(57)【要約】  本発明は新規のリン酸化抗原塩および新規のリン酸化抗原塩の結晶相を提供し、後者は、医薬品として有用な非溶媒和多形体および溶媒和物を含む。また本発明は、新規のリン酸化抗原結晶相を含む医薬品組成物、および新規のリン酸化抗原結晶相の製造方法も提供する。疾患の治療のため、免疫賦活または免疫応答の変更用途のためのかかる組成物の使用方法も提供される。また本発明は、リン酸化抗原結晶および高純度のリン酸化抗原組成物を得るための方法も提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
リン酸化抗原および有機塩基の反応生成物を含む塩。
【請求項２】
結晶相を呈する請求項１に記載の塩。
【請求項３】
前記結晶相が非溶媒和多形体である請求項２に記載の塩。
【請求項４】
前記結晶相が溶媒和物である請求項２に記載の塩。
【請求項５】
前記リン酸化抗原が幾何異性体である請求項１に記載の塩。
【請求項６】
前記リン酸化抗原が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ、ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧの化合物からなる群の中で選択された化合物である請求項１〜５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項７】
前記リン酸化抗原が式ＩＩの化合物である請求項１〜６のいずれか一項に記載の塩。
【請求項８】
前記リン酸化抗原が式ＩＩａの化合物である請求項１〜７のいずれか一項に記載の塩。
【請求項９】
前記リン酸化抗原が、式ＩＩＩａ、ＩＩＩｂまたはＩＩＩｃの化合物である請求項１〜８のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１０】
前記リン酸化抗原が、式Ａ〜Ｇのいずれかの化合物である請求項１〜６のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１１】
前記リン酸化抗原が、式（Ａ）を有する請求項１〜６のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１２】
前記リン酸化抗原が、式（Ｄ）を有する請求項１〜６のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１３】
前記リン酸化抗原が、式（Ｅ）を有する請求項１〜６のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１４】
前記リン酸化抗原が、前記リン酸化抗原の異なる幾何異性体を実質的に含まない請求項１〜１３のいずれか一項に記載のリン酸化抗原塩。
【請求項１５】
前記有機塩基が、医薬上許容される有機塩基である請求項１〜１４のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１６】
前記有機塩基が、キニーネ、シンコニジン、シンコニン、キニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジンおよびアルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群から選択される請求項１〜１５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１７】
前記有機塩基がキナの天然アルカロイドである請求項１〜１５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１８】
前記有機塩基が、キニーネ、シンコニジン、シンコニン、およびキニジンからなる群から選択される請求項１７に記載の塩。
【請求項１９】
前記有機塩基がキノリン塩基である請求項１〜１５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項２０】
前記有機塩基が、８−ヒドロキシ−キノリンおよび５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリンからなる群から選択される請求項１９に記載の塩。
【請求項２１】
前記有機塩基が、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジンおよびアルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群から選択される医薬上許容される塩基である請求項１〜１５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項２２】
前記有機塩基がキニーネである請求項１〜１５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項２３】
前記有機塩基がシンコニジンである請求項１〜１５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項２４】
前記有機塩基が８−ヒドロキシ−キノリンである請求項１〜１５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項２５】
前記有機塩基がベンザチンである請求項１〜１５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項２６】
前記リン酸化抗原が、ＢｒＨＰＰ、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰ、ＩＰＰ、Ｎ−ＨＤＭＡＰＰ、Ｈ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰ、ＨＤＭＡＰＰ塩からなる群から選択され、前記リン酸化抗原と、キニーネ、シンコニジン、シンコニン、キニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジンおよびアルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群の中で選択される有機塩基とを反応させることによって製造される請求項１〜１５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項２７】
前記有機塩基がキニーネであり、前記リン酸化抗原がＢｒＨＰＰである請求項１〜５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項２８】
前記有機塩基がシンコニジンであり、前記リン酸化抗原がＢｒＨＰＰである請求項１〜５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項２９】
前記有機塩基が８−ヒドロキシ−キノリンであり、前記リン酸化抗原がＢｒＨＰＰである請求項１〜５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項３０】
前記有機塩基がベンザチンであり、前記リン酸化抗原がＢｒＨＰＰである請求項１〜５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項３１】
前記有機塩基がキニーネであり、前記リン酸化抗原がＣ−ＨＤＭＡＰＰである請求項１〜５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項３２】
前記有機塩基がベンザチンであり、前記リン酸化抗原がＣ−ＨＤＭＡＰＰである請求項１〜５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項３３】
前記有機塩基がキニーネであり、前記リン酸化抗原がＩＰＰである請求項１〜５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項３４】
前記リン酸化抗原の結晶相が、相（Ａ）〜（Ｏ）のピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全てを含むＸＲＰＤパターンを特徴とし、前記相（Ａ）〜（Ｏ）のピークが、約、
（Ａ）７．５２、１１．２８、１６．７５、１８．９１および２０．８２、
（Ｂ）７．７１、１６．７８および２０．７０、
（Ｃ）７．６６、１６．７０および１８．４０、
（Ｄ）６．６５、１８．５４および２３．６８、
（Ｅ）５．９６、７．３７、１６．０６および１９．２７、
（Ｆ）１５．１８、１５．５１、１６．６９、１７．７８および２６．２４、
（Ｇ）５．７９、１１．４６および１７．１４、
（Ｈ）８．５８、１７．１３、１８．６７および２０．０３、
（Ｉ）８．３８、１８．１４、１９．７１および１９．９６、
（Ｊ）５．９２および７．１６、
（Ｋ）５．５３、２０．８７および２４．８２、
（Ｌ）８．３３、１５．９３、１８．０６および１９．８９、
（Ｍ）７．７９、１７．５１、１７．８５および１８．５３、
（Ｎ）５．６２、１２．３７、１６．４１、１８．２１、１８．７０、２１．４４および２５．０６、ならびに
（Ｏ）５．８０、８．６８、１１．３６、２３．３２、２４．１１
におけるピークからなる群の中で選択される請求項２に記載の塩。
【請求項３５】
前記リン酸化抗原の結晶相が、相（Ａ）〜（Ｏ）のピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つを含むＸＲＰＤパターンを特徴とし、前記相（Ａ）〜（Ｏ）のピークが、約、
（Ａ）５．６４、７．５２、１１．２８、１１．６０、１２．９２、１３．８０、１５．７１、１６．７５、１７．４９、１８．１１、１８．４４、１８．９１、１９．２５、２０．０８、２０．８２、２２．３０、２３．９６、２５．７２、２６．５６および２７．２４、
（Ｂ）５．８２、７．７１、８．２２、１５．５５、１５．９３、１６．４５、１６．７８、１７．６０、１８．０７、１８．６８、１９．４７および２０．７０、
（Ｃ）５．８１、７．６６、１６．７０および１８．４０、
（Ｄ）４．６４、６．６５、１３．８９、１４．２４、１６．９３、１８．５４、２０．５０、２３．６８および２７．９０、
（Ｅ）５．９６、７．３７、９．３４、９．７０、１１．１０、１２．３８、１２．６６、１３．６９、１４．８７、１６．０６、１６．４０、１８．２０、１８．７６、１９．２７、１９．８０、２０．８６、２２．６０、２３．００、２３．６５、２４．３２、２５．１０、２５．５０、２６．２４、２６．６２および２７．０３、
（Ｆ）５．５３、１０．６９、１３．３０、１３．９７、１５．１８、１５．５１、１５．８４、１６．６９、１７．７８、１８．１２、２０．１３、２０．６７、２２．４２、２３．８５、２４．５０、２５．４２、２５．７６、２６．２４、２６．７３および２８．８４、
（Ｇ）５．７９、１１．４６、１６．１９、１７．１４、１７．３９、１８．９４および２１．５２、
（Ｈ）８．５８、９．１７、１０．０７、１０．７０、１４．３３、１４．８２、１６．０４、１６．８８、１７．１３、１８．６７、２０．０３、２０．９５、２２．４２、２３．３３、２５．３４および２５．６４、
（Ｉ）８．３８、１５．７４、１６．１５、１８．１４、１９．７１、１９．９６、２３．００、２５．０６および２５．９９、
（Ｊ）４．９８、５．９２、７．１６および１２．６１、
（Ｋ）５．５３、９．０２、１０．６１、１１．１０、１４．３１、１７．５３、１９．８３、２０．８７、２３．４９および２４．８２、
（Ｌ）８．３３、１３．５６、１５．９３、１６．７４、１７．５４、１８．０６、１９．２３、１９．８９、２３．１８、２４．９８、２６．１４および２８．２７、
（Ｍ）６．８３、６．９８、７．７９、９．７８、１３．７１、１４．１７、１４．４１、１４．９４、１５．３８、１６．１４、１７．２８、１７．５１、１７．８５、１８．５３、１８．７７、１９．１２、１９．５０、２０．０７、２０．９３、２１．５６、２１．７３、２２．１４、２４．０９、２４．５８、２４．９６および２５．６８、
（Ｎ）５．６２、１０．２６、１０．５４、１１．２２、１１．６３、１２．３７、１３．８３、１４．８８、１５．７２、１６．４１、１６．８９、１７．１２、１８．２１、１８．７０、１９．４１、２０．６３、２１．４４、２１．８５、２２．５０、２３．３１、２３．６４、２４．１１、２４．４８、２５．０６、２６．３９、２７．１４および２９．６２、ならびに
（Ｏ）５．８０、８．６８、１０．５８、１１．３６、１１．６０、１６．０６、１６．７０、１７．１５、１７．４５、１９．０７、１９．５２、２１．０２、２１．８２、２３．３２、２４．１１、２４．９１、２５．３３および２８．１６
におけるピークからなる群の中で選択される請求項２に記載の塩。
【請求項３６】
前記相が、図１Ａ、２、３、および５〜１６のＸＲＰＤパターンからなる群から選択されるＸＲＰＤパターンの２シータ角に関して表される少なくとも５つのピークを含むＸＲＰＤパターンを特徴とする請求項２に記載の塩。
【請求項３７】
前記相が、図１Ａ、２、３、および５〜１６のＸＲＰＤパターンからなる群から選択されるＸＲＰＤパターンを特徴とする請求項３４に記載の塩。
【請求項３８】
前記相が、（Ａ）〜（Ｏ）からなる群から選択される相の２シータ角に関して表される少なくとも４つのピークを含むＸＲＰＤパターンを特徴とする請求項３２または３３に記載の塩。
【請求項３９】
前記相が、（Ａ）〜（Ｏ）からなる群から選択される相の２シータ角に関して表される少なくとも５つのピークを含むＸＲＰＤパターンを特徴とする請求項３２または３３に記載の塩。
【請求項４０】
前記相が、（Ａ）〜（Ｏ）からなる群から選択される相の２シータ角に関して表される少なくとも６つのピークを含むＸＲＰＤパターンを特徴とする請求項３２または３３に記載の塩。
【請求項４１】
前記リン酸化抗原塩が、少なくとも９５％のアニオン純度を有する請求項１〜４０のいずれか一項に記載の塩。
【請求項４２】
前記リン酸化抗原塩が、少なくとも９９％のアニオン純度を有する請求項１〜４０のいずれか一項に記載の塩。
【請求項４３】
前記リン酸化抗原塩が、少なくとも９９．５％のアニオン純度を有する請求項１〜４０のいずれか一項に記載の塩。
【請求項４４】
前記リン酸化抗原塩が、周囲温度で少なくとも３ヶ月の期間中安定である請求項１〜４０のいずれか一項に記載の塩。
【請求項４５】
前記リン酸化抗原塩が、周囲温度で少なくとも６ヶ月の期間中安定である請求項１〜４０のいずれか一項に記載の塩。
【請求項４６】
前記リン酸化抗原塩のアニオン純度が、前記期間の間に３％未満だけ低下する請求項１〜４０のいずれか一項に記載の塩。
【請求項４７】
前記リン酸化抗原塩が実質的に非吸湿性である請求項１〜４０のいずれか一項に記載の塩。
【請求項４８】
前記リン酸化抗原が０〜９０％の相対湿度範囲にわたって３段階で分析され、各段階が次の段階に移動する前に平衡にされ、１２０秒につき１ポイントで、連続する５ポイントの重量変化が０．００２ｍｇ（０．０２％）未満のときに平衡が評価される場合に、前記リン酸化抗原塩の重量が、８０％の相対湿度において５％より多くは変化しない請求項１〜４０のいずれか一項に記載の塩。
【請求項４９】
前記リン酸化抗原が０〜９０％の相対湿度範囲にわたって３段階で分析され、各段階が次の段階に移動する前に平衡にされ、１２０秒につき１ポイントで、連続する５ポイントの重量変化が０．００２ｍｇ（０．０２％）未満のときに平衡が評価される場合に、前記リン酸化抗原塩の重量が、８０％の相対湿度において１％より多くは変化しない請求項１〜４０のいずれか一項に記載の塩。
【請求項５０】
キニーネ、シンコニジン、シンコニン、キニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジン、アルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群の中で選択される有機塩基を反応させることによって製造される式ＩＩＩの塩であって、その形態が周囲温度で少なくとも３ヶ月の期間中安定である塩。
【請求項５１】
キニーネ、シンコニジン、シンコニン、キニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジン、アルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群の中で選択される有機塩基を反応させることによって製造される式Ａ〜Ｇの塩であって、その形態が周囲温度で少なくとも６ヶ月の期間中安定である塩。
【請求項５２】
キニーネ、シンコニジン、シンコニン、キニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジン、アルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群の中で選択される有機塩基を反応させることによって製造される式Ａ〜Ｇの塩であって、その形態が周囲温度で少なくとも３ヶ月の期間中安定である塩。
【請求項５３】
キニーネ、シンコニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、およびベンザチンからなる群の中で選択される有機塩基を反応させることによって製造されるＢｒＨＰＰまたはＣ−ＨＭＡＰＰの塩であって、その形態が周囲温度で少なくとも３ヶ月の期間中安定である塩。
【請求項５４】
キニーネ、シンコニジン、シンコニン、キニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジン、アルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群の中で選択される有機塩基を反応させることによって製造される式Ａ〜Ｇの塩であって、その形態が実質的に非吸湿性である塩。
【請求項５５】
キニーネ、シンコニジン、シンコニン、キニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジン、アルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群の中で選択される有機塩基を反応させることによって製造される式Ａ〜Ｇの塩であって、その形態が少なくとも９９．５％の純度を有する塩。
【請求項５６】
本質的に純粋なリン酸化抗原塩であって、前記リン酸化抗原が式ＩＩＩのいずれかの化合物の塩であるリン酸化抗原塩。
【請求項５７】
前記リン酸化抗原が純粋である請求項５６に記載のリン酸化抗原塩。
【請求項５８】
前記リン酸化抗原が幾何異性体である請求項５６または５７に記載のリン酸化抗原塩。
【請求項５９】
前記リン酸化抗原が、前記リン酸化抗原の異なる幾何異性体を実質的に含まない請求項５６〜５８のいずれか一項に記載のリン酸化抗原塩。
【請求項６０】
前記リン酸化抗原がＢｒＨＰＰである請求項５６〜５９のいずれか一項に記載のリン酸化抗原塩。
【請求項６１】
前記リン酸化抗原がＣ−ＨＤＭＡＰＰである請求項５６〜５９のいずれか一項に記載のリン酸化抗原塩。
【請求項６２】
前記リン酸化抗原がＨＤＭＡＰＰである請求項５６〜５９のいずれか一項に記載のリン酸化抗原塩。
【請求項６３】
前記リン酸化抗原が、Ｖγ９Ｖδ２Ｔ細胞を活性化または刺激する請求項５６〜６２のいずれか一項に記載のリン酸化抗原塩。
【請求項６４】
少なくとも１０ｇの請求項１〜６３のいずれか一項に記載のリン酸化抗原塩を含む組成物。
【請求項６５】
少なくとも１００ｇの請求項１〜６３のいずれか一項に記載のリン酸化抗原塩を含む組成物。
【請求項６６】
少なくとも１ｋｇの請求項１〜６３のいずれか一項に記載のリン酸化抗原塩を含む組成物。
【請求項６７】
有機溶媒和物をさらに含む請求項１〜６０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６８】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載のリン酸化抗原塩と、医薬上許容されるキャリアとを含む組成物。
【請求項６９】
崩壊剤をさらに含む請求項６８に記載の組成物。
【請求項７０】
前記剤形が、経口的、非経口的、吸入スプレーによって、局所的、経直腸的、経鼻的、経頬的、経膣的または移植用リザーバー（ｉｍｐｌａｎｔｅｄ  ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）を介して投与され得る請求項６８に記載の組成物。
【請求項７１】
５０μｇ〜１０ｇの間のリン酸化抗原を含み、前記リン酸化抗原が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ、ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧの化合物からなる群の中で選択される化合物であり、前記組成物が単位剤形である請求項６８〜７０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７２】
前記単位剤形が錠剤である請求項７１に記載の組成物。
【請求項７３】
前記単位剤形がカプセルである請求項７１に記載の組成物。
【請求項７４】
前記リン酸化抗原が実質的に非吸湿性である請求項７１に記載の組成物。
【請求項７５】
医薬上許容されるキャリアと、治療上有効な量の請求項１〜３３に記載の化合物とを含む医薬品剤形。
【請求項７６】
５ｍｇ〜１０ｇの間のリン酸化抗原を含む単位剤形組成物であって、前記リン酸化抗原が少なくとも９９％のアニオン純度を有し、前記リン酸化抗原が式Ａ〜Ｇのいずれかの化合物である単位剤形組成物。
【請求項７７】
その形態が錠剤である請求項７５または７６に記載の単位剤形。
【請求項７８】
その形態がカプセルである請求項７５または７６に記載の単位剤形。
【請求項７９】
前記リン酸化抗原が実質的に非吸湿性である請求項７５または７６に記載の単位剤形。
【請求項８０】
結晶性リン酸化抗原を調製する方法であって、
（ａ）リン酸化抗原を酸性化させ、
（ｂ）有機塩基で塩化させ、次いで
（ｃ）結晶を単離し、それにより結晶性リン酸化抗原塩を得ること
を含む方法。
【請求項８１】
リン酸化抗原を精製する方法であって、
（ａ）請求項８０に従ってリン酸化抗原を結晶化させ、次いで
（ｂ）前記リン酸化抗原を再結晶させて実質的に純粋なリン酸化抗原を得ること
を含む方法。
【請求項８２】
好ましくは医薬上許容される有機塩基を添加することによって薬品を製剤化することをさらに含む請求項８０または８１に記載の方法。
【請求項８３】
前記結晶性リン酸化抗原塩が、実質的に純粋なリン酸化抗原塩である請求項８０または８１に記載の方法。
【請求項８４】
結晶性リン酸化抗原を調製する方法であって、
（ａ）好ましくは溶液中の前記リン酸化抗原にカチオン樹脂を添加することにより、前記リン酸化抗原を酸性化させ、
（ｂ）有機塩基溶液で塩化させ、
（ｃ）溶媒の蒸発または蒸留を行うことにより固体を形成させ、
（ｄ）段階（ｃ）の固体を最小量の適切な溶媒中に溶解させ、
（ｅ）貧溶媒を添加するか、あるいは
（ｅ）’制御された雰囲気中で溶媒をゆっくり蒸発させるか、または
（ｅ）’’溶液を冷却させ、
（ｆ）懸濁液を熟成サイクルにかけ、
（ｇ）結晶化固体を単離し、
（ｊ）任意で、（ｇ）の結晶化固体を洗浄するか、あるいはスラリーにし、次いで
（ｋ）前記結晶化固体を乾燥させ、それにより結晶性リン酸化抗原塩を得ること
を含む方法。
【請求項８５】
前記結晶性リン酸化抗原塩が、リン酸化抗原の幾何異性体を含む請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
前記リン酸化抗原の幾何異性体が、前記リン酸化抗原の異なる幾何異性体を実質的に含まない請求項８４に記載の方法。
【請求項８７】
前記段階（ａ）のリン酸化抗原出発材料が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ、ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧの化合物からなる群の中で選択される化合物である請求項８０〜８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８８】
前記段階（ａ）のリン酸化抗原出発材料が、式Ａ〜Ｇのいずれかの化合物である請求項８０〜８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８９】
前記段階（ａ）のリン酸化抗原出発材料がＢｒＨＰＰである請求項８０〜８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９０】
前記段階（ａ）のリン酸化抗原出発材料がＣ−ＨＤＭＡＰＰである請求項８０〜８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９１】
前記段階（ａ）のリン酸化抗原出発材料がＨＤＭＡＰＰである請求項８０〜８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９２】
前記有機塩基が、キナの天然アルカロイドである請求項８０〜９１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９３】
前記有機塩基が、キニーネ、シンコニジン、シンコニン、およびキニジンからなる群から選択される請求項９１に記載の方法。
【請求項９４】
前記有機塩基がキノリン塩基である請求項８０〜９１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９５】
前記有機塩基が、８−ヒドロキシ−キノリンおよび５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリンからなる群から選択される請求項９３に記載の方法。
【請求項９６】
前記有機塩基が、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジンおよびアルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群から選択される医薬上許容される塩基である請求項８０〜９１のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規のリン酸化抗原（ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎ）塩および新規のリン酸化抗原塩の結晶相を提供し、後者は、医薬品として有用な非溶媒和多形体および溶媒和物を含む。本発明はまた、新規のリン酸化抗原結晶相を含む医薬組成物、および新規のリン酸化抗原結晶相の製造方法も提供する。使用を変更し、疾患、免疫賦活または免疫応答の治療用のかかる組成物の使用方法もまた提供される。本発明はまた、リン酸化抗原結晶および高純度のリン酸化抗原組成物を得るための方法も提供する。
【背景技術】
【０００２】
近年、多数の関連のリン酸含有化合物が医薬品として提唱または開発されている。特定の化合物はリン酸エステルであり、あるいはより一般的には、ヌクレオチド（またはポリヌクレオチド）、ヌクレオチド類似物、例えば７−デアザ−ｄＧＴＰおよび７−デアザ−ｄＡＴＰ、またはゾレドロネート（ノバルティス（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））などのビスホスホネートのごときリン酸含有化合物である。ヌクレオチドまたはヌクレオチド関連分子およびビスホスホネートはいずれも免疫調節活性を有することが見出されている。例えば、アルダラ（Ａｌｄａｒａ）（登録商標）（米国、ミネアポリスの３Ｍ）は、免疫応答調節剤として開発されている。ゾレドロネート、パミドロネートおよびその他のビスホスホネートは骨吸収を抑制し、骨粗鬆症、骨転移、多発性骨髄腫および骨の脆弱性を特徴とする他の疾患のために開発されてきたが、最近では、ガンマデルタＴ細胞を活性化する能力について研究された（非特許文献１）。ピロリン酸部分を含む多数のその他のリン酸含有化合物が免疫調節剤として提案されている（非特許文献２）。
【０００３】
これらの化合物の多くが様々な応用研究に用いられる一方、その他はヒトの治療上の使用に開発されている。これらの化合物のいくつかの所望される１つの生物学的特性は、これらの免疫賦活活性または免疫調節活性である。多数のリン酸含有化合物は、直接的または間接的にＶγ９Ｖδ２Ｔ細胞を活性化または刺激する能力を有することが見出されている。例えば、イソペンテニルピロホスフェート（ＩＰＰ）はＶγ９Ｖδ２Ｔ細胞を刺激する。ごく最近では、ブロモヒドリンピロホスフェート（ＢｒＨＰＰ）と呼ばれるリン酸化抗原が、癌の徴候のあるヒト治療用の臨床開発に入った（Ｐｈｏｓｐｈｏｓｔｉｍ（登録商標）、フランスのイナート・ファルマ社（Ｉｎｎａｔｅ  Ｐｈａｒｍａ  Ｓ．Ａ．，Ｆｒａｎｃｅ））。リン酸化抗原のいくつかの他の化合物は、多数の異なる治療的徴候におけるヒトの将来的な治療について研究中である（非特許文献３、非特許文献４、非特許文献５、非特許文献６、非特許文献７、非特許文献８、非特許文献９、特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５、特許文献６、特許文献７、特許文献８、特許文献９および特許文献１０）。
【０００４】
しかしながら、今まで、これらの化合物が、ヒトの治療に用いられることが望ましい化合物について高純度の形態で得られるようにする方法は存在していない。ヒトの治療において使用される化合物のために望ましい高純度の形態で得られるようにする方法は存在しない。調製用液体クロマトグラフィなどの現在利用可能な方法は一般に高価で時間のかかる技術を必要とし、実質的に不純物を含まず、かつ高い安定性および非吸湿性特性を有する組成物を得ることはできない。安定性および非吸湿性は医薬品の製造における重要な基準である。医薬品の製造は通常大量のＡＰＩ（活性医薬品成分）の調製を行い、次に、バイアルに充填するまで、あるいはより一般的には使用するまで貯蔵されなければならない。高い安定性はまた、例えば錠剤またはカプセルのごとき特定の医薬上の形態に必要である。
【特許文献１】米国特許第６，６６０，７２３号明細書
【特許文献２】米国特許第５，６３９，６５３号明細書
【特許文献３】米国特許第６，６２４，１５１号明細書
【特許文献４】欧州特許第１１０９８１８Ｂ１号明細書
【特許文献５】国際公開第９５／２０６７３号パンフレット
【特許文献６】国際公開第００／１２５１６号パンフレット
【特許文献７】国際公開第００／１２５１９号パンフレット
【特許文献８】国際公開第０３／０５０１２８号パンフレット
【特許文献９】国際公開第０２／０８３７２０号パンフレット
【特許文献１０】国際公開第０３／００９８５５号パンフレット
【非特許文献１】クンズマン（Ｋｕｎｚｍａｎｎ）ら（２０００年）Ｂｌｏｏｄ  ９６（２）：３８４−３９２頁
【非特許文献２】エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ）ら（２００１年）Ｍｉｃｒｏｂｅｓ  ａｎｄ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ（３）：６４５−６５４頁
【非特許文献３】ヒンツ（Ｈｉｎｔｚ）Ｍ．、ジョマア（Ｊｏｍａａ）Ｈ．、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ（２００１年）３１７
【非特許文献４】ギナー（Ｇｉｎｅｒ）Ｊ−Ｌ．、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ４３（２００２年）５４５７頁
【非特許文献５】アムスリンガー（Ａｍｓｌｉｎｇｅｒ）Ｓ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、６７（２００２年）４５９０頁
【非特許文献６】フォックス（Ｆｏｘ）Ｄ．Ｔ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、６７（２００２年）５００９頁
【非特許文献７】ウォルフ（Ｗｏｌｆｆ）Ｍ．、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ４３（２００２年）２５５５頁
【非特許文献８】ヘクト（Ｈｅｃｈｔ）Ｓ．、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ４３（２００２年）８９２９頁
【非特許文献９】エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ）ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、２７６巻、２１刷、１８３３７−１８３４４頁
【０００５】
従って、当該技術分野では、高純度を有し、比較的非吸湿性であり、高安定性であるリン酸化抗原の組成物、特に医薬組成物と、これらを得るための利便的な製造方法とが必要とされている。
【０００６】
（発明の要約）
（一般的な結晶相）
本発明は、医薬品として有用な非溶媒和多形体および溶媒和物を含む新規のリン酸化抗原塩の結晶相を提供する。本発明はまた、これらのリン酸化抗原結晶相を含む医薬組成物および製造方法も提供する。本発明はまた、高純度形態において、一般的にはＡＰＩとしてリン酸化抗原を含む高純度のリン酸化抗原組成物（特に医薬組成物を含む）も提供する。本発明はまた、費用対効果の高い様式で高純度のリン酸化抗原を得る新規の方法も提供する。疾患の治療または予防のためであって、最も好ましくはＶγ９Ｖδ２Ｔ細胞の直接的または間接的な活性化のためのかかる組成物を使用する方法が提供される。好ましい具体例では、本発明は、結晶性リン酸化抗原の相を提供する。
【０００７】
一態様では、本発明は、リン酸化抗原および有機塩基の反応生成物を含む塩を開示しており、前記塩は、
（ａ）リン酸化抗原の結晶相、リン酸化抗原の塩の非溶媒和多形体、および
（ｂ）リン酸化抗原の塩の溶媒和物
からなる群から選択される。
【０００８】
好ましくは、前記有機塩基は、（ｉ）キニーネ、シンコニジン、シンコニン、およびキニジンを含むがこれらに限定されないキナ（ｑｕｉｎｑｕｉｎａ）の天然アルカロイド、（ｉｉ）８−ヒドロキシ−キノリンおよび５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリンを含むがこれらに限定されないキノリン塩基、または（ｉｉｉ）ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ならびに塩基性および極性アミノ酸、例えばリジンおよびアルギニンを含むがこれらに限定されない医薬上許容される塩基である。
【０００９】
さらに、本発明の具体例では、種々のリン酸化抗原種および有機塩基の多数の異なる結晶相が、２シータ角および相対強度に関して表される粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる（たとえ優先方位がこれらの強度を変更し得るとしても）。特に、本発明は、２シータ角に関して表される粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられるリン酸化抗原のキニーネ、シンコニジン、８−ヒドロキシキノリン、およびベンザチン塩を提供する。
【００１０】
本発明はまた、これらのリン酸化抗原結晶相を含む医薬組成物および製造方法を提供する。疾患の治療または予防のためであって、最も好ましくは免疫細胞、例えばγδＴ細胞、樹状細胞、Ｂ細胞、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋またはＣＤ４＋）、ＮＫ．Ｔ細胞、またはナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の調節のためにかかる組成物を使用する方法を提供する。
【００１１】
本発明の化合物は、リン酸化抗原キニーネ塩、リン酸化抗原シンコニジン塩、リン酸化抗原シンコニン塩、リン酸化抗原キニジン塩、リン酸化抗原８−ヒドロキシ−キノリン塩、リン酸化抗原５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン塩、リン酸化抗原ベンザチン塩、リン酸化抗原プロカイン塩、リン酸化抗原Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン塩、リン酸化抗原リジン塩、リン酸化抗原アルギニン塩、リン酸化抗原ジエチルアミン塩、リン酸化抗原エチレンジアミン塩、リン酸化抗原ピペラジン塩、リン酸化抗原エタノールアミン塩、リン酸化抗原トリエタノールアミン（ｔｈｉｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ）塩、リン酸化抗原ベタイン塩の非溶媒和多形体および溶媒和物を含む結晶相を含むが、これらだけに限定されない。
【００１２】
本発明の医薬品剤形は、治療的または予防的に有効な量の本明細書に開示されるリン酸化抗原の可溶性結晶相を含む。
【００１３】
（一般的な結晶化方法）
