5,814,600号、同第5,998,367号又は同第6,114,2304号に記載されているようにプラムリンチドである。
【０１２８】
ある実施態様において、飽食因子は、ボムベシン又はボムベシン様ペプチドであり、有効量のボムベシン又はボムベシン様ペプチドアゴニストが、それを必要とする対象に投与される。いくつかの実施態様において、ボムベシン又はボムベシン様ペプチドアゴニストは、ボムベシン又はボムベシン様ペプチドである。
【０１２９】
ある実施態様において、飽食因子はコレシストキニンであり、有効量のコレシストキニンアゴニストが、それを必要とする対象に投与される。いくつかの実施態様において、コレシストキニンアゴニストは、コレシストキニンである。
【０１３０】
ある実施態様において、飽食因子はエンテロスタチンであり、有効量のエンテロスタチンが、それを必要とする対象に投与される。いくつかの実施態様において、エンテロスタチンアゴニストは、エンテロスタチンである。
【０１３１】
ある実施態様において、飽食因子はグレリンであり、有効量のグレリンアンタゴニストが、それを必要とする対象に投与される。いくつかの実施態様において、グレリンアンタゴニストは、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれている米国特許公報第20050201938号、同第20050080007号、同第20040186181号又は同第20020187938号に記載されている通りである。
【０１３２】
ある実施態様において、飽食因子は、GLP-1であり、有効量のGLP-1アゴニストが、それを必要とする対象に投与される。いくつかの実施態様において、GLP-1アゴニストはGLP-1である。いくつかの実施態様において、GLP-1アゴニストは、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれている米国特許第6,872,700号又は同第6,989,366号に記載されているようにエキセンディン又はその類似体である。いくつかの実施態様において、GLP-1アゴニストは、BYETTA(登録商標)である。いくつかの実施態様において、GLP-1アゴニストは、GLP-1を不活性化する酵素ジペプチジルペプチダーゼIV(DPP IV)の阻害薬である。
【０１３３】
ある実施態様において、飽食因子はオベスタチンであり、有効量のオベスタチンアゴニストが、それを必要とする対象に投与される。いくつかの実施態様において、オベスタチンアゴニストは、オベスタチンである。
【０１３４】
ある実施態様において、飽食因子はオキシントモジュリンであり、有効量のオキシントモジュリンアゴニストが、それを必要とする対象に投与される。いくつかの実施態様において、オキシントモジュリンアゴニストは、オキシントモジュリンである。
【０１３５】
ある実施態様において、飽食因子はペプチドYYであり、有効量のペプチドYYアゴニストが、それを必要とする対象に投与される。いくつかの実施態様において、ペプチドYYアゴニストは、ペプチドYY3〜36である。
【０１３６】
ある実施態様において、飽食因子は膵臓ペプチドであり、有効量の膵臓ペプチドアゴニストが、それを必要とする対象に投与される。いくつかの実施態様において、膵臓ペプチドアゴニストは、膵臓ペプチドである。
【０１３７】
飽食因子のアゴニストは、間接的な作用を通じて作用することもできる。例えば、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)のアゴニストは、GLP-1を不活性化する酵素ジペプチジルペプチダーゼIV(DPP IV)の阻害薬であり得る。
【０１３８】
ある実施態様において、アジポネクチン、アミリン、アポリポタンパク質A-IV、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、脳由来神経因子(BDNF)、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、コレシストキニン(CCK)、毛様体神経栄養因子(CNTF)、コカイン及びアンフェタミン調節転写物(CART)、コルチコトロピン放出ホルモン(CRH)、シクロ-his-pro、エンテロスタチン、インシュリン、インシュリン様成長因子I及びII(IGF-I及びIGF-II)、レプチン、αメラノサイト刺激ホルモン(α-MSH)、モチリン、ネスファチン、ニューロメディンB及びニューロメディンU、神経ペプチドb(NPB)及び(NPW)、神経ペプチドK(NPK)、ニューロテンシン(NT)、オベスタチン、オキシトシン、膵臓ペプチド、ペプチドYY、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド及び主要プログルカゴン断片を含むプログルカゴン由来ペプチド、プロオピオメラノコルチン(POMC)、プロトポルフィリン、QRFP43(RFアミドペプチド、26Rfa)、ソマトスタチン、チロトロピン放出ホルモン(TRH)、ウロコルチン又はバソプレシンのアゴニストを投与する。
【０１３９】
ある実施態様において、アグーチ放出プロテイン(AGRP)、ビーコン、βカソモルフィン、ダイノルフィン、β-エンドルフィン、ガラニン、ガラニン様ペプチド(GALP)、グレリン、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、ヒポクレチン/オレキシン、メラニン濃縮ホルモン(MCH)、神経ペプチドY(NPY)、プロラクチン放出ペプチド又はQRFP43(RFアミドペプチド、26Rfa)のアンタゴニストを投与する。
【０１４０】
前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを、経口、鼻内、肺内、静脈内、皮下、経皮、胃内、腹腔内、脳室内及び直腸を含むが、それらに限定されない、当業者に知られている任意の経路で投与することができる。
【０１４１】
飽食因子アゴニスト及びアンタゴニストを、以下に説明する当業者に明らかなあらゆる方法によって調製し、処方し、対象に投与することができる。勿論、医薬として許容し得る調製物、製剤及び投与が好ましい。
【０１４２】
(5.2.4. 組合せ治療)
ある実施態様において、本発明の方法を第2の治療と併用することができる。第2の治療は、当業者に知られている任意の状態又は障害に対する任意の治療であり得る。ある実施態様において、状態又は障害は、過体重、肥満、代謝障害、高血圧症、脂質関連障害、拒食症及びII型糖尿病からなる群から選択される。
【０１４３】
ある実施態様において、第2の治療を、当業者に好適と思われる技術に従って投与することができる。
【０１４４】
ある実施態様において、第2の治療は、飽食因子の投与である。飽食因子は、本明細書に記載の飽食因子を含む、当業者に知られている任意の飽食因子であり得る。ある実施態様において、第2の治療の飽食因子を、当業者に好適と思われる技術に従って投与することができる。ある実施態様において、第2の治療を本明細書に記載の方法、即ち、飽食因子の望ましくないレベルを有する対象を治療に対して選択し、状態又は障害を治療又は予防するのに有効な量の前記飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを対象に投与する方法に従って投与することができる。
【０１４５】
ある実施態様において、第2の治療は、非消化管ペプチド飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストである。ある実施態様において、第2の治療は、非消化管ペプチド飽食因子である。例としては、アジポネクチン、アグーチ関連タンパク質(AGRP)、アポリポタンパク質A-IV、ビーコン、脳由来神経因子(BDNF)、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、βカソモルフィン、毛様体神経栄養因子(CNTF)、コカイン及びアンフェタミン調節転写物(CART)、コルチコトロピン放出ホルモン(CRH)、シクロ-his-pro、ダイノルフィン、β-エンドルフィン、ガラニン、ガラニン様ペプチド(GALP)、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、ヒポクレチン/オレキシン、インシュリン、インシュリン様成長因子I及びII(IGF-I及びIGF-II)、レプチン、メラニン濃縮ホルモン(MCH)、メラノサイト刺激ホルモン(MSH)、モチリン、ネスファチン、ニューロメディンB及びニューロメディンU、神経ペプチドb(NPB)及び(NPW)、神経ペプチドK(NPK)、神経ペプチドY(NPY)、ニューロテンシン(NT)、オキシトシン、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)を含むプログルカゴン由来ペプチド、プロラクチン放出ペプチド、プロオピオメラノコルチン(PMOC)、プロトポルフィリン、QRFP43(RFアミドペプチド、26Rfa)、ソマトスタチン、チロトロピン放出ホルモン(TRH)、ウロコルチン並びにバソプレシンが挙げられる。
【０１４６】
ある実施態様において、第2の治療は、消化管ペプチド飽食因子である。例としては、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、例えば、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1)、グルカゴン様ペプチド2(GLP-2)、オキシントモジュリン、グリセンチン、グリセンチン関連膵臓ペプチド及び主要プログルカゴン断片を含むプログルカゴン由来ペプチド、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYが挙げられる。
【０１４７】
組合せ治療の使用は、提供される方法で薬剤又は治療薬を対象に投与する順序を限定しない。例えば、組合せ治療の薬剤を同時に、任意の順序で順次、又は周期的に対象に投与することができる。いくつかの実施態様において、組合せ治療の2つの構成要素を同時に対象に投与する。
【０１４８】
組合せ治療の構成要素を同一の医薬組成物で対象に投与することができる。或いは、組合せ治療の構成要素を個別の医薬組成物で対象に投与することができ、これらの個別の組成物を、例えば、経口投与、非経口投与又は局部投与を含む同一又は異なる投与経路で投与することができる。
【０１４９】
好ましい実施態様において、他の治療をそれぞれの標準的又は業界で認識された投与量及び投与スケジュールに従って対象に投与する。
【０１５０】
いくつかの実施態様において、他の治療は、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態の治療又は予防のための飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストによる相加効果について選択される。
【０１５１】
いくつかの実施態様において、他の治療は、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態の治療又は予防のための飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストによる相乗効果について選択される。
【０１５２】
本明細書に提示されている方法に使用できる治療の例としては、食事、運動、生活様式及び挙動の改良、アンフェタミン(デキストロアンフェタミン)、フェンテルミン、ベンズフェタミン、フェンジメトラジン、マジンドール、ジエチルプロピオン、フェニルプロパノールアミンのような交感神経様作用薬、シブトラミンのようなセロトニン(5-HT)再取込み阻害薬、オルリスタットのような胃腸リパーゼが挙げられるが、それらに限定されない。(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているObesity Research 12(8):1197〜1211参照)。
【０１５３】
(5.3. 飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を識別する方法)
本発明は、一部に、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる肥満及び関連疾患による治療が、飽食因子治療に応答する対象に有効であり、飽食因子治療に応答する対象が、望ましくない内因性レベルの飽食因子を有する対象を含むという発見に基づく。
【０１５４】
(5.3.1. 飽食因子のレベルの測定)
対象中の飽食因子の内因性レベルを当業者に利用可能な任意の方法によって測定することができる。それを直接又は間接的に測定することができる。いくつかの実施態様において、それは、対象からのサンプル中の飽食因子の量を測定することによって測定される。他の実施態様において、それは、対象からのサンプル中の飽食因子の前駆体の活性を測定することによって測定される。例えば、エンテロスタチンのレベルを、対象からのサンプル中のプロコリパーゼの活性を測定することによって測定することができる。飽食因子の全内因性レベルに加えて、対象における飽食因子の活性型の内因性レベルを測定することができる。例えば、ある実施態様において、グレリンの全レベル及びアシル化グレリンのレベルの両方を測定する。
