(57)【要約】培地を光損傷から保護するための光バリアとして働く独自の収縮包装光保護ラベルによる光感受性培地の包装を提供する。2009518037.tif 000003
2009518037.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
光感受性培地を保持するように構成された取り外し可能な蓋を備えた容器；および
該光感受性培地を保護するために、該容器の外部を覆って有害な光を遮断するように構成された、1つまたは複数の窓を有する収縮包装ラベル
を含む、光感受性培地の容器アセンブリ。
【請求項２】
収縮包装ラベルの下で容器に近接し、窓の1つを通して見える温度ゲージをさらに含む、請求項1記載のアセンブリ。
【請求項３】
温度ゲージが約32〜40℃の温度を測定するように構成されている、請求項2記載のアセンブリ。
【請求項４】
温度ゲージが約0〜8℃の温度を測定するように構成されている、請求項2記載のアセンブリ。
【請求項５】
窓の1つが容器の内容物が見えるように構成されている、請求項1記載のアセンブリ。
【請求項６】
貼り付け式ラベルをさらに含む、請求項1記載のアセンブリ。
【請求項７】
貼り付け式ラベルが収縮包装ラベルの下で容器に貼り付けられ、該貼り付け式ラベルが窓の1つを通して見える、請求項6記載のアセンブリ。
【請求項８】
貼り付け式ラベルが収縮包装ラベルの上で容器に貼り付けられる、請求項6記載のアセンブリ。
【請求項９】
窓の１つが逆「T」字形である、請求項1記載のアセンブリ。
【請求項１０】
収縮包装ラベルがPETGで作られている、請求項1記載のアセンブリ。
【請求項１１】
光感受性培地；
該光感受性培地を保持するように構成された容器；
該光感受性培地を保護するために、該容器の外部を覆って有害な光を遮断するように構成された、1つまたは複数の窓を有する収縮包装ラベル；および
収縮包装ラベルの下で該容器に近接し、該窓の1つを通して見える温度ゲージ
を含む、光感受性培地パッケージキット。
【請求項１２】
容器内の光感受性培地の識別を含む情報が印刷された貼り付け式ラベルをさらに含む、請求項11記載のキット。
【請求項１３】
容器を保持するように構成された水浴バッグをさらに含む、請求項11記載のキット。
【請求項１４】
水浴バッグが透明であり、該水浴バッグを通して温度ゲージが見える、請求項13記載のキット。
【請求項１５】
光感受性培地が、リボフラビンを含む任意の培地；RPIM 1640；ダルベッコ最小必須培地(DMEM)；ハムF12；ウェイマウス；ウィリアムE；MEM；EMEM；199培地；MCDB 131；マッコイ5A；リーボビッツL-15；イスコフ；改変ダルベッコ培地；グラスゴーMEM；DMEM-F12；チオールまたは金属イオン(第二鉄イオンまたはシスチンなど)含有；培地；および光に曝露された場合に、直接、または培地中の他の成分との中間反応を介して細胞毒性ラジカル、化学物質、または化合物を生じる化合物または化学物質を含有する培地からなる群より選択される、請求項11記載のキット。
【請求項１６】
（a) 光感受性培地を提供する段階；
（b) 容器に該光感受性培地を充填する段階；
（c) 温度計を該容器に取り付ける段階；
（d) 該光感受性培地の注文を受ける段階；
（e) 該注文に対応する貼り付け式ラベルを作り出す段階；
（f) 該貼り付け式ラベルを該容器に貼り付ける段階；
（g) 該貼り付け式ラベルと位置合わせされたラベル窓を有する収縮包装ラベルを該容器にかぶせる段階；および
（h) 該収縮包装ラベルを加熱して該容器を覆う段階
を含む、光感受性培地パッケージキットを作製する方法。
【請求項１７】
細胞培養液容器を覆うことができる、遮光特性を有する収縮包装材料；および
収縮包装材料中の1つまたは複数ののぞき窓
を含む、細胞培養液容器アセンブリと共に使用するための収縮包装ラベル。
【請求項１８】
容器の蓋部分に対応する収縮包装材料にミシン目をさらに含む、請求項17記載の収縮包装ラベル。
【請求項１９】
窓の1つがラベル窓である、請求項17記載の収縮包装ラベル。
【請求項２０】
窓の1つが内容物窓である、請求項17記載の収縮包装ラベル。
【請求項２１】
収縮包装材料がPETGである、請求項17記載の収縮包装ラベル。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、細胞培養液の分野、より具体的には細胞培養液を保存するための収縮包装光保護ラベルを有する細胞培養液容器に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景情報
