(57)【要約】本発明は、全般的に化学および放射性核種画像の分野に関する。より具体的には、本発明は、Ｎ４化合物および誘導体を含む組成物、キット、ならびに画像化法および療法に関する。本化合物は、金属原子にキレート化することができる。前記金属原子は、放射性ではない。前記金属原子は、銅、コバルト、白金、鉄、ヒ素、レニウム、またはゲルマニウムであってよい。前記化合物は、放射性核種にキレート化することができる。前記放射性核種は、特定の実施形態では、６８Ｇａ、９０Ｙ、９９ｍＴｃ、６８Ｇａ、または１８８Ｒｅからなる群から選択される。前記放射性核種は９９ｍＴｃであってよい。本化合物は、医薬組成物に含まれ得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
標的リガンドに結合した、次式を含むＮ４化合物を含む化合物
【化１】
2009534381.tif 000035
［式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４は、それぞれ独立に−（ＣＨ２）Ｘ−であり、Ｘ＝２〜４であり、
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である場合、前記標的リガンドは、疾患受容体標的リガンド、疾患細胞周期リガンド、腫瘍血管形成標的リガンド、腫瘍アポトーシス標的リガンド、および保護基からなる群から選択され、
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）２−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）２−である場合、前記標的リガンドは、疾患受容体標的リガンド、疾患細胞周期リガンド、腫瘍血管形成標的リガンド、腫瘍アポトーシス標的リガンド、および保護基からなる群から選択される］。
【請求項２】
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−であり、前記標的リガンドが疾患受容体である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記疾患受容体が腫瘍標的リガンドである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
前記標的リガンドが、テトラ酢酸マンノース、α−β−チロシン、チロシン、チロシン誘導体、エストロン、タモキシフェン、およびαメチルチロシンからなる群から選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
前記疾患受容体がグルコース輸送体である、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
前記疾患受容体がエストロゲン受容体である、請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
前記疾患受容体がアミノ酸輸送体である、請求項２に記載の化合物。
【請求項８】
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−であり、前記標的リガンドが保護基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
前記保護基がトリフルオロ酢酸エチルである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）２−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）２−であり、前記標的リガンドが疾患受容体である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
前記疾患受容体が腫瘍標的リガンドである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
前記疾患受容体がグルコース輸送体である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１３】
前記疾患受容体がエストロゲン受容体である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１４】
前記疾患受容体がアミノ酸輸送体である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１５】
前記標的リガンドが、テトラ酢酸マンノース、α−β−チロシン、チロシン、チロシン誘導体、エストロン、タモキシフェン、およびαメチルチロシンからなる群から選択される、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１６】
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）２−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）２−であり、前記標的リガンドが保護基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
前記保護基がトリフルオロ酢酸エチルである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
前記標的リガンドが、アミフォスチン、アンギオスタチン、モノクローナル抗体Ｃ２２５、モノクローナル抗体ＣＤ３１、モノクローナル抗体ＣＤ４０、カペシタビン、ＣＯＸ−２阻害剤、デオキシシチジン、フラーレン、ハーセプチン、ヒト血清アルブミン、乳糖、黄体形成ホルモン、ピリドキサール、キナゾリン、サリドマイド、トランスフェリン、およびトリメチルリシンからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
前記標的リガンドがＣＯＸ−２阻害剤である、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
前記ＣＯＸ−２阻害剤が、セレコキシブ、ロフェコキシブ、およびエトリコキシブからなる群から選択される、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
前記標的リガンドが、テトラ酢酸マンノース、α−β−チロシン、チロシン、チロシン誘導体、エストロン、タモキシフェン、αメチルチロシン、およびトリフルオロ酢酸エチルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
前記標的リガンドが抗癌化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２３】
前記標的リガンドが疎水性である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２４】
疎水性である、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
前記標的リガンドが糖である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２６】
Ａ１＝−（ＣＨ２）３−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）２−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）２−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２７】
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２８】
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）３−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２９】
Ａ１＝−（ＣＨ２）３−、Ａ３＝−（ＣＨ２）３−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３０】
Ａ１＝−（ＣＨ２）４−、Ａ３＝−（ＣＨ２）３−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３１】
Ａ１＝−（ＣＨ２）４−、Ａ３＝−（ＣＨ２）３−、Ａ２＝−（ＣＨ２）４−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３２】
Ａ１＝−（ＣＨ２）３−、Ａ３＝−（ＣＨ２）３−、Ａ２＝−（ＣＨ２）４−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）４−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３３】
Ａ１＝−（ＣＨ２）３−、Ａ３＝−（ＣＨ２）４−、Ａ２＝−（ＣＨ２）４−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）４−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３４】
Ａ１＝−（ＣＨ２）４−、Ａ３＝−（ＣＨ２）４−、Ａ２＝−（ＣＨ２）４−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）４−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３５】
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−である場合、Ａ４は−（ＣＨ２）３−ではなく、
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）２−である場合、Ａ４は−（ＣＨ２）２ではなく、
前記標的リガンドが、疾患受容体標的リガンド、疾患細胞周期リガンド、腫瘍血管形成標的リガンド、腫瘍アポトーシス標的リガンド、および保護基からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３６】
前記標的リガンドが疾患受容体標的リガンドである、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
前記疾患受容体標的リガンドが腫瘍標的リガンドである、請求項３６に記載の化合物。
【請求項３８】
前記疾患受容体がグルコース輸送体である、請求項３６に記載の化合物。
【請求項３９】
前記疾患受容体がエストロゲン受容体である、請求項３６に記載の化合物。
【請求項４０】
前記疾患受容体がアミノ酸輸送体である、請求項３６に記載の化合物。
【請求項４１】
前記標的リガンドが保護基である、請求項３５に記載の化合物。
【請求項４２】
前記保護基がトリフルオロ酢酸エチルである、請求項４１に記載の化合物。
【請求項４３】
次式を有するとさらに定義される、請求項１に記載の化合物
【化１−２】
2009534381.tif 000036
［式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４は、それぞれ独立に−（ＣＨ２）Ｘ−であり、Ｘ＝２〜４であり、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、それぞれ独立に、水素、
【化１−３】
2009534381.tif 000037
からなる群から選択され、
Ｒ４は、
【化１−４】
2009534381.tif 000038
および
【化１−５】
2009534381.tif 000039
からなる群から選択される］。
【請求項４４】
金属原子にキレート化されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項４５】
前記金属原子が放射性ではない、請求項１に記載の化合物。
【請求項４６】
前記金属原子が、銅、コバルト、白金、鉄、ヒ素、レニウム、またはゲルマニウムである、請求項４５に記載の化合物。
【請求項４７】
放射性核種にキレート化されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項４８】
前記放射性核種が、９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、または６２Ｃｕである、請求項４７に記載の化合物。
【請求項４９】
前記放射性核種が、６８Ｇａ、９０Ｙ、９９ｍＴｃ、６８Ｇａ、または１８８Ｒｅである、請求項４８に記載の化合物。
【請求項５０】
前記放射性核種が９９ｍＴｃである、請求項４９に記載の化合物。
【請求項５１】
医薬組成物に含まれる、請求項１に記載の化合物。
【請求項５２】
請求項１の化合物を対象に投与することを含む、癌の治療方法。
【請求項５３】
前記対象が哺乳動物である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記哺乳動物がヒトである、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記化合物が、９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、または６２Ｃｕにキレート化されている、請求項５２に記載の方法。
【請求項５６】
前記化合物が９９ｍＴｃにキレート化されている、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記化合物が、第２の抗癌化合物と組み合わせて投与される、請求項５５に記載の方法。
【請求項５８】
前記化合物が、放射線療法または手術と組み合わせて投与される、請求項５５に記載の方法。
【請求項５９】
請求項１に記載の化合物を対象に投与することを含む、画像化法。
【請求項６０】
前記対象が哺乳動物である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記哺乳動物がヒトである、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記化合物が、９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、または６２Ｃｕにキレート化されている、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
前記化合物が９９ｍＴｃにキレート化されている、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記画像がＰＥＴ画像を含む、請求項５９に記載の方法。
【請求項６５】
前記画像がＳＰＥＴ画像を含む、請求項５９に記載の方法。
【請求項６６】
請求項１に記載の化合物および還元剤を含むキット。
【請求項６７】
放射性核種をさらに含む、請求項６６に記載のキット。
【請求項６８】
前記放射性核種が、９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、または６２Ｃｕである、請求項６７に記載のキット。
【請求項６９】
前記放射性核種が９９ｍＴｃである、請求項６８に記載のキット。
【請求項７０】
抗酸化剤をさらに含む、請求項６６に記載のキット。
【請求項７１】
前記抗酸化剤が、ビタミンＣ、トコフェロール、ピリドキシン、チアミン、またはルチンである、請求項７０に記載のキット。
【請求項７２】
前記抗酸化剤がビタミンＣである、請求項７１に記載のキット。
【請求項７３】
遷移キレート化剤をさらに含む、請求項６６に記載のキット。
【請求項７４】
前記遷移キレート化剤が、グルコヘプトン酸塩、グルコン酸塩、グルカリン酸塩、クエン酸塩、または酒石酸塩である、請求項７３に記載のキット。
【請求項７５】
前記遷移キレート化剤が、グルコン酸塩またはグルカリン酸塩である、請求項７４に記載のキット。
【請求項７６】
前記還元剤が、塩化スズ（ＩＩ）またはトリフェニルホスフィンである、請求項６６に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、全般的に化学および放射性核種画像の分野に関する。より具体的には、本発明は、Ｎ４化合物および誘導体を含む組成物および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（関連技術の説明）
放射性核種画像モダリティ（陽電子放出断層撮影装置、ＰＥＴ；単光子放出コンピューター断層撮影、ＳＰＥＣＴ）は、放射性核種標識された化合物の位置および濃度をマッピングするものである。組織特異的な疾患治療の診断、予後、計画、および監視を改善するために、より疾患に特異的な医薬品を開発することによって、疾患組織の特性が広範に決定される。ＰＥＴ１８Ｆ−フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）は、腫瘍、心筋梗塞、および神経系疾患を診断し評価するために使用されてきた。１８Ｆ−ＦＤＧを使用する腫瘍代謝画像がこの２０年間に研究されてきたが、その臨床診療は、入手し易さ、アベイラビリティ、およびアイソトープ費用などの要因によって未だ制限されている。さらに、１８Ｆの化学的性質は複雑であり、長い合成時間が必要とされ（例えば、１８Ｆ−ＦＤＧ、４０分〜７５分）、多数の薬剤を同時に生成することは困難である。したがって、組織特異的な標的放射性画像および放射線治療のために金属アイソトープを使用して薬剤を標識する、簡単なキレート化技術を開発することが望ましいであろう。
【０００３】
