(57)【要約】  本発明は、線維症を非侵襲的に可視化できる新規な造影剤を提供する。本発明では、造影剤の製造方法、並びにこの方法で使用する前駆体も提供し、この造影剤を含む医薬組成物並びにこの医薬を製造するためのキットも提供する。さらなる態様では、インビボイメージングを行うためのこの造影剤の使用、並びにＬＯＸが上方制御される病態を診断する薬剤の製造における造影剤の使用も提供する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）リジルオキシダーゼ（ＬＯＸ）６結合剤と、
（ｉｉ）造影基と
を含む造影剤であって、造影基がＬＯＸ結合剤の一体部分であるか、或いは適当な化学基を介してＬＯＸ結合剤と結合している造影剤。
【請求項２】
ＬＯＸ結合剤が以下の（ｉ）〜（ｉｖ）から選択される、請求項１記載の造影剤。
（ｉ）ホモシステインラクトン、
（ｉｉ）ピリダジノン、
（ｉｉｉ）ハロゲン化アリルアミン、及び
（ｉｖ）ビシナルジアミン。
【請求項３】
ＬＯＸ結合剤がホモシステインラクトンであって、次の式Ｉのものである、請求項２記載の造影剤。
【化１】
2009518373.tif 000041
式中、
Ｒ１及びＲ２は各々独立に水素、アミノ酸残基、Ｃ１−６アルキル、ハロ、Ｃ１−６ハロアルキル、ヒドロキシル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシル、Ｃ２−６アルコキシアルキル、Ｃ１−６アシル、Ｃ２−６アルカシル、Ｃ１−６カルボキシル、Ｃ２−６カルボキシアルキル、アミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、ニトロ、シアノ及びチオールからなる群から選択され、
Ｘ１及びＹ１は各々独立にＳ、Ｓｅ及びＯからなる群から選択される。
【請求項４】
Ｒ１及びＲ２が各々独立に水素、アミノ酸残基、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ２−６アルコキシアルキル、Ｃ２−６カルボキシアルキル及びＣ１−６アルキルアミノからなる群から選択される、請求項３記載の造影剤。
【請求項５】
Ｒ１が水素であり、Ｒ２がアミノ酸残基又はＣ１−６アルキルアミノである、請求項３又は請求項４記載の造影剤。
【請求項６】
ホモシステインラクトンが以下の（ｉ）〜（ｖ）から選択される、請求項３乃至請求項５のいずれか１項記載の造影剤。
（ｉ）グリシルホモシステインチオラクトン、
（ｉｉ）β−アラニルホモシステインチオラクトン、
（ｉｉｉ）γ−アミノブチリルホモシステインチオラクトン、
（ｉｖ）ε−アミノカプロイルホモシステインチオラクトン、
（ｖ）リジルホモシステインチオラクトン。
【請求項７】
上記ＬＯＸ結合剤がピリダジノンであって次式のものである、請求項２記載の造影剤。
【化２】
2009518373.tif 000042
式中、
Ｒ３及びＲ４の一方はＸ２であり、もう一方がＹ２であり、
Ｘ２は含窒素脂肪族又は芳香族五又は六員環であって、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６スルホニル及びイミダゾリルから選択される０〜４の置換基を有するものであり、
Ｙ２はフェニル基であって、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ１−６アミノアルキル及びＣ１−６アルキルアミドから選択される０〜４の置換基を有するものであり、
Ｒ５はメチル又はクロロである。
【請求項８】
Ｘ２が、ピロリル、イミダゾイル、ピラゾイル、２−ピペリジル又はピペラジルであって、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル及びＣ１−６スルホニルから選択される０〜２の置換基を有するものである、請求項７記載の造影剤。
【請求項９】
Ｘ２がイミダゾイル、２−ピペリジル又はピペラジルであって、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル及びＣ１−６スルホニルから選択される０〜２の置換基を有するものであり、Ｙ２がフェニル基であって、ヒドロキシル、フルオロ、Ｃ１−６アミノアルキル及びカルバモイルから選択される０〜２の置換基を有するものである、請求項７又は請求項８記載の造影剤。
【請求項１０】
ピリダジノンが次式の化合物から選択される、請求項７乃至請求項９のいずれか１項記載の造影剤。
【化３】
2009518373.tif 000043
【化４】
2009518373.tif 000044
【請求項１１】
ＬＯＸ結合剤がハロゲン化アリルアミンであって、次の式ＩＩＩのものである、請求項２記載の造影剤。
【化５】
2009518373.tif 000045
式中、
Ｒ６はメチル、ナフチル、インデニル、フルオレニル、ピペリジニル、ピロリル、チエニル、フラニル、インドリル、チアナフチレニル、ベンゾフラニル、或いはフェニル基であってＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ヒドロキシル、クロロ、フルオロ、ブロモ、ヨード、トリフルオロメチル、ニトロ、Ｃ２−６アルキルカルボニル、ベンゾイル及びフェニルから選択される０〜４の置換基を有するものであり、
Ｒ７は水素又はＣ１−６アルキルであり、
Ａは式−（Ｌ３）ｐ−のリンカーであり、各Ｌ３は独立に−ＣＯ−、−ＣＲ′２−、−ＣＲ′＝ＣＲ′−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＲ′２ＣＯ２−、−ＣＯ２ＣＲ′２−、−ＮＲ′−、−ＮＲ′ＣＯ−、−ＣＯＮＲ′−、−ＮＲ′（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ′−、−ＮＲ′（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ′−、−ＳＯ２ＮＲ′−、−ＮＲ′ＳＯ２−、−ＣＲ′２ＯＣＲ′２−、−ＣＲ′２ＳＣＲ′２−、−ＣＲ′２ＮＲ′ＣＲ′２−、Ｃ４−８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４−８シクロアルキレン基、Ｃ５−１２アリーレン基、Ｃ３−１２ヘテロアリーレン基、アミノ酸、ポリアルキレングリコール、ポリ乳酸又はポリグリコール酸部分であり、
ｐは０〜１０の整数であり、
各Ｒ′基は独立にＨ又はＣ１−１０アルキル、Ｃ３−１０アルキルアリール、Ｃ２−１０アルコキシアルキル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲ′基がそれらと結合した原子と共に炭素環、複素環式、飽和又は不飽和環を形成するものであり、
Ｘ３及びＹ３は各々独立に水素、フルオロ、クロロ及びブロモからなる群から選択される。
【請求項１２】
Ｒ６がフェニル基であって、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ヒドロキシル、クロロ、フルオロ、ブロモ、ヨード、トリフルオロメチル、ニトロ、Ｃ２−６アルキルカルボニル、ベンゾイル及びフェニルから選択される０〜２の置換基を有するものであり、Ｒ７が水素であり、Ａが−（ＣＨ２）ｑ−であり、ｑが１〜６の整数であり、Ｘ３が水素である、請求項１１記載の造影剤。
【請求項１３】
Ｒ６が、クロロ、フルオロ、ブロモ及びヨードから選択される１〜２の置換基で適宜置換されたフェニル基であり、Ａが−（ＣＨ２）ｑ−であり、ｑが１〜６の整数であり、Ｘ３が水素であり、Ｙ３がフルオロである、請求項１１又は請求項１２記載の造影剤。
【請求項１４】
ハロゲン化アリルアミンが次の式のものである、請求項１１乃至請求項１３のいずれか１項記載の造影剤。
【化６】
2009518373.tif 000046
【請求項１５】
ビシナルジアミンが次の式ＩＶのものである、請求項２記載の造影剤。
【化７】
2009518373.tif 000047
式中、
Ｒ８及びＲ９は各々独立に水素又はＣ１−６アルキルであるか、或いはＲ８とＲ９がそれらに結合した炭素と共に適宜置換された六〜十四員脂肪族又は芳香族環系を形成するものである。
【請求項１６】
式ＩＶの複数の第一アミンが同一の立体化学平面上に配列されている、請求項１５記載の造影剤。
【請求項１７】
Ｒ８及びＲ９がそれらに結合した炭素と共に適宜Ｃ１−３アルキル及びハロから選択される１〜３の置換基で置換されたシクロヘキシル又はジシクロヘキシル環を形成している、請求項１５又は請求項１６記載の造影剤。
【請求項１８】
造影基が以下（ｉ）〜（ｖｉｉ）から選択される、請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載の造影剤。
（ｉ）放射性金属イオン、
（ｉｉ）常磁性金属イオン、
（ｉｉｉ）γ線放出型放射性ハロゲン、
（ｉｖ）陽電子放出型放射性非金属、
（ｖ）過分極ＮＭＲ活性核種、
（ｖｉ）インビボ光学イメージングに適したレポーター、及び
（ｖｉｉ）血管内検出に適したβ線放射体。
【請求項１９】
造影基が放射性金属イオンである、請求項１８記載の造影剤。
【請求項２０】
放射性金属イオンが９９ｍＴｃである請求項１９記載の造影剤。
【請求項２１】
造影基がγ線放出型放射性ハロゲンである、請求項１８記載の造影剤。
【請求項２２】
γ線放出型放射性ハロゲンが１２３Ｉ及び１３１Ｉから選択される、請求項２１記載の造影剤。
【請求項２３】
造影基が陽電子放出型放射性非金属である、請求項１８記載の造影剤。
【請求項２４】
前記陽電子放出型放射性非金属が１８Ｆである、請求項２３記載の造影剤。
【請求項２５】
前駆体と請求項１又は請求項１８乃至請求項２４のいずれか１項記載の適当な造影基源との反応を含む、請求項１乃至請求項２４のいずれか１項記載の造影剤の製造方法であって、上記前駆体が、
（ｉ）請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載のＬＯＸ結合剤と、
（ｉｉ）造影基源と反応し得る化学基であって、請求項１乃至請求項２４のいずれか１項記載の造影剤を生成じる化学基と
を含んでおり、上記化学基がＬＯＸ結合剤の一体部分であるか或いはＬＯＸ結合剤と結合している、方法。
【請求項２６】
化学基が、
（ｉ）金属造影基と錯形成し得るキレート剤、
（ｉｉ）トリアルキルスタンナン又はトリアルキルシランのような有機金属誘導体、
（ｉｉｉ）求核置換反応のためのアルキルハライド、アルキルトシレート又はアルキルメシレートを含有する誘導体、
（ｉｖ）求核又は求電子置換反応用の活性化芳香族環を含む誘導体、
（ｖ）容易にアルキル化を起こす官能基を有する誘導体、又は
（ｖｉ）チオール含有化合物とのアルキル化によってチオエーテル含有生成物を生じる誘導体
を含む、請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
前駆体が無菌の非発熱性の形態である、請求項２５又は請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
前駆体が固相と結合している、請求項２５乃至請求項２７のいずれか１項記載の方法。
【請求項２９】
請求項２５乃至請求項２８のいずれか１項記載の方法に定義された前駆体であって、化学基が、
（ｉ）金属造影基と錯形成し得るキレート剤、
（ｉｉ）トリアルキルスタンナン又はトリアルキルシランのような有機金属誘導体、
（ｉｉｉ）求核置換反応のためのアルキルハライド、アルキルトシレート又はアルキルメシレートを含有する誘導体、又は
（ｉｖ）チオール含有化合物とのアルキル化によってチオエーテル含有生成物を生じる誘導体
を含む、前駆体。
【請求項３０】
請求項１乃至請求項２４のいずれかの造影剤を生体適合性担体と共にヒトへの投与に適した形態で含む医薬組成物。
【請求項３１】
造影剤が放射性造影基を含む、請求項３０記載の医薬組成物。
【請求項３２】
一人の患者に適した放射性用量を有していて適当なシリンジ又は容器で供給され、る請求項３１記載の医薬組成物。
【請求項３３】
請求項３０乃至請求項３２のいずれか１項記載の医薬組成物の製造用キットであって、請求項２９記載の前駆体を含むキット。
【請求項３４】
インビボ診断又はイメージング法法に用いられる請求項１乃至請求項２４記載の造影剤。
【請求項３５】
前記方法がＬＯＸが上方制御される病態のインビボイメージングに関する、請求項３４記載の造影剤。
【請求項３６】
ＬＯＸが上方制御される病態が線維症に関連した、病態である請求項３５記載の造影剤。
【請求項３７】
前記線維症に関連した病態が、肝線維症、うっ血性心不全、糸球体硬化症又は呼吸不全である、請求項３６記載の造影剤。
【請求項３８】
前記線維症に関連した病態が肝線維症である、請求項３７記載の造影剤。
【請求項３９】
ＬＯＸが上方制御される病態にある対象でインビボ診断又はイメージングを行う方法であって、請求項３０乃至請求項３２の医薬組成物を投与することを含んでなる方法。
【請求項４０】
ＬＯＸが上方制御される病態にある対象のインビボイメージングにおける請求項１乃至請求項２４のいずれか１項記載の造影剤の使用であって、対象に請求項３０乃至請求項３２記載の医薬組成物を予め投与しておく使用。
【請求項４１】
ＬＯＸが上方制御される病態のインビボイメージング用の医薬品の製造における請求項１乃至請求項２４のいずれか１項記載の造影剤の使用。
【請求項４２】
ＬＯＸが上方制御される病態に対処するための薬剤によるヒト又は動物の身体の治療効果をモニタリングする方法であって、請求項１乃至請求項２４のいずれか１項記載の造影剤を身体に投与し、造影剤の取込を検出することを含んでなる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、画像診断、特に線維症の画像診断に関する。この目的に適した診断用造影剤、特に肝臓、心臓、腎臓及び肺の線維症の画像診断に適した診断用造影剤について開示する。
【背景技術】
【０００２】
線維症は、細胞外マトリックス成分の過剰分泌を特徴とするプロセスである。これは、マトリックスタンパク質、特にＩ型及びＩＩＩ型コラーゲンの合成増大と分解減少によって起こり、炎症、感染又は損傷に起因する組織損傷に対する反応として引き起こされる。簡単にいうと、線維症は瘢痕組織であり、組織の「修復」プロセス全体の一部をなす。しかし、炎症や感染の進行及び損傷の繰り返しによって、線維症の瘢痕組織が増加し、「機能性」細胞に置き換えられないので、臓器の機能に異常をきたし、ひいては臓器不全を招く。
【０００３】
線維症は医学における重要で古典的な病理過程の一つである。以下に挙げるような世界中で何百万人もの人々が罹患する多くの疾患の重要な構成要素である。
ａ）特発性肺線維症（原因不明の肺線維症）、喘息及び慢性閉塞性肺疾患のような肺疾患、
ｂ）強皮症：体内の結合組織（すなわち、皮膚及び内蔵）中での細胞外マトリックスの過剰蓄積を特徴とする重篤な不均質疾患、
ｃ）移植後の手術後瘢痕、
ｄ）糖尿病性網膜症及び加齢性黄斑変性症（目の線維性疾患で、失明の最大の原因）、