調製用液体クロマトグラフィのごとき現在利用可能な方法は、一般に高価かつ長時間を要する技術を必要とする。本発明の１つの目的は、利便的かつ費用対効果の高い様式で高純度のリン酸化抗原を得るための新しい方法を提供することである。本発明は、リン酸化抗原もしくはその幾何異性体、または前記のものを含む組成物を獲得、精製、単離、製造、あるいは別な方法で製造もしくは調製するための方法を開示する。また、構造的に異なるリン酸化抗原化合物を用いて実施例で示されるように、薬剤を調製または製造するため、ＡＰＩ、中間体または製剤化された薬剤を貯蔵するため、あるいはリン酸化抗原化合物の範囲に適用できる使用（例えば、投与、個体を治療）のための方法も提供される。本方法は、一般には、
（１）リン酸化抗原を酸性化させ、
（２）有機塩基を用いて塩化させ、次いで
（３）結晶を単離すること
を含む。
【００１４】
好ましい典型的な手順がさらに以下で提供されるが、当業者がリン酸化抗原結晶相を調製するために手順を改変しうることと理解されるであろう。
【００１５】
発明はまた、リン酸化抗原、特にリン酸化抗原塩をさらに精製する方法を提供し、前記方法は、
（ａ）好ましくは上記段階（１）〜（３）に従って、リン酸化抗原を結晶化させ、次いで
（ｂ）前記リン酸化抗原を再結晶させて実質的または本質的に純粋なリン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物、および／あるいは有利には実質的または本質的に不純物を含まないリン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物を得る
段階を含む。任意選択的に、前記方法はさらに、
（ｃ）好ましくは医薬上許容される有機塩基を添加することにより、薬品を製剤化する段階を含む。
【００１６】
特に好ましい方法では、実施例および図２２において本明細書中でさらに示されるように、広範囲のリン酸化抗原を結晶化させるために用いられ得る特定の手順は、
（ａ）好ましくは溶液中でリン酸化抗原に酸性陽イオン交換樹脂を添加することにより、リン酸化抗原を酸性化させ、
（ｂ）有機塩基溶液を用いて塩化させ、
（ｃ）溶媒を蒸発（蒸留）させ−固体（アモルファスまたは半結晶性のいずれか）の形成、
（ｄ）段階（ｃ）の固体を最小量の適切な溶媒中に溶解させ、
（ｅ）貧溶媒を添加する（結晶化の第１段階−懸濁液の形成）か、あるいは
（ｅ）’制御された雰囲気中で溶媒をゆっくり蒸発させるか、または
（ｅ）’’溶液を冷却し、
（ｆ）懸濁液において熟成サイクルを行い（＝結晶成長−結晶化度の改善）、
（ｇ）（好ましくは懸濁液のろ過により）結晶化固体を単離させ、
（ｈ）任意で洗浄するか、またはスラリー化させ、
（ｉ）前記結晶化固体を乾燥させる
段階を含む。
【００１７】
段階（ｉ）に続いて、結晶化工程を１回または複数回の再結晶サイクルで何度でも所望されるだけ繰り返すことができ、この場合、前の結晶化サイクルの段階（ｉ）で得られる固体を用いて段階（ｄ）〜（ｉ）が繰り返される。これは、化学的純度の増大を提供し得る。任意選択的に、上記方法は段階（ｊ）の固体の形成をさらに含むことができる。
【００１８】
任意選択的に、リン酸化抗原は、記載される方法を用いて、１またはそれ以上の回数、好ましくは少なくとも２、３、４または５回の連続的な再結晶化（すなわち、最初の結晶化に加えて）を行うことにより、結晶化形態からさらに精製されうる。再結晶化は、好ましくは、前の結晶化サイクルの段階（ｉ）において得られる固体を用いて前の段落の段階（ｄ）〜（ｉ）を繰り返すことを含む。
【００１９】
リン酸化抗原の無機塩（ナトリウム、カリウム）の結晶化の試みはほとんど成功していない。得られる化合物はほとんどすべての場合アモルファスであり、かつ高吸湿性である。対照的に、本発明者らは、驚くべきことに、リン酸化抗原の有機塩を調製するために選択された有機塩基の使用が安定な結晶相の単離を促進することを発見した。使用される有機塩基および／または使用者の選択によっては、上記の結晶化方法により得られるリン酸化抗原塩は、ＡＰＩまたは薬剤の製造において中間体として用いられることができ、例えば、さらなる使用のために貯蔵されてもよい。その他の態様では、上記の結晶化方法によって得られるリン酸化抗原塩は、薬剤として、または一般的にはＡＰＩとして薬剤中において直接用いられうる。薬剤として直接的なリン酸化抗原塩の使用のために、多数の医薬上許容される塩基のうちのいずれが用いられてもよい。任意選択的に、この方法は、医薬上許容される有機塩基を有する精製されたリン酸化抗原化合物から薬剤を製剤化するさらなる段階を含んでもよい。特に好ましい具体例では、医薬上許容される有機塩基はリン酸化抗原の結晶化において使用され、得られる結晶相が薬剤として直接用いられ、この目的のための好ましい医薬上許容される有機塩基としては、キニーネ、シンコニジン、シンコニン、キニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、リジン、アルギニン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタインが挙げられるが、これらだけに限定されない。
【００２０】
実施例で示されるように、本明細書に記載される方法はまた、リン酸化抗原の立体異性体、特にリン酸化抗原の幾何異性体を獲得、単離、精製または調製することに有利に用いることができる。本発明の方法を用いて、リン酸化抗原の濃縮された幾何異性体、あるいは好ましくはリン酸化抗原の実質的または本質的に純粋な幾何異性体を得ることができ、リン酸化抗原化合物のこのような実質的または本質的に純粋な幾何異性体またはそれを含む組成物も本発明の範囲内に入る。好ましくは「純粋な立体異性体」または「純粋な幾何異性体」は、各化合物の１つの立体異性体または幾何異性体を含む組成物であり、その化合物の他の立体異性体または幾何異性体を実質的に含まない、本質的に含まない、あるいは含まない。好ましくは、１つの幾何学形態を有する幾何異性体は、化合物の対称の幾何異性体を実質的に含まないであろう。典型的な純粋な幾何異性体は、約９０重量％、９５重量％、９８重量％、９９重量％または９９．５重量％よりも多い化合物の１つの幾何異性体と、それぞれ約１０重量％、５重量％、２重量％、１重量％または０．５重量％未満の化合物のもう１つの幾何異性体とを含む。
【００２１】
（新規の結晶相）
本発明は、いくつかの結晶性リン酸化抗原相、特に結晶性リン酸化抗原無水和物、結晶性リン酸化抗原水和物、結晶性リン酸化抗原一水和物、結晶性リン酸化抗原二水和物、結晶性リン酸化抗原三水和物を開示する。好ましくは、前記結晶相は実質的または本質的に純粋であり、最も好ましくは単離された形態である。少なくとも２つの異なる結晶相を含む組成物、特に２つ、３つまたはそれ以上の異なる結晶相の混合物である組成物も包含される。また、前記結晶相のいずれかの溶媒和物も包含される。また、上記のものを含む医薬品製剤も包含される。
【００２２】
本発明は、リン酸化抗原塩のいくつかの結晶相、特に結晶性リン酸化抗原キニーネ塩、リン酸化抗原シンコニジン塩、リン酸化抗原８−ヒドロキシキノリン塩およびリン酸化抗原ベンザチン塩を開示する。特に好ましいのは、式Ｉ〜ＩＩＩの化合物、好ましくはキニーネ塩、シンコニジン塩、シンコニン塩、キニジン塩、８−ヒドロキシ−キノリン塩、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン塩、ベンザチン塩、プロカイン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン塩、リジン塩、アルギニン塩、ジエチルアミン塩、エチレンジアミン塩、ピペラジン塩、エタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、ベタイン塩の結晶相である。他の特定の具体例では、リン酸化抗原は、ＢｒＨＰＰ、ＩＰＰ、ＨＤＭＡＰＰ、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰ、Ｎ−ＨＤＭＡＰＰおよびＨ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰからなる群から選択される。最も好ましくは、前記の相は、以下に記載されるように、相Ａ〜Ｏのうちの少なくとも１つの結晶性リン酸化抗原である。
【００２３】
本発明の構成上、「式Ｉ〜ＩＩＩ」という表現は、以下で定義されるような式Ｉ〜ＩＩＩから誘導される全ての化合物：Ｉ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ、ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧを指定する。
【００２４】
本発明のもう１つの具体例は、リン酸化抗原の結晶性溶媒和物、特に式Ｉ〜ＩＩＩの化合物の塩、特にキニーネ塩の結晶性溶媒和物、シンコニジン塩の結晶性溶媒和物、８−ヒドロキシキノリン塩の結晶性溶媒和物およびベンザチン塩の結晶性溶媒和物を包含する。好ましくは、式Ｉ〜ＩＩＩの前記化合物は、ＢｒＨＰＰ、ＩＰＰ、ＨＤＭＡＰＰ、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰ、Ｎ−ＨＤＭＡＰＰおよびＨ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰからなる群から選択される。
【００２５】
さらに好ましい特定の具体例では、本発明は、結晶性ビスホスホネート、ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似物、ビスホスホネート、ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似物の塩または溶媒和物、特に結晶性キニーネ塩または溶媒和物、シンコニジン塩または溶媒和物、８−ヒドロキシキノリン塩または溶媒和物およびベンザチン塩または溶媒和物を包含する。
【００２６】
簡単に説明すると、本明細書において提供される一般的な方法は、上記結晶相のいずれかを調製するために用いられうる。結晶相を調製するための前記方法は、リン酸化抗原を水溶液中に溶解させ、好ましくは酸性または強酸性カチオン交換樹脂を用いて酸性化させ、有機塩基、好ましくはキニーネ、シンコニジン、８−ヒドロキシキノリン溶媒和物またはベンザチンを添加することにより結晶相を沈殿させ、次いで、好ましくは溶媒を蒸発させることにより結晶を単離する段階と含む。この方法は、結晶を単離する前に溶液を冷却させることをさらに含んでもよい。この一般的な方法は、リン酸化抗原および構造的に関連する化合物に広く適用できる。
【００２７】
リン酸化抗原の結晶相は、様々な化学量論、例えば０．５：１、１：１、１：１．５、１：２、１：３、１：４などのリン酸化抗原分子対水分子の比の水和物であってもよい。また、リン酸化抗原無水和物も包含される。
【００２８】
本発明のさらに別の具体例は、相Ａ〜Ｏからなる群から選択されるリン酸化抗原の結晶相のうちの少なくとも１つを含む医薬組成物を包含する。
【００２９】
（高純度リン酸化抗原塩またはそれを含有する組成物）
本発明は、高純度のリン酸化抗原化合物およびそれらを得るための方法を提供する。本発明はまた、特に医薬製剤に含むがそれに限定されない薬剤として有用な組成物を提供する。好ましい具体例では、ヒトへの投与に適した剤形である。様々な化合物の典型的な用量およびリン酸化抗原類の範囲が本明細書においてさらに提供される。好ましい用量は、約０．０１ｍｇ〜１０ｇの間、より好ましくは０．１ｍｇ〜１０ｇの間、０．１ｍｇ〜１ｇの間、１ｍｇ〜１ｇの間、１０ｍｇ〜１ｇの間、または１０ｍｇ〜１００ｍｇの間の本質的に純粋または実質的に純粋なリン酸化抗原を含む。本発明者らはまた、リン酸化抗原を高度に精製する方法を提供し、これは商業的な製造のために容易に拡大することができる。一の好ましい態様では、本発明は、少なくとも１ｇ、２ｇ、５ｇ、１０ｇ、２０ｇ、５０ｇ、１００ｇ、２５０ｇ、５００ｇまたは１ｋｇの高純度な、好ましくは実質的または本質的に純粋なリン酸化抗原化合物、最も好ましくは非吸湿性であるリン酸化抗原化合物を含む、本明細書中の具体例のいずれかによる組成物を提供する。好ましくは、リン酸化抗原は結晶相である。
【００３０】
好ましい具体例では、この方法は、ＨＰＡＥＣで測定したとき（相対的な面積パーセントで表される）に、少なくとも９５％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．８％または９９．９％であるアニオン純度を有するリン酸化抗原を製造するために使用される。好ましくは、リン酸化抗原はまた、従来技術の方法で調製されたリン酸化抗原組成物と比較して不純物レベルの低下も示し、好ましくは、本質的または実質的に不純物を含まない。好ましくは、リン酸化抗原は結晶相である。
【００３１】
本発明によってさらに包含されるのは、ＨＰＡＥＣで測定したとき（相対的な面積パーセントで表される）に、少なくとも９５％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．８％または９９．９％であるアニオン純度を有するリン酸化抗原を含む医薬品製剤である。好ましくは、リン酸化抗原は結晶相である。
【００３２】
また、本発明には、リン酸化抗原および有機塩基を含む組成物も包含され、好ましくは、塩基は、（ｉ）キニーネ、シンコニジン、シンコニン、およびキニジンを含むがそれらだけに限定されないキナの天然アルカロイド、（ｉｉ）８−ヒドロキシ−キノリンおよび５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリンを含むがそれらだけに限定されないキノリン塩基、および（ｉｉｉ）ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、および塩基性と極性アミノ酸、例えばリジンおよびアルギニンを含むがそれらだけに限定されない医薬上許容される塩基からなる群から選択される。
【００３３】
好ましくは、前記医薬品製剤は、さらに、医薬上許容されるキャリアを含む。
【００３４】
本発明にさらに包含されるのは、非吸湿性リン酸化抗原組成物である。好ましい態様では、本発明は、本質的または実質的に非吸湿性であるリン酸化抗原組成物を提供し、好ましくは、前記リン酸化抗原組成物は、ＨＰＡＥＣで測定（相対的な面積パーセントで表される）したときに少なくとも９５％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．８％または９９．９％のアニオン純度を有する。
【００３５】
本明細書中の具体例のいずれかの好ましい具体例では、本発明は、実質的または本質的に非吸湿性のリン酸化抗原塩あるいはそれを含有する組成物を提供する。リン酸化抗原塩およびそれを含有する組成物は、好ましくは、室温（または周囲温度、すなわち約２５℃）および周囲雰囲気と接触した場合でも少なくとも３ヶ月間は安定なままであるが、ＢｒＨＰＰナトリウム塩（アモルファス化合物）は同一の貯蔵条件に対して５０％の分解を受ける（実施例を参照）。最も好ましくは、リン酸化抗原は実質的または本質的に純粋なリン酸化抗原塩である。吸湿性は任意の適する方法により測定され得、このリン酸化抗原は、この化合物が用いられる特定の方法において低吸湿性または非吸湿性の範囲内に入るかどうかで実質的に非吸湿性であるかが調べられる。例えば、動的蒸気吸着（ＤＶＳ）、重量法または含水量法（ｗａｔｅｒ  ｃｏｎｔｅｎｔ  ｄｏｓａｇｅ  ｍｅｔｈｏｄ）（例えば、カール・フィッシャー（Ｋａｒｌ  Ｆｉｓｈｅｒ））が用いられ得る。ＤＶＳは吸湿性を測定するためのよく知られた方法であり、ＤＶＳ手順の一例が実施例に記載される。一の実施例では、吸湿性は、様々な相対湿度で貯蔵後、化合物の平衡含水率を決定することによる、出典明示により全体を本明細書に一体化させるカラハン（Ｃａｌｌａｈａｎ）らの方法（（１９８２年）Ｄｒｕｇ．Ｄｅｖ．Ｉｎｄ．Ｐｈａｒｍ．８（３）：３５５−３６９頁）により評価される。カラハンら（１９８２年）の分類システムを使用して、カラハンらによる少なくとも低吸湿性または非吸湿性の分類に入る化合物は、本発明のために非吸湿性であると考えることができる。
【００３６】
別の実施例では、吸湿性は、２５℃の温度における制御雰囲気ミクロバランスを用いる動的水分吸着重量法（ＤＭＳＧ）によって測定される。サンプルは、３％の段階で０〜９０％の相対湿度範囲にわたって分析される。各段階は次の段階に移動する前に平衡にされ、平衡は、１２０秒につき１ポイントで連続する５ポイントの間の重量変化が０．００２ｍｇ（０．０２％）未満のときに評価される。この吸湿性の測定を用いると、本発明の非吸湿性塩は、８０％の相対湿度において、１０重量％未満、好ましくは５重量％未満、好ましくは４重量％未満、より好ましくは３重量％未満、より好ましくは２重量％未満、より好ましくは１重量％未満の水分吸収を示す。
【００３７】
さらに好ましい態様では、高純度のリン酸化抗原塩またはそれを含有する組成物は、貯蔵条件下で安定性の増加を示す。貯蔵の安定性に関しては、貯蔵に用いられる条件および特定の結晶形態に依存しており、本発明は、制御環境下、特に室温、好ましくは一定温度および／または一定湿度において、少なくとも１ヶ月、あるいはより好ましくは２、３、６、９または１２ヶ月間安定であるリン酸化抗原化合物を提供する。安定性は、好ましくはアニオン純度、すなわち、好ましくは、化合物がそのアニオン純度が３％、２％またはより好ましくは１％よりも多く低下しなければ一定期間にわたり安定であることを意味する。例えば、温度は、４℃、１０℃、２０℃、２５℃、３０℃、３５℃、４０℃、５０℃、６０℃、７５℃または１００℃、もしくはそれ以上でもよく、該温度は、一定の湿度、例えば１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％のいずれかの相対湿度で用いられうる。本発明は、ほとんどの地理的領域における周囲温度以下の温度、例えば２０℃、２５℃、３０℃または３５℃までの温度でこのように長期間貯蔵することができるいくつかの結晶性リン酸化抗原塩を提供し、改善された品質、安全性の増加ならびにコストおよび物流の利点を提供する。また、安定性によってリン酸化抗原の錠剤および他の医薬品形態の開発が可能になり、それにより本発明はリン酸化抗原を含む錠剤およびカプセルを含む新規の医薬品形態を提供する。これらの具体例の好ましい態様では、かかるリン酸化抗原組成物は、結晶性リン酸化抗原キニーネ塩、リン酸化抗原シンコニジン塩、リン酸化抗原８−ヒドロキシキノリン塩およびリン酸化抗原ベンザチン塩である。特に好ましいのは、式Ｉ〜ＩＩＩの化合物の結晶相であり、好ましくはキニーネ塩、シンコニジン塩、シンコニン塩、キニジン塩、８−ヒドロキシ−キノリン塩、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン塩、ベンザチン塩、プロカイン塩、ｎ−メチル−ｄ−グルカミン塩、リジン塩およびアルギニン塩の結晶相である。その他の特定の具体例では、リン酸化抗原は、ＢｒＨＰＰ、ＩＰＰ、ＨＤＭＡＰＰ、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰ、Ｎ−ＨＤＭＡＰＰおよびＨ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰからなる群から選択される。最も好ましくは、前記の相が相Ａ〜Ｏのうちの少なくとも１つの結晶性リン酸化抗原である。
【００３８】
特定の具体例によると、本発明は、キニーネ、シンコニジン、シンコニン、キニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジン、アルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群の中で選択される有機塩基を反応させることによって製造される式ＩＩＩの塩を提供し、該形態は周囲温度で少なくとも３ヶ月の期間中安定である。
【００３９】
もう１つの特定の具体例によると、本発明は、キニーネ、シンコニジン、シンコニン、キニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジン、アルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群の中で選択される有機塩基を反応させることによって製造される式Ａ〜Ｇの塩を提供し、該形態は周囲温度で少なくとも３ヶ月、または好ましくは６ヶ月の期間中安定である。
【００４０】
さらに、本発明は、キニーネ、シンコニジン、シンコニン、キニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリン、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、リジン、アルギニン、ならびに他の塩基性および極性アミノ酸からなる群の中で選択される有機塩基を反応させることによって製造される式Ａ〜Ｇの塩を提供し、該形態は実質的に非吸湿性であるか、あるいは該形態は少なくとも９９．５％の純度を有する。
【００４１】
別の特定の具体例によると、本発明は、キニーネ、シンコニジン、８−ヒドロキシ−キノリン、およびベンザチンからなる群の中で選択される有機塩基を反応させることによって製造されるＢｒＨＰＰまたはＣ−ＨＭＡＰＰの塩を提供し、該形態は、周囲温度において少なくとも３ヶ月の期間中安定である。
【００４２】
別の好ましい具体例では、本発明は、従来技術の方法で使用されるものと比較して低減されたレベルの溶媒を用いてリン酸化抗原を製造するために使用される。
【００４３】
本発明のもう１つの目的は、有機塩基の使用を含むリン酸化抗原の精製方法を提供することである。好ましい態様では、本発明は、（１）リン酸化抗原、好ましくは式Ｉ〜ＩＩＩに従うリン酸化抗原の酸性化、（２）有機塩基による塩化、次いで（３）結晶の単離、ならびに任意選択的に（４）リン酸化抗原の再結晶化、および／または（５）好ましくは医薬上許容される有機塩基の添加による薬品の製剤化を含む。好ましい具体例では、この方法は、少なくとも９５％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．８％または９９．９％（ＨＰＡＥＣ分析に基づく面積パーセント）のアニオン純度を有するか、あるいは実質的または本質的に不純物を含まないリン酸化抗原を製造するために使用される。好ましくは、高純度のリン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物は不純物、特に無機ホスフェートおよび／またはピロホスフェート不純物を、実質的または本質的に含まない。ピロホスフェート不純物は、例えば合成後に一般に少量残存するような、標的とされるピロホスフェート化合物以外のピロリン酸含有化合物である。最も好ましくは、高純度のリン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物は、３％、２．５％、２％、１．５％、１％または０．５％（ＨＰＡＥＣ分析に基づく面積パーセント）未満の無機ホスフェートおよび／またはピロホスフェート不純物を含む。化合物のさらなる特定の例は本明細書中にさらに記載されており、例えば、本発明は、３％、２．５％、２％、１．５％、１％または０．５％（ＨＰＡＥＣ分析に基づく面積パーセント）未満の無機ホスフェートおよび／または無機ピロホスフェートを含むリン酸化抗原組成物が得られることを示す。後者の例に関して、本発明者らは、図１７ａおよび１７ｂ（ＨＰＡＥＣプロファイル）において、ＩＰＰおよびＣ−ＨＤＭＡＰＰと称されるリン酸化抗原が、無機ホスフェートおよびピロホスフェートを実質的に含まずに得られうることを示す。
【００４４】
（図の説明）
図１Ａは、結晶相Ａ：ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００４５】
図１Ｂは、結晶性ＢｒＨＰＰキニーネ塩（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉの熱重量分析を示す。
【００４６】
図２は、結晶相Ｂ：ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００４７】
図３は、結晶相Ｃ：ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００４８】
図４は、アモルファス状態の結晶性ＢｒＨＰＰシンコニジン塩のＸＲＰＤパターンを示す。
【００４９】
図５は、結晶相Ｄ：ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００５０】
図６は、結晶相Ｅ：ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００５１】
図７は、結晶相Ｆ：ＢｒＨＰＰ８−ヒドロキシキノリン塩、結晶相ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００５２】
図８は、結晶相Ｇ：ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００５３】
図９は、結晶相Ｎ：ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００５４】
図１０は、結晶相Ｏ：ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００５５】
図１１は、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの実施例５で得られた（Ｅ）幾何異性体のＸＲＰＤパターンを示す。結晶相Ｈ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相ＩのＸＰＲＤパターンが示される。
【００５６】
図１２は、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの実施例５で得られた（Ｅ）幾何異性体のＸＲＰＤパターンを示す。結晶相Ｉ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩのＸＲＰＤパターンが示される。
【００５７】
図１３は、結晶相Ｊ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００５８】
図１４は、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの実施例６で得られた（Ｅ）幾何異性体のＸＲＰＤパターンを示す。結晶相Ｋ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩのＸＲＰＤパターンが示される。
【００５９】
図１５は、結晶相Ｌ：ＩＰＰキニーネ塩、結晶相ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００６０】
図１６は、結晶相Ｍ：ＩＰＰキニーネ塩、結晶相ＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【００６１】
図１７ａは、本発明の方法に従って得られたリン酸化抗原塩（ＩＰＰキニーネ塩、結
晶相ＩＩＩ）の化学純度（アニオン純度）を決定するためのＨＰＡＥＣプロファイルの一例である。
【００６２】
図１７ｂは、本発明の方法に従って得られたリン酸化抗原塩（Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩ）の化学純度（アニオン純度）を決定するためのＨＰＡＥＣプロファイルの一例である。
【００６３】
図１８は、アモルファスＢｒＨＰＰナトリウム塩のＤＳＣ／ＴＧ分析を示す。
【００６４】
図１９は、実施例４に従って調製された（非溶媒和）結晶相（ＢｒＨＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉ））のＤＳＣ分析を示しており、融解−分解事象が１４６℃よりも高温で生じるだけなので、高熱安定性のプロファイルが明らかにされる。
【００６５】
図２０は、ＢｒＨＰＰナトリウム塩のＤＶＳ分析を示す。図２０Ａは、サンプルの質量変化および実験的なＲ．Ｈ．を時間に対して表し、図２０Ｂは、ＢｒＨＰＰナトリウム塩のＤＶＳ分析を示す。２０℃における吸着および脱着等温線を表す。
【００６６】
図２１は、ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩのＤＶＳ分析を示す。図２１Ａは、サンプルの質量変化および実験的なＲ．Ｈ．を時間に対して表し、図２１Ｂは、ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩのＤＶＳ分析を示す。２２℃における吸着および脱着等温線を表す。
【００６７】
図２２は、リン酸化抗原の結晶化方法の総括の流れ図である。
【００６８】
（発明の詳細な説明）
他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術および化学用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般に理解されている意味を有する。本発明の実施では、他に指示されない限り、化学、生化学および微生物学の従来の技法、ならびにそこで使用される基本的な専門用語が用いられる。所定の百分率（％）は、他に指定されない限り、重量により表される。
【００６９】
「単離された」という用語は化合物または生成物を指し、すなわち、混合物中に存在する少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも５０％、６０％または７０％、そして最も好ましくは少なくとも８０％、９０％、９５％または９８％の化合物を表す化合物を指す。
【００７０】
リン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物は、サンプルの少なくとも９８％が特定のリン酸化抗原である場合に「実質的に純粋」である。好ましくは、リン酸化抗原は、サンプルの少なくとも９９％が特定のリン酸化抗原である場合に「実質的に純粋」である。
【００７１】
リン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物は、サンプルの少なくとも９９．５％が特定のリン酸化抗原である場合に「本質的に純粋」である。好ましくは、リン酸化抗原は、サンプルの少なくとも９９．９％が特定のリン酸化抗原である場合に「本質的に純粋」である。
【００７２】
リン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物は、リン酸化抗原組成物の量の１％以下の量で他の化合物が存在する場合に、別の化合物を「実質的に含まない」。
【００７３】
リン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物は、リン酸化抗原組成物の量の０．５％以下の量で他の化合物が存在する場合に、別の化合物を「本質的に含まない」。
【００７４】
リン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物は、リン酸化抗原調製物の量の０．１％以下の量で他の化合物が存在する場合に、別の化合物を「含まない」。あるいは、リン酸化抗原は、検出限界がリン酸化抗原調製物の量の約０．０５％以下である最大感度の条件下で化合物がＨＰＡＥＣによって検出できない場合に、別の化合物を「含まない」。典型的なＨＰＡＥＣ法は、本明細書中の「実施例」と題された部分に記載される。
【００７５】
「精製された」リン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物は、実質的に純粋なリン酸化抗原、本質的に純粋なリン酸化抗原、またはこれらの塩、あるいは別の化合物を実質的に含まない、本質的に含まない、または含まないリン酸化抗原またはその塩を指す。
【００７６】
「部分的に精製した」リン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物は、９０％未満の純度のリン酸化抗原またはその塩を指す。
【００７７】
リン酸化抗原または別の化合物の純度は、医薬品組成物中に製剤化される前のリン酸化抗原または他の化合物を指す。純度は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）、液体クロマトグラフィ／質量分析（ＬＣ／ＭＳ）または微生物学的検定法を含む任意の手段によって測定することができる。リン酸化抗原の純度を測定するための好ましい手段は、アニオン純度を測定するＨＰＬＣまたはＨＰＡＥＣなどの分析的な高圧液体クロマトグラフィによるものである。
【００７８】
有機または無機塩基は、キニーネ、シンコニジン、シンコニン、およびキニジンを含むがこれらに限定されないキナの天然アルカロイドと、８−ヒドロキシ−キノリンおよび５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリンを含むがこれらに限定されないキノリン塩基と、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、ならびに塩基性および極性アミノ酸を含むがこれらに限定されない医薬上許容される塩基、例えばリジンおよびアルギニンと、一般的には、酸性リン酸化抗原との反応で熱力学的に安定な結晶性（塩）相を形成し得る塩基種とを含むがこれらに限定されない。
【００７９】
「有機溶媒」という用語は、１，４−ジオキサン（ジオキサン）、１，２−ジクロロエタン、ジメトキシエタン、ジエチレングリコール、ジメチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジイソプロピルエーテル、ヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン、トルエンまたはエチレンなどの炭化水素、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノールまたはエチレングリコールなどのアルコール、メチルエチルケトンまたはイソブチルメチルケトンなどのケトン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドまたはＮ−メチルピロリドンなどのアミド、およびこれらの混合物を含むが、これらに限定されない。
【００８０】
本明細書において使用される場合、「医薬上許容される塩」という用語は、薬理学的に許容可能な金属カチオン、アンモニウム、アミンカチオン、または第４級アンモニウムカチオンなどの（しかしこれらに限定されない）薬理学的に許容可能なカチオンから調製される塩を指す。特に好ましい金属カチオンは、アルカリ金属、例えばリチウム、ナトリウムおよびカリウム、ならびにアルカリ土類金属、マグネシウムおよびカルシウムから誘導されるものであるが、他の金属、例えばアルミニウム、亜鉛および鉄のカチオン型も本明細書の範囲内に入る。薬理学的に許容可能なアミンカチオンは、第１級、第２級、および第３級アミン、特にＮ−メチルグルカミン（メグルミン）、および低級アルカノールアンモニウム、ならびに医薬上許容される有機アミンの他の塩基性塩から誘導されるものである。
【００８１】
本明細書において使用される場合、「結晶相」という用語は、明確な結晶充填を有する組成物を意味する。
【００８２】
本明細書において使用される場合、「多形体」という用語は、その結晶充填が異なる同一の組成物の結晶相を意味する。
【００８３】
本明細書において使用される場合、「溶媒和物」という用語は、溶質（例えば、リン酸化抗原または塩）および溶媒によって形成された固定または可変化学量論の結晶複合体である。同一の組成を有するいくつかの溶媒和相が存在でき、溶媒和相の多形形態を表す。
【００８４】
本明細書において使用される場合、「治療上有効な量」という用語は、疾患または状態もしくはその１またはそれ以上の症候を改善するため、あるいは疾患または状態の進行を予防するため、あるいは別の治療（例えば、治療薬または他の物理的処置）の治療効果を改善するために十分な治療（例えば、治療薬）の量を指す。
【００８５】
本明細書において使用される場合、「治療する」、「治療」および「治療すること」という用語は、１またはそれ以上の治療（例えば、１またはそれ以上の予防薬および／または治療薬）の投与に起因する、疾患もしくは状態または１またはそれ以上の症候の進行、重症度および／または持続期間の低減または改善を指す。
【００８６】
本明細書において使用される場合、「予防する」、「予防すること」、および「予防」という用語は、被験者の疾患または状態、あるいは１またはそれ以上の症候の再発、発症または進行の予防を指し、前記予防は、治療（例えば、予防薬または治療薬の投与）、または併用療法（例えば、予防薬または治療薬の組み合わせの投与）に起因する。
【００８７】
本明細書において使用される場合、「癌を治療する」は、癌の進行の予防、癌の症候の低減、および／または成長の阻害、サイズの減少、ならびに／あるいは確定した癌の破壊の誘発を含む。他の態様では、癌の発生の危険を低減するために、薬剤は、癌を発生させる危険のある被験者に投与される。
【００８８】
本明細書において使用される場合、「付属的に投与される」という用語は、所望の治療または予防効果を達成するために、医薬上許容されるリン酸化抗原組成物に加えて１またはそれ以上の化合物または活性成分を、リン酸化抗原組成物の投与と同時、あるいはリン酸化抗原組成物の投与の前、最中または後に間隔を置いて投与することを指す。
