(57)【要約】本発明は、特に、複合体を形成するために、生物活性物質との反応に適切な分割型の分解性重合体試薬を提供し、該重合体試薬は、１つ以上の分解性連鎖により、腎クリアランスに適切な分子量を有する重合体セグメントに分割または分離される、１つ以上の重合体鎖を含む。重合体試薬は、実質的に、線形構造、分枝構造または多腕構造を有することができる。各構造は、生体内で分解可能な１つ以上の連鎖を含む。本発明は、少なくとも、線形重合体において、約３０，０００Ｄａ、多腕重合体において、２０，０００Ｄａの総重合体数平均分子量などの高分子量の使用が所望される用途に適している。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式、
【化１】
2009527581.tif 000072
の１つに従う構造を有する重合体試薬であって、
式中、
各ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、同一または異なってもよいが、水溶性の非ペプチド系重合体であり、
各Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｘ８およびＸ９は、同一または異なってもよいが、スペーサー部分であり、
Ａは、欠損または−（Ｘ８）ｈ−（Ｌ６）ｊ−（Ｘ９）ｉ−ＰＯＬＹ２−Ｚ３および−（Ｘ８）ｈ−（Ｌ７）ｊ−（Ｘ９）ｉ−Ｚ３から選択され、
各Ｌ１は、生体内で切断可能である連鎖であり、
各Ｌ３、Ｌ６およびＬ７は、同一または異なってもよいが、任意に、生体内で切断可能である連鎖であり、
Ｌ４は、非分解性連鎖であり、
各Ｚは、同一または異なってもよいが、キャップ基または官能基であり、少なくとも、１つのＺが官能基であるという条件のもとで、任意に、スペーサー部分を含んでもよく、
各Ｚ１は、同一または異なってもよいが、キャップ基であり、
Ｚ２は、官能基であり、
Ｚ３は、イオン化可能な官能基であり、任意にスペーサー部分を介して結合され、
各Ｚ４は、同一または異なってもよいが、キャップ基または官能基であり、
各ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉおよびｊは、同一または異なってもよいが、０または１のいずれかであり、
ｍは、１から１０の範囲の整数であり、連続して共有結合される重合体セグメントであるＰＯＬＹ１の数を表し、
ｏは、１から１０の範囲の整数であり、連続して共有結合される重合体セグメントであるＰＯＬＹ２の数を表し、
Ｒは、少なくとも、重合体結合に利用可能なｐ＋１個の部位を含む分子由来のモノマーまたはオリゴマー多腕核分子であり、式（ＩＩＩａ）中のＬ３およびＲのうちの少なくとも１つが、生体内で切断可能である連鎖を含み、
ｐは、２から３２の範囲の整数であり、
前記重合体試薬は、ヒロドゲルの形態ではなく、少なくとも１つのＬ１は、炭酸基を欠く連鎖である、重合体試薬。
【請求項２】
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２２のそれぞれは、約２０，０００Ｄａ以下の数平均分子量を有する、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項３】
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２２のそれぞれは、約１０，０００Ｄａ以下の数平均分子量を有する、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項４】
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２のそれぞれは、約８，０００Ｄａ以下の数平均分子量を有する、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項５】
ｍおよびｏのそれぞれは、同一または異なってもよいが、１から５の範囲である、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項６】
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２２のそれぞれは、ポリ（アルキレングリコール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカライド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）、およびそれらのコポリマー、ターポリマーまたは混合物からなる群から選択される、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項７】
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、ポリ（エチレングリコール）である、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項８】
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｘ８およびＸ９のそれぞれは、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、および置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は０から６であり、（Ｊ）は０から２０である、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項９】
Ｌ１は、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖、およびテトラペプチド連鎖からなる群から選択される、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項１０】
前記試薬は、構造
【化２】
2009527581.tif 000073
を有し、
式中、
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、それぞれ、ポリオール核と、ポリオール核から伸びる少なくとも２つの重合体腕を有する、分枝ポリ（エチレングリコール）分子であり、
Ｌ１は、ジスルフィド結合であり、
ｍは、１であり、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４のそれぞれは、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、および置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は０から６であり、（ｊ）は０から２０である、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項１１】
各重合体の腕は、生体内で切断可能な連鎖により連結される２つの重合体セグメントを含む、請求項１０に記載の重合体試薬。
【請求項１２】
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２の前記重合体セグメントを連結する前記連鎖は、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖、およびテトラペプチド連鎖からなる群から選択される、請求項１１に記載の重合体試薬。
【請求項１３】
構造
【化３】
2009527581.tif 000074
を有し、
式中、
ＰＯＬＹａおよびＰＯＬＹｂは、ポリ（エチレングリコール）セグメントであり、
Ｌは、連鎖であり、
Ｌ′は、生体内で切断可能な連鎖であり、
Ｒは、水素、アルキル、置換されたアルキル、またはカルボン酸である、請求項１１に記載の重合体試薬。
【請求項１４】
Ｌ′は、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖、およびテトラペプチド連鎖からなる群から選択される、請求項１３に記載の重合体試薬。
【請求項１５】
構造
【化４】
2009527581.tif 000075
を有し、
式中、
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、それぞれ、ポリ（エチレングリコール）重合体であり、
Ｌ１は、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖、およびテトラペプチド連鎖からなる群から選択され、
ｍおよびｏは、それぞれ１であり、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６およびＸ７のそれぞれは、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、および置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は０から６であり、（ｊ）は０から２０である、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項１６】
各Ｚ１は、２から約６の末端官能基を含む多腕反応性基である、請求項１５に記載の重合体試薬。
【請求項１７】
各Ｚ１は、
【化５】
2009527581.tif 000076
からなる群から選択され、
式中、各Ｚは、同一または異なってもよいが、任意にスペーサー部分を含む官能基であり、ｍは、１から約１０の範囲の整数である、請求項１６に記載の重合体試薬。
【請求項１８】
構造
【化６】
2009527581.tif 000077
を有し、
式中、
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、それぞれ、ポリ（エチレングリコール）重合体であり、
各Ｌ１およびＬ３は、生体内で切断可能であり、
ｍおよびｏは、それぞれ２以上であり、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６およびＸ７のそれぞれは、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−０−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、および置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は０から６であり、（ｊ）は０から２０である、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項１９】
各Ｌ１およびＬ３は、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖、およびテトラペプチド連鎖からなる群から選択される、請求項１８に記載の重合体試薬。
【請求項２０】
構造
【化７】
2009527581.tif 000078
を有し、
式中、各ＰＯＬＹ１は、ポリ（エチレングリコール）重合体であり、
Ｒは、ジスルフィド連鎖、ジペプチド、トリペプチドまたはテトラペプチドであり、
各Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、および置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は０から６であり、（Ｊ）は０から２０である、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項２１】
Ａはカルボン酸である、請求項２０に記載の重合体試薬。
【請求項２２】
Ｒは、少なくとも、１つのリジン残基を含む、請求項２０に記載の重合体試薬。
【請求項２３】
各ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、分枝ポリ（エチレングリコール）重合体である、請求項２０に記載の重合体試薬。
【請求項２４】
Ｌ３は、生体内で切断可能な連鎖である、請求項２０に記載の重合体試薬。
【請求項２５】
Ｌ３は、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖およびトリペプチド連鎖からなる群から選択される、請求項２４に記載の重合体試薬。
【請求項２６】
Ｒは、構造
【化８】
2009527581.tif 000079
を有する、ジスルフィド分子に由来する、請求項２０に記載の重合体試薬。
【請求項２７】
構造
【化９】
2009527581.tif 000080
を有し、
式中、
各ＰＯＬＹ１は、生体内で切断可能な連鎖により連結される２つのポリ（エチレングリコール）セグメントを含み、
Ａは、（Ｘ８）ｈ−（Ｌ６）ｊ−（Ｘ９）ｒＰＯＬＹ２−Ｚ３であり、
ＰＯＬＹ２は、ポリ（エチレングリコール）重合体であり、
Ｒは、ポリオールに由来し、
各Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−，二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、および置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は０から６であり、（ｊ）は０から２０である、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項２８】
前記２つのポリ（エチレングリコール）セグメント間の前記切断可能な連鎖は、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖、およびテトラペプチド連鎖からなる群から選択される、請求項２７に記載の重合体試薬。
【請求項２９】
構造
【化１０】
2009527581.tif 000081
を有し、
式中、各ＰＯＬＹ１は、ポリ（エチレングリコール）重合体を含み、
Ａは、欠損しており、
Ｒは、少なくとも、１つのペプチド残基を含み、
各Ｘ１、Ｘ２，およびＸ３は、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）Ｊ−、二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、および置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は０から６であり、（ｊ）は０から２０である、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項３０】
アールは、ジスルフィド結合をさらに含む、請求項２９に記載の重合体試薬。
【請求項３１】
Ｒは、脂肪族炭素鎖、ジスルフィド結合を含む脂肪酸炭素鎖、およびポリ（エチレングリコール）オリゴマーからなる群から選択されるリンカーに、アミド連鎖により結合されるリジン残基を、少なくとも２つ含む、請求項２９に記載の重合体試薬。
【請求項３２】
構造
【化１１】
2009527581.tif 000082
を有し、
式中、
各ＰＯＬＹ１は、ポリ（エチレングリコール）重合体を含み、
Ａは、欠損しており、
Ｒは、少なくとも、１つのジスルフィド結合と、少なくとも、２つのアミド連鎖を含む、非ペプチド部分であり、
各Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、および置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は０から６であり、（ｊ）は０から２０である、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項３３】
Ｌ１は、構造：−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｙ′−を有するウレタン連鎖であり、Ｙは、Ｈ、アルキル、置換されたアルキルおよびアリールから選択され、Ｙ′は、アルキルまたは置換されたアルキルである、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項３４】
Ｌ３は、構造：−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｙ′−を有するウレタン連鎖であり、Ｙは、Ｈ、アルキル、置換されたアルキルおよびアリールから選択され、Ｙ′は、アルキルまたは置換されたアルキルである、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項３５】
Ｒは、構造−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｙ′−を有するウレタン連鎖を含み、Ｙは、Ｈ、アルキル、置換されたアルキルおよびアリールから選択され、Ｙ′は、アルキルまたは置換されたアルキルである、請求項１に記載の重合体試薬。
【請求項３６】
生物活性物質、および請求項１に記載の重合体試薬の反応生成物を含む、複合体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、特に、水溶性で非ペプチド系重合体、およびそれから生成される複合体に関し、それぞれ、線形、分枝または多腕構造を有し、１つ以上の分解性連鎖により特徴付けされる。投与されると、本明細書に記述される複合体は、１つ以上の分解性連鎖において、結果として、対応する非分解性複合体よりも、より効果的に除去することのできる、小さな種になるように分解される。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
「ＰＥＧ」と略される親水性重合体のポリ（エチレングリコール）の分子および表面への共有結合は、バイオテクノロジーおよび医薬などの分野において、かなり利用されている。ＰＥＧは、多数の有益な性質を備えている重合体である。例えば、ＰＥＧは、水および多くの有機溶媒に溶解可能で、非毒性で非免疫原性であり、表面に結合されると、ＰＥＧは、生体適合性の保護膜を提供する。ＰＥＧの一般的な用途または使用は、（ｉ）例えば、血漿半減期を拡大し、腎臓を介したクリアランスを減少するために、タンパク質に共有結合する、（ｉｉ）動脈置換、血液接触デバイスおよびバイオセンサーなどの表面に結合する、（ｉｉｉ）バイオポリマー合成のために溶解性担体として使用する、および（ｉｖ）ヒドロゲルの調製での試薬として使用することを含む。
【０００３】
上述の使用の、全てとはいえないが、その多くにおいて、最初に、そのヒドロキシル末端を、タンパク質の表面に存在する官能基などの、所望の標的分子または表面内に存在する官能基と容易に反応することができる官能基に変換することによりＰＥＧを活性化することが必要である。タンパク質において、一般的な官能基は、リジン、システイン、ヒスチジン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、スレオニンおよびチロシンの側鎖にかかわる官能基、ならびに、Ｎ末端アミノ官能基およびＣ末端カルボン酸官能基を含む。
【０００４】
多くのＰＥＧ活性化反応の開始材料として使用されるＰＥＧは、一般的に、端キャップのＰＥＧである。端キャップのＰＥＧは、一般的に重合体の末端に位置する１つ以上のヒドロキシル基が、メトキシ、エトキシまたはベンジルオキシ基などの非反応性基に変換されるものである。最も一般的に使用されるものは、ｍＰＥＧと略されるメトキシＰＥＧである。このような端キャップのＰＥＧは、一般的に、架橋結合および凝集に抵抗性があるため、ｍＰＥＧなどの端キャップのＰＥＧが、一般的に好まれる。一般的に使用される２つの端キャップのＰＥＧアルコール、ｍＰＥＧ、およびモノベンジルＰＥＧ（別名ｂＰＥＧとして知られる）の構造を、以下に示す。
【０００５】
【化１２】
2009527581.tif 000002
式中、ｎは、一般的に、約１０から約２，０００の範囲である。
【０００６】
多数の成功にも関わらず、重合体の活性物質への結合は、しばしば、困難である。例えば、比較的長いポリ（エチレングリコール）分子を活性物質に結合すると、一般的に、短いポリ（エチレングリコール）分子を結合するより大きい水溶解性を付与する。しかし、このような長いポリ（エチレングリコール）部分を有する複合体の欠点の１つは、このような複合体が、実質的に、生体内で不活性状態でありうる可能性があることである。これらの複合体は、活性物質全ての周りを効果的に「覆う」ことにより、薬理学的活性に必要なリガンド類へのアクセスを制限する、ポリ（エチレングリコール）鎖の長さのため、実質的に、不活性であるという仮説が立てられている。
【０００７】
比較的大きいポリ（エチレングリコール）部分を有する比較的不活性な複合体に関する問題は、部分的に、活性物質に結合する「分枝形態」の重合体を使用することにより解決されている。分枝形のポリ（エチレングリコール）誘導体の例は、従来、以下に示すように、「ｍＰＥＧ２−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド」および「ｍＰＥＧ２−アルデヒド」と呼ばれ、
【０００８】
【化１３】
2009527581.tif 000003
式中、ｎは、エチレンオキシドモノマー反復単位の数を表す。他の分枝重合体構造は、ヒドロキシル基の部位で共有結合される多腕重合体を有する、グリセロールオリゴマーなどのポリオール核を含む。ポリオール核を有する例示的な分枝重合体構造は、特許文献１に記載されている。
【０００９】
複合体の合成において、上述のような分枝構造を使用する別の理由は、薬物の生体内循環時間を増加することに対する要望に関する。大きい重合体は、小さい重合体より長い循環時間を有することが知られている。従って、重合体量重合体に結合する薬物は、長い循環時間を有し、よって、しばしば、注入されなければならない薬物の投与回数を減らす。
【００１０】
分枝重合体構造は、比較的大きい重合体サイズにかかわるいくつかの欠点に対応するが、それ自身の欠点が付随する。例えば、活性物質に結合する分枝構造の重合体は、薬理学的活性を満たす場合もあるが、分枝重合体は、体からのクリアランスが依然として不十分であるという問題がありうる。従って、薬物-重合体複合体の形成による循環時間の増加が所望されるが、複合体が、体から除去されやすいままであることを確実にするという相反する要望がある。
【特許文献１】米国特許第６，７３０，３３４号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
結果として、所望の生体内循環時間を有する複合体を提供する分子量を有するが、適時に体からのクリアランスも示す、線形、分枝または多腕重合体誘導体の必要が、当該分野において、依然として存在する。本発明は、当該分野における本必要性と他の必要性に取り組む。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
（発明の概要）
本発明は、複合体を形成するために生物活性物質と反応するために適切な分割型の分解性重合体試薬を提供し、本重合体試薬は、１つ以上の分解性連鎖により、腎クリアランスに適切な分子量を有する重合体セグメントに分割または分離される、１つ以上の重合体鎖を含む。本発明の重合体試薬は、実質的に、線形構造を有するが、分枝または多腕構造も考慮されている。本発明は、少なくとも、線形重合体において、約３０，０００Ｄａ、多腕重合体において、２０，０００Ｄａの総重合体数平均分子量などの高分子量の使用が所望される用途に適している。各構造は、生体内で分解可能な１つ以上の連鎖を含む。
