(57)【要約】  式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体（式（Ｉ）ここで、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、本明細書で定義したとおりである）、かかる化合物の製造方法、かかる化合物を含む医薬組成物および医薬におけるかかる化合物の使用。2009543837.tif 000042
2009543837.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2009543837.tif 000040
［式中、
Ｒ1は、メチル、−ＣＦ3、塩素、フッ素または臭素を表し；
Ｒ2は、式（ｉ）または（ｉｉ）：
【化２】
2009543837.tif 000041
で示される基を表し；
Ｒ3は、イソプロピル、イソブチル、−ＣＨ2−Ｃ(＝ＣＨ2)(Ｍｅ)、−ＣＨ2−ＣＨ(Ｅｔ)2、−ＣＨ2−シクロプロピル、−ＣＨ2−シクロヘキシルまたはシクロペンチルを表し、
Ｒ4は、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＮＨ−ＳＯ2−Ｒ5またはテトラゾールを表し；
Ｒ5は、Ｃ1-3アルキル、置換されていてもよいフェニルまたは２,４−ジメチルイソオキサゾール−４−イルを表す］
で示される化合物またはその誘導体。
【請求項２】
実施例１〜１０の化合物から選択される請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項３】
請求項１もしくは２記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体を医薬担体および／または賦形剤と一緒に含む医薬組成物。
【請求項４】
活性な治療物質として使用するための請求項１もしくは２記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項５】
ＥＰ1受容体でのＰＧＥ2の作用によって媒介される状態の治療に用いるための請求項１もしくは２記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項６】
ＥＰ1受容体でのＰＧＥ2の作用によって媒介される状態に苦しんでいるヒトまたは動物対象体の治療方法であって、該対象体に請求項１もしくは２記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体の有効量を投与することを含む方法。
【請求項７】
疼痛、または炎症性障害、免疫障害、骨障害、神経変性性障害もしくは腎障害に罹患しているヒトまたは動物対象体の治療方法であって、該対象体に請求項１もしくは２記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体の有効量を投与することを含む方法。
【請求項８】
炎症性疼痛、神経因性疼痛または内臓痛に苦しんでいるヒトまたは動物対象体の治療方法であって、該対象体に請求項１もしくは２記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体の有効量を投与することを含む方法。
【請求項９】
ＥＰ1受容体でのＰＧＥ2の作用によって媒介される状態の治療のための薬剤の製造のための請求項１もしくは２記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用。
【請求項１０】
疼痛、または炎症性障害、免疫障害、骨障害、神経変性性障害もしくは腎障害のような状態の治療または予防のための薬剤の製造のための請求項１もしくは２記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用。
【請求項１１】
炎症性疼痛、神経因性疼痛または内臓痛のような状態の治療または予防のための薬剤の製造のための請求項１もしくは２記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インドール化合物、それらの製造方法、それらを含有する医薬組成物、および医薬におけるそれらの使用、特に、ＥＰ1受容体でのＰＧＥ2の作用により媒介される状態の治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＥＰ1受容体は、７回膜貫通型受容体であり、その天然リガンドは、プロスタグランジンＰＧＥ2である。ＰＧＥ2は他のＥＰ受容体（ＥＰ2型、ＥＰ3型およびＥＰ4型）に対しても親和性を有する。ＥＰ1受容体は、平滑筋収縮、疼痛（特に、炎症性、神経因性および内臓性）、炎症、アレルギー活性、腎臓制御および胃粘液分泌または腸管粘液分泌に関与している。本発明者らは、この度、ＥＰ1受容体に対して高い親和性で結合する新規な化合物群を見出した。
【０００３】
多くの論文が、プロスタノイド受容体の特徴付けおよび治療的関連性ならびに最も一般的に使用される選択的アゴニストおよびアンタゴニストについて記載している：非特許文献１および非特許文献２および非特許文献３。非特許文献４の論文は、プロスタグランジンＥ2（ＰＧＥ2）が、マウスの脊髄において、ＥＰ1受容体サブタイプを介して異痛を発現し、ＥＰ2受容体およびＥＰ3受容体を介して痛覚過敏を発現することを示唆している。さらにまた、非特許文献５の論文は、ＥＰ1ノックアウトマウスにおいて痛覚感受性反応が約５０％減少することを示している。Anesthesia and Analgesiaからの２つの研究論文は、ＥＰ1受容体アンタゴニスト（ＯＮＯ−８７１１）がラットの慢性狭窄損傷モデルにおいて痛覚過敏および異痛を減少させること（非特許文献６）、および同アンタゴニストが齧歯類の術後痛モデルにおいて機械的な痛覚過敏を阻害すること（非特許文献７）を示している。非特許文献８は、ヒトの過敏症モデルでの内臓痛の治療におけるＥＰ1受容体アンタゴニストの効力を立証している。かくして、選択的プロスタグランジンリガンド、アゴニストまたはアンタゴニストに依存してプロスタグランジンＥ受容体サブタイプが考慮され、それらは、慣用の非ステロイド性抗炎症薬と同様の抗炎症性、抗発熱性および鎮痛性を有し、加えて、ホルモン誘発性子宮収縮を阻害し、抗癌効果を有する。これらの化合物は、広範囲なシクロオキシゲナーゼ阻害剤であるＮＳＡＩＤの機序に基づく副作用のいくつかを誘発する能力を低下させる。特に、該化合物は、胃腸毒性を低下させる能力、腎副作用を減少させる能力、出血時間を減少させる効果およびアスピリン感受性喘息患者における喘息発作誘発を低下させる能力を有する。さらにまた、潜在的に有益なプロスタグランジン経路を割愛することにより、これらの剤は、ＮＳＡＩＤＳおよび／またはＣＯＸ−２阻害剤よりも増強された効果を有することができる。
【０００４】
非特許文献９における研究は、ラットにおけるＰＧＥ2誘発性の体温上昇が主にＥＰ1受容体を介して媒介されることを示唆している。
【０００５】
特許文献１（１９９６年３月７日）、特許文献２（１９９６年４月２５日）、特許文献３（１９９７年１月８日）、特許文献４（２００１年３月２２日）、特許文献５（２００３年１０月１６日）、特許文献６（２００３年１２月１１日）、特許文献７（２００４年５月１３日）、特許文献８（２００４年９月３０日）、特許文献９（２００５年４月２８日）、特許文献１０（２００５年４月２８日）、特許文献１１（２００５年４月２８日）、特許文献１２（２００５年５月６日）、特許文献１３（２００５年６月１６日）、特許文献１４（２００５年１１月１７日）、特許文献１５（２００６年６月２９日）、特許文献１６（２００６年１１月２日）、特許文献１７（２００６年１１月２日）、特許文献１８（２００６年１１月２日）には、プロスタグランジン媒介疾患の治療に有用な化合物が開示されている。
【０００６】
非特許文献１０には、ヒトＥＰ1プロスタノイド受容体に対するリガンドとしての２,３−ジアリールチオフェン類が開示されている。非特許文献１１には、ＥＰ1受容体アンタゴニストとしての２,３−ジアリールチオフェン類が開示されている。非特許文献１２にはまた、選択的ＥＰ1受容体アンタゴニストとしての２,３−ジアリールチオフェンが開示されている。
【０００７】
非特許文献１３、非特許文献１４、非特許文献１５、非特許文献１６、非特許文献１７、非特許文献１８、非特許文献１９、非特許文献２０は、ＥＰ1受容体アンタゴニスト化合物に関するものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第９６／０６８２２号
【特許文献２】国際公開第９６／１１９０２号
【特許文献３】欧州特許出願公開第７５２４２１号明細書
【特許文献４】国際公開第０１／１９８１４号
【特許文献５】国際公開第０３／０８４９１７号
【特許文献６】国際公開第０３／１０１９５９号
【特許文献７】国際公開第２００４／０３９７５３号
【特許文献８】国際公開第２００４／０８３１８５号
【特許文献９】国際公開第２００５／０３７７８６号
【特許文献１０】国際公開第２００５／０３７７９３号
【特許文献１１】国際公開第２００５／０３７７９４号
【特許文献１２】国際公開第２００５／０４０１２８号
【特許文献１３】国際公開第２００５／０５４１９１号
【特許文献１４】国際公開第２００５／１０８３６９号
【特許文献１５】国際公開第２００６／０６６９６８号
【特許文献１６】国際公開第２００６／１１４２７２号
【特許文献１７】国際公開第２００６／１１４２７４号
【特許文献１８】国際公開第２００６／１１４３１３号
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Eicosanoids; From Biotechnology to Therapeutic Applications, Folco, Samuelsson, Maclouf, and Velo eds, Plenum Press, New York, 1996, chap. 14, 137-154
【非特許文献２】Journal of Lipid Mediators and Cell Signalling, 1996, 14, 83-87
【非特許文献３】Prostanoid Receptors, Structure, Properties and Function, S Narumiya et al, Physiological Reviews 1999, 79(4), 1193-126
【非特許文献４】The British Journal of Pharmacology, 1994, 112, 735-740
【非特許文献５】The Journal of Clinical Investigation, 2001, 107(3), 325
【非特許文献６】Anesthesia and Analgesia, 2001, 93, 1012-7
【非特許文献７】Anesthesia and Analgesia, 2001, 92, 233-238
【非特許文献８】S. Sarkar et al in Gastroenterology, 2003, 124(1), 18-25
【非特許文献９】The American Physiological Society (1994, 267, R289-R-294)
