(57)【要約】  本発明は、フラボノイド化合物の豊富な供給源としての、インドの薬草であるOroxylum  indicumの同定に関する。それから単離されたフラボン部類の化合物における粘膜保護及び抗胃潰瘍特性が、フラバノイド混合物と共に、ヘキサン及びアセトン抽出物から相当な収率で同定された。ヘキサン抽出物を、分別し、精製して、化合物を、オロキシリンＡ、クリシン及びバイカレインとして同定した。アセトン抽出物を精製し、得られた化合物を、メトキシクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグリコシドとして同定した。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験者に、ＯＡ−５、並びにＮＭＣ−２、ＮＭＣ−３、ＣＨＮ−２、ＣＨＭ−３、ＣＰＰ−２、ＣＧ及びＣＧＬからなる群より順に選択されるその類似体からなる群より選択される粘膜保護性の抗胃潰瘍剤の薬学的に許容される量を投与することを含む、胃潰瘍の処置方法。
【請求項２】
ＯＡ−５が、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで７４．１５％までの保護性の基準品ラニチジンと比較して、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでアスピリンによる誘発に７７．８４％までの粘膜保護特性をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３】
ＯＡ−５が、請求項２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルでアスピリンによる誘発に７４．５５％までの粘膜保護特性をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項４】
ＯＡ−５が、請求項２記載の基準品と比較して、体重の１５ｍｇ／ｋｇの用量レベルでアスピリンによる誘発に４０．９８％までの粘膜保護特性をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項５】
ＯＡ−５が、請求項２記載の基準品と比較して体重の１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで、アスピリンによる誘発に４０．９８％までの粘膜保護特性をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項６】
ＯＡ−５が、請求項２記載の基準品と比較して、体重の５ｍｇ／ｋｇの用量レベルでアスピリンによる誘発に１８．７５％までの粘膜保護特性をもたらす、請求項１記載の方法。  
【請求項７】
ＯＡ−５が、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで潰瘍指数の７８．８３％までの低減の標準品ラニチジンと比較して、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで寒冷ストレス束縛潰瘍化による誘発に７８．２２％までの腺潰瘍指数の低減をもたらす、請求項１記載の方法。  
【請求項８】
ＯＡ−５が、請求項７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで寒冷ストレス束縛潰瘍化による誘発に７５．４５％までの腺潰瘍指数の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項９】
ＯＡ−５が、請求項７記載の基準品と比較して、体重の１５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで寒冷ストレス束縛潰瘍化による誘発に５０．１４％までの腺潰瘍指数の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
ＯＡ−５が、請求項７記載の基準品と比較して、体重の１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで寒冷ストレス束縛潰瘍化による誘発に４１．９２％までの腺潰瘍指数の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項１１】
ＯＡ−５が、請求項７記載の基準品と比較して、体重の５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで寒冷ストレス束縛潰瘍化による誘発に３１．５５％までの腺潰瘍指数の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
ＯＡ−５が、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで６１．２６％までの胃粘膜保護の参考基準ラニチジンと比較して、体重の３０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで６７．５１％までの胃粘膜保護の参考基準オメプラゾールと比較して、そして体重の４００ｍｇ／ｋｇの用量レベルで８７．５％までの胃粘膜保護の参考基準スクラルファートと比較して、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に８５．００％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項１３】
ＯＡ−５が、請求項１２記載の参考基準と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に８２．５％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項１４】
ＯＡ−５が、請求項１２記載の基準品と比較して、体重の１５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に６０．６１％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
ＯＡ−５が、請求項１２記載の基準品と比較して、体重の１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に３５．００％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項１６】
ＯＡ−５が、請求項１２記載の基準品と比較して、体重の５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に３０．０１％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項１７】
ＯＡ−５が、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで４．９６までのｐＨの上昇の基準品ラニチジンと比較して、体重の３０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで４．６５までのｐＨの上昇の基準品オメプラゾールと比較して、そして体重の４００ｍｇ／ｋｇの用量レベルで４．００までのｐＨの上昇の基準品スクラルファートと比較して、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に４．９５までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項１８】
ＯＡ−５が、請求項１７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に６．８１までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項１９】
ＯＡ−５が、請求項１７記載の基準品と比較して、体重の１５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に４．５までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２０】
ＯＡ−５が、請求項１７記載の基準品と比較して、体重の１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に４．６６までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２１】
ＯＡ−５が、請求項１７記載の基準品と比較して、体重の５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に３．５までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２２】
ＯＡ−５が、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５．０ｍｌまでの胃液分泌の基準品ラニチジンと比較して、体重の３０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで３．５ｍｌまでの胃液分泌の基準品オメプラゾールと比較して、そして体重の４００ｍｇ／ｋｇの用量レベルで４．００ｍｌまでの胃液分泌の基準品スクラルファートと比較して、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に７．４ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２３】
ＯＡ−５が、請求項２２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に５．５ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２４】
ＯＡ−５が、請求項２２記載の基準品と比較して、体重の１５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に４．５ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２５】
ＯＡ−５が、請求項２２記載の基準品と比較して、体重の１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に４．２ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２６】
ＯＡ−５が、請求項２２記載の基準品と比較して、体重の５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に４．０ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２７】
ＯＡ−５が、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで２６．７４ｍＥｇ平均レベルまでの酸性度の低減の基準品ラニチジンと比較して、体重の３０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで３２．０１ｍＥｇ平均レベルまでの酸性度の低減の基準品オメプラゾールと比較して、そして体重の４００ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５２．００ｍＥｇ平均レベルまでの酸性度の低減の基準品スクラルファートと比較して、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に１８．２５ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２８】
ＯＡ−５が、請求項２７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に１２．４ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２９】
ＯＡ−５が、請求項２７記載の基準品と比較して、体重の１５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に２９．６６ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３０】
ＯＡ−５が、請求項２７記載の基準品と比較して、体重の１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に３１．３３ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３１】
ＯＡ−５が、請求項２７記載の基準品と比較して、体重の５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に４２．６６ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３２】
