(57)【要約】本発明は、化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容できる塩、１つ以上の薬理学的に許容できる担体、賦形剤、もしくは希釈剤と組合せて化合物（Ｉ）を含む医薬組成物、ならびに炎症性疾患および免疫障害の治療を必要とする患者に有効量の化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む炎症性疾患および免疫障害の治療方法を提供する。2009543804.tif 000027
2009543804.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド、またはその薬理学的に許容できる塩である化合物。
【請求項２】
（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミドである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミドである化合物。
【請求項４】
（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝メタンスルホンアミド・ＨＢｒ、（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド・ＨＣｌ、または（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド・Ｈ２ＳＯ４（２：１）である、請求項１に記載の塩。
【請求項５】
関節リウマチ、変形性関節症、リウマチ熱、ぜんそく、アレルギー性鼻炎、全身性エリテマトーデス、慢性閉塞性肺疾患、クローン病、炎症性腸疾患、もしくは潰瘍性大腸炎の治療方法であって、それを必要とする患者に有効量の請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の化合物または塩を投与することを含む、方法。
【請求項６】
関節リウマチを治療するための請求項５に記載の方法。
【請求項７】
関節リウマチの治療方法であって、それを必要とする患者に有効量の（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミドである化合物を投与することを含む、方法。
【請求項８】
関節リウマチ、変形性関節症、リウマチ熱、ぜんそく、アレルギー性鼻炎、全身性エリテマトーデス、慢性閉塞性肺疾患、クローン病、炎症性腸疾患、もしくは潰瘍性大腸炎の治療のための医薬の製造のための、請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の化合物または塩の使用。
【請求項９】
関節リウマチの治療のための請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
関節リウマチの治療のための医薬の製造のための、（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝メタンスルホンアミドである化合物の使用。
【請求項１１】
１つ以上の薬理学的に許容できる担体、賦形剤、もしくは希釈剤と組合せて請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の化合物または塩を含む、医薬組成物。
【請求項１２】
１つ以上の薬理学的に許容できる担体、賦形剤、もしくは希釈剤と組合せて請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の化合物または塩を含む、関節リウマチの治療用の医薬組成物。
【請求項１３】
１つ以上の薬理学的に許容できる担体、賦形剤、もしくは希釈剤と組合せて（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミドである化合物を含む、医薬組成物。
【請求項１４】
治療用の請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ステロイド系グルココルチコイドに反応する炎症性疾患および免疫障害の治療における治療薬として有用な三環式化合物、その化合物を含む医薬組成物、患者において炎症性疾患および免疫障害を治療するためのその化合物の使用方法、ならびにその化合物の合成において有用な中間体およびプロセスに関する。
【背景技術】
【０００２】
天然物および合成物のステロイド系グルココルチコイド（例えば、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン）は、５０年以上にわたって急性および慢性の炎症性疾患ならびに免疫障害の治療に広く使用されてきた。特に、グルココルチコイドは、関節リウマチ、変形性関節症、リウマチ熱、ぜんそく、アレルギー性鼻炎、全身性エリテマトーデス、慢性閉塞性肺疾患、クローン病、炎症性腸疾患、および潰瘍性大腸炎の治療のために処方されてきた。しかしながら、グルココルチコイドを使用すると、骨量の減少／骨粗しょう症、高血糖、真性糖尿病、高血圧、緑内障、筋萎縮、クッシング症候群、および精神病などの重篤かつ時には不可逆的な副作用を伴うことがしばしばある。このように、ステロイド系グルココルチコイドの薬効を有しつつ付随する副作用の可能性または発生を低下させる代替的療法に対するニーズがいまだ存在する。
【０００３】
グルココルチコイドは、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）との複合体の形成の後の遺伝子転写を調節することにより、その薬理学的効果をもたらす。このＧＲ−グルココルチコイド複合体は、特徴のあるメカニズムによって遺伝子転写に影響を及ぼす。まず、グルココルチコイドの結合後、複合体を形成したＧＲは核に移行し、そこでＧＲは特定の遺伝子のプロモーター領域のＤＮＡグルココルチコイドホルモン応答エレメント（ＧＲＥ）において二量体として作用する。次いで、このＧＲ−グルココルチコイド／ＧＲＥ複合体は、近位に位置する遺伝子の転写を活性化（トランス活性化）または阻害する。逆に、ＧＲ−グルココルチコイド複合体は、ＤＮＡへの結合が関与しないプロセスによって遺伝子転写を負に調節することがある。転写抑制と呼ばれるこのプロセスにおいて、グルココルチコイドの結合後、複合体を形成したＧＲは核に侵入し、そこでＧＲはモノマーとして作用して（タンパク質−タンパク質相互作用によって）他の転写因子と直接相互作用し、遺伝子転写、ひいてはタンパク質発現を誘発するという転写因子の能力を抑制する。
【０００４】
他のステロイドホルモン受容体、例えばアンドロゲン受容体（ＡＲ）、ミネラルコルチコイド受容体（ＭＲ）、およびプロゲステロン受容体（ＰＲ）は他の生理的プロセスを媒介するが、これらの受容体がＧＲに相同的なリガンド結合ドメインを有するという事実のために、ステロイド系グルココルチコイドの代替品として適したＧＲリガンドの探索は妨げられている。結果として、ＧＲリガンドはこれらの他の受容体との交差反応性についての可能性を有する。このように、ステロイド系グルココルチコイドの代替品の所望の特質は、それが他のステロイドホルモン受容体よりも大きい親和性でＧＲに結合することである。
【０００５】
最近の洞察によって、グルココルチコイド療法に伴う副作用を誘発する傾向よりも強力な抗炎症性を備えたＧＲリガンドを同定する機会がもたらされた。グルココルチコイドは、インターロイキン−６（ＩＬ−６）および腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦα）などの前炎症性タンパク質の内因性産生を抑制することが長く知られていた。ＤＮＡ結合とは無関係なＧＲの機能を介して選択的に作用するリガンドでも炎症性疾患の治療にとって十分であるはずであるとの報告がなされていることは意義深い。非特許文献１。さらに、グルココルチコイド療法の多くの副作用（例えば、高血糖、真性糖尿病、緑内障、および筋萎縮）はＤＮＡへのＧＲの結合後のトランス活性化メカニズムによって媒介されることが報告されている（非特許文献２参照）。このように、ＧＲに媒介される転写抑制とＧＲに媒介されるトランス活性化とを判別することができる薬剤は特に望ましい。さらに、他のステロイドホルモン受容体の転写活性を調節する（すなわち、作動させる（ａｇｏｎｉｚｅ）、部分的に作動させる、部分的に拮抗させる、または拮抗させる）限られた能力を示す薬剤も特に望ましい。
【０００６】
このように、他のステロイドホルモン受容体よりも大きい親和性でＧＲに結合する薬剤を提供することが本発明の目的である。より具体的にいえば、ＡＲ、ＭＲ、およびＰＲよりも３０倍大きい親和性でＧＲに結合する薬剤を提供することが目的である。さらに、グルココルチコイド療法に伴う副作用を誘発する傾向よりも強力な抗炎症性を有する薬剤を提供することが本発明の目的である。より具体的にいえば、骨量の減少または骨粗しょう症を誘発する傾向よりも強力な抗炎症性を有する薬剤を提供することが本発明の目的である。さらに、他のステロイドホルモン受容体の活性を調節する限られた能力を示す薬剤を提供することが本発明の目的である。
【０００７】
三環式ＧＲモジュレーターは当該技術分野で公知である。例えば特許文献１は、ミネラルコルチコイド受容体またはグルココルチコイド受容体の調節に反応する障害を治療するのに有用な、１つの属の三環式ステロイド系ホルモン受容体モジュレーターを開示する。特許文献２は、グルココルチコイド受容体に結合しかつ抗炎症性を有するトリフェニルプロパンアミド誘導体化合物を開示する。
【特許文献１】国際公開第０４／０５２８４７号パンフレット
【特許文献２】国際公開第９９／３３７８６号パンフレット
【非特許文献１】Ｒｅｉｃｈａｒｄｔら，ＥＭＢＯ  Ｊ．，２０：７１６８−７１７３（２００１）
【非特許文献２】Ｓｈａｃｋｅら，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．＆  Ｔｈｅｒａｐ．，９６（１）：２３−４３（２００２）
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本願明細書において下記の化合物（Ｉ）として提供される、国際公開第０４／０５２８４７号の範囲内の化合物を選択することによって、ステロイド系グルココルチコイドに反応する炎症性疾患および免疫障害の治療に特に有用であるとの示唆を与える具体的な活性プロフィールを有する新規な治療薬が同定されたことが本発明において見出された。従って、本発明は化合物（Ｉ）：
【化１】
2009543804.tif 000003
（（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド）
またはその薬理学的に許容できる塩を提供する。
【０００９】
具体的な実施形態として、本発明は結晶形態にある化合物（Ｉ）を提供する。
【００１０】
別の実施形態では、本発明は炎症性疾患または免疫障害、特に関節リウマチの治療方法を提供する。この方法は、それを必要とする患者に有効量の化合物（Ｉ）、またはその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む。
【００１１】
別の実施形態では、本発明は、炎症性疾患または免疫障害、特に関節リウマチの治療用の医薬の製造のための化合物（Ｉ）、またはその薬理学的に許容できる塩の使用を提供する。さらに、本発明は、治療において使用するための化合物（Ｉ）、またはその薬理学的に許容できる塩を提供する。
【００１２】
別の実施形態では、本発明は、１つ以上の薬理学的に許容できる担体、賦形剤、または希釈剤と組合せて化合物（Ｉ）、またはその薬理学的に許容できる塩を含む医薬組成物を提供する。好ましい実施形態として、本発明は、１つ以上の薬理学的に許容できる担体、賦形剤、または希釈剤と組合せて化合物（Ｉ）、またはその薬理学的に許容できる塩を含む、関節リウマチの治療用の医薬組成物を提供する。さらに本発明は、化合物（Ｉ）の合成のための新規な中間体およびプロセスをも提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明は、ステロイド系グルココルチコイドに反応する炎症性疾患および免疫障害の治療に特に有用なものとする活性プロフィールを有する化合物（Ｉ）を提供する。生体外試験および生体内試験によって証明されるとおり、化合物（Ｉ）は他のステロイドホルモン受容体よりも大きい親和性でＧＲに結合し、かつグルココルチコイド療法に伴う副作用を誘発する傾向よりも強力な抗炎症性を示す。さらに化合物（Ｉ）は、他のステロイドホルモン受容体ＡＲ、ＭＲ、およびＰＲの活性を調節する限られた能力しか示さない。さらに化合物（Ｉ）は、患者治療および医薬開発の分野における他の課題に対処する、本願明細書において考察するようななお一層の技術的効果または有利な特性を有する。
【００１４】
本発明はまた、ステロイド系グルココルチコイドに反応する炎症性疾患および免疫障害の治療のための化合物（Ｉ）の使用をも提供する。かかる障害としては、例えば、関節リウマチ、変形性関節症、リウマチ熱、ぜんそく、アレルギー性鼻炎、全身性エリテマトーデス、慢性閉塞性肺疾患、クローン病、炎症性腸疾患、および潰瘍性大腸炎が挙げられる。化合物（Ｉ）が有用である具体的な障害は、関節リウマチである。関節リウマチ（ＲＡ）は、通常は３０歳から５０歳の間の年齢で発症する持続性の滑膜関節組織の炎症を特徴とする慢性障害である。ＲＡは炎症性関節炎の最も一般的な形態であり、有病率は全世界の人口の約０．８％と見積もられ、女性は男性よりも２倍この疾患を発症する可能性が高い。Ｒｉｎｄｆｌｅｉｓｃｈら，Ａｍ．Ｆａｍ．Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ，７２（６）：１０３７−１０４７（２００５）。
【００１５】
炎症性疾患および免疫障害の治療のための化合物（Ｉ）の使用はまた、グルココルチコイド療法に通常伴う副作用の傾向、可能性または発生の低下を伴うとも考えられている。グルココルチコイド療法の１つのかかる副作用は、骨量の減少／骨粗しょう症、すなわちグルココルチコイド惹起骨粗しょう症（ＧＩＯＰ）である。ＧＩＯＰは、薬物惹起骨粗しょう症の最も一般的な原因であり、慢性の（すなわち、６ヶ月よりも長く継続している）グルココルチコイド療法を受けている患者の５０％にまで発生することが報告されている。Ｆｅｌｄｓｔｅｉｎら，Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓ．Ｉｎｔ．，１６：２１６８−２１７４（２００５）。特に、化合物（Ｉ）の使用は、骨量の減少または骨粗しょう症の傾向、可能性または発生の低下を伴うとも考えられている。
【００１６】
特段の定義がないかぎり、本発明は、化合物（Ｉ）の薬理学的に許容できる塩および化合物（Ｉ）の遊離塩基またはその薬理学的に許容できる塩の溶媒和物を含む。本願明細書において使用する場合の「薬理学的に許容できる塩」との用語は、生物にとって実質的に無毒である化合物（Ｉ）の塩を指す。薬理学的に許容できる塩およびそれらの調製方法の例は、当該分野で慣用的である。例えば、Ｓｔａｈｌら，「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ」，ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，（２００２）；Ｇｏｕｌｄ，Ｐ．Ｌ．，「Ｓａｌｔ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｂａｓｉｃ  ｄｒｕｇｓ」，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，３３：２０１−２１７（１９８６）；およびＢａｓｔｉｎら、「Ｓａｌｔ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｎｅｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｎｔｉｔｉｅｓ」，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，４：４２７−４３５（２０００）を参照のこと。塩酸塩、臭化水素酸塩、およびヘミスルフェート塩を特に挙げることができるが、化合物（Ｉ）の遊離塩基が好ましいことを理解するべきである。
【００１７】
本願明細書において使用する場合の「患者」との用語は、ヒトまたは非ヒトの哺乳動物（例えば、イヌ、ネコ、ウシ、サル、ウマ、またはヒツジ）を指す。より具体的には、「患者」との用語は、ヒトを指す。本願明細書において使用する場合の「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」（または「治療する（ｔｒｅａｔ）」または「治療」）との用語は、症状または障害の進行または重篤度を妨げる（ｐｒｏｈｉｂｉｔｉｎｇ）か、予防するか、制止するか、遅らせるか、停止させるか、または回復に向かわせることを含む。
【００１８】
化合物（Ｉ）、またはその薬理学的に許容できる塩は、医薬組成物の一部として投与用に処方することができる。従って、１つ以上の薬理学的に許容できる担体、賦形剤、または希釈剤と組合せて化合物（Ｉ）、またはその薬理学的に許容できる塩を含む医薬組成物は本発明の重要な実施形態の１つである。医薬組成物およびそれらの調製方法の例は当該技術分野で周知である。例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：ＴＨＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＹ，  Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏら編集，第１９版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ（１９９５）を参照のこと。化合物（Ｉ）を含む例示の組成物としては、例えば、１％カルボキシメチルセルロースナトリウム、０．２５％ポリソルベート８０、および０．０５％  Ａｎｔｉｆｏａｍ  １５１０（商標）（Ｄｏｗ  Ｃｏｒｎｉｎｇ）を伴う懸濁液中の化合物（Ｉ）、１％カルボキシメチルセルロースナトリウム、０．２５％ポリソルベート８０、および０．０５％  Ａｎｔｉｆｏａｍ  １５１０を伴うナノ懸濁液中の化合物（Ｉ）、および０．０１Ｎ  ＨＣｌ中の０．５％メチルセルロース、１％ラウリル硫酸ナトリウム、および０．１％  Ａｎｔｉｆｏａｍ  １５１０を伴う懸濁液中の化合物（Ｉ）が挙げられる。化合物（Ｉ）を含む具体的な組成物は以下に提供される。