シンチグラフィーによる腫瘍画像の改善は、より腫瘍に特異的な放射性医薬品の開発から利益を得ることになろう。より高い腫瘍特異性により、放射性標識リガンドならびに放射性標識抗体は、シンチグラフィーによる腫瘍の検出に新たな時代を開き、広範な前臨床開発および評価を受けている（Ｍａｔｈｉａｓら、１９９６年、１９９７年ａ、１９９７年ｂ）。放射性核種画像モダリティ（例えば、ＰＥＴ、ＳＰＥＣＴ）は、放射性核種標識された放射性トレーサーの位置および濃度をマッピングする診断用断面画像技術である。ＣＴおよびＭＲＩによって、腫瘍の位置および程度に関する多量の解剖学的情報が得られるものの、これらの画像モダリティは一般に、浸潤性病変を、浮腫、放射線壊死、悪性度（ｇｒａｄｉｎｇ）、または神経膠症と正確に区別することができない。ＰＥＴおよびＳＰＥＣＴを使用して、代謝活性を測定することによって腫瘍を位置付け特徴付けることができる。したがって、腫瘍のより特異的な画像を可能にする方法が望ましい。
【０００４】
画像化のための新規化合物を生成する一手法は、本発明の組成物とは異なるエチレンジシステイン（ＥＣ）誘導体の使用を含むものであった。幾つかの化合物が、窒素および硫黄キレートを使用して９９ｍＴｃで標識されている（Ｂｌｏｎｄｅａｕら、１９６７年；Ｄａｖｉｓｏｎら、１９８０年）。ジアミノジチオール化合物とも呼ばれるビス−アミノエタンチオール四座リガンドは、オキソテクネチウム基と、２つのチオール硫黄原子および２つのアミン窒素原子との効率的な結合をベースとして、非常に安定なＴｃ（Ｖ）Ｏ錯体を形成することが知られている。９９ｍＴｃ−２−ピロールチオン（ｐｙｒｒｏｌｔｈｉｏｎｅ）錯体で標識された２−ピロールチオンの放射性金属錯体は、画像および療法用の放射性医薬品として使用するために開発された（特許文献１）。９９ｍＴｃ−Ｌ，Ｌ−エチレンジシステイン（９９ｍＴｃ−ＥＣ）は、最近の成功しているＮ２Ｓ２キレートの一例である。ＥＣは、高い放射化学的純度および安定性により容易かつ効率的に９９ｍＴｃで標識することができ、活発な尿細管輸送によって腎臓を介して排出される（Ｓｕｒｍａら、１９９４年；Ｖａｎ  Ｎｅｒｏｍら、１９９０年、１９９３年；Ｖｅｒｂｒｕｇｇｅｎら、１９９０年、１９９２年）。さらに、エチレンジシステイン（ＥＣ）とキレート化され、様々なリガンドと結合した９９ｍＴｃは、予後用の手段としての、および哺乳動物体内の特定部位に治療剤を送達するための手段として、組織特異的疾患用の造影剤として使用するために開発された（ＷＯ０１９１８０７Ａ２、ＡＵ０１７５２１０Ａ５）。９９ｍＴｃ−ＥＣ−キレートは、腎臓の画像および腎臓機能の検査のために開発された（米国特許第５，９８６，０７４号および米国特許第５，９５５，０５３号）。９９ｍＴｃ−ＥＣ錯体の調製方法および前記方法を実施するためのキットも開発されている（米国特許第５，２６８，１６３号およびＷＯ９１１６０７６Ａ１）。特許文献２には、エチレンシステイン薬物複合体が開示されており、参照によってその全体を本明細書に組み込む。
【特許文献１】国際公開第０１／８０９０６号パンフレット
【特許文献２】米国特許第６，６９１，７２４号明細書
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
（発明の要旨）
本発明は、組織特異的な標的放射性画像および放射線治療に使用できる、金属アイソトープを使用する標識薬剤の簡単なキレート化技術に関する化合物および方法を提供する。
【０００６】
本発明の一態様は、標的リガンドに結合したＮ４化合物を含む化合物を対象とし、ここでＮ４化合物は次式を含む
【０００７】
【化２】
2009534381.tif 000002
［式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４は、それぞれ独立に−（ＣＨ２）Ｘ−であり、Ｘ＝２〜４であり；Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である場合、前記標的リガンドは、疾患受容体標的リガンド、疾患細胞周期リガンド、腫瘍血管形成標的リガンド、腫瘍アポトーシス標的リガンド、および保護基からなる群から選択され；Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）２−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）２−である場合、前記標的リガンドは、疾患受容体標的リガンド、疾患細胞周期リガンド、腫瘍血管形成標的リガンド、腫瘍アポトーシス標的リガンド、および保護基からなる群から選択される］。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−であり、前記標的リガンドは疾患受容体であり得る。前記疾患受容体は、腫瘍標的リガンドであり得る。前記標的リガンドは、テトラ酢酸マンノース、α−β−チロシン、チロシン、チロシン誘導体、エストロン、タモキシフェン、およびαメチルチロシンからなる群から選択され得る。前記疾患受容体は、グルコース輸送体、エストロゲン受容体、またはアミノ酸輸送体であり得る。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−であり、前記標的リガンドは、保護基であり得る（例えば、トリフルオロ酢酸エチル）。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）２−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）２−であり、前記標的リガンドは疾患受容体であり得る。前記疾患受容体は、腫瘍標的リガンド、グルコース輸送体、エストロゲン受容体、またはアミノ酸輸送体であり得る。前記標的リガンドは、テトラ酢酸マンノース、α−β−チロシン、チロシン、チロシン誘導体、エストロン、タモキシフェン、およびαメチルチロシンからなる群から選択され得る。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）２−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）２−であり、前記標的リガンドは、保護基（例えば、トリフルオロ酢酸エチル）であり得る。
【０００８】
幾つかの実施形態では、標的リガンドは、アミフォスチン、アンギオスタチン、モノクローナル抗体Ｃ２２５、モノクローナル抗体ＣＤ３１、モノクローナル抗体ＣＤ４０、カペシタビン、ＣＯＸ−２阻害剤、デオキシシチジン、フラーレン、ハーセプチン、ヒト血清アルブミン、乳糖、黄体形成ホルモン、ピリドキサール、キナゾリン、サリドマイド、トランスフェリン、およびトリメチルリシンからなる群から選択される。ＣＯＸ−２阻害剤は、セレコキシブ、ロフェコキシブ、およびエトリコキシブからなるリストから選択され得る。幾つかの実施形態では、標的リガンドは、テトラ酢酸マンノース、α−β−チロシン、チロシン、チロシン誘導体、エストロン、タモキシフェン、αメチルチロシン、およびトリフルオロ酢酸エチルからなる群から選択される。標的リガンドは、抗癌化合物であり得る。標的リガンドは、疎水性であり得る。前記化合物は、疎水性であり得る。標的リガンドは糖であり得る。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）３−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）２−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）２−である。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）３−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）３−、Ａ３＝−（ＣＨ２）３−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）４−、Ａ３＝−（ＣＨ２）３−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）４−、Ａ３＝−（ＣＨ２）３−、Ａ２＝−（ＣＨ２）４−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−である。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）３−、Ａ３＝−（ＣＨ２）３−、Ａ２＝−（ＣＨ２）４−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）４−である。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）３−、Ａ３＝−（ＣＨ２）４−、Ａ２＝−（ＣＨ２）４−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）４−である。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）４−、Ａ３＝−（ＣＨ２）４−、Ａ２＝−（ＣＨ２）４−、およびＡ４＝−（ＣＨ２）４−である。幾つかの実施形態では、Ａ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−であり、Ａ４が−（ＣＨ２）３−でない場合、またはＡ１＝−（ＣＨ２）２−、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−、Ａ２＝−（ＣＨ２）２−であり、Ａ４が−（ＣＨ２）２でない場合、前記標的リガンドは、疾患受容体標的リガンド、疾患細胞周期リガンド、腫瘍血管形成標的リガンド、腫瘍アポトーシス標的リガンド、および保護基からなる群から選択され得る。標的リガンドは、疾患受容体標的リガンドであり得る。前記疾患受容体標的リガンドは、腫瘍標的リガンド、グルコース輸送体、エストロゲン受容体、アミノ酸輸送体、または保護基（例えば、トリフルオロ酢酸エチル）であり得る。
【０００９】
幾つかの実施形態では、化合物は次式を有すると定義される
【００１０】
【化３】
2009534381.tif 000003
［式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４は、それぞれ独立に−（ＣＨ２）Ｘ−であり、Ｘ＝２〜４であり、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、それぞれ独立に、水素、
【００１１】
【化４】
2009534381.tif 000004
からなる群から選択され、
Ｒ４は、
【００１２】
【化５】
2009534381.tif 000005
からなる群から選択される］。
【００１３】
本化合物は、金属原子にキレート化することができる。前記金属原子は、放射性ではない。前記金属原子は、銅、コバルト、白金、鉄、ヒ素、レニウム、またはゲルマニウムであってよい。前記化合物は、放射性核種にキレート化することができる。前記放射性核種は、９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、または６２Ｃｕであってよい。特定の実施形態では、前記放射性核種は、６８Ｇａ、９０Ｙ、９９ｍＴｃ、６８Ｇａ、または１８８Ｒｅからなる群から選択される。前記放射性核種は９９ｍＴｃであってよい。本化合物は、医薬組成物に含まれ得る。
【００１４】
本発明の別の態様は、対象に本発明の化合物を投与することを含む癌の治療方法に関する。対象は、ヒトなどの哺乳動物であり得る。化合物は、９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、または６２Ｃｕにキレート化することができる。化合物は、第２の抗癌化合物、放射線療法、または手術と組み合わせて投与することができる。
【００１５】
本発明の別の態様は、対象に本発明の化合物を投与することを含む画像化法に関する。対象は、ヒトなどの哺乳動物であり得る。化合物は、９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、または６２Ｃｕにキレート化することができる。前記画像は、ＰＥＴ画像またはＳＰＥＴ画像を含むことができる。
【００１６】
本発明の別の態様は、本発明の化合物および還元剤を含むキットに関する。このキットは、放射性核種を含むことができる。放射性核種は、９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、または６２Ｃｕであってよい。キットは、抗酸化剤（例えば、ビタミンＣ、トコフェロール、ピリドキシン、チアミン、またはルチン）を含むことができる。キットは、遷移キレート化剤（例えばグルコヘプトン酸塩、グルコン酸塩、グルカリン酸塩、クエン酸塩、または酒石酸塩）を含むことができる。還元剤は、塩化スズ（ＩＩ）またはトリフェニルホスフィンであってよい。
【００１７】
「ａ」または「ａｎ」という用語の使用は、請求の範囲および／または本明細書において「含む」という用語と共に使用される場合には「１つ」を意味することができるが、「１つまたは複数」、「少なくとも１つ」、および「１つまたは２つ以上」の意味とも一致する。本明細書で使用される「別の」は、少なくとも１つの第２のものまたはそれ以上のものを意味する。
【００１８】
本明細書で論じられる任意の実施形態は、本発明の任意の方法または組成物に関連して実施され得、その逆もまた同様であることが企図される。さらに本発明の組成物を使用して、本発明の方法を実現することができる。
【００１９】
本願を通して「約」という用語は、ある値が、その値を決定するために使用される装置、方法に固有の誤差変動、または研究対象の間に存在する変動を含むことを示すために使用される。
【００２０】
請求の範囲における「または」という用語の使用は、代替のみを指すことが明確に示されない、またはその代替が相互排他的でない場合、「および／または」を意味するために使用される。
【００２１】
本明細書および請求の範囲（複数項）で使用される、「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」（ならびに、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」などの含んでいるという任意形態）、「有している（ｈａｖｉｎｇ）」（ならびに、「有する（ｈａｖｅ）」および「有する（ｈａｓ）」などの有しているという任意形態）、「含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」（ならびに、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」および「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」などの含んでいるという任意形態）、または「含有している（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」（ならびに、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」および「含有する（ｃｏｎｔａｉｎ）」などの含んでいるという任意形態）という用語は、包括的またはオープンエンドであり、列挙されていない追加の要素または方法ステップを排除するものではない。
【００２２】
本発明の他の目的、特徴、および利点は、以下の詳細な説明から明らかになろう。しかし、本発明の精神および範囲内の様々な変化および改変は、この詳細な説明から当業者には明らかであるはずなので、詳細な説明および特定の実施例は、本発明の特定の実施形態を示すが、例示目的のみによって与えられるものであることを理解されたい。
【００２３】
以下の図は本明細書の部分を形成し、本発明の幾つかの態様をさらに示すために含まれるものである。本発明は、本明細書に提示される特定の実施形態の詳細な説明と共にこれらの図の１つまたは複数を参照することによってより理解され得る。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２４】
核医学分野では、少量の体内投与された放射活性標識トレーサー化合物（放射性トレーサーまたは放射性医薬品と呼ばれる）の分布を検出することによって、幾つかの病的状態の位置が特定され、またはそれらの程度が評価される。これらの放射性医薬品の検出方法は、一般に画像法または放射性画像法として知られている。
【００２５】
Ｉ．定義
「アルキル」基は、直鎖、分岐鎖、および環式アルキル基を含む脂肪族飽和炭化水素を指す。アルキル基は、非環式および環式サブユニットの任意の組合せを含むことができる。さらに、特に本明細書で使用される「アルキル」という用語には、飽和基ならびに不飽和基が含まれる。不飽和基は、１つまたは複数の（例えば１つ、２つ、または３つの）二重結合および／または三重結合を含む。好ましくは、アルキルは飽和である。「アルキル」という用語には、飽和および不飽和のアルキル基が含まれる。置換されている場合、その置換基（複数）は、ヒドロキシル、シアノ、アルコキシ、＝Ｏ、＝Ｓ、ＮＯ２、Ｎ（ＣＨ３）２、アミノ、またはＳＨであってよい。好ましくは、アルキル基は１〜１２個の炭素を有する。より好ましくは、１〜７個の炭素、より好ましくは２〜４個の炭素の低級アルキルであり、より好ましくは−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、および−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−からなる群から選択される。
【００２６】
