(57)【要約】式(Ｉ)の化合物は、抗菌活性を有する：2009541289.tif 000088[式中、mは0または1であり; Qは水素またはシクロプロピルであり; Alkは、エーテル(-O-)、チオエーテル(-S-)またはアミノ(-NR)-（ここで、Rは水素、-CNまたはC1-C3アルキルである）結合を含んでいてもよく、任意に置換されていてもよい、2価のC1-C6アルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン基であり; Xは-C(=O)NR6-、-S(O)NR6-、-C(=O)O-または-S(=O)O-（ここで、R6は水素、任意に置換されていてもよいC1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、-Cycまたは-(C1-C3アルキル)-Cyc（ここで、Cycは、3〜7の環原子を有する、任意に置換されていてもよい単環式の炭素環式基もしくは複素環式基である））であり; ZはNもしくはCH、またはCFであり; R2およびR3は詳細な説明で定義されたとおりである］。【選択図】なし
2009541289.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)：
【化１】
2009541289.tif 000083
[式中、
mは0または1であり; 
Qは水素またはシクロプロピルであり;
Alkは、エーテル(-O-)、チオエーテル(-S-)またはアミノ(-NR)-（ここで、Rは水素、-CNまたはC1-C3アルキルである）結合を含んでいてもよく、任意に置換されていてもよい、2価のC1-C6アルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン基であり;
Xは-C(=O)NR6-、-S(O)NR6-、-C(=O)O-または-S(=O)O-（ここで、R6は水素、任意に置換されていてもよいC1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、-Cycまたは-(C1-C3アルキル)-Cyc（ここで、Cycは、3〜7の環原子を有する、任意に置換されていてもよい単環式の炭素環式基もしくは複素環式基である））であり;
ZはNもしくはCH、またはCFであり;
R2は基Q1-[Alk1]q-Q2-
（ここで、
qは0または1であり;
Alk1は、エーテル(-O-)、チオエーテル(-S-)もしくはアミノ(-NR)-結合を中間もしくは末端に含んでいてもよく、任意に置換されていてもよい、2価の直鎖状もしくは分枝鎖状のC1-C6アルキレン、C2-C6アルケニレンまたはC2-C6アルキニレン基であり;
Q2は、5もしくは6の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、2価の単環式の炭素環式基もしくは複素環式基であるか、または9もしくは10の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、2価の2環式の炭素環式基もしくは複素環式基であり;
Q1は水素、任意の置換基、または3〜7の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、炭素環式基もしくは複素環式である）
であり;
R3は水素以外の基Q4-[Alk2]p-[Q3]q-
（ここで、
pおよびqは独立して0または1であり;
Alk2は任意に置換されていてもよい、2価のC1-C6アルキレン、C2-C6アルケニレンまたはC2-C6アルキニレン基であり;
Q3は5もしくは6の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、2価の単環式の炭素環式基もしくは複素環式基であるか、または9もしくは10の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、2価の2環式の炭素環式基もしくは複素環式基であり;
Q4は水素、任意の置換基、または3〜7の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、炭素環式基もしくは複素環式基である）
である］
の化合物、またはその塩、水和物、溶媒和物もしくはN-オキサイドの、抗菌組成物の製造における使用。
【請求項２】
上記の化合物において、ZがCHである、請求項1に記載の使用。
【請求項３】
上記の化合物において、mが1であり、Qが水素である、請求項1または2に記載の使用。
【請求項４】
上記の化合物において、Xが-C(O)NH-である、請求項1〜3のいずれか一つに記載の使用。
【請求項５】
上記の化合物において、mが1であり、Qが水素であり、Alkが-CH2CH2-であり、Xが-C(O)NH-である、請求項1または2に記載の使用。
【請求項６】
上記の化合物の置換基R2 において、Q2が任意に置換されていてもよいピリジン、ピリミジン、ピラジンまたはピリジン-2-オン環である、請求項1〜5のいずれか一つに記載の使用。
【請求項７】
上記の化合物の置換基R2において、Q2が任意に置換されていてもよいピリジン-3-イル環、任意に置換されていてもよいピリミジン-5-イル環、任意に置換されていてもよいピラジン-2-イル環または任意に置換されていてもよいピリジン-2-オン-4-イル環である、請求項1〜5のいずれか一つに記載の使用。
【請求項８】
上記の化合物の置換基R2において、Q2における任意の置換基が、CH3-、CH3O-、-CNおよび-NH2から選択される、請求項1〜７のいずれか一つに記載の使用。
【請求項９】
上記の化合物の置換基R2において、Alk1が存在し、それが任意に置換されていてもよい2価のC1-C3アルキレン基である、請求項1〜8のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１０】
上記の化合物の置換基R2において、Alk1が存在し、それが任意に置換されていてもよい2価のC1-C3アルキレン基であり、該アルキレン基は-NH-結合を含むか、またはQ2に対して-NH-結合で任意に終結していてもよい、請求項1〜8のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１１】
Alk1が2価のC2-C3アルキレン基であり、該アルキレン基はQ2に対して-NH-結合で終結し、該-NH-結合に隣接するC原子がオキソで置換され、したがってAlk1が式-(CH2)0-2C(=O)NH-を有する、請求項10に記載の使用。
【請求項１２】
Alk1が式-(CH2)1-2NHC(=O)-を有し、該(C=O)がQ2に結合している、請求項10に記載の使用。
【請求項１３】
上記の化合物の置換基R2において、Q1が1級、2級または環式のアミノ基である、請求項9〜12のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１４】
上記の化合物の置換基R2において、Q1が式-NRARB（ここで、RAおよびRBは独立して水素、または(C1-C6)アルキル、ヒドロキシ(C1-C6)アルキルもしくは(C1-C3)アルコキシ(C1-C3)アルキル基である）の基である、請求項9〜12のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１５】
上記の化合物の置換基R2において、Q1が式-NRARB（ここで、RAおよびRBは該窒素と一緒になって環式アミノ環を形成する）の基である、請求項9〜12のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１６】
環式アミノ環がモルホリニル、ピペリジニルまたはピペラジニル環である、請求項15に記載の使用。
【請求項１７】
上記の化合物の置換基R2が、次の基：
【化２】
2009541289.tif 000084
から選択される、請求項1〜5のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１８】
上記の化合物の置換基R3において、qが1である、請求項1〜17のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１９】
上記の化合物の置換基R3において、pが1である、請求項18に記載の使用。
【請求項２０】
上記の化合物の置換基R3において、Alk2が任意に置換されていてもよい2価のC1-C3アルキレン基である、請求項19に記載の使用。
【請求項２１】
上記の化合物の置換基R3において、Q4が水素であり、pが0である、請求項18に記載の使用。
【請求項２２】
上記の化合物の置換基R3において、Q3が任意に置換されていてもよいピリジン環、任意に置換されていてもよいピリミジン環または任意に置換されていてもよいピラジン環である、請求項18〜21のいずれか一つに記載の使用。
【請求項２３】
上記の化合物の置換基R3において、Q3が任意に置換されていてもよいピリジン-2-イル環、任意に置換されていてもよいピリミジン-2-イル環または任意に置換されていてもよいピラジン-2-イル環である、請求項18〜21のいずれか一つに記載の使用。
【請求項２４】
上記の化合物の置換基R3において、Q3における任意の置換基が、CH3O-、-NH2、-CN、Cl、CH3-および-CF3から選択される、請求項1〜23のいずれか一つに記載の使用。
【請求項２５】
上記の化合物の置換基R3において、pおよびqが0であり、Q4がハロ、-CONHRA、-NHCONHRB（ここで、RAおよびRBは水素、または(C1-C6)アルキル、ヒドロキシ(C1-C6)アルキルもしくは(C1-C3)アルコキシ(C1-C3)アルキル基である）から選択される、請求項1〜17のいずれか一つに記載の使用。
【請求項２６】
上記の化合物の置換基R3が、次の基：
【化３】
2009541289.tif 000085
から選択される、請求項1〜17のいずれか一つに記載の使用。
【請求項２７】
細菌の増殖を阻害するのに十分な量の、請求項1〜26のいずれか一つで定義された化合物(I)を、汚染または潜在的な汚染の部位に適用することを含む、基体の細菌汚染を処置または予防する方法。
【請求項２８】
請求項1〜26のいずれか一つで定義された化合物の抗菌有効量を、対象に投与することを含む、細菌感染症に罹患した対象の細菌感染症を治療するか、または対象の細菌感染症を予防する方法。
【請求項２９】
置換基R3において、qが1である、請求項1で定義された式(I)の化合物、またはその塩、水和物、溶媒和物もしくはN-オキサイド。
【請求項３０】
ZがCHである、請求項29に記載の化合物。
【請求項３１】
mが1であり、Qが水素である、請求項29または30に記載の化合物。
【請求項３２】
Xが-C(O)NH-である、請求項29〜31のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項３３】
mが1であり、Qが水素であり、Alkが-CH2CH2-であり、Xが-C(O)NH-である、請求項29または30に記載の化合物。
【請求項３４】
Q2が任意に置換されていてもよいピリジン、ピリミジンもしくはピラジン環、または任意に置換されていてもよいピリジン-2-オン環である、請求項29〜33のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項３５】
Q2が任意に置換されていてもよいピリジン-3-イル環、任意に置換されていてもよいピリミジン-5-イル環、任意に置換されていてもよいピラジン-2-イル環、または任意に置換されていてもよいピリジン-2-オン-4-イル環である、請求項29〜33のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項３６】
Q2中の任意の置換基が、CH3-、CH3O-、-CNおよび-NH2から選択される、請求項29〜35のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項３７】
Alk1が存在し、それが任意に置換されていてもよい2価のC1-C3アルキレン基である、請求項29〜36のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項３８】
Alk1が存在し、それが任意に置換されていてもよい2価のC1-C3アルキレン基であり、該アルキレン基が-NH-結合を含むか、またはQ2に対して-NH-結合で任意に終結していてもよい、請求項29〜34のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項３９】
Alk1が、Q2に対して-NH-結合で終結し、該-NH-結合に隣接するC原子がオキソで置換された2価のC2-C3アルキレン基であり、したがってAlk1が式-(CH2)0-2C(=O)NH-を有する、請求項38に記載の化合物。
【請求項４０】
Alk1が式-(CH2)1-2NHC(=O)-を有し、該(C=O)がQ2に結合している、請求項38に記載の化合物。
【請求項４１】
上記の化合物の置換基R2において、Q1が1級、2級または環式のアミノ基である、請求項37〜39のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項４２】
Q1が式-NRARB（ここで、RAおよびRBは独立して水素、または(C1-C6)アルキル、ヒドロキシ(C1-C6)アルキルもしくは(C1-C3)アルコキシ(C1-C3)アルキル基である）の基である、請求項37〜40のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項４３】
Q1が式-NRARB（ここで、RAおよびRBは該窒素と一緒になって環式アミノ環を形成する）の基である、請求項37〜40のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項４４】
環式アミノ環がモルホリニル、ピペリジニルまたはピペラジニル環である、請求項43に記載の化合物。
【請求項４５】
R2が、次の基：
【化４】
2009541289.tif 000086
から選択される、請求項29〜33のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項４６】
pが1である、請求項29〜45のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項４７】
Alk2が任意に置換されていてもよい2価のC1-C3アルキレン基である、請求項46に記載の化合物。
【請求項４８】
Q4が水素であり、pが0である、請求項29〜45のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項４９】
Q3が任意に置換されていてもよいピリジン環、任意に置換されていてもよいピリミジン環、または任意に置換されていてもよいピラジン環である、請求項46〜48のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項５０】
Q3が任意に置換されていてもよいピリジン-2-イル環、任意に置換されていてもよいピリミジン-2-イル環、または任意に置換されていてもよいピラジン-2-イル環である、請求項46〜48のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項５１】
Q3における任意の置換基が、CH3O-、-NH2、-CN、Cl、CH3-および-CF3から選択される、請求項29〜50のいずれか一つに記載の化合物。
【請求項５２】
R3が、次の基：
【化５】
2009541289.tif 000087
から選択される、請求項29〜45のいずれか一つに記載の化合物物。
【請求項５３】
mが1であり、Qが水素であり、Alkが-CH2CH2-であり、Xが-C(O)NH-であり、R2が請求項45で特定されたものから選択される基であり、R3が請求項52で特定されたものから選択される基である、請求項29または30に記載の化合物。
【請求項５４】
請求項29〜53のいずれか一つに記載の化合物を、医薬的に許容される担体とともに含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、抗菌剤とし有用な置換ベンゾチアゾール類およびチアゾロピリジン類に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明の背景
II型トポイソメラーゼは、1つのDNAセグメントをもう1つのDNAセグメントを介して輸送することにより、DNAトポアイソマーの相互変換を触媒する。細菌は、2つのII型トポイソメラーゼ、DNAジャイレース（gyrase）およびDNAトポイソメラーゼIVをコード化している。ジャイレースは、DNAの超らせん化を制御し、位相的ストレスを緩和する。トポイソメラーゼIVは、娘染色体の連鎖を解き(decatenate)、次いで複製し、超らせんDNAを弛緩することもできる。
【０００３】
細菌のII型トポイソメラーゼは、2つのサブユニットから構成されるヘテロテトラマー複合体を形成する。ジャイレースは、GyrAおよびGyrBよりなるA2B2複合体を形成し、一方、トポイソメラーゼは、ParCおよびParEよりなるC2E2複合体を形成する。対照的に、真核生物のII型トポイソメラーゼはホモダイマーである。
【０００４】
理想的には、細菌のII型トポイソメラーゼの阻害に基づく抗生物質は、細菌の酵素に選択的であり、真核生物のII型イソメラーゼに対して比較的不活性ということになるであろう。II型トポイソメラーゼは、広域スペクトルの阻害剤の設計を可能にする高度に保存された(conserved)酵素である。
【０００５】
さらに、GryAおよびParEサブユニットは機能的に類似しており、他のサブユニット(GyrAおよびParCそれぞれ)およびDNAと相互作用するN-末端ドメインならびにC-末端ドメインにATPaseドメインを有する。ジャイレースとトポイソメラーゼIVの活性部位の保存は、該部位の阻害剤が両方のII型トポイソメラーゼを同時に標的とし得ることを提示している。そのような2重標的(dual-targeting)阻害剤は、標的ベース(target-based)の耐性の進展を減ずる可能性を有するので、魅力的である。
【０００６】
II型トポイソメラーゼは、多くの抗菌剤の標的である。これらの剤の中で最も著名なものはキノロン系である。初代のキノロン抗生物質は、ナリジクス酸、シノキサシンおよびオキソリン酸を含んでいた。フッ素の付加は、新しいクラスの薬物、フルオロキノリン系をもたらし、それらはより広範な抗菌スペクトルおよび改善された薬物動態学的性質を有する。
【０００７】
フルオロキノロン系は、ノルフロキサシン、シプロフロキサシン、ならびに第4世代キノロン系ガチフロキサシンおよびモキシフロキサシンを含む。
クマリン系およびシクロチアリジン系は、II型トポイソメラーゼを阻害するさらなるクラスの抗生物質であるが、それらは、細菌中への乏しい透過性、真核生物毒性、および低い水溶性のために広く用いられない。そのような抗生物質の例は、ノボビオシンおよびクメルマイシンA1、シクロチアリジン、シノジンならびにクレロシジンを含む。
【０００８】
抗生物質耐性の連続的な出現は、新規なクラスの抗生物質が開発され続けることを要求する。そのゴールを求めて、WO 02/060879、WO 03/105846およびWO 2005/012292は、細菌のジャイレース活性を阻害するベンズイミダゾールおよびピリドイミダゾール化合物に関する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかしながら、細菌のトポイソメラーゼを阻害する代替の化合物が求められている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明の概要
本発明は、置換ベンゾチアゾールおよびチアゾロピリジンのクラスが、そのクラスのメンバーによる細菌増殖の阻害によって明らかなように、抗菌活性を有することを見出したことに基づいている。
【００１１】
これらの化合物は、ブドウ球菌(staphylococci)、腸球菌(enterococci)、連鎖球菌(streptococci)、ヘモフィリス菌(haemophili)、モラクセラ菌(moraxellas)、クラミドフィラス菌(chlamydophilas)、レジオネラ菌(legionellas)およびマイコプラズマ菌(mycoplasmas)のような、例えば、黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、表皮ブドウ球菌(Staphylococcus epidermidis)、エンテロカッカス フェカリス(Enterococcus faecalis)、エンテロコッカス フェシウム(Enterococcus faecium)、肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)、化膿連鎖球菌(Streptococcus pyogenes)、インフルエンザ菌(Haemophilus influenzae)、モラクセラ カタラリス(Moraxella catarrhalis)、クラミドフィラ ニューモニア(Chlamydophila pneumonia)、レジオネラ ニューモフィラ(Legionella pneumophila)およびマイコプラズマ ニューモニアエ(Mycoplasma pneumoniae)のようなグラム陽性、グラム陰性および非定型な細菌の菌株に対して活性を示す。
【００１２】
それゆえ、本発明に係る化合物は、細菌感染症および細菌汚染の処置、例えば、特にグラム陽性感染症および院外感染性肺炎の治療に有用である。
【００１３】
本発明は、これらの化合物の作用メカニズムに関するあらゆる特定の仮説によって限定されないけれども、そのような活性は、少なくとも一部は、本化合物がII型細菌トポイソメラーゼを阻害することによると、現在のところ信じられている。
