(57)【要約】  本発明は、静脈内（ＩＶ）投与のために適当であるチピファルニブ（ｔｉｐｉｆａｒｎｉｂ）の新規調合物に関する。さらに、本発明は、そのような調合物の使用およびそのような調合物の製造方法および該調合物を投与することによる処置の方法に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
静脈内投与に適したチピファルニブの製薬学的調合物。
【請求項２】
シクロデキストリンをさらに含む、請求項１に記載のチピファルニブの製薬学的調合物。
【請求項３】
シクロデキストリンがヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンである、請求項１または２に記載のチピファルニブの製薬学的調合物。
【請求項４】
チピファルニブの濃度が約１０ｍｇ／ｍｌである、請求項１〜３のいずれかに記載のチピファルニブの製薬学的調合物。
【請求項５】
シクロデキストリンを含んでなるチピファルニブの凍結乾燥組成物。
【請求項６】
シクロデキストリンがヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンである、請求項５に記載の凍結乾燥組成物。
【請求項７】
チピファルニブの凍結乾燥組成物を水および酸を含んでなる溶媒と混合する段階を含む、請求項１に記載の製薬学的調合物の製造方法。
【請求項８】
酸が、酒石酸、マレイン酸、コハク酸およびクエン酸から選ばれる、請求項７に記載の製薬学的調合物の製造方法。
【請求項９】
処置が請求項１の製薬学的調合物の投与を含むことを特徴とする、急性骨髄性白血病の処置のためのチピファルニブの使用。
【請求項１０】
処置が請求項１の製薬学的組成物の投与を含むことを特徴とする、乳がんの処置のためにチピファルニブの使用。
【発明の詳細な説明】
【関連出願との関係】
【０００１】
本出願は、２００５年１０月１４日提出の米国暫定特許出願第６０／７２６，９１１号の利益を請求するものであり、これは完全に、かつすべての目的のために、引用によって本明細書に組み入れられている。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、静脈内（ＩＶ）投与に適したチピファルニブ（ｔｉｐｉｆａｒｎｉｂ）の新規調合物に関する。さらに、本発明は、そのような調合物の使用およびそのような調合物の製造方法および該調合物を患者に投与することによって該患者を処置する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
チピファルニブは特許文献１に記述されている。チピファルニブの化学名は、（Ｒ）−（＋）−６−［アミノ９４−クロロフェニル）（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−５−イル）メチル］−４−（３−クロロフェニル）−１−メチル−２（１Ｈ）キノリノンである。チピファルニブの市販名は、市販名ＺＡＲＮＥＳＴＲＡ（Ｒ）である。本化合物の絶対立体化学配置は、上記特許出願に記述される実験では決定されなかったが、それがカラムクロマトグラフィーから単離された第２の化合物であったことを示すために、接頭辞「（Ｂ）」によって同定された。このようにして得られた化合物は、（Ｒ）−（＋）−立体配置を有することが見出だされた。また、その公表コード番号Ｒ１１５７７７によって言及されるこの化合物は、次に示す構造を有する：
【０００４】
【化１】
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チピファルニブは、酸性ｐＨにおいて非常に良好な水溶解度をもつ塩基である。それはＲ１１０１２７に加水分解するが、ここではアミン官能基がヒドロキシ官能基によって置換される。加水分解の割合は酸性条件では最低であるが、非常に速やかに進む。Ｒ１１０１２７は、次に示す構造を有する：
【０００５】
【化２】
2009511569.tif 000004
チピファルニブは、インビトロおよびインビボにおいてヒト・ファルネシルトランスフェラーゼ（ＦＴａｓｅ）の強力かつ選択的な非ペプチド模倣競合阻害剤である。この化合物は、インビトロではナノモル濃度において抗増殖効果を有し、そして数例のインビトロとインビボモデルおよび臨床において、単独療法として抗腫瘍効果を有する。チピファルニブの顕著な抗腫瘍効果は、血管形成の抑制、アポトーシスの誘導、および直接的抗増殖を含む。
【０００６】
ファルネシル化された標的、例えば（限定されるものではないが）、細胞のホメオスタシスおよび増殖に関与しているＲａｓ、ＲｈｏＢ、およびホスファチジルイノシトール−３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／セリン−トレオニンキナーゼＡＫＴは、しばしば、ＡＭＬでは突然変異または異常調節される。ファルネシル化の阻害は、インビトロで骨髄性白血病細胞の増殖および始原細胞コロニー（ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  ｃｏｌｏｎｙ）の形成を防ぐ。がん患者から得られた白血病細胞は、正常の骨髄細胞よりもチピファルニブの増殖抑制効果に対して有意に感受性であった。ファルネシル化の阻害が抗白血病活性をもたらす特定の下流エフェクターの同定は進行中の研究の課題である。チピファルニブは、限定されるものではないが急性髄鞘発生性白血病、脊髄異形成症候群および多発性骨髄腫を含む血液学的悪性腫瘍を有する患者、ならびに限定されるものではないが神経膠芽腫および乳がんを含む固形腫瘍を有する患者において臨床的活性の徴候を示した。
【０００７】
今日まで、数人の研究者が経口投与後のチピファルニブの薬物動態を試験した。チピファルニブの用量増大試験が進行したがんを有する２８人の患者において実施された。５０〜５００ｍｇ  ｂ．ｉ．ｄ．の用量範囲内では、６８〜１４５８ｎｇ／ｍｌという最高濃度範囲が、経口投与後２〜５時間達成された。チピファルニブの血漿濃度における直線的増加が観察された。この研究で観察されたチピファルニブの最低および最高血漿濃度は抗白血病活性の範囲内にあった。
【０００８】
チピファルニブは経口投与に続いて広範に代謝される。ヒト肝細胞を用いるインビトロ研究からのデータは、チピファルニブが直接グルクロン酸抱合を受けることを示した。診断学的インヒビターおよび異種発現系による実験もまた、ＣＹＰ３Ａ４が、他のＣＹＰ４５０酵素、例えばＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ａ６、ＣＹＰ２Ｄ６およびＣＹＰ２Ｃ８／９／１０に較べてチピファルニブについての顕著な代謝経路であることを明らかにした。チピファルニブの代謝物は、数例の前臨床研究においてファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤および抗増殖性作用物としては不活性であった。しかしながら、その個々の代謝物の薬物動態はヒトでは研究されなかった。［１４Ｃ］チピファルニブが健康な男性被験者に経口的に投与された後の血漿サンプルにおいて、数種のチピファルニブの代謝物が見出だされた。これらの代謝物は、酸化的脱メチル、脱アミノ、およびメチル−イミダゾール部分の喪失を介して形成されるチピファルニブおよび代謝物のグルクロニド抱合物を含んだ。親化合物のグルクロン酸抱合は生物変換の主要経路である。しかしながら、この化合物のがん被験者への投与後のチピファルニブの代謝は研究されていない。それに加えて、異なる投与経路後に起きるであろうチピファルニブ代謝物の蓄積における潜在的差異は、系統的には試験されなかった。
【０００９】