【００１３】
一側面において、本発明は、構造
【００１４】
【化１４】
2009527581.tif 000004
を有する、実質的に線形の水溶性で非ペプチド系重合体を含む組成物を提供し、
式中、
各ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、同一または異なってもよいが、水溶性で非ペプチド重合体であり、好ましくは、数平均分子量が、約２２，０００Ｄａ未満、より好ましくは、約１５，０００Ｄａ未満、最も好ましくは、約８，０００Ｄａ未満であり、
各Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は、同一または異なってもよいが、スペーサー部分であり、
各Ｌ１は、生体内で切断可能な連鎖であり、
Ｚのそれぞれは、同一または異なってもよいが、キャップ基または官能基であり、任意に、スペーサー部分（少なくとも、１つのＺは官能基である）を含んでもよく、
ａ、ｂ、ｃおよびｄのそれぞれは、同一または異なってもよいが、０または１のいずれかであり、
ｍは、１から１０（好ましくは１から５）の範囲の整数であり、連続して共有結合される重合体セグメントであるＰＯＬＹ１の数を表し、
少なくとも、１つのＬ１は、炭酸基を欠損する連鎖であり、組成物は、ヒドロゲルの形態ではない。
【００１５】
上の重合体構造は、構造
【００１６】
【化１５】
2009527581.tif 000005
を有する複合体などの、生物活性物質との複合体を形成するために使用することができ、
式中、
各Ｙ１およびＹ２は、少なくとも、Ｙ１およびＹ２の１つが−Ｌ２−薬物であるという条件で、−Ｌ２−薬物または−Ｚのいずれかであり、
Ｌ２は、任意に、生体内で切断可能な連鎖であり、
薬物は、生物活性物質の残基であり、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、ＰＯＬＹ１、ＰＯＬＹ２、Ｌ１、ａ、ｂ、ｃ、ｄおよびｍは、式（Ｉａ）に関して前に定義した通りである。一般的に、Ｌ２は、生物活性物質と、式（Ｉａ）の重合体の官能基の反応から形成される。
【００１７】
別の側面において、本発明は、構造
【００１８】
【化１６】
2009527581.tif 000006
を有する分枝重合体を含む組成物などの、分枝重合体試薬を提供し、
式中、
各ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、同一または異なってもよいが、水溶性で非ペプチド重合体であり、好ましくは、数平均分子量が、約１５，０００Ｄａ未満であり、より好ましくは、約１０，０００Ｄａ未満であり、最も好ましくは、約８，０００Ｄａ未満であり、
各Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６およびＸ７は、同一または異なってもよいが、スペーサー部分であり、
各Ｌ１は、生体内で切断可能な連鎖であり、
各Ｌ３は、任意に、生体内で切断可能な連鎖であり、
Ｌ４は、非分解性連鎖であり、
各Ｚ１は、同一または異なってもよいが、キャップ基であり、任意に、スペーサー部分を含んでもよく、
Ｚ２は、官能基であり、好ましくは、連鎖を形成するために、生物活性物質上の相補的官能基と反応するように適合された官能基であり、
各ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆおよびｇは、同一または異なってもよいが、０または１のいずれかであり、
ｍは１から１０（好ましくは、１から５）の範囲の整数であり、連続して共有結合される重合体セグメントであるＰＯＬＹ１の数を表し、
ｏは、１から１０（好ましくは、１から５）の範囲の整数であり、連続して共有結合される重合体セグメントであるＰＯＬＹ２の数を表し、
少なくとも、１つのＬ１は、炭酸基を欠損する連鎖であり、組成物は、ヒドロゲルの形態ではない。
【００１９】
本発明は、構造
【００２０】
【化１７】
2009527581.tif 000007
を有する複合体などの、式（ＩＩａ）の分枝重合体の複合体も提供し、
式中、
Ｌ５は、任意に、生体内で切断可能な連鎖であり、
薬物は、生物活性物質の残基であり、
各Ｚ１、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｌ１、Ｌ３、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｍおよびｏは、式（Ｉａ）に関して前に定義した通りである。一般的に、Ｌ５は、生物活性物質と、式（ＩＩａ）の重合体の官能基の反応から形成される。
【００２１】
本発明のさらに別の側面において、多腕重合体、およびそれから生成される複合体を提供する。多腕重合体は、ポリオールなどの核分子の存在により特徴付けられ、そこから、複数の重合体の腕が伸長する。本発明は、構造
【００２２】
【化１８】
2009527581.tif 000008
を有する重合体を含む組成物を含み、
式中、
Ａは、欠損または−（Ｘ８）ｈ−（Ｌ６）ｊ−（Ｘ９）ｉＰＯＬＹ２−Ｚ３または−（Ｘ８）ｈ−（Ｌ７）ｊ−（Ｘ９）ｒＺ３であり、
各ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、同一または異なってもよいが、水溶性で非ペプチド重合体であり、好ましくは、数平均分子量が、約１５，０００Ｄａ未満であり、より好ましくは、約１０，０００Ｄａ未満であり、最も好ましくは、約８，０００Ｄａ未満であり、
各Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ８、およびＸ９は、同一または異なってもよいが、スペーサー部分であり、
各Ｌ３、Ｌ６およびＬ７は、同一または異なってもよいが、任意に、生体内で切断可能な連鎖であり、
各Ｚ１は、同一または異なってもよいが、キャップ基または官能基（多腕反応基を含む）であり、任意に、官能基またはキャップ基と重合体セグメントの間にスペーサー部分を含み、
Ｚ３は、イオン化可能な官能基であり、任意にスペーサー部分を介して結合され、
各ａ、ｂ、ｃ、ｈ、ｉおよびｊは、同一または異なってもよいが、０または１のいずれかであり、
Ｒは、少なくとも、重合体結合に利用可能なｐ＋１個の部位を含む、１分子から由来するモノマーまたはオリゴマー多腕核分子であり、
ｐは、２から３２の範囲の整数であり、少なくとも、ＲおよびＬ３のうちの１つは、生体内で切断可能な連鎖を含む。
【００２３】
本発明は、構造
【００２４】
【化１９】
2009527581.tif 000009
を有する複合体などの、上述の多腕重合体の複合体も提供し、
式中、
Ｂは、Ａ、−（Ｘ８）ｈ−（Ｌ６）ｊ−（Ｘ９）ｒ−ＰＯＬＹ２−Ｌ９−薬物または−（Ｘ８）ｈ−（Ｌ７）ｊ−（Ｘ９）ｒＬ９−薬物であり、各Ｄは、同一または異なってもよいが、Ｚ１またはＬ８−薬物であり、
Ｌ８およびＬ９は、同一または異なってもよいが、連鎖であり、連鎖は任意に、生体内で切断可能であり、
薬物は、生物活性物質の残基であり、
各Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ８、Ｘ９、Ｌ３、Ｌ６、Ｌ７、Ａ、Ｚ１、ａ、ｂ、ｃ、ｈ、ｉ、ｊおよびｐのそれぞれは、式（ＩＩＩａ）に関して前に定義した通りである。一般的に、Ｌ８およびＬ９は、生物活性物質と、式（ＩＩＩａ）の重合体の官能基（それぞれＺ１およびＺ３）の反応から形成される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
（発明の詳細な説明）
本発明の詳細を説明する前に、本発明は、特定の重合体、合成技術、活性物質などに制限されないことを理解するべきである。なぜなら、それらは変わる可能性があるからである。本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明するためであり、制限する意図がないことも理解するべきである。
【００２６】
本明細書で使用される、単数形「ａ」、「ａｎ」およびは、「ｔｈｅ」は、文脈で明確に指定されない限り、複数の対象を含むことに留意されたい。従って、例えば、「重合体」の意味は、単一の重合体だけでなく２つ以上の同一または異なる重合体を含み、「複合体」の意味は、単一の複合体だけでなく２つ以上の同一または異なる複合体を含み、「賦形剤」の意味は、単一の賦形剤だけでなく２つ以上の同一または異なる賦形剤を含む。
【００２７】
Ｉ．定義
本明細書の説明および特許請求の範囲において、以下の用語は、下に記述する定義に従い、使用される。
【００２８】
「ＰＥＧ」、「ポリエチレングリコール」、および「ポリ（エチレングリコール）」は、本明細書において、任意の水溶性ポリ（エチレンオキシド）を意味するために使用される。一般的に、本発明で使用されるＰＥＧは、次の２つの構造、「−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−」または「−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−ＣＨ２ＣＨ２−」のうち１つを含み、ｎは３から３０００であり、末端基および全体的なＰＥＧの構造は、変動してよい。「ＰＥＧ」は、含まれる大部分、つまり、５０％以上の小単位が−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−である重合体を意味する。
【００２９】
一般的に使用されるＰＥＧの１つは、端キャップのＰＥＧである。ＰＥＧが、「−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−」として定義される時、端キャップ基は、一般的に、１から２０個の炭素を含む、炭素含有基であり、好ましくは、アルキル（例えば、メチル、エチルまたはベンジル）であるが、その飽和および不飽和形態、ならびに、アリール、ヘテロアリール、シクロ、ヘテロシクロ、および前述のいずれかの置換された形態も想定される。ＰＥＧが「−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−ＣＨ２ＣＨ２−」として定義される時、端キャップ基は、一般的に、１から２０個の炭素原子、および前記の基に共有結合し、ＰＥＧの末端の１つに共有結合のために利用可能な酸素原子を含む、炭素含有基である。この場合、基は、一般的に、アルコキシ（例えば、メトキシ、エトキシまたはベンジルオキシ）であり、炭素含有基に関して、任意に、飽和および不飽和ならびに、アリール、ヘテロアリール、シクロ、ヘテロシクロおよび前述のいずれかの置換された形態であってよい。それ以外の（「非端キャップ」）の末端は、一般的に、ヒドロキシル、アミン、またはＰＥＧが、「−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−ＣＨ２ＣＨ２−」として定義される時、さらなる化学修飾の対象となりうる活性化基である。さらに、端キャップ基は、シランであってもよい。
【００３０】
本発明で使用される特定のＰＥＧ形態は、以下で詳細に説明するが、多様な分子量、構造または幾何学構造（例えば、分枝、線形、多腕など）を有するＰＥＧを含む。
【００３１】
端キャップ基は、検出可能な標識も有利に含んでよい。重合体が、検出可能な標識を含む端キャップ基を有する時、対象の重合体および／または重合体が結合される、部分（例えば、活性物質）の量または位置は、適切な検出器を使用して測定することができる。そのような標識は、非制限的に、蛍光物質、化学発光物質、酵素標識に使用される部分、比色（例えば、色素）、金属イオン、放射性部分などを含む。
【００３２】
本明細書に記述される方法で使用される重合体は、一般的に、多分散（すなわち、重合体の数平均分子量および重量平均分子量は、等しくない）である。しかし、本明細書に記述される方法に従い調製された重合体は、重量平均分子量（Ｍｗ）数平均分子量（Ｍｎ）の比率（Ｍｗ／Ｍｎ）で表される、低い多分散値を有し、一般的に、約１．２未満、好ましくは、約１．１５未満、より好ましくは、約１．１０未満、さらに好ましくは、約１．０５未満、またさらに好ましくは、約１．０３未満、最も好ましくは、約１．０２５未満である。
【００３３】
本明細書で使用される、用語「イオン化可能な官能基」およびその変形は、水溶性または他の極性媒体中で、イオン化可能な、別の官能基の種との相互作用によりプロトンを得る、または失いうる官能基である。イオン化可能な官能基は、非制限的に、アミン、カルボン酸、アルデヒド水和物、ケトン水和物、アミド類、ヒドラジン、チオール、フェノール、オキシム類、ジチオピリジンおよびビニルピリジンを含む。
【００３４】
本明細書で使用される、用語「カルボン酸」は、
【００３５】
【化２０】
2009527581.tif 000010
官能基［「−ＣＯＯＨ」または−Ｃ（Ｏ）ＯＨとしても表される］を有する部分、ならびに、例えば、保護化カルボン酸を含む、カルボン酸の誘導体である部分である。従って、文脈で明確に指示されない限り、用語「カルボン酸」は、酸形態だけでなく対応するエステルおよび保護化形態も含む。Ｇｒｅｅｎｅら「ＰＲＯＴＥＣＴＩＶＥ  ＧＲＯＵＰＳ  ＩＮ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ」３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９を参照することができる。
【００３６】
「活性化カルボン酸」とは、特に、求核アシル置換に関して、親カルボン酸より反応性の高いカルボン酸の官能性誘導体を意味する。活性化カルボン酸は、非制限的に、酸ハライド（酸クロライドなど）、無水物、アミド、およびエステルを含む。
【００３７】
用語「反応性」または「活性化」は、特定の官能基と併して使用される時、別の分子の求電子または求核と容易に反応する反応性官能基を意味する。これは、反応するために、強い触媒または非常に実用性のない反応条件を必要とする基（すなわち、「非反応性」または「不活性」基）と対照的である。
【００３８】
用語「保護」または「保護基」とは、特定の反応条件下で分子中の特定の化学反応官能基の反応を阻止または抑止する部分（すなわち、保護基）の存在を意味する。保護基は、保護される化学反応基のタイプ、ならびに、使用される反応条件および分子中のさらなる反応または保護基の存在があればそれにより、変化する。当該分野において周知の保護基は、上のＧｒｅｅｎｅｎらに記載されている。
【００３９】
本明細書で使用される、用語「官能基」またはその同意語は、その保護形態を含むことを意図する。
【００４０】
用語「スペーサー」または「スペーサー部分」は、水溶解性重合体および官能基の末端などの相互接続部分を接続するために、任意に使用される原子または原子の集合体を意味するために、本明細書で使用される。本発明のスペーサー部分は、加水分解的に安定性があるか、または生理学的に加水分解性あるいは酵素学的に分解性の連鎖を含む。
【００４１】
「アルキル」は、炭化水素を意味し、一般的に、長さが約１から２０個の原子の範囲である。このような炭化水素は、必然ではないが、好ましくは、飽和状態であり、一般的に直鎖が好まれるが、分枝または直鎖であってよい。例示的なアルキル基は、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、１−メチルブチル、１−エチルプロピル、３−メチルペンチルなどを含む。本明細書で使用される、「アルキル」は、アルキルが３つ以上の炭素原子を含むことができる時、シクロアルキルを含む。
【００４２】
「低アルキル」は、１から６個の原子を含むアルキル基を意味し、直鎖または分枝鎖であってよく、メチル、エチル、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルにより例示される。
【００４３】
「シクロアルキル」は好ましくは、３から約１２個の炭素原子、より好ましくは３から約８個からなる、架橋、融合またはスピロ環式化合物を含む、飽和または不飽和環式炭化水素鎖を意味する。
【００４４】
「非干渉置換基」は、分子中に存在する時、一般的に分子内に含まれる他の官能基と非反応性である基である。
【００４５】
例えば、「置換されたアルキル」での用語「置換された」は、非制限的に、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル（例として、シクロプロピル、シクロブチルなど）、ハロ（例として、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードなど）、シアノ、アルコキシ、低フェニル（例えば、０から２の置換されたフェニル）、置換されたフェニルなどの１つ以上の非干渉置換基と置換される部分（例えば、アルキル基）を意味する。
【００４６】
「置換されたアリール」は、置換基として１つ以上の非干渉基を有するアリールである。フェニル環上の置換基において、置換基は、任意の位置（すなわち、オルト、メタまたはパラ）であってよい
「アルコキシ」は、−Ｏ−Ｒ基を意味し、Ｒは、アルキルまたは置換されたアルキルであり、好ましくは、Ｃ１−Ｃ２０アルキル（例えば、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ベンジルオキシなど）、より好ましくはＣ１−Ｃ８アルキルである。
【００４７】
「アリール」は、それぞれが５または６個のコア炭素原子である、１つ以上の芳香環を意味する。アリールは、ナフチルのように融合、またはビフェニルのように縮合であってよい、多アリール環を含む。アリール環は、１つ以上の環式炭化水素、ヘテロアリールまたは複素環式環と融合または縮合されてもよい。
【００４８】
「ヘテロアリール」は、好ましくは、Ｎ、ＯあるいはＳ、またはその組み合わせである１から４個のヘテロ原子を含むアリール基である。ヘテロアリール環は、１つ以上の環式炭化水素、複素環式、アリールまたはヘテロアリール環と融合してもよい。
【００４９】
「求電子」とは、求電子中心、すなわち、電子が求核を求める、または求核と反応可能な中心を有するイオン性であってよい、イオンまたは原子または原子の集合体を意味する。
【００５０】
「求核」とは、求核中心、すなわち、求電子中心を求める、または求電子と反応可能である中心を有するイオン性であってよい、イオンまたは原子または原子の集合体を意味する。
【００５１】
「生体内で切断可能」である連鎖は、加水分解プロセス、酵素プロセス、化学プロセス、またはこのようなプロセスの組み合わせにより、生体内で循環中に切断可能である連鎖を意味する。すなわち、生体内で切断可能な連鎖は、生理学的条件（すなわち、血清または他の体液の存在下、約ｐＨ７から７．５で、約３７℃の温度）下で壊れる連鎖である。連鎖の分解半減期は、種類によって異なるが、一般的に、生理学的条件下で、約０．１から約１０日の範囲である。
【００５２】
「加水分解的に切断可能」または「加水分解可能」または「加水分解的に分解可能」な結合は、生理学的条件下で、水と反応する（すなわち、加水分解される）、比較的弱い結合である。水で加水分解する結合の傾向は、２つの中心原子を連結する連鎖の一般のタイプだけでなく、それらの中心原子に結合している置換基にも依存する。適切な加水分解的に不安定または弱い連鎖は、非制限的に、カルボキシレートエステル、リン酸エステル、無水物、アセタール、ケタル、アシルオキシアルキルエーテル、イミン、オルトエステルおよびオリゴヌクレオチドを含む。
【００５３】
「酵素学的に分解可能な連鎖」とは、生理学的条件下で、１つ以上の酵素による、分解の対象である連鎖を意味する。酵素学的分解プロセスは、加水分解反応も含んでよい。酵素学的に分解可能な連鎖は、特に、分解の活性または酵素の誘引を必要とする付加部位のいずれかを提供しうる他の原子の群との隣接した配列において、特定のアミド（−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）およびウレタン（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）連鎖を含んでよい。例えば、特定のアミド、例えば、Ｙが、Ｈ、アルキル、置換されたアルキル（例えば、アリールアルキル、ヒドロキシルアルキル、チオアルキルなど）またはアリールであり、Ｙ′が、アルキルまたは置換されたアルキルである、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｙ′の隣接位置でのウレタンは、酵素学的に分解可能である。本明細書に定義する、「ウレタン」連鎖は、上の構造を有する連鎖に含まれる。
【００５４】
本明細書で使用される「化学的に分解可能」な連鎖は、生体内の生理学的条件下で化学反応を介して分解する連鎖である。例えば、ジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−）結合は、グルタチオンとの化学反応を介して、生体内で分解されてよい。
【００５５】
「加水分解的に安定」または「非分解性」連鎖または結合は、実質的に水中で安定している化学結合、特に、共有結合を指し、つまり、生理学的条件下で、長期間にわたり、感知できるほどの加水分解または酵素による切断が生じないことを意味する。加水分解的に安定した連鎖の例は、非制限的に、炭素−炭素結合（例えば、脂肪族鎖中）、エーテルなどを含む。一般的に、加水分解的に安定した連鎖は、生理学的条件下で、約１から２％／日未満の加水分解率を示すものである。代表的な化学結合の加水分解率は、最も一般的な教科書に記載されているだろう。
【００５６】
重合体またはポリオールの文脈での「多官能性の」または「多置換される」とは、２つ以上の官能基を含有する重合体またはポリオールを意味し、当該官能基は、同一または異なることができる。本発明の多官能性重合体またはポリオールは、一般的に、約２から１００の官能基、２から５０の官能基、２から２５の官能基、２から１５の官能基、３から１０の官能基のうち１つ以上の範囲条件を満たす官能基の数を含む。従って、重合体骨格またはポリオール中の官能基の数は、２、３、４、５、６、７、８、９または１０の官能基のいずれの数であってもよい。
【００５７】
「二官能」または「二置換」の重合体は、同一（すなわち、ホモ二官能）または異なる（すなわち、へテロ二官能）２つの官能基を含有する重合体またはポリオールを意味する。
【００５８】
「モノ官能」または「モノ置換」の重合体とは、単一の官能基を含有する重合体（例えば、ｍＰＥＧベースの重合体）を意味する。
【００５９】
本明細書に記述される塩基性または酸性の反応物は、天然、荷電および任意の対応するその塩形態を含む。
【００６０】
用語「被験者」とは、複合体の投与により予防または治療されうる状態を患っている、またはその状態の傾向がある生体を意味し、ヒトおよび動物を含む。
【００６１】
「任意」または「任意に」は、次に記述される状況が生じる場合もあるし、生じない場合もあることを意味し、従って、説明は、状況が生じる事例と生じない事例とを含む。
【００６２】
記載されない限り、分子量は、本明細書において、
【００６３】
【化２１】
2009527581.tif 000011
として定義される数平均分子量（Ｍｎ）として表され、Ｎｉは、分子量Ｍｉを有する重合体分子の数（またはそれらの分子のモル数）である。
【００６４】
