(57)【要約】前立腺特異的膜抗原（ＰＭＳＡ）の強力阻害剤である、式：Ａ−Ｌ−Ｂの化合物であって、式中、Ａがグルタメートまたはグルタメート類似体であり；Ｌがホスホルアミデートまたはホスホルアミデート類似体であり；Ｂがセリンまたはセリン類似体である、化合物が記載される。このような化合物は、前立腺癌の治療に有用であり、蛍光色素に化学的に結合する場合、蛍光イメージングのために前立腺癌細胞を効率的かつ選択的に標識することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物であって：
Ａ−Ｌ−Ｂ
式中、
Ａがグルタメートまたはグルタメート類似体であり；
Ｌがホスホルアミデートまたはホスホルアミデート類似体であり；
Ｂがセリンまたはセリン類似体である、
化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩であって、
式中、Ａが、以下の式に記載のものであり：
【化１】
2009532338.tif 000020
式中、
ｎが１、２、３、４、５または６であり；
Ｑが、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）−、−Ｎ（Ｒ３）Ｏ−、−ＯＮ（Ｒ３）−、−ＣＨ２−または＝ＮＯ−であって、式中、ＱがＬに結合し；
Ｒ１およびＲ２が独立して−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
各Ｒ３が独立して−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである、
化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項３】
請求項１に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩であって、
式中、Ｂが、以下の式に記載のものであり：
【化２】
2009532338.tif 000021
式中、
ｎが１、２、３、４、５または６であり；
Ｒ４が、−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
ＭおよびＴが独立して−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）−または−ＣＨ２−であって、式中、ＴがＬに結合し；
Ｒ１０が、−Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキル−アリール、−アリール−アリール、−Ｘ−Ｒ６、−Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ５、ペプチド、デンドリマーまたはペプチドデンドリマーであって、式中、
Ｘが、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−であり；
Ｒ５が、−ＣＨ（Ｒ５１）Ｎ（Ｒ５２）２；
独立して−ハロゲン、ＣＯＯＲ５３、−Ｎ（Ｒ５２）２である１〜３個の基で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；
アリール；
またはヘテロアリールであって、式中、
Ｒ５１が、−Ｈ、アリール、ヘテロアリール；−ＯＨで場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル−アリール；Ｃ１−Ｃ６アルキル−ヘテロアリール、または−ＯＲ５３、−ＳＲ５３、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＣＯＯＲ５３もしくは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５３）２で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５２が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ５３、Ｃ（Ｏ）ＯＲ５３、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５３）２、−Ｃ（Ｏ）アリールまたは−Ｃ（Ｏ）ヘテロアリールであり；
Ｒ５３が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであり；
Ｒ６が、−Ｈまたは−Ｃ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ７が、−Ｌ１−Ｒ８であって、式中、
Ｌ１が、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒ２１）−、−Ｃ（Ｏ）（Ｏ）または−Ｃ（Ｏ）−Ｌ２−であって、式中、
Ｒ２１が、−Ｈ、アリール、ヘテロアリール；−ＯＨで場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル−アリール；Ｃ１−Ｃ６アルキル−ヘテロアリール、または−ＯＲ２３、−ＳＲ２３、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＣＯＯＲ２３もしくは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２３）２で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２３が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであり；
Ｌ２が、−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−または−フェニル−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−であって、式中、
各アルキル基が、オキソ、＝Ｓまたは−ＣＯＯＨである１〜４個の基で場合により置換され；
各アルキル基のメチレン基の内の１〜６個が、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で場合により置換されるが、但し、２個の隣接するメチレン基がいずれも−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で置換されないことを条件とし；
Ｒ８が、−Ｈ、−ＮＨ２または−ＯＨであり；
各Ｒ３が独立して−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである、
記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項４】
Ｌが、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｎ（Ｒ３）２）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｓ）−であって、式中、各Ｒ３が独立して−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項１に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項５】
以下の式に記載の請求項１に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩であって、
【化３】
2009532338.tif 000022
式中、
各ｎが独立して１、２、３、４、５または６であり；
各Ｒ１およびＲ２が独立して−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
各Ｒ３が独立して−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４が、−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
Ｌが、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｎ（Ｒ３）２）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｓ）−であり；
ＭおよびＴが独立して−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）−または−ＣＨ２−であり；
Ｒ１０が、−Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキル−アリール、−アリール−アリール、−Ｘ−Ｒ６、−Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ５、ペプチド、デンドリマーまたはペプチドデンドリマーであって、式中、
Ｘが、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−であり；
Ｒ５が−ＣＨ（Ｒ５１）Ｎ（Ｒ５２）２；
独立して−ハロゲン、ＣＯＯＲ５３、−Ｎ（Ｒ５２）２である１〜３個の基で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；
アリール；
またはヘテロアリールであって、式中、
Ｒ５１が、−Ｈ、アリール、ヘテロアリール；−ＯＨで場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル−アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキル−ヘテロアリール、または−ＯＲ５３、−ＳＲ５３、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＣＯＯＲ５３もしくは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５３）２で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５２が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ５３、Ｃ（Ｏ）ＯＲ５３、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５３）２、−Ｃ（Ｏ）アリールまたは−Ｃ（Ｏ）ヘテロアリールであり；
Ｒ５３が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであり；
Ｒ６が、−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ７が、−Ｌ１−Ｒ８であって、式中、
Ｌ１が、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒ２１）−、−Ｃ（Ｏ）（Ｏ）または−Ｃ（Ｏ）−Ｌ２−であって、式中、
Ｒ２１が、−Ｈ、アリール、ヘテロアリール；−ＯＨで場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル−アリール；Ｃ１−Ｃ６アルキル−ヘテロアリール、または−ＯＲ２３、−ＳＲ２３、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＣＯＯＲ２３もしくは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２３）２で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２３が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであり；
Ｌ２が、−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−または−フェニル−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−であって、式中、
各アルキル基が、オキソ、＝Ｓまたは−ＣＯＯＨである１〜４個の基で場合により置換され；
各アルキル基のメチレン基の内の１〜６個が、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で場合により置換されるが、但し、２個の隣接するメチレン基がいずれも−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で置換されないことを条件とし；
Ｒ８が、−Ｈ、−ＮＨ２または−ＯＨであり；
Ｑが、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）−、−Ｎ（Ｒ３）Ｏ−、−ＯＮ（Ｒ３）−、−ＣＨ２−または＝ＮＯ−である、
化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項６】
以下の式に記載のものである：
【化４】
2009532338.tif 000023
請求項５に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項７】
以下の式に記載のものである：
【化５】
2009532338.tif 000024
請求項５に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項８】
Ｒ１およびＲ２が、それぞれ−Ｃ（Ｏ）ＯＨである、請求項７に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項９】
Ｒ１０が、−Ｃ（Ｏ）−フェニルである、請求項７に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１０】
Ｒ１０がＲ７である、請求項７に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１１】
