(57)【要約】本発明は、ＥＣＯ−４６０１の結晶形およびそれらを提供するためのプロセスに関する。本発明は、さらに、該結晶形を備える医薬組成物、および医薬品としての該結晶形の使用方法に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物１の結晶形であって、前記化合物１は、以下の構造式、
2009527466.tif 000008
を有する、結晶形。
【請求項２】
前記結晶形は、図１（ａ）、１（ｂ）、１（ｃ）または１（ｄ）に図示されるように、Ｘ線回折図形を本質的に形成する、請求項１に記載の結晶形。
【請求項３】
前記結晶形は、図３（ａ）または４（ａ）に図示されるように示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを本質的に形成する、請求項１に記載の結晶形。
【請求項４】
前記結晶形は、図３（ｂ）、４（ｂ）または図５（ａ）から５（ｄ）のいずれかに図示されるように示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを本質的に形成する、請求項１に記載の結晶形。
【請求項５】
前記結晶形は、図６（ｂ）または７（ｂ）に図示されるように熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムを本質的に形成する、請求項１に記載の結晶形。
【請求項６】
前記結晶形は、図６（ａ）または７（ａ）に図示されるように熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムを形成する、請求項１に記載の結晶形。
【請求項７】
化合物１の結晶形であって、前記化合物は、以下の構造式、
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を有し、
前記結晶形は、図１（ｃ）に図示されるようにＸ線回折図形を本質的に形成する、結晶形。
【請求項８】
化合物１の結晶形であって、前記化合物１は、以下の構造式、
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を有し、
前記結晶形は、図１（ｂ）または１（ｄ）に図示されるようにＸ線回折図形を本質的に形成する、結晶形。
【請求項９】
化合物１の結晶形であって、前記化合物１は、以下の構造式、
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を有し、
前記結晶形は、図１（ａ）に図示されるようにＸ線回折図形を本質的に形成する、結晶形。
【請求項１０】
Ｘ線粉末回折図形における以下の角度位置（２つのθ角度±１％）、
ａ）５．１°、１０．３°、１５．２°、２０．８°、２２．８°、２６．０°および３１．２°（形態Ｉ）、
ｂ）４．２°、８．３°、１２．５°、１６．７°、２０．９°、２５．２°、２９．５°および３３．８°（形態ＩＩ）、または、
ｃ）４．０°、７．９°、１１．８°、１５．７°、２３．６°および２７．６°（形ＩＩＩ）
を特徴とする、請求項１に記載の結晶形。
【請求項１１】
Ｘ線粉末回折図形における以下の角度位置（２つのθ角度±１％）、５．１４°、１０．３４°、１５．２０°、２０．７８°、２２．８０°、２６．０２°および３１．２０°（形態Ｉ）を特徴とする、請求項１に記載の結晶形。
【請求項１２】
Ｘ線粉末回折図形における以下の角度位置（２つのθ角度±１％）、４．１６°、８．３２°、１２．５０°、１６．７０°、２０．９４°、２５．２０°、２９．４８°および３３．８２°（形態ＩＩ）を特徴とする、請求項１に記載の結晶形。
【請求項１３】
Ｘ線粉末回折図形における以下の角度位置（２つのθ角度±１％）、３．９６°、７．８６°、１１．８０°、１５．７４°、２３．６４°および２７．６２°（形態ＩＩＩ）を特徴とする、請求項１に記載の結晶形。
【請求項１４】
前記結晶形は、化合物１を少なくとも１つの低級アルキルアルコールを含む溶媒系で処理することにより得られる、請求項１に記載の結晶形。
【請求項１５】
前記溶媒系は、水および、メタノール、エタノール、ならびにイソプロパノールから選択される低級アルキルアルコールを含む、請求項１４に記載の結晶形。
【請求項１６】
前記低級アルキルアルコールは、メタノール、エタノール、ならびにイソプロパノールから選択される、請求項１４または１５に記載の結晶形。
【請求項１７】
前記低級アルキルアルコールは、メタノールである、請求項１４から１６のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項１８】
前記低級アルキルアルコールは、エタノールである、請求項１４から１６のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項１９】
前記低級アルキルアルコールは、イソプロパノールである、請求項１４から１６のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項２０】
前記結晶形は、第１の結晶形を約５０°Ｃから約１１０°Ｃの温度で乾燥させることにより得られる、請求項１に記載の結晶形。
【請求項２１】
前記乾燥は、約３０分間から約２４時間の乾燥時間で行われる、請求項２０に記載の結晶形。
【請求項２２】
前記乾燥時間は、約２時間から約１２時間である、請求項２１に記載の結晶形。
【請求項２３】
前記第１の結晶形は、形Ｉである、請求項２０から２２のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項２４】
前記第１の結晶形は、形ＩＩである、請求項２０から２２のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項２５】
実質的に純粋な形態である、請求項１から２４のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項２６】
本質的に純粋な形態である、請求項１から２５のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項２７】
前記結晶形は実質的に結晶性である、請求項１から２６のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項２８】
前記結晶形は本質的に結晶性である、請求項１から２７のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項２９】
前記結晶形の概観は、灰色から灰銀色の結晶である、請求項１から２８のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項３０】
前記結晶形は、化合物１の他の結晶形を本質的に含まない、請求項４、６、９および１３のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項３１】
請求項１に記載の結晶形を生成する過程であって、
ａ）単離した化合物１を得るステップと、
ｂ）低級アルキルアルコールを含む溶媒系で化合物１を処理するステップと、
ｃ）化合物１の結晶を浮遊物から分離させるステップと、
を含む、過程。
【請求項３２】
請求項３１に記載の過程であって、
ｉ）化合物１の生成をもたらす条件下で、微生物を生成する化合物１を培養するステップと、
ｉｉ）化合物１を前記微生物から単離するステップと、
を含む、過程。
【請求項３３】
微生物を生成する前記化合物１は、バクテリアを生成する、請求項３２に記載の過程。
【請求項３４】
前記バクテリアは、放線菌である、請求項３３に記載の過程。
【請求項３５】
前記放線菌は、ミクロモノスポラまたはストレプトミセス種である、請求項３４に記載の過程。
【請求項３６】
前記放線菌は、それぞれが、ＩＤＡＣ登録番号０７０３０３−０１、２３１２０３−０１、および０７０９０５−０１を有する、ミクロモノスポラ種菌株０４６−ＥＣＯ１１、［Ｓ０１］０４６、または［Ｓ０１Ｕ０２］０４６である、請求項３５に記載の過程。
【請求項３７】
請求項１、４、６、９および１３のいずれか一項に記載の結晶形を生成する過程であって、
ａ）化合物１の第１の実質的な化合物１の結晶形を得るステップと、
ｂ）結晶性構造を生成するために、（ａ）に記載の第１の結晶形を、約５０°Ｃから約１７０°Ｃの温度で乾燥させるステップと、
を含む、過程。
【請求項３８】
ステップ（ａ）は、
ｉ）化合物１を得るステップと、
ｉｉ）（ａ）で得られる化合物１を低級アルキルアルコールを含む溶媒系で処理するステップと、
ｉｉｉ）化合物１の第１の結晶形を前記浮遊物から分離させるステップと、
を含む、請求項３７に記載の過程。
【請求項３９】
乾燥させるステップ（ｂ）は、不活性条件の下で行われる、請求項３７または３８に記載の過程。
【請求項４０】
前記不活性条件は、減圧または窒素雰囲気から選択される、請求項３９に記載の過程。
【請求項４１】
前記乾燥させるステップ（ｂ）は、約５０°Ｃから約１１０°Ｃの温度で約３０分から約２４時間行われる、請求項３７から４０のいずれか一項に記載の過程。
【請求項４２】
前記温度は、約５５°Ｃから１００°Ｃで約４時間から１２時間である、請求項４１に記載の過程。
【請求項４３】
前記溶媒系は、水をさらに含む、請求項３１、３２、または３８に記載の過程。
【請求項４４】
前記溶媒系は、水およびメタノールを含む、請求項４３に記載の過程。
【請求項４５】
前記溶媒系は、水およびエタノールを含む、請求項４３に記載の過程。
【請求項４６】
前記溶媒系は、水およびイソプロパノールを含む、請求項４３に記載の過程。
【請求項４７】
前記結晶形は、形Ｉである、請求項３１〜３６のいずれか一項に記載の過程。
【請求項４８】
前記結晶形は、形ＩＩである、請求項３１〜３６のいずれか一項に記載の過程。
【請求項４９】
前記第１の結晶形は、形Ｉである、請求項３７〜４２のいずれか一項に記載の過程。
【請求項５０】
前記第１の結晶形は、形ＩＩである、請求項３７〜４２のいずれか一項に記載の過程。
【請求項５１】
パラグラフ（ｂ）の結晶形は、形ＩＩＩである、請求項３７〜４２、４９および５０に記載の過程。
【請求項５２】
請求項１から２９のいずれか一項に記載の結晶形の治療有効量および薬学的に許容されるキャリアを含む、医薬組成物。
【請求項５３】
請求項２から１３のいずれか一項に記載の結晶形の治療有効量および薬学的に許容されるキャリアを含む、医薬組成物。
【請求項５４】
請求項１０に記載の結晶形の治療有効量および薬学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物。
【請求項５５】
請求項１１に記載の結晶形の治療有効量および薬学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物。
【請求項５６】
請求項１２に記載の結晶形の治療有効量および薬学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物。
【請求項５７】
請求項１３に記載の結晶形の治療有効量および薬学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物。
【請求項５８】
前記医薬組成物は、経口懸濁液または固体経口製剤の形態である、請求項５２から５７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
腫瘍性の病状を治療する方法であって、かかる治療を必要とする患者へ請求項１から２９のいずれか一項に記載の結晶形の治療有効量を投与するステップを含む、方法。
【請求項６０】
腫瘍性の病状を治療する方法であって、かかる治療を必要とする患者へ請求項２から１３のいずれか一項に記載の結晶形の治療有効量を投与するステップを含む、方法。
【請求項６１】
腫瘍性の病状を治療する方法であって、かかる治療を必要とする患者へ請求項１０に記載の結晶形の治療有効量を投与するステップを含む、方法。
【請求項６２】
腫瘍性の病状を治療する方法であって、かかる治療を必要とする患者へ請求項１１に記載の結晶形の治療有効量を投与するステップを含む、方法。
【請求項６３】
腫瘍性の病状を治療する方法であって、かかる治療を必要とする患者へ請求項１２に記載の結晶形の治療有効量を投与するステップを含む、方法。
【請求項６４】
腫瘍性の病状を治療する方法であって、かかる治療を必要とする患者へ請求項１３に記載の結晶形の治療有効量を投与するステップを含む、方法。
【請求項６５】
前記腫瘍の状態は、肺癌、結腸直腸癌（結晶癌を含む）、ＣＮＳ癌（神経膠腫）、卵巣癌、腎癌、前立腺癌、乳癌、造血癌（白血病を含む）および黒色腫を含む、請求項５９から６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
腫瘍性の病状の治療のための薬剤の調合における請求項１から２９のいずれか一項に記載の結晶形の使用。
【請求項６７】
腫瘍性の病状の治療のための薬剤の調合における請求項２から１３のいずれか一項に記載の結晶形の使用。
【請求項６８】
腫瘍性の病状の治療のための薬剤の調合における請求項１０に記載の結晶形の使用。
【請求項６９】
腫瘍性の病状の治療のための薬剤の調合における請求項１１に記載の結晶形の使用。
【請求項７０】
腫瘍性の病状の治療のための薬剤の調合における請求項１２に記載の結晶形の使用。
【請求項７１】
腫瘍性の病状の治療のための薬剤の調合における請求項１３に記載の結晶形の使用。
【請求項７２】
腫瘍性の病状の治療における使用のための説明書とともに、請求項１から２９のいずれか一項に記載の結晶形を含む、コマーシャルパッケージ。
【請求項７３】
腫瘍性の病状の治療における使用のための説明書とともに、請求項２から１３のいずれか一項に記載の結晶形を含む、コマーシャルパッケージ。
【請求項７４】
腫瘍性の病状の治療における使用のための説明書とともに、請求項１０に記載の結晶形を含む、コマーシャルパッケージ。
【請求項７５】
腫瘍性の病状の治療における使用のための説明書とともに、請求項１１に記載の結晶形を含む、コマーシャルパッケージ。
【請求項７６】
腫瘍性の病状の治療における使用のための説明書とともに、請求項１２に記載の結晶形を含む、コマーシャルパッケージ。
【請求項７７】
腫瘍性の病状の治療における使用のための説明書とともに、請求項１３に記載の結晶形を含む、コマーシャルパッケージ。
【請求項７８】
腫瘍性の病状の治療における使用のための、請求項１から２９のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項７９】
腫瘍性の病状の治療における使用のための、請求項２から１３のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項８０】
腫瘍性の病状の治療における使用のための、請求項１０に記載の結晶形。
【請求項８１】
腫瘍性の病状の治療における使用のための、請求項１１に記載の結晶形。
【請求項８２】
腫瘍性の病状の治療における使用のための、請求項１２に記載の結晶形。
【請求項８３】
腫瘍性の病状の治療における使用のための、請求項１３に記載の結晶形。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ファルネシルジベンゾジアゼピノンの結晶形に関する。本発明は、さらに、該結晶形、該結晶形を含む医薬組成物の調合の過程、およびかかる薬剤を必要とする哺乳類へ投与するために、薬剤においてそれらを使用する方法に関する。
【０００２】
発明の背景
新規ファルネシルジベンゾジアゼピノン（本願において下記に化合物１と示される）は、全体を参照することによって本願に組み込まれる、２００４年１月２１日出願の、米国特許出願番号第１０／７６２，１０７に開示され、２００４年８月のＷＯ２００４／０６５５９１にも公開されるように、新規の放線菌株、ミクロモノスポラ種から単離された。該構造は、Ｃｈａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００４），Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．，ｖｏｌ  ６７，１４３１−１４３３（ジアゼピノマイシンとして）、およびＩｇａｒａｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００５），Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，３５０−３５２にも開示された。本化合物は、抗リポキシゲナーゼ作用、抗バクテリア作用、および抗癌作用を含む、強力な活性を有することが発見された。さらに、米国出願番号第１０／９５１，４３６号（２００４年９月２７日出願）、および第１１／１３０，２９５号（２００５年５月１６日出願）は、動物モデルにおけるファルネシルジベンゾジアゼピノンの生体内抗癌力を開示した。これらの開示は、化合物１の結晶形またはそれらを生成する方法のいずれでもない。
