(57)【要約】  本発明は、少なくとも一つのラトランキュリンを含む水性薬用製剤に関するものであり、この製剤は実質量のジメチルスルホキシドを含有しない。或る態様では、本発明は、0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、0.01-2%w/v量の非イオン性界面活性剤、および、4ないし8のpHにおいて200-400mOsm/kGの間の浸透圧を維持するための等張化剤を含む水性薬用製剤［ここで、ラトランキュリン、界面活性剤、および等張化剤は、この製剤と共存でき、この製剤は実質量のジメチルスルホキシドを含有しない］を目的とする。この製剤は、冷蔵温度で少なくとも6箇月間安定である。本発明はさらに、眼内圧を低下させる方法、緑内障を治療する方法、線維柱帯切除術後の創傷治癒を阻害する方法、および血管新生を阻害する方法を提供する。
2009528390.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、0.01-2%w/v量の非イオン性界面活性剤、および、4ないし8のpHにおいて200-400mOsm/kGの間の浸透圧を維持するための等張化剤を含む水性薬用製剤［ここで、ラトランキュリン、界面活性剤、および等張化剤は、この製剤と共存でき、この製剤は実質量のジメチルスルホキシドを含有しない］。
【請求項２】
該製剤が0.001%v/v以上のジメチルスルホキシドを含有しない、請求項1に記載の水性薬用製剤。
【請求項３】
該製剤がジメチルスルホキシドを含有しない、請求項1に記載の水性薬用製剤。
【請求項４】
該非イオン性界面活性剤が、ポリソルベート、チロキサポール、ポリオキシルヒマシ油、ポロキサマー、ポリエチレングリコールカプリル酸トリグリセリド、ステアリン酸ポリオキシル、モノステアリン酸グリセリル、およびそれらの組み合わせより成る群から選ばれる、請求項1に記載の水性薬用製剤。
【請求項５】
該非イオン性界面活性剤が、ポリソルベート、ポロキサマー、またはそれらの組み合わせである、請求項1に記載の水性薬用製剤。
【請求項６】
pHを4-6の間に維持するのに好適な1-100mMの緩衝剤をさらに含む、請求項1-5のいずれか1項に記載の水性薬用製剤。
【請求項７】
該緩衝剤が、クエン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、クエン酸／燐酸緩衝剤、マレイン酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、またはそれらの組み合わせである、請求項6に記載の水性薬用製剤。
【請求項８】
キレート化剤および／または保存剤をさらに含む、請求項1-7のいずれか1項に記載の水性薬用製剤。
【請求項９】
該等張化剤が非イオン性等張化剤である、請求項1-8のいずれか1項に記載の水性薬用製剤。
【請求項１０】
該非イオン性等張化剤がマンニトールまたはデキストロースである、請求項9に記載の水性薬用製剤。
【請求項１１】
該製剤が2-8℃で少なくとも6箇月間安定である、請求項1-10のいずれか1項に記載の水性薬用製剤。
【請求項１２】
該界面活性剤が0.02-0.25%w/v量のポロキサマーであり、該製剤が1-10%v/vのプロピレングリコールをさらに含む、請求項1に記載の水性薬用製剤。
【請求項１３】
0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、5-10%v/vのエタノール、および200-400mOsm/kGの間の浸透圧を維持するための等張化剤を含む水性薬用製剤［ここで、この製剤のpHは4-8であり、この製剤は実質量のDMSOを含有しない］。
【請求項１４】
0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、シクロデキストリン、保存剤、および200-400mOsm/kGの間の浸透圧を維持するための等張化剤を含む水性薬用製剤［ここで、この製剤のpHは4-8であり、この製剤は実質量のDMSOを含有しない］。
【請求項１５】
該ラトランキュリンがラトランキュリンA、ラトランキュリンB、デス-メチル-ラトランキュリンB、またはラトランキュリン類似体である、請求項1-14のいずれか1項に記載の水性薬用製剤。
【請求項１６】
該ラトランキュリンがラトランキュリンA、ラトランキュリンB、またはデス-メチル-ラトランキュリンBである、請求項15に記載の水性薬用製剤。
【請求項１７】
該ラトランキュリンが0.005-0.02%(w/v)量である、請求項15に記載の水性薬用製剤。
【請求項１８】
処置を必要とする哺乳動物に、アクチン細胞骨格を変化させるに有効な量の請求項1-17のいずれか1項に記載の水性薬用製剤を投与する工程を含む、哺乳動物の眼内圧を低下させる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、薬用製剤、特に、大環状細胞骨格活性化合物、例えばラトランキュリン化合物およびそれらの関連類似体の眼科用製剤に関するものである。本発明はさらに、アクチン細胞骨格の完全性の修飾に影響を受ける疾患または異常の予防または治療、例えば、眼内圧が上昇する疾患、例えば、ヒトおよびその他の哺乳動物における原発性開放隅角緑内障の治療および眼の神経保護においてこのような薬用製剤を使用する方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
緑内障は、不可逆的視力障害を導く眼科疾患である。これは、米国で4番目に多い失明原因であり、2番目に多い視力障害の原因であり、そしてアフリカ系アメリカ人の不可逆的視力障害の第一原因である。一般的にこの疾患は、視神経に及ぼす眼内圧上昇から起こる有害作用に少なくとも部分的に起因する進行性神経障害を特徴とする。開放隅角緑内障は、全原発性緑内障のおよそ90%を占め、眼からの液体(房水)の流出に対する異常に高い抵抗性を特徴とする。眼の完全性のためには、眼の形状を維持するに充分な眼内圧を維持するための正常な抵抗性が必要である。この抵抗性は、特化した内皮細胞、結合組織束および細胞外マトリックスより成る複雑な組織である小柱網により提供される。小柱網の抵抗性は通常、眼内圧が〜16mmHg、即ち房水が、それが産生されるのと同じ速度(2.5μL/分)で排出される圧力であるようになっている。極端に高い圧(例えば70mmHg)は、僅か数日以内に失明を惹起し得る。P.L.Kaufman and T.W.Mittag, “Medical Therapy Of Glaucoma, “Ch. 9, Sec. II(pp.9.7-9.30), in P.L.Kaufman and T.W.Mittag(eds.): Glaucoma(Vol. 7 of S.M.Podos and M.Yanoff(eds): Textbook of Ophthalmology Series). London, Mosby-Year Book Europe Ltd.(1994); A.C.Guyton, Textbook of Medical Physiology(W.B.Saunders Co., Sixth Ed.), pp. 386-89(1981)を参照されたい。