【００８９】
本発明の構成上、「式Ｉ〜ＩＩＩ」という表現は、式Ｉ〜ＩＩＩから誘導される全ての化合物：Ｉ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ、ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧを指定する。
【００９０】
（一般的な方法の説明）
結晶性リン酸化抗原を調製するために一般的に使用することができる方法は、図２２に説明されており、以下のようにさらに記載される。さらに、本方法の詳細な手順は、実施例部分で提供される。それぞれの特定のリン酸化抗原用に本方法を適合させるために変更が成され得ることは認識されるであろう。変更の種類を例示する目的で、実施例では、多数の異なる典型的な有機塩基を用いて多数の異なるリン酸化抗原が結晶化される。
【００９１】
（リン酸化抗原化合物の結晶化方法）
（出発材料）
本発明の方法において使用するのに適したリン酸化抗原は、以下にさらに詳細に説明される。出発材料は好ましくは十分に安定な形態で提供され、可能であれば、酸の形態、あるいはナトリウム、カリウム、リチウムまたはアンモニウムなどの一価のミネラルカチオン塩として提供され、このような一価のミネラルカチオンは樹脂上でより簡単に交換可能である。いくつかのビスホスホン酸のように化合物が酸の形態で既に利用可能である特定の場合には、酸性化（段階１）は必要とされない。
【００９２】
（リン酸化抗原）
「リン酸化抗原」という用語は、リン酸部分を含む化合物を示す。いくつかの場合には、リン酸化抗原は、免疫調節活性を有し、例えば好ましくは、免疫細胞を直接または間接的に活性化または刺激することができる。好ましい非限定的な例は、免疫細胞（例えばＴ細胞、特にγδＴ細胞（例えば、Ｖγ９Ｖδ２Ｔ細胞）、ＮＫ細胞、樹状細胞）を活性化または刺激するリン酸化抗原である。このため、例えばγδＴ細胞を活性化または刺激する特性を有するリン酸化抗原は、「γδＴ細胞活性化剤」と呼ばれる。γδＴ細胞活性化剤は、γδＴリンパ球に対して直接作用する場合でも、好ましくは（しかし、必ずしもそうではない）γδＴリンパ球のＴ受容体のリガンドである。その他の例としては、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）のリガンド（またはリガンドとの複合体の一部、またはシグナル伝達経路に係わる）がある。γδＴ細胞活性化剤は、直接または間接的にγδＴ細胞を刺激または活性化することができ、通常後者は、γδＴ細胞の活性化を次にもたらす別の免疫細胞の刺激または活性化によって生じることが認識されるであろう。また、γδＴ細胞を活性化または刺激するリン酸化抗原と構造的に関連するが、それ自体はγδＴ細胞を活性化または刺激しないリン酸化抗原化合物（すなわち、リン酸部分を含有する）も本発明の方法で用いられるのに適する。かかる化合物の例としては、免疫調節活性を有する、または有さないヌクレオチドおよびその誘導物または類似物が挙げられる。また、γδＴ細胞を活性化または刺激するリン酸化抗原と構造的に関連するが、「γδＴ細胞阻害薬」と呼ばれるγδＴ細胞の阻害薬としての役割を果たすように適合されたリン酸部分を含有する化合物も、本発明の方法で用いられるのに適する。γδＴ細胞阻害薬の例は、米国特許第６，６２４，１５１号明細書に開示されており、出典明示により本明細書に援用される。
【００９３】
γδＴ細胞活性化剤であるリン酸化抗原は、好ましくは生物活性を増大させるかあるいはγδＴ細胞の増殖を引き起こし、好ましくはγδＴ細胞の活性化を増大させ、特にγδＴ細胞からのサイトカイン分泌を増大させるかあるいはγδＴ細胞の細胞溶解活性を増大させ、γδＴ細胞の増殖または拡大を刺激する場合もそうでない場合もある。従って、γδＴ細胞活性化剤は、被験者のγδＴ細胞の活性を増大させるのに十分な量および条件下、好ましくはγδＴ細胞によるサイトカイン分泌を増大させるおよび／またはγδＴ細胞の細胞溶解活性を増大させるのに十分な量および条件下で投与される。サイトカイン分泌および細胞溶解活性は、適切なインビトロ検定法を用いて評価することができる。
【００９４】
典型的な検定法では、ＴＮＦ−α感受性細胞を用いる生物検定法におけるＴＮＦ−α放出の測定について記載しているエスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ）ら（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、２７６巻、２１刷、１８３３７−１８３４４頁）に記載される方法に従って、サイトカイン分泌を決定することができる。簡単に言うと、２５単位のＩＬ２／ウェルを加えた刺激とともに、１０４γδＴ細胞／ウェルを１００μｌの培地中、３７℃で２４時間インキュベートした。次に、アクチノマイシンＤ（２μｇ／ｍｌ）およびＬｉＣｌ（４０ｍＭ）を加えた培地に３×１０４細胞／ウェルでプレーティングした５０μｌのＷＥＨＩ細胞に５０μｌの上澄みを添加し、３７℃で２０時間インキュベートした。３−（４，５−ジメチルチアゾ−ル−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド検定法を用いてＴＮＦ−α感受性細胞の生存率を測定した。ウェルあたり５０μｌの３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（シグマ（Ｓｉｇｍａ）、リン酸緩衝生理食塩水中２．５ｍｇ／ｍｌ）を添加し、３７℃で４時間のインキュベーションの後、５０μｌの可溶化緩衝液（２０％ＳＤＳ、６６％ジメチルホルムアミド、ｐＨ４．７）を添加し、吸光度（５７０ｎｍ）を測定した。次に、精製ヒトｒＴＮＦ−α（ニュージャージー州ロッキーヒル（Ｒｏｃｋｙ  Ｈｉｌｌ，ＮＪ）のペプロテック社（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｎｃ．））を用いて得られた標準曲線からＴＮＦ−αの放出レベルを計算した。活性化Ｔ細胞によって放出されたインターフェロン−γを、サンドイッチ酵素結合免疫吸着検定法で測定した。２５単位のＩＬ２／ウェルを加えた刺激とともに、５×１０４Ｔ細胞／ウェルを１００μｌの培地中、３７℃で２４時間インキュベートした。次に、マウスモノクローナル抗体（カリフォルニア州カマリロ（Ｃａｍａｒｉｌｌｏ，ＣＡ）のバイオソース（ＢＩＯＳＯＵＲＣＥ）を用いる酵素結合免疫吸着検定法用に５０μｌの上澄みを採取した。
【００９５】
細胞溶解活性のための好ましい検定法は、５１Ｃｒ放出検定法である。典型的な検定法では、γδＴ細胞の細胞溶解活性は、４時間の５１Ｃｒ放出検定法において、自己の正常および腫瘍標的細胞株、またはダウディ（Ｄａｕｄｉ）などの対照感受性標的細胞株およびラジ（Ｒａｊｉ）などの対照耐性標的細胞株に対して測定される。特定の例では、２×１０３細胞／ウェルの量の標的細胞を用い、１００μＣｉの５１Ｃｒで６０分間標識化した。エフェクター／標的（Ｅ／Ｔ）比は、３０：１〜３．７５：１の範囲であった。特異的な溶解（百分率で表される）は、標準式［（実験的な自然放出／全自然放出）×１００］を用いて計算される。
【００９６】
考察されるように、本発明の方法は、通常、γδＴ細胞活性を刺激することができるγδＴ細胞活性化剤と共に実行することができる。この刺激は、純粋なγδＴ細胞培養液中でγδＴ細胞を刺激することができる化合物を用いて以下で考察されるようなγδＴ細胞に対する直接的な影響によって行うこともできるし、あるいは、この刺激は、ＩＰＰの蓄積をもたらすビスホスホネートなどの薬剤を用いる治療のごとき間接的なメカニズムによって行うこともできる。好ましくは、γδＴ細胞活性化剤は、培養液中のγδＴ細胞クローン集団のγδＴ細胞の活性を調節することができる化合物である。好ましくは培養液中にγδＴ細胞活性化剤が１００ｍＭ未満の濃度で存在するときに、γδＴ細胞活性化剤は、γδＴ細胞クローンのγδＴ細胞集団の活性をミリモル濃度で調節することができる。任意選択的に、好ましくは培養液中にγδＴ細胞活性化剤が１０ｍＭ未満、あるいはより好ましくは１ｍＭ未満の濃度で存在するときに、γδＴ細胞活性化剤は、γδＴ細胞クローン集団のγδＴ細胞の活性をミリモル濃度で調節することができる。γδＴ細胞の活性の調節は、好ましくはサイトカインの分泌、最も好ましくは本明細書中に記載されるＴＮＦ−αの分泌を評価することによって、任意の適切な手段で評価することができる。純粋なγδＴ細胞クローンの集団を得るための方法は、ダボドー（Ｄａｖｏｄｅａｕ）ら（１９９３年）およびモロー（Ｍｏｒｅａｕ）ら（１９８６年）に記載されており、その開示は参照によって本明細書中に援用される。好ましくは、活性化剤は、培養液中のγδＴ細胞の数の少なくとも２０％、５０％またはそれ以上の増大、あるいはより好ましくは培養液中のγδＴ細胞の数の少なくとも２倍の増大を引き起こすことができる。
【００９７】
一の具体例では、活性化剤は、Ｖγ９Ｖδ２Ｔリンパ球を選択的に活性化することができる合成化学化合物であってもよい。Ｖγ９Ｖδ２Ｔリンパ球の選択的な活性化は、化合物が特定の細胞集団に対する選択作用を有することを示し、好ましくは、Ｖδ１Ｔ細胞などの他のＴ細胞型よりも速い速度でまたは大きい程度までＶγ９Ｖδ２Ｔ細胞の活性化を増大させるか、あるいは他のＴ細胞型を実質的に活性化しない。かかる選択性は、インビトロのＴ細胞活性化検定法において評価されうる。かかる選択性は、本出願で開示されるように、好ましい化合物がＶγ９Ｖδ２Ｔリンパ球の増殖または生物活性の選択的なまたは標的とされる活性化を引き起こし得ることを示唆する。
【００９８】
（好ましいリン酸化抗原）
好ましい具体例では、リン酸化抗原は式Ｉの化合物であり、特に式Ｉ〜ＩＩＩに従うγδＴ細胞活性化剤であり、特に、ＢｒＨＰＰ、ＣＢｒＨＰＰ、ＩＰＰ、ｅｐｏｘＰＰ、ＨＤＭＡＰＰ、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰ、Ｎ−ＨＤＭＡＰＰおよびＨ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰ（化合物Ａ〜Ｇ）からなる群から選択されるγδＴ細胞活性化剤である。本発明の構成上、「式Ｉ〜ＩＩＩ」という表現は、式Ｉ〜ＩＩＩから誘導される全ての化合物：Ｉ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ、ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧを指定する。最も好ましくは、この化合物は、ＢｒＨＰＰ、ＩＰＰ、ＨＤＭＡＰＰ、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰ、Ｎ−ＨＤＭＡＰＰおよびＨ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰからなるリストから選択される。しかしながら、あまり効力のないγδＴ細胞活性化剤であるリン酸化抗原化合物の多くが利用可能であることが認められ、本発明に用いられてもよい。例えば、１つの変形では、パミドロネート（独国ニュルンベルクのノバルティス（Ｎｏｖａｒｔｉｓ，Ｎｕｅｒｎｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ））またはゾレドロネートなどのビスホスホネート化合物が使用されてもよい。本発明で使用するためのその他のγδＴ細胞活性化剤は、国際公開第９５／２０６７３号パンフレットにおいて開示されるリン酸化抗原、イソペンテニルピロホスフェート（ＩＰＰ）（米国特許第５，６３９，６５３号明細書）（２つの上記文献の開示は、参照によって本明細書中に援用される）、ならびにアルキルアミン（例えば、エチルアミン、イソプロピルアミン（ｉｓｏ−ｐｒｏｐｙｕｌａｍｉｎｅ）、ｎ−プロピルアミン、ｎ−ブチルアミンおよびイソブチルアミンなど）である。イソブチルアミンおよび３−アミノプロピルホスホン酸は、アルドリッチ（Ａｌｄｒｉｃｈ）（イリノイ州シカゴ（Ｃｈｉｃａｇｏ，ＩＬ））から得られる。
【００９９】
一態様では、本発明によるリン酸化抗原は、式（Ｉ）：
【化１】
2009511449.tif 000002
［式中、
Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同一のまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
Ｙは、Ｏ−Ｃａｔ＋、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、またはより好ましくはＣ１〜Ｃ３アルキル基、基−Ｂ−Ｒ、あるいはヌクレオシド、オリゴヌクレオチド、核酸、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、単糖、オリゴ糖、多糖、脂肪酸、単純脂質、複合脂質、葉酸、テトラヒドロ葉酸、リン酸、イノシトール、ビタミン、補酵素、フラボノイド、アルデヒド、エポキシドおよびハロヒドリンからなる群から選択されるラジカルを表し、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２もしくはＣＨ２またはＲ１−Ｃ−Ｒ２（ここで、Ｒ１およびＲ２はＲのように定義されるが、それぞれ互いに独立して異なり得る）を表し、ならびに、
Ｒは、任意で少なくとも１つのへテロ原子で中断された線状、分枝状、または環式、芳香族もしくは非芳香族、飽和もしくは不飽和のＣ１〜Ｃ２０炭化水素基であり、前記炭化水素基は、アルキル、アルキレニル、アルキニル、エポキシアルキル、アリール、複素環、アルコキシ、アシル、アルコール、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、エステル、アミン、アミノ基（−ＮＨ２）、アミド（−ＣＯＮＨ２）、イミン、ニトリル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルデヒド基（−ＣＨＯ）、ハロゲン、ハロゲノアルキル、チオール（−ＳＨ）、チオアルキル、スルホン、スルホキシド、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される１つまたはいくつかの置換基により置換され得るアルキル、アルキレニル、アルキニル、好ましくはアルキルまたはアルキレンを含む。好ましくは、Ｒ１およびＲ２は、表１に示されるＲ１およびＲ２のいずれかのように定義される。］
の化合物を含む。
【０１００】
もう１つの態様では、本発明によるリン酸化抗原は、式（ＩＩ）：
【化２】
2009511449.tif 000003
［式中、
Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同一のまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは１〜３の整数であり、
ＡはＯ、ＮＨ、または加水分解されることが可能な任意の基であり、
ＹおよびＢは上記の意味を有する。］
の化合物を含む。
【０１０１】
「独立して」という用語は、本明細書において、独立して適用される変化が適用間で独立して変化することを示す。従って、「Ｒが炭素または窒素として独立して異なる」Ｒ−Ｃ−Ｒなどの化合物では、両方のＲが炭素、両方のＲが窒素、あるいは一方のＲが炭素および他方のＲが窒素であることが可能である。
【０１０２】
さらなる具体例において、本発明および特に結晶相の製造方法は、本明細書で特に言及されるものと構造的に関連する化合物と共に使用するのに適することが認識されるであろう。好ましい具体例では、本発明は、ヌクレオチドおよびヌクレオチド類似物または誘導物あるいはヌクレオチド様化合物ならびにビスホスホネート化合物も包含する。好ましい態様では、式ＩＩの化合物はビスホスホネート化合物であり、好ましくは式ＩＩａの化合物である。ビスホスホネート化合物は、好ましくは、式（ＩＩａ）：
【化３】
2009511449.tif 000004
の構造を含む。
【０１０３】
好ましくは、Ｒ１およびＲ２は、表１に示されるＲ１およびＲ２のいずれかのように定義される。
【表１】
2009511449.tif 000005
【０１０４】
好ましくは、ビスホスホネート型の化合物は、以下の化合物またはその医薬上許容される塩またはその水和物：３−アミノ−１−ヒドロキシプロパン−１，１−ジホスホン酸（パミドロン酸）、例えばパミドロネート（ＡＰＤ）と、３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−１−ヒドロキシプロパン−１，１−ジホスホン酸、例えばジメチル−ＡＰＤと、４−アミノ−１−ヒドロキシブタン−１，１−ジホスホン酸（アレンドロン酸）、例えばアレンドロネートと、１−ヒドロキシ−エチデン−ビスホスホン酸、例えばエチドロネートと、１−ヒドロキシ−３−（メチルペンチルアミノ）−プロピリデン−ビスホスホン酸、イバンドロン酸、例えばイバンドロネートと、６−アミノ−１−ヒドロキシヘキサン−１，１−ジホスホン酸、例えばアミノ−ヘキシル−ＢＰと、３−（Ｎ−メチル−Ｎ−ペンチルアミノ）−１−ヒドロキシプロパン−１，１−ジホスホン酸、例えばメチル−ペンチル−ＡＰＤ（＝ＢＭ２１．０９５５）と、１−ヒドロキシ−２−（イミダゾール−１イル）エタン−１，１−ジホスホン酸と、１−ヒドロキシ−２−（３−ピリジニル）エタン−１，１−ジホスホン酸（リセドロン酸）、例えばリセドロネート（ＮＥ−１０２４４またはＮＥ−１０４４６などのそのＮ−メチルピリジニウム塩、例えばＮ−メチルピリジニウムヨージドを含む）と、１−（４−クロロフェニルチオ）メタン−１，１−ジホスホン酸（チルドロン酸）、例えばチルドロネートと、３−［Ｎ−（２−フェニルチオエチル）−Ｎ−メチルアミノ］−１−ヒドロキシプロパン−１，１−ジホスホン酸と、１−ヒドロキシ−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１，１−ジホスホン酸、例えばＥＢ１０５３（レオ（Ｌｅｏ））と、１−（Ｎ−フェニルアミノチオカルボニル）メタン−１，１−ジホスホン酸、例えばＦＲ７８８４４（フジサワ（Ｆｕｊｉｓａｗａ））と、５−ベンゾイル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラゾール−３，３−ジホスホン酸テトラエチルエステル、例えばＵ−８１５８１（アップジョン（Ｕｐｊｏｈｎ））と、１−ヒドロキシ−２−（イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル）エタン−１，１−ジホスホン酸、例えばＹＭ５２９と、１，１−ジクロロメタン−１，１−ジホスホン酸（クロドロン酸）、例えばクロドロネートとからなる群から選択される。好ましくは、ビスホスホネートは、γδＴ細胞の活性化をもたらす化合物である。商品化されたビスホスホネートの例は、各分子についてのＲ１およびＲ２の同一性を含む上記の表１に示される。
【０１０５】
ヌクレオチドおよびヌクレオチド類似物または誘導物あるいはヌクレオチド様化合物はまた、本発明の方法に適合することが予想される。「ヌクレオチド」という用語は、リン酸基および交換可能な有機塩基（置換ピリミジン（例えば、シトシン（Ｃ）、チミン（Ｔ）またはウラシル（Ｕ））または置換プリン（例えば、アデニン（Ａ）またはグアニン（Ｇ））のいずれかである）に結合した糖（例えば、リボースまたはデオキシリボース）を含む分子を指すために使用される。ヌクレオチドはまた、Ｃ５−プロピン、ピリミジンおよび７−デアザ−７−置換プリン修飾塩基などの置換プリンおよびピリミジンも含む（ワーグナー（Ｗａｇｎｅｒ）ＲＷら（１９９６年）Ｎａｔ；Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  １４：８４０−４頁）。プリンおよびピリミジンは、アデニン、シトシン、グアニン、チミン、およびウラシル、ならびに他の天然に存在するおよび天然に存在しない核酸塩基、置換および非置換の芳香族部分を含むが、これらだけに限定されない。「ヌクレオチド」という用語は、１つ、２つまたは３つのリン酸基を有するヌクレオチド（例えば、１つ、２つまたは３つのリン酸基を有するヌクレオシド）、および他の有機塩基を含有するポリマーも含むものとし、例えば、ｄＡＴＰ、ｄＣＴＰ、ｄＩＴＰ、ｄＵＴＰ、ｄＧＴＰ、ｄＴＴＰなどのデオキシリボヌクレオシドトリホスフェート、ｄＡＤＰ、ｄＣＤＰ、ｄＩＤＰ、ｄＵＤＰ、ｄＧＤＰ、ｄＴＤＰなどのデオキシリボヌクレオシドジホスフェートｄＡＭＰ、ｄＣＭＰ、ｄＩＭＰ、ｄＵＭＰ、ｄＧＭＰ、ｄＴＭＰなどのデオキシリボヌクレオシドモノホスフェート、ならびに例えば［αＳ］ｄＡＴＰ、７−デアザ−ｄＧＴＰおよび７−デアザ−ｄＡＴＰが含まれる。本明細書中で使用される「ヌクレオチド」という用語は、リボヌクレオシドトリホスフェート（例えば、ｒＮＴＰ）、ジホスフェートおよびモノホスフェート（ｍｏｎｏｐｈｏｓｐａｇｅ）およびこれらの誘導物も指す。リボヌクレオシドトリホスフェートの例には、ＡＴＰ、ＣＴＰ、ＧＴＰ、ＩＴＰおよびＵＴＰが含まれるが、これらだけに限定されない。修飾塩基は、Ｔ、Ｃ、Ｇ、ＡおよびＵなどのＤＮＡおよびＲＮＡにおいて通常見られる天然に存在する塩基とは化学的に異なるが、これらの天然に存在する塩基と基本的な化学構造を共有する塩基である。修飾ヌクレオシド塩基は、例えば、ヒポキサンチン、ウラシル、ジヒドロウラシル、偽ウラシル、２−チオウラシル、４−チオウラシル、５−アミノウラシル、５−（Ｃ２〜Ｃ６）−アルキルウラシル、５−（Ｃ２〜Ｃ６）−アルケニルウラシル、５−（Ｃ２〜Ｃ６）−アルキニルウラシル、５−（ヒドロキシメチル）ウラシル、５−クロロウラシル、５−フルオロウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヒドロキシシトシン、５−（Ｃ２〜Ｃ６）−アルキルシトシン、５−（Ｃ２〜Ｃ６）−アルケニルシトシン、５−（Ｃ２〜Ｃ６）−アルキニルシトシン、５−クロロシトシン、５−フルオロシトシン、５−ブロモシトシン、（Ｎ）−２−ジメチルグアニン、２，４−ジアミノ−プリン、８−アザプリン、置換７−デアザプリン、好ましくは７−デアザ−７−置換および／または７−デアザ−８−置換プリン、５−ヒドロキシメチルシトシン、（��）−４−アルキルシトシン、例えば（Ｎ）−４−エチルシトシン、５−ヒドロキシデオキシシチジン、（Ｓ）−ヒドロキシメチルデオキシシチジン、（Ｎ）−４−アルキルデオキシシチジン、例えば（Ｎ）−４−エチルデオキシシチジン、６−チオデオキシグアノシン、ならびにニトロピロール、Ｃ５−プロピニルピリミジンおよびジアミノプリンのデオキシリボヌクレオシド、例えば、２，６−ジアミノプリン、イノシン、５−メチルシトシン、２−アミノプリン、２−アミノ−６−クロロプリン、ヒポキサンチンまたは天然ヌクレオシド塩基の他の修飾体から選択することができる。
【０１０６】
従って、ヌクレオシドまたはヌクレオシド類似物が少なくとも１つのリン酸を含む限りは、一般的には、ヌクレオシドおよびヌクレオシド類似物を本発明により使用することができる。例えば、ＡＮＡ３１７（ＬＢ８０３１７）およびそのエステルプロドラッグ版のＬＢ８０３８０／ＡＮＡ３８０は、グアノシン一リン酸のリン酸ヌクレオシド類似物である。別の例は、ホスホノメトキシエチルプリンのヌクレオシド類似誘導物のＭＣＣ−４７８（ＬＹ５８２５６３）である。ＭＣＣ０４７８は、２−アミノ−９−［２−（ホスホノメトキシ）エチル］−６−（４−メトキシフェニルチオ）プリンビス（２，２，２−トリフルオロエチル）エステルの構造を有し、野生型およびラミブジン耐性ＨＢＶの治療において有用であった。さらにもう１つの例は、アデホビルジピボキシル（Ａｄｅｆｏｖｉｒ  Ｄｉｐｉｖｏｘｉｌ）である。アデホビルジピボキシルはｄＡＭＰの非環式類似物である。ＭＣＣ−４７８（Ａ）およびアデホビル（Ｂ）の化学構造は、キオコ・オノ−ニタ（Ｋｉｏｋｏ  Ｏｎｏ−Ｎｉｔａ）ら，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，２００２年８月，２６０２−２６０５頁，４６巻，８号に開示されており、化合物の化学構造および特性の開示は出典明示により本明細書中に援用される。さらにもう１つの例は、フマル酸テノホビルジソプロキシルである。テノホビルは、アデホビルジピボキシルと近い化学的な類似性を有するＨＢＶポリメラーゼおよびＨＩＶ逆転写酵素の非環式ヌクレオチド阻害薬である。リン酸を含有するように修飾され得る類似物の例は、例えば、ラミブジン、エンテカビル、エムトリシタビン、エルブチタビン（Ｅｌｖｕｃｉｔａｂｉｎｅ）および２’，３’−ジデオキシ−３’−フルオログアノシン（ＦＬＧ）を含むことができる。エンテカビルはＨＢＶの複製を選択的に阻害するシクロペンチルグアノシン類似物であり、エムトリシタビン（ＦＴＣ）はフッ素化シトシン類似物（ビリッヒ（Ｂｉｌｌｉｃｈ）Ａ，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ．２００１年５月，２（５）：６１７−２１頁）であり、エルブチタビンはＬ−立体配置のシチジン類似物であり、２’，３’−ジデオキシ−３’−フルオログアノシン（ＦＬＧ）は、ＨＩＶ−１およびＨＢＶの両方に阻害性であるデオキシグアノシン類似物である。その他の例としては、Ｌ−ヌクレオシド類似物、Ｌ−デオキシチミジン（ＬｄＴ；テルビブジン）およびバリル−Ｌ−デオキシシチジン（ｖａｌ−ＬｄＣ、バルトルチタビン（ｖａｌｔｏｒｃｉｔａｂｉｎｅ））があり、ＨＢＶの複製の強力で選択性の阻害薬の非常に有望な化合物である。さらなる例としては、イミダゾキノリンアミン、イミキモッド（化学名１−（２−アミノ−２−メチルプロピル）−２−（エトキシメチル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたは４−アミノ−１−イソブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン、ブロピリミン、イミダゾキノリンおよびイサトリビン（ｉｓａｔｏｒｉｂｉｎｅ）、特に、ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）介在のシグナル伝達を介して少なくともＮＫ細胞および／または樹状細胞を直接刺激するものが挙げられる。核酸を基とする��合物の例は、ＴＬＲ９を介して作用するＣｐＧオリゴヌクレオチドのごとき他のＴＬＲ受容体を介在して作用すると考えられる。さらなる例として、ロキソリビン（ｌｏｘｏｒｉｂｉｎｅ）（７−アリル−８−オキソグアノシン）などのグアノシン類似物が挙げられる。ポープ（Ｐｏｐｅ）ら，Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １９９５年，１６２：２（３３３−３３９頁）およびポープ（Ｐｏｐｅ）ら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １９９３年，１５１：６（３００７−３０１７頁。
【０１０７】
本発明による使用のための好ましいリン酸化抗原のさらなる例は、式（ＩＩＩ）：
【化４】
2009511449.tif 000006
［式中、
Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同一のまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは１〜３の整数であり、
ＡはＯ、ＮＨ、または加水分解されることが可能な任意の基であり、
Ｙは、Ｏ−Ｃａｔ＋、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、基−Ｂ−Ｒ、またはヌクレオシド、オリゴヌクレオチド、核酸、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、単糖、オリゴ糖、多糖、脂肪酸、単純脂質、複合脂質、葉酸、テトラヒドロ葉酸、リン酸、イノシトール、ビタミン、補酵素、フラボノイド、アルデヒド、エポキシドおよびハロヒドリンからなる群から選択されるラジカルを表し、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２であり、ならびに
Ｒは、任意で少なくとも１つのへテロ原子で中断された線状、分枝状、または環式、芳香族または非芳香族、飽和または不飽和のＣ１〜Ｃ２０炭化水素基であり、前記炭化水素基は、アルキル、アルキレニル、アルキニル、エポキシアルキル、アリール、複素環、アルコキシ、アシル、アルコール、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、エステル、アミン、アミノ基（−ＮＨ２）、アミド（−ＣＯＮＨ２）、イミン、ニトリル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルデヒド基（−ＣＨＯ）、ハロゲン、ハロゲノアルキル、チオール（−ＳＨ）、チオアルキル、スルホン、スルホキシド、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される１つまたはいくつかの置換基により置換され得るアルキル、アルキレニル、またはアルキニル、好ましくはアルキルまたはアルキレンを含む。最も好ましくは、前記リン酸化抗原化合物はγδＴ細胞活性化剤である。］
を含む。
【０１０８】
本発明による使用のために開示される式のいずれかの特定の具体例では、上記で定義されるごとき置換基は、上記で特定されるごとき置換基のうちの少なくとも１つにより置換される。
【０１０９】
好ましくは、置換基は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキレニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、（Ｃ２〜Ｃ６）エポキシアルキル、アリール、複素環、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ２〜Ｃ６）アシル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコール、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、（Ｃ２〜Ｃ６）エステル、（Ｃ１〜Ｃ６）アミン、アミノ基（−ＮＨ２）、アミド（−ＣＯＮＨ２）、（Ｃ１〜Ｃ６）イミン、ニトリル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルデヒド基（−ＣＨＯ）、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロゲノアルキル、チオール（−ＳＨ）、（Ｃ１〜Ｃ６）チオアルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）スルホン、（Ｃ１〜Ｃ６）スルホキシド、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０１１０】
さらにより好ましくは、置換基は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）エポキシアルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキレニル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ２〜Ｃ６）アシル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコール、（Ｃ２〜Ｃ６）エステル、（Ｃ１〜Ｃ６）アミン、（Ｃ１〜Ｃ６）イミン、ヒドロキシル、アルデヒド基、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロゲノアルキル、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０１１１】
さらにより好ましくは、置換基は、（Ｃ３〜Ｃ６）エポキシアルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、（Ｃ２〜Ｃ３）エステル、（Ｃ１〜Ｃ３）アミン、（Ｃ１〜Ｃ３）イミン、ヒドロキシル、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）ハロゲノアルキル、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される。好ましくは、Ｒは（Ｃ３〜Ｃ２５）炭化水素基であり、より好ましくは（Ｃ５〜Ｃ１０）炭化水素基である。
【０１１２】
本発明との関連では、「アルキル」という用語は、より具体的には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシル、エイコシル、ヘンエイコシル、ドコシル、およびこれらのその他の異性体などの基を意味する。（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルは、より具体的には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、およびこれらのその他の異性体を意味する。（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルは、より具体的には、メチル、エチル、プロピル、またはイソプロピルを意味する。
【０１１３】
「アルケニル」という用語は少なくとも１つの不飽和エチレン結合を有する上記で定義したアルキル基を指し、「アルキニル」という用語は少なくとも１つの不飽和アセチレン結合を有する上記で定義したアルキル基を指す。（Ｃ２〜Ｃ６）アルキレンは、エテニル、プロペニル（１−プロペニルまたは２−プロペニル）、１−または２−メチルプロペニル、ブテニル（１−ブテニル、２−ブテニル、または３−ブテニル）、メチルブテニル、２−エチルプロペニル、ペンテニル（１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル）、ヘキセニル（１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、４−ヘキセニル、５−ヘキセニル）、およびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニルは、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、４−ヘキシニル、または５−ヘキシニルおよびこれらの他の異性体を含む。
【０１１４】
「エポキシアルキル」という用語は、エポキシド基を有する上記で定義したアルキル基を指す。より詳しくは、（Ｃ２〜Ｃ６）エポキシアルキルは、エポキシエチル、エポキシプロピル、エポキシブチル、エポキシペンチル、エポキシヘキシル、およびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ２〜Ｃ３）エポキシアルキルは、エポキシエチルおよびエポキシプロピルを含む。
【０１１５】
「アリール」基は、６〜１８個の炭素原子を有する単環式、二環式または三環式芳香族炭化水素である。例としては、特に、フェニル、α−ナフチル、β−ナフチルまたはアントラセニル基が挙げられる。
【０１１６】
「複素環」基は、１またはそれ以上のへテロ原子、好ましくは１〜５個の環内へテロ原子を含む５〜８個の環を含有する基である。これらは、単環式、二環式または三環式でよい。これらは芳香族でもそうでなくてもよい。好ましくは、Ｒ５においてより具体的には、これらは芳香族複素環である。芳香族複素環の例としては、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、フラン、チオフェン、ピロール、オキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、イミダゾール、ピラゾール、オキサジアゾール、トリアゾール、チアジアゾールおよびトリアジン基が挙げられる。二環式の例としては、特に、キノリン、イソキノリンおよびキナゾリン基（２つの６員環）ならびにインドール、ベンゾイミダゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾールおよびインダゾール（６員環および５員環）が挙げられる。非芳香族複素環は、特にピペラジン、ピペリジンなどを含む。
【０１１７】
「アルコキシ」基は、−Ｏ−（エーテル）結合によって分子に結合された上記で定義したアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ブチルオキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシおよびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、およびイソプロピルオキシを含む。
【０１１８】
「アシル（Ａｌｃｙｌ）」基は、−ＣＯ−（カルボニル）基によって分子に結合された上記で定義したアルキル基に相当する。（Ｃ２〜Ｃ６）アシルは、アセチル、プロピルアシル、ブチルアシル、ペンチルアシル、ヘキシルアシルおよびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ２〜Ｃ３）アシルは、アセチル、プロピルアシルおよびイソプロピルアシルを含む。