細胞培養液は、通常は実験室において(専門用語ではインビトロでという；ラテン語で「ガラス内で」の意味)、細胞を生物体外で維持するために用いられる。細胞培養液は、無菌の栄養系；通常、有機および無機物質の複雑な混合物から構成される。通常、細胞増殖または他の特定の挙動を促進するために、タンパク質増殖因子が加えられる。細胞を微生物から保護するか、または環境を安定化するためには、補助剤が加えられる。
【０００３】
細胞培養液は一般に、ねじ蓋付きの透明なプラスチックもしくはガラスの瓶、または場合によってはバッグ中に保存する。ラベル付けは一般に、容器の限られた範囲(一般に容器の表面積の25パーセント未満)を覆う貼り付け式の紙またはプラスチックに基づくラベルからなる。
【０００４】
培地は、細胞に液体の形態で添加する。生細胞が培地の成分を代謝するにつれて、重要な成分が枯渇していくと共に老廃物が産生され、よって頻繁に培地交換をする必要性が生じる。
【０００５】
培地は、液体であるため、冷蔵温度で保存し、かつ遮光すべきである。低温にすることで、重要な培地成分を枯渇させ得るタンパク質変性の通常の速度が遅くなる。光曝露により、成分を分解し、活性酸素種(ROS)を産生し得る、リボフラビン、チオール、金属イオン、および他の成分が関与する光化学反応が起こり、このROSが種々の機構を介して細胞に損傷を与え(Grzelak et al., 「Light-dependent generation of reactive oxygen species in cell culture media」, Free Radic. Biol. Med. 12:1418-1425; 2001(非特許文献1)を参照されたい)、DNA改変またはDNA変異を引き起こすため、可視光からの保護が必要である。室内の蛍光灯は、過酸化水素を含む光毒性産物を生じることが認められている(Stoien et al., 「Effect of near-ultraviolet and visible light on mammalian cells in culture II. Formation of toxic photoproducts in tissue culture medium by blacklight」, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 71:3961-3955; 1974(非特許文献2)；Wang et al., 「Effect of room fluorescent light on the deterioration of tissue culture medium」, In Vitro. 12: 19-22; 1976(非特許文献3)；およびWang et. al., 「Identification of hydrogen peroxide as a photoproduct toxic to human cells in tissue-culture medium irradiated with “daylight” fluorescent light」, In Vitro. 14:715-722; 1978(非特許文献4)を参照されたい)。トリプトファン、チロシン、ピリドキシン、および葉酸などの通常の培地成分は、これらの反応を増強し得る(Grzelak et al., 前記を参照されたい)。従来、培地中に血清を存在させることで、光産生ROSに起因する問題を最小限に抑えてきた。しかし、今日、哺乳動物細胞培養で一般に用いられる無血清または低血清合成培地では、ROSによって生じる細胞毒性がより一般的となり得る。
【０００６】
培地は、細胞代謝が起こる理想的な環境が提供されるように、37℃という温度で哺乳動物細胞に加える。培地を加える際の温度が低すぎると、細胞にショックが加わり、代謝の阻害または生存度の減少が起こり得る。これらの問題を回避するため、細胞培養液は通常温めてから細胞に加える。一般に、細胞培養液は、予め所定の温度に温めておいた「水浴」中の水に、培地を含む容器を浸すことによって、水浴中で温める。培地が少量必要である場合には、技術者が最初の容器から培地の一部を第2の滅菌容器に移すか(滅菌技法により)、または最初の瓶全体を水浴中で温める。現在の慣行は、細胞培養技術者が、容器内部の培地が適温に到達した時点を推定するというものである。これは通常、時間を見計らって、または容器の外側を触り、それが適温であると「感じる」かどうかを確認して行う。技術者が培地温度を誤って推定した場合には、短時間での培地温度の大きな変化によって起こるショックに起因して、細胞は代謝的に阻害されるか、生存度が減少するか、または極端な場合には死滅する恐れがある。
