(57)【要約】  式（Ｉ）のチエノピリミジン及びその医薬的に許容可能な塩は、Ｐ１１０サブタイプについて選択性を有するＰＩ３Ｋの阻害剤として活性を有し、異常な細胞の増殖、機能または挙動から生じる疾患または障害、特にＰＩ３キナーゼに関連する疾患または障害、例えば癌、免疫疾患、心臓血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌疾患及び神経疾患を治療するのに使用し得る。上記化合物の合成プロセスも記載される。
2009534461.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2009534461.tif 000030
のチエノピリミジンまたはその医薬的に許容可能な塩である、化合物。
【請求項２】
医薬的に許容可能な塩が、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、エタンスルホン酸、アスパラギン酸及びグルタミン酸との塩類から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
医薬的に許容可能な塩がモノ塩またはビス塩である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、塩酸、リン酸、及び硫酸とのモノ塩またはビス塩である、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
２−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）−６−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジンビスメシル酸塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
請求項１に記載の化合物の製造プロセスであって、式（ＩＩＩ）
【化２】
2009534461.tif 000031
の化合物を、適当な還元剤の存在下で、式（Ｖ）
【化３】
2009534461.tif 000032
のアミンで処理することを含む、請求項１に記載の化合物の製造プロセス。
【請求項７】
さらに、式（ＩＩ）
【化４】
2009534461.tif 000033
の化合物を、Ｐｄ触媒の存在下で、式（ＩＶ）
【化５】
2009534461.tif 000034
（式中、それぞれのＲ１５は、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであるか、あるいは２つの基ＯＲ１５は、これらを結合しているホウ素原子と一緒になってピナコラトボロン酸エステル基を形成する）
のボロン酸またはそのエステルで処理することによって式（ＩＩＩ）の化合物を製造することを含む、請求項６に記載のプロセス。
【請求項８】
式（ＶＩ）
【化６】
2009534461.tif 000035
の化合物を、Ｐｄ触媒の存在下で、式（ＩＶ）
【化７】
2009534461.tif 000036
（式中、それぞれのＲ１５は、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであるか、あるいは２つの基ＯＲ１５は、これらを結合しているホウ素原子と一緒になってピナコラトボロン酸エステル基を形成する）
のボロン酸またはそのエステルで処理する工程を含む、請求項１に記載の化合物の製造プロセス。
【請求項９】
さらに、式（ＩＩ）
【化８】
2009534461.tif 000037
の化合物を、適当な還元剤の存在下で、式（Ｖ）
【化９】
2009534461.tif 000038
のアミンで処理することによって式（ＶＩ）の化合物を製造する工程を含む、請求項８に記載のプロセス。
【請求項１０】
請求項１に記載の医薬的に許容可能な塩の製造プロセスであって、式（Ｉ）
【化１０】
2009534461.tif 000039
のチエノピリミジンを、適当な溶媒中で適当な酸で処理する工程を含む、請求項１に記載の医薬的に許容可能な塩の製造プロセス。
【請求項１１】
酸が、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、エタンスルホン酸、アスパラギン酸、及びグルタミン酸から選択される、請求項１０に記載のプロセス。
【請求項１２】
酸が、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、塩酸、リン酸、及び硫酸から選択される、請求項１０または１１に記載のプロセス。
【請求項１３】
医薬的に許容可能な担体または希釈剤と、有効成分として、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物とを含む、医薬組成物。
【請求項１４】
経口投与用に処方される、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
治療によってヒトまたは動物の体の治療方法で使用される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
異常な細胞の増殖、機能、もしくは挙動から生じる疾患または障害を治療するための薬物の製造における、請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項１７】
異常な細胞の増殖、機能、または挙動が、ＰＩ３キナーゼに関連する、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
疾患または障害が、癌、免疫疾患、心臓血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌疾患、及び神経疾患から選択される、請求項１６または１７に記載の使用。
【請求項１９】
癌が、結腸、乳房、脳、肝臓、卵巣、胃、肺、及び頭頸部の固形腫瘍から選択される、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
癌が、グリア芽細胞腫、黒色腫、前立腺癌、子宮内膜癌、卵巣癌、乳癌、肺癌、頭頸部癌、肝細胞癌、及び甲状腺癌から選択される、請求項１８に記載の使用。
【請求項２１】
癌が、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、泌尿生殖器癌、食道癌、喉頭癌、グリア芽細胞腫、神経芽細胞腫、胃癌、皮膚癌、角化棘細胞腫、肺癌、類表皮癌、大細胞癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞癌、肺腺癌、骨肉腫、結腸癌、腺腫、膵臓癌、腺癌、甲状腺癌、濾胞状癌、未分化癌、乳頭状癌、精上皮腫、黒色腫、肉腫、膀胱癌、肝臓癌及び胆道癌、腎臓癌、骨髄性疾患、リンパ系疾患、毛様細胞白血病、口腔及び咽頭癌、口唇癌、舌癌、口唇癌、咽頭癌、小腸癌、結腸直腸癌、大腸癌、直腸癌、脳腫瘍及び中枢神経系の癌、ホジキンリンパ腫並びに白血病から選択される、請求項１８に記載の使用。
【請求項２２】
異常な細胞の増殖、機能または挙動から生じる疾患または障害を治療する方法であって、それを必要とする患者に請求項１に記載の化合物を投与する工程を含む、方法。
【請求項２３】
異常な細胞の増殖、機能、または挙動が、ＰＩ３キナーゼに関連する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
疾患または障害が、癌、免疫疾患、心臓血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌疾患、及び神経疾患からなる群より選択される、請求項２２または２３に記載の方法。
【請求項２５】
疾患または障害が、癌、免疫疾患、心臓血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌疾患、及び神経疾患から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
癌が、グリア芽細胞腫、黒色腫、前立腺癌、子宮内膜癌、卵巣癌、乳癌、肺癌、頭頸部癌、肝細胞癌、及び甲状腺癌から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
