(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）若しくは式（II）の化合物、又は薬学的に許容できるその塩に関する。さらなる態様は、本発明による化合物を含む医薬組成物、及び増殖性障害、ウイルス障害、卒中などを含む種々の障害を治療するための医薬品の調製における前記化合物の使用に関する。【化１】2009511556.tif 000043
2009511556.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下から選択される式II又はIIの化合物及び薬学的に許容できるその塩。
【化１】
2009511556.tif 000032
【表１】
2009511556.tif 000033
2009511556.tif 000034
【請求項２】
式Ｉの化合物又は薬学的に許容できるその塩
【化２】
2009511556.tif 000035
Ｉ    
［式中、
Ｘ１及びＸ２の一方はＮＲ７であり、他方はＣＲ８であり、
Ｚ１、Ｚ２及びＺ３の１つはＮ又はＮＲ９＋であり、残りは、それぞれ独立に、ＣＲ１０であり、
Ｙは、ＮＲ１１、ＮＨＣＯ、ＮＨＳＯ２、ＮＨＣＨ２、ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２又はＣＨ＝ＣＨから選択され、
Ｒ１〜Ｒ６、Ｒ８及び各Ｒ１０は、それぞれ独立に、Ｈ又は（ＣＨ２）ｍＲ１２から選択され、ここで、ｍは、０、１、２又は３であり、
Ｒ７及びＲ１１は、それぞれ独立に、Ｈ又はアルキルであり、
Ｒ９はアルキルであり、
各Ｒ１２は、独立に、ＯＲ１３、Ｒ１３、ＣＯＲ１３、ＣＯＯＲ１３、ＣＮ、ＣＯＮＲ１３Ｒ１４、ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＲ１３ＣＯＲ１４、ＳＲ１３、ＳＯＲ１３、ＳＯ２Ｒ１３、ＮＲ１３ＳＯ２Ｒ１４、ＳＯ２ＯＲ１３、ＳＯ２ＮＲ１３Ｒ１４、ハロゲン、ＣＦ３及びＮＯ２から選択され、
Ｒ１３及びＲ１４は、それぞれ独立に、Ｈ又は（ＣＨ２）ｎＲ１５であり、ここで、ｎは、０、１、２又は３であり、
各Ｒ１５は、独立に、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、アラルキル、アリール及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯ−アルキル、アラルキル、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、ＣＯＯＨ、ＣＯ−アルキル、ＣＯ−アリール、ＮＨ２、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）２、ＣＦ３、アルキル及びアルコキシから選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよく、ここで、前記アルキル及びアルコキシ基は、１個又は複数のＯＨ基でさらに置換されていてよい］。
【請求項３】
ＹがＮＲ１１である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ＹがＮＨである、請求項２又は３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３及びＲ４が、両方共Ｈである、請求項２〜４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
各Ｒ１５が、独立に、エチル、エチル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、ピリジニル、ピロリジニル、ピロリル、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、トリアゾリル、テトラゾリル及びチアゾリルから選択される、請求項２〜５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
各Ｒ１２が、独立に、ＯＨ、ＯＭｅ、ＣＯＭｅ、ＣＨＯ、ＣＯ２Ｍｅ、ＣＯＯＨ、ＣＮ、ＣＯＮＨ２、ＮＨＭｅ、ＮＨ２、ＮＭｅ２、ＳＨ、ＳＭｅ、ＳＯＭｅ、ＳＯ２Ｍｅ、ＳＯ２ＮＨＭｅ、ＳＯ２ＮＨ２、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、ＣＦ３、ＮＯ２、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピロリジニル及びＮ−ピペラジニルから選択される、請求項２〜６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ５、Ｒ６及び各Ｒ１０が、それぞれ独立に、Ｈ及び（ＣＨ２）ｍＲ１２から選択され、
各Ｒ１２が、独立に、Ｒ１３、ＮＲ１３ＣＯＲ１４、ＮＲ１３Ｒ１４、ＳＯ２Ｒ１３、ＮＲ１３ＳＯ２Ｒ１４、ＯＲ１３、アルキル、ＮＯ２、ＣＦ３、アルコキシ、ハロゲンから選択され、
Ｒ１３及びＲ１４が、それぞれ独立に、Ｈ又は（ＣＨ２）ｎＲ１５であり、
各Ｒ１５が、独立に、アルキル、ヘテロアリール、アリール及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯ−アルキル、ＣＯＯＨ、ＣＯ−アルキル、アラルキル、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、ＣＯ−アリール、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）２及びＣＦ３から選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよい、
請求項２〜７のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ５、Ｒ６及び各Ｒ１０が、それぞれ独立に、Ｈ及びＲ１２から選択され、
各Ｒ１２が、独立に、Ｒ１３、ＮＨＣＯＲ１４、ＮＲ１３Ｒ１４、ＳＯ２Ｒ１３、ＮＨＳＯ２Ｒ１４、ＯＲ１３、アルキル、ＮＯ２、ＣＦ３、アルコキシ、ハロゲンから選択され、
Ｒ１３及びＲ１４が、それぞれ独立に、Ｈ又はＲ１５であり、
各Ｒ１５が、独立に、アルキル、アリール及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ハロゲン、ＯＨ、ＣＯ−アルキル、アラルキル、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、ＣＯ−アリール、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、ＮＨ−アルキル及びＮ（アルキル）２から選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよい、
請求項２〜８のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ５、Ｒ６及び各Ｒ１０が、それぞれ独立に、Ｈ、Ｍｅ、ＮＯ２、ＣＦ３、ＯＭｅ、Ｆ、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピペラジニル及びＮ−ピペリジニルから選択され、前記Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピペラジニル及びＮ−ピペリジニル基は、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯ−Ｍｅ、ＣＯＯＨ、ＣＯ−Ｍｅ、ＣＯ−フェニル、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＮＨ２、ＮＨ−Ｍｅ、ＮＭｅ２及びＣＦ３から選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよい、請求項２〜９のいずれかに記載の化合物。
【請求項１１】
Ｘ１がＣＲ８であり、Ｘ２がＮＲ７である、請求項２〜１０のいずれかに記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ７がＨ又はＭｅである、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ１、Ｒ２及び各Ｒ１０が、それぞれ独立に、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、アルキル、ＣＯＮＲ１３Ｒ１４、ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＨＣＯＲ１３ＯＲ１３、Ｒ１３及びＮＲ１３ＳＯ２Ｒ１４から選択される、請求項２〜１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１、Ｒ２及び各Ｒ１０が、それぞれ独立に、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、アルキル、ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＲ１３ＣＯＲ１４及びＯＲ１３から選択され、ここで、Ｒ１３及びＲ１４は、それぞれ独立に、Ｈ又はアルキルである、請求項２〜１３のいずれかに記載の化合物。
【請求項１５】
Ｘ１がＣＲ８であり、
Ｘ２がＮＲ７であり、
Ｒ２及びＲ８が、両方共アルキルであり、
Ｒ１が、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、アルキル、ＣＯＮＲ１３Ｒ１４、ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＨＣＯＲ１３ＯＲ１３、Ｒ１３及びＮＲ１３ＳＯ２Ｒ１４から選択される、
請求項２〜１４のいずれかに記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ１がＨ又はＣＮである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｚ２がＮであり、Ｚ１及びＺ３が、それぞれ独立に、ＣＲ１０である、請求項２〜１６のいずれかに記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ５、Ｒ６及び各Ｒ１０が、それぞれ独立に、Ｈ、ハロ、アルキル、アルコキシ及び１個又は複数のアルキル又はアシル置換基で置換されていてもよいヘテロシクロアルキルから選択される、請求項２から１７のいずれかに記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ５、Ｒ６及び各Ｒ１０が、それぞれ独立に、Ｈ、ハロ、アルキル、アルコキシ、Ｎ−ピペラジニル、Ｎ−モルホリニル及びＮ−ピペリジニルから選択され、ここで、前記Ｎ−ピペラジニル、Ｎ−モルホリニル及びＮ−ピペリジニル基は、１個又は複数のアルキル又はアシル置換基で置換されていてもよい、請求項２〜１８のいずれかに記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ５がＨであり、
Ｒ６がＨ又はアルキルであり、
Ｚ１がＣＨであり、
Ｚ２がＮであり、
Ｚ３がＣＲ１０であり、Ｒ１０は、独立に、Ｈ、アルコキシ、ハロ又はＮ−ピペラジニルであり、前記Ｎ−ピペラジニル基は、アシル基で置換されていてもよい、
請求項２〜１９のいずれかに記載の化合物。
【請求項２１】
以下から選択される請求項２〜２０のいずれかに記載の化合物及び薬学的に許容できるその塩。
【化３】
2009511556.tif 000036
【表２】
2009511556.tif 000037
【請求項２２】
式IIの化合物又は薬学的に許容できるその塩。
【化４】
2009511556.tif 000038
II
［式中、
Ｘ１ａ及びＸ２ａの一方はＮＲ７ａであり、他方はＣＲ８ａであり、
Ｙは、ＮＲ１１ａ、ＮＨＣＯ、ＮＨＳＯ２、ＮＨＣＨ２、ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２又はＣＨ＝ＣＨから選択され、
Ｒ１ａ〜Ｒ６ａ、Ｒ８ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａは、それぞれ独立に、Ｈ又は（ＣＨ２）ｍＲ１２ａから選択され、ここで、ｍは、０、１、２又は３であり、
Ｒ７ａ及びＲ１１ａは、それぞれ独立に、Ｈ又はアルキルであり、
各Ｒ１２ａは、独立に、ＯＲ１３ａ、Ｒ１３ａ、ＣＯＲ１３ａ、ＣＯＯＲ１３ａ、ＣＮ、ＣＯＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＣＯＲ１４ａ、ＳＲ１３ａ、ＳＯＲ１３ａ、ＳＯ２Ｒ１３ａ、ＮＲ１３ａＳＯ２Ｒ１４ａ、ＳＯ２ＯＲ１３ａ、ＳＯ２ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ハロゲン、ＣＦ３及びＮＯ２から選択され、
Ｒ１３ａ及びＲ１４ａは、それぞれ独立に、Ｈ又は（ＣＨ２）ｎＲ１５ａであり、ここで、ｎは、０、１、２又は３であり、
各Ｒ１５ａは、独立に、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、アラルキル、アリール及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯ−アルキル、アラルキル、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、ＣＯＯＨ、ＣＯ−アルキル、ＣＯ−アリール、ＮＨ２、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）２、ＣＦ３、アルキル及びアルコキシから選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよく、ここで、前記アルキル及びアルコキシ基は、１個又は複数のＯＨ基でさらに置換されていてよく、
ここで、Ｒ１ａ〜Ｒ６ａ、Ｒ８ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａの少なくとも１つは、ＳＯ２ＮＲ１３ａＲ１４ａ及び置換されていてもよいヘテロシクロアルキルから選択される］。
【請求項２３】
ＹがＮＲ１１ａである、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
ＹがＮＨである、請求項２２又は請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ３ａ及びＲ４ａが、両方共Ｈである、請求項２２〜２４のいずれかに記載の化合物。
【請求項２６】
各Ｒ１５ａが、独立に、エチル、エチル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、ピリジニル、ピロリジニル、ピロリル、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、トリアゾリル、テトラゾリル及びチアゾリルから選択される、請求項２２〜２５のいずれかに記載の化合物。
【請求項２７】
各Ｒ１２ａが、独立に、ＯＨ、ＯＭｅ、ＣＯＭｅ、ＣＨＯ、ＣＯ２Ｍｅ、ＣＯＯＨ、ＣＮ、ＣＯＮＨ２、ＮＨＭｅ、ＮＨ２、ＮＭｅ２、ＳＨ、ＳＭｅ、ＳＯＭｅ、ＳＯ２Ｍｅ、ＳＯ２ＮＨＭｅ、ＳＯ２ＮＨ２、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、ＣＦ３、ＮＯ２、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピロリジニル及びＮ−ピペラジニルから選択される、請求項２２〜２６のいずれかに記載の化合物。
【請求項２８】
Ｒ５ａ、Ｒ６ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａが、それぞれ独立に、Ｈ及びＲ１２ａから選択され、
各Ｒ１２ａが、独立に、Ｒ１３ａ、ＮＨＣＯＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＳＯ２Ｒ１３ａ、ＮＨＳＯ２Ｒ１４ａ、ＯＲ１３ａ、アルキル、ＮＯ２、ＣＦ３、アルコキシ、ハロゲン及びＳＯ２ＮＲ１３ａＲ１４ａから選択され、
Ｒ１３ａ及びＲ１４ａが、それぞれ独立に、Ｈ又はＲ１５ａであり、
各Ｒ１５ａが、独立に、アルキル、アリール及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ハロゲン、ＯＨ、ＣＯ−アルキル、アラルキル、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、ＣＯ−アリール、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、ＮＨ−アルキル及びＮ（アルキル）２から選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよい、
請求項２２〜２７のいずれかに記載の化合物。
【請求項２９】
Ｒ５ａ、Ｒ６ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａが、それぞれ独立に、Ｈ、Ｍｅ、ＮＯ２、ＣＦ３、ＯＭｅ、Ｆ、ＳＯ２ＮＨ−アルキル、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピペラジニル及びＮ−ピペリジニルから選択され、前記アルキル、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピペラジニル及びＮ−ピペリジニル基は、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯ−Ｍｅ、ＣＯＯＨ、ＣＯ−Ｍｅ、ＣＯ−フェニル、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＮＨ２、ＮＨ−Ｍｅ、ＮＭｅ２及びＣＦ３から選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよい、請求項２２〜２８のいずれかに記載の化合物。
【請求項３０】
Ｘ１ａがＣＲ８ａであり、Ｘ２ａがＮＲ７ａである、請求項２２〜２９のいずれかに記載の化合物。
【請求項３１】