【００１４】
それゆえ、本発明は、本明細書中で定義される置換ベンゾチアゾールおよびチアゾロピリジン化合物のクラスおよびそのクラスの化合物の新規なメンバーの抗菌的使用を含む。
【００１５】
国際特許出願番号WO 2001057008は、癌および血管新生が有力なメカニズムである病状の治療に有用である前記ベンゾチアゾールに関する。該文献は、それに係る化合物が抗菌活性を有することを述べるかまたは暗示していないし、それは本明細書中でクレームされている置換ベンゾチアゾールおよびチアゾロピリジン化合物も開示していない。
【００１６】
本発明の記述
本発明によれば、式(I)：
【化１】
2009541289.tif 000003
【００１７】
[式中、
mは0または1であり; 
Qは水素またはシクロプロピルであり;
Alkは、エーテル(-O-)、チオエーテル(-S-)またはアミノ(-NR)-（ここで、Rは水素、-CNまたはC1-C3アルキルである）結合を含んでいてもよく、任意に置換されていてもよい、2価のC1-C6アルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン基であり;
Xは-C(=O)NR6-、-S(O)NR6-、-C(=O)O-または-S(=O)O-（ここで、R6は水素、任意に置換されていてもよいC1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、-Cycまたは-(C1-C3アルキル)-Cyc（ここで、Cycは、3〜7の環原子を有する、任意に置換されていてもよい単環式の炭素環式基もしくは複素環式基である））であり;
【００１８】
ZはNもしくはCH、またはCFであり;
R2は基Q1-[Alk1]q-Q2-
（ここで、
qは0または1であり;
Alk1は、エーテル(-O-)、チオエーテル(-S-)もしくはアミノ(-NR)-結合を中間もしくは末端に含んでいてもよく、任意に置換されていてもよい、2価の直鎖状もしくは分枝鎖状のC1-C6アルキレン、C2-C6アルケニレンまたはC2-C6アルキニレン基であり;
Q2は、5もしくは6の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、2価の単環式の炭素環式基もしくは複素環式基であるか、または9もしくは10の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、2価の2環式の炭素環式基もしくは複素環式基であり;
Q1は水素、任意の置換基、または3〜7の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、炭素環式基もしくは複素環式である）
であり;
【００１９】
R3は水素以外の基Q4-[Alk2]p-[Q3]q-
（ここで、
pおよびqは独立して0または1であり;
Alk2は任意に置換されていてもよい、2価のC1-C6アルキレン、C2-C6アルケニレンまたはC2-C6アルキニレン基であり;
Q3は5もしくは6の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、2価の単環式の炭素環式基もしくは複素環式基であるか、または9もしくは10の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、2価の2環式の炭素環式基もしくは複素環式基であり;
Q4は水素、任意の置換基、または3〜7の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、炭素環式基もしくは複素環式基である）
である］
の化合物、またはその塩、水和物、溶媒和物もしくはN-オキサイドの、抗菌組成物の製造における使用が提供される。
【００２０】
その他の広い観点において、本発明は、
(i) 細菌の増殖を阻害するのに十分な量の、上で定義した化合物(I)を、対象に投与することを含む、細菌感染症に罹患した対象の細菌感染症を治療するか、または対象の細菌感染症を予防する方法；
(ii) 細菌の増殖を阻害するのに十分な量の、上で定義した化合物(I)を、汚染または潜在的な汚染の部位に適用することを含む、基体の細菌汚染を処置または予防する方法；
(iii) 人体の治療方法に用いるための、上で定義した化合物(I)；
(iv) 細菌感染症の治療または予防に用いるための、上で定義した化合物(I)
を含む。
【００２１】
置換基R3におけるqが1である、上で定義した式(I)の化合物、その塩、水和物、溶媒和物およびN-オキサイドは、それ自身は新規であると信じられるので、それらは本発明のもう一つの観点を形成する。
【００２２】
具体的には、Q2が任意に置換されていてもよいピリジン、ピリミジンもしくはピラジン環、または任意に置換されていてもよいピリジン-2-オン環である化合物が、本発明の観点を形成する。
【００２３】
用語
本明細書で用いられる用語、「(Ca-Cb)アルキル」(ここで、aおよびbは整数である)は、a〜bの炭素原子を有する直鎖または分枝鎖状のアルキル基をいう。したがって、aが1でbが6である場合、例えば、該用語は、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、t-ブチル、n-ペンチルおよびn-ヘキシルを含む。
【００２４】
本明細書で用いられる用語、「2価の(Ca-Cb)アルキレン基」(ここで、aおよびbは整数である)は、a〜bの炭素原子および2つの未飽和原子価を有する飽和炭化水素鎖をいう。該用語は、例えば、メチレン、エチレン、n-プロピレンおよびn-ブチレンを含む。
【００２５】
本明細書で用いられる用語、「(Ca-Cb)アルケニル」(ここで、aおよびbは整数である)は、a〜bの炭素原子を有し、該当する場合にはEまたはZ立体化学のいずれかの2重結合の少なくとも一つを有する、直鎖または分枝鎖状のアルケニル部分をいう。該用語は、例えば、ビニル、アリル、1-および2-ブテニル、ならびに2-メチル-2-プロペニルを含む。
【００２６】
本明細書で用いられる用語、「2価の(Ca-Cb)アルケニレン基」は、a〜bの炭素原子、少なくとも一つの2重結合、および二つの未飽和原子価を有する炭化水素鎖を意味する。該用語は、例えば、-CH=CH-(ビニレン)、-CH=CH-CH2-、-CH2-CH=CH-、-CH=CH-CH2-CH2-、-CH=CH-CH2-CH2-CH2-、-CH=CH-CH=CH-、-CH=CH-CH=CH-CH2-、-CH=CH-CH=CH-CH2-CH2-、-CH=CH-CH2-CH=CH-、および-CH=CH-CH2-CH2-CH=CH-を含む。
【００２７】
本明細書で用いられる用語、「Ca-Cbアルキニル」(ここで、aおよびbは整数である)は、a〜bの炭素原子を有し、加えて少なくとも一つの3重結合を有する直鎖または分枝鎖状の炭化水素基をいう。該用語は、例えば、エチニル、1-プロピニル、1-および2-ブチニル、2-メチル-2-プロピニル、2-ペンチニル、3-ペンチニル、4-ペンチニル、2-ヘキシニル、3-ヘキシニル、4-ヘキシニルならびに5-ヘキシニルを含み得る。
【００２８】
本明細書で用いられる用語、「2価の(Ca-Cb)アルキニレン基」(ここで、aおよびbは整数である)は、a〜bの炭素原子および少なくとも一つの3重結合を有する2価の炭化水素鎖をいう。該用語は、例えば、-C≡C-、-C≡C-CH2-、および-CH2-C≡CH-を含む。
【００２９】
本明細書で用いられる用語、「炭素環式」は、環原子が全て炭素である、16までの環原子を有する単環、2環または3環式基をいい、アリールおよびシクロアルキルを含む。
【００３０】
本明細書で用いられる用語、「シクロアルキル」は、3〜8の炭素原子を有する単環式の飽和炭素環式基をいい、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルおよびビシクロ[2.2.1]ヘプト-1-イルを含む。
【００３１】
本明細書で用いられる非限定的な用語、「アリール」は、単環、2環または3環式の炭素環式芳香族基をいい、共有結合により直接連結された二つの単環式の炭素環式芳香族環を有する基を含む。そのような基の例は、フェニル、ビフェニルおよびナフチルである。
【００３２】
本明細書で用いられる非限定的な用語、「ヘテロアリール」は、S、NおよびOから選択される一つ以上のヘテロ原子を含む単環、2環または3環式の芳香族基であり、そのような二つの単環式環を有する基、またはそのような一つの単環式環と一つの単環式アリール環を含み、それらは共有結合により直接連結される。そのような基の例は、チエニル、ベンゾチエニル、フリル、ベンゾフリル、ピロリル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、イソチアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、ベンズオキサゾリル、イソオキサゾリル、ベンズイソオキサゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、ベンゾトリアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリルおよびインダゾリルである。
【００３３】
本明細書で用いられる非限定的な用語、「ヘテロサイクリル(heterocyclyl)」または「複素環式」は、上で定義した「ヘテロアリール」を含み、その非芳香族の意味において、S、NおよびOから選択される一つ以上のヘテロ原子を含む単環、2環または3環式の非芳香族基、ならびにそのような一つ以上のヘテロ原子を含み、そのようなもう一つの基もしくは単環式の炭素環式基と共有的に結合した単環式の非芳香族基からなる基に関する。
【００３４】
そのような基の例は、アゼチジニル、ピロリル、フラニル、チエニル、ピペリジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピロリジニル、ピリミジニル、モルホリニル、ピペラジニル、インドリル、モルホリニル、ベンゾフラニル、ピラニル、イソオキサゾリル、ベンズイミダゾリル、メチレンジオキシフェニル、エチレンジオキシフェニル、マレイミドおよびスクシンイミド基である。
【００３５】
本明細書で特に特定されていない限り、ここで用いられている用語、「置換(された)」は、四つまでの共存可能な置換基で置換されていることを意味し、それらは独立して、例えば、(C1-C6)アルキル、(C2-C6)アルケニル、(C2-C6)アルキニル、(C1-C6)アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシ(C1-C6)アルキル、(C1-C3)アルコキシ(C1-C3)アルキル、メルカプト、メルカプト(C1-C6)アルキル、(C1-C6)アルキルチオ、ハロ(フルオロ、ブロモおよびクロロを含む)、完全にまたは部分的にフッ素化された(C1-C3)アルキル、(C1-C3)アルコキシもしくは(C1-C3)アルキルチオ(例えばトリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、およびトリフルオロメチルチオのような)、ニトロ、ニトリル(-CN)、オキソ(=O)、フェニル、フェニル(C1-C3)アルキル-、フェノキシ、5もしくは6の環原子を有する単環式のヘテロアリール、ヘテロアリール(C1-C3)アルキル-もしくはヘテロアリールオキシ、3〜6の環炭素原子を有するシクロアルキル、-COORA、-CORA、-OCORA、-SO2RA、-CONRARB、-CONHNH2、-SO2NRARB、-NRARB、-NHNH2、-OCONRARB、-NRBCORA、-NRBCOORA、-NRBSO2ORAまたは-NRACONRARB(ここで、RAおよびRBは独立して水素または(C1-C6)アルキル、ヒドロキシ(C1-C6)アルキルもしくは(C1-C3)アルコキシ(C1-C3)アルキル基であるか、またはRAおよびRBが同じN原子に結合している場合には、RAおよびRBはその窒素と一緒になって、モルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル、または4-メチルピペラジニルのような4-(C1-C6)アルキル-ピペリジニルのような環式アミノ環を形成していてもよい)である。
【００３６】
置換基がフェニル、フェニル(C1-C3)アルキル-、フェノキシ、または5もしくは6の環原子を有する単環式のヘテロアリール、ヘテロアリール(C1-C3)アルキル-もしくはヘテロアリールオキシである場合、それらのフェニルもしくはヘテロアリール環は、それら自体が、フェニル、フェニル(C1-C3)アルキル-、フェノキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリール(C1-C3)アルキル-またはヘテロアリールオキシ以外の上記の置換基のいずれかで置換されていてもよい。「任意の置換基」または「置換基」は上記で特定された基の一つであり得る。
【００３７】
本明細書で用いられる用語、「塩」は、塩基付加塩、酸付加塩および四級塩を含む。酸性である本発明の化合物は、アルカリ金属水酸化物(例えば、ナトリウムおよびカリウムの水酸化物)；アルカリ土類金属水酸化物(例えば、カルシウム、バリウムおよびマグネシウムの水酸化物)のような塩基；有機塩基(例えば、N-メチル-D-グルカミン、コリントリス(ヒドロキシメチル)アミノ-メタン、L-アルギニン、L-リジン、N-エチルピペリジン、ジベンジルアミン等)と塩(医薬的に許容される塩を含む)を形成することができる。
【００３８】
塩基であるこれらの化合物(I)は、無機酸(例えば、塩酸もしくは臭化水素酸のようなハロゲン化水素酸、硫酸、硝酸もしくはリン酸等)、および有機酸(例えば、酢酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、サリチル酸、クエン酸、メタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、安息香酸、ベンゼンスルホン酸、グルタミン酸、乳酸、およびマンデル酸等)と塩(医薬的に許容される塩を含む)を形成することができる。
適当な塩の総説には、StahlおよびWermuthによるHandbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use (Wiley-VCH,Weinheim, Germany, 2002)を参照されたい。
【００３９】
用語「溶媒和物」は、本発明の化合物および一つ以上の化学量論量の医薬的に許容される溶媒分子(例えば、エタノール)を含む分子複合体を示すのに本明細書で用いられる。用語「水和物」は、該溶媒が水である場合に用いられる。
【００４０】
一つ以上の実質的または潜在的なキラル中心を含む本発明の化合物は、不斉炭素原子が存在するために、各キラル中心においてRもしくはSの立体化学を有する数多くのジアオステレオマーとして存在することができる。本発明はそのようなジアオステレオマーおよびそれらの混合物をすべて含む。
【００４１】
構造的特徴
本発明に係る化合物は、例えば、あらゆる両立できる組合せで、以下の特徴を有し得る：
ZはNもしくはCH、またはCFである。現在のところ、ZがCHであることが好ましく、それゆえ、化合物(I)は置換ベンゾチアゾールである。
【００４２】
Xは、例えば-C(O)O-または-C(O)NH-であり得る。このサブクラスにおいて、mは0であり、Qは、例えば水素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルであり得る。
また、このサブクラスにおいて、mは1であり、Qは、存在するAlk、例えば-CH2-、-(CH2)2-または-(CH2)3-と一緒になって水素であり得る。現在のところ、mが1であるとき、Xが-C(O)NH-であり、Alkが-(CH2)2-であり、Qが水素であることが好ましい。
【００４３】
R3は水素以外の基Q4-[Alk2]p-[Q3]q-である。いくつかの実施態様において、qは1であり、pは0または1である。他の実施態様において、qは0であり、pは0または1である。
【００４４】
存在する（すなわちpが1である）とき、Alk2は、任意に置換されていてもよい2価のC1-C6アルキレンまたはC2-C6アルケニレンまたはC2-C6アルキニレン基、例えば任意に置換されていてもよい-CH2-、-CH(OH)-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH=CH-、-C≡C-、-CH2CH=CH-、-CH2C≡C-である。現在のところ、任意に置換されていてもよい2価のC1-C3アルキレン基が好ましい。
【００４５】
存在するとき、Q3は、5もしくは6の環原子を有する、任意に置換されていてもよい2価の単環式炭素環式基、もしくは任意に置換されていてもよい複素環式基、または9もしくは10の環原子を有する、任意に置換されていてもよい2価の2環式の炭素環式もしくは複素環式基である。
そのような基の例は、任意に置換されていてもよい、チエニル、ベンゾチエニル、フリル、ベンゾフリル、ピロリル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、イソチアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、ベンズオキサゾリル、イソオキサゾリル、ベンズイソオキサゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、ベンゾトリアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリル、インダゾリル、アゼチジニル、ピロリル、フラニル、チエニル、ピペリジニル、イミダゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピロリジニル、ピリミジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、インドリル、モルホリニル、ベンゾフラニル、ピラニル、イソオキサゾリル、ベンズイミダゾリル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、およびナフチル環を有するものを含む。
【００４６】
Q4は、水素、任意の置換基、または3〜7の環原子を有し、任意に置換されていてもよい炭素環もしくは複素環である。任意の置換基は、用語「任意の置換基」で述べた、前で特定されたものを含む。3〜7の環原子を有する炭素環もしくは複素環は、前段落で列挙された単環式の環、ならびにシクロペンチルおよびホモピペラジニル環を含む。
【００４７】
現在のところ、Q3が存在する（すなわちqが1である）ことが好ましく、そのような場合、Q3は、例えば、任意に置換されていてもよいピリジン-2-イル環、任意に置換されていてもよいピリミジン-2-イル環、または任意に置換されていてもよいピラジン-2-イル環のような、任意に置換されていてもよいピリジン環、任意に置換されていてもよいピリミジン環、または任意に置換されていてもよいピラジン環であり得る。Q3における任意の置換基は、CH3O-、-NH2、-CN、Cl、CH3-、および-CF3含む。
【００４８】
pおよびqがそれぞれ0である態様において、Q4は、例えばクロロもしくはブロモのようなハロ、-CONHRA、-NHCONHRB（ここで、RAおよびRBは水素または(C1-C6)アルキル、ヒドロキシ(C1-C6)アルキルもしくは(C1-C3)アルコキシ(C1-C3)アルキル基である）のような、前で特定された任意の置換基の一つであり得る。
【００４９】
現在のところ、好ましいR3基は次の：
【化２】
2009541289.tif 000004
を含む。
【００５０】
R2は基Q1-[Alk1]q-Q2-である。
【００５１】
存在するとき、Alk1は、エーテル(-O-)、チオエーテル(-S-)もしくはアミノ(-NR)-結合を中間もしくは末端に含んでいてもよく、任意に置換されていてもよい、2価の直鎖状もしくは分枝鎖状のC1-C6アルキレン、C2-C6アルケニレンまたはC2-C6 アルキニレン基である。そのような基の例は、-CH2-、-CH(OH)-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH=CH-、-C≡C-、-CH2CH=CH-、-CH2C≡C-、-CH2NH-、-C(=O)NH-、-CH2OCH2-、-CH2CH2C(=O)NH-を含む。
【００５２】
Q2は、5もしくは6の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、2価の単環式の炭素環式基もしくは複素環式基であるか、または9もしくは10の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、2価の2環式の炭素環式基もしくは複素環式基である。そのような基の例は、基Q3で述べた、前で特定されたものを含む。
【００５３】
Q1は水素、任意の置換基、または3〜7の環原子を有し、任意に置換されていてもよい、炭素環式基もしくは複素環式基である。そのような基の例は、基Q4で述べた、前で特定されたものを含む。
【００５４】
基R2において、Q2は、任意に置換されていてもよい2価のピリドニル、ピリジル、ピラゾリル、ピリミジニル、チアゾリルまたはピロリル基のような、5もしくは6の環原子を有し、任意に置換されていてもよい2価の窒素含有複素環式基であり得るか、または存在するとき、Q2は、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリルもしくは5-アザインドリルのような9もしくは10の環原子を有する、2価の窒素含有の2環式の炭素環式基もしくは複素環式基であり得る。
【００５５】