ＯＡ−５が、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで７８．３９％までの胃粘膜保護の参考基準ラニチジンと比較して、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に７９．８５％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３３】
ＯＡ−５が、請求項３２記載の参考基準と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に７５．０７％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３４】
ＯＡ−５が、請求項３２記載の参考基準と比較して、体重の１５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に７０．０７％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３５】
ＯＡ−５が、請求項３２記載の参考基準と比較して、体重の１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に５９．７８％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３６】
ＯＡ−５が、請求項３２記載の参考基準と比較して、体重の５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に４６．８０％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３７】
ＯＡ−５が、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで４．７５までのｐＨの上昇の基準品ラニチジンと比較して、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に４．６２までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３８】
ＯＡ−５が、請求項３７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に５．６２までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３９】
ＯＡ−５が、請求項３７記載の基準品と比較して、体重の１５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に４．３５までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項４０】
ＯＡ−５が、請求項３７記載の基準品と比較して、体重の１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に３．５８までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項４１】
ＯＡ−５が、請求項３７記載の基準品と比較して、体重の５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に３．２５までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項４２】
ＯＡ−５が、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで１．８２ｍｌまでの胃液分泌の基準品ラニチジンと比較して、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に２．５ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項４３】
ＯＡ−５が、請求項４２記載の基準品と比較して、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に２．１ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項４４】
ＯＡ−５が、請求項４２記載の基準品と比較して、体重の１５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に３．６２ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項４５】
ＯＡ−５が、請求項４２記載の基準品と比較して、体重の５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に３．５ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項４６】
ＯＡ−５が、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで３１．８ｍＥｇ平均レベルまでの酸性度の低減の基準品ラニチジンと比較して、体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に３２．６６ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項４７】
ＯＡ−５が、請求項４６記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に３０．１８ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項４８】
ＯＡ−５が、請求項４６記載の基準品と比較して、体重の１５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に３０．２５ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項４９】
ＯＡ−５が、請求項４６記載の基準品と比較して、体重の１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に４２．９ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項５０】
ＯＡ−５が、請求項４６記載の基準品と比較して、体重の５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に４５．５ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項５１】
ＮＭＣ−２が、請求項７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで寒冷ストレス束縛潰瘍化による誘発に５９．６７％までの腺潰瘍指数の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項５２】
ＮＭＣ−２が、請求項１２記載の参考基準と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に５７．５％までの胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項５３】
ＮＭＣ−２が、請求項１７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に４．７５までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項５４】
ＮＭＣ−２が、請求項２２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に４．８ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項５５】
ＮＭＣ−２が、請求項２７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に３０．８ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項５６】
ＣＨＮ−２が、請求項２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルでアスピリンによる誘発に５５．６８％までの粘膜保護特性をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項５７】
ＣＨＭ−２が、請求項２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルでアスピリンによる誘発に５５．５９％までの粘膜保護特性をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項５８】
ＣＨＭ−３が、請求項２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルでアスピリンによる誘発に５１．７４％までの粘膜保護特性をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項５９】
ＣＰＰ−２が、請求項２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルでアスピリンによる誘発に６６．７７％までの粘膜保護特性をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項６０】
ＮＭＣ−３が、請求項７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで寒冷ストレス束縛潰瘍化による誘発に５７．９２％までの腺潰瘍指数の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項６１】
ＣＨＮ−２が、請求項７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで寒冷ストレス束縛潰瘍化による誘発に５６．１２％までの腺潰瘍指数の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項６２】
ＣＨＭ−３が、請求項７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで寒冷ストレス束縛潰瘍化による誘発に５２．６４％までの腺潰瘍指数の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項６３】
ＣＰＰ−２が、請求項７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで寒冷ストレス束縛潰瘍化による誘発に６１．４４％までの腺潰瘍指数の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項６４】
ＣＨＮ−２が、請求項３２記載の参考基準と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に５８．４４％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項６５】
ＣＨＮ−２が、請求項３７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に４．２５までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項６６】
ＣＨＮ−２が、請求項４２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に１．８ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項６７】
ＣＨＮ−２が、請求項４６記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に３１．１８ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項６８】
ＣＰＰ−２が、請求項３２記載の参考基準と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に６８．４７％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項６９】
ＣＰＰ−２が、請求項３７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に３．２５までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項７０】
ＣＰＰ−２が、請求項４２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に２．６ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項７１】
ＣＰＰ−２が、請求項４６記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に２９．０６ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項７２】