Ｎ−｛［（２Ｓ）−２−（ベンゾイルアミノ）−２−カルボキシエトキシ］（ヒドロキシ）ホスホリル｝−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−［｛（２Ｓ）−２−［ベンゾイル（メチル）アミノ］−２−カルボキシエトキシ｝（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−｛［２−（ベンゾイルアミノ）エトキシ］（ヒドロキシ）ホスホリル｝−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−［｛２−［ベンゾイル（メチル）アミノ］エトキシ｝（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−［（ビフェニル−４−イルメトキシ）（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−［（２−カルボキシ−４−フェニルブトキシ）（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−［ヒドロキシ（４−フェニルブトキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−｛［（２Ｓ）−２−｛［４−（アミノメチル）ベンゾイル］アミノ｝−２−カルボキシエトキシ］（ヒドロキシ）ホスホリル｝−Ｌ−グルタミン酸；
Ｌ−γ−グルタミル−Ο−［｛［（１Ｓ）−１，３−ジカルボキシプロピル］アミノ｝（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−セリン；
Ｎ−｛［（２Ｓ）−２−アミノ−２−カルボキシエトキシ］（ヒドロキシ）ホスホリル｝−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−［｛［（２Ｓ）−２０−アミノ−２−カルボキシ−４，８−ジオキソ−６，１２，１５，１８−テトラオキサ−３，９−ジアザイコス−１−イル］オキシ｝（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸である、
請求項１に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項１２】
以下の式の化合物であって：
Ａ−Ｌ−Ｂ
式中、
Ａがグルタメートまたはグルタメート類似体であり；
Ｌがホスホルアミデートまたはホスホルアミデート類似体であり；
Ｂがセリンまたはセリン類似体であり；
前記化合物が、前記化合物の任意の置換可能な位置で、検出可能な標識、治療剤、または固体担体に結合する生体分子アンカーに、２価のリンカーを介して共有結合する、
化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項１３】
以下の式に記載の請求項１２に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩であって、
【化６】
2009532338.tif 000025
式中、
各ｎが独立して１、２、３、４、５または６であり；
各Ｒ１およびＲ２が独立して−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
各Ｒ３が独立して−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４が、−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
Ｌが、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｎ（Ｒ３）２）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｓ）−であり；
ＭおよびＴが独立して−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）−または−ＣＨ２−であり；
Ｒ７が、−Ｘ−Ｒ８または−Ｌ１−Ｒ８であって、式中、
Ｘが、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−であり；
Ｌ１が、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒ２１）−、−Ｃ（Ｏ）（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｌ２−、ペプチド、デンドリマーまたはペプチドデンドリマーであって、式中、
Ｒ２１が、−Ｈ、アリール、ヘテロアリール；−ＯＨで場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル−アリール；Ｃ１−Ｃ６アルキル−ヘテロアリール、または−ＯＲ２３、−ＳＲ２３、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＣＯＯＲ２３もしくは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２３）２で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２３が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであり；
Ｌ２が、−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−または−フェニル−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−であって、式中、
各アルキル基が、オキソ、＝Ｓまたは−ＣＯＯＨである１〜４個の基で場合により置換され；
各アルキル基のメチレン基の内の１〜６個が、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で場合により置換されるが、但し、２個の隣接するメチレン基がいずれも−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で置換されないことを条件とし；
Ｒ８が、治療剤、検出可能な標識、または固体担体に結合する生体分子アンカーであり；
Ｑが、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）Ｏ−、−ＯＮ（Ｒ３）−、−ＣＨ２−または＝ＮＯ−である、
請求項１２に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項１４】
以下の式に記載のものである：
【化７】
2009532338.tif 000026
請求項１３に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１５】
Ｒ８が治療剤である、請求項１４に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１６】
Ｒ８が、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、オキソ、ヒドロキシまたはハロゲンからなる群から選択される１〜５個の基で場合により置換されるステロイド基である、請求項１５に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項１７】
以下の式に記載のものであり：
【化８】
2009532338.tif 000027
式中、
Ｒ７が、−Ｏ−Ｒ８であって、式中、
Ｒ８が、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、オキソ、ヒドロキシまたはハロゲンからなる群から選択される１〜５個の基で場合により置換されるステロイド基である、
請求項１３に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項１８】
Ｒ８が検出可能な標識である、請求項１４に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１９】
Ｒ８が蛍光標識である、請求項１８に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２０】
式中、Ｒ８がフルオレセインまたはフルオレセイン誘導体である、請求項１９に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項２１】
Ｒ８がキレート剤である、請求項１４に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２２】
Ｒ８がＲ９であって、式中、
Ｒ９が、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリールまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであって、式中、Ｒ９が、独立して−ＣＯＯＨまたはＮ（Ｒ９１）２である１〜３個の基で置換され、式中、
各Ｒ９１が独立して、独立して−ＣＯＯＨまたは−Ｎ（Ｒ９２）２である１〜３個の基で置換される−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであって、式中、
各Ｒ９２が独立して、−Ｈまたは１〜３個のＣＯＯＨで置換されるＣ１−Ｃ６アルキルである、
請求項２１に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項２３】
Ｎ−｛［（２Ｓ）−２−カルボキシ−２−（｛４−［（｛３−［（２−｛［３−カルボキシ−４−（６−ヒドロキシ−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）フェニル］アミノ｝−２−オキソエチル）チオ］プロパノイル｝アミノ）メチル］ベンゾイル｝アミノ）エトキシ］（ヒドロキシ）ホスホリル｝−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−［｛（２Ｓ）−２−カルボキシ−２−［（４−｛［（６−｛［３−カルボキシ−４−（６−ヒドロキシ−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）ベンゾイル］アミノ｝ヘキサノイル）アミノ］メチル｝ベンゾイル）アミノ］エトキシ｝（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−｛３−［（２−｛［３−カルボキシ−４−（６−ヒドロキシ−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）フェニル］アミノ｝−２−オキソエチル）チオ］プロパノイル｝−Ｌ−γ−グルタミル−Ο−［｛［（１Ｓ）−１，３−ジカルボキシプロピル］アミノ｝（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−セリン；
Ｎ−（６−｛［３−カルボキシ−４−（６−ヒドロキシ−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）ベンゾイル］アミノ｝ヘキサノイル）−Ｌ−γ−グルタミル−Ο−［｛［（１Ｓ）−１，３−ジカルボキシプロピル］アミノ｝（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−セリン；
Ｎ−［｛（２Ｓ）−２−カルボキシ−２−［（｛［３−カルボキシ−４−（６−ヒドロキシ−３−オキソ−９，９ａ−ジヒドロ−３Ｈ−キサンテン−９−イル）フェニル］アミノ｝カルボノチオイル）アミノ］エトキシ｝（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−｛［（４−｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−３−［｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝（カルボキシメチル）アミノ］プロピル｝フェニル）アミノ］カルボノチオイル｝−Ｌ−γ−グルタミル−Ο−［｛［（１Ｓ）−１，３−ジカルボキシプロピル］アミノ｝（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−セリン；
Ｎ−｛６−［（６−｛［５−（２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタノイル］アミノ｝ヘキサノイル）アミノ］ヘキサノイル｝−Ｌ−γ−グルタミル−Ο−［｛［（１Ｓ）−１，３−ジカルボキシプロピル］アミノ｝（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−セリン；
Ｎ−｛［（２Ｓ）−２−カルボキシ−２−（｛４−［（｛６−［（６−｛［５−（２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタノイル］アミノ｝ヘキサノイル）アミノ］ヘキサノイル｝アミノ）メチル］ベンゾイル｝アミノ）エトキシ］（ヒドロキシ）ホスホリル｝−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−［｛３−［（３β，８ξ，９ξ，１４ξ，１７ξ，２０ξ）−コレスタン−３−イルオキシ］プロポキシ｝（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−［ヒドロキシ（３−｛［（３β，８ξ，９ξ，１４ξ）−１７−オキソアンドロスタン−３−イル］オキシ｝プロポキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−｛［（３β，８ξ，９ξ，１４ξ，１７ξ，２０ξ）−コレスタン−３−イルオキシ］（ヒドロキシ）ホスホリル｝−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−（ヒドロキシ｛［（３β，８ξ，９ξ，１４ξ）−１７−オキソアンドロスタン−３−イル］オキシ｝ホスホリル）−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−［ヒドロキシ（３−｛［１７−オキソエストラ−１（１０），２，４−トリエン−３−イル］オキシ｝プロポキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸；
Ｎ−［（３−｛［３−（ベンゾイルオキシ）エストラ−１（１０），２，４−トリエン−１７−イル］オキシ｝プロポキシ）（ヒドロキシ）ホスホリル］−Ｌ−グルタミン酸である、
請求項１３に記載の化合物、あるいはその医薬的に許容される塩。
