(57)【要約】【課題】本発明は、特に治療および／または予防の目的で、人または動物への有効成分の投与のために用いられる、少なくとも１つのイミダゾリル基Ｉｍおよび少なくとも１つの疎水性基Ｈｙによって２官能化された、新規な多糖類、そして特にはデキストリンを提供するものである。【解決手段】本発明は、少なくとも１つのイミダゾリル基Ｉｍおよび少なくとも１つの疎水性基Ｈｙによって２官能化されたデキストランおよび／またはデキストラン誘導体に関し、このイミダゾリル基およびこの疎水性基はそれぞれ同一および／または異なっており、また１つまたはそれ以上の連結基Ｒ、ＲｉもしくはＲｈおよび官能基Ｆ、ＦｉもしくはＦｈを経由して、デキストランおよび／またはデキストラン誘導体にグラフトまたは結合している。また本発明は、前記のデキストランおよび少なくとも１つの有効成分を含む医薬組成物である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つのイミダゾリル基Ｉｍおよび少なくとも１つの疎水性基Ｈｙによって２官能化されたデキストランおよび／またはデキストラン誘導体であって、このイミダゾリル基およびこの疎水性基はそれぞれ同一および／または異なっており、また１つまたはそれ以上の連結基Ｒ、ＲｉもしくはＲｈまたは官能基Ｆ、ＦｉもしくはＦｈを経由して、デキストランおよび／またはデキストラン誘導体にグラフトまたは結合しており、
・Ｒは、１〜１８の範囲の炭素原子を含み、ただし、分岐していてもよいし、および／もしくは不飽和でも、１つまたはそれ以上のヘテロ原子、例えばＯ、Ｎおよび／もしくはＳを含んでいてもよい、化学結合または鎖からなる連結基を表し、
Ｒは、イミダゾリル基を保持する場合にはＲｉと表し、また疎水性基を保持する場合にはＲｈと表し、ＲｉとＲｈは同じでも異なっていてもよく、
・Ｆは、エステル、チオエステル、アミド、炭酸塩、カルバミン酸塩、エーテル、チオエーテルまたはアミン官能基から選ばれた官能基を表し、
Ｆは、イミダゾリル基を保持する場合にはＦｉと表し、また疎水性基を保持する場合にはＦｈと表し、ＦｉとＦｈは同じでも異なっていてもよく、
・Ｉｍは、炭素原子の１つがＣ１〜Ｃ４アルキル基（Ａｌｋｙ）によって置換されていてもよい、下式のイミダゾリル基を表し、
【化１】
2009532552.tif 000022
・Ｈｙは、
・線状もしくは分岐したＣ８〜Ｃ３０のアルキル基（ただし、不飽和であってもよいし、および／または１つまたはそれ以上のヘテロ原子、例えばＯ、ＮもしくはＳを含んでいてもよい。）、
・線状もしくは分岐したＣ８〜Ｃ３０のアルキルアリール基またはアリールアルキル基（ただし、不飽和であってもよいし、および／またはヘテロ原子を含んでいてもよい。）、
・Ｃ８〜Ｃ３０の多環式基（ただし、不飽和であってもよい。）、
から選ばれる疎水性基を表し、
前記のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、それが溶液中にある場合には両親媒性である、
ことを特徴とするデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項２】
デキストラン誘導体がカルボキル化誘導体から選ばれることを特徴とする請求項１記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項３】
カルボキル化デキストラン誘導体が、カルボキシメチルデキストランおよび無水コハク酸とデキストランの間の反応生成物から選ばれることを特徴とする請求項２記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項４】
デキストランおよび／またはデキストラン誘導体が、次の一般式Ｉに該当し、
【化２】
2009532552.tif 000023
ｎは１〜３の範囲であり、
ｉは、１つの単糖単位に対するイミダゾリル基のモル分率を表し、０．１〜０．９の範囲であり、
ｈは、１つの単糖単位に対する疎水性基のモル分率を表し、０．０１〜０．５の範囲であることを特徴とする、請求項１記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項５】
デキストランおよび／またはデキストラン誘導体が、次の一般式ＩＩに該当し、
【化３】
2009532552.tif 000024
ｎは１〜３の範囲であり、
ｉは、１つの単糖単位に対するイミダゾリル基のモル分率を表し、０〜０．９の範囲であり、
ｋは、１つの単糖単位に対する疎水性基のモル分率を表し、０．０１〜０．５の範囲であることを特徴とする、請求項１記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項６】
Ｒｉ基が、それが結合でない場合には、以下の基から選ばれ、
【化４】
2009532552.tif 000025
ｎは１〜６であり、
Ｒ１はＨ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ２、ＣＯＮＨ２であり、
Ｒ２は、１〜１８の炭素原子を含むアルキル基から選ばれ、
Ｒ３はＨ、Ｒ２、Ｈｙである、
ことを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項７】
Ｒｉ基が結合であることを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項８】
Ｒｈ基が、それが結合でない場合には、以下の基、
【化５】
2009532552.tif 000026
から選ばれることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項９】
Ｒｈ基が結合であることを特徴とする請求項１〜８のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項１０】
Ｒｉ基が下記の基から選ばれ、
【化６】
2009532552.tif 000027
ｎは１〜６であり、
Ｒ１はＨ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ２、ＣＯＮＨ２であり、
Ｒ２は、１〜１８の炭素原子を含むアルキル基から選ばれ、
Ｒ３はＨ、Ｒ２、Ｈｙであり、
そしてＲｈ基は結合である、
ことを特徴とする、請求項１〜９のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項１１】
イミダゾール−Ｒｉ基が、ヒスチジンエステル、ヒスチジノール、ヒスチジンアミドまたはヒスタミンから選ばれることを特徴とする請求項１〜４または６〜８のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項１２】
Ｈｙが、脂肪酸、脂肪族アルコール、脂肪族アミン、コレステロール誘導体、例えばコール酸、およびフェノール、例えばα−トコフェロール、および疎水性アミノ酸からなる群から選ばれることを特徴とする請求項１〜１１のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか１項記載の多糖類の１種および少なくとも１種の有効成分を含む医薬組成物。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項記載の多糖類の１種および遷移金属塩を含む医薬組成物。
【請求項１５】
遷移金属が、亜鉛、鉄、銅およびコバルトからなる群から選ばれることを特徴とする請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１６】
医薬組成物が、ｐＨが６．５未満の均質な水溶液または水性懸濁液の形態で供給されることを特徴とする請求項１３〜１６のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１７】
均質溶液および／または懸濁液が、ミセルおよび／またはナノ粒子からなっていることを特徴とする請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１８】
医薬組成物が、微少粒子の水性懸濁液の形態で、生理的ｐＨに近いｐＨで供給されることを特徴とする請求項１３〜１５のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１９】
医薬組成物が、静脈内に、筋肉内に、骨内に、皮下に、経皮で、または眼に投与することができることを特徴とする請求項１３〜１８のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項２０】
医薬組成物が、経口で、経鼻的に、経膣的に、または口腔に投与することができることを特徴とする請求項１３〜１８のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項２１】
医薬組成物が、固体の形態で供給されることを特徴とする請求項１３〜１５のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項２２】
