(57)【要約】本発明は、チエノピリミジン化合物を含んで成る新規医薬組成物に関する。さらに、本発明は、Ｍｎｋ１および／またはＭｎｋ２（Ｍｎｋ２ａまたはＭｎｋ２ｂ）および／またはそれらの変異体のキナーゼ活性の阻害に影響されうる疾患の予防および／または治療用の医薬組成物を製造するための、本発明のチエノピリミジン化合物の使用にも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）で示される化合物：
【化１】
2009532407.tif 000027
（式中、
Ｘは、単結合、Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ１ａ、ＣＲ１ａＲ１ｂ、ＣＨ（ハロゲン）、Ｃ（ハロゲン）２、Ｃ＝Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ａ、ＮＨまたはＮＲ１ａであり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルＣ３−１０シクロアルキル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）であり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されており；
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルＣ３−１０シクロアルキル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ６−１０アリール、Ｃ１−６アルキルＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ１−６アルキルＣ５−１０ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）であり、Ｒ１は、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されており；
または、Ｘが、ＮＲ１ａ、ＣＨＲ１ａ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ａまたはＣＲ１ａＲ１ｂである場合、Ｒ１は、Ｒ１ａおよびそれらが結合しているＮまたはＣ原子と一緒になって、５または６員環の飽和、不飽和または芳香族炭素環式または複素環式環を形成してよく、該環は、Ｎ、ＳおよびＯから選択される１個またはそれ以上の付加的へテロ原子を有してよく、該環は、１個またはそれ以上のＲ９で置換されていてよく；
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルＣ３−１０シクロアルキル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ６−１０アリール、Ｃ１−６アルキルＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ１−６アルキルＣ５−１０ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ１−６アルキル３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）から選択されるか、または、それらが結合しているＣ原子と一緒になって、Ｃ３−７シクロアルキルまたは３〜１０員環ヘテロシクロアルキル基を形成し、Ｒ２およびＲ３は、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されており；Ｒ２はＲ９であってもよく、Ｒ３は、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ１１、Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、ＳＲ１１、Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、オキソ（＝Ｏ）（環は少なくとも部分的に飽和されている）、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ１−６アルキル、フェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、またはヘテロシクリルであってもよく；Ｃ１−６アルキル、フェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、およびヘテロシクリルは、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されており；
Ｒ４は、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されている水素、Ｃ１−４アルキル、尿素、チオ尿素またはアセチルであり；
または、Ｒ４は、Ｘと一緒になって、５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環を形成してよく；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、同じかまたは異なり、水素およびＲ９から独立して選択され；
または、Ｒ６およびＲ７は、５または６員環の飽和、不飽和または芳香族炭素環式または複素環式環を形成してよく、該複素環式環は、Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有し；
Ｒ９は、独立して、ハロゲン、ＣＮ、ＣＯＯＲ１１、ＯＲ１１、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、ＳＲ１１、Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、オキソ（＝Ｏ）（環は少なくとも部分的に飽和されている）、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ１−６アルキル、フェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、またはＮ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する５または６員環の飽和、不飽和または芳香族ヘテロシクリルであり；Ｃ１−６アルキル、フェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、およびヘテロシクリルは、１個またはそれ以上のＲ１０で任意選択的に置換されており；
Ｒ１０は、独立して、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ１１、Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、ＳＲ１１、Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、オキソ（＝Ｏ）（環は少なくとも部分的に飽和されている）、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ１−６アルキル、フェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、またはヘテロシクリルであり；
Ｒ１１、Ｒ１１ａ、Ｒ１１ｂは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルＣ３−１０シクロアルキル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ６−１０アリール、５〜１０員環ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）から成る群から選択され、Ｒ１１、Ｒ１１ａ、Ｒ１１ｂは、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されている）
またはその代謝物質、プロドラッグまたは医薬的に許容される塩であり、
【化２】
2009532407.tif 000028
でない化合物。
【請求項２】
Ｘが、単結合、ＯまたはＮＲ１ａである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘが、ＯまたはＮＲ１ａである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ＸがＯである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が、１個またはそれ以上のハロゲン原子で任意選択的に置換されているＣ１−６アルキル、Ｃ３〜１０シクロアルキル、ＯおよびＮから選択されるヘテロ原子を有し、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されている３〜１０員環ヘテロシクロアルキルであるか；または、ＸがＮＲ１ａである場合、Ｒ１は、Ｒ１ａおよびそれらが結合しているＮ原子と一緒になって、５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環を形成してよい、請求項１〜４のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２およびＲ３が、独立して、水素、Ｃ１−６アルキルおよびＣ６−１０アリールから選択される、請求項１〜５のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２およびＲ３が、独立して、水素およびＣ１−６アルキルから選択される、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２およびＲ３が水素である、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ４が水素である、請求項１〜８のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ５が、水素およびハロゲンから選択される、請求項１〜９のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ５が水素である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ６が、水素、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、−ＣＯＯＲ１１、ならびにＮ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環から選択されるか、またはＲ７と一緒になって、Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環を形成する、請求項１〜１１のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ７が、水素であるか、またはＲ６と一緒になって、Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環を形成する、請求項１〜１２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ８が水素である、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ６が、水素、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）および−ＣＯＯＲ１１から選択される、請求項１２〜１４のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ６が、弗素、ＣＯＯＨおよびＣ（Ｏ）ＮＨ２から選択される、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ７が水素である、請求項１３〜１６のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ５、Ｒ７およびＲ８が水素である、請求項１〜１７のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ６がＲ７と一緒になって、Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環を形成する、請求項１〜１５のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ６がＲ７と一緒になって、２個のＮ原子を有する５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環を形成する、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
下記：
【化３−１】
2009532407.tif 000029
【化３−２】
2009532407.tif 000030
【化３−３】
2009532407.tif 000031
【化３−４】
2009532407.tif 000032
【化３−５】
2009532407.tif 000033
【化３−６】
2009532407.tif 000034
【化３−７】
2009532407.tif 000035
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
下記：
【化４−１】
2009532407.tif 000036
【化４−２】
2009532407.tif 000037
【化４−３】
2009532407.tif 000038
【化４−４】
2009532407.tif 000039
【化４−５】
2009532407.tif 000040
から成る群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２３】
下記式：
【化５】
2009532407.tif 000041
で示される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２４】
請求項１〜２４のいずれか１つに記載の化合物、および任意選択的に、医薬的に許容される担体を含んで成る医薬組成物。
【請求項２５】
付加的治療薬をさらに含んで成る、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
付加的治療薬が、抗糖尿病薬、脂質降下薬、心臓血管薬、抗高血圧薬、利尿薬、血小板凝集阻害剤、抗腫瘍薬または抗肥満薬から選択される、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
付加的治療薬が下記：
ヒトＮＰＨインスリン、ヒトレンテまたはウルトラレンテインスリン、インスリンリスプロ（ｉｎｓｌｉｎ  Ｌｉｓｐｒｏ）、インスリンアスパタート（ｉｎｓｌｉｎ  Ａｓｐａｔａｒｔ）またはインスリングラルギン（ｉｎｓｕｌｉｎ  Ｇｌａｒｇｉｎｅ）、アテノロール、ビソプロロール、メトプロロール、エスモロール、セリピロロール、タリノロール、オクスプレノロール、ピンドロール、プロパノロール、ブプロパノロール、ペンブトロール、メピンドロール、ソタロール、セルテオロール、ナドロール、カルベジロール、ニフェジピン、ニトレンジピン、アムロジピン、ニカルジピン、ニソルジピン、ジルチアゼム、エナラプリル、ベラパミル、ガロパミル、キナプリル、カプトプリル、リシノプリル、ベナゼプリル、ラミプリル、ペリドプリル、ホシノプリル、トランドラプリル、イルベサタン、ロサルタン、バルサルタン、テルミサルタン、エプロサルタン、オルメサルタン、ヒドロクロロチアジド、ピレタニド、クロロタリドン、メフルシド、フロセミド、ベンドロフルメチアジド、トリアムテレン、デヒドララジン、アセチルサリチル酸、チロフィバン−ＨＣｌ、ジピラミドール、トリクロピジン、イロプロスト−トロメタノール、エプチフィバチド、クロピドグレル、ピラテカム、アブシキシマブ、トラピジル、シンバスタチン、ベザフィブレート、フェノフィブレート、ゲムフィブロジル、エトフィリン、クロフィブレート、エトフィブレート、フルバスタチン、ロバスタチン、プラバスタチン、コレスチラミド、コレスチポール−ＨＣｌ、キサンチノールニコチネート、イノシトールニコチネート、アシピモックス、ネビボロール、グリセロールニトレート、イソソルビドモノニトレート、イソソルビドジニトレート、ペンタエリスリチルテトラニトレート、インダパミド、シラゼプリル、ウラピジル、エプロサルタン、ニルバジピン、メトプロロール、ドキサゾシン、モルシドルミン、モキサベリン、アセブトロール、プラゾシン、トラピジル、クロニジン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ポドフィロトキシン誘導体、エトポシド、テニポシド、アルキル化薬、ニトロソ尿素、Ｎ−喪失類似体（Ｎ−ｌｏｓｔ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ）、シクロプロンファミド、エスタムスチン、メルファラン、イホスファミド、ミトキサントロン、イダルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ダクチノマイシン、ダプトマイシン、シタラビン、フルオロウラシル、フルオロアラビン、ゲムシタビン、チオグアニン、カペシタビン、アドリアマイシン／ダウノルビシン、シトシンアラビノシド／シタラビン、４−ＨＣ、または他のホスファミド；
から選択される、請求項２５または２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
経口、非経口（例えば、気管支肺）、局部または局所投与のための、請求項２４〜２７のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【請求項２９】
Ｍｎｋ１またはＭｎｋ２（Ｍｎｋ２ａ、Ｍｎｋ２ｂ）またはそれらの変異体のキナーゼ活性の活性を阻害するための、請求項１〜２３のいずれか１つに記載の化合物を含んで成る医薬組成物。
【請求項３０】