【０００３】
哺乳類へ投与するための化合物１を含む医薬組成物を調合するために、正常性登録機関の正常性登録要件（例：ＦＤＡ医薬品適正製造基準（ＧＭＰ））に基づいて、該化合物は、できる限り純粋な形態で使用され、純粋性、溶解性、安定性を含む、一定の物理的特性を有する必要がある。薬物単体または賦形剤の存在下における薬物の固体特性は、その安定性、溶解性および生物学的利用能を含む、薬物効果に非常に顕著な影響を有する。
【０００４】
非晶形と比較して、結晶形は、一般的に、不純物濃がより低く、より一貫かつ一定した製品品質、例えば、色、溶解度、取り扱いの簡易性、さらに長期間の安定性などのより一定した物理的性質を有する。したがって、薬物、医薬組成物または薬剤の製造においては、可能な限り常に、実質的な結晶形において活性化合物を提供することが重要である。より信頼性があるため、結晶形は、溶融値のような物理的特性に関して、バッチ間の品質管理結果の再現性を確実にする。
【０００５】
既知である多形の例は、ＮｏｒｖｉｒTMという商標名で、Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓより、ＨＩＶ／ＡＩＤＳの治療のために市販される、プロテアーゼ阻害剤である、リトナビル薬剤である。該製品は、１９９６年に、唯一の既知の固形として、最初に発売された。その後結晶形が発見され、熱力学的により安定性があり、原形よりも５０％溶解性が低く、蓄積中に形成されるということが明らかとなった。本形態は、規制の溶解規格に一致せず、該薬物は、市場から回収された。軟性のゲル製剤は、第２の結晶形で再販されたが、会社と、治療の選択肢のないＨＩＶ／ＡＩＤＳ患者に影響がないわけではなかった。
【０００６】
ガラス転移（Ｔｇ）が５０℃以下である非晶形での薬物の使用は、固体経口剤形の開発において懸念となる可能性がある（例として、Ｂｅｃｈａｒｄ  ａｎｄ  Ｄｏｗｎ（１９９２），Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｖｏｌ  ９，ｎｏ  ４，５２１−５２８を参照されたい）。理想的に、使用される形態は、Ｔｇが１００℃以下であってはならない。これらは本業界において標準とみなされ、Ｔｇが低い非晶形は、より熱力学的に安定した形態へ転換する傾向にあり、例えば、製造中および調剤ステップの間（例：加熱、圧縮など）、貯蔵中、またはいったん投与された胃腸経路において発生しうる。
【０００７】
発明の要約
本発明は、化合物１の結晶形、それらを生成する方法、および医薬品としてのそれらの使用を提供する。一実施形態において、化合物１は、以下の構造式、
2009527466.tif 000003
化合物１
を有する。
【０００８】
一態様において、本発明は、結晶形Ｉを提供する。一実施形態において、結晶形Ｉは、約１００℃から約１４０℃の間の少なくとも１つの広範囲の１次転移相、および約１８３℃±５℃の溶融温度（ＤＳＣによる発現）を示すＤＳＣ（示差走査熱量測定）スキャン、図１（ｃ）に本質的に図示されるようなＸ線回折図形、および熱重量分析（ＴＧＡ）によって示されるように１００℃以下の重量減少を特徴とする。一実施形態において、形Ｉは、Ｘ線粉末回折図形における以下の角度位置（２つのシータ角度±１％）、５．１４°、１０．３４°、１５．２０°、２０．７８°、２２．８０°、２６．０２°および３１．２０°を特徴とする。別の実施形態において、形Ｉは、Ｘ線粉末回折図形における以下の角度位置（２つのシータ角度±１％）、５．１°、１０．３°、１５．２°、２０．８°、２２．８°、２６．０°および３１．２°を特徴とする。
【０００９】
別の態様において、本発明は、結晶形ＩＩを提供する。一実施形態において、結晶形ＩＩは、約１００℃から約１４０℃の間の広範囲の１次転移相、および約１８３℃±５℃の溶融温度（ＤＳＣによる発現）を示すＤＳＣ（示差走査熱量測定）スキャン、図１（ｂ）または図１（ｄ）に本質的に図示されるようなＸ線回折図形、およびＴＧＡによって示される１００℃以下の重量減少を特徴とする。一実施形態において、形ＩＩは、Ｘ線粉末回折図形における以下の角度位置（２つのシータ角度±１％）、４．１６°、８．３２°、１２．５０°、１６．７０°、２０．９４°、２５．２０°、２９．４８°および３３．８２°を特徴とする。別の実施形態において、形ＩＩは、Ｘ線粉末回折図形における以下の角度位置（２つのシータ角度±１％）、４．２°、８．３°、１２．５°、１６．７°、２０．９°、２５．２°、２９．５°および３３．８°を特徴とする。
【００１０】
別の態様において、本発明は、結晶形ＩＩＩを提供する。一実施形態において、結晶形ＩＩＩは、約１８３℃±５℃の溶融温度（ＤＳＣによる発現温度）を示し、溶解前に１次転移相を示さない（ピークなし）ＤＳＣスキャン、および本質的に図１（ａ）に図示される、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）図形を特徴とする。一実施形態において、形ＩＩＩは、Ｘ線粉末回折図形における以下の角度位置（２つのシータ角度±１％）、３．９６°、７．８６°、１１．８０°、１５．７４°、２３．６４°および２７．６２°を特徴とする。別の実施形態において、形ＩＩＩは、Ｘ線粉末回折図形における以下の角度位置（２つのシータ角度±１％）、４．０°、７．９°、１１．８°、１５．７°、２３．６°および２７．６°を特徴とする。
【００１１】
別の態様において、本発明は、少なくとも１つの低級アルキルアルコールを含む溶媒系から結晶化することによって得ることができる、化合物１の結晶形を提供する。一実施形態において、該低級アルキルアルコールはＣ１−６アルキルアルコールであり、好ましくは、Ｃ１−４アルキルアルコールである。別の実施形態において、該低級アルキルアルコールは、メタノール、エタノール並びにイソプロパノールから選択される。別の実施形態において、該溶解系は、水および、メタノール、エタノール、並びにイソプロパノールから選択される低級アルキルアルコールを含む。別の実施形態において、該結晶形は形Ｉである。別の実施形態において、結晶形は形ＩＩである。
【００１２】
別の態様において、該結晶形は、部分的結晶形または実質的結晶形の熱処理により得ることができる。一実施形態において、該熱処理は、約５０℃から溶融点に近い温度（例：約１７０℃）、好ましくは、約５０℃から約１００℃、さらに好ましくは、約６０℃から約８０℃の範囲の温度で行われる。別の実施形態において、該熱処理は、３０分から２４時間、好ましくは、２時間から２０時間、さらに好ましくは、４時間から１０時間行われる。別の実施形態において、該熱処理は、任意に、減圧条件下または不活性条件下で実現される。
【００１３】
別の態様において、本発明は、化合物１の結晶形を調合する方法であって、（ａ）化合物１を提供するステップと、（ｂ）化合物１を溶解系で処理するステップと、（ｃ）結晶を採取するステップとを含む、方法を提供する。一実施形態において、該方法のステップ（ｂ）は、脱色のステップをさらに含む。別の実施形態において、該方法は、（ｃ）で採取された結晶を乾燥させるステップである、ステップ（ｄ）をさらに含む。一実施形態において、該溶解系は、１つ以上の溶媒を含み、それらとしては、有機溶媒（例：低級アルキルアルコール、アルキルアセテート、脂肪族炭化水素、ハロゲン化炭化水素、低級ジアルキルケトン、アセトニトリルおよびジアルキルエーテル）および水性溶媒（例：水）が挙げられる。好ましくは、該溶媒系は、低級アルキルアルコール溶媒を含み、さらに好ましくは、該溶媒系は低級アルキルアルコールおよび水を含む。さらなる実施形態において、ステップ（ｄ）の熱処理は、約５０℃から溶融点に近い温度（例：約１７０℃）、好ましくは、約５０℃から約１００℃、さらに好ましくは、約６０℃から約８０℃の範囲の温度で行われる。別の実施形態において、該熱処理は、３０分から２４時間、好ましくは、２時間から２０時間、さらに好ましくは、４時間から１０時間行われる。別の実施形態において、ステップ（ｅ）の熱処理は、任意に、減圧条件下または不活性条件下で実現される。一実施形態において、ステップ（ｃ）で得られた結晶は、結晶形Ｉである。別の実施形態において、ステップ（ｃ）で得られた結晶は、結晶形ＩＩである。別の実施形態において、ステップ（ｄ）で得られた結晶は、結晶形ＩＩＩである。
【００１４】
別の態様において、本発明は、少なくとも１つの化合物１の結晶形の治療有効量、および薬学的に許容されるキャリアを含む、医薬組成物を提供する。一実施形態において、該医薬組成物は、経口投与用である。別の実施形態において、該医薬組成物は、経口投与用の固体組成物である。別の実施形態において、剤形は、液体懸濁液である。本実施形態の一区分において、該懸濁用は、経鼻投与、局所投与、経口投与または非経口投与用、あるいは、吸入による投与用である。さらに別の実施形態において、剤形は、経口投与用または吸入による投与用の固体製剤である。別の実施形態において、該医薬組成物は、結晶形Iを含む。別の実施形態において、該医薬組成物は、結晶形ＩＩを含む。別の実施形態において、該医薬組成物は、結晶形ＩＩＩを含む。
【００１５】
別の実施形態において、本発明は、かかる治療が必要な対象における腫瘍を治療するための薬剤の調合における、少なくとも１つの化合物１の結晶形の使用を提供する。本実施形態の一区分において、該薬剤は、固体経口組成物または経口懸濁液である。別の実施形態において、本発明は、かかる治療が必要な対象における腫瘍性の病状の治療における、少なくとも１つの化合物１の結晶形の使用を提供する。別の実施形態において、本発明は、少なくとも１つの化合物１の結晶形の治療有効量および薬学的に許容されるキャリアを含む、抗腫瘍薬としての医薬組成物の使用を提供する。別の実施形態において、本発明は、かかる治療が必要な対象における腫瘍を治療するための薬剤の調合における、少なくとも１つの化合物１の結晶形および薬学的に許容されるキャリアを含む、医薬組成物の使用を提供する。本発明は、さらに、腫瘍性の病状の治療のための化合物１結晶の使用のための説明書と共に、少なくとも１つの化合物１の結晶形を含む、キットまたはコマーシャルパッケージを提供する。
【００１６】
さらなる実施形態において、本発明は、少なくとも１つの化合物１の結晶形の治療有効量を、かかる治療が必要な対象へ投与するステップを含む、腫瘍の治療のための方法を提供する。さらなる実施形態において、化合物１の結晶形は、薬学的に許容されるキャリアをさらに含む、医薬組成物として投与される。
【００１７】
一実施形態において、上述のいずれかの方法または使用で治療された腫瘍は、肺癌、結腸直腸癌（結晶癌を含む）、ＣＮＳ癌（神経膠腫）、卵巣癌、腎癌、前立腺癌、乳癌、造血癌（白血病を含む）および黒色腫から選択される。
【００１８】
[発明の詳細な説明]
本発明の一態様は、粉末形態よりもより再生産性のある純粋性および／または物理的安定性を示し、約−１５℃のグラス転移（Ｔｇ）を示すと判明した、化合物１として定義される構造式を有する化合物の結晶形を提供する。化合物１（特にフォームＩ、ＩＩおよびＩＩＩ）の結晶形および化合物１粉末は、ＷＯ２００４／０６５５９１および米国特許番号第１０／９５１，４３６（２００４年９月２７日出願）ならびに１１／１３０，２９５（２００５年５月１６日出願）に説明されるように、抗腫瘍活性について同等のスペクトルを有する。
【００１９】
本発明の第２の態様は、化合物１の結晶形を調合する過程を提供する。一実施形態において、該過程は、結晶化生成物を採取するステップを提供する。別の実施形態において、該過程は、化合物１の商業生産のために大規模で実施される化合物の結晶化を含む。
【００２０】
本発明の第３の態様は、化合物１を結晶化する方法を提供する。一実施形態において、該方法は、結晶化前の該化合物の粉末形態と比較して、化合物の純粋性および／または物理的安定性を増大させる。該方法は、該結晶化された化合物が、該化合物の非晶質の調合よりもより純粋である条件下で該粉末を結晶化するステップを含む。
【００２１】
本実施形態の別の態様において、化合物１は、結晶化し、形Ｉを生成する。本実施形態の別の態様において、化合物１は、結晶化し、形ＩＩ生成する。本実施形態のさらに別の態様において、例えば、形Ｉあるいは形ＩＩの結晶、または両方の結晶形の本質的、実質的、または部分的な熱処理は、例えば、形ＩＩＩなどの、別の結晶形を生成する。
【００２２】
Ｉ．  定義
別段の定義がない限り、本願に使用される技術的および科学的用語は、本発明の属する分野に精通する者によって一般的に理解される意味を有する。
【００２３】
「ファルネシルジベンゾジアゼピノン」、「化合物」「薬物」あるいは「活性成分」という用語は化合物１を意味する。「化合物１」という用語は、化合物１結晶を生成する過程または方法に関連して使用される際、結晶化の出発物質としての化合物１を示し、粗の粉末の実質的に純粋または本質的に純粋な形態であることができ、１つの結晶形または混合形が、同様の（例：さらに純粋化）または異なる結晶形を生成する際、非晶質、部分的結晶質または結晶質であることができる。
【００２４】
化合物１または結晶形の純粋性は、医薬組成物におけるその調剤の前の該化合物を示す。純粋性は、「純粋度」によって示され、化合物１以外の成分の存在に対する化合物１（結晶質あるいは、非晶質）の量の尺度であり、結晶化の程度の尺度ではない。純粋性は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法、ガスクロマトグラフ／質量分析（ＧＣ／ＭＳ）、液体クロマトグラフィ／質量分析（ＬＣ／ＭＳ）、および液体クロマトグラフィ／ＵＶ分光法（ＬＣ／ＵＶ）を含む手段により、計測されてもよい。
【００２５】
「単離」という用語は、その起源環境から除去された化合物または生成物（例：反応混合物、生成培養または発光）を示し、それらは固体または粉末の形態、半固体形態あるいは油形態であることができ、該混合物において、最低、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％（重量％）の化合物が存在する、化合物または生成物を示す。「粗」という用語は、重量％で最低５０％の化合物１を含む、化合物１の混合物を示し、半固体あるいは油形態、または固体あるいは粉末形態であることができ、結晶を含む。「純粋」あるいは「純正化」という用語は、実質的に純粋または本質的に純粋な化合物１を示す。「実質的に純粋」という用語は、最低９５重量％の化合物１を有するサンプルを示す。「本質的に純粋」という用語は、最低９７重量％の化合物１を有するサンプルを示す。
【００２６】
化合物１の「粉末形態」という用語は、非晶質形態または、部分的に結晶質であることができる、部分的非晶質形態を示す。化合物１の粉末形態は、一般的に、本願に記載される条件下における約−１５℃でのグラス転移（Ｔｇ）を示す。
【００２７】
「結晶形」または「多形」という用語は、同様の化学組成（例：化合物１）を有するが、異なる３次元配列を有する固体形態を示し、該配列に溶媒および／または水分子を含む場合がある。「非晶質」という用語は、概して、３次元配列をほとんど有さない、または全く有さない形態を示す。
【００２８】
結晶としての化合物１の決定は、光学顕微鏡法、電子顕微鏡法、Ｘ線回折図形、固体ＮＭＲ分光法または偏光顕微鏡法を含む手段によって、決定される。光学顕微鏡法および電子顕微鏡法は、結晶の大きさおよび形を決定するために使用されこともできる。本願の発明は、化合物１のすべての結晶を含む。
【００２９】
「結晶化合物１」、「化合物１結晶」または「化合物１の結晶形」という用語は、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９５％以上の１つ以上の結晶形を含む化合物１の固体形態または化合物１の多形を含む。「実質的に結晶」という用語は、最低９５％の化合物１の結晶を含む、化合物１の固体形態を示す。「本質的な結晶」という用語は、本質的に非晶質形態ではない結晶形を示す。
【００３０】
「化合物１の処理」は、本願に記載されるいかなる溶媒から化合物１を結晶化または再結晶化することを示す。結晶化または再結晶化に必要なステップは、セクションＩＩＩに説明される。
【００３１】
「溶質」という用語は、他の物質に溶解し、溶液を形成する物質を示す。本願に使用されるように、溶質は、非晶質粉末または結晶形での化合物１を示す。
【００３２】