Ｒ７ａがＨ又はＭｅである、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｒ１ａ、Ｒ２ａ及びＲ８ａが、それぞれ独立に、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、アルキル、ＣＯＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＨＣＯＲ１３ａＯＲ１３ａ、Ｒ１３ａ及びＮＲ１３ａＳＯ２Ｒ１４ａから選択される、請求項２２〜３１のいずれかに記載の化合物。
【請求項３３】
Ｒ１ａ、Ｒ２ａ及びＲ８ａが、それぞれ独立に、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、アルキル、ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＣＯＲ１４ａ及びＯＲ１３ａから選択され、ここで、Ｒ１３ａ及びＲ１４ａは、それぞれ独立に、Ｈ又はアルキルである、請求項２２〜３２のいずれかに記載の化合物。
【請求項３４】
Ｘ１ａがＣＲ８ａであり、
Ｘ２ａがＮＲ７ａであり、
Ｒ２ａがアルキルであり、
Ｒ８ａがアルキル又はアリールであり、
Ｒ１ａが、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＯＯＲ１３ａアルキル、ＣＯＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＨＣＯＲ１３ａＯＲ１３ａ、Ｒ１３ａ及びＮＲ１３ａＳＯ２Ｒ１４ａから選択される、
請求項２２〜３３のいずれかに記載の化合物。
【請求項３５】
Ｒ１ａが、Ｈ、ＣＮ、ＣＯ２（ＣＨ２）２ＯＭｅ又はＣＯ２Ｅｔである、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３６】
Ｒ５ａ、Ｒ６ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａが、それぞれ独立に、Ｈ、ハロ、ＳＯ２ＮＲ１３ａＲ１４ａ、アルコキシ及び１個又は複数のアルキル、アラルキル又はアシル置換基で置換されていてもよいヘテロシクロアルキルから選択される、請求項２２〜３５のいずれかに記載の化合物。
【請求項３７】
Ｒ５ａ、Ｒ６ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａが、それぞれ独立に、Ｈ、ハロ、ＳＯ２ＮＲ１３ａＲ１４ａ、アルコキシ、Ｎ−ピペラジニル、Ｎ−モルホリニル及びＮ−ピペリジニルから選択され、ここで、前記Ｎ−ピペラジニル、Ｎ−モルホリニル及びＮ−ピペリジニル基は、１個又は複数のアルキル、アラルキル又はアシル置換基で置換されていてもよく、Ｒ１３ａ及びＲ１４ａは、それぞれ独立に、１個又は複数のＯＨ又はアルコキシ基で置換されていてもよいアルキル基である、請求項２２〜３６のいずれかに記載の化合物。
【請求項３８】
Ｒ５ａ、Ｒ６ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａが、それぞれ独立に、Ｈ、ハロ、アルコキシ、ＳＯ２ＮＨＥｔ、ＳＯ２ＮＨｉＰｒ、ＳＯ２ＮＨＣ（Ｍｅ）２ＣＨ２ＯＨ、ＳＯ２ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＯＭｅ、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−Ａｃ−ピペラジニル、Ｎ−Ｂｚ−ピペラジニル及びビス−メチル−モルホリニルから選択される、請求項２２〜３７のいずれかに記載の化合物。
【請求項３９】
Ｒ５ａ及びＲ１８ａがＨであり、
Ｒ６ａがＨ又はハロであり、
Ｒ１６ａ及びＲ１７ａが、それぞれ独立に、Ｈ、ハロ、アルコキシ、ＳＯ２ＮＨＥｔ、ＳＯ２ＮＨｉＰｒ、ＳＯ２ＮＨＣ（Ｍｅ）２ＣＨ２ＯＨ、ＳＯ２ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＯＭｅ、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−Ａｃ−ピペラジニル、Ｎ−Ｂｚ−ピペラジニル及びビス−メチル−モルホリニルから選択される、
請求項２２〜３８のいずれかに記載の化合物。
【請求項４０】
以下から選択される請求項２２〜３９のいずれかに記載の化合物及び薬学的に許容できるその塩。
【化５】
2009511556.tif 000039
【表３】
2009511556.tif 000040
【請求項４１】
以下から選択される化合物及び薬学的に許容できるその塩。
【化６】
2009511556.tif 000041
【表４】
2009511556.tif 000042
【請求項４２】
薬学的に許容できる希釈剤、賦形剤又は担体と混合した請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項４３】
増殖性障害を治療するための医薬品の調製における、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項４４】
増殖性障害が癌又は白血病である、請求項４３に記載の使用。
【請求項４５】
増殖性障害が、糸球体腎炎、関節リウマチ、乾癬又は慢性閉塞性肺疾患である、請求項４３に記載の使用。
【請求項４６】
化合物が１種又は複数のその他の抗癌化合物と組み合わせて投与される、請求項４３〜４５のいずれかに記載の使用。
【請求項４７】
ウイルス障害を治療するための医薬品の調製における、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項４８】
ウイルス障害が、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）、単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）、ヒト免疫不全ウイルス１型（ＨＩＶ−１）及び水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）から選択される、請求項４７に記載の使用。
【請求項４９】
プロテインキナーゼを阻害するための、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項５０】
プロテインキナーゼがサイクリン依存性キナーゼである、請求項４９に記載の使用。
【請求項５１】
サイクリン依存性キナーゼが、ＣＤＫ２、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８及びＣＤＫ９から選択される、請求項５０に記載の使用。
【請求項５２】
プロテインキナーゼがオーロラキナーゼである、請求項４９に記載の使用。
【請求項５３】
オーロラキナーゼが、オーロラキナーゼＡ、オーロラキナーゼＢ又はオーロラキナーゼＣである、請求項５２に記載の使用。
【請求項５４】
プロテインキナーゼがチロシンキナーゼである、請求項４９に記載の使用。
【請求項５５】
チロシンキナーゼが、エイブルソンチロシンキナーゼ（ＢＣＲ−ＡＢＬ）、ＦＭＳ関連チロシンキナーゼ３（ＦＬＴ３）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）受容体チロシンキナーゼ又は血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）受容体チロシンキナーゼである、請求項５４に記載の使用。
【請求項５６】
プロテインキナーゼがＧＳＫである、請求項４９に記載の使用。
【請求項５７】
プロテインキナーゼがＧＳＫ−３βである、請求項５６に記載の使用。
【請求項５８】
哺乳動物に治療有効量の請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、増殖性疾患を治療する方法。
【請求項５９】
哺乳動物に治療有効量の請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、ウイルス障害を治療する方法。
【請求項６０】
サイクリン依存性キナーゼ、オーロラキナーゼ、ＧＳＫ、チロシンキナーゼ及びＰＬＫ酵素の１種又は複数を阻害することが可能であるさらなる候補化合物を同定するアッセイにおける、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項６１】
アッセイが競合結合アッセイである、請求項６０に記載の使用。
【請求項６２】
競合結合アッセイが、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物を、サイクリン依存性キナーゼ、ＧＳＫ、チロシンキナーゼ及びＰＬＫから選択される酵素、並びに候補化合物と接触させるステップと、請求項１〜４０のいずれかに記載の化合物と酵素との間の相互作用の任意の変化を検出するステップとを含む、請求項６１に記載の使用。
【請求項６３】
中枢神経系障害を治療するための医薬品の調製における、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項６４】
中枢神経系障害がアルツハイマー病又は双極性障害である、請求項６３に記載の使用。
【請求項６５】
脱毛症を治療するための医薬品の調製における、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項６６】
卒中を治療するための医薬品の調製における、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項６７】
化合物が少なくとも１種のＰＬＫ酵素を阻害するのに十分な量で投与される、請求項４３〜４８又は６３〜６６のいずれかに記載の使用。
【請求項６８】
ＰＬＫ酵素がＰＬＫ１である、請求項６７に記載の使用。
【請求項６９】
化合物が少なくとも１種のＣＤＫ酵素を阻害するのに十分な量で投与される、請求項４３〜４８又は６３〜６６のいずれかに記載の使用。
【請求項７０】
ＣＤＫ酵素が、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ３、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８及び／又はＣＤＫ９である、請求項６９に記載の使用。
【請求項７１】
化合物がオーロラキナーゼを阻害するのに十分な量で投与される、請求項４３〜４８又は６３〜６６のいずれかに記載の使用。
【請求項７２】
オーロラキナーゼが、オーロラキナーゼＡ、オーロラキナーゼＢ又はオーロラキナーゼＣである、請求項７１に記載の使用。
【請求項７３】
化合物が少なくとも１種のチロシンキナーゼを阻害するのに十分な量で投与される、請求項４３〜４８又は６３〜６６のいずれかに記載の使用。
【請求項７４】
チロシンキナーゼが、エイブルソンチロシンキナーゼ（ＢＣＲ−ＡＢＬ）、ＦＭＳ関連チロシンキナーゼ３（ＦＬＴ３）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）受容体チロシンキナーゼ又は血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）受容体チロシンキナーゼである、請求項７３に記載の使用。
【請求項７５】
糖尿病を治療するための医薬品の調製における、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項７６】
糖尿病がII型糖尿病である、請求項７５に記載の使用。
【請求項７７】
化合物がＧＳＫを阻害するのに十分な量で投与される、請求項７５又は７５に記載の使用。
【請求項７８】
化合物がＧＳＫ３βを阻害するのに十分な量で投与される、請求項７６に記載の使用。
【請求項７９】
薬剤に使用するための、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物。
【請求項８０】
眼科疾患を治療するための医薬品の調製における、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項８１】
眼科疾患が、緑内障、浸出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）又は増殖性糖尿病網膜症（ＰＤＲ）である、請求項８０に記載の使用。
【請求項８２】
実質的に本明細書で記載の通りの化合物、医薬組成物、使用、方法又はプロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、置換ピリミジン誘導体に関する。特に、本発明は、２−置換−４−ヘテロアリール−ピリミジン及び治療におけるそれらの使用に関する。より具体的には、しかし排他的ではなく、本発明は、１種又は複数のプロテインキナーゼを阻害することが可能である化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
真核生物では、ＤＮＡ複製、細胞周期進行、エネルギー代謝、並びに細胞増殖及び細胞分化を含む全ての生物学的機能は、タンパク質の可逆的リン酸化を介して調節されている。タンパク質のリン酸化状態によって、その機能、細胞内分布及び安定性が決定されるだけでなく、他のどんなタンパク質又は細胞成分と関連するかも決定される。したがって、生物は、プロテオームにおける全般的な特異的リン酸化、さらに生化学的経路における個々のメンバーのバランスを、絶え間なく変化する環境に応答してホメオスタシスを維持するためのストラテジーとして使用する［Cohen, P.Nat.Rev.Drug Disc., 2002, 1, 309］。これらのリン酸化及び脱リン酸化ステップを実施する酵素はそれぞれ、プロテインキナーゼ及びホスファターゼである。多くのキナーゼが、種々の治療分野において創薬標的としての重要性を増してきている［Fischer, P.M. Curr. Med. Chem., 2004, 11, 1563］。
【０００３】
真核性プロテインキナーゼファミリーは、約５００遺伝子を含むヒトゲノム中のの最も大きなファミリーの１つである［Manning, G.; Whyte, D. B.; Martinez, R.; Hunter, T.; Sudarsanam, S., The protein kinase complement of the human genome, Science 2002, 298, 1912-1934; Kostich, M.; English, J.; Madison, V.; Gheyas, F.; Wang, L., et al. Human members of the eukaryotic protein kinase family, Genome Biology 2002, 3, Research 0043.0041-0043.0012］。
【０００４】
大多数のキナーゼは、保存核構造を伴う２５０〜３００アミノ酸残基触媒ドメインを含む。このドメインは、ＡＴＰのための結合ポケット（ＧＴＰではより少なく）を含み、その末端リン酸基をキナーゼは、その高分子基質へと共有結合により移動させる。リン酸ドナーは常に、二価のイオン（通常はＭｇ２＋又はＭｎ２＋）との錯体として結合する。触媒ドメインの別の重要な機能は、高分子基質をリン酸転移させるための結合及び配向である。大抵のキナーゼに存在する触媒ドメインは、およそ相同である。
【０００５】
ＡＴＰ結合に拮抗することを介してプロテインキナーゼ機能を阻害することが可能である幅広い分子が、当技術分野では知られている［Dancey, J.; Sausville, E. A. Issues and progress with protein kinase inhibitors for cancer treatment, Nat. Rev. Drug Disc. 2003, 2, 296-313; Cockerill, G. S.; Lackey, K. E., Small molecule inhibitors of the class 1 receptor tyrosine kinase family. Current Topics in Medicinal Chemistry 2002, 2, 1001-1010; Fabbro, D.; Ruetz, S.; Buchdunger, E.; Cowan-Jacob, S. W.; Fendrich, G. et al., Protein kinases as targets for anticancer agents: from inhibitors to useful drugs, Pharmacol.Ther. 2002, 93, 79-98; Cohen, P., Protein kinases - the major drug targets of the twenty-first century? Nat. Rev. Drug Disc. 2002, 1, 309-315; Bridges, A. J., Chemical inhibitors of protein kinases, Chem.Rev. 2001, 101(8), 2541-2571］。
【０００６】
例えば、本出願人は、特にサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）に対してキナーゼ阻害特性を有する２−アニリノ−４−ヘテロアリール−ピリミジン化合物を以前に開示している［Wang, S.; Meades, C.; Wood, G.; Osnowski, A.; Fischer, P. M., N-(4-(4-methylthiazol-5-yl) pyrimidin-2-yl)-N-phenylamines as antiproliferative compounds,ＰＣＴ国際特許出願公開ＷＯ２００３０２９２４８, Cyclacel Limited, UK; Wu, S. Y.; McNae, I.; Kontopidis, G.; McClue, S. J.; McInnes, C. et al., Discovery of a Novel Family of CDK Inhibitors with the Program LIDAEUS: Structural Basis for Ligand-Induced Disordering of the Activation Loop, Structure 2003, 11, 399-410; Fischer, P. M.; Wang, S.; Wood, G., Inhibitors of cyclin dependent kinases as anti-cancer agents,ＰＣＴ国際特許出願公開ＷＯ０２／０７９１９３; Cyclacel Limited, UK; Wang, S.; Fischer, P. M. Anti-cancer compounds,米国特許出願公開２００２／００１９４０４; Fischer, P. M.; Wang, S., 2-substituted 4-heteroaryl-pyrimidines and their use in the treatment of proliferative disorders,ＰＣＴ国際特許出願公開ＷＯ２００１０７２７４５; Cyclacel Limited, UK］。
