(57)【要約】【課題】タキサン類と１３−デオキシアントラサイクリン類とを併用する抗癌治療の提供。【解決手段】１３−デオキシアントラサイクリンとタキサンは、同時に、別々に、逐次的に、又は連続的に患者に投与されることにより、抗癌治療効果が発揮されて、どちらか一方の化合物のみを同等の有効量で投与した場合と比較し、毒性及び副作用プロファイルが軽減される。強力な抗癌治療効果を発揮する１３−デオキシアントラサイクリンとタキサンとの組成物又は調合物も提供される。【選択図】図１
2009534426.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）下記式：
【化１】
2009534426.tif 000019
（式中、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、それぞれ個々にＨ又はＯＨであり、
Ｒ４は、Ｈ、ＯＨ、アルキル基、又はＯ−アルキル基であり、
Ｒ５は、Ｏ又はＮＨであり、かつ
Ｒ６は、糖部分である）
の１３−デオキシアントラサイクリン、薬学的に許容されるその塩、及びそのプロドラッグと
ｂ）タキサンと
を含む抗癌性組成物。
【請求項２】
前記１３−デオキシアントラサイクリンは、１３−デオキシドキソルビシン、１３−デオキシダウノルビシン、１３−デオキシカルミノマイシン、１３−デオキシエピルビシン、１３−デオキシイダルビシン、１３−デオキシアナマイシン、１３−デオキシアムルビシン、及びその５−イミノ類似体から成る群から選択され、かつ、前記タキサンはパクリタキセル又はドセタキセルである、
請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の組成物と、薬学的に許容される基剤又は賦形剤とを含む
薬学的組成物。
【請求項４】
請求項２に記載の組成物と、薬学的に許容される基剤又は賦形剤とを含む
薬学的組成物。
【請求項５】
前記糖部分は、ダウノサミン、エピダウノサミン、又はラムナール糖である、
請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
治療上有効量の下記式：
【化２】
2009534426.tif 000020
（式中、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、それぞれ個々にＨ又はＯＨであり、
Ｒ４は、Ｈ、ＯＨ、アルキル基、又はＯ−アルキル基であり、
Ｒ５は、Ｏ又はＮＨであり、かつ
Ｒ６は、糖部分である）
の１３−デオキシアントラサイクリン；その薬学的に許容される塩、及びそのプロドラッグと、
治療上有効量のタキサンと
を投与を必要とする哺乳動物に投与する、
癌の治療法。
【請求項７】
前記糖部分はダウノサミン、エピダウノサミン、又はラムナール糖である、
請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記１３−デオキシアントラサイクリンは、１３−デオキシドキソルビシン、１３−デオキシダウノルビシン、１３−デオキシカルミノマイシン、１３−デオキシエピルビシン、１３−デオキシイダルビシン、１３−デオキシアナマイシン、１３−デオキシアムルビシン、及びその５−イミノ類似体から成る群から選択され、かつ、前記タキサンはパクリタキセル又はドセタキセルである、
請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記１３−デオキシアントラサイクリンと前記タキサンは、同時に、順不同で別々に、順不同で逐次的に、又は順不同で連続的に投与されることにより、抗癌効果が発揮される、
請求項６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、パクリタキセル又はドセタキセル等のタキサンと１３−デオキシアントラサイクリンとを投与する抗癌治療に関する。本開示は、蓄積性・不可逆性の心毒性が示されることなく、高い抗癌効果が達成されることを可能にする。また、本開示は、タキサンと１３−デオキシアントラサイクリンとを含む組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
アントラサイクリン系抗癌剤としては、１３−ケト基を有するドキソルビシンとダウノルビシンが最もよく知られている。ドキソルビシンは、特許文献１に開示されており、抗癌効果が広範囲であって、白血病、リンパ腫及び固形腫瘍の治療に使用される。ダウノルビシンは、特許文献２に開示されており、急性白血病の治療に有用である。しかしながら、心毒性という深刻な副作用のため、これらの薬剤の効用は制限され、薬剤を総量で５５０ｍｇ／Ｍ２を超えて患者に投与することはできない（非特許文献１）。推奨される最大総累積投与量（４３０〜６５０ｍｇ／Ｍ２）、又はそれに近い量であっても、患者の６０％に重篤かつ持続的な心機能障害が生じ、１４％がうっ血性心不全を発症する（非特許文献２）。このように、これらの薬剤は癌性腫瘍の増殖阻害に有用ではあるものの、薬剤の副作用である重篤な心毒性のために、患者がうっ血性心不全で死亡することがある。
【０００３】
また、１３−ケト部位が１３−ジヒドロアルコール代謝産物に還元的に代謝されることによって、これらのアントラサイクリン類の心毒性が生じることが分かった（非特許文献３）。ドキソルビシンが１３−ジヒドロアルコール代謝産物（ドキソルビシノール）に十分には代謝されない試験系では、心毒性による深刻な影響は観察されない（非特許文献４及び非特許文献５）。これに対し、１３−ジヒドロ代謝産物であるドキソルビシノール及びダウノルビシノールは、上記同一試験系において、比較的低濃度（１〜２μｇ／ｍｌ）で心毒性を引き起こす（非特許文献６及び非特許文献７）。
【０００４】