さらに、がん患者は、一様に、腫瘍による閉鎖、外科的操作、随伴する口部感染症、有意な味覚倒錯もしくは食欲欠乏、または悪心および嘔吐によって、経口摂取を損なわれている。したがって、静脈内投与のようなその他の投与経路を可能にする調合物に対する要望がなお存在する。
【特許文献１】ＷＯ９７／２１７０１
【発明の開示】
【００１０】
本発明の目的は、経口投与が問題になる患者のためのチピファルニブの代替投与経路（すなわち、非経口的）を提供することである。本発明の目的は、現状のチピファルニブの１日２回の経口投与に類似する臨床成果を可能にする、チピファルニブへの十分な曝露を与えることができ、連続注入としても、または短期間注入（１時間以下〜数時間；１日当たり１回もしくはそれ以上の回数）としても、チピファルニブの投与のための静脈内経路を提供することであった。特に、本発明の目的は、現状のチピファルニブの１日２回の経口投与に類似する曝露を与えることができる、連続注入としても、または１日２回の２時間注入としても、チピファルニブの投与のための静脈内経路を提供することであった。本発明のさらなる目的は、一般的および血液学的悪性腫瘍、および特に固形がんにおける処置の方法を提供することである。
【００１１】
＜発明の記述＞
本発明は、経口投与が問題になる患者のためのチピファルニブの代替投与経路（すなわち、非経口的）を提供する。本発明の目的は、現状のチピファルニブの１日２回の経口投与に類似する臨床成果を可能にする、チピファルニブの十分な曝露を提供することができる、連続注入としても、または短期間注入（１時間以下〜数時間；１日当たり１回もしくはそれ以上の回数）としても、チピファルニブの投与のための静脈内経路を提供することであった。特に、本発明の目的は、現状のチピファルニブの１日２回の経口投与に類似する曝露を与えることができる、連続注入としても、または１日２回の２時間注入としても、チピファルニブの投与のための静脈内経路を提供することであった。
【００１２】
本発明のさらなる目的は、静脈内に投与できるチピファルニブの調合物を可能にするために、溶液により可溶化できるチピファルニブの乾燥調合物を提供することである。当業者は、静脈内投与のための調合物に適用できる制約を周知している。多くの制約がこれ以降で議論されるであろう。静脈内に投与される調合物は、あるｐＨを有する必要がある。静脈中に入れられる溶液は、非常に塩基性であってはならず、また酸性であってもならない。調合物は、血中に入った場合に有害反応を惹起するであろう添加物を含有してはならない。さらにまた、調合物は、有効成分が血中に入ったら溶解したままであるようにされるべきである。この制約のリストは必ずしも全てではない。
【００１３】
本発明の調合物は適当な量においてチピファルニブを含む。これらの量は、得られるＩＶ調合物が単一用量投与のために使用されるか、またはそれが連続ＩＶ投与のために使用されるかによって異なるであろう。
【００１４】
調合物は、好ましくは、さらなる若干のシクロデキストリンまたはその誘導体を含む。他の可溶化剤がまた使用されてもよい。好適なシクロデキストリンはヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンである。他のシクロデキストリンがまた使用されてもよい。
【００１５】
場合によっては、マンニトールまたはその他の糖、例えばトレアロース（ｔｒｅａｌｏｓｅ）またはスクロースが使用されてもよい。マンニトールまたは他の糖は、凍結乾燥された材料の迅速溶液を確実にする。マンニトールが存在しない場合、徐々にしか溶解しない若干のゲル様凝集体が観察される。マンニトールの存在により、これらの凝集体は現れないか、またはより少程度に現れる。さらに、マンニトールは、確実に、凍結乾燥された材料の美的外観を改善させる。マンニトールなしでは、凍結乾燥材料は、美的観点からは低い魅力の外観を与えるひび割れを示すことがある。本発明のさらなる目的は、一般的および血液学的悪性腫瘍、および特に固形がんにおける処置の方法を提供することである。
【００１６】
本発明は、本発明の製薬学的調合物を投与することによって、トランスフォームされた細胞を含む、細胞の異常増殖を抑制する方法を提供する。細胞の異常増殖は、正常な調節機構に依存しない（例えば、接触阻止の欠如）細胞増殖を指す。これは、（１）活性ｒａｓがん遺伝子を発現する腫瘍細胞（腫瘍）；（２）ｒａｓタンパク質がその他の遺伝子の発がん性変異の結果として活性化される腫瘍細胞；（３）ｒａｓ活性化が生じる他の増殖性疾患の良性および悪性細胞：の異常増殖を含む。さらにまた、ｒａｓがん遺伝子は、腫瘍細胞増殖に及ぼす直接効果によってインビボで腫瘍の成長に寄与するのみならず、また間接的に、すなわち腫瘍誘導の血管形成を促進することによって寄与することが、文献において示唆された。それ故、薬理学的に標的とする変異ｒａｓがん遺伝子は、おそらく、腫瘍誘導の血管形成を抑制することによって、部分的に、インビボで固形腫瘍の成長を抑制することができるであろう。
【００１７】
また、本発明は、被験者、例えばそのような処置の必要な哺乳動物（より具体的にはヒト）に対して、本発明の本製薬学的調合物を投与することによって腫瘍の成長を抑制する方法を提供する。特に、本発明は、本発明の製薬学的調合物の投与によって活性ｒａｓがん遺伝子を発現する腫瘍の成長を抑制する方法を提供する。抑制されてもよい腫瘍の例は、限定されるものではないが、肺がん（例えば、腺がん）、膵臓がん（例えば、外分泌膵臓がん腫のような膵臓がん腫）、結腸がん（例えば、結腸腺がん腫および結腸腺腫のような結腸直腸がん腫）、類リンパ直系の造血性腫瘍（例えば、急性リンパ性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫）、骨髄性白血病（例えば、急性髄鞘発生性白血病（ＡＭＬ））、甲状腺（例えば、胞状）がん、脊髄異形成症候群（ＭＤＳ）、間葉起源の腫瘍（例えば、繊維肉腫および横紋筋肉腫）、黒色腫、奇形がん腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、皮膚の良性腫瘍（例えば、角質乳頭腫）、乳がん腫、腎臓がん腫、卵巣がん腫、膀胱がん腫および表皮がん腫である。
【００１８】
また、本発明は、ｒａｓタンパク質が遺伝子における発がん性変異の結果として異常に活性化される、すなわち、ｒａｓ遺伝子自体は、発がん性変異への変異によって発がん性形態に活性化されない、良性および悪性の両増殖性疾患を抑制する方法であって、該抑制が、そのような処置の必要な被験者に対する本明細書に記述される製薬学的調合物の投与によって達成される方法を提供してもよい。例えば、良性の増殖性疾患神経繊維腫症、またはｒａｓがチロシンキナーゼがん遺伝子の変異または過剰発現により活性化される腫瘍は、本発明の製薬学的調合物によって抑制されてもよい。
【００１９】
したがって、本発明は、医薬として使用するための本発明の製薬学的調合物ならびに１種以上の前記症状を処置する薬物の製造のための式（Ｉ）のこれらの化合物の使用を開示する。
【００２０】
用語および定義
より正確な記述を提供するために、本明細書に与えられる若干の量的表現は用語「約」により修飾されない。用語「約」が明確に使用されるか否かは、本明細書で与えられる各数量が実際に与えられた値を指すことが意味され、そしてまた、それが、そのような与えられた値についての実験および／または測定条件による近似値を含む、当業者によって合理的に推定できるような与えられた値への近似値を指すことが意味されると理解される。
【００２１】
本明細書で使用されるように用語「被験者」は、処置、観察または実験の対象であった、動物、好ましくは哺乳動物、もっとも好ましくはヒトを指す。
【００２２】
