(57)【要約】ＧＬＰ−１類似体を含むＧＬＰ−１化合物、および患者において代謝性疾患を治療する、インスリン発現を高める、およびインスリン分泌を促進するためにＧＬＰ−１化合物を使用する方法が提供される。この方法は、たとえば糖尿病、耐糖能異常、インスリン抵抗性、様々な脂質障害、肥満、心臓血管疾患および骨障害を治療するために使用できる。本発明において提供されるＧＬＰ−１化合物は、たとえば式Ｉ（配列番号５）などのアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含み、この化合物はＧＬＰ−１活性を有する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ（配列番号５）：
Ｘａａ７−Ｇｌｙ−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｃｙｓ−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｇｌｙ−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式Ｉ、配列番号５）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ３３は、ＶａｌまたはＬｙｓであり；  
Ｘａａ３４は、ＬｙｓまたはＡｓｎであり；
Ｘａａ３６は、ＡｒｇまたはＧｌｙであり；
Ｘａａ３７は、ＧｌｙまたはＰｒｏである］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
【請求項２】
前記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号７−８のいずれかのアミノ酸配列を有し、該保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２３、またはＸａａ３８−Ｘａａ４５のいずれかではないことを条件とする、請求項１に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項３】
前記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号７−８のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項１に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項４】
式ＩＩ（配列番号９）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩ、配列番号９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓである］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
【請求項５】
前記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号１１−１２のいずれかのアミノ酸配列を有し、該保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、またはＸａａ３８−Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件とする、請求項４に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項６】
前記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号１１−１２のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項４に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項７】
式ＩＩＩ（配列番号１３）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｇｌｙ−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩＩ、配列番号１３）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、２−アミノイソ酪酸、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、α−α−二置換アミノ酸または２−アミノアジピン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３８位のＸａａは、Ｃｙｓ、Ｇｌｙであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
３８、３９、４０または４１位のアミノ酸が除かれているとき、そのアミノ酸の下流の各々のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
【請求項８】
前記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号１６−２８のいずれかのアミノ酸配列を有し、該保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２２、またはＸａａ３８−Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件とする、請求項７に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項９】
前記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号１６−２８のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項７に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１０】
式ＩＶ（配列番号２９）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＶ、配列番号２９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３８位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｃｙｓであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
Ｘａａ１８、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２２、Ｘａａ２３、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、Ｘａａ２８、Ｘａａ２９およびＸａａ３０から選択される２個のアミノ酸は、結合して環を形成しており、および該環を形成する２個のアミノ酸は、３、４または５個のアミノ酸によって分離されている］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
【請求項１１】
前記環を形成する２個のアミノ酸が３個のアミノ酸によって分離されている、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１２】
前記環を形成する２個のアミノ酸が４個のアミノ酸によって分離されている、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１３】
前記環を形成する２個のアミノ酸が５個のアミノ酸によって分離されている、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１４】
Ｘａａ１８が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２２が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ１８とＸａａ２２が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１５】
Ｘａａ１９が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２３が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ１９とＸａａ２３が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１６】
Ｘａａ２０が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２４が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２０とＸａａ２４が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１７】
Ｘａａ２１が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２５が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２１とＸａａ２５が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１８】
Ｘａａ２２が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２６が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２２とＸａａ２６が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１９】
Ｘａａ２３が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２７が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２３とＸａａ２７が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２０】
Ｘａａ２４が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２８が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２４とＸａａ２８が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２１】
Ｘａａ２５が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２９が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２５とＸａａ２９が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２２】
Ｘａａ２６が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ３０が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２６とＸａａ３０が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２３】
前記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号３０−２４６のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２４】
前記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号３０−２４６のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２５】
Ｒ１が、カルボキシル基、アミン、エステルまたは置換アミンである、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２６】
式ＶＩ：
Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｈｉｓ７−Ａｌａ８−Ｇｌｕ９−Ｇｌｙ１０−Ｔｈｒ１１−Ｐｈｅ１２−Ｔｈｒ１３−Ｓｅｒ１４−Ａｓｐ１５−Ｖａｌ１６−Ｓｅｒ１７−Ｓｅｒ１８−Ｔｙｒ１９−Ｌｅｕ２０−Ｇｌｕ２１−Ｇｌｙ２２−Ｇｌｎ２３−Ａｌａ２４−Ａｌａ２５−Ｌｙｓ２６−Ｇｌｕ２７−Ｐｈｅ２８−Ｉｌｅ２９−Ａｌａ３０−Ｔｒｐ３１−Ｌｅｕ３２−Ｖａｌ３３−Ｌｙｓ３４−Ｇｌｙ３５−Ａｒｇ３６−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＶＩ、配列番号２７６）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
４位のＸａａは、Ｍｅｔであるかまたは除かれており；
５位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ｈｉｓであるかまたは除かれており；
６位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＴｒｐまたはＰｈｅであり；
５位のアミノ酸が除かれているとき、４位のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
に示すアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
【請求項２７】
前記ＧＬＰ−１類似体が、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号２４７−２６７のいずれかのアミノ酸配列を有し、該保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ４、Ｘａａ５またはＸａａ６ではないことを条件とする、請求項２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２８】
前記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号２４７−２６７のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２９】
代謝性疾患を有する被験体を治療するための方法であって、請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を被験体に投与することを含み、該代謝性疾患が、糖尿病、肥満および代謝症候群の群から選択される、方法。
【請求項３０】
請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を被験体に投与することを含む、該被験体においてインスリン発現を高めるための方法。
【請求項３１】
請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を被験体に投与することを含む、該被験体においてインスリン分泌を促進するための方法。
【請求項３２】
水溶性ポリマーで共有結合によって改変されている、請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項３３】
前記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコール、モノメトキシ−ポリエチレングリコール、デキストラン、セルロース、ポリ−（Ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオールおよびポリビニルアルコールから成る群より選択される、請求項３２に記載のポリペプチド。
【請求項３４】
前記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコールおよびデキストランから成る群より選択される、請求項３２に記載のポリペプチド。
【請求項３５】
前記ＧＬＰ−１類似体がペグ化されている、請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項３６】
医薬的に許容される担体および請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を含有する医薬組成物。
【請求項３７】
代謝性疾患を有する被験体を治療するための方法であって、請求項３６に記載の医薬組成物の有効量を該被験体に投与することを含み、該代謝性疾患が、糖尿病、肥満および代謝症候群の群から選択される、方法。
【請求項３８】
請求項３６に記載の医薬組成物の有効量を被験体に投与することを含む、該被験体においてインスリン発現を高めるための方法。
【請求項３９】
請求項３６に記載の医薬組成物の有効量を被験体に投与することを含む、該被験体においてインスリン分泌を促進するための方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本願は、２００６年４月２０日に出願された米国仮特許出願第６０／７９３，７０７号の利益を主張し、これは、全ての目的において本明細書中の全体にわたって参考として明白に援用される。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）と関連ペプチド、グルカゴンは、プログルカゴンの示差的なプロセシングによって生産され、拮抗する生物活性を有する。プログルカゴン自体は、膵のα細胞および、主として遠位小腸と結腸に位置する、腸内分泌性Ｌ細胞において産生される。膵において、グルカゴンはプログルカゴンから選択的に切断される。腸では、これに対し、プログルカゴンはＧＬＰ−１とグルカゴン様ペプチド２（ＧＬＰ−２）を形成するようにプロセシングされ、それらはそれぞれ、プログルカゴンのアミノ酸残基７８−１０７と１２６−１５８に対応する（たとえば非特許文献１および非特許文献２参照）。慣例により、ＧＬＰ−１のアミノ酸の番号付けは、プログルカゴンの切断から形成されるＧＬＰ−１（１−３７）に基づく。生物活性形態は、このペプチドのさらなるプロセシングから生成され、ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨおよびＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２を生じる。これらのプロセシングされたペプチドの最初のアミノ酸はＨｉｓ７である。ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨ（または単にＧＬＰ−（７−３７））とＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２はどちらも同じ活性を有する。便宜上、「ＧＬＰ−１」という用語を、これらの形態の両方を指すために使用する。
【０００３】
グルカゴンは、低血糖に応答して膵のα細胞から分泌され、グルカゴンの主要標的器官は肝である。グルカゴンは、グリコーゲンの分解を刺激し、グリコーゲンの生合成を阻害する。また脂肪酸の合成も阻害するが、糖新生を促進する。これらの作用の正味の結果は、肝からのグルコースの放出を有意に上昇させることである。ＧＬＰ−１は、これに対し、グルカゴン分泌を低下させるが、その一方で、腸管による栄養素の吸収に応答してインスリンの分泌、グルコースの取込みおよびサイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）形成を刺激する。様々な臨床データがこれらの作用の証拠を提供する。コントロール不良の２型糖尿病患者におけるＧＬＰ−１の投与は、たとえば、患者の空腹時血糖値を正常化した（たとえば非特許文献３参照）。
【０００４】
ＧＬＰ−１は多くの他の重要な活性を有する。たとえばＧＬＰ−１はまた、胃の運動性および胃液分泌を抑制する（たとえば非特許文献４参照）。時として回腸ブレーキ作用と称されるこの作用は、栄養素のアベイラビリティに遅延期を生じさせ、その結果急速なインスリン応答の必要性を有意に低下させる。
【０００５】
試験はまた、ＧＬＰ−１が細胞分化と複製を促進することができ、それが次に、膵島細胞の保存およびβ細胞量の増加を助けることを示唆する（たとえば非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７；および非特許文献８参照）。また、ＧＬＰ−１が満腹感を高め、食物摂取を低下させ得ることを示唆する証拠もある（たとえば非特許文献９；非特許文献１０；非特許文献１１参照）。
【０００６】
他の研究は、ＧＬＰ−１が、ＧＬＵＴ−１輸送体、インスリン受容体およびヘキソキナーゼ−１を含む、β細胞特異的遺伝子発現を誘導することを指示する（たとえば非特許文献１２参照）。そのような誘導は、しばしば加齢に関連するグルコース不耐性を逆転させ得る。
【０００７】
ＧＬＰ−１は代謝ホメオスタシスを調節する上で鍵となる役割を果たすので、糖尿病、肥満および代謝症候群を含む様々な代謝性疾患を治療するための魅力的な標的である。糖尿病のための現在の治療は、インスリン注射、およびスルホニル尿素、メトホルミンおよびＴＺＤの投与を含む。これらのアプローチには、しかしながら、重要な欠点がある。たとえばインスリン注射は、複雑な投薬上の配慮を必要とし、スルホニル尿素による治療はしばしば経時的に無効になり、メトホルミンは低血糖を誘導することがあり、ＴＺＤは体重増加や浮腫などの副作用を有する。ＧＬＰ−１治療の潜在的利点は、１）インスリン分泌が高血糖に依存することによる高い安全性、２）結果として過度のグルコース産生を抑制する、グルカゴン分泌の抑制、および３）結果として栄養素の吸収を遅延させ、急激なグルコース上昇を防ぐ、胃排出の緩慢化を含む。
【０００８】
ＧＬＰ−１による有効な治療の重要な障害は、しかしながら、典型的にはわずか数分しかない、このペプチドの非常に短い半減期である（たとえば非特許文献１３参照）。この分子の半減期を延長することを目標として様々な類似体が開発されてきた。これらの一部は、しかし、嘔吐および吐気を含む、有意の消化器系副作用を有する（たとえば非特許文献１４参照）。
【非特許文献１】ＩｒｗｉｎとＷｏｎｇ，１９９５，Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．９：２６７−２７７
【非特許文献２】Ｂｅｌｌら、１９８３，Ｎａｔｕｒｅ  ３０４：３６８−３７１
【非特許文献３】Ｇｕｔｎｉａｋら、１９９２，Ｎｅｗ  Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２６：１３１６−１３２２
【非特許文献４】Ｔｏｌｅｓｓａ，１９９８，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０２：７６４−７７４
【非特許文献５】Ａｎｄｒｅａｓｅｎら、１９９４，Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ  ５５：２２１−２２８
【非特許文献６】Ｗａｎｇら、１９９７，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９９：２８８３−２８８９
【非特許文献７】Ｍｏｊｓｏｖ，１９９２，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐ．Ｐｒｏｔ．Ｒｅｓ．４０：３３３−３４３
【非特許文献８】Ｘｕら、１９９９，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ４８：２２７０−２２７６
【非特許文献９】Ｔｏｆｔ−Ｎｉｅｌｓｅｎら、１９９９，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ  ２２：１１３７−１１４３
【非特許文献１０】Ｆｌｉｎｔら、１９９８，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０１：５１５−５２０
【非特許文献１１】Ｇｕｔｓｗｉｌｌｅｒら、１９９９  Ｇｕｔ  ４４：８１−８６
【非特許文献１２】ＰｅｒｆｅｔｔｉとＭｅｒｋｅｌ，２０００，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１４３：７１７−７２５
【非特許文献１３】Ｈｏｌｓｔ，１９９４，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １０７：１８４８−１８５５
【非特許文献１４】Ａｇｅｒｓｏら、２００２，Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ  ４５：１９５−２０２
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
従って、糖尿病、肥満、過敏性腸症候群および代謝症候群などの様々な代謝性疾患の治療における使用のための、ＧＬＰ−１型活性を有する改善された分子への必要性が現在も存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
（要旨）
ＧＬＰ−１類似体を含み、ＧＬＰ−１の活性（たとえばインスリン分泌刺激活性）を有するＧＬＰ−１化合物をここで開示する。その組成物の有効量を投与することによって様々な疾患を治療するための方法も提供する。そのような方法は、たとえば糖尿病、耐糖能異常、インスリン抵抗性、様々な脂質障害、肥満、心臓血管疾患および骨障害を治療するために使用できる。
【００１１】
ここで提供するＧＬＰ−１化合物の一部は、たとえば式Ｉ（配列番号５）：
Ｘａａ７−Ｇｌｙ−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｃｙｓ−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｇｌｙ−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式Ｉ、配列番号５）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ３３は、ＶａｌまたはＬｙｓであり；  
Ｘａａ３４は、ＬｙｓまたはＡｓｎであり；
Ｘａａ３６は、ＡｒｇまたはＧｌｙであり；
Ｘａａ３７は、ＧｌｙまたはＰｒｏである］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含み、前記化合物はＧＬＰ−１活性を有する。特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号７または８のアミノ酸配列を有し、保存的アミノ酸置換は、アミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２３、またはＸａａ３８−Ｘａａ４５のいずれかではないことを条件とする。もう１つの特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、配列番号７または８のいずれかのアミノ酸配列を有する。
【００１２】
ここで提供する他のＧＬＰ−１化合物は、式ＩＩ（配列番号９）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩ、配列番号９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、Ａｉｂ（２−アミノイソ酪酸）またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓである］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含み、前記化合物はＧＬＰ−１活性を有する。特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号１１または１２のアミノ酸配列を有し、保存的アミノ酸置換は、アミノ酸Ｘａａ８、またはＸａａ３８−Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件とする。もう１つの特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、配列番号１１または１２のアミノ酸配列を有する。
【００１３】
ここで提供するさらなる他のＧＬＰ−１化合物は、式ＩＩＩ（配列番号１３）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｇｌｙ−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩＩ、配列番号１３）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、Ａｉｂ（２−アミノイソ酪酸）またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ａｉｂ（２−アミノイソ酪酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、α−α−二置換アミノ酸またはＡａｄ（２−アミノアジピン酸）であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３８位のＸａａは、Ｃｙｓ、Ｇｌｙであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
３８、３９、４０または４１位のアミノ酸が除かれているとき、そのアミノ酸の下流の各々のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含み、前記化合物はＧＬＰ−１活性を有する。特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号１６−２８のいずれかのアミノ酸配列を有し、保存的アミノ酸置換は、アミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２２、またはＸａａ３８−Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件とする。もう１つの特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、配列番号１６−２８のいずれかのアミノ酸配列を有する。
【００１４】
ここで提供する一部のＧＬＰ−１化合物は、式ＩＶ（配列番号２９）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＶ、配列番号２９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３８位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｃｙｓであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
Ｘａａ１８、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２２、Ｘａａ２３、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、Ｘａａ２８、Ｘａａ２９およびＸａａ３０から選択される２個のアミノ酸は、結合して環を形成しており、および環を形成する２個のアミノ酸は、０、１、２、３、４または５個のアミノ酸によって分離されている］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含み、前記化合物はＧＬＰ−１活性を有する。特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号３０−２４６のいずれかのアミノ酸配列を有する。もう１つの特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、配列番号３０−２４６のいずれかのアミノ酸配列を有する。
【００１５】
さらにもう１つの態様では、ここで提供するＧＬＰ−１化合物は、式ＶＩ：
Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｈｉｓ７−Ａｌａ８−Ｇｌｕ９−Ｇｌｙ１０−Ｔｈｒ１１−Ｐｈｅ１２−Ｔｈｒ１３−Ｓｅｒ１４−Ａｓｐ１５−Ｖａｌ１６−Ｓｅｒ１７−Ｓｅｒ１８−Ｔｙｒ１９−Ｌｅｕ２０−Ｇｌｕ２１−Ｇｌｙ２２−Ｇｌｎ２３−Ａｌａ２４−Ａｌａ２５−Ｌｙｓ２６−Ｇｌｕ２７−Ｐｈｅ２８−Ｉｌｅ２９−Ａｌａ３０−Ｔｒｐ３１−Ｌｅｕ３２−Ｖａｌ３３−Ｌｙｓ３４−Ｇｌｙ３５−Ａｒｇ３６−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＶＩ、配列番号２７６）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