【請求項２４】
請求項１３に記載の化合物と、医薬的に許容される賦形剤、担体または希釈剤とを含む、組成物。
【請求項２５】
請求項１３に記載の化合物を含む、診断キット。
【請求項２６】
前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）を阻害するための方法であって、ＰＭＳＡを発現する細胞を、請求項２４に記載の有効阻害量の医薬組成物と接触させる工程を含む、方法。
【請求項２７】
前立腺特異的膜抗原提示細胞を検出するための方法であって、該細胞を請求項１３に記載の化合物と接触させる工程と、ＰＭＳＡ提示細胞のみの検出が可能となる条件下で検出可能な標識を検出する工程とを含む、方法。
【請求項２８】
治療を必要とする被験体において、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）を提示する細胞に関与する疾患を阻害または治療するための方法であって、該細胞を、請求項１６に記載の有効阻害量の化合物と接触させる工程を含む、方法。
【請求項２９】
前記被験体がヒトである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前立腺特異的膜抗原（ＰＭＳＡ）提示細胞を捕捉、検出および定量化するための方法であって、ＰＭＳＡを提示することが疑われる細胞を、請求項１８に記載の化合物と接触させる工程と、捕捉または固定したＰＳＭＡ提示細胞の存在を検出する工程とを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
本願は、２００６年３月１４日に出願された米国仮特許出願第６０／７８２，２１１号の優先権の利益を請求し、その全体は、本明細書中に参考として援用される。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に対する高い親和性および特異性を有する小分子、ならびに診断目的および治療目的のためにそれらを使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
（関連技術の要約）
前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）は、前立腺癌細胞の表面ならびに種々の固形腫瘍の新生血管系に特異的に過剰発現する。そのため、ＰＳＭＡは、前立腺癌の検出および管理のための臨床的バイオマーカーとして注目を集めてきた。一般的に、これらの手法は、イメージング剤または治療剤を方向づけるためにＰＳＭＡを特異的に標的とする抗体を利用する。例えば、ＰｒｏｓｔａＳｃｉｎｔ（Ｃｙｔｏｇｅｎ、米国ペンシルベニア州フィラデルフィア）は、前立腺癌の検出およびイメージングのためにＦＤＡの承認を得たものであるが、キレート化された放射性同位元素（インジウム（ＩＩＩ））を送達するために抗体を利用する。しかし、ＰｒｏｓｔａＳｃｉｎｔ技術は死細胞の検出に限定されているため、その臨床的な重要性が疑わしいことが現在認められている。
【０００４】
抗体を使用する癌の診断および治療は、これらの分子を血液から排除するのが遅い点や、血管透過性に劣っている点などの問題により、十分な成果をあげていない。さらに、細胞表面の標的に結合する大きな抗体は、その後隣接した細胞表面部位に他の抗体が結合する際の障害となるため、細胞表面の標識化が低減してしまう。
【０００５】
診断剤または治療剤を送達する抗体の細胞表面標的として機能することに加えて、ＰＳＭＡのほとんど見過ごされている固有の特性に、その酵素活性がある。すなわち、ＰＳＭＡは、ジペプチドと同程度の小さな分子を認識し、プロセッシングすることができる。この特性を有するにもかかわらず、ＰＳＭＡは、新規の診断戦略および治療戦略の開においてほとんど考察されてこなかった。ＰＳＭＡの標識小分子阻害剤を使用して前立腺癌細胞を検出した結果について記載した参考文献の例は、最近では数例しかない。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の要旨）
本発明は、高親和性および特異性を有する前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）と結合する化合物を含む。これらの特性により、本発明の化合物は、ＰＳＭＡを提示する細胞に診断剤または治療剤を送達するのに有用であるか、あるいは本発明の化合物を固体担体に直接的または間接的に固定する時などにこのような細胞を捕捉および検出するのに有用である。それためこれに付随して、本発明はまた、ＰＳＭＡを提示する細胞を検出および／または同定する診断方法であって、ＰＳＭＡを提示することが疑われる細胞を検出可能なマーカーまたは検出素子に結合する本発明の化合物と接触させる（またはこれらの接触を引き起こす）工程と、前記化合物と細胞とが結合しているかどうかを判定する工程を含む、方法も含む。本発明はまた、本発明の化合物を、医薬的に許容される担体、賦形剤および／または希釈剤とともに含む組成物も含む。本発明はさらに、前立腺癌を抑制または治療する方法であって、前立腺癌治療剤（またはその組成物）に結合する治療有効量の本発明の化合物を前立腺癌の羅患体に投与する工程を含む、方法も含む。
【０００７】
小分子を調製および精製することは抗体を調製することよりも効率性がよく、費用対効果も高いことから、本発明の小分子は、ＰＭＳＡ抗体を使用する手法よりも利点がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
（発明の詳細な説明）
小分子が腫瘍細胞に対して十分な親和性を有する場合は、小分子によって腫瘍の標的化を達成できることが認識されている。抗体に基づく送達剤と拮抗し、実質的に同等となるには、小分子の親和性の範囲は、標的に対する抗体の親和性と同じでなければならない。
【０００９】
第１の態様において、本発明は、この基準を満たす、ＰＳＭＡ（好ましくはＰＳＭＡの酵素認識部位）を標的とする小分子を含む。本発明の化合物の固有の特徴は、それらの化合物が中心的なホスホルアミデートコアに主に由来することである。具体的には、このような化学化合物には、図１（ＣＣＳ、ＪＭ１３９および２−ＰＭＰＡを除く）、図２および図７〜１２に示すすべての化合物が含まれる。本発明の化合物は、実施例（下記参照）に記載の検定に従って測定した場合に、一般的には５μＭ未満、好ましくは１μＭ未満、より好ましくは１００ｎＭ未満のＩＣ５０を有する。
【００１０】
本発明の化合物は、ＰＳＭＡ発現細胞に診断剤または治療剤を送達するために官能基化することもできるＰＭＳＡの強力なペプチド模倣体阻害剤を生じる以下の３つの成分を有する：１）Ｐ１’位のグルタメートまたはグルタメート類似体、２）亜鉛結合基でしての中心的なホスホルアミデートまたはホスホルアミデート類似体、および３）側鎖を介して結合し、好ましくはそのＮ末端またはＮ末端等価物において疎水基を有するＰ１位のセリンまたはセリン類似体。
【００１１】
従って、第１の態様の実施形態において、本発明は、以下の式Ｉの化合物であって：
Ａ−Ｌ−Ｂ  （Ｉ）
（式中、Ａがグルタメートまたはグルタメート類似体であり；Ｌがホスホルアミデートまたはホスホルアミデート類似体であり；Ｂがセリンまたはセリン類似体である、化合物を提供する。好ましくは、セリンまたはセリン類似体は、Ｎ末端またはＮ末端等価物において疎水基を有する。本明細書に開示される本発明のすべての化合物の医薬的に許容される塩もまた、本発明の態様である。
【００１２】
第１の態様の好ましい実施形態において、本発明は、Ａが以下の式（Ｉａ）に記載のものである式Ｉの化合物であって：
【００１３】
【化９】
2009532338.tif 000002
式中、
ｎが１、２、３、４、５または６であり；
Ｑが、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）−、−Ｎ（Ｒ３）Ｏ−、−ＯＮ（Ｒ３）−、−ＣＨ２−または＝ＮＯ−であって、式中、ＱがＬに結合し；
Ｒ１およびＲ２が独立して−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
それぞれが独立して−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである、
化合物；ならびにその医薬的に許容される塩を提供する。
【００１４】
第１の態様の別の実施形態において、本発明は、Ｂが以下の式（Ｉｂ）である式Ｉの化合物であって：
【００１５】
【化１０】
2009532338.tif 000003
式中、
ｎが１、２、３、４、５または６であり；
Ｒ４が、−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
ＭおよびＴが独立して−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）−または−ＣＨ２−であって、式中、ＴがＬに結合し；
Ｒ１０が、−Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキル−アリール、−アリール−アリール、−Ｘ−Ｒ６、−Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ５、ペプチド、デンドリマーまたはペプチドデンドリマーであって、式中、
Ｘが、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−であり；
Ｒ５が、−ＣＨ（Ｒ５１）Ｎ（Ｒ５２）２；
独立して−ハロゲン、ＣＯＯＲ５３、−Ｎ（Ｒ５２）２である１〜３個の基で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；
アリール；
またはヘテロアリールであって、式中、
Ｒ５１が、−Ｈ、アリール、ヘテロアリール；−ＯＨで場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル−アリール；Ｃ１−Ｃ６アルキル−ヘテロアリール、または−ＯＲ５３、−ＳＲ５３、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＣＯＯＲ５３もしくは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５３）２で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５２が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ５３、Ｃ（Ｏ）ＯＲ５３、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５３）２、−Ｃ（Ｏ）アリールまたは−Ｃ（Ｏ）ヘテロアリールであり；
Ｒ５３が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであり；
Ｒ６が、−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ７が、−Ｌ１−Ｒ８であって、式中、
Ｌ１が、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒ２１）−、−Ｃ（Ｏ）（Ｏ）または−Ｃ（Ｏ）−Ｌ２−であって、式中、
Ｒ２１が、−Ｈ、アリール、ヘテロアリール；−ＯＨで場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル−アリール；Ｃ１−Ｃ６アルキル−ヘテロアリール、または−ＯＲ２３、−ＳＲ２３、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＣＯＯＲ２３もしくは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２３）２で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２３が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであり；
Ｌ２が、−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−または−フェニル−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−であって、式中、
各アルキル基が、オキソ、＝Ｓまたは−ＣＯＯＨである１〜４個の基で場合により置換され；
各アルキル基のメチレン基の内の１〜６個が、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で場合により置換されるが、但し、２個の隣接するメチレン基がいずれも−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で置換されないことを条件とし；
Ｒ８が、−Ｈ、−ＮＨ２または−ＯＨであり；
各Ｒ３が独立して−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである、
化合物；ならびにその医薬的に許容される塩を提供する。
【００１６】
第１の態様の別の実施形態において、本発明は、式Ｉの化合物であって、式中、Ｌが、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｎ（Ｒ３）２）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｓ）−であって、式中、各Ｒ３が独立して−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである、化合物（ならびにその医薬的に許容される塩）を提供する。
【００１７】
第１の態様の好ましい実施形態において、本発明は、以下の式（ＩＩ）の化合物であって：
【００１８】
【化１１】
2009532338.tif 000004
式中、
各ｎが独立して１、２、３、４、５または６であり；
各Ｒ１およびＲ２が独立して−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
各Ｒ３が独立して−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４が、−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