【０１１９】
「アルコール」基は、少なくとも１つのヒドロキシル基を含有する上記で定義したアルキル基に相当する。アルコールは、第１級、第２級または第３級であり得る。（Ｃ１〜Ｃ６）アルコールは、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、ヘキサノールおよびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）アルコールは、メタノール、エタノール、プロパノールおよびイソプロパノールを含む。
【０１２０】
「エステル」基は、−ＣＯＯ−（エステル）結合によって分子に結合された上記で定義したアルキル基に相当する。（Ｃ２〜Ｃ６）エステルは、メチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、ブチルエステル、ペンチルエステルおよびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ２〜Ｃ３）エステルは、メチルエステルおよびエチルエステルを含む。
【０１２１】
「アミン」基は、−Ｎ−（アミン）結合によって分子に結合された上記で定義したアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）アミンは、メチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、ブチルアミン、ペンチルアミン、ヘキシルアミンおよびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）アミンは、メチルアミン、エチルアミン、およびプロピルアミンを含む。
【０１２２】
「イミン」基は、（−Ｃ＝Ｎ−）結合を有する上記で定義したアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）イミンは、メチルイミン、エチルイミン、プロピルイミン、ブチルイミン、ペンチルイミン、ヘキシルイミンおよびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）イミンは、メチルイミン、エチルイミン、およびプロピルイミンを含む。
【０１２３】
ハロゲンは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＦ、より好ましくはＢｒまたはＦであり得る。
【０１２４】
「ハロゲノアルキル」基は、少なくとも１つのハロゲンを有する上記で定義したアルキル基に相当する。この基は、モノハロゲン化またはポリハロゲン化（同一のまたは異なるハロゲン原子を含有する）され得る。例えば、この基は、トリフルオロアルキル（ＣＦ３−Ｒ）であり得る。（Ｃ１〜Ｃ６）ハロゲノアルキルは、ハロゲノメチル、ハロゲノエチル、ハロゲノプロピル、ハロゲノブチル、ハロゲノペンチル、ハロゲノヘキシルおよびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）ハロゲノアルキルは、ハロゲノメチル、ハロゲノエチル、およびハロゲノプロピルを含む。
【０１２５】
「チオアルキル」基は、−Ｓ−（チオエーテル）結合によって分子に結合された上記で定義したアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）チオアルキルは、チオメチル、チオエチル、チオプロピル、チオブチル、チオペンチル、チオヘキシルおよびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）チオアルキルは、チオメチル、チオエチル、およびチオプロピルを含む。
【０１２６】
「スルホン」基は、−ＳＯＯ−（スルホン）結合によって分子に結合された上記で定義したアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）スルホンは、メチルスルホン、エチルスルホン、プロピルスルホン、ブチルスルホン、ペンチルスルホン、ヘキシルスルホンおよびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）スルホンは、メチルスルホン、エチルスルホンおよびプロピルスルホンを含む。
【０１２７】
「スルホキシド」基は、−ＳＯ−（スルホキシド）基によって分子に結合された上記で定義したアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）スルホキシドは、メチルスルホキシド、エチルスルホキシド、プロピルスルホキシド、ブチルスルホキシド、ペンチルスルホキシド、ヘキシルスルホキシドおよびこれらの他の異性体を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）スルホキシドは、メチルスルホキシド、エチルスルホキシド、プロピルスルホキシドおよびイソプロピルスルホキシドを含む。
【０１２８】
「へテロ原子」は、Ｎ、Ｓ、またはＯを示す。
【０１２９】
「ヌクレオシド」は、複素環の特定の位置、あるいはプリン（９−位）またはピリミジン（１−位）の天然の位置、あるいは類似物の同等の位置に結合されたペントースまたは変性ペントース部分で構成される化合物を指す。ヌクレオシドという用語は、アデノシン、チミン、ウリジン、シチジンおよびグアノシンを含むが、これらだけに限定されない。
【０１３０】
特定の具体例において、炭化水素基は、シクロペンタジエンまたはフェニルなどのシクロアルキレニル、あるいはフラン、ピロール、チオフェン、チアゾール、イミダゾール、トリアゾール、ピリジン、ピリミジン、ピラン、またはピラジンなどの複素環である。好ましくは、シクロアルキレニルまたは複素環は、シクロペンタジエン、ピロールまたはイミダゾールからなる群から選択される。特定の具体例では、シクロアルキレニルまたは複素環は、アルコールによって置換される。好ましくは、前記アルコールは（Ｃ１〜Ｃ３）アルコールである。
【０１３１】
別の具体例では、炭化水素基は、１つまたはいくつかの二重結合を有するアルキレニルである。好ましくは、アルキレニル基は１つの二重結合を有する。好ましくは、アルキレニル基は（Ｃ３〜Ｃ１０）アルキレニル基であり、より好ましくは（Ｃ４〜Ｃ７）アルキレニル基である。好ましくは、前記アルキレニル基は少なくとも１つの官能基によって置換される。より好ましくは、官能基は、ヒドロキシ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、アルデヒド、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルからなる群から選択される。より好ましい具体例では、炭化水素基は、基−ＣＨ２ＯＨによって置換されたブテニルである。任意選択的に、前記アルケニル基はアイソフォームのトランス（Ｅ）またはシス（Ｚ）でよく、より好ましくはトランスアイソフォーム（Ｅ）である。最も好ましい具体例では、アルキレニル基は、（Ｅ）−４−ヒドロキシ−３−メチル−２−ブテニルである。他の好ましい具体例では、アルキレニル基はイソペンテニル、ジメチルアリルアリルまたはヒドロキシジメチルアリルである。
【０１３２】
さらなる具体例では、炭化水素基は、アシルにより置換されたアルキル基である。より好ましくは、炭化水素基は、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルによって置換された（Ｃ４〜Ｃ７）アルキル基である。
【０１３３】
さらに好ましい具体例では、リン酸化抗原は式（ＩＩＩａ）：
【化５】
2009511449.tif 000007
［式中、
Ｒ２は、ハロゲン化（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ハロゲン化（Ｃ２〜Ｃ３）アシルまたは（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−（Ｃ２〜Ｃ３）アシルであり、
Ｒ１は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基であり、
ｍは、１〜３の整数であり、
ｎは、２〜２０の整数であり、
Ａは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解されることが可能な任意の基を表し、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２を表し、
Ｙは、Ｏ−Ｃａｔ＋、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、基−Ｂ−Ｒ、またはヌクレオシド、オリゴヌクレオチド、核酸、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、単糖、オリゴ糖、多糖、脂肪酸、単純脂質、複合脂質、葉酸、テトラヒドロ葉酸、リン酸、イノシトール、ビタミン、補酵素、フラボノイド、アルデヒド、エポキシドおよびハロヒドリンからなる群から選択されるラジカルを表し、
Ｒは、任意選択的に少なくとも１つのへテロ原子により中断された、線状、分枝状、または環式、芳香族または非芳香族、飽和または不飽和のＣ１〜Ｃ５０炭化水素基であり、前記炭化水素基は、アルキル、アルキレニル、アルキニル、エポキシアルキル、アリール、複素環、アルコキシ、アシル、アルコール、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、エステル、アミン、アミノ基（−ＮＨ２）、アミド（−ＣＯＮＨ２）、イミン、ニトリル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルデヒド基（−ＣＨＯ）、ハロゲン、ハロゲノアルキル、チオール（−ＳＨ）、チオアルキル、スルホン、スルホキシド、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される１つまたはいくつかの置換基により置換され得るアルキル、アルキレニル、またはアルキニル、好ましくはアルキルまたはアルキレンを含む。最も好ましくは、前記リン酸化抗原化合物はγδＴ細胞活性化剤であり、ならびに
Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同一のまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表す。］
を有する。
【０１３４】
好ましくは、Ｒ２は、ハロゲン化メチル（−ＣＨ２−Ｘ、Ｘはハロゲン）、ハロゲン化（Ｃ２〜Ｃ３）アセチル、または（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−アセチルである。ハロゲン化メチルまたはアセチルは、モノ−、ジ−、またはトリ−ハロゲン化であり得る。より好ましくは、Ｒ２はＣＨ２−Ｘ基であり、Ｘはハロゲン原子を表す。好ましくは、Ｒ１はメチルまたはエチル基である。より好ましくは、Ｒ１はメチルである。好ましくは、ＡはＯであり、そしてＢはＯまたはＣＨ２である。好ましくは、ｎは２〜１０、または２〜５の整数である。より好ましい具体例では、ｎは２である。好ましくは、ｍは１または２である。より好ましくは、ｍは１である。好ましくは、Ｙは、Ｏ−Ｃａｔ＋またはヌクレオシドである。より好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。
【０１３５】
最も好ましい具体例では、ｎは２であり、Ｒ１はメチルであり、Ｒ２は、ハロゲン化メチル、より好ましくはモノハロゲン化メチル、さらにより好ましくは臭化メチルである。特に好ましい具体例では、ｎは２であり、Ｒ１はメチルであり、Ｒ２は臭化メチルである。最も好ましい具体例では、Ｒは３−（ブロモメチル）−３−ブタノール−１−イルである。
【０１３６】
もう１つの具体例では、Ｒ２はＣＨ２−Ｘ基であり、ＡおよびＢはＯを表す。
【化６】
2009511449.tif 000008
【０１３７】
もう１つの具体例では、Ｒ２はＣＨ２−Ｘ基であり、ＡはＯを表し、ＢはＣＨ２を表す。
【化７】
2009511449.tif 000009
ここで、Ｒ１、Ｘ、ｎ、ｍ、ＹおよびＣａｔ＋は上記の意味を有する。
【０１３８】
一の好ましい具体例では、リン酸化抗原は、式（ＩＩＩａ３）：
【化８】
2009511449.tif 000010
［式中、
Ｘはハロゲン（好ましくは、Ｉ、ＢｒおよびＣｌから選択される）であり、Ｒ１はメチルまたはエチル基であり、Ｃａｔ＋は１つの（またはいくつかの、同一のまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、ｎは２〜２０の整数である。好ましくは、Ｒ１はメチルである。好ましくは、ｎは２である。好ましくは、Ｘは臭化物である。］
の化合物を含む。
【０１３９】
最も好ましい具体例では、リン酸化抗原は、式（Ａ）：
【化９】
2009511449.tif 000011
の化合物を含む。好ましくは、ｘＣａｔ＋は１個または２個のＮａ＋である。
【０１４０】
別の最も好ましい具体例では、リン酸化抗原は、式（Ｂ）：
【化１０】
2009511449.tif 000012
の化合物を含む。好ましくは、ｘＣａｔ＋は１個または２個のＮａ＋である。
【０１４１】
さらに好ましい具体例では、リン酸化抗原は、式（ＩＩＩｂ）：
【化１１】
2009511449.tif 000013
［式中、
ｎは、２〜２０の整数であり、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｒ１は、メチルまたはエチル基であり、
Ａは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解可能な任意の基を表し、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２を表し、
Ｙは、Ｏ−Ｃａｔ＋、ヌクレオシド、またはラジカル−Ｂ−Ｒであり、ここで、Ｒは上記の意味を有し、ならびに
Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同一のまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表す。］
を有する。
【０１４２】
好ましくは、ｎは２〜１０、または２〜５の整数である。より好ましい具体例では、ｎは２である。好ましくは、Ｒ１はメチルである。好ましくは、Ｙは、Ｏ−Ｃａｔ＋、またはヌクレオシドである。より好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。好ましくは、ＢはＯ、ＮＨまたはＣＨ２である。より好ましくは、ＢはＯである。好ましくは、ＡはＯである。好ましくは、ｍは１または２である。より好ましくは、ｍは１である。
【０１４３】
例えば、リン酸化抗原は、式（ＩＩＩｂ１）または（ＩＩＩｂ２）：
【化１２】
2009511449.tif 000014
［式中、
Ｒ１、ｎ、ｍ、ＹおよびＣａｔ＋は上記の意味を有する。］
の化合物を含んでもよい。
【０１４４】
別の好ましい具体例では、リン酸化抗原は、式（ＩＩＩｂ３）：
【化１３】
2009511449.tif 000015
［式中、
Ｒ１はメチルまたはエチル基であり、ＣＡＴ＋は１つの（またはいくつかの、同一のまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、ｎは２〜２０の整数である。好ましくは、Ｒ１はメチルである。好ましくは、ｎは２である。］
の化合物を含む。
【０１４５】
別の好ましい具体例では、リン酸化抗原は、式（Ｃ）：
【化１４】
2009511449.tif 000016
の化合物を含む。好ましくは、ｘＣａｔ＋は、１個または２個のＮａ＋である。
【０１４６】
さらに好ましい具体例では、リン酸化抗原は、式（ＩＩＩｃ）：
【化１５】
2009511449.tif 000017
［式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ７は、互いに独立して水素原子または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基を表し、
Ｒ６は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルであり、
Ｗは、−ＣＨ−、−Ｎ−または−Ｃ−Ｒ７であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２であり、
Ａは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解可能な任意の基を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｙは、Ｏ−Ｃａｔ＋、ヌクレオシド、またはラジカル−Ｂ−Ｒであり、ここでＲは上記の意味を有し、
Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同一のまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表す。］
を有する。
【０１４７】
より好ましくは、Ｒ３およびＲ５はメチルであり、Ｒ４は水素である。より好ましくは、Ｒ６は−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ−ＣＨ３または−ＣＯ−ＯＣＨ３である。任意選択的に、ＷとＣの間の二重結合は、トランス（Ｅ）またはシス（Ｚ）のコンホメーションである。より好ましくは、ＷとＣの間の二重結合は、トランス（Ｅ）のコンホメーションである。
【０１４８】
基Ｙは、プロドラッグの設計を可能にし得る。そのため、Ｙは、目的の特定領域で切断され得る酵素分解性の（ｅｎｚｙｍｏｌａｂｉｌｅ）基である。基Ｙは標的基であってもよい。好ましい具体例では、Ｙは、Ｏ−Ｃａｔ＋、基−Ｂ−Ｒ、あるいは、ヌクレオシド、単糖、エポキシドおよびハロヒドリンからなる群から選択されるラジカルである。好ましくは、Ｙは酵素分解性の基である。好ましくは、Ｙは、Ｏ−Ｃａｔ＋、基−Ｂ−Ｒ、またはヌクレオシドである。第一の好ましい具体例では、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。第二の好ましい具体例では、Ｙはヌクレオシドである。
【０１４９】
好ましい具体例では、Ｃａｔ＋は、Ｈ＋、Ｎａ＋、ＮＨ４＋、Ｋ＋、Ｌｉ＋、（ＣＨ３ＣＨ２）３ＮＨ＋である。
【０１５０】
好ましい具体例では、ＡはＯまたはＮＨである。より好ましくは、ＡはＯである。
【０１５１】
好ましい具体例では、ＢはＯ、ＮＨまたはＣＨ２である。
【０１５２】
好ましい具体例では、ｍは１または２である。より好ましくは、ｍは１である。
【０１５３】
もう１つの実施例では、リン酸化抗原は、式（ＩＩＩｃ１）または（ＩＩＩｃ２）：
【化１６】
2009511449.tif 000018
［式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｗ、ｍ、ＹおよびＣａｔ＋は、上記の意味を有する。］
の化合物を含む。
【０１５４】
好ましい具体例では、Ｗは−ＣＨ−である。好ましくは、Ｒ３およびＲ４は水素である。好ましくは、Ｒ５はメチルである。好ましくは、Ｒ６はーＣＨ２−ＯＨである。
【０１５５】
別の好ましい具体例では、リン酸化抗原は、式（Ｄ）：
【化１７】
2009511449.tif 000019
の化合物を含む。
【０１５６】
さらに別の好ましい具体例では、酸化抗原は、式（Ｅ）：
【化１８】
2009511449.tif 000020
の化合物を含む。
【０１５７】
さらに別の好ましい具体例では、リン酸化抗原は、式（Ｆ）：
【化１９】
2009511449.tif 000021
の化合物を含む。
【０１５８】
もう１つの例では、リン酸化抗原は、式（ＩＩＩｃ３）：
【化２０】
2009511449.tif 000022
［式中、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＢは上記で言及した意味を有する。］
の化合物を含む。
【０１５９】
好ましくは、Ｒ３およびＲ４は水素である。好ましくは、Ｒ６およびＲ７はメチルである。好ましくは、Ｒ５は−ＣＨ２−ＯＨである。好ましくは、ＢはＣＨ２、ＮＨまたはＯである。
【０１６０】
好ましい具体例では、リン酸化抗原は、式：
【化２１】
2009511449.tif 000023
の化合物を含む。
【０１６１】
化合物の特定の例はまた、（Ｅ）１−ピロホスホノブタ−１，３−ジエン、（Ｅ）１−ピロホスホノペンタ−１，３−ジエン、（Ｅ）１−ピロホスホノ−４−メチルペンタ−１，３−ジエン、（Ｅ，Ｅ）１−ピロホスホノ−４，８−ジメチルノナ−１，３，７−トリエン、（Ｅ，Ｅ，Ｅ）１−ピロホスホノ−４，８，１２−トリメチルトリデカ−１，３，７，１１−テトラエン、（Ｅ，Ｅ）１−トリホスホノ−４，８−ジメチルノナ−１，３，７−トリエン、４−トリホスホノ−２−メチルブテン、α，β−ジ−［３−メチルペンタ−３−エニル］−ピロホスホネート、１−ピロホスホノ−３−メチルブタ−２−エン、α，γ−ジ−［３−メチルブタ−２−エニル］−トリホスホネート、α，β−ジ−［３−メチルブタ−２−エニル］−ピロホスホネート、アリル−ピロホスホネート、アリル−トリホスホネート、α，γ−ジ−アリル−ピロホスホネート、α，β−ジ−アリル−トリホスホネート、（Ｅ，Ｅ）４−［（５’−ピロホスホノ−６’−メチル−ペンタ−２’，４’−ジエニルオキシメチル）−フェニル］−フェニル−メタノン、（Ｅ，Ｅ）４−［（５’−トリホスホノ−６’−メチル−ペンタ−２’，４’−ジエニルオキシメチル）−フェニル］−フェニル−メタノン、（Ｅ，Ｅ，Ｅ）［４−（９’−ピロホスホノ−２’，６’−ジメチル−ノナ−２’，６’，８’−トリエニルオキシメチル）−フェニル］−フェニル−メタノン、（Ｅ，Ｅ，Ｅ）［４−（９’−ピロホスホノ−２’，６’，８’−トリメチル−ノナ−２’，６’，８’−トリエニルオキシメチル）−フェニル］−フェニル−メタノン、５−ピロホスホノ−２−メチペンテン、５−トリホスホノ−２−メチペンテン、α，γ−ジ−［４−メチルペンタ−４−エニル］−トリホスホネート、５−ピロホスホノ−２−メチペンタ−２−エン、５−トリホスホノ−２−メチペンタ−２−エン、９−ピロホスホノ−２，６−ジメチノナ−２，６−ジエン、９−トリホスホノ−２，６−ジメチノナ−２，６−ジエン、α，γ−ジ−［４，８−ジメチルノナ−２，６−ジエニル］−トリホスホネート、４−ピロホスホノ−２−メチブテン、４−メチル−２−オキサ−ペンタ−４−エニルオキシメチルピロホスフェート、４−メチル−２−オキサ−ペンタ−４−エニルオキシメチルトリホスフェート、α，β−ジ−［４−メチル−２−オキサ−ペンタ−４−エニルオキシメチル］−ピロホスフェート、およびα，γ−ジ−［４−メチル−２−オキサ−ペンタ−４−エニルオキシメチル］−トリホスフェートを含む。
【０１６２】
他の特定の具体例では、リン酸化抗原は、３−（ハロメチル）−３−ブタノール−１−イル−ジホスフェート、３−（ハロメチル）−３−ペンタノール−１−イル−ジホスフェート、４−（ハロメチル）−４−ペンタノール−１−イル−ジホスフェート、４−（ハロメチル）−４−ヘキサノール−１−イル−ジホスフェート、５−（ハロメチル）−５−ヘキサノール−１−イル−ジホスフェート、５−（ハロメチル）−５−ヘプタノール−１−イル−ジホスフェート、６−（ハロメチル）−６−ヘプタノール−１−イル−ジホスフェート、６−（ハロメチル）−６−オクタノール−１−イル−ジホスフェート、７−（ハロメチル）−７−オクタノール−１−イル−ジホスフェート、７−（ハロメチル）−７−ノナノール−１−イル−ジホスフェート、８−（ハロメチル）−８−ノナノール−１−イル−ジホスフェート、８−（ハロメチル）−８−デカノール−１−イル−ジホスフェート、９−（ハロメチル）−９−デカノール−１−イル−ジホスフェート、９−（ハロメチル）−９−ウンデカノール−１−イル−ジホスフェート、１０−（ハロメチル）−１０−ウンデカノール−１−イル−ジホスフェート、１０−（ハロメチル）−１０−ドデカノール−１−イル−ジホスフェート、１１−（ハロメチル）−１１−ドデカノール−１−イル−ジホスフェート、１１−（ハロメチル）−１１−トリデカノール−１−イル−ジホスフェート、１２−（ハロメチル）−１２−トリデカノール−１−イル−ジホスフェート、１２−（ハロメチル）−１２−テトラデカノール−１−イル−ジホスフェート、１３−（ハロメチル）−１３−テトラデカノール−１−イル−ジホスフェート、１３−（ハロメチル）−１３−ペンタデカノール−１−イル−ジホスフェート、１４−（ハロメチル）−１４−ペンタデカノール−１−イル−ジホスフェート、１４−（ハロメチル）−１４−ヘキサデカノール−１−イル−ジホスフェート、１５−（ハロメチル）−１５−ヘキサデカノール−１−イル−ジホスフェート、１５−（ハロメチル）−１５−ヘプタデカノール−１−イル−ジホスフェート、１６−（ハロメチル）−１６−ヘプタデカノール−１−イル−ジホスフェート、１６−（ハロメチル）−１６−オクタデカノール−１−イル−ジホスフェート、１７−（ハロメチル）−１７−オクタデカノール−１−イル−ジホスフェート、１７−（ハロメチル）−１７−ノナデカノール−１−イル−ジホスフェート、１８−（ハロメチル）−１８−ノナデカノール−１−イル−ジホスフェート、１８−（ハロメチル）−１８−エイコサノール−１−イル−ジホスフェート、１９−（ハロメチル）−１９−エイコサノール−１−イル−ジホスフェート、１９−（ハロメチル）−１９−ヘンエイコサノール−１−イル−ジホスフェート、２０−（ハロメチル）−２０−ヘンエイコサノール−１−イル−ジホスフェート、２０−（ハロメチル）−２０−ドコサノール−１−イル−ジホスフェート、２１−（ハロメチル）−２１−ドコサノール−１−イル−ジホスフェート、および２１−（ハロメチル）−２１−トリコサノール−１−イル−ジホスフェートからなる群から選択されうる。
【０１６３】
より特定すると、リン酸化抗原は、３−（ブロモメチル）−３−ブタノール−１−イル−ジホスフェート（ＢｒＨＰＰ）、５−ブロモ−４−ヒドロキシ−４−メチルペンチルピロホスホネート（ＣＢｒＨＰＰ）、３−（ヨードメチル）−３−ブタノール−１−イル−ジホスフェート（ＩＨＰＰ）、３−（クロロメチル）−３−ブタノール−１−イル−ジホスフェート（ＣｌＨＰＰ）、３−（ブロモメチル）−３−ブタノール−１−イル−トリホスフェート（ＢｒＨＰＰＰ）、３−（ヨードメチル）−３−ブタノール−１−イル−トリホスフェート（ＩＨＰＰＰ）、α，γ−ジ−［３−（ブロモメチル）−３−ブタノール−１−イル］−トリホスフェート（ｄｉＢｒＨＴＰ）、およびα，γ−ジ−［３−（ヨードメチル）−３−ブタノール−１−イル］−トリホスフェート（ｄｉＩＨＴＰ）からなる群から選択されうる。
【０１６４】
別の特定の具体例では、リン酸化抗原は、３，４−エポキシ−３−メチル−１−ブチル−ジホスフェート（Ｅｐｏｘ−ＰＰ）、３，４，−エポキシ−３−メチル−１−ブチル−トリホスフェート（Ｅｐｏｘ−ＰＰＰ）、α，γ−ジ−３，４，−エポキシ−３−メチル−１−ブチル−トリホスフェート（ジ−Ｅｐｏｘ−ＴＰ）、３，４−エポキシ−３−エチル−１−ブチル−ジホスフェート、４，５−エポキシ−４−メチル−１−ペンチル−ジホスフェート、４，５−エポキシ−４−エチル−１−ペンチル−ジホスフェート、５，６−エポキシ−５−メチル−１−ヘキシル−ジホスフェート、５，６−エポキシ−５−エチル−１−ヘキシル−ジホスフェート、６，７−エポキシ−６−メチル−１−ヘプチル−ジホスフェート、６，７−エポキシ−６−エチル−１−ヘプチル−ジホスフェート、７，８−エポキシ−７−メチル−１−オクチル−ジホスフェート、７，８−エポキシ−７−エチル−１−オクチル−ジホスフェート、８，９−エポキシ−８−メチル−１−ノニル−ジホスフェート、８，９−エポキシ−８−エチル−１−ノニル−ジホスフェート、９，１０−エポキシ−９−メチル−１−デシル−ジホスフェート、９，１０−エポキシ−９−エチル−１−デシル−ジホスフェート、１０，１１−エポキシ−１０−メチル−１−ウンデシル−ジホスフェート、１０，１１−エポキシ−１０−エチル−１−ウンデシル−ジホスフェート、１１，１２−エポキシ−１１−メチル−１−ドデシル−ジホスフェート、１１，１２−エポキシ−１１−エチル−１−ドデシル−ジホスフェート、１２，１３−エポキシ−１２−メチル−１−トリデシル−ジホスフェート、１２，１３−エポキシ−１２−エチル−１−トリデシル−ジホスフェート、１３，１４−エポキシ−１３−メチル−１−テトラデシル−ジホスフェート、１３，１４−エポキシ−１３−エチル−１−テトラデシル−ジホスフェート、１４，１５−エポキシ−１４−メチル−１−ペンタデシル−ジホスフェート、１４，１５−エポキシ−１４−エチル−１−ペンタデシル−ジホスフェート、１５，１６−エポキシ−１５−メチル−１−ヘキサデシル−ジホスフェート、１５，１６−エポキシ−１５−エチル−１−ヘキサデシル−ジホスフェート、１６，１７−エポキシ−１６−メチル−１−ヘプタデシル−ジホスフェート、１６，１７−エポキシ−１６−エチル−１−ヘプタデシル−ジホスフェート、１７，１８−エポキシ−１７−メチル−１−オクタデシル−ジホスフェート、１７，１８−エポキシ−１７−エチル−１−オクタデシル−ジホスフェート、１８，１９−エポキシ−１８−メチル−１−ノナデシル−ジホスフェート、１８，１９−エポキシ−１８−エチル−１−ノナデシル−ジホスフェート、１９，２０−エポキシ−１９−メチル−１−エイコシル−ジホスフェート、１９，２０−エポキシ−１９−エチル−１−エイコシル−ジホスフェート、２０，２１−エポキシ−２０−メチル−１−ヘンエイコシル−ジホスフェート、２０，２１−エポキシ−２０−エチル−１−ヘンエイコシル−ジホスフェート、２１，２２−エポキシ−２１−メチル−１−ドコシル−ジホスフェート、および２１，２２−エポキシ−２１−エチル−１−ドコシル−ジホスフェートからなる��から選択されうる。
【０１６５】
さらなる特定の具体例では、リン酸化抗原は、３，４−エポキシ−３−メチル−１−ブチル−ジホスフェート（Ｅｐｏｘ−ＰＰ）、３，４，−エポキシ−３−メチル−１−ブチル−トリホスフェート（Ｅｐｏｘ−ＰＰＰ）、α，γ−ジ−３，４，−エポキシ−３−メチル−１−ブチル−トリホスフェート（ジ−Ｅｐｏｘ−ＴＰ）、およびウリジン５’−トリホスフェート−（３，４−エポキシメチルブチル）（Ｅｐｏｘ−ＵＴＰ）からなる群から選択されうる。
【０１６６】
別の好ましい具体例では、リン酸化抗原は、（Ｅ）−４−ヒドロキシ−３−メチル−２−ブテニルピロホスフェート（ＨＤＭＡＰＰ）および（Ｅ）−５−ヒドロキシ−４−メチルペンタ−３−エニルピロホスホネート（ＣＨＤＭＡＰＰ）からなる群から選択することができる。
【０１６７】
これらの化合物は、当該技術分野においてそれ自体が既知の様々な技術により製造されてもよく、そのいくつかは、ＰＣＴ公報、国際公開第００／１２５１６号パンフレット、国際公開第００／１２５１９号パンフレット、国際公開第０３／０５０１２８号パンフレット、国際公開第０２／０８３７２０号パンフレットおよび国際公開第０３／００９８５５号パンフレットに開示されており、出典明示により本明細書中に援用される。
【０１６８】
一の好ましい具体例では、リン酸化抗原はγδＴ細胞活性化剤であり、ＰＣＴ公報、国際公開第００／１２５１６号パンフレット、国際公開第００／１２５１９号パンフレット、国際公開第０３／０５０１２８号パンフレット、国際公開第０２／０８３７２０号パンフレット、国際公開第０３／００９８５５号パンフレットおよび国際公開第０５／０５４２５８号パンフレットのいずれかに記載される化合物であり、その式および特定の構造ならびに合成方法の開示は、出典明示により本明細書中に援用される。別の好ましい具体例では、リン酸化抗原はγδＴ細胞活性化剤であり、ＨＤＭＡＰＰ、ＣＨＤＭＡＰＰ、ＮＨＤＭＡＰＰ、Ｈ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰ、Ｅｐｏｘ−ＰＰ、ＢｒＨＰＰおよびＣＢｒＨＰＰからなる群から選択される化合物である。
【０１６９】
代替的に、γδＴ細胞活性化剤としての作用をあまり有さないが、本発明の使用のためのその他の活性化剤は、国際公開第９５／２０６７３号パンフレットに開示されるリン酸化抗原、イソペンテニルピロホスフェート（ＩＰＰ）（米国特許第５，６３９，６５３号）および３−メチルブタ−３−エニルピロホスホネート（Ｃ−ＩＰＰ）である。いずれの参考文献も出典明示により本発明中に援用される。また、リン酸部分を含有し、γδＴ細胞阻害薬としての機能を果たす化合物も包含され、一例として、米国特許第６，６２４，１５１号Ｂ１に開示される化合物があり、出典明示により本明細書中に援用される。
【０１７０】
化合物およびそれらの合成に関連する上記の参考文献は各々、出典明示により本明細書中に援用される。
【０１７１】
（段階１：酸性化（好ましくは、カチオン性樹脂を用いる））
この最初の段階では、リン酸化抗原化合物は溶液中、好ましくは水溶液またはヒドロアルコール溶液中で提供される。酸性化のために使用することができるカチオン樹脂には、一般に、任意の強酸性カチオン樹脂、例えば、シグマ・アルドリッチ（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）などの業者から入手可能なダウエックス（Ｄｏｗｅｘ）５０ＷＸ８が含まれる。
【０１７２】
（段階２：有機塩基溶液による塩化）
次いで、酸性化されたリン酸化抗原組成物は、有機塩基溶液の組成物を添加することによって塩化または中和される。用いることができる適切な有機塩基は、例えば、「有機塩基」と表題した欄で挙げたものを含む。疎水性塩基の場合には、塩溶液の均一性を保証するため、この段階の前にリン酸化抗原の水溶液に対して共溶媒を添加することが必要なこともある。
【０１７３】
医薬上許容できない塩基と許容できる塩基とを後の段階で交換することを回避することによりヒトに投与することが予定される組成物の製造方法を単純化するために、ベンザチンなどの医薬上許容される有機塩基を使用することが好ましいこともある。
【０１７４】
（有機塩基）
例として有機塩基のいくつかが記載されており、構造的に関連する化合物は同様の特性を有し、同様に用いることができ、かかる化合物が本発明の範囲内であることが理解されるであろう。適する有機塩基の好ましい例としては、キニーネ、シンコニジン、シンコニンおよびキニジンを含むがこれらに限定されないキナの天然アルカロイド；８−ヒドロキシ−キノリンおよび５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリンを含むがこれらに限定されないキノリン塩基；ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン、ならびに塩基性および極性アミノ酸、例えばリジンおよびアルギニンを含むがこれらに限定されない医薬上許容される塩基が挙げられる。
【０１７５】
キナの天然アルカロイド
【化２２】
2009511449.tif 000024
一例では、リン酸化抗原化合物を塩化するために、キナの天然アルカロイドが用いられ、好ましくは、前記塩基は、キニーネ、シンコニジン、シンコニン、およびキニジンからなる群から選択される。好ましくは、キナの天然アルカロイドは、式ＩＶの化合物を含む。
【０１７６】
キノリン塩基
別の好ましい例では、リン酸化抗原化合物を塩化するために、キノリン塩基、好ましくは８−ヒドロキシ−キノリンおよび５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリンからなる群から選択される塩基が用いられる。
【化２３】
2009511449.tif 000025
【０１７７】
医薬上許容される塩基
別の好ましい例では、リン酸化抗原化合物を塩化するために、医薬上許容される塩基、好ましくは、ベンザチン、プロカイン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ベタイン，ならびに塩基性および極性アミノ酸、例えばリジンおよびアルギニンからなる群から選択される塩基が用いられる。
【化２４】
2009511449.tif 000026
【０１７８】
（段階３：溶媒の蒸発（蒸留）：固体状態の形成（アモルファスまたは半結晶性））
蒸発が好ましくは加熱を伴う真空下において一部または全部である。必要であれば、この段階は、少量の揮発性共溶媒を添加し、それにより混合物の沸点を低下させることで単純化されうる。蒸発が全部である場合、残渣は少量の適切な溶媒中で均質化される。適切な溶媒には、医薬上許容される溶媒、例えば、水、エタノール、イソプロパノール、メタノール、アセトン、ＤＭＳＯ、エチレングリコール、プロピレングリコールが含まれるがこれらだけに限定されない。蒸発が一部のみである場合、得られた濃縮溶液から結晶化が行われる。
【０１７９】
（段階４：結晶化：（結晶化の第１段階−懸濁液の形成））
これは、貧溶媒の添加、徐冷、溶媒の蒸発またはこれらの組み合わせを含む多くの適する方法のいずれかにより行われうる。代替的または好ましくは、溶液がゆっくりと冷却されるか、あるいは溶媒がゆっくり蒸発される。一般的には、用いられる最も好ましい方法は貧溶媒の添加であり、次に好ましい方法は、好ましい方から順に制御された雰囲気中での（ｉ）徐冷および（ｉｉ）溶媒のゆっくりとした蒸発である。