４位のＸａａは、Ｍｅｔであるかまたは除かれており；
５位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ｈｉｓであるかまたは除かれており；
６位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＴｒｐまたはＰｈｅであり；
５位のアミノ酸が除かれているとき、４位のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
に示すアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含み、前記化合物はＧＬＰ−１活性を有する。
【００１６】
また、医薬的に許容される担体およびここで述べるＧＬＰ−１化合物の有効量を含有する医薬組成物も提供する。
【００１７】
加えて、ここで提供するＧＬＰ−１化合物またはここで提供するＧＬＰ−１化合物を含有する医薬組成物の有効量を被験体に投与することを含む、糖尿病、肥満および代謝症候群の群から選択される代謝性疾患を有する被験体を治療するための方法を提供する。
【００１８】
加えて、ここで提供するＧＬＰ−１化合物またはここで提供するＧＬＰ−１化合物を含有する医薬組成物の有効量を被験体に投与することを含む、被験体においてインスリン発現を高めるための方法および被験体においてインスリン分泌を促進するための方法を提供する。
【００１９】
ある態様では、ここで提供するＧＬＰ−１化合物は、ポリエチレングリコール、モノメトキシ−ポリエチレングリコール、デキストラン、セルロース、ポリ−（Ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオールまたはポリビニルアルコールなどの、水溶性ポリマーで共有結合的に修飾され得る。
【００２０】
具体的な実施形態は、一部の実施形態の以下のより詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
Ｉ．定義
本明細書および付属の特許請求の範囲において使用するとき、単数形態「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに異なる指示を与えない限り、複数の言及を包含する。
【００２２】
異なる定義がない限り、ここで使用するすべての技術および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味を有する。以下の参考文献は、本発明において使用する用語の多くの一般的定義を当業者に提供する：Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎら、ＤＩＣＴＩＯＮＡＲＹ  ＯＦ  ＭＩＣＲＯＢＩＯＬＯＧＹ  ＡＮＤ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ（第２版、１９９４）；ＴＨＥ  ＣＡＭＢＲＩＤＧＥ  ＤＩＣＴＩＯＮＡＲＹ  ＯＦ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ  （Ｗａｌｋｅｒら、１９８８）；ＴＨＥ  ＧＬＯＳＳＡＲＹ  ＯＦ  ＧＥＮＥＴＩＣＳ，第５版、Ｒ．Ｒｉｅｇｅｒら（編集），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ（１９９１）；およびＨａｌｅ  ＆  Ｍａｒｈａｍ，ＴＨＥ  ＨＡＲＰＥＲ  ＣＯＬＬＩＮＳ  ＤＩＣＴＩＯＮＡＲＹ  ＯＦ  ＢＩＯＬＯＧＹ（１９９１）。
【００２３】
ここで使用するとき、以下の用語は、異なる記載がない限りそれらに帰せられる意味を有する。
【００２４】
「インスリン分泌刺激活性」は、グルコース依存的にインスリンの合成、放出または分泌を上昇させる能力を指す。インスリン分泌刺激作用は、インスリン陽性細胞の数の増加および／または所与の期間に合成されるまたは既存のインスリン陽性細胞から放出されるインスリンの量の増加によるものを含むが、これらに限定されない、多くの異なる機構のいずれかから生じ得る。インスリン分泌刺激活性は、ＧＬＰ−１受容体結合活性または受容体活性化を測定するインビボおよびインビトロ実験などの（たとえば欧州特許第６１９，３２２号および米国特許第５，１２０，７１２号に述べられているような膵島細胞またはインスリノーマ細胞を使用するアッセイ）、当技術分野において公知の方法を用いて検定できる。ヒトでは、インスリン分泌刺激活性は、インスリンレベルまたはＣペプチドレベルを検査することによって測定できる。
【００２５】
「核酸」、「ポリヌクレオチド」および「オリゴヌクレオチド」という用語は、リボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドを含むがこれらに限定されない、何らかの長さのヌクレオチドの重合形態を含むためにここで使用される。
【００２６】
「ポリペプチド」および「タンパク質」は、ここでは交換可能に使用され、ペプチド結合を通して連結されたアミノ酸の分子鎖を含む。これらの用語は生成物の特定の長さを表わさない。それゆえ、「ペプチド」および「オリゴペプチド」はポリペプチドの定義に包含される。これらの用語は、ポリペプチドの翻訳後修飾、たとえばグリコシル化、アセチル化、リン酸化等を含む。加えて、タンパク質フラグメント、類似体、突然変異または変異タンパク質、融合タンパク質等はポリペプチドの意味に包含される。これらの用語はまた、１またはそれ以上のアミノ酸類似体または非天然アミノ酸が含まれる分子を包含する。
【００２７】
２またはそれ以上の核酸またはポリペプチドに関して「同一」または「同一性」パーセント」という用語は、たとえば以下に述べられているような配列比較アルゴリズムを用いて、または目視検査によって測定されるような、比較し、最大対応性になるように整列したとき、同じであるか、または同じであるヌクレオチドまたはアミノ酸残基の特定パーセンテージを有する、２またはそれ以上の配列またはサブ配列を指す。
【００２８】
ここで使用する「実質的に同一」という語句は、たとえば以下に述べられているような配列比較アルゴリズムを用いて、または目視検査によって測定されるような、比較し、最大対応性になるように整列したとき、少なくとも７５％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上のヌクレオチドまたはアミノ酸残基同一性を有する２またはそれ以上の配列またはサブ配列を指す。最も好ましくは、配列は、たとえばヌクレオチドのコード領域のような、比較される配列の全長にわたって実質的に同一である。
【００２９】
配列比較のために、典型的には１つの配列を参照配列として使用し、試験配列をそれと比較する。配列比較アルゴリズムを使用するときは、試験配列と参照配列をコンピュータに入力し、必要に応じて配列座標を指定し、配列アルゴリズムプログラムのパラメータを指定する。配列比較アルゴリズムが、その後、指定したプログラムパラメータに基づき、参照配列と比較した試験配列についての配列同一性パーセントを算定する。
【００３０】
比較のための配列の最適アラインメントは、たとえばＳｍｉｔｈとＷａｔｅｒｍａｎ，１９８１，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２によるローカルホモロジーアルゴリズムによって、ＮｅｅｄｌｅｍａｎとＷｕｎｓｃｈ，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３のホモロジーアラインメントアルゴリズムによって、ＰｅａｒｓｏｎとＬｉｐｍａｎ，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：２４４４の類似性についての検索方法によって、これらのアルゴリズムのコンピュータでの実施によって（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ，  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．のＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡおよびＴＦＡＳＴＡ）、または目視検査によって［一般に、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，（Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．ら編集）Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８７−１９９９，補遺４６  （１９９９年４月）などの補遺を含む）参照］実施できる。配列比較を行うためのこれらのプログラムの使用は、典型的には各プログラムについて特異的なデフォルトパラメータを用いて実施される。
【００３１】
配列同一性および配列類似性パーセントを決定するために適切なアルゴリズムのもう１つの例は、Ａｌｔｓｃｈｕｌら、１９９０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０に述べられている、ＢＬＡＳＴアルゴリズムである。ＢＬＡＳＴ分析を実施するためのソフトウエアは、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎを通して公的に入手可能である。このアルゴリズムは、データベース配列中の同じ長さのワードとアラインメントしたときある正の値の閾値スコアＴにマッチするかまたはそれを満たす、問い合わせ配列における長さＷの短いワードを同定することにより、高スコア配列対（ＨＳＰ）を最初に同定することを含む。Ｔは、近接ワードスコア閾値と称される（Ａｌｔｓｃｈｕｌら、前出）。これらの最初の近接ワードヒットは、それらを含むより長いＨＳＰを見出するための検索を開始するための種として機能する。次いでこれらのワードヒットは、累積アラインメントスコアが増加し得る限り、各々の配列に沿って両方向に拡張される。累積スコアは、ヌクレオチド配列については、パラメータＭ（マッチする残基の対に対する報酬スコア；常に＞０）およびパラメータＮ（ミスマッチ残基に対するペナルティースコア；常に＜０）を用いて算定される。アミノ酸配列に関しては、スコアリング行列を使用して累積スコアを算定する。各方向におけるワードヒットの拡張は、以下の場合に停止される：累積アライメントスコアが、その最大達成値から量Ｘだけ低下する場合；１またはそれ以上の負のスコアリング残基アライメントの累積に起因して、累積スコアが０またはそれ以下になる場合；またはいずれかの配列の末端に到達した場合。核酸またはポリペプチドが本発明の範囲内であるかどうかを同定するには、ＢＬＡＳＴプログラムのデフォルトパラメータが適切である。ＢＬＡＳＴＮプログラム（ヌクレオチド配列に関して）は、ワード長（Ｗ）１１、期待値（Ｅ）１０、Ｍ＝５、Ｎ＝−４をデフォルトとし、両方の鎖の比較を使用する。アミノ酸配列に関しては、ＢＬＡＳＴＰプログラムは、ワード長（Ｗ）３、期待値（Ｅ）１０をデフォルトとし、ＢＬＯＳＵＭ６２スコアリング行列を使用する。ＴＢＬＡＴＮプログラム（ヌクレオチド配列に対してタンパク質配列を使用する）は、ワード長（Ｗ）３、期待値（Ｅ）１０をデフォルトとして、そしてＢＬＯＳＵＭ６２スコアリング行列を使用する（ＨｅｎｉｋｏｆｆとＨｅｎｉｋｏｆｆ，１９８９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：１０９１５参照）。
【００３２】
配列同一性パーセントを算定することに加えて、ＢＬＡＳＴアルゴリズムはまた、２つの配列間の類似性の統計的分析を実施する（たとえばＫａｒｌｉｎとＡｌｔｓｃｈｕｌ，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：５８７３−５７８７参照）。ＢＬＡＳＴアルゴリズムによって提供される類似性の１つの測定は、２つのヌクレオチド配列またはアミノ酸配列の間の一致が偶然に起こる確率の指標を提供する、最小和確率（ｓｍａｌｌｅｓｔ  ｓｕｍ  ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ）（Ｐ（Ｎ））である。たとえば、参照核酸に対する試験核酸の比較における最小和確率が、約０．１未満、より好ましくは約０．０１未満、最も好ましくは約０．００１未満である場合、核酸は参照配列に対して類似するとみなされる。
【００３３】
ポリペプチドは、典型的には、たとえば２つのポリペプチドが保存的置換によってのみ異なる場合、２番目のポリペプチドと実質的に同一である。タンパク質について述べるとき「保存的置換」は、タンパク質の活性を実質的に変化させない、タンパク質のアミノ酸組成における変化を指す。それゆえ、特定アミノ酸配列の「保存的に修飾された変化」は、タンパク質活性にとって重要でないアミノ酸のアミノ酸置換、または重要なアミノ酸の置換であっても活性を実質的に変化させない、類似の性質（たとえば酸性、塩基性、正または負に荷電、極性または非極性等）を有する他のアミノ酸によるアミノ酸の置換を指す。機能的に類似のアミノ酸を示す保存的置換表は、ここで説明されており、また当技術分野において周知である（たとえばＣｒｅｉｇｈｔｏｎ，１９８４，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ参照）。加えて、タンパク質の活性を実質的に変化させずにコード配列内の１個のアミノ酸または小さなパーセンテージのアミノ酸を変化させる、付加するまたは欠失させる個々の置換、欠失または付加も、「保存的に修飾された変化」である。
【００３４】
ここで使用するとき、２０個の従来アミノ酸およびそれらの１文字および３文字略記は慣例的用法に従う。いかなる目的に関しても参照によりここに組み込まれる、ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ−−Ａ  ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ，第２版（Ｅ．Ｓ．ＧｏｌｕｂとＤ．Ｒ．Ｇｒｅｎ編集），Ｓｉｎａｕｅｒ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ：Ｓｕｎｄｅｒｌａｎｄ，ＭＡ，１９９１参照。２０個の従来アミノ酸の立体異性体（たとえばＤ−アミノ酸）；α，α−二置換アミノ酸などの非天然アミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸、乳酸および他の非従来アミノ酸も、ここで提供するポリペプチドのための適切な成分であり得る。非従来アミノ酸の例は、４−ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタメート、ε−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルリシン、ε−Ｎ−アセチルリシン、Ｏ−ホスホセリン、Ｎ−アセチルセリン、Ｎ−ホルミルメチオニン、３−メチルヒスチジン、５−ヒドロキシリシン、σ−Ｎ−メチルアルギニン、および他の類似アミノ酸およびイミノ酸（たとえば４−ヒドロキシプロリン）を含む。ここで言及する一部のアミノ酸類似体は以下のように略記される：
ｂＡｌａは、β−アミノプロピオン酸である；
Ｊは、Ａａｄ（２−アミノアジピン酸；ホモグルタミン酸とも称される）である；
Ｚは、Ａｉｂ（２−アミノイソ酪酸）である；
Ｏは、オルニチンである；
Ｃｐａは、４−カルボキシ−フェニルアラニンである；および
Ｂは、βグルタミン酸である。
アミノ酸略記がスラッシュ（すなわち「／」によって分離されるとき、これは、スラッシュによって分離されたアミノ酸のいずれか１個が指示された位置で生じ得ることを意味する。たとえばＫ／Ｏ／Ｃは、リシン、オルニチンまたはシステインのいずれか１個が指示された位置で生じ得ることを意味する。
【００３５】
ここで使用するα，α−二置換アミノ酸という用語は、当技術分野におけるその通常の意味を有し、たとえばα−メチル−ロイシン、α−メチル−フェニルアラニン、α−メチル−トリプトファン、４−アミノ−１−ピペリジン、２−アミノ−２，２−ジフェニル酢酸を含む。
【００３６】
ここで使用するポリペプチド表記法では、標準用法および慣例に従って、左側方向はアミノ末端方向であり、右側方向はカルボキシル末端方向である。ＧＬＰ−１化合物に関して使用するとき「下流」という用語は、言及される位置に対してポリペプチドのカルボキシル末端側、すなわち言及される位置の右側にある位置を意味する。ＧＬＰ−１化合物に関して使用するとき「上流」という用語は、言及される位置に対してポリペプチドのアミノ末端側、すなわち言及される位置の左側にある位置を意味する。推奨されるアミノ酸およびペプチドに関するＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ命名法および記号体系（ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｓｙｍｂｏｌｉｓｍ  ｆｏｒ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ）は、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８４，２１９，３４５−３７３；Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８４，１３８，９−３７；１９８５，１５２，１；１９９３，２１３，２；Ｉｎｔｅｒｎａｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔ．Ｒｅｓ．，１９８４，２４，ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｐ  ８４；Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９８５，２６０，１４−４２；Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．，１９８４，５６，５９５−６２４；Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，１９８５，１６，３８７−４１０；Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ，第２版、Ｐｏｒｔｌａｎｄ  Ｐｒｅｓｓ，  １９９２，ｐ．３９−６９に公表されている。
【００３７】
天然に生じる残基は、共通側鎖特性に基づくクラスに分類され得る：
１）疎水性：ノルロイシン（Ｎｏｒ）、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
５）鎖の方向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；および
６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【００３８】
保存的アミノ酸置換は、これらのクラスの１つのメンバーと同じクラスのもう１つ別のメンバーとの交換を含み得る。保存的アミノ酸置換は、典型的には生物系における合成によってではなく化学的ペプチド合成によって組み込まれる、非天然に生じるアミノ酸残基を含み得る。これらは、ペプチドミメティックおよびアミノ酸部分の他の逆形態または反転形態を含む。
【００３９】
非保存的置換は、これらのクラスの１つのメンバーともう１つ別のクラスのメンバーとの交換を含み得る。そのような置換された残基は、非ヒト抗体と相同なヒト抗体の領域に、または分子の非相同領域に導入され得る。
【００４０】
そのような変更を行う場合、ある実施形態によれば、アミノ酸のハイドロパシー指数（ｈｙｄｒｏｐａｔｈｉｃ  ｉｎｄｅｘ）を考慮し得る。各々のアミノ酸は、その疎水性および電荷特徴に基づいてハイドロパシー指数が割り当てられている。それらは以下の通りである：イソロイシン（＋４．５）；バリン（＋４．２）；ロイシン（＋３．８）；フェニルアラニン（＋２．８）；システイン／シスチン（＋２．５）；メチオニン（＋１．９）；アラニン（＋１．８）；グリシン（−０．４）；トレオニン（−０．７）；セリン（−０．８）；トリプトファン（−０．９）；チロシン（−１．３）；プロリン（−１．６）；ヒスチジン（−３．２）；グルタミン酸（−３．５）；グルタミン（−３．５）；アスパラギン酸（−３．５）；アスパラギン（−３．５）；リシン（−３．９）；およびアルギニン（−４．５）。
【００４１】
タンパク質に相互作用的な生物学的機能を与える上でのアミノ酸のハイドロパシー指数の重要性は当技術分野において了解されている（たとえばＫｙｔｅら、１９８２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５７：１０５−１３１参照）。一定のアミノ酸を類似のハイドロパシー指数またはスコアを有する他のアミノ酸の代わりに使用することができ、依然として類似の生物活性を保持し得ることは公知である。ハイドロパシー指数に基づいて変更を行う場合、ある実施形態では、ハイドロパシー指数が±２以内であるアミノ酸の置換を含む。ある実施形態では、±１以内であるものを含み、またある実施形態では、±０．５以内であるアミノ酸の置換を含む。
【００４２】
類似のアミノ酸の置換は、特にそれによって作製される生物学的に機能性のタンパク質またはペプチドが、ここで開示されるような、免疫学的実施形態における使用を意図されている場合、親水性に基づいて有効に行われ得ることが当技術分野において了解されている。ある実施形態では、タンパク質の最大局所平均親水性は、その隣接するアミノ酸の親水性によって支配されるので、その免疫原性および抗原性、すなわち、タンパク質の生物学的性質と相関する。
【００４３】
以下の親水性値がこれらのアミノ酸残基に割り当てられている：アルギニン（＋３．０）；リシン（＋３．０）；アスパラギン酸（＋３．０±１）；グルタミン酸（＋３．０±１）；セリン（＋０．３）；アスパラギン（＋０．２）；グルタミン（＋０．２）；グリシン（０）；トレオニン（−０．４）；プロリン（−０．５±１）；アラニン（−０．５）；ヒスチジン（−０．５）；システイン（−１．０）；メチオニン（−１．３）；バリン（−１．５）；ロイシン（−１．８）；イソロイシン（−１．８）；チロシン（−２．３）；フェニルアラニン（−２．５）；およびトリプトファン（−３．４）。類似の親水性の値に基づいて変更を行う場合、ある実施形態では、その親水性値が±２以内であるアミノ酸の置換を含み、ある実施形態では、±ｌ以内であるものを含み、またある実施形態では、±０．５以内であるアミノ酸の置換を含む。また、親水性に基づき、一次アミノ酸配列からエピトープを同定し得る。これらの領域は「エピトープコア領域」とも称される。
【００４４】
例示的なアミノ酸置換を表１に示す。
【００４５】
【表１−１】
2009534423.tif 000002
【００４６】
【表１−２】
2009534423.tif 000003
ここで、保護基、リンカーおよび固相支持体の使用、ならびに詳細な保護および脱保護反応条件、リンカー切断条件、スカベンジャーの使用、および固相ペプチド合成の他の態様は周知であり、また“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”第３版、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅとＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ編集、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９９；Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃａｔａｌｏｇ，２０００；“Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ａ  Ｕｓｅｒ’ｓ  Ｇｕｉｄｅ，”Ｇ．Ａ．Ｇｒａｎｔ編集、Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ＆  Ｃｏｍｐａｎｙ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９９２；“Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｔｅｃｈ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  ＆  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，”Ｗ．Ｄ．Ｂｅｎｎｅｔ，Ｊ．Ｗ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ，Ｌ．Ｋ．Ｈａｍａｋｅｒ，Ｍ．Ｌ．Ｐｅｔｅｒｓｏｎ，Ｍ．Ｒ．ＲｈｏｄｅｓおよびＨ．Ｈ．Ｓａｎｅｉｉ編集、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｔｅｃｈ，１９９８；“Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第２版“  Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ編集、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，１９９３；“Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第２版、“Ｍ．ＢｏｄａｎｓｚｋｙとＡ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ編集、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，１９９４；“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ，”Ｐ．Ｊ．Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ編集、Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ，１９９４；“Ｆｍｏｃ  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，”Ｗ．Ｃ．ＣｈａｎとＰ．Ｄ．Ｗｈｉｔｅ編集、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｐｒｅｓｓ，２０００，Ｇ．Ｂ．Ｆｉｅｌｄｓら、Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ａ  Ｕｓｅｒ’ｓ  Ｇｕｉｄｅ，１９９０，７７−１８３その他に述べられている。
【００４７】
当業者は、周知の手法を用いてここで示すようなポリペプチドの適切な変異体を決定することができる。ある実施形態では、当業者は、活性にとって重要ではないと考えられる領域を標的することにより、活性を破壊せずに変更し得る分子の適切な領域を同定し得る。他の実施形態では、当業者は、類似のポリペプチドの間で保存されている分子の残基および部分を同定することができる。さらなる実施形態では、生物活性にとってまたは構造にとって重要であると考えられる領域であっても、生物活性を破壊せずにまたはポリペプチドの構造に有害な影響を及ぼさずに保存的アミノ酸置換に供し得る。
【００４８】
加えて、当業者は、活性または構造にとって重要な類似ポリペプチド内の残基を同定する構造−機能試験を検討し得る。そのような比較を考慮して、当業者は、類似のタンパク質内の活性または構造にとって重要なアミノ酸残基に対応する、タンパク質内のアミノ酸残基の重要性を予測することができる。当業者は、そのような予測上の重要アミノ酸残基に対する化学的に類似のアミノ酸置換を選択し得る。
【００４９】
当業者はまた、類似ポリペプチドにおける構造に関して三次元構造およびアミノ酸配列を分析し得る。そのような情報を考慮して、当業者は、抗体のアミノ酸残基のアラインメントをその三次元構造に関して予測し得る。ある実施形態では、当業者は、タンパク質の表面にあると予測されるアミノ酸残基に根本的な変化を加えないことを選択し得る。そのような残基は他の分子との重要な相互作用に関与し得るからである。さらに、当業者は、各々の所望アミノ酸残基に１個のアミノ酸置換を含む試験変異体を作製し得る。それらの変異体は、その後、当業者に公知の活性アッセイを用いてスクリーニングし得る。そのような変異体は、適切な変異体についての情報を収集するために使用できる。たとえば特定アミノ酸残基への変化が、活性の破壊、活性の望ましくない低下または不適切な活性を生じさせることが発見された場合、そのような変化を有する変異体を回避することができる。言い換えると、そのような常套的実験から収集された情報に基づき、当業者は、単独でまたは他の突然変異と組み合わせて、さらなる置換を回避すべきアミノ酸を容易に判定できる。
【００５０】
多くの学術公表文献が二次構造の予測を対象としてきた。たとえばＭｏｕｌｔ，１９９６，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．７：４２２−４２７；Ｃｈｏｕら、１９７４，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １３：２２２−２４５；Ｃｈｏｕら、１９７４，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １１３：２１１−２２２；Ｃｈｏｕら、１９７８，Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．  Ｒｅｌａｔ．Ａｒｅａｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４７：４５−１４８；Ｃｈｏｕら、１９７９，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．４７：２５１−２７６；およびＣｈｏｕら、１９７９，Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｊ．２６：３６７−３８４参照。さらに、二次構造の予測を支援するためにコンピュータプログラムが現在使用可能である。二次構造を予測する１つの方法はホモロジーモデリングに基づく。たとえば３０％以上の配列同一性または４０％以上の配列類似性を有する２つのポリペプチドまたはタンパク質は、しばしば類似の構造トポロジーを有する。タンパク質構造データベース（ＰＤＢ）の最近の発展は、ポリペプチドまたはタンパク質構造内の潜在的な折りたたみの数を含む、二次構造の高い予測可能性を提供してきた。たとえばＨｏｌｍら、１９９９，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ．Ｒｅｓ．２７：２４４−２４７参照。所与のポリペプチドまたはタンパク質内には限られた数の折りたたみが存在すること、およびひとたび決定的な数の構造が決定されれば、構造予測は劇的により正確になることが示唆された（Ｂｒｅｎｎｅｒら、１９９７，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．７：３６９−３７６）。
【００５１】
二次構造を予測するさらなる方法は、「スレッディング（ｔｈｒｅａｄｉｎｇ）」（Ｊｏｎｅｓ，１９９７，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．７：３７７−８７；Ｓｉｐｐｌら、１９９６，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ４：１５−１９）、「プロフィール解析」（Ｂｏｗｉｅら、１９９１，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５３：１６４−１７０；Ｇｒｉｂｓｋｏｖら、１９９０，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍ．１８３：１４６−１５９；Ｇｒｉｂｓｋｏｖら、１９８７，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８４：４３５５−４３５８）、および「進化的連鎖」（たとえばＨｏｌｍ，１９９９，前出；およびＢｒｅｎｎｅｒ，１９９７，前出）を含む。
【００５２】