【０００７】
ＣＤＫは、様々なサイクリンサブユニットを伴うセリン／トレオニンプロテインキナーゼである。これらの複合体は、真核細胞周期進行の調節に、さらに転写の調節に重要である［Knockaert, M.; Greengard, P.; Meijer, L., Pharmacological inhibitors of cyclin-dependent kinases, Trends Pharmacol. Sci. 2002, 23, 417-425; Fischer, P. M.; Endicott, J.; Meijer, L., Cyclin-dependent kinase inhibitors, Progress in Cell Cycle Research; Editions de la Station Biologique de Roscoff: Roscoff, France, 2003; pp 235-248］。
【特許文献１】ＰＣＴ国際特許出願公開ＷＯ２００３０２９２４８
【特許文献２】ＰＣＴ国際特許出願公開ＷＯ０２／０７９１９３
【特許文献３】米国特許出願公開２００２／００１９４０４
【特許文献４】ＰＣＴ国際特許出願公開ＷＯ２００１０７２７４５
【非特許文献１】Cohen, P.Nat.Rev.Drug Disc., 2002, 1, 309
【非特許文献２】Fischer, P.M. Curr. Med. Chem., 2004, 11, 1563
【非特許文献３】Manning, G.; Whyte, D. B.; Martinez, R.; Hunter, T.; Sudarsanam, S., The protein kinase complement of the human genome, Science 2002, 298, 1912-1934;
【非特許文献４】Kostich, M.; English, J.; Madison, V.; Gheyas, F.; Wang, L., et al. Human members of the eukaryotic protein kinase family, Genome Biology 2002, 3, Research 0043.0041-0043.0012
【非特許文献５】Dancey, J.; Sausville, E. A. Issues and progress with protein kinase inhibitors for cancer treatment, Nat. Rev. Drug Disc. 2003, 2, 296-313
【非特許文献６】Cockerill, G. S.; Lackey, K. E., Small molecule inhibitors of the class 1 receptor tyrosine kinase family. Current Topics in Medicinal Chemistry 2002, 2, 1001-1010
【非特許文献７】Fabbro, D.; Ruetz, S.; Buchdunger, E.; Cowan-Jacob, S. W.; Fendrich, G. et al., Protein kinases as targets for anticancer agents: from inhibitors to useful drugs, Pharmacol.Ther. 2002, 93, 79-98
【非特許文献８】Cohen, P., Protein kinases - the major drug targets of the twenty-first century? Nat. Rev. Drug Disc. 2002, 1, 309-315
【非特許文献９】Bridges, A. J., Chemical inhibitors of protein kinases, Chem.Rev. 2001, 101(8), 2541-2571
【非特許文献１０】Wu, S. Y.; McNae, I.; Kontopidis, G.; McClue, S. J.; McInnes, C. et al., Discovery of a Novel Family of CDK Inhibitors with the Program LIDAEUS: Structural Basis for Ligand-Induced Disordering of the Activation Loop, Structure 2003, 11, 399-410
【非特許文献１１】Knockaert, M.; Greengard, P.; Meijer, L., Pharmacological inhibitors of cyclin-dependent kinases, Trends Pharmacol. Sci. 2002, 23, 417-425
【非特許文献１２】Fischer, P. M.; Endicott, J.; Meijer, L., Cyclin-dependent kinase inhibitors, Progress in Cell Cycle Research; Editions de la Station Biologique de Roscoff: Roscoff, France, 2003; pp 235-248
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、さらなる置換ピリミジン誘導体を提供しようとするものである。より詳細には、本発明は、数多くの様々な疾患を治療する際に広い治療用途を有するか、及び／又は１種又は複数のプロテインキナーゼを阻害することが可能である化合物に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の第１の態様は、式Ｉの化合物又は薬学的に許容できるその塩
【００１０】
【化１】
2009511556.tif 000003
Ｉ
【００１１】
［式中、
Ｘ１及びＸ２の一方はＮＲ７であり、他方はＣＲ８であり、
Ｚ１、Ｚ２及びＺ３の１つはＮ又はＮＲ９＋であり、残りは、それぞれ独立に、ＣＲ１０であり、
Ｙは、ＮＲ１１、ＮＨＣＯ、ＮＨＳＯ２、ＮＨＣＨ２、ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２又はＣＨ＝ＣＨから選択され、
Ｒ１〜Ｒ６、Ｒ８及び各Ｒ１０は、それぞれ独立に、Ｈ又は（ＣＨ２）ｍＲ１２から選択され、ここで、ｍは、０、１、２又は３であり、
Ｒ７及びＲ１１は、それぞれ独立に、Ｈ又はアルキルであり、
Ｒ９はアルキルであり、
各Ｒ１２は、独立に、ＯＲ１３、Ｒ１３、ＣＯＲ１３、ＣＯＯＲ１３、ＣＮ、ＣＯＮＲ１３Ｒ１４、ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＲ１３ＣＯＲ１４、ＳＲ１３、ＳＯＲ１３、ＳＯ２Ｒ１３、ＮＲ１３ＳＯ２Ｒ１４、ＳＯ２ＯＲ１３、ＳＯ２ＮＲ１３Ｒ１４、ハロゲン、ＣＦ３及びＮＯ２から選択され、
Ｒ１３及びＲ１４は、それぞれ独立に、Ｈ又は（ＣＨ２）ｎＲ１５であり、ここで、ｎは、０、１、２又は３であり、
各Ｒ１５は、独立に、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、アラルキル、アリール及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯ−アルキル、アラルキル、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、ＣＯＯＨ、ＣＯ−アルキル、ＣＯ−アリール、ＮＨ２、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）２、ＣＦ３、アルキル及びアルコキシから選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよく、ここで、前記アルキル及びアルコキシ基は、１個又は複数のＯＨ基でさらに置換されていてよい］
に関する。
【００１２】
本発明の第２の態様は、式IIの化合物又は薬学的に許容できるその塩
【００１３】
【化２】
2009511556.tif 000004
II
【００１４】
［式中、
Ｘ１ａ及びＸ２ａの一方はＮＲ７ａであり、他方はＣＲ８ａであり、
Ｙは、ＮＲ１１ａ、ＮＨＣＯ、ＮＨＳＯ２、ＮＨＣＨ２、ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２又はＣＨ＝ＣＨから選択され、
Ｒ１ａ〜Ｒ６ａ、Ｒ８ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａは、それぞれ独立に、Ｈ又は（ＣＨ２）ｍＲ１２ａから選択され、ここで、ｍは、０、１、２又は３であり、
Ｒ７ａ及びＲ１１ａは、それぞれ独立に、Ｈ又はアルキルであり、
各Ｒ１２ａは、独立に、ＯＲ１３ａ、Ｒ１３ａ、ＣＯＲ１３ａ、ＣＯＯＲ１３ａ、ＣＮ、ＣＯＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＣＯＲ１４ａ、ＳＲ１３ａ、ＳＯＲ１３ａ、ＳＯ２Ｒ１３ａ、ＮＲ１３ａＳＯ２Ｒ１４ａ、ＳＯ２ＯＲ１３ａ、ＳＯ２ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ハロゲン、ＣＦ３及びＮＯ２から選択され、
Ｒ１３ａ及びＲ１４ａは、それぞれ独立に、Ｈ又は（ＣＨ２）ｎＲ１５ａであり、ここで、ｎは、０、１、２又は３であり、
各Ｒ１５ａは、独立に、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、アラルキル、アリール及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯ−アルキル、アラルキル、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、ＣＯＯＨ、ＣＯ−アルキル、ＣＯ−アリール、ＮＨ２、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）２、ＣＦ３、アルキル及びアルコキシから選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよく、ここで、前記アルキル及びアルコキシ基は、１個又は複数のＯＨ基でさらに置換されていてよく、
ここで、Ｒ１ａ〜Ｒ６ａ、Ｒ８ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａの少なくとも１つは、ＳＯ２ＮＲ１３ａＲ１４ａ及び置換されていてもよいヘテロシクロアルキルから選択される］
に関する。
【００１５】
本発明は、オーロラキナーゼ［Carmena, M.; Earnshaw, W.C., Nat.Rev.Mol.Cell Biol., 2003, 4, 842］、ＦＭＳ様チロシンキナーゼ３（ＦＬＴ３）[Stirewalt, D.L.; Radich, J.P., Nat.Rev. Cancer, 2003, 3, 650］、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）[Fischer, P.M.; Endicott, J.; Meijer, L., Progr.Cell Cycle Res., 2003, 5, 235］、及びグリコーゲン合成酵素キナーゼ３（ＧＳＫ３）[Cohen, P.; Goedert, M., Nat.Rev.Drug Disc., 2004, 3, 479］を含む種々のプロテインキナーゼを阻害することが可能である化合物を提供する。
【００１６】
本発明の別の態様は、薬学的に許容できる希釈剤、賦形剤又は担体と混合した上記定義の本発明の化合物を含む医薬組成物に関する。
【００１７】
本発明のさらなる態様は、以下：
増殖性障害；
ウイルス障害；
中枢神経系障害；
卒中（stroke）；
微生物感染；
真菌性障害；
寄生障害；
炎症性疾患；
心血管障害．
脱毛症；及び
糖尿病
の１種又は複数を治療するための医薬品の調製における上記定義の本発明の化合物の使用に関する。
【００１８】
本発明の別の態様は、サイクリン依存性キナーゼ、ＧＳＫ、オーロラキナーゼ、チロシンキナーゼ、ＦＭＳ様チロシンキナーゼ−２（ＦＬＴ−３）及びＰＬＫ酵素の１種又は複数を阻害することが可能であるさらなる候補化合物を同定するアッセイにおける上記定義の本発明の化合物の使用に関する。
【００１９】
本発明の別の態様は、薬剤で使用するための、上記定義の本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
本明細書で使用する場合、用語「ヒドロカルビル」は、少なくともＣ及びＨを含む基を指す。ヒドロカルビル基が１個を上回るＣを含む場合、これらの炭素は、必ずしも相互に結合している必要はない。例えば、少なくとも２個の炭素が、適切な元素又は基を介して結合していてよい。したがって、ヒドロカルビル基は、ヘテロ原子を含有していてよい。適切なヘテロ原子は、当業者には明らかであり、例えば、イオウ、窒素、酸素、リン及びケイ素が含まれる。ヒドロカルビル基が１個又は複数のヘテロ原子を含む場合、その基は、炭素原子を介して、又はヘテロ原子を介して別の基に結合していてよい。即ち、リンカー原子は、炭素でもヘテロ原子でもよい。好ましくは、ヒドロカルビル基は、アリール、ヘテロアリール、アルキル、シクロアルキル、アラルキル、ヘテロシクロアルキル又はアルケニル基である。さらに好ましくは、ヒドロカルビル基は、アリール、ヘテロアリール、アルキル、シクロアルキル、アラルキル又はアルケニル基である。ヒドロカルビル基は、１個又は複数のＲ１２又はＲ１２ａは基で置換されていてよい。
【００２１】
本明細書で使用する場合、用語「アルキル」は、（モノ−又はポリ−）置換又は非置換であってよい飽和している直鎖及び分枝鎖アルキル基の両方を含む。好ましくは、アルキル基は、Ｃ１−２０アルキル基、より好ましくはＣ１−１５、さらにより好ましくはＣ１−１２アルキル基、さらにより好ましくは、Ｃ１−６アルキル基、より好ましくはＣ１−３アルキル基である。特に好ましいアルキル基には、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル及びヘキシルが含まれる。適切な置換基には、例えば、１個又は複数のＲ１２又はＲ１２ａ基が含まれる。好ましくは、アルキル基は、非置換である。
【００２２】
本明細書で使用する場合、用語「シクロアルキル」は、（モノ−又はポリ−）置換又は非置換であってよい環式アルキル基を指す。好ましくは、シクロアルキル基はＣ３−１２シクロアルキル基である。適切な置換基には、例えば、１個又は複数のＲ１２又はＲ１２ａ基が含まれる。
【００２３】
本明細書で使用する場合、用語「アルケニル」は、分枝鎖又は非分子鎖で、（モノ−又はポリ−）置換又は非置換であってよい１個又は複数の炭素−炭素二重結合を含む基を指す。好ましくは、アルケニル基は、Ｃ２−２０アルケニル基、より好ましくはＣ２−１５アルケニル基、さらにより好ましくはＣ２−１２アルケニル基、又は好ましくはＣ２−６アルケニル基、より好ましくはＣ２−３アルケニル基である。適切な置換基には、例えば、上記定義の１個又は複数のＲ１２又はＲ１２ａ基が含まれる。
【００２４】
本明細書で使用する場合、用語「アリール」は、（モノ−又はポリ−）置換又は非置換であってよいＣ６−１２芳香族基を指す。代表的な例には、フェニル及びナフチルなどが含まれる。適切な置換基には、例えば、１個又は複数のＲ１２又はＲ１２ａ基が含まれる。
【００２５】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロアリール」は、１個又は複数のヘテロ原子を含む（モノ−又はポリ−）置換又は非置換のＣ２−１２芳香族基を指す。好ましくは、ヘテロアリール基は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１個又は複数のヘテロ原子を含むＣ４−１２芳香族基である。適切なヘテロアリール基には、ピロール、ピラゾール、ピリミジン、ピラジン、ピリジン、キノリン、チオフェン、１，２，３−トリアゾール、１，２，４−トリアゾール、チアゾール、オキサゾール、イソ−チアゾール、イソ−オキサゾール、イミダゾール、フランなどが含まれる。この場合にも、適切な置換基には、例えば、１個又は複数のＲ１２又はＲ１２ａ基が含まれる。
【００２６】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロシクロアルキル」は、１個又は複数のヘテロ原子を含む環式脂肪族基を指す。好ましいヘテロシクロアルキル基には、ピペリジニル、ピロリジニル、ピペラジニル及びモルホリニルが含まれる。さらに好ましくは、ヘテロシクロアルキル基は、Ｎ−ピペリジニル、Ｎ−ピロリジニル、Ｎ−ピペラジニル及びＮ−モルホリニルから選択される。
【００２７】
本明細書で使用する場合、用語「アラルキル」には、これだけに限定するものではないが、アリール及びアルキル官能基の両方を有する基が含まれる。例として、この用語には、アルキル基の水素原子の１個がアリール基で置き換えられた基、例えば、ハロ、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシなどの１個又は複数の置換基を有してもよいフェニル基が含まれる。代表的なアラルキル基には、ベンジル、フェネチルなどが含まれる。
【００２８】
上記の通り、本発明の第１の態様は、上記定義の通りの式Ｉの化合物
