(57)【要約】  標的物質（８）は、物質が、物質の温度を下げるために最初に冷凍チャンバ（３１）に入れられ、次に標的物質の乾燥を促進するために真空が適用される別の真空チャンバ（３２）の中に入れられる冷凍乾燥プロセスを受ける。キャリヤ（１０）及び標的物質（８）は冷凍チャンバ（３１）から別の真空チャンバ（３２）に移されるため、環境をより厳密に管理することができ、冷凍から乾燥への循環はより高速とすることができる。このようにして、キャリヤ（１０）及び標的物質（８）は、取り囲むチャンバ及び装置が完全なサイクルにさらされることなく完全温度循環にさらされる。これは、時間及びエネルギーの費用を削減する。本技法は、冷凍乾燥試薬を使用するバイオセンサを製造するために特に適している。【選択図】図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
標的物質を冷凍乾燥するプロセスであって、
キャリヤによって搬送される標的物質を提供することと、
該標的物質の温度を下げるために該キャリヤ及び標的物質を冷凍チャンバの中に渡すことと、
該標的物質の乾燥を促進するために真空が適用される別の真空チャンバに該キャリヤ及び標的物質を渡すことと、
該真空チャンバから該キャリヤ及び標的物質を取り除くことと、
を含むプロセス。
【請求項２】
該標的物質が、該真空チャンバから該キャリヤが取り除かれた後に固化した標的物質を生じさせる初期液体物質を備える請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
該標的物質が電気活性物質を備える請求項２に記載のプロセス。
【請求項４】
該キャリヤ及び標的物質が該冷凍チャンバから該真空チャンバに直接的に渡される任意の前記請求項のプロセス。
【請求項５】
該プロセスが、一連のそれぞれのキャリヤが該冷凍チャンバ及び真空チャンバを順々に通される連続プロセス又は準連続プロセスとして操作される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項６】
該冷凍チャンバが、キャリヤ及び標的物質が該チャンバを連続してそれぞれ通過中に、及び通過の間に周囲を大幅に下回る冷凍温度で保持される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項７】
該冷凍チャンバ及び／又は該真空チャンバが、冷凍動作又は真空適用中に密封される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項８】
該標的物質が該キャリヤを備えるウェル内に沈殿される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項９】
該キャリヤが電気化学電極センサを備える任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項１０】
該キャリヤが、複数の電気化学電極センサを担持する下地材又は基板を備える任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項１１】
該冷凍チャンバ及び真空チャンバが一方のチャンバから他方のチャンバへの該キャリヤ及び標的物質の直接的な移行のために並列関係で配置される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項１２】
該冷凍チャンバと該真空チャンバの間の該キャリヤの移行のためにコンベヤ手段が提供される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項１３】
移行中、該キャリヤが該冷凍チャンバと真空チャンバの両方に同時に存在する請求項１２に記載のプロセス。
【請求項１４】
該冷凍チャンバ内で該キャリヤ及び標的物質に適用される温度が、実質的には−４０℃、又は−４０℃以下である任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項１５】
該冷凍チャンバ内で該キャリヤ及び該標的物質に適用される温度が、実質的には−６０℃、又は−６０℃以下である請求項１４に記載のプロセス。
【請求項１６】
該キャリヤ及び標的物質が、５分以下の間、該冷凍チャンバ内で該冷凍温度で保持される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項１７】
該真空チャンバ内で適用される該真空が、１０−２ｍｂａｒの領域まで圧力を削減する任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項１８】
該削減された真空圧力が、５分以下の間、該真空チャンバ内で適用される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項１９】
該真空が、該真空チャンバの密封から３０秒以下の内に動作真空に達する形態に従って適用される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項２０】
該真空が、該真空チャンバの密封から１５秒以下の内に動作真空に達する形態に従って適用される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項２１】
該冷凍チャンバと該真空チャンバ間の該キャリヤ及び標的物質の該移行時間が、実質的に５秒以下である任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項２２】