【非特許文献１０】P. Lacombe et al (220th National Meeting of The American Chemical Society, Washington D.C., USA, 20-24 August, 2000)
【非特許文献１１】Y. Ducharme et al (18th International Symposium on Medicinal Chemistry; Copenhagen, Denmark and Malmo, Sweden; 15th-19th August 2004)
【非特許文献１２】Y. Ducharme et al, Biorg. Med. Chem. Lett., 2005, 15(4): 1155
【非特許文献１３】S.C.McKeown et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2007, 17, 1750
【非特許文献１４】A. Hall et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2007, 17, 1200
【非特許文献１５】A. Hall et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2007, 17, 916
【非特許文献１６】A. Hall et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2007, 17, 732
【非特許文献１７】G.M.P. Giblin et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2007, 17, 385-389
【非特許文献１８】S.C.McKeown et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2006, 16(18), 4767-4771
【非特許文献１９】A. Hall et al, Bioorg. Med Chem. Lett., 2006, 16(14), 3657-3662
【非特許文献２０】A. Hall et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2006, 16(10), 2666-2671
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
この度、新規なインドールおよびインダゾール誘導体群がＥＰ1受容体でのＰＧＥ2の作用により媒介される状態の治療に有用であることを示すことが示唆される。かかる状態としては、疼痛、または炎症性障害、免疫障害、骨障害、神経変性性障害もしくは腎障害が挙げられる。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
したがって、本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
2009543837.tif 000003
［式中、
Ｒ1は、メチル、−ＣＦ3、塩素、フッ素または臭素を表し；
Ｒ2は、式（ｉ）または（ｉｉ）：
【化２】
2009543837.tif 000004
で示される基を表し；
Ｒ3は、イソプロピル、イソブチル、−ＣＨ2−Ｃ(＝ＣＨ2)(Ｍｅ)、−ＣＨ2−ＣＨ(Ｅｔ)2、−ＣＨ2−シクロプロピル、−ＣＨ2−シクロヘキシルまたはシクロペンチルを表し、
Ｒ4は、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＮＨ−ＳＯ2−Ｒ5またはテトラゾールを表し；
Ｒ5は、Ｃ1-3アルキル、置換されていてもよいフェニルまたは２,４−ジメチルイソオキサゾール−４−イルを表す］
で示される化合物から選択される１種類またはそれ以上の化学物質またはそれらの誘導体を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
フェニルについての任意の置換基は、置換されていてもよいＣ1-6アルキル（例えば、メチル）、アミノ、置換されていてもよいＣ1-6アルキルアミノ、ヒドロキシ、ＨＯＣ1-4アルキル（例えば、ＨＯＣＨ2）およびハロゲン（例えば、フッ素）から選択される。
【００１３】
好適には、Ｒ1は臭素またはメチルを表す。一の実施態様では、Ｒ1は塩素を表す。
【００１４】
好適には、Ｒ3は、イソブチルを表す。
【００１５】
好適には、Ｒ4は、−ＣＯＯＨまたは−ＣＯ−ＮＨ−ＳＯ2−Ｒ5を表す。一の実施態様では、Ｒ4は−ＣＯＯＨを表す。
【００１６】
好適には、Ｒ5は、フェニルを表す。
【００１７】
式（Ｉ）で示される化合物としては、実施例１〜１０の化合物およびそれらの誘導体が挙げられる。
【００１８】
式（Ｉ）で示される特定の化合物としては、実施例１、２、７および８の化合物およびそれらの誘導体が挙げられる。
【００１９】
実施例の化合物には、ＥＰ3に対するよりもＥＰ1に対する方が選択的であるものがある。実施例の化合物には、３０倍よりも大きい選択性を有するものがある。
【００２０】
式（Ｉ）で示される化合物の誘導体としては、式（Ｉ）で示される化合物の塩、溶媒和物（水和物を含む）、塩の溶媒和物（水和物を含む）、エステルおよび多形体が挙げられる。式（Ｉ）で示される化合物の誘導体は、医薬上許容される誘導体を包含する。
【００２１】
本発明は、式（Ｉ）の全ての異性体およびそれらの医薬上許容される誘導体を包含し、全ての幾何異性体、互変異性体および光学異性体ならびにそれらの混合物（例えば、ラセミ混合物）を包含する。式（Ｉ）で示される化合物にさらなるキラル中心が存在する場合、本発明は、その範囲内に、全ての起こり得るジアステレオ異性体（それらの混合物を包含する）を包含する。異なる異性体形態は、慣用の方法により１つのものを他のものから分離または分割することができるか、または、慣用の合成法または立体特異的合成法もしくは不斉合成法により所定の異性体を得ることができる。
【００２２】
本発明はまた、１個またはそれ以上の原子が、自然界にて通常見られる原子量または質量数とは異なる原子量または質量数を有する原子と置き換えられたこと以外は式（Ｉ）で示される化合物と同一である同位体標識化合物を含む。本発明の化合物に取り込まれ得る同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、ヨウ素および塩素の同位体が挙げられ、例えば、2Ｈ、3Ｈ、11Ｃ、14Ｃ、18Ｆ、35Ｓ、123Ｉおよび125Ｉが挙げられる。
【００２３】
上記同位体および／または他の原子の他の同位体を含有する本発明の化合物および該化合物の医薬上許容される誘導体（例えば、塩）は本発明の範囲内である。本発明の同位体標識化合物、例えば、3Ｈおよび／または14Ｃのような放射性同位体が取り込まれているものは、薬物および／または基質組織分布アッセイに有用である。3Ｈおよび14Ｃは、それらの製造の容易さおよび検出能のために有用であると考えられる。11Ｃおよび18Ｆ同位体は、ＰＥＴ（陽電子放射型断層撮影）に有用であると考えられ、125Ｉ同位体は、ＳＰＥＣＴ（単一光子放射型コンピューター断層撮影）に有用であると考えられ、全て、脳画像診断に有用である。さらに、2Ｈのようなより重い同位体での置換は、大きい代謝安定性によりもたらされるある種の治療的利点、例えば、インビボ半減期の増加または必要用量の減少をもたらすことができ、故に、状況によっては有用であると考えられる。本発明の式（Ｉ）の同位体標識化合物は、一般に、同位体標識されていない試薬の代わりに容易に入手可能な同位体標識試薬を用いることによって下記スキームおよび／または下記実施例に記載されている方法を行うことにより製造され得る。
【００２４】
他に指摘しない限り、本明細書では以下の定義を使用する。
【００２５】
「医薬上許容される誘導体」なる用語は、式（Ｉ）で示される化合物の医薬上許容される塩、溶媒和物、エステル、または塩もしくはエステルの溶媒和物、または、受容者への投与後に（直接または間接的に）式（Ｉ）で示される化合物となり得る他の化合物を意味する。一の態様では、「医薬上許容される誘導体」なる用語は、医薬上許容される塩、溶媒和物、または塩の溶媒和物を意味する。別の態様では、「医薬上許容される誘導体」なる用語は、医薬上許容される塩を意味する。
【００２６】
当然のことながら、医薬用途について、上記誘導体は、医薬上許容される誘導体であるが、他の誘導体は、例えば式（Ｉ）で示される化合物およびその医薬上許容される誘導体の製造における使用を見出すことができる。
【００２７】
医薬上許容される塩としては、Berge, Bighley and Monkhouse, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19によって記載されているものが挙げられる。「医薬上許容される塩」なる用語は、無機塩基および有機塩基を包含する医薬上許容される塩基から製造される塩をいう。無機塩基から誘導される塩としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、第二マンガン塩、第一マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛および同類のものが挙げられる。医薬上許容される有機塩基から誘導される塩としては、第一、第二および第三アミン；天然の置換アミンを包含する置換アミン；ならびに環状アミンの塩が挙げられる。特定の医薬上許容される有機塩基としては、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチル−モルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン（hydrabamine）、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン（ＴＲＩＳ、トロメタモール）および同類のものが挙げられる。塩はまた、塩基性イオン交換樹脂、例えばポリアミン樹脂から形成することもできる。本発明の化合物が塩基性である場合、塩は、無機酸および有機酸を含む医薬上許容される酸から製造され得る。かかる酸としては、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、パモン酸、パントテン酸、リン酸、プロピオン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、および同類のものが挙げられる。
【００２８】
式（Ｉ）で示される化合物は、結晶形態または非結晶形態で製造することができ、水和化または溶媒和化されていてもよい。本発明は、その範囲に、化学量論的水和物、および可変量の水を含有する化合物を含む。
【００２９】
好適な溶媒和物としては、水和物のような医薬上許容される溶媒和物が挙げられる。
【００３０】
溶媒和物は、化学量論的溶媒和物および非化学量論的溶媒和物を含む。
【００３１】
式（Ｉ）で示される化合物は、下記スキームおよび実施例に記載するように製造することができる。以下の方法は、本発明の別の態様を成す。
【００３２】
例えば、式（ＩＩ）で示される化合物は、下記スキーム１に示される一般的な経路によって製造することができる：
【００３３】
Ｒ2が式（ｉ）で示される基を表し、Ｒ4が−ＣＯＯＨを表す式（Ｉ）で示される化合物（本明細書では、式（ＩＡ）aで示される化合物と記す）は、下記スキーム１に示される一般的な経路によって製造することができる。