ＣＧが、請求項２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルでアスピリンによる誘発に５２％までの粘膜保護特性をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項７３】
ＣＧＬが、請求項２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルでアスピリンによる誘発に７０．４６％までの粘膜保護特性をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項７４】
ＣＧＬが、請求項７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで寒冷ストレス束縛潰瘍化による誘発に５０．２２％までの腺潰瘍指数の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項７５】
ＣＧが、請求項１２記載の参考基準と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に５２．５％までの胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項７６】
ＣＧが、請求項１７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に５．９までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項７７】
ＣＧが、請求項２２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に５．９ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項７８】
ＣＧが、請求項２７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に４１．３３ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項７９】
ＣＧＬが、請求項１２記載の参考基準と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に６２．５％までの胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項８０】
ＣＧＬが、請求項１７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に３．９までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項８１】
ＣＧＬが、請求項２２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に４．６ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項８２】
ＣＧＬが、請求項２７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで５０％エタノール潰瘍化による誘発に３９ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項８３】
ＣＧが、請求項３２記載の参考基準と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に５０．２５％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項８４】
ＣＧが、請求項３７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に３．５までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項８５】
ＣＧが、請求項４２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に１．５ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項８６】
ＣＧが、請求項４６記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に４４．３３ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項８７】
ＣＧＬが、請求項３２記載の参考基準と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に６０．１７％までの顕著な胃粘膜保護をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項８８】
ＣＧＬが、請求項３７記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に３．０８までのｐＨの上昇をもたらす、請求項１記載の方法。  
【請求項８９】
ＣＧＬが、請求項４２記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に４．８３ｍｌまでの胃液分泌の増加をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項９０】
ＣＧＬが、請求項４６記載の基準品と比較して、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで幽門結紮潰瘍化による誘発に４０ｍＥｇまでの酸性度レベルの低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項９１】
オロキシリンＡ、クリシン、バイカレイン、メトキシクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグルコシド、並びにクリシンのアシルエステル誘導体及びアルキルアミノ誘導体としてのオロキシリン−Ａの合成類似体からなる群より選択される化合物。
【請求項９２】
Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍのアセトン抽出物からの天然に生じる新たな化合物としてオロキシロシドメチルエステルを含む、請求項９１記載の化合物。
【請求項９３】
下記：
【化１】
2009527461.tif 000016
からなる群より選択される、請求項９１記載の化合物。
【請求項９４】
下記：
【化２】
2009527461.tif 000017
で示される構造を含む、請求項９１記載の化合物。
【請求項９５】
Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから抗潰瘍化合物として、オロキシリンＡ、クリシン、バイカレイン、メトキシクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグリコシドを単離する方法であって、以下の
（ａ）Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍの乾燥茎樹皮を、ソックスレー装置を使用してヘキサンで抽出する工程、
（ｂ）抽出物を濾過して、固体を分離する工程、
（ｃ）残渣を、クロロホルム中１％メタノールによる第１溶離に付して、オロキシリンＡを得る工程、
（ｄ）工程ｃの残渣をクロロホルム中２％メタノールによる第２溶離に付して、クリシンを得る工程、及び
（ｅ）工程ｄの残渣をクロロホルム中３％メタノールによる第３溶離に付して、バイカレインを得る工程
を含む方法。
【請求項９６】
抗潰瘍化合物形態のＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍとして、オロキシリンＡ、クリシン、バイカレイン、メトキシクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグリコシドを単離する方法であって、以下の
ａ）請求項９３記載のヘキサン抽出物質をアセトンで抽出して、残渣を得る工程、
ｂ）工程（ａ）の残渣をクロロホルム中１％メタノールによる第１溶離に付して、オロキシリンＡを得る工程、
ｃ）工程ｂの残渣をクロロホルム中２％メタノールによる第２溶離に付して、クリシンを得る工程、及び
ｄ）残渣（工程ｃ）をクロロホルム中３％メタノールによる第３溶離に付して、バイカレインを得る工程、
ｅ）残渣（工程ｄ）をクロロホルム中４％メタノールによる第４溶離に付して、メトキシクリシンを得る工程
ｆ）残渣（工程ｅ）をクロロホルム中５％メタノールによる第５溶離に付して、オロキシロシドメチルエステルを得る工程、
ｇ）残渣（工程ｆ）をクロロホルム中７％メタノールによる第６溶離に付して、クリシン−７−Ｏ−メチルグリコシドを得る工程
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、フラボノイド化合物の豊富な供給源としての、インドの薬草であるＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍの同定に関する。フラボンの部類の化合物において粘膜保護性の抗胃潰瘍特性を同定した。本発明は、ヘキサン及びアセトン抽出物から相当な収率で得られるフラボノイド混合物も提供する。ヘキサン抽出物を、分別し、精製して、化合物を、オロキシリンＡ、クリシン及びバイカレインとして同定した。アセトン抽出物を精製し、化合物を、メトキシクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグリコシドとして同定した。強力な抗胃潰瘍化合物の発明は、オロキシリン及びクリシンから誘導される幾つかの類似体の合成を伴い、これらをこの植物から良好な収率で単離した。この結果によると、オロキシロシドメチルエステル化合物は、アスピリン、エタノール、ストレス及び幽門結紮により誘発される胃潰瘍に対して強力な活性を示した。
【０００２】
胃又は消化性潰瘍は、ヒトの胃腸管に罹患する主な疾患、及び罹患率と死亡率の両方に関する主な健康問題を構成する。消化性潰瘍の一般的な臨床的特徴は、胃及び腸の十二指腸部分における酸過剰分泌及び潰瘍形成である。消化性潰瘍疾患（ＰＵＤ）は、主に、先進国及び発展途上国の成人人口に影響を与える。消化性潰瘍の危険度は、世紀の変わり目の前に生まれた世代において最も高く、それ以降の全ての世代では低下している。低い家計所得、老齢、喫煙、低い教育的達成、民族性、胃酸産出量の増加、ヘリコバクター・ピロリ、ＮＳＡＩＤ及びストレスが、ＰＵＤ危険因子における有意であり、独立した基本的な危険因子として作用するものである。上部ＧＩ疾患の有病率は、６５歳以上の被験者において増加している。高齢の患者におけるほぼ４０％のＧＵ（胃潰瘍）及び２５％のＤＵ（十二支潰瘍）が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）の使用に関わっている。胃腸（ＧＩ）の副作用には、潰瘍（ＮＳＡＩＤを定期的に使用している患者の１５〜３０％において内視鏡検査で見出される）、上部ＧＩ出血（年間発症率１．０〜１．５％）のような合併症、及び消化不良（ＮＳＡＩＤを摂取している患者の最大６０％に発生する）のような上部ＧＩの症状の発生が含まれる。ＮＳＡＩＤは、そのなかで、抗炎症、鎮痛及び解熱効果のために世界中で最も広く使用されている処方薬であり、一方、低用量のアスピリン（これもＮＳＡＩＤ）が心血管障害の予防に使用されている。これらの薬剤の治療利益は相当なものであるが、これらの使用は、その胃腸毒性のために制限されており、そのうちの幾つかは重大であるか又は致命的でさえある。ＮＳＡＩＤ誘発ＧＩ合併症の確立された危険因子は、年齢、潰瘍歴、多量のアルコール消費、個別のＮＳＡＩＤ、コルチコイド若しくはアスピリン又は抗凝血剤に関連する用量（潰瘍性出血）である。２００４年のＰＵＤの治療上の獲得は、ＣＯＸ−２インヒビターの使用が、抗炎症性処置におけるＧＩの副作用を有意に低減したことである。特定のＣＯＸ−２インヒビター（ＮＳＡＩＤ）による心臓の副作用が報告されたので、ＣＯＸ−２インヒビターによる処置が広く問題になった。アスピリンは、心血管疾患（ＣＶＤ）を有するか又はその危険性のある患者において、心臓血管の血栓発症の予防のために非常に有用な医薬である。アスピリンで治療を受けている患者は、心臓保護のために８１ｍｇ／日であっても、ＧＩ損傷の危険性を増加する因子について評価するべきである。
【０００３】
ストレスは、多様な身体系に対して広範囲な影響を有する。ストレスは、長い間、冠動脈疾患の危険因子の一つとして関連づけられてきた。ホメオスタシスに対する急性の脅威として定義されているストレスは、適応又はアロスタティック応答を誘発し、胃腸管の機能に対して短期間と長期間の両方の影響を有する可能性がある。胃のストレス潰瘍化は、外傷、頭部損傷、熱傷、ショック、敗血症及び神経障害のような臨床状態に関連し、現在は、多因子的現象として考えられている。粘膜、血管及び神経液性因子と自律神経系との相互作用の結果が、重要な役割を果たすことが報告されている。したがって循環障害及び栄養欠如が局部組織において誘発され、次に続いて深部潰瘍の急速な出現となる。