該冷凍チャンバと該真空チャンバ間の該キャリヤ及び標的物質の該移行時間が、実質的に３秒以下である任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項２３】
該標的物質が該キャリヤのそれぞれのマイクロウェルの中に導入され、該マイクロウェルが
１）実質的には５０μｍから１０００μｍの範囲の深さ、及び／又は
２）０．１ｍｍから５ｍｍ（さらに典型的には０．８から１ｍｍ）の範囲の交差する側面寸法（つまり直径）
を有する任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項２４】
該標的物質が、１００ナノリットルから１０００ナノリットルの範囲のマイクロ量の用量で提供される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項２５】
該標的物質が、３００ナノリットルから７００ナノリットルの範囲のマイクロ量の用量で提供される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項２６】
該標的物質が、４００ナノリットルから６００ナノリットルの範囲のマイクロ量の用量で提供される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項２７】
該冷凍チャンバの中で、該標的物質がその崩壊温度以下に冷却される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項２８】
該真空チャンバの中で、該標的物質からの昇華がその崩壊温度以下の温度で発生する任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項２９】
該キャリヤ及び／又は該標的物質が、温度変化の影響を減速させるように配置される熱減速材手段を備える任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項３０】
該熱減速材手段が、（プラスチックシート又は層等の）断熱装置を備える請求項３０に記載のプロセス。
【請求項３１】
該断熱装置が該キャリヤのためのバッキング層及び／又は外装層を備える請求項３０に記載のプロセス。
【請求項３２】
該熱減速材手段が熱伝導性素子を備える請求項２９から３１のいずれかに記載のプロセス。
【請求項３３】
該熱減速材手段が、該冷凍チャンバに進入する前に適用され、該減速材手段が処理後に取り除かれる請求項２９から３２のいずれかに記載のプロセス。
【請求項３４】
冷却中、該冷凍チャンバにおける温度低下が毎分５Ｃから毎分１５０Ｃの範囲内になるように制御される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項３５】
該真空チャンバ内で、不活性ガスの流入（ブリード）が該真空の適用中に提供される任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項３６】
該不活性ガスが窒素である請求項３５に記載のプロセス。
【請求項３７】
サイクル中、又はサイクルの間に、該冷凍チャンバ及び／又は該真空チャンバが不活性ガスでパージされる任意の前記請求項に記載のプロセス。
【請求項３８】
該パージガスが窒素である請求項３７に記載のプロセス。
【請求項３９】
該真空チャンバと冷凍チャンバの両方ともがパージされる請求項３７又は３８に記載のプロセス。
【請求項４０】
キャリヤ上の溶液の中に電気活性試薬物質を沈殿させることと、該電気活性試薬物質を冷凍乾燥させるために、任意の前記請求項に記載の冷凍乾燥プロセスを操作することとを含むバイオセンサ素子を製造する方法。
【請求項４１】
液体標的物質を冷凍乾燥させる装置であって、
中で該標的物質の温度を下げるための冷凍チャンバと、
該冷凍チャンバに隣接し、該冷凍チャンバから出た後に該標的物質が渡され、該標的物質の乾燥を促進するために中で真空が適用できる真空チャンバと、
を備える装置。
【請求項４２】
該冷凍チャンバと関連付けられた冷蔵システムをさらに備え、該冷凍チャンバの中で冷凍環境を作り出すことができるようにする請求項４１に記載の装置。
【請求項４３】
該冷蔵システムが、互いに隣接して対向して配置される２つの冷却素子を備える請求項４１に記載の装置。
【請求項４４】
該冷却素子の間隔が調整可能である請求項４３に記載の装置。
【請求項４５】
該２つの冷却素子を近接させるための変位を調整する際に、該標的物質が該素子の一方又は他方によって運ばれる請求項４４に記載の装置。
【請求項４６】
該冷凍チャンバが、該標的物質のために、該冷凍チャンバへの進入及び該冷凍チャンバからの退出を許す入口手段及び出口手段を備える請求項４１から４５のいずれかに記載の装置。
【請求項４７】
該入口手段及び出口手段が密封可能である請求項４６に記載の装置。
【請求項４８】
バルブが該入口手段及び出口手段に設けられる請求項４７に記載の装置。
【請求項４９】
それぞれの回転式スリットバルブが、該入口手段及び出口手段に設けられる請求項４８に記載の装置。
【請求項５０】
該入口手段及び出口手段が、該冷凍チャンバを横切る該標的物質の移動軸である、実質的に共通した軸上で相互位置合わせされる請求項４６から４９のいずれかに記載の装置。
【請求項５１】
該輸送手段が、入口手段と出口手段の間の該チャンバの内部での該標的物質の輸送のために該冷凍チャンバの内部に設けられる請求項４６から５０のいずれかに記載の装置。