「薬物」、「生物活性分子」、「生物活性部分」、「活性物質」および「生物活性物質」のそれぞれの用語は、本明細書で使用される時、非制限的に、ウイルス、バクテリア、真菌、植物、動物およびヒトを含む生体の任意の物理的または生化学的特性に影響する任意の物質を意味する。特に、本明細書で使用される生物活性分子は、ヒトまたは他の動物の疾患の診断、治癒、緩和、治療または予防、あるいは、ヒトまたは動物の物理的または精神的健康を強化することを意図する任意の物質を含む。生物活性分子は、非制限的に、ペプチド、タンパク質、酵素、低分子薬物、色素、脂質、ヌクレオシド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核酸、細胞、ウイルス、リポソーム、マイクロ粒子およびミセルを含む。本発明との使用に適切な生物活性物質の種類は、非制限的に、抗生物質、抗真菌剤、抗ウイルス剤、抗炎症剤、抗腫瘍剤、心筋血管作用薬、抗不安剤、ホルモン、成長因子、ステロイド剤などを含む。
【００６５】
本明細書で使用される通り、「非ペプチド」とは、実質的に、ペプチド連鎖がない重合体骨格を意味する。しかし、重合体骨格は、骨格の長さに沿って、例えば、約１ペプチド連鎖／約５０モノマー単位以下などの、少量のペプチド連鎖を含んでもよい。
【００６６】
用語「複合体」は、例えば、生物活性分子などの分子の、１つ以上の反応性基を有する反応性重合体分子、好ましくは、ポリ（エチレングリコール）への共有結合の結果として形成された実体を意味することを意図する。
【００６７】
ＩＩ．分割型の分解性重合体とそれから生成される複合体
一側面において、本発明は、生体内で分解する１つ以上の切断可能または分解可能な連鎖の存在により特徴付けられる重合体試薬、および重合体試薬を使用して生成される生物活性物質を用いた複合体を提供する。分解可能な連鎖または複数の連鎖は、重合体鎖に沿って、または中心核分子内に配置されるため、生体内の連鎖の分解により放出される重合体試薬の各セグメントは、セグメントの腎クリアランスを阻害しない分子量を有する。本発明の重合体試薬は、比較的高い重合体分子量と実質的に、体からの重合体の除去を完全なものにすることの双方が所望される複合体の調製に使用されることにおいて、特に有利である。例えば、重合体試薬（およびそれから調製される複合体）の総重合体数平均分子量は、一般的に、約３０，０００から約１５０，０００Ｄａ（例えば、約３０，０００Ｄａ、３５，０００Ｄａ、４０，０００Ｄａ、４５，０００Ｄａ、５０，０００Ｄａ、５５，０００Ｄａ、６０，０００Ｄａ、６５，０００Ｄａ、７０，０００Ｄａなどの総分子量）などの、少なくとも、約３０，０００Ｄａである。分解性連鎖の分解により放出される各重合体セグメントの数平均分子量は、好ましくは、約２２，０００Ｄａ以下、より好ましくは、約２０，０００Ｄａ以下、さらにより好ましくは、約１５，０００Ｄ以下、最も好ましくは、約８，０００Ｄａ以下である。一部の実施形態において、重合体セグメントは、約５，０００Ｄａ以下、または約２，５００Ｄａ以下の分子量を有する。分解性連鎖の切断から生じる重合体セグメントの数は、２から約４０まで、様々であるが、一般的に、２から約１０（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０の重合体セグメント）の範囲である。
【００６８】
本発明の重合体試薬（およびそれから調製される複合体）の構造は、様々な形態をとり得る。重合体試薬は、実質的に線形形状を有することができる。重合体は、活性物質に結合するための単一の反応部位、および、結合基を介して、反応性部位に共有結合的に結合される２つの重合体の腕により特徴付けられる分枝構造を有してもよい。分枝重合体形態のまた別の実施形態において、本発明の重合体試薬は、ポリオールまたはジペプチドなどの一般的な多官能性核分子から伸びる、２つ以上（好ましくは３つ以上）の重合体の腕を含む、「多腕」形態を有することができる。本発明の重合体の好適な実施形態は、ヒドロゲルの形態ではない、つまり、重合体試薬（およびそれから調製される複合体）は、水膨潤性マトリックスにおいて、相当な度合いで、他の重合体と架橋結合しない。
【００６９】
重合体試薬（およびそれから調製される複合体）内の分解性連鎖は、様々である。生理学的条件下（すなわち、ｐＨ７から７．５で、温度が約３７℃）で、約０．１から約１０日の間の半減期を有する、生体内で切断可能な分解性連鎖の使用が好まれる。連鎖分解の速度は、ガス浸透クロマトグラフィー（「ＧＰＣ」）を使用して、遊離した重合体セグメントの分析測定により測定されてよい。本発明の重合体試薬は、分解性連鎖として１つ以上の炭酸基を含むことができるが、重合体試薬において、炭酸基を含まない分解性連鎖を少なくとも１つ含むことが好まれ、任意の炭酸基を含まない重合体試薬が想定される。
【００７０】
例示的な分解性連鎖は、非制限的に、エステル連鎖、炭酸連鎖、カルバメート、イミド、ジスルフィド、ジ、トリまたはテトラペプチド、例えば、アミンおよびアルデヒドの反応から生じるイミン連鎖（例えば、本明細書に参照として引用されるＯｕｃｈｉら、Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ、３８（１）：５８２−３（１９９７）を参照のこと。）、例えば、アルコールをリン酸基と反応させることにより形成されるリン酸エステル連鎖、一般的に、ヒドラジドとアルデヒドの反応により形成されるヒドラゾン、一般的に、アルデヒドとアルコール間の反応により形成されるアセタール連鎖、例えば、ギ酸とアルコール間の反応により形成されるオルトエステル連鎖、および、例えば、ホスホラミダイト基（例えば、重合体の末端、およびオリゴヌクレオチドの５′ヒドロキシル基）により形成されるオリゴヌクレオチド連鎖を含む。
【００７１】
アミドまたはウレタン結合は、一般的に、インターフェロン（例えば、Ｋ．Ｒ．Ｒｅｄｄｙ，Ｍ．Ｗ．Ｍｏｄｉ  ａｎｄ  Ｓ．Ｐｅｄｄｅｒ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．５４（２００２）５７１−５８６）などのタンパク質にＰＥＧを結合するための安定した基として考えられる。しかし、これらの安定した基のある多少の切断は、生体内で生じる可能性がある。例えば、ＰＥＧインターフェロン（「ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）」ブランド下で市販されている）において、複合体に関するＰＥＧの３０％は、ウレタン結合の切断によりクリアされる（Ｍ．Ｗ．Ｍｏｄｉ，Ｊ．Ｓ．Ｆｕｌｔｏｎ，Ｄ．Ｋ．Ｂｕｃｋｍａｎｎ，Ｔ．Ｌ．Ｗｒｉｇｈｔ，Ｄ．Ｊ．Ｍｏｏｒｅ，“Ｃｌｅａｒａｎｃｅ  ｏｆ  ｐｅｇｙｌａｔｅｄ（４０ｋＤａ）ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  α−２ａ（ＰＥＧＡＳＹＳ）  ｉｓ  ｐｒｉｍａｒｉｌｙ  ｈｅｐａｔｉｃ，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，３２（２０００）３７１Ａを参照のこと）。複合体の全体的なクリアランスのメカニズムは、非常に遅く、数日かかる。
【００７２】
アミド結合については、ペプチド連鎖にみられるものなどの、アミド結合が酵素的切断に影響されやすい、特別な場合がある。Ｓｕｚａｗａら（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．８（８）２０００，２１７５−８４）は、ポリ（エチレングリコール）結合Ｌ−アラニン−ロイシンジペプチド連鎖が、モデル酵素サーモライシンの存在下で切断されることを発見した。本発明で使用することのできるペプチド連鎖（例えば、ジペプチドまたはトリペプチド連鎖）の追加の例は、米国特許第５，２８６，６３７号および第６，１０３，２３６号、ＧｏｆｆおよびＣａｒｒｏｌｌ（Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．１９９０，１，３８１−３８６）、およびＨｕａｎｇら（Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．１９９８，９，６１２−６１７）に見られる。従って、特定の実施形態において、重合体試薬（および、それから生成される複合体）内に含まれる分解性連鎖は、アミドまたはウレタン連鎖を含んでよい。
【００７３】
エステルは、アミドおよびウレタンより加水分解切断により影響を受けやすいが、酵素プロセスにより容易に切断もされるため、生体内でエステルを特に不安定な連鎖にする。エステルは、酵素の接近を立体的に抑止する官能基の付近に基を有する場合、酵素的切断に対して、より抵抗性が高い。従って、このタイプの立体的に阻害されたエステル機能を含有することは、重合体が、数時間から数日で加水分解的または酵素的に分解することが所望される用途において、エステル基を魅力的な連鎖にする場合もある。
【００７４】
立体障害を通して、安定性を最も促進にする基は、下の２つのエステル含有重合体（「ＰＯＬＹ」は、水溶解性で非ペプチド重合体である）の場合のように、エステルのカルボニル炭素に対して、位置αに位置する基（例えば、アルキル基）である。酵素的切断に立体障害を与えるための構造の選択において、カルボニル基上に、電子求引性作用を有する基を含まないことが好まれる。理論によって拘束されることを望まないが、このような電子求引性基は、酸性または塩基性加水分解を加速する傾向がある。
【００７５】
【化２２】
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エステルのアルキル部分（例えば、一部または酸素原子に隣接する原子であって、次いで、カルボニル炭素に結合される）の立体障害は、エステルの酵素的切断を遅くする場合もある。従って、立体障害が酵素的切断の速度に影響を与えることが所望される場合、カルボニル炭素および／または酸素原子に対してαおよび／またはβ位置で、立体障害を加えることが想定され、それは、次いで、エステル基のカルボニル炭素に結合される。しかし、ＳＮ１経路によりエステルの求電子的切断を容易にするために、立体密集および電子供給の組み合わせを加えることが重要である。さらに、電子求引性基の置換により、塩基性触媒の加水分解が好まれるような、アルキル部分を良好な脱離基にしないことが重要である。バランスは、以下の構造に示す通り、酸素原子のαおよびβ位置で、軽度の立体遅延の導入により達成されてよく、次いで、それは、エステル基のカルボニル炭素に結合される。
【００７６】
【化２３】
2009527581.tif 000013
式中、Ｌは、エステル含有部分とＰＯＬＹの反応から生じるスペーサー部分または連鎖であり、ＰＯＬＹは、水溶解性で非ペプチドである。
【００７７】
従って、好適な立体障害基は、カルボニル炭素に隣接し、および／またはエステルのカルボニル基に結合される酸素原子に隣接し、最も好ましくは、カルボニル炭素に隣接して位置する（すなわち、αまたはβ位置）アルキル基（例えば、Ｃ１−Ｃ１０アルキル基）またはアリール基（例えば、Ｃ６−Ｃ１０アリール基）を含む。
【００７８】
任意の提案された基が、提案された基を用いて重合体試薬を調製することにより、所望の立体障害を提供するのに適しているかどうかを判断することが可能である。提案された重合体試薬からの複合体の形成後、複合体は、次に、被験者に投与されるか、または適切なモデルに添加される。試験者への投与（または適切なモデルへの添加）後、複合体内の分解性連鎖のそれぞれの分解速度は、例えば、血液サンプル（または適切なモデルからの液体のアリコート）を採取すること、およびクロマトグラフィー技術により複合体の分解性要素を同定することにより、決定されてよい。全体的な分解速度が、所望の範囲に収まる、および／または同じ条件下で試験された対照重合体試薬に対して改善される場合、提案された基は、所望の立体障害を提供するために適している。
【００７９】
本発明の重合体試薬の一部を構成する水溶解性および非ペプチドの重合体（例えば、ＰＯＬＹ１、ＰＯＬＹ２など）は、重合体が、害を及ぼすことなく、生体組織および生体と共存可能であるという意味で、非毒性で生体適合性がなければならない。重合体は、多くの水溶解性および非ペプチド重合体のうちのいずれであってもよいことを理解するべきである。好ましくは、ポリ（エチレングリコール）（すなわち、ＰＥＧ）は、本明細書に記述する重合体試薬を形成するために使用される重合体である。他の適切な重合体の例は、非制限的に、他のポリ（アルキレングリコール）、エチレングリコールおよびプロピレングリコールのコポリマー、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカライド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、参照によりその全体が参照により本明細書に記載されているもとのみなす、米国特許第５，６２９，３８４号に記載されている、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）、および、それらのコポリマー、ターポリマー、また、混合物を含む。異なる重合体は、同一の重合体骨格に組込まれてよい。水溶解性および非ペプチドの重合体の任意の組み合わせが、本発明内に含まれる。各重合体セグメント（例えば、ＰＯＬＹ１またはＰＯＬＹ２のそれぞれ）も、切断可能なまたは安定した連鎖により連結される２つ以上の重合体セグメントを含んでもよい。
【００８０】
重合体は、実質的に、線形形態、または本明細書に参照としてその全体が記載されているものとみなす、米国特許第５，９３２，４６２号に記述される分枝ＰＥＧ分子などの、多腕あるいは分枝形態であってよい。一般的に、多腕または分枝重合体は、中心の分枝点から伸びた２つ以上の重合体の「腕」を有する。例えば、例示的な分枝ＰＥＧ重合体は、構造
【００８１】
【化２４】
2009527581.tif 000014
を有し、式中、ＰＥＧ１およびＰＥＧ２は、本明細書に記述される任意の形態または幾何学構造のＰＥＧ重合体であり、同一または異なってよく、Ｌ′は、加水分解的に安定した連鎖である。
例示的な式Ｉの分枝ＰＥＧは、構造
【００８２】
【化２５】
2009527581.tif 000015
を有し、式中、ｐｏｌｙａおよびｐｏｌｙｂは、メトキシポリ（エチレングリコール）などのＰＥＧ骨格であり、Ｒ“は、Ｈ、メチルまたはＰＥＧ骨格などの非反応性部分であり、ＰおよびＱは、非反応性連鎖である。好適な実施形態において、分枝ＰＥＧ重合体は、メトキシポリ（エチレングリコール）二置換されたリジンである。
【００８３】
式ＩＶの分枝ＰＥＧ構造は、以下に示す通り、第３オリゴマーまたは重合体鎖に結合されてもよい。
【００８４】
【化２６】
2009527581.tif 000016
式中、ＰＥＧ３は、第３ＰＥＧオリゴマーまたは重合体鎖であり、ＰＥＧ１およびＰＥＧ２と同一または異なってもよい。
【００８５】
別の実施形態において、本発明で使用される分枝ＰＥＧは、構造
【００８６】
【化２７】
2009527581.tif 000017
を有し、
式中、各ＰＯＬＹは、水溶解性および非ペプチド重合体またはオリゴマーセグメント（例えば、ＰＥＧセグメント）であり、各Ｚは、キャップ基または官能基である。
【００８７】
以下の例示的な重合体構造に示される通り、本発明の重合体試薬は、一般的に、重合体試薬と活性物質の間で共有結合（任意に、生体内で切断可能であってよい）を形成するために、生物活性物質上の相補的な官能基との反応に適切な１つ以上の官能基を含む。適切な官能基の例は、ヒドロキシル、活性エステル（例えば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドイルエステルおよび１−ベンゾトリアゾリルエステル）、活性炭酸（例えば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドイル炭酸、１−ベンゾトリアゾリル炭酸、およびｐ−ニトロフェニル炭酸）アセタール、１から２５個の炭素の長さの炭素を有するアルデヒド（例えば、アセトアルデヒド、プロピオンアルデヒド、およびブチルアルデヒド）、アルデヒド水和物、アルケニル、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミド、活性スルホン、アミン、ヒドラジド、チオール、１から約２５個の炭素原子（例えば、カルボン酸、カルボオキシメチル、プロパノン酸、および酪酸）の炭素の長さ（カルボニル炭素を含む）を有するアルカン酸、酸ハライド、イソシアネート、イソチオシアナート、マレイミド、ビニルスルホン、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、グリオキサル、ジオン、メシレート、トシレートおよびトレシレートを含む。例示的な官能基の例は、次の参照文献に記載されている。Ｎ−スクシンイミドイル炭酸（例えば、米国特許第５，２８１，６９８号、第５，４６８，４７８号を参照）、アミン（例えば、Ｂｕｃｋｍａｎｎら、Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．１８２：１３７９（１９８１）、Ｚａｌｉｐｓｋｙら、Ｅｕｒ．Ｐｏｌｙｍ．Ｊ．１９：１１７７（１９８３）を参照）、ヒドラジド（例えば、Ａｎｄｒｅｓｚら、Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．１７９：３０１（１９７８）を参照）、スクシンイミドイルプロピオン酸およびスクシンイミドイル酪酸（例えば、Ｏｌｓｏｎら、Ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＆  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ  １７０−１８１，Ｈａｒｒｉｓ  ＆  Ｚａｌｉｐｓｋｙ  Ｅｄｓ．，ＡＣＳ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ，１９９７を参照。また、米国特許第５，６７２，６６２号を参照）、スクシンイミドコハク酸（例えば、Ａｂｕｃｈｏｗｓｋｉ  ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．７：１７５（１９８４）、およびＪｏｐｐｉｃｈら、Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．１８０：１３８１（１９７９）を参照）、スクシンイミドイルエステル（例えば、米国特許第４，６７０，４１７号を参照）、ベンゾトリアゾール炭酸（例えば、米国特許第５，６５０，２３４号を参照）、グリシジルエーテル（例えば、Ｐｉｔｈａら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．９４：１１（１９７９）、Ｅｌｌｉｎｇら、Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１３：３５４（１９９１）を参照）、オキシカルボニルイミダゾール（例えば、Ｂｅａｕｃｈａｍｐら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１３１：２５（１９８３）、Ｔｏｎｄｅｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １：２５１（１９８５）を参照）、ｐ−ニトロフェニル炭酸（例えば、Ｖｅｒｏｎｅｓｅら、Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉ��ｔｅｃｈ．，１１：１４１（１９８５）、およびＳａｒｔｏｒｅら、Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２７：４５（１９９１）を参照）、アルデヒド（例えば、Ｈａｒｒｉｓら、Ｊ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｃｉ．Ｃｈｅｍ．Ｅｄ．２２：３４１（１９８４）、米国特許第５，８２４，７８４号、米国特許第５，２５２，７１４を参照）、マレイミド（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ８：３４３（１９９０）、Ｒｏｍａｎｉら、ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ２：２９（１９８４））、およびＫｏｇａｎ，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｃｏｍｍ．２２：２４１７（１９９２）を参照）、オルトピリジル−ジスルフィド（例えば、Ｗｏｇｈｉｒｅｎら、Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．４：３１４（１９９３）を参照）、アクリルオール（例えば、Ｓａｗｈｎｅｙら、Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，２６：５８１（１９９３）を参照）およびビニルスルホン（例えば、米国特許第５，９００，４６１を参照）に記載されている。上の参照の全ては、参照により本明細書に引用される。
【００８８】
特定の実施形態において、重合体試薬（および、そこから生成される複合体）のキャップ基または官能基（Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、などの「Ｚ」部分）は、多腕構造を有する。例えば、「Ｚ」部分は、２から６の官能基（例えば、２、３、４、５または６官能基）を含む、多腕活性構造であってよい。例示的な多腕基は、
【００８９】
【化２８】
2009527581.tif 000018
構造を有するものを含み、
式中、各Ｚは、同一または異なってもよいが、任意にスペーサー部分を含む官能基であり、ｍは、１から約１０の範囲の整数であり、好ましくは、１から約４である。
【００９０】
重合体試薬（および、それから形成される複合体）は、もう１つのスペーサー部分（Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｘ８、Ｘ９などの「Ｘ」部分）を含んでよく、特に、２つの重合体種または重合体と生物活性物質の反応から生じる分解性の、または安定した連鎖のいずれかの側に位置する。例示的なスペーサー部分は、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、アミノ酸、ジまたはトリペプチド、−Ｎ（Ｒ６）−および２つ以上の前記の任意の組み合わせを含み、式中、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカル、（ｈ）は、０から６であり、（ｊ）は、０から２０である。他の特定のスペーサー部分は、構造、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−０−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−を有し、式中、各メチレンの後の添字の値は、構造に含有されるメチレンの数を示し、例えば、（ＣＨ２）１−６は、構造が１、２、３、４、５または６のメチレンを含んでいることを意味する。スペーサー部分は、上述のスペーサー部分に加え、またはそのかわりに、１から２５のエチレンオキシドモノマー単位［すなわち、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１−２５］を含有するエチレンオキシドオリゴマー／重合体を含んでもよい。別のスペーサー部分への追加として使用される時、エチレンオキシドオリゴマー鎖は、スペーサー部分の前後、また任意に、２つ以上の原子を含むスペーサーの任意の２つの原子間に生じてよい。