【０００４】
胃腸合併症は、集中治療室に運び込まれた患者において頻繁に発生する。ストレス関連粘膜疾患に関連するこの潰瘍化及び出血によって、入院が長期化する可能性があり、死亡率を増加する。ストレス潰瘍出血を予防するために選択される予防レジメンは、個別の患者の危険因子及び基礎的な疾患状態を考慮して、最も利益となりうる最適な治療を提供するべきである。
【０００５】
エタノールは、ヒトと動物の両方において、一般的な急性胃粘膜損傷の原因である。この胃炎は、外科的介入を必要とする、生命を脅かす出血を生じうる。そのような介入の死亡率は、少なくとも３０％である。ラットにおいて、持続的な胃粘膜虚血は、胃の慢性潰瘍化を生じる。幾つかの他の因子が潰瘍形成に関連しているが、これは間接的な関係である場合があり、そのような因子には、遺伝、喫煙、カルシウムレベルの上昇、高用量のコルチコステロイドが含まれる。
【０００６】
胃の領域に増大する灼熱又はうずく痛みを引き起こす大多数の消化性潰瘍は、食物により悪化するか、又はそれとは無関係である。頭痛は、夜間に悪化する傾向があり、通常、日中の食後の１〜３時間に発生する。加えて、食物忌避、体重減少、吐き気、おくび又は鼓脹がありうる。著しい個人差があり、場合によっては、疼痛は背中又は腹部の上四分の一にある場合もある。合併症には、出血、閉鎖、穿孔又は難治性疼痛が含まれる。胃腸潰瘍化に罹患している患者の予防の選択肢には、制酸剤、スクラルファート、ヒスタミン２−レセプターアンタゴニスト（Ｈ２ＲＡ）、プロスタグランジン、ムスカリン性Ｍ１−アンタゴニスト及びプロトンポンプインヒビターが含まれる。治療は、今までも、そして今もなお、ほとんど経験に基づいている。
【０００７】
プロスタグランジンは、初期の期待を満たし、ムスカリン性Ｍ1−アンタゴニストは、初期の抗コリン作動剤よりも選択的であるが、限定された用途を有する。非競合剤によるＨ+／Ｋ+  ＡＴＰａｓｅの阻害は、短期間の投与に限定され、強力な選択的ガストリンアンタゴニストの開発は、未だに実現していない。
【０００８】
症状の低減、副作用をなくすること及び生活の質の改善が、罹患している患者にとって疾患における優先のものである。しかし、新たな治療を広範な使用のために評価するのに、これらの因子を、考慮し、調和させる必要がある。特定のレジメンが無効である又は費用が高すぎると考える前に、特定の患者人口における危険度の低減を考慮するべきである。
【０００９】
植物は、捕食生物から自らを保護するために予想外で新規の構造を作り出す。試行錯誤によって、幾つかの植物及び植物生成物が薬剤として同定されている。天然物薬剤は、効果が高く、毒性の副作用がないが、供給不足及び化学構造に関する欠点を有し、これらの製造を困難又は不可能にしている。天然物薬剤は、薬剤設計及び開発におけるリード構造の供給源である。リードの天然物薬剤に緊密に関連する半合成類似体又は合成類似体は、合成され、それらの作用の障害についてスクリーニングされる。上記の記載を考慮すると、単離処理において、胃のｐＨ、胃の粘膜内層を増大し、関連する障害のための強力な抗潰瘍剤であるフラボノイドが単離され、初めて、相当な収率で強力な抗潰瘍フラボノイドを含有するＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍの同定をもたらした。
【００１０】
Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍ  Ｖｅｎｔは、幾つかの疾患のためにインドの伝統的な医療行為において提唱されてきた。インドの民間医薬において、粉末茎樹皮が、赤痢、下痢、咽喉炎、咳及び骨折を治療するために使用される（Ｋａｕｓｉｋ，Ｐ  ａｎｄ  Ｄｈａｍａｎ  Ａ．Ｋ，Ｔｈｅ  ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  ｐｌａｎｔｓ  ａｎｄ  ｃｒｕｄｅ  ｄｒｕｇｓ  ｏｆ  Ｉｎｄｉａ，２０００，３９８）。
【００１１】
本発明の主な目的は、植物由来物質と、細胞保護及び抗胃潰瘍活性に関して測定されたそれらの生物活性との関係を試験し評価すること、及びこれらの効果が、無水エタノール、寒冷ストレス、アスピリン及び幽門結紮により誘発される胃粘膜病巣に影響を与えることができるかを決定することである。
【００１２】
本発明の別の目的は、Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍのヘキサン抽出物又はアセトン抽出物から単離された、オロキシリンＡ、クリシン、バイカレイン、メトキシクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグルコシド、並びにオロキシリンＡ及びクリシン由来の合成類似体に抗潰瘍化合物として新たな活性を割り当てることである。更に、これらの単離され合成された化合物は、潰瘍及び他の同様の疾患の治療的制御に使用される。
【００１３】
本発明は、また、この植物Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから初めて単離された、これらの化合物及びオロキシロシドメチルエステル（新たな化合物）、並びに別の２つの化合物、すなわち、メトキシクリシン及びクリシン−７−Ｏ−メチルグルコシドの活性に関する。本発明で調製される全ての合成類似体も、新たな合成化合物である。本発明は、更に、これらの化合物を使用して、初めて抗潰瘍活性を同定する。
【００１４】
本発明の目的によると、本発明は、新たな供給源、すなわち、相当な収率を有するＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍ乾燥茎樹皮を同定し、化合物は、胃潰瘍に対する活性を有する。本発明は、単離された化合物のオロキシリンＡ、クリシン、バイカレイン、メトキシクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグルコシド、並びにクリシンのアシルエステル誘導体及びアルキルアミノ誘導体としてのオロキシリン−Ａの合成類似体の存在を同定する。
【００１５】
本発明は、また、Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍのアセトン抽出物からの新たな天然に生じる化合物として、初めてオロキシロシドメチルエステルを同定する。
【００１６】
本発明の別の実施態様において、メトキシクリシンは、Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍのアセトン抽出物から初めて単離される。
【００１７】
本発明のさらに別の実施態様は、抗潰瘍化合物形態のＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍとして、オロキシリンＡ、クリシン、バイカレイン、メトキシクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグリコシドを単離するプロセスであって、以下の（１）ヘキサン抽出物、（２）アセトン抽出物の工程：
ａ）Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍの乾燥茎樹皮を、ソックスレー装置を使用してヘキサンで抽出する工程、
ｂ）抽出物を濾過して、固体を分離する工程、
ｃ）残渣を、クロロホルム中１％メタノールによる第１溶離に付して、オロキシリンＡを得る工程、
ｄ）残渣（工程ｃ）をクロロホルム中２％メタノールによる第２溶離に付して、クリシンを得る工程、及び
ｅ）残渣（工程ｄ）をクロロホルム中３％メタノールによる第３溶離に付して、バイカレインを得る工程
を含むプロセスを提供する。
【００１８】
本発明の更なる目的は、これらの３つの化合物、すなわち、ヘキサン抽出物によるＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍからのオロキシリン−Ａ、クリシン及びバイカレインの単離に関する。
【００１９】
更には、Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから単離されたこれらの化合物の全てが、初めて抗潰瘍活性を示している。
【００２０】
更には、アセトンによるＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍの乾燥茎樹皮の抽出、及びオロキシリンＡ、クリシン及びバイカレインに加えて、化合物のメトキシクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグリコシドを単離するプロセスであって、
ａ）ヘキサン抽出物質を同じ手順でアセトンにより後抽出して、残渣を得る工程、
ｂ）残渣を、クロロホルム中１％メタノールによる第１溶離に付して、オロキシリンＡを得る工程、
ｃ）残渣（工程ｂ）をクロロホルム中２％メタノールによる第２溶離に付して、クリシンを得る工程、
ｄ）残渣（工程ｃ）をクロロホルム中３％メタノールによる第３溶離に付して、バイカレインを得る工程、
ｅ）残渣（工程ｄ）をクロロホルム中４％メタノールによる第４溶離に付して、メトキシクリシンを得る工程
ｆ）残渣（工程ｅ）をクロロホルム中５％メタノールによる第５溶離に付して、オロキシロシドメチルエステルを得る工程、
ｇ）残渣（工程ｆ）をクロロホルム中７％メタノールによる第６溶離に付して、クリシン−７−Ｏ−メチルグリコシドを得る工程
を含むプロセス。
【００２１】
更に本発明は、上記の前記プロセスにおいて、この植物のＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから、化合物のオロキシロシドメチルエステルが最初に単離された化合物として同定され、化合物のメトキシクリシン及びクリシン−７−Ｏ−メチルグルコシドが最初に単離された化合物として同定され、化合物オロキシロシドメチルエステルが、抗潰瘍活性について優れた強力な分子を示し、化合物のクリシン−７−Ｏ−メチルグリコシドが、胃潰瘍に対する非常に良好な活性を示すことを同定する。
【００２２】
本発明は、Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍの抽出物からの強力な抗潰瘍分子の単離の同定に関し、これには、胃腸毒性の抑制を、胃腸毒性の阻害が本記載に記述されていない疾患の予防及び処置に重要な役割を果たす障害における更なる使用において他の合併症と共に制御するための、予防的並びに治療的用途を見出すことができる。
【００２３】
本発明は、強力な胃腸毒性インヒビターを有するインドの薬草であるＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍの同定に依存している。Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍの乾燥茎樹皮のヘキサン抽出物質は、オロキシリンＡ、クリシン及びバイカレインとして同定される３つの主な活性成分で９５％構成され、アセトン抽出物は、６つの主な活性成分を含有し、オロキシリンＡ、クリシン及びバイカレインの他に、化合物、すなわち、メチルクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグリコシド、並びにオロキシリンとクリシンの合成類似体を相当な収率で含有する。これらの混合物及び分子には、胃腸障害及び疾患の障害を制御する予防的、並びに治療的用途を見出すことができる。
【００２４】
これらの抗胃潰瘍分子を、胃腸毒性の処置、胃のｐＨの制御及びＧＩ毒性における潰瘍危険因子の低減のために、また、炎症、ストレス状態のような疾患状態、胃酸産出の抑制の必要なＮＳＡＩＤ治療、粘膜内層の形成、本発明に記載されている及び記載されていない疾患の予防及び処置における胃酸ｐＨの上昇のために、薬務に一般的な任意の適切な従来の方法によって投与することができる。
【００２５】
本発明における強力な抗潰瘍ＯＡ−５分子は、胃の病巣の病因に役割を果たす攻撃因子を拮抗し胃粘膜を損傷から保護する防御因子を増大する。抗胃潰瘍分子の場合、適用は、好ましくは経口で行い、作用機序を増強することができ、したがって、より良好な治療作用を付与することができる。本発明の医薬調合剤に存在する抗胃潰瘍分子を、ヒトへの適用に適している、任意の適切な薬学的に許容される添加剤、担体、ビヒクル、食品調製物などと配合することができる。材料は、これらが混合物又は分子の効力及び特性を妨げるべきではないように選択されるべきであるが、添加できる又は活性を改善できる材料が好ましく、配合に利用可能な従来の技術及び技能により決定することができる。
【００２６】
有効用量：
薬剤投与の有効用量レベル及び持続期間を、考慮される疾患の治療パラメーターを制御下におくために、当業者によって決定することができる。実際の頻度、適用量、及び投与時間は、疾患の状態及び重篤度によって変わることができ、本発明の実施例に記載されている濃度及び持続期間と無関係である場合もある。