「溶液」という用語は、単相また均一相を形成するように混合された２つ以上の物質を示す。該物質の１つは、溶媒であり、その他の物質（溶質）は、その中に溶解されると考えられる。本願に使用される、溶液は、上述の１つの溶質、および組み合わせで１つ以上の溶媒を含む。
【００３３】
「低分子量アルコール」、「低級アルキルアルコール」または「Ｃ１−６アルキルアルコール」は、最低１つのアルコール官能基および１から６の炭素原子を含む、有機化合物を示す。低分子量アルコールの代表例は、メタノール、エタノール、プロパノール（例：イソ−プロパノールおよびｎ−プロパノール）、ブタノール（例：イソ−ブタノール、セク−ブタノール、テルト−ブタノールおよびｎ−ブタノール）、およびグリコール（例：エチレングリコールおよびプロピレングリコール）を含むが、これらに限定されない。
【００３４】
「一次転移温度」という用語は、物理的状態が、別の状態（分子分解は無し）に変わる温度を示す。本温度は、分子転移（結晶タイプの変換）または溶融点であることができる。「溶融点」という用語は、固体物質（結晶質または非晶質）が液状へ変わる温度を示す。
【００３５】
「グラス転移温度」または「Ｔｇ」は、熱容量の変化が生じる温度、および固体物質が（非晶質状態）が、分子運動性に関して、自由度を得る温度を示す。
【００３６】
「温度ランプ」という用語は、スキャンが実施される、加熱速度および冷却速度を示す。
【００３７】
「重量減少」という用語は、一定の温度ランプを用いる加熱過程中のサンプル（または溶媒などのその内容物）の重量の減少を示し、通常、重量％（重量に基づく％）で示される。本重量減少は、化合物内に捕捉された溶媒の除去に関連する。重量減少は溶媒を除去した後の化合物の分子分解にも関連する。
【００３８】
「熱分解温度」という用語は、化合物が分解し始める温度を示す。それは、通常、溶融点の後に生じる転移である。
【００３９】
「アニーリング」という用語は、材料を加熱し、また制御冷却し、その結晶の大きさを増大させ、またその欠点を減らすことを含む技術を示す。熱によって、原子（分子）をその最初の位置（内部エネルギーの極小位置）から離れ、高エネルギー状態の中を、無作為に動き、ゆっくりとした冷却によって、最初の位置よりも、より多くの低内部エネルギーとの構成を見出す可能性をもたらす。「アニーリング処理」、「アニーリングステップ」、「熱処理」という用語は、時として脱溶媒を伴い、より安定した結晶状態を得るために、温度が決定された期間、一定に設定される、等温ステップを示す。「脱溶媒」という用語は、化合物が、それぞれ、溶媒分子の大多数から遊離する過程を示す。溶媒分子が水分子である場合、脱溶媒過程は「脱水」とも呼ばれる。本願において、「アニーリング」は、等温温度での単純乾燥過程を生じ、「アニーリング処理」、「熱処理」および「乾燥」という用語は、本明細書を通じて、同等に使用される。
【００４０】
「微生物を生成する化合物１」という用語および対応する用語は、生物が自然に化合物を生成するかどうかに関わらず、化合物１を生成するために必要な遺伝情報を運ぶ微生物を示す。該用語は、化合物１を生成するための遺伝情報が天然の環境において存在するように生物において発見される生物、および遺伝子情報が、既知の組み換え技術によって導入される生物（宿主細胞）へ等しく適用される。宿主細胞に導入することのできる遺伝子情報の例は、全体を参照することにより本願に組み込まれる、米国特許公開第２００５−００４３２９７号、および米国特許出願第ＸＸ／ＸＸＸ，ＸＸＸ号（２００６年１月１２日出願）に提供される。
【００４１】
ＩＩ．      化合物１の結晶形
本発明は、本願において化合物１
2009527466.tif 000004
化合物１
と称される、化合物の結晶形を提供する。
【００４２】
化合物１の結晶形Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩは、溶融温度、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）図形、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラム、および熱重量分析（ＴＧＡ）などの、いずれか１つまたはそれ以上の物理化学的特性を特徴とする。すべての結晶形は、約１８３℃±５℃（ＤＳＣで出現）の溶融温度を特徴とする。
【００４３】
結晶形Ｉは、さらに、本質的に図１（ｃ）に図示され、表１に表示されるようなＸＲＰＤ図形、本質的に図３（ａ）に図示されるようなＤＳＣサーモグラム、少なくとも１つの約１００℃から約１４０℃の広範囲の一次転移、約１８３℃±５℃（ＤＳＣで出現）の溶融温度、および本質的に図６（ｂ）に図示されるようなＴＧＡサーモグラムを特徴とする。
【００４４】
結晶形ＩＩは、さらに、本質的に図１（ｂ）または図１（ｄ）に図示され、表１に表示されるようなＸＲＰＤ図形、本質的に図４（ａ）に図示されるようなＤＳＣサーモグラム、約１００℃から約１４０℃の広範囲の一次転移、約１８３℃±５℃（ＤＳＣで出現）の溶融温度、および本質的に図７（ｂ）に図示されるようなＴＧＡサーモグラムを特徴とする。
【００４５】
結晶形ＩＩＩは、さらに、本質的に図１（ａ）に図示され、表１に表示されるようなＸＲＰＤ図形、本質的に図３（ｂ）、４（ｂ）および５（ａ〜ｄ）に図示されるようなＤＳＣサーモグラム、溶融点以下の一次転移を有さないこと、約１８３℃±５℃（ＤＳＣで出現）の溶融温度、および本質的に図６（ａ）および７（ａ）のいずれかに図示されるようなＴＧＡサーモグラムを特徴とする。
【００４６】
結晶形Ｉおよび結晶形ＩＩは、本願に記載されるように、化合物１を低級アルキルアルコールで処理することにより生成され、形ＩＩＩは、形Ｉまたは形ＩＩを乾燥させることにより生成される。すべての形は、化合物１を異なる溶媒系で処理することにより生成されてもよい。本発明の結晶形は、本願に例示される、それらが生成される過程に限定されない。形ＩＩＩは、化合物１を非プロトン系溶媒系で処理することにより生成してもよい。形ＩＩＩは、化合物１を非プロトン系溶媒系で処理し、該溶媒を、減圧条件下で微温加熱で蒸発させることにより生成してもよい。
【００４７】
ＩＩＩ．    結晶の生成方法
薬物の結晶形は、通常、溶融法および徐冷法などの方法、結晶化（再結晶化とも呼ばれる）、昇華、または、脱水ステップまたは脱溶媒ステップを含むこともある熱処理により得られる。結晶化は、通常、出発物質の特性（例：結晶化度、純度、不純物の存在の程度、溶解度、など）に応じて、異なる方法で達成され、これらの方法は、例えば、単一溶媒（低温では貧溶媒であるが、加熱される際に良溶媒になる）を用いた、古典的結晶化を含み、共溶媒（例：少なくとも１つの良溶媒および貧溶媒）を用いることにより、または溶液を冷却することにより、または化合物の結晶を播種することにより、または徐々に蒸発することにより、同様の結果を得ることによって実現される。
【００４８】
結晶化は、通常、過飽和現象により可能となる。過飽和は、溶媒に溶解される溶質の量が、溶媒が保持できる量以上である状態である。例えば、主要成分「溶質Ａ」および副不純物「溶質Ｂ」（ＡおよびＢは、同様の溶解度特性を有する）を含む固体物質は、溶液が溶質Ｂではなく溶質Ａで飽和するように、熱性溶媒で溶解される。溶液が冷却可能な際、溶液は、溶液が溶質Ａにおいて過飽和となる点に到達し、溶質Ａの結晶が、最初に徐々に形成し始める。最初の結晶は、さらに、溶液から溶質Ａの結晶化を誘導する種晶として作用するが、飽和点にない溶質Ｂは、溶液中に残る。その後、溶質Ａの純粋結晶は、回収される。
【００４９】
過飽和は異なる方法により、実現される。一般的に、飽和溶液が冷却される際、または該溶液からの溶媒が徐々に蒸発する際、該溶液は過飽和状態になる。抗溶媒（貧溶媒）の追加の方法、またはＮａＣｌあるいはトリエチルアミン塩酸塩のような塩の追加による溶解度の低下の方法、または上述のいずれかの方法の組み合わせの他の方法。
【００５０】
溶媒は狭い温度範囲に対して、大きな溶解度差を示さなければならないため、結晶化のための純性溶媒の使用は限られている。溶媒系の使用は、より順応性を有する。本溶媒系は、少なくとも１つの良溶媒（薬物が良溶解度を有する溶媒）および、最初の溶媒に混和できる、少なくとも１つの貧溶媒（薬物が難溶性である溶媒）を含む。溶媒系は、通常、１つの良溶媒および１つの貧溶媒（抗溶媒）を含むが、２つ以上の溶媒を含むこともできる。
【００５１】
化合物１を溶解するための良溶媒の例は、低級アルキルアルコール（例：メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、プロピレングリコール）、アセトニトリル、芳香族溶媒（例：トルエン）、およびジアルキルケトン（例：アセトン、２−ブタノン）のような有機溶媒を含む酸素、テトラヒドロフラン、ジオキサン、アルキルアセテート（例：エチルアセテート、イソ−プロピルアセテート、ブチルアセテート）、およびジアルキルエーテル（例：テルと−ブチルメチルエーテル）などを含むが、これらに限定されない。化合物１が難溶性である溶媒の例は、水性溶媒（例：水）、脂肪族炭化水素（例：へキサン、ｎ−ヘプタン、イソ−オクタン）およびハロゲン化炭化水素（例：ジクロロメタン、クロロフォルム）を含むが、これらに限定されない。
【００５２】
過程のいずれのステップにおいても、結晶の形成に先立ち、溶液は、ＮｏｒｉｔTM炭などの脱色剤で処理され、続いて、該薬剤はろ過される。脱色ステップは、ＣｅｌｉｔｅTMのような、ろ過剤の補助の有無を問わず、溶液を脱色剤のカラムに通過させることによっても行われる。脱色ステップは、結晶化過程前、例えば、共溶媒系の貧溶媒の追加の前に、薬物が溶液中にある際、または冷却過程の前に溶液が加熱される場合に、行われる。
【００５３】
過飽和に到達する際、結晶化は開始される。結晶が自然に形成されるか、または、該過程は、沈殿剤を使用することにより、あるいは、溶液中に化合物の結晶を藩種することにより開始してもよい。また溶媒を徐々に蒸発させるか、少量の貧溶媒を追加することによって、結晶化を開始してもよい。ｐＨにおける変更または塩の追加もまた、結晶化過程を補助することができる。結晶は、ろ過、遠心分離法、および傾斜法、またはそれらの組み合わせを含む標準技術によって、採取される。
【００５４】
結晶は、溶媒和形（該溶媒が水である際の水和形を含む）として、または実質的な非溶媒和形（結晶構造に溶媒分子がほとんど、あるいは全く存在せず、該無溶媒が水である場合、無水和物とも呼ばれる）として生成される。溶媒和形は、存在溶媒（または水和系の水分子）において調合される。無水形態は、水を溶媒系から排除することによって（例：実質的な水遊離有機溶媒の使用）、または含水結晶を封入水分子が排除されるまで温めることによって調合される。したがって、無溶媒和形態は、結晶構造内に滞在しない溶媒を用いることにより、または封入され続ける傾向のある溶媒を実質的に排除する溶媒形を用いることにより、または溶媒和結晶を封入溶媒分子が排除されるまで温める（乾燥させる）ことにより、調合される。
【００５５】
結晶は、その調合に使用される条件（例：温度、溶媒、および溶媒の割合、また化合物の濃度など）にしたがって、異なる形態または多形で得られる。該形態は、結晶の分子の３次元配列、および通常、結晶構造における水および／溶媒の分子の有無によって、異なる。これらの違いは、Ｘ線粉末回折によって、または光学顕微鏡法、電子顕微鏡法、固体ＮＭＲ分光法あるいは偏光顕微鏡法よって、結晶を分析することにより示される。種々の多形には、種々の能力および安定性がある。多形形態は、アニーリング処理とも呼ばれる乾燥処理および熱処理のような方法によって、他の結晶形（例：低能力またはより安定した形態）へ転換できる場合もある。
【００５６】
結晶形は、すべての巨視的結晶または、針状、棒状、板状、断片状または、とげ状とはウニに類似して分類される針状結晶であるとげ状を含むが、それらに限定されない結晶状型を有することができる。  
【００５７】
化合物１の結晶を生成するための一般的手順
一態様において、本発明は、実質的に結晶形の化合物１を生成する方法を提供し、該方法は、（ａ）化合物１を提供するステップと、（ｂ）化合物１を最低１つの溶媒を含む溶媒系で処理するステップと、（ｃ）該結晶を浮遊物から分離させるステップとを含む。一実施形態において、ステップ（ｂ）は、脱色のステップを含む。別の実施形態において、ステップ（ｂ）は、化合物１の結晶を藩種するステップを含む。別の実施形態において、該方法は、任意に、（ｃ）で分離された結晶をアニーリングまたは乾燥させるステップである、ステップ（ｄ）をさらに含む。
【００５８】
結晶化前の化合物１は、粗形態、粉末形態、非晶質形態、または部分的非晶質形態で提供され、さらに部分的結晶質、または結晶質である場合もある。化合物１は、化合物１の粉末形態あるいは粗形態、または、実質的な純性形態であることができる。結晶形は、化合物１は同様のあるいは異なる結晶形、または結晶形の混合である、化合物１を処理することにより、生成されることもできる。化合物１の粉末形態または粗形態は、「微生物を生成する化合物１」を培養し、続いて、沈降、ろ過、ＨＰＬＣ（高性能液体クロマトグラフィ）、高速向流クロマトグラフィ、サイズ排除限外ろ過クロマトグラフィおよび／またはイオン交換クロマトグラフィを含む、単離法および精製法、およびＤｉａｉｏｎTMＨＰ−２０カラムを含む、その他の樹脂を用いた方法によって、得ることができる。化合物１を生成するための例示的な過程は、実施例１に提供される。
【００５９】
一態様において、化合物１は、少なくとも１つの良溶媒および貧溶媒を含む溶媒系で処理される。別の態様において、該溶解系は、低級アルキルアルコールを含み、好ましくは、該低級アルキルアルコールは、「抗溶媒」（貧溶媒）の水を用いた、メタノール、エタノールまたはイソプロパノールから選択される。結晶化の時間と温度は、溶液中の化合物１の濃度と純性度、および使用される溶媒系により異なる。得られた結晶の純度は、出発物資の純性度、すなわち結晶前の化合物１の純性度により変わる。結晶は、好ましくは、ろ過により分離されるが、遠心分離法および／または傾斜法のような手段によっても採取される。
【００６０】
本発明の別の態様において、結晶形を生成するための過程は、少なくとも１つの化合物１の結晶形を、約５０℃から約１７０℃の等温温度で、好ましくは、約５０℃から約１００℃の間の温度で、さらに好ましくは、約６０℃から約８０℃の温度で、約３０分から約２４時間、好ましくは、約２時間から約２０時間、最も好ましくは、約４時間から約１０時間乾燥させるステップである、ステップ（ｄ）を含む。一実施形態において、該乾燥させるステップは、任意に、減圧下または不活性雰囲気（例：窒素雰囲気またはアルゴン雰囲気など）などの不活性条件下で行われる。一実施形態において、乾燥前の結晶形は、形Ｉまたは形ＩＩ、またはそれらの混合形である。別の実施形態において、乾燥後に得られた結晶形は、形ＩＩＩである。
【００６１】
さらなる一態様において、該方法は、当医薬生産の技術において既知である機器または方法を用いて、大きな規模、過程、または生産規模で達成される。
【００６２】
別の態様において、本発明は、（ａ）化合物１を提供するステップと、（ｂ）化合物１を水および少なくとも１つの低級アルキルアルコールを含む溶解系で処理するステップと、（ｃ）形成された結晶を採取するステップとを含む、化合物１の結晶形を調合する方法を提供する。一実施形態において、ステップ（ｂ）は、脱色のステップをさらに含む。別の実施形態において、該方法は、（ｃ）で採取された結晶を乾燥させるステップである、ステップ（ｄ）をさらに含む。一実施形態において、低級アルキルアルコールの水に対する割合は、２０：８０から８０：２０の間であり、好ましくは、約３０：７０から６０：４０である。別の実施形態において、該アルコール／水溶媒系における粉末の最終濃度は、約０．１ｍｇ／ｍＬから１００ｍｇ／ｍＬであり、好ましくは、約１５ｍｇ／ｍＬから１００ｍｇ／Ｌである。
【００６３】
別の態様において、本発明は、（ａ）化合物１を提供するステップと、（ｂ）化合物１を水において約２０％から約８０％のエタノールを含む溶媒系で処理するステップと、（ｃ）該溶媒を約２７℃から４０℃の温度で、エタノールが十分に蒸発し過飽和に到達するまで温めるステップと、（ｄ）形成された結晶を採取するステップと、を含む、化合物１の結晶形を調合する方法を提供する。一実施形態において、該方法は、（ｃ）で採取された結晶を乾燥させるステップである、ステップ（ｅ）をさらに含む。
【００６４】
高純性度および容易な処理性により、本発明の結晶形を、薬剤の調合に使用してもよい。それらは、非経口投与または非注射投与のための薬剤の調合の過程において媒介物として使用されてもよい。
【００６５】
ＩＶ．      結晶形を含む医薬組成物