【０００３】
現在、広範囲の化学分類にわたる様々な治療物質を使用して、緑内障の治療および眼内圧上昇の制御への取り組みがなされている。
眼内圧を低下させるために最も頻繁に用いられる種類の薬物は、房水生成の抑制(例えば、β遮断薬、α2アドレナリンアゴニスト、炭酸脱水酵素インヒビター)またはブドウ膜強膜への流出の促進(プロスタグランジン類似体)に依拠している。小柱網に直接作用する、一般的に使用される抗緑内障薬は現在ない。ピロカルピンは、薬物の誘発する毛様体筋収縮の結果起こる小柱網の変形に基づいて、小柱網を通過する流れの抵抗性を二次的に減ずるが、その使用は、毎日3-4回投与する必要があること、そして局所副作用、特に縮瞳によって限定されている。エピネフリンは、明らかに小柱網細胞に直接作用して、β2アドレナリンレセプター仲介経路を介する便宜を向上させるが、レセプター仲介性の局所および全身副作用、高頻度の局所アレルギー、ならびに有効性が小幅でしかないこと、そして応答性に患者間のばらつきがあるため、めったに臨床使用されない。
【０００４】
線維柱帯切除術は、緑内障濾過手術の最も一般的な形態であり、原発性開放隅角緑内障における薬理学的に制御できない眼内圧の外科的低減のための第一選択治療であり続けている。この方法は、房水がその中を通り結膜下腔へと排水される輪部フィステルを作り、眼内圧を低下させるための濾過胞を確立するものである。この方法の成功は、創傷治癒の薬理学的調節に大きく依存する。
【０００５】
緑内障の外科的管理における大きな進歩は、緑内障濾過手術後の瘢痕化を防ぐ代謝拮抗物質の使用であった。濾過胞の術後瘢痕化は、近代的緑内障濾過手術の短期および長期的予後を決定する最重要因子である。代謝拮抗物質マイトマイシンC(MMC)および5-フルオロウラシル(5-FU)は、瘢痕化および濾過胞の不具合を抑制するために最も広く用いられる物質である。大規模な後ろ向き調査において、常套的に実施されてきた線維柱帯切除術は、術後3箇月以内の失敗率が最大30%である事が示されている。この有害な合併症の発症を減少させるため、自然に起こる濾過胞の瘢痕化を回避するための様々な方法が研究されてきており、大抵は術中または術後の代謝拮抗薬（即ち、最も広く使用される二つの細胞毒性物質、5-フルオロウラシル(5-FU)またはマイトマイシンC(MMC)）の適用を扱っている。
【０００６】
持続的な濾過に及ぼす好ましい長期的効果はあるものの、外科的に開放した眼への細胞毒性薬の適用は、視力を脅かす合併症の同時増加といったような重篤な合併症の発症を増加させる。MMCおよび5-FUは、重篤な適用後合併症の多発を示し；それらの副作用は主として角膜上皮を冒し、それらの臨床使用は、患者に重篤な疼痛および不快感があるため限定されている。患者にとって副作用が僅かまたは皆無の術後長期にわたる満足できる手術結果を達成できる充分な方法は確立されていない。
【０００７】
米国特許第6586425; 6110912; および同第5798380号は、房水の流出を亢進させるために眼のアクチンフィラメントの完全性に影響を及ぼす化合物を使用する、緑内障の治療法を開示している。これらの特許はさらに、キナーゼインヒビターならびにラトランキュリン-A、ラトランキュリン-B、スウィンホライド-A、およびジャスプラキノリドを具体的に開示しており、これらは、小柱網のアクチン細胞骨格の摂動またはその下にある膜との相互作用の調節を引き起こす。細胞骨格の摂動およびこれに関連する接着は、液の流れに対する小柱網の抵抗性を減じ、それにより眼内圧を低下させる。
【０００８】
ラトランキュリンはジメチルスルホキシド(DMSO)に可溶であるが、大環状化合物であるラトランキュリンが概して親油性であるため、水溶性は極めて低い。DMSOはヒトに使用する眼科用製剤には許容できない。ラトランキュリン-Bは、典型的には貯蔵溶液としてDMSOに溶解し、長期安定性のために-20℃で保存する(Okka, et.al., Trans. Am. Ophthalmol. Soc. 102:251-259(2004))。既知の液体ラトランキュリン製剤は、以下の問題の1またはそれ以上のため、許容できない薬用製剤である：媒質またはアジュバントに起因する毒性のような望ましくない副作用、DMSOを使用しないラトランキュリンの低い溶解性、および、ラトランキュリンの経時的分解に起因する劣悪な安定性。
【０００９】
緑内障を治療し、線維柱帯切除術後の創傷治癒を調節し、そしてアクチン細胞骨格の完全性に影響を受けるその他の疾患または異常を治療するために使用できる薬用製剤の必要性が存在する。
【発明の開示】
【００１０】
発明の要約
本発明は、少なくとも一つのラトランキュリンを含む水性薬用製剤を目的とするものであり、その製剤は実質量のジメチルスルホキシドを含有しない。本発明は、少なくとも一つのラトランキュリンおよび水性媒質中のラトランキュリンの溶解度を高める1またはそれ以上の物質を含む、水性薬用製剤を提供する。この製剤は、薬学的、特に眼科的使用にとって容認できない物質を実質量含有しない。この製剤は、治療用途のための充分な活性を有するラトランキュリンを提供し、冷蔵温度において少なくとも6箇月間安定である。
【００１１】
本発明は、0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、0.01-2%w/v量の非イオン性界面活性剤、および、4ないし8のpHにおいて200-400mOsm/kGの間の浸透圧を維持するための等張化剤を含む水性薬用製剤［ここで、ラトランキュリン、界面活性剤、および等張化剤は、この製剤と共存でき、この製剤は実質量のジメチルスルホキシドを含有しない］を目的とする。
【００１２】