医薬組成物が、６超のｐＨであるｐＨによって制御される凝固によって得られることを特徴とする請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２３】
医薬組成物が、注入の場所で物理的な架橋を受けることを特徴とする請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２４】
医薬組成物が、有効成分が注入の場所に保持されるのを可能にすることを特徴とする請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２５】
医薬組成物が、乾燥および／または凍結乾燥によって得られることを特徴とする請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２６】
医薬組成物が、ステント、インプラント可能な生体材料の膜もしくは被覆、インプラント、ゲルまたはクリームの形態で投与することができることを特徴とする請求項２１〜２３のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項２７】
有効成分が、タンパク質、糖タンパク質、ペプチドおよび非ペプチド治療用分子からなる群から選ばれることを特徴とする請求項１３〜２４のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項２８】
タンパク質または糖タンパク質が、成長因子、例えば形質転換成長因子−β（ＴＧＦ−β）のスーパーファミリーの一員、例えば骨形態形成タンパク質（ＢＭＰ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、インスリン成長因子（ＩＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、インターロイキン（ＩＬ）型のサイトカインまたはインターフェロン（ＩＦＮ）から選ばれることを特徴とする請求項２５記載の医薬組成物。
【請求項２９】
有効成分が、ロイプロリドまたは副甲状腺ホルモンＰＴＨの短シーケンスから選ばれるペプチドの群から選ばれることを特徴とする請求項２７記載の医薬組成物。
【請求項３０】
有効成分が、非ペプチド治療用分子、例えば抗がん剤、例えばタクソールまたはシスプラチンの群から選ばれることを特徴とする請求項２７記載の医薬組成物。
【請求項３１】
有効成分が、インスリンまたは成長ホルモンｈＧＨからなる群から選ばれることを特徴とする請求項２７記載の医薬組成物。
【請求項３２】
請求項１〜１２のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体および／または請求項１３〜３１のいずれか１項記載の組成物の使用を含むことを特徴とする、神経組織の再生を意図した薬剤の製剤方法または治療方法。
【請求項３３】
請求項１１および１２のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体および／または請求項１３〜３１のいずれか１項記載の組成物の使用を含むことを特徴とする、心臓血管組織の再生を意図した薬剤の製剤方法または治療方法。
【請求項３４】
皮膚組織の再生を意図した治療または薬剤の製剤における、請求項１〜３１のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体および／または組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、多糖類系の、そして特にはデキストラン系の、新規な生分解性のポリマーに関する。
【背景技術】
【０００２】
これらのポリマーは、特に治療および／または予防の目的で、人または動物への有効成分（ＡＰ）の投与のために用いられる。これらのポリマーはまた、内在の有効成分の薬効を高め、また保護するのに役立つことができる。
【０００３】
これらのポリマーはいくつかの用途に合致するように設計されてきている。
・全身的なＡＰ、例えばタンパク質、例えばインスリンまたは成長ホルモンの放出。
・局部的なＡＰ、例えば成長因子、例えば形質転換成長因子または骨形態形成タンパク質の放出。
・体外での（in vitro）細胞培養。
・体内での（in vivo）細胞の移植。
・ＡＰが内在の成長因子である治療。
【０００４】
これらの分野において研究がなされてきたにも関わらず、これらの用途に関して多くの問題が残っている。先ず第一に、タンパク質の全身的な放出については、ＡＰの濃度を長期にわたって一定に保つことが望ましい。実際は、インスリン用の、例えばランタス（Lantus）という製品の場合には、その濃度は１日を通して変化する可能性があり、それは高血糖をもたらす可能性がある。成長因子の投入の場合には、これは強力な局部的治療薬剤であるので、主要な問題の１つは、それの全身的な循環を防止するために、それを投与したその場所に保持することにあり、このことはシーハーマン（Seeherman）の、「サイトカインおよび成長因子の総説（Cytokines and Growth Factors Reviews）」、２００５年、第１６巻、ｐ．３２９〜３４５にまとめられている。細胞培養の場合は、成長因子の供給が有益であることが認められている。しかしながら、溶液中でのこれらの分子の低い安定性のために、これらの高価な薬剤を大量に使用しなければならない。
【０００５】
そこで、以下の事柄を可能にする医薬組成物に対する未だに満足されていない必要性が存在している。
・全身的ＡＰ、例えばインスリンまたはｈＧＨの放出時間を延長すること。
・例えばＡＰが成長因子である場合には、有効成分を投与された場所に保持すること。
・細胞培養に用いられる、通常は成長因子であるＡＰの量を制限すること。
・特に治療の場合に、内在するＡＰの作用を促進すること。
【０００６】
これらの医療上の目的を達成するための新規なポリマーを開発する多くの試みにも関わらず、薬物送達分野においては今までＰＬＡＧＡだけが承認されている。これらのポリマーは、水性の媒体中で、ＡＰを含む高密度の固体を形成する。この場合には、ＡＰは数週間にわたって放出されていることができ、これは望ましい目的の１つである。製剤の１つの例はニュートロピンデポ（Nutropin Depot.）であり、アルケルメス（Alkermes）およびジェネンテック(Genentech)により開発され、人成長ホルモンの長期に及ぶ放出（２週間）のためのものであり、国際公開第９５／２９６６４号パンフレットに記載されている。
【０００７】
しかしながら、この取り組みは、以下のような多くの欠点に悩まされている。
・「破裂」効果、すなわちＡＰのかなりの部分が、注入の後で即座に放出されること。
・ＰＬＡＧＡポリマーの化学的分解、これは固体の内部に乳酸およびグリコール酸を形成し、この酸はポリマーの分解を触媒し、また場合によっては、ＡＰの分解を触媒する。
・酸性の局部的な増大は炎症の原因である。これらの２つの現象はアンダーソン（Anderson）による報文、アドヴドラッグデルレヴ（Adv. Drug Del. Rev.）、１９９７年、第２８巻、ｐ．５〜２４に記載されている。
【０００８】
これらの理由により、ニュートロピンデポ（Nutropin Depot.）は市場から最近撤退している。
【０００９】
アトリックス（Atrix）は、米国特許第５９９０１９４号明細書の中に、アトリゲル（Atrigel）の名称で、ぺプチド、ロイプロリドの放出のためのＰＬＡＧＡの使用を記載しており、これは有機溶媒系の製剤である。上記のＰＬＡＧＡに関する問題に加えて、この技術は以下の欠点を示している。
・有機溶媒の注入。アトリゲル（Atrigel）の場合にはこの溶媒はＣＭＲ化合物に分類される。
・ＮＭＰの変性効果のために、この系はタンパク質に適用することが困難である。
【００１０】
製薬のＡＰの制御された放出を目的とした他の製剤は架橋可能なポリマーを用いているが、多くの研究努力にも関わらず、医薬組成物中に含まれる生体材料はいずれも、有効成分の全身的放出または局部的放出を制御するための、有効成分の注入可能性の要求と、有効成分を投入の場所に保持する要求を、同時に解決することを可能にはしない。
【００１１】
本発明は、少なくとも１つのイミダゾリル基Ｉｍおよび少なくとも１つの疎水性基Ｈｙによって２官能化された、新規な多糖類、そして特にはデキストリンに関し、それは今日まで解決策が見出されなかった、上記で目標とした用途を満足することを可能にする。官能化された多糖類の中で、その酸がアミン、そして特にはイミダゾール環を持つアミンによって変性されているペクチン(ガラクツロナン)を、国際公開第９９／０９０６７号パンフレットから知ることができる。これらの単官能性化されたポリマーは両親媒性ではない。
【００１２】
疎水性基によって単官能化された他の多糖類が当業者には知られている。アキヨスキー（Akiyoski）らの、制御された放出誌（J. Controlled Release）、１９９８年、第５４巻、ｐ．３１３〜３２０の研究には、インスリンの制御された放出のためのコレステロールによって変性されたプルランが記載されている。