【００２９】
【化３】
2009511556.tif 000005
Ｉ
【００３０】
又は薬学的に許容できるその塩に関する。
【００３１】
好ましい一実施形態では、ＹはＮＲ１１である。さらに好ましくは、ＹはＮＨである。
【００３２】
好ましい一実施形態では、Ｒ３及びＲ４は、両方共Ｈである。
【００３３】
好ましい一実施形態では、各Ｒ１５は、独立に、エチル、エチル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、ピリジニル、ピロリジニル、ピロリル、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、トリアゾリル、テトラゾリル及びチアゾリルから選択される。
【００３４】
好ましい一実施形態では、各Ｒ１２は、独立に、ＯＨ、ＯＭｅ、ＣＯＭｅ、ＣＨＯ、ＣＯ２Ｍｅ、ＣＯＯＨ、ＣＮ、ＣＯＮＨ２、ＮＨＭｅ、ＮＨ２、ＮＭｅ２、ＳＨ、ＳＭｅ、ＳＯＭｅ、ＳＯ２Ｍｅ、ＳＯ２ＮＨＭｅ、ＳＯ２ＮＨ２、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、ＣＦ３、ＮＯ２、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピロリジニル及びＮ−ピペラジニルから選択される。
【００３５】
好ましい一実施形態では、
Ｒ５、Ｒ６及び各Ｒ１０は、それぞれ独立に、Ｈ及び（ＣＨ２）ｍＲ１２から選択され、
各Ｒ１２は、独立に、Ｒ１３、ＮＲ１３ＣＯＲ１４、ＮＲ１３Ｒ１４、ＳＯ２Ｒ１３、ＮＲ１３ＳＯ２Ｒ１４、ＯＲ１３、アルキル、ＮＯ２、ＣＦ３、アルコキシ、ハロゲンから選択され、
Ｒ１３及びＲ１４は、それぞれ独立に、Ｈ又は（ＣＨ２）ｎＲ１５であり、
各Ｒ１５は、独立に、アルキル、ヘテロアリール、アリール及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯ−アルキル、ＣＯＯＨ、ＣＯ−アルキル、アラルキル、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、ＣＯ−アリール、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）２及びＣＦ３から選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよい。
【００３６】
より好ましい実施形態では，
Ｒ５、Ｒ６及び各Ｒ１０は、それぞれ独立に、Ｈ及びＲ１２から選択され、
各Ｒ１２は、独立に、Ｒ１３、ＮＨＣＯＲ１４、ＮＲ１３Ｒ１４、ＳＯ２Ｒ１３、ＮＨＳＯ２Ｒ１４、ＯＲ１３、アルキル、ＮＯ２、ＣＦ３、アルコキシ、ハロゲンから選択され、
Ｒ１３及びＲ１４は、それぞれ独立に、Ｈ又はＲ１５であり、
各Ｒ１５は、独立に、アルキル、アリール及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ハロゲン、ＯＨ、ＣＯ−アルキル、アラルキル、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、ＣＯ−アリール、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、ＮＨ−アルキル及びＮ（アルキル）２から選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよい。
【００３７】
特に好ましい一実施形態では、Ｒ５、Ｒ６及び各Ｒ１０は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｍｅ、ＮＯ２、ＣＦ３、ＯＭｅ、Ｆ、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピペラジニル及びＮ−ピペリジニルから選択され、前記Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピペラジニル及びＮ−ピペリジニル基は、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯ−Ｍｅ、ＣＯＯＨ、ＣＯ−Ｍｅ、ＣＯ−フェニル、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＮＨ２、ＮＨ−Ｍｅ、ＮＭｅ２及びＣＦ３から選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよい。
【００３８】
好ましい一実施形態では、Ｘ１はＣＲ８であり、Ｘ２はＮＲ７である。
【００３９】
好ましくは、Ｒ７はＨ又はＭｅである。
【００４０】
好ましい一実施形態では、Ｒ１、Ｒ２及び各Ｒ１０は、それぞれ独立に、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、アルキル、ＣＯＮＲ１３Ｒ１４、ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＨＣＯＲ１３ＯＲ１３、Ｒ１３及びＮＲ１３ＳＯ２Ｒ１４から選択される。
【００４１】
より好ましい実施形態では、Ｒ１、Ｒ２及び各Ｒ１０は、それぞれ独立に、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、アルキル、ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＲ１３ＣＯＲ１４及びＯＲ１３から選択され、ここで、Ｒ１３及びＲ１４は、それぞれ独立に、Ｈ又はアルキルである。
【００４２】
さらにより好ましくは、
Ｘ１はＣＲ８であり、
Ｘ２はＮＲ７であり、
Ｒ２及びＲ８は、両方共アルキルであり、
Ｒ１は、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、アルキル、ＣＯＮＲ１３Ｒ１４、ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＨＣＯＲ１３ＯＲ１３、Ｒ１３及びＮＲ１３ＳＯ２Ｒ１４から選択される。
【００４３】
高度に好ましい一実施形態では、Ｒ１はＨ又はＣＮである。
【００４４】
好ましい一実施形態では、Ｚ２はＮであり、Ｚ１及びＺ３は、それぞれ独立に、ＣＲ１０である。
【００４５】
好ましくは、Ｒ５、Ｒ６及び各Ｒ１０は、それぞれ独立に、Ｈ、ハロ、アルキル、アルコキシ及び１個又は複数のアルキル又はアシル置換基で置換されていてもよいヘテロシクロアルキルから選択される。
【００４６】
さらにより好ましくは、Ｒ５、Ｒ６及び各Ｒ１０は、それぞれ独立に、Ｈ、ハロ、アルキル、アルコキシ、Ｎ−ピペラジニル、Ｎ−モルホリニル及びＮ−ピペリジニルから選択され、ここで、前記Ｎ−ピペラジニル、Ｎ−モルホリニル及びＮ−ピペリジニル基は、１個又は複数のアルキル又はアシル置換基で置換されていてもよい。
【００４７】
特に好ましい一実施形態では、
Ｒ５はＨであり、
Ｒ６はＨ又はアルキルであり、
Ｚ１はＣＨであり、
Ｚ２はＮであり、
Ｚ３はＣＲ１０であり、ここで、Ｒ１０は、独立に、Ｈ、アルコキシ、ハロ、Ｎ−ピペラジニルであり、ここで、前記Ｎ−ピペラジニル基は、アシル基で置換されていてもよい。
【００４８】
特に好ましい一実施形態では、前記化合物は、以下
【００４９】
【化４】
2009511556.tif 000006
【００５０】
【表１】
2009511556.tif 000007
【００５１】
及び薬学的に許容できるその塩から選択される。
【００５２】
本発明の第２の態様は、上記定義の通りの式IIの化合物又は薬学的に許容できるその塩に関する。
【００５３】
【化５】
2009511556.tif 000008
II
【００５４】
好ましくは、ＹはＮＲ１１ａであり、さらに好ましくは、ＮＨである。
【００５５】
好ましい一実施形態では、Ｒ３ａ及びＲ４ａは、両方共Ｈである。
【００５６】
好ましい一実施形態では、各Ｒ１５ａは、独立に、エチル、エチル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、ピリジニル、ピロリジニル、ピロリル、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、トリアゾリル、テトラゾリル及びチアゾリルから選択される。
【００５７】
好ましい一実施形態では、各Ｒ１２ａは、独立に、ＯＨ、ＯＭｅ、ＣＯＭｅ、ＣＨＯ、ＣＯ２Ｍｅ、ＣＯＯＨ、ＣＮ、ＣＯＮＨ２、ＮＨＭｅ、ＮＨ２、ＮＭｅ２、ＳＨ、ＳＭｅ、ＳＯＭｅ、ＳＯ２Ｍｅ、ＳＯ２ＮＨＭｅ、ＳＯ２ＮＨ２、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、ＣＦ３、ＮＯ２、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピロリジニル及びＮ−ピペラジニルから選択される。
【００５８】
特に好ましい一実施形態では、
Ｒ５ａ、Ｒ６ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａは、それぞれ独立に、Ｈ及び（ＣＨ２）ｍＲ１２ａから選択され、
各Ｒ１２ａは、独立に、Ｒ１３ａ、ＮＲ１３ａＣＯＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＳＯ２Ｒ１３ａ、ＮＲ１３ａＳＯ２Ｒ１４ａ、ＯＲ１３ａ、アルキル、ＮＯ２、ＣＦ３、アルコキシ、ハロゲン及びＳＯ２ＮＲ１３ａＲ１４ａから選択され、
Ｒ１３ａ及びＲ１４ａは、それぞれ独立に、Ｈ又は（ＣＨ２）ｎＲ１５ａであり、
各Ｒ１５ａは、独立に、アルキル、ヘテロアリール、アリール及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯ−アルキル、ＣＯＯＨ、ＣＯ−アルキル、アラルキル、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、ＣＯ−アリール、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）２及びＣＦ３から選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよい。
【００５９】
より好ましくは、
Ｒ５ａ、Ｒ６ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａは、それぞれ独立に、Ｈ及びＲ１２ａから選択され、
各Ｒ１２ａは、独立に、Ｒ１３ａ、ＮＨＣＯＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＳＯ２Ｒ１３ａ、ＮＨＳＯ２Ｒ１４ａ、ＯＲ１３ａ、アルキル、ＮＯ２、ＣＦ３、アルコキシ、ハロゲン及びＳＯ２ＮＲ１３ａＲ１４ａから選択され、
Ｒ１３ａ及びＲ１４ａは、それぞれ独立に、Ｈ又はＲ１５ａであり、
各Ｒ１５ａは、独立に、アルキル、アリール及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ハロゲン、ＯＨ、ＣＯ−アルキル、アラルキル、ＳＯ２−アルキル、ＳＯ２−アリール、ＣＯ−アリール、アルキル、アルコキシ、ＮＨ２、ＮＨ−アルキル及びＮ（アルキル）２から選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよい。
【００６０】
さらにより好ましくは、Ｒ５ａ、Ｒ６ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａは、それぞれ独立に、Ｈ、Ｍｅ、ＮＯ２、ＣＦ３、ＯＭｅ、Ｆ、ＳＯ２ＮＨ−アルキル、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピペラジニル及びＮ−ピペリジニルから選択され、前記アルキル、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−ピペラジニル及びＮ−ピペリジニル基は、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯ−Ｍｅ、ＣＯＯＨ、ＣＯ−Ｍｅ、ＣＯ−フェニル、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＮＨ２、ＮＨ−Ｍｅ、ＮＭｅ２及びＣＦ３から選択される１個又は複数の置換基で置換されていてもよい。
【００６１】
好ましい一実施形態では、Ｘ１ａはＣＲ８ａであり、Ｘ２ａはＮＲ７ａである。
【００６２】
好ましい一実施形態では、Ｒ７ａはＨ又はＭｅである。
【００６３】
好ましい一実施形態では、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ及びＲ８ａは、それぞれ独立に、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、アルキル、ＣＯＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＨＣＯＲ１３ａＯＲ１３ａ、Ｒ１３ａ及びＮＲ１３ａＳＯ２Ｒ１４ａから選択される。
【００６４】
さらに好ましい実施形態では、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ及びＲ８ａは、それぞれ独立に、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、アルキル、ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＣＯＲ１４ａ及びＯＲ１３ａから選択され、ここで、Ｒ１３ａ及びＲ１４ａは、それぞれ独立に、Ｈ又はアルキルである。
【００６５】
特に好ましい一実施形態では、
Ｘ１ａはＣＲ８ａであり、
Ｘ２ａはＮＲ７ａであり、
Ｒ２ａはアルキルであり、
Ｒ８ａはアルキル又はアリールであり、
Ｒ１ａは、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＯＯＲ１３ａアルキル、ＣＯＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＲ１３ａＲ１４ａ、ＮＨＣＯＲ１３ａＯＲ１３ａ、Ｒ１３ａ及びＮＲ１３ａＳＯ２Ｒ１４ａから選択される。
【００６６】
さらにより好ましくは、Ｒ２ａ及びＲ８ａは、両方共メチルである。
【００６７】
好ましい一実施形態では、Ｒ１ａは、Ｈ、ＣＮ、ＣＯ２（ＣＨ２）２ＯＭｅ又はＣＯ２Ｅｔである。
【００６８】
好ましい一実施形態では、Ｒ５ａ、Ｒ６ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａは、それぞれ独立に、Ｈ、１個又は複数のアルキル、アラルキル又はアシル置換基で置換されていてもよいハロ、ＳＯ２ＮＲ１３ａＲ１４ａ、アルコキシ及びヘテロシクロアルキルから選択される。
【００６９】
より好ましい実施形態では、Ｒ５ａ、Ｒ６ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａは、それぞれ独立に、Ｈ、ハロ、ＳＯ２ＮＲ１３ａＲ１４ａ、アルコキシ、Ｎ−ピペラジニル、Ｎ−モルホリニル及びＮ−ピペリジニルから選択され、ここで、前記Ｎ−ピペラジニル、Ｎ−モルホリニル及びＮ−ピペリジニル基は、１個又は複数のアルキル、アラルキル又はアシル置換基で置換されていてもよく、Ｒ１３ａ及びＲ１４ａは、それぞれ独立に、１個又は複数のＯＨ又はアルコキシ基で置換されていてもよいアルキル基である。
【００７０】
さらに好ましい実施形態では、Ｒ５ａ、Ｒ６ａ、Ｒ１６ａ、Ｒ１７ａ及びＲ１８ａは、それぞれ独立に、Ｈ、ハロ、アルコキシ、ＳＯ２ＮＨＥｔ、ＳＯ２ＮＨｉＰｒ、ＳＯ２ＮＨＣ（Ｍｅ）２ＣＨ２ＯＨ、ＳＯ２ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＯＭｅ、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−Ａｃ−ピペラジニル、Ｎ−Ｂｚ−ピペラジニル及びビス−メチル−モルホリニルから選択される。
【００７１】
高度に好ましい一実施形態では、
Ｒ５ａ及びＲ１８ａはＨであり、
Ｒ６ａはＨ又はハロであり、
Ｒ１６ａ及びＲ１７ａは、それぞれ独立に、Ｈ、ハロ、アルコキシ、ＳＯ２ＮＨＥｔ、ＳＯ２ＮＨｉＰｒ、ＳＯ２ＮＨＣ（Ｍｅ）２ＣＨ２ＯＨ、ＳＯ２ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＯＭｅ、Ｎ−モルホリニル、Ｎ−Ａｃ−ピペラジニル、Ｎ−Ｂｚ−ピペラジニル及びビス−メチル−モルホリニルから選択される。
【００７２】
特に好ましい実施形態では、式IIの化合物は、以下
【００７３】
【化６】
2009511556.tif 000009
【００７４】
【表２】
2009511556.tif 000010
【００７５】
及び薬学的に許容できるその塩から選択される。
【００７６】
本発明のさらなる態様は、以下から選択される化合物
【００７７】
【化７】
2009511556.tif 000011
【００７８】
【表３】
2009511556.tif 000012
【００７９】
及び薬学的に許容できるその塩に関する。
【００８０】
好ましい一実施形態では、本発明の化合物は、後述の実施例のセクションで記載のアッセイで測定して、１種又は複数のプロテインキナーゼを阻害することが可能である。好ましくは、本発明の化合物は、１０μＭ未満、さらに好ましくは５μＭ未満、さらにより好ましくは１μＭ未満又は０．５μＭ未満、さらにより好ましくは０．１μＭ未満のＫｉ値を示す。さらにより好ましくは、化合物は、０．０１μＭ未満、さらにより好ましくは０．００５μＭ未満のＫｉ値を示す。
【００８１】
本発明の高度に好ましい一実施形態では、化合物は、１種又は複数のその他のプロテインキナーゼよりもＧＳＫ３を優先的に阻害することが可能である。したがって、化合物は、１種又は複数のその他のプロテインキナーゼよりもＧＳＫ３を選択的に阻害することが可能である。本明細書で使用する場合、用語「選択的に」は、１種又は複数のその他のプロテインキナーゼよりもＧＳＫに対して選択的な化合物を指す。好ましくは、１種又は複数のその他のプロテインキナーゼを超えるＧＳＫの選択比は、約２対１超、さらに好ましくは約５対１又は約１０対１超、さらにより好ましくは約１００対１超である。選択比は、当業者が決定してよい。
【００８２】
