(57)【要約】本発明は抗生物質組成物の分野、および医療分野の内外の両方に関する。グラム陽性菌、特にMRSAの感染に対抗するために特に有用である、新しいクラスの抗生物質化合物、ビス(1-アリール-5-テトラゾリル)メタンを提示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
薬剤としての使用のための、下記式(I)に記載の化合物を含む組成物：
2009510054.tif 000023
式中、
R1およびR2は、それぞれ独立してハロゲン、低級アルキル、または不在（absent）であるが、ただしR1とR2が両方とも不在であることはなく、
R3、R3'、R4、およびR4'は、それぞれ独立して不在、OH、SO2NH3、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルコキシ(メチル)、アリール、ヘテロアリール、アリールアルコキシ、またはハロゲンであり、該低級アルキル、アリール、およびヘテロアリールは置換されていてもよい。
【請求項２】
R1もしくはR2のいずれかまたは両方がClである、薬剤としての使用のための、請求項1記載の組成物。
【請求項３】
R3'およびR4'が不在であり、R3もしくはR4または両方がフェニル部分とオルソ位で結合している、薬剤としての使用のための、請求項1記載の組成物。
【請求項４】
R3および／またはR4が、CH3、Cl、またはO-CH3を含む群より選択される、薬剤としての使用のための、前記請求項のいずれか一項記載の組成物。
【請求項５】
本質的に、
ビス-(1-o-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-(2,4-ジメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-m-メチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-トリフルオロメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-(3,5-ジクロロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-o-トリフルオロメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-(3,5-ビス-トリフルオロメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-(2,4-ジフルオロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-p-ジフルオロメトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
5-{ジクロロ[1-(3,4-ジクロロフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾ-5-イル]メチル}-1-[4-メトキシフェニル]-1H-1,2,3,4-テトラアゾール、
ビス-(1-o-フルオロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-(2,5-ジクロロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-p-スルホノアミドベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-m-クロロ-p-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-(5-クロロ-2-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-o,m-ジクロロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-m,p-ジメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-p-フェノキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-(3-クロロ-2-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-(2,5-ジメトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-(2,5-ジメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン、
ビス-(1-o-トリル-5-テトラゾリル)-クロロメタン
からなる群より選択される、化合物。
【請求項６】
薬剤としての使用のための、請求項5記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、エステル、もしくは溶媒和物。
【請求項７】
式(I)に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、エステル、もしくは溶媒和物、および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項８】
細菌感染治療用の薬剤の製造のための、式(I)に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、エステル、もしくは溶媒和物の使用。
【請求項９】
所望の基R3、R3'、R4、およびR4'を有する、1つまたは2つのアニリン誘導体をマロン酸ジエステルと反応させて、対応するジアミドとし、
該ジアミドをPCl5と反応させて、塩素化イミドイル誘導体とし、
さらに、
該塩素化イミドイル誘導体をNaN3と反応させて、所望のテトラゾール誘導体を生成させることにより、
請求項5記載の化合物を調製する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は薬学的化合物、特に抗生物質化合物の分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
特に、多くの微生物が公知の抗生物質化合物に耐性を持つようになりつつあるため、新規抗生物質化合物の探索はますます重要なものとなった。これは特にMRSA（methicillin-resistant S. aureus）として現在確認されている黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus bacteria）群の場合である。それ故、一般に使われる抗生物質に耐性を持ってしまった微生物に対して用いることができる、新しい抗生物質化合物の必要性がかつてなく増大している。
【発明の開示】
【０００３】
本発明者らは、新規抗生物質および抗生物質の新規ターゲットを探索するために、新しい試験および検出システムを開発した。該システムは、いくつかの同時係属中の出願（WO 03/0087397、WO 03/0981389、WO 05/0035782、WO 05/106033）を対象とするものである。該システムを使用して、現在、新しいクラス（class）の抗生物質が発見された。
【０００４】
ここで開示される新しいクラスの抗生物質は、下記一般式(I)を有する化合物を包含する：
2009510054.tif 000002
式中、
R1およびR2は、それぞれ独立してハロゲン、低級アルキル、または不在（absent）であるが、ただしR1とR2が両方とも不在であることはなく、
R3、R3'、R4、およびR4'は、それぞれ独立して不在、OH、SO2NH3、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルコキシ(メチル)、アリール、ヘテロアリール、アリールアルコキシ、またはハロゲンであり、該アルキル、アルコキシ、アリール、およびヘテロアリールは置換されていてもよい。
【０００５】
「アルキル」または「低級アルキル」という用語は、1〜6個の炭素原子を含有する直鎖状または分枝鎖状のアルキル遊離基のことを言い、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、n-ブチル、t-ブチル、およびネオペンチルを含むが、これらに限定されるものではない。
【０００６】
「低級アルコキシ」という用語は、前記で定義したアルキルまたは低級アルキル基、すなわち1〜6個のC原子を有する基が、エーテル結合により親分子部分に結合したもののことを言う。
【０００７】
「低級アルコキシ(メチル)」という用語は、前記のアルコキシ基がメチレン基（-CH2-）を介して親分子部分に結合したもののことを言う。
【０００８】
