(57)【要約】  スタブジン多形性形態Ｉおよび形態ＩＩの調製の新規の方法が記述されている；それは５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンから出発して調製される。Ｃ１−Ｃ４のアルコール性溶媒中で５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンのナトリウムメトキシドの触媒量との反応により粗スタブジン形態ＩＩが生成する。これは単離も精製もされる必要なく、イソプロパノール中の還流におけるスラリーによって多形性形態Ｉに変換され得る。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドの触媒量と反応させることを含む、スタブジン形態ＩまたはＩＩの調製方法。
【請求項２】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンのモルあたり、ナトリウムメトキシドの０．２から０．０１モル、好適には０．０５から０．０１モルの使用により特徴づけられる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンのモルあたり、ナトリウムメトキシドの約０．０２モルの使用により特徴づけられる、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンのナトリウムメトキシドとの反応が、Ｃ１からＣ４のアルコール中で行われることを特徴とする、請求項１から３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記アルコールが、メタノールであることを特徴とする、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記反応が、アルコールの還流温度で行われることを特徴とする、請求項４から５に記載の方法。
【請求項７】
前記反応が、４０から６５°Ｃにおいて，好適には５０から６５°Ｃにおいて、より好適には５００Ｃにおいて行われることを特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
反応混合物が、３から１０時間に亘り、好適には５から８時間に亘り加熱されることを特徴とする、請求項１から７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドと反応させて得られる製品が、イソプロパノールに懸濁され、このように得られる懸濁液が加熱還流されることを特徴とする、請求項１から８のいずれかに記載のスタブジン形態Ｉの調製。
【請求項１０】
懸濁液が、少なくとも２時間に亘り、好適には２から１５時間に亘り、より好適には２から４時間に亘り加熱還流されることを特徴とする、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
加熱される懸濁液が、０から３０℃に、好適には１５から２５℃に冷却されることを特徴とする、請求項９及び１０に記載の方法。
【請求項１２】
イソプロパノールが、冷却された懸濁液に加えられることを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
冷却された懸濁液が攪拌され、ついで０から３０℃において、好適には１５から２５℃において濾過されることを特徴とする、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドと反応させて得られる製品が、スタブジン形態ＩＩまたはスタブジン形態ＩおよびＩＩの混合物であることを特徴とする、請求項９から１３に記載の方法。
【請求項１５】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドと反応させて得られる製品が、イソプロパノール中に懸濁される前に単離も精製もされないことを特徴とする、請求項９から１４に記載の方法。
【請求項１６】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドと反応させて得られる製品が、攪拌下でイソプロパノール中に懸濁されることを特徴とする、請求項１から８に記載のスタブジン形態Ｉの単離の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
スタブジン多形性形態Ｉおよび形態ＩＩの調製のための新規方法が記述されている；それは、５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジン（その化学式は、以下に報告されている。）から出発して調製される：
【０００２】
【化１】
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【０００３】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンは、触媒量のナトリウムメトキシドとの反応により粗スタブジン形態ＩＩを生成する。粗スタブジン形態ＩＩ（これは、単離されまたは精製される必要はない。）は、イソプロパノール中での還流におけるスラリーにより多形性形態Ｉに変換され得る。