一つの態様では、この水性薬用製剤は、0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、pHを4-6に維持するのに好適な1-100mMの緩衝液、0.01-2%w/vの非イオン性界面活性剤、および、浸透圧を200-400mOsm/kGの間に維持するための等張化剤を含む。好ましい緩衝液はクエン酸緩衝液である。好ましい等張化剤はマンニトールおよびデキストロースである。
【００１３】
別の態様では、この水性薬用製剤は、0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、5-10%のエタノールおよび浸透圧を200-400mOsm/kGの間に維持するための等張化剤を含む。この製剤は、所望によりpHを4-8に維持するための1-100mMの緩衝液を含んでいてもよい。
【００１４】
さらに別の態様では、この水性薬用製剤は、0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、1-10%のポリプロピレングリコール、0.02-0.25%のポロキサマー、0.1-1%のポリソルベート、および浸透圧を200-400mOsm/kGの間に維持するための等張化剤［ここで、この製剤のpHは4-8である］を含む。
さらに別の態様では、この水性薬用製剤は、0.001-2%のラトランキュリン、シクロデキストリン、0.01-0.5%の保存剤、および浸透圧を200-400mOsm/kGの間に維持するための等張化剤［ここで、この製剤のpHは4-8である］を含む。
【００１５】
本発明は、眼内圧を低下させる方法、緑内障を治療する方法、線維柱帯切除術後の創傷治癒を阻害する方法、および血管新生を阻害する方法を提供する。この方法は、治療を必要とする対象に、例えばアクチン重合を阻害することによりアクチン細胞骨格を変化させるのに有効な量の本発明に係る水性薬用製剤を投与する工程を含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
発明の詳細な説明
別途明記しない限り、本出願中の%量は%(w/v)を指す。
本発明者等は、DMSOの使用を必要としない水性ラトランキュリン製剤を発見した。本発明者等は、室温および冷蔵温度でかなりの期間安定な、無DMSO水性ラトランキュリン製剤を発見した。本発明者等は、アクチンフィラメントの重合を阻害することにより或る種の状態、例えば緑内障の治療に有用な、水性ラトランキュリン製剤を発見した。本発明者等は、眼科的使用のために良く寛容される水性ラトランキュリン製剤を発見した。
【００１７】
本発明は、大環状化合物、具体的にはラトランキュリンおよびラトランキュリン類似体を含む水性薬用製剤を目的とする。本発明は、水性媒質におけるラトランキュリン化合物の溶解度を高める1またはそれ以上の物質を含む製剤を提供する。この製剤は、薬学的、特に眼科的使用にとって容認できない物質を実質量含有しない。本発明は、ラトランキュリンの安定な水性製剤を提供し；この製剤は、治療用途に好適であり、そして通常使用の保存条件の下で長期間安定であり続ける。
【００１８】
本発明の水性薬用製剤は、ヒトまたは哺乳動物に長期間使用した時に毒物学的結果および組織損傷を惹起し得る、メタノールおよびジメチルスルホキシドのような不適当な可溶化アジュバントの使用を排除する。これらの薬用製剤は、水溶液中にラトランキュリンを充分な濃度で含有し、哺乳動物において眼内圧低下に関する薬理作用を示す。局所投与のためには、これらの製剤の1ないし2滴を、熟練した臨床医の日常的な裁量に従って、眼の表面に1日に1ないし4回投与する。これらの水性薬用製剤は、眼にとって非刺激的且つ耐用性があり、複数回の滴下に好適である。
【００１９】
ラトランキュリンは細胞骨格活性マクロライドである。ラトランキュリンは、単量体G-アクチンを隔離しアクチンフィラメントの分解を導く特異的且つ強力なアクチン破壊物質である。天然のラトランキュリンは、Latrunculia magnifica、Negombata magnifica、およびSpongia mycofijiensisのようなカイメン、ならびに裸鰓類、例えばChromodoris lochiから単離される。ラトランキュリン類似体は合成法によって製造できる(A.B.Smith III et al., J. Am. Chem.. Soc. 1992, 114, 2995-3007；J.D.White and M.Kawasaki, J. Org. Chem. 1992, 57, 5292-5300；A. Furstner et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2003, 42, 5358-5380)。
【００２０】
本出願において使用するラトランキュリンとは、天然のラトランキュリンおよびラトランキュリン類似体を指す。本発明に係る好ましいラトランキュリンは、ラトランキュリンB、ラトランキュリンA、デス-メチル-ラトランキュリンB、またはそれらの薬学上許容し得る塩、互変異性体、溶媒和物、もしくは水和物である。
【００２１】
【化１】
2009528390.tif 000003
【００２２】
【化２】
2009528390.tif 000004
【００２３】
【化３】
2009528390.tif 000005
【００２４】
本出願において使用するラトランキュリン類似体とは、D.Blasberger, et al., Liebigs Ann. Chem. 1171-1188(1989)；Furstner, et al., PNAS, 102: 8103-8108(2005)；および米国特許公開US2006-0217427(これらの内容は引用により本明細書の一部とする)に開示されるような、その構造が天然ラトランキュリンの構造に類似する合成化合物を指す。
【００２５】
本発明は、少なくとも一つのラトランキュリンを含む水性薬用製剤を目的とするものであり、その製剤は実質量のジメチルスルホキシドを含有しない。本明細書で使用する「実質量」とは、0.1%、好ましくは0.01%、より好ましくは0.001%以上を指す。本発明に係る水性薬用製剤は、0.1%、好ましくは0.01%、より好ましくは0.001%v/v以上のDMSOを含有しない。好ましい態様では、本発明の水性薬用製剤はジメチルスルホキシドを含有しない。
【００２６】
本発明は、0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、および浸透圧を200-400mOsm/kGの間に維持するための等張化剤［ここで、この製剤のpHは4-9である］を含む水性薬用製剤を目的とし、この製剤は実質量のジメチルスルホキシドを含有しない。この薬用製剤が眼科的に使用される場合、製剤のpHは好ましくは4-8、そして浸透圧は好ましくは220-380mOsm/kGである。