現在のところ、好ましいQ2環は、任意に置換されていてもよいピリジン-3-イル環、任意に置換されていてもよいピリミジン-5-イル環、任意に置換されていてもよいピラジン-2-イル環、または任意に置換されていてもよいピリジン-2-オン-4-イル環のような、任意に置換されていてもよいピリジン、ピリミジン、ピラジンもしくはピリミジン-2-オン環を含む。現在のところ、Q2における好ましい任意の置換基は、CH3-、CH3O-、-CNおよび-NH2を含む。
【００５６】
基R2において、qは0または1である。qが1であるとき、Alk1は存在し、それは、例えば、-NH-結合を任意に含み得るか、またはQ2に対して-NH-結合で任意に終結し得る、任意に置換されていてもよい2価のC1-C3アルキレン基である。
特別な場合、Alk1は、Q2に対して-NH-結合で終結し、該-NH-結合に隣接するC原子がオキソで置換された2価のC2-C3アルキレン基であり、したがってAlk1は式-(CH2)0-2C(=O)NH-を有する。他の場合、Alk1は、(C=O)がQ2に結合した式-(CH2)1-2NHC(=O)-を有する。
【００５７】
基R2において、Q1は、例えば水素、または前で特定された任意の置換基であり得る。いくつかの態様において、Q1は式-NRARB（ここで、RAおよびRBは独立して水素、または(C1-C6)アルキル、ヒドロキシ(C1-C6)アルキルもしくは(C1-C3)アルコキシ(C1-C3)アルキル基であるか、またはRAおよびRBは窒素と一緒になって環式アミノ環、例えばピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、アゼチジン、ピロリジンまたはピペラジン環を形成し、後者はNがC1-C3アルキルで任意に置換されてもよい）の基である。
【００５８】
現在のところ、好ましいR2基は、次の：
【化３】
2009541289.tif 000005
を含む。
【００５９】
有用性および組成物
前記のように、本発明に係る化合物は抗菌活性であり、それゆえ、局所の抗菌消毒剤として、またはヒトおよびヒト以外の動物（例えば、他の哺乳類、鳥および魚）における微生物感染症の治療に有用である。本発明化合物の標的であるII型トポイソメラーゼは、細菌に共通の酵素であるので、本発明の化合物は、種々の細菌の種、ブドウ球菌、腸球菌、連鎖球菌、ヘモフィリス菌、モラクセラ菌、クラミドフィラス菌、レジオネラ菌およびマイコプラズマ菌のような、例えば、黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、エンテロカッカス フェカリス、エンテロコッカス フェシウム、肺炎連鎖球菌、化膿連鎖球菌、インフルエンザ菌、モラクセラ カタラリス、クラミドフィラ ニューモニア、レジオネラ ニューモフィラおよびマイコプラズマ ニューモニアエのような種々のグラム陽性および／またはグラム陰性のクラスならびに非定型な細菌の増殖を阻害する。
それゆえ、本発明に係る化合物は、細菌感染症または細菌汚染の処置、例えば、特にグラム陽性感染症および院外感染性肺炎の処置に有用である。
【００６０】
任意の特定の患者に対する具体的な用量レベルは、用いる特定化合物の活性、患者の年齢、体重、身体全体の健康、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄の速度、薬物の組合せおよび治療を受ける特定の疾患の重篤度を含む種々の要因に左右されると理解されるであろう。投与量の最適な用量レベルおよび回数は、当該分野において要求される臨床試験により決定されるであろう。
【００６１】
本発明に係る化合物は、それらの薬物動態学的性質に矛盾しない任意の経路による投与用に製造され得る。経口的に投与可能な組成物は、経口、局所、または無菌の非経口の溶液または懸濁液のような、錠剤、カプセル剤、粉末、顆粒、トローチ、液体またはゲル製剤の形状であり得る。
【００６２】
経口投与用の錠剤およびカプセル剤は、単位用量提示形態であり得、慣用の賦形剤：結合剤(例えば、シロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、またはポリビニル-ピロリドン)；充填剤(例えば、乳糖、砂糖、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、ソルビトールまたはグリシン)；打錠用滑沢剤(例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコールまたはシリカ)；崩壊剤(例えば、馬鈴薯デンプン)、または許容される湿潤剤(例えば、ラウリル硫酸ナトリウム)を含有していてもよい。錠剤は、通常の製薬実務で周知の方法に従ってコーティングされていてもよい。
【００６３】
経口液体製剤は、例えば水性もしくは油性の懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップまたはエリキシルの形状であってもよいし、あるいは使用前に水または他の適切な媒体で溶解する乾燥製品として提示されてもよい。そのような液体製剤は、慣用の添加剤：懸濁化剤(例えば、ソルビトール、シロップ、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン食用硬化油脂)；乳化剤(例えば、レシチン、ソルビタンモノオレエート、またはアカシア)；非水性媒体(食用油を含み得る)(例えば、アーモンド油、ヤシ油、グリセリンのような油状エステル、プロピレングリコール、またはエチルアルコール)；防腐剤(例えば、p-ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピルまたはソルビン酸)、および所望により慣用の矯味矯臭剤または着色剤を含有していてもよい。
【００６４】
皮膚への局所適用のためには、薬物は、クリーム、ローションまたは軟膏に調合し得る。薬物に使用し得るクリーム製剤または軟膏製剤は、当該分野において周知の慣用の製剤であり、例えば英国薬局方のような薬学の標準的な教科書に記載されるものである。
【００６５】
眼への局所適用のためには、薬物は、適切な無菌の水性または非水性媒体中の溶液または懸濁液に調合し得る。添加剤、例えば緩衝液[例えば、メタ重亜硫酸ナトリウムまたはエディト酸ジナトリウム]；殺菌剤および殺真菌剤(例えば、酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、塩化ベンザルコニウムまたはクロルヘキシジン)を含む防腐剤、および増粘剤(例えばヒプロメロース)も含まれ得る。
【００６６】
活性成分は、無菌媒体中で非経口的に投与されてもよい。使用する媒体および濃度によって、薬物は媒体中に懸濁または溶解のいずれかにできる。有利には、佐剤、例えば局所麻酔剤、防腐剤および緩衝化剤を媒体に溶解することができる。
【００６７】
合成および実施例化合物
本発明に係る化合物(I)の合成には複数の合成方法が存在するが、その全てが合成有機化学者に公知である既存の化学に基づく。したがって、式(I)に係る化合物は、標準的な文献に記載され、当業者に周知の手順に従い合成することができる。代表的な文献は、「Advanced organic chemistry」第４版(Wiley)、J March；「Comprehensive Organic Transformation」第２版(Wiley)、R.C．Larock；「Handbook of Heterocyclic Chemistry」第２版(Pergamon)、A.R．Katritzky；「Synthesis」、「Acc．Chem．Res.」、「Chem．Rev」に見られるような総説論文、もしくは標準的なオンライン文献検索により特定される一次文献ソース、または「Chemical Abstracts」もしくは「Beilstein」のような二次文献ソースからである。
【実施例】
【００６８】
化合物(I)の製造のための合成アプローチおよびスキームの例は、本明細書の実施例で示される。
本発明が、以下の実施例を参照することにより、ここに説明される。
【００６９】
略語
DMF      −N,N-ジメチルホルムアミド
DMSO     −ジメチルスルホキシド
HPLC-MS  −高性能液体クロマトグラフィー-質量分析
NMR      −核磁気共鳴
Rt       −保持時間
THF      −テトラヒドロフラン
【００７０】
スキーム1
【化４】
2009541289.tif 000006
【００７１】
工程1.  4-ブロモ-2-ヨード-6-ニトロアニリン
エタノール(300ml)中に溶解したヨウ素(17.6g, 0.0692 mol)に、4-ブロモ-2-ニトロアニリン(14.3g, 0.0659 mol)を一度に加え、続いて硫酸銀(I)(20.4g, 0.0659 mol)を加えた。室温で18時間撹拌後、反応体(the reaction)を濾過し、得られた固体を、全ての橙色の物質が溶解するまで、ジクロロメタンで洗浄した。合わせた濾液を真空下に蒸発させ、得られた固体をジエチルエーテル／40-60 石油エーテル(1:1)で洗浄し、濾過して、4-ブロモ-2-ヨード-6-ニトロアニリンを橙色の固体(19.8 g, 88%)として得、それをさらに精製することなく用いた。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3): 6.15(2H,br s), 8.00(1H,s), 8.42(1H,s)
【００７２】
工程2.  3-ブロモ-5-ヨードニトロベンゼン
撹拌した濃硫酸(60 ml)に、0〜5℃に温度を保ちながら、4-ブロモ-2-ヨード-6-ニトロアニリン(5 g, 0.0145 mol)を少しずつ加えた。冷却下で1時間撹拌後、亜硝酸ナトリウム(2.3 g, 0.0326 mol)を加え、反応混合物を冷却下でさらに2時間撹拌した。次いで、反応混合物を氷(250 ml)に注いだ。得られた混合物を、エタノール(150 ml)中の硫酸銅(II)(0.36 g, 0.00145 mol)の沸騰溶液に少しずつ加え、さらに2時間沸騰させた。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチル(300 ml)で抽出し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液(250 ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)した。溶媒を真空下に除去し、3-ブロモ-5-ヨードニトロベンゼンを黄色の固体(4.21 g, 88 %)として得、それをさらに精製することなく用いた。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3): 8.18(1H,s), 8.34(1H,s), 8.50(1H,s)
【００７３】
工程3.  3-ブロモ-5-ヨードアニリン
氷酢酸(50 ml)中の3-ブロモ-5-ヨードニトロベンゼン(4.21 g, 0.0128 mol)および鉄粉(3.6g, 0.0642 mol)の混合物を、室温で16時間撹拌した。次いで、反応混合物をセライトのパッドにより濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を真空下に蒸発させ、褐色の油状物を得た。これを酢酸エチルに再溶解し、シリカの大きなパッド上に装填し、酢酸エチルで溶出した。濾液を真空下に蒸発させ、3-ブロモ-5-ヨードアニリンを褐色の固体(3.67g, 96%)として得、それをさらに精製することなく用いた。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3): 3.72(2H,br s), 6.77(1H,s), 6.95(1H,s), 7.21(1H,s)
【００７４】
工程4.  1-ベンゾイル-3-(3-ブロモ-5-ヨードフェニル)-チオウレア
無水アセトン(48 ml)中のアンモニウムチオシアネート(4.45g, 0.0585 mol)の溶液を、塩化ベンゾイル(6.47 ml, 0.05583 mol)で滴下処理し、室温で1時間撹拌した。次いで、無水アセトン(48 ml)中の3-ブロモ-5-ヨードアニリン(15.85g, 0.05319 mol)の溶液を一度に加え、混合物を室温で16時間撹拌した。得られた懸濁液を水(300 ml)に注ぎ、0.5時間撹拌した。沈殿した固体を濾取し、水、続いて40-60°の石油エーテルで洗浄し、真空下に乾燥し、1-ベンゾイル-3-(3-ブロモ-5-ヨード-フェニル)-チオウレア(20.70 g, 84 %)を得た。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3): 7.56(2H,m), 7.67(1H,m), 7.76(1H,s), 7.90(2H,d), 7.99(1H,s), 8.05(1H,s), 9.17(1H,br s), 12.70(1H,br s)
【００７５】
工程5.  (3-ブロモ-5-ヨード-フェニル)-チオウレア
メタノール(303 ml)中の1-ベンゾイル-3-(3-ブロモ-5-ヨードフェニル)-チオウレア(20.70 g, 0.0449 mol)の撹拌懸濁液をナトリウムメトキサイド(2.42g, 0.0449 mol)で処理し、室温で4時間撹拌した。得られた懸濁液を減圧下で蒸発乾固した。残渣を水(500 ml)と混合し、酢酸エチル(3×200ml)で抽出し、乾燥(MgSO4)し、溶媒を真空下に除去し、残渣を得た。それを40-60°の石油エーテル／ジエチルエーテル(1:1)で摩砕して、(3-ブロモ-5-ヨードフェニル)-チオウレアをオフホワイトの固体(14.35 g, 89 %)として得た。
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 7.67(1H,s), 7.83(1H,s), 7.89(1H,s), 9.87(1H,br s)
【００７６】
工程6.  7-ブロモ-5-ヨード-ベンゾチアゾール-2-イルアミンおよび5-ブロモ-7-ヨード-ベンゾチアゾール-2-イルアミン
クロロホルム(65 ml)中の(3-ブロモ-5-ヨード-フェニル)-チオウレア(2.83g, 0.00723 mol)の撹拌懸濁液を臭素(1.16g, 0.4 ml, 0.00723 mol)で処理し、還流下に5時間沸騰させた。室温に冷却後、混合物をエーテル(200 ml)で希釈した。固体の物質を濾取し、炭酸水素ナトリウム水溶液(200 ml)、続いて水(200 ml)で洗浄し、真空下に乾燥して、7-ブロモ-5-ヨード-ベンゾチアゾール-2-イルアミンおよび5-ブロモ-7-ヨード-ベンゾチアゾール-2-イルアミンの1:1混合物(2.87g, 100 %)を得、それをさらに精製することなく用いた。
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 3.40(2H,br s), 7.50-7.95(2H,m)
【００７７】
工程7.  1-(7-ブロモ-5-ヨード-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレアおよび1-(5-ブロモ-7-ヨード-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア
工程6からの生成物(2.87g, 0.00808 mol)、無水1,4-ジオキサン(95 ml)、エチル イソシアネート(2.87g, 3.2 ml, 0.0404 mol)およびジブチル錫ジアセテート(0.2 ml)の撹拌混合物を100℃で16時間加熱した。室温に冷却後、反応混合物を蒸発乾固し、残渣をジエチルエーテル(250 ml)で摩砕した。固体の物質を濾取し、真空下に乾燥し、1-(7-ブロモ-5-ヨード-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレアおよび1-(5-ブロモ-7-ヨード-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレアの1:1混合物を白色の固体(2.17 g, 63 %)として得、それをさらに精製することなく用いた。
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 1.12(3H,m), 3.23(2H,m), 6.77(1H,br t), 7.72-8.00(2H,m)
【００７８】
工程8.  1-(5-ブロモ-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア[実施例2]および1-(7-ブロモ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア[実施例3]
工程7からの生成物(3.66g, 0.00859 mol)、3-ピリジンボロン酸(1.06g, 0.00859 mol)、粉末リン酸三カリウム(2.18g, 0.0103 mol)、無水1,4-ジオキサン(58 ml)および無水メタノール(117ml)の撹拌混合物を窒素で15分間パージした。1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体(0.70g, 0.000859 mol)を加え、混合物を窒素雰囲気下、80℃で16時間加熱した。室温に冷却後、混合物をセライトにより濾過し、メタノールで十分に洗浄した。濾液を真空下に蒸発させ、得られた残渣を「フラッシュ」シリカクロマトグラフィーで精製し、酢酸エチルを用いて、1-(5-ブロモ-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(1.0g, 30%)を溶出し、酢酸エチル中5 %メタノールを用いて、1-(7-ブロモ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(0.857g, 26%)を溶出した。
【００７９】
1-(5-ブロモ-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア:
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 1.10(3H,t), 3.20(2H,m), 6.76(1H,br t), 7.56(1H,s), 7.62(1H,m), 7.90(1H,s), 8.17(1H,d), 8.71(1H,d), 8.92(1H,s)
1-(7-ブロモ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア:
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 1.15(3H,t), 3.23(2H,m), 6.78(1H,br t), 7.53(1H,m), 7.81(1H,s), 8.00(1H,s), 8.20(1H,d), 8.62(1H,d), 9.00(1H,s)
LC-MS m/z 377[M+H]+ Rt=2.63分
【００８０】
同様にして以下のものを製造した。
【表１】
2009541289.tif 000007
【００８１】
スキーム1A
【化５】
2009541289.tif 000008
【００８２】
工程1.  1,3-ジブロモ-5-ニトロ-ベンゼン
エタノール(1.50 L)中の2,6-ジブロモ-4-ニトロ-アニリン(100 g, 0.34 mol)の氷冷溶液に、濃H2SO4(116 ml, 2.15 mol)を撹拌下、30〜45分かけて滴下した。反応混合物を60℃に加熱し、反応混合物に亜硝酸ナトリウム(72 g, 1.09 mol)を少しずつ加えた。得られた黄色の反応混合物を90℃にゆっくりと加熱し、2〜2.5時間還流した。室温に冷却後、反応混合物を氷水に注いだ。そのようにして得られた赤褐色の固体を濾過し、水で洗浄し、乾燥して、所期の化合物を褐色の固体(85.0 g, 90%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.38 (d, J= 1.20 Hz, 1H)および8.40 Hz, br s, 2H)
【００８３】
工程2.  3,5-ジブロモアニリン
エタノール(1 L)中の1,3-ジブロモ-5-ニトロ-ベンゼン(85.0 g, 0.30 mol)の溶液に、SnCl2・2H2O(341.0 g, 1.50 mol)を室温で少しずつ加えた。反応混合物を80℃で1.5時間、還流下に加熱した。室温に冷却後、減圧下に溶媒を蒸発させ、そのようにして得られた白色の粗固体を4N NaOH溶液でpH 12に塩基性化した。混合物を酢酸エチル(×3)で抽出し、合わせた有機層を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を減圧下に除去し、所期の化合物を褐色の固体(65.0 g, 86%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 5.71 (br s, 2H), 6.71 (s, 2H)および6.77 (s, 1H)
【００８４】
工程3.  1-ベンゾイル-3-(3,5-ジブロモ-フェニル)-チオウレア
無水アセトン(1.6 L)中の3,5-ジブロモアニリン(65.0 g, 0.26 mol)の溶液に、ベンゾイルイソチオシアネート(46.4 g, 0.28 mol)を加え、反応混合物を室温で30分間撹拌した。アセトンを留去し、粗残渣をヘキサンで洗浄し、所期の化合物を黄色の固体(96.5 g, 90 %)として得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.56 (t, J= 7.60 Hz, 2H), 7.67 (t, J= 7.20 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.96-7.98 (m, 4H), 11.76 (br s, 1H)および12.54 (br s, 1H). 