ある実施形態によれば、アミノ酸置換は、（１）タンパク質分解に対する感受性を低下させる、（２）酸化に対する感受性を低下させる、（３）タンパク質複合体を形成するための結合親和性を変化させる、（４）結合親和性を変化させる、および／または（５）そのようなポリペプチドに他の物理化学的または機能的性質を与えるまたは性質を改変するものである。ある実施形態によれば、１個または複数のアミノ酸置換（ある実施形態では、保存的アミノ酸置換）は、天然に生じる配列において（ある実施形態では、分子間接触を形成するドメインの外側のポリペプチドの部分において）作製し得る。ある実施形態では、保存的アミノ酸置換は、典型的には親配列の構造特徴を実質的に変化させない（たとえば置換アミノ酸は、親配列内に生じるらせんをこわすまたは親配列を特徴づける他の種類の二次構造を崩壊させる傾向があってはならない）。当技術分野で認識されているポリペプチドの二次および三次構造の例は、各々が参照によりここに組み込まれる、ＰＲＯＴＥＩＮＳ，ＳＴＲＵＣＴＵＲＥＳ  ＡＮＤ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＰＲＩＮＣＩＰＬＥＳ，（Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ編集），１９８４，Ｗ．  Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  Ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮ  ＴＯ  ＰＲＯＴＥＩＮ  ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ（Ｃ．ＢｒａｎｄｅｎとＪ．Ｔｏｏｚｅ編集），１９９１，Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．；およびＴｈｏｒｎｔｏｎら、１９９１，Ｎａｔｕｒｅ  ３５４：１０５に述べられている。
【００５３】
ペプチド類似体は、鋳型ペプチドと類似の性質を有する非ペプチド薬として製薬産業において一般的に使用されている。これらの種類の非ペプチド化合物は、「ペプチドミメティック」と称される。いかなる目的に関しても参照によりここに組み込まれる、Ｆａｕｃｈｅｒｅ，１９８６，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．１５：２９；ＶｅｂｅｒとＦｒｅｉｄｉｎｇｅｒ，１９８５，ＴＩＮＳ  Ｐ．３９２；およびＥｖａｎｓら、１９８７，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３０：１２２９参照。そのような化合物は、しばしばコンピュータ分子モデリングを援用して開発される。治療上有用なペプチドと構造的に類似するペプチドミメティックは、同様の治療または予防効果を生じさせるために使用され得る。一般に、ペプチドミメティックは、ヒト抗体のようなパラダイムポリペプチド（すなわち生化学的性質または薬理活性を有するポリペプチド）に構造的に類似するが、場合により、当技術分野で周知の方法によって、−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−Ｓ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（シスおよびトランス）、−ＣＯＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−、および−ＣＨ２ＳＯ−から選択される結合によって置換された１またはそれ以上のペプチド結合を有する。同じ種類のＤ−アミノ酸によるコンセンサス配列の１またはそれ以上のアミノ酸の体系的置換（たとえばＬ−リシンの代わりにＤ−リシン）は、特定実施形態において、より安定なペプチドを作製するために使用され得る。加えて、コンセンサス配列または実質的に同一のコンセンサス配列変異を含む拘束ペプチドは、当技術分野で公知の方法によって（いかなる目的に関しても参照によりここに組み込まれる、ＲｉｚｏとＧｉｅｒａｓｃｈ，１９９２，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６１：３８７）；たとえばペプチドを環化する分子内ジスルフィド結合を形成することができる内部システイン残基を付加することによって作製し得る。
【００５４】
ＩＩ．概説
ＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１の少なくとも１つの活性を保持する様々なＧＬＰ−１化合物がここで提供される。開示されるＧＬＰ−１類似体は、以下の特徴の１またはそれ以上を含む：１）ＧＬＰ−１の特定位置におけるアミノ酸置換、２）ＧＬＰ−１のＮ末端および／またはＣ末端における付加アミノ酸、３）ＧＬＰ−１のＮ末端および／または４）Ｃ末端におけるアミノ酸の不在、および／またはポリペプチドと特定アミノ酸の側鎖を結合することによって形成される環の存在。
【００５５】
以下でより詳細に述べるように、提供されるＧＬＰ−１化合物は、様々な疾患を治療するために治療的または予防的に投与され得る。前記化合物で治療することができる疾患の例は、糖尿病、耐糖能異常、インスリン抵抗性、高血糖症、代謝症候群、様々な脂質障害、肥満、冠疾患、骨障害および過敏性腸症候群を含むが、これらに限定されない。
【００５６】
ＩＩＩ．ＧＬＰ−１化合物
Ａ．構造
上述したように、「ＧＬＰ−１」は、ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨおよびＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２を指す。ここで使用するＧＬＰ−１のアミノ酸の番号づけは、プログルカゴンの切断から形成されるＧＬＰ−１（１−３７）に基づく。
【００５７】
天然ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨは以下のアミノ酸配列を有する：
７Ｈｉｓ−８Ａｌａ−９Ｇｌｕ−１０Ｇｌｙ−１１Ｔｈｒ−１２Ｐｈｅ−１３Ｔｈｒ−１４Ｓｅｒ−１５Ａｓｐ−１６Ｖａｌ−１７Ｓｅｒ−１８Ｓｅｒ−１９Ｔｙｒ−２０Ｌｅｕ−２１Ｇｌｕ−２２Ｇｌｙ−２３Ｇｌｎ−２４Ａｌａ−２５Ａｌａ−２６Ｌｙｓ−２７Ｇｌｕ−２８Ｐｈｅ−２９Ｉｌｅ−３０Ａｌａ−３１Ｔｒｐ−３２Ｌｅｕ−３３Ｖａｌ−３４Ｌｙｓ−３５Ｇｌｙ−３６Ａｒｇ−３７Ｇｌｙ  （配列番号１）。
【００５８】
この式に示すように、アミノ末端のＨｉｓ残基は、ＧＬＰ−１（１−３７）からのプロセシングを反映するために慣例的にアミノ酸残基７と称される；カルボキシル末端のＧｌｙは、次に、慣例的にアミノ酸残基３７と称される。背景技術の章で述べたように、ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨのカルボキシル末端は、ＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２を生じるように切断され得る。これら２つの末端の間に位置するその他のアミノ酸は、示されているように連続的に番号づけられる。そこで、たとえば８位のアミノ酸はＡｌａであり、２６位のアミノ酸はＬｙｓである。同様に、ここで特定位置で置換を行うことに言及するとき、同じ番号づけシステムが適用される。それゆえ、たとえば２２位におけるＡｌａの置換は、２２位のＧｌｙがＡｌａで置換されたことを意味する。アミノ酸がＧＬＰ−１（７−３６）のアミノ末端で付加される場合、その位置は、７位のすぐ上流のアミノ酸がアミノ酸６であり、その次の上流アミノ酸が５位である等のように、漸減順序で連続的に番号づけられる。アミノ酸がＧＬＰ−１（７−３６）のカルボキシル末端で付加される場合、その位置は、３６位のすぐ下流のアミノ酸がアミノ酸３７であり、その次の下流アミノ酸が３８位である等のように、漸増順序で連続的に番号づけられる。上記で論じたように、ＧＬＰ−１（７−３７）とも称されるＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨとＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２はどちらも同じ活性を有する。便宜上、「ＧＬＰ−１」および「天然ＧＬＰ−１」という用語は、これらの生物活性形態の両方を指すために使用される。
ここで使用する「ＧＬＰ−１」化合物は、ＧＬＰ−１類似体を含み、および１またはそれ以上の付加的な成分（たとえばインビボで化合物の半減期を延長させる成分）を含み得る分子を指す。
【００５９】
「ＧＬＰ−１活性」という語句またはその文法上の等価物は、広くＧＬＰ−１に関連する活性を指す。そのような活性の例は、インスリン分泌刺激活性、胃の運動性の抑制、胃液分泌の抑制、β細胞の増殖と複製の促進、β細胞量の増加、ＧＬＰ−１を被験体に投与したときの満腹感の上昇と食物摂取の低下を含むが、これらに限定されない。
【００６０】
ここで使用するとき、「ＧＬＰ−１類似体」という用語は、天然ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨまたはＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２のアミノ酸配列の１またはそれ以上の変化を有するが、天然ＧＬＰ−１の少なくとも１つの活性を保持するポリペプチドを指す。ここで提供し、説明するＧＬＰ−１類似体は、たとえばＧＬＰ−１の特定残基における特定アミノ酸置換を含む。類似体の一部はまた、Ｃ末端に付加アミノ酸残基を含み、また別の類似体はＣ末端が短縮されている。ここで提供するＧＬＰ−１類似体は、様々なインビボモデルにおいて血糖値を顕著に低下させ、天然ＧＬＰ−１に比べて長い半減期を有する。ここで述べるように、ＧＬＰ−１類似体は、類似体のインビボでの半減期を上昇させるためにポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の１またはそれ以上の分子でペグ化され得る。あるいは、ＧＬＰ−１類似体は、ここで述べるような融合タンパク質を形成するためにもう１つ別のポリペプチドに結合され得る。ここで列挙する式において、Ｒ１は、カルボキシル基、アミン、エステル、または置換アミンであり得る。それゆえ、ここで提供するＧＬＰ−１類似体は、そのＣ末端にカルボキシル基またはアミド基を有し得る。
【００６１】
ある実施形態では、ここで提供するＧＬＰ−１類似体は、以下の特徴の１またはそれ以上を有する：
１）ＧＬＰ−１に対する１またはそれ以上のアミノ酸置換（たとえば１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個）；
２）ＧＬＰ−１のＣ末端またはＮ末端における１またはそれ以上の追加アミノ酸残基の付加（たとえば１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のアミノ酸）；
３）ＮまたはＣ末端における１またはそれ以上のアミノ酸のトランケーション（典型的には１、２、３、４または５個のアミノ酸）；および／または
４）類似体内の特定アミノ酸上の側鎖の間で形成される環構造。
【００６２】
提供される一部のＧＬＰ−１類似体は、たとえば、以下の置換を含むがこれらに限定されない、８、２２、２３、２６、３３、３４、３５、３６および／または３７位の１またはそれ以上における特定アミノ酸置換を含む：
８Ａｌａ：Ｇｌｙ、２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）またはβ−アミノプロピオン酸（ｂＡｌａ）による置換；
２２Ｇｌｙ：２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、α−α−二置換アミノ酸または２−アミノアジピン酸による置換；
２３Ｇｌｎ：Ｃｙｓによる置換；
２６Ｌｙｓ：オルニチンまたはホモリシンによる置換；
３３Ｖａｌ：Ｌｙｓによる置換；
３４Ｌｙｓ：Ａｓｎによる置換；
３６Ａｒｇ：Ｇｌｙによる置換；
３７Ｇｌｙ：Ｐｒｏによる置換。
【００６３】
ＧＬＰ−１類似体の一部は、たとえば３７位のアミノ酸へのＣｙｓ、Ｃｙｓ−Ａｌａ、Ｃｙｓ−Ｇｌｙ、Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ、Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（配列番号２７８）、またはＧｌｙ−Ｃｙｓの付加（前記の各々はアミノ末端からカルボキシル末端方向に列記されている）を含む、特定Ｃ末端伸長を含む。
【００６４】
他のＧＬＰ−１類似体は、ＧＬＰ−１のＮ末端におけるＭｅｔ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＴｒｐまたはＰｈｅの付加のような特定Ｎ末端付加を含む。一部の類似体は、ＭＱ、ＭＲ、ＭＫ、ＭＨ、ＭＹ、ＭＩ、ＭＤ、ＭＬ、ＭＮ、ＭＥ、ＭＷ、ＭＦまたはＭＭジペプチドの付加によってアミノ末端へとＮ末端で伸長される。さらなる他の類似体は、アミノ末端に付加されたＭＨＨトリペプチドを有する。
【００６５】
ＧＬＰ−１類似体は、論議を容易にするために、特定の構造特徴を共有する分子の特定ファミリーに分類できる。これらは、以下に提供する一般式によって最も容易に表すことができる。
【００６６】
１つのファミリーは、たとえば、式Ｉ：
Ｘａａ７−Ｇｌｙ−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｃｙｓ−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｇｌｙ−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式Ｉ、配列番号５）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ３３は、ＶａｌまたはＬｙｓであり；  
Ｘａａ３４は、ＬｙｓまたはＡｓｎであり；
Ｘａａ３６は、ＡｒｇまたはＧｌｙであり；
Ｘａａ３７は、ＧｌｙまたはＰｒｏである］
に示すアミノ酸配列を含むまたは前記アミノ酸配列から成り、その化合物はＧＬＰ−１活性を有する。
【００６７】
ここで列挙する式において、Ｒ１は、カルボキシル基、アミン、エステル、または置換アミンであり得る。それゆえ、ここで提供するＧＬＰ−１類似体は、そのＣ末端にカルボキシル基またはアミド基を有し得る。
【００６８】
ＧＬＰ−１類似体の２番目のファミリーは、式ＩＩ：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩ、配列番号９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓである］
に示すアミノ酸配列を含むまたは前記アミノ酸配列から成り、その化合物はＧＬＰ−１活性を有する。
【００６９】
ＧＬＰ−１類似体の３番目のファミリーは、式ＩＩＩ（配列番号１３）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｇｌｙ−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩＩ、配列番号１３）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、２−アミノイソ酪酸、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、α−α−二置換アミノ酸または２−アミノアジピン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３８位のＸａａは、Ｃｙｓ、Ｇｌｙであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
３８、３９、４０または４１位のアミノ酸が除かれているとき、そのアミノ酸の下流の各々のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
に示すアミノ酸配列を含むまたは前記アミノ酸配列から成り、その化合物はＧＬＰ−１活性を有する。それゆえ、たとえば３８位のアミノ酸が除かれている場合、３９−４１位のアミノ酸も存在しない。同様に、３９位のアミノ酸が除かれている場合、４０および４１位のアミノ酸も存在しない。および４０位のアミノ酸が除かれている場合、４１位のアミノ酸は存在しない。
【００７０】
ＧＬＰ−１類似体のもう１つのファミリーは、類似体内の２個のアミノ酸が、典型的にはそれらの側鎖を通して、一緒に連結されたときに形成される環または環式構造を含む。側鎖は、互いに直接連結されるかまたはリンカーを通して連結され得る。
【００７１】
このファミリーの中の一部のＧＬＰ−１類似体は、式Ｖ：
【００７２】
【化１】
2009534423.tif 000004
［式中、
Ｘは、−Ｎ（Ｚ１）−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｚ１）−であり；    
Ｚ１は、水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；  
Ｘ１は、少なくとも１１個のアミノ酸であり；  
Ｘ２は、１個のアミノ酸であり；
Ｘ３は、結合または１−５個のアミノ酸であり；
Ｘ４は、１個のアミノ酸であり；  
Ｘ５は、少なくとも１０個のアミノ酸であり；  
Ｚ２は、−ＯＺ３または−ＮＺ４Ｚ５であり；および  
Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
およびＸ１およびＸ５を含むアミノ酸は、それぞれＧＬＰ−１のアミノ部分およびカルボキシル部分からのアミノ酸に対応する］
に示す一般構造、または天然ＧＬＰ−１内のアミノ酸が式Ｘ−Ｙに示すようなアミノ酸で置換されている類似配列を有する。
【００７３】
一部の環状ＧＬＰ−１類似体は、たとえば、式ＩＶ：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＶ、配列番号２９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３８位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｃｙｓであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
Ｘａａ１８、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２２、Ｘａａ２３、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、Ｘａａ２８、Ｘａａ２９およびＸａａ３０から選択される２個のアミノ酸は、結合して環を形成しており、および環を形成する２個のアミノ酸は、０、１、２、３、４または５個のアミノ酸によって分離されている］
に示すアミノ酸配列を含むまたは前記アミノ酸配列から成り、その化合物はＧＬＰ−１活性を有する。
【００７４】
分離に関与するアミノ酸の数を数えるとき、側鎖が結合している２個のアミノ酸は除外される。それゆえ、たとえば側鎖が結合して環を形成している２個のアミノ酸は、それらの２個のアミノ酸が互いに隣り合うとき（たとえばＸａａ１８とＸａａ１９の位置のアミノ酸が結合して環を形成しているとき）、それらを分離する０個のアミノ酸を有する。
【００７５】
特定実施形態では、結合して環を形成する２個のアミノ酸は、たとえば：  
Ｘａａ１８が、Ｘａａ２２またはＸａａ２３のいずれかと結合する；または
Ｘａａ１９が、Ｘａａ２３またはＸａａ２４のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２０が、Ｘａａ２４またはＸａａ２５のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２１が、Ｘａａ２５またはＸａａ２６のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２２が、Ｘａａ２６またはＸａａ２７のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２３が、Ｘａａ２７またはＸａａ２８のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２４が、Ｘａａ２８またはＸａａ２９のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２５が、Ｘａａ２９またはＸａａ３０のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２６が、Ｘａａ３０またはＸａａ３１のいずれかと結合する
ときを含めて、３または４個のアミノ酸によって分離される。
【００７６】
多種多様なアミノ酸、アミノ酸類似体（たとえば非天然アミノ酸）をこれらの位置に挿入することができる。アミノ酸または類似体は、互いに直接にまたはリンカーを通して反応して環を形成することができる、側鎖内の反応性官能基を有するように選択される。一部の環状類似体における環は、たとえば１個のアミノ酸または類似体の側鎖内のカルボキシル基を２番目のアミノ酸または類似体の側鎖内のアミノ基と反応させて環状ラクタムを形成することによって形成される。それゆえ、たとえばある実施形態では、環構造は、以下に例示するように、上記で特定した位置にあるＧｌｕ（Ｅ）、Ａｓｐ（Ｄ）、Ｌｙｓ（Ｋ）、オルニチン（Ｏ）、４−カルボキシ−フェニルアラニン（Ｃｐａ）、β−ホモグルタミン酸（Ｂ）、α，γ−ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、およびホモグルタミン酸（Ｊ）のいずれか２個の側鎖の間で形成される：
【００７７】
【化２】
2009534423.tif 000005
図１は、たとえば、結合して環状ラクタムを形成することができる、３個のアミノ酸によって分離されたＧＬＰ−１内の位置の例を示す。
【００７８】
図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対が結合して環を形成している化学構造を示す。特定対合は、上記に示す他の対合のいずれかならびに他の対合で置換され得ることは当業者に認識される。
【００７９】
結合して環状ラクタムを形成することができる適切な位置に必要なアミノ酸を有するＧＬＰ−１類似体の配列の特定例を配列番号３０−２４６に提示し、また表２に示しており、結合して環を形成することができる２個のアミノ酸を太字の下線付き活字で示す。
【００８０】
一部のＧＬＰ−１類似体は２個の環状構造を含む。一例は、
ＨＧＥＧＴ  ＦＴＳＤＶ  ＳＳＹＬＥ  ＧＱＡＫＫ  ＥＦＩＡＷ  ＬＥＫＧＲ  Ｋ（配列番号２７７）
である。この類似体において、最初のＥとＫの対（それぞれ２１位と２５位）が１個の環状ラクタムを形成し、２番目のＥとＫの対（それぞれ３３位と３７位）が２番目の環状ラクタムを形成する。Ｇｌｕ（Ｅ）およびＬｙｓ（Ｋ）残基の１つの対または両方の対が、環状ラクタム環を形成するために上記で列挙し、例示したようなその他のアミノ酸またはアミノ酸類似体で置換され得る。
【００８１】
ＧＬＰ−１類似体の最後のファミリーは、式ＶＩ：
Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｈｉｓ７−Ａｌａ８−Ｇｌｕ９−Ｇｌｙ１０−Ｔｈｒ１１−Ｐｈｅ１２−Ｔｈｒ１３−Ｓｅｒ１４−Ａｓｐ１５−Ｖａｌ１６−Ｓｅｒ１７−Ｓｅｒ１８−Ｔｙｒ１９−Ｌｅｕ２０−Ｇｌｕ２１−Ｇｌｙ２２−Ｇｌｎ２３−Ａｌａ２４−Ａｌａ２５−Ｌｙｓ２６−Ｇｌｕ２７−Ｐｈｅ２８−Ｉｌｅ２９−Ａｌａ３０−Ｔｒｐ３１−Ｌｅｕ３２−Ｖａｌ３３−Ｌｙｓ３４−Ｇｌｙ３５−Ａｒｇ３６−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＶＩ、配列番号２７６）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
４位のＸａａは、Ｍｅｔであるかまたは除かれており；
５位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ｈｉｓであるかまたは除かれており；
６位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＴｒｐまたはＰｈｅであり；
５位のアミノ酸が除かれているとき、４位のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
に示すアミノ酸配列を含むまたは前記アミノ酸配列から成り、その化合物はＧＬＰ−１活性を有する。
【００８２】
一部のＧＬＰ−１類似体を表２に示す。表２に列挙する配列のいくつかは、Ｃ末端アミドを有することが示されている。しかし、表２に列挙する配列および本明細書中の別の箇所で述べる配列のすべてがＣ末端カルボキシル基またはＣ末端アミド基を有し得ることは了解されるべきである。表２において使用するとき、ｂＡｌａはβ−アミノプロピオン酸であり；Ａａｄは２−アミノアジピン酸であり；ＺはＡｉｂ（２−アミノイソ酪酸）であろ；Ｏはオルニチンであり；Ｃｐａは４−カルボキシ−フェニルアラニンであり；Ｄａｂはα，γ−ジアミノ酪酸であり；およびＢはβホモグルタミン酸であり；Ｊはホモグルタミン酸である。［Ｋ／Ｏ／Ｃ］は、アミノ酸配列が、場合によりこの位置にリシン、オルニチンまたはシステインのいずれかを含むが、これらのアミノ酸を全く含まなくてもよいことを意味する。太字と下線で強調されている残基は、結合して（典型的にはそれらの側鎖によって）環または環状構造を形成するアミノ酸を示す。
【００８３】
【表２−１】
2009534423.tif 000006
【００８４】
【表２−２】
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【００８５】
【表２−３】
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【００８６】
【表２−４】
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【００８７】
【表２−５】
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【００８８】
【表２−６】
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【００８９】
【表２−７】
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【００９０】
【表２−８】
2009534423.tif 000013
「ＧＬＰ−１類似体」という用語はまた、変異体、フラグメントまたは誘導体が類似アミノ酸配列を有し（たとえば保存的置換を含む）、ＧＬＰ−１類似体の少なくとも１つの活性を、ある程度まで、保持するという点で前記ＧＬＰ−１類似体の１つの機能的等価物である、前記ＧＬＰ−１類似体の変異体、フラグメントおよび誘導体を包含する。
【００９１】
「ＧＬＰ−１変異体」は、上記および表２に列挙するファミリー中のＧＬＰ−１類似体と「実質的に同一」（上記の定義参照）であるポリペプチドを含む。そのような変異体は、欠失、挿入および／または置換などのアミノ酸変化を有するタンパク質を含む。典型的には、そのような変化は、変異体ポリペプチドの活性がここで開示するＧＬＰ−１類似体の１つと実質的に類似する（たとえばインスリン分泌刺激活性のようなＧＬＰ−１活性を有する）ように、本来は保存的である（たとえばＣｒｅｉｇｈｔｏｎ，１９８４，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙおよび上記考察参照）。置換の場合、もう１つ別のアミノ酸を置換するアミノ酸は、通常、類似の構造および／または化学的性質を有する。上記ファミリーの中に列挙されるＧＬＰ−１類似体に対する挿入および欠失は、典型的には１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のアミノ酸を含む。別の場合には、１、２、３、４または５個のアミノ酸の挿入または欠失が存在する。
【００９２】
ＧＬＰ−１変異体は、変異体がまだＧＬＰ−１活性を有することを条件として、ここで述べるＧＬＰ−１類似体（すなわち上記で列挙する種々のファミリー中の類似体および表２に列挙するもの）と少なくとも７５％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有し得る。たとえば変異体は、アミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２３、またはＸａａ３８  −Ｘａａ４５  のいずれかが変化していないことを条件として、配列番号７または８のＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有し得る。他の変異体は、アミノ酸Ｘａａ８またはＸａａ３８−Ｘａａ４１  のいずれかが変化していないことを条件として、配列番号１１または１２のＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有する。一部の他の変異体は、アミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２２、またはＸａａ３８  −Ｘａａ４１のいずれかが、存在するとき、変化していないことを条件として、配列番号１６−２８のいずれか１つのＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有する。さらなる他の変異体は、Ｘａａ１８、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２２、Ｘａａ２３、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、Ｘａａ２８、Ｘａａ２９およびＸａａ３０から選択される２個のアミノ酸が結合して環を形成していることを条件として、配列番号３０−２４６のいずれか１つのＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有する。さらなる他の変異体は、アミノ酸Ｘａａ４、Ｘａａ５またはＸａａ６が、存在するとき、変化していないことを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２４７−２６７のいずれか１つのＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有する。さらなる他の変異体は、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２６８−２７５のいずれか１つのＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有する。
【００９３】
ある実施形態では、ＧＬＰ−１変異体は、保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２３、またはＸａａ３８  −Ｘａａ４５  のいずれかではなく、および変異体がＧＬＰ−１活性（たとえばインスリン分泌刺激活性）を有することを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号７または８を含む。
【００９４】
ある実施形態では、ＧＬＰ−１変異体は、保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８またはＸａａ３８−Ｘａａ４１  のいずれかではなく、および変異体がＧＬＰ−１活性（たとえばインスリン分泌刺激活性）を有することを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号１１または１２を含む。
【００９５】
ある実施形態では、ＧＬＰ−１変異体は、保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２２、またはＸａａ３８  −Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号１６−２８のいずれか１つを含む。
【００９６】
ある実施形態では、ＧＬＰ−１変異体は、Ｘａａ１８、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２２、Ｘａａ２３、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、Ｘａａ２８、Ｘａａ２９およびＸａａ３０から選択される２個のアミノ酸が結合して環を形成していることを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号３０−２４６のいずれか１つを含む。
【００９７】