ｅ）アテローム性動脈硬化症及び不安定プラークを始めとする循環器病、
ｆ）糖尿病に関連した腎線維症：糖尿病性腎症及び糸球体硬化症、
ｇ）ＩｇＡ腎症（腎不全の原因であり、透析及び再移植が必要となる。）、
ｈ）肝硬変及び胆道閉鎖症（肝線維症及び肝不全の最大の原因）、
ｉ）関節リウマチ、
ｊ）皮膚筋炎のような自己免疫疾患、
ｋ）うっ血性心不全。
【０００４】
線維症の臨床症状は変化に富む。肝硬変を例にとると、臨床症状は、症状の全くないものから肝不全まで様々であり、根底にある肝疾患の性状及び程度、さらには肝線維症の程度によって決まる。肝硬変の患者の４０％以下は無症状で、十年以上無症状であることもあるが、ひとたび腹水、静脈瘤出血、脳症などの合併症を発症すると、進行性機能低下は避けられない。肝線維症及び肝硬変は、ウイルス、自己免疫、薬物性、コレステロール性及び代謝疾患を始めとする様々な原因に由来する慢性肝障害の持続性創傷治癒反応の結果であるといえる。肝線維症及び肝硬変の一般的原因としては、免疫媒介障害、遺伝的異常、糖尿病やメタボリックシンドローム（ＭＳ）に付随することが特に多い非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）が挙げられる。西欧ではメタボリックシンドローム（ＭＳ）の割合が高い。メタボリックシンドロームは通例肥満で高脂血症や高血圧の個体で起こり、ＩＩ型糖尿病の発症につながることが多い。メタボリックシンドロームの肝臓での症状は、非アルコール性脂肪肝症（ＮＡＦＬＤ）であり、米国での推定罹患率は人口の２４％である。脂肪肝は、非アルコール性脂肪肝症ＮＡＦＬＤの一群の症状としては軽いものであるが、進行すると、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）やひいては肝硬変になる。線維症の発症はかかる進行のリスクを示し、現在では肝臓の生検によって診断されている。しかし、肝臓の生検は、相当の不快感を伴い、リスクもあり、費用もかさむ。さらに、肝線維症に関して現在利用可能な血液検査は、ＮＡＦＬＤにおいては信頼性に欠ける。
【０００５】
コラーゲンの強度は、原繊維内及び原繊維間の各種のリジン残基の架橋によって実現されている。この架橋の最初の過程は、リジン及びヒドロキシリジン残基が、リジルオキシダーゼ酵素（ＬＯＸ）によって脱アミノ化され、アルデヒド基を生じる過程である。こうして生じた高度に反応性の基が、架橋を生じる。いくつもの特許文献に、ＬＯＸ結合剤を線維症の治療に利用することが記載されている。
【０００６】
国際公開第９６／０４０７４６号には、各種の病理学的な線維性の障害又は異常の制御又は治療に有用な抗繊維化剤が記載されている。ホモシステインチオラクトン及びその同族体は、ＬＯＸの活性をＩＣ５０値４〜２５μＭの範囲で阻害することが示されている。
【０００７】
国際公開第０３／０９７６１２号には、繊維症の治療に有用な２−フェニル−３（２Ｈ）−ピリダジノンが記載されている。この特許出願に記載された化合物は、ＬＯＸの活性を、ＩＣ５０値０．００５〜０．０７μＭの範囲で阻害することが示されている。
【０００８】
米国特許第５２５２６０８号には、ハロゲン化アリルアミンを使用したコラーゲンの異常な堆積を伴う疾患の治療方法が記載されている。これらの化合物は、ＬＯＸ活性を、ＩＣ５０値０．０００１〜１μＭの範囲で阻害することが示されている。
【０００９】
米国特許第４９９７８５４号には、リジルオキシダーゼの基質阻害剤類縁体として作用し、線維症の治療に利用できる一群のジアミン抗繊維化剤が記載されている。マイクロモルレベルのＩＣ５０値が、いくつかの具体的化合物について報告されている。
【特許文献１】国際公開第９６／０４０７４６号パンフレット
【特許文献２】国際公開第０３／０９７６１２号パンフレット
【特許文献３】米国特許第５２５２６０８号明細書
【特許文献４】米国特許第４９９７８５４号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
上述の先行技術文献のいずれにも、ＬＯＸ結合剤を診断用の造影剤として利用することは開示されていない。そこで、線維症、特に肝線維症を検出するための非侵襲性の検査が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、線維症の非侵襲的な可視化に適した造影剤を提供する。本発明では、造影剤の製造方法、並びに該方法で用いる前駆体も提供する。本発明は、造影剤を含む医薬組成物、並びに医薬組成物の調製用キットも提供する。本発明の別の態様では、インビボイメージング並びにＬＯＸが上方制御される病態を診断するための薬剤の製造における造影剤の使用を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明の一態様では、
（ｉ）リジルオキシダーゼ（ＬＯＸ）結合剤と、
（ｉｉ）造影基と
を含む造影剤であって、造影基がＬＯＸ結合剤の一体部分であるか、或いは適当な化学基を介してＬＯＸ結合剤と結合している造影剤を提供する。
【００１３】
「造影剤」という用語は、哺乳類の特定の生理又は病態生理をターゲティングするように設計された化合物であって、哺乳類の身体に投与した後でインビボで検出できる化合物を意味する。
【００１４】
本発明の造影剤では、造影基はＬＯＸ結合剤の一体部分として存在していてもよく、例えば、ＬＯＸ結合剤の構成原子の１つを１２Ｃでなく１１Ｃとすることもできる。或いは、造影基は、適当な化学基（例えば、金属イオンである造影基と錯形成できる金属キレート）を介してＬＯＸ結合剤に結合していてもよい。ＬＯＸ結合剤を適当な化学基又は直接造影基自体に結合するためのリンカーが存在していてもよい。本発明の適当なリンカーは式−（Ｌ１）ｎ−のものである。
式中、
各Ｌ１は独立に−ＣＯ−、−ＣＲ２−、−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＲ２ＣＯ２−、−ＣＯ２ＣＲ２−、−ＮＲ−、−ＮＲ′ＣＯ−、−ＣＯＮＲ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ−、−ＳＯ２ＮＲ−、−ＮＲ′ＳＯ２−、−ＣＲ２ＯＣＲ２−、−ＣＲ２ＳＣＲ２−、−ＣＲ２ＮＲ′ＣＲ２−、Ｃ４−８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４−８シクロアルキレン基、Ｃ５−１２アリーレン基、Ｃ３−１２ヘテロアリーレン基、アミノ酸残基、ポリアルキレングリコール、ポリ乳酸又はポリグリコール酸部分であり、
ｎは０〜１５の整数であり、
各Ｒ基は独立にＨ、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ３−１０アルキルアリール、Ｃ２−１０アルコキシアルキル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル又はＣ１−１０フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲ基がそれらに結合した原子と共に炭素環、複素環式、飽和又は不飽和環を形成したものである。
【００１５】
枝分れリンカー基、つまりＲ″基を末端とする別のリンカー−（Ｌ２）ｏ−でさらに置換されたリンカー基−（Ｌ１）ｎ−（Ｌ２、ｏ及びＲ′はそれぞれＬ１、ｎ及びＲについて定義した通りである。）も利用できる。
【００１６】
かかるリンカーは、造影剤の体内分布及び／又は分泌プロファイルを操作する場合に特に有用である。例えば、ポリエチレングリコール基又はアセチル基を含むリンカーを導入すると、造影剤の血液滞留時間を改善することができる。
【００１７】
「アミノ酸」という用語は、Ｌ−若しくはＤ−アミノ酸、アミノ酸類似体（ナフチルアラニンなど）又はアミノ酸模倣体を意味し、これらは天然のものであっても純粋な合成品であってもよく、光学的に純粋、つまり単一の鏡像異性体でキラルなものであってもよいし、鏡像異性体の混合物であってもよい。好ましくは、本発明のアミノ酸は光学的に純粋である。
【００１８】
かかるリンカーは、以下で説明する本発明の他の部分についても有用である。本発明では、好ましいＬ１基及びＬ２基は、−ＣＯ−、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＣＨ２ＯＣＨ２−及びアミノ酸残基である。
【００１９】
「リジルオキシダーゼ（ＬＯＸ）結合剤」という用語は、本発明では、インビトロで、１００ｎＭ未満、好ましくは５０ｎＭ未満、最も好ましくは１０ｎＭ未満のＫｄ値でＬＯＸに結合できる化合物を意味する。好ましい実施形態では、ＬＯＸ結合剤は、（例えば、国際公開第９６／０４０７４６号に記載の通り）、ＬＯＸの酵素活性をインビトロで、１０μＭ未満、好ましくは１μＭ未満、最も好ましくは０．１μＭ未満、特に好ましくは０．０１μＭ未満のＩＣ５０値で阻害することができる。
【００２０】
好ましくは、ＬＯＸ結合剤は、以下の（ｉ）〜（ｖ）から選択される。
（ｉ）ホモシステインラクトン、
（ｉｉ）ピリダジノン、
（ｉｉｉ）ハロゲン化アリルアミン、
（ｉｖ）ビシナルジアミン、及び
（ｖ）β−アミノプロプリオンニトリル及びその誘導体。
【００２１】
最も好ましくは、ＬＯＸ結合剤はホモシステインラクトン、ハロゲン化アリルアミン又はビシナルジアミンである。
【００２２】
ＬＯＸ結合剤がホモシステインラクトンの場合、ホモシステインラクトンは好ましくは次の式Ｉのものである。
【００２３】
【化１】
2009518373.tif 000002
式中、
Ｒ１及びＲ２は各々独立に水素、アミノ酸残基、Ｃ１−６アルキル、ハロ、Ｃ１−６ハロアルキル、ヒドロキシル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシル、Ｃ２−６アルコキシアルキル、Ｃ１−６アシル、Ｃ２−６アルカシル、Ｃ１−６カルボキシル、Ｃ２−６カルボキシアルキル、アミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、ニトロ、シアノ及びチオールからなる群から選択され、
Ｘ１及びＹ１は各々独立にＳ、Ｓｅ及びＯからなる群から選択される。
【００２４】
式Ｉについて、好ましくは、Ｒ１及びＲ２は各々独立に水素、アミノ酸、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ２−６アルコキシアルキル、Ｃ２−６カルボキシアルキル、Ｃ１−６アルキルアミノからなる群から選択される。
【００２５】
式Ｉについて、最も好ましくは、Ｒ１は水素であり、Ｒ２はアミノ酸又はＣ１−６アルキルアミノである。
【００２６】
好適なホモシステインラクトンの例としては、以下の（ｉ）〜（ｖ）が挙げられる。
（ｉ）グリシルホモシステインチオラクトン、
（ｉｉ）β−アラニルホモシステインチオラクトン、
（ｉｉｉ）γ−アミノブチリルホモシステインチオラクトン、
（ｉｖ）ε−アミノカプロイルホモシステインチオラクトン、
（ｖ）リジルホモシステインチオラクトン。
【００２７】
上記の好適なホモシステインラクトンの合成方法は国際公開第９６／０４０７４６号に記載されている。
【００２８】
ＬＯＸ結合剤がピリダジノンである場合、ピリダジノンは好ましくは次式のものである。
【００２９】
【化２】
2009518373.tif 000003
式中、
Ｒ３及びＲ４の一方はＸ２であり、もう一方はＹ２であり、
Ｘ２は含窒素脂肪族又は芳香族五又は六員環であって、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６スルホニル及びイミダゾリルから選択される０〜４の置換基を有するものであり、
Ｙ２はフェニル基であって、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ１−６アミノアルキル及びＣ１−６アルキルアミドから選択される０〜４の置換基を有するものであり、
Ｒ５は、メチル又はクロロである。
【００３０】
式ＩＩについて、好ましくは、Ｘ２はピロリル、イミダゾイル、ピラゾイル、ピペリジル又はピペラジルであって、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル及びＣ１−６スルホニルから選択される０〜２の置換基を有するものである。
【００３１】
式ＩＩについて、最も好ましくは、Ｘ２はイミダゾイル、ピペリジル又はピペラジルであって、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル及びＣ１−６スルホニルから選択される０〜２の置換基を有するものであり、Ｙ２はフェニル基であって、ヒドロキシル、フルオロ、Ｃ１−６アミノアルキル及びカルバモイルから選択される０〜２の置換基を有するものである。
【００３２】
本発明の好ましいピリダジノンの例としては、以下のものが挙げられる。
【００３３】
【化３】
2009518373.tif 000004
【００３４】
【化４】
2009518373.tif 000005
上述のホモシステインラクトンの合成方法は国際公開第９６／０４０７４６号に記載されている。
【００３５】
上記ＬＯＸ結合剤がピリダジノンの場合、ＬＯＸ結合剤は好ましくは次の式ＩＩＩのものである。
【００３６】
【化５】
2009518373.tif 000006
式中、Ｒ６は、メチル、ナフチル、インデニル、フルオレニル、ピペリジニル、ピロリル、チエニル、フラニル、インドリル、チアナフチレニル、ベンゾフラニル、或いはフェニル基であってＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ヒドロキシル、クロロ、フルオロ、ブロモ、ヨード、トリフルオロメチル、ニトロ、Ｃ２−６アルキルカルボニル、ベンゾイル及びフェニルから選択される０〜４の置換基を有するものであり、
Ｒ７は、水素又はＣ１−６アルキルであり、
Ａは、式−（Ｌ３）ｐ−のリンカーであって、Ｌ３及びｐはそれぞれＬ１及びｎについて定義した通りであり、
Ｘ３及びＹ３は各々独立に水素、フルオロ、クロロ及びブロモからなる群から選択される。
【００３７】
式ＩＩＩについて、好ましくは、Ｒ６はフェニル基であって、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ヒドロキシル、クロロ、フルオロ、ブロモ、ヨード、トリフルオロメチル、ニトロ、Ｃ２−６アルキルカルボニル、ベンゾイル及びフェニルから選択される０〜２の置換基を有するものであり、Ｒ７は水素であり、Ａは−（ＣＨ２）ｑ−であって、ｑは１〜６の範囲であり、Ｘ３は水素である。
【００３８】
式ＩＩＩについて、最も好ましくは、Ｒ６は、クロロ、フルオロ、ブロモ及びヨードから選択される１〜２の置換基で適宜置換されたフェニル基であり、Ａは−（ＣＨ２）ｑ−であって、ｑは１〜６の範囲であり、Ｘ３は水素であり、Ｙ３はフルオロである。
【００３９】