【００２７】
本発明は、0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、pHを4-8、好ましくは4-6に維持するために好適な1-100mMの緩衝剤、0.01-2%w/vの非イオン性界面活性剤、および浸透圧を200-400mOsm/kGの間に維持するための等張化剤を含む水性薬用製剤を目的とする。この薬用製剤は、実質量のDMSOを含有せず、好ましくは5%(v/v)以下、より好ましくは2%、1%以下のエタノールを含有する。
【００２８】
本製剤の成分が相互に共存可能であることは重要である。本明細書で使用する共存可能とは、物理的共存可能性および化学的共存可能性を指す。物理的共存可能性とは、成分が沈殿またはコアセルベートを形成せず、相分離、沈殿または変色を惹起しないことを意味する。化学的共存可能性とは、成分がラトランキュリンの分解を惹起せず、ラトランキュリンの生物活性を不活性化しないことを意味する。
【００２９】
本発明にとって好適な界面活性剤(surface active agents)は、非イオン性であってもイオン性であってもよい。しかしながら、イオン性界面活性剤は好ましさがより低い。陽イオン性物質、特に陽イオン性界面活性剤の長期使用は、角膜上皮の損傷を引き起こすことがよく知られている。陰イオン性界面活性剤は、しばしば本製剤の他の成分と非共存的である。
【００３０】
本発明のための好ましい界面活性剤は非イオン性である。好適な非イオン性界面活性剤には、ポリソルベート80、ポリソルベート60、ポリソルベート20、チロキサポール、ステアリン酸ポリオキシル、モノステアリン酸グリセリル、ポリオキシルヒマシ油、ポリエチレングリコール、カプリル酸トリグリセリド、およびポロキサマーがあるが、これらに限定される訳ではない。好ましい非イオン性界面活性剤は、ポリソルベートおよびポロキサマーである。これらの界面活性剤は、ヒドロキシ基を含む有機化合物の非イオン性アルカリ性オキシド縮合物である。非イオン性界面活性剤は、ラトランキュリンの溶解性を高める。非イオン性界面活性剤はしばしば、ラトランキュリン分子をミセル環境に保持することによってラトランキュリン分子を化学分解から防御し、そのことが物理的および化学的安定性を改善する。製剤中の界面活性剤(群)の濃度は、約0.01-2%、好ましくは0.05-1.5%、より好ましくは0.1-1%(w/v)である。界面活性剤の適正濃度は、その界面活性剤の存在下におけるラトランキュリンの溶解度、共存する保存剤に及ぼす殺菌作用の中和、および／またはヒトに刺激を引き起こし得る濃度によって決定される。非イオン性界面活性剤の存在下で製造される本薬用製剤は、ラトランキュリンの溶解性を損なわずに、目的とするpH4-8に調整され得る。
【００３１】
ラトランキュリンまたは製剤中の他の成分との非共存性の故に、または、ヒトへの使用の不適当性の故に、全ての非イオン性界面活性剤がラトランキュリン製剤にとって好適である訳ではない。例えば、モノステアリン酸ソルビタン、トリオレイン酸ソルビタン、モノオレイン酸ソルビタン、ポリエチレングリコールグリセリルココアート、およびオレスクラスの界面活性剤は、この製剤の他の成分と混合した時に透明溶液を形成せず、コアセルベートおよび／または沈殿を形成するため、ラトランキュリン製剤とは共存できない。また、非イオン性界面活性剤TRITON（登録商標）(ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル)はヒトへの使用に適さない。
【００３２】
この水性製剤中のラトランキュリン(群)の濃度は、一般に0.001-2%、好ましくは0.005-0.2%、より好ましくは0.005-0.1%、そしてさらに好ましくは0.005-0.02%(w/v)である。
pHを4-8の間に維持するのに適した緩衝液は、燐酸、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液、マレイン酸緩衝液、酒石酸緩衝液、またはそれらの組み合わせを包含する。燐酸緩衝液またはクエン酸緩衝液が好ましい。長期安定性のために、この製剤はpH4-6であるのが好ましい。pHを4-6の間に維持するのに適した緩衝液は、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液、クエン酸／燐酸緩衝液、マレイン酸緩衝液、酒石酸緩衝液、またはそれらの組み合わせを包含する。緩衝液の好適な濃度は、1-100mM、好ましくは5-50mM、より好ましくは5-25mM、そして最も好ましくは10-20mMである。
【００３３】
等張化剤は、200-400、好ましくは220-380、より好ましくは250-340mOsm/kGの浸透圧を達成する量でしばしば存在する。等張化剤は非イオン性であってもイオン性であってもよい。非イオン性等張化剤は、イオン性等張化剤よりも界面活性剤とより共存し易いため、非イオン性等張化剤が好ましい。非イオン性等張化剤には、ジオール類、例えばグリセロール、マンニトール、エリスリトール；およびデキストロースのような糖がある。その他の非イオン性等張化剤、例えばグリセロール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール(これらは共溶媒としても機能する)も使用できる。非イオン性等張化剤は一般に、2-20%、好ましくは3-10%、より好ましくは3.5-5%(w/v)の量である。好ましい非イオン性等張化剤はマンニトールおよびデキストロースであり、2-6%の量である。
【００３４】
等張化剤は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、または平衡塩類溶液といったイオン性物質であってもよい。このイオン性等張化剤は、0.5-0.9%、好ましくは0.6-0.9%(w/v)の量で存在できる。
【００３５】
この製剤中に導入される界面活性剤、等張化剤、共溶媒、およびその他のいかなる成分も、良好な水溶性を持ち、他の成分と共存でき、そして製剤の最終粘度への影響が穏やかでなければならない。この製剤は、典型的な眼科用点眼瓶を用いて局所点眼液として送達されるよう、適正な最終粘度を持つ必要があり、そして濾過滅菌できる。この製剤は、好ましくは沈殿のない透明溶液である。
【００３６】