【０１５５】
本発明のある実施態様において、飽食因子の量を測定する方法は、重要でない。よって、本発明は、対象からのサンプル中の飽食因子の量に基づいて、対象が治療に好適であるかどうかを判断する単一の工程を含む、飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択するための方法を提供する。
【０１５６】
飽食因子の量は、本発明の方法の実施者が何らかの方法で測定することができる。代表的な技術を本明細書に記載する。
【０１５７】
飽食因子の量を、例として、限定することなく、血液サンプル、血漿サンプル、唾液サンプル、血清サンプル、痰サンプル、尿サンプル、便サンプル、細胞サンプル、細胞抽出物サンプル、組織生検サンプル、又は当業者によく知られている技術を用いて対象から得ることができる任意のサンプルであり得る、対象の任意のサンプルから測定することができる。対象から採取される厳密なサンプルは、異なり得るが、サンプリングは、好ましくは侵襲性が最小限であり、従来の技術によって容易に行われる。
【０１５８】
例えば、使用されるサンプル及び測定技術の種類に基づき、当業者の判断に従ってサンプルを処理又は精製することができる。特に有用な処理工程は、析出、遠心分離、濾過及び/又はクロマトグラフィーである。
【０１５９】
(5.3.2. 飽食因子の量の測定)
対象からのサンプル中の飽食因子の量を、限定することなく当業者に知られているあらゆる方法によって測定することができる。例えば、それを分光光度法、クロマトグラフィー、免疫アッセイ法又は電気泳動によって測定することができる。いくつかの実施態様において、飽食因子の量は、免疫アッセイ法によって測定される。いくつかの好ましい実施態様において、飽食因子の量は、ELISAによって測定される。
【０１６０】
好ましい実施態様において、アミリンの量は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているLudvikらの論文、1991、Diabetes 40(12):1615〜19に記載されているように測定される。
【０１６１】
好ましい実施態様において、エンテロスタチンの量は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているImamuraらの論文、1998、Peptides、19:8、1385〜1391;Bowyerらの論文、1991、Clinica.Chimica.Acta..200:137〜152;Mizumaらの論文、1995、Biochemical & Biophysical Research Communications 1995、215(1):227〜234;又はZhaoらの論文、2001、Fresenius J.Anal.Chem.269:220〜224に記載されているように測定される。
【０１６２】
好ましい実施態様において、GLP-1の量は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているKreymannらの論文、1987、Gut 2(8571):1300〜04;Verdichらの論文、2001、Int..J.Obesity 25:1206-14;又はFeinleらの論文、2002、Peptides 23:1491〜95に記載されているように測定される。
【０１６３】
好ましい実施態様において、グレリンの量は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているDruceらの論文、2005、Intl.J.Obesity 29:1130〜36;Akamizuらの論文、2005、J.Clin.Endodrinol.Metab.90(1):6〜9(アシル化及び脱アシル化グレリンについて);又はTschopらの論文、2001、Diabetes、50:707〜09に記載されているように測定される。
【０１６４】
好ましい実施態様において、PYYの量は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBatterhamらの論文、2003、N Eng.J.Med.349(10):941〜8;Adrian TEらの論文、1987、Surgery 101(6):715〜19;Savageらの論文、1987、Gut 28(2):166〜70;又はFuesslらの論文、1988、Klin Wochenschr 66(19):985〜89に記載されているように測定される。
【０１６５】
好ましい実施態様において、膵臓ポリペプチドの量は、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBerntsonらの論文、1993、Peptides.14(3):497〜503;Polakら、1976、Lancet.1(7955):328-30;又はAdrianらの論文、1976、Gut 17(5):393〜94に記載されているように測定される。
【０１６６】
サンプルに存在するペプチド又は対象となるペプチドの量を測定するための標準的な技術を、サンプル中の飽食因子の量を測定するのに利用することができる。例えば、ウェスタンブロット、免疫沈降に続いてドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)、及び免疫細胞化学等のような免疫検定法を用いて、サンプル中のタンパク質又は対象となるタンパク質の量を測定する標準的な技術を採用することができる。対象となるタンパク質を検出するための1つの代表的な薬剤は、対象となるペプチドに特異的に結合することが可能な抗体、好ましくは、直接又は間接的に検出可能に標識された抗体である。
【０１６７】
当該検出法では、要望に応じて、当業者によく知られている技術を用いてサンプルから飽食因子を容易に単離することができる。それらの方法は、例えば、全面的に参照により本明細書に組み込まれているHarlow及びLane、1988、「抗体:実験室マニュアル(Antibodies:A Laboratory Manual)」、Cold Spring Harbor Laboratory Press(Cold Spring Harbor、New York)に記載されているものなどであり得る。
【０１６８】
ある実施態様において、サンプル中の飽食因子の量を検出する方法は、飽食因子を特異的に結合することが可能な抗体との相互作用を介する検出を含む。抗体を商業源から得るか、又は当業者によく知られている標準的な技術を利用して生成することができる。具体的な実施態様において、抗体は、ポリクローナル、又はより好ましくはモノクローナルであり得る。例えば、無処置の抗体又は抗体断片(例えばscFv、Fab又はF(ab')2)を使用することができる。代表的な免疫アッセイ法を以下に説明する。
【０１６９】
いくつかの実施態様において、プロテインチップアッセイ(例えば、Zhu & Snyderの論文、2003、Curr.Opin.Chem.Biol.7:55-63;Mitchellの論文、2002、Nature Biotechnology 20:225-229参照)を用いて、生物マーカープロフィルにおける生物マーカーに対する量を測定する(また、例えば、全面的に参照により本明細書に組み込まれているLinの論文、2004、Modern Pathology、1-9;Li、2004、Journal of Urology 171、1782-1787;Wadsworthの論文、2004、Clinical Cancer Research、10、1625-1632;Prietoの論文、2003、Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies 26、2315-2328;Coombesの論文、2003、Clinical Chemistry 49、1615-1623;Mianの論文、2003、Proteomics 3、1725-1737;Lehreらの論文、2003、BJU International 92、223-225;及びDiamond、2003、Journal of the American Society for Mass Spectrometry 14、760-765参照)。本発明のある実施態様において特に有用なのは、MALDI又はSELDIによる検出を容易にする抗体チップである(例えば、内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているWangらの論文、2001、Int'l.J.of Cancer 92:871-876;Figeys、2002、Proteomics 2:373-382;Sonksenらの論文、1998、Anal.Chem.70:2731-6;Glokler,& Angenendt、2003、J.Chromatography B、797:229-240参照)。
【０１７０】
ある実施態様において、飽食因子に特異的な抗体又は抗体の断片を使用して、サンプル中の飽食因子の量を測定することができる。これを例えば免疫蛍光技術によって遂行することができる。また、飽食因子のインサイチュ測定のために、免疫蛍光又は免疫電子顕微鏡法のように、抗体(又はその断片)を組織学的に採用することができる。
【０１７１】
免疫アッセイ法は、典型的には、飽食因子を識別することが可能な検出可能に標識された抗体のサンプルをインキュベートし、当該技術分野でよく知られているいくつかの技術のいずれかによって結合抗体を検出することを含む。代表的な免疫アッセイ法は、サンプル中のペプチドの量を測定するためのウェスタンプロット、硫酸ドデシルナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)を伴う免疫沈降法、及び免疫細胞化学等である。
【０１７２】
飽食因子に特異的な抗体を検出可能に標識できる方法の1つは、それを酵素に結合し、酵素免疫アッセイ法(EIA)に使用することである(それぞれ全面的に参照により本明細書に組み込まれているVoller、1978、「酵素結合免疫吸着アッセイ(The Enzyme Linked Immunosorbent Assay(ELISA))」、Diagnostic Horizons 2:1-7、Microbiological Associates Quarterly Publication、Walkersville、MD;Vollerらの論文、1978、J.Clin.Pathol.31:507-520;Butler,J.E.の論文、1981、Meth.Enzymol.73:482-523;Maggio,E.(編)、1980、「酵素免疫アッセイ(Enzyme Immunoassay)」、CRC Press、Boca Raton、FL;Ishikawa,E.(編)、1981、「酵素免疫アッセイ(Enzyme Immunoassay)」、Igaku Shoin、Tokyo)。抗体に結合した酵素は、例えば、分光光度的手段、蛍光定量的手段又は視覚的手段によって検出できる化学成分を生成するように適切な基質、好ましくは色素産性基質と反応する。抗体を検出可能に標識するのに使用できる酵素としては、リンゴ酸脱水素酵素、ブドウ球菌性核酸分解酵素、デルタ-5-ステロイド異性化酵素、酵母アルコール脱水素酵素、アルファ-グリセロホスフェート、脱水素酵素、トリオースリン酸異性化酵素、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、アスパラギナーゼ、グルコースオキシダーゼ、ベータ-ガラクトシダーゼ、リボ核酸分解酵素、尿素分解酵素、カタラーゼ、グルコール-6-リン酸脱水素酵素、グルコアミラーゼ及びアセチルコリンエステラーゼが挙げられるが、それらに限定されない。酵素に対する色素産性基質を採用する比色法によって検出を遂行することができる。基質の酵素反応の程度を同様の調製標準と視覚的に比較することによって検出を遂行することもできる。
【０１７３】
様々な他の免疫アッセイ法のいずれかを用いて測定を遂行することもできる。例えば、抗体又は抗体断片を放射性標識することによって、放射性免疫アッセイ法(RIA)の使用を通じて生物マーカーを検出することが可能である(例えば、参照により本明細書に組み込まれているWeintraub,B.、「ラジオイムノアッセイの原理、放射性リガンドアッセイ手法に関する第7回トレーニングコース(Principles of Radioimmunoassays、Seventh Training Course on Radioligand Assay Techniques)」、The Endocrine Society、March、1986)。ガンマカウンタ若しくはシンチレーションカウンタを使用する等の手段又はオートラジオグラフィーによって放射性同位体(例えば、125I、131I、35S又は3H)を検出することができる。
【０１７４】
抗体を蛍光化合物で標識することも可能である。蛍光標識された抗体を適切な波長の光に露光すると、その存在を蛍光により検出することができる。最も広く使用されている蛍光標識化合物には、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、フィコエリスリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、o-フタルデヒド及びフルオレサミンがある。