ある実施形態では、ＧＬＰ−１変異体は、保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ４、Ｘａａ５またはＸａａ６ではないことを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２４７−２６７のいずれか１つを含む。
【００９８】
ここで使用する「ＧＬＰ−１誘導体」は、１またはそれ以上のアミノ酸が、１）対応するＤ−アミノ酸で置換されている、２）非天然に生じるアミノ酸残基に変化している、および／または３）化学修飾されている、上記ファミリーおよび表２に列挙されるＧＬＰ−１類似体の１つを指す。化学修飾の例は、ペプチド骨格および／またはアミノ酸側鎖のアルキル化、アシル化、脱アミド化、エステル化、リン酸化およびグリコシル化を含むが、これらに限定されない。
【００９９】
「ＧＬＰ−１フラグメント」は、上記ファミリーまたは表２に列挙されるＧＬＰ−１類似体のトランケート形態またはその変異体または誘導体を指す。フラグメントは、典型的には上記ファミリーに示すＧＬＰ−１類似体に対して１、２、３、４または５個のアミノ酸がトランケートされている。トランケーションは、アミノ末端および／またはカルボキシル末端のいずれでもよい。
【０１００】
ここで提供するＧＬＰ−１化合物は、適切な二価金属カチオンと錯体形成することができる。ここで提供するＧＬＰ−１化合物の二価金属錯体は、懸濁液として皮下投与することができ、ここで提供するＧＬＰ−１化合物のそのような錯体は一般にほぼ生理的ｐＨの水溶液に不溶性であるので、インビボで低い放出速度を有する。ここで提供するＧＬＰ−１化合物と錯体形成するのに適した二価金属カチオンの非限定的な例は、Ｚｎ＋＋、Ｍｎ＋＋、Ｆｅ＋＋、Ｃａ＋＋、Ｃｏ＋＋、Ｃｄ＋＋、Ｎｉ＋＋等を含む。ここで提供するＧＬＰ−１化合物の二価金属錯体は、たとえば、参照によりここに組み込まれる、国際公開公報第ＷＯ０１／９８３３１号に述べられているような手法を用いて入手できる。
【０１０１】
提供されるＧＬＰ−１化合物は、単にここで開示するＧＬＰ−１類似体を含み得るかまたは、典型的にはインビボでの類似体の半減期を延長させるように選択される、付加的な成分を含み得る。一部のＧＬＰ−１化合物は、たとえば、分子の半減期を延長させるおよび／またはクリアランスを低減するためにペグ化される。他のＧＬＰ−１類似体は、ＰＥＧ以外の水溶性ポリマーで修飾される。適切な水溶性ポリマーまたはそれらの混合物は、Ｎ結合型またはＯ結合型糖鎖、糖類（たとえばキトサン、キサンタンガム、セルロースおよびその誘導体、アカシアガム、カラヤガム、グアーガム、カラギーナンおよびアガロースなどの様々な多糖類）、リン酸塩、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）（モノ−（Ｃ１−Ｃ１０）、アルコキシ−またはアリールオキシ−ポリエチレングリコールを含む、タンパク質を誘導体化するために使用されてきたＰＥＧの形態を含む）、モノメトキシ−ポリエチレングリコール、デキストラン（たとえば約６ｋＤの、低分子量デキストラン）、セルロース、または他の糖鎖ベースのポリマー、ポリ−（Ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（たとえばグリセロール）、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン、ポリビニルアルコール、および前記のコポリマーを含むが、これらに限定されない。ＧＬＰ−１化合物は、たとえば、ＧＬＰ−１類似体のインビボでの半減期を上昇させるように選択される様々な成分を含み得る。
【０１０２】
さらにもう１つの選択肢は、ＧＬＰ−１類似体をもう１つ別のポリペプチドまたはポリペプチドドメインに融合することである。それゆえ、ＧＬＰ−１化合物は、ここで開示するＧＬＰ−１類似体が、免疫グロブリンのＦｃ領域、トランスフェリン、または血清アルブミン（たとえばヒト血清アルブミン）などの血液成分のような様々なタンパク質、またはこれらのタンパク質のフラグメントに融合している融合タンパク質であり得る。ヒトアルブミンについての例示的アミノ酸配列は、Ｌａｗｎら、１９８１，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ９：６１０２−６１１４；Ｍｅｌｏｕｎら、１９７５，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．５８：１３６；およびＭｉｎｇｈｅｔｔｉら、１９８６，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６１：６７４７）において論じられている。そのような融合タンパク質は、ここで述べるようなおよび当技術分野で公知の標準組換え手法を用いて作製できる。
【０１０３】
融合は、ＧＬＰ−１類似体のアミノ末端、カルボキシル末端または両方末端で実施し得る。融合は、リンカーまたはアダプター分子なしで直接であり得るかまたはリンカーまたはアダプター分子を通してであり得る。リンカーまたはアダプター分子は、１またはそれ以上のアミノ酸残基、典型的には約２０−約５０アミノ酸残基であり得る。リンカーまたはアダプター分子はまた、融合部分の分離を可能にする、ＤＮＡ制限エンドヌクレアーゼのためまたはプロテアーゼのための切断部位と共に設計され得る。ひとたび構築されれば、融合ポリペプチドはここで述べる方法に従って誘導体化され得ることが認識される。
【０１０４】
Ｂ．ペグ化
ある実施形態では、ここで提供するＧＬＰ−１類似体はペグ化される。ここで使用するとき、「ペグ化」という用語は、当技術分野におけるそれらの一般的な意味を有し、一般に、たとえば、ポリエチレングリコールまたはその誘導体の１またはそれ以上の分子の共有結合によって、たとえばポリアルキレングリコール、好ましくは活性化ポリアルキレングリコールを、アミノ酸、たとえばリシンなどの適切な反応基または部分と反応させて共有結合を形成することによって、ここで述べるようにＧＬＰ−１類似体を化学修飾する工程を指す。「ペグ化」は、しばしばポリエチレングリコールまたはメトキシポリエチレングリコールのようなその誘導体を用いて実施されるが、ここで使用する用語は、たとえばポリプロピレングリコールなどの、他の何らかの有用なポリアルキレングリコールも包含する。ここで使用するとき、「ＰＥＧ」は、当技術分野で理解されているポリエチレングリコールおよびその誘導体を指す（たとえば米国特許第５，４４５，０９０号、同第５，９００，４６１号、同第５，９３２，４６２号、同第６，４３６，３８６号、同第６，４４８，３６９号、同第６，４３７，０２５号、同第６，４４８，３６９号、同第６，４９５，６５９号、同第６，５１５，１００号および同第６，５１４，４９１号参照）。
【０１０５】
ここで提供するＧＬＰ−１類似体は、ペプチド内のランダムな位置でまたは分子内のあらかじめ定められた位置でペグ化することができ、１またはそれ以上の結合分子、典型的には１、２、３、４または５個の分子を含み得る。
【０１０６】
ペグ化のために使用されるポリマーはいかなる分子量であってもよく、分枝状または非分枝状のいずれでもよい。ポリエチレングリコールに関しては、一般に分子量は、取扱いおよび製造の容易さのために約１ｋＤａ−約１００ｋＤａ（「約」という用語は、ポリエチレングリコールの製剤において、一部の分子は言及される分子量を超え、一部の分子は言及される分子量より低いことを指示する）である。たとえばポリエチレングリコールは、約１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０または１００ｋＤａの平均分子量を有し得る。一部のＧＬＰ−１化合物は、４０、３０または２０ｋＤａ未満の１またはそれ以上の分子でペグ化される。所望する治療プロフィールに依存して（たとえば所望する循環半減期の期間、もしあれば、生物活性への作用、取扱いの容易さ、抗原性の程度または欠如、および治療タンパク質または類似体へのポリエチレングリコールの他の公知の作用）、他の大きさも使用できる。
【０１０７】
ＰＥＧ分子（またはここで述べる他の水溶性ポリマー）は、ポリペプチドまたはタンパク質の機能的または抗原性ドメインへの作用を考慮してＧＬＰ−１類似体に結合すべきである。たとえばＰＥＧは、遊離アミノ基、カルボキシル基またはスルフヒドリル基などの反応性基によりアミノ酸残基を通して共有結合され得る。反応性基は、活性化ＰＥＧ分子が結合され得るものである。遊離アミノ基を含む天然に生じるアミノ酸残基の例は、リシン残基およびＮ末端アミノ酸残基を含む；遊離カルボキシル基を有するものは、アスパラギン酸残基、グルタミン酸残基およびＣ末端アミノ酸残基を含む。スルフヒドリル基（たとえばシステイン上の）も、ポリエチレングリコール分子を結合するための反応性基として使用できる。ＰＥＧ分子はまた、共役により、非天然アミノ酸として合成によって導入された反応性官能基に組み込み得るか、あるいはＰＥＧは、ペプチド合成の間に直交法（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  ｍｅｔｈｏｄｓ）を用いてペプチドに共役し得る。
【０１０８】
様々な戦略がＧＬＰ−１類似体のペグ化のために使用できる（たとえば国際公開公報第ＷＯ２００５／０４２０２７号、同第ＷＯ２００４／０６０３８６号、Ｖｅｒｏｎｅｓｅ，  ２００１，Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２２：４０５−４１７；Ｒｏｂｅｒｔｓら、２００２，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ５４：４５９−４７６参照；また。欧州特許第０  ４０１  ３８４号（Ｇ−ＣＳＦへのＰＥＧの結合）、およびＭａｌｉｋら、１９９２，Ｅｘｐ．Ｈｅｍａｔｏｌ．２０：１０２８−１０３５（塩化トレシルを使用したＧＭ−ＣＳＦのペグ化を報告している）も参照のこと）。たとえばＰＥＧは、リシン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸またはシステイン残基への共有結合によってＧＬＰ−１類似体に連結され得る。１またはそれ以上の反応化学が、ＧＬＰ−１類似体の特定アミノ酸残基（たとえばリシン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸またはシステイン）またはＧＬＰ−１類似体の２種類以上のアミノ酸残基（たとえばリシン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、システインおよびそれらの組合せ）にポリエチレングリコールを結合するために使用できる。
【０１０９】
１つのそのような戦略は、ＧＬＰ−１類似体の一部であるシステインにＰＥＧを結合することである。上記に示すように、提供されるＧＬＰ−１類似体のいくつかは、ＰＥＧを結合できるＣ末端にまたはＣ末端の近くにシステイン残基を含む。システインへの結合は様々なアプローチを用いて実施できる。１つの一般的な方法は、ＰＥＧ−マレイミドをシステインのチオール基に反応させることを含む。
【０１１０】
もう１つのアプローチは、酵素カップリングによってＧＬＰ−１類似体のカルボキシ末端にＰＥＧを結合することである（たとえば米国特許第４，３４３，８９８号参照）。        
【０１１１】
直接または介在リンカーによってＰＥＧをＧＬＰ−１類似体に結合することができる。ポリエチレングリコールをタンパク質およびポリペプチドに結合するための無リンカー系は、Ｄｅｌｇａｄｏら、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓ．９：２４９−３０４，１９９２；Ｆｒａｎｃｉｓら、１９９８，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｊ．  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｌ．６８：１−１８；米国特許第４，００２，５３１号；米国特許第５，３４９，０５２号；国際公開公報第ＷＯ９５／０６０５８号；および国際公開公報第ＷＯ９８／３２４６６号に述べられている。
【０１１２】
介在リンカーを伴わずにＰＥＧをＧＬＰ−１類似体のアミノ酸残基に直接結合するための１つの方法は、塩化トレシル（ＣｌＳＯ２ＣＨ２ＣＦ３）を使用したモノメトキシポリエチレングリコール（ＭＰＥＧ）の修飾によって生成される、トレシル化ＭＰＥＧを使用する。タンパク質またはポリペプチドとトレシル化ＭＰＥＧの反応後、ポリエチレングリコールをタンパク質またはポリペプチドのアミン基に直接結合する。それゆえＧＬＰ−１類似体−ＰＥＧ複合体は、ＧＬＰ−１類似体を、２，２，２−トリフルオロエタンスルホニル基を有するＰＥＧ分子と反応させることによって生成できる。
【０１１３】
ＰＥＧはまた、多くの異なる介在リンカーを使用してＧＬＰ−１類似体に結合することができる。たとえば米国特許第５，６１２，４６０号は、ＰＥＧをＧＬＰ−１類似体に結合するためのウレタンリンカーを開示する。ＰＥＧがリンカーによってＧＬＰ−１類似体に結合しているＧＬＰ−１類似体−ＰＥＧ複合体はまた、ＭＰＥＧ−スクシンイミジルスクシネート、１，１’−カルボニルジイミダゾールで活性化されたＭＰＥＧ、ＭＰＥＧ−２，４，５−トリクロロペニルカルボネート、ＭＰＥＧ−．ｒｈｏ．−ニトロフェノールカルボネート、および様々なＭＰＥＧ−スクシネート誘導体などの化合物とＧＬＰ−１類似体の反応によって生成され得る。ポリエチレングリコールをタンパク質およびポリペプチドに結合するための多くの付加的なポリエチレングリコール誘導体および反応化学が、国際公開公報第ＷＯ９８／３２４６６号に述べられている。
【０１１４】
各々のＧＬＰ−１類似体に結合されるポリエチレングリコール部分の数（すなわち置換の程度）も変化させ得る。たとえばペグ化ＧＬＰ−１類似体は、平均して、１、２、３、４または５個、またはそれ以上のポリエチレングリコール分子に結合され得る。置換の程度を決定するための方法は、たとえばＤｅｌｇａｄｏら、１９９２，Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓ．９：２４９−３０４において論じられている。
【０１１５】
ＧＬＰ−１類似体へのＰＥＧの共有結合を生じさせるためには、ＰＥＧのヒドロキシル末端基を最初に反応性官能基に変換しなければならない。この工程はしばしば「活性化」と称され、その生成物は「活性化ＰＥＧ」と呼ばれる。末端で反応性官能基によってキャップされた、メトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）がしばしば使用される。そのような活性化ＰＥＧの１つは、ＰＥＧのスクシンイミジルスクシネート誘導体（ＳＳ−ＰＥＧ）である。Ａｂｕｃｈｏｗｓｋｉら、１９８４，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．７：１７５−１８６；およびポリエチレングリコール−Ｎ−スクシンイミドカルボネートおよびその製剤を開示する米国特許第５，１２２，６１４号も参照のこと。
【０１１６】
以下の実施例の章は、ここで開示するＧＬＰ−１化合物をペグ化するための戦略に関する詳細な指針を提供する。
【０１１７】
ＩＶ．ＧＬＰ−１化合物および類似体を作製するための核酸および方法
提供されるＧＬＰ−１類似体は、化学合成および／または組換え法を含む、当技術分野で確立されている様々な方法を用いて生成することができる。ＰＥＧをペプチドに結合するための種々の戦略は上記に示されている。
【０１１８】
ＧＬＰ−１類似体を化学合成によって作製する場合、そのような方法は、典型的には固相アプローチを含むが、溶液ベースの化学または固相アプローチと溶液アプローチの組合せも利用できる。以下の実施例の章は、環を含む様々な環状化合物を含めて、ここで述べるＧＬＰ−１化合物の合成に関する詳細な指針を含む。
【０１１９】
タンパク質を合成するための固相法の例は、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，１９６４，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９；およびＨｏｕｇｈｔｏｎ，１９８５，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８２：５１３２によって述べられている。ＧＬＰ−１類似体のフラグメントも合成することができ、その後それらを連結することができる。そのような反応を実施するための方法は、Ｇｒａｎｔ，１９９２，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ａ  Ｕｓｅｒ  Ｇｕｉｄｅ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ．；および“Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”１９９３（ＢｏｄａｎｓｋｙとＴｒｏｓｔ編集），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｉｎｃ．Ｎ．Ｙ．によって記述されている。ここで述べるＧＬＰ−１類似体の作製において当業者を導くために十分な、ペプチドを製造するための方法に関するさらなるガイダンスは、Ｌｉｕら、１９９６，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１８：３０７−３１２；Ｋｕｌｌｍａｎｎ，１９８７，Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，ｐ．４１−５９；Ｄｒｙｌａｎｄら、１９８６，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１：１２５−１３７；Ｊｏｎｅｓ，１９９１，Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｃｌａｒｅｎｄｏｎ  Ｐｒｅｓｓ；およびＢｏｄａｎｓｚｋｙ，Ｍ．とＢｏｄａｎｓｚｋｙ  Ａ．，１９９４，Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第２版、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇによって提供される。
【０１２０】
あるいは、ＧＬＰ−１類似体は、確立された組換え手法を用いて作製することができる。たとえば、ＧＬＰ−１類似体をコードする組換え核酸構築物を細胞に導入することにより、ＧＬＰ−１類似体を宿主細胞において発現させ得る。そのような実施形態によれば、細胞は、たとえばポリヌクレオチドをウイルス（またはウイルスベクター）にパッケージングし、そのウイルス（またはベクター）で宿主細胞を形質転換することを含む、ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための何らかの方法を使用して、または米国特許第４，３９９，２１６号、同第４，９１２，０４０号、同第４，７４０，４６１号および同第４，９５９，４５５号（いかなる目的に関しても参照によりここに組み込まれる）によって例示されているような、当技術分野で公知のトランスフェクション手順によって、組換え核酸構築物で形質転換される。使用される形質転換手順は、形質転換される細胞に依存し得る。哺乳動物細胞への異種ポリヌクレオチドの導入のための方法は当技術分野において周知であり、デキストラン媒介性トランスフェクション、リン酸カルシウム沈殿法、ポリブレン媒介性トランスフェクション、プロトプラスト融合、電気穿孔、リポソームへのポリヌクレオチドの封入、核酸を正に荷電した脂質と混合すること、および細胞および細胞核へのＤＮＡの直接的微量注入を含むが、これらに限定されない。
【０１２１】
ＧＬＰ−１類似体アミノ酸配列の全部または機能的部分をコードする核酸分子を、従来の組換え遺伝子手法を用いて適切な発現ベクターに挿入することができる。ベクターは、典型的には使用される特定宿主細胞において機能性であるように選択される（すなわちベクターは宿主細胞機構と適合性であり、遺伝子の増幅および／または発現を許容する）。発現ベクターの総説については、ＮｏｌａｎとＳｈａｔｚｍａｎ，１９９８，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．９：４４７−４５０参照。
【０１２２】
発現ベクターは、市販のベクターなどの好都合な出発ベクターから構築され得る。そのようなベクターは、所望隣接配列全部を含んでもよくまたは必ずしも全部を含まなくてもよい。ここで述べる隣接配列の１またはそれ以上が既にベクター内に存在しない場合、それらを個別に入手し、ベクターに連結し得る。隣接配列の各々を得るために使用される方法は当業者に周知である。
【０１２３】
ベクターが構築され、ＧＬＰ−１類似体をコードする核酸分子がベクターの適切な部位に挿入された後、完成されたベクターを増幅および／またはポリペプチド発現のために適切な宿主細胞に挿入し得る。ＧＬＰ−１類似体をコードする発現ベクターの選択宿主細胞への形質転換は、トランスフェクション、感染、塩化カルシウム法、電気穿孔、微量注入、リポフェクション、ＤＥＡＥ−デキストラン法などの方法、または上述したような他の公知の手法を含む周知の方法によって達成し得る。選択される方法は、一部には、使用される宿主細胞の種類に依存する。これらの方法および他の適切な方法は当業者に周知であり、たとえばＳａｍｂｒｏｏｋら、２００１，  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＣＬＯＮＩＮＧ：  Ａ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＭＡＮＵＡＬ，  ３ｄ  ｅｄ．，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．に示されている。
【０１２４】
宿主細胞は、適切な条件下で培養されたとき、ＧＬＰ−１類似体を合成し、このタンパク質の収集を所望する場合は、その後培地から収集するか（宿主細胞がタンパク質を培地に分泌する場合）またはタンパク質を生産する宿主細胞から直接収集することができる。適切な宿主細胞の選択は、たとえば所望発現レベル、活性のために望ましいまたは必要なポリペプチド修飾（グリコシル化またはリン酸化など）および生物活性分子への折りたたみの容易さなどの、多くの異なる因子に依存する。
【０１２５】
発現のための宿主細胞として使用可能な哺乳動物細胞系は当技術分野において周知であり、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）より入手可能な多くの不死化細胞系、たとえばチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎（ＢＨＫ）細胞、サル腎細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞癌細胞（たとえばＨｅｐ  Ｇ２）、および多くの他の細胞系を含むが、これらに限定されない。ある実施形態では、細胞系は、いずれの細胞系がＧＬＰ−１類似体の高発現レベルを有するかを判定することを通して選択され得る。
【０１２６】
Ｖ．例示的治療用途
ＧＬＰ−１に関連する様々な活性（背景技術参照）を考慮して、ここで述べるＧＬＰ−１化合物は、一般に以下の生物活性の１またはそれ以上を達成するために使用できる：１）インスリン放出を刺激する、２）血糖値を低下させる、３）血漿インスリンレベルを上昇させる、４）β細胞特異的遺伝子（たとえばＧＬＵＴ−１輸送体、インスリン受容体およびヘキソキナーゼ−１）の転写を刺激する、５）β細胞のアポトーシスを阻害し、β細胞の増殖と複製を上昇させることによってβ細胞の量を増加させる、６）満腹感を誘導し、それによって食物摂取を減少させ、体重減少を促進する、７）胃液の分泌を低下させる、８）胃排出を遅延させる、および９）胃の運動性を低下させる。
【０１２７】
ＧＬＰ−１化合物は、それゆえ、Ｉ型またはＩＩ型糖尿病、耐糖能異常、インスリン抵抗性、成人潜伏性自己免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ）、妊娠糖尿病、代謝症候群、および若年者の成人発症糖尿病（ＭＯＤＹ）を含むが、これらに限定されない、多くの異なる形態の糖尿病またはそれと密接に関連する疾患を治療するために使用できる。そこで、ＧＬＰ−１化合物は、感染、ストレス、発作に起因する、または妊娠中に誘導される感受性低下による、インスリンに対する低い感受性を有する個体を治療するために使用できる。治療できる他の種類の糖尿病は、糖尿病がグルカゴノーマ、原発性アルドステロン症、クッシング症候群およびソマトスタチノーマなどのもう１つ別の内分泌疾患に関連するもの、または特定の薬剤またはホルモン（たとえばエストロゲン含有薬剤、精神活性薬剤、高血圧薬、およびサイアザイド利尿薬）の投与によって生じる糖尿病である。
【０１２８】
ＧＬＰ−１化合物はまた、冠疾患および、たとえば高血圧、冠動脈疾患、高脂血症、心臓血管疾患、アテローム性動脈硬化症および高コレステロール血症および心筋梗塞を含む、脂質障害に関連する疾患を治療するために使用できる。
【０１２９】
骨障害、骨粗しょう症および他の関連疾患もＧＬＰ−１組成物で治療することができる。
【０１３０】
ＧＬＰ−１化合物で治療できるさらなる疾患は、肥満、過敏性腸症候群、発作、手術後の異化作用の変化、心筋梗塞および高血糖症を含む。ＧＬＰ−１化合物はまた、鎮静剤として使用することもできる。
【０１３１】
ＧＬＰ−１化合物はまた、上記に列挙したような疾患を発症する危険度が高い個体を治療することを含めて、予防的に使用することができる。具体例として、前記化合物は、インスリン非依存性糖尿病または肥満になる危険度が高い個体に予防的に投与できる。そのような個体は、たとえば耐糖能異常を有するもの、過体重であるもの、および前記疾患に対する遺伝的素因を有するもの（糖尿病の病歴を有する家族からの個体）を含む。
【０１３２】
多種多様な被験体がＧＬＰ−１化合物で治療できる。ここで使用する「被験体」または「患者」という用語は、典型的には哺乳動物を指し、しばしば前記疾患の１つを有するまたは前記疾患の１つに対する危険度が高いヒトであるが、必ずしもそうでなくてもよい。被験体は、しかしながら、非ヒト霊長動物（たとえば類人猿、サル、ゴリラ、チンパンジー）でもよい。被験体はまた、家畜（たとえばウマ、ウシ、ヒツジまたはブタ）、ペット動物（たとえばネコまたはイヌ）または実験動物（たとえばマウスまたはラット）などの、霊長動物以外の哺乳動物でもよい。
【０１３３】
ＶＩ．医薬組成物
Ａ．組成物
ここで提供するＧＬＰ−１化合物は、治療用途の章で列挙した疾患の治療のために製剤された医薬組成物における有効成分として使用できる。それゆえ、開示されるＧＬＰ−１化合物は、上記に列挙したものを含む様々な治療適用における使用のための薬剤の製造において使用できる。
【０１３４】
ＧＬＰ−１化合物に加えて、医薬組成物はまた、ＧＬＰ−１化合物が有用性を有する様々な疾患の１またはそれ以上を治療する上で有用な１またはそれ以上の他の治療薬を含み得る。特定のＧＬＰ−１組成物と組み合わせることができる他の治療薬の一般的なクラスは、インスリン放出薬、グルカゴン分泌の阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、グルカゴン拮抗薬、抗肥満薬、カロリー摂取を低下させる化合物、選択的エストロン受容体調節薬、ステロイドまたは非ステロイドホルモン、成長因子、および食物栄養素を含むが、これらに限定されない。
【０１３５】
そのような付加的な治療薬は、たとえば高血糖症、糖尿病、高血圧、肥満および骨障害を治療するための薬剤を含み得る。組成物に含有され得る、糖尿病を治療するための他の治療薬の例は、脂質障害を治療するときに使用されるものを含む。そのような薬剤の具体例は、胆汁酸抑制剤（たとえばコレスチラミン、リポスタビル、テトラヒドロリプスタチン）、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤（たとえば米国特許第４，３４６，２２７号；同第５，３５４，７７２号；同第５，１７７，０８０号；同第５，３８５，９２９号；および同第５，７５３，６７５号参照）、ニコチン酸、ＭＴＰ阻害剤（たとえば米国特許第５，５９５，８７２号；同第５，７６０，２４６号；同第５，８８５，９８３号；および同第５，９６２，４４０号参照）、リポキシゲナーゼ阻害剤、フィブリン酸誘導体、コレステロール吸収阻害剤、スクアレンシンテターゼ阻害剤（たとえば米国特許第４，８７１，７２１号；同第５，７１２，３９６号；および同第４，９２４，０２４号）、および回腸ナトリウム／胆汁酸共輸送体を含むが、これらに限定されない。組成物に組み込むことができる他の抗糖尿病薬は、メグリチニド、チアゾリジンジオン、ビグアナイド、インスリン分泌促進薬、インスリン抵抗性改善薬、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、ＰＰＡＲ−αアゴニスト、ＰＰＡＲ−γアゴニストを含む。
【０１３６】
ジペプチジルペプチダーゼＩＶ活性の阻害剤も、ＧＬＰ−１類似体のＮ末端での切断を阻害するために含有され得る。
【０１３７】
医薬組成物は、所望製剤に依存して、動物またはヒト投与のために医薬組成物を製剤するために一般的に使用されるビヒクルと定義される、医薬的に許容される非毒性担体または希釈剤を含み得る。希釈剤は、配合剤の生物活性に影響を及ぼさないように選択される。そのような希釈剤の例は、蒸留水、緩衝水、生理的食塩水、ＰＢＳ、リンガー液、デキストロース溶液、およびハンクス液である。加えて、医薬組成物または製剤は、他の担体、アジュバント、または非毒性、非治療性、非免疫原性安定剤、賦形剤等を含み得る。組成物はまた、ｐＨ調節剤および緩衝剤、毒性調節剤、湿潤剤および界面活性剤などの、生理的条件に近付けるための付加的な物質も含み得る。
【０１３８】
組成物はまた、たとえば抗酸化剤などの、様々な安定剤のいずれかを含み得る。医薬組成物がポリペプチド（たとえばＧＬＰ−１類似体）を含む場合、ポリペプチドは、ポリペプチドのインビボでの安定性を高める、またはその薬理的性質を高める（たとえばポリペプチドの半減期を上昇させる、その毒性を低減する、溶解度または再取込みを増強する）、様々な周知の化合物と錯体形成することができる。そのような修飾または錯化剤の例は、硫酸塩、グルコン酸塩、クエン酸塩およびリン酸塩を含む。組成物のＧＬＰ−１類似体はまた、それらのインビボでの属性を高める分子と錯体形成することができる。そのような分子は、たとえば炭水化物、ポリアミン、アミノ酸、他のペプチド、イオン（たとえばナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン）、および脂質を含む。
【０１３９】
医薬組成物はまた、制御放出システムの一部として製剤され得る。そのようなシステムは、移植可能な浸透圧ポンプ、リポソームまたは経皮パッチを含み得る。ポンプを使用した送達のための方法は、たとえばＬａｎｇｅｒ，１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−３３；およびＳａｕｄｅｋら、１９８９，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５７４によって述べられている。リポソームを使用するための送達選択肢は、たとえばＴｒｅａｔら、１９８９，ｉｎ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｔｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｉｎｆｅｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ，（Ｌｏｐｅｚ−ＢｅｒｅｓｔｅｉｎとＦｉｄｌｅｒ編集），Ｌｉｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐ．３５３−６５；およびＬａｎｇｅｒ，１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−３３）によって論じられている。
【０１４０】
様々な種類の投与に適する製剤についてのさらなるガイダンスは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９８５，Ｍａｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．第１７版に見出される。薬剤送達のための方法の簡単な総説については、Ｌａｎｇｅｒ，１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−１５３３参照。
【０１４１】
２．用量