【００９１】
本発明の複合体に使用される、特に好適な生物活性物質は、特定のタンパク質、ペプチド、および低分子薬物などの、比較的低い水溶解性を有する活性物質を含む。本発明の重合体試薬に共有結合的に結合されてよい、比較的疎水性の活性物質の例は、非制限的に、アビエチン酸、アセグラトン、アセナフテン、アセノクルナロール、アセトヘキサミド、アセトメロクトール、アセトキソロン、アセチルジギトキシン、アセチレンジ臭化物、アセチレン二塩化物、アセチルサリチル酸、アラントラクトン、アルドリン、アレキシトールナトリウム、アレスリン、アリルエストレノール、アリルスルフィド、アルプラゾルム、アルミニウムビス（アセチルサリチル酸）、アンブセタミド、アミノクロテンオキサジン、アミノグルテチミド、アミル塩化物、アンドロステンジオール、アネトールトリチオン、アニラジン、アントラリン、アンチマイシンＡ、アプラスモマイシン、アルセノアセト酸、アジアチコシド、アスターニゾール、オーロドクス、オーロチオグリカニド、８−アザグアニン、アゾベンゼン、バイカレイン、バルサムペルー、バルサムトルー、バーバン、バクストロビン、ベンダザック、ベンダゾール、ベンドロフルメチアジド、ベノミル、ベンザチン、ベンゼステロール、ベンゾデパ、ベンゾキシキノン、ベンズフェタミン、ベンゾチアジド、ベンジル安息香酸、ベンジル桂皮酸、ビブロカトール、ビフェノックス、ビナパクリル、バイオレスメサリン、ビサボロール、ビサコジル、ビス（クロロフェノキシ）メタン、次没食子酸ビスマスヨード、次没食子酸ビスマス、ビスマスタンニン酸、ビスフェノールＡ、ビチオノール、ボルニル、イソ吉草酸ブロモ、塩化ボルニル、イソ吉草酸ボルニル、サリチル酸ボルニル、ボロジファクム、ブロメタリン、ブロキシキノリン、ブフェキサマク、ブタミラート、ブテタール、ブチオベート、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、カルシウムヨードステアリン酸、カルシウムサッカリン酸、ステアリン酸カルシウム、カポベン酸、カプタン、カルバマゼピン、カルボクロラール、カルボフェノチン、カルボクオン、カロチン、カルバクロール、セファエリン、セファリン、カウルムグラ酸、ケノジオール、キチン、クロルダン、クロルフェナック、クロルフェネトール、クロタノニル、クロロトリアニセン、クロルプロチキセン、クロルキナルドール、クロモナール、シロスタゾール、シンコニジン、シトラール、クリノフィブレート、クロファジミン、クロフィブレート、クロフルカルバン、クロナイトレート、クロピドール、クロリンジオン、クロキサゾラム、コロクソン、コルチコステロン、クルナクロル、クマホス、クミトエートクレシル酢酸、クリミジン、クルホマート、クプロバム、シアメマジン、シクランデレート、シクラルバメートシマリン、シクロスポリンＡ、シペルメトリル、ダプソン、デフォスファミド、デルタメトリン、デオキシコルチココステロン酢酸、デスオキシメタゾン、デキストロモラミド、ジアセタゾト、ジアリホル、ジアチモスルホン、デカプトン、ジクロフルアニ、ジクロロフェン、ジクロフェナミド、ジコホル、ピクリル、ジクマロール、ジエネストロール、ジエチルスチルベストロール、ジフェナミゾール、ジヒドロコデイノンエノール酢酸、ジヒドロエルゴタミン、ジヒドロモルフィン、ジヒドロタキステロール、ジメステロール、ジメチステロン、ジオキサチオン、ジフェナン、Ｎ−（１，２−ジフェニルエチル）ニコチンアミド、３，４−ジ−［１−メチル６−ニトロ−３−インドリル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（ＭＮＩＰＤ）、ジピロセチル、ジスルファミド、ジチアノン、ドキセニトイ、ドラゾキソロン、デュラバタイト、エジフェンホス、エモジン、エンフェナム酸、エルボン、エルゴコルニニン、エリスリチルテトラ硝酸、エリスロマイシンステアリン酸、エストリオール、エタベリン、エシステロン、エチルビスクルンアセト酸、エチルヒドロクプレイン、エチルメタンカルボキサミド、オイゲノール、ユープロシン、エクサルアミド、フェバルバメート、フェナルアミド、フェンベンザゾール、フェニペントール、フェニトロチオン、フェノフィブレート、フェンキゾン、フェンチオン、フェプラゾン、フリルピン、フィリキシン酸、フロクタフェニン、フルアニソン、フルメキン、フルオコルチンブチル、フルオキシメステロン、フルロチル、フルタゾラム、フマギリン、５−フルフチリル−５−イソプロピルバルビツール酸、フサフムジン、グラフェニン、グルカゴン、グルテチミド、グルブチアゾール、グリセオフルビン、グアヤコール炭酸、グアヤコールリン酸、ハルシノニド、ヘマトポルフィリン、ヘキサクロロフェン、ヘキセストロール、ヘキセチジン、ヘキソバアルビタール、ヒドロクロロチアジド、ヒドロコドン、イブプロキサム、イデベノン、インドメタシン、イノシトールニアシナート、イオベンザミン酸、イオセタム酸、イオジパミド、ヨーメグラム酸、イポダート、イソメテプテン、イソノキシン、２−イソバレリリンダン−１，３−ジオン、ジョサマイシン、１１−ケトプロゲステロン、ラウロカプラム、３−Ｏ−ラウロイルピリドキシン２酢酸、リドカイン、リンデン、リノレン酸、リオチロニン、ルセンソマイシン、マンコゼム、マンデル酸、イソアミルエステル、マジンドール、メベンダゾール、メブヒドロリン、メビキン、メラルソプロール、メルファラン、メナジオン、メンチル吉草酸、メフェノキサロン、メフェンテルミン、メフェニトイン、メプリルカイン、メスタオノロン、メストラノール、メスルフェン、メテルゴリン、メタラタル、メタンドリオール、メタカロン、メチルコラントレン、メチルフェニデート、１７−メチルテストステロン、メチプラノロール、ミナプリン、ミオラル、ナフタオロホス、ナフトピジル、ナフタレン、２−ナフチル乳酸、２−（２−ナフチルオキシ）エタノール、ナフチルサリチル酸、ナプロキセン、ネアルバルビタール、ネマデクチン、ニクロサミド、ニコクロネート、ニコモルフィン、ニクロクワイン、ニフロキサジド、ニトラクリン、ニトロメルゾール、ノガラマイシン、ノルダゼパム、ノルエタンドロロン、ノルゲストリエノン、オクタベリン、オレアンドリン、オレイン酸、オキサゼパム、オキサゾラム、オキセラジン、オキセサゼイン、オキシコドン、オキシムエステロン、オキシフェニスタン酢酸、パクリタキセル、パラヘルクアミド、パラチオン、ペモリン、ペンタエリスリトール、テトラ硝酸、ペンチルフェノール、パーフェナジン、フェンカルバミド、フェニラミン、２−フェニル−６−クロロフェノール、フェントンエチルバルビツール酸、フェニトイン、ホサロン、フォタリルスルファチアゾール、フィロキノン、ピカデックス、ピファルニン、ピケトフェン、ピロゾリン、ピロダジル、ピバロイルオキシメチルブチレート、プラフィルリド、プラウノトール、ポラプレジンク、ポリチアジド、プロベネシド、プロゲステロン、プロメゲストン、プロパニジド、プロパルギット、プロファム、プロカゾン、プロチオナミド、ピリメタミン、ピリミテート、ピリビニウムパモ酸、ケルセチン、キンボロン、キンザロホ−エチル、ラフォキサニド、レシナミン、ロシベリン、ロンネル、サレン、スカーレットレッド、シッカニン、シマジン、シメトリド、シンバスタチン、ソブゾキサン、ソラン、スピロノラクトン、スクアレン、スタノロン、スクラルファート、スルファベンズ、スルファグアノール、スルファサラジン、スルホキシド、スルピリド、スキシブゾン、タルブタール、テルグリド、テストステロン、テトラブロモクレゾール、テトランドリン、チアセタゾン、チオコルヒチン、チオクト酸、チオキノックス、チオリダジン、チラム、チミルＮ−イソアミルカルバメート、チオキシダゾール、チオキソロン、トコフェロール、トルシクラート、トルナフタート、トリクロサン、トリフルサル、トリパラノール、ウルソル酸、バリノマイシン、ベラパミル、ビンブラスチン、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、キセンブシン、キシラジン、ザルトプロフェン、およびゼアラレノンを含む。
【００９２】
Ａ．線形重合体試薬およびそれから生成される複合体
本発明は、特に、重合体の総分子量が、少なくとも、約３０，０００Ｄａ、より好ましくは、少なくとも、約４０，０００Ｄａ、最も好ましくは、少なくとも、約５０，０００Ｄａである用途などの、高分子量重合体が所望される用途に特に適した、実質的に線形の水水溶性で非ペプチドの重合体とそれから生成される複合体を、提供する。本実施形態において、循環時間の増加などの、高い分子量の重合体の利点は、重合体骨格に沿って配置される１つ以上の切断可能な連鎖による重合体の腎クリアランスの向上と組み合わせることができる。
【００９３】
例えば、本発明は、構造
【００９４】
【化２９−１】
2009527581.tif 000019
を有する、実質的に、線形の水溶解性で非ペプチドの重合体を含む組成物を提供し、
式中、
各ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、同一または異なってもよいが、線形または分枝の水溶解性で非ペプチドの重合体であり、好ましくは、約１５，０００Ｄａ未満であり、より好ましくは、約１０，０００Ｄａ未満であり、最も好ましくは、約８，０００Ｄａ未満の数平均分子量を有し、
各Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は、同一または異なってもよいが、スペーサー部分であり、
各Ｌ１は、生体内で切断可能な連鎖であり、
各Ｚは、同一または異なってよいが、キャップ基または官能基（多腕反応基を含む）であり、任意にスペーサー部分を含んでもよく、
各ａ、ｂ、ｃ、およびｄは、同一または異なってもよいが、０または１のいずれかであり、
ｍは、１から１０、好ましくは、１から５（例えば、１、２、４、５または５）の範囲の整数であり、連続して共有結合される重合体セグメント、ＰＯＬＹ１の数を表し、
式中、少なくとも１つのＬ１は、炭酸基を欠損する連鎖であり、組成物は、ヒドロゲルの形態ではない。
【００９５】
式（Ｉａ）の特定の実施形態において、各Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）−，−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、およびその組み合わせからなる群から選択され、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、および置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は、０から６であり、（ｊ）は０から２０である。
【００９６】
式（Ｉａ）の特定の実施形態において、Ｌ１は、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖およびテトラペプチド連鎖からなる群から選択され、および／またはＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、それぞれ、ポリオール核とポリオール核から伸びる少なくとも２つの重合体の腕を含む分枝ポリ（エチレングリコール）分子である。さらなる実施形態において、式（Ｉａ）中の各重合体は、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖およびテトラペプチド連鎖などの生体内で切断可能な連鎖により連結される、２つ以上の重合体セグメントを含むことができる。式（Ｉａ）のＬ１の好適なウレタン連鎖は、構造−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｙ′−を有し、式中、ＹおよびＹ′は、独立して、Ｈ、アルキル、置換されたアルキル、およびアリールから選択される。
【００９７】
式（Ｉａ）の好適な一実施形態は、構造
【００９８】
【化２９−２】
2009527581.tif 000020
を有し、
式中、
ＰＯＬＹａおよびＰＯＬＹｂは、ポリ（エチレングリコール）セグメントであり、
Ｌは、連鎖であり、
Ｌ′は、生体内で切断可能な連鎖（例えば、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖およびテトラペプチド連鎖）であり、
Ｒは、水素、アルキル、置換アルキル、またはカルボン酸である。
【００９９】
上述の実施形態のいずれかにおいて、各ａ、ｂ、ｃ、およびｄは、０または１であってよく、ａ、ｂ、ｃ、およびｄ値の全順列は、本明細書に明確に含まれる。例えば、本発明の実施形態は、ａ、ｂ、ｃ、およびｄの全てが０、または全てが１、ａが１で、他の全てが０、ｂが１で、他の全てが０などを含む。
【０１００】
上の重合体構造は、構造
【０１０１】
【化３０】
2009527581.tif 000021
を有する複合体などの、生物活性物質と複合体を形成するために使用されてよく、
式中、
Ｙ１およびＹ２のそれぞれは、少なくとも、Ｙ１およびＹ２のうちの１つが−Ｌ２−薬物であるという条件で、−Ｌ２−薬物または−Ｚのいずれかであり、
Ｌ２は、生物活性物質と重合体（すなわち、Ｚ）の末端官能基の反応から生じる連鎖であり、当該連鎖は、任意に、生体内で切断可能であり、
薬物は、生物活性物質の残基であり、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、ＰＯＬＹ１、ＰＯＬＹ２、Ｌ１、ａ、ｂ、ｃ、ｄおよびｍは、式（Ｉａ）に関して、前に定義されている通りである。一般的に、Ｌ２は、生物活性物質と式（Ｉａ）の重合体（例えば、Ｚ）の官能基の反応から形成される。
【０１０２】
上の線形重合体実施形態は、所望の連鎖を形成するための反応できる相補的な末端官能基を有する多腕重合体セグメントの共有結合により形成することができる。複合体は、生物活性物質上に相補的な官能基を有する分割型の分解性重合体の１つ以上の官能基の反応により形成されてよい。
【０１０３】
Ｂ．分枝重合体試薬およびそれから生成される複合体
本発明は、生物活性物質に結合するための２つの分割型の分解性重合体鎖と官能基１つにより特徴付けられる、分枝の水溶解性で非ペプチドの重合体も提供する。このような重合体構造は、生物活性物質（例えば、タンパク質）上の活性部位への浸透の可能性を減少できる立体障害の比容積などの分枝重合体の機能的利点と、向上した腎クリアランスの追加の利点を併用する。このタイプの重合体は、Ｎｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ＡＬ  ｏｆ  Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌ，ＡＬから入手可能なものなどの、市場で入手可能な一官能性分枝重合体の代替として使用されてよい。
【０１０４】
一実施形態において、本発明は、構造
【０１０５】
【化３１】
2009527581.tif 000022
を有する、分枝重合体を含む組成物を提供し、
式中、
各ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、同一または異なってもよいが、線形または分枝の水溶解性で非ペプチドの重合体であり、好ましくは、約１５，０００Ｄａ未満、より好ましくは、約１０，０００Ｄａ未満、最も好ましくは、約８，０００Ｄａ未満の数平均分子量を有し、
各Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６およびＸ７は、同一または異なってもよいが、スペーサー部分であり、
各Ｌ１は、生体内で切断可能な連鎖であり、
各Ｌ３は、任意に、生体内で切断可能な連鎖であり、
Ｌ４は、非分解性連鎖（例えば、Ｃ１−Ｃ１２脂肪族炭素鎖）であり、
各Ｚ１は、同一または異なってもよいが、キャップ基または官能基（多腕反応性基を含む）であってよく、任意に、スペーサー部分を含んでもよく、
Ｚ２は、官能基であり、好ましくは、連鎖を形成するために、生物活性物質上の相補的な官能基と反応するように適合された官能基であり、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆおよびｇのそれぞれは、同一または異なってもよいが、０または１のいずれかであり、
ｍは、１から１０の範囲の整数であり、連続して共有結合的に結合される重合体セグメント、ＰＯＬＹ１の数を表し、
ｏは、１から１０の範囲の整数であり、連続して共有結合的に結合される重合体セグメント、ＰＯＬＹ２の数を表し、
式中、少なくとも、Ｌ１の１つは、炭酸基を欠損する連鎖であり、組成物は、ヒドロゲルの形態ではない。ＰＯＬＹ（例えば、ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２）が線形の時、「単一」分枝構造をもたらし、分枝点がＬ４となることを留意するべきである。１つ以上のＰＯＬＹ（例えば、ＰＯＬＹ１）が分枝の場合、多重枝をもたらす。
【０１０６】
式（ＩＩａ）の特定の実施形態において、各Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６およびＸ７は、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、およびその組み合わせからなる群から選択され、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、および置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は、０から６であり、（ｊ）は０から２０である。
【０１０７】
さらに、式（ＩＩａ）の特定の実施形態において、各Ｚ１は、以下の形式
【０１０８】
【化３２】
2009527581.tif 000023
を設定する、多腕基などの、２から約６の末端官能基を含む、多腕反応性基であり、
式中、各Ｚは、同一または異なってもよいが、任意にスペーサー部分を含む官能基であり、ｍは、１から約１０の範囲の整数である。
【０１０９】
式（ＩＩａ）の特定の実施形態において、各ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、ポリ（エチレングリコール）を含み、ｍおよびｏは、それぞれ、２またはそれ以上（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０）であり、各Ｌ１およびＬ３は、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖およびテトラペプチド連鎖などの、生体内で切断可能である。
【０１１０】
式（ＩＩａ）の特定の実施形態において、ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、それぞれ、ポリ（エチレングリコール）重合体であり、Ｌ１は、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖およびテトラペプチド連鎖からなる群から選択され、ｍおよびｏは、それぞれ１である。式（ＩＩａ）のＬ１の好適なウレタン連鎖は、構造−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｙ′−を有し、Ｙは、Ｈ、アルキル、置換されたアルキル、およびアリールから選択され、Ｙ′は、アルキル、または置換されたアルキルである。
【０１１１】
上述の実施形態のいずれにおいても、各ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆおよびｇは、０または１であってよく、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆおよびｇの値の全順列は、本明細書に、明白に含まれる。例えば、本発明の実施形態は、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆおよびｇの全てが０、または全てが１、ａが１で、他の全てが０、ｂが１で、他の全てが０などを含む。
【０１１２】
式（ＩＩａ）に関する例示的な分枝重合体を以下に示す。
【０１１３】
【化３３】
2009527581.tif 000024
式中、各ＰＯＬＹは、水水溶性で非ペプチドの重合体であり、各Ｕは、ウレタン連鎖であり。中心のカルボン酸基は、Ｚ２官能基を表す。本実施形態において、各Ｚ１は、反応基（この場合、ウレタン基）の重合体側に任意のスペーサー部分を有する多腕反応基であることに留意されたい。末端ヒドロキシル基は、本発明から逸脱することなく、置換されるか、または他の官能基（例えば、カルボン酸、反応性エステル）を提供するために、さらに修飾されてよい。
【０１１４】
式（ＩＩａ）の別の例示的実施形態において、ｍおよびｏは、それぞれ１であり、ｃおよびｄは１であり、Ｘ３およびＸ４は、エチレンオキシドオリゴマー鎖（例えば、１から約２５モノマー単位の短ＰＥＧ鎖）である。本実施形態において、２つの重合体の腕のそれぞれは、２つのＰＥＧセグメントを含み、１つは、一般的に、他の１つより大きく、小さい方は、Ｘ３またはＸ４により表される。２つのＰＥＧ間の連鎖は、様々であり得るが、好ましい連鎖は、ウレタン連鎖である。
【０１１５】
構造
【０１１６】
【化３４】
2009527581.tif 000025
を有する、複合体などの、式（ＩＩａ）の分枝重合体の複合体も、本発明により提供され、
式中、
Ｌ５は、生物活性物質と重合体（すなわち、Ｚ２）の末端官能基との反応から生じる連鎖であり、該連鎖は、任意に、加水分解的または酵素的に切断可能であり、
薬物は、生物活性物質の残基であり、
各Ｚ１、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｌ１、Ｌ３、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｍおよびｏは、式（ＩＩａ）に関して、前に定義される通りである。一般的に、Ｌ５は、生物活性物質と式（ＩＩａ）の重合体の官能基との反応から形成される。
【０１１７】
Ｃ．多腕重合体試薬およびそれから生成される複合物
本発明のまた別の側面において、多腕重合体およびそれから生成される複合体を提供する。多腕重合体は、ポリオール、ジスルフィド、ジペプチド、トリペプチド、またはテトラペプチドなどの核分子の存在により特徴付けられ、そこから、多腕重合体の腕が伸びる。本発明は、構造
【０１１８】
【化３５】
2009527581.tif 000026
を有する重合体を含む組成物を含み、
式中、
Ａは、欠損、−（Ｘ８）ｈ−（Ｌ６）ｊ−（Ｘ９）ｉＰＯＬＹ２−Ｚ３または−（Ｘ８）ｈ−（Ｌ７）ｊ−（Ｘ９）ｉＺ３（例えば、Ｚ３は、カルボン酸基を含んでよく、ｈ、ｊおよびｉは０であってよい）、
各ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は、同一または異なってもよいが、線形または分枝の水溶解性で非ペプチドの重合体であり、好ましくは、約１５，０００Ｄａ未満であり、より好ましくは、約１０，０００Ｄａ未満であり、最も好ましくは、約８，０００Ｄａ未満の数平均分子量を有し、
各Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ８およびＸ９は、同一または異なってもよいが、スペーサー部分であり、
各Ｌ３、Ｌ６およびＬ７は、同一または異なってもよいが、任意に、生体内で切断可能な連鎖（例えば、Ｌ３は、好ましくは、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖およびテトラペプチド連鎖などの、生体内で切断可能な連鎖から選択される）であり、