【０１７５】
152Eu又はランタンニド族の他の金属のような蛍光発光金属を使用して、抗体を検出可能に標識することもできる。ジエチレントリアミンペンタ酢酸(DTPA)又はエチレンジアミンテトラ酢酸(EDTA)のような金属キレート化基を使用して、これらの金属を抗体に結合させることができる。
【０１７６】
抗体を化学発光化合物に結合させることによって検出可能に標識することもできる。次いで、化学反応の過程を通じて発生する発光の存在を検出することによって、化学発光タグ付け抗体の存在を確認する。特に有用な化学発光標識化合物の例は、ルミノール、イソルミノール、セロマティックアクリジニウムエステル、イミダゾール、アクリジニウム塩及びシュウ酸エステルである。
【０１７７】
同様に、生物発光化合物を使用して、本発明の抗体を標識することができる。生物発光は、触媒タンパク質が化学発光反応の効率を高める生態系に見いだされる化学発光の一種である。生物発光タンパク質の存在は、発光の存在を検出することによって確認される。標識を目的とした重要な生物発光化合物は、ルシフェリン、ルシフェラーゼ及びエクオリンである。
【０１７８】
例えば、以下に説明する方法の1つ以上を用いることによって、飽食因子の量を測定することもできる。例えば、方法としては、核磁気共鳴(NMR)分光光度法、エレクトロスプレーイオン化質量分析法(ESI-MS)、ESI-MS/MS、ESI-MS/(MS)n(nは、0より大きい整数)、マトリックス補助レーザ脱離イオン化飛行時間質量分析法(MALDI-TOF-MS)、表面励起レーザ脱離/イオン化飛行時間質量分析法(SELDI-TOF-MS)、シリコンによる脱離/イオン化(DIOS)、二次イオン質量分析法(SIMS)、四極飛行時間(Q-TOF)、大気圧化学イオン化質量分析法(APCI-MS)、APCI-MS/MS,APCI-(MS)n、大気圧光イオン化質量分析法(APPI-MS)、APPI-MS/MS及びAPPI-(MS)nのような質量分析法を挙げることができる。他の質量分析法としては、とりわけ四極、フーリエ変換質量分析法(FTMS)及びイオントラップを挙げることができる。他の好適な方法としては、化学抽出分割、カラムクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性(逆相)液体クロマトグラフィー、等電点集束法、一次元ポリアクリルアミドゲル電気泳動(PAGE)、二次元ポリアクリルアミドゲル電気泳動(2D-PAGE)、又は薄層、ガス若しくは液体クロマトグラフィーのような他のクロマトグラフィー、或いはそれらの組合せを挙げることができる。一実施態様において、生体サンプルを分離法の適用前に分割することができる。
【０１７９】
一実施態様において、レーザ脱離/イオン化飛行時間質量分析法は、入射レーザ放射によってイオン化され、固定化支持体から蒸発された分子である生物マーカーの量を測定するのに用いられる。様々なレーザ脱離/イオン化技術が、当該技術分野で知られている(例えば、参照により本明細書に組み込まれているGuttmanらの論文、2001、Anal.Chem.73:1252-62及びWeiらの論文、1999、Nature 399:243-246参照)。
【０１８０】
レーザ脱離/イオン化飛行時間質量分析法は、比較的短時間で大量の情報を生成することを可能にする。生体サンプルを、サンプル中のすべての生物マーカー又はその部分集合体を結合させる数種類の支持体の1つに適用する。細胞可溶化物又はサンプルを、予め精製又は分画し、又は予め精製又は分画せずにわずか0.5μL程度の容量でこれらの表面に直接適用する。該可溶化物又はサンプルを支持体表面に適用する前に濃縮又は希釈することができる。次いで、レーザ脱離/イオン化を用いて、わずか3時間でサンプル(複数も可)の質量スペクトルを生成する。
【０１８１】
液体クロマトグラフィー-質量分析による分析は、そのピークがサンプルの様々な成分を表し、各成分が特徴的な質量対電荷比(m/z)及び保持時間(r.t.)を有する質量強度スペクトルを生じる。生物マーカーのそのm/z及び保持時間を有するピークの存在は、マーカーが存在することを示す。マーカーを表すピークを他のスペクトル(例えばコントロールサンプルからの)の対応するピークと比較して、相対的測定値を得ることができる。定量的測定値が望まれる場合は、当該技術分野における任意の正規化技術(例えば内部標準)を用いることができる。加えて、重複ピークを分離するのに逆重畳積分ソフトウェアが利用可能である。保持時間は、液体クロマトグラフィー分離を行うのに採用される条件にある程度依存する。
【０１８２】
MALDI質量分析法(MALDI-MS)では、様々な分析装置、例えば、シングル又はトリプル四重極型(MS/MS)の磁気セクター/磁気偏向装置、フーリエ変換、及び直交飛行時間(O-TOF)を含む飛行時間(TOF)、質量分析の技術分野で知られている構造を使用することができる。脱離/イオン化法では、多くのマトリックス/レーザの組合せを使用することができる。イオントラップ及び反射構造を採用することもできる。
【０１８３】
エレクトロスプレーイオン化質量分析法(ESI-MS)は、タンパク質、核酸及び炭水化物を含む巨大分子の分析に広く適用可能である(Fennらの論文、1989、Science 246:64-71;Crainらの論文、1998、Curr.Opin.Biotechnol.9:25-34;Smithらの論文、1990、Anal Chem.62:882-99;Han & Gross、1994、Proc Natl Acad Sci USA 91:10635-10639)。式I及び式Iaのような生物マーカーを分離及び測定するのにエレクトロスプレー技術が使用された(その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているPetkovicらの論文、2001、Anal Biochem.289(2):202-16;Pulfer & Murphy、2003、Mass Spec Rev 22:332-364;Han & Gross、1995,J.Amer.Soc.Mass Spec.6:1202-1210参照)。
【０１８４】
タンパク質又はペプチドについては、例えば、Vorm,O.らの論文、Anal.Chem.66:3281-3287(1994);及びVorm and Mann、J.Am.Soc.Mass.Spectrom.5:955-958(1994)に当該分子の質量スペクトル分析に関するさらなるガイダンスが示されており、該文献は、全面的に参照により組み込まれている。これらの出版物の内容は、全面的に参照により本明細書に組み込まれている。
【０１８５】
(5.3.3 飽食因子による治療の対象の選択)
対象が飽食因子の望ましくないレベルを有するかどうかを当業者に利用可能な任意の方法によって判断することができる。代表的な方法を本明細書に記載する。
【０１８６】
ある実施態様において、飽食因子のレベルが低い対象又は飽食因子欠乏の対象を治療の対象に選択する。対象は、対象からのサンプル中の飽食因子の量が、正常な飽食因子値より低い場合に治療の対象に選択される。いくつかの実施態様において、当該技術分野で利用可能な技術を用いて検出可能な飽食因子の量を示さない、又は分泌しない対象が選択される。他の実施態様において、飽食因子をまったく示さない、又は分泌しない対象が選択される。好ましい実施態様において、対象は、食事後にコントロール対象より低量の飽食因子を示す、又は分泌する場合に選択される。対象における飽食因子のレベルが低いのは、当該技術分野で知られている何らかの原因の可能性がある。例えば、飽食因子の発現又は分泌のレベルが低いこと、或いは腸又は胃における飽食因子の活性が不十分であることに起因し得る。また、飽食因子を加水分解することができる過剰のプロテアーゼ活性のような過剰のタンパク質分解活性の結果であり得る。
【０１８７】
ある実施態様において、高レベルの飽食因子を有する対象、又は飽食因子が過剰生成される対象を治療に対して選択する。対象のサンプル中の飽食因子の量が正常な飽食因子値を超える場合に、該対象を治療に対して選択する。好ましい実施態様において、対象が絶食状態でコントロール対象より高量の飽食因子を発現又は分泌する場合に、該対象を選択する。対象における高レベルの飽食因子は、当該技術分野で知られているいずれかの原因に起因し得る。例えば、飽食因子の高レベルの発現又は分泌に起因し得る。
【０１８８】
ある実施態様において、対象のサンプル中の飽食因子の量及び正常な飽食因子値に基づいて選択することができる。正常な飽食因子値を以下のセクションに記載する。いくつかの実施態様において、試験対象における飽食因子の量が正常な飽食因子値を下回る、又は実質的に下回る場合は、試験対象を飽食因子による治療の対象に選択する。いくつかの実施態様において、対象は、対象からのサンプル中の飽食因子の量が、正常な飽食因子値未満である場合に選択される。他の実施態様において、対象は、対象からのサンプル中の飽食因子の量が、正常な飽食因子値の95%、90%、85%、80%、75%、70%、65%、60%、55%、50%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、10%、5%、2%又は1%未満である場合に選択される。
【０１８９】
他の実施態様において、試験対象における飽食因子の量が正常な飽食因子値を超える、又は実質的に超える場合は、該試験対象を飽食因子による治療に対して選択する。いくつかの実施態様において、対象からのサンプル中の飽食因子の量が正常な飽食因子値を超える場合に、該対象を選択する。他の実施態様において、対象からのサンプル中の飽食因子の量が正常な飽食因子値の約110%、120%、130%、140%、150%、160%、170%、180%、190%、200%、250%、300%、400%、500%、600%、700%、800%、900%、1000%又は1500%である場合に、該対象を選択する。
【０１９０】
ある実施態様において、単一時点に対象から採取した1つ以上のサンプルを使用して、選択を行う。いくつかの実施態様において、単一時点に単一サンプルのみを採取する。他の実施態様において、異なる時点に対象から複数のサンプルを採取する。複数のサンプルは同一又は異なるサンプル種であり得る。特定の実施態様において、血液サンプル及び尿サンプルの両方を対象から採取して、選択を行う。複数の同一種のサンプルを使用する場合は、ANOVA又はカイ二乗試験のような当業者に知られている任意の統計技術に基づいて評価を行うことができる。
【０１９１】
単一時点のサンプルを使用する場合は、対象が一晩絶食したとき、対象が摂食したとき、又は対象が摂食してから約0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5若しくは4.0時間後にサンプルを対象から得ることができる。いくつかの実施態様において、対象に正規食、高脂肪食又は高炭水化物食を与える。
【０１９２】
ある実施態様において、食事は炭水化物を含む。ある実施態様において、食事はタンパク質を含む。ある実施態様において、食事は脂肪を含む。ある実施態様において、食事は、特定の栄養物の負荷食である。ある実施態様において、食事は、炭水化物の負荷食である。ある実施態様において、食事は、タンパク質の負荷食である。ある実施態様において、食事は、脂肪の負荷食である。
【０１９３】
ある実施態様において、異なる時点に対象から採取した複数のサンプルを使用して、選択を行う。それらの時点を当業者の判断に応じて分割することができる。いくつかの実施態様において、これらのサンプルを1日1回、或いはより高頻度で、例えば4、6、8又は12時間毎に対象から得る。
【０１９４】
いくつかの実施態様において、異なる時点で採取した複数のサンプルは、反復測定を目的とする。当該実施態様において、ANOVA又はカイ二乗試験のような当業者に知られている任意の統計技術に基づいて評価を行うことができる。好ましくは、当業者の判断に応じて、対象が同一又は類似の摂食条件下にあるときにサンプルを対象から採取する。いくつかの実施態様において、対象が一晩絶食したときにサンプルを採取する。いくつかの実施態様において、対象が摂食したときにサンプルを採取する。いくつかの実施態様において、対象が摂食してからほぼ特定時間後にサンプルを採取する。特定の実施態様において、対象が食事を摂食してから約0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5又は4.0時間後にすべてのサンプルを採取する。
【０１９５】
他の実施態様において、異なる時点に対象から採取された複数のサンプル及び飽食因子の量の変化又は無変化を評価して、選択を行う。肥満の対象は、飽食因子の内因性レベルが変化しているばかりでなく、飽食因子のレベルの食事誘発応答が損なわれているということが報告された。(例えば、Verdichらの論文、2001、Int.J.Obesity 25:1206〜14(GLP-1);le Rouxらの論文、2005、J.Clin.End & Metab.90(2):1068〜71(グレリン)参照)。よって、飽食因子の量の摂食:絶食比を測定し、それを用いて、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択することができる。
