(57)【要約】  式(Ia)の化合物は、フラビウイルス科のウイルスの複製を阻害するのに活性であることが知見された：2009511459.tif 000011｛式中、R1及びR2は同一または異なり、水素、ハロゲン、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表し；ここでLはそれぞれ同一または異なり、直接結合またはC1-C4アルキレン基を表し；L’は直接結合またはC2-C4アルキレン基を表し；R3は水素、C1-C4アルキルまたはC1-C4ハロアルキルを表し；Aは5-〜10-員のヘテロシクリル基を表し；及びA’はC6-C10アリール基を表し；ここでR1及びR2の少なくとも一つは、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-L’-A’である｝。
2009511459.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ia）：
【化１】
2009511459.tif 000009
のキナゾリン誘導体、またはその医薬的に許容可能な塩｛式中、R1及びR2は同一または異なり、水素、ハロゲン、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表し；
ここでLはそれぞれ同一または異なり、直接結合またはC1-C4アルキレン基を表し；
L’は直接結合またはC2-C4アルキレン基を表し；
R3は水素、C1-C4アルキルまたはC1-C4ハロアルキルを表し；
Aは5-〜10-員のヘテロシクリル基を表し；
A’はC6-C10アリール基を表し；
ここでR1及びR2の少なくとも一つは、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’である｝。
【請求項２】
R1は前記キナゾリン環に対してパラ位にあり、R2は前記キナゾリン環に対してメタ位にある、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記R1は、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表し、及び前記R2は、水素、ハロゲン、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表し、但し、R1が-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表すとき、R2は水素、ハロゲンまたは-L-O-R3を表す、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
R1またはR2が、-L-O-R3を表すとき、基Lは直接結合若しくはC1-C2アルキレンであり、R3は水素、C1-C2アルキル若しくはC1-C2ハロアルキルである、請求項１〜３のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項５】
前記基-L-O-L-Aが基-O-L-Aまたは-(C1-C2アルキレン)-O-L-Aであり、ここでLは直接結合またはC1-C4アルキレン基である、請求項１〜４のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項６】
Aがモルホリニル基である、請求項１〜５のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項７】
基-L-O-L’-A’-が基-O-L’-A’または-(C1-C2アルキレン)-O-L'-A’であり、ここでL’は直接結合またはC2-C4アルキレン基である、請求項１〜６のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項８】
A’がフェニル基である、請求項１〜７のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項９】
式(Ia)の前記キナゾリン誘導体が式(I)：
【化２】
2009511459.tif 000010
のキナゾリン誘導体である、請求項１〜８のいずれか1項に記載の化合物｛式中、R1及びR2は同一または異なり、水素、ハロゲン、-O-R3、-O-L-Aまたは-O-L’-A’を表し；
ここでLはC1-C4アルキレン基を表し；
L’はC2-C4アルキレン基を表し； 
R3は水素、C1-C2アルキルまたはC1-C2ハロアルキルを表し；
Aはモルホリニルを表し；及び
A’はフェニルを表し；
ここでR1及びR2の少なくとも一つは、-O-R3、-O-L-Aまたは-O-L’-A’である｝。
【請求項１０】
R1及びR2は同一または異なり、水素、ハロゲン、-O-R3または-O-L-Aを表し；
ここでLはC1-C4アルキレン基を表し；
R3は水素、C1-C2アルキルまたはC1-C2ハロアルキルを表し；及び
Aはモルホリニル基を表し；
ここでR1及びR2の少なくとも一つは、-O-R3または-O-L-Aである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
ヒトまたは動物の身体を処置する際に使用するための、請求項１〜１０のいずれか１項に定義の式(Ia)のキナゾリン誘導体。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか１項に定義の式(Ia)のキナゾリン誘導体またはその医薬的に許容可能な塩と、医薬的に許容可能なキャリヤまたは希釈剤とを含む、医薬組成物。
【請求項１３】
フラビウイルス科感染の処置または予防で使用する薬剤の製造における、請求項１〜１０のいずれか1項に定義の式(Ia)のキナゾリン誘導体またはその医薬的に許容可能な塩の使用。
【請求項１４】
前記フラビウイルス科感染がペスチウイルス感染である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
前記ペスチウイルス感染が、牛ウイルス性下痢症、古典型豚コレラウイルスまたはボーダー病ウイルスによる感染症である、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
前記フラビウイルス科感染がフラビウイルス感染症である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１７】
前記フラビウイルス感染が、黄熱病ウイルス、デング熱ウイルス、日本脳炎ウイルスまたはダニ媒介脳炎ウイルスによる感染症である、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記フラビウイルス感染がヘパシウイルス属感染症である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１９】
前記ヘパシウイルス属感染がC型肝炎ウイルスによる感染である、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
前記薬剤がさらに(a)インターフェロンまたはその誘導体、及び/または(b)リバビリンまたはその誘導体を含む、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
前記インターフェロン誘導体がPEG-インターフェロンであり、及び/または前記リバビリン誘導体はビラミジンである、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
ヒトまたは動物の身体の処置において同時、個別または逐次使用するための
(a)請求項１〜１０のいずれか１項に定義の式(Ia)のキナゾリン誘導体、またはその医薬的に許容可能な塩と、
(b)請求項２０または２１に定義のインターフェロンまたはインターフェロン誘導体及び／または請求項２０または２１に定義のリバビリンまたはリバビリン誘導体とを含む製品。
【請求項２３】
請求項１３〜１９のいずれか1項に定義のフラビウイルスに感染した患者またはそれにかかりやすい患者の処置法であって、請求項１〜１０のいずれか1項に定義の式(I)のキナゾリン誘導体またはその医薬的に許容可能な塩の有効量を前記患者に投与することを含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、フラビウイルス科感染の処置または予防で有用な一連のキナゾリン誘導体に関する。
フラビウイルスファミリーのウイルスは、プラス鎖RNAゲノムを含む、小さな二十面体のエンベロープを持ったウイルスである。このファミリーには三つの属があり、それらはフラビウイルス属、ペスチウイルス属とヘパシウイルス属である。
【０００２】
フラビウイルス科ウイルスの多くは重大なヒト病原体である。実際、ヘパシウイルス属としてはC型肝炎ウイルスが挙げられる。しかし、フラビウイルス科感染の有効且つ安全な処置法はいまだにない。
