(57)【要約】  本発明は、重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）の治療のための、ベンゾピラノン誘導体を含む薬剤組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）：
【化１】
2009534293.tif 000037
［式中、
【化２】
2009534293.tif 000038
は、任意の二重結合であり；Ｘは、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）及び硫黄（Ｓ）から独立的に選択される；Ｒ１は、置換されていてもよい芳香族基であり；Ｒ２は、直鎖若しくは分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、低級シクロアルケニル、複素環基、芳香族基、ヘテロ芳香族基、アラルキル及びグリコシルから成る群から選択される；並びにＲ３とＲ４は、水素（Ｈ）、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、イミド、チオール、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、アラルキル、及びグリコシルから成る群から独立的に選択される］
で示される化合物、又はその製薬的に受容される塩を含む薬剤組成物。
【請求項２】
該化合物が、式（ＩＡ）：
【化３】
2009534293.tif 000039
で示される、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項３】
Ｒ２が、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級シクロアルキル、及び低級シクロアルケニルから成る群から選択される、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項４】
Ｒ３とＲ４が、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、及び低級アルコキシから成る群から独立的に選択される、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項５】
Ｘが酸素である、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項６】
Ｒ１がフェニルラジカルである、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項７】
Ｒ１がヒドロキシル置換フェニルラジカルである、請求項６記載の薬剤組成物。
【請求項８】
Ｒ１が、下記構造（ＩＩ）：
【化４】
2009534293.tif 000040
を有する、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項９】
Ｒ１がビフェニルラジカルである、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項１０】
Ｒ１がビフェニルヘテロ原子ラジカルである、請求項９記載の薬剤組成物。
【請求項１１】
Ｒ１が、下記構造（ＩＩＩ）：
【化５】
2009534293.tif 000041
を有する、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項１２】
Ｒ３とＲ４の少なくとも一方が、独立的にヒドロキシルである、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項１３】
Ｒ３が水素であり、Ｒ４がヒドロキシルである、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項１４】
Ｒ３がヒドロキシルであり、Ｒ４が水素である、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項１５】
該化合物が、一般式（ＩＶ）：
【化６】
2009534293.tif 000042
で示される、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項１６】
該化合物が、一般式（Ｖ）：
【化７】
2009534293.tif 000043
で示される、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項１７】
該化合物が、一般式（ＶＩ）：
【化８】
2009534293.tif 000044
で示される、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項１８】
該化合物が、一般式（ＶＩＩ）：
【化９】
2009534293.tif 000045
で示される、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項１９】
該化合物が、一般式（ＶＩＩＩ）：
【化１０】
2009534293.tif 000046
で示される、請求項１記載の薬剤組成物。
【請求項２０】
患者における（ｉ）重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）の治療、（ｉｉ）（ＳＡＲＳ）に関連した症状の少なくとも緩和、（ｉｉｉ）急性鼻咽頭炎の治療、及び（ｉｖ）急性鼻咽頭炎に関連した症状の少なくとも緩和の少なくとも一つの方法であって、請求項１記載の薬剤組成物の治療的に許容される量を該患者に投与することを含む方法。
【請求項２１】
該薬剤組成物が経口的に又は静脈内に投与される、請求項１７記載の方法。
【請求項２２】
３ＣＬプロティナーゼの転写又は複製を阻害する方法であって、式（Ｉ）：
【化１１】
2009534293.tif 000047
［式中、
【化１２】
2009534293.tif 000048
は、任意の二重結合であり；Ｘは、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）及び硫黄（Ｓ）から独立的に選択される；Ｒ１は、置換されていてもよい芳香族基であり；Ｒ２は、直鎖若しくは分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、低級シクロアルケニル、複素環基、芳香族基、ヘテロ芳香族基、アラルキル及びグリコシルから成る群から選択される；並びにＲ３とＲ４は、水素（Ｈ）、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、イミド、チオール、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、アラルキル、及びグリコシルから成る群から独立的に選択される］
で示される構造を有する化合物、又はその製薬的に受容される塩を３ＣＬプロティナーゼに導入する工程を含む方法。
【請求項２３】
方法がin vivoで行われる、請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
方法がin vitroで行われる、請求項２２記載の方法。
【請求項２５】
構造式（Ｉ）：
【化１３】
2009534293.tif 000049
［式中、
【化１４】
2009534293.tif 000050
は、任意の二重結合であり；Ｘは、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）及び硫黄（Ｓ）から独立的に選択される；Ｒ１は、置換されていてもよい芳香族基であり；Ｒ２は、直鎖若しくは分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、低級シクロアルケニル、複素環基、芳香族基、ヘテロ芳香族基、アラルキル及びグリコシルから成る群から選択される；並びにＲ３とＲ４は、水素（Ｈ）、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、イミド、チオール、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、アラルキル、及びグリコシルから成る群から独立的に選択される］
で示される化合物又はその製薬的に受容される塩の、患者における（ｉ）重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）の治療、（ｉｉ）（ＳＡＲＳ）に関連した症状の少なくとも緩和、（ｉｉｉ）急性鼻咽頭炎の治療、及び（ｉｖ）急性鼻咽頭炎に関連した症状の少なくとも緩和の少なくとも一つのための薬剤の製造における使用。
【請求項２６】
薬剤に用いるための、構造式（Ｉ）：
【化１５】
2009534293.tif 000051
［式中、
【化１６】
2009534293.tif 000052
は、任意の二重結合であり；Ｘは、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）及び硫黄（Ｓ）から独立的に選択される；Ｒ１は、置換されていてもよい芳香族基であり；Ｒ２は、直鎖若しくは分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、低級シクロアルケニル、複素環基、芳香族基、ヘテロ芳香族基、アラルキル及びグリコシルから成る群から選択される；並びにＲ３とＲ４は、水素（Ｈ）、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、イミド、チオール、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、アラルキル、及びグリコシルから成る群から独立的に選択される］
で示される化合物又はその製薬的に受容される塩。
【請求項２７】
前記薬剤が、患者における（ｉ）重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）の治療、（ｉｉ）（ＳＡＲＳ）に関連した症状の少なくとも緩和、（ｉｉｉ）急性鼻咽頭炎の治療、及び（ｉｖ）急性鼻咽頭炎に関連した症状の少なくとも緩和の少なくとも一つのためである、請求項２６記載の化合物。
【請求項２８】
（ｉ）重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）の治療、（ｉｉ）（ＳＡＲＳ）に関連した症状の少なくとも緩和、（ｉｉｉ）急性鼻咽頭炎の治療、及び（ｉｖ）急性鼻咽頭炎に関連した症状の少なくとも緩和の少なくとも一つのためのキットであって、請求項１で定義したとおりの薬剤と、前記薬剤を前記患者に投与するための使用説明書を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般的には、ベンゾピラノン誘導体類と、抗コロナウイルス剤としてのそれらの使用に関し、より詳しくは、重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）、急性鼻咽頭炎、又はその他の関連疾患に罹患した患者の治療のための薬剤におけるそれらの使用に関する。
背景
ＳＡＲＳコロナウイルスは、ニドウイルス目、コロナウイルス科及びコロナウイルス属に属する。ＳＡＲＳコロナウイルスは、球形の膜封入ポジティブＲＮＡウイルス(membrane enclosed positive RNA virus)の１種である。ヒト及び動物における呼吸器疾患及び胃腸疾患を惹起することが観察されている、１０種類を超えるウイルスが存在する。コロナウイルスは３グループ：主として哺乳動物（例えば、ヒト）に見出されるグループＩとＩＩ；及び鳥類に見出されるグループＩＩＩに分類することができる。