各Ｚ１は、同一または異なってもよいが、キャップ基または官能基（多腕反応基を含む）であり、任意に、官能基またはキャップ基と重合体セグメントの間にスペーサー部分を含み、
Ｚ３は、イオン化可能な官能基であり、任意に、スペーサーを介して結合され、
ａ、ｂ、ｃ、ｈ、ｉおよびｊのそれぞれは、同一または異なってもよいが、０または１のいずれかであり、
Ｒは、少なくとも、重合体結合に利用可能なｐ＋１個の部位（例えば、ポリオール、ジスルフィド、ジペプチド、トリペプチド、それらの組み合わせなど）を含む、モノマーまたはオリゴマー多腕核分子であり、任意に、生体内で分解可能な連鎖（例えば、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖およびテトラペプチド連鎖）を含み、
ｐは、２から３２、好ましくは、２から約１２、より好ましくは、２から約８、（例えば、２、３、４、５、６、７または８）の範囲の整数である。少なくとも、ＲおよびＬ３のうちの１つは、生体内で切断可能である。
【０１１９】
イオン化可能な官能基、Ｚ３は、分子の調節および高純度化で使用されてよい反応性ハンドルとして機能する。例示的なイオン化可能な官能基は、アミンおよびカルボン酸基を含む。他の適切な官能基の例は、アルデヒド水和物、ケトン水和物、アミド、ヒドラジン、ヒドラジド、チオール、スルホン酸、アミダート、ヒドロキシルアミン、フェノール、オキシム、１から約２５個の炭素原子（例えば、カルボキシメチル、プロパノン酸、および酪酸）の炭素の長さ（カルボニル炭素を含む）を有するアルカン酸、ジチオピリジン、ビニルピリジン、２−置換−１、３−オキサゾリン、２−置換１、３−（４Ｈ）−ジヒドロチアジンを含む。
【０１２０】
核分子のＲは、重合体セグメント結合のための３つ以上の反応性部位、一般的には、３から約３２の反応性部位、より好ましくは、３から約２５の反応性部位、最も好ましくは、３から約１０の間の反応性部位（例えば、３、４、５、６、７、８、９または１０の反応性部位）を提供する任意のモノマー、またはオリゴマー分子であってよい。核分子の反応性部位数は、重合体セグメントに結合するために実際に使用される部位の数より大きくてよい（すなわち、反応性部位の数は、ｐより大きくてよい）ことに留意されたい。反応性部位は、官能性重合体セグメントと反応するために利用可能な末端官能基を含み、１種より多い官能基を含んでよい。例えば、特定のジまたはトリペプチド核分子は、１つ以上のカルボン酸基および１つ以上のアミン基双方を含む。上述の通り、Ｒ核分子は、重合体の腕がポリオールのヒドロキシル基の部位および／またはポリペプチドまたはジスルフィドの部位で結合されてよい多腕核分子を形成するため、ポリペプチド（例えば、ジまたはトリペプチド）またはジスルフィドおｔポリオールの組み合わせであってよい。このタイプの核分子は、以下の反応スキームＶＩＩに記載される。Ｒ核分子は、重合体の腕の結合前に実行されなくてもよいことに留意されたい。代わりに、核分子は、重合体の腕が、最終的核分子を形成する粗要素の１つに結合された後に、生成されてよい。例えば、反応スキームＶＩＩに記述される通り、重合体の腕は、ジスルフィドまたはジあるいはトリペプチド連鎖を介して、共に２つの重合体修飾ポリオールの結合前にポリオールに結合されてよい。
【０１２１】
核分子として使用されるポリオールは、複数の利用可能なヒドロキシル基を含む。所望の数の重合体の腕により、ポリオールは、一般的に、３から約２５のヒドロキシル基、好ましくは３から約２２のヒドロキシル基、最も好ましくは約５から１２のヒドロキシル基を含む。ヒドロキシル基間の間隔は、ポリオール間でで異なるが、一般的に、各ヒドロキシル間で、炭素原子などの、１から約２０個の原子であり、好ましくは、１から約５個である。選択される特定のポリオールは、重合体の腕のために結合部位として必要とされる所望のヒドロキシル基の数に依存する。ポリオール開始材料の重量平均分子量は、一般的に、約１００から約２，０００Ｄａの間である。ポリオールは、一般的に、分枝構造を有する、つまり、ポリオールの炭化水素核構造中の１つ以上の炭素原子は、炭素原子およびエーテル連鎖酸素原子（すなわち、２つの炭素原子に結合される酸素原子）から選択される３または４個の原子に共有結合的に結合される。
【０１２２】
核分子として使用される好適なポリオールは、ヘキサグリセロール、ペンタエリトリトール、およびオリゴマーまたはその重合体（例えば、ジペンタエリトリトール、トリペンタエリトリトール、およびテトラペンタエリトリトール）などのグリセロールオリゴマー、およびソルビトール、アラバニトールおよびマンニトールなどの糖由来アルコールを含む。また、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール（ＴＲＩＳ）、２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール、｛［２−ヒドロキシ−１，１−ビス（ヒドロキシメチル）エチル］アミノ｝酢酸（トリシン）、２−［（３−｛［２−ヒドロキシ−１，１−ビス（ヒドロキシメチル）エチル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−（ヒドロキシメチル）−１、３−プロパンジオール、２−｛［２−ヒドロキシ−１，１−ビス（ヒドロキシメチル）エチル］アミノ｝エタンスルホン酸（ＴＥＳ）、４−｛［２−ヒドロキシ−１，１−ビス（ヒドロキシメチル）エチル］アミノ｝−１−ブタンスルホン酸および２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール塩酸塩などの、イオン化可能な基を含有する多くの市場で入手可能なポリオールも、適切な開始材料である。一般的に、本発明に使用される重合体ポリオールは、２５モノマー単位以上を含まない。ジペンタエリトリトールおよびトリエリトリトールの構造を、ヘキサグリセロールに可能な構造の１つと共に以下に提供する。
【０１２３】
【化３６】
2009527581.tif 000027
２１の利用可能なヒドロキシル基を有するヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンは、別の例示的ポリオールである。以下に示す、また別の例示的ポリオールは、ドイツのＦｒｅｉｂｕｒｇの超重合体ＧｍｂＨから入手可能な超分枝ポリグリセロールである。
【０１２４】
【化３７】
2009527581.tif 000028
ポリオールは、ポリオール核に結合されるＰＥＧオリゴマーまたは重合体セグメントを含んでよい。ポリオール開始材料は、一般的に、ポリオールオリゴマーまたは異なる分子量の重合体の混合物または異なる分子量のエトキシル化ポリオール構造の混合物などの、生成物の混合物の形態でよく、さらに、グリセロールなどの、元のポリオールモノマー単位の残留量を含んでよい。しかし、開始混合物の少なくともポリオールの１つは、一般的に、式Ｒ（ＯＨ）Ｐに従う、少なくとも３つの利用可能なヒドロキシル基を有する分枝ポリオールであり、式中、Ｒは、任意に１つ以上のエーテル連鎖を含む分枝炭化水素で、ｐは少なくとも３で、一般的に、３から２５、好ましくは、３から約１０である。
【０１２５】
密接配置されたヒドロキシルを有するポリオールは、本発明の特定の実施形態において、特に好まれ、それは、ヒドロキシル保護基としての環状アセタールまたはケタル基の使用を容易にする。ポリオール構造内のヒドロキシル基間の２または３個の炭素原子の配置は、特定の好適な複素環式保護基の形成を可能にする。例えば、ペンタエリトリトールオリゴマーまたは重合体のヒドロキシル基間の密接配置は、当該分野に周知の技術を使用して、環状アセタールまたはケタル基の形成を可能にする。環状アセタールまたはケタル基は、式Ｒ′−ＣＨＯを有する試薬などの、アルデヒド基とポリオールを反応することにより形成されてよく、そこで、Ｒ′はアルキル、置換されたアルキル、アリール、または置換されたアリールあるいはケトン試薬（例えば、シクロヘキサノン）である。例示的なアルデヒド試薬は、ベンズアルデヒドである。例として、ペンタエリトリトールオリゴマーまたは重合体核の使用による、アルデヒド試薬を用いた反応から生じる構造を以下に示す。
【０１２６】
【化３８】
2009527581.tif 000029
保護された形態で、大部分のポリオールのヒドロキシル基を配置することにより、ポリオール核は、そこに存在するＺ３基の数により異なる複数の生成物を生成するために、イオン化可能な官能基を含む試薬と反応することができる。一般的に、反応は、モノ官能化生成物、ジ官能化生成物、および、未反応の残留ポリオールを生成する。イオン交換クロマトグラフィーシステムは、荷電の差に基づいて各生成物の画分を分離するために使用することができ、それによって、所望のモノ官能化生成物の精製を可能にする。荷電差に基づきＰＥＧ重合体種を精製するためのプロセスは、米国特許出願第２００５／００５４８１６号に記載されており、参照によりその全体が本明細書に記載されているものとする。
【０１２７】
イオン交換カラムまたは精製プロセスに使用されるカラムは、荷電に基づき混合物を分離するために従来使用される、任意のイオン交換カラムであってよい（Ｉｏｎ  Ｅｘｃｈａｎｇｅ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄ．Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  １９９４；”Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：ａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ  ａｎｄ  ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．”Ｈｅｆｔｍａｎ，Ｅ（Ｅｄ．），Ｖａｎ  Ｎｏｓｔｒａｎｄ  Ｒｈｅｉｎｈｏｌｄ  Ｃｏ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９７５）。各カラムは、イオン交換媒体、およびイオン交換媒体を通過する移動相または溶出液を含む。本明細書で使用されるのに適したイオン抗過ンカラムは、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ製造のＰＯＲＯＳ（登録商標）イオン交換媒体およびＰｈａｒｍａｃｉａ製造のＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）イオン交換媒体を含む。
【０１２８】
式（ＩＩＩａ）の特定の実施形態において、各Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価のシクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、式中、Ｒ６は、Ｈ、またはアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリールおよび置換されたアリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は０から６であり、（ｊ）は０から２０である。
【０１２９】
式（ＩＩＩａ）の特定の実施形態において、各ＰＯＬＹ１は、ポリ（エチレングリコール）重合体であり、Ｒは、ジスルフィド連鎖、ジペプチド、トリペプチドまたはテトラペプチドであり、これはＲが、少なくとも、１つのジスルフィド結合（ジスルフィド連鎖から）またはアミド結合（例えば、ペプチド残基の連鎖）を含むことを意味する。好適なＲ基は、少なくとも、１つのリジン残留物を含むものを含む。適切なジスルフィド連鎖は、−Ｓ−Ｓ−結合と、鎖の長さが合計４から２５個の原子を含む様々な連鎖を含み、好適なジスルフィド分子は、重合体セグメントの結合に利用可能な４から８の官能基を有する。
【０１３０】
式（ＩＩＩａ）の特定の実施形態において、ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２のそれぞれは、分枝ポリ（エチレングリコール）重合体である。
【０１３１】
式（ＩＩＩａ）の重合体試薬は、構造
【０１３２】
【化３９】
2009527581.tif 000030
を有する、ジスルフィド分子由来のＲ部分を含むことができる。
【０１３３】
式（ＩＩＩａ）の特定の実施形態において、各ＰＯＬＹ１は、生体内で切断可能な連鎖（例えば、アミド連鎖、ウレタン連鎖、ジスルフィド連鎖、ジペプチド連鎖、トリペプチド連鎖およびテトラペプチド連鎖）により結合される２つ以上のポリ（エチレングリコール）セグメントを含み、Ａは、−（Ｘ８）ｈ−（Ｌ６）ｊ−（Ｘ９）ｉ−ＰＯＬＹ２−Ｚ３であり、ＰＯＬＹ２は、ポリ（エチレングリコール）重合体であり、Ｒは、ポリオール由来である。
【０１３４】
式（ＩＩＩａ）のさらなる実施形態において、各ＰＯＬＹ１は、ポリ（エチレングリコール）重合体を含み、Ａは、欠損しており、Ｒは、少なくとも、１つのペプチド残基を含む。Ｒ部分は、ジスルフィド結合をさらに含んでよい。特定の実施形態において、Ｒは、少なくとも、アミド連鎖により脂肪酸炭素鎖、ジスルフィド結合を含む脂肪酸炭素鎖、およびポリ（エチレングリコール）オリゴマー（例えば、１から２５モノマー単位を有する）から選択されるリンカーにに結合される２つのリジン残基を含む。
【０１３５】
式（ＩＩＩａ）のまたさらなる実施形態において、各ＰＯＬＹ１は、ポリ（エチレングリコール）重合体を含み、Ａは、欠損しており、Ｒは、少なくとも、１つのジスルフィド結合と、少なくとも２つのアミド結合を含む非ペプチド部分を含む。「非ペプチド」とは、Ｒ分子が、ペプチド残基を含まない（すなわち、アミドおよびジスルフィド結合がペプチド分子の一部ではない）ことを意味する。これにより、Ｒ核分子は、アミド連鎖の介在により、構造のペプチド分子を模倣することに使用されるが、技術的には、本来、ペプチドではない。
【０１３６】
本来、非ペプチドである部分を有し、ウレタン連鎖に特定の隣接にアミド連鎖を含有する核分子を含む、本発明の多腕重合体の２例を、以下に示す。これらの例示的構造に図示するように、核分子の中心部分は、ウレタン連鎖に特定の隣接にアミド連鎖を含む。以下に示す核分子の外側の分枝部分は、リジン残基などの、ペプチド分子から由来してよい。下のＰｏｌｙ１およびＰｏｌｙ２は、式（ＩＩＩａ）のＰＯＬＹ１に記載するのと同じ定義をもつ。これらの実施例の構造のＬ１およびＬ２は、式（ＩＩＩａ）のＸ２などの、スペーサー部分を表すことができる。ｎの値は、ＰＥＧセグメントの所望の分子量に依存するが、一般的に、１から２５の範囲である。このような核分子は、Ｈ２Ｎ−（ＣＨ２）４−ＮＨ２またはＨ２Ｎ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−ＮＨ２などの、ジアミン連鎖を２つのリジン残基と反応させることにより調製することができる。リジン残基の利用可能な官能基は、次に、最終重合体分子を形成するために、重合体試薬と反応させることができる。
【０１３７】
【化４０】
2009527581.tif 000031
上述のいかなる実施形態においても、各ａ、ｂ、ｃ、ｈ、ｉおよびｊは、０または１であってよく、ａ、ｂ、ｃ、ｈ、ｉおよびｊの値の全順列は、明確に、本明細書に含まれる。例えば、本発明の実施形態は、全てのａ、ｂ、ｃ、ｈ、ｉおよびｊが０または全てが１、ａが１で、他の全てが０、ｂが１で、他の全てが０などを含む。
【０１３８】
Ｌ３連鎖として使用するための、または式（ＩＩＩａ）のＲ核部分の一部を形成してよい好適なウレタン連鎖は、構造−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｙ′−を有し、ＹおよびＹ′は、独立して、Ｈ、アルキル、置換されたアルキルおよびアリールから選択される。
【０１３９】
本発明の例示的な一つの多腕重合体試薬は、式（ＩＩＩａ）の重合体試薬に対応する、構造
【０１４０】
【化４１】
2009527581.tif 000032
を有し、式中、ｐは、２であり、各ＰＯＬＹ１は、多腕重合体である。末端ヒドロキシル基は、本発明から逸脱することなく、他の官能基と置換され得る。
【０１４１】
本発明の別の多腕重合体試薬を以下に例示する。示す多腕試薬は、ジリジン核および３本の重合体の腕を有する。当該分子のペプチド連鎖は、当業者に周知の酵素により、切断され易いため（哺乳類のサブチリシン様セリンエンドプロテアーゼＰＣ２など。Ｅｓｋｅｌａｎｄら、（１９９６）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９８（１）：１４８−１５６を参照のこと）、特定の生体内状態下で不安定になる。以下の反応スキームＩにおいて、ｍＰＥＧ−ＢＴＣは、イオン交換クロマトグラフィーにより重合体を精製するために使用されてよい、活性カルボン酸単位を用いて重合体を形成するためにジペプチドと反応する。
【０１４２】
【化４２】
2009527581.tif 000033
反応スキームＩ
分枝または多腕重合体が、上で使用した線形重合体を置換する同様の例は、反応スキームＩＩとして以下に記載する。また、分解性ジペプチド連鎖の切断は、活性（薬物）要素のサイズによるが、元の複合体のサイズの約半分であってよい、２つの画分を発生させる。
【０１４３】
【化４３】
2009527581.tif 000034
反応スキームＩＩ
上述と同様の方法を使用することにより、ジスルフィド連鎖を、ジペプチド連鎖の代わりに使用することができる。ジスルフィド結合は、特定の酵素の存在下で不安定であり、従って、薬物および／または重合体クリアランスを助ける分解性結合を提供する。このような分子の合成方法を以下の反応スキームＩＩＩで、以下に示す。
【０１４４】
【化４４】
2009527581.tif 000035
反応スキームＩＩＩ
構造
【０１４５】
【化４５】
2009527581.tif 000036
を有する複合体などの、上述の多腕重合体の複合体も、本発明により提供され、
式中、
Ｂは、Ａ、−（Ｘ８）ｈ−（Ｌ６）ｊ−（Ｘ９）ｉ−ＰＯＬＹ２−Ｌ９−薬物、または−（Ｘ８）ｈ−（Ｌ７）ｊ−（Ｘ９）ｉ−Ｌ９−薬物であり、各Ｄは、同一または異なってもよいが、Ｚ１またはＬ８−薬物であり、
Ｌ８およびＬ９は、同一または異なってもよいが、連鎖であって、任意に、生体内で切断可能であり、
薬物は、生物活性物質の残基であり、
各Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ８、Ｘ９、Ｌ３、Ｌ６、Ｌ７、Ａ、Ｚ１、ａ、ｂ、ｃ、ｈ、ｊおよびｐは、式（ＩＩＩａ）に関して、前に定義される通りである。一般的に、Ｌ８およびＬ９は、生物活性物質と式（ＩＩＩａ）の重合体の官能基（それぞれ、Ｚ１およびＺ３）の反応から形成される。
【０１４６】
本発明の例示的複合体を以下に示すが、複合体は、分解性アミド結合を含む例示的重合体試薬とポリペプチド活性物質の反応から生じる。重合体試薬は、薬物分子に結合された。分解性アミド連鎖の重要性は、ＰＥＧ単位の分子量が比較的高い時、明らかになる。ＰＥＧセグメントの分子量が、２０，０００ダルトンの場合、重合体は、６０，０００ダルトンよりも、僅かに高い分子量を有するだろう。８，０００ダルトンの分子量を有するポリペプチドが、複合体を生成するために添加される場合（チオール基を介して、重合体のマレイミドに結合されることを以下に示す）、重合体の最終分子量は、この場合、６８，０００ダルトンより高くなる。本サイズの分子のクリアランスは、非常に問題であり、一般的に、投与されないだろう。しかし、本明細書に記述される一実施形態において、本発明の利点を例証することが可能である。
【０１４７】
例えば、以下に示す複合体（本明細書に記述される通り、重合体試薬から調製される）は、ジペプチドの中心のペプチド結合において切断することができ（以下の点線により示される）、約４０，０００ダルトン、および、２８，０００ダルトンの分子量を有する複合体の画分を生じることとなる。従って、本薬物生成物のクリアランスは、分解性連鎖の存在により強化される。
【０１４８】
【化４６】
2009527581.tif 000037
本発明の多腕複合体を生成するための別の例示的スキームを、反応スキームＩＶとして、以下に記載する。示す通り、利用可能なアミン基を有する薬物分子は、核分子の不安定なジスルフィド連鎖を特徴とする多腕重合体試薬と反応する。
【０１４９】
【化４７】
2009527581.tif 000038
式中、Ｒは、一般的に、アルキルまたは置換されたアルキル（例えば、ベンジル）などの、比較的不活性なキャップ基である。
【０１５０】
反応スキームＩＶ
反応スキームＶと称する以下の反応スキームは、本発明が分解性複合体構造を提供することができる手段のさらなる例を提供する。保護エステル基を含む活性重合体基は、核重合体分子の腕の１つに追加される。その後、分解性連鎖、この場合、ジペプチド連鎖は多腕核の３つの重合体腕に追加される。次に、エステル加水分解は、クロマトグラフィーによる精製のために、カルボン酸基を解放する。次に、薬物分子が結合することのできる官能基（例えば、ＮＨＳエステル）の添加により、４つの全ての腕を活性化するために、プロセスが実行され、必要に応じて、さらに官能化することもできる。
【０１５１】
【化４８】
2009527581.tif 000039
反応スキームＶ
様々な重合体セグメントの分子量は、分子構造を実用的にするために可変であると同時に、薬物供給のために実用的な、最終の全体分子量を与える。従って、核分子のより小さいＰＥＧ連鎖（すなわち、反応スキームＶで、ｎにより表される）は、一般的に短い連鎖である。主鎖ＰＥＧ連鎖（すなわち、反応スキームＶで、ｍにより表される）は、比較すると、一般的に、長い重合体である。
【０１５２】
上の重合体試薬の各末端での薬物分子との反応後、得られた複合体は、次の一般構造のように表されてよい。
【０１５３】
【化４９】
2009527581.tif 000040
式中、ＰＯＬＹ１〜ＰＯＬＹ３は、上述の通り、水水溶性で非ペプチド重合体であり、Ｌ１、Ｌ２およびＬ３は、安定した連鎖であり、Ｌ４は、好ましくは、薬物分子を放出する分解性連鎖であり、Ｌ５は、複合体の、より小さい重合体セグメントへの分子分解を可能にする、加水分解的、または酵素的に分解性連鎖である。
【０１５４】
従って、全体的なプロセスは、最終的に、反応スキームＶＩとして以下に示す切断可能な反応に従い、クリアランスの対象として残る、次の要素を導く。新しい基Ｇ１、Ｇ２およびＧ３は、分解性連鎖の切断から生じる新しい末端基である。
【０１５５】
【化５０】
2009527581.tif 000041
反応スキームＶＩ
上の反応の全体的な結果は、次の薬物供給を、多腕核および実質的に線形である小さい重合体単位を含む要素に分解する多腕重合体を提供する。従って、本方法は、腎クリアランスに抵抗を示す可能性がある高球状多腕重合体のクリアランスを回避する。
【０１５６】
多腕重合体の別の例示的実施形態において、薬物供給に役立つ４つの腕の試薬を、反応スキームＶＩＩで、以下に記述する。合成は、中間体がイオン交換クロマトグラフィーを使用して精製されてよい、いくつかのポイントを含む。最初のステップにおいて、ヒドロキシル基をスクシンイミドイル炭酸基に変換するために、市場で入手可能な、エステル基を特徴とする分枝ポリオールを、ジスクシンイミドイル炭酸と反応させる。任意の第２ステップにおいて、末端保護アミン基を用いて、それに結合される２つのエチレングリコールオリゴマー／重合体を有する核を形成するために、市場で入手可能なモノ保護ジアミンであってよい、比較的小さいＰＥＧ連鎖を、核分子と反応させる（以下の反応スキームＶＩＩ（ａ）を参照）。