【０００３】
PCT国際特許出願国際公開第WO98/02434号は、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤としてキナゾリン類を開示する。この文献は6-位置にモルホリノ-アニリン基をもつ化合物については具体的にまったく開示していない。
【０００４】
式(Ia)のキナゾリン誘導体は、フラビウイルス属の増殖阻害に活性であるので、フラビウイルス感染の処置または予防に有用であることが、意外にも知見された。これらの化合物は、特に有益な生物学的利用性を提供する。したがって、本発明は、式(Ia)：
【０００５】
【化１】
2009511459.tif 000003
【０００６】
のキナゾリン誘導体またはその医薬的に許容可能な塩を提供する｛式中、R1及びR2は同一または異なり、水素、ハロゲン、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表し；
ここでLはそれぞれ同一または異なり、直接結合またはC1-C4アルキレン基を表し；
L’は直接結合またはC2-C4アルキレン基を表し；
R3は水素、C1-C4アルキルまたはC1-C4ハロアルキルを表し；
Aは5-〜10-員のヘテロシクリル基を表し；及び
A’はC6-C10アリール基を表し；
ここでR1及びR2の少なくとも一つは、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’である｝。
【０００７】
一態様において、式(Ia)のキナゾリン誘導体は、式(I)：
【０００８】
【化２】
2009511459.tif 000004
【０００９】
のキナゾリン誘導体である｛式中、R1及びR2は同一または異なり、水素、ハロゲン、-O-R3、-O-L-Aを表し；
ここでLはC1-C4アルキレン基を表し；
R3は水素、C1-C2アルキルまたはC1-C2ハロアルキルを表し；及び
Aはモルホリニル基を表し；
ここでR1及びR2の少なくとも一つは、-O-R3または-O-L-Aである｝。
【００１０】
通常、R1は-O-R3または-O-L-Aを表し、R2は水素、ハロゲン、-O-R3または-O-L-Aを表す。
本明細書中で使用するように、C1-C4アルキル基または部分は、１〜４個の炭素原子を含む線状または分岐のアルキル基または部分である。C1-C4アルキル基または部分は、C1-C2アルキル基または部分であるのが好ましい。C1-C4アルキル基及び部分の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、i-ブチル及びt-ブチルが挙げられる。C1-C4アルキル基及び部分の例としては、メチル及びエチルが挙げられる。
【００１１】
本明細書中で使用するように、C1-C4アルキレン基または部分は線状または分岐のアルキレン基または部分である。これらの例としては、メチレン、エチレン及びn-プロピレン基及び部分、特にエチレン及びn-プロピレン基及び部分が挙げられる。C2-C4アルキル基または部分は、線状または分岐のアルキレン基または部分である。これらの例としては、エチレン及びn-プロピレン基及び部分がある。誤解を避けるために、二つのアルキレン部分がある一つの基に存在する場合、このアルキレン部分は同一でも異なっていてもよい。
【００１２】
通常、本明細書中で使用するように、C6-C10アルキル基または部分はフェニルまたはナフチルである。フェニルが好ましい。
本明細書中で使用するように、ハロゲンは通常、塩素、フッ素、臭素またはヨウ素であり、好ましくは塩素、臭素またはフッ素であり、フッ素が特に好ましい。
【００１３】
本明細書中で使用するように、ハロアルキル基は通常、一つ以上の前記ハロゲン基で置換されたアルキル基である。通常、これは１、２または３個の前記ハロゲン原子で置換されており、特に１、２または３個のフッ素原子で置換されている。好ましいハロアルキル基としては、-CF3及び-CHF2が挙げられる。
【００１４】
本明細書中で使用するように、5-〜10-員のヘテロシクリル基または部分は、炭素原子の一つ以上、たとえば１、２または３個がN、O、S、S(O)及びS(O)2、たとえばN及び/またはOから選択される部分で置換されている、単環式、非-芳香族、飽和または不飽和C5-C10炭素環式環である。通常これは5-または6-員環である。通常、飽和環である。
【００１５】
好適なヘテロシクリル基及び部分としては、ピラゾリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、チオモルホリニル、モルホリニル、ピロリジニル、1,3-ジオキソラニル及び1,4-ジオキソリル基及び部分が挙げられる。モルホリニルが特に好ましい。
【００１６】
通常、R1及びR2置換基中の前記アリール及びヘテロシクリル基は非置換である。
式(Ia)の化合物において、R1及びR2は通常、フェニル環の３と４の位置に配置される。言い換えれば、これらは通常、前記キナゾリン環に対してメタ及びパラである。R1は好ましくは４位置(パラ)であり、R2は好ましくは３位置(メタ)である。
【００１７】
通常R1及びR2の一つは、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表すか、そのいずれも-L-O-L-Aも-L-O-L’-A’も表わさない。従ってR1が水素、ハロゲンまたは-L-O-R3を表すとき、R2は通常、水素、ハロゲン、-L-O-R3、-L-O-L-A、または-L-O-L’-A’を表し、但し、R1及びR2の一つは-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L'-A'である。しかしながら、R1が-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表すとき、R2は通常、水素、ハロゲンまたは-L-O-R3を表す。
【００１８】
通常、R1は-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表し、好ましくは-L-O-R3または-L-O-L-Aである。通常、R2は-水素、ハロゲン、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表し、好ましくは、ハロゲン、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表し、より好ましくは、ハロゲン、-L-O-R3または-L-O-L-Aを表す。好ましくは、R1が-L-O-R3を表すとき、R2は水素、ハロゲン、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表し、好ましくはハロゲン、-L-O-R3、-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表し、より好ましくは、ハロゲン、R1は-L-O-R3または-L-O-L-Aを表す。あるいは、R1が-L-O-L-Aまたは-L-O-L’-A’を表すとき、R2は水素、ハロゲンまたは-L-O-R3、好ましくはハロゲンまたは-L-O-R3を表す。
【００１９】
R1またはR2が-L-O-R3を表すとき、基Lは、通常、直接結合またはC1-C2アルキレン、好ましくは直接結合である。R3は通常、水素、C1-C2アルキルまたはC1-C2ハロアルキルである。従って、-L-O-R3は、通常、-O-R3を表し、ここでR3は水素、C1-C2アルキルまたはC1-C2ハロアルキルである。
【００２０】
R1またはR2が-L-O-L-Aを表すとき、これは通常、基-O-L-Aまたは(C1-C2アルキレン)-O-L-A、好ましくは基-O-L-Aであり、ここでLは直接結合であるか、C1-C4アルキレン基、好ましくはC1-C4アルキレン基である。Aは通常モルホリニル基である。
【００２１】
R1またはR2が-L-O-L'-A'を表すとき、これは基-O-L’-A’または-(C1-C2アルキレン)-O-L’-A’、好ましくは基-O-L’-A’であり、ここでL'は直接結合またはC1-C4アルキレン基、好ましくはC2-C4アルキレン基である。A’は通常フェニル基である。
【００２２】
本発明の好ましい態様において、式(Ia)のキナゾリン誘導体は、式(I)のキナゾリン誘導体であり、ここでR1及びR2は同一または異なり、水素、ハロゲン、-O-R3、-(C1-C2アルキレン)-O-R3、-O-L-A、-(C1-C2アルキレン)-O-L-A、-O-L’-A’または-(C1-C2アルキレン)-O-L’-A’を表し；
ここでLは直接結合またはC1-C4アルキレン基を表し；
L’は直接結合またはC2-C4アルキレン基を表し；
R3は、水素、C1-C4アルキルまたはC1-C4ハロアルキルを表し；
Aはモルホリニル基を表し；及び
A'はフェニルを表し、