本明細書において用いられる「アリール」という用語は、1または2個の芳香環を有する単環式または二環式の炭素環系のことを言い、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、およびインデニル等を含むが、これらに限定されるものではない。アリール基（二環式アリール基を含む）は、非置換であり得るか、または低級アルキル、置換低級アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アシルアミノ、ベンジルオキシカルボニル、シアノ、ヒドロキシル、ハロ、メルカプト、ニトロ、カルボキサルデヒド、カルボキシ、アルコキシカルボニル、カルボキサミド、および保護されたヒドロキシルから独立して選択される1、2、または3個の置換基で置換され得る。加えて、置換アリール基としては、テトラフルオロフェニルおよびペンタフルオロフェニルが挙げられる。
【０００９】
本明細書において用いられる「ヘテロアリール」という用語は、1個の環原子がS、O、およびNから選択され；0、1、または2個の環原子がS、O、およびNから独立して選択される追加のヘテロ原子であり；残りの環原子が炭素である、5〜10個の環原子を有する単環式または二環式の縮合芳香環遊離基のことを言い、例えば、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、チオフェニル、フラニル、キノリニル、およびイソキノリニル等のような、環原子のいずれかを介して分子の残基につながる遊離基のことを言う。
【００１０】
本明細書において用いられる「置換アルキルまたはアルコキシ」という用語は、本明細書において定義されたアルキルまたはアルコキシ基が、それらの上にある1、2、または3個の水素原子と、Cl、Br、F、I、OH、CN、ハロアルキル、チオアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、メルカプト、ニトロ、カルボキサルデヒド、カルボキシ、アルコキシカルボニル、およびカルボキサミドとの独立した置換により、置換されたもののことを言う。
【００１１】
本明細書において用いられる「置換アリール」という用語は、本明細書において定義されたアリール基が、それらの上にある1、2、または3個の水素原子の、Cl、Br、F、I、OH、CN、C1-C3-アルキル、C1-C6-アルコキシ、アリールで置換されたC1-C6-アルコキシ、ハロアルキル、チオアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、メルカプト、ニトロ、カルボキサルデヒド、カルボキシ、アルコキシカルボニル、およびカルボキサミドとの独立した置換により、置換されたもののことを言う。加えて、いずれの置換基もアリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロアルキル基であってもよい。また、置換アリール基としては、テトラフルオロフェニルおよび ペンタフルオロフェニルも挙げられる。
【００１２】
本明細書において用いられる「置換ヘテロアリール」という用語は、本明細書において定義されたヘテロアリール基が、それらの上にある1、2、または3個の水素原子の、Cl、Br、F、I、OH、CN、C1-C3-アルキル、C1-C6-アルコキシ、アリールで置換されたC1-C6-アルコキシ、ハロアルキル、チオアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、メルカプト、ニトロ、カルボキサルデヒド、カルボキシ、アルコキシカルボニル、およびカルボキサミドとの独立した置換により、置換されたもののことを言う。加えて、いずれの置換基もアリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロアルキル基であってもよい。
【００１３】
本明細書において用いられる「薬学的に許容される塩」という用語は、可能であれば本発明の化合物の両性イオンの形態のもののことだけでなく、本発明の化合物のカルボン酸塩、エステル、およびプロドラッグのことを言い、信頼できる医学的判断（sound medical judgment）の範囲内で、過度の毒性、刺激、およびアレルギー反応等を伴う人間および下等動物の組織と接触させて使用するのに適しており、妥当な損益比に見合い、それらの使用目的に有効なもののことを言う。
【００１４】
薬学的に許容される塩は、当技術分野において周知のものであり、比較的毒性のない、本発明の化合物の無機および有機酸付加塩のことを言う。例えば、S. M. BergeらがJ. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977)に、薬学的に許容される塩について詳細に記述しており、この内容は参照により本明細書に組み入れられる。該塩は、本発明の化合物の最終的な単離および精製の間にインサイチューで調製されるか、または、別途、遊離塩基官能基を、適した有機酸と反応させることにより調製される。
【００１５】
薬学的に許容される無毒の酸付加塩の例示は、例えば塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、および過塩素酸等のような無機酸を用いて、または例えば酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、もしくはマロン酸等のような有機酸を用いて形成された、または例えばイオン交換等のような当技術分野において用いられる他の方法を用いることにより形成されたアミノ基の塩である。他の薬学的に許容される塩としては、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、カンファスルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、2-ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パルモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、3-フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、および吉草酸塩等が挙げられる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、およびマグネシウム等が挙げられる。さらに、薬学的に許容される塩としては、適切な場合、例えばハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、低級スルホン酸塩、およびアリールスルホン酸塩等のような、対イオンを用いて形成された、無毒のアンモニウム、第四級アンモニウム、およびアミンカチオンが挙げられる。
【００１６】
本明細書において用いられる「薬学的に許容されるエステル」という用語は、インビボで加水分解するエステルのことを言い、人体中で容易に分解して親化合物またはその塩を残すものを含む。適したエステル基としては、例えば、薬学的に許容される脂肪族カルボン酸、とりわけ、それぞれのアルキルまたはアルケニル部分が6個以下の炭素原子を都合よく有する、アルカン酸、アルケン酸、シクロアルカン酸、およびアルカン二酸から誘導されるものが挙げられる。特定のエステルの例示としては、ホルマート、アセタート、プロピオナート、ブチラート、アクリラート、および エチルスクシナートが挙げられる。
【００１７】
「薬学的に許容される溶媒和物」という用語は、例えば本発明の化合物等のような1つ以上の溶質分子を含む、1つ以上の溶媒分子との会合体のことを表す。
【００１８】
本明細書において用いられる「薬学的に許容されるプロドラッグ」という用語は、可能であれば本発明の化合物の両性イオンの形態のもののことだけでなく、本発明の化合物のプロドラッグのことを言い、信頼できる医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、およびアレルギー反応等を伴う人間および下等動物の組織と接触させて使用するのに適しており、妥当な損益比に見合い、使用目的に有効であるもののことを言う。「プロドラッグ」という用語は、例えば血中での加水分解により、インビボで速やかに転換され、前記の式の親化合物を与える化合物のことを言う。徹底的な論議が、T. Higuchi および V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Svstems, Vol. 14 of the A. C. S. Symposium Series, ならびに Edward B. Roche編, Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987 の中で提供されており、これらは両方参照により本明細書に組み入れられる。
【００１９】
好ましい、式(I)に記載の化合物は、R1およびR2の一方または両方がClである、化合物である。また、好ましい化合物は、R3およびR4がフェニル部分のオルト位に位置し、R3'およびR4'が不在である、式(I)に記載の化合物である。最も好ましい化合物は、R1＝R2＝Clであり、R3＝R4＝CH3であり、R3'およびR4'が不在であり、R3およびR4がオルト位である化合物である。
【００２０】
