(57)【要約】本発明は特に細菌感染による疾患治療用の殺菌剤又は静菌剤を提供する方法に関する。治療的に有効量のデキストロメトルファン又はナロキソンの化合物、又はその薬学的容認の塩又は類似物を、その治療が必要な患者に投与することを含む方法。この化合物を患者の皮膚表面又は粘膜表面に塗布する。この発明は又マクロファージからのＴＮＦ−α、ＩＬ−β又はＭＣＰ−１分泌の抑制で生ずる炎症の治療法に関し、治療的に有効量のＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤をその治療が必要な患者に投与することを含む。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
細菌感染による疾患の治療法で、治療有効量の式Ｉ又は式ＩＩの化合物、又はそれらの薬学的容認の塩または類似物をこの治療が必要な患者に投与することを含む治療法で、
2009527553.tif 000008
ここでＲ１はC1-6アルキル、C2-6アルケニル、C3-6シクロ、アルキルC1-6アルキル又はC2-6アルキレンで、
Ｒ２は水素原子、水酸基、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C2-6アルケニル又はC2-6アルキレンである治療法。
【請求項２】
式Ｉの化合物が（＋）−３−メトキシ−１７−メチル−９α、１３α、１４α−モルフィナン（デキストロメトルファン）である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
この塩がデキストロメトルファン臭化水素酸塩、又はデキストロメトルファンリン酸塩である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
式ＩＩの化合物が１７−アリール−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナロキソン）、又は１７−（シクロプロピルメチル）−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナルトレキソン）である請求項１に記載の方法。
【請求項５】
細菌がアクネ菌又はバクテロイデスフラジリスである請求項１に記載の方法。
【請求項６】
アクネ菌がざ瘡を生ずる請求項５に記載の方法。
【請求項７】
この化合物を患者の皮膚表面又は粘膜表面に塗布する請求項１に記載の方法。
【請求項８】
患者がヒトである請求項１に記載の方法。
【請求項９】
この化合物の有効量が１００００ｐｐｍ乃至１ｐｐｍの範囲である請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
この化合物の有効量が５０００ｐｐｍ乃至１ｐｐｍの範囲である請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
創傷治癒に使用できる請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
創傷治癒が、切開、裂創、擦過傷、穿刺傷、水疱、皮膚裂傷、ドナー部位又はグラフト部位、切創、熱傷創又は放射線外傷からなる一群から選ぶ創傷に向けられる請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
マクロファージからの腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）及びインターロイキン−６（ＩＬ−６）又は単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）の分泌抑制で生ずる炎症疾患の治療法で、治療有効量のＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤をその治療が必要な患者に投与することを含む治療法。
【請求項１４】
ＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤が、式Ｉ又は式ＩＩの化合物、又はそれらの薬学的容認の塩または類似物で
2009527553.tif 000009
ここでＲ１はC1-6アルキル、C2-6アルケニル、C3-6シクロ、アルキルC1-6アルキル又はC2-6アルキレンで、Ｒ２は水素原子、水酸基、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C2-6アルケニル又はC2-6アルキレンである請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
式Ｉの化合物が（＋）−３−メトキシ−１７−メチル−９α、１３α、１４α−モルフィナン（デキストロメトルファン）である請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
この塩がデキストロメトルファン臭化水素酸塩、又はデキストロメトルファンリン酸塩である請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
式ＩＩの化合物が１７−アリール−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナロキソン）、又は１７−（シクロプロピルメチル）−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナルトレキソン）である請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
疾患がざ瘡菌である請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