「結合する」および「結合した」という用語は、本明細書では同じ分子内の化学的結合と定義される。例えば、２つ以上の分子および／または原子は、共有結合によって一緒になって結合し、単一分子を形成することができる。２つの分子が直接連結によって互いに結合することができ（例えば、化合物が共有結合によって直接結合する）、または化合物は、間接連結によって結合することができる（例えば、２つの化合物が、１つまたは複数のリンカーと共有結合して、単一分子を形成する）。他の場合では、金属原子が、キレート化相互反応によって分子と結合することができる。
【００２７】
「Ｎ４誘導体」という用語は、本明細書では少なくとも１つの他の分子または原子と結合したＮ４化合物と定義される。幾つかの実施形態では、誘導体は、キレート化された原子を有するＮ４化合物を含む。Ｎ４誘導体は、標的リガンドに結合し（例えば共有結合によって）、かつ／またはリンカーに結合し（例えば共有結合によって）、かつ／または金属キレートに結合する（例えばキレート化相互反応によって）Ｎ４化合物を含むことができる。
【００２８】
本明細書で使用されるように「放射性核種」という用語は、特定の実施形態では、粒子または電磁放射線の放出によって崩壊する放射性核種（測定可能な寿命の間で存在することができ、核のその電荷、質量、数、および量子状態によって区別されるある種の原子）と定義される。この用語は、「ラジオアイソトープ」という用語と同義に使用することができる。
【００２９】
本明細書で使用される「治療剤」という用語は、疾患または病状の治療をもたらす薬剤と定義される。特定の実施形態における薬剤は、疾患または病状の少なくとも１つの症候またはパラメータを改善する。例えば腫瘍療法では、治療剤は腫瘍の寸法を縮小し、腫瘍の増殖もしくは転移を阻害もしくは防止し、または腫瘍を排除する。具体例には、抗癌薬などの薬物、遺伝子療法組成物、放射性核種、ホルモン、栄養補助食品、またはそれらの組合せが含まれる。
【００３０】
本明細書で使用される「腫瘍」という用語は、組織内の細胞の制御されない進行性増殖と定義される。当業者は、新生物または悪性腫瘍などの他の同義語の存在を知っている。特定の実施形態では、腫瘍は固形腫瘍である。他の特定の実施形態では、原発性または転移形態としての腫瘍は、肝臓、前立腺、膵臓、頭頸部、胸部、脳、結腸、アデノイド、口、皮膚、肺、精巣、卵巣、頸部、子宮内膜、膀胱、胃、および上皮などの癌に由来する。
【００３１】
本明細書で使用される「薬物」という用語は、疾患もしくは病状の治療の助けとなる、または疾患もしくは病状に関連した任意の生理学的もしくは病理学的状態を制御もしくは改善する化合物と定義される。
【００３２】
本明細書で使用される「抗癌薬」という用語は、固形腫瘍などの癌の治療のための薬物と定義される。抗癌薬は、腫瘍の寸法を縮小し、腫瘍の増殖もしくは転移を阻害もしくは防止し、および／または腫瘍を排除することが好ましい。「抗癌（ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ）薬」、「抗癌（ａｎｔｉ−ｃａｎｃｅｒ）薬」、および「抗癌化合物」という用語は、本明細書では同義に使用される。
【００３３】
本明細書で使用される「ａ」または「ａｎ」は、１つまたは複数を意味することができる。請求の範囲（複数項）で使用されるように、「含む」という用語と共に使用される場合には、「ａ」または「ａｎ」という用語は、１つまたは２つ以上を意味することができる。本明細書で使用される「別の」は、少なくとも１つの第２のものまたはそれ以上のものを意味することができる。
【００３４】
ＩＩ．Ｎ４化合物および誘導体
本発明は、一般に疎水性キレート化剤であるＮ４化合物が疎水性分子と結合して、画像化および放射線治療を含む目的で使用される新規化合物を生成し得る方法を提供する。幾つかのＮ４化合物は、Ｓｉｇｍａ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｏｍｐａｎｙ（ミズーリ州セントルイス）およびＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｏｍｐａｎｙ（ウィスコンシン州ミルウォーキー）などの市販の供給源から得ることができる。米国特許第５，８８０，２８１号には、幾つかのＮ４化合物を生成するための方法が記載されている。
【００３５】
本明細書では、Ｎ４化合物は、構造
【００３６】
【化６】
2009534381.tif 000006
［式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４は、アルキルであり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、水素である］
を有すると定義される。幾つかのＮ４化合物を以下に示す。
【００３７】
Ｎ４化合物の構造
【００３８】
【化７】
2009534381.tif 000007
１）登録番号：２９４−９０−６
ＣＡインデックス名：１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（６ＣＩ，８ＣＩ，９ＣＩ）
他の名称：サイクレン（Ｃｙｃｌｅｎ）；ＮＳＣ６２９３７４；テトラアザ−１２−クラウン−４
【００３９】
【化８】
2009534381.tif 000008
２）登録番号：２９５−１４−７
ＣＡインデックス名：１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン（６ＣＩ，８ＣＩ，９ＣＩ）
他の名称：サイクラム（Ｃｙｃｌａｍ）１３
【００４０】
【化９】
2009534381.tif 000009
３）登録番号：５２８７７−３６−８
ＣＡインデックス名：１，４，７，１１−テトラアザシクロテトラデカン（９ＣＩ）
他の名称：イソサイクラム
【００４１】
【化１０】
2009534381.tif 000010
４）登録番号：２９５−３７−４
ＣＡインデックス名：１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（６ＣＩ，７ＣＩ，８ＣＩ，９ＣＩ）
他の名称：サイクラム；ＪＭ１４９８；ＮＳＣ１８０８１１
【００４２】
【化１１】
2009534381.tif 000011
５）登録番号：１５４３９−１６−４
ＣＡインデックス名：１，４，８，１２−テトラアザシクロペンタデカン（８ＣＩ，９ＣＩ）
他の名称：サイクラル（Ｃｙｃｌａｌ）
【００４３】
【化１２】
2009534381.tif 000012
６）登録番号：２４７７２−４１−６
ＣＡインデックス名：１，５，９，１３−テトラアザシクロヘキサデカン（８ＣＩ，９ＣＩ）
【００４４】
【化１３】
2009534381.tif 000013
７）登録番号：４３０３１−３２−９
ＣＡインデックス名：１，５，９，１３−テトラアザシクロヘプタデカン（９ＣＩ）
【００４５】
【化１４】
2009534381.tif 000014
８）登録番号：６８９６６−２８−９
ＣＡインデックス名：１，５，１０，１４−テトラアザシクロオクタデカン（９ＣＩ）
【００４６】
【化１５】
2009534381.tif 000015
９）非存在化合物
名称：１，５，９，１４−テトラアザシクロオクタデカン
【００４７】
【化１６】
2009534381.tif 000016
１０）非存在化合物
名称：１，５，１０，１５−テトラアザシクロノナデカン
【００４８】
【化１７】
2009534381.tif 000017
１１）登録番号：３７１３−７７−７
ＣＡインデックス名：１，６，１１，１６−テトラアザシクロエイコサン（８ＣＩ，９ＣＩ）
：非存在化合物
：市販入手不可能
Ｎ４化合物は、キレート化剤として使用することができる。例えば、サイクラムおよび他のＮ４化合物は、急性カドミウム中毒を緩和するそれらの能力について試験された（Ｓｒｉｖａｓｔａｖａら、１９９６年）。米国特許第４，１４１，６５４号には、アクチニドイオンをキレート化するために使用できる、Ｎ４化合物に類似の構造を有する幾つかの化合物が記載されている。米国特許第５，６４８，０６３号には、金属イオンをキレート化することができ、幾つかのＮＭＲ診断手順でも使用できる、Ｎ４化合物に類似の構造を有する化合物が開示されている。米国特許第６，０７１，４９０号は、ＰＥＴ画像のために改変されたサイクレンを利用している。米国特許第６，６１３，３０５号には、様々なＮ４化合物に結合したビタミンＢ１２が開示されている。
【００４９】
Ａ．標的リガンド
本発明では一般に、標的部分（例えば、疎水性抗癌薬）をＮ４化合物に結合させることが好ましい。しかし幾つかの実施形態では、標的部分に結合していないＮ４化合物は、画像および療法に使用できる。標的部分は、幾つかの方法によってＮ４化合物に結合させることができる。一方法は、ハロゲン（例えばヨウ化）標的部分を合成することである。例えば、標的部分（例えば疎水性分子）のヒドロキシ基は、トシル−、メシル−、トリフラート、またはハロゲン（例えばヨウ化）基に変換することができる。反応条件は、一般に有機溶媒（ジメチルホルムアミド、ＤＭＦ）中で実施される。本発明の幾つかの実施形態では、最終生成物は、塩酸塩形成後に水に溶解する。あるいはＮ４化合物を標的部分に結合させる別の方法は、スルホン酸（例えば、トシル−、メシル−、またはトリフラート）標的部分を合成することである。Ｎ４化合物上の二置換、三置換、または全ての置換基は、これらのヨウ化またはスルホン酸標的薬剤を反応させることによって調製できる。一置換については、窒素基の選択的保護が必要である。Ｎ４化合物と結合できる標的リガンドには、アミノ酸（例えば、チロシン、セリン）、アミノ酸誘導体（例えば、αメチルチロシン）、タモキシフェン、エストロン、およびテトラ酢酸マンノースが含まれる。
【００５０】
他のリガンドも、Ｎ４化合物に結合することができる。一般に、本発明に関連して使用されるリガンドは、一方または両方の酸の手でＮ４化合物と反応し、共有結合することができるハロゲン基またはヒドロキシ基を有するはずである。本発明における使用に企図されるリガンドには、それに限定されるものではないが、血管新生／抗血管新生リガンド、ＤＮＡトポイソメラーゼ阻害剤、解糖マーカー、代謝拮抗リガンド、アポトーシス／低酸素リガンド、ＤＮＡ挿入剤、受容体マーカー、ペプチド、ヌクレオチド、抗生物質または抗真菌剤などの抗菌剤、臓器特異的リガンドおよび糖、ならびにグルコース擬態薬剤が含まれる。
【００５１】
ヒドロキシ基またはハロゲン化物を有するか、あるいはその構造に導入されたヒドロキシ基またはハロゲン基を有することができる（例えば、側鎖の添加によって、または標的リガンド内のフェノール基にハロゲン基を結合させることによって）、知られているまたは後に発見され得る実質的に任意の標的リガンドを、本発明で使用できることが企図される。幾つかの実施形態では、標的リガンドは、Ｎ４化合物に直接結合することができ（例えば、標的リガンドおよびＮ４化合物の間の共有結合によって）、または標的リガンドは、リンカーを介してＮ４化合物に間接的に結合することができる。ＥＣなどの既に別の（非Ｎ４化合物）キレート化剤に結合していた標的リガンドが、本発明のＮ４化合物に結合し、治療目的に使用できることが想定される。幾つかの場合には、標的リガンドをＮ４化合物と共有結合させるために、標的リガンドを修飾する必要があり得る（例えば、ヒドロキシルまたはハロゲンを含有する側鎖を添加する）。例えば、ＥＣ化合物とのリガンドの共有結合は、一般に水中で実施され、幾つかの場合には有機溶媒中の反応を利用することによって標的リガンドをＮ４化合物と共有結合させることが好ましい。これらの場合には、水中での反応によってＥＣと共有結合することができる標的リガンドを修飾して（例えばハロゲン基またはヒドロキシ基をその構造に導入することができる）、有機溶媒中での反応によって、標的リガンドをＮ４化合物に共有結合させることができる。
【００５２】
Ｎ４誘導体は、腫瘍（例えば、癌性、前癌性、良性）、腫瘍血管形成、低酸素症、アポトーシス欠陥、疾患受容体（例えば、癌を示す細胞受容体）、疾患機能的経路（例えば、疾患状態によって変えられた代謝経路）、および疾患細胞周期を標的にするために使用できる。さらにＮ４誘導体は、これらの生化学的過程で医薬品の有効性を評価するために使用することができる。
【００５３】
Ｎ４誘導体はまた、診断用手段として、および／またはある種の治療への応答を予測するために使用することができる。例えば、タモキシフェン（エストロゲン受容体標的リガンド）を含むＮ４誘導体は、癌性腫瘍を画像化するために使用することができる。この例では画像は、癌性細胞がどの程度エストロゲン受容体を発現するかなどの疾患についての重要な情報を提供することができ、エストロゲン受容体を発現する細胞を標的にする治療に対して、疾患がどの位応答するかを予測するために使用することができる（例えば、癌性腫瘍が高レベルのエストロゲン受容体を選択的に発現すると同定される場合、その癌性細胞が、エストロゲン受容体を発現する細胞を標的にする治療量の抗癌剤に応答する可能性が高いことがこの情報によって示される）。この手法は、「画像誘導療法」と呼ばれる。
【００５４】
Ｎ４化合物を組織標的リガンドに結合させる利点は、その組織標的リガンドの特異的結合特性が、対象となる領域にわたって放射性信号を集中させ得るということである。画像および／または療法に使用されるＮ４誘導体は、癌性腫瘍、前癌性腫瘍、疾患受容体、低酸素組織（低酸素症）、アポトーシス経路、疾患細胞周期、および／または疾患機能的経路を標的にするように設計された標的リガンドに結合したＮ４化合物を含み得ることが想定される。Ｎ４誘導体はまた、様々な代謝および／または生化学経路または個体反応に対する医薬品の有効性を評価するために使用することができる。本発明で使用できる幾つかの標的リガンドの例を、表１に見ることができる。幾つかの実施形態では、抗癌薬は、標的リガンドとして使用することができる。抗癌薬は、当技術分野では周知である（例えば、Ｃｏｎｎｏｒｓ、１９９６年）。米国特許第６，６９１，７２４号の表２には、本発明の様々な実施形態において標的リガンドとして使用することができる抗癌薬の幾つかの例が列挙されている。
【００５５】
【表１】
2009534381.tif 000018
１．腫瘍血管形成標的
本明細書を通して「腫瘍血管形成標的」は、腫瘍新血管形成および腫瘍細胞に結合する薬剤の使用を指す。この目的で使用される薬剤は、腫瘍血管床の寸法の測定および腫瘍体積の測定を含む様々な腫瘍測定の実施に使用されることが当業者には知られている。これらの薬剤の幾つかは、血管壁に結合する。当業者には、この目的での使用に入手可能な薬剤が思い当たるはずである。腫瘍血管形成標的リガンドは、先に定義の腫瘍血管形成標的の目的で使用されるリガンドである。腫瘍血管形成標的リガンドの例には、血管形成に対する生化学的過程の評価のために開発されたセレコキシブ、Ｃ２２５、ハーセプチン、アンギオスタチン、およびサリドマイドが含まれる。
【００５６】
幾つかの実施形態では、腫瘍標的リガンドは、腫瘍細胞に関連する低酸素を標的にすることによって腫瘍組織に関連し得る。低酸素組織を標的にする腫瘍標的リガンドの例には、ニトロイミダゾールおよびメトロニダゾールが含まれ、これらのリガンドは、癌以外の理由により（例えば卒中）低酸素になっている他の低酸素組織を標的にするために使用することもできる。
【００５７】
２．腫瘍アポトーシス標的
「腫瘍アポトーシス標的」は、アポトーシス状態にある、またはアポトーシス状態になる危険性のある細胞に結合する薬剤の使用を指す。これらの薬剤は一般に、腫瘍などの細胞集団におけるアポトーシスまたはプログラム細胞死の程度または危険性の指標を提供するために使用される。当業者には、この目的で使用される薬剤が思い当たるはずである。アポトーシス標的薬剤の幾つかの例を表１に示す。「腫瘍アポトーシス標的リガンド」は、この段落で定義される「腫瘍アポトーシス標的」を実施することができるリガンドである。腫瘍アポトーシスリガンドの例には、ＴＲＡＩＬ（ＴＮＦ−関連アポトーシス誘発性リガンド）モノクローナル抗体が含まれる。ＴＲＡＩＬは、様々な形質転換細胞株においてアポトーシスを急速に誘発する腫瘍壊死因子リガンドファミリーのメンバーである。腫瘍アポトーシス標的リガンドの他の例には、４アミノ酸配列アスパラギン酸−グルタミン酸−バリン−アスパラギン酸を含む、ペプチドまたはポリペプチドなどのカスパーゼ−３基質が含まれる。
【００５８】
重要な研究が、癌細胞に対するアポトーシス感受性を修復するなどのアポトーシスに影響を及ぼす新規化合物の創製および評価を対象としている（Ｒｅｅｄ、２００３年）。本発明を使用して、知られているおよび／または後に発見される腫瘍アポトーシス標的化合物の評価および／または有効性を促進できることが想定される。
【００５９】
３．疾患受容体標的
「疾患受容体標的」では、幾つかの薬剤が、癌などの疾患状態に過剰発現している幾つかの細胞受容体に結合するそれらの能力を利用される。標的とされるかかる受容体の例には、エストロゲン受容体、アミノ酸輸送体、アンドロゲン受容体、下垂体受容体、トランスフェリン受容体、プロゲステロン受容体、およびグルコース輸送体が含まれる。疾患−受容体標的に適用することができる薬剤の例を、表１に示す。疾患受容体標的リガンド（例えば、ペンテトレオチド、オクトレオチド、トランスフェリン、および下垂体ペプチド）は、それらの幾つかが特定の細胞に過剰発現する細胞受容体と結合する。
【００６０】
エストロゲン、エストロン、およびタモキシフェンは、エストロゲン受容体を標的とする。エストロゲン受容体は、ある種の癌に過剰発現し、幾つかの実施形態では、エストロゲン受容体標的リガンドを含むＮ４誘導体を使用して、腫瘍を画像化することができる。エストロゲン受容体の発現はまた、骨粗鬆症および子宮内膜症の疾患では変化する。エストロゲン受容体標的リガンドを含むＮ４誘導体を使用して、骨粗鬆症および子宮内膜症などの他の疾患を画像化できることが期待されている。
