(57)【要約】  コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールを含む徐放性医薬製剤、製剤の製造方法ならびに２５−ヒドロキシビタミンＤ不足または欠乏を治療するための製剤の投与方法が開示されている。本組成物および投与方法は、好ましくは、小腸の回腸におけるビタミン（単数または複数）の遅延放出および長時間、例えば、少なくとも４時間以上にわたるビタミン（単数または複数）の持続する実質的に一定の放出をもたらす。好ましくは毎日の、剤形当たり500 IU〜50,000 IUの個別および組み合わせの投与量が開示されている。本組成物および方法は、限定するものではないが、ビタミンＤ補充および維持の有効性；十二指腸に対するビタミンＤ化合物の初回通過効果の緩和または回避；コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの管腔内、細胞内および血中濃度における有害な超生理学的急上昇ならびにそれらの結果の緩和または回避；ならびにビタミンＤ補充、すなわちビタミンＤ毒性に関連する重篤な副作用の緩和または回避、を含む１以上の利点を示すと予期される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者における２５−ヒドロキシビタミンＤ不足または欠乏を治療する方法であって、30ng/mL未満の血清２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度により特徴付けられる２５−ヒドロキシビタミンＤ不足または欠乏が認められる患者に、患者の回腸に到達するまでコレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールの実質的な放出を遅らせる、コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを含む遅延または持続放出医薬製剤を経口投与することを含む前記方法。
【請求項２】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールが実質的に一定速度で放出される、請求項１記載の方法。
【請求項３】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールの全血清濃度が、少なくとも２日間にわたって10nmol/L以下の量で上昇する、請求項１または２のいずれか１項記載の方法。
【請求項４】
２５−ヒドロキシビタミンＤ3および２５−ヒドロキシビタミンＤ2の全血清濃度が、少なくとも２日間にわたって合わせて3ng/mL以下の量で上昇する、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールが、少なくとも４時間にわたって実質的に一定速度で放出される、請求項１〜４のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で少なくとも500 IU含む量の製剤を毎日投与することを含む、請求項１〜５のいずれか１項記載の方法。
【請求項７】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で少なくとも1,500 IU含む量の製剤を毎日投与することを含む、請求項６記載の方法
【請求項８】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で少なくとも2,000 IU含む量の製剤を毎日投与することを含む、請求項７記載の方法。
【請求項９】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で50,000 IU未満含む量の製剤を毎日投与することを含む、請求項１〜８のいずれか１項記載の方法。
【請求項１０】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で10,000 IU以下含む量の製剤を毎日投与することを含む、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で5,000 IU以下含む量の製剤を毎日投与することを含む、請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全量で500 IU〜50,000 IU含む量の製剤を毎日投与することを含む、請求項１から５のいずれか１項記載の方法。
【請求項１３】
コレカルシフェロール1,500 IUおよびエルゴカルシフェロール1,500 IUを含む量の製剤を毎日投与することを含む、請求項１から５のいずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
血清２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度が少なくとも30ng/mLに回復する、請求項１〜１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
血清２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度が少なくとも３ヶ月間少なくとも30ng/mLに維持される、請求項１〜１４のいずれか１項記載の方法。
【請求項１６】
血清２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度が少なくとも６ヶ月間少なくとも30ng/mLに維持される請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
カルシウム擬態薬を同時投与することをさらに含む、請求項１〜１６のいずれか１項記載の方法
【請求項１８】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを含む遅延または持続放出経口医薬製剤を含む組成物であって、前記製剤が患者の回腸に到達するまでコレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールの実質的な放出を遅らせる製剤である、前記組成物。
【請求項１９】
製剤が実質的に一定速度でコレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを放出する、請求項１８記載の組成物。
【請求項２０】
製剤が少なくとも４時間にわたって実質的に一定速度でコレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを放出する、請求項１９記載の組成物。
【請求項２１】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で少なくとも500 IU含む、請求項１８から２０のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２２】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で少なくとも1,500 IU含む、請求項１８から２１のいずれか１項記載の組成物。
【請求項２３】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で少なくとも2,000 IU含む、請求項１８から２２のいずれか１項記載の組成物。
【請求項２４】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で50,000 IU未満含む、請求項１８から２３のいずれか１項記載の組成物。
【請求項２５】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で10,000 IU以下含む、請求項１８から２４のいずれか１項記載の組成物。
【請求項２６】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全部で5,000 IU以下含む、請求項１８から２５のいずれか１項記載の組成物。
【請求項２７】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを全量で500 IU〜50,000 IU含む、請求項１８から２０のいずれか１項記載の組成物。
【請求項２８】
コレカルシフェロール1,500 IUおよびエルゴカルシフェロール1,500 IUを含む、請求項１８から２０のいずれか１項記載の組成物。
【請求項２９】
腸溶コーティングをさらに含む、請求項１８から２７のいずれか１項記載の組成物。
【請求項３０】
腸溶コーティングが7.0〜8.0のｐＨで少なくとも部分的に溶解する請求項２９記載の組成物。
【請求項３１】
カルシウム擬態薬をさらに含む、請求項１８から３０のいずれか１項記載の組成物。
【請求項３２】
コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールの徐放性製剤の製造方法であって、望ましい量のコレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールを最小量のＵＳＰ等級無水エタノールに溶解し、前記溶液と１以上の医薬品等級賦形剤とを混合して、胃内で実質的に消化に対して抵抗性であって下位腸で徐々に崩壊するマトリックスを形成させることを含む前記製造方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９（ｅ）の下で、２００５年１０月１２日に出願された米国仮特許出願第６０／７２５，７０９号に基づく優先権を主張する。
【０００２】
背景技術
技術分野