式ＩＩＩの化合物には、二重結合が１つ又は２つ存在しているので、幾何異性の可能性もあり、すなわち、アリルアミンの二重結合と、場合によってはＡ基において幾何異性の可能性がある。本発明は、実質的に純粋な異性体と、異性体の混合物の両方を包含するものである。Ｘ３及びＹ３の一方がハロゲンで、もう一方が水素であるような化合物では、ハロゲンは好ましくは−Ａ−Ｒ６基に対してシスで配向する。
【００４０】
本発明のハロゲン化アリルアミンの例は、次式のものである。
【００４１】
【化６】
2009518373.tif 000007
上記ハロゲン化アリルアミンの合成方法は米国特許第５２５２６０８号に記載されている。
【００４２】
ＬＯＸ結合剤がビシナルジアミンである場合、ビシナルジアミンは好ましくは次の式ＩＶのものである。
【００４３】
【化７】
2009518373.tif 000008
式中、Ｒ８及びＲ９は各々独立に水素又はＣ１−６アルキルであるか、或いはＲ８とＲ９がそれらに結合した炭素と共に適宜置換された脂肪族又は芳香族六員環〜１４員環の系を形成するものである。
【００４４】
式ＩＶの２つの１級アミン基が、同じ立体化学平面上に配列しているのが好ましい。したがって、ビシナルジアミンが不飽和であったり、環状構造を有する場合、分子の立体配置は、トランスではなく、シスの配向とすべきである。
【００４５】
式ＩＶのビシナルジアミンの合成方法は、Ｇａｃｈｅｒｕ  ｅｔ  ａｌ，  １９８９，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４（２２）ｐｐ．１２９６３−９並びに米国特許第４９９７８５４号に概述されている。
【００４６】
式ＩＶの化合物については、好ましくは、Ｒ８とＲ９がそれらに結合した炭素と共に置換シクロヘキシル又は置換ジシクロヘキシルを形成しており、置換基は好ましくはＣ１−３アルキル及びハロから選択される。
【００４７】
式ＩＶの化合物として最も好ましいのは、以下の式ＩＶａ及びＩＶｂの化合物である。
【００４８】
【化８】
2009518373.tif 000009
式中、Ｒ＊は、メチル、メトキシ、クロロ、フルオロ又はブロモである。
「造影基」は患者の体外から検出してもよいし、或いはインビボ用に設計された検出機器、例えば血管内放射線又は光学検出機器（内視鏡など）又は術中用に設計された放射線検出機器を使用することによって検出してもよい。
【００４９】
造影基は、好ましくは、以下の（ｉ）〜（ｖｉｉ）から選択される。
（ｉ）放射性金属イオン、
（ｉｉ）常磁性金属イオン、
（ｉｉｉ）γ線放出型放射性ハロゲン、
（ｉｖ）陽電子放出型放射性非金属、
（ｖ）過分極ＮＭＲ活性核種、
（ｖｉ）インビボ光学イメージングに適したレポーター、
（ｖｉｉ）血管内検出に適したβ線放射体。
【００５０】
造影基が放射性金属イオンつまり放射性金属である場合、好適な放射性金属は、６４Ｃｕ、４８Ｖ、５２Ｆｅ、５５Ｃｏ、９４ｍＴｃ又は６８Ｇａのような陽電子放射体、或いは９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、１１３ｍＩｎ又は６７Ｇａのようなγ線放射体である。好ましい放射性金属は９９ｍＴｃ、６４Ｃｕ、６８Ｇａ及び１１１Ｉｎである。最も好ましい放射性金属はγ放射体、特に９９ｍＴｃである。
【００５１】
造影基が常磁性金属イオンである場合、かかる金属イオンの好適なものとして、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｃｕ（ＩＩ）、Ｃｒ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｃｏ（ＩＩ）、Ｅｒ（ＩＩ）、Ｎｉ（ＩＩ）、Ｅｕ（ＩＩＩ）又はＤｙ（ＩＩＩ）が挙げられる。好ましい常磁性金属イオンはＧｄ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）及びＦｅ（ＩＩＩ）であり、Ｇｄ（ＩＩＩ）が特に好ましい。
【００５２】
造影基がγ線放出型放射性ハロゲンである場合、放射性ハロゲンは好適には１２３Ｉ、１３１Ｉ又は７７Ｂｒから選択される。１２５Ｉは、画像診断用の造影基としての使用には適していないので、特に除外してある。好ましいγ線放出型放射性ハロゲンは１２３Ｉである。
【００５３】
造影基が陽電子放出型放射性非金属である場合、かかる陽電子放射体の好適なものとして、１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１７Ｆ、１８Ｆ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ又は１２４Ｉが挙げられる。好ましい陽電子放出型放射性非金属は１１Ｃ、１３Ｎ、１８Ｆ及び１２４Ｉであり、特に好ましくは１１Ｃ及び１８Ｆであり、最も好ましくは１８Ｆである。
【００５４】
造影基が過分極ＮＭＲ活性核種である場合、かかるＮＭＲ活性核種はゼロ以外の核スピンを有し、１３Ｃ、１５Ｎ、１９Ｆ、２９Ｓｉ及び３１Ｐが挙げられる。これらのうち、１３Ｃが好ましい。「過分極」という用語は、ＮＭＲ活性核種の分極の程度がその平衡分極を超えていることを意味する。１３Ｃの天然存在量（１２Ｃに対して）は約１％であり、適当な１３Ｃ標識化合物は過分極する前に好適には５％以上、好ましくは５０％以上、最も好ましくは９０％以上の存在量となるように濃縮される。本発明の造影剤の１以上の炭素原子は好適には１３Ｃで濃縮され、これを次いで過分極させる。
【００５５】
造影基がインビボ光学イメージングに適したレポーターである場合、レポーターは光学イメージング法で直接又は間接的に検出できる部分であればよい。レポーターは光散乱体（例えば着色又は未着色粒子）でも、光吸収体でも、発光体でもよい。さらに好ましくは、レポーターは発色団又は蛍光化合物のような色素である。色素は紫外乃至近赤外域の波長を有する電磁スペクトルの光と相互作用する色素であればよい。最も好ましくはレポーターは蛍光特性を有する。
【００５６】
好ましい有機発色団及び蛍光団レポーターとしては、広範な非局在化電子系を有する基、例えばシアニン、メロシアニン、インドシアニン、フタロシアニン、ナフタロシアニン、トリフェニルメチン、ポルフィリン、ピリリウム色素、チアピリリウム色素、スクアリリウム色素、クロコニウム色素、アズレニウム色素、インドアニリン、ベンゾフェノキサジニウム色素、ベンゾチアフェノチアジニウム色素、アントラキノン、ナフトキノン、インダスレン、フタロイルアクリドン、トリスフェノキノン、アゾ色素、分子内及び分子間電荷移動色素及び色素鎖体、トロポン、テトラジン、ビス（ジチオレン）鎖体、ビス（ベンゼン−ジチオレート）鎖体、ヨードアニリン色素、ビス（Ｓ，Ｏ−ジチオレン）鎖体が挙げられる。蛍光タンパク質、例えば緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）及び吸収／発光特性の異なるＧＦＰの修飾体も有用である。ある種の希土類金属（例えばユーロピウム、サマリウム、テルビウム又はジスプロシウム）の鎖体も、蛍光ナノ結晶（量子ドット）と同様に、特定の状況で用いられる。
【００５７】
使用し得る発色団の具体例としては、フルオレセイン、スルホローダミン１０１（テキサスレッド）、ローダミンＢ、ローダミン６Ｇ、ローダミン１９、インドシアニングリーン、Ｃｙ２、Ｃｙ３、Ｃｙ３．５、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、Ｃｙ７、マリーナブルー、パシフィックブルー、オレゴングリーン８８、オレゴングリーン５１４、テトラメチルローダミン並びにＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ３５０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４３０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５３２、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５４６、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５５５、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５６８、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５９４、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６３３、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６６０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６８０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ７００及びＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ７５０が挙げられる。
【００５８】
特に好ましいのは、４００ｎｍ〜３μｍ、特に６００〜１３００ｎｍの可視又は近赤外（ＮＩＲ）域に吸収極大を有する色素である。光学イメージングモダリティ及び測定法としては、特に限定されないが、発光イメージング、内視鏡検査、蛍光内視鏡検査、光干渉断層撮影、透過イメージング、時間分解透過イメージング、共焦点イメージング、非線形顕微鏡、光音響イメージング、音響光学イメージング、分光法、反射分光法、干渉分光法、コヒーレンス干渉法、拡散光トモグラフィー及び蛍光媒介拡散光トモグラフィー（連続波、時間領域及び周波数領域システム）、並びに光散乱、吸収、偏光、発光、蛍光寿命、量子収率及び消光の測定が挙げられる。
【００５９】
造影基が血管内検出に適したβ線放射体である場合、かかるβ線放射体の好適なものとして、放射性金属の６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、９０Ｙ、１５３Ｓｍ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ又は１９２Ｉｒ並びに非金属の３２Ｐ、３３Ｐ、３８Ｓ、３８Ｃｌ、３９Ｃｌ、８２Ｂｒ及び８３Ｂｒが挙げられる。
【００６０】
造影基が血管内検出に適したβ線放射体である場合、かかるβ線放射体の好適なものとして、放射性金属の６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、９０Ｙ、１５３Ｓｍ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ又は１９２Ｉｒ並びに非金属の３２Ｐ、３３Ｐ、３８Ｓ、３８Ｃｌ、３９Ｃｌ、８２Ｂｒ及び８３Ｂｒが挙げられる。
【００６１】
好ましい造影基は、インビボ投与後に、非侵襲的方法で外部から検出できるものである。最も好ましい造影基は、放射性、特に放射性金属イオン、γ線放出型放射性ハロゲン及び陽電子放出型放射性非金属、特にＳＰＥＣＴ又はＰＥＴを用いたイメージングに適したものである。
【００６２】
本発明の好ましい造影剤はインビボで容易に代謝されず、最も好ましくは人体で６０〜２４０分のインビボ半減期を示す。造影剤は好ましくは腎臓経由で排泄（つまり尿中排泄）される。造影剤の好ましくは病巣で１．５以上、さらに好ましくは５以上、特に好ましくは１０以上の信号対バックグラウンド比を示す。造影剤が放射性同位体を含む場合、生体内で非特異的に結合しているか或いは遊離している造影剤のピーク値の半量のクリアランスは、好ましくは造影基の放射性同位体の放射性崩壊の半減期以下の時間で起こる。
【００６３】
また、造影剤の分子量は好適には５０００Ｄａ以下である。好ましくは、分子量は１５０〜３０００Ｄａ、最も好ましくは２００〜１５００Ｄａの範囲であり、３００〜８００Ｄａであるのが特に好ましい。
【００６４】
ＬＯＸ結合剤が式Ｉのホモシステインラクトンである好ましい実施形態では、造影基はＲ１又はＲ２、好ましくはＲ２の一体部分であり、例えば以下のものである。
【００６５】
【化９】
2009518373.tif 000010
ＬＯＸ結合剤が式Ｉのホモシステインラクトンである別の好ましい実施形態では、造影基はＲ１又はＲ２、好ましくはＲ２に直接又は安定な化学基及び／又はリンカーを介して結合しており、例えば以下のものである。
【００６６】
【化１０】
2009518373.tif 000011
造影剤３及び４を得るための合成経路をそれぞれ実施例４及び５に示す。
【００６７】
ＬＯＸ結合剤が式ＩＩのピリダジノンである好ましい実施形態では、造影基はＲ３又はＲ４、好ましくはＲ４の一体部分であり、例えば以下のものである。
【００６８】
【化１１】
2009518373.tif 000012
ＬＯＸ結合剤が式ＩＩのピリダジノンである別の好ましい実施形態では、造影基はＲ３又はＲ４、好ましくはＲ４に直接又は安定な化学基及び／又はリンカーを介して結合しており、例えば以下のものである。
【００６９】
【化１２】
2009518373.tif 000013
式中、Ｔｃは９９ｍＴｃである。
【００７０】
ＬＯＸ結合剤が式ＩＩＩのハロゲン化アリルアミンである好ましい実施形態では、造影基はＲ６、Ｒ７又はＹ２、最も好ましくはＲ７の一体部分であり、例えば以下のものである。
【００７１】
【化１３】
2009518373.tif 000014
造影剤９の非放射性型のものの合成については、実施例１１に記載した。
【００７２】
ＬＯＸ結合剤が式ＩＩＩのハロゲン化アリルアミンである別の好ましい実施形態では、造影基はＲ６、Ｒ７又はＹ２、最も好ましくはＲ７に直接又は安定な化学基及び／又はリンカーを介して結合しており、例えば以下のものである。
【００７３】
【化１４】
2009518373.tif 000015
ＬＯＸ結合剤が式ＩＶのビシナルジアミンである好ましい実施形態では、造影基はＲ８及び／又はＲ９に結合している。
【００７４】
【化１５】
2009518373.tif 000016
上記化合物を得るための合成経路を実施例１０に示す。
【００７５】
前駆体化合物を経る造影剤の合成については、本発明の別の態様に関連して、以下で詳しく説明する。
【００７６】
別の態様では、本発明は、前駆体と適当な造影基源との反応を含む、本発明の造影剤の製造方法であって、上記前駆体が、
（ｉ）上記で定義したＬＯＸ結合剤と、
（ｉｉ）上記造影基源と反応して本発明の造影剤を生じる化学基と
を含んでおり、上記化学基がＬＯＸ結合剤の一体部分であるか或いはＬＯＸ結合剤と結合している、方法を提供する。
【００７７】
「前駆体」には、本発明のＬＯＸ結合剤の誘導体であって、適当な化学的形態の造影剤との化学反応が部位特異的に起こり、最小限の段階数（理想的には一段階）で実施でき、しかも多大な精製を行わずに（理想的にはそれ以上精製しなくても）所望の造影剤が得られるように設計されたものが包含される。かかる前駆体は合成品であり、良好な化学的純度で得ることができる。「前駆体」は、適宜、ＬＯＸ結合剤の官能基に対する保護基を含んでいてもよい。
【００７８】