本明細書で使用されるように用語「治療学的に有効な量」は、研究者、獣医、医学者または他の臨床医によって探求されつつある、組織系、動物またはヒトにおける生物学的または医学的応答を惹起する活性化合物または製薬学的作用物の量を意味し、この応答は、処置されつつある疾病または障害の少なくとも１つの症候の緩和および／または処置されつつある疾病または障害の少なくとも１つの症候の頻発および／または重篤度における低下を含む。
【００２３】
用語「立体異性体」は、共有結合された原子の同じ分子式および同じ配列であるが、異なる空間的方向を有する異性体を指す。
【００２４】
用語「光学異性体」は、それらの基の空間配置においてのみ異なる同一化学構造の異性体を意味する。光学異性体は、異なる方向に偏光面を回転する。用語「光学活性」は、光学異性体が偏光面を回転する程度を意味する。
【００２５】
用語「ラセミ化合物」または「ラセミ混合物」は、２つの鏡像異性種の等モルの混合物を意味し、ここで、単離された種の各々は、混合物が光学活性を欠くように反対方向に偏光面を回転する。
【００２６】
用語「鏡像異性体」は、その鏡像と重ね合わされない立体異性体を意味する。用語「ジアステレオマー」は、鏡像異性体ではない立体異性体を意味する。
【００２７】
用語「キラル分子」は、少なくとも１対の鏡像異性体を有する分子を意味する。これは、それらの鏡像において重ね合わすことができるアキラル分子とは反対である。
【００２８】
また、キラル分子の２つの別々の鏡像分子は、それらが偏光面を回転する方向に応じて、ｌｅｖｏ（左手側）、Ｌと略記、またはｄｅｘｔｒｏ（右手側）、Ｄと略記、として知られている。記号「Ｒ」および「Ｓ」は立体形成炭素原子の周囲の基の立体配置を表す。
【００２９】
ラセミ混合物から単離された鏡像異性体として富有化された形態物の例は、混合物が左旋性異性体を実質的に含有しない右旋性鏡像異性体を含む。これに関連して、実質的に含有しないは、左旋性異性体が、式：
【００３０】
【数１】
2009511569.tif 000005
にしたがって、混合物の２５％未満、１０％未満、５％未満、２％未満または１％未満の範囲において含まれてもよいことを意味する。
【００３１】
同様に、ラセミ混合物から単離された鏡像異性体として富有化された形態物の例は、混合物が右旋性異性体を実質的に含有しない左旋性鏡像異性体を含む。これに関連して、実質的に含有しないは、右旋性異性体が、式：
【００３２】
【数２】
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にしたがって、混合物の２５％未満、１０％未満、５％未満、２％未満または１％未満の範囲において含まれてもよいことを意味する。
【００３３】
用語「幾何学的異性体」は、炭素−炭素二重結合、シクロアルキル環または架橋二環式系に対する関係において置換原子の方向で異なる異性体を意味する。炭素−炭素二重結合の各側の置換原子（水素以外の）は、ＥまたはＺ配置において存在できる。「Ｅ」配置では、置換基は炭素−炭素二重結合との関係で反対側に存在する。「Ｚ」配置では、置換基は炭素−炭素二重結合との関係で同じ側に向けられる。
【００３４】
環系に結合される置換原子（水素以外の）は、ｃｉｓまたはｔｒａｎｓ配置において存在できる。「ｃｉｓ」配置では、置換基は環の面との関係で同じ側に存在する；「ｔｒａｎｓ」配置では、環の面との関係で反対側に存在する。「ｃｉｓ」および「ｔｒａｎｓ」種の混合物を有する化合物は「ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ」と呼ばれる。
【００３５】
異性体の記述子（「Ｒ」、「Ｓ」、「Ｅ」および「Ｚ」）は原子配置を示し、そして文献において定義されるように使用されるよう意図される。
【００３６】
本発明の化合物は、異性体に特異的な合成によってもまた異性体混合物からの分割されても、個々の異性体として製造できる。慣用の分割技術は、光学的に活性な酸（または塩基）を用いて異性体ペアの各異性体の遊離塩基（または酸）を化合させて光学的に活性な塩を形成させること（続いて、分別晶出および遊離塩基の再生）、適当なキラル補助剤との反応によって異性体ペアの各異性体のエステルまたはアミドを形成させること（続いて、分別晶出またはクロマトグラフィー分離およびキラル補助剤の除去）、または種々の周知のクロマトグラフィー法を用いて中間体または最終生成物のいずれかの異性体混合物を分離することを含む。
【００３７】
さらにまた、本発明の化合物は、１種以上の多形または無定形結晶形態を有してもよく、そしてそれ自体、本発明の範囲内に包含されることが意図される。さらに、若干の本化合物は水と溶媒和物（すなわち水和物）または通常の有機溶媒と溶媒和物（例えば、エタノール和物などのような有機エステル）を形成してもよく、そしてそれ自体また、本発明の範囲内に包含されることが意図される。
【００３８】
次の実施例は、本発明の理解を助けるために記述されるものであり、そしてそれ以降に示される請求項に記述される本発明を、いかなる点においても限定することは意図されず、そしてそのように考えられるべきではない。
【実施例】
【００３９】
実験の部
調合物
凍結乾燥のためのチピファルニブ１０ｍｇ／ｍｌ注射用溶液（調合物１）
チピファルニブ                                １０      ｍｇ
マンニトール                                  ５０      ｍｇ
濃塩酸                                        ３．７５  μｌ
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン    ２００    ｍｇ
注射剤のための水  ｑｓ  ａｄ                  １０００  μｌ
放出（ｒｅｌｅａｓｅ）ｐＨ＝２．０±０．２
チピファルニブ注射用凍結乾燥粉末を再構成するための溶液（調合物２）
クエン酸一水和物                              １．９７  ｍｇ
無水リン酸水素二ナトリウム                    ４．４４  ｍｇ
注射剤のための水  ｑｓ  ａｄ                  １０００  μｌ
放出ｐＨ＝６．０±０．５
【００４０】
調合物の調製
調合物１
調合物１の１０ｍｌが２０ｍｌバイアル中に充満され、そして凍結乾燥される（１バイアル当たり１００ｍｇのチピファルニブ）。使用前に、凍結乾燥粉末が調合物２の８．６ｍｌに溶解されて、チピファルニブ１０ｍｇ／ｍｌ注射溶液（ｐＨ〜４−５）の１０ｍｌを得る。このチピファルニブ１０ｍｇ／ｍｌ溶液は、次に、０．９％ＮａＣｌ溶液により所望の濃度（０．５〜２ｍｇ／ｍｌ）までさらに希釈される。
【００４１】
調合物１のｐＨ値はチピファルニブの可溶化のために非常に酸性（１）であり、製造中Ｒ１１０１２７の最小生成を有するためには（２）である（製造は好ましくは低温〜１０℃で実施される）。
【００４２】
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンは、チピファルニブが調合物２により再構成される場合に、それを可溶化するために調合物１に添加される。再構成溶液のｐＨ値は〜４．５である。このｐＨでは、チピファルニブはヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンが存在しないと沈殿する。末梢静脈（腕）中への注入中の局部刺激のリスクは、このｐＨ値では許容できるレベルにある。
【００４３】