【００１３】
デラシェリー（Dellacherie）らは、仏国特許第２７９４７６３号明細書中にＣ１２またはＣ１８の脂肪族アルキル鎖によって変性されたヒアルロン酸誘導体を記載している。このグループはまた、仏国特許第２７８１６７７号明細書に、脂肪族アルキル鎖によって変性されたアルギン酸誘導体を記載している。
【００１４】
官能化されたデキストランの中で、米国特許第６６４６１２０号明細書に記載されている、バイオデックス（Biodex）からのカルボキシメチルデキストランは、ベンジルアミンによって変性されている。これらのポリマーはイミダゾリル基によっては官能化されていない。
【００１５】
デラシェリー（Dellacherie）らはまた、疎水性物質によって官能化されたデキストランを記載しており（デュラン、エー（Durand A.）ら、生体高分子（biomacromolecules）、２００６年、第７巻、ｐ．９５８〜９６４）、（デュラン、アラン（Durand, Alain）ら、コロイドポリマー科学（Colloid polym. Sci.）、２００６年、第２８４巻、ｐ．５３６〜５４５）、それはデキストランのヒドロキシ官能基とエポキシド（フェニルグリシジルエーテル、１，２−エポキシオクタンまたは１，２−エポキシドデカン）との反応によって得られている。従って、そこに記載されているポリマーはイミダゾリル基によって２官能化されておらず、またイミダゾリル基を有してもいない。
【００１６】
バウアー（Bauer）らは、米国特許第５７５０６７８号明細書中にＣ１０〜Ｃ１４の脂肪酸によって官能化されたデキストランを記載している。これらのポリマーもまた、単官能化されている。
【００１７】
デキストラン系の官能性ポリマーの最近の総説（ハインツ、トーマス（Heinze, Thomas）ら、ポリマー科学の発展（Adv. Polym. Sci.）、２００６年、第２０５巻、ｐ．１９９〜２９１）には、疎水性物質およびイミダゾリル基によって２官能化されたデキストランは報告されていない。
【００１８】
求核試薬によるアニオン性多糖類の化学変性によって水中に不溶となった組成物もまた、国際公開第９２／２０３４９号パンフレットによって知られている。ヒスチジンおよびその誘導体のいくつかが求核試薬の中に現れるが、しかしながらこれらのポリマーは単官能性である。
【００１９】
従って、本発明の２官能化された多糖類、そして特には２官能化されたデキストランは、これらの従来技術では知られていない。
【００２０】
【特許文献１】国際公開第９５／２９６６４号パンフレット
【特許文献２】米国特許第５９９０１９４号明細書
【特許文献３】国際公開第９９／０９０６７号パンフレット
【特許文献４】仏国特許第２７９４７６３号明細書
【特許文献５】仏国特許第２７８１６７７号明細書
【特許文献６】米国特許第６６４６１２０号明細書
【特許文献７】米国特許第５７５０６７８号明細書
【特許文献８】国際公開第９２／２０３４９号パンフレット
【非特許文献１】シーハーマン（Seeherman）、「サイトカインおよび成長因子の総説（Cytokines and Growth Factors Reviews）」、２００５年、第１６巻、ｐ．３２９〜３４５
【非特許文献２】シーハーマン（Seeherman）、「サイトカインおよび成長因子の総説（Cytokines and Growth Factors Reviews）」、２００５年、第１６巻、ｐ．３２９〜３４５
【非特許文献３】アンダーソン（Anderson）、アドヴドラッグデルレヴ（Adv. Drug Del. Rev.）、１９９７年、第２８巻、ｐ．５〜２４
【非特許文献４】アキヨスキー（Akiyoski）ら、制御された放出誌（J. Controlled Release）、１９９８年、第５４巻、ｐ．３１３〜３２０
【非特許文献５】デュラン、エー（Durand A.）ら、生体高分子（biomacromolecules）、２００６年、第７巻、ｐ．９５８〜９６４
【非特許文献６】デュラン、アラン（Durand, Alain）ら、コロイドポリマー科学（Colloid polym. Sci.）、２００６年、第２８４巻、ｐ．５３６〜５４５
【非特許文献７】ハインツ、トーマス（Heinze, Thomas）ら、ポリマー科学の発展（Adv. Polym. Sci.）、２００６年、第２０５巻、ｐ．１９９〜２９１
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２１】
本発明は、今日まで解決策が見出されなかった、上記で目標とした用途を満足することを可能にする、少なくとも１つのイミダゾリル基Ｉｍおよび少なくとも１つの疎水性基Ｈｙによって２官能化された、新規な多糖類、そして特にはデキストリンを提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
従って、本発明は少なくとも１つのイミダゾリル基Ｉｍおよび少なくとも１つの疎水性基Ｈｙによって２官能化された多糖類に関し、このイミダゾリル基およびこの疎水性基はそれぞれ同一および／または異なっており、また１つまたはそれ以上の連結基Ｒ、ＲｉもしくはＲｈおよび官能基Ｆ、ＦｉもしくはＦｈを経由して多糖類にグラフトまたは結合している。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
１つの実施態様では、本発明による多糖類は、ヒアルロン酸、アルギン酸塩、キトサン、ガラクツロナン、コンドロイチン硫酸塩、デキストラン、カルボキシメチルデキストランおよびカルボキシメチルセルロースからなる群から選ばれる。
【００２４】
１つの実施態様では、本発明による多糖類は、ヒアルロン酸、アルギン酸塩、キトサンおよびカルボキシメチルデキストランからなる群から選ばれる。
【００２５】
１つの実施態様では、本発明による多糖類は、デキストランおよびカルボキシメチルデキストランからなる群から選ばれる。
【００２６】
本発明は、少なくとも１つのイミダゾリル基Ｉｍおよび少なくとも１つの疎水性基Ｈｙによって２官能化されたデキストランおよび／またはデキストラン誘導体に関し、このイミダゾリル基およびこの疎水性基はそれぞれ同一および／または異なっており、また１つまたはそれ以上の連結基Ｒ、ＲｉもしくはＲｈおよび官能基Ｆ、ＦｉもしくはＦｈを経由して、デキストランおよび／またはデキストラン誘導体にグラフトまたは結合している。
・Ｒは、１〜１８の範囲の炭素原子を含み、ただし、分岐していてもよいし、および／もしくは不飽和でも、１つまたはそれ以上のヘテロ原子、例えばＯ、Ｎおよび／もしくはＳを含んでいてもよい、化学結合または鎖からなる連結基を表す。
Ｒは、イミダゾリル基を保持する場合にはＲｉと表し、また疎水性基を保持する場合にはＲｈを表し、ＲｉとＲｈは同じでも異なっていてもよい。
・Ｆは、エステル、チオエステル、アミド、炭酸塩、カルバミン酸塩、エーテル、チオエーテルまたはアミン官能基から選ばれた官能基を表す。
Ｆは、イミダゾリル基を保持する場合にはＦｉと表し、また疎水性基を保持する場合にはＦｈと表し、ＦｉとＦｈは同じでも異なっていてもよい。
・Ｉｍは、炭素原子の１つがＣ１〜Ｃ４アルキル基（Ａｌｋｙ）によって置換されていてもよい、下式のイミダゾリル基を表す。
【００２７】
【化１】
2009532552.tif 000002
【００２８】
・Ｈｙは、下記の基から選ばれる疎水性基を表す。
・線状もしくは分岐したＣ８〜Ｃ３０のアルキル基（ただし、不飽和であってもよいし、および／または１つまたはそれ以上のヘテロ原子、例えばＯ、ＮもしくはＳを含んでいてもよい。）
・線状もしくは分岐したＣ８〜Ｃ３０のアルキルアリール基またはアリールアルキル基（ただし、不飽和であってもよいし、および／またはヘテロ原子を含んでいてもよい。）
・Ｃ８〜Ｃ３０の多環式基（ただし、不飽和であってもよい。）
前記のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、それが溶液中にある場合には両親媒性である。
１つの実施態様では、デキストランおよび／またはデキストラン誘導体は酸性のｐＨで両親媒性である。
【００２９】
本明細書の中では、用語「デキストラン」は、本発明によれば、デキストランおよびデキストラン誘導体を意味すると理解される。
デキストラン誘導体は、１つの実施態様では、カルボキシル化誘導体である。
デキストランのカルボキシル化誘導体は、特にはカルボキシメチルデキストランおよび無水コハク酸およびデキストランの間の反応生成物から選ばれる。
【００３０】
本発明によれは、２官能化されたデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、次の一般式に該当していてよい。
【００３１】
【化２】
2009532552.tif 000003
【００３２】
ｎは１〜３の範囲であり、
ｉは、１つの単糖単位に対するイミダゾリル基のモル分率を表し、０．１〜０．９の範囲である。