たとえ短時間であってもドキソルビシンが試験系に残存する場合、代謝変換が起き、心毒性が発現し始めるのに十分な量の１３−ジヒドロ代謝産物が生成される（非特許文献８及び非特許文献９）。このように、ドキソルビシン及びダウノルビシン等の薬剤の１３−ジヒドロ代謝産物が引き起こす強力な心毒性の影響に起因してそれらの薬剤の心毒性が生じることに関して、かなりの根拠が蓄積されている（非特許文献１０、非特許文献１１、及び非特許文献１２、非特許文献１３）。
【０００５】
ドキソルビシンをパクリタキセル等のタキサン類と併用すると、どちらか一方の薬剤を単独で使用した場合と比較して、乳癌に対する抗癌効果が向上することが知られている。ドキソルビシン単独での乳癌に対する抗癌奏効率は、３５〜５０％である。パクリタキセル単独での奏効率は、３２〜６２％である。しかしながら、これら２種類の薬剤を併用すると、奏効率を８３〜９４％とすることができる（非特許文献１４及び非特許文献１５）。残念なことに、パクリタキセルとドキソルビシンとを併用すると、患者の１８〜２０％が臨床的にうっ血性心不全を発症してしまうことがある（非特許文献１４及び非特許文献１５）。パクリタキセルはドキソルビシンの心毒性を増強するので、タキサン類とのアントラサイクリン類の併用が制限されたり、不可能になったりする。ドキソルビシンの投与量を減らすことで、うっ血性心不全の罹患率を抑えることができるが（非特許文献１６）、その結果として、併用による効能も低減される（非特許文献１７及び非特許文献１８）。また、例え少量のドキソルビシンをパクリタキセルと併用したとしても、左室駆出分画率の低下に示されるように心毒性を引き起こしてしまう（非特許文献１７）。
【特許文献１】米国特許第３，５９０，０２８号明細書
【特許文献２】米国特許第３，６１６，２４２号明細書
【非特許文献１】Ｅ．Ａ．Ｌｅｆｒａｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ，３２：３０２，１９７３
【非特許文献２】Ａ．Ｄｒｅｓｄａｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ，５２：５１，１９８３
【非特許文献３】Ｐ．Ｓ．Ｍｕｓｈｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｅｄ．Ｐｒｏｃ．，４５：８０９，１９８６
【非特許文献４】Ｐ．Ｓ．Ｍｕｓｈｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｅｄ．Ｐｒｏｃ．，４４：１２７４，１９８５
【非特許文献５】Ｒ．Ｄ．Ｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｅｄ．Ｐｒｏｃ．，４５：８０９，１９８６
【非特許文献６】Ｒ．Ｄ．Ｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃｅｅｄ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２６：２２７，１９８５
【非特許文献７】Ｒ．Ｄ．Ｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃｅｅｄ  Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２８：４４１，１９８７
【非特許文献８】Ｌ．Ｒｏｓｓｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｓｕｐｐｌ．，９：４７４，１９８６
【非特許文献９】Ｍ．Ｄｅｌ  Ｔｏｃｃａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１７：１０７３，１９８５
【非特許文献１０】Ｐ．Ｍｕｓｈｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＡＳＥＢ  Ｊｏｕｒｎａｌ，２：Ａ１１３３，１９８８
【非特許文献１１】Ｒ．Ｂｏｕｃｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６２：１５８５１，１９８７
【非特許文献１２】Ｒ．Ｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，８５：３５８５，１９８８
【非特許文献１３】Ｆｏｒｒｅｓｔ  ＧＬ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ６０：５１５８，２０００
【非特許文献１４】Ｇｉａｎｎｉ  Ｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．１３：２６８８，１９９５
【非特許文献１５】Ｄｏｍｂｅｒｎｏｗｓｋ；Ｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ２３：２３，１９９６
【非特許文献１６】Ｇｉｏｒｄａｎｏ  ＳＨ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ８：３３６０，２００２
【非特許文献１７】Ｓｐａｒａｎｏ  ＪＡ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  １７：３８２８，１９９９
【非特許文献１８】Ｖａｌｅｒｏ  Ｖ，ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｍｉ  Ｏｎｃｏｌ  ２８：１５．２００１