【０００２】
該ウイルスの宿主範囲は限定されており、細胞培養のための条件は、非常に厳しい。ヒト・コロナウイルスを培養するための最適温度は、３３℃〜３５℃の範囲である。２種類の抗原型のヒト・コロナウイルス：（ｉ）ＯＣ４３と（ｉｉ）ＨＣｏＶ−２２９Ｅが存在する。両方のコロナウイルス型は、ヒトにおける上気道感染症を惹起し、しばしば、主として冬季及び早春に起こる急性鼻咽頭炎（風邪）を惹起する病原体である。インキュベーション期間は２〜５日間であり、症状は６〜７日間存続する。主要な臨床症状には、不快感、鼻炎、頭痛、喉の痛み、咳、高熱、失声、胸痛及び腹痛等が包含される。
【０００３】
コロナウイルスはまた、突然に、小児喘息を誘発したり、時には、成人慢性気管支炎を悪化させたりしうる。
【０００４】
国が異なれば、陽性抗体率も異なる。中国では、コロナウイルスの陽性抗体率は３０％〜６０％である。かってのＵＳＳＲでは、コロナウイルスの陽性抗体率は５３％〜９７％であった。Washington D.C. では、連続４年間に基づく血清疫学的研究は、コロナウイルス感染症の症例の１０％〜２４％が上気道感染に帰因することを示している。Michiganにおける家族単位の調査(family-based check)では、コロナウイルスが下記年齢群を感染させる可能性があり：０〜４歳は２９．２％であり、４０歳以上は２２％であり、１５〜１９歳群が最高の感染率であることが発見された。
【０００５】
コロナウイルスＨｃｏＶ−２２９Ｅは、ヒトにおける急性鼻咽頭炎の約３０％の原因である、風邪の一つのタイプである。
【０００６】
重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）とも呼ばれる、伝染性の非定型肺炎は、新型のコロナウイルスによって惹起される疾患である。このウイルスは、上記コロナウイルスのいずれの型にも属さない。このウイルスは、エアロゾル、糞便若しくは尿との接触及び多くの他の経路によって伝播しうる。ＳＡＲＳは、高度に伝染性であり、高い致死率を生じる急性疾患である。臨床症状には、例えば悪寒、頭痛、関節痛及び筋肉痛、エネルギー損、下痢のような、発熱（＞３８℃）の初期症状の急性発現が挙げられ、幾つかのより重篤な症例では、呼吸速度が速くなり、呼吸困難を付随する。ＳＡＲＳに重度に罹患した患者に関しては、症状が１８〜２３日間存続しうるが、これらの症状がさらに長く存続することもありうる。
【０００７】
２００２年１１月以来、ＳＡＲＳはアジアにおいて流行病として始まり、間もなく、全世界にわたって伝播した。罹患した患者の９０％は、ＳＡＲＳから完全に回復することができ、死亡率は約１０％である。２００３年４月１６日に、世界保健機構は、ＳＡＲＳの病原体が新しいコロナウイルス型であり、公式にこれを“ＳＡＲＳコロナウイルス”と名づけたことを宣言した。ＳＡＲＳコロナウイルスは一本鎖陽性ＲＮＡウイルスであり、その複製は標準コドンを用いてＤＮＡ中間体を迂回する。
【０００８】
３ＣＬプロティナーゼと呼ばれるタンパク質が、ＳＡＲＳと、急性鼻咽頭炎に関連したウイルスの両方のウイルス寿命サイクルに重要な調節役割を果たすことが、研究から判明した。該ウイルスは、該ウイルスによって発現されるポリタンパク質が３ＣＬプロティナーゼによって切断された後に初めて、その転写と複製を完成することができる。それ故、３ＣＬプロティナーゼは、薬物を発見するための理想的な標的である。
【０００９】
３ＣＬプロティナーゼに関する研究は、急性鼻咽頭炎及びＳＡＲＳを治療する薬物を開発するための主要なインジケーターになっている。３ＣＬプロティナーゼの活性を効果的に阻害することができるならば、体内でのウイルスの複製は阻止され、それによって、急性鼻咽頭炎又はＳＡＲＳは治療される。
【００１０】
患者における急性鼻咽頭炎を治療するため又はＳＡＲＳコロナウイルスによって惹起される感染症を治療するための効果的な抗ウイルス治療法を提供する必要がある。
【００１１】
患者における急性鼻咽頭炎に関連した、又はＳＡＲＳコロナウイルスによって惹起される感染症に関連した症状を少なくとも緩和するための薬剤を提供する必要がある。
【００１２】
比較的容易に合成することができる活性化合物を、薬剤に用いるために提供する必要がある。
【００１３】
活性化合物がヒトに対して有害でないように、充分に低い毒性を有する活性化合物を、薬剤に用いるために提供する必要がある。
【００１４】
３ＣＬプロティナーゼの転写又は複製を阻害することができ、特に、ＳＡＲＳウイルスとＨＣｏＶ−２２９Ｅの３ＣＬプロティナーゼ（3CLMpro）を阻害することができる活性化合物を提供する必要がある。
概要
本発明の第１態様によると、下記式（Ｉ）：
【００１５】
【化１】
2009534293.tif 000002
【００１６】
［式中、
【００１７】
【化２】
2009534293.tif 000003
【００１８】
は、任意の二重結合であり；Ｘは、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）及び硫黄（Ｓ）から独立的に選択される；Ｒ１は、置換されていてもよい芳香族基であり；Ｒ２は、直鎖若しくは分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、低級シクロアルケニル、複素環基、芳香族基、ヘテロ芳香族基、アラルキル及びグリコシルから成る群から選択される；並びにＲ３とＲ４は、水素（Ｈ）、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、イミド、チオール、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、アラルキル、及びグリコシルから成る群から独立的に選択される］
で示される化合物、又はその製薬的に受容される塩を提供する。
【００１９】
１実施態様では、Ｒ２は、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級シクロアルキル、及び低級シクロアルケニルから成る群から選択される。
【００２０】
１実施態様では、Ｒ３とＲ４は、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、及び低級アルコキシからなる群から独立的に選択される。
【００２１】
第２態様によると、製薬的に受容されるキャリヤーとの混合物として、式（Ｉ）で示される１種類以上の化合物を含む薬剤組成物を提供する。
【００２２】
第３態様によると、患者における重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）又は急性鼻咽頭炎（風邪ウイルス）に関連した症状を治療する又は緩和するための方法であって、上記で定義したような式（Ｉ）で示される１種類以上の化合物を、製薬的に受容されるキャリヤーとの混合物として、含む薬剤組成物を該患者に投与する段階を含む方法を提供する。
【００２３】
第４態様によると、薬剤に用いるための式（Ｉ）で示される化合物を提供する。１実施態様では、該化合物は、患者における重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）若しくは風邪ウイルスに関連した症状を治療又は防止するために用いられる。
【００２４】
第５態様によると、患者における重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）に関連した症状を治療又は防止するための薬剤の製造における式（Ｉ）で示される化合物の使用を提供する。
【００２５】
第６態様によると、患者における急性鼻咽頭炎に関連した症状を治療又は防止するための薬剤の製造における式（Ｉ）で示される化合物の使用を提供する。
【００２６】
第７態様によると、３ＣＬプロティナーゼの転写又は複写を阻害する方法であって、第１態様で定義したとおりの、式（Ｉ）で示される化合物を３ＣＬプロティナーゼに導入する段階を含む方法を提供する。
【００２７】
１実施態様では、該患者は哺乳動物である。該患者はヒトでありうる。
【００２８】
第８態様では、上記で定義したとおりの式（Ｉ）で示される１種類以上の化合物を製薬的に受容されるキャリヤーとの混合物として含む薬剤組成物を、該薬剤組成物を患者に投与し、それによって重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）又は急性鼻咽頭炎ウイルスに関連した症状を治療又は防止するための使用説明書と共に含むキットを提供する。
定義
本明細書に用いる、下記の言葉及び用語は、提示した意味を有することになる：
下記には、本発明の記載を理解する上で役に立つと思われる幾つかの定義を挙げる。これらは、一般的定義として意図するものであり、本発明の範囲をこれらの用語のみに限定する意味では決してなく、以下の説明をよりよく理解するために提起するものである。
【００２９】
前後関係が他の場合を要求しない限り、又はそうでない場合を特に述べることを要求しない限り、本明細書に挙げた、単数の完全体(integers)、段階(steps)又は要素(elements)としての、本発明の完全体、段階又は要素は、挙げた完全体、段階又は要素の単数形と複数形の両方を明らかに包含する。
【００３０】
この明細書を通して、前後関係が他の場合を要求しない限り、言葉“含む(comprise)”又は例えば“含む(comprises)”若しくは“含むこと(comprising)”のような変形は、記載した段階若しくは要素若しくは完全体又は段階群若しくは要素群若しくは完全体群を包含することを意味するが、他の段階若しくは要素若しくは完全体又は要素群若しくは完全体群を排除することを意味するのでは決してない。したがって、本明細書に関しては、“含むこと”なる用語は、“主として包含するが、必ずしも排他的にではないこと(including principally, but not necessarily solely)”を意味する。
【００３１】
当業者は、本明細書に記載した本発明が、特に記載したもの以外に、変更及び修正を受けることが可能であることを理解するであろう。本発明が、このような変更及び修正の全てを包含することを理解すべきである。本発明はさらに、本明細書において個々に又は集約的に言及した又は指示した、段階、特徴、組成物及び化合物の全て、並びに段階又は特徴の任意の二つ以上の組み合わせのいずれも及び全てを包含する。
【００３２】
本明細書で用いる限り、“アルキル基”なる用語は、その意味の範囲内に、炭素原子１〜１０個、又は炭素原子１〜６個、又は炭素原子１〜４個、例えば、炭素原子１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個を有する一価（“アルキル”）及び二価（“アルキレン”）の、直鎖又は分枝鎖の飽和又は脂肪族基を包含する。例えば、アルキルなる用語は、非限定的に、メチル、エチル、１−プロピル、イソプロピル、１−ブチル、２−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、アミル、１，２−ジメチルプロピル、１，１−ジメチルプロピル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、４−メチルペンチル、１−メチルペンチル、２−メチルペンチル、３−メチルペンチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、１，２−ジメチルブチル、１，３−ジメチルブチル、１，２，２−トリメチルプロピル、１，１，２−トリメチルプロピル、２−エチルペンチル、３−エチルペンチル、ヘプチル、１−メチルヘキシル、２，２−ジメチルペンチル、３，３−ジメチルペンチル、４，４−ジメチルペンチル、１，２−ジメチルペンチル、１，３−ジメチルペンチル、１，４−ジメチルペンチル、１，２，３−トリメチルブチル、１，１，２−トリメチルブチル、１，１，３−トリメチルブチル、５−メチルヘプチル、１−メチルヘプチル、オクチル、ノニル、デシル等を包含する。