【００３４】
【化３】
2009543837.tif 000005
ここで、Ｒ1およびＲ3は、上記定義と同じであり、Ｌ1およびＬ2は、ともに、ハロゲン原子（例えば、臭素）のような好適な脱離基を表す。
【００３５】
工程（ｉ）は、典型的には、式（ＩＩ）で示される化合物を塩化チオニルと反応させ、次いで、アンモニアと反応させることを含む。
【００３６】
工程（ｉｉ）は、典型的には、好適な溶媒（例えば、エタノール）中にて式（ＩＩＩ）で示される化合物を式（ＩＶ）で示される化合物と一緒に加熱することを含む。
【００３７】
工程（ｉｉｉ）は、典型的には、好適な溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド）中にて塩基（例えば、炭酸カリウム）の存在下で式（Ｖ）で示される化合物を式（ＶＩ）で示される化合物と反応させることを含む。
【００３８】
工程（ｉｖ）は、典型的には、アルコール溶媒（例えば、メタノールまたはエタノール）中にて式（ＶＩＩ）で示される化合物を水酸化ナトリウム水溶液で処理することを含む。
【００３９】
式（ＩＡ）aで示される化合物はまた、式（ＩＩ）で示される化合物を、式（ＩＶ）で示される化合物との反応の前に式（ＶＩ）で示される化合物と反応させる、スキーム１と類似の方法で製造することもできる。当然のことながら、式（ＩＩ）で示される化合物のエステル誘導体を実施例に記載の方法のような公知の経路によって式（ＶＩＩ）で示される化合物に変換することができる。
【００４０】
式（ＩＩ）で示される化合物は、商業的に入手可能であるか、または実施例に記載の方法およびM. Fedouloff et al, Bioorg. Med. Chem., 2001, 9(8), 2119-2128に記載の方法に従って製造することができる。
【００４１】
したがって、本発明はまた、式（ＩＡ）：
【化４】
2009543837.tif 000006
［式中、
Ｒ1は、メチル、−ＣＦ3、塩素、フッ素または臭素であり；
Ｒ3は、イソプロピル、イソブチル、−ＣＨ2−Ｃ(＝ＣＨ2)(Ｍｅ)、−ＣＨ2−ＣＨ(Ｅｔ)2、−ＣＨ2−シクロプロピル、−ＣＨ2−シクロヘキシルまたはシクロペンチルであり、
Ｒ4は、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＮＨ−ＳＯ2−Ｒ5またはテトラゾールを表し；
Ｒ5は、Ｃ1-3アルキル、置換されていてもよいフェニルまたは２,４−ジメチルイソオキサゾール−４−イルを表す］
で示される化合物またはその誘導体の製造方法であって、
式（ＩＩ）：
【化５】
2009543837.tif 000007
［式中、Ｒ1は、式（ＩＡ）で示される化合物についての定義と同じである］
で示される化合物を式（ＶＩＩ）：
【化６】
2009543837.tif 000008
［式中、Ｒは、保護基（例えば、エチル）であり、Ｒ1およびＲ3は、式（ＩＡ）で示される化合物についての定義と同じである］
で示される化合物に変換すること；および
脱保護を行うこと；および
必要に応じて、かつ、任意の順序で、得られたＣＯＯＨ基Ｒ4を別の基Ｒ4に変換すること；および／または
その誘導体を形成すること
を含む方法を提供する。
【００４２】
Ｒ2が式（ｉｉ）で示される基を表し、Ｒ4が−ＣＯＯＨを表す式（Ｉ）で示される化合物（以下、式（ＩＢ）aで示される化合物と記す）は、下記スキーム２に示される一般的な経路によって製造することができる：
【００４３】
【化７】
2009543837.tif 000009
ここで、Ｒ1、Ｒ3およびＬ2は、上記定義と同じである。
【００４４】
工程（ｉ）は、典型的には、好適な溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド）中にて塩基（例えば、炭酸カリウム）の存在下で式（ＶＩＩＩ）で示される化合物を式（ＶＩ）で示される化合物と反応させることを含む。
【００４５】
工程（ｉｉ）は、典型的には、好適な溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド）の存在下での式（ＩＸ）で示される化合物と好適なホルミル化剤（例えば、ジメチルカルバモイルクロリド）との反応を含む。
【００４６】
工程（ｉｉｉ）は、典型的には、好適な溶媒（例えば、ピリジン）中にて式（Ｘ）で示される化合物を式（ＸＩ）で示される化合物と反応させることを含む。
【００４７】
工程（ｉｖ）は、典型的には、好適な溶媒（例えば、トルエン）の存在下にて式（ＸＩＩ）で示される化合物を好適な酸化剤（例えば、二酸化マンガン）で処理することを含む。
【００４８】
工程（ｖ）は、典型的には、アルコール溶媒（例えば、メタノールまたはエタノール）中にて式（ＸＩＩＩ）で示される化合物を水酸化ナトリウム水溶液で処理することを含む。
【００４９】
したがって、本発明はまた、式（ＩＢ）：
【化８】
2009543837.tif 000010
［式中、
Ｒ1は、メチル、−ＣＦ3、塩素、フッ素または臭素であり；
Ｒ3は、イソプロピル、イソブチル、−ＣＨ2−Ｃ(＝ＣＨ2)(Ｍｅ)、−ＣＨ2−ＣＨ(Ｅｔ)2、−ＣＨ2−シクロプロピル、−ＣＨ2−シクロヘキシルまたはシクロペンチルであり、
Ｒ4は、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＮＨ−ＳＯ2−Ｒ5またはテトラゾールを表し；
Ｒ5は、Ｃ1-3アルキル、置換されていてもよいフェニルまたは２,４−ジメチルイソオキサゾール−４−イルを表す］
で示される化合物またはその誘導体の製造方法であって、
式（Ｘ）：
【化９】
2009543837.tif 000011
［式中、Ｒ1およびＲ3は、式（ＩＢ）で示される化合物についての定義と同じである］
で示される化合物を式（ＸＩＩＩ）：
【化１０】
2009543837.tif 000012
［式中、Ｒは、保護基（例えば、エチル）であり；Ｒ1およびＲ3は、式（ＩＢ）で示される化合物についての定義と同じである］
で示される化合物に変換すること；および
脱保護を行うこと；および
必要に応じて、かつ、任意の順序で、基ＣＯＯＨを別の基Ｒ4に変換すること；および／または
その誘導体を形成すること
を含む方法を提供する。
【００５０】
当業者にとっては当然のことながら、Ｒ4が−ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ5またはテトラゾールを表す式（Ｉ）で示される化合物は、標準的な反応シーケンスによって式（Ｉ）aで示される化合物から製造することができる。例えば、Ｒ4が−ＣＯＮＨＳＯ2Ｒ5を表す誘導体は、ＤＣＭのような好適な溶媒中にてＤＭＦの存在下における、酸塩化物への変換によって、例えば塩化チオニルまたは塩化オキサリルとの反応によって、次いで、スルホンアミドとの反応によって、式（Ｉ）aで示される化合物から製造することができる。別の条件としては、ＥＤＣおよびＤＭＡＰの存在下でのＴＨＦまたはＤＣＭのような溶媒中における式（Ｉ）aで示されるカルボン酸とスルホンアミドとの反応が挙げられる。Ｒ4がテトラゾールである式（ＶＩＩ）の誘導体は、カルボン酸の第一アミドへの変換（例えば、塩化スルホニルとの反応、次いで、アンモニアとの反応による）、次いで、該アミドのニトリルへの脱水（例えば、オキシ塩化リン中での加熱による）、次いで、アジドとの反応によって、対応するカルボン酸から得ることができる。
【００５１】
反応中間体および式（Ｉ）で示される化合物における置換基には、当業者に公知の慣用的な方法によって他の置換基に変換することができるものがある。かかる変換の例としては、エステルの加水分解およびカルボン酸のエステル化が挙げられる。かかる変換は、当業者に周知であり、例えば、Richard Larock, Comprehensive Organic Transformations, 2nd edition, Wiley-VCH, ISBN 0-471-19031-4に記載されている。
【００５２】
当業者にとっては当然のことながら、上記工程には、その工程中にある種の反応性置換基を保護することを必要とするものがある。当業者は、保護基が必要な場合を認識するであろう。Greene T.W. ‘Protective groups in organic synthesis’, New York, Wiley (1981)に記載されるもののような標準的な保護および脱保護技術を使用することができる。例えば、カルボン酸基は、エステルとして保護することができる。かかる基の脱保護は、当該技術分野で知られている慣用的な方法を使用して行われる。当然のことながら、保護基は、慣用的な手段によって相互変換することができる。
【００５３】
式（ＩＩ）、（ＩＶ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩＩ）および（ＸＩ）で示される化合物は、商業的に入手可能であるか、または、公知の方法によって製造することができる。
【００５４】
本発明の化合物は、ＥＰ1受容体と結合し、この受容体のアンタゴニストである。したがって、それらは、ＥＰ1受容体でのＰＧＥ2の作用によって媒介される状態の治療に有用であると考えられる。
【００５５】
ＥＰ1受容体でのＰＧＥ2の作用によって媒介される一の状態は疼痛であり、急性痛、慢性痛、慢性関節痛、筋骨格痛、神経因性疼痛、炎症性疼痛、内臓痛、癌に伴う疼痛、片頭痛、緊張型頭痛および群発性頭痛に伴う疼痛、腸機能障害に伴う疼痛、腰部頸部痛、捻挫および筋挫傷に伴う疼痛、交感神経依存性疼痛；筋炎、インフルエンザまたは感冒のような他のウイルス感染症に伴う疼痛、リウマチ熱に伴う疼痛、心筋虚血に伴う疼痛、術後痛、頭痛、歯痛ならびに月経困難症が挙げられる。
【００５６】
慢性関節痛状態としては、関節リウマチ、変形性関節症、リウマチ様脊椎炎、痛風性関節炎および若年性関節炎が挙げられる。
【００５７】
腸機能障害に伴う疼痛としては、非潰瘍性ディスペプシア、非心臓性胸痛および過敏性腸症候群が挙げられる。
【００５８】
神経因性疼痛症候群としては、糖尿病性神経障害、坐骨神経痛、非特異的腰痛、多発性硬化症痛、線維筋痛症、ＨＩＶ関連神経障害、ヘルペス後神経痛、三叉神経痛、および身体的外傷、切断、癌、トキシンまたは慢性炎症状態に起因する疼痛が挙げられる。加えて、神経因性疼痛状態としては、「しびれてピリピリとする感覚（pins and needles）」のような通常は無痛の感覚に伴う疼痛（知覚異常および異常感覚）、接触に対する感受性の増大（知覚過敏）、非侵害性刺激後の痛みの感覚（動的異痛症、静的異痛症、温熱性異痛症または冷感異痛症）、侵害性刺激に対する感受性の増大（温熱性痛覚過敏、冷感痛覚過敏、機械的痛覚過敏）、刺激除去後の断続的な痛みの感覚（痛感過敏）、または選択的感覚経路の欠如もしくは消失（痛覚鈍麻）が挙げられる。
【００５９】