癌が、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、泌尿生殖器癌、食道癌、喉頭癌、グリア芽細胞腫、神経芽細胞腫、胃癌、皮膚癌、角化棘細胞腫、肺癌、類表皮癌、大細胞癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞癌、肺腺癌、骨肉腫、結腸癌、腺腫、膵臓癌、腺癌、甲状腺癌、濾胞状癌、未分化癌、乳頭状癌、精上皮腫、黒色腫、肉腫、膀胱癌、肝臓癌及び胆道癌、腎臓癌、骨髄性疾患、リンパ系疾患、毛様細胞白血病、口腔及び咽頭癌、口唇癌、舌癌、口唇癌、咽頭癌、小腸癌、結腸直腸癌、大腸癌、直腸癌、脳腫瘍及び中枢神経系の癌、ホジキンリンパ腫並びに白血病から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
請求項１に記載の化合物と医薬的に許容可能な担体とを組み合わせる工程を含む医薬組成物の製造プロセス。
【請求項２９】
（ａ）請求項１に記載の化合物を含む第１の医薬組成物；及び
（ｂ）使用するための説明書
を含む、Ｐ１３Ｋ介在疾患を治療するためのキット。
【請求項３０】
さらに、（ｃ）抗過剰増殖活性を有する第２の化合物を含む第２の医薬組成物を含む、請求項２９に記載のキット。
【請求項３１】
さらに、前記の第１の医薬組成物と第２の医薬組成物を、投与を必要とする患者に、同時、順次、または別々に投与するための説明書を含む、請求項３０に記載のキット。
【請求項３２】
前記の第１の医薬組成物と第２の医薬組成物が別々の容器に収容される、請求項３０に記載のキット。
【請求項３３】
前記の第１の医薬組成物と第２の医薬組成物が同じ容器に収容される、請求項３０に記載のキット。
【請求項３４】
（ａ）請求項１に記載の化合物；及び
（ｂ）抗過剰増殖活性を有する第２の化合物
を含み、癌の予防または治療処置において、別々、同時、または順次投与するための製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、ピリミジン誘導体及びそのホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ１３Ｋ）の阻害剤としての使用に関する。
【０００２】
本発明の優先権
【０００３】
本出願は、２００６年４月２６日付けで出願された米国仮出願第６０／７９４，９６６号の優先権を主張する。この仮出願の全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００４】
ホスファチジルイノシトール（以下、「ＰＩ」と略記する）は、細胞膜において認められる多数のリン脂質の一つである。近年、ＰＩが細胞内シグナル伝達において重要な役割を果たすことが明らかになった。１９８０年代後半に、ＰＩ３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）が、ホスファチジルイノシトールのイノシトール環の３位をリン酸化する酵素であることが見出された（D. Whitman et al, 1988, Nature, 332, 664）。
【０００５】
ＰＩ３Ｋは、最初は単一の酵素であると考えられていたが、現在ではＰＩ３Ｋには複数のサブタイプが存在することが明らかにされている。それぞれのサブタイプは、活性を調節するそれぞれのメカニズムを有する。ＰＩ３Ｋの３つの主要なクラスが、そのｉｎ  ｖｉｔｒｏ基質特異性に基づいて確認されている（B. Vanhaesebroeck., 1997, Trend in Biol. Sci., 22, 267）。クラスＩのＰＩ３Ｋの基質は、ＰＩ、ＰＩ  ４−ホスフェート（ＰＩ４Ｐ）及びＰＩ  ４，５−ビホスフェート（ＰＩ（４，５）Ｐ２）である。クラスＩのＰＩ３Ｋは、その活性化メカニズムの点から、さらに２つの群、すなわちクラスＩａ及びクラスＩｂに分類される。クラスＩａのＰＩ３Ｋとしては、ＰＩ３Ｋ  ｐ１１０α、ｐ１１０β及びｐ１１０δサブタイプが挙げられ、これらはチロシンキナーゼ結合受容体からシグナルを伝達する。クラスＩｂのＰＩ３Ｋとしては、Ｇタンパク質結合受容体によって活性化されるｐ１１０γサブタイプが挙げられる。ＰＩ及びＰＩ（４）Ｐは、クラスＩＩのＰＩ３Ｋの基質として公知である。クラスＩＩのＰＩ３Ｋとしては、ＰＩ３Ｋ  Ｃ２α、Ｃ２β及びＣ２γサブタイプが挙げられ、これらはＣ末端にＣ２ドメインを含有することを特徴とする。クラスＩＩＩのＰＩ３Ｋの基質は、ＰＩだけである。
【０００６】
ＰＩ３Ｋサブタイプにおいて、クラスＩａサブタイプは、今日まで最も広く研究されている。クラスＩａの３つのサブタイプは、触媒１１０ｋＤａサブユニットと８５ｋＤａまたは５５ｋＤａの調節サブユニットとのヘテロ二量体である。調節サブユニットは、ＳＨ２ドメインを含有し、チロシンキナーゼ活性を有する成長因子受容体によってリン酸化されたチロシン残基または癌遺伝子産物に結合し、それによってその脂質基質をリン酸化するｐ１１０触媒サブユニットのＰＩ３Ｋ活性を誘発する。従って、クラスＩａサブタイプは、細胞の増殖及び発癌に関連すると考えられる。
【０００７】
国際公開ＷＯ０１／０８３４５６号明細書には、ＰＩ３Ｋの阻害剤として活性を有し且つ癌細胞の増殖を抑制する一連の縮合ヘテロアリール誘導体が記載されている。
【発明の開示】
【０００８】
今般、特定のチエノピリミジンが薬物様の物理化学的特性及び薬物動態特性を有するＰＩ３Ｋの強力な阻害剤であることが見出された。この化合物は、クラスＩｂよりもクラスＩａのＰＩ３Ｋに対して選択性を示し、特にＰ１１０ａサブタイプに対して選択性を示す。
【０００９】
従って、本発明は、式（Ｉ）
【化１１】
2009534461.tif 000003
のチエノピリミジンまたはその医薬的に許容可能な塩である化合物を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
式（Ｉ）のチエノピリミジンは、２−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）−６−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジンである。
【００１１】
本発明の化合物を製造するのに適した合成戦略は、式（ＩＩ）
【化１２】
2009534461.tif 000004
の前駆物質カルボキサルデヒドを用いる。
【００１２】
この前駆物質から出発して、合成は、パラジウム介在（スズキタイプ）クロスカップリング反応と還元アミノ化を、いずれかの順序で行うことを含む。従って、本発明の化合物は、
（ａ）式（ＩＩ）
【化１３】
2009534461.tif 000005
の化合物を、Ｐｄ触媒の存在下で、式（ＩＶ）
【化１４】
2009534461.tif 000006
（式中、それぞれのＲ１５は、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであるか、あるいは２つの基ＯＲ１５は、これらを結合しているホウ素原子と一緒になってピナコラトボロン酸エステル基を形成する）
のボロン酸またはそのエステルで処理し；得られる式（ＩＩＩ）
【化１５】
2009534461.tif 000007
の化合物を、適当な還元剤の存在下で、式（Ｖ）
【化１６】
2009534461.tif 000008
のアミンで処理するか；または
（ｂ）式（ＩＩ）
【化１７】
2009534461.tif 000009
の化合物を、適当な還元剤の存在下で、式（Ｖ）
【化１８】
2009534461.tif 000010
のアミンで処理し；得られる式（ＶＩ）
【化１９】
2009534461.tif 000011
の化合物を、Ｐｄ触媒の存在下で、式（ＩＶ）
【化２０】
2009534461.tif 000012
（式中、それぞれのＲ１５は、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであるか、あるいは２つの基Ｒ１５は、これらを結合しているホウ素原子と一緒になってピナコラトボロン酸エステル基を形成する）
のボロン酸またはそのエステルで処理する工程を含むプロセスで調製してもよい。
【００１３】
従って、本発明はまた、式（ＩＩＩ）
【化２１】
2009534461.tif 000013
の化合物を、適当な還元剤の存在下で、式（Ｖ）
【化２２】
2009534461.tif 000014
のアミンで処理する工程を含む、前記の本発明の化合物の製造プロセスを提供する。
【００１４】
このように定義されたプロセスは、さらに、式（ＩＩ）
【化２３】
2009534461.tif 000015
の化合物を、Ｐｄ触媒の存在下で、式（ＩＶ）
【化２４】