【００３３】
“低級アルキル”なる用語は、炭素原子１〜６個、又は炭素原子１〜４個、例えば炭素原子１、２、３、４、５又は６個を有するアルキル基を意味する。
【００３４】
“アルケニル基”なる用語は、その意味の範囲内に、炭素原子２〜１０個、又は炭素原子２〜６個、又は炭素原子２〜４個、例えば、炭素原子２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個を有し、適当である場合には、アルキル鎖のいずれかにＥ、Ｚ、シス又はトランス立体化学のいずれかの二重結合を少なくとも一つ有する、一価（“アルケニル”）及び二価（“アルケニレン”）の、直鎖又は分枝鎖の不飽和脂肪族炭化水素基を包含する。アルケニル基の例は、非限定的に、エテニル、ビニル、アリル、１−メチルビニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、１，３−ブタジエニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、１，３−ペンタジエニル、２，４−ペンタジエニル、１，４−ペンタジエニル、３−メチル−２−ブテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、１，３−ヘキサジエニル、１，４−ヘキサジエニル、２−メチルペンテニル、１−ヘプテニル、２−ヘプテニル、３−ヘプテニル、１−オクテニル、１−ノネニル、１−デセニル等を包含する。
【００３５】
“アルケニル”なる用語は、炭素原子２〜６個、又は炭素原子２〜４個、例えば炭素原子２、３、４、５又は６個を有するアルケニル基を意味する。
【００３６】
本明細書で用いる“アルキニル基”なる用語は、その意味の範囲内に、炭素原子２〜１０個、又は炭素原子２〜６個、又は炭素原子２〜４個を有し、炭素鎖のいずれかに三重結合を少なくとも一つ有する、一価（“アルキニル”）及び二価（“アルキニレン”）の、直鎖又は分枝鎖の不飽和脂肪族炭化水素基を包含する。アルキニル基の例は、非限定的に、エチニル、１−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−メチル−２−ブチニル、３−メチル−１−ブチニル、１−ペンチニル、１−ヘキシニル、メチルペンチニル、１−ヘプチニル、２−ヘプチニル、１−オクチニル、２−オクチニル、１−ノニル、１−デシニル等を包含する。
【００３７】
“低級アルキニル”なる用語は、炭素原子２〜６個、又は炭素原子２〜４個、例えば炭素原子２，３，４、５又は６個を有するアルキニル基を意味する。
【００３８】
“ヒドロキシル”なる用語は、ラジカル−ＯＨを意味するように意図される。
【００３９】
“チオール”なる用語は、−ＳＨを意味する。
【００４０】
“シアノ”なる用語は、−ＣＮを意味する。
【００４１】
“ニトロ”なる用語は、−ＮＯ２を意味する。
【００４２】
本明細書で用いる“シクロアルキル”なる用語は、環式飽和脂肪族基を意味し、その意味の範囲内に、炭素原子３〜１０個又は炭素原子３〜６個、例えば炭素原子３、４、５、６、７、８、９又は１０個を有する、一価（“シクロアルキル”）及び二価（“シクロアルキレン”）の、飽和単環式、二環式、多環式又は縮合多環式炭化水素ラジカルを意味する。シクロアルキル基の例は、非限定的に、シクロプロピル、２−メチルシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、２−メチルシクロペンチル、３−メチルシクロペンチル、シクロヘキシル等を包含する。
【００４３】
“低級シクロアルキル”なる用語は、炭素原子３〜６個、又は炭素原子３〜４個、例えば炭素原子３、４、５又は６個を有するシクロアルキル基を意味する。
【００４４】
本明細書で用いる“シクロアルケニル”なる用語は、環式不飽和脂肪族基を意味し、その意味の範囲内に、炭素原子３〜１０個又は炭素原子３〜６個を有し、適当である場合には、アルキル鎖のいずれかにＥ、Ｚ、シス又はトランス立体化学のいずれかの二重結合を少なくとも一つ有する、一価（“シクロアルケニル”）及び二価（“シクロアルケニレン”）の、単環式、二環式、多環式又は縮合多環式炭化水素ラジカルを包含する。シクロアルケニル基の例は、非限定的に、シクロプロペニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル等を包含する。
【００４５】
“低級シクロアルケニル”なる用語は、炭素原子３〜６個又は炭素原子３〜４個、例えば炭素原子３、４、５又は６個を有するシクロアルケニル基を意味する。
【００４６】
“複素環式”なる用語は、本明細書では、少なくとも一つのヘテロ原子を含有する炭素原子環を意味すると定義され、さらに該環は飽和であることも不飽和であることもできる。それ故、該用語は、その意味の範囲内に、環原子３〜１０個を有し、この場合１〜５個の原子が、Ｏ、Ｎ、ＮＨ又はＳから選択されるヘテロ原子である、一価（“ヘテロシクロアルキル”）及び二価（“ヘテロシクロアルキレン”）の、飽和単環式、二環式、多環式又は縮合炭化水素ラジカルを包含する。例は、ピロリジニル、ピペリジニル、キヌクリジニル、アゼチジニル、モルホリニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル等を包含する。本明細書で用いる複素環式なる用語はさらに、その意味の範囲内に、環原子３〜１０個を有し、少なくとも一つの二重結合を有し、この場合、１〜５個の環原子がＯ、Ｎ、ＮＨ又はＳから選択されるヘテロ原子である、一価（“ヘテロシクロアルケニル”）及び二価（“ヘテロシクロアルケニレン”）の、飽和単環式、二環式、多環式又は縮合多環式炭化水素ラジカルを包含する。
【００４７】
本明細書で用いる“ヘテロ芳香族基”なる用語と、例えば“ヘテロアリール”又は“ヘテロアリーレン”）のような変形は、その意味の範囲内に、原子６〜２０個を有し、１〜６個の原子がＯ、Ｎ、ＮＨ及びＳから選択されるヘテロ原子である、一価（“ヘテロアリール”）及び二価（“ヘテロアリーレン”）の、単核(single)、多核、共役及び縮合芳香族ラジカルを包含する。このような基の例は、ピリジル、２，２’−ビピリジル、フェナントロリニル、キノリニル、チオフェニル等を包含する。
【００４８】
“グリコシル”なる用語は、単糖、二糖、三糖及びオリゴ糖ラジカル、好ましくは単糖類、二糖類及び三糖類並びにこれらの類似体又は誘導体を意味するものと理解すべきである。典型的なグリコシルは、グルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、グルコフラノシル、リボフラノシル、アラビノピラノシル、リキソピラノシル若しくはＤ−グリセロ−Ｄ−グルコヘプトピラノシル、マルトシル、マルトトリオシル、マルトテトラオシル、ラクトシル、セロビオシル、メリビオシル又は６−Ｏ−α−若しくはβ−リボフラノシル）グルコピラノシル、２−アセチルアミド−２−デオキシグルコピラノシル、２−アミノ−２−デオキシグルコピラノシル、２−カプロイルアミド−２−デオキシグルコピラノシル、２−ラウロイルアミド−２−デオキシグルコピラノシル、２−ミリストイルアミド−２−デオキシグルコピラノシル、２−パルミトイルアミド−２−デオキシグルコピラノシル、２−ステアロイルアミド−２−デオキシグルコピラノシル、４−アジド−４−デオキシグルコピラノシル、４−ステアロイルアミド−４−デオキシグルコピラノシル、４−ドデコイルアミド−４−デオキシグルコピラノシル、６−ヘキサデカノイルアミド−６−デオキシグルコピラノシル、２，６−ジアミノ−２，６−ジデオキシグルコピラノシル、６，６’−ジアミノ−６，６’−ジデオキシマルトシル、６−アミノ−６，６’−ジデオキシラクトシル、６−デオキシマンノピラノシル、２−デオキシリボフラノシル、フコシル、５−フルオロ−５−デオキシリボフラノシル、６−Ｏ−メチルグルコピラノシル、６−デオキシ−６−チオグルコピラノシル、及び３−デオキシ−３−ニトロガラクトピラノシルを包含する。
【００４９】
本明細書で用いる“ハロゲン”なる用語、又は例えば“ハライド”若しくは“ハロ”のような変形は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素を意味する。
【００５０】
本明細書で用いる“ヘテロ原子”なる用語、又は例えば“ヘテロ−”のような変形は、Ｏ、Ｎ、ＮＨ及びＳを意味する。
【００５１】
本明細書で用いる“アルコキシ”なる用語は、炭素原子１〜１０個又は１〜６個を有する直鎖又は分枝鎖アルキルオキシ基を意味する。例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ等を包含する。
【００５２】
“低級アルコキシ”なる用語は、炭素原子１〜６個又は炭素原子１〜４個、例えば炭素原子１、２、３、４、５又は６個を有するアルコキシ基を意味する。
【００５３】
本明細書で用いる“アミノ”なる用語は、−ＮＲａＲｂ形［この場合、ＲａとＲｂは、非限定的に、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル及び置換されていてもよいアリール基を包含する群から個別に選択される］で示される基を意味する。
【００５４】
本明細書で用いる“芳香族基”なる用語、又は例えば“アリール”又は“アリーレン”のような変形は、炭素原子６〜１０個を有する芳香族炭化水素の、一価（“アリール”）及び二価（“アリーレン”）の、単核、多核、共役及び縮合残基を意味する。このような基の例は、フェニル、ビフェニル、ナフチル、フェナントレニル等を包含する。
【００５５】
本明細書で用いる“アラルキル”なる用語は、その意味の範囲内に、二価の飽和直鎖及び分枝鎖アルキレンラジカルに結合した、一価（“アリール”）及び二価（“アリーレン”）の、単核、多核、共役及び縮合芳香族炭化水素ラジカルを包含する。
【００５６】
本明細書で用いる“置換されていてもよい”なる用語は、この用語が指示する(refered to)基が、非置換であることも、又はアルキル、アルケニル、アルキニル、チオアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、ハロ、カルボキシル、ハロアルキル、ハロアルキニル、ヒドロキシル、アルコキシ、チオアルコキシ、アルケニルオキシ、ハロアルコキシ、ハロアルケニルオキシ、ニトロ、アミノ、ニトロアルキル、ニトロアルケニル、ニトロアルキニル、ニトロヘテロサイクリル、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルケニルアミノ、アルキニルアミノ、アシル、アルケノイル、アルキノイル、アシルアミノ、ジアシルアミノ、アシルオキシ、アルキルスルホニルオキシ、ヘテロシクロオキシ、ヘテロシクロアミノ、ハロヘテロシクロアルキル、アルキルスルフェニル、アルキルカルボニルオキシ、アルキルチオ、アシルチオ、リン含有基（例えば、ホスホノ及びホスフィニル）、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、シアノ、シアネート及びイソシアネートから独立的に選択される、一つ以上の基によって置換されることもできることを意味する。