【０１８０】
段階４’：スラリーの熟成
この段階は任意選択であるが、結晶化度（結晶学的な長期秩序の質）および構造的な純度（単相のみが存在する、例えば、付随する多形体または種々の共存する溶媒和物が存在しない）を改善するために行われることが好ましい。この段階は、段階５で固体を単離する前に段階４の懸濁液に熟成サイクルを受けさせることを必要とし、サイクルは通常高速加熱段階の後に徐冷段階を含む。
【０１８１】
段階５：結晶化された固体の単離
この段階は、懸濁液のろ過または遠心分離によって有利に行われる。
【０１８２】
段階５’：任意選択の洗浄またはスラリー化
この段階は任意選択であるが、有利である。固体ケーク中に捕捉された段階５の残留ろ液は除去され、その結果、一般的には純度が改善されると共に、用いられる特定の溶媒の性質によって特定の場合（例えば、アセトン洗浄）にはより速く乾燥され得る。
【０１８３】
段階６：結晶化固体の乾燥
段階５または５’の結晶は適切な条件下で乾燥され、固相を変性させないように注意が払われる。温度および条件は固体の特性に基づいて決定されるが、周囲雰囲気における乾燥が一般的に適用可能であると予想される。
【０１８４】
段階７：再結晶
段階７は任意選択であるが、組成物の純度を改善するために、数回の連続サイクルで再結晶させることは非常に好ましい。段階６の結晶化された固体は、段階３の少量の適切な溶媒中で均質化され、残りの段階（すなわち、段階４以降）が行われる。このことは、固相の純度および結晶化度を改善できる。再結晶は何回でも実行することができるが、好ましくは、固体の製剤化の前に少なくとも１、２、３または４サイクルの再結晶が行われることである。
【０１８５】
任意選択：薬学的使用のための組成物の獲得
結晶化方法で使用される有機塩基が医薬上許容できない場合、あるいは何か他の理由で異なる塩基が所望される場合には、精製したリン酸化抗原塩は、医薬品の製剤化または開発のために、上記段階（１）で記載されるように実質的にカチオン交換技術を用いて他の適切な医薬上許容される塩に変えることができる。しかしながら、ベンザチンなどの医薬上許容される塩基の塩は、薬品の製剤化において直接使用することができ、この段階は不要とされる。
【０１８６】
得られた組成物は、その後、適切な方法に従ってさらに製剤化することができ、「医薬品」と題された部分においていくつかの例が提供される。
【０１８７】
新規の結晶相
本発明の一具体例は、リン酸化抗原塩の結晶性溶媒和物、特に、リン酸化抗原キニーネ塩の結晶性溶媒和物、リン酸化抗原シンコニジン塩の結晶性溶媒和物、リン酸化抗原８−ヒドロキシキノリン塩の結晶性溶媒和物、およびリン酸化抗原ベンザチン塩の結晶性溶媒和物を包含する。
【０１８８】
本発明の別の具体例は、式Ｉ〜ＩＩＩの化合物の結晶性塩、特に、式Ｉ〜ＩＩＩの化合物の結晶性キニーネ塩、シンコニジン塩、８−ヒドロキシキノリン塩およびベンザチン塩を包含する。
【０１８９】
さらなる具体例では、本発明は、結晶性ＢｒＨＰＰ、ＩＰＰ、ＨＤＭＡＰＰ、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰ、Ｎ−ＨＤＭＡＰＰおよびＨ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰ塩、特に、ＢｒＨＰＰ、ＩＰＰ、ＨＤＭＡＰＰ、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰ、Ｎ−ＨＤＭＡＰＰおよびＨ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰの結晶性キニーネ塩、シンコニジン塩、８−ヒドロキシキノリン塩およびベンザチン塩を包含する。
【０１９０】
さらに他の具体例では、本発明は、ビスホスホネート、ヌクレオチド、ヌクレオチド類似物あるいはリン酸含有ヌクレオシドまたはヌクレオシド類似物の結晶性溶媒和物を包含する。特に好ましいのは、ビスホスホネート、ヌクレオチド、ヌクレオチド類似物あるいはリン酸含有ヌクレオシドまたはヌクレオシド類似物のキニーネ塩の結晶性溶媒和物、シンコニジン塩の結晶性溶媒和物、８−ヒドロキシキノリン塩の結晶性溶媒和物、およびベンザチン塩の結晶性溶媒和物である。
【０１９１】
結晶相Ａ〜Ｏ
さらに好ましい具体例では、本明細書において相Ａ〜Ｏと指定されるリン酸化抗原塩の一連の結晶相が開示される。ＸＲＰＤパターンのピークは、２シータ角に関して表され、前記パターンは、以下で言及される手順に従って得た。測定の変動のために、ピークは＋／−０．０２°（２シータ）変化すると予想されることが理解されるであろう。２シータ角に関連して「約」が用いられる場合、これは好ましくは＋／−０．０２という数を意味する。
【０１９２】
相Ａ：ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉ
ＢｒＨＰＰの第１の新規の結晶相は、約５．６４、７．５２、１１．２８、１１．６０、１２．９２、１３．８０、１５．７１、１６．７５、１７．４９、１８．１１、１８．４４、１８．９１、１９．２５、２０．０８、２０．８２、２２．３０、２３．９６、２５．７２、２６．５６および２７．２４度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンによって特徴付けられる相Ａである。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より特定的には約７．５２、１１．２８、１６．７５、１８．９１および２０．８２のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。またこの結晶相は、実質的に図１Ａに示されるような粉末Ｘ線回折パターンを有すると特徴付けることもできる。上記ピークまたは図１Ａ中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）Ｍｉｘ−Ｉを特徴付けることができる。ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉの調製方法は実施例１に示される。
【０１９３】
相Ｂ：ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩ
ＢｒＨＰＰの別の結晶相は、約５．８２、７．７１、８．２２、１５．５５、１５．９３、１６．４５、１６．７８、１７．６０、１８．０７、１８．６８、１９．４７および２０．７０度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より特定的には約７．７１、１６．７８および２０．７０のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図２に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図２中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）Ｍｉｘ−ＩＩを特徴付けることができる。ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩの調製方法は実施例１に示される。
【０１９４】
相Ｃ：ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩ
ＢｒＨＰＰの別の結晶相は、約５．８１、７．６６、１６．７０および１８．４０度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より特定的には約７．６６、１６．７０および１８．４０のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図３に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図３中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）Ｍｉｘ−ＩＩＩを特徴付けることができる。ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩの調製方法は実施例１に示される。
【０１９５】
相Ｄ：ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉ
ＢｒＨＰＰの別の結晶相は、約４．６４、６．６５、１３．８９、１４．２４、１６．９３、１８．５４、２０．５０、２３．６８および２７．９０度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より特定的には約６．６５、１８．５４および２３．６８のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図５に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図５中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉを特徴付けることができる。ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉの調製方法は実施例２に示される。
【０１９６】
相Ｅ：ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩ
ＢｒＨＰＰの別の結晶相は、約５．９６、７．３７、９．３４、９．７０、１１．１０、１２．３８、１２．６６、１３．６９、１４．８７、１６．０６、１６．４０、１８．２０、１８．７６、１９．２７、１９．８０、２０．８６、２２．６０、２３．００、２３．６５、２４．３２、２５．１０、２５．５０、２６．２４、２６．６２および２７．０３度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より特定的には約５．９６、７．３７、１６．０６および１９．２７のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図６に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図６中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩを特徴付けることができる。ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩの調製方法は実施例２に示される。
【０１９７】
相Ｆ：ＢｒＨＰＰ８−ヒドロキシキノリン塩、結晶相Ｉ
ＢｒＨＰＰの別の結晶相は、約５．５３、１０．６９、１３．３０、１３．９７、１５．１８、１５．５１、１５．８４、１６．６９、１７．７８、１８．１２、２０．１３、２０．６７、２２．４２、２３．８５、２４．５０、２５．４２、２５．７６、２６．２４、２６．７３および２８．８４度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より詳しくは約１５．１８、１５．５１、１６．６９、１７．７８および２６．２４のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図７に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図７中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、ＢｒＨＰＰ８−ヒドロキシキノリン塩、結晶相Ｉを特徴付けることができる。ＢｒＨＰＰ８−ヒドロキシキノリン塩、結晶相Ｉの調製方法は実施例３に示される。
【０１９８】
相Ｇ：ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉ
ＢｒＨＰＰの別の結晶相は、約５．７９、１１．４６、１６．１９、１７．１４、１７．３９、１８．９４および２１．５２度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より詳しくは約５．７９、１１．４６および１７．１４のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図８に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図８中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉを特徴付けることができる。ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉの調製方法は実施例４に示される。
【０１９９】
相Ｈ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相Ｉ
Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの結晶相も開示される。一の例では、（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの結晶相は、約８．５８、９．１７、１０．０７、１０．７０、１４．３３、１４．８２、１６．０４、１６．８８、１７．１３、１８．６７、２０．０３、２０．９５、２２．４２、２３．３３、２５．３４および２５．６４度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より詳しくは約８．５８、１７．１３、１８．６７および２０．０３のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図１１に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図１１中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相Ｉを特徴付けることができる。（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相Ｉの調製方法は実施例５に示される。
【０２００】
相Ｉ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩ
別の具体例は、約８．３８、１５．７４、１６．１５、１８．１４、１９．７１、１９．９６、２３．００、２５．０６および２５．９９度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの結晶相を包含する。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より詳しくは約８．３８、１８．１４、１９．７１および１９．９６のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。もう１つの具体例では、本発明は、実質的に図１２に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図１２中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩを特徴付けることができる。（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩの調製方法は実施例５に示される。
【０２０１】
相Ｊ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相Ｉ
別の具体例は、約４．９８、５．９２、７．１６および１２．６１度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの結晶相を包含する。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より特定的には約５．９２および７．１６のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図１３に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図１３中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相Ｉを特徴付けることができる。（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相Ｉの調製方法は実施例６に示される。
【０２０２】
相Ｋ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩ
別の具体例は、約５．５３、９．０２、１０．６１、１１．１０、１４．３１、１７．５３、１９．８３、２０．８７、２３．４９および２４．８２度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの結晶相を包含する。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より特定的には約５．５３、２０．８７、および２４．８２のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図１４に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図１４中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩを特徴付けることができる。（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩの調製方法は実施例６に示される。
【０２０３】
相Ｌ：ＩＰＰキニーネ塩、結晶相Ｉ
ＩＰＰの結晶相も開示される。一の例では、ＩＰＰの結晶相は、約８．３３、１３．５６、１５．９３、１６．７４、１７．５４、１８．０６、１９．２３、１９．８９、２３．１８、２４．９８、２６．１４および２８．２７度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より詳しくは約８．３３、１５．９３、１８．０６および１９．８９のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図１５に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図１５中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、ＩＰＰキニーネ塩、結晶相Ｉを特徴付けることができる。ＩＰＰキニーネ塩、結晶相Ｉの調製方法は実施例７に示される。
【０２０４】
相Ｍ：ＩＰＰキニーネ塩、結晶相ＩＩ
別の具体例は、約６．８３、６．９８、７．７９、９．７８、１３．７１、１４．１７、１４．４１、１４．９４、１５．３８、１６．１４、１７．２８、１７．５１、１７．８５、１８．５３、１８．７７、１９．１２、１９．５０、２０．０７、２０．９３、２１．５６、２１．７３、２２．１４、２４．０９、２４．５８、２４．９６および２５．６８度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられるＩＰＰの結晶相を包含する。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より詳しくは約７．７９、１７．５１、１７．８５および１８．５３のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図１６に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図１６中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、ＩＰＰキニーネ塩、結晶相ＩＩを特徴付けることができる。ＩＰＰキニーネ塩、結晶相ＩＩの調製方法は実施例７に示される。
【０２０５】
相Ｎ：ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩ
ＢｒＨＰＰの別の結晶相は、約５．６２、１０．２６、１０．５４、１１．２２、１１．６３、１２．３７、１３．８３、１４．８８、１５．７２、１６．４１、１６．８９、１７．１２、１８．２１、１８．７０、１９．４１、２０．６３、２１．４４、２１．８５、２２．５０、２３．３１、２３．６４、２４．１１、２４．４８、２５．０６、２６．３９、２７．１４および２９．６２度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より特定的には約５．６２、１２．３７、１６．４１、１８．２１、１８．７０、２１．４４、２５．０６のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図９に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図９中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩを特徴付けることができる。ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩの調製方法は実施例４に示される。
【０２０６】
相Ｏ：ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩ
ＢｒＨＰＰの別の結晶相は、約５．８０、８．６８、１０．５８、１１．３６、１１．６０、１６．０６、１６．７０、１７．１５、１７．４５、１９．０７、１９．５２、２１．０２、２１．８２、２３．３２、２４．１１、２４．９１、２５．３３および２８．１６度（２シータ）における顕著なピーク（２シータ角）を含む粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる。好ましくは、この相は、上記ピーク（２シータ角）のうちの少なくとも１つ、２つ、３つ、４つまたは全て、より特定的には約５．８０、８．６８、１１．３６、２３．３２、２４．１１のピークからなる群の中で選択されるピークを含むＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる。別の具体例では、本発明は、実質的に図１０に示されるような粉末Ｘ線回折パターンによって特徴付けられる結晶相を提供する。上記ピークまたは図１０中のピークのうちの任意の２つ、任意の３つ、任意の４つ、任意の５つ、または任意の６つ（あるいはそれ以上）の組み合わせを用いて、ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩを特徴付けることができる。ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩの調製方法は実施例４に示される。
【０２０７】
本明細書で提供される一般的な方法は、上記結晶相のいずれを調製するためにも使用することができる。結晶相を調製するための前記方法は、リン酸化抗原を水溶液中に溶解し、次いで塩基性溶媒和物の存在下でカチオンを交換し、それにより、塩基との塩を形成し、結晶形態、好ましくはキニーネ塩、シンコニジン塩、８−ヒドロキシキノリン塩またはベンザチン塩を沈殿させる段階と、好ましくは溶媒を蒸発させることによって結晶を単離する段階とを含む。該プロセスは、さらに、結晶を単離する前に溶液の冷却を含んでもよい。
【０２０８】
リン酸化抗原の結晶相は、脱水和物、無水和物、半水和物、または二水和物であってもよく、様々な化学量論で溶媒和および／または水和される。
【０２０９】
本発明のさらに別の具体例は、相Ａ〜Ｏからなる群から選択される少なくとも１つのリン酸化抗原の結晶相を含む医薬品組成物を包含する。
【０２１０】
医薬品
本発明のさらなる具体例は、本発明によるリン酸化抗原、好ましくは高純度の安定性および／または非吸湿性のリン酸化抗原を含む医薬品組成物を提供する。好ましくは、医薬品を調製するために使用されるリン酸化抗原原薬は、結晶相Ａ〜Ｏのうちの１またはそれ以上あるいはこれらの混合物を含むがこれらに限定されない検出可能な量の結晶性リン酸化抗原である。「原薬」は、活性医薬品成分（ＡＰＩ）を意味する。薬剤中のリン酸化抗原の結晶相（例えば、結晶相Ａ〜Ｏのいずれか１つまたはこれらの混合物を含むがこれらに限定されない）の量は、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）、固体フッ素−１９マジック角回転（ｍａｇｉｃ−ａｎｇｌｅ  ｓｐｉｎｎｉｎｇ、ＭＡＳ）核磁気共鳴分光法、固体炭素−１３交差分極マジック角回転（ＣＰＭＡＳ）核磁気共鳴分光法、固体フーリエ変換赤外分光法、およびラマン分光法などの物理的方法の使用によって定量することができる。
【０２１１】
この具体例の種類では、原薬中に約５重量％〜約１００重量％の結晶性リン酸化抗原が存在する。この具体例の第２の種類では、原薬中に約１０重量％〜約１００重量％の結晶性リン酸化抗原またはその混合物が存在する。この具体例の第３の種類では、原薬中に約２５重量％〜約１００重量％の結晶性リン酸化抗原またはその混合物が存在する。この具体例の第４の種類では、原薬中に約５０重量％〜約１００重量％の結晶性リン酸化抗原またはその混合物が存在する。この具体例の第５の種類では、原薬中に約７５重量％〜約１００重量％の結晶性リン酸化抗原またはその混合物が存在する。この具体例の第６の種類では、実質的に全てのリン酸化抗原原薬が結晶性リン酸化抗原またはその混合物であり、すなわちリン酸化抗原は、実質的または本質的に純粋なリン酸化抗原またはその混合物である。最も好ましくは、前記リン酸化抗原は、式Ｉ〜ＩＩＩの化合物またはこれらの混合物からなる群から選択される。本発明の構成において、「式Ｉ〜ＩＩＩ」という表現は、式Ｉ〜ＩＩＩから誘導される全ての化合物：Ｉ、ＩＩ、ＩＩａ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ、ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧを指定する。
【０２１２】
本発明はまた、例えば癌の治療においてリン酸化抗原が必要とされるまたは有用である臨床症状の予防または治療のため、免疫調節の目的のため、感染症の治療および／または予防のため、自己免疫障害の治療のため、骨粗鬆症、変形性骨炎（「骨パジェット病」）、骨転移（高カルシウム血症を伴うまたは伴わない）、多発性骨髄腫および骨の脆弱性を特徴とする他の症状のための薬剤の製造における本発明のリン酸化抗原の使用も提供する。
【０２１３】
本発明はまた、１またはそれ以上の医薬上許容されるキャリアまたは賦形剤を伴った結晶性リン酸化抗原を含む医薬品組成物も提供する。一の具体例では、医薬品組成物は、予防的または治療上有効な量の活性医薬品成分（ＡＰＩ）を、医薬上許容される賦形剤と混合して含み、ＡＰＩは検出可能な量の本発明の結晶性リン酸化抗原を含む。第２の具体例では、医薬品組成物は、予防的または治療上有効な量のＡＰＩを、医薬上許容される賦形剤と混合して含み、ＡＰＩは、約５重量％〜約１００重量％の本発明の結晶性リン酸化抗原を含む。この第２の具体例の１つの種類では、該組成物中のＡＰＩは、約１０重量％〜約１００重量％の結晶性リン酸化抗原を含む。この具体例の第２の種類では、該組成物中のＡＰＩは、約２５重量％〜約１００重量％の結晶性リン酸化抗原を含む。この具体例の第３の種類では、該組成物中のＡＰＩは、約５０重量％〜約１００重量％の結晶性リン酸化抗原を含む。この具体例の第４の種類では、該組成物中のＡＰＩは、約７５重量％〜約１００重量％の結晶性リン酸化抗原を含む。この具体例の第５の種類では、実質的にＡＰＩの全てが結晶性リン酸化抗原であり、すなわちＡＰＩは実質的または本質的に純粋なリン酸化抗原またはその混合物である。
【０２１４】
本発明による組成物は、錠剤、ピル、カプセル、粉末、顆粒、無菌溶液または懸濁液、定量エアロゾルまたは液体スプレー、ドロップ、アンプル、自動注入デバイス、あるいは坐薬などの単位剤形であるのが適切である。組成物は、経口、非経口、鼻腔内、舌下、または直腸投与、あるいは吸入またはガス注入による投与を目的とする。本発明による組成物の製剤化は、利便的には、例えば、レミントン（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ）の薬学（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、第１８版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ペンシルベニア州イーストン（Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）（１９９０年）に記載されるごとき当該技術から既知の方法によって達成することができる。
【０２１５】
投与計画は、患者のタイプ、種、年齢、体重、性別および病状、治療すべき状態の重症度、投与経路、ならびに患者腎機能および肝機能を含む様々な因子により選択される。通常の熟練した医師、獣医、または臨床医は、状態の進行を防止、阻止または抑止するために必要とされる薬物の有効量を容易に決定および処方することができる。
【０２１６】
免疫細胞を活性化または刺激するために使用される場合、本発明の投薬量は通常、１日に体重１ｋｇあたり約０．０１ｍｇ（ｍｇ／ｋｇ／日）〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日、ならびに最も好ましくは０．１〜５．０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であろう。静脈内投与においては、免疫細胞を活性化または刺激するために使用される場合、治療すべき患者への投薬量を症候的に調整するために組成物は好ましくは、約０．０１ミリグラム〜約５ｇ、または約１０ｇまでのＡＰＩを含有する剤形において提供される。薬剤は、通常、約０．０１ｍｇ〜約５００ｍｇのＡＰＩ、好ましくは約１ｍｇ〜約２００ｍｇのＡＰＩを含有する。１つの説明的な例では、静脈内に、一定速度の注入中に約０．１〜約１００ｍｇ／ｋｇ／分の範囲の用量を投与することができる。
【０２１７】
例えば癌の治療のためのγδＴ細胞活性化剤リン酸化抗原の好ましい投薬量および投与計画は、２００３年１２月２日に出願された同時係属中のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＩＢ２００３／００６３７５号明細書において提供されている。疾患、特に感染症および癌の治療または予防のために抗原と併用してアジュバントとして使用するための投薬量および投与計画は、２００５年４月２５日に出願された同時係属中のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＩＢ２００５／００１４８５号明細書、２００５年２月８日に出願された第ＰＣＴ／ＩＢ２００５／０００５０９号明細書、ならびに２００４年１２月２０日に出願された米国仮特許出願６０／６３７，６１９号明細書において提供されている。気道過敏症に関連する障害を治療するための方法は、ＰＣＴ／ＵＳ００／２６６８４号明細書および米国特許第６，７３７，３９８号明細書において提供されている。上記参考文献のそれぞれの開示は参照によって本明細書中に援用される。
【０２１８】
有利に、結晶性リン酸化抗原は１日に単一用量で投与されてもよいし、あるいは１日の投与量全体が１日２回、３回または４回の分割量で投与されてもよい。さらに、結晶性リン酸化抗原は、適切な鼻腔内媒体の局所使用によって鼻腔内投与形態で、あるいは当業者にはよく知られた経皮皮膚パッチ形態を用いる経皮経路によって投与することもできる。経皮送達系の形で投与されるために、当然ながら、投薬量の投与は投与計画を通して断続的ではなく連続的であり得る。
【０２１９】
本発明の剤形の組成、形状、および型は、通常、その用途によって変化し得る。例えば、疾患または障害の急性治療で用いられる剤形は、同じ疾患または障害の慢性治療で用いられる剤形よりも多量の活性成分を含有してもよい。同様に、非経口剤形は、同じ疾患または障害を治療するために用いられる経口剤形よりも少量の活性成分を含有してもよい。
【０２２０】
本発明の方法では、結晶性リン酸化抗原はＡＰＩを形成することができ、通常、意図される投与形態、すなわち、経口錠剤、カプセル、エリキシル剤、シロップなどに関して適切に選択され、従来の薬務と矛盾しない適切な医薬品希釈剤、賦形剤またはキャリア（本明細書ではひとまとめにして「キャリア」物質と呼ばれる）との混合物で投与される。
【０２２１】
ピーク血漿濃度
ヒトを含む宿主動物は、医薬上許容されるキャリアまたは希釈剤の存在下で患者に有効な量の活性化合物または医薬上許容されるプロドラッグまたはこれらの塩を投与することによって治療することができる。活性材料は、液体または固体の形態で任意の適切な経路によって、例えば、経口、非経口、静脈内、皮内、皮下、または局所的に投与することができる。
【０２２２】
免疫細胞、特にガンマデルタＴ細胞を活性化または刺激するための化合物の好ましい用量は本明細書中にさらに記載される。送達すべき薬剤組成物の有効な投薬量範囲は、送達すべきリン酸化抗原化合物の重量に基づいて計算することができる。薬剤の別の要素がそれ自体で活性を示す場合には、有効な投薬量は、他の要素の重量を用いて上記のように、あるいは当業者に既知の他の手段によって見積もることができる。理想的には、γδＴ細胞活性化剤のリン酸化抗原は、約０．０１μＭ〜１０ｍＭ、好ましくは約１μＭ〜１０ｍＭ、好ましくは約１０μＭ〜約１ｍＭの活性化合物のピーク血漿濃度を達成するように投与されるべきである。これは、例えば、０．１〜５％溶液の活性成分の静脈内注射によって、あるいは経口剤形として達成され得る。
【０２２３】
薬物組成物中の活性化合物の濃度は、薬物の吸収、不活性化および排泄速度、ならびに当業者間で周知な他の因子に依存し得る。また、投薬量の値は、軽減すべき状態の重症度と共に変化し得る、あるいはγδＴ細胞活性化剤の場合には所望される活性化または刺激の程度または性質とともに変化し得ることに注意すべきである。さらに、特定の被験者のために、特定の投与計画は、個々の必要性と、組成物の投与または投与の監督をする人の専門の判断とに従って時間をかけて調整されるべきであること、ならびに本明細書に示される濃度範囲が単なる例示であって、主張される組成物の範囲および実施の限定を意図しないことは理解されるべきである。活性成分は一度に投与されてもよいし、より少ない多数の用量に分割されて様々な時間間隔で投与されてもよい。
【０２２４】
経口剤形
経口投与に適した本発明の医薬品組成物は、錠剤（分割錠または被覆錠剤を含むが限定されない）、ピル、顆粒、ロゼンジ、カプレット、カプセル、咀嚼錠、粉末パケット、カシェ剤、トローチ、ウェハ、エアロゾルスプレー、または液体、例えば（限定されない）水性液体、非水性液体、水中油エマルジョン、または油中水エマルジョン中のシロップ、エリキシル剤、溶液または懸濁液などのような（これらに限定されない）別個の剤形として提供され得る。このような組成物は、所定の量の医薬上許容されるリン酸化抗原塩を含有し、当業者によく知られた薬学的な方法によって調製され得る。一般に、レミントン（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ）の薬学（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、第１８版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ペンシルベニア州イーストン（１９９０年）が参照される。
【０２２５】
本発明の典型的な経口剤形は、従来の医薬品配合技術に従って、医薬上許容されるリン酸化抗原塩と、少なくとも１つの賦形剤とを十分に混ぜ合わせることによって調製される。賦形剤は、投与が所望される組成物の形態によって様々な種類の形態をとることができる。例えば、経口液体またはエアロゾル剤形における使用に適した賦形剤は、（ａ）表面安定剤、（ｂ）分散助剤、（ｃ）結合剤、（ｄ）充填剤、（ｅ）潤滑剤、（ｆ）流動化剤、（ｇ）懸濁化剤、（ｈ）甘味料、（ｉ）香味料、（ｊ）防腐剤、（ｋ）緩衝剤、（ｌ）湿潤剤、（ｍ）崩壊剤、（ｎ）発泡剤、（ｏ）湿潤剤、（ｐ）徐放剤、（ｑ）吸収促進剤、（ｒ）吸収剤、（ｓ）可塑剤を含むが、これらだけに限定されない。
【０２２６】
投与が容易であるため、錠剤およびカプセルは、最も有効な固体経口単位剤形を表し、この場合、固体の医薬品賦形剤が使用される。望ましくは、錠剤を一般的な水溶液手法または非水溶液手法によって被覆することができる。これらの剤形は、薬学的な方法のいずれかによって調製することができる。一般的には、医薬品組成物および剤形は、活性成分と、液体キャリア、微粉化した固体キャリア、または両方とを均一および十分に混合し、次に必要であれば生成物を所望の表示に成形することによって調製される。
【０２２７】
例えば、錠剤は、圧縮または成形によって調製することができる。圧縮錠剤は、１またはそれ以上の賦形剤と任意で混合された粉末または顆粒などの自由に流動する形態の活性成分を適切な機械で圧縮することによって調製することができる。成形錠剤は、不活性液体希釈剤に浸した粉末状化合物の混合物を適切な機械で成形することによって製造することができる。