2009534461.tif 000016
（式中、それぞれのＲ１５は、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであるか、あるいは２つの基ＯＲ１５は、これらを結合しているホウ素原子と一緒になってピナコラトボロン酸エステル基を形成する）
のボロン酸またはそのエステルで処理することによって式（ＩＩＩ）の化合物を製造する工程を含んでもよい。
【００１５】
さらにまた、本発明は、式（ＶＩ）
【化２５】
2009534461.tif 000017
の化合物を、Ｐｄ触媒の存在下で、式（ＩＶ）
【化２６】
2009534461.tif 000018
（式中、それぞれのＲ１５は、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであるか、あるいは２つの基ＯＲ１５は、これらを結合しているホウ素原子と一緒になってピナコラトボロン酸エステル基を形成する）
のボロン酸またはそのエステルで処理する工程を含む、前記の本発明の化合物の製造プロセスを提供する。
【００１６】
このように定義した方法は、さらに、式（ＩＩ）
【化２７】
2009534461.tif 000019
の化合物を、適当な還元剤の存在下で、式（Ｖ）
【化２８】
2009534461.tif 000020
のアミンで処理することによって式（ＶＩ）の化合物を製造する工程を含んでもよい。
【００１７】
式（Ｉ）のチエノピリミジンの医薬的に許容可能な塩は、従来技術を使用して調製してもよい。典型的には、前記プロセスは、上記の式（Ｉ）のチエノピリミジンを、適当な溶媒中で適当な酸で処理することを含む。
【００１８】
上記の本発明のプロセスにおいて、アミノ化工程及びＰｄ−介在クロスカップリング工程の両方は、従来の条件下で行う。パラジウム触媒は、スズキタイプクロスカップリング反応に典型的に使用される触媒、例えばＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２であってもよい。還元剤は、典型的には、水素化ホウ素、例えばＮａＢＨ（ＯＡｃ）３、ＮａＢＨ４、またはＮａＣＮＢＨ４、特にＮａＢＨ（ＯＡｃ）３である。
【００１９】
ピナコラトボロン酸エステルは、例えば、以下の参考例５及び６のいずれかに記載のプロセスで調製してもよい。
【００２０】
上記の式（ＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩ）
【化２９】
2009534461.tif 000021
の化合物を、リチウム化剤で処理し、次いでＮ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）で処理する工程を含むプロセスによって調製してもよい。反応は、典型的には、リチウム化剤を、非極性有機溶媒、例えば炭化水素溶媒、例えばヘキサンに溶解した溶液を、式（ＩＸ）の化合物を有機溶媒、例えばテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）の懸濁した懸濁物に加えることによって実施される。ＴＨＦを使用する場合には、 前記添加は、約−７８℃の低い温度で行う。リチウム化剤は、典型的には、アルキルリチウム、例えばｎ−ブチルリチウムである。
【００２１】
上記の式（ＶＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩＩ）
【化３０】
2009534461.tif 000022
の化合物を、有機溶媒中で、モルホリンで処理する工程を含むプロセスで製造してもよい。溶媒は、典型的にはアルコール、例えばメタノールである。反応は、一般に室温で行う。
【００２２】
式（ＶＩＩＩ）の化合物は、参考例１に記載のプロセス、またはこのようなプロセスと類似のプロセスで調製してもよい。
【００２３】
式（Ｉ）のチエノピリミジンは、従来の方法で、医薬的に許容可能な塩に変換してもよく、塩は遊離の化合物に変換してもよい。医薬的に許容可能な塩の例としては、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、及びリン酸；並びに有機酸、例えばメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、エタンスルホン酸、アスパラギン酸、及びグルタミン酸との塩が挙げられる。典型的には、塩は、メシル酸塩、塩酸塩、リン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩または硫酸塩である。最も典型的には、塩はメシル酸塩または塩酸塩である。
【００２４】
塩、例えば上記の無機酸または有機酸のいずれかとの塩は、モノ塩またはビス塩であってもよい。従って、例えば、メシル酸塩は、モノメシル酸塩またはビスメシル酸塩であってもよい。
【００２５】
式（Ｉ）の化合物及びその塩は、水和物または溶媒和物として存在していてもよい。
【００２６】
本発明の化合物は、生物試験においてＰＩ３キナーゼの阻害剤であることが見出された。本発明の化合物は、クラスＩｂよりもクラスＩａのＰＩ３キナーゼに対して選択性であり、典型的にはクラスＩｂのＰＩ３キナーゼよりもクラスＩａのＰＩ３キナーゼに対して少なくとも２０倍の選択性を示す。特に、本発明の化合物は、ｐ１１０αイソ型に対して選択性である。
【００２７】
従って、本発明の化合物は、ＰＩ３キナーゼ、特にクラスＩａのＰＩ３キナーゼの阻害剤として使用してもよい。従って、本発明の化合物は、異常な細胞の増殖、機能または挙動から生じる疾患または障害を治療するのに使用できる。このような異常な細胞の増殖、機能または挙動は、典型的には、ＰＩ３キナーゼに関連する。このような疾患及び障害の例は、Ｄｒｅｅｓらによって、Expert Opin. Ther. Patents (2004) 14(5)：703-732で論じられている。これらの疾患及び障害としては、癌、免疫疾患、心臓血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌疾患、及び神経疾患が挙げられる。代謝／内分泌疾患の例としては、糖尿病及び肥満症が挙げられる。
【００２８】
本発明の化合物を使用して治療することができる癌の例としては、白血病、脳腫瘍、腎臓癌、胃癌並びに皮膚、膀胱、乳房、子宮、肺、結腸、前立腺、卵巣及び膵臓の癌が挙げられる。従って、免疫疾患、癌、心臓血管疾患、ウイルス感染症、炎症、代謝／内分泌疾患または神経疾患に罹患しているヒトまたは動物患者は、該患者に上記の本発明の化合物を投与することを含む方法で治療してもよい。患者の状態は、それによって好転または改善するかもしれない。
【００２９】
本発明の方法に従って治療できる疾患及び状態としては、以下に限定されないが、患者の癌、脳卒中、糖尿病、肝腫大、心臓血管疾患、アルツハイマー病、嚢胞性線維症、ウイルス性疾患、自己免疫疾患、アテローム性動脈硬化症、再狭窄、乾癬、アレルギー性疾患、炎症、神経疾患、ホルモン関連疾患、臓器移植に付随する病気、免疫不全症、破壊性骨疾患、増殖性疾患、感染性疾患、細胞死に関連する病気、トロンビン誘発血小板凝集、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、肝疾患、Ｔ細胞活性化を伴う病的免疫状態、及びＣＮＳ疾患が挙げられる。一つの実施形態において、ヒト患者は、式Ｉの化合物と、医薬的に許容可能な担体、補助剤、またはビヒクルとを用いて治療され、この場合に前記の式Ｉの化合物は、ＰＩ３キナーゼ活性を検出可能に阻害する量で存在する。
【００３０】
本発明の方法に従って治療できる癌としては、以下に限定されないが、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、泌尿生殖器癌、食道癌、喉頭癌、グリア芽細胞腫、神経芽細胞腫、胃癌、皮膚癌、角化棘細胞腫、肺癌、類表皮癌、大細胞癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞癌、肺腺癌、骨肉腫、結腸癌、腺腫、膵臓癌、腺癌、甲状腺癌、濾胞状癌、未分化癌、乳頭状癌、精上皮腫、黒色腫、肉腫、膀胱癌、肝臓癌及び胆道癌、腎臓癌、骨髄性疾患、リンパ系疾患、毛様細胞白血病、口腔及び咽頭癌(口腔癌)、口唇癌（lip）、舌癌、口唇癌（mouth）、咽頭癌、小腸癌、結腸直腸癌、大腸癌、直腸癌、脳及び中枢神経系の癌、ホジキンリンパ腫並びに白血病が挙げられる。
【００３１】