経口用液剤中に処方された化合物（Ｉ）
【００１９】
【表１】
2009543804.tif 000004
【００２０】
例えば、５０．０ｇヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）（Ｒｏｑｕｅｔｔｅ）を５００ｍＬビーカーに加え、次いで約４００ｍＬの潅注用の水を加え、混合物を磁石を用いて約３０分間撹拌しＨＰ−β−ＣＤを溶解させる。５０．０ｍｇの特に微粉化した形態の化合物（Ｉ）をＨＰ−β−ＣＤ溶液に加え、混合物に蓋をして撹拌を継続し（約２時間）化合物を溶解させる。撹拌を継続しながらペパーミント香味料（０．１５ｍＬ）をこの混合物に加え、この香味料を分散させる。この溶液を容量フラスコに移し、さらに潅注用の水を加えて最終体積を５００ｍＬにする。
経口用懸濁液ビヒクル中に処方された化合物（Ｉ）
【００２１】
【表２】
2009543804.tif 000005
【００２２】
例えば、１．２５ｇのＴｗｅｅｎ８０（Ｆｌｕｋａ）を５００ｍＬビーカーに加え、次いで７．５ｇのヒドロキシプロピルメチルセルロース（Ｍｅｔｈｏｃｅｌ  Ｅ５−ＬＶ，Ｃｏｌｏｒｃｏｎ）および０．４ｇのサッカリンナトリウム（Ｓｉｇｍａ）を加える。約３００ｍＬの潅注用の水をビーカーに加え、この混合物に蓋をして、内容物が完全に溶解するまで磁石を用いて撹拌する。５０．０ｇのソルビトール液体（Ｆｌｕｋａ）を１００ｍＬビーカーに秤量し、ヒドロキシプロピルメチルセルロース溶液に加える（この１００ｍＬビーカーを水でリンスし、このリンスした水をヒドロキシプロピルメチルセルロース溶液に加える）。撹拌しながら、０．１５ｍＬのペパーミント香味料をこの混合物に加え、次いで約１０分間撹拌を継続しながら０．２５ｍＬのＡｎｔｉｆｏａｍ  １５１０（Ｄｏｗ  Ｃｏｒｎｉｎｇ）を加える。この溶液を５００ｍＬ容量フラスコに移し、さらに潅注用の水を加えて最終体積を５００ｍＬにする。最終の懸濁液ビヒクルを、使用する時までねじ口瓶中に封をしておく。
【００２３】
化合物（Ｉ）を含有する懸濁液を調製するために、必要量の化合物（Ｉ）（例えば１〜２００ｍｇ、特に微粉化したもの）をまず新しい瓶に加える。バルクの懸濁液ビヒクルをゆっくりと振盪し、このビヒクル１０ｍＬを化合物（Ｉ）を含有する瓶に加える。この瓶を封鎖して激しく振盪してこの化合物を分散させ、使用前に約１分間静置する。あるいは、所望量の化合物（Ｉ）を１０ｍＬの懸濁液ビヒクルを含む新しい瓶に加え、この瓶を上に記載したように封鎖して振盪してもよい。
【００２４】
しかしながら、本発明の好ましい組成物は、カプセル剤または錠剤中に処方された化合物（Ｉ）、またはその薬理学的に許容できる塩を含むことは理解されるであろう。
【００２５】
化合物（Ｉ）、または化合物（Ｉ）を含む組成物は、化合物（Ｉ）が生物学的に利用可能になる任意の経路（経口経路および非経口経路を含む）によって投与することができる。例えば、化合物（Ｉ）、または化合物（Ｉ）を含む組成物は、経口投与、皮下投与、筋肉内投与、静脈内投与、経皮投与、局所投与、鼻腔内投与、直腸内投与、口腔投与などすることができる。あるいは、上記化合物は持続静注により投与することができる。しかしながら、経口投与が好ましい投与経路であることは理解するべきである。
【００２６】
本願明細書において使用する場合の「有効量」との用語は、患者への単回または複数回の用量の投与の際に、診断中または治療中の患者において所望の効果をもたらす化合物（Ｉ）の量または用量を指す。有効量は、哺乳動物の種、その体格、年齢、および全体的な健康状態、関与する具体的な疾患、疾患の程度または重篤度、その個々の患者の反応、投与される具体的な化合物、投与様式、投与される製剤のバイオアベイラビリティ特性、選択される用量レジメン、ならびに任意の併用薬の使用などの多くの要因を考慮して、当業者としての主治医が容易に決定することができる。決して本発明を限定すると解釈するべきではないが、１〜２００ｍｇ／日が化合物（Ｉ）の通常の有効量を表す。
【００２７】
（生物活性）
化合物（Ｉ）は生体外試験において独特の活性プロフィールを有し、これは、化合物（Ｉ）が従来からのグルココルチコイドに反応する炎症性疾患および免疫障害の治療に特に適していることを示唆する。例えば、ヒトのＧＲ、ＭＲ、ＡＲおよびＰＲを発現するＨＥＫ２９３細胞において実施された放射性標識リガンド結合研究において、化合物（Ｉ）は約０．５０ｎＭ未満のＫｉでＧＲに結合する。さらに、化合物（Ｉ）はＭＲ、ＡＲ、およびＰＲの各々よりも約３０倍以上大きい親和性でＧＲに結合する。ヒトの皮膚線維芽細胞ＣＣＤ−３９  ＳＫ細胞およびＵ９３７単球で実施された全細胞グルココルチコイド受容体媒介性転写抑制試験において、化合物（Ｉ）はＩＬ−６およびＴＮＦαの内因性産生の強力かつ完全な転写抑制因子である（最大阻害の約９０％より大きい）。意義深いことに、ＧＲ媒介性トランス活性化の機能分析において、化合物（Ｉ）は、ＧＲ／ＧＲＥ媒介性遺伝子転写を誘発することにおいて、半アゴニスト活性を示すに過ぎない（最大効力の約５０％未満）。このように、完全なＧＲ媒介性転写抑制を誘発するがＧＲ／ＧＲＥ媒介性トランス活性化を部分的にしか誘発しないことによって、化合物（Ｉ）は際立ったプロフィールを示す。さらに、他のステロイド受容体の機能調節に及ぼす効果を調べる試験において化合物（Ｉ）は、ＡＲ、ＭＲ、およびＰＲに媒介される遺伝子発現を調節することにおいて、限定された活性しか示さない。
【００２８】
炎症の急性動物モデルおよび慢性動物モデルの両方において、化合物（Ｉ）の効果をステロイド系グルココルチコイドの効果と比較すると、化合物（Ｉ）は、強力な抗炎症性を示す。例えば、カラギーナン惹起足浮腫（ＣＰＥ）の急性ラットモデルにおいて、化合物（Ｉ）は、経口投与の際に、カラギーナン惹起足浮腫を用量に依存して阻害し、炎症反応の間に生成されるサイトカインであるインターロイキン−１−β（ＩＬ−１β）の産生を阻害する。これらの結果は、プレドニゾロンによって誘発される結果と有利に比較できる。プレドニゾロンは、類似の条件下では約５倍効力が弱い。
【００２９】
逆に、化合物（Ｉ）は、骨形成の動物モデルにおいて検討した場合、ＧＲ媒介性の骨に対する効果を誘発する傾向の低下を示す。例えば、（炎症の動物モデルにおける化合物（Ｉ）およびプレドニゾロンについてのそれぞれのＥＤ５０値に近い投与量における）化合物（Ｉ）の効果をプレドニゾロンの効果と比較するマウス血清オステオカルシン試験において、化合物（Ｉ）は、骨形成についての認められているマーカーである血清オステオカルシンの産生のより少ない減少を誘発した。
【００３０】
上述の生体外試験および生体内動物モデルについての代表的な手順を以下に提供する。本願明細書において使用する場合、「Ｋｄ」はリガンド−受容体複合体についての平衡解離定数を指す。「Ｋｉ」は薬物−受容体複合体についての平衡解離定数を指し、これは、平衡において結合部位の半分に結合する薬物の濃度の指標である。「ＩＣ５０」はある薬剤について可能な最大阻害反応の５０％をもたらすその薬剤の濃度、あるいは受容体に結合しているリガンドの５０％置換をもたらすある薬剤の濃度を指す。「ＥＣ５０」は、ある薬剤について可能な最大反応の５０％をもたらすその薬剤の濃度を指す。「ＥＤ５０」は、ある治療薬についての最大反応の５０％をもたらす、投与されたその薬剤の用量を指す。
【００３１】
（核ホルモン受容体結合分析）
ヒトのＧＲ（グルココルチコイド受容体）、ＡＲ（アンドロゲン受容体）、ＭＲ（ミネラルコルチコイド受容体）、またはＰＲ（プロゲステロン受容体）を過剰発現するヒト胎児腎臓細胞ＨＥＫ２９３細胞由来の細胞溶解物がＫｉ値を決定するための受容体−リガンド競合結合分析に使用される。
【００３２】
手短に言えば、ステロイド受容体競合結合分析は、２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ緩衝液（ｐＨ＝７．６）、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、７５ｍＭ  ＮａＣｌ、１．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、２０％グリセロール、２０ｍＭ  モリブデン酸ナトリウム、０．２ｍＭ  ＤＴＴ（ジチオトレイトール）、２０μｇ／ｍＬ  アプロチニンおよび２０μｇ／ｍＬ  ロイペプチンを含有する緩衝液中で実施される。通常、ステロイド受容体結合分析は、１ウェルあたり放射性標識化リガンド（例えば、ＧＲ結合についての０．３ｎＭ  ［３Ｈ］−デキサメタゾン、ＡＲ結合についての０．３６ｎＭ  ［３Ｈ］−メチルトリエノロン、ＭＲ結合についての０．２５ｎＭ  ［３Ｈ］−アルドステロン、およびＰＲ結合についての０．２９ｎＭ  ［３Ｈ］−メチルトリエノロン）、および２０μｇ  ２９３−ＧＲ溶解物、２２μｇ  ２９３−ＡＲ溶解物、２０μｇ  ２９３−ＭＲ溶解物または４０μｇ  ２９３−ＰＲ溶解物のいずれかを含む。通常、分析は９６ウェル形式で実施される。競合する試験化合物は、約０．０１ｎＭ〜１０μＭの範囲の種々の濃度で添加される。非特異的結合は、ＧＲ結合についての５００ｎＭ  デキサメタゾン、ＭＲ結合についての５００ｎＭ  アルドステロン、またはＡＲ結合およびＰＲ結合についての５００ｎＭ  メチルトリエノロンの存在下で測定される。結合反応液（１４０μＬ）は４℃で一晩インキュベーションされ、次いで７０μｌの冷炭末−デキストラン緩衝液（５０ｍｌの分析緩衝液あたり０．７５ｇの炭末および０．２５ｇのデキストランを含む）が各反応液に加えられる。プレートは、４℃で８分間、オービタルシェーカーで混合される。次いでプレートは４℃で１０分間、３，０００ｒｐｍで遠心分離される。次いで、結合反応混合物の１２０μＬのアリコートが別の９６ウェルプレートに移され、各ウェルに１７５μＬのＷａｌｌａｃ  Ｏｐｔｉｐｈａｓｅ  Ｈｉｓａｆｅ  ３（商標）シンチレーション流体が添加される。プレートは密封され、オービタルシェーカーで激しく振盪される。２時間のインキュベーション後、プレートはＷａｌｌａｃ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ  カウンタで読み取られる。
【００３３】
データは、１０μＭにおける推定のＩＣ５０および阻害％を算出するために使用される。ＧＲ結合についての［３Ｈ］−デキサメタゾン、ＡＲ結合についての［３Ｈ］−メチルトリエノロン、ＭＲ結合についての［３Ｈ］−アルドステロン、またはＰＲ結合についての［３Ｈ］−メチルトリエノロンに対するＫｄは、飽和結合により決定される。化合物についてのＩＣ５０値はＣｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆの式を使用してＫｉに変換される。
【００３４】
上述した手順と同様の結合分析手順は、当業者は容易に策定することができる。基本的に上述した手順に従うと、化合物（Ｉ）は以下の受容体結合プロフィールを示す。
【００３５】
【表３】
2009543804.tif 000006
（Ｋｉ値は５個体による測定の平均を示す）
【００３６】
ステロイドホルモン受容体の活性を調節する（すなわち、作動させる、部分的に作動させる、部分的に拮抗させる、または拮抗させる）という本発明の化合物の能力を実証するために、核受容体タンパク質およびホルモン応答エレメント−レポーター遺伝子構築物で一過性にトランスフェクトされた細胞における標的遺伝子発現の機能調節を検出するバイオアッセイが実施される。機能分析で用いる溶媒、試薬、およびリガンドは商業的供給元から容易に入手可能であるか、または当業者が調製できる。
【００３７】
（核ホルモン受容体機能調節分析）
ヒト胎児腎臓細胞ＨＥＫ２９３細胞は、Ｆｕｇｅｎｅ（商標）（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉｇａｎｏｓｔｉｃｓ）トランスフェクション試薬を使用してステロイドホルモン受容体およびレポーター遺伝子プラスミドでトランスフェクトされる。手短に言えば、プロバシン（ｐｒｏｂａｓｉｎ）  ＡＲＥ（アンドロゲン応答エレメント５’ＧＧＴＴＣＴＴＧＧＡＧＴＡＣＴ３’（配列番号１））およびルシフェラーゼレポーターｃＤＮＡの上流のＴＫ（チミジンキナーゼ）プロモーターの２つのコピーを含有するこのレポータープラスミドは、ウイルス性ＣＭＶ（サイトメガロウイルス）プロモーターを使用して、ヒトアンドロゲン受容体（ＡＲ）を構成的に発現するプラスミドを用いてＨＥＫ２９３細胞にトランスフェクトされる。ＧＲＥ（グルココルチコイド応答エレメント５’ＴＧＴＡＣＡＧＧＡＴＧＴＴＣＴ’３（配列番号２））およびルシフェラーゼレポーターｃＤＮＡの上流のＴＫプロモーターの２つのコピーを含むこのレポータープラスミドは、ウイルス性ＣＭＶプロモーターを使用して、ヒトのグルココルチコイド受容体（ＧＲ）、ヒトのミネラルコルチコイド受容体（ＭＲ）、またはヒトのプロゲステロン受容体（ＰＲ）を構成的に発現するプラスミドを用いてトランスフェクトされる。細胞は、Ｔ１５０ｃｍフラスコのＤＭＥＭ培地中で５％の炭末を除いた（ｃｈａｒｃｏａｌ−ｓｔｒｉｐｐｅｄ）ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）とともにトランスフェクトされる。一晩インキュベーションの後、トランスフェクトされた細胞はトリプシン処理され、９６ウェルの皿中で５％の炭末を除いたＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地中にプレートされ、４時間インキュベーションされ、約０．０１ｎＭ〜１０μＭの範囲の種々の濃度の試験化合物に曝される。この試験についてのアンタゴニストモードにおいて、各々それぞれの受容体に対する低濃度のアゴニストは培地（ＧＲについて０．２５ｎＭのデキサメタゾン、ＡＲについて０．３ｎＭのメチルトリエノロン、ＰＲについての０．０５ｎＭのプロメゲストンおよびＭＲについて０．０５ｎＭのアルドステロン）に添加され、試験化合物がアゴニスト反応に拮抗できる能力が決定される。試験化合物との２４時間のインキュベーション後、細胞が溶解され、標準的な技法を用いてルシフェラーゼ活性が測定される。
【００３８】
データは４つのパラメータでフィットさせるロジスティック曲線近似にフィットされ、ＥＣ５０値が決定される。効力％（飽和最大反応を有する化合物）または最大刺激％（飽和していない最大反応を有する化合物）は、以下の基準アゴニスト：ＡＲ分析について１００ｎＭメチルトリエノロン、ＰＲ分析について３０ｎＭ  プロメゲストン、ＭＲ分析について３０ｎＭ  アルドステロン、およびＧＲ分析について１００ｎＭ  デキサメタゾンを用いて得られる最大刺激に対して決定される。ＩＣ５０値は、アンタゴニストモードの分析データを使用して同様に決定することができる。阻害％もまた、上で説明したようにして、アゴニストのみの存在下での反応に対して決定することができる。
【００３９】
上で説明したのと同様の核ホルモン受容体調節についての機能分析は、当業者が容易に策定することができる。基本的に上述した手順に従うと、化合物（Ｉ）はヒトＧＲ、ヒトＡＲ、ヒトＭＲおよびヒトＰＲによって媒介される転写を活性化することにおいて以下のプロフィールを示す。
【００４０】
【表４】
2009543804.tif 000007
「ｎｄ」は１０μＭよりも大きい値であることを示す。
＊１０μＭにおける効力％。
（ＥＣ５０および％効力の値は、３個体での測定値の平均を表す）
【００４１】
（グルココルチコイド受容体媒介性転写抑制分析）
（１．ヒト皮膚線維芽細胞ＣＣＤ−３９ＳＫ細胞におけるＩＬ−１β刺激性ＩＬ−６産生）
手短に言えば、アメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）（米国、バージニア州、マナッサス）から入手したヒト皮膚線維芽細胞ＣＣＤ−３９ＳＫ細胞（２０，０００細胞／ウェル）（ＡＴＣＣ  カタログ番号ＣＲＬ−１５０１）が、９６ウェルプレート中の、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１００Ｕ／ｍＬ  ペニシリン、１００μｇ／ｍＬ  ストレプトマイシンおよび２ｍｍｏｌ／Ｌ  Ｌグルタミンを補ったＳＦ−ＧＭ（ＭＥＭ）培地（ＡＴＣＣ  カタログ番号３０−２００３０）中に播種される。細胞は、３７℃で、５％ＣＯ２とともに加湿されたチャンバに維持される。試験化合物が約４．６５ｐＭ〜４．６４μＭの最終濃度範囲の種々の濃度でこのウェルに加えられる。０．１μＭのデキサメタゾンが陽性対照として使用される。試験化合物による処理の１時間後に、ＩＬ−１βが１ｎｇ／ｍＬの最終濃度で加えられ、この反応混合物は一晩インキュベーションされる。ＩＬ−６濃度は、標準的な技法を使用して、ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，米国、ミネソタ州、ミネアポリス）を用いて測定される。手短に言えば、各ウェルから１０μＬの上清を取り出して、９０μＬの分析緩衝液を加える。ＩＬ６濃度は、４５０ｎｍにおける吸光度を読み取ることにより定量される。吸光度対ＩＬ−６濃度の標準曲線が構築され、実験試料におけるＩＬ−６の濃度を測定するために使用される。
【００４２】
（２．ＰＭＡ分化Ｕ９３７細胞におけるＬＰＳ刺激性ＴＮＦ−α産生）