ＥＰ1受容体でのＰＧＥ2の作用によって媒介される他の状態としては、発熱、炎症、免疫疾患、血小板機能異常疾患（例えば、閉塞性血管疾患）、インポテンスまたは勃起不全；異常な骨代謝または骨吸収を特徴とする骨疾患；非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）およびシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）阻害剤の血行力学的副作用、心血管疾患；神経変性性疾患および神経変性、外傷後神経変性、耳鳴、オピオイド（例えば、モルヒネ）、ＣＮＳ抑制薬（例えば、エタノール）、覚醒剤（例えば、コカイン）およびニコチンのような依存症誘発性薬剤による依存症；Ｉ型糖尿病の合併症、腎機能障害、肝機能障害（例えば、肝炎、肝硬変）、胃腸機能障害（例えば、下痢）、大腸癌、過活動性膀胱および切迫性尿失禁が挙げられる。
【００６０】
炎症状態としては、皮膚状態（例えば、日焼け、火傷、湿疹、皮膚炎、乾癬）、眼病、例えば、緑内障、網膜炎、網膜症、ブドウ膜炎、および眼組織への急性損傷（例えば、結膜炎）、炎症性肺障害（例えば、喘息、気管支炎、肺気腫、アレルギー性鼻炎、呼吸窮迫症候群、ハト愛好家病、農夫肺、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ））；胃腸管障害（例えば、アフタ性潰瘍、クローン病、アトピー性胃炎、疣状胃炎（gastritis varialoforme）、潰瘍性大腸炎、セリアック病、限局性回腸炎、過敏性腸症候群、炎症性腸疾患、胃腸逆流症）；臓器移植、ならびに血管疾患、片頭痛、結節性動脈周囲炎、甲状腺炎、再生不良性貧血、ホジキン病、強皮症、重症無筋力症、多発性硬化症、サルコイドーシス、ネフローゼ症候群、ベーチェット症候群、歯肉炎、心筋虚血、発熱、全身性紅斑性狼瘡、多発性筋炎、腱炎、滑液包炎およびシェーグレン症候群のような炎症性要素を有する他の症状が挙げられる。
【００６１】
免疫疾患としては、自己免疫疾患、免疫不全疾患または臓器移植が挙げられる。式（Ｉ）で示される化合物はまた、ＨＩＶ感染症の潜伏期を延長するのに効果的である。
【００６２】
異常な骨代謝または骨吸収を特徴とする骨疾患としては、骨粗鬆症（特に、閉経後骨粗鬆症）、高カルシウム血症、副甲状腺機能亢進、骨パジェット病、骨溶解症、骨転移を伴うか伴わない悪性高カルシウム血症、関節リウマチ、歯周炎、変形性関節症、骨痛、骨減少症、癌性悪液質、結石症（calculosis）、結石症（lithiasis）（特に、尿路結石症）、固形癌、痛風および強直性脊椎炎、腱炎および滑液包炎が挙げられる。
【００６３】
心血管疾患としては、高血圧または心筋虚血；機能性または器質性静脈不全；静脈瘤療法；痔；および動脈圧の著しい低下に伴うショック状態（例えば、敗血症性ショック）が挙げられる。
【００６４】
神経変性性疾患としては、認知症、特に、変性認知症（老人性認知症、アルツハイマー病、ピック病、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病およびクロイツフェルト・ヤコブ病、ＡＬＳ、運動ニューロン疾患を含む）；血管性認知症（多発脳梗塞性認知症を含む）；ならびに、頭蓋内占拠性病変、外傷、感染症および関連状態（ＨＩＶ感染症を含む）、代謝、トキシン、無酸素症およびビタミン欠乏症に伴う認知症；ならびに加齢に伴う軽度認知機能障害、特に加齢に伴う記憶障害が挙げられる。
【００６５】
式（Ｉ）で示される化合物はまた、神経保護の治療、ならびに、脳卒中、心停止、肺バイパス、外傷性脳障害、脊髄損傷または同類のもののような外傷後の神経変性の治療に有用であると考えられる。
【００６６】
１型糖尿病の合併症としては、糖尿病性微小血管症、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、黄斑変性症、緑内障、ネフローゼ症候群、再生不良性貧血、ブドウ膜炎、川崎病およびサルコイドーシスが挙げられる。
【００６７】
腎機能障害としては、腎炎、特に、メサンギウム増殖性糸球体腎炎および腎炎症候群が挙げられる。
【００６８】
式（Ｉ）で示される化合物はまた、利尿作用を有する薬物の調製に有用であると考えられる。
【００６９】
治療への言及は、他に明示的に記載しない限り、確立された症状の治療および予防的治療の両方を包含すると解されるべきである。
【００７０】
本発明のさらなる態様によると、本発明は、ヒトまたは獣医学において使用するための式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を提供する。
【００７１】
本発明の別の態様によると、本発明は、ＥＰ1受容体でのＰＧＥ2の作用によって媒介される状態の治療に使用するための式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を提供する。
【００７２】
本発明のさらなる態様によると、本発明は、ＥＰ1受容体でのＰＧＥ2の作用によって媒介される状態に苦しんでいるヒトまたは動物対象体を治療する方法であって、該対象体に式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体の有効量を投与することを含む方法を提供する。
【００７３】
本発明のさらなる態様によると、本発明は、疼痛、炎症障害、免疫障害、骨障害、神経変性性障害または腎障害に罹患しているヒトまたは動物対象体を治療する方法であって、該対象体に式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体の有効量を投与することを含む方法を提供する。
【００７４】
本発明のさらなる態様によると、本発明は、炎症性疼痛、神経因性疼痛または内臓痛に苦しむヒトまたは動物対象体を治療する方法であって、該対象体に式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体の有効量を投与することを含む方法を提供する。
【００７５】
本発明の別の態様によると、本発明は、ＥＰ1受容体でのＰＧＥ2の作用によって媒介される状態の治療のための薬剤の製造のための式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用を提供する。
【００７６】
本発明の別の態様によると、本発明は、疼痛、炎症性障害、免疫障害、骨障害、神経変性性障害または腎障害のような状態の治療または予防のための薬剤の製造のための式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用を提供する。
【００７７】
本発明の別の態様によると、本発明は、炎症性疼痛、神経因性疼痛または内蔵痛のような状態の治療または予防のための薬剤の製造のための式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用を提供する。
【００７８】
式（Ｉ）で示される化合物およびそれらの医薬上許容される誘導体は、好都合には、医薬組成物の形態で投与される。かかる組成物は、好都合には、１種類またはそれ以上の生理学的に許容される担体または賦形剤と混合して慣用の方法で使用するために提供され得る。
【００７９】
かくして、本発明の別の態様では、本発明は、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を含む医薬組成物を提供する。
【００８０】
式（Ｉ）で示される化合物またはそれらの医薬上許容される誘導体のヒトの治療のために提案される日用量は、１日あたり体重１ｋｇにつき０.０１〜８０ｍｇ、特に、１日あたり体重１ｋｇにつき０.０１〜３０ｍｇ、例えば、１日あたり体重１ｋｇにつき０.１〜１０ｍｇであり、単回投与または分割投与として投与することができ、例えば、１日１〜４回投与することができる。成人のための投与量範囲は、一般に、８〜４０００ｍｇ／日、特に、８〜２０００ｍｇ／日、例えば、２０〜１０００ｍｇ／日、例えば、３５〜２００ｍｇ／日である。
【００８１】
宿主（特に、ヒト患者）に投与される式（Ｉ）で示される化合物の正確な量は、主治医の責務であろう。しかしながら、使用される用量は、患者の年齢および性別、処置される正確な状態およびその重篤度ならびに投与経路を包含する多数のファクターに依存するであろう。
【００８２】
式（Ｉ）で示される化合物およびそれらの医薬上許容される誘導体は、好適な方法での投与のために製剤化され得る。それらは、吸入による投与、または経口投与、局所投与、経皮投与もしくは非経口投与のために製剤化され得る。医薬組成物は、式（Ｉ）で示される化合物およびそれらの医薬上許容される誘導体の制御放出を行うことができるような形態であり得る。
【００８３】
経口投与のためには、医薬組成物は、例えば、許容される賦形剤を用いて慣用の手段によって調製される、錠剤（舌下錠を含む）、カプセル剤、散剤、液剤、シロップ剤または懸濁剤の剤形をとり得る。
【００８４】
経皮投与のためには、医薬組成物は、イオントフォレーシス経皮パッチ剤のような経皮パッチ剤の剤形で提供され得る。
【００８５】
非経口投与のためには、医薬組成物は、注射または持続点滴（例えば、静脈内、血管内または皮下）として提供され得る。該組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液またはエマルションのような形態をとり得、懸濁化剤、安定剤および／または分散剤のような処方剤を含有することができる。注射による投与のためには、これらは、単位投与形態または複数投与形態（好ましくは、保存剤を添加）をとり得る。別法として、非経口投与については、活性成分は、適当なビヒクルによる復元用の粉末形態であり得る。
【００８６】
本発明の化合物はまた、デポー製剤としても製剤化され得る。かかる長期作用性製剤は、埋め込み（例えば、皮下または筋肉内）または筋肉注射により投与され得る。かくして、例えば、本発明の化合物は、好適な高分子材料もしくは疎水性材料（例えば、許容される油中のエマルションとして）またはイオン交換樹脂を用いて、または難溶性誘導体として、例えば、難溶性塩として、製剤化され得る。
【００８７】
本発明で用いるためのＥＰ1受容体化合物は、他の治療薬、例えば、ＣＯＸ−２（シクロオキシゲナーゼ−２）阻害剤、例えば、セレコキシブ、デラコキシブ（deracoxib）、ロフェコキシブ、バルデコキシブ、パレコキシブ、ＣＯＸ−１８９または２−(４−エトキシ−フェニル)−３−(４−メタンスルホニル−フェニル)−ピラゾロ[１,５−ｂ]ピリダジン（ＷＯ９９／０１２９３０）；５−リポキシゲナーゼ阻害剤；ＮＳＡＩＤ（非ステロイド性抗炎症薬）、例えば、ジクロフェナク、インドメタシン、ナブメトンまたはイブプロフェン；ロイコトリエン受容体アンタゴニスト；ＤＭＡＲＤ（疾患修飾性抗リウマチ薬）、例えば、メトトレキサート；アデノシンＡ１受容体アゴニスト；ナトリウムチャネル遮断剤、例えば、ラモトリジン；ＮＭＤＡ（Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテート）受容体モジュレーター、例えば、グリシン受容体アンタゴニスト；電位依存性カルシウムチャネルのα2δ−サブユニットに対するリガンド、例えば、ガバペンチンおよびプレガバリン；三環系抗うつ剤、例えば、アミトリプチリン；ニューロン安定化抗癲癇薬；モノアミン作動性取り込み阻害剤、例えば、ベンラファキシン；オピオイド鎮痛剤；局所麻酔薬；５ＨＴ1アゴニスト、例えば、トリプタン、例えば、スマトリプタン、ナラトリプタン、ゾルミトリプタン、エレトリプタン、フロバトリプタン、アルモトリプタンまたはリザトリプタン；ニコチン性アセチルコリン（ｎＡＣｈ）受容体モジュレーター；グルタミン酸受容体モジュレーター、例えば、ＮＲ２Ｂサブタイプのモジュレーター；ＥＰ4受容体リガンド；ＥＰ2受容体リガンド；ＥＰ3受容体リガンド；ＥＰ4アゴニストおよびＥＰ2アゴニスト；ＥＰ4アンタゴニスト；ＥＰ2アンタゴニストおよびＥＰ3アンタゴニスト；カンナビノイド受容体リガンド；ブラジキニン受容体リガンド；バニロイド受容体リガンド；およびプリン受容体リガンド（Ｐ２Ｘ3、Ｐ２Ｘ2/3、Ｐ２Ｘ4、Ｐ２Ｘ7またはＰ２Ｘ4/7でのアンタゴニストを含む）と組み合わせて使用してもよい。該化合物を他の治療薬と組み合わせて使用する場合、化合物は、好都合な経路によって連続的または同時に投与すればよい。