【０２２８】
特に、本発明の経口剤形において使用することができる賦形剤の例は、結合剤、充填剤、崩壊剤および潤滑剤を含むがこれらに限定されない。
【０２２９】
医薬品組成物および剤形において使用するために適切な結合剤としては、トウモロコシデンプン、ポテトデンプン、または他のデンプン、ゼラチン、アカシアなどの天然および合成ガム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、他のアルギナート、粉末状トラガカント、グァーガム、セルロースおよびその誘導物（例えば、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ナトリウムカルボキシメチルセルロース）、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、アルファ化デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、（例えば、番号２２０８、２９０６、２９１０）、微結晶性セルロース、ならびにこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。微結晶性セルロースの適切な形態は、アビセル（ＡＶＩＣＥＬ）−ＰＨ−１０１、アビセル−ＰＨ−１０３、アビセル（Ａｖｉｃｅｌ）ＰＨ１０２、アビセルＰＨ１１２およびアビセルＰＨ３０２、アビセルＲＣ−５８１、およびアビセル−ＰＨ−１０５（米国ペンシルベニア州マーカスフック（Ｍａｒｃｕｓ  Ｈｏｏｋ，ＰＡ，Ｕ．Ｓ．Ａ）のＦＭＣコーポレーション、米国ビスコース部門、アビセル販売（ＦＭＣ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｖｉｓｃｏｓｅ  Ｄｉｖｉｓｉｏｎ，Ａｖｉｃｅｌ  Ｓａｌｅｓ）から入手可能）、ならびにこれらの混合物として販売される材料を含むが、これらに限定されない。典型的な適切な結合剤は、アビセルＲＣ−５８１として販売される微結晶性セルロースおよびナトリウムカルボキシメチルセルロースの混合物である。適切な無水または低水分賦形剤または添加剤にはアビセル−ＰＨ−１０３およびスターチ（Ｓｔａｒｃｈ）１５００ＬＭが含まれる。
【０２３０】
本明細書において開示される医薬品組成物および剤形において使用するために適切な充填剤の例としては、タルク、炭酸カルシウム（例えば、顆粒または粉末）、リン酸カルシウム、微結晶性セルロース、粉末状セルロース、ラクトース、デキストレート（ｄｅｘｔｒａｔｅ）、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、スクロース、マルトデキストリン、デンプン、アルファ化デンプン、ポリメタクリレート、およびこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の医薬品組成物中の結合剤または充填剤は、典型的には、医薬品組成物または剤形の約５０〜約９９重量パーセントで存在する。
【０２３１】
崩壊剤は、水性環境にさらされたときに崩壊する錠剤を提供するために本発明の組成物中で使用される。多過ぎる崩壊剤を含有する錠剤は貯蔵中に膨張、破損または崩壊し得るが、少な過ぎる崩壊剤を含有する錠剤は崩壊が生じるのに不十分であり、それにより剤形からの活性成分の放出の速度および量を変更し得る。従って、活性成分の放出を有害に変更するほど少な過ぎでも多過ぎでもない十分な量の崩壊剤を使用して、本発明の固体経口剤形を形成するべきである。使用される崩壊剤の量は製剤化の種類および投与の仕方に基づいて変化し、当業者には容易に認識できる。典型的な医薬品組成物は、約０．５〜約１５重量パーセントの崩壊剤、好ましくは約１〜約５重量パーセントの崩壊剤を含む。本発明の医薬品組成物および剤形を形成するために使用することができる崩壊剤には、寒天、アルギン酸、グァーガム、炭酸カルシウム、微結晶性セルロース、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、メチルセルロース、クロスポビドン、ポラクリリン（ｐｏｌａｃｒｉｌｉｎ）カリウム、ナトリウムデンプングリコレート、ポテトまたはタピオカデンプン、他のデンプン、アルファ化デンプン、クレイ、他のアルギン、他のセルロース、ガム、およびこれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。
【０２３２】
本発明の医薬品組成物および剤形を形成するために使用することができる潤滑剤には、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、鉱油、軽油、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、他のグリコール、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、水素化植物油（例えば、ピーナッツ油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、および大豆油）、安息香酸ナトリウム、ステアリルフマル酸ナトリウム、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル（ｅｔｈｙｌ  ｌａｕｒｅａｔｅ）、寒天、およびこれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。さらなる潤滑剤としては、例えば、シロイド（ｓｙｌｏｉｄ）シリカゲル（アエロジル（ＡＥＲＯＳＩＬ）２００、メリーランド州ボルティモア（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ）のＷ．Ｒ．グレース社（Ｗ．Ｒ．Ｇｒａｃｅ  Ｃｏ．）により製造）、合成シリカの凝固エアロゾル（テキサス州プラノ（Ｐｌａｎｏ，ＴＸ）のデグサ社（Ｄｅｇｕｓｓａ  Ｃｏ．）により販売）、ＣＡＢ−Ｏ−ＳＩＬ（マサチューセッツ州ボストン（Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）のキャボット社（Ｃａｂｏｔ  Ｃｏ．）により販売される熱分解二酸化ケイ素製品）、およびこれらの混合物がある。使用される場合、潤滑剤は、通常、それらが取り込まれる医薬品組成物または剤形の約１重量パーセント未満の量で使用される。
【０２３３】
本発明はさらに、ラクトースフリーの医薬品組成物および剤形を包含し、該組成物は、もし含有するとしても、ラクトースまたは他の単糖または二糖を少ししか含有しないのが好ましい。本明細書において使用される場合、「ラクトースフリー」という用語は、もし存在するとしても、存在するラクトース量が活性成分の分解速度を実質的に増大させるのに不十分であることを意味する。
【０２３４】
本発明のラクトースフリーの組成物は、当該技術分野においてよく知られおり、参照によって本明細書中に援用されるＵＳＰ（ＸＸＩ）／ＮＦ（ＸＶＩ）に記載されている賦形剤を含むことができる。一般的には、ラクトースフリーの組成物は、医薬上許容されるリン酸化抗原塩（例えば、リン酸化抗原ナトリウム）、結合剤／充填剤、および任意で潤滑剤を、医薬上の適合性および医薬上許容される量で含む。好ましいラクトースフリーの剤形は、リン酸化抗原の医薬上許容される塩、微結晶性セルロース、アルファ化デンプン、およびステアリン酸マグネシウムを含む。
【０２３５】
本発明はさらに、水がいくつかの化合物の分解を促進し得るので、活性成分を含む無水医薬品組成物および剤形を包含する。例えば、水の添加（例えば、５％）は、製剤の有効期間または安定性などの特性を時間に関して決定するために長期間の貯蔵をシミュレートする手段として、医薬品技術分野において広く受け入れられている。例えば、ジェンス（Ｊｅｎｓ）Ｔ．カシュテンセン（Ｃａｒｓｔｅｎｓｅｎ）、薬物の安定性：原理＆実施（Ｄｒｕｇ  Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ＆Ｐｒａｃｔｉｃｅ）、３７９−８０（第２版、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、ニューヨーク州ニューヨーク（ＮＹ，ＮＹ）、１９９５年）が参照される。水および熱は、いくつかの化合物の分解を促進する。従って、製剤の製造、取扱い、梱包、貯蔵、出荷および使用の間に水分および／または湿度に一般に接触されるので、製剤化に対する水の効果は非常に重要である。
【０２３６】
本発明の無水医薬品組成物および剤形は、無水または低水分含有成分と、低水分または低湿度条件とを用いて調製することができる。ラクトースと、第１級または第２級アミンを含む少なくとも１つの活性成分とを含む医薬品組成物および剤形は、製造、梱包、および／または貯蔵の間に水分および／または湿度との実質的な接触が予想される場合には、好ましくは無水である。
【０２３７】
無水医薬品組成物は、その無水の性質が保持されるように調製および貯蔵されるべきである。従って、無水組成物は好ましくは水への暴露を防止することが知られている原料を用いて梱包され、その結果、適切な製剤化キット（ｆｏｒｍｕｌａｒ  ｋｉｔ）内に包含させることができる。適切な梱包の例としては、密閉ホイル、プラスチック、乾燥剤を含むまたは含まない単位用量容器（例えば、バイアル）、ブリスターパック、およびストリップパックが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２３８】
制御および遅延放出剤形
医薬上許容されるリン酸化抗原塩は、制御放出または遅延放出手段によって投与することができる。制御放出医薬品は、その対応する非制御放出によって達成されるよりも薬物治療を改善するという一般的な目標を有する。
【０２３９】
理想的には、最適に設計された制御放出調製物の医学的治療における使用は、最低限の原薬を用いて、最低限の時間で状態を治療または制御することを特徴とする。制御放出製剤の利点は、１）薬物の活性の延長と、２）投薬頻度の低下と、３）患者のコンプライアンスの増大と、４）より少ない総量の薬物の使用と、５）局所的または全身的な副作用の低減と、６）薬物の蓄積の最小化と、７）血中レベルの変動の低下と、８）治療の効力の改善と、９）薬物活性の増強または損失の低下と、１０）疾患または状態の制御速度の改善とを含む。キム（Ｋｉｍ）、チャーンギュ（Ｃｈｅｒｎｇｊｕ）、制御放出剤形設計（Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍ  Ｄｅｓｉｇｎ）、２（Ｔｅｃｈｎｏｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ペンシルベニア州ランカスター（Ｌａｎｃａｓｔｅｒ，ＰＡ）、２０００年）。
【０２４０】
従来の剤形は、一般的には、急速または即時性の製剤からの薬物放出を提供する。薬物の薬理および薬物動態に依存して、従来の剤形の使用は、患者の血液および他の組織における薬物濃度の幅広い変動を導き得る。これらの変動は、投与頻度、作用の開始、効力の持続期間、治療的血中レベルの維持、毒性、副作用などの多数のパラメータに影響を与え得る。有利に、制御放出製剤は、薬物の作用の開始、作用の持続期間、治療領域内の血漿レベル、およびピーク血中レベルを制御するために使用することができる。特に、制御放出または延長放出剤形または製剤は、薬物を不十分に投与する（すなわち、最低治療レベルよりも低くなる）こと、および薬物の毒性レベルを超えることから生じ得る潜在的な悪影響および安全性の懸念を最小限にしながら薬物の最大限の有効性が達成されることを保証するために使用することができる。
【０２４１】
ほとんどの制御放出製剤は、初めに所望の治療効果を即座に生じる量の薬物（活性成分）を放出し、徐々にそして継続的に残りの量の薬物を放出し、このレベルの治療または予防効果が長期間にわたって保持されるように設計される。体内の薬物のこの一定レベルを保持するために、薬物は、体内からの代謝および排出されている薬物の量を置換し得る速度で剤形から放出されなければならない。活性成分の制御放出は、ｐＨ、イオン強度、浸透圧、温度、酵素、水、および他の生理学的条件または化合物を含むが限定されない様々な条件によって刺激することができる。
【０２４２】
様々な既知の制御放出または延長放出剤形、製剤、およびデバイスは、本発明のリン酸化抗原塩および組成物と共に使用するために適合させることができる。
【０２４３】
例としては、米国特許第３，８４５，７７０号明細書、米国特許第３，９１６，８９９号明細書、米国特許第３，５３６，８０９号明細書、米国特許第３，５９８，１２３号明細書、米国特許第４，００８，７１９号明細書、米国特許第５６７４，５３３号明細書、米国特許第５，０５９，５９５号明細書、米国特許第５，５９１，７６７号明細書、米国特許第５，１２０，５４８号明細書、米国特許第５，０７３，５４３号明細書、米国特許第５，６３９，４７６号明細書、米国特許第５，３５４，５５６号明細書、米国特許第５，７３３，５６６号明細書、および米国特許第６，３６５，１８５号明細書（これらはそれぞれ、参照によって本明細書中に援用される）に記載されるものが挙げられるが、これらに限定されない。これらの剤形は、例えば、アルギン酸、脂肪族ポリエステル、ベントナイト、酢酸セルロース、フタレート、カルナウバロウ（ｃａｒｎｕｂａ  ｗａｘ）、キトサン、エチルセルロース、グァーガム、微結晶性ワックス、パラフィン、ポリメタクリレート、ポビドン、キサンタンガム、イエローワックス、カルボマー、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、他のポリマーマトリックス、ゲル、透過性膜、浸透圧系（ＯＲＯＳＸ（米国カリフォルニア州マウンテンビュー（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ  ＵＳＡ）のアルザ・コーポレーション（Ａｌｚａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ））など）、多層コーティング、微小粒子、リポソーム、またはミクロスフェア、もしくは所望の放出プロファイルを提供するために様々な割合のこれらの組み合わせを用いる１またはそれ以上の活性成分の遅延または制御放出を提供するために使用することができる。さらに、イオン交換材料は、固定化された吸着塩の形態のリン酸化抗原、そしてそれと共に薬物の効果制御された送達を調製するために使用することができる。特定のアニオン交換体の例としては、デュオライト（Ｄｕｏｌｉｔｅ）Ａ５６８およびデュオライトＡＰ１４３（米国ペンシルベニア州スプリングハウス（Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈｏｕｓｅ，ＰＡ  ＵＳＡ）のローム＆ハース（Ｒｏｈｍ＆Ｈａａｓ））が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４４】
本発明の一具体例は、医薬上許容されるリン酸化抗原塩（例えば、ナトリウム、カリウム、またはリチウム塩）、またはその多形体、溶媒和物、水和物、脱水和物、無水物、またはアモルファス形態と、１またはそれ以上の医薬上許容される賦形剤または希釈剤とを含む単位剤形を包含し、医薬品組成物または剤形は制御放出のために処方される。特定の剤形は、浸透圧薬物送達系を用いる。
【０２４５】
特定のよく知られた浸透圧薬物送達系は、ＯＲＯＳ（米国カリフォルニア州マウンテンビューのアルザ・コーポレーション）と呼ばれる。この技術は、本発明の化合物および組成物の送達に容易に適合させることができる。技術の様々な態様は、米国特許第６，３７５，９７８号明細書、米国特許第６，３６８，６２６号明細書、米国特許第６，３４２，２４９号明細書、米国特許第６，３３３，０５０号明細書、米国特許第６，２８７，２９５号明細書、米国特許第６，２８３，９５３号明細書、米国特許第６，２７０，７８７号明細書、米国特許第６，２４５，３５７号明細書、および米国特許第６，１３２，４２０号明細書に開示されており、これらはそれぞれ参照によって本明細書中に援用される。本発明の化合物および組成物を投与するために使用することができるＯＲＯＳの特定の適合には、ＯＲＯＳプッシュ−プル、遅延プッシュ−プル、多層プッシュ−プル、およびプッシュ−スティック系が含まれるがこれらに限定されず、これらは全てよく知られている。例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｌｚａ．ｃｏｍ．が参照される。本発明の化合物および組成物の制御された経口送達のために使用することができるさらなるＯＲＯＳ系としては、ＯＲＯＳ−ＣＴおよびＬ−ＯＲＯＳが挙げられ、Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｔｉｍｅｓ、第ＩＩ巻、第ＩＩ版（アルザ・コーポレーション）も参照される。
【０２４６】
従来のＯＲＯＳ経口剤形は、薬物粉末（例えば、リン酸化抗原塩）を硬い錠剤に圧縮し、錠剤をセルロース誘導物でコーティングして半透過性膜を形成し、次にコーティングにオリフィスを穿孔する（例えばレーザーで）ことによって製造される。キム、チャーン（Ｃｈｅｒｎｇ）、制御放出剤形設計、２３１−２３８（Ｔｅｃｈｎｏｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ペンシルベニア州ランカスター、２０００年）。このような剤形の利点は、薬物の送達速度が生理学的または実験的な条件によって影響を受けないことである。ｐＨ依存性の溶解度を有する薬物でさえ、送達媒体のｐＨにかかわらず一定の速度で送達することができる。しかしながら、これらの利点は投与後の剤形内の浸透圧の増加により提供されるので、従来のＯＲＯＳ薬物送達系は、水溶性が低い薬物を有効に送達するために使用することができない。本発明のリン酸化抗原塩および複合体（例えば、リン酸化抗原ナトリウム）は、例えばアモルファスリン酸化抗原ナトリウム塩またはリン酸化抗原出発材料よりも水中により溶けやすいので、患者への浸透圧ベースの送達によく適している。
【０２４７】
その結果として、本発明の特定の剤形は、空洞を画定する壁（該壁は出口オリフィスがその中に形成されているか形成可能であり、少なくとも壁の一部は半透過性である）と、出口オリフィスから離れて空洞内に位置し、壁の半透過性部分と流体で連通する膨張性層と、出口オリフィスと隣接して空洞内に位置し、膨張性層と直接的または間接的に接触関係にある、乾燥または実質的に乾燥状態の薬物層と、壁の内側表面と空洞内に位置する薬物層の少なくとも外側表面との間に介在された流動促進層とを含み、前記薬物層は、リン酸化抗原の塩、もしくはその多形体、溶媒和物、水和物、脱水和物、無水物、またはアモルファス形態を含む。米国特許第６，３６８，６２６号明細書が参照され、その全体が参照によって本明細書中に援用される。
【０２４８】
本発明のもう１つの特定の剤形は、空洞を画定する壁（該壁は出口オリフィスがその中に形成されているか形成可能であり、少なくとも壁の一部は半透過性である）と、出口オリフィスから離れて空洞内に位置し、壁の半透過性部分と流体で連通する膨張性層と、出口オリフィスと隣接して空洞内に位置し、膨張性層と直接的または間接的に接触関係にある薬物層とを含み、該薬物層は多孔性粒子内に吸収された液体の活性剤製剤を含み、多孔性粒子は、液体の活性剤製剤がほとんど浸出することなく圧縮された薬物層を形成するのに十分な圧縮力に耐えるように適合され、剤形は出口オリフィスと薬物層との間に任意でプラセボ層を有し、活性剤製剤は、リン酸化抗原の塩、あるいはその多形体、溶媒和物、水和物、脱水和物、無水物、またはアモルファス形態を含む。米国特許第６，３４２，２４９号明細書が参照され、その全体が参照によって本明細書中に援用される。
【０２４９】
非経口剤形
非経口剤形は、皮下、静脈内、筋肉内および動脈内を含むがこれらに限定されない様々な経路で患者に投与することができる。非経口剤形の投与は、典型的には、汚染物質に対する患者の自然の防御をバイパスするので、非経口剤形は好ましくは無菌であるか、あるいは患者へ投与する前に無菌化することが可能である。非経口剤形の例としては、注射の準備用溶液、医薬上許容される注射用媒体中への溶解または懸濁に備えた乾燥品、注射の準備懸濁液、およびエマルジョンが挙げられるがこれらに限定されない。さらに、制御放出非経口剤形を調製することができる。
【０２５０】
本発明の非経口剤形を提供するために使用することができる適切な媒体は当業によく知られている。例としては、無菌水と、注射ＵＳＰ用の水と、生理食塩水と、グルコース溶液と、塩化ナトリウム注射、リンゲル注射、デキストロース注射、デキストロースおよび塩化ナトリウム注射、ならびに乳酸化リンゲル注射など（これらに限定されない）の水性媒体と、エチルアルコール、ポリエチレングリコール、およびプロピレングリコールなど（これらに限定されない）の水混和性媒体と、コーン油、綿実油、ピーナッツ油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、および安息香酸ベンジルなど（これらに限定されない）の非水性媒体とが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２５１】
また、本明細書で開示されるリン酸化抗原の医薬上許容される塩の溶解度を変更または修正する化合物も、従来の非経口剤形および制御放出非経口剤形を含む本発明の非経口剤形内に取り込むことができる。
【０２５２】
局所、経皮および粘膜剤形
本発明の局所剤形は、クリーム、ローション、軟膏、ゲル、シャンプー、スプレー、エアロゾル、溶液、エマルジョン、および当業者に知られた他の形態を含むがこれらに限定されない。例えば、レミントン（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ）の薬学（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、第１８版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ペンシルベニア州イーストン（１９９０年）、および医薬品剤形入門（Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ）、第４版、Ｌｅａ  ＆  Ｆｅｂｉｇｅｒ、ペンシルベニア州フィラデルフィア（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ）（１９８５年）が参照される。噴霧できない局所剤形のために、局所用途に適合性があり、好ましくは水よりも大きい動的粘度を有するキャリアあるいは１またはそれ以上の賦形剤を含む粘性〜半固体または固体の形態が一般的に使用される。適切な製剤は、溶液、懸濁液、エマルジョン、クリーム、軟膏、粉末、リニメント、膏薬などを含むがこれらに限定されず、所望される場合には、これらは殺菌されるか、あるいは例えば浸透圧などの種々の特性に影響を与えるための助剤（例えば、防腐剤、安定剤、湿潤剤、緩衝剤、または塩）と混合される。
【０２５３】
その他の適切な局所剤形としては噴霧可能なエアロゾル調製物があり、活性成分は好ましくは固体または液体不活性キャリアと併用され、加圧した揮発性物質（例えば、フレオンなどの気体推進剤）との混合物中、あるいはスクイーズボトル中にパッケージ化される。保湿剤または湿潤剤も、所望される場合には医薬品組成物および剤形に添加することができる。このようなさらなる成分の例は当該技術分野においてよく知られている。例えば、レミントン（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ）の薬学（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、第１８版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ペンシルベニア州イーストン（１９９０年）が参照される。
【０２５４】
本発明の経皮および粘膜剤形は、点眼液、パッチ、スプレー、エアロゾル、クリーム、ローション、坐薬、軟膏、ゲル、溶液、エマルジョン、懸濁液、または当業者に知られた他の形態を含むがこれらに限定されない。例えば、レミントン（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ）の薬学（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、第１８版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ペンシルベニア州イーストン（１９９０年）、および医薬品剤形入門（Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ）、第４版、Ｌｅａ＆Ｆｅｂｉｇｅｒ、ペンシルベニア州フィラデルフィア（１９８５年）が参照される。口腔内の粘膜組織の治療に適切な剤形は、口腔洗浄薬、経口ゲル、または口腔パッチとして処方することができる。さらなる経皮剤形としては「蓄積型」または「マトリックス型」パッチがあり、これらは、皮膚に適用されて特定の期間着用され、所望の量の活性成分の浸透を可能にする。
【０２５５】
本発明の活性成分を投与するために使用することができる経皮剤形および投与方法の例としては、米国特許第４，６２４，６６５号明細書、米国特許第４，６５５，７６７号明細書、米国特許第４，６８７，４８１号明細書、米国特許第４，７９７，２８４号明細書、米国特許第４，８１０，４９９号明細書、米国特許第４，８３４，９７８号明細書、米国特許第４，８７７，６１８号明細書、米国特許第４，８８０，６３３号明細書、米国特許第４，９１７，８９５号明細書、米国特許第４，９２７，６８７号明細書、米国特許第４，９５６，１７１号明細書、米国特許第５，０３５，８９４号明細書、米国特許第５，０９１，１８６号明細書、米国特許第５，１６３，８９９号明細書、米国特許第５，２３２，７０２号明細書、米国特許第５，２３４，６９０号明細書、米国特許第５，２７３，７５５号明細書、米国特許第５，２７３，７５６号明細書、米国特許第５，３０８，６２５号明細書、米国特許第５，３５６，６３２号明細書、米国特許第５，３５８，７１５号明細書、米国特許第５，３７２，５７９号明細書、米国特許第５，４２１，８１６号明細書、米国特許第５，４６６，４６５号明細書、米国特許第５，４９４，６８０号明細書、米国特許第５，５０５，９５８号明細書、米国特許第５，５５４，３８１号明細書、米国特許第５，５６０，９２２号明細書、米国特許第５，５８５，１１１号明細書、米国特許第５，６５６，２８５号明細書、米国特許第５，６６７，７９８号明細書、米国特許第５，６９８，２１７号明細書、米国特許第５，７４１，５１１号明細書、米国特許第５，７４７，７８３号明細書、米国特許第５，７７０，２１９号明細書、米国特許第５，８１４，５９９号明細書、米国特許第５，８１７，３３２号明細書、米国特許第５，８３３，６４７号明細書、米国特許第５，８７９，３２２号明細書、および米国特許第５，９０６，８３０号明細書（これらはそれぞれ、参照によって本明細書中に援用される）に開示されるものが挙げられるがこれらに限定されない。
【０２５６】
本発明によって包含される経皮剤形および粘膜剤形を提供するために使用することができる適切な賦形剤（例えば、キャリアおよび希釈剤）および他の材料は、医薬品技術分野において当業者にはよく知られており、所与の医薬品組成物または剤形が適用され得る特定の組織または器官に依存する。その事実を考慮して、無毒性および薬学的に許容可能である剤形を形成するために、典型的な賦形剤は、水、アセトン、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブタン−１，３−ジオール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、鉱油、およびこれらの混合物を含むがこれらに限定されない。
【０２５７】
治療すべき特定の組織によっては、本発明のリン酸化抗原の医薬上許容される塩による治療の前、同時、あるいは後にさらなる成分が使用されてもよい。例えば、浸透促進剤を用いることにより、組織へまたは組織を透過して活性成分を送達するのを助けることができる。適切な浸透促進剤は、アセトンと、エタノール、オレイル、テトラヒドロフリルなどの種々のアルコールと、ジメチルスルホキシドなどのアルキルスルホキシドと、ジメチルアセトアミドと、ジメチルホルムアミドと、ポリエチレングリコールと、ポリビニルピロリドンなどのピロリドンと、コリドン（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ）グレード（ポビドン（Ｐｏｖｉｄｏｎｅ）、ポリビドン（Ｐｏｌｙｖｉｄｏｎｅ））と、尿素と、トゥイーン（ＴＷＥＥＮ）８０（ポリソルベート８０）およびスパン（ＳＰＡＮ）６０（モノステアリン酸ソルビタン）などの種々の水溶性または不溶性糖エステルとを含むがこれらに限定されない。
【０２５８】
また、医薬品組成物または剤形のｐＨ、あるいは医薬品組成物または剤形が適用される組織のｐＨは、活性成分の送達を改善するように調整され得る。同様に、溶媒キャリアの極性、そのイオン強度、または張性も送達を改善するように調整することができる。ステアレートなどの化合物を医薬品組成物または剤形に添加して、送達を改善するように活性成分の親水性または親油性を有利に変更することができる。この関連で、ステアレートは、製剤のための脂質媒体として、乳化剤または界面活性剤として、そして送達促進剤または浸透促進剤としての機能を果たすことができる。リン酸化抗原の医薬上許容される塩の異なる水和物、脱水和物、溶媒和物、多形体、無水物、またはアモルファス形態を用いて、得られる組成物の特性をさらに調整することができる。
【０２５９】
好ましい用量
本発明の化合物は、化合物およびその特定の治療特性よび兆候に応じて、様々な障害の治療において使用することができる。一例では、リン酸化抗原化合物はγδＴ細胞の活性化または発現をもたらし、障害は、免疫障害か、あるいは、例えば癌または感染症あるいはワクチン接種において免疫刺激が所望される障害である。化合物は、自己免疫障害、アレルギーまたは喘息の治療において、および／または気道過敏症の治療のためにも有用であり得る。典型的な化合物には、ビスホスホネート化合物、ＢｒＨＰＰ、ＥｐｏｘＰＰ、ＨＤＭＡＰＰ、Ｃ−ＨＤＭＡＰＰ、およびＩＰＰが含まれ、その化学構造は本明細書中に記載される。
【０２６０】
本発明は、好ましくはヒトに投与するための剤形で、実質的または本質的に純粋な組成物および製剤を提供する。好ましい剤形は、任意で医薬品キャリアと一緒に実質的または本質的に純粋なリン酸化抗原を含む組成物を含み、リン酸化抗原は以下の量で存在する。
（１）式ＩＩＩａおよびＩＩＩｂならびにこれらの誘導物（ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ）の組成物：
ａ．  約０．１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇの間、または好ましくは約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間、好ましくは約５ｍｇ／ｋｇ〜約６０ｍｇ／ｋｇの間、もしくは約１０、１５、２０、３０、４０または５０ｍｇ／ｋｇ、あるいは
ｂ．  約５ｍｇ〜１０ｇの間、または好ましくは約２００ｍｇ〜約１０ｇの間、好ましくは約２００ｇ〜約１．２ｇの間、あるいは約２００ｍｇ／ｍ２〜４００、６００、８００、１０００、１２００、１４００、１６００または１８００ｍｇ／ｍ２（体表面積）の間。
（２）式ＩＩＩｃおよびその誘導物（ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）の組成物：
ａ．  約１μｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間、または好ましくは約１０μｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの間、好ましくは約２０μｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇの間、約２０μｇ／ｋｇ〜２．５ｍｇ／ｋｇの間、あるいは約０．１、０．２、０．３、０．４または０．５ｍｇ／ｋｇ、あるいは
ｂ．  約５０μｇ〜１０ｇの間、または好ましくは約１００μｇ〜約２ｇの間、好ましくは約１００μｇ〜約０．５ｇの間、あるいは約５ｍｇ／ｍ２〜１０、５０、１００、２００、３００、５００または１０００ｍｇ／ｍ２（体表面積）の間。
【０２６１】
好ましくは、リン酸化抗原は、実質的または本質的に非吸湿性である。好ましくは、リン酸化抗原は、ＨＰＡＥＣで測定（相対的な面積パーセントで表される）したときに少なくとも９５％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．８％または９９．９％であるアニオン純度を有する。
【０２６２】
本方法はこのような組成物の大規模製造も提供し、従って、バッチ量（例えば、少なくとも１０ｇ、２０ｇ、５０ｇ、１００ｇ、２００ｇ、３００ｇ、５００ｇ、７５０ｇ、１ｋｇ、２ｋｇまたはそれ以上）の実質的または本質的に純粋なリン酸化抗原組成物を含む。
【０２６３】
（治療方法）
本発明に従って調製されるリン酸化抗原は、任意の適切な治療的手順において使用することができる。異なるリン酸化抗原が異なる治療的有用性を有し、活性成分が分かっているまたは有効であると考えられている兆候において使用され得ることが認識されるであろう。例えば、リン酸化抗原は免疫調節（免疫賦活または阻害）活性を有し得るが、有する必要はない。
【０２６４】
一の態様では、本発明は、本発明の免疫賦活性リン酸化抗原分子および抗原を含むワクチンを提供する。もう１つの態様では、本発明は、サイトカイン発現、例えばインターロイキン発現、ＩＮＦ（型Ｉインターフェロン、例えばＩＦＮ−α、βまたはγ）発現、またはＴＮＦ（腫瘍壊死因子、例えばＴＮＦ−α）発現を誘発するための方法を提供する。本発明のこの態様による方法は、インターロイキン、型ＩのＩＦＮまたはＴＮＦを発現可能な細胞と、前記インターロイキン、型ＩのＩＦＮまたはＴＮＦの発現を誘発するのに有効な量の本発明のリン酸化抗原とを接触させることを必要とする。一の態様では、本発明は、γδＴ細胞、樹状細胞、Ｂ細胞、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋またはＣＤ４＋）、ＮＫ．Ｔ細胞、またはナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を直接または間接的に活性化するための方法を提供する。本発明のこの態様による方法は、免疫細胞、好ましくはγδＴ細胞と、前記免疫細胞を活性化するのに十分な量の本発明のリン酸化抗原とを接触させることを必要とする。
【０２６５】
一の態様では、本発明は、感染症を治療するための方法を提供する。本発明のこの態様による方法は、感染症の発症を有しているかあるいは発症の危険のある被験者に、感染症を治療または予防するために有効な量の本発明のリン酸化抗原を投与することを必要とする。一の具体例では、被験者は、ウィルス、細菌、真菌または寄生虫感染症から選択される感染症の発症を有しているか、あるいは発症の危険がある。一の態様では、本発明は、癌の治療方法を提供する。本発明のこの態様による方法は、癌の発症を有しているかあるいは発症の危険がある被験者に、癌を治療または予防するために有効な量の本発明のリン酸化抗原を投与することを必要とする。
【０２６６】
本発明が、特に、本明細書において言及されるいずれかの疾患または目的のため、例えば、癌、感染症の治療、ワクチン接種、予防、免疫細胞の活性化または刺激などにおける使用のための薬剤を製造するための本発明のリン酸化抗原の使用も提供することは認識されるであろう。
【０２６７】
癌の治療におけるＢｒＨＰＰおよびＥｐｏｘＰＰ
ＢｒＨＰＰの合成は、エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ）ら（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、第２７６巻、第２１版、１８３３７−１８３４４頁）に記載されており、その開示は参照によって本明細書中に援用される。ＥｐｏｘＰＰの合成は、欧州特許第１１０９８１８Ｂ１号明細書に記載されており、その開示は参照によって本明細書中に援用される。
【０２６８】
（１）本発明は特に、疾患、特に腫瘍、特に固体腫瘍、より特別には上記または下記で定義される好ましい疾患の１つの治療に関し、式ＩＩＩａおよびＩＩＩｂの化合物ならびにこれらの誘導物（ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ、特にＢＲＨＰＰ（Ａ）またはＥｐｏｘＰＰ（Ｃ））が、２週間から８週間までに１回、好ましくは３週間または４週間の間に１回の間隔で２回以上、式（Ａ）：
単一用量（ｍｇ／ｋｇ）＝（０．１〜ｙ）＊Ｎ    （Ａ）