【０００７】
培地容器は水浴中の非滅菌水に直接曝露されるため、培地加温過程中に汚染が起こり得る。非滅菌水浴水中に存在する細菌、カビ、酵母、および他の微生物が培地容器の外側に残存し、これらの微生物が培地容器の外側から、加温した培地を細胞培養物に移す生物学的安全キャビネットなどの滅菌環境中に持ち込まれる可能性がある。技術者は通常、70%イソプロピルアルコールなどの殺菌溶液で培地瓶の外側を洗浄することにより、この危険を最小限に抑えている。
【０００８】
上記の問題を回避するために、細胞培養液を保存し操作する方法が必要である。
【０００９】
【非特許文献１】Grzelak et al., 「Light-dependent generation of reactive oxygen species in cell culture media」, Free Radic. Biol. Med. 12:1418-1425; 2001
【非特許文献２】Stoien et al., 「Effect of near-ultraviolet and visible light on mammalian cells in culture II. Formation of toxic photoproducts in tissue culture medium by blacklight」, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 71:3961-3955; 1974
【非特許文献３】Wang et al., 「Effect of room fluorescent light on the deterioration of tissue culture medium」, In Vitro. 12: 19-22; 1976
【非特許文献４】Wang et. al., 「Identification of hydrogen peroxide as a photoproduct toxic to human cells in tissue-culture medium irradiated with “daylight” fluorescent light」, In Vitro. 14:715-722; 1978
【発明の開示】
【００１０】
発明の概要
培地を光損傷から保護するための光バリアとして働く独特の収縮包装光保護ラベルを備えた細胞培養液容器アセンブリを開示する。
【００１１】
光感受性培地を保持するように構成された取り外し可能な蓋、および1つまたは複数の窓を有する収縮包装ラベルを有する光感受性培地の容器アセンブリを開示する。収縮包装ラベルは、光感受性培地を保護するために容器の外部を覆い、有害な光を遮断するように構成される。
【００１２】
光感受性培地、光感受性培地を保持するように構成された容器、1つまたは複数の窓を有する収縮包装ラベル、および収縮包装ラベルの下で容器に近接し、窓の1つを通して見える温度ゲージを有する光感受性培地パッケージキットを開示する。収縮包装ラベルは、光感受性培地を保護するために容器の外部を覆い、有害な光を遮断するように構成される。
【００１３】
光感受性培地パッケージキットを作製する方法であって、光感受性培地を提供する段階、容器に光感受性培地を充填する段階、温度計を容器に取り付ける段階、光感受性培地の注文を受ける段階、注文に対応する貼り付け式ラベルを作り出す段階、そのような貼り付け式ラベルを容器に貼り付ける段階、貼り付け式ラベルと位置合わせされたラベル窓を有する収縮包装ラベルを容器にかぶせる段階、および収縮包装ラベルを加熱して容器を覆う段階を含む方法を開示する。
【００１４】
細胞培養液容器を覆うことができる、遮光特性を有する収縮包装材料、および収縮包装材料中の1つまたは複数ののぞき窓を含む、細胞培養液容器と共に使用するための収縮包装ラベルを開示する。
【００１５】
本発明の以下の詳細な説明では、その一部を成す添付図面を参照するが、図面には、本発明を実施できる特定の態様が説明のために示されている。これらの態様は、当業者が本発明を実施できるように十分詳細に記載してある。他の態様も使用することができ、本発明の範囲を逸脱することなく変更がなされ得る。