本発明の方法に従って治療できる心臓血管疾患としては、以下に限定されないが、再狭窄、心肥大、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、及び鬱血性心不全が挙げられる。
【００３２】
本発明の方法に従って治療できる神経変性疾患としては、以下に限定されないが、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、及び脳虚血症、並びに外傷によって引き起こされる神経変性疾患、グルタミン酸神経毒性及び低酸素症が挙げられる。
【００３３】
本発明の方法に従って治療できる炎症性疾患としては、以下に限定されないが、関節リウマチ、乾癬、接触性皮膚炎、及び遅延型過敏反応が挙げられる。
【００３４】
生化学的効果を有する他に、本発明の化合物は、薬物使用に特によく適応させる物理化学的及び薬物動態的特性を示す。これは、例えば以下の実施例３に記載の生物アッセイの結果に示される。特に、本発明の化合物は、生理学的ｐＨにおいて高い水溶性を有する；この溶解性は、１００μＭよりも大きい。生理学的ｐＨでの高い溶解性は、生体利用性を促進することから望ましい。
【００３５】
化合物はまた、特に化合物が低い肝細胞クリアランスを有することが明らかにされた実施例３に記載の肝細胞クリアランスアッセイによって示されるような、高い代謝安定性を有する。低い肝細胞クリアランスは、低い割合の肝臓代謝と相関する。従って、本発明の化合物が、ＰＩ３キナーゼの阻害剤として生化学的効果を保持しながら、改良された物理化学的及び薬物動態的特性を有することを認めることができる。
【００３６】
本発明の化合物は、種々の剤形で投与でき、例えば、経口的に、例えば錠剤、カプセル剤、糖衣錠またはフィルムコート錠、溶液または懸濁液の形態で投与できるし、あるいは非経口的に、例えば、筋肉内に、静脈内にまたは皮下に投与できる。従って、化合物は、注射または輸液で提供し得る。
【００３７】
投薬量は、種々の因子、例えば患者の年齢、体重及び状態並びに投与の経路に依存する。１日投薬量は、幅広い制限内で変化させることができ、それぞれ具体的な事例における個々の要件に応じて調節される。しかし、典型的には、化合物が単独で成人に投与される場合にはそれぞれの投与の経路に適合した投薬量は、０．０００１〜５０ｍｇ／ｋｇであり、最も一般的には０．００１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば０．０１〜１ｍｇ／ｋｇの範囲内にある。このような投薬量は、例えば１日に１〜５回投与し得る。静脈内注射については、適当な１日投薬量は、０．０００１〜１ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは０．０００１〜０．１ｍｇ／ｋｇ体重である。１日投薬量は、１回投与として投与でき、または分割投与計画に従って投与できる。
【００３８】
典型的には、ヒト患者を治療するための用量は、本発明の化合物が約１０ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲内にしてもよい。典型的な用量は、化合物が約１００ｍｇ〜約３０００ｍｇの範囲内にしてもよい。用量は、薬物動態的及び薬力学的特性、例えば具体的な化合物の吸収、分布、代謝、及び排出に応じて、１日に１回（ＱＩＤ）、１日に２回（ＢＩＤ）、またはそれ以上頻繁に投与してもよい。また、毒性因子は、投薬量及び投与計画に影響を及ぼしてもよい。経口投与する場合には、丸剤、カプセル剤、または錠剤は、１日に１回または特定の期間より少ない頻度で摂取され得る。投与計画は、多数の治療サイクルの間、反復してもよい。
【００３９】
化合物は、医薬的にまたは獣医学的に許容可能な担体または希釈剤も含有する医薬または動物薬組成物として使用するために処方される。組成物は、典型的には従来の方法に従って調製され、医薬的にまたは獣医学的に適当な形態で投与される。化合物は、例えば、次の通り慣用の形態で投与してもよい。すなわち、
Ａ）経口的に、例えば、錠剤、被覆錠剤、糖衣錠、トローチ、ロゼンジ、水性または油性懸濁物、溶液、分散性粉末または顆粒、エマルジョン、硬または軟カプセル、あるいはシロップまたはエリキシルとして投与してもよい。経口用途を目的とした組成物は、医薬組成物を製造するために当分野において公知の方法に従って調製してもよく、このような組成物は、医薬として上品で口当たりのよい製剤を提供するために、甘味剤、風味剤、着色剤及び防腐剤からなる群より選択される１種またはそれ以上の薬剤を含有してもよい。
【００４０】
錠剤は、有効成分を、錠剤の製造に適した毒性のない医薬的に許容可能な賦形剤との混合物で含有する。これらの賦形剤は、例えば、不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、デキストロース、ショ糖、セルロース、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウム； 造粒剤及び崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン、アルギン酸、アルギン酸塩またはデンプングリコール酸ナトリウム；結合剤、例えば、デンプン、ゼラチンまたはアラビアゴム；潤滑剤、例えば、シリカ、ステアリン酸マグネシウムまたはカルシウム、ステアリン酸あるいはタルク；起泡性混合物；色素、甘味剤、湿潤剤、例えばレシチン、ポリソルベートまたはラウリル硫酸であり得る。錠剤は、被覆されていなくてもよいし、または胃腸での崩壊及び吸着を遅らせ、それによってより長い期間にわたって持続作用を提供するために公知の方法で被覆されていてもよい。例えば、時間遅延物質、例えばグリセリルモノステアレートまたはグリセリルジステアレートを使用してもよい。このような製剤は、公知の方法で、例えば、混合法、造粒法、錠剤化法、糖衣またはフィルムコーティング法で製造してもよい。
【００４１】
経口用途の製剤は、有効成分が不活性固形希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合される硬ゼラチンカプセルとして提供してもよいし、あるいは有効成分がそのままで存在するか、あるいは水または油性媒体、例えば、ピーナツ油、流動パラフィン、またはオリーブ油と混合される軟ゼラチンカプセルとして提供してもよい。
【００４２】
水性懸濁物は、活性物質を、水性懸濁物の製造に適した賦形剤との混合物で含有する。このような賦形剤は、懸濁剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン・ガム・トラガカント及びガム・アカシアであり；分散剤または湿潤剤は、天然リン脂質、例えば、レシチン、あるいはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンステアレート、またはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール、またはエチレンオキシドと、脂肪酸及びヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート、またはエチレンオキシドと、脂肪酸及び無水ヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートであってもよい。
【００４３】
前記の水性懸濁物はまた、１種以上の防腐剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはｎ−プロピル、１種以上の着色剤、例えばスクロースまたはサッカリンを含有し得る。
【００４４】
油性懸濁物は、有効成分を、植物油、例えば、落花生油、オリーブ油、ゴマ油またはココナツ油、あるいは鉱油、例えば流動パラフィンに懸濁することによって製剤してもよい。油性懸濁物は、増粘剤、例えば、ミツロウ、固形パラフィンまたはセチルアルコールを含有してもよい。
【００４５】
甘味剤、例えば前記に挙げた甘味剤、及び風味剤は、口当たりのよい経口製剤を提供するために添加し得る。これらの組成物を、酸化防止剤、例えばアスコルビン酸の添加によって保存してもよい。水を添加することによって水性懸濁物の調製に適した分散性粉末及び顆粒は、有効成分を、分散剤または湿潤剤、懸濁剤及び１種またはそれ以上の防腐剤との混合物で提供する。適当な分散剤または湿潤剤及び懸濁剤は、上記に既に述べた分散剤または湿潤剤及び懸濁剤によって例示される。追加の賦形剤、例えば、甘味剤、風味剤及び着色剤も存在させてもよい。
【００４６】