上述したように、医薬組成物は予防的および／または治療的処置のために投与できる。「有効量」は、一般に、所望効果を達成するために十分であるが非毒性である有効成分（たとえばＧＬＰ−１化合物またはＧＬＰ−１類似体）の量を指し、前記所望効果は、症状の重症度および／または頻度の低減または排除、および／または損傷の改善または矯正である。「治療有効量」は、疾患状態または症状を改善する、または疾患または他の何らかの望ましくない症状の進行を予防する、妨げる、遅延させるまたは逆転させるために十分な量を指す。「予防有効量」は、疾患状態または症状の発症を予防する、妨げるまたは遅延させるために有効な量を指す。
【０１４２】
一般に、ＧＬＰ−１化合物の毒性および治療効果は、たとえばＬＤ５０（集団の５０％に致死的な用量）およびＥＤ５０（集団の５０％において治療上有効な用量）を測定することを含む、細胞培養および／または実験動物における標準医薬手順に従って決定され得る。毒性と治療効果の間の用量比が治療指数であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０比として表わすことができる。大きな治療指数を示す組成物が望ましい。
【０１４３】
細胞培養および／または実験動物から得られたデータは、ヒトのための用量範囲を策定するときに使用できる。有効成分の用量は、典型的には、ほとんどまたは全く毒性を伴わないＥＤ５０を含む循環濃度範囲内に存する。用量は、使用される投与形態および使用される投与経路に依存してこの範囲内で変化し得る。
【０１４４】
投与される有効成分の量は、疾患の重症度、治療される被験体の年齢と大きさ、および特定の疾患自体などの、主治医によって評価され得る様々な因子に依存する。一般に、しかし、投与されるＧＬＰ−１類似体自体の総量は、典型的には１μｇ／ｋｇ体重／日−１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。一部の場合には、用量は１０μｇ／ｋｇ／日−１０  ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。他の治療レジメンでは、ＧＬＰ−１化合物は、５０μｇ／ｋｇ／日−５ｍｇ／ｋｇ／日または１００μｇ／ｋｇ／日−１ｍｇ／ｋｇ／日で投与される。
【０１４５】
Ｃ．投与
ここで述べる医薬組成物は様々な方法で投与することができる。例は、経口、鼻内、直腸、局所、腹腔内、静脈内、筋肉内、皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ，ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）、髄腔内、および頭蓋内投与法によって医薬的に許容される担体を含有する組成物を投与することを含む。
【０１４６】
経口投与に関しては、有効成分は、カプセル、錠剤および粉末などの固体投与形態で、またはエリキシル、シロップおよび懸濁液などの液体投与形態で投与することができる。活性成分を、グルコース、ラクトース、スクロース、マンニトール、デンプン、セルロースまたはセルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、サッカリンナトリウム、滑石、炭酸マグネシウムなどの、不活性成分および粉末担体と共にゼラチンカプセルに封入することができる。望ましい色、味、安定性、緩衝能力、分散または他の公知の望ましい特徴を与えるために添加し得る付加的な不活性成分の例は、べんがら、シリカゲル、ラウリル硫酸ナトリウム、二酸化チタン、および食用白色インクである。同様の希釈剤が圧縮錠剤を作製するために使用できる。錠剤およびカプセルのいずれもが、数時間にわたって薬剤の持続的放出を提供する持続放出製剤として製造できる。圧縮錠剤は、不快な味を隠し、大気から錠剤を保護するために糖被覆またはフィルム被覆することができ、または消化管での選択的崩壊のために腸溶被覆することができる。経口投与のための液体投与形態は、患者の受け入れを高めるために着色料および着香料を含有し得る。
【０１４７】
単独または他の適切な成分と組み合わせた有効成分は、吸入によって投与されるエアロゾル製剤（すなわちそれらは「噴霧」され得る）に製造することができる。エアロゾル製剤は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などの許容される加圧推進薬に含め得る。
【０１４８】
直腸投与のための適切な製剤は、たとえば坐薬基剤と共に充填された有効成分から成る坐薬を含む。適切な坐薬基剤は、天然または合成トリグリセリドまたはパラフィン系炭化水素を含む。加えて、たとえば液体トリグリセリド、ポリエチレングリコールおよびパラフィン系炭化水素を含む、基剤と充填有効成分の組合せから成るゼラチン直腸カプセルを使用することも可能である。
【０１４９】
たとえば関節内（関節の中）、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内および皮下経路などの非経口投与に適する製剤は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌薬、および製剤を意図する受容者の血液と等張にする溶質を含有し得る、水性および非水性等張滅菌注射溶液、および懸濁化剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤および防腐剤を含有し得る、水性および非水性滅菌懸濁液を含む。
【０１５０】
医薬組成物を製剤するために使用される成分は、好ましくは高純度であり、潜在的に有害な夾雑物を実質的に含まない（たとえば少なくともＮａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｏｄ（ＮＦ）グレード、一般には少なくとも分析グレード、より典型的には少なくとも医薬品グレード）。さらに、インビボでの使用を意図される組成物は通常無菌である。所与の化合物が使用前に合成されなければならない限り、生じる生成物は、典型的には、合成または精製工程の間に存在し得る、いかなる潜在的毒性物質も、特にいかなる内毒素も実質的に含まない。非経口投与のための組成物も無菌であり、実質的に等張で、ＧＭＰ条件下にて製造される。
【実施例】
【０１５１】
実施される実験および達成される結果を含む、以下の実施例は、説明のみを目的として提供され、本発明を限定すると解釈されるべきではない。
【０１５２】
（実施例１）
ＧＬＰ−１化合物の合成
ペプチド合成
ここで述べるＧＬＰ−１類似体を生成するために以下のプロトコールを使用した。Ｎα−Ｆｍｏｃ、側鎖保護アミノ酸、Wang樹脂、およびRinkアミド樹脂を使用した。以下の側鎖保護戦略を用いた：Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）、Ａｒｇ（Ｐｂｆ）、Ｃｙｓ（Ａｃｍ）、Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）、Ｇｌｕ（Ｏ２−ＰｈｉＰｒ）、Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）、Ｌｙｓ（Ｎε−Ｂｏｃ）、Ｌｙｓ（Ｎε−Ｍｔｔ）、Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）、Ｔｈｒ（ＯｔＢｕ）およびＴｙｒ（ＯｔＢｕ）。ＧＬＰ−１ペプチド誘導体は、Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロ−ホスフェート（ＨＢＴＵ）／Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）カップリング化学を０．２ｍｍｏｌ当量の樹脂スケール（Ｆｍｏｃ脱保護リンクアミド樹脂）で使用して、ペプチド固相合成法（ＳＰＰＳ）によりＡＢＩ４３３ペプチドシンセサイザーで段階的に合成した。各々のカップリングサイクルについて、Ｎα−Ｆｍｏｃアミノ酸１ｍｍｏｌ、ＤＩＥＡ  ４ｍｍｏｌおよびＨＢＴＵの１ｍｍｏｌ当量を使用した。ＨＢＴＵ活性化Ｆｍｏｃアミノ酸の濃度はＤＭＦ中０．５Ｍであり、カップリング時間は４５分であった。Ｆｍｏｃ脱保護は、ＤＭＦ溶液中の３０％ピペリジンを最初に２分間、その後さらに２０分間使用する２回の処理で実施した。
【０１５３】
ラクタム形成
側鎖−側鎖ラクタム形成を、構築したＮ末端Ｆｍｏｃ保護ペプチド樹脂上で実施した。ペプチド−樹脂をＤＣＭ中で３０分間溶媒和し、排液した（ｄｒａｉｎｅｄ）。Ｍｔｔおよび２−ＰｈｉＰｒ基（特定ラクタム結合形成部位で保護する）を、５％ＴＩＳを含むＤＣＭ溶液中１％ＴＦＡで除去した。ＤＣＭ溶液中１％ＴＦＡによるペプチド−樹脂の処理を３０分ずつ８回反復し、各々の処理の後に十分なＤＣＭ洗浄を実施した。次に、遊離カルボキシル基およびアミノ基を、０．５Ｍベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）５当量の添加によって縮合し、ＤＭＦ中のＤＩＥＡ  １０当量をペプチド樹脂に添加して、２４時間放置した。その後樹脂をＤＭＦ、ＤＣＭおよびＤＣＭ／ＭｅＯＨで十分に洗浄し、乾燥させた。
【０１５４】
側鎖の脱保護と樹脂からの切断
合成と修飾後、樹脂を排液し、ＤＣＭ、ＤＭＦ、ＤＣＭで洗浄し、その後真空中で乾燥させた。ペプチド−樹脂を脱保護し、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／１，２−エタンジチオール（ＥＤＴ）／トリイソプロピル−シラン（ＴＩＳ）／Ｈ２Ｏ（９２．５：２．５：２．５：２．５ｖ／ｖ）溶液で室温にて９０分間処理することによって樹脂から遊離させた。次に揮発性物質を窒素ガス流で除去し、粗ペプチドをジエチルエーテルで２回沈殿させ、遠心分離によって収集した。
【０１５５】
Ａｃｍ脱保護
粗ＧＬＰ−１  Ｃｙｓ（Ａｃｍ）保護ペプチドを、新鮮添加した酢酸水銀（ＩＩ）（１５ｍｇ／ｍＬ）を含む１０％ＡｃＯＨ水溶液に溶解した。溶液を周囲温度で４時間攪拌した。次に２−メルカプトエタノールの８０％水溶液を添加して２０％ｖ／ｖの組成物を生成し、十分に混合して、一晩放置した。次に０．１％ＴＦＡ水溶液で希釈し、水銀塩を含む灰色沈殿物を遠心分離とろ過によって除去した。脱保護されたペプチドを、その後、逆相ＨＰＬＣ精製に供した。
【０１５６】
特定実施例
環を含まないＧＬＰ−１化合物を合成するための合成プロトコールを図３に示しており、この図は、８位にＧｌｙ置換、２２位にＡｉｂ置換、およびＣ末端にシステインとアラニンの付加を含む類似体（すなわち配列番号１８）を合成するためのアプローチを例示する。
【０１５７】
図４−１１は、様々な環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを例示する。図４は、たとえば、グルタミン酸とリシン残基の側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を形成するためのスキームを示す。図５は、グルタミン酸とオルニチンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図６は、アスパラギン酸の側鎖とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図７は、アスパラギン酸の側鎖とオルニチンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図８は、リシンの側鎖とグルタミン酸鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図９は、ホモグルタミン酸の側鎖とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図１０は、４−カルボキシ−フェニルアラニンの側鎖とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図１１は、β−ホモグルタミン酸の側鎖とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。
【０１５８】
逆相ＨＰＬＣ精製
逆相高速液体クロマトグラフィーを分析カラム（Ｃ１８、５μｍ、０．４６ｃｍ×２５ｃｍ）または分取カラム（Ｃ１８、１０μｍ、２．２ｃｍ×２５ｃｍ）で実施した。典型的には、解析的分析については１ｍＬ／分の流速にて３５分間で５−９５％、および分取分離については２０ｍＬ／分の流速にて９０分間で５−６５％の、緩衝液Ａ中の緩衝液Ｂ（Ａ＝０．１％ＴＦＡ水溶液；Ｂ＝０．０９％ＴＦＡを含む９０％ＡＣＮ水溶液）の直線勾配を使用してクロマトグラフィー分離を達成した。分析および分取ＨＰＬＣ画分をＥＳＭＳおよびフォトダイオードアレイ（ＰＤＡ）ＨＰＬＣによって特性決定し、選択した画分を合わせ、凍結乾燥した。
【０１５９】
質量分析法
イオンスプレイ大気圧イオン化源を備えたシングル四重極質量分析計で質量スペクトルを取得した。試料（２５μＬ）を、溶融シリカキャピラリーのインターフェース（内径５０μｍ）によってイオン化源に直接結合された移動溶媒（１０μＬ／分；３０：５０：２０  ＡＣＮ／ＭｅＯＨ／０．０５％ＴＦＡ）に注入した。試料の小滴を５ｋＶの正電位でイオン化し、インターフェースプレートを通しておよびその後６０Ｖの電位でオリフィス（直径１００−１２０μｍ）を通して分析計に導入した。フルスキャン質量スペクトルを、０．１Ｄａのスキャンステップサイズで４００−２２００Ｄａの質量範囲にわたって取得した。認められたｍ／ｚ値から分子量を導いた。
【０１６０】
ペグ化
チオエーテル結合ＰＥＧペプチドを、所望結合部位で操作された反応性システインチオールを有するＧＬＰ類似体から導いた（表２参照）。活性化ＰＥＧ誘導体はすべて、５ｋＤ−４０ｋＤの分子量を有する単官能性メトキシＰＥＧ−マレイミド（ｍＰＥＧ−ｍａｌ）であった。結合は、ｐＨ６でのアルキル化によって達成された。簡単に述べると、ペプチドをアミン不含緩衝液（５０ｍＭリン酸ナトリウム、５ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ６）に２ｍｇ／ｍｌで溶解し、ｍＰＥＧ−ｍａｌを控え目な化学量論的過剰量（１．２−１．５倍）で添加し、室温で０．５−２時間反応させた。反応を逆相ＨＰＬＣによって観測し、５ｍＭ  β−メルカプトエタノールで反応停止させて、さらに３０分間室温で放置してインキュベートし、その後精製した。
【０１６１】
精製は、ＳＰセファロースＨＰ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用し、０−５００ｍＭの直線塩化ナトリウム勾配で溶出する分取陽イオン交換クロマトグラフィーによって実施した。溶出されたＰＥＧペプチドをＲＰ−ＨＰＬＣおよびＳＤＳ−ＰＡＧＥによって評価し、プールして、その後濃縮し、１０ｍＭ酢酸ナトリウム、５％ソルビトール、ｐＨ４に透析した。ＲＰ−ＨＰＬＣにより、すべての最終プールについて＞９９％の純度が測定された。標的結合部位の各々におけるＰＥＧとの結合を確認するためにペプチドマッピングと塩基配列決定を使用した。
【０１６２】
（実施例２）
インビボアッセイ
ＧＬＰ−１構築物のインビトロでの効果
Ａ．ＧＬＰ−１Ｒレポーターアッセイ
ＧＬＰ−１と試験化合物の力価を比較するため、ヒトまたはマウスＧＬＰ−１受容体を発現するレポーター細胞系を生成した。ルシフェラーゼレポーター遺伝子の発現増強を通してｃＡＭＰレベルの上昇を測定した。簡単に述べると、環状ＡＭＰレベルによって調節されるルシフェラーゼレポーター遺伝子構築物を担持することに加えて、マウスまたはヒトＧＬＰ−１受容体を発現するＣＨＯＫ１細胞を、アッセイの２日前にプレートし、その後３７℃、５％ＣＯ２で培養した。アッセイの前日の晩に、細胞を洗浄し、培地を、０．５％プロテアーゼ不含ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含む無血清培地と交換し、その後一晩培養した。細胞を、０．５％プロテアーゼ不含ＢＳＡおよび１００μＭ  ＩＢＭＸを含む培地にて３７℃で６時間、一連の濃度の試験化合物またはＧＬＰ−１に暴露した。細胞溶解産物を、Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を使用してルシフェラーゼ活性に関して検定した。ルシフェラーゼ活性はＬｕｍｉｎｏｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍａｒｉｅｔｔａ，ＯＨ）を用いて測定した。生じた化合物濃度曲線の非線形回帰分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて実施した。「ＥＣ５０」は、最大活性の５０パーセントが達成される化合物の濃度を表わす。
【０１６３】
Ｂ．構築物のインビトロでのＧＬＰ−１受容体結合
膜の作製。ヒトまたはマウスのＧＬＰ−１受容体を発現するＣＨＯＫ１細胞を、ＰＢＳを使用して１５０ｍｍ培養皿から採集した。細胞を１５００ｒｐｍで１０分間沈降させた。生じたペレットを氷冷スクロース緩衝液（２５ｍＭトリス−ＨＣｌ、０．３２Ｍスクロース、０．２５ｇ／Ｌアジ化ナトリウム、ｐＨ７．４）１５ｍｌ中で、モータ付きガラス張り（ｇｌａｓｓ  ｆｉｔｔｅｄ）テフロン（登録商標）ホモジナイザで均質化した。ホモジネートを４８，０００×ｇにて４℃で１０分間遠心分離し、Ｔｉｓｓｕｅ−Ｔｅａｒｏｒ（Ｂｉｏｓｐｅｃ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を用いてアッセイ緩衝液（５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０ｍｇ／ｍｌプロテアーゼ不含ＢＳＡ、０．１ｍｇ／ｍｌ  ＳＴＩ、および０．１ｍｇ／ｍｌ  Ｐｅｆａｂｌｏｃ、ｐＨ７．４）２５ｍｌに再懸濁して、その後再び４８，０００×ｇで１０分間遠心分離した。ペレットを、Ｔｉｓｓｕｅ−Ｔｅａｒｏｒを用いてアッセイ緩衝液１５ｍｌ中で３回目の均質化に供し、再び４８，０００×ｇで１０分間遠心分離した。生じたペレットを４ｍｇ／ｍｌの湿重量濃度でアッセイ緩衝液に再懸濁した。
【０１６４】
リガンド結合アッセイ。結合アッセイを９６穴Ｕ底プレートにおいて実施した。膜（組織２００μｇ）を、総容量１００μｌで、０．２ｎＭ  １２５Ｉ−ＧＬＰ−１（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）を含むアッセイ緩衝液中、一連の濃度の試験化合物またはＧＬＰ−１と共に室温で２時間インキュベートした。加えて、１μＭの非標識ＧＬＰ−１の存在下で非特異的結合を評価した。あらかじめ０．５％ポリエチレンイミンに浸したＵｎｆｉｌｔｅｒ−９６  ＧＦ／Ｃガラス繊維フィルタープレート（ＦｉｌｔｅｒＭａｔｅ  １９６  Ｐａｃｋａｒｄ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ，ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｓｈｅｌｔｏｎ，ＣＴ）を通しての速やかなろ過によって反応を終了させ、その後低温５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４の３００μｌで３回洗浄した。結合放射能を、ＴｏｐＣｏｕｎｔ（マイクロプレートシンチレーションおよびルミネセンス計数器（Ｐａｃｋａｒｄ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ，ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｓｈｅｌｔｏｎ，ＣＴ）を用いて測定した。生じた濃度曲線の非線形回帰分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて実施した。「ＩＣ５０」は、最大特異的１２５Ｉ−ＧＬＰ−１結合を５０パーセント低下させる化合物の濃度を表わす。
【０１６５】
（実施例３）
インビボアッセイ
Ａ．ｄｂ／ｄｂマウス：
食後血糖値に関してＧＬＰ−１化合物をさらに検討するため、ｄｂ／ｄｂ糖尿病マウスモデルをこのスクリーニングにおいて使用し、この測定を１、２、４、６および２４時間目に観測した。ｄｂ／ｄｂマウスは、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ＪＡＸ（登録商標）  ＧＥＭＭ（登録商標）  Ｓｔｒａｉｎ  −  Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  Ｃｏｎｇｅｎｉｃ  Ｍｉｃｅより市販されており、糖尿病の偶発突然変異に関してホモ接合である（Ｌｅｐｒｄｂ）。これらのマウスは約３−４週齢で特定可能に肥満になった。試験に含めるための各マウスについての選択判定基準は、少なくとも３００ｍｇ／ｄＬの血糖値であった。８．５週齢（慢性１−２週間試験のため）から約１０−１１週齢（急性１−３日間試験のため）のｄｂ／ｄｂマウスに各々の試験化合物を１回（急性実験）または複数回（慢性実験）注射した。実験当日、午前９時にマウスから採血し（基線値）、その後直ちにマウスを注射者に引き渡して、注射者は適切なＧＬＰ−１化合物または陽性／陰性対照を注射した。次にマウスを、摂食行動に関連する血糖値の変動性を制限するため、食餌を含まない新鮮ケージに入れた。通常は１時間、４時間、６時間および２４時間の時点で採血した。２４時間の時点で血糖値が開始時より低い時は、血糖値が基線レベルに戻るまで２４時間ごとにさらなる時点で採血した。６時間の時点の後、通常食を与えた。
【０１６６】
多回注射によってタキフィラキシーを測定した。血糖値が十分に開始時の基線レベルに戻った後、化合物の２回目の注射を実施した。この時点で、化合物が同じ効果／有効性を有するか、または何らかの顕著なタキフィラキーがあるかどうかは明白であった。
【０１６７】
Ｂ．Ｃ５７ｂ１６マウス：
Ｃ５７Ｂ１６（正常やせ型）マウスを１０−１２週齢で使用した。これらのマウスは、Ｊａｃｋｓｏｎ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓまたはＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒなどの業者から市販されており、正常であるとみなされる。「やせ型」という用語は、これらのマウスを肥満ｄｂ／ｄｂマウスと対比するために使用する。Ｃ５７Ｂ１６マウスを体重に関して無作為化した。基線血糖値を測定するために午前９時に採血を実施し、ＧＬＰ−１化合物またはＰＢＳを投与したあと、食餌を含まないケージにマウスを収容した。４−５時間後、２ｇ／ｋｇのグルコース用量を使用して腹腔内ブドウ糖負荷試験（ブドウ糖負荷試験は、ブドウ糖を代謝する身体能力を測定する）を実施した。ブドウ糖負荷の投与後３０分および９０分目および２４時間目に、または血糖値がもとの値に戻るまで、血糖値を測定した。これらの試験から、陰性対照であるＰＢＳに比べて、グルコースを利用する上でのＧＬＰ−１の効果増強作用が認められる。
【０１６８】
（実施例４）
式Ｉに関するＧＬＰ−１化合物についての結果
８位にグリシン置換、２２位にシステイン置換および可変Ｃ末端を有する分子のクラスに関して受容体結合と力価を測定するため、インビトロ実験を実施した。実施例２で述べたように実験を実施し、結果を以下の表３に要約する。
【０１６９】
【表３−１】
2009534423.tif 000014
【０１７０】
【表３−２】
2009534423.tif 000015
表３に示すように、これらの分子の一部は種々の形態のＰＥＧに結合されており、結合は２３位のシステインで生じた。たとえば２０ｋ  ＰＥＧ二量体は２個のペプチドを有する単一２０ｋＤ直鎖ＰＥＧポリマーであり、２個のペプチドはどちらもフォークのように同じ末端で結合する。「フォーク状（ｆｏｒｋｅｄ）」ＰＥＧ−（マレイミド）２はＮｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，ＡＬ，カタログ番号２Ｄ２ＭＯＰＯＦ）から入手でき、以下の構造を有する：
【０１７１】
【化３】
2009534423.tif 000016
「分枝」ＰＥＧ複合体は、単一ペプチド上の同じ部位で結合した２個のポリマーである。分枝ＰＥＧ２−マレイミドも、カタログ番号２Ｄ３Ｘ０Ｐ１１でＮｅｋｔａｒ  Ｔｈｅａｒｐｅｕｔｉｃｓ（Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，ＡＬ）より入手でき、以下の構造を有する。
【０１７２】
【化４】
2009534423.tif 000017
他の分子（たとえばｃｇＧＬＰ−３）は、「ダンベル状」ＰＥＧ複合体である。この立体配置では、２個のペプチドが、ダンベルのように、各々の末端で１つずつ、８ｋＤ  ＰＥＧに結合している。８ｋＤのｍａｌ−ＰＥＧ−ｍａｌポリマーも、カタログ番号ＺＦ−０６６−０５でＮｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，ＡＬ）より入手でき、以下の構造を有する：
【０１７３】
【化５】
2009534423.tif 000018
（実施例５）
式ＩＩに関するＧＬＰ−１化合物についての結果
８位の置換およびＣＳＧまたはＣＳＧＧのいずれかのＣ末端付加を有するＧＬＰ−１化合物に関して受容体結合と力価を測定するため、インビトロ実験を実施した。ペグ化分子を３８位のシステインで結合した。実施例２で述べたように実験を実施し、結果を以下の表４に要約する。
【０１７４】
【表４】
2009534423.tif 000019
（実施例６）
式ＩＩＩに関する化合物についての結果
２２位にＡｉｂ（２−アミノイソ酪酸）またはＡａｄ（２−アミノアジピン酸）置換および場合により８位とＣ末端に置換を有するＧＬＰ−１化合物に関して受容体結合と力価を測定するため、インビトロ実験を実施した。ペグ化分子を３８位のシステインで結合した。実施例２で述べたように実験を実施し、結果を以下の表５に要約する。
【０１７５】
【表５】
2009534423.tif 000020
（実施例７）
環状ＧＬＰ−１化合物に関する結果
一部のアミノ酸の側鎖が結合して環（環状ラクタム）を形成している様々なＧＬＰ−１化合物に関して受容体結合と力価を測定するため、インビトロ実験を実施した。実施例２で述べたように実験を実施した。試験した環状化合物の配列を結果と共に表６に示す。環状ラクタムの形成に関与するアミノ酸の側鎖を太字と下線で示している。表６に列挙する化合物のうちで、ｍｇＧＬＰ−２４だけがペグ化されていた。
【０１７６】
【表６】
2009534423.tif 000021
（実施例８）
Ｎ末端伸長を有するＧＬＰ−１化合物に関する結果
Ｎ末端伸長を有するＧＬＰ−１化合物に関して受容体結合と力価を測定するため、インビトロ実験を実施した。実施例２で述べたように実験を実施し、結果を以下の表７に要約する。表７に列挙する化合物はいずれもペグ化されていなかった。
【０１７７】
【表７】
2009534423.tif 000022
（実施例９）
インビボ結果−時間と血糖値への作用
ここで開示する種々のクラスからの代表化合物（たとえば上述した式Ｉ−ＩＶの一般構造を有する化合物）を含む様々なＧＬＰ−１化合物を、血糖値に影響を及ぼすそれらの能力に関して試験した。これらの実験では、実施例３で述べたようにｄｂ／ｄｂマウスにおいて血糖を測定した。
【０１７８】
図１２は、ｃｇＧＬＰ−１７、ｃｇＧＬＰ−１８、ｃｇＧＬＰ−１９、ｍｇＧＬＰ−０９Ａ（配列およびＰＥＧの大きさと種類については表４および５参照）およびｍｇ−ＧＬＰ−０９Ａが７２時間の期間にわたって血糖を低下させる能力を示す。これらの化合物の各々は対照と比べて血糖を低下させ、ｃｇ−ＧＬＰ−１９が最も長い時間にわたって血糖を低下させた（マウスにおける血糖値が正常レベルに戻るのに１０μｇ／マウス用量で７２時間を要した）。もうひと組の実験をｃｇＧＬＰ−１９、ｃｇＧＬＰ−２０、ｃｇＧＬＰ−２３、ｃｇＧＬＰ−２４（配列およびＰＥＧの大きさと種類については表５参照）に関して実施した。ＧＬＰ−１化合物１０μｇを各マウスに注射した。図１３に示すように、これら４つのＧＬＰ−１化合物は、経時的に血糖値を低下させる同様の能力を示し、各々が４８時間にわたって血糖値の有意の低下を生じさせた。
【０１７９】
もうひと組の実験をｍｇＧＬＰ−２０、ｃｇＧＬＰ−２６、ｍｇＧＬＰ−２２およびｍｇＧＬＰ−２４（配列およびＰＥＧの大きさと種類については表５および６参照）を用いて実施した。用量は１０μｇ／マウスであった。図１４に示すように、各化合物は血糖値を低下させたが、低下の仕方は異なっていた。この例では、ｍｇＧＬＰ−２０およびｍｇＧＬＰ−２４が最も長い時間グルコースを低下させた。これらの２つの化合物に関しては、血糖値が正常レベルに戻るのに７２時間を要した。
【０１８０】
（実施例１０）
用量依存的な血糖の低下
実施例３で述べたように、ｄｂ／ｄｂマウスに種々の用量（５および１０μｇ／マウス）のｍｇＧＬＰ−３２（配列とＰＥＧの大きさについては表５参照）を注射した。図１５に示すように、ｍｇＧＬＰ−３２は、２４時間にわたって用量依存的に血糖値を低下させた。
【０１８１】
（実施例１１）
やせ型ＧＴＴ実験
インスリン放出へのＧＬＰ−１の作用は、グルコースの不在下よりもグルコースの存在下でより大きい。Ｃ５７Ｂ１６マウスは正常血糖を有しており、種々のＧＬＰ−１類似体の間での効果の相違を測定することが難しい（効果についてのウインドウがあまり広くない）。試験したＧＬＰ−１類似体の間で効果を測定するために、実施例３で述べたようにＧＬＰ−１類似体またはＰＢＳの注射の５２時間後にＣ５７Ｂ１６マウスにおいてブドウ糖負荷試験（ＧＴＴ）を実施した。図１６は、ｍｇＧＬＰ−２０、ｍｇＧＬＰ−２２およびｍｇＧＬＰ−２４が、ＧＬＰ−１類似体またはＰＢＳの注射後最初の５２時間に血糖を同程度に低下させたことを示す（配列およびＰＥＧ分子の大きさと種類については表５および６参照）。ＧＴＴに入って３０分目に、ビヒクル処置マウスとＧＬＰ−１類似体処置マウスのグルコースレベルの間で分離が起こり、血糖低下へのＧＬＰ−１類似体の予想された作用を明らかにした。また、３０分目に、ＧＴＴの間の血糖低下においてｍｇＧＬＰ−２４はｍｇＧＬＰ−２２より大きな効果を示し、ｍｇＧＬＰ−２２はｍｇＧＬＰ−２０より大きな効果を示した。
【０１８２】
（実施例１２）
多回投与実験
タキフィラキシーが長時間作用形態のＧＬＰ−１化合物に関する問題であるかどうかを調べるため、ｄｂ／ｄｂマウスにおいて多回投与実験を実施した。ＧＬＰ−１化合物の２回目のボーラスを、翌日、２４時間目の血糖測定の直後に注射したことを除き、実施例３で述べた方法を使用した。図１７に示すように、血糖は、２日目にｍｇＧＬＰ−３３（配列とＰＥＧの大きさについては表５参照）で同程度に低下した。試験したＧＬＰ−１化合物に関してタキフィラキシーは認められなかった。ｍｇＧＬＰ−２０（配列およびＰＥＧの大きさと種類については表５参照）に関しても同じ結果を認めた。
【０１８３】
加えて、ｍｇＧＬＰ−３２（配列およびＰＥＧの大きさと種類については表５参照）に関する４日間の多回投与実験を正常Ｃ５７Ｂ１６マウスにおいて実施した。また、効果を測定するため、１回目の注射後にＧＴＴを実施し、４回目の注射後に２回目のＧＴＴを実施した。ＧＴＴは実施例３で述べたように実施した。血糖に対するＧＬＰ−１類似体の効果を示す結果を図１８に示す。
【０１８４】
図１９に示すように、ｍｇＧＬＰ−２０に関しては４時間の絶食中に血糖が低下した。また、ｍｇＧＬＰ−２０で処置したマウスでは１回目と２回目のＧＴＴの間に血糖スパイクは見られなかった。ｍｇＧＬＰ−２０の４回目の投与後、タキフィラキシーは認められなかった。
【０１８５】
（実施例１３）
ペグ化試験
活性化ＰＥＧポリマーはすべてＮｅｋｔａｒ  Ｔｈｅａｒｐｅｕｔｉｃｓ（Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，ＡＬ）より入手した。使用した種々の形態のＰＥＧ分子の説明は実施例４に述べられている。
【０１８６】
５−４０ｋＤにわたる大きさの数多くのＰＥＧ−マレイミドポリマーが入手可能であり、それらは分枝ＰＥＧポリマーを含み得る、または多価官能基を有し得る。受容体結合への影響を最小限にとどめる改善された薬物動態のための、ＰＥＧの大きさ、ポリマーの分枝およびペプチド原子価の最適のバランスを判定するためにこれらのポリマーを使用した。ＧＬＰ−１類似体を、５ｋＤ、１０ｋＤ、２０ｋＤおよび３０ｋＤの直鎖単官能性ＰＥＧ−マレイミドから作製した。また、４０ｋＤ分枝ＰＥＧ（２×２０ｋＤポリマー）マレイミドも試験した。インビトロ結合アッセイは、ＰＥＧの大きさと受容体親和性の間の逆相関を明らかにし、分枝４０ｋＤポリマーは受容体結合に極めて有意の影響を及ぼす（表３−５）。同様に、ＰＥＧの大きさはインビボでのグルコース低下の期間に影響を及ぼし、より大きなポリマーが、典型的には、最大期間を達成する（データは示していない）。しかし、この作用には限界があり、分枝４０ｋＤポリマーを有する最も大きいＰＥＧ−ＧＬＰ類似体（ｃｇＧＬＰ−２９）はインビボで最も活性ではなかった。
【０１８７】