【０１９６】
ある実施態様において、対象が一晩絶食したとき、対象が摂食したとき、或いは対象が食事を摂食してから1、2若しくは3時間にわたってサンプルを採取し、対象からの飽食因子の量の摂食:絶食比を計算する。ある実施態様において、飽食因子レベルを食事後1、2又は3時間にわたって連続的に測定する。いくつかの実施態様において、対象は、絶食:摂食比が、正常な飽食因子絶食:摂食比と比較して低下した場合に選択される。別の実施態様において、対象は、絶食:摂食比が、正常な飽食因子絶食:摂食比の95%、90%、85%、80%、75%、70%、65%、60%、55%、50%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、10%、5%、2%又は1%未満である場合に選択される。いくつかの実施態様において、絶食:摂食比が、正常な飽食因子の絶食:摂食比と比べて大きい場合に、対象を選択する。別の実施態様において、絶食:摂食比が、正常な飽食因子の約110%、120%、130%、140%、150%、160%、170%、180%、190%、200%、250%、300%、400%、500%、600%、700%、800%、900%、1000%又は1500%である場合に対象を選択する。飽食因子の正常な絶食:摂食比を以下に説明する。
【０１９７】
ある実施態様において、複数の飽食因子の内因性レベルを測定し、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択するのに用いる。例えば、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYを含むが、それらに限定されない飽食因子プロファイルを測定し、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択するのに用いる。
【０１９８】
飽食因子のレベルに加えて、他のパラメータ又は変数を飽食因子のレベルと併用して、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択することができる。いくつかの実施態様において、対象の血糖値を用いる。他の実施態様において、対象の体重又はBMIを用いて、選択を行う。さらに、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択するかどうかは、例えば、血液検査、心電図、絶食化学パネル、CBC、血圧、脈拍数、検尿、飽食因子のレベルと組み合わせた対象の有害事象に基づく当業者の判断によるものであってもよい。
【０１９９】
ある実施態様において、対象における複数の飽食因子の量を測定することができる。その量の内の1つ以上の量が上記のように望ましくない場合に、その対象を選択する。1つの量が望ましくない場合は、上記方法で記載されているように、対応する飽食因子の1つのアゴニスト又はアンタゴニストを対象に投与することができる。2つ以上の量が望ましくない場合は、対応する飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストの組合せを対象に投与することができる。該組合せは、当業者により安全且つ有効であると思われるアゴニスト又はアンタゴニストの任意の組合せによるものであり得る。該アゴニスト又はアンタゴニストを混合物で一緒に、又は同時で個別の投与で、又は周期的投与で、又は当業者が決定する任意の他のスケジュールに従って投与することができる。
【０２００】
ある実施態様において、対象における飽食因子のパネルの量を測定することができる。上記のように、その量の内の1つ以上の量が望ましくない場合に、その対象を選択する。有利には、該パネルを使用して、アゴニスト又はアンタゴニストの対象への投与を個人に応じて調整することができる。本明細書に記載の方法のような当該技術分野で知られている方法に従って、各アゴニスト又はアンタゴニストを投与することができる。アゴニスト又はアンタゴニストを混合物で一緒に、又は同時投与で、又は周期投与で、又は当業者が決定する任意の他のスケジュールに応じて投与することができる。特定の実施態様において、アゴニスト又はアンタゴニストの混合物又はカクテルを、パネルについて測定した量に基づいて、対象に対して選択することができる。例えば、対象が、いずれも本発明の方法に従って測定された低レベルのエンテロスタチン及び高レベルのグレリンを有する場合は、エンテロスタチンのアゴニスト及びグレリンのアンタゴニストを組み合わせて対象に投与することができる。
【０２０１】
ある実施態様において、該パネルは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYから選択される2つ以上の飽食因子を含む。ある実施態様において、該パネルは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYから選択される3つ以上の消化管ペプチドを含む。ある実施態様において、該パネルは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYから選択される4つ以上の飽食因子を含む。ある実施態様において、該パネルは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYから選択される5つ以上の飽食因子を含む。ある実施態様において、該パネルは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYから選択される6つ以上の飽食因子を含む。ある実施態様において、該パネルは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYから選択される7つ以上の飽食因子を含む。ある実施態様において、該パネルは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYから選択される8つ以上の飽食因子を含む。ある実施態様において、該パネルは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYから選択される9つ以上の飽食因子を含む。ある実施態様において、該パネルは、アミリン、ボムベシン又はボムベシン様ペプチド、コレシストキニン、エンテロスタチン、グレリン、グルカゴン様ペプチド1、オベスタチン、オキシントモジュリン、膵臓ポリペプチド及びペプチドYYから選択される飽食因子を含む。
【０２０２】
(5.3.4. 正常な飽食因子値及び正常な飽食因子摂食:絶食比)
正常な飽食因子値は、例えば、コントロール対象又は複数のコントロール対象からのサンプル中の飽食因子の量であり得る。コントロール対象又は複数のコントロール対象からのサンプル中の飽食因子の量を、本明細書に記載されているものを含む当業者に知られている技術によって測定することができる。有利には、ある実施態様において、コントロール対象における飽食因子の量及び試験対象における飽食因子の量を同一の技術によって得る。正常な飽食因子値は、特定のアッセイ法、サンプルの種類及び無細胞抽出物の種類毎に異なり得ることを当業者なら理解するであろう。正常な飽食因子値は、選択される対象の異なる種又は性別に応じて異なり得ることを当業者なら理解するであろう。例えば、正常な飽食因子値は、同一種の雄の対象の方が雌の対象より高くなる可能性がある。よって、好ましい実施態様において、雌の対象の飽食因子レベルを雌の対象について期待されるレベルと比較し、雄の対象の飽食因子レベルを雄の対象について期待されるレベルと比較する。
【０２０３】
正常な飽食因子値を本明細書に記載の方法又は当業者に利用可能な他の情報源からの方法に従って求めることができる。ある実施態様において、正常な飽食因子値は、正常な対象における値を測定することによって求める。対象は、当業者によって正常、例えば、肥満でも過体重でもないと判断されるべきである。好ましい正常な対象は、可能な限り、例えば性別、年齢、身長等が治療対象と同等である。当該対象における飽食因子値を本明細書に記載の方法に従って、又は当業者に明らかな他の方法に従って求めることができる。例えば、文献、臨床試験及び利用可能なデータベースを含む当業者に利用可能な情報源から正常な飽食因子値を求めることもできる。飽食因子値を示す代表的な非限定的文献としては、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているAlevizakeらの論文、2001、Eur.J.Endocrinol.145:585〜9;Schouらの論文、2005、J.Clin.Endocrinl.Metabol.90:4912〜4919;Peracciらの論文、1999、Scand.J.Gastroenterol.34:25〜28;Teitelbaumらの論文、1989、J.Pediatr.Surg.24:629〜633;Zhouらの論文、2006、Obesity 14:683〜689、Batterham & Bloom、2003、Ann.N.Y.Acad.Sci.994:162〜168;Kimらの論文、2005、J.Clin.Endocrinl.Metabol.90:6665〜6671;Teffらの論文、2004、J.Clin.Endocrinl.Metabol.89:2963〜2972;Espelundらの論文、2005、J.Clin.Endocrinl.Metabol.90:2741〜2746;le Rouxらの論文、2006、Ann.Surgery 243:108〜114が挙げられる。
【０２０４】
コントロール対象は、痩せ形の対象、又は正常な体重の対象であり得る。対象がヒトである場合は、コントロール対象は、20〜25kg/m2の正常なBMI範囲の個人又は個人(複数)であり得る。ある実施態様において、正常な飽食因子量は、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態の症状を示さない複数のコントロール対象によるものである。正常な飽食因子量を当業者に知られている任意の好適な統計手法に従って計算することができる。例えば、正常な飽食因子量は、飽食因子の望ましくないレベルに関連する障害又は状態の症状を示さないコントロール対象からのサンプル中の飽食因子量の統計的平均値に基づくことができる。
【０２０５】
有利には、正常な飽食因子値は、本発明の方法の実施者が入手又は測定する必要はない。その代わり、科学文献、公的データベース又は私的データベースのような当業者に利用可能な情報源を参照することによって、或いは本明細書に示されているデータを参照することによって、正常な飽食因子値の量を特定することができる。
【０２０６】
正常な飽食因子値は、当業者によって測定される絶対値、誤差限界を有する絶対値又はある範囲の値であり得る。ある実施態様において、飽食因子の量の正常な値の範囲に基づいて選択が行われる。その正常値の範囲を、本明細書に記載されているように入手し、本発明の方法の実施者に利用できるようにすることが可能である。
【０２０７】
ある実施態様において、正常な飽食因子値は、カットオフ基準量である。カットオフ基準量は、正常な飽食因子量の絶対値である。コントロール対象から得られた対照量に基づいて、当業者に知られている統計技術を使用してカットオフ基準量を求めることができる。例えば、コントロール対象からのサンプル中の飽食因子の量の統計的平均値に基づいて求めることができる。
【０２０８】
対象からのサンプル中の飽食因子の量を、当業者に知られている任意の好適な統計手法に従って正常な飽食因子値と比較することができる。好ましい実施態様において、反復測定との比較に二又は三元配置分散分析(ANOVA)又はカイ二乗試験を用いる。
【０２０９】
ある実施態様において、対象のサンプル中の飽食因子の摂食:絶食比及び正常な飽食因子の摂食:絶食比に基づいて、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択する。飽食因子の摂食:絶食比は、対象が一晩絶食したときの対象からのサンプル中の飽食因子の量を、対象が摂食した時、又は対象が摂食してから約0.5、1、1.5、2、2.5若しくは3時間後のサンプル中の飽食因子の量で割ることによって求められる。正常な飽食因子値に関する上記説明は、正常な飽食因子摂食:絶食比にも適用される。例えば、正常な飽食因子摂食:絶食比は、例えば、コントロール対象又は複数のコントロール対象の正常な飽食因子摂食:絶食比であり得、本発明の方法の実施者が求める、又は測定する必要はない。それは、特定のアッセイ法、サンプルの種類、及び無細胞抽出物の種類毎に異なっていてもよい。それは、絶対値、誤差限界を有する絶対値、ある範囲の値又はカットオフ基準量であり得る。
【０２１０】
(飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストの製剤及び投与経路)
【０２１１】
治療に使用するための飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストを、そのまま、医薬組成物の形で、共複合体の形で、又は共複合体を含む医薬組成物の形で投与することができる。