「保護基」という用語は、不都合な化学反応は阻害又は抑制するが、分子の残りの部分を修飾しない十分穏和な条件下で当該官能基から脱離させることができる十分な反応性をもつように設計された基を意味する。脱保護後に、所望の生成物が得られる。保護基は当業者に周知であり、好適には、アミン基については、Ｂｏｃ（Ｂｏｃはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルである。）、Ｆｍｏｃ（Ｆｍｏｃはフルオレニルメトキシカルボニルである。）、トリフルオロアセチル、アリルオキシカルボニル、Ｄｄｅ［すなわち、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）エチル］又はＮｐｙｓ（すなわち、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル）から、カルボニル基については、メチルエステル、ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はベンジルエステルから選択される。
ヒドロキシ基に対する適当な保護基は、メチル、エチル又はｔｅｒｔ−ブチル、アルコキシメチル又はアルコキシエチル、ベンジル、アセチル、ベンゾイル、トリチル（Ｔｒｔ）或いはテトラブチルジメチルシリルのようなトリアルキルシリルである。チオール基に対する適当な保護基は、トリチル及び４−メトキシベンジルである。その他の保護基の使用については、‘Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ’，Ｔｈｅｏｒｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ（Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９９）に記載されている。
【００７９】
好ましくは、造影基源と反応し得る化学基は、以下の（ｉ）〜（ｖｉ）のいずれかを含む。
（ｉ）金属造影基と錯形成し得るキレート剤、
（ｉｉ）トリアルキルスタンナン又はトリアルキルシランのような有機金属誘導体、
（ｉｉｉ）求核置換反応のためのアルキルハライド、アルキルトシレート、又はアルキルメシレートを含有する誘導体、
（ｉｖ）求核又は求電子置換反応用の活性化芳香族環を含む誘導体、
（ｖ）容易にアルキル化を起こす官能基を有する誘導体、
（ｖｉ）チオール含有化合物とのアルキル化によってチオエーテル含有生成物を生じる誘導体。
【００８０】
造影基が金属イオンを含む場合、前駆体は、金属イオンと錯形成して金属錯体を形成することのできる化学基を含む。「金属鎖体」という用語は、金属イオンと１以上の配位子との配位鎖体を意味する。金属鎖体は「キレート交換耐性」、つまり金属の配位部位に対する他の潜在的な競合配位子との配位子交換を容易に起こさないものであるのが極めて好ましい。潜在的な競合配位子には、ＬＯＸ結合剤自体並びにインビトロ標品中の他の賦形剤（製剤に使用される例えば放射線防護剤又は抗菌保存剤）又は生体の内在性化合物（例えばグルタチオン、トランスフェリン又は血漿タンパク質）がある。
【００８１】
キレート交換に耐性の金属鎖体を形成する本発明の使用に適した配位子としては、（金属ドナー原子同士が炭素原子又は非配位ヘテロ原子の非配位骨格で連結されて）五又は六員キレート環が形成されるように２〜６、好ましくは２〜４個の金属ドナー原子が配列したキレート剤、又はイソニトリル、ホスフィン又はジアゼニドのように金属イオンに強く結合するドナー原子を含む単座配位子が挙げられる。キレート剤の一部として金属によく結合するドナー原子の例は、アミン、チオール、アミド、オキシム及びホスフィンである。ホスフィン類は強固な金属鎖体を形成し、単座又は二座ホスフィンであっても適当な金属鎖体を形成する。イソニトリル及びジアゼニドの線状構造は、それらをキレート剤に導入するのが容易ではないので、通例、単座配位子として使用される。適当なイソニトリルの例としては、ｔｅｒｔ−ブチルイソニトリルのような単純なアルキルイソニトリル及びｍｉｂｉ（すなわち、１−イソシアノ−２−メトキシ−２−メチルプロパン）のようなエーテル置換イソニトリルが挙げられる。適当なホスフィンの例としては、テトロホスミン及び単座ホスフィン類、例えばトリス（３−メトキシプロピル）ホスフィンが挙げられる。適当なジアゼニドの例としては、配位子のＨＹＮＩＣ系配位子、すなわちヒドラジン置換ピリジン又はニコチンアミドが挙げられる。
【００８２】
キレート交換耐性の金属鎖体を形成するテクネチウム用の適当なキレート剤の例としては、特に限定されないが、以下の（ｉ）〜（ｖ）が挙げられる。
（ｉ）ジアミンジオキシム；
（ｉｉ）チオールトリアミドドナーセットを有するＮ３Ｓ配位子、例えばＭＡＧ３（メルカプトアセチルトリグリシン）及び関連配位子、又はジアミドピリジンチオールドナーセットを有するもの、例えばＰｉｃａ；
（ｉｉｉ）ジアミンジチオールドナーセットを有するＮ２Ｓ２配位子、例えばＢＡＴ又はＥＣＤ（すなわちエチルシステイネート二量体）又はアミドアミンジチオールドナーセットを有するもの、例えばＭＡＭＡ；
（ｉｖ）テトラミン、アミドトリアミン又はジアミンジアミンドナーセットを有する開環又はマクロ環状配位子であるＮ４配位子、例えばサイクラム、モノオキシサイクラム又はジオキシサイクラム；又は
（ｖ）ジアミンジフェノールドナーセットを有するＮ２Ｏ２配位子。
【００８３】
本発明の好ましいテクネチウム用キレート剤はジアミンジオキシム及びテトラアミンであり、それらの好ましいものについて以下で詳しく説明する。
【００８４】
好ましいジアミンジオキシムは、次の式（Ｘ）のものである。
【００８５】
【化１６】
2009518373.tif 000017
式中、
Ｅ１〜Ｅ６は各々独立にＲ＊基であり、
各Ｒ＊はＨ、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ３−１０アルキルアリール、Ｃ２−１０アルコキシアルキル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０フルオロアルキル、Ｃ２−１０カルボキシアルキル、又はＣ１−１０アミノアルキルであるか、或いは２以上のＲ＊基がそれらと結合した原子と共に飽和又は不飽和炭素環又は複素環を形成するもので、１以上のＲ＊基がベクターと結合しており、
ＱＸは式−（Ｊ１）ｆ−の架橋基であり、ｆは３、４、又は５であり、各Ｊ１は独立に−Ｏ−、−ＮＲ＊−、又は−Ｃ（Ｒ＊）２−であるが、−（Ｊ１）ｆ−が、−Ｏ−又は−ＮＲ＊−であるＪ１基を最大１個しか含まないことを条件とする。
【００８６】
好ましいＱＸ基は以下のものである。
ＱＸ＝−（ＣＨ２）（ＣＨＲ＊）（ＣＨ２）−、すなわちプロピレンアミンオキシムつまりＰｎＡＯ誘導体、
ＱＸ＝−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ＊）（ＣＨ２）２−、すなわちペンチレンアミンオキシムつまりＰｅｎｔＡＯ誘導体、
ＱＸ＝−（ＣＨ２）２ＮＲ＊（ＣＨ２）２−。
【００８７】
Ｅ１〜Ｅ６は、好ましくは、Ｃ１−３アルキル、アルキルアリールアルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、フルオロアルキル、カルボキシアルキル、アミノアルキルから選択される。最も好ましくは、各Ｅ１〜Ｅ６基はＣＨ３である。
【００８８】
ＬＯＸ結合剤は、好ましくは、Ｅ１もしくはＥ６のＲ＊基又はＱｘ部分のＲ＊基で結合している。最も好ましくは、Ｑｘ部分のＲ＊基で結合する。Ｑｘ部分のＲ＊基で結合している場合、Ｒ＊基は好ましくは橋頭位である。この場合、Ｑｘは、好ましくは、−（ＣＨ２）（ＣＨＲ＊）（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ＊）（ＣＨ２）２−、又は−（ＣＨ２）２ＮＲ＊（ＣＨ２）２−であり、最も好ましくは−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ＊）（ＣＨ２）２−である。特に好ましい二官能性ジアミンジオキシムキレート剤は、次の式（Ｘａ）のものである。
【００８９】
【化１７】
2009518373.tif 000018
Ｅ７〜Ｅ２０は各々独立にＲ＊基であり、
Ｇ１はＮ又はＣＲ＊であり、
Ｙｘは−（Ｌ４）ｒ−結合剤であり、Ｌ４及びｒはそれぞれ上記でＬ１及びｎについて定義した通りであり、「結合剤」は、上記で定義したＬＯＸ結合剤である。リンカー基−（Ｌ４）４−が存在する場合、それ以外にキレートとＬＯＸ結合剤を連結する他のリンカー基は存在しない。
【００９０】
式（Ｘａ）の好ましいキレート剤は、次の式（Ｘｂ）のものである。
【００９１】
【化１８】
2009518373.tif 000019
式中、Ｇ２は上記のＧ１で定義した通りであり、好ましくはＣＨ（＝「キレートＸ」、その合成方法については実施例６に記載）であって、ＬＯＸ結合剤が橋頭位−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２基を介して結合する。
【００９２】
本発明の好ましいテトラアミンキレート剤は、次の式Ｚのものである。
【００９３】
【化１９】
2009518373.tif 000020
式中、Ｑｚは式−（Ｊ２）ｇ−の架橋基であり、ｇは１〜８であり、各Ｊ２は独立に−Ｏ−、−ＮＲ＊−又は−Ｃ（Ｒ＊）２−、好ましくは−Ｃ（Ｒ＊）２−、最も好ましくは−ＣＨ２−である。
【００９４】
Ｙｚは−（Ｌ５）ｓ−結合剤であり、Ｌ５及びｓはそれぞれＬ１及びｎについて上記で定義した通りであるが、−（Ｌ５）ｓ−がアリール環を含んでおらず、錯体の親油性を下げるのに役立つ。「結合剤」という用語は、上記で定義したＬＯＸ結合剤である。−（Ｌ５）ｓ−が存在している場合、これ以外にキレートをＬＯＸ結合剤に連結するリンカーは存在しない。
【００９５】
Ｅ２１〜Ｅ２６は、上記で定義したＲ＊基である。
【００９６】
最も好ましい本発明のテトラアミンキレートは、次の式Ｚａのものである。
【００９７】
【化２０】
2009518373.tif 000021
式中、Ｙｚは上記で定義した通りである。
【００９８】
本発明の特に好ましいテトラアミンキレートは、式ＺａのものでＹｚが−ＣＯ−結合剤であるものである。
【００９９】
上述の配位子は、テクネチウム（例えば９４ｍＴｃ又は９９ｍＴｃ）の錯体の形成に特に適しており、Ｊｕｒｉｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，９９，２２０５−２２１８（１９９９）に詳細に記載されている。この配位子は、銅（６４Ｃｕ又は６７Ｃｕ）、バナジウム（例えば４８Ｖ）、鉄（例えば５２Ｆｅ）又はコバルト（例えば５５Ｃｏ）のような他の金属にも有用である。その他の適当な配位子については、インジウム、イットリウム及びガドリニウム、特に単環アミノカルボキシレート及びアミノホスホン酸配位子に特に適した配位子を始めとして、Ｓａｎｄｏzの国際公開第９１／０１１４４号に記載されている。かかるドナー原子を有する好適なキレート剤の例としては、１、４、７、１０−テトラアザシクロデカン−１、４、７、１０−テトラ酢酸（ＤＯＴＡ）及びジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）が挙げられる。ガドリニウムの非イオン性（すなわち中性）の金属錯体を形成する配位子は公知であり、米国特許第４８８５３６３号に記載されている。放射性金属がテクネチウムの場合、配位子は好ましくは四座のキレート剤である。テクネチウム用の好ましいキレート剤は、ジアミンジオキシム又は上述のＮ２Ｓ２又はＮ３Ｓドナーセットを有するものである。
【０１００】
リンカー基（−（Ｌ４）ｒ−又は−（Ｌ５）ｓ−として上述したもの）の役割は、金属の配位で得られる比較的嵩高いテクネチウム錯体を、ＬＯＸ結合剤の活性部位から遠ざけることによって、例えば、基質の結合に支障をきたさないようにすることである。これは、嵩高い基が活性部位から遠ざかる自由度をもつようにするための柔軟性（例えば単純なアルキル鎖）及び／又は金属錯体を活性部位から遠ざけるシクロアルキル系もしくはアリール系スペーサーのような剛直性の組合せによって達成することができる。リンカー基の性状は、得られるコンジュゲートのテクネチウム錯体の体内分布を変更するのにも利用できる。例えばエーテル基をリンカーに導入すると、血漿タンパク質の結合を最小限に抑制するのに役立つし、ポリアルキレングリコールのようなポリマー系リンカー基、特にポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を使用すると、血液中での造影剤のインビボ寿命を延ばすのに役立つ。
【０１０１】
好ましいリンカー基−（Ｌ４）ｒ−又は−（Ｌ５）ｓ−は、原子数２〜１０、最も好ましくは原子数２〜５の骨格鎖（つまり−（Ｌ４）ｒ−又は−（Ｌ５）ｓ−基を構成する連結原子）を含むもので、原子数２又は３のものが特に好ましい。原子数２の最短のリンカー基骨格鎖であっても、生物学的ターゲティング基からキレーターが十分に離隔して相互反応が最小限になるという利点が得られる。さらに、ＬＯＸ結合剤も、金属イオンへのキレーターの配位に有効に拮抗できなくなる。こうして、ＬＯＸ結合剤の生物学的ターゲティング特性とキレーターの金属錯形成能が共に保持される。なお、ＬＯＸ結合剤がキレーターに、それらの結合が血中で容易に代謝されないように結合していることが強く望まれる。かかる代謝によって、標識ＬＯＸ結合剤がインビボで所望の標的部位に達する前に、造影用の金属錯体が開裂してしまうからである。そこで、ＬＯＸ結合剤は、好ましくは、容易には代謝されない−（Ｌ４）ｒ−又は−（Ｌ５）ｓ−リンカー基を介して本発明の金属錯体に共有結合させる。かかる好適な結合は、炭素−炭素結合、アミド結合、尿素もしくはチオ尿素結合又はエーテル結合である。
【０１０２】
アルキレン基又はアリーレン基のような非ペプチド系リンカー基は、連結されたＬＯＸ結合剤と有意の水素結合相互作用がないため、リンカーがＬＯＸ結合剤に巻き付くことがないという利点を有する。好ましいアルキレンスペーサー基は−（ＣＨ２）ｔ−であり、式中、ｔは２〜５の整数である。好ましくは、ｔは２又は３である。好ましいアリーレンスペーサーは次式のものである。
【０１０３】
【化２１】
2009518373.tif 000022
式中、ａ及びｂは各々独立に０、１又は２である。
【０１０４】
好ましいＹ基（Ｙｘ又はＹｚ）は−ＣＨ２ＣＨ２−（Ｌ６）ｕ−であり、Ｌ６は上記でＬ１について定義した通りであり、ｕは０〜３の整数である。
【０１０５】
ＬＯＸ結合剤がペプチドの場合、Ｙ基は好ましくは−ＣＨ２ＣＨ２−（Ｌ７）ｖ−であり、式中、−（Ｌ７）ｖ−は−ＣＯ−又は−ＮＲ′−（Ｒ′は上記で定義した通り）である。式Ｘｂについて、Ｇ２がＮの場合、この組合せは市販の対称中間生成物Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）３から誘導できるという追加の利点がある。
【０１０６】