高度に好ましい一実施形態では、化合物は、１種又は複数のその他のプロテインキナーゼよりもオーロラＡを優先的に阻害することが可能である。したがって、化合物は、１種又は複数のその他のプロテインキナーゼよりもオーロラＡを選択的に阻害することが可能である。本明細書で使用する場合、用語「選択的に」は、１種又は複数のその他のプロテインキナーゼよりもオーロラＡに対して選択的な化合物を指す。好ましくは、１種又は複数のその他のプロテインキナーゼを超えるオーロラＡの選択比は、約２対１超、さらに好ましくは約５対１又は約１０対１超、さらにより好ましくは約１００対１超である。選択比は、当業者が決定してよい。
【００８３】
治療的使用
本発明の化合物は、抗増殖活性を有することが見出され、したがって、癌、白血病などの増殖性障害、並びに乾癬及び再狭窄など、非制御の細胞増殖に関連するその他の障害の治療における使用を有すると考えられる。
【００８４】
したがって、本発明の一態様は、増殖性障害を治療するための医薬品の調製における、本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩の使用に関する。
【００８５】
本明細書で使用する場合、成句「医薬品の調製」は、１種又は複数の上記化合物を、さらなる抗ウイルス剤及び／又は抗増殖剤のためのスクリーニングプログラムにおいて、又はそのような医薬品の製造の任意の段階において使用することに加えて、医薬品として直接使用することを含む。
【００８６】
本明細書で定義する場合、本発明の範囲内の抗増殖作用は、例えば、細胞系ＡＧＳ、Ｈ１２９９若しくはＳＪＳＡ−１の任意のものを使用する、又は適切なアッセイにおけるＨＤＭ２とｐ５３との間の相互作用の阻害を示すことによるインビトロ全細胞アッセイで細胞増殖を阻害する能力によって示すことができる。これらのアッセイは、それらの実行方法も含めて、後述の実施例でより詳細に記載する。これらのアッセイを使用して、化合物が本発明の状況で抗増殖性であるかを決定することができる。
【００８７】
したがって、好ましい一実施形態は、増殖性障害の治療における本発明の１種又は複数の化合物の使用に関する。好ましくは、増殖性障害は、癌又は白血病である。増殖性障害という用語を本発明では、細胞周期の制御を必要とする任意の障害、例えば、再狭窄及び心筋症などの心血管障害、糸球体腎炎及び関節リウマチなどの自己免疫障害、乾癬などの皮膚障害、マラリア、気腫及び脱毛症などの抗炎症性、抗真菌性、抗寄生障害を含む幅広い意味で使用する。これらの障害において、本発明の化合物は、アポトーシスを誘発し得るか、必要により所望の細胞内の静止を維持し得る。
【００８８】
好ましい一実施形態では、増殖性障害は癌又は白血病である。
【００８９】
別の好ましい実施形態では、増殖性障害は、糸球体腎炎、関節リウマチ、乾癬又は慢性閉塞性肺疾患である。
【００９０】
本発明の化合物は、細胞周期のステップ又は段階のいずれかを、例えば、核膜の形成、細胞周期の休止期（Ｇ０）からの脱出、Ｇ１進行、染色体脱凝縮、核膜破壊、ＳＴＡＲＴ、ＤＮＡ複製の開始、ＤＮＡ複製の進行、ＤＮＡ複製の終止、中心体重複、Ｇ２進行、有糸分裂又は核分裂の活性、染色体凝縮、中心体分離、微小管核形成、紡錘体形成及び機能、微小管モータータンパク質との相互作用、染色分体分裂及び分離、有糸分裂機能の不活化、収縮環の形成及び細胞質分裂機能を阻害し得る。特に、本発明の化合物は、染色質結合、複製複合体の形成、複製許諾、リン酸化又は他の二次変更活性、タンパク質分解、微小環結合、アクチン結合、セプチン結合、微小管組織化中枢核形成活性及び細胞周期シグナリング経路のコンポーネントとの結合などの一定の遺伝子機能に影響を及ぼし得る。
【００９１】
一実施形態では、本発明の化合物は、少なくとも１種のＣＤＫ酵素を阻害するのに十分な量で投与される。ＣＤＫ活性を決定するアッセイは、後述の実施例でより詳細に記載する。
【００９２】
本発明のさらなる態様は、ＣＤＫ依存性障害を治療する方法に関し、前記方法は、それを必要とする対象に、上記定義の通りの本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩を、ＣＤＫを阻害するのに十分な量で投与することを含む．
【００９３】
別の態様は、本発明の化合物の抗有糸分裂剤としての使用に関する。
【００９４】
本発明の別の態様は、本発明の化合物の抗ウイルス剤としての使用に関する。
【００９５】
したがって、本発明の別の態様は、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）、単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）、ヒト免疫不全ウイルス１型（ＨＩＶ−１）及び水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）などのウイルス障害を治療するための医薬品の調製における本発明の化合物の使用に関する。
【００９６】
本発明のより好ましい実施形態では、本発明の化合物は、ウイルス複製に関与する宿主細胞ＣＤＫ、即ち、ＣＤＫ２、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８及びＣＤＫ９の１種又は複数を阻害するのに十分な量で投与される［Wang D, De la Fuente C, Deng L, Wang L, Zilberman I, Eadie C, Healey M, Stein D, Denny T, Harrison LE, Meijer L, Kashanchi F., Inhibition of human immunodeficiency virus type 1 transcription by chemical cyclin-dependent kinase inhibitors, J. Virol. 2001; 75: 7266-7279］。
【００９７】
本明細書で定義する場合、本発明の範囲内での抗ウイルス効果は、ＣＤＫ２、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８又はＣＤＫ９を阻害する能力によって証明することができる。
【００９８】
特に好ましい実施形態では、本発明は、ＣＤＫ依存性又は感受性であるウイルス障害の治療における本発明の１種又は複数の化合物の使用に関する。ＣＤＫ依存性障害は、正常を上回るレベルの１種又は複数のＣＤＫ酵素を随伴する。このような障害は好ましくは、異常なレベルのＣＤＫ２、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８及び／又はＣＤＫ９の活性を随伴する。ＣＤＫ感受性障害は、ＣＤＫレベルの異常が主な原因ではないが、それが一次代謝異常のダウンストリームである障害である。このようなシナリオにおいては、ＣＤＫ２、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８及び／又はＣＤＫ９は、感受性代謝経路の一部と見なすことができるので、ＣＤＫ阻害剤は、このような障害の治療において活性であり得る。
【００９９】
別の態様は、糖尿病を治療するための医薬品の調製における、本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩の使用に関する。
【０１００】
特に好ましい実施形態では、糖尿病はII型糖尿病である。
【０１０１】
ＧＳＫ３は、グリコーゲン合成酵素（ＧＳ）をリン酸化するいくつかのプロテインキナーゼのうちの１種である。骨格筋でのインスリンによるグリコーゲン合成の刺激は、ＧＳの脱リン酸化及び活性をもたらす。そこで、ＧＳに対するＧＳＫ３の作用は、ＧＳの失活を、したがって筋肉内でのグルコースのグリコーゲンへの変換の抑制をもたらす。
【０１０２】
II型糖尿病（インスリン非依存性糖尿病）は、多因子病である。高血糖は、肝臓、筋肉及び他の組織でのインスリン耐性に起因し、インスリンの分泌障害と結びついている。骨格筋は、インスリン刺激によるグルコース取込みのための主な部位であり、そこで、グルコースは、循環から除去されるか、グリコーゲンに変換される。筋グリコーゲン沈着は、グルコースホメオスタシスでの主な決定因子であり、II型糖尿病は、不完全な筋グリコーゲン貯蔵を有する。ＧＳＫ３活性の上昇が、II型糖尿病では重要であるという証拠がある［Chen, Y.H.; Hansen, L.; Chen, M.X.; Bjorbaek, C.; Vestergaard, H.; Hansen, T.; Cohen, P.T.; Pedersen, O. Diabetes, 1994, 43, 1234］。さらに、ＧＳＫ３は、II型糖尿病の筋細胞で過剰発現され、骨格筋ＧＳＫ３活性とインスリン作用との間に逆相関が存在することが証明されている［Nikoulina, S.E.; Ciaraldi, T.P.; Mudaliar, S.; Mohideen, P.; Carter, L.; Henry, R.R. Diabetes, 2000, 49, 263］。
【０１０３】
したがってＧＳＫ３阻害は、糖尿病、特にII型糖尿病及び糖尿病性ニューロパシーの治療において治療的に重要である。
【０１０４】
ＧＳＫ３は、ＧＳ以外の多くの基質をリン酸化することが知られており、したがって、多様な生化学経路の調節に関与することを特記する。例えば、ＧＳＫは、中枢及び末梢神経系で高度に発現される。
【０１０５】
したがって、別の態様は、中枢神経系障害、例えば、神経変性障害を治療するための医薬品の調製における本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩の使用に関する。
【０１０６】
好ましい一実施形態では、神経変性障害はニューロンアポトーシスである。
【０１０７】
別の好ましい実施形態では、中枢神経系障害はアルツハイマー病である。
【０１０８】
タウは、アルツハイマー病の病因に関与しているＧＳＫ−３基質である。健康な神経細胞では、タウは、チューブリンと集合して（co-assemble）、微小管になる。しかし、アルツハイマー病では、タウは、フィラメントの大きなもつれを形成し、これが神経細胞での微小管構造を中断させるので、栄養素の輸送を、さらに、ニューロンメッセージの転送を損なう。
【０１０９】
理論に結び付けられることは望まないが、ＧＳＫ３阻害剤は、アルツハイマー病並びに進行性核上性麻痺、皮質基底変性及びピック病などのいくつかの他の神経変性疾患の不変形態である微小管付属タンパク質タウの異常な高リン酸化を予防及び／又は逆転させ得ると考えられる。タウ遺伝子での突然変異は、前頭側頭骨認知症の遺伝形態を惹起し、さらに、神経変性プロセスのためのタウタンパク質機能障害の関連性を強調する［Goedert, M. Curr. Opin. Gen. Dev., 2001, 11, 343］。
【０１１０】
別の態様は、双極性障害を治療するための医薬品の調製における本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩の使用に関する。
【０１１１】
さらに別の態様は、卒中を治療するための医薬品の調製における本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩の使用に関する。
【０１１２】
ニューロンアポトーシスを低減することは、頭部外傷、卒中、癲癇及び運動ニューロン疾患の場合の重要な治療目的である［Mattson, M.P. Nat. Rev. Mol. Cell. Biol., 2000, 1, 120］。したがって、ニューロン細胞での前アポトーシス因子としてのＧＳＫ３は、このプロテインキナーゼを、これらの疾患を治療するための阻害剤を設計するための魅力的な治療ターゲットにしている。
【０１１３】
さらに別の態様は、脱毛症を治療するための医薬品の調製における本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩の使用に関する。
【０１１４】
髪の成長は、Ｗｎｔシグナリング経路、特にＷｎｔ−３により制御される。皮膚の組織培養モデル系では、β−カテニンの非分解性突然変異体の発現は、比較的高い増殖能を有する推測上の幹細胞の集合の劇的な増大をもたらす［Zhu, A.J.; Watt, F.M. Development, 1999, 126, 2285］。この幹細胞集団は、比較的高いレベルの非カドヘリン随伴β−カテニンを発現し［DasGupta, R.; Fuchs, E. Development, 1999, 126, 4557］、これは、その高い増殖能に寄与することがある。さらに、皮膚で短縮されたβ−カテニンを過剰発現するトランスジェニックマウスは、胚形成の間にのみ通常は確立されるだけのデノボ毛包形態形成を受ける。したがって、ＧＳＫ３阻害剤の異所性適用は、はげの治療で、及び化学療法により惹起された脱毛症の後に髪を再生させる際に治療的に有効であり得る。
【０１１５】
本発明のさらなる態様は、ＧＳＫ３−依存性障害を治療する方法に関し、前記方法は、それを必要とする対象に、上記定義の通りの本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩を、ＧＳＫ３を阻害するのに十分な量で投与することを含む。
【０１１６】
好ましくは、本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩は、ＧＳＫ３βを阻害するのに十分な量で投与される。
【０１１７】
本発明の一実施形態では、本発明の化合物は、少なくとも１種のＰＬＫ酵素を阻害するのに十分な量で投与される。
【０１１８】
本発明のさらなる態様は、ＰＬＫ−依存性障害を治療する方法に関し、前記方法は、それを必要とする対象に、上記定義の通りの本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩を、ＰＬＫを阻害するのに十分な量で投与することを含む。
【０１１９】
ポロ様キナーゼ（ＰＬＫ）は、セリン／トレオニンプロテインキナーゼのファミリーを構成している。ポロ位置での有糸分裂ドロソフィラメラノガスター突然変異体は、紡錘体異常を示し［Sunkel et al., J. Cell Sci., 1988, 89, 25］、ポロは、有糸分裂キナーゼをコードすることが判明している［Llamazares et al., Genes Dev., 1991, 5, 2153］。ヒトでは、３種のよく類似しているＰＬＫが存在する［Glover et al., Genes Dev., 1998, 12, 3777］。これらは、高度に相同しているアミノ末端触媒キナーゼドメインを含有し、そのカルボキシル末端は、２個又は３個の保存領域、ポロボックスを含む。これらポロボックスの機能は、完全には理解されていないが、これらは、細胞レベル下区画へのＰＬＫのターゲッティング［Lee et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998, 95, 9301; Leung et al., Nat. Struct. Biol., 2002, 9, 719］、他のタンパク質との相互作用の仲介に［Kauselmann et al., EMBO J., 1999, 18, 5528］関与しているか、自己制御ドメインの一部を構成し得る［Nigg, Curr. Opin. Cell Biol., 1998, 10, 776］。さらに、ポロボックス依存性ＰＬＫ１活性は、正確な中期／後期遷移及び細胞質分裂を必要とする［Yuan et al., Cancer Res., 2002, 62, 4186; Seong et al., J. Biol. Chem., 2002, 277, 32282］。
【０１２０】
研究により、ヒトＰＬＫは、有糸分裂のいくつかの基本的な態様を調節していることが判明している［Lane et al., J. Cell. Biol., 1996, 135, 1701; Cogswell et al., Cell Growth Differ., 2000, 11, 615］。特に、ＰＬＫ１活性は、後期Ｇ２／前期の初期で中心体の機能成熟及び双極性紡錘体の後続の確立に必要であると考えられている。小さな妨害ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）技術を介しての細胞ＰＬＫ１の欠失によっても、このタンパク質が複数の有糸分裂プロセス及び細胞質分裂の完了に必要であることが確認されている［Liu et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2002, 99, 8672］。
【０１２１】
本発明のより好ましい実施形態では、本発明の化合物は、ＰＬＫ１を阻害するのに十分な量で投与される。
【０１２２】
３種のヒトＰＬＫのうち、ＰＬＫ１が最もよく同定されている；これは、有糸分裂の開始を含むいくつかの細胞分裂周期効果を［Toyoshima-Morimoto et al., Nature, 2001, 410, 215; Roshak et al., Cell. Signalling, 2000, 12, 405］、ＤＮＡ損傷チェックポイント活性を［Smits et al., Nat. Cell Biol., 2000, 2, 672; van Vugt et al., J. Biol. Chem., 2001, 276, 41656］、後期促進複合体の調節を［Sumara et al., Mol. Cell, 2002, 9, 515; Golan et al., J. Biol. Chem., 2002, 277, 15552; Kotani et al., Mol. Cell, 1998, 1, 371］、プロテアソームのリン酸化を［Feng et al., Cell Growth Differ., 2001, 12, 29］、中心体重複及び成熟を［Dai et al., Oncogene, 2002, 21, 6195］調節する。
【０１２３】