ヒトにおける試験中、長時間（例えば、２４時間）にわたる投与の場合には若干の血栓性静脈炎が注入の場所に見出だされた。これはヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン自体によって惹起され、担体によるものではないであろう。したがって、末梢静脈を介して投与せずに中心静脈を介して投与することが決定された。中心静脈は、注入溶液の混合と希釈が、より迅速かつ高度に実施されるので、非常に高い血中負荷（ｂｌｏｏｄ  ｄｅｂｉｔ）を有する。注入が中心静脈を介して実施される場合、注入溶液のｐＨ値はあまり重要ではないので、調合物２による代わりにＷＦＩ（注射用水）により再構成することが決定された。ＷＦＩを用いて調合物１の凍結乾燥粉末を再構成することによって得られる溶液のｐＨ値は〜３である。再構成溶液は中心静脈を介して投与することができる。
【００４４】
製造方法
（ａ）調合物１の製造（１０Ｌバッチ）
（１）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの２ｋｇを適当な容器に添加し、
（２）（１）に５００ｇのマンニトールを添加し、
（３）（２）に８ｋｇの注射用水を添加し、溶解するまで撹拌し、
（４）（３）に１６４．０ｇの１０％ＨＣｌを添加し、均質に混合し、
（５）（４）に１００ｇのＲ１１５７７７を添加し、混合して溶解し、
（６）無菌の０．２２μｍフィルターを通して濾過し、
（７）（６）の１０ｍｌを２０ｍｌバイアル中に充満する。
【００４５】
（ｂ）調合物１の凍結乾燥
（８）バイアルに栓をして、冷温トレーに移し、
（９）（８）を凍結乾燥機に移し、
（１０）凍結乾燥：−  凍結：大気圧で−４０℃
−  一次乾燥：０．１ｍｂａｒで１０℃
−  二次乾燥：０．０１ｍｂａｒで３０℃
（１１）バイアルの密封（ｃｒｉｍｐｉｎｇ）。
【００４６】
臨床試験
方法および材料
この無作為化されたオープン・ラベルの比較試験は、臨床試験実施規準（ｇｏｏｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｐｒａｃｔｉｃｅ）にしたがって実施された。倫理委員会の承認は試験前に得られ、そして患者は参加することへの彼らの書面で示されたインフォームドコンセントを与えた。
【００４７】
チピファルニブは、１００ｍｇ経口錠剤または１００ｍｇのチピファルニブおよび２．０ｇのヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰβＣＤ）を含有するバイアル中の凍結乾燥粉末のいずれかとして供給された。凍結乾燥粉末は、静脈内注入直前に調合物２により再構成される。この一定分量が０．９％ＮａＣｌにおいて希釈され、そして適当な注入ラインをもつ注射器ドライバーを通して投与された。
【００４８】
研究被験者
治癒療法を受け入れる余地のない（ｎｏｔ  ａｍｅｎａｂｌｅ）、病理学的に確認されたがんを有する年齢１８歳以上の男性および女性がこの研究のために選ばれる資格があった。患者はＥＣＯＧ（Ｅａｓｔｅｒｎ  Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｇｒｏｕｐ）Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｓｔａｔｕｓ＜２を有することが要求された。他の要件、研究開始前少なくとも４週（ニトロソ尿素またはマイトマイシンＣでは６週）の照射療法および／または化学療法の不在および栄養の合理的状態を維持するための十分な経口摂取を含んだ。
【００４９】
患者は、彼らが、好中球カウント＜１，５００／ｍｍ３、血小板カウント＜１００，０００／ｍｍ３、血清ビリルビン＞２．０ｍｇ／ｄｌ、トランスアミナーゼ  制定正常値（ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  ｎｏｒｍａｌ）の上限の＞５倍、またはクレアチニン＞１．５ｍｇ／ｄｌによって判定されるような有意に異常な血液学的状態を有する場合は除外された。プロトンポンプ・インヒビター（例えば、オメプラゾール、ランソプラゾール、パントプラゾール）の共存投与は、チピファルニブの経口投与期間中は許されなかった（これは、いかなる潜在的妨害をも避けるために、ＰＫ評価が実施された場合、サイクル１においてのみだった）。損傷された胃の酸度または上部胃腸（ＧＩ）管の偏位により薬物の吸収を妨害しそうなＧＩ管の手術を受けた患者は、選ばれる資格はなかった。研究者の意見で、この研究に参加するための障害を構成するであろうすべての共存する疾病、具体的には等級＞２の抹消神経病の存在は、また患者を不適格にさせた。
【００５０】
研究計画
本研究の第１（用量−決定）相の目的は、十分に許容される静脈内処置プログラム（ｒｅｇｉｍｅｎ）を同定することであった。この処置プログラムは、健康な男性ボランティアにおける絶対生物利用度の予備試験的決定に基づいて、臨床的に適切な経口用量（２００ｍｇ）の５０％〜６０％と同等であろうことが期待された。３人の被験者の第１コホートは、次のような中断することのないチピファルニブの４日連続の処置：第１〜４日における２時間静脈内注入ｂ．ｉ．ｄ．として３０ｍｇ、続いて第５〜８日における経口投与ｂ．ｉ．ｄ．として２００ｍｇ、続いて第９〜１２日における連続静脈内注入として１日当たり６０ｍｇを受けた。同様に、３人の被験者の第２コホートは、チピファルニブの類似の４日処置プログラム：２時間静脈内注入ｂ．ｉ．ｄ．として６０ｍｇ、続いて経口投与ｂ．ｉ．ｄ．として２００ｍｇ、続いて連続静脈内注入として１日当たり１２０ｍｇを受けた。前記の各々４日の経口またはｉ．ｖ．処置の間にはウォッシュアウト（ｗａｓｈｏｕｔ）はなかった。
【００５１】
コホートの第２および第３被験者は、第１の被験者が、用量制限毒性（ｄｏｓｅ−ｌｉｍｉｔｉｎｇ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ）（ＤＬＴ）なしに最初の静脈内および経口投与（すなわち、８日間）を終了した時点でのみ出発されねばならなかった。第１または第２コホートのいずれかの３被験者の１人においてＤＬＴが起きた場合には、３人の補助被験者がそのコホートに加えられる必要があった。１人以上の被験者がＤＬＴを経験した場合（第１の３被験者か、または拡大された６被験者のコホートのいずかにおいて）、用量増大は終了され、そしてそのコホートの他の被験者は、同じ用量においてそれらの療法を完了しなければならなった。
【００５２】
本研究の第２（ｉ．ｖ．−経口のブリッジング（ｂｒｉｄｇｉｎｇ））相は、患者の別のグループにおいて完了された。選ばれた２時間および連続静脈内処置プログラム（前以ての用量−決定相からの）に続くチピファルニブへの全身性曝露が、２００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．経口処置プログラム後の曝露に比較された。ブリッジング相は、用量−決定相の第２コホートの少なくとも２被験者が２１日目までＤＬＴのないことが観察された場合に開始された。全２４被験者が、潜在的な連鎖効果を説明するために、選ばれた静脈内処置プログラムにおける２つの処置順序の１つに対して１：１比で無作為に割り当てられた。
【００５３】
順序（ｓｅｑｕｅｎｃｅ）１：第１〜４日における２時間の静脈内注入として投与される１００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．、続いて第５〜８日における２００ｍｇの経口錠剤、次いで第９〜１２日における連続４日の静脈内注入として投与される２００ｍｇ／日。
【００５４】