【００８５】
工程4.  (3,5-ジブロモ-フェニル)-チオウレア
THF(1.20 L)中の1-ベンゾイル-3-(3,5-ジブロモ-フェニル)-チオウレア(96.0 g, 0.23 mol)の溶液に、H2O(480 mL)に溶解したNaOH(46.30 g, 1.16 mol)の溶液を加えた。得られた反応混合物を70℃で12時間撹拌した。THFを留去し、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、留去して、粗残渣を得た。それをヘキサンで洗浄し、所期の化合物を灰色の固体(68 g, 95 %)として得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.49 (s, 1H), 7.84 (s, 2H), 7.98 (br s, 2H)および10.48 (br s, 1H)
MS: 310.88 (M+H)+
【００８６】
工程5.  5,7-ジブロモ-ベンゾチアゾール-2-イルアミン
CHCl3(600 mL)中の(3,5-ジブロモ-フェニル)-チオウレア(35 g, 0.11 mol)の溶液に、-55〜60℃でBr2(40.40 g, 0.25 mol, CHCl3の100 ml中)の溶液を1時間かけて滴下した。反応混合物を-55〜60℃で15分間撹拌し、続いて70〜75℃で3時間還流した。反応混合物を室温に冷却し、濾過し、粗残渣を得、それをヘキサンおよびジエチルエーテルで洗浄した。そのようにして得られた固体をH2Oに溶解し、アンモニア水溶液でpH 10〜12に塩基性化し、30分間撹拌した。そのようにして得られた固体を濾過し、水で洗浄して、所期の生成物(34.0 g, 98%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.39 (s, 1H), 7.48 (s, 1H)および7.95 (br s, 2H)
MS: 308.96 (M+H)+
【００８７】
工程6.  1-(5,7-ジブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア
ジオキサン(400 mL)中の5,7-ジブロモ-ベンゾチアゾール-2-イルアミン(20.0 g, 0.65 mol)の溶液に、エチルイソシアネート(27.83 g, 0.39 mol)を加え、反応混合物を75〜80℃で15時間撹拌した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、溶媒を蒸発させ、残渣をH2O中に採取し、70〜75℃で15時間撹拌した。固体を濾過し、熱水で洗浄し、高真空下に乾燥して、所期の生成物(19.65 g, 80%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1.08 (t, J= 6.80 Hz, 3H), 3.18 (m, 2H), 6.76 (br s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.82 (s, 1H)および11.10 (br s, 1H)
MS: 379.90 (M+H)+
【００８８】
工程7.  1-(5-ブロモ-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア [実施例2]
1-(7-ブロモ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア [実施例3]
1-(5,7-ジ-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア [実施例4]
DMF-H2O(2:1, 48 mL)中の1-(5,7-ジブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(1.60 g, 0.40 mmol)の溶液に、ピリジン-3-ボロン酸(0.51 g, 0.42 mmol)およびK3PO4 (0.90 g, 0.42 mmol)を窒素雰囲気下、室温で加えた。次いで、反応混合物を30分間脱気し、続いてCH2Cl2と[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)との複合体(0.35 g, 0.042 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を再度30分間脱気し、窒素雰囲気下、120℃で1時間加熱した。DMFを留去し、反応混合物に水を加え、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。化合物を酢酸エチル／ヘキサン(勾配)を用いるシリカ(230-400 M)で精製し、所期の化合物を得た。
【００８９】
1-(5-ブロモ-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア
60% EtOAc-ヘキサン (収率14%)
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1.07 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.14 (m, 2H), 6.73 (br s, 1H), 7.52-7.60 (m, 2H), 7.87 (s, 1H), 8.11-8.13 (m, 1H), 8.67-8.69 (m, 1H), 8.89 (m, 1H),および10.99 (br s, 1H)
MS: 378.99 (M+H)+
【００９０】
1-(7-ブロモ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア
80% EtOAc-ヘキサン (収率17%), m.p. 345℃
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.11 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.20 (m, 2H), 6.75 (br s, 1H), 7.48-7.51 (m, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 8.18 (m, 1H), 8.60 (m, 1H), 8.97 (s, 1H)および11.01 (br s, 1H)
MS: 377.17 (M+H+)
【００９１】
1-(5,7-ジ-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア
95% EtOAc-MeOH (収率25%)
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.08 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.15-3.22 (m, 2H), 6.57 (s, 3H), 6.75 (br s, 1H), 7.49-7.53 (m, 1H), 7.59-7.62 (m, 1H), 7.70 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 8.21-8.26 (m, 2H), 8.34 (s, 1H), 8.59 (d, J=4.8 Hz, 1H), 8.68 (d, J=4.8 Hz, 1H), 9.00 (s, 1H),および11.0 (br s, 1H)
MS: 376.07 (M+H+)
【００９２】
同様にして次のものを製造した。
【表２−１】
2009541289.tif 000009
【００９３】
【表２−２】
2009541289.tif 000010
【００９４】
スキーム1B
【化６】
2009541289.tif 000011
【００９５】
工程1.  1,3-ジヨード-5-ニトロ-ベンゼン
エタノール(625 mL)中の2,6-ジヨード-4-ニトロ-アニリン(25.0 g, 0.06 mol)の氷冷溶液に、濃H2SO4(50.0 ml, 0.90 mol)を撹拌下に30〜45分かけて滴下した。反応混合物を60℃に加熱し、反応混合物に亜硝酸ナトリウム(9.70 g, 0.14 mol)を少しずつ加えた。得られた黄色の反応混合物をゆっくりと90℃に加熱し、2〜2.5時間還流した。室温に冷却後、混合物を氷水に注いだ。そのようにして得られた赤褐色の固体を濾過し、水で洗浄し、乾燥して、所期の化合物を黄色の固体(17.0 g, 72%)として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.48 (s, 2H)および8.56 (s, 1H)
【００９６】
工程2.  3,5-ジヨードアニリン
エタノール(200 mL)中の1,3-ジヨード-5-ニトロ-ベンゼン(15.80 g, 0.042 mol)の溶液に、SnCl2.2H2O(28.50 g, 0.13 mol)を室温で少しずつ加えた。反応混合物を80℃で1.5時間還流下に加熱した。室温に冷却後、溶媒を減圧下に蒸発させ、そのようにして得られた粗固体を4N NaOH溶液でpH 12に塩基性化した。混合物を酢酸エチル(×3)で抽出し、合わせた有機層を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を減圧下に除去し、所期の化合物を黄色の固体 (11.0 g, 75%)として得た。
【００９７】
工程3.  1-ベンゾイル-3-(3,5-ジヨード-フェニル)-チオウレア
無水アセトン(150 mL)中の3,5-ジヨードアニリン(5.0 g, 0.01 mol)の溶液に、ベンゾイルイソチオシアネート(2.81 g, 0.012 mol)を加え、反応混合物を室温で30分間撹拌した。アセトンを留去し、粗残渣をヘキサンで洗浄し、所期の化合物を黄色の固体(6.35 g, 91%)として得た。
【００９８】
工程4.  (3,5-ジヨード-フェニル)-チオウレア
H2O(35 mL)に溶解したNaOH(1.30 g, 0.033 mol)の溶液を、THF(75 mL)中の1-ベンゾイル-3-(3,5-ジヨード-フェニル)-チオウレア(6.30 g, 0.013 mol)の溶液に加えた。得られた反応混合物を70℃で12時間撹拌した。THFを留去し、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、留去し、粗残渣を得、それをヘキサンで洗浄して、所期の化合物(4.0 g, 75 %)を得た。
MS: 405.06 (M+H+)
【００９９】
工程5.  5,7-ジヨード-ベンゾチアゾール-2-イルアミン
CHCl3(160 mL)中の(3,5-ジヨード-フェニル)-チオウレア(4.0 g, 0.01 mol)の溶液に、-55〜60℃でBr2(4.72 g, 0.02 mol, CHCl3の25 ml中)の溶液を15分間かけて滴下した。反応混合物を-55〜60℃で15分間撹拌し、続いて70〜75℃で3時間還流した。反応混合物を室温に冷却し、濾過し、粗残渣を得、それをヘキサンおよびジエチルエーテルで洗浄した。そのようにして得られた固体をH2Oに溶解し、アンモニア水溶液でpH 10〜12に塩基性化し、30分間撹拌した。そのようにして得られた固体を濾過し、水で洗浄し、所期の生成物(3.50 g, 88%)を得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.59 (d, J= 1.0 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 1.0 Hz, 1H)および7.85 (br s, 2H)
MS: 403.06 (M+H+)
【０１００】
工程6.  1-(5,7-ジヨード-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア
ジオキサン(160 mL)中の5,7-ジヨード-ベンゾチアゾール-2-イルアミン(8.0 g, 0.02 mol)の溶液に、エチルイソシアネート(10.70 g, 0.15 mol)を加え、反応混合物を75〜80℃で15時間撹拌した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、溶媒を蒸発させ、残渣をH2O中に採取し、70〜75℃で15時間撹拌した。固体を濾過し、熱水で洗浄し、高真空下で乾燥し、所期の生成物(5.0 g, 53%)を得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.08 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.16-3.19 (m, 2H), 6.73 (br s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.94 (s, 1H)および10.97 (br s, 1H)
MS: 474.12 (M+H+)
【０１０１】
工程7.  1-エチル-3-(5-ヨード-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア [実施例8]および
1-エチル-3-(7-ヨード-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア [実施例9]
DMF(5 mL)中の1-(5,7-ジヨード-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(0.20 g, 0.42 mmol)の溶液に、窒素雰囲気下、室温で、ピリジン 3-ボロン酸(0.076 g, 0.63 mmol)およびK3PO4 (0.133 g, 0.63 mmol)を加えた。反応混合物を30分間脱気し、続いてビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)ジクロライド(0.0044 g, 0.063 mmol)を加えた。反応混合物を再度30分間脱気し、次いで窒素雰囲気下、120℃で1時間加熱した。DMFを留去し、水を加え、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。残渣を、シリカ(230-400 M)のクロマトグラフィーで精製し、DCM／メタノール(99:1)を用いて、1-エチル-3-(5-ヨード-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレアをオフホワイトの固体(0.025 g, 14%)として、DCM／メタノール(98:2)を用いて、1-エチル-3-(7-ヨード-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレアをオフホワイトの固体(0.025 g, 14%)として得た。
【０１０２】
1-エチル-3-(5-ヨード-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア：
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.07 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.16 (m, 2H), 6.76 (br s, 1H), 7.56-7.59 (m, 1H), 7.64 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 8.11 (dd, J=1.6および8.0 Hz, 1H), 8.69 (d, J= 4.40 Hz, 1H), 8.88 (s, 1H), 11.01 (br s, 1H)
MS: 425.00 (M+H+)
【０１０３】
1-エチル-3-(7-ヨード-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア：
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.09 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.19 (m, 2H), 6.77 (br s, 1H), 7.47-7.50 (m, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 8.12-8.15 (m, 1H), 8.58 (br s, 1H), 8.93 (s, 1H)および10.96 (br s, 1H)
MS: 425.0 (M+H+)
【０１０４】
工程8.  1-(5,7-ジ-ピラジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア [実施例10]
DMF(5.0 mL)中の1-(5,7-ジヨード-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(0.50 g, 1.0 mmol)の溶液に、窒素雰囲気下、室温で、2-トリブチルスタニル-ピラジン(0.78 g, 2.0 mmol)を加えた。反応混合物を30分間脱気し、続いてテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(0.18 g, 0.10 mmol)を加えた。反応混合物を再度30分間脱気し、次いで窒素雰囲気下、120℃で2時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、DMFを留去し、水を加え、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。化合物を酢酸エチル／メタノール(95:5)を用いるシリカ(230-400 M)のクロマトグラフィーで精製し、標記の化合物をオフホワイトの固体(0.025 g, 6.5%)として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.11 (t, J= 7.2 Hz, 3H), 3.22 (q, J= 8.4 Hz, 2H), 6.79 (br s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 9.60 (s, 1H), 9.78 (s, 1H)および10.83 (br s, 1H)
MS: 378.18 (M+H+)
【０１０５】
工程9.  1-エチル-3-[7-(1-メチル-1H-ピロール-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア [実施例11] 
DMF(2.0 mL)中の1-エチル-3-(7-ヨード-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア(0.10 g, 0.24 mmol)の溶液に、窒素雰囲気下、室温で、N-メチル-2-トリブチルスタニル-1H-ピロール(0.18 g, 0.47 mmol)を加えた。反応混合物を30分間脱気し、続いてテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(0.027 g, 0.024 mmol)を加えた。反応混合物を再度30分間脱気し、次いで窒素雰囲気下、120℃で20時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、DMFを留去し、水を加え、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。粗残渣を分取(prep)-HPLCで精製し、標記の化合物をオフホワイトの固体(0.005 g, 6.0%)として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.08 (t, J= 6.80 Hz, 3H), 3.17 (q, J= 6.0 Hz, 2H), 3.68 (s, 3H), 6.19 (s, 1H), 6.41 (m, 1H), 6.77 (br s, 1H), 6.96 (s, 1H), 7.48-7.53 (m, 2H), 7.89 (s, 1H), 8.19 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.59 (m, 1H), 9.00 (s, 1H)および10.80 (br s, 1H)
MS: 378.15 (M-H+)
定性的HPLC純度 (Xbridge C18, 250×4.6 mm, 275 nm):  98.22% (Rt = 14.25分)
【０１０６】
スキーム１C
【化７】
2009541289.tif 000012
【０１０７】
工程1.  3-ブロモ-5-ピラゾール-1-イル-フェニルアミン
DMSO(2.0 mL)中の3,5-ジブロモアニリン(0.50 g, 1.99 mmol)の溶液に、L-プロリン(0.041 g, 0.36 mmol)、Cs2CO3(1.16 g, 3.58 mmol)、CuI(0.038 g, 0.20 mmol)およびピラゾール(0.12 g, 1.80 mmol)を順次加えた。反応混合物を10分間脱気し、次いで48時間、110℃まで加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、反応混合物を室温に冷却し、水を加え、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機物を水で洗浄し、乾燥(Na2SO4)し、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル(230-400 M, 15% EtOAc-ヘキサン)で精製し、所期の化合物(0.18 g, 37%)を得た。
【０１０８】
工程2.  1-ベンゾイル-3-(3-ブロモ-5-ピラゾール-1-イル-フェニル)-チオウレア
無水アセトン(5.0 mL)中の3-ブロモ-5-ピラゾール-1-イル-フェニルアミン(0.18 g, 0.76 mmol)の溶液に、ベンゾイルイソチオシアネート(0.14 g, 0.83 mmol)を加え、反応混合物を室温で30分間撹拌した。アセトンを留去し、粗残渣をヘキサンで洗浄し、所期の化合物(0.27 g, 89%)を得た。
【０１０９】
工程3.  (3-ブロモ-5-ピラゾール-1-イル-フェニル)-チオウレア
H2O(1.0 mL)に溶解したNaOH(0.13 g, 3.35 mmol)の溶液を、THF(5.0 mL)中の1-ベンゾイル-3-(3-ブロモ-5-ピラゾール-1-イル-フェニル)-チオウレア 3 (0.27 g, 0.67 mmol)の溶液に加えた。得られた反応混合物を70℃で12時間撹拌した。THFを留去し、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、留去し、粗残渣を得、それを2% 酢酸エチル-ヘキサンで洗浄し、所期の化合物(0.17 g, 85%)を得た。
【０１１０】
工程4.  7-ブロモ-5-ピラゾール-1-イル-ベンゾチアゾール-2-イルアミン
DCM(17.0 mL)中の(3-ブロモ-5-ピラゾール-1-イル-フェニル)-チオウレア(1.0 g, 3.0 mmol)の溶液に、0℃で、Br2(1.07 g, 6.0 mmol, DCMの3.0 ml中)の溶液を15分間かけて滴下した。反応混合物を0℃で15分間撹拌し、続いて2時間還流した。反応混合物を室温に冷却し、濾過し、粗残渣を得、それをヘキサンおよびジエチルエーテルで洗浄した。そのようにして得られた固体をH2Oに溶解し、アンモニア水溶液でpH 10〜12に塩基性化し、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機物を水で洗浄し、乾燥(Na2SO4)し、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル(230-400 M, 25% EtOAc-ヘキサン)で精製し、所期の生成物(0.30 g, 30%)を得た。
【０１１１】
工程5.  1-(7-ブロモ-5-ピラゾール-1-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア
ジオキサン(5.0 mL)中の7-ブロモ-5-ピラゾール-1-イル-ベンゾチアゾール-2-イルアミン(0.10 g, 0.34 mmol)の溶液に、エチルイソシアネート(0.24 g, 3.34 mmol)を加え、反応混合物を55℃で15時間撹拌した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、溶媒を蒸発させ、残渣をヘキサンで洗浄し、所期の生成物(0.11 g, 88%)を得た。
【０１１２】
工程6.  1-エチル-3-(5-ピラゾール-1-イル-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア [実施例12]
DMF:H2O(2:1, 15 mL)中の1-(7-ブロモ-5-ピラゾール-1-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(0.27 g, 0.74 mmol)の溶液に、窒素雰囲気下、室温で、3-ピリジル ボロン酸(0.11 g, 0.88 mmol)およびK3PO4 (0.17 g, 0.81 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を30分間脱気し、続いてビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)ジクロライド(0.077 g, 0.11 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を再度30分間脱気し、窒素雰囲気下、120℃で2時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、DMFを留去し、反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。粗残渣を、EtOAc-ヘキサン(70:30)を用いるシリカゲル(230-400 M)で精製し、標記の化合物(0.066 g, 22%)を得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.08 (t, J= 7.2 Hz, 3H), 3.17 (m, 2H), 6.57 (s, 1H), 6.75 (br s, 1H), 7.60-7.63 (m, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 8.13-8.20 (m, 2H), 8.70 (s, 1H), 8.97 (s, 1H)および11.0 (br s, 1H)
MS: 365.24 (M+H+)
【０１１３】
スキーム2A
【化８】
2009541289.tif 000013
【０１１４】
1-エチル-3-(7-ピリジン-3-イル-5-ピリミジン-5-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア [実施例13]
無水1,4-ジオキサン(5 ml)および無水メタノール(10 ml)中の1-(5-ブロモ-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(250 mg, 0.663 mmol)、ピリミジン-5-ボロン酸(86 mg, 0.696 mmol)、粉末リン酸三カリウム(167 mg, 0,796 mmol)および1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンパラジウム(II)クロライド錯体(81 mg, 0,0995 mmol)の撹拌混合物を、窒素で5分間パージし、密封容器中、80℃で16時間加熱した。室温に冷却後、混合物をケイソウ土を通して濾過した。ケイソウ土をメタノールで十分に洗浄し、合わせた濾液を真空下に蒸発乾固し、粗1-エチル-3-(7-ピリジン-3-イル-5-ピリミジン-5-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレアを得た。それを酢酸エチル中の0〜5%メタノールで溶出する「フラッシュ」シリカクロマトグラフィーで精製し、オフホワイトの固体57 mg (22%)を得た。
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 1.13(3H,t), 3.22(2H,m), 6.79(1H,br t), 7.66(1H,m), 7.85(1H,s), 8.18(1H,s), 8.28(1H,d), 8.74(1H,d), 9.07(1H,s), 9.25(1H,s), 9.36(2H,s), 10.95(1H,br s)
LC-MS m/z 377[M+H]+ Rt=2.59分
【０１１５】
同様にして次のものを製造した。
【表３−１】
2009541289.tif 000014
【０１１６】
【表３−２】
2009541289.tif 000015
【０１１７】
【表３−３】
2009541289.tif 000016
【０１１８】
1-(5-ブロモ-7-ピリジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(スキーム10)を用い、同様にして次のものを製造した:
【表４−１】
2009541289.tif 000017
【０１１９】
【表４−２】
2009541289.tif 000018
【０１２０】
1-[7-(2-アミノ-ピリミジン-5-イル)-5-ブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(スキーム1)を用い、同様にして次のものを製造した:
【表５】
2009541289.tif 000019
【０１２１】
スキーム2B
【化９】
2009541289.tif 000020
【０１２２】
工程1.  1-[5-(5,5-ジメチル-[1,3,2]ジオキサボリナン-2-イル)-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア
ジメチルスルホキシド(4ml)中の1-(5-ブロモ-7-(ピリジン-3-イル)ベンゾ[d]チアゾール-2-イル)-3-エチルウレア(100mg, 0.265mmol)、ビス(ネオペンチル)グリコラート ジボロン(120mg, 0.530mmol)および酢酸カリウム(78mg, 0.796mmol)の混合物を、窒素で5分間パージした。ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体(22mg, 0.0265mmol)を加え、反応混合物を密封し、80℃で16時間加熱した。
【０１２３】
工程2.  1-エチル-3-(5-ピラジン-2-イル-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア [実施例43]
工程1からの反応混合物を室温に冷却した。2-クロロピラジン(46mg, 0.405mmol)、続いて炭酸セシウム水溶液(3.7M, 0.1ml, 0.405mmol)を加えた。反応混合物を窒素で5分間パージし、テトラキストリフェニルホスフィン パラジウム(0)(21mg, 0.0265mmol)で処理し、密封し、80℃で8時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ジクロロメタン(50ml)で希釈し、水(3×10ml)、続いて食塩水(25ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)した。溶媒を真空下に除去し、残渣を酢酸エチル中の5%メタノールで溶出するフラッシュシリカクロマトグラフィーで精製し、1-エチル-3-(5-ピラジン-2-イル-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレアを淡褐色の固体(15mg, 2工程で15%)として得た。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3 = CD3OD): 1.26(3H,t), 3.37(2H,m), 7.51(1H,m), 7.99(1H,s), 8.14(1H,d), 8.30(1H,s), 8.56(1H,s), 8.66(1H,d), 8.70(1H,s), 8.93(1H,s), 9.14(1H,s)
LC-MS m/z 377[M+H]+ Rt=2.36分
【０１２４】
同様にして次のものを製造した。
【表６】
2009541289.tif 000021
【０１２５】
1-(5-ブロモ-7-ピリジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(スキーム10)を用い、同様にして次のものを製造した:
【表７−１】
2009541289.tif 000022
【０１２６】
【表７−２】
2009541289.tif 000023
【０１２７】
【表７−３】
2009541289.tif 000024
【０１２８】
1-[7-(2-アミノ-ピリミジン-5-イル)-5-ブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(スキーム1)を用い、同様にして次のものを製造した:
【表８】
2009541289.tif 000025
【０１２９】
スキーム3A
【化１０】
2009541289.tif 000026
【０１３０】
1-エチル-3-[7-(2-フルオロ-フェニル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア [実施例75]
無水1,4-ジオキサン(1 ml)および無水メタノール(2 ml)中の1-(7-ブロモ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(50 mg, 0.133 mmol), 2-フルオロベンゼンボロン酸(19 mg, 0.139 mmol)、粉末リン酸三カリウム(34 mg, 0.160 mmol)および1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体(16 mg, 0.01995 mmol)の撹拌混合物を、窒素で5分間パージし、密封容器中、80℃で16時間加熱した。室温に冷却後、混合物をケイソウ土を通して濾過した。ケイソウ土をメタノールで十分に洗浄し、合わせた濾液を真空下に蒸発乾固し、粗1-エチル-3-[7-(2-フルオロ-フェニル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレアを得、それを酢酸エチル中の0〜30%メタノールで溶出する「フラッシュ」シリカクロマトグラフィーで精製し、淡褐色の固体12 mgを得た。
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 1.12(3H,t), 3.21(2H,m), 6.77(1H,br t), 7.46(2H,m), 7.55(2H,m), 7.62(1H,s), 7.74(1H,t), 8.05(1H,s), 8.24(1H,d), 8.63(1H,d), 9.05(1H,s), 10.88(1H,br s)
LC-MS m/z 393[M+H]+ Rt=2.79分
同様にして次のものを製造した：
【０１３１】
【表９】
2009541289.tif 000027
【０１３２】
以下に示した代替条件以外は同様にして以下のものを製造した：
A.  溶媒: DMF:水 (2:1)、塩基: リン酸カリウム、触媒: ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)ジクロライド、温度: 120℃
B.  溶媒: トルエン: 水 (9:1)、塩基: リン酸カリウム、触媒: パラジウム(II)アセテートおよびトリシクロヘキシルホスフィン、温度: 110℃
C.  溶媒: DMF:水 (2:1)、塩基: リン酸カリウム、触媒: 1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体、温度: 120℃
【０１３３】
D.  溶媒: DMF:水 (2:1)、塩基: 炭酸ナトリウム、触媒: 1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体、温度: 120℃
E.  溶媒: DMF:水 (2:1)、塩基: リン酸カリウム、触媒: テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)、温度: 120℃
F.  溶媒: DMF:水 (2:1)、塩基: 炭酸ナトリウム、触媒: テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)、温度: 120℃
【０１３４】
【表１０−１】
2009541289.tif 000028
【０１３５】
【表１０−２】
2009541289.tif 000029
【０１３６】
【表１０−３】
2009541289.tif 000030
【０１３７】
【表１０−４】
2009541289.tif 000031
【０１３８】
【表１０−５】
2009541289.tif 000032
【０１３９】
【表１０−６】
2009541289.tif 000033
【０１４０】
スキーム3B
【化１１】
2009541289.tif 000034
【０１４１】
工程1.  1-[7-(5,5-ジメチル-[1,3,2]ジオキサボリナン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア
ジメチルスルホキシド(2mL)中の1-(7-ブロモ-5-(ピリジン-3-イル)ベンゾ[d]チアゾール-2-イル)-3-エチルウレア(41mg, 0.11mmol)、ビス(ネオペンチル)グリコラート ジボロン(50mg, 0.22mmol)および酢酸カリウム(74mg, 0.33mmol)の混合物を、窒素で5分間パージした。ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体(10mg, 0.011mmol)を加え、反応混合物を密封し80℃で16時間加熱した。
【０１４２】
工程2.  1-エチル-3-[7-(3-フルオロ-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア [実施例91]
工程1からの反応混合物を室温に冷却し、2-クロロ-3-フルオロ-ピリジン(15mg, 0.11mmol)および炭酸セシウム(53mg, 0.165mmol)で処理した。反応混合物を窒素で5分間パージし、テトラキス トリフェニルホスフィン パラジウム(0)(13mg, 0.011mmol)で処理し、密封し、80℃で8時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ジクロロメタン(50ml)で希釈し、水(3×10mL)、続いて食塩水(25 ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)した。溶媒を真空下に除去し、残渣を酢酸エチル中の5%メタノールで溶出するフラッシュシリカクロマトグラフィーで精製し、1-エチル-3-[7-(3-フルオロ-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレアを白色の固体(7.5mg, 17%)として得た。
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 1.15(3H,t), 3.26(2H,m), 6.85(1H,br t), 7.58(1H,m), 7.65(1H,m), 8.02(1H,m), 8.12(1H,s), 8.23(2H,m), 8.66(1H,m), 8.75(1H,d), 9.05(1H,s), 10.74(1H,br s)
LC-MS m/z 394[M+H]+ Rt=2.47分
【０１４３】
同様にして次のものを製造した:
【表１１−１】
2009541289.tif 000035
【０１４４】
【表１１−２】
2009541289.tif 000036
【０１４５】
【表１１−３】
2009541289.tif 000037
【０１４６】
【表１１−４】
2009541289.tif 000038
【０１４７】
【表１１−５】
2009541289.tif 000039
【０１４８】
N-｛5-[7-ブロモ-2-(3-エチル-ウレイド)-ベンゾチアゾール-5-イル]-ピリジン-2-イル｝-アセタミド(スキーム1A)を用い、同様にして次のものを製造した:
【表１２】
2009541289.tif 000040
【０１４９】
1-[5-(6-アミノ-ピリジン-3-イル)-7-ブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(スキーム1A)を用い、同様にして次のものを製造した:
【表１３】
2009541289.tif 000041
【０１５０】
1-[5-(2-アミノ-ピリミジン-5-イル)-7-ブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(スキーム1)を用い、同様にして次のものを製造した:
【表１４】
2009541289.tif 000042
【０１５１】
スキーム3C
【化１２】
2009541289.tif 000043
【０１５２】
工程1.  1-[7-(5,5-ジメチル-[1,3,2]ジオキサボリナン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア
ジメチルスルホキシド(4 ml)中の1-(7-ブロモ-5-(ピリジン-3-イル)ベンゾ[d]チアゾール-2-イル)-3-エチルウレア(100 mg, 0.2652mmol)、ビス(ネオペンチル)グリコラート ジボロン(120 mg, 0.5303 mmol)および酢酸カリウム(78 mg, 0.7957 mmol)の撹拌混合物を、窒素で5分間パージし、1,1'ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体(22 mg, 0.02653 mmol)で処理し、80℃で16時間加熱した。室温に冷却後、混合物をジクロロメタン(50mL)で希釈し、水(3×10 mL)で洗浄し、MgSO4で乾燥し、溶媒を真空下に除去し、粗1-[7-(5,5-ジメチル-[1,3,2]ジオキサボリナン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレアを得、これをさらに精製することなく次の工程に用いた。
【０１５３】
工程2.  1-エチル-3-(7-ピラゾール-1-イル-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア [実施例140]
無水ジクロロメタン中の、粗1-[7-(5,5-ジメチル-[1,3,2]ジオキサボリナン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(116 mg, 0.339 mmol)、ピラゾール(25 mg, 0.373 mmol)、酢酸銅(II)(71 mg, 0.39 mmol)、無水トリエチルアミン(188 mg, 1.865 mmol)および粉末4Aモレキュラー シーブス(8ペレット)の混合物を、開放容器中、室温で2日間撹拌した。得られた混合物を濾過し、溶媒を真空下に除去し、粗1-エチル-3-(7-ピラゾール-1-イル-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレアを得、それを分取HPLCで精製した。生成物をオフホワイトの固体(8 mg)として得た。
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 1.13(3H,t), 3.23(2H,m), 6.71(1H,s), 7.06(1H,br s), 7.58(1H,br t), 7.93(1H,s), 7.96(1H,s), 8.08(1H,s), 8.33(1H,d), 8.66(1H,br s), 8.98(1H,s), 9.15(1H,br s), 10.80(1H,br s)
LC-MS m/z 365[M+H]+ Rt=2.41分
【０１５４】
スキーム3D
【化１３】
2009541289.tif 000044
【０１５５】
工程1.  1-[5-(5,5-ジメチル-[1,3,2]ジオキサボリナン-2-イル)-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア
ジメチルスルホキシド(4 ml)中の、1-(5-ブロモ-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(100 mg, 0.2652mmol)、ビス(ネオペンチル)グリコラート ジボロン(120 mg, 0.5303 mmol)および酢酸カリウム(78 mg, 0.7957 mmol)の撹拌混合物を、窒素で5分間パージし、1,1'ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体(22 mg, 0.02653 mmol)で処理し、80℃で16時間加熱した。室温に冷却後、混合物をジクロロメタン(50 mL)で希釈し、水(3×10 mL)で洗浄し、MgSO4で乾燥し、溶媒を真空下に除去し、粗1-[5-(5,5-ジメチル-[1,3,2]ジオキサボリナン-2-イル)-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレアを得、それをさらに精製することなく次の工程に用いた。
【０１５６】
工程2.  1-エチル-3-[5-(2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル)-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア [実施例141]
無水ジクロロメタン(21 ml)中の、粗1-[5-(5,5-ジメチル-[1,3,2]ジオキサボリナン-2-イル)-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア、2-ヒドロキシピリジン(88 mg, 0.292 mmol)、酢酸銅(II)(56 mg, 0.305 mmol)、無水トリエチルアミン(147 mg, 1.458 mmol)および粉末4Aモレキュラー シーブス(6ペレット)の混合物を、開放容器中、室温で5日間撹拌した。得られた混合物を濾過し、溶媒を真空下に除去し、粗1-エチル-3-[5-(2-オキソ-2H-ピリジン-1-イル)-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレアを得、それを分取HPLCで精製した。生成物を褐色の固体(17mg)として得た。
LC-MS m/z 392[M+H]+ Rt=2.39分
【０１５７】
1-(5-ブロモ-7-ピリジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(スキーム10)を用い、同様にして次のものを製造した：
【表１５】
2009541289.tif 000045
【０１５８】
スキーム4
【化１４】
2009541289.tif 000046
【０１５９】
工程1.  1-[5,7-ビス-(5-メトキシ-ピリジン-3-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア [実施例143]
無水1,4-ジオキサン(1.8 ml)および無水メタノール(3.6 ml)中の、1-(5,7-ジブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル-3-エチル ウレア(100 mg, 0.264 mmol)、粉末リン酸三カリウム(67 mg, 0.317 mmol)、(1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン)ジクロロ-パラジウム(II)クロライド(32 mg, 0.0386 mmol)、3-メトキシ-5-ピリジンボロン酸ピナコールエステル(248 mg, 1.056 mmol)の撹拌混合物を、窒素で5分間パージし、80℃で16時間加熱した。反応混合物をセライトを通して濾過し、酢酸エチルで十分に洗浄した。濾液を真空下に蒸発させ、粗1-[5,7-ビス-(5-メトキシ-ピリジン-3-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレアを得、それを分取HPLCで精製し、暗褐色の固体(20 mg, 17 %)を得た。
1HNMR(400MHz,δ,D6DMSO) 1.12(3H,t), 2.58(6H,s), 3.22(2H,m) 7.03(1H,m), 7.77(1H,s), 7.80(1H, s), 7.84(1H, s), 8.08(1H,s), 8.25(1H,s) 8.46(1H d), 8.46(1H,d), 8.65(1H, s), 8.69(1H,s)
LC-MS m/z 436[M+H]+ Rt=2.52分
【０１６０】
同様にして次のものを製造した：
【表１６】
2009541289.tif 000047
【０１６１】
スキーム5
【化１５】
2009541289.tif 000048
【０１６２】
工程1.  4-ブロモ-2,6-ジニトロアニリン
氷酢酸(50 ml)中の2,6-ジニトロアニリン(5 g, 27.3 mmol)の撹拌懸濁液を臭素(1.5 ml, 30 mmol)で滴下処理し、120℃で2時間加熱した。室温に冷却後、得られた混合物を水(500 ml)に注いだ。沈殿した固体を濾取し、水で洗浄し、真空下に乾燥し、4-ブロモ-2,6-ジニトロアニリンを黄色の固体(6.5 g, 91%)として得た。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3): 8.45(2H,br s), 8.65(2H,s)
【０１６３】
工程2.  2,6-ジニトロ-4-ピリジン-3-イル-アニリン
1,2-ジメトキシエタン(83 ml)中の4-ブロモ-2,6-ジニトロアニリン(3 g, 11.45 mmol)の撹拌溶液を、窒素で15分間パージし、炭酸水素ナトリウム水溶液(1M, 22.8 ml)、続いてピリジン 3-ボロン酸(2.1 g, 17.17 mmol)および1,1-ビス-(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体(0.94 g, 1.15 mmol)で処理した。得られた混合物を窒素雰囲気下で、18時間、還流下に沸騰させた。室温に冷却後、暗色の混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(300 ml)で希釈し、酢酸エチル(3×250 ml)で抽出した。これを乾燥(MgSO4)し、溶媒を真空下に除去し、残渣を得、これを40-60 石油エーテル中の30%〜100%酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィー(シリカ)で精製した。2,6-ジニトロ-4-ピリジン-3-イル-アニリンを黄色の固体(1.46 g, 49%)として得た。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3): 7.44(1H,m), 7.90(1H,m), 8.56(2H,br s), 8.68(1H,m), 8.80(2H,s), 8.87(1H,d)
【０１６４】
工程3.  3-(3,5-ジニトロ-4-チオシアネト-フェニル)-ピリジン
硫酸水溶液(50% v/v, 12 ml)中の2,6-ジニトロ-4-ピリジン-3-イル-アニリン(1.24 g, 4.76 mmol)の懸濁液を室温で1時間撹拌した後、氷浴で冷却し、亜硝酸ナトリウム水溶液(20% w/v, 2.0 ml)で5分間かけて処理した。混合物を冷却下で1.5時間撹拌した後、水(1.4 ml)中のチオシアン酸カリウム(0.6 g)の溶液で一度に処理した。得られた混合物を冷却下で15分間撹拌し、次いで、氷浴で冷却しながら水(4 ml)中のチオシアン酸銅(I)(1.0 g)の懸濁液に加えた。混合物を冷却下で2時間撹拌し、次いで70℃で20分間加熱した。室温に冷却後、混合物を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液(200 ml)に注ぎ、酢酸エチル(3×100 ml)で抽出し、それを食塩水(200 ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)した。溶媒を真空下に除去し、残渣を得、それを40-60 石油エーテル中の80%〜100%酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィー(シリカ)で精製した。3-(3,5-ジニトロ-4-チオシアネト-フェニル)-ピリジンを黄色の固体(1.07 g, 74%)として得た。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3): 7.54(1H,m), 7.99(1H,m), 8.49(2H,s), 8.82(1H,m), 8.95(1H,d)
【０１６５】
工程4.  7-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イルアミン
氷酢酸(15 ml)中の3-(3,5-ジニトロ-4-チオシアネト-フェニル)-ピリジン(0.66 g, 2.19 mmol)の溶液を、鉄粉(0.61 g, 11.0 mmol)で処理し、室温で16時間撹拌した。得られた混合物を水(200 ml)で希釈し、濃アンモニア溶液を加えてアルカリ性にした。固体の物質を濾取し、水、続いて酢酸エチルで洗浄した。次いで、濾過された固体を沸騰エタノール(3×200 ml)で抽出し、エタノールを真空下に除去し、7-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イルアミンを淡黄色の固体(0.57 g, 95%)として得た。
LC-MS m/z 273[M+H]+ Rt=2.24分
【０１６６】
工程5.  1-エチル-3-(7-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア
無水1,4-ジオキサン(10 ml)中の、7-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イルアミン(100 mg, 0.3676 mmol)、エチル イソシアネート(0.18 ml, 1.831 mmol)およびジブチル錫ジアセテート(10滴)の撹拌混合物を、密封容器中、100℃で16時間加熱した。室温に冷却後、沈殿した固体を濾取し、1,4-ジオキサンで洗浄し、真空下に乾燥し、1-エチル-3-(7-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレアを黄色の固体(30 mg, 24%)として得た。
LC-MS m/z 344[M+H]+ Rt=2.59分
【０１６７】
工程6.  1-(7-アミノ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア [実施例149]
エタノール(0.5 ml)および濃塩酸(0.5 ml)中の、1-エチル-3-(7-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア(25 mg, 0.0728 mmol)の撹拌懸濁液を、塩化錫(II)(69 mg, 0.364 mmol)で処理し、80℃で5時間加熱した。室温に冷却後、混合物を水(50 ml)で希釈し、濃アンモニアを加えてアルカリ性(pH 11)にした。1-(7-アミノ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレアを酢酸エチル(3×50 ml)で抽出し、それを乾燥(MgSO4)し、溶媒を真空下に除去し、オフホワイトの固体(37 mg)を得、それをさらに精製することなく用いた。
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 1.14(3H,t), 3.24(2H,m), 5.63(2H,br s), 6.79(1H,br t), 6.80(1H,s), 7.22(1H, br s), 7.50(1H,m), 8.03(1H,d), 8.58(1H,d), 8.86(1H,s), 10.62(1H,br s)
【０１６８】
工程7.  1-エチル-3-[2-(3-エチル-ウレイド)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-イル]-ウレア [実施例150]
無水1,4-ジオキサン(2 ml)中の、1-(7-アミノ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(15 mg, 0.048 mmol)、エチル イソシアネート(0.03 ml)およびジブチル錫ジアセテート(2滴)の撹拌混合物を、密封容器中、100℃で16時間加熱した。室温に冷却後、分取HPLCにより、1-エチル-3-[2-(3-エチル-ウレイド)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-イル]-ウレアを白色の固体(5.4 mg, 29%)として単離した。
1H NMR (400MHz,δ,CD3OD): 1.23(6H,m), 3.29(4H,m), 7.56(1H,m), 7.66(1H,s), 7.79(1H,s), 8.16(1H,d), 8.43(1H,br s), 8.55(1H,br s), 8.87(1H,br s)
LC-MS m/z 385[M+H]+ Rt=2.00分
【０１６９】
スキーム6
【化１６】
2009541289.tif 000049
【０１７０】
工程1.  5-ブロモ-3-ニトロ-2-(2,2,2-トリフルオロ-アセチルアミノ)-安息香酸メチルエステル
撹拌した無水トリフルオロ酢酸(120 ml)を氷-塩浴で冷却し、6℃より低い温度を保ちながら、5分かけてメチル-2-アミノ-5-ブロモベンゾエート(10 g, 43.5 mmol)で処理した。添加が終了したとき、得られた懸濁液を冷却下にさらに15分間撹拌し、硝酸カリウム(5.27 g, 52.2 mmol)を一度に加えた。反応混合物を室温に戻るままにし、16時間撹拌した。得られた混合物を蒸発により濃縮し、残渣を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液(300 ml)で希釈し、酢酸エチル(3×250 ml)で抽出し、それを食塩水(300 ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)した。溶媒を真空下に除去し、粗生成物を得、それを40-60 石油エーテル中の10%〜90%酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィー(シリカ)で精製した。副生成物(5-ブロモ-2-(2,2,2-トリフルオロ-アセチルアミノ)-安息香酸メチルエステル)の溶出後、5-ブロモ-3-ニトロ-2-(2,2,2-トリフルオロ-アセチルアミノ)-安息香酸メチルエステルを黄色の固体(11.1 g, 69%)として得た。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3): 4.03(3H,s), 7.26(1H,s), 8.33(1H,d), 8.44(1H,d), 11.23(1H,br s)