本開示は、一般に、２５−ヒドロキシビタミンＤ不足および／または欠乏を治療するための方法および製剤に関する。より具体的には、本開示は、ビタミン（単数または複数）の徐放性、例えば遅延および／または持続放出を有するエルゴカルシフェロールおよび／またはコレカルシフェロールを患者に投与する方法ならびに前記方法を実施するための前記ビタミン（単数または複数）の適切な製剤に関する。
【０００３】
関連技術の簡単な説明
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールは、総称してビタミンＤと呼ばれるが、数ある特徴の中で特に血流中のカルシウムおよびリンの正常濃度の維持に寄与する、ビタミンＤホルモンの脂溶性セコステロイド前駆体である。
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールは、通常は、ヒト血液中に安定した低い濃度で存在する。非補充食品はビタミンＤ強化食品を含有するものであってもビタミンＤ含有量が低いので、食後において血中ビタミンＤ濃度の上昇はあるとしてもわずかしか起こらない。ヒトのビタミンＤ供給の大部分は強化食品、日光への暴露、またはダイエタリー・サプリメントに由来し、後者の供給源がますます重要になっている。皮膚の７−デヒドロキシコレステロールはＵＶ放射線によりプレビタミンＤ3に変換され、これは血中を循環する前に数日間にわたって皮膚内でコレカルシフェロールへの熱変換を受けるので、日光暴露後、血中ビタミンＤ濃度は、全然ではないにしても徐々にしか上昇しない。それにひきかえ、サプリメント、例えば現在入手可能なサプリメントは、投与量に比例して管腔内、血中および細胞内ビタミンＤ濃度の顕著な上昇をもたらす。
【０００４】
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールは共に、主に人体の肝臓中に位置する酵素によりプロホルモンに代謝される。コレカルシフェロールはプロホルモン２５−ヒドロキシビタミンＤ3に代謝され、エルゴカルシフェロールは２つのプロホルモン２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２４（Ｓ）−ヒドロキシビタミンＤ2に代謝される。これら２つの２５−水酸化プロホルモンは総称して“２５−ヒドロキシビタミンＤ”（“25(OH)Ｄ”）と呼ばれる。コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールはまた、肝臓以外で、特定の細胞中、例えば腸上皮細胞中で肝臓中に含まれる酵素と同一または類似の酵素によりプロホルモンに代謝され得る。
いずれの前駆体の濃度を上昇させてもプロホルモンの産生増加が起こる。同様に、前駆体濃度を低下させるとホルモンの産生低下が起こる。コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロール（“コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロール”）の血中濃度の急上昇により、細胞内ビタミンＤ濃度は一過性に上昇し、プロホルモン産生は促進され、細胞内および血中プロホルモン濃度は上昇しうる。コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールの血中濃度の急上昇により、プロホルモンを産生する酵素は飽和し、過剰のビタミンＤは異化または分路されて脂肪組織内に長期蓄積がもたらされうる。脂肪組織に蓄積されたビタミンＤは、プロホルモンへの将来の変換を受けづらい。現行の経口サプリメントの摂取後におけるビタミンＤの管腔内濃度の急上昇により、局所腸上皮細胞におけるビタミンＤおよびプロホルモン濃度は直ちに上昇し、それにより、小腸においてカルシウムおよびリン代謝に対する“初回通過”効果が発揮されうる。
【０００５】
ビタミンＤプロホルモンは、さらに、腎臓において強力なホルモンに代謝される。プロホルモン２５−ヒドロキシビタミンＤ3はホルモン１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3（すなわちカルシトリオール）に代謝され、同様に、２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２４（Ｓ）−ヒドロキシビタミンＤ2は、それぞれ１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2および１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシビタミンＤ2として知られているホルモンに代謝される。血中または細胞内プロホルモン濃度の急上昇は、過剰な腎外ホルモン産生を促進し、カルシウムおよびリン代謝に対する局所副作用を引き起こしうる。このような急上昇はまた、その後のサプリメントのビタミンＤからの肝臓のプロホルモン産生を抑制し、腎臓および他の組織においてビタミンＤおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの両方の異化作用を促進する場合もある。
血中ビタミンＤホルモン濃度は、健常者において一般に１日中一定に保たれるが、より長期間にわたっては、日光暴露における季節変化またはビタミンＤ摂取量の持続的変化に応じて著しく変化しうる。日光暴露による持続的で適切なビタミンＤの供給および、非補充食品を与えられる場合、通常、コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールおよび３つのビタミンＤプロホルモンの血中濃度もまた１日中一定である。しかしながら、コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールの血中濃度は、現在入手可能なビタミンＤサプリメントを投与した後、特にビタミンＤ欠乏性くる病または骨軟化症を予防するのに必要な量を大きく超えた投与量で投与した後に著しく上昇しうる。
【０００６】
ビタミンＤホルモンは、ヒトの健康において、細胞内ビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）により介在される重要な役割を有している。特に、ビタミンＤホルモンは、小腸による食事からのカルシウムの吸収および腎臓によるカルシウムの再吸収を調節することにより血中カルシウム濃度を調節している。ホルモン濃度の過剰は尿カルシウム（高カルシウム尿症）、血中カルシウム（高カルシウム血症）および血中リン（高リン血症）の異常な上昇を引き起こす恐れがある。ビタミンＤホルモンはまた、細胞分化および増殖の調節、副甲状腺によるＰＴＨ分泌ならびに正常な骨形成および代謝にも関与している。さらにまた、ビタミンＤホルモンは筋骨格系、免疫系およびレニン−アンジオテンシン系の正常な機能に必要である。ビタミンＤホルモンの多くの他の役割は、ほぼすべてのヒト組織における細胞内ＶＤＲの存在が報告されていることに基づいて想定され解明されるであろう。
特定の組織に対するビタミンＤホルモンの作用は、これらの組織内における細胞内ＶＤＲに対する結合の程度（すなわち占拠の程度）によって決まる。コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールは、ＶＤＲに対して、ビタミンＤホルモンの親和性よりも少なくとも１００倍低いと推算される親和性を有する。結果として、生理的濃度のコレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールは、ビタミンＤホルモンへの事前の代謝なしには生物学的作用をほとんど発揮しない。しかしながら、正常濃度よりも１０〜１０００倍高い範囲の超生理学的濃度のコレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールはＶＤＲを十分占拠でき、ビタミンＤホルモンと同様な作用を発揮し得る。
【０００７】
ビタミンＤ不足またはビタミンＤ欠乏（あるいは、ビタミンＤ低下症）などの状態におけると同様に、ビタミンＤが供給不足の場合、ビタミンＤプロホルモンの産生は低下する。ビタミンＤプロホルモンの低い産生は、２５−ヒドロキシビタミンＤの低い血中濃度をもたらす。不十分なビタミンＤ供給は、多くの場合、日焼け止め剤を用いずに日光に低頻度で暴露された個人、慢性的にビタミンＤ摂取が不十分な個人または脂溶性ビタミン（例えばビタミンＤ）の腸管吸収が低下した状態を患う個人に生じる。北緯度地方に住んでいる大部分の個人は、ビタミンＤ供給が不十分であることが最近報告された。治療せずに放置すると、不十分なビタミンＤ供給は、くる病および骨軟化症を含む重篤な骨障害の原因となる恐れがある。
米国科学アカデミー（National Academy of Sciences）の医学研究所（Institute of Medicine, IOM）は、健常者のためのビタミンＤの適性摂取量（Adequate Intake）(AI)は、個人の年齢および性別に応じて、１日当たり200〜600 IUであると結論を下している。Standing Committee on the Scientific Evaluation of Dietary Reference Intakes, Dietary reference intakes: calcium, phosphorus, magnesium, vitamin D, and fluoride, Washington, DC: National Academy Press (1997) を参照のこと（引用により本願に組み込まれる）。ビタミンＤのＡＩは、主として、ビタミンＤ欠乏性くる病または骨軟化症を予防するのに十分な血清２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度（すなわち少なくとも１１ｎｇ／ｍＬ）に基づいて定義された。ＩＯＭはまた、より高い投与量には、高カルシウム尿症、高カルシウム血症ならびに、心不整脈、発作ならびに全身性の血管および他の軟組織の石灰化を含む関連後遺症のリスク増加が付随するという根拠に基づいて、１日当たりビタミンＤ 2,000 IUという許容上限摂取量（Tolerable Upper Intake Level)（UL）を確定した。