図２０および２１は、１）「ダンベル」のように、各々の末端に１個ずつ、２個の８ｋＤ  ＰＥＧポリマー；２）２０ｋＤ  ＰＥＧポリマー；３）３０ｋＤ  ＰＥＧポリマー；または４）４０ｋＤ分枝ＰＥＧポリマーにそれぞれ結合した配列番号６および１０によるヒトＧＬＰ−１受容体の活性化についてのＧＬＰ−１レポーターアッセイの結果を示す。興味深いことに、配列番号１０は２０、３０および４０ｋＤのＰＥＧ複合体に関して同様の機能的活性を示し、配列番号６は２０ｋＤ複合体の活性で目立った減少を示し、４０ｋＤの分枝複合体は３０ｋＤおよび８ｋＤのダンベル複合体と類似の力価を示す。これは、受容体結合親和性とＰＥＧの大きさの間で認められた逆相関と著しく異なる。図２２は、１）５ｋＤ  ＰＥＧポリマー；２）１０ｋＤ  ＰＥＧポリマー；３）２０ｋＤ  ＰＥＧポリマー；４）３０ｋＤ  ＰＥＧポリマー；または５）４０ｋＤ分枝ＰＥＧポリマーに結合した配列番号２２を使用したＧＬＰ−１受容体機能アッセイからの同様の結果を示す。これらの結果に対応するＥＣ５０値が表３−５に要約されている。これらのペプチド複合体に関して、非複合ペプチドと同様の力価を有する５ｋＤ  ＰＥＧ複合体を除き、すべての大きさのＰＥＧ複合体に関して同様のインビトロ力価が認められる。ＰＥＧの種々の大きさと形状がグルコースレベルを低下させる能力に及ぼす影響を調べるため、ｃｇＧＬＰ−２５（５ｋＤａ  ＰＥＧ）、ｃｇＧＬＰ−２６（１０ｋＤａ  ＰＥＧ）、ｃｇＧＬＰ−２７（２０ｋＤａ  ＰＥＧ）およびｃｇＧＬＰ−２８（分枝４０ｋＤａ  ＰＥＧ）を用いてインビボでのひと組の実験を実施した。これらの化合物の各々は、配列番号２２のアミノ酸配列を有するが、指示されているように、結合しているＰＥＧの大きさまたは形状が異なる。実施例３で述べたようにｄｂ／ｄｂマウスにおいて血糖を測定した。異なる化合物は異なる形で血糖を低下させ、ｃｇＧＬＰ−２７は最も長期間血糖を低下させた（図２３）。
【０１８８】
ここで述べる実施例および実施形態は説明だけを目的とするものであり、それらに照らして様々な修正または変更が当業者に示唆され、それらの修正または変更は本出願の精神と範囲内および付属の特許請求の範囲内に包含されることが了解される。ここで引用するすべての出版物、特許および特許出願は、各々個々の出版物、特許または特許出願が参照によりここに組み込まれることが特定して個別に指示されているのと同じように、すべての目的に関してそれらの全体が参照によりここに組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【０１８９】
【図１】図１は、結合して環状ラクタムを形成することができる、３個のアミノ酸によって分離されたＧＬＰ−１内の位置の例の図式的表示である。
【図２Ａ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｂ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｃ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｄ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｅ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｆ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｇ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｈ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｉ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図３】図３は、８位にＧｌｙ置換、２２位にＡｉｂ置換、およびＣ末端にシステインとアラニンの付加を含む類似体（すなわち配列番号１８）を合成するための例示的アプローチを示す。
【図４】図４は、グルタミン酸とリシン残基の側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図５】図５は、グルタミン酸とオルニチンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図６】図６は、アスパラギン酸とリシン残基の側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図７】図７は、アスパラギン酸とオルニチンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図８】図８は、リシンとグルタミン酸残基の側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図９】図９は、ホモグルタミン酸とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図１０】図１０は、４−カルボキシ−フェニルアラニンとリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図１１】図１１は、β−ホモグルタミン酸とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図１２】図１２は、ｃｇＧＬＰ−１７、ｃｇＧＬＰ−１８、ｃｇＧＬＰ−１９またはｃｇＧＬＰ−０９Ａで処置したマウスにおける血糖値を表すグラフを示す。
【図１３】図１３は、ｃｇＧＬＰ−１９、ｃｇＧＬＰ−２０、ｃｇＧＬＰ−２３またはｃｇＧＬＰ−２４で処置したマウスにおける血糖値を表すグラフを示す。
【図１４】図１４は、ｍｇＧＬＰ−２０、ｃｇＧＬＰ−２６、ｍｇＧＬＰ−２２またはｍｇＧＬＰ−２４で処置したマウスにおける血糖値を描画したグラフを示す。
【図１５】図１５は、ｍｇＧＬＰ３２で処置したマウスにおける血糖値を表すグラフを示す。
【図１６】図１６は、ｍｇＧＬＰ−２０、ｍｇＧＬＰ−２２またはｍｇＧＬＰ−２４で処置したマウスに関して実施したひと組のＧＴＴ（ブドウ糖負荷試験）実験の間の血糖値を描画したグラフを示す。
【図１７】図１７は、ｍｇＧＬＰ−３３で処置したマウスにおける血糖値を描画したグラフを示す。
【図１８】図１８は、ｍｇＧＬＰ−３２で処置したマウスにおける血糖値を描画したグラフを示す。
【図１９】図１９は、ｍｇＧＬＰ−２０で処置したマウスにおける血糖値を描画したグラフを示す。
【図２０】図２０は、一部のｃｇＧＬＰ−３、ｃｇＧＬＰ−１、ｃｇＧＬＰ−７およびｃｇＧＬＰ−２へのＰＥＧの大きさと形状の影響を描画したグラフを示す。
【図２１】図２１は、ｃｇＧＬＰ−６、ｃｇＧＬＰ−４、ｃｇＧＬＰ−８、ｃｇＧＬＰ−５へのＰＥＧの大きさと形状の影響を描画したグラフを示す。
【図２２】図２２は、ｃｇＧＬＰ−２５、ｃｇＧＬＰ−２６、ｃｇＧＬＰ−２４、ｃｇＧＬＰ−２８、ｃｇＧＬＰ−２９へのＰＥＧの大きさと形状の影響を描画したグラフを示す。
【図２３】図２３は、配列番号２２に示すアミノ酸配列を有するＧＬＰ−１化合物およびｃｇＧＬＰ−２５、ｃｇＧＬＰ−２６、ｃｇＧＬＰ−２７、ｃｇＧＬＰ−２９のいずれかで処置したｄｂ／ｄｂマウスへのインビボでのＰＥＧの大きさと形状の影響を描画したグラフを示す。
【図１】
2009534423.tif 000023
【図２Ａ】
2009534423.tif 000024
【図２Ｂ】
2009534423.tif 000025
【図２Ｃ】
2009534423.tif 000026
【図２Ｄ】
2009534423.tif 000027
【図２Ｅ】
2009534423.tif 000028
【図２Ｆ】
2009534423.tif 000029
【図２Ｇ】
2009534423.tif 000030
【図２Ｈ】
2009534423.tif 000031
【図２Ｉ】
2009534423.tif 000032
【図３】
2009534423.tif 000033
【図４】
2009534423.tif 000034
【図５】
2009534423.tif 000035
【図６】
2009534423.tif 000036
【図７】
2009534423.tif 000037
【図８】
2009534423.tif 000038
【図９】
2009534423.tif 000039
【図１０】
2009534423.tif 000040
【図１１】
2009534423.tif 000041
【図１２】
2009534423.tif 000042
【図１３】
2009534423.tif 000043
【図１４】
2009534423.tif 000044
【図１５】
2009534423.tif 000045
【図１６】
2009534423.tif 000046
【図１７】
2009534423.tif 000047
【図１８】
2009534423.tif 000048
【図１９】
2009534423.tif 000049
【図２０】
2009534423.tif 000050
【図２１】
2009534423.tif 000051
【図２２】
2009534423.tif 000052
【図２３】
2009534423.tif 000053
【配列表】
2009534423000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成20年12月9日(2008.12.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ（配列番号５）：
Ｘａａ７−Ｇｌｙ−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｃｙｓ−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｇｌｙ−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式Ｉ、配列番号５）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ３３は、ＶａｌまたはＬｙｓであり；  
Ｘａａ３４は、ＬｙｓまたはＡｓｎであり；
Ｘａａ３６は、ＡｒｇまたはＧｌｙであり；
Ｘａａ３７は、ＧｌｙまたはＰｒｏである］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
【請求項２】
前記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号７−８のいずれかのアミノ酸配列を有し、該保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２３、またはＸａａ３８−Ｘａａ４５のいずれかではないことを条件とする、請求項１に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項３】
前記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号７−８のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項１に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項４】
式ＩＩ（配列番号９）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩ、配列番号９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓである］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
【請求項５】
前記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号１１−１２のいずれかのアミノ酸配列を有し、該保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、またはＸａａ３８−Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件とする、請求項４に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項６】
前記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号１１−１２のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項４に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項７】
式ＩＩＩ（配列番号１３）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｇｌｙ−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩＩ、配列番号１３）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、２−アミノイソ酪酸、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、α−α−二置換アミノ酸または２−アミノアジピン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３８位のＸａａは、Ｃｙｓ、Ｇｌｙであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
３８、３９、４０または４１位のアミノ酸が除かれているとき、そのアミノ酸の下流の各々のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
【請求項８】
前記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号１６−２８のいずれかのアミノ酸配列を有し、該保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２２、またはＸａａ３８−Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件とする、請求項７に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項９】
前記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号１６−２８のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項７に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１０】
式ＩＶ（配列番号２９）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＶ、配列番号２９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３８位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｃｙｓであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
Ｘａａ１８、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２２、Ｘａａ２３、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、Ｘａａ２８、Ｘａａ２９およびＸａａ３０から選択される２個のアミノ酸は、結合して環を形成しており、および該環を形成する２個のアミノ酸は、３、４または５個のアミノ酸によって分離されている］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
【請求項１１】
前記環を形成する２個のアミノ酸が３個のアミノ酸によって分離されている、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１２】
前記環を形成する２個のアミノ酸が４個のアミノ酸によって分離されている、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１３】
前記環を形成する２個のアミノ酸が５個のアミノ酸によって分離されている、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１４】
Ｘａａ１８が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２２が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ１８とＸａａ２２が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１５】
Ｘａａ１９が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２３が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ１９とＸａａ２３が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１６】
Ｘａａ２０が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２４が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２０とＸａａ２４が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１７】
Ｘａａ２１が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２５が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２１とＸａａ２５が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１８】
Ｘａａ２２が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２６が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２２とＸａａ２６が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項１９】
Ｘａａ２３が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２７が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２３とＸａａ２７が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２０】
Ｘａａ２４が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２８が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２４とＸａａ２８が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２１】
Ｘａａ２５が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２９が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２５とＸａａ２９が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２２】
Ｘａａ２６が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ３０が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２６とＸａａ３０が結合して前記環を形成している、
請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２３】
前記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号３０−２４６のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２４】
前記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号３０−２４６のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２５】
Ｒ１が、カルボキシル基、アミン、エステルまたは置換アミンである、請求項１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２６】
式ＶＩ：
Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｈｉｓ７−Ａｌａ８−Ｇｌｕ９−Ｇｌｙ１０−Ｔｈｒ１１−Ｐｈｅ１２−Ｔｈｒ１３−Ｓｅｒ１４−Ａｓｐ１５−Ｖａｌ１６−Ｓｅｒ１７−Ｓｅｒ１８−Ｔｙｒ１９−Ｌｅｕ２０−Ｇｌｕ２１−Ｇｌｙ２２−Ｇｌｎ２３−Ａｌａ２４−Ａｌａ２５−Ｌｙｓ２６−Ｇｌｕ２７−Ｐｈｅ２８−Ｉｌｅ２９−Ａｌａ３０−Ｔｒｐ３１−Ｌｅｕ３２−Ｖａｌ３３−Ｌｙｓ３４−Ｇｌｙ３５−Ａｒｇ３６−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＶＩ、配列番号２７６）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
４位のＸａａは、Ｍｅｔであるかまたは除かれており；
５位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ｈｉｓであるかまたは除かれており；
６位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＴｒｐまたはＰｈｅであり；
５位のアミノ酸が除かれているとき、４位のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
に示すアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
【請求項２７】
前記ＧＬＰ−１類似体が、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号２４７−２６７のいずれかのアミノ酸配列を有し、該保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ４、Ｘａａ５またはＸａａ６ではないことを条件とする、請求項２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２８】
前記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号２４７−２６７のいずれかのアミノ酸配列を有する、請求項２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項２９】
代謝性疾患を有する被験体を治療するための組成物であって、請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を含み、該代謝性疾患が、糖尿病、肥満および代謝症候群の群から選択される、組成物。
【請求項３０】
請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を含む、該被験体においてインスリン発現を高めるための組成物。
【請求項３１】
請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を含む、該被験体においてインスリン分泌を促進するための組成物。
【請求項３２】
水溶性ポリマーで共有結合によって改変されている、請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項３３】
前記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコール、モノメトキシ−ポリエチレングリコール、デキストラン、セルロース、ポリ−（Ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオールおよびポリビニルアルコールから成る群より選択される、請求項３２に記載のポリペプチド。
【請求項３４】
前記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコールおよびデキストランから成る群より選択される、請求項３２に記載のポリペプチド。
【請求項３５】
前記ＧＬＰ−１類似体がペグ化されている、請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
【請求項３６】
医薬的に許容される担体および請求項１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を含有する医薬組成物。
【請求項３７】
代謝性疾患を有する被験体を治療するための請求項３６に記載の医薬組成物であって、該代謝性疾患が、糖尿病、肥満および代謝症候群の群から選択される、医薬組成物。
【請求項３８】
被験体においてインスリン発現を高めるための請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
被験体においてインスリン分泌を促進するための請求項３６に記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本願は、２００６年４月２０日に出願された米国仮特許出願第６０／７９３，７０７号の利益を主張し、これは、全ての目的において本明細書中の全体にわたって参考として明白に援用される。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）と関連ペプチド、グルカゴンは、プログルカゴンの示差的なプロセシングによって生産され、拮抗する生物活性を有する。プログルカゴン自体は、膵のα細胞および、主として遠位小腸と結腸に位置する、腸内分泌性Ｌ細胞において産生される。膵において、グルカゴンはプログルカゴンから選択的に切断される。腸では、これに対し、プログルカゴンはＧＬＰ−１とグルカゴン様ペプチド２（ＧＬＰ−２）を形成するようにプロセシングされ、それらはそれぞれ、プログルカゴンのアミノ酸残基７８−１０７と１２６−１５８に対応する（たとえば非特許文献１および非特許文献２参照）。慣例により、ＧＬＰ−１のアミノ酸の番号付けは、プログルカゴンの切断から形成されるＧＬＰ−１（１−３７）に基づく。生物活性形態は、このペプチドのさらなるプロセシングから生成され、ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨおよびＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２を生じる。これらのプロセシングされたペプチドの最初のアミノ酸はＨｉｓ７である。ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨ（または単にＧＬＰ−（７−３７））とＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２はどちらも同じ活性を有する。便宜上、「ＧＬＰ−１」という用語を、これらの形態の両方を指すために使用する。
【０００３】
グルカゴンは、低血糖に応答して膵のα細胞から分泌され、グルカゴンの主要標的器官は肝である。グルカゴンは、グリコーゲンの分解を刺激し、グリコーゲンの生合成を阻害する。また脂肪酸の合成も阻害するが、糖新生を促進する。これらの作用の正味の結果は、肝からのグルコースの放出を有意に上昇させることである。ＧＬＰ−１は、これに対し、グルカゴン分泌を低下させるが、その一方で、腸管による栄養素の吸収に応答してインスリンの分泌、グルコースの取込みおよびサイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）形成を刺激する。様々な臨床データがこれらの作用の証拠を提供する。コントロール不良の２型糖尿病患者におけるＧＬＰ−１の投与は、たとえば、患者の空腹時血糖値を正常化した（たとえば非特許文献３参照）。
【０００４】
ＧＬＰ−１は多くの他の重要な活性を有する。たとえばＧＬＰ−１はまた、胃の運動性および胃液分泌を抑制する（たとえば非特許文献４参照）。時として回腸ブレーキ作用と称されるこの作用は、栄養素のアベイラビリティに遅延期を生じさせ、その結果急速なインスリン応答の必要性を有意に低下させる。
【０００５】
試験はまた、ＧＬＰ−１が細胞分化と複製を促進することができ、それが次に、膵島細胞の保存およびβ細胞量の増加を助けることを示唆する（たとえば非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７；および非特許文献８参照）。また、ＧＬＰ−１が満腹感を高め、食物摂取を低下させ得ることを示唆する証拠もある（たとえば非特許文献９；非特許文献１０；非特許文献１１参照）。
【０００６】
他の研究は、ＧＬＰ−１が、ＧＬＵＴ−１輸送体、インスリン受容体およびヘキソキナーゼ−１を含む、β細胞特異的遺伝子発現を誘導することを指示する（たとえば非特許文献１２参照）。そのような誘導は、しばしば加齢に関連するグルコース不耐性を逆転させ得る。
【０００７】
ＧＬＰ−１は代謝ホメオスタシスを調節する上で鍵となる役割を果たすので、糖尿病、肥満および代謝症候群を含む様々な代謝性疾患を治療するための魅力的な標的である。糖尿病のための現在の治療は、インスリン注射、およびスルホニル尿素、メトホルミンおよびＴＺＤの投与を含む。これらのアプローチには、しかしながら、重要な欠点がある。たとえばインスリン注射は、複雑な投薬上の配慮を必要とし、スルホニル尿素による治療はしばしば経時的に無効になり、メトホルミンは低血糖を誘導することがあり、ＴＺＤは体重増加や浮腫などの副作用を有する。ＧＬＰ−１治療の潜在的利点は、１）インスリン分泌が高血糖に依存することによる高い安全性、２）結果として過度のグルコース産生を抑制する、グルカゴン分泌の抑制、および３）結果として栄養素の吸収を遅延させ、急激なグルコース上昇を防ぐ、胃排出の緩慢化を含む。
【０００８】
ＧＬＰ−１による有効な治療の重要な障害は、しかしながら、典型的にはわずか数分しかない、このペプチドの非常に短い半減期である（たとえば非特許文献１３参照）。この分子の半減期を延長することを目標として様々な類似体が開発されてきた。これらの一部は、しかし、嘔吐および吐気を含む、有意の消化器系副作用を有する（たとえば非特許文献１４参照）。
【非特許文献１】ＩｒｗｉｎとＷｏｎｇ，１９９５，Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．９：２６７−２７７
【非特許文献２】Ｂｅｌｌら、１９８３，Ｎａｔｕｒｅ  ３０４：３６８−３７１
【非特許文献３】Ｇｕｔｎｉａｋら、１９９２，Ｎｅｗ  Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２６：１３１６−１３２２
【非特許文献４】Ｔｏｌｅｓｓａ，１９９８，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０２：７６４−７７４
【非特許文献５】Ａｎｄｒｅａｓｅｎら、１９９４，Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ  ５５：２２１−２２８
【非特許文献６】Ｗａｎｇら、１９９７，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９９：２８８３−２８８９
【非特許文献７】Ｍｏｊｓｏｖ，１９９２，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐ．Ｐｒｏｔ．Ｒｅｓ．４０：３３３−３４３
【非特許文献８】Ｘｕら、１９９９，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ４８：２２７０−２２７６
【非特許文献９】Ｔｏｆｔ−Ｎｉｅｌｓｅｎら、１９９９，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ  ２２：１１３７−１１４３
【非特許文献１０】Ｆｌｉｎｔら、１９９８，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０１：５１５−５２０
【非特許文献１１】Ｇｕｔｓｗｉｌｌｅｒら、１９９９  Ｇｕｔ  ４４：８１−８６