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本開示は、先行技術における問題を克服するものであり、タキサン類と併用した場合、心毒性を引き起こさないで、又は少なくとも心毒性を著しく軽減して、うっ血性心不全という受け入れがたいリスクを回避する特定のアントラサイクリン類を使用する併用抗癌療法を提供する。これにより、乳癌を含む癌の治療が、既存の治療法と比べて飛躍的に進歩する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本開示は、
治療上有効量の下記式：
【０００８】
【化１】
2009534426.tif 000003
【０００９】
（式中、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３はそれぞれ個々にＨ又はＯＨであり、
Ｒ４は、Ｈ、ＯＨ、アルキル基、又はＯ−アルキル基であり、
Ｒ５は、Ｏ又はＮＨであり、かつ
Ｒ６は、糖部分である）
の１３−デオキシアントラサイクリン；薬学的に許容されるその塩、そのプロドラッグ、及び混合物と、
治療上有効量のタキサンと
を投与を必要とするヒトを含む哺乳動物に投与する、
癌の治療法に関する。本開示の方法の実行において、上記１３−デオキシアントラサイクリンとタキサンは、同時に、順不同で別々に、順不同で逐次的に、又は順不同で連続的に投与されることにより、抗癌効果が発揮される。
【００１０】
本開示の別の態様は、癌治療に有用な抗癌、抗腫瘍、及び／又は抗新生物効果を発揮する組成物に関する。本開示組成物は、下記式Ｘ：
【００１１】
【化２】
2009534426.tif 000004
【００１２】
（式中、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、それぞれ個々にＨ又はＯＨであり、
Ｒ４は、Ｈ、ＯＨ、アルキル基、又はＯ−アルキル基であり、
Ｒ５は、Ｏ又はＮＨであり、かつ
Ｒ６は、糖部分である）
で表される１３−デオキシアントラサイクリン化合物、薬学的に許容されるその塩、及びそのプロドラッグと、パクリタキセル又はドセタキセル等のタキサン化合物とを含む。
【００１３】
当業者が下記の詳細な説明を見れば、本開示のさらに別の目的及び利点が直ちに明らかになるであろう。なお下記の詳細な説明は、単に最良の形態の例証のために、好ましい実施形態のみを示し、また説明したものである。当然認識されるだろうが、本開示内容は他の実施形態及び異なる実施形態をとることが可能であり、その詳細の幾つかについては、本開示内容から逸脱しない範囲で、種々の自明な観点から変形することができる。従って下記詳細な説明は、本質的に本発明を例証したものであって、本発明を限定するものではない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
以下に本開示の特定の実施形態を詳述するが、本開示内容は他の実施形態をとること及び種々の方法で実行することが可能であるので、本開示はその適用において、下記の実施例及び実験に記載された化合物の詳細な組成及び組み合わせに限定されるものではないことを理解されたい。
【００１５】
本開示に従って使用される１３−デオキシアントラサイクリン化合物は、下記式Ｘ：
【００１６】
【化３】
2009534426.tif 000005
【００１７】
（式中、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、それぞれ個々にＨ又はＯＨであり、
Ｒ４は、Ｈ、ＯＨ、アルキル基、又はＯ−アルキル基であり、
Ｒ５は、Ｏ又はＮＨであり、かつ
Ｒ６は、糖部分である）
；薬学的に許容されるその塩、及びそのプロドラッグで表される。
【００１８】
より典型的な糖部分は、ダウノサミン、エピダウノサミン、又はラムナール糖（ｒｈａｍｎａｌ  ｓｕｇａｒ）である。より典型的な１３−デオキシ化合物は、１３−デオキシドキソルビシン、１３−デオキシダウノルビシン、１３−デオキシカルミノマイシン、１３−デオキシエピルビシン、１３−デオキシイダルビシン、１３−デオキシアナマイシン、及びその５−イミノ類似体である。
【００１９】
本開示に係る併用療法は、さらに、タキサンを使用する。より典型的なタキサン類は、パクリタキセル及びドセタキセル；薬学的に許容されるその塩、及びそのプロドラッグである。
【００２０】
本開示に係る化合物は、水酸基又はアミノ基に関して、アルコキシ基、アミノ酸基等をプロドラッグ形成部位として用い、プロドラッグを形成してもよい。例えば、４位のヒドロキシメチル基をモノ−、ジ−、又はトリホスフェートとしてもよく、同様に、これらホスフェートによってプロドラッグを形成することができる。水酸基及びヒドロキシメチル基は、−ＯＣＨ２Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２に変換され、ホスホネートのプロドラッグに変換されていてもよい。ヒドロキシメチル基の酸素原子はＣＨ２、さらにはＣＨ２Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２に変換され、プロドラッグに変換されていてもよい。
【００２１】
種々の窒素官能基（アミノ基、ヒドロキシアミノ基、アミド基等）を担持する化合物のプロドラッグ形態には、以下のタイプの誘導体（下記式中、Ｒ基は、上述のように、それぞれ個々に水素、置換又は非置換のアルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、複素環基、アルキルアリール基、アラルキル基、アラルケニル基、アラルキニル基、シクロアルキル基、若しくはシクロアルケニル基であってもよい）が含まれてもよい。
（ａ）カルボキサミド、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ
（ｂ）カルバメート、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ
（ｃ）（アシルオキシ）アルキルカルバメート、ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲＯＣ（Ｏ）Ｒ
（ｄ）エナミン、−ＮＨＣＲ（＝ＣＨＣＯ２Ｒ）、又は−ＮＨＣＲ（＝ＣＨＣＯＮＲ２）
（ｅ）シッフ塩基、−Ｎ＝ＣＲ２
（ｆ）マンニッヒ塩基（カルボキシミド化合物由来）、ＲＣＯＮＨＣＨ２ＮＲ２
【００２２】
このようなプロドラッグ誘導体の調製については、様々な文献で考察されている（例えば、Ａｌｅｘａｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８８，３１，３１８；Ａｌｉｇａｓ−Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＴ  ＷＯ  ｐｐ／４１５３１，ｐ．３０）。これらの誘導体を調製する際に変換される窒素官能基は、本開示化合物の窒素原子の１つ（又は複数）である。
【００２３】
カルボキシル基を担持する本開示化合物のプロドラッグ形態には、エステル（−ＣＯ２Ｒ）が含まれる。上記エステルの式中、Ｒ基は任意のアルコール（酵素又は加水分解のプロセスを介して、薬学的に許容されるレベルで体内に放出される）に相当する。本開示のカルボン酸型に由来する別のプロドラッグは、文献：Ｂｏｄｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８０，２３，４６９に記載された構造を有する、以下の第四級塩タイプであってもよい。
【００２４】
【化４】
2009534426.tif 000006
【００２５】
本開示化合物の薬学的に許容される塩には、薬学的に許容される無機酸又は有機酸に由来する塩が含まれる。好適な酸としては、例えば塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、フマル酸、マレイン酸、リン酸、グリコール酸、乳酸、サリチル酸、コハク酸、トルエン−ｐ−スルホン酸、酒石酸、酢酸、クエン酸、メタンスルホン酸、蟻酸、安息香酸、マロン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、トリフルオロ酢酸、及びベンゼンスルホン酸が挙げられる。好適な塩基由来の塩としては、ナトリウム及びアンモニア等のアルカリが挙げられる。
【００２６】
近年、ドキソルビシン、ダウノルビシン、又は他の類似したアントラサイクリン類の１３−デオキシ型が、代謝されても心毒性の１３−ジヒドロ型に変換されず、従って蓄積性・不可逆性の心毒性がないことが確認された。特に、国際公開第９９／０８６８７号パンフレット、米国特許第５，９４８，８９６号明細書、米国特許第５，９４２，６０５号明細書、及びＰＣＴ／ＵＳ９９／０４７０４（これらの開示内容を本明細書に引用して援用する）を参照されたい。このようなアントラサイクリン系抗癌剤をタキサン類と併用した場合、その抗癌効果が増強されるかどうかについて、さらにはその抗癌効果が相乗的に発揮されるかどうかについてこれまで不明であった。
【００２７】
これに関して、パクリタキセル単独でのヒト乳癌細胞ＭＣＦ−７の増殖阻害におけるＩＣ５０値は２２１ｎＭである。本開示の１３−デオキシアントラサイクリン類が弱い増殖阻害濃度で存在する場合、パクリタキセルのＩＣ５０値は０．５５〜１１ｎＭまで減少する。パクリタキセル単独では、マウス白血病細胞Ｐ３８８増殖阻害活性はないが、１３−デオキシアントラサイクリン類が弱い増殖阻害濃度で存在する場合、パクリタキセルのＩＣ５０値は１３〜２０ｎＭとなる。ラット由来の非癌性細胞Ｈ９ｃ２では、弱い増殖阻害濃度（ＩＣ１０）のパクリタキセルにより、１３−デオキシドキソルビシンのＩＣ５０値は７００ｎＭから４００ｎＭまで減少し、１３−デオキシ−５−イミノドキソルビシンのＩＣ５０値は１５００ｎＭから２１０ｎＭまで減少するが、ドキソルビシンのＩＣ５０値は、２１０ｎＭのままで低減されない。タキサン類と併用した場合、本開示の１３−デオキシアントラサイクリン類の抗癌、抗腫瘍、及び／又は抗新生物効果は向上し、非常に強力なものとなる。
【００２８】
本開示の化学式の１３−デオキシアントラサイクリン類を少量処方することにより、本開示は、タキサン類の抗癌、抗腫瘍、及び／又は抗新生物効能を高めることができる。さらに、本開示に係る組成物は、タキサンと１３−デオキシアントラサイクリンとを含有するものであり、心毒性がない、又は心毒性が著しく軽減されている。タキサンと１３−デオキシアントラサイクリンとを併用する本開示は、薬剤をそれぞれ単独で使用した場合に必要な投与量に比べて少ない投与量で、効果的な治療を行うことができる。
【００２９】
さらに、タキサンを１３−デオキシアントラサイクリンと併用することで、薬剤をそれぞれ単独で使用した場合に比べて安全で、かつ毒性の少ない治療を提供することができる。なお、重要なことには、１３−デオキシアントラサイクリンとタキサンとを同時に、別々に、又は連続的に使用することもできる。
【００３０】
また、１３−デオキシアントラサイクリン類とタキサン類とを併用して使用する本開示の治療は、抗癌、抗腫瘍、及び／又は抗新生物効能を示し、上記治療は癌、新生物、又は腫瘍（白血病、メラノーマ、並びに、肝臓、乳房、卵巣、前立腺、胃、膵臓、肺、腎臓、結腸、及び中枢神経系の腫瘍等）の治療における全ての療法に有用である。本開示の治療は、ヒトを含む哺乳動物の癌、腫瘍、及び／又は新生物の増殖を抑制する方法を提供する。
【００３１】