本発明の薬用製剤は、所望によりキレート化剤を含んでいてもよい。キレート化剤は、金属イオンに対して幾つかの配位結合を形成できる物質である。キレート化剤は、広範囲の金属イオン封鎖剤を提供して、水溶液系の金属イオンを制御する。多価金属イオンと安定な水溶性錯体を形成することにより、キレート化剤は、金属イオンの通常の反応性を遮断して望ましくない相互作用を防ぐ。エチレンジニトリロ四酢酸(EDTA)、ジエチレントリアミン五酢酸(DTPA)、およびN,N-ビス(カルボキシメチル)グリシン(NTA)が、本発明のためのキレート化剤の例である。EDTA(エチレンジアミン四酢酸)が好ましいキレート化剤である。
【００３７】
様々な国の保健条例は、複数回投与用眼科製剤が保存剤を含むことを要求している。他の幾つかの眼科製剤に使用されてきた多くのよく知られた保存剤が、本発明には使用できない。何故なら、それらの保存剤は眼への反復使用に安全とは考えられず、または、それらは本発明で使用される界面活性剤と相互作用して複合体を形成し、それが当該保存剤の殺菌性を低下させるためである。或る態様では、塩化ベンザルコニウムが安全な保存剤として使用され、好ましくは塩化ベンザルコニウムはEDTAと共に使用される。他の好適な保存剤には、ベンジルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、チメロサール、クロロブタノール、および塩化ベンゼトニウムがある。典型的には、このような保存剤を0.001-1%、好ましくは0.01-0.25%、最も好ましくは0.05-0.2%(w/v)のレベルで使用する。
【００３８】
或る態様では、この薬用製剤は、塩化ナトリウムのようなイオン性浸透圧調節剤0.5-0.9%を含み；この製剤は、1-100mMのさらなる緩衝剤(例えば燐酸ナトリウムおよび／またはクエン酸ナトリウムおよびクエン酸)、0.01-2%の範囲の非イオン性界面活性剤、0.005-0.5%w/vの範囲のキレート化剤、およびpH調節剤を含有する。このような水性組成物は250-350mOsm/kGの浸透圧を持ち、pH4-6に調合される。
【００３９】
或る態様では、この薬用製剤は、4-5%の非イオン性等張化剤、例えばマンニトールを含み；この製剤は、5-50mMの範囲の緩衝剤(例えば、燐酸ナトリウムおよび／またはクエン酸ナトリウムおよびクエン酸)、0.01-2%の範囲の界面活性剤、0.005-0.5%w/vの範囲のキレート化剤、およびpH調節剤を含有する。このような水性組成物は250-350mOsm/kGの等張化剤を有し、pH4-6に調合する。この製剤は所望により0.001-0.1%w/vの範囲の保存剤を含有していてもよい。
【００４０】
或る態様では、この薬用製剤は、0.001-2%w/vのラトランキュリン、0.1-2%のポリソルベート80、および浸透圧を200-400mOsm/kGの間に維持するための等張化剤を含む。この製剤は所望により、pHを4-6の間に維持するための1-100mMの緩衝剤を含んでいてもよい。好適な緩衝剤には、燐酸、クエン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、マレイン酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、またはそれらの組み合わせがある。燐酸またはクエン酸緩衝剤が好ましい。
【００４１】
本発明はさらに、0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、5-25%のエタノール(v/v)および浸透圧を200-400mOsm/kGの間に維持するための等張化剤を含む水性薬用製剤を目的とする。眼科適用のためにはエタノール濃度が5-10%であるのが好ましい。この製剤は所望により、pHを4-8の間に維持するための1-100mMの緩衝剤を含んでいてもよい。好適な緩衝剤には、燐酸、クエン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、マレイン酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、またはそれらの組み合わせがある。燐酸緩衝剤またはクエン酸緩衝剤が好ましい。この製剤は実質量のDMSOを含有しない。或る態様では、この製剤は、0.005-0.02%のラトランキュリン、5-10%のエタノール、および0.5-0.9%の塩化ナトリウムを含有する。
【００４２】
本発明はさらに、0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、1-10%(v/v)のプロピレングリコール、0.02-0.25%(w/v)のポロキサマー、および浸透圧を200-400mOsm/kGの間に維持するための等張化剤を含む水性薬用製剤を目的とする。この製剤は所望により、pHを4-8の間に維持するための1-100mMの緩衝剤、および／または0.1-1%の界面活性剤、例えばポリソルベート80を含んでいてもよい。好適な緩衝剤には、燐酸、クエン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、マレイン酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、またはそれらの組み合わせがある。燐酸緩衝剤またはクエン酸緩衝剤が好ましい。この製剤はDMSOを含有しない。
【００４３】
本発明はさらに、0.001-2%w/v量の少なくとも一つのラトランキュリン、0.005-5%、好ましくは0.01-2%w/v量のシクロデキストリン、0.01-0.5%w/v量の保存剤、例えば塩化ベンザルコニウム、および浸透圧を200-400mOsm/kGの間に維持するための等張化剤を含む水性薬用製剤を目的とする。ラトランキュリンと複合体を形成しラトランキュリンの水溶性を増大させるシクロデキストリンは、本発明に好適である。例えば、0.01-2%のヒドロキシプロピル-βシクロデキストリンまたは0.01-1%のヒドロキシプロピル-βシクロデキストリンのスルホブチル化エステルが、この水性製剤に含まれる。この製剤は所望により、pHを4-8の間に維持するための1-100mMの緩衝剤を含んでいてもよい。好適な緩衝剤には、燐酸、クエン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、マレイン酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、またはそれらの組み合わせがある。燐酸またはクエン酸緩衝剤が好ましい。この製剤は実質量のDMSOを含有しない。この製剤は所望により、TWEEN（登録商標）(ポリソルベート)-20、TWEEN（登録商標）(ポリソルベート)-40、TWEEN（登録商標）(ポリソルベート)-60、Span(モノオレイン酸ソルビタン)-20、Span(モノオレイン酸ソルビタン)-40、チロキサポール、ポリビニルピロリドン、およびポリビニルアルコールを含んでいてよい。