特に、有糸分裂の開始には、Ｍ相促進因子（ＭＰＦ）、サイクリン依存性キナーゼＣＤＫ１及びＢ型サイクリンとの複合体の活性が必要である［Nurse, Nature, 1990, 344, 503］。後者は、細胞周期のＳ及びＧ２相の間に蓄積され、ＷＥＥ１、ＭＩＫ１及びＭＹＴ１キナーゼによるＭＰＦ複合体の阻害リン酸化を促進する。Ｇ２相の終了時には、両特異性ホスファターゼＣＤＣ２５Ｃによる対応する脱リン酸化が、ＭＰＦの活性を引き起こす［Nigg, Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 2001, 2, 21］。界面相では、サイクリンＢは、細胞質に局在し［Hagting et al., EMBO J., 1998, 17, 4127］、次いでこれは、前期の間にリン酸化されるが、この事象は、核転座を誘発する［Hagting et al., Curr. Biol., 1999, 9, 680; Yang et al., J. Biol. Chem., 2001, 276, 3604］。前期の間の活性ＭＰＦの核蓄積は、Ｍ相事象を開始するために重要であると考えられる［Takizawa et al., Curr. Opin. Cell Biol., 2000, 12, 658］。しかし、ＣＤＣ２５Ｃにより妨害されない限り、核ＭＰＦは、ＷＥＥ１によって不活性なままである。間期の間は細胞質に局在化されているホスファターゼＣＤＣ２５Ｃ自体も、前期では核中に蓄積している［Seki et al., Mol. Biol. Cell, 1992, 3, 1373; Heald et al., Cell, 1993, 74, 463; Dalal et al., Mol. Cell. Biol., 1999, 19, 4465］。サイクリンＢ［Toyoshima-Morimoto et al., Nature, 2001, 410, 215］及びＣＤＣ２５Ｃ［Toyoshima-Morimoto et al., EMBO Rep., 2002, 3, 341］の両方の核侵入は、ＰＬＫ１によるリン酸化を介して促進される［Roshak et al., Cell. Signalling, 2000, 12, 405］。このキナーゼは、Ｍ相開始の重要な調節子である。
【０１２４】
特に好ましい一実施形態では、本発明の化合物は、ＰＬＫ１のＡＴＰ−拮抗性阻害剤である。
【０１２５】
本文脈では、ＡＴＰ拮抗作用とは、ＰＬＫ触媒作用、即ち、ＡＴＰ結合を損なうか、破壊するように酵素の活性部位で可逆的又は不可逆的に結合することにより、ＡＴＰから高分子ＰＬＫ基質へのリン転移を低減又は阻止する阻害剤化合物の能力を指す。
【０１２６】
別の好ましい実施形態では、本発明の化合物は、ＰＬＫ２及び／又はＰＬＫ３を阻害するのに十分な量で投与される。
【０１２７】
哺乳動物ＰＬＫ２（ＳＮＫとしても知られている）及びＰＬＫ３（ＰＲＫ及びＦＮＫとしても知られている）は元々、直接の初期遺伝子産物であることが判明していた。ＰＬＫ３キナーゼ活性は、後期Ｓ及びＧ２相の間にピークに達することが判明している。これは、ＤＮＡ損傷チェックポイント活性及び深刻な酸化応力の間にも活性化する。さらにＰＬＫ３は、細胞内において微小管力学及び中心体機能の調節で重要な役割を果たし、制御を逸脱したＰＬＫ３発現は、細胞周期の停止及びアポトーシスをもたらす［Wang et al., Mol. Cell. Biol., 2002, 22, 3450］。ＰＬＫ２は、３種のＰＬＫのうちで最もよく理解されていない相同体である。ＰＬＫ２及びＰＬＫ３は両方とも、付加的で重要な分裂終了機能を有している可能性がある［Kauselmann et al., EMBO J., 1999, 18, 5528］。
【０１２８】
別の好ましい実施形態では、本発明の化合物は、少なくとも１種のオーロラキナーゼを阻害するのに十分な量で投与される。好ましくは、オーロラキナーゼは、オーロラキナーゼＡ、オーロラキナーゼＢ又はオーロラキナーゼＣである。
【０１２９】
本発明のさらなる態様は、オーロラキナーゼ−依存性障害を治療する方法に関し、前記方法は、それを必要とする対象に、上記定義の通りの本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩を、オーロラキナーゼを阻害するのに十分な量で投与することを含む。
【０１３０】
別の好ましい実施形態では、本発明の化合物は、少なくとも１種のチロシンキナーゼを阻害するのに十分な量で投与される。
【０１３１】
好ましくは、チロシンキナーゼは、エイブルソンチロシンキナーゼ（ＢＣＲ−ＡＢＬ）、ＦＭＳ関連チロシンキナーゼ３（ＦＬＴ３）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）受容体チロシンキナーゼ又は血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）受容体チロシンキナーゼである。
【０１３２】
本発明のさらなる態様は、チロシンキナーゼ−依存性障害を治療する方法に関し、前記方法は、それを必要とする対象に、上記定義の通りの本発明の化合物又は薬学的に許容できるその塩を、チロシンキナーゼを阻害するのに十分な量で投与することを含む。
【０１３３】
別の態様は、プロテインキナーゼを阻害するための本発明の化合物の使用に関する。
【０１３４】
本発明のさらなる態様は、プロテインキナーゼを阻害する方法に関し、前記方法は、前記プロテインキナーゼを本発明の化合物と接触させることを含む。
【０１３５】
好ましくは、プロテインキナーゼは、ＣＤＫ、ＧＳＫ、オーロラキナーゼ、ＰＬＫ及びチロシンキナーゼから選択される。
【０１３６】
この態様の好ましい実施形態では、プロテインキナーゼは、サイクリン依存性キナーゼである。好ましくは、プロテインキナーゼは、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ３、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８又はＣＤＫ９、さらに好ましくはＣＤＫ２である。
【０１３７】
本発明の化合物はまた、種々の眼科疾患を治療するための医薬品の調製に有用である。好ましくは、眼科疾患は、緑内障、浸出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）又は増殖性糖尿病網膜症（ＰＤＲ）である。
【０１３８】
緑内障として言及される病状は、視神経への不可逆的損傷による視覚機能の永久的な喪失を特徴とする。緑内障のいくつかの形態学的又は機能的に異なるタイプは、高い眼圧（ＩＯＰ）を典型的に特徴とし、これは、この疾患の病理学的過程に原因として関わると考えられる。高眼圧症は、眼圧が高い状態であるが、視覚機能の明らかな喪失は生じておらず、そのような患者は、緑内障と関わる視力喪失を最終的に発症する高いリスクを有すると考えられる。ＧＳＫ−３阻害剤は、緑内障などの眼疾患の治療に有用である。Ｗｎｔシグナリング経路のコンポーネント、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ関連タンパク質（ＦＲＰ）は、緑内障性小柱網細胞系の多くで示差的に発現され、通常のシグナリングカスケードを破壊して流出抵抗を増大させ、高いＩＯＰの発現を生じさせ得ることが示されている。Hellberg M.R et al（ＵＳ２００４０１８６１５９）は、ＧＳＫ−３とＷｎｔシグナリング経路のコンポーネントとの相互作用を介して、薬理作用のある物質によってＧＳＫ−３を阻害することにより、増加量のＦＲＰにより生じたＷｎｔシグナリング経路のＦＲＰ仲介拮抗作用を回避することができ、緑内障を有する個体におけるＦＲＰ産生の増大に起因する流出抵抗の増大を妨げることができることを示している。
【０１３９】
ＣＴＧＦは、主にコラーゲンＩ及びフィブロネクチンの沈着の増大を介して、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の産生を増大させることが知られている分泌サイトカインである。ＣＴＧＦの過剰発現は、ＥＣＭコンポーネントの過剰蓄積がある強皮症、線維増殖性疾患、瘢痕などの状態の主要な原因因子として以前に関係付けられている。小柱網（ＴＭ）の領域における細胞外マトリックス物質の過剰蓄積はまた、緑内障の多くの形態の顕著な特徴であり、そのような増大は、水性流出に対する抵抗の増大、したがって高眼圧につながると考えられる。Fleenor D L et al（ＵＳ２００５０２３４０７５）は、ＧＳＫ−３阻害剤及びＣＤＫ阻害剤がヒトＴＭ細胞における基礎的な及びＴＧＦβ２誘発ＣＴＧＦ発現の両方を阻害できることを示しており、したがって、本発明の化合物は緑内障の治療に有用である。
【０１４０】
本発明の化合物はまた、ＡＭＤ及びＰＤＲの治療に有用である。浸出型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）及び増殖性糖尿病網膜症（ＰＤＲ）は、先進国の後天性失明の主要原因であり、眼の病的な後部血管新生を特徴とする。滲出性ＡＭＤ及びＰＤＲの両方の誘因はまだ分かっていないが、種々の血管新生促進性増殖因子の精巧な産生は、共通の刺激と思われる。血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ又はＦＧＦ−２）、インスリン様増殖因子１（ＩＧＦ−１）、アンジオポエチンなどの可溶性増殖因子は、病理学的眼血管形成を有する患者から取り出した組織及び液体に見出されている。これらの増殖因子及びその他の細胞内酵素、例えばオーロラキナーゼの活性の阻害又は遮断は、抗血管形成効果を有することが示されている。したがって、本発明の化合物は、血管新生を特徴とする眼科疾患の治療に有用である。
【０１４１】
医薬組成物
本発明のさらなる態様は、１種又は複数の薬学的に許容できる希釈剤、賦形剤又は担体と混合された本発明の化合物を含む医薬組成物に関する。本発明の化合物（薬学的に許容できる塩、エステル及び薬学的に許容できる溶媒和物を含む）を単独で投与することもできるが、これらを通常は、特にはヒトを治療するための薬学的担体、賦形剤又は希釈剤と混合して投与する。医薬組成物は、ヒト医学及び獣医学におけるヒト又は動物用途のためであってよい。
【０１４２】
本明細書に記載の様々異なる形態の医薬組成物のためのこのような適切な賦形剤の例は、「Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd Edition、(1994)、Edited by A Wade and PJ Wellerに見ることができる。
【０１４３】
治療的使用のための許容できる担体又は希釈剤は、薬剤分野ではよく知られており、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co.（A.R.Gennaro edit.1985）に記載されている。
【０１４４】
適切な担体の例には、ラクトース、デンプン、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、ソルビトールなどが含まれる。適切な希釈剤の例には、エタノール、グリセロール及び水が含まれる。
【０１４５】
薬学的担体、賦形剤又は希釈剤の選択は、投与の所定の経路及び標準的な薬剤学的実施を考慮して選択することができる。薬剤組成物は、担体、賦形剤又は希釈剤として、又はそれらに加えて、適切な結合剤、滑剤、懸濁剤、コーティング剤、可溶化剤を含有していてもよい。
【０１４６】
適切な結合剤の例には、デンプン、ゼラチン、グルコース、無水ラクトース、フリーフローラクトース、βラクトースなどの天然の糖、コーン甘味剤、アラビアゴム、トラガカントなどの天然及び合成ゴム又はアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース及びポリエチレングルコールが含まれる。
【０１４７】
適切な滑剤の例には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが含まれる。
【０１４８】
防腐剤、安定剤、染料、さらに着香剤が、医薬組成物中に加えられていてもよい。防腐剤の例には、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸及びｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルが含まれる。酸化防止剤及び懸濁剤を使用することもできる。
【０１４９】
塩／エステル
本発明の化合物は、塩又はエステルとして、特に薬学的に許容できる塩又はエステルとして存在できる。
【０１５０】
本発明の化合物の薬学的に許容できる塩には、適切なその酸付加塩又は塩基付加塩が含まれる。適切な薬学的塩の概観は、Berge et al, J Pharm Sci, 66, 1-19 (1977)で見ることができる。例えば、鉱酸、例えば、硫酸、リン酸又はハロゲン化水素酸などの強無機酸と；酢酸などの、１から４個の炭素原子を有する非置換又は置換（例えばハロゲンで）のアルカンカルボン酸などの強有機カルボン酸と；飽和又は不飽和ジカルボン酸、例えば、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸又はテトラフタル酸と；ヒドロキシカルボン酸、例えば、アスコルビン酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸又はクエン酸と；アミノ酸、例えば、アスパラギン酸又はグルタミン酸と；安息香酸と；又はメタン−又はｐ−トルエンスルホン酸などの非置換又は置換（例えばハロゲンで）の（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル−又はアリールスルホン酸などの有機スルホン酸と、塩を形成する。
【０１５１】
エステル化される官能基に応じて、有機酸又はアルコール／水酸化物を使用して、エステルを形成する。有機酸には、酢酸などの、１から１２個の炭素原子を有する非置換又は置換（例えばハロゲンで）のアルカンカルボン酸などのカルボン酸と；飽和又は不飽和ジカルボン酸、例えば、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸又はテトラフタル酸と；ヒドロキシカルボン酸、例えば、アスコルビン酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸又はクエン酸と；アミノ酸、例えば、アスパラギン酸又はグルタミン酸と；安息香酸と；又はメタン−又はｐ−トルエンスルホン酸などの非置換又は置換（例えばハロゲンで）の（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル−又はアリールスルホン酸などの有機スルホン酸が含まれる。適切な水酸化物には、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化アルミニウムなどの無機水酸化物が含まれる。アルコールには、非置換又は置換（例えばハロゲンで）されていてもよい１〜１２個の炭素原子を有するアルカンアルコールが含まれる。
【０１５２】
鏡像異性体／互変異性体
前記で検討した本発明の全ての態様で、本発明は、適切な場合には、本発明の化合物の鏡像異性体及び互変異性体全てを含む。当業者であれば、光学特性（１種又は複数のキラル炭素原子）又は互変異性特性を有する化合物を認識するであろう。対応する鏡像異性体及び／又は互変異性体は、当技術分野で知られた方法により単離／調製することができる。
【０１５３】
立体異性体及び幾何異性体
本発明の化合物のうちの数種は、立体異性体及び／又は幾何異性体として存在することがあり、例えば、これらは、１個又は複数の不斉及び／又は幾何中心を有することがあるので、２種又はそれ以上の立体異性形態及び／又は幾何異性形態で存在し得る。本発明は、これら阻害剤の個々の立体異性体及び幾何異性体並びにこれらの混合物の全ての使用を考慮している。請求項中で使用されている用語は、前記形態が適切な機能的活性（同じ程度である必要はないが）を残しているならば、これらの形態を包含する。
【０１５４】
本発明はさらに、薬剤又はその薬学的に許容できる塩の適切な同位体変異全てを含む。本発明の薬剤又はその薬学的に許容できる塩の同位体変異は、少なくとも１個の原子が、同じ原子番号を有するが、自然に通常見られる原子質量とは異なる原子質量を有する原子によって置換されているものと定義される。本薬剤及びその薬学的に許容できる塩に導入することができる同位体の例には、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ及び３６Ｃｌなどの水素、炭素、窒素、酸素、リン、イオウ、フッ素及び塩素の同位体が含まれる。本薬剤及びその薬学的に許容できる塩の一定の同位体変異、例えば、３Ｈ又は１４Ｃなどの放射性同位体が導入されているものは、薬物及び／又は基質組織分布研究で有用である。トリチウム、即ち３Ｈ及び炭素−１４、即ち１４Ｃ同位体は、調製のその容易さ及び検出性において特に好ましい。さらに、ジュウテリウム、即ち２Ｈなどの同位体で置換すると、比較的大きな代謝安定性、例えば、高いインビボ半減期又は低い用量要求により、一定の治療的有利さが得られ、したがって、環境によっては、好ましい。本発明の薬剤及び本発明の薬学的に許容できるその塩の同位体変異は通常、適切な試薬の適切な同位体変異を使用することにより、慣用の手順で調製することができる。
【０１５５】
溶媒和物
さらに本発明は、本発明の化合物の溶媒和物形態を含む。請求項中で使用される用語は、これらの形態を包含する。
【０１５６】
多形体
さらに本発明は、その様々な結晶形、多形、無水形、含水形である本発明の化合物に関する。化合物は、精製方法を僅かに変換することによりこのような形態のいずれかの形態で、及び又はこのような化合物の合成調製で使用される溶媒を僅かに変換することにより単離された形態で単離することができることは、薬学工業の範囲内では、十分に確立されている。
【０１５７】
プロドラッグ
さらに本発明は、プロドラッグの形態である本発明の化合物を含む。このようなドラッグは通常、ヒト又は哺乳動物対象に投与されると変更が元に戻り得るように１個又は複数の適切な基が変更されている本発明の化合物である。このような逆戻りは通常、このような対象に自然に存在する酵素によるが、第２の薬剤をこのようなプロドラッグと一緒に投与して、インビボで逆戻りを実施することも可能である。このような変異の例には、エステル（例えば、前記のいずれか）が含まれ、ここで、逆戻りは、エステラーゼなどにより実施され得る。他のこのような系は、当業者によく知られているであろう。