順序２：第１〜４日における連続４日の静脈内注入として投与される２００ｍｇ／日、続いて第５〜８日における２００ｍｇの経口錠剤、次いで第９〜１２日における２時間の静脈内注入として投与される１００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．。
【００５５】
チピファルニブの経口用量は、食物の摂取直後に与えられる必要があった。チピファルニブの注入は、前腕の末梢静脈を介するか、または比較的高用量では中心ラインを介して投与された。
【００５６】
血漿のサンプリングおよびアッセイ
用量−決定およびブリッジングの両相において、薬動学上のサンプリングは、各処置の４日目の朝（ｍｏｒｎｉｎｇ）の用量の開始から１０時間の間実施された。全血液サンプルが、経口投与直前、および投与後０．５、１、２、３、４、６、８および１０時間に採取された。２時間静脈内注入では、血液サンプルは、投薬直前、および投薬後１、２（すなわち、注入終了直前）、２．２５、３、４、６、８および１０時間に採取された。血液サンプルは、連続静脈内注入の開始直前、および開始後２、４、６、８および１０時間に採取された。
【００５７】
各ＰＫサンプルについて血液の最小７ｍｌが収集された。全血液サンプルは直ちに氷上に置かれ、そして収集２時間以内に遠心（１０分、１０００ｘｇ）された。分離された血漿は、アッセイされるまで直ちに−１８℃以下で凍結された。
【００５８】
血漿サンプルは室温で解凍され、そして個々のサンプルは、既に公表された方法を用いてチピファルニブについて分析された。ヒト血漿の１ｍｌ分量に対して、内部標準（Ｒ１２１５５０、構造類似体）の２００ｎｇがスパイク（ｓｐｉｋｅ）された。ＮａＯＨ（０．１Ｍ）１ｍｌを添加後、サンプルはイソアミルアルコール１０％を含有するヘプタン４ｍｌで２回抽出された。合わせた有機相は、ＨＣｌ（２Ｍ）２ｍｌで逆抽出された。濃アンモニアでアルカリ化した後、水相が、イソアミルアルコール５％を含有するヘプタン５ｍｌで１回抽出された。この抽出液は窒素下６５℃で蒸発され、そして残渣が注入溶媒（酢酸アンモニウム０．０１Ｍ／アセトニトリル／メタノール；５０／２５／２５）の１００μｌに溶解された。１５μｌの抽出液が、波長２４０ｎｍでのＵＶ検出（Ａｇｉｌｅｎｔ）を備えたＨＰＬＣ中に注入された。分離は、３μｍＣ１８ＢＤＳ−Ｈｙｐｅｒｓｉｌ（Ａｌｌｔｅｃｈ）を充填された１０ｃｍｘ４．６ｍｍクロマトグラフィーカラムにおいて実施された。溶出は、最初は、関心のある化合物の溶出まで０．０１Ｍ酢酸アンモニウム／アセトニトリル（５２／４８）において無勾配で、続いて、９０％アセトニトリルまでの勾配によって０．８ｍｌ／ｍｉｎの流速において実施された。総行程時間は１４分であった。アッセイは範囲２．００〜５０００ｎｇ／ｍｌにおいて評価された。
【００５９】
チピファルニブの代謝物、特にＲ１３０５２５、Ｒ１０７２５２およびＲ１０４２０９がＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いて決定された。これらの代謝物の化学構造は、図１１において表される。グルクロン酸抱合された代謝物の存在を決定するために、血漿サンプルがまた、エシェリヒア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）β−グルクロニダーゼ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ  ＧｍｂＨ，Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）による脱抱合の後に分析された。サンプル調製は次の記述のとおりであった：０．２ｍｌのヒト血漿の一定分量または希釈された脱抱合血漿サンプルの１．０ｍｌの一定分量が、各５ｎｇにおける３種の内部標準：チピファルニブとＲ１３０５２５のために使用される、安定な同位元素で標識された化合物、Ｒ１９８８３８、およびＲ１０１７６３とＲ１０４２０９のために使用される、２種の構造類似体、Ｒ１０７２５２およびＲ１２１７０４、それぞれの混合物によりスパイクされた。０．１ＭＮａＯＨの１ｍｌを添加後、サンプルは、１０％のイソアミルアルコールを含有するヘプタン３ｍｌで２回抽出された。合わせた有機画分は窒素下で蒸発され、そして残渣が、メタノール１００μｌおよび０．００２Ｍ酢酸アンモニウム１００μｌの混合液において再構成された。クロマトグラフィー分離は、Ｃ１８ＢＤＳ−Ｈｙｐｅｒｓｉｌ  ３μｍ（３．２ｍｍＩ．Ｄ．ｘ５０ｍｍ）カラムにおいて実施された。注入容量は２５μｌであった。無勾配の移動相は、０．００２Ｍギ酸アンモニウム（ギ酸によりｐＨ４）／アセトニトリル（４４／５６）からなり、０．５ｍｌ／ｍｉｎでポンプ送出された。検出は、Ｔｕｒｂｏｉｏｎｓｐｒａｙイオン化（陽イオン方式）によるタンデム質量分析によって実施された。次の質量遷移が、種々の化合物および内部標準をモニターするために使用された：チピファルニブ：４８９．１→４０７．１；Ｒ１９８８３８：４９２．１→４０７．１；Ｒ１３０５２５：４７５．１→３９３．１；Ｒ１０１７６３：３９４．０→１３９．０；Ｒ１０４２０９＋Ｒ１０７２５２：４０８．０→１３９．０；およびＲ１２１７０４：４２２．１→１３９．０。アッセイは、脱抱合後、各代謝物については範囲０．５０〜１２５０ｎｇ／ｍｌおよびチピファルニブについては１０．０〜２５０００ｎｇ／ｍｌにおいて評価された。
【００６０】
チピファルニブタンパク質結合分析
チピファルニブは、不斉炭素原子において［１４Ｃ］により特異的に標識された。７ｍｌの血液サンプルが、４日目のチピファルニブの連続静脈内注入の開始後４時間に２４人の患者から採取された。血漿サンプルは、５００ｎｇ／ｍｌにおける［１４Ｃ］−チピファルニブにより強化された。強化された血漿サンプルが、同一のｍａｃｒｏ−１  ＴｅｆｌｏｎセルとＤｉａｃｈｅｍａ１０．１７透析膜（ＭＷカットオフ１０，０００）を備えたＤｉａｃｈｅｍａシステムにおいて、３７℃で４時間、０．０６７Ｍリン酸バッファー、ｐＨ７．１７に対する平衡透析にかけられた。放射能レベルは、平衡透析の前後に強化された血漿の２並列の一定分量１００μｌについて、および透析後にメタノールと混合された透析セルのバッファー・コンパートメントの内容物の１０００μｌの２並列一定分量について、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｔｒｉ−Ｃａｒｂ  １９００  ＴＲ液体シンチレーション分光計で測定された。総タンパク質濃度は、比色ビューレット法、キットＲｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  １９２９９１７により決定された。アルブミン濃度は、比色ブロモクレゾールグリーン法、キットＲｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  １９７０９０９により決定された。α１−酸性糖タンパク質濃度は、免役比濁法、キットＲｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  １５５７６０２により決定された。すべてこれらの試験はＲｏｃｈｅ  Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒアナライザーにおいて実施された。
【００６１】
未結合チピファルニブのフラクション（ｆｕ）は、透析セルのバッファー（Ｃｕ）および血漿（Ｃ）コンパートメントの放射能測定によって決定されるように、総濃度（Ｃ）に対する未結合濃度（Ｃｕ）の比として計算された：Ｆｕ＝Ｃｕ／Ｃ  。
結合フラクションｆｂ＝１−ｆｕ    。
【００６２】
非区分（ｎｏｎｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔａｌ）薬物動態分析