阻害剤を患者の皮膚表面又は粘膜表面に塗布する請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
患者がヒトである請求項１３に記載の方法。
【請求項２１】
この化合物の有効量が１００００ｐｐｍ乃至１ｐｐｍの範囲である請求項１３に記載の方法。
【請求項２２】
この化合物の有効量が５０００ｐｐｍ乃至１ｐｐｍの範囲である請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
創傷治癒に使用できる請求項１３に記載の方法。
【請求項２４】
創傷治癒が、切開、裂創、擦過傷、穿刺傷、水疱、皮膚裂傷、ドナー部位又はグラフト部位、切創、熱傷創又は放射線外傷からなる一群から選ぶ創傷に向けられる請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
組成がＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤と、式Ｉ又は式ＩＩの化合物、又はそれらの薬学的容認の塩または類似物と、薬学的容認の担体を含み、
2009527553.tif 000010
ここでＲ１はC1-6アルキル、C2-6アルケニル、C3-6シクロ、アルキルC1-6アルキル又はC2-6アルキレンで、
Ｒ２は水素原子、水酸基、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C2-6アルケニル又はC2-6アルキレンである組成。
【請求項２６】
式Ｉの化合物が（＋）−３−メトキシ−１７−メチル−９α、１３α、１４α−モルフィナン（デキストロメトルファン）である請求項２５に記載の組成。
【請求項２７】
この塩がデキストロメトルファン臭化水素酸塩、又はデキストロメトルファンリン酸塩である請求項２５に記載の組成。
【請求項２８】
式ＩＩの化合物が１７−アリール−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナロキソン）、又は１７−（シクロプロピルメチル）−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナルトレキソン）である請求項２５に記載の組成。
【請求項２９】
ＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤が、デキストロメトルファン、ナロキソン又はナルトレキソンである請求項２５に記載の組成。
【請求項３０】
組成が、クリーム、軟膏、ローション、鉱油、化粧品、シャンプー、かゆみ止めクリーム、皮膚パッチ、又は表皮投与又は経皮投与で薄く塗布する他の物の形状である請求項２５に記載の組成。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は殺菌剤又は静菌剤を提供する方法に関する。又この発明はマクロファージで腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）及びインターロイキン−６（ＩＬ−６）又は単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）が起こす炎症の治療法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ざ瘡は十代の若者では９０％の発生率で起こり、又二十代は三十代でもまれな間隔で見られる。ざ瘡（又尋常性ざ瘡）は皮脂腺と毛包に発生する慢性炎症疾患又は障害であり、その病因病理学としては、皮脂の過剰分泌、毛包表皮の異常角化、嫌気性皮膚生着菌であるアクネ菌（Ｐ．acnes）の過成長、及び他の原因が挙げられる。ざ瘡は、通常皮膚のもっとも目立つ部分である顔、胸、背中、首及び上腕に見られ、面疱、膿疱、ループス、小ノブ又は瘢痕として特徴づけられる。
【０００３】
世界中で何百万の人がざ瘡に悩む。現在利用できる治療法は、患者に悪影響があるもの（疱疹、光過敏性、アレルギー反応）から患者に有効性が欠けるか又は最小な（例えば治療薬に対する微生物抵抗性により）範囲で種々の不都合がある。従ってざ瘡、特に尋常性ざ瘡治療又は制御用の代替え治療法の必要性が続いている。
【０００４】
これらの角質嵌入での細菌増殖の結果、毛包が破裂して膿疱、丘疹、嚢胞及び小結節の形状となる疾患の炎症段階が始まる。この苦痛の治療に多くの異なるやり方が用いられてきたが、いずれも普遍的に有効ではなく大部分は好ましくない副作用を有する。
【０００５】
広く使用されるＯＴＣ鎮咳薬であるデキストロメトルファン（ＤＭ、（＋）−３−メトキシ−１７−メチル−９α、１３α、１４α−モルフィナン）は、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体の非競合的拮抗薬であり、Ｈｃｙ（ホモシステイン）とその代謝物の有害作用から守る。オピエートアゴニストのレボルファノールのＤ−異性体であるＤＭは、このオピエートに関連する鎮痛効果又は鎮静効果のいずれも持たない。ＤＭはＮＭＤＡ受容体の拮抗薬として作用し、ＮＭＤＡ受容体が仲介する神経インパルスと神経シグナルの伝達を抑制する。更にＤＭは、又神経特異的カルシウムチャネルの活動を抑制すると報告されている。
【０００６】
ＤＭは、流感や風邪のような上気道疾患に関連する咳症状の治療と軽減に用いる鎮咳薬である。これはその臭化水素酸塩、ＤＭ−ＨＢｒ（デキストロメトルファン臭化水素酸塩）の形で市販されている。この塩は消化液に容易に溶け、ＤＭが血流に送られる。この薬物の生物学的修飾及び／又は身体からの除去が直ちに始まる。身体で即時放出する薬物の常用量は、約１５乃至約３０ｍｇの範囲で４乃至６時間毎に投与する。
【０００７】