【０００８】
現在入手可能な経口ビタミンＤサプリメントは、最適の血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を達成維持するためには、理想から程遠い。これらの調製物は、通常ビタミンＤ3400 IU〜5,000 IUまたはビタミンＤ2 50,000 IUを含有し、消化管中での迅速放出または即時放出のために製剤化される。ビタミンＤ補充のために多くの場合必要とされるが、長期にわたり高用量で投与された場合、これらの製品は、以下に要約する、顕著で、しばしば厳しい制限を受ける。
高用量の即時放出ビタミンＤサプリメントは、血中ビタミンＤ濃度の顕著な急上昇を引き起こし、そのために、（ａ）脂肪組織内へのビタミンＤの貯蔵が促進され（貯蔵されたビタミンＤはその後の２５−ヒドロキシビタミンＤへの肝臓による変換を受けづらいためこのことは望ましくない）；（ｂ）代謝物へのビタミンＤの肝異化作用が促進され（２４−および／または２６−ヒドロキシル化によって、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を上昇させるためには、このことは有用性の低いまたはもはや有用ではない）；および（ｃ）ビタミンＤの、過剰な細胞内２４−または２５−ヒドロキシル化（このことは高カルシウム尿症、高カルシウム血症および高リン血症のリスク増加をもたらす）が促進される。
【０００９】
高用量の即時放出ビタミンＤサプリメントはまた、血中および細胞内２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度の急上昇またはスパイクを引き起こし、そのために、（ａ）カルシウムおよびリンホメオスタシスの局所異常ならびに高カルシウム尿症、高カルシウム血症および高リン血症のリスク増加をもたらす、ビタミンＤホルモンの過剰な腎外産生；（ｂ）腎臓および他の組織における２４−および／または２６−ヒドロキシル化によるビタミンＤおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの両方の異化作用の促進；（ｃ）ビタミンＤ不足または欠乏の十分な補充を不必要に妨げる、ビタミンＤプロホルモンの肝産生のダウンレギュレーション；ならびに（ｄ）ＶＤＲへの直接結合により仲介されるカルシウムおよびリンホメオスタシスの局所異常；を促進する。
【００１０】
さらにまた、高用量の即時放出ビタミンＤサプリメントは、例えば十二指腸内腔においてビタミンＤの超生理学的薬理学的濃度を引き起こし、（ａ）高カルシウム尿症、高カルシウム血症および高リン血症のリスク増加をもたらす、腸上皮細胞における２５−ヒドロキシル化および、カルシウムおよびリンの腸管吸収の局所刺激；（ｂ）全身バイオアベイラビリティの低下を引き起こす、局所腸上皮細胞における２４−および２６−ヒドロキシル化によるビタミンＤ異化作用；（ｃ）肝異化作用の上昇をもたらす、主としてキロミクロンによる吸収；を促進する。
特定の個人において、ＵＬを越えるビタミンＤ補充がしばしば必要となる。しかしながら、高用量の即時放出ビタミンＤ化合物を投与する問題を考慮すれば、現在入手可能な経口ビタミンＤサプリメントは、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度に維持するためには十分適しているとはいえない。
【００１１】
概要
本発明の１つの側面は、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度（患者に関しては30ng/mL以上と定義される）に安全かつ効果的に回復させ、このような最適濃度に血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を維持する方法を提供する。１つの方法は、現在入手可能なビタミンＤサプリメントと比較してレシピエントに予期せぬ利点を提供する、十分なコレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールまたはこれら２つのビタミンを製剤に含む組み合わせを、被験者、動物またはヒト患者に経口投与することを含む。例えば、本明細書記載の方法を実施することにより、高用量においてさえも血中ビタミンＤおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの急上昇（すなわち有害な超生理学的濃度）のリスクを低下させ、長期間にわたって身体に実質的に一定なビタミンＤ源を供給するビタミンＤ補充を提供することができる。コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールの組み合わせを含めれば、よりさらなる臨床的利点が提供されると期待される。
【００１２】
一実施形態において、コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールのある量が徐放性製剤に含有され、治療を必要とするヒトまたは動物に経口投与される。コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールのこの徐放性製剤は、１以上の利点、例えばキロミクロンによりリンパ系よりもむしろ血流への直接吸収を促進させ、小腸上部の腸上皮細胞における異化作用を抑制することにより含有コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールのバイオアベイラビリティーを著しく増加させ；十二指腸に対する含有コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの望ましくない初回通過効果を著しく抑制し；コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの血中濃度における有害な超生理学的急上昇の促進を著しく抑制し；血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度（患者に関しては30ng/mL以上と定義される）に回復させるために経口投与されたコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの効果を著しく増強させ；血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度をこのような最適濃度に維持するために経口投与されたコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの効果を著しく増強させ；ビタミンＤ代謝阻害および関連するＰＴＨ、カルシウムおよびリンホメオスタシスの異常を著しく抑制し；高カルシウム尿症、高カルシウム血症、高リン血症およびビタミンＤ毒性を含む、ビタミンＤ補充に関連する重篤な副作用のリスクを低下させる利点を有することができる。予期される特別な患者群は慢性腎疾患患者群である。ステージ３、４および／または５の慢性腎疾患患者は本発明によって治療できる。
他の側面において、本発明は、コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールを含み、胃ならびに小腸の十二指腸および空腸を通過させて回腸における実質的な放出（例えば、遅延放出）を可能にするために製剤化された安定な徐放性組成物を提供する。組成物は胃液中での崩壊を効果的に阻止し、コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールが小腸の回腸に到達するまで含有コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールの実質的な放出を防止する。本開示組成物は、さらに、コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの両方の血中濃度を最適濃度まで持続的に漸増させこれを維持できるようにデザインされることもできる。
【００１３】
前述の短い説明は、一般に本発明の特徴的な側面の概略を示したものであり、以下に述べるより完全な詳細な説明をよりよく理解するための補助として役立つものである。これらを参考にすれば、本発明は本明細書記載の方法もしくは製造の詳細、化学組成物または用途に限定されるものではないことが明確に理解されるであろう。製造、化学組成物、使用または応用のその他の変形は本発明の代替実施形態として明白であるとみなされるべきである。本発明の特定の適合、組成物の変形ならびに化学的および物理的属性の他の利点およびより完全な認識は、詳細な説明を吟味することにより得られる。
同様に、本明細書の術語および用語法は説明目的のためのものであり、限定とみなすべきではないことが理解される。本明細書においては、“含有する”、“有する”および“含む”ならびにそれらの変形の使用は、その後に記載される項目およびそれらの均等物ばかりでなく、追加の項目およびそれらの均等物を含むと解される。
【００１４】
詳細な説明
血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度（ヒト被験者および患者に関しては30ng/mL以上と定義される）に安全かつ効果的に回復させ、このような最適濃度に血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を維持するために、十分なコレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールまたはこれら２つのビタミンの任意の組み合わせを用いるビタミンＤ補充を必要とする被験者、動物またはヒト患者に経口投与するための組成物および方法が本明細書に記載されている。
【００１５】