各投与期間の４日目の朝用量の開始から１０時間の間のチピファルニブの個々の血漿濃度−時間データが、プログラムＷｉｎＮｏｎｌｉｎバージョン３．１（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｃａｒｙ，ＮＣ）を用いて非区分方法によって分析された。時間０〜１０時間からの濃度−対−時間曲線下面積（ＡＵＣ０−１０ｈ）は、直線台形法を用いて計算された。最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）、定常状態における血漿濃度（Ｃｓｓ、連続静脈内注入についてのみ）および最高血漿濃度に達する時間（ｔｍａｘ）は観察された値であった。経口投与後のチピファルニブの生物利用度は、
［ＡＵＣｐｏｘＤＯＳＥｉｖ／（ＡＵＣｉｖｘＤｏｓｅｐｏ）］ｘ１００％
にしたがって、ＡＵＣ０−１０ｈ値に基づいて計算された。
【００６３】
統計学的解析
人口統計学的情報は、中間値、最小値および最大値として総括された。チピファルニブおよびその代謝物の薬動学的データもまた記述統計学を用いて総括された。全３処置に関する薬物動態サンプルが得られた被験者からの、経口および静脈内投与後のチピファルニブに対する全身性曝露（血漿ＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１０ｈ）がＡＮＯＶＡを使用して評価された。チピファルニブＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１０ｈについての静脈内注入（試験）対経口投与（参考）の最小平方平均比の周囲の点（ｐｏｉｎｔ）推定値および対応する９０％信頼区間が計算された。解析は、ＳＡＳバージョン６．１２統計学的ソフトウエアプログラム（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｃａｒｙ，ＮＣ）を用いて対数変換された薬動学的パラメーターに関して実施された。
【００６４】
臨床評価
完全な患者の病歴が採られ、そして身体検査（生命徴候を含む）、血液学的試験および臨床化学試験が、基準線においておよび処置中に実施された。心臓血管安全性を評価するために、１２リード（ｔｗｅｌｖｅ−ｌｅａｄ）Ｅ．Ｃ．Ｇ．が、スクリーニング、Ｃｙｃｌｅ  １および治療の終わりにおいて記録された。目標の腫瘍応答はこの研究の主要目標ではなかったけれども、適当な測定値を得て応答を調査するために、１つの試みがなされた。すべての有害事象および臨床的に関連する実験室の異常は、Ｃｏｍｍｏｎ  Ｔｏｘｉｃｉｔｙ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ（ＣＴＣバージョン２．０）にしたがって格付けされた。
【００６５】
結果
被験者の素因
３２人の被験者（１０人の男性および２２人の女性）の全部が登録された；６被験者は用量決定相に、そして２６被験者はブリッジング相に関与した。この研究における３１人の被験者は、進展した固形腫瘍をもつと診断された。１人の被験者は高リスクの脊髄異形成症候群を有した。ブリッジング相では、１２被験者が、無作為に、処置順序  １（２時間の静脈内注入ｂ．ｉ．ｄ．／経口投与ｂ．ｉ．ｄ．／連続静脈内注入）を受けるように割り当てられ、そして１４被験者が、処置順序  ２（連続静脈内注入／経口投与ｂ．ｉ．ｄ．／２時間の静脈内注入ｂ．ｉ．ｄ．）を受けた。処置順序  １に無作為化された１被験者は、プロトコール違反のために４日目に研究から撤収され、そして処置順序  ２の１被験者は、疾病の進行に関連する肝不全により８日目に撤収された。
【００６６】
本研究に募集された３２人の被験者の人口統計学的データは、表１（図１）において総括されている。患者の年齢は３５〜７０才にわたり、体重範囲は４８〜９２ｋｇであり、そして身長範囲は１４９〜１７６ｃｍであった。コホート  ３（ブリッジング相）の２つの無作為化群の間には明らかな差異は存在しなかった。
【００６７】
チピファルニブの静脈内用量の決定
第１コホートは、２時間静脈内注入として１日２回３０ｍｇ、続いて経口投与として１日２回２００ｍｇおよび連続静脈内注入として１日当たり６０ｍｇの４日のチピファルニブ処置プログラムを受けた３被験者からなった。平均して、２時間静脈内注入として３０ｍｇｂ．ｉ．ｄ．および連続静脈内注入として１日当たり６０ｍｇについてのＡＵＣ０−１０ｈに基づくチピファルニブの全身性曝露は、これらの個人によって受けられた２００ｍｇの経口用量後の曝露に較べて、それぞれ約６４％および５９％低かった（表ＩＩ〜ＩＶ）（図２〜４）。静脈内投与後の用量制限毒性は観察されなかった。したがって、静脈内投与用量は次の用量レベルまで増大された。
【００６８】
第２コホートでは、３人のさらなる被験者が、２時間静脈内注入として１日２回６０ｍｇ、続いて連続内注入として１日当たり１２０ｍｇの４日処置プログラムを受けた。これらの静脈内処置プログラム後の全身性曝露は、２００ｍｇの経口用量後の曝露に較べて、それぞれ約４７％および４６％低かった（表ＩＩ〜ＩＶ）（図２〜４）。再び、ＤＬＴはこのコホートでは観察されなかった。これらの結果に基づいて２時間注入として投与された１００ｍｇ、および２００ｍｇ／日の連続注入の１日２回処置プログラムが、経口ブリッジング研究に対して静脈内について選ばれた。
【００６９】
チピファルニブの血漿薬物動態
予期されたように、チピファルニブ血漿濃度−時間プロフィルの形は、投与経路および投薬処置プログラムにより異なった（図１）。チピファルニブの最高血漿濃度は、経口投与および２時間静脈内注入後に明らかであった。反対に、連続静脈内注入は、明らかなピークのない薬物投与中の比較的一定した血漿濃度を生じた。
【００７０】
最大血漿濃度は、４日連続のチピファルニブの２００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．の経口投与の約２時間後に観察された（表ＩＶ）（図４）。ｔｍａｘの範囲は、２９被験者では０．５〜３時間であった；１被験者は８時間目に最大濃度を有した。ｂ．ｉ．ｄ．経口投薬４日の後、算術平均ＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１０ｈ値（±ＳＤ、ｎ−２４）は、それぞれ９９４±４８７ｎｇ／ｍｌおよび３９９０±１６７１ｎｇ・ｈ／ｍｌであった。
【００７１】
チピファルニブのより高い血漿濃度は、２００ｍｇ経口用量に較べて、１００ｍｇ用量が２時間静脈内注入として与えられた場合に観察された（表ＩＶ）（図４）。平均して、チピファルニブが、経口的に投与された（２００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．）場合よりも２時間静脈内注入として投与された（１００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．）場合に、ＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１０ｈ値は、それぞれ４８．０％および１９．３％高かった（表ＩＶ）（図４）。９０％信頼区間の上限は、生物学的等価の８０％〜１２５％の範囲の外側にあった。経口投与後の曝露に対して、２時間静脈内注入後に観察された比較的高い曝露は、臨床的に有意であることが期待されない。
【００７２】