【００５７】
本発明は、その範囲内に、本明細書に開示した化合物の全ての異性体形を、全てのジアステレオマー異性体、ラセメート及びエナンチオマーを含めて、包含する。したがって、式（Ｉ）は、各場合に必要に応じて、例えば、Ｅ、Ｚ、シス、トランス、（Ｒ）、（Ｓ）、（Ｌ）、（Ｄ）、（＋）及び／又は（−）形を包含すると理解すべきである。
【００５８】
本発明に関連して、“投与すること(administering)”なる用語と、“投与する(administer)”及び“投与(administration)”を含めた該用語の変形は、本発明の化合物又は組成物を任意の適当な手段によって、生物に又は表面に接触させる、適用する、デリバリーする又は与えることを包含する。
【００５９】
“患者”なる用語は、ヒト又は他の哺乳動物の患者を意味し、本発明の方法を用いて検査する又は治療することが望ましい、任意の個体を包含する。しかし、“患者”が、症状が存在することを意味するのではないことは、理解されるであろう。本発明の範囲内に入る、適当な哺乳動物は、非限定的に、霊長類、家畜（例えば、ヒツジ、乳牛、ウマ、ロバ、ブタ）、実験室実験動物（例えば、ウサギ、マウス、ラット、モルモット、ハムスター）、コンパニオン・アニマル（例えば、ネコ、イヌ）及び捕らわれの野生動物（例えば、キツネ、シカ、ディンゴ）を包含する。
【００６０】
“哺乳動物”は、ヒト、家畜及び飼育場動物と、動物園、スポーツ及びペットのコンパニオン・アニマル、例えば、家庭用ペット及び他の飼い慣らされた動物（例えば、非限定的に、ウシ、ヒツジ、フェレット、ブタ、ウマ、家禽、ウサギ、ヤギ、イヌ、ネコ等）を含めた哺乳動物として分類される、任意の動物を意味する。好ましいコンパニオン・アニマルはイヌとネコである。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。
【００６１】
本明細書で用いる限り、“製薬的に受容される塩(pharmaceutically acceptable salt)”なる用語は、抗菌性組成物の活性化合物の生物学的効果及び性質を保有し、その他の点でも好ましくないことがないような塩を意味する。製薬的に受容される塩についての詳細な考察は、Remington’s Pharmaceutical Sciences (Mack Pub. Co., N.J. 1991)中で得られる。
【００６２】
本明細書で用いる限り、“ＳＡＲＳウイルス”なる用語は、重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）感染症を惹起すると、又はこれと関連すると一般に認められた病原体（感染因子）を意味する。ＳＡＲＳ感染症には、症候性及び無症候性感染症が包含され、症状は呼吸疾患の重症形から、比較的軽度な、インフルエンザに似た若しくは非定型的な発現、例えば、発熱、筋肉痛、嗜眠、胃腸症状、咳、喉の痛み及びその他の非特異的症状までの範囲でありうる。後では、息切れも生じうる。該用語は、“ＳＡＲＳコロナウイルス”（“ＳＡＲＳ−ＣｏＶ”）及び“ＳＡＲＳ−ＣｏＶ様ウイルス”を包含する。該用語はさらに、該病原体の自然発生型（例えば、野生型）；該病原体の自然発生変形；並びに選択によって得られる変形、化学的修飾によって得られる変形及び遺伝的修飾によって得られる変形（例えば、組み換えＤＮＡ方法によって実験室で修飾される病原体）を含めた、実験室において得られる変形を包含する。
【００６３】
本明細書で用いる限り、“風邪ウイルス”なる用語は、風邪の症状を惹起するか又は該症状に関連すると一般に見なされるウイルスを意味する。急性鼻咽頭炎の症状は、くしゃみ、鼻水、鼻閉塞若しくは鼻詰まり若しくは鼻充血、喉の痛み若しくは痒み、咳、嗄れ声、並びに例えば頭痛、発熱、寒気及び体調が優れないという全身的感覚のような、軽度な全身症状を包含する。このような症状を惹起することが知られているウイルスは２００種類を超え、最も一般的であるのは、コロナウイルス属、ピコルナウイルス属、ライノウイルス属、コクサッキーウイルス属、及びアデノウイルス属に属するウイルスである。ウイルスの他の属は、パラインフルエンザウイルス、呼吸器多核体ウイルス及びエンテロウイルスを包含する。該用語はさらに、該ウイルスの自然発生型（例えば、野生型）；該ウイルスの自然発生変形；並びに選択によって得られる変形、化学的修飾によって得られる変形及び遺伝的修飾によって得られる変形（例えば、組み換えＤＮＡ方法によって実験室で修飾されるウイルス）を含めた、実験室において得られる変形を包含する。
【００６４】
本明細書で用いる限り、“治療(treatment)”なる用語は、疾患状態若しくは症状を改善し、疾患の確立を妨げる、又はさもなければ、疾患若しくは不快な症状の進行を何であれ、多少なりとも(in any way)、予防し、妨害し、遅延させる、若しくは逆転させる、ありとあらゆる使用(any and all uses)を意味する。
【００６５】
本明細書で用いる限り、“含むこと(comprising)”なる用語は、“包含する、但し、必ずしもそれのみではないこと(including, but not necessarily solely)”を意味する。例えば、“含む(comprise)”又は“含む(comprises)”のような、“含むこと(comprising)”なる言葉の変形は、それ相応に変化した意味を有する。したがって、例えば、Ｘを“含む”組成物は、排他的にＸのみから成ることも、又は一つ以上の付加的な成分を包含することもできる。
【００６６】
本明細書で用いる限り、製剤の成分の濃度に関する“約(about)”なる用語は、典型的に、表示値の±５若しくは１０％、より典型的には、表示値の±４％、より典型的には、表示値の±３％、より典型的には、表示値の±２％、さらにより典型的には、表示値の±１％、さらにいっそう典型的には、表示値の±０．５％を意味する。
【００６７】
本明細書に関連して、“治療的有効量(therapeutically effective amount)”及び“診断的有効量(diagnostically effective amount)”なる用語は、それらの意味の範囲内に、本発明の化合物又は組成物の、所望の治療効果又は診断効果を与えるために、充分であるが無害な量を包含する。正確な必要量は、例えば、治療される種、対象の年齢及び全身状態、治療される状態の重症度、投与される特定の作用剤(agent)、投与形式等の要因に依存して、対象毎に異なるであろう。
【００６８】
したがって、正確な“有効量”を特定することは不可能である。しかし、任意の特定の場合のために、適当な“有効量”を当業者がルーチンの実験のみを用いて決定することができる。
【００６９】
本開示を通して、ある範囲のフォーマットで、ある一定の実施態様を開示することがある。該ある範囲のフォーマットでの開示は、便利さと簡潔さのためのみであり、開示された範囲の意図に対する確固たる限定と見なすべきではないことを理解すべきである。したがって、範囲についての記載は、可能な部分的範囲の全て並びに該範囲内の個々の数値の全てを明確に開示していると解釈すべきである。例えば、１から６までのような範囲についての記載は、例えば１〜３、１〜４、１〜５、２〜４、２〜６、３〜６等のような部分的範囲並びに該範囲内の個々の数値、例えば１、２、３、４、５及び６を明確に開示していると見なすべきである。このことは、範囲の広さに関係なく、適用される。
実施態様の詳細な説明
患者における重症急性呼吸症候群（ＳＡＲＳ）又は急性鼻咽頭炎（風邪）に関連した症状を防止又は治療することができる、新規な化合物を含む組成物の典型的な非限定的実施態様を今、開示することにする。
【００７０】
本明細書に開示する活性化合物が、in vitroでＳＡＲＳ  ＣｏＶ  ３ＣＬプロティナーゼに対して阻害効果を示すことを、本発明者らは意外にも発見した。したがって、本明細書に開示した活性化合物はＳＡＲＳに罹患した患者及び急性鼻咽頭炎ウイルスに感染した患者の治療に薬剤として用いることができる。
活性化合物
該活性化合物は、下記一般式（Ｉ）：
【００７１】
【化３】
2009534293.tif 000004
【００７２】
［式中、
【００７３】
【化４】
2009534293.tif 000005
【００７４】
は任意の二重結合であり；Ｘは、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）及び硫黄（Ｓ）から独立的に選択される；Ｒ１は、置換されていてもよい芳香族基であり；Ｒ２は、直鎖若しくは分枝鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、低級シクロアルケニル、複素環基、芳香族基、ヘテロ芳香族基、アラルキル及びグリコシルから成る群から選択される；並びにＲ３とＲ４は、水素（Ｈ）、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、イミド、チオール、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいシクロアルケニル、アラルキル、及びグリコシルから成る群から独立的に選択される］
によって表されることができる。
【００７５】
１実施態様において、該活性化合物は式（ＩＡ）：
【００７６】
【化５】
2009534293.tif 000006
【００７７】
によって表される。
【００７８】
１実施態様では、Ｒ２は、低級シクロアルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級シクロアルキル及び低級シクロアルケニルから成る群から選択される。１実施態様では、Ｒ２は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２、−ＣＨ２ＣＨＣＨ３、−ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−ＣＣＣＨ３、−ＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨＣＨ２ＣＨ２及び−ＣＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２から成る群から選択される。
【００７９】
１実施態様では、Ｒ３とＲ４は、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル及び低級アルコキシから成る群から独立的に選択される。１実施態様では、Ｒ３とＲ４は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２、−ＣＨ２ＣＨＣＨ３、−ＣＨＣＨ２ＣＨ３、−ＣＣＣＨ３、−ＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯＣＨ３及び−ＣＨ２ＣＨＯから成る群から独立的に選択される。
【００８０】
１実施態様では、Ｘは酸素である。
【００８１】
１実施態様では、Ｒ１はフェニル・ラジカルである。１実施態様では、Ｒ１は、ヒドロキシル置換フェニル・ラジカルである。１実施態様では、Ｒ１は、下記構造（ＩＩ）：
【００８２】
【化６】
2009534293.tif 000007
【００８３】
を有する。
【００８４】
１実施態様では、Ｒ１は、ビフェニル・ラジカルである。１実施態様では、Ｒ１は、ビフェニルヘテロ原子・ラジカルである。１実施態様では、Ｒ１は、下記構造（ＩＩＩ）：
【００８５】
【化７】
2009534293.tif 000008
【００８６】
を有する。
【００８７】