【非特許文献１２】ＰｅｒｆｅｔｔｉとＭｅｒｋｅｌ，２０００，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１４３：７１７−７２５
【非特許文献１３】Ｈｏｌｓｔ，１９９４，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １０７：１８４８−１８５５
【非特許文献１４】Ａｇｅｒｓｏら、２００２，Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ  ４５：１９５−２０２
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
従って、糖尿病、肥満、過敏性腸症候群および代謝症候群などの様々な代謝性疾患の治療における使用のための、ＧＬＰ−１型活性を有する改善された分子への必要性が現在も存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
（要旨）
ＧＬＰ−１類似体を含み、ＧＬＰ−１の活性（たとえばインスリン分泌刺激活性）を有するＧＬＰ−１化合物をここで開示する。その組成物の有効量を投与することによって様々な疾患を治療するための方法も提供する。そのような方法は、たとえば糖尿病、耐糖能異常、インスリン抵抗性、様々な脂質障害、肥満、心臓血管疾患および骨障害を治療するために使用できる。
【００１１】
ここで提供するＧＬＰ−１化合物の一部は、たとえば式Ｉ（配列番号５）：
Ｘａａ７−Ｇｌｙ−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｃｙｓ−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｇｌｙ−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式Ｉ、配列番号５）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ３３は、ＶａｌまたはＬｙｓであり；  
Ｘａａ３４は、ＬｙｓまたはＡｓｎであり；
Ｘａａ３６は、ＡｒｇまたはＧｌｙであり；
Ｘａａ３７は、ＧｌｙまたはＰｒｏである］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含み、前記化合物はＧＬＰ−１活性を有する。特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号７または８のアミノ酸配列を有し、保存的アミノ酸置換は、アミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２３、またはＸａａ３８−Ｘａａ４５のいずれかではないことを条件とする。もう１つの特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、配列番号７または８のいずれかのアミノ酸配列を有する。
【００１２】
ここで提供する他のＧＬＰ−１化合物は、式ＩＩ（配列番号９）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩ、配列番号９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、Ａｉｂ（２−アミノイソ酪酸）またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓである］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含み、前記化合物はＧＬＰ−１活性を有する。特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号１１または１２のアミノ酸配列を有し、保存的アミノ酸置換は、アミノ酸Ｘａａ８、またはＸａａ３８−Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件とする。もう１つの特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、配列番号１１または１２のアミノ酸配列を有する。
【００１３】
ここで提供するさらなる他のＧＬＰ−１化合物は、式ＩＩＩ（配列番号１３）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｇｌｙ−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩＩ、配列番号１３）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、Ａｉｂ（２−アミノイソ酪酸）またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ａｉｂ（２−アミノイソ酪酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、α−α−二置換アミノ酸またはＡａｄ（２−アミノアジピン酸）であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３８位のＸａａは、Ｃｙｓ、Ｇｌｙであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
３８、３９、４０または４１位のアミノ酸が除かれているとき、そのアミノ酸の下流の各々のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含み、前記化合物はＧＬＰ−１活性を有する。特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号１６−２８のいずれかのアミノ酸配列を有し、保存的アミノ酸置換は、アミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２２、またはＸａａ３８−Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件とする。もう１つの特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、配列番号１６−２８のいずれかのアミノ酸配列を有する。
【００１４】
ここで提供する一部のＧＬＰ−１化合物は、式ＩＶ（配列番号２９）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＶ、配列番号２９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３８位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｃｙｓであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
Ｘａａ１８、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２２、Ｘａａ２３、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、Ｘａａ２８、Ｘａａ２９およびＸａａ３０から選択される２個のアミノ酸は、結合して環を形成しており、および環を形成する２個のアミノ酸は、０、１、２、３、４または５個のアミノ酸によって分離されている］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含み、前記化合物はＧＬＰ−１活性を有する。特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号３０−２４６のいずれかのアミノ酸配列を有する。もう１つの特定態様では、ＧＬＰ−１類似体は、配列番号３０−２４６のいずれかのアミノ酸配列を有する。
【００１５】
さらにもう１つの態様では、ここで提供するＧＬＰ−１化合物は、式ＶＩ：
Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｈｉｓ７−Ａｌａ８−Ｇｌｕ９−Ｇｌｙ１０−Ｔｈｒ１１−Ｐｈｅ１２−Ｔｈｒ１３−Ｓｅｒ１４−Ａｓｐ１５−Ｖａｌ１６−Ｓｅｒ１７−Ｓｅｒ１８−Ｔｙｒ１９−Ｌｅｕ２０−Ｇｌｕ２１−Ｇｌｙ２２−Ｇｌｎ２３−Ａｌａ２４−Ａｌａ２５−Ｌｙｓ２６−Ｇｌｕ２７−Ｐｈｅ２８−Ｉｌｅ２９−Ａｌａ３０−Ｔｒｐ３１−Ｌｅｕ３２−Ｖａｌ３３−Ｌｙｓ３４−Ｇｌｙ３５−Ａｒｇ３６−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＶＩ、配列番号２７６）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
４位のＸａａは、Ｍｅｔであるかまたは除かれており；
５位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ｈｉｓであるかまたは除かれており；
６位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＴｒｐまたはＰｈｅであり；
５位のアミノ酸が除かれているとき、４位のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
に示すアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含み、前記化合物はＧＬＰ−１活性を有する。
【００１６】
また、医薬的に許容される担体およびここで述べるＧＬＰ−１化合物の有効量を含有する医薬組成物も提供する。
【００１７】
加えて、ここで提供するＧＬＰ−１化合物またはここで提供するＧＬＰ−１化合物を含有する医薬組成物の有効量を被験体に投与することを含む、糖尿病、肥満および代謝症候群の群から選択される代謝性疾患を有する被験体を治療するための方法を提供する。
【００１８】
加えて、ここで提供するＧＬＰ−１化合物またはここで提供するＧＬＰ−１化合物を含有する医薬組成物の有効量を被験体に投与することを含む、被験体においてインスリン発現を高めるための方法および被験体においてインスリン分泌を促進するための方法を提供する。
【００１９】
ある態様では、ここで提供するＧＬＰ−１化合物は、ポリエチレングリコール、モノメトキシ−ポリエチレングリコール、デキストラン、セルロース、ポリ−（Ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオールまたはポリビニルアルコールなどの、水溶性ポリマーで共有結合的に修飾され得る。
【００２０】
具体的な実施形態は、一部の実施形態の以下のより詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになる。
【００２１】
したがって、本発明は、以下の項目を提供する
（項目１）  式Ｉ（配列番号５）：
Ｘａａ７−Ｇｌｙ−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｃｙｓ−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｇｌｙ−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式Ｉ、配列番号５）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ３３は、ＶａｌまたはＬｙｓであり；  
Ｘａａ３４は、ＬｙｓまたはＡｓｎであり；
Ｘａａ３６は、ＡｒｇまたはＧｌｙであり；
Ｘａａ３７は、ＧｌｙまたはＰｒｏである］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
（項目２）  上記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号７−８のいずれかのアミノ酸配列を有し、この保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２３、またはＸａａ３８−Ｘａａ４５のいずれかではないことを条件とする、項目１に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目３）  上記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号７−８のいずれかのアミノ酸配列を有する、項目１に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目４）  式ＩＩ（配列番号９）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩ、配列番号９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓである］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
（項目５）  上記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号１１−１２のいずれかのアミノ酸配列を有し、この保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、またはＸａａ３８−Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件とする、項目４に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目６）  上記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号１１−１２のいずれかのアミノ酸配列を有する、項目４に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目７）  式ＩＩＩ（配列番号１３）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｇｌｙ−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩＩ、配列番号１３）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、２−アミノイソ酪酸、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、α−α−二置換アミノ酸または２−アミノアジピン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３８位のＸａａは、Ｃｙｓ、Ｇｌｙであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
３８、３９、４０または４１位のアミノ酸が除かれているとき、そのアミノ酸の下流の各々のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
（項目８）  上記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号１６−２８のいずれかのアミノ酸配列を有し、この保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２２、またはＸａａ３８−Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件とする、項目７に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目９）  上記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号１６−２８のいずれかのアミノ酸配列を有する、項目７に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目１０）  式ＩＶ（配列番号２９）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＶ、配列番号２９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３８位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｃｙｓであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
Ｘａａ１８、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２２、Ｘａａ２３、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、Ｘａａ２８、Ｘａａ２９およびＸａａ３０から選択される２個のアミノ酸は、結合して環を形成しており、およびこの環を形成する２個のアミノ酸は、３、４または５個のアミノ酸によって分離されている］
のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
（項目１１）  上記環を形成する２個のアミノ酸が３個のアミノ酸によって分離されている、項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目１２）  上記環を形成する２個のアミノ酸が４個のアミノ酸によって分離されている、項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目１３）  上記環を形成する２個のアミノ酸が５個のアミノ酸によって分離されている、項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目１４）  Ｘａａ１８が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２２が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ１８とＸａａ２２が結合して上記環を形成している、
項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目１５）  Ｘａａ１９が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２３が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ１９とＸａａ２３が結合して上記環を形成している、
項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目１６）  Ｘａａ２０が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２４が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２０とＸａａ２４が結合して上記環を形成している、
項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目１７）  Ｘａａ２１が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２５が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２１とＸａａ２５が結合して上記環を形成している、
項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目１８）  Ｘａａ２２が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２６が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２２とＸａａ２６が結合して上記環を形成している、
項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目１９）  Ｘａａ２３が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２７が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２３とＸａａ２７が結合して上記環を形成している、
項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目２０）  Ｘａａ２４が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２８が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２４とＸａａ２８が結合して上記環を形成している、
項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目２１）  Ｘａａ２５が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ２９が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２５とＸａａ２９が結合して上記環を形成している、
項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目２２）  Ｘａａ２６が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、
Ｘａａ３０が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり、および
アミノ酸Ｘａａ２６とＸａａ３０が結合して上記環を形成している、
項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目２３）  上記ＧＬＰ−１類似体が、５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号３０−２４６のいずれかのアミノ酸配列を有する、項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目２４）  上記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号３０−２４６のいずれかのアミノ酸配列を有する、項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目２５）  Ｒ１が、カルボキシル基、アミン、エステルまたは置換アミンである、項目１０に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目２６）  式ＶＩ：
Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｈｉｓ７−Ａｌａ８−Ｇｌｕ９−Ｇｌｙ１０−Ｔｈｒ１１−Ｐｈｅ１２−Ｔｈｒ１３−Ｓｅｒ１４−Ａｓｐ１５−Ｖａｌ１６−Ｓｅｒ１７−Ｓｅｒ１８−Ｔｙｒ１９−Ｌｅｕ２０−Ｇｌｕ２１−Ｇｌｙ２２−Ｇｌｎ２３−Ａｌａ２４−Ａｌａ２５−Ｌｙｓ２６−Ｇｌｕ２７−Ｐｈｅ２８−Ｉｌｅ２９−Ａｌａ３０−Ｔｒｐ３１−Ｌｅｕ３２−Ｖａｌ３３−Ｌｙｓ３４−Ｇｌｙ３５−Ａｒｇ３６−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＶＩ、配列番号２７６）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
４位のＸａａは、Ｍｅｔであるかまたは除かれており；
５位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ｈｉｓであるかまたは除かれており；
６位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＴｒｐまたはＰｈｅであり；
５位のアミノ酸が除かれているとき、４位のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
に示すアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１活性を有するＧＬＰ−１化合物。
（項目２７）  上記ＧＬＰ−１類似体が、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を含む配列番号２４７−２６７のいずれかのアミノ酸配列を有し、この保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ４、Ｘａａ５またはＸａａ６ではないことを条件とする、項目２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目２８）  上記ＧＬＰ−１類似体が、配列番号２４７−２６７のいずれかのアミノ酸配列を有する、項目２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目２９）  代謝性疾患を有する被験体を治療するための方法であって、項目１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を被験体に投与することを含み、この代謝性疾患が、糖尿病、肥満および代謝症候群の群から選択される、方法。
（項目３０）  項目１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を被験体に投与することを含む、この被験体においてインスリン発現を高めるための方法。
（項目３１）  項目１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を被験体に投与することを含む、この被験体においてインスリン分泌を促進するための方法。
（項目３２）  水溶性ポリマーで共有結合によって改変されている、項目１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目３３）  上記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコール、モノメトキシ−ポリエチレングリコール、デキストラン、セルロース、ポリ−（Ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオールおよびポリビニルアルコールから成る群より選択される、項目３２に記載のポリペプチド。
（項目３４）  上記水溶性ポリマーが、ポリエチレングリコールおよびデキストランから成る群より選択される、項目３２に記載のポリペプチド。
（項目３５）  上記ＧＬＰ−１類似体がペグ化されている、項目１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物。
（項目３６）  医薬的に許容される担体および項目１、４、７、１０または２６に記載のＧＬＰ−１化合物の有効量を含有する医薬組成物。
（項目３７）  代謝性疾患を有する被験体を治療するための方法であって、項目３６に記載の医薬組成物の有効量をこの被験体に投与することを含み、この代謝性疾患が、糖尿病、肥満および代謝症候群の群から選択される、方法。
（項目３８）  項目３６に記載の医薬組成物の有効量を被験体に投与することを含む、この被験体においてインスリン発現を高めるための方法。
（項目３９）  項目３６に記載の医薬組成物の有効量を被験体に投与することを含む、この被験体においてインスリン分泌を促進するための方法。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
Ｉ．定義
本明細書および付属の特許請求の範囲において使用するとき、単数形態「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに異なる指示を与えない限り、複数の言及を包含する。
【００２３】
異なる定義がない限り、ここで使用するすべての技術および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味を有する。以下の参考文献は、本発明において使用する用語の多くの一般的定義を当業者に提供する：Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎら、ＤＩＣＴＩＯＮＡＲＹ  ＯＦ  ＭＩＣＲＯＢＩＯＬＯＧＹ  ＡＮＤ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ（第２版、１９９４）；ＴＨＥ  ＣＡＭＢＲＩＤＧＥ  ＤＩＣＴＩＯＮＡＲＹ  ＯＦ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ  （Ｗａｌｋｅｒら、１９８８）；ＴＨＥ  ＧＬＯＳＳＡＲＹ  ＯＦ  ＧＥＮＥＴＩＣＳ，第５版、Ｒ．Ｒｉｅｇｅｒら（編集），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ（１９９１）；およびＨａｌｅ  ＆  Ｍａｒｈａｍ，ＴＨＥ  ＨＡＲＰＥＲ  ＣＯＬＬＩＮＳ  ＤＩＣＴＩＯＮＡＲＹ  ＯＦ  ＢＩＯＬＯＧＹ（１９９１）。
【００２４】
ここで使用するとき、以下の用語は、異なる記載がない限りそれらに帰せられる意味を有する。
【００２５】
「インスリン分泌刺激活性」は、グルコース依存的にインスリンの合成、放出または分泌を上昇させる能力を指す。インスリン分泌刺激作用は、インスリン陽性細胞の数の増加および／または所与の期間に合成されるまたは既存のインスリン陽性細胞から放出されるインスリンの量の増加によるものを含むが、これらに限定されない、多くの異なる機構のいずれかから生じ得る。インスリン分泌刺激活性は、ＧＬＰ−１受容体結合活性または受容体活性化を測定するインビボおよびインビトロ実験などの（たとえば欧州特許第６１９，３２２号および米国特許第５，１２０，７１２号に述べられているような膵島細胞またはインスリノーマ細胞を使用するアッセイ）、当技術分野において公知の方法を用いて検定できる。ヒトでは、インスリン分泌刺激活性は、インスリンレベルまたはＣペプチドレベルを検査することによって測定できる。
【００２６】
「核酸」、「ポリヌクレオチド」および「オリゴヌクレオチド」という用語は、リボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドを含むがこれらに限定されない、何らかの長さのヌクレオチドの重合形態を含むためにここで使用される。
【００２７】
「ポリペプチド」および「タンパク質」は、ここでは交換可能に使用され、ペプチド結合を通して連結されたアミノ酸の分子鎖を含む。これらの用語は生成物の特定の長さを表わさない。それゆえ、「ペプチド」および「オリゴペプチド」はポリペプチドの定義に包含される。これらの用語は、ポリペプチドの翻訳後修飾、たとえばグリコシル化、アセチル化、リン酸化等を含む。加えて、タンパク質フラグメント、類似体、突然変異または変異タンパク質、融合タンパク質等はポリペプチドの意味に包含される。これらの用語はまた、１またはそれ以上のアミノ酸類似体または非天然アミノ酸が含まれる分子を包含する。
【００２８】
２またはそれ以上の核酸またはポリペプチドに関して「同一」または「同一性」パーセント」という用語は、たとえば以下に述べられているような配列比較アルゴリズムを用いて、または目視検査によって測定されるような、比較し、最大対応性になるように整列したとき、同じであるか、または同じであるヌクレオチドまたはアミノ酸残基の特定パーセンテージを有する、２またはそれ以上の配列またはサブ配列を指す。
【００２９】
ここで使用する「実質的に同一」という語句は、たとえば以下に述べられているような配列比較アルゴリズムを用いて、または目視検査によって測定されるような、比較し、最大対応性になるように整列したとき、少なくとも７５％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上のヌクレオチドまたはアミノ酸残基同一性を有する２またはそれ以上の配列またはサブ配列を指す。最も好ましくは、配列は、たとえばヌクレオチドのコード領域のような、比較される配列の全長にわたって実質的に同一である。
【００３０】
配列比較のために、典型的には１つの配列を参照配列として使用し、試験配列をそれと比較する。配列比較アルゴリズムを使用するときは、試験配列と参照配列をコンピュータに入力し、必要に応じて配列座標を指定し、配列アルゴリズムプログラムのパラメータを指定する。配列比較アルゴリズムが、その後、指定したプログラムパラメータに基づき、参照配列と比較した試験配列についての配列同一性パーセントを算定する。
【００３１】