【００１６】
発明の詳細な説明
特記しない限り、本明細書で使用する専門用語および科学用語はすべて、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解される意味と同じ意味を有する。本発明の実施または試験において、本明細書に記載のものと類似のまたは同等の方法および材料を用いることができるが、適切な方法および材料は以下に記載するものである。本明細書において言及する出版物、特許出願、特許、およびその他の参考文献はすべて、その全体が参照により組み入れられる。抵触する場合、定義を含め、本明細書が優先する。さらに、材料、方法、および実施例は例示にすぎず、限定を意図するものではない。
【００１７】
本明細書に示し記載する特定の実施は、本発明およびその最良の形態を例証するものであり、いかなる形であれ本発明の範囲を限定することを意図するものではない。実際に、簡潔さを考慮して、収縮包装、細胞培養液のクリーンルームでの製造、および例示的な態様の他の局面に関する多くの従来技法は、本明細書において詳細に記載していない場合がある。
【００１８】
本発明は、従来の光感受性培地の包装に顕著な改善をもたらす。これらの改善には以下のものが含まれる：
・培地を光損傷から保護するための光バリアとして働く独特の収縮包装ラベル(1つまたは複数ののぞき窓は、光透過を減少させるために、わずかに色がついていてよい)。
・汚染のない培地加温に役立つ簡便な組み込み式培地温度ゲージ。
・収縮包装ラベルは、重要な情報を書き込むための十分なスペースを含むよう設計される。
・容器内に残存している量を確認するための小さな内容物のぞき窓が、収縮包装ラベル設計に含まれる。
・培地容器アセンブリを水浴中に置く際に使用するための、特殊な保護水浴バッグ/スリーブ。スリーブは、水浴中に認められる汚染物質から瓶を保護する。
【００１９】
図1〜6は、収縮包装光保護ラベル110で覆われた蓋106を備えた容器105を有する、本発明の1つの態様による細胞培養液容器アセンブリ100を示す。収縮包装ラベル110は容器105に適合して、有害な光から光感受性培地などの容器の内容物を保護する。収縮包装ラベル110は、以下に詳述する1つまたは複数ののぞき窓を含む。
【００２０】
培養液容器アセンブリ100は、多くの種類の光感受性培地を保護するように設計されている。例としては、リボフラビンを含む任意の培地；RPIM 1640；ダルベッコ最小必須培地(DMEM)；ハムF12；ウェイマウス；ウィリアムE；MEM；EMEM；199培地；MCDB 131；マッコイ5A；リーボビッツL-15；イスコフ；改変ダルベッコ培地；グラスゴーMEM；DMEM-F12；チオールまたは金属イオン(第二鉄イオンまたはシスチンなど)含有；培地；および光に曝露された場合に、直接、または培地中の他の成分との中間反応を介して細胞毒性ラジカル、化学物質、または化合物を生じる化合物または化学物質を含有する培地が含まれる。
【００２１】
容器105は任意の適切な形状および大きさであってよく、PETG(ポリエチレンテレフタラート共重合体)、PET(ポリエチレンテレフタラート)、ガラス、ポリカーボネート、または培地と適合する他の材料で作製され得る。適切な容器の一例は、Nalge Nunc International、米国、ニューヨーク州、ロチェスターのNalgene Labware 500 ml瓶、モデル2019 Sterile Square Media Bottleである。
【００２２】
1つの態様において、貼り付け式ラベル115は容器105に直接貼り付けられる。貼り付け式ラベル115は、容器105の内容物に関する情報を含み得る。使用者が収縮包装ラベル110をはがした場合に貼り付け式ラベル115が製品上に残り、それにより表示のない液体の不確実性を防ぐことから、このことは重要である。収縮包装ラベル110は、貼り付け式ラベル115を覆う。収縮包装ラベル110中にラベル窓120があるために、組み立て後、使用者は貼り付け式ラベル115を読むことができる。ラベル窓120は透明であってよく、または光保護の色合いを有してもよい。
【００２３】
別の態様では、貼り付け式ラベル115は収縮包装ラベルの上に貼り付けられ得る。貼り付け式ラベル115は、容器105の内容物に関する情報を含み得る。本態様では、収縮包装ラベル110はラベル窓120を有さなくてよい。収縮包装ラベル110がラベル窓120を有する場合、貼り付け式ラベル115は遮光のために窓上に位置し得る。