１実施態様では、Ｒ３とＲ４の少なくとも一方は、独立的にヒドロキシルである。１実施態様では、Ｒ３は水素であり、Ｒ４はヒドロキシルである。別の実施態様では、Ｒ３はヒドロキシルであり、Ｒ４は水素である。
【００８８】
１実施態様では、該活性化合物は一般式（ＩＶ）：
【００８９】
【化８】
2009534293.tif 000009
【００９０】
によって表される。
【００９１】
１実施態様では、該活性化合物は一般式（Ｖ）：
【００９２】
【化９】
2009534293.tif 000010
【００９３】
によって表される。
【００９４】
１実施態様では、該活性化合物は一般式（ＶＩ）：
【００９５】
【化１０】
2009534293.tif 000011
【００９６】
によって表される。
【００９７】
１実施態様では、該活性化合物は一般式（ＶＩＩ）：
【００９８】
【化１１】
2009534293.tif 000012
【００９９】
によって表される。
【０１００】
１実施態様では、該活性化合物は一般式（ＶＩＩＩ）：
【０１０１】
【化１２】
2009534293.tif 000013
【０１０２】
によって表される。
典型的な活性化合物
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−３−メトキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−７−ヒドロキシ−５−メチル−３−プロポキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（３，５−ジヒドロキシフェニル）−７−ヒドロキシ−５−メチル−３−プロポキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
３−（シクロプロピルオキシ）−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−７−ヒドロキシ−５−メチル−４Ｈ−クロメン−４−オン；
３−（シクロブチルオキシ）−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−７−ヒドロキシ−５−メチル−４Ｈ−クロメン−４−オン；
３−（シクロペンチルオキシ）−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−７−ヒドロキシ−５−メチル−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−３−β−Ｌ−フコピラノシルオキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−３−β−Ｄ−アラビノピラノシルオキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−３−β−Ｄ−ガラクトピラノシルオキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−３−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−フェニル−３−β−Ｄ−ガラクトピラノシルオキシ−７−ヒドロキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−３−β−Ｄ−ガラクトピラノシルオキシ−７−ヒドロキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
３−β−Ｄ−ガラクトピラノシルオキシ−７−ヒドロキシ−２−（４−メトキシ−ナフタレン−１−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−３−（［１，３］ジオキソラン−２−イルメトキシ）−７−ヒドロキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
３−シクロヘプチルオキシ−２−（３，４−ジヒドロキシ−フェニル）−７−ヒドロキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシン−６−イル）−７−ヒドロキシ−３−（２−オキソ−テトラヒドロ−フラン−３−イルオキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；及び
２−（３−フルオロ−４−クロロ−フェニル）−３−β−Ｄ−ガラクトピラノシルオキシ−７−ヒドロキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン。
【０１０３】
開示した活性化合物は、不斉炭素中心を有しうるので、これらの化合物はラセメート、ジアステレオマー又はそれらの混合物の形態で存在することができる。それ故、本発明はさらに、これらの異性体とそれらの混合物の全てをも包含する。
活性化合物の合成
式（Ｉ）で示される化合物は、下記スキームに述べる方法によって製造することができる。
スキームＩ：  活性化合物（ＩＡ）の合成
最初に、下記式（ＩＸａ）で示されるケルセチン(Quercitin)（既知フラボノイド）を、反応（Ｉ）によって表されるように、ジクロロジフェニルメタンと反応させて、２−フェニル部分のオルト−ジヒドロキシル基を保護する：
【０１０４】
【化１３】
2009534293.tif 000014
【０１０５】
式（ＩＸｂ）で示される化合物に、次に、反応（ＩＩ）によって表されるように、アルキル化を受けさせる：
【０１０６】
【化１４】
2009534293.tif 000015
【０１０７】
式中、Ｒ２は上記のとおりであり、Ｘはハライドである。
【０１０８】
化合物（ＩＸｃ）を、次に、反応（ＩＩＩ）によって表されるように、接触水素化によって対応する脱保護化合物（ＩＸｄ）に転化させる：
【０１０９】
【化１５】
2009534293.tif 000016
【０１１０】
スキームＩＩ：  活性化合物（ＩＢ）の合成
最初に、式（Ｘａ）で示される化合物を、反応（Ｉ）によって表されるように、選択的にモノベンジル化して、化合物Ｘｂを得る：
【０１１１】
【化１６】
2009534293.tif 000017
【０１１２】
式中、Ｒ３は上記のとおりである。
【０１１３】
式（Ｘｂ）で示される化合物に、次に、反応（ＩＩ）によって表されるように、ＡＦＯ(Algar-Flynn-Oyamada)反応（J.Med.Chem. 2000, 43, 3752-3760）を受けさせる：
【０１１４】
【化１７】
2009534293.tif 000018
【０１１５】
式中、Ｒ１とＲ３は上記のとおりである。
【０１１６】
化合物ＩＸｂ〜化合物ＩＸｄの合成と同様に、化合物Ｘｅを、反応（ＩＩＩ）によって表されるように、合成する：
【０１１７】
【化１８】
2009534293.tif 000019
【０１１８】
式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は上記のとおりである。
活性化合物塩
一般に、溶解性とバイオアベイラビリティを改良するため及び、容易に吸収されうる活性薬物を提供するために、何らかの形式で、該活性化合物を製薬的に受容される塩の形態で処方することが望ましい可能性がある。
【０１１９】
該活性化合物は、有機酸及び無機酸の両方によって、製薬的に受容される塩を形成することができる。塩形成のために適当な、生理的に容認される酸は、有機酸及び無機酸であることができ、例えば、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、クエン酸、シュウ酸、マロン酸、サリチル酸、リンゴ酸、フマル酸、コハク酸、アスコルビン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、イセチオン酸、乳酸、グルコン酸、グルクロン酸、スルファミン酸、安息香酸、酒石酸、パモ酸等であることができる。
【０１２０】
遊離塩基形を当量の所望の酸と、慣用的な方法で接触させることによって、塩を製造することができる。該塩形を塩基で処理することによって、遊離塩基を再生することができる。例えば、希薄な塩基水溶液を用いることができる。希薄な水酸化ナトリウム水溶液、炭酸カリウム水溶液、アンモニア水溶液及び炭酸水素ナトリウム水溶液がこの目的のために適すると考えられる。
【０１２１】
遊離塩基形は、それらの各々の塩形とは、例えば極性溶媒中の溶解度のような、ある一定の物理的性質において、異なる可能性がある。その他の点では、塩はそれらの各々の遊離塩基形と、本発明のために同等であると考えられる。
【０１２２】
該活性化合物は、非溶媒和形でも、水和形を含めた溶媒和形でも存在しうる。該活性化合物のこのような塩形は、使用前に、例えば水又はエタノールのような、生理的に許容される溶媒と共に与える又は該溶媒と混合することができる。
製薬的に受容されるキャリヤー
本明細書で開示する活性化合物は、慣用的な製薬的キャリヤー若しくは賦形剤を含むことができ、さらに、他の治療剤、薬剤、キャリヤー、アジュバント等を含むことができる。適当な製薬的キャリヤーの例は、リン酸塩緩衝化生理食塩溶液、水、エマルジョン（例えば、油／水エマルジョン）、種々なタイプの湿潤剤、滅菌溶液等を包含する。他の適当な製薬的キャリヤーは、Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing. Company.（この分野における標準的な参考書）又はU.S. Pharmacopeia National Formulary, 1857-1859(1990)中に記載されている。このようなキャリヤーを含む組成物は、慣用的な方法で処方することができる。
投与形式
純粋な形態で又は適当な薬剤組成物として本明細書に開示する活性化合物の投与は、許容される投与形式又は製薬的に受容されるデリバリー手段のいずれかによって行うことができる。該投与形式及び製薬的に受容されるデリバリー手段は、固体、半固体、凍結乾燥粉末の形態又は液体投与形での経口投与若しくはデリバリーを包含しうる。該投与形は、錠剤、座薬、ピル、軟質弾性及び硬質ゼラチン・カプセル、粉末、溶液、懸濁液、又はエアロゾル等を、好ましくは、精確な投与量を簡単に投与するために適した単位投与形で包含しうる。
【０１２３】
開示した活性化合物の経口投与は、該開示した活性化合物を不活性希釈剤と若しくは消化されやすい食用キャリヤーと一緒にした混合物を製造することによって、行うことができる、又はこれらを硬質若しくは軟質のシェル・ゼラチンカプセル中に封入することができる、又はこれらを錠剤に圧縮成形することができる、又はこれらをダイエットの食物と直接一緒にすることができる。経口による治療的投与のためには、開示した活性化合物を賦形剤と一緒にして、摂取可能な錠剤、口腔錠、トローチ、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ、ウェファー等の形態で用いることができる。このような組成物及び製剤は、該活性化合物を約０．１％〜約７０％、約０．５％〜約６５％、約１％〜約６０％、約２％〜約５５％及び約３％〜約５０％から成る群から選択される重量％の量で含有することができる。
【０１２４】