【背景技術】
【０００４】
その国際名称が、「スタブジン」（Ｄ４Ｔ）である以下に報告される化合物は、抗ウイルス作用を有する周知の活性成分である。
【０００５】
【化２】
2009528324.tif 000004
【０００６】
スタブジンの複数の調製法が、例えば、ＥＰ−Ａ−０３４０７７８、ＥＰ−Ａ−０４９３６０２、ＥＰ−Ａ−０５０１５１１、ＵＳ２００１００３９３４２およびＭａｎｓｕｒｉら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８９，５４，４７８０−４７８５およびＣｌａｓｓｏｎら、Ａｃｔａ  Ｃｈｅｍ．Ｓｃａｎｄ．，Ｂ３６，１９８２，２５１などの文献に記述されている。
【０００７】
スタブジンの調製法は、例えば、ＥＰ０７４９９６９、Ｈａｒｔｅ，Ｗ．Ｅ．，ら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍ．，１７５（１），ｐｐ２９８−３０４（１９９１）およびＧｈａｎｄｉ，Ｒ．Ｂ．，Ｂｏｇａｒｄｕｓ，Ｊ．Ｂ．，ら、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ２０１（２０００）２２１−２３７に開示されている。スタブジンの３つの固体状態の形態、即ち形態Ｉ，形態ＩＩおよび形態ＩＩＩが、文献に報告されている。具体的には、欧州特許出願ＥＰ０７４９９６９に、スタブジンを１つの多形性形態からもう１つの多形性形態に変換する方法が、記述されている。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の記載）
本発明は、以下の経路による５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンからのスタブジン多形性形態Ｉおよび形態ＩＩの調製に関する：
【０００９】
【化３】
2009528324.tif 000005
【００１０】
この方法によって、非常に容易で速く、中間体の単離または精製を全く含まず、スタブジンを非常に純粋な形で回収することができる。
【００１１】
より詳細には、本発明は：
ａ）５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンのナトリウムメトキシドの触媒量との反応；
ｂ）得られる粗製スタブジンが、形態ＩＩと同定される；
ｃ）および、場合により、得られる粗製スタブジン形態ＩＩが、イソプロパノール中に懸濁され、還流において攪拌され、純粋なスタブジン多形性形態Ｉを生成することを特徴とする、スタブジンの調製のための新規方法に関する。
【００１２】
第一の好適な実施形態にしたがって、本方法は、スタブジン多形性形態Ｉまたは形態ＩＩのろ過の前に、中間体の単離又は精製を全く行わないで実施される。
【００１３】
０から３０°Ｃの好適な温度において、特に１５から２５°Ｃにおいて、５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをＣ１からＣ４のアルコールに懸濁する。該アルコールは、好適にはメタノールである。
【００１４】
０から３０°Ｃにおいて、特に１５から２５°Ｃにおいて、ナトリウムメトキシドを加える。本反応の好適な実施形態において、５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの各モルあたり，ナトリウムメトキシド０．２から０．０１モル、特に０．０５から０．０１モル、より好適には約０．０２モルが用いられる。
【００１５】
該懸濁液を、アルコールの還流温度に加熱する；即ち、メタノールの場合、４０から６５°Ｃに、特に５０から６５°Ｃに、さらに特に５００Ｃに。
【００１６】
３から１０時間後、特に５から８時間後、得られた該溶液を冷却し、ついで溶媒を留去する；この時点で、予備的な解析により、該懸濁液中のスタブジンが、純粋な多形性形態ＩＩと同定される。
【００１７】
イソプロパノールを加え、該懸濁液を真空下で再度蒸留する。イソプロパノールを加え、懸濁液を得る：
・形態Ｉを得るために、該懸濁液を２から１５時間、特に２から４時間加熱還流し、ついで０から３０°Ｃに、特に１５から２５°Ｃに冷却し、イソプロパノールを加える；該懸濁液を攪拌し、０から３０°Ｃにおいて、特に１５から２５°Ｃにおいてろ過し；ケーキをイソプロパノールで洗浄し、得られた純粋なスタブジン多形性形態Ｉを真空下で乾燥する；
・形態ＩＩを単離するために、該懸濁液を０から３０°Ｃにおいて、特に１５から２５°Ｃにおいて攪拌し、イソプロパノールを加える；該懸濁液を攪拌し、０から３０°Ｃにおいて、特に１５から２５°Ｃにおいてろ過する；ケーキをイソプロパノールで洗浄し、得られた純粋なスタブジン多形性形態ＩＩを真空下で乾燥する。