【０２１２】
飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストを、経口、鼻内、肺内、静脈内、皮下、経皮、胃内、腹腔内、脳室内及び直腸を含むが、それらに限定されない当業者の判断による任意の経路で投与することができる。
【０２１３】
好ましい実施態様において、投与される組成物は、医薬組成物又は単一単位剤形である。医薬組成物及び単一単位剤形は、予防又は治療有効量の1つ以上の予防又は治療薬、及び典型的には1つ以上の医薬として許容し得る担体又は賦形剤を含むことができる。具体的な実施態様及びこの文脈において、「医薬として許容し得る」という用語は、連邦又は州政府の管理機関によって承認されている、或いは動物、より好ましくはヒトにおける使用について米国薬局方又は広く認識されている他の薬局方に掲載されていることを意味する。「担体」という用語は、希釈剤、補助剤(例えば、フロイントアジュバント(完全又は不完全))、賦形剤、又は治療薬を投与するための媒体を指す。当該医薬担体は、水、並びにピーナッツ油、大豆油、鉱油及びゴマ油等のような石油、動物、食物又は合成起源のものを含む油などの無菌液であり得る。水は、医薬組成物が静脈内投与される場合に好ましい担体である。食塩水並びにデキストロース及びグリセロール水溶液を特に注射可能溶液の液体担体として採用することもできる。好適な医薬担体の例が、E.W.Martinによる「レミントンの医薬科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)」に記載されている。
【０２１４】
典型的な医薬組成物及び剤形は、1つ以上の賦形剤を含む。好適な賦形剤は、製薬の当業者によく知られており、好適な賦形剤の非限定的な例としては、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦、白墨、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水及びエタノール等が挙げられる。特定の賦形剤が、医薬組成物又は剤形に組み込むのに好適であるかどうかは、剤形を患者に投与する方法及び剤形における具体的な活性成分を含むが、それらに限定されない、当該技術分野でよく知られている様々な要因に依存する。組成物又は単一単位剤形は、要望に応じて、少量の湿潤剤若しくは乳化剤又はpH緩衝剤を含むこともできる。
【０２１５】
本発明の無ラクトース組成物は、当該技術分野でよく知られており、例えば、米国薬局方(USP)SP(XXI)/NF(XVI)に掲載されている賦形剤を含むことができる。概して、無ラクトース組成物は、活性成分、結合剤/充填剤、及び潤滑剤を医薬として適合し得る量及び医薬として許容し得る量で含む。代表的な無ラクトース剤形は、活性成分、微結晶セルロース、アルファ化デンプン及びステアリン酸マグネシウムを含む。
【０２１６】
本発明は、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを含む無水医薬組成物及び剤形の投与をさらに包括する。例えば、水(例えば5%)を添加することは、保存寿命又は経時的な製剤の安定性を測定するために長期的保管をシミュレートする手段として、医薬技術分野で広く受け入れられている(例えば、Jens T.Carstensen、「医薬品の安定性:原理と実践(Drug Stability:Principles & Practice)」、第2版、Marcel Dekker、NY、NY、1995、379-380頁参照)。実際、水及び熱は、いくつかの化合物の分解を加速させる。したがって、湿分及び/又は湿度は、製剤の製造、処理、包装、保管、出荷及び使用中に広く遭遇するため、製剤に対する水分の影響は非常に重要な場合がある。
【０２１７】
無水又は低湿分含有成分及び低湿分又は低湿度条件を用いて、本発明の無水医薬組成物及び剤形を調製することができる。製造、包装及び/又は保管中に湿分及び/又は湿度に実質的に接触することが想定される場合は、ラクトース、及び一級又は二級アミンを含む少なくとも1つの活性成分を含む医薬組成物及び剤形は、無水であることが好ましい。
【０２１８】
無水医薬組成物は、無水性が維持されるように調製及び保管されるべきである。よって、無水組成物は、好ましくは、好適な処方キットに含めることができるように、水との接触を防止することが知られている材料を使用して包装される。好適な包装の例としては、気密密封箔、プラスチック、単位剤形容器(例えばバイアル)、ブリスターパック及びストリップパックが挙げられるが、それらに限定されない。
【０２１９】
本発明は、活性成分が分解する速度を小さくする1つ以上の化合物を含む医薬組成物及び剤形の投与をさらに包括する。本明細書において「安定剤」と称する当該化合物としては、アスコルビン酸のような酸化防止剤、pH緩衝液又は塩緩衝液が挙げられるが、それらに限定されない。
【０２２０】
医薬組成物及び単一単位剤形は、液剤、懸濁剤、乳剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、粉剤及び持続放出製剤等の形をとることができる。経口製剤は、医薬グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウムサッカリン、セルロース、炭酸マグネシウム等の標準的な担体を含むことができる。当該組成物及び剤形は、予防又は治療有効量の予防又は治療薬を好ましくは精製された形で、患者に適切に投与するための形を提供するように好適な量の担体とともに含むことになる。製剤は、投与の様式に適する必要がある。好ましい実施態様において、医薬組成物又は単一単位剤形は、無菌であり、対象、好ましくは動物対象、より好ましくは哺乳類対象、最も好ましくはヒト対象に対する投与に好適な形である。
【０２２１】
飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを含む医薬組成物は、その意図する投与経路と適合するように処方される。投与経路の例としては、非経口投与、例えば、静脈内投与、内皮投与、皮下投与、筋肉内投与、皮下投与、経口投与、頬投与、舌下投与、吸入投与、鼻内投与、経皮投与、局部投与、経粘膜投与、腫瘍内投与、滑液包内投与及び直腸投与が挙げられるが、それらに限定されない。具体的な実施態様において、組成物は、ヒトに対する静脈内投与、皮下投与、筋肉内投与、経口投与、鼻内投与又は局部投与に適合させた医薬組成物として、慣例手順に従って処方される。一実施態様において、医薬組成物は、ヒトに対する皮下投与のための慣例手順に従って処方される。典型的には、静脈内投与のための組成物は、無菌の等張性水性緩衝液の溶液である。必要な場合には、組成物は、可溶化剤、及び注射部位の痛みを緩和するためのリグノカムネのような局部麻酔剤を含むこともできる。
【０２２２】
剤形の例としては、錠剤;カプレット剤;軟質弾性ゼラチンカプセル剤のようなカプセル剤;カシェ剤;トローチ剤;ロゼンジ剤;分散剤;坐薬;軟膏剤;パップ剤(湿布剤);糊剤;粉剤;包帯剤;クリーム剤;硬膏剤;液剤;貼付剤;エアロゾル剤(例えば、鼻スプレー剤又は吸入剤);ゲル剤;懸濁剤(例えば、水性又は非水性液体懸濁剤、水中油乳剤、或いは油中水液体乳剤)、液剤及びエリキシル剤を含む、患者に対する経口又は粘膜投与に好適な液体剤形;患者に対する非経口投与に好適な液体剤形;患者に対する非経口投与に好適な液体剤形を提供するように再構成できる無菌固体剤(例えば、結晶性又は非晶質の固体)が挙げられるが、それらに限定されない。
【０２２３】
飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストの剤形の組成、形状及び種類は、それらの使用に応じて典型的に異なる。例えば、障害の急性治療に使用される剤形は、同じ疾患の慢性治療に使用される剤形より多量の1つ以上の飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを含んでいてもよい。また、治療に有効な剤形は、それぞれの種類の癌の間で異なっていてもよい。同様に、非経口剤形は、同じ疾患又は障害を治療するのに使用される経口剤形より少量の1つ以上の活性成分を含んでいてもよい。本発明に包括される具体的な剤形が互いに異なるこれら及び他の方法を当業者なら容易に理解するであろう(例えば、「レミントンの医薬科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)」、第18版、Mack Publishing、Easton PA(1990)参照)。
【０２２４】
一般に、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを含む組成物の成分は、個別に供給されるか、或いは、例えば、活性剤の量を示したアンプル又はサシェのような気密密封容器内の凍結乾燥粉末又は無水濃縮物として単位剤形で共に混合される。組成物を注入によって投与する場合には、無菌の医薬グレードの水又は食塩水を含む注入ボトルで分配することができる。組成物を注射によって投与する場合には、成分を投与前に混合できるように、注射用無菌水又は食塩水のアンプルを提供することができる。
【０２２５】
本発明の方法において投与される典型的な剤形は、午前中に摂取される単一の1日1回の投与として、好ましくは食物とともに1日を通じて摂取される分割投与として与えられる1日当たり約0.001mgから約1000mg又は約0.1pmol/lから約100pmol/lの範囲内の飽食因子のアゴニスト若しくはアンタゴニスト、又は飽食因子のアゴニスト若しくはアンタゴニストを含む共複合体、或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物又は水和物を含む。
【０２２６】
(5.3.5 経口剤形)
経口投与に好適である、本発明の方法に使用される医薬組成物を錠剤(例えば咀嚼性錠剤)、カプレット剤、カプセル剤及び液剤(例えば香りづけしたシロップ)などの(但し、それらに限定されない)個別剤形として提供することができる。当該剤形は、所定量の活性成分を含み、当業者によく知られている製薬方法で調製され得る(概要は「レミントンの医薬科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)」、第18版、Mack Publishing、Easton PA(1990)参照)。
【０２２７】
好ましい実施態様において、経口剤形は、固体であり、上記セクションに詳述されるように、無水成分により無水条件下で調製される。しかし、本発明の範囲は、無水の固体経口剤形を超えている。そのため、さらなる剤形を本明細書に記載する。
【０２２８】
典型的な経口剤形は、従来の医薬混合技術に従って、均一混合物における活性成分を少なくとも1つの賦形剤と組み合わせることによって調製される。賦形剤は、投与に応じた所望の調製の形に応じて、広範な形をとることができる。例えば、経口液体剤形又はエアロゾル剤形における使用に好適な賦形剤としては、水、グリコール、油、アルコール、香料、防腐剤及び着色剤が挙げられるが、それらに限定されない。固体の経口剤形(例えば、粉剤、錠剤、カプセル剤及びカプレット剤)における使用に好適な賦形剤の例としては、デンプン、糖、微結晶セルロース、希釈剤、造粒剤、潤滑剤、結合剤及び崩壊剤が挙げられるが、それらに限定されない。
【０２２９】
錠剤及びカプセル剤は、投与が容易であるため、最も有利な経口単位剤形であり、その場合は固体の賦形剤が採用される。要望に応じて、標準的な水性又は非水性技術により錠剤をコーティングすることができる。当該剤形を製薬方法のいずれかによって調製することができる。概して、医薬組成物及び剤形は、活性成分を液体担体、微細固体担体又はその両方と均質且つ均一に混合し、次いで製品を必要に応じて所望の形に成形することによって調製される。
【０２３０】
例えば、錠剤を圧縮又は成形によって調製することができる。賦形剤と場合により混合された粉末又は顆粒のような易流動形態の活性成分を好適な装置で圧縮することによって圧縮錠剤を調製することができる。不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化化合物の混合物を好適な装置で成形することによって成形錠剤を製造することができる。
【０２３１】
本発明の経口剤形に使用できる賦形剤の例としては、結合剤、充填剤、崩壊剤及び潤滑剤が挙げられるが、それらに限定されない。医薬組成物及び剤形における使用に好適な結合剤としては、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン又は他のデンプン、ゼラチン、アカシアのような天然及び合成ゴム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、他のアルギン酸塩、粉末化トラガカント、グアールガム、セルロース及びその誘導体(例えば、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ナトリウムカルボキシメチルセルロース)、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、アルファ化デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(例えば第2208、2906、2910)、微結晶セルロース並びにそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。