錠剤、トローチ、ピル、カプセル剤等は、下記：結合剤（例えば、トラガカントガム、アラビアゴム、コーンスターチ、若しくはゼラチン）；賦形剤（例えば、リン酸二カルシウム）；崩壊剤（例えば、コーンスターチ、ジャガイモ澱粉、アルギン酸等）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）；及び甘味剤（例えば、スクロース、ラクトース若しくはサッカリン）を含有することもできる、又はフレーバー剤(flavoring agent)（例えば、ペパーミント、冬緑油若しくはチェリー・フレーバー(cherry flavoring)）を加えることができる。投与単位形がカプセル剤である場合には、該投与単位形は、上記種類の物質の他に、液体キャリヤーを含有することができる。種々な他の物質が、コーティングとして又は他のやり方で該投与単位の物理的形態を修飾するために存在することができる。例えば、錠剤、ピル又はカプセル剤をシェラック、砂糖又は両方で被覆することができる。エリキシル剤のシロップは、活性化合物、甘味剤としてのスクロース、保存剤としてのメチルパラベン及びプロピルパラベン、染料及びフレーバー剤（例えば、チェリー若しくはオレンジ・フレーバー）を含有することができる。いずれの投与単位形の製造に用いる如何なる材料も、明らかに、製薬的に純粋であるべきであり、使用量において実質的に無害であるべきである。さらに、該活性化合物は持続放出調合剤及び製剤に組み込むことができる。
【０１２５】
本明細書に開示する活性化合物は、非経口投与することも、又は腹腔内投与することも可能である。遊離塩基として又は製薬的に受容される塩としての開示した活性化合物の溶液は、例えばヒドロキシプロピルセルロースのような界面活性剤と適当に混合した水中で調製することができる。分散液も、グリセロール、液体ポリエチレングリコール及びこれらの混合物中及び油中で調製することができる。これらの調合剤は、通常の貯蔵及び使用条件下で、微生物の増殖を防止するために保存剤を含有することができる。
【０１２６】
注射可能な使用のために適した薬剤形は、無菌の水溶液又は分散液と、無菌の注射可能な溶液又は分散液を即時に調合するための無菌粉末を包含しうる。全ての場合に、該薬剤形は、無菌でなければならず、容易な注入可能性が存在する程度に流動性でなければならない。該薬剤形は、製造及び貯蔵の条件下で、安定でなければならず、例えば細菌及び真菌のような微生物の汚染作用に対して保護されなければならない。該キャリヤーは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、ポリエチレングリコール及び液体ポリエチレングリコール等）、適当な、これらの混合物並びに植物油を含有する、溶媒又は分散媒質であることができる。適当な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティングの使用によって、分散液の場合には必要な粒度の維持によって、及び界面活性剤の使用によって、維持することができる。微生物の作用の防御は、種々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサール等によってもたらされうる。
投与量
製薬的に受容される形態での該活性化合物は、用いる特定化合物の活性；該化合物の代謝安定性及び作用長さ；患者の年齢、体重、全身の健康、性別及びダイエット；投与の形式と時間；排泄速度；薬物組み合わせ；特定の疾患状態の重症度；並びに治療を受ける患者を含めた、多様な要因に依存して変化する治療有効量で投与することができる。
治療剤としての活性化合物
一般式（Ｉ）で示される活性化合物が、ＳＡＲＳ−ＣｏＶウイルス及び風邪ウイルス（ＨＣｏＶ−２２９Ｅ抗原型）の両方の３ＣＬプロティナーゼ（３ＣＬ  Ｍｐｒｏ）を阻害しうる可能性があることが、意外にも発見されている。このため、該開示した活性化合物は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶと急性鼻咽頭炎ウイルスの両方のウイルス複製を阻害しうる可能性がある。該活性化合物はＳＡＲＳ及び急性鼻咽頭炎に罹患した患者の治療に有用であると見なすことができる。
【実施例】
【０１２７】
該開示した活性化合物の非限定的実施態様を特定の実施例を参照することによって、より詳細にさらに説明するが、これらの特定の実施例を、如何なる意味でも、本発明の範囲を限定すると解釈すべきではない。
【０１２８】
試薬類（化学薬品類）は、Lancaster、Acros及びShanghai Chemical Reagent Companyから購入して、特に述べない限り、さらに精製せずに用いた。分析用薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、ＨＳＧＦ２５４（１５０〜２００μｍ厚さ、Yantai Huiyou Company、China）であった。カラムクロマトグラフィーに用いたシリカゲルは、２００〜３００メッシュ（Shanghai Chemical Reagent Company, China）であった。
【０１２９】
収量は最適化しなかった。融点（Ｍｐ）は、ＳＧＷ  Ｘ−４融点装置上において毛管内で、修正なしに測定した。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、Ｂｒｕｃｋｅｒ  ＡＭＸ−４００  ＮＭＲ（ＴＭＳとしてＩＳ）上で得た。化学シフトは、テトラメチルシランからダウンフィールドにおいてパーツ・パー・ミリオン(parts per million)（ｐｐｍ、δ）で報告した。プロトン・カップリング・パターンは、一重線（ｓ）、二重線（ｄ）、三重線（ｔ）、四重線（ｑ）、多重線（ｍ）及び幅広い（ｂｒ）として記載した。低分解能及び高分解能質量スペクトル（ＬＲＭＳ及びＨＲＭＳ）は、Finnigan MAT-95及びLCQ-DECAスペクトロメーターによって得られた、電気イオン化及びエレクトロスプレイ・イオン化（ＥＩ及びＥＳＩ）によって記載した。
活性化合物の製造
実施例１
工程１：  ２−（２，２−ジフェニル−ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−３，５，７−トリヒドロキシ−ベンゾピラン−４−オン（ＩＸｂ）の製造
５０ｍｌ丸底フラスコ中のケルセチンＩＸａ（５ｇ，１５ｍｍｏｌ）とＰｈ２ＣＣｌ２（８．５ｍｌ，４５ｍｍｏｌ）との混合物を１８０℃において１０分間撹拌した。反応混合物をシリカゲル上でのフラッシュ・クロマトグラフィーによって精製して、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（１：４，ｖ／ｖ）の混合物によって溶離して、ＩＸｂ（２．５ｇ，３７％）を黄色固体として得た：Ｍｐ２３９〜２４０℃、
【０１３０】
【化１９】
2009534293.tif 000020
【０１３１】
工程２：  ２−（２，２−ジフェニル−ベンゾ［１，３］ジオキソラン−５−イル）−３−Ｏ−β−Ｄ−テトラアセチルグルコピラノシル−５，７−ジヒドロキシ−ベンゾピラン−４−オン（ＩＸｃ−１）の製造
ＤＭＦ（５ｍｌ）中のＩＸｂ（０．３ｇ，０．６４ｍｍｏｌ）とアセトブロモ−α−Ｄ−グルコース（０．４ｇ，０．９７ｍｍｏｌ）とＫ２ＣＯ３（０．１２ｇ，０．９ｍｍｏｌ）との混合物をアルゴン下、約２１℃の室温において１０時間撹拌した。反応混合物を水（５０ｍｌ）中に注入して、ＥｔＯＡｃ（３ｘ３０ｍｌ）で抽出した。一緒にした有機層を水で洗浄して、無水ＭｇＳＯ４によって乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲル上でのフラッシュ・クロマトグラフィーによって精製して、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（１：４，ｖ／ｖ）の混合物によって溶離して、ＩＸｃ−１（０．１６ｇ，３１％）を得た。  ＭＳ−ＥＳＩ  ７９７［Ｍ＋Ｈ］＋
工程３：  ケルセチン−３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド（ＩＡ−１）
ＩＸｃ−１（１６０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）と、炭素付き１０％パラジウム（２０ｍｇ）と、ＥｔＯＨ（２０ｍｌ）との混合物を水素雰囲気中、２５℃において２４時間撹拌した。触媒を濾別して、濾液を減圧下で乾燥するまで濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲル上でのフラッシュ・クロマトグラフィーによって精製して、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（１：２，ｖ／ｖ）の混合物によって溶離して、２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−Ｏ−β−Ｄ−テトラアセチルグルコピラノシル−５，７−ジヒドロキシ−ベンゾピラン−４−オン（ＩＸｄ−１）６２ｍｇを得た。  ＭＳ−ＥＳＩ  ６３３［Ｍ＋Ｈ］＋
メタノール（１０ｍｌ）中のＩＸｄ−１（５０ｍｇ，０．０７９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＯＭｅ（５ｍｇ，０．０９ｍｍｏｌ）を加えて、得られた溶液を約２１℃の室温において１時間撹拌した。該溶液をＤｏｗｅｘ  ５０（Ｈ＋）イオン交換樹脂に通すことによって中和した。該樹脂を濾別し、濾液を濃縮して、ＩＡ−１（３０ｍｇ，８１％）を得た。Ｍｐ  １７２〜１７４℃
【０１３２】
【化２０】
2009534293.tif 000021
【０１３３】
実施例２
ケルセチン−３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＩＡ−２）
実施例１と同じ方法及び物質によって、但し、工程２におけるアセトブロモ−α−Ｄ−ピラノグルコースに代えて、アセトブロモ−α−Ｄ−ピラノガラクトースを用いて、ケルセチン−３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＩＡ−２）を製造した。
【０１３４】
Ｍｐ１８７〜１９０℃を有する黄色固体７５ｍｇが得られた。総収率は４５．７％であった（最後の２工程）。
【０１３５】
【化２１】
2009534293.tif 000022
【０１３６】
実施例３
ケルセチン−３−Ｏ−β−Ｄ−アラビノピラノシド（ＩＡ−３）
実施例１と同じ方法及び物質によって、但し、工程２におけるアセトブロモ−α−Ｄ−ピラノグルコースに代えて、アセトブロモ−α−Ｄ−ピラノアラビノースを用いて、ケルセチン−３−Ｏ−β−Ｄ−アラビノピラノシド（ＩＡ−３）を製造した。
【０１３７】
Ｍｐ４１〜４４℃を有する黄色固体３７ｍｇが得られた。総収率は４０．７％であった（最後の２工程）。
【０１３８】
【化２２】
2009534293.tif 000023
【０１３９】
実施例４
ケルセチン−３−Ｏ−β−Ｄ−フコピラノシド（ＩＡ−４）
実施例１と同じ方法及び物質によって、但し、工程２におけるアセトブロモ−α−Ｄ−ピラノグルコースに代えて、アセトブロモ−α−Ｄ−ピラノフコースを用いて、ケルセチン−３−Ｏ−β−Ｄ−フコピラノシド（ＩＡ−４）を製造した。
【０１４０】
Ｍｐ１７２〜１７４℃を有する黄色固体６３ｍｇが得られた。総収率は３８．７％である（最後の２工程）。
【０１４１】
【化２３】
2009534293.tif 000024
【０１４２】
実施例５
工程１：  ３’，４’，７−トリベンジルオキシ−フラボノール（ＶＩ−１）の合成
ジオキサン：エタノール（３：２）の溶液（２０ｍｌ）中に、４−ベンジルオキシ−２−ヒドロキシルアセトフェノン（１．２１ｇ）と３，４−ジベンジルオキシベンズアルデヒド（１．５９ｇ）を加えた。
【０１４３】
反応混合物を氷浴中で撹拌して、約０℃に冷却してから、４０％ＫＯＨ（４ｍｌ）を該反応混合物に加えた。
【０１４４】
次に、該反応混合物を約２１℃の室温において６６時間撹拌した。
【０１４５】