【０１７１】
工程2.  2-アミノ-5-ブロモ-3-ニトロ-安息香酸メチルエステル
メタノール(150 ml)中の5-ブロモ-3-ニトロ-2-(2,2,2-トリフルオロ-アセチルアミノ)-安息香酸メチルエステル(8 g, 21.56 mmol)の撹拌懸濁液を、塩酸(6M, 75 ml)で処理し、80℃で16時間加熱した。室温に冷却後、黄色の固体を濾取し、冷水で洗浄し、真空下に乾燥して、2-アミノ-5-ブロモ-3-ニトロ-安息香酸メチルエステル(5.0 g, 84%)を得た。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3): 3.99(3H,s), 8.33(1H,d), 8.40(2H,br s), 8.51(1H,d)
【０１７２】
工程3.  2-アミノ-3-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-安息香酸メチルエステル
1,2-ジメトキシエタン(53 ml)中の2-アミノ-5-ブロモ-3-ニトロ-安息香酸メチルエステル(2 g, 7.27 mmol)の撹拌溶液を、窒素で15分間パージし、炭酸水素ナトリウム水溶液(1M, 14.5 ml)、続いてピリジン 3-ボロン酸(1.33 g, 10.9 mmol)および1,1-ビス-(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体(0.6 g, 0.733 mmol)で処理した。得られた混合物を窒素雰囲気下、還流下に18時間沸騰させた。室温に冷却後、暗色の混合物を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液(300 ml)で希釈し、酢酸エチル(3×250 ml)で抽出した。これを食塩水(200 ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)し、溶媒を真空下に除去し、残渣を得、これを40-60 石油エーテル中の30%〜100%酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィー(シリカ)で精製した。2-アミノ-3-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-安息香酸メチルエステルを黄色の固体(1.1 g, 56%)として得た。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3): 3.97(3H,s), 7.39(1H,m), 7.87(1H,m), 8.52(1H,d), 8.55(2H,br s), 8.62(1H,m), 8.65(1H,d), 8.84(1H,m)
【０１７３】
工程4.  3-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-2-チオシアネト-安息香酸メチルエステル
硫酸水溶液(50% v/v, 9 ml)中の2-アミノ-3-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-安息香酸メチルエステル(0.92 g, 3.37 mmol)の懸濁液を、室温で1時間撹拌後、氷浴で冷却し、5分かけて亜硝酸ナトリウム水溶液(20% w/v, 1.4 ml)で処理した。混合物を冷却下で1.5時間撹拌後、水(1.0 ml)中のチオシアン酸カリウム(0.42 g)の溶液で一度に処理した。得られた混合物を冷却下で15分間撹拌し、次いで氷浴で冷却しながら、水(2.8 ml)中のチオシアン酸銅(I)(0.71 g)の懸濁液に加えた。混合物を冷却下で2時間撹拌し、次いで70℃で20分間加熱した。室温に冷却後、混合物を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液(200 ml)に注ぎ、酢酸エチル(3×100 ml)で抽出し、食塩水(200 ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)した。溶媒を真空下に除去し、残渣を得、それを40-60 石油エーテル中の80%〜100%酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィー(シリカ)で精製した。3-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-2-チオシアネト-安息香酸メチルエステルを淡黄色の固体(0.78 g, 74%)として得た。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3): 4.12(3H,s), 7.49(1H,m), 7.96(1H,m), 8.34(1H,d), 8.40(1H,d), 8.76(1H,m), 8.92(1H,d)
【０１７４】
工程5.  2-アミノ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸メチルエステル
氷酢酸(23 ml)中の3-ニトロ-5-ピリジン-3-イル-2-チオシアネト-安息香酸メチルエステル(1.1 g, 3.49 mmol)の溶液を、鉄粉(0.97 g, 17.5 mmol)で処理し、室温で16時間撹拌した。得られた混合物を水(200 ml)で希釈し、濃アンモニア溶液を加えてアルカリ性にした。混合物を濾過し、濾液を酢酸エチル(3×200 ml)で抽出した。濾過した後の固体を沸騰エタノール(3×250 ml)で抽出し、合わせた有機フラクションを蒸発乾固し、2-アミノ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸メチルエステルをオフホワイトの固体(0.46 g, 46%)として得た。
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 3.98(3H,s), 7.55(1H,m), 7.81(2H,br s), 7.95(2H,s), 8.18(1H,m), 8.64(1H,m), 8.98(1H,s)
【０１７５】
工程6.  2-(3-エチル-ウレイド)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸メチルエステル [実施例151]
無水1,4-ジオキサン(1.5 ml)中の、2-アミノ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸メチルエステル(20 mg, 0.07 mmol)、エチル イソシアネート(0.03 ml, 0.35 mmol)およびジブチル錫ジアセテート(2滴)の撹拌混合物を、CEM Discover反応器中、マイクロウエーブ照射により125℃で1時間加熱した。室温に冷却後、分取HPLCにより、2-(3-エチル-ウレイド)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸メチルエステルを白色の固体(7.4 mg, 30%)として単離した。
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3+CD3OD): 1.26(3H,t), 3.38(2H,m), 4.06(3H,s), 7.51(1H,m), 8.06(1H,d), 8.08(1H,m), 8.19(1H,d), 8.59(1H,m), 8.88(1H,d)
LC-MS m/z 357[M+H]+ Rt=2.25分
【０１７６】
工程7.  2-(3-エチル-ウレイド)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸エチルアミド [実施例 152]および
2-(3-エチル-ウレイド)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸
無水1,4-ジオキサン(10 ml)中の、2-アミノ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸メチルエステル(125 mg, 0.439 mmol)、エチル イソシアネート(0.21 ml, 2.187 mmol)およびジブチル錫ジアセテート(12滴)の撹拌混合物を、密封溶液中、100℃で16時間加熱した。室温に冷却後、溶媒を真空下に除去し、2-(3-エチル-ウレイド)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸メチルエステルを得、それをさらに精製することなく用いた。
2-(3-エチル-ウレイド)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸メチルエステル(78 mg, 0.22 mmol)およびエチルアミン水溶液(70% w/v, 3 ml)の撹拌混合物をCEM Discover反応器中、マイクロウエーブ照射により100℃で1時間加熱した。反応混合物を分取HPLCで精製し、2-(3-エチル-ウレイド)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸エチルアミドを白色の固体(8.7 mg, 5%)として得た。
【０１７７】
1H NMR (400MHz,δ,CDCl3+CD3OD): 1.28(6H,m), 3.40(2H,m), 3.53(2H,m), 7.51(1H,m), 7.99(2H,d), 8.12(1H,d), 8.35(1H,br d), 8.57(1H,br s), 8.91(1H,s)
LC-MS m/z 370[M+H]+ Rt=2.05分
2-(3-エチル-ウレイド)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸も白色の固体(2.5 mg, 2%)として単離した。
LC-MS m/z 343[M+H]+ Rt=1.91分
【０１７８】
スキーム7
【化１７】
2009541289.tif 000050
【０１７９】
1-エチル-3-(7-ヒドラジノカルボニル-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア [実施例153]
メタノール(10 ml)中の2-(3-エチル-ウレイド)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-7-カルボン酸メチルエステル(319mg, 0.895mmol)の懸濁液を、ヒドラジン水和物(2 ml)で処理し、室温で16時間撹拌した。反応混合物がかなりの量の出発物質をまだ含んでいることをHPLCが示したので、ヒドラジン水和物をさらに1 ml加え、撹拌をさらに24時間続けた。得られた混合物を水(50 ml)で希釈し、固体を濾取した。これを水(25 ml)、続いてエタノール(25 ml)で洗浄し、真空下に乾燥して、1-エチル-3-(7-ヒドラジノカルボニル-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレアをオフホワイトの固体(312mg, 98%)として得た。
1H NMR (400MHz,δ, D6DMSO): 1.15(3H,t), 3.26(2H,m), 4.69(2H,br s), 6.86(1H,br t), 7.57(1H,m), 8.15(1H,s), 8.22(1H,s), 8.29(1H,d), 8.65(1H,d), 9.12(1H,s), 10.24(1H,br s), 10.71(1H,br s)
LC-MS m/z 357[M+H]+ Rt=2.22分
【０１８０】
スキーム9
【化１８】
2009541289.tif 000051
【０１８１】
工程1.  1-[7-ブロモ-5-(5-メトキシ-ピリジン-3-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア
ジメチルホルムアミド(8 ml)および水(2 ml)中の、1-(5,7-ジブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル-3-エチル ウレア(300 mg, 0.79 mmol)、炭酸ナトリウム(167 mg, 1.58 mmol)、(1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン)ジクロロ-パラジウム(II)(45 mg, 0.05 mmol)、3-メトキシ-5-ピリジンボロン酸ピナコールエステル(186 mg, 0.79 mmol)の撹拌混合物を、窒素で5分間パージし、100℃で1時間加熱した。反応混合物を真空下に濃縮し、次いで酢酸エチルと水の間で分配した。有機相を乾燥(MgSO4)し、濾過し、真空下に濃縮した。粗物質を酢酸エチル中の0〜5%メタノールで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、1-[7-ブロモ-5-(5-メトキシ-ピリジン-3-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア 1 を白色の固体(49 mg, 15%)として得た。
1HNMR(400MHz,δ,CDCl3) 1.25(3H,t), 3.39(2H,q), 3.98(3H,s), 7.42(1H,s), 7.50(1H,m), 7.58(1H, s), 7.67(1H, m), 7.80(1H,s), 8.29(1H,s) 8.42(1H,s)
LC-MS m/z 407および409[M+H]+ (79 Brおよび81 Br) Rt = 3.22分
【０１８２】
工程2.  1-エチル-3-[5-(5-メトキシ-ピリジン-3-イル)-7-ピリジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア [実施例179]
テトラヒドロフラン(4 ml)中の、1-[7-ブロモ-5-(5-メトキシ-ピリジン-3-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(90 mg, 0.22 mmol)およびビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)クロライド(10 mg, 0.015 mmol)の撹拌溶液に、2-ピリジル亜鉛ブロマイド(3.1 ml, 1.5 mmol, THF中0.5 M溶液)を加えた。反応物を窒素でパージし、次いで60℃で16時間加熱した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、塩化アンモニウム飽和水溶液、続いて食塩水で洗浄した。有機相を乾燥(MgSO4)し、濾過し、真空下に濃縮した。粗生成物を分取HPLCで精製し、1-エチル-3-[5-(5-メトキシ-ピリジン-3-イル)-7-ピリジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレアを白色の固体(25 mg, 27%)として得た。
1HNMR(400MHz,δ, CDCl3) 1.31(3H,t), 3.48(2H,q), 3.90(3H,s), 7.21(1H,m), 7.50(1H,s), 7.80(1H, m), 8.32(1H, s), 8.57(1H, br s), 8.60(1H,s) 10.52(1H,br s)
LC-MS m/z 406[M+H]+ Rt = 2.91分
【０１８３】
1-[5-(2-アミノ-ピリミジン-5-イル)-7-ブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(スキーム1)を用い、同様にして次のものを製造した：
【表１７】
2009541289.tif 000052
【０１８４】
スキーム9A
【化１９】
2009541289.tif 000053
【０１８５】
1-エチル-3-(5-ピリジン-2-イル-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア [実施例155]
DMF(5 mL)中の1-(5-ブロモ-7-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(0.20 g, 0.53 mmol)の溶液に、2-トリブチルスタニル ピリジン(0.23 g, 0.53 mmol)を窒素雰囲気下、室温で加えた。次いで、反応混合物を30分間脱気し、続いてテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(0.061 g, 0.053 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を再度脱気し、窒素雰囲気下、120℃で8時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、DMFを留去し、反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。粗残渣をEtOAc-ヘキサン(80:20)を用いるシリカゲル(230-400 M)で精製し、標記の化合物をオフホワイトの固体(0.012 g, 6%)として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.08 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.10-3.20 (m, 2H), 6.73 (s, 3H), 7.37-7.40 (m, 1H), 7.60-7.63 (m, 1H), 7.87-.7.93 (m, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.17-8.21 (m, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.69-8.70 (m, 1H), 8.98 (m, 1H),および10.78 (br s, 1H)
MS: 376.09 (M+H+) 
【０１８６】
スキーム9B
【化２０】
2009541289.tif 000054
【０１８７】
1-(7-アリル-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア [実施例156]
DMF(2 mL)中の1-(7-ブロモ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(0.14 g, 0.37 mmol)の溶液に、窒素雰囲気下、室温でトリブチルアリル錫(0.15 g, 0.45 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を30分間脱気し、続いてテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(0.043 g, 0.0371 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を再度30分間脱気し、窒素雰囲気下、120℃で20時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、DMFを留去し、反応混合物に水を加え、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。粗残渣をEtOAc-MeOH(95:5)を用いるシリカゲル(230-400 M)で精製し、標記の化合物をオフホワイトの固体(0.034 g, 27%)として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.09 (t, J=7.2 Hz, 3H), 3.12-3.28 (m, 2H), 3.65 (m, 2H), 5.14-5.23 (m, 2H), 5.97-6.07 (m, 1H), 6.74 (br s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.47-7.50 (m, 1H), 7.83 (s, 1H), 8.12 (d, J=7.6 Hz, 1H), 8.56-8.57 (m, 1H), 8.93-8.94 (m, 1H)および10.77 (br s, 1H)
MS: 337.13 (M-H)
【０１８８】
同様にして次のものを製造した：
【表１８−１】
2009541289.tif 000055
【０１８９】
【表１８−２】
2009541289.tif 000056
【０１９０】
【表１８−３】
2009541289.tif 000057
【０１９１】
【表１８−４】
2009541289.tif 000058
【０１９２】
スキーム9C
【化２１】
2009541289.tif 000059
【０１９３】
工程-1.  4-ピリジン-2-イル-モルホリン
トルエン(10 ml)中の2-クロロピリジン(1.0 g, 8.78 mmol)、モルホリン(1.14 g, 13.18 mmol)、NaOtBu(1.27 g, 13.18 mmol)、Pd(OAc)2(0.098 g, 0.44 mmol)およびBINAP(0.12 g, 0.18 mmol)の混合物を20分間脱気した。反応混合物を120℃で16時間還流した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、トルエンを留去し、反応マス(mass)に水を加え、酢酸エチル(3×30 mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、蒸発乾固した。粗残渣をEtOAc-ヘキサン(5:95)を用いるシリカゲル(60-120 M)で精製し、該化合物を黄色の油状物(1.10 g, 76%)として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 3.48-350 (m, 4H), 3.81-3.83 (m, 4H), 6.62-6.67 (m, 2H), 7.47-7.52 (m, 1H), 8.20 (d, J= 8.80 Hz, 1H)
MS: 165.15 (M+H)+
【０１９４】
工程2.  4-(6-トリブチルスタンナニル-ピリジン-2-イル)-モルホリン
ヘキサン(7.0 mL, HPLCグレード)中の2-ジメチルアミノエタノール(0.46 mL, 4.56 mmol)の-5℃に冷却した溶液に、窒素雰囲気下、n-BuLi(1.60 M, 5.70 mL, 9.12 mmol)を滴下した。0℃で30分後、ヘキサン(2.0 mL)中の4-ピリジン-2-イル-モルホリン(0.25 g, 1.52 mmol)を滴下した。反応混合物を0〜5℃で1時間撹拌後、反応媒体を-78℃に冷却し、続いてトリブチル錫クロライド(1.03 mL, 3.70 mmol)を滴下した。得られた反応混合物を-78℃で30分間撹拌し、次いで0〜5℃で2時間撹拌を続けた。次いで、反応混合物を室温に戻るままにした。反応の終了(TLCでモニタリング)後、反応マスを0℃に冷却し、水をゆっくりと加えた。水相をジエチルエーテル(3×20 mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、蒸発乾固した。粗残渣をEtOAc-ヘキサン(2:98)を用いるシリカゲル(230-400 M)で精製し、該化合物を黄色の油状物(0.050 g, 7.20%)として得た。
MS: 455 (M+H)+
【０１９５】
工程3.  1-エチル-3-[7-(6-モルホリン-4-イル-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア [実施例166]
DMF(5 mL)中の1-(7-ヨード-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(0.15 g, 0.35 mmol)の溶液に、窒素雰囲気下、室温で4-(6-トリブチルスタンナニル-ピリジン-2-イル)-モルホリン(0.30 g, 0.70 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を30分間脱気し、続いてテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(0.020 g, 0.018 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を再度30分間脱気し、窒素雰囲気下、120℃で15時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、DMFを留去し、反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。粗残渣を分取HPLCで精製し、標記の化合物(0.01 g, 6.0%)を白色の固体として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.09 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.21 (m, 2H), 3.70-3.71 (m, 4H), 3.78-3.79 (m, 4H), 6.89-6.91 (m, 1H), 7.07 (br s, 1H), 7.50-7.54 (m, 1H), 7.68-7.77 (m, 2H), 7.98 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.26-8.28 (m, 1H), 8.59 (m, 1H), 9.08 (s, 1H)および10.64 (br s, 1H)
MS: 461.24 (M+H)+
定性的HPLC純度 (Xbridge C18, 250×4.6 mm, 260 nm): 90.43% (Rt = 14.25分)
【０１９６】
スキーム9D
【化２２】
2009541289.tif 000060
【０１９７】
工程1.  2-メトキシ-ピリジン
MeOH(50.0 mL)中の2-クロロピリジン(5.0 g, 44.0 mmol)およびKOMe(3.10 g, 44.0 mmol)の混合物をスチールのボンベ中、180℃で48時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、MeOHを留去し、残渣をシリカゲル(60-120 M, 2% EtOAc-ヘキサン)で精製し、標記の化合物(0.60 g, 12%)を得た。
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 3.93 (s, 3H), 6.75 (8.80 Hz, 1H), 6.84-6.87 (m, 1H), 7.53-7.58 (m, 1H)および8.15-8.17 (m,1H)
【０１９８】
工程2.  2-メトキシ-6-トリブチルスタンナニル-ピリジン
ヘキサン(20.0 mL, HPLCグレード)中の2-ジメチルアミノエタノール(3.50 mL, 16.36 mmol)の-5℃に冷却した溶液に、窒素雰囲気下、n-BuLi(3.60 M, 9.0 mL, 32.40 mmol)を滴下した。0℃で30分後、ヘキサン(20.0 mL)中の2-メトキシ-ピリジン(0.60 g, 5.45 mmol)を滴下した。反応混合物を0〜5℃で1時間撹拌後、反応媒体を-78℃に冷却し、続いてトリブチル錫クロライド(3.70 mL, 13.62 mmol)を滴下した。得られた反応混合物を-78℃で30分間撹拌し、次いで0〜5℃で30分間撹拌を続けた。次いで、反応混合物を室温に戻るままにした。反応の終了(TLCでモニタリング)後、反応マスを0℃に冷却し、水をゆっくりと加えた。水相をジエチルエーテル(3×50 mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、蒸発乾固した。粗残渣(1.80 g, 72%)をさらに精製することなく、次の工程に進めた。
【０１９９】
工程3.  1-エチル-3-[7-(6-メトキシ-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア [実施例167]
DMF(5.0 mL)中の1-(7-ブロモ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(0.50 g, 1.32 mmol)の溶液に、窒素雰囲気下、室温で2-メトキシ-6-トリブチルスタンナニル-ピリジン(1.05 g, 2.65 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を30分間脱気し、続いてテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(0.23 g, 0.20 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を再度30分間脱気し、窒素雰囲気下、120℃で6時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、DMFを留去し、反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。粗残渣を分取HPLCで精製し、標記の化合物を白色の固体(0.06 g, 11%)として得た。. M.P. 300.10℃.