【０１５７】
【化５１】
2009527581.tif 000042
反応スキームＶＩＩ（ａ）
ＢＯＣ保護基の脱保護とモノ保護ＰＥＧ−ＢＴＣとの反応は、ＰＥＧ腕と分枝炭素原子間にウレタン連鎖を有する分枝ＰＥＧの形成を導く（以下の反応スキームＶＩＩ（ｂ）を参照）。当該重合体誘導体は、ＰＥＧ−ＢＴＣ分枝の結合前または後のいずれかに、イオン交換クロマトグラフィーにより精製されてよい。ＶＩＩ（ｂ）の分枝ＰＥＧ構造は、式ＩＩａの分枝重合体構造により包含されることに留意されたい。エチレングリコールモノマーの数である、ｍ１およびｍ２は、変動してよい。しかし、モノ保護ジアミン分子からのエチレングリコール鎖は、一般的に、約２から約８０のモノマー単位を有し（すなわち、ｍ１は、約２から約８０の間であり）、より好ましくは、約４０から約８０の間のモノマー単位を有する。以下のＶＩＩ（ｂ）において結合される第２重合体鎖は、約１００から約４５０モノマー単位（すなわち、ｍ２は、約１００から約４５０である）、より好ましくは、約１５０から約２５０の間のモノマー単位を含む重合体鎖などのように、一般的に長い。
【０１５８】
【化５２】
2009527581.tif 000043
反応スキームＶＩＩ（ｂ）
酸のＮ−ヒドロキシスクシンイミド活性エステルへの変換と、活性エステルのアミノアルキルジスルフィドへの結合は、以下の反応スキームＶＩＩ（ｃ）に示すように、４つの腕構造を有するジスルフィドを導く。ジスルフィドを含有する任意の炭素の連鎖上であってよいＲ基は、様々であってよいが、例示的なＲ基は、カルボン酸、およびメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチルなどの低アルキルを含む。また、強化された精製のため、カルボン酸基は、スペーサー基により、連鎖から除去することができ、当該スペーサー基は、連鎖の核から酸基を離すように働き、クロマトグラフィーカラムへの良好な結合を可能にする。ヒドロキシル基を形成するためのベンジル基の加水分解は、ジスルフィド連鎖の減少なしに生じる。
【０１５９】
【化５３】
2009527581.tif 000044
反応スキームＶＩＩ（ｃ）
ジスクシンイミドイル炭酸によるＶＩＩ（ｃ）の生成物の末端ヒドロキシル基の活性化は、重合体鎖の４つの終端で、活性スクシンイミドイルエステルを形成する。ヒドロキシル基は、また、当該分野に周知の別の官能基に変換されてよい。その後、活性多腕重合体は、各重合体鎖の終端で、薬物分子に結合されてよい。得られた複合体は、時間をかけて、酵素的ジスルフィド切断を受けることが予想され、それが、基本的に、それぞれが２つのＰＥＧ鎖を有する分枝ＰＥＧ分子である、２つの分子のクリアランスを可能にする。例示的な薬物複合体を以下に示す。
【０１６０】
【化５４】
2009527581.tif 000045
最終複合体の高分子量が、所望される場合、上の構造のジスルフィド連鎖に加え、重合体切断のための部位を提供することが必要である場合がある。例えば、上の最初の反応シーケンスで、分子量が３，４００ダルトンのＰＥＧジアミンを使用する場合、生成物のジアミン（まだＢＯＣ保護されている）は、約６，８００ダルトンの分子量を有する。これが、１０，０００ダルトンの分子量を有するＰＥＧ−ＢＴＣを使用する薬物複合体として上に示す同様の最終構造に生成される場合、最終重合体は、５３，６００ダルトンを超える分子量を有することとなる。
【０１６１】
適切な時間枠中に分子のクリアランスを可能するために、分解のさらなるポイントを有するこのような高分枝構造を提供することは、有益である可能性がある。これは、各腕の２つのＰＥＧセグメントの連鎖ポイントで、２番目の酵素的に切断可能なセグメントを添加することにより達成されてよい。これは、ジアミン連鎖に反応する前に、ＰＥＧ−ＢＴＣ要素に事前結合されるジペプチド連鎖を使用する反応スキームＶＩＩＩで、以下に図示される。合成の最終ステップ後、試薬が得られる。最終的な重合体分解の５つのポイントは、点線で示される。従って、全ての酵素的プロセスがクリアランスの前に生じる場合、長さが７，０００ダルトン以上でない重合体セグメントが、クリアされる。以下に記載されるＲ２およびＲ３基は、例えば、カルボキシアルキル、アルキルなどであってよい。
【０１６２】
【化５５】
2009527581.tif 000046
反応スキームＶＩＩＩ
選択肢として、ジスルフィドは、精製のために酸基を含むことができる。例えば、ジペプチド、システインを使用することができ、それは、後の段階で重合体の精製のための２つのカルボン酸基を提供することとなる。次に、酸基は、任意に６つの腕の重合体を生成するために活性することができる。
【０１６３】
また、任意に、遊離カルボン酸基を有するジ、トリ、またはテトラペプチドは、反応スキームＶＩＩおよびＶＩＩＩの多腕構造で主な主鎖のために、ジスルフィドの代わりに使用されてよい。例えば、例示的なジペプチド連鎖は、アミン基（例えば、以下に示すように、アラニンの遊離アミン基を用いてアミドを形成するために添加されるテトラエチレンジアミン）を用いてさらに終結される、グルタミン酸残基および別のアミノ酸（例えば、以下に示すアラニン）を取り込むことができる。例示的なジペプチド（テトラエチレンジアミンに結合されるグルタミン−アラニン）を以下に示す。
【０１６４】
【化５６】
2009527581.tif 000047
本明細書で参照される全ての論文、本、特許、特許公報および他の出版物は、その全てが参照により本明細書に組込まれているものとする。
【０１６５】
ＩＩＩ．実験
本発明は、ある好適な特定の実施形態に関連して記述されているが、前述、ならびに、次の例も、説明が目的であり、本発明の範囲を制限するものではないことを理解されたい。本発明の範囲内の他の側面、利点および修正は、本発明に関連する当該分野の者には明らかであろう。例えば、ある用途において、全ての連鎖が、分解性というよりむしろ安定性がある、任意の上の式により、重合体試薬の使用を所望してよい。
【０１６６】
添付の例に参照される全てのＰＥＧ試薬は、別記しない限り、例えば、Ｎｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｕｔｉｃｓ、Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ、ＡＬ．から市場で入手可能である。全ての１ＨＮＭＲデータは、Ｂｒｕｋｅｒにより製造された３００または４００ＭＨｚ  ＮＭＲ分光器により作成された。高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、Ａｇｉｌｅｎｔ１１００ＨＰＬＣシステム（Ａｇｉｌｅｎｔ）、ゲル透過またはイオン交換カラム、移動相としての水性リン酸緩衝液、および屈折率（ＲＩ）検出器を使用して実施された。
【実施例】
【０１６７】
実施例１：ジスルフィド結合の３つの腕を有する４腕ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−モノ−ブタン酸
Ａ．ペンタエリトリトールエトキシレート−モノ−ＰＥＧ（５ＫＤａ）−ブタン酸、メチルエステル
【０１６８】
【化５７】
2009527581.tif 000048
トルエン（１００ｍｌ）中のペンタエリトリトールエトキシレート（３／４ＥＯ／ＯＨ）（２５ｇ、０．３７０ＯＨ当量）の溶液を、減圧下でトルエンを留去することにより、共沸的に乾燥させた。乾燥したペンタエリトリトールエトキシレートを無水アセトニトリル（１００ｍｌ）に溶解し、無水ピリジン（４．２ｍｌ）とジスクシンイミドイル炭酸（９．５ｇ、０．０３７モル）を添加し、混合物をアルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。次に、ＰＥＧ（５ＫＤａ）−α−アミン−ω−酪酸、メチルエステル（２０ｇ，０．００４０モル）およびトリエチルアミン（１．５ｍｌ）を添加し、反応混合物をアルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。溶媒を減圧下で留去した。粗生成物をジクロロメタン（２０ｍｌ）に溶解し、次に、イソプロピルアルコール（７００ｍｌ）を室温で添加した。沈殿生成物を濾過し、真空で乾燥させ、１９ｇの白色固体を得た。
【０１６９】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．７１ｐｐｍ（ｑ，ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯ−）２．２４ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＣＯＯ−），３．２５ｐｐｍ（ｓ，−Ｃ−ＣＨ２−Ｏ−），３．５１ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格）。
【０１７０】
ＧＰＣ分析は、生成物が、約５ＫＤａの分子量を有する９５．７％の所望の生成物と約１０ＫＤａの分子量を有する４．３％のダイマーを含むことを示した。
【０１７１】
Ｂ．ペンタエリトリトールエトキシレート−モノ−ＰＥＧ（５ＫＤａ）−ブタン酸、メチルエステル、トリ−スクシンイミドイル炭酸
【０１７２】
【化５８】
2009527581.tif 000049
ペンタエリトリトールエトキシレート−モノ−ＰＥＧ（５  ＫＤａ）−酪酸、メチルエステル（５．０ｇ、０．００３０−ＯＨ等量）を、無水トルエン（１００ｍｌ）に溶解した。トルエンを減圧下で留去した。乾燥した生成物を無水アセトニトリル（２５ｍｌ）に溶解し、無水ピリジン（０．３４ｍｌ）およびジスクシンイミドイル炭酸（０．８５ｇ，０．００３３モル）を溶液に添加した。混合物をアルゴン環境下、室温で、一晩攪拌した。ＮＭＲ分析は、全てのヒドロキシル基が、スクシンイミドイル炭酸エステルに変換され、混合物が、残りのジスクシンイミド炭酸（０．０００３１７モル）をも含むことを示した。水（０．００５ｍｌ）を添加し、混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。次のＮＭＲ分析は、生成物が、まだ、１００％置換されているが、残りのジスクシンイミドイル炭酸が、完全に、加水分解されたことを示した。得られた溶液は、直接、次の合成ステップに使用された。
【０１７３】
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．８８ｐｐｍ（ｑ，ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯ−，生成物の１モル当り１当量），２．３７ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＣＯＯ−，生成物の１モル当り１当量），２．６９ｐｐｍ（ｓ，遊離Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドピーク），２．８２ｐｐｍ（ｓ，−０−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−ＮＨＳ，生成物の１モル当り３当量），３．３３ｐｐｍ（ｓ，−Ｃ−ＣＨ２−Ｏ−），３．６３ｐｐｍ（ｂｍ，−Ｃ−ＣＨ２−Ｏ−，−ＯＣＨ３，およびＰＥＧ骨格），３．７７ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−スクシンイミドイル炭酸，生成物の１モル当り３当量），４．４４ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−スクシンイミドイル炭酸，生成物の１モル当り３当量）
Ｃ．ＨＯ−ＰＥＧ（５ＫＤａ）−シスタミン
【０１７４】
【化５９】
2009527581.tif 000050
アセトニトリル（５０ｍｌ）中のシスタミン二塩酸塩（２．３ｇ，０．０１００モル）の懸濁液に、トリエチルアミン（２．８ｍｌ、０．０２００モル）を添加し、混合物を、アルゴン環境下、室温で、３０分、攪拌した。次に、無水アセトニトリル（５０ｍｌ）に溶解されたＨＯ−ＰＥＧ（５ＫＤａ）−スクシンイミドイル炭酸を２０分間、添加し、混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。溶媒は、減圧下で留去され、粗生成物をジクロロメタンに溶解し、０−５℃で、イソプロピルアルコールを用いて２回、沈殿させた。収率４．７ｇ．ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：２．７０ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−Ｓ−），３．０１ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＮＨ２），３．１１ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−），３．５１ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格）４．０４ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−），４．５７ｐｐｍ（−ＯＨ），７．１１ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−）。
【０１７５】
Ｄ．ジスルフィド結合の３つの腕を有する４腕ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−モノ−ブタン酸
【０１７６】
【化６０】
2009527581.tif 000051
トルエン（５０ｍｌ）中のＨＯ−ＰＥＧ（５ＫＤａ）−シスタミン（３．８ｇ、０．０００７６モル）の溶液を、減圧下、トルエンを留去することにより、共沸的に乾燥させた。乾燥した生成物は、無水アセトニトリル（５０ｍｌ）に溶解され、トリエチルアミン（０．３０ｍｌ）を添加した。次に、ペンタエリトリトールエトキシレート−モノ−ＰＥＧ（５ＫＤａ）−ブタン酸、メチルエステル、１．２ｇの固体化合物（０．０００７２スクシンイミドイル炭酸等量）を含むトリ−スクシンイミドイル炭酸を添加し、混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。溶媒を減圧下で留去した。生成物を、１００ｍｌの脱イオン水に溶解し、５％のＮａＯＨ水溶液を添加して、溶液のｐＨを１２．１に調節した。溶液をｐＨ１２．０＋／−０．１で、２時間攪拌した。次に、ＮａＣｌ（１０ｇ）を添加し、ｐＨを５％Ｈ３ＰＯ４で３．０に調節した。生成物をジクロロメタン（４０，２０、および１５ｍｌ）で抽出した。抽出物を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下で留去し、４．６ｇの白色固体の生成物を得た。
【０１７７】
ＨＰＬＣ分析は、生成物が、６６．８％の純度であり、高分子量（８．２重量％）および低分子量（２５．０重量％）の不純物を含むことを示した。
【０１７８】
生成物は、ＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦＦメディアを使用して、イオン交換クロマトグラフィーで精製され、２．１ｇの１００％純度の４ＡＲＭ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−モノ−ブタン酸を得た。ゲル透過クロマトグラフィーは、生成物の分子量が１８，６２６Ｄａであったことを示した。
【０１７９】
実施例２：トリリジンベースの４腕ＰＥＧ
Ａ．トリリジンベースの４腕−ベンジルオキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−酸
【０１８０】
【化６１】
2009527581.tif 000052
トリリジン（１．０ｇ、０．００１５１モル）を１００ｍｌの０．１Ｍホウ酸塩緩衝液に溶解し、ｐＨを０．１ＭのＮａＯＨで８．５に調節した。得られた溶液にＢｎＯ−ＰＥＧ（５ＫＤａ）−ＢＴＣ（Ｎｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、４０．０ｇ、０．００８００モル）を３０分に渡り、添加し、０．１ＭのＮａＯＨで、ｐＨを８．５に保った。得られた溶液を３時間攪拌し、ＮａＣｌ（１０ｇ）を添加し、ｐＨを１０％のリン酸で、３．０に調節した。生成物をジクロロメタンで抽出し、抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させた。次に、溶媒を減圧下で留去した。湿った生成物を真空下で乾燥させ、３９．５ｇの生成物を白色固体として得た。ＨＰＬＣ分析は、生成物であるテトラ−Ｎ−ペグ化トリリジン（ＭＷ約２０ＫＤａ）は、８６．４％純度で、高分子量（３．１重量％）および低分子量（１０．５重量％）副産物で汚染されていたことを示した。
【０１８１】
生成物を、ＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦＦメディアを使用してイオン交換クロマトグラフィーで生成し、２２．８ｇの１００％純度のトリリジンベースの４腕ベンジルオキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−酸を得た。ＭＡＬＤＩ分析は、生成物の分子量（Ｍｎ）が、２０，６６１Ｄａであったことを示した。
【０１８２】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ７−ＮＨ−，リジン，１８Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，６Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，重合体骨格），３．９５ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯＨ，リジン，１Ｈ），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，８Ｈ）４．４９ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２−，ベンジル，８Ｈ），７．３２ｐｐｍ（ｍ，ベンジル基の芳香族プロトン，２０Ｈ）。
【０１８３】
Ｂ．トリリジンベースの４腕−ベンジルオキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−酸エチルエステル
【０１８４】
【化６２】
2009527581.tif 000053
無水ジクロロメタン（２２８ｍｌ）中のトリリジンベースの４腕−ベンジルオキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−酸（２２．８ｇ、０．００１１４モル）の溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（０．１４４ｇ、０．００１２５モル）およびＮ，Ｎ′−Ｄｉクロヘキシルカルボジイミド（０．２７０ｇ、０．００１３１モル）を添加し、混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。次に、無水エチルアルコール（３０ｍｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．５００ｇ）および４−ジメチルアミノピリジン（２．５ｇ）を添加し、混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。溶媒を減圧下で留去した。生成物を３５ｍｌジクロロメタンで溶解し、６００ｍｌのイソプロピルアルコールで沈殿させ、乾燥後、２０．６ｇの白色固体を得た。
【０１８５】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．２９ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ３−，エチル，３Ｈ），１．３５ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，１８Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，６Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，重合体骨格），３．９８ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯＥｔ，リジン，１Ｈ），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，８Ｈ）４．４９ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２−，ベンジル，８Ｈ），７．３２ｐｐｍ（ｍ，ベンジル基の芳香族プロトン，２０Ｈ）。
【０１８６】
Ｃ．トリリジンベースの４腕−ＨＶｄＴオキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−酸エチルエステル
【０１８７】
【化６３】
2009527581.tif 000054
エチルアルコール（２００ｍｌ）中の４腕−ベンジルオキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−酸エチルエステル（２０．０ｇ）に、炭素（１．５ｇ、２０％Ｐｄ、約５０％水）上のパラジウムヒドロキシを添加し、混合物を４５ｐｓｉの水素下で、一晩、水素化した。混合物を盧花氏、溶媒を減圧下で留去し、１９．５ｇの白色固体の生成物を得た。
【０１８８】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．２９ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ３−，エチル，３Ｈ），１．３５ｐｐｍ（ＢＭ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，１８Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，６Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，重合体骨格），３．９８ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯＥｔ，リジン，１Ｈ），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，８Ｈ）４．５７ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，４Ｈ）。
【０１８９】
ｄ．トリリジンベースの４腕−スクシンイミドイル炭酸−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−酸，エチルエステル
【０１９０】
【化６４】
2009527581.tif 000055