ヒトＵ９３７単球（ｐｒｅ−ｍｏｎｏｃｙｔｉｃ）細胞（ＡＴＣＣ  カタログ番号ＣＲＬ−１５９３．２）が１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含有する完全ＲＰＭＩ  １６４０培地（ＡＴＣＣ  カタログ番号３０−２００１）中で増殖される。単球を接着性マクロファージへと分化させるために、Ｕ９３７細胞は（カルシウム、マグネシウムを欠く）ＰＢＳ中で洗浄され、２０ｎＭホルボール１２−ミリスチン酸−１３−アセテート（ＰＭＡ）を含有する新しいＲＰＭＩ培地中に一晩再懸濁される。分化後、試験化合物が、約４．６５ｐＭ〜４．６４μＭの範囲の種々の濃度で９６ウェルプレート中でこの細胞に添加される。試験化合物による処理の１時間後、ＬＰＳが１００ｎｇ／ｍＬの最終濃度で添加され、反応混合物は一晩インキュベーションされる。
【００４３】
ＴＮＦ−α産生は、標準的な技法を使用して、ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，米国、ミネソタ州、ミネアポリス）を用いて測定される。手短に言えば、２５μＬの細胞を欠く上清を別の９６ウェルプレートに移し、７５μＬの分析緩衝液が添加される。ＴＮＦ−αは４５０ｎｍにおける吸光度を読み取ることにより定量される。吸光度対ＴＮＦ−α濃度の標準曲線が構築され、実験試料におけるＴＮＦ−αの濃度を測定するために使用される。
【００４４】
基本的に上で説明したとおりの手順に従うと、化合物（Ｉ）は、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αの内因性発現の約９０％以上の最大阻害を誘発し、それぞれ約４．８ｎＭおよび３０ｎＭのＥＣ５０値を示す（ＩＬ−６分析のデータは２２個体における測定値の平均を表し、ＴＮＦ−α分析のデータは６個体における測定値の平均を表す）。
【００４５】
（動物モデル）
（１．カラギーナン惹起足浮腫（ＣＰＥ）モデル）
カラギーナンは、動物において急性炎症反応を誘発することがある一群の多糖類である。浮腫、痛覚過敏および紅斑を含めた炎症の主な兆候は、注入後にその注入部位で発症される。ＣＰＥモデル（Ｗｉｎｔｅｒら，Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１１１，５４４−５４７，１９６２）は、広く認められている炎症のモデルであり、グルココルチコイド受容体リガンドの抗炎症性効果を評価するために使用することができる。
【００４６】
化合物（Ｉ）の抗炎症性効果を評価するために、化合物（Ｉ）は０．５％カルボキシメチルセルロースおよび０．２５％Ｔｗｅｅｎ８０を含むビヒクルに処方され、雄性のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（１８０〜２００ｇ）（Ｈａｒｌａｎ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ、インディアナ州、インディアナポリス）に強制飼養によって経口投与される。比較のために、プレドニゾロンが同一のビヒクルで経口投与される。２時間後、０．９％発熱物質を欠く生理食塩水５０μＬ中の１％カラギーナンが右後足の足底下（ｓｕｂｐｌａｎｔａｒ）領域に注射される。カラギーナン注射の３時間後、ラットはＣＯ２によって安楽死させられる。足が取り出され、微量天秤を使用して秤量される。足は、直ちに凍結するまで液体窒素に浸漬される。凍結した足は、足の表面上にいくつかの切り込みを入れることによって切開され、次いで遠心分離にかけられ浸出液が抽出される。炎症反応の際に生成されるサイトカインであるＩＬ−１βの浸出液濃度は、標準的な技法を使用してＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，カタログ番号ＲＬＢ００）によって測定される。足のタンパク質全体も、タンパク質分析キット（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，米国、イリノイ州、ロックフォード、カタログ番号１８５６２１０）を使用して測定され、ｎｇ  ＩＬ−１β／ｍｇ全タンパク質の濃度値を得るためにＩＬ−１βの絶対濃度は正規化される。
【００４７】
化合物（Ｉ）は、約１．２ｍｇ／ｋｇのＥＤ５０でカラギーナンが惹起する足重量の増加を阻害する。化合物（Ｉ）はまた、約０．３１ｍｇ／ｋｇのＥＤ５０でＩＬ−１βの足浸出液濃度を低下させる。逆に、このモデルにおけるプレドニゾロン治療は、約６．６ｍｇ／ｋｇのＥＤ５０で足重量の増加を阻害し、約１ｍｇ／ｋｇ未満のＥＤ５０でＩＬ−１β濃度を低下させる（ＥＤ５０値は、５個体における測定値の平均を表す）。
【００４８】
（２．血清オステオカルシン分析）
骨量の減少／骨粗しょう症およびその結果生じる骨折の危険性の上昇は、グルココルチコイド療法から生じる一般的かつ重大な副作用である。グルココルチコイド惹起骨粗しょう症は、少なくとも一部は骨形成の阻害から生じると考えられている。骨合成の生物学的マーカーである血清オステオカルシンの測定は、グルココルチコイド療法の骨に対する副作用を評価するための広く認められたツールである。（Ｐｅａｒｃｅら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏ．Ｍｅｔａｂ．８３：８０１−８０６，（１９９８）を参照）。
【００４９】
骨形成に対する化合物（Ｉ）の効果を評価するために、化合物（Ｉ）は５％カルボキシメチルセルロースおよび０．２５％Ｔｗｅｅｎ８０を含むビヒクルに処方され、７日間、強制飼養によって１６週齢の雄性のＳｗｉｓｓ−Ｗｅｂマウス（Ｈａｒｌａｎ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，インディアナ州、インディアナポリス）に経口投与される。比較のために、プレドニゾロンが同一のビヒクルで経口投与される。最後の用量の２４時間後に血清が採取され、９６ウェル形式に改変された競合ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）キット（Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．、マサチューセッツ州、ストートン）を使用してオステオカルシン濃度が測定される。手短に言えば、Ｍｕｌｔｉｓｃｒｅｅｎ（商標）プレート（ＭＡＨＶ  Ｎ４５，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、マサチューセッツ州、ベッドフォード）の２．５μＬ  マウス血清、２．５μＬ  ヤギ抗マウスオステオカルシン、０．６２５μＬ  正常ヤギ血清、および１１９．３７５μＬ  ＲＩＡ緩衝液（０．１２２５Ｍ  ＮａＣｌ、０．０１Ｍ  ＮａＨ２ＰＯ４、ｐＨ７．４、０．０２５Ｍ  ＥＤＴＡ四ナトリウム、０．１％（ｗ／ｖ）ＢＳＡ、および０．１％（ｗ／ｖ）Ｔｗｅｅｎ−２０）を含有する各ウェルが、４℃で１８時間、オービタルシェーカーで８０ｒｐｍでインキュベーションされる。各ウェルに２５μｌ  ＲＩＡ緩衝液中の０．２μＣｉ／ｍｌ  ［１２５Ｉ］マウスオステオカルシンを加えた後、このプレートは４℃で２４時間、オービタルシェーカーで８０ｒｐｍでインキュベーションされる。０．２Ｍ  Ｎａ２ＨＰＯ４、ｐＨ７．４、５％（ｗ／ｖ）ポリエチレングリコール中のロバ抗ヤギＩｇＧ（１：３０）を、１ウェルあたり１２５μＬ加えることにより、２５℃で２時間複合体の沈殿が形成される。この沈殿は真空濾過によって集められ、１ウェルあたり１００μＬの蒸留水（ｄＨ２Ｏ）で１回洗浄される。ろ紙は穴を開けられ、γ線計数器（Ｃｏｂｒａ  ＩＩ，Ｐａｃｋａｒｄ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、コネティカット州、メリデン）で放射活性が定量される。試験試料からのフィルターで検出された放射活性は血清オステオカルシン濃度に反比例する。精製したマウスオステオカルシンの標準曲線が、試験試料中の血清オステオカルシン濃度を算出するために使用される。
【００５０】
ラットのＣＰＥモデルで決定されたＥＤ５０値に近い１日投与量（化合物（Ｉ）の１ｍｇ／ｋｇ／日とプレドニゾロンの１０ｍｇ／ｋｇ／日と）を比較すると、化合物（Ｉ）はプレドニゾロンよりも血清オステオカルシン濃度の低下を誘発しない（血清オステオカルシン濃度は６個体における測定値の平均を表す）。
【００５１】
上述したように、化合物（Ｉ）は、患者治療および医薬開発の分野における他の制約に対処するさらなる技術的効果または有利な特性を有する。例えば化合物（Ｉ）は、試験動物に対する経口投与後に良好なバイオアベイラビリティおよび良好な血漿曝露を示す。加えて化合物（Ｉ）は、生体外でヒト肝細胞培養物とインキュベーションした場合に、わずかの代謝を示すに過ぎない。さらに、化合物（Ｉ）の生体内投与後のラット、イヌおよびサルの血漿の代謝プロファイリングによって、化合物（Ｉ）が主要な循環物であり、サルの血漿では代謝物が検出されないことが示された。さらに、遺伝毒性の潜在性についての生体外分析および生体内研究で検討した場合では、化合物（Ｉ）は遺伝毒性がないようである。これらの特性および他の特性を考慮すると、化合物（Ｉ）は、治療薬を反復的にまたは長期間にわたって投与することがしばしば必要になる慢性の炎症性疾患または免疫障害の治療に特に適していると考えられる。
【００５２】
患者治療に恩恵を与える特性に加えて、化合物（Ｉ）は、医薬開発を促すなおさらなる利点を有している。例えば、化合物（Ｉ）は結晶形態で単離することができる。所望の生物学的特性を有することに加えて治療薬が特定の物理的性質をも有することが望ましいことは理解できるであろう。具体的にいえば、安定な結晶性固体である化合物は、化学合成、精製、貯蔵、および処方または剤形開発に関する従来の発想に受け入れられ易いため、そのような化合物は所望される。本願明細書において使用する場合の「結晶形態」または「結晶形」とは、同一の元素組成の他の形態からある固体形態を際立たせる特徴的な結晶配列を有する、ある化学種の固体形態をいう。本願明細書において使用する場合の「実質的に純粋な結晶形態」は、約９５％よりも多いその特定の結晶形態、好ましくは約９８％よりも多いその特定の結晶形態を含むその化学種の純粋な結晶形をいう。
【００５３】
特定の結晶形は、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）、分光学的方法（例えば、赤外（ＩＲ）または核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法）、および熱分析技術（例えば、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、熱重量分析（ＴＧＡ）、または示差熱分析（ＤＴＡ））を含めて、従来の技法を使用して特徴付けることができ、従って同一の化学種の他の固体形態から区別することができる。ＸＲＰＤは化学種の結晶形を特徴付けるための特に有用な手段であるが、分析される試料および機器、溶媒、または用いた手順に依存して、同一の結晶形を分析した場合でも分析ごとにＸ線パターンにおける実際のピーク強度は変わる可能性があることは理解されるであろう。さらに、所定の結晶形の分析から得られる°２θ単位で測定される正確なピーク位置は分析ごとに変わる（例えば±０．１°）可能性があるが、ピーク位置の相対的なパターンは、スペクトル間で基本的に同一のままであることも理解されるべきである。
【００５４】
本発明は、結晶形態の化合物（Ｉ）を提供する。より具体的に言えば本発明は、約１０．９、１８．８、および２２．９の°２θに特徴的なピークを有する結晶形態の化合物（Ｉ）の遊離塩基（本願明細書中の実施例における結晶形Ｉ）を提供する。さらに本発明は、約４．５、９．０、１１．５、および１４．７の°２θに特徴的なピークを有する結晶形態の化合物（Ｉ）の遊離塩基（本願明細書中の実施例における結晶形ＩＩ）を提供する。さらにより具体的に言えば、本発明は、実質的に純粋な結晶形態の化合物（Ｉ）の結晶形Ｉおよび結晶形ＩＩの各々を提供する。さらに、化合物（Ｉ）は吸湿性ではなく、高い温度、相対湿度および光への曝露の条件下でも安定である。
【００５５】
粒径は医薬品の生体内での溶解に影響を及ぼす可能性があり、ひいてはその薬剤の吸収にも影響を及ぼす可能性があることも当業者は理解するであろう。本願明細書において使用する場合の「粒径」は、レーザー光散乱、レーザー回折、ミー散乱、沈降場流動分画法、光子相関分光法などの慣用的な技法によって測定される場合の医薬品粒子の直径をいう。医薬品の溶解性が低い場合、小さいまたは小さくした粒径は溶解を助ける可能性があり、従ってその薬剤の吸収を高める可能性がある。Ａｍｉｄｏｎら，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１２；４１３−４２０（１９９５）。粒径を小さくするかまたは制御するための方法（微粉化）は慣用的であり、これにはボールミル粉砕、ピンミル粉砕、ジェットミル粉砕、湿式粉砕などが含まれる。粒径を制御するための別の方法には、ナノ懸濁液中で医薬品を調製することがある。
【００５６】
化合物（Ｉ）の化学調製によって特定の粒径を有する結晶が得られることが見出された。特に、本願明細書中に記載される実施例１（ａ）に基本的に従って調製した場合に、化合物（Ｉ）の遊離塩基の試料は、２０μｍ未満の平均粒径および５０μｍ未満のｄ９０粒径（すなわち、粒子の９０％がこの値よりも小さいかそれに等しいことを表す粒径）を提供する（粒径はＢｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  ＬＳ１３  ３２０レーザー回折粒径アナライザを使用して測定した）。さらに、基本的に，本願明細書中の実施例６および実施例７に記載されるようにして調製した場合、化合物（Ｉ）の遊離塩基の微粉化した試料は、１０μｍ未満のｘ５０粒径（すなわち、その粒子の５０％がこの値よりも小さいかそれに等しいことを表す粒径）および２０μｍ未満のｘ９０粒径（すなわち、その粒子の９０％がこの値よりも小さいかそれに等しいことを表す粒径）を提供する（粒径は、Ｓｙｍｐａｔｅｃ（ＨＥＬＯＳ粒径分析システム）レーザー回折粒径アナライザを使用して測定した）。従って、本発明の特定の実施形態は、２０μｍ未満の平均粒径および５０μｍ未満のｄ９０粒径を有する化合物（Ｉ）の遊離塩基、またはかかる化合物（Ｉ）の遊離塩基を含む医薬組成物である。より具体的な実施形態は、１５μｍ未満の平均粒径および４０μｍ未満のｄ９０粒径を有する化合物（Ｉ）の遊離塩基、またはかかる化合物（Ｉ）の遊離塩基を含む医薬組成物である。さらにより具体的な実施形態は、１０μｍ未満のｘ５０粒径および２０μｍ未満のｘ９０粒径を有する化合物（Ｉ）の遊離塩基、またはかかる化合物（Ｉ）の遊離塩基を含む医薬組成物である。なおより具体的な実施形態は、５μｍ未満のｘ５０粒径および１５μｍ未満のｘ９０粒径を有する化合物（Ｉ）の遊離塩基、またはかかる化合物（Ｉ）の遊離塩基を含む医薬組成物である。さらに、ナノ懸濁液中の化合物（Ｉ）の例は本願明細書中の実施例に提供される。
【００５７】
化合物（Ｉ）の調製方法は当該技術分野で公知である。例えば、国際公開第０４／０５２８４７号パンフレットは、採用することができる一般的手順を提供する。さらに国際公開第０５／０６６１６１号パンフレットは、採用することができるさらなる一般的手順を提供する。以下のスキーム、中間体、および実施例は本発明を例証し、化合物（Ｉ）の代表的な合成法を示す。試薬および出発物質は当業者にとって容易に入手可能であるか、または当業者によって容易に合成できるものである。スキーム、中間体、および実施例は例証のために提示されているのであって限定のためではないこと、および改変は当業者によってなされ得ることを理解するべきである。
【００５８】
本願明細書において使用する場合の「ＤＭＳＯ」はジメチルスルホキシドを指す。「ＤＩＡＤ」はジイソプロピルアゾジカルボキシレートを指す。「ＡＤＤＰ」は１，１’−（アゾジカルボニル）ジピペリジンを指す。「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを指す。「ＤＭＦ」はジメチルホルムアミドを指す。「ＴＭＳＣＮ」はシアン化トリメチルシリルを指す。「ＴＥＡ」または「Ｅｔ３Ｎ」はトリエチルアミンを指す。「ＤＭＥ」は１，２−ジメトキシエタンを指す。「ＡｃＯＥｔ」は酢酸エチルを指す。「ｐｙｒ」はピリジンを指す。「ＭｓＣｌ」はメタンスルホニルクロリドを指す。「Ｅｔ２ＮＨ」はジエチルアミンを指す。「ＭｅＯＨ」はメタノールを指す。「ＰｈＣＨ３」はトルエンを指す。「ＰｈＨ」はベンゼンを指す。「ＰＢｕ３」はトリブチルホスフィンを指す。「ＰＰｈ３」はトリフェニルホスフィンを指す。「ｄｐｐｆ」は１，１’−ビス（ジフェニルホスファニル）フェロセンを指す。「ＮａＯ−ｔ−Ｂｕ」はナトリウム  ｔｅｒｔ−ブトキシドを指す。「ＭＴＢＥ」はｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを指す。
【化２】
2009543804.tif 000008
【００５９】
ピリジン中間体（５）、（６）、および（７）の調製がスキームＩに説明されている。スキームＩ、ステップ１において、３−ブロモピリジン（１）は３−ブロモ−ピリジン−Ｎ−オキシド（２）に酸化される。スキームＩ、ステップ２において、シアン化物置換によって３−ブロモ−ピリジン−２−カルボニトリル（３）が得られる。式（３）のニトリルはステップ３でカルボン酸へと加水分解され、酸触媒反応によって式（４）のエステルへとエステル化される。スキームＩ、ステップ４において、このエステルは水素化ホウ素ナトリウムを用いて式（５）のピリジニルメタノールへと還元される。このピリジニルメタノールはメタンスルホニルクロリドを用いて式（６）のメシレートに変換される（ステップ５）か、または塩化チオニルを用いて式（７）のピリジニルメチルクロリドに変換される（ステップ６）。
【化３】
2009543804.tif 000009
【００６０】
化合物Ｉである最終のベンゾピリジル−１０−オキセピンの合成がスキームＩＩに説明されている。スキームＩＩ、ステップ１において、式（８）のアニリンの改良したザンドマイヤー反応によって式（９）の５−クロロ−２−ヨードフェノールが得られる。
【００６１】