ＤＭは合成オピオイドである。通常ＤＭの臭化水素酸塩が薬理学的に用いられるが、他の塩も排除されない。（＋）−３−メトキシ−１７−メチル−９α、１３α、１４α−モルフィナンの生成は、米国特許２，６７６，１７７（シュナイダー等（Schnider et al.））と、ハフリガー等（Hafliger et al.）、ヘルベティカキミカアクタ（Helv. Chil. Acta）、３９巻、１９５６年、２０５３頁に開示された。
【０００８】
鎮咳薬としてではないＤＭの経皮投与が、例えば凍結ゲル絆創膏に関する米国特許５，２６０，０６６で知られている。
【０００９】
デキストロメトルファン（ＤＭ）は咳止めシロップとして広く使用され、人に十分安全で、ＯＴＣ薬として広く使用できることが示された。経口投薬形態で、それ単独か又はキニジンと共に一日当たり最大１２０ミリグラム（ｍｇ）まで十分許容され、大幅により少ない用量（例えば３０ｍｇ／日）を受ける場合にも薬効が観察された（米国特許５，２０６，２４８）。
【００１０】
ＤＭは弱い非競合的ＮＭＤＡ受容体拮抗薬であり、受容体複合体のフェンシクリジン部位と中乃至高親和性で結合する。しかしＤＭは更なる特異的薬理学的特性を有する。ＤＭは高親和性のシグマ１部位のリガンドであることが結合の研究により示され、最初は拮抗薬として作用すると提案されたが、より最近にはアゴニストとして作用することが提案された（モーリス等（Maurice et al.）、ブレインリサーチブレインリサーチレビュー（Brain Res. Brain Res. Rev.）、２００１年、３７巻、１１６−３２頁）。シグマリンガンドは又ＮＭＤＡ応答を調節する。
【００１１】
チエン−チュウアンウオン等（Chien-Chuan Wang et al.）はラットでリポ多糖体（ＬＰＳ）誘発内毒血症モデルを用いた。この研究で彼らは敗血症でのサイトカイン又は一酸化窒素産生の減少が、内毒血症の動物でのＤＭの薬効を伴うか否かを調べた。彼らの結果は、ＤＭが腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）（従ってＩＬ−１０の産生を間接的に抑制する）、一酸化窒素及びスーパーオキシドアニオンを阻害し、げっ歯類のＬＰＳ誘発内毒血症に有害な影響（循環障害と死亡を含む）の発生を緩和することを示した。これらの結果により、ＤＭが敗血症患者の治療として開発の可能性がある薬効を有することが示された（ウオン等（Wang et al.）、ジャーナルオブバイオメディカルサイエンス（J. Biomed. Sci.）、２００４年、１１巻、７３９−７４７頁）。
【００１２】
ナロキソン（商品名ナルカン（Narcan））は、ヘロインやモルヒネのようなオピエートの過量投与の影響に対向するのに用いる医薬品である。ナロキソンはヘロイン中毒者に対する応急キットの一部として流通し、死亡率を低下することが示された。この医薬品は又体が自然に産生する痛み低下エンドルフィンの作用を遮断する。これのありそうな理由は、これらのエンドルフィンが同一オピエート受容体に作動することである。
【００１３】
米国特許５，３６６，９８０には、皮膚炎、特に非処方薬には十分応答しない重度の皮膚炎に悩む人患者の治療法が開示されている。こうような患者は、通常咳止めシロップで用いる鎮咳薬のＤＭを用いて治療する。この患者が所謂“高代謝群”の場合には、酸化防止薬（キニジンのような）を同時投与して、ＤＭをその代謝物であるデキストルファンに迅速に変換する酵素のデブリソキンヒドロキシラーゼのＤＭ分解活性を阻害できる。この治療が重度の皮膚炎の治療に非常に有効であることが示され、大部分の患者でこの医薬品の組み合わせが有意な有害な副作用を起こさない。
【００１４】
ノックアウトマウスの使用により、粥状動脈硬化症のマクロファージ補充の誘引での化学誘引物質サイトカイン（ケモカイン）の単球走化性タンパク質（ＭＣＰ−１）が関係づけられた。アテローム硬化性危険因子と関連するマクロファージ活性化刺激物としては、酸化低密度リポタンパク質（oxLDL、“悪玉コレステロール”）、糖尿病の終末糖化産物（ＡＧＥ）、アンジオテンシンＩＩ及びエンドセリンが挙げられる。大量の研究により、ＯｘＬＤＳがマクロファージスカベンジャー受容体（ＭＲＳ）、特にＭＳＲＡとＣＤ３６を通してマクロファージを活性化することが明らかになった。活性化マクロファージは、細胞を死滅し細胞外基質を分解するエフェクター分子を発現する。これらとしてはＦａｓ−Ｌと一酸化窒素（ＮＯ）が挙げられる。マクロファージＮＯは、高拍出誘導型一酸化窒素合成酵素（iNOS）経路で誘導され、血管平滑筋（ＶＳＭＣ）細胞表面Ｆａｓを上方制御してそれらのアポトーシスを刺激する。活性化マクロファージは、細胞傷害性Ｔリンパ球とナチュラルキラー細胞と同様に表面Ｆａｓ−Ｌを発現する。ＶＳＭＣは血小板の安定性を促進するので、ＶＳＭＣのアポトーシスは血小板の破裂を促進できる。マクロファージは、細胞外基質を分解する多種メタロプロテイナーゼ（例えばストロメライシン）とセリンプロテアーゼ（例えばウロキナーゼ）を発現し、その血小板を弱め破裂し易くする。
【００１５】
マクロファージは、反応性酸素種、エイコサノイド、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１（ＩＬ−１）及びインターロイキン−６（ＩＬ−６）を含む他の多くのエフェクターを分泌する。マクロファージ由来のトランスフォーミング増殖因子ベータは線維症を促進する。アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬とアンジオテンシン変換酵素阻害剤、アスピリン、コレステロール低下薬、特にスタチンを含む既存の心血管疾患治療はマクロファージを阻害できる。一酸化窒素ドナーとマクロファージとアポトーシスとの相互作用は複雑で二機能性である。グルココルチコイドやシクロホスファミドのような伝統的な抗炎症薬は、非常に重い副作用があり、恐らく不適切である。