【請求項５２】
該輸送手段がコンベヤ装置を備える請求項５１に記載の装置。
【請求項５３】
該真空チャンバが、該標的物質のために、該真空チャンバへの進入及び該真空チャンバからの退出を許す入口手段及び出口手段を備える請求項４１から５２のいずれかに記載の装置。
【請求項５４】
該入口手段及び該出口手段が密封可能である請求項５３に記載の装置。
【請求項５５】
バルブが該入口手段及び出口手段に設けられる請求項５４に記載の装置。
【請求項５６】
それぞれの回転式スリットバルブが、該入口手段及び出口手段に設けられる請求項５５に記載の装置。
【請求項５７】
該入口手段及び出口手段が、該冷凍チャンバを横切る該標的物質の移動軸である、実質的に共通した軸上で相互位置合わせされる請求項５３から５６のいずれかに記載の装置。
【請求項５８】
該輸送手段が、入口手段と出口手段の間の該チャンバの内部での該標的物質の輸送のために該真空チャンバの内部に設けられる請求項５３から５７のいずれかに記載の装置。
【請求項５９】
該輸送手段がコンベヤ装置を備える請求項５８に記載の装置。
【請求項６０】
該真空チャンバの中で該適用された真空を生成する真空生成手段をさらに備える請求項４１から５９のいずれかに記載の装置。
【請求項６１】
該真空チャンバが、該真空の適用に続いて該真空チャンバの通気のための不活性ガス送達手段を備える請求項４１から６０のいずれかに記載の装置。
【請求項６２】
プロセスパラメータを制御する制御システムをさらに備える請求項４１から６１のいずれかに記載の装置。
【請求項６３】
正圧を該冷却チャンバ及び又は該真空チャンバに適用できるようにするように配置される加圧装置をさらに備える請求項４１から６２のいずれかに記載の装置。
【請求項６４】
該冷凍チャンバの該出口手段及び該真空チャンバの該入口手段が、
実質的に該装置を通る該サンプルの移動軸上で実質的に相互位置合わせされ、
標的物質の複数の標本用のキャリヤが、両方のチャンバの内部で同時に伸びることができるように互いに近接して配置され、
密封されたシュラウド又は導管により接続される、
請求項４１から６３のいずれかに記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は標的物質の冷凍乾燥法に関連し、特にサンプルアナライザ装置の電気化学セル内でその場で電気活性物質等の試薬を冷凍乾燥するために適した技法及び装置に関するが、これに限らない。
【背景技術】
【０００２】
多様な用途においてターゲット材を冷凍乾燥することが望ましく、通常は、冷凍乾燥プロセスの効果を削減することなくプロセスのためのサイクルタイムを最小限に抑えることが有益である。改良された技法及び装置が考案されてきた。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
第１の態様によれば、本発明は標的物質を冷凍乾燥する装置を提供し、装置は、
標的物質の温度を下げるための少なくとも１つの冷凍チャンバと、
冷凍チャンバに隣接し、冷凍チャンバから出た後に標的物質が渡され、標的物質の乾燥を促進するために中で真空を適用できる少なくとも１つの真空チャンバと、
を備える。
【０００４】
通常、標的物質はキャリヤに載せて搬送される。
【０００５】
追加の態様によれば、本発明は標的物質を冷凍乾燥するプロセスを提供し、プロセスは、
キャリヤによって運ばれる標的物質を提供することと、
標的物質の温度を下げるためにキャリヤ及び標的物質を別個の冷凍チャンバの中に渡すことと、
標的物質の乾燥を促進するために真空が適用される真空チャンバにキャリヤ及び標的物質を渡すことと、
真空チャンバからキャリヤ及び標的物質を取り除くことと、
を含む。
【０００６】
キャリヤ及び標的物質は冷凍チャンバから別個の真空チャンバに移されるため、環境をより厳密に管理することができ、冷凍から乾燥への循環はより高速とすることができる。このようにして、キャリヤ及び標的物質は、取り囲むチャンバ及び装置が完全なサイクルにさらされることなく完全温度循環にさらされる。これは、時間及びエネルギーの費用を削減する。
【０００７】
追加の態様によれば、本発明は、バイオセンサ素子を製造する方法を提供する。
【０００８】
キャリヤは、例えばストリップ又はシートであってよく、（通常は当初液体の形で導入される）ターゲット材がウェルに沈殿されてよい。
【０００９】
冷凍チャンバの処理は、存在する任意の液体（例えば水）及び水分が固体粒子になることを確実にする。真空／乾燥器の処理は、結晶が昇華し、固形の乾燥した残留ターゲット材を残すことを確実にする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、好ましくは、標的物質が１ナノリットルから１０００ナノリットルの量で液体の形（通常はウェル）でキャリヤの上又はキャリヤの中に沈殿される、少量の用途に特に適している。
【００１１】
発明の好適特長は、従属クレームで提示され、特定の実施形態に関して説明される。
【００１２】
本発明は、ほんの一例として、及び添付図面を参照して、特定の実施形態においてここでさらに説明される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
ここで添付図面の図１を参照すると、断面側面図に描かれている電気化学セル１は、非導電性の多孔質材から形成される基層２を備える。基層２は好ましくは５０から２５０μｍ、好ましくは約１２５μｍの厚さを有する。
【００１４】