通常は、（いくつかの）式(I)に記載の化合物の合成ルートが、Shivanyuk, A.F.ら, (1986) Zhurnal Organicheskoi Chimii 22(l):200-205 により提示されており、一方、これらの分子の電子構造はPen'kovskii ら, (1991) Zhurnal Organicheskoi Chimii 27(1):148-153の中で提供されている。要するに（スキーム1参照）、マロン酸ジエステル（ROC(O)CC(O)OR）から、この場合はアニリンまたはその誘導体を伴って合成が開始され、該マロン酸ジエステルは対応するジアミド（RNHC(O)CC(O)NHR）に変換され、続いてPCl5と反応させて塩素化された塩化イミドイル誘導体を与える。アジ化ナトリウムと反応させた後、テトラゾール誘導体が単離される。
2009510054.tif 000003
【００２１】
アミド化反応がVennerstrom, J.Lおよび Holmes, T.J. Jr., (1987) J. Med. Chem. 30: 434-437によって記述されている。
【００２２】
非対称の化合物が、すなわちフェニル環のR基が同一ではない化合物が、ふたつの異なったアニリン誘導体をマロン酸ジエステルと反応させることにより作られ得る（スキーム2）。
2009510054.tif 000004
【００２３】
式(I)に記載の化合物は抗生物質活性、とりわけ、グラム陽性菌に対して活性を有する。それらはブドウ球菌株および腸球菌株に対して、とりわけ、MRSA菌株として一般に知られている黄色ブドウ球菌の菌株をもまた含む、黄色ブドウ球菌（S. aureus）に対して特に活性を有している。
【００２４】
それらは、細菌性疾患、特に前述の微生物に起因する該細菌性疾患の治療のための薬学的組成物に、または対象が微生物に感染している危険性がある状態に用いることができる。
【００２５】
しかしながら、本発明の化合物またはそれらを伴う組成物は、薬学的適用以外にも、例えば化粧品に（例えば、にきびの治療のために）、洗剤および／もしくは他の洗浄液に、抗汚染塗料に、食品もしくは飼料に、または食品もしくは飼料の包装等にも用いることができる。
【００２６】
式(I)に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、予防的なまたは治療的な理由でそれらを必要性とする対象に与えられ得る。式(I)に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、かかる投与形態が対象における感染を治療および／または予防することができるのであれば、任意の製剤の形態で、それらを必要とする対象に与え得る。感染の予防または治療の結果として、臨床効果または感染の後遺症もまた予防されるであろう。
【００２７】
また、本発明は、対象における感染を、好ましくは人間または他の哺乳類対象における感染を予防および／または治療するための方法に関する。該方法は、式(I)に記載の化合物、より好ましくは表1に示したような化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグ、ならびに薬学的に許容される担体、ならびに任意で1種以上の賦形剤を含む、治療にまたは予防に有効な量の薬学的組成物を、対象に投与することを含む。
【００２８】
また、本発明は、感染、好ましくは細菌感染、最も好ましくはブドウ球菌または腸球菌感染治療用の薬剤の製造のための、式(I)に記載の化合物、より好ましくは表Iに示したような化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの使用に関する。
【００２９】
また、抗生物質治療（すなわち、対象における感染を予防および／または治療するための方法）は、別の場合、感染を起こす危険性があるとき、予防に有効な量の薬学的組成物を健常人に投与することを含んでいてもよい。
【００３０】
本明細書に記載された薬学的組成物の抗生物質効果を達成するための投薬量は、当業者により容易に決定される。本発明の目的のための有効量は、成人した人間に対して、式(I)に記載の化合物約0.01 mg と10 gの間の一日量であるだろう。より好ましくは0,1 mg と1 gの間の用量が用いられ、さらに好ましくは1 mg〜100 mgの用量で、最も好ましくは4〜40 mgの用量で本発明の化合物が投与される。この一日量を、単回用量（one-dose）として投与してもよいし、または何回かの分割用量（subdose）に分割してもよく、分割用量はその日に分配して投与される。
【００３１】
経口投与のために、組成物を、例えばゼラチンカプセル等に充填してもよいし、または錠剤の形態に錠剤化してもよい。経口治療への適用のために、活性化合物は賦形剤とともに投与してもよく、例えば粉末、サッシェ（sachet）、錠剤、丸薬（pill）、トローチ（pastille）、またはカプセルという形態で用いてもよい。薬学的組成物は、例えば結合剤（例えばアルファ化トウモロコシデンプン、タラガカントガム、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、またはヒドロキシプロピルメチルセルロース）；増量剤（例えば乳糖、結晶セルロース、マンニトール、またはリン酸水素カルシウム）；滑沢剤（例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、またはシリカ）；崩壊剤（例えばジャガイモデンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、またはアルギン酸）；または湿潤剤（例えばラウリル硫酸ナトリウム）等のような薬学的に許容される賦形剤とともに常法により調製され得る。錠剤は、当業者に周知の方法により被覆されていてもよい。経口投与のための液状製剤は、例えば、液体、シロップ、もしくは懸濁液の形態をとってもよく、または、それらは、使用時に、水もしくは他の適した媒体とともに組成を成すための乾燥製品として存在してもよい。このような液状製剤は、例えば懸濁化剤（例えばソルビトールシロップ、セルロース誘導体、または硬化食用脂）；乳化剤（例えばレシチンまたはアラビアゴム）；非水性媒体（例えばアーモンドオイル、油性エステル、エチルアルコール、または分画植物油(fractionated vegetable oils)）；および防腐剤（例えばメチルもしくはプロピル-p-ヒドロキシベンゾアートまたはソルビン酸）等のような薬学的に許容される添加剤とともに常法により調製され得る。また、該製剤は、緩衝塩、矯味剤、着色剤、および甘味剤を必要に応じて含有してもよい。経口投与のための製剤は、活性化合物の制御放出を付与するために、適当に処方され得る。
【００３２】
口腔投与のために、組成物は、常法により処方される錠剤または飴剤（Lozenge）の形態をとってもよい。
【００３３】
本発明に記載の化合物は、注射による、例えばボーラス注射または持続注入による非経口投与のために処方され得る。注射のための処方は、防腐剤を加えた単位投薬形態（unit dosage form）で、例えばアンプルまたはマルチドーズ容器（multi-dose container）で存在してもよい。組成物は、油性または水性の媒体中で、懸濁液、溶液、またはエマルションのような形態をとってもよく、懸濁化剤、安定化剤、および／または分散剤等のような処方剤（formulatory agents）を含有してもよい。あるいは、有効成分は、使用時に、適した媒体、例えば無菌のパイロジェンフリーな水とともに組成を成すための粉末の状態であってもよい。
【００３４】
投薬がカプセルの形態で行われる場合、カプセルは前述の要素とは別に、例えばオイル等のような液状担体を含んでもよい。投薬形態には、さらに、糖衣、セラック、または他の薬剤が与えられてもよい。薬学的組成物の成分としては、好ましくは、活性化合物の所望の働きを減じることのないようなものが選ばれる。
【００３５】
薬学的組成物は、さらに矯味剤、甘味剤、着色剤、および／または防腐剤を含むことができる。
【００３６】
また、式(I)に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、例えばエリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ワッフル（waffle）、またはチューインガムの形態で投与されてもよい。
【００３７】
前記の薬学的組成物において、式(I)に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグは、0.01〜99.9重量%の量で用いられ、好ましくは0.01〜10重量%で、より好ましくは0.05〜5重量%で用いられる。
【００３８】
さらに、本発明は、活性物質としての式(I)に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグを、薬学的に許容される担体と一緒にして、薬学的組成物へと加工または混合することを含む、感染の予防および／または治療のための薬学的組成物の調製方法に関する。