ここでR1及びR2の少なくとも一つは、-O-R3、-(C1-C2アルキレン)-O-R3、-O-L-A、-(C1-C2アルキレン)-O-L-A、-O-L’-A’または-(C1-C2アルキレン)-O-L’-A’である。
【００２３】
通常、この態様において、R1は、-O-R3、-(C1-C2アルキレン)-O-R3、-O-L-A、-(C1-C2アルキレン)-O-L-A、-O-L’-A’または-(C1-C2アルキレン)-O-L’-A’を表し、R2は、水素、ハロゲン、-O-R3、-(C1-C2アルキレン)-O-R3、-O-L-A、-(C1-C2アルキレン)-O-L-A、-O-L’-A’または-(C1-C2アルキレン)-O-L’-A’を表し、但し、R1が-O-L-A、-(C1-C2アルキレン)-O-L-A、-O-L’-A’または-(C1-C2アルキレン)-O-L’-A’を表すとき、R2は、水素、ハロゲン、-O-R3または-(C1-C2アルキレン)-O-R3を表し、好ましくはハロゲン、-O-R3または-(C1-C2アルキレン)-O-R3を表す。
【００２４】
本発明のさらに好ましい態様では、式(Ia)のキナゾリン誘導体は、式(I)のキナゾリン誘導体であり、ここでR1及びR2は同一または異なり、水素、ハロゲン、-O-R3、-O-L-Aまたは-O-L’-A’を表し；
ここでLはC1-C4アルキレン基を表し；
L’はC2-C4アルキレン基を表し；
R3は、水素、C1-C2アルキルまたはC1-C2ハロアルキルを表し；
Aはモルホリニル基を表し；及び
A'はフェニルを表し、
ここでR1及びR2の少なくとも一つは、-O-R3、-O-L-Aまたは-O-L’-A’である。
【００２５】
本態様の好ましい側面では、R1は、-O-R3、-O-L-Aまたは-O-L’-A’を表し、R2は、水素、ハロゲン、-O-R3、-O-L-Aまたは-O-L’-A’、好ましくはハロゲン、-O-R3、-O-L-Aまたは-O-L’-A’を表し、但し、R1が-O-L-Aまたは-O-L’-A’を表すとき、R2は、水素、ハロゲンまたは-O-R3を表し、好ましくはハロゲンまたは-O-R3を表す。
【００２６】
本発明のさらに好ましい態様では、式(Ia)のキナゾリン誘導体は、式(I)のキナゾリン誘導体であり、ここでR1及びR2は同一または異なり、水素、ハロゲン、-O-R3または-O-L-Aであり、ここでLはC1-C4アルキレン基を表し；
R3は、水素、C1-C2アルキルまたはC1-C2ハロアルキルを表し；及び
Aはモルホリニル基を表す。
【００２７】
本態様の好ましい側面では、R1は-O-R3または-O-L-Aを表し、R2は、水素、ハロゲン、-O-R3または-O-L-A、好ましくはハロゲン、-O-R3または-O-L-Aを表し、但し、R1が-O-L-Aを表すとき、R2は、水素、ハロゲンまたは-O-R3を表し、好ましくはハロゲンまたは-O-R3を表す。
【００２８】
式(Ia)の特に好ましい化合物としては、以下のものが挙げられる：
6-[4-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン；
(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-{6-[4-(3-モルホリン-4-イル-プロポキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-アミン；
[6-(3,4-ジメトキシ-フェニル-キナゾリン-4-イル)-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン；
[6-(3,4-ジエトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン；
{6-[3-フルオロ-4-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン；
2-メトキシ-5-[4-(4-モルホリン-4-イル-フェニルアミノ)-キナゾリン-6-イル]-フェノール；
[6-(3,4-ビス-トリフルオロメトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン；
[6-(3,4-ビス-ジフルオロメトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン；
{6-[4-メトキシ-3-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン；
{6-[3-メトキシ-4-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン；
{6-[3-フルオロ-4-(3-モルホリン-4-イル-プロポキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン；
[6-(3-エトキシ-4-メトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-4-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン；
[6-(4-エトキシ-3-メトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン及びその医薬的に許容可能な塩。
【００２９】
一つ以上の不斉中心を含む式(Ia)の化合物は、鏡像異性的若しくはジアステレオマー的に純粋な形、または異性体の混合物の形態で使用することができる。誤解を避けるために、所望により、式(Ia)の化合物は溶媒和形で使用することができる。さらに誤解を避けるために、本発明の化合物は任意の互変異性形で使用することができる。
【００３０】
本明細書で使用するように、医薬的に許容可能な塩は、医薬的に許容可能な酸または塩基との塩である。医薬的に許容可能な塩としては、塩酸、硫酸、リン酸、二リン酸、臭化水素酸若しくは硝酸などの無機酸及び、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、コハク酸、酒石酸、安息香酸、酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸若しくはp-トリエンスルホン酸などの有機酸の両方の酸が挙げられる。医薬的に許容可能な塩基としては、アルカリ金属(たとえばナトリウム若しくはカリウム)及びアルカリ土類金属(たとえばカルシウム若しくはマグネシウム)の水酸化物、並びにアルキルアミン、アラルキルアミン及び複素環式アミンなどの有機塩基が挙げられる。
【００３１】
本発明の化合物（式中、R1は水素やハロゲン以外である）は、以下の反応スキームに従って製造することができる。
【００３２】
【化３】
2009511459.tif 000005
【００３３】
当業者には明らかなように、上記反応スキーム中のXは好適な離脱基、たとえばハロゲンである。
スキーム１を参照して、式(II)の化合物の有機金属試薬(V)との処理は、好適な溶媒(たとえばテトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミドまたはトルエン)中、高温(たとえば50°〜環流)で好都合に実施する。好都合には、本反応は、有機塩基(たとえばトリエチルアミン)または無機塩基(たとえば炭酸ナトリウム若しくはリン酸カリウム)の存在下、パラジウム触媒(たとえば20モル％のトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(II)または20モル％のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム(0))のもとで実施する。試薬(V)が有機スタナン(organostannane)(たとえばM=SnBu3)であるとき、当業者はスティルカップリングの一例として本反応を認識するだろう。ここで塩化リチウム、酸化銀などの追加の添加剤は有益であり、好都合にはこの反応は還流温度でトルエン中で実施する。試薬(V)がボロン酸誘導体である場合、当業者はスズキ-ミヤウラカップリングの一例として本反応を認識するだろう。このカップリングはテトラヒドロフラン中、60°で好都合に実施することができる。
【００３４】
スキーム１を参照して、式(III)の化合物の式(II)の化合物への転換は、式(III)の化合物の4-ヒドロキシ基を、ジメチルホルムアミドなどの触媒活性化剤を添加して、溶媒として塩化チオニルなどの試薬を使用してクロロなどの好適な離脱基に転換させ、続いてアセトニトリルなどの好適な溶媒中、4-モルホリノアニリンとの反応により実施する。
【００３５】
スキーム１を参照して、式(IV)の化合物の式(III)の化合物への転換は、当業者に公知であり、溶媒としてホルムアミドと、還流などの高温を使用して好都合に実施する。