非導電性の支持層３は、基層２の上に形成される。支持層３は、好ましくはＰＥＴから形成され、５０μｍから５００μｍの範囲、好ましくは２５０μｍ、１５０μｍ又は５０μｍの厚さを有する。
【００１５】
支持層３は、上に作用電極４が形成されるサポートを形成する。作用電極４は、好ましくはセル１の壁（複数の場合がある）の回りの連続バンドの形を取る。セル１が基部２の上に置かれるときの垂直方向のその寸法である作用電極４の厚さは、通常は０．０１から５０マイクロメートルである。作用電極の好ましく且つ可能な厚さは、我々の同時係属出願国際公開公報第０３／０５６３１９号に説明される通りである。
【００１６】
作用電極４は、好ましくは、例えば導電性インクの形を取る炭素から形成される。好ましい炭素系の導電性インクは、樹脂溶液の中で分散される炭素の懸濁液を備える。作業物質は、国際公開第０３／０５６３１９号に詳説されるような他の物質及びインクから形成されてよい。さらに、作用電極を形成するためには、同じ又は異なる物質の２つ又は３つ以上の層が使用されてよい。
【００１７】
やはり国際公開公報第０３／０５６３１９号に詳説されるような、通常はポリマー、プラスチック又はセラミックである絶縁材を備える誘電体層５は、作用電極４上に形成され、作用電極４を擬似基準電極６から絶縁する。通常、誘電体層５は厚さ１から１０００μｍである。誘電体層は複数の層から形成できるであろう。
【００１８】
セル１は、１個又は複数のウェル７を有するように形成される。
【００１９】
０．１ｍｍから５ｍｍのウェル直径は、特定の用途に応じて活用されてよい。非円形ウェルが使用される場合、長さ又は幅の寸法は、通常、０．１ｍｍから５ｍｍの範囲（さらに典型的には０．９から１ｍｍ）となる。通常、ウェル深さは、５０μｍから１０００μｍ、好ましくは５０μｍから５００μｍ、さらに好ましくは約１５０μｍから５０μｍの範囲となる。
【００２０】
基層２はウェル７の底部を形成し、多孔質膜の形を取ってよい。
【００２１】
セルの開口端は、例えば血液又は血漿等の試験対象のサンプルの成分に透過性である膜９で覆われてよい。膜は、例えば赤血球等の細胞に進入してはならないサンプルの成分をろ過して取り除くために使用されてもよい。
【００２２】
ここで図面の図２を参照すると、概略平面図の中には、前述されたような種類の、前述されたように作られる４つの電気化学セルを備えるセンサストリップ１０の層が描かれている。
【００２３】
センサストリップ１０は絶縁基板シート１１を備える。絶縁基板シート４上に形成されるのは、各４個のセルのそれぞれに１つづつ、４個の作用電極１２ａ、１２ｂ、１２ｃ及び１２ｄ、並びに４個の作用電極１２ａ、１２ｂ、１２ｃ及び１２ｄのそれぞれ１つと電気的に接触する４つの導電性トラック１２ｅ、１２ｆ、１２ｇ及び１２ｈのそれぞれを形成する材料のパターン化された層１２である。
【００２４】
簡単に見ることができるように、多様な層、つまり誘電体層１３及び擬似基準電極層１４はそれぞれ、ストリップ１０のそれらの実際の位置から側面方向に横にシフトされて描かれていることが理解される。
【００２５】
電気活性物質８はウェル７の中に入れられている。電気活性物質８は、多孔性の沈殿物を形成するために本発明によって冷凍乾燥される。測定サンプル（不図示）をウェル７の中に導入すると、電気活性物質８は溶解し、電気化学反応が発生してよく、測定可能な電流、電圧又は電荷がセル内で発生してよい。電気活性物質は、例えば我々の同時係属出願国際公開第０３／０５６３１９号にさらに詳しく説明される。
【００２６】
センサストリップ１０は、大多数のストリップ１０用の基板として働く下地材３０の上に形成される。基板下地材３０は、ストリップ１０が最終的に下地材から分けられると、それぞれのセルのＰＥＴ基層３を備えてよい。
【００２７】
電気活性物質は、液体の形（水溶液）で下地材３０の上で支えられるストリップのウェル７の中に導入される。ウェルは、通常、約１ｍｍの直径であり、測定された１回分（例えば０．４マイクロリットル）の液体が各ウェル７の中に導入される。次に、液体は本発明により冷凍乾燥プロセスを受ける。本発明の技法は、典型的には１ナノリットルから１０００ナノリットルの範囲の、さらに典型的には２００ナノリットルから７００ナノリットルの範囲で、最も典型的には２００ナノリットルから４００ナノリットルの範囲のマイクロ量の液体が入った一連のウェルを冷凍乾燥するために特に適している。
【００２８】
本発明の冷凍乾燥装置は、図３に示されるように冷凍チャンバ３１と、真空／乾燥器チャンバ３２とを備える。特定の処理要件に応じて、加温チャンバ３３が真空／乾燥器チャンバ３２の下流に設けられてよい。インフィードコンベヤ３５は冷凍チャンバ３１の上流に配置され、コンベヤはチャンバ３１と３２（及び、存在する場合はチャンバ３３）の内部に設けられる。アウトフィードコンベヤ３７は、装置を出るシート３０を回収するために設けられる。回転式のスリットバルブ３８ａと３８ｆがチャンバ３１と３３の入口と出口に設けられ、真空下にあってよい、又は真空下になくてよい。連続チャンバは、真空下にあるスリットバルブ３８ｂ、３８ｃ、３８ｄ及び３８ｅによって接続される。
【００２９】
マトリックスアレイの中で多くの電極ストリップ１０を形成する印刷層構造を備えるそれぞれの下地材３０は、インフィードコンベヤ３５のすぐ上流のウェル７充填ステーション（不図示）から送られる。結果として、インフィードコンベヤ３５上の定位置にあるとき、ウェルには冷凍乾燥される準備ができた液体の形を取る、測定された１回分の電気活性物質が入っている。
【００３０】