【０２３２】
本明細書に開示されている医薬組成物及び剤形における使用に好適な充填剤の例としては、タルク、炭酸カルシウム(例えば、顆粒又は粉末)、微結晶セルロース、粉末化セルロース、デキストレート、カオリン、マンニトール、珪酸、ソルビトール、デンプン、アルファ化デンプン、及びそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。本発明の医薬組成物における結合剤又は充填剤は、典型的には医薬組成物又は剤形の約50から約99重量パーセントで存在する。
【０２３３】
微結晶セルロースの好適な形としては、AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103 AVICEL RC-581、AVICEL-PH-105(FMC Corporation、American Viscose Division、Avicel Sales、PA(ペンシルベニア)州Marcus Hookから入手可能)として販売されている材料及びそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。具体的な結合剤は、AVICEL RC-581として販売されている微結晶セルロースとナトリウムカルボキシメチルセルロースとの混合物である。好適な無水又は低湿分賦形剤又は添加剤としては、AVICEL-PH-103及びデンプン1500LM(Starch 1500LM)が挙げられる。
【０２３４】
水性環境に曝されると崩壊する錠剤を提供するために、崩壊剤を本発明の組成物に使用する。過大量の崩壊剤を含有する錠剤は、保管中に崩壊し得るのに対して、過小量の崩壊剤を含有する錠剤は、所望の速度又は所望の条件下で崩壊し得ない可能性がある。したがって、活性成分の放出を不利に改変するほど過大でも過小でもない十分量の崩壊剤を使用して、本発明の固体経口剤形を形成すべきである。使用される崩壊剤の量は、製剤の種類に応じて異なり、当業者にとって容易に識別可能である。典型的な医薬組成物は、約0.5から約15重量パーセントの崩壊剤、具体的には約1から約5重量パーセントの崩壊剤を含む。
【０２３５】
本発明の医薬組成物及び剤形に使用できる崩壊剤としては、寒天、アルギン酸、炭酸カルシウム、微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポラクリリンカリウム、グリコール酸ナトリウムデンプン、ジャガイモ又はタピオカデンプン、アルファ化デンプン、他のデンプン、粘土、他のアルギン、他のセルロース、ガム、並びにそれらの混合物が挙げられるがそれらに限定されない。
【０２３６】
本発明の医薬組成物及び剤形に使用できる潤滑剤としては、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、鉱油、軽油、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、他のグリコール、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、水素化植物油(例えば、ピーナッツ油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油及び大豆油)、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル、寒天、及びそれらの混合物が挙げられるがそれらに限定されない。さらなる潤滑剤としては、例えば、シロイドシリカゲル(syloid silica gel)(MD(メリーランド)州BaltimoreのW.R.Grace Coが製造するAEROSIL 200)、合成シリカの凝集エアロゾル(TX(テキサス)州PlanoのDegussa Co.により市販)、CAB-O-SIL(MA(マサチューセッツ)州BostonのCabot Co.が販売する発熱性酸化珪素製品)及びそれらの混合物が挙げられる。潤滑剤は、使用される場合は、典型的には、それらが組み込まれる医薬組成物又は剤形の約1重量パーセント未満の量で使用される。
【０２３７】
(5.3.6 経皮、局部及び粘膜剤形)
固体の無水経口剤形が好ましいが、本発明は、また、経皮剤形、局部剤形又は粘膜剤形による飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストの投与を提供する。本発明の経皮剤形、局部剤形及び粘膜剤形としては、眼科用液剤、スプレー剤、エアロゾル剤、クリーム剤、ローション剤、軟膏剤、ゲル剤、液剤、乳剤、懸濁剤、又は当業者に知られている他の形が挙げられるが、それらに限定されない(例えば、「レミントンの医薬科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)」、第16版及び第18版、Mack Publishing、Easton PA(1980及び1990);及び「医薬剤型序説(Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms)」、第4版、Lea & Febiger、Philadelphia(1985)参照)。口腔内の粘膜組織を治療するのに好適な剤形を口内洗浄液又は経口ゲルとして処方することができる。さらに、経皮剤形は、皮膚に貼付し、所望量の活性成分の浸透を可能にするために、特定時間にわたって着用することができる「リザーバ型」又は「マトリックス型」貼付剤を含む。
【０２３８】
好適な賦形剤(例えば、担体及び希釈剤)、並びに本発明に包括される経皮剤形、局部剤形及び粘膜剤形を提供するために使用できる他の材料は、製薬技術分野の当業者によく知られており、所定の医薬組成物又は剤形が適用される特定の組織に依存する。その事実を念頭において、典型的な賦形剤としては、無毒性で、医薬として許容し得るローション剤、チンキ剤、クリーム剤、乳剤、ゲル剤又は軟膏剤を形成するための水、アセトン、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブタン-1,3-ジオール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、鉱油、並びにそれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。要望に応じて、加湿剤又は保湿剤を医薬組成物及び剤形に添加することもできる。当該追加的な成分の例は、当該技術分野でよく知られている(例えば、「レミントンの医薬科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)」、第16版及び第18版、Mack Publishing、Easton PA(1980 & 1990)参照)。
【０２３９】
治療される具体的な組織に応じて、本発明の活性成分による治療の前に、治療とともに、又は治療の後に追加的な成分を使用することができる。例えば、活性成分の組織への送達を助けるために浸透向上剤を使用することができる。好適な浸透向上剤としては、アセトン;エタノール、オレイル及びテトラヒドロフリルのような様々なアルコール;ジメチルスルホキシドのようなアルキルスルホキシド;ジメチルアセトアミド;ジメチルホルムアミド;ポリエチレングリコール;ポリビニルピロリドンのようなピロリドン;コリドングレード(ポビドン、ポリビドン);尿素;Tween 80(ポリソルベート80)及びSpan 60(モノステアリン酸ソルビタン)のような様々な水溶性又は水不溶性糖エステルが挙げられるが、それらに限定されない。
【０２４０】
医薬組成物又は剤形、或いは医薬組成物又は剤形が適用される組織のpHを調整して、1つ以上の活性成分の送達を向上させることもできる。同様に、溶媒担体の極性、そのイオン強度又は緊張度を調整して、送達を向上させることができる。ステアリン酸塩のような化合物を医薬組成物又は剤形に添加して、送達を向上するように、1つ以上の活性成分の親水性又は親油性を有利に改変することもできる。この点に関して、ステアリン酸塩は、製剤の脂質媒体として、乳化剤又は界面活性剤として、且つ送達向上剤又は浸透向上剤としての役割を果たすことができる。活性成分の異なる塩、水和物又は溶媒和物を使用して、得られた組成物の特性をさらに調整することができる。
【０２４１】
(5.3.7 投与量及び投与頻度)
障害又はその1つ以上の症状の予防、治療、管理又は改善に有効な本発明の方法における飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストの量は、疾患又は状態の性質及び重度、及び活性成分の投与経路に応じて異なる。頻度及び投与量は、投与される具体的な治療薬(例えば、治療又は予防薬)、障害、疾患又は状態の重度、投与経路、並びに患者の年齢、身体、体重、応答及び病歴に応じて、各患者に特有の要因によっても異なる。インビトロ又は動物モデル試験系から導かれた用量反応曲線から有効な投与量を推定することができる。
【０２４２】
飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストの代表的な投与量は、対象の体重又はサンプル重量1キログラム当たりミリグラム又はマイクログラム量のアゴニスト又はアンタゴニスト(例えば、1キログラム当たり約1マイクログラムから1キログラム当たり約500ミリグラム、1キログラム当たり約100マイクログラムから1キログラム当たり約5ミリグラム、又は1キログラム当たり約1マイクログラムから1キログラム当たり約50マイクログラム)を含む。
【０２４３】
飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストを、単一の1日1回の投与として、又は好ましくは1日を通しての分割投与として投与することができる。いくつかの実施態様において、1日投与量は、等分された投与量で1日2回投与される。他の実施態様において、1日投与量は、1日3回投与される。特定の実施態様において、1日投与量は、等分された投与量で1日3回投与される。いくつかの実施態様において、1日投与量は、三分割された投与量で1日3回投与され、各投与量は、飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストを約0.0001〜100mg、約0.001〜10mg、約0.01〜1mg、又は約0.001〜1000pmol/l、0.01〜100pmol/l若しくは0.1〜10pmol/lの量で含む。好ましくは、飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストの三分割された投与量は、毎日3回の食事の頃与えられる。ある実施態様において、例えば、上記のもののような経皮又は浸透圧若しくはポンプ送達系を使用して、アゴニスト又はアンタゴニストを連続的に投与することができる。
【０２４４】
飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストを様々な時点で投与することができる。いくつかの実施態様において、それは、飽食因子の望ましくないレベルを有する対象に対して、対象が絶食したときに投与される。いくつかの実施態様において、食事の前に投与される。いくつかの実施態様において、食事中に投与される。いくつかの実施態様において、食後に投与される。
【０２４５】
当業者であれば容易にわかるように、異なる治療有効量が異なる疾患及び状態に適用可能であり得る。同様に、当該障害を予防、管理、治療又は改善するのに十分であるが、本発明の飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストの投与に関連する悪影響を引き起こすのに不十分、又は該悪影響を低減するのに十分な量も、上記投与量及び投与頻度スケジュールに包括される。さらに、患者に複数回投与量の本発明の飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストが投与される場合は、投与量のすべてが同一である必要はない。例えば、共複合体の予防又は治療効果を向上させるために、患者に投与する投与量を増加させてもよいし、特定の患者が経験する1つ以上の副作用を低減するために減少させてもよい。
【０２４６】
ある実施態様において、本発明における飽食因子アゴニスト又はアンタゴニストの投与を繰り返すことができ、少なくとも1日、2日、3日、5日、10日、15日、30日、45日、2カ月、75日、3カ月又は6カ月の間隔をあけて投与することができる。他の実施態様において、同じ予防又は治療薬の投与を繰り返すことができ、少なくとも1日、2日、3日、5日、10日、15日、30日、45日、2カ月、75日、3カ月又は6カ月の間隔をあけて投与することができる。
【０２４７】