Ｌが、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｎ（Ｒ３）２）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｓ）−であり；
ＭおよびＴが独立して−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）−または−ＣＨ２−であり；
Ｒ１０が、−Ｈ、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、−Ｃ１−Ｃ６アルキル−アリール、−アリール−アリール、−Ｘ−Ｒ６、−Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ５、ペプチド、デンドリマーまたはペプチドデンドリマーであって、式中、
Ｘが、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−であり；
Ｒ５が−ＣＨ（Ｒ５１）Ｎ（Ｒ５２）２；
独立して−ハロゲン、ＣＯＯＲ５３、−Ｎ（Ｒ５２）２である１〜３個の基で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；
アリール；
またはヘテロアリールであって、式中、
Ｒ５１が、−Ｈ、アリール、ヘテロアリール；−ＯＨで場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル−アリール；Ｃ１−Ｃ６アルキル−ヘテロアリール、または−ＯＲ５３、−ＳＲ５３、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＣＯＯＲ５３もしくは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５３）２で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５２が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ５３、Ｃ（Ｏ）ＯＲ５３、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ５３）２、−Ｃ（Ｏ）アリールまたは−Ｃ（Ｏ）ヘテロアリールであり；
Ｒ５３が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであり；
Ｒ６が、−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ７が、−Ｌ１−Ｒ８であって、式中、
Ｌ１が、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒ２１）−、−Ｃ（Ｏ）（Ｏ）または−Ｃ（Ｏ）−Ｌ２−であって、式中、
Ｒ２１が、−Ｈ、アリール、ヘテロアリール；−ＯＨで場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル−アリール；Ｃ１−Ｃ６アルキル−ヘテロアリール、または−ＯＲ２３、−ＳＲ２３、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＣＯＯＲ２３もしくは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２３）２で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２３が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであり；
Ｌ２が、−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−または−フェニル−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−であって、式中、
各アルキル基が、オキソ、＝Ｓまたは−ＣＯＯＨである１〜４個の基で場合により置換され；
各アルキル基のメチレン基の内の１〜６個が、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で場合により置換されるが、但し、２個の隣接するメチレン基がいずれも−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で置換されないことを条件とし；
Ｒ８が、−Ｈ、−ＮＨ２または−ＯＨであり；
Ｑが、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）−、−Ｎ（Ｒ３）Ｏ−、−ＯＮ（Ｒ３）−、−ＣＨ２−または＝ＮＯ−である、
化合物；ならびにその医薬的に許容される塩を提供する。
【００１９】
第１の態様の好ましい実施形態において、本発明は、以下の式（ＩＩＩ）の化合物であって：
【００２０】
【化１２】
2009532338.tif 000005
式中、各変数が式（ＩＩ）に定義される通りである、化合物；ならびにその医薬的に許容される塩を提供する。
【００２１】
第１の態様の好ましい実施形態において、本発明は、以下の式（ＩＶ）の化合物であって：
【００２２】
【化１３】
2009532338.tif 000006
式中、各変数が式（ＩＩ）に定義される通りである、化合物；ならびにその医薬的に許容される塩を提供する。
【００２３】
式（ＩＩ）〜（ＩＶ）の好ましい実施形態において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ−Ｃ（Ｏ）ＯＨである。
【００２４】
式（ＩＩ）〜（ＩＶ）の好ましい実施形態において、Ｒ４は−Ｃ（Ｏ）ＯＨである。
【００２５】
式（ＩＩ）〜（ＩＶ）のより好ましい実施形態において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ４はそれぞれ−Ｃ（Ｏ）ＯＨである。
【００２６】
式（ＩＩ）〜（ＩＶ）の好ましい実施形態において、Ｒ１０は−Ｃ（Ｏ）−フェニルである。
【００２７】
式（ＩＩ）〜（ＩＶ）のより好ましい実施形態において、Ｒ１０はＲ７である。
【００２８】
式（ＩＩ）〜（ＩＶ）のより好ましい実施形態において、Ｒ１０はＲ７であって、式中、Ｒ７が−Ｌ１−Ｒ８であって、式中、
Ｌ１が、−Ｃ（Ｏ）−Ｌ２−であって、式中、
Ｌ２が、−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−または−フェニル−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−であって、式中、
各アルキル基が、オキソ、＝Ｓまたは−ＣＯＯＨである１〜４個の基で場合により置換され；
各アルキル基のメチレン基の内の１〜６個が、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で場合により置換されるが、但し、２個の隣接するメチレン基がいずれも−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で置換されないことを条件とし；
Ｒ８が、−Ｈ、−ＮＨ２または−ＯＨである。
【００２９】
式（ＩＩ）〜（ＩＶ）のより好ましい実施形態において、Ｒ１０はＲ７であって、式中、Ｒ７が、−Ｌ１−Ｒ８であって、式中、
Ｌ１が、−Ｃ（Ｏ）−Ｌ２−であって、式中、
Ｌ２が、−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−または−フェニル−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−であって、式中、
各アルキル基が、オキソまたは−ＣＯＯＨである１〜４個の基で場合により置換され；
各アルキル基のメチレン基の内の１〜６個が、−Ｏ−または−Ｎ（Ｒ３）−で場合により置換されるが、但し、２個の隣接するメチレン基がいずれも−Ｏ−または−Ｎ（Ｒ３）−で置換されないことを条件とし；
Ｒ８が、−Ｈ、−ＮＨ２または−ＯＨである。
【００３０】
式（ＩＩ）〜（ＩＶ）のより好ましい実施形態において、Ｒ１０は、ペプチド、デンドリマーまたはペプチドデンドリマーである。
【００３１】
第１の態様のより好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物であって、以下の通りである、化合物を提供する。
【００３２】
【化１４】
2009532338.tif 000007
【００３３】
【化１５】
2009532338.tif 000008
第２の態様において、本発明は、検出可能な標識と共有結合する本発明の第１の態様の化合物、治療剤、または固体担体に結合する生体分子アンカーを含むキメラ化合物を含む。固体担体の例には、ポリリシンがコーティングされた、無水マレイン酸がコーティングされた、またはストレプトアビジンがコーティングされた、市販の９６ウェルプレートが含まれる。他の固体担体には、金がコーティングされた、または官能基化した金がコーティングされた市販のセンサーチップが含まれる。
【００３４】
一実施形態において、検出可能な標識は蛍光標識である。標準的な蛍光標識には、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ染料、ＢＯＤＩＰＹ染料、フルオレセイン系染料、ローダミン系染料、クマリン系染料、およびピレン系染料が含まれる。
【００３５】
別の実施形態において、検出可能な標識は、特異的結合対の片側、例えば、ビオチンとストレプトアビジンの結合対の内のビオチンである。代表的な結合対の薬剤および生体分子アンカーには、ビオチン、ＤＮＡもしくはＲＮＡのオリゴヌクレオチド、または脂質が含まれる。
【００３６】
別の実施形態において、検出可能な標識は、９９Ｔｃなどの放射性同位元素またはＧｄなどのＭＲＩ造影剤に結合することが可能なキレート構造である。標準的なキレート剤には、ＤＯＴＡ、ＤＴＰＡ、ＣＨＸ−Ａ”、ＰＣＴＡ、およびＤＯ３Ａが含まれる。
【００３７】
本明細書に記載されるような標準的な蛍光標識、結合対、キレート剤および生体分子アンカーが使用される場合がある。当業者に既知の標準的な方法は、このような薬剤およびアンカーならびに治療剤に本発明の化合物を結合するために使用される場合がある。
【００３８】
治療剤は、好ましくは、ＰＳＭＡを提示する細胞の１つ以上の生物学的プロセスに干渉し、それによってＰＭＳＡ提示細胞に関連する疾患を治療または抑制する、化合物である。治療剤は、９０Ｙまたは１８８Ｒｅなどのキレート化または共有結合した細胞障害性放射性同位元素を場合により含む場合があり、このようなキレート化または共有結合は、当業者に既知の手段により行うことができる。
【００３９】
治療剤には、癌細胞の細胞表面に直接結合するか、癌細胞における抗原ペプチドの発現を調節するかのいずれかによって、腫瘍細胞の免疫原性を増大させるものが含まれる。共有結合のために選択される薬剤は、既知の抗癌性、抗増殖性、または細胞障害性を有する。あるいは、このような剤は、Ｔ細胞免疫監視機構の標的として細胞の免疫原性を促進するか、または増大させる既知の特性を有する。
【００４０】
治療剤にはまた、２−メトキシエストラジオールなどのステロイド系剤や、ミフェプリストーン、タモキシフェン、レチノイン酸などのアポトーシス誘導物質、酪酸などのヒストンデアセチラーゼ阻害剤、Ｐｌｋ１  ｓｉＲＮＡなどのアポトーシス誘導または細胞障害性ｓｉＲＮＡ、ドキソルビシンなどの有糸分裂阻害剤、メトトレキサートなどの代謝拮抗剤、および細胞毒をカプセル化するように設計されたナノ粒子またはリポソームが含まれるが、これらに限定されない。
【００４１】
第２の態様の実施形態において、本発明は、式：Ａ−Ｌ−Ｂの化合物であって、式中、
Ａがグルタメートまたはグルタメート類似体であり；
Ｌがホスホルアミデートまたはホスホルアミデート類似体であり；
Ｂがセリンまたはセリン類似体であり；
前記化合物が、前記化合物の任意の置換可能な位置で、検出可能な標識、治療剤、または固体担体に結合する生体分子アンカーに、２価のリンカーを介して共有結合する、
化合物；ならびにその医薬的に許容される塩を提供する。
【００４２】
第２の態様の実施形態において、前記２価のリンカーは、アミノ酸、オリゴペプチド、ポリ（エチレン）グリコール、オリゴエチレングリコールなどに由来する。
【００４３】
第２の態様の実施形態において、前記化合物は、検出可能な標識に共有結合する。
【００４４】
第２の態様の別の実施形態において、前記化合物は、治療剤に結合共有結合する。
【００４５】
第２の態様の別の実施形態において、前記化合物は、固体担体に結合する生体分子アンカーに共有結合する。
【００４６】
第２の態様の好ましい実施形態において、前記化合物は、検出可能な標識に共有結合し、前記検出可能な標識は蛍光標識である。
【００４７】
第２の態様の別の好ましい実施形態において、前記化合物は、検出可能な標識に共有結合し、前記検出可能な標識は、放射性同位元素または磁気共鳴映像法用造影剤に結合するキレート構造である。
【００４８】
第２の態様の別の好ましい実施形態において、本発明は、以下の式（ＶＩ）の化合物であって：
【００４９】
【化１６】
2009532338.tif 000009
式中、
各ｎが独立して１、２、３、４、５または６であり；
各Ｒ１およびＲ２が独立して−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
各Ｒ３が独立して−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４が、−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ３）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ３）２またはテトラゾリルであり；
Ｌが、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ３）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｎ（Ｒ３）２）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｓ）−であり；