無水アセトニトリル（２００ｍｌ）中のトリリジン４腕−ヒドロキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−酸、エチルエステル（１９．５ｇ、０．００３９  ＯＨ等量）を、減圧下でアセトニトリルを留去することにより共沸的に乾燥させた。乾燥した生成物を、無水アセトニトリル（２００ｍｌ）に溶解し、無水ピリジン（０．５６ｍｌ）およびジスクシンイミドイル炭酸（１．４４ｇ、０．０５６モル）を添加し、混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。次に、混合物を濾過し、溶媒を減圧下で蒸留した。粗生成物をジクロロメタン（２０ｍｌ）に溶解し、次に、イソプロピルアルコール（６００ｍｌ）を、室温で添加した。沈殿した生成物を濾過し、真空下で乾燥させ、１８．４ｇの白色固体を得た。
【０１９１】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．２９ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ３−，エチル，３Ｈ），１．３５ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，１８Ｈ），２．８４ｐｐｍ（ｓ，スクシンイミドの−ＣＨ２ＣＨ２−，１６Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，６Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，重合体骨格），３．９８ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯＥｔ，リジン，１Ｈ），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，８Ｈ），４．４６ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨＳ，８Ｈ）。
【０１９２】
実施例３：１つのジスルフィド結合を有する４腕ＰＥＧ（２０Ｋ）−モノ−ブタン酸
Ａ．ＰＥＧ（５ＫＤａ）−α−スクシンイミドイル炭酸−ω−酪酸，メチルエステル
トルエン（５００ｍｌ）中のＰＥＧ（５ＫＤａ）−α−ヒドロキシ−ω−酢酸，メチルエステル（５８．８ｇ、０．０．０１１８モル）の溶液を、減圧下でトルエンを留去することにより共沸的に乾燥させた。乾燥した生成物を、無水アセトニトリル（３００ｍｌ）に溶解し、無水ピリジン（１．５２ｍｌ）およびジスクシンイミドイル炭酸（３．９２ｇ、０．０１５３モル）を添加し、混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。溶媒を減圧下で留去した。粗生成物をジクロロメタン（１００ｍｌ）に溶解し、次に、イソプロピルアルコール（１５００ｍｌ）を、室温で添加した。沈殿した生成物を濾過し、真空下で乾燥させ、５７．０ｇの白色固体を得た。
【０１９３】
ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）：１．８２ｐｐｍ（ｑ，ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ），，２．３４ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ），２．７７ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２ＣＨ２−，スクシンイミドイル，４Ｈ），３．５８ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），４．４０ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）−，２Ｈ）。純度約１００％。
【０１９４】
Ｂ．ＰＥＧ（５ＫＤａ−α−（ε−Ｂｏｃ−リジン）−ω−ブタン酸，メチルエステル
【０１９５】
【化６５】
2009527581.tif 000056
無水アセトニトリル（５０ｍｌ）中のε−Ｂｏｃ−リジン（０．２９６ｇ，０．００１２モル）の攪拌した分散液に、トリエチルアミン（０．３５ｍｌ）を添加し、１０分後に、ＰＥＧ（５ＫＤａ）−α−スクシンイミドイル炭酸−ω−ブタン酸，メチルエステル（５．０ｇ、０．００１０モル）を添加し、反応混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。混合物を濾過し、溶媒を減圧下で留去した。湿った生成物を真空で乾燥させ、４．８ｇの白色固体を得た。
【０１９６】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５−１．５０ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ７−ＮＨ−，リジン，６Ｈ），１．３７ｐｐｍ（ｓ，−Ｃ（ＣＨ３）３，９Ｈ），１．７５ｐｐｍ（ｑ，ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ）２．３４ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ），２．８７ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ，リジン，２Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．５８ｐｐｍ（ｓ，ＣＨ３Ｏ−，３Ｈ），４．０４ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，２Ｈ），６．７５ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ−，１Ｈ），７．２７ｐｐｍ（ｄ，−ＣＨＮＨ−，１Ｈ）。ＨＰＬＣ分析は、生成物が、９２．１％の所望の構造を含んでいたことを示した。
【０１９７】
Ｃ．ＰＥＧ（５ＫＤａ）−α−（ε−Ｂｏｃ−リジン−ｃｖｓｔ）−ω−ブタン酸，メチルエステル
【０１９８】
【化６６】
2009527581.tif 000057
無水ジクロロメタン（５０ｍｌ）中のＰＥＧ（５ＫＤａ）−α−（ε−Ｂｏｃ−リシン）−ω−ブタン酸，メチルエステル（４．６９ｇ，０．０００９４モル）の溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（０．１１３ｇ、０．０００９８モル），１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．０２５ｇ、０．０００１８モル）およびＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．２１３ｇ、０．００１０３モル）を添加し、反応混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。混合物を濾過し、溶媒を減圧下で留去した。残留物を無水アセトニトリル（５０ｍｌ）に溶解し、溶液を、無水アセトニトリル（１００ｍｌ）中の攪拌したシスタミン二塩酸塩（４．６ｇ、０．０２モル）およびトリエチルアミン（５．６ｍｌ、０．０４モル）の懸濁液にゆっくり添加した。混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。次に、溶液を濾過して、溶媒を減圧下で留去した。粗生成物を含む残留物を、ジクロロメタンに溶解し、イソプロピルアルコールで沈殿させた。乾燥後、３．７９ｇを得た。
【０１９９】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５−１．５０ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，６Ｈ），１．３７ｐｐｍ（ｓ，−Ｃ（ＣＨ３）３，９Ｈ），１．７５ｐｐｍ（ｑ，ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ）２．３４ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ），２．７８ｐｐｍ（ｔ，Ｓ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２，２Ｈ），２．８７ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ２−ＮＨ，リジン，２Ｈおよび−ＣＨ２Ｓ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２，２Ｈ），（ｔ，Ｓ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２，２Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．５８ｐｐｍ（ｓ，ＣＨ３Ｏ−，３Ｈ），３．８５ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−，リジン，１Ｈ），４．０４ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，２Ｈ），６．７５ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，リジン，１Ｈ），７．２７ｐｐｍ（ｄ，−ＣＨＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，リジン，１Ｈ），８．０８ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，シスタミン，１Ｈ）。
【０２００】
Ｄ．ＰＥＧ（５ＫＤａ）−α−（リジン−シスタミン−リジン）−ω−ブタン酸，メチルエステル
【０２０１】
【化６７】
2009527581.tif 000058
無水ジクロロメタン（５０ｍｌ）中のＰＥＧ（５ＫＤａ）−α−（ε−Ｂｏｃ−リジン−シスタミン）−ω−酢酸，メチルエステル（３．７９ｇ、０．０００７６モル）の溶液に、トリエチルアミン（０．２１ｍｌ）およびＮ，Ｎ−ジ−Ｂｏｃ−リジンヒドロキシスクシンイミド（０．４３７ｇ、０．０００９８モル）を添加し、混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。溶媒を減圧下で留去した。残留物をジクロロメタンに溶解し、生成物をイソプロピルアルコールで沈殿させ、真空下で乾燥させた。生成物（５ＫＤａ）−α−（ε−Ｂｏｃ−リジン−シスタミン−ジ−Ｂｏｃ−リジン）−ω−ブタン酸，メチルエステル）をジクロロメタンおよびトリフルオロ酢酸（４０ｍｌ）の混合物（１：１）に溶解し、室温で１．５時間攪拌した。溶媒を減圧下で留去し、生成物をイソプロピルアルコールで沈殿することにより精製し、３．７５ｇの白色固体を得た。
【０２０２】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．２０−１．５０ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）Ｓ−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，１２Ｈ），１．７５ｐｐｍ（ｑ，ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ）２．３４ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ），２．７７ｐｐｍ（ｂｍ，Ｓ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ−リジン，８Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．５８ｐｐｍ（ｓ，ＣＨ３Ｏ−，３Ｈ），３．８５ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−，リジン，１Ｈ），４．０４ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−（Ｃ＝０）ＮＨ−，２Ｈ），７．２７ｐｐｍ（ｄ，−ＣＨＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−．リジン，１Ｈ），８．０８ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，シスタミン，２Ｈ）。Ｂｏｃ基は検知されなかった。
【０２０３】
Ｅ．ジスルフィド結合を１つ有する４腕ＰＥＧ（２０Ｋ）−モノ−ブタン酸
【０２０４】
【化６８】
2009527581.tif 000059
無水ジクロロメタン（８０ｍｌ）中のＰＥＧ（５ＫＤａ）−α−（ε−ｂｏｃ−リジン−シスタミン）−ω−ブタン酸，メチルエステル（２．０ｇ、０．０００４０モル）の溶液に、トリエチルアミン（０．３７ｍｌ）およびＰＥＧ（５ＫＤａ）−α−ヒドロキシ−ω−スクシンイミドイル炭酸（Ｎｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，６．６ｇ、０．００１３２モル）を添加し、混合物を、アルゴン下、室温で、一晩、攪拌した。溶媒を、減圧下で留去した。残留物を脱イオン水（２００ｍｌ）に溶解し、溶液のｐＨを０．１Ｍ  ＮａＯＨで１２に調節した。０．１Ｍ  ＮａＯＨを定期的に添加することにより、ｐＨを１２．０から１２．２に維持しながら、溶液を２時間攪拌した。次に、ＮａＣｌ（２０ｇ）を添加し、ｐＨを５％Ｈ３ＰＯ４で、３．０に調節した。生成物をジクロロメタンで抽出した。抽出物を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下で留去した。湿った生成物を真空下で乾燥させ、８．２ｇの白色固体を得た。
【０２０５】
生成物を、ＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦＦメディアを使用してイオン交換クロマトグラフィーで精製し、５．１ｇの１００％純度の４腕ＰＥＧ（２０ＫＤａ）−モノ−ブタン酸を得た。ゲル透過クロマトグラフィーは、生成物の分子量が、１７，４９３Ｄａであったことを示した。
【０２０６】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．２０−１．５０ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，１２Ｈ），１．７２ｐｐｍ（ｑ，ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ）２．４４ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ），２．７７ｐｐｍ（ｂｍ，Ｓ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ−リジン，８Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），４．０４ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，８Ｈ），４．５６ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，３Ｈ），７．１６ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，リジン，２Ｈ），７．２７ｐｐｍ（ｄ，−ＣＨＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−．リジン，２Ｈ），８．０３ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，シスタミン，２Ｈ）。
【０２０７】
実施例４．ジスルフィド結合を１つ有する４腕ＰＥＧ（２０Ｋ）
Ａ．ＨＯ−ＰＥＧ２（１０Ｋ）−ブタン酸，Ｎ−ヒドロキシルオキシスクシンイミドエステル
【０２０８】
【化６９】
2009527581.tif 000060
本明細書で使用される、ＢｎＯ−ＰＥＧ（５Ｋ）は、５，０００ダルトンの分子量を有するベンジルオキシ−ＰＥＧを意味する。
【０２０９】
ベンジルオキシ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブタン酸，メチルエステル
ＢｎＯ−ＰＥＧ（５Ｋ）−アミン（１５．０ｇ、０．００３００モル）（Ｎｅｋｔａｒ  ｔｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ、ＡＬ）、アセトニトリル（７５ｍｌ）およびトリエチルアミン（１．０ｍｌ）の混合物に、化合物９−０２（この活性前駆体の調製は、米国特許出願第２００５／０００９９８８号に記載されている。０．６７５ｇ，０．００２８４等量）を添加した。混合物を、アルゴン下、室温で、１２時間、攪拌した。次に、溶媒を減圧下で留去した。
【０２１０】
概略的に、反応は、以下の通り、表される。
【０２１１】
【化７０】
2009527581.tif 000061
ベンジルオキシ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブタン酸
ＢｎＯ−ＰＥＧ２（１０Ｋ）−ブタン酸，メチルエステルとして示される、本明細書の得られた化合物を、１５０ｍｌの蒸留水に溶解し、溶液のｐＨを５％のＮａＯＨで１２．２に調節した。溶液を１２．０から１２．２の範囲のｐＨで、１．５時間、攪拌した。次に、ＮａＣｌ（１０ｇ）を添加し、ｐＨを５％のＨ３ＰＯ４溶液を２．５に調節した。生成物をＣＨ２Ｃｌ２処理で抽出した。抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、溶媒を減圧下で留去し、１４．５ｇの固体生成物を得た。イオン交換クロマトグラフィーにより、ＢｎＯ−ＰＥＧ２（１０Ｋ）−ブタン酸８９．７％、およびＢｎＯ−ＰＥＧ（５Ｋ）アミン約６％を得た。生成物を、米国特許第５，９３２，４６２号に記載される通り、イオン交換クロマトグラフィーにより精製し、１００％の純度の生成物を得た。
【０２１２】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．７２ｐｐｍ（ｑ，ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ），２．２４ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ），３．２４ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，４Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９９ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，４Ｈ），４．４９ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２−，ベンジル，４Ｈ），７．１９ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，２Ｈ），７．３２ｐｐｍ（ｍ，ベンジルの芳香族プロトン，１０Ｈ）。
【０２１３】
ＢｎＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブタン酸，Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル
【０２１４】
【化７１】
2009527581.tif 000062
ＢｎＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブタン酸（７．７ｇ、０．０００７７０モル）（上述のとおり調製された）を、無水ジクロロメタン（１００ｍｌ）に溶解し、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（０．０９６ｇ、０．０００８３４モル）およびＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボイミド（０．１８０ｇ、０．０００８７２モル）を添加した。混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。次に、溶媒の一部を減圧下で留去し、生成物を、室温で、イソプロピルアルコールで沈殿させ、真空下で乾燥させ、６．６ｇの白色粉末を得た。
【０２１５】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．８１ｐｐｍ（ｑ，ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ）２．７０ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ），２．８１ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２ＣＨ２−，スクシンイミド，４Ｈ），３．２４ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，４Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９９ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，４Ｈ），４．４９ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２−，ベンジル，４Ｈ），７．２２ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，２Ｈ），７．３２ｐｐｍ（ｍ，ベンジルの芳香族プロトン，１０Ｈ）。
【０２１６】
ＨＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブタン酸，Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル
ＢｎＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブタン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（６．６ｇ、０．０００６６０モル）を、無水メタノール（１３０ｍｌ）に溶解し、活性炭素（０．５ｇ、２０％Ｐｄ、５６％デカン）上のＰｄ（ＯＨ）２を添加した。混合物を、４５ｐｓｉの水素下、室温で、一晩、水素化された。次に、溶媒を減圧下で留去し、生成物を真空下で乾燥させ、６．０ｇの白色固体を得た。
【０２１７】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．８１ｐｐｍ（ｑ，ＣＨ２−ＣＨ２−（ＣＯＯ−，２Ｈ），２．７０ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−ＣＯＯ−，２Ｈ），２．８１ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２ＣＨ２−，スクシンイミド，４Ｈ），３．２４ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，４Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９９ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，４Ｈ），４．５７ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，２Ｈ），７．２２ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，２Ｈ）。