【００３９】
式(I)に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグと一緒に、例えば増量剤、結合剤、滑沢剤、および任意で他の賦形剤等のような、別々の成分を全て混合し、得られた混合物を製剤へと加工することにより、薬学的組成物の調製は、非常に適切に行われ得る。
【００４０】
（表Ｉ）一般式Ｉの例示的な化合物
R3、R4、R3'、およびR4'には、示した部分がパラ位（p-）、メタ位（m-）、またはオルソ位（o-）であるかを示す。
2009510054.tif 000005
2009510054.tif 000006
【００４１】
これらの化合物の化学名を以下のリストに与える。
NewCo001：ビス-(1-p-クロロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン（CAS no. 105678-80-6 = 1H-テトラゾール, 5,5'-(ジクロロメチレン)ビス[1-(クロロフェニル)]）
NewCo002：ビス-(1-p-トリル-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン（CAS no. 77174-39-1 = 1H-テトラゾール, 5,5'-(ジクロロメチレン)ビス[1-(メチルフェニル)]）
NewCo003：ビス-(1-o-トリル-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン（CAS no. 105678-65-7 = 1H-テトラゾール, 5,5'-(ジクロロメチレン)ビス[1-(2-メチルフェニル)]）
NewCo004：ビス-(1-ベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン（CAS no. 77166-08-6 = 1H-テトラゾール, 5,5'-(ジクロロメチレン)ビス[1-(フェニル)]）
NewCo005：ビス-(1-p-トリル-5-テトラゾリル)-クロロメタン（CAS no. 138352-04-2 = 1H-テトラゾール, 5,5'-(クロロメチレン)ビス[1-(4-メチルフェニル)]）
NewCo006：ビス-(1-o-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン（CAS no. 105678-79-3 = 1H-テトラゾール, 5,5'-(ジクロロメチレン)ビス[1-(4-メトキシフェニル)]）
NewCo007：ビス-(1-o-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo008：ビス-(1-(2,4-ジメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo009：ビス-(1-m-メチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0010：ビス-(1-p-ブロモベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0011：ビス-(1-トリフルオロメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0012：ビス-(1-(3,5-ジクロロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0013：ビス-(1-o-トリフルオロメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0014：ビス-(1-(3,5-ビス-トリフルオロメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0015：ビス-(1-(2,4-ジフルオロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0016：ビス-(-1-p-ジフルオロメトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0017：5-{ジクロロ[1-(3,4-ジクロロフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾ-5-イル]メチル}-1[4-メトキシフェニル]-1H-1,2,3,4-テトラアゾール
NewCo0018：ビス-(1-o-フルオロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0019：ビス-(1-(2,5-ジクロロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0020：ビス-(1-p-スルホノアミドベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0021：ビス-(1-m-クロロ-p-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0022：ビス-(1-(5-クロロ-2-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0023：ビス-(1-o,m-ジクロロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0024：ビス-(1-m,p-ジメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0025：ビス-(1-p-フェノキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0027：ビス-(1-(3-クロロ-2-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0028：ビス-(1-(2,5-ジメトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0029：ビス-(1-(2,5-ジメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
NewCo0030：ビス-(1-o-トリル-5-テトラゾリル)-クロロメタン
【００４２】
実施例
実施例1  化合物の合成
1a. ビス-(1-o-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
2-メトキシアニリン 100 mmolおよびマロン酸ジエチル 50 mmolを一緒にして、170℃で終夜攪拌した。生成したエタノール（100 mmol ≡ 6.6 mL）を窒素気流で直接留去した。N1,N3-ジ(2-メトキシ-フェニル)-マロンアミドが一塊の固形物として生成した。反応物を冷却してEtOAcを添加した。生成物が非常に硬いレンガ状の塊であったので、生成物を乳鉢で粉砕しなければならなかった。粉砕した物質をEtOAc中で攪拌して濾過した。このEtOAcの添加は2度行い、その度に混合物を攪拌して濾過した。N1,N3-ジ(2-メトキシ-フェニル)-マロンアミド24.5 gを得た。
【００４３】
室温で、PCl5 6.44 mmolを、N1,N3-ジ(2-メトキシ-フェニル)-マロンアミド 1.61 mmolのPOCl3 5 mL懸濁液に添加した。反応物を還流下で16時間加熱した。反応の経過はNMRにより追跡した。反応物を室温まで冷却し、真空で濃縮乾固させ、黄色／褐色のオイルを得た。残留溶媒を100℃でオイルポンプを使用して乾燥することにより除去した。褐色のオイルの、N1,N3-ジ(2-メトキシフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリドをさらには精製しなかった。
【００４４】
室温で、アジ化ナトリウム 15.4 mmolを、N1,N3-ジ(2-メトキシフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 1.61 mmolのアセトン 5 mL溶液に添加した。反応物を室温で1時間攪拌した。反応物を水（50 mL）で希釈し、ジクロロメタン（2×50 mL）で抽出した。抽出液を合わせて乾燥し（Na2SO4）、濾過して真空で濃縮乾固させ、生成物を黄色のオイルとして得た。生成物をカラムクロマトグラフィ（EtOAc/ヘプタン：1/20〜1/5）により精製して、5-ジクロロ[1-(2-メトキシフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1-(2-メトキシフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾールを239 mg（34%）の収量で得た。
2009510054.tif 000007
【００４５】
1b. ビス-(1-(2,5-ジメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
