(57)【要約】  本発明は、腫瘍負荷について患者をスクリーニングするための方法、ならびに高血清もしくは血漿ＬＤＨ５レベルを有する、消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんおよび肺がん（小細胞性および非小細胞性）患者、および神経堤起原細胞（neural crest origin）がんを有する患者の処置のための、ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤単独または化学療法との組合せにおける使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤による治療に成功し得る患者を選択するために、血清または血漿ＬＤＨ５を測定することにより腫瘍負荷について患者をスクリーニングする非侵襲的方法であって、高い血清または血漿ＬＤＨ５が候補選択の基準である方法。
【請求項２】
４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体による治療に成功し得る患者を選択するために、血清または血漿ＬＤＨ５を測定することにより腫瘍負荷について患者をスクリーニングする非侵襲的方法であって、高い血清／血漿ＬＤＨ５が候補選択の基準である方法。
【請求項３】
ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤による治療に対する応答または再発をモニタリングするために、腫瘍の代替物／バイオマーカーとして血清または血漿ＬＤＨ５を測定することにより腫瘍負荷について患者をスクリーニングする非侵襲的方法。
【請求項４】
４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体による治療に対する応答または再発をモニタリングするために、腫瘍の代替物／バイオマーカーとして血清または血漿ＬＤＨ５を測定することにより腫瘍負荷について患者をスクリーニングする非侵襲的方法。
【請求項５】
消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがん、肺がん（小細胞および非小細胞）または神経冠原発がんを処置する方法であって、治療上有効量のＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤を、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有するヒト患者に投与することを含む方法。
【請求項６】
結直腸がんを処置する方法であって、治療上有効量のＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤を、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有するヒト患者に投与することを含む方法。
【請求項７】
消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがん、肺がん（小細胞および非小細胞）または神経冠原発がんを処置する方法であって、治療上有効量の４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体を、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有するヒト患者に投与することを含む方法。
【請求項８】
結直腸がんを処置する方法であって、治療上有効量の４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体を、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有するヒト患者に投与することを含む方法。
【請求項９】
治療上有効量の式Ｉ
【化１】
2009544003.tif 000006
〔式中、
ｒは０から２であり、
ｎは０から２であり、
ｍは０から４であり、
Ｒ１およびＲ２は(ｉ)低級アルキルであるか、または
(ii)一緒になって下位式Ｉ＊
【化２】
2009544003.tif 000007
の架橋を形成し、結合は二つの末端炭素原子を介して達成されるか、または
(iii)一体となって下位式Ｉ**
【化３】
2009544003.tif 000008
（式中、環員Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３およびＴ４の１個または２個は窒素であり、他はいずれの場合もＣＨである）
の架橋を形成し、結合はＴ１およびＴ４を介して達成され；
Ａ、Ｂ、ＤおよびＥは各々独立してＮまたはＣＨである。ただし、これらの基の２つ以上がＮであることはなく；
Ｇは低級アルキレン、アシルオキシもしくはヒドロキシにより置換された低級アルキレン、−ＣＨ２−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｓ−、−ＣＨ２−ＮＨ−、オキサ(−Ｏ−)、チア(−Ｓ−)またはイミノ(−ＮＨ−)であり；
Ｑは低級アルキルであり；
ＲはＨまたは低級アルキルであり；
Ｘはイミノ、オキサまたはチアであり；
Ｙは置換もしくは非置換アリール、ピリジル、または非置換もしくは置換シクロアルキルであり；そして
Ｚはアミノ、モノ−もしくはジ置換アミノ、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヒドロキシ、エーテル化またはエステル化ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、エステル化カルボキシ、アルカノイル、カルバモイル、Ｎ−モノ−もしくはＮ，Ｎ−ジ置換カルバモイル、アミジノ、グアニジノ、メルカプト、スルホ、フェニルチオ、フェニル低級アルキルチオ、アルキルフェニルチオ、フェニルスルホニル、フェニル−低級アルキルスルフィニルまたはアルキルフェニルスルフィニルであり、置換基Ｚは１個以上の基Ｚが存在する場合、置換基Ｚは互いに同一または異なり得て；
そして、存在する場合、波線で示される結合は１重または２重結合である〕
の４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体、
または１個またはそれ以上のＮ原子が酸素原子を担持するとき、該定義化合物のＮ−オキシド；
または少なくとも１個の塩形成基を有する当該化合物の塩を、それを必要とする温血動物に投与することを含む、請求項２、４、７または８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
式Ｉの４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体がＰＴＫ／ＺＫである、請求項９の方法。
【請求項１１】
１２００ｍｇ／日から１３００ｍｇ／日のＰＴＫ／ＺＫを投与する、請求項１０の方法。
【請求項１２】
１２５０ｍｇ／日のＰＴＫ／ＺＫを投与する、請求項１０の方法。
【請求項１３】
高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルによって特徴付けられる消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがん、肺がん（小細胞および非小細胞）または神経冠原発がん、とりわけ結直腸がんの処置用医薬の製造のためのＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤の使用。
【請求項１４】
ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤と、プラチナ化合物および／または抗新生物性代謝拮抗剤、および所望によりフォリン酸から成る群から選択される少なくとも１種の化合物（有効成分は各場合において遊離形または薬学的に許容される塩形で存在している）、および所望により少なくとも１種の薬学的に許容される担体を含む組合せ剤の使用であって、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する患者のヒト消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがん、肺がん（小細胞および非小細胞）または神経冠原発がん、とりわけ結直腸がんの処置における同時、個別または逐次使用用医薬の製造のための使用。
【請求項１５】