そうでなければ、純粋なスタブジン形態ＩＩからの純粋のスタブジン形態Ｉは、純粋なスタブジン形態ＩＩ（単離前）のイソプロパノール中の懸濁液を用いて得られる。（該懸濁液を）０から３０°Ｃにおいて、特に１５から２５°Ｃにおいて攪拌し、更にイソプロパノールを加える。該懸濁液を攪拌し、０から３０°Ｃ、特に１５から２５°Ｃにおいてろ過する。ケーキをイソプロパノールで洗浄し、得られる純粋なスタブジン多形性形態Ｉを真空下で乾燥する。
【００１８】
本発明の目的は従って、５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドの触媒量と反応させ、それによってスタブジン形態ＩＩを得ることを含むスタブジン形態ＩまたはＩＩの調製のための方法によって示される。
【００１９】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンのナトリウムメトキシドとの反応は、Ｃ１からＣ４のアルコール、好適にはメタノール中で，アルコールの還流温度：即ち通常４０から６５°Ｃ、好適には５０から６５°Ｃ、より好適には５００Ｃで行われる。
【００２０】
本発明の１つの実施形態によれば、５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンのモルあたり、ナトリウムメトキシド０．２から０．０１モル、好適には０．０５から０．０１モル、さらにより好適には約０．０２モルが用いられる。
【００２１】
もう１つの実施形態によれば、該反応混合物は、３から１０時間に亘り、好適には５から８時間に亘り加熱される。
【００２２】
このように得られるスタブジン形態ＩＩは、攪拌下イソプロパノールに懸濁し、ついでろ過して単離され得る。
【００２３】
そうでなければ、単離後にまたは単離されもしくは精製される必要なしに、形態Ｉに変換され得る。これは、イソプロパノールにスタブジン形態ＩＩを懸濁し、ついで該懸濁液を加熱還流することにより達成され得る；本発明の１つの実施形態によれば、該懸濁液は、少なくとも２時間に亘り、好適には２から１５時間に亘り、より好適には２から４時間に亘り加熱還流される；適宜加熱された懸濁液は、ついで０から３０°Ｃまで、好適には１５から２５°Ｃまで冷却される；ついで、該冷却された懸濁液にイソプロパノールを加え、ついでこれを攪拌し、ついで０から３０°Ｃにおいて，好適には１５から２５°Ｃにおいてろ過される。
【００２４】
形態Ｉへの形態ＩＩの動的変換を定量的に評価するために、多形性形態試験を実施した。；データは、被験試料を０．２ｍｍの試料ウェルを有するガラススライドに詰め、これをＢｒｕｋｅｒ  ＡＸＳＤ８  Ａｖａｎｃｅ回折計を用いて解析した。該試料を、５°から５５°２θまで、ステップスキャン（ｓｔｅｐ  ｓｃａｎ）  Δ２θ＝０．０２°，ｔ＝ｌｓで走査した。
粗スタブジンを、イソプロパノール中に懸濁した；この時点で粉体をＩＲ分光法およびＸ線回折像で特性化し，これを３０，６０および１２０分において繰り返し、次の結果を得た：
・還流での０分において、スタブジンは１００％が形態ＩＩとして同定される（図１）；
・イソプロパノール中の還流での３０分後において、変換をモニターし、Ｘ−線回折およびＩＲで特性化する：スタブジンは、約９５％が形態ＩＩおよび５％が形態Ｉであると同定される（図２）；
・イソプロパノール中の還流での１時間後において、変換をモニターし、Ｘ−線回折およびＩＲで特性化する：スタブジンは、約１０％が形態ＩＩおよび９０％が形態Ｉであると同定される（図３）；
・イソプロパノール中の還流での２時間後において、変換が終了する：それは、１００％が形態Ｉであると同定される（図４）。
【００２５】
動的変換を下表に要約する：
【００２６】
【表１】
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【００２７】
本発明の用語の範囲内において、表現「５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドと反応させて得られる製品」は、好適にはスタブジン形態ＩＩを指すことが意図されるが、例えば、スタブジン形態ＩおよびＩＩの混合物などの他の意味を有し得る。
【００２８】
次の実施例（これは、単に例示的説明であり、本発明を制限するものでない。）によって認識され得るように、本方法は、反応の塩、後処理時間をかなり低減することを可能にし、ついで形態Ｉに変換される純粋の多形性形態ＩＩの単離および結晶化を含まない。
【実施例】
【００２９】
（実施例１）
スタブジン多形性形態Ｉ：
メタノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの１０容量）１５０ｍｌ中に２５°Ｃで５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジン（０．５６２２モル）１５０ｇを懸濁する。２５°Ｃでメタノール中のナトリウムメトキシド０．５Ｍ溶液２２．２ｍｌ（０．０ｌｌｌモル）を加える。該懸濁液を７時間加熱還流する。得られた溶液を室温に冷却し、炭７．５ｇを加える。
該懸濁液を室温で３０分攪拌し、室温でろ過する。得られた溶液を真空下６００Ｃで油まで蒸留する。