【発明の開示】
【００１６】
本発明は細菌感染による疾患の治療法を提供し、治療有効量の殺菌性化合物をその治療が必要な患者に投与することを含む。
【００１７】
本発明は更にマクロファージからのＴＮＦ−α、ＩＬ−６又はＭＣＰ−１の分泌抑制で生ずる炎症疾患の治療法を提供し、治療有効量のＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤をその治療が必要な患者に投与することを含む。
【００１８】
本発明は又ＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤と殺菌性化合物を含む組成を提供する。
【００１９】
本発明の他の目的と特性は、付随図面との関連で考察する以下の詳細説明で明らかになる。しかしこの図面は説明目的を策定するにしか過ぎず、この発明の限界の規定を策定するものではなく、付随の特許の請求項を参照する必要があることを理解する必要がある。更にこの図面は必ずしも縮尺で描いてはなく、異なるように指示していない場合には、図面はここに記載の構造と手順を概念的に示す意図にしか過ぎないことを更に理解する必要がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
細菌感染で生ずる疾患又は障害の大部分は、病原体の大量増殖と炎症のような好ましくない副作用が関与する。病原体増殖を死滅又は阻害する多くの抗生物質と、炎症治療用の幾つかの医薬品が存在するが、ざ瘡のようなやや面倒な疾患には良好な治療性能が得られなかった。
【００２１】
本発明により置換モルフィナン（デキストロメトルファンのような）が、細菌（アクネ菌のような）に対し殺菌活性と静菌活性を有することが示された。
【００２２】
従って本発明は細菌感染による疾患の治療法を提供し、治療有効量の式Ｉ又は式ＩＩの化合物、又は薬学的容認のその塩又は類似物をその治療が必要な患者に投与することを含み、
2009527553.tif 000003
ここでＲ１はC1-6アルキル、C2-6アルケニル、C3-6シクロ、アルキルC1-6アルキル又はC2-6アルキレンで、Ｒ２は水素原子、水酸基、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C2-6アルケニル又はC2-6アルキレンである。
【００２３】
式Ｉの好ましい塩は、デキストロメトルファン臭化水素塩、又はデキストロメトルファンリン酸塩である。式ＩＩの好ましい化合物は、１７−アリール−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナロキソン）、又は１７−（シクロプロピルメチル）−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナロキソン）（ナルトレキソン）である。式Ｉの好ましい化合物は、（＋）−３−メトキシ−１７−メチル−９α、１３α、１４α−モルフィナン（デキストロメトルファン）である。モルヒネ、コデインやヘロインのような中毒性鎮痛オピエートの大部分は、左旋性立体異性体（偏光を所謂左手方向に回転する）である。これらは立体配置で“モルフィナン”構造として知られる４つの分子環を有する。モルヒネの多くの右旋性類似物は、左旋性化合物に比べ遙かに低中毒性である。デキストロメトルファン及びデキストロファンを含むこれらの右旋性類似物の幾つかは、モルフィナン構造の鏡像異性体である。これらの鏡像異性体では、９位と１３位炭素原子から広がる環は、上記構造に示したものと反対方向に配向する。
【００２４】
本発明は又ＴＮＦ−α、ＩＬ−６又はＭＣＰ−１のマクロファージからの分泌抑制で生ずる炎症疾患の治療法に関連し、治療有効量のＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤をその治療が必要な患者に投与することを含む。
【００２５】
本発明の方法に従うと、感染性細菌はグラム陽性又はグラム陰性である。プロピオニバクテリウムは、ゆっくり増殖し、非胞子形成のグラム陽性嫌気性細菌である。これらは棒状又は分岐しており、ただ一つだけ、対として、又は群として発生できる。これは通常グルコースから乳酸、プロピオン酸及び酢酸を産生する。アクネ菌は成人の人皮膚に住むグラム陽性細菌である。これはざ瘡形成に関与するが、通常無害な共生生物として皮脂腺小胞内に住む。これは又中でも心内膜炎、角膜潰瘍のような他の疾患とも関連する。しかしグラム陰性桿菌のバクテロイデスフラジリスは、人の正常結腸細菌ミクロフローラの１％乃至２％を構成する。これは動物と人の下痢と同様に、膿瘍、軟部組織感染症のような腸外感染としばしば関連する。それ故感染性細菌のより良い実施形態は、アクネ菌又はバクテロイデスフラジリスである。感染性細菌の最適実施形態は、ざ瘡を起こすアクネ菌である。
【００２６】
医薬組成の用量は、少なくとも治療有効量の活性化合物（即ち式Ｉの化合物又はその薬学的容認の塩）を含み、好ましくは一つ以上の投与量単位で構成される。治療有効量の式Ｉの化合物、又は薬学的容認のその塩又は類似物の選択用量を、その治療を必要とする哺乳動物、例えば人患者に、局所的に、例えば軟膏又はクリームとして、経口的に、直腸性に、例えば座薬として、注入による非経口で、又は膣内注入、鼻腔内注入、気管支内注入、耳内注入又は眼内注入による継続的注入を含む任意の周知又は適切な用量投与法により投与できる。この化合物のより良い実施形態では、細菌感染に苦しむ哺乳動物の皮膚表面又は粘膜表面に塗布する。この哺乳動物の最適実施形態は人患者である。
【００２７】
“治療有効量”とは、発明性化合物を必要な哺乳動物に投与した場合、細菌活性の阻害により疾患状態の治療の緩和に影響するに十分な発明性化合物の量を意味すること意図する。治療に有効なこの発明の所定化合物の量は、特定化合物、疾患状態とその重症度、これが必要な哺乳動物のアイデンティティーのような因子により変わり、その量は熟練者により日常的に決定できる。