ＭおよびＴが独立して−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）−または−ＣＨ２−であり；
Ｒ７が、−Ｘ−Ｒ８または−Ｌ１−Ｒ８であって、式中、
Ｘが、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−であり；
Ｌ１が、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ３）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ（Ｒ２１）−、−Ｃ（Ｏ）（Ｏ）、−Ｃ（Ｏ）−Ｌ２−、ペプチド、デンドリマーまたはペプチドデンドリマーであって、式中、
Ｒ２１が、−Ｈ、アリール、ヘテロアリール；−ＯＨで場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキル−アリール；Ｃ１−Ｃ６アルキル−ヘテロアリール、または−ＯＲ２３、−ＳＲ２３、−ＮＨ２、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＣＯＯＲ２３もしくは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２３）２で場合により置換されるＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２３が、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであり；
Ｌ２が、−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−または−フェニル−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−であって、式中、
各アルキル基が、オキソ、＝Ｓまたは−ＣＯＯＨである１〜４個の基で場合により置換され；
各アルキル基のメチレン基の内の１〜６個が、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で場合により置換されるが、但し、２個の隣接するメチレン基がいずれも−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で置換されないことを条件とし；
Ｒ８が、治療剤、検出可能な標識、または固体担体に結合する生体分子アンカーであり；
Ｑが、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３）Ｏ−、−ＯＮ（Ｒ３）−、−ＣＨ２−または＝ＮＯ−である、
化合物；ならびにその医薬的に許容される塩を提供する。
【００５０】
第２の態様の好ましい実施形態において、本発明は、以下の式（ＶＩＩ）の化合物であって：
【００５１】
【化１７】
2009532338.tif 000010
式中、各変数が式（ＶＩ）に定義される通りである、化合物；ならびにその医薬的に許容される塩を提供する。
【００５２】
第２の態様の好ましい実施形態において、本発明は、以下の式（ＶＩＩＩ）の化合物であって：
【００５３】
【化１８】
2009532338.tif 000011
式中、各変数が式（ＶＩ）に定義される通りである、化合物；ならびにその医薬的に許容される塩を提供する。
【００５４】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ−Ｃ（Ｏ）ＯＨである。
【００５５】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ４は−Ｃ（Ｏ）ＯＨである。
【００５６】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）のより好ましい実施形態において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ４はそれぞれ−Ｃ（Ｏ）ＯＨである。
【００５７】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）のより好ましい実施形態において、Ｌ１は−Ｃ（Ｏ）−Ｌ２−であって、式中、
Ｌ２が、−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−または−フェニル−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−であって、式中、
各アルキル基が、オキソ、＝Ｓまたは−ＣＯＯＨである１〜４個の基で場合により置換され；
各アルキル基のメチレン基の内の１〜６個が、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で場合により置換されるが、但し、２個の隣接するメチレン基がいずれも−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ３）−で置換されないことを条件とする。
【００５８】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）のより好ましい実施形態において、Ｌ１は−Ｃ（Ｏ）−Ｌ２−であって、式中、
Ｌ２が、−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−または−フェニル−Ｃ１−Ｃ２４アルキル−であって、式中、
各アルキル基が、オキソまたは−ＣＯＯＨである１〜４個の基で場合により置換され；
各アルキル基のメチレン基の内の１〜６個が、−Ｏ−または−Ｎ（Ｒ３）−で場合により置換されるが、但し、２個の隣接するメチレン基がいずれも−Ｏ−または−Ｎ（Ｒ３）−で置換されないことを条件とする。
【００５９】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）のより好ましい実施形態において、Ｌ１は、ペプチド、デンドリマーまたはペプチドデンドリマーである。
【００６０】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ８は検出可能な標識である。
【００６１】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ８は固体担体に結合する生体分子アンカーである。
【００６２】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ８は検出可能な標識であって、前記標識は蛍光色素である。
【００６３】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ８は検出可能な標識であって、前記標識は蛍光標識であって、前記蛍光標識は、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ、ＢＯＤＩＰＹ、フルオレセイン、ローダミン、クマリンまたはピレン系染料である。
【００６４】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ８は検出可能な標識であって、前記標識は蛍光色素であって、前記蛍光色素は、フルオレセインまたはフルオレセイン誘導体である。
【００６５】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ８は検出可能な標識であって、前記標識はキレート剤である。
【００６６】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ８は検出可能な標識であって、前記標識はキレート剤であって、前記キレート剤は、ＤＯＴＡ、ＤＴＰＡ、ＣＨＸ−Ａ”、ＰＣＴＡおよびＤＯ３Ａである。
【００６７】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）のより好ましい実施形態において、Ｒ８はＲ９であって、式中、
Ｒ９が、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリールまたはＣ１−Ｃ６アルキル−アリールであって、式中、Ｒ９が、独立して−ＣＯＯＨまたはＮ（Ｒ９１）２である１〜３個の基で置換され、式中、
各Ｒ９１が独立して、独立して−ＣＯＯＨまたは−Ｎ（Ｒ９２）２である１〜３個の基で置換される−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであって、式中、
各Ｒ９２が独立して、１〜３個のＣＯＯＨで置換される−ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００６８】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ８は検出可能な標識であって、前記標識は特異的結合対の片側である。
【００６９】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ８は検出可能な標識であって、前記標識は特異的結合対の片側であって、前記特異的結合対の前記片側は、ビオチン、ＤＮＡもしくはＲＮＡのオリゴヌクレオチド、または脂質である。
【００７０】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ８は検出可能な標識であって、前記標識は特異的結合対の片側であって、前記特異的結合対の前記片側はビオチンである。
【００７１】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ８は治療剤である。
【００７２】
式（ＶＩ）〜（ＶＩＩＩ）のより好ましい実施形態において、Ｒ８は、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、オキソ、ヒドロキシまたはハロゲンからなる群から選択される１〜５個の基で場合により置換されるステロイド基である。
【００７３】
第１の態様の別の好ましい実施形態において、本発明は、以下の式（ＩＸ）の化合物であって：
【００７４】
【化１９】
2009532338.tif 000012
式中、Ｒ７が−Ｏ−Ｒ８であって、式中、Ｒ８が、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、オキソ、ヒドロキシまたはハロゲンからなる群から選択される１〜５個の基で場合により置換されるステロイド基であり；各残りの変数が式（ＶＩ）に定義される通りである、化合物；ならびにその医薬的に許容される塩を提供する。
【００７５】
第１の態様のより好ましい実施形態において、本発明は、式（ＶＩ）の化合物であって、以下の通りである：
【００７６】
【化２０】
2009532338.tif 000013
【００７７】
【化２１】
2009532338.tif 000014
【００７８】
【化２２】
2009532338.tif 000015
【００７９】
【化２３】
2009532338.tif 000016
を提供する。
【００８０】
第３の態様において、本発明は、本発明の第２の態様のキメラ化合物、またはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む組成物を含む。
【００８１】
第４の態様において、本発明は、本発明の第２の態様のキメラ化合物を含む診断キットを含む。本発明の本態様の一実施形態において、検出可能な標識または生体分子アンカーは、特異的結合対の一方のメンバー（例えば、ビオチン）であり、前記キットは前記特異的結合対のもう一方のメンバーを含む。
【００８２】
第５の態様において、本発明は、ＰＭＳＡ提示細胞を検出する方法であって、ＰＭＳＡを提示することが疑われる細胞を本発明の第２の態様のキメラ化合物と接触させる工程と、前記検出可能な標識が、ＰＭＳＡ提示細胞に結合する場合にのみ検出される条件下で、前記検出可能な標識の存在を測定する工程とを含む、方法を含む。検出可能な標識を検出する方法は、当然ながら、使用する標識により異なり、当業者に明らかになるであろう。例えば、検出可能な標識が近赤外蛍光標識である場合、標識の検出はｉｎ  ｖｉｖｏ蛍光イメージングにより達成することができる。
【００８３】
第６の態様において、本発明は、ＰＭＳＡを提示する細胞を伴う疾患を阻害または治療する方法であって、前記細胞を本発明の第２の態様の化合物または本発明の第３の態様の組成物と接触させるか、または前記細胞への接触を引き起こす工程を含み、前記キメラ化合物が、治療剤に共有結合する本発明の第１の態様の化合物を含む、方法を含む。本態様の一実施形態において、本発明は、ＰＭＳＡ提示細胞を伴う疾患を有する哺乳類の被験体（好ましくはヒト）に、前記疾患の抑制または治療に有効な量の前記組成物を投与する工程を含む。適切な製剤および投与方法は、標準的な方法を使用して慣例的に決定することができる。
【００８４】
第７の態様において、本発明は、ＰＭＳＡ提示細胞を捕捉、検出および定量化する方法であって、ＰＭＳＡを提示することが疑われる細胞を本発明の第２の態様のキメラ化合物と接触させる工程と、捕捉または固定されたＰＳＭＡ提示細胞を検出する工程とを含む、方法を含む。第７の態様の好ましい実施形態において、第２の態様のキメラ化合物は、固体担体上の生体分子アンカーに結合する。細胞を検出する方法は、当然ながら、使用する検出素子により異なり、当業者に明らかになるであろう。例えば、本発明の第２の態様のキメラ化合物が固体担体に結合する場合、ＰＳＭＡ提示細胞の検出は、プラズモン共鳴を使用して直接達成することもできれば、あるいは細胞が放出され、フローサイトメトリーを使用して蛍光標識で標識されることで達成することもできる。
【００８５】
本発明で使用される場合がある代表的なデンドリマーについては、J．Ｍ．Ｊ．Ｆｒｅｃｈｅｔ，Ｄ．Ａ．Ｔｏｍａｌｉａ，Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｏｔｈｅｒ  Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｌｔｄ．ＮＹ，ＮＹ（２００２）に記載されている。
【００８６】