得られた油にイソプロパノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの０．６７容量）１００ｍｌを加え、該溶液を再度真空下６００Ｃで蒸留する。得られた該懸濁液にイソプロパノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの３容量）４５０ｍｌを加え、該懸濁液を１４から１６時間に亘り加熱還流する。該懸濁液を２５°Ｃに冷却し、イソプロパノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの３容量）６００ｍｌを加え、該懸濁液を２５°Ｃで３０分間攪拌する。該懸濁液をろ過し、ケーキをイソプロパノール（２００ｍｌｘ３）で３回洗浄する。湿ったスタブジンを真空下５００Ｃで１０から１４時間に亘り乾燥する。純粋のスタブジン多形性形態Ｉ：１０３ｇ．
【００３０】
（実施例２）
スタブジン多形性形態Ｉ：
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジン（０．５６２２モル）１５０ｇを２５°Ｃでメタノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの１０容量）１５０ｍｌに懸濁する。２５°Ｃで、メタノール中のナトリウムメトキシド０．５Ｍ溶液５５．５ｍｌ（０．０２７７モル）（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの０．０５当量）を加える。該懸濁液を５００Ｃで７時間加熱する。得られた溶液を室温に冷却し、炭７．５ｇを加える。該懸濁液を室温で３０分間攪拌し、室温でろ過する。得られた溶液を真空下６００Ｃで油まで蒸留する。得られた油にイソプロパノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの０．６７容量）１００ｍｌを加え、該溶液を真空下６００Ｃで再度蒸留する。得られた懸濁液にイソプロパノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの３容量）４５０ｍｌを加え、該懸濁液Ｉを２から３時間加熱還流する。該懸濁液を２５°Ｃに冷却し、イソプロパノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの３容量）６００ｍｌを加え、該懸濁液を２５°Ｃで３０分間攪拌する。該懸濁液をろ過し、ケーキをイソプロパノール（２００ｍｌｘ３）で３回洗浄する。湿ったスタブジンを真空下５００Ｃで１０から１４時間に亘り乾燥する。純粋のスタブジン多形性形態Ｉ：９９ｇ
【００３１】
（実施例３）
スタブジン多形性形態ＩＩ：
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジン（０．５６２２モル）１５０ｇを２５°Ｃでメタノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの１０容量）１５０ｍｌに懸濁する。２５°Ｃで、メタノール中のナトリウムメトキシド０．５Ｍ溶液５５．５ｍｌ（０．０２７７モル）（０．０５５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの０．０５当量）を加える。該懸濁液を５００Ｃで５時間加熱する。得られた溶液を室温に冷却し、炭７．５ｇを加える。該懸濁液室温で３０分間攪拌し、室温でろ過する。得られた溶液を真空下６００Ｃで油まで蒸留する。
【００３２】
得られた油にイソプロパノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの０．６７容量）１００ｍｌを加え、該溶液を真空下６００Ｃで再度蒸留する。得られた該懸濁液にイソプロパノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの３容量）４５０ｍｌを加え、該懸濁液を室温で３０分間攪拌する。イソプロパノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの３容量）６００ｍｌを加え、該懸濁液を室温で更に３０分間攪拌する。該懸濁液をろ過し、ケーキをイソプロパノール（２００ｍｌｘ３）で３回洗浄する。湿ったスタブジンを真空下５００Ｃで１０から１４時間に亘り乾燥する。純粋のスタブジン多形性形態ＩＩ：９８ｇ
【００３３】
（実施例４）
スタブジン多形性形態ＩＩからのスタブジン多形性形態Ｉ：
単離したスタブジン多形性形態ＩＩの１００ｇにイソプロパノール（３容量）３００ｍｌを加え、該懸濁液を２４時間加熱還流する。該懸濁液を２５°Ｃに冷却し、イソプロパノール（５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンの３容量）３００ｍｌを加え、該懸濁液を２５°Ｃで３０分間攪拌する。該懸濁液をろ過し、ケーキをイソプロパノール（２００ｍｌｘ３）で３回洗浄する。湿ったスタブジンを真空下５００Ｃで１０から１４時間に亘り乾燥する。純粋のスタブジン多形性形態Ｉ：９５ｇ