【００２８】
この治療が必要な患者に適応するこの化合物の有効量は、１００００ｐｐｍ乃至１ｐｐｍ、好ましくは５０００ｐｐｍ乃至１ｐｐｍ、より好ましくは１０００ｐｐｍ乃至１ｐｐｍ、最も好ましくは１ｐｐｍである。
【００２９】
ここで用いた“薬学的容認の塩”という用語は、薬学的に容認でき所望の薬理特性を有する任意の塩を意味する。この塩は、決して有毒でもなく、好ましくないこともない無機酸又は有機酸、無機塩基又はアミノ酸を含む有機塩基から誘導塩を含む。適切な無機塩としては、アルカリ金属、例えばナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム及びアルミニウムと形成した物が挙げられる。適切な有機塩としては、アミン塩基、例えばエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、Ｎ−メチルグルコサミンなどのような有機塩基と形成した物が挙げられる。又この塩としては、無機酸（例えば塩酸、臭化水素酸）と有機酸（例えば酢酸、クエン酸、マレイン酸及びメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸のようなアルカンスルホン酸とアレーンスルホン酸、スルホン酸及びリン酸）とで形成する酸付加塩が挙げられる。二つの酸性基が存在する場合、薬学的容認の塩は一酸単塩、又は複塩であり得る。同様に二つより多い酸性基が存在する場合には、この基の幾らか又は全てが加塩できる。
【００３０】
マクロファージからのＴＮＦ−α、ＩＬ−６又はＭＣＰ−１の分泌抑制によって生じる炎症疾患でのＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤の使用が見いだされた。
【００３１】
ここでも用いた“ＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤”という用語は、化合物の薬学的容認塩、その誘導体、その二量体及びそのプロドラッグを含む化合物の全で、代謝的にＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤又は酸化バースト阻害剤に変換できる化合物全てを包含すると規定する。安全且つ有効である限り、任意のＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤が本発明の方法で使用できる。この化合物の適切な例としては、ＷＯ９７／１９６７９又は米国特許６０９０８５１に示した物が挙げられる。好ましいＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤は、式Ｉ又は式ＩＩの化合物、又は薬学的容認のその塩又は類似物で、
2009527553.tif 000004
ここでＲ１はC1-6アルキル、C2-6アルケニル、C3-6シクロ、アルキルC1-6アルキル又はC2-6アルキレンで、Ｒ２は水素原子、水酸基、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C2-6アルケニル又はC2-6アルキレンである。
【００３２】
より好ましいＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤は、（＋）−３−メトキシ−１７−メチル−９α、１３α、１４α−モルフィナン（デキストロメトルファン）、１７−アリール−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナロキソン）又は１７−（シクロプロピルメチル）−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナルトレキソン）である。もっとも好ましいＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤は、デキストロメトルファン臭化水素塩、又はデキストロメトルファンリン酸塩である。
【００３３】
マクロファージの主な役割は病原体と壊死組織片の除去である。後者の機能が慢性炎症ではより重要である。マクロファージは、又その細胞膜上のＭＨＣクラスＩＩ分子を摂取した病原体断片（抗原と呼ばれる）を与える。ヘルパーＴ細胞がこれを認識し、Ｂ細胞にリンホカインの知らせを発する。次いでＢ細胞は特定抗原、従って病原体に特異な抗体を創成放出する。マクロファージは付着抗体を有する細胞に特別に誘引されるので再度関与する。
【００３４】
マクロファージの活性化は、マクロファージの形態と機能活動の変化プロセスであるため、どん欲な食作用になる。マクロファージ活性化因子（maf）のようなリンホカイン、マクロファージ遊走阻止因子（mmif）、免疫複合体、ｃ３ｂ、種々のペプチド、多糖体類及び免疫アジュバントにより活性化が始まる。マクロファージコロニー刺激因子は糖タンパク成長因子であり、関与する株化細胞の増殖とマクロファージへの成熟を起こす。
【００３５】
マクロファージは、食作用の役割により免疫系の多くの疾患で関与する。例えばマクロファージは、多数の疾患で起こりうる炎症性病変である肉芽腫形成に参与する。
【００３６】
大部分は希な効果のない食作用とマクロファージ機能の幾つかの障害が記載されている。マクロファージ機能の異常活性化は、慢性炎症プロセスと急性炎症プロセスの両者と同様に自己免疫疾患に関連する。
【００３７】