ｈは、１つの単糖単位に対する疎水性基のモル分率を表し、０．０１〜０．５の範囲である。
【００３３】
【化３】
2009532552.tif 000004
【００３４】
ｎは１〜３の範囲である。
ｉは、１つの単糖単位に対するイミダゾリル基のモル分率を表し、０〜０．９の範囲である。
ｋは、１つの単糖単位に対する疎水性基のモル分率を表し、０．０１〜０．５の範囲である。
【００３５】
驚くべきことに、本発明による、少なくとも１つのイミダゾリル基および少なくとも１つの疎水性基によって２官能化されたデキストランは、生理的なｐＨで凝固し、更にポリマー中でのＡＰの保持を可能にする。従って、有効成分は、分解されることや、変性されることのいずれもなく、生体内で注入の場所に保持される。
【００３６】
用語「凝固」は、ポリマーが固体を形成する、またはヒドロゲルを形成することのいずれかができることを意味すると理解される。
【００３７】
ヒドロゲルは、コロイドの一種であり水性媒体中で得られ、その中では液体が、その系中に微細な網目組織を形成している固体を含んでいる。その固体相および液体相は、その中で連続している。
【００３８】
２種の２官能化デキストランが本発明に該当しており、カチオン性デキストランおよびアニオン性デキストランである。
【００３９】
本発明によるカチオン性デキストランは、６未満のｐＨの範囲で均質な溶液を形成し、そして生理的ｐＨに近いｐＨで凝固する特性を有する。
【００４０】
生理的ｐＨに近いｐＨでは、全てのまたは一部の荷電された、そして従って親水性のイミダゾールセグメントは、中性のセグメントに転換され、そのことがその凝固をもたらす。
【００４１】
この凝固の効果は、ポリマーのイミダゾリル環および、有効成分上に恐らく存在するであろうイミダゾリル環と、多価の遷移金属、例えば亜鉛との配位による物理的架橋の効果と組み合わせることができる。この配位は６超のｐＨでのみ起こる。
【００４２】
本発明のアニオン性デキストランは中性のｐＨで均質な溶液を形成し、そして遷移金属塩の存在下で、生理的ｐＨに近いｐＨで凝固する特性を有している。
【００４３】
アニオン性デキストランが均質な溶液を形成する場合は、本発明のデキストランは両親媒性であり、そして従ってミセルおよび／またはナノ粒子の形態で溶解している。
【００４４】
生理的ｐＨに近いｐＨでは、物理的な架橋効果によってもたらされる凝固は、ポリマーのイミダゾリル環および、有効成分上に恐らく存在するであろうイミダゾリル環と、多価の遷移金属、例えば亜鉛との配位によって起こる。
【００４５】
下記の図式は、生理的ｐＨでの金属塩の、ポリマーまたはＡＰによって保持されているイミダゾールとの作用の様式を示している。
【００４６】
【化４】
2009532552.tif 000005
【００４７】
生理的ｐＨで凝固が得られることを可能にするポリマーの特性に応じて、注入可能な製剤が、該ポリマーが均質な溶液を形成するｐＨ領域で調製される。
【００４８】
１つの実施態様では、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、Ｒｉ基が、それが結合でない場合には、以下の基から選ばれることを特徴としている。
【００４９】
【化５】
2009532552.tif 000006
【００５０】
ｎ＝１〜６
Ｒ１＝Ｈ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ２、ＣＯＮＨ２
Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２、Ｈｙ
Ｒ２は、１〜１８の炭素原子を含むアルキル基から選ばれる。
【００５１】
１つの実施態様では、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、Ｒｉ基が結合であることを特徴としている。
【００５２】
１つの実施態様では、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、イミダゾール−Ｒｉ基がヒスチジンエステル、ヒスチジノール、ヒスチジンアミドまたはヒスタミンをグラフトすることによって得られる基から選ばれることを特徴としている。
【００５３】
それらのイミダゾール誘導体は以下のように表すことができる。
【００５４】
【化６】
2009532552.tif 000007
【００５５】
１つの実施態様では、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体はＨｙが、脂肪酸、脂肪族アルコール、脂肪族アミン、コレステロール誘導体、例えばコール酸、およびフェノール、例えばα−トコフェロール、からなる群から選ばれることを特徴としている。
【００５６】
１つの実施態様では、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、Ｒｈ基が、それが結合でない場合には、以下の基から選ばれることを特徴としている。
【００５７】
【化７】
2009532552.tif 000008
【００５８】
１つの実施態様では、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、Ｒｈ基が結合であることを特徴としている。
【００５９】
１つの実施態様では、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、Ｒｉ基が、それが結合でない場合には、以下の基から選ばれることを特徴としている。
【００６０】
【化８】
2009532552.tif 000009
【００６１】
ｎ＝１〜６
Ｒ１＝Ｈ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ２、ＣＯＮＨ２
Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２、Ｈｙ
Ｒ２は、１〜１８の炭素原子からなるアルキル基から選ばれる。
また、Ｒｈ基は結合である。
【００６２】
１つの実施態様では、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、イミダゾール−Ｒｉ基が、ヒスチジンエステル、ヒスチジノール、ヒスチジンアミドまたはヒスタミンから選ばれることを特徴としている。
【００６３】
１つの実施態様では、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、Ｈｙが脂肪酸、脂肪族アルコール、脂肪族アミン、コレステロール誘導体、例えばコール酸、フェノール、例えばα−トコフェロールおよび疎水性アミノ酸、からなる群から選ばれることを特徴としている。
【００６４】
この疎水性アミノ酸は、トリプトファン誘導体、例えばトリプトファンエチルエステル、フェニルアラニン誘導体、ロイシン誘導体、バリン誘導体またはイソロイシン誘導体から選ばれる。
【００６５】
デキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、１０〜１００００の範囲の重合度ｍを有することができる。
【００６６】
１つの実施態様では、それは１０〜１０００の範囲の重合度ｍを有している。
【００６７】
他の実施態様では、それは１０〜５００の範囲の重合度ｍを有している。
【００６８】
本発明はまた、上記の本発明による１つのデキストランおよび／またはデキストラン誘導体および少なくとも１つの有効成分を含む医薬組成物に関する。
【００６９】
用語「有効成分」は、生理学的な活性を有する、単一の化学物質の形態の、または配合物の形態の生成物を意味すると理解される。前記の有効成分は外因性であることができ、換言すると、本発明による組成物によって持ち込まれる。有効成分はまた内因性であることができ、例えば成長因子であって、それは治癒の第一段階では傷の中に隠れており、そしてそれは本発明による組成物によって前記の傷上に保持されていることができる。
【００７０】
本発明はまた、上記の本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体の１つと遷移金属塩とを含む医薬組成物に関する。
１つの実施態様では、この遷移金属は、亜鉛、鉄、銅およびコバルトからなる群から選ばれる。
【００７１】
本発明はまた、均質な水溶液または水性懸濁液の形態で、６未満のｐＨで提供されることを特徴とする、上記の本発明による医薬組成物に関する。
【００７２】
本発明はまた、６未満のｐＨの、均質な溶液および／または懸濁液がミセルおよび／またはナノ粒子からなることを特徴とする、上記の本発明による医薬組成物に関する。用語「ナノ粒子」は、その平均直径が６００ｎｍ未満である、水性懸濁液中の物を意味すると理解される。
【００７３】
本発明はまた、生理的ｐＨに近いｐＨで、微小粒子の水性懸濁液の形態で提供されることを特徴とする、上記の本発明による医薬組成物に関する。用語「微小粒子」は、平均直径が６００ｎｍ超のものを意味すると理解され、また「生理的ｐＨに近いｐＨ」は、６〜８の範囲のｐＨを意味すると理解される。