2,5-ジメチルアニリン 100 mmolおよびマロン酸ジエチル 50 mmolを一緒にして、170℃で終夜攪拌した。生成したエタノール（100 mmol ≡ 6.6 mL）を窒素気流で直接留去した。N1,N3-ジ(2,5-ジメチル-フェニル)-マロンアミドが一塊の固形物として生成した。反応物を冷却してEtOAcを添加した。生成物が非常に硬いレンガ状の塊であったので、生成物を乳鉢で粉砕しなければならなかった。粉砕した物質をEtOAc中で攪拌して濾過した。このEtOAcの添加は2度行い、その度に混合物を攪拌して濾過した。N1,N3-ジ(2,5-ジメチル-フェニル)-マロンアミド14.9 gを得た（収率 96.0%、純度 98.5%）。
【００４６】
50℃で、細かく粉砕したPCl5（4.5 eq., 45 mmol, 9,37 g）を少しずつ、N1,N3-ジ(2,5-ジメチル-フェニル)-マロンアミド 10 mmolのトルエン 120 mL溶液に添加した。溶液を加熱還流した。加熱しても物質が完全に溶解しない場合は、トルエンとPCl5を比例させて（in ratio）、さらに加えた。ガスの放出が止まるまで、4〜6時間、還流を継続した。次いで、溶媒を濃縮し、POCl3とトルエンの標準的な蒸留の後、オイルポンプと140〜150℃のオイルバスを使用して、全ての揮発性物質を除去し、（結晶性）残渣を冷エタノールで洗浄した。結晶性の塊を濾過し、フィルター上で、エタノールで洗浄して、気流下で乾燥させたN1,N3-ジ(2,5-ジメチルフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド（粗生成物）1.54 gを得た（収率 37.0%）。
【００４７】
N1,N3-ジ(2,5-ジメチルフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 1.54 gをアセトン 43 mLに溶解し、溶液を氷浴で冷却した。アジ化ナトリウム 2.41 gを添加して、溶液を室温で週末を超えて（over weekend）攪拌した。沈殿物が生成した。水（約28 mL/出発物質g）を添加して、濾過することにより、5-ジクロロ[1-(2,5-ジメチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1-(2,5-ジメチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾールを単離した。生成物を水で洗浄し、気流下で乾燥し、EtOH（20 mL /粗生成物g）から再結晶化して、220 mg（収率 13.9%、純度 >94%）を得た。
2009510054.tif 000008
融点 = 217℃（分解）
【００４８】
1c. ビス-(1-o,m-ジクロロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
2,3-ジクロロアニリン 100 mmolおよびマロン酸ジエチル 50 mmolを一緒にして、170℃で終夜攪拌した。生成したエタノール（100 mmol ≡ 6.6 mL）を窒素気流で直接留去した。N1,N3-ジ(2,3-ジクロロ-フェニル)-マロンアミドが一塊の固形物として生成した。反応物を冷却してEtOAcを添加した。生成物が非常に硬いレンガ状の塊であったので、生成物を乳鉢で粉砕しなければならなかった。粉砕した物質をEtOAc中で攪拌して濾過した。このEtOAcの添加は2度行い、その度に混合物を攪拌して濾過した。N1,N3-ジ(2,3-ジクロロ-フェニル)-マロンアミド14.7 gを得た（収率 75.0%、純度 98.4%）。
【００４９】
室温で、POCl3 5 mLを、N,N’-ビス(2,3-ジクロロ-フェニル)-マロンアミド 1.61 mmolとPCl5 7.54 mmolの混合物に添加した。反応物を還流下で18時間加熱した。反応混合物を、真空で濃縮乾固させ、黄色のオイルを得た。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（EtOAc/ヘプタン：1/20）により精製して、N1,N3-ジ(2,3-ジクロロフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリドを493 mgの収量で、黄色のオイルとして得た。
【００５０】
室温で、アジ化ナトリウム 10 mmolを、N1,N3-ジ(2,3-ジクロロフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 0.99 mmolのアセトン 5 mL溶液に添加した。反応物を室温で3時間攪拌した。反応物を水（50 mL）で希釈し、ジクロロメタン（50 mL）で抽出した。有機層を乾燥し（Na2SO4）、濾過して真空で濃縮乾固させ、生成物を452 mgの収量で、黄色固体として得た。生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（EtOAc/ヘプタン：1/100〜1/4）により精製して、5-ジクロロ[1-(2,3-ジクロロフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1-(2,3-ジクロロフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール340 mgを得た。
2009510054.tif 000009
融点 = 194℃（分解）
【００５１】
1d. ビス-(1-o-フルオロベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
2-フルオロアニリン 100 mmolおよびマロン酸ジエチル 50 mmolを一緒にして、170℃で終夜攪拌した。生成したエタノール（100 mmol ≡ 6.6 mL）を窒素気流で直接留去した。N1,N3-ジ(2-フルオロ-フェニル)-マロンアミドが一塊の固形物として生成した。反応物を冷却してEtOAcを添加した。生成物が非常に硬いレンガ状の塊であったので、生成物を乳鉢で粉砕しなければならなかった。粉砕した物質をEtOAc中で攪拌して濾過した。このEtOAcの添加は2度行い、その度に混合物を攪拌して濾過した。N1,N3-ジ(2-フルオロ-フェニル)-マロンアミド9.9 gを得た（収率 68.2%、純度 99.3%）。
【００５２】
室温で、PCl5 7.11 mmolを、N1,N3-ジ(2-フルオロ-フェニル)-マロンアミド 1.78 mmolのPOCl3 5 mL懸濁液に添加した。反応物を還流下で42時間加熱した。反応の経過はNMRを用いて監視した。反応混合物を、真空で濃縮乾固させ、黄色のオイルを得た。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（EtOAc/ヘプタン：1/20）により精製した。N1,N3-ジ(2-フルオロフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 56 mgをカラムから単離した。
【００５３】
室温で、アジ化ナトリウム 2.3 mmolを、N1,N3-ジ(2-フルオロフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 0.14 mmolのアセトン 2 mL溶液に添加した。反応物を室温で1時間攪拌した。反応物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を乾燥し（Na2SO4）、濾過して真空で濃縮乾固させ、生成物を45 mgの収量で、白色固体として得た。生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（EtOAc/ヘプタン：1/100〜1/2）により精製した後、ジイソプロピルエーテルで粉末化し、5-ジクロロ[1-(2-フルオロフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1-(2-フルオロフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾールを17 mgの収量で、白色固体として得た。
2009510054.tif 000010
【００５４】
1e. ビス-(1-m-メチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
m-トルイジン 100 mmolおよびマロン酸ジエチル 50 mmolを一緒にして、170℃で終夜攪拌した。生成したエタノール（100 mmol ≡ 6.6 mL）を窒素気流で直接留去した。N1,N3-ジ(3-メチルフェニル)マロンアミドが一塊の固形物として生成した。反応物を冷却してEtOAcを添加した。生成物が非常に硬いレンガ状の塊であったので、生成物を乳鉢で粉砕しなければならなかった。粉砕した物質をEtOAc中で攪拌して濾過した。このEtOAcの添加は2度行い、その度に混合物を攪拌して濾過した。N1,N3-ジ(3-メチルフェニル)マロンアミド 9.5 gを得た（収率 67.3%、純度 97.2%）。