スキームＩＩ、ステップ２において、５−クロロ−２−ヨードフェノールと式（５）のピリジニルメタノールとの間のＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応によって式（１０）のヨードアリールエーテルが得られる。他の適切な試薬としては、ＴＨＦ中でのＤＩＡＤおよびトリフェニルホスフィンが挙げられる。あるいは、ステップ３において、式（１０）のヨードアリールエーテルは、ＴＨＦまたはアセトニトリルなどの不活性溶媒中、ナトリウム  ｔ−ブトキシド、カリウム  ｔ−ブトキシド、または炭酸カリウムなどの塩基を使用して、式（６）のピリジンメチルメシレートまたは式（７）のクロリドを用いたアルキル化によって得られる。
【００６２】
スキームＩＩ、ステップ４において、式（１０）のヨードアリールエーテルは、薗頭カップリングで１ブチンで処理され、式（１１）のアルキニルアリールエーテルを与える。この反応はジエチルアミン／アセトニトリル／ＴＨＦの混合物を使用して行われ、１ブチンはこの反応混合物にバブリングされる。あるいは、この反応はトリエチルアミンを塩基として用いて行われ、１ブチンの２４％ｗｔ／ｗｔ  ＤＭＦ溶液で処理される。
【００６３】
スキームＩＩ、ステップ５およびステップ６において、式（１１）のアルキニルアリールエーテルの白金触媒によるジホウ素化は、式（１２）のジボロン酸エステルを与え、これは分子内Ｓｕｚｕｋｉカップリングによって式（１３）のビニルボロン酸エステルを生成する。
【００６４】
スキームＩＩ、ステップ７において、ビニルボロン酸エステル（１３）と３−ヨードアニリンとの間の分子間Ｓｕｚｕｋｉカップリングは、式（１４）のアニリンを与える。式（１４）のアニリンの精製を改善するために、アニリンを適切な酸で処理して塩を形成させてもよい。例えば、式（１４）アニリンをトルエンスルホン酸で処理して式（１４）のアニリンをジトルエンスルホン酸塩として得てもよい。
【００６５】
スキームＩＩ、ステップ８において、このアニリンは、メタンスルホニルクロリドでスルホニル化され、化合物（Ｉ）である最終のベンゾピリジル−１０−オキセピンを与える。あるいは、スキームＩＩ、ステップ９において、化合物（Ｉ）であるベンゾピリジル−１０−オキセピンは、Ｎ−（３−ヨード−フェニル）−メタンスルホンアミドとのＳｕｚｕｋｉカップリングを行うことにより直接得られる。化合物（Ｉ）は、例えば、メタノールからの再結晶により精製することができる。
【化４】
2009543804.tif 000010
【００６６】
式（１１）のアルキニルアリールエーテルの代替的合成がスキームＩＩａに説明されている。
【００６７】
スキームＩＩａ，ステップ１において、式（９）の５−クロロ−２−ヨードフェノールは式（９ａ）のテトラヒドロピラン（ＴＨＰ）エーテルとして保護される。この反応はジクロロメタンなどの不活性溶媒中、ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウムなどの酸触媒の存在下で行われる。３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピランが約３０℃以下で添加され、この反応は約室温で１０〜２４時間行われる。
【００６８】
スキームＩＩａ、ステップ２において、式（９ａ）のヨードベンゼンは薗頭カップリングで１ブチンで処理され、式（９ｂ）のアルキニルベンゼンを与える。この反応は、酢酸エチルなどの不活性溶媒およびジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）などのパラジウム触媒、およびヨウ化銅（Ｉ）とともにトリエチルアミンを用いて行われる。１−ブチンは約０〜１０℃の温度で加えられ、この反応は約室温で約１０〜２４時間行われる。ワークアップ後、生成物はシリカゲルクロマトグラフィおよびヘプタン／トリエチルアミンからの再結晶によって精製することができる。
【００６９】
ステップ３において、式（９ｂ）のＴＨＰエーテルは、酸性条件を使用して式（９ｃ）のアルキニルフェノールに脱保護される。特定の条件下では、アルコール系溶媒（メタノールなど）中で触媒量の鉱酸（塩化水素酸など）が使用される。この反応は０℃〜室温で３０分間〜６時間行われる。
【００７０】
スキームＩＩａ、ステップ４において、式（９ｃ）のアルキニルフェノールは、ＴＨＦまたはアセトニトリルなどの不活性溶媒中でナトリウム  ｔ−ブトキシド、カリウム  ｔ−ブトキシド、または炭酸カリウムなどの塩基を使用して式（６）のピリジンメチルメシレートでアルキル化される。特定の条件下では、ＴＨＦ中でナトリウム  ｔ−ブトキシドが使用される。ナトリウム  ｔ−ブトキシドは、０℃より低い温度でメシレートおよびフェノールの溶液に加えられ、次いで室温で２４〜７２時間撹拌される。抽出によるワークアップ後、生成物はエタノールから再結晶される。
【化５】
2009543804.tif 000011
【００７１】
化合物（Ｉ）である最終のベンゾピリジル−１０−オキセピンの代替的合成がスキームＩＩＩに説明されている。スキームＩＩＩ、ステップ１において、トリメチルシリル−（アセチレン）と式（１５）の３−ヨードニトロアニリンとの間の薗頭反応により、式（１６）のトリメチルシリルアルキンが得られ、これは脱シリル化によりスキームＩＩＩ、ステップ２の式（１７）のアルキンに変換される。
【００７２】
スキームＩＩＩ、ステップ３において、典型的な薗頭反応の条件を使用して、（１７）は式（１８）のピリジニルメタノールとカップリングされ、式（１９）のジアリールアルキンを与える。スキームＩＩＩ、ステップ４において、ジアリールアルキン（１９）と式（９）の５−クロロ−２−ヨードフェノールとの間のＭｉｔｓｏｎｏｂｕ反応は式（２０）のビアリールアルキニルヨードアリールエーテルを与える。代表的な条件としては、塩化メチレン中でトリフェニルホスフィンおよびＤＩＡＤを使用することが挙げられる。
【００７３】
スキームＩＩＩ、ステップ５において、ビアリールアルキニルヨードアリール（２０）は、三量体ビニルボロン酸無水物の存在下でパラジウム触媒による分子内Ｈｅｃｋ−Ｓｕｚｕｋｉカスケード反応を介して式（２１）のピリジルオキセピンに変換される。最適化された条件としては、ＤＭＥ：水（４：１の体積比）中のビアリールアルキニルヨードアリール（２０）、２ｍｏｌ％酢酸パラジウム（ＩＩ）、２当量の炭酸ナトリウムの混合物に９０℃で無水ボロン酸をゆっくり加えることが挙げられる。
【００７４】
スキームＩＩＩ、ステップ６において、Ｐｄ／Ｃによるピリジルオキセピン（２１）の二重結合およびニトロ基の両方のワンポット水素化は、式（１４）のアニリンを与える。スキームＩＩＩ、ステップ７において、このアニリンは、ピリジン塩基を使用してメタンスルホニルクロリドでスルホニル化され、化合物（Ｉ）である最終のベンゾピリジル−１０−オキセピンを与える。
【実施例】
【００７５】
（機器分析）
ＧＣ−ＭＳ分析は、温度プログラミング（７．３分間６０〜２８０℃、次いで２８０℃で２分間）を使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ  ０．２５ｍｍ×１５ｍ×０．２５μｍキャピラリーカラムを備えたＨＰ６８９０  Ｓｅｒｉｅｓ  ＧＣ−ＭＳ（７０ｅＶ）で実施することができる。ＬＣ−ＭＳ分析は、Ｗａｔｅｒｓ  Ｘｔｅｒｒａ（商標）ＭＳ  Ｃ１８  ４．６ｍｍ×５０ｍｍ  ３．５μｍカラムおよび大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）を使用するＡｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ  ＨＰＬＣで実施することができる。通常、分析は８０％メタノール：水から１００％メタノールへの勾配を使用して実施される。あるいは、ＬＣ−ＭＳ分析は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ  Ｃ１８  ２．１×５０ｍｍ  ３．５μｍカラムおよびエレクトロスプレーイオン化を使用して実施することができる。溶媒系は、０．２％ギ酸ＮＨ４を含む５〜１００％アセトニトリル／ＭｅＯＨ（５０／５０）である。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、周囲温度でＶａｒｉａｎ  ４００ＭＨｚ分光計を用いて記録することができる。データは以下のように報告する：δスケールによる内部標準のテトラメチルシランからのｐｐｍ単位の化学シフト、多重度（ｂ＝ブロード、ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｑｎ＝五重線およびｍ＝多重線）、積分、カップリング定数（Ｈｚ）および帰属。Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンは、ＣｕＫα線源（λ＝１．５４０５６Å）および固体電子検出器（ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  ｓｏｌｉｄ−ｓｔａｔｅ  ｄｅｔｅｃｔｏｒ）を備え、４０ｋＶおよび４０ｍＡで動作するＢｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅ  ＸＲＰＤ粉末回折計で得ることができる。制御された可変の（ｖ１２）発散スリットおよび受光スリットおよび０．２ｍｍ検出器スリットを用いて、２θ単位で０．０２°の刻み幅、３秒／ステップの走査速度で、各試料を°２θ単位で４°と４０°との間で走査した。あるいは、Ｘ線粉末回折分析は、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅ回折計で実施することもできる。この場合、０．６ｍｍ発散スリット、０．６ｍｍ散乱線除去スリット、０．１ｍｍ受光スリットおよび０．６ｍｍ検出器スリットを用いて、２θ単位で０．０２°の刻み幅および５秒／ステップの走査速度で、°２θ単位で２°と４５°との間で試料を走査した。示差走査熱量測定（ＤＳＣ）分析は、Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ  ＤＳＣユニット（モデル８２２）で実施することができる。５０ｍＬ／分の窒素パージを加えながら、ピンホールを開けた密閉したアルミニウムパン中で５℃／分で３０〜３００℃に試料を加熱した。示差熱分析（ＤＴＡ）および熱重量分析（ＴＧＡ）は、Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  ＤＴＡおよびＴＧＡユニット（モデルＴＧＡ／ＳＤＴＡ  ８５１）で実施することができる。５０ｍＬ／分の窒素パージを加えながら、ピンホールを開けた密閉したアルミニウムパン中で１０℃／分で２５℃から３００〜３５０℃に試料を加熱した。ＴＧＡ温度はインジウム／アルミニウム標品、ｍ．ｐ．＝１５６．６℃および６６０．３℃で較正した。重量較正は、製造業者が供給している標品を用いて実施し、クエン酸ナトリウム脱水脱溶媒和に対して検証した。本発明の化合物の化合物名は、通常ＣｈｅｍＤｒａｗ  Ｕｌｔ��ａ（商標）、バージョン７．０．１が名付けたものを採用した。
【００７６】
（中間体１）
（５−クロロ−２−ヨード−フェノール）
【化６】
2009543804.tif 000012
２−アミノ−５−クロロフェノール（５．７ｇ、４０ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ／水／Ｈ２ＳＯ４（２００／６０／１４０ｍＬ）に溶解させ、０℃に冷却した。この溶液に水（２０ｍＬ）中の亜硝酸ナトリウム（４．１ｇ、６０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を０℃で１時間撹拌した。この混合物に水（２０ｍＬ）中のヨウ化カリウム（１９．９ｇ、１２０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。水（２０ｍＬ）中のヨウ化カリウム（１９．９ｇ、１２０ｍｍｏｌ）の別のバッチを加え、混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、水、飽和硫酸ナトリウム水溶液、およびブラインで洗浄した。有機部分をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。生成した残渣をフラッシュクロマトグラフィ（Ｂｉｏｔａｇｅ（商標）Ｓｉ６５Ｍ、２０％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製し、８．０９ｇ（７９％）の標題の化合物をピンク色の固体として得た。ＧＣＭＳ  ｍ／ｅ  ２５４［Ｍ］−。
【００７７】
（代替的手順）
５０Ｌの３つ口丸底フラスコにメカニカルスターラー、滴下ロート、窒素導入口、乾燥管および熱電対を取り付け、冷却浴中に置いた。水（４．５Ｌ）をこのフラスコに入れ、撹拌を開始し、反応液を０℃に冷却した。温度を３０℃以下に維持ながら、硫酸（３．７Ｌ）を滴下した。温度を３０℃以下に維持ながら、２０分間かけて２−アミノ−５−クロロフェノール（１５００ｇ）をこのフラスコに入れた。温度を３０℃以下に維持ながら、１時間かけてＤＭＳＯ（１２Ｌ）を滴下した。反応混合物を−５℃〜０℃に冷却した。温度を０℃以下に維持ながら、１時間４５分かけて水（６Ｌ）中の亜硝酸ナトリウム（１０８２ｇ）の溶液を滴下した。添加終了後、反応混合物を０℃以下の温度で少なくとも１時間撹拌した。５０Ｌの３つ口丸底フラスコにメカニカルスターラー、滴下ロート、窒素導入口、および熱電対を取り付け、加熱マントル中に置いた。ヨウ化カリウム（６．９ｋｇ）および水（７．５Ｌ）をこのフラスコに入れ、撹拌を開始し、反応物を４８℃〜５０℃に加熱した。ガスを放出するための２つの冷却器を使用して温度を４８℃〜５０℃に維持しながら、２−アミノ−５−クロロフェノールジアゾ化溶液をこのフラスコに少しずつ加えた。反応混合物を４８℃〜５０℃で２時間加熱した。このあと、加熱を止め、反応液を周囲温度で一晩撹拌した。反応の進行はＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、９：１）でモニタリングした。出発物質はＲｆ＝０．３に観察され、生成物はＲｆ＝０．６に観察される。出発物質が観察されなくなった時に反応が完了したとみなした。反応が完了すると、反応混合物をＭＴＢＥ（１６Ｌ）で希釈し、２０分間撹拌した。反応混合物を分液ロートに移し、有機層を水層から分離した。有機層をＮａ２Ｓ２Ｏ３（３ｋｇ）および水（１２Ｌ）の溶液で洗浄し、５〜１０分間撹拌した。有機層を分離し、同じ洗浄手順をさらに２回繰り返した。有機層を水層から分離し、すべての洗浄水を廃棄した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（４Ｌ）で洗浄した。有機層を水層から分離し、有機層をブライン（４Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、活性炭で処理し、濾過し、濃縮した。油ポンプを用いて、生成した残渣をヘプタン（１Ｌ）と同時エバポレーションし、残存溶媒を除去した。残渣の褐色油状物（２８８０ｇ）をヘプタン（１ｍＬ／ｇ）に溶解させ、この溶液を冷凍庫中に一晩置いた。固体を濾過により集め，冷ヘプタン（２×６００ｍＬ、０℃）で洗浄し、真空オーブン中で、周囲温度で一晩乾燥した。褐色の固体を得た。
【００７８】
（中間体２）
（３−ブロモ−ピリジン  １−オキシド）
【化７】
2009543804.tif 000013
メチルトリオキソレニウム（１００ｍｇ、０．４０１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４０ｍＬ）に溶解させ、３−ブロモピリジン（１５．８ｇ、１００ｍｍｏｌ）を添加し、次いで３０％Ｈ２Ｏ２水溶液（２２．７ｍＬ）を添加した。この二相混合物を室温で撹拌した。１８時間後、ＭｎＯ２（２５ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温で２時間撹拌した。混合物をジクロロメタンで抽出し、合わせた抽出液をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し９．５２ｇ（５５％）の標題の化合物を橙色油状物として得た。ＧＣＭＳ  ｍ／ｅ  １７４［Ｍ−Ｈ］−。
【００７９】
（代替的手順）
２２Ｌの３つ口丸底フラスコにメカニカルスターラーおよび熱電対を取り付けた。このフラスコに３−ブロモピリジン（３１６９ｇ、２０ｍｏｌ）、ジクロロメタン（８．２Ｌ）およびメチルトリオキソレニウム（１０ｇ）を入れた。冷水道水浴を使用してこの反応混合物を１８℃に冷却し、３０％過酸化水素水溶液（３．０７Ｌ、３０ｍｏｌ）を約１５分間にわたって少しずつ添加した。この反応はわずかに発熱性であり、温度を２０〜２５℃に維持するために氷を冷却浴に加えた。この反応混合物を、浴中、室温で一晩撹拌した（この浴を空にしてはいけない）。反応の進行をＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、１：ｌ）でモニタリングした。出発の３−ブロモピリジンはＲｆ＝０．６を有し、生成物がＲｆ＝０．１を有することが判明した。痕跡量の出発物質が一晩の撹拌後にも存在するかも知れず、この反応液をワークアップしてもよいし、さらに８〜２４時間撹拌してもよい。反応が完了したと判断すると、二酸化マンガン（３１ｇ、１０ミクロン未満）を泡立ちを制御する速度で少しずつ加え、温度を２０〜２５℃に維持した。温度が上昇する場合には、冷却水浴に氷を加えてもよい。泡立ちを観察した場合は、さらに二酸化マンガンを加えてもよい。新しい二酸化マンガンを加えた後にもはや泡立ちが観察されない場合には、固体の塩化ナトリウム（８６０ｇ）を加え、反応混合物をもう３０分間室温で撹拌した。反応混合物を分液ロートに移し、有機層を分離した。水層をジクロロメタン（３×２．５Ｌ）で抽出した。各有機層からの抽出液を、ＴＬＣを用いてモニタリングしてもよい。最後の抽出の後に生成物が存在すれば、水層を濾過してもよく、次いで追加の塩化ナトリウム（５００ｇ）を加えてもよく、混合物を撹拌してその塩を溶解させてもよい。次いで水層をジクロロメタン（３×２Ｌ）で抽出した。合わせた有機部分を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。淡黄色の油状物がフラスコに残留した。この物質を、３−ブロモピリジン−２−カルボニトリルを調製するために直接使用した。