キャリヤ層の中へ、及びキャリヤ層の中からの熱伝達は、例えばサポートの上で、下地材３０を保持する、あるいは層を付加し、下地材３０と冷却プレートの間に障壁を形成する等の多くの方法で修正できる。
【００３１】
冷凍チャンバ及び真空乾燥器チャンバ３２の中に入る前に、下地材３０は、チャンバ内の処理特性を改変するために断熱されてよい。下地材の断熱は、特定の試薬及び物質の冷凍乾燥のために有益である場合がある方法で処理特性を改変できることが知られている。断熱は、下地材３０のために断熱裏張り及び又は外装材を使用することによって達成されてよい。金属シート又は（ＰＥ発泡シート等の）発泡断熱材は優れた結果を示すことが判明している。断熱材を下地材（あるいは本来センサストリップ／素子も）に提供することは、説明されるように処理に関していくつかの利点を有する。例えば、
１．断熱材は、冷凍乾燥システムに、又は冷却プレート自体に入る前に下地材又は素子に付けることができる。
２．断熱材は、標的物質を含むシートを、冷却プレートから分離する。
３．下地材に付着される場合、断熱材は処理に続いて取り外すことができなければならない。
【００３２】
断熱材は、それが下地材又は素子を、環境上の暴露条件、特に温度の変化によって影響される感受性から隔離する傾向があるために、このように説明される。したがって、断熱材は（金属性のヒートシンク等の）熱伝導性又はＰＥ発泡体等の非熱伝導性であってよい。断熱材は、熱減速を提供するとして代わりに説明できる。遮蔽、断熱材又はヒートシンクは、相応して熱減速材手段として特徴付けられてよい。熱減速の性質及び目的は、本書の後半にさらに説明される。
【００３３】
インフィードコンベヤ３５からチャンバの中に下地材を送り込むために、回転式スリットバルブ３８ａが閉鎖位置から、バルブの水平に位置合わせされたスリット通路４０を通って冷凍チャンバ３１の内部の中に下地材を送り込むことができる（図４に示されているような）開放位置に四分の一回転、回転する。下地材３０は冷凍チャンバ３１の中に入ると、それぞれの滑車の回りに巻き付けられた別々の周辺コンベヤバンド４３を備えるチャンバ内部コンベヤ装置の上で受け取られる。それぞれのコンベヤバンド４３が、下地材３０のそれぞれ向かい合った長手方向に通る周縁部の下になるように設けられる。コンベヤは、シート３０を、それがチャンバ内に完全に入るまで送り、コンベヤは、下地材３０上の基準マークが光ビームリミットスイッチを破壊すると動作を停止される。
【００３４】
冷凍チャンバ３１は上部冷蔵プレート４４及び下部冷蔵プレート４７を含む。冷蔵装置はチャンバ３１の外部に位置し、プレート４４、４７を冷却するために、チャンバの外壁を通ってチャンバの中へ導管接続部を介して熱伝導流体（通常はシリコーンオイル）を供給する。プレート４４、４７は少なくとも−４０℃という温度まで冷却される。１つの操作実施形態においては、プレート４４、４７は、−５８℃まで冷却される。下部プレートは、通常（図４の太線で示されるように）コンベヤバンド４３より下に配置される。それぞれの下地材がプレート４４、４７に関して中心に配置されると、下部プレートは（例えば空圧シリンダ及びシリンダ装置４２によって等）持ち上げられ、コンベヤから下地材３０を持ち上げ、それを上部冷蔵プレート４７との近接まで（通常は、上部プレートから３ｍｍ以内に）運ぶ。２枚の冷蔵プレート４４、４７をこのようにして近接することによって管理冷凍が達成される。冷蔵プレートの内の１枚又は両方は、層構造電極が印刷されていないゾーンで（つまり中立ゾーンで）下地材に接触し、冷凍段階の間のシートの湾曲を抑制するために、隆起、突起又は他の堂々と立つ構造物（例えば構造物４９）を備えてよい。所定の期間、２枚の冷蔵プレートの間に挟まれる隆起位置に保持した後に、下地材３０はプレート４４上で引き下げられ、コンベヤバンド４３上で置換される。下部プレート４４を持ち上げる速度及びタイミングは、冷凍状態を調整し、特定の要件を満たすために調節可能且つ可変である。特に、特定の例においては、物質の冷凍速度を修正する、改変する又は調整することが有益である場合がある。通常、結晶サイズの制御を保証するためには、高速冷凍（従って、冷凍チャンバ３１内で費やされる少ない総時間）と低速冷凍をうまく両立させる必要がある。
【００３５】
高速冷凍は、全体的な処理時間を実現可能な生産速度のための水準で保つことを可能にする。実験的には、技法の実現のための好適平均冷凍速度が毎分５℃から１５０℃の範囲にあることが判明した。これは、冷却プレートの温度及び下部プレートの上昇時間を制御することによって達成される。加えて、前述されたような下地材の断熱は、より一様な冷却を生じさせることが判明している。図５は、底部冷却プレートを上昇させること、及びシートの断熱の冷凍速度に与える影響を示す。トレース５０１は、断熱シートが使用され、下部冷却プレートが完全に引き下げられたままとなる実験を表す。トレース５０２は非断熱下地材３０を表し、下部冷却プレートは完全に引き下げられたままである。トレース５０３は、冷凍プロセスの開始直後に下部冷却プレートが上昇する断熱下地材についてである。トレース５０４は、下部冷却プレートが冷凍プロセスの開始直後に上昇する非断熱下地材についでである。図６は、冷却プレートが−５８℃に設定されているときのポリエチレン（ＰＥ）発泡断熱層の提供に対する冷凍速度の変化についての実験結果を示す。
【００３６】
冷凍チャンバ３１の中から下地材３０を送り出すために、チャンバ内コンベヤ４３が操作され、下地材１０は冷凍チャンバ３１から出るために、水平に位置合わせされた出口空気スリットバルブ３８ｂを通ってバルブのスリット通路４０の中に送り込まれる。