本発明は、少なくとも１つの化合物１の結晶形を含む医薬組成物を、本願に記載されるように、薬学的に許容されるキャリアとの組み合わせで、提供する。結晶形を含む医薬組成物は、腫瘍性の病状のような、制御されない細胞成長および増殖に関連する疾患ならびに障害を治療するために役立つ。化合物１の結晶形を含む医薬組成物は、適切な容器で、医薬組成物および腫瘍性の病状を治療するための使用の説明書を提供する、便利なコマーシャルパッケージに包装されてもよい。
【００６６】
本発明の結晶は、製剤前に、さらに、処理される。例えば、化合物１の結晶形は、適切な製剤の前に、より小さい粒子へ、製粉または粉砕されてもよい。
【００６７】
本発明の結晶は、腫瘍性また増殖性の疾患および障害の治療用または予防用処置のために、経口投与、舌下投与、経鼻投与、眼内投与、直腸投与、経皮投与、粘膜投与、局所性投与、または非経口投与用に製剤することができる。非経口の投与法としては、皮内投与、皮下投与（ｓ．ｃ．、ｓ．ｑ．、ｓｕｂ−Ｑ、Ｈｙｐｏ）、筋内投与（ｉ．ｍ．）、静脈内投与（ｉ．ｖ．）、腹腔内投与（ｉ．ｐ．）、動脈内投与、髄内投与、心内投与、関節内投与（関節）、滑液嚢内投与（滑液領域）、脳内投与または頭蓋内投与、髄腔内投与、嚢内投与、および髄腔内投与（髄液）が挙げられるが、これらに限定されない。注射剤または薬物剤の注入のためのいかなる既知の機器も該投与を達成するために使用することができる。経口投与および／または非経口投与のため、本発明の結晶形は、従来の医薬品キャリアおよび添加剤と混合し、溶液、乳液、タブレット、カプセル、ソフトゲル、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、ウエハおよび同様のものなどの形態で使用することができる。剤形は、例えば、経口投与、舌下投与、直腸投与での、固体剤形であってもよい。本発明の結晶形を含む化合物は、結晶形の重量あたり、約０．１％から約９９．９％、約１％から約９８％、約５％から約９５％、約１０％から約８０％または約１５％から約６０％を含む。
【００６８】
本願に開示される医薬組成物は、標準手順（ＵＳＰ、ＦＤＡ）に基づいて調合され、癌状態または前癌状態を軽減、予防、排除するように選択される投与量で投与される。（化学療法を含むヒトの治療のための種々の薬剤の投与法の概要のため、例えば、その内容は参照することにより本願に組み込まれる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ、およびＧｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹを参照。）
【００６９】
本願に使用される、「ユニット投与量」という用語は、ヒト対象およびその他の哺乳類のための単一投与量として適した、物理的に分離したユニットを示し、各ユニットは、所望の治療効果を作り出すために、適した、予め決められた量の結晶形（活性剤）を、適した薬学的に許容されるキャリアに基づいて、有する。一実施形態において、該ユニット投与量は、１０から３０００ｍｇの活性剤を含む。別の実施形態において、該ユニット投与量は、２０から１０００ｍｇの活性剤を含む。本発明の組成物は、制御放出性送達系（例：カプセル）または持続放出性送達系（例：生体分解性マトリクス）を用いて、送達される。本発明の組成物の投与に適した例示的な薬物送達の遅延放出性送達系は、その全体で参照することにより本願に組み込まれる、米国特許第４，４５２，７７５号（Ｋｅｎｔへ発行）、第５，０３９，６６０号（Ｌｅｏｎａｒｄへ発行）、および第３，８５４，４８０号（Ｚａｆｆａｒｏｎｉへ発行）に記載される。
【００７０】
薬学的に許容される本発明の組成物は、少なくとも１つの、本願において「キャリア」と総称される、非毒性の、薬学的許容のキャリアおよび／または希釈剤および／またはアジュバントおよび／または添加剤、および望ましくは、その他の活性剤と共に、少なくとも１つの本発明の結晶形を含む。薬学的に許容されるキャリアは、例えば、サリン、緩衝食塩水、デキストロース、水、グリセロール、エタノール、プロピレングリコール、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ−８０TM）、ポリ（エチレン）グリコールグリコール３００および４００（ＰＥＧ３００および４００）、ポリエチレングリコール化ヒマシ油（例：クレモホールＥＬ）、ポロクサマー４０７および１８８、疎水性キャリア、およびそれらの組み合わせなどの溶媒、賦形剤または媒体を含むが、これらに限定されない。疎水性キャリアは、例えば、脂肪乳剤、脂質、ポリエチレングリコール化ポポリド、ポリマーマトリクス、生体適合性ポリマー、脂質球、小水疱、粒子、およびリポソームを含む。該用語は、厳密には、細胞培養液を除く。
【００７１】
剤形に含まれる添加剤または添加物は、例えば、薬物の性質および投与方法によって、異なる。一般的に使用される添加剤の例としては、分解防止剤、溶解補助剤および界面活性剤、緩衝剤、抗酸化物質および保存料、等張化剤、膨張性薬剤、平滑剤、乳化剤、懸濁化剤または粘性剤、不活性希釈剤、充填剤、崩壊剤、結合剤、湿潤剤、潤滑剤、抗菌剤、キレート剤、甘味料、香料、香味剤、着色剤、投与補助剤、およびそれらの組み合わせが挙げられるが、これに限定されない。
【００７２】
該組成物は、コーンスターチまたはゼラチン、ラクトース、サクロース、微結晶セルロース、カオリン、マニトール、第二リン酸カルシウム、塩化ナトリウムおよびアルギン酸などの、一般キャリアおよび添加剤を含むことができる。該組成物は、クロスアルメロースナトリウム、微結晶性セルロース、デンプングリコール酸ナトリウムを含むことができる。
【００７３】
非経口投与のための剤形は、少なくとも１つの化合物１の結晶形を含む、水性または非水性無菌等張注射液、懸濁液、または脂肪乳剤の形態であることができる。注入のために使用される非経口型は、容易に注入可能な程度で存在する流体でなければならない。これらの溶液または懸濁液は、無菌性の濃縮された液体または粉末または顆粒から調合することができる。結晶は、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、コーン油、ベンジルアルコール、グリコフロール、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、グリセリン、食塩水、デキストロース、水、グリセロール、疎水性キャリア、およびそれらの組み合わせなどの溶媒または賦形剤のようなキャリアに溶解することができる。
【００７４】
結晶形の製剤は、非経口または、例えば経口投与、経鼻投与あるいは局所性投与などの非注射投与のための懸濁液として、調合されてもよい。結晶形の粒子サイズの縮小が必要な場合、製粉器や粉砕器のような機械的手段または微紛化によって実現されてもよい。結晶状粒子は、例えば、国際特許出願ＷＯ／３８８１１に記載されるような、連続フローセルの使用など、当技術分野において既知の装置および方法を用いても生成される。追加の添加剤は、懸濁化剤、表面安定剤、分散剤などの懸濁剤調合液において、使用されてもよい。懸濁化剤の例としては、カルボキシメチルセルロース、ビーガム、トラガカント、ベントナイト、メチルセルロース、微結晶セルロースおよびポリエチレングリコールなどが挙げられるが、それらに限定されない。投与方法によって、最大粒子の平均サイズは、例えば、約５０ｎｍから約１００μｍまでで、変えられる必要がある。非注射投与に使用される場合、粒子の平均サイズは、非経口投与用のサイズよりも大きくなる。
【００７５】
非経口調合に使用される添加剤は、分解防止剤（例：炭水化物、アミノ酸、ポリソルベート）、溶解補助剤（例：セトリミド、ドキュセートナトリウム、グリセリルモノオレエート、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ））および界面活性剤（例：ポリソルベート、コハク酸トコフェロールＰＥＧ、ポロクサマーおよびＣｒｅｍｏｐｈｏｒTM）、緩衝剤（例：アセテート、クエン酸塩、リン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、コハク酸エステル塩、アミノ酸および同類のもの）、抗酸化剤および保存料（例：ＢＨＡ、ＢＨＴゲンチシン酸、ビタミンＥ、アスコルビン酸および亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、メタ重亜硫酸塩、チオグリセロール、チオグリコレートおよび同様の薬剤を含む硫黄）、等張化剤（生理学的適合性に合わせる）、懸濁化剤または粘性剤、抗菌剤（例：チメルサ−ル、塩化ベンザルコニウム、フェノール、クレソルおよびクロロブタノール）、キレート剤、および投与補助剤（例：局所麻酔薬、抗炎症性剤、抗凝固剤、延長のための血管収縮物質、および組織透過を増加させる薬剤）、およびそれらの組み合わせを含むが、それらに限定されない。
【００７６】
疎水性キャリアを用いた非経口製剤は、例えば、脂質、脂質球、小水疱、粒子、およびリポソームを含む脂肪乳剤および製剤を含む。脂肪乳剤は、上述の添加剤に加えて、脂質相および水相、および、乳化剤（例：リン脂質、ポロクサマー、ポリソルベート、ポロキシエチレンヒマシ油）などの添加物、および浸透圧性薬剤（例：塩化ナトリウム、グリセロール、ソルビトール、キシリトールおよびグルコース）を含む。リポソームは、天然または派生リン脂質を含み、任意に、コレステロールなどの分解防止剤を含む。
【００７７】
該化合物の非経口ユニット投与形態は、無菌の密封されたアンプルまたは無菌の事前に入れられている注射器である、適したキャリアで、すぐに使用可能な結晶の溶液であることができる。適したキャリアは、任意に、いずれの上述の添加剤を含む。
【００７８】
代わりとしては、本発明の結晶のユニット投与は、送達時における適した薬学的に許容されるキャリアで、即席の再構成のための、濃縮の液体、粉末、顆粒の形態であることができる。上述の添加剤に加えて、粉末形態は、任意に、膨張性薬剤（例：マニトール、グリシン、ラクトース、サクロース、トレハロース、デキストラン、ヒドロキシエチルデンプン、フィコールおよびゼラチン）、および凍結保護剤または溶解保護剤を含む。
【００７９】
例えば、静脈（ＩＶ）使用において、化合物１の結晶形の抗菌製剤、および随意に可溶化剤または界面活性剤を含む、１つ以上の添加物は、一般的に使用されるいずれの静脈内輸液でも溶解、または懸濁され、点滴によって、投与することができる。静脈内輸液は、生理食塩水、リン酸緩衝食塩水、５％グルコースまたはＲｉｎｇｅｒ’ｓTM溶液を含むが、それらに限定されない。
【００８０】
別の実施例において、筋肉内投与剤形において、本発明の結晶の無菌製剤は、注入用水（ＷＦＩ）、生理食塩水または５％のグルコースなどの医薬希釈剤で溶解、および投与することができる。化合物１の結晶の適した不溶形態は、塩基水溶液、またはオレイン酸エチルなどの長鎖脂肪酸エステルなどの、薬学的に許容される油性基における懸濁液として調合され、投与されてもよい。
【００８１】
経口投与のため、タブレットやカプセルのような固体剤形は、特に便利である。持続放出性または結腸性被覆の調合も考案される。小児および老人への適用には、懸濁液、シロップおよびチュアブル錠は、特に、適している。経口投与に関しては、該医薬組成物は、例えば、タブレット、カプセル、懸濁液、または液状シロップあるいは、エリキシル剤、ウエハースおよび同様のものである。通常の経口投与に関して、添加剤または添加物としては、不活性希釈剤、充填剤、崩壊剤、結合剤、潤湿剤、潤滑剤、甘味剤、香味剤、着色剤および保存料が挙げられるが、それらに限定されない。
【００８２】
経口用医薬組成物は好ましくは、活性剤の治療有効量を備えるユニット投与量の形態で作られる。該投与量のユニットは、タブレットおよびカプセルである。治療目的で、タブレットおよびカプセルは、活性剤に加えて、不活性希釈剤（例：炭酸ナトリウムおよび炭酸カルシウム、リン酸ナトリウムおよびリン酸カルシウム、およびラクト−ス）、結合剤（例：アカシアガム、デンプン、ゼラチン、スクロース、ポリビニルピロリドン（プロビドン）、ソルビトール、またはトラガカントメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびエチルセルロース）、充填剤（例：リン酸カルシウム、グリシン、ラクトース、トウモロコシデンプン、ソルビトール、またはスクロース）、潤滑剤または潤滑化剤（例：ステアリン酸マグネシウムまたはその他のステアリン酸金属塩、ステアリン酸、ポリエチレングリコール、ワックス、油、シリカおよびコロイドシリカ、シリコン溶液またはタルク）、錠剤分解物質または崩壊剤（例：ポテトスターチ、コーンスターチ、およびアルギン酸）、香味剤、着色剤、または許容される潤湿剤などの、従来のキャリアを含む。キャリアは、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリルなどのコーティング添加剤も含むことができ、消化管における吸収を遅らせることができる。
【００８３】
経口用の液体調合は、通常、水性溶液または油性溶液、懸濁液、乳液、シロップ、エリキシル剤の形態で、懸濁化剤、乳化剤、非水性薬剤、保存料、着色剤および香味剤などの従来の添加物を含むことができる。液体調合の炭化物の例としては、アカシア、アーモンド油、エチルアルコール、ヤシ油、ゼラチン、グルコースシロップ、グリセリン、水素化食用脂、レシチン、メチルセルロース、パラオキシ安息香酸メチルまたはパラオキシ安息香酸プロピル、プロピレングリコール、ソルビトール、またはソルビン酸が挙げられる。
【００８４】
液体および固体の両方の経口調合に関して、ペパーミント、ウィンターグリーン油、チェリー、グレープ、果実風味または同様物などの香味剤も使用することができる。また着色剤を加え、投与形態を外観上より美しく、または製品を識別しやすくすることが望ましい。本発明の結晶の局所性使用には、皮膚、鼻およびのどの粘膜内層に塗布されるような適切な形態で調合することができ、クリーム、軟膏、液状スプレーまたは吸入抗原、ロゼンジまたは、のど塗料の形態をとることができる。該局所性剤形は、さらに、活性剤の表面浸透を促進するためのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）のような化合物を含むことができる。目または耳への塗布に関して、化合物１の結晶形は、ローション、塗料、または粉末として疎水性基材あるいは親水性基剤の液状または半液液状形態で製剤することができる。直腸投与に関して、本発明の結晶形はココアバター、ワックス、またはその他のグリセリドなどの従来のキャリアで混合される坐剤の形態で投与することができる。
【００８５】
V．腫瘍成長を抑制する方法
一態様において、本発明は、哺乳類における癌細胞の成長および／または増殖を抑制する方法に関する。別の態様において、本発明は、哺乳類における新生物を治療する方法を提供する。哺乳類には、有蹄動物（例：ヒツジ、やぎ、ウシ、ウマ、ブタ）、および齧歯類、ネコ科、イヌ科、および霊長類（ヒトおよび非ヒト霊長類）を含む非有蹄動物が含まれる。好適な実施形態において、該哺乳類はヒトである。
【００８６】
本願に使用される、「新生物」、「腫瘍性障害」、「新生組織形成」、「癌」、「腫瘍」および「増殖症」という用語は、自律的増殖能力、すなわち、正常組織での組織構造および機能調整の部分的欠如または完全な欠如を示す特異的質量を形成する急速な増殖性細胞成長を特徴とする病状の異常事態を有する細胞を示す。該用語は、造血系新生物（例：リンパ腫または白血病）、さらにすべての種類の前癌状態および癌性増殖、発癌過程、転移性組織または悪性形質転換の細胞、組織、または臓器を含む、悪性新生物（例：肉腫または癌腫）を、組織病理学的タイプまたは侵襲性の段階に関わりなく、包含するものとする。造血系新生物は、骨髄性、リンパ性また赤血球系統から生じる白血病（白血球（白血細胞）および血液および骨髄の前駆物質に関する）、およびリンパ腫（リンパ球に関する）を含む、造血構造（血液細胞を形成することに関する構造）および免疫システムの構成に影響する悪性腫瘍である。充実性新生物は、肉腫を含み、それらは、筋肉、軟骨、血管、線維性組織、脂肪または骨などの結合組織が起源である悪性新生物である。充実性新生物は、癌腫もまた含み、それらは上皮性構造（外部上皮（例：皮膚および消化菅、肺、および頸癌の上皮）、および種々の分泌線（例：胸、膵臓、甲状腺）を覆う内部上皮を含む）から生じる悪性新生物である。特に、本発明の方法による治療の影響を受けやすい腫瘍の例としては、白血病、および肝細胞癌、肉腫、血管内皮癌、乳癌、中枢神経系癌（例：星状細胞腫、神経膠肉腫、神経芽細胞腫、希突起グリオーマおよびグリア芽腫）、前立腺癌、肺癌および気管支癌、喉頭癌、食道癌、結腸癌、結腸直腸癌、消化管癌、メラノーマ、卵巣がんおよび子宮内膜癌、腎臓癌および膀胱癌、肝臓癌、内分泌癌（例：甲状腺癌）、および膵臓癌を含む。