式(Ia)の化合物｛式中、R1またはR2は、基-O-R3、-O-L-Aまたは-O-L’-A’である｝は以下のスキーム２に示されている反応によっても製造することができる。本反応は通常、酢酸の存在下、約120℃の温度で、約１時間実施する。
【００３６】
【化４】
2009511459.tif 000006
【００３７】
スキーム２で出発物質として使用される式(VII)の化合物は、以下のスキーム３に示されている反応の一つによって製造することができる。スキーム２及び３において、基R1及びR2は、ベンジルなどの保護基を表し、これは当業者に公知の方法によって所望のR1またはR2基で置き換えることができる。脱保護は、式(VII)の化合物の式(Ia)の化合物への転換前後で実施することができる。
【００３８】
スキーム３を参照して、有機金属試薬を含むそれぞれの反応は、スキーム１に関して記載されている式(II)の化合物と式(V)の化合物との間の反応と同一方法で好都合に実施する。有機金属化合物はそれぞれ通常、基Mをもち、これはB(OR’)2またはSnR3、好ましくはB(OR’)2である。カップリング反応は、通常、上記のようにスズキ-ミヤウラまたはスティルカップリング反応である。当業者には理解されるように、スキーム３に示される化合物中の基Xは、IまたはBr、好ましくはIなどの好適な離脱基である。
【００３９】
スキーム３を参照して、式(VIIIa)の化合物は、ジメチルホルムアミドジメチルアセタールとの約100℃で約1.5時間の反応により式(VIIIc)の化合物に転換することができる。同様に、式(VIIa)の化合物は、同一反応により式(VII)の化合物に転換することができる。
【００４０】
【化５】
2009511459.tif 000007
【００４１】
上記反応スキーム中の出発物質は公知化合物であるか、公知方法と類似の方法により製造することができる。
本発明の化合物は治療的に有用である。従って本発明は、ヒトまたは動物の身体を処置する際に使用するための、上記定義の式(Ia)のキナゾリン誘導体、またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。また、上記定義のように式(Ia)のキナゾリン誘導体、またはその医薬的に許容可能な塩と、医薬的に許容可能なキャリヤまたは希釈剤とを含む医薬組成物を提供する。
【００４２】
前記医薬組成物は、通常本発明の化合物を85重量％以下含む。通常、本発明の化合物を50重量％以下で含む。好ましい医薬組成物は滅菌であり、且つ発熱物質を含まない。さらに、本発明により提供される医薬組成物は、通常、実質的に純粋な光学異性体である本発明の化合物を含む。
【００４３】
上記のように、本発明の化合物はフラビウイルス感染に対して活性である。従って、本発明は、フラビウイルス感染の処置または予防で使用する薬剤の製造における、上記定義のような式(Ia)のキナゾリン誘導体、またはその医薬的に許容可能な塩の使用を提供する。また、フラビウイルス感染しているかまたはかかりやすい患者の処置法であって、式(Ia)のキナゾリン誘導体またはその医薬的に許容可能な塩の有効量を前記患者に投与することを含む、前記方法を提供する。
【００４４】
フラビウイルスファミリーは三つの属を含む。これらはヘパシウイルス、フラビウイルス及びペスチウイルスである。本発明の化合物は、ヘパチウイルス感染、フラビウイルス感染またはペスチウイルス感染の処置または予防に活性である。
【００４５】
本発明の化合物を使用して処置し得る典型的なペスチウイルス感染症としては、牛ウイルス性下痢症（bovine viral diarrhea virus）、古典型豚コレラウイルス（classical swine fever virus）またはボーダー病ウイルス（border disease virus）による感染症が挙げられる。
【００４６】
本発明の化合物で処置し得る典型的なフラビウイルス感染症としては、黄熱病ウイルス（yellow fever virus）、デング熱ウイルス（dengue fever virus）、日本脳炎ウイルス（Japanese encephalitis virus）またはダニ媒介脳炎ウイルス（tick borne encephalitis virus）による感染症が挙げられる。
【００４７】
本発明の化合物で処置し得る典型的なヘパチウイルス感染症としては、C型肝炎が挙げられる。
本発明の化合物は特にC型肝炎に対して活性である。通常、前記フラビウイルスはC型肝炎ウイルスである。
【００４８】
本発明の化合物は、種々の剤形で投与することができる。従って、これらは錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性若しくは油性懸濁液、分散可能な粉末若しくは粒子として経口投与することができる。本発明の化合物は、皮下、静脈内、筋肉内、胸骨内、経皮内または輸液法であろうと、非経口投与することもできる。本化合物は座剤としても投与することができる。
【００４９】
本発明の化合物は、医薬的に許容可能なキャリヤまたは希釈剤と共に投与するために配合する。たとえば固体経口形では、活性化合物と一緒に、希釈剤、たとえばラクトース、デキストロース、蔗糖、セルロース、コーンスターチ若しくはジャガイモデンプン；潤滑剤、たとえばシリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム若しくはカルシウム、及び／またはポリエチレングリコール；結合剤、たとえばスターチ、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース若しくはポリビニルピロリドン；崩壊剤、たとえばスターチ、アルギン酸、アルギン酸塩若しくはナトリウムスターチグリコラート；泡立ち作用性混合物；染料；甘味料；湿潤剤、たとえばレシチン、ポリソルベート、ラウリルサルフェートと；通常、医薬組成物中で使用される非毒性且つ医薬的に不活性物質を含む。そのような医薬製剤は、混合、造粒、錠剤形成、糖衣コーティング、またはフィルムコーティングプロセスなど公知方法により製造することができる。
【００５０】
経口投与用の液体分散液は、シロップ、エマルション及び懸濁液であってもよい。このシロップはキャリヤとして、たとえば蔗糖または、グリセリン及び／またはマンニトール及び／またはソルビトールと一緒に蔗糖を含むことができる。
【００５１】
懸濁液及びエマルションは、キャリヤとして天然ガム、寒天、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、またはポリビニルアルコールを含むことができる。筋肉注射用の懸濁液または溶液は、本活性化合物と共に、医薬的に許容可能なキャリヤ、たとえば滅菌水、オリーブオイル、オレイン酸エチル、グリコール類、たとえばプロピレングリコールと、所望により好適量のリドカイン塩酸塩を含むことができる。
【００５２】
注射または輸液用の溶液は、キャリヤとして、滅菌水などを含むことができ、好ましくはこれらは滅菌の水性、等張食塩水の形態であってもよい。
本発明の化合物は、公知の抗ウイルス剤と関連して使用することができる。この点における好ましい公知の抗ウイルス薬はインターフェロン及びリバビリン、並びにその誘導体であり、これらはC型肝炎の処置に関して公知である(Clinical  Microbiology  Reviews，2000年１月、67-82)。従ってこの薬剤は通常、さらにインターフェロンまたはその誘導体及び／またはリバビリンまたはその誘導体を含む。さらに本発明は、
(a)上記の式(Ia)のキナゾリン誘導体、またはその医薬的に許容可能な塩；
(b)インターフェロンまたはその誘導体及び／またはリバビリンまたはその誘導体；及び
(c)医薬的に許容可能なキャリヤまたは希釈剤
を含む医薬組成物を提供する。
【００５３】
また、ヒトまたは動物の身体を処置する際に個別に、同時にまたは逐次使用するための、
(a)上記の式(Ia)のキナゾリン誘導体、またはその医薬的に許容可能な塩；及び
(b)インターフェロンまたはその誘導体及び／またはリバビリンまたはその誘導体を含む製品を提供する。
【００５４】
好ましいインターフェロン誘導体は、PEG-インターフェロンである。好ましいリバビリン誘導体はビラミジンである。
本発明の化合物の治療的有効量を患者に投与する。具体的な化合物の活性、処置すべき患者の年齢、体重及び症状並びに、疾病の重篤度及び投与頻度及び経路に従って、典型的な用量は約0.01〜100mg/体重kgである。好ましくは、一日の用量レベルは0.05〜16mg/体重kgであり、より好ましくは0.05〜1.25mg/体重kgである。
【００５５】
以下の実施例により本発明を説明する。しかしながら、これらの実施例は本発明を決して限定するものではない。この点において、実施例セクションで使用する特定のアッセイは、抗ウイルス活性の適応を提供するためだけに設計されていると理解することが重要である。そのような活性を測定するために多くのアッセイが利用可能であり、任意の一つの特定のアッセイでの否定的な結果は決定的となるものではない。