【００８８】
さらなるＣＯＸ−２阻害剤は、米国特許第５,４７４,９９５号、米国特許第５,６３３,２７２号；米国特許第５,４６６,８２３号、米国特許第６,３１０,０９９号および米国特許第６,２９１,５２３号；ならびにＷＯ９６／２５４０５、ＷＯ９７／３８９８６、ＷＯ９８／０３４８４、ＷＯ９７／１４６９１、ＷＯ９９／１２９３０、ＷＯ００／２６２１６、ＷＯ００／５２００８、ＷＯ００／３８３１１、ＷＯ０１／５８８８１およびＷＯ０２／１８３７４に開示されている。
【００８９】
かくして、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体をさらなる治療薬と一緒に含む組合せを提供する
【００９０】
上記組合せは、好都合には、医薬製剤の形態で使用するために提供され得、かくして、上記定義の組合せを医薬上許容される担体または賦形剤と一緒に含む医薬製剤は、本発明のさらなる態様を構成する。かかる組合せの個々の成分は、別々のまたは合わせた医薬製剤で連続的にまたは同時に投与することができる。
【００９１】
式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を同じ病態に対して活性な別の治療薬と組み合わせて使用する場合には、個々の化合物の投与量は、該化合物が単独で使用される場合の投与量とは異なることがある。適当な投与量は、当業者にとって容易に理解されるであろう。
【００９２】
本発明の化合物についての非毒物学的効果は、現在のところ観察されていない。
【００９３】
本明細書にて引用した特許および特許出願を包含するがこれらに限定されない全ての刊行物は、個々の刊行物が十分に開示されているかの如く具体的かつ個別的に出典明示により本明細書の一部とすることが明示されているかのように出典明示により本明細書の一部とする。
【００９４】
以下の非限定的な実施例は、本発明の医薬的に活性な化合物の製造を例示する。
【実施例】
【００９５】
略語
固相抽出法（ＳＰＥ）；液体クロマトグラフィー／質量分析（ＬＣＭＳ、ＬＣ／ＭＳおよびＬＣ−ＭＳ）；ＭＤＡＰ（Ｍａｓｓ Ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ａｕｔｏ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）；ＮＭＲ（核磁気共鳴）；ｓ、ｄ、ｔ、ｄｄ、ｍ、ｂ（一重線、二重線、三重線、二重の二重線、多重線、幅広）；Ｐｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、Ｂｕ、Ｂｎ（フェニル、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ベンジル）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ｈ（時間）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、１−(３−ジメチルアミノプロピル)−３−エチルカルボジイミド・塩酸塩（ＥＤＣおよびＥＤＡＣ）、４−Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、紫外線（ＵＶ）、室温（ＲＴ、ｒｔ）、保持時間（Ｒｔ）、分（ｍｉｎ）、ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）、Ｅｔ2Ｏ（ジエチルエーテル）、ＭｅＣＮ（アセトニトリル）、ＥｔＯＨ（エタノール）、ＰｈＣＨ3およびＰｈＭｅ（トルエン）。
【００９６】
反応生成物の精製
実施例の反応物の後処理および生成物の精製のために本明細書では慣用的な技術を使用することができる。
【００９７】
有機層または有機相の乾燥に関する下記実施例における言及は、硫酸マグネシウムまたは硫酸ナトリウムにより溶液を乾燥させ、慣用的な技術に従って乾燥剤を濾去することをいう。生成物は、一般に、減圧下での蒸発によって溶媒を除去することによって得ることができる。
【００９８】
実施例の精製は、クロマトグラフィーおよび／または適当な溶媒を使用する再結晶のような慣用的な方法によって行うことができる。クロマトグラフィー方法は、当業者に公知であり、例えば、カラムクロマトグラフィー、フラッシュクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）、およびＭＤＡＰ（質量依存型自動調製、質量依存型ＬＣＭＳ精製とも称される）が挙げられる。ＭＤＡＰは、例えば、W. Goetzinger et al, Int. J. Mass Spectrom., 2004, 238, 153-162に記載されている。
【００９９】
ＬＣＭＳ
実施例の製造の間、以下のＬＣＭＳ条件を使用した。
ソフトウェア
Ｗａｔｅｒｓ ＭａｓｓＬｙｎｘ ｖｅｒｓｉｏｎ ４.０ ＳＰ２
カラム
使用したカラムは、Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓであり、その寸法は、４.６ｍｍ×５０ｍｍである。固定相粒径は３ｍである。
溶媒
Ａ：  水性溶媒＝水＋０.０５％ギ酸
Ｂ：  有機溶媒＝アセトニトリル＋０.０５％ギ酸
方法
使用した一般的な方法は５分の実行時間を有する。
【表１】
2009543837.tif 000013
全ての保持時間は分で測定する。
【０１００】
記載例１
５−クロロ−１Ｈ−インドール−３−カルボニルクロリド（Ｄ１）
【化１１】
2009543837.tif 000014
５−クロロ−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸（２.５０ｇ、１２.８ｍｍｏｌ）および塩化チオニル（４.７ｍｌ、６３.９ｍｍｏｌ）の混合物をアルゴン雰囲気下にて６０℃で３０分間撹拌した。ピンク色のスラリーが得られた。冷却後、さらなる塩化チオニル（１.０ｍｌ、１２.８ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、反応混合物を６０℃に再加熱し、アルゴン雰囲気下にて１時間撹拌した。その後、反応混合物を冷却し、減圧下で濃縮して、５−クロロ−１Ｈ−インドール−３−カルボニルクロリドを得た。残留物は、さらなる精製をせずに次工程に直接使用した。
【０１０１】
記載例２
５−クロロ−１Ｈ−インドール−３−カルボキシアミド（Ｄ２）
【化１２】
2009543837.tif 000015
５−クロロ−１Ｈ−インドール−３−カルボニルクロリド（０.２２ｇ、１.０１ｍｍｏｌ；Ｄ１の記載に従って製造することができる）およびアンモニアの１,４−ジオキサン（０.５Ｍ、８.０ｍｌ、４.０２ｍｍｏｌ）中溶液をアルゴン雰囲気下にて室温で３０分間撹拌した。その後、溶媒を減圧下にて蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃとＮａＨＣＯ3（飽和水溶液）との間で分配させた。有機物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、白色固体、５−クロロ−１Ｈ−インドール−３−カルボキシアミド（０.１８ｇ、９２％）を得た。残留物は、さらなる精製をせずに次工程で使用した。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝１.９２分、［ＭＨ+］１９５。
【０１０２】
記載例３
２−(５−クロロ−１Ｈ−インドール−３−イル)−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸エチル（Ｄ３）
【化１３】
2009543837.tif 000016
５−クロロ−１Ｈ−インドール−３−カルボキシアミド（１.０３ｇ、５.３０ｍｍｏｌ；Ｄ２の記載に従って製造することができる）および３−ブロモ−２−オキソプロパン酸エチル（０.６６ｍｌ、５.３０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１１ｍｌ）中溶液をアルゴン雰囲気下にて８０℃で最大１６時間（一夜）撹拌した。反応物をＬＣ−ＭＳによってモニターした。その後、反応混合物を減圧濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃで希釈し、水（×２）で洗浄した。有機物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、茶色の固体を得た。残留物をＥｔＯＡｃおよびヘキサンから再結晶して、２−(５−クロロ−１Ｈ−インドール−３−イル)−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸エチル（０.４６ｇ、３０％）を得た。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝３.００分、［ＭＨ+］２９１、２９３。
【０１０３】
記載例４
２−[５−クロロ−１−(シクロプロピルメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸エチル（Ｄ４）
【化１４】
2009543837.tif 000017
２−(５−クロロ−１Ｈ−インドール−３−イル)−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸エチル（０.０６０ｇ、０.２０７ｍｍｏｌ；Ｄ３の記載に従って製造することができる）および炭酸カリウム（０.０５７ｇ、０.４１４ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（０.５ｍｌ）中混合物を室温で撹拌した。(ブロモメチル)シクロプロパン（８０μｌ、０.８２８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をアルゴン雰囲気下にて室温で１７時間（一夜）撹拌した。反応物をＬＣ−ＭＳによってモニターした。その後、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、無色の油状物を得た。精製を要する場合には、カラムクロマトグラフィー処理［ＳｉＯ2、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（９：１〜２：３）］して、２−[５−クロロ−１−(シクロプロピルメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸エチル（５８ｍｇ、８２％）を得た。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝３.６１分、［ＭＨ+］３４５、３４７。