組合せ剤がＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤、プラチナ化合物、とりわけオキサリプラチン、５−フルオロウラシルおよびフォリン酸を含む、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
組合せ剤がＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤、プラチナ化合物、とりわけオキサリプラチン、カペシタビンおよびフォリン酸を含む、請求項１４に記載の使用。
【請求項１７】
ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤と、トポイソメラーゼＩ阻害剤および／または抗新生物性代謝拮抗剤、および所望によりフォリン酸から成る群から選択される少なくとも１種の化合物（有効成分は各場合において遊離形または薬学的に許容される塩形で存在している）、および所望により少なくとも１種の薬学的に許容される担体を含む組合せ剤の使用であって、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する患者のヒト消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがん、肺（小細胞性および非小細胞性）がんまたは神経冠原発がん、とりわけ結直腸がんの処置における同時、個別または逐次使用用医薬の製造のための使用。
【請求項１８】
組合せ剤がＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、５−フルオロウラシルまたはカペシタビン、およびフォリン酸を含む、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
ＶＥＧＦ−Ｒが式Ｉ
【化４】
2009544003.tif 000009
〔式中、
ｒは０から２であり、
ｎは０から２であり、
ｍは０から４であり、
Ｒ１およびＲ２は(ｉ)低級アルキルであるか、または
(ii)一緒になって下位式Ｉ＊
【化５】
2009544003.tif 000010
の架橋を形成し、結合は二つの末端炭素原子を介して達成されるか、または
(iii)一体となって下位式Ｉ**
【化６】
2009544003.tif 000011
（式中、環員Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３およびＴ４の１個または２個は窒素であり、他はいずれの場合もＣＨである）
の架橋を形成し、結合はＴ１およびＴ４を介して達成され；
Ａ、Ｂ、ＤおよびＥは各々独立してＮまたはＣＨである。ただし、これらの基の２つ以上がＮであることはなく；
Ｇは低級アルキレン、アシルオキシもしくはヒドロキシにより置換された低級アルキレン、−ＣＨ２−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｓ−、−ＣＨ２−ＮＨ−、オキサ(−Ｏ−)、チア(−Ｓ−)またはイミノ(−ＮＨ−)であり；
Ｑは低級アルキルであり；
ＲはＨまたは低級アルキルであり；
Ｘはイミノ、オキサまたはチアであり；
Ｙは置換もしくは非置換アリール、ピリジル、または非置換もしくは置換シクロアルキルであり；そして
Ｚはアミノ、モノ−もしくはジ置換アミノ、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヒドロキシ、エーテル化またはエステル化ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、エステル化カルボキシ、アルカノイル、カルバモイル、Ｎ−モノ−もしくはＮ，Ｎ−ジ置換カルバモイル、アミジノ、グアニジノ、メルカプト、スルホ、フェニルチオ、フェニル低級アルキルチオ、アルキルフェニルチオ、フェニルスルホニル、フェニル−低級アルキルスルフィニルまたはアルキルフェニルスルフィニルであり、置換基Ｚは１個以上の基Ｚが存在する場合、置換基Ｚは互いに同一または異なり得て；
そして、存在する場合、波線で示される結合は１重または２重結合である〕
の４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体、
または１個またはそれ以上のＮ原子が酸素原子を担持するとき、該定義化合物のＮ−オキシド；
または少なくとも１個の塩形成基を有する当該化合物の塩
である、請求項１３から１８のいずれかに記載の使用。
【請求項２０】
ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤がＰＴＫ／ＺＫである、請求項１３から１８のいずれかに記載の使用。
【請求項２１】
ＶＥＧＦが「ＡＶＡＳＴＩＮ」（登録商標）の投与によって低減される、請求項１３から１８のいずれかに記載の使用。
【請求項２２】
４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体と、プラチナ化合物および／または抗新生物性代謝拮抗剤、および所望によりフォリン酸から成る群から選択される少なくとも１種の化合物（有効成分は各場合において遊離形または薬学的に許容される塩形で存在している）、および所望により少なくとも１種の薬学的に許容される担体を、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する患者の消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがん、肺がん（小細胞および非小細胞）または神経冠原発がん、とりわけ結直腸がんの処置における同時、個別または逐次使用のための指示書と共に含む商品パッケージ。
【請求項２３】
ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤単独または化学療法との組合せ処置に好適な候補であり得る、消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがん、肺がん（小細胞および非小細胞）または神経冠原発がん、とりわけ結直腸がんを有する対象を診断する方法であって、当該対象由来の生物学的サンプルのＬＤＨ５レベルをアッセイし、対照と比較して高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する対象がＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤単独または化学療法との組合せ処置に好適な候補である、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍負荷について患者をスクリーニングするための方法、ならびに高い血清もしくは血漿ＬＤＨ５レベルを有する、消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんおよび肺がん（小細胞および非小細胞）患者、および神経冠原発がん（cancers of neural crest origin）を有する患者の処置のための、ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤単独または化学療法との組合せにおける使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
増殖性疾患の処置のための血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）阻害剤の使用は、当業者に既知である。血管系およびその構成成分の増殖および分化を制御するネットワークの中心に、胚発生および正常な成長の間のいずれにおいても、そして多くの病理的異常および疾患において、「血管内皮増殖因子」（ＶＥＧＦ）として知られる血管形成因子が、その細胞受容体と共に存在する（Breier, G., et al., Trends in Cell Biology 6, 454-6 [1996] およびその中の引用文献参照）。ＶＥＧＦは２量体、ジスルフィド結合４６ｋＤａの糖タンパク質である。ＶＥＧＦ受容体は膜貫通受容体チロシンキナーゼである。該受容体は７個の免疫グロブリン様ドメインを持つ細胞外ドメインおよび細胞内チロシンキナーゼドメインにより特徴付けられる。ある種の疾患群、例えば網膜症、加齢性黄斑変性、感染、動脈硬化、およびとりわけ増殖性疾患、例えばいわゆる固形腫瘍、例えば結直腸がんおよび液性腫瘍、例えば白血病は、脱制御された血管形成に関連していることが知られている。ＶＥＧＦ−Ｒチロシンキナーゼ活性を阻害する様々な化合物が当該技術分野において報告されている。
【０００３】