【００２４】
収縮包装ラベル110中に内容物窓125があることで、使用者は容器105の内容物およびどのくらい残っているかを見ることができる。内容物窓125は、四角い培地容器の底の隅を見ることができる逆「T」字形を有し得る。容器105が液体レベル表示を有する場合には、内容物窓125はそれが見えるようにその上に位置し得る。内容物窓125は、有害な光から内容物を保護するために光保護の色合いを有するべきである。
【００２５】
温度ゲージ130は、容器105の上の、内容物窓125の中、収縮包装ラベル110の下に位置し得る。温度ゲージ130の1つの態様は、適温に到達した時点で色が現われ、温度が変化した場合に色が消失するという可逆的な色変化をもたらす。この過程は何度も繰り返して起こり得る。この技術はマイクロカプセル化液晶色変化インクを使用するものであり、TMC LLC(http://www.t-m-c.com/our_products.html)により作製され、Dry Pak Industries(カリフォルニア州、スタジオシティ、www.drypak.com)によって販売される。この製品は、16-Event可逆的温度ラベル90〜120°F(細断型)と称される(http://www.t-m-c.com/16_level_vertical.htmlを参照されたい)。1つの態様において、温度計130は温度範囲32〜40℃を測定する。別の態様において、温度計130は温度範囲0〜8℃を測定する。
【００２６】
図7は、ラベル窓120および内容物窓125(図中、125aおよび125bとして示される)を示す収縮包装ラベル110の平面図を示す。逆「T」字部分は収縮包装ラベル110の底部に沿って位置し、これによって容器105の底を見ることができる。収縮包装ラベル110の材料は、PETG材料および収縮特性を有する他の材料を含む、ポリオレフィン収縮フィルムなどの任意の適切な収縮包装材料であってよい。収縮材料の厚さは1〜5 mm厚、好ましくは2 mm厚であってよい。収縮包装ラベルは、個々に切断された円筒型スリーブ、シート、またはロールとして提供され得る。
【００２７】
収縮包装ラベル110はまた、上部に沿ったミシン目135を含む。ミシン目135は容器105の蓋部分に対応し、好ましくは「V」字形であるべきであるが、他の形状であってもよく、垂直に見て水平のミシン目が蓋底部の周りを囲んでいる。収縮包装ラベルは、その破損が、受領前に製品が開封された可能性があるという証拠を提供する不正開封防止機能の付いた封印を提供するために、蓋の上部を部分的に覆うべきである(収縮後)。収縮包装ラベル110は、細胞培養液容器に関する会社情報155、取扱説明、または記録情報160などの情報を書き込むための多くの領域を含む。収縮包装ラベル110上に印刷するために用いられるインクは、プラスチックを通して浸出し得る化学物質を含んではならない(フェノールは禁止)。
【００２８】
本発明の別の態様では、図8〜10に示す水浴バッグ140を使用する。水浴バッグ140は、図10に示す、閉口下端145、および細胞培養液容器アセンブリ100を挿入するための開口上端150を有する「自立型」袋であるように設計される。水浴バッグ140は、細胞培養液容器アセンブリ100が見えるように透明である、75ゲージPETまたはナイロンなどの任意の適切なプラスチック材料で作製され得る。温度計がバッグを通して見えることが重要である。上端150は、細胞培養液容器アセンブリ100を保存するまたは輸送するために、ジッパーで閉じることができる(ジップロックのように)。水浴バッグ140はまた、会社情報、取扱説明、または警告などの印字をそこに有し得る。
【００２９】
以下は、細胞培養液容器アセンブリ100の組み立て、および容器に光感受性培地を充填して光感受性培地パッケージキットを作製する段階の1つの態様である。
1. 光感受性培地を製造する。
2. 容器105などの容器に光感受性培地を充填する。温度ゲージ130などの適切な温度ゲージを、容器の特定の位置に取り付ける(それによって、収縮包装ラベルが温度ゲージを覆う場合に温度ゲージが見える)。これは、自動ラベル付け機で、または配置補助具として用いられる単純な鋳型を使用して手動で行うことができる。
3. 光感受性培地の注文が届く。