撹拌後に、粗生成物をジクロロメタン（１２５ｍｌ）で洗浄し、それぞれ、水（４０ｍｌ）で３回洗浄してから、乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、油状混合物（約１０ｍｌ）を得た。
【０１４６】
上記油状混合物を５．４％ＮａＯＨ（１６ｍｌ）、ジオキサン（１７ｍｌ）及び無水エタンアルコール（４７ｍｌ）中に、反応物の溶液の温度が約０℃であるように、氷浴中で撹拌しながら、加えた。
【０１４７】
３０％Ｈ２Ｏ２（２．１ｍｌ）を該反応混合物中に滴加し、この反応混合物を０℃において２時間撹拌した。次に、該反応混合物を約２１℃の室温においてさらに１２時間撹拌した。
【０１４８】
粗生成物を２Ｍ  ＨＣｌ（３２ｍｌ）で酸性化して、減圧下で濾過し、水とエタノール、それぞれで洗浄して、黄色固体生成物（ＶＩ−１）（２．３ｇ）を得た。総収率は４２．７％である（２工程）。
【０１４９】
【化２４】
2009534293.tif 000025
【０１５０】
工程２：  ３−Ｏ−シクロヘキシル−３’，４’，７−トリベンジルオキシ−フラボノール（ＶＩＩ−１）
ＤＭＦ（５ｍｌ）中に、ＶＩ−１（１００ｍｇ）、ブロモシクロヘキサン（１５０ｍｇ）及び炭酸カリウム（５０ｍｇ）を加えた。反応混合物を１００℃に加温して、Ａｒ雰囲気下で２４時間撹拌してから、約２１℃の室温に冷却した。
【０１５１】
該反応混合物を水（５０ｍｌ）中に注入して、ＥｔＯＡｃ（３ｘ３０ｍｌ）で抽出した。有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下で留去した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって分離させ、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ（８：１）によって洗浄して、黄色固体（９０ｍｇ）を得た（収率７５．０％）。
【０１５２】
【化２５】
2009534293.tif 000026
【０１５３】
工程３：  ３−Ｏ−シクロヘキシル−３’，４’，７−トリヒドロキシ−フラボノール（ＩＢ−１）
ＶＩＩ−１（８０ｍｇ）とＰｄ／Ｃ（１０％）（２０ｍｇ）を無水エタンアルコール（２０ｍｌ）中に加えた。
【０１５４】
反応混合物を約２１℃の室温において２４時間撹拌した。該反応生成物(reactant product)を濾過して、次に、減圧下で約２ｍｌにまで濃縮して、これをカラムクロマトグラフィーを用いて分離して、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ（２：１）によって洗浄して、黄色固体（１７ｍｇ）を得た（収率３６．２％）。Ｍｐ９８〜１００℃
【０１５５】
【化２６】
2009534293.tif 000027
【０１５６】
実施例６
３−［２−（２，５−ジメトキシフェニル）−２−オキソ−エトキシ］−３’，５’，７−トリヒドロキシ−フラボノール（ＩＢ−２）
実施例５と同じ方法及び物質によって、３−［２−（２，５−ジメトキシフェニル）−２−オキソ−エトキシ］−３’，５’，７−トリヒドロキシ−フラボノール（ＩＢ−２）を製造した。但し、工程２におけるブロモシクロヘキサンの代わりに、α−ブロモ−２，５−ジメトキシアセトフェノンを用いた。
【０１５７】
Ｍｐ１３８〜１４０℃を有する黄色固体（２５ｍｇ）が得られた。収率は２５．０％である。
【０１５８】
【化２７】
2009534293.tif 000028
【０１５９】
実施例７
３−Ｏ−シクロヘプチル−３’，４’，７−トリヒドロキシ−フラボノール（ＩＢ−３）
実施例５と同じ方法及び物質によって、３−Ｏ−シクロヘプチル−３’，４’，７−トリヒドロキシ−フラボノール（ＩＢ−３）を製造した。但し、工程２におけるブロモシクロヘキサンの代わりに、ブロモシクロヘプタンを用いた。
【０１６０】
Ｍｐ６８〜７１℃を有する黄色固体（１１０ｍｇ）が得られた。収率は７５．０％であった。
【０１６１】
【化２８】
2009534293.tif 000029
【０１６２】
実施例８
３−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキサン−２−イル−メトキシ）−３’，５’，７−トリヒドロキシ−フラボノール（ＩＢ−４）
実施例５と同じ方法及び物質によって、３−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキサン−２−イル−メトキシ）−３’，５’，７−トリヒドロキシ−フラボノール（ＩＢ−４）を製造した。但し、工程２におけるブロモシクロヘキサンの代わりに、２−ブロモメチル−２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキサンを用いた。
【０１６３】
黄色固体（９０ｍｇ）が得られた。
【０１６４】
【化２９】
2009534293.tif 000030
【０１６５】
実施例９
３−（２−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イル−オキシ）−３’，５’，７−トリヒドロキシ−フラボノール（ＩＢ−５）
実施例５と同じ方法及び物質によって、３−（２−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イル−オキシ）−３’，５’，７−トリヒドロキシ−フラボノール（ＩＢ−５）を製造した。但し、工程２におけるブロモシクロヘキサンの代わりに、３−ブロモ−ジヒドロフラン−２−ケトンを用いた。
【０１６６】
黄色固体（２９ｍｇ）が得られた。
【０１６７】
【化３０】
2009534293.tif 000031
【０１６８】
実施例１０
２−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキサン−６−イル）−３−ヒドロキシ−７−ベンジルオキシ−ベンゾピラン−４−オン（ＶＩ−２）
実施例５と同じ方法及び物質によって、２−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキサン−６−イル）−３−ヒドロキシ−７−ベンジルオキシ−ベンゾピラン−４−オン（ＶＩ−２）を製造した。但し、工程１における３，４−ジベンジルオキシベンズアルデヒドの代わりに、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキサン−６−ホルムアルデヒドを用いた。
【０１６９】
黄色固体（０．６ｇ）が得られた。総収率は１５．５％である（２工程）。ＭＳ−ＥＳＩ  ３８７［Ｍ＋Ｈ］＋
実施例１１
２−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキサン−６−イル）−３−Ｏ−シクロヘキシル−７−ベンジルオキシ−ベンゾピラン−４−オン（ＶＩＩ−２）
実施例５と同じ方法及び物質によって、但し、工程２におけるＶＩ−１の代わりにＶＩ−２を用いて、ＶＩＩ−２を製造した。
【０１７０】
黄色固体（２００ｍｇ）が得られた（収率８３．３％）。ＭＳ−ＥＳＩ  ４９９［Ｍ＋Ｈ］＋
実施例１２
２−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキサン−６−イル）−３−Ｏ−シクロヘキシル−７−ヒドロキシ−ベンゾピラン−４−オン（ＩＢ−６）
無水エタンアルコール（２０ｍｌ）中にＶＩＩ−２（１００ｍｇ）とＰｄ／Ｃ（１０％）（２０ｍｇ）を加えた。反応混合物を約２１℃の室温において２４時間撹拌し、濾過し、次に減圧下で約２ｍｌになるまで濃縮した。次に、該混合物をカラムクロマトグラフィーによって分離して、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ（２：１）によって洗浄して、黄色固体（５５ｍｇ）を得た（収率６９．６％）。Ｍｐ１３７〜１３９℃
【０１７１】
【化３１】
2009534293.tif 000032
【０１７２】
実施例１３
メチル  ４−［２−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキサン−６−イル）−７−ヒドロキシ−ベンゾピラン−４−オン−３−オキシ］−ブタノエート（ＩＢ−７）
上記実施例１２におけるＩＢ−６の製造と同じ方法及び物質によって、但し、ブロモシクロヘキサンの代わりにメチル−γ−ブトプレートを用いて、メチル  ４−［２−（２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキサン−６−イル）−７−ヒドロキシ−ベンゾピラン−４−オン−３−オキシ］−ブタノエート（ＩＢ−７）を製造した。
【０１７３】
黄色固体（３２０ｍｇ）が得られた（収率８９．６％）。Ｍｐ１６８〜１７０℃
【０１７４】
【化３２】
2009534293.tif 000033
【０１７５】
生物学的研究
実施例１４
幾つかの化合物と、ＳＡＲＳ及び風邪ウイルスの３ＣＬプロティナーゼとの結合活性アッセイ
３−アルコキシ置換−２，５，７−三置換ベンゾピラン−４−オンと３ＣＬプロティナーゼとの間の結合性に関する研究は、ＳＰＲ（表面プラスモン共鳴）手法に基づくものであった。用いた機器は、Biacore 3000(Biacore AB, Uppsala, Sweden)であった。
【０１７６】
下記研究は、単離したＳＡＲＳの３ＣＬプロティナーゼと風邪ウイルスの３ＣＬプロティナーゼによって行った。
（１）ＳＡＲＳ  ３ＣＬプロティナーゼ（ｐＱＥ３０−ＳＡＲＳ  ３ＣＬｐｒｏ）の構築
蛍光基質Dabcyl-KLNSTLQSGLRKE-Edansは合成されたものであり、Shanghai Sheng Gong Biotechnology Limited Companyから入手した。
【０１７７】
ＳＡＲＳ  ＣｏＶ  ３ＣＬプロティナーゼは、ｐＱＥ３０ベクターから構築した発現プラスミドを用いて、Ｍ１５大腸菌株に発現させ、本発明者らの実験室において細胞及び分子生物学的方法によって、ＮＴＡ−Ｎｉカラムクロマトグラフィーに通して精製した。ｐＱＥ３０−３ＣＬ発現プラスミドを構築する方法は、H.Sun et al によるMolecular cloning, expression, purification and mass spectrometric characterization of 3C-like protease of SARS coronavirus のProtein Expression and Purification 32(2003) 302-308に見出すことができる。
（２）ＳＡＲＳ  ＣｏＶ  ３ＣＬプロティナーゼの発現と精製
本発明者らの実験室で構築したｐＱＥ３０−３ＣＬ発現プラスミドを用いて、Ｍ１５大腸菌株を形質転換させた。ＳＡＲＳ  ３ＣＬプロティナーゼをＮＴＡ  Ｎｉカラムによって精製した。ＳＡＲＳ  ＣｏＶ  ３ＣＬプロティナーゼを発現させ、精製する方法は、H.Sun et al によるMolecular cloning, expression, purification and mass spectrometric characterization of 3C-like protease of SARS coronavirus のProtein Expression and Purification 32(2003) 302-308に見出すことができる。
【０１７８】
該新たに製造したタンパク質では、Ｕ−２０１０分光光度計（HITACHI Company）によって、２８０ｎｍにおける吸光度を測定して、タンパク質濃度を算出した。これらの結果は、阻害剤のスクリーニング及びＩＣ５０決定に用いた。酵素阻害剤にとって特に有用なパラメータは、ＩＣ５０値である。ＩＣ５０値は、酵素活性の５０％を阻害する、活性化合物の濃度を意味する。