造影用金属がテクネチウムの場合、通常のテクネチウム出発原料は過テクネチウム酸塩、すなわちＴｃＯ４−つまり酸化状態がＴｃ（ＶＩＩ）のテクネチウムである。過テクネチウム酸塩自体は金属錯体を形成しにくいので、テクネチウム錯体の製造に際しては、テクネチウムの酸化状態を低酸化状態（Ｔｃ（Ｉ）〜Ｔｃ（Ｖ））に還元することによって錯形成を促進するための第一スズイオンのような適当な還元剤を添加する必要がある。溶媒は有機溶媒でも、無機溶媒でも、それらの混合物でもよい。溶媒が有機溶媒を含む場合、有機溶媒は好ましくはエタノール又はＤＭＳＯのような生体適合性溶媒である。好ましくは、溶媒は水性溶媒であり、最も好ましくは等張塩類溶液である。
【０１０７】
造影基が放射性ヨウ素である場合、好ましい前駆体は、求電子又は求核ヨウ素化或いは標識アルデヒド又はケトンとの縮合を起こすような誘導体を含むものである。前者に属するものの例としては、以下の（ａ）〜（ｃ）が挙げられる。
（ａ）トリアルキルスタンナン（例えばトリメチルスタンニル又はトリブチルスタンニル）、トリアルキルシラン（例えばトリメチルシリル）又は有機ホウ素化合物（例えば、ボロン酸エステル又はオルガノトリフルオロボレート）のような有機金属誘導体、
（ｂ）ハロゲン交換のための非放射性臭化アルキル、或いは求核ヨウ素化のためのアルキルトシレート、メシレート又はトリフレート、
（ｃ）求電子ヨウ素化用の活性化芳香族環（例えばフェノール）及び求核ヨウ素化用の活性化芳香族環（例えばアリールヨードニウム、アリールジアゾニウム、アリールトリアルキルアンモニウム塩又はニトロアリール誘導体）。
【０１０８】
前駆体は、好ましくは、ヨウ化又は臭化アリールのような非放射性ハロゲン原子（放射性ヨウ素交換を可能とするため）、活性化前駆体アリール環（例えばフェノール基）、有機金属前駆体化合物（例えばトリアルキルスズ、トリアルキルシリル又は有機ホウ素化合物）、トリアゼンのような有機前駆体、或いはヨードニウム塩のような求核置換反応のための良好な脱離基を含む。放射性ヨウ素化では、前駆体は好ましくは有機金属前駆体化合物を含み、最も好ましくはトリアルキルスズを含む。
【０１０９】
前駆体及び放射性ヨウ素を有機分子に導入する方法は、Ｂｏｌｔｏｎ，  Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，４５，４８５−５２８（２００２）に記載されている。適当なボロン酸エステル有機ホウ素化合物及びその製造方法は、Ｋａｂａｌａｋａ  ｅｔ  ａｌ，  Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．，２９、８４１−８４３（２００２）及び３０，３６９−３７３（２００３）に記載されている。適当なオルガノトリフルオロホウ化物及びその製造方法は、Ｋａｂａｌａｋａ  ｅｔ  ａｌ，  Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．，３１、９３５−９３８（２００４）に記載されている。
【０１１０】
放射性ヨウ素を結合させることのできるアリール基の例としては、以下のものがある。
【０１１１】
【化２２】
2009518373.tif 000023
これらはいずれも、芳香族環での放射性ヨウ素置換が容易な置換基を含んでいる。放射性ヨウ素を含む他の置換基は、例えば以下のような放射性ハロゲン交換による直接ヨウ素化によって合成することができる。
【０１１２】
【化２３】
2009518373.tif 000024
飽和脂肪族系に結合したヨウ素原子はインビボで代謝され易く、放射性ヨウ素が失われ易いことが知られているので、放射性ヨウ素原子は好ましくは芳香族環（ベンゼン環など）又はビニル基に直接共有結合で結合させる。
【０１１３】
造影基がフッ素の放射性同位体である場合、フッ化アルキルはインビボ代謝に抵抗性であるので、放射性フッ素原子はフルオロアルキル基又はフルオロアルコキシ基の一部としてもよい。或いは、放射性フッ素原子は、芳香族環（例えばベンゼン環）に直接共有結合で結合させてもよい。放射性ハロゲン化は、臭化アルキル、アルキルメシレート又はアルキルトシレートのような良好な脱離基を有する前駆体の適当な化学基と１８Ｆ−フッ化物との反応を用いた直接標識法で実施できる。１８Ｆは、１８Ｆ（ＣＨ２）３ＯＨ反応体を用いたＮ−ハロアセチル基のアルキル化によって導入することもでき、−ＮＨ（ＣＯ）ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）３１８Ｆ誘導体が得られる。アリール系については、アリールジアゾニウム塩、アリールニトロ化合物又はアリール第四級アンモニウム塩からの１８Ｆ−フッ化物求核置換が、アリール−１８Ｆ誘導体への好適な経路である。
【０１１４】
国際公開第０３／０８０５４４号に記載された放射性フッ素化の別の方法は、以下の置換基のいずれかを含む前駆体化合物を式ＶＩの化合物と反応させて、それぞれ式（ＶＩａ）又は（ＶＩｂ）の放射性フッ素化造影剤を生成させる。
【０１１５】
【化２４】
2009518373.tif 000025
１８Ｆ−Ｙ５−ＳＨ                （ＶＩ）
式中、
Ｙ４は式−（Ｌ８）ｗ−のリンカーであって、適宜１〜６のヘテロ原子を含んでいてもよく（Ｌ８はＬ１について上記で定義した通りであり、ｗは１〜１０である。）、
Ｙ５は、式−（Ｌ９）ｘ−のリンカーであって、適宜１〜１０のヘテロ原子を含んでいてもよい（Ｌ９はＬ１について上記で定義した通りであり、ｘは１〜３０である。）。
【０１１６】
【化２５】
2009518373.tif 000026
式中、Ｙ４及びＹ５は上記で定義した通りであり、「結合剤」は上記で定義したＬＯＸ結合剤である。
【０１１７】
１８Ｆ−標識誘導体の合成経路についてのさらに詳しい内容は、Ｂｏｌｔｏｎ，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，４５，４８５−５２８（２００２）に記載されている。
【０１１８】
本発明の１８Ｆ−標識化合物は、１８Ｆフルオロジアルキルアミンの形成後、１８Ｆフルオロジアルキルアミンを、例えば塩素、Ｐ（Ｏ）Ｐｈ３又は活性化エステルを含む前駆体と反応させてアミドを形成することによって得ることができる。
【０１１９】
本発明の前駆体の例を幾つか以下の表に示す。
【０１２０】
【化２６】
2009518373.tif 000027
【０１２１】
【化２７】
2009518373.tif 000028
前駆体１は、１２３Ｉとのヨウ素交換反応による放射性ヨウ素化で造影剤６を合成するのに適している。前駆体２、３及び４は、９９ｍＴｃとの錯形成で造影剤７、８及び１３を合成するのに適している。前駆体５は、フェノールでの放射性ヨウ素置換で他の造影剤を合成するのに適している。
【０１２２】
前駆体１、３、４及び５の合成方法は、実施例２、８、１０及び１２に記載されている。
【０１２３】
本発明の別の態様は、造影剤の製造方法に関して定義した前駆体であって、上記化学基が、
（ｉ）金属造影基と錯形成し得るキレート剤、
（ｉｉ）トリアルキルスタンナン又はトリアルキルシランのような有機金属誘導体、
（ｉｉｉ）求核置換反応のためのアルキルハライド、アルキルトシレート又はアルキルメシレートを含有する誘導体、
（ｖｉ）チオール含有化合物とのアルキル化によってチオエーテル含有生成物を生じる誘導体
を含む、前駆体に関する。
【０１２４】
本発明は、別の態様では、上述の造影剤を生体適合性担体と共に哺乳類への投与に適した形態で含む医薬組成物を提供する。好ましい実施形態では、医薬組成物は放射性医薬組成物である。
【０１２５】
「生体適合性担体」とは、造影剤を懸濁又は溶解できる流体、特に液体であって、組成物が生理学的に認容できるもの、つまり毒性も耐え難い不快感も伴わずに哺乳類の身体に投与することができるようなものである。生体適合性担体は好適には注射可能な担体液であり、例えば、発熱物質を含まない注射用の滅菌水、食塩液のような水溶液（これは注射用の最終製剤が等張性又は非低張性となるように調整するのに都合がよい）、１種以上の張度調節物質（例えば血漿陽イオンと生体適合性対イオンとの塩）、糖（例えばグルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えばソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えばグリセロール）その他の非イオン性ポリオール材料（例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液である。生体適合性担体は、エタノールのような生体適合性の有機溶媒を含んでいてもよい。かかる有機溶媒は、親油性の高い化合物又は製剤の可溶化に有用である。好ましくは、生体適合性担体はパイロジェンフリーの注射用水、等張塩類溶液又はエタノール水溶液である。静脈内注射用の生体適合性担体のｐＨは好適には４．０〜１０．５の範囲内である。
【０１２６】
かかる医薬品は、好適には、無菌状態を維持したまま皮下注射針で一回又は複数回穿刺するのに適したシール（例えばクリンプオン式セプタムシール蓋）を備えた容器に入れて供給される。かかる容器には、１回又は複数回分の用量を入れることができる。好ましい多用量用容器は、複数回分の用量を収容した単一バルクバイアル（例えば容積１０〜３０ｃｍ３のもの）からなり、臨床症状に応じて製剤の有効期間中様々な時間間隔で１回分の用量を臨床グレードのシリンジに吸引することができる。プレフィルドシリンジは１回分の用量つまり「単位用量」を収容するように設計され、そのため好ましくは使い捨て又はその他臨床用に適したシリンジである。医薬組成物が放射性医薬組成物の場合、プレフィルドシリンジは、適宜、オペレーターを放射能被曝から保護するためのシリンジシールドを備えていてもよい。かかる適当な放射性医薬品シリンジシールドは当技術分野で公知であり、好ましくは鉛又はタングステンからなる。
【０１２７】
本発明の医薬組成物は、以下の本発明の追加の態様で説明する通り、キットから調製することもできる。或いは、医薬組成物は、所望の滅菌生成物が得られるような無菌製造条件下で製造してもよい。医薬組成物を非滅菌条件下で調製した後、例えばγ線照射、オートクレーブ処理、乾熱又は化学的処理（例えばエチレンオキサイドでの処理）を用いて最終的に滅菌してもよい。好ましくは、本発明の医薬組成物はキットから調製される。
【０１２８】
本発明の造影剤に関して上述した通り、放射性医薬組成物に対して最も好ましい本発明の放射性造影基は９９ｍＴｃ、１２３Ｉ、１１Ｃ及び１８Ｆである。
【０１２９】
本発明は、さらに別の態様では、本発明の医薬組成物の調製用キットを提供する。かかるキットは、本発明の適当な前駆体、好ましくは滅菌された非発熱性の形態の前駆体を含んでいて、滅菌造影基源との反応で所望の医薬組成物を最低限の操作数で生ずる。かかる配慮は、放射性医薬品、特に放射性同位体の半減期が比較的短い放射性医薬品に対して重要であり、取扱いの容易さ及び放射性医薬品の取扱者の放射線被曝量の低減という点でも重要である。したがって、かかるキットの再構成用の反応溶媒は、好ましくは上記で定義した「生体適合性担体」であり、最も好ましくは水性担体である。
【０１３０】
キットの容器として適しているのは、無菌健全性及び／又は放射能の安全性並びに適宜、不活性ヘッドスペースガス（例えば窒素又はアルゴン）を維持することができ、しかも、シリンジで溶液の添加及び吸引もできる密封容器である。かかる容器として好ましいのはセプタムシールバイアルであり、気密蓋をオーバーシール（通例アルミニウム製）でクリンプしたものである。かかる容器は、適宜、例えば、ヘッドスペースガスの交換又は溶液の脱気などのため、蓋が真空に耐えることができるという追加の利点も有する。
【０１３１】
前駆体をキットに用いる際の好ましい態様は、合成法に関して上記で説明した通りである。キットに用いられる前駆体は、望ましい無菌の非発熱性物質を生じるように無菌製造条件下で用いられる。前駆体を非無菌条件下で使用し、最後に例えばγ線照射、オートクレーブ処理、乾熱又は化学的処理（例えばエチレンオキサイドでの処理）を用いて滅菌してもよい。好ましくは、前駆体は無菌非発熱性の形態で用いられる。最も好ましくは、無菌の非発熱性の前駆体を上述の密封容器内で用いる。
【０１３２】
キットの前駆体は、好ましくは、合成法に関して説明した固形担体マトリックスに共有結合させた形態で供給される。
【０１３３】
９９ｍＴｃ用には、キットは好ましくは凍結乾燥したもので、９９ｍＴｃ放射性同位体ジェネレータからの無菌９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸（ＴｃＯ４−）で再構成すれば、それ以上操作しなくてもヒトへの投与に適した溶液が得られるように設計される。適当なキットは、上述の未錯化キレート剤を、亜ジチオン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、第一スズイオン、Ｆｅ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）のような薬学的に許容される還元剤、並びに弱有機酸と生体適合性陽イオンとの１種以上の塩と共に収容した容器（例えばセプタムシールバイアル）を備える。「生体適合性陽イオン」という用語は、イオン化し負に荷電した基と塩を形成する正に荷電した対イオンであって、該正に荷電した対イオンが無毒性で、哺乳類の身体、特に人体への投与に適しているものを意味する。好適な生体適合性陽イオンの例としては、アルカリ金属のナトリウム及びカリウム、アルカリ土類金属のカルシウム及びマグネシウム、並びにアンモニウムイオンが挙げられる。好ましい生体適合性陽イオンはナトリウム及びカリウムであり、最も好ましくはナトリウムである。
【０１３４】
９９ｍＴｃ造影剤の調製用キットは、適宜、トランスキレーターとして機能する第二の弱有機酸又はその生体適合性陽イオンとの塩をさらに含んでいてもよい。トランスキレーターは、テクネチウムと迅速に反応して弱い錯体を形成し、次いでキットのキレート剤で置き換えられる化合物である。これは、テクネチウム錯形成と競合する過テクネチウム酸の迅速な還元に起因した還元型加水分解テクネチウム（ＲＨＴ）が形成されるおそれを最小限に抑制する。かかるトランスキレーターとして適しているのは、上述の弱有機酸及びその塩であり、好ましくは、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプタン酸塩、安息香酸塩又はホスホン酸塩であり、好ましくはホスホン酸塩、特に好ましくはジホスホン酸塩である。かかる好ましいトランスキレーターは、ＭＤＰ（メチレンジホスホン酸）又はその生体適合性陽イオンとの塩である。
【０１３５】
９９ｍＴｃキットに関しては、遊離型のキレート剤の使用に代えて、キットは、適宜、キレート剤の非放射性金属錯体を含んでいてもよく、テクネチウムを添加すると、トランスメタレーション（配位子交換）によって所望の生成物を生じる。かかるトランスメタレーションに適した錯体は銅又は亜鉛錯体である。