診断においてある種の予後因子を示すヒトがん患者は、かかる予後因子を欠く患者と比較してより少ない予測される生存時間を有する患者であると考えられる。生存のための予後因子は、例えば結直腸がんについて、疾患の状態を決定し、予測される患者の生存時間を予測するのに適しているものとして同定されている（N. Kemeny et al, Prognostic variables in patients with hepatic metastases from colorectal cancer, Cancer 63(4), 1989, 742-7）．
【０００４】
高血清総ＬＤＨ（ラクターゼデヒドロゲナーゼ）レベルは、肺がん１−３、膵臓がん４および結直腸がん５−６を含む多くの固形腫瘍における不良な予後に関連している。この血清総ＬＤＨは、巨大、低酸素および進行性であり、かつ転移性増殖５を好む腫瘍の代理マーカーである。
【０００５】
血管は腫瘍に酸素および栄養を供給する。大きさおよび細胞密度における腫瘍増殖のために、酸素およびエネルギー拡散の限界に達する。血管から約１００ミクロンの距離で、腫瘍細胞が低酸素となり、低酸素症誘導性因子（ＨＩＦ）のような低酸素症に関連した遺伝子が安定化される。これらは続いて、ＬＤＨＡを含む様々な遺伝子のプロモーター領域における低酸素症応答要素（ＨＲＥ）に結合し、タンパク質の製造を上昇させる。
【０００６】
ＬＤＨ（ラクターゼデヒドロゲナーゼ）は、ＭおよびＨサブユニットから成る５種の４量体アイソフォーム（ＬＤＨ１−５）からなる糖分解酵素である。
【化１】
2009544003.tif 000002
ＨサブユニットはＬＤＨＢ遺伝子に由来し、低酸素症によって制御されない。ＭサブユニットはＬＤＨＡ遺伝子に由来し、低酸素症の間増加する。
【０００７】
結直腸腺がんおよび肺がんにおいて、血清総ＬＤＨは高腫瘍組織ＬＤＨ−５および腫瘍における低酸素症のマーカーと関連する３、７。したがって、腫瘍ＬＤＨ−５は低酸素症の内部マーカーとして考えられ得る８。さらにまた、肺および膀胱由来の隣接正常組織および腫瘍組織において、ＬＤＨ−ＨサブユニットからＭ含有アイソフォームへのシフトが存在することが示されている９−１１。
【発明の概要】
【０００８】
驚くべきことに、本発明において、血漿または血清由来のＬＤＨ５が腫瘍由来であり得て、そして総ＬＤＨよりもより特異的な低酸素性腫瘍のマーカーであることを見出した。
【０００９】
血漿または血清における高ＬＤＨ５は、腫瘍負荷に関連し、したがって最も高い腫瘍負荷を有しており、それゆえにＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤療法に、より応答する患者を同定するための階層マーカーとして使用することができる。ＬＤＨ５レベルによって腫瘍負荷を予測するため、血清または血漿ＬＤＨ５をＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤療法に対する応答をモニターするための非侵襲的方法として使用することができる。
【００１０】
下記実験部分で説明する試験において、血漿または血清ＬＤＨ５と２つの異なる腫瘍タイプの腫瘍負荷との密接な相関関係が示される。この相関関係は、多くの腫瘍タイプ間に適用することが可能である。この相関関係を例えば、腫瘍応答または特定の治療からの再発を評価するための臨床試験におけるバイオマーカーとして使用することができる。これは抗腫瘍から高血管形成両方のあらゆるタイプの治療法に適用可能である。
【００１１】
したがって本発明は、ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤での治療に成功し得る患者を選択するための血清または血漿ＬＤＨ５を測定することにより腫瘍負荷について患者をスクリーニングする非侵襲的方法であって、高い血清または血漿ＬＤＨ５が選択候補の基準である方法に関する。
【００１２】
本発明はさらに、ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤での治療に対する応答／再発をモニタリングするための、腫瘍の代替物またはバイオマーカーとして血清または血漿ＬＤＨ５を測定することにより腫瘍負荷について患者をスクリーニングする非侵襲的方法に関する。
【００１３】
本発明はさらに、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する、消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんおよび肺がん（小細胞および非小細胞）患者、ならびに高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する神経冠原発がん患者を処置するための、ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤単独または化学療法との組合せにおける使用に関する。
【００１４】
本発明はさらに、抗ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤での治療中に腫瘍サイズをモニターするための、腫瘍の進行、停止または退行を評価するために使用することができるバイオマーカーとしての血漿または血清中ＬＤＨ５の使用に関する。
【００１５】
本発明はさらに、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する、消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんおよび肺がん（小細胞および非小細胞）患者、ならびに高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する神経冠原発がん患者の処置用医薬の製造のための、ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤単独または上記化学療法との組合せにおける使用；かかる組合せ剤を同時、個別または逐次使用のための組合せ製剤として、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんおよび肺がん（小細胞および非小細胞）患者、または高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する神経冠原発がん患者の処置におけるかかる組合せ剤の使用のための指示書と共に含む商品パッケージまたは製品；および高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する、消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんおよび肺がん（小細胞および非小細胞）患者、ならびに高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する神経冠原発がん患者を処置する方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
（原文に記載無し）
【発明を実施するための形態】
【００１７】
より具体的には、本発明は以下の態様に関する：
・治療上有効量のＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤を高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する患者に投与することを含む、消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんまたは肺がん（小細胞および非小細胞）を処置する方法；および
・治療上有効量の４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体を高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する患者に投与することを含む、消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんまたは肺がん（小細胞および非小細胞）、または神経冠原発がんを有する患者を処置する方法；および
・治療の開始前に血清または血漿ＬＤＨ５レベルについて患者をスクリーニングする方法、および腫瘍負荷の代替物またはバイオマーカーとして治療中にレベルをモニターし、したがってＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤での治療（抗ＶＥＧＦＲ療法）に対する応答／再発である情報を得る方法。