本発明の医薬組成物はまた、水中油エマルジョンの形態であってもよい。油相は、植物油、例えば、オリーブ油または落花生油、あるいは鉱油、例えば流動パラフィンまたはこれらの混合物であり得る。適当な乳化剤は、天然のガム、例えば、ガム・アカシアまたはガム・トラガカント、天然リン脂質、例えばダイズレシチン、及び脂肪酸と無水ヘキシトールから誘導されるエステルまたは部分エステル、例えばソルビタンモノオレエート、並びに前記の部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートであり得る。エマルジョンはまた、甘味剤及び風味剤も含有し得る。シロップ及びエリキシルは、甘味剤、例えばグリセリン、ソルビトールまたはスクロースを用いて製剤してもよい。特に、糖尿病患者用のシロップは、例えばグルコースに代謝しないかまたは極めて少量がグルコースに代謝するだけである製品、例えばソルビトールのみを、担体として含有することができる。
【００４７】
このような製剤は、粘滑剤、防腐剤並びに風味剤及び着色剤も含有してもよい；
Ｂ）非経口的に、皮下に、または静脈内に、または筋肉内に、または胸骨内に、あるいは輸液法によって、滅菌注射剤水性または油性懸濁物の形態。この懸濁物は、公知の技術に従って上記に述べた適当な分散剤または湿潤剤及び懸濁剤を使用して処方し得る。この滅菌注射製剤は、毒性のない非経口的に許容可能な希釈剤または溶媒中の、例えば、１，３−ブタンジオールの溶液としての滅菌注射剤溶液または懸濁物であり得る。
【００４８】
許容可能なビヒクル及び使用されてもよい溶媒は、水、リンゲル液、及び等張性塩化ナトリウム溶液である。加えて、無菌の不揮発性油は、慣用的に、溶媒または懸濁媒体として利用される。この目的に、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含むいかなる無菌性の不揮発性油も使用してよい。加えて、脂肪酸、例えばオレイン酸は、注射剤の調製に用途が見出される；
Ｃ）ネブライザー用のエアロゾルまたは溶液の形態で吸入によって投与し得る；
Ｄ）直腸内に、前記薬剤を、常温で固体であるが直腸温度で液体であり、従って直腸で溶融して薬剤を放出する適当な無刺激賦形剤と混合することによって調製される坐薬の形態で直腸に投与し得る。このような物質は、カカオバター及びポリエチレングリコールである；
Ｅ）局所に、クリーム、軟膏、ゼリー、洗顔薬、溶液または懸濁液の形態で投与し得る。
Ｆ）膣に、有効成分の他に、当該技術において適切であることが知られているような担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレー製剤の形態で投与し得る。
【００４９】
本発明の化合物の徐放性製剤を調製してもよい。徐放性製剤の適当な例としては、式Ｉの化合物を含有する固形疎水性重合体の半透性マトリックスを含み、該マトリックスは造形品、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリックスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号明細書）、Ｌ−グルタミン酸とγ−エチル−Ｌ−グルタメートの共重合体、非分解性のエチレン−酢酸ビニル、分解性の乳酸−グリコール酸共重合体、例えばＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸−グリコール酸共重合体と酢酸ロイプロリドとから構成される注射用微小球）及びポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。
【００５０】
本発明の化合物は、本明細書に記載の疾患または障害、例えば過剰増殖性疾患（例えば、癌）を治療するために、単独で、もしくは他の治療剤と組み合わせて使用してもよい。ある実施形態において、本発明の化合物は、医薬併用製剤、または併用療法としての投与計画において、抗過剰増殖特性を有するかまたは過剰増殖性疾患（例えば、癌）を治療するのに有用である第２の化合物と組み合わせられる。医薬併用製剤または投与計画の第２の化合物は、好ましくは、これらの化合物が相互に悪影響を及ぼさないような本発明の化合物に対する補完活性を有する。このような化合物は、意図する目的に有効な量で組み合わせて存在させることが適当である。一つの実施形態において、本発明の組成物は、本発明の化合物を、本明細書に記載のような化学療法剤との組み合わせで含む。
【００５１】
併用療法は、同時または連続投与計画として投与してもよい。連続的に投与される場合には、前記組み合わせは、２回またはそれ以上の投与で投与してもよい。併用投与は、別々の製剤を使用するかあるいは単一の医薬製剤を使用する同時投与と、いずれの順序であれ連続的な投与とを含み、この場合、好ましくは、両方（または全部）の活性剤がこれらの生物活性に同時に影響を与える期間が存在する。
【００５２】
上記の同時投与剤のいずれかについて適当な投薬量は、現在使用されている投薬量であり、新たに同定された薬剤及びその他の化学療法剤または治療剤の併用作用（相乗作用）により減らし得る。
【００５３】
本発明を、以下の実施例でさらに説明する。
【００５４】
参考例１：２，４−ジクロロ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン（ＶＩＩＩ）
【化３１】
2009534461.tif 000023
３−アミノ−２−チオフェンカルボン酸メチル（１３．４８ｇ、８５．８５ミリモル）及び尿素（２９．７５ｇ、５当量）の混合物を、１９０℃で２時間加熱した。次いで、熱反応混合物を水酸化ナトリウム溶液に注ぎ、濾過することによって不溶性物質を除去した。次いで、得られた混合物を酸性にして（ＨＣｌ、２Ｎ）、１Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジオン（ＩＸ）を白色沈殿物として取得し、これを濾過することにより採取し、風乾した（９．４９ｇ、６６％）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），８．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），１１．６０−１１．１０（２Ｈ，ｂｒ ｓ）。
【００５５】
１Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−２，４−ジオン（９．４９ｇ、５６．４９ミリモル）とオキシ塩化リン酸（１５０ｍＬ）との混合物を、還流下で６時間加熱した。次いで、反応混合物を、冷却し、激しく攪拌しながら氷／水の上に注いで沈殿物を得た。次いで、混合物を濾過して、２，４−ジクロロ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン（ＶＩＩＩ）を白色固体として得た（８．６８ｇ、７５％）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）７．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），８．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ）。
【００５６】
参考例２：２−クロロ−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン（ＶＩＩ）
【化３２】
2009534461.tif 000024
２，４−ジクロロ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン（ＶＩＩＩ）（８．６８ｇ、４２．３４ミリモル）、モルホリン（８．１１ｍＬ、２．２当量）及びＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）の混合物を、室温で１時間攪拌した。次いで、反応混合物を、濾過し、水及びＭｅＯＨで洗浄して、表題化合物を白色固体として得た（１１．０４ｇ、１００％）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）３．７４（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），３．９０（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），７．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），８．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）。