多形核好中球（ＰＭＮ）は炎症疾患で主な役割を果たす。これは感染性微生物の侵入に対する防御の最前線の働きをする。この目的のために、ＰＭＮはタンパク質分解酵素と他の細胞毒性酵素で充満された顆粒を含む。ＰＭＮは又酵素を放出する以外に貧食でき、酸素を高反応性酸素種（ＲＯＳ）に変換できる。食作用後、摂取微生物は酵素活性とＲＯＳ産生の複合作用により食胞内で死滅できる。刺激ＰＭＮによるＲＯＳの形成は、宿主に有利な生理反応であるが、多くの炎症状態で又有害でこれらラジカルは過剰な組織損傷を生ずる。それ故ＰＭＮの他の死滅能力に影響すること無しに、この有害なＲＯＳ産生を防止できる抗炎症化合物に関する継続的探索が行われている。
【００３８】
ＰＭＮが微生物制御に用いる機構の一つは呼吸性バーストである。分子酸素が、この機構でＮＤＡＰＨオキシダーゼと呼ばれる多数成分酵素によりスーパーオキシドアニオンに変換する。食作用中にＮＡＤＰＨオキシダーゼが食胞膜上に蓄積され、スーパーオキシドアニオンと他のＲＯＳが、摂取微生物と非常に近接した食胞内に蓄積される。
【００３９】
幾つかのＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤（デキストロメトルファンのような）が、抗炎症性を示すだけでなく殺菌活性又は静菌活性を与えることには驚く。この効果はざ瘡又は他の皮膚表面又は粘膜表面の治療に特に重要且つ有用である。
【００４０】
従って本発明は、ＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤と、式Ｉ又は式ＩＩの化合物、又は薬学的容認のその塩又は類似物と、薬学的容認の担体を含む組成を提供し、
2009527553.tif 000005
ここでＲ１はC1-6アルキル、C2-6アルケニル、C3-6シクロ、アルキルC1-6アルキル又はC2-6アルキレンで、Ｒ２は水素原子、水酸基、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C2-6アルケニル又はC2-6アルキレンである。
【００４１】
好ましい実施形態では、ＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤と式Ｉの化合物の両者は、（＋）−３−メトキシ−１７−メチル−９α、１３α、１４α−モルフィナン（デキストロメトルファン）、１７−アリール−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナロキソン）又は１７−（シクロプロピルメチル）−４，５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシモルフィナン−６−オン（ナルトレキソン）に向けられる。
【００４２】
本発明の組成は、クリーム、軟膏、ローション、鉱油、化粧品、シャンプー、かゆみ止めクリーム、皮膚パッチ又は表皮投与又は経皮投与で薄く塗る他の物の形状にできる。
【００４３】
本発明の方法は、切開、裂創、擦過傷、穿刺傷、水疱、皮膚裂傷、ドナー部位又はグラフト部位、切創、熱傷創又は放射線外傷からなる一群から選ぶ創傷治癒に使用できる。
【００４４】
以下の実施例は限定されず、本発明の種々様態と特性の代表にしか過ぎない。
【実施例１】
【００４５】
アクネ菌（嫌気性グラム陽性菌）に対するＤＭの抗菌効果
５０００００ｐｐｍ（５０％）のＤＭ原液調整。
ＤＭ０．２５ｇをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）２５０μｌに加え、良く混合されるまで攪拌した。次いで５０００００ｐｐｍに逐次希釈した。
アクネ菌のＲＣＭ（強化クロストリジウム培地）培養液５ｍｌを遠心分離した。菌体培養液を２０倍希釈により約ＯＤ５９５＝０．１ｘ１０６ＣＦＵ／ｍｌの濃度に調節した。菌体培養液２００μｌのアリコットを９６穴プレートのそれぞれに分散した。菌体とＤＭ２μｌを含む培養液を混合し、各濃度で三組の試験を行った。細菌を嫌気下に３７℃、９６時間培養し、ＯＤ５９５での値を測定した。最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）は、細菌増殖抑制（例えば増殖阻害）に十分な抗菌剤の最低濃度を意味する。
【００４６】
ＯＤ５９５が約０．１ｘ１０６ＣＦＵ／ｍｌの菌体を含む培養液０．１ｍｌをＲＣＭ寒天プレートに薄く塗った。０．８ｃｍの濾紙をはり、ＤＭ２０μｌをそれに滴下した。細菌を嫌気下に３７℃、９６時間培養し、抗菌円の大きさを測定した。
結果
表１  アクネ菌のＭＩＣ試験（最小阻止濃度試験、試験したＤＭ単位はｐｐｍとパーセント％で表す。）
（＋：増殖阻害；−−：増殖阻止無し）
2009527553.tif 000006
表２  嫌気性細菌増殖阻害におけるＤＭディスク拡散の結果：嫌気性条件下、３７℃、９６時間の菌叢株アクネ菌

ディスク番号        ＤＭの濃度                    透明ゾーンの直径
５                    ５％ＤＭ                    ３４mm
６                    ２．５％ＤＭ                １２mm
７                    １．２５％ＤＭ              −−
８                    ０．１％トリクロサン        ３０mm                  
【実施例２】
【００４７】
バクテロイデスフラジリス（嫌気性グラム陰性菌）に対するＤＭの抗菌効果
嫌気性チオグリコール酸ブロス中で１８乃至２４時間増殖したバクテロイデスフラジリスを用いて、マックファランド０．５の菌体懸濁液を処方した。嫌気性チオグリコール酸ブロスでＤＭＳＯ原液０．５ｇ／ｍｌを希釈した。嫌気性チオグリコール酸ブロス１０００μｌをＤＭ希釈液１０００μｌに１：１の比で加えた後、嫌気性恒温器に入れ２４時間インキュベートした。