【００２７】
オロキシリンＡの７−Ｏ−アシル誘導体の合成：
【００２８】
【化１】
2009527461.tif 000002
【００２９】
手順：対応する酸、ＥＤＣＩ（０．８３６ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（０．６９ｍｍｏｌ）を０℃に冷却し、窒素雰囲気下、無水塩化メチレン（５ｍｌ）で１５〜３０分間撹拌した。この混合物に、無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアルデヒド（３ｍｌ）中のオロキシリンＡ（０．７０４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物全体を、窒素下、室温で４〜５時間撹拌した。反応が完了した（ＴＬＣ）後、反応混合物を氷水に注ぎ、塩化メチレン（２×１０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下で濃縮した。残渣を、シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）のカラムクロマトグラフィーにより精製して、オロキシリンＡの対応する７−Ｏ−アシル誘導体ＯＲＰＭ−１及びＯＲＣ−１６を良好な収率で得た。
【００３０】
クリシンのアルキルアミノ誘導体の調製：
【００３１】
【化２】
2009527461.tif 000003
【００３２】
クリシンの７−Ｏ−アルキルアミノ誘導体の調製の一般手順
ｉ）クリシンの７−Ｏ−アルキル誘導体の調製の一般手順
アセトン２０ｍｌ中のクリシン１（１ｇ、３．９３ｍｍｏｌ）及び無水炭酸カリウム（０．８１ｇ、５．８ｍｍｏｌ）の混合物に、対応するジブロモアルカン（２ａでは１，３−ジブロモプロパン、２ｂでは１，４−ジブロモブタン）を加えた。混合物を窒素雰囲気下で３〜４時間環流した。反応が完了した後、炭酸カリウムを濾過し、過剰量のアセトン（２×５０ｍｌ）で洗浄した。合わせたアセトン層を真空下で濃縮した。残渣を、シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）のカラムクロマトグラフィーにより精製して、７−Ｏ−ブロモアルキルクリシン（２ａ、２ｂ）を純粋な形態で得た。
【００３３】
ｉｉ）クリシンの７−Ｏ−アルキルアミノ誘導体の調製の一般手順
アセトニトリル２０ｍｌ中のブロモアルキルクリシン（２ａ、２ｂ）及び無水炭酸カリウム（２．４１ｇ、１７．２ｍｍｏｌ）の混合物に、対応するアミンを加えた。混合物を窒素雰囲気下で３〜４時間環流した。反応が完了した後、反応混合物を室温にし、氷水に注ぎ、塩化メチレン（２×１０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下で濃縮した。残渣を、シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）のカラムクロマトグラフィーにより精製して、クリシンの対応する７−Ｏ−アルキルアミノ誘導体を非常に良好な収率（６０〜８０％）で得た。
【００３４】
フラバノイドのグリコシド誘導体の調製
【００３５】
【化３】
2009527461.tif 000004
【００３６】
手順：１）無水酢酸（２．５ｍｌ）を、ピリジン５ｍｌ中の無水Ｄ−グルコース（１．０ｇ、５．５５ｍｍｏｌ）の溶液に加え、室温で８時間撹拌した。溶液を真空下で蒸発させ、シロップ状の残渣をＣＨＣｌ3  ２５ｍｌに溶解し、水、飽和Ｎａ2ＳＯ4で洗浄し、真空下で蒸発させて、２，３，４，６−ペンタ−Ｏ−アシル−Ｄ−ガラクトピロノース（２）を、更に精製することなく得て、収率は９２％である。
【００３７】
２）氷酢酸（４０％、５ｍｌ）中の臭化水素の溶液を、酢酸１０ｍｌ中の（２）（１．１７ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に加えた。撹拌を室温で８時間続け、直射日光を避けた。反応混合物を氷水５０ｍｌに注意深く注ぎ、ＣＨＣｌ3で３回抽出した。合わせた層を飽和Ｎａ2ＳＯ4溶液及びＮａＣｌ溶液で洗浄し、真空下で蒸発させ、この黄色のシロップ状の残渣をエーテル５ｍｌに溶解し、５℃で結晶化させ、得られた化合物は、アセトブロモガラクトース（３）を与え、収率は７２％であった。
【００３８】
３）対応するフラボノイド（２．４３ｍｍｏｌ）をアセトンに溶解し、無水Ｋ2ＣＯ3（０．４ｇ、２．９１６ｍｍｏｌ）を加え、１５分間撹拌し、次にアセトブロモガラクトース（３）（１ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）を加え、室温で３〜４時間撹拌した。反応が完了した後、反応混合物を濾過し、真空下で蒸発させて、カラムクロマトグラフィーにより精製して、５ａ及び５ｇを８５〜９０％で得た。
【００３９】
４）メタノール中の５ａ及び５ｂの溶液に、メタノールＫＯＨを加え、１〜２時間撹拌し、反応が完了した後、メタノールを完全に蒸発させ、反応混合物を水に溶解し、ＣＨＣｌ3で２回抽出し、合わせた層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、真空下で蒸発させて、６ａ及び６ｂを、更に精製することなく、純粋な形態で得た。収率９５％。
【００４０】
６）ＯＡ−５酸（オロキシリンＡの７−Ｏ−グルコロニド誘導体）の調製：
【００４１】
【化４】
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【００４２】
手順：化合物をメタノールＫＯＨに溶解し、１〜２時間環流した。反応が完了した（ＴＬＣでモニタリングした）後、メタノールを完全に、反応混合物を水に溶解し、酢酸エチルで２回抽出し、合わせた層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、真空下で蒸発させ、カラムクロマトグラフィーで対応する酸を得た。収率：８５％。
【００４３】
下記の構造において、
図１は、オロキシリン−Ａ〔５，７−ジヒドロキシ−６−メトキシ−２−フェニルクロメン−４−オン〕の式を表し、
図２は、クリシン〔５，７−ジヒドロキシ−２−フェニル−クロメン−４−オン〕の式を表し、
図３は、バイカレイン〔５，６，７−トリヒドロキシ−２−フェニル−クロメン−４−オン〕の式を表し、
図４は、メトキシクリシン〔５−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−フェニル−クロメン−４−オン〕の式を表し、
図５は、オロキソロシド（oroxoloside）メチルエステル〔３，４，５−トリヒドロキシ−６−（６−メトキシ−４−オキソ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−７−ヨルオキシ（yoloxy））テトラヒドロ−ピラン−２−カルボン酸メチルエステル〕の式を表し、
図６は、クリシン−７−Ｏ−メチルグリコシド〔３，４，５−トリヒドロキシ−６−（４−オキソ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−７−ヨルオキシ（yoloxy））テトラヒドロ−ピラン−２−カルボン酸メチルエステル〕の式を表し、
図７は、ＯＲＣ−１６〔ヘプタデカン酸５−ヒドロキシ−６−メトキシ−４−オキソ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−７−イルエステル〕の式を表し、
図８は、ＯＲＰＭ−１〔４−メチル−安息香酸５−ヒドロキシ−６−メトキシ−４−オキソ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−７−イルエステル〕の式を表し、
図９は、ＣＰＰ−２〔５−ヒドロキシ−２−フェニル−７−（３−ピペリジン−１−イル−プロポキシ）−クロメン−４−オン〕の式を表し、
図１０は、ＣＨＭ−２〔５−ヒドロキシ−７−（３−モルホリン−４−イル−プロポキシ）−２−フェニル−クロメン−４−オン〕の式を表し、
図１１は、ＣＨＮ−２〔７−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）−５−ヒドロキシ−２−フェニルクロメン−４−オン〕の式を表し、
図１２は、ＮＭＣ−２〔５−ヒドロキシ−７−〔３−（４−メチル−ピペリジン−１−イル）−プロポキシ〕−２−フェニルホロメン（phenyl hromen）−４−オン〕の式を表し、
図１３は、ＮＭＣ−３〔５−ヒドロキシ−７−〔４−（４−メチル−ピペリジン−１−イル）−ブトキシ〕−２−フェニルクロメン−４−オン〕の式を表し、
図１４は、ＣＨＭ−３〔５−ヒドロキシ−７−（４−モルホリン−４−イル−ブトキシ）−２−フェニルクロメン−４−オン〕の式を表し、
図１５は、ＯＡＧ〔５−ヒドロキシ−６−メトキシ−２−フェニル−７−（３，４，５−トリヒドロキシ−６−ヒドロキシメチル−テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−クロメン−４−オン〕の式を表し、
図１６は、ＣＧ〔５−ヒドロキシ−２−フェニル−７−（３，４，５−トリヒドロキシ−６−ヒドロキシメチル−テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−クロメン−４−オン〕の式を表し、
図１７は、ＯＡ−５酸〔３，４，５−トリヒドロキシ−６−（５−ヒドロキシ−６−メトキシ−４−オキソ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−７−イルオキシ）−テトラヒドロ−ピラン−２−カルボン酸〕の式を表す。
【００４４】
【化５】
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【化６】
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【００４５】
Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたオロキシリンＡ（図１）の本発明の別の実施態様では、以下の分光化学的及び物理的特性を有する。
ＭＰ：２３１−２３２℃．ＩＲ（ＫＢｒ）νmax  ３４３５，２８２５，１６２２，１０１６ｃｍ-1．1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3＋ＭｅＯＨ−ｄ4）（δ）７．８２−７．８６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４２−７．５６（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．６２（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．５８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），３．９６（３Ｈ，ｓ，Ａｒ−ＯＭｅ）．13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ  ｄ6）δ  １６３．３７（Ｃ−２），１０４．４６（Ｃ−３），１８２．３１（Ｃ−４），１５２．６４  （Ｃ−５），１３０．８０（Ｃ−６），１５７．６２（Ｃ−７），９４．４９（Ｃ−８），１５２．７９（Ｃ−９），１０４．７１（Ｃ−１０），１３１．６０（Ｃ−１’），１２６．４２（Ｃ−２’），１２９．２０（Ｃ−３’），１３２．０６（Ｃ−４’），６０．０６（ＯＭｅ）．ＥＩＭＳ：２８４（Ｍ+，１００）．
【００４６】
Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたクリシン（図２）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性を有する。
ＭＰ：２８５−２８６℃．ＩＲ（ＫＢｒ）νmax３４５０，２９２５，１６２６，１０２４ｃｍ-1．1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3＋ＭｅＯＨ−ｄ4）（δ）７．８２−７．９２（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４４−７．５８（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．６４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．４４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），６．２４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−６）．13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ  ｄ6）δ  １６３．０（Ｃ−２），１０５．０（Ｃ−３），１８１．６（Ｃ−４），１６１．５（Ｃ−５），９９．０（Ｃ−６），１６４．３（Ｃ−７），９４．０（Ｃ−８），１５７．３（Ｃ−９），１０４．０（Ｃ−１０），１３８．７（Ｃ−１’），１２６．１（Ｃ−２’），１２８．８（Ｃ−３’），１３１．６（Ｃ−４’），１２８．８（Ｃ−５’），１２６．１（Ｃ−６’）．ＥＩＭＳ：Ｍ+２５４．