【００５７】
参考例３：２−クロロ−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−カルバルデヒド（ＩＩ）
【化３３】
2009534461.tif 000025
乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）中の２−クロロ−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン（ＶＩＩ）（１．７５ｇ、６．８５ミリモル）の−７８℃での懸濁液を、２．５ＭのｎＢｕＬｉのヘキサン溶液（３．３ｍＬ、１．２当量）に加えた。１時間攪拌した後に、乾燥ＤＭＦ（７９６μＬ、１．５当量）を加えた。反応混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次いで徐々に室温まで温めた。さらに室温で２時間後に、反応混合物を氷／水の上に注ぎ、黄色沈殿物を得た。これを濾過することにより採取し、風乾して表題化合物を得た（１．５０ｇ、７７％）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）３．７６（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９），３．９５（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９），８．２８（１Ｈ，ｓ），１０．２０（１Ｈ，ｓ）。
【００５８】
参考例４  ２−クロロ−６−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン（ＶＩ）
【化３４】
2009534461.tif 000026
Ｎ−ＢＯＣ−ピペラジンとメタンスルホニルクロリドとを一緒に、ジクロロメタン及びトリエチルアミン中で反応させて、４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。ジクロロメタン中のＨＣｌ（２Ｍ）を使用して、ＢＯＣ保護基を切断して、１−メタンスルホニル−ピペラジン．ＨＣｌ塩を得た。
【００５９】
２−クロロ−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−カルバルデヒド（ＩＩ）（１．００ｇ）、１−メタンスルホニル−ピペラジン（７５０ｍｇ）及びオルトギ酸トリメチル（３．８０ｍＬ）の混合物を、１，２−ジクロロエタン（３０ｍＬ）中で室温で６時間攪拌した。これに、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（９００ｍｇ）を加え、反応混合物を室温で２４時間攪拌した。次いで、混合物を食塩水を用いて反応を停止させ、ジクロロメタンで抽出し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物を熱酢酸エチルと共に磨砕して、表題化合物（ＶＩ）を白色固体として得た（１．０１ｇ）。
【００６０】
参考例５  ４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（ＩＶａ）−経路１
【化３５】
2009534461.tif 000027
クロロホルム（５０ｍＬ）中の３−ブロモ−２−メチルアニリン（５．０ｇ、２６．９ミリモル）溶液に、酢酸カリウム（１．０５当量、２８．２ミリモル、２．７７ｇ）を加えた。無水酢酸（２．０当量、５３．７ミリモル、５．０７ｍＬ）を、氷水中で同時に冷却しながら加えた。次いで、得られた混合物を室温で１０分攪拌し、その時間後に白色ゲル状固体が生成した。次いで、１８−クラウン−６（０．２当量、５．３７ミリモル、１．４２ｇ）を加え、次いで亜硝酸イソアミル（２．２当量、５９．１ミリモル、７．９４ｍＬ）を加え、混合物を還流下で１８時間加熱した。反応混合物を冷却し、クロロホルム（３×１００ｍＬ）と飽和水性炭酸水素ナトリウム（１００ｍＬ）の間で分配した。この組み合わされた有機抽出液を食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、分離し、乾燥した（ＭｇＳＯ４）。
【００６１】
粗生成物をシリカ上で蒸発させ、クロマトグラフィーで２０％→４０％ＥｔＯＡｃ−ペトロールを用いて溶出することにより精製して、１−（４−ブロモ−インダゾール−１−イル）−エタノン（Ａ）（３．１４ｇ、４９％）を橙色固体として取得し、４−ブロモ−１Ｈ−インダゾール（Ｂ）（２．１３ｇ、４０％）を淡橙色固体として取得した。
Ａ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）２．８０（３Ｈ，ｓ），７．４１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．１５（１Ｈ，ｓ），８．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）
Ｂ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）７．２５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），８．１１（１Ｈ，ｓ），１０．２０（１Ｈ，ｂｒ ｓ）、
【００６２】
ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中の１−（４−ブロモ−インドール−１−イル）−エタノン（３．０９ｇ、１２．９ミリモル）溶液に、６Ｎ水性ＨＣｌ（３０ｍＬ）を加え、混合物を室温で７時間攪拌した。ＭｅＯＨを蒸発させ、混合物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の間で分配した。組み合わされた有機層を食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、分離し、乾燥した（ＭｇＳＯ４）。溶媒を減圧下で蒸発させることにより除去して、４−ブロモ−１Ｈ−インダゾール（２．３６ｇ、９３％）を得た。
【００６３】
ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中の４−ブロモ−１Ｈ−インダゾール（５００ｍｇ、２．５４ミリモル）及びビス（ピナコラト）ジボロン（１．５当量、３．８１ミリモル）溶液に、酢酸カリウム（３．０当量、７．６１ミリモル、７４７ｍｇ；乾燥ピストル中で乾燥した）及びＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）２（３モル％、０．０７６ミリモル、６２ｍｇ）を加えた。混合物をアルゴンで脱気し、８０℃で４０時間加熱した。反応混合物を冷却し、水（５０ｍＬ）とエーテル（３×５０ｍＬ）の間で分配した。合わせた有機層を食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、分離し、乾燥した（ＭｇＳＯ４）。粗製物質を、クロマトグラフィーで３０％→４０％ＥｔＯＡｃ−ペトロールを用いて溶出することにより精製して、４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（３６９ｍｇ、６０％）とインダゾール（６０ｍｇ、２０％）の分離不可能な３：１混合物を得た；表題化合物（ＩＶａ）を黄色ガム状物として単離し、これを放置して固化させて、灰白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）１．４１（１２Ｈ，ｓ），７．４０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，６．９Ｈｚ），７．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１０．００（１Ｈ，ｂｒｓ），８．４５（１Ｈ，ｓ），及び
インダゾール：７．４０（１Ｈ，ｔ），７．１８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），７．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），８．０９（１Ｈ，ｓ）。１．２５に不純物。
【００６４】