【０１３６】
９９ｍＴｃ造影剤キットに用いられる薬学的に許容される還元剤は、好ましくは、塩化第一スズ、フッ化第一スズ又は酒石酸第一スズのような第一スズ塩であり、これらは無水塩でも水和塩でもよい。第一スズ塩は好ましくは塩化第一スズ又はフッ化第一スズである。
【０１３７】
キットは、適宜、放射線防護剤、抗菌保存剤、ｐＨ調節剤又は充填剤のような追加の成分をさらに含んでいてもよい。
【０１３８】
「放射線防護剤」という用語は、水の放射線分解で生成する含酸素フリーラジカルのような反応性の高いフリーラジカルを捕捉することによって、酸化還元過程のような分解反応を阻害する化合物をいう。本発明の放射線防護剤は、好適には、アスコルビン酸、パラアミノ安息香酸（すなわち４−アミノ安息香酸）、ゲンチシン酸（すなわち２，５−ジヒドロキシ安息香酸）並びにこれらと生体適合性陽イオンとの塩から選択される。「生体適合性陽イオン」及びその好適な実施形態は上述の通りである。
【０１３９】
「抗菌保存剤」という用語は、細菌、酵母又はカビなどの有害微生物の増殖を阻害する薬剤を意味する。抗菌保存剤は、濃度に応じてある程度の殺菌作用を示すこともある。本発明の抗菌保存剤の主な役割は、再構成後の医薬組成物（つまり、放射性診断薬自体）での微生物の増殖を阻害することである。ただし、抗菌保存剤は、再構成前の本発明の非放射性キットの１以上の成分における有害微生物の増殖の防止にも適宜使用できる。適当な抗菌保存剤としては、パラベン類、すなわちメチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン又はこれらの混合物、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオメルサールが挙げられる。好ましい抗菌保存剤はパラベン類である。
【０１４０】
「ｐＨ調節剤」という用語は、再構成したキットのｐＨが、ヒト又は哺乳類への投与に関して許容範囲（約ｐＨ４．０〜１０．５）内に収まるようにするのに有用な化合物又は化合物の混合物を意味する。かかる適当なｐＨ調節剤としては、トリシン、リン酸塩又はＴＲＩＳ（すなわちトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）のような薬学的に許容される緩衝剤、並びに炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はこれらの混合物などの薬学的に許容される塩基が挙げられる。前駆体を酸塩の形態で用いる場合、キットのユーザーが多段階法の一部としてｐＨを調節できるようにｐＨ調節剤を適宜別のバイアル又は容器で提供してもよい。
【０１４１】
「充填剤」という用語は、製造及び凍結乾燥時の材料の取扱いを容易にする薬学的に許容される増量剤を意味する。適当な充填剤としては、塩化ナトリウムのような無機塩並びに水溶性糖類又は糖アルコール、例えばスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースが挙げられる。
【０１４２】
本発明の造影剤は、インビボイメージングに有用である。したがって、別の態様では、本発明は、インビボ診断又はイメージング法、例えばＳＰＥＣＴ又はＰＥＴに用いる造影剤を提供する。好ましくは、この方法は、ＬＯＸが上方制御される病態のインビボイメージングに関する方法であり、肝線維症、うっ血性心不全、糸球体硬化症及び呼吸不全のように、線維症に関連した病態の診断に有用である。最も好ましい実施形態では、上記病態は肝線維症である。
【０１４３】
本発明のこの態様では、ＬＯＸが上方制御される病態にある対象でインビボ診断又は造影する方法であって、本発明の医薬組成物を投与する段階を含む方法を提供する。対象は好ましくは哺乳類であり、最も好ましくはヒトである。別の実施形態では、本発明のこの態様は、ＬＯＸが上方制御される病態にある対象のインビボイメージングにおける本発明の造影剤の使用であって、対象に本発明の医薬組成物を予め投与しておく使用を提供する。
【０１４４】
「予め投与」とは、医療従事者が関与する段階であり、患者には医薬品が投与されていること、例えば、静脈内注射が既に実施されていることを意味する。本発明のこの態様には、ＬＯＸが上方制御される病態のインビボ画像診断用の医薬品の製造における本発明の造影剤の使用も包含される。
【０１４５】
さらに別の態様では、本発明は、ＬＯＸが上方制御される病態に対処するための薬剤によるヒト又は動物の身体の治療効果をモニタリングする方法であって、本発明の造影剤を身体に投与し、造影剤の取込を検出し、任意ではあるが好ましくは、上記投与と検出を、例えば上記薬剤による治療の前後途中のいずれかに繰り返すことを含んでなる方法を提供する。
【０１４６】
実施例の簡単な説明
実施例１では、ピリダジノンＬＯＸ結合剤の合成について記載する。
【０１４７】
実施例２では、放射性ヨウ素化に適したピリダジノン系前駆体化合物（「前駆体１」）の合成について記載する。
【０１４８】
実施例３では、ホモシステインラクトンの合成について記載する。
【０１４９】
実施例４及び５では、造影剤３及び４の非放射性型の合成について記載する。
【０１５０】
実施例６では、キレートＸの合成について記載する。
【０１５１】
実施例７では、キレートＸのグルタリルアミド誘導体の合成について記載する。
【０１５２】
実施例８では、前駆体３の合成について記載する。前駆体３は、９９ｍＴｃで標識して造影剤８を形成するのに適した前駆体である。
【０１５３】
実施例９では、前駆体３を９９ｍＴｃで標識して造影剤８を形成する方法について記載する。
【０１５４】
実施例１０では、９９ｍＴｃで標識した造影剤１３の合成について記載する。
【０１５５】
実施例１１では、非放射性造影剤９の合成について記載する。
【０１５６】
実施例１２では、前駆体５の合成について記載する。
【実施例】
【０１５７】
実施例で用いた略語のリスト
Ｂｏｃ：ｔ−ブトキシカルボニル
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＥＳＩ−ＭＳ：エレクトロスプレーイオン化質量分析
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ′Ｎ′−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＬＣ−ＭＳ：液体クロマトグラフィー−質量分析
Ｌｙｓ：リジン
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン
ＰｙＡＯＰ：（７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸。
【０１５８】
実施例１：ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−クロロ−６−オキソ−１−ｐ−トリル−１，６−ジヒドロ−４−ピリダジニル）−ピペラジン−１−カルボン酸の合成
【０１５９】
【化２８】
2009518373.tif 000029
Ｂｏｃ−ピペラジン（Ａｃｒｏｓ、０．３７３ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を、４，５−ジクロロ−２−（４−メチルフェニル）−２，３−ジヒドロピリダジン−３−オン（Ｍａｙｂｒｉｄｇｅ、０．２５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍｌ）溶液に徐々に加え、２０時間乾留させた。溶液を水酸化ナトリウム（１Ｍ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。生成物をカラムクロマトグラフィーで精製した（シリカ、ジクロロメタン／メタノール、９９：１）ところ、０．２３６ｇ（収率５８％）が得られた。ＬＣ−ＭＳ分析（カラム、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）３μｍ２．０×５０ｍｍ；溶剤：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；勾配１０〜８０％のＢ、１０分間；流量、０．３ｍｌ／分；２１４ｎｍ及び２５４ｎｍの紫外線で検出；ＥＳＩ−ＭＳ；ｔＲ＝８．４分；ｍ／ｚ、４０５．１（ＭＨ＋））を行って構造を確認した。
【０１６０】
実施例２：  ４−［５−（４′−ヨード−ビフェニル−４−イルオキシ）−６−オキソ−１−ｐ−トリル−１，６−ジヒドロ−４−ピリダジニル］−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル［前駆体１］の合成
【０１６１】
【化２９】
2009518373.tif 000030
Ｃｓ２ＣＯ３（Ｆｌｕｋａ、０．１６４ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）の乾燥メタノール（１ｍｌ）への懸濁液に、４−ヒドロキシ−４′−ヨードフェニル（Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ、０．２９９ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を何度かに分けて加えた。反応は、アルゴン中で実施した。混合物を１時間撹拌し、濃縮した。残留物に、上記ａ）で得られた溶液（０．１３６ｇ、０．３３６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３．５ｍｌ）溶液を加えた。混合物を、１２０℃で２０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳで分析し（カラム、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）３μｍ２．０×５０ｍｍ；溶剤：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；勾配、５０〜９５％のＢ、１０分間；流量、０．３ｍｌ／分、２１４ｎｍ及び２５４の紫外線で検出、ＥＳＩ−ＭＳ；ｔＲ＝８．０分；ｍ／ｚ、６６５．２（ＭＨ＋））生成物を確認した。
【０１６２】
実施例３：リジン−ホモシステインチオラクトン［Ｈ−Ｌｙｓ−Ｈｃｙ−チオラクトン］の合成
【０１６３】
【化３０】
2009518373.tif 000031
Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＳｕ（４４ｍｇ）、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）（４４μＬ）、Ｌ−ホモシステインチオラクトンの塩酸塩（１５ｍｇ）を、１ｍｌのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解し、反応混合物を１６時間撹拌した。ＤＭＦを真空中で蒸発させ、残留物を、５％の水を含む１０ｍｌのトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）中で、３０分処理した。ＴＦＡを真空中で蒸発させ、残留物を調製用ＨＰＬＣ（定組成：１０００％のＨ２Ｏ／０．１％のＴＦＡ、４０分間、流量：１０ｍＬ／ｍｉｎ、カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）２５０×２１．２０ｍｍ、検出：ＵＶ２１４ｎｍ、生成物の保持時間：１４．７分）にかけたところ、３６ｍｇの純粋な生成物が得られた。この純粋な生成物を分析用ＨＰＬＣ（定組成：１００％Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ、１０分間、流量：０．３ｍＬ／ｍｉｎ、カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）５０×２ｍｍ、検出：ＵＶ２１４ｎｍ、生成物の保持時間：１．０６分）で分析した。生成物を質量分析でさらに調べた。（ＭＨ＋計算値：２４６．１、ＭＨ＋実測値：２４６．１）。
【０１６４】
実施例４：非放射性造影剤３［Ｈ−Ｌｙｓ（３−（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）プロピオニル）−Ｈｃｙ−チオラクトン］の合成
【０１６５】
【化３１】
2009518373.tif 000032
Ｂｏｃ−Ｌｙｓ−ＯＨ（２５ｍｇ）、Ｎ−スクシンイミジル３−（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）プロピオネート（１９ｍｇ）及びＮＭＭ（２２μＬ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解し、混合物を３日間撹拌した。調製用ＨＰＬＣで精製したところ、２６ｍｇの純粋なＢｏｃ−Ｌｙｓ（３−（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）プロピオニル）−ＯＨが得られた。Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（３−（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）プロピオニル）−ＯＨ（２６ｍｇ）、ＮＭＭ（２２μＬ）及びＬ−ホモシステインチオラクトンＨＣｌ塩（１５ｍｇ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した。（７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＡＯＰ）（２６ｍｇ）を加え、反応混合物を８０分撹拌した。ＤＭＦを真空中で蒸発させ、５％の水を含むＴＦＡ（１０ｍＬ）で残留物を３０分処理した。ＴＦＡを真空中で蒸発させ、残留物を調製用ＨＰＬＣ（勾配：１０〜４０％のＢ、４０分間、Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％のＴＦＡ及びＢ＝ＡＣＮ／０．１％のＴＦＡ、流量：１０ｍＬ／ｍｉｎ、カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）２５０×２１．２０ｍｍ、検出：ＵＶ２１４ｎｍ、生成物の保持時間：３０分）にかけたところ、２２ｍｇの純粋な生成物が得られた。この純粋な生成物を、分析用ＨＰＬＣ（勾配：１０〜４０％のＢ、１０分、Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％のＴＦＡ及びＢ＝ＡＣＮ／０．１％のＴＦＡ、流量：０．３ｍＬ／ｍｉｎ、カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）５０×２ｍｍ、検出：ＵＶ２１４ｎｍ、生成物の保持時間：５．２８分）で分析した。生成物を、質量分析でさらに調べた（ＭＨ＋計算値：５２０．１、ＭＨ＋実測値：５２０．２）。
【０１６６】