本開示に係る成分の典型的な組成物、組み合わせ物、混合物、又は調合物は、パクリタキセル又はドセタキセルと併用される化学式Ｘの化合物である。さらに典型的な組成物、組み合わせ物、混合物、又は調合物は、パクリタキセル又はドセタキセルと併用した、１３−デオキシドキソルビシン、１３−デオキシダウノルビシン、１３−デオキシエピルビシン、１３−デオキシイダルビシン、１３−デオキシアナマイシン、１３−デオキシカルミノマイシン、１３−デオキシアムルビシン、及びその５−イミノ類似体から成る群から選択される１３−デオキシアントラサイクリンである。
【００３２】
上記組成物、組み合わせ物、混合物、又は調合物の成分は、患者に同時に、別々に、逐次的に、又は連続的に投与することができる。経口投与、非経口投与、局所投与、又は植え込み等の医学的に許容される任意の方法で上記成分を患者に投与することができる。経口投与としては、組成物、組み合わせ物、混合物、又は調合物の成分をタブレット、カプセル、菱形錠剤（ｌｏｚｅｎｇｅｓ）、懸濁液、溶液、乳剤、粉末、シロップ等の形態で投与することが挙げられる。好ましい投与経路は非経口投与である。
【００３３】
個々の使用する化学式Ｘの１３−デオキシアントラサイクリン製剤、個々の使用するタキサン製剤、個々の治療する癌、個々の治療する疾病の重篤度、及び個々の治療する患者に応じて、実際に成分を投与する方法及び順序を変更してもよい。成分の投与量の範囲は、患者の年齢、健康状態、性別、及び疾病の程度により変更してもよく、当業者であれば決定できるものである。
【００３４】
本開示の医薬組成物は、薬学的に許容される基剤又は賦形剤中でタキサンと混合された化学式Ｘの１３−デオキシアントラサイクリンを含む。本開示のこれらの医薬組成物は抗癌治療に有用である。
【００３５】
薬学的に許容される基剤又は賦形剤は、化合物を医薬品の組成物、組み合わせ物、混合物、又は調合物の形態で処方している当業者には周知のものである。薬学的に許容される基剤とは、ヒトを含む哺乳動物への投与に好適な１つ又は複数の融和性の固体若しくは液体の充填剤、希釈剤又はカプセル化剤のことである。非経口投与に好適な医薬品の組成物、組み合わせ物、混合物、又は調合物は、無菌状態で処方されるものであり、許容される希釈剤又は溶剤を用いた無菌溶液又は懸濁液であってよい。
【００３６】
投与経路、ビヒクル等の種々の要因により、医薬組成物に含まれる活性成分の量をかなり広範囲にわたって変更してもよい。本発明において、医薬組成物は、化学式Ｘの１３−デオキシアントラサイクリン約０．１〜１０００ｍｇと、タキサン約０．１〜１０００ｍｇとを含んでもよい。
【００３７】
本開示の方法において、化学式Ｘの１３−デオキシアントラサイクリンは、約０．１ｍｇ／ｍ２（体表面積）〜約１０００ｍｇ／ｍ２（体表面積）、より典型的には約１０ｍｇ／ｍ２（体表面積）〜約５００ｍｇ／ｍ２（体表面積）の投与量で、投与を必要とする患者に投与され、より典型的には非経口投与経路で投与される。本開示のタキサンは、約０．１ｍｇ／ｍ２〜約１０００ｍｇ／ｍ２、より典型的には約１０ｍｇ／ｍ２〜約５００ｍｇ／ｍ２の投与量で、投与を必要とする患者に投与され、より典型的には非経口投与経路で投与される。１３−デオキシアントラサイクリンとタキサンは、単一の組成物、組み合わせ物、混合物、及び調合物として一緒に投与することができる。あるいは、順不同で別々に、順不同で逐次的に、又は順不同で連続的に投与することもできる。一緒に投与しない場合、２番目の化合物は、典型的には１番目の化合物を投与してから７２時間以内に投与される。
【００３８】
化学式Ｘの１３−デオキシアントラサイクリンによって、毒性が増強することなく、タキサンの抗癌治療効果は著しく向上する。これは、幾分、タキサンと１３−デオキシアントラサイクリンとの相乗作用に起因するものである。上記投与量のタキサン及び１３−デオキシアントラサイクリン類は、必要に応じた頻度で投与することができる。個々の処方物、組成物、組み合わせ物、混合物、又は調合物に、個々の治療する癌に、及び個々の治療する患者に応じて、実際に投与する方法及び順序は変更されるだろう。
【００３９】
本開示の１３−デオキシアントラサイクリンとタキサンとの併用により増強される作用を、一例としての以下の試験に示すが、この試験は本開示を説明するものであって、限定するものではない。
【００４０】
１３−デオキシアントラサイクリン類の抗癌効果
ドキソルビシン（化合物Ｉ）、１３−デオキシドキソルビシン（化合物ＩＩ）、及び５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシン（化合物ＩＩＩ）の生体内での抗癌活性を、Ｐ３８８細胞（マウス由来白血病癌細胞）を注入したＣＤ２Ｆ１マウスを使用して、白血病モデルマウスにおける抗癌活性として検査する。ＣＤ２Ｆ１マウス各群の腹腔内にＰ３８８細胞を１００万個注入する。各群は１０匹のマウスから成っていた。ドキソルビシン群では、０．８ｍｇ／ｋｇを調査１〜９日目に９日間連続して腹腔内に投与する。１３−デオキシドキソルビシンは１．６ｍｇ／ｋｇを、５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシンは３．２ｍｇ／ｋｇをドキソルビシンと同一の方法で腹腔内に投与する。対照群にはビヒクルを注入する。各群のメディアン生存時間を算出する。化合物の活性は、長期生存率（治療群のメディアン生存時間／対照群のメディアン生存時間×１００、Ｔ／Ｃ％）として表される。結果を表１に示す。ドキソルビシンは、メディアン生存時間の有意な増加（１４７％）に示されるように、抗腫瘍効果を発揮する。１３−デオキシドキソルビシン及び５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシンについても、メディアン生存時間が有意に増加するが、ドキソルビシンとの間に有意差はない。この調査結果から、投与量は異なるものの、１３−デオキシアントラサイクリン類が、ドキソルビシンと類似した抗癌効能を有することが示される。