【００８７】
該化合物は、癌性細胞または組織へ接触あるいは、導入させられる。一般的に、体内で、医薬組成物（本発明の結晶を含む）を送達するための本発明の方法は、当分野で認められている治療薬が本発明の結晶形に置き換えられている重要な手続きの修正のみが加えられた、治療薬を送達するための当分野で認められている手順を活用する。剤形、キャリア、賦形剤と共に、結晶含有剤形が投与される経路は、その場所、また腫瘍の種類によって、異なる。種々の投与経路が、利用される。剤形は、静脈内または腹腔内の注入あるいは注射によって、投与してもよい。例えば、接触可能な充実性癌または腫瘍に関して、剤形は、癌または腫瘍への直接的な注射により、投与してもよい。造血系新生物に関して、剤形は、静脈内に、または経脈管的に投与してもよい。転移癌または脳腫瘍などの、体内において容易に接触可能ではない新生物に関しては、剤形は、例えば、経口的、髄腔内的、静脈内的、筋肉内的に哺乳類の身体を通じて前進へ運ばれ、それにより新生物および遠隔転移へ到達する方法で投与してもよい。結晶含有剤形は、経口的、皮下的、腹腔内的、局所的（例：メラノーマに対して）、直腸的（例：結腸直腸腫瘍に対して）、経膣的（例：頸部または膣の腫瘍に対して）、経鼻的にまたは吸入噴霧（例：肺腫瘍に対して）によっても、投与することができる。
【００８８】
化合物１の結晶含有剤形は、新生物細胞の成長または増殖を抑制するため、または腫瘍性障害を治療するために十分な量で投与される。「抑制」という用語は、細胞抑制、細胞殺滅、細胞停止、細胞破壊を示す。本方法による、哺乳類の癌細胞成長の抑制は、いくつかの方法で観察することができる。体内での成長した癌細胞は、該結晶形で処置し、結晶形が無い状態で培養された同様の細胞と比較して成長または死滅について観察することができる。成長の停止または、例えば、１００ミクロモルで５０％以上の成長速度の低下（倍加速度）は、癌細胞抑制の兆候である（Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｇｕｉｄｅ：前臨床スクリーニング、臨床試験認可；Ｂ．Ａ．Ｔｅｉｃｈｅｒ  ａｎｄ  Ｐ．Ａ．Ａｎｄｒｅｗｓ，ｅｄ．，２００４，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ参照）。代替方法として、癌細胞抑制は、医薬剤を対象の癌の動物モデルへ投与することによって観察することができる。実験的非ヒト動物癌モデルの例は、当技術分野において既知であり、下記および本願の実施例に説明される。剤形で処置された動物における腫瘍成長の停止（さらなる大きさの増大が無い）または腫瘍の大きさの縮小（腫瘍容積最低５８％）は、剤形で処置されていない対照動物における腫瘍と比較して、顕著な腫瘍成長抑制を示す（Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｇｕｉｄｅ：前臨床スクリーニング、臨床試験認可；Ｂ．Ａ．  Ｔｅｉｃｈｅｒ  ａｎｄ  Ｐ．Ａ．Ａｎｄｒｅｗｓ，ｅｄ．，２００４，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ）。
【００８９】
「治療」という用語は、哺乳類への結晶化合物１含有製剤の塗布または投与、あるいは、腫瘍性障害、または腫瘍性障害の兆候、あるいは腫瘍性障害の素因を有する哺乳類からの単離組織または細胞系への、該障害、障害の兆候、障害の素因を治療、治癒、緩和、軽減、変化、改善、改良、抑制する目的で、剤形を塗布または投与することを意味する。「治療する」という用語は、哺乳類へ、哺乳類における新生物細胞を防止、減少、または排除する結果をもたらすために十分な量（治療有効量）の結晶化合物１含有剤形を投与することと定義される。治療有効量および投与のタイミングは、個別基準で決定され、少なくとも、一部は、被検対象の年齢、体重、性別、食生活および全体的な健康状態、また疾患の状態の性質、重症度、および過去の治療およびその他の疾患の存在に基づいている。その他の要因としては、さらに投与の経路および頻度、投与される化合物の活性、代謝的安定性、化合物の作用時間および排出時間、薬物の組み合わせ、被対象の該化合物への耐性および新生物または増殖症の種類が含まれる。一実施形態において、該化合物の治療有効量は、該哺乳類の体重の約０．０１から約７５０ｍｇ／ｋｇの範囲である。別の実施形態において、治療有効量は、１日あたり、体重の約０．０１から約３００ｍｇ／ｋｇの範囲である。さらに別の実施形態において、治療有効量は、１日あたり、体重の約１０から約１２０ｍｇ／ｋｇの範囲である。上述の実施形態の治療有効量は、ヒト患者の場合、１平方メートルあたり１ミリグラム（ｍｇ／ｍ２）で示されてもよい。異なる哺乳類種の換算係数は、Ｆｒｅｉｒｅｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ，Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  ｍｏｕｓｅ，ｒａｔ，ｄｏｇ，ｍｏｎｋｅｙ  ａｎｄ  ｍａｎ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈ．Ｒｅｐｏｒｔ，１９６６，５０（４）：２１９−２４４に見られる。特別な条件が必要となる場合（例：小児患者用など）、上述の治療有効投与量は、本願に記述される範囲外となる場合がある。そのような、より多いまたは少ない投与量は、本発明の範囲内である。
【００９０】
ヒトにおける腫瘍の治療の有効性を観察するために、腫瘍の大きさおよび／または腫瘍の形態は、治療開始の前と後に計測され、該腫瘍の大きさがさらなる成長を停止する場合、または、例えば、最低１０％以上（例：２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはさらに１００％、つまり腫瘍が存在しない状態）、該腫瘍が大きさを縮小させる場合のいずれかの場合に、治療は有効であると考えられる。生存率、疾患進行期率、部分反応率および客観的反応率の長期化は、治験薬の臨床活性代替的測定値である。腫瘍の縮小は、１つの治療特異反応であると考えられる。本システムは、患者が、精密測定が可能である内臓嚢を有する条件によって制限される。体内で、腫瘍の大きさを判断する方法は、腫瘍の種類によって異なり、例えば、医学画像または腫瘍学の分野において既知である種々の画像法（ＭＲＩ、ＣＡＴ、ＰＥＴなど）、さらに組織学的方法およびフローサイトメトリー法を含む。特定の種類の癌に関して、血清腫瘍マーカーの評価は、反応を評価する為にも使用される（例：前立腺癌に対する前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、および結腸癌に対する胚性癌腫抗原（ＣＥＡ））。癌成長を観察するその他の方法としては、血液中の細胞計算（例：白血病において）または骨痛の緩和（例：前立線癌）を含む。
【００９１】
結晶化合物１含有製剤は、１日に１回投与されることができ、または、１日を通じて、適切な間隔で、２回、３回、４回またはそれ以上の副投与量で投与してもよい。その場合、それぞれの副投与量に含まれる化合物１の量は、一日の総投与量を達成するために、対応して少なくなくてはならない。投与量ユニットは、例えば、数日間に渡って化合物を持続放出させる従来の持続放出性製剤を使用して、数日間に渡って送達されるように、調合されることもできる。持続放出性製剤は、当技術分野において既知である。本実施形態において、投与量ユニットは、対応する複数の１日の投与量を含む。有効な投与量は、単一投与事象（例：ボーラス注入法）または、例えば、３０分から２４時間にわたる、ゆっくりとした注射あるいは注入のいずれかで投与される。剤形は、治療として、３０日間まで投与されてもよい。さらに、治療有効量の化合物での被検体の治療は、単一治療または一連の治療（例：４週間の治療を３回繰り返し、各治療に２ヶ月の間隔をあける。）を含むことができる。本発明に包含される化合物の有効投与量、毒性および体内半減期の推定は、従来の手法を用いて、または適切な動物モデルを用いた体内検査に基づいて行われる。
【００９２】
哺乳類およびヒトを含む、被検体における腫瘍の治療は、単一薬剤として本発明の製剤を投与すること、または、外科手術および／または放射線治療および化学療法レジメンなどの既知の抗癌治療との組み合わせにより、達成されてもよい。結晶化合物１は、既知の抗癌化合物または化学療法剤を併用または追加されて投与されてもよい。化学療法剤のファミリーは、細胞増殖抑制剤または細胞毒性薬、抗生物質型薬剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、ホルモン剤、アロマターゼ薬剤、免疫剤、インターフェロン型薬剤、シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例：ＣＯＸ−２阻害剤）、マトリクスメタロプロテアーゼ阻害剤、テロメラーゼ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、抗成長因子受容体薬剤、抗ＨＥＲ剤、抗ＥＧＦＲ剤、抗血管形成剤、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、ｒａｓ−ｒａｆ信号変換経路阻害剤、細胞周期阻害剤、その他のＣＤＫ阻害剤、チューブリン結合剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤および類似体を含む。化学療法剤の例としては、５−フルロウラシル、マイトマイシンＣ、メトトレキサート、ヒドロキシウレア、ニトロソウレア（例：ＢＣＮＵ、ＣＣＮＵ）、シクロホスファミド、プロカルバジン、ダカルバジン、チオテパ、アトレプトゾシン、テモゾロマイド、エンザスタウリン、エルロチニブ、ミトキサントロン、アントラサイクリン（エピルビシンおよびドクスルビシン）、ＣＰＴ−１１、カンプトセシンおよびそれらの誘導体、エトポシド、ネベルビン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ｐｒｅｇプレグナゾーネ、カルボプラチンおよびシスプラチンなどの白金化合物、タクソールおよびタキソテールなどのタキサン、タモキシフェンおよびエストロゲンなどのホルモン療法剤、ハーセプチンおよびイレッサなどの受容体に対する抗体、アロマターゼ阻害剤、黄体ホルモン薬およびＬＨＲＨ誘導体、ＩＬ２およびインターフェロンなどの生物反応修飾物質、シクロスポリン誘導体ＰＳＣ８３３などの多剤克服剤が挙げられるが、これらに限定されない。（さらなる例は、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ，１２ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ（１９９６）、“Ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ”セクションに記載のＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｃａｔｅｇｏｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｉｎｄｅｘを参照。）
【００９３】
化合物１結晶の毒性および治療効果は、細胞培養または実験動物において、標準の薬学的手順により判断される。治療効果は、動物モデルにおいて、上述のように、また本願の実施例のように判断される。毒性検査は、試験動物の１０％の致死量を決定する（ＬＤ１０）。動物は、最大耐量（ＭＴＤ）で治療され、最大耐量は、死亡または２０％以上の体重減少に至らない最多量である。有効量（ＥＤ）は、特定の腫瘍モデルにおけるＭＴＤに関連し、化合物の治療指数を決定する。１．０に近い治療指数（ＭＴＤ／ＥＤ）は、いくつかの化学療法剤に関して許容範囲であることが認められ、古典的化学療法剤の好適な治療指数は、１．２５以上である。
【００９４】
細胞培養分析および動物研究から得られたデータは、ヒトにおける使用のための投与量の調合において使用することができる。本発明の化合物の投与量は、通常、ＭＴＤを含む、血中濃度の範囲内である。投与量は、本範囲内で、使用される投与形態および利用される投与経路によって異なる。本発明の方法において使用されるすべての化合物に関して、治療有効量は、最初に、細胞培養分析から推側される。剤形は、化合物の循環血漿濃度の範囲を達成するように、動物モデルにおいて処方される。かかる情報は、より正確に、ヒトにおける有効な投与量を決定するために使用することができる。血漿中の濃度は、例えば、高性能液体クロマトグラフィによって、測定されてもよい。化合物の抗腫瘍効果を判断するための動物モデルは、通常、マウスで実施される。いずれのマウス腫瘍細胞も、同種（同系モデル）からのマウスの脇腹後部へ皮下的に接種され、また、ヒト腫瘍細胞も、重症複合免疫不全（ＳＣＩＤ）マウスまたはその他の免疫不全マウス（ヌードマウス）（異種移植モデル）の脇腹後部へ皮下的に接種される。
【００９５】
マウス遺伝子学の進歩は、癌を含む、種々のヒトの疾患の研究のための多くのマウスモデルを作り出してきた。国立癌研究所が提供する、ＭＭＨＣＣ（ヒト癌のマウスモデルコンソ−シアム）ウェブページ（ｅｍｉｃｅ．ｎｃｉ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）は、既知の癌モデルの疾患部位の明細概要を提供し、ＮＣＩ−ＭＭＨＣＣマウスリポジトリのみならず、検索可能な癌モデルデータベース（ｃａｎｃｅｒｍｏｄｅｌｓ．ｎｃｉ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）へのリンクがある。マウスリポジトリは、Ｔｈｅ  Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｔａｃｏｎｉｃ、Ｈａｒｌａｎ、Ｍｕｔａｎｔ  Ｍｏｕｓｅ  Ｒｅｇｉｏｎａｌ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅ  Ｃｅｎｔｅｒｓ（ＭＭＲＲＣ）Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｎｅｔｗｏｒｋ、およびｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｕｔａｎｔ  Ａｒｃｈｉｖｅにも見ることができる。かかるモデルは、化合物１の結晶の体内試験、さらには、治療有効量を決定するために、使用してもよい。                                
【００９６】
[実施例]
別段の表示がない限り、以下の実施例において使用される試薬および溶媒は、Ｓｉｇｍａ−ＡｌｄｒｉｃｈおよびＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃにより提供される。別段の指示がない限り、本明細書および請求項に記載される、物質の量、結晶化の状態などの特性、分子重量、溶融点、相対強度および距離値などのＸ線粉末回折データを示すすべての数字は、「約」という用語によって、すべての場合に、修正されると理解されるものとする。したがって、異なった指示がない限り、本明細書および添付の請求項に記載される数値パラメータは、近似値である。少なくとも、特許請求の範囲への均等論の適用を制限する試みとしてではなく、各数値パラメータは、少なくとも、有効な図の数を考慮して、初期の丸め技法を適用することによって、解釈されるものとする。本発明の広範囲を示す、数値の範囲およびパラメータは近似値であることに関わらず、実施例、表および図に挿入される数値は、できる限り正確に報告される。すべての数値は、本質的に、実験、試験計測、統計分析などの変化によって生じる誤差を含む可能性がある。
【００９７】
別段の定義がない限り、本願に使用される技術的および科学的用語は、本発明の属する分野に精通する者によって一般的に理解される意味を有する。本願の記載と、類似あるいは同等の方法および物質が、本発明の実施または試験において使用されることができ、適した方法および物質は、以下に記述される。さらに、物質、方法、および実施例は、一例に過ぎず、制限することを目的としない。
【００９８】
実施例１：化合物１の生成および単離
発明の結晶化に使用される化合物１は、「微生物を生成する化合物１」から生成され、単離される。実施例１に示される手順は、例示的な手順としてのみ示され、制限することを目的としない。
【００９９】