【００１８】
「消化器がん、泌尿生殖器がん、またはリンパのがん、および肺がん（小細胞および非小細胞）、および神経冠原発がん」なる用語は、本明細書において使用するとき、とりわけ結直腸がん、肺がん、例えば非小細胞肺がんおよび小細胞肺がん、黒色腫、褐色細胞腫、神経芽腫、膵臓がん、リンパ腫、とりわけとりわけバーキットリンパ腫、ホジキンスリンパ腫および非ホジキンスリンパ腫、睾丸がん、中皮腫、腎細胞がん、卵巣がんおよび前立腺がんに関する。本発明の１つの好ましい態様において、がんタイプは結直腸がん、とりわけ転移性結直腸がんである。
【００１９】
ＬＤＨ５値を患者の血漿サンプルから、当業者に既知の標準的な研究室的血清評価によって測定することができる。この目的のために、典型的には、血液サンプル（２から１０ｍＬ）を静脈、または踵、指、爪先または肘から吸引し、予め冷却した（氷浴）ヘパリン化チューブに回収し、ゆっくりと８から１０回反転させ、速やかに氷浴に置く。３０分以内に血漿を遠心分離（例えば、約２０００×ｇ、４℃、１０分）で製造する。遠心分離の後、血漿サンプルを≦−１８℃で分析まで凍結保存することができる。
【００２０】
ＬＤＨ５値を患者の血清サンプルから、当業者に既知の標準的な研究室的血清評価によって測定することができる。この目的のために、典型的には、血液サンプル（２から１０ｍＬ）を静脈、または踵、指、爪先または肘から吸引し、血液層の分離を良好にするＺ−Ｇｅｌ（Sarstedt, Nuembrecht, Germany）を含む通常のマイクロチューブに回収する。これを室温で３０分静置する。３０分以内に血漿を遠心分離（例えば、約２０００×ｇ、４℃、１０分）で製造する。遠心分離の後、血漿サンプルを≦−１８℃で分析まで凍結保存することができる。
【００２１】
より広い局面において、本発明は、あらゆる種類の機構によって不良な予後を有する消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんもしくは肺がん（小細胞および非小細胞）患者、および不良な予後を有する神経冠原発がん患者、とりわけ高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する患者のＶＥＧＦ活性を低減させる化合物の使用に関する。ＶＥＧＦの活性を減少させる化合物は、とりわけ、ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼを阻害する化合物、ならびにＶＥＧＦ受容体を阻害する化合物およびＶＥＧＦと結合する化合物であり、そしてとりわけ、ＷＯ  ９８／３５９５８、ＷＯ  ００／０９４９５、ＷＯ  ００／２７８２０、ＷＯ  ００／５９５０９、ＷＯ  ９８／１１２２３、ＷＯ  ００／２７８１９、ＷＯ  ０１／５５１１４、ＷＯ  ０１／５８８９９およびＥＰ  ０７６９９４７に一般的および具体的に記載の化合物、タンパク質およびモノクローナル抗体；M. Prewett et alの Cancer Research 59 (1999) 5209-5218、F. Yuan et alの Proc. Natl. Acad. Sci. USA, vol. 93, pp. 14765-14770, December 1996、Z. Zhu et alの Cancer Res. 58, 1998, 3209-3214、およびJ. Mordenti et alのToxicologic Pathology, vol. 27, no. 1, pp 14-21, 1999に記載のもの；ＷＯ  ００／３７５０２およびＷＯ  ９４／１０２０２に記載のもの；M． S． O’Reilly et al， Cell 79， 1994， 315‐328に記載のＡｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ（商標）；およびM． S． O’Reilly et al， Cell 88， 1997， 277‐285に記載のＥｎｄｏｓｔａｔｉｎ（商標）；各場合においてとりわけ請求項の化合物、および実施例の最終生成物、最終生成物の主題、医薬製剤および請求項であり、これらの文献を参照により本明細書の一部とする。単独または組合せで有効成分として使用する本命明細書に記載の化合物を、それぞれ記載の文献に記載のとおり製造および投与することができる。
【００２２】
１つの態様において、本発明は、４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体単独、または化学療法との組合せにおける使用であって、薬剤を同時、個別または逐次的に投与することによって、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんもしくは肺がん（小細胞および非小細胞）または神経冠原発がんを処置するための使用に関する。
【００２３】
ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼの阻害剤である４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体、およびそれらの製造、その医薬製剤、かかる化合物の製造方法は、ＷＯ００／５９５０９、ＥＰ０２／０４８９２、ＷＯ０１／１０８５９およびとりわけ、米国特許第６，２５８，８１２号に記載されている（出典明示により本明細書の一部とする）。式Ｉ
【化２】
2009544003.tif 000003
〔式中、
ｒは０から２であり、
ｎは０から２であり、
ｍは０から４であり、
Ｒ１およびＲ２は(ｉ)低級アルキルであるか、または
(ii)一緒になって下位式Ｉ＊
【化３】
2009544003.tif 000004
の架橋を形成し、結合は二つの末端炭素原子を介して達成されるか、または
(iii)一体となって下位式Ｉ**
【化４】
2009544003.tif 000005
（式中、環員Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３およびＴ４の１個または２個は窒素であり、他はいずれの場合もＣＨである）
の架橋を形成し、結合はＴ１およびＴ４を介して達成され；
Ａ、Ｂ、ＤおよびＥは各々独立してＮまたはＣＨである。ただし、これらの基の２つ以上がＮであることはなく；
Ｇは低級アルキレン、アシルオキシもしくはヒドロキシにより置換された低級アルキレン、−ＣＨ２−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｓ−、−ＣＨ２−ＮＨ−、オキサ(−Ｏ−)、チア(−Ｓ−)またはイミノ(−ＮＨ−)であり；
Ｑは低級アルキルであり；
ＲはＨまたは低級アルキルであり；
Ｘはイミノ、オキサまたはチアであり；
Ｙは置換もしくは非置換アリール、ピリジル、または非置換もしくは置換シクロアルキルであり；そして
Ｚはアミノ、モノ−もしくはジ置換アミノ、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヒドロキシ、エーテル化またはエステル化ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、エステル化カルボキシ、アルカノイル、カルバモイル、Ｎ−モノ−もしくはＮ，Ｎ−ジ置換カルバモイル、アミジノ、グアニジノ、メルカプト、スルホ、フェニルチオ、フェニル低級アルキルチオ、アルキルフェニルチオ、フェニルスルホニル、フェニル−低級アルキルスルフィニルまたはアルキルフェニルスルフィニルであり、置換基Ｚは１個以上の基Ｚが存在する場合、置換基Ｚは互いに同一または異なり得て；
そして、存在する場合、波線で示される結合は１重または２重結合であるか；
または１個またはそれ以上のＮ原子が酸素原子を担持するとき、定義の化合物のＮ−オキシドである；
ただし、Ｙがピリジルまたは非置換シクロアルキルであるとき、Ｘはイミノであり、残りの基は上記定義のとおりであり、Ｇは低級アルキレン、−ＣＨ２−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｓ−、オキサおよびチアから成る群から選択される〕
の化合物、およびそれらの薬学的に許容される塩が最も好ましい。
【００２４】
式Ｉの化合物の定義において使用される基および記号は、ＷＯ  ９８／３５９５８に記載の意味を有する（出典明示により本明細書の一部とする）。
【００２５】