代謝性疾患、造血性障害および癌、ならびにそれらの続発性合併症および疾患の予防または治療のための、請求項１〜２３のいずれか１つに記載の化合物を含んで成る医薬組成物。
【請求項３１】
炭水化物および／または脂質代謝の代謝性疾患、ならびにそれらの続発性合併症および障害の予防または治療のための、請求項２９または３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
下記：
グルコース許容値低下症、ＩＩ型糖尿病、ＬＡＤＡ、Ｉ型糖尿病、肥満症、代謝性症候群、摂食障害、悪液質、骨関節炎、胆石、糖尿病性合併症、例えば、糖尿病性壊疽、糖尿病性関節症、糖尿病性骨減少症、糖尿病性糸球体硬化症、糖尿病性腎症、糖尿病性皮膚障害、糖尿病性神経障害、糖尿病性白内障および糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑症、糖尿病性フィートシンドローム（ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｆｅｅｔ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ケトアシドーシスを伴うか伴わない糖尿病性昏睡、糖尿病性高浸透圧性昏睡、低血糖性昏睡、高血糖性昏睡、糖尿病性アシドーシス、糖尿病性ケトアシドーシス、毛細管内糸球体ネフローゼ（ｉｎｔｒａｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｏｓｉｓ）、キンメルスティール−ウィルソン症候群、糖尿病性筋萎縮症、糖尿病性自律神経障害、糖尿病性単神経障害、糖尿病性多発神経障害、糖尿病性血管障害、糖尿病性末梢血管障害、糖尿病性潰瘍、糖尿病性関節症、または糖尿病における肥満症；
から選択される炭水化物代謝の疾患、ならびにそれらの続発性合併症および障害の予防または治療のための、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
下記：
高コレステロール血症、ディスリピデミア（ｄｉｓｌｉｐｉｄｅｍｉａ）、家族性高コレステロール血症、フレドリックソン高リポ蛋白血症、高βリポ蛋白血症、高脂血症、低密度リポ蛋白型［ＬＤＬ］高リポ蛋白血症、純粋高グリセリド血症、内因性高グリセリド血症、孤立性高コレステロール血症、孤立性高トリグリセリド血症、心臓血管疾患（高血圧症、虚血、拡張蛇行静脈、網膜静脈閉塞、冠状動脈性心疾患、狭心症（ａｎｇｉｎａ  ｐｅｃｔｏｒｉｓ）、心筋梗塞、狭心症（ｓｔｅｎｏｃａｒｄｉａ）、肺高血圧症、うっ血性心不全、糸球体症、尿細管間質性障害、腎不全、血管狭窄症、脳血管障害または脳卒中から選択される）；
から選択される脂質代謝の代謝性疾患（即ち、脂質障害）、ならびにそれらの続発性合併症および障害の治療および／または予防のための、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
Ｉ型糖尿病またはＩＩ型糖尿病またはＬＡＤＡ、ならびにそれらの続発性合併症および障害の予防または治療のための、請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
造血性障害の予防または治療のための、請求項２９または３０に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
ＩＩ型糖尿病ならびにその続発性合併症および障害の予防または治療のための、請求項３２または３３に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
肥満症の予防または治療のための、請求項２９または３０に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
付加的治療薬と組み合わせて、同時にまたは逐次的に患者に投与される、請求項２９から３７のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【請求項３９】
付加的治療薬が、抗糖尿病薬、脂質降下薬、心臓血管薬、抗高血圧薬、利尿薬、血小板凝集阻害剤、抗腫瘍薬または抗肥満薬から選択される、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
付加的治療薬が下記：
ヒトＮＰＨインスリン、ヒトレンテまたはウルトラレンテインスリン、インスリンリスプロ、インスリンアスパタートまたはインスリングラルギン、アテノロール、ビソプロロール、メトプロロール、エスモロール、セリピロロール、タリノロール、オクスプレノロール、ピンドロール、プロパノロール、ブプロパノロール、ペンブトロール、メピンドロール、ソタロール、セルテオロール、ナドロール、カルベジロール、ニフェジピン、ニトレンジピン、アムロジピン、ニカルジピン、ニソルジピン、ジルチアゼム、エナラプリル、ベラパミル、ガロパミル、キナプリル、カプトプリル、リシノプリル、ベナゼプリル、ラミプリル、ペリドプリル、ホシノプリル、トランドラプリル、イルベサタン、ロサルタン、バルサルタン、テルミサルタン、エプロサルタン、オルメサルタン、ヒドロクロロチアジド、ピレタニド、クロロタリドン、メフルシド、フロセミド、ベンドロフルメチアジド、トリアムテレン、デヒドララジン、アセチルサリチル酸、チロフィバン−ＨＣｌ、ジピラミドール、トリクロピジン、イロプロスト−トロメタノール、エプチフィバチド、クロピドグレル、ピラテカム、アブシキシマブ、トラピジル、シンバスタチン、ベザフィブレート、フェノフィブレート、ゲムフィブロジル、エトフィリン、クロフィブレート、エトフィブレート、フルバスタチン、ロバスタチン、プラバスタチン、コレスチラミド、コレスチポール−ＨＣｌ、キサンチノールニコチネート、イノシトールニコチネート、アシピモックス、ネビボロール、グリセロールニトレート、イソソルビドモノニトレート、イソソルビドジニトレート、ペンタエリスリチルテトラニトレート、インダパミド、シラゼプリル、ウラピジル、エプロサルタン、ニルバジピン、メトプロロール、ドキサゾシン、モルシドルミン、モキサベリン、アセブトロール、プラゾシン、トラピジル、クロニジン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ポドフィロトキシン誘導体、エトポシド、テニポシド、アルキル化薬、ニトロソ尿素、Ｎ−喪失類似体、シクロホスファミド、エストラムスチン、メルファラン、イホスファミド、ミトキサントロン、イダルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ダクチノマイシン、ダプトマイシン、シタラビン、フルオロウラシル、フルオロアラビン、ゲムシタビン、チオグアニン、カペシタビン、アドリアマイシン／ダウノルビシン、シトシンアラビノシド／シタラビン、４−ＨＣ、または他のホスファミド；
から選択される、請求項３８または３９に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
サイトカイン関連障害を治療または予防するための、請求項１〜２３のいずれか１つに記載の化合物を含んで成る医薬組成物。
【請求項４２】
付加的治療薬と組み合わせて、同時にまたは逐次的に患者に投与される、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
付加的治療薬が、下記：
ヒスタミン拮抗薬、ブラジキニン拮抗薬、セロトニン拮抗薬、ロイコトリエン、抗喘息薬、ＮＳＡＩＤ、解熱薬、コルチコステロイド、抗生物質、鎮痛薬、尿酸排泄促進薬、化学療法薬、抗痛風薬、気管支拡張薬、シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤、ステロイド、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、免疫抑制薬、ロイコトリエン拮抗薬、細胞増殖抑制薬、サイトカインに対する抗体またはそのグラグメント、およびサイトカイン受容体の可溶性部分（フラグメント）；
から選択される請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
付加的治療薬が、下記：
クレマスチン、ジフェンヒドラミン、ジメンヒドリネート、プロメタジン、セチリジン、アステミゾール、レボカバスチン、ロラチジン、テルフェナジン、アセチルサリチル酸、サリチル酸ナトリウム、サルサラート、ジフルニサル、サリチルサリチル酸、メサラジン、スルファサラジン、オサラジン、アセトアミノフェン、インドメタシン、スリンダク、エトドラク、トルメチン、ケトロラク、ベタメタゾン、ブデソニド、クロモグリシン酸、ジメチコーン、シメチコーン、ドンペリドン、メトクロプラミド、アセメタシン、オキサセプロール、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトプロフェン、フルブリプロフェン、フェノプロフェン、オキサプロジン、メフェナム酸、メクロフェナム酸、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、アザプロパゾン、ニメスリド、メタミゾール、レフルナミド、エフォリコキシブ、ロナゾラク、ミソプロストール、パラセタモール、アセクロフェナク、バルデコキシブ、パレコキシブ、セレコキシブ、プロピルフェナゾン、コデイン、オキサポジン、ダプソン、プレドニソン、プレドニソロン、トリアムシノロン、デキシブプロフェン、デキサメタゾン、フルニソリド、アルブテロール、サルメテロール、テルブタリン、テオフィリン、カフェイン、ナプロキセン、グルコサミンスルフェート、エタネルセプト、ケトプロフェン、アダリムマブ、ヒアルロン酸、インドメタシン、プログルメタシンジマレエート、ヒドロキシクロロキン、クロロキン、インフリキシマブ、エトフェナメート、アウラノフィン、金、［２２４Ｒａ］ラジウムクロリド、チアプロフェン酸、デクスケトプロフェン（トロメタモール）、クロプレドノール、アウロチオマレイン酸ナトリウム、アウロチオグルコース、コルヒチン、アロプリノール、プロベネシド、スルフィンピラゾン、ベンズブロマロン、カルバマゼピン、ロルノキシカム、フルオロコルトロン、ジクロフェナク、エファリズマブ、イダルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ダクチノマイシン、ダプトマイシン、シタラビン、フルオロウラシル、フルオロアラビン、ゲムシタビン、チオグアニン、カペシタビン、アドリアマイシン／ダウノルビシン、シトシンアラビノシド／シタラビン、４−ＨＣ、または他のホスファミド、ペリシラミン、ヒアルロン酸調製物、アルテパロン、グルコサミン、ＭＴＸ、ＴＮＦ−受容体の可溶性フラグメント、およびＴＮＦに対する抗体；
から選択される請求項４２または４３に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
サイトカイン関連疾患が下記：
慢性または急性炎症、慢性炎症性関節炎、関節炎、関節リウマチ、乾癬性関節炎、骨関節炎、若年性関節リウマチ、痛風性関節炎；乾癬、紅皮症性乾癬、膿疱性乾癬、炎症性腸疾患、クローン病および関連症状、潰瘍性大腸炎、大腸炎、憩室炎；腎炎、尿道炎、卵管炎、卵巣炎、子宮内膜炎、脊椎炎、全身性エリテマトーデスおよび関連障害、多発性硬化症、喘息、髄膜炎、脊髄炎、脳脊髄炎、脳炎、静脈炎、血栓性静脈炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性肺疾患、アレルギー性鼻炎、心内膜炎、骨髄炎、リウマチ熱、リウマチ性心膜炎、リウマチ性心内膜炎、リウマチ性心筋炎、リウマチ性僧帽弁疾患、リウマチ性大動脈弁疾患、前立腺炎、前立腺膀胱炎、脊椎関節症、硬直性脊椎炎、滑膜炎、腱滑膜炎、筋炎、咽頭炎、リウマチ性多発性筋痛、肩腱炎または滑液嚢炎、痛風、偽痛風、脈管炎；肉芽腫性甲状腺炎、リンパ球性甲状腺炎、侵襲性線維性甲状腺炎、急性甲状腺炎から選択される甲状腺の炎症性疾患；橋本甲状腺炎、川崎病、ノイレー現象、シェーグレン症候群、神経炎症性疾患、敗血症、結膜炎、角膜炎、虹彩毛様体炎、視神経炎、耳炎、リンパ腺炎、鼻咽頭炎、副鼻腔炎、咽頭炎、扁桃炎、喉頭炎、喉頭蓋炎、気管支炎、肺炎、口内炎、歯肉炎、食道炎、胃炎、腹膜炎、肝炎、胆石症、胆嚢炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー病、半月体形成性糸球体腎炎、膵臓炎、皮膚炎、子宮内膜炎、子宮筋層炎、子宮炎、子宮頚管炎、子宮頚内膜炎、子宮頚外膜炎、子宮傍結合組織炎、結核、膣炎、外陰炎、珪肺症、サルコイドーシス、塵肺症、炎症性多発性関節症、乾癬性関節症、腸線維症、気管支拡張症、および腸疾患に基づく関節症；
から選択される、請求項４２〜４４のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【請求項４６】
慢性または急性炎症、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬、ＣＯＰＤ、炎症性腸疾患、敗血症性ショック、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症および喘息を治療または予防するための、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
経口、非経口（例えば、気管支肺）、局部または局所適用に適合される、請求項２９〜４６のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、チエノピリミジン化合物、およびチエノピリミジン化合物を含んで成る新規医薬組成物に関する。
【０００２】
さらに、本発明は、Ｍｎｋ１（Ｍｎｋ１ａまたはＭｎｋ１ｂ）および／またはＭｎｋ２（Ｍｎｋ２ａまたはＭｎｋ２ｂ）またはそれの更なる変異体のキナーゼ活性の阻害に影響されうる疾患の予防および／または治療用の医薬組成物を製造するための、本発明のチエノピリミジン化合物の使用に関する。特に、本発明は、代謝性疾患、例えば、糖尿病、高脂血症および肥満、造血性障害および癌、ならびにそれらの続発性合併症およびそれらに関連した障害の予防および／または治療用の医薬組成物を製造するための、本発明のチエノピリミジン化合物の使用に関する。
【０００３】
代謝性疾患は、異常代謝過程によって生じる疾患であり、遺伝性酵素異常により先天性である場合もあり、内分泌器官の疾患または代謝的に重要な器官、例えば肝臓または膵臓の不全により後天性である場合もある。
【０００４】
本発明は、特に脂質および炭水化物代謝の代謝性疾患、およびそれらに関連した続発性合併症および障害の治療および／または予防に特に関する。
【０００５】
脂質障害は、血漿脂質およびリポ蛋白のレベルおよび代謝における異常を生じる症状の群を包含する。したがって、例えば、高脂血症は、アテローム性動脈硬化症およびそれに続く血管性疾患、例えば冠状動脈性心疾患の発症の重要な危険因子を構成するので、特に臨床に関連している。
【０００６】
真性糖尿病は、結果として生じる器官の損傷および代謝過程の不全を伴う慢性高血糖症として定義される。その病因に依存して、糖尿病のいくつかの形態が区別され、それらは、インスリンの絶対的欠乏（欠乏しているかまたは減少したインスリン分泌）または相対的欠乏のいずれかによるものである。Ｉ型糖尿病（ＩＤＤＭ、インスリン依存性糖尿病）は、一般に、２０歳以下の若年者に発症する。それは、自己免疫性病因によるものと考えられ、それは、膵島炎を生じ、次に、インスリン合成を担っているランゲルハンス島のβ細胞を破壊する。さらに、成人における潜伏性自己免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ；Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ．８：１４６０−１４６７，２００１）において、β細胞が自己免疫性攻撃によって破壊される。残留ランゲルハンス島細胞によって産生されるインスリンの量が少なすぎると、高血中値（高血糖症）を生じる。ＩＩ型糖尿病は、一般に、より高い年齢で発症する。それは、肝臓および骨格筋におけるインスリンへの抵抗性に特に関連しているが、ランゲルハンス島の欠損にも関連している。高血糖値（および高い血中脂質レベル）は、次に、β細胞機能の障害、およびβ細胞アポトーシスの増加を生じる。
【０００７】
糖尿病は、極めて障害性の疾患であり、なぜなら、現在の通常の抗糖尿病薬は、高および低血糖値の発生を完全に防止するのに充分に、血糖値を調節しないからである。範囲を超える血糖値は、毒性であり、長期の合併症、例えば、網膜症、腎臓病、神経障害および抹消血管疾患を生じる。糖尿病患者が実質的にリスクを有する多くの関連症状、例えば、肥満、高血圧症、心疾患および高脂血症も存在する。
【０００８】
肥満は、追従疾患、例えば、心臓血管疾患、高血圧症、糖尿病、高脂血症のリスク増加、および死亡率増加にも関連している。糖尿病（インスリン抵抗性）および肥満は、いくつかの疾患との連鎖として定義される「代謝性症候群」（シンドロームＸ、インスリン抵抗性症候群、または死の四重奏（ｄｅａｄｌｙ  ｑｕａｒｔｅｔ）とも呼ばれる）の一部である。これらは、多くの場合、同じ患者で発症し、ＩＩ型糖尿病および心臓血管疾患の発症の主要危険因子である。脂質レベルおよびグルコースレベルの調節が、ＩＩ型糖尿病、心臓疾患、および他の代謝性症候群事象の治療に必要とされることが示されている（例えば、Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ４８：１８３６−１８４１，１９９９：ＪＡＭＡ  ２８８：２２０９−２７１６、２００２参照）。
【０００９】