【００７４】
本発明はまた、静脈内に、筋肉内に、骨内に、皮下に、経皮で、または眼に投与することができることを特徴とする、上記の本発明による医薬組成物に関する。
【００７５】
本発明はまた、経口で、経鼻的に、経膣的に、または口腔投与することができることを特徴とする、上記の本発明による医薬組成物に関する。
【００７６】
本発明はまた、固体の形態で提供されることを特徴とする、上記の本発明による医薬組成物に関する。
【００７７】
本発明はまた、ｐＨによって制御された凝固によって得られることを特徴とする、上記の本発明による医薬組成物に関する。
【００７８】
１つの実施態様では、凝固は６．５超のｐＨで行われる。
【００７９】
本発明はまた、乾燥および／または凍結乾燥によって得られることを特徴とする、上記の本発明による医薬組成物に関する。
【００８０】
本発明はまた、ステント、インプラント可能な生体材料の膜もしくは被覆、またはインプラントの形態で投与することができることを特徴とする、上記の本発明による医薬組成物に関する。
【００８１】
本発明はまた、注入の場所で物理的な架橋を受けることを特徴とする、上記の組成物に関する。
【００８２】
本発明はまた、有効成分の、注入の場所での保持を可能にすることを特徴とする、上記の組成物に関する。
【００８３】
本発明による医薬組成物は、当業者に知られた慣用の医薬製剤技術によって得られ、また商業的に、もしくは使用の時のいずれでも調製することができる。
【００８４】
本発明はまた、有効成分が、タンパク質、糖タンパク質、ペプチドおよび非ペプチド治療用分子からなる群から選ばれることを特徴とする、上記の本発明による医薬組成物に関する。
【００８５】
本発明によれば、タンパク質または糖タンパク質は、ホルモン、例えばインスリンもしくはｈＧＨから、または成長因子、例えば形質転換成長因子−β（ＴＧＦ−β）のスーパーファミリーの一員、例えば骨形態形成タンパク質（ＢＭＰ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、インスリン成長因子（ＩＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、インターロイキン（ＩＬ）型のサイトカインまたはインターフェロン（ＩＦＮ）、から選ばれる。
【００８６】
医療の治療用の用途としては次のものが挙げられる。
・ＡＰ、例えば成長因子、例えばＴＧＦ類、ＢＭＰ類、ＰＤＧＦ類、ＮＧＦ類、ＶＥＧＦ類、ＩＧＦ類、ＦＧＦ類またはＥＧＦ類の局部的な放出。
・ＡＰ、例えばタンパク質、例えばインスリン、成長ホルモン、ＥＰＯ、ＩＬ類、またはＩＦＮ類の全身的な放出。
・細胞の生体内投与。
・体外での細胞の培養。
・ＡＰ類が内因性の成長因子であるところの治療。
【００８７】
有効成分が、タンパク質、糖タンパク質、ペプチドおよび非ペプチド治療用分子からなる群から選ばれる、上記の発明による組成物は、組成物の総質量に対して０．００５質量％〜２質量％の範囲の有効成分を含んでいる。
【００８８】
１つの実施態様では、この組成物は、組成物の総質量に対して０．０１質量％〜０．５質量％の範囲のタンパク質、糖タンパク質、ペプチドおよび非ペプチド治療用分子を含む。
【００８９】
成長因子、とくにＢＭＰ類の局部的な放出において、引用した医療用途の中で目標とされるのは、骨粗しょう症によって衰弱した骨の局部的処置である。これらの処置は、特に臀部、手首および脊椎の、骨折し、また強い物理的圧力を受ける骨の最も迅速な再生からなっている。これらの処置は、骨折した場合には治療的であり、また高い危険性の状況では予防的である。
【００９０】
本発明は、従って、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体および／もしくは組成物の、骨粗しょう症によって衰弱した骨の局部的な処置を意図した薬剤の製剤または処置における使用に関する。
【００９１】
この特定の場合において、この組成物は、組成物の総質量に対して０．００５％〜２％の範囲のＢＭＰを含んでいる。
【００９２】
１つの実施態様では、この組成物は、組成物の総質量に対して０．０１％〜０．５％の範囲のＢＭＰを含んでいる。
【００９３】
成長因子、特にＮＧＦ類、またはＴＧＦ−β類の局部的な放出において、引用した医療用途の中で目標とされるのは、神経組織の再生のための処置である。
【００９４】
本発明は従って、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体および／もしくは組成物の、神経組織の再生を意図した薬剤の製剤または処置における使用に関する。
【００９５】
この特定の場合において、この組成物は、組成物の総質量に対して０．００５％〜２％の範囲のＮＧＦまたはＴＧＦ−βを含んでいる。
【００９６】
１つの実施態様では、この組成物は、組成物の総質量に対して０．０１％〜０．５％の範囲のＮＧＦまたはＴＧＦ−βを含んでいる。
【００９７】
成長因子、特にＴＧＦ−β、ＰＤＧＦ類またはＶＥＧＦ類の局部的な放出において、引用した医療用途の中で目標とされるのは、心臓血管組織の再生のための処置である。
【００９８】
本発明は従って、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体および／もしくは組成物の、心臓血管組織の再生を意図した薬剤の製剤または処置における使用に関する。
【００９９】
この特定の場合において、この組成物は、組成物の総質量に対して０．００５％〜２％の範囲のＶＥＧＦまたはＴＧＦ−βを含んでいる。
【０１００】
１つの実施態様では、組成物は、組成物の総質量に対して０．０１％〜０．５％の範囲のＶＥＧＦまたはＴＧＦ−βを含んでいる。
【０１０１】
成長因子、特にＰＤＧＦ類またはＦＧＦ類の局部的な放出において、引用した医療用途の中で目標とされるのは、皮膚組織の再生のための処置である。
【０１０２】
本発明は従って、本発明によるデキストランおよび／またはデキストラン誘導体および／もしくは組成物の、皮膚組織の再生を意図した薬剤の製剤または処置における使用に関する。
【０１０３】
この特定の場合において、この組成物は、組成物の総質量に対して０．００５％〜２％の範囲のＰＤＧＦまたはＦＧＦを含んでいる。
【０１０４】
１つの実施態様では、この組成物は、組成物の総質量に対して０．０１％〜０．５％の範囲のＰＤＧＦまたはＦＧＦを含んでいる。
【０１０５】
本発明によれば、タンパク質は、インスリンまたは成長ホルモンｈＧＨからなる群から選ばれる。
【０１０６】
本発明によれば、非ペプチド治療用分子は、抗がん剤、例えばタクソールまたはシスプラチンからなる群から選ばれる。
【０１０７】
この特定の場合において、この組成物は、組成物の総質量に対して０．００５％〜２％の範囲のインスリンまたは成長ホルモンｈＧＨを含んでいる。
【０１０８】
１つの実施態様では、この組成物は、組成物の総質量に対して０．０１％〜０．５％の範囲のインスリンまたは成長ホルモンｈＧＨを含んでいる。
【０１０９】
本発明によれば、有効成分は、ロイプロリドまたは副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）の短シーケンスから選ばれるペプチドの群から選ばれる。
【０１１０】
本発明の医薬組成物は、液体の形態（水性懸濁液もしくは溶媒混合物中の懸濁液中のナノ粒子または微小粒子）、または粉体、インプラント、膜、ゲルまたはクリームの形態のいずれかで提供される。
【０１１１】
局部的な、また全身的な放出の場合には、想定された投与の様式は皮下の、皮内の、筋肉内の、経口の、経鼻的、経膣的、眼への、口腔の、などの投与である。
【０１１２】
本発明の医薬組成物は、従って、長期にわたっての制御された放出のための１種またはそれ以上の医薬の有効成分を含むインプラントを形成するのに用いることができる。この用途は、固形腫瘍の抗がん剤での治療または細胞再生に特に有利である。
【０１１３】
本発明はまた、タンパク質、糖タンパク質、ペプチドおよび非ペプチド治療用分子からなる群から選ばれた有効成分を含む、注入場所で物理的に架橋した医薬組成物に関する。
【０１１４】
本発明はまた、上記のような医薬組成物の調製における、本発明による２官能化されたデキストランおよび／またはデキストラン誘導体の使用に関する。
【実施例】
【０１１５】
実施例１
ヒスチジンエチルエステルおよびベンジルアミンによって変性されたカルボキシメチルデキストランの合成
カルボキシメチルデキストランの酸官能基（グリコシド単位当りの平均酸度が１．０）を、ＮＭＰ中でＮ−メチルモルホリンおよびイソブチルクロロギ酸エステルの存在の下に活性化した。ベンジルアミンとそれからヒスチジンエチルエステルをこの活性化したポリマーへグラフトした。得られたポリマーは下記の構造を有していた。
【０１１６】
【化９】
2009532552.tif 000010
【０１１７】
ＨｉｓＯＥｔは下式の通り。
【０１１８】
【化１０】
2009532552.tif 000011
【０１１９】