【００３７】
冷凍チャンバ３１の温度は実質的には、それぞれが各それぞれの下地材３０のサイクルを通過する前に、通過する間に、及び通過した後の冷蔵温度（−４０℃から−６０℃）で維持される。１つの下地材が冷凍チャンバ３１を出ると、出口スリットバルブ３８ｂが、次の連続する下地材が入口回転式スリットバルブ３８ａを介して進入するための準備が完了したチャンバを閉じ、密封する。下地材は、ウェル７の中に存在する液体の高速且つ完全な冷凍を確実にするために、典型的には１分から５分の範囲の、さらに典型的には約２分の期間、冷凍チャンバの冷たい環境で保持される。通常、冷凍チャンバ内のガス圧は大気圧を僅かに上回るように（例えば、窒素の５ｍＢａｒの領域で）制御され、特にスリットバルブ３８ａ、３８ｂが操作されるときには周辺空気の進入を防ぐためにこのように保持される。冷凍チャンバは、空気の進入を妨げるため、及びチャンバを常に乾燥した状態に保つために乾性ガス（例えば窒素）でパージされる。パージはたえずオンである。これにより、プロセス及び装置を湿度が高い環境で使用できるようになる。
【００３８】
冷凍乾燥された沈殿物が冷凍チャンバ内でその崩壊温度以下に冷却されることが重要である。崩壊温度は、物質が、それ自体の構造を支えることができない点まで軟化する点として定義される。
【００３９】
下地材は、出口スリットバルブ３８ｂを通って冷凍チャンバ３１から出ると、密封されたシュラウドダクト３７を通って真空／乾燥器入口空気スリットバルブ３８ｃを介して真空／乾燥器チャンバ３２の中に入り、真空／乾燥器入口空気スリットバルブはその水平に向けられたスリット通路４０を通過する下地材を受け取るためにその接合点に配置される。下地材３０は、真空／乾燥器チャンバ３２の内部に配置されるコンベヤ装置５３の上で受け取られる。コンベヤは下地材を完全にチャンバ内部に配置するために起動し、次に動作を停止される。コンベヤはシート３０を、それがチャンバ内部に完全に入るまで送り、コンベヤは、下地材３０上の基準マークが光ビームリミットスイッチを破壊すると動作を停止される。
【００４０】
次に、入口スリットバルブ３８ｃは、真空／乾燥器チャンバ３２を密封するために閉じられる。真空／乾燥器チャンバ３２内での密封から冷凍チャンバ３１内での密封への総移行時間は３０秒未満に、さらに好ましくは２０秒以下に抑えられる。したがって、下地材の前縁部は後縁部と実質的に同一の状態に露呈される。
【００４１】
乾燥チャンバ内の状態は、密封に続いて、及び周囲圧力で、周囲温度が例えば２０℃から２５℃の領域内にあるほどである。通常はオイルフリーのポンプ及びブースタ装置５７を含む真空システムは、真空／乾燥器チャンバ３２と動作可能なように関連付けられ、チャンバ内圧を迅速に且つ大幅に降下できるようにする。例えば、本発明の第１の形態によれば、真空／乾燥器チャンバを、チャンバの密封の直後の周囲圧力から約５分間の１０−２ｍｂａｒ圧力範囲に下げることが望ましい場合があり、迅速に、例えば１０秒以内に削減された真空レベルに達する。本発明に係る代替の形態においては、低真空圧力に類似する圧力低下が必要とされる場合があるが、ポンプは、より高速の圧力低下の第２の期間が後に続く圧力低下の初期の低速によってこれを達成するために制御される。
【００４２】
必要とされる期間、真空／乾燥器チャンバ３２内での減圧形態を操作した後に、チャンバ３２は、再びチャンバ内で大気圧が達成されるまで、不活性ガス（好ましくは、冷凍チャンバ３１内で実施される窒素パージと同様に窒素）で通気される（パージされる）。この時点で、出口スリットバルブ３８ｄはチャンバを開放するために操作され、コンベヤ５３は真空乾燥器チャンバの中から下地材を通すために起動される。出口スリットバルブ３８ｄは、前述されたスリットバルブ３８ｂ、３８ｃに類似しており、それらと同様に動作する。
【００４３】
前述されたように、冷凍乾燥された標的物質は、その崩壊温度以下に冷凍チャンバ内で冷却される。真空／乾燥器チャンバにおいては、好ましくは昇華温度も崩壊温度以下となるように調整される。昇華が発生する温度が、下地材３０の断熱によって調整できることが判明している。真空チャンバにおいては、通常、加熱プレートが下地材の上下に配置され、所望の温度（例えば２５℃）に設定される。（例えば、下地材３０の底部上に）断熱シートを追加すると多くの効果をあげることができる。最初に、シートが冷凍チャンバ３１と真空／乾燥器チャンバ３２の間を通過するにつれ、第２に真空／乾燥器チャンバ３２内に存在するときに断熱層は加温を低速化する。下地材３０を断熱することは、下地材の実際の温度が低下した結果昇華が発生する圧力の引き下げを生じさせることがあることが判明した。図７は、冷凍チャンバ（−５８℃に設定された冷却プレートで設定される）から真空チャンバ３２に移行された、断熱シート及び非断熱シートの実験により引き出された温度プロファイルを示す。冷凍チャンバから真空チャンバ３２への移行後のシートの温度差を示すプロファイルの部分だけが示されており、トレース７０１は非断熱シートを表し、トレース７０２は断熱シートを表し、トレース７０３は真空の適用を表す。
【００４４】
図８は、断熱（トレース８０１）、非断熱ＴＣ（トレース８０２）、非断熱ブランク下地材（トレース１０３）、及び断熱ブランク下地材（８０４）を備える総コレステロール（ＴＣ）センサ用のピラニ真空計を使用して実験的に測定される真空乾燥チャンバ３２内で測定された圧力の圧力トレースを示す。
【００４５】