【００４１】
【表１】
2009534426.tif 000007
【００４２】
１３−デオキシアントラサイクリン類の心毒性の評価
同じ月齢で、重さ３．０ｋｇのニュージーランド白ウサギ２４匹を、４つの群に無作為化する（各群Ｎ＝６）。各群を、ドキソルビシン、１３−デオキシドキソルビシン（ＩＩ）、５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシン（ＩＩＩ）、又はビヒクル（０．９％ＮａＣｌ）で長期的に治療する。薬剤又はビヒクルを耳静脈に毎週２回静脈内投与する。血清及び血液サンプルを毎週採取し、Ｍ−モード心エコーを毎週、又は隔週で行い、左室内径短縮率（ＬＶＦＳ）を求め、心機能を評価する。飼料消費量を毎日測定し、体重を毎週計測する。ドキソルビシン治療群ウサギと同量の飼料を対照群ウサギに与える（ｐａｉｒ  ｆｅｄ）。屠殺時に、心尖部及び左室自由壁サンプルを採取し、光学顕微鏡による組織学的スコアリング及び分析のため１０％緩衝ホルマリン中に保存する。左心室組織サンプルも採取し、心臓でのアントラサイクリン類及び代謝産物の濃度を評価する。ウサギが心毒性を発現した場合（ＬＶＦＳ＜３０％、又は１０％単位でＬＶＦＳが減少、即ちＬＶＦＳが４２％から３２％に減少）、生死に関わる毒性、若しくは衰弱性毒性（即ち、重篤な骨髄抑制又は粘膜炎）を発現した場合、又は調査開始から１３週経過した場合にウサギを屠殺する。
【００４３】
【化５】
2009534426.tif 000008
【００４４】
【化６】
2009534426.tif 000009
【００４５】
【化７】
2009534426.tif 000010
【００４６】
１３−デオキシドキソルビシンの抗腫瘍性を示す最適な投与量は、ドキソルビシンの投与量の約２倍である。一方、５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシンの上記最適な投与量はドキソルビシンの最適な投与量の７倍に及ぶ。従って、１３−デオキシドキソルビシン及び５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシンの投与量は、ドキソルビシンの心毒性が示される累積投与量（１７．５ｍｇ／ｋｇ）の２倍（１３−デオキシドキソルビシン）、及び７倍（５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシン）とする。ドキソルビシンについては、１．２５ｍｇ／ｋｇを週に２回、７週にわたって投与する（累積投与量：１７．５ｍｇ／ｋｇ）。１３−デオキシドキソルビシンについては、２ｍｇ／ｋｇを週に２回、１０週にわたって投与する（累積投与量：４０ｍｇ／ｋｇ）。５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシンについては、５ｍｇ／ｋｇを週に２回、１２週にわたって投与する（累積投与量：１２０ｍｇ／ｋｇ）。
【００４７】
屠殺時に心臓を取り除き、心臓から２種類の組織、即ち心室心尖部及び左室自由壁をサンプリングし、１０％ホルマリン中に保存する。各組織を、それぞれ異なる３種類の染色（ヘマトキシリン・エオジン染色、トルイジンブルー染色、及びトリクローム染色）で処理する。修正したビリンガムスケール（Ｂｉｌｌｉｎｇｈａｍ  ｓｃａｌｅ）で組織をスコアリングする（盲検）。０〜４段階でスコアリングし、０は病変細胞又は組織が１０％未満、１は病変細胞又は組織が１０％〜１９％、２は病変細胞又は組織が２０％〜２９％、３は病変細胞又は組織が３０〜３９％、４は病変細胞又は組織が４０％以上とする。心室心尖部及び左室自由壁の分析は、別々に行う。各々、単核浸潤、線維形成、及び細胞質内空胞形成についてスコアリングする。従って、各ウサギは６つのスコア、即ち上記心尖部に対して３つ（単核浸潤、線維形成、及び細胞質内空胞形成）と左室自由壁に対して３つ（単核浸潤、線維形成、及び細胞質内空胞形成）を有する。３種類全ての染色を観察して各スコアを得る。各ウサギの６つのスコアそれぞれの平均を求め、各ウサギの単一の総合スコアを得てから、各治療群の平均を求めた。
【００４８】
また、屠殺時に左心房を分離して２等分し、各々について、後負荷と前負荷とを調査中一定に保つ組織溶液中で生体外での心機能を調査し、評価する。心筋収縮能は、各筋組織標本の底部に配置された点状の電極の電気刺激によって誘発された収縮に応じて、最大の、力の立ち上がり速度（ｒａｔｅ  ｏｆ  ｆｏｒｃｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ：ｄＦ／ｄｔ）として測定される。
【００４９】
表２にこれらの調査結果を示す。ドキソルビシンでは、ビヒクル対照群と比較して、また他の２つの治療群と比較して左室内径短縮率（ＦＳ％）が統計的に有意に減少する。化合物ＩＩ及びＩＩＩでは、左室内径短縮率に変化がない。３つの薬剤全てにおいて、ヘマトクリット値はビヒクル対照群と比較して同程度減少する。生体外で測定した、屠殺時の分離した心房の心筋収縮能（ｄＦ／ｄｔ）は、ドキソルビシンにおいて、ビヒクル対照群と比較して、また他の２つの治療群と比較して有意に減少する。化合物ＩＩ及びＩＩＩでは、心筋収縮能に変化はない。同様に、ドキソルビシンでは、ビヒクル対照群と比較して、また他の２つの治療群と比較して病理組織学的な病変が有意に増加し、化合物ＩＩ及びＩＩＩでは、病理組織学的病変は生じない。これらの結果より、ドキソルビシンを長期投与したウサギでは、深刻な心毒性が発現するが、化合物ＩＩ及びＩＩＩについては、ドキソルビシンと同等の投与量の本モデルにおいて心毒性がないことが示される。このように化合物ＩＩ及びＩＩＩに心毒性がないのは、１３−ケト基がないこと、及びアルコール代謝産物が形成されないことに起因すると考えられる。