本発明の併用に有用な代表的な化合物には、上記の化合物、それらの医薬的に許容される酸、ならびにそれらの塩基付加塩および溶媒和物が含まれる。本発明の化合物が酸付加塩として得られる場合、遊離塩基は、酸性塩の溶液を塩基性化することによって得ることができる。逆に、産物が遊離塩基である場合、付加塩、特に医薬的に許容される付加塩は、塩基化合物から酸付加塩を調製する従来の方法に従って、適切な有機溶媒中に遊離塩基を溶解し、その溶液を酸で処理することによって産生される場合がある。
【００８７】
無毒性医薬塩には、例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸、スルフィン酸、蟻酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、硝酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、マレイン酸、ヨウ化水素酸、アルカン酸（例えば酢酸）、ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ（式中、ｎは０〜４である）などの酸の塩が含まれる。無毒性医薬塩基付加塩には、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウムなどの塩基の塩が含まれる。当業者であれば、多種多様な無毒性の医薬的に許容される付加塩を認識するであろう。
【００８８】
本発明の化合物および／またはそれらの組成物は、動物およびヒトのＰＭＳＡ関連疾患の抑制および／または治療における特定の用途が見出されている。従って、本発明の別の態様には、治療有効量の本発明の１種以上の化合物または本発明の１種以上の化合物を含有する組成物を、このようなＰＭＳＡ関連疾患の治療を必要とする羅患体に投与することがある。好ましくは、羅患体は哺乳類であり、最も好ましくはヒトである。この状況で使用される場合、前記化合物は、それ自体が投与される場合があるが、通常は医薬組成物の形態に製剤化されて投与される。正確な組成物は、とりわけ投与方法により異なり、当業者に明らかになるであろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０ｔｈ  ｅｄ．，２００１には、多種多様な適切な医薬組成物が記載されている。
【００８９】
経口投与に適切な製剤は、（ａ）希釈液（例えば、水、生理食塩水、またはＰＥＧ  ４００）に懸濁した有効量の活性化合物などの液体溶液；（ｂ）それぞれ液体、固体、顆粒またはゼラチンなどの活性成分を所定量含有する、カプセル剤、小包、または錠剤；（ｃ）適切な液体中の懸濁剤；および（ｄ）適切な乳剤、から構成されてよい。錠剤の形態には、ラクトース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、リン酸カルシウム、トウモロコシ澱粉、ジャガイモ澱粉、微結晶性セルロース、ゼラチン、コロイド状二酸化ケイ素、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ならびに他の賦形剤、顔料、充填剤、結合剤、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、保存剤、着香剤、染料、崩壊剤および医薬的に適合する担体が含まれてよい。口内錠の形態は、香料中の活性成分（例えばスクロース）、ならびに不活性塩基中の活性成分を含む香錠（例えば、活性成分に加えて当該技術分野で既知の担体を含有する、ゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアカシア乳剤、ゲル剤など）を含んでよい。
【００９０】
選択化合物は、単独でまたは他の適切な成分と組み合わせて、吸入により投与されるようにエアロゾル製剤に作製することができる（すなわち、「霧状」にすることができる）。エアロゾル製剤は、許容される加圧噴射剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素など）に入れることができる。
【００９１】
直腸投与に適切な製剤には、例えば、坐剤基剤で包装された核酸から構成される坐剤が含まれる。適切な坐剤基剤には、天然または合成のトリグリセリドまたはパラフィン族炭化水素が含まれる。さらに、基剤と選択化合物との組み合わせから構成されるゼラチン直腸投与カプセル（例えば、液体トリグリセリド、ポリエチレングリコール、およびパラフィン族炭化水素を含む）も使用することができる。
【００９２】
例えば、関節内経路（関節中）、静脈内経路、筋肉内経路、皮内経路、腹腔内経路、皮下経路などによる非経口投与に適切な製剤には、製剤を所期のレシピエントの血液と浸透圧が等しくなるようにする抗酸化剤、緩衝液、静菌剤および溶質を含有し得る水溶性および非水溶性の等張性無菌注射溶液、ならびに懸濁化剤、溶解剤、増粘剤、安定剤および保存剤を含み得る水溶性および非水溶性の無菌懸濁液が含まれる。本発明の実施において、組成物は、例えば、静脈内、経口的、局所的、腹腔内、膀胱内、髄腔内に投与することができる。非経口投与、経口投与、皮下投与および静脈内投与が、好ましい投与方法である。適切な溶液製剤の具体例は、水中に約０．５〜１００ｍｇ／ｍＬの化合物と約１０００ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコールとを含む場合がある。適切な溶液製剤の別の具体例は、水中に約０．５〜１００ｍｇ／ｍＬの化合物と約８００〜１０００ｍｇ／ｍＬのポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ  ４００）とを含む場合がある。
【００９３】
適切な懸濁製剤の具体例は、水中に約０．５〜３０ｍｇ／ｍＬの化合物と、約２００ｍｇ／ｍＬのエタノール、約１０００ｍｇ／ｍＬの植物油（例えばトウモロコシ油）、約６００〜１０００ｍｇ／ｍＬの果汁（例えばグレープフルーツジュース）、約４００〜８００ｍｇ／ｍＬの乳汁、約０．１ｍｇ／ｍＬのカルボキシメチルセルロース（または微結晶性セルロース）、約０．５ｍｇ／ｍＬのベンジルアルコール（またはベンジルアルコールと塩化ベンザルコニウムとの組み合わせ）および約４０〜５０ｍＭの緩衝液（ｐＨ７）（例えば、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、あるいは緩衝液の代わりに５％のデキストロースが使用される場合がある）からなる群から選択される１種以上の賦形剤とを含む場合がある。
【００９４】
適切なリポソーム懸濁製剤の具体例は、水中に約０．５〜３０ｍｇ／ｍＬの化合物と、約１００〜２００ｍｇ／ｍＬのレシチン（または他のリン脂質もしくはリン脂質の混合物）と、場合により５ｍｇ／ｍＬのコレステロールとを含む場合がある。化合物９の皮下投与の場合には、１００ｍｇ／ｍＬのレシチンを有する水中の５ｍｇ／ｍＬの化合物と、１００ｍｇ／ｍＬのレシチンおよび５ｍｇ／ｍＬのコレステロールを有する水中の５ｍｇ／ｍＬの化合物とを含むリポソーム懸濁製剤が、良好な結果をもたらす。本製剤は、本発明の他の化合物に使用される場合もある。
【００９５】
化合物の製剤は、アンプルやバイアルなど、単回用量または複数回用量の密封容器で提供することができる。注射溶液および注射懸濁液は、既述の種類の無菌の粉剤、顆粒および錠剤から調製することができる。
【００９６】
前記医薬製剤は、単位投与形態が好ましい。このような形態では、前記製剤は、適切な量の有効成分を含有する単位用量に細分される。単位投与形態は、包装製剤、すなわち、小包にされた錠剤、カプセル剤、およびバイアルまたはアンプルに入った粉剤など、個別の量の製剤を含有する包装物であってよい。また、単位投与形態は、カプセル剤、錠剤、カシェ剤または口内錠自体であってもよければ、あるいは包装形態における適切な数のこれらのいずれかであってもよい。組成物はまた、所望により、以下に詳述する他の適合した治療剤を含有してもよい。
【００９７】
別の態様において、本発明は、ＰＭＳＡ関連疾患の治療および／または阻害のための組成物を作製する方法であって、本発明の化合物を、医薬的に許容される担体、希釈剤および／または賦形剤と混合する工程を含む、方法を含む。
【００９８】
ＰＭＳＡ関連疾患の治療のための治療的使用において、本発明の医薬的方法で利用される化合物は、治療的有益性を達成するのに適切な投与レベルで、ＰＭＳＡ関連疾患であると診断された罹患体に投与される。治療的有益性とは、化合物の投与が時間とともに罹患体に有益な効果をもたらすことを意味する。治療的有益性はまた、化合物の投与によりＰＭＳＡ関連疾患に通常伴う有害な症候が緩和するかもしくは完全に消失する場合に達成される。
【００９９】
本発明の化合物および／またはそれらの組成物はまた、ＰＭＳＡ関連疾患を発症するリスクがある罹患体に予防的に投与される場合がある。
【０１００】
ヒトへの投与に適切な初回投与量は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定または動物モデルから決定される場合がある。例えば、初回投与量は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ検定で測定される、投与する特定の化合物のＩＣ５０を含む血清中濃度を達成するように製剤化される場合がある。あるいは、ヒトの初回投与量は、ＰＭＳＡ関連疾患の動物モデルにおいて有効であることが見出されている投与量を基準にする場合もある。適切なモデル系の例については、例えば、Ｍｕｃｈｍｏｒｅ，２００１，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．１８３：８６−９３；およびＬａｎｆｏｒｄ  ＆  Ｂｉｇｇｅｒ，２００２，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，２９３：１−９；ならびにそれらで引用された参考文献に記載されている。一例として、初回投与量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約２００ｍｇ／ｋｇ／日である場合もあれば、あるいは約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日、または約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日、または約１０ｍｇ／ｋｇ／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日を使用してもよい。しかし、投与量は、罹患体の必要量、治療する病態の重症度、および使用する化合物により異なる場合がある。投与量は、特定の罹患体における特定の化合物の投与に伴ういずれかの有害副作用の存在、性質および程度によっても決定される。特定の状況に適切な投与量を決定することは、実務家の技術の範囲内に含まれる。一般的に、投与は、化合物の最適な量よりも少ない投与量で開始される。その後、状況下における最適な作用に達するまで、投与量が少しずつ増加される。便宜上、1日の全投与量は、所望により、その日の中で複数回に分けて投与される場合がある。
【０１０１】
定義
本明細書におけるすべての化合物は、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ  ８．００（Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ８．１７、Ｂｕｉｌｄ：０４  Ｍａｙ  ２００５；ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｃｄｌａｂｓ．ｃｏｍ；カナダ  オンタリオ州トロント）を使用して命名した。
【０１０２】
本発明の化合物は、不斉中心またはキラル中心が存在する立体異性体として存在することができる。本発明は、種々の立体異性体およびそれらの混合物を企図し、本発明の適用範囲内に具体的に含まれる。立体異性体には、エナンチオマー、ジアステレオマー、エナンチオマーまたはジアステレオマーの混合物が含まれる。
【０１０３】
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、特に定義がない限り、１〜２４個の炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖の炭化水素を意味する。アルキルの代表的な例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、３−メチルヘキシル、２，２−ジメチルペンチル、２，３−ジメチルペンチル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、およびｎ−デシルが含まれるが、これらに限定されない。
【０１０４】
本明細書で定義されるように、本明細書で使用される「アルキル−アリール」という用語は、本明細書で定義されるようにアルキル基を介して母体部分に結合するアリール基を意味する。アルキル−アリール基の例には、ベンジルおよびフェネチルが含まれるが、これらに限定されない。
【０１０５】
本明細書で定義されるように、本明細書で使用される「アルキル−ヘテロアリール」という用語は、本明細書で定義されるようにアルキル基を介して母体部分に結合するヘテロアリール基を意味する。アルキル−ヘテロアリール基の例には、ピリジルメチルおよび２−ピリジルエチルが含まれるが、これらに限定されない。
【０１０６】
本明細書で使用される「アリール」という用語は、フェニルまたは２環式アリールまたは３環系アリールを意味する。２環式アリールはナフチル、またはシクロアルキルに融合するフェニル、またはシクロアルケニルに融合するフェニルである。２環式アリールは、前記２環式アリールの中に含まれる任意の炭素原子を介して母体分子部分に結合する。２環式アリールの代表的な例には、ジヒドロインデニル、インデニル、ナフチル、ジヒドロナフタレニル、およびテトラヒドロナフタレニルが含まれるが、これらに限定されない。３環式アリールは、アンスラセンもしくはフェナントレン、またはシクロアルキルに融合する２環式アリール、またはシクロアルケニルに融合する２環式アリール、またはフェニルに融合する２環式アリールである。３環系アリールは、３環系アリールの中に含まれる任意の炭素原子を介して母体分子部分に結合する。３環式アリール環の代表的な例には、アズレニル、ジヒドロアントラセニル、フルオレニル、およびテトラヒドロフェナントレニルが含まれるが、これらに限定されない。
【０１０７】