化合物１は、２００４年１月２１日に出願された米国特許出願第１０／７６２，１０７号の実施例１および２記載され、また、２００４年８月にＷＯ２００４／０６５５９１で公開された手順に従って、それぞれ、ＩＤＡＣ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｄｅｐｏｓｉｔｏｒｙ  Ａｕｔｈｏｒｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｎａｄａ（ＩＤＡＣ），Ｂｕｒｅａｕ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｈｅａｌｔｈ  Ｃａｎａｄａ，１０１５  Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ  Ｓｔｒｅｅｔ，Ｗｉｎｎｉｐｅｇ，Ｍａｎｉｔｏｂａ，Ｃａｎａｄａ，Ｒ３Ｅ  ３Ｒ２）登録番号２３１２０３−０１および０７０３０３−０１を有する、ミクロモノスポラ菌［Ｓ０１］０４６または０４６−ＥＣＯ１１を用いて、得られた。
【０１００】
さらに、化合物１は、以下のように生成された。     
【０１０１】
１．１．手順１
Ａ．発酵
発酵は、１４．５Ｌ発酵槽（ＢｉｏＦｌｏ  １１０TM  Ｆｅｒｍｅｎｔｏｒ，Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｅｄｉｓｏｎ，ＮＪ，ＵＳＡ）で１×１０Ｌバッチで、改良された、米国特許出願第１０／７６２，１０７号に記載される手順を用いて、行われた。
【０１０２】
ミクロモノスポラ種（登録番号ＩＤＡＣ０７０３０３−０１）は、ＩＳＰ２寒天（Ｄｉｆｃｏ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｄｅｔｒｏｉｔ，ＭＩ）の寒天プレート上に保持された。生産段階の接種材料は、ミクロモノスポラ種の表面成長を、寒天プレートから５００ｍＬの無菌ＫＨ培地を含む２−Ｌフラスコへ移動させることにより、調合された。各１リットルのＫＨ培地には、１リットルになるまで水（ｐＨ７．０）を用いて作られる１０ｇのグルコース、２０ｇのポテトデキストリン、５ｇのイースト抽出物、５ｇのＮＺ−アミンＡ、および１ｇのＣａＣＯ３が含まれる。培養液は、約２８ｏＣで約７０時間、２５０ｒｐｍに設定された回転式振盪培養機で培養された。培養に続いて、３００ｍＬの培養液が、１０Ｌの無菌生培地ＨＩを含む１４．５Ｌの発酵槽へ移された。各１リットルの生成培地ＨＩは、２０ｇのポテトデキストリン、３０ｇのグリセロール、２．５ｇのべクト−ペプトン、８．３４ｇのイースト抽出物、および３ｇのＣａＣＯ３、（発酵槽において使用される場合のみ、消泡剤として０．３ｍＬのシリコン消泡油（Ｃｈｅｍ  Ｓｅｒｖｉｃｅ）および０．０５ｍｌのＰｒｏｆｌｏ  ｏｉｌTM（Ｔｒａｄｅｒｓ  ｐｒｏｔｅｉｎ）を伴う）を含み、蒸留水で１リットルとし、ｐＨ７．０へ調整される。培養液は、２８ｏＣで、１５０〜４５０ＲＰＭ間で変化する撹拌および０．５Ｖ／Ｖ／Ｍの速度に固定された曝気によって、カスケードループにおいて、２５％で制御される溶解酸素（ｄＯ２）で培養される。     
【０１０３】
Ｂ．化合物１の単離
集菌において、培養ブロス（１×１０Ｌ）のｐＨは、２０％の水性Ｈ２ＳＯ４（硫酸）の液滴の追加により、一定の撹拌を伴って、３．０へ調整される。結果として生じた混合液は、４℃まで冷却され、その温度で１２時間保持される。その後、冷却されたブロスは、遠心分離され（３２００ｒｐｍで２０分間）菌糸から分離される。回収された菌糸は、メタノール（１００ｇの菌糸に対し３００ｍＬのＭｅＯＨを２回）で採取される。
【０１０４】
採取後、メタノール抽出物は、プールされ、回転蒸発器を用いて、減圧下において、乾燥するまで蒸発させられる。メタノール抽出濃縮物は、ＭｅＯＨ（１０ｇの濃縮物ごとに１００ｍＬ）で再構成され、生じた溶液は、分液漏斗へ移される。蒸留水（１０ｇの濃縮物ごとに３０ｍＬ）に続いてヘキサン（１０ｇの濃縮物ごとに５０ｍＬ）が、分液漏斗のメタノール溶液に加えられた。混合液は、緩やかに、かき混ぜることによって撹拌され、良位相の密着を可能にするが、エマルション形成を避けることができる。その後、混合液は、生じる相分離に抵抗することが可能となる。上部ヘキサン層は、廃棄された。水性メタノール相は、分液漏斗へ回収され、同量の１５％のＮａＣｌおよび２倍の量のＥｔＯＡｃ（エチルアセテート）が加えられた。生じた混合液は撹拌され、良位相の密着を可能にし、生じる相分離に抵抗することが可能となった。上部ＥｔＯＡｃ層は、回収された。ＤｉａｉｏｎTMＨＰ−２０樹脂がＥｔＯＡｃ層へ加えられ、溶媒は、減圧下で除去され、溶液が樹脂へ結合することを可能にした。
【０１０５】
溶液結合樹脂は、ＤｉａｉｏｎTMＨＰ−２０カラムへ塗布され、水で溶出され水溶液成分を除去し、続いて６０％の水性ＭｅＯＨ（ｖ／ｖ）で溶出され弱い結合の不純物を除去した。その後、標的化合物は、段階的な８０％から９０％の水性ＭｅＯＨの勾配で溶出された。８０％〜９０％の水性ＭｅＯＨ留分は、プールされ濃縮され、真空で乾燥され、粗化合物１をもたらした。１００ｍｇの粗化合物１は、容積で５：２：１０：５の割合の、クロロフォルム、シクロヘキサン、メタノールおよび水から調合された５ｍＬの混合液の上相で消化された。サンプルは、２００ｍＬのカートリッジを装着され、本２相システムの上位相をプレパックされた高速向流（ＨＳＣＣ）システム（Ｋｒｏｍａｔｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ａｎｇｅｒｓ，Ｆｒａｎｃｅ）を用いた遠心分配クロマトグラフィへさらされる。ＨＳＣＣは、移動相としての下相に動かされ、化合物１は、約半分のカラム容積で溶出された。留分は、回収され、化合物１は、留分のアリコートのＴＬＣによって、市販のＫｉｅｓｅｌｇｅｌ６０Ｆ２５４プレートにおいて検出された。化合物は、エタノールの持続的に温められたプレートにおいて、紫外線下の乾燥プレートの検査により、またはバニリン（０．７５％）および濃縮硫酸（１．５％、ｖ／ｖ）を含むスプレーでプレートを噴射することにより可視化される。化合物１を含む留分は、プールされ濃縮され、実質的に純性であるが、高度に着色された化合物１を生じる。    
【０１０６】
１．２．手順２
Ａ．発酵
ミクロモノスポラ種［Ｓ０１Ｕ０２］０４６（ＩＤＡＣ０７０９０５−０１）は、ＧＹＭ寒天プレート上に維持された。表面成長は、それぞれ５００ｍＬの無菌ＫＨ培地を含む、３つの２Ｌのバッフルフラスコ（実施例１．１Ａ参照）へ移され、７０時間から７２時間、２８℃（±１．０ｏＣ）で、軌道撹拌器で培養された。藩種フラスコは、プールされ、無菌で２８Ｌ容量の接種発酵槽へ移された。移された容積は、接種発酵槽において、３％のＫＨ培地の容積（発酵槽において、ＫＨはさらに消泡剤として、０．３ｍＬのシリコン消泡油（Ｃｈｅｍ  Ｓｅｒｖｉｃｅ）および０．０５ｍｌのＰｒｏｆｌｏ  ｏｉｌTM（Ｔｒａｄｅｒｓ  ｐｒｏｔｅｉｎ）を含む、実施例１．１Ａを参照）と同等である。発酵は、撹拌に関連する２５％で維持される溶解酸素を用いて、２８℃（±１．０ｏＣ）で４８時間実施された。
【０１０７】
接種発酵槽からの全容積は、７５０Ｌ容量のパイロット発酵槽へ移された。移された容積は、パイロット発酵槽において、３．３％の培地ＨＩの容積（消泡剤を含む、実施例１．１Ａを参照）と同等である。発酵は、撹拌に関連する２５％で維持される溶解酸素を用いて、２８℃（±１．０ｏＣ）で９６時間実施された。    
【０１０８】
Ｂ．化合物１の単離
パイロット発酵槽の集菌の前に、ブロスのｐＨは、一定で撹拌しながら９９％のＨ２ＳＯ４をゆっくりと加えることによって、ｐＨ３へ調整する。その後、発酵培養は、発酵容器で４℃（±２ｏＣ）まで冷却され、後続して、貯蔵タンクへ移され、４℃（±２ｏＣ）で１６時間から７２時間維持される。その後、菌糸は、限外ろ過法（０．２ミクロンフィルタ膜）によって集菌され、濃厚スラリーを生成した。
【０１０９】
菌糸分離ステップの後に得られた菌糸スラリーの１Ｌに対して、３Ｌのメタノールが使用された。抽出ステップは、６０分（±１０分）の、限外ろ過システムを通す、菌糸−メタノール混合液の循環を含んだ。高速の循環は、菌糸凝集体の分散させ、温度は、４２℃（±３ＯＣ）まで上がることが可能となり、十分な抽出を提供した。一度、菌糸が適切に抽出溶媒と混合されると、限外ろ過システムの弁が開口し、透過水を回収することが可能となった（透明メタノール抽出物）。メタノール抽出物は、非透過物容器へ供給され、残菌糸は、第２の等体積のメタノールで再抽出される。本ステップは、第３の等体積のメタノールで繰り返される。３つのメタノール抽出物を、プールし、減圧下で蒸発し、濃い粗濃縮物を生成した。
【０１１０】
室温で、塩（ＮａＣｌ１０％ｗ／ｖ）が、粗濃縮物へ加えられ、該混合物は、３０分（±１０分）間撹拌され、該塩を溶解した。メタノールは、３：１（メタノール：濃縮物）の割合で、塩化粗濃縮物へ加えられ、該混合物は、６０分（±１０分）間撹拌された。生じた混合物は、真空下で、ろ過され（０．５ミクロン膜）、粒子状物質を除去した。ろ液は、分液容器へ移され、続いて、ヘプタン（粗濃縮物の再溶解に使用されたメタノールの１００ｍＬに対して、５０ｍＬのヘプタン）が加えられた。分液容器の内容物は、２０分（±５分）間よく撹拌され、水位相および有機相への密着を達成することを確実にした。撹拌後、該混合液は、室温で生じる相分離に抵抗することが可能となる。低水性メタノール層が回収された。メタノール抽出物を、第２のヘプタンの体積（第１の抽出で使用されたヘプタンの５０％の体積と同等の量）で再抽出した。メタノール層は、プールされた。
【０１１１】
脱脂により得られたメタノール層は、回転蒸発器でＨＰ２０（登録商標）と混合され、メタノールは、減圧下で蒸発され、疎水性成分が樹脂へ結合することを可能にした。積載された樹脂は、プレパックされたＨＰ２０（登録商標）カラム上へ加えられた。該カラムは、広範囲にわたって、精製水（１０（±２）カラム体積）洗浄され、すべての溶媒、塩および非結合水溶性有機成分を除去した。化合物１よりも低い疎水性を有する弱結合不純物は、カラム放出色が透明または非常に明るい黄色になるまで、約１０（±２）カラム体積の水性メタノール（６０：４０ｖ／ｖメタノール：水）でカラムから溶出される。７０：３０のメタノール：水の溶液（３（±１）カラム体積）が、その後使用され、カラムを洗浄した。化合物１は、水性メタノール（９０：１０ｖ／ｖメタノール：水）で溶出され、留分が回収された。各９０％溶出留分のサンプルが、化合物１の内容物を分析するためのＬＣ−ＵＶ分析へ送られた。１％以上の化合物１の総推定量を含む、７０％および９０％の水性メタノール留分は、プールされ、第２のＨＰ２０（登録商標）カラム浄化へ送られ、前述のように進められた。１％以上の化合物１の推定量を含む、得られた９０：１０ｖ／ｖメタノール：水留分を、プールし、濃縮し、結晶化前に乾燥させた。
【０１１２】
実施例２：化合物１の結晶の調合
結晶化の過程は、単離された化合物１または粗化合物１または紛末形態の化合物１の使用に制限されず、結晶形は、結晶化過程においても使用され、同様または異なる形態に生成する。同様の結晶形は、その他の溶媒系から、または異なる条件下においても得られ、本願に例示される手順は、例示する目的に過ぎない。
【０１１３】
実施例１に従って得られた化合物１の凍結乾燥粉末は、形Iの結晶および形ＩＩの結晶の調合において使用された（粗物質が使用された２．１Ｃは除く）。形ＩＩＩの結晶は、形Iまたは形ＩＩの結晶から調合された。     
【０１１４】
２．１．結晶形Ｉ（メタノール／水）（３手順）
注意：微量の形ＩＩの結晶は、メタノールおよび水の混合体から生成された形Iの結晶において時折存在した。形Iの結晶の生成は、化合物１を、約０．８ｍｇ／ｍＬで、それぞれが、水に３％ｗ／ｖの濃度である、ＰＥＧ（ポリエチレングリコール）とＰＧ（プロピレングリコール）の混合体で処置する際に、観察した。
【０１１５】
Ａ．実施例１．１ＢにおけるＨＳＣＣ精製からの凍結乾燥化合物１（２４ｍｇ）は、２０ｍＬのガラスバイアルで計量され、２ｍＬのメタノールで溶解され、薄い茶系の溶液を生成する。該溶液は、パスツールピペットのＮｏｒｉｔTM（活性炭）プラグに送られ、該溶液を脱色する。薄い黄色系の溶液が得られ、数滴のメタノールが、容積を２ｍＬに調整するために加えられた。脱色された溶液は、溶液がちょうど濁るまで、水で滴定された。一定した回転が、滴定の間用いられた。加えられた水の総容積は、約７２％の最終メタノール含有物に対して、７００μＬであった。濁った懸濁液は、水槽で５５℃まで熱せられ、透明飽和水溶液を生成した。透明溶液は、水槽から除去され、室温に冷却された。溶液が冷却されると、過飽和溶液が生じ、そこから結晶が形成し始めた。溶液の温度は、この時点で、約３１〜３３℃であった。溶液は、焼結ガラス漏斗でのろ過および洗浄の前に、引き起こされる完全な結晶化のために、暗い場所に室温で７２時間置かれることを許された。結晶は、一晩凍結乾燥され、２０．５ｍｇの結晶化合物１（形Ｉ）をもたらした。
【０１１６】
Ｂ．使用された代替手順は、以下であった。ＨＳＣＣ精製（実施例１．１Ｂ）からの凍結乾燥化合物１（１３０ｍｇ）が計量され、３０ｍＬのメタノールで溶解され、薄い茶系の溶液を生成した。溶液は、ＮｏｒｉｔTMのショートカラム（ろ過助剤として、２００ｍｇのノリットおよび４００ｍｇのセリットから作成された）へ送られ、溶液を脱色し、減圧が、カラムを通る溶液の流れを促進するために、使用された。薄い黄色系の溶液が得られた。追加の５ｍＬの温められたメタノールを、カラムを溶出するために使用した。カラムから集められた容積は、３４．２ｍＬであった。脱色された溶液は、室温になるまで冷却され、溶液が濁り始めるまで、水で滴定された。一定した回転が、滴定の間用いられた。加えられた水の総容積は、７２％の最終メタノール含有物に対して、約１３ｍＬであった。濁った懸濁液は、水槽で５０℃まで加熱し、透明飽和水溶液を生成した。透明溶液は、水槽から除去し、水のビーカーで、徐々に室温まで冷却された（ビーカー内の水は、５０℃の開始温度を有する）。約３０分間、放置した後、溶液内に結晶が現れ始めた（ビーカー内の温度は、３５℃であった）。溶液は、暗い場所に室温で、一晩置かれ、その後、完全な結晶化のため、冷蔵庫（４℃）へ、入れられた。結晶は、焼結ガラス漏斗において、ろ過によって回収され、冷たい（４℃）２０％の水性メタノールで洗浄された。結晶は、一晩凍結乾燥され、１１６．３ｍｇの結晶化合物１（形Ｉ）をもたらした。
【０１１７】
Ｃ．代替方法をさらに用いて、形Ｉの結晶を調合した。使用された物質は、ダイヤイオンＨＰ−２０ステップ（ＨＳＣＣの前の実施例１．１Ｂ）から得られた。約１０００ｍｇの凍結乾燥された粗化合物１抽出物（約７０％の純性）が、メタノール（３０ｍＬ）で溶解され、濃い茶色の溶液（ほぼ黒色）を生成した。溶液は、溶液の流れを促進するために真空を用いて、ＮｏｒｉｔTMのショートカラム（ろ過助剤として２ｇＮｏｒｉｔTMと２ｇセリット）へ送られた。初めは、カラムから溶出された溶液は、薄い黄色の溶液であったが、溶出の終わりに向けて、その色は、黄色系茶色へ変化した。ＮｏｒｉｔTMカラムは、２０ｍＬの温められたメタノールで洗浄された。溶液の容積は、メタノールで５０ｍＬへ調整され、緑黄色溶液をもたらした。溶液は、室温まで冷却され、一定の回転を用いて、液滴の方法で、水で、曇り点まで滴定された（２０ｍＬの水が、約７１％のメタノール濃度のために必要とされた）。濁った懸濁液は、水槽で５０℃まで熱せられ、透明飽和水溶液を生成した。生じた溶液を、水槽から除去し、水のビーカーで、室温まで冷却した（ビーカーの開始温度は、５０℃であった）。一晩、放置した後、針状の結晶が、溶液に現れ始めた（結晶は１５時間後に現れた）。水滴が、結晶化過程が完了したかどうかを判断するために、溶液へ加えられた。（水が加えられた際の混濁は、結晶化が完了していないことを意味した）。顕著な混濁が認められない場合、その溶液は、冷蔵庫（４℃）に５時間保管された。結晶は、焼結ガラス漏斗を用いて、真空ろ過によって回収され、冷たい２０％の水性メタノールで洗浄された。回収された結晶（形Ｉ）は、凍結乾燥され、３５０ｍｇの結晶（ＮＭＲおよびＨＰＬＣによる９８％以上の純性）をもたらした。    
【０１１８】
２．２．    結晶形ＩＩ（エタノール／水）
Ａ．ＨＳＣＣ精製（実施例１．１Ｂ）からの凍結乾燥化合物１（１１０ｍｇ）は、２０ｍＬのバイアルで計量され、１０ｍＬのエタノールで溶解され、茶系の溶液を生成した。溶液は、曇り点まで、水で、一定の回転で、滴定された（１４ｍＬの水が使用され、３９％エタノール濃度をもたらした）。濁った懸濁液は、水槽で５０℃まで熱せられ、透明過飽和水溶液を生成した。約２時間放置された際、板状の銀色の結晶の粒が現れた。結晶化過程の完了後、結晶が回収され、先述のように計量された。９５ｍｇの量の結晶（形ＩＩ）が回収された。結晶は、銀白色であった。
【０１１９】