場合によっては、さらなる臭化アルキル（４当量）を添加し、さらに完了に向けて反応を進行させるために最大１７時間（一夜）５０℃に加熱することが必要であった。
【０１０４】
記載例５〜９（Ｄ５〜Ｄ９）
上記方法を使用して下記化合物を製造した：
【０１０５】
【表２−１】
2009543837.tif 000018
【表２−２】
2009543837.tif 000019
【０１０６】
記載例１０
５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール（Ｄ１０）
【化１５】
2009543837.tif 000020
油中６０％の水素化ナトリウム（６００ｍｇ、１５ｍｍｏｌ）を５−クロロインドール（１.５ｇ、１０ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２５ｍｌ）中撹拌溶液に５分間にわたって
滴下した。該混合物をＲＴで１０分間撹拌し、次いで、臭化イソブチル（２.０５ｇ、１.６３ｍｌ、１５ｍｍｏｌ）を添加し、該混合物を８０℃で３０分間加熱した。反応混合物をＲＴに冷却し、Ｅｔ2Ｏ（５０ｍｌ）と水（５０ｍｌ）との間で分配させた。有機相を分取し、水で洗浄し、乾燥させ、蒸発させて、薄黄色の油状物を得た（２.３２ｇ）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝３.６６分、［ＭＨ+］２０８。
【０１０７】
記載例１１
５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボアルデヒド（Ｄ１１）
【化１６】
2009543837.tif 000021
オキシ塩化リン（１.８６ｍｌ、２０ｍｍｏｌ）を−２０℃にて乾燥ＤＭＦ（１０ｍｌ）に滴下した。添加完了後、反応混合物を０℃で１時間撹拌した。５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール（２.０８ｇ、１０ｍｍｏｌ；Ｄ１０に記載に従って製造することができる）を添加し、混合物をＲＴで１時間撹拌した。反応混合物を氷冷し、反応物をＮａＨＣＯ3（飽和水溶液、５０ｍｌ）の滴下によりクエンチした（注：多量のＣＯ2）。混合物をＣＨ2Ｃｌ2（３×２５ｍｌ）で抽出した。合わせた有機物を乾燥させ、蒸発させて、ピンク色の油状物を得た（９００ｍｇ）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝３.２６分、［ＭＨ+］２３６。
【０１０８】
２−[５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−チアゾリジン−４−カルボン酸エチル（Ｄ１２）
【化１７】
2009543837.tif 000022
５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボアルデヒド（０.４００ｇ；Ｄ１１の記載に従って製造することができる）のピリジン（３.０ｍｌ）中溶液をアルゴン雰囲気下にて室温で撹拌した。該撹拌溶液にシステインエチルエステル・塩酸塩（０.３４５ｇ、１.８７ｍｍｏｌ）を添加した。該混合物を室温で一夜撹拌した。その後、溶媒を減圧除去した。残留物を精製せずに使用した。
【０１０９】
記載例１３
２−[５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−チアゾール−４−カルボン酸エチル（Ｄ１３）
【化１８】
2009543837.tif 000023
２−[５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−チアゾリジン−４−カルボン酸エチル（粗残留物；Ｄ１２の記載に従って製造することができる）の溶液をＰｈＣＨ3（３０.０ｍｌ）およびピリジン（３.０ｍｌ）に溶解し、室温で撹拌した。該撹拌溶液にＭｎＯ2（２.１９５ｇ、２５.５２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５時間１００℃に加熱した。その後、該混合物にＭｎＯ2（４.３９ｇ）を添加し、該混合物を１００℃でさらに３時間撹拌した。混合物を室温まで冷却した。次いで、該混合物を濾過し、溶液を減圧濃縮した。ＭＤＡＰを使用して残留物を精製した。
【０１１０】
記載例１４
５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸２−メチルプロピル（Ｄ１４）
【化１９】
2009543837.tif 000024
５−クロロインドール−３−カルボン酸（２.００ｇ、１０.２６ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３５ｍｌ）中溶液をアルゴン雰囲気下にて室温で撹拌した。Ｋ2ＣＯ3（２.８３１ｇ、２０.５２ｍｍｏｌ）を添加した。該溶液に１−ブロモ−２−メチルプロパン（４.４６２ｍｌ、４１.０４ｍｍｏｌ）を添加し、該溶液を一夜６０℃に加熱した。該混合物を室温まで冷却し、次いで、ＥｔＯＡｃ（約２００ｍｌ）で希釈した。有機物をＨ2Ｏ（×３）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、ピンク色の固体を得た。残留物をクロマトグラフィー処理して［ＳｉＯ2、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ ０〜２５％］、生成物を得た（２.２１７ｇ、収率７０％）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝４.０３分、［ＭＨ+］３０８、３１０。
【０１１１】
記載例１５
５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸（Ｄ１５）
【化２０】
2009543837.tif 000025
５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸２−メチルプロピル（２.２１７ｇ、７.２２ｍｍｏｌ；Ｄ１４の記載に従って製造することができる）のＥｔＯＨ（１０.０ｍｌ）中溶液を室温で撹拌した。ＮａＯＨ（２Ｍ、１０.０ｍｌ）を添加し、この段階で沈殿物が形成された。該混合物を約１６時間（一夜）６０℃に加熱した。その後、溶液を室温まで冷却し、溶媒を減圧除去した。２Ｍ ＨＣｌを用いて溶液を酸性化し、有機物をＥｔＯＡｃ中に抽出した。合わせた有機物を水（×２）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、白色固体を得た（１.７１１ｇ、収率９５％）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝２.９６分、［ＭＨ+］２５２、２５４。
【０１１２】
記載例１６
５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボニルクロリド（Ｄ１６）
【化２１】
2009543837.tif 000026
５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸（１.７１１ｇ、６.８２ｍｍｏｌ；Ｄ１５の記載に従って製造することができる）のＳＯＣｌ2（３.０ｍｌ）中溶液を１.５時間６０℃に加熱した。その後、溶液を室温まで冷却し、該混合物を減圧濃縮した。残留物を精製せずに直接使用した。
【０１１３】
記載例１７
５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボキシアミド（Ｄ１７）
【化２２】
2009543837.tif 000027
５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボニルクロリド（６.８２ｍｍｏｌ；Ｄ１６の記載に従って製造することができる）のＮＨ4ＯＨ（４.０ｍｌ）中溶液を０℃で５分間撹拌した。溶媒を減圧除去して、薄茶色の固体を得た。残留物をさらなる精製をせずに使用した。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝２.６８分、［ＭＨ+］２５１、２５３。
【０１１４】
記載例１８
２−[５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸エチル（Ｄ１８）
【化２３】
2009543837.tif 000028
５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボキシアミド（１.７０５ｇ、６.８２ｍｍｏｌ；Ｄ１７の記載に従って製造することができる）のＥｔＯＨ（１５.０ｍｌ）中溶液をアルゴン雰囲気下にて６０℃で約１６時間（一夜）撹拌した。該溶液を室温まで冷却し、溶媒を減圧除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（約２００ｍｌ）とＨ2Ｏ（約１００ｍｌ）との間で分配させた。有機物を水（２×１００ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、茶色の油状物を得た。残留物をクロマトグラフィー処理して［ＳｉＯ2、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（３：１）］、生成物を得た（２.１６１ｇ、収率９２％）。
ＬＣＭＳ Ｅｔ＝３.７７分、［ＭＨ+］３４７、３４９。
【０１１５】
記載例１９
５−メチル−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸メチル（Ｄ１９）
【化２４】
2009543837.tif 000029
５−メチルインドール（１.１９８３ｇ、９.１５ｍｍｏｌ）をジオキサン（３７ｍＬ）に溶解し、次いで、ピリジン（７.４ｍＬ、９１.６１ｍｍｏｌ、１０当量）を添加した。トリクロロアセチルクロリド（５.１ｍＬ、４５.６９ｍｍｏｌ、５当量）をゆっくりと添加し、混合物を２.２５時間８０℃に加熱した（１.５時間後にＬＣＭＳにより完了）。室温まで冷却した（固体を含む茶色の混合物）。ＥｔＯＡｃで希釈し、２Ｍ ＨＣｌで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、濃縮して、２,２,２−トリクロロ−１−(５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル)エタノンを得、精製せずに処理した。
ＬＣＭＳ Ｒｔ ３.２１分、［ＥＳ＋］２７６、２８０、［ＥＳ−］２７６。
【０１１６】
ＮａＯＨ（０.１８ｇ）をＭｅＯＨ（４５ｍＬ）中の２,２,２−トリクロロ−１−(５−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル)エタノン（推定９.１５ｍｍｏｌ）に添加し、次いで、２.５時間８０℃に加熱した（ＬＣＭＳは反応がないことを示した）。ＮａＯＭｅ（１ｇ）を添加し、加熱を８０℃で一夜続け（ＬＣＭＳは生成物を示した）、合計反応時間は約１８.５時間であり、ＮａＯＭｅの添加後約１６時間であった。室温まで冷却した。部分濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、濃縮して、茶色の固体を得た。残留物を、ヘキサン＋ＥｔＯＡｃ（３０〜５０％）を用いてシリカゲルによるクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物を得た（１.３４８１ｇ、７８％）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ ２.５７分、［ＥＳ＋］１９０、［ＥＳ−］１８８。