実施例
全ての温度は℃である。薄層クロマトグラフィー(TLC)は、uv254インジケーター(Polygram)で、Si  60Gコーティングしたプラスチックプレート上で実施した。他に記載しない限り、全てのNMRスペクトルは、D6-DMSO中、250MHzで得た。
LC-MS条件
サンプルは、同時正-負イオン検出を使用するエレクトロスプレーを使用して、MicroMass  ZMDで実施した。
カラム：Synergi  Hydro-RP，30×4.6mm、I.D.、４μｍ。
勾配液：95：5〜5：95v/v  H2O/CH3CN＋0.05％蟻酸に4.0分で、３分保持、95：5v/v  H2O/CH3CN＋0.05％蟻酸に0.2分で戻す、95：5v/v  H2O/CH3CN＋0.05％蟻酸で3分保持。
検出：PDA250−340nm。
流速：1.5ml/分。
中間体１：2-アミノ-5-ヨードベンゾニトリル
A.Rosowsky及びH.Chen、J.Org.Chem.2001年、66巻、7522-7526頁の方法により製造した。
1H-NMR(CDCl3)δ7.64(1H，s)，7.55(1H，dd，J8.5，2.5Hz)，6.53(1H，d，J8.5Hz)，4.66(2H，br  s)。
LC-MS：室温、2.42  m/z  243ES−。
【００５６】
中間体２：N’-(2-シアノ-4-ヨード-フェニル)-N,N-ジメチル-ホルムアミジン
DMF-DMA(2.5当量，68ml)中の2-アミノ-5-ヨードベンゾニトリル(50g，0.2mol)の溶液を120°に２時間加熱した過剰量のDMF-DMAを真空下で濃縮により除去すると、粘稠な茶色油状の表記化合物が残った(61g，定量的)。
1H-NMR(CDCl3)δ7.79(1H，d，J＝1.9Hz)，7.65(1H，dd，J1.9，8.5Hz)，7.57(1H，s)，6.70(1H，d，J8.2Hz)，3.08(6H，s)。
LC-MS  rt  保持時間2.1  M/z  300ES+。
【００５７】
中間体３：2-アミノ-5-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-ベンゾニトリル
乾燥DMF(80ml)中のPdCl2(dppf)(3.35g)、酢酸カリウム(12.07g)とビス(ピナコラト)ボロン(12.48g)の混合物を中間体１(10g)で処理し、80度に４時間加熱した。冷却した混合物を水(400ml)とCH2Cl2(400ml)との間で分配した。水性相をさらにCH2Cl2(2×100ml)で抽出し、混和した有機相を乾燥し、真空下で濃縮した。残渣を溶離液として石油中10〜30％酢酸エチルを使用するシリカゲル(90g，回収(retrieve))上のクロマトグラフィーにより精製した。生成物を含む画分を濃縮し、さらに石油(petrol)ですりつぶすと、白色固体状の所望の生成物が得られた(6.91g，69%)。
1H-NMR(CDCl3)δ7.87(1H，s)，7.72(2H，d，J8.21)，6.7(1H，d，J8.2Hz)，4.57(2H，br  s)，1.31(12H，s)。
LC-MS：rt  2.84  m/z  244  ES+。
中間体４：3-シアノ-4-(N’,N’-ジメチルホルムアミジル)-フェニルボロン酸
THF(250ml)中の中間体２(10.9g，36.4mmol)の溶液に、トリイソプロピルボレート(２当量，16.8ml)を加え、この混合物を−70°に冷却した。ブチルリチウム(３当量，ヘキサン中1.6Mの69ml)を滴下添加し、得られた暗黄色溶液を−70°で２時間攪拌した。これを放置して室温まで温めてから、徐々に２M  HClを添加してクエンチした。この混合物一部濃縮してTHFを除去して、水性容積を減らし、得られた固体を濾過により単離し、ジエチルエーテルで洗浄してブチル不純物を除去し、乾燥すると、オフホワイト固体状の表記化合物が得られた(7.62g，96%)。
1H-NMRδ8.66(1H，s)，8.23(1H，s)，8.11(1H，d，J8.2)，7.62(1H，d，J8.2Hz)，3.31(6H，d)。
LC-MS：rt  0.55  m/z  218  ES+。
中間体５：N’-[2-シアノ-4-(4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル)-フェニル]-N’,N’-ジメチルホルムアミジン
DMF-DMA(1ml)中の中間体３(750mg)の懸濁液をN2下、100°で30分間加熱し、次いで室温に冷却した。溶媒を真空下で除去し、溶離液として10％酢酸エチル/石油を使用するシリカゲル(5g)のSPEで精製した。これにより、透明油状の表記化合物が得られ、これを静置すると結晶化した(915mg，100％)。
1H(CDCl3)7.98(1H，s)，7.817(1H，d，J8.2Hz)，7.62(1H，s)，6.92(1H，d，J7.6Hz)，3.1(3H，s)，3.07(3H，s)，1.33(12H，s)。
LC-MS  rt  2.73  m/z  300  ES+。
中間体６：4-[3-(4-ヨード-フェノキシ)-プロピル]-モルホリン
MeCN(200ml)中の4-ヨードフェノール(10g，45mmol)、K2CO3(粉末化，4.5当量)と1-ブロモ-3-クロロプロパン(1.66当量，7.5ml)の混合物を環流下、２時間加熱した。これを濃縮して水性処理にかけると、淡い油状物が得られた(14g)。DMA(20ml)中のこの油状物の一部(3g)とモルホリン(3当量，2.64ml)を90°に72時間加熱した。冷却して、溶媒を真空下で除去し、残渣をEtOAc(100ml)と炭酸ナトリウム(水性)(50ml)との間で分配した。有機相を乾燥し、濃縮すると、淡いガム状物が得られ、これは固化した(3.21g，91%)。
1H(CDCl3)7.53(2H，d，J9.5Hz)，6.66(2H，d，J8.5Hz)，3.98(2H，t，J6.3Hz)，3.7(4H，m)，2.46(6h，m)，1.95(2H，m)。
LC-MS  rt  2.02  M+  348。
中間体７：4-ブロモ-1,2-ジエトキシ-ベンゼン
アセトニトリル(20ml)中のジエトキシベンゼン(500mg)と臭化アンモニウム(323mg，1.1当量)のよく攪拌した混合物に、オキソン(2.03g，1.1当量)を添加した。この懸濁液を室温で４時間攪拌し、次いで懸濁液を濾過し、濾液を濃縮すると、表記化合物(723mg，＞90%)が得られた。これをさらに精製することなく使用した。
1H(CDCl3)6.98(2H，m)，6.73(1H，d，J8.85Hz)，4.05(4H，m)，1.44(6H，m)。
LC-MS  rt  2.48  m/z  279  ES+。
中間体８：5-ブロモ-2-メトキシ-フェノール
Meyers及びSnyder，J.Org.Chem，(1993)，58，42の方法により、5-アミノ-2-メトキシフェノール(1g)を硫酸/MeOH/水(6ml/3ml/10ml)に懸濁し、０°に冷却した。水(4.2ml)中の硝酸ナトリウム(550mg)の溶液を15分で滴下添加して、０°で１時間攪拌したままにして、次いでHBr(48％，２ml)を含む水(4.2ml)中の臭化第一銅(583mg)で15分間処理した。１時間で室温に温めた後、混合物を３時間環流し、次いで冷却し、ジエチルエーテル抽出した。混和した抽出物を乾燥し、濃縮すると暗色油状物が得られ、これを溶離液として石油中０〜15％EtOAcでSi上のカラムクロマトグラフィーで精製すると、透明油状の所望の化合物が得られた(300mg，20%)。
1H(CDCl3)7.06(1H，d，J2.5Hz)，6.96(1H，dd，J2.5，8.2Hz)，6.71(1H，d，J8.5Hz)，5.63(1H，s)3.87(3H，s)。
LC-MS  rt  2.27  m/z  201&203  ES+。
【００５８】
中間体９：4-ブロモ-1,2-ビス-トリフルオロメトキシ-ベンゼン
欧州特許第EP1013637号で使用されたこの化合物は、中間体７または中間体８を製造するのに使用したのと同様の方法により製造することができる。これらの方法の出発物質、1，2-ビス-トリフルオロメトキシ-ベンゼンは、カテコールのジブロモジフルオロメタンとのアルキル化、続いて残りのブロモ置換基を、銀テトラフルオロボレートまたは他のフッ化物イオンの供給源との処理によりフルオロに転換することにより製造することができる。
【００５９】
中間体１０：4-ブロモ-1,2-ビス-ジフルオロメトキシ-ベンゼン
この化合物は、3,4-ビス-ジフルオロメトキシ-フェニルアミン(J.Pharm.Sci，78，7，1989，585に記載)から中間体８と同様に、または1,2-ビス-ジフルオロメトキシ-ベンゼン (これ自体は塩基性触媒のもと、カテコールのエチルクロロジフルオロアセテートのアルキル化/脱カルボキシル化により製造) を使用して中間体７と同様に製造することができる。