Ｂ．代替方法として、結晶化は、実施例１．２ＢからのＨＰ２０（登録商標）精製物質で実施された。ＨＰ２０（登録商標）精製物質は、約２４±３ｇ／Ｌの濃度まで、９５％エタノールで溶解された。精製水が加えられ、７０％エタノールにおいて１７．５±２．５ｇ／Ｌの「原液」を得た。本溶液は、約３０（±２）ｏＣへ予め温められたカーボイ容器で調合された３３％エタノール溶液へ加えられた。「原液」の追加は、１０ｍｇ／分／１０Ｌの結晶容積に設定された溶媒送達系を用いて、一定の撹拌を伴い、達成された。約６±０．５時間後、結晶タンクは、１０ｍｇの化合物１の結晶で藩主された。いったん原液が完全に結晶化溶液へ送達されると、そのシステムは、約１２．０（±０．５）時間、成熟されることが可能になった。成熟期の後、精製水（０．１５×結晶化溶液の総容積）が、０．１×結晶化溶液の容積の割合でタンクへ加えられた。精製水の追加後、生じた結晶化溶液は、結晶の収集の前に、さらに１６．０（±０．５）時間、成熟された。結晶は、中間ゲージ焼結ガラス漏斗を使用したろ過によって、回収された。     
【０１２０】
２．３      結晶形ＩＩ（イソプロパノ−ル／水）
ＨＳＣＣ精製（実施例１．１Ｂ）からの凍結乾燥化合物１（２１ｍｇ）は、ホウケイ酸ガラス菅（１３×１００ｍｍ）で計量され、８００μＬのイソプロピルアルコールで溶解された。溶液は、水を追加することにより、曇り点に近づけられた（１５００ｍＬの水が使用され、３５％のイソプロピルアルコール濃度をもたらした）。溶液は、一晩、４℃〜８℃に維持され、結晶形を可能にした。結晶が回収され、計量された。回収収率は、約７５％であった。     
【０１２１】
２．４      結晶形ＩＩＩ（アニーリング処理）
結晶形ＩＩＩを、形Ｉまたは形ＩＩの結晶のいずれかによって、多様な温度で、空気雰囲気あるいは不活性雰囲気などの多様な条件の下、または減圧下で、生成した。結果を、以下に要約する。
【０１２２】
Ａ．手順例
形ＩＩの化合物１の結晶のサンプル（１ｍｇから３０ｇ）を、エドワーズＲＶ８ポンプを用いて、６時間、等温の６０℃の温度の乾燥機で、減圧下（１〜４トール）において、（または真空乾燥機において）乾燥した。サンプルを室温まで冷却し、得られた結晶形ＩＩＩを、実施例３、４、５および６に記載のように、分析した。     
【０１２３】
Ｂ．一般的な乾燥（アニーリング）処理および結果
形ＩおよびＩＩのすべてのサンプルは、空気雰囲気下で、６０℃、７０℃、８０℃、９０℃、または１００℃の温度で加熱した際、観察化可能な分解（１Ｈ  ＮＭＲ、ＴＧＡ、ＸＲＰＤおよび溶解度による）なく、形ＩＩＩへ変化した。アニーリング処理は、上述の溶媒除去の温度で行われた。結晶を窒素下または減圧下でアニールした際、分解は１６０℃まで認められなかった。アニーリングは、さらに、５０℃まで、ゆっくりと進行することが示された。
【０１２４】
一例として、６０℃、７０℃、および９０℃の温度が用いられた場合、後続のＤＳＣ分析は、それぞれ、１８５．５℃、１８４．５℃、および１８３．４℃の溶融点、および、それぞれ、８４．６Ｊ／ｇ、６６．８Ｊ／ｇ、および６４．９Ｊ／ｇの質量エンタルピーを示した。１２０℃の空気雰囲気下（１７４℃の溶融点、３９．７Ｊ／ｇの質量エンタルピー）では、わずかな分解（４％以下）が認められた（ＮＭＲおよび溶解度）。
【０１２５】
以下のステップ、（ａ）実施例１．２に記載される、発酵および単離のステップ、および（ｂ）実施例２．２Ｂに記載される、形ＩＩの結晶を生成するステップ、および（ｃ）実施例２．４Ａに記載される、形ＩＩＩを生成するためのアニーリング（乾燥）のステップを用いる際、総合結果物は、４５０Ｌの発酵に対し、約５０ｇの結晶形ＩＩＩであった。
【０１２６】
約８〜１０ｇ／Ｌの濃度で、約５：１０：２：５（ＨＳＣＣ、低位相移動）の容積比率の、クロロフォルム／メタノール／シクロヘキサン／水の混合体の低位相において溶解された化合物１は、ロータバップ（回転蒸発器）で、微温による加熱で、乾燥するまで濃縮した場合、結晶形ＩＩＩが、認められた。
【０１２７】
実施例３：結晶形Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの一般的特性
実施例２に従って調合された、形Ｉ、ＩＩおよびＩＩの化合物１の結晶は、本実施例および実施例４、５ならびに６に記載される特性を有することが明らかとなった。
【０１２８】
溶液中に結晶形は存在せず、したがって、生理化学的溶液の特徴、すなわち、結晶多形の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルおよび紫外線スペクトルと、実質的に純性の化合物１の非晶形は、同様である。すべての化合物１の結晶形に対して得られた１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、２００４年８月にＷＯ２００４／０６５５９１としても公開された２００４年１月２１日に出願された米国特許出願第１０／７６２，１０７号に記載された、化合物１の構造およびＮＭＲスペクトルと同等であった。
【０１２９】
概して、実質的に純性である、化合物１の結晶は、灰色から灰銀色の結晶を示した。クリスタルの外観は、通常化合物１の出発物質の純粋性により変わる、その純粋性（結晶化度ではない）により、変わる。より純性度の低い結晶形（例：９０〜９４％）は、非常に明るい茶系色を示した。
【０１３０】
実施例４：結晶形Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩのＸＲＰＤ図形
４．１      一般的手順
Ｘ線粉末回折分析（ＸＲＰＤ）は、標準手順に従って調合されたサンプルにおいて、実施された。Ｘ線分析は、放射線源Ｃｏ  １．７９０９１オングストロームを用いた、回折測定器Ｄ５０００−Ｓｉｅｍｅｎｓ／Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳおよび、Ｓｉ検出器を用いて、実施された。データは、参照基準として１〜２ｍｇのシリコンを用いた、シリコンプレート上の２〜４ｍｇの結晶のサンプルで、室温で、サンプルを回転させることなく、２°／２°／０．０２ｍｍの一定シャトルで採取された。Ｘ線強度は、１秒につき０．０１°の増加角度を伴う３°から７０°のシータ角度で収集された。   
【０１３１】
４．２      結果
形Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩは、例えば、それぞれ形ＩＩＩ、形ＩＩ（ｉ−ＰｒＯＨ／水）、形Ｉおよび形ＩＩ（ＥｔＯＨ／水）から収集される、図１（ａ）から（ｄ）の回折図形において示されるようなＸ線粉末回折図形（ＸＲＰＤ）を特徴とする。表１に詳細が記載の値は、最も重要な値であり、程度（±１％）での「２−シータ角度」および相対強度「ＲＩ」（Ｓ＝強、Ｍ＝中、Ｗ＝弱、Ｖ＝非常に、および、例えば、ＶＳ＝非常に強などのそれたの組み合わせ）で示される。
【表１】
2009527466.tif 000005
【０１３２】
メタノール／水の結晶化から得られた結晶の分析（表１、図１（ｃ））は、形Ｉの結晶を示し、微量の形ＩＩの結晶を含む場合があることが明らかとなった。
【０１３３】
エタノール／水またはイソプロパノール／水のいずれかにおける結晶化は、形ＩＩの結晶を生成した（表１、各図１（ｄ）および図１（ｂ））。ｉ−ＰｒＯＨ／水またはＥｔＯＨ／水のいずれかから生成された形ＩＩは、ＸＲＰＤ図形においては大きな相違は示さず、同等であると考えられる。
【０１３４】
また、すべての結晶形（形ＩおよびＩＩ）は、結晶化に使用された溶媒に関係なく、乾燥されると、第３の形（形ＩＩＩ）に変化することが明らかとなった。アニーリング後の結晶に対してのＸＲＰＤ結果の分析は、すべての例において、形ＩＩＩの結晶（表１、図１（ａ））を示した。アニーリングのステップの後、形ＩおよびＩＩの両方が、形ＩＩＩの結晶へ変化した。化合物１粉末は、部分的に多形であると考えられるが（ＤＳＣ実験、実施例５および図２を参照）、特定の結晶化度を特徴とする。その結晶部分は、ほぼ形Ｉの結晶で構成され、最初の変化の後、粉末の一部分は、すべての他の例で認められるように、形ＩＩＩの結晶へ変わった。
【０１３５】
実施例５：結晶形Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩのＤＳＣ
５．１      一般的手順
示差走査熱量測定分析は、ＴＡ  ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓＱ１０００−ＤＳＣ（製造番号１０００−００２４）スキャナーを使用して、ＤＳＣ細胞を用いて行われた。冷蔵冷却システムは、サンプルを−９０℃まで冷却することが可能なＤＳＣ装置に接続された。ＤＳＣ装置は、ＩＳＯガイド２５によって推奨されるように、インジウム金属温度基準を用いて、調整された。高容量のステンレス製のなべ（蓋と封を伴う、ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃａｔ番号９００８２５．９０２）を、サンプル容器として使用した。３つの異なる条件設定（Ａ、Ｂ、Ｃ）を、所望の測定されるパラメータまたは結果に応じて、使用した。
【０１３６】
Ａ．１０〜１２ｍｇのサンプルのＴｇ（グラス転移温度）測定（少なくとも部分的に非晶質粉末）は、以下の条件、−６０℃までの冷却（ランプ：２０℃／分）と、１６０℃までの加熱（ランプ：２０℃／分）と、等温ステップ（１６０℃、３０分間）と、−６０℃までの冷却（ランプ：２０℃／分）と、２１０℃までの加熱（ランプ：２０℃／分）との条件を用いて、達成された。図２のサーモグラムは、本手順を用いて作成されたが、第２の加熱ランプである、２０℃／分の温度ランプでの−６０℃から２１０℃のみを示す。
【０１３７】
Ｂ．５〜６ｍｇのサンプルにおける一次転移測定（結晶形および粉末形）は、室温から２１０℃まで加熱することによって、達成された（ランプ：５℃／分）。溶融温度および質量エンタルピーは、１．５〜２ｍｇのサンプルで、同条件を使用して測定された。
【０１３８】
Ｃ．結晶型の変化（結晶および粉末の両形態のアニーリング）は、５〜６ｍｇのサンプルで測定され、以下の条件、１６０℃までの加熱（ランプ：５℃／分）と、等温ステップ（１６０℃、１２０分間）と、室温までの冷却（ランプ：５℃／分）と、２１０℃までの加熱（ランプ：５℃／分）とが用いられた。
５．２      結果     
【表２】
2009527466.tif 000006
【０１３９】
示差走査熱量測定サーモグラムは、非晶質粉末を含める、すべての形に対して行われた。例示的なＤＳＣスキャンは、本願（図２から５）で示され、得られた結果は、表２に要約される。非晶質粉末のＤＳＣ（手順Ａ、図２）は、例えば、約−５０℃から−６０℃のＴｇが飽和炭化水素鎖を有する化合物に期待されるように、Ｔｇは炭化水素鎖を有する化合物の非晶質形態に一致することが明らかにされる、約−１５℃のグラス転移温度（Ｔｇ）を示した。観察された値は、最低基準温度の５０℃以下であるが、さらに好ましくは、経口固体医薬剤において物理的状態の転移を超過時間有する危険性を避けるため（例えば、Ｂｅｃｈａｒｄ  ａｎｄ  Ｄｏｗｎ（１９９２），Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｖｏｌ  ９，ｎｏ  ４，５２１−５２８を参照）、１００℃である。
【０１４０】
形ＩのＤＳＣサーモグラムにおいて（手順Ｂ、図３（ａ））、概して、２つの一次転移が溶融点以下で認められた。一次転移は約８０℃で認められ、二次転移は約１００から約１４０℃の範囲で観測された。形Iで認められる一次転移は、溶媒除去により引き起こされる場合がある。
【０１４１】
形ＩＩのＤＳＣサーモグラムにおいて（手順Ｂ、図４（ａ））、一次転移は溶融点以下で認められた。該転移は、約１００℃から１４０℃の範囲で示された。
【０１４２】
形Ｉと形ＩＩの両方で認められたより約１００℃から１４０℃の転移は、ＸＲＰＤ図形およびＮＭＲにより示されるように（分解産物なし）、分解することなく、安定した形ＩＩＩを生成する分子の３次元分子再配列に一致する。
【０１４３】
形ＩＩＩのＤＳＣサーモグラム（手順Ｂ、図３（ｂ））は、溶融点以下の一次転移を示さなかった。このことは、さらに、形IおよびIIに関して、溶融点以下で認められた一次転移は、３次元再配列に関係する。ＤＳＣ実験は、形IおよびＩＩを異なる温度で熱処理することにより得られた形ＩＩＩの結晶で実施された。図５（ａからｄ）は、減圧下において、それぞれ１１０℃、９０℃、７０℃および６０℃で、フォームＩＩ（エタノールから）をアニーリングした後に得られた結果を示す。
【０１４４】
形Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの溶融点はすべて、ＤＳＣによる約１８３（±５）℃の開始温度である、同様の結果を示した。それらは、溶融点以下で、形ＩＩＩへ変換するので、観察される溶融点は、実際、形ＩＩＩが融解する温度である。
【０１４５】
アニーリングステップ（手順Ｃ、１６０℃等温線を伴う）を含むＤＳＣスキャンなどのその他の実験は、さらに結晶形ＩおよびＩＩ、および粉末形態を特徴付けるために、窒素下で実施された。観察結果は、上述の結果に一致する。
【０１４６】
形ＩＩＩの溶融温度は、キャピラリＵ．Ｓ．Ｐ装置（米国薬局方に盛り込まれる要件から特別に設計される）を使用して計測される場合、２℃の標準偏差を伴い、１８４℃の平均結果を示す。
【０１４７】
実施例６：結晶形Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの熱重量分析
６．１      一般的手順
熱重量分析（ＴＧＡ）は、ＴＡＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓＱ５００−ＴＧＡ（製造番号０５００−０００６）を用いて実施される。該装置は、製造業者の要求どおりに、温度および重量に関して調整された。重量調整は、認定重量（クラス１およびクラスＥ２）を用いて行われた。温度は、ニッケルワイヤキュリー点温度基準（製造番号：ＣＲＭ２−１８４）を用いて調整された。プラチナ１００μＬ皿（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔカタログ番号９５２０１８．９０６）を、サンプル容器として使用した。データは、以下の条件、９℃から５５０℃の２０℃／分の温度ランプと、窒素フローは５５０℃で、酸化および最終分解を促進するために空気フローへ変化する条件と、〜１００％重量減少に到達するための５５０℃から１００℃の２０℃／分の温度ランプと、を使用して回収された。    
【０１４８】
６．２      結果
結晶形Ｉ、ＩＩ（エタノール／水から）およびＩＩＩの熱重量分析（ＴＧＡ）から得られた結果の例を、図６および７に示す。形ＩおよびＩＩのＴＧＡ（例：それぞれ図６（ｂ）および７（ｂ））は、分解することなく、一次転移の前に約６％の重量減少を示し、（ＮＭＲおよびＸＲＰＤ図形により示される）、溶媒除去（例：水、メタノール、エタノールまたはイソプロパノール）があることを意味する。重量減少は、結晶形ＩおよびＩＩの両方に関して、１００℃以下で生じた。
【０１４９】
溶媒除去後、結晶は、別の結晶型（形ＩＩＩ）へ変換し始めた。溶媒除去の終わりと溶融点の間には、重要減少は、生じなかった。形ＩおよびＩＩに関して、第２の重量減少は、溶融点の後に生じ、溶融化合物の分解によって生じた。
【０１５０】
図６（ａ）および７（ａ）に示される形ＩＩＩのＴＧＡは、それぞれ形IまたはＩＩのアニーリングから得られ、溶融点前の重量減少は示さず、溶媒除去は、形ＩおよびＩＩにおける第１の重量減少を引き起こしたことを証明した。重量減少は、溶融点が到達した後に認められ、形ＩおよびＩＩに関して、分解が生じたことを示した。
【０１５１】
実施例７：水における溶解度測定
熱力学的に最も安定した形態は、溶解度検査によって、測定される。概して、最も安定した形態は、低溶解度特性を示す。結晶形Ｉおよび結晶形ＩＩのそれぞれのサンプル、および結晶形ＩＩＩ（形Ｉおよび形ＩＩの乾燥により得られる）の２つのサンプルの薬物溶解度は、ＨＰＬＣ−ＭＳ法（質量分析計に接続される高性能液体クロマトグラフィ装置）を用いて、水において評価された。結晶の飽和水溶液は、撹拌され、周囲温度で２４時間維持された。溶液は、３６００ｒｐｍ遠心分離され、浮遊物のアリコートＨＰＬＣ−ＭＳによって、分析された。結果を、下記の表３に示す。
【表３】
2009527466.tif 000007
【０１５２】
表３に示される結果は、結晶形ＩＩＩは、明らかに結晶形ＩおよびＩＩよりも安定性を有するということを示した。２つの異なる源の形ＩＩＩは、異なる溶解度を示し、溶解度検査は、平衡状態では行われなかったが、２４時間の一定期間であったという事実によって説明することができる。