ある実施態様において、該方法及び組成物を単一の1回投与として、又は慢性的に施すことができる。慢性的とは、本発明の方法及び組成物を所定の個体に2回以上施すことを意味する。例えば、慢性的投与は、当業者にとって明らかなように、1日1回、1日2回、又はより高い若しくは低い頻度で対象に投与される医薬組成物の複数回投与であり得る。慢性的投与は、当業者の判断に応じて、適宜数日間、数週間、数カ月間又は数年間持続し得る。
【０２４８】
別の実施態様において、該方法及び組成物を急性的に施す。急性的とは、本発明の方法及び組成物を事象の発生に近い時間又は同一時間に施すことを意味する。例えば、急性的投与は、食事の開始頃に投与される医薬組成物の単回投与又は複数回投与であり得る。いくつかの実施態様において、食事は、高カロリー又は高脂肪食である。急性的投与は、また、食物の渇望の発生、特に脂肪性食物の渇望の発生頃に投与される医薬組成物の単回投与又は複数回投与であり得る。事象の発生に近い時間又は同一時間は、事象に応じて異なるが、例えば、食事又は食物の渇望の約30分以内であり得る。ある実施態様において、急性的投与は、食事又は食物の渇望の約1時間以内の投与である。ある実施態様において、急性的投与は、食事又は食物の渇望から約2時間、約6時間、約10時間、約12時間、約15時間又は約24時間以内の投与である。
【０２４９】
具体的な実施態様において、本発明は、障害、又はその1つ以上の症状を予防、治療、管理又は改善する方法であって、それを必要とする対象に対して、飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを含む組成物を3日に1回、好ましくは4日に1回、5日に1回、6日に1回、7日に1回、8日に1回、10日に1回、2週間に1回、3週間に1回、又は1カ月に1回投与することを含む、前記方法を提供する。
【０２５０】
本明細書に記載されている飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストの有効量は、実質的な毒性を生じることなく、治療の有益性を提供する。
【０２５１】
飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストの毒性を細胞培養又は実験動物による標準的な薬学的手順、例えば、LD50(集団の50%にとって致死的な投与量)又はLD100(集団の100%にとって致死的な投与量)を測定することによって測定できる。毒性効果と治療効果との投与量比が治療指数である。高い治療指数を示す化合物が好ましい。ヒトにおける使用に対して無毒な投与量範囲を処方するのに、これらの細胞培養アッセイ及び動物試験から得られたデータを用いることができる。本明細書に記載されている化合物の投与量は、好ましくは、毒性をほとんど又はまったく伴わない有効投与量を含む循環濃度の範囲にある。投与量は、採用される剤形及び利用される投与経路に応じて、この範囲内で異なっていてもよい。的確な処方、投与経路及び投与量は、個々の医師が患者の状態に鑑みて選択できる(例えば、Finglら、1996:「治療薬の薬理学的基礎(The Pharmacological Basis of Therapeutics)」、第9版、第2章、29頁、Elliot M.Ross参照)。
【０２５２】
(5.4. 飽食因子の望ましくないレベルを有する対象を選択するためのキット)
本発明は、また、本発明による飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択するのに有用なキットを提供する。いくつかの実施態様において、本発明のキットは、対象からのサンプル中の飽食因子又は複数の飽食因子を検出することが可能な試薬を含む。該試薬は、1つ以上の飽食因子を特異的に結合させる抗体若しくは機能的断片又はそれらの誘導体(例えば、Fab、F(ab)2、Fv又はsc Fv断片)であってもよい。いくつかの実施態様において、抗体を検出可能に標識することができる。試薬は、アレイの一部であってもよいし、個別及び/又は個々に包装されてもよい。キットは、1つ以上の飽食因子の量を測定するのに使用される少なくとも1つの内部標準を含むこともできる。
【０２５３】
いくつかの実施態様において、キットは、投与が必要な対象に対する投与に好適な量及び形で、1つ以上の飽食因子及び飽食因子の1つ以上のアゴニスト又はアンタゴニストを検出することが可能な1つ以上の試薬を含むことができる。有用な試薬及び有用なアゴニスト又はアンタゴニストは、上記のセクションに記載されている。
【０２５４】
本発明のキットは、対象からサンプルを得るのに使用できる緩衝液のような試薬を含むこともできる。様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール及びフェノールソルビン酸等を含めることによって、微生物の作用を確実に防ぐことができる。糖及び塩化ナトリウム等の等張剤を含むことも望ましいことがある。
【０２５５】
ある実施態様において、キットは、本発明の方法を実施するための指示が記載された標示又はラベルをさらに含む。例えば、標示又はラベルは、正常な飽食因子値を示すことができる。さらに、標示又はラベルは、当該基準量の情報源の引用又はリンクを提供することができる。いくつかの実施態様において、少なくとも1つの陽性コントロール及び少なくとも陰性コントロールをキットに含める。
【０２５６】
以下の実施例は、本発明を例示するものであり、本発明の範囲を限定するものと見なされるべきではない。
【実施例】
【０２５７】
(6. 実施例)
(6.1. 実施例1: 飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる肥満の治療)
(6.1.1. 血液サンプル中の飽食因子の量の測定)
血液を対象から、アプロトニンの5000カリクレイン阻害薬ユニットを含むヘパリンコーティング管へ採取する。血漿を4℃で遠心分離により直ちに分離し、次いで分析するまで-70℃で保管する。
【０２５８】
飽食因子に対する抗体を利用可能な供給源から得る、又は当業者によく知られている標準的な技術を利用して生成する。抗体は、ポリクローナル又はモノクローナルであり得る。
【０２５９】
当該技術分野で知られている標準的な技術を用いて、放射能標識抗体による免疫検定又はELISAによって飽食因子の血漿値を測定する。
【０２６０】
(6.1.2. 飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを含む医薬組成物)
有効量の飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストと、1つ以上の医薬として許容し得る担体又は賦形剤とを含む医薬組成物を当該技術分野で知られている標準的な方法によって調製する。医薬組成物は、液剤、懸濁剤、乳剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、粉剤又は持続放出製剤等の形である。
【０２６１】
(6.1.3. 飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる肥満の治療)
上記の飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを含む医薬組成物を使用して、それを必要とする対象における肥満を治療する。対象を、対象からのサンプル中の飽食因子の量及び正常な飽食因子値に基づいて選択する。本実施例において、正常な飽食因子値を複数のコントロール対象から確定する。
【０２６２】
(コントロール対象からの正常な飽食因子値の決定)
【０２６３】
当業者の判断に応じて、20kg/m2から25kg/m2のBMIを有する18〜60歳の男性に対して、身体検査、心電図測定、化学パネル試験、全血球算定又は尿検査を実施する。これらの試験及び病歴に基づいて、正常なBMIを有する10人の健康な男性を選択して、彼らの正常な飽食因子値を決定する。定期的な治療を受けている対象を試験から除外する。
【０２６４】
これらの対象を一晩絶食させ、水を許可するが、カロリーのある飲料を許可しない。翌朝、正規食を対象に与える。食事を与えてから1時間後に、5mlの血液サンプルを採取する。各血液サンプルを上記のように調製かつ処理する。各血液サンプルからの飽食因子の量を、免疫検定を用いて決定する。
【０２６５】
絶食状態の対象の正常な飽食因子値をこれらの対象から採取したサンプルの飽食因子の量の平均値として計算する。
【０２６６】
(飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる肥満の治療に対する対象の選択)
【０２６７】
18〜60歳のそれ以外は健康な肥満(BMIが30kg/m2から40kg/m2)の10人の男性を飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストによる治療に対して選別する。これらの対象の健康状態を、コントロール対象について上記で記載した身体検査及び化学パネル試験等によって測定する。
【０２６８】
これらの肥満の対象を絶食及び摂食させ、上記のように血液サンプルを採取する。各血液サンプルからの飽食因子の量を測定し、上記で決定した正常な飽食因子値と比較する。
【０２６９】
対象の血液サンプルからの消化管ペプチドの量が、上記で決定した正常な消化管ペプチド値の50%未満である場合に、消化管ペプチドのアゴニスト又はアンタゴニストによる治療の対象を選択する。飽食因子のアゴニスト又はアンタゴニストを含む医薬組成物を上記のように調製し、4週間にわたって1日3食の開始時に、選択した対象に対して静脈内又は経口投与する。
【０２７０】
心電図測定、化学パネル試験、全血球算定及び尿検査を実施して、投与の安全性を監視する。食物摂取、エネルギー摂取若しくは消費、食欲、満腹感、体重、BMI、体脂肪率及び代謝効果(睡眠時代謝率、休息時代謝率、脂肪酸化及び脂肪バランスなど)等を熟練した実務者が監視して、投与の効果及び安全性を判断する。
【０２７１】
(6.2. 実施例2: エンテロスタチンによる肥満の治療)
(6.2.1. 血液サンプル中のエンテロスタチンの量の測定)
血液サンプル中のエンテロスタチンの量を、ELISAを用いて測定する。抗APGPR抗体を使用するELISAを、その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているImamuraらの論文、1998、Peptides、19:8、1385-1391;Bowyerらの論文、1991、Clinica.Chimica.Acta.、200:137-152に記載されているように実施することができる。
【０２７２】
(血液サンプルの採取)
【０２７３】
5mlの血液サンプルを採取し、直ちに20mMの酢酸亜鉛と混合し、30分間にわたって室温で凝固させる。次いで、サンプルを3000gで20分間遠心分離する。分離した血清を、50mMのTRIS/HCl、0.05%(w/v)のカゼイン、3.1mMのNaN3、10mMのエチレンジアミン四酢酸(EDTA)及び0.05%(w/v)のTween 20を含む等容量のELISA免疫アッセイ緩衝液(pH7.2〜7.4)と混合する。サンプルを煮沸浴で10分間懸濁させ、次いで10,000gで5分間遠心分離し、エンテロスタチンについて評価を行うまで上清を-70℃で凍結保存することができる。
【０２７４】
保存された血清のアリコットを後に室温で解凍し、十分に混合し、10,000gで5分間遠心分離することができる。エンテロスタチンを抽出するために、上清を1:9容量のメタノールと混合する。混合物を30〜60分間にわたって氷上で保存し、次いで4℃にて10分間にわたって11,000gで遠心分離する。透明な上清を凍結乾燥し、アッセイのためにELISA緩衝液に懸濁させるか、或いはクロマトグラフィーのためにTBS(50mM Tris.HCl、150nM NaCl、3.1mM NaN3、pH7.4)に懸濁させることができる。アッセイ中のエンテロスタチンのタンパク質分解を抑制するために、2つのプロテアーゼ阻害剤をELISAの前に血清サンプルに添加することができる(最終濃度、1mmol/LジプロテインA及び0.1mmol/Lカプトプリル)。
【０２７５】
(酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA))
【０２７６】
当業者によく知られている標準的な技術を利用して、APGPRに対する抗体を生成することができる。抗体は、ポリクローナル又はモノクローナルであり得る。
【０２７７】
コーティング抗原の調製:5mgのスベリン酸ビス(スルホスクシンイミジル)(BS)(米国Illinois(イリノイ)州Pierce)をPBSに含めた溶液(pH7.2)1mlを、10g/lのウサギ血清アルブミン(RSA)をPGSに含めた溶液2mlに対して徐々に滴下添加し、室温で2時間にわたって撹拌する。余剰のBSを2〜20cmのSephadex G-50カラム上のPBS中ゲル濾過によって除去する。280nmの吸収によって監視されるタンパク質ピークをプールする。これを4℃で一晩インキュベートしながら、透析緩衝液を2回交換する。ローリー法を用いてタンパク質含有量を730μg/mlとして測定する(例えば、Markwellらの論文、1978、Anal.Biochem.87:206-210参照)。これを0.5mg/mlまで希釈し、3.1mmol/lのNaN3を添加する。一定分量を必要になるまで-20℃で保管する。