【００５５】
50℃で、細かく粉砕したPCl5（4.5 eq., 45 mmol, 9,37 g）を少しずつ、N1,N3-ジ(3-メチルフェニル)マロンアミド 10 mmolのトルエン 120 mL溶液に添加した。溶液を加熱還流した。加熱しても物質が完全に溶解しない場合は、トルエンとPCl5を比例させて、さらに加えた。ガスの放出が止まるまで、4〜6時間、還流を継続した。次いで、溶媒を濃縮し、POCl3とトルエンを普通に蒸留した後、オイルポンプと140〜150℃のオイルバスを使用して、全ての揮発性物質を除去し、（結晶性）残渣を冷エタノールで洗浄した。結晶性の塊を濾過し、フィルター上で、エタノールで洗浄して、気流下で乾燥させたN1,N3-ジ(3-メチルフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド（粗生成物）0.52 gを得た（収率 13.4%）。
【００５６】
N1,N3-ジ(3-メチルフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 0.52 gをアセトン 14.6 mLに溶解し、溶液を氷浴で冷却した。アジ化ナトリウム 0.87 gを添加して、溶液を室温で週末を超えて攪拌した。沈殿物が生成した。水（約28 mL/出発物質g）を添加して、濾過することにより、5-ジクロロ[1-(3-メチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1-(3-メチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾールを単離した。生成物を水で洗浄し、気流下で乾燥し、EtOH（20 mL /粗生成物g）から再結晶化して、199 mg（収率 37.0%、純度 >95%）を得た。
2009510054.tif 000011
【００５７】
1f. ビス-(1-m-クロロ-p-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
3-クロロ-p-アニシジン 100 mmolおよびマロン酸ジエチル 50 mmolを一緒にして、170℃で終夜攪拌した。生成したエタノール（100 mmol ≡ 6.6 mL）を窒素気流で直接留去した。N1,N3-ジ(3-クロロ-4-メトキシフェニル)マロンアミドが一塊の固形物として生成した。反応物を冷却してEtOAcを添加した。生成物が非常に硬いレンガ状の塊であったので、生成物を乳鉢で粉砕しなければならなかった。粉砕した物質をEtOAc中で攪拌して濾過した。このEtOAcの添加は2度行い、その度に混合物を攪拌して濾過した。N1,N3-ジ(3-クロロ-4-メトキシフェニル)マロンアミド 18.1 gを得た（収率 94.5%、純度 99.3%）。
【００５８】
室温で、POCl3 5 mLを、N1,N3-ジ(3-クロロ-4-メトキシフェニル)マロンアミド 1.84とPCl5 9.17 mmolの混合物に添加した。反応物を還流下で18時間加熱した。反応混合物を、真空で濃縮乾固させ、黄色のオイルを得た。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（EtOAc/ヘプタン：1/20〜1/4）により精製して、N1,N3-ジ(3-クロロ-4-メトキシフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリドを281 mg（31%）の収量で、黄色のオイルとして得た。
【００５９】
室温で、アジ化ナトリウム 5.75 mmolを、N1,N3-ジ(3-クロロ-4-メトキシフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 0.575 mmolのアセトン 5 mL溶液に添加した。反応物を室温で2時間攪拌した。反応物を水で希釈し、沈殿物を濾過して、1-(3-クロロ-4-メトキシフェニル)-5-ジクロロ[1-(3-クロロ-4-メトキシフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1H-1,2,3,4-テトラアゾール 220 mg（76%）を得た。
2009510054.tif 000012
融点 = 167℃（分解）
【００６０】
1g. ビス-(1-(5-クロロ-2-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
3-クロロ-o-アニシジン 100 mmolおよびマロン酸ジエチル 50 mmolを一緒にして、170℃で終夜攪拌した。生成したエタノール（100 mmol ≡ 6.6 mL）を窒素気流で直接留去した。N1,N3-ジ(3-クロロ-2-メトキシフェニル)マロンアミドが一塊の固形物として生成した。反応物を冷却してEtOAcを添加した。生成物が非常に硬いレンガ状の塊であったので、生成物を乳鉢で粉砕しなければならなかった。粉砕した物質をEtOAc中で攪拌して濾過した。このEtOAcの添加は2度行い、その度に混合物を攪拌して濾過した。N1,N3-ジ(3-クロロ-2-メトキシフェニル)マロンアミド 13.2 gを得た（収率 74.9%、純度 98.6%）。
【００６１】
密閉型フラスコにPCl5 20.8 mmolを入れて、次いで、窒素雰囲気下で、帯黄色のN1,N3-ジ(3-クロロ-2-メトキシフェニル)マロンアミド 4.1 mmolを添加した。POCl3 161 mmolを添加し、室温から110℃まで温度を上昇させながら、N1,N3-ジ(3-クロロ-2-メトキシフェニル)マロンアミドをゆっくりと溶解して、次いで、16時間攪拌した。反応混合物を冷却し、次いで真空で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカ〜50 g、n-ヘプタン(A)/EtOAc (B)；30分間で0% B→25% B）に供して、N1,N3-ジ(3-クロロ-2-メトキシフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリドを得た。
【００６２】
室温で、アジ化ナトリウム 26.0 mmolを、N1,N3-ジ(3-クロロ-2-メトキシフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 2.54 mmolのアセトン 8.5 mL溶液に添加した。反応物を室温で1.5時間攪拌した。反応混合物を水（50 mL）で希釈した。沈殿物を濾過により収集し、1-(3-クロロ-2-メトキシフェニル)-5-ジクロロ[1-(3-クロロ-2-メトキシフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1H-1,2,3,4-テトラアゾールを、855 mg（67%）の収量で、淡紅色個体として得た。
2009510054.tif 000013
融点 = 161℃（分解）
【００６３】
1h. ビス-(1-m,p-ジメチルベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
3,4-ジメチルアニリン 100 mmolおよびマロン酸ジエチル 50 mmolを一緒にして、170℃で終夜攪拌した。生成したエタノール（100 mmol ≡ 6.6 mL）を窒素気流で直接留去した。N1,N3-ジ(3,4-ジメチルフェニル)マロンアミドが一塊の固形物として生成した。反応物を冷却してEtOAcを添加した。生成物が非常に硬いレンガ状の塊であったので、生成物を乳鉢で粉砕しなければならなかった。粉砕した物質をEtOAc中で攪拌して濾過した。このEtOAcの添加は2度行い、その度に混合物を攪拌して濾過した。N1,N3-ジ(3,4-ジメチルフェニル)マロンアミド 13.9 gを得た（収率 89.6%、純度 98.5%）。
【００６４】
密閉型フラスコにPCl5 22.4 mmolを入れて、重さを量り、次いで、窒素雰囲気下で、暗橙色のN1,N3-ジ(3,4-ジメチルフェニル)マロンアミド 4.5 mmolを添加した。POCl3 161 mmolを添加し、室温から110℃まで温度を上昇させながら、N1,N3-ジ(3,4-ジメチルフェニル)マロンアミドをゆっくりと溶解して、16時間攪拌した。反応混合物を冷却し、次いで真空で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカ〜40 g、n-ヘプタン(A)/EtOAc (B)；30分間で0% B→25% B）に供して、N1,N3-ジ(3,4-ジメチルフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリドを得た。
【００６５】