【００６１】
グルコース輸送体は、幾つかの癌性細胞などの様々な疾患細胞に過剰発現する。テトラ酢酸マンノース、デオキシグルコース、幾つかの多糖類（例えば、ネオマイシン、カナマイシン、トブラマイシン）、および単糖類（例えばグルコサミン）もグルコース輸送体に結合し、疾患受容体標的リガンドとして使用することができる。これらのリガンドは免疫原性ではなく、血漿から素早く除去されるので、受容体画像は抗体画像と比較してより見込みがあるように思われる。
【００６２】
同様にアミノ酸輸送体も、幾つかの癌性細胞などの様々な疾患細胞に過剰発現する。アミノ酸および／またはアミノ酸誘導体（例えば、セリン、チロシン、αメチルチロシン）は、疾患受容体標的リガンドとして使用することができる。
【００６３】
さらなる受容体標的リガンドが利用可能であり、Ｎ４化合物に結合することができる。疾患受容体標的リガンドの他の例には、黄体形成ホルモンおよびトランスフェリンが含まれる。葉酸、葉酸塩、トムデックス、およびメトトレキサートは、葉酸塩受容体に結合する疾患受容体標的リガンドの例である。
【００６４】
「腫瘍標的」は、腫瘍（例えば、癌性、前癌性、および／または良性）と優先的に関連する化合物の能力を指す。「腫瘍標的リガンド」は、非腫瘍組織と比較して腫瘍組織に優先的に結合または関連する化合物を指す。優先的に腫瘍を標的にするリガンド（例えば、小分子または抗体）は、当技術分野で周知であり、現在知られているまたは後に発見され得る腫瘍標的リガンドが、本発明で使用できることが期待される。
【００６５】
４．疾患細胞周期標的
疾患細胞周期標的は、増殖細胞内で亢進される薬剤標的を指す。この目的で使用される化合物を使用して、腫瘍細胞ＤＮＡ含量などの細胞中の様々なパラメータを測定することができる。
【００６６】
幾つかの疾患細胞周期標的リガンドは、ヌクレオシド類似体である。例えば、ピリミジンヌクレオシド（例えば、２’−フルオロ−２’−デオキシ−５−ヨード−１−β−Ｄ−アラビノフラノシルウラシル［ＦＩＡＵ］、２’−フルオロ−２’−デオキシ−５−ヨード−１−β−Ｄ−リボフラノシルウラシル［ＦＩＲＵ］、２’−フルオロ−２’−５−メチル−１−β−Ｄ−アラビノフラノシルウラシル［ＦＭＡＵ］、２’−フルオロ−２’−デオキシ−５−ヨードビニル−１−β−Ｄ−リボフラノシルウラシル［ＩＶＦＲＵ］）およびアシクログアノシン：９−［（２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エトキシ）メチル］グアニン（ＧＣＶ）および９−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシ−メチル）ブチル］グアニン（ＰＣＶ）（Ｔｊｕｖａｊｅｖら、２００２年；Ｇａｍｂｈｉｒら、１９９８年；Ｇａｍｂｈｉｒら、１９９９年）および他の１８Ｆ−標識アシクログアノシン類似体、例えば８−フルオロ−９−［（２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エトキシ）メチル］グアニン（ＦＧＣＶ）（Ｇａｍｂｈｉｒら、１９９９年；Ｎａｍａｖａｒｉら、２０００年）、８−フルオロ−９−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）ブチル］グアニン（ＦＰＣＶ）（Ｇａｍｂｈｉｒら、２０００年；Ｉｙｅｒら、２００１年）、９−［３−フルオロ−１−ヒドロキシ−２−プロポキシメチル］グアニン（ＦＨＰＧ）（Ａｌａｕｄｄｉｎら、１９９６年；Ａｌａｕｄｄｉｎら、１９９９年）、ならびに９−［４−フルオロ−３−（ヒドロキシメチル）ブチル］グアニン（ＦＨＢＧ）（ＡｌａｕｄｄｉｎおよびＣｏｎｔｉ、１９９８年；Ｙａｇｈｏｕｂｉら、２００１年）が、野生型および突然変異型（Ｇａｍｂｈｉｒら、２０００年）ＨＳＶ１−ｔｋ発現の画像化のためのレポーター基質として開発されている。当業者には、疾患細胞周期標的のために使用されるこれらおよび他の薬剤が思い当たるはずである。
【００６７】
疾患標的リガンドの例には、例えばアデノシンおよびペンシクロビルが含まれる。抗ウィルス性ヌクレオシド類似体ＦＨＢＧ（ペンシクロビル類似体）、別の疾患標的リガンドが、ＰＥＴを使用する細胞増殖のｉｎ  ｖｉｖｏ測定のために用意され（Ａｌａｕｄｄｉｎら、２００１年）、類似の標的リガンドが本発明で使用できることが期待される。
【００６８】
５．低酸素疾患標的
疾患細胞低酸素標的は、低酸素細胞内で亢進される薬剤標的を指す。この目的で使用される化合物を使用して、腫瘍細胞低酸素症、抵抗性、または残留物含有量などの細胞における様々なパラメータを測定することができる。
【００６９】
幾つかの疾患細胞低酸素標的リガンドには、２−または５−ニトロイミダゾール類似体が含まれる。例えば、ミソニダゾール（２−ニトロイミダゾール）およびメトロニダゾール（５−ニトロイミダゾール）類似体。
【００７０】
６．解糖疾患標的
疾患細胞解糖標的は、細胞内のグルコース利用によって亢進される薬剤標的を指す。この目的で使用される化合物を使用して、腫瘍細胞増殖、炎症の程度などの細胞における様々なパラメータを測定することができる。疾患細胞解糖標的リガンドには、グルコース、ガラクトース、マンノース、およびリボース類似体が含まれる。
【００７１】
Ｂ．リンカー
アミノ基またはヒドロキシ基が利用できない場合（例えば、酸性官能基）でも、本発明の方法を使用して、エチレンジアミン、アミノプロパノール、ジエチレントリアミン、アスパラギン酸、ポリアスパラギン酸、グルタミン酸、ポリグルタミン酸、またはリシンなどのリンカーを添加することによって、所望のリガンドを、Ｎ４化合物（放射性標識されていても、またはされていなくてもよい）に結合させることができる。例えば、米国特許第６，７３７，２４７号には、本発明で使用できる幾つかのリンカーが開示されており、権利放棄することなく参照によってその全体を本明細書に組み込む。米国特許第５，６０５，６７２号には、本発明のリンカーとして使用できる幾つかの「好ましい主鎖」が開示されており、参照によってその全体を本明細書に組み込む。幾つかの実施形態では、Ｎ４化合物はリンカーと結合することができ、そのリンカーは、標的リガンドと結合する。他の実施形態では、１つまたは複数のリンカーを使用することができる。例えば、Ｎ４化合物はリンカーと結合することができ、そのリンカーは第２のリンカーに結合し、その第２のリンカーが標的リガンドに結合する。幾つかの実施形態では、一緒になって結合する２つ、３つ、４つ、またはそれ以上のリンカーを使用して、Ｎ４化合物および標的リガンドに結合することができる。しかし一般に、Ｎ４化合物および標的リガンドに結合する単一リンカーのみを使用することが好ましい。
【００７２】
Ｃ．Ｎ４誘導体
「Ｎ４誘導体」という用語は、少なくとも１つの他の分子または原子に結合したＮ４化合物と本明細書では定義される。幾つかの実施形態では、この誘導体は、キレート化された原子を有するＮ４化合物を含む。Ｎ４誘導体は、標的リガンドに結合している（例えば共有結合により）および／またはリンカーに結合している（例えば共有結合により）および／または金属キレートに結合している（例えばキレート化相互反応）Ｎ４化合物を含むことができる。
【００７３】
本発明の幾つかの実施形態は、Ｎ４誘導体、Ｎ４誘導体の生成方法、およびＮ４誘導体の使用に関する。幾つかの実施形態では、Ｎ４誘導体は、式
【００７４】
【化１８】
2009534381.tif 000019
［式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４は、アルキルであり、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、それぞれ独立に、水素、
【００７５】
【化１９】
2009534381.tif 000020
からなる群から選択され、
Ｒ４は、
【００７６】
【化２０】
2009534381.tif 000021
からなる群から選択される］
を有する化合物である。
【００７７】
Ｎ４誘導体は、キレート化された金属原子を有することができる（即ち、Ｎ４誘導体はラジオアイソトープで標識できる）。その金属原子は、放射性であっても、または放射性でなくてもよい。
【００７８】
Ｄ．ラジオアイソトープ標識
例えば、画像または化学療法剤としてのＮ４誘導体の使用を伴う幾つかの実施形態を容易にするために、ラジオアイソトープをＮ４誘導体にキレート化することができる。例えば、Ｎ４誘導体を、９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、または６２Ｃｕに結合（好ましくはキレート化）させることができる。
【００７９】
一般に、実質的に任意のα，β−放射体、γ−放射体、またはβ，γ−放射体が、本発明に関連して使用できると思われる。好ましいα放射体には、ビスマス−２１３、アスタチン−２１１、およびラジウム−２２３が含まれる。好ましいβ，γ−放射体には、１６６Ｈｏ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１５３Ｓｍ、および８９Ｓｒが含まれる。好ましいβ−放射体には、９０Ｙおよび２２５Ａｃが含まれる。好ましいγ−放射体には、６７Ｇａ、６８Ｇａ、６４Ｃｕ、６２Ｃｕ、および１１１Ｉｎが含まれる。好ましいα−放射体には、２１１Ａｔおよび２１２Ｂｉが含まれる。またＧｄ、Ｍｎ、Ｃｕ、またはＦｅなどのパラ磁性体は、本発明に関連して使用するためにＮ４誘導体とキレート化し得ることが想定される。
【００８０】
放射性画像では、放射性標識は一般にγ−放射線を放出する放射性核種であり、放射性トレーサーは一般に、γ−放射線検出カメラを使用して位置決めされる（この過程はしばしばγシンチグラフィーと呼ばれる）。放射性トレーサーは、病的部位で位置を特定するように選択されるか（陽性造影という）、あるいは放射性トレーサーは、かかる病的部位で特に位置を特定しないよう選択されるか（陰性造影という）のいずれかであるため、画像化部位が検出可能である。
【００８１】
６７Ｇａ／６８Ｇａ、９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１６９Ｙｂ、または１８６Ｒｅ／１８８Ｒｅを含む様々な放射性核種が、放射性画像および放射性免疫療法に有用であることが知られている。より良好な画像特性および低料金が理由で、可能な場合には１２３Ｉ、１３１Ｉ、６７Ｇａ、および１１１Ｉｎ標識化合物の代替に、対応する９９ｍＴｃ標識化合物を提供するか、または交換する試みが行われてきた。好ましい物理的特性ならびに極度の低価格（＄０．２１／ｍＣｉ）が理由で、９９ｍＴｃは放射性医薬品を標識するのに好ましい。ＤＴＰＡ−薬物複合体は、９９ｍＴｃでは効果的に標識できなかったことが報告されているが（Ｍａｔｈｉａｓら、１９９７年）、ＤＴＰＡ部分は、９９ｍＴｃとは１１１Ｉｎとほど安定にはキレート化しない（Ｇｏｌｄｓｍｉｔｈ、１９９７年）。
【００８２】
ヒトでの最適な放射性画像のためには、幾つかの因子が考慮されなければならない。検出効果を最大限にするために、１００〜２００ｋｅＶ範囲のγエネルギーを放出する放射性核種が一般には好ましい。患者への吸収放射線量を最小限にするために、画像手順が許す限り、放射性核種の物理的半減期は短くすべきである。任意の日およびその日の任意の時間に試験を実施できるようにするために、放射性核種の供給源は、臨床治療現場で常時利用可能であることが有利である。９９ｍＴｃは１４０ｋｅＶのγ放射線を放出し、６時間という物理的半減期を有し、モリブデン−９９／テクネチウム−９９ｍ発生器を使用してその場で容易に利用可能であるため、９９ｍＴｃはしばしば好ましい放射性核種である。
【００８３】
幾つかの実施形態では、Ｎ４誘導体は、ＰＥＴ画像のために６８Ｇａで、または体内放射性核種療法のために１８８Ｒｅ（βおよびγ放射体）で、標識（例えばキレート化）することができる。上記のように、９９ｍＴｃ、６８Ｇａ、および１８８Ｒｅは、利用しやすく手頃な価格の発生器から得ることができる。非放射性金属（例えば、銅、コバルト、白金、鉄、ヒ素、レニウム、ゲルマニウム）とキレート化する場合、冷却（非放射性）Ｎ４誘導体は、金属化学療法剤として使用することができる。この技術の特異性の一態様は、同ＰＥＴスルホン酸塩前駆体またはＳＰＥＣＴヨウ化薬剤を使用して、キレート化剤であるＮ４化合物と反応させることである。次いで、最終生成物は金属とキレート化してもよいが、これはさらに容易で、より利用しやすく、より手頃な価格である。
【００８４】
テクネチウムは、幾つかの酸化状態＋１、＋２、＋４、＋５、＋６、および＋７を有する。テクネチウムが＋１の酸化状態にある場合、ＴｃＭＩＢＩと呼ばれる。ＴｃＭＩＢＩは一般に、熱反応で生成される（Ｓｅａｂｏｌｄら、１９９９年）。ＴｃをＮ４化合物またはＮ４誘導体とキレート化することを含む本発明の幾つかの実施形態では、Ｔｃは＋４の酸化状態であることが一般に好ましい。この酸化状態は、Ｎ４化合物またはＮ４誘導体とキレートを形成するのに理想的である。したがって、放射性テクネチウムの錯体を本発明の薬物複合体で形成する際、テクネチウム錯体、好ましくは９９ｍＴｃ過テクネチウム酸の塩を、一般に還元剤の存在下で本発明の薬物複合体と反応させる。
【００８５】
本発明で使用される好ましい還元剤は、Ｔｃを＋４のその酸化状態に還元するための、塩化第１スズ（ＳｎＣｌ２）形態のスズイオンである。しかし、ジチオン酸イオンまたは第１鉄イオンなどの他の還元剤が、本発明に関連して有用となり得ることが企図される。還元剤は、固相還元剤であり得ることも企図される。還元剤の量は、コロイド形成を回避することが必要である場合に重要となり得る。例えば、Ｔｃ過テクネチウム酸約１００〜約３００ｍＣｉ当たりＳｎＣｌ２約１０〜約１００μｇを使用することが好ましい。最も好ましい量は、Ｔｃ過テクネチウム酸約２００ｍＣｉ当たりＳｎＣｌ２約０．１ｍｇおよび生理食塩水約２ｍｌである。
【００８６】
放射性核種で標識されたＮ４誘導体での腫瘍画像化に加えて、これらの化合物が、他の疾患に関係する組織の画像化、ならびに癌および他の疾患に関係する診断に使用できることも想定される。例えば、本発明の放射性核種で標識されたＮ４誘導体は、腫瘍だけでなく、感染症、低酸素組織（卒中）、心筋梗塞、アポトーシス細胞、アルツハイマー疾患、および子宮内膜症などの他の組織特異的状態を画像化するために有用となり得ることが企図される。組織標的リガンドに結合する放射性標識Ｎ４化合物を含むＮ４誘導体を使用する画像の利点は、組織標的リガンドの特異的結合特性が、対象となる領域にわたって放射性信号を集中させるということである。
【００８７】
Ｅ．放射性標識Ｎ４誘導体を調製するためのキット
錯体およびかかる錯体を調製するための手段は、本発明の所定量のＮ４誘導体と、放射性核種で複合体を標識するのに十分な量の還元剤を含有する封止バイアルを一般に含むキットの形態で提供され得る。本発明の幾つかの実施形態では、キットは放射性核種を含む。さらなる幾つかの実施形態では、放射性核種は９９ｍＴｃである。キットはまた、例えば浸透圧を調節するための医薬として許容可能な塩、緩衝液、保存剤、抗酸化剤等の通常の医薬補助材料を含有することができる。
【００８８】
幾つかの実施形態では、Ｎ４誘導体の酸化を防止するために、組成物に抗酸化剤および遷移キレート化剤（ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｃｈｅｌａｔｏｒ）を含む。幾つかの実施形態では、抗酸化剤はビタミンＣ（アスコルビン酸）である。しかし、トコフェロール、ピリドキシン、チアミン、またはルチンなどの、当業者に知られている他の任意の抗酸化剤を使用できることも企図される。本発明で使用される遷移キレート化剤の例には、それに限定されるものではないが、グルコヘプトン酸塩、グルコン酸塩、グルカリン酸塩、クエン酸塩、および酒石酸塩が含まれる。キットの成分は、液体形態、凍結形態、または乾燥形態であってよい。幾つかの実施形態では、キットの成分は凍結乾燥形態で提供され得る。
【００８９】
ＩＩＩ．Ｎ４誘導体の使用
本発明のＮ４誘導体は、予後目的で使用することもできる。Ｎ４誘導体は、腫瘍を有する患者に投与することができると想定される。標識化戦略としての放射性標識Ｎ４化合物の使用は、疾患受容体、低酸素症マーカー、アポトーシス欠陥、疾患細胞周期、疾患機能的経路を標的とし、これらの生化学的過程の医薬品の有効性を評価するように設計されたリガンドで効果的となり得ることが想定される。疾患受容体、低酸素症マーカー、アポトーシス欠陥、疾患細胞周期、疾患機能的経路、およびこれらの生化学的過程への医薬品の有効性評価に関係する患者の特定の問題に対するＮ４誘導体の有効性を決定するために、画像化を実施することができる。この方法論を使用して、どのＮ４誘導体が患者にとって最も効果的となるかを医師は迅速に決定することがき、対応する療法または治療態様を設計することができる。まず薬剤を選択し、身体的にも経済的にも著しいコストをかけて数カ月の患者の時間を必要とすることがある一連の化学療法を投与した後、癌の化学療法剤の有効性を決定するという方法よりも、この方法論は非常に有利である。
【００９０】
本発明はまた、化学療法または放射線治療が成功している前の患者の進行を監視して、癌が寛解状態にあるか、または転移しつつあるかを決定するために使用することができる。家族に癌の病歴があるまたは癌に関連する遺伝子（複数）を持つと診断されたことのある人々は、医療従事者によって、本発明の方法論を使用して監視され得る。本発明の方法および医薬品はまた、発癌物質への環境曝露などの癌の危険因子を持つヒトにおいて癌が発症しているかどうかを監視するために、医療従事者によって使用され得る。