【０２７８】
競合ELISA:4℃で一晩インキュベートすることによって、0.2μg/mlのRSA-BS-CCG-APGPR及び0.8μg/mlのRSAを15mmol/lのNa2CO3、35mmol/lのNaHCO3、3.1mmol/lのNaN3に含めた溶液(pH9.6)100μlをPVCマイクロタイタプレートのウェルにコーティングする。すべてのさらなるインキュベーションを撹拌器により室温で行う。次いで、プレートを3回洗浄し、洗浄用緩衝液(20mmol/lのTris/HCl、75mmol/lのNaCl、3.1mmol/lのNaN3、0.05%(w/v)のTween 20(pH7.2〜7.4))でブロックする。次いで、未知又は標準の合成APGPRペプチド(American Peptide Companyより購入)溶液100μl及びマウス抗APGPRモノクローナル抗体をELISA緩衝液(50mMのTRIS/HCL、0.05%(w/v)のカゼイン、3.1mMのNaN3、10mMのエチレンジアミン四酢酸(EDTA)及び0.05%(w/v)Tween 20(pH7.2〜7.4))に含めた1:2000溶液50μlをウェルにて1時間インキュベートする。各インキュベーションの間に、プレートを洗浄用緩衝液で3回洗浄する。最初に、ヤギ抗マウスIgGビオチン複合体をELISA緩衝液に含めた1:1000溶液100μlを各ウェルにて30分間インキュベートし、次いで洗浄用緩衝液中エクストラビジンアルカリホスファターゼ1:500溶液100μlを各ウェルにて30分間インキュベートする。最後に、1mg/mlのリン酸p-ニトロフェニルを基質緩衝液(10%(w/v)ジエタノールアミン/HCl、0.49mmol/lのMgCl2、3.1mmol/lのNaN3(pH9.8))に含めた溶液100μlを、Anthos 2001 ELISAプレートリーダで測定される405nmの最大吸収が最小標準ペプチド濃度に対して1.5になるまで各ウェルにてインキュベートする。3mmol/lのNaOH(50μl)を添加することによって反応を終了させる。次いで、プレートを405nmで読み取り、標準曲線を作成して、読取値を補正する。
【０２７９】
競合合成抗原(APGPR)の濃度を対数スケールのx軸にプロットし、吸光度を直線スケールのy軸にプロットすることによって、特定の条件下における標準阻害曲線を得る。対象からのサンプル中の抗原(APGPR)の濃度を標準抗原阻害曲線から推定することができる。
【０２８０】
(クロマトグラフィー分析)
【０２８１】
血清APGPR免疫反応性のサイズを確認するために、Sephadex G-25(50×1.0m;9.3ml;球状タンパク質の分画範囲、1〜5kDa)カラムを使用して、ゲル濾過クロマトグラフィーを行う。最小容量の蒸留水で再構成された凍結乾燥メタノール抽出血清を、緩衝液A(10mmol/lのNH4HCO3)で平衡化されたカラムに充填する。カラムを約5分/1ml留分の速度で10mmol/lのNH4HCO3により溶出する。
【０２８２】
(6.2.2 エンテロスタチンの経口剤形)
エンテロスタチン、又はエンテロスタチンを含む共複合体を含む経口剤形を調製する。
【０２８３】
エンテロスタチンは、優良製造手順(Good Manufacture Procedures)(cGMP)に従ってAmerican peptide Companyにより製造される。HPLC分析によるエンテロスタチンの純度は、95%を超える。
【０２８４】
その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれている米国仮出願第60/750,208号に記載されているようにエンテロスタチン共複合体を調製することができる。例えば、エンテロスタチン共複合体は、共結晶ゲストとエンテロスタチンを1:1のモル比で溶媒中にて混合することによる。溶媒を蒸発させ、得られた固体共複合体を回収する。溶媒はメタノールとすることができ、塩は酢酸エンテロスタチンであり、ゲストは1-ヒドロキシ-2-ナフトエ酸である。得られる固体は、淡褐色の破片又は粉砕ガラスの形である。
【０２８５】
エンテロスタチンの経口剤形は、2.5、4、5、7.5、10、15、20、30、40、50、60又は70mgのエンテロスタチンを含有することができる。それらは、賦形剤又は非吸湿性添加剤を含むことができる。好適な賦形剤は、デンプン、糖及び微結晶セルロース等であってもよい。好適な非吸湿性添加剤は、二塩基性無水リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、粉末化セルロース、デキストロース及びラクチトール等であってもよい。エンテロスタチンの経口剤形は、錠剤又はカプセル剤の形であってもよい。
【０２８６】
エンテロスタチンを含む代表的なカプセル剤は、エンテロスタチン2.5%(重量%)、クレモファーEL(Cremphor EL)42%、ラブラゾール20%及びラブラフィルM2125CS30%を含む充填物、並びにゼラチン54%、グリセリン18%、アニドリソルブ(anidrisorb)35/70 22%及び水6%を含む殻を含有することができる。
(6.2.3 エンテロスタチンによる肥満の治療)
【０２８７】
上記のエンテロスタチンの経口剤形を使用して、肥満の治療を必要とする対象における肥満を治療する。対象からのサンプル中のエンテロスタチンの量及び正常なエンテロスタチン値に基づいて対象を選択する。本実施例では、正常なエンテロスタチン値を複数のコントロール対象から確定する。
【０２８８】
(エンテロスタチンによる肥満治療の患者の選択)
【０２８９】
(コントロール対象からの正常なエンテロスタチン値の測定)
【０２９０】
当業者の判断に応じて、年齢が18〜60歳で、BMIが20kg/m2から25kg/m2の男性に対して身体検査、心電図測定、化学パネル試験、全血液検査及び尿検査を行う。これらの試験及び病歴に基づいて、正常なBMIを有する10人の健常男性を選択して、正常なエンテロスタチン値を決定する。定期的な投薬を受けている対象を試験から除外する。
【０２９１】
これらの対象を一晩絶食させ、水を与えるが、カロリー飲料は与えない。翌朝、高脂肪食をこれらの対象に与える。高脂肪食は、約800カロリーを含み、45%の脂肪を含む。食事を与えてから3時間後に、留置カテーテルを介して対象から5mlの血液サンプルを採取する。各血液サンプルを上記のように調製かつ処理する。各血液サンプルからのエンテロスタチンの量を、上記のように決定する。
【０２９２】
絶食させた対象の正常なエンテロスタチンを、これらの対象から採取したサンプルのエンテロスタチンの量の平均値として計算する。
【０２９３】
(エンテロスタチンによる肥満治療の対象の選択)
【０２９４】
それ以外は健康な18〜60歳の肥満男性(BMIが30kg/m2から40kg/m2)をエンテロスタチンによる治療の対象に選別する。これらの対象の健康状態をコントロール対象について上述したように身体検査及び化学パネル試験等によって判断する。
【０２９５】
上述のように、これらの肥満の対象を絶食及び摂食させ、血液サンプルを採取する。各血液サンプルのエンテロスタチンの量を、上記ELISAを用いて測定し、上記で決定した正常なエンテロスタチン値と比較する。
【０２９６】
対象の血液サンプルのエンテロスタチンの量が上記で決定した正常なエンテロスタチン値の半分未満である場合に、その対象をエンテロスタチンの治療の対象に選択する。20.0mgのエンテロスタチンを含む経口投与用カプセルを上記のように調製する。4週間にわたって毎日3回の食事開始時にエンテロスタチンカプセル剤を選択された対象に与える。
【０２９７】
心電図測定、化学パネル試験、全血液検査及び尿検査を行って、経口エンテロスタチン投与の安全性を監視する。食物摂取、エネルギー摂取若しくは消費、食欲、満腹感、体重、BMI、体脂肪率及び代謝効果(例えば睡眠時代謝率、休息時代謝率、脂肪酸化及び脂肪バランス)等を当業者によって監視して、経口エンテロスタチン投与の効果及び安全性を確認する。
【０２９８】
(6.3. 実施例3: ペプチドYY3〜36(PYY3〜36)による肥満の治療)
(6.3.1. 血液サンプル中のペプチドYY3〜36の量の測定)
PYY3〜36の血漿値を放射能標識抗体による免疫検定によって測定する。その内容が全面的に参照により本明細書に組み込まれているBatterhamらの論文、2003、New Eng.J.Med.349(10):941〜8に記載されているように、放射能標識抗PYY抗体を使用した免疫検定を実施することができる。
【０２９９】
血液を対象から、アプロトニンの5000カリクレイン阻害薬ユニットを含むヘパリンコーティング管へ採取する。血漿を4℃で遠心分離により直ちに分離し、次いで分析するまで-70℃で保管する。
【０３００】
当業者によく知られている標準的な技術を利用して、PYYに対する抗体を生成することができる。抗体は、ポリクローナル又はモノクローナルであり得る。PYYに対する抗体を、グルタルアルデヒドによりウシ血清に結合された合成ブタPYYに対してラビットに生成し、1:50,000の最終希釈率で使用する。抗体は、PYY及びPYY3〜36の両方を検出することができる。I125標識PYY抗体をヨードジェン法によって調製し、高圧液体クロマトグラフィーによって精製する。すべての血液サンプルを二重にアッセイし、200μlの未抽出血漿をアッセイする。0.3パーセントのウシ血清アルブミンを含有する700μlの0.06Mリン酸緩衝液(pH7.3)中でアッセイを実施する。200μlのPYYフリーの血漿を対照として使用する。サンプルを4℃で3日間インキュベートしてから、ヒツジ抗ウサギ抗体により遊離及び抗体結合標識を分離する。アッセイにより、サンプル中のPYYの2pmol/lの変化を検出することができる。
【０３０１】
(6.3.2. PYY3〜36を含む医薬組成物)
Phoenix Pharmaceuticals Incの製造所業務実施規定(cGMP)に従ってPYY3〜36を製造する。PYY3〜36の純度は、HPLC分析によると95%を超える。
PYY3〜36を含む医薬組成物を、米国特許出願第20050009748号に記載されているように調製及び製剤化することができる。
【０３０２】
(6.3.3. PYY3〜36による肥満の治療)
上記のPYY3〜36を含む医薬組成物を使用して、肥満の治療を必要とする対象における肥満を治療する。対象からのサンプル中のPYYの量及び正常なPYY値に基づいて対象を選択する。本実施例において、正常なPYY値を複数のコントロール対象から確定する。
【０３０３】
(コントロール対象の正常なPYY値の決定)
【０３０４】
当業者の判断に応じて、20kg/m2から25kg/m2のBMIを有する18〜60歳の男性に対して、身体検査、心電図測定、化学パネル試験、全血球算定又は尿検査を実施する。これらの試験及び病歴に基づいて、正常なBMIを有する10人の健康な男性を選択して、彼らの正常なPYY値を決定する。定期的な治療を受けている対象を試験から除外する。
【０３０５】
これらの対象を一晩絶食させ、水を許可するが、カロリーのある飲料は許可しない。翌朝、正規食を対象に与える。食事を与えてから1時間後に、5mlの血液サンプルを採取する。各血液サンプルを上記のように調製及び処理する。各血液サンプルからのPYYの量を上記のように測定する。
【０３０６】
絶食状態の対象の正常なPYY値をこれらの対象から採取したサンプルのPYYの量の平均値として計算する。
【０３０７】
(PYYによる肥満治療の対象の選択)
【０３０８】
18〜60歳のそれ以外は健康な肥満(BMIが30kg/m2から40kg/m2)の10人の男性をPYY3〜36による治療に対して選別する。これらの対象の健康状態を、コントロール対象について上記に記載した身体検査及び化学パネル試験等によって測定する。
【０３０９】
これらの肥満の対象を絶食及び摂食させ、上記のように血液サンプルを採取する。各血液サンプルからのPYYの量を、上記方法を用いて測定し、上記で決定した正常なPYY値と比較する。
【０３１０】
対象の血液サンプルからのPYY3〜36の量が、上記で決定した正常なPYY3〜36値の70%未満である場合に、PYY3〜36による治療の対象を選択する。PYY3〜36を含む医薬組成物を上記のように調製し、4週間にわたって1日3食の開始時に、選択した対象に対して経口投与する。心電図測定、化学パネル試験、全血球算定及び尿検査を実施して、経口PYY3〜36投与の安全性を監視する。食物摂取、エネルギー摂取若しくは消費、食欲、満腹感、体重、BMI、体脂肪率及び代謝効果(睡眠時代謝率、休息時代謝率、脂肪酸化及び脂肪バランスなど)等を熟練した実務者が監視して、経口PYY3〜36投与の効果及び安全性を判断する。
【０３１１】
本明細書に引用されているすべての出版物及び特許出願は、各々の出版物又は特許出願が具体的且つ個別的に参照により組み込まれていることを意味するように、参照により本明細書に組み込まれている。上述の発明を明確に理解しやすいように例示及び実施例によりある程度詳細に説明したが、添付の請求項の主旨又は範囲を逸脱することなく一定の変更及び修正を加えることができることを本発明の教示に鑑みて当業者なら容易に理解するであろう。
【国際調査報告】
2009542813.tif 000002