４日目の平均ＡＵＣ０−１０ｈ値は、経口投与（２００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．）および連続静脈内注入（１日当たり２００ｍｇ）の両方の後では類似していた（表Ｖ）（図５）。９０％信頼区間の下限は、８０％〜１２５％の範囲の内に入った；しかしながら、上限は、この範囲をやや超えて広がった（表Ｖ）（図５）。ＡＵＣ０−１０ｈによって測定されたように、総全身性曝露に関しては、連続注入による投薬効果は、経口経路による投薬効果に類似していた。しかしながら、プロフィルの形は、最高チピファルニブ濃度が、連続注入後には明らかでなかった点で異なった。
【００７３】
用量−標準化後に、経口錠剤調合物（経口対２時間ｉ．ｖ．）の平均絶対生物利用度は４６．３％であった。同様に、経口錠剤調合物（経口対連続静脈内注入）の平均絶対生物利用度は４０．９％であった。
【００７４】
チピファルニブに対する全身性曝露は、連続静脈内注入（２００ｍｇ／日）または２時間静脈内注入（１００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．）としての投与後に同等であった。再び、血漿濃度−時間プロフィルの形における違いにも拘らず、平均ＡＵＣ０−１０ｈ値は類似していた。９０％信頼区間の上限および下限（８１．１％〜１００．３％）は、８０％〜１２５％の範囲の内に入った。
【００７５】
総括すれば、投薬後の１０時間の間の血漿ＡＵＣ０−１０ｈによって測定されるようなチピファルニブの全身性曝露は、この化合物が経口錠剤（２００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．）として、２時間静脈内注入（１００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．）によって、または連続静脈内注入（２００ｍｇ／日）によって投与された場合には同等であった。平均ＡＵＣ０−１０ｈ値の狭い範囲が、３処置を越えて観察された（３９９０〜４４８７ｎｇ・ｈ／ｍｌ）。２時間静脈内注入は、プロフィルの形が考慮される場合、経口投与に一層よく類似していた。
【００７６】
血漿中のチピファルニブのタンパク質結合
チピファルニブは、分析された全サンプルにおいて血漿タンパク質に広く結合されていた（図２）。平均遊離（未結合）フラクションは、連続静脈内注入の開始後４時間に採取された血漿サンプルにおいて０．６２％（範囲０．４５〜０．８８％）であった。未結合チピファルニブのフラクションは、２１１ｎｇ／ｍｌ〜８１２ｎｇ／ｍｌの範囲で総薬物血漿濃度とは独立していた。経口投与後または２時間静脈内注入後に採取された被験者サンプルからのタンパク質結合に関するデータは得られていない。しかしながら、４日間の２００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．経口投与後の中央血漿濃度は、１０時間の用量期間中、１５９ｎｇ／ｍｌ〜７８８ｎｇ／ｍｌの範囲にある。
【００７７】
血清アルブミン、α１−酸性糖タンパク質、および総タンパク質の平均濃度（範囲）は、それぞれ、４．１ｇ／１００ｍｌ（３．１〜４．７ｇ／ｍｌ）、１３１ｍｇ／１００ｍｌ（９０〜２１８ｍｇ／１００ｍｌ）、および６．８ｇ／１００ｍｌ（４．７〜７．９ｇ／ｍｌ）であった。
【００７８】
血漿中のチピファルニブの代謝物
チピファルニブ代謝物の血漿薬物動態が、経口錠剤（２００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．）、２時間静脈内注入（６０および１００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．）または連続静脈内注入（１２０および２００ｍｇ／日）として４日投与後、４、８および１２日目に分析された。分析された代謝物は、Ｒ１３０５２５、Ｒ１０１７６３、Ｒ１０４２０９、チピファルニブ−グルクロニド、Ｒ１３０５２５−グルクロニド、およびＲ１０４２０９−グルクロニドを含んだ。これらの代謝物の化学構造は、Ｇａｒｎｅｒ  ＲＣらによって例証された。全身性循環において観察された主要代謝物はＲ１３０５２５およびチピファルニブ−グルクロニドであった（図３）。静脈内経路において決定されたチピファルニブの主要および少代謝物は、経口投与におけるそれらと同一であった。
【００７９】
一般に、チピファルニブ−グルクロニド代謝物に対する全身性曝露（ＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１０ｈ）は、静脈内に投与されたチピファルニブ用量における増大とともに増大した（表ＶＩ）（図６）。並列で比較すると、１２日目のチピファルニブ−グルクロニド代謝物への曝露は、それ以前の１１日の投与からは増大しなかった（データ未掲載）。チピファルニブに対してチピファルニブ−グルクロニドについてのＡＵＣ０−１０ｈ値の平均比率は経口投与では１８．６、１００ｍｇ２時間静脈内注入では７．５、そして２００ｍｇ連続静脈内注入では８．６であった。全体的に、血漿中の親化合物に対するグルクロニドの濃度比は、静脈内投与に較べて、チピファルニブの経口投薬後には、より高かった。このことは、多分、経口経路を介する投薬に関連する肝臓の一次通過効果（ｆｉｒｓｔ−ｐａｓｓ  ｅｆｆｅｃｔ）（すなわち、全身性吸収前の親化合物の損失）によるものであろう。
【００８０】
Ｒ１３０５２５代謝物に対する全身性曝露（ＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１０ｈ）は、静脈内に投与されたチピファルニブ用量における増大とともに増大した（表ＶＩＩ）（図７）。チピファルニブに対してＲ１３０５２５についてのＡＵＣ０−１０ｈ値の平均比率は経口投与では１／５、そして２時間静脈内注入および連続静脈内注入では約１／１０であった。
【００８１】
２００ｍｇチピファルニブの経口投与後のチピファルニブの他の代謝物もまた、血漿において測定され、これらは、Ｒ１０１７６３（Ｃｍａｘ：１４．８ｎｇ／ｍｌ、ＡＵＣ０−１０ｈ：１０１ｎｇ・ｈ／ｍｌ）、Ｒ１０４２０９（Ｃｍａｘ：６９．７ｎｇ／ｍｌ、ＡＵＣ０−１０ｈ：４４７ｎｇ・ｈ／ｍｌ）、Ｒ１３０５２５−グルクロニド（Ｃｍａｘ：５３．０ｎｇ／ｍｌ、ＡＵＣ０−１０ｈ：３２０ｎｇ・ｈ／ｍｌ）、Ｒ１０１７６３−グルクロニド（Ｃｍａｘ：１２．０ｎｇ／ｍｌ、ＡＵＣ０−１０ｈ：６３．９ｎｇ・ｈ／ｍｌ）、およびＲ１０４２０９−グルクロニド（Ｃｍａｘ：６４．０ｎｇ／ｍｌ、ＡＵＣ０−１０ｈ：４３４ｎｇ・ｈ／ｍｌ）を含んだ。これらの代謝物の濃度は、Ｒ１３０５２５およびチピファルニブ−グルクロニドの濃度よりも著しく低かった。静脈内投与後のこれらの代謝物への曝露は、経口投与後の曝露よりも低かった。
【００８２】
臨床評価
全被験者が毒性について評価可能であった。１被験者は、研究のために不適格であることが分かった；有害な事象が報告されなかったので、３日後に撤収された。１被験者は、脊髄異形成症候群を有した。この被験者は、用量の減少および遅延によって管理される、グレード３〜４の好中球減少期間を有した。血小板カウントは正常に留まった。有意な非血液学的毒性は観察されなかった。
【００８３】
グレード３または４の薬物関連血液学的毒性、好中球減少は、９／３０の患者において観察された（３０％）。熱性好中球減少が１患者において報告された（３％）。主な薬物関連の非血液学的毒性、主としてグレード１は、疲労（６０％）、嘔気（４０％）、食欲不良（２０％）、嘔吐（１７％）および下痢（１３％）であった。静脈炎は、ＩＶボーラス（ｂｏｌｕｓ）が末梢静脈接近を介して与えられた場合にすべて、３被験者において観察され；ＩＶボーラスが中心静脈を使用して与えられた場合には、これは観察されなかった。
【００８４】