【００９１】
ＩＶ．薬物評価
本発明の幾つかの薬物系リガンドは、薬物に対する対象の薬理学的応答の測定に適用することができる。薬物投与に対する対象の応答を決定する際には、広範なパラメータが測定され得る。当業者には、測定され得る応答の種類が思い当たるはずである。これらの応答は、評価される特定の薬物、対象が治療を受ける特定の疾患または状態、および対象の特徴を含む様々な因子に部分的に依存する。放射性標識剤は、薬物評価の測定に適用することができる。
【００９２】
Ｖ．医薬調製物
本発明の医薬組成物は、医薬として許容可能な担体に溶解または分散した本発明の有効量のＮ４誘導体を含む。「医薬として」または「薬理学的に許容可能な」という語句は、例えばヒトなどの動物に適切に投与される場合に、副作用、アレルギー、または他の有害反応をもたらさない分子の存在および組成物を指す。放射性標識Ｎ４誘導体などの少なくとも１つのＮ４誘導体、または追加の有効成分を含有する医薬組成物の調製は、参照によって本明細書に組み込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１８ｔｈ  Ｅｄ．  Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９０年に例示のように、本開示に照らして当業者は知ることになろう。さらに動物（例えばヒト）への投与については、調製物は、ＦＤＡ  Ｏｆｆｉｃｅ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓによって必要とされる無菌、発熱、一般的安全性、および純度の標準を満たすべきであることを理解されよう。
【００９３】
本明細書で使用される「医薬として許容可能な担体」には、任意および全ての溶媒、分散媒、コーティング、界面活性剤、抗酸化剤、保存剤（例えば、抗菌剤、抗真菌剤）、等張剤、吸収遅延剤、塩、保存剤、薬物、薬物安定剤、ゲル、結合剤、賦形剤、崩壊剤、潤滑剤、甘味剤、香味剤、色素、当業者に知られているはずの材料およびそれらの組合せ（参照によって本明細書に組み込まれる、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１８ｔｈ  Ｅｄ．  Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９０年、１２８９〜１３２９頁参照）が含まれる。任意の通常の担体が有効成分に不適合である場合を除いて、治療組成物または医薬組成物におけるその使用が企図される。
【００９４】
本発明のＮ４誘導体は、それが固体、液体、またはエアロゾル形態で投与されるかどうか、および注射などの投与経路のために滅菌される必要があるかどうかに依存して様々な種類の担体を含むことができる。本発明は、静脈内、皮内、動脈内、腹腔内、病変内、頭蓋内、関節内、前立腺内、胸膜内、気管内、鼻腔内、硝子体内、膣内、直腸内、局所、腫瘍内、筋肉内、腹腔内、皮下、結膜下、膀胱内、粘膜内、心膜内、臍帯内、眼内、経口、局所（ｔｏｐｉｃａｌｌｙ）、局所（ｌｏｃａｌｌｙ）、注射、注入、持続注入、カテーテルによる、洗浄による標的細胞を直接浸す局所かん流、脂質組成（例えばリポソーム）、または当業者に知られているはずの他の方法もしくは前記の任意の組合せ（参照によって本明細書に組み込まれる、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１８ｔｈ  Ｅｄ．  Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９０年、１２８９〜１３２９頁参照）によって投与することができる。
【００９５】
患者に投与される本発明の組成物の実際の投与量は、患者の体重、状態の重篤度、治療される疾患の種類、以前の治療または併用療法の介入、特発性疾患、および投与経路などの身体的および生理学的因子によって決定することができる。投与に関与する医療従事者は、いずれにしても組成物中の有効成分（複数）の濃度および個々の対象に適した用量（複数）を決定することになる。
【００９６】
幾つかの実施形態では、医薬組成物は、例えば少なくとも約０．１％のＮ４誘導体を含むことができる。他の実施形態では、活性化合物は、単位重量の約２％〜約７５％、または約２５％〜約６０％、および例えばその中で導き出せる任意の範囲を含むことができる。他の非限定的な例では、用量は、体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇから、体重１ｋｇ当たり０．５ｍｇ、体重１ｋｇ当たり１ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約５ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約１０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約２０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約３０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約４０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約５０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約７５ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約１００ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約２００ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約３５０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約５００ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約７５０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約１０００ｍｇまで、または１投与当たりさらに多量、およびその中で導き出せる任意の範囲を含むこともできる。本明細書に列挙した数から導き出せる範囲の非限定的な例では、上記の数を基にして体重１ｋｇ当たり約１０ｍｇ〜体重１ｋｇ当たり約１００ｍｇ等の範囲を投与することができる。
【００９７】
いかなる場合でも、組成物は１つまたは複数の成分の酸化を遅延させるための様々な抗酸化剤を含むことができる。さらに、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えばそれに限定されるものではないがパラベン（例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン）、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサール、またはそれらの組合せなどの保存剤によって、微生物作用を防止することができる。
【００９８】
Ｎ４誘導体は、遊離塩基、中性、または塩の形態の組成物に配合することができる。医薬として許容可能な塩には、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、もしくは水酸化鉄などの無機塩基；またはイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ヒスチジン、もしくはプロカインなどの有機塩基に由来する遊離カルボキシル基で形成される塩が含まれる。
【００９９】
組成物が液体形態である実施形態では、担体は、それに限定されるものではないが、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール等）、脂質（例えば、トリグリセロール、植物油、リポソーム）、およびそれらの組合せを含む溶媒または分散媒であってよい。例えば、レシチンなどのコーティングを使用することによって、例えば液体ポリオールもしくは脂質などの担体中に分散させることにより必要な粒経を維持することによって、例えばヒドロキシプロピルセルロースなどの界面活性剤を使用することによって、またはかかる方法の組合せによって、適切な流動性を維持することができる。多くの場合、例えば糖類、塩化ナトリウム、またはそれらの組合せなどの等張剤を含むことが好ましいであろう。
【０１００】
滅菌注射溶液は、必要な量の適切な溶媒中に、必要により先に列挙した様々な量の他の成分と共にＮ４誘導体を導入した後に滅菌濾過することによって調製される。一般に分散剤は、塩基性分散媒および／または他の成分を含有する滅菌ビヒクルに、様々な滅菌有効成分を導入することによって調製される。注射可能な滅菌溶剤、懸濁剤、または乳剤の調製のための滅菌粉末の場合、好ましい調製方法は、真空乾燥または冷凍乾燥技術であり、これによって、先の滅菌濾過した液体媒体から有効成分と追加の所望の任意成分の粉末が得られる。液体媒体は、必要に応じて適切に緩衝化すべきであり、まず液体希釈剤を等張にした後、十分な生理食塩水またはグルコースと共に注射する。直接注射用の高濃度組成物の調製物も企図され、この場合、極度に急速な浸透をもたらし、高濃度の活性薬剤を小領域に送達するために、溶媒としてＤＭＳＯを使用することが想定される。
【０１０１】
組成物は、製造および保存条件下で安定であり、バクテリアおよび菌類などの微生物の汚染作用から保護されなければならない。内毒素汚染は、例えばタンパク質０．５ｎｇ／ｍｇ未満の安全なレベルに、最小限に抑えられるべきであることを理解されたい。
【０１０２】
特定の実施形態では、例えばモノステアリン酸アルミニウム、ゼラチン、またはそれらの組合せなどの吸収を遅延する薬剤を組成物に使用することによって、注入可能な組成物の持続的吸収をもたらすことができる。
【０１０３】
ＶＩ．併用療法
本発明の一態様は、本発明の放射性標識Ｎ４誘導体などのＮ４誘導体を、別の薬剤または療法、好ましくは別の癌治療と組み合わせて使用できるものである。Ｎ４誘導体は、数分から数週間の範囲の間隔で、他の薬剤治療の前または後に用いることができる。他の薬剤および発現構築物が細胞に対して別々に適用される実施形態では、一般に、その薬剤および発現構築物が細胞に対して有利な組合せ効果をなおも発揮できるように、各送達時の間に長時間が経過しないようにした。例えばこのような場合には、２つ、３つ、４つ、またはそれ以上のモダリティを用いて実質的に同時に（即ち約１分未満以内）、細胞、組織、または有機体をＮ４誘導体と接触させ得ることが企図される。他の態様では、Ｎ４誘導体の投与前および／または後、約１分、約５分、約１０分、約２０分、約３０分、約４５分、約６０分、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、約６時間、約７時間、約８時間、約９時間、約１０時間、約１１時間、約１２時間、約１３時間、約１４時間、約１５時間、約１６時間、約１７時間、約１８時間、約１９時間、約２０時間、約２１時間、約２２時間、約２３時間、約２４時間、約２５時間、約２６時間、約２７時間、約２８時間、約２９時間、約３０時間、約３１時間、約３２時間、約３３時間、約３４時間、約３５時間、約３６時間、約３７時間、約３８時間、約３９時間、約４０時間、約４１時間、約４２時間、約４３時間、約４４時間、約４５時間、約４６時間、約４７時間、約４８時間まで、またはそれより長時間以内に、１つまたは複数の薬剤を投与することができる。他の幾つかの実施形態では、Ｎ４誘導体の投与前および／または後、約１日から、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約７日、約８日、約９日、約１０日、約１１日、約１２日、約１３日、約１４日、約１５日、約１６日、約１７日、約１８日、約１９日、約２０、約２１日まで、それ以内で薬剤を投与することができる。幾つかの場合、治療期間を著しく延長することが望ましいが、この場合、それぞれの投与間に数週（例えば、約１、約２、約３、約４、約５、約６、約７、もしくは約８週、またはそれ以上）が経過する。
【０１０４】
様々な組合せを使用することができ、Ｎ４誘導体を「Ａ」、任意の他の治療剤であってよい第２の薬剤を「Ｂ」とする。
Ａ／Ｂ／Ａ  Ｂ／Ａ／Ｂ  Ｂ／Ｂ／Ａ  Ａ／Ａ／Ｂ  Ａ／Ｂ／Ｂ  Ｂ／Ａ／Ａ  Ａ／Ｂ／Ｂ／Ｂ  Ｂ／Ａ／Ｂ／Ｂ  Ｂ／Ｂ／Ｂ／Ａ  Ｂ／Ｂ／Ａ／Ｂ  Ａ／Ａ／Ｂ／Ｂ  Ａ／Ｂ／Ａ／Ｂ  Ａ／Ｂ／Ｂ／Ａ  Ｂ／Ｂ／Ａ／Ａ  Ｂ／Ａ／Ｂ／Ａ  Ｂ／Ａ／Ａ／Ｂ  Ａ／Ａ／Ａ／Ｂ  Ｂ／Ａ／Ａ／Ａ  Ａ／Ｂ／Ａ／Ａ  Ａ／Ａ／Ｂ／Ａ
患者への本発明の治療発現構築物の投与は、もしあればベクターの毒性を考慮に入れて、化学療法の投与に関する一般的な手順に従うことになる。治療周期は必要に応じて反復されると予測される。また、様々な標準的療法ならびに外科的介入が、Ｎ４誘導体と組み合わせて適用され得ることが企図される。これらの療法は、それに限定されるものではないが、化学療法、放射線治療、免疫療法、遺伝子療法、および手術が含まれる。
【０１０５】
Ａ．化学療法
癌療法には、化学治療および放射線系治療の両方との様々な併用療法も含まれる。併用化学療法には、例えば、シスプラチン（ＣＤＤＰ）、カルボプラチン、プロカルバジン、メクロレタミン、シクロホスファミド、カンプトテシン、イフォスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、ニトロソ尿素、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリコマイシン、マイトマイシン、エトポシド（ＶＰ１６）、タモキシフェン、ラロキシフェン、エストロゲン受容体結合剤、タキソール、ゲムシタビン、ナベルビン、ファルネシル−タンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、シスプラチン、５−フルオロウラシル、ビンクリスチン、ビンブラスチンおよびメトトレキサート、または前述の任意の類似体もしくは誘導体変異体が含まれる。
【０１０６】
Ｂ．放射線治療
ＤＮＡ損傷を引き起こし、広範に使用されてきた他の因子には、γ線、Ｘ線として一般に知られるもの、および／または腫瘍細胞への放射性アイソトープの有向送達が含まれる。マイクロ波およびＵＶ照射などのＤＮＡ損傷因子の他の形態も企図される。これらの因子の全てが、ＤＮＡ、ＤＮＡ前駆体、ＤＮＡの複製および修復、ならびに染色体の集合体および維持に広範な損傷を及ぼす可能性が最も高い。Ｘ線範囲の線量は、１日当たり５０レントゲンから、長期では（３〜４週）２００レントゲンの範囲であり、単一線量２０００〜６０００レントゲンまでである。放射性アイソトープの線量範囲は広範に変化し、アイソトープの半減期、放出される放射線の強度および種類、ならびに腫瘍性細胞による取込みに依存する。「接触した」および「曝露した」という用語は、細胞に適用される場合、本明細書では治療構築物および化学治療剤または放射線治療剤が標的細胞に送達されるか、または標的細胞と直接並置される過程を説明するために使用される。細胞の殺滅または停止を実現するために、細胞を殺滅するかまたはその潜伏を防止するのに有効な組合せの量で、両方の薬剤が送達される。
【０１０７】
Ｃ．免疫療法
免疫療法は一般に、癌細胞を標的とし破壊するための免疫エフェクター細胞および分子の使用に依存するものである。免疫エフェクターは、例えば腫瘍細胞の表面上のあるマーカーに特異的な抗体であってよい。抗体のみで療法のエフェクターとして働くことができ、または他の細胞を集めて細胞殺滅を実際に行うことができる。抗体は、薬物または毒素（化学療法剤、放射性ヌクレオチド、リシンＡ鎖、コレラ毒素、百日咳毒素等）に結合することもでき、単に標的剤としてのみ働くこともできる。あるいはエフェクターは、腫瘍細胞標的と直接または間接的に相互作用する表面分子を担持するリンパ球であってよい。様々なエフェクター細胞には、細胞障害性Ｔ細胞およびＮＫ細胞が含まれる。
【０１０８】
したがって免疫療法は、併用療法の一部分として、場合により遺伝子療法と併用して使用することができよう。併用療法の一般的な手法を以下に論じる。一般に腫瘍細胞は、標的可能な、即ち他の細胞の大部分には存在しないあるマーカーを担持するはずである。多くの腫瘍マーカーが存在し、これらのいずれかは、本発明の文脈では標的として適し得る。一般的な腫瘍マーカーには、癌胎児性抗原、前立腺特異抗原、泌尿器腫瘍関連抗原、胎児性抗原、チロシナーゼ（ｐ９７）、ｇｐ６８、ＴＡＧ−７２、ＨＭＦＧ、シアリルルイス抗原、ＭｕｃＡ、ＭｕｃＢ、ＰＬＡＰ、エストロゲン受容体、ラミニン受容体、ｅｒｂＢ、およびｐ１５５が含まれる。
【０１０９】
Ｄ．遺伝子療法
さらに別の実施形態では、第２の治療は、治療ポリヌクレオチドが第１の治療剤の前、後、または同時に投与される第２の遺伝子療法である。遺伝子産物をコードするベクターと共に治療剤を送達することは、標的組織への抗過剰増殖性の組合せ作用を有することになる。
【０１１０】
Ｅ．手術
癌を有するヒトの約６０％は、予防、診断、または病期的な根治および緩和目的の手術を含むある種の手術を受けることになる。根治目的の手術は、本発明の治療、化学療法、放射線治療、ホルモン療法、遺伝子療法、免疫療法、および／または代替療法などの他の療法と組み合わせて使用できる癌治療である。根治目的の手術は、癌性組織の全てまたは一部分が、物理的または部分的に除去され、切除され、かつ／または破壊される切除術を含む。腫瘍切除とは、腫瘍の少なくとも一部分の物理的除去を指す。腫瘍切除に加えて手術による治療には、レーザー手術、凍結外科手術、電気外科手術、および顕微鏡下手術（モース手術）が含まれる。さらに本発明が、表在癌、前癌状態、または正常組織の偶発的量の除去と共に使用できることが企図される。