【０１５３】
本願に引用されるすべての特許、特許出願、および公開参照文献は、全体を参照することにより、本願に組み込まれる。論争が生じた場合、定義を含む本明細書によって、規制する。本発明は、好適な実施形態を参照することで具体的に示され、説明されてきたが、添付の特許請求の範囲に包含される本発明の範囲から逸脱することなく、本願において、形態および詳細に関して種々の変更がなされるということを、当業者は理解するであろう。
【図面の簡単な説明】
【０１５４】
【図１】（ａ〜ｄ）は、種々の化合物１の結晶形のピーク値での特性Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）図形（室温で）を示す（縦軸：強度、横軸：２℃から４０℃の２つのシータ（角度））。表１参照。図１（ａ）は、６０℃で６時間アニーリング処理をした後の、結晶形ＩＩＩの特性ＸＲＰＤ図形を示す。図１（ｂ）は、結晶形ＩＩの特性ＸＲＰＤ図形を示す（イソプロパノ−ル／水から結晶化）。図１（ｃ）は、結晶形Iの特性Ｘ線粉末回折図形（室温で）を示す（メタノール／水から結晶化）。図１（ｄ）は、結晶形ＩＩの特性ＸＲＰＤ図形を示す（エタノール／水から結晶化）。
【図２】図２は、化合物１の部分的非晶質粉末のＤＳＣ（示差走査熱量測定）サーモグラムを示し、−１５℃のグラス転移を含む、−６０℃から２１０℃の、２０℃／分の温度傾斜を伴う。
【０１５５】
図３から図５に示されるすべてのＤＳＣサーモグラムは、室温（２５℃）から２１０℃で、５℃／分の温度傾斜を伴う窒素下で実現される。
【図３】図３（ａ、ｂ）：図３（ａ）は、結晶形ＩのＤＳＣサーモグラムを示し、約１８３℃以下の溶融点の広範囲の一次転移を示す。図３（ｂ）は、減圧下において６０℃で６時間、形Iをアニーリングした後の、結晶形ＩＩＩのＤＳＣサーモグラムを示し、約１８３℃以下の溶融点の一次転移は示さない。
【図４】図４（ａ、ｂ）：図４（ａ）は、結晶形ＩＩ（エタノール／水から）のＤＳＣサーモグラムを示し、約１８３℃以下の溶融点の一次転移を示す。図４（ｂ）は、減圧下において６０℃で６時間、形ＩＩ（エタノール／水から）をアニーリングした後の、結晶形ＩＩＩのＤＳＣサーモグラムを示し、約１８３℃以下の溶融点の一次転移は示さない。
【図５】図５（ａ〜ｄ）は、形ＩＩ（エタノール／水から）を異なる温度で６時間、アニーリングした後の、結晶形ＩＩＩのＤＳＣサーモグラムを示す。図５（ａ）は、１１０℃での形ＩＩのアニーリングからの形ＩＩＩのＤＣＳを示す。図５（ｂ）は、９０℃での形ＩＩのアニーリングからの形ＩＩＩのＤＳＣを示す。図５（ｃ）は、７０℃での形ＩＩのアニーリングからの形ＩＩＩのＤＳＣを示す。図５（ｄ）は、６０℃での形ＩＩのアニーリングからの形ＩＩＩのＤＳＣを示す。
【０１５６】
図６〜７は、室温（２５℃）から６７５度の、２０℃／分の温度傾斜を伴う、ＴＧＡ（熱重量分析）サーモグラムを示す。窒素ガスフローを伴う、室温（２５℃）から５５０℃。５５０℃で、窒素フローは最終転移（分解）を促進するため空気フローへ変えられる。
【図６】図６（ａ）は、形I（メタノール／水から）を減圧下において６０℃で６時間アニーリングした後の、結晶形IIIのＴＧＡサーモグラムを示す。図６（ｂ）は、１００℃以下の重量減少を示す、形Ｉ（メタノール／水から）のＴＧＡサーモグラムを示す。
【図７】図７（ａ）は、形ＩＩ（エタノール／水から）を減圧下において６０℃で６時間アニーリングした後の、結晶形ＩＩＩのＴＧＡサーモグラムを示す。図７（ｂ）は、１００℃以下の重量減少を示す、形ＩＩ（エタノール／水から）のＴＧＡサーモグラムを示す。
【図１】
2009527466.tif 000012
【図２】
2009527466.tif 000013
【図３】
2009527466.tif 000014
【図４】
2009527466.tif 000015
【図５】
2009527466.tif 000016
【図６】
2009527466.tif 000017
【図７】
2009527466.tif 000018
【手続補正書】
【提出日】平成19年1月26日(2007.1.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物１の結晶形であって、前記化合物１は、以下の構造式、
2009527466.tif 000019
を有する、結晶形。
【請求項２】
前記結晶形は、図１（ａ）、１（ｂ）、１（ｃ）または１（ｄ）に図示されるように、Ｘ線回折図形を本質的に形成する、請求項１に記載の結晶形。
【請求項３】
前記結晶形は、図３（ａ）または４（ａ）に図示されるように、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを本質的に形成する、請求項１に記載の結晶形。
【請求項４】
前記結晶形は、図３（ｂ）、４（ｂ）または図５（ａ）から５（ｄ）のいずれかに図示されるように示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを本質的に形成する、請求項１に記載の結晶形。
【請求項５】
前記結晶形は、図６（ｂ）または７（ｂ）に図示されるように熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムを本質的に形成する、請求項１に記載の結晶形。 
【請求項６】
前記結晶形は、図６（ａ）または７（ａ）に図示されるように、熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムを形成する、請求項１に記載の結晶形。
【請求項７】
化合物１の結晶形であって、前記化合物は、以下の構造式、
2009527466.tif 000020
を有し、
前記結晶形は、図１（ｃ）に図示されるように、Ｘ線回折図形を本質的に形成する、結晶形。
【請求項８】
化合物１の結晶形であって、前記化合物１は、以下の構造式、
2009527466.tif 000021
を有し、
前記結晶形は、図１（ｂ）または１（ｄ）に図示されるようにＸ線回折図形を本質的に形成する、結晶形。 
【請求項９】
化合物１の結晶形であって、前記化合物１は、以下の構造式、
2009527466.tif 000022
を有し、
前記結晶形は、図１（ａ）に図示されるようにＸ線回折図形を本質的に形成する、結晶形。
【請求項１０】
Ｘ線粉末回折図形における以下の角度位置（２つのθ角度±１％）、
a)  5.1°、10.3°、15.2°、 20.8°、 22.8°、 26.0° および 31.2° (形態 I)、
b)  4.2°、 8.3°、 12.5°、 16.7°、 20.9°、 25.2°、 29.5° および 33.8° (形態 II)、または
c)  4.0°, 7.9°、 11.8°、 15.7°、 23.6°および 27.6° (形態 III)。
【請求項１１】
Ｘ線粉末回折パターンにおいて以下の角度位置（２つのθ角度±１％）により特徴づけられる請求項１の結晶形。5.14°、10.34°、15.20°、20.78°、22.80°、26.02° および 31.20° (形態 I)。
【請求項１２】
Ｘ線粉末回折パターンにおいて以下の角度位置（２つのθ角度±１％）により特徴づけられる請求項１の結晶形。4.16°、8.32°、12.50°、16.70°、20.94°、25.20°、29.48°および33.82°（形態II）。
【請求項１３】
Ｘ線粉末回折パターンにおいて以下の角度位置（２つのθ角度±１％）により特徴づけられる請求項１の結晶形。3.96°、7.86°、11.80°、15.74°、23.64°および27.62°（形態III）。
【請求項１４】
前記結晶形は少なくとも1つの低級アルキルアルコールを含んでいる溶媒系で化合物1を処理することによって得られる請求項1の結晶形。
【請求項１５】
前記低級アルキルアルコールは、メタノール、エタノール、ならびにイソプロパノールから選択される、請求項１４に記載の結晶形。
【請求項１６】
前記溶媒系は、メタノール、エタノール、ならびにイソプロパノールから選択される前記低級アルキルアルコールより選択される、請求項１５に記載の結晶形。
【請求項１７】
前記低級アルキルアルコールがメタノールである、請求項１４に記載の結晶形。
【請求項１８】
前記低級アルキルアルコールがエタノールである、請求項１４に記載の結晶形。
【請求項１９】
前記低級アルキルアルコールがイソプロピルアルコールである、請求項１４に記載の結晶形。
【請求項２０】
前記結晶形は第１の結晶形を約５０℃から約１１０℃の温度で乾燥させることにより得られる、請求項１に記載の結晶形。
【請求項２１】
前記乾燥が約３０分から約２４時間の乾燥時間で達成される、請求項２０に記載の結晶形。
【請求項２２】
前記乾燥時間が約２時間から約１２時間である、請求項２１に記載の結晶形。
【請求項２３】
前記第１の結晶形が形態Ｉである、請求項２０に記載の結晶形。
【請求項２４】
前記第１の結晶形が形態ＩＩである、請求項２０に記載の結晶形。
【請求項２５】
実質的に純粋な形態である、請求項１に記載の結晶形
【請求項２６】
本質的に純粋な形態である、請求項１に記載の結晶形
【請求項２７】
前記結晶性形は、実質的に結晶構造である、請求項１に記載の結晶形。
【請求項２８】
前記結晶性形状は、本質的に結晶構造である、請求項１に記載の結晶形。
【請求項２９】
前記結晶形の外観が灰色から灰銀色の結晶である、請求項１に記載の結晶形
【請求項３０】
前記結晶形は化合物１の他の結晶形を本質的に含まない、請求項４、６、９および１３のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項３１】
請求項１に記載の結晶形を生成する過程であって、 
ａ）単離した化合物１を得るステップと、 
ｂ）低級アルキルアルコールを含む溶媒系で化合物１を処理するステップと、
ｃ）化合物１の結晶を浮遊物から分離するステップからなる。 
【請求項３２】
請求項３１に記載の過程であって、 
i）化合物１の生成をもたらす条件下で、化合物１を生成する微生物を培養するステップと、 
ii）化合物１を前記微生物から単離するステップとを含む。 
【請求項３３】
前記化合物１を生成する微生物がバクテリアである、請求項３２に記載の過程
【請求項３４】
前記バクテリアが放線菌である、請求項３３に記載の過程。
【請求項３５】
前記放線菌がミクロモノスポラまたはストレプトミセス種である、請求項３４に記載の過程。
【請求項３６】
前記放線菌は、それぞれが、ＩＤＡＣ登録番号０７０３０３−０１、２３１２０３−０１、および０７０９０５−０１を有する、ミクロモノスポラ種菌株０４６−ＥＣＯ１１、［Ｓ０１］０４６、または［Ｓ０１Ｕ０２］０４６である、請求項３４に記載の過程。
【請求項３７】
請求項１、４、６、９および１３のいずれか一項に記載の結晶形を生成する過程であって、
a) 化合物１の第１の実質的な結晶形を得るステップと、
b) 結晶性構造を生成するために約５０℃から約１７０℃の温度で（ａ）に記載の第１の結晶形を乾燥させるステップを含む。
【請求項３８】
請求項３７に記載の過程であって、ステップ（ａ）は、 
i)  化合物１を得るステップと、 
ii)   （i）で得られる化合物１を、低級アルキルアルコールを含む溶媒系で処理するステップと、 
iii)  化合物１の第１の実質的な結晶形を得るために前記浮遊物から化合物１の第１の結晶形を分離させるステップを含む。 
【請求項３９】
乾燥させるステップ（ｂ）が不活性条件の下で行われる、請求項３７に記載の過程。
【請求項４０】
前記不活性条件は減圧または窒素雰囲気から選択される、請求項３９に記載の過程。
【請求項４１】
前記乾燥させるステップ（ｂ）が約５０℃から約１１０℃の温度でもって約３０分から約２４時間で達成される、請求項３７に記載の過程。
【請求項４２】
前記温度が約５５℃から１００℃において約４時間から１２時間である、請求項４１に記載の過程。
【請求項４３】
前記溶媒系にさらに水を含む、請求項３１または３２に記載の過程。
【請求項４４】
前記溶媒系に水およびメタノールを含む、請求項４３に記載の過程。
【請求項４５】
前記溶媒系に水およびエタノールを含む、請求項４３に記載の過程。
【請求項４６】
前記溶媒系に水およびイソプロパノールを含む、請求項４３に記載の過程。
【請求項４７】
前記結晶形が形態Ｉである、請求項３１〜３６のいずれか一項に記載の過程。
【請求項４８】
前記結晶形が形態ＩＩである、請求項３１〜３６のいずれか一項に記載の過程。
【請求項４９】
前記第１の結晶形が形態Ｉである、請求項３７に記載の過程。
【請求項５０】
前記第１の結晶形が形態ＩＩである、請求項３７に記載の過程。
【請求項５１】
段落（b）の結晶形が形態IIIである請求項37に記載の過程。
【請求項５２】
請求項１から２９のいずれか一項に記載のある結晶形の治療有効量および薬理学上許容可能な担体を含む医薬組成物。
【請求項５３】
請求項１０に記載の結晶形の治療有効量および薬理学上許容可能な担体を含む医薬組成物。
【請求項５４】
請求項１１に記載の結晶形の治療有効量および薬理学上許容可能な担体を含む医薬組成物。
【請求項５５】
請求項１２に記載の結晶形の治療有効量および薬理学上許容可能な担体を含む医薬組成物。
【請求項５６】
請求項１３に記載の結晶形の治療有効量および薬理学上許容可能な担体を含む医薬組成物。
【請求項５７】
前記医薬組成物が経口懸濁液または固体経口製剤の形態である、請求項５３から５６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
前記の治療を必要とする患者に請求項１から２９のいずれか一項に記載の結晶形の治療有効量を投与することよりなる腫瘍性症の治療方法。
【請求項５９】
前記の治療を必要とする患者に請求項１０に記載の結晶形の治療有効量を投与することよりなる腫瘍性症の治療方法。
【請求項６０】
前記の治療を必要とする患者に請求項１１項に記載の結晶形の治療有効量を投与することよりなる腫瘍性症の治療方法。
【請求項６１】
前記の治療を必要とする患者に請求項１2項に記載の結晶形の治療有効量を投与することよりなる腫瘍性症の治療方法。
【請求項６２】
前記の治療を必要とする患者に請求項１３項に記載の結晶形の治療有効量を投与することよりなる腫瘍性症の治療方法。
【請求項６３】
前記腫瘍性症が、肺癌、結腸直腸癌（結腸癌を含む）、ＣＮＳ癌（神経膠腫を含む）、卵巣癌、腎癌、前立腺癌、乳癌、血液癌（白血病を含む）および黒色腫を含む、請求項５９から６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
腫瘍性症治療のための薬物製剤調製における請求項１から２９のいずれか一項に記載の結晶形の使用。
【請求項６５】
腫瘍性症治療のための薬物製剤調製における請求項１０に記載の結晶形の使用。
【請求項６６】
腫瘍性症治療のための薬物製剤調製における請求項１１に記載の結晶形の使用。
【請求項６７】
腫瘍性症治療のための薬物製剤調製における請求項１２に記載の結晶形の使用。
【請求項６８】
腫瘍性症治療のための薬物製剤調製における請求項１３に記載の結晶形の使用。
【請求項６９】
腫瘍性症治療における使用法とともに、請求項１から２９のいずれか一項に記載の結晶形を含んでいる商業包装。
【請求項７０】
腫瘍性症治療における使用のための説明書とともに、請求項１０に記載の結晶形を含んでいる商業包装。
【請求項７１】
腫瘍性症治療における使用のための説明書とともに、請求項１１に記載の結晶形を含んでいる商業包装。
【請求項７２】
腫瘍性症治療における使用のための説明書とともに、請求項１２に記載の結晶形を含んでいる商業包装。
【請求項７３】
腫瘍性症治療における使用のための説明書とともに、請求項１３に記載の結晶形を含んでいる商業包装。
【請求項７４】
腫瘍性症治療における使用のための、請求項１から２９のいずれか一項に記載の結晶形。
【請求項７５】
腫瘍性症治療における使用のための、請求項１０に記載の結晶形。
【請求項７６】
腫瘍性症治療における使用のための、請求項１１に記載の結晶形。
【請求項７７】
腫瘍性症治療における使用のための、請求項１２に記載の結晶形。
【請求項７８】
腫瘍性症治療における使用のための、請求項１３に記載の結晶形。
【請求項７９】
前記医薬組成物は、経口懸濁液または固体経口製剤の形態である、請求項５２に記載の医薬組成物。
【請求項８０】
前記腫瘍性症が、肺癌、結腸直腸癌（結腸癌を含む）、ＣＮＳ癌（神経膠腫を含む）、卵巣癌、腎癌、前立腺癌、乳癌、血液癌（白血病を含む）および黒色腫を含む、請求項５８に記載の方法。
【国際調査報告】
2009527466.tif 000023
2009527466.tif 000024