参考例６：４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（ＩＶａ）−経路２
【化３６】
2009534461.tif 000028
酢酸（６０ｍＬ）中の２−メチル−３−ニトロアニリン（２．２７ｇ、１４．９１ミリモル）溶液に、水（５ｍＬ）中の亜硝酸ナトリウム（１．１３ｇ、１．１当量）溶液を加えた。２時間後に、深紅色溶液を氷／水に注ぎ、生じた沈殿物を濾過することにより採取して、４−ニトロ−１Ｈ−インダゾール（６７）（１．９８ｇ、８１％）を得た。
【００６５】
４−ニトロ−１Ｈ−インダゾール（７６０ｍｇ、４．６８ミリモル）、パラジウム担持チャコール（１０％、触媒量）及びエタノール（３０ｍＬ）の混合物を、水素のバルーンの下で４時間攪拌した。次いで、反応混合物をセライトに通して濾過し、溶媒を真空中で除去して１Ｈ−インダゾール−４−イルアミン（６８）（６３１ｍｇ、１００％）を得た。
【００６６】
亜硝酸ナトリウム（３３７ｍｇ、４．８９ミリモル）を水（２ｍＬ）に溶解した水溶液を、１Ｈ−インダゾール−４−イルアミン（６３ｌｍｇ、４．７４ミリモル）を６Ｍ塩酸（７．２ｍＬ）に懸濁した懸濁液に０℃以下で滴加した。３０分間攪拌した後に、反応混合物にテトラフルオロホウ酸ナトリウム（７２４ｍｇ）を加えた。粘稠溶液が生じ、これを濾過し、手短に水洗して１Ｈ−インダゾール−４−ジアゾニウムテトラフルオロホウ酸塩（６９）（２１８ｍｇ、２０％）を深紅色固体として得た。
【００６７】
乾燥ＭｅＯＨ（４ｍＬ）にアルゴンを５分間パージした。これに、１Ｈ−インダゾール−４−ジアゾニウムテトラフルオロホウ酸塩（２１８ｍｇ、０．９４ミリモル）、ビス−ピナコラトジボロン（２３９ｍｇ、１．０当量）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）クロリド（２０ｍｇ）を加えた。反応混合物を５時間攪拌し、次いでセライトに通して濾過した。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーを使用して精製して、所望の表題化合物（ＩＶａ）、（１１７ｍｇ）を得た。
【００６８】
参考例７：２−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−カルバルデヒド（ＩＩＩ）
【化３７】
2009534461.tif 000029
２−クロロ−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−６−カルバルデヒド（ＩＩ）（１００ｍｇ、０．３５ミリモル）、４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（７０）（９５ｍｇ、０．３９ミリモル）及び炭酸ナトリウム（１１２ｍｇ）の混合物を、トルエン（２．５ｍＬ）、エタノール（１．５ｍＬ）及び水（０．７ｍＬ）に懸濁した。これに、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（１３．５ｍｇ）を加え、反応容器にアルゴンを勢いよく流した。反応混合物を１２０℃で１時間マイクロ波処理し、次いでＤＣＭと水の間で分配し、有機層を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空中で蒸発させた。得られた残留物を、フラッシュクロマトグラフィーを使用して精製して、表題化合物（ＩＩＩ）（９７ｍｇ）を得た。
【００６９】
実施例１：２−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）−６−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン（Ｉ）
２−クロロ−６−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン（２．００ｇ）、４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキソボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（２．２６ｇ）、トルエン（２４ｍＬ）、エタノール（１２ｍＬ）、水（６ｍＬ）、炭酸ナトリウム（１．７２ｇ）及びＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（３２５ｍｇ）の混合物を、マイクロ波中で、１３０℃で９０分間加熱した。
【００７０】
反応混合物を冷却し、クロロホルムで希釈し、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空中で除去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル、次いで５％酢酸エチル／メタノール）を使用して精製し、次いでエーテルと共に磨砕して、所望の表題化合物（１．４ｇ）を得た。
ＭＳデータ：（ＥＳＩ＋）：ＭＨ＋５１４
ＮＭＲデータ：（ＣＤＣ１３）：２．６７−２．７１（４Ｈ，ｍ），２．８１（３Ｈ，ｓ），３．２９−３．３３（４Ｈ，ｍ），３．８９（２Ｈ，ｓ），３．８９−３．９３（４Ｈ，ｍ），４．０８−４．１２（４Ｈ，ｍ），７．４１（１Ｈ，ｓ），７．５１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２），７．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３），８．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５），９．０２（１Ｈ，ｓ），１０．１０（１Ｈ，ｂｒ） 
【００７１】
実施例２：２−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）−６−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジンビスメシル酸塩
ジクロロメタン（５０ｍｌ）及びメタノール（２０ｍｌ）中の２−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）−６−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イルメチル）−４−モルホリン−４−イル−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン（２．００ｇ、３．８９ミリモル）に、メタンスルホン酸（２当量、５０５ｕｌ）を加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌した。その間に、白色沈殿物が徐々に砕けた。揮発性物質を真空中で除去し、残留物をジエチルエーテルと共に磨砕し、溶媒をデカントし、固形物を真空乾燥して表題化合物（２．７０ｇ）を得た。
ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）。以下のシグナルを含む。
２．３２（ｓ，６Ｈ），３．００（ｓ，３Ｈ），３．８４−３．８６（４Ｈ，ｍ）．４．０９−４．１ｌ（４Ｈ，ｍ），８．８）（１Ｈ，ｓ）。
【００７２】
実施例３  生物試験
上記のようにして調製した本発明の化合物を、以下の一連の生物アッセイに供した。
（ｉ）ＰＩ３Ｋ生化学的スクリーニング
ＰＩ３Ｋの化合物阻害を、精製した組換え酵素及びＡＴＰを１ｕＭの濃度で使用して放射分析アッセイで調べた。化合物を１００％ＤＭＳＯに連続的に希釈した。キナーゼ反応を室温で１時間インキュベートし、反応を、ＰＢＳを加えることにより停止させた。ＩＣ５０値を、用量応答シグモイド曲線フィット（可変勾配）を使用して順次測定した。本化合物は、ＰＩ３Ｋに対して０．１μＭよりも小さいＩＣ５０を有した。
【００７３】
（ｉｉ）細胞増殖阻止
細胞を、最適密度で９６ウエルプレートに接種し、試験化合物の存在下で４日間インキュベートした。Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ（商標）をアッセイ培地に順次加え、細胞を６時間インキュベートし、その後に励起５４４ｎｍ、発光５９０ｎｍで読み取った。ＥＣ５０値は、用量応答シグモイド曲線フィットを使用して算出した。試験化合物は、一連の利用した細胞株において５０ｕＭのＥＣ５０を有した。
【００７４】
（ｉｉｉ）Ｃａｃｏ−２透過性