表３  バクテロイデスフラジリスのＭＩＣ試験（最小阻止濃度試験、試験したＤＭ単位はｐｐｍとパーセント％で表す。）
（＋：増殖阻害；−−：増殖阻止無し）
2009527553.tif 000007
“負の対照”は、ＤＭ無しのチオグリコール酸ブロスプラス細菌を意味する。
【実施例３】
【００４８】
好気性グラム陰性菌の大腸菌に対するＤＭの抗菌効果
抗菌ディスク拡散に基づく。
感受性試験はベクトンディッキンソン社（Becton, Dickinson and Company）、フランスか得たミューラーヒントンＩＩ（Mueller Hinton II）寒天からなる。
【００４９】
ミューラーヒントンＩＩ（Mueller Hinton II）寒天の粉末３８ｇを、再蒸留水１Ｌに懸濁して調整した。この寒天を１２１℃で１５分間加圧殺菌した。この寒天を各寒天プレートに注ぎ、固化するまで待った。大腸菌１ｘ１０５ＣＦＵの培養液１００μｌをこの寒天プレートに薄く塗り、９６時間増殖した。
表４  好気性グラム陰性菌の増殖阻害におけるＤＭディスク拡散の結果：菌叢株大腸菌の３７℃、９６時間増殖

ＤＭの濃度            透明ゾーンの直径
１０％ＤＭ            １８mm
５％ＤＭ              １３mm
２．５％ＤＭ            ９．５mm
１，２％ＤＭ            −−                                                
【実施例４】
【００５０】
グラム陽性菌の黄色ブドウ球菌に対するＤＭの抗菌効果
抗菌ディスク拡散に基づく。
感受性試験はベクトンディッキンソン社（Becton, Dickinson and Company）、フランスか得たミューラーヒントンＩＩ（Mueller Hinton II）寒天からなる。
【００５１】
ミューラーヒントンＩＩ（Mueller Hinton II）寒天の粉末３８ｇを、再蒸留水１Ｌに懸濁して調整した。この寒天を１２１℃で１５分間加圧殺菌した。この寒天を各寒天プレートに注ぎ、固化するまで待った。黄色ブドウ球菌１０５ＣＦＵの培養液１００μｌをこの寒天プレートに薄く塗り、９６時間増殖した。
表５  好気性菌の増殖阻害におけるＤＭディスク拡散の結果：菌叢株黄色ブドウ球菌の３７℃、９６時間増殖

ＤＭの濃度            透明ゾーンの直径
１０％ＤＭ            １４mm
５％ＤＭ              １０mm
２．５％ＤＭ            −−
１，２％ＤＭ            −−                                                
【実施例５】
【００５２】
方法と結果
単球細胞ＴＨＰ−１を培養し、マクロファージに分化した。このマクロファージを種々濃度のデキストロメトルファン又はナロキソンで１時間前処理し、次いでリポ多糖体（ＬＰＳ）で２４時間インキュベートした。デキストロメトルファン又はナロキソンの前処理により、ＬＰＳ刺激後ＴＨＰ−１細胞培養液中の腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）及び単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）の濃度を有意に減少した。
【００５３】
材料調整
ＲＰＭＩ培養液、ホルボール１２−ミリステートー１３−アセテート（ＰＭＡ）、ＬＰＳ（大腸菌０１１１：Ｂ４）及びナロキソンをシグマ社（Sigma）から購入した。ヒト単球系ＴＨＰ−１株細胞を、食品工業研究開発研究所（Food Industry Research and Development Institute）、新竹（Hsin Chu）、台湾から購入した。培養液中の腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）及び単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）のレベルを、アールアンドディーシステム社（R&D Systems）（ミネアポリス（Minneapolis）、ミネソタ州（MN）、米国）から購入の酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）キットに基づく単クローン抗体で決定し、動物実験の全ては施設内動物実験委員会（Institutional Animal Care and Use Committee）で承認された。
【００５４】
細胞培養
１０％ウシ胎仔血清含有のＲＰＭＩ−１６４０培養液で、ＴＨＰ−１細胞を５％炭酸ガス下３７℃で増殖した。培養液に１００ｎＭＰＭＡで２４時間処理後、この細胞をマクロファージに分化した。この細胞懸濁液（５ｘ１０５）０．５ｍＬを組織培養プレートの各穴に加えた。ＬＰＳを減菌水に溶解し、一定分量を−７０℃で保存した。投与群では、このＴＨＰ−１細胞培養液を種々濃度のデキストロメトルファン又はナロキソンで１時間前処理後、ＬＰＳ１０μｇ／ｍＬで最大２４時間処理した。対照群では、この細胞培養液をＬＰＳ１０μｇ／ｍＬで２４時間処理するだけであった。上澄み液を収集した。上澄み液中のＴＮＦ−α、ＩＬ−６及びＭＣＰ−１のレベルをＥＬＩＳＡ法キットを用いて決定した。
【００５５】
ＬＰＳ誘発マクロファージ活性化に対するＤＭの効果
炎症反応が０．０１μＭより少ないデキストロメトルファンで阻害できる。デキストロメトルファン存在下で１単位／ｍｌのＬＰＳで２４時間処理したＴＨＰ−１細胞と、培養液培地に放出されたＴＮＦ−αとＩＬ−６をＥＬＩＳＡ法で測定した（図１）。図１に、ＴＮＦ−α（Ａ）とＩＬ−６（Ｂ）のＬＰＳ誘発マクロファージ放出に対するデキストロメトルファン処理の効果を示す。ＴＨＰ−１細胞培養液を、ＬＰＳ１００ｎｇ／ｍｌによる刺激前に指示濃度のデキストロメトルファンで１時間前処理した。上澄み液をＴＮＦ−αとＩＬ−６の測定のために２４時間後に収集した。結果は三つの実験の平均値±標準誤差で表す。＊＊ｐ＜０．０１と＊＊＊ｐ＜０．００１は、ＬＰＳ処理培養液と比較する。