4. コンピュータによって、注文製品(すなわち、光感受性培地)に関する製品に特有の情報、例えば製品名、品番、ロット番号、製造日、使用期限、容量、用途、顧客名、保存温度、およびその他のそのような製品に特有の情報などが記載された、貼り付け式ラベル115などの貼り付け式ラベルを作製する。この情報はコンピュータ化されたラベル付け機にロードすることができ、ラベル付け機が貼り付け式ラベルを印刷し、それを容器上の特定の位置に貼り付けるか、または第1段階で貼り付け式ラベルを印刷し、第2段階でラベルを手動で貼り付けることによってこの工程を行うことができる。
5. 収縮包装スリーブラベル110などの収縮包装ラベルを、貼り付け式ラベルでラベル付けされた容器にかぶせる。収縮包装ラベルは、貼り付け式ラベルがラベル窓を通して見えて、製品に特有の情報が見えるように正確に配置されなければならない。収縮包装ラベルが誤ってはがされた場合には、貼り付け式ラベルが容器上に残り、その結果製品がなおラベル付けされていることに留意されたい。この段階は自動機器により、または手動で行うことができる。
6. 収縮包装ラベルをかぶせた培地容器を、収縮包装が容器上で均等にかつ適切に収縮することを可能にする適切な熱量を適切な時間加えるように慎重に制御された加熱環境に供する。これはいくつかの方法で行うことができる：
a. ラベル付けされた容器を回転している「回転台」に乗せ、ヒートガンを使用して回転している容器に手動で熱風を吹きかけ、収縮包装ラベルを容器上で収縮させることができる。
b. ラベル付けされた容器をベルトコンベヤーに乗せて、加熱された「収縮トンネル」に導くことができる。加熱されたトンネル内に入ると、ラベル付けされた容器は熱および乱気流レベルの増加に供され、ラベルが容器上で収縮する。
c. 乾熱または蒸気を熱源として使用することができる。
7. 続いて、ラベル付けされた製品を直ちに出荷するか、または別の日に出荷するために保存することができる。
【００３０】
限られた数の態様の状況において本発明を記載し説明したが、本発明は、本発明の本質的な特徴の精神から逸脱することなく多くの形態で具体化され得る。したがって、本開示の要約に記載した内容も含めて、説明し記載した態様は、あらゆる点において例示的であり限定的ではないと見なされるべきである。本発明の範囲は、前述の記載ではなく、むしろ添付の特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲と同等の意味および範囲内に入る変更はすべて、本発明の範囲内に包含されることが意図される。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】蓋部分の周囲にミシン目のある収縮包装光保護ラベルを有する、本発明の1つの態様による細胞培養液容器アセンブリの正面図である。
【図２】収縮包装ラベルのミシン目のある蓋部分がはがされた、図1の細胞培養液容器の細胞培養液容器アセンブリの正面図である。
【図３】下のラベルを見るための収縮包装ラベル中のラベル窓を示す、図2の細胞培養液容器アセンブリの正面図である。
【図４】容器の内容物、および温度をモニターするための温度ゲージを見るための収縮包装ラベル中の内容物窓(または「T」字窓)を示す、図2の細胞培養液容器アセンブリの側面図である。
【図５】収縮包装ラベル上に印刷された表現または取扱説明を示す、図2の細胞培養液容器アセンブリの背面図である。
【図６】細胞培養液容器に関する情報を記録するための収縮包装ラベル上のスペースを示す、図2の細胞培養液容器アセンブリの側面図である。
【図７】収縮包装ラベルの1つの態様の平面図である。
【図８】図1の細胞培養液容器アセンブリと共に使用するための水浴バッグの図である。
【図９】図1の細胞培養液容器アセンブリと共に使用するための水浴バッグの図である。
【図１０】図8および9の水浴バッグ中に位置する、図2の細胞培養液容器アセンブリの図である。温度計および内容物は水浴バッグを通して見える。
【図１】
2009518037.tif 000004
【図２】
2009518037.tif 000005
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
2009518037.tif 000009
【図７】
2009518037.tif 000010
【図８】
2009518037.tif 000011
【図９】
2009518037.tif 000012
【図１０】
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【国際調査報告】
2009518037.tif 000014