本明細書において、以下の定義は、当業者が本発明を理解するのを助ける上で有用である。
本明細書において、ビタミンＤの血清または血中濃度に関する用語“実質的に一定の”は、徐放性（下記に定義される）製剤の放出挙動が、投薬単位の投与後、場合により少なくとも４時間、１２時間、１日間、２日間、３日間、４日間または５日間にわたる、おおよそ10nmol/Lを超えるコレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールの全血清または血中濃度の上昇を含むべきではないことを意味する。
本明細書において、血清または血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度に関する用語“実質的に一定の”は、徐放性製剤の放出挙動が、投薬単位の投与後、場合により少なくとも４時間、１２時間、１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、１週間、１０日または２週間にわたる、それぞれおおよそ3ng/mLを超える全血清または血中２５−ヒドロキシビタミンＤ3および２５−ヒドロキシビタミンＤ2濃度の上昇を含むべきではないことを意味する。
【００１６】
本明細書において、用語“徐放性”および“持続放出”は互換的に使用され、コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの全血清または血中濃度が、長期間、例えば４〜２４時間またはそれ以上の間、前投与濃度を維持またはそれを超えて維持されるような速度での投与されたビタミンＤの放出を指す。用語“徐放性”は、場合により遅延放出特性を含む。
本明細書において、用語“ビタミンＤ毒性”は、吐き気、嘔吐、多尿、高カルシウム尿症、高カルシウム血症および高リン血症の１以上を含む、過剰なビタミンＤ摂取量および過度に上昇したビタミンＤ血中濃度から来る副作用を指すと解される。
ビタミンＤの管腔内、細胞内および血中濃度に関する“超生理学的”は、ビタミンＤ補充が少なくとも３０日間差し控えられたとき、実験室測定により、任意の２４時間の間、ビタミンＤ補充を受けた被験者、動物またはヒト患者において観察される一般に安定な濃度よりも顕著に大きいコレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールの総濃度を指す。“有害な超生理学的急上昇”は、カルシウムおよびリン代謝に対する局所有害作用、ビタミンＤの肝２５−ヒドロキシル化の阻害、ビタミンＤおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの両方の異化作用の増強、高カルシウム尿症、潜在的心血管後遺症を伴う高カルシウム血症および／または高リン血症をもたらす、過剰な腎外ホルモン産生などの副作用を誘発する、コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールまたは２５−ヒドロキシビタミンＤの局所または血清濃度を指す。
“ビタミンＤ不足および欠乏”は、一般に濃度30ng/mL未満の血清２５−ヒドロキシビタミンＤを有するとして定義される(National Kidney Foundationのガイドライン、NKF, Am. J. Kidney Dis. 42:S1-S202 (2003) を参照のこと（参照により本願に組み込まれる））。
本明細書に記載の任意の数値は、低い値から高い値までのすべての値を含むこと、すなわち列挙される最も低い値から最も高い値までのすべての可能な数値の組み合わせが本願において明白に述べられていると考慮されるべきであることもまた特に了解される。例えば、濃度範囲または有益な効果の範囲が１％〜５０％と述べられている場合、例えば２％〜４０％、１０％〜３０％または１％〜３％などの値は本明細書に明白に列挙されているものとする。これらは具体的に予期されたものの単なる例に過ぎない。
【００１７】
本開示の１つの側面は、十二指腸に対するビタミンＤ化合物の望ましくない初回通過効果を免れ；コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの管腔内、細胞内および血中濃度の有害な超生理学的急上昇ならびにその帰結を免れ；ビタミンＤ補充に伴う重篤な副作用、すなわちビタミンＤ毒性を免れて、従来得られなかった有効性の濃度で２５−ヒドロキシビタミンＤ不足および欠乏を治療するための、コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールの徐放性製剤を含む組成物およびこのような製剤の投与方法（一実施形態において、高用量で）を含む。
徐放性組成物は、ＵＬ以上のコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの濃度を含有するようにデザインされ、長期間、コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの、徐放性で好ましくは実質的に一定の放出がなされるように調製される。さらにまた、本組成物は、好ましくはヒトまたは動物の消化管の回腸中に遅延放出されるようにデザインされる。実施形態の１つのタイプにおいて、本組成物は体内におけるコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの実質的に一定の濃度およびより持続性の血中濃度を確実にすることが予期される。時間と共に、コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの低速で一定の放出を提供することにより、血中、管腔内および細胞内ビタミンＤ濃度の急上昇、すなわち有害な超生理学的濃度は低減または解消される。
【００１８】
5,000 IUを超え、または7,500 IUを超え、または10,000 IUを超える投与量でビタミンＤ3を含む組成物が予期される。少なくとも1,500 IU（合わせて）または少なくとも2,000、2,500、3,000、4,000、5,000、6,000、7,000、7,500、8,000、9,000、10,000、11,000、12,000もしくは12,500 IUの投薬単位でコレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールの組み合わせを含む組成物が予期される。200,000 IU未満または100,000もしくは75,000もしくは50,000 IU未満の投薬単位もまた予期される。
本発明はまた１日１回、１日おきに１回、週３回、週２回、週１回または２週に１回の間隔で投与できることが予期される。各回に投与された累積用量は、1,500IU（コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロール単独または合わせて）または少なくとも2,000、2,500、3,000、4,000、5,000、6,000、7,000、7,500、8,000、9,000、10,000、11,000、12,000もしくは12,500 IUであることができる。200,000 IU未満または100,000もしくは75,000もしくは50,000 IU未満の投与量もまた予期される。このような投与量は成人のヒトへの使用に好ましい。
【００１９】
任意の比率、例えば、９：１〜１：９のコレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを含むことができる。限定するものではないが、１：１、コレカルシフェロール：エルゴカルシフェロール１：１を超えるおよびコレカルシフェロール：エルゴカルシフェロール１：１未満を含む比率は、種々の実施形態に有用であると予期される。
前述の投与量は経口送達形態用に予期される。本明細書記載の方法に従って投与されるビタミンＤ調製物は、当該技術分野で公知であり、他の選択経路による投与に適した技術に従って製剤化できる。例えば、限定するものではないが錠剤、溶液、粉末剤、懸濁液、クリーム、エアゾールなどを含む、本調製物を含有する任意の薬学的に許容される製剤を使用できる。当該技術分野で既知または予想される任意の薬学的に許容される担体を本製剤に添加することができる。
例えば、単一投薬単位カプセルおよび／または１日量中の、コレカルシフェロール1,500 IUおよびエルゴカルシフェロール1,500 IUの組み合わせが予期される。同様に、単一投薬単位カプセルおよび／または１日量中の、コレカルシフェロール1,000 IUおよびエルゴカルシフェロール1,000 IUの組み合わせならびに単一投薬単位カプセルおよび／または１日量中の、コレカルシフェロール2,000 IUおよびエルゴカルシフェロール2,000 IUの組み合わせが予期される。このような投薬単位カプセルの初期の用法・用量は、例えば、単一投薬単位カプセル中のコレカルシフェロール1,500 IUおよびエルゴカルシフェロール1,500 IUの組み合わせに関して下記の表１に詳細を記したように、ベースラインの血清25(OH)Ｄ(ng/ml)[nmol/L]濃度に基づくものであることができる。
【００２０】
表１
2009511590.tif 000002
【００２１】
25(OH)Ｄの血清濃度を30ng/mL以上に維持するために、成人患者に対して１日当たりこのようなカプセルを１つ投与することができる。
【００２２】