【０１１７】
記載例２０
５−メチル−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸メチル（Ｄ２０）
【化２５】
2009543837.tif 000030
５−メチル−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸メチル（Ｄ１９の記載に従って製造することができる）をＤＭＦに溶解した。Ｋ2ＣＯ3および臭化イソブチルを添加し、該混合物を６０℃で加熱した。約８時間後、２４.５時間後および３０時間後に、さらなる臭化イソブチルを添加した。３２時間後に反応が停止した。Ｈ2ＯとＥｔ2Ｏとの間で分配させた。層を分取し、水性相をＥｔ2Ｏでさらに抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、濃縮して、茶色の油状物を得、溶離液としてヘキサン＋ＥｔＯＡｃ（５〜３０％）を用いてシリカゲルによるクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物を得た（１.１０７０ｇ）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ ３.４１分、［ＥＳ＋］２４６。
【０１１８】
記載例２１
５−メチル−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸（Ｄ２１）
【化２６】
2009543837.tif 000031
５−メチル−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸メチル（１.０８３ｇ、４.４２ｍｍｏｌ；Ｄ２０の記載に従って製造することができる）をＭｅＯＨ（８.８４ｍＬ、０.５Ｍ）に溶解し、２Ｍ ＮａＯＨを添加した（濁った）。混合物をマイクロ波にて８０℃で１分間加熱した。ＬＣＭＳは、出発物質だけを示した。一夜放置し、次いで、イソプロパノール（４ｍＬ）を添加し（溶解性を向上させ）、マイクロ波にて１００℃で１０分間加熱した（均一）。ＬＣＭＳは、まだ若干の出発物質を示した。マイクロ波にて１００℃でさらに３０分間加熱した。２Ｍ ＨＣｌで酸性化した（乳濁）。ＤＣＭを添加し、強く撹拌し、次いで、Ｎａ2ＳＯ4乾燥カプセルを装着した疎水性フリット（相分離器）で濾過し、次いで、蒸発させて、標記化合物を得た（９１７.７ｍｇ、９０％）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ ２.８９分、［ＥＳ＋］２３２、［ＥＳ−］２３０ ９３＆純粋。さらなる精製をせずに次工程に使用した。
【０１１９】
記載例２２
５−メチル−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボキシアミド（Ｄ２２）
【化２７】
2009543837.tif 000032
５−メチル−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸（９１７.７ｍｇ、３.９７ｍｍｏｌ；Ｄ２１の記載に従って製造することができる）をＤＣＭ（８ｍＬ、約０.５Ｍ）に溶解／懸濁した（多少溶解した）。ＳＯＣｌ2（１.４６ｍＬ、約５当量）を添加した（混合物は濃い紫色になった）。混合物を室温で１.５時間放置し（約５分後にＬＣＭＳは反応の完了を示した）、次いで、蒸発させた（紫色の固体）。残留物をＴＨＦ（１６ｍＬ、約０.２５Ｍ）に溶解し、０.８８ ＮＨ3（７.５ｍＬ）を滴下した（濃い紫色から淡い茶色に変わった）。約５分後のＬＣＭＳ分析は生成物を示した。約３０分間撹拌し、ＤＣＭおよび水で希釈し、Ｎａ2ＳＯ4カプセルを装着した疎水性フリット（相分離器）で濾過し、蒸発させて、標記化合物を得（９３５ｍｇ、＞１００％）、さらなる精製をせずに次工程で使用した。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝２.６２分、［ＥＳ＋］２３１。
【０１２０】
記載例２３
２−[５−メチル−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸エチル（Ｄ２３）
【化２８】
2009543837.tif 000033
５−メチル−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−カルボキシアミド（９３５.０ｍｇ、４.０６ｍｍｏｌ；Ｄ２２の記載に従って製造することができる）をエタノール（１６ｍＬ、０.２５Ｍ）に懸濁した。ブロモピルビン酸エチル（５６２μＬ、４.４７ｍｍｏｌ、１.１当量）を添加し、５時間加熱し（ブロック温度８０℃）、次いで、室温まで冷却し、蒸発させた。ヘキサン＋ＥｔＯＡｃ（１０−３０−４０％）を用いてシリカゲルによるクロマトグラフィーにより精製した。蒸発させて、標記化合物を得た（６３.７ｍｇ、７３％）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝３.６６分、［ＥＳ＋］３２７。
【０１２１】
実施例１
２−[５−クロロ−１−(シクロプロピルメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸（Ｅ１）
【化２９】
2009543837.tif 000034
２−[５−クロロ−１−(シクロプロピルメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸エチル（Ｄ４の記載に従って製造することができる）および２Ｍ水酸化ナトリウム（４.０当量）のＥｔＯＨ（２.７ｍｌ、０.０６２Ｍ）中溶液を９０℃で３０分間〜１８時間（一夜）撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより反応をモニターした。その後、反応混合物を室温まで冷却させ、減圧濃縮した。残留物を水で希釈し、２Ｍ ＨＣｌを使用してｐＨ１に酸性化した。該生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。精製が必要な場合、ＭＤＡＰを使用した。ヘキサンを使用して得られた残留物を粉砕して、白色固体、２−[５−クロロ−１−(シクロプロピルメチル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸を得た（２６ｍｇ、４８％）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝３.０１分、［Ｍ＋Ｈ］３１７、３１９。
【０１２２】
実施例２〜６（Ｅ２〜Ｅ６）
Ｅ１について記載した方法と類似の方法を使用して、Ｄ５〜Ｄ９からそれぞれ実施例２〜６を製造した：
【０１２３】
【表３】
2009543837.tif 000035
【０１２４】
実施例７
２−[５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−チアゾール−４−カルボン酸（Ｅ７）
【化３０】
2009543837.tif 000036
２−[５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−チアゾール−４−カルボン酸エチル（０.０３５ｇ、０.１ｍｍｏｌ；Ｄ１３の記載に従って製造することができる）のＥｔＯＨ（２.０ｍｌ）中溶液を室温で撹拌した。ＮａＯＨ（２Ｍ、１ｍｌ）を添加し、混合物を室温でさらに１.５時間撹拌した。その後、該溶液に２Ｍ ＨＣｌを添加した。溶媒を減圧除去した。有機物をＥｔＯＡｃ中に抽出し、水で洗浄した。有機物をＭｇＳＯ4で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、黄色固体を得た。残留物をＥｔ2Ｏと一緒に粉砕して、薄黄色固体を得た（０.０２２ｇ、収率６８％）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝３.３１分、［ＭＨ+］３３５、３３７。
【０１２５】
実施例８
２−[５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸（Ｅ８）
【化３１】
2009543837.tif 000037
２−[５−クロロ−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸エチル（２.１６１ｇ、６.８２ｍｍｏｌ；Ｄ１８の記載に従って製造することができる）のＥｔＯＨ（１０.０ｍｌ）中溶液を室温で撹拌した。ＮａＯＨ（２Ｍ、５.０ｍｌ）を添加し、該溶液を一夜６０℃に加熱した。該溶液を室温まで冷却し、溶媒を減圧除去した。２Ｍ ＨＣｌを用いて混合物を酸性化し、有機物をＥｔＯＡｃ中に抽出した。合わせた有機物をＨ2Ｏ（×２）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、黄色油状物を得た。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝３.１２分、［ＭＨ+］３１９、３２１。
【０１２６】
実施例９
２−[５−メチル−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸（Ｅ９）
【化３２】
2009543837.tif 000038
２−[５−メチル−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸エチル（Ｄ２３の記載に従って製造することができる）をエタノール（６ｍＬ）および２Ｍ ＮａＯＨ（３ｍＬ）中で還流させながら２.５時間加熱した。室温まで冷却した。２Ｍ ＨＣｌおよびＤＣＭで希釈し、次いで、Ｎａ2ＳＯ4カプセルを装着した疎水性フリット（相分離器）で濾過して、標記化合物を得た（８１２.３ｍｇ、９４％）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ＝３.０５分、［ＥＳ＋］２９９、［ＥＳ−］２９７。
【０１２７】
実施例１０
２−[５−メチル−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−Ｎ−(フェニルスルホニル)−１,３−オキサゾール−４−カルボキシアミド（Ｅ１０）
【化３３】
2009543837.tif 000039
ＥＤＣ（１６５.３ｍｇ、０.８６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（触媒、触媒量）を室温でＴＨＦ−ＤＣＭ（各々２.１ｍＬ、約０.２Ｍ）中の２−[５−メチル−１−(２−メチルプロピル)−１Ｈ−インドール−３−イル]−１,３−オキサゾール−４−カルボン酸（２５１.０ｍｇ、０.８４ｍｍｏｌ；Ｅ９の記載に従って製造することができる）に添加した。５分間撹拌し、次いで、ベンゼンスルホンアミド（２２０.５ｍｇ、１.２８ｍｍｏｌ）を添加した。室温で一夜撹拌した。２Ｍ ＨＣｌおよびＤＣＭを添加し、混合物を５分間強く撹拌し、次いで、疎水性フリット（相分離器）で濾過し、蒸発させた。残留物をＤＭＳＯおよびＭｅＣＮ（１：１、２.７ｍＬ）に溶解し、３つの試料に分け、ＤＭＡＰで精製した。蒸発後、残留物をシリカゲルによるクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン＋ＥｔＯＡｃ（４０〜６０％）で溶離した。最初の分画を合わせた。蒸発させて、白色泡沫体として標記化合物を得た（１１３ｍｇ、３１％）。