【００４４】
本発明はさらに、マイクロエマルジョンまたは希釈エマルジョンを包含するエマルジョン［ここで、ラトランキュリンは、アジュバントと共に調合されて均質な、再現性のある、そして堅固な、物理的および化学的に安定な薬用製剤を形成する］を目的とする。好適なアジュバントは、界面活性剤、乳化剤、および、薬学上許容し得る適当な植物油または合成油を包含する。このエマルジョンは、pH4-8、好ましくは4-7、より好ましくは4-6の間のpHの水溶液に調合される。この製剤は所望により、pHを4-8の間に維持するための緩衝剤1-100mMを含んでいてもよい。好適な緩衝剤には、燐酸、クエン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、マレイン酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、またはそれらの組み合わせがある。燐酸またはクエン酸緩衝剤が好ましい。この製剤は実質量のDMSOを含有しない。このエマルジョンは所望により、適当な保存剤および1またはそれ以上の抗酸化剤を含有していてもよい。このようなエマルジョンは、高剪断ホモジナイズ、超音波処理、高圧ホモジナイズ、機械的撹拌後の高圧乳化、またはマイクロ流動化もしくは流体-流体相互作用のような技術を包含する(但しこれらに限定されない)通常の乳化技術を用いて製造できる。
【００４５】
或る態様では、このエマルジョン製剤は、0.001-2%のラトランキュリン、1-10%のヒマシ油または10-20%の鉱油、1-5%のカルボマーまたは1-10%のセチルアルコール、0.1-1%のポリソルベート80、0.1-1%のモノステアリン酸グリセリルまたは0.1-2%のステアリン酸ポリオキシル、および、浸透圧を200-400mOsm/kGの間に維持するためのグリセリンまたはプロピレングリコールのような等張化剤を含み；この製剤のpHは4-7である。
【００４６】
本発明の薬用製剤は、冷蔵保存温度の下で、少なくとも3箇月、好ましくは6箇月、より好ましくは12箇月間安定である。本明細書で使用する、安定、とは、少なくとも70%、好ましくは80%、より好ましくは90%のラトランキュリン分子が分解せずに無傷であり続けることを指す。
【００４７】
本発明の薬用製剤は冷蔵温度または室温での保存に好適であるが、ラトランキュリン分子の非均質性に示されるように凍結-融解サイクルに付された場合には安定でなく、この製剤の保存有効性が変化する。
【００４８】
本発明の薬用製剤は、無菌技術により製造されるか、または最後に滅菌される。この調製物に使用される全ての材料の純度レベルは90%を超える。本発明の溶液は、ラトランキュリン、緩衝剤、浸透圧調節剤、界面活性剤、キレート化剤；所望により非イオン性ポリマー、錯化剤、可溶化剤、保存剤および抗酸化剤を完全に混合することにより製造する。
【００４９】
この薬用製剤は、滅菌グレードフィルター、好ましくは公称0.22ミクロン孔径のフィルターで濾過することにより滅菌できる。この薬用製剤はまた、熱工程、または照射滅菌工程、または無菌製剤を製造するためのパルス光の使用を包含する(但しこれらに限定されない)1またはそれ以上の滅菌技術を使用して最後に滅菌することもできる。
【００５０】
或る態様では、本発明の薬用製剤を、眼科用調製物の形態で眼に(例えば、局所的に、前眼房内に、またはインプラントを介して)局所投与する。この薬用製剤を、眼科学的に許容し得る粘度増強剤、または透過促進剤と合して、眼科用懸濁液または溶液を形成させることができる。この薬用製剤は、さらなる希釈または他のいかなる操作もすることなく使用に供せられる。
【００５１】
緑内障は、不可逆的な視力障害を導く眼科疾患である。開放隅角緑内障は、眼からの液体(房水)排出に対する異常に高い抵抗性を特徴とする。小柱網の細胞間の接着が、流出抵抗性の主たる決定因子である。本発明の薬用製剤は、主に、関連する細胞骨格構造の破壊またはそれらの膜との相互作用の調節を介して、細胞接着の一時的薬理学的摂動を引き起こす。この接着の摂動は、液体流出に対する小柱網の抵抗性を低減し、それによって治療的に有用なやり方で眼内圧を低下させる。
【００５２】
本発明の薬用製剤は、線維柱帯切除術後の創傷治癒の調節に有用である。一般にこの薬用製剤は、5-フルオロウラシルまたはマイトマイシンCのような代謝拮抗物質よりも角膜内皮細胞に対する毒性が低い。この薬用製剤は、アクトミオシン駆動型収縮を阻害し、アクチンマイクロフィラメント系の劣化およびその膜係留の摂動を導き、それが細胞-細胞外マトリックス接着を弱める。これらの性質が創傷治癒を阻害し、それにより術後のブレブの不具合を減少させる。
【００５３】
血管新生は、既存の血管からの新血管系の発生を特徴とし、胚形成、創傷治癒および女性生殖機能のような生理プロセス、ならびに癌、関節リウマチおよび糖尿病性網膜症を包含する病態生理学的事象において中心的役割を果たしている。腫瘍の増殖および転移は、血管新生に決定的に依存している。血管新生は、移動、増殖、および障壁安定化に内皮細胞(EC)細胞骨格を含む多段階プロセスである。本出願人等は、細胞骨格とアポトーシスの間の相互作用が、血管新生チューブ形成がそれによって起こる、細胞内経路に関わっていると考える。本発明の薬用製剤は、血管新生の阻害および腫瘍の治療に有用である。
【００５４】
抗有糸分裂薬は、抗利尿反応を著しく阻害し、この事は、細胞骨格の完全性がこの機能に必須であることを強く示唆している。上皮輸送の制御における細胞骨格のこの役割は、粒子凝集体を内包する水チャネルの転位および頂端膜へのそれらの送達に必要な工程である。アクチン細胞骨格の制御は流体輸送の調節において重要である。細胞骨格の浸透圧依存的再編成および特異的ストレス蛋白の発現は、浸透圧ストレスに対する骨髄細胞の適応に関わる調節系の重要要素である。本発明の薬用製剤は、上皮機能の指揮および流体輸送の調節に有用である。
【００５５】
本発明は、眼内圧を低下させる方法、緑内障を治療する方法、線維柱帯切除術後の創傷治癒を阻害する方法、血管新生を阻害する方法、癌を治療する方法、および上皮機能を指揮し流体輸送を調節する方法を提供する。その方法は、処置を必要とする対象に、本発明の薬用製剤を、例えばアクチン重合化を阻害することによりアクチン細胞骨格を変化させるのに有効な量で投与する工程を含む。