本明細書で使用される「ヘテロアリール」という用語は、単環式ヘテロアリールまたは２環式ヘテロアリールを意味する。単環式ヘテロアリールは、５員環または６員環である。５員環は、２個の二重結合と、１個、２個、３個または４個の窒素原子と、場合により１個の酸素原子または硫黄原子とから構成される。６員環は、３個の二重結合と、１個、２個、３個または４個の窒素原子とから構成される。５員環または６員環のヘテロアリールは、ヘテロアリールの中に含まれる任意の炭素原子または任意の窒素原子を介して母体分子部分に結合する。単環式ヘテロアリールの代表的な例には、フリル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピロリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、およびトリアジニルが含まれるが、これらに限定されない。２環式ヘテロアリールは、フェニルに融合する単環式ヘテロアリール、またはシクロアルキルに融合する単環式ヘテロアリール、またはシクロアルケニルに融合する単環式ヘテロアリール、または単環式ヘテロアリールに融合する単環式ヘテロアリールである。２環式ヘテロアリールは、２環式ヘテロアリールの中に含まれる任意の炭素原子または任意の窒素原子を介して母体分子部分に結合する。２環式のヘテロアリールの代表的な例には、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサジアゾリル、シンノリニル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロイソキノリニル、フロピリジニル、インダゾリル、インドリル、イソキノリニル、ナフチリジニル、キノリニル、テトラヒドロキノリニル、およびチエノピリジニルが含まれるが、これらに限定されない。
【０１０８】
本明細書で使用される「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉまたは−Ｆを意味する。
【０１０９】
本明細書で使用される「ヒドロキシ」という用語は、−ＯＨ基を意味する。
【０１１０】
本明細書で使用される「メチレン」という用語は、−ＣＨ２−基を意味する。
【０１１１】
本明細書で使用される「オキソ」という用語は、＝Ｏ部分を意味する。
【０１１２】
本明細書で使用される「ペプチド」という用語は、２〜１０個のアミノ酸残基を有するペプチドを意味する。
【０１１３】
本明細書で使用される「ステロイド」という用語は、一般的な４環構造を有する基のモノラジカル（ｍｏｎｏｒａｄｉｃａｌ）であって、
【０１１４】
【化２４】
2009532338.tif 000017
前記４環構造は、完全に飽和する場合もあれば、１個以上の不飽和結合を含有する場合があり、かつ任意の有効な置換可能な位置で母体部分に結合する場合がある。例えば、環式のサブユニットの１個以上は芳香族である場合がある。
【０１１５】
本明細書で使用される「グルタメート類似体」という用語は、グルタミン酸の構造を模倣するための化学構造を意味する。このような化学構造は、グルタミン酸の構造におけるように相互に関連して同様に配置されるアミノ基またはアミノ基のバイオアイソスター（ｂｉｏｉｓｏｓｔｅｒｅ）、ならびに２個のカルボン酸またはカルボン酸のバイオアイソスターから構成されるグルタミン酸の分子骨格の周囲に設計される。例えば、アミノ基は、チオール基、ヒドロキシル基、ヒドロキシルアミノ基、オキシム基またはメチレン基で置換できると考えられる。カルボン酸の一方または両方は、カルボキサミド基、ホスホン酸塩基、リン酸塩基、スルホン酸塩基またはテトラゾール基で置換できると考えられる。グルタメート類似体はまた、環式化学構造および非環式化学構造、ならびに相同構造（短いまたは長い構造）から構成されると考えられる。生物活性を有し、本発明で使用できるこのようなグルタメート類似体の例が最近検討されている（全体が参考として本明細書で援用される、Ａｓｐａｒｔａｔｅ  ａｎｄ  ｇｌｕｔａｍａｔｅ  ｍｉｍｅｔｉｃ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｉｎ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  ａｃｔｉｖｅ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．（Ｓｔｅｆａｎｉｃ  Ｐ，Ｄｏｌｅｎｃ  ＭＳ．Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２００４  Ａｐｒ；１１（８）：９４５−６８））。
【０１１６】
本明細書で使用される「セリン類似体」という用語は、セリンの構造を模倣するための化学構造を意味する。このような化学構造は、セリン自体の構造におけるように相互に関連して同様に位置するアミノ基またはアミノ基のバイオアイソスター、カルボン酸またはカルボン酸のバイオアイソスター、ならびに水酸基または水酸基のバイオアイソスターから構成されるセリンの分子骨格の周囲に設計される。例えば、アミノ基は、チオール基、ヒドロキシル基またはメチレン基で置換できると考えられる。カルボン酸は、カルボキサミド基、ホスホン酸塩基、リン酸塩基、スルホン酸塩基またはテトラゾール基で置換できると考えられる。カルボン酸は完全に除去できると考えられる。水酸基は、アミノ基、チオール基またはメチレン基で置換できると考えられる。セリン類似体はまた、環式化学構造および非環式化学構造、ならびに相同構造（短いまたは長い構造）から構成されると考えられる。
【０１１７】
本明細書で使用される「ホスホルアミデート類似体」という用語は、亜鉛結合能を有するホスホルアミデートの分子構造を模倣する化学構造を意味する。例えば、ホスホルアミデート類似体は、ホスホルアミデート基、ホスホン酸塩基、リン酸塩基、ホスフィン酸塩基、スルホンアミド基、尿素基、Ｎ−ヒドロキシ尿素基、チオ尿素基、カルバミン酸塩基、ヒドロキサメート基、逆のヒドロキサメート基、Ｎ−ヒドロキシアミド基またはＮ−ヒドロキシカルバミン酸塩基であってよい。
【０１１８】
「フルオレセイン」という用語は、以下の一般式の化合物を指す：
【０１１９】
【化２５】
2009532338.tif 000018
「フルオレセイン誘導体」という用語は、それぞれが本明細書で定義される、独立してハロゲン基またはアルキル基である１〜３個の基で場合により置換される、本明細書で定義されるフルオレセインを指す。
【実施例】
【０１２０】
スキーム１は、ホスホルアミデート阻害剤Ｔ３３の合成についての代表的な合成スキームを示す。この一般的な方法を使用して、複雑性の異なるホスホルアミデートＴ３３の類似体を１５個超合成した。このスキームを、標準的な合成方法とともに使用して、本発明の第１の態様の化合物を調製することができる。本発明の第２の態様の化合物は、標準的な合成方法を使用して、これらから慣例的に調製することができる。
【０１２１】
スキーム１
【０１２２】
【化２６】
2009532338.tif 000019
（実施例１）
ＰＭＳＡ阻害検定
Ｍａｕｎｇ，Ｊ．；Ｍａｌｌａｒｉ，Ｊ．Ｐ．；Ｇｉｒｔｓｍａｎ，Ｔ．Ａ．；Ｗｕ，Ｌ．Ｙ．；Ｒｏｗｌｅｙ，Ｊ．Ａ．；Ｓａｎｔｉａｇｏ，Ｎ．Ｍ．；Ｂｒｕｎｅｌｌｅ，Ａ．；Ｂｅｒｋｍａｎ，Ｃ．Ｅ．Ｐｒｏｂｉｎｇ  ｆｏｒ  ａ  Ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ  ａ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｒｅｇｉｓｔｅｒ  ｉｎ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ａｎｔｉｇｅｎ  ｗｉｔｈ  Ｐｈｅｎｙｌａｌｋｙｌｐｈｏｓｐｈｏｎａｍｉｄａｔｅｓ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４，１２，４９６９より引用。
【０１２３】
基質（Ｎ−［４−（フェニルアゾ）ベンゾイル］−グルタミル−ｇ−グルタミン酸、ＰＡＢ−Ｇｌｕ−γ−Ｇｌｕ）の使用液およびすべての阻害剤を、ＴＲＩＳ緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７．４）中で作製した。精製したＰＳＭＡの使用液を、ＴＲＩＳ緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７．４）中で適切に希釈し、阻害剤の非存在下において基質から産物へ１５％〜２０％変換させた。２５μＬの阻害剤溶液か２５μＬのＴＲＩＳ緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７．４）かのいずれかを試験管内の１７５μＬのＴＲＩＳ緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７．４）に添加することによって、一般的なインキュベーション混合物（終量２５０μＬ）を調製した。上記の溶液に２５μＬのＰＡＢ−Ｇｌｕ−γ−Ｇｌｕ（１００μＭ）を添加した。２５μＬのＰＳＭＡ使用液を添加することより、酵素反応を開始した。いずれの例でも、ＰＡＢ−Ｇｌｕ−γ−Ｇｌｕの終濃度は１０μＭであったが、一方で酵素を５種類の連続希釈した阻害剤濃縮物でインキュベートして、１０％〜９０％の阻害率を得た。３７℃での一定の振盪により反応を１５分間継続させた後、２５μＬのメタノールＴＦＡ（メタノール中における２容量％のトリフルオロ酢酸）を添加してボルテックスすることにより反応を終了させた。急冷したインキュベーション混合物を、２５μＬのＫ２ＨＰＯ４（０．１Ｍ）を添加して直ちに緩衝し、ボルテックスして、遠心分離させた（７０００ｇ、１０分間）。その後、得られた上澄液の８５μＬのアリコートをＨＰＬＣにより定量化し、ＫａｌｅｉｄａＧｒａｐｈ  ３．６（Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用してＩＣ５０値を算出した。
【０１２４】
ＰＡＢＧγＧおよびその加水分解産物（ＰＡＢＧ）を、それぞれ４０：６０の容積比で、ＡＣＮ／リン酸カリウムからなる移動相［２５ｍＭ、ｐＨ２．０（Ｈ３ＰＯ４で調整）］で解析用逆相ＨＰＬＣカラム（Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒｅ  Ｃ１８  ５μｍ、１５０×４．６ｍｍ；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、米国カリフォルニア州トーランス）を使用して分離し、定量化した。１．０ｍＬ／分の流速で、ＰＡＢＧγＧおよびその加水分解産物（ＰＡＢＧ）を、それぞれ４．８分および６．９分の滞留時間により３２５ｎｍで検出した。
【０１２５】
（実施例２）
γ−ジグルタメートのホスホルアミデート類似体の分子剪定によるＰＳＭＡの強力阻害剤の同定
本発明者等は、ＰＳＭＡの阻害のための鉛化合物として、ホスホルアミデートＴ３３を設計し、合成した。その設計は、葉酸類似体のγ−グルタミン酸誘導体などの既知のＰＳＭＡ基質の構造に基づくものであった。Ｔ３３の初期スクリーニングにより、Ｔ３３がＰＳＭＡに対して相当な効力を発揮することが示された（ＩＣ５０＜５０ｎＭ）。ＰＳＭＡに対する阻害能についてのＴ３３の種々の構造要素の重要性をよりよく理解するために、本発明者等は分子剪定試験を実施し、図１に示すＴ３３類似体のライブラリーを作製した。このライブラリーからの３種の化合物の合成については、既に文献の中で報告されている：ＣＣＳ、ＪＭ１３９（Ｌｕ，Ｈ．；Ｎｇ，Ｒ．；Ｓｈｉｅｈ，Ｃ．Ｃ．；Ｍａｒｔｉｎｅｚ，Ａ．Ｒ．；Ｂｅｒｋｍａｎ，Ｃ．Ｅ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｇｌｕｔａｍａｔｅ  Ｃａｒｂｏｘｙｐｅｐｔｉｄａｓｅ  ｂｙ  Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌ  ａｎｄ  Ｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｇｌｕｔａｍｉｃ  ａｎｄ  ２−Ｈｙｄｒｏｘｙｇｌｕｔａｒｉｃ  Ａｃｉｄ．Ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ，Ｓｕｌｆｕｒ  ａｎｄ  Ｓｉｌｉｃｏｎ，２００３，１７８，１７）、および２−ＰＭＰＡ（Ｊａｃｋｓｏｎ，Ｐ．Ｆ．；Ｃｏｌｅ，Ｄ．Ｃ．；Ｓｌｕｓｈｅｒ，Ｂ．Ｓ．；Ｓｔｅｔｚ，Ｓ．Ｌ．；Ｒｏｓｓ，Ｌ．Ｅ．；Ｄｏｎｚａｎｔｉ，Ｂ．Ａ．；Ｔｒａｉｎｏｒ，Ｄ．Ａ．Ｄｅｓｉｇｎ，ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ａ  ｐａｔｅｎｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ  Ｎ−ａｃｅｔｙｌａｔｅｄ−ｌｉｎｋｅｄ  ａｃｉｄｉｃ  ｄｉｐｅｐｔｉｄａｓｅ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３９，６１９−６２２）。図１、図２および図７〜１２の残りの化合物は、本発明の新規の化合物である。
【０１２６】
図１、図２および図７〜１２に記載のライブラリー内の全化合物に対して、実施例１に記載の検定を使用してＰＳＭＡの阻害能についてスクリーニングを行った。
【０１２７】
本発明者等が公表した方法（Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ａｎｔｉｇｅｎ  ｗｉｔｈ  Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  Ｅｐｉｔｏｐｅ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ａｆｆｉｎｉｔｙ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｌｉｕ，Ｔ．；Ｔｏｒｉｙａｂｅ，Ｙ．；Ｂｅｒｋｍａｎ，Ｃ．Ｅ．Ｐｒｏｔ．Ｅｘｐ．Ｐｕｒｉｆ．２００６，４９，２５１．）によるＬＮＣａＰ細胞由来の精製ＰＳＭＡに対する図１のライブラリーのスクリーニングにより、以下の２つの一般的構造が優れた阻害能を発揮することが示された：無損傷のホスホルアミデートペプチド模倣体（例えばＴ３３およびＬ３６）、ならびに単純なＰ１’類似体（例えばＣＣＳ、ＪＭ１４０、および２−ＰＭＰＡ）。