に従って計算される用量でヒトに投与されることを特徴とする。式中、Ｎ（整数または分数）は、治療と治療の間の週の数（約２〜約８週間）であり、すなわちＮは約２〜約８であり、好ましくは約３〜４の間である。より好ましくは、治療用量は、式Ｂ：
単一用量（ｍｇ／ｋｇ）＝（５〜１００）＊Ｎ    （Ｂ）
に従って計算され、さらにより好ましくは、式Ｃ：
単一用量（ｍｇ／ｋｇ）＝（１０〜１００）＊Ｎ    （Ｃ）
に従って計算され、あるいはさらにより好ましくは式Ｄ：
単一用量（ｍｇ／ｍ２）＝（５〜６０）＊Ｎ    （Ｄ）
に従って計算される。ここで、式Ａ〜Ｄのそれぞれにおいて、Ｎは約２〜約８、または好ましくは約３〜４であり（治療と治療の間の約２〜約８週および約３〜約４週の間隔に相当する）、式ＩＩＩａおよびＩＩＩｂの化合物ならびにこれらの誘導物（ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ、特にＢＲＨＰＰ（Ａ）の投与は、好ましくは、
（ａ）約３週間〜約４週間に１回、好ましくは３週間または４週間に１回、ヒトにおいて、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１．２ｇ／ｋｇの間、好ましくは約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１．２ｇ／ｋｇの間、より好ましくは約５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間、さらにより好ましくは約５ｍｇ／ｋｇ〜６０ｍｇ／ｋｇの間、または好ましくは約２０ｍｇ／ｋｇである用量で行われるか、あるいは
（ｂ）約４週間〜約８週間に１回、好ましくは約５週間、６週間、７週間または８週間に１回、ヒトにおいて、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１．２ｇ／ｋｇの間、好ましくは約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１．２ｇ／ｋｇの間、より好ましくは約５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間、さらにより好ましくは約５ｍｇ／ｋｇ〜６０ｍｇ／ｋｇの間、または好ましくは約２０ｍｇ／ｋｇである用量で行われ、好ましくは投与は、２〜１２０分間、より好ましくは約５〜約３０分間、最も好ましくは約１０〜約３０分間、例えば約３０分間、静脈内注入によって行われる。
【０２６９】
（２）また本発明は、好ましくは、腫瘍疾患、最も好ましくは転移を有する腫瘍疾患の治療に関し、前記腫瘍は、胃腸、例えば結腸直腸、肺腫瘍、特に非小細胞肺癌、乳腺腫瘍、類表皮腫瘍、腎臓、尿生殖器、例えば前立腺、すい臓、脳腫瘍（および／またはその転移）、最も好ましくは、胃腸の腫瘍、特に結腸直腸癌、より特別には胃腸癌、特に結腸直腸癌、または尿生殖器管の腫瘍、特に前立腺癌から選択され、式ＩＩＩａおよびＩＩＩｂの化合物ならびにこれらの誘導物（ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ）、特にＢＲＨＰＰ（Ａ）またはＥｐｏｘＰＰ（Ｃ）は、温血動物、特にヒトに投与される。
【０２７０】
（３）また本発明は、好ましくは、個体のγδＴ細胞を刺激するためのインビボ投与計画、好ましくは腫瘍疾患、好ましくは固体腫瘍、あるいは自己免疫性障害または感染症の治療のための投与計画に関し、組成物は、式ＩＩＩａおよびＩＩＩｂの化合物ならびにこれらの誘導物（ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ）、特にＢＲＨＰＰ（Ａ）またはＥｐｏｘＰＰ（Ｃ）が、
（ａ）ヒトに対して、約ＥＣ５０値〜ＥＣ１００値の間、より好ましくはＥＣ５０の少なくとも１１０％、１２０％、１５０％または１７５％である用量、
（ｂ）ヒトに対して、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間である用量
で１回投与されるように個体に投与される。そして所望される場合には、１回または複数回（好ましくは少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも８回または少なくとも１０回）のさらなる用量（それぞれ、最初の用量について上記で言及した用量範囲内である）がさらなる治療サイクルで投与され、好ましくは、各用量は、治療される個体において前回の各用量投与からγδＴ細胞集団の基底レベルへの十分な回復を可能にする期間の後、特に前回の治療の１週間よりも後、２週間よりも後、より特別には前回の治療の２〜８週間後、最も特別には３〜４週間後、特にその治療の３週間後に投与される。
【０２７１】
より好ましくは、（１）〜（３）において、式ＩＶ〜ＸＩＶの化合物、特にＢＲＨＰＰまたはＥｐｏｘＰＰは、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１．２ｇ／ｋｇの間、好ましくは約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１．２ｇ／ｋｇの間、より好ましくは約５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間、さらにより好ましくは約５ｍｇ／ｋｇ〜６０ｍｇ／ｋｇの間、または好ましくは約２０ｍｇ／ｋｇである用量で３週間に１回ヒトに投与される。あるいは、式ＩＶ〜ＸＩＶの化合物、特にＢＲＨＰＰまたはＥｐｏｘＰＰは、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１．２ｇ／ｋｇの間、好ましくは約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１．２ｇ／ｋｇの間、より好ましくは約５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間、さらにより好ましくは約５ｍｇ／ｋｇ〜６０ｍｇ／ｋｇの間、または好ましくは約２０ｍｇ／ｋｇである用量で４週間に１回（４週間毎に）投与される。この用量は、好ましくは、２〜１２０分間、より好ましくは約５〜約３０分間、最も好ましくは約１０〜約３０分間、例えば約３０分間、静脈内（ｉ．ｖ．）投与によってヒトに投与される。
【０２７２】
より好ましくは、前記治療は、疾患の進行、許容できない毒性、完全寛解の決定を過ぎて１サイクルまたは好ましくは２サイクル、あるいは何らかの理由で患者の同意の中止が起きるまで繰り返される。
【０２７３】
（４）また本発明は、好ましくは、腫瘍疾患、特に（ｉ）胃腸、例えば結腸直腸、肺腫瘍、特に非小細胞肺癌、乳腺腫瘍、類表皮腫瘍、腎臓、尿生殖器、例えば前立腺、すい臓、脳腫瘍（および／またはその転移）、最も好ましくは、胃腸の腫瘍、特に結腸直腸癌、より特別には胃腸癌、特に結腸直腸癌、または尿生殖器管の腫瘍、特に前立腺癌から選択される固体腫瘍の治療のためのインビボ投与計画に関し、特に、該腫瘍は転移性であり、式ＩＩＩａおよびＩＩＩｂの化合物ならびにこれらの誘導物（ＩＩＩａ１、ＩＩＩａ２、ＩＩＩａ３、Ａ、Ｂ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｂ１、ＩＩＩｂ２、ＩＩＩｂ３、Ｃ）特にＢＲＨＰＰ（Ａ）またはＥｐｏｘＰＰ（Ｃ）は、最大耐容量（ＭＴＤ）または非ヒト動物で試験した最高用量の８０％よりも少ない、より好ましくは５０％よりも少ない用量で、温血動物に１週間〜８週間の間に１回投与される。
【０２７４】
癌の治療におけるＨＤＭＡＰＰ、ＣＨＤＭＡＰＰ、ＮＨＤＭＡＰＰおよびＨ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰ
ＨＤＭＡＰＰの合成方法は、ウォルフ（Ｗｏｌｆｆ）ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ（２００２年）４３：２５５５およびヘクト（Ｈｅｃｈｔ）ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ（２００２年）４３：８９２９に記載されており、これらの開示は、ＨＤＭＡＰＰ化合物の調製方法の教示に対する参照によって本明細書中に援用される。ＣＨＤＭＡＰＰの合成方法は、「実施例」と題された部分で言及される。ＮＨＤＭＡＰＰの構造および合成方法は、２００４年１２月２日に出願されたＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＩＢ２００４／００４３１１号明細書において提供され、その開示は参照によって本明細書中に援用される。Ｈ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰの構造および合成方法は、２００６年３月２１日に出願されたＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＩＢ２００６／００１２０６号明細書および実施例１１において提供され、その開示は参照によって本明細書中に援用される。
【０２７５】
（１）本発明は特に、疾患、特に腫瘍、特に固体腫瘍、より特別には上記または下記で定義される好ましい疾患の１つの治療に関し、式ＩＩＩｃの化合物およびその誘導物（ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）、特にＨＤＭＡＰＰ（Ｄ）またはＣ−ＨＤＭＡＰＰ（Ｅ）が、２週間から８週間までに１回、好ましくは３週間〜４週間の間に１回の間隔で２回以上、式（Ａ）
単一用量（ｍｇ／ｋｇ）＝（０．１〜ｙ）＊Ｎ    （Ａ）
に従って計算される用量でヒトに投与されることを特徴とする。式中、Ｎ（整数または分数）は、治療と治療の間の週の数（約２〜約８週間）であり、すなわちＮは約２〜約８であり、好ましくは約３〜４の間である。より好ましくは、治療用量は、式Ｂ
単一用量（ｍｇ／ｋｇ）＝（０．００１〜１００）＊Ｎ    （Ｂ）
に従って計算され、さらにより好ましくは、式Ｃ
単一用量（ｍｇ／ｋｇ）＝（０．０１〜５）＊Ｎ    （Ｃ）
に従って計算され、あるいはさらにより好ましくは式Ｄ
単一用量（ｍｇ／ｍ２）＝（０．０２〜２．５）＊Ｎ    （Ｄ）
に従って計算される。ここで、式Ａ〜Ｄのそれぞれにおいて、Ｎは約２〜約８、または好ましくは約３〜４であり（治療と治療の間の約２〜約８週および約３〜約４週の間隔に相当する）、式ＩＩＩｃの化合物およびその誘導物（ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）、特にＨＤＭＡＰＰ（Ｄ）またはＣ−ＨＤＭＡＰＰ（Ｅ）の投与は、好ましくは、
（ａ）約３週間〜約４週間に１回、好ましくは３週間または４週間に１回、ヒトにおいて、約１μｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間、好ましくは約１０μｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの間、より好ましくは約２０μｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇの間、さらにより好ましくは約２０μｇ／ｋｇ〜２．５ｍｇ／ｋｇの間、または好ましくは約０．５ｍｇ／ｋｇである用量で行われるか、
（ｂ）約４週間〜約８週間に１回、好ましくは約５週間、６週間、７週間または８週間に１回、ヒトにおいて、約１μｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間、好ましくは約１０μｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの間、より好ましくは約２０μｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇの間、さらにより好ましくは約２０μｇ／ｋｇ〜２．５ｍｇ／ｋｇの間、または好ましくは約０．５ｍｇ／ｋｇである用量で行われ、
好ましくは、投与は、２〜１２０分間、より好ましくは約５〜約３０分間、最も好ましくは約１０〜約３０分間、例えば約３０分間、静脈内注入によって行われる。
【０２７６】
（２）また本発明は、好ましくは、腫瘍疾患、最も好ましくは転移を有する腫瘍疾患の治療に関し、前記腫瘍は、胃腸、例えば結腸直腸、肺腫瘍、特に非小細胞肺癌、乳腺腫瘍、類表皮腫瘍、腎臓、尿生殖器、例えば前立腺、すい臓、および脳腫瘍（および／またはその転移）、最も好ましくは胃腸の腫瘍、特に結腸直腸癌、より特別には胃腸癌、特に結腸直腸癌、または尿生殖器管の腫瘍、特に前立腺癌から選択され、前記式ＩＩＩｃの化合物およびその誘導物（ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）、特にＨＤＭＡＰＰ（Ｄ）またはＣ−ＨＤＭＡＰＰ（Ｅ）は、温血動物、特にヒトに投与される。
【０２７７】
（３）また本発明は、好ましくは、個体のγδＴ細胞を刺激するためのインビボ投与計画、好ましくは腫瘍疾患、好ましくは固体腫瘍、あるいは自己免疫性障害または感染症の治療のための投与計画に関し、式ＩＩＩｃの化合物およびその誘導物（ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）、特にＨＤＭＡＰＰまたはＣ−ＨＤＭＡＰＰは、
（ａ）ヒトに対して、約ＥＣ５０〜ＥＣ１００の間、より好ましくはＥＣ５０の少なくとも１１０％、１２０％、１５０％または１７５％である用量、
（ｂ）ヒトに対して、約１０μｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの間の用量
で１回投与される。そして所望される場合には、１回または複数回（好ましくは少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも８回または少なくとも１０回）さらなる用量（それぞれ、最初の用量について上記で言及した用量範囲内である）がさらなる治療サイクルで投与され、好ましくは、各用量は、治療される個体において前回の各用量投与からγδＴ細胞集団の基底レベルへの十分な回復を可能にする期間の後、特に前回の治療の１週間よりも後、２週間よりも後、より特別には前回の治療の２〜８週間後、最も特別には３〜４週間後、特にその治療の３週間後に投与される。
【０２７８】
より好ましくは、（１）〜（３）において、式ＩＩＩｃの化合物およびその誘導物（ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）、特にＨＤＭＡＰＰまたはＣ−ＨＤＭＡＰＰは、約１μｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間、好ましくは約１０μｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの間、より好ましくは約２０μｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇの間、さらにより好ましくは約２０μｇ／ｋｇ〜２．５ｍｇ／ｋｇの間、または好ましくは約０．５ｍｇ／ｋｇ、または好ましくは約０．５ｍｇ／ｋｇである用量で３週間に１回ヒトに投与される。あるいは、式ＩＩＩｃの化合物およびその誘導物（ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）、特にＨＤＭＡＰＰまたはＣ−ＨＤＭＡＰＰは、約１μｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの間、好ましくは約１０μｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの間、より好ましくは約２０μｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇの間、さらにより好ましくは約２０μｇ／ｋｇ〜２．５ｍｇ／ｋｇの間、または好ましくは約０．５ｍｇ／ｋｇである用量で４週間に１回（４週間毎に）投与される。この用量は、好ましくは、２〜１２０分間、より好ましくは約５〜約３０分間、最も好ましくは約１０〜約３０分間、例えば約３０分間、静脈内（ｉ．ｖ．）投与によってヒトに投与される。
【０２７９】
より好ましくは、前記治療は、疾患の進行、許容できない毒性、完全寛解の決定を過ぎて１サイクルまたは好ましくは２サイクル、あるいは何らかの理由で患者の同意の中止が起きるまで繰り返される。
【０２８０】
（４）また本発明は、好ましくは、腫瘍疾患、特に（ｉ）胃腸、例えば結腸直腸、肺腫瘍、特に非小細胞肺癌、乳腺腫瘍、類表皮腫瘍、腎臓、尿生殖器、例えば前立腺、すい臓、および脳腫瘍（および／またはその転移）、最も好ましくは、胃腸の腫瘍、特に結腸直腸癌、より特別には胃腸癌、特に結腸直腸癌、または尿生殖器管の腫瘍、特に前立腺癌から選択される固体腫瘍の治療のためのインビボ投与計画に関し、特に、該腫瘍は転移性であり、式ＩＩＩｃの化合物およびその誘導物（ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）、特にＨＤＭＡＰＰまたはＣ−ＨＤＭＡＰＰは、最大耐容量（ＭＴＤ）の８０％よりも少ない、より好ましくは５０％よりも少ない用量で、温血動物に１週間〜８週間の間に１回投与される。
【０２８１】
好ましくは、前記式ＸＶ〜ＸＸＩの化合物、特にＨＤＭＡＰＰまたはＣ−ＨＤＭＡＰＰによるヒトの毎週の治療の場合、用量は、ＭＴＤの約１〜約６０％、好ましくは約１０〜約６０％、例えば約５〜約３５％の範囲、例えばＭＴＤの約３０〜約３５％の範囲である。好ましくは、ＨＤＭＡＰＰおよびＣ−ＨＤＭＡＰＰについては、用量は、ＭＴＤの約５〜約６０％、好ましくは約１０〜約６０％の範囲、特に約１０〜約４５％の範囲、最も特別には約３０〜約４５％の範囲である。特別な場合には、ＨＤＭＡＰＰおよびＣ−ＨＤＭＡＰＰについては、用量は約２〜約１８ｍｇ／ｍ２の間であり得る。
【０２８２】
（５）また本発明は、好ましくは、疾患、特に胃腸、例えば結腸直腸、肺腫瘍、特に非小細胞肺癌、乳腺腫瘍、類表皮腫瘍、腎臓、尿生殖器、例えば前立腺、すい臓、および脳腫瘍（および／またはその転移）、最も好ましくは胃腸の腫瘍、特に結腸直腸癌、より特別には胃腸癌、特に結腸直腸癌、または尿生殖器管の腫瘍、特に前立腺癌から選択される固体腫瘍疾患の治療のためのインビボ投与計画に関し、特に、該腫瘍は転移性であり、式ＩＩＩｃの化合物およびその誘導物（ＩＩＩｃ、ＩＩＩｃ１、ＩＩＩｃ２、ＩＩＩｃ３、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ）、特にＨＤＭＡＰＰ（Ｄ）は、最大効果の半分を与える有効濃度値（ＥＣ５０）と、最大効果を与える有効濃度値（ＥＣ１００）との間である用量、あるいはＥＣ５０の１１０％〜２００％の間、または好ましくはＥＣ５０値の少なくとも１１０％、１２０％、１３０％、１５０％、１６０％、１７５％または２００％である用量で、温血動物に１週間〜８週間の間に１回投与される。
【０２８３】
本明細書中に記載されるいずれかの治療方法のさらに好ましい態様では、本方法は、サイトカイン、好ましくはＩＬ−２をさらに投与することを含み得る。癌については、最も好ましくは、１日〜１０日の間を含む期間にわたってインターロイキン−２ポリペプチドが投与される。好ましくは、インターロイキン−２ポリペプチドは、１日あたり０．２〜１０ＭＵ（１００万単位）の間、さらにより好ましくは０．２〜１．５ＭＵの間、さらに好ましくは０．２〜１ＭＵの間を含む１日の用量で投与される。サイトカイン、好ましくはインターロイキン−２ポリペプチドの１日の用量は、単回の注入または２回の注入で投与される。好ましくは、γδＴ細胞活性化剤は、治療の初めに単一用量で投与される。
【０２８４】
（手順）
ＸＲＰＤ分析の手順：
第１の手順：
Ｘ線粉末回折測定は、シータ−シータ反射モードにおいてブラッグ・ブレンターノ（Ｂｒａｇｇ  Ｂｒｅｎｔａｎｏ）ジオメトリーを有するＳＩＥＭＥＮＳ  Ｄ５００５回折計（ブルカー・アナリティカル・エックスレイ・システムズ（Ｂｒｕｋｅｒ  ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  ｘ−Ｒａｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、Ｄ−７６１８７、カールスルーエ、独国（Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ））を用いて実行した。機器には、Ｘ線管（銅対陰極、４０ｋＶ、３０ｍＡ、Ｋα１放射：１．５４０５９８オングストローム、Ｋα２放射：１．５４４４２６オングストローム）、ニッケルフィルタおよびシンチレーション検出器が備えられる。段階につき４秒のカウント時間で３°〜３０°の角度範囲にわたって、０．０４°（２シータ）の段階によって回折パターンを集めた。内部標準は使用しなかったが、外部標準として石英サンプルを分析した。サンプルの温度は室温であるか、あるいは加熱が必要とされる場合には正確に監視した。制御ソフトウェアとしてＤＩＦＦＲＡＣ  ＰＬＵＳ  Ｅｄｉｔ  Ｊｏｂソフトウェア（ｖ．２．００）を使用し、Ｅｖａソフトウェア（ｖ．９．０およびｖ．１０．０）を用いてデータ処理を実施した。
【０２８５】
第２の手順：
Ｘ線粉末回折測定は、シータ−シータ反射モードにおいてブラッグ・ブレンターノ・ジオメトリーを有するＳＩＥＭＥＮＳ  Ｄ５０００Ｍａｔｉｃ回折計（ブルカー・アナリティカル・エックスレイ・システムズ、Ｄ−７６１８７、カルルスルーエ、独国）を用いて実行した。機器には、Ｘ線管（銅対陰極、４０ｋＶ、４０ｍＡ、Ｋα１放射：１．５４０５９８オングストローム、Ｋα２放射：１．５４４４２６オングストローム）、ニッケルフィルタおよびシンチレーション検出器が備えられる。段階につき４秒のカウント時間で３°〜３０°の角度範囲にわたって、０．０４°（２シータ）の段階によって回折パターンを集めた。内部標準は使用しなかったが、外部標準として石英サンプルを分析した。分析は室温で実行した。制御ソフトウェアとしてＤＩＦＦＲＡＣ  ＰＬＵＳ  Ｅｄｉｔ  Ｊｏｂソフトウェア（ｖ．２．００）を使用し、Ｅｖａソフトウェア（ｖ．９．０）を用いてデータ処理を実施した。
【０２８６】
ＤＳＣ分析の手順：
ＤＳＣ分析は、ＳＥＴＡＲＡＭ１４１示差走査熱量計（セタラム（ＳＥＴＡＲＡＭ）、６９３００  カリュイール、仏国（Ｃａｌｕｉｒｅ，Ｆｒａｎｃｅ））を用いて実行した。パージガスは使用しなかった。対照材料は、蓋のない空のアルミニウムパンであった。開放されたアルミニウムパン内にサンプルを秤量し、次にアナライザー内に入れた。分析は、２°／分−１の加熱速度を用いて、様々な温度範囲内で実施した。制御ソフトウェアとしてＳＥＴＡＲＡＭ  ＡＣＱＵＩＳＩＴＩＯＮ  Ｍｏｄｕｌｅソフトウェア（ｖ．１．４）を使用し、ＳＥＴＡＲＡＭ  ＤＡＴＡ  ＰＲＯＣＥＳＳＩＮＧ  Ｍｏｄｕｌｅソフトウェア（ｖ．１．３９）を用いてデータ処理を実施した。
【０２８７】
ＴＧＡ分析の手順：
ＴＧＡ測定は、ＮＥＴＺＳＣＨ  ＳＴＡ  ４０９ＰＣ熱重量分析器（ＮＥＴＺＳＣＨ、Ｄ−９５１００  ゼルプ、独国（Ｓｅｌｂ，Ｇｅｒｍａｎｙ））を用いて実行した。使用したパージガスは、乾燥窒素（ガス流＝５０ｍＬ／分）であり、対照材料は蓋のない空のアルミニウムパンであった。開放されたアルミニウムパン内にサンプルを秤量し、次に熱重量分析計内に入れた。分析は、２°／分−１の加熱速度を用いて、様々な温度範囲内で実施した。獲得およびデータ処理のためにＰＲＯＴＥＵＳソフトウェアを用いた。
【０２８８】
ＴＧ／ＤＳＣ分析の手順：
ＴＧ／ＤＳＣ測定は、低温炉を備えたＮＥＴＺＳＣＨ  ＳＴＡ  ４４９Ｃ  Ｊｕｐｉｔｅｒ熱重量分析器（ＮＥＴＺＳＣＨ、Ｄ−９５１００  セルブ、独国）を用いて実行した。使用したパージガスはヘリウム（ガス流＝６０ｍＬ／分）であり、対照材料は蓋のない空のアルミニウムパンであった。開放されたアルミニウムパン内にサンプルを秤量し、次に分析器内に入れた。分析は、２°／分−１の加熱速度を用いて、様々な温度範囲内で実施した。獲得およびデータ処理のためにＰＲＯＴＥＵＳソフトウェアを使用した（ｖ．４．７．０）。
【０２８９】
吸湿性および水分測定の手順：
第１の手順：
自動化された水分吸着アナライザーを用いてアモルファスＢｒＨＰＰの水分吸着等温線を獲得した。分析の温度は２０℃であった。それぞれの測定ごとに正確に、事前に風袋を考慮したパン内に約２５ｍｇのサンプルを秤量し、次にアナライザー内に入れた。
【０２９０】
０％Ｒ．Ｈ．（Ｒ．Ｈ．は相対湿度を表す）における安定化段階の後、２０％Ｒ．Ｈの段階によってＲ．Ｈ．を上昇させながら、質量変化を記録した。上限を８０％Ｒ．Ｈ．に調整した。この第２の段階は後で、Ｒ．Ｈ．の０％Ｒ．Ｈまでの段階的な低下が行われる。この全体的な手順は、「フルサイクル」分析を構成する。数回の連続フルサイクルが同じサンプルに適用され得る。
【０２９１】
第２の手順：
ＤＶＳ−１自動化水分吸着アナライザーを用いて結晶相の水分吸着等温線を獲得した（サーフェス・メジャーメンツ・システムズ（Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、アルパートン、ミドルセックス、英国（Ａｌｐｅｒｔｏｎ，Ｍｉｄｄｌｅｓｅｘ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍ））。対照材料は空のガラスパンであり、全体のガス流は２００ｓｃｃｍ／分−１（標準立方センチメートル／分）であった。分析の温度は２２℃であった。それぞれの測定ごとに正確に、事前に風袋を考慮したガラスパン内に約１５ｍｇのサンプルを秤量し、次にアナライザー内に入れた。
【０２９２】
第１の段階として、吸着または吸収された水を除去するために、サンプルの恒量まで乾燥窒素（０％Ｒ．Ｈ）を適用した（潜在的な脱水）。次に、１０％Ｒ．Ｈの段階によってＲ．Ｈ．を上昇させながら質量変化を記録した。サンプルの質量変化が５．１０−４ｍｇ／分−１未満になり次第、自動化アナライザーに以下の段階を開始させた。上限を化合物の潮解よりも下に調整し、９８％Ｒ．Ｈ．を決して超えなかった。この第２の段階の後で、Ｒ．Ｈ．の０％Ｒ．Ｈまでの段階的な低下が行われる。この全体的な手順は、「フルサイクル」分析を構成する。数回の連続フルサイクルが同じサンプルに適用され得る。
【０２９３】
制御およびデータ収集ソフトウェアとしてＤＶＳＷｉｎ（ｖ２．１８）を使用し、データ処理は、ＤＶＳ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｕｉｔｅ（ｖ４．３）を用いて実施した。
【０２９４】
ＤＶＳ手順において使用されるさらなるパラメータは次のとおりである：
プロトコール（Ｐｒｏｔｏｃｏｌｅ）動的蒸気吸着／アパレイル（Ａｐｐａｒｅｉｌ）表面測定システム
自動化水分吸着アナライザー／モデル：ＤＶＳ−１
分析方法：
段階モード
温度：２５℃
段階の数
段階ｄｍ／ｄｔ＜０，０００５（ｍｇ／分）
初期段階Ｒ．Ｈ．＝０％
最終段階Ｒ．Ｈ．＝９８％
ハーフサイクルまたはフルサイクル（または数回の連続フルサイクル）
ｄｍ／ｄｔウィンドウ：５
最小段階：２０分
最大段階：１２０分
総ガス流：２００
窒素：２００バール、Ｈ２Ｏ＜３ｐｐｍ、Ｏ２  ＜２ｐｐｍ、Ｒｅｆ．Ａｚｏｔｅ  Ｎ５０  Ｂ５０＊０
初期サンプル重量：
ソフトウェア−データ収集およびデータ処理：
ＤＶＳＷｉｎ  ｖ２．１８（制御ソフトウェア）、
ＤＶＳ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｕｉｔｅ  ｖ４．３（分析ソフトウェア）。
【０２９５】
ＨＰＡＥＣ分析の手順：
リン酸エステルの化学純度（幾何異性体の異性体純度を含む）は、導電率検出が抑制された高速アニオン交換クロマトグラフィ（ＨＰＡＥＣ）を用いて決定される。ＨＰＡＥＣデバイスは、ＤＩＯＮＥＸ  Ｃｈｒｏｍｅｌｅｏｎ（登録商標）クロマトグラフィソフトウェアがロードされたコンピュータに接続されたＤＩＯＮＥＸ  ＤＸ６００システム（米国カリフォルニア州、サニーベール（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ  ＣＡ，ＵＳＡ）のダイオネクス（ＤＩＯＮＥＸ）コーポレーション）を含む。ＤＩＯＮＥＸ  ＣＤ２５導電率検出器は、自動抑制モードまたは外部水分モードのいずれかに設定されたアニオン自己再生サプレッサ（ＡＳＲＳ（登録商標）−ｕｌｔｒａＩＩ−４ｍｍ）と共に使用される。使用されるＨＰＡＥＣカラムは、ＡＧ１１ガードカラム（４×５０ｍｍ）を備えたＤＩＯＮＥＸ  Ｉｏｎ  Ｐａｃ（登録商標）ＡＳ１１カラム（４×２５０ｍｍ）である。この手順では、リン酸エステルは、水酸化ナトリウムまたはカリウムの段階勾配によりアニオン交換カラムから溶出される（アニオン形態で）。
【実施例】
【０２９６】
リン酸化抗原化合物
【０２９７】
【表２】
2009511449.tif 000027
【０２９８】
ＢｒＨＰＰの合成は、エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ）ら（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、第２７６巻、第２１版、１８３３７−１８３４４頁）または米国特許第６，６６０，７２３号明細書に記載されており、これらの開示は参照によって本明細書中に援用される。ＥｐｏｘＰＰの合成は、欧州特許第１１０９８１８Ｂ１号明細書に記載されている。
【０２９９】
ＣＨＤＭＡＰＰの合成は、任意の適切な方法に従って実行することができる。例としては、ナカムラ（Ｎａｋａｍｕｒａ）ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ｎ°２、１１１−１１２頁（１９７３年）、ゾレティク（Ｚｏｒｅｔｉｃ）およびチャン（Ｚｈａｎｇ）、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、第３７−１１巻、１７５１−１７５４頁（１９９６年）またはアンブライト（Ｕｍｂｒｅｉｔ）およびシャープレス（Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ）、ＪＡＣＳ、９９−１６、５５２６−５５２７頁（１９７７年）（これらの開示は参照によって本明細書中に援用される）の、リン酸化またはホスホン酸化の前のＥ−ヒドロキシジメチルアリル型シントンの製造方法が挙げられる。次に、リン酸化またはホスホン酸化は、ＰＣＴ特許公報、国際公開第０３／０５０１２８号パンフレット、ブロンディノ（Ｂｒｏｎｄｉｎｏ）ら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｆｌｕｏｒｉｎｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、７６、１９３−２００頁（１９９６年）、またはバレンタイン（Ｖａｌｅｎｔｉｊｎ）ら、Ｓｙｎ．Ｌｅｔｔ．、６６３−６６４頁（１９９１年）（これらの開示は参照によって本明細書中に援用される）に記載される方法に従って実行することができる。ＩＰＰの調製は、米国特許第５、６３９，６５３号明細書に記載されている。
【０３００】
（実施例１）
３−（ブロモメチル）−３−ブタノール−１−イル二リン酸ジキニニウム塩（ＢｒＨＰＰキニーネ塩）の調製
ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉの調製：
２５．４５ｇ（４９．７ｍｍｏｌ、１当量）のＢｒＨＰＰナトリウム塩のラセミ混合物
（仏国マルセイユ（Ｍａｒｓｅｉｌｌｅｓ，Ｆｒａｎｃｅ）のイナート・ファルマ（ＩＮＮＡＴＥ  ＰＨＡＲＭＡ）バッチＩＮＰ−Ｄ００４−０３ａ、ＨＰＡＥＣ分析に基づいて８６％の純度）を室温で１００ｍＬの脱イオン水に溶解する。得られた水溶液を、１．２１６当量（５５３ｍＬ）のＩＭＡＣ１１００カチオン樹脂（Ｈ＋型）を含有するカラムにロードし、次に６５０ｍＬの脱イオン水で溶出させる。溶出後、得られたＢｒＨＰＰの酸性溶液の体積は約７５０ｍＬである。この溶液に同体積のエタノールを添加する。次に、３２．２６ｇの無水キニーネ（９９．５ｍｍｏｌ、２当量、９９重量％純度、ベルギーのＡＣＲＯＳ（登録商標）から購入）を３００ｍＬのエタノールに溶解することによって予め調製したキニーネ塩基のエタノール性溶液を、ＢｒＨＰＰの酸性溶液に攪拌しながらゆっくり添加する（塩化段階）。４０℃の減圧下における蒸発によって溶媒の全量を除去し、乾燥残渣を得るためにエタノールの２００ｍＬ部分の添加により蒸留の連続段階を実施する。この段階で、約５６．６ｇの黄色がかったフォームが得られる。結晶化を実施するために、乾燥残渣を最小量のエタノール（約２５０ｍＬ）に溶解し、周囲温度で脱イオン水を攪拌しながらゆっくり添加する。高濁度のスラリーが得られたら水の添加を停止する（約１Ｌの水）。次に、ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、周囲雰囲気で恒量まで乾燥させる。この手順によって４０．５ｇのＢｒＨＰＰキニーネ塩の結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉが約７８％の収率で得られる。
【０３０１】
ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩの調製：
３０℃から開始して、（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉを１０℃段階（それぞれの増分の間は４５分）で徐々に加熱する。７０℃において、（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩが得られる。
【０３０２】
ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩの調製：
３０℃から開始して、（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉを１０℃増分（それぞれの増分の間は４５分）で徐々に加熱する。１００℃において、（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩが得られる。
【０３０３】
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）分析：
（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉ、（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩおよび（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩのＸＲＰＤパターンは、図１、図２および図３にそれぞれ示される（バックグラウンドは除去されていない）。各ＸＲＰＤパターンについて、顕著なピークの回折角（２シータ）、強度および相対強度（最も強力な線の割合で表される）は関連の表にまとめられる。（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉの分析は第２の手順（ＳＩＥＭＥＮＳ  Ｄ５０００  Ｍａｔｉｃ）に従って実行したが、他の２つは、第１の手順（ＳＩＥＭＥＮＳ  Ｄ５００５、（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩについては７０℃、および（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩについては１００℃）に従って実行した。
【０３０４】
ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉの組成：
周囲条件下で保存される結晶性ＢｒＨＰＰキニーネ塩（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉの化学量論は、ＢｒＨＰＰ１分子、キニーネ２分子、および水３分子である。この例では、水の量は、第１の手順（ＮＥＴＺＳＣＨ  ＳＴＡ  ４０９ＰＣ熱重量分析器）を用いて図１に示されるような熱重量分析によって決定される。
【０３０５】
数回の分析の後の平均質量損失は５．１５％であり、これは３モル当量の水に相当する（理論上の質量変化：Δｍｔｈ＝５．１６％）。５５℃〜１００℃の間に脱水が生じる。ＢｒＨＰＰ結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩに相当する無水化合物が、周囲温度（約２０℃）で２４時間、１００％相対湿度（ＲＨ）下で保存される場合には、三水和物の結晶性ＢｒＨＰＰキニーネ（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉが回収される。このように、この現象は可逆的である。
【０３０６】
（実施例２）
３−（ブロモメチル）−３−ブタノール−１−イル二リン酸、ジ−シンコニジニウム塩（ＢｒＨＰＰシンコニジン塩）の調製
アモルファス状態のＢｒＨＰＰシンコニジン塩の調製：