本発明の１つの実施形態において、本発明の化合物および組成物は、下記のような炭水化物代謝の代謝性疾患ならびにその続発性合併症および障害の治療および／または予防に有用である：グルコース許容値低下症、糖尿病（好ましくはＩＩ型糖尿病）、糖尿病性合併症、例えば、糖尿病性壊疽、糖尿病性関節症、糖尿病性骨減少症、糖尿病性糸球体硬化症、糖尿病性腎症、糖尿病性皮膚障害、糖尿病性神経障害、糖尿病性白内障および糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑症、糖尿病性フィートシンドローム（ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｆｅｅｔ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ケトアシドーシスを伴うか伴わない糖尿病性昏睡、糖尿病性高浸透圧性昏睡、低血糖性昏睡、高血糖性昏睡、糖尿病性アシドーシス、糖尿病性ケトアシドーシス、毛細管内糸球体ネフローゼ（ｉｎｔｒａｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｏｓｉｓ）、キンメルスティール−ウィルソン症候群、糖尿病性筋萎縮症、糖尿病性自律神経障害、糖尿病性単神経障害、糖尿病性多発神経障害、糖尿病性血管障害、糖尿病性末梢血管障害、糖尿病性潰瘍、糖尿病性関節症、または糖尿病における肥満症。
【００１０】
他の実施形態において、本発明の化合物および組成物は、下記のような脂質代謝の代謝性疾患（即ち、脂質障害）ならびにその続発性合併症および障害の治療および／または予防に有用である：高コレステロール血症、家族性高コレステロール血症、フレドリックソン高リポ蛋白血症、高βリポ蛋白血症、高脂血症、低密度リポ蛋白型［ＬＤＬ］高リポ蛋白血症、純粋高グリセリド血症、内因性高グリセリド血症、孤立性高コレステロール血症、孤立性高トリグリセリド血症、心臓血管疾患、例えば、高血圧症、虚血、拡張蛇行静脈、網膜静脈閉塞、アテローム性動脈硬化症、狭心症（ａｎｇｉｎａ  ｐｅｃｔｏｒｉｓ）、心筋梗塞、狭心症（ｓｔｅｎｏｃａｒｄｉａ）、肺高血圧症、うっ血性心不全、糸球体症、尿細管間質性障害、腎不全、血管狭窄症、または脳血管障害、例えば、脳卒中。
【００１１】
本発明の他の実施形態において、本発明の化合物および組成物は、下記のような造血性障害ならびにその続発性合併症および障害の治療および／または予防に有用である：急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫；造血性疾患、急性非リンパ性白血病（ＡＮＬＬ）、骨髄増殖性疾患、急性前骨髄球性白血病（ＡＰＬ）、急性骨髄単球性白血病（ＡＭＭｏＬ）、真性赤血球増加症、リンパ腫、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＣＬ）、ウィルムス腫瘍、またはユーイング肉腫。
【００１２】
本発明の他の実施形態において、本発明の化合物および組成物は、下記のような癌ならびにその続発性合併症および障害の治療および／または予防に有用である：上部胃腸管の癌、膵臓癌、乳癌、大腸癌、卵巣癌、頚癌、体癌、脳腫瘍、精巣癌、咽頭癌、骨癌、前立腺癌、網膜芽細胞腫、肝臓癌、肺癌、神経芽細胞腫、腎臓癌、甲状腺癌、食道癌、軟部組織肉腫、悪液質、または疼痛。
【００１３】
さらに、本発明は、サイトカイン関連疾患の予防および／または治療用の医薬組成物を製造するための、チエノピリミジン化合物の使用にも関する。
【００１４】
そのような疾患は、特に、炎症性疾患、自己免疫性疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染症、神経変性疾患、アレルギー、または炎症誘発性サイトカインに関連した他の疾患である。
【００１５】
アレルギー性および炎症性疾患は、例えば、急性または慢性炎症、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬、ＣＯＰＤ、炎症性腸疾患、喘息および敗血症性ショック、ならびにそれらの続発性合併症およびそれらに関連した障害である。
【００１６】
関節リウマチのような炎症性疾患、ＣＯＰＤのような炎症性肺疾患、炎症性腸疾患および乾癬は、三人に一人が生涯のうちに罹患する。それらの疾患は、莫大な保健医療費を要するだけでなく、それらは、多くの場合、体を不自由にさせ、衰弱させる。
【００１７】
炎症は、下記の炎症性疾患の一体化した病原性過程であるが、現在の治療法は、複雑であり、一般に、ある１つの疾患に特定されている。現在使用可能な治療法の多くは、疾患の症状を治療するだけであり、根本的な炎症の原因を治療するものでない。
【００１８】
本発明の組成物は、下記のような炎症性疾患および続発性合併症および障害の治療および／または予防に有用である：慢性または急性炎症、関節の炎症、例えば、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬性関節炎、骨関節炎、若年性関節リウマチ、ライター症候群、リウマチ様外傷性関節炎、風疹性関節炎、急性滑膜炎および痛風性関節炎；炎症性皮膚疾患、例えば、日焼け、乾癬、紅皮症性乾癬、膿疱性乾癬、湿疹、皮膚炎、急性または慢性グラフトフォーメーション（ｇｒａｆｔ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ）、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、じんま疹および硬皮症；胃腸管の炎症、例えば、炎症性腸疾患、クローン病および関連症状、潰瘍性大腸炎、大腸炎および憩室炎；腎炎、尿道炎、卵管炎、卵巣炎、子宮内膜炎、脊椎炎、全身性エリテマトーデスおよび関連障害、多発性硬化症、喘息、髄膜炎、脊髄炎、脳脊髄炎、脳炎、静脈炎、血栓性静脈炎、呼吸疾患、例えば、喘息、気管支炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性肺疾患および成人呼吸促進症候群、およびアレルギー性鼻炎；心内膜炎、骨髄炎、リウマチ熱、リウマチ性心膜炎、リウマチ性心内膜炎、リウマチ性心筋炎、リウマチ性僧帽弁疾患、リウマチ性大動脈弁疾患、前立腺炎、前立腺膀胱炎、脊椎関節症、硬直性脊椎炎、滑膜炎、腱滑膜炎、筋炎、咽頭炎、リウマチ性多発性筋痛、肩腱炎または滑液嚢炎、痛風、偽痛風、脈管炎；肉芽腫性甲状腺炎、リンパ球性甲状腺炎、侵襲性線維性甲状腺炎、急性甲状腺炎から選択される甲状腺の炎症性疾患；橋本甲状腺炎、川崎病、ノイレー現象、シェーグレン症候群、神経炎症性疾患、敗血症、結膜炎、角膜炎、虹彩毛様体炎、視神経炎、耳炎、リンパ腺炎、鼻咽頭炎、副鼻腔炎、咽頭炎、扁桃炎、喉頭炎、喉頭蓋炎、気管支炎、肺炎、口内炎、歯肉炎、食道炎、胃炎、腹膜炎、肝炎、胆石症、胆嚢炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー病、半月糸球体腎炎、膵臓炎、子宮内膜炎、子宮筋層炎、子宮炎、子宮頚管炎、子宮頚内膜炎、子宮頚外膜炎（ｅｘｏｃｅｒｖｉｃｉｔｉｓ）、子宮傍結合組織炎、結核、膣炎、外陰炎、珪肺症、サルコイドーシス、塵肺症、ピレシス（ｐｙｒｅｓｉｓ）、炎症性多発性関節症、乾癬性関節症、腸線維症、気管支拡張症、および腸疾患に基づく関節症。
【００１９】
さらに、サイトカインは、下記のような疾患の発症および進行にも関係していると考えられる：種々の心臓血管および脳血管障害、例えば、うっ血性疾患、心筋梗塞、アテローム硬化性プラークの形成、高血圧症、血小板凝集、アンギナ、脳卒中、アルツハイマー病、再灌流障害、再狭窄および抹消血管疾患を包含する血管障害、および、例えば、骨代謝の種々の障害、例えば、骨粗しょう症（老年性および閉経後の骨粗しょう症を包含する）、パジェット病、骨転移、高カルシウム血症、副甲状腺機能亢進症、骨硬化症、骨粗しょう症および歯周炎、ならびに関節リウマチおよび骨関節炎を伴いうる骨代謝の異常変化。
【００２０】
過剰のサイトカイン産生は、細菌、真菌および／またはウイルス感染の特定の合併症、例えば、内毒素性ショック、敗血症性ショックおよびトキシックショック症候群の媒介、およびＣＮＳ手術または損傷の特定の合併症、例えば、神経外傷および虚血性脳卒中の媒介にも関係づけられている。
【００２１】
過剰のサイトカイン産生は、さらに、下記を包含する疾患の発症の媒介または悪化にも関係づけられている：軟骨または筋肉吸収、肺線維症、肝硬変、腎線維症、悪性疾患および後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）のような特定の慢性疾患に見られる悪液質、腫瘍侵襲性および腫瘍転移および多発性硬化症。これらの疾患の治療および／または予防も本発明に含まれる。
【００２２】
さらに、本発明の組成物は、下記を包含するがそれらに限定されない自己免疫疾患に関連した炎症の治療にも使用しうる：全身性エリテマトーデス、アジソン病、自己免疫性多腺性疾患（自己免疫性多腺性症候群としても既知）、糸球体腎炎、関節リウマチ硬皮症、慢性甲状腺炎、グレーブス病、自己免疫性胃炎、糖尿病、自己免疫性溶血性貧血、糸球体腎炎、関節リウマチ自己免疫性好中球減少症、血小板減少症、アトピー性皮膚炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、多発性硬化症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬、および移植片対宿主病。
【００２３】
他の実施形態において、本発明の組成物は、下記の感染症の治療および予防に使用しうる：敗血症、敗血症性ショック、細菌性赤痢、およびヘリコバクターピロリおよびウイルス疾患（単純ヘルペス１型（ＨＳＶ−１）、単純ヘルペス２型（ＨＳＶ−２）、サイトメガロウイルス、エプスタイン−バー、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）を包含する）、急性肝炎感染（Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎を包含する）、ＨＩＶ感染およびＣＭＶ網膜炎、ＡＩＤＳまたは悪性疾患、マラリア、ミコバクテリア感染および髄膜炎。これらは、インフルエンザウイルス、水痘−帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタイン−バーウイルス、ヒトヘルペスウイルス−６（ＨＨＶ−６）、ヒトヘルペスウイルス−７（ＨＨＶ−７）、ヒトヘルペスウイルス−８（ＨＨＶ−８）、仮性狂犬病および鼻気管炎によるウイルス感染も包含する。
【００２４】
本発明の組成物は、過剰のサイトカイン産生によって媒介または悪化される下記のような局所性疾患状態の治療または予防においても局所的に使用しうる：炎症性関節、湿疹、乾癬および他の炎症性皮膚症状、例えば日焼け；結膜炎を包含する炎症性眼症状；ピレシス、疼痛、および炎症に関連した他の症状。
【００２５】
歯周病も、局所的および全身的の両方において、サイトカイン産生に関係づけられている。従って、歯肉炎および歯周炎などの口の疾患における、サイトカイン産生に関連した炎症を抑制するために、本発明組成物を使用することは、本発明の他の態様である。
【００２６】
最終的に、本発明の組成物は、下記から選択される神経変性疾患の治療または予防にも使用しうる：アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脳虚血、または、外傷性損傷、グルタミン酸神経毒性または低酸素によって生じる神経変性疾患。
【００２７】
好ましい実施形態において、本発明の組成物は、下記から選択される疾患の治療または予防に使用しうる：慢性または急性炎症、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬、ＣＯＰＤ、炎症性腸疾患、敗血症性ショック、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症および喘息。
【００２８】
プロテインキナーゼは、多くの細胞機能の調節に関与している重要な酵素である。キイロショウジョウバエのＬＫ６−セリン／スレオニン−キナーゼ遺伝子は、微小管と会合することができる短命キナーゼとして記載されている（Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉ．１９９７，１１０（２）：２０９−２１９）。ショウジョウバエの複眼の発達における遺伝分析は、ＲＡＳシグナル経路の調節における役割を示している（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ２０００  １５６（３）：１２１９−１２３０）。ショウジョウバエＬＫ６−キナーゼの最も近いヒト同族体は、ＭＡＰ−キナーゼ相互作用キナーゼ２（Ｍｎｋ２、例えば、変異体Ｍｎｋ２ａおよびＭｎｋ２ｂ）、およびＭＡＰ−キナーゼ相互作用キナーゼ１（Ｍｎｋ１）およびその変異体である。これらのキナーゼは、細胞形質に最も局在している。Ｍｎｋは、ｐ４２ＭＡＰキナーゼＥｒｋ１およびＥｒｋ２およびｐ３８ＭＡＰキナーゼによってリン酸化される。このリン酸化は、成長因子、ホルボールエステルおよびオンコジーン、例えばＲａｓおよびＭｏｓに反応して、ストレスシグナル伝達分子およびサイトカインによって、誘発される。Ｍｎｋ蛋白質のリン酸化は、真核性（ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ）開始因子４Ｅ（ｅｌＦ４Ｅ）に対する、それらのキナーゼ活性を刺激する（ＥＭＢＯ  Ｊ．１６：１９０９−１９２０、１９９７；Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  １９，１８７１−１８８０，１９９０；Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２１，７４３−７５４，２００１）。マウスにおけるＭｎｋ１およびＭｎｋ２遺伝子の同時破壊は、基礎および刺激ｅｌＦ４Ｅリン酸化を減少させる（Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２４，６５３９−６５４９，２００４）。ｅｌＦ４Ｅのリン酸化は、蛋白質翻訳の調節を生じる（Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２２：５５００−５５１１，２００１）。
【００２９】
Ｍｎｋ蛋白質による蛋白質翻訳の刺激の様式を説明する種々の仮説がある。大部分の刊行物は、ＭＡＰキナーゼ−相互作用キナーゼの活性化の際の、キャップ依存性蛋白質翻訳における正の刺激作用を記載している。このように、Ｍｎｋ蛋白質の活性化は、例えば、細胞質のホスホリパーゼ２αにおける作用によって、蛋白質翻訳の間接的刺激または調節を生じうる（ＢＢＡ  １４８８：１２４−１３８，２０００）。
【００３０】
ＷＯ０３／０３７３６２は、ヒトＭｎｋ遺伝子、特にヒトＭｎｋ２遺伝子の変異体と、体重または熱発生の調節に関係した疾患との関連を開示している。ヒトＭｎｋ遺伝子、特にＭｎｋ２変異体は、下記のような疾患に関与していると推定される：例えば、代謝性疾患（肥満、摂食障害、悪液質、真性糖尿病、高血圧症、冠状動脈性心疾患、高コレステロール血症、異常脂質血症、骨関節炎、胆石、生殖器の癌および睡眠時無呼吸を包含する）などの疾患、およびＲＯＳ防御に関連した疾患、例えば、真性糖尿病および癌。ＷＯ０３／０３７６２は、さらに、体重または熱発生の調節に関係している疾患の診断、予防または治療における、ＭＡＰキナーゼ−相互作用キナーゼ（Ｍｎｋ）遺伝子ファミリーの核酸配列およびこれらをコード化するアミノ酸配列の使用、およびこれらの配列の使用、またはＭｎｋ核酸またはポリペプチドのエフェクター、特にＭｎｋ阻害剤および活性剤の使用を開示している。
【００３１】
ＷＯ０２／１０３３６１は、２型糖尿病の治療に特に有用な薬理活性成分の同定のためのアッセイにおける、ヒトＭＡＰキナーゼと相互作用するキナーゼ２ａおよび２ｂ（Ｍｎｋ２ａおよびＭｎｋ２ｂ）の使用を記載している。さらに、ＷＯ０２／１０３３６１は、Ｍｎｋ２ａまたはＭｎｋ２ｂの発現または活性の調節による、インスリン抵抗性に関連した疾患の予防および／または治療も開示している。ペプチドに加えて、模擬ペプチド、アミノ酸、アミノ酸類似体、ポリヌクレオチド、ポリヌクレオチド類似体、ヌクレオチドおよびヌクレオチド類似体、４−ヒドロキシ安息香酸メチルエステルが、ヒトＭｎｋ２蛋白質に結合する物質として記載されている。
【００３２】
Ｍｎｋの阻害剤（ＣＧＰ５７３８０およびＣＧＰ０５２０８８と称される）が記載されている（Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２１，５５００，２００１；Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍ  ３，２０５，２０００；Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ６９，６３，２０００参照）。ＣＧＰ０５２０８８は、Ｍｎｋ１のインビトロキナーゼ活性の阻害に関して７０ｎＭのＩＣ５０を有するスタウロスポリン誘導体である。ＣＧＰ５７３８０は、Ｍｎｋ２（Ｍｎｋ２ａまたはＭｎｋ２ｂ）またはＭｎｋ１の低分子量選択的非細胞傷害性阻害剤である：Ｍｎｋ２（Ｍｎｋ２ａまたはＭａｎ２ｂ）またはＭｎｋ１を移入した培養細胞へのＣＧＰ５７３８０の添加は、リン酸化ｅｌＦ４Ｅの強烈な減少を示した。
【００３３】
炎症におけるＭｎｋの役割に関する第１証拠は、炎症誘発性刺激によるＭｎｋ１の活性化を示す試験によって与えられた。サイトカインＴＮＦαおよびＩＬ−１βは、インビトロにおけるＭｎｋ１の活性化を引き起こし（ＦｕｋｕｎａｇａおよびＨｕｎｔｅｒ、ＥＭＢＯ  Ｊ  １６（８）：１９２１−１９３３，１９９７）、インビボにおけるＭｎｋ特異性基質ｅｌＦ４Ｅのリン酸化を誘発する（Ｕｅｄａら、Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２４（１５）：６５３９−６５４９，２００４）。さらに、炎症反応の強力な刺激物質であるリポ多糖体（ＬＰＳ）の投与は、マウスにおいてＭｎｋ１およびＭｎｋ２の活性化、それに付随する、それらの基質ｅｌＦ４Ｅのリン酸化を誘発する（Ｕｅｄａら、Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２４（１５）：６５３９−６５４９，２００４）。
【００３４】
さらに、Ｍｎｋ１は、炎症誘発性サイトカインの産生の調節に関与していることが示されている。Ｍｎｋ１は、ケモカインＰＡＮＴＥＳの発現を増加させる（Ｎｉｋｏｌｃｈｅｖａら、Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  １１０，１１９−１２６，２００２）。ＰＡＮＴＥＳは、単球、好酸球、好塩基球およびナチュラルキラー細胞の強力なケモトラクタント（ｃｈｅｍｏｔｒａｃｔａｎｔ）である。それは、Ｔリンパ球の増殖を活性化および誘発し、好塩基球の脱顆粒を媒介し、好酸球における呼吸バーストを誘発する（ＣｏｎｔｉおよびＤＩＧｉｏａｃｃｈｉｎｏ，Ａｌｌｅｒｇｙ  Ａｓｔｈｍａ  Ｐｒｏｃ  ２２（３）：１３３−７，２００１）。