【００４７】
Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたバイカレイン（図３）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性を有する。
ＭＰ：２２３−２２６℃．1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3＋ＭｅＯＨ−ｄ４）（δ）  ７．８２−７．９８（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４４−７．６０（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．６２（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．５８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３）．13Ｃ  ＮＭＲ（５０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ  ｄ6）δ  １６２．９（Ｃ−２），１０４．５（Ｃ−３），１８２．１（Ｃ−４），１４７．０（Ｃ−５），１２９．３（Ｃ−６），１５３．７（Ｃ−７），９４．０（Ｃ−８），１４９．９（Ｃ−９），１０４．３（Ｃ−１０），１３１．０（Ｃ−１’），１２６．２（Ｃ−２’），１２９．０（Ｃ−３’），１３１．７（Ｃ−４’），１２９．０（Ｃ−５’），１２６．２（Ｃ−６）．ＥＩＭＳ：２７０（Ｍ+，１００）．
【００４８】
Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたメトキシクリシン（図４）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性を有する。
ＭＰ：１６４℃．（ＫＢｒ）νmax  ３４５０，２９２５，１６５４，１６２１，１０１６ｃｍ-1．1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）（δ）１３．０（ｌＨ，ｓ，ＯＨ−５），７．８２−７．９６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４４−７．６０（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．６２（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．６０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），６．５８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−６），３．９６（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ）．13Ｃ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣl3）（δ）１６４．０８（Ｃ−２），１０５．０４（Ｃ−３），１８２．８８（Ｃ−４），１６４．０８（Ｃ−５），９３．９７（Ｃ−６），１５３．３１（Ｃ−７），９３．９７（Ｃ−８），１５３．３１（Ｃ−９），１０５．５０（Ｃ−１０），１３０．９６（Ｃ−１’），１２６．２４（Ｃ−２’），１２８．８８（Ｃ−３’），１３１．２６（Ｃ−４’），１２８．８８（Ｃ−５’），１２６．２４（Ｃ−６’），６０．６３（Ａｒ−ＯＭｅ）．ＥＩＭＳ：１９２（Ｍ+，１００）．
【００４９】
Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたオロキシロシドメチルエステル（図５）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性を有する。
ＭＰ：２０１℃．ＵＶ  λmax（ＭｅＯＨ）３４５，２８５ｎｍ．ＩＲ（ＫＢｒ）νmax３３９５，２９２４，１７３５（エステル−Ｃ＝Ｏ），１６１８（−Ｃ＝Ｏ），１４６１，１３５９，１２２４，１０７６ｃｍ-1．1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）（δ）１２．７８（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），７．９０−８．０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４８−７．６０（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．８４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．８Ｏ（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），３．４−５．５０（ｍ，糖プロトン），３．７８（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３．８２（３Ｈ，ｓ，Ａｒ−ＯＭｅ）．13Ｃ  ＮＭＲ（３００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）（δ）１６３．７２（Ｃ−２），１０４．９５（Ｃ−３），１８２．３７（Ｃ−４），１５２．５２（Ｃ−５），１３２．０４（Ｃ−６），１５６．０８（Ｃ−７），９４．０７（Ｃ−８），１５２．１７（Ｃ−９），１０６．１２（Ｃ−１０），１３０．５９（Ｃ−１’），１２６．３５（Ｃ−２’，６’），１２９．０３（Ｃ−３’，５’），１３２．０６（Ｃ−４’），９９．４９（Ｃ−ｌ”），７５．６０（Ｃ−２”），７５．２５（Ｃ−３”），７２．７７（Ｃ−４”），７１．１８（Ｃ−５”），１６８．９６（Ｃ−６”），６０．２１（Ａｒ−ＯＭｅ），５１．８１（ＯＭｅ）．ＥＩＭＳ：４７５（Ｍ+＋１，１００）．
【００５０】
Ｏｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたクリシン−７−Ｏ−メチルグリコシド（図６）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性を有する。
ＭＰ：２０１℃．ＵＶ  λmax（ＭｅＯＨ）３４５，２８５ｎｍ．ＩＲ（ＫＢｒ）νmax３３９０，２９２８，１７３５（エステル−Ｃ＝Ｏ），１６１０（−Ｃ＝Ｏ），１４６５，１３４５，１２１０，１０５５ｃｍ-1．1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）（δ）１２．７０（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），７．９２−８．０５（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４５−７．５６（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．８０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．７４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−６）６．６８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），３．４−５．５０（ｍ，糖プロトン），３．７０（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ）．13ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）（δ）１６２．６５（Ｃ−２），１０４．６４（Ｃ−３），１８１．９７（Ｃ−４），１５２．０５（Ｃ−５），９８．５６（Ｃ−６），１５５．６０（Ｃ−７），９４．２３（Ｃ−８），１５１．８７（Ｃ−９），１０６．１０（Ｃ−１０），１３１．５９（Ｃ−１’），１２６．０５（Ｃ−２’，６’），１２９．１５（Ｃ−３’，５’），１３２．００（Ｃ−４’），９９．４３（Ｃ−ｌ”），７５．４５（Ｃ−２”），７５．０５（Ｃ−３”），７２．５４（Ｃ−４”），７０．９８（Ｃ−５”），１６８．９０（Ｃ−６”），５１．８１（ＯＭｅ）．ＥＩＭＳ：４４５（Ｍ+＋１）
【００５１】
アシル誘導体としてＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたオロキシリン−Ａの合成類似体、すなわち７−Ｏ−ドデシルオロキシリン−Ａ（図７）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性である。
ＭＰ：１０１．２℃；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  １２．８２（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），７．８８−７．９２（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．５０−７．５６（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．７０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．６４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），３．９０（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），２．６２（２Ｈ，ｔ，Ｈ−２”），１．６０−１．８０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−３”），１．２２−１．４０（１６Ｈ，ｂｒｓ，Ｈ−４”−Ｈ−１１”），０８４（３Ｈ，ｔ，Ｈ−１２”）．ＦＡＢＭＳ：４６７（Ｍ+＋１）．
【００５２】
アシル誘導体としてＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたオロキシリン−Ａの合成類似体、すなわち７−Ｏ−（ｐ−メチルベンゾイル）オロキシリン−Ａ（図８）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性である。
ＭＰ：２０３℃，1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  １２．８２（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），８．４６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，Ｈ−２”，６”），７．８２−７．８４（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．５０−７．５８（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），７．３６（２Ｈ，ｄ，Ｊ６Ｈｚ，Ｈ−３”，５”），６．９０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．７０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），３．９６（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），２．５２（３Ｈ，ｓ，Ａｒ−Ｍｅ）．ＦＡＢＭＳ：４２９（Ｍ+＋Ｎａ）．
【００５３】
アルキルアミノ誘導体としてＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたクリシンの合成類似体、７−Ｏ−プロピル（ピペリジニル）クリシン（図９）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性である。