このようにして、適切な断熱装置をセンサ及び下地材に使用することにより、冷凍乾燥プロセス及び昇華プロセスの（温度を含む）パラメータが、改良された効果を生み出し、優れた特性の乾燥沈殿物を生じさせるために調整できることを確実にできる。
【００４６】
チャンバ３２内の加熱プレートは、チャンバ又は環境上の周囲以下の温度で操作されることにより、特定の状況で代わりにチャンバを冷却するために操作されてよい。これに関連して、加熱プレートは、真空乾燥器チャンバ３２内に設けられる温度制御手段としてさらに正確に説明されてよい。
【００４７】
真空適用中に真空乾燥器チャンバ３２の中に不活性ガスの正の流れを導入すると、チャンバ内で達成される最終的な圧力が引き下げられることが判明している。この不活性ガスのブリードは、沈殿され、乾燥された物質からの水分除去の速度を加速すると考えられる。実験的に、窒素ガスブリードが使用された。結果として生じるサンプルは、そうでない場合に検出されるよりさらにひびが入り、より溶けやすかった。図９は、真空乾燥器チャンバ３２で達成される圧力に対する窒素の影響を示す。トレース９０１は、窒素ブリードがオンではない圧力を示す。トレース９０２は窒素ブリードがオンの圧力を示す。トレース９０３は窒素が（ブリードがオフの―ゼロに近似する―状態で）送達された窒素を表す。トレース９０４は、ブリードがオンの状態での窒素ブリード速度を示す。好ましいブリード速度の範囲はゼロから５５０ｃｃｍである。パージ及びブリードの想定は窒素の使用に関して説明されてきたが、他のガス、特に不活性ガスが適切である場合があることが理解される必要がある。
【００４８】
特定の実施形態では、下地材は真空乾燥器チャンバ３２を出て、これからの処理（ストリップ１０からの切削等）及び密封包装のために直接的に通過する。特定の実施形態では、この前に、下地材３０が真空乾燥器チャンバから、工場の露点を超えた温度で維持される加温チャンバ３３の中に入る加温段階が活用される。加温チャンバ３３は、コンベヤ５３に類似したコンベヤを含む。アウトフィードコンベヤ４７が装置の下流端に設けられる。加温チャンバは、真空乾燥器チャンバと類似した方法で、類似した理由のために（窒素等の）不活性ガスでパージされてよい。チャンバ３３内の加熱プレートは、特定の状況では、代わりに、チャンバ又は環境上の周囲以下の温度で操作されることによりチャンバを冷却するために操作されてよい。これに関連して、これは真空乾燥器チャンバ３１内に設けられる温度制御手段としてさらに正確に説明されてよい。
【００４９】
本発明の重要な優位点は、液体標的物質の効果のある高速冷凍乾燥が達成できるという点である。冷凍プロセスステップが実施されるチャンバとは別個の異なるチャンバで真空乾燥器チャンバ３２内の圧力を所望されるレベルまで、好適な形態に従い急速に減圧する能力を有することが特に有益である。これにより、標的物質中の液体を効果的に昇華し、高品質の乾燥した固形の残留物を残すことができる。キャリヤは冷凍チャンバから別個の真空チャンバに移されるため、環境をより厳密に管理することができ、冷凍から乾燥への循環はより高速とすることができる。このようにして、下地材キャリヤ及び標的物質は、取り囲むチャンバ及び装置が完全なサイクルにさらされることなく完全温度循環にさらされる。これは、時間及びエネルギーの費用を削減する。
【００５０】
本発明の技法及び装置は、（下地材の上に保持される、又は別の方法で）標的物質の冷凍及び真空乾燥を、別々の冷凍チャンバと真空乾燥器チャンバが活用される連続した又は準連続した方法で達成できるようにする。１つの加温チャンバ又は複数の冷凍チャンバを有することも可能である。本発明のシステムは、追加の真空乾燥器、冷凍チャンバ又は加温チャンバを、これが有益である状況で付加できるようにする。
【００５１】
代替装置では、多くの下地材が同時に（又は連続して）冷凍チャンバ及び又は真空乾燥器チャンバの中に送り込み、中から排出できることが予想される。液体試薬は、下地材の上に示された以外のコンテナ、ウェル又は容器に保持できるであろう。プロセス及び装置は、液体（特に添加された少量）の迅速且つ正確な冷凍乾燥が必要とされる他の状況に応用されるとして予想される。
【００５２】
本発明の追加の優れた説明及び解明を介して、以下の例が含まれる。
【００５３】
標準的な（非断熱）シート及び断熱シートが例示的な実験手順で使用された。
【００５４】
標準的な（非断熱）シートは、疎水性のメッシュ裏張りが付いた、穴をあけられた、あるいはレーザで穴があけられたかのどちらかのウェルを備えたスクリーン印刷された電極を構成した。
【００５５】
断熱シートは、非断熱シート用としてであったが、一時的に断熱材がシートの裏側に付着されている。断熱材はシールドエア（Ｓｅａｌｅｄ  Ａｉｒ）のＣｅｌｌ−Ａｉｒｅ（登録商標）の厚さ１ｍｍのポリエチレン発泡体である。
【００５６】
電極は、本明細書に、及び例えば国際公開第２００３５６３１９号パンフレットに開示されるとおりの標準電極である。
【００５７】
酵素混合
最終的な酵素混合の近似濃度：
０．１Ｍバッファ
５０ｍＭ  ＭｇＳＯ４
５％  ｗ／ｖグリシン
１％  ｗ／ｖミオイノシトール
１％  ｗ／ｖエクトイン
各種％の界面活性剤
８８．８ｍＭ媒体
合計〜１０７．５ｍｇ／ｍｌの酵素
【００５８】
計量配分
１．０．４μｌの酵素溶液がセンサストリップの全てのウェルの中に電子ピペットを使用して計量配分された。各酵素溶液は各酵素混合の圧力トレースを調べるために適した装置を作り出すために、穴をあけられたウェルを備えた断熱電極シートと非断熱電極シートの両方の全ての電極の中に計量配分された。