【００５６】
本発明の薬用製剤は、眼内圧を低下させる物質として有用であり、したがって、緑内障または関連する眼科的状態の治療または予防に有用である。
本発明の薬用製剤は、眼内圧上昇および眼のニューロンの損傷の結果としての神経変性疾患の治療または予防に有用である。
本発明の薬用製剤はさらに、当業者の知悉する投与手段および経路によって、しわを減少させるための化粧品の分野で、血小板保存の分野で、そして血管攣縮および平滑筋攣縮の分野で使用できる。
【００５７】
本明細書に開示する薬用製剤は、任意の適当な手段で患者の眼に局所的に投与できるが、好ましくは点眼薬、スプレーまたはゲルの形態で投与する。或いは、この薬用製剤は、リポソームによって眼に適用できる。さらにこの薬用製剤は、ポンプ-カテーテル系によって涙液膜中に注入できる。別の態様では、この薬用製剤を、連続的または選択的放出装置、例えばOcusert（登録商標） System (Alza Corp., Palo Alto, CA) またはRetisert (Bausch & Lomb, Rochester, NY) で使用されているような膜(但しこれらに限定される訳ではない)の中に入れる。さらなる態様として、この薬用製剤を、眼に装着するコンタクトレンズの中に入れ、またはそれによって担持し、またはそれに付着させることができる。本発明の別の態様は、眼の表面に適用できる綿棒またはスポンジの中に入れた本薬用製剤を含む。本発明の別の態様は、眼の表面に適用できる液体スプレーの中に入れた本薬用製剤を含む。本発明の別の態様は、涙腺組織中または眼の表面に直接適用する本薬用製剤の注射を含む。
【００５８】
或る態様では、この薬用製剤を対象に全身投与する。本明細書で使用する全身的という語は、皮下注射、静脈内、硝子体内注射、前眼房内注射、結膜下注射、局所投与、および経口投与を包含する。
硝子体内送達は、単回または複数回の硝子体内注射、または、細胞骨格を標的とする化合物を持続的容量で放出する埋め込み可能な硝子体内装置による送達を包含できる。硝子体内送達はさらに、外科的処置の際に眼内洗浄液を補助するものとして、または外科手術中に硝子体に直接適用する送達を包含し得る。結膜下または眼球後注射のために同様のアプローチをとることができる。
【００５９】
本発明を以下の実施例によってさらに説明するが、これらを、そこに記載される具体的方法の範囲に本発明を限定するものと解してはならない。当業者は、さらなる努力をすることなく、先の記述を使用して本発明を最大限利用することができる。故に以下の好ましい具体的態様は、単に実例として解釈すべきであって、いかなるものであれ残りの開示内容を限定するものでは決してない。
【実施例】
【００６０】
実施例
実施例1. ラトランキュリンBの製剤の製造、5%エタノール媒質処方中0.02%
ラトランキュリンB 1mgを入れたバイアルに200プルーフエタノール250マイクロリットルを加え、次いでこの溶液を周囲温度で混合した。ここに、pHがおよそ7の燐酸緩衝化生理食塩水750マイクロリットルを加え；溶液を周囲温度で約5分間混合した。得られた溶液は透明であり、ラトランキュリンBについて0.1%であった。この溶液をそのまま使用するか、または燐酸緩衝化生理食塩水の処方を用いて0.02%濃度に希釈した。
【００６１】
実施例2. 水性媒質処方に入れたラトランキュリンBの溶液の製造
ラトランキュリンB 1mgを入れたバイアルにプロピレングリコール100マイクロリットルを加え、次いでこの溶液を周囲温度で混合した。ラトランキュリンBは直ちに溶液となった。この溶液を氷浴中でおよそ5℃に冷却した。ここに、0.25%w/vポロキサマー407を含有する燐酸緩衝化生理食塩水(pH〜7)450マイクロリットルを加え、温度をおよそ5℃に維持しつつ10分間混合した。ここに、1%w/vポリソルベート80を含有する燐酸緩衝化生理食塩水(pH〜7)450マイクロリットルを加え、周囲温度条件で10分間混合した。得られた溶液は透明であり、ラトランキュリンBについて0.1%であった。この溶液をそのまま使用するか、または燐酸緩衝化生理食塩水(pH〜7)を用いて0.02%濃度に希釈した。
【００６２】
実施例3. 水性媒質処方に入れたラトランキュリンBの製剤の製造
ラトランキュリンB 1mgを入れたバイアルにプロピレングリコール50マイクロリットルおよびグリセリン40マイクロリットルを加え、次いでこの溶液を周囲温度で混合した。ラトランキュリンBは溶液となった。この溶液を氷浴中でおよそ5℃に冷却した。ここに、0.2%w/vポロキサマー407および1%w/vポリソルベート80を含有する燐酸緩衝化生理食塩水(pH〜7)910マイクロリットルを加えた。添加後、溶液を5℃で約10分間混合し、次いで室温でさらに10分間混合した。得られた溶液は透明であり、ラトランキュリンBについて0.1%であった。この溶液をそのまま使用するか、または0.2%w/vポロキサマー407および1%w/vポリソルベート80を含有する燐酸緩衝化生理食塩水(pH〜7)を用いて0.02%またはそれ以下の濃度に希釈した。
【００６３】
実施例4. 水性媒質処方に入れたラトランキュリンBの保存調製物の製造
ラトランキュリンB 1mgを入れたバイアルに、4.5%w/vマンニトール、1%w/vポリソルベート80、0.05%w/vエデト酸二ナトリウム、および0.01%w/v塩化ベンザルコニウムを含有するおよそ10mMのクエン酸緩衝液(pH〜5.5)1mLを加え、室温で約15分間混合した。溶液は無色透明であった。この溶液は、ラトランキュリンBについて0.1%であり、およそ5.5のpHであった。この溶液をそのまま使用するか、または4.5%w/vマンニトール、1%w/vポリソルベート80、0.05%w/vエデト酸二ナトリウム、および0.01%w/v塩化ベンザルコニウムを含有するクエン酸緩衝液(pH〜5.5)を用いて0.02%w/vまたはそれ以下の濃度(例えば0.005%w/v)に希釈した。
0.02%(溶液A)および0.005%(溶液B)のラトランキュリンBを含有する溶液を安定性について試験した。ラトランキュリンBの分解はHPLCで測定した。結果は、2-8℃で6箇月間保存後に、溶液Aは95%、そして溶液Bは100%のラトランキュリンB初期量を維持することを示す。
【００６４】
実施例5. デス-メチル-ラトランキュリンBの溶液の製造、5%エタノール媒質処方中0.02%