ＭＰ：２１５℃，1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  １２．５０（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），７．８２−７．８６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４４−７．５８（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．６６（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．５８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），６．３９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−６），４．１６（２Ｈ，ｔ，Ｈ−Ｉ”），２．３８−２．５８（６Ｈ，ｍ，Ｈ−２’”，６’”及びＨ−３”），１．９８−２．０８（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２”），１．５８−１．６０（４Ｈ，ｍ，Ｈ−３’”，５’”），１．４１−１．５０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４’”）．ＦＡＢＭＳ：４０２（Ｍ+＋Ｎａ）．
【００５４】
アルキルアミノ誘導体としてＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたクリシンの合成類似体、７−Ｏ−プロピル（モルホリニル）クリシン（図１０）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性である。
ＭＰ：１３８℃，1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  １２．６０（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），７．８６−７．９０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．５０−７．６２（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．６４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．４６（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），６．３８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−６），４．１８（２Ｈ，ｔ，Ｈ−１”），３．８２（４Ｈ，ｔ，Ｈ−３’”，５’”），２．４０−２．６０（６Ｈ，ｍ，Ｈ−２’”，６’”，Ｈ−３”），１．９−２．１０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２”）．ＦＡＢＭＳ：３８２（Ｍ+＋１）．
【００５５】
アルキルアミノ誘導体としてＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたクリシンの合成類似体、７−Ｏ−プロピル（Ｎ，Ｎ−ジメチル）クリシン（図１１）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性である。
ＭＰ：１１９−１２０℃，1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  １２．７２（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），７．８２−７．８６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．５０−７．５８（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．６４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．４８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），６．３８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−６），４．１０（２Ｈ，ｔ，Ｈ−１”），２．４２（２Ｈ，Ｈ−３”），２．２２（６Ｈ，ｓ，２ｘＭｅ），１．９８−２．０２（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２”）．ＦＡＢＭＳ：３４０（Ｍ+＋１）
【００５６】
アルキルアミノ誘導体としてＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたクリシンの合成類似体、７−Ｏ−プロピル（Ｎ−メチルピペリジニル）クリシン（図１２）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性である。
ＭＰ：  １２８−１３０℃，1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  １２．７０（１Ｈ，  ｓ，ＯＨ−５），７．８４−７．８６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４６−７．５８（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．６４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．５２（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），６．１８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−６），４．１２（２Ｈ，ｔ，Ｈ−１”），２．４０−２．６０（９Ｈ，ｍ，Ｈ−３’”，５’”，Ｈ−３”及びＨ−２’”，６’”），２．３０（３Ｈ，ｓ，Ｍｅ），１．９０−２．１０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２”）．ＦＡＢＭＳ：３９５（Ｍ+＋１）．
【００５７】
アルキルアミノ誘導体としてＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたクリシンの合成類似体、７−Ｏ−ブチル（Ｎ−メチルピペリジニル）クリシン（図１３）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性である。
ＭＰ：８０℃，1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  １２．６４（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），７．７６−７．８６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４０−７．５８（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．５８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．４０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），６．３０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−６），４．０（２Ｈ，ｔ，Ｈ−Ｉ”），２．８０−３．０（１０Ｈ，ｍ，Ｈ−２”’，６’”，Ｈ−３’”，５’”，Ｈ−４”），２．５８（３Ｈ，ｓ，Ｍｅ），１．６−１．８２（４Ｈ，ｍ，Ｈ−２”，３”）．ＦＡＢＭＳ：４３１（Ｍ+＋Ｎａ）．
【００５８】
アルキルアミノ誘導体としてＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたクリシンの合成類似体、７−Ｏ−ブチル（モルホリニル）クリシン（図１４）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性である。
ＭＰ：１３０℃，1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ  １２．３８（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），７．８０−７．８８（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．５０−７．５８（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．７２（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．６２（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），６．４０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−６），４．１０（２Ｈ，ｔ，Ｈ−１”），３．７０−３．７６（４Ｈ，ｍ，Ｈ−３’”，５’”），２．４０−２．５０（６Ｈ，ｍ，Ｈ−２’”，６’”，Ｈ−４”），１．８０−２．０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−３”），１．６０−１．８０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２”）．ＦＡＢＭＳ：３９６（Ｍ+＋１）．
【００５９】
グリコシド誘導体としてＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたオロキシリンＡの合成類似体、ＯＡＧ（図１５）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性である。
1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3＋ＭｅＯＨ−ｄ4）δ  １２．７８（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），７．８０−７．８６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４２−７．５６（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．８３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．５０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），３．４−５．５０（ｍ，糖プロトン），３．７８（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３．９２−３．９６（２Ｈ，ｄ）．
【００６０】
グリコシド誘導体としてＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたクリシンの合成類似体、ＣＧ（図１６）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性である。
1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3＋ＭｅＯＨ−ｄ4）δ  １２．７８（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），７．８２−７．９８（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４４−７．６０（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．６３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．４８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），６．２４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−６），３．４−５．５０（ｍ，糖プロトン），３．９０−３．９３（２Ｈ，ｄ）．
【００６１】
グリコシド誘導体としてＯｒｏｘｙｌｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍから得られたオロキシロシドメチルエステルの合成類似体、ＯＡ−５酸（図１７）の本発明の別の実施態様では、以下のスペクトル化学的及び物理的特性である。
1Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−ｄ4）（δ）１２．７０（１Ｈ，ｓ，ＯＨ−５），７．９４−８．０５（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２’，６’），７．４０−７．５５（３Ｈ，ｍ，Ｈ−３’，４’，５’），６．８０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−８），６．５７（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３），３．４−５．５０（ｍ，糖プロトン），３．８２（３Ｈ，ｓ，Ａｒ−ＯＭｅ）．
【００６２】
実施例１：
実験プロトコール：オロキシリンＡ、クリシン及びバイカレインを単離するプロセス。