本組成物は、便利な毎日の経口投与のためにコレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールが組み込まれた、高度に安定した徐放性医薬組成物を含む。本組成物はまた、好ましくは胃液中での崩壊を効果的に阻止し、本組成物が小腸、より好ましくは小腸の回腸に到達するまで含有コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールの実質的な放出を防止する。本開示組成物は、血中２５−ヒドロキシビタミンＤの最適濃度への回復における卓越した効果およびビタミンＤの公知の経口製剤に対する卓越した安全の２つの予期せぬ利点を有しながら、（ａ）コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールおよび（ｂ）２５−ヒドロキシビタミンＤの両方の血中濃度の漸増とその後の血中濃度の維持をもたらす。複数の実施形態において、本方法は、長期間、例えば少なくとも１ヶ月間、少なくとも３ヶ月間、少なくとも６ヶ月間またはそれ以上にわたって、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を30ng/mL以上に維持するために本明細書記載の製剤を投与することを含むと予期される。
【００２３】
コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの、制御された実質的に一定の放出形態の調製物は、多くの異なる技術に従って実施できる。例えば、コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールを、固体、半固体または液体のマトリックス（すなわち、注意深く選択された比率の速度調節成分および賦形剤の、マトリックス内の特有の混合物）内に分散させ、コーティング剤で覆うことができる。医薬製剤からのコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの放出速度および／または部位を調節するために、種々のコーティング技術を使用できる。例えば、コーティングの溶出は、周囲の媒質のｐＨにより引き起こすことができ、結果として時間と共にコーティングが徐々に溶出し、腸内環境の液にマトリックスが露出される。コーティングが浸透性になった後、コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールはマトリックスの外表面から拡散する。この表面からコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールが使いつくされ枯渇されたとき、崩壊するマトリックスを通して外部溶液に拡散することにより、下にあるたくわえが消耗され始める。
一側面において、本発明記載の製剤は、回腸の内容物にさらされたとき、コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールの制御された実質的に一定の放出をもたらす、放出可能または可逆的に成分と結合するマトリックス内のコレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールを提供する。
【００２４】
コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロール含有マトリックスは、胃液内で崩壊に抵抗するコーティングで適切におおわれる。ついでコーティングされたコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの徐放性製剤は、被験者、例えば、動物またはヒト被験者および患者に経口投与される。製剤が小腸の近位部を通過するとき、腸溶コーティングは徐々に透過性となるが、適切な実施形態において、製剤はコレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロール含有マトリックスのまわりに持続する構造を備える。コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロール含有マトリックスは透過性外套膜を通して回腸内の腸液に著しくさらされるようになり、ついでコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールは、単純拡散および／またはマトリックスの緩慢な崩壊により徐々に放出される。
回腸の内腔にいったん放出されれば、コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールは血流に吸収される。コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールまたはそれらの組み合わせの大部分は、使用される場合、十二指腸および空腸を過ぎた部分で吸収される。これらの小腸近位部は、高い管腔内濃度のビタミンＤに応答することができ、その過程で、かなりの量のコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールを異化することができる。回腸までコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの放出を遅らせることにより、本明細書記載の医薬組成物は、近位腸での初回通過効果を事実上排除し、望ましくない異化作用を緩和する。さらにまた、エルゴカルシフェロールの経回腸吸収は、吸収されたコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールをキロミクロンと比較して血清ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）に振り向けるようにデザインできる本明細書記載の製剤を用いて増加させることができる。ＤＢＰに結合しているコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールは肝異化作用をより受けづらいと考えられる。投与されたビタミンＤの、血流への吸収前または吸収後の顕著な異化作用により、その全身バイオアベイラビリティは著しく低下する。初回通過効果の排除により、ビタミンＤ毒性のリスクは低下する。
【００２５】
本発明の一実施形態において、コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールの徐放性製剤は、一般に以下の手順に従って製造される。十分な量のコレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールを最小量のＵＳＰ等級無水エタノール（または他の適切な溶媒）に完全に溶解し、適切な量およびタイプの医薬品等級賦形剤と混合して、室温および人体の正常体温の両方で固体または半固体であるマトリックスを作成する。このマトリックスは、胃または小腸上部において完全またはほぼ完全に消化に抵抗し、下位腸において徐々に崩壊する。他のタイプの実施形態において、液体マトリックスを使用できる。
適切な製剤において、マトリックスはコレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールに結合し、単純拡散および／または緩慢な崩壊による、小腸下部の内腔の内容物中への、４〜８時間またはそれ以上にわたる、コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの低速で比較的一定の、好ましくは実質的に一定の放出を可能にする。この製剤は、さらに、pH約7.0〜8.0を有する水溶液に部分的に溶解するか、またはコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの顕著な放出が、この製剤が十二指腸および空腸を通過し終えるまで遅延されるように単に十分に緩慢に溶解する腸溶コーティングを有することができる。
上記のように、コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールの徐放性を提供する手段は、ワックスマトリックスシステムおよびEudragit RS/RLシステム（ドイツWeiterstadtのRohm Pharma GmbH製）を含む、約４時間またはそれ以上にわたる活性成分の既知の徐放性デリバリーシステムのいずれかから選択できる。
【００２６】
ワックスマトリックスシステムは親油性マトリックスを提供する。ワックスマトリックスシステムには、密蝋、白蝋、マッコウクジラワックスまたは同様な組成物を利用することができる。活性成分（単数または複数）はワックスバインダー中に分散され、これは腸液中で緩慢に崩壊して徐々に活性成分（単数または複数）を放出する。コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールを含侵させたワックスバインダーは、部分架橋軟ゼラチンカプセルに装填される。ワックスマトリックスシステムは、体温で軟化し、腸液中で緩慢に崩壊して活性成分（単数または複数）を徐々に放出するワックスバインダー中に活性成分（単数または複数）を分散させる。体温よりも高いが、軟ゼラチンおよび／または硬ゼラチンカプセルのいずれかの殻を作成するために通常用いられるゼラチン製剤または腸溶コーティングを作成するために用いられる他の製剤の溶融温度よりも低い融点を達成するために、このシステムは適切にはオイルを随意に添加したワックスの混合物を含む。あるいはまた、このシステムは、室温および／または体温で固体、半固体または液体形のままである、オイルを随意に添加したワックスの混合物を含む。
【００２７】
具体的には、１つの適切な実施形態において、マトリックスのために選択されるワックスは溶融され完全に混合される。望ましい量のオイルは、もしあれば、この時点で添加され、次いで十分に混合される。ついでこの蝋質混合物は、その融点の少し上の温度に徐々に冷却される。エタノールに溶解された望ましい量のコレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールは溶融マトリックス中に均一に分配され、このマトリックスは軟ゼラチンカプセル中に装填される。充填カプセルは、カプセルシェル中のゼラチンを部分架橋させるために、アセトアルデヒドなどのアルデヒドを含有する溶液で適切な期間処理される。ゼラチン殻は、例えば数週間にわたって次第に架橋を受け、それにより胃および腸上部の内容物中への溶出に抵抗するようになる。適切に構築された場合、経口投与後、このゼラチン殻は徐々に溶解し、回腸に到達するまでには十分に多孔性になり（完全には崩壊しないで）、ワックスマトリックスから小腸下部の内容物中にコレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールが緩慢に拡散することが可能になる。