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.10 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.21 (q, J= 7.20 Hz, 2H), 4.17 (s, 3H), 6.81 (br s, 1H), 6.89 (d, J= 8.40 Hz, 1H), 7.52-7.55 (m, 1H), 7.92 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 8.07 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.30 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.61 (m, 1H), 9.10 (s, 1H)および10.65 (br s, 1H)
MS: 406.18 (M+H)+
定性的HPLC純度 (Xbridge C18, 250×4.6 mm, 261 nm): 94.90% (Rt = 14.73分)
【０２００】
スキーム9E
【化２３】
2009541289.tif 000061
【０２０１】
工程-1.  ジメチル-ピリジン-2-イル-アミン
アセトニトリル(150.0 mL)中の2-アミノピリジン(5.0 g, 53.12 mmol)の氷冷溶液に、水(33.0 mL)、続いてホルムアルデヒド(37% 水溶液, 50.0 mL)およびナトリウム シアノボロハイドライド(10.0 g, 159.13 mmol)を順次加えた。得られた反応混合物を0℃で10分間撹拌し、続いて酢酸(12.0 mL)を滴下した。次いで、反応混合物を室温で15時間撹拌し続けた。反応の終了(TLCでモニタリング)後、溶媒を蒸発させ、残渣をNaOH水溶液(2N, 50.0 mL)で処理し、ヘキサン(3×50.0 mL)で抽出した。合わせた有機物を食塩水で洗浄し、乾燥(Na2SO4)し、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル(100-200 M, 2% EtOAc-ヘキサン)で精製し、所期の化合物を(3.50 g, 55%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 2.99 (s, 6H), 6.52-6.55 (m, 1H), 6.61 (d, J= 8.80 Hz, 1H), 7.44-7.49 (m, 1H)および8.07 (m, 1H)
MS: 123.10 (M+H)+
【０２０２】
工程-2.  ジメチル-(6-トリブチルスタンナニル-ピリジン-2-イル)-アミン
ヘキサン(10.0 mL, HPLCグレード)中の2-ジメチルアミノエタノール(0.65 mL, 9.60 mmol)の-5℃に冷却した溶液に、窒素雰囲気下、n-BuLi(1.60 M, 11.38 mL, 18.20 mmol)を滴下した。0℃で30分後、ヘキサン(5.0 mL)中のジメチル-ピリジン-2-イル-アミン(0.40 g, 3.20 mmol)を滴下した。反応混合物を0〜5℃で1時間撹拌後、反応媒体を-78℃に冷却し、続いてトリブチル錫クロライド(1.55 mL, 8.0 mmol)を滴下した。得られた反応混合物を-78℃で30分間撹拌し、次いで、0〜5℃で1時間撹拌を続けた。次いで、反応混合物を室温で16時間撹拌を続けた。反応の終了(TLCでモニタリング)後、反応マスを0℃に冷却し、水をゆっくりと加えた。水相をジエチルエーテル(3×20 mL)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、蒸発乾固した。粗残渣をさらに精製することなく、次の工程に進めた。
MS: 413.22
【０２０３】
工程-3.  1-[7-(6-ジメチルアミノ-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア [実施例168]
DMF(5 mL)中の1-(7-ブロモ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(0.125 g, 0.33 mmol)の溶液に、窒素雰囲気下、室温でジメチル-(6-トリブチルスタンナニル-ピリジン-2-イル)-アミン(0.14 g, 0.33 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を30分間脱気し、続いてビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)クロライド(0.023 g, 0.033 mmol)を加えた。次いで、反応混合物を再度30分間脱気し、窒素雰囲気下、100℃で15時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、DMFを留去し、反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。粗残渣を分取HPLCで精製し、標記の化合物(0.006 g, 5.0%)をオフホワイトの固体として得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1.10 (t, J= 6.80 Hz, 3H), 3.19 (m, 2H), 3.23 (s, 6H), 6.84 (d, J= 8.40 Hz, 1H), 6.97 (br s, 1H), 7.51 (m, 1H), 7.58 (d, J= 7.20 Hz, 1H), 7.67 (t, J= 7.60 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.27 (m, 1H), 8.60 (m, 1H), 9.07 (s, 1H)および11.03 (br s, 1H)
MS: 419.24 (M+H)+
HPLC: (Xbridge C18, 250×4.6 mm, 259 nm): 92.51% (Rt= 14.81分)
【０２０４】
工程-2から出発し、同じ方法で次のものも製造した。
【表１９】
2009541289.tif 000062
【０２０５】
スキーム10
【化２４】
2009541289.tif 000063
【０２０６】
1-(5-ブロモ-7-ピリジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア
1-(5,7-ジブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル-3-エチル ウレア(2.62g, 0.00687 mol)およびジクロロビス(トリフェニルホスフィン)-パラジウム(0.48g 0.000687 mol)の撹拌混合物を、窒素下、シリンジにより一度に2-ピリジル亜鉛ブロマイド溶液(THF中の0.5M溶液, 7.66g, 0.0344 mol)で処理した。反応混合物を撹拌下、55℃で18時間加熱し、冷えるままにし、〜5 mlの濃塩酸を含む500mlの水に注いだ。懸濁液を撹拌し、固体を濾去し、水、続いて20mlの1:1 DCM/メタノール混液で洗浄し、粗1-(5-ブロモ-7-ピリジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(1.43 g)を得た。これを0〜100% ヘキサン/酢酸エチル、続いて酢酸エチル中の0〜100%メタノールを用いる「フラッシュ」シリカクロマトグラフィーで精製し、ベージュの固体(1.1g)として所期の生成物を溶離した。
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 1.13(3H,t), 3.23(2H,m), 6.83(1H,t), 7.50(1H,m), 7.91(1H,s), 8.02(1H,t), 8.20(1H,s), 8.36(1H,d), 8.84(1H,dd), 10.76(1H,br s)
LC-MS m/z 377[M+H]+ Rt=3.82分
【０２０７】
1-(4,6-ジピリジン-2-イル ベンゾチアゾール-2-イル) 3-エチルウレア [実施例170]
精製の間に、1-(4,6-ジピリジン-2-イル ベンゾチアゾール-2-イル) 3-エチルウレアのサンプルもオフホワイトの固体として単離した。
1H NMR (400MHz,δ,D6DMSO): 1.16(3H,t), 3.26(2H,m), 6.88(1H,t), 7.44(1H,m), 7.50(1H,m), 7.97(1H,m), 8.06(1H,m), 8.29(1H,d), 8.46(2H,d), 8.71(1H,s), 8.77(1H,d), 8.65(1h,d), 10.70 (1h,s)
LC-MS m/z 376[M+H]+ Rt=2.90分
【０２０８】
実施例171なし
【０２０９】
スキーム13A
【化２５】
2009541289.tif 000064
【０２１０】
1-エチル-3-[7-(2-ヒドロキシ-チアゾール-4-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア [実施例172]
乾燥DCM(5 mL)中の1-エチル-3-[7-(2-メトキシ-チアゾール-4-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア(0.05 g, 0.12mmol)の溶液に、窒素雰囲気下、0℃でBBr3(0.20 mL)を加えた。次いで、反応混合物を窒素雰囲気下、50℃で24時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、反応混合物を0℃に冷却し、次いで氷冷水でクエンチし、続いてDCMで抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。粗残渣をDCM-MeOH(96:4)を用いるシリカゲル(230-400 M)で精製し、標記の化合物を薄緑色がかった固体(3.5 mg, 7%)として得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1.10 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.21 (q, J= 7.20 Hz, 2H), 6.77(br s, 1 H), 6.87(s, 1H), 7.51-7.56 (m, 1H), 7.79 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 8.26 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.62 (br s, 1H), 9.09 (s, 1H), 10.95 ( s, 1H)および11.99 (s, 1H)
MS: 398.07 (M+H)+
定性的HPLC純度 (Xbridge C18, 250×4.6 mm, 263 nm): 88.40% (Rt = 13.21分)
【０２１１】
スキーム13B
【化２６】
2009541289.tif 000065
【０２１２】
1-エチル-3-[7-(6-ヒドロキシ-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア [実施例173]
乾燥DCM中の1-エチル-3-[7-(6-メトキシ-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア(0.04 g, 0.098 mmol)の溶液に、窒素雰囲気下、0℃でBBr3(0.50 ml)を加えた。次いで、反応混合物を窒素雰囲気下、50℃で6時間加熱した。出発物質が消滅していなかった(TLCでモニタリング)ので、反応混合物にトルエン(5 mL)を加え、120℃で16時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、反応混合物を0℃に冷却し、氷冷水でクエンチした。トルエンを留去し、水を加え、DCMで抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に蒸発乾固した。粗残渣をDCM-MeOH(96:4)を用いるシリカゲル(100-200 M)で精製し、標記の化合物をオフホワイトの固体(2.5 mg, 6%)として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.10 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.19 (q, J= 7.20 Hz, 2H), 6.60 (br s, 1 H), 7.0-7.06 (m, 1H), 7.52-7.54 (m, 1H), 7.62-7.72 (m, 2H), 8.0 (m, 2H), 8.28 (d, J= 7.60 Hz, 1H), 8.60 (m, 1H), 9.08 (s, 1H)および10.91-11.02 ( br s, 2H)
MS: 392.23 (M+H)+
定性的HPLC純度 (Xbridge C18, 250×4.6 mm, 261 nm): 95.09% (Rt = 11.74分)
【０２１３】
スキーム14
【化２７】
2009541289.tif 000066
【０２１４】
工程1.  5-ピリジン-3-イル-7-ピリジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イルアミン
DMF(10 mL)中の1-エチル-3-(5-ピリジン-3-イル-7-ピリジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-ウレア(0.19 g, 0.53 mmol)を、圧力容器中、120℃で10時間加熱した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、DMFを留去し、水を加え、酢酸エチルで抽出した。粗固体(0.14 g, 90%)を次の工程にそのまま用いた。
【０２１５】
工程2.  (5-ピリジン-3-イル-7-ピリジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-カルバミン酸エチルエステル [実施例174]
トルエン(5 mL)中の5-ピリジン-3-イル-7-ピリジン-2-イル-ベンゾチアゾール-2-イルアミン(0.10 g, 0.33 mmol)の溶液に、室温でトリエチルアミン (0.10 ml, 0.07 mmol)を加えた。反応混合物を40℃に加熱し、続いてエチルクロロホルメート(0.17 g, 0.16 mmol)を加えた。得られた反応混合物を窒素雰囲気下、70℃で16時間撹拌した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、トルエンを減圧下に蒸発させた。粗固体の残渣を水で洗浄し、酢酸エチル：ヘキサン(60:40)を用いるシリカゲル(230-400 M)のクロマトグラフィーで精製し、標記の化合物を白色の固体(0.046 g, 38%)として得た。
M.P. 235℃
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.31 (t, J=7.20 Hz, 3H), 4.25-4.30 (m, 2H), 7.45-7.48 (m, 1H), 7.53-7.56 (m, 1H), 8.02 (t, J= 7.60 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.33 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H, J=8.0 Hz), 8.56 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.63 (d, J= 4.80 Hz, 1H), 8.84 (m, 1H), 9.13 (s, 1H)および11.97 (br s, 1H)
MS: 377.16 (M+H+)
定性的HPLC純度 (Xbridge C18, 250×4.6 mm, 260 nm): 96.88% (Rt = 14.77分)
【０２１６】
スキーム16
【化２８】
2009541289.tif 000067
【０２１７】
工程-1.  1-エチル-3-[7-(5-メチル-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア [実施例175]
無水DMF(5.0 mL)中の1-(7-ブロモ-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア(0.25 g, 0.66 mmol)の溶液にK2CO3(0.28 g, 1.99 mmol)を加え、得られた溶液を窒素で15分間パージした。反応混合物に[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)-フェロセン]ジクロロパラジウム(II)とジクロロメタンとの複合物(0.054 g, 0.066 mmol)を加え、再度窒素でもう15分間パージし、続いて5-メチル-2-ピリジル亜鉛ブロマイド(3.32 mL, 1.66 mmol)を加えた。得られた反応混合物を100℃で15時間撹拌し、続いてDMFを真空下で除去した。水を加え、EtOAc(3×20 mL)で抽出した。合わせた有機物を食塩水で洗浄し、乾燥(Na2SO4)し、濃縮した。残渣を分取-HPLCで精製し、所期の生成物(0.011 g, 4%)をオフホワイトの固体として得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1.13 (t, J= 6.80 Hz, 3H), 2.40 (s, 3H), 3.21 (m, 2H), 6.93 (br s, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.83 (m, 1H), 8.01 (s, 1H), 8.27-8.31 (m, 2H), 8.41 (d, J= 8.40 Hz, 1H), 8.61-8.65 (m, 2H), 9.11 (br s, 1H)および10.71 (br s, 1H)
MS: 390.19 (M+H)+
M.P. 231.0℃
定性的HPLC純度 (Xbridge C18, 250×4.6 mm, 265nm): 98.58 (Rt = 14.41分)
【０２１８】
同様にして次のものを製造した：
【表２０−１】
2009541289.tif 000068
【０２１９】
【表２０−２】
2009541289.tif 000069
【０２２０】
実施例178なし
【０２２１】
スキーム18
【化２９】
2009541289.tif 000070
【０２２２】
工程1.  2-アミノ-3-ブロモ-5-ニトロ-フェノール
DCM(1.0 L)中の2-アミノ-5-ニトロ-フェノール(40.0 g, 259.52 mmol)の氷冷溶液に臭素(13.38 mL, 259.52 mmol)を滴下した。得られた反応混合物を室温で45分間撹拌した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、水を加え、EtOAc(3×1.0 L)で抽出した。合わせた有機物を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に濃縮した。粗生成物(55.0 g, 92%)をさらに精製することなく次の工程に進めた。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6):δ 6.06 (s, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.85 (s, 1H)および10.68 (s, 1H)
【０２２３】
工程2.  3-ブロモ-5-ニトロ-フェノール
EtOH(150.0 mL)中の2-アミノ-3-ブロモ-5-ニトロ-フェノール(6.50 g, 27.89 mmol)の氷冷溶液に濃H2SO4(9.40 mL, 177.13 mmol)を少しずつ加えた。次いで、反応混合物を50℃に加熱し、続いてNaNO2(6.19 g, 89.82 mmol)を少しずつ加えた。得られた溶液を80℃で2時間還流した。次いで、反応混合物を水で希釈し、EtOAc(3×150.0 mL)で抽出した。合わせた有機物を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に濃縮した。粗生成物をシリカゲル(100-200 M, 10% EtOAc-ヘキサン)で精製し、所期の生成物(5.0 g, 82%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.37 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.77 (s, 1H)および10.91 (s, 1H)
【０２２４】
工程3.  3-ベンジルオキシ-5-ブロモ-ニトロベンゼン
アセトン(420.0 mL)中の3-ブロモ-5-ニトロ-フェノール(21.0 g, 96.33 mmol)の氷冷溶液にK2CO3(40.0 g, 289.41 mmol)を加え、続いてベンジルブロマイド(17.20 mL, 144.40 mmol)を加えた。得られた反応混合物を室温で2時間撹拌した。次いで、反応混合物を水で希釈し、EtOAc(3×250.0 mL)で抽出した。合わせた有機物を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に濃縮した。粗生成物をシリカゲル(100-200 M, 5% EtOAc-ヘキサン)で精製し、所期の生成物(27.0 g, 91%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 5.13 (s, 2H), 7.35-7.45 (m, 6H), 7.75 (s, 1H)および7.98 (s, 1H).