【００５６】
ＬＰＳ誘発マクロファージ活性化に対するナロキソンの効果
ＴＮＦ−α（Ａ）、ＩＬ−６（Ｂ）及びＭＣＰ−１（Ｃ）のＬＰＳ誘発マクロファージ放出に対するナロキソン処理の効果
ＬＰＳ１００ｎｇ／ｍｌによる刺激前に、ＴＨＰ−１細胞培養液を指示濃度のナロキソンで１時間前処理した。上澄み液をＴＮＦ−α、ＩＬ−６及びＭＣＰ−１の測定のために２４時間後に収集した。結果は三つの実験の平均値±標準誤差で表す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１と＊＊＊ｐ＜０．００１は、ＬＰＳ処理培養液と比較する（図２）。
【００５７】
本発明が、目的を実施し記述の目的と利益と同様に、そこに備わる物を得るのに良く適用されることは当業者には容易に分かる。株化細胞、動物及びそれらを産生するプロセスと方法は好ましい実施形態を代表するものであり、典型的なものであり、この発明の範囲を限定しようとするものではない。ここでの当業者による修正や他の使用は生ずる。これらの修正はこの発明の精神内に包含され、特許の請求項により規定される。
【００５８】
ここに開示の発明の様々な置換や修正が、この発明の範囲と精神から逸脱しないでできることは当業者には直ちに明白である。
【００５９】
この明細書に記載の特許と公表物の全ては、この発明に関係する当業者の水準を示す。特許と公表物の全ては、あたかも個々の公表物が文献として取り入れるように具体的に個々に示すごとき程度に、ここに文献として取り入れる。
【００６０】
ここに図解的に記載の発明は、ここには具体的に開示しない任意の要素又は複数の要素、限界又は複数の限界なしに適切に実施できる。使用した用語と表現は説明用語として使用し、制限ではなくこれら用語と表現の使用で表示又は記述した特性の同等物のいずれか又はその一部を排除する意図はなく、種々の修正が請求のこの特許の範囲内で可能なことが分かる。従って本発明は好ましい実施形態と付加機能により具体的に開示したが、ここに開示の概念の修正と変形は当業者の助けを求めても良く、そのような修正と変形が付随の特許の請求項により規定した本発明の範囲内にあると考えることを理解する必要がある。
【図面の簡単な説明】
【００６１】
【図１】図１はＴＮＦ−α（Ａ）とＩＬ−６（Ｂ）のリポ多糖体誘発マクロファージ放出に対するデキストロメトルファンの処理効果を示す。ＴＨＰ−１細胞培養液をリポ多糖体１００ｎｇ／ｍＬで刺激する前に指示濃度のデキストロメトルファンで一時間前処理した。上澄み液をＴＮＦ−αとＩＬ−６の測定のために２４時間後に収集した。結果は３回の実験の平均値±標準誤差（ＳＤ）で表す。＊＊ｐ＜０．０１と＊＊＊＜０．００１をリポ多糖体処理の培養液と比較する。
【００６２】
【図２】図２はＴＮＦ−α（Ａ）、ＩＬ−６（Ｂ）とＭＣＰ−１（Ｃ）のリポ多糖体誘発マクロファージ放出に対するナロキソンの処理効果を示す。
【図１】
2009527553.tif 000011
【図２】
2009527553.tif 000012
【手続補正書】
【提出日】平成21年4月24日(2009.4.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細菌感染による疾患の治療法で、細菌感染患者に治療的適応する薬剤の製造に、治療有効量の式Ｉ又はＩＩの化合物、又はそれらの薬学的容認の塩または類似物を使用する方法で、この治療が必要な患者に投与することを含む治療法で、
2009527553.tif 000013
ここでＲ１はＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、シクロＣ３−６アルキル−Ｃ１−６アルキル又はＣ２−６アルキレンで、
Ｒ２は水素原子、水酸基、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ２−６アルケニル又はＣ２−６アルキレンである治療法方法。
【請求項２】
マクロファージからの腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）及びインターロイキン−６（ＩＬ−６）又は単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）の分泌抑制で生ずる炎症疾患の治療法で、その治療が必要な患者に謄写投与することを含む治療法患者のマクロファージからの腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）及びインターロイキン−６（ＩＬ−６）又は単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）の分泌抑制で生ずる炎症疾患に治療的適応する薬剤の製造に治療有効量のＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤を使用する方法。
【請求項３】
組成がＮＡＤＰＨオキシダーゼ阻害剤と、式Ｉ又は式ＩＩの化合物、又はそれらの薬学的容認の塩又は類似物と、薬学的容認の単体を含み、
2009527553.tif 000014
ここでＲ１はＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、シクロ３−６アルキル−Ｃ１−６アルキル又はＣ２−６アルキレンで、
Ｒ２は水素原子、水酸基、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ２−６アルケニル又はＣ２−６アルキレンである組成。
【国際調査報告】
2009527553.tif 000015