【００５０】
１３−デオキシアントラサイクリン類とパクリタキセルとの併用
ドキソルビシン（Ｉ）、１３−デオキシドキソルビシン（ＩＩ）、５−イミノ−１３−デオキシドキソルビシン（ＩＩＩ）、ダウノルビシン（ＩＶ）、１３−デオキシダウノルビシン（Ｖ）、及び５−イミノ−１３−デオキシダウノルビシン（ＶＩ）のヒト乳癌細胞ＭＣＦ−７及びマウス白血病細胞Ｐ３８８の増殖阻害効果を、生体外で測定する。本調査に使用したＭＣＦ−７及びＰ３８８細胞系は、米国菌株保存機関（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ：ＡＴＣＣ）のプロトコルより得たプロトコルに従って培養され、維持される。
【００５１】
【表２】
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【００５２】
ＭＣＦ−７培地はＥＭＥＭ（イーグル最小必須培地、ＡＴＣＣ）であり、Ｐ３８８培地はダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ、ＡＴＣＣ）である。４５０ｍｌのＥＭＥＭ培地（ＭＣＦ−７）又はＤＭＥＭ培地（Ｐ３８８）に５０ｍｌのＦＢＳ（ウシ胎仔血清、ＭＣＦ−７）、又は５０ｍｌのウマ血清（ＡＴＣＣ、Ｐ３８８）を添加して、ＭＣＦ−７及びＰ３８８の培養培地を調製する。４．５ｇ／Ｌのグルコース（Ｓｉｇｍａ社）もＤＭＥＭ（Ｐ３８８）に添加する。５ｍｌのペニシリン／ストレプトマイシン（Ｐ／Ｓ、Ｇｉｂｃｏ社）をＭＣＦ−７及びＰ３８８培養培地に添加する。５％ＣＯ２中、３７℃で１週間、細胞を増殖させ、２５ｍｌの新しい培地を加える。細胞密度が１〜２×１０６細胞／ｍｌに達したら、新しい培地を含む新しいフラスコに細胞を移して継代する。
【００５３】
【化８】
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【００５４】
【化９】
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【００５５】
【化１０】
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【００５６】
無菌操作により、培地を除去して、ＭＣＦ−７細胞をＴ−７５フラスコから採取する。５ｍｌの０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡ溶液（Ｓｉｇｍａ社）を各フラスコに添加して、細胞を分散させる。分散を促進するため、フラスコを５〜１０分間インキュベータに入れる。完全増殖培地を１０ｍｌ添加し、５０ｍｌの試験管に直接デカントした後、２００×ｇで１０分間遠心分離機にかける。Ｐ３８８細胞は、５０ｍｌの試験管に培地を直接デカントし、２００×ｇで１０分間遠心分離機にかけて採取する。ペレット（ＭＣＦ−７及びＰ３８８）を５ｍｌ中に再懸濁し、注射器に取り付けられた１８ｇの針で細胞を緩やかに放出して分散させる。血球計数器で細胞をカウントし、１５０，０００細胞／ｍｌになるまで培地で希釈する。希釈した細胞１００μｌをピペットで９６ウェルプレートに移し、濃度を１５，０００細胞／ウェルにする。プレートに蓋をし、３７℃で４８時間培養する。
【００５７】
アントラサイクリン類及びパクリタキセルの希釈剤は、細胞に特異的な無血清培地で調製される。適当な濃度の薬剤の５０μｌアリコートを全てのウェルに添加し、薬剤（アントラサイクリン類／パクリタキセル）存在下で細胞を２４時間培養する。トリチウム化チミジン（ＩＣＮ社）を濃度が１μＣｉ／５０μｌになるまで、細胞に特異的な無血清培地で希釈する。分析に用いた全てのウェルに、トリチウム化チミジンを含む培地の５０μｌアリコートを加える。４時間アイソトープに曝露した後、脱イオン水で細胞を低張溶解（ｈｙｐｏｔｏｎｉｃ  ｌｙｓｉｓ）し、ブランデル細胞採取器（Ｂｒａｎｄｅｌ  ｃｅｌｌ  ｈａｒｖｅｓｔｅｒ）を用いてワットマンＧＦ−Ｃフィルタ上に細胞内容物を収集することにより、ＤＮＡ中に取り込まれたトリチウム化チミジンを測定する。ＭＣＦ−７細胞を採取する前に、培地を吸引し、１５０μＬの０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡを各ウェルに添加し、細胞を分散させる。フィルタを乾燥させて、５ｍｌのシンチレーションカクテルを含む７ｍｌのシンチレーションバイアルに入れ、シンチレーション検出器でカウントする。予備実験で、アントラサイクリン類について、ＭＣＦ−７細胞の増殖を３０％阻害する濃度（阻害濃度３０：ＩＣ３０値）を、またＰ３８８細胞の増殖を１０％阻害する濃度（ＩＣ１０値）を求める。表３及び表４にその結果を示す。
【００５８】
【表３】
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【００５９】
【表４】
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【００６０】
パクリタキセル単独での、及び、濃度ＩＣ３０のドキソルビシン、ダウノルビシン、又は化合物ＩＩ、ＩＩＩ、Ｖ、若しくはＶＩ存在下でのＭＣＦ−７細胞増殖阻害におけるパクリタキセルの用量−反応関係を図１及び図２に示す。これらの用量−反応曲線から、パクリタキセルのＩＣ５０値を算出し、表５に示す。
【００６１】
【表５】
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【００６２】
ドキソルビシンは、パクリタキセルの癌増殖阻害能を２．８倍増強させる。化合物ＩＩは２０倍、化合物ＩＩＩは２２０倍増強させる。ダウノルビシン、化合物Ｖ及びＶＩは、パクリタキセルの増殖阻害能を２９５〜４００倍増強させる。他の化合物と比較すると、ドキソルビシンは、パクリタキセルの癌増殖阻害能の増強剤としては比較的劣っている。