（３）３ＣＬプロティナーゼのカップリング
Biacore 3000 (Biacore AB, Uppsala, Sweden)を用いて、活性化合物と酵素とのカップリングを分析した。クリーニング後に、１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、３ｍＭ  ＥＤＴＡ及び０．００５％（ｖ／ｖ）界面活性剤ｐ２０（ｐＨ７．４）から成るＨＢＳ−ＥＰのダンピング液を用いて、Biacore 3000テーブルをベースラインに設定した。
【０１７９】
０．２Ｍ  Ｎ−エチル−Ｎ’−ジメチルアミノプロピル・カルボジイミド（ＥＤＣ）と５０ｍＭ  Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）（１：１比率）を自動的に混合して、Biacore 3000ソフトウェアの管理下でチップの表面に注入した。次に、該チップ（CM5 Biacore AB, Uppsala, Sweden）を、５μｌ／分で７分間、活性化した。
【０１８０】
ＳＡＲＳ−ＣｏＶ  ３ＣＬｐｒｏを１０ｍＭ酢酸ナトリウム・バッファー（ｐＨ４．３）で２５μｇ／ｍｌの濃度に希釈して、センサー・チップＣＭ５の表面に５μｌ／分において固定化した。最後に、反応しなかったプロテアーゼを、１Ｍエタノールアミン−ＨＣｌ（ｐＨ８．５）を７分間注入することによって、ブロックした。最終カップリング量は４０００共鳴単位（ＲＵ）であった。
（４）化合物のスクリーニング
実施例１〜１３で合成した活性化合物を１００％ＤＭＳＯ中に最終濃度１０ｍＭで溶解して、次に、ダンピング液ＨＢＳ−ＥＰによって１μＭと１０μＭに希釈した。ＤＭＳＯの最終濃度は０．１％であった。
【０１８１】
ＳＡＲＳ  ３ＣＬプロティナーゼに対する化合物の結合活性を、ＲＵの値によって測定した。
（５）ダイナミック試験
化合物をＨＢＳ−ＥＰバッファーによって種々な濃度（８０μＭ、５６μＭ、３９．２μＭ、２７．４μＭ、１９．２μＭ、１３．４μＭ及び９．４μＭ）に希釈して、２５℃において３０μｌ／分の定常流で注入した。センサーグラムを非特異的バルク屈折率効果を自動的に控除することによって処理した。グローバル・データ分析プログラム（BIAevaluation 3.1 software, Biacore AB）を用いて、カイネティック・パラメータ（ＫＤ）を分析した。
（６）実験結果
上記のように合成した化合物（ＩＡ−１、ＩＡ−３、ＩＡ−４、ＩＢ−１、ＩＢ−３及びＩＢ−４）のＫＤ値を、ＳＡＲＳ  ３ＣＬ及びＨＣＶ  ３ＣＬプロティナーゼに対して測定して、結果を下記表１として表にした。
【０１８２】
【化３３】
2009534293.tif 000034
【０１８３】
表１のデータから、化合物（ＩＡ−１、ＩＡ−３、ＩＡ−４、ＩＢ−１、ＩＢ−３及びＩＢ−４）がＳＡＲＳ  ３ＣＬと強くカップリングすることを知ることができる。該化合物（ＩＡ−３、ＩＡ−４、ＩＢ−１、ＩＢ−３及びＩＢ−４）はＨＣＶ  ３ＣＬプロティナーゼに高度なアフィニティを有する。しかし、ＩＡ−１とＩＡ−４は、それぞれ、他の化合物よりも、ＨＣＶ  ３ＣＬ及びＳＡＲＳ  ３ＣＬプロティナーゼに弱いアフィニティを有した。このことは、アフィニティ選択性が、構造変化の理由から変化することを意味すると考えられる。
（７）ＩＣ５０測定
（７．１）実験物質
ＳＡＲＳ  ３ＣＬプロティナーゼに対する幾つかの活性化合物の阻害活性（ＩＣ５０）を、蛍光共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）によって測定した。具体的なＦＲＥＴ方法は、C. Wu et al.によるSmall  molecules targeting severe acute respiratory syndrome human coronavirus,  PNAS, 101:27, (2004), pages10012-10017 中で知ることができる。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ  ３ＣＬプロティナーゼに対する蛍光基質を、該プロティナーゼの該基質の切断特異性（コア配列Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−↓−Ｓｅｒ）に従って、合成した。該基質のアミノ酸配列はＥＤＡＮＳ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−（Ｄａｂｃｙｌ）−Ｍｅｔであった。ＥＤＡＮＳとＤａｂｃｙｌは、広く用いられている蛍光クエンチング分子対(fluorescent-quenching molecular pair)である。
【０１８４】
該基質の蛍光強度の変化を、ＴＥＣＡＮ  ＧＥＮｉｏｓ  Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎによって測定した。基質の蛍光強度の変化は、酵素活性に依存する。酵素が基質を切断することができる場合には、蛍光強度は上昇し、最後には最大値に達する。最適励起波長は３４０ｎｍであり、最適発光波長は１時間にわたって４８８ｎｍであった。
【０１８５】
活性化合物の種々な濃度（１００ｍＭ〜２０μＭ）のストック溶液を調製して、１μＭ３ＣＬプロティナーゼと混合した。蛍光基質の最終濃度は、１０μＭであった。該溶液量は２００μｌであり、活性化合物の最終濃度は、それぞれ、５００μＭ〜０．１μＭであった。活性化合物の１００ｍＭ〜２０μＭの濃度をストック溶液として用いる。これらを比率１：２００に応じて２００μｌに希釈した場合に、それぞれの濃度は５００μＭ〜０．１μＭである。
【０１８６】
活性化合物のＩＣ５０の測定中に、０．５％ＤＭＳＯを用いて、ブランク基準を設定した。各サンプルに対して、多重ウェルを用いて、各測定に関して平均値を算出した。該化合物の種々な濃度によって、該化合物を含むサンプルとブランク・サンプルとの間の反応速度の比較から種々な濃度の阻害率を算出した。
【０１８７】
３ＣＬプロティナーゼに対する阻害のＩＣ５０を、対数式とOrigin ソフトウェアによって、非線形フィッティングを用いて算出した。用いた該式は下記のとおりであった：
【０１８８】
【化３４】
2009534293.tif 000035
【０１８９】
［式中：Ａ０は、該ブランク基準の酵素活性である。Ａ（Ｉ）は種々な濃度の活性化合物の酵素活性である。Ｉは阻害剤の濃度である。］
（７．２）実験結果
活性化合物ＩＡ−１、ＩＡ−２、ＩＡ−３、ＩＡ−４及びＩＢ−１のＩＣ５０結果を、表２に開示する。
【０１９０】
【化３５】
2009534293.tif 000036
【０１９１】
表２から、活性化合物がＳＡＲＳ  ３ＣＬプロティナーゼに高度なアフィニティを有し、それによって、ＳＡＲＳウイルスの阻害に活性を示すことを知ることができる。
実施例１５
３−アルコキシ置換−２，５，７−三置換ベンゾピラン−４−オンのシリーズ化合物の経口錠剤の製造
下記成分を混合して、均質な混合物にすることによって、患者に経口投与するための錠剤を製造した：
活性化合物  １２５ｇ；ビタミンＣ  １０ｇ；ミクロン化シリカゲル  ４０ｇ；コロイド状澱粉  １０ｇ；及びステアリン酸マグネシウム  ４ｇ．
上記成分の均質な混合物を、湿式方法と真空乾燥によって、錠剤５００個に成形した。各錠剤は活性化合物２５０ｍｇを有する。“湿式方法”は製薬業界において知られた錠剤製造方法である。最初に、活性化合物、ビタミンＣ、ミクロン化シリカゲル及びステアリン酸マグネシウムをブレンドし、粉砕して、混合粉末を形成する。次に、コロイド状澱粉を水によって（例えば、１：１０の比率で）ペーストにして、これを“結合剤溶液”として用いる。最後に、結合剤ペーストを該粉末に加えて、混合して、湿った塊状物を形成し、これから錠剤を成形する。
実施例１６
３−アルコキシ置換−２，５，７−三置換ベンゾピラン−４−オンのシリーズ化合物の経口溶液の製造
下記成分を混合して、均質な混合物にすることによって、患者に経口投与するための経口溶液を製造した：
甘蔗糖  １００ｇ；カルボキシメチルセルロース・ナトリウム  ５ｇ；Ｔｗｅｅｎ  ３０ｇ；蒸留水  ５００ｇ．
該成分を６０℃において完全に混合した。次に、混合物を２０℃に冷却させてから、活性化合物  １０ｇとビタミンＣ  ５０ｇを該混合物に加えて、経口溶液  １０００ｍｌを製造した。
実施例１７
３−アルコキシ置換−２，５，７−三置換ベンゾピラン−４−オンのシリーズ化合物のカプセル剤の製造
下記成分を混合して、均質な混合物にすることによって、患者に経口投与するためのカプセル剤を製造した：
活性化合物  １２５ｇ；ビタミンＣ  ５０ｇ；Ｌｓ−ヒドロキシプロピルセルロース  １０ｇ；ミクロン化シリカゲル  ４０ｇ；微結晶セルロース  ２５ｇ．
フメクタントとして用いる７０％エタノールの存在下で、上記成分を混合して、続いて、真空乾燥させた。
【０１９２】
ステアリン酸マグネシウム  ４ｇを加えて、活性化合物  ０．１２５ｇが各カプセル剤中に存在するカプセル剤１０００個を製造した。
実施例１８
３−アルコキシ置換−２，５，７−三置換ベンゾピラン−４−オンのシリーズ化合物の注射薬の製造
下記成分を混合して、均質な混合物にすることによって、患者に注射するための薬剤を製造した：
活性化合物  ３００ｇ；４５％エタノール  １３５０ｍｌ；ポリオキシエチレンひまし油  １５００ｇ．
該均質な混合物を冷蔵保存し、その後、濾過して、小ボトル１０００個にした。各ボトル中には、活性化合物  ０．３ｇが存在した。標準食塩水  ２５０ｍｌによって希釈した後に、該溶液をドリップ中に入れることができる。
実施例１９
３−アルコキシ置換−２，５，７−三置換ベンゾピラン−４−オンのシリーズ化合物の発泡錠の製造
２部分、即ち、酸性部分と塩基性部分を混合することによって、発泡錠を製造した。
【０１９３】
酸性部分の粒子の製造
活性化合物  １００ｇ；クエン酸  ４５０ｇ；ラクトース  ５０ｇ．
塩基性部分の粒子の製造
ＮａＨＣＯ３  ３９０ｇ；ラクトース  ４０ｇ；アスパルテーム  １０ｇ；オレンジエッセンス  ４ｇ．
該２部分の均質な混合物を、パーツ当たり約４ｇをなし、各パーツ中に活性化合物０．４ｇを含む、パーツ２５０個に分離した。
用途
開示した活性化合物は、ＳＡＲＳの３ＣＬプロティナーゼと、急性鼻咽頭炎に関連したウイルスの両方に実質的に結合し、これらを阻害する能力を示している。
【０１９４】
したがって、該開示活性化合物は、実質的な抗ＳＡＲＳ活性と、抗急性鼻咽頭炎活性を示している。したがって、該開示活性化合物は、ＳＡＲＳ、急性鼻咽頭炎及びその他の関連疾患に罹患した患者を治療するための薬剤として有用である。
【０１９５】
該開示活性化合物は、容易に入手可能な市販物質から比較的容易に合成することができる。
【０１９６】
該開示活性化合物は、ヒトに対する非常に低い毒性を有し、それ故、薬剤に用いるために、特に、例えば、ＳＡＲＳ及び急性鼻咽頭炎に関連した感染症のようなウイルス感染症に罹患した患者を治療する、又は抑制するための薬剤に用いるために理想的である。
【０１９７】
上記開示を読んだ後に、本発明の要旨及び範囲から逸脱することのない、その他の種々な変更及び適応が当業者に自明であることは明らかであろう、そしてこのような変更及び適応が本発明の特許請求の範囲内に包含されることが意図される。
【国際調査報告】
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