【００８０】
（中間体３）
（３−ブロモ−ピリジン−２−カルボニトリル）
【化８】
2009543804.tif 000014
３−ブロモ−ピリジン  １−オキシド（９．４ｇ、５４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（６０ｍＬ）に溶解させ、トリエチルアミン（１５ｍＬ）を加え、次いでシアン化トリメチルシリル（２１．７ｍＬ、１６３ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を１００℃に加熱し、１６時間撹拌した。混合物をｔｏ０℃に冷却し、２５０ｍＬの５Ｍ  ＮａＯＨ水溶液に注ぎ込み、ジクロロメタンで抽出した。合わせた抽出液をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。生成物をフラッシュクロマトグラフィ（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｓｉ６５Ｍ、２０％酢酸エチル／ヘキサン）を使用して精製し、７．８ｇ（７９％）の標題の化合物を黄色固体として得た。ＧＣＭＳ  ｍ／ｅ  １８２、１８４［Ｍ］−。
【００８１】
（代替的手順）
５０Ｌの３つ口丸底フラスコにメカニカルスターラー、熱電対、窒素導入口、効率よい還流冷却器、および乾燥管を取り付けた（シアン化トリメチルを加える間は乾燥管を取り付けてはいけない）。このフラスコに、３７７８ｇ（約２０ｍｏｌ）の粗３−ブロモピリジン−Ｎ−オキシド（例えば、基本的に中間体２についての代替的手順で説明したようにして調製した）、アセトニトリル（１９Ｌ）およびトリエチルアミン（６．６６７Ｌ、５０ｍｏｌ）を入れた。約７０℃〜７３℃でゆっくり還流するまでこの反応混合物を加熱し、ニートのシアン化トリメチルシリル（６．６６７Ｌ、５０ｍｏｌ）を滴下ロートによって１０〜１５分間隔で全体で３時間にわたって加えた。シアン化トリメチルシリルの各分量の添加の後に、反応液は激しく還流に向かって進行した（蒸気が散逸する場合には、反応を完了させるために追加のシアン化トリメチルシリルが必要になる場合がある）。添加が完了すると、還流を維持するのに必要な加熱速度に調整しながら、反応混合物を還流温度で２０時間撹拌した。反応の進行はＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ  １：１）でモニタリングした。反応が完了したと判断すると、反応混合物を０〜１０℃に冷却した。水（９Ｌ）中の５０％ＮａＯＨ（７．２ｋｇ）水溶液を３０分間かけて流し込むと、発熱が生じた。温度は２０〜２５℃に上昇し、反応液を１５〜２５℃で３０分間撹拌した。反応混合物を分液ロートに移し、有機層を分離した。有機層をブライン（４Ｌ）で洗浄し、合わせた水層をＥｔＯＡｃ（３×３Ｌ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３Ｌ）で洗浄し、活性炭で処理し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。生成した固体（約３．８ｋｇ）をＥｔＯＡｃ（２５Ｌ、いくらか加熱した）に溶解させ、硫酸マグネシウムで乾燥し、活性炭を濾過し、濃縮した。加熱しながら、生成した黄褐色／褐色の固体をエタノール（７Ｌ）に溶解させた。生成した溶液をペイル（円筒型容器）に移し、室温で一晩静置した。この後、濾過により固体をを集め、フィルター上で冷エタノール（２×１Ｌ、−２０℃）で洗浄した。この固体をＥｔＯＡｃ（２０〜２５Ｌ）に溶解させ、この溶液を硫酸マグネシウムで乾燥し、活性炭で処理して脱色し、濾過した。濾過ケーキをＥｔＯＡｃ（２×２Ｌ）で洗浄し、濾液を合わせ、乾固するまで濃縮した。残渣の固体（２．７ｋｇ）をＥｔＯＨ（１Ｌ）と同時エバポレーションした。次いで、加熱しながらこの固体をＥｔＯＨ（６Ｌ）に溶解させた。透明な溶液が約７０℃で生成し、この溶液を０〜５℃に冷却し、この温度で２時間撹拌した。固体を濾過により集め、冷エタノール（２×１Ｌ、０〜５℃）、次いでヘプタン（１Ｌ、０〜５℃）で洗浄し、真空オーブン中で４０℃で乾燥した。
【００８２】
（中間体４）
（３−ブロモ−ピリジン−２−カルボン酸  メチルエステル）
【化９】
2009543804.tif 000015
３−ブロモ−ピリジン−２−カルボニトリル（１４．７ｇ、８０．３ｍｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（５０ｍＬ）に溶解させ、１１０℃に１８時間加熱した。この混合物を０℃に冷却し、濾過し、少量のエーテルでリンスし、オーブン中、減圧下で乾燥した。生成した褐色固体をメタノール（８０ｍＬ）に溶解させ、濃Ｈ２ＳＯ４（６．６ｍＬ）を滴下し、この溶液を９０℃に１６時間加熱した。メタノールを減圧下で除去し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて塩基性ｐＨにし、この混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた抽出液をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し１２．８ｇ（７４％）の標題の化合物を白色固体として得た。ＧＣＭＳ  ｍ／ｅ  ２１５，２１７［Ｍ］−。
【００８３】
（代替的手順）
５０Ｌの３つ口丸底フラスコにメカニカルスターラー、熱電対、窒素導入口および還流冷却器を取り付けた。このフラスコに、ＨＣｌ（２０Ｌ）および３−ブロモピリジン−２−カルボニトリル（６７９０ｇ、３７．１ｍｏｌ）（例えば、基本的に中間体３についての代替的手順で説明したようにして調製した）を入れた。この反応混合物を還流温度に加熱すると、出発物質は溶解し、ピンク色の懸濁液が生成した。この反応混合物を還流温度で２０時間撹拌した。反応の進行はＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ，１：１）でモニタリングした。出発物質はＲｆ＝０．５には存在せず、中間体アミドもＲｆ＝０．１５に存在しなかった。反応が完了したと判断すると、反応混合物を０〜５℃に冷却し、この温度で３時間撹拌した。この後、固体を濾過により集めた（フィルターを洗浄したり、押し付けたりしてはいけない）。ＨＣｌが湿った生成物中に存在するため、適切なトラップを用いて、この固体（３−ブロモピリジン−２−カルボン酸）を真空オーブン中、５０℃で乾燥した。５０Ｌの３つ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、熱電対および還流冷却器を取り付けた。このフラスコにＭｅＯＨ（２５．５Ｌ）、および３−ブロモピリジン−２−カルボン酸（５．０９８ｋｇ）を入れ、次いでＨＣｌ（１５ｍＬ）を入れた。この反応混合物を約６４〜６５℃で還流させ、この温度で９時間撹拌した。この反応混合物を４０〜５０℃に冷却し、ペースト状になるまで濃縮した。５０Ｌの分液ロートに水（１２Ｌ）および固体ＮａＨＣＯ３（２３３８ｇ）を入れ、この混合物を１０〜１５分間撹拌した。濃縮したペーストからの残渣を、少しずつ泡立ちを制御する速度で撹拌した炭酸水素ナトリウム溶液に加えた。すべての残渣を加えた後、ＥｔＯＡｃ（１０Ｌ）をこのロートに加え、１０〜１５分間撹拌した。水層を分離し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１Ｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。合わせた水層をＥｔＯＡｃ（２×２Ｌ）で抽出し、合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１Ｌ）で洗浄し，硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、最初の抽出液とともに濃縮した。淡黄色の油状物を得た。この油状物は冷却するにつれて固化した。真空オーブン中、室温で一晩生成物を乾燥した。
【００８４】
（中間体５）
（（３−ブロモ−ピリジン−２−イル）−メタノール）
【化１０】
2009543804.tif 000016
３−ブロモ−ピリジン−２−カルボン酸  メチルエステル（１２．８ｇ、５９．２ｍｍｏｌ）をメタノール（１５０ｍＬ）に溶解させ、０℃に冷却した。この混合物に、ＮａＢＨ４（１１．２ｇ、２９６ｍｍｏｌ）を１．０ｇずつ加えた。この混合物を室温まで加温し、３時間撹拌した。このメタノールを減圧下で除去し、酢酸エチルを加え、この溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液およびブラインで洗浄した。有機部分をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し６．８ｇ（６２％）の標題の化合物を白色固体として得た。ＧＣＭＳ  ｍ／ｅ  １８７，１８９［Ｍ］−。
【００８５】
（代替的手順）
２つの５０Ｌの３つ口丸底フラスコに、各々、メカニカルスターラー、熱電対、窒素導入口、および乾燥管を取り付けた。各フラスコに、３−ブロモ−ピリジン−２−カルボン酸  メチルエステル（１８８６ｇ、８．７３ｍｏｌ）（例えば、基本的に中間体４についての代替的手順にて説明したようにして調製した）およびＭｅＯＨ（１９Ｌ）を入れた。この反応混合物を、ＭｅＯＨ／ドライアイス浴を用いて−５〜５℃に冷却した。ドライアイスは、冷えすぎないように注意しながら少しずつ加えた。水素化ホウ素ナトリウム（約１６５１ｇ、４３．６４ｍｏｌ）を１００ｇずつ各フラスコに加えた。温度を−５〜５℃に維持し、各分量を加えるまで温度を安定させるようにした。添加終了後、ＭｅＯＨ浴を氷水に置き換えた。反応混合物を０〜５℃で６〜８時間撹拌し、必要に応じて浴中に氷を加えることにより温度を０〜５℃に維持するように注意した。反応の進行はＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、１：１）でモニタリングした。出発物質はＲｆ＝０．６に存在しないはずであり、生成物をＲｆ＝０．１〜０．５に観察した。反応が完了したと判断すると、氷水浴を氷／ＭｅＯＨ浴またはＭｅＯＨ／ドライアイス浴に置き換えた。添加の前半については温度を１０℃より低く、添加の後半については温度を１０〜２０℃に維持する速度でアセトンを加えた（各フラスコに４．５Ｌ）。アセトンの添加が完了すると、この反応液を氷水浴中で一晩撹拌したままにしてもよく、ワークアップへと進んでもよい。各反応混合物を水（各フラスコに５Ｌ）で希釈し、反応混合物をほぼ乾固するまで濃縮した。生成した固体残渣を水（全量１５Ｌ）およびＥｔＯＡｃ（２０Ｌ）で希釈し、混合物を１５ガロン（約６０リットル）の容器（ｃｒｏｃｋ）に移した。５０％水酸化ナトリウム溶液を混合物（２ｋｇ）に加え、この混合物／懸濁液を室温で２０〜３０分間撹拌した。混合物を濾過し、濾過ケーキをＥｔＯＡｃ（２×２Ｌ）で洗浄し、この固体を保存した。合わせた濾液を分液ロート中で合わせ、有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。水層を保存した。濾過によって得た固体および水層を、１５ガロン（約６０リットル）の容器（ｃｒｏｃｋ）に水（１５Ｌ）およびＥｔＯＡｃ（１５Ｌ）とともに入れた。混合物を室温で２０〜３０分間撹拌した。このあと混合物を濾過し、有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、最初の抽出液とともに濃縮した。必要に応じて、抽出を繰り返した。合わせた濃縮した濾液（３．１２ｋｇのピンク色がかった油状物）は、冷所に保存してもよいし、すぐに精製してもよい。濃縮した濾過した残渣（３．１２ｋｇ）を、必要に応じて熱を加えてＥｔＯＡｃ（６Ｌ）に溶解させた。生成したピンク色がかった溶液をヘプタン（６Ｌ）で希釈し、生成した溶液をシリカゲル栓（５．５ｋｇ、ｄ＝２４インチ（約６１ｃｍ）、ｈ＝２インチ（約５ｃｍ）、ヘプタン（９Ｌ）およびＥｔＯＡｃ（１Ｌ）の混合物に予めロードした）にロードし、ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、８：２混合物（約３０Ｌ）、後にヘプタン：ＥｔＯＡｃ、７：３混合物（約４０Ｌ）で溶出した。画分をＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、１：１）でモニタリングした。生成物の画分を懸濁液の状��になるまで濃縮したが、乾固するまでは濃縮しなかった。この懸濁液を０〜５℃に冷却し、この温度で１時間撹拌した。この後、この固体を濾過により集め、ヘプタン（０〜５℃、２Ｌ）で洗浄し、真空オーブン中で２５℃で一定の重量になるまで乾燥した。
【００８６】
（中間体６）
（３−ブロモ−２−（５−クロロ−２−ヨード−フェノキシメチル）−ピリジン）
【化１１】
2009543804.tif 000017
（３−ブロモ−ピリジン−２−イル）−メタノール（３．４ｇ、１８ｍｍｏｌ）、および２−ヨード−５−クロロフェノール（４．５ｇ、１８ｍｍｏｌ）をベンゼン（６０ｍＬ）に溶解させ、０℃に冷却した。この溶液にトリブチルホスフィン（１５ｍＬ、９０ｍｍｏｌ）、および１，１’−（アゾジカルボニル）ジピペリジン（ＡＤＤＰ）（６．６ｇ、１８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４０℃で３時間加熱した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。生成した残渣をフラッシュクロマトグラフィ（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｓｉ６５Ｍ，１５％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製し、３．７７ｇ（５１％）の標題の化合物を白色固体として得た。ＧＣＭＳ  ｍ／ｅ  ２９６，２９８［Ｍ−Ｉ］−。
【００８７】
（代替的アルキル化方法）
（３−ブロモ−ピリジン−２−イル）−メタノール（７．３９ｇ、３９．３０ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（７．１５ｍＬ、５１．３ｍｍｏｌ）を、窒素下でテトラヒドロフラン（７０ｍＬ）中で混合した。氷浴を用いて溶液を０．６℃に冷却した。内部温度が５℃を超えないように発熱を制御しながら、メタンスルホニルクロリド（３．３５ｍＬ、４３．２８ｍｍｏｌ）を２０分間かけて滴下した。添加後、この反応液を氷浴上で撹拌した。２０分後のＨＰＬＣ分析によると、（３−ブロモ−ピリジン−２−イル）−メタノールは完全に消費されていた。焼結ガラスロートを使用してトリエチルアミン塩酸塩を濾過し、冷ＴＨＦ（５０ｍＬ）で洗浄した。メシレートを含むこのＴＨＦ濾液を窒素下に置き、氷浴で冷却した。２−ヨード−５−クロロフェノール（１０．００ｇ、３９．３０ｍｍｏｌ）を加え、次いでナトリウム  ｔ−ブトキシド（４．１０ｇ、４１．３８ｍｍｏｌ）を、等量に２回に分けて加えた。いずれの添加でも約５℃の穏やかな発熱があった。この氷浴を取り除き、反応液を一晩撹拌した。この反応物を水（５０ｍＬ）でクエンチし、下側の水層をゆっくり分離させた。有機部分をブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、次いでこのブラインおよび水層部分をＴＨＦ（１０ｍＬ）で逆抽出した。有機部分を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、さび色を帯びた橙色固体を得た。この固体をジクロロメタン（２５ｍＬ）に溶解させ、ＡｎａＬｏｇｉｘ  Ｉｎｃ．，Ｉｎｔｅｌｌｉｆｌａｓｈ  １８０自動クロマトグラフィ装置、バージョン１．８．０．で、３５分間にわたる１０〜２０％酢酸エチル／ヘキサンの勾配を使用してクロマトグラフにかけ、１１．０ｇ（６５％）の生成物を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ  ５．３１（２Ｈ，ｓ），６．８５（１Ｈ，ｄｄ），７．２５（１Ｈ，ｍ），７．３９（１Ｈ，ｄｄ），７．７７（１Ｈ，ｄ），８．１７（１Ｈ，ｄ），８．５９（１Ｈ，ｄ）。
【００８８】
（中間体７）
（３−ブロモ−２−（２−ブト−１−イニル−５−クロロ−フェノキシメチル）−ピリジン）
【化１２】
2009543804.tif 000018
３−ブロモ−２−（５−クロロ−２−ヨード−フェノキシメチル）−ピリジン（３．８ｇ、８．９ｍｍｏｌ）を圧力フラスコ中に入れ、ジエチルアミン：アセトニトリル：ＴＨＦ（１８ｍＬ：４ｍＬ：４ｍＬ）に溶解させ、窒素で１５分間脱気した。過剰の１−ブチンを溶液に吹き込み、次いでＣｕＩ（５０７ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ）、およびＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（６２３ｍｇ、０．８８８ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温で１時間撹拌した。混合物をエーテルで希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液およびブラインで洗浄した。有機部分をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィ（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｓｉ６５Ｍ、３０％ヘキサン／ＣＨ２Ｃｌ２次いで２０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、２．３ｇ（７５％）の標題の化合物を淡橙色固体として得た。ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ  ３５１［Ｍ］＋。