加熱しながら、N1,N3-ジ(3,4-ジメチルフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 4.6 mmolを、アセトン 15 mLに溶解した。アルゴン雰囲気下で溶液を冷却し、次いで、室温でアジ化ナトリウム 46.0 mmolを添加し、攪拌した。1.5時間の反応の後、水（100 mL）を添加して、混合物を〜10分間激しく攪拌した。固体物質を濾過して（濾液は濁っていた）、水で洗浄し、フィルター上で風乾した。生成物750 mgをフラッシュカラムクロマトグラフィ（EtOAc/ヘプタン：1/100〜1/5）により精製して、5-ジクロロ[1-(3,4-ジメチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1-(3,4-ジメチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾールを黄色固体として得た。
2009510054.tif 000014
融点 = 102℃
【００６６】
1i. ビス-(1-p-フェノキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
4-フェノキシアニリン 100 mmolおよびマロン酸ジエチル 50 mmolを一緒にして、170℃で終夜攪拌した。生成したエタノール（100 mmol ≡ 6.6 mL）を窒素気流で直接留去した。N1,N3-ジ(4-フェノキシフェニル)マロンアミドが一塊の固形物として生成した。反応物を冷却してEtOAcを添加した。生成物が非常に硬いレンガ状の塊であったので、生成物を乳鉢で粉砕しなければならなかった。粉砕した物質をEtOAc中で攪拌して濾過した。このEtOAcの添加は2度行い、その度に混合物を攪拌して濾過した。N1,N3-ジ(4-フェノキシフェニル)マロンアミド 20.6 gを得た（収率 94.0%、純度 100.0%）。
【００６７】
密閉型フラスコにPCl5 21.8mmolを入れて、重さを量り、次いで、窒素雰囲気下で、淡灰色のN1,N3-ジ(4-フェノキシフェニル)マロンアミド 4.4 mmolを添加した。POCl3 161 mmolを添加し、16時間で室温から110℃まで温度を上昇させる間に、濃いやまぶき色のペーストが生じた。反応混合物を冷却し、次いで真空で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカ〜40 g、n-ヘプタン(A)/EtOAc (B)；30分間で0% B→25% B）に供して、N1,N3-ジ(4-フェノキシフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリドを得た。
【００６８】
室温で、アジ化ナトリウム 46.0 mmolを、N1,N3-ジ(4-フェノキシフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 4.48 mmolのアセトン 15 mL溶液に添加した。反応物を室温で1.5時間攪拌した。反応物を水（50 mL）で希釈した。水層をジクロロメタン（50 mL）で抽出した。有機抽出物を乾燥し（Na2SO4）、濾過して真空で濃縮乾固させ、生成物を得た。生成物をカラムクロマトグラフィ（EtOAc/ヘプタン：1/100〜1/5）により精製し、5-ジクロロ[1-(4-フェノキシフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1-(4-フェノキシフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール 1.47 g（59%）を得た。
2009510054.tif 000015
【００６９】
1j. ビス-(1-(3-クロロ-2-メトキシベンゼン-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
5-クロロ-o-アニシジン 100 mmolおよびマロン酸ジエチル 50 mmolを一緒にして、170℃で終夜攪拌した。生成したエタノール（100 mmol ≡ 6.6 mL）を窒素気流で直接留去した。N1,N3-ジ(5-クロロ-2-メトキシフェニル)マロンアミドが一塊の固形物として生成した。反応物を冷却してEtOAcを添加した。生成物が非常に硬いレンガ状の塊であったので、生成物を乳鉢で粉砕しなければならなかった。粉砕した物質をEtOAc中で攪拌して濾過した。このEtOAcの添加は2度行い、その度に混合物を攪拌して濾過した。N1,N3-ジ(5-クロロ-2-メトキシフェニル)マロンアミド 16.0 gを得た（収率 84.0%、純度 100%）。
【００７０】
室温で、POCl3 5 mLを、N1,N3-ジ(5-クロロ-2-メトキシフェニル)マロンアミド 1.33 mmolとPCl5 7.49 mmolの混合物に添加した。反応物を還流下で18時間加熱した。反応混合物を、真空で濃縮乾固させ、黄色のオイルを得た。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（EtOAc/ヘプタン：1/20〜1/3）により精製して、N1,N3-ジ(5-クロロ-2-メトキシフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリドを293 mg（45%）の収量で、黄色のオイルとして得た。
【００７１】
室温で、アジ化ナトリウム 6.0 mmolを、N1,N3-ジ(5-クロロ-2-メトキシフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 0.6 mmolのアセトン 3 mL溶液に添加した。反応物を室温で1.5時間攪拌した。反応物を水（50 mL）で希釈して、沈殿物を濾過し、1-(5-クロロ-2-メトキシフェニル)-5-ジクロロ[1-(5-クロロ-2-メトキシフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1H-1,2,3,4-テトラアゾール 221 mgを得た。
2009510054.tif 000016
融点 = 246℃（分解）
【００７２】
1k. ビス-(1-o-トリル-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
o-トルイジン 329 mmolおよびマロン酸ジエチル 165 mmolを一緒にして、170℃で終夜攪拌した。生成したエタノール（100 mmol ≡ 6.6 mL）を窒素気流で直接留去した。N1,N3-ジ(2-メチルフェニル)マロンアミドが一塊の固形物として生成した。反応物を冷却してEtOAcを添加した。生成物が非常に硬いレンガ状の塊であったので、生成物を乳鉢で粉砕しなければならなかった。粉砕した物質をEtOAc中で攪拌して濾過した。このEtOAcの添加は2度行い、その度に混合物を攪拌して濾過した。N1,N3-ジ(2-メチルフェニル)マロンアミド 38.1 g（収率 82%）を得た。
【００７３】
細かく粉砕したPCl5 48.0 mmolを少しずつ、N1,N3-ジ(2-メチルフェニル)マロンアミド 10.6 mmolのトルエン 127 mL溶液に添加した。反応混合物を加熱し、4〜6時間還流した。反応混合物を真空で濃縮乾固させた。残渣をトルエンとともに2度濃縮し、N1,N3-ジ(2-メチルフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリドを1.79 gの収量で得た。粗生成物を、続く実験にあるように使用した。
【００７４】
粗N1,N3-ジ(2-メチルフェニル)-2,2-ジクロロプロパンジイミドイル=ジクロリド 4.61 mmolをアセトン 50 mLに溶解し、氷浴で冷却した。アジ化ナトリウム 46.1 mmolを添加して、反応混合物を室温で週末を超えて攪拌した。水（約50 mL）を添加して、濾過することにより、生成物を単離した。物質を水で洗浄し、気流下で乾燥し、5-ジクロロ[1-(2-メチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1-(2-メチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール 1.4 g（80%）を得た。
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【００７５】
1l. ビス-(1-o-トリル-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン
合成はアルゴン雰囲気下で実行した。5-ジクロロ[1-(2-メチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1-(2-メチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール0.2 mmol（実施例1kで生成した）を、アセトニトリル5 mLに溶解した。トリエチルアミン0.4 mmol（56.2μl; 0.4 mmol）とマロノジニトリル0.20を、反応混合物に添加し、室温で16時間攪拌した。反応混合物を真空で濃縮乾固させ、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（EtOAc/ヘプタン：1/100〜1/3）により精製して、生成物を110 mgの収量で、白色固体として得た。生成物はヘプタンを含有しているので、真空オーブン内で、40℃で乾燥し、5-クロロ[1-(2-メチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾール-5-イル]メチル-1-(2-メチルフェニル)-1H-1,2,3,4-テトラアゾールを56 mg（60%）の収率で得た。