「ＰＴＫ７８７」または「ＰＴＫ／ＺＫ」または「ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４」なる用語は、本明細書において使用するとき、ｒ、ｎおよびｍが各々０であり、Ｒ１とＲ２が一体となって下位式Ｉ＊の架橋を形成し、Ａ、Ｂ、ＤおよびＥが各々ＣＨであり、Ｇがメチレンであり、Ｘがイミノであり、Ｙが４−クロロフェニルであり、波線で示される結合が二重結合である式ＩのＶＥＧＦ受容体チロシン阻害剤を意味する。かかる式ＩのＶＥＧＦ受容体チロシン阻害剤は、本発明に極めて好ましい。最も好ましくは、ＰＴＫ７８７をコハク酸塩形で使用する。
【００２６】
ヒトにおける試験によって、ＰＴＫ７８７が十分に耐用性であり、腫瘍血管浸透性を低下させることが示されている。ＰＴＫ７８７に関するさらなる言及には、その薬学的に許容される塩が含まれることを意図していると理解される。
【００２７】
本発明の１つの態様において、ＶＥＧＦの活性を「ＡＶＡＳＴＩＮ」（登録商標）の投与によって減少させる。
【００２８】
増殖性疾患の処置のための化学療法は、当業者に既知である。化学療法との組合せにおいて適用するとき、薬剤を同時、個別、または逐次的に投与する。
【００２９】
本発明の好ましい態様において、化学療法にはプラチナ化合物および／または抗新生物性代謝拮抗剤、および所望によりフォリン酸が含まれる。本発明の具体的な態様において、化学療法はプラチナ化合物、５−フルオロウラシルおよびフォリン酸を含む。さらに具体的な本発明の態様において、化学療法はプラチナ化合物、カペシタビンおよびフォリン酸を含む。
【００３０】
本発明の他の態様において、化学療法は、トポイソメラーゼＩ阻害剤および／または抗新生物性代謝拮抗剤、および所望によりフォリン酸を含む。本発明の具体的な態様において、化学療法は、トポイソメラーゼＩ阻害剤、５−フルオロウラシルまたはカペシタビン、およびフォリン酸を含む。
【００３１】
「抗新生物性代謝拮抗剤」なる用語には、これらに限定されないが、５−フルオロウラシル、テガフル、カペシタビン、クラドリビン、シタラビン、リン酸フルダラビン、フルオロウリジン、ゲムシタビン、６−メルカプトプリン、ヒドロキシウレア、メトトレキセート、エダトレキセート、およびかかる化合物の塩、さらにまた、ＺＤ１６９４（ＲＡＬＴＩＴＲＥＸＥＤ（商標））、ＬＹ２３１５１４（ＡＬＩＭＴＡ（商標））、ＬＹ２６４６１８（ＬＯＭＯＴＲＥＸＯＬ（商標））およびＯＧＴ７１９が含まれる。
【００３２】
５−フルオロウラシルを、例えばＵＳ  ２，８０２，００５に記載の通り製造することができる。これは例えば、ＥＦＵＤＥＸ（商標）、ＦＬＵＲＡＣＩＬ（商標）またはＦＬＵＲＯＢＬＡＳＴＩＮ（商標）の商品名で市販されているとおりに使用することができる。テガフルは、とりわけＵＳ  ５，１１６，６００およびＵＳ  ５，５２５，６０３に記載の組成物の形態で使用することができる。さらにまた、テガフルは例えば、ＦＴＯＲＡＦＵＲ（商標）、ＬＡＭＡＲ（商標）またはＮＥＢＥＲＥＫ（商標）の商品名で市販されている形態で投与することができる。カペシタビンは例えば、ＵＳ  ５，４７２，９４９に記載の形態で、または例えばＸＥＬＯＤＡ（商標）の商品名で市販されている形態で投与することができる。クラドリビンは、例えばＵＳ  ４，７６０，１３５に記載されているとおりに製造することができる。これは、例えばＬＥＵＳＴＡＴＩＮ（商標）またはＬＥＵＳＴＡＴ（商標）の商品名で市販されている形態で投与することができる。シタラビンは、例えばＵＳ  ３，１１６，２８２、またはHesslerのJ. Org. Chem. 41 (1970) 1828に記載の通りに製造することができる。これは、例えばＡＲＡ−Ｃ（商標）、ＣＹＴＯＳＡＲ（商標）またはＵＤＩＣＩＬ（商標）の商品名で市販されている形態で投与することができる。かかる化合物の好適な塩は、シタラビンオクフォスフェート（ＳＴＡＲＡＳＩＤ（商標））であり、これをＵＳ  ４，８１２，５６０に記載の通りに製造することができる。リン酸フルダラビンを、ＵＳ  ４，３５７，３２４に記載の通りに製造することができる。これは、ＦＬＵＤＡＲＡ（商標）の商品名で市販されているとおりに適用することができる。ゲムシタビンは、例えば、ＵＳ  ５，４６４，８２６の開示にしたがって、または例えばＧＥＭＺＡＲ（商標）の商品名で市販されている形態で投与することができる。６−メルカプトプリン（６−プリンチオール）を例えば、ＵＳ  ２，９３３，４９８に記載の通りに製造することができる。これは例えば、ＬＥＵＫＥＲＩＮ（商標）またはプリンＴＨＯＬ（商標）の商品名で市販されている通りに使用することができる。ヒドロキシウレアは、例えばＵＳ  ２，７０５，７２７に記載の通りに製造することができる。メトトレキセートは、例えばＦＯＬＥＸ（商標）またはＭＴＸ（商標）の商品名で市販されている通りに使用することができる。エダトレキセートは、例えばＵＳ  ４，３６９，３１９に記載の通りに製造することができる。
【００３３】
「フォリン酸」なる用語は、Ｎ−［４−［［（２−アミノ−５−ホルミル−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−４−オキソ−６−プテリジニル）メチル］アミノ］ベンゾイル−Ｌ−グルタミン酸に関し、これは例えば、ＬＥＵＣＯＶＯＲＩＮ（商標）の商品名で市販されている。
【００３４】
「プラチナ化合物」なる用語は、本明細書において使用するとき、カルボプラチン、シスプラチンまたはオキサリプラチンを意味する。好ましくは、プラチナ化合物はオキサリプラチンである。
【００３５】
「カルボプラチン」なる用語は、本明細書において使用するとき、抗新生物性薬剤ｃｉｓ−ジアミン（１，１−シクロブタンジカルボキシレート）プラチナム（ＩＩ）に関し、これは例えば、ＵＳ  ４，１４０，７０７またはR.C. Harrison et al.のInorg. Chim. Acta 46，L15 (1980)に記載されている。この薬剤は例えばＣＡＲＢＯＰＬＡＴ（商標）またはＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。
【００３６】
「オキサリプラチン」なる用語は、本明細書において使用するとき、オキサリプラチナムとしても知られている抗新生物性薬剤に関し、これは例えば、ＵＳ  ５，７１６，９８８に記載されている。この薬剤は例えば、上記米国特許または例えばＥＬＯＸＡＮＴＩＮＥ（商標）または１−ＯＨＰ（商標）の商品名で市販されている形態で、投与することができる。
【００３７】
「シスプラチン」なる用語は、本明細書において使用するとき、ｃｉｓ−ジアミンジクロロプラチナムとしても知られている抗新生物性薬剤に関し、この化合物およびその抗新生物性薬剤としての使用は例えば、ＤＥ  ２，３１８，０２０に記載されている。
【００３８】
「トポイソメラーゼＩ阻害剤」なる用語は、本明細書において使用するとき、これらに限定されないが、トポテカン、イリノテカン、９−ニトロカンプトテシンおよび巨大分子カンプトテシン結合ＰＮＵ−１６６１４８（ＷＯ９９／１７８０４の化合物Ａ１）を含む。イリノテカンは例えば、ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。トポテカンは例えば、ＨＹＣＡＭＴＩＮ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。
【００３９】
本発明のより広い意味において、「化学療法」なる用語は、これらに限定されないが、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、微小管活性剤、プロテインキナーゼＣ阻害剤、ゴナドレリンアゴニスト、抗アンドロゲン剤、ビスホスホネート、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、Ｓ−アデノシルメチオニンデカルボキシラーゼ阻害剤およびトラスツズマブから成る群から選択される抗新生物性薬剤の投与を意味する。
【００４０】