【００３５】
ＷＯ２００５／００３８５、およびＢｕｘａｄｅら，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２３：１７７−１８９，Ａｕｇｕｓｔ  ２００５の両方は、Ｍｎｋと、ＴＮＦα生合成の調節との関連を開示している。示されているメカニズムは、ＴＮＦα  ｍＲＮＡにおける調節ＡＵ豊富エレメント（ＡＲＥ）によって媒介される。Ｂｕｘａｄｅらは、結合してＡＲＥ機能を調節する蛋白質が、Ｍｎｋ１およびＭｎｋ２によってリン酸化されることを示している。特に、ＡＲＥ−結合タンパク質ｈｎＲＮＰ  Ａ１のＭｎｋ媒介リン酸化は、ＴＮＦα  ｍＲＮＡの翻訳を増加させることが示されている。
【００３６】
ＴＮＦαは、ＡＲＥによって調節される唯一のサイトカインではない。機能ＡＲＥは、いくつかのインターロイキン、インターフェロンおよびケモカインの転写物においても見出される（Ｋｈａｂａｒ，Ｊ  Ｉｎｔｅｒｆ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ  ２５：１−１０，２００５）。従って、ＡＲＥ−結合蛋白質のＭｎｋ媒介リン酸化は、ＴＮＦαの生合成に加えて、サイトカインの生合成を調節する可能性を有する。
【００３７】
現在の証拠は、Ｍｎｋが、炎症信号伝達の下流標的、ならびに炎症反応の媒介物であることを示している。ＴＮＦα、ＰＡＮＴＥＳおよび潜在的に付加的なサイトカインの産生におけるそれらの関与は、Ｍｎｋの阻害が、抗炎症治療的介入の方法であることを示している。
【００３８】
本発明の根底にある課題は、代謝性疾患、炎症性疾患ならびにそれらの続発性合併症および障害の治療のために効果的かつ安全に使用されうる有効かつ選択的Ｍｎｋ１および／またはＭｎｋ２阻害剤を提供することである。
【００３９】
驚くべきことに、特定のチエノピリミジン化合物が、キナーゼ酵素Ｍｎｋ１および／またはＭｎｋ２および／またはそれらの変異体の有効な阻害剤であり、従って、Ｍｎｋ１および／またはＭｎｋ２（Ｍｎｋ２ａまたはＭｎｋ２ｂ）および／またはそれらの変異体の阻害に影響されうる疾患の予防および／または治療に有用でありうることが見出された。
【００４０】
本発明のチエノピリミジン化合物は、一般式（１）で示される化合物：
【００４１】
【化１】
2009532407.tif 000002
【００４２】
（式中、
Ｘは、単結合、Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ１ａ、ＣＲ１ａＲ１ｂ、ＣＨ（ハロゲン）、Ｃ（ハロゲン）２、Ｃ＝Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ａ、ＮＨまたはＮＲ１ａであり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルＣ３−１０シクロアルキル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）であり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されており；
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルＣ３−１０シクロアルキル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ６−１０アリール、Ｃ１−６アルキルＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ１−６アルキルＣ５−１０ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）であり、Ｒ１は、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されており；
または、Ｘが、ＮＲ１ａ、ＣＨＲ１ａ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ａまたはＣＲ１ａＲ１ｂである場合、Ｒ１は、Ｒ１ａおよびそれらが結合しているＮまたはＣ原子と一緒になって、５または６員環の飽和、不飽和または芳香族炭素環式または複素環式環を形成してよく、該環は、Ｎ、ＳおよびＯから選択される１個またはそれ以上の付加的へテロ原子を有してよく、該環は、１個またはそれ以上のＲ９で置換されていてよく；
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルＣ３−１０シクロアルキル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ６−１０アリール、Ｃ１−６アルキルＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ１−６アルキルＣ５−１０ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ１−６アルキル３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）から選択されるか、または、それらが結合しているＣ原子と一緒になって、Ｃ３−７シクロアルキルまたは３〜１０員環ヘテロシクロアルキル基を形成し、Ｒ２およびＲ３は、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されており；Ｒ２はＲ９であってもよく、Ｒ３は、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ１１、Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、ＳＲ１１、Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、オキソ（＝Ｏ）（環は少なくとも部分的に飽和されている）、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ１−６アルキル、フェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、またはヘテロシクリルであってもよく；Ｃ１−６アルキル、フェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、およびヘテロシクリルは、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されており；
Ｒ４は、１個またはそれ以上のＲ９で置換されてもよい水素、Ｃ１−４アルキル、尿素、チオ尿素またはアセチルであり；
または、Ｒ４は、Ｘと一緒になって、５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環を形成してよく；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、同じかまたは異なり、水素およびＲ９から独立して選択され；
または、Ｒ６およびＲ７は、５または６員環の飽和、不飽和または芳香族炭素環式または複素環式環を形成してよく、該複素環式環は、Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有し；
Ｒ９は、独立して、ハロゲン、ＣＮ、ＣＯＯＲ１１、ＯＲ１１、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、ＳＲ１１、Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、オキソ（＝Ｏ）（環は少なくとも部分的に飽和されている）、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ１−６アルキル、フェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、またはＮ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する５または６員環の飽和、不飽和または芳香族ヘテロシクリルであり；Ｃ１−６アルキル、フェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、およびヘテロシクリルは、１個またはそれ以上のＲ１０で任意選択的に置換されており；
Ｒ１０は、独立に、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ１１、Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、ＳＲ１１、Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｓ（Ｏ）Ｒ１１ａ、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１ａＲ１１ｂ）、Ｎ（Ｒ１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、オキソ（＝Ｏ）（環は少なくとも部分的に飽和されている）、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ１−６アルキル、フェニル、Ｃ３−７シクロアルキル、またはヘテロシクリルであり；
Ｒ１１、Ｒ１１ａ、Ｒ１１ｂは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルＣ３−１０シクロアルキル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ６−１０アリール、５〜１０員環ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）から成る群から選択され、Ｒ１１、Ｒ１１ａ、Ｒ１１ｂは、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されている）
またはその代謝物質、プロドラッグまたは医薬的に許容される塩であり、
【００４３】
【化２】
2009532407.tif 000003
【００４４】
は除外される。
【００４５】
好ましい実施形態において、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、ＣＨ２、ＣＨＲ１ａ、ＣＲ１ａＲ１ｂ、ＣＨ（ハロゲン）、Ｃ（ハロゲン）２、Ｃ＝Ｏ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ａ、ＮＨまたはＮＲ１ａであり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルＣ３−１０シクロアルキル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）であり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されている。Ｘが単結合、ＯまたはＮＲ１ａである化合物がより好ましい。特に好ましい実施形態において、Ｘは、ＯまたはＮＲ１ａであり、より好ましくはＯである。
【００４６】
好ましい実施形態において、Ｒ１は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルＣ３−１０シクロアルキル、Ｃ３−１０シクロアルキル、Ｃ１−６アルキル３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、３〜１０員環ヘテロシクロアルキル（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ６−１０アリール、Ｃ１−６アルキルＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）、Ｃ１−６アルキルＣ５−１０ヘテロアリール（Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する）であり；Ｒ１は、１個またはそれ以上のＲ９で置換されてもよい。さらに、前記のように定義される化合物であって、Ｒ１が、１個またはそれ以上のハロゲン原子で任意選択的に置換されているＣ１−６アルキル、Ｃ３−１０シクロアルキル、ＯおよびＮから選択されるヘテロ原子を有し、１個またはそれ以上のＲ９で任意選択的に置換されている３〜１０員環ヘテロシクロアルキルであるか；または、ＸがＮＲ１ａである場合、Ｒ１は、Ｒ１ａおよびそれらが結合しているＮ原子と一緒になって、５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環を形成してよい化合物がより好ましい。
【００４７】
Ｒ２およびＲ３が、独立して、水素、Ｃ１−６アルキルおよびＣ６−１０アリールから選択される化合物も好ましい。より好ましくは、Ｒ２およびＲ３は、独立して、水素およびＣ１−６アルキルから、より好ましくは水素およびＣＨ３から、選択される。特に好ましい実施形態において、Ｒ２およびＲ３は水素である。
【００４８】
Ｒ４が水素である化合物が好ましい。
【００４９】
Ｒ５が、水素およびハロゲンから選択される化合物が好ましい。Ｒ５が水素である化合物が特に好ましい。
【００５０】
本発明は、下記のような化合物にも関する：Ｒ６が、水素、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）、−ＣＯＯＲ１１、ならびにＮ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環から選択されるか、またはＲ７と一緒になって、Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環を形成する。好ましい実施形態において、Ｒ６は、水素、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１１ａ）および−ＣＯＯＲ１１から選択される。
【００５１】
Ｒ７が、水素であるか、またはＲ６と一緒になって、Ｎ、ＳおよびＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を有する５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環を形成する化合物が好ましい。好ましい実施形態において、Ｒ７は水素である。
【００５２】
Ｒ８が水素である化合物が好ましい。
【００５３】
１つの態様において、本発明は、Ｒ５、Ｒ７およびＲ８が水素である化合物に関し、他の態様において、Ｒ５、Ｒ７およびＲ８が水素であり、Ｒ６が、弗素、ＣＯＯＨおよびＣ（Ｏ）ＮＨ２から選択される化合物に関する。
【００５４】
他の態様において、本発明は、Ｒ６がＲ７と一緒になって、Ｎ、ＳおよびＯ、好ましくはＮから選択される少なくとも１個、好ましくは２個のヘテロ原子を有する５または６員環の飽和、不飽和または芳香族複素環式環を形成する化合物に関する。
【００５５】
本発明の化合物は、好ましくはＣｌ、ＢｒおよびＦから選択されるハロゲン原子を有しうる。
【００５６】
特に好ましい化合物は、下記の化合物から選択される：
【００５７】
【化３−１】
2009532407.tif 000004
【００５８】
【化３−２】
2009532407.tif 000005
【００５９】
【化３−３】
2009532407.tif 000006
【００６０】
【化３−４】
2009532407.tif 000007
【００６１】
【化３−５】
2009532407.tif 000008
【００６２】
【化３−６】
2009532407.tif 000009
【化３−７】
2009532407.tif 000010
下記の化合物が特に好ましい：
【００６３】
【化４−１】
2009532407.tif 000011
【００６４】
【化４−２】
2009532407.tif 000012
【００６５】
【化４−３】
2009532407.tif 000013
【００６６】
【化４−４】
2009532407.tif 000014
【００６７】
【化４−５】
2009532407.tif 000015
【００６８】
下記の化合物がさらに好ましい：
【００６９】
【化５】
2009532407.tif 000016
【００７０】
本発明の化合物の典型的な製造法は、下記の実験部分に記載されている。
【００７１】
本発明の化合物の有効な阻害作用は、実施例においてさらに詳しく記載されているインビトロ酵素アッセイによって測定しうる。
【００７２】
式（１）の本発明化合物の医薬的に許容される塩は、多くの有機および無機酸および塩基を使用して形成することができる。例示的酸付加塩は、下記の塩である：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、硫酸水素塩、硼酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロ燐酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、沃化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、蓚酸塩、パモエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルスルホン酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、燐酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、琥珀酸塩、硫酸塩、スルホン酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、例えばトシレート、ウンデカン酸塩など。
【００７３】