【００８９】
（代替的手順）
３−ブロモ−２−（５−クロロ−２−ヨード−フェノキシメチル）−ピリジン（５．００ｇ、１１．５４ｍｍｏｌ）をトリエチルアミン（６０ｍＬ、４３０．５ｍｍｏｌ）に懸濁させ、脱気した。１−ブチン（２．６ｇ、１１．５４ｍｍｏｌ）（２４％  ｗｔ／ｗｔ  ＤＭＦ溶液）を加え、次いでビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（４１０ｍｇ、０．５８４ｍｍｏｌ）およびヨウ化銅（Ｉ）（２２０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を一晩撹拌した。この反応液をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（５０ｍＬ）で希釈し、ＮＨ４Ｃｌ溶液（５０ｍＬ）でクエンチした。クエンチの際、３℃のわずかな発熱を伴った。この反応液を３０分間撹拌した。水層を除き、有機層を５Ｎ  ＨＣｌ（８０ｍＬ）で洗浄し、有機層からＴＥＡを除いた。酸性層（ｐＨ＝２）を除去し、有機層有機層をブラインで洗浄し、乾燥し、濾過し、暗褐色油状物になるまでエバポレーションした。この油状物を、ＡｎａＬｏｇｉｘ  Ｉｎｃ．，Ｉｎｔｅｌｌｉｆｌａｓｈ  １８０自動クロマトグラフィ装置、バージョン１．８．０．で、５分間のヘプタン中の０％〜１０％酢酸エチル勾配、５分間保持、および１０分間のヘプタン中の１０％〜２０％酢酸エチルの勾配を使用してクロマトグラフにかけた。橙色固体（４．０ｇ）を得たが、これは出発物質と予想した生成物との混合物であった。この生成物をヘプタンから再結晶し、出発物質（ＨＰＬＣによれば６％）と標題の生成物との混合物３．１ｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ  １．０５（３Ｈ，ｔ），２．３３（２Ｈ，ｑ），５．３１（２Ｈ，ｓ），６．９６（１Ｈ，ｄｄ），７．２２（１Ｈ，ｍ），７．３１（１Ｈ，ｄ），７．３７（１Ｈ，ｄｄ），８．１５（１Ｈ，ｄｄ），８．５７（１Ｈ，ｄｄ）。ＨＰＬＣ（カラム：Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−Ｃ８；溶媒：５０％アセトニトリル／水（０．０１％ＴＦＡを含む）から８０％アセトニトリルへの勾配）で測定したところ、この物質は６％の出発物質を含んでいた。生成物のＴＲ＝６．１５分。
【００９０】
（代替的合成）
（Ａ．２−（５−クロロ−２−ヨード−フェノキシ）−テトラヒドロ−ピランの調製）
２２Ｌの３つ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、滴下ロート、窒素導入口、乾燥管および熱電対を取り付け、冷却浴中においた。５−クロロ−２−ヨードフェノール（２２９０ｇ、９ｍｏｌ）（例えば、基本的に中間体１の代替的手順にて説明したようにして調製した）、ジクロロメタン（１１．４５Ｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（４５．２ｇ、０．１８ｍｏｌ）をこのフラスコに入れ、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（１２１１ｇ、１４．４ｍｏｌ）を約１時間かけてこのフラスコに滴下した。添加の間、穏やかな発熱を観察し、温度を３０℃以下に維持するために冷水道水を冷却浴に加えた。添加終了後、反応混合物を周囲温度で最低１２時間撹拌した。反応の進行はＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、９：１）でモニタリングした。出発物質をＲｆ＝０．２に観察し、生成物をＲｆ＝０．５に観察した。痕跡量よりも多い出発物質が存在する場合には、この反応液をさらに４時間撹拌してもよい。反応が完了すると、混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１．５Ｌ）で洗浄し、有機層を水層から分離し、水層をジクロロメタン（１Ｌ）で抽出し、合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、活性炭で処理し、濾過し、濃縮した。生成した褐色油状物をトルエンと同時エバポレーションして残る可能性がある３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピランを除去した。生成物をトリエチルアミン（４．５Ｌ）に溶解させて濁った溶液を形成させ、濾過し、濾過ケーキをトリエチルアミン（２００ｍＬ）で洗浄した。後に次の反応において、生成物をトリエチルアミン溶液として使用した。
【００９１】
（Ｂ．２−（２−ブト−１−イニル−５−クロロ−フェノキシ）−テトラヒドロ−ピランの調製）
直前に記載した反応から得たトリエチルアミン溶液中の生成物を、メカニカルスターラー、窒素導入口、乾燥管、および熱電対を備える、５０Ｌの３つ口丸底フラスコに入れ、これを冷却浴中に入れた。トリエチルアミン（４．２８Ｌ）、酢酸エチル（８．７８Ｌ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１２６．３ｇ、０．１８ｍｏｌ）、およびヨウ化銅（Ｉ）（３４．３ｇ、０．１８ｍｏｌ）をこのフラスコに加え、反応混合物を撹拌し、窒素雰囲気下で０〜１０℃に冷却した（注：生成物を、パートＡで最初に９Ｌのトリエチルアミンに溶解させてもよく、その場合は上述した追加のトリエチルアミンを後で加える必要はない）。この後、窒素気流を止め、反応混合物の表面より下においたガラス製浸漬管を用いて、３時間の添加の間温度を１０℃以下に維持しながら１−ブチン（６８１．５ｇ、１２．６ｍｏｌ）をこのフラスコに入れた。添加終了後、冷却浴を取り除き、反応混合物を室温で最低１２時間撹拌した。反応をＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、９：１）でモニタリングした。出発物質をＲｆ＝０．６に観察し、生成物をＲｆ＝０．５に観察した。反応が完了したと判断すると、反応混合物を濾過し、濾過ケーキをＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で洗浄し、洗浄回ごとに真空を開放した。すべての有機部分を合わせて、褐色油状物にまで濃縮した。残渣をヘプタン（５Ｌ）およびトリエチルアミン（２５ｍＬ）で希釈した。シリカゲルカラム（ヘプタン（５Ｌ）およびトリエチルアミン（６０ｍＬ）を予めロードした３ｋｇのシリカゲル、ｄ＝８インチ（約２０ｃｍ）、ｈ＝１８インチ（約４６ｃｍ））を使用して生成物を精製した。粗生成物を溶液でロードし、ヘプタン（９Ｌ）／０．２％ＥｔＯＡｃ、ヘプタン（９Ｌ）／３％ＥｔＯＡｃ、およびヘプタン（９Ｌ）／４％ＥｔＯＡｃで逐次的に溶出した。適切な画分を合わせ、褐色油状物（２６４４ｇ、純粋ではない）を得た。この油状物をヘプタン（１ｍＬ／ｇ）およびトリエチルアミン（２０ｍＬ）に溶解させ、この溶液を冷凍庫中に置いた。約１２時間後に固体を分離した。上澄みを傾瀉し、固体を秤量し、ヘプタン（１ｍＬ／ｇ）およびトリエチルアミン（２０ｍＬ）に溶解させた。結晶化を繰り返し、純粋な生成物（２００３ｇ）を得た。
【００９２】
（さらなる精製）
上記固体をジクロロメタン（２ｍＬ／ｇ）に溶解させ、生成した溶液をメカニカルスターラー、窒素導入口、および乾燥管を備える適切な３つ口丸底フラスコに入れ、冷却浴中に置いた。Ｓｉ−チオール誘導体化シリカゲル（充填量１．３３ｍｍｏｌ／ｇ）を加え、生成した懸濁液を最低１２時間、室温で撹拌した。この後、この懸濁液を濾過し、濾過ケーキをジクロロメタン（３×５００ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を濃縮して琥珀色の油状物を得た。この油状物をヘプタン（１ｍＬ／ｇ）に溶解させ、冷凍庫に一晩置いた。固体を傾瀉し、周囲温度、１ｍｍＨｇ（約１３３Ｐａ）で最低１８時間真空オーブン中で乾燥した。
【００９３】
（Ｃ．２−ブト−１−イニル−５−クロロ−フェノールの調製）
２２Ｌの３つ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、滴下ロート、窒素導入口、熱電対、および乾燥管を取り付け、冷却浴中に置いた。ＭｅＯＨ（２．３Ｌ）およびＨＣｌ（９ｍＬ）をこのフラスコに入れ、撹拌を開始し、反応液を１０〜２０℃に冷却した。加熱マントルに入れた２０Ｌの広口丸底フラスコにメカニカルスターラーを取り付け、２−（２−ブト−１−イニル−５−クロロ−フェノキシ）−テトラヒドロ−ピラン（２３１３ｇ、８．７３６ｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（３．４７Ｌ）をこのフラスコに入れた。ゆっくり加熱してこの固体を溶解させ、フラスコをＭｅＯＨ（７０ｍＬ）でリンスした。４５分間にわたって温度を２０℃以下に維持しながら、この溶液を滴下ロートによって上記３つ口丸底フラスコに入れた。冷却を止め、反応混合物を最低３０分間撹拌した。反応の進行はＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、９：１）でモニタリングした。出発物質をＲｆ＝０．６に観察し、生成物をＲｆ＝０．５に観察した。反応が完了したと判断すると、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３００ｍＬ）で希釈し、室温で５〜１０分間撹拌した。この後、反応混合物を濃縮してＭｅＯＨを除去した。残存した油状物（２１１８ｇ）をＭＴＢＥ（４Ｌ）で希釈し、ブライン溶液（１．５Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、水層をＭＴＢＥ（２×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機部分を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。生成物をトルエン（２×８００ｍＬ）と同時エバポレーションし、そのまま直接使用した。
【００９４】
（Ｄ．３−ブロモ−２−（２−ブト−１−イニル−５−クロロ−フェノキシメチル）−ピリジン（中間体７）の調製）
５０Ｌの３つ口丸底フラスコにメカニカルスターラー、滴下ロート、窒素導入口、熱電対、および乾燥管を取り付け、冷却浴中に置いた。（３−ブロモ−ピリジン−２−イル）−メタノール（例えば、基本的に中間体５についての代替的手順にて説明したようにして調製した）（１８３７ｇ、９．７６９ｍｏｌ）、ＴＨＦ（１４．７Ｌ）およびトリエチルアミン（１．５３Ｌ、１１．０１ｍｏｌ）をフラスコに入れ、この反応混合物を−５〜５℃に冷却した。温度を５℃より低く維持しながら、１．５時間にわたってニートのメタンスルホニルクロリド（１１５５ｇ、１０．０９）を滴下すると、白色懸濁液が生成した。生成した懸濁液を−５〜０℃で１時間撹拌し、反応の進行をＴＬＣ（ジクロロメタン：ＭｅＯＨ、２０：１）でモニタリングした。出発物質をＲｆ＝０．５に観察し、メシレート生成物をＲｆ＝０．９５に観察した。反応が完了したと判断すると、反応混合物を濾過し、濾過ケーキを冷ＴＨＦ（０〜５℃、３×２Ｌ）で洗浄した。
【００９５】
５０Ｌの３つ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、滴下ロート、窒素導入口、熱電対、および乾燥管を取り付け、冷却浴中に置いた。メタンスルホン酸  ３−ブロモ−ピリジン−２−イルメチルエステルおよび２−ブト−１−イニル−５−クロロ−フェノール（８．７３６ｍｏｌ、０．９５当量）（例えば、基本的に上記のステップＣにて説明したようにして調製した）を含有する合わせた濾液を、フラスコをリンスするのにＴＨＦ（７０ｍＬ）を使用してこのフラスコに入れた。撹拌を開始し、反応混合物を−１５〜０℃に冷却した。ナトリウム  ｔｅｒｔ−ブトキシド（９６９．７ｇ、１０．０９ｍｏｌ）を、温度を０℃より低く維持しながら４０分間にわたって少しずつ添加した。濁った黄褐色／黄色の溶液になるまで、最低４８時間撹拌しながらこの反応液を室温まで加温した。反応の進行はＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、１：ｌ）でモニタリングした。このメシレートをＲｆ＝０．１に観察し、生成物をＲｆ＝０．５に観察した。反応が完了したと判断すると、反応混合物を水（５Ｌ）で希釈し、有機層を水層から分離し、有機層を濃厚なスラリーになるまで濃縮した。水層をＭＴＢＥ（２×２Ｌ）で抽出し、有機層を分離した。濃縮したスラリーをＭＴＢＥ（１２Ｌ）に溶解させ、それまでの抽出液（４Ｌ）と合わせ、すべての固体が溶解するまで撹拌した。有機層をブライン（３Ｌ）で洗浄し、分離し，硫酸マグネシウムで乾燥し、活性炭で処理し、濾過し、濃縮した。生成物をＥｔＯＨ（１Ｌ）と同時エバポレーションし、オフホワイトの固体（３５８１ｇ）を得た。撹拌しながら１時間−５〜５℃に冷却して、この固体をＥｔＯＨ（２．５Ｌ、０．７ｍＬ／ｇ）から再結晶した。この固体を濾過により集め、冷ＥｔＯＨ（２×９００ｍＬ、−２０〜−１０℃）で洗浄した。油ポンプを使用して、真空オーブン中、３０℃で生成物を乾燥した。
【００９６】
（中間体８）
（（Ｚ）−２−｛２−［１，２−ビス−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ブト−１−エニル］−５−クロロ−フェノキシメチル｝−３−ブロモ−ピリジン）
【化１３】
2009543804.tif 000019
３−ブロモ−２−（２−ブト−１−イニル−５−クロロ−フェノキシメチル）−ピリジン（２．３ｇ、６．６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（６５ｍＬ）に溶解させ、この溶液に１５分間窒素を吹き込むことにより脱気した。この溶液に、ビス（ピナコラト）ジボロン（１．８ｇ、７．２ｍｍｏｌ）、およびＰｔ（ＰＰｈ３）４（６５３ｍｇ、０．５２５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を８０℃で２４時間加熱し、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して固体を得た。この固体をエーテルに溶解させ、濾過し、減圧下で濃縮し、３．６１ｇ（９１％）の標題の化合物を黄色固体として得、これをさらに精製することなく使用した。ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ  ６０５［Ｍ］＋。
【００９７】
（代替的手順）
５０Ｌの３つ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、窒素浸漬管、熱電対、および乾燥管を取り付け、冷却浴中に置いた。ＤＭＦ（２７Ｌ）、３−ブロモ−２−（２−ブト−１−イニル−５−クロロ−フェノキシメチル）−ピリジン（３３８１ｇ、９．６４２ｍｏｌ）（例えば、基本的に中間体７についての代替的合成にて説明したようにして調製した）をこのフラスコに入れ、強い窒素ガス気流を最低１時間吹き込みながら、生成した溶液を室温で撹拌した。この後、ビス（ピナコラトジボロン）（２５２２ｇ、９．９３ｍｏｌ）をこのフラスコに一度に加え、強い窒素ガス気流を少なくとも１５分間吹き込みながら、生成した溶液を室温で撹拌した。テトラキス（トリフェニルホスフィン）白金（０）（２４ｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）をこのフラスコに加え、浸漬管を通常の窒素導入口に置き換えた。この反応混合物を８０℃に加熱し、この温度で８〜１０時間撹拌した。反応の進行はＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ）でモニタリングした。出発物質はＲｆ＝０．４には存在しないはずであり、生成物をＲｆ＝０．３５に観察した。反応が完了したと判断すると、反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物をＭＴＢＥ（２０Ｌ）で希釈し、次いで１０％ＮａＣｌ水溶液（２５Ｌ）を加えた。有機層を水層から分離し、１０％ＮａＣｌ水溶液（１０Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。水層を合わせ、ＭＴＢＥ（５Ｌ）で抽出した。ＭＴＢＥ抽出液を１０％ＮａＣｌ水溶液（３Ｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、最初の抽出液とともに濃厚なペーストになるまで濃縮した。イソプロピルアルコール（７Ｌ）を加え、濃縮を継続して残存するＭＴＢＥを除去した。生成した懸濁液を冷却浴中で最低１時間、室温で撹拌した。次いで、固体を濾過により集め、濾過ケーキをイソプロピルアルコール（２×１．５Ｌ）で洗浄した。油ポンプを用いて、真空オーブン中、４０〜４５℃で最低１８時間、固体を乾燥した。
【００９８】
（中間体９）
（（Ｚ）−８−クロロ−５−［１−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−プロピリデン］−５，１１−ジヒドロ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプタン）
【化１４】
2009543804.tif 000020
（Ｚ）−２−｛２−［１，２−ビス−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ブト−１−エニル］−５−クロロ−フェノキシメチル｝−３−ブロモ−ピリジン（３．６ｇ、６．０ｍｍｏｌ）をジオキサン（６００ｍＬ）に溶解させ、１５分間溶液に窒素を吹き込むことにより脱気した。粉砕したＫ３ＰＯ４（３．８ｇ、１８ｍｍｏｌ）を添加し、次いでＰｄＣｌ２ｄｐｐｆＣＨ２Ｃｌ２（４８８ｍｇ、０．５９８ｍｍｏｌ）を添加した。このスラリーを８０℃で２２時間加熱し、室温に冷却し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮し固体を得た。この固体を酢酸エチルに溶解させ、重力濾過し、減圧下で濃縮し２．３７ｇ（約１００％）の標題の化合物を得て、これをさらに精製せずに使用した。ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ  ３９８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９９】