【０１２８】
他の親和性エレメントが欠如しているものの、ＣＣＳ、ＪＭ１４０および２−ＰＭＰＡの２塩基性ホスホリルモチーフは、ＰＳＭＡの活性部位の亜鉛原子との強力な相互作用によりＰＳＭＡに対する親和性の増大に関与しているとの仮説を立てている。興味深いことに、単純な疎水性類似体ＭＰ１Ｄにかなりの親和性が維持されている。本発明者等がステロイド含有ホスホルアミデート阻害剤のライブラリーを調製してスクリーニングを行ったところ、疎水性を有しかつ空間的に厳しいリガンドを収容するＰＳＭＡの能力がさらに確認された（図２）。図２のすべての化合物は、実施例１に記載の検定による測定で１μＭ未満のＩＣ５０を示した。ＭＰ１Ｄおよびステロイド含有ホスホルアミデート阻害剤による阻害検定の結果は、ＰＳＭＡの中心的触媒機構から離れた疎水性結合ドメインの存在を同定した本発明者等の以前の研究と一致する（Ｍａｕｎｇ，Ｊ．；Ｍａｌｌａｒｉ，Ｊ．Ｐ．；Ｇｉｒｔｓｍａｎ，Ｔ．Ａ．；Ｗｕ，Ｌ．Ｙ．；Ｒｏｗｌｅｙ，Ｊ．Ａ．；Ｓａｎｔｉａｇｏ，Ｎ．Ｍ．；Ｂｒｕｎｅｌｌｅ，Ａ．；Ｂｅｒｋｍａｎ，Ｃ．Ｅ．Ｐｒｏｂｉｎｇ  ｆｏｒ  ａ  Ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ  ａ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｒｅｇｉｓｔｅｒ  ｉｎ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ａｎｔｉｇｅｎ  ｗｉｔｈ  Ｐｈｅｎｙｌａｌｋｙｌｐｈｏｓｐｈｏｎａｍｉｄａｔｅｓ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４，１２，４９６９）。
【０１２９】
（実施例３）
Ｔ３３類似体によるＰＳＭＡの時間依存的かつ不可逆的な阻害
驚くべきことに、本発明者等は、Ｔ３３類似体ライブラリー（図１）のＰＳＭＡ阻害化合物が、ＰＳＭＡの強力な阻害剤であるだけでなく、図３に示す通り酵素活性の時間依存的な減損も示したことを見出した。この固有の結果により、本発明者等は、Ｔ３３およびその類似体が固有の緩慢な結合阻害剤であることを仮定するに至った。場合により、その阻害は不可逆的であると思われ、Ｔ３３、Ｌ３６およびＭＰ１Ｅの場合がこれに当てはまる。というのも、これらの化合物により阻害される酵素の１００倍の希釈によってＰＳＭＡの活性を回復できないためである（図４）。これらの結果により、Ｔ３３、Ｌ３６およびＭＰ１Ｅは、ＰＳＭＡのいずれかの機構に基づいた不可逆的な阻害剤であるか、または場合により劇的な配座変化を生じる可能性あるか、もしくは場合により酵素に共有結合による損傷を引き起こす可能性がある、ＰＳＭＡの機能的に不可逆的な阻害剤であることが強く示唆されている。本発明者等は最近になって、Ｔ３３、Ｌ３６およびＭＰ１Ｅのほかにも、ＬＷ−５４およびＬＷ−３９もまたＰＳＭＡの不可逆的な阻害剤であることを明らかにした。文献を検討によれば、「これはＰＳＭＡの時間依存的かつ不可逆的な阻害剤の最初の発見」とのことである。リン酸誘導体による亜鉛ペプチダーゼおよび亜鉛プロテアーゼの緩徐な結合阻害は既知の現象であるものの、このような酵素の機序に基づいた不可逆的な阻害剤はまれである。図１の阻害剤は、図５の不可逆的および緩徐に可逆的な阻害剤に分類される。図５に示すすべての化合物は、１μＭ未満のＩＣ５０を示した。
【０１３０】
（実施例４）
阻害剤により誘導されるホモダイマーの形成
ホスホルアミデートＴ３３およびＬ３６の作用に関して、本発明者等は、これらの阻害剤におるＰＳＭＡの治療により、ウェスタンブロット法により示される、共有結合性ＰＳＭＡホモダイマーの形成が生じることを明らかにした。図６の代表例に示される通り、Ｔ３３により媒介される共有結合性ＰＳＭＡダイマーの形成は、濃度依存的でかつ時間依存的である。これらの結果は、上述のようなホスホルアミデートＴ３３およびその類似体によるＰＳＭＡの時間依存的な酵素的阻害と一致する。さらに重要なことに、これらのデータは、化合物Ｔ３３、Ｌ３６およびＭＰ１Ｄの不可逆的阻害プロファイルと一致する。これらのデータにより、Ｔ３３およびＬ３６は、タンパク質間架橋や潜在的なタンパク質間架橋を促進するＰＳＭＡの共有結合による修飾に関与することが示されている。本発明者等はＴ３３、Ｌ３６およびＭＰ１Ｄの阻害機序を測定しなかったが、これらの薬剤が、ＰＳＭＡ発現癌細胞に特異的な共有結合送達ビヒクルとして使用される場合がある、固有の種類のＰＳＭＡ阻害剤であることは明らかである。おおまかに文献を考察したところ、これは、ＰＳＭＡの不可逆的な共有結合調節剤における初めての設計と調製である。
【０１３１】
（実施例５）
ＰＳＭＡに対するホスホルアミデート阻害剤の特異性
本発明のホスホルアミデート阻害剤の設計がＰＳＭＡに特異的であることを判定するため、マトリックスメタロプロテアーゼ−９（ＭＭＰ−９）を有するＴ３３類似体ライブラリー（図１）に由来する代表的な化合物により予備試験を実施した。ＭＭＰ酵素は、細胞外マトリックスの分解に関与する亜鉛依存性エンドペプチダーゼである。ＮＣ−２−２９などの検討された化合物の系列の中で、１つの化合物（ＮＣ−２−２９）だけが、ＭＭＰ−９に対する阻害能を示し、Ｋｉ値が５ｍＭであった。Ｔ３３は最近になり、ＭＭＰ−２の阻害について検定が行われており、最高１０μＭまでの濃度では阻害を示さなかった。これらの大部分の陰性の結果により、本発明のＴ３３系阻害剤の一般的な構造骨格は、標的金属ペプチダーゼであるＰＳＭＡに対して特異性をもたらすことが示唆される。
【０１３２】
（実施例６）
ＰＳＭＡ発現前立腺癌細胞の阻害剤に誘導される標識
最近の実験により、イメージングペイロード（例えば有機蛍光団）は、ＰＳＭＡ発現前立腺癌細胞に特異的に送達され得ることが明らかにされている。本発明者等は、それぞれがイメージングペイロードまたは治療的ペイロードの結合点としてＮ末端アミノ基を有する４種のＰＳＭＡ阻害剤を設計し、合成した（図８）。
【０１３３】
その後、これらの化合物を、ＰＳＭＡ発現前立腺癌細胞を特異的に標識するためにアミン反応性蛍光色素で誘導体化した（図９）。蛍光顕微鏡データにより、これらの化合物はそれぞれ、ＰＳＭＡ発現前立腺癌細胞（ＬＮＣａＰ細胞）を特異的に標識し、ＰＳＭＡ（ＰＣ３細胞）を発現しない細胞は標識しないことが明らかにされた。チオ尿素結合蛍光阻害剤Ｌ６−Ｖ１−２１は、ＰＳＭＡに対する８５ｎＭのＩＣ５０を示した。この結果により、阻害剤のコアがかなりの大きさの構造モチーフで誘導体化される場合、阻害能が消滅しなかったことが明らかとなっている。Ｌ６−ＶＩ−２１で治療したＰＳＭＡ発現前立腺癌細胞（ＬＮＣａＰ）は、蛍光顕微鏡による観察で特異的な標識を生じた。Ｌ６−Ｖ１−２１およびヨウ化プロピジウムによる治療後、ＬＮＣａＰ前立腺癌細胞およびＰＣ３前立腺癌細胞の両方に共焦点顕微鏡法を行った。
【０１３４】
ＬＮＣａＰ細胞をＬ６−Ｖ１−２１で治療すると、蛍光顕微鏡検査により、濃い緑色の細胞蛍光標識で示されるようにＬ６−Ｖ１−２１による細胞表面の広範な標識化が確認される。ＬＮＣａＰ細胞をＬ６−Ｖ１−２およびヨウ化プロピジウムで治療すると、共焦点蛍光顕微鏡検査により、細胞表面の濃い緑色の蛍光標識で示されるようにＬ６−Ｖ１−２１による細胞表面の広範な標識化が確認されるとともに、ヨウ化プロピジウム染色から細胞核の赤い蛍光が観察される。ＰＣ３細胞をＬ６−Ｖ１−２およびヨウ化プロピジウムで治療すると、細胞表面の緑色の蛍光標識化がＰＣ３細胞において観察されないが、ヨウ化プロピジウム染色から細胞核の赤い蛍光が観察され、共焦点蛍光顕微鏡検査により、ＰＳＭＡ発現細胞（ＬＮＣａＰ）に対するＬ６−Ｖ１−２の特異性が確認される。ＰＣ３細胞は、ＰＳＭＡを発現しないことから、陰性対照として機能した。ヨウ化プロピジウムにより両細胞株の核が染色されたものの、ＰＳＭＡ発現ＬＮＣａＰ  ６細胞の表面のみがＬ６−Ｖ１−２１で蛍光標識された。これらのＬＮＣａＰ細胞上の強い標識部位は、ＰＳＭＡが凝集した位置であると仮定される。
【０１３５】
蛍光阻害剤ＬＷ−５４−Ｆ５ＥＸにより治療されたＬＮＣａＰ細胞の蛍光顕微鏡検査により、ＰＳＭＡの小分子阻害剤は、ＰＳＭＡ発現細胞を送達して蛍光色素で標識する際に、実質的に抗体（３Ｃ６）と等価であることが明らかになった。この実験で、フルオレセイン−５−ＥＸでそれぞれが標識されたＬＷ−５４および抗体３Ｃ６はいずれも、ＬＮＣａＰ細胞の膜を特異的に標識した。ＬＮＣａＰ細胞をＬＷ−５４−Ｆ５ＥＸまたは蛍光標識抗体３Ｃ６−Ｆ５ＥＸのいずれかで治療すると、蛍光顕微鏡検査により、細胞表面の濃い緑色の蛍光標識により明らかになるように、いずれの場合も細胞表面の広範な標識化が確認される。ＬＷ−５４−Ｆ５ＥＸがＰＳＭＡ発現細胞に特異的であることを確認するため、ＬＮＣａＰおよびＰＣ３細胞をこの化合物で治療した。ＤＡＰＩ（４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール）は両細胞株内の核ＤＮＡを染色したものの、ＬＷ−５４−Ｆ５ＥＸで蛍光標識されたのはＬＮＣａＰ細胞だけであった。ＬＮＣａＰ細胞をＬＷ−５４−Ｆ５ＥＸおよびＤＡＰＩで治療すると、蛍光顕微鏡検査により、細胞表面の濃い緑色の蛍光標識で示されるようにＬＷ−５４−Ｆ５ＥＸによる広範わたる細胞表面の標識化が確認されるとともに、ＤＡＰＩ染色から細胞核の青色蛍光が観察される。ＰＣ３細胞をＬＷ−５４−Ｆ５ＥＸおよびＤＡＰＩで治療すると、細胞表面の緑色の蛍光標識化がＰＣ３細胞において観察されないものの、ＤＡＰＩ染色から細胞核の青色蛍光が観察され、蛍光顕微鏡検査により、ＰＳＭＡ発現細胞（ＬＮＣａＰ）に対するＬＷ−５４−Ｆ５ＥＸの特異性が確認される。ＰＣ３細胞はＰＳＭＡを発現しないことから、これらの結果により、５４−Ｆ５ＥＸなどの小分子剤はＰＳＭＡ発現癌細胞に特異的であることが確認される。
【０１３６】
また、蛍光阻害剤ＬＷ−５４−５ＦＡＭＸで治療したＬＮＣａＰ細胞の蛍光顕微鏡検査により、ＰＳＭＡの小分子阻害剤は、ＰＳＭＡ発現細胞を送達して蛍光色素で標識する際に、実質的に抗体と等価であることが明らかになった。この実験では、ＬＮＣａＰ細胞およびＰＣ３細胞の両方をＬＷ−５４−５ＦＡＭＸで治療した。ＤＡＰＩ（４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール）は両細胞株内の核ＤＮＡを染色したものの、ＬＷ−５４−Ｆ５ＥＸで蛍光標識されたのはＬＮＣａＰ細胞だけであった。ＬＮＣａＰ細胞をＬＷ−５４−５ＦＡＭＸおよびＤＡＰＩで治療すると、蛍光顕微鏡検査により、細胞表面の濃い緑色の蛍光標識で示されるようにＬＷ−５４−５ＦＡＭＸによる細胞表面の広範な標識化が確認されるとともに、ＤＡＰＩ染色から細胞核の青色蛍光が観察される。ＰＣ３細胞をＬＷ−５４−５ＦＡＭＸおよびＤＡＰＩで治療すると、細胞表面の緑色の蛍光標識化がＰＣ３細胞において観察されないものの、ＤＡＰＩ染色から細胞核の青色蛍光が観察され、蛍光顕微鏡検査により、ＰＳＭＡ発現細胞（ＬＮＣａＰ）に対するＬＷ−５４−５ＦＡＭＸの特異性が確認される。これらの結果により、ＬＷ−５４−５ＦＡＭＸなどの小分子剤はＰＳＭＡ発現癌細胞に特異的であることが確認される。
【０１３７】
細胞標識化試験の上記の結果により、ＬＮＣａＰに特異的な標識化は、ＰＳＭＡの小分子非生物学的阻害剤によって達成できることが確認される。これらの結果は、ＰＳＭＡの小分子阻害剤がＰＳＭＡ発現癌細胞にイメージングペイロードまたは治療的ペイロードを特異的に送達できるという証明となる。
【０１３８】
以上の詳細な説明および添付の実施例は、単に例示的なものであって、添付の特許請求の範囲で定義される本発明の適用範囲を限定するものとは見なされないことが理解される。開示した実施形態の種々の変更および改変は当業者に明らかになるであろう。本発明の化学構造、置換基、誘導体、中間体、合成および／または使用方法を含むがこれらに限定されないこのような変更および改変は、本発明の趣旨および適用範囲から逸脱しない範囲で行われる場合がある。
【０１３９】
本明細書で言及する各雑誌論文、書籍、特許および特許出願は、全体が参考として本明細書で援用される。
【図面の簡単な説明】
【０１４０】
【図１】Ｔ３３の分子剪定類似体を示す。
【図２】ＰＳＭＡのステロイド含有ホスホルアミデート阻害剤を示す。
【図３】Ｔ３３による時間依存的なＰＳＭＡの阻害を示す。
【図４】Ｔ３３および代表的分子剪定類似体の不可逆的および緩徐な可逆的阻害を示す。
【図５】ＰＳＭＡの不可逆的、緩徐な可逆的、および急速な可逆的阻害剤としてのＴ３３およびその分子剪定類似体の分類を示す。
【図６】（Ａ）時間の増加および（Ｂ）濃度の増加に伴うＴ３３治療ＰＳＭＡのウェスタンブロットを示す。
【図７】ＭＰ１Ｄのビフェニル類似体を示す。
【図８】Ｎ末端アミノ基における誘導体化と、前立腺癌細胞へのイメージングペイロードおよび治療的ペイロードの送達との両方のために設計される合成ＰＳＭＡ阻害剤を示す。
【図９】ＰＳＭＡ発現前立腺癌細胞を特異的に標識することが知られている蛍光標識ＰＳＭＡ阻害剤を示す。
【図１０】蛍光標識ＰＳＭＡ阻害剤の代表的な調製物を示す。
【図１１】キレート剤含有ＰＳＭＡ阻害剤ＴＬ−ＬＷ−５４−ＢｎＤＴＰＡの調製物を示す。
【図１２】代表的なビオチン標識ＰＳＭＡ阻害剤を示す。
【図１】
2009532338.tif 000028
【図２】
2009532338.tif 000029
【図３】
2009532338.tif 000030
【図４】
2009532338.tif 000031
【図５】
2009532338.tif 000032
【図６】
2009532338.tif 000033
【図７】
2009532338.tif 000034
【図８】
2009532338.tif 000035
【図９】
2009532338.tif 000036
【図１０】
2009532338.tif 000037
【図１１】
2009532338.tif 000038
【図１２】
2009532338.tif 000039
【国際調査報告】
2009532338.tif 000040
2009532338.tif 000041
2009532338.tif 000042
2009532338.tif 000043
2009532338.tif 000044
2009532338.tif 000045
2009532338.tif 000046