価値のある可能性のある他の脂質マトリックスの例は、グリセリド、脂肪酸およびアルコールならびに脂肪酸エステルである。
【００２８】
他の適切な徐放性経口ドラッグデリバリーシステムは、活性成分、コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールが寸法２５／３０メッシュを有する顆粒に形成されたEudragit RL/RSシステムである。ついでこの顆粒は、水不溶性であるが水が緩慢に浸透できる薄いポリマーラッカーで均一にコーティングされる。コーティングを施した顆粒は、選択可能な添加剤、例えば抗酸化剤、安定化剤、バインダー、滑沢剤、加工助剤などと混合することができる。この混合物は、使用前には硬くて乾燥している錠剤に成形し、さらにコーティング処理することができ、あるいはカプセル中に流し込むこともできる。錠剤またはカプセルが飲み込まれ、水性腸液と接触した後、薄いラッカーは膨潤し、腸液による浸透が緩慢に可能になる。腸液がラッカーコーティングを緩慢に浸透するに従って、含有コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールは緩慢に放出される。錠剤またはカプセルが小腸を通過する時間まで、すなわち４〜８時間またはそれ以上までには、コレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールは緩慢に、しかし完全に放出されていると考えられる。従って、摂取された錠剤は、コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールばかりでなく任意の他の活性成分を次々と放出する。
【００２９】
Eudragitシステムは高浸透性ラッカー（ＲＬ）および低浸透性ラッカー（ＲＳ）を含む。ＲＳは、中性の膨潤性メタクリル酸エステルと少ない割合のトリメチルアンモニオエチルメタクリレートクロリドとに基づき、中性エステル群に対する第四級アンモニウム群のモル比が約１：４０である水不溶性皮膜形成剤である。ＲＬはまた、中性のメタクリル酸エステルと小量のトリメチルアンモニオエチルメタクリレートクロリドに基づき、中性エステル群に対する第四級アンモニウム群のモル比が約１：２０である水不溶性膨潤性皮膜形成剤である。コーティングの浸透性ひいては薬物放出の時間的経過はＲＬコーティング剤に対するＲＳコーティング剤の割合を変えることにより調節することができる。Eudragit RL/RSシステムのさらなる詳説に関しては、Rohm Tech, Inc., 195 Canal Street, Maiden, Mass. 02146 から入手できる技術刊行物を参照できる。同様に、K. Lehmann, D. Dreher "Coating of tablets and small particles with acrylic resins by fluid bed technology", Int. J. Pharm. Tech. & Prod. Mfr. 2(r), 31-43 (1981) を参照のこと（引用により本願に組み込まれる）。
不溶性ポリマーの他の例は、ポリビニルエステル、ポリビニルアセタール、ポリアクリル酸エステル、ブタジエンスチレンコポリマーなどを含む。
【００３０】
コーティングを施した顆粒が錠剤に成形またはカプセルに封入された時点で、錠剤またはカプセルは、pH7.0〜8.0で溶解する腸溶コーティングでコーティング処理することができる。このようなｐＨ依存性腸溶剤の１つには、腸液中で溶解するが胃液中では溶解しないEudragit L/Sがある。胃液による溶出には抵抗するが、小腸エステラーゼの加水分解作用により容易に崩壊するセルロースアセテートフタレート（ＣＡＰ）などの他の腸溶コーティング剤を使用できる。
特に選ばれた腸溶コーティング剤および徐放性コーティング剤は、４〜８時間またはそれ以上にわたって徐放性で、好ましくは実質的に一定の放出および製剤が回腸に到達するまでの遅延放出を提供できる。さらに、本発明の徐放性組成物は、１日１回投与されるとき、１日１回投与される等しい投与量のコレカルシフェロール／エルゴカルシフェロールの即時放出組成物と比較して、実質的に一定の管腔内、細胞内および血中ビタミンＤ濃度を適切に提供する。
本剤形はまた、アジュバント、例えば保存アジュバントまたは安定アジュバントを含む。本剤形はまた、他の治療上有効な物質を含むこともでき、あるいは本明細書および請求項に記載の化合物の２以上を混合物で含有することもできる。
【００３１】
好都合には、他の治療剤と共に、コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールまたはそれらの組み合わせは、上記の実施形態に従って経口投与できる。どちらかのビタミンまたはそれらの組み合わせの予期される最低経口投与量は、使用される場合、投薬単位当たり少なくとも200 IU、投薬単位当たり少なくとも500 IU、投薬単位当たり少なくとも1,500 IUおよび投薬単位当たり少なくとも2,000 IUを含む。どちらかのビタミンまたはそれらの組み合わせの予期される最大経口投与量は、使用される場合、投薬単位当たり200,000 IU、投薬単位当たり50,000 IU、投薬単位当たり10,000 IUおよび投薬単位当たり5,000 IUを含む。どちらかのビタミンまたはそれらの組み合わせの予期される経口投与量範囲は、使用される場合、投薬単位当たり200 IU〜投薬単位当たり200,000 IU、投薬単位当たり500 IU〜投薬単位当たり50,000 IU、投薬単位当たり1,500 IU〜投薬単位当たり10,000 IUおよび投薬単位当たり2,000 IU〜投薬単位当たり5,000 IUを含む。好ましくは、本剤形は、前述の投与量が同様に１日当たりＩＵに相当する値に一致するように連日投与される。本発明の化合物が他の治療剤と組み合わせて投与される場合、投与される組み合わせにおける化合物のそれぞれの割合は、取り組まれる特定の疾病状態によって決まる。例えば、コレカルシフェロールおよび／またはエルゴカルシフェロールと、カルシウム塩（カルシウムサプリメントまたは食物リン酸結合剤として意図された）、ビスホスホネート、カルシウム擬態薬、ニコチン酸、鉄、リン酸結合剤、活性ビタミンＤステロール、２５−ヒドロキシビタミンＤ、ＣＹＰ２４発現または活性の阻害剤、血糖および高血圧のコントロール薬ならびに種々の抗腫瘍剤の１以上とを投与することを選択することができる。実際、疾病状態（例えば慢性腎疾患）の治療処置が望ましい結果である場合、高投与量の本発明の化合物が用いられ、予防目的には一般に低投与量が用いられるが、任意の症例において投与される特定の投与量は、当業者に公知なように、投与される特定の化合物、治療される疾患、被験者の状態ならびに薬剤の活性または被験者の反応を修飾する他の関連性のある医学的事実に従って調整されることが理解されなければならない。
コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールの組み合わせを徐放性経口ドラッグデリバリーシステムに組み込むことにより、得られた製剤がビタミンＤ3およびビタミンＤ2内分泌系の両方を維持するのに有用となり得る。現在入手可能な経口ビタミンＤサプリメントは、ちょうど両方の系を維持する。
【００３２】
実施例
本発明は以下の実施例によりさらに詳細に説明されるが、これを本発明の範囲を限定するものと解釈してはならない。
【００３３】
実施例１
徐放性製剤の１つの実施形態
黄色精製蜜蝋および分留ココナッツ油を１：１の比率で混合し、均一な混合物が得られるまで連続して撹拌しながら７５℃に加熱する。ワックス混合物を均質化しながらおおよそ４５℃に冷却する。１：１の比率のコレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールを無水エタノールに溶解し、均質化を続けながら、このエタノール溶液を溶融ワックス混合物に加える。加えるエタノールの量は、１〜２容量％の範囲である。混合物が均一になるまで混合を続ける。軟ゼラチンカプセルに均一な混合物が装填される。カプセルを直ちに洗浄し、加工滑沢剤（単数または複数）を除去し、ゼラチンシェルを架橋させるためにアセトアルデヒド水溶液に短時間浸漬する。アセトアルデヒド溶液の濃度および浸漬時間は、近赤外分光光度計による測定で望ましい程度に架橋が達成されるように選択する。出来上がったカプセルを洗浄し、乾燥し、包装する。
【００３４】
実施例２
イヌにおける薬物動態試験