【０１５８】
投与
本発明の医薬組成物は、投与の経口、直腸、膣、非経口、筋肉内、腹腔内、動脈内、くも膜下、気管支内、皮下、皮内、静脈内、鼻、口腔内又は舌下経路に適している。
【０１５９】
経口投与では、個々の使用は、圧縮錠剤、丸剤、錠剤、ゲル剤（gellules）、ドロップ剤及びカプセルにより行われる。好ましくは、これらの組成物は１用量当たり、１〜２５０ｍｇ、さらに好ましくは１０〜１００ｍｇの活性成分を含有する。
【０１６０】
投与の他の形態には、静脈内、動脈内、くも膜下、皮下、皮内、腹腔内又は筋肉内で注射することができ、滅菌されているか滅菌可能な溶液から調製される溶液又はエマルジョンが含まれる。本発明の医薬組成物はさらに、坐薬、膣坐薬、懸濁液、エマルジョン、ローション、軟膏、クリーム、ゲル、スプレー、溶液又は散布剤の形態であってもよい。
【０１６１】
経皮投与の別の手段は、皮膚パッチの使用による。例えば、活性成分を、ポリエチレングリコール又は流動パラフィンの水性エマルジョンからなるクリームに導入することができる。活性成分を１から１０重量％の濃度で、必要ならば安定剤及び防腐剤を伴う白色ろう又は白色軟質パラフィン基剤からなる軟膏に導入することもできる。
【０１６２】
注射可能な形態は、１用量当たり１０〜１０００ｍｇ、好ましくは１０〜２５０ｍｇの活性成分を含有していてもよい。
【０１６３】
組成物を、単位剤形に、即ち、１単位用量若しくは複数又は小単位の単位用量を含有する別々のポーションの形態で処方することができる。
【０１６４】
用量
当業者は、過度に実験しなくても、対象に投与するための即時的組成物の１つの適切な用量を簡単に決定することができる。通常、医師は、個々の患者に最も適した実際の用量を決定し、これは、使用される特定の化合物の活性、その化合物の代謝安定性及び作用長さ、年齢、体重、全身健康、性別、食事、投与方法及び時間、排出率、薬物の組合せ、特定の状態の重度、個別に行われる治療を含む様々なファクターに左右される。本明細書に開示の用量は、平均的なケースの例である。勿論、より高い又はより低い用量範囲が有利である個々の状況も存在し、そのような場合も、本発明の範囲内である。
【０１６５】
必要に応じて、薬剤を、０．０１〜３０ｍｇ／体重ｋｇ、例えば０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは０．１〜１ｍｇ／体重ｋｇで投与することができる。
【０１６６】
例示的な実施形態では、１０〜１５０ｍｇ／日の１回又は複数回用量を悪性腫瘍の治療のために患者に投与する。
【０１６７】
組合せ
特に好ましい一実施形態では、本発明の１種又は複数の化合物を、１種又は複数の他の治療活性剤、例えば、市場で入手可能な既存の抗癌剤と組み合わせて投与する。このような場合、本発明の化合物を、１種又は複数の他の活性剤と連続して、それと同時に、又はそれに続いて投与することができる。
【０１６８】
抗癌剤は通常、組み合わせて使用すると、より効果的である。特に、併用療法は、主な毒性、作用機序及び耐性機序の重複を回避するために望ましい。さらに、大抵の薬物をその最大許容用量で、このような用量間の最短間隔で投与することが望ましい。化学治療薬を組み合わせることの主な利点は、このことにより、生化学的相互作用を介して相加効果又はあり得る相乗効果を促進することができ、さらに、単一剤を用いての当初化学療法に応答するであろう初期腫瘍細胞での耐性の出現を低減することができることである。薬物の組合せを選択する際の生化学的相互作用の利用の例は、５−フルオロウラシルの活性細胞内代謝産物とそのターゲットとの結合、即ちチミジル酸シンターゼを増大させるロイコボリンを投与すると、その細胞毒性効果が増大することにより証明される。
【０１６９】
現在の癌及び白血病の治療では、多数の組合せが使用されている。医学的実践のより広範な概観は、E.E.Vokes及びH.M.Golomb編、Springer出版の「Oncologic Therapies」に見ることができる。
【０１７０】
最初に特定の癌を、又はその癌に由来する細胞系の治療において有用であると知られているか、有用であると思われる薬剤と共に、試験化合物の成長阻害活性を研究することにより、有利な組合せを提示することができる。この手順は、薬剤を投与する順番、即ち、輸送前、それと同時、又はその後を決定するために使用することもできる。このようなスケジューリングは、本明細書で同定されている周期活性薬全ての特徴であってよい。
【０１７１】
アッセイ
本発明の別の態様は、ＣＤＫ、ＦＬＴ−３、オーロラキナーゼ、ＧＳＫ−３、ＰＬＫ及び／又はチロシンキナーゼの１つ又は複数の活性に影響を与えるさらなる候補化合物を同定するアッセイにおける、本明細書で上記定義の本発明の化合物の使用に関する。
【０１７２】
好ましくは、アッセイは、ＣＤＫ酵素、ＦＬＴ−３、オーロラキナーゼ、チロシンキナーゼ、ＧＳＫ又はＰＬＫ酵素の１つ又は複数を阻害することが可能である候補化合物を同定することが可能である。
【０１７３】
より好ましくは、アッセイは競合結合アッセイである。
【０１７４】
好ましくは、候補化合物は、本発明の化合物の慣用のＳＡＲ修飾によって生成される。
【０１７５】
本明細書で使用する場合、用語「慣用のＳＡＲ修飾」は、化学誘導体化によって所与の化合物を変化させる、当技術分野で知られた標準的な方法を指す。
【０１７６】
したがって、一態様では、同定した化合物は他の化合物を開発するためのモデル（例えば、テンプレート）として働いてよい。そのような試験に用いられる化合物は、溶液中で遊離であってよく、固体支持体に固定されていてよく、細胞表面に担持されていてよく、又は細胞内に位置していてよい。活性の消滅又は化合物と試験される薬剤との間の結合錯体の形成は測定できる。
【０１７７】
本発明のアッセイはスクリーニング法であってよく、これにより多くの薬剤が試験される。一態様では、本発明のアッセイ方法は高スループットスクリーニング法である。
【０１７８】
本発明はまた、競合薬物スクリーニングアッセイの使用を企図し、ここで、化合物を結合することが可能な中和抗体は、化合物に結合する試験化合物と特異的に競合する。
【０１７９】
スクリーニングのための別の技術は、物質に対して適切な結合親和性を有する薬剤の高スループットスクリーニング（ＨＴＳ）を提供し、ＷＯ８４／０３５６４で詳述された方法に基づいている。
【０１８０】
本発明のアッセイ方法は、試験化合物の小規模及び大規模スクリーニングの両方、並びに定量分析に適していると期待される。
【０１８１】
好ましくは、競合結合アッセイは、本発明の化合物と、ＣＤＫ、ＦＬＴ−３、オーロラキナーゼ、ＧＳＫ−３、ＰＬＫ及び／又はチロシンキナーゼ酵素とを、前記酵素の既知の基質の存在下で接触させること、及び前記酵素と前記既知の基質との間の相互作用に何らかの変化を検出することを含む。
【０１８２】
本発明のさらなる態様は、リガンドと、ＣＤＫ、ＦＬＴ−３、オーロラキナーゼ、ＧＳＫ−３、ＰＬＫ又はチロシンキナーゼ酵素との結合を検出する方法を提供し、前記方法は、
（ｉ）リガンドと、ＣＤＫ、ＦＬＴ−３、オーロラキナーゼ、ＧＳＫ−３、ＰＬＫ又はチロシンキナーゼ酵素とを前記酵素の既知の基質の存在下で接触させるステップと、
（ii）前記酵素と前記既知の基質との間の相互作用に何らかの変化を検出するステップと
を含み、ここで、前記リガンドは本発明の化合物である。
【０１８３】
本発明の一態様は、
（ａ）前記アッセイ方法を行うステップと、
（ｂ）リガンド結合ドメインに結合することが可能である１種又は複数のリガンドを同定するステップと、
（ｃ）前記１種又は複数のリガンドを多量に調製するステップと
を含む方法に関する。
【０１８４】
本発明の別の態様は、
（ａ）前記アッセイ方法を行うステップと、
（ｂ）リガンド結合ドメインに結合することが可能である１種又は複数のリガンドを同定するステップと、
（ｃ）前記１種又は複数のリガンドを含む医薬組成物を調製するステップと
を含む方法を提供する。
【０１８５】
本発明の別の態様は、
（ａ）前記アッセイ方法を行うステップと、
（ｂ）リガンド結合ドメインに結合することが可能である１種又は複数のリガンドを同定するステップと、
（ｃ）リガンド結合ドメインに結合することが可能である１種又は複数のリガンドを改質するステップと、
（ｄ）前記アッセイ方法を行うステップと
（ｅ）場合によって、前記１種又は複数のリガンドを含む医薬組成物を調製するステップと
を含む方法を提供する。
【０１８６】
さらに本発明は、上記の方法により同定されたリガンドに関する。
【０１８７】
本発明のさらに別の態様は、上記の方法により同定されたリガンドを含む医薬組成物に関する。
【０１８８】
本発明の別の態様は、増殖性障害を治療する際に使用するための医薬組成物の調製において、上記の方法により同定されたリガンドを使用することに関する。
【０１８９】
上記の方法は、１種又は複数のＣＤＫ酵素、ＦＬＴ−３、オーロラキナーゼ、ＧＳＫ−３、ＰＬＫ又はチロシンキナーゼ酵素の阻害剤として有用なリガンドをスクリーニングするのに使用してよい。
【０１９０】
合成
本発明の化合物は、ＷＯ０２／０７９１９３（Cyclacel Limited）に挙げられた合成経路で調製してよい。
【０１９１】
例として、式Ｉ及びIIの化合物は、例えば、Traube合成（A.R.Katritzky, I.Taher, Can.J.Chem.1986, 64, 2087及びそこに挙げられた引例）を適応させることによって、即ち、スキーム１ａ及び１ｂで以下に示した通り、１，３−ジカルボニル化合物１、１ａ又はアクリレート２、２ａ若しくは３、３ａと、アミジン４、４ａとを縮合させることによって合成できる。
【０１９２】
【化８】
2009511556.tif 000013
スキーム１ａ
【０１９３】
【化９】
2009511556.tif 000014
スキーム１ｂ
【０１９４】
次に、ジカルボニル化合物１、１ａは、当技術分野で知られた多くの方法によって調製できる（J.March, In: Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanism, and Structure, 4th Ed., John Wiley & Sons、Inc., New York, 1992, p.1283）。本発明の目的に特に適切なアクリレート２、２ａ及び３、３ａは、複素環式メチルケトン５から、ｔｅｒｔ−ブトキシビス（ジメチルアミノ）メタン６と縮合することによって得る（スキーム２）。
【０１９５】
【化１０】
2009511556.tif 000015
スキーム２
【０１９６】
ジアミノ化合物４、４ａは、一般構造Ｉ又はIIのＹの定義に応じてアミジン４ｃ又はグアニジン４ｄ、４ｅである。アミジン（ＨＮ＝ＣＲＮＨ２）は、容易に入手可能なアミン前駆体から、例えばケテンイミンと縮合することによって、又はアンモニアを適切なニトリル又はイミデートに加えることによって得ることができる。グアニジン４ｄ、４ｅ（スキーム３）は、当技術分野で知られているいくつかの方法によって精巧に産生することができる。この発明の目的では、最も有用な経路はシアンアミド８のアニリン９、９ａによるアミノ化である。
【０１９７】
【化１１】
2009511556.tif 000016
スキーム３
【０１９８】
ピロール５には、２つの系（スキーム４参照）を適用できる。即ち、ピリミジン前駆体２、２ａ及び３、３ａを生成するのに使用するアセチル基は、ピロールの３位（５：Ｘ１＝ＣＲ８、Ｘ２＝ＮＨ；即ち、構造５ｂ）又はピロールの２位（Ｘ１＝ＮＨ、Ｘ２＝ＣＲ８；即ち、構造５ｃ）のいずれかにある。
【０１９９】
【化１２】
2009511556.tif 000017
スキーム４
【０２００】
両方の場合、ピロール環は、当技術分野で知られている方法を使用して作ることができる。特に関連するのは、Knorr合成の変形である（例えば、J.A.Joule, G.F.Smith, Heterocyclic Chemistry, 2nd Ed., Van Nostrand Reinhold(UK) Co.Ltd., 1978, pp.213-215参照）。ピロール−３−イル系では、活性化（即ち、Ｒ１＝ＣＯＯＥｔ、ＣＮなど）カルボニル化合物１０を最初にニトロシル化する。得られたオキシム１１をジカルボニル化合物１２と、例えば亜鉛−酢酸又はジチオネート水溶液の存在下で縮合させて反応性α−アミノカルボニル中間体１３を形成する。得られた３−アセチルピロール５ｂのＲ１置換基（例えば、ＣＯＯＥｔ、ＣＮ）は、直接、又は中間体２若しくは３との関連で、又はピロロピリミジン生成物Ｉ、II中でさらに操作させることができる。したがって、脱炭酸（Ｒ１＝ＣＯＯＥｔ）によりＲ１＝Ｈの生成物が得られ、酸化（Ｒ１＝ＣＮ）によりＲ１＝ＣＯＮＨ２の生成物が得られるなどである。さらに、Ｒ１＝Ｈの生成物は種々の誘導体に、特に求電子置換を介して変換できる。したがって、Ｒ１が、例えば、ハロゲン、ニトロ、アミノ、アルキル、アルキルアミノなどの基である誘導体は、容易に得ることができる。ピロール−２−イル系の場合、類似の状況が生じ、ここで、賦活基はカルボニル成分１５に存在する必要がある（例えば、Ｒ８＝ＣＯＯＥｔ、ＣＮなど）。これをオキシム１６（ジカルボニル化合物１４から誘導）と縮合し、再び中間体１７を形成する。生成物５ｃ又は誘導体のＲ８置換基は、上記のピロール−３−イル系のＲ１基と同様に操作させることができる。
【０２０１】
別法として、一般構造Ｉ、IIの化合物は、適切なピリミジン前駆体から直接、例えば、連続的置換反応により２，４−二置換（ハロゲン、アミンなど）ピリミジンから得ることができる。
【０２０２】
本発明を実施例によりさらに記載する。
【実施例】
【０２０３】
一般
Varian INOVA-500機器を使用してＮＭＲスペクトルを記録した。内部テトラメチルシラン標準に対して化学シフトをｐｐｍで報告する。エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）を用いるWaters ZQ2000単一四重極質量分析計を使用して質量スペクトルを得た。それぞれVydac 218TP54（２５０×４．６ｍｍ）及び218TP1022（２５０×２２ｍｍ）カラムを使用して分析及び分取ＲＰ−ＨＰＬＣを実施した。Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮシステム（０．１％のＣＦ３ＣＯＯＨ含有）を使用する線形勾配溶離を流速１ｍＬ／分（分析）及び９ｍＬ／分（分取）で実施した。クロマトグラム（γ＝２５４ｎｍ）の積分により純度を分析した。フラッシュクロマトグラフィーには、シリカゲル（EM Kieselgel 60、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、Merck社製）又はISOLUTEプレパックカラム（Jones Chromatography社製、UK）を使用した。
【０２０４】
本発明の化合物は、ＷＯ０２／０７９０１９３（Cyclacel Limited）に記載の合成アプローチの変形により調製した。
【０２０５】
例示的な化合物を表Ｉに示す。特性決定データ（ＮＭＲ、ＭＳ、ＨＰＬＣ及びＭＰ）を表IIに示す。
【０２０６】
キナーゼアッセイ
上記の本発明の化合物を、種々のプロテインキナーゼの酵素活性を阻害するそれらの能力について調べた。これは、ＡＴＰから適切なポリペプチド基質への放射活性ホスフェートの取込みを測定することによって達成した。組換えプロテインキナーゼ及びキナーゼ複合体は、作製するか又は市販で入手した。アッセイは、９６ウェルプレート及び適切なアッセイバッファー（典型的には、２５ｍＭ  β−グリセロホスフェート、２０ｍＭ  ＭＯＰＳ、５ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭ  Ｎａ３ＶＯ３、ｐＨ７．４）を用い、ここに２〜４μｇの活性酵素を適切な基質と共に加えて行った。反応は、Ｍｇ／ＡＴＰミックス（１５ｍＭ  ＭｇＣｌ２＋１００μＭ  ＡＴＰ及び１ウェル当たり３０〜５０ｋＢｑの［γ−３２Ｐ］−ＡＴＰ）を加えることによって開始し、混合物を必要に応じて３０℃でインキュベートした。反応を氷上で停止し、その後、ｐ８１フィルタープレート又はＧＦ／Ｃフィルタープレート（Whatman Polyfiltronics社製, Kent, UK）を通して濾過した。７５ｍＭオルトリン酸水溶液で３回洗浄した後に、プレートを乾燥し、シンチラントを加え、取り込まれた放射活性をシンチレーションカウンター（TopCount, Packard Instruments社製, Pangbourne, Berks, UK）で測定した。キナーゼアッセイのための化合物は、ＤＭＳＯ中に１０ｍＭストックとして作製し、アッセイバッファー中で１０％ＤＭＳＯとなるように希釈した。データは、カーブフィッティングソフトウェア（GraphPad Prism version 3.00 for Windows（登録商標）, GraphPad Software社製、San Diego California, USA）を使用して解析して、ＩＣ５０値（キナーゼ活性を５０％阻害する試験化合物の濃度）を決定した。
【０２０７】
ＣＤＫ７及び９アッセイ
ＣＴＤペプチド基質（ビオチニル−Ａｈｘ−（Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ）４−ＮＨ２；１〜２ｍｇ／ｍＬ）及び組換えヒトＣＤＫ７／サイクリンＨ、ＣＤＫ９／サイクリンＴ１又はＣＤＫ９／サイクリンＫ（０．５〜２μｇ）を、２０ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．２、２５ｍＭ  β−グリセロホスフェート、５ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭバナジン酸ナトリウム、１５ｍＭ  ＭｇＣｌ２及び１００μＭ  ＡＴＰ（痕跡量の32ＰγＡＴＰを含有）中の様々な量の試験化合物の存在下で、全体積２５μＬで、９６ウェルマイクロタイタープレート中、３０℃で４５分間インキュベートした。プレートを氷上に２分間置くことにより、反応を停止させた。アビジン（５０μｇ）を各ウェルに加え、室温で３０分間、プレートをインキュベートした。試料を９６ウェルＰ８１フィルタープレートに移し、７５ｍＭリン酸で洗浄した（１ウェル当たり４×２００μＬ）。Microscint 40シンチレーション液（５０μＬ）を各ウェルに加え、Packard Topcountマイクロプレートシンチレーションカウンターを使用して、各試料の３２Ｐ取込み量を測定した。