（代替的合成）
加熱マントル中に置いた２つの５０Ｌの３つ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、窒素浸漬管、熱電対、還流冷却器および乾燥管を取り付けた。１，４−ジオキサン（各々２６Ｌ）、（Ｚ）−２−｛２−［１，２−ビス−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ブト−１−エニル］−５−クロロ−フェノキシメチル｝−３−ブロモ−ピリジン（例えば、基本的に中間体８の代替的手順にて説明したようにして調製した）（各々２６１０ｇ）および炭酸カリウム粉末（各々１７９０ｇ）をこのフラスコに入れた。強い窒素ガス気流を吹き込みながら、少なくとも２時間生成した懸濁液を室温で撹拌した。この後、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（ジクロロメタンとの錯体（１：１））、（各々１７６．３ｇ）をこのフラスコに加え、浸漬管を通常の窒素導入口に置き換えた。この反応混合物を８０℃に加熱し、この温度で最低２０時間撹拌した。暗褐色の懸濁液が生成した。反応の進行はＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ  １：１）でモニタリングした。痕跡量の出発物質がＲｆ＝０．７に存在し、生成物をＲｆ＝０．６に観察した。痕跡量よりも多い出発物質が存在する場合には、追加の炭酸カリウム（各々５９６．５ｇ、全量で１１９３ｇ）を添加した。この反応混合物を８０℃で４時間撹拌した。反応が完了したと判断すると、反応混合物を６０℃に冷却するかまたは室温まで撹拌した。反応混合物を濾過し、濾過ケーキを１，４−ジオキサン（３×３Ｌ）およびＥｔＯＡｃ（３×３Ｌ）で洗浄した。合わせた濾液を固体にまで濃縮した。暗色の固体をＥｔＯＡｃ（２０Ｌ）に溶解させ、生成した溶液を１５％  ＮａＣｌ水溶液（５Ｌ）で洗浄した。（分液ロートを使用して）混合物を激しく撹拌した。層分離はしなかった。混合物をペイル（円筒型容器）に集め、珪藻土（各ペイルへ１ｋｇ）を加え、このペイルを激しく撹拌し、混合物全体を濾過し、層分離を妨げる固体を除去した。この濾過ケーキをＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で洗浄した。濾液を合わせ、有機層を分離した。有機層を１５％  ＮａＣｌ水溶液（５Ｌ）で洗浄した。有機層を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。１，４−ジオキサン（２Ｌ）と同時エバポレーションし、褐色がかった固体残渣を得た。
【０１００】
（実施例１）
（（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド）
【化１５】
2009543804.tif 000021
（Ｚ）−８−クロロ−５−［１−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−プロピリデン］−５，１１−ジヒドロ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプタン（２．３７ｇ、５．９６ｍｍｏｌ）、Ｎ−（３−ヨードフェニル）メタンスルホンアミド（２．６６ｇ、８．９４ｍｍｏｌ）、３，５−ジメトキシフェノール（４．６ｇ、３０ｍｍｏｌ）、およびＫＯＨ（５．０ｇ、８９ｍｍｏｌ）をジオキサン／水（４０ｍＬ／１５ｍＬ）に溶解させ、１５分間溶液に窒素を吹き込むことにより脱気した。この混合物に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（６８９ｍｇ、０．５９６ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を８０℃で１８時間加熱した。この溶液を室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、水、飽和塩化アンモニウム水溶液、およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。生成した残渣を、フラッシュクロマトグラフィ（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｓｉ６５Ｍ、３％エタノール／ＣＨＣｌ３）、次いでイオン交換クロマトグラフィ（２つの分量に分けて、ＢｏｎｄＥｌｕｔ（登録商標）ＳＣＸ、８０／２０  ＣＨ２Ｃｌ２／メタノールで流し出し、８０／２０  ＣＨ２Ｃｌ２／２．０Ｍ  ＮＨ３を含むメタノールで溶出）、さらに別のフラッシュクロマトグラフィ精製（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）Ｓｉ４０Ｍ、４０％  酢酸エチル／ヘキサンから８０％  酢酸エチル／ヘキサン）によって精製し１．０１ｇ（３８％）の標題の化合物を白色固体として得た。ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ  ４４１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０１】
（中間体１０）
（（Ｅ）−３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニルアミン）
【化１６】
2009543804.tif 000022
窒素雰囲気下で、水（１．５０Ｌ）中の水酸化カリウム（５００ｇ、８．９１ｍｏｌ）の溶液を、メカニカルスターラー、還流冷却器、および熱電対を備えた１２Ｌの４つ口丸底フラスコに入れた。この溶液に、３−ヨードアニリン（１２８ｇ、５８５ｍｍｏｌ）、（Ｚ）−８−クロロ−５−［１−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−プロピリデン］−５，１１−ジヒドロ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプタン（２３２ｇ、５８３ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（２．４０Ｌ）、および３，５−ジメトキシフェノール（４５４ｇ、２．９２ｍｏｌ）を加えると、暗褐色混合物が生成した。還流冷却器に取り付けた三方弁を通して混合物を脱気した。三方弁を介して約３分間内部を真空にした。真空にしたフラスコに窒素パージを行った。これを全部で３回繰返した。固体のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（２０．４ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）を加え、脱気手順を繰返した。暗褐色混合物を８０℃で２時間加熱した。反応混合物を４０℃に冷却し、２２Ｌの底に口のある、１５％  ＮａＣｌ溶液（２．５Ｌ）を含有するフラスコに入れた。混合物を１０分間撹拌し、相分離させた。有機層を１５％  ＮａＣｌ溶液（２．５Ｌ）で２回洗浄した。有機層を単離し、真空中で濃縮し濃厚な暗色油状物を得た。２リットルのヘプタンを加え、真空中で濃縮し残存するジオキサンを除去した。ヘプタンで湿らせた３ｋｇのシリカゲルを充填した１０インチ（約２５ｃｍ）の焼結ガラスロートを使用して、大スケールのシリカゲルクロマトグラフィによって生成物を精製した。この物質をヘプタン（約５００ｍＬ）に溶解させ、シリカに載せた。わずかに減圧にして、この物質を、溶出液としての３Ｌのヘプタンとともにシリカに加えた。３．５Ｌの画分を集める間、移動相を９：１ヘプタン：ＥｔＯＡｃおよび１：１  ヘプタン：ＥｔＯＡｃへの勾配に変えた。画分を、ＴＬＣ（１：１  ＥｔＯＡｃ：ヘプタン、ＳｉＯ２、Ｒｆ＝０．４５）を使用してモニタリングした。所望の生成物を含む画分を合わせ、真空中で濃縮して暗緑色油状物を得た。この油状物にヘプタン（２Ｌ）を加え、この溶液を濃縮して２０１．３ｇ（９５％）の暗緑色の固体を得た。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ  ３６３．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０２】
（代替的手順）
（Ｅ）−３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニルアミン、ジトルエンスルホン酸塩（５７６５ｇ）（例えば基本的に、以下の中間体１１についての代替的合成にて説明するようにして調製した）を、４０Ｌの分液ロートを使用して水（１２Ｌ）およびＥｔＯＡｃ（１２Ｌ）に懸濁させた。５０％  ＮａＯＨ溶液（４．８ｋｇ）を一度に加えた。すべての固体が溶解するまでこの懸濁液を激しく撹拌した。有機層を分離し、５％  ＮａＯＨ水溶液（１Ｌ）で洗浄した。合わせた水層をＥｔＯＡｃ（２×２Ｌ）で抽出した。有機層を分離し、５％  ＮａＯＨ水溶液（５００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、活性炭で処理し濾過した。濾液をヘプタン（１６Ｌ）で希釈し、ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、１：１の溶液を作製した。生成物を、シリカゲル栓（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、１：１（８Ｌ）中に予めロードした６ｋｇのシリカゲル、直径＝１８インチ（約４６ｃｍ）、高さ＝３インチ（約８ｃｍ））を使用して精製した。粗生成物を溶液でロードし、ヘプタン：ＥｔＯＡｃ  １：１（約４０〜５０Ｌ）、次いでヘプタン：ＥｔＯＡｃ  １：３（約２０〜３０Ｌ）、次いでヘプタン：ＥｔＯＡｃ  １：９（１０〜２０Ｌ）で溶出した。生成物を含む画分をＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ、１００％）で決定した。不純物をＲｆ＝０．０に観察した。生成物をＲｆ＝０．４に観察した。生成物を含む画分を合わせ、濃縮してペースト状にした。生成した残渣をヘプタン（２〜３Ｌ）で希釈した。この懸濁液を、室温で３０分間撹拌し、固体を濾過により集め、ヘプタン（２×１．５Ｌ）で洗浄した。４０〜４５℃で一晩、真空オーブン中で固体を乾燥した。
【０１０３】
（実施例１（ａ））
（中間体１０から）
（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド
【化１７】
2009543804.tif 000023
窒素雰囲気下で、固体状の（Ｅ）−３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニルアミン（１９８ｇ、５４５ｍｍｏｌ）、ピリジン（６７．０ｍＬ、８２８ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（１．６Ｌ）をメカニカルスターラーおよび熱電対を備えた５リットルの４つ口丸底フラスコに入れた。この暗緑色の反応混合物に、ジクロロメタン（４００ｍＬ）中のメタンスルホニルクロリド（５１．０ｍＬ、６５８ｍｍｏｌ）の溶液を滴下ロートから２０分間かけて滴下した。添加の過程にわたって６．９℃の発熱が観察された。添加が終了すると、反応液を周囲温度で１６時間撹拌した。混合物を、１０％クエン酸溶液（２Ｌ）を収容する底に口のある２２Ｌのフラスコに入れた。混合物を１５分間撹拌し、静置して層分離させた。有機層を１５％  ＮａＣｌ溶液で洗浄した。窒素雰囲気下で、メカニカルスターラーを備えた５Ｌの４つ口フラスコに有機層を入れた。濃赤色溶液をＤＡＲＣＯ（登録商標）活性炭（２００ｇ）、Ｎａ２ＳＯ４（２００ｇ）およびＴＭＴ（トリチオシアヌル酸三ナトリウム塩水和物）（５０ｇ）で処理した。混合物を周囲温度で１８時間撹拌し、２インチ（約５ｃｍ）の珪藻土（Ｈｙ−ｆｌｏ  Ｓｕｐｅｒｃｅｌ（登録商標））のパッドの上から濾過した。濾液を真空中で濃縮し、硬い白色フォーム状物を得た。イソプロピルアルコール（１Ｌ、５体積分）をこのフォーム状物に加え、このスラリーを４０℃で１時間撹拌した。濃厚な混合物を周囲温度に冷却した。ブフナー漏斗でこの固体をポリプロピレンのパッドの上から真空濾過した。この生成物を真空乾燥機内で７０℃で１６時間乾燥し、１７１．８５ｇ（７１．４％）の白色結晶生成物を得た。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ  ４４１．２［Ｍ＋Ｈ］＋，４３９．１［Ｍ−Ｈ］−。元素分析：Ｃ２３Ｈ２１Ｎ２ＣｌＯ３Ｓに対する計算値：Ｃ，６２．６５；Ｈ，４．８０；Ｎ，６．３５。実測値：Ｃ，６２．８１；Ｈ，４．８２；Ｎ，６．２０。
【０１０４】
（中間体１１）
（（Ｅ）−３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニルアミン、ジトルエンスルホン酸塩）
【化１８】
2009543804.tif 000024
３−ヨードアニリン（１３．７２ｇ、６２．６４ｍｍｏｌ）および（Ｚ）−８−クロロ−５−［１−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−プロピリデン］５，１１−ジヒドロ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプタン（２４．９１ｇ、６２．６４ｍｍｏｌ）を使用して、基本的に中間体１０について説明したようにして標題の化合物を調製した。反応終了後、反応液を４０℃に冷却した。水（２５０ｍＬ）、１５％ブライン溶液（５０ｍＬ）およびｔ−ブチルメチルエーテル（２５０ｍＬ）を添加した。上側の有機層を分離し、水層をｔ−ブチルメチルエーテル（１００ｍＬ）で抽出した。この有機溶液を、予め充填した７０ｍｍ  ＳＵＰＥＬＣＯ（登録商標）ブフナー漏斗中でシリカパッドに通した。この濾液を濃縮し、４２．４５ｇの油状物を得た。この油状物にＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）を加え、次いで１８時間撹拌しながらトルエンスルホン酸一水和物（２３．８３ｇ）を加えた。この黄褐色沈殿を濾過し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）、次いでヘプタン（５０ｍＬ）および１：１  ＥｔＯＡｃ／ヘプタン（５０ｍＬ）で洗浄した。この生成物を５０℃で１８時間、真空乾燥機内で乾燥し、３４．４３ｇ（７７．７％収率（重量による））を得た。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ  ３６２［Ｍ＋］；１Ｈ  ＮＭＲ  ＤＭＳＯ（δ）０．８（三重線，３Ｈ），２．２２（ｓ，６Ｈ），２．６（ｍ，１Ｈ），２．６５（ｍ，１Ｈ），５．１（ｄ，１Ｈ），５．８８（ｄ，１Ｈ），７−７．５（ＡｒおよびＮＨ３，２１Ｈ），８．２（ｄ，１Ｈ）。
【０１０５】
（代替的合成）
２つの５０Ｌの３つ口丸底フラスコに、メカニカルスターラー、窒素導入口、熱電対、還流冷却器および乾燥管を取り付け、冷却浴中に置いた。水（各フラスコに８．５Ｌ）および水酸化カリウム（各フラスコに２４２２ｇ）をこのフラスコに入れ、混合物を５〜１５分間撹拌して、固体を溶解させ温度を安定（約４０℃）させた。混合物を、窒素雰囲気下で２０〜３０℃に冷却した。この後、フラスコを加熱マントル中に置き、１，４−ジオキサン（各フラスコに３Ｌ）、３−ヨードアニリン（各フラスコに９４５．５ｇ、４．３１７ｍｏｌ）、および１，４−ジオキサン（１５Ｌ、各フラスコに７．５Ｌ）中の（Ｚ）−８−クロロ−５−［１−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−プロピリデン］−５，１１−ジヒドロ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプタン（８．６３４ｍｏｌ、１当量と考えられる）（基本的に中間体９の代替的合成にて説明したようにして調製した）の均等に分割した溶液を各フラスコに入れ、次いで３，５−ジメトキシフェノール（３３２８ｇ、各フラスコに２１．５８５ｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（各フラスコに１４９．５８ｇ、０．２６ｍｏｌ）を入れた。この反応混合物を８０℃に加熱し、この温度で２時間撹拌した。暗色溶液が観察された。反応の進行はＴＬＣ（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ、１：１）でモニタリングした。出発物質はＲｆ＝０．６に存在しないはずである。生成物をＲｆ＝０．２に観察した。反応が完了したと判断すると、この反応混合物を室温に冷却した。反応混合物を水およびＭＴＢＥ（８Ｌ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＭＴＢＥ（４×２Ｌ）で抽出した。合わせた有機層をブライン溶液（５Ｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、活性炭で処理し、濾過し、濃縮した。ＥｔＯＡｃ（１．５Ｌ）と同時エバポレーションして、明褐色油状物（４０８０ｇ）を得た。
【０１０６】