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【００７６】
1m. テトラゾリルモノクロロメタンの合成
ジクロロ-化合物NewCo003をそのモノクロロメタン誘導体（NewCo0030）に変換するという、実施例1lに類似して、表1の全てのジクロロ化合物を、それらの一塩素化ペンダント（monochloric pendants）に変換できる。
【００７７】
実施例 2  MIC試験
MIC試験は標準の方法論：M7-A6-“Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically”；Approved Standard, Sixth Edition Clinical and Laboratory Standards Institute 2005 (CLSI/以前はNCCLS)、に従い実行される。
【００７８】
表IIに、黄色ブドウ球菌の単一菌株における、式(I)に記載の6個の異なる化合物の結果を、マイクログラム/ミリリットルで表される、MIC値として記載する。このリストから、BAS 00160352（NewCo003, ビス-(1-o-トリル-5-テトラゾリル)-ジクロロメタン）が、最も活性のある化合物であると思われる。
【００７９】
表IIIに、黄色ブドウ球菌の複数の菌株における、実験の結果を記載する。MIC値は、これらの実験において認められる最低値と最高値の間の範囲として表される。平均MIC50と平均MIC90の両方を太字で示す。再度、BAS 00160352が最も活性のある化合物であることが見い出される。対照用に、陽性対照（バンコマイシン）を試験した。
【００８０】
表IVに、黄色ブドウ球菌の単一菌株における、追加のMICデータを、マイクログラム/ミリリットルで表される、MIC値として記載する。再度、BAS 00160352（NewCo003）を、その一塩素化ペンダント（NewCo0030）および表Iの新しい化合物のいくつかに次いで、試験する。二重で実施した実験もある。TTC03.0236とTTC03.0239の菌株は、Utrecht University Medical Centreから得た2種のMRSA菌株（それぞれUMC 01-8756/140およびUMC 03-543155）である。表Iの新しい化合物のいくつかには、少なくともNewCo003と同等の活性があると思われる。
【００８１】
（表ＩＩ）
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【００８２】
（表ＩＩＩ）
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【００８３】
（表ＩＶ）
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【００８４】
実施例 3  インビボ毒性試験
この試験の目的は、マウスにおけるMRSA 2141による局所性感染に対する、種々の用量での化合物BAS00160352（NewCo003）の抗生物質の効力を調査することであった。30匹のマウスに0.05、0.5、または5.0 mg/体重kgをそれぞれ静脈内投与して、処置した。薬効を決定するために、感染の結果を用いた。
【００８５】
それぞれの投与用量に対して、適切な保存溶液（stock solution）を、媒体（DMSO）中の試験物質の1mlアリコットとして作製した。保存溶液を2〜8℃で16時間保存した。
【００８６】
陽性対照：バンコマイシン（Vancomycine 500 PCH、静注用バンコマイシン塩酸塩(vancomycinehydrochloride voor i.v. gebruik)、chargenr. 03L19A、有効期限：2005年11月、Pharmachemie、Haarlem、The Netherlands）
【００８７】
動物および飼育環境
種類                ：マウス
系統                ：スイス・アウト・ブレッド（Swiss out bred）（IcoCaw Of1）
供給者              ：Charles River Nederland, The Netherlands
性別および年齢      ：50匹の雌、到着時に6〜8週齢
識別                ：個々の尾に印をつけた
順応期間            ：7日間
収容                ：ケージ（フィルタートップ付きマクロロン・ケージ(macrolon cages)）、当り5匹の動物/性別、および環境エンリッチメント（environmental enrichment）：細切りの紙
取扱い              ：マウスは層流下で取り扱われた
照明                ：12時間点灯/12時間消灯のサイクル
試験の間の温度      ：22±3℃
試験の間の湿度      ：30%〜70%
換気                ：約10回の換気/時間
食餌                ：餌と水は自由に摂取；
SDS D3フード（Special Diets Service, Witham, England）
【００８８】
試験物質の投与
試験物質をジメチルスルホキシド（DMSO）の溶液として投与した。試験物質を、全ての用量においてマウス当り20μlの注射剤として投与した。バンコマイシンを陽性対照として用い、10 mg/ml DMSO溶液（マウス当り20μl）として静脈内注射した。
【００８９】
試験物質を媒体で新たに希釈したものを用意して、2〜8℃で保存し、調製から18時間以内に使用した。注射直前に、試験物質を室温まで温めた。
【００９０】
試験デザインおよび用量
22E05 MRSA 2141菌、2141菌株を、マウスの右大腿筋に筋肉内注射し、続いて一日後、被験化合物、バンコマイシン、または媒体を、尾静脈に静脈内注射した。24時間後、マウスを屠殺して、心臓への穿刺により血液を採取し、右大腿筋を摘出した。血液試料から血漿を調製し、予想されるのちの分析を可能にするために、−80°±10℃で保存した。大腿筋の重さを量り、Ultra-Turrax（登録商標）を用いてホモジナイズし、生理食塩水で該ホモジネートの希釈液を調製した。限界希釈液を寒天プレート培地に播き、2日後、化合物の殺菌作用の指標として、それぞれのマウス個体に対するMRSA 2141のCFU数を測定した。加えて、使用した細菌がまだオキサシリン耐性黄色ブドウ球菌であるかどうかを確認するために試験を行った。これは、注射の前、プールした大腿筋分離株（pooled thigh muscle isolate）上で、群ごとに行った。この目的のためにStaphaurex（登録商標）（Remel Europe Ltd., Crossways, UK）およびORSAB（登録商標）＋サプリメント（supplements）（Oxoid Ltd., Basingstoke, UK）を用いた。インビボでの抗生物質活性を、陰性対照（媒体のみ）と比較して、CFUの減少率＞90%（1 log減少）により判定した。
【００９１】
用量
各10匹の雌からなる5群で試験を構成した。該群を表Vに提示する。
（表Ｖ）
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1媒体のみ（DMSO）
【００９２】
インビボでの化合物BAS00160352の単回投与の効果
実験からのインビボデータの結果を図1に提示し、かつ以下に示す。
1.  媒体（DMSO）のみを受けたマウスにおける細菌増殖
2.  バンコマイシン（陽性対照）で処置された集団内で、1 Log減少を超えたもの
3.  試験物質での処置群における約2 Log減少
【００９３】
GraphPad Prism (V3)を使用した、実験データの統計分析は、局所MRSA 2141感染に対して、化合物BAS00160352が有効(P＜O.001)であったことを示す。種々の用量での未処置群に対する化合物の個々の分析は、細菌増殖の有意な減少が、0.05 mg/kg (P＜0.01)、0.5 mg/kg (P＜O.01)、および5.0 mg/kg (P＜0.01)の用量での化合物により達成されたこと、および用量依存的な効果の傾向に有意差はみなれなかったことを示唆した。
【００９４】
注射後の観察中に、副作用の徴候はみられなかった。
【図面の簡単な説明】
【００９５】
【図１】実験からのインビボデータの結果を示す。
【図１】
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【国際調査報告】
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