１．１２０ｇ（２．１８７ｍｍｏｌ、１当量）のラセミ型ＢｒＨＰＰナトリウム塩（仏国マルセイユのイナート・ファルマ、バッチＩＮＰ−Ｄ００４−０３ａ、ＨＰＡＥＣ分析に基づいて８６％の純度）を室温で５ｍＬの脱イオン水に溶解する。得られた水溶液を、１９４ミリ当量（８８ｍＬ）のＩＭＡＣ１１００カチオン樹脂（Ｈ＋型）を含有するカラムにロードし、次に９０ｍＬの脱イオン水で溶出させる。溶出後、得られたＢｒＨＰＰの酸性溶液の体積は約９５ｍＬである。この溶液に５０ｍＬのエタノールを添加する。次に、１．２８４ｇのシンコニジン（４．３６２ｍｍｏｌ、２当量、９８．５重量％最低純度、ベルギーのＡＣＲＯＳ（登録商標）から購入）を４０ｍＬのエタノールに溶解することによって予め調製したシンコニジン塩基のエタノール性溶液を、ＢｒＨＰＰの酸性溶液に攪拌しながらゆっくり添加する（塩化段階）。得られる混合物は均一な無色の溶液である。４０℃の減圧下における蒸発によって溶媒の全量を除去し、乾燥残渣を得るためにエタノールの５０ｍＬ部分の添加により蒸留の連続段階を実施する。この手順によって２．２６６ｇのアモルファスＢｒＨＰＰシンコニジン塩（黄色がかったフォーム）が得られる。
【０３０７】
ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉの調製：
４６２ｍｇのアモルファス状態のＢｒＨＰＰシンコニジン塩を、周囲温度（約２０℃）で攪拌しながら２３．３ｇの脱イオン水中に均質化する。数分後、固相は自然発症的に核形成し、徐々に白色懸濁液に至る。温度を７０℃に上昇させる（加熱プレートを用いて）ことによって固体の全量を溶解した。次に加熱を停止し、系をプレート上に保持して、周囲温度まで混合物の徐冷（数時間）を可能にする。この方法によって、ゆっくりとした再結晶が得られる。ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、アセトンで洗浄し、次に周囲雰囲気で恒量まで乾燥させる。２５ｍｇの白色のＢｒＨＰＰシンコニジン塩の結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉが約５％の収率で得られる。
【０３０８】
ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩの調製：
１．６９７ｇのアモルファス状態のＢｒＨＰＰシンコニジン塩を、周囲温度（約２０℃）で攪拌しながら５．９３ｇの水／エタノール（７５／２５重量％）混合物中に均質化する。数分後、固相は自然発症的に核形成し、徐々に白色スラリーに至る。系を攪拌しながら２４時間周囲温度に保持する。ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、次に周囲雰囲気で恒量まで乾燥させる。この手順によってＢｒＨＰＰシンコニジン塩の（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩが得られる。
【０３０９】
Ｘ線粉末回折分析：
アモルファス（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉおよび（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩのＸＲＰＤパターンは、図４、図５および図６にそれぞれ示される（バックグラウンドは除去されていない）。（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉおよび（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩについて、顕著なピークの回折角（２シータ）、強度および相対強度（最も強力な線の割合で表される）は関連の表にまとめられる。これらの分析は、第１の手順（ＳＩＥＭＥＮＳ  Ｄ５００５、室温）に従って実行した。
【０３１０】
（実施例３）
３−（ブロモメチル）−３−ブタノール−１−イル二リン酸、ジ−８−ヒドロキシキノリニウム塩（ＢｒＨＰＰ８−ヒドロキシキノリン塩）の調製
ＢｒＨＰＰ８−ヒドロキシキノリン塩、結晶相Ｉの調製：
１．０３４ｇ（２．０１９ｍｍｏｌ、１当量）のラセミ型ＢｒＨＰＰナトリウム塩（仏国マルセイユのイナート・ファルマ、バッチＩＮＰ−Ｄ００４−０３ａ、ＨＰＡＥＣ分析に基づいて８６％の純度）を室温で５ｍＬの脱イオン水に溶解する。得られた水溶液を、１９４ミリ当量（８８ｍＬ）のＩＭＡＣ１１００カチオン樹脂（Ｈ＋型）を含有するカラムにロードし、次に９０ｍＬの脱イオン水で溶出させる。溶出後、得られたＢｒＨＰＰの酸性溶液の体積は約９５ｍＬである。この溶液に２０ｍＬのメタノールを添加する。次に、５９４ｍｇの８−ヒドロキシキノリン（４．０９２ｍｍｏｌ、２当量、ジエチルエーテル中での再結晶によって予め精製される）を２０ｍＬのメタノールに溶解することによって予め調製した８−ヒドロキシキノリン塩基のメタノール性溶液を、ＢｒＨＰＰの酸性溶液に攪拌しながらゆっくり添加する（塩化段階）。得られる混合物は均一な黄色の溶液である。４０℃の減圧下における蒸発によって溶媒の全量を除去し、乾燥残渣を得るためにメタノールの５０ｍＬ部分の添加により蒸留の連続段階を実施する。この段階で、１．５３７ｇの黄色の固体が得られる。この固体を６０℃で２０ｍＬのメタノールに溶解する（均一な黄色の溶液）。結晶化を誘発するために、冷却勾配（６０℃から２０℃まで２時間）が適用される（２８℃で少量の相Ｉにより種入れする）。この結晶化の後に、熟成段階（１０°／時の冷却速度で３０℃〜１０℃の間の２４回の温度サイクル）を行う。最後のサイクルは、１８℃で停止させ（冷却段階中）、ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、周囲雰囲気で恒量まで乾燥させる。この手順によって、４１１ｍｇの黄色いＢｒＨＰＰ８−ヒドロキシキノリン塩の結晶相Ｉが約３２％の収率で得られる。
【０３１１】
Ｘ線粉末回折分析：
結晶相ＩのＸＲＰＤパターンは、図７に示される（バックグラウンドは除去されていない）。顕著なピークの回折角（２シータ）、強度および相対強度（最も強力な線の割合で表される）は関連の表にまとめられる。この分析は、第２の手順（ＳＩＥＭＥＮＳ  Ｄ５０００  Ｍａｔｉｃ）に従って実行した。
【０３１２】
（実施例４）
３−（ブロモメチル）−３−ブタノール−１−イル二リン酸、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアンモニウム塩（ＢｒＨＰＰベンザチン塩）の調製
ＢｒＨＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉの調製：
１．０８０ｇ（２．１０９ｍｍｏｌ、１当量）のラセミ型ＢｒＨＰＰナトリウム塩（仏国マルセイユのイナート・ファルマ、バッチＩＮＰ−Ｄ００４−０３ａ、ＨＰＡＥＣ分析に基づいて８６％の純度）を室温で５ｍＬの脱イオン水に溶解する。得られた水溶液を、１９４ミリ当量（８８ｍＬ）のＩＭＡＣ１１００カチオン樹脂（Ｈ＋型）を含有するカラムにロードし、次に１１０ｍＬの脱イオン水で溶出させる。溶出後、得られたＢｒＨＰＰの酸性溶液の体積は約１１５ｍＬである。次に、５２０ｍｇのベンザチン（２．１６４ｍｍｏｌ、１当量、９７％純度、独国のシグマ−アルドリッチ（ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ）（登録商標）から購入）を２０ｍＬのエタノールに希釈することによって予め調製したベンザチン塩基のエタノール性溶液を、ＢｒＨＰＰの酸性溶液に攪拌しながらゆっくり添加する（塩化段階）。得られる混合物は無色の溶液である。４０℃の減圧下における蒸発によって溶媒の全量を除去し、数時間乾燥窒素雰囲気下で乾燥を完了させる。この段階で１．３８３ｇの白色固体が得られる。４０℃において乾燥残渣に７８ｇの脱イオン水を攪拌しながら添加し、低粘度の白色懸濁液がもたらされる。徐冷勾配（４０℃から２℃まで、ｔ＞４時間）は、結晶性材料の量をあまり増大させない。この懸濁液に５．１ｇのエタノールを添加し（最終溶媒組成物：９４／６重量％）、系を−７℃まで急速に冷却する（溶媒−固体系の結晶化）。次に、温度を０℃まで上昇させ、スラリーを等温で１６時間の攪拌下に保持する。ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、２０ｍＬのアセトンで洗浄し、次に周囲雰囲気で恒量まで乾燥させる。この手順によって、５２１ｍｇのＢｒＨＰＰベンザチン塩のラセミ型白色結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉが約５１％の収率で得られる。
【０３１３】
ＢｒＨＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩの調製（自発性の核形成）：
２５４ｍｇのＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉ（０．４３５ｍｍｏｌ）を、２．３７４ｇの酢酸（５０％、重量％）−水（５０％）混合物（酢酸１００％、仏国のプロラボ、ＶＷＲインターナショナル（Ｐｒｏｌａｂｏ，ＶＷＲ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｒａｎｃｅ）から購入）中に３３℃で溶解する。７．９７４ｇのメタノールを攪拌しながら添加する。次に、白色固相の自発性核形成が生じ、適度な粘度の懸濁液が徐々にもたらされる。ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、周囲雰囲気で恒量まで乾燥させる。この手順によって、０．１８２ｇのＢｒＨＰＰベンザチン塩の溶媒和したラセミ型白色結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩが７２％の収率で得られる。
【０３１４】
ＢｒＨＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩの調製（種入れされた結晶化）：
２５９ｍｇのＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉ（０．４４４ｍｍｏｌ）を室温で９３２ｍｇの酢酸（５０％、重量％）−水（５０％）混合物（酢酸１００％、仏国のプロラボ、ＶＷＲインターナショナルから購入）中に溶解する。１．０６４ｇのメタノールが攪拌しながら添加される。次に、数ミリグラムのＢｒＨＰＰベンザチン塩結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩ：によって透明な溶液に種入れする。結晶化速度は比較的高いようである。得られた懸濁液は、攪拌しながら一晩保持される。５．２８９ｇ以上のメタノールを添加し、懸濁液の粘度の低下を可能にし、それによりろ過を容易にする。ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、周囲雰囲気で恒量まで乾燥させる。この手順によって、０．１９３ｇのＢｒＨＰＰベンザチン塩の溶媒和したラセミ型白色結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩが７５％の収率で得られる。
【０３１５】
ＢｒＨＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩの調製：
２４９ｍｇのＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩ（０．４２７ｍｍｏｌ）を、室温で８３７ｍｇの水中でスラリーにした。系を攪拌しながら一晩保持し、白色ペーストとして（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩが得られる（風解性の二水和物）。
【０３１６】
Ｘ線粉末回折分析：
結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉ、（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩおよび（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩのＸＲＰＤパターンは、それぞれ図８、図９および図１０に与えられる（バックグラウンドは除去されていない）。顕著なピークの回折角（２シータ）、強度および相対強度（最も強力なピークの割合で表される）は関連の表にまとめられる。これらの分析は、第２の手順（ＳＩＥＭＥＮＳ  Ｄ５０００  Ｍａｔｉｃ）に従って実行した。
【０３１７】
（実施例５）
（２Ｅ）−１−ヒドロキシ−２−メチル−２−ペンテニル−ピロホスホン酸、ジキニニウム塩（（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩）の調製
（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相Ｉの調製：
８６１ｍｇ（２．１２７ｍｍｏｌ、１当量）の（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰアンモニウム塩（バッチＮＥ−０１４２７１−Ａ−３−２粗製４＃１、ＨＰＡＥＣ分析に基づいて８０％純度）を室温で１０ｍＬの脱イオン水に溶解する。得られた水溶液を、１６６ミリ当量（８３ｍＬ）のＤＯＷＥＸ  ５０ＷＸ８−１００カチオン樹脂（Ｈ＋型）を含有するカラムにロードし、次に１４０ｍＬの脱イオン水で溶出させる。溶出後、得られた（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの酸性溶液の体積は約１５０ｍＬである。この溶液に８０ｍＬのエタノールを添加する。次に、１６．５ｍＬの０．２７８Ｍのキニーネ塩基（４．５８７ｍｍｏｌ、２．２当量、９９重量％純度、ベルギーのＡＣＲＯＳ（登録商標）から購入）のエタノール性溶液を攪拌しながら（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの酸性溶液にゆっくり添加する（塩化段階）。得られる混合物は、無色の溶液である。４０℃の減圧下における蒸発によって溶媒の全量を除去し、乾燥残渣を得るためにエタノールの５０ｍＬ部分の添加により蒸留の連続段階を実施する。この段階で、２．１４８ｇの（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩（黄色がかった固体）が得られる。４５℃において、１７．１ｇの水／メタノール（５８／４２重量％）混合物を攪拌しながら乾燥残渣に添加する。低粘度の白色懸濁液がもたらされる。温度を２０℃までゆっくり低下させて白色スラリーを得る。ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、周囲雰囲気で恒量まで乾燥させる。この手順によって、１．０１５ｇの白色の（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩の結晶性（Ｅ）−相Ｉが約５３％の収率で得られる。
【０３１８】
（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩの調製：
（Ｅ）−相Ｉを５０℃で２時間１５分加熱する。得られる固体は、（Ｅ）−相ＩＩと呼ばれる（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩の新しい結晶相に相当する。
【０３１９】
Ｘ線粉末回折分析：
（Ｅ）−相Ｉおよび（Ｅ）−相ＩＩのＸＲＰＤパターンは、それぞれ図１１および図１２に示される（バックグラウンドは除去されていない）。顕著なピークの回折角（２シータ）、強度および相対強度（最も強力な線の割合で表される）は関連の表にまとめられる。これらの分析は、第１の手順（ＳＩＥＭＥＮＳ  Ｄ５００５、室温）に従って実行した。
【０３２０】
（実施例６）
（２Ｅ）−１−ヒドロキシ−２−メチル−２−ペンテニル−ピロホスホン酸、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアンモニウム塩（（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩）の調製
（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相Ｉの調製：
１１．１４１ｇの１．９５１％（重量％）の（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰトリアンモニウム塩（バッチＮＥ−０１４２７１−Ａ−３−４Ｃｈｒｏｍ１＃３、ＨＰＡＥＣ分析に基づいて８９％純度）の水溶液（０．６９９ｍｍｏｌ、１当量）を、１９４ミリ当量（８８ｍＬ）のＩＭＡＣ１１００カチオン樹脂（Ｈ＋型）を含有するカラムにロードし、次に９０ｍＬの脱イオン水で溶出させる。溶出後、得られた（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの酸性溶液の体積は約１００ｍＬである。次に、１７８．５ｍｇのベンザチン（０．７４３ｍｍｏｌ、１．１当量、９７％純度、独国のシグマ−アルドリッチ（登録商標）から購入）を２０ｍＬのエタノールに希釈することによって予め調製したベンザチン塩基のエタノール性溶液を、（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの酸性溶液に攪拌しながらゆっくり添加する（塩化段階）。得られる混合物は無色の溶液である。４０℃の減圧下における蒸発によって溶媒の全量を除去し、乾燥残渣を得るためにエタノールおよびアセトンの５０ｍＬ部分の添加により蒸留の連続段階を実施する。それにより、４７６ｍｇのアモルファス状態の（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩（白色フォームと無色のオイルの混合物）を得ることができる。少量のエタノール（２０ｍＬ未満）を攪拌しながら添加し、白色スラリーがもたらされる。この混合物を等温で２時間の攪拌下に保持し、次にガラスフィルタでろ過する。収穫物を周囲雰囲気下で恒量まで乾燥させる。この手順によって、３３７ｍｇの（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩の結晶性（Ｅ）−相Ｉが約７１％の収率で得られる。
【０３２１】
（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩの調製：
１．３９８ｇの７７％（重量％）の（２Ｅ）−１−（２−テトラヒドロピラニルオキシ）−２−メチル−２−ペンテニル−ピロホスホネートのビス−トリブチルアンモニウム塩（ＴＨＰ保護Ｃ−ＨＤＭＡＰＰ、バッチＮＥ−０１４２７１−Ａ−３−５粗製１４＃１、ＨＰＡＥＣ分析に基づいて７７％純度）のオイル（１．５００ｍｍｏｌ、１当量）を室温で５ｍＬの脱イオン水に希釈する。得られた水溶液を、１７５ミリ当量（８８ｍＬ）のＤＯＷＥＸ  ５０ＷＸ８−１００カチオン樹脂（Ｈ＋型）を含有するカラムにロードし、次に１４５ｍＬの脱イオン水で溶出させる（脱保護／酸性化段階、以下の注を参照）。溶出後、得られた（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの酸性溶液の体積は約１５０ｍＬである。次に、１７．０ｍＬの０．１００Ｍのベンザチン塩基（１．７００ｍｍｏｌ、１．１当量、９７％純度、独国のシグマ−アルドリッチ（登録商標）から購入）のエタノール性溶液を、（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの酸性溶液に攪拌しながらゆっくり添加する（塩化段階）。得られる混合物は無色の溶液である。４０℃の減圧下における蒸発によって溶媒の全量を除去し、０．９２６ｇのアモルファス状態の（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩（黄色がかったフォームおよびオイルの混合物）を得ることができる。この残渣を室温で攪拌しながら１０．２ｇの水により均質化する。得られる溶液に少量の結晶性（Ｅ）−相Ｉを種入れする。それにより、高粘度の茶色のスラリーがもたらされる。次に温度を２℃まで徐々に低下させる。ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、周囲雰囲気で恒量まで乾燥させる。この手順によって、１９２ｍｇの（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩の結晶性（Ｅ）−相ＩＩが約２６％の収率で得られる。
注：アリルアルコールのＴＨＰ保護基は酸性条件下で容易に除去することができるので、この実施例では、「ワンポット」脱保護／酸性化シーケンスが行われる。
【０３２２】
Ｘ線粉末回折分析：
（Ｅ）−相Ｉおよび（Ｅ）−相ＩＩのＸＲＰＤパターンは、それぞれ図１３および図１４に示される（バックグラウンドは除去されていない）。顕著なピークの回折角（２シータ）、強度および相対強度（最も強力な線の割合で表される）は関連の表にまとめられる。これらの分析は第２の手順（ＳＩＥＭＥＮＳ  Ｄ５０００  Ｍａｔｉｃ）に従って実行した。
【０３２３】
（実施例７）
３−メチル−３−ブテン−１−イルピロリン酸、ジキニニウム塩（ＩＰＰキニーネ塩）の調製
ＩＰＰキニーネ塩、結晶相Ｉの調製：
７９１ｍｇ（２．５３５ｍｍｏｌ、１当量）のＩＰＰナトリウム塩（バッチＣｈＰ４、ＨＰＡＥＣ分析に基づいて７０％純度）を室温で４ｍＬの脱イオン水に溶解する。この水溶液を、１９４ミリ当量（８８ｍＬ）のＩＭＡＣ１１００カチオン樹脂（Ｈ＋型）を含有するカラムにロードし、次に２００ｍＬの脱イオン水で溶出させる。溶出後、得られたＩＰＰの酸性溶液の体積は約２００ｍＬである。この溶液に１００ｍＬのエタノールを添加する。次に、１．６４４ｇのキニーネ（５．０６８ｍｍｏｌ、２当量、９９重量％純度、ベルギーのＡＣＲＯＳ（登録商標）から購入）を２０ｍＬのエタノールに溶解することによって予め調製したキニーネ塩基のエタノール性溶液を、ＩＰＰの酸性溶液に攪拌しながらゆっくり添加する（塩化段階）。４０℃の減圧下における蒸発によって溶媒の全量を除去し、エタノールを用いて１つの補足的な蒸留段階を実施する。この段階で、３．０２０ｇのＩＰＰキニーネ塩（無色のペースト、アモルファス状態）が得られる。結晶化を実施するために、この残渣を２０ｍＬのエタノール中で均質化し、水を攪拌しながらゆっくり添加し（ＶＨ２Ｏ＝１９０ｍＬ−周囲温度）、低濁度の白色懸濁液がもたらされる。次に、混合物を４０℃の減圧下で濃縮する。得られる懸濁液（Ｖ約１００ｍＬ）を攪拌せずに周囲雰囲気で一晩（１６時間）保持した。これにより、白色スラリーを得ることができる。ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、周囲雰囲気で恒量まで乾燥させる。この手順によって、１．１４２ｇのＩＰＰキニーネ塩の白色結晶相Ｉが〜５０％の収率で得られる。
【０３２４】
ＩＰＰキニーネ塩、結晶相ＩＩの調製：
８５８ｍｇのＩＰＰキニーネ塩の相Ｉおよび１０ｍＬのアセトンを用いてスラリーを調製する。この混合物を攪拌しながら２０℃に４日間保持する。ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、周囲雰囲気で乾燥させる。この手順によって、ＩＰＰキニーネ塩の相ＩＩが得られる。
【０３２５】
Ｘ線粉末回折分析：
相Ｉおよび相ＩＩのＸＲＰＤパターンは、それぞれ図１５および図１６に示される（バックグラウンドは除去されていない）。顕著なピークの回折角（２シータ）、強度および相対強度（最も強力な線の割合で表される）は関連の表にまとめられる。これらの分析は、第１の手順（ＳＩＥＭＥＮＳ  Ｄ５００５、室温）に従って実行した。
【０３２６】
（実施例８）
化学純度および立体選択性
リン酸エステルの化学純度（幾何異性体の異性体純度を含む）は、導電率検出が抑制された高速アニオン交換クロマトグラフィ（ＨＰＡＥＣ）を用いて決定される。表３に示されるように、本発明に従う結晶化方法は、リン酸化抗原化合物の化学純度（アニオン純度とも呼ばれる）の増大を可能にする。表３は、単独の結晶化段階の後の化学純度の改善を示し、単独の段階は、例えば、出発材料として粗製または非結晶化リン酸化抗原、もしくは結晶化リン酸化抗原を使用することができ、後者の出発材料は通常前者よりも高い化学純度を有し、この段階は再結晶化と考えることもできる（以下の注（ｂ）および（ｄ）を参照）。幾何異性体が存在する場合（表３のエントリー７、８、９および１０）には、本発明に従う方法は、立体選択的な精製ももたらす。ＨＰＡＥＣプロファイルの一例は図１７に提供される。
【０３２７】
【表３】
2009511449.tif 000028
【０３２８】
（実施例９）
化学安定性の評価
本発明に従う結晶形態の化学安定性は、ＤＳＣ分析およびイオンクロマトグラフィ（ＨＰＡＥＣ）を用いて評価することができる。例としてリンおよびプロトンＮＭＲ、逆相ＨＰＬＣ分析を含む任意の他の適切な方法を使用することもできる。
【０３２９】
図１８は、ＢｒＨＰＰナトリウム塩のＴＧ／ＤＳＣ分析を示す（ＴＧ／ＤＳＣ手順を参照）。低いが有意であるＤＳＣシグナルの変動および継続的な質量損失は、化学分解を受けるアモルファス材料の特徴である。この現象は周囲温度に近い温度でも生じる。
【０３３０】
それに反して、実施例４に従って調製される（非溶媒和）結晶形態（ＢｒＨＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉ））のＤＳＣ分析（図１９）は、融解−分解事象が１４６℃よりも高温でだけ生じるので、高熱安定性プロファイルを明らかにする。
【０３３１】
室温（２０〜２５℃）および周囲雰囲気（５０〜７０％相対湿度）でガラス瓶に保存されたＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉのサンプルの安定性は、ＨＰＡＥＣ分析を用いて評価した。化合物ＢｒＨＰＰは、少なくとも５ヶ月の期間にわたって安定であることがわかった。このサンプルのアニオン純度は、その期間の間中、９９．５％±０．２％の値のままであった。
【０３３２】
（実施例１０）
吸湿性および水分測定
第１の手順に従って、アモルファスＢｒＨＰＰ二ナトリウム塩を用いてＤＶＳ測定を実施した。サンプルの質量変化および実験的なＲ．Ｈ．を時間の関数で図２０（ａ）にプロットする。吸着および脱着等温線は、図２０（ｂ）に与えられる。４０％Ｒ．Ｈ．から、水の吸収は高く（３．８％＜Δｍ＜５５．３％）、Ｒ．Ｈ．とともに連続的に増大する。高い相対湿度（≧８０％Ｒ．Ｈ．）の場合、２３００分後に質量の安定化は観察できなかった。この段階で、化合物は潮解性になる（すなわち、溶解するまで水蒸気分子を吸収し、その後希釈される）。アモルファスＢｒＨＰＰナトリウム塩は、低Ｒ．Ｈの場合でも大気中の水分に対して非常に感受性である。
【０３３３】
比較して、ＤＶＳ分析は、第２の手順に従ってＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉを用いても実施した。サンプルの質量変化および実験的なＲ．Ｈ．は、時間の関数として図２１（ａ）にプロットする。吸着および脱着等温線は図２１（ｂ）において報告する。０％〜５０％Ｒ．Ｈ．の間では、質量変化は少なく（０．４％よりも下の集積変化）、おそらく結晶表面の水分子の吸着に関連する。５０％〜７０％の範囲を含むＲ．Ｈ．については、可逆および再現可能な６．１％の質量変化が記録される。この観察は相（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉ（脱水和物）と（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩ（二水和物）との間の（脱）水和変態に関連する。ヒステリシスは、水和の閾値よりも高い脱水和物の準安定性または脱水の閾値よりも低い二水和物の準安定性も示し得る（図２０（ｂ））。高い相対湿度（９０％まで）の場合、低い質量変化で示されるように圧倒的に水分吸着現象が生じる（０．２％よりも下の集積変化）。
【０３３４】
結晶性ＢｒＨＰＰベンザチン塩は、高い相対湿度では安定であり、潮解現象は今まで観察されていないことが分かった。この挙動は、表題の化合物の時間内の大きな化学安定性を保証し、貯蔵作業も容易にする（すなわち、乾燥雰囲気のパッケージ化は特に必要でない）。
【０３３５】
（実施例１１）
（２Ｚ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エン−１−イルジホスフェート、ベンザチン塩（Ｈ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰベンザチン塩）の調製
Ｈ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰベンザチン塩の調製：
４９８ｍｇ（１．４４０ｍｍｏｌ、１当量）の（（２Ｚ）−２−メチル−４−（テトラヒドロピラニルオキシ）ブタ−２−エン−１−イルジホスフェート、アンモニウム塩（ＴＨＰ保護Ｈ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰ、バッチＡＢ０３０、ＨＰＡＥＣ分析に基づいて６０％純度）を室温で４０ｍＬの脱イオン水により希釈する。得られた水溶液を、１２６ミリ当量（６０ｍＬ）のＤＯＷＥＸ  ５０ＷＸ８−２００カチオン樹脂（Ｈ＋型）を含有するカラムにロードし、次に９０ｍＬの脱イオン水で溶出させる（脱保護／酸性化段階以下の注を参照）。溶出後、得られたＨ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰの酸性溶液の体積は約１３０ｍＬである。次に、４０．０ｍＬの０．０３Ｍのベンザチン塩基（１．５８４ｍｍｏｌ、１．１当量、９７％純度、独国のシグマ−アルドリッチ（登録商標）から購入））のエタノール性溶液を、Ｈ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰの酸性溶液に攪拌しながらゆっくり添加する（塩化段階）。得られる混合物は無色の溶液である。４０℃の減圧下における蒸発によって溶媒の全量を除去し、０．７２１ｇのアモルファス状態のＨ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰベンザチン塩（白色固体）を得ることができる。この残渣は、室温で２時間攪拌しながら、３０ｍＬのメタノールで均質化される。得られた懸濁液をろ過し、単離した固相（５８３ｍｇ）を１５ｍＬのエタノールと室温で混合した。次に、温度を１０℃まで徐々に低下させた後、熟成段階（１５°／時の冷却速度で４５℃〜１０℃の間の１０回の温度サイクル）を行う。最後のサイクルは、１０℃で停止させ（冷却段階中）、ガラスフィルタによるろ過によって固相を捕集し、周囲雰囲気で恒量まで乾燥させる。この手順によって、３６０ｍｇの（２Ｚ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エン−１−イルジホスフェート、ベンザチン塩（Ｈ−ａｎｇｅｌｙｌＰＰベンザチン塩）が白色固体として約５１％の収率で得られる（ＨＰＡＥＣ分析に基づいて９５％純度）。アリルアルコールのＴＨＰ保護基は酸性条件下で容易に除去することができるので、この実施例では、「ワンポット」脱保護／酸性化シーケンスが行われる。
【図面の簡単な説明】
【０３３６】
【図１Ａ】結晶相Ａ：ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図１Ｂ】結晶性ＢｒＨＰＰキニーネ塩（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−Ｉの熱重量分析を示す。
【図２】結晶相Ｂ：ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図３】結晶相Ｃ：ＢｒＨＰＰキニーネ塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図４】アモルファス状態の結晶性ＢｒＨＰＰシンコニジン塩のＸＲＰＤパターンを示す。
【図５】結晶相Ｄ：ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図６】結晶相Ｅ：ＢｒＨＰＰシンコニジン塩、結晶性（ｎ，ｐ）−Ｍｉｘ−ＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図７】結晶相Ｆ：ＢｒＨＰＰ８−ヒドロキシキノリン塩、結晶相ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図８】結晶相Ｇ：ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図９】結晶相Ｎ：ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図１０】結晶相Ｏ：ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図１１】Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの実施例５で得られた（Ｅ）幾何異性体のＸＲＰＤパターンを示す。結晶相Ｈ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相ＩのＸＰＲＤパターンが示される。
【図１２】Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの実施例５で得られた（Ｅ）幾何異性体のＸＲＰＤパターンを示す。結晶相Ｉ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰキニーネ塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩのＸＲＰＤパターンが示される。
【図１３】結晶相Ｊ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図１４】Ｃ−ＨＤＭＡＰＰの実施例６で得られた（Ｅ）幾何異性体のＸＲＰＤパターンを示す。結晶相Ｋ：（Ｅ）−Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩのＸＲＰＤパターンが示される。
【図１５】結晶相Ｌ：ＩＰＰキニーネ塩、結晶相ＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図１６】結晶相Ｍ：ＩＰＰキニーネ塩、結晶相ＩＩのＸＲＰＤパターンを示す。
【図１７ａ】本発明の方法に従って得られたリン酸化抗原塩（ＩＰＰキニーネ塩、結晶相ＩＩＩ）の化学純度（アニオン純度）を決定するためのＨＰＡＥＣプロファイルの一例である。
【図１７ｂ】本発明の方法に従って得られたリン酸化抗原塩（Ｃ−ＨＤＭＡＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｅ）−相ＩＩ）の化学純度（アニオン純度）を決定するためのＨＰＡＥＣプロファイルの一例である。
【図１８】アモルファスＢｒＨＰＰナトリウム塩のＤＳＣ／ＴＧ分析を示す。
【図１９】実施例４に従って調製された（非溶媒和）結晶相（ＢｒＨＰＰベンザチン塩、結晶性（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−Ｉ））のＤＳＣ分析を示しており、融解−分解事象が１４６℃よりも高温で生じるだけなので、高熱安定性のプロファイルが明らかにされる。
【図２０Ａ】ＢｒＨＰＰナトリウム塩のＤＶＳ分析を示す。サンプルの質量変化および実験的なＲ．Ｈ．を時間に対して表す。
【図２０Ｂ】ＢｒＨＰＰナトリウム塩のＤＶＳ分析を示す。２０℃における吸着および脱着等温線を表す。
【図２１Ａ】ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩのＤＶＳ分析を示す。サンプルの質量変化および実験的なＲ．Ｈ．を時間に対して表す。
【図２１Ｂ】ＢｒＨＰＰベンザチン塩（Ｒａｃ）−Ｍｉｘ−ＩのＤＶＳ分析を示す。２２℃における吸着および脱着等温線を表す。
【図２２】リン酸化抗原の結晶化方法の総括の流れ図である。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７ａ】
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【図１７ｂ】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０Ａ】
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【図２０Ｂ】
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【図２１Ａ】
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【図２１Ｂ】
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【図２２】
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【国際調査報告】
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