【００６０】
中間体１１：4-ブロモ-2-エトキシ-1-メトキシ-ベンゼン
この公知化合物(Tercio  J.ら、Synthesis，1987，149-153)は、NaH、DMFなどの塩基性触媒の元、中間体８のヨウ化エチルを使用するアルキル化により製造することができる。
【００６１】
中間体１２：4-ブロモ-1-エトキシ-2-メトキシ-ベンゼン
この公知化合物(Traverso  G，Gazz.  Chim.  Ital，1960，778-791)は、NaH、DMFなどの塩基性触媒の元、4-ブロモグイアコール(4-bromoguiiacol)のヨウ化エチルを使用するアルキル化により製造することができる。
【００６２】
実施例１：6-[4-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン
段階１：4-アミノ-4’-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)-ビフェニル-3-カルボニトリル
DME/2M炭酸ナトリウム水溶液(2：1，15ml)中の中間体１(0.5g)4-ヒドロキシフェニルボロン酸(565mg)及びテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(290mg)の混合物を環流下２時間加熱した。冷却した混合物を酢酸エチルで希釈し、さらに塩基水溶液で洗浄した。有機相を乾燥(MgSO4)し、シリカゲル上で還元した。溶離液としてCH2Cl2〜CH2Cl2中５％メタノールを使用するフラッシュクロマトグラフィーで精製すると、NMRによりトリフェニルホスフィンオキシドが少し混じったカップリング生成物が得られた。この物質(340mg)をアセトン(20ml)中の2-クロロエチルモルホリン塩酸塩(330mg)及び炭酸カリウム(670mg)と共に環流下、一晩加熱した。冷却した反応物をCH2Cl2と2M塩酸(水溶液)との間で分配した。酸性相を分離し、塩基性にし、CH2Cl2(2×)で抽出した。これらの有機洗浄液を濃縮すると、茶色固体状の表記化合物(342mg)が得られた。
LC-MS  rt  2.15  M+  324。
1H-NMRδ7.55(2H，m)，7.38(2H，d，J8.21Hz)，6.95(2H，d，J8.21Hz)，6.78(1H，m)，4.24(2H，br  s)4.14(2H，t，J6.3Hz)，3.72(4H，m)，2.82(2H，m)，2.59(4H，m)。
【００６３】
段階２： {6-[4-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン
DMF-DMA(1.2ml)中の4-アミノ-4’-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)-ビフェニル-3-カルボニトリル(330mg)の溶液を環流下、１時間加熱した。冷却した混合物を真空下で濃縮し、残渣を酢酸(3ml)中に取り出し、4-モルホリノアニリン(180mg)で処理した。この混合物を環流温度に２時間加熱し、次いで放冷し、1MのNaOHで塩基性にしてから、CH2Cl2に抽出し、乾燥した(MgSO4)。シリカゲル上で真空下で濃縮し、続いてCH2Cl2/エタノール/アンモニア(200：8：1)でクロマトグラフィーにかけると固体が得られ、これをジエチルエーテルですりつぶし、濾過すると、表記化合物(214mg)が得られた。
1H-NMRδ9.8(1H，s)，8.75(1H，s)，8.49(1H，s)，8.12(1H，d，J8.85Hz)，7.82(3H，m)，7.64(2H，d，J8.2Hz)，7.14(2H，d，J8.2Hz)，7.02(2H，d，J8.2Hz)，4.17(2H，t，J6.3Hz)，3.75(4H，m)，3.6(4H，m)，3.11(3H，m)，2.7(2H，m)。
LC-MS  rt  3.03  M+  512。
【００６４】
実施例２：(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-{6-[4-(3-モルホリン-4-イル-プロポキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-アミン
段階１：DME：1M  NaCO3水溶液(2：1，10ml)中の中間体３(367mg)と中間体６(350mg)と、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(10%，116mg)の混合物を80°に12時間加熱した。この混合物を冷却し、酢酸エチルで希釈し、相を分離した。有機相を水洗し、乾燥してから、シリカゲル上に吸着させて、溶離液としてCH2Cl2/EtOH/NH3(200：8：1)を使用するSPEクロマトグラフィーで精製すると、茶色油状の結合したアニリンが得られた(〜400mg)。LC-MS  rt  2.03  m/z  334。これをDMF-DMA(3ml)に溶解し、120°に２時間加熱した。冷却し、濃縮して、溶離液としてCH2Cl2/EtOH/NH3(300：8：1〜200：8：1)を使用してSi上でSPEクロマトグラフィーで精製した。これにより淡色ガム状物が得られ、これを整地すると固化した(213mg，63%、２段階で)。LC-MS  rt  1.83  m/z  393。この淡色固体(213mg)をAcOH(2ml)中の4-モルホリノアニリン(97mg)で処理し、125°に２時間加熱した。濃縮した後、この混合物をDCMと炭酸ナトリウム水溶液との間で分配し、有機相を乾燥し、濃縮すると固体となり、これをジエチルエーテル/CH2Cl2/石油ですりつぶすと、濾過により表記化合物が得られた(178mg，62%)。
1H-NMRδ9.79(1H，s)，8.74(1H，s)，8.48(1H，s)8.12(1H，d，J7.6Hz)，7.8(3H，m)7.64(2H，d，J8.8Hz)，7.09(2H，d，J8.8Hz)，6.99(2H，d，J8.85Hz)，4.09(2H，m)，3.76(4H，m)，3.58(4H，m)，3.1(4H，m)，2.38(4H，m)，1.9(2H，m)。
LC-MS  rt  1.96  m/z  524  ES-。
【００６５】
実施例３：[6-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミンの製造
段階１：4-アミノ-3’,4’-ジメトキシビフェニル-3-カルボニトリル
DME/2M炭酸ナトリウム水溶液(２：１，21ml)中の3,4-ジメトキシボロン酸(956mg，２当量)、中間体１(640mg，１当量)、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(10%，303mg)の混合物を80°に16時間加熱した。
【００６６】
冷却した反応混合物を酢酸エチルで希釈し、さらに炭酸ナトリウム水溶液、次いで水で洗浄した。乾燥した有機相を濃縮すると、暗赤色ガム状物が得られ、これをCH2Cl2に溶解し、SPEカートリッジ(Si，20g)上に充填し、CH2Cl2で溶出した。生成物を含む主な画分を混和し、濃縮すると半固体状物が得られ、これをジエチルエーテルですりつぶし、所望の化合物は薄茶色固体状で濾過により単離した(296mg，44%)。
LC-MS  rt  2.73、イオンは全く知見されなかった。
1H(DMSO)δ7.77(1H，s)，7.71(1H，d)，7.2(1H，s)，7.17(1H，d)，7.03(1H，d)，6.91(1H，d)，6.17(2H，br  s)，3.89(3H，s)，3.83(3H，s)。
【００６７】
段階２：N’-(3-シアノ-3’,4’-ジメトキシ-ビフェニル-4-イル)-N,N-ジメチル-ホルムアミジン
DMF-DMA(過剰量、１ml)中のアミノビフェニル(I，296mg，1.16mmol)の溶液を100°に1.5時間加熱した。冷却した反応混合物をジエチルエーテル、次いで石油で希釈し、アミジン生成物を濾過により単離し、乾燥後に薄茶色固体が得られた(313mg，87%)。
1H-NMR(DMSO)δ7.99(1H，s)7.91(1H，d，J1.9Hz)，7.79(1H，dd，J8.2，1.9Hz)，7.2(3H，m)，6.99(1H，d，J8.2Hz)，3.84(3H，s)，3.78(3H，s)，3.08(3H，s)3.01(3H，s)。
LC-MS  rt  2.31  m/z  309.95。
段階３：[6-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン
酢酸(0.5ml)中のアミジン(II，112mg)と4-モルホリノアニリン(1当量，65mg，薄茶色固体、Lancaster，98%+)を120°に１時間加熱した。冷却した反応混合物をNaOH(2N水溶液)で塩基性にし、得られた黄色い固体を濾過により単離し、真空乾燥した。