【０２０８】
ＧＳＫ−３βキナーゼアッセイ
ＧＳＫ−３をNew England Biolabs(UK) Ltd., Hitchin, Hertsから入手した。この組換え酵素は、ウサギ骨格筋ｃＤＮＡライブラリー［Wang、Q.M.; Fiol, C.J.; DePaoli-Roach、A.A.; Roach, P.J.J.Biol.Chem., 1994, 269, 14566］から誘導したＧＳＫ−３βを発現するクローンを担持する大腸菌株から単離した。ＧＳＫ−３機能の阻害は、試験化合物の存在下でＣＲＥＢホスホペプチドＫＲＲＥＩＬＳＲＲＰｐｈｏｓｐｈｏＳＹＲのリン酸化を測定することによって評価した。９６ウェルアッセイフォーマットを使用して、ＧＳＫ３（７．５Ｕ）を３０分間３０℃において、２０ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．２、２５ｍＭ  β−グリセロホスフェート、５ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭ  Ｎａ３ＶＯ３、４０μＭ  ＣＲＥＢペプチド、１５ｍＭ  ＭｇＣｌ２及び１００μＭ  ＡＴＰ（０．２５μＣｉ［γ−３２Ｐ］−ＡＴＰ含有）中、総容量２５μＬで、様々な濃度の試験化合物の存在下においてインキュベートした。試料を９６ウェルｐ８１フィルタープレート（Whatman Polyfiltronics社製, Kent, UK）に移し、２００μＬ／ウェルの７５ｍＭオルトリン酸水溶液でプレートを４回洗浄した。シンチレーション液（５０μＬ）を各ウェルに加え、シンチレーションカウンター（TopCount, Packard Instruments社製, Pangbourne, Berks, UK）を使用して、各試料に取り込まれた放射活性を測定した。
【０２０９】
オーロラ−Ａ（ヒト）キナーゼアッセイ
市販のオーロラ−Ａ（ヒト、Upstate社製, Dundee, UK）によるリン酸化で、ＡＴＰからKemptide基質（ＬＲＲＡＳＬＧ）への放射活性ホスフェートの取込みを測定することにより、これを達成した。９６ウェルプレート並びに活性酵素２〜５ｎｇと共に５００μＭの基質（Kemptide）を加えた適切なアッセイバッファー（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、２５ｍＭ  β−グリセロホスフェート、５ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭバナジン酸ナトリウム、ｐＨ７．５）を使用して、アッセイを行った。反応は、Ｍｇ／ＡＴＰミックス（１５ｍＭ  ＭｇＣｌ２＋１００μＭ  ＡＴＰ及び１ウェル当たり１５〜２５ｋＢｑの［γ−３２Ｐ］−ＡＴＰ）を加えることによって開始し、混合物を３０分間３０℃でインキュベートした。７５ｍＭオルトリン酸水溶液を等量加えることによって反応を停止し、その後、ｐ８１フィルタープレート（Whatman Polyfiltronics社製, Kent, UK）を通して濾過した。７５ｍＭオルトリン酸水溶液で４回洗浄した後に、プレートを乾燥し、シンチラントを加え、取り込まれた放射活性をシンチレーションカウンター（TopCount, Packard Instruments社製, Pangbourne, Berks, UK）で測定した。キナーゼアッセイのための化合物は、ＤＭＳＯ中に１０ｍＭストックとして作製し、アッセイバッファー中で１０％ＤＭＳＯとなるように希釈した。データは、カーブフィッティングソフトウェア（XLfit version 4.0.2, IDBS社製, Guildford, Surrey, UK）を使用して解析して、ＩＣ５０値（キナーゼ活性を５０％阻害する試験化合物の濃度）を決定した。
【０２１０】
オーロラ−Ｂ（ヒト）キナーゼアッセイ
市販のオーロラ−Ｂ（ヒト、Upstate社製, Dundee, UK）によるリン酸化で、ＡＴＰからKemptide基質（ＬＲＲＡＳＬＧ）への放射活性ホスフェートの取込みを測定することにより、これを達成した。９６ウェルプレート並びに事前活性化した酵素７５ｎｇと共に５００μＭの基質（Kemptide）を加えた適切なアッセイバッファー（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、２５ｍＭ  β−グリセロホスフェート、５ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭバナジン酸ナトリウム、ｐＨ７．５）を使用して、アッセイを行った。反応は、ＭｇＡＴＰミックス（１５ｍＭ  ＭｇＣｌ２＋１００μＭ  ＡＴＰ及び１ウェル当たり１５〜２５ｋＢｑの［γ−３２Ｐ］−ＡＴＰ）を加えることによって開始し、混合物を６０分間３０℃でインキュベートした。７５ｍＭオルトリン酸水溶液を等量加えることによって反応を停止し、その後、ｐ８１フィルタープレート（Whatman Polyfiltronics社製, Kent, UK）を通して濾過した。７５ｍＭオルトリン酸水溶液で４回洗浄した後に、プレートを乾燥し、シンチラントを加え、取り込まれた放射活性をシンチレーションカウンター（TopCount, Packard Instruments社製, Pangbourne, Berks, UK）で測定した。キナーゼアッセイのための化合物は、ＤＭＳＯ中に１０ｍＭストックとして作製し、アッセイバッファー中で１０％ＤＭＳＯとなるように希釈した。データは、カーブフィッティングソフトウェア（XLfit version 4.0.2, IDBS社製, Guildford, Surrey, UK）を使用して解析して、ＩＣ５０値（キナーゼ活性を５０％阻害する試験化合物の濃度）を決定した。
【０２１１】
オーロラ−Ｂ（ヒト）の事前活性化
酵素１５μｇを４μｇのINCENP（Upstate社製, Dundee, UK）と共にＭｇＡＴＰミックス（１５ｍＭ  ＭｇＣｌ２＋１００μＭ  ＡＴＰ）の存在下において１５分間３０℃でインキュベートすることによって、適切なバッファー（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、２５ｍＭ  β−グリセロホスフェート、５ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭバナジン酸ナトリウム、ｐＨ７．５）中でのキナーゼアッセイの直前にオーロラ−Ｂ（ヒト、Upstate社製, Dundee, UK）を事前活性化した。
【０２１２】
Ｆｌｔ３キナーゼアッセイ
市販のＦｌｔ−３（Upstate社製, Dundee, UK）によるリン酸化で、ＡＴＰからミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）基質への放射活性ホスフェートの取込みを測定することにより、これを達成した。９６ウェルプレート並びに活性酵素５ｎｇと共に０．４ｍｇ／ｍｌの基質（ＭＢＰ）を加えた適切なアッセイバッファー（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、２５ｍＭ  β−グリセロホスフェート、５ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭバナジン酸ナトリウム、ｐＨ７．５）を使用して、アッセイを行った。反応は、ＭｇＡＴＰミックス（１５ｍＭ  ＭｇＣｌ２＋１００μＭ  ＡＴＰ及び１ウェル当たり１５〜２５ｋＢｑの［γ−３２Ｐ］−ＡＴＰ）を加えることによって開始し、混合物を３０分間３０℃でインキュベートした。７５ｍＭオルトリン酸水溶液を等量加えることによって反応を停止し、その後、ｐ８１フィルタープレート（Whatman Polyfiltronics社製, Kent, UK）を通して濾過した。７５ｍＭオルトリン酸水溶液で４回洗浄した後に、プレートを乾燥し、シンチラントを加え、取り込まれた放射活性をシンチレーションカウンター（TopCount, Packard Instruments社製, Pangbourne, Berks, UK）で測定した。キナーゼアッセイのための化合物は、ＤＭＳＯ中に１０ｍＭストックとして作製し、アッセイバッファー中で１０％ＤＭＳＯとなるように希釈した。データは、カーブフィッティングソフトウェア（XLfit version 4.0.2, IDBS社製, Guildford, Surrey, UK）を使用して解析して、ＩＣ５０値（キナーゼ活性を５０％阻害する試験化合物の濃度）を決定した。
【０２１３】
本発明の選択された化合物のインビトロキナーゼデータを表III（Ｋｉ値（μＭ））に示す。
【０２１４】
好都合には、本発明の選択された化合物は、当技術分野で知られた化合物と比較して向上した薬物速度論的特性を示す。例えば、化合物は、向上したバイオアベイラビリティー、溶解性及び／又は半減期を示してよい。
【０２１５】
ＭＴＴ細胞毒性アッセイ
本発明の化合物は、ＡＴＣＣ（American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manessas, VA 20110-2209, USA）から得られたヒト腫瘍細胞系を使用する標準的な細胞増殖アッセイにかけた。標準的な７２時間ＭＴＴ（チアゾリルブルー；臭化３−［４，５−ジメチルチアゾール−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウム）アッセイを行った（Haselsberger, K.; Peterson, D. C.; Thomas, D. G.; Darling, J. L. Anti Cancer Drugs 1996, 7, 331-8; Loveland, B. E.; Johns, T. G.; Mackay, I. R.; Vaillant, F.; Wang, Z. X.; Hertzog, P. J. Biochemistry International 1992, 27, 501-10）。簡単に述べると、細胞を、倍加時間に応じて９６ウェルプレートに播種し、３７℃で終夜インキュベートした。試験化合物を、ＤＭＳＯ中で調製し、１／３希釈系を１００μＬ細胞培地で調製し、細胞に加え（３回で）、３７℃で７２時間インキュベートした。ＭＴＴを、細胞培地中５ｍｇ／ｍＬのストックとして製造し、濾過滅菌した。細胞から培地を除去し、続いて、ＰＢＳ２００μＬで洗浄した。次いで、ＭＴＴ溶液を１ウェル当たり２０μＬで加え、暗所において３７℃で４時間インキュベートした。ＭＴＴ溶液を除去し、細胞を再び、ＰＢＳ２００μＬで洗浄した。撹拌しながらＭＴＴ染料を、１ウェル当たりＤＭＳＯ２００μＬと共に溶かした。５４０ｎｍで吸光度を読み取り、カーブフィッティングソフトウェア（GraphPad Prism version 3.00 for Windows（登録商標）, GraphPad Software, San Diego California USA）を使用して、データを解析し、ＩＣ５０値を決定した（細胞増殖を５０％阻害する試験化合物の濃度）。
【０２１６】
脂肪細胞及び筋管の分化
３Ｔ３−Ｌ１マウス前脂肪細胞を、１０％ＦＣＳ及びｐｅｎ／ｓｔｒｅｐを補充したＤＭＥＭ中で完全にコンフルエントになるまで増殖させた。０．５ｍＭ  ＩＢＭＸ（２−イソブチル−１−メチルキサンチン）、０．２５μＭデキサメタゾン及び１μｇ／ｍｌのインスリンを増殖培地に加えることによって細胞分化を開始させた。分化の開始後４日目と７日目に分化培地を交換し、細胞をさらに３日間ＤＭＥＭ、１０％ＦＣＳ及びｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ中で増殖させた。
【０２１７】
ラット筋管をＬ６．Ｇ８．Ｃ５筋芽細胞から分化させ、これをＤＭＥＭ、１０％ＦＣＳ及びｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ中でコンフルエントになるまで増殖させた。次いで培地を除去し、細胞をＰＢＳで洗浄し、最小基本培地イーグル（α改変）を含有する分化培地に２％ＦＣＳ及びｐｅｎ／ｓｔｒｅｐを補充した。細胞を３〜４日間、細胞の９０％超が多核筋管を形成するまで培養した。次いで、分化した細胞を、ＧＳＫ３阻害剤で処理後のグリコーゲン合成酵素活性化の判定に使用した。
【０２１８】
培養細胞中のグリコーゲン合成酵素活性化
ＨＥＫ２９３細胞、マウス脂肪細胞又はラット筋管を、異なる濃度のＧＳＫ３阻害剤を含む１０ｃｍペトリ皿中で９０分間処理した。処理時間の最後に細胞を洗浄し、２０ｍＭ  ＮａＦを補充した氷冷ＰＢＳバッファー中に掻き取った。細胞を遠心分離によってペレット化し、３００μｌのバッファー−５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＥＤＴＡ、１００ｍＭ  ＮａＦ、５ｍＭ  ＤＴＴ、プロテアーゼ阻害剤カクテル（Sigma）中に溶解させた。３０分間氷上でインキュベートした後、試料を遠心分離により清澄化した。グリコーゲン合成酵素の活性を可溶性画分中、２つの異なる濃度のグルコース−６−ホスファターゼ−低（０．１ｍＭ）及び高（１０ｍＭ）で判定した。反応は３０分間バッファー−５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．８、２０ｍＭ  ＥＤＴＡ、２５ｍＭ  ＮａＦ、５ｍＭ  ＤＴＴ中で実施した。反応混合物（総体積９０μｌ）はさらに、１％グリコーゲン、０．３ｍＭ  ＵＤＰ−グルコース及び０．０６μＣｉ  １４Ｃ−ＵＤＰ−グルコースからなっていた。１００％エタノール１４０μｌを含有するＧＦＣ９６ウェルフィルタープレートに７０μｌを移すことによって反応を停止させた。グリコーゲンを１時間４℃で沈殿させた。ウェルを６６％エタノール２００μｌで２回洗浄し、次いで乾燥させた。次いで、シンチレーション液１００μｌを加え、プレートを密封し、Packard Topcounter中で計数した。グリコーゲン合成酵素の活性化を、ＵＤＰグルコース低濃度と高濃度の場合の標識１４Ｃ−ＵＤＰグルコースのグリコーゲンへの取込みの比率（速度分率）として計算した。
【０２１９】
ＰＥＰＣＫ遺伝子発現アッセイ−ｑＰＣＲ
ＰＥＰＣＫ遺伝子発現を、１ウェル当たり１×１０７細胞で６ウェルプレートに播種したＨＥＰＧ２（肝臓癌）細胞で試験した。細胞を２０時間血清飢餓にし、その後インスリン又はＧＳＫ３阻害剤の存在下又は不存在下においてデキサメタゾン／ｃＡＭＰ（ＰＥＰＣＫ遺伝子発現の刺激物質）で処理した。３時間処理後、細胞を収穫し、溶解し、RNeasyミニスピンカラム（Quiagen社製）を使用してＲＮＡを抽出した。ＰＥＰＣＫ遺伝子にプライマーセットCOD2063/COD2064（３５０ｂｐ）を使用した。１ステップＲＴ−ＰＣＲをLightcycler-RNA Master SYBR Green 1キットを使用して実施した。ｑＰＣＲ分析により、ＰＣＲ産物増幅が対数期に到達するのに必要なＰＣＲサイクルの数を計算した。ハウスキーピング遺伝子、２８ＳのＱＰＣＲを正規化に使用した。
【０２２０】
結果
細胞系中のグリコーゲン合成酵素活性の刺激
グリコーゲン合成酵素を刺激するＧＳＫ３阻害活性を有するピロロピリミジンの能力を、ＨＥＫ２９３細胞、マウス脂肪細胞及びラット筋管で判定した。判定したＥＣ５０値（グリコーゲン合成酵素の最大活性の半分を誘導するのに必要な濃度）を表IVに示す。
【０２２１】
ＰＥＰＣＫ遺伝子発現に対するピロロピリミジンＧＳＫ３阻害剤の作用
ＰＥＰＣＫは、肝臓での糖新生における重要な酵素であり、ＧＳＫ３の阻害を介してインスリンによって負に調節されることが知られている。ＰＥＰＣＫ遺伝子発現に対するＧＳＫ３阻害剤の作用を、インスリン又はＧＳＫ３阻害剤の存在下又は不存在下においてデキサメタゾン／ｃＡＭＰ（ＰＥＰＣＫ遺伝子発現の正のレギュレーター）で処理したＨＥＰＧ２（肝臓癌）で試験した。デキサメタゾン誘発刺激のパーセントとして表したＰＥＰＣＫ遺伝子転写のレベルを表Ｖに示す。
【０２２２】
ＧＳＫ３のピロロピリミジン阻害剤は、ＨＥＰＧ２細胞におけるＰＥＰＣＫ遺伝子発現のデキサメタゾン／ｃＡＭＰ誘発刺激の消失に有効である。なぜなら、その作用はインスリンの１つに匹敵するか、それを上回るからである。これらの結果は、糖尿病患者に欠けており、糖尿病患者の高血糖を促進する肝臓の糖新生の調節におけるＧＳＫ３阻害剤の潜在的な使用を示唆している。
【０２２３】
本発明の前記の態様の様々な変更及び変化は、本発明の範囲及び意図を逸脱することなく、当業者には明らかであろう。本発明を、特定の好ましい実施形態に関して記載したが、請求のように、本発明をこのような特定の実施形態に不当に限定すべきではないことは理解されたい。実際に、当業者には明らかである本発明の実施における前記の方法の様々な変更は、請求項の範囲内にあるものとする。
【０２２４】
表１：本発明の選択された化合物
【０２２５】
【化１３】
2009511556.tif 000018
【０２２６】
【表４】
2009511556.tif 000019
2009511556.tif 000020
【０２２７】
【表５】
2009511556.tif 000021
2009511556.tif 000022
2009511556.tif 000023
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2009511556.tif 000025
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2009511556.tif 000027
2009511556.tif 000028
【０２２８】
【表６】
2009511556.tif 000029
【０２２９】
【表７】
2009511556.tif 000030
【０２３０】
【表８】
2009511556.tif 000031
【国際調査報告】
2009511556.tif 000044
2009511556.tif 000045
2009511556.tif 000046
2009511556.tif 000047