【実施例】
【０１１１】
以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態を示すために含まれるものである。以下の実施例に開示される技術は、本発明の実施において良好に機能するように本発明者によって発見された技術を表し、したがってその実施のための好ましい態様を構成するとみなされ得ることを、当業者は理解すべきである。しかし、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、開示されている特定の実施形態で多くの変更が行われることを当業者は本開示に照らして理解すべきであり、さらに当業者は同様のまたは類似の結果を得るはずである。
【０１１２】
（実施例１）
Ｎ−一置換物のためのＮ４化合物の保護
Ａ．トリフルオロ酢酸エチルでのサイクラムの保護
【０１１３】
【化２１】
2009534381.tif 000022
サイクラム（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン）４．００６ｇ（２０ｍｍｏｌ）を、トリエチルアミン２．７９ｍＬの乾燥メタノール１５ｍＬ中溶液に入れた。トリフルオロ酢酸エチル６．９２ｍＬを、先の溶液に室温で撹拌しながら滴加した。添加を５分間継続した。均質な反応混合物を氷水浴で冷却して、穏やかな発熱を制御した。Ｎ２下で５時間撹拌を継続した。揮発物を真空下で除去した。残渣を小シリカゲルプラグ（２５ｇ）に通過させ、１００％のＥｔＯＡｃで溶出した。溶出した溶媒を濃縮して、生成物を白色気泡として得た（８．９７２ｇ、９５％収率）。
【０１１４】
Ｂ．トリフルオロ酢酸エチルでのサイクレンの保護
【０１１５】
【化２２】
2009534381.tif 000023
先の（実施例１、Ａ）方法に従って、この反応ではサイクラムの代わりにサイクレン（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン）３．４４５ｍｇ（２０ｍｍｏｌ）を使用した（８．２７６ｇ、９３％収率）。
【０１１６】
Ｃ．トリフルオロ酢酸エチルでのサイクラルの保護
【０１１７】
【化２３】
2009534381.tif 000024
先の（実施例１、Ａ）方法に従って、この反応ではサイクラムの代わりにサイクラル（１，４，８，１２−テトラアザシクロペンタデカン）４．２８７ｇ（２０ｍｍｏｌ）を使用した（９．２２７ｇ、９５％収率）。
【０１１８】
（実施例２）
スルホン化およびヨウ化チロシン誘導体の調製
【０１１９】
【化２４】
2009534381.tif 000025
Ａ．３−ブロモプロパノールでのチロシンのＯ−アルキル化
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−チロシンメチルエステル（以下Ｂｏｃ−Ｔｙｒ）２９５３．３ｍｇ（１０ｍｍｏｌ）のメタノール（無水）３０ｍＬ中溶液を、ナトリウムメトキシド５４０．２ｍｇ（１０ｍｍｏｌ）を含有するメタノール溶液５０ｍＬに添加した。３−ブロモプロパノール１３６３μＬ（１５ｍｍｏｌ）を、先のＢｏｃ−Ｔｙｒ溶液に添加した。混合物を、窒素雰囲気下の室温で２０分間撹拌した後７０℃で６時間撹拌した。揮発物を除去するために、混合物を減圧下で蒸発させた後、酢酸エチル２０ｍＬに溶解した。有機相を水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ロータリーエバポレーターを使用して溶媒を除去した。透明な液体が白色固体に変化し、ヒドロキシプロピル−Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（以下ＨＯＰｒ−Ｂｏｃ−Ｔｙｒ）２．９１５８ｇ（８２．５％収率）を、ヘキサン−酢酸エチル系勾配（１０：１〜１：１）を使用するカラムクロマトグラフィーによって得た。
【０１２０】
Ｂ．３−ヒドロキシプロピル−Ｂｏｃ−Ｔｙｒのトシル化
ピリジン（無水）１０ｍｌ中ヒドロキシプロピル−Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（以下ＨＯＰｒ−Ｂｏｃ−Ｔｙｒ）１４１３．６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を、ｐ−トルエンスルホニルクロリド１１４３．９ｍｇ（６．０ｍｍｏｌ）のピリジン（無水）２０ｍＬ中溶液に、窒素雰囲気下の氷水浴中で撹拌しながら添加した。混合物を終夜冷蔵庫に置いた。反応混合物はその後色が変化し、その後ピリジン塩酸塩をフィルター分離した。ピリジンを除去するために、減圧下で濾液を蒸発させた。白色固体１．８１２３ｇ（８７．９％収率）を、ヘキサン−酢酸エチル系勾配（１０：１〜２：１）を使用するカラムクロマトグラフィーによって得た。
【０１２１】
Ｃ．３−ヨードプロピル−Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（以下Ｉ−Ｐｒ−Ｂｏｃ−Ｔｙｒ）の合成
ヨウ化カリウム１９９２．１ｍｇ（１２ｍｍｏｌ）を、ＴｓＯ−Ｐｒ−Ｂｏｃ−Ｔｙｒ１５２２．８ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（無水）１５ｍｌ中溶液に注いだ。混合物は溶媒に完全には溶解せず、静置して２時間還流した。固体を濾別し、濾過溶液を蒸発させてアセトニトリルを除去した。残渣を、ヘキサン：酢酸エチル系勾配（１０：１〜１０：４）を使用するカラムクロマトグラフィーによって単離した。透明な液体１３２４．５ｍｇを得た（９５．３％収率）。
【０１２２】
（実施例３）
スルホン化およびヨウ化α−メチルチロシン誘導体の調製
【０１２３】
【化２５】
2009534381.tif 000026
Ａ．α−メチルチロシンのＮ−保護
二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル１３．０９５ｇ（６０ｍｍｏｌ）を、α−メチルチロシン（以下ＡＭＴ）８．３７０ｇ（４０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（無水）１１．２ｍＬ（８０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）４０ｍＬ中溶液に添加した。混合物を終夜室温で撹拌した後、減圧下で蒸発させ、その後固体を除去するために濾過した。白色固体（以下Ｂｏｃ−ＡＭＴ）１１．２１７ｇ（９０．６％収率）を、ヘキサン−酢酸エチル系勾配（１０：１〜１０：７）を使用する残渣のカラム分離によって得た。
【０１２４】
Ｂ．３−ブロモプロパノールでのＢｏｃ−ＡＭＴのＯ−アルキル化
Ｂｏｃ−ＡＭＴ３．０９４ｇ（１０ｍｍｏｌ）を使用し、先の（実施例２、Ｂ）方法を使用してそれに従った。透明な溶液が白色固体（以下ＨＯ−Ｐｒ−Ｂｏｃ−ＡＭＴ）に変化し、ヘキサン−酢酸エチル系勾配（１０：１〜１０：５）を使用するカラムクロマトグラフィーによって３．２８９ｇ（８９．５％収率）を得た。
【０１２５】
Ｃ．３−ＨＯ−Ｐｒ−Ｂｏｃ−ＡＭＴのトシル化
ＨＯ−Ｐｒ−Ｂｏｃ−ＡＭＴ２．９４０ｇ（８．０ｍｍｏｌ）を使用し、先の２−３）の方法に従った。白色固体（以下ＴｓＯ−Ｐｒ−Ｂｏｃ−ＡＭＴ）３．４９３ｇ（８３．７％収率）を、ヘキサン−酢酸エチル系勾配（１０：１〜１０：５）を使用するカラムクロマトグラフィーによって得た。
Ｄ．３−ヨードプロピル−Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（以下Ｉ−Ｐｒ−Ｂｏｃ−Ｔｙｒ）の合成
ＴｓＯ−Ｐｒ−Ｂｏｃ−ＡＭＴ３．１３０ｇ（６．０ｍｍｏｌ）を使用し、先の２−４）の方法に従った。透明な溶液（以下Ｉ−Ｐｒ−Ｂｏｃ−ＡＭＴ）２．８０１ｇ（９７．８％収率）を、ヘキサン−酢酸エチル系勾配（１０：１〜１０：４）を使用するカラムクロマトグラフィーによって得た。
【０１２６】
（実施例４）
スルホン化およびヨウ化タモキシフェン誘導体の調製
【０１２７】
【化２６】
2009534381.tif 000027
Ａ．４−ヒドロキシメチル−Ｎ，Ｎ−ジエチルタモキシフェンのトシル化
４−ヒドロキシメチル−Ｎ，Ｎ−ジエチルタモキシフェン（以下ＨＯ−ＴＭＸ）１．２８９ｇ（８．０ｍｍｏｌ）を使用し、先の２−３）の方法に従った。薄黄色の液体（以下ＴｓＯ−ＴＭＸ）１．４４５ｇ（８２．５％収率）を、ヘキサン：エチルエーテル：トリエチルアミン勾配＝１００：１００：５〜１００：１００：２０）を使用するカラムクロマトグラフィーによって得た。
【０１２８】
Ｂ．４−ヨードメチル−Ｎ，Ｎ−ジエチルの合成
Ｉ−ＴＭＸ１．１６８ｇ（２．０ｍｍｏｌ）を使用し、先の（実施例２、Ｄ）方法に従った。透明な液体（以下Ｉ−ＴＭＸ）１．０５８ｇ（９８．１％収率）を、ヘキサン：エチルエーテル：トリエチルアミン勾配＝１００：１００：１〜１００：１００：１０）を使用する短カラムクロマトグラフィーに通過させた後に得た。
【０１２９】
（実施例５）
【０１３０】
【化２７】
2009534381.tif 000028
スルホン化およびヨウ化エストロン誘導体の調製
Ａ．３−ブロモプロパノールでのエストロンのＯ−アルキル化
エストロン２．７０３ｇ（１０ｍｍｏｌ）を使用し、先の２−２）の方法に従った。透明な液体が白色固体（以下ＨＯ−Ｐｒ−ＥＳＴ）に変化し、ヘキサン−酢酸エチル系勾配（１０：１〜１０：５）を使用するカラムクロマトグラフィーによって２．４０５ｇ（７３．２％収率）を得た。
【０１３１】
Ｂ．ＨＯ−Ｐｒ−ＥＳＴのトシル化
ＨＯ−Ｐｒ−ＥＳＴ１．９７１ｇ（６．０ｍｍｏｌ）を使用し、先の２−３）の方法に従った。白色固体（以下ＴｓＯ−Ｐｒ−ＥＳＴ）２．２５３ｇ（７７．８％収率）を、ヘキサン−酢酸エチル系勾配（１０：１〜１０：５）を使用するカラムクロマトグラフィーによって得た。
【０１３２】
Ｃ．３−ヨードプロピル−ＥＳＴの合成
ＴｓＯ−Ｐｒ−ＥＳＴ１．９３０ｇ（４．０ｍｍｏｌ）を使用し、先の２−４）の方法に従った。透明な液体（以下Ｉ−Ｐｒ−ＥＳＴ）１．７２０ｇ（９８．１％収率）を、ヘキサン−酢酸エチル系勾配（１０：１〜１０：４）を使用するカラムクロマトグラフィーによって得た。
【０１３３】
（実施例６）
サイクラルの１，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−トリフルオロメタンスルホニル−β−Ｄマンノピラノース（ＦＤＧ合成のための前駆体）との反応
【０１３４】
【化２８】
2009534381.tif 000029
Ａ．Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四置換サイクラル−ＤＧの実施例
１，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−トリフルオロメタンスルホニル−β−Ｄ−マンノピラノース２００ｍｇ（０．４１６ｍｍｏｌ）を、サイクラル２２．３ｍｇ（０．１０４ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン８４．２ｍｇ、１１６マイクロｍＬ（０．８３２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。混合物を窒素雰囲気下で１６時間、５０℃で撹拌し、蒸発させて揮発物を除去した。残渣を１，４−ジオキサン６ｍＬに入れ、次いで白色沈殿物が生じた。固体を濾過によって廃棄した。４Ｎ−ＨＣｌの１，４−ジオキサン中溶液１ｍｌを濾液に滴加し、次いで薄い茶色の粉末が沈殿した。固体を濾過によって収集し、凍結乾燥機で乾燥させた。
【０１３５】
固体を１Ｎ−塩酸水溶液３ｍＬに溶解し、３０分間撹拌した。１Ｎ−ＮａＨＣＯ３を先の溶液に添加してｐＨ＝約９にした。溶液を膜（ＭＷカットオフ＜５００）で精製し、凍結乾燥機で蒸発させた。薄い茶色の固体６３．２ｍｇ（６７．２％収率）を収集した。
【０１３６】
Ｂ．Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’−三置換サイクラル−ＤＧの実施例
１，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−トリフルオロメタンスルホニル−β−Ｄ−マンノピラノース２００ｍｇ（０．４１６ｍｍｏｌ）を、サイクラル２９．６ｍｇ（０．１３８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン８４．２ｍｇ、１１６マイクロｍＬ（０．８３２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。混合物を窒素雰囲気下で１６時間、５０℃で撹拌し、蒸発させて揮発物を除去した。残渣を１，４−ジオキサン６ｍＬに入れ、次いで白色沈殿物が生じた。固体を濾過によって破棄した。４Ｎ−ＨＣｌの１，４−ジオキサン溶液１ｍｌを濾液に滴加し、次いで薄い茶色の粉末が沈殿した。
【０１３７】
固体を濾過によって収集し、凍結乾燥機で乾燥させた。固体を１Ｎ−塩酸水溶液３ｍＬに溶解し、３０分間撹拌した。１Ｎ−ＮａＨＣＯ３を先の溶液に添加してｐＨ＝約９にした。溶液を膜（ＭＷカットオフ＜５００）で精製し、凍結乾燥機で蒸発させた。薄い茶色の固体５８．８ｍｇ（５７．４％収率）を収集した。
【０１３８】
Ｃ．Ｎ，Ｎ’−二置換サイクラル−ＤＧの実施例
１，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−トリフルオロメタンスルホニル−β−Ｄ−マンノピラノース２００ｍｇ（０．４１６ｍｍｏｌ）を、サイクラル４４．６ｍｇ（０．２０８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン８４．２ｍｇ、１１６マイクロｍＬ（０．８３２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。混合物を窒素雰囲気下で１６時間、５０℃で撹拌し、蒸発させて揮発物を除去した。残渣を１，４−ジオキサン６ｍＬに入れ、次いで白色沈殿物が生じた。固体を濾過によって破棄した。４Ｎ−ＨＣｌの１，４−ジオキサン溶液１ｍｌを濾液に滴加し、次いで薄い茶色の粉末が沈殿した。固体を濾過によって収集し、凍結乾燥機で乾燥させた。
【０１３９】
固体を１Ｎ−塩酸水溶液３ｍＬに溶解し、３０分間撹拌した。１Ｎ−ＮａＨＣＯ３を先の溶液に添加してｐＨ＝約９にした。溶液を膜（ＭＷカットオフ＜５００）で精製し、凍結乾燥機で蒸発させた。残渣を最小の水に溶解した。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ−７５単離後に凍結乾燥機によって薄い茶色の固体２３．９ｍｇ（１９．８％収率）を収集した。
【０１４０】
Ｄ．Ｎ−一置換サイクラル−ＤＧの実施例
１，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−トリフルオロメタンスルホニル−β−Ｄ−マンノピラノース２００ｍｇ（０．４１６ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’−トリス（トリフルオロアセチル）−サイクラル（実施例１、Ｃより）２０９ｍｇ（０．４１６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン８４．２ｍｇ、１１６マイクロｍＬ（０．８３２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。混合物を窒素雰囲気下で６時間、５０℃で撹拌し、蒸発させて揮発物を除去した。
【０１４１】
残渣を１，４−ジオキサン６ｍＬに入れ、次いで白色沈殿物が生じた。固体を濾過によって破棄した。４Ｎ−ＨＣｌの１，４−ジオキサン溶液１ｍｌを濾液に滴加し、次いで薄い茶色の粉末が沈殿した。濾過によって収集した固体を、１Ｎ−塩酸水溶液３ｍＬに溶解し、３０分間撹拌した。１Ｎ−ＮａＨＣＯ３を先の溶液に添加してｐＨ＝約９にした。溶液を凍結乾燥機で蒸発させ、最小の水に溶解した。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ−７５単離後に凍結乾燥機によって白色固体１２３．３ｍｇ（７８．７％収率）を収集した。
【０１４２】
（実施例７）
サイクラルのヨウ化αメチルチロシン（ＡＭＴ）との反応
類似の反応条件を使用して、他のサイクラル標的剤複合物を調製することができた。
【０１４３】
【化２９】
2009534381.tif 000030
Ａ．Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四置換ＡＭＴの実施例
Ｉ−ＡＭＴ２８６．４ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）を、サイクラル３２．２ｍｇ（０．１５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン８３．６μＬ（０．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。混合物を窒素雰囲気下で１６時間、７０℃で撹拌し、蒸発させて揮発物を除去した。１Ｎ−塩酸水溶液５ｍＬを、蒸発残渣のエタノール５ｍＬ中溶液に注いだ。反応混合物を濃縮器なしに６０℃で３０分間加熱し、冷却した。１Ｎ−ＮａＨＣＯ３を先の溶液に添加してｐＨ＝約９にした。溶媒を減圧下で除去し、残渣を最小の水に溶解した。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ−７５単離後に凍結乾燥機によって白色固体９１．３ｍｇ（５２．７％収率）を収集した。