【０２２５】
工程4.  3-ベンジルオキシ-5-ブロモ-フェニルアミン
THF(800.0 mL)中の3-ベンジルオキシ-5-ブロモ-ニトロベンゼン(27.0 g, 87.60 mmol)の溶液に、SnCl2.2H2O(99.0 g, 438.30 mmol)を加え、得られた反応混合物を65℃で2時間加熱還流した。次いで、反応マスを0〜5℃に冷却し、NaHCO3の飽和溶液でpH 8まで塩基性化し、次いでEtOAc(3×1.0 L)で抽出した。合わせた有機物を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に濃縮した。そのようにして得られた残渣(23.60 g, 95%)をさらに精製することなく次の工程に進めた。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 3.70 (br s, 2H), 5.03 (s, 2H), 6.25 (s, 1H), 6.46 (s, 1H), 6.65 (s, 1H)および7.33-7.52 (m, 5H)
MS: 278.04 (M+H)+
【０２２６】
工程5.  1-ベンゾイル-3-(3-ベンジルオキシ-5-ブロモ-フェニル)-チオウレア
アセトン(550.0 mL)中の3-ベンジルオキシ-5-ブロモ-フェニルアミン(23.50 g, 84.40 mmol)の溶液に、ベンジル イソチオシアネート(18.50 mL, 93.13 mmol)を加え、反応混合物を室温で30分間撹拌した。反応の終了(TLCでモニタリング)後、溶媒を蒸発させ、そのようにして得られた残渣をヘキサンで洗浄し、所期の生成物(33.0 g, 89%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 5.05 (s, 2H), 7.05 (m, 1H), 7.38-7.50 (m, 6H), 7.52-7.55 (m, 3H), 7.57-7.67 (m, 1H), 7.90 (d, J= 7.60 Hz, 2H), 9.05 (br s, 1H)および12.67 (br s, 1H)
【０２２７】
工程6.  (3-ベンジルオキシ-5-ブロモ-フェニル)-チオウレア
THF(500.0 mL)中の1-ベンゾイル-3-(3-ベンジルオキシ-5-ブロモ-フェニル)-チオウレア(33.0 g, 74.70 mmol)の氷冷溶液にH2O(180.0 mL)中のNaOH(15.0 g, 375.0 mmol)の溶液を加えた。得られた反応混合物を65℃で15時間撹拌した。次いで、反応マスを室温に冷却し、水を加え、EtOAc(3×1.0 L)で抽出した。合わせた有機物を水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に濃縮し、所期の化合物(23.50 g, 94%)を得、それをさらに精製することなく次の工程に進めた。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 5.10 (s, 2H), 6.97 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.32-7.44 (m, 7H)および9.78 (br s, 1H)
MS: 337.04 (M+H)+
【０２２８】
工程7.  5-ベンジルオキシ-7-ブロモ-ベンゾチアゾール-2-イルアミン
CHCl3(80.0 mL)中の(3-ベンジルオキシ-5-ブロモ-フェニル)-チオウレア(2.0 g, 5.93 mmol)の溶液を-60℃に冷却し、続いて、CHCl3(20.0 mL)中の臭素(0.30 mL, 5.93 mmol)の溶液を滴下した。得られた反応混合物を室温で15分間撹拌し、続いて70℃で1時間還流した。次いで、反応マスを冷却し、25%アンモニア水溶液でpH 8〜9に塩基性化し、次いでEtOAc(3×150.0 mL)で抽出した。合わせた有機物を無水Na2SO4で乾燥し、減圧下に濃縮した。粗残渣をシリカゲル(60-120 M, 40% EtOAc-ヘキサン)で精製し、所期の化合物(1.35 g, 68%)を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 5.12 (s, 2H), 6.93 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.98 d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.30-7.45 (m, 5H)および7.70 (br s, 2H)
MS: 335.0 (M+H)+
工程8.  1-(5-ベンジルオキシ-7-ブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル)-3-エチル-ウレア
ジオキサン(50.0 mL)中の5-ベンジルオキシ-7-ブロモ-ベンゾチアゾール-2-イルアミン(1.35 g, 4.02 mmol)の溶液に、エチル イソシアネート(1.90 mL, 24.22 mmol)を加え、得られた反応混合物を80℃で15時間加熱した。次いで、溶媒を蒸発させ、残渣を水中、85℃で5〜6時間撹拌した。次いで、溶液を濾過し、そのようにして得られた固体を熱水およびヘキサンで洗浄し、所期の生成物(1.50 g, 92%)をオフホワイトの固体として得た。M.P. 294.2℃
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1.08 (t, J= 7.20 Hz, 3H), 3.21 (m, 2H), 5.24 (s, 2H), 6.71 (br s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.26-7.47 (m, 5H)および10.83 (br s, 1H)
MS: 406.0 (M+H)+
【０２２９】
工程9.  1-[5-ベンジルオキシ-7-(4-メチル-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア
ジメチルスルホキシド(7ml)中の1-[5-ベンジルオキシ-7-ブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(406mg, 1.0mmol)、ビス(ネオペンチル)グリコラート ジボロン(452mg, 2.0mmol)および酢酸カリウム(294mg, 3.0mmol)の混合物を、窒素で5分間パージした。ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体(82mg, 0.1mmol)を加え、反応混合物を密封し、80℃で16時間加熱した。
【０２３０】
反応混合物を室温に冷却した。2-ブロモ-4-メチルピリジン(258mg, 1.5mmol)、続いて炭酸セシウム水溶液(3.7M, 0.405ml, 1.5mmol)を加えた。反応混合物を窒素で5分間パージし、テトラキストリフェニルホスフィン パラジウム(0)(115mg, 0.1mmol)で処理し、密封し、80℃で8時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチル(150ml)で希釈し、水(3×20ml)、続いて食塩水(25ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)した。溶媒を真空下に除去し、残渣を1:1 酢酸エチル：石油エーテルで溶出するフラッシュシリカクロマトグラフィーで精製し、1-[5-ベンジルオキシ-7-(4-メチル-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレアをオフホワイトの固体(290mg, 69%)として得た。
LC-MS m/z 419[M+H]+ Rt=4.11分
【０２３１】
工程10.  1-エチル-3-[5-ヒドロキシ-7-(4-メチル-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア
無水ジクロロメタン(2ml)中の、1-[5-ベンジルオキシ-7-(4-メチル-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(100mg, 0.239mmol)の撹拌溶液を、メタンスルホン酸(0.25ml)で処理し、室温で2時間保持した。次いで、ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を水(3ml)で処理した。得られた混合物を酢酸エチル(3×20ml)で抽出し、水性部分を炭酸水素ナトリウムで塩基性化した。得られた混合物を酢酸エチル(3×30ml)で抽出し、乾燥(MgSO4)し、溶媒を真空下に除去し、粗1-エチル-3-[5-ヒドロキシ-7-(4-メチル-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア(38mg, 46%)をオフホワイトの固体として得、それをさらに精製することなく用いた。
LC-MS m/z 329[M+H]+ Rt=2.86分
【０２３２】
工程11.  トリフルオロ-メタンスルホン酸 2-(3-エチル-ウレイド)-7-(4-メチル-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-5-イルエステル
無水ジクロロメタン(3ml)中の、粗1-エチル-3-[5-ヒドロキシ-7-(4-メチル-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア(38mg, 0.116mmol)の撹拌溶液を無水ピリジン(31mg, 0.394mmol)で処理した。得られた溶液を氷浴で冷却し、無水トリフルオロメタンスルホン酸(111mg, 0.394mmol)で処理した。室温で2時間撹拌後、溶液をジクロロメタン(75ml)で希釈し、水(4×25ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)し、溶媒を除去し、粗トリフルオロ-メタンスルホン酸 2-(3-エチル-ウレイド)-7-(4-メチル-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-5-イルエステル(44mg, 100%)を得、これをさらに精製することなく用いた。
【０２３３】
工程12.  1-エチル-3-[7-(4-メチル-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレア [実施例176]
粗トリフルオロ-メタンスルホン酸 2-(3-エチル-ウレイド)-7-(4-メチル-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-5-イルエステル(44mg, 0.096mmol)、3-ピリジンボロン酸(13mg, 0.106mmol)、粉末のリン酸三カリウム(25mg, 0.115mmol)、無水1,4-ジオキサン(0.7 ml)および無水メタノール(1.2ml)の撹拌混合物を窒素で15分間パージし、1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体(12mg, 0.0144mmol)を加え、混合物を窒素雰囲気下、80℃で16時間加熱した。室温に冷却後、混合物をセライトにより濾過し、メタノールで十分に洗浄した。濾液を真空下に蒸発させ、粗1-エチル-3-[7-(4-メチル-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-ウレアを得た。
LC-MS m/z 390[M+H]+ Rt=2.63分
【０２３４】
スキーム18b
【化３０】
2009541289.tif 000071
【０２３５】
工程1〜8はスキーム18と同様。
【０２３６】
工程9.  1-[5-ベンジルオキシ-7-(5-シアノ-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア
ジメチルスルホキシド(7ml)中の、1-[5-ベンジルオキシ-7-ブロモ-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(406mg, 1.0mmol)、ビス(ネオペンチル)グリコラート ジボロン(452mg, 2.0mmol)および酢酸カリウム(294mg, 3.0mmol)の混合物を窒素で5分間パージした。ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン パラジウム(II)クロライド錯体(82mg, 0.1mmol)を加え、反応混合物を密封し、80℃で16時間加熱した。
反応混合物を室温に冷却した。2-クロロ-4-シアノピリジン(208mg, 1.5mmol)、続いて炭酸セシウム水溶液(3.7M, 0.405ml, 1.5mmol)を加えた。反応混合物を窒素で5分間パージし、テトラキストリフェニルホスフィン パラジウム(0)(115mg, 0.1mmol)で処理し、密封し、80℃で8時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチル(150ml)で希釈し、水(3×20ml)、続いて食塩水(25ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)した。溶媒を真空下に除去し、残渣を1:1 酢酸エチル：石油エーテルで溶出するフラッシュシリカクロマトグラフィーで精製し、1-[5-ベンジルオキシ-7-(5-シアノ-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレアを淡黄色の固体(140mg, 32%)として得た。
LC-MS m/z 430[M+H]+ Rt=3.92分
【０２３７】
工程10.  1-[7-(5-シアノ-ピリジン-2-イル)-5-ヒドロキシ-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア
無水ジクロロメタン(3ml)中の、1-[5-ベンジルオキシ-7-(5-シアノ-ピリジン-2-イル)-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(110mg, 0.26mmol)の撹拌溶液をメタンスルホン酸(1ml)で処理し、室温で2時間保持した。有機層を酢酸エチルで希釈し、次いで水(3×30ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)し、溶媒を真空下に除去し、粗1-[7-(5-シアノ-ピリジン-2-イル)-5-ヒドロキシ-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(80mg, 90%)をオフホワイトの固体として得、それをさらに精製することなく用いた。
LC-MS m/z 340[M+H]+ Rt=2.96分
【０２３８】
工程11.  トリフルオロ-メタンスルホン酸 7-(5-シアノ-ピリジン-2-イル)-2-(3-エチル-ウレイド)-ベンゾチアゾール-5-イルエステル
無水ジメチルホルムアミド(3ml)中の、粗1-[7-(5-シアノ-ピリジン-2-イル)-5-ヒドロキシ-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア(80mg, 0.23mmol)の撹拌懸濁液を、N-フェニルビス(トリフルオロメタンスルホンイミド)(99mg, 0.276mmol)および無水トリエチルアミン(32μl, 0.23mmol)で処理した。室温で2時間撹拌後、溶液を酢酸エチル(100ml)で希釈し、水(3×30ml)で洗浄し、乾燥(MgSO4)し、溶媒を除去し、粗トリフルオロ-メタンスルホン酸 7-(5-シアノ-ピリジン-2-イル)-2-(3-エチル-ウレイド)-ベンゾチアゾール-5-イルエステル(108mg, 100%)を得、それをさらに精製することなく用いた。
【０２３９】
工程12.  1-[7-(5-シアノ-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレア [実施例107]
粗トリフルオロ-メタンスルホン酸 7-(5-シアノ-ピリジン-2-イル)-2-(3-エチル-ウレイド)-ベンゾチアゾール-5-イルエステル(108mg, 0.23mmol)、3-ピリジンボロン酸(56mg, 0.46mmol)、炭酸セシウム水溶液(0.155ml, 0.57mmol, 3.7M)、ジメチルホルムアミド(2.4ml)および水(0.4ml)の撹拌混合物を窒素で15分間パージし、テトラキストリフェニルホスフィン パラジウム(0)(27mg, 0.023mmol)で処理し、密封し、80℃で8時間加熱した。室温に冷却後、混合物をセライトにより濾過し、メタノールで十分に洗浄した。濾液を真空下に蒸発させ、粗1-[7-(5-シアノ-ピリジン-2-イル)-5-ピリジン-3-イル-ベンゾチアゾール-2-イル]-3-エチル-ウレアを褐色の固体して得た。
LC-MS m/z 401[M+H]+ Rt=2.61分
【０２４０】
上記の合成で用いた分析方法
用いた典型的な分析方法および製造方法を以下に記載する：
【０２４１】
標準的な酸性LC-MS条件(3cm  モード  ギ酸)
分析HPLC設定
溶媒：-  0.1% (V/V) ギ酸を有するアセトニトリル(Far UVグレード)
0.1% ギ酸を有する水(Elga UHQユニットによる高純度) 
カラム：-  Phenomenex Luna 5μC18 (2), 30×4.6mm.
流速：-  2ml/分
勾配：-  A: 水/ギ酸    B: MeCN/ギ酸
時間      A%            B%
0.00      80            20
2.50      0.00          100
3.50      0.00          100
3.60      80            20
4.50      80            20
【０２４２】
HPまたはWaters DADによるUV検出
出発レンジ(nm)  210    終了レンジ(nm)  400    レンジ間隔(nm)  4.0
その他の波長のトレースは、DADデータから抽出される。
【０２４３】
MS検出：Micromass Platform またはZQのどちらか、両方シングル4重極型LC-MS装置
フロースプリッター(Flow splitter)は、マススペクトル(mass spec)に対して約300μl/分を与える。
MSデータ(m/z)のスキャンレンジ
出発(m/z)  100
終了(m/z)  650または必要なときは1000
+ve / -veのスイッチングで
イオン化は化合物のタイプによりエレクトロスプレーまたはAPCIのどちらかである(ZQは単回の運転でESIとAPCIのデータの両方を得ることができるESCIオプションを有する)。
典型的なESI電圧および温度は：
ソース(Source) 120-150C  3.5KV キャピラリー  25V コーン(cone)である。
典型的なAPCI電圧および温度は：
ソース 140-160C  17uA コロナ(corona)  25V コーン  脱溶媒(Desolvation) (プラットホーム) 350Cである。
【０２４４】
HPLC精製条件
Trilution標準条件- (0〜2分の分析的Ret時間を有する試料、酸性)
分取HPLC設定1
溶媒：-  0.1% ギ酸を有するアセトニトリル(Far UVグレード)
0.1% ギ酸を有する水
カラム：-  Waters Sunfire C18, 100×19 mm. (プラス  ガード  カートリッジ)
流速：-  10ml/分
勾配：-  A: 水/ギ酸    B: MeCN/ギ酸
時間      A%            B%
0.00      95            5
10        80            20
22        0             100
25        0             100
26        95            5
33        95            5
典型的注入量 100-600ul (10-50mg/ml)
Gilson２波長検出器によるUV検出
回収および「観測」波長はLC-MS DADの結果から選択した。
【０２４５】
Trilution標準条件- (2〜3分の分析的Ret時間を有する試料、酸性)
分取HPLC設定条件2
溶媒：-  0.1% ギ酸を有するアセトニトリル(Far UVグレード)
0.1% ギ酸を有する水
カラム：-  Waters Sunfire C18, 100×19 mm. (プラス  ガード  カートリッジ)
流速：-  10ml/分
勾配：-  A: 水/ギ酸    B: MeCN/ギ酸
時間      A%            B%
0.00      95            5
6         90            10
18        0             100
23        0             100
23.5      95            5
30        95            5
典型的注入量 相溶可能な溶媒中100-600ul (10-50mg/ml)
Gilson２波長検出器によるUV検出
回収および「観測」波長はLC-MS DADの結果から選択した。
【０２４６】
NMR
1H NMRスペクトルは400MHz NMR装置で記録した。
表1.  本明細書に記載された実施例の構造
【表２１−１】
2009541289.tif 000072
【０２４７】
【表２１−２】
2009541289.tif 000073
【０２４８】
【表２１−３】
2009541289.tif 000074
【０２４９】
【表２１−４】
2009541289.tif 000075
【０２５０】
【表２１−５】
2009541289.tif 000076
【０２５１】
【表２１−６】
2009541289.tif 000077
【０２５２】
生物学的データ
最小阻止濃度(MIC)試験
本発明の化合物を、液体または固体培地での感受性試験による抗菌活性試験を行なった。各菌株に対する化合物のMICは、臨床研究所および規格研究所(Clinical Laboratories and Standards Institute)、前の米国国立臨床研究所規格委員会(National Committee for Clinical Laboratory Standards)のガイドライン(Clinical Laboratories and Standards Institute. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Approved Standard-Seventh Edition. Document M7-A7. CLSI, Wayne, Pa, 2006; Clinical Laboratories and Standards Institute. Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria; Approved Standard-Sixth Edition. Document M11-A6. CLSI, Wayne, Pa, 2004)による液体マイクロ希釈法または寒天希釈法により測定した。クラミジア トラコマチス(Chlamydia trachomatis)およびクラミドフィラ ニューモニアエに対するMICは、免疫蛍光ストレイニング(straining)による封入の実証(demonstration of inclusions)でのマイクロタイター組織培養取り込み法(microtitre tissue culture incorporation technique)を用いて測定した。
本発明の化合物は、上記のMICアッセイにおいて抗菌作用を有することが判った。
【０２５３】
ジャイレースATPaseアッセイ
ジャイレースはATPをADPと無機のホスフェートに変換する。放出されたホスフェートはマラカイトグリーン溶液を加えることにより検出でき、600nmでの吸光度の増加をモニタリングすることにより測定できる。
ATPaseアッセイを、4.8 μg/ml ジャイレース酵素(大腸菌からのA2B2複合体)、0.08 μg/ml ssDNA、35 mM Tris pH 7.5、24 mM KCl、2 mM MgCl2、6.5% グリセロール、2 mM DTT、1.8 mMスペルミジン、0.5 mg/ml BSA、および阻害剤を含む5% DMSO溶液を含む緩衝液中で行う。最終濃度1mMとなるようにATPを加えることにより反応を開始し、30℃で60分間インキュベーションする。200μlのマラカイトグリーン溶液(0.034% マラカイトグリーン、10 mM モリブデン酸アンモニウム、1 M HCl, 3.4% エタノール、0.01% ツイーン20)を加えて反応を停止する。5分間顕色させ、600nmでの吸光度を分光光度法で測定する。無化合物および無酵素のコントロールを用いる吸光度表示からIC50値を決定する。
【０２５４】
本発明の前記の全ての実施例化合物が、0.75マイクロモル未満の50%阻害濃度(IC50)で、前記のジャイレースATPaseアッセイを阻害することが判った。
全ての実施例は細菌の増殖を阻害した。表2に、前記のMICアッセイでのエンテロカッカス フェカリス ATCC 29212に対する各実施例のMIC値を示す。活性「C」を有する実施例は、2〜16 μg/mlのMICを示す。活性「B」を有する実施例は、0.25〜1 μg/mlのMICsを示す。活性「A」を有する実施例は、＜0.25 μg/mlのMICsを示す。
【０２５５】
表2.  エンテロカッカス フェカリスに対するMIC
【表２２−１】
2009541289.tif 000078
【０２５６】
【表２２−２】
2009541289.tif 000079
【０２５７】
実施例化合物のいくつかは、その他の細菌種に対する活性試験も行なった。例えば、表3は、種々の細菌種に対する実施例163のMICを示す。活性「C」は2〜16 μg/mlのMICを示す。活性「B」は0.25〜1 μg/mlのMICを示す。活性「A」は、＜0.25 μg/mlのMICを示す。
【０２５８】
表3.  種々の細菌に対するMIC
【表２３−１】
2009541289.tif 000080
【０２５９】
【表２３−２】
2009541289.tif 000081
【０２６０】
実施例化合物のいくつかは、マウスの感染症の黄色ブドウ球菌敗血症モデルでの活性試験も行なった。例えば、表4は、黄色ブドウ球菌の致死量での腹腔内接種1時間後または1時間と6時間後に実施例4、91および163の化合物のそれぞれを単回または2回腹腔内投与量で示されたように処置された感染マウスの7日目での生存を示す。
【０２６１】
表4.  ネズミの生存
【表２４】
2009541289.tif 000082
【手続補正書】
【提出日】平成21年3月9日(2009.3.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２４６】
NMR
1H NMRスペクトルは400MHz NMR装置で記録した。
表1.  本明細書に記載された実施例の構造
【表２１−１】
2009541289.tif 000089
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２４７】
【表２１−２】
2009541289.tif 000090
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２４８】
【表２１−３】
2009541289.tif 000091
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２４９】
【表２１−４】
2009541289.tif 000092
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２５０】
【表２１−５】
2009541289.tif 000093
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２５１】
【表２１−６】
2009541289.tif 000094
【国際調査報告】
2009541289.tif 000095
2009541289.tif 000096
2009541289.tif 000097
2009541289.tif 000098
2009541289.tif 000099