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】還流での０分において、スタブジンは１００％が形態ＩＩとして同定される図である。
【図２】イソプロパノール中の還流での３０分後において、変換をモニターし、Ｘ−線回折およびＩＲで特性化する：スタブジンは、約９５％が形態ＩＩおよび５％が形態Ｉであると同定される図である。
【図３】イソプロパノール中の還流での１時間後において、変換をモニターし、Ｘ−線回折およびＩＲで特性化する：スタブジンは、約１０％が形態ＩＩおよび９０％が形態Ｉであると同定される図である。
【図４】イソプロパノール中の還流での２時間後において、変換が終了する：それは、１００％が形態Ｉであると同定される図である。
【図１】
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【図２】
2009528324.tif 000008
【図３】
2009528324.tif 000009
【図４】
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【手続補正書】
【提出日】平成20年10月23日(2008.10.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドの触媒量と反応させることを含む、スタブジン形態ＩまたはＩＩの調製方法。
【請求項２】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンのモルあたり、ナトリウムメトキシドの０．２から０．０１モル、好適には０．０５から０．０１モルの使用により特徴づけられる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンのモルあたり、ナトリウムメトキシドの約０．０２モルの使用により特徴づけられる、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンのナトリウムメトキシドとの反応が、Ｃ１からＣ４のアルコール中で行われることを特徴とする、請求項１から３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記アルコールが、メタノールであることを特徴とする、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記反応が、アルコールの還流温度で行われることを特徴とする、請求項４から５に記載の方法。
【請求項７】
前記反応が、４０から６５°Ｃにおいて，好適には５０から６５°Ｃにおいて、より好適には５００Ｃにおいて行われることを特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
反応混合物が、３から１０時間に亘り、好適には５から８時間に亘り加熱されることを特徴とする、請求項１から７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドと反応させて得られる製品が、イソプロパノールに懸濁され、このように得られる懸濁液が加熱還流されることを特徴とする、請求項１から８のいずれかに記載のスタブジン形態Ｉの調製方法。
【請求項１０】
懸濁液が、少なくとも２時間に亘り、好適には２から１５時間に亘り、より好適には２から４時間に亘り加熱還流されることを特徴とする、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
加熱される懸濁液が、０から３０℃に、好適には１５から２５℃に冷却されることを特徴とする、請求項９及び１０に記載の方法。
【請求項１２】
イソプロパノールが、冷却された懸濁液に加えられることを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
冷却された懸濁液が攪拌され、ついで０から３０℃において、好適には１５から２５℃において濾過されることを特徴とする、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドと反応させて得られる製品が、スタブジン形態ＩＩまたはスタブジン形態ＩおよびＩＩの混合物であることを特徴とする、請求項９から１３に記載の方法。
【請求項１５】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドと反応させて得られる製品が、イソプロパノール中に懸濁される前に単離も精製もされないことを特徴とする、請求項９から１４に記載の方法。
【請求項１６】
５’−アセテート−２’，３’−ジアセチル−５−メチルウリジンをナトリウムメトキシドと反応させて得られる製品が、攪拌下でイソプロパノール中に懸濁されることを特徴とする、請求項１から８に記載のスタブジン形態Ｉの単離の方法。
【国際調査報告】
2009528324.tif 000011
2009528324.tif 000012