２０頭の雄のビーグル犬を２つの同等の群に無作為に分割し、続く３０日間、サプリメントのビタミンＤを投与しない。この期間の終わりに、群＃１の各イヌに、実施例１で開示した徐放性製剤と同様な徐放性製剤に調製されたエルゴカルシフェロール10,000 IUを含有する単一の軟ゼラチンカプセルを投与する。他の群（群＃２）における各イヌに中鎖トリグリセリドオイルに溶解したエルゴカルシフェロール10,000 IUを含有する単一の即時放出軟ゼラチンカプセルを投与する。すべてのイヌは、投与前に少なくとも８時間絶食させる。投与後、各イヌから０、0.5、１、1.5、２、３、４、６、９、１５、２４、３６および７２時間目に採血する。エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの含有濃度について採取した血液を分析し、処置群に関してデータを分析する。群＃１におけるイヌは、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの平均血中濃度において、群＃２におけるイヌよりも、緩慢な上昇および低い最大値（Ｃmax）を示す。しかしながら、群＃１におけるイヌは、群＃１におけるＣmaxがより低いにもかかわらず、群＃２におけるイヌよりも、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤ2の平均血中濃度のより長期の上昇を示す。投与前のバックグラウンド濃度（ｔ＝０の時点で記録）で補正した平均曲線下面積（ＡＵＣ）は、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの両方に関して群＃１の方がかなり大きい。これらの手順により、本明細書記載の製剤中のエルゴカルシフェロールのイヌへの投与は、即時放出のために（中鎖トリグリセリドオイル中に）製剤化されたエルゴカルシフェロールの同一量の投与後よりもずっと徐々に上昇し、より安定に維持される、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの血中濃度をもたらすことが明らかとなる。群＃１におけるエルゴカルシフェロールの血中濃度のより大きなＡＵＣは、本明細書記載のように製剤化されたエルゴカルシフェロールのバイオアベイラビリティーが顕著に改善されたことを明らかにする。群＃１における血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度のより大きなＡＵＣは、本明細書記載のように製剤化されたエルゴカルシフェロールはより効率的に２５−ヒドロキシビタミンＤに変換されることを明らかにする。この差異は、より高いバイオアベイラビリティーおよび異化クリアランスの減少に基づくと考えられる。本明細書記載の製剤の使用による、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの血中濃度における投与後“スパイク”の排除または抑制により、ＣＹＰ２４の誘導が抑制され、それにより２５−ヒドロキシビタミンＤの好ましくない異化作用が抑制されると予期される。このように、本発明の組成物および方法により示される利点の１つは、例えば組織中のｍＲＮＡまたはタンパク質濃度により測定される、循環ＣＹＰ２４または肝臓、腎臓もしくは腸におけるＣＹＰ２４の誘導の低下であることができる。
さらにまた、エルゴカルシフェロールの経回腸吸収は、吸収されたエルゴカルシフェロールをキロミクロンと比較して血清ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）に振り向けるようにデザインできる本明細書記載の製剤を用いて増加させることができる。ＤＢＰに結合しているエルゴカルシフェロールは、肝異化作用からさらに保護されていると考えられる。さらにまた、全部で10,000 IUのエルゴカルシフェロールおよびコレカルシフェロールの混合物は、10,000 IUのエルゴカルシフェロールまたはコレカルシフェロール単独よりも異化作用を受けずらいと期待される。特定の理論に拘束されることを意図しないが、この期待は、エルゴカルシフェロールおよびコレカルシフェロールと関連する異なる代謝経路および異化経路ならびに、ビタミン間の投与量を分割すること（かつ好ましくは徐放性製剤を用いること）は、ＣＹＰ２４および他の異化酵素から両方のビタミンを保護するのに役立つことができることに基づいている。
【００３５】
実施例３
健常ボランティアにおける薬物動態試験
年齢１８〜２４歳の健常な非肥満成人１６名が、二重盲検法を用いてエルゴカルシフェロールの２製剤の継続的な投与を受ける、１１週薬物動態試験に参加する。製剤の１つ（製剤＃１）は、実施例１で開示した徐放性製剤と同様な徐放性製剤に調製されたエルゴカルシフェロール50,000 IUを含有する軟ゼラチンカプセルである。他の製剤（製剤＃２）は、中鎖トリグリセリドオイルに溶解したエルゴカルシフェロール50,000 IUを含有する、同じ外観の即時放出軟ゼラチンカプセルである。試験開始に先立って６０日間、すべての被験者は他のビタミンＤサプリメントの摂取をやめ、これを試験終了まで続ける。試験の１、３および５日目に、治療前ベースライン値を確定するために、すべての被験者は朝の空腹時の血液サンプルを提供する。８日目の朝に、被験者はさらなる空腹時の血液サンプル（ｔ＝０）を提供し、２つの処置群の１つに無作為に割り付けられる。朝食をとる前に、どちらの群にも単一試験カプセルを投与する。１つの群には製剤＃１のカプセルを投与し、他の群には製剤＃２のカプセルを投与する。投与後0.5、１、1.5、２、３、４、６、８、１０、１２、１５、２４、３６、４８、７２および１０８時間目に各被験者から採血する。７０日目の朝に、被験者は朝の空腹時の血液サンプル（ｔ＝０）を提供し、朝食をとる前に他の試験製剤の単一カプセルを投与される。投与後0.5、１、1.5、２、３、４、６、８、１０、１２、１５、２４、３６、４８、７２および１０８時間目に各被験者から血液を再度採取する。エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの含有濃度に関してすべての採取した血液を分析し、ベースライン値の補正後に処置製剤に関してデータを分析する。製剤＃１は、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの平均血中濃度において、製剤＃２よりも緩慢な上昇および低い（Ｃmax）をもたらすことが見いだされる。しかしながら、製剤＃１はまた、記録されるＣmaxが低いにもかかわらず、製剤＃２と比較して、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤ2の平均血中濃度のより長期的な上昇をもたらす。製剤＃１の投与後、平均ＡＵＣはエルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの両方に関してかなり大きい。これらの手順により、本発明記載の製剤中のエルゴカルシフェロールの健常なヒト成人への投与は、即時放出のために（中鎖トリグリセリドオイル中に）製剤化されたエルゴカルシフェロールの同一量の投与後よりもずっと徐々に上昇し、より安定に維持される、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの血中濃度をもたらすことを明らかにできる。製剤＃１によるビタミンＤ投与後の血中濃度に関するＡＵＣがより大きいことにより、本明細書記載のとおり製剤化されたエルゴカルシフェロールのバイオアベイラビリティーがより優れていることが明らかになる。製剤＃１後の２５−ヒドロキシビタミンＤの血中濃度に関するＡＵＣがより大きいことにより、本明細書記載のとおり製剤化されたエルゴカルシフェロールは、より効率的に２５−ヒドロキシビタミンＤに変換されることが明らかになる。
【００３６】
実施例４
ビタミンＤ不足である健常な成人男性ボランティアにおける有効性試験
血清２５−ヒドロキシビタミンＤの最適濃度（30ng/mLを超える）への回復における３つの異なるビタミンＤ製剤の効果を、ビタミンＤ不足と診断された健常な非肥満男性の２３日間試験で試験する。製剤の１つ（製剤＃１）は、コレカルシフェロール1,250 IUおよびエルゴカルシフェロール1,250 IUの混合物を含み本明細書記載のように調製される、ビタミンD 2,500 IUを含有する軟ゼラチンカプセルである。第２の製剤（製剤＃２）は、中鎖トリグリセリドオイルに溶解したエルゴカルシフェロール50,000 IUを含有する、同じ外観の即時放出軟ゼラチンカプセルである。第３の製剤（製剤＃３）は、中鎖トリグリセリドオイルに溶解したコレカルシフェロール50,000 IUを含有する、同様に同じ外観の即時放出軟ゼラチンカプセルである。合計１００名の健常な白人およびアメリカ黒人の男性がこの試験に参加する。全員年齢３０〜４５であり、血清２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度15〜29ng/mL（両端を含む）を有する。すべての被験者は、試験開始に先立って６０日間他のビタミンＤサプリメントの摂取をやめ、これを試験終了まで続ける。この試験の１日目および２日目に、血清２５−ヒドロキシビタミンＤの治療前ベースライン値を確定するために、すべての被験者は朝の空腹時の血液サンプルを提供する。３日目の朝に、被験者はさらなる空腹時の血液サンプル（ｔ＝０）を提供し、４つの処置群の１つに無作為に割り付けられ、朝食をとる前に単一試験カプセルを投与される。群＃１の被験者はそれぞれ製剤＃１の単一カプセルを投与され、群＃２および＃３の各被験者は、それぞれ製剤＃２および製剤＃３の単一カプセルを投与される。群＃４の被験者はマッチングプラセボカプセルを投与される。群＃１の被験者は、それぞれ、４日目から２２日目の朝の朝食前に製剤＃１のさらなるカプセルを投与されるが、群＃２、＃３および＃４の被験者はさらなるカプセルを投与されない。群＃１、＃２および＃３の被験者は、試験期間を通して総量50,000 IUのビタミンＤを投与される。処置群にかかわらず、４、５、６、１０、１７および２３日目（すなわち投与開始後１、２、３、７、１４および２０日目）に、各被験者から朝の空腹時の血液サンプルを採取する。ビタミンＤおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの含有濃度に関してすべての採取した血液を分析し、ベースラインの補正後、処置群に関してデータを分析する。全４処置群の被験者は、１日目から３日目までに採取された空腹時の血液サンプルの分析に基づいて、平均ベースライン血清全ビタミンＤ濃度おおよそ８〜10nmol/Lおよびベースライン血清２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度おおよそ16〜18ng/mLを示す。