変性された酸官能基の水準は次の通りである。
−ヒスチジンエチルエステルによって５５％、
−ベンジルアミンによって４５％。
変性されなかった酸の水準は０であった。
【０１２０】
実施例２
ヒスチジンエチルエステルおよびドデシルアミンによって変性されたカルボキシメチルデキストランの合成
カルボキシメチルデキストランの酸官能基（グリコシド単位当りの平均酸度が１．０）を、ＤＭＦ中でＮ−メチルモルホリンおよびイソブチルクロロギ酸エステルの存在の下に活性化した。ヒスチジンエチルエステルおよびドデシルアミンをこの活性化したポリマーへグラフトした。得られたポリマーは下記の構造を有していた。
【０１２１】
【化１１】
2009532552.tif 000012
【０１２２】
ＨｉｓＯＥｔは下式の通り。
【０１２３】
【化１２】
2009532552.tif 000013
【０１２４】
変性された酸官能基の水準は次の通りである。
−ヒスチジンエチルエステルによって８５％、
−ドデシルアミンによって１０％。
変性されなかった酸の水準は５％であった。
【０１２５】
実施例３
ヒスチジンアミドおよびベンジルアミンによって変性されたカルボキシメチルデキストランの合成
カルボキシメチルデキストランの酸官能基（グリコシド単位当りの平均酸度が１．０）を、ＮＭＰ中でＮ−メチルモルホリンおよびイソブチルクロロギ酸エステルの存在の下に活性化した。ヒスチジンアミドおよびベンジルアミンをこの活性化したポリマーへグラフトした。得られたポリマーは下記の構造を有していた。
【０１２６】
【化１３】
2009532552.tif 000014
【０１２７】
ＨｉｓＮＨ２は下式の通り。
【０１２８】
【化１４】
2009532552.tif 000015
【０１２９】
変性された酸官能基の水準は次の通りである。
−ヒスチジンアミドによって６５％、
−ベンジルアミンによって３０％。
変性されなかった酸の水準は５％であった。
【０１３０】
実施例４
ヒスチジンエチルエステルおよびトリプトファンエチルエステルによって変性されたカルボキシメチルデキストランの合成
カルボキシメチルデキストランの酸官能基（グリコシド単位当りの平均酸度が１．０）を、ＤＭＦ中で０℃で、Ｎ−メチルモルホリンおよびイソブチルクロロギ酸エステルの存在の下に活性化した。ヒスチジンエチルエステルおよびトリプトファンエチルエステルをこの活性化したポリマーへグラフトした。得られたポリマーは、変性された酸官能基の水準によって以下のように特徴づけられた。
−ヒスチジンエチルエステルによって７０％、
−トリプトファンエチルエステルによって３０％。
変性されなかった酸の水準は０であった。
【０１３１】
実施例５
ヒスチジンエチルエステルおよびトリプトファンエチルエステルによって変性されたカルボキシメチルデキストランの合成
カルボキシメチルデキストランの酸官能基（グリコシド単位当りの平均酸度が０．７）を、ＤＭＦ中で０℃で、Ｎ−メチルモルホリンおよびイソブチルクロロギ酸エステルの存在の下に活性化した。ヒスチジンエチルエステルおよびトリプトファンエチルエステルをこの活性化したポリマーへグラフトした。得られたポリマーは、変性された酸官能基の水準によって以下のように特徴づけられた。
−ヒスチジンエチルエステルによって６０％、
−トリプトファンエチルエステルによって４０％。
変性されなかった酸の水準は０であった。
【０１３２】
実施例６
ヒスチジンエチルエステルおよびベンジルアミンによって変性されたカルボキシメチルデキストランの合成
カルボキシメチルデキストランの酸官能基（グリコシド単位当りの平均酸度が１．０）を、ＤＭＦ中で０℃で、Ｎ−メチルモルホリンおよびイソブチルクロロギ酸エステルの存在の下に活性化した。ヒスチジンエチルエステルおよびベンジルアミンをこの活性化したポリマーへグラフトした。得られたポリマーは下記の構造を有していた。
【０１３３】
【化１５】
2009532552.tif 000016
【０１３４】
ＨｉｓＯＥｔは下式の通り。
【０１３５】
【化１６】
2009532552.tif 000017
【０１３６】
変性された酸官能基の水準は次の通りである。
−ヒスチジンエチルエステルによって１０％、
−ベンジルアミンによって４５％。
変性されなかった酸の水準は４５％であった。
【０１３７】
実施例７
ヒスチジンエチルエステルおよびベンジルアミンによって変性されたカルボキシメチルデキストランの合成
カルボキシメチルデキストランの酸官能基（グリコシド単位当りの平均酸度が１．０）を、ＤＭＦ中で０℃で、Ｎ−メチルモルホリンおよびイソブチルクロロギ酸エステルの存在の下に活性化した。ヒスチジンエチルエステル（酸に対して０．２当量）およびベンジルアミン(酸に対して０．４５当量)をこの活性化したポリマーへグラフトした。得られたポリマーは下記の構造を有していた。
【０１３８】
【化１７】
2009532552.tif 000018
【０１３９】
ＨｉｓＯＥｔは下式の通り。
【０１４０】
【化１８】
2009532552.tif 000019
【０１４１】
変性された酸官能基の水準は次の通りである。
−ヒスチジンエチルエステルによって３０％、
−ベンジルアミンによって４５％。
変性されなかった酸の水準は２５％であった。
【０１４２】
比較例８
ベンジルアミンによって変性されたカルボキシメチルデキストランの合成
ポリマーを米国特許第６６４６１２０号明細書に従って調製した。ベンジルアミンによって変性された酸官能基の水準は４０％であった。
【０１４３】
実施例９
ｐＨの関数としてのポリマーの溶解性の検討
前記の実施例１〜８に記載したポリマーを、ｐＨが６未満の酸性のｐＨで溶解した。酸性のｐＨでのポリマー溶液の状態を表の２番目の欄に記載した。次いで、酸性のｐＨにあるこれらの溶液を、緩衝液を入れて中性のｐＨ（ＰＢＳ緩衝液）にした媒体中に分散させた。中性のｐＨにあるこの溶液の状態を表の３番目の欄に記載した。
【０１４４】
【表１】
2009532552.tif 000020
【０１４５】
実施例１〜５で得られたポリマーの場合には、中性のｐＨで２つの相が共存しており、凝縮したポリマーの相と透明な水性溶液である。実施例６および７で得られたポリマーの場合には、単一の相しか存在せず、それは均質で、またポリマーのより希薄な溶液である。イミダゾール環によるポリマーの官能基化の不存在または少ない官能基化は、中性のｐＨでの凝縮を可能にしない。
【０１４６】
実施例１０
ＺｎＣｌ２の存在下での凝縮の検討
前記の実施例１〜８に記載したポリマーを、ポリマー１〜５については酸性のｐＨで、またポリマー６〜８については中性のｐＨで、水に溶解させた。ポリマー１〜５については、酸性のｐＨのポリマー溶液にＺｎＣｌ２を加えた。ＺｎＣｌ２の数は、イミダゾール２当り１であった。ＺｎＣｌ２を含むポリマー１〜５の酸性のｐＨの溶液を、緩衝液を加えて中性のｐＨにした（ＰＢｓ緩衝液）媒体中に分散させた。ポリマー６〜８の中性のｐＨの溶液を、緩衝液を加えて中性のｐＨにした（ＰＢＳ緩衝液）ＺｎＣｌ２を含む媒体中に分散させた。中性のｐＨで、ＺｎＣｌ２が存在しているポリマーの溶液の状態を、表の３番目の欄に記載した。
【０１４７】
【表２】
2009532552.tif 000021
【０１４８】
実施例１〜５で得たポリマーのイミダゾールによる亜鉛の配位による物理的な架橋は、効果的な、実に強化さえされている凝固をもたらす。ポリマー６および７は亜鉛イオンの存在下で中性のｐＨで沈殿するのに対して、亜鉛イオンが存在しないとそれらは沈殿しない。比較例８で得たポリマーは、いずれのｐＨでも可溶であり、遷移金属塩の存在に鈍感である。イミダゾール環によるポリマーの少ない官能化は、中性のｐＨで、ＺｎＣｌ２を通した凝固を可能にする。一方、イミダゾール環によるポリマーの官能化が存在しなければ、中性のｐＨでのＺｎＣｌ２を通した凝固は可能にならない。
【０１４９】
固体と溶液の間の遷移金属塩の分布の検討
全ての金属塩が、生理的ｐＨで、凝固したポリマー相の中にまさに捕捉されることを示すことができるように、塩化亜鉛（ＩＩ）の分布を調べた。この塩の溶液は無色である。実施例１で得たポリマーを酸性のｐＨで溶解し、イミダゾールに対して半分の当量のＺｎＣｌ２で処理した。この溶液は均質で、また無色であった。この溶液を次いで、緩衝液を加えて中性のｐＨ（ＰＢＳ緩衝液）にした媒体中に分散させた。瞬時に形成された沈殿は白色であり、また上澄みは透明で無色であった。後者の固形物含量を測定し、そしてこの相中の亜鉛の不存在を確認した。このことは中性のｐＨでポリマーによって形成された固体中に金属塩が定量的に捕捉されたことを示している。比較例８で得たポリマーの場合には、中性のｐＨで得た均質な溶液は亜鉛の塩を含んでいた。
【０１５０】
中性のｐＨでポリマーによって形成された固体中のタンパク質の隔離（sequestration）の検討