「トポイソメラーゼＩＩ阻害剤」なる用語は、本明細書において使用するとき、これらに限定されないが、アントラサイクリンドキソルビシン、（リポソーム製剤、例えばＣＡＥＬＹＸ（商標）を含む）、エピルビシン、イダルビシンおよびネモルビシン、アントラキノンミトキサントロンおよびロソキサントロン、およびポドフィロトキシンエトポシドおよびテニポシドを含む。エトポシドは例えば、ＥＴＯＰＯＰＨＯＳ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。テニポシドは例えば、ＶＭ  ２６−ＢＲＩＳＴＯＬ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。ドキソルビシンは例えば、ＡＤＲＩＢＬＡＳＴＩＮ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。エピルビシンは例えば、ＦＡＲＭＯＲＵＢＩＣＩＮ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。イダルビシンは例えば、ＺＡＶＥＤＯＳ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。ミトキサントロンは例えば、ＮＯＶＡＮＴＲＯＮ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。
【００４１】
「微小管活性剤」なる用語は、パクリタキセル、ドセタキセル、エレウセロビン、ビンカアルカロイド、例えばビンブラスチン、とりわけ硫酸ビンブラスチン、ビンクリスチン、とりわけ硫酸ビンクリスチン、およびビノレルビンおよびディスコデルモリドから選択される、微小管安定化剤および微小管脱安定化剤に関する。硫酸ビンブラスチンは例えば、ＶＩＮＢＬＡＳＴＩＮ  Ｒ．Ｐ．（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。硫酸ビンクリスチンは例えば、ＦＡＲＭＩＳＴＩＮ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。
【００４２】
「プロテインキナーゼＣ阻害剤」なる用語は、とりわけスタウロスポリン誘導体、および好ましくは、ＵＳ  ５，０９３，３３０に記載のものに関する。かかる化合物は、ＷＯ９９／４８８９６に記載されている形態で投与することができる。
【００４３】
「抗血管形成化合物」なる用語は、本明細書において使用するとき、サリドマイド（ＴＨＡＬＯＭＩＤ（商標））、ＳＵ５４１６、ソラフェニブ、ステントに関する。
【００４４】
「ゴナドレリンアゴニスト」なる用語は、本明細書において使用するとき、これらに限定されないが、アバレリクス、ゴセレリンおよび酢酸ゴセレリンを含む。ゴセレリンはＵＳ  ４，１００，２７４に記載されており、ＺＯＬＡＤＥＸ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。アバレリクスは例えば、ＵＳ  ５，８４３，９０１に記載されている通りに製剤することができる。
【００４５】
「抗アンドロゲン剤」なる用語は、本明細書において使用するとき、これらに限定されないが、ビカルタミド（ＣＡＳＯＤＥＸ（商標））を含み、これは例えば、ＵＳ  ４，６３６，５０５に記載されている通りに製剤することができる。
【００４６】
「ビスホスホネート」なる用語は、本明細書において使用するとき、これらに限定されないが、エトリドン酸、クロドロン酸、チルドロン酸、パミドロン酸、アレンドロン酸、イバンドロン酸、リセドロン酸およびゾレドロン酸を含む。エトリドン酸は、例えば、ＤＩＤＲＯＮＥＬ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。クロドロン酸は例えば、ＢＯＮＥＦＯＳ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。チルドロン酸は、例えばＳＫＥＬＩＤ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。パミドロン酸は例えば、ＡＲＥＤＩＡ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。アレンドロン酸は例えば、ＦＯＳＡＭＡＸ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。イバンドロン酸は例えば、ＢＯＮＤＲＡＮＡＴ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。リセドロン酸は例えば、ＡＣＴＯＮＥＬ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。ゾレドロン酸は例えば、ＺＯＭＥＴＡ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。
【００４７】
「ヒストンデアセチラーゼ阻害剤」なる用語は、本明細書において使用するとき、これらに限定されないが、ＭＳ−２７５、ＳＡＨＡ、ＦＫ２２８（正式にはＦＲ９０１２２８）、トリコスタチンＡおよびＷＯ  ０２／２２５７７に記載の化合物、とりわけＮＶＰ−ＬＡＱ８２４またはその乳酸塩、およびＮＶＰ−ＬＢＨ５８９を含む。
【００４８】
「Ｓ−アデノシルメチオニンデカルボキシラーゼ阻害剤」なる用語は、本明細書において使用するとき、これらに限定されないが、ＵＳ  ５，４６１，０７６に記載の化合物を含む。
【００４９】
「トラスツズマブ」は、例えばＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（商標）の商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。
【００５０】
コード番号、一般名および商品名で同定される活性薬剤の構造は、標準的概要書「The Merck Index」の現行版またはデータベース、例えばPatents Internationalまたは他のIMS World Publicationsから入手することができる。対応するその内容を、参照により本明細書の一部とする。
【００５１】
「組合せ製剤」なる用語は、本明細書において使用するとき、上記定義の組合せパートナー（ａ）および（ｂ）を独立して、または異なる量の組合せパートナー（ａ）および（ｂ）を含む異なる固定された組合せ剤の使用によって、すなわち同時または異なる時点で投与することができるという意味において、とりわけ「パーツのキット」と定義される。パーツのキットのパーツを、例えば同時に、または時短を違えて、すなわち異なる時点で、そしていずれかのパーツのキットのパーツを等しいまたは異なる時間間隔で投与することができる。したがって、本発明はさらに、経口投与に適した形態の１−（４−クロロアニリノ）−４−（４−ピリジルメチル）フタラジンまたはその薬学的に許容される塩、および１−（４−クロロアニリノ）−４−（４−ピリジルメチル）フタラジンまたはその薬学的に許容される塩を、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんもしくは肺がん（小細胞および非小細胞）患者、または高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する神経冠原発がんを有する患者に投与するための指示書を含む商品パッケージを含む。
【００５２】
本発明はまた、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する患者における消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんもしくは肺がん（小細胞性および非小細胞性）、または神経堤起源細胞がんの処置のための、ならびに高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルによって特徴付けられる消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがんもしくは肺がん（小細胞および非小細胞）、または神経冠原発がんの処置用医薬の製造のための、本明細書に記載の組合せ剤の使用に関する。
【００５３】
「転移性増殖」なる用語は、本明細書において使用するとき、腫瘍の転移性拡散およびがん患者の他の臓器における微小転移巣の増殖および発生を含む。
【００５４】
組合せパートナー（ａ）および（ｂ）についての言及は、当該化合物の薬学的に許容される塩も含むことを意味すると理解される。
【００５５】
一般に、結直腸がんの処置のために、４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体を経口的に、継続的に、例えば１日１回投与することができる。１−（４−クロロアニリノ）−４−（４−ピリジルメチル）フタラジンコハク酸塩について、７５０ｍｇから２５００ｍｇ、とりわけ１０００ｍｇから１５００ｍｇ／日、より好ましくは１２００ｍｇから１３００ｍｇ／日、最も好ましくは１２５０ｍｇ／日の１日経口投与量が、薬学的に有効な用量として理解される。しかし、他の投与スケジュールも同様に有効であり、本発明の範囲に含まれる。
【００５６】