実施例５：非放射性造影剤４［３−（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）プロピオニル−Ｌｙｓ−Ｈｃｙ−チオラクトン］の合成
【０１６７】
【化３２】
2009518373.tif 000033
Ｈ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（２５ｍｇ）、Ｎ−スクシンイミジル３−（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）プロピオン酸（１９ｍｇ）及びＮＭＭ（２２μＬ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解し、混合物を３日間撹拌した。調製用ＨＰＬＣで精製したところ、２６ｍｇの純粋な３−（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）プロピオニル−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨが得られた。３−（４−ヒドロキシ−３−ヨードフェニル）プロピオニル−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（２６ｍｇ）、ＮＭＭ（２２μＬ）及びＬ−ホモシステインチオラクトンＨＣｌ塩（１５ｍｇ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した。（ＰｙＡＯＰ）（２６ｍｇ）を加え、反応混合物を６０分撹拌した。ＤＭＦを真空中で蒸発させ、５％の水を含むＴＦＡ（１０ｍＬ）で残留物を３０分処理した。ＴＦＡを真空中で蒸発させ、残留物を調製用ＨＰＬＣ（勾配：１０〜４０％のＢ、４０分間、Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％のＴＦＡ及びＢ＝ＡＣＮ／０．１％のＴＦＡ、流量：１０ｍＬ／ｍｉｎ、カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）２５０×２１．２０ｍｍ、検出：ＵＶ２１４ｎｍ、生成物の保持時間：２６分）にかけたところ、２２ｍｇの純粋な生成物が得られた。この純粋な生成物を、分析用ＨＰＬＣ（勾配：１０〜４０％のＢ、５分間、Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％のＴＦＡ及びＢ＝ＡＣＮ／０．１％のＴＦＡ、流量：０．６ｍＬ／ｍｉｎ、カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）２０×２ｍｍ、検出：ＵＶ２１４ｎｍ、生成物の保持時間：２．６２分）で分析した。生成物を、質量分析でさらに調べた（ＭＨ＋計算値：５２０．１、ＭＨ＋実測値：５２０．１）。
【０１６８】
実施例６：キレートＸ［ビス［Ｎ−（１，１−ジメチル−２−Ｎ−ヒドロキシイミンプロピル）２−アミノエチル］−（２−アミノエチル）メタン］の合成
【０１６９】
【化３３】
2009518373.tif 000034
（工程ａ）：トリス（メチルオキシカルボニルメチル）メタンの調製
３−（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステル（８９ｇ、２６７ｍｍｏｌ）のメタノール（２００ｍｌ）溶液を、木炭に担持させたパラジウム１０％：水５０％（９ｇ）と共に、水素ガス雰囲気（３．５バール）中で３０時間振盪し、溶液を珪藻土で濾過し、真空中で濃縮して、ジメチル３−（メトキシカルボニルメチル）グルタル酸を油分として得た。収率：８４．９ｇ、９４％。
ＮＭＲ１Ｈ（ＣＤＣｌ３），δ２．４８（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，３ｘＣＨ２），２．７８（１Ｈ，六重項，Ｊ＝８Ｈｚ，ＣＨ，）３．７（９Ｈ，ｓ，３ｘＣＨ３）。
ＮＭＲ１３Ｃ（ＣＤＣｌ３），δ２８．６，ＣＨ；３７．５０，３ｘＣＨ３；５１．６，３ｘＣＨ２；１７２．２８，３ｘＣＯＯ。
【０１７０】
（工程ｂ）：ｐ−メトキシ−ベンジルアミンによる、トリメチルエステルのアミド化
トリス（メチルオキシカルボニルメチル）メタン［２ｇ、８．４ｍｍｏｌ］をｐ−メトキシ−ベンジルアミン（２５ｇ、１７８．６ｍｍｏｌ）に溶解した。蒸留用の装置を組み、窒素流中で、１２０℃に２４時間加熱した。反応の進行を、集まったメタノールの量で監視した。反応混合物を周囲温度まで冷却し、３０ｍｌの酢酸エチルを加え、沈殿したトリアミド生成物を３０分間撹拌した。トリアミドを、濾過によって単離し、フィルターケーキを十分な量の酢酸エチルで数回洗浄して、過剰なｐ−メトキシ−ベンジルアミンを除去した。乾燥後、４．６ｇ（１００％）の白色粉末が得られた。高度に不溶性の生成物は、それ以上精製したり解析したりすることなく、直接、次の工程に使用した。
【０１７１】
（工程ｃ）：１，１，１−トリス［２−（ｐ−メトキシベンジルアミノ）エチル］メタンの調製
氷水浴中で冷却しておいた１０００ｍｌの３口丸底フラスコで、工程２（ａ）で得たトリアミド（１０ｇ、１７．８９ｍｍｏｌ）を、２５０ｍｌの１Ｍボラン溶液（３．５ｇ、２４４．３ｍｍｏｌのボラン）に注意深く加えた。加え終わったら氷水浴を取り外し、反応混合物を徐々に６０℃まで加熱した。反応混合物を６０℃で２０時間撹拌した。反応混合物のサンプル（１ｍｌ）を取り出し、０．５ｍｌの５ＮのＨＣｌと混合し、３０分間静置した。サンプルに、０．５ｍｌの５０ＮａＯＨを加え、その後、２ｍｌの水を加え、溶液を、白色の沈殿がすべて溶解するまで撹拌しつづけた。溶液をエーテル（５ｍｌ）で抽出し、蒸発させた。残留物を、１ｍｇ／ｍｌの濃度でアセトニトリルに溶解し、質量分析を行った。質量分析スペクトルで、モノ−及びジアミドが見られる場合には（Ｍ＋Ｈ／ｚ＝５２０及び５３４）、反応は完了していない。反応を完了させるために、さらに１００ｍｌのボランの１ＭのＴＨＦ溶液を反応混合物に加え、さらに６時間６０℃にて撹拌を続けた。上記のサンプル採取につづき、さらに新たなサンプルを採取した。トリアミンへの完全な添加が完了するまで、適宜、ボランの１ＭのＴＨＦ溶液をさらに加えつづけた。
【０１７２】
反応混合物を周囲温度まで冷却し、５ＮのＨＣｌを徐々に加えた［注意：激しく発泡するので注意］。ＨＣｌは、気体の発生が観察されなくなるまで加えた。混合物を３０分間撹拌し、その後蒸発させた。ケーキをＮａＯＨ水溶液に懸濁し（２０〜４０％、１：２ｗ／ｖ）、３０分間撹拌した。混合物を水（３容量）で希釈した。次に、混合物をジエチルエーテル（２×１５０ｍｌ）で抽出した［注意：ハロゲン化溶剤は使用しないこと］。次に、有機相を一緒にして、水（１ｘ２００ｍｌ）及び食塩水（１５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。蒸留後の収率：７．６ｇ、８４％（油分として）。
【０１７３】
ＮＭＲ１Ｈ（ＣＤＣｌ３），δ：１．４５，（６Ｈ，ｍ，３ｘＣＨ２；１．５４，（１Ｈ，七重項，ＣＨ）；２．６０（６Ｈ，ｔ，３ｘＣＨ２Ｎ）；３．６８（６Ｈ，ｓ，ＡｒＣＨ２）；３．７８（９Ｈ，ｓ，３ｘＣＨ３Ｏ）；６．９４（６Ｈ，ｄ，６ｘＡｒ）．７．２０（６Ｈ，ｄ，６ｘＡｒ）。
【０１７４】
ＮＭＲ１３Ｃ（ＣＤＣｌ３），δ：３２．１７，ＣＨ；３４．４４，ＣＨ２；４７．００，ＣＨ２；５３．５６，ＡｒＣＨ２；５５．２５，ＣＨ３Ｏ；１１３．７８，Ａｒ；１２９．２９，Ａｒ；１３２．６１；Ａｒ；１５８．６０，Ａｒ。
【０１７５】
（工程ｄ）：１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンの調製
１，１，１−トリス［２−（ｐ−メトキシベンジルアミノ）エチル］メタン（２０．０グラム、０．０３６ｍｏｌ）をメタノール（１００ｍｌ）に溶解し、Ｐｄ（ＯＨ）２（５．０グラム）を加えた。混合物の水素添加を行い（３バール、１００℃、オートクレーブ中）、５時間撹拌した。Ｐｄ（ＯＨ）２を、さらに、１０時間後と１５時間後に２回に分けて加えた（２×５グラム）  。
【０１７６】
反応混合物を濾過し、濾液をメタノールで洗浄した。有機相を一緒にして、蒸発させ、残留物を減圧下で蒸留したところ（１×１０−２、１１０℃）、２．６０グラム（５０％）の１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンが得られた。
【０１７７】
ＮＭＲ１Ｈ（ＣＤＣｌ３），δ２．７２（６Ｈ，ｔ，３ｘＣＨ２Ｎ），１．４１（Ｈ，七重項，ＣＨ），１．３９（６Ｈ，ｑ，３ｘＣＨ２）。
【０１７８】
ＮＭＲ１３Ｃ（ＣＤＣｌ３），δ３９．８（ＣＨ２ＮＨ２），３８．２（ＣＨ２．），３１．０（ＣＨ）。
【０１７９】
（工程ｅ）：キレートＸの調製
トリス（２−アミノエチル）メタン（４．０４７ｇ、２７．９ｍｍｏｌ）の乾燥エタノール（３０ｍｌ）溶液に、無水炭酸カリウム（７．７ｇ、５５．８ｍｍｏｌ、２当量）を、窒素雰囲気で、室温にて、激しく撹拌しながら加えた。３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタン（７．５６ｇ、５５．８ｍｏｌ、２当量）の溶液を、乾燥エタノール（１００ｍｌ）に溶解し、７５ｍｌのこの溶液を、反応混合物に徐々に滴下して加えた。反応後、シリカでＴＬＣを行った［ジクロロメタン、メタノール、濃縮（０．８８ｓｇ）アンモニア（１００／３０／５）で展開させ、ニンヒドリンを吹き付けて加熱することによって、ＴＬＣプレートを現像した］。モノ−、ジ−及びトリアルキル化した生成物が観察され、ＲＦはその順で上昇していた。分析用ＨＰＬＣを、ＲＰＲ逆相カラムで、アセトニトリルの３％アンモニア水溶液への７．５〜７５％の勾配を用いて行った。反応生成物を真空中で濃縮して、エタノールを除去し、水（１１０ｍｌ）に再懸濁させた。水性のスラリーをエーテル（１００ｍｌ）で抽出して、トリアルキル化化合物の一部と親油性の不純物を除去し、モノ−及び所望のジアルキル化生成物を、水相に残留させた。水溶液を、酢酸アンモニウム（２当量、４．３ｇ、５５．８ｍｍｏｌ）で緩衝化させ、クロマトグラフィーを最適化した。水溶液を４℃で一晩保存してから、自動化した調製用のＨＰＬＣで精製を行った。
収率（２．２ｇ、６．４ｍｍｏｌ、２３％）。
【０１８０】
質量分析：正イオン、コーン電圧１０Ｖ、実測値：３４４、計算値（Ｍ＋Ｈ）：３４４
ＮＭＲ１Ｈ（ＣＤＣｌ３），δ１．２４（６Ｈ，ｓ，２ｘＣＨ３），１．３（６Ｈ，ｓ，２ｘＣＨ３），１．２５−１．７５（７Ｈ，ｍ，３ｘＣＨ２，ＣＨ），（３Ｈ，ｓ，２ｘＣＨ２），２．５８（４Ｈ，ｍ，ＣＨ２Ｎ），２．８８（２Ｈ，ｔ，ＣＨ２Ｎ２），５．０（６Ｈ，ｓ，ＮＨ２，２ｘＮＨ，２ｘＯＨ）。
【０１８１】
ＮＭＲ１Ｈ（（ＣＤ３）２ＳＯ），δ１．１４ｘＣＨ；１．２９，３ｘＣＨ２；２．１（４Ｈ，ｔ，２ｘＣＨ２）；
ＮＭＲ１３Ｃ（（ＣＤ３）２ＳＯ），δ９．０（４ｘＣＨ３），２５．８（２ｘＣＨ３），３１．０２ｘＣＨ２，３４．６ＣＨ２，５６．８２ｘＣＨ２Ｎ；１６０．３，Ｃ＝Ｎ。
【０１８２】
ＨＰＬＣの条件：流量、８ｍｌ／分、２５ｍｍのＰＲＰカラムを使用
Ａ＝３％アンモニア水（比重＝０．８８）／水、Ｂ＝アセトニトリル
時間                Ｂ（％）
０                ７．５
１５              ７５．０
２０              ７５．０
２２              ７．５
３０              ７．５。
【０１８３】
１回あたり３ｍｌの水溶液を充填し、１２．５〜１３．５分の時間幅で採取すること。
【０１８４】
実施例７：キレートＸのグルタリルイミド誘導体［ｂｉｓ［（１，１−ジメチル−２−Ｎ−ヒドロキシイミンプロピル）２−アミノエチル］−（２−（グルタリルイミド）エチル）メタン］の合成
【０１８５】
【化３４】
2009518373.tif 000035
キレートＸ（０．５ｇ、１．４５ｍｍｏｌ）を乾燥アセトニトリル（５０ｍｌ）及びトリエチルアミン（１５０ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）に窒素雰囲気中で溶解し、氷浴で０ｏＣまで冷却した。撹拌しながら、グルタル酸無水物（１６５ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）を反応系に加え、室温まで戻し、一晩撹拌した。一晩で生成した沈殿を濾過で集め、真空中で乾燥して、標記化合物の不純なサンプル（２６７ｍｇ、０．５８３ｍｍｏｌ、４０％）を得た。濾液を真空中で濃縮して得た無色のガラスを、集めておいた沈殿と一緒にして、５％のアンモニア水（比重０．８８０）（５０ｍｌ）に再度溶解し、自動化調製用ＨＰＬＣで精製した。
ＨＰＬＣの条件：流量８ｍｌ／分、１５０ｍｍ×２５ｍｍのＰＲＰカラムを使用、サンプルは、１回に溶液２ｍｌを充填
Ａ＝３％アンモニア溶液（比重＝０．８８）／水
Ｂ＝アセトニトリル
時間                Ｂ（％）
０                ７．５
１５            ７５．０
２０            ７５．０
２２              ７．５
３１              ７．５。
【０１８６】
所望の生成物は、１５．２５〜１６．５分で溶出した。生成物の溶液を真空中で蒸発させたところ、無色のガラス状の発泡体（３０４ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ、４７％）（融点、５４．８℃）が得られた。生成物を、ＴＬＣと分析用ＨＰＬＣで、ワンスポットで分析した。
【０１８７】
ＮＭＲ１Ｈ（ＤＭＳＯ），０．７（１２Ｈ，ｓ，４ｘＣＨ３），０．８５（４Ｈ，ｍ，２ｘＣＨ２），１．０（１Ｈ，ｍ，ＣＨ），１．３（６Ｈ，ｓ，２ｘＣＨ３），１．３（４Ｈ，ｍ，２ｘＣＨ２），１．６（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２），１．７５（６，ｍ，３ｘＣＨ２），２．６（２，ｍ，，２ｘＯＨ）３．２（２Ｈ，ｔ，ＮＨ）７．３（１Ｈ，ｔ，ＮＨ）。
【０１８８】
ＮＭＲ１３Ｃ（ＣＤ３ＳＯ）８．９７，２０．５１，２０．９１，２５．０９，２５．６０，３１．０６，３３．４１，３３．８６，５６．８９，６６．９９１６０．０７，１７１２．３４，１７４．３５１７４．５６。
【０１８９】
Ｍ／Ｓ：Ｃ２２Ｈ４３Ｎ５Ｏ５，Ｍ＋Ｈ＝４５７計測値４５７．６。
【０１９０】
実施例８：前駆体３［５−｛４−［１−（４−クロロ−フェニル）−５−（４′−フルオロ−ビフェニル−４−イルオキシ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−５−オキソペンタン酸｛５−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）−３−［２−（２−ヒドロキシイミノ−１，１−ジメチル−プロピルアミノ）エチル］ペンチル｝アミド］の合成
【０１９１】
【化３５】
2009518373.tif 000036