塩基性窒素含有成分は、下記のような物質で四級化することができる：低級アルキルハロゲン化物、例えば、メチル、エチル、プロピルおよびブチル塩化物、臭化物および沃化物；ジアルキル硫酸塩、例えば、ジメチル、ジエチル、ジブチルおよびジアミル硫酸塩；長鎖アルキルハロゲン化物、例えば、デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリル塩化物、臭化物および沃化物；またはアラルキルハロゲン化物、例えば、ベンジルおよびフフェネチル臭化物など。水に溶解性または分散性の生成物がそれによって得られる。
【００７４】
医薬的に許容される塩基付加塩は、以下の塩を包含するがそれらに限定されない：アルカリおよびアルカリ土類金属に基づく陽イオン、例えば、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム塩等、ならびに、非毒性アンモニウム、第四級アンモニウムおよびアミン陽イオン（アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン等を包含するがそれらに限定されない）。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的アミンは、ベンズアゼチン、ジシクロヘキシルアミン、ヒドラビン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミド、ｔ−ブチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン等、およびアルギニン、リシン等のようなアミノ酸との塩を包含する。
【００７５】
式（１）の化合物は、互変異性体として存在することができる。本発明は、全ての互変異性形を含む。さらに、本発明は、本発明化合物の全ての立体異性体（その鏡像異性体およびジアステレオ異性体を含む）も含む。本発明化合物の個々の立体異性体は、実質的に、他の異性体を含まずに、それらとの混合物において、またはラセミ体として、または選択された立体異性体として、存在することができる。
【００７６】
本明細書において使用される「代謝物質」という用語は、（ｉ）中間体および生成物を包含する代謝の生成物、（ｉｉ）代謝に関連した任意の物質（代謝の生成物として、または代謝に必要な物質として）、または（ｉｉｉ）代謝中に生成されるかまたは使用される任意の物質。特に、それは、代謝後に残留する最終生成物を意味する。
【００７７】
本明細書において使用される「プロドラッグ」という用語は、下記を意味する：（ｉ）体内の代謝過程がそれを使用可能なまたは活性な形態に変換した後に、その効果を発揮する薬剤の不活性形態、または（ｉｉ）それ自体は活性でないが、薬理学的に活性な代謝物質を生じる物質（即ち、不活性な先駆体）。
【００７８】
本明細書において使用される「Ｃ３−１０シクロアルキル」という用語は、３〜１０個の環原子を有する単−または多環式炭素環式アルキル置換基または基、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプテニル、シクロヘプタジエニル、シクロヘプタトリエニル過水化ナフタレンまたはインデン、アダマンチルまたはノルボナニル等を意味する。
【００７９】
本明細書において、単独で、またはアルコキシにおけるように他の用語と組み合わせて使用される「Ｃ１−６アルキル」という用語は、Ｃ１−６、好ましくはＣ１−４直鎖または分岐鎖アルキル／アルコキシ基、例えば、メチル、エチル、プロピル（イソ−、ｎ−）、ブチル（イソ−、ｎ−、ｓｅｃ−、ｔｅｒｔ−）、ペンチル、ヘキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ（イソ−、ｎ−）、ブトキシ（イソ−、ｎ−、ｓｅｃ−、ｔｅｒｔ−）、ペントキシ、ヘキソキシを意味し；さらに、「Ｃ１−６アルキル」という用語は、鎖に酸素原子を有し、ハロゲンで置換されて、エーテルまたはハロゲン化エーテル基を形成しうるアルキル基も包含する。
【００８０】
「ハロゲン」という用語は、弗素、塩素、臭素、沃素、好ましくは弗素および塩素、より好ましくは弗素から選択されるハロゲン原子を意味する。
【００８１】
「アリール」という用語は、６〜１０個の主鎖炭素原子を有する単−または二環式芳香族基を意味し、任意選択的に、二環式構造の環の一方が芳香族であり、他方が炭素環基であり、例えば、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、インデニル、インダニル、アズレニル、フルオレニル、１，２，３，４−テトラヒドロナフチルである。
【００８２】
「ヘテロシクリル」という用語は、Ｎ、ＳおよびＯから選択される１〜４個のヘテロ原子を有し、環原子の残りが炭素原子であり、好ましくは合計３〜１０個の環原子を有する、単環式飽和または不飽和ヘテロシクリル基を意味し、例えば、モルホリノ、ピペラジニル、ピペリジニル、ピリジル、ピリミジニル、チアゾリル、インドリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、ピラジニル、チアゾリル、チオフェニルまたはフラニルである。
【００８３】
「ヘテロアリール」という用語は、Ｎ、ＳおよびＯから選択される１〜４個のヘテロ原子を有し、環原子の残りは炭素原子であり、好ましくは合計５〜１０個の環原子を有する、単−または二環式芳香族基を意味する。非限定的なヘテロアリール基の例は、下記の基である：ベンゾフラニル、フリル、チエニル、ベンゾチエニル、チアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、ベンゾチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、ピラニル、テトラヒドロピラニル、ピラゾリル、ピリジル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、カルバゾリル、ベンズオキサゾリル、ベンズアミダゾリル、インドリル、イソインドリル、ピラジニル、ジアジニル、ピラジン、トリアジニルトリアジン、テトラジニル、テトラゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾピリジルおよびベンズイミダゾリル。
【００８４】
他の態様において、本発明は、請求の範囲１〜２３のいずれかに記載されている本発明のチエノピリミジン化合物、および任意選択的に、医薬的に許容される担体を含んで成る医薬組成物を提供する。
【００８５】
本発明の医薬組成物は、付加的治療薬をさらに含んで成ってよい。特に好ましいのは、付加的治療薬が下記の治療薬から選択される組成物である：抗糖尿病薬、例えば、インスリン、長時間および短時間作用型インスリン類似体、スルホニル尿素、およびチアゾリジンジオンから誘導される他の抗糖尿病薬、脂質降下薬、例えば、スタチン、フィブレート、イオン交換樹脂、ニコチン酸誘導体、またはＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、心臓血管治療薬、例えばニトレート、抗高血圧薬、例えば、β−遮断剤、ＡＣＥ阻害剤、Ｃａ−チャンネル遮断剤、アンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬、利尿薬、血小板凝集阻害剤、または抗腫瘍薬、例えば、アルカロイド、アルキル化薬、抗生物質、または代謝拮抗薬、または抗肥満薬。他の好ましい組成物は、付加的治療薬が下記の治療薬から選択される組成物である：ヒスタミン拮抗薬、ブラジキニン拮抗薬、セロトニン拮抗薬、ロイコトリエン、抗喘息薬、ＮＳＡＩＤ、解熱薬、コルチコステロイド、抗生物質、鎮痛薬、尿酸排泄促進薬、化学療法薬、抗痛風薬、気管支拡張薬、シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤、ステロイド、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、免疫抑制薬、ロイコトリエン拮抗薬、細胞増殖抑制薬、サイトカインに対する抗体またはそのグラグメント、およびサイトカイン受容体の可溶性部分（フラグメント）。
【００８６】
さらに特に好ましいのは、下記のような化合物である：ヒトＮＰＨインスリン、ヒトレンテまたはウルトラレンテインスリン、インスリンリスプロ（ｉｎｓｌｉｎ  Ｌｉｓｐｒｏ）、インスリンアスプタート（ｉｎｓｌｉｎ  Ａｓｐｔａｒｔ）またはインスリングラルギン（ｉｎｓｕｌｉｎ  Ｇｌａｒｇｉｎｅ）、アテノロール、ビソプロロール、メトプロロール、エスモロール、セリピロロール、タリノロール、オクスプレノロール、ピンドロール、プロパノロール、ブプロパノロール、ペンブトロール、メピンドロール、ソタロール、セルテオロール、ナドロール、カルベジロール、ニフェジピン、ニトレンジピン、アムロジピン、ニカルジピン、ニソルジピン、ジルチアゼム、エナラプリル、ベラパミル、ガロパミル、キナプリル、カプトプリル、リシノプリル、ベナゼプリル、ラミプリル、ペリドプリル、ホシノプリル、トランドラプリル、イルベサタン、ロサルタン、バルサルタン、テルミサルタン、エプロサルタン、オルメサルタン、ヒドロクロロチアジド、ピレタニド、クロロタリドン、メフルシド、フロセミド、ベンドロフルメチアジド、トリアムテレン、デヒドララジン、アセチルサリチル酸、チロフィバン−ＨＣｌ、ジピラミドール、トリクロピジン、イロプロスト−トロメタノール、エプチフィバチド、クロピドグレル、ピラテカム、アブシキシマブ、トラピジル、シンバスタチン、ベザフィブレート、フェノフィブレート、ゲムフィブロジル、エトフィリン、クロフィブレート、エトフィブレート、フルバスタチン、ロバスタチン、プラバスタチン、コレスチラミド、コレスチポール−ＨＣｌ、キサンチノールニコチネート、イノシトールニコチネート、アシピモックス、ネビボロール、グリセロールニトレート、イソソルビドモノニトレート、イソソルビドジニトレート、ペンタエリスリチルテトラニトレート、インダパミド、シラゼプリル、ウラピジル、エプロサルタン、ニルバジピン、メトプロロール、ドキサゾシン、モルシドルミン、モキサベリン、アセブトロール、プラゾシン、トラピジル、クロニジン、ビンカアルカロイドおよび類似体、例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ポドフィロトキシン誘導体、エトポシド、テニポシド、アルキル化薬、ニトロソ尿素、Ｎ−喪失類似体（Ｎ−ｌｏｓｔ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ）、シクロプロンファミド、エスタムスチン、メルファラン、イホスファミド、ミトキサントロン、イダルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ダクチノマイシン、ダプトマイシン、代謝拮抗薬、例えば、シタラビン、フルオロウラシル、フルオロアラビン、ゲムシタビン、チオグアニン、カペシタビン、組合せ、例えば、アドリアマイシン／ダウノルビシン、シトシンアラビノシド／シタラビン、４−ＨＣ、または他のホスファミド。
【００８７】
他の特に好ましい化合物は、下記のような化合物である：クレマスチン、ジフェンヒドラミン、ジメンヒドリネート、プロメタジン、セチリジン、アステミゾール、レボカバスチン、ロラチジン、テルフェナジン、アセチルサリチル酸、サリチル酸ナトリウム、サルサラート、ジフルニサル、サリチルサリチル酸、メサラジン、スルファサラジン、オサラジン、アセトアミノフェン、インドメタシン、スリンダク、エトドラク、トルメチン、ケトロラク、ベタメタゾン、ブデソニド、クロモグリシン酸、ジメチコーン、シメチコーン、ドンペリドン、メトクロプラミド、アセメタシン、オキサセプロール、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトプロフェン、フルブリプロフェン、フェノプロフェン、オキサプロジン、メフェナム酸、メクロフェナム酸、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、アザプロパゾン、ニメスリド、メタミゾール、レフルナミド、エフォリコキシブ、ロナゾラク、ミソプロストール、パラセタモール、アセクロフェナク、バルデコキシブ、パレコキシブ、セレコキシブ、プロピルフェナゾン、コデイン、オキサポジン、ダプソン、プレドニソン、プレドニソロン、トリアムシノロン、デキシブプロフェン、デキサメタゾン、フルニソリド、アルブテロール、サルメテロール、テルブタリン、テオフィリン、カフェイン、ナプロキセン、グルコサミンスルフェート、エタネルセプト、ケトプロフェン、アダリムマブ、ヒアルロン酸、インドメタシン、プログルメタシンジマレエート、ヒドロキシクロロキン、クロロキン、インフリキシマブ、エトフェナメート、アウラノフィン、金、［２２４Ｒａ］ラジウムクロリド、チアプロフェン酸、デクスケトプロフェン（トロメタモール）、クロプレドノール、アウロチオマレイン酸ナトリウム、アウロチオグルコース、コルヒチン、アロプリノール、プロベネシド、スルフィンピラゾン、ベンズブロマロン、カルバマゼピン、ロルノキシカム、フルオロコルトロン、ジクロフェナク、エファリズマブ、イダルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ダクチノマイシン、ダプトマイシン、シタラビン、フルオロウラシル、フルオロアラビン、ゲムシタビン、チオグアニン、カペシタビン、アドリアマイシン／ダウノルビシン、シトシンアラビノシド／シタラビン、４−ＨＣ、または他のホスファミド、ペリシラミン、ヒアルロン酸調製物、アルテパロン、グルコサミン、ＭＴＸ、ＴＮＦ−受容体の可溶性フラグメント（例えばエタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ））、およびＴＮＦに対する抗体（例えばインフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、ナタリズマブ（Ｔｙｓａｂｒｉ）およびアダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ））。
【００８８】
本発明の化合物および付加的治療薬は、単一投与形態において配合してもよく、または別個の投与形態において存在してよく、付随的に（即ち、同時に）または逐次的に投与しうることが当業者に理解される。
【００８９】
本発明の医薬組成物は、意図する投与方法に好適な任意の形態であってよい。
【００９０】
本発明の化合物は、経口的、非経口的、例えば、気管支肺的、皮下的、静脈内的、筋肉内的、腹腔内的、脊髄内的、経皮的、経粘膜的、硬膜下的、イオン導入法によって局部的（ｌｏｃａｌｌｙ）または局所的（ｔｏｐｉｃａｌｌｙ）、舌下的、吸入スプレー、エーロゾルによって、または直腸的などの方法によって、常套の医薬的に許容される賦形剤を任意選択的に含んで成る用量単位配合物において、投与しうる。
【００９１】
本発明の医薬組成物の配合に使用しうる賦形剤は、下記の物質を包含する：担体、賦形剤、希釈剤、溶媒、例えば一価アルコール、例えば、エタノール、イソプロパノール、および多価アルコール、例えばグリコール、および食用油、例えば、ダイズ油、ヤシ油、オリーブ油、ベニバナ油、綿実油、油性エステル、例えば、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル；結合剤、佐剤、可溶化剤、粘稠化剤、安定剤、崩壊剤、グリダント（ｇｌｉｄａｎｔｓ）、潤滑剤、緩衝剤、乳化剤、湿潤剤、懸濁化剤、甘味剤、着色剤、香味剤、被覆剤、防腐剤、酸化防止剤、加工剤、薬剤送達調節剤および促進剤、例えば、燐酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、単糖類、二糖類、デンプン、ゼラチン、セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、デキストロース、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ポリビニルピロリドン、低融点ワックス、イオン交換樹脂。
【００９２】
他の好適な医薬的に許容される賦形剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ（１９９１）に記載されている。
【００９３】
経口投与用の投与形態は、錠剤、カプセル剤、ロゼンジ剤、丸剤、オブラート剤、顆粒剤、経口液体、例えば、シロップ剤、懸濁剤、液剤、乳剤、再構成用の粉末を包含する。
【００９４】
非経口投与用の投与形態は、注入用の水性または油性の溶液または乳濁液、事前充填注射器用の水性または油性の溶液、懸濁液または乳濁液、および／または再構成用の粉末を包含する。
【００９５】
局部／局所投与用の投与形態は、吸入剤、エーロゾル剤、計量供給エーロゾル剤、経皮治療系、薬物添加貼付剤、直腸坐剤および／または膣坐剤を包含する。
【００９６】
単一投与形態を配合するために賦形剤と合わせうる本発明化合物の量は、被治療者、および特定の投与法によって変わる。
【００９７】
本発明の医薬組成物は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ（１９９１）に記載されているような、それ自体で当業者に既知の方法によって製造することができる。
【００９８】
本発明の他の態様において、Ｍｎｋ１またはＭｎｋ２（Ｍｎｋ２ａ、Ｍｎｋ２ｂ）または他のそれらの変異体のキナーゼ活性の活性を阻害する医薬組成物であって、特に、代謝性疾患、造血性障害、癌ならびにそれらの続発性合併症および障害の予防または治療用の医薬組成物を製造するための、本発明のチエノピリミジン化合物の使用を提供する。それによって、炭水化物および／または脂質代謝の代謝性疾患を予防および治療するのが好ましい。
【００９９】
Ｍｎｋ１および／またはＭｎｋ２（Ｍｎｋ２ａまたはＭｎｋ２ｂ）および／または他のそれらの変異体のキナーゼ活性の阻害に影響される本発明の疾患は、代謝性疾患の調節に関連した疾患、例えば、肥満、摂食障害、悪液質、真性糖尿病、代謝性症候群、高血圧症、冠状動脈性心疾患、高コレステロール血症、異常脂質血症、骨関節炎、胆石、および／または睡眠時無呼吸、および活性酸素化合物（ＲＯＳ防御）に関連した疾患、例えば、真性糖尿病、神経変性疾患および癌を包含する。
【０１００】