本明細書に記載の組合せ剤において使用される組合せパートナーを１個の薬剤として市販されている形態で適用するとき、それらの用量および投与形態を、特に記載がない限り、本明細書に記載の有利な効果を得るために、各市販薬剤の添付文書によって得られる情報に従って行うことができる。
【００５７】
化学療法は一般に、確立された投与レジメンに従って投与される。かかる投与レジメン、例えば結直腸がんについてのｄｅＧｒａｍｏｎｔレジメンは、当業者に既知である（A De Gramont et al，J. Clin. Onc. 18(16)，2000，2938-47）。特定の態様において、化学療法は、確立された投与レジメン、例えば当業者に既知のものに従ってオキサリプラチン、フォリン酸および５−フルオロウラシルを投与することを含む。具体的な化学療法レジメンは、８５ｍｇ／ｍ２のオキサリプラチンを１日目に投与し、２００ｍｇ／ｍ２のフォリン酸を２時間輸液として１および２日目に投与し、そして５−フルオロウラシルをボーラスとして４００ｍｇ／ｍ２、次に６００ｍｇ／ｍ２の用量で２２時間にわたって、１および２日目に投与し、これを１４日毎に投与することがとりわけ有用である。
【００５８】
５−フルオロウラシルをヒトに、約５０から１０００ｍｇ／ｍ２／日、例えば５００ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。
【００５９】
カペシタビンをヒトに、約１０から１０００ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。
【００６０】
塩酸ゲムシタビンをヒトに、１０から約１０００ｍｇ／週の用量範囲で投与することができる。
【００６１】
メトトレキセートをヒトに、約５から５００ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。
【００６２】
ＺＤ  １６９４（ＲＡＬＴＩＴＲＥＸＥＤ（商標））をヒトに、約２．０から４．０ｍｇ／ｍ２、例えば３．５ｍｇ／ｍ２の用量範囲で、３週間毎に１５分輸液として投与することができる。
【００６３】
カルボプラチンをヒトに、約１００から４００、例えば２００ｍｇ／ｍ２体表面の用量範囲で、約４から６週間毎に静脈内投与することができる。
【００６４】
オキサリプラチンをヒトに、約２５から１３５、例えば４５または８５ｍｇ／ｍ２体表面の用量範囲で、２から３週間毎に静脈内投与することができる。
【００６５】
シスプラチンをヒトに、約２５から１００ｍｇ／ｍ２の用量範囲で約３週間毎に投与することができる。
【００６６】
トポテカンはヒトに、約１から５ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。
【００６７】
イリノテカンはヒトに、約５０から３５０ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。
【００６８】
ビンブラスチンはヒトに、約１．５から１０ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。硫酸ビンクリスチンはヒトに、約０．０２５から０．０５ｍｇ／ｋｇ体重／週の用量範囲で投与することができる。ビノレルビンはヒトに、約１０から５０ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。リン酸エトポシドはヒトに、約２５から１１５ｍｇ／ｍ２／日、例えば５６．８または１１３．６ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。テニポシドはヒトに、約７５から１５０ｍｇ、約２週間毎の用量範囲で投与することができる。ドキソルビシンはヒトに、約１０から１００ｍｇ／ｍ２／日、例えば２５もしくは５０ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。エピルビシンはヒトに、約１０から２００ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。イダルビシンはヒトに、約０．５から５０ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。ミトキサントロンはヒトに、約２．５から２５ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。パクリタキセルはヒトに、約５０から３００ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。アレンドロン酸はヒトに、約５から１０ｍｇ／日の用量範囲で投与することができる。クロドロン酸はヒトに、例えば約７５０から１５００ｍｇ／日の用量範囲で投与することができる。エトリドン酸はヒトに、約２００から４００ｍｇ／日の用量範囲で投与することができる。イバンドロン酸はヒトに、約１から４ｍｇ／３から４週の用量範囲で投与することができる。リセドロン酸はヒトに、約２０から３０ｍｇ／日の用量範囲で投与することができる。パミドロン酸はヒトに、約１５から９０ｍｇ／３から４週の用量範囲で投与することができる。チルドロン酸はヒトに、約２００から４００ｍｇ／日の用量範囲で投与することができる。トラスツズマブはヒトに、約１から４ｍｇ／ｍ２／週の用量範囲で投与することができる。ビカルタミドはヒトに、約２５から５０ｍｇ／ｍ２／日の用量範囲で投与することができる。
【００６９】
増殖性疾患に共同的に治療上有効である量で本明細書に記載の組合せ剤を含む医薬組成物を提供することは本発明の１つの目的である。この組成物において、組合せパートナー（ａ）および（ｂ）を一緒に、連続的にまたは個別に、単位投与形態で、または２個の別個の単位投与形態で投与することができる。単位投与形態はまた、固定された組合せ剤であり得る。
【００７０】
組合せパートナー（ａ）および（ｂ）の個別投与のための、および固定された組合せ剤、すなわち少なくとも２種の組合せパートナー（ａ）および（ｂ）を含む１個の医薬組成物の投与のための本発明の医薬組成物を、自体公知の方法で製造することができ、そしてそれはヒトを含む哺乳類（温血動物）に経腸、例えば経口または直腸、および非経腸投与に適しており、治療上有効量の少なくとも１種の薬理学的活性組合せパートナーを単独で、または１種以上の薬学的に許容される担体、とりわけ経腸もしくは非経腸適用に好適なものと組合せて含む。
【００７１】
新規な医薬組成物は例えば、約１０％から約１００％、好ましくは約２０％から約６０％の有効成分を含む。経腸または非経腸投与のための医薬製剤は、例えば単位投与形態のもの、例えば糖衣錠、錠剤、カプセル剤または座薬、およびさらにアンプルである。特に記載が無い限り、これらを自体公知の方法で、例えば常套の混合、造粒、糖コーティング、溶解または凍結乾燥方法によって製造する。各投与形態の個々の用量に含まれる組合せパートナーの単位含量それ自体が有効量を構成する必要がないことは、必要な有効量を複数の投与単位の投与によって達成することが可能であるため、理解される。
【００７２】
確立された試験モデルによってＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤単独または化学療法との組合せによって上記の有利な効果が得られることを示すことができる。当業者はかかる有利な効果を証明するための対応する試験モデルを選択することが十分可能である。薬理学的活性は、例えば臨床試験または本質的に以下に記載されている試験方法において示され得る。
【００７３】
好適な臨床試験は、例えば、転移性結直腸がんを有する患者におけるランダム化二重盲検プラセボ対照並行試験、あるいは用量漸増試験である。化学療法を含む処置スケジュールのために、所望により急性嘔吐の予防のための標準的制吐レジメンを化学療法、例えば５ＨＴ３アンタゴニスト、例えばコルチコステロイドを含むかまたは含まないグラニセトロンまたはオンダンセトロンの日に患者に投与することができる。かかる試験の主要評価項目は、一般状態、生活の質スコア、疾患の進行時間、疾病率、死亡率または無進行生存期間の増加であり得る。動的造影磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）の形態での腫瘍評価は、処置の効果を測定する好適なアプローチである。
【００７４】