キレートＸのグルタリルアミド誘導体（３００ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、ＨＡＴＵ（２４９ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（１３２μＬ、１．３２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を５分間撹拌し、テトラフルオロチオフェノール（０．６６ｍｍｏｌ、１１９ｍｇ）を加えた。１０分間撹拌後、反応混合物を２０％のアセトニトリル／水（８ｍＬ）で希釈し、生成物を逆相ＨＰＬＣで精製したところ、収量１１０ｍｇの所望の生成物が凍結乾燥後に得られた。
【０１９２】
２−（４−クロロ−フェニル）−４−（４′−フルオロビフェニル−４−イルオキシ）−５−ピペラジン−１−イル−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（０．５ｍｍｏｌ、国際公開第０３／０９７６１２号に記載された方法で合成）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液に、Ｎ−メチルモルホリン（１ｍｍｏｌ）及び上述のペンタフルオロフェニルエステル（０．５５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間撹拌し、真空中で濃縮した。残留物を、０．１％のＴＦＡを含む水とアセトニトリルの混合物に加え、適当な水／アセトニトリル（０．１％のＴＦＡ）勾配を用いて、逆相クロマトグラフィーで精製した。
【０１９３】
実施例９：前駆体３の９９ｍＴｃ標識による造影剤８の形成［予測例］
【０１９４】
【化３６】
2009518373.tif 000037
１６μｇの無水塩化第一スズ、２５μｇのメチレンジホスホン酸、４５００μｇの炭酸水素ナトリウム、６００μｇの炭酸ナトリウム、２００μｇのｐ−アミノ安息香酸ナトリウムを、５０μｇの前駆体３の水溶液に加える。１ｍｌ（約５００ＭＢｑ）の９９ｍＴｃＯ４−を加え、得られた溶液を、室温で３０分間静置し、その後、ＨＰＬＣ及び／又はＴＬＣで、以下の条件を用いて分析する。
ＨＰＬＣ
カラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ、５ｕ、４．６×１５０ｍｍ
紫外線：２２０ｎｍ
流量：１ｍｌ／分
溶出剤Ａ：０．２％アンモニア水溶液（０．８８アンモニアを用いて調製）
溶出剤Ｂ：アセトニトリル
勾配：１０〜６０％のＢ、１０分間。
ＴＬＣ
１）シリカゲルストリップ、塩類溶液中で実施
２）シリカゲルストリップ、５０：５０の０．１ＭのＮＨ４ＯＡｃ：ＭｅＯＨ中で実施。
【０１９５】
実施例１０：造影剤１３の合成［予測例］
【０１９６】
【化３７】
2009518373.tif 000038
（ｉ）Ｎ−（カルボキシメチル）−Ｎ−（２−ピリジニルメチル）グリシンｔ−ブチルエステル（Ｔｃ９９ｍ（ＣＯ３）＋のキレート剤）の合成
この化合物の合成は、Ｓｔｉｃｈｅｌｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ，  Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（２００３）３０（５）４６５］で対応するメチルエステルについて記載されている方法を、ブロモ酢酸メチルのかわりにｔ−ブチルを用いることによって僅かに改変して実施する。
【０１９７】
（ｉｉ）工程（ｉ）で得られたキレート剤の１，２−ジアミノシクロヘキサンとの結合
１，２−ジアミノシクロヘキサン（０．５０ｍｍｏｌ、合成方法は、Ｇａｃｈｅｒｕら（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９８９  ２６４（２２）１２９６３−９）に記載）、工程（ｉ）で得られたキレート剤（０．５５ｍｍｏｌ）、ＰｙＡＯＰ（０．５５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液に、Ｎ−メチルモルホリン（１．１ｍｍｏｌ）を加える。反応の進行を、適当な水／アセトニトリル（０．１％のＴＦＡ）の勾配を用いた逆相ＨＰＬＣで監視する。出発材料が完全に転化したら、溶液を真空中で濃縮し、残留物を逆相クロマトグラフィーで精製する。
【０１９８】
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で得られたコンジュゲートの脱保護
工程（ｉｉ）で得られた化合物のＴＦＡ／水（９５：５）混合物溶液を、Ｂｏｃ基が完全に開裂するまで撹拌し、ＨＰＬＣで分析を行って、ｔ−ブチルエステルを確認する。反応混合物を真空中で濃縮し、残留物を、適当な水／アセトニトリル（０．１％のＴＦＡ）の勾配を用いて調製用逆相クロマトグラフィーで精製する。
【０１９９】
（ｉｖ）工程（ｉｉｉ）で得られた前駆体の放射標識
９９ｍＴｃ（Ｈ２Ｏ）３（ＣＯ）３＋をＰｓｉｍａｄａｓ  ｅｔ  ａｌ，  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｓｏｔｏｐｅｓ（２００６）６４、１５１］に記載の通り用いて、放射標識を実施する。適当な水／メタノール（０．１％ＴＦＡ）の勾配を用いた逆相ＨＰＬＣで、放射化学分析を行う。
【０２００】
実施例１１：非放射性造影剤９の合成
【０２０１】
【化３８】
2009518373.tif 000039
（ｉ）化合物２の調製
エピクロロヒドリン（３．８５ｇ、０．０４１７ｍｍｏｌ、１当量）を、市販のグリニャール塩１（０．０３７５ｍｍｏｌ、０．９当量）の０．２５ＭのＴＨＦ溶液に徐々に加えた。溶液を３５℃で約２時間撹拌したところ、反応が完了した（ＴＬＣ：酢酸エチル／石油エーテル、２：８）。反応混合物に水を徐々に加えた。沈殿したマグネシウム塩を濾別し、濾液を減圧下で濃縮して、ＴＨＦを除去した。残った水溶液をＤＣＭで洗浄した（ｘ３）。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、硫酸マグネシウムを濾別し、溶剤を減圧下で留去した。その後、粗生成物を、クロマトグラフィーで精製した（１０〜２０％酢酸エチル／石油エーテル）。収率：７０％。
【０２０２】
（ｉｉ）化合物３の調製
化合物２（１ｇ、０．００５ｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（２５ｍｌ）に溶解し、アジ化ナトリウム（１．６ｇ、０．０２５ｍｏｌ、５当量）を加えた。反応混合物を１２０℃で一晩撹拌した（ＴＬＣ：酢酸エチル／石油エーテル、２：８）。水を加え、溶液をジエチルエーテルで抽出した（ｘ２）。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、硫酸マグネシウムを濾別し、溶剤を減圧下で蒸発させて、容積を約２０ｍｌとした。その後、酢酸エチルを加え、溶液を約５ｍｌまで再度濃縮した。その後、この残留物を、クロマトグラフィーによって精製した。（５〜２０％の酢酸エチル／石油エーテル）。収率：９０％。
【０２０３】
（ｉｉｉ）化合物４の調製
３（１．０３５ｇ、０．００５ｍｍｏｌ）のメタノール溶液に、木炭に担持させた１０％のパラジウム（２００ｍｇ）を加えた。その後、Ｐａｒｒ装置を用いて、混合物の水素付加を行い、触媒を濾別して、濾液を減圧下で乾燥するまで蒸発させたところ、黄色の油が得られた。１Ｈ−ＮＭＲを行ったところ、この油分は、所望のアミン４であることが確認された。収率：９５％。
【０２０４】
（ｉｖ）化合物５の調製
４（１．０７８ｇ、５．８９ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ溶液に、Ｂｏｃ無水物（１．４１４ｇ、６．４８ｍｍｏｌ、１．１当量）を０℃で加えた。溶液を、一晩撹拌した。ＴＨＦを蒸発させ、残留物を水に加えた。水を酢酸エチルで抽出した（ｘ３）。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、硫酸マグネシウムを濾別し、溶剤を減圧下で乾燥するまで蒸発させたところ、黄色の油分が得られた。この油分を、クロマトグラフィー（２０〜７０％の酢酸エチル／石油エーテル）で精製した。収率：５０％。
【０２０５】
（ｖ）化合物６の調製
アルコール５（１．３ｇ、４．６ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（０℃）を、ピリジン（８２０μｌ、１０．１２ｍｍｏｌ、２．２当量）で処理し、その後、デス・マーチン・ペルヨージナン（３．９０ｇ、９．２ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。反応系を、室温で撹拌しつづけた（ＴＬＣ：石油エーテル／酢酸エチル、３：７）。約３時間後に、数滴の水を加え、反応を飽和重炭酸ナトリウム水溶液と飽和亜硫酸ナトリウムで、クエンチさせ、ＤＣＭで抽出した（ｘ３）。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、硫酸マグネシウムを濾別し、溶剤を減圧下で蒸発させたところ、ゴム状物が得られた。ゴム状物を、クロマトグラフィー（２０〜５０％の酢酸エチル／石油エーテル）で精製した。収率：４０％。
【０２０６】
（ｖｉ）化合物７の調製
フルオロメチルフェニルスルホン（２９７ｍｇ、１．７０８ｍｍｏｌ、２当量）とクロロリン酸ジエチル（２４７μｌ、１．７０８ｍｍｏｌ、２当量）のＴＨＦ溶液に、窒素中で−６０℃にて、ＬｉＨＤＭＳの１．０ＭのＴＨＦ溶液（３．４２ｍｌ、３．４１６ｍｍｏｌ、４当量）を加えた。溶液を約３０分撹拌しつづけ、ＴＨＦに溶解したケトンを加えた。反応系を室温にて１２時間撹拌しつづけた（ＴＬＣ：酢酸エチル／石油エーテル、３：７）。反応混合物を、クロマトグラフィー（５〜４０％酢酸エチル／石油エーテル）で精製した。ＮＭＲによって、主生成物が所望の化合物７であることを確認した。収率：７１．４％。
【０２０７】
（ｖｉｉ）化合物８の調製
化合物７（２６７ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ、１当量）、トリブチルスズ水和物（５３３ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ、３当量）、ＡＣＮ（１５ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ、０．１当量）を、ベンゼンに溶解し、混合物を一晩還流した（ＴＬＣ：酢酸エチル／石油エーテル、１：９）。ベンゼンを減圧下で蒸発させ、粗生成物をＮＭＲで分析したところ、所望の生成物が主成分であることが示された。次に、この混合物を、１〜３０％の酢酸エチル・石油エーテルを用いてクロマトグラフィーで精製した。収率：５４％。
【０２０８】
（ｖｉｉｉ）化合物の９の調製
化合物８のＴＨＦ溶液に、ＮａＯＭｅの０．５Ｍメタノール溶液を徐々に加え、反応混合物を６０℃に１２時間加熱した（ＴＬＣ：酢酸エチル／石油エーテル、１：９．）。溶剤を減圧下で除去し、粗生成物を、１０〜３０％の酢酸エチル／石油エーテルを用いたクロマトグラフィーで精製した。収率：７２％。
【０２０９】
（ｉｘ）化合物１０［非放射性造影剤９］の調製
化合物９（７０ｍｇ、０．２３６ｍｍｏｌ、１当量）を、４ＭのＨＣｌのジオキサン溶液（１ｍｌ、約４当量）に溶解した。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。溶剤を減圧下で除去した。ジエチルエーテルを透明の油分に加えたところ、生成物が、白色固体として沈殿した。純粋な化合物を１Ｈ−ＮＭＲ及びＮＯＥ実験で調べたところ、１０が所望の化合物及び所望の異性体（フッ素はアミンに対してトランス）であることが確認された。
【０２１０】
実施例１２：５−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−４−（４′−ヒドロキシ−ビフェニル−４−イルオキシ）−２−ｐ−トリル−２Ｈ−ピリダジン−３−オン［前駆体５］の合成
【０２１１】
【化３９】
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反応は、マイクロ波によって反応させる都合上、ガラス製バイアル中で実施した。４、４′−ジヒドロキシビフェニル（Ｆｌｕｋａ、１１ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）を、炭酸セシウム（Ｆｌｕｋａ、３９ｍｇ、０．１２  ｍｍｏｌ）の乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｒａｔｈｂｕｒｎ、２ｍＬ）への懸濁液に、アルゴン中で加えた。１時間後、この混合物を、４−クロロ−５−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−ｐ−トリル−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（２０ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）に加えた。マイクロ波を照射することによって混合物を１３０℃に９時間加熱した。減圧下でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを蒸発させ、反応混合物を逆相ＨＰＬＣ（カラム、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）５μ２１．２×２５０ｍｍ、溶剤：Ａ＝水／０．１％のＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％のＴＦＡ；勾配、２〜４０％のＢ、６０分間；流量、１０ｍｌ／分、２１４ｎｍ及び２５４ｎｍの紫外線で検出）を用いて精製したところ、１．４ｍｇの純粋な化合物が得られた。ＨＰＬＣによる分析（カラム、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）５μ４．６×２５０ｍｍ、溶剤：Ａ＝水／０．１％のＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％のＴＦＡ；勾配、２０〜４０％のＢ、２０分間；流量、１．０ｍｌ／分、２１４ｎｍ及び２５４ｎｍの紫外線で検出、ｔＲ＝１９．８分）、並びにＬＣ−ＭＳによる分析（カラム、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）３μｍ２．０×２０ｍｍ；溶剤：Ａ＝水／０．１％のＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％のＴＦＡ；勾配、１０〜８０％のＢ、５分間；流量、０．６ｍｌ／分、２１４ｎｍ及び２５４ｎｍの紫外線で検出、ＥＳＩ−ＭＳ；ｔＲ＝２．５分、ｍ／ｚ、４８３．３（ＭＨ＋））によって、生成物を確認した。
【国際調査報告】
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