本発明の医薬組成物は、前記のような肥満、真性糖尿病ならびに炭水化物および脂質代謝の他の代謝性疾患、特に真性糖尿病および肥満の、予防および治療に特に有用である。
【０１０１】
従って、本発明のより好ましい実施形態において、代謝性疾患の予防または治療用の医薬組成物を製造するための、チエノピリミジン化合物の使用を提供する。
【０１０２】
本発明のさらに他の態様において、サイトカイン媒介障害、例えば炎症性疾患の、治療または予防用の医薬組成物の製造のための、本発明のチエノピリミジン化合物の使用を提供する。
【０１０３】
従って、本発明の医薬組成物は、以下の疾患の予防または治療に有用である：炎症性疾患、特に、慢性または急性炎症、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬性関節炎、骨関節炎、若年性関節リウマチ、痛風性関節炎；乾癬、紅皮症性乾癬、膿疱性乾癬、炎症性腸疾患、クローン病および関連症状、潰瘍性大腸炎、大腸炎、憩室炎、腎炎、尿道炎、卵管炎、卵巣炎、子宮内膜炎、脊椎炎、全身性エリテマトーデスおよび関連障害、多発性硬化症、喘息、髄膜炎、脊髄炎、脳脊髄炎、脳炎、静脈炎、血栓性静脈炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性肺疾患、アレルギー性鼻炎、心内膜炎、骨髄炎、リウマチ熱、リウマチ性心膜炎、リウマチ性心内膜炎、リウマチ性心筋炎、リウマチ性僧帽弁疾患、リウマチ性大動脈弁疾患、前立腺炎、前立腺膀胱炎、脊椎関節症、硬直性脊椎炎、滑膜炎、腱滑膜炎、筋炎、咽頭炎、リウマチ性多発性筋痛、肩腱炎または滑液嚢炎、痛風、偽痛風、脈管炎；肉芽腫性甲状腺炎、リンパ球性甲状腺炎、侵襲性線維性甲状腺炎、急性甲状腺炎から選択される甲状腺の炎症性疾患；橋本甲状腺炎、川崎病、ノイレー現象、シェーグレン症候群、神経炎症性疾患、敗血症、結膜炎、角膜炎、虹彩毛様体炎、視神経炎、耳炎、リンパ腺炎、鼻咽頭炎、副鼻腔炎、咽頭炎、扁桃炎、喉頭炎、喉頭蓋炎、気管支炎、肺炎、口内炎、歯肉炎、食道炎、胃炎、腹膜炎、肝炎、胆石症、胆嚢炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー病、半月体形成性糸球体腎炎、膵臓炎、皮膚炎、子宮内膜炎、子宮筋層炎、子宮炎、子宮頚管炎、子宮頚内膜炎、子宮頚外膜炎、子宮傍結合組織炎、結核、膣炎、外陰炎、珪肺症、サルコイドーシス、塵肺症、炎症性多発性関節症、乾癬性関節症、腸線維症、気管支拡張症、および腸疾患に基づく関節症。
【０１０４】
前記のように、本発明の組成物は、下記から選択される疾患の治療または予防に特に有用である：慢性または急性炎症、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬、ＣＯＰＤ、炎症性腸疾患、敗血症性ショック、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症および喘息。
【０１０５】
従って、本発明のより好ましい実施形態において、下記から選択される炎症性疾患の予防または治療用の医薬組成物の製造のための、ピラゾロピリミジン化合物の使用を提供する：慢性または急性炎症、慢性炎症性関節炎、関節リウマチ、乾癬、ＣＯＰＤ、炎症性腸疾患、敗血症性ショック、クローン病、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症および喘息。
【０１０６】
本発明の目的ために、治療有効投与量は、一般に、約１〜５００ｍｇ／日、好ましくは約１０〜約２００ｍｇ／日、最も好ましくは約１０〜約１００ｍｇ／日であり、それは、単一用量または複数用量で投与しうる。
【０１０７】
しかし、任意の特定患者のための本発明化合物の特定用量レベルは、種々の要因、例えば、年齢、性別、体重、全身の健康状態、食事、治療される患者の個々の反応、投与時間、治療される疾患の重症度、適用される特定の化合物の活性、投与形態、適用法および併用薬に依存することが理解される。所定状況のための治療有効量は、日常試験によって容易に決められ、通常の臨床医および内科医の技能および判断の範囲内である。
実施例
実施例１：本発明化合物の製造例
本発明の化合物、それらの誘導体および前駆体の一般的合成法
以下に、いくつかの一般的合成法を記載する。
経路Ａ
【０１０８】
【化６】
2009532407.tif 000017
【０１０９】
アミン（１．０当量）および４−Ｃｌ−ピリミジン誘導体（１．０当量）を、封管において、水性１Ｍ  ＨＣｌ中、１〜２時間にわたって還流させながら加熱した。次に、反応物を室温に冷まし、２８％水酸化アンモニウム溶液でｐＨ９〜１０に塩基性化した。得られた沈殿物を濾過によって分離し、水で洗浄し、シンター（ｓｉｎｔｅｒ）で乾燥し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空乾燥して、所望の生成物を得た。
・アミン基が酸を含有する場合、反応は塩基性化されない。
・反応は、典型的には、５０ｍｇ規模で、１〜２ｍＬの１Ｍ  ＨＣｌ中で行われて、＞１０ｍｇの生成物を生じる。
・反応が沈殿物を生じない場合、溶媒を除去し、固形物を水でひいて、所望の生成物を得る。
・ピリミジン誘導体が主要な副生成物として形成され、熱いメタノールからの粉砕によって除去することができる。
経路Ｂ
【０１１０】
【化７】
2009532407.tif 000018
【０１１１】
アミン（１．０当量）および４−Ｃｌ−ピリミジン誘導体（１．０当量）を、封管において、ＩＰＡ中、６０℃で４〜１８時間加熱した。次に、反応物を室温に冷まし、２８％水酸化アンモニウム溶液でｐＨ９〜１０に塩基性化した。得られた沈殿物を濾過によって分離し、水で洗浄し、シンターで乾燥し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空乾燥して、所望の生成物を得た。
・アミン基が酸を含有する場合、反応は塩基性化されない。
・反応は、典型的には、５０ｍｇ規模で、２〜３ｍＬのＩＰＡ中で行われて、＞１０ｍｇの生成物を生じる。
・反応が沈殿物を生じない場合、溶媒を除去し、固形物を水でひいて、所望の生成物を得る。
・５，６−置換チエノピリミジンは、典型的には、より長い反応時間およびより高い温度を必要とする。
カルボン酸の、エステル、アミドおよびヒドロキサム酸への変換
【０１１２】
下記スキームのために、親カルボン酸を、経路ＡまたはＢによって調製した。
経路Ｃ
【０１１３】
【化８】
2009532407.tif 000019
【０１１４】
メチルエステル形成
カルボン酸（１．０当量）を、トルエン／メタノール［３：１］に懸濁し、０℃に冷却した。この混合物に、ＴＭＳ−ジアゾメタン（Ｅｔ２Ｏ中の２Ｍ溶液、１．３当量）を滴下した。反応混合物を０℃で３０分間攪拌し、次に、室温に温め、反応が終了するまで攪拌した。溶媒を真空除去して、所望の生成物を得た。
【０１１５】
３時間後に反応が終了していない場合、さらに１当量のＴＭＳ−ジアゾメタン（Ｅｔ２Ｏ中の２Ｍ溶液）を反応混合物に添加し、反応が終了するまで室温で攪拌を継続した。
【０１１６】
第一級カルボキサミド形成
出発メチルエステルを、ＡＣＥ圧力管において、２８％  ｗ／ｗ  ＮＨ４ＯＨ溶液（５〜１０ｖｏｌ）に懸濁し、９０℃で８時間加熱した。反応混合物を室温に冷まし、得られた沈殿物を濾過によって分離した。濾過ケーキをアセトン、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥して、所望の生成物を得た。
【０１１７】
沈殿物が得られない場合、溶媒を真空除去し、得られた固形物を、必要であれば準分取（ｓｅｍｉ−ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ）ＨＰＬＣによって精製した。
【０１１８】
メチルカルボキサミド形成
出発メチルエステルを、ＡＣＥ圧力管において、４０％  ｗ／ｗメチルアミン溶液（７ｖｏｌ）に懸濁した。８０℃で１８時間加熱した後に、反応混合物を室温に冷ました。得られた沈殿物を濾過によって分離し、乾燥して、所望の生成物を得た。
【０１１９】
ヒドロキシルアミン形成
出発メチルエステルを、５０％  ｗ／ｗヒドロキシルアミン水溶液（７ｖｏｌ）に懸濁し、室温で１８時間攪拌した。次に、溶媒を真空除去し、得られた残渣をアセトンでひいた。得られた沈殿物を濾過によって収集し、ＤＣＭで洗浄し、乾燥して、所望の生成物を得た。
経路Ｋ
【０１２０】
【化９】
2009532407.tif 000020
【０１２１】
炭酸セシウム（０．６当量）、フェノール（１．０当量）および４−Ｃｌ−ピリミジン誘導体（１．０当量）を、封管に装填し、アセトニトリル（４０ｖｏｌ）に懸濁した。次に、反応物を１００℃で１８時間加熱し、次に、冷まし、無機物を濾過によって除去した。溶媒を真空除去し、得られた残渣をカラムクロマトグラフィによって精製した。
経路Ｌ
【０１２２】
【化１０】
2009532407.tif 000021
【０１２３】
フェノールのアルキル化
ニトロ−フェノール（１．０当量）を、アセトニトリル（１０ｖｏｌ）に溶解し、炭酸カリウム（２．０当量）を添加した。室温で１０分間攪拌した後に、１−ブロモ−２−クロロエタン（３．０当量）を添加し、反応物を８０℃で１８時間加熱した。次に、反応混合物を冷まし、無機物を濾過によって除去し、溶媒を真空除去した。得られた残渣を、精製せずに次の段階に使用した。
【０１２４】
第三級アミンの形成
塩化アルキル（１．０当量）を、アセトニトリル（１０ｖｏｌ）中の炭酸カリウム（２．０当量）およびアミン（２．０当量）の懸濁液に添加した。反応物を８０℃に１８時間加熱し、次に、冷ました。次に、無機物を濾過によって除去し、溶媒を真空除去し、得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製した。
【０１２５】
水素化
アリール−ニトロ化合物をエタノール（５ｖｏｌ）に溶解し、１０％  ｗ／ｗ炭素上パラジウム（１０％  ｗ／ｗ）を添加した。次に、混合物をＮ２で２回パージし、次に、Ｈ２雰囲気下に置き、１８時間攪拌した。次に、反応物をＮ２で２回パージし、パラジウム残渣をセライトパッドでの濾過によって除去した。次に、溶媒を真空除去し、次に、所望のアニリンをいずれの付加的精製も行わずに次に進めた。
経路Ｎ
【０１２６】
【化１１】
2009532407.tif 000022
【０１２７】
ＢＯＣ保護
アミノ−安息香酸（１．０当量）をジオキサン（２０ｖｏｌ）に懸濁し、水（５０ｖｏｌ）中のＮａＯＨ（０．９５当量）の溶液を１０分間にわたって添加した。次に、混合物を０℃に冷却し、ジオキサン中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１．４当量）の溶液を添加した。次に、反応混合物を室温で１８時間攪拌し、次に、クエン酸（１．１当量）でクエンチした。得られた沈殿物を濾過によって分離し、水で洗浄し、乾燥して、所望の生成物を得た。
【０１２８】
弗素化
ＢＯＣ保護アミノ−安息香酸（１．０当量）を、ＤＣＭ（１０ｖｏｌ）に懸濁し、懸濁液を−７８℃に冷却した。次に、ＤＡＳＴ（１．１当量）を懸濁液に滴下し、反応物を−７８℃で攪拌した。反応が終了したら、混合物を室温に温め、次に、飽和ＮａＨＣＯ３（水性）溶液に注いだ。次に、混合物をＤＣＭで２回抽出し、有機相を合わせ、５％  ＮａＨＣＯ３（水性）溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を真空除去して、所望の生成物を得た。
【０１２９】
アミド形成
酸弗化物（１．０当量）およびアミン（１．１当量）を、ＤＣＭ（５０ｖｏｌ）に溶解し、トリエチルアミン（１．５当量）を添加した。次に、反応物を室温で１８時間攪拌した。１Ｍ  ＨＣｌを反応物に添加し、有機相を分離し、水で洗浄し、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を真空除去して、所望の生成物を得た。
【０１３０】
ＢＯＣ脱保護
ＢＯＣ保護アニリン（１．０当量）を、ジオキサン（３０ｖｏｌ）中の４Ｍ  ＨＣｌに懸濁し、室温で１８時間攪拌した。得られた沈殿物を濾過によって分離し、ジエチルエーテルで洗浄した。これによって、所望の生成物をＨＣｌ塩として得た。
【０１３１】
ＳＮＡｒ
経路Ａに関する。
経路Ｘ
【０１３２】
【化１２】
2009532407.tif 000023
【０１３３】
ＳＮＡｒ
経路Ａに関する。
【０１３４】
スルホンアミド形成
ピリミジルジアミン（１．０当量）を、ＤＣＭ（２０ｖｏｌ）に溶解し、塩化スルホニルを添加し、反応物を室温で１８時間攪拌した。次に、溶媒を真空除去し、得られた残渣を準分取ＨＰＬＣによって精製して、所望の化合物を得た。
特に好ましい化合物（化合物１５）
【０１３５】
【化１３】
2009532407.tif 000024
【０１３６】
は、下記のように調製しうる。
合成経路
【０１３７】
【化１４】
2009532407.tif 000025
【０１３８】
３−フルオロ−４−ニトロベンズアミド
ＴＨＦ（３６０ｍＬ）中の３−フルオロ−４−ニトロベンゼンカルボン酸（１８．０ｇ、１．０当量、０．１０ｍｏｌ）の溶液に、０℃で、塩化チオニル（５６．７ｍＬ、８．０当量、０．７８ｍｏｌ）およびＤＭＦ（１ｍＬ）を添加した。反応物を室温に温め、３．５時間攪拌し、その後、全ての出発物質を消費した。次に、塩化チオニルを真空除去して、３−フルオロ−４−ニトロベンゾイルクロリドを黄色固形物として得た。これをＤＣＭ（３６０ｍＬ）に溶解し、その溶液を、水（３６０ｍＬ）中の８８０アンモニアの冷却溶液に強烈攪拌しながら滴下した。添加後に、反応物を室温で１５分間攪拌した。得られた沈殿物を濾過によって収集し、次に、濾液をさらに２回濾過した。３つの沈殿物をそれぞれシクロヘキサン（２×１００ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥し、合わせて、標記化合物を黄色固形物として得た（１３．３２ｇ、７２ｍｍｏｌ、７４％）。
ＬＣＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝入手不能、Ｒｔ＝１．４１分、１００％純度
【０１３９】
４−ニトロ−３−（テトラヒドロフラン−３−イルオキシ）−ベンズアミド
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の３−ヒドロキシテトラヒドロフラン（２．５７ｍＬ、１．２当量、２３．０ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ナトリウムを、油中６０％の分散液（０．８４ｇ、１．１当量、２０．９１ｍｍｏｌ）として添加し、次に、この混合物を０℃で３０分間攪拌した。前記の混合物を、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中の３−フルオロ−４−ニトロベンズアミド（３．５ｇ、１．０当量、１９．０１ｍｍｏｌ）の溶液に滴下し、室温で３．５時間攪拌した。反応を水でクエンチし、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出し、有機物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒を真空除去して、標記化合物を黄色固形物として得た（４．７７ｇ、１８．９ｍｍｏｌ、９６％  補正済み）。
ＬＣＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝２５３、Ｒｔ＝１．４１分、１００％純度
【０１４０】
４−アミノ−３−（テトラヒドロフラン−３−イルオキシ）−ベンズアミド
エタノール（２００ｍＬ）中の４−ニトロ−３−（テトラヒドロフラン−３−イルオキシ）−ベンズアミド（４．７７ｇ、１８．１５ｍｍｏｌ）の溶液に、炭素上１０％パラジウム（０．５ｇ、１０％  ｗ／ｗ）を添加し、フラスコを追加分のエタノール（２０ｍＬ）で濯いだ。次に、反応物を窒素雰囲気下にパージし、Ｈ２（ｇ）雰囲気下に置き、室温で１８時間攪拌した。次に、反応物を、Ｎ２（ｇ）でパージし、セライトパッドで濾過した。パッドをエタノール（１００ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空下に濃縮乾固して、標記化合物を白色固形物として得た（４．２２ｇ、１８．９ｍｍｏｌ、１００％  補正済み）。
ＬＣＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝２２３、Ｒｔ＝１．０１分、１００％純度
【０１４１】
３−（テトラヒドロフラン−３−イルオキシ）−４−（チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イルアミノ）−ベンズアミド
ＡＣＥ圧力管を使用して、反応を４バッチで行った。４−アミノ−３−（テトラヒドロフラン−３−イルオキシ）−ベンズアミド（０．５２ｇ、１．０当量、２．３４ｍｍｏｌ）を、ＩＰＡ（４ｍＬ）中の４−クロロチエノ［３，２−ｄ］ピリミジン（０．４０ｇ、１．０当量、２．３４ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。次に、反応混合物を１２０℃で１８時間攪拌し、次に、冷ました。２８％  ｗ／ｗ水酸化アンモニウム溶液（４ｍＬ）、次に水（８ｍＬ）を添加し、反応物を合わせた。沈殿物を濾過によって分離し、水（４×５０ｍＬ）で洗浄し、シンターで乾燥し、シクロヘキサン（８×５０ｍＬ）で洗浄し、次に、真空乾燥して、標記化合物をオフホワイトの固形物として得た（２．７１ｇ、７．６ｍｍｏｌ、８１％）。
ＬＣＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３５７、Ｒｔ＝１．２７分、１００％純度
【０１４２】
実施例２．キナーゼ蛍光偏光アッセイ
アッセイ原理：Ｍｎｋ１、Ｍｎｋ２ａおよび他のキナーゼに対する化合物の阻害効力を、間接的（競合的）蛍光偏光として当業者に公知のフォーマットに基づくアッセイによって評価した。アッセイ検出系は、ホスホ−特異性抗体に結合した小蛍光体標識ホスホ−ペプチド（リガンドと称す）を含んで成る。キナーゼ反応によって生じる生成物は、抗体結合に関して、リガンドと競合する。溶解状態でより低い旋光速度を生じる結合リガンドのより大きい分子容に基づいて、その放射光は、遊離リガンドからの偏光より高度の偏光を有する。