Ｃａｃｏ−２細胞を、Ｍｉｌｌｐｏｒｅ  Ｍｕｌｔｉｓｃｒｅｅｎプレートに細胞１×１０５個／ｃｍ２で接種し、２０日間培養した。その後に、化合物透過性の評価を行った。化合物を細胞単層の先端面（Ａ）に塗布し、基底（Ｂ）区画への化合物の透過を測定した。これは、逆方向（Ｂ−Ａ）で行い、能動輸送を調べた。各化合物の透過係数値（Ｐａｐｐ）、すなわち膜を横切る化合物の透過の割合の尺度を算出した。確立されたヒト吸収を有する対照化合物との比較に基づいて、化合物を低（Ｐａｐｐ＜／＝１．０×１０６ｃｍ／ｓ）吸収ポテンシャルまたは高（Ｐａｐｐ＞／＝１．０×１０６ｃｍ／ｓ）吸収ポテンシャルに分類した。
【００７５】
化合物が能動拡散を行う能力の評価について、基底（Ｂ）から先端面（Ａ）へ輸送をＡからＢへの輸送と比べた比を調べた。Ｂ−Ａ／Ａ−Ｂ＞／＝１．０の値は、能動細胞拡散の出現を示した。Ｐａｐｐ値＞／＝１．０×１０６ｃｍ／ｓを有した。
【００７６】
（ｉｖ）肝細胞クリアランス
凍結保存ヒト肝細胞の懸濁物を使用した。インキュベーションは、１ｍＭまたは３μＭの化合物濃度で、生存細胞０．５×１０６個／ｍＬの細胞密度で行った。インキュベーションでの最終ＤＭＳＯ濃度は０．２５％であった。また、対照インキュベーションは、非酵素分解を明らかにするために細胞の不在下で行った。二重反復試料（５０μＬ）を、インキュベーション混合物から、０分、５分、１０分、２０分、４０分及び６０分（対照試料は６０分のみ）で取り出し、ＭｅＯＨ含有内部標準（１００μＬ）に加え、反応を停止させた。トルブタミド、７−ヒドロキシクマリン、及びテストステロンを、対照化合物として使用した。試料を遠心分離し、ＬＣ−ＭＳＭＳで分析するためにそれぞれの時点で上清をプールした。時間に対するｌｎピーク面積比（親化合物のピーク面積／内部標準のピーク面積）のプロットから、固有クリアランス（ＣＬｉｎｔ）を次の通りに算出した。ＣＬｉｎｔ（μｌ／分／百万個の細胞）＝Ｖ×ｋ（式中、ｋは、時間に対したプロットしたｌｎ濃度の勾配から得られる消失速度定数であり；Ｖはインキュベーション容量から誘導される容量ターム（term）であり、ｕＬ １０６細胞−１として表される）。
【００７７】
低（ＣＬ＜／＝４．６μＬ／分／１０６細胞）クリアランス、中間（ＣＬ＞／＝４．６；＜／＝２５．２μＬ／分／１０６細胞）クリアランス及び高（＞／＝２５．２μｌ／分／１０６細胞）クリアランスの基準に基づいて、本発明の化合物が低い肝細胞クリアランスを有すると決定された。
【００７８】
（ｖ）シトクロムＰ４５０阻害
本発明の化合物を、５つのＣＹＰ４５０標的（１Ａ２、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６、３Ａ４）に対して１０通りの濃度で、二重反復で選別した。１００ｕＭの最高濃度が使用される。標準阻害剤（フラフィリン、スルファフェナゾール、トラニルシプロミン、キニジン、ケトコナゾール）を、対照として使用した。プレートは、ＢＭＧ  Ｌａｂ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＰｏｌａｒＳｔａｒを使用して蛍光モードで読み取った。化合物は、ＣＹＰ４５０の全てのイソ型に対して弱い活性（ＩＣ５０＞／＝５ｕＭ）を示した。
【００７９】
（ｖｉ）シトクロムＰ４５０誘導
単一のドナーから新しく単離したヒト肝細胞を４８時間培養し、その後に試験化合物を３通りの濃度で加え、７２時間インキュベートした。ＣＹＰ３Ａ４及びＣＹＰ１Ａ２のプローブ基質を、インキュベーションが終わる１時間３０分前に加えた。７２時間で、細胞及び培地を取り出し、各プローブ基質の代謝の程度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳで定量した。実験は、１つの濃度で三重反復でインキュベートした個々のＰ４５０の誘導物質を使用することによって制御した。本発明の化合物は、シトクロムＰ４５０酵素の誘導に対してほとんど影響を及ぼさなかった。
【００８０】
（ｖｉｉ）血漿タンパク質の結合
試験化合物の溶液（５ｕｍ、０．５％の最終ＤＭＳＯ濃度）を、緩衝液及び１０％血漿（緩衝液中ｖ／ｖ）中で調製した。９６ウエルＨＴ透析プレートを、各ウエルを半透性セルロース膜で２つに分けるように組み立てた。緩衝液を、膜の片側に加え、血漿溶液を他方の側に加えた；次いで、インキュベーションを、三重反復で、３７℃で２時間にわたって行った。細胞をその後に空にし、化合物のそれぞれのバッチの溶液を２つの群（血漿無含有群及び血漿含有群）に合わせ、次いで血漿無含有溶液（６点）及び血漿含有溶液（７点）について２組の較正標準を使用することによってＬＣ−ＭＳＭＳで分析した。化合物について非結合画分値を算出した。高タンパク質結合化合物（＞／＝９０％結合）は、Ｆｕ＜／＝０．１を有した。本発明の化合物は、Ｆｕ値＞／＝０．１を有した。
【００８１】
（ｖｉｉｉ）ｈＥＲＧチャンネルのブロック
本発明の化合物を、確立された流出方法（flux methodology）を使用してｈＥＲＧカリウムチャネルを安定的に発現するＨＥＫ−２９４細胞からルビジウムの拡散を調節する能力について評価した。細胞を、ＲｂＣｌを含有する培地で調製し、９６ウエルプレートに移植し、一夜増殖させて単層を形成した。拡散実験を、培地を吸引し、各ウエルを３×１００μＬの予備インキュベーション用緩衝液（低［Ｋ＋］含有）を用いて室温で洗浄することによって開始した。最終吸引の後に、各ウエルに５０μＬのワーキングストック（working stock）（２倍）化合物を加え、室温で１０分間インキュベートした。次いで、各ウエルに、５０μＬの刺激用緩衝液（高［Ｋ＋］含有）を加えて、最終試験化合物濃度を得た。次いで、細胞のプレートを室温でさらに１０分間インキュベートした。次いで、各ウエルから８０μＬの上清を、９６ウエルプレートの相当するウエルに移し、原子発光分析法により分析した。化合物を、最大濃度１００μＭから１０ｐｔ二重反復ＩＣ５０曲線（ｎ＝２）として選別した。
【００８２】
実施例４  錠剤組成
それぞれ重量０．１５ｇの重量を有し且つ２５ｍｇの本発明の化合物を含有する錠剤を、次の通りに製造した。
錠剤１０，０００個の組成
活性化合物（２５０ｇ）
ラクトース（８００ｇ）
トウモロコシデンプン（４１５ｇ）
タルク粉末（３０ｇ）
ステアリン酸マグネシウム（５ｇ）
活性化合物、ラクトース及び半量のトウモロコシデンプンを混合した。次いで、得られた混合物を、０．５ｍｍの網目サイズの篩に強制的に通した。トウモロコシデンプン（１０ｇ）を温水（９０ｍＬ）に懸濁した。得られたペーストを使用して、粉末を造粒した。得られた顆粒を、乾燥し、１．４ｍｍの網目サイズの篩上で小さな断片に粉砕した。残った量のデンプン、タルク及びマグネシウムを加え、注意深く混合し、錠剤に加工した。
【００８３】
実施例５：注射剤製剤
製剤Ａ
活性化合物      ２００ｍｇ
０．１Ｍ塩酸溶液または
０．１Ｍ水酸化ナトリウム溶液適量      ｐＨ４．０から７．０まで
滅菌水適量      １０ｍＬまで
本発明の化合物を、大部分の水（３５℃、４０℃）に溶解し、ｐＨを必要ならば塩酸または水酸化ナトリウムを用いて４．０〜７．０の間に調節した。次いで、このバッチを水で容量を調整し、滅菌微細孔フィルタに通して滅菌１０ｍＬアンバーガラスバイアル（タイプ１）に濾過し、滅菌栓で密封し、シールで覆った（overseal）。
【００８４】
製剤Ｂ
活性化合物      １２５ｍｇ
滅菌、発熱物質無含有ｐＨ７リン酸緩衝液適量    ２５ｍＬまで
活性化合物      ２００ｍｇ
ベンジルアルコール      ０．１０ｇ
グリコフロール７５      １．４５ｇ
注射用の水適量      ３．００ｍＬまで
活性化合物をグリコフロールに溶解した。次いで、ベンジルアルコールを加え、溶解し、水を３ｍＬになるまで加えた。次いで、混合物を滅菌微細孔フィルタに通して滅菌３ｍＬアンバーガラスバイアル（タイプ１）に密封した。
【００８５】
実施例６：シロップ製剤
活性化合物      ２５０ｍｇ
ソルビトール溶液      １．５０ｇ
グリセリン      ２．００ｇ
安息香酸ナトリウム      ０．００５ｇ
香料      ０．０１２５ｍＬ
純水適量      ５．００ｍＬまで
本発明の化合物を、グリセリン及び大部分の純水の混合物に溶解した。次いで、得られた溶液に、安息香酸ナトリウムの水溶液を加え、次いでソルビトール溶液を加え、最後に香料を加えた。容量を、純水で調整し、十分に混合した。
【国際調査報告】
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