【０１４４】
Ｂ．Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’−三置換ＡＭＴの実施例
Ｉ−ＡＭＴ２８６．４ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）を、サイクラル４２．９ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン８３．６ｍｉｃｒｌＬ（０．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。混合物を窒素雰囲気下で１６時間、７０℃で撹拌し、蒸発させて揮発物を除去した。
【０１４５】
１Ｎ−塩酸水溶液５ｍＬを、蒸発残渣のエタノール５ｍＬ中溶液に注いだ。反応混合物を濃縮器なしに６０℃で３０分間加熱し、冷却した。１Ｎ−ＮａＨＣＯ３を先の溶液に添加してｐＨ＝約９にした。溶媒を減圧下で除去し、残渣を最小の水に溶解した。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ−７５単離後に凍結乾燥機によって白色固体７６．７ｍｇ（４１．７％収率）を収集した。
【０１４６】
Ｃ．Ｎ，Ｎ’−二置換ＡＭＴの実施例
Ｉ−ＡＭＴ２８６．４ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）を、サイクラル６４．３ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン８３．６μＬ（０．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。混合物を窒素雰囲気下で１６時間、７０℃で撹拌し、蒸発させて揮発物を除去した。１Ｎ−塩酸水溶液５ｍＬを、蒸発残渣のエタノール５ｍＬ中溶液に注いだ。反応混合物を濃縮器なしに６０℃で３０分間加熱し、冷却した。１Ｎ−ＮａＨＣＯ３を先の溶液に添加してｐＨ＝約９にした。溶媒を減圧下で除去し、残渣を最小の水に溶解した。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ−７５単離後に凍結乾燥機によって白色固体５２．３ｍｇ（２５．９％収率）を収集した。
【０１４７】
Ｄ．Ｎ−一置換ＡＭＴの実施例
Ｉ−ＡＭＴ２８６．４ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’−トリス（トリフルオロアセチル）−サイクラル（実施例１〜３より）３０１．４ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン８３．６ｍｉｃｒｌＬ（０．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。混合物を窒素雰囲気下で６時間、７０℃で撹拌し、蒸発させて揮発物を除去した。１Ｎ−炭酸カリウム２ｍＬを、蒸発残渣のメタノール５ｍＬ中溶液に注ぎ、４０℃で１時間静置した。
【０１４８】
１Ｎ−塩酸水溶液９ｍＬを先の溶液に添加した。反応混合物を濃縮器なしに６０℃で３０分間加熱し、冷却した。１Ｎ−ＮａＨＣＯ３を先の溶液に添加してｐＨ＝約９にした。溶媒を減圧下で除去し、残渣を最小の水に溶解した。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ−７５単離後に凍結乾燥機によって白色固体２３３．４ｍｇ（８６．５％収率）を収集した。
【０１４９】
（実施例８）
サイクラルのスルホン化αメチルチロシン（ＴｓＯ−ＡＭＴ）との反応
本明細書に提示したものに類似の反応条件を使用して、他のサイクラル標的剤複合物を調製することができる。
【０１５０】
Ａ．Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四置換ＡＭＴの実施例
【０１５１】
【化３０】
2009534381.tif 000031
ＴｓＯ−ＡＭＴ３１３ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）を、サイクラル３２．２ｍｇ（０．１５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン１６７．２μＬ（１．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。反応は、先の実施例７−１）に従った。白色固体７２．３ｍｇ（４１．７％収率）を収集した。
【０１５２】
Ｂ．Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’−三置換ＡＭＴの実施例
ＴｓＯ−ＡＭＴ３１３ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）を、サイクラル４２．９ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン１６７．２ｍｉｃｒｌＬ（１．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。反応は、先の実施例７−２）に従った。白色固体５６．７ｍｇ（３０．８％収率）を収集した。
【０１５３】
Ｃ．Ｎ，Ｎ’−二置換ＡＭＴの実施例
ＴｓＯ−ＡＭＴ３１３．０ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）を、サイクラル６４．３ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン１６７．２μＬ（１．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。反応は、先の実施例７−３）に従った。白色固体４５．４ｍｇ（２２．１％収率）を収集した。
【０１５４】
Ｄ．Ｎ−一置換ＡＭＴの実施例
ＴｓＯ−ＡＭＴ３１３．０ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’−トリス（トリフルオロアセチル）−サイクラル（実施例１〜３より）３０１．４ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン１６７．２μＬ（１．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水）１０ｍＬ中溶液に入れた。反応は、先の実施例７−４）に従った。白色固体１９７．２ｍｇ（７３．１％収率）を収集した。
【０１５５】
（実施例９）
Ｎ４誘導体を使用する画像化
Ａ．材料および方法
サイクラムのテトラ酢酸マンノース複合体との反応（Ｎ４−ＤＧ−サイクラム）
ＤＭＦ５ｍＬ中１，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−トリフルオロメタンスルホニル−β−Ｄ−マンノピラノース（３００ｍｇ、０．６２５ｍｍｏｌ）を、１，４，８，１２−テトラアザシクロペンタデカン（Ｎ４）（２５０．２ｍｇ、１．２３７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１７４マイクロＬ、１．２４９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ５ｍＬ中混合物に添加した。反応混合物を室温で６時間撹拌した。反応溶媒を、高真空下、４０〜４５℃で乾燥するまで蒸発させた。次いで、１，４−ジオキサン溶液（１０ｍＬ）を添加した。沈殿物を濾過した。塩酸（４Ｎ）の１，４−ジオキサン（２ｍＬ、８ｍｍｏｌ）中溶液を添加した。混合物を氷浴中で冷却した。混合物をブフナー漏斗で濾過し、ジエチルエーテル（２×５ｍＬ）で洗浄した。濾液を乾燥するまで蒸発させ、白色固体３８３．１ｍｇ（９０．８％）を得た。１Ｈ−  ＮＭＲ／Ｎ４−ＤＧ  d  （ｐｐｍ）８．５０  （ｓ，  １Ｈ），  ３．９８−４．０１  （ｍ，  １Ｈ），  ３．７６  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．５４−３．６０  （ｍ，  ９Ｈ），  ３．３８−３．４５  （ｍ，  ８Ｈ），  ３．３１−３．３７  （ｍ，  １Ｈ），  ３．１８−３．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ２．０２−２．３１  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．１５  （ｓ，  １２Ｈ）．    １３Ｃ−  ＮＭＲ／Ｎ４−ＤＧ  d  （ｐｐｍ）  １９７．３，  １７５．２，  １７０．４，  １６５．６，  ６７．０，  ６６．８，  ６６．４，  ５１．７，  ４５．３，  ４４．０，  ４３．６，  ４３．２，  ４２．９，  ４２．５，  ４１．９，  ３８．６，  ３７．５，  ３７．３，  ３１．８，  １９．５，  １９．３，  １４．５．合成スキームを図１に示す。
【０１５６】
Ｎ４−ＤＧ（Ｎ４−ＤＧ−サイクラム）の放射性標識
Ｎ４−ＤＧ（５ｍｇ）を、水０．２ｍｌに溶解した。塩化スズ（ＩＩ）溶液（０．１ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌ）を添加した。ナトリウム過テクネチウム酸（Ｎａ９９ｍＴｃＯ４、３７〜３７０ＭＢｑ、Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ、テキサス州ヒューストン）を添加した。最後に、この溶液に水を添加して、体積を１ｍｌに調節した。放射化学的純度は、メタノール：酢酸アンモニウム（１：４）で溶出するＴＬＣ（ＩＴＬＣ  ＳＧ、Ｇｅｌｍａｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、ミシガン州アナーバー）によって決定した。放射性ＴＬＣ分析（Ｂｉｏｓｃａｎ、ワシントンＤＣ）から、放射化学的純度は９７％超であった。
【０１５７】
６８Ｇａ標識については、１Ｎ  ＨＣＬを使用して６８Ｇｅ／６８Ｇａ発生器（Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、カリフォルニア州バレンシア）から６８Ｇａを溶出した。ＧａＣｌ３担体を添加するか、または担体を添加しないで、酸性溶液を乾燥するまで蒸発させた。溶液を水で再構成した。次いで、水０．２ｍｌに溶解したＮ４−ＤＧ（５ｍｇ）を、放射性溶液に添加した。
９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧ（Ｎ４−ＤＧ−サイクラム）およびＮ４−ＤＧ−サイクラル）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞取込み
２つの異なる細胞株（ヒト肺ＮＳＣＬＣ  Ａ５４９、胸部１３７６２）を、細胞取込みアッセイで使用した。細胞株は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（メリーランド州ロックビル）から得た。各ウェル５０，０００を含有する１２ウェルの組織培養プレートに、細胞を入れた。９９ｍＴｃ−および６８Ｇａ−Ｎ４−ＤＧ４μＣｉ（０．１４８ＭＢｑ）またはＮ４（０．１ｍｇ／ウェル）を各ウェルに添加した。放射性トレーサーを用いて、３７℃において異なる間隔で細胞をインキュベートした。インキュベーション後、氷冷リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で細胞を２回洗浄し、トリプシン溶液０．５ｍｌでトリプシン処理した。次いで細胞を収集し、放射能をγカウンターによって測定した。データは、３つの測定値の平均±ＳＤパーセント取込み比で表した。
【０１５８】
乳房の腫瘍を担持するラットにおける９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧの生体内分布
動物は、Ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｔｅｘａｓ  Ｍ．Ｄ．Ａｎｄｅｒｓｏｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆａｃｉｌｉｔｙに収容されていた。動物（ラットおよびウサギ（以下参照））を含む全ての手順は、Ｍ．Ｄ．Ａｎｄｅｒｓｏｎ  Ａｎｉｍａｌ  Ｕｓｅ  ａｎｄ  Ｃａｒｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによって承認されているものである。２５−ゲージ針を使用して、Ｆｉｓｃｈｅｒ−３４４ラット（１５０±２５ｇ）（Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ、インディアナ州インディアナポリス）（ｎ＝１８）に、脚の腰部においてラット乳腺腺癌細胞（げっ歯類１匹当たり１０６個の細胞）を皮下接種した。接種後、この研究を１２〜１５日実施した。約１ｃｍの腫瘍寸法を測定した。９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧを使用して生体内分布の研究を実施した。各群が時間間隔（０．５、２、および４時間、ｎ＝３／時点）を表し、１化合物当たり合計９匹のげっ歯類を含む３つの群にげっ歯類を分割した。注射活性は、ラット１匹当たり２５±０．５μＣｉ（０．９２５±０．０１９ＭＢｑ）であった。９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧの注射質量は、げっ歯類１匹当たり０．１ｍｇであった。放射性トレーサーの投与後、ラットを屠殺し、選択組織を摘出し、秤量し、放射能を計数した。各サンプルのトレーサーの生体内分布を、組織湿重量１グラム当たりの注入用量パーセンテージ（ＩＤ／ｇ％）として算出した。腫瘍／非標的組織の計数密度比を、対応するＩＤ／ｇ％値から算出した。
【０１５９】
シンチグラフィーによる画像研究
Ｆｉｓｃｈｅｒ３４４雌ラット（１５０±２５ｇ）（Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ、インディアナ州インディアナポリス）に、１３７６２腫瘍細胞株懸濁液（ラット１匹当たり１０６個の細胞／、Ｆｉｓｃｈｅｒラットに特異的な腫瘍細胞株）からの乳房腫瘍０．１ｍｌを後脚において皮下接種した。接種後、画像研究を１２〜１５日実施した。約１〜１．５ｃｍの腫瘍寸法を測定した。シンチグラフィーによる画像は、Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（イリノイ州ホフマンエステーツ）製のＭ−カメラを使用して得た。カメラには、低エネルギー平行孔コリメーターが備えられていた。視野は、５３．３ｃｍ×３８．７ｃｍである。固有空間分解能は３．２ｍｍであり、画素寸法は１９．１８ｍｍ（３２×３２、ズーム＝１）〜０．１８７ｍｍ（１０２４×１０２４、ズーム＝３．２）である。この系は、低エネルギーの高解像度コリメーター（９９ｍＴｃで必要とされる）で、少なくとも１７２計数／分（ｃｐｍ）／μＣｉの平面感度（ｐｌａｎａｒ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）および４〜２０ｍｍの空間分解能に設計されている。ＰＥＴ画像研究にはｕＰＥＴを使用した（ラット１匹当たり０．５ｍＣｉ）。
【０１６０】
９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧまたは９９ｍＴｃ−Ｎ４（ラット１匹当たり０．３ｍＣｉ；ウサギ１匹当たり０．１質量ｍｇ）を、腹腔内注入して０．５〜４時間直後に、平面シンチグラフィーを得た。放射性トレーサー蓄積を比較するために、ＲＯＩ（ピクセル当たりの対象領域数）を決定した。腫瘍および筋肉の間のＲＯＩ計数を使用して、腫瘍対非腫瘍比を算出した。
【０１６１】
Ｂ．結果
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞取込み研究
試験した癌細胞株において、インキュベーション時間の関数としての９９ｍＴｃ−または６８Ｇａ−Ｎ４−ＤＧまたは９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＡＭＴの取込み増加があった（図２、図３、図４Ａ〜Ｃ）。対照群としての９９ｍＴｃ−Ｎ４の取込みは、いずれの時点でも０．５％未満であった。
【０１６２】
生体内分布およびシンチグラフィーによる画像研究
腫瘍を担持するラットにおける９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧの生体内分布は、時間の関数としての腫瘍対組織の計数密度比の増加を示した（表２）。腫瘍を担持する動物モデルの平面画像によって、９９ｍＴｃ−または６８Ｇａ−Ｎ４−ＤＧ（図５Ａ〜Ｂ、図６、図７）およびＮ４−ＡＭＴ（図９、図１０）で腫瘍が明確に視覚化され得ることが確認された。コンピューターでアウトラインされた対象領域（ＲＯＩ）は、９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧ群における腫瘍／バックグラウンド比が、時間の関数として増加したことを示した（図８）。最適な画像時間は、ラットモデル１匹当たり１時間であった。
【０１６３】
【表２】
2009534381.tif 000032
データは３匹の動物からの平均±標準偏差を示す