５０Ｌの３つ口丸底フラスコにメカニカルスターラー、窒素導入口および乾燥管を取り付け、冷却浴中に置いた。ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（４１０６ｇ、２１．５８５ｍｏｌ、２．５当量）およびＥｔＯＡｃ（１５Ｌ）をこのフラスコ入れ、撹拌を開始し、白色懸濁液を観察した。上記褐色油状物をＥｔＯＡｃ（１６．３Ｌ、４ｍＬ／ｇ）に溶解させ、この溶液を少しずつ（最初は素早く、固体が現れるとゆっくりと）ＥｔＯＡｃ中のｐ−トルエンスルホン酸一水和物の懸濁液に加えた。生成した灰色がかった褐色の懸濁液を室温で１２時間撹拌した。この後、この固体を濾過により集め、ＥｔＯＡｃ（３×２Ｌ、室温）で洗浄した。この固体をペイルに移し、ＥｔＯＡｃ（１４Ｌ）でスラリーにし、この固体を濾過により集めた。固体をペイルに移し、もう一度イソプロピルアルコール（１４Ｌ）でスラリーにし、濾過により集めた。加熱マントル中に置いた５０Ｌの３つ口丸底フラスコにメカニカルスターラー、還流冷却器、窒素導入口および乾燥管を取り付けた。この固体およびイソプロピルアルコール（１２Ｌ）をフラスコに入れた。生成した懸濁液を加熱して３０分間還流させ、室温に冷却し、固体を濾過により集めた。この固体を室温でイソプロピルアルコール（２×２Ｌ）、ＥｔＯＡｃ（２×２Ｌ）、およびヘプタン（２×２Ｌ）で洗浄し、真空オーブン中で４０〜４５℃で一晩乾燥した。灰色がかった褐色の固体を得た。
【０１０７】
（実施例１（ｂ））
（（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド）
５０Ｌの３つ口丸底フラスコにメカニカルスターラー、窒素導入口、熱電対および乾燥管を取り付け、冷却浴中に置いた。（Ｅ）−３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニルアミン（１８００ｇ、４．９６ｍｏｌ）（基本的に中間体１０についての代替的手順にて説明するようにして調製した）、ジクロロメタン（１８Ｌ）およびピリジン（５８８．５ｇ、７．４４ｍｏｌ）をこのフラスコに加えた。この反応混合物を０〜５℃に冷却し、温度を５℃に維持してニートのメタンスルホニルクロリド（６８１．８ｇ、５．９５２ｍｏｌ）を約２０〜３０分間かけて滴下した。添加終了後、反応混合物を０〜５℃で１時間撹拌した。冷却浴を取り除き、反応液を室温で最低１２時間撹拌した。反応の進行はＴＬＣ（ＥｔＯＡｃのみ）でモニタリングした。反応が完了したと判断すると、４０Ｌの分液ロートを使用して、この反応混合物を１０％クエン酸水溶液（１４Ｌ）で洗浄した。水層をジクロロメタン（１．５Ｌ）で逆抽出した。合わせた有機層を１０％クエン酸水溶液（２Ｌ）で洗浄した。水層をジクロロメタン（１．５Ｌ）で逆抽出した。合わせた有機層を１５％塩化ナトリウム水溶液（５Ｌ）で洗浄し、水層をジクロロメタン（１．５Ｌ）で逆抽出した。合わせた有機層を半飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５Ｌ）で洗浄した。炭酸水素ナトリウム洗浄を最低３０分間実施するべきである。水層をジクロロメタン（１．５Ｌ）で逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。冷却浴中に置いた５０Ｌの３つ口丸底フラスコにメカニカルスターラー、窒素導入口、熱電対および乾燥管を取り付けた。生成物を含むジクロロメタン溶液をこのフラスコに入れ、次いでトリチオシアヌル酸三ナトリウム塩（６３０ｇ、出発物質１ｇあたり０．３５ｇ）、硫酸ナトリウム（３．６ｋｇ、出発物質１ｇあたり２ｇ）および活性炭（１８０ｇ、出発物質１ｇあたり０．１ｇ）をそのフラスコに入れた。この懸濁液を室温で１２時間撹拌した。懸濁液を濾過し、濾過ケーキをジクロロメタン（３×３Ｌ）でスラリーにした。濾液を合わせ、オフホワイトの固体まで濃縮した。真空オーブン中、４０℃で一晩生成物を乾燥した。
【０１０８】
（実施例１（ｃ））
（中間体１１から）
（（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド）
（パートＡ）
磁気撹拌機を備えた２５０ｍＬ  ＲＢフラスコに中間体１１（３．１４ｇ、５．０９ｍｍｏｌ）および塩化メチレン（７０ｍＬ）を入れた。この混合物に、５分かけて少しずつ１５％炭酸ナトリウム溶液を加えた。混合物を３０分間撹拌した。下側の有機層を分離し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥した。混合物を濾過し、ケーキを塩化メチレン（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を浴温度５０℃で、ロータリーエバポレータで濃縮し、１．８５ｇの油状物を得た。
【０１０９】
（パートＢ）
セパレート式の２５０ｍＬの３つ口反応容器に、塩化メチレン（６５ｍＬ）、およびピリジン（０．６２ｍＬ、７．６４ｍｍｏｌ）に溶解させたパートＡからの油状物（１．８５ｇ）の溶液を加えた。反応溶液を５分間撹拌した。塩化メチレン（５ｍＬ）に溶解させたメタンスルホニルクロリド（０．４６ｍＬ、６．１２ｍｍｏｌ）を５分間かけて加えた。反応混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応をＨＰＬＣでモニタリングし、中間体１１の消失後、１０％クエン酸溶液（１０ｍＬ）でクエンチした。反応混合物を５分間撹拌した。脱イオン水（２０ｍＬ）を加え、２０分間撹拌したあと下側の有機層を分離した。有機層をＤＡＲＣＯ（登録商標）活性炭（２．０ｇ）で２０分間処理した。混合物を珪藻土の上から濾過し、ケーキを塩化メチレン（２０ｍＬ）で洗浄した。ロータリーエバポレータで濾液を濃縮し、１．８４ｇの標題の化合物を得た。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｅ  ４４０［Ｍ＋］；１Ｈ  ＮＭＲ  ＤＭＳＯ（δ６）０．８（三重線，３Ｈ），２．４５（ｍ，１Ｈ），２．５５（ｍ，４Ｈ），５．０（ｄ，１Ｈ），５．８５（ｄ，１Ｈ），６．９−７．１（ｍ，７Ｈ），７．２（ｄ，１Ｈ），７．３８（ｄ，１Ｈ），８．２４（ｄ，１Ｈ），９．４５（ｓ，１Ｈ）。
【０１１０】
（実施例２）
（（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド  Ｈ２ＳＯ４（２：１））
シンチレーションバイアル中で、（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド（２５１ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）をアセトン（４ｍＬ）と混合した。この試料を、撹拌しながら約５５℃に加熱した。１モル当量の硫酸（０．２５Ｍ）を加えた。数時間さらに高温で加熱および撹拌を行った後、この試料を、一晩撹拌しながら約２５℃に冷却した。沈殿は生じておらず、この試料を、窒素気流下で乾固するまでエバポレーションした。この生成した残渣に、約５５℃で撹拌および加熱をしながらアセトン（２ｍＬ）を添加し懸濁液を生成させた。さらにアセトン（１ｍＬ）を加えて透明な溶液にした。この試料を窒素気流下で乾固するまでエバポレーションした。約５５℃で撹拌および加熱をしながらアセトン（２ｍＬ）を生成した残渣に加え、懸濁液を生成させた。この試料を、一晩撹拌しながら約２５℃に冷却した。この懸濁液を真空濾過により単離し、この固体を風乾させた。この物質の融点特性を示差熱分析（ＤＴＡ）により測定した。融解開始温度＝１３９℃；融解ピーク温度＝１４８℃。対イオンを定量するためのＥＳＡ  Ｃｏｒｏｎａ（商標）検出器を備えたＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ２６９５（Ａｌｌｉａｎｃｅ）モデルオートインジェクタ、Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ＲＰ−１８カラムを用いて５％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡを含む）から１００％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡを含む）で１ｍＬ／分で溶出した）により、この物質はヘミスルフェート塩であると決定した。そして５６．７％の理論上のモノ塩を含むことがわかった。遊離塩基をＵＶ（２４５ｎｍ、ＰＤＡ  Ｗａｔｅｒｓ  ９９６検出器）で検出し、標準曲線と比較して８９．５％効力にあることが判明した。これは、２モルの遊離塩基：１モルのＨ２ＳＯ４（ヘミスルフェート塩）の化学量論に相当する。
【０１１１】
（実施例３）
（（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド  ＨＢｒ）
（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド（１８３ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を、シンチレーションバイアル中でエタノール（５ｍＬ）と混合した。この試料を、撹拌しながら約７５℃に加熱した。１モル当量のＨＢｒ（０．２５Ｍ）を加えた。数時間さらに高温で加熱および撹拌を行った後、この試料を、一晩撹拌しながら約２５℃に冷却した。沈殿は生じておらず、この試料を、窒素気流下で乾固するまでエバポレーションした。この生成した残渣に、分液ロート中でＥｔＯＡｃを水で洗浄することによって約３％水／ＥｔＯＡｃに調製した「含水」ＥｔＯＡｃ（６ｍＬ）を加えた。生成した懸濁液を撹拌し、約６５℃で数時間加熱した。この試料を、一晩撹拌しながら約２５℃に冷却した。この固体を真空濾過により懸濁液から単離し、この固体を風乾させた。この物質の融点特性を示差熱分析（ＤＴＡ）により測定した。融解開始温度＝２２７℃；ピーク融解温度＝２３３℃。
【０１１２】
（実施例４）
（（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド  ＨＣｌ）
（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド（２１８ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を、シンチレーションバイアル中でエタノール（５ｍＬ）と混合した。この試料を、撹拌しながら約７５℃に加熱した。１モル当量のＨＣｌ（１Ｎ）を加えた。数時間さらに高温で加熱および撹拌を行った後、この試料を、一晩撹拌しながら約２５℃に冷却した。沈殿は生じておらず、この試料を、窒素気流下で乾固するまでエバポレーションした。この生成した残渣に、分液ロート中でＥｔＯＡｃを水で洗浄することによって約３％水／ＥｔＯＡｃに調製した「含水」ＥｔＯＡｃ（６ｍＬ）を加えた。生成した懸濁液を撹拌し、約６５℃で数時間加熱した。この試料を、一晩撹拌しながら約２５℃に冷却した。この固体を真空濾過により懸濁液から単離し、この固体を風乾させた。この物質の融点特性を示差熱分析（ＤＴＡ）により測定した。分解温度＝１８０℃。
【０１１３】
（実施例５）
（（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド（結晶性）（結晶形Ｉ））
（初期分析）
基本的に実施例Ｉ（ａ）にて説明したようにして調製した（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミドの試料を（軽く粉砕した前後で）示差走査熱量測定およびＸ線粉末回折により分析した。ＤＳＣ：開始温度１８９．７９℃；ピーク温度１０９．９１℃。
【０１１４】
（再結晶）
実施例Ｉ（ａ）からのメタンスルホンアミドの試料（約５０ｍｇ）を、完全に溶解するまで室温で撹拌しながら溶媒を少しずつ加えることにより、イソプロピルアルコール、酢酸イソプロピル、アセトニトリル、メタノール、エタノール（無水）、エタノール（９６％）、およびアセトンに溶解させた。未溶解の粒子が残留した場合には、その溶液を約５０℃に加熱した。各溶液を、結晶化が起こるまで（数時間から一晩）、撹拌しながら開放したバイル中に残した。約０．５ｍｌの溶液が残る（アセトン溶液については約０．２ｍｌ）まで、エバポレーションを継続して十分に結晶形成させた。十分な結晶が生成すると、その溶液を濾過し、生成した粉末をガラスプレート上で室温で一晩風乾させた。各再結晶から得た粉末試料をＸ線粉末回折により分析した。
【０１１５】
初期分析（軽く粉砕した前後で）の試料および再結晶した試料についてＸ線パターンを得て、軽く粉砕した後の初期試料から得られた以下のデータと共通の特徴的なピーク位置（°２θ値）を有する共通の結晶形（結晶形Ｉ）であることが明らかとなった。
【０１１６】
【表５】
2009543804.tif 000025
【０１１７】
（実施例６）
（（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド（メタノール再結晶））
５０Ｌの３つ口丸底フラスコにメカニカルスターラー、還流冷却器、熱電対および乾燥管を取り付け、加熱マントル中に置いた。基本的に実施例Ｉ（ｂ）にて説明したようにして調製した固体物質２２６３ｇおよびＭｅＯＨ（３０Ｌ）をフラスコに入れた。撹拌を開始し、混合物を加熱して還流させ、固体が溶解するまで加熱を続けた。透明な溶液が得られると、活性炭（１８０ｇ）を注意深くフラスコに入れた。混合物を熱いうちに濾過し、メカニカルスターラー、熱電対および乾燥管を備えた、冷却浴中に置いた５０Ｌの３つ口丸底フラスコに濾液を入れた。生成した溶液を最初はゆっくり冷却し、次いで−１０から０℃に冷却し、この温度で最低１時間撹拌した。この後、この固体を濾過により集め、冷ＭｅＯＨ（２×６００ｍＬ、−４０℃）で洗浄した。生成物を真空オーブン中、７０℃で一晩乾燥し、１９４２ｇを得た。
【０１１８】
（実施例７）
（（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド（微粉化））
化合物（Ｉ）の試料（例えば、基本的に実施例６にて説明したようにして調製した）を、一連の０１０１  Ｊｅｔ−Ｏ−Ｍｉｚｅｒ（ループミル）（Ｆｌｕｉｄ  Ｅｎｅｒｇｙ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｎｄ  Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ）および圧縮窒素粉砕ガス（露点＞４０℃）を使用して粒径を小さくした（微粉化した）。粒径分布をＳｙｍｐａｔｅｃ（ＨＥＬＯＳ粒径分析システム）レーザー回折粒径アナライザで測定し、ｘ５０およびｘ９０粒径をｘ５０＜５μｍ、ｘ９０＜１５μｍと測定した。
【０１１９】
（実施例８）
（（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド（結晶性）（結晶形ＩＩ））
例えば基本的に実施例６にて説明したようにして調製した未微粉化化合物（Ｉ）の試料、および例えば基本的に実施例７にて説明したようにして調製した微粉化化合物（Ｉ）をＢｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅ回折計を使用するＸ線粉末回折分析に供し、０．６ｍｍ発散スリット、０．６ｍｍ散乱線除去スリット、０．１ｍｍ受光スリットおよび０．６ｍｍ検出器スリットを用いて、２θ単位で０．０２°の刻み幅、５秒／ステップの走査速度で、試料を°２θ単位で２°と４５°との間で走査した。未微粉化試料および微粉化試料についてのＸ線パターンにより、以下の°２θ値に特徴的なピーク位置を有する共通の結晶形（結晶形ＩＩ）であることが明らかとなった。
【０１２０】
【表６】
2009543804.tif 000026
【０１２１】
（実施例９）
（ナノ懸濁液中の（Ｅ）−Ｎ−｛３−［１−（８−クロロ−１１Ｈ−１０−オキサ−１−アザ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−イリデン）−プロピル］−フェニル｝−メタンスルホンアミド）
初期ｄ９０粒径＝３２μｍ（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  ＬＳ１３  ３２０レーザー回折粒径アナライザを使用して測定した初期粒径）を有する化合物Ｉ約５７９ｍｇを、２５０ｍＬのＰｙｒｅｘ  Ｎｏ．１３９５培地瓶中で、１％カルボキシメチルセルロースナトリウム、０．２５％ポリソルベート８０、および０．０５％  Ａｎｔｉｆｏａｍ  １５１０を含む１７４ｍＬのビヒクルに懸濁させた。この処方物を、最大値の約８６％であるパワー出力で０．５インチ（約１．３ｃｍ）プローブを使用して、Ｂｒａｎｓｏｎ  Ｓｏｎｉｆｅｒ  ２５０で４６分間超音波処理した。プローブで超音波処理した処方物中の化合物Ｉの粒径を、Ｈｏｒｉｂａ  ＬＡ−９２０粒径アナライザを使用して測定した：平均粒径：３．８μｍ；ｄ９０粒径：６．５μｍ。
【０１２２】
プローブで超音波処理した処方物をホモジナイズして、ＪＲ３０、７５ミクロン、相互作用チャンバおよび冷却コイルを備えたＭｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ  Ｍ−１１０Ｓ  Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒを使用してナノ懸濁液を得た。冷却コイルを、１４℃までの低下および３９℃への上昇という短時間のずれを除いて２０〜３０℃の温度に保った水浴中に維持した。圧力計を１００ｐｓｉ（約６．８９ｂａｒ）に設定し、２３，０００ｐｓｉ（約１５９ＭＰａ）の圧力をこの処方物に加えた。この処方物を１Ｌのホッパーに入れ、ホッパーの底からＭｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒに入れ、生成物ドレインおよびある長さのシリコーンチュービングを通してホッパー中の液体の上に戻した。またこの処方物を、標準的なプロペラミキサでホッパー中で撹拌した。この処方物の全体の体積を、相互作用チャンバに８１回通した。ナノ懸濁液処方物の中の化合物Ｉの最終粒径は、Ｈｏｒｉｂａ  ＬＡ−９２０粒径アナライザを用いて測定した：平均粒径：０．４３０μｍ；ｄ９０粒径：０．５９４μｍ。
【国際調査報告】
2009543804.tif 000028
2009543804.tif 000029