【００６３】
パクリタキセル単独での、及び、濃度ＩＣ１０のドキソルビシン、ダウノルビシン、又は化合物ＩＩ、ＩＩＩ、Ｖ、若しくはＶＩ存在下でのマウス白血病細胞Ｐ３８８の増殖阻害におけるパクリタキセルの用量−反応関係を図３及び４に示す。これらの用量−反応曲線から、パクリタキセルのＩＣ５０値を算出し、表６に示す。
【００６４】
【表６】
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【００６５】
パクリタキセル単独では、Ｐ３８８細胞に対して不活性であり、増殖を阻害しないが、アントラサイクリン類存在下でのパクリタキセルは、強力な増殖阻害剤となる。ダウノルビシンを除く全てのアントラサイクリン類存在下でのパクリタキセルの効能は、低ナノモル範囲であり、ダウノルビシン存在下での上記効能は高ナノモル範囲である。
【００６６】
２種類の薬剤を併用投与した際の薬理効果が、２種類の薬剤を別々に投与した際の相加効果より大きい場合、効果が増強されたことになる。例えば、３０％の反応をもたらす第一の薬剤の投与量が１００ユニットであり、かつ３０％の反応をもたらす第二の薬剤の投与量が１０ユニットであると仮定する。１００ユニットの第一の薬剤と１０ユニットの第二の薬剤とが６０％の反応をもたらす場合には、２種類の薬剤間に相加効果がある。一方、１００ユニットの第一の薬剤と１０ユニットの第二の薬剤とが９０％の反応をもたらす場合には、２種類の薬剤間に相乗効果、即ち超相加的効果がある。ＭＣＦ７細胞において、本発明の化学式の１３−デオキシアントラサイクリン類が増殖を３０％だけ阻害する濃度で存在すると、増殖阻害効果がない濃度（１〜５０ｎＭ）のパクリタキセルが、増殖を５０％〜９５％阻害することとなる。同様に、パクリタキセルは、２０００ｎＭ以下の濃度ではＰ３８８細胞の増殖阻害効果はないものの、本開示の化学式の１３−デオキシアントラサイクリン類が増殖を１０％だけ阻害する濃度で存在すると、増殖を６５％〜９５％阻害することとなる。従って、本開示の１３−デオキシアントラサイクリン類は、パクリタキセルと併用すると、その作用が増強される、即ち相乗的に作用するので、癌細胞増殖の抑制に非常に強力で効果的な組成物、組み合わせ物、混合物、又は調合物をもたらす。
【００６７】
上述の説明は、本開示の特定の実施形態に限定されるが、本開示に記載された実施形態の変更及び変形により、本発明の趣旨及び範囲を逸脱することなく、その利点の一部又は全てを達成できることは、当業者にとって明らかであろう。例えば、ラット由来の非癌性Ｈ９ｃ２細胞において、弱い増殖阻害濃度（ＩＣ１０）のパクリタキセルにより、１３−デオキシドキソルビシンのＩＣ５０値が７００ｎＭから４００ｎＭまで減少し、１３−デオキシ−５−イミノドキソルビシンのＩＣ５０値が１５００ｎＭから２１０ｎＭまで減少するが、ドキソルビシンのＩＣ５０値は２１０ｎＭのままで低減されない。このように、１３−デオキシアントラサイクリン類の効能は、タキサン類によって増強される。臨床治療において通常遭遇する種々の条件や要素を適当に変形及び適合させることは、当業者にとって明らかであり、本開示の範囲に含まれる。
【００６８】
上記記載は本開示を例証し、説明するものである。加えて本開示は好ましい実施形態のみを示し、説明しているが、既に述べた通り、本開示は上記教示及び／又は関連技術分野の技術や知識に対応する種々の他の組み合わせ、変形、及び環境において使用することが可能であり、また本明細書中に表された本発明の概念の範囲内で、上記教示及び／又は関連技術分野の技術や知識に対応する変更や変形が可能であると理解されたい。さらに、本明細書中に記載された実施形態は、本願出願人が知る最良の形態を説明するものであり、当業者が上記の、又は他の実施形態において本開示を利用できるように、またその特定の適用や用途により要求される種々の変形を施して本開示を利用できるようにするものである。従って、本明細書は、発明を本明細書中に開示された形態に限定するものではない。また、添付の特許請求の範囲は、別の実施形態も包含すると解釈されるべきものである。
【００６９】
本明細書において引用された全ての刊行物及び特許出願について、それぞれ個々の刊行物又は特許出願を具体的に、かつ個々に示して、引用して援用するように、それら全てを本明細書に引用して援用し、任意の全ての目的のものとする。
【図面の簡単な説明】
【００７０】
【図１】パクリタキセル単独での、及び、濃度ＩＣ３０のドキソルビシン、ダウノルビシン、又は本開示に係る１３−デオキシアントラサイクリン化合物存在下でのＭＣＦ−７細胞増殖阻害におけるパクリタキセルの用量−反応関係を示す。
【図２】パクリタキセル単独での、及び、濃度ＩＣ３０のドキソルビシン、ダウノルビシン、又は本開示に係る１３−デオキシアントラサイクリン化合物存在下でのＭＣＦ−７細胞増殖阻害におけるパクリタキセルの用量−反応関係を示す。
【図３】パクリタキセル単独での、及び、濃度ＩＣ１０のドキソルビシン、ダウノルビシン、又は本開示に係る１３−デオキシアントラサイクリン化合物存在下でのマウス白血病細胞Ｐ３８８の増殖阻害におけるパクリタキセルの用量−反応関係を示す。
【図４】パクリタキセル単独での、及び、濃度ＩＣ１０のドキソルビシン、ダウノルビシン、又は本開示に係る１３−デオキシアントラサイクリン化合物存在下でのマウス白血病細胞Ｐ３８８の増殖阻害におけるパクリタキセルの用量−反応関係を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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