本明細書に開示および特許請求されている組成物および方法の全ては、過度の実験なしに本開示に照らして行われ遂行され得る。本発明の組成物および方法は、好ましい実施形態に関して記載されているが、本明細書に記載の組成物および方法、ならびに本方法のステップまたはステップの連続において、本発明の概念、精神、および範囲から逸脱することなく変更を行い得ることが、当業者には明らかとなろう。より具体的には、化学的および生理学的両方に関係する幾つかの薬剤は、本明細書に記載の薬剤に代替することができると共に、同じまたは類似の結果が達成されることが明らかとなろう。当業者に明らかである全てのかかる代替および改変は、添付の請求の範囲によって定義されるように、本発明の精神、範囲、および概念に含まれるとみなされる。
【０１６４】
（参考文献）
以下の参考文献は、本明細書中に記載されたものに対して補充するような例示的な手法または他の詳細を提供する範囲において、参考として本明細書中に具体的に援用される。
【０１６５】
【数１】
2009534381.tif 000033
【０１６６】
【数２】
2009534381.tif 000034
【図面の簡単な説明】
【０１６７】
【図１】Ｎ４−ＤＧの合成の図である。
【図２】２３１乳癌細胞における９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧ（サイクラム）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞取込みのグラフである。１ウェル当たり５０，０００個の細胞をプレートに入れ、密集度７０〜８０％に達するまで静置した。トレーサーを１ウェル当たり４μＣｉで投与し、３７℃で１〜３時間インキュベートした。次いで細胞を回収し、放射能を計数し定量化した。
【図３】ヒト肺癌細胞における６８Ｇａ−Ｎ４−ＤＧ２（サイクラム）の細胞取込みのグラフである。Ａ５４９細胞を使用するｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞取込みは、６８Ｇａ−Ｎ４−ＤＧの取込みの増大を示したが、６８Ｇａ−Ｎ４は乏しい取込みを示した。
【図４Ａ】ラット乳房腫瘍細胞における６８Ｇａ−Ｎ４−ＤＧ２（サイクラム）の細胞取込みのグラフである。１３７６２細胞を使用するｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞取込みは、６８Ｇａ−Ｎ４−ＤＧの取込みの増大を示したが、６８Ｇａ−Ｎ４は乏しい取込みを示した。
【図４Ｂ】９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧ（サイクラル）の細胞取込み研究のグラフである。１ウェル当たり５０，０００個の細胞をプレートに入れ、密集度７０〜８０％に達するまで静置した。トレーサーを１ウェル当たり４μＣｉで投与し、３７℃で０．５〜２時間インキュベートした。次いで細胞を回収し、放射能を計数し定量化した。
【図４Ｃ】１３７６２乳癌細胞株における９９ｍＴｃ−標識Ｎ４、ビオチン、ＡＭＴ、およびＤＯＴＡ化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究のグラフである。１ウェル当たり５０，０００個の細胞をプレートに入れ、密集度７０〜８０％に達するまで静置した。トレーサーを１ウェル当たり４μＣｉで投与し、３７℃で０．５〜１．５時間インキュベートした。
【図５Ａ】６８Ｇａ−Ｎ４−ＤＧ対１８Ｆ−ＦＤＧ（ｕＰＥＴ）の図である。類似の分布パターンが、６８Ｇａ−Ｎ４−ＤＧ（サイクラム）と１８Ｆ−ＦＤＧとの間で観測された。
【図５Ｂ】６８Ｇａ−Ｎ４のμＰＥＴ画像である。乳房腫瘍を担持するラットに４００μＣｉの６８Ｇａ−Ｎ４を注入した。注入２時間後の選択画像を示した。
【図６】腫瘍のあるラットおよび腫瘍のないラットの１０、６０、および１２０分における９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧ（サイクラム）画像である。ラット１匹当たり３００ｍＣｉを静脈注射した１０、６０、および１２０分後の、腫瘍（乳房の腫瘍細胞株）のあるラットおよび腫瘍のないラットにおける９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧの平面シンチグラフィーでは、５００，０００計数を得て腫瘍の可視化を実施した。腫瘍対非腫瘍比を示す。Ｔ＝腫瘍およびＭ＝筋肉。
【図７】乳房の腫瘍細胞株を担持するラットの１０、６０、および１２０分における９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧ（サイクラム）および９９ｍＴｃ−ＥＣ−ＤＧ画像の比較の図である。乳房の腫瘍細胞株を担持するラットの９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧおよび９９ｍＴｃ−ＥＣ−ＤＧの６０および１２０分の平面シンチグラフィー比較。（ラット１匹当たり３００ｍＣｉを静脈注射、５００，０００計数を得た）。腫瘍対非腫瘍比を示す。Ｔ＝腫瘍およびＭ＝筋肉。
【図８】乳癌細胞株を担持するラットおよび担持しないラットでの９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧ（サイクラム）画像の腫瘍対筋肉の計数密度比のグラフである。９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＤＧでは腫瘍対筋肉比の増大が観測された。
【図９】注入１時間および３時間直後のウサギにおける９９ｍＴｃ−Ｎ４および９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＡＭＴ（サイクラム）画像を比較する図である。腫瘍可視化を比較するための、ＶＸ２腫瘍を担持するウサギにおける９９ｍＴｃ−Ｎ４および９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＡＭＴの平面シンチグラフィー（ウサギ１匹当たり１ｍＣｉ、静脈注入）。９９ｍＴｃ−Ｎ４−ＡＭＴ群では腫瘍／筋肉比の増大が見られた。
【図１０】６８Ｇａマイクロ−ＰＥＴ画像である。乳房腫瘍を担持するラットに、４００μＣｉの６８Ｇａ−Ｎ４−ＡＭＴを注入した。注入２時間後に腫瘍（右脚）が画像化されたことが全身画像によって示された。
【図１】
2009534381.tif 000040
【図２】
2009534381.tif 000041
【図３】
2009534381.tif 000042
【図４Ａ】
2009534381.tif 000043
【図４Ｂ】
2009534381.tif 000044
【図４Ｃ】
2009534381.tif 000045
【図５Ａ】
2009534381.tif 000046
【図５Ｂ】
2009534381.tif 000047
【図６】
2009534381.tif 000048
【図７】
2009534381.tif 000049
【図８】
2009534381.tif 000050
【図９】
2009534381.tif 000051
【図１０】
2009534381.tif 000052
【手続補正書】
【提出日】平成21年4月22日(2009.4.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）直接共有結合、または（ｉｉ）少なくとも１つのリンカーおよびそれによる間接的共有結合によって標的リガンドに結合したＮ４化合物であって、該Ｎ４化合物は、式
【化１】
2009534381.tif 000053
を含み、
式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４は、アルキルであるか、またはそれぞれ独立に−（ＣＨ２）Ｘ−であり、
Ｘ＝２〜４であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、水素であるか、または該標的リガンドであり、
該標的リガンドは、疾患受容体標的リガンド、疾患細胞周期リガンド、腫瘍血管形成標的リガンド、腫瘍アポトーシス標的リガンド、保護基、アミノ酸、アミノ酸誘導体、血管新生／抗血管新生リガンド、ＤＮＡトポイソメラーゼ阻害剤、解糖マーカー、代謝拮抗リガンド、アポトーシス／低酸素リガンド、ＤＮＡ挿入剤、受容体マーカー、ペプチド、ヌクレオチド、抗生物質または抗真菌剤などの抗菌剤、臓器特異的リガンド、糖、グルコース擬態薬剤、タモキシフェン、エストロン、テトラ酢酸マンノース、または疎水性抗癌薬であり、該標的リガンドは、ヒドロキシ基またはハロゲン基を提示するか、あるいはその構造内に導入されたヒドロキシ基またはハロゲン基を有し得、
ただし、
Ａ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４がアルキルである場合、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は水素であり、
Ａ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４が−（ＣＨ２）Ｘ−である場合、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は該標的リガンドであり、
Ａ１およびＡ３が−（ＣＨ２）２−であり、Ａ２およびＡ４が−（ＣＨ２）３−である場合、またはＡ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４が−（ＣＨ２）２−である場合、該標的リガンドは、疾患受容体標的リガンド、疾患細胞周期リガンド、腫瘍血管形成標的リガンド、腫瘍アポトーシス標的リガンド、および保護基である、化合物。
【請求項２】
前記標的リガンドは、アミノ酸、アミノ酸誘導体、タモキシフェン、エストロン、テトラ酢酸マンノース、疾患受容体標的リガンド、疾患細胞周期リガンド、腫瘍血管形成標的リガンド、腫瘍アポトーシス標的リガンド、アポトーシス標的リガンド、組織標的リガンド、血管新生／抗血管新生リガンド、ＤＮＡトポイソメラーゼ阻害剤、解糖マーカー、代謝拮抗リガンド、アポトーシス／低酸素リガンド、ＤＮＡ挿入剤、受容体マーカー、ペプチド、ヌクレオチド、抗菌剤、臓器特異的リガンド、糖、またはグルコース擬態薬剤である、請求項１に記載のＮ４化合物。
【請求項３】
前記標的リガンドが、疾患受容体標的リガンドである、請求項２に記載のＮ４化合物。
【請求項４】
前記疾患受容体標的リガンドが、デオキシグルコースまたはグルコサミンである、請求項３に記載のＮ４化合物。
【請求項５】
標的リガンドに結合したＮ４化合物を含む化合物であって、該Ｎ４化合物は、式
【化２】
2009534381.tif 000054
を含み、
式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４は、それぞれ独立に−（ＣＨ２）Ｘ−であり、Ｘ＝２〜４であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立に、水素、
【化３】
2009534381.tif 000055
であり、ここでＲ４は、
【化４】
2009534381.tif 000056
であり、ただし、
Ａ１およびＡ３が−（ＣＨ２）２−であり、Ａ２およびＡ４が−（ＣＨ２）３−である場合、またはＡ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４が−（ＣＨ２）２−である場合、該標的リガンドは、疾患受容体標的リガンド、疾患細胞周期リガンド、腫瘍血管形成標的リガンド、腫瘍アポトーシス標的リガンド、または保護基である、化合物。
【請求項６】
Ａ１およびＡ３が−（ＣＨ２）２−であり、Ａ２およびＡ４が−（ＣＨ２）３−であるか、またはＡ１、Ａ２、Ａ３、およびＡ４が−（ＣＨ２）２−であり、該標的リガンドは、血管新生／抗血管新生リガンド、ＤＮＡトポイソメラーゼ阻害剤、解糖マーカー、代謝拮抗リガンド、アポトーシス／低酸素リガンド、ＤＮＡ挿入剤、受容体マーカー、ペプチド、ヌクレオチド、抗生物質または抗真菌剤などの抗菌剤、臓器特異的リガンド、糖、グルコース擬態薬剤、腫瘍標的リガンドのような疾患受容体標的リガンド、グルコーストランスポーター、エストロゲン受容体、またはアミノ酸トランスポーターであり、特に該標的リガンドは、テトラ酢酸マンノース、α−β−チロシン、チロシン、チロシン誘導体、エストロン、タモキシフェン、またはαメチルチロシンであるか、または該標的リガンドはトリフルオロ酢酸エチルのような保護基である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
前記疾患受容体標的リガンドが、デオキシグルコースまたはグルコサミンである、請求項６に記載のＮ４化合物。
【請求項８】
前記標的リガンドが、アミフォスチン、アンギオスタチン、モノクローナル抗体Ｃ２２５、モノクローナル抗体ＣＤ３１、モノクローナル抗体ＣＤ４０、カペシタビン、（ｉ）セレコキシブ、（ｉｉ）ロフェコキシブ、および（ｉｉｉ）エトリコキシブのようなＣＯＸ−２阻害剤、デオキシシチジン、フラーレン、ハーセプチン、ヒト血清アルブミン、乳糖、黄体形成ホルモン、ピリドキサール、キナゾリン、サリドマイド、トランスフェリン、またはトリメチルリシンである、請求項５に記載の化合物。
【請求項９】
前記標的リガンドが、デオキシグルコース、グルコサミン、テトラ酢酸マンノース、α−β−チロシン、チロシン、チロシン誘導体、エストロン、タモキシフェン、αメチルチロシン、またはトリフルオロ酢酸エチルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項１０】
前記標的リガンドは抗癌化合物であり、該標的リガンドは、疎水性であり、かつ必要に応じて、該化合物は疎水性であるか、または該標的リガンドは糖である、請求項５に記載の化合物。
【請求項１１】
Ａ１＝−（ＣＨ２）３−であり、Ａ２〜Ａ４は−（ＣＨ２）２であるか、
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−であり、Ａ２〜Ａ４＝−（ＣＨ２）３−であるか、
Ａ１〜Ａ４＝−（ＣＨ２）３−であるか、
Ａ１＝−（ＣＨ２）４−であり、Ａ２〜Ａ４＝−（ＣＨ２）３−であるか、
Ａ１およびＡ２＝−（ＣＨ２）４−であり、Ａ３およびＡ４＝−（ＣＨ２）３−であるか、
Ａ１およびＡ３＝−（ＣＨ２）３−であり、Ａ２およびＡ４＝−（ＣＨ２）４−であるか、
Ａ１＝−（ＣＨ２）３−であり、Ａ２〜Ａ４＝−（ＣＨ２）４−であるか、または
Ａ１〜Ａ４＝−（ＣＨ２）４−である、請求項５に記載の化合物。
【請求項１２】
Ａ１＝−（ＣＨ２）２−であり、Ａ２＝−（ＣＨ２）３−であり、Ａ３＝−（ＣＨ２）２−であり、そしてＡ４＝−（ＣＨ２）２−または−（ＣＨ２）４であるか；あるいは
Ａ１〜Ａ３＝−（ＣＨ２）２であり、Ａ４＝−（ＣＨ２）３−または−（ＣＨ２）４あり；
そして前記標的リガンドは、請求項において規定される通りであり、特に、該標的リガンドは、（ｉ）腫瘍標的リガンド、（ｉｉ）グルコーストランスポーター、（ｉｉｉ）エストロゲン受容体、もしくは（ｉｖ）アミノ酸トランスポーターのような疾患受容体標的リガンドであるか、またはトリフルオロ酢酸エチルのような保護基である、請求項５に記載の化合物。
【請求項１３】
前記化合物は金属原子または放射線核種にキレート化されており、特に該金属原子は放射性ではなく、かつ銅、コバルト、白金、鉄、ヒ素、レニウム、またはゲルマニウムであるか、あるいは該放射性核種が、９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、もしくは６２Ｃｕである、請求項５に記載の化合物。
【請求項１４】
ヒトおよび獣医学用の医薬における使用のための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１５】
癌の処置における使用のための、請求項１または５に記載の化合物。
【請求項１６】
画像化法における使用のための、請求項１または５に記載の化合物。
【請求項１７】
前記癌の処置は、ヒトのような哺乳動物におけるものである、請求項１５または１６に記載の化合物。
【請求項１８】
前記化合物は、９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、または６２Ｃｕにキレート化されている、請求項１５または１６に記載の使用のための化合物。
【請求項１９】
前記化合物は、第２の抗癌化合物または放射線治療もしくは外科手術と組み合わせて使用される、請求項１８に記載の癌の処置における使用のための化合物。
【請求項２０】
前記画像化法は、ＰＥＴ、ＰＥＴ／ＣＴ画像化、ＳＰＥＣＴ、またはＳＰＥＣＴ／ＣＴ画像化を含む、請求項１６に記載の使用のための化合物。
【請求項２１】
請求項１または５に記載の化合物、および塩化スズ（ＩＩ）またはトリフェニルホスフィンのような還元剤を含む、キット。
【請求項２２】
（ｉ）９９ｍＴｃ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、１８３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、１１１Ｉｎ、１８３Ｇｄ、５９Ｆｅ、２２５Ａｃ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、４５Ｔｉ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、または６２Ｃｕのような放射線核種、（ｉｉ）ビタミンＣ、トコフェロール、ピリドキシン、チアミン、またはルチンのような抗酸化剤、あるいは（ｉｉｉ）グルコヘプトン酸塩、グルコン酸塩、グルカリン酸塩、クエン酸塩、または酒石酸塩のような遷移キレート化剤、をさらに含む、請求項２１に記載のキット。
【国際調査報告】
2009534381.tif 000057