１つの局面において、本発明は、４−ピリジルメチル−フタラジン誘導体と、プラチナ化合物および／または抗新生物性代謝拮抗剤、および所望によりフォリン酸から成る群から選択される少なくとも１種の化合物（有効成分は各場合において遊離形または薬学的に許容される塩形で存在している）、および所望により少なくとも１種の薬学的に許容される担体を、高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する患者の消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがん、肺がん（小細胞および非小細胞）または神経冠原発がんの処置における同時、個別または逐次使用のための指示書と共に含む商品パッケージを提供する。
【００７５】
さらなる局面において、本発明は、ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤、好ましくは式Ｉのもの単独または化学療法との組合せ処置に好適な候補であり得る、消化器がん、泌尿生殖器がん、リンパのがん、肺がん（小細胞性および非小細胞性）または神経冠原発がん、とりわけ転移性結直腸がんを有する対象を診断する方法であって、当該対象由来の生物学的サンプル、とりわけ血液または血清または血漿サンプルのＬＤＨ５レベルをアッセイし、対照と比較して高い血清または血漿ＬＤＨ５レベルを有する対象がＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤単独または化学療法との組合せ処置に好適な候補である、方法を提供する。
【実施例】
【００７６】
実験部分
ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４（血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）受容体チロシンキナーゼ阻害剤）、アバスチン（ＶＥＧＦ−Ａヒト化抗体）およびＤＣ１０１（ラット抗マウスＶＥＧＦＲ２阻害剤）を、腫瘍負荷を減少させ、ＬＤＨ５の血清／血漿レベルに作用する例示的化合物として使用する。
【００７７】
材料
Helena Biosciencesのザイモグラム技術を用いてＬＤＨアイソフォームをアガロースゲル上で分離する。Helena biosciences装置SAS-1 Plus（Cat.Nr. 1531）。ＬＤＨアイソザイム測定を、Helena BioSciences Europe，Colima Avenue，Sunderland Enterprise Park，Sunderland Tyne & Wear，SR5 3 XB，England のDiagnosticキット（Cat.Nr. 201300）を用いて確立する。
Cat. No. 210300      塗布ブレード
Cat. No. 210100      使い捨てサンプルカップ
Cat. No. 5014        Development weight
Cat.No. 4062         インキュベーションチャンバー
Cat. No.3100         Rep Prep バッファー
脱染溶液：氷酢酸１００ｍｌと純水９００ｍｌの混合物。固く閉じたボトル中で保存。
【００７８】
方法
３５μｌ血漿サンプルを使い捨てサンプルカップ（#210100）にピペットで取り、キットに記載の通り実行した。要約すると、サンプルトレーをアプリケーターの所定位置に注意深く置いた。４００μｌのRep Prep バッファー（#3100）をヒートシンク上に注加し、アガロースゲル面を上にして、ゲル下に気泡が入らないようにゲルを注意深くヒートシンク上に置いた。ゲル表面をブロッターＣ紙で乾燥させてゲル上部の過剰のバッファーを除去した。２つの電極をそれらがゲルブロックに接触するように、電極支柱の上側に取り付けて、カバーをゲルおよび電極に被せ、接触を確かにするため５秒間押した。１個の塗布器ブレードアセンブリ（#210300）を装置の頭頂部に置き、ＬＤ電気泳動を行った。５つのサンプル塗布を機械で行った。アガロースゲルを８０ボルトで２０分間、１５℃で実行した。電気泳動の終了の約３−４分前に、１バイアルのＬＤアイソザイムをＬＤアイソザイム希釈剤１ｍｌを加えて再構成した。ＬＤアイソザイム試薬の全量をゲルの中央に沿って注いだ。試薬の均等な拡散を確かにするため、試薬拡散フィルム１枚を注意深くゲルの上に適用した。ゲルを２５分間、４５℃でインキュベートした。インキュベーション後、試薬拡散フィルムおよび両ゲルブロックを取り外した。ゲルを１０％酢酸で２分間脱染色した。ブロッターＢを脱染溶液で湿らせ、ゲル表面に置き、次に三つ折りペーパータオルを置いた。ゲルをdevelopment weightで５分間プレスした。完了後速やかにゲルをスキャンした。５つのアイソザイムバンドをAlpha Ease v5.5ソフトウェアプログラムで定量した。
【００７９】
ＬＤＨバンドの定量
ザイモグラムゲルを、hp scanjet 5590を用いてスキャンした。スキャンした画像をＴＩＦファイルとして保存し、バンドをMicrosoftプログラム Alpha Ease V5.5を用いて定量した。値を積分密度値（ＩＤＶ＝定義領域の全ピクセルの合計）として表現する。
【００８０】
本明細書の一部を構成する添付の図面（図１−４）は、本発明の例示的態様を説明する。
【００８１】
実施例１：
血漿を、２人の健常ボランティア、２匹の非腫瘍マウスおよび８匹のヒト前立腺腫瘍系ＤＵ１４５を埋め込んだマウス（２匹はビークル（ＰＥＧ３００）で、２匹はＰＴＫ／ＺＫ  １００ｍｇ／ｋｇ／ｐ．ｏ．／日で、２匹はＡｖａｓｔｉｎ  ５ｍｇ／ｋｇで週２回、ｉ．ｐ．で、そしてＤＣ１０１  ２１ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．で週２回処置した）から採取した。ＤＵ１４５腫瘍を０日目に埋め込み、処置は１７から４３日目であった。
【００８２】
ヒトＬＤＨアイソフォームはマウスＬＤＨアイソザイムよりも異なる電気泳動シフトを有する。これは、Ｍサブユニットが２種の間で実質的に異なるからである。ＬＤＨ５はＭサブユニットのみから成るため、これはヒトとマウス間で最も大きい差を示す（図１で比較；レーン１および２と３および４）。Ｍサブユニットを含むため、ＬＤＨ４、３および２も異なるシフトを示すＬＤＨ１バンドはマウスとヒト間で類似する。非腫瘍マウスとヒト間の他の驚くべき差は、アイソフォームの優性である。ヒトは血漿中により多くのＬＤＨ１、２、３を有するが、マウスは多量のＬＤＨ５を有する。
【００８３】
ヒト由来ＬＤＨ（腫瘍由来）対マウスＬＤＨ（間質由来）をこのＤＵ１４５モデルで区別する電気泳動シフトの違いを利用することができる。
【００８４】
図１；レーン５および６（ビークル）各々、７および８（ＰＴＫ／ＺＫ）、９および１０（Ａｖａｓｔｉｎ）、１１および１２（ＤＣ１０１−抗マウスＶＥＧＦＲ２抗体）において、ヒトＬＤＨ５バンドを明瞭に見ることができ、したがってこれは腫瘍に由来するものである。これはまた、図１のゲルの下部分の各腫瘍の移動に示すとおり、腫瘍負荷に相関する。
間質成分も存在するように見えるが、マウスとヒトのバンドを同時に実行するため、確保および定量することはより困難である。
【００８５】
ヒトＬＤＨ５バンドを各ＤＵ１４５マウス血漿サンプルについて定量した。図２において、各バンドの密度を動物から切除した腫瘍重要に対してプロットしたところ、ＬＤＨ５と腫瘍負荷の良好な相関関係が示される。
【００８６】
実施例２：
血漿を、２人の健常ボランティア、２匹の非腫瘍マウスおよびビークルで処置した８匹のヒト結腸腫瘍系ＳＷ４８０を埋め込んだマウスから採取した。腫瘍を０日目に埋め込み、ビークル（ＰＥＧ３００）で７日目から分析のために動物を屠殺して血漿を採取する２２日目まで処理した。
【００８７】
図３；レーン５から１２（ビークル）において、ヒトＬＤＨ５バンドを明瞭に見ることができ、したがってこれは腫瘍に由来するものである。これはまた、図３のゲルの下部分の各腫瘍のミリグラムに示すとおり、腫瘍負荷に相関する。間質成分も存在するように見えるが、マウスとヒトのバンドを同時に実行するため、確保および定量することはより困難である。
【００８８】
したがってこのモデルにおいて、本発明者らは、少なくともＬＤＨ５が腫瘍由来であり、これは腫瘍負荷と相関することを見出す。
【００８９】
ヒトＬＤＨ５バンドを各ＳＷ４８０マウス血漿サンプルについて定量した。図４において、各バンドの密度を動物から切除した腫瘍重要に対してプロットしたところ、ＬＤＨ５と腫瘍負荷の良好な相関関係が示される。
【００９０】
引用文献
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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