【０２１８】
Ｂ．酸基をもたず、１つのジスルフィド結合を有する４腕ＰＥＧ（２０Ｋ）
【０２１９】
【化７２】
2009527581.tif 000063
シスタミン二塩酸塩（０．０５６ｇ、０．０００２５モル）、トリエチルアミン（０．２ｍｌ）および無水アセトニトリル（３０ｍｌ）の混合物に、ＨＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブタン酸，無水アセトニトリル（６０ｍｌ）中のＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（５．６ｇ、０．０００５６モル）を添加し、混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。混合物を濾過し、溶媒を減圧下で留去した。湿った生成物を真空下で乾燥させ、５．２ｇの白色固体を得た。生成物を脱イオン水に溶解し、過剰のＨＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブタン酸，Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルをＨＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブタン酸に水素化した。次に、ＨＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブタン酸を、ＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦＦメディアを使用して、イオン交換クロマトグラフィーにより除去し、純粋の、ジスルフィド結合を有する４．７ｇの４腕ＰＥＧ（２０ＫＤａ）を得た。
【０２２０】
ＮＭＲ（ｄ6−ＤＭＳＯ）：１．７２ｐｐｍ（ｑ，ＣＨ２−ＣＨ７−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−．４Ｈ），２．４４ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−（ＣＯ）ＮＨ−，４Ｈ），２．７７ｐｐｍ（ｂｍ，−Ｓ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ−，８Ｈ），３．２４ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，８Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９９ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−．８Ｈ），４．５６ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，４Ｈ），７．２２ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，４Ｈ），８．０３ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，シスタミン，２Ｈ）。
【０２２１】
実施例５．リジンベースのＰＥＧ２および１，４−ジアミノブタンから調製された４腕ＰＥＧ
【０２２２】
【化７３】
2009527581.tif 000064
Ａ．リジンベースのベンジルオキシ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）酸
【０２２３】
【化７４】
2009527581.tif 000065
リジン一塩酸塩（０．８０ｇ、０．００４３８モル）を、２００ｍｌの０．１Ｍホウ酸塩緩衝液に溶解し、ｐＨを０．１Ｍ  ＮａＯＨで調節した。得られた溶液に、ＢｎＯ−ＰＥＧ（５ＫＤａ）−ＢＴＣ（Ｎｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、５０．０ｇ、０．０１０００モル）を３０分に渡り添加し、ｐＨを０．１Ｍ  ＮａＯＨの添加により８．５に維持した。得られた溶液を３時間攪拌した後、ＮａＣｌ（２０ｇ）を添加し、ｐＨを１０％リン酸で３．０に調節した。生成物をジクロロメタンで抽出し、抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させた。次に、溶媒を減圧下で留去した。湿った生成物を真空下で乾燥させ、白色固体として４７．５ｇの生成物を得た。ＨＰＬＣ分析は、生成物であるジ−Ｎ−ペグ化リジン（ＭＷ約１０ＫＤａ）が８３．３％純度で、高分子量（２．１重量％）および低分子量（１４．６重量％）副産物で汚染させていることを示した。
生成物を、ＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦＦメディアを使用して、イオン交換クロマトグラフィーにより精製し、１００％純度のリジンベースのベンジルオキシ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）酸を得た。
【０２２４】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ２−ＮＨ−．リジン，６Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，２Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，重合体骨格），３．９５ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯＨ，リジン，１Ｈ），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，４Ｈ）４．４９ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２−，ベンジル，４Ｈ），６．７５ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，リジン，１Ｈ），７．３２ｐｐｍ（ｍ，ベンジル基の芳香族プロトンベンジル，１０Ｈ）。
【０２２５】
Ｂ．リジンベースのベンジルオキシ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）酸，Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル
【０２２６】
【化７５】
2009527581.tif 000066
リジンベースのベンジルオキシ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）酸（３０．０ｇ、０．００３００モル）（上述の通りに調製された）を、無水ジクロロメタン（５００ｍｌ）に溶解し、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（０．３６３ｇ、０．００３１５モル）およびＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボイミド（０．６８１ｇ、０．００３３０モル）を添加した。混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。次に、溶媒の一部を減圧下で留去し、室温で、イソプロピルアルコールを用いて沈殿させ、真空下で乾燥させ、２７．１ｇの白色粉末を得た。
【０２２７】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ２−ＮＨ−．リジン，６Ｈ），２．８１ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２ＣＨ２−，スクシンイミド，４Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，２Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，重合体骨格），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，４Ｈ），４．３６ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯ−，リジン，１Ｈ），４．４９ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２−，ベンジル，４Ｈ），６．７５ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，リジン，１Ｈ），７．３２ｐｐｍ（ｍ，ベンジル基の芳香族プロトン，１０Ｈ）。
【０２２８】
Ｃ．リジンベースのＨＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）酸，Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル
【０２２９】
【化７６】
2009527581.tif 000067
リジンベースのベンジルオキシ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）酸，Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（２７．０ｇ、０．００２７０モル）を、無水メタノール（５００ｍｌ）に溶解し、活性炭素（２．７ｇ、２０％Ｐｄ、５６％デカン）上のＰｄ（ＯＨ）２を添加した。混合物を４５ｐｓｉの水素下、室温で、水素化した。次に、溶媒を減圧下で留去し、生成物を真空下で乾燥させ、２４．６ｇの白色固体を得た。
【０２３０】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ２−ＮＨ−．リジン，６Ｈ），２．８１ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２ＣＨ２−，スクシンイミド，４Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，２Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，重合体骨格），３．９５ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯＨ，リジン，１Ｈ），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，４Ｈ），４．３６ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯ−，リジン，１Ｈ），４．５７ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，２Ｈ），６．７５ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，リジン，１Ｈ），７．２１ｐｐｍ（ｄ，−ＣＨＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−．リジン，１Ｈ）。
【０２３１】
Ｄ．リジンベースのＰＥＧ２および１．４−ジアミノブタンから調製された４腕ＰＥＧ
無水アセトニトリル（５０ｍｌ）中の１，４−ジアミノブタン（０．０８３ｇ、０．００１８８等量）およびトリエチルアミン（０．３ｍｌ）の溶液に、無水アセトニトリル（２００ｍｌ）中のリジンベースのＨＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（２０．０ｇ、０．００２００モル）の溶液を添加し、化合物を、アルゴン下、室温で、一晩、攪拌した。溶媒を、減圧下で留去した。湿った生成物を真空下で乾燥させ、１８．８ｇの白色固体を得た。生成物を、脱イオン水に溶解し、過剰のリジンベースのＨＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルをリジンベースのＨＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）酸に加水分解した。次に、ＨＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）酸を、ＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦＦメディアを使用して、イオン交換クロマトグラフィーにより除去し、１５．７ｇの純４腕ＰＥＧ（２０ＫＤａ）を得た。
【０２３２】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５−１．５０ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ２−ＮＨ−．リジン，１２Ｈ，および−ＮＨ−ＣＨ２−（ＣＨ２）２−ＮＨ−．４Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，４Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，重合体骨格），３．９５ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，リジン，２Ｈ），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，８Ｈ），４．５７ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，４Ｈ），６．７５ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，リジン，２Ｈ），７．２１ｐｐｍ（ｄ，−ＣＨＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−．リジン，２Ｈ），７．６０ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，１，４−ジアミノブタン，２Ｈ）。
【０２３３】
実施例６．Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓベースの４腕ＰＥＧ（２０ＫＤａ）
Ａ．リジン−グリシン−リジンベースの３腕ベンジルオキシ−ＰＥＧ（１５ＫＤａ）酸
【０２３４】
【化７７】
2009527581.tif 000068
リジン−グリシン−リジン二塩酸塩（１．０ｇ、０．００２２７モル）を、１００ｍｌの０．１Ｍホウ酸塩緩衝液に溶解し、０．１ＭのＮａＯＨでｐＨを８．５に調節した。得られた溶液に、ＢｎＯ−ＰＥＧ（５ＫＤａ）−ＢＴＣ（Ｎｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、３８．０ｇ、０．００７６０モル）を３０分にわたり添加し、０．１ＭのＮａＯＨを添加することにより、ｐＨを８．５に維持した。得られた溶液を３時間攪拌した後、ＮａＣｌ（１０ｇ）を添加し、１０％のリン酸でｐＨを３．０に調節した。生成物をジクロロメタンで抽出し、抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させた。次に、溶媒を減圧下で留去した。湿った生成物を真空下で乾燥させ、白色固体として３５．５ｇの生成物を得た。ＨＰＬＣによる分析は、生成物である３腕ベンジルオキシ−ＰＥＧ（１５ＫＤａ）酸（ＭＷ約１５ＫＤａ）が９１．１％の純度で、高分子量（２．４重量％）および低分子量（６．５重量％）副産物で汚染されていることを示した。
【０２３５】
生成物をＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦＦメディアを使用して、イオン交換クロマトグラフィーにより精製し、２７．１ｇの１００％純度のリジン−グリシン−リジンベースの３腕ベンジルオキシ−ＰＥＧ（１５ＫＤａ）酸を得た。
【０２３６】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）Ｓ−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，１２Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，４Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，重合体骨格），３．９５ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯＨ，リジン，１Ｈ），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，６Ｈ），４．４９ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２−，ベンジル，６Ｈ），７．３２ｐｐｍ（ｍ，ベンジル基の芳香族プロトン，１５Ｈ）。
【０２３７】
Ｂ．リジン−グリシン−リジンベースの４腕ベンジルオキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）酸ＮＨＳエステル
【０２３８】
【化７８】
2009527581.tif 000069
無水ジクロロメタン（２５０ｍｌ）中のリジン−グリシン−リジンベースの３腕ベンジルオキシ−ＰＥＧ（１５ＫＤａ）酸（２５．０ｇ、０．００１６７モル）に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（０．２０２ｇ、０．００１７５モル）およびＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．３７９ｇ、０．００１８４モル）を添加し、混合物を、アルゴン下、室温で、一晩、攪拌した。溶媒を減圧下で留去した。生成物を４０ｍｌのジクロロメタンに溶解し、６００ｍｌのイソプロピルアルコールで沈殿させ、乾燥後、２２．６ｇの白色固体を得た。
【０２３９】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ２−ＮＨ−．リジン，１２Ｈ），２．８１ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２ＣＨ２−，スクシンイミド，４Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，４Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，重合体骨格），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，６Ｈ），４．３６ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯ−，リジン，１Ｈ），４．４９ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２−，ベンジル，６Ｈ），７．３２ｐｐｍ（ｍ，ベンジル基の芳香族プロトン，１５Ｈ）。
【０２４０】
Ｃ．リジン−グリシン−リジンベースの４腕ベンジルオキシ−ＰＥＧ（１５ＫＤａ）
【０２４１】
【化７９】
2009527581.tif 000070
無水ジクロロメタン（２００ｍｌ）中のリジン−グリシン−リジンベースの４腕ベンジルオキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）酸、ＮＨＳエステル（２０．０ｇ、０．００１３３モル）の溶液に、トリエチルアミン（０．３７ｍｌ）を、次に、ＢｎＯ−ＰＥＧ（５Ｋ）−アミン（Ｎｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、７．５ｇ、０．００１５０モル）を添加し、混合物を、アルゴン環境下、室温で、一晩、攪拌した。溶媒を減圧下で留去し、２７．５ｇの白色固体の生成物を得た。生成物を脱イオン水に溶解し、過剰のＢｎＯ−ＰＥＧ（５Ｋ）−アミンを、ＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦＦメディアを使用して、イオン交換クロマトグラフィーにより除去し、２１．７ｇの純粋のリジン−グリシン−リジンベースの４腕ベンジルオキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）を得た。
【０２４２】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ２−ＮＨ−．リジン，１２Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン，およびＣＨ２−ＮＨ−，ＰＥＧ，６Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，ｐ重合体骨格），３．９５ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，リジン，１Ｈ），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，６Ｈ），４．４９ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２−，ベンジル，８Ｈ），７．３２ｐｐｍ（ｍ，ベンジル基の芳香族プロトン，２０Ｈ）。
【０２４３】
Ｄ．リジン−グリシン−リジンベース４腕ヒドロキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）
【０２４４】
【化８０】
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リジン−グリシン−リジンベースの４腕ベンジルオキシ−ＰＥＧ（２０ＫＤａ）（２０．０ｇ、０．００１００モル）を、無水メタノール（２００ｍｌ）に溶解し、活性炭素（１．０ｇ、２０％Ｐｄ、５６％デカン）上のＰｄ（ＯＨ）２を添加した。混合物を４５ｐｓｉの水素下、室温で、一晩、水素化した。次に、溶媒を減圧下で留去し、生成物を真空下で乾燥させ、１８．２ｇの白色固体を得た。
【０２４５】
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３５ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ７−ＮＨ−．リジン，１２Ｈ），２．９２ｐｐｍ（ｂｍ，−ＣＨ２−ＮＨ−，リジン、およびＣＨ２−ＮＨ−，ＰＥＧ，６Ｈ），３．５１ｐｐｍ（ｓ，重合体骨格），３．９５ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，リジン，１Ｈ），４．０２ｐｐｍ（ｍ，−ＯＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，６Ｈ），４．５７ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，４Ｈ）。
【国際調査報告】
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