２．０．４μｌの酵素溶液が、センサストリップの４つすべてのウェルの中に電子ピペットを使用して計量配分された。各酵素溶液は、電気化学試験に適した装置を作り出すためにレーザで穴をあけられたウェルを備える断熱電極シート及び非断熱電極シートの両方の全ての電極の中に計量配分された。
冷凍乾燥
それらの上に何も計量配分されていない電極シートが、対象としての冷凍乾燥装置を介して通された。
計量配分されたシートは冷凍乾燥装置の中に装填され、以下の手順に従った。
【００５９】
2009518640.tif 000003
センサはいったん冷凍乾燥されると、低相対湿度環境で保管される。
【００６０】
例１Ａ：
Ｋ型熱電対がＰＥＴカード及び断熱ＰＥＴカード上に取り付けられた。これらの測定値はカードの、したがって冷凍チャンバの中の計量配分された混合物の温度プロファイルを示す。実験条件は、前項の一般的な試験に示された条件である。
【００６１】
例１：
アイボタンＤＳ１９２２Ｌ−Ｆ５０温度センサがＰＥＴカード及び断熱ＰＥＴカードの上に取り付けられた。これらの測定値は、カードの、したがって冷凍乾燥器システムを通して計量配分された混合物の温度プロファイルを示す。センサは４１℃で飽和するが、冷凍及び加温は冷却と加温のニュートンの法則を使用して推定可能であり、これらの実験では、冷却板のプログラムされた温度を変更する効果が調べられた。実験条件は、前項の一般的な試験に示された条件である。
【００６２】
2009518640.tif 000004
表１：冷却板温度の冷凍速度に対する影響を示す。
【００６３】
例２：
アイボタンＤＳ１９２２Ｌ−Ｆ５０温度センサがＰＥＴカード及び断熱ＰＥＴカードの上に取り付けられた。シールドエア（Ｓｅａｌｅｄ  Ａｉｒ）のＣｅｌｌ−Ａｉｒｅ（登録商標）の厚さ１ミリのポリエチレン発泡体が断熱層として使用された。これらの測定値は、カード及び冷凍乾燥器システムを通る計量配分された混合物が受ける温度プロファイルを示す。アイボタンセンサの感知限度は−４１Ｃであるが、冷凍及び加温は冷却と加温のニュートンの法則を使用して推定できる。実験条件は、前項の一般的な試験に示された条件である。
【００６４】
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表２：冷凍チャンバと真空チャンバの間の移動に真空が当初適用される温度に対して断熱カードの使用が与える影響
【００６５】
例３：
溶解試験
各適用の間に０．１秒の間隔をおいて６０回、２秒間に−０．４５Ｖの電位を印加し、電流を測定するためにＰＧ５８０定電位電解装置を使用して溶解試験を完了することによって、冷凍乾燥された沈殿物の電気化学的性能が評価された。窒素ブリードはゼロに設定された。電位サイクルが開始され、一度ゼロ点信号が記録され、２０μｌの脱脂された血清がウェルに適用された。各２秒の過渡状態の最後の測定電流が、試験された各ウェルの時間に応じてプロットされた。冷凍乾燥された沈殿物が溶解し、電極表面で削減される媒体を放出するにつれて、電流は時間とともに増加する。次に、媒体の溶解が終了すると電流は水平状態に達し、電流は単に拡散律速状態になる。電流がその拡散律速値に達する時刻がウェルごとに記録され、平均値は表３に報告される。
【００６６】
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表３：冷凍乾燥沈殿物の溶解の速度について電気化学的応答で測定した断熱カードの使用の与える影響
【００６７】
例４：
第１の実験の場合、窒素ブリードはゼロに設定された。窒素の正圧は適用されなかった。第２の実験では、窒素ブリードは、乾燥チャンバ内の圧力が１ｍｂａｒに達するとすぐに開放された。窒素流量は５６秒間その最大値（５５０ｓｃｃｍ）に留まってから、ゆっくりと減少し、それがオンにされた１３０秒後に０ｓｃｃｍに達した。
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【００６８】
例５：
実験条件は、前項の一般的な試験に示される条件である。
【００６９】
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表４：同じ量の溶液が４００ｎｌ又は８００ｎｌを含むただ単一列の滴で計量配分されるのか、又は２列の隣接する列の４００ｎｌの滴で計量配分されるのかによる、酵素溶液のための水除去の最大速度の変化の影響を示す。
【図面の簡単な説明】
【００７０】
【図１】電気化学セルの概略側面図である。
【図２】４個の電気化学セルを備えるセンサストリップの概略平面図である。
【図３】本発明に係るプロセスを操作する、本発明に係る例示的な装置の概略側面図である。
【図４】図３の装置の冷凍チャンバの概略側面図である。
【図５】さまざまな想定での冷凍チャンバ内での経時的な温度の影響を示すグラフである。
【図６】存在又はそうでなければ断熱層の存在に応じた冷凍速度の変化を示すグラフである。
【図７】異なる想定での真空乾燥器チャンバについて時間と対照して温度を示すグラフである。
【図８】異なる想定での真空乾燥器チャンバ内での圧力を示すグラフである。
【図９】異なる想定での真空乾燥器チャンバ内への窒素ブリードの影響を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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