３１人の被験者が有効性について評価可能であった：ＭＤＳを有する被験者は、８カ月間、血液学的改善（ＭＤＳにおける応答に関するＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ基準に対するようなヘモグロビンにおける永続性増加）を有した。目標の腫瘍応答は観察されず、そして１４被験者は少なくとも６カ月間安定した疾病を有した。
【００８５】
検討
「用量−決定」相の目的は、１日２回経口的に投与される２００ｍｇに較べて、類似の曝露を生じるであろうチピファルニブの静脈内用量処置プログラムを同定することであった。より一般的に言えば、本目的は、現存の経口投与と類似の効果を与えるのに十分な曝露を提供できる静脈内用量およびスケジュールを同定することであった。低用量の静脈内処置プログラムによる第１および第２コホートでは、チピファルニブに対する全身性曝露は、２００ｍｇ経口投与のそれよりもかなり低かった。これらの低用量処置プログラム後の用量制限毒性の不在を考慮して、最終静脈内投与用量は、本研究の「ブリッジング」相において、２時間注入としては１００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．、そして連続注入としては２００ｍｇ／日に増大された。
【００８６】
平均して、チピファルニブが、経口錠剤（２００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．）、２時間静脈内注入（１００ｍｇｂ．ｉ．ｄ．）または連続静脈内注入（２００ｍｇ／日）として投与された場合には、チピファルニブに対する曝露（ＡＵＣ０−１０ｈ）は同等であり、かつ狭い範囲（３９９０〜４４８７ｎｇ・ｈ／ｍｌ）内に入った。２つの静脈内注入処置プログラムのプロフィルの形が考慮される場合、２時間注入が、より密に経口投与を模倣した。
【００８７】
２００ｍｇチピファルニブｂ．ｉ．ｄ．用量の経口投与後の平均ＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１０ｈ値は、それぞれ、９９４ｎｇ／ｍｌおよび３９９０ｎｇ・ｈ／ｍｌであった。これは、チピファルニブの１５０−および３００−ｍｇが１日２回経口的に投与された場合の従来の研究とよく一致している（それぞれ、４４３および９７４の平均Ｃｍａｘ；それぞれ、２４９５および４６７４ｎｇ・ｈ／ｍｌのＡＵＣ０−１０ｈ値）。
【００８８】
摂食条件下で投与されたチピファルニブ錠剤の平均経口生物利用度は、４６．３％（２時間静脈内注入ｂ．ｉ．ｄ．に対して）および４０．９％（連続静脈内注入に対して）であった。これらの結果は、血漿サンプルが最終薬物投与後の１０時間にのみ収集されたので、絶対経口生物利用度の近似値を表している。しかしながら、チピファルニブが、食物とともに投与された場合に、比較的良好な生物利用度を有することは明白である。
【００８９】
ヒトにおける従来の研究は、チピファルニブが広範な代謝を受け、そして無変化の親化合物は血漿において比較的少量の構成物であることを示した。経口投与後、無変化のチピファルニブの濃度は、沈降されなかったサンプルでは総放射能濃度よりも平均４２倍低く、そして除タンパクされたサンプルでは約８倍低かった。無変化の薬物は、尿中に排泄されず、そして投与された経口用量の７％未満がチピファルニブとして便において回収された。よく合致した結果が本研究において得られた。チピファルニブ−グルクロニドの血漿ＡＵＣ０−１０ｈ値は、チピファルニブのそれよりも３〜３０倍高かった。チピファルニブは、その構造においてアミノおよびケト基を保有するので、直接抱合が期待できる。重要なことには、ＮＩＨ  ３Ｔ３  Ｈ−ｒａｓ細胞系およびファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ酵素を用いるインビトロの研究は、チピファルニブのグルクロニド代謝物がファルネシルトランスフェラーゼの阻害剤ではないことを示した。酸化的生物変換を介して生成されるチピファルニブの他の代謝物が患者の血漿において測定され、これらは、Ｒ１３０５２５およびＲ１０４２０９およびそれらのそれぞれグルクロン酸抱合物、および本研究および従来の研究におけるＲ１０１７６３を含んだ。しかしながら、これらの代謝物の濃度は、チピファルニブの濃度よりも低かった。
【００９０】
チピファルニブの２種の顕著な代謝物、グルクロン酸抱合物およびＮ−脱アルキル化種Ｒ１３０５２５への曝露は、投与されたチピファルニブの静脈内用量における増加とともに増加した。これらの経路は、研究された用量範囲内では明らかに飽和されていない。各投与経路後のＲ１３０５２５への相対的曝露は匹敵していた。反対に、グルクロン酸抱合された代謝物の血漿濃度は、静脈内投与後よりも経口投与後に約２倍高かった。経口投与後の肝臓における一次通過代謝中のより広範なグルクロン酸抱合が、チピファルニブ−グルクロニドの相対的濃度におけるこの経路に依存する差異についてのもっとも可能性のある説明である。さらに、本研究において同定された代謝物は、投与経路には依存しなかった。この結果はまた、各代謝物への曝露における一次通過代謝の代謝物に特異的な劇的影響を示している。
【００９１】
この試験におけるがん被験者でのエクスビボ測定から得られたチピファルニブの血漿タンパク質結合の値は、５人の健康な人の血漿サンプルによるインビトロ実験から得られた値（９９．２２％結合）に非常に接近している。このインビトロ研究では、これらの健康な被験者からのブランク血漿サンプルが、１０００ｎｇ／ｍｌの１４Ｃ−チピファルニブにより強化され、そして測定操作は現試験において使用されたものと同じであった。また、チピファルニブのインビトロでの血漿タンパク質結合は、１００〜５０００ｎｇ／ｍｌの範囲において総チピファルニブ濃度には依存しなかった。
【００９２】
結論として、２時間静脈内処置プログラムからの血漿濃度−時間プロフィルは、経口投与からのプロフィルに密接に類似していた。チピファルニブに対する全身性曝露は、１００ｍｇが２時間静脈内注入として１日２回与えられるか、あるいは２００ｍｇが経口経路により与えられる場合には、投薬後の最初の１０時間は同等であった。異常な有害事象は静脈内チピファルニブには伴われなかった。
【図面の簡単な説明】
【００９３】
【図１】「表１」：研究に参加している患者の人口統計学的データの総括。
【図２】「表２」：２時間の静脈内注入ｂ．ｉ．ｄ．として投与後の平均（±ＳＤ）チピファルニブ血漿ＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１０ｈ値。
【図３】「表３」：連続静脈内注入として投与後の平均（±ＳＤ）チピファルニブ血漿ＣｍａｘおよびＡＵＣ０−１０ｈ値。
【図４】「表４」：チピファルニブに対する全身性曝露：２時間の静脈内注入対経口投薬。
【図５】「表５」：チピファルニブに対する全身性曝露：連続静脈内注入対経口投薬。
【図６】「表６」：経口投与、２時間静脈内注入および連続静脈内注入後のチピファルニブ−グルクロニドの平均（±ＳＤ）血漿薬動学的パラメーター。
【図７】「表７」：経口投与、２時間静脈内注入および連続静脈内注入後のＲ１３０５２５の平均（±ＳＤ）血漿薬動学的パラメーター。
【図８】３種の４日処置プログラムの連続的投与の後のチピファルニブの平均（±ＳＤ）血漿濃度−時間プロフィル。
【図９】チピファルニブの遊離フラクションと総血漿濃度との間の相関関係。
【図１０】３種の４日処置プログラムの連続的投与の後のチピファルニブおよび誘導される代謝物の平均（±ＳＤ）血漿濃度−時間プロフィル。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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