ＬＣＭＳ Ｒｔ ３.６４分、［ＥＳ＋］４３８、４３８；［ＥＳ−］４３６、４３７。
【０１２８】
本発明は、上記の特定のものおよび好ましいサブグループの全ての組合せに及ぶものと解すべきである。
【０１２９】
生物学的活性の測定のためのアッセイ
式（Ｉ）で示される化合物を、インビトロおよびインビボでそれらのプロスタノイドアンタゴニストまたはアゴニスト活性を示すためおよびそれらの選択性を示すために以下のアッセイを使用して試験することができる。研究することができるプロスタグランジン受容体は、ＤＰ、ＥＰ1、ＥＰ2、ＥＰ3、ＥＰ4、ＦＰ、ＩＰおよびＴＰである。
【０１３０】
ＥＰ1およびＥＰ3受容体での生物学的活性
化合物のＥＰ1およびＥＰ3受容体をアンタゴナイズする能力は、機能性カルシウム動員アッセイを使用して示すことができる。すなわち、化合物のアンタゴニスト特性は、それらの、天然アゴニストホルモンプロスタグランジンＥ2（ＰＧＥ2）によるＥＰ1またはＥＰ3受容体の活性化に応答して細胞内カルシウム（［Ｃａ2+］i）の動員を阻害する能力によって評価することができる。アンタゴニストの濃度の増大は、所定の濃度のＰＧＥ2が動員することができるカルシウムの量を減少させる。正味の効果は、ＰＧＥ2濃度−効果曲線を高い濃度のＰＧＥ2にずらすことである。生産されたカルシウムの量は、カルシウム感受性蛍光染料、例えば、Ｆｌｕｏ−４、ＡＭおよび好適な装置、例えば、Ｆｌｕｏｒｉｍｅｔｒｉｃ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（ＦＬＩＰＲ）を使用して評価される。受容体活性化により生産される［Ｃａ2+］iの量の増加は、該染料により生産される蛍光の量が増加させ、シグナルの増加を引き起こす。該シグナルは、ＦＬＩＰＲ装置を使用して検出することができ、得られたデータは、好適な曲線適合ソフトウェアを用いて解析することができる。
【０１３１】
ヒトＥＰ1またはＥＰ3カルシウム動員アッセイ（以下、「カルシウムアッセイ」という）は、ＥＰ1またはＥＰ3のいずれかのｃＤＮＡを含有する安定な（ｐＣＩＮ；BioTechniques 20(1996): 102-110）ベクターが予めトランスフェクトされているチャイニーズ・ハムスター卵巣−Ｋ１（ＣＨＯ−Ｋ１）細胞を利用する。１０％ｖ／ｖウシ胎仔血清、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、０.２５ｍｇ／ｍｌゲネチシン、１００μＭフルルビプロフェンおよび１０μｇ／ｍｌプロマイシンを補足したＤＭＥＭ：Ｆ−１２のような培養培地を含有する適当なフラスコにて細胞を培養する。
【０１３２】
アッセイについては、Ｖｅｒｓｅｎｅのような細胞を取り出す独自に開発した試薬を用いて細胞を集める。３８４ウェルプレートへの導入のために細胞を適量の新鮮な培地に再び懸濁させる。３７℃にて２４時間インキュベートした後、該培地をＦｌｕｏ−４およびデタージェントであるプルロニックアシッド（pluronic acid）を含有する培地と置き換え、さらにインキュベーションを行う。次いで、濃度−効果曲線を作成するために、種々の濃度の化合物を該プレートに添加する。化合物のアゴニスト特性を評価するために、この操作をＦＬＩＰＲで行ってもよい。次いで、化合物のアンタゴニスト特性を評価するために、種々の濃度のＰＧＥ2を該プレートに添加する。
【０１３３】
このようにして得られたデータをコンピュータ曲線適合ルーチンにより解析することができる。次いで、ＰＧＥ2により誘発されるカルシウム動員の最大阻害の半分を惹起する化合物の濃度（ｐＩＣ50）を推定することができる。
【０１３４】
ヒト・プロスタノイドＥＰ1受容体についての結合アッセイ
［3Ｈ］−ＰＧＥ2を使用する競合アッセイ
放射性リガンド結合アッセイを使用して化合物の効力を決定する。このアッセイでは、化合物の効力を、それらの、ヒトＥＰ1受容体への結合に関してトリチウム化プロスタグランジンＥ2（［3Ｈ］−ＰＧＥ2）と競合する能力により決定する。
【０１３５】
このアッセイは、ＥＰ1のｃＤＮＡを含有する安定なベクターが予めトランスフェクトされているチャイニーズ・ハムスター卵巣−Ｋ１（ＣＨＯ−Ｋ１）細胞を利用する。１０％ｖ／ｖウシ胎仔血清、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、０.２５ｍｇ／ｍｌゲネチシン、１０μｇ／ｍｌプロマイシンおよび１０μＭインドメタシンを補足したＤＭＥＭ：Ｆ−１２のような培養培地を含有する適当なフラスコにて細胞を培養する。
【０１３６】
１ｍＭエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（Ｎａ2ＥＤＴＡ）および１０μＭインドメタシンを含有するカルシウムおよびマグネシウム不含リン酸緩衝生理食塩水中にて５分間インキュベートすることにより培養フラスコから細胞を分離させる。２５０×ｇで５分間の遠心分離により細胞を単離し、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ、１ｍＭ Ｎａ2ＥＤＴＡ、１４０ｍＭ ＮａＣｌ、１０μＭインドメタシン（ｐＨ７.４）のような氷冷バッファーに懸濁する。Ｐｏｌｙｔｒｏｎ組織破壊器（フルセッティングで２×１０ｓバースト）を使用して細胞をホモジナイズし、４８,０００×ｇで２０分間遠心分離し、膜分画を含有するペレットを懸濁および４８,０００×ｇで２０分間の遠心分離により３回（任意）洗浄する。最終膜ペレットを、１０ｍＭ ２−[Ｎ−モルホリノ]エタンスルホン酸、１ｍＭ Ｎａ2ＥＤＴＡ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ2（ｐＨ６）のようなアッセイバッファーに懸濁する。必要となるまで、アリコートを−８０℃で冷凍する。
【０１３７】
結合アッセイのために、細胞膜、競合化合物および［3Ｈ］−ＰＧＥ2（最終アッセイ濃度３ｎＭ）を最終容量１００μｌにて３０℃で３０分間インキュベートする。全ての試薬は、アッセイバッファー中にて調製する。反応は、Ｂｒａｎｄｅｌｌセル・ハーベスターを使用してＧＦ／Ｂフィルターを用いる急速真空濾過により停止する。該フィルターを氷冷アッセイバッファーで洗浄し、乾燥させ、フィルター上に保持されている放射能を、Ｐａｃｋａｒｄ ＴｏｐＣｏｕｎｔシンチレーションカウンターにおいて液体シンチレーションカウンティングにより測定する。
【０１３８】
データは、特異的結合の５０％阻害を生じる化合物の濃度（ＩＣ50）を決定するために非線形曲線適合法を使用して解析する。
【０１３９】
別法として、[3Ｈ]−ＰＧＥ2の代わりに３−｛２−[５−ブロモ−２−(２,４−ジフルオロ−ベンジルオキシ)−フェニル]−５−メチル−ピロール−１−イル｝−６−[3Ｈ3−メトキシ]メトキシ−安息香酸を使用して同様のアッセイを行うことができる。
【０１４０】
[3Ｈ]−ＰＧＥ2の代わりに３−｛２−[５−ブロモ−２−(２,４−ジフルオロ−ベンジルオキシ)−フェニル]−５−メチル−ピロール−１−イル｝−６−[3Ｈ3−メトキシ]メトキシ−安息香酸を使用する結合アッセイに関して、該アッセイは、以下の変更を伴って、[3Ｈ]−ＰＧＥ2を使用する上記方法と類似の方法を使用して行われる：
【０１４１】
細胞膜、競合化合物および３−｛２−[５−ブロモ−２−(２,４−ジフルオロ−ベンジルオキシ)−フェニル]−５−メチル−ピロール−１−イル｝−６−[3Ｈ3−メトキシ]メトキシ−安息香酸（最終アッセイ濃度０.２ｎＭ）を最終容量４００μｌで３７℃にて４５分間インキュベートする。全ての試薬は、アッセイバッファー中にて調製する。Ｂｒａｎｄｅｌｌセル・ハーベスターを使用してＧＦ／Ｂフィルターを用いる急速真空濾過により反応を停止させる。該フィルターを周囲温度にて水で洗浄し、乾燥させ、フィルター上に保持されている放射能を、Ｐａｃｋａｒｄ ＴｏｐＣｏｕｎｔシンチレーションカウンターにおける液体シンチレーションカウンティングにより測定する。
【０１４２】
３−｛２−[５−ブロモ−２−(２,４−ジフルオロ−ベンジルオキシ)−フェニル]−５−メチル−ピロール−１−イル｝−６−メトキシ−安息香酸の製造は、ＷＯ ０３／１０１９５９およびHall et al, Biorg. Med. Chem. Lett., 2007, 17, 916-920に記載されている。トリチウム化形態は、例えば３−｛２−[５−ブロモ−２−(２,４−ジフルオロ−ベンジルオキシ)−フェニル]−５−メチル−ピロール−１−イル｝−６−ヒドロキシ−安息香酸または３−｛２−[５−ブロモ−２−(２,４−ジフルオロ−ベンジルオキシ)−フェニル]−５−メチル−ピロール−１−イル｝−６−ヒドロキシ−安息香酸メチルエステルから、慣用の経路により製造することができる。
【０１４３】
結果
[3Ｈ]−ＰＧＥ2を使用してヒト・プロスタノイドＥＰ1受容体についての結合アッセイで実施例１〜９の化合物を試験した。実施例１０の化合物は、[3Ｈ]−ＰＧＥ2の代わりに３−｛２−[５−ブロモ−２−(２,４−ジフルオロ−ベンジルオキシ)−フェニル]−５−メチル−ピロール−１−イル｝−６−[3Ｈ3−メトキシ]メトキシ−安息香酸を使用して該結合アッセイで試験した。結果は、ｐＩＣ50値として表される。ｐＩＣ50は、ＩＣ50の負の対数10である。得られた結果は、多数の実験の平均である。実施例１〜１０の化合物は、≧６のｐＩＣ50値を有した。さらに詳しくは、実施例１〜２および７〜１０の化合物は、≧７のｐＩＣ50値を示した。
【０１４４】
ヒトＥＰ1カルシウム動員アッセイで実施例１〜３および５〜９の化合物を試験した。結果は、機能的ｐＫi値として表される。機能的ｐＫiは、ヒトＥＰ1カルシウム動員アッセイで決定されるアンタゴニスト解離定数の負の対数10である。得られた結果は、多数の実験の平均である。実施例１〜３および５〜９の化合物は、≧７.０の機能的ｐＫi値を示した。
【０１４５】
ヒトＥＰ3カルシウム動員アッセイで実施例７、８および１０の化合物を試験した。結果は、機能的ｐＫi値として表される。機能的ｐＫiは、ヒトＥＰ3カルシウム動員アッセイで決定されるアンタゴニスト解離定数の負の対数10である。得られた結果は、多数の実験の平均である。実施例７、８および１０の化合物は、＜６.５の機能的ｐＫi値を示した。実施例７および８の化合物は、≦６.０の機能的ｐＫi値を示した。
【０１４６】
この説明および特許請求の範囲が一部を構成する本願は、いずれの後願についても優先権の基礎として使用することができる。このような後願の特許請求の範囲は、本明細書に記載されているいずれもの特徴または特徴の組合せを対象とすることができる。それらは、生成物、組成物、方法または使用の発明の形態を取ることができ、例えば、特許請求の範囲を含むことができるが、これに限定されるものではない。
【国際調査報告】
2009543837.tif 000043
2009543837.tif 000044
2009543837.tif 000045
2009543837.tif 000046