デス-メチル-ラトランキュリンB 1mgを入れたバイアルに200プルーフエタノール250マイクロリットルを加え、次いでこの溶液を周囲温度で混合した。ここに、pHがおよそ7の燐酸緩衝化生理食塩水750マイクロリットルを加え；溶液を周囲温度で約5分間混合した。得られた溶液は透明であり、ラトランキュリンBについて0.1%であった。この溶液をそのまま使用するか、または燐酸緩衝化生理食塩水の処方を用いて0.02%濃度に希釈した。
【００６５】
実施例6. 水性媒質処方に入れたcis-デス-メチル-ラトランキュリンBの溶液の製造
cis-デス-メチル-ラトランキュリンB 1mgを入れたバイアルに、4.5%w/vマンニトール、1%w/vポリソルベート80、0.05%w/vエデト酸二ナトリウム、および0.01%w/v塩化ベンザルコニウムを含有するおよそ10mMのクエン酸緩衝液(pH〜5.5)1mLを加え、室温で約15分間混合した。溶液は無色透明であった。この溶液は、ラトランキュリンBについて0.1%であり、およそ5.5のpHであった。この溶液をそのまま使用するか、または4.5%w/vマンニトール、1%w/vポリソルベート80、0.05%w/vエデト酸二ナトリウム、および0.01%w/v塩化ベンザルコニウムを含有するクエン酸緩衝液(pH〜5.5)を用いて0.02%w/vまたはそれ以下の濃度に希釈した。
【００６６】
実施例7. 眼内圧に及ぼす細胞骨格標的化合物の製剤のインビボ効果
動物の準備および機器：  本製剤の寛容性の全インビボ実験および評価、ならびに眼内圧に及ぼすこれらの製剤中の本化合物の効果の調査のため、実験をダッチベルト系ウサギで実施した。これらの評価に使用した動物は、個別に収容し、正常な非逆転12時間明暗サイクルに暴露し、食物と水を自由に摂らせた。眼内圧の測定は市販のTonoPen XL眼圧計を用いて実施した。
【００６７】
実験プロトコル：  ウサギをケージから取り出し、ストレスが誘発するIOP上昇を最小限とするため、IOP測定前に数分間布袋の中に拘束する。ウサギの眼の角膜を0.25%プロパラカインHClで麻酔する。麻酔を効かせるため約2分間待った後に、利き手でない方の手で眼瞼を開けておき、Tono-Penを角膜中央部に連続して何回も触れさせ、読みを記録する。ラトランキュリンBを含有する薬用製剤または対照媒質のいずれかを、1またはそれ以上の回数の局所点眼として各動物に投与する。典型的には、ピペットを使用して、20マイクロリットル(2滴 x 各々10マイクロリットル)をおよそ30秒間隔で角膜中央部に投与する。浸透を最大とするため、瞬きをさせないようにし；同じ被験化合物溶液または媒質を同容量、両眼に注入する。IOP測定は、注入の前(-1時間、0時間)および注入の1、2-2.5、3、4.5、および6時間後に行う。それぞれ一連の測定を行った後、動物をケージに戻す。IOP測定に加えて、投薬前、および一連の投与の最中、および実験終了時に、短時間の眼の観察を行う。評価は、眼の状態、特に充血、結膜浮腫、結膜からの分泌、および角膜混濁といった眼の徴候の観察に焦点を定める。
【００６８】
結果
図1は、5%エタノール処方中0.02%ラトランキュリンBおよび媒質で処置したダッチベルト系ウサギにおける眼内圧低下作用を示す。
図2は、プロピレングリコール、ポロキサマー407およびポリソルベート80を含有する燐酸緩衝化生理食塩水(pH〜7)中の0.02%ラトランキュリンBならびに媒質で処置したダッチベルト系ウサギにおける眼内圧低下作用を示す(実施例3)。
【００６９】
図3は、4.5%w/vマンニトール、1%w/vポリソルベート80、0.05%w/vエデト酸二ナトリウム、および0.01%w/v塩化ベンザルコニウムを含有するクエン酸緩衝液(pH〜5.5)中の0.02%ラトランキュリンBならびに媒質で処置したダッチベルト系ウサギにおける眼内圧低下作用を示す(実施例4)。
図4は、5%エタノール処方中0.02%デス-メチル-ラトランキュリンB製剤および媒質で処置したダッチベルト系ウサギにおける眼内圧低下作用を示す(実施例5)。
図5は、4.5%w/vマンニトール、1%w/vポリソルベート80、0.05%w/vエデト酸二ナトリウム、および0.01%w/v塩化ベンザルコニウムを含有するクエン酸緩衝液(pH〜5.5)に入れた0.1% cis-デス-メチルラトランキュリンBならびに媒質で処置したダッチベルト系ウサギにおける眼内圧低下作用を示す(実施例6)。
【００７０】
本発明およびそれを製造し使用する様式および方法を、当業者が本発明を製造し使用できるよう、完全な、明瞭な、簡潔な、そして正確な用語でここに記載する。前記内容は本発明の好ましい態様を記載するものであって、請求項に開示される本発明の範囲を逸脱することなく、そこに修飾を施し得るということは当然である。発明とみなされる対象を特に指摘および明確に特許請求するために、以下の請求項により本明細書を締めくくる。
【図面の簡単な説明】
【００７１】
【図１】図1は、5%エタノール処方中の0.02%ラトランキュリンBおよび媒質で処置したダッチベルト系ウサギの眼内圧(IOP、%基線)対処置後時間を示す。
【図２】図2は、プロピレングリコール、ポロキサマー407およびポリソルベート80を含有する燐酸緩衝化生理食塩水(pH〜7)中の0.02%ラトランキュリンBならびに媒質で処置したダッチベルト系ウサギの眼内圧(IOP、%基線)対処置後時間を示す。
【図３】図3は、4.5%w/vマンニトール、1%w/vポリソルベート80、0.05%w/vエデト酸二ナトリウムおよび0.01%w/v塩化ベンザルコニウムを含有するクエン酸緩衝化溶液(pH〜5.5)中の0.02%ラトランキュリンBならびに媒質で処置したダッチベルト系ウサギの眼内圧(IOP、%基線)対処置後時間を示す。
【図４】図4は、5%エタノール中の0.02%デス-メチル-ラトランキュリンB製剤および媒質で処置したダッチベルト系ウサギの眼内圧(IOP、%基線)対処置後時間を示す。
【図５】図5は、4.5%w/vマンニトール、1%w/vポリソルベート80、0.05%w/vエデト酸二ナトリウムおよび0.01%w/v塩化ベンザルコニウムを含有するクエン酸緩衝化溶液(pH〜5.5)中の0.1%cis-デス-メチル-ラトランキュリンBならびに媒質で処置したダッチベルト系ウサギの眼内圧(IOP、%基線)対処置後時間を示す。
【図１】
2009528390.tif 000006
【図２】
2009528390.tif 000007
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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