シトクロムＣ、赤色タンパク質の、生理的ｐＨでのポリマー相中への隔離を調べた。このために、酸性のｐＨで、実施例１で得たポリマーの溶液を調製した（３０ｍｇ／ｍＬ）。シトクロムＣを、１０ｍｇ／ｍＬに溶解した。このタンパク質の溶液は赤色であった。このタンパク質２ｍｇを、実施例１で得、酸性のｐＨで溶解されたポリマー３０ｍｇに加えた。この溶液は均質で、また赤色であった。この溶液を次いで、緩衝液を加えて中性のｐＨ（ＰＢＳ緩衝液）にした媒体中に分散した。瞬時に形成された沈殿は赤色だったが、上澄みは透明で、また無色であった。このことは、中性のｐＨでポリマーによって形成された固体中にタンパク質が定量的に隔離されていることを示している。
この実験は他のポリマーについても成功裏に繰り返された。一方、比較例８で得たポリマーの場合には、中性のｐＨの溶液は赤色であり、また沈殿を含まなかった。
【０１５１】
実施例１３
ＺｎＣｌ２の存在下で中性のｐＨでポリマーによって形成された固体中へのタンパク質の隔離の検討
ＺｎＣｌ２の存在下での生理的ｐＨの固体中のシトクロムＣの隔離を調べた。このために、酸性のｐＨで、実施例１で得たポリマーの溶液を調製した（３０ｍｇ／ｍＬ）。シトクロムＣを１０ｍｇ／ｍＬに溶解した。このタンパク質の溶液は赤色であった。ＺｎＣｌ２を１３．６ｍｇ／ｍＬに溶解した。２ｍｇのタンパク質および６．８ｍｇのＺｎＣｌ２を、酸性のｐＨで溶解した実施例１で得たポリマー３０ｍｇに加えた。酸性の溶液は均質で、また赤色であった。この溶液を次いで、緩衝液を加えて中性のｐＨ（ＰＢＳ緩衝液）にした媒体中に分散した。瞬時に形成された沈殿は赤色であったが、上澄みは透明で、また無色であった。このことは、ＺｎＣｌ２の存在下で、中性のｐＨでポリマーによって形成された固体中にタンパク質が定量的に隔離されていることを示している。
この実験は、実施例１〜７で得たポリマーについて成功裏に繰り返された。金属塩はこのように、亜鉛／イミダゾール配位によるポリマー鎖の物理的架橋のおかげで、タンパク質を捕捉する固体を形成することを可能にする。
【０１５２】
ＺｎＣｌ２の存在下で中性のｐＨでポリマーによって形成された固体中へのＰＤＧＦ−ＢＢの隔離の検討
生理的ｐＨの固体中のＰＤＧＦ−ＢＢの隔離を、ＺｎＣｌ２の存在下で調べた。このために、実施例１で得たポリマーの溶液を酸性ｐＨで調製した（２０ｍｇ／ｍＬ）。０．０２ｍｇのＰＤＧＦ−ＢＢおよび６．５ｍｇのＺｎＣｌ２を酸性のｐＨの１００μＬのポリマー溶液に加えた。この酸性溶液は均質で、また透明であった。この溶液を次いで、緩衝液を加えて中性のｐＨ（３０ｍＭのＰＢＳ緩衝液の１０体積）にした媒体中に分散した。沈殿が急速に形成された。不均一な媒体を遠心分離した後に、上澄み中に存在するＰＤＧＦ−ＢＢをＥＬＩＳＡによって定量的に測定した。上澄み中のＰＤＧＦ−ＢＢの濃度は０．２μｇ／ｍＬ未満であり、一方でポリマーを含まない対照では、それは２μｇ／ｍＬであった。従って、ＺｎＣｌ２の存在下で、中性のｐＨでポリマーによって形成された固体中では、９０％超の、実際に実質的に定量的なタンパク質の隔離が起こっている。
【０１５３】
実施例１で得たポリマー＋ＢＭＰ−２製剤
実施例１で得たポリマーの溶液Ｎｏ．１を５０ｍｇ／ｍＬの濃度で、ｐＨ５で調製した。ＢＭＰ−２の溶液Ｎｏ．２を１ｍｇ／ｍＬの濃度で、ｐＨ７で調製した。それぞれの溶液の浸透圧は、ＮａＣｌの添加によって３００ｍＯｓｍに調整した。これらの溶液を４℃で貯蔵した。患者の大腿部の首部中への注入の１時間前に、０．９ｍＬの溶液Ｎｏ．１と０．１ｍＬの溶液Ｎｏ．２を混合することによって溶液Ｎｏ．３を調製した。得られた溶液は均質で、また５に近いｐＨを有していた。
【０１５４】
実施例１で得たポリマー＋ＺｎＣｌ２＋ＢＭＰ−２製剤
実施例１５に記載した溶液Ｎｏ．１とＮｏ．２の浸透圧を、ＺｎＣｌ２の添加によって調整した。次いで、最終的な溶液Ｎｏ．３を、実施例１５で記載した方法で、使用時に調製した。
【０１５５】
実施例１７
実施例１で得たポリマー＋ＢＭＰ−２製剤
実施例１５に記載した最終的な溶液Ｎｏ．３を、凍結乾燥した実施例１で得たポリマーおよび凍結乾燥したＢＭＰ−２から、使用時に調製することができた。最終的な溶液の浸透圧は、ＮａＣｌの添加によって３００ｍＯｓｍに調整した。このポリマーは緩衝能を有しており、そして５に近いｐＨを有する溶液をもたらした。この最終的な溶液は透明であった。
【０１５６】
実施例１８
実施例１で得たポリマー＋ＺｎＣｌ２＋ＢＭＰ−２製剤
実施例１５に記載した最終的な溶液Ｎｏ．３を、凍結乾燥した実施例１で得たポリマーおよび凍結乾燥したＢＭＰ−２から、使用時に調製することができた。この場合には、最終的な溶液の浸透圧は、ＺｎＣｌ２の添加によって３００ｍＯｓｍに調整した。この最終的な溶液は透明であった。
【０１５７】
実施例１９
実施例１で得たポリマー、ＢＭＰ−２製剤
製剤を、０．１ｍｇの凍結乾燥したＢＭＰ−２を、実施例１で得たポリマーの４５ｍｇ／ｍＬでｐＨ５の溶液１ｍＬ中に溶解することによって、使用時に調製し、そしてＮａＣｌの添加によって３００ｍＯｓｍに調整することができた。この最終的な溶液は透明であった。
【０１５８】
実施例２０
実施例１で得たポリマー＋ＺｎＣｌ２＋ＢＭＰ−２製剤
実施例１７に記載したように、実施例１で得たポリマーの４５ｍｇ／ｍＬでｐＨ５の溶液を、ＺｎＣｌ２の添加によって３００ｍＯｓｍに調整した。使用時に、０．１ｍｇの凍結乾燥したＢＭＰ−２を１ｍＬのポリマー溶液中に溶解した。この最終的な溶液もまた、透明であった。
【０１５９】
実施例２１
実施例１で得たポリマー＋ＰＤＧＦ−ＢＢ製剤
この事例は実施例１で得たポリマーおよびＰＤＧＦ−ＢＢで形成された製剤の調製に関している。この製剤は、実施例１５〜２０に記載した６種の方法の内の１つに従って調製した。この製剤は、溶液１ｍＬ当りにポリマー４５ｍｇとＰＤＧＦ−ＢＢ０．１ｍｇを含んでいる。この溶液は透明で、また５に近いｐＨを有していた。この製剤を糖尿病患者の足の潰瘍の治療に用いた。
【０１６０】
実施例２２
実施例１で得たポリマー＋ｈＧＨ製剤
この事例は、実施例１で得たポリマーおよびｈＧＨで形成される製剤の調製に関する。この製剤は、実施例１５〜２０に記載した６種の方法の内の１つに従って調製した。この製剤は、溶液１ｍＬ当りにポリマー４５ｍｇとｈＧＨ５ｍｇを含んでいる。この溶液は透明で、また５に近いｐＨを有していた。この製剤は患者に週に１回注入した。
【手続補正書】
【提出日】平成21年2月25日(2009.2.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つのイミダゾリル基Ｉｍおよび少なくとも１つの疎水性基Ｈｙによって２官能化されたデキストランおよび／またはデキストラン誘導体であって、このイミダゾリル基およびこの疎水性基はそれぞれ同一および／または異なっており、また１つまたはそれ以上の連結基Ｒ、ＲｉもしくはＲｈまたは官能基Ｆ、ＦｉもしくはＦｈを経由して、デキストランおよび／またはデキストラン誘導体にグラフトまたは結合しており、
・Ｒは、１〜１８の範囲の炭素原子を含み、ただし、分岐していてもよいし、および／もしくは不飽和でも、１つまたはそれ以上のヘテロ原子を含んでいてもよい、化学結合または鎖からなる連結基を表し、該ヘテロ原子はＯ、Ｎおよび／もしくはＳであり、
Ｒは、イミダゾリル基を保持する場合にはＲｉと表し、また疎水性基を保持する場合にはＲｈと表し、ＲｉとＲｈは同じでも異なっていてもよく、
・Ｆは、エステル、チオエステル、アミド、炭酸塩、カルバミン酸塩、エーテル、チオエーテルまたはアミン官能基から選ばれた官能基を表し、
Ｆは、イミダゾリル基を保持する場合にはＦｉと表し、また疎水性基を保持する場合にはＦｈと表し、ＦｉとＦｈは同じでも異なっていてもよく、
・Ｉｍは、炭素原子の１つがＣ１〜Ｃ４アルキル基（Ａｌｋｙ）によって置換されていてもよい、下式のイミダゾリル基を表し、
【化１】
2009532552.tif 000028
・Ｈｙは、
・線状もしくは分岐したＣ８〜Ｃ３０のアルキル基（ただし、不飽和であってもよいし、および／または１つまたはそれ以上のヘテロ原子を含んでいてもよく、該ヘテロ原子はＯ、ＮもしくはＳである。）、
・線状もしくは分岐したＣ８〜Ｃ３０のアルキルアリール基またはアリールアルキル基（ただし、不飽和であってもよいし、および／またはヘテロ原子を含んでいてもよい。）、
・Ｃ８〜Ｃ３０の多環式基（ただし、不飽和であってもよい。）、
の群から選ばれる疎水性基を表し、
前記のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体は、それが溶液中にある場合には両親媒性である、
ことを特徴とするデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項２】
デキストラン誘導体がカルボキル化誘導体から選ばれることを特徴とする請求項１記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項３】
カルボキル化デキストラン誘導体が、カルボキシメチルデキストランおよび無水コハク酸とデキストランの間の反応生成物から選ばれることを特徴とする請求項２記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項４】
デキストランおよび／またはデキストラン誘導体が、次の一般式Ｉに該当し、