群＃４（対照群）の被験者は、試験期間を通して平均血清ビタミンＤまたは平均血清２５−ヒドロキシビタミンＤのいずれにおいても有意な変化を示さない。群＃１の被験者は、試験期間中おおよそ２〜５nmol/Lの範囲で血清ビタミンＤの平均上昇を示し、平均血清２５−ヒドロキシビタミンＤは着実に上昇し、２３日目にはおおよそ37ng/mLに達する。これとは著しく異なり、群＃２および＃３の被験者は投与の２４時間後までに25nmol/Lを超える血液のビタミンＤの平均上昇を示し、次いでこれは次の週を通してベースラインの方に減少し、試験の終了のかなり前にベースライ���に達する。群＃２の被験者は、投与後、最初の数日間は平均血清２５−ヒドロキシビタミンＤの上昇を示し、これは25ng/mLより少し大きい最大値に達し、その後急速に低下する。試験終了までには、血清２５−ヒドロキシビタミンＤは群＃２のベースラインよりも著しく低下している。群＃３の被験者は、投与後、最初の２週間まで平均血清２５−ヒドロキシビタミンＤの継続的な上昇を示し、その後これは徐々に漸進的に低下する。試験終了までに平均血清２５−ヒドロキシビタミンＤは30ng/mL以下になっており、治療前ベースラインよりもわずかおおよそ11ng/mL高いだけになる。この試験からのデータにより、本明細書記載のように製剤化され、１日当たり2,500 IUの１日量を２０日間投与する、ビタミンＤ 50,000 IUの投与は、経口ビタミンＤ補充療法に関して現在のところＮＫＦおよび他の指導的な専門家により推奨されている、単回投与で投与されるエルゴカルシフェロールまたはコレカルシフェロールのいずれかの50,000 IUの即時放出製剤よりも、２５−ヒドロキシビタミンＤの低い血清濃度を最適濃度に回復させるのに実質的により効果的であることを明らかにすることができる。
【００３７】
実施例５
ビタミンＤ欠乏を示す健常な閉経後ボランティアにおける有効性および安全性に関する試験
血清２５−ヒドロキシビタミンＤの最適濃度（30ng/mLを超える）への回復における２つの異なるビタミンＤ製剤の有効性および安全性を、ビタミンＤ不足と診断された健常な非肥満閉経期の女性の１年試験で試験する。製剤の１つ（製剤＃１）は、コレカルシフェロール1,000 IUを含有する、実施例１記載の徐放性製剤と同様な徐放性製剤に調製される軟ゼラチンカプセルである。第２の製剤（製剤＃２）は、中鎖トリグリセリドオイルに溶解したエルゴカルシフェロール1,000 IUを含有する、同じ外観の即時放出軟ゼラチンカプセルである。合計３５０名の健常な白人、アジア人、ラテンアメリカ人およびアメリカ黒人の女性が本試験に参加する。全員少なくとも閉経後５年であり、血清２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度15ng/mL未満を有する。登録に先立って、血清カルシウム、血漿インタクトＰＴＨ、血清２５−ヒドロキシビタミンＤおよび２４時間尿カルシウム排泄の治療前ベースライン値を確定するために、すべての被験者は、少なくとも１週間離れた、朝の空腹時の血液サンプル２つおよび２４時間尿採取物２つを提供する。１日目の朝に、被験者は７つの処置群のうちの１つに無作為に割り付けられ、２つの試験調製物またはマッチングプラセボを連日投与される。処置群のうちの３つは、それぞれ１日当たり製剤＃１の１、２または４カプセルを自己投与し、他の３群は、それぞれ１日当たり製剤＃２の１、２または４カプセルを自己投与する。残った処置群は１日当たり１つのプラセボカプセルを自己投与する。すべての投与は、朝、朝食前に行う。血清カルシウム、血漿インタクトＰＴＨ、血清２５−ヒドロキシビタミンＤおよび２４時間尿カルシウム排泄の測定のために、年４回、さらなる空腹時の血液サンプルおよび２４時間尿採取物を各被験者から得る。試験を通じて、すべての被験者は、栄養士の継続的指導の下に、元素カルシウム１日摂取量おおよそ1,000〜1,500mg（自己選択食および、必要に応じてカルシウムサプリメントから）を厳守する。試験の終わりに、適切なベースライン値の補正後に、処置群および試験製剤に関して検査データの分析を行う。全７群は、血清２５−ヒドロキシビタミンＤ（範囲：10.7ng/mL〜11.9ng/mL）、血漿インタクトＰＴＨ（範囲：45.3pg/mL〜52.1pg/mL）、血清カルシウム（範囲：9.15mg/dL〜9.31mg/dL）および２４時間尿カルシウム（範囲：55mg/日〜64mg/日）に関して、同等の平均ベースライン値を有する。試験期間を通じて、プラセボ（対照）群において、検査平均値のいずれにおいても有意な変化は見られない。製剤＃１を投与される３つの処置群および製剤＃２を投与される３つの処置群における被験者は、投与の最初の６ヶ月の間、血清２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度の漸増を示し、その後定常状態濃度に達する。試験の終わりにおける、１日量に対する血清２５−ヒドロキシビタミンＤの平均上昇の分析は、両方の製剤に関して近線形直接用量応答関係を示す。しかしながら、製剤＃１に関する用量応答関係の勾配は製剤＃２に関するものよりも著しく大きい。６、９および１２ヶ月目における、１日量に対する血漿インタクトＰＴＨの平均変化の分析は、製剤＃１の最高投与量においてよりも、製剤＃２の最高投与量においての方がインタクトＰＴＨがより低下するという、両方の��剤に関する非線形逆相関関係を明らかにする。ビタミンＤを投与されるすべての処置群において、平均血清カルシウムおよび平均２４時間尿カルシウムはベースラインから著しく上昇し、製剤＃２の高投与量において、製剤＃１の同等の投与量におけるよりも著しく高い。250mgを超える２４時間尿カルシウムで定義される高カルシウム尿症発作および9.5mg/dLを超える血清カルシウムで定義される高カルシウム血症は、製剤＃１の最高投与量と比較して、製剤＃２の最高投与量で処置した被験者において著しく多く観察される。この試験からのデータは、製剤＃１は、製剤＃２よりも血清２５−ヒドロキシビタミンＤを上昇させる上でより効果的であり、製剤＃１はカルシウムおよびＰＴＨ代謝に関連した副作用を引き起こすことがかなり少ないことを示すことができる。
【００３８】
実施例６
年齢１８〜２４歳の健常な非肥満成人１６名が、二重盲検法を用いて２製剤の継続的な投与を受ける薬物動態試験に参加する。製剤の１つは、徐放性製剤に調製されたコレカルシフェロール1,500 IUおよびエルゴカルシフェロール1,500 IUの組み合わせを含有する軟ゼラチンカプセル（製剤＃１）である。他の製剤は、中鎖トリグリセリドオイルに溶解したコレカルシフェロール1,500 IUおよびエルゴカルシフェロール1,500 IUの組み合わせを含有する同じ外観の即時放出軟ゼラチンカプセル（製剤＃２）である。試験開始に先立って６０日間、被験者は他のビタミンＤサプリメントの摂取をやめ、これを試験終了まで続ける。試験の１、３および５日目に、治療前ベースライン値を確定するために、すべての被験者は朝の空腹時の血液サンプルを提供する。８日目の朝に、被験者はさらなる空腹時の血液サンプル（ｔ＝０）を提供し、２つの処置群の１つに無作為に割り付けられる。朝食をとる前に、どちらの群にも単一試験カプセルを投与する。１つの群には製剤＃１のカプセルを投与し、他の群には製剤＃２のカプセルを投与する。投与後0.5、１、1.5、２、３、４、６、８、１０、１２、１５、２４、３６、４８、７２および１０８時間目に各被験者から採血する。コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロールおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの含有濃度に関してすべての採取した血液を分析し、ベースライン値の補正後に処置製剤に関してデータを分析する。
【００３９】
慢性腎疾患患者におけるビタミンＤ低下症の予防と治療のための徐放性製剤（血清全２５−ヒドロキシビタミンＤを目標値（≧30ng/mL）に回復する）の有効性および安全性を２ヶ月試験で試験する。合計１００名の健常な白人およびアメリカ黒人の男性がこの試験に参加する。全員年齢３０〜４５であり、血清２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度15〜29ng/mL（両端を含む）を有する。すべての被験者は、試験開始の前に６０日間他のビタミンＤサプリメントの摂取をやめ、これを試験終了まで続ける。この試験の１日目および２日目に、血清２５−ヒドロキシビタミンＤの治療前ベースライン値を確定するために、すべての被験者は朝の空腹時の血液サンプルを提供する。３日目の朝に、被験者はさらなる空腹時の血液サンプル（ｔ＝０）を提供し、４つの処置群の１つに無作為に割り付けられ、朝食をとる前に単一試験カプセルを投与される。群＃１の被験者はそれぞれ製剤＃１の単一カプセルを投与され、群＃２の被験者はそれぞれ製剤＃２の単一カプセルを投与される。群＃１の被験者は、それぞれ、４日目から２２日目の朝の朝食前に製剤＃１のさらなるカプセルを投与されるが、群＃２の被験者はさらなるカプセルを投与されない。処置群にかかわらず、４、５、６、１０、１７および２３日目（すなわち投与開始後１、２、３、７、１４および２０日目）に、各被験者から朝の空腹時の血液サンプルを採取する。ビタミンＤおよび２５−ヒドロキシビタミンＤの含有濃度に関してすべての採取した血液を分析し、ベースラインの補正後、処置群に関してデータを分析する
【００４０】
本明細書に記載のすべての特許、出版物および引用文献は、引用により本願に組み込まれる。本開示および組み込まれた特許、出版物および引用文献との間に矛盾が存在する場合、本開示が支配する。
【国際調査報告】
2009511590.tif 000003
2009511590.tif 000004
2009511590.tif 000005
2009511590.tif 000006