【００６８】
これにより、黄色固体状の表記化合物が得られた(130mg，80%)。
1H-NMR(DMSO)δ9.78(1H，s)，8.72(1H，s)，8.48(1H，s)，8.16(1H，d，J9.5Hz)，7.78(1H，d，J8.2Hz)，7.64(2H，d，J8.8Hz)，7.42(2H，m)，7.12(1H，d，J8.8Hz)，7.0(2H，d，J9.5Hz)，3.90(3H，s)，3.83(3H，s)，3.76(4H，m)，3.1(4H，m)。
LC-MS  rt  2.47  m/z  443。
【００６９】
実施例４：6-(3,4-ジエトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミンの製造
中間体７(200mg)と中間体５(490mg)の混合物を、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(95mg，DME(3ml)中)と炭酸ナトリウム(1ml)と混和し、100°に一晩加熱した。冷却した混合物を水で希釈し、CH2Cl2に抽出した。有機相を合わせ、濃縮し、CH2Cl2/EtOH/NH3(200：8：1)を使用するカラムクロマトグラフィーで部分的に精製すると物質(290mg)が得られ、これを酢酸(3ml)中で、80°で４時間、4-モルホリノアニリン(230mg)と一緒に加熱した。この混合物を水で希釈し、2N  NaOHで塩基性にし、得られた沈殿物を濾過により単離し、水とジエチルエーテルで洗浄し、乾燥し、次いで酢酸エチルと石油エーテル(pet  ether)で洗浄し、再び乾燥すると、黄色固体状の表記化合物が得られた(215mg，70%)。
1H-NMR(DMSO)δ9.76(1H，s)，8.7(1H，s)，8.48(1H，s)，8.16(1H，d，J8.85Hz)，7.78(1H，d，J8.85Hz)，7.64(2H，d，J8.85Hz)，7.42(2H，m)，7.11(1H，d，J8.2Hz)，6.99(2H，d，J8.85Hz)，4.13(4H，m)，3.76(4H，m)，3.11(4H，m)，1.36(6H，m)。
LC-MS  rt  2.40  m/z  471  ES+。
【００７０】
実施例５：{6-[3-フルオロ-4-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミンの製造
DME(3ml)と２M炭酸ナトリウム水溶液(1ml)中の中間体１(100mg)、4-ヒドロキシ-3-フルオロフェニルボロン酸(128mg)とテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(47mg)の混合物を80°で３時間加熱した。冷却した混合物を酢酸エチルで希釈し、水洗した。有機相を乾燥し、濃縮し、CH2Cl2/EtOH/NH3(300：8：1)を使用してカラムクロマトグラフィーで精製すると、所望のビフェニル化合物(70mg，LC-MS  rt  2.29  m/z  227  ES-)が得られ、これをアセトン(2ml)に溶解し、クロロエチルモルホリン塩酸塩(63mg)と炭酸カリウム(128mg)で処理し、16時間、環流下加熱した。濃縮後、残渣をCH2Cl2に取り出し、水洗した。有機層を乾燥し、濃縮すると茶色固体(79mg)が得られ、これをCH2Cl2/EtOH/NH3(300：8：1)を使用して、シリカゲルのクロマトグラフィーで部分的に精製すると物質(69mg，LC-MS  rt  1.95  m/z  342  ES+)が得られ、これをDMF-DMA(1ml)中で60°で２時間加熱した。溶媒を真空除去し、残渣(74mg，LC-MS  rt  1.85  m/z  397  ES+)を酢酸(1ml)中で4-モルホリンアニリン(68mg)で80°で４時間加熱した。冷却した混合物を水で希釈し、２M  NaOHで塩基性にしてから、酢酸エチルで抽出した。混和した有機物を乾燥し、濃縮すると暗色固体が得られ、これを溶離液としてCH2Cl2/EtOH/NH3(300：8：1〜100：8：1)を使用してシリカゲルのクロマトグラフィーで精製した。これにより表記化合物(31.5mg，31%)が得られた。
1H-NMR(DMSO)δ9.79(1H，s)，8.76(1H，s)，8.15(1H，d，J8.5Hz)，7.8(2H，m)，7.66(3H，m)，7.35(1H，t，J8.85Hz)，6.99(2H，d，J8.85Hz)，4.25(2H，t，J5.7Hz)，3.76(4H，m)，3.59(4H，m)，3.11(4H，m)，2.75(2H，t，J5.69Hz)。
LC-MS  rt  2.01  m/z  530  ES+。
【００７１】
実施例６：2-メトキシ-5-[4-(4-モルホリン-4-イル-フェニルアミノ)-キナゾリン-6-イル]-フェノール
DME(5ml)と２M炭酸ナトリウム水溶液(1ml)中の中間体８(300mg)、中間体５(659mg)とテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(170mg)の混合物を80°に16時間加熱した。冷却した混合物を水で希釈し、CH2Cl2で抽出した。有機相を乾燥し、シリカ上で濃縮すると、溶離液としてCH2Cl2/EtOH/NH3(600：8：1〜300：8：1)を使用するクロマトグラフィーの後、アミジンのやや不純なサンプル(190mg，LC-MS：rt  1.94  m/z  296  ES+)が得られ、これを酢酸(2ml)中、80°で３時間4-モルホリノアニリン(171mg)で処理した。冷却したら、混合物を水で希釈し、2M  NaOHで塩基性化し、CH2Cl2に抽出した。有機相を乾燥し、シリカゲル上で濃縮した。カラムクロマトグラフィーにより精製すると、90％純度の物質が得られ、この物質のサンプル(90mg)をさらに分取HPLCで精製すると、表記化合物が得られた。
1H-NMR(DMSO)δ9.88(1H，s)，9.2(1H，brs)，8.76(1H，s)，8.53(1H，s)，8.11(1H，d)，7.82(1H，d)，7.71(2H，d)，7.37(2H，m)，7.13(1H，d)，7.04(2H，d)，3.9(3H，s);3.82(4H，m)，3.17(4H，m)。
LC-MS：rt  2.16  m/z  429  ES+。
【００７２】
実施例７：[6-(3,4-ビス-トリフルオロメトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン
この化合物は、中間体９と中間体５を使用して実施例４の方法により製造することができる。
【００７３】
実施例８：[6-(3,4-ビス-ジフルオロメトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン
この化合物は、中間体１０と中間体５を使用して、実施例４の方法により製造することができる。
【００７４】
実施例９：{6-[4-メトキシ-3-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン
DMF(2ml)中の実施例６(100mg)、クロロエチルモルホリン塩酸塩(48mg)と炭酸カリウム(95mg)を100°に16時間加熱した。冷却し、濾過して、フィルターケーキをCH2Cl2で洗浄した。濾液を水洗し、乾燥し、シリカ上で濃縮してから、溶離液としてCH2Cl2/EtOH/NH3(600：8：1〜200：8：1)を使用してクロマトグラフィーにより一部精製した。生成物を含む画分をさらに分取HPLCで精製すると、橙色ガム状物(54mg)が得られ、これを酢酸エチルですりつぶすと、表記化合物(9mg)が得られた。
1H-NMR(DMSO)δ9.8(1H，s)，8.72(1H，s)，8.49(1H，s)，8.16(1H，d，J8.2Hz)，7.78(1H，d，J8.85Hz)，7.64(2H，d，J8.85Hz)，7.45(2H，m)，7.12(1H，d，J8.2Hz)，6.99(2H，d，J8.85Hz)，4.23(2H，m)，3.83(3H，s)，3.76(4H，m)，3.57(4H，m)，3.1(4h，m)，2.74(2H，m)。
LC-MS：rt  1.91  m/z  542  ES+。
【００７５】
実施例１０：{6-[3-メトキシ-4-(2-モルホリン-4-イル-エトキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン
アセトン(100ml)中の4-ブロモグアヤコール(7g)とクロロエチルモルホリン塩酸塩(7.06g)を炭酸カリウム(14.27g)で処理し、16時間環流した。濾過後、濾液をシリカゲル上で濃縮し、溶離液として石油中、20％酢酸エチルを使用してカラムクロマトグラフィーで精製すると、透明油状物状のアルキル化生成物が得られた。DME(10ml)と２M炭酸ナトリウム水溶液(3ml)中のこの物質の一部(1g)、中間体５(1.42g)及びテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(365mg)を80°で16時間加熱した。この混合物を水で希釈し、CH2Cl2に抽出した。混和した有機抽出物を乾燥し、シリカ上で濃縮し、溶離液としてCH2Cl2/EtOH/NH3(600：8：1〜200：8：1)を使用してクロマトグラフィーにより精製した。これにより、単一画分で所望の結合した生成物が得られた(900mg，61%)。この物質の一部(100mg)を酢酸(1ml)中の4-モルホリノアニリン(68mg)と一緒に80°で３時間処理した。冷却して、この混合物を水で希釈し、２M  NaOHで塩基性にし、CH2Cl2に抽出した。有機相を乾燥し、シリカゲル上で濃縮した。カラムクロマトグラフィーにより精製すると、表記化合物が得られた(20mg)。
1H-NMR(DMSO)δ9.78(1H，s)，8.72(1H，s)，8.48(1H，s)，8.16(1H，d，J8.85Hz)，7.78(1H，d，J8.85Hz)m，7.64(2H，d，J8.85Hz)，7.43(2H，m)，7.14(1H，d，J8.85Hz)，7.092H，d，J8.85Hz)，4.14(2H，m)，3.9(3H，s)，3.76(4H，m)，3.59(4H，m)，3.1(4H，m)，2.72(2H，m)。
LC-MS：rt  1.91  m/z  542  ES+。
【００７６】
実施例１１：{6-[3-フルオロ-4-(3-モルホリン-4-イル-プロポキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン
段階１：2-フルオロ-4-[4-(4-モルホリン-4-イル-フェニルアミノ)-キナゾリン-6-イル]-フェノール
DME(18ml)と2M炭酸ナトリウム水溶液(9ml)中の3-フルオロ-4-ヒドロキシボロン酸(600mg)と中間体２(767mg)の、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(300mg)による触媒作用下でのカップリングは、環流下、16時間加熱した。冷却した反応混合物を2M  HClで酸性化して、得られたべたべたしたガム状物から水性物をデカンテーションした。この物質をトルエンで共沸させて、次いで酢酸(10ml)中の4-モルホリノアニリン(479mg)で環流下、1.5時間処理した。冷却した混合物を濃縮し、水で希釈し、重炭酸ナトリウム水溶液で塩基性化した。水性物質をデカンテーションし、攪拌しながら残渣にアセトニトリルを添加すると、懸濁液が得られた。濾過により暗緑色固体状の所望のキナゾリンが得られた(540mg，51%)。
1H-NMR(DMSO)δ10.2(1H，s)，9.13(1H，s)，8.89(1H，s)，8.53(1H，d)，8.06(6H，m)，7.4(4H，m)，4.18(4H，m)，3.54(4H，m)。
LC-MS：rt  m/z  ES+。
【００７７】
段階２：{6-[3-フルオロ-4-(3-モルホリン-4-イル-プロポキシ)-フェニル]-キナゾリン-4-イル}-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アミン
段階１からの物質(50mg)を、DMF(2ML)中の3-クロロプロピルモルホリン塩酸塩(36mg)と炭酸カリウム(75mg)で70°で処理した。冷却した反応混合物を冷却し、濃縮し、水中に懸濁して、濾過した。単離した固体を、溶離液としてCH2Cl2/EtOH/NH3(100：8：1)を使用してシリカゲルのカラムクロマトグラフィーで精製すると、表記化合物が得られた。
1H-NMR(DMSO)9.8(1H，s)，8.77(1H，s)，8.50(1H，s)，8.15(1H，d，J8.85Hz)，7.8(2H，m)，7.63(3H，m)，7.33(1H，t，J8.85Hz)，7.03(2H，d，J8.85Hz)，4.17(2H，m)，3.76(4H，m)，3.58(4H，m)，3.1(4H，m)，2.38(3H，m)，1.93(2H，m)。
LC-MS：rt  m/z  ES+。
【００７８】
実施例１２：[6-(3-エトキシ-4-メトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)アミン
この化合物は、実施例４の製造例と同様の手順により、中間体１１と中間体５との反応により製造することができる。
【００７９】
実施例１３：[6-(4-エトキシ-3-メトキシ-フェニル)-キナゾリン-4-イル]-(4-モルホリン-4-イル-フェニル)-アニリン
この化合物は、実施例４の製造例と同様の手順により、中間体１２と中間体５との反応により製造することができる。
【００８０】
活性の実験
使用した細胞：
細胞培養適応ミューテーションをもつ蛍ルシフェラーゼ-ユビキチン-ネオマイシンホスホトランスフェラーゼ融合タンパク質とEMCV-IRES駆動HCVポリタンパク質を含むHCVレプリコン細胞Huh  ９B(ReBlikon)。
【００８１】
細胞培養条件：
細胞は、５％CO2環境中、37℃で培養し、１日目は２×10E6個/フラスコ、３日後から１×10E6個/フラスコで播種して１週間に２回分割した。0.25mg/ml  G418を一部培地(125μｍ/25ml)に添加したが、アッセイ培地には添加しなかった。
【００８２】
培地は、4500g/lグルコースを含んだDMEM、１×非必須アミノ酸を補ったglutamax(Gibco  61965-026)、ペニシリン(100IU/ml)/ストレプトマイシン(100μg/ml)、FCS(10％，50ml)と１mg/ml  G418(Invitrogenカタログ番号10131-027)と10％ウシ胎児血清からなっていた。
【００８３】
アッセイ手順：
細胞のフラスコをトリプシン処理し、細胞数をカウントした。細胞を100,000個/mlに希釈し、この100μlを使用して、IC50用に試験すべき各7種の化合物について不透明白色96-ウエルプレート(レプリコンアッセイ用)一つと、平底透明プレート(毒物アッセイ用)一つに播種した。ウエルG12とH12は、ブランクとして透明プレート中に空のまま残した。次いでプレートを５％CO2環境中、37℃で24時間培養した。
【００８４】
翌日、透明丸底プレート中にその所望の終濃度の２倍で培地中に希釈液を製造する。全ての希釈液は１％の最終DMSO濃度を有している。
一度希釈液プレートを作ったら、対照と化合物を二重プレート中、100μl/ウエルでアッセイプレート(細胞を含む)に移した。
【００８５】
例外：白色(レプリコン)プレートでは、ウエルA1とA2には全く化合物を添加せず、その代わりに１％DMSO100μlを添加した。透明(毒物)プレートでは、ウエルE12とF12だけはDMSO対照を含んでいた。次いでプレートを５％CO2で37°で72時間培養した。
【００８６】
培養時間の終わりに、白色プレート中の細胞を温かい(37℃)PBS200μl/ウエルで洗浄して集め、20μlの細胞培養溶解緩衝液(lysis  buffer)(Promega)で濯いだ。室温で５分間培養した後、ルシフェリン溶液をルシフェラーゼアッセイ緩衝液に添加した(10mlLARB当たり200μlLARB)。ミクロプレート照度計(Lmax，Molecular  Devices)のMインジェクターを４×300lインジェクションで準備した。プレートを照度計に挿入し、100μlルシフェラーゼアッセイ試薬を照度計のインジェクターにより添加した。シグナルは、１秒遅延続いて４秒測定プログラムを使用して測定した。IC50、すなわち、未処理細胞対照値に関して50％レプリコンレベルを減少するのに必要な薬剤濃度は、ルシフェラーゼ活性対薬剤濃度の減少割合（％）をプロットすることにより計算することができる。
【００８７】
透明プレートは室温で１時間、50％エタノール中0.5％メチレンブルー100μlで染色し、続いて１％ラウロイルサルコシンのウエル当たり100μlで吸着したメチレンブルーを溶媒和させた。プレートの吸収をミクロプレート分光光度計(Molecular  Devices)上で測定し、それぞれの化合物濃度の吸光度は、相対DMSO対照の割合として表した。TD50、すなわちDMSO対照に対して全細胞面積を50％減少させるのに必要な薬剤の濃度は、620nmにおける吸光度対薬剤濃度をプロットすることにより計算することができる。
【００８８】
【表１】
2009511459.tif 000008
【国際調査報告】
2009511459.tif 000012
2009511459.tif 000013
2009511459.tif 000014
2009511459.tif 000015