【０１４３】
特異性均質キナーゼアッセイの説明
実施例２ａ．Ｍｎｋ１およびＭｎｋ２ａインビトロキナーゼアッセイ
酵素源として、ヒトＭｎｋ１およびヒトＭｎｋ２ａを、大腸菌中でＧＳＴ融合蛋白質として発現させ、グルタチオンアフィニティクロマトグラフィによって＞８０％均質に精製し、予備活性化ＥＲＫ２によってインビトロで活性化した。簡単に言えば、順方向／逆方向プライマー対：
配列番号１  ５’ＴＴＴＡＧＧＡＴＣＣＧＴＡＴＣＴＴＣＴＣＡＡＡＡＧＴＴＧＧ／
配列番号２  ５’ＣＴＧＧＧＴＣＧＡＣＴＣＡＧＡＧＴＧＣＴＧＴＧＧＧＣＧＧ  及び
配列番号３  ５’ＡＣＡＧＧＧＡＴＣＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＡＡＣＣＡＧＣＣ／
配列番号４  ５’ＧＡＴＧＧＴＣＧＡＣＴＣＡＧＧＣＧＴＧＧＴＣＴＣＣＣＡＣＣ
（下線を付した制限酵素認識部位を使用）をそれぞれ使用して、ヒトＭｎｋ１およびＭｎｋ２ａの読み取り枠をｃＤＮＡから増幅し、ベクターｐＧＥＸ−４Ｔ１（Ａｍｅｒｓｈａｍ，Ｓｗｅｄｅｎ，ｃａｔ．ｎｏ．２７−４５８０−０１）のＢａｍＨＩおよびＳａＩＩ部位にクローン化した。これらのコンストラクトは、Ｎ−末端グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）タグを有する融合蛋白質としてのＭｎｋ１またはＭｎｋ２ａ（ＧＳＴ−Ｍｎｋ１またはＧＳＴ−Ｍｎｋ２ａと称する）の原核性発現を可能にする。下記の発現および精製手順は、２つの異性体を区別しない場合にＧＳＴ−Ｍｎｋと一般に称するＧＳＴ−Ｍｎｋ１およびＧＳＴ−Ｍｎｋ２ａと同じである。ＧＳＴ−Ｍｎｋの発現は、大腸菌ＢＬ２１（Ｍｅｒｃｋ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．６９４４９）において行われた。１００μｇ／ｍＬアンピシリン（Ｓｉｇｍａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ａ９５１８）を補充したＬＢ−Ｂｏｕｉｌｌｏｎ（Ｍｅｒｃｋ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．１．１０２８５）中で、３７℃において、細胞を増殖させた。培養物が０．８のＡ６００に対応する密度に達した際に、等量の氷冷ＬＢ／アンピシリンを添加し、培養物を２５℃にし、１ｍＭ  イソプロピルチオガラクトシド（ＩＰＴＧ，Ｒｏｔｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．２３１６．４）で４時間誘導した。遠心分離によって収集した細胞を、１ｇ湿重量細胞ペレットにつき１０ｍＬの溶解緩衝液（５０ｍＭ  トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンヒドロクロリド（Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、Ｓｉｇｍａ  Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｔ５９４１）ｐＨ７．５、３００ｍＭ  塩化ナトリウム（ＮａＣｌ、Ｓｉｇｍａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｓ７６５３、）、５％（ｗ／ｖ）グリセロール（Ｓｉｇｍａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｇ５５１６）、３ｍＭ  ＤＴＴジチオトレイトール（ＤＴＴ、Ｓｉｇｍａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｄ９７７９））に再懸液した。音波発生器での細胞の破壊、次に、４℃で４５分間にわたる３８０００ｇでの遠心分離によるクリーニングによって、溶解物を調製した。
【０１４４】
溶解物を、溶解緩衝液で平衡化したＧＳＴＰｒｅｐ  ＦＦ  １６／１０  カラム（Ａｍｅｒｓｈａｍ，Ｓｗｅｄｅｎ  ｃａｔ．ｎｏ．１７−５２３４−０１）に適用した。非結合物質の除去を、３カラム容量（ＣＶ）溶解緩衝液で行った。溶離は、２ＣＶの溶離緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、５％（ｗ／ｖ）グリセロール、２０ｍＭ  グルタチオン（Ｓｉｇｍａ  Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｇ４２５１））で行った。ピーク画分を溜め、蛋白質を、ＰＤ１０脱塩カラム（Ａｍｅｒｓｈａｍ，Ｓｗｅｄｅｎ  ｃａｔ．ｎｏ．１７−０８５１−０１）でのゲル濾過によって、保存緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、２００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１ｍＭ  エチレングリコール−ビス（２−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ、Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．２３，４５３−２）、１ｍＭ  ＤＴＴ、１０％（ｗ／ｖ）グリセロール、０．５Ｍ  スクロース（Ｓｉｇｍａ  Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｓ０３８９））に移した。アリコートを液体窒素中で衝撃凍結し（ｓｈｏｃｋ  ｆｒｏｚｅｎ）、−８０℃で保存した。
【０１４５】
Ｍｎｋ１およびＭｎｋ２ａの活性化は、２．５μＭの精製ＧＳＴ−Ｍｎｋ１またはＧＳＴ−Ｍｎｋ２ａの濃度において、２０ｍＭ  Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジン−Ｎ’−（２−エタンスルホン酸）（ＨＥＰＥＳ、Ｆｌｕｋａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．５４４５９）／水酸化カリウム（ＫＯＨ、Ｒｏｔｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．６７５１．１）ｐＨ７．４、１０ｍＭ  塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ２、Ｓｉｇｍａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｍ２６７０）、０．２５ｍＭ  ＤＴＴ、０．０５％（ｗ／ｖ）ポリオキシエチレン２０ステアリルエーテル（Ｂｒｉｊ  ７８，Ｓｉｇｍａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｐ４０１９）を含んで成る緩衝液（ＨＭＤＢ緩衝液）中の１５０ｎＭ  予備活性化ＮＨｉｓ−ＥＲＫ２（調製に関してＥＲＫ２アッセイ参照）および５０μＭ  アデノシン三リン酸（ＡＴＰ、Ｓｉｇｍａ，ｃａｔ．ｎｏ．Ａ２６９９）を用いて、３０℃で４５分間インキュベーションすることによって行った。インキュベーション後に、調製物を、１回使用の試料に等分し、液体窒素中で衝撃凍結し、−８０℃で保存し、以下に詳述するＭｎｋ１またはＭｎｋ２ａキナーゼアッセイに使用した。Ｍｎｋ活性アッセイを妨げないために、活性化キナーゼの存在を調べた。
【０１４６】
基質：真核性翻訳開始因子４Ｅ（ｅｌＦ４Ｅ）のセリン２０９付近のアミノ酸配列から誘導された配列番号５  ＴＡＴＫＳＧＳＴＴＫＮＲ
を有するカルボキシ末端アミド化１２マーペプチドを合成し、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）によって＞９５％に精製した（Ｔｈｅｒｍｏ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。Ｍｎｋキナーゼによってリン酸化されるセリン残基に下線が付されている。
リガンド：下記に示すように、アミド化カルボキシ末端を含有し、アミノ末端においてオキサジン誘導蛍光体と結合したペプチドＴＡＴＫＳＧ−ｐＳ−ＴＴＫＮＲを合成し、リガンドとして使用した：
【０１４７】
【化１５】
2009532407.tif 000026
【０１４８】
抗体：ＳＰＦニュージーランド白ウサギを、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）に結合させたペプチドＮＨ２−ＣＴＡＴＫＳＧ−ｐＳ−ＴＴＫＮＲ−ＣＯＮＨ２で、標準プロトコルに従って免疫化した。免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）画分を、当分野において公知の方法によって、追加免疫動物の血清から精製した。簡単に言えば、血清を蛋白質Ａアフィニティクロマトグラフィに付した。溶出物を、５０％の冷飽和硫酸アンモニウムで沈殿させ、ペレットを溶解し、脱塩した。得られた物質は、さらに抗原特異性精製を行わずに、以下に記載するアッセイに使用するのに適していた。
【０１４９】
アッセイ構成：予備活性化ＧＳＴ−Ｍｎｋ１またはＧＳＴ−Ｍｎｋ２ａをそれぞれ使用して、Ｍｎｋ１およびＭｎｋ２ａのキナーゼ活性の阻害を、同じアッセイ系で評価した。キナーゼ反応は、３０μＭ  基質ペプチド、２０μＭ  ＡＴＰ、６０ｎＭ  リガンド、および２５ｎＭ  予備活性化Ｍｎｋ１または２．５ｎＭ  予備活性化Ｍｎｋ２ａのいずれか１つを含有する。反応緩衝液条件は、１６ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ  ｐＨ７．４、８ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．４ｍＭ  ＤＴＴ、０．０８％（ｗ／ｖ）ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ、Ｓｉｇｍａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ａ３０５９）、０．００８％（ｗ／ｖ）Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７（Ｓｉｇｍａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｐ２４４３）、３％（ｖ／ｖ）ＤＭＳＯ（Ａｐｐｌｉｃｈｅｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ａ３００６）である。キナーゼ反応は、３０℃で４０分間である。キナーゼ反応は、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ  ｐＨ７．４、５０ｍＭ  エチレンジアミン四酢酸、二ナトリウム塩（ＥＤＴＡ、Ｓｉｇｍａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｅ５１３４）、０．５ｍＭ  ＤＴＴ、０．０５％（ｗ／ｖ）ポリオキシエチレン−ソルビタンモノラウレート（Ｔｗｅｅｎ２０、Ｓｉｇｍａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｐ７９４９）中の、０．６７反応容量の１μＭ抗体の添加によって停止させる。室温で１時間の平衡時間後に、試料を蛍光偏光測定に付す。蛍光偏光読出しは、ＤＬＲＰ６５０ダイクロイックミラー（Ｏｍｅｇａ  Ｏｐｔｉｃａｌｓ，Ｂｒａｔｔｌｅｂｏｒｏ，ＶＴ，ＵＳＡ，ｃａｔ．ｎｏ．ＸＦ２０３５）、励起における６３０ＡＦ５０帯域フィルター（Ｏｍｅｇａ  Ｏｐｔｉｃａｌｓ，Ｂｒａｔｔｌｅｂｏｒｏ，ＶＴ，ＵＳＡ，ｃａｔ．ｎｏ．ＸＦ１０６９）および放射側における６９５ＡＦ５５帯域フィルター（Ｏｍｅｇａ  Ｏｐｔｉｃａｌｓ，Ｂｒａｔｔｌｅｂｏｒｏ，ＶＴ，ＵＳＡ，ｃａｔ．ｎｏ．ＸＦ３０７６）を取り付けたＡｎａｌｙｓｔ  ＡＤマルチモード読取り機（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ，ＵＳＡ）で生成した。
【０１５０】
実施例２ｂ．ＥＲＫ２インビトロキナーゼアッセイ
キナーゼ：酵素の源として、ヒトＥＲＫ２を、大腸菌中で、Ｎ−末端ヘキサ−ヒスチジン融合蛋白質として発現し、固定化金属イオンアフィニティクロマトグラフィ（ＩＭＡＣ）によって＞８０％均質に精製し、ＭＥＫ１の構成的活性変異体によってインビトロで活性化した。簡単に言えば、順方向／逆方向プライマー対：
配列番号６  ５’ＡＧＣＣＧＴＣＧＡＣＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＧＣ／
配列番号７  ５’ＴＧＡＣＡＡＧＣＴＴＡＡＧＡＴＣＴＧＴＡＴＣＣＴＧＧＣＴＧＧ
（下線を付した制限酵素認識部位を使用）を使用して、ヒトＥＲＫ２の読み取り枠をｃＤＮＡから増幅し、ベクターｐＱＥ８１Ｌ（Ｑｉａｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．３２９２３）のＳａＩＩおよびＨｉｎｄＩＩＩ部位にクローン化した。このコンストラクトは、ＮＨｉｓ−ＥＲＫ２と称されるＮ−末端ヘキサ−ヒスチジンタグを有する融合蛋白質としてのＥＲＫ２の原核性発現を可能にする。ＮＨｉｓ−ＥＲＫ２の発現は、大腸菌ＢＬ２１において行われた。１００μｇ／ｍＬアンピシリンを補充したＬＢ−Ｂｏｕｉｌｌｏｎ中で、３７℃において、細胞を増殖させた。培養物が０．８のＡ６００に対応する密度に達した際に、等量の氷冷ＬＢ／アンピシリンを添加し、培養物を２５℃にし、１ｍＭ  ＩＰＴＧで４時間誘導した。遠心分離によって収集した細胞を、１ｇ湿重量細胞ペレットにつき１０ｍＬの溶解緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、ｐＨ７．５、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、５％（ｗ／ｖ）グリセロール、１０ｍＭ  β−メルカプトエタノール（Ｓｉｇｍａ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｍ３１４８））に再懸液した。音波発生器での細胞の破壊、次に、４℃で４５分間にわたる３８０００ｇでの遠心分離によるクリーニングによって、溶解物を調製した。
【０１５１】
溶解物を、溶解緩衝液で平衡化した２５ｍＬ  Ｎｉ−ＮＴＡ  Ｓｕｐｅｒｆｌｏｗ  ｍａｔｒｉｘ（Ｑｉａｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．１０１８６１１）を含有するカラムに適用した。非結合物質の除去を、３カラム容量（ＣＶ）洗浄緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、５％（ｗ／ｖ）グリセロール、１０ｍＭ  β−メルカプトエタノール、２０ｍＭ  イミダゾール（Ｓｉｇｍａ  Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．１２３９９）／ＨＣｌ  ｐＨ７．５）を用いて行った。溶離は、２ＣＶの溶離緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、５％（ｗ／ｖ）グリセロール、３００ｍＭ  イミダゾール）で行った。ピーク画分を溜め、蛋白質を、ＰＤ１０脱塩カラムでのゲル濾過によって、保存緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ７．５、２００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１０％（ｗ／ｖ）グリセロール、０．５Ｍ  スクロース）に移した。アリコートを液体窒素中で衝撃凍結し、−８０℃で保存した。
【０１５２】
順方向／逆方向プライマー対：
配列番号８  ５’ＧＴＣＣＧＧＡＴＣＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＧＡＣＧＣＣＣ
配列番号９  ５’ＴＣＣＣＧＴＣＧＡＣＴＴＡＧＡＣＧＣＣＡＧＣＡＧＣＡＴＧＧＧ
（下線を付した制限酵素認識部位を使用）を使用して、ヒトＭＥＫ１の読み取り枠をｃＤＮＡから増幅し、ベクターｐＱＥ８０Ｌ（Ｑｉａｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ，ｃａｔ．ｎｏ．３２９２３）のＢａｍＨＩおよびＳａＩＩ部位にクローン化した。当分野において公知の方法によって、セリンコドン２１２および２１４を変異誘発して、アスパルテートおよびグルタメートをコード化した。得られた発現コンストラクトは、ＮＨｉｓ−ＭＥＫ１  ＳＳＥＤと称される。このコンストラクトは、構成的活性変異体としてのＭＥＫ１の原核性発現を可能にする。ＮＨｉｓ−ＭＥＫ１  ＳＳＤＥを発現させ、ＭＨｉｓ−ＥＲＫ２に関して記載した条件下に精製した。
【０１５３】
ＮＨｉｓ−ＥＲＫ２の活性化は、１１．３μＭの精製酵素の濃度において、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ  ｐＨ７．４、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．２５ｍＭ  ＤＴＴ、０．０５％（ｗ／ｖ）Ｂｒｉｊ７８を含んで成る緩衝液（ＨＭＤＢ緩衝液）中の、１μＭ  ＮＨｉｓ−ＭＥＫ１  ＳＳＤＥおよび１００μＭ  ＡＴＰを用いて、３０℃で２０分間インキュベーションすることによって行った。インキュベーション後に、調製物を、１回使用の試料に等分し、液体窒素中で衝撃凍結し、−８０℃で保存し、以下に詳述するＥＲＫ２キナーゼアッセイ、および前記のＭｎｋ１およびＭｎｋ２ａの活性化に使用した。ＥＲＫ２活性アッセイを妨げないために、ＭＥＫ１  ＳＳＤＥの存在を調べた。
【０１５４】
基質：ミエリン塩基性蛋白質（ＭＢＰ）のスレオニン９８付近のアミノ酸配列から誘導された配列番号１０  ＦＦＫＮＩＶＴＰＲＴＰＰＰＳＱＧＫ
（Ｔｈｅｒｍｏ，Ｇｅｒｍａｎｙにより合成）を有するカルボキシ末端アミド化１７マーペプチドを合成し、ＨＰＬＣによって＞９５％に精製した。ＥＲＫ２によってリン酸化される関連残基に下線が付されている。
【０１５５】