乾燥粉末茎樹皮（２００ｇ）を、最初に、ソックスレー（soxlet）装置でガソリンにより脱脂した。ヘキサン抽出物の濾過の後で、明黄色の粉末固体を得た。固体（２ｇ）を、シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）、高さ６０ｃｍまで装填された直径３．５ｃｍのカラムでクロマトグラフィーに付した。カラムをクロロホルム中１％メタノールで連続的に溶離して、オロキシリン−Ａを得た。オロキシリン−Ａの収量はおよそ１．２ｇである。カラムをクロロホルム中２％メタノールで更に溶離すると、クリシンを得た。クリシンの収量はおよそ０．２ｇである。カラムをクロロホルム中３％メタノールで更に溶離すると、バイカレインを得た。バイカレインの収量はおよそ０．５ｇである。
【００６３】
メトキシクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグリコシドを単離するプロセス：
乾燥粉末茎樹脂（２００ｇ）を、ヘキサン及びアセトンで連続的に抽出した。アセトン抽出物を蒸発させて、暗褐色の残渣（３ｇ）を得た。残渣を、シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）、高さ６０ｃｍまで装填された直径３．５ｃｍのカラムでクロマトグラフィーに付した。オロキシリンＡ、クリシン及びバイカレインに加えて、更に２つの化合物、すなわちメトキシクリシン、オロキシロシドメチルエステル及びクリシン−７−Ｏ−メチルグルコシドを以下のように単離した。カラムをクロロホルム中１％メタノールで連続的に溶離して、オロキシリン−Ａを得た。オロキシリン−Ａの収量はおよそ０．２ｇである。カラムをクロロホルム中２％メタノールで更に溶離すると、クリシンを得た。クリシンの収量はおよそ０．２５ｇである。カラムをクロロホルム中３％メタノールで更に溶離すると、バイカレインを得た。バイカレインの収量はおよそ１．５ｇである。カラムをクロロホルム中４％メタノールで連続的に更に溶離すると、メトキシクリシンを得る。メトキシクリシンの収量はおよそ０．５ｇである。カラムをクロロホルム中５％メタノールで更に溶離すると、オロキシロシドメチルエステルを得る。オロキシロシドメチルエステルの収量はおよそ０．４ｇである。カラムをクロロホルム中７％メタノールで更に溶離すると、クリシン−７−Ｏ−メチルグルコシドを得る。クリシン−７−Ｏ−メチルグルコシドの収量はおよそ０．３ｇである。上記の化合物は全て純度９５％で単離された。
【００６４】
上記の全ての化合物の分光化学的及び物理的特性は、前記に考察されている。更に、全ての合成類似体の調製及び収率は、前記の手順で考察された。
【００６５】
実施例２：胃潰瘍の実験方法
４つの異なるモデルによる抗機械用スクリーニングの研究で扱われた化合物を、実験用白ネズミを使用して選択した：
１．アスピリン誘発胃潰瘍化
２．幽門結紮潰瘍化
３．エタノール誘発胃潰瘍化
４．ストレス誘発胃潰瘍化
【００６６】
市販の薬剤ラニチジン（ｓｉｇｍａ）、オメプラゾール（ｓｉｇｍａ）及びスクラルファート（Ｍｅｒｃｋ）を実験モデルにおいて基準品（reference standard）として使用した。ツイーン８０（ＳＤ  ｆｉｎｅ  ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を薬剤の投与用のビヒクルとして使用した（これは対照として使用する）。得られた結果を下記の表に表す。
【００６７】
２．１  アセチルサリチル酸誘発潰瘍：
摂取中の化合物の抗潰瘍活性を研究した。動物を、それぞれ６匹の動物の２０群に分けた。群１は、ビヒクルのツイーン−８０（１％、１ｍｌ）を摂取し、これは対照として機能した。群２は体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量でラニチジンを摂取し、これは比較基準として機能した。群３〜２０は、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量であった。ラットに、化合物及び薬剤のラニチジンの１日量を経口で５日間投与し、次に２４時間絶食させた。体重の２００ｍｇ／ｋｇの用量の鎮静剤のアセチルサリチル酸（アスピリン）を、毎日の薬剤投与の３０分後に、ツイーン−８０（１％）中の懸濁剤として投与した。全ての薬剤を、薬剤と潰瘍誘発剤のアスピリンの最後の投与後の６日目に経口投与し、ラットを頸椎脱臼により死亡させ、その胃を大弯に沿って開き、微温の食塩水で洗浄し、解剖顕微鏡で検査した。潰瘍指数をそれぞれの胃で計算した。結果を表１に提示する。
【００６８】
２．２  寒冷束縛（restraint）誘発潰瘍化
化合物の抗胃潰瘍活性を研究した。動物を、それぞれ７匹の動物の２１群に分けた。群１は、ビヒクルのツイーン−８０（１％、１ｍｌ）を摂取し、これは対照として機能した。群２は体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量でラニチジンを摂取し、これは比較基準として機能した。群３〜２１は、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量であった。試験の４８時間前に、動物から食餌を取り上げた。水は自由に入手させた。ラットに、化合物及び薬剤のラニチジンを経口投与した。水を、束縛及び４℃で２時間の暴露の１時間前に取り除いた。ストレスの２時間後、動物を殺処理した。ストレスを受けた動物を、胃の大弯に沿って開き、胃潰瘍の重篤度を平均潰瘍指数によって評価した。結果を下記の表２にまとめる。
【００６９】
２．３  エタノール誘発潰瘍
動物を、それぞれ６匹の動物の２２群に分けた。動物から食餌を４８時間取り上げたが、水は自由に入手させた。群１は、ビヒクルのツイーン−８０（１％、１ｍｌ）を摂取し、これは対照として機能した。群２は体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量でラニチジンを摂取し、これは比較基準として機能した。群３は体重の３０ｍｇ／ｋｇの用量でオメプラゾールを摂取し、これは比較基準として機能した。群４は体重の４００ｍｇ／ｋｇの用量でスクラルファートを摂取し、これは比較基準として機能した。群５〜２２は、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量を摂取した。エタノール攻撃動物の１時間後に病巣が誘発された。エーテルで麻酔をかけて、胃を幽門で結紮した。結紮の４時間後、動物を殺処理し、内容物を排出し、５０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上澄みのアリコートを、テッフェル試薬及びフェノールフタレイン指示薬を使用した０．０１Ｎ  ＮａＯＨの滴定による総酸の決定に使用した。結果を表３にまとめる。
【００７０】
２．４  幽門結紮潰瘍
動物を、それぞれ６匹の動物の１９群に分けた。動物から食餌を４８時間取り上げたが、水は自由に入手させた。群１は、ビヒクルのツイーン−８０（１％、１ｍｌ）を摂取し、これは対照として機能した。群２は体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量でラニチジンを摂取し、これは比較基準として機能した。群３〜２０は、体重の２５ｍｇ／ｋｇの用量を摂取した。薬剤の投与の１時間後、エーテルで麻酔をかけて、胃を幽門で結紮した。結紮の４時間後、動物を殺処理し、内容物を排出し、５０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上澄みのアリコートを、テッフェル試薬及びフェノールフタレイン指示薬を使用した０．０１Ｎ  ＮａＯＨの滴定による総酸の決定に使用した。結果を表４にまとめる。
【００７１】
２．５  アセチルサリチル酸誘発潰瘍：
化合物の抗胃潰瘍活性を研究した。動物を、それぞれ６匹の動物の１９群に分けた。群１は、ビヒクルのツイーン−８０（１％、１ｍｌ）を摂取し、これは対照として機能した。群２は体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量でラニチジンを摂取し、これは比較基準として機能した。群３〜８は、それぞれ、体重の５０、２５、１５、１０及び５ｍｇ／ｋｇの用量であった。ラットに、化合物及び薬剤のラニチジンの１日量をそれぞれの群に経口で５日間投与し、次に２４時間絶食させた。体重の２００ｍｇ／ｋｇの用量の鎮静剤のアセチルサリチル酸（アスピリン）を、毎日の薬剤投与の３０分後に、ツイーン−８０（１％）中の懸濁剤として投与した。全ての薬剤を、薬剤と潰瘍誘発剤のアスピリンの最後の投与後の６日目に経口投与し、ラットを頸椎脱臼により死亡させ、その胃を大弯に沿って開き、微温の食塩水で洗浄し、解剖顕微鏡で検査した。潰瘍指数をそれぞれの胃で計算し、表５に提示する。
【００７２】
２．６  寒冷束縛誘発潰瘍
化合物の抗胃潰瘍活性を研究した。動物を、それぞれ６匹の動物の８群に分けた。群１は、ビヒクルのツイーン−８０（１％、１ｍｌ）を摂取し、これは対照として機能した。群２は体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量でラニチジンを摂取し、これは比較基準として機能した。群３〜８は、それぞれ、体重の５０、２５、１５、１０及び５ｍｇ／ｋｇの用量であった。試験の４８時間前に、動物から食餌を取り上げた。水は自由に入手させた。ラットに、化合物及び薬剤のラニチジンを経口投与した。水を、束縛及び４℃で２時間の暴露の１時間前に取り除いた。ストレスの２時間後、動物を殺処理した。ストレスを受けた動物を、胃の大弯に沿って開き、胃潰瘍の重篤度を平均潰瘍指数によって評価した。結果を表６にまとめる。
【００７３】
２．７  エタノール誘発潰瘍
動物を、それぞれ６匹の動物の９群に分けた。動物から食餌を４８時間取り上げたが、水は自由に入手させた。群１は、ビヒクルのツイーン−８０（１％、１ｍｌ）を摂取し、これは対照として機能した。群２は体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量でラニチジンを摂取し、これは比較基準として機能した。群３は体重の３０ｍｇ／ｋｇの用量でオメプラゾールを摂取し、これは比較基準として機能した。群４は体重の４００ｍｇ／ｋｇの用量でスクラルファートを摂取し、これは比較基準として機能した。群５〜９は、それぞれ、体重の５０、２５、１５、１０及び５ｍｇ／ｋｇの用量を摂取した。エタノール攻撃動物の１時間後に病巣が誘発された。エーテルで麻酔をかけて、胃を幽門で結紮した。結紮の４時間後、動物を殺処理し、内容物を排出し、５０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上澄みのアリコートを、テッフェル試薬及びフェノールフタレイン指示薬を使用した０．０１Ｎ  ＮａＯＨの滴定による総酸の決定に使用した。結果を表７にまとめる。
【００７４】
２．８  幽門結紮潰瘍
動物を、それぞれ６匹の動物の７群に分けた。動物から食餌を４８時間取り上げたが、水は自由に入手させた。群１は、ビヒクルのツイーン−８０（１％、１ｍｌ）を摂取し、これは対照として機能した。群２は体重の５０ｍｇ／ｋｇの用量でラニチジンを摂取し、これは比較基準として機能した。群３〜７は、それぞれ、体重の５０、２５、１５、１０及び５ｍｇ／ｋｇの用量を摂取した。薬剤の投与の１時間後、エーテルで麻酔をかけて、胃を幽門で結紮した。結紮の４時間後、動物を殺処理し、内容物を排出し、５０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上澄みのアリコートを、テッフェル試薬及びフェノールフタレイン指示薬を使用した０．０１Ｎ  ＮａＯＨの滴定による総酸の決定に使用した。結果を表８にまとめる。
【００７５】
【表１】
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【００７６】
【表２】
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【００７７】
【表３】
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【００７８】
【表４】
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【００７９】
【表５】
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【００８０】
【表６】
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【００８１】
【表７】
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【００８２】
【表８】
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【国際調査報告】
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