【化２】
2009532552.tif 000029
ｎは１〜３の範囲であり、
ｉは、１つの単糖単位に対するイミダゾリル基のモル分率を表し、０．１〜０．９の範囲であり、
ｈは、１つの単糖単位に対する疎水性基のモル分率を表し、０．０１〜０．５の範囲であることを特徴とする、請求項１記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項５】
デキストランおよび／またはデキストラン誘導体が、次の一般式ＩＩに該当し、
【化３】
2009532552.tif 000030
ｎは１〜３の範囲であり、
ｉは、１つの単糖単位に対するイミダゾリル基のモル分率を表し、０〜０．９の範囲であり、
ｋは、１つの単糖単位に対する疎水性基のモル分率を表し、０．０１〜０．５の範囲であることを特徴とする、請求項１記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項６】
Ｒｉ基が、それが結合でない場合には、以下の基から選ばれ、
【化４】
2009532552.tif 000031
ｎは１〜６であり、
Ｒ１はＨ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ２、ＣＯＮＨ２であり、
Ｒ２は、１〜１８の炭素原子を含むアルキル基から選ばれ、
Ｒ３はＨ、Ｒ２、Ｈｙである、
ことを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項７】
Ｒｉ基が結合であることを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項８】
Ｒｈ基が、それが結合でない場合には、以下の基、
【化５】
2009532552.tif 000032
から選ばれることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項９】
Ｒｈ基が結合であることを特徴とする請求項１〜８のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項１０】
Ｒｉ基が下記の基から選ばれ、
【化６】
2009532552.tif 000033
ｎは１〜６であり、
Ｒ１はＨ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ２、ＣＯＮＨ２であり、
Ｒ２は、１〜１８の炭素原子を含むアルキル基から選ばれ、
Ｒ３はＨ、Ｒ２、Ｈｙであり、
そしてＲｈ基は結合である、
ことを特徴とする、請求項１〜９のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項１１】
イミダゾール−Ｒｉ基が、ヒスチジンエステル、ヒスチジノール、ヒスチジンアミドまたはヒスタミンから選ばれることを特徴とする請求項１〜４または６〜８のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項１２】
Ｈｙが、脂肪酸、脂肪族アルコール、脂肪族アミン、コール酸を含むコレステロール誘導体、およびα−トコフェロールを含むフェノール、および疎水性アミノ酸からなる群から選ばれることを特徴とする請求項１〜１１のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体の１種および少なくとも１種の有効成分を含む医薬組成物。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体の１種および遷移金属塩を含む医薬組成物。
【請求項１５】
遷移金属が、亜鉛、鉄、銅およびコバルトからなる群から選ばれることを特徴とする請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１６】
医薬組成物が、ｐＨが６．５未満の均質な水溶液または水性懸濁液の形態で供給されることを特徴とする請求項１３〜１６のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１７】
均質溶液および／または懸濁液が、ミセルおよび／またはナノ粒子からなっていることを特徴とする請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１８】
医薬組成物が、微少粒子の水性懸濁液の形態で、生理的ｐＨに近いｐＨで供給されることを特徴とする請求項１３〜１５のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１９】
医薬組成物が、静脈内に、筋肉内に、骨内に、皮下に、経皮で、または眼に投与することができることを特徴とする請求項１３〜１８のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項２０】
医薬組成物が、経口で、経鼻的に、経膣的に、または口腔に投与することができることを特徴とする請求項１３〜１８のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項２１】
医薬組成物が、固体の形態で供給されることを特徴とする請求項１３〜１５のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項２２】
医薬組成物が、６超のｐＨであるｐＨによって制御される凝固によって得られることを特徴とする請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２３】
医薬組成物が、注入の場所で物理的な架橋を受けることを特徴とする請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２４】
医薬組成物が、有効成分が注入の場所に保持されるのを可能にすることを特徴とする請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２５】
医薬組成物が、乾燥および／または凍結乾燥によって得られることを特徴とする請求項２１記載の医薬組成物。
【請求項２６】
医薬組成物が、ステント、インプラント可能な生体材料の膜もしくは被覆、インプラント、ゲルまたはクリームの形態で投与することができることを特徴とする請求項２１〜２３のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項２７】
有効成分が、タンパク質、糖タンパク質、ペプチドおよび非ペプチド治療用分子からなる群から選ばれることを特徴とする請求項１３〜２４のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項２８】
タンパク質または糖タンパク質が、成長因子から選ばれることを特徴とする請求項２５記載の医薬組成物。
【請求項２９】
有効成分が、ロイプロリドまたは副甲状腺ホルモンＰＴＨの短シーケンスから選ばれるペプチドの群から選ばれることを特徴とする請求項２７記載の医薬組成物。
【請求項３０】
有効成分が、非ペプチド治療用分子から選ばれ、該非ペプチド治療分子が抗がん剤であることを特徴とする請求項２７記載の医薬組成物。
【請求項３１】
有効成分が、インスリンまたは成長ホルモンｈＧＨからなる群から選ばれることを特徴とする請求項２７記載の医薬組成物。
【請求項３２】
請求項１〜１２のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体および／または請求項１３〜３１のいずれか１項記載の組成物の使用を含むことを特徴とする、神経組織の再生を意図した薬剤の製剤方法。
【請求項３３】
請求項１１および１２のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体および／または請求項１３〜３１のいずれか１項記載の組成物の使用を含むことを特徴とする、心臓血管組織の再生を意図した薬剤の製剤方法。
【請求項３４】
皮膚組織の再生を意図した薬剤の製剤における、請求項１〜３１のいずれか１項記載のデキストランおよび／またはデキストラン誘導体および／または組成物の使用。
【請求項３５】
成長因子が、形質転換成長因子−β（ＴＧＦ−β）の一員であることを特徴とする請求項２８記載の医薬組成物。
【請求項３６】
成長因子が、骨形態形成タンパク質（ＢＭＰ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、インスリン成長因子（ＩＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、インターロイキン（ＩＬ）型のサイトカインまたはインターフェロン（ＩＦＮ）からなる群から選ばれることを特徴とする請求項２８記載の医薬組成物。
【請求項３７】
非ペプチド治療用分子がタクソールまたはシスプラチンであることを特徴とする請求項２７記載の医薬組成物。
【国際調査報告】
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