リガンド：アミド化カルボキシ末端を含有し、アミノ末端において蛍光体５−カルボキシテトラメチルローダミン（５−ＴＡＭＲＡ）と結合したペプチドＫＮＩＶＴＰＲ−ｐＴ−ＰＰＰＳを、Ｔｈｅｒｍｏ（Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入し、リガンドとして使用した。
【０１５６】
抗体：抗−ホスホ−ＭＢＰ抗体（クローンＰ１２）を、Ｕｐｓｔａｔｅ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ（ｃａｔ．ｎｏ．０５−４２９）から購入した（ｃａｔ．ｎｏ．０５−４２９）。
【０１５７】
アッセイ構成：キナーゼ反応は、６０μＭ  基質ペプチド、１０μＭ  ＡＴＰ、および３０ｎＭ  予備活性化ＮＨｉｓ−ＥＲＫ２を含有する。反応緩衝液条件は、１６ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ  ｐＨ７．４、８ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．４ｍＭ  ＤＴＴ、０．０８％（ｗ／ｖ）ＢＳＡ、０．００８％（ｗ／ｖ）Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７、３％（ｖ／ｖ）ＤＭＳＯである。
【０１５８】
キナーゼ反応は、３０℃で４０分間である。キナーゼ反応は、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ  ｐＨ７．４、５０ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．５ｍＭ  ＤＴＴ、０．０５％（ｗ／ｖ）Ｔｗｅｅｎ２０中の、０．６７反応容量の５ｎＭ  リガンドおよび５０ｎＭ  抗体の添加によって停止させる。室温で３０分間の平衡時間後に、試料を蛍光偏光測定に付す。蛍光偏光読出しは、５６１ｎｍダイクロイックミラー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ，ＵＳＡ，ｃａｔ．ｎｏ．４２−０００−００４８）、励起における５５０／１０ｎｍ帯域フィルター（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ，ＵＳＡ，ｃａｔ．ｎｏ．４２−０００−０１３０）および放射側における５８０／１０ｎｍ帯域フィルター（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ，ＵＳＡ，ｃａｔ．ｎｏ．４２−０００−００３４）を取り付けたＡｎａｌｙｓｔ  ＡＤマルチモード読取り機（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ，ＵＳＡ）で生成した。
【０１５９】
本発明の特定の好ましい化合物は、Ｍｎｋ１および／またはＭｎ２キナーゼ活性の阻害に関するインビトロ生物学的スクリーニングアッセイにおいて、１０マイクロモル未満のＩＣ５０値を示すことが示された。
【０１６０】
網羅的ではないが、以下の原理および方法を使用して、前記および請求の範囲に定義されている本発明によって意図される炎症性疾患および症状を使用するのに治療するための治療化合物を同定および選択しうる。
【０１６１】
一般原理として、炎症刺激に暴露されていない系を、そのような刺激および候補治療化合物に暴露する。そのような系は、培養細胞、または細胞の成分、または動物からの単離器官または組織を含んで成ってよい。または、動物を、炎症刺激および化合物に暴露することもできる。
【０１６２】
具体的には、対照群は、既知量の炎症刺激を与えられる。処置群は、同量の炎症刺激、ならびに候補治療化合物のアリコートに暴露される。各群の炎症反応を、当業者に公知の常套手段によって検出し、比較する。
【０１６３】
特に、以下のアッセイを使用しうる。
末梢血単核細胞を利用するアッセイ（例えば、Ｎｅｗｔｏｎ，Ｊ  Ｌｅｕｋｏｃ  Ｂｉｏｌ  ３９：２９９−３１１，１９８６）
ヒト末梢血単核細胞を、フィコール−ハイパーク密度分離（Ｈａｎｓｅｌｌら、Ｊ  Ｉｍｍ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １４５：１０５，１９９１）を使用して、ヒト末梢血単核細胞を末梢血から調製する。細胞を、適切な培地において適切な密度で培養する。そのような密度は、９６穴皿の１穴につき１０５〜１０６細胞である。適切な培地は、１０％ウシ胎児血清を補充したＲＰＭＩ  １６４０を含んで成ることができる。細胞を、所定時間にわたって、被験化合物の系列希釈でインキュベートする。このインキュベーション後に、細胞に炎症刺激を適用する。この刺激は、ＬＰＳ、または他の物質、または物質の組合せを含んで成ることができる。さらなるインキュベーション後に、化合物処理細胞および対照細胞から上澄みを抜き取り、炎症反応をモニタリングするのに有用な分子について分析する。この分析は、サイトカイン（例えば、インターロイキン、インターフェロン、腫瘍壊死因子、ケモカイン）、またはロイコトリエン、またはプロスタグランジン、またはそれらの誘導体の検出および定量化を含みうる。検出は、例えば、市販の酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）で行いうる。
【０１６４】
リポ多糖刺激マウスまたはラットにおけるサイトカイン産生の阻害についてのアッセイ
マウスまたはラットへのリポ多糖体（ＬＰＳ）の注射は、可溶性サイトカインの末梢への迅速放出を誘発する（例えば、Ｗｉｃｈｔｅｒｍａｎら、Ｊ  Ｓｕｒｇ  Ｒｅｓ  ２９：１８９−２０１，１９８０，Ｂｅｕｔｌｅｒ  １９９２．Ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒｓ：ｔｈｅ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｅｍｅｒｇｉｎｇ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．）。ＬＰＳ注射に先立って、本発明の化合物を、経口的、または皮下的、または静脈内的に与える。化合物は急性的または亜急性的に与えうる。ＬＰＳ注射から所定時間後またはいくつかの所定時点で、動物から血液を採取し、サイトカインレベルについて分析する。化合物処置動物および擬処置動物における作用を比較する。
【０１６５】
アジュバント関節炎の阻害についてのアッセイ（Ｐｅａｒｓｏｎ，Ｐｒｏｃ  Ｓｏｃ  Ｅｘｐ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ  ９１：９５−１０１，１９５６）
アジュバント関節炎は、不完全フロイントアジュバントに分散した加熱殺菌ミコバクテリアの投与によって、特定のラット系統に誘発される急性炎症性疾患である。この疾患は、主に足首および足の、重度関節腫脹によって示される。処置群および対照群のラット、例えばルイスラットを、不完全フロイントアジュバントに乳化した加熱殺菌した結核菌で免疫化する。次に、対照群は偽処置を受け、処置群は本発明の化合物を投与される。投与は、経口的、または皮下的、または静脈内的に行いうる。処置は、急性または亜急性的であってよい。処置段階の間に、関節炎の進行を、肢節の腫脹を評価することによって判定した。
【０１６６】
下記の動物モデルを一般試験原理によって前記のように利用して、指示された炎症性疾患および症状のための化合物を、同定し選択しうる。
【０１６７】
炎症性およびリウマチ様関節炎の動物モデル
炎症性およびリウマチ様関節炎の疾患進行を反映する動物モデルが、Ｂｒａｎｄ（Ｃｏｍｐ  Ｍｅｄ  ５５（２）：１１４−１２２，２００５）によって調査されている。具体的には、抗原−誘発関節炎（ＤｕｍｏｎｄｅおよびＧｌｙｎｎ，Ｂｒ  Ｊ  Ｅｘｐ  Ｐａｔｈｏｌ  ４３：３７３−３８３，１９６２）、アジュバント関節炎（Ｐｅａｒｓｏｎ，Ｐｒｏｃ  Ｓｏｃ  Ｅｘｐ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ  ９１：９５−１０１，１９５６）、抗体関節炎（Ｔｅｒａｔｏら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １４８：２１０３−２１０８，１９９２）、またはコラーゲン誘発関節炎（Ｔｒｅｎｔｈａｍら、Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １４６：８５７−８６８，１９７７；Ｃｏｕｒｔｅｎａｙら、Ｎａｔｕｒｅ  ２８３：６６６−６６８，１９８０）のモデルを、本発明の特定化合物の選択に使用しうる。
【０１６８】
炎症性腸疾患および関連障害の動物モデル
炎症性腸疾患、例えば、クローン病および潰瘍性大腸炎の、動物モデルが、ＷｉｒｔｚおよびＮｅｕｒａｔｈ（Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  Ｄｉｓ  １５（３）：１４４−６０，２０００）によって調査されている。慢性腸炎症の病因を反映する状態は、下記の物質と組み合わせたホルムアルデヒドの投与によって誘発しうる：免疫複合体（Ｈｏｄｇｓｏｎら、Ｇｕｔ  １９：２２５−２３２，１９７８；Ｍｅｅら、Ｇｕｔ  ２０：１−５，１９７９）、酢酸（ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎおよびＰｆｅｉｆｆｅｒ，Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ  １７：１３５−１５０，１９７８）、インドメタシン（ＢａｎｅｒｊｅｅおよびＰｅｔｅｒｓ，Ｇｕｔ  ３１：１３５８−１３６４，１９９０；Ｙａｍａｄａら、Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  １７：６４１−６６２，１９９３）、デキストラン硫酸ナトリウム（ｄｅｘｔｒａｎ  ｓｕｌｆａｔｅ  ｓｏｄｉｕｍ）（Ｏｋａｙａｓｕら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ９８：６９４−７０２，１９９０）、またはトリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）／ジニトロベンゼンスルホン酸（ＤＮＢＳ）のようなハプテン（Ｍｏｒｒｉｓら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ９６：７９５−８０３，１９８９；Ｅｌｓｏｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５７：２１７４−２１８５，１９９６；Ｎｅｕｒａｔｈら、Ｊ．Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １８２：１２８１−１２９０，１９９５；Ｙａｍａｄａら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １０２：１５２４−１５３４，１９９２；Ｄｏｈｉら、Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １８９：１１６９−１１８０，１９９９）またはオキサゾロン（Ｅｋｓｔｒｏｍ，Ｓｃａｎｄ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  ３３：１７４−１７９，１９９８；Ｂｏｉｒｉｖａｎｔら、Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １８８：１９２９−１９３９，１９９８）。
【０１６９】
敗血症性ショックの動物モデル
敗血症性ショックの動物モデルは、試料を、リポ多糖体（ＬＰＳ）、グラム陰性菌またはグラム陽性菌、またはそれらの組合せに暴露する（Ｗｉｃｈｔｅｒｍａｎｅｔら、Ｊ  Ｓｕｒｇ  Ｒｅｓ  ２９：１８９−２０１，１９８０；ＦｉｎｋおよびＨｅａｒｄ，Ｊ  Ｓｕｒｇ  Ｒｅｓ  ４９（２）：１８６−９６，１９９０）。盲腸ライゲーションおよび穿刺（ＣＬＰ）のげっ歯類モデルは、腸穿孔の状況および腸管起源の混合細菌感染に類似している（Ｂａｋｅｒら、Ｓｕｒｇｅｒｙ  ９４：３３１−３３５，１９８３）。
【０１７０】
乾癬の動物モデル
乾癬治療用の化合物の適合性を調べるために、ヒト乾癬皮膚異種移植モデル（Ｎｉｃｋｏｌｏｆｆ，Ａｒｃｈ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  １３５：１１０４−１１１０，１９９９；Ｎｉｃｋｏｌｏｆｆ，Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｓｙｍｐ  Ｐｒｏｃ  ５：６７−７３，２０００）を使用しうる。
【０１７１】
アレルギー性喘息の動物モデル
一般に使用されるアレルギー性喘息げっ歯類モデルにおいて、動物を、抗原（例えば、オボアルブミン）に感作し、次に、エーロゾルの吸入によって同じ抗原で攻撃する（例えば、Ｆｕｊｉｔａｎｉら、Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ  １５５：１８９０−１８９４，１９９７；Ｋａｎｅｈｉｒｏら、Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ  １６３：１７３−１８４，２００１；Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎら、Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ  １６５：１０８−１１６，２００２；Ｏｈら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６８：１９９２−２０００，２００２）。
【０１７２】
化合物１５のインビボ薬理活性が、マウスにおいて測定されている。
【０１７３】
材料および方法
動物
ＢＫＳ．Ｃｇ−ｍ＋／＋Ｌｅｐｒｄｂ／Ｊ（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）雄マウス（一般にｄｂ／ｄｂマウスと称される）は、偶発点突然変異によりアジポキンレプチン（ａｄｉｐｏｋｉｎｅ  Ｌｅｐｔｉｎ）が欠損している。それらを、Ｃ５７ＢＬ６／Ｊ株（ｓｔｒａｉｎ）に維持する。マウスを、２２〜２４℃の温度、およびｄｇ７０１４／１０時間（０５：００〜１９：００〜０５：００）の昼／夜サイクルにおいて、１ケージに４匹入れ、標準固形試料および水道水を自由に与える。物質投与に先立って、マウスをハウジングおよび環境に１４日間適合させる。
【０１７４】
物質投与
食塩水中０．３％のメチルセルロースにおける化合物懸濁液を、投与の直前に、新しく調製する。摂取（ｆｅｄ）血糖値および体重を測定する１時間前、午前０７：００に、物質を経口胃管栄養によって投与する。夕方１７：００〜１８：００に物質を投与する。投与後１時間にわたって、動物を目視監視する。
【０１７５】
投与量（ｄｏｓｉｎｇ）
投与は、薬物動態（ＰＫ）および用量耐容性試験の結果に基づいて選択される。
【０１７６】
対照物質
ロシグリタゾン（Ａｖａｎｄｉａ（登録商標））は、ＰＰＡＲγ作用薬のチアゾリジンジオン種に属し、該作用薬は、ブドウ糖恒常性およびブドウ糖耐性における顕著な作用によって２型糖尿病におけるインスリン感受性を向上させることによって、それらの主要治療効果を発揮する。
【０１７７】
試験計画
動物を、１週間前もって準備して、収容室および環境に適応させる。その間、体重および摂食血糖を毎日測定する。予備監視段階（体重、血糖、飼料、水、ＩＴＴ、ｏＧＴＴ）を−１２日目に開始する。試験および対照物質の投与を０日目に開始する。試験の間に、午前中の化合物投与後１時間における、体重および摂食血糖の記録を継続する。経口ブドウ糖耐性ならびにインスリン耐性試験を行う。試験を１４日目に終了し、その際に、動物を犠牲にし、器官、組織および体液を、さらに分析するために採取した。
【０１７８】
読出し
体重および血糖を週に３回測定した。試験の最後に、膵臓インスリン含有量および血漿パラメータを測定した。
【０１７９】
経口ブドウ糖耐性試験
一晩絶食（１４時間絶食）した動物に、午前の適用から２時間後に、経口ブドウ糖ボーラス（２ｇブドウ糖／ｋｇ体重）を与える。直前（ｔ＝０分）および下記の時点で、血糖値をテールティップ（ｔａｉｌ  ｔｉｐ）法で測定する：１５、３０、６０、９０、１２０および１８０分。
【０１８０】
インスリン耐性試験
充分に摂食したマウスに、午前の適用から２時間後に、ヒトインスリンを腹腔注射（Ｌｉｌｌｙ；０．７５Ｕ／ｋｇ；０．９％  ＮａＣｌで希釈）によって与える。インスリン投与後、飼料を除去する。直前（ｔ＝０分）および下記の時点で、血糖値をテールティップ法で測定する：１５、３０、４５、７５および１３５分。
【０１８１】
結果
試験の間に、体重を週３回測定した。ＰＰＡＲγ作用ロシグリタゾンを対照として使用した。ロシグリタゾン処置は、ｄ１〜ｄ１４において賦形剤と比較して体重の有意な増加を生じた。これに対して、Ｍｎｋ阻害剤は、賦形剤処置動物との違いを示さず、Ｍｎｋ阻害剤は体重中立性（ｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔ  ｎｅｕｔｒａｌ）である（図１）。
【０１８２】
図２は、試験の間の、ランダム摂食（ｒａｎｄｏｍ  ｆｅｄ）血糖を示す。Ｍｎｋ阻害剤化合物１５による血糖の漸進的向上が見られる。
【０１８３】
インスリン耐性試験は、試験の最後に行った。Ｍｎｋ阻害剤での処置は、向上したインスリン耐性試験を生じ、増加したインスリン感受性を示す（図３）。
【０１８４】
試験の最後における血漿分析は、Ｍｎｋ阻害剤処置による循環トリグリセリドの明らかな減少を示す。さらに、ＮＥＦＡの有意な減少も見られた（図４）。
【０１８５】
Ｍｎｋ阻害剤での処置は、減少した血漿インスリンおよび増加した膵臓インスリン含有量も生じた（図５）。これは、観測されたインスリン感受性の向上と一致する。
【図面の簡単な説明】
【０１８６】
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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