比較のための配列の最適アラインメントは、たとえばＳｍｉｔｈとＷａｔｅｒｍａｎ，１９８１，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２によるローカルホモロジーアルゴリズムによって、ＮｅｅｄｌｅｍａｎとＷｕｎｓｃｈ，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３のホモロジーアラインメントアルゴリズムによって、ＰｅａｒｓｏｎとＬｉｐｍａｎ，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：２４４４の類似性についての検索方法によって、これらのアルゴリズムのコンピュータでの実施によって（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ，  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．のＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡおよびＴＦＡＳＴＡ）、または目視検査によって［一般に、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，（Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．ら編集）Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８７−１９９９，補遺４６  （１９９９年４月）などの補遺を含む）参照］実施できる。配列比較を行うためのこれらのプログラムの使用は、典型的には各プログラムについて特異的なデフォルトパラメータを用いて実施される。
【００３２】
配列同一性および配列類似性パーセントを決定するために適切なアルゴリズムのもう１つの例は、Ａｌｔｓｃｈｕｌら、１９９０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０に述べられている、ＢＬＡＳＴアルゴリズムである。ＢＬＡＳＴ分析を実施するためのソフトウエアは、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎを通して公的に入手可能である。このアルゴリズムは、データベース配列中の同じ長さのワードとアラインメントしたときある正の値の閾値スコアＴにマッチするかまたはそれを満たす、問い合わせ配列における長さＷの短いワードを同定することにより、高スコア配列対（ＨＳＰ）を最初に同定することを含む。Ｔは、近接ワードスコア閾値と称される（Ａｌｔｓｃｈｕｌら、前出）。これらの最初の近接ワードヒットは、それらを含むより長いＨＳＰを見出するための検索を開始するための種として機能する。次いでこれらのワードヒットは、累積アラインメントスコアが増加し得る限り、各々の配列に沿って両方向に拡張される。累積スコアは、ヌクレオチド配列については、パラメータＭ（マッチする残基の対に対する報酬スコア；常に＞０）およびパラメータＮ（ミスマッチ残基に対するペナルティースコア；常に＜０）を用いて算定される。アミノ酸配列に関しては、スコアリング行列を使用して累積スコアを算定する。各方向におけるワードヒットの拡張は、以下の場合に停止される：累積アライメントスコアが、その最大達成値から量Ｘだけ低下する場合；１またはそれ以上の負のスコアリング残基アライメントの累積に起因して、累積スコアが０またはそれ以下になる場合；またはいずれかの配列の末端に到達した場合。核酸またはポリペプチドが本発明の範囲内であるかどうかを同定するには、ＢＬＡＳＴプログラムのデフォルトパラメータが適切である。ＢＬＡＳＴＮプログラム（ヌクレオチド配列に関して）は、ワード長（Ｗ）１１、期待値（Ｅ）１０、Ｍ＝５、Ｎ＝−４をデフォルトとし、両方の鎖の比較を使用する。アミノ酸配列に関しては、ＢＬＡＳＴＰプログラムは、ワード長（Ｗ）３、期待値（Ｅ）１０をデフォルトとし、ＢＬＯＳＵＭ６２スコアリング行列を使用する。ＴＢＬＡＴＮプログラム（ヌクレオチド配列に対してタンパク質配列を使用する）は、ワード長（Ｗ）３、期待値（Ｅ）１０をデフォルトとして、そしてＢＬＯＳＵＭ６２スコアリング行列を使用する（ＨｅｎｉｋｏｆｆとＨｅｎｉｋｏｆｆ，１９８９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：１０９１５参照）。
【００３３】
配列同一性パーセントを算定することに加えて、ＢＬＡＳＴアルゴリズムはまた、２つの配列間の類似性の統計的分析を実施する（たとえばＫａｒｌｉｎとＡｌｔｓｃｈｕｌ，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：５８７３−５７８７参照）。ＢＬＡＳＴアルゴリズムによって提供される類似性の１つの測定は、２つのヌクレオチド配列またはアミノ酸配列の間の一致が偶然に起こる確率の指標を提供する、最小和確率（ｓｍａｌｌｅｓｔ  ｓｕｍ  ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ）（Ｐ（Ｎ））である。たとえば、参照核酸に対する試験核酸の比較における最小和確率が、約０．１未満、より好ましくは約０．０１未満、最も好ましくは約０．００１未満である場合、核酸は参照配列に対して類似するとみなされる。
【００３４】
ポリペプチドは、典型的には、たとえば２つのポリペプチドが保存的置換によってのみ異なる場合、２番目のポリペプチドと実質的に同一である。タンパク質について述べるとき「保存的置換」は、タンパク質の活性を実質的に変化させない、タンパク質のアミノ酸組成における変化を指す。それゆえ、特定アミノ酸配列の「保存的に修飾された変化」は、タンパク質活性にとって重要でないアミノ酸のアミノ酸置換、または重要なアミノ酸の置換であっても活性を実質的に変化させない、類似の性質（たとえば酸性、塩基性、正または負に荷電、極性または非極性等）を有する他のアミノ酸によるアミノ酸の置換を指す。機能的に類似のアミノ酸を示す保存的置換表は、ここで説明されており、また当技術分野において周知である（たとえばＣｒｅｉｇｈｔｏｎ，１９８４，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ参照）。加えて、タンパク質の活性を実質的に変化させずにコード配列内の１個のアミノ酸または小さなパーセンテージのアミノ酸を変化させる、付加するまたは欠失させる個々の置換、欠失または付加も、「保存的に修飾された変化」である。
【００３５】
ここで使用するとき、２０個の従来アミノ酸およびそれらの１文字および３文字略記は慣例的用法に従う。いかなる目的に関しても参照によりここに組み込まれる、ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ−−Ａ  ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ，第２版（Ｅ．Ｓ．ＧｏｌｕｂとＤ．Ｒ．Ｇｒｅｎ編集），Ｓｉｎａｕｅｒ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ：Ｓｕｎｄｅｒｌａｎｄ，ＭＡ，１９９１参照。２０個の従来アミノ酸の立体異性体（たとえばＤ−アミノ酸）；α，α−二置換アミノ酸などの非天然アミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸、乳酸および他の非従来アミノ酸も、ここで提供するポリペプチドのための適切な成分であり得る。非従来アミノ酸の例は、４−ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタメート、ε−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルリシン、ε−Ｎ−アセチルリシン、Ｏ−ホスホセリン、Ｎ−アセチルセリン、Ｎ−ホルミルメチオニン、３−メチルヒスチジン、５−ヒドロキシリシン、σ−Ｎ−メチルアルギニン、および他の類似アミノ酸およびイミノ酸（たとえば４−ヒドロキシプロリン）を含む。ここで言及する一部のアミノ酸類似体は以下のように略記される：
ｂＡｌａは、β−アミノプロピオン酸である；
Ｊは、Ａａｄ（２−アミノアジピン酸；ホモグルタミン酸とも称される）である；
Ｚは、Ａｉｂ（２−アミノイソ酪酸）である；
Ｏは、オルニチンである；
Ｃｐａは、４−カルボキシ−フェニルアラニンである；および
Ｂは、βグルタミン酸である。
アミノ酸略記がスラッシュ（すなわち「／」によって分離されるとき、これは、スラッシュによって分離されたアミノ酸のいずれか１個が指示された位置で生じ得ることを意味する。たとえばＫ／Ｏ／Ｃは、リシン、オルニチンまたはシステインのいずれか１個が指示された位置で生じ得ることを意味する。
【００３６】
ここで使用するα，α−二置換アミノ酸という用語は、当技術分野におけるその通常の意味を有し、たとえばα−メチル−ロイシン、α−メチル−フェニルアラニン、α−メチル−トリプトファン、４−アミノ−１−ピペリジン、２−アミノ−２，２−ジフェニル酢酸を含む。
【００３７】
ここで使用するポリペプチド表記法では、標準用法および慣例に従って、左側方向はアミノ末端方向であり、右側方向はカルボキシル末端方向である。ＧＬＰ−１化合物に関して使用するとき「下流」という用語は、言及される位置に対してポリペプチドのカルボキシル末端側、すなわち言及される位置の右側にある位置を意味する。ＧＬＰ−１化合物に関して使用するとき「上流」という用語は、言及される位置に対してポリペプチドのアミノ末端側、すなわち言及される位置の左側にある位置を意味する。推奨されるアミノ酸およびペプチドに関するＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ命名法および記号体系（ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｓｙｍｂｏｌｉｓｍ  ｆｏｒ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ）は、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８４，２１９，３４５−３７３；Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８４，１３８，９−３７；１９８５，１５２，１；１９９３，２１３，２；Ｉｎｔｅｒｎａｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔ．Ｒｅｓ．，１９８４，２４，ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｐ  ８４；Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９８５，２６０，１４−４２；Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．，１９８４，５６，５９５−６２４；Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，１９８５，１６，３８７−４１０；Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ，第２版、Ｐｏｒｔｌａｎｄ  Ｐｒｅｓｓ，  １９９２，ｐ．３９−６９に公表されている。
【００３８】
天然に生じる残基は、共通側鎖特性に基づくクラスに分類され得る：
１）疎水性：ノルロイシン（Ｎｏｒ）、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
５）鎖の方向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；および
６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【００３９】
保存的アミノ酸置換は、これらのクラスの１つのメンバーと同じクラスのもう１つ別のメンバーとの交換を含み得る。保存的アミノ酸置換は、典型的には生物系における合成によってではなく化学的ペプチド合成によって組み込まれる、非天然に生じるアミノ酸残基を含み得る。これらは、ペプチドミメティックおよびアミノ酸部分の他の逆形態または反転形態を含む。
【００４０】
非保存的置換は、これらのクラスの１つのメンバーともう１つ別のクラスのメンバーとの交換を含み得る。そのような置換された残基は、非ヒト抗体と相同なヒト抗体の領域に、または分子の非相同領域に導入され得る。
【００４１】
そのような変更を行う場合、ある実施形態によれば、アミノ酸のハイドロパシー指数（ｈｙｄｒｏｐａｔｈｉｃ  ｉｎｄｅｘ）を考慮し得る。各々のアミノ酸は、その疎水性および電荷特徴に基づいてハイドロパシー指数が割り当てられている。それらは以下の通りである：イソロイシン（＋４．５）；バリン（＋４．２）；ロイシン（＋３．８）；フェニルアラニン（＋２．８）；システイン／シスチン（＋２．５）；メチオニン（＋１．９）；アラニン（＋１．８）；グリシン（−０．４）；トレオニン（−０．７）；セリン（−０．８）；トリプトファン（−０．９）；チロシン（−１．３）；プロリン（−１．６）；ヒスチジン（−３．２）；グルタミン酸（−３．５）；グルタミン（−３．５）；アスパラギン酸（−３．５）；アスパラギン（−３．５）；リシン（−３．９）；およびアルギニン（−４．５）。
【００４２】
タンパク質に相互作用的な生物学的機能を与える上でのアミノ酸のハイドロパシー指数の重要性は当技術分野において了解されている（たとえばＫｙｔｅら、１９８２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５７：１０５−１３１参照）。一定のアミノ酸を類似のハイドロパシー指数またはスコアを有する他のアミノ酸の代わりに使用することができ、依然として類似の生物活性を保持し得ることは公知である。ハイドロパシー指数に基づいて変更を行う場合、ある実施形態では、ハイドロパシー指数が±２以内であるアミノ酸の置換を含む。ある実施形態では、±１以内であるものを含み、またある実施形態では、±０．５以内であるアミノ酸の置換を含む。
【００４３】
類似のアミノ酸の置換は、特にそれによって作製される生物学的に機能性のタンパク質またはペプチドが、ここで開示されるような、免疫学的実施形態における使用を意図されている場合、親水性に基づいて有効に行われ得ることが当技術分野において了解されている。ある実施形態では、タンパク質の最大局所平均親水性は、その隣接するアミノ酸の親水性によって支配されるので、その免疫原性および抗原性、すなわち、タンパク質の生物学的性質と相関する。
【００４４】
以下の親水性値がこれらのアミノ酸残基に割り当てられている：アルギニン（＋３．０）；リシン（＋３．０）；アスパラギン酸（＋３．０±１）；グルタミン酸（＋３．０±１）；セリン（＋０．３）；アスパラギン（＋０．２）；グルタミン（＋０．２）；グリシン（０）；トレオニン（−０．４）；プロリン（−０．５±１）；アラニン（−０．５）；ヒスチジン（−０．５）；システイン（−１．０）；メチオニン（−１．３）；バリン（−１．５）；ロイシン（−１．８）；イソロイシン（−１．８）；チロシン（−２．３）；フェニルアラニン（−２．５）；およびトリプトファン（−３．４）。類似の親水性の値に基づいて変更を行う場合、ある実施形態では、その親水性値が±２以内であるアミノ酸の置換を含み、ある実施形態では、±ｌ以内であるものを含み、またある実施形態では、±０．５以内であるアミノ酸の置換を含む。また、親水性に基づき、一次アミノ酸配列からエピトープを同定し得る。これらの領域は「エピトープコア領域」とも称される。
【００４５】
例示的なアミノ酸置換を表１に示す。
【００４６】
【表１−１】
2009534423.tif 000054
【００４７】
【表１−２】
2009534423.tif 000055
ここで、保護基、リンカーおよび固相支持体の使用、ならびに詳細な保護および脱保護反応条件、リンカー切断条件、スカベンジャーの使用、および固相ペプチド合成の他の態様は周知であり、また“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”第３版、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅとＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ編集、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９９；Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃａｔａｌｏｇ，２０００；“Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ａ  Ｕｓｅｒ’ｓ  Ｇｕｉｄｅ，”Ｇ．Ａ．Ｇｒａｎｔ編集、Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ＆  Ｃｏｍｐａｎｙ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９９２；“Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｔｅｃｈ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  ＆  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，”Ｗ．Ｄ．Ｂｅｎｎｅｔ，Ｊ．Ｗ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ，Ｌ．Ｋ．Ｈａｍａｋｅｒ，Ｍ．Ｌ．Ｐｅｔｅｒｓｏｎ，Ｍ．Ｒ．ＲｈｏｄｅｓおよびＨ．Ｈ．Ｓａｎｅｉｉ編集、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｔｅｃｈ，１９９８；“Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第２版“  Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ編集、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，１９９３；“Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第２版、“Ｍ．ＢｏｄａｎｓｚｋｙとＡ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ編集、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，１９９４；“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ，”Ｐ．Ｊ．Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ編集、Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ，１９９４；“Ｆｍｏｃ  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，”Ｗ．Ｃ．ＣｈａｎとＰ．Ｄ．Ｗｈｉｔｅ編集、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｐｒｅｓｓ，２０００，Ｇ．Ｂ．Ｆｉｅｌｄｓら、Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ａ  Ｕｓｅｒ’ｓ  Ｇｕｉｄｅ，１９９０，７７−１８３その他に述べられている。
【００４８】
当業者は、周知の手法を用いてここで示すようなポリペプチドの適切な変異体を決定することができる。ある実施形態では、当業者は、活性にとって重要ではないと考えられる領域を標的することにより、活性を破壊せずに変更し得る分子の適切な領域を同定し得る。他の実施形態では、当業者は、類似のポリペプチドの間で保存されている分子の残基および部分を同定することができる。さらなる実施形態では、生物活性にとってまたは構造にとって重要であると考えられる領域であっても、生物活性を破壊せずにまたはポリペプチドの構造に有害な影響を及ぼさずに保存的アミノ酸置換に供し得る。
【００４９】
加えて、当業者は、活性または構造にとって重要な類似ポリペプチド内の残基を同定する構造−機能試験を検討し得る。そのような比較を考慮して、当業者は、類似のタンパク質内の活性または構造にとって重要なアミノ酸残基に対応する、タンパク質内のアミノ酸残基の重要性を予測することができる。当業者は、そのような予測上の重要アミノ酸残基に対する化学的に類似のアミノ酸置換を選択し得る。
【００５０】
当業者はまた、類似ポリペプチドにおける構造に関して三次元構造およびアミノ酸配列を分析し得る。そのような情報を考慮して、当業者は、抗体のアミノ酸残基のアラインメントをその三次元構造に関して予測し得る。ある実施形態では、当業者は、タンパク質の表面にあると予測されるアミノ酸残基に根本的な変化を加えないことを選択し得る。そのような残基は他の分子との重要な相互作用に関与し得るからである。さらに、当業者は、各々の所望アミノ酸残基に１個のアミノ酸置換を含む試験変異体を作製し得る。それらの変異体は、その後、当業者に公知の活性アッセイを用いてスクリーニングし得る。そのような変異体は、適切な変異体についての情報を収集するために使用できる。たとえば特定アミノ酸残基への変化が、活性の破壊、活性の望ましくない低下または不適切な活性を生じさせることが発見された場合、そのような変化を有する変異体を回避することができる。言い換えると、そのような常套的実験から収集された情報に基づき、当業者は、単独でまたは他の突然変異と組み合わせて、さらなる置換を回避すべきアミノ酸を容易に判定できる。
【００５１】
多くの学術公表文献が二次構造の予測を対象としてきた。たとえばＭｏｕｌｔ，１９９６，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．７：４２２−４２７；Ｃｈｏｕら、１９７４，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １３：２２２−２４５；Ｃｈｏｕら、１９７４，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １１３：２１１−２２２；Ｃｈｏｕら、１９７８，Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．  Ｒｅｌａｔ．Ａｒｅａｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４７：４５−１４８；Ｃｈｏｕら、１９７９，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．４７：２５１−２７６；およびＣｈｏｕら、１９７９，Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｊ．２６：３６７−３８４参照。さらに、二次構造の予測を支援するためにコンピュータプログラムが現在使用可能である。二次構造を予測する１つの方法はホモロジーモデリングに基づく。たとえば３０％以上の配列同一性または４０％以上の配列類似性を有する２つのポリペプチドまたはタンパク質は、しばしば類似の構造トポロジーを有する。タンパク質構造データベース（ＰＤＢ）の最近の発展は、ポリペプチドまたはタンパク質構造内の潜在的な折りたたみの数を含む、二次構造の高い予測可能性を提供してきた。たとえばＨｏｌｍら、１９９９，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ．Ｒｅｓ．２７：２４４−２４７参照。所与のポリペプチドまたはタンパク質内には限られた数の折りたたみが存在すること、およびひとたび決定的な数の構造が決定されれば、構造予測は劇的により正確になることが示唆された（Ｂｒｅｎｎｅｒら、１９９７，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．７：３６９−３７６）。
【００５２】
二次構造を予測するさらなる方法は、「スレッディング（ｔｈｒｅａｄｉｎｇ）」（Ｊｏｎｅｓ，１９９７，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．７：３７７−８７；Ｓｉｐｐｌら、１９９６，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ４：１５−１９）、「プロフィール解析」（Ｂｏｗｉｅら、１９９１，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５３：１６４−１７０；Ｇｒｉｂｓｋｏｖら、１９９０，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍ．１８３：１４６−１５９；Ｇｒｉｂｓｋｏｖら、１９８７，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８４：４３５５−４３５８）、および「進化的連鎖」（たとえばＨｏｌｍ，１９９９，前出；およびＢｒｅｎｎｅｒ，１９９７，前出）を含む。
【００５３】
ある実施形態によれば、アミノ酸置換は、（１）タンパク質分解に対する感受性を低下させる、（２）酸化に対する感受性を低下させる、（３）タンパク質複合体を形成するための結合親和性を変化させる、（４）結合親和性を変化させる、および／または（５）そのようなポリペプチドに他の物理化学的または機能的性質を与えるまたは性質を改変するものである。ある実施形態によれば、１個または複数のアミノ酸置換（ある実施形態では、保存的アミノ酸置換）は、天然に生じる配列において（ある実施形態では、分子間接触を形成するドメインの外側のポリペプチドの部分において）作製し得る。ある実施形態では、保存的アミノ酸置換は、典型的には親配列の構造特徴を実質的に変化させない（たとえば置換アミノ酸は、親配列内に生じるらせんをこわすまたは親配列を特徴づける他の種類の二次構造を崩壊させる傾向があってはならない）。当技術分野で認識されているポリペプチドの二次および三次構造の例は、各々が参照によりここに組み込まれる、ＰＲＯＴＥＩＮＳ，ＳＴＲＵＣＴＵＲＥＳ  ＡＮＤ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＰＲＩＮＣＩＰＬＥＳ，（Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ編集），１９８４，Ｗ．  Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  Ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮ  ＴＯ  ＰＲＯＴＥＩＮ  ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ（Ｃ．ＢｒａｎｄｅｎとＪ．Ｔｏｏｚｅ編集），１９９１，Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．；およびＴｈｏｒｎｔｏｎら、１９９１，Ｎａｔｕｒｅ  ３５４：１０５に述べられている。
【００５４】
ペプチド類似体は、鋳型ペプチドと類似の性質を有する非ペプチド薬として製薬産業において一般的に使用されている。これらの種類の非ペプチド化合物は、「ペプチドミメティック」と称される。いかなる目的に関しても参照によりここに組み込まれる、Ｆａｕｃｈｅｒｅ，１９８６，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．１５：２９；ＶｅｂｅｒとＦｒｅｉｄｉｎｇｅｒ，１９８５，ＴＩＮＳ  Ｐ．３９２；およびＥｖａｎｓら、１９８７，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３０：１２２９参照。そのような化合物は、しばしばコンピュータ分子モデリングを援用して開発される。治療上有用なペプチドと構造的に類似するペプチドミメティックは、同様の治療または予防効果を生じさせるために使用され得る。一般に、ペプチドミメティックは、ヒト抗体のようなパラダイムポリペプチド（すなわち生化学的性質または薬理活性を有するポリペプチド）に構造的に類似するが、場合により、当技術分野で周知の方法によって、−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−Ｓ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（シスおよびトランス）、−ＣＯＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−、および−ＣＨ２ＳＯ−から選択される結合によって置換された１またはそれ以上のペプチド結合を有する。同じ種類のＤ−アミノ酸によるコンセンサス配列の１またはそれ以上のアミノ酸の体系的置換（たとえばＬ−リシンの代わりにＤ−リシン）は、特定実施形態において、より安定なペプチドを作製するために使用され得る。加えて、コンセンサス配列または実質的に同一のコンセンサス配列変異を含む拘束ペプチドは、当技術分野で公知の方法によって（いかなる目的に関しても参照によりここに組み込まれる、ＲｉｚｏとＧｉｅｒａｓｃｈ，１９９２，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６１：３８７）；たとえばペプチドを環化する分子内ジスルフィド結合を形成することができる内部システイン残基を付加することによって作製し得る。
【００５５】
ＩＩ．概説
ＧＬＰ−１類似体を含む、ＧＬＰ−１の少なくとも１つの活性を保持する様々なＧＬＰ−１化合物がここで提供される。開示されるＧＬＰ−１類似体は、以下の特徴の１またはそれ以上を含む：１）ＧＬＰ−１の特定位置におけるアミノ酸置換、２）ＧＬＰ−１のＮ末端および／またはＣ末端における付加アミノ酸、３）ＧＬＰ−１のＮ末端および／または４）Ｃ末端におけるアミノ酸の不在、および／またはポリペプチドと特定アミノ酸の側鎖を結合することによって形成される環の存在。
【００５６】
以下でより詳細に述べるように、提供されるＧＬＰ−１化合物は、様々な疾患を治療するために治療的または予防的に投与され得る。前記化合物で治療することができる疾患の例は、糖尿病、耐糖能異常、インスリン抵抗性、高血糖症、代謝症候群、様々な脂質障害、肥満、冠疾患、骨障害および過敏性腸症候群を含むが、これらに限定されない。
【００５７】
ＩＩＩ．ＧＬＰ−１化合物
Ａ．構造
上述したように、「ＧＬＰ−１」は、ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨおよびＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２を指す。ここで使用するＧＬＰ−１のアミノ酸の番号づけは、プログルカゴンの切断から形成されるＧＬＰ−１（１−３７）に基づく。
【００５８】
天然ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨは以下のアミノ酸配列を有する：
７Ｈｉｓ−８Ａｌａ−９Ｇｌｕ−１０Ｇｌｙ−１１Ｔｈｒ−１２Ｐｈｅ−１３Ｔｈｒ−１４Ｓｅｒ−１５Ａｓｐ−１６Ｖａｌ−１７Ｓｅｒ−１８Ｓｅｒ−１９Ｔｙｒ−２０Ｌｅｕ−２１Ｇｌｕ−２２Ｇｌｙ−２３Ｇｌｎ−２４Ａｌａ−２５Ａｌａ−２６Ｌｙｓ−２７Ｇｌｕ−２８Ｐｈｅ−２９Ｉｌｅ−３０Ａｌａ−３１Ｔｒｐ−３２Ｌｅｕ−３３Ｖａｌ−３４Ｌｙｓ−３５Ｇｌｙ−３６Ａｒｇ−３７Ｇｌｙ  （配列番号１）。
【００５９】
この式に示すように、アミノ末端のＨｉｓ残基は、ＧＬＰ−１（１−３７）からのプロセシングを反映するために慣例的にアミノ酸残基７と称される；カルボキシル末端のＧｌｙは、次に、慣例的にアミノ酸残基３７と称される。背景技術の章で述べたように、ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨのカルボキシル末端は、ＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２を生じるように切断され得る。これら２つの末端の間に位置するその他のアミノ酸は、示されているように連続的に番号づけられる。そこで、たとえば８位のアミノ酸はＡｌａであり、２６位のアミノ酸はＬｙｓである。同様に、ここで特定位置で置換を行うことに言及するとき、同じ番号づけシステムが適用される。それゆえ、たとえば２２位におけるＡｌａの置換は、２２位のＧｌｙがＡｌａで置換されたことを意味する。アミノ酸がＧＬＰ−１（７−３６）のアミノ末端で付加される場合、その位置は、７位のすぐ上流のアミノ酸がアミノ酸６であり、その次の上流アミノ酸が５位である等のように、漸減順序で連続的に番号づけられる。アミノ酸がＧＬＰ−１（７−３６）のカルボキシル末端で付加される場合、その位置は、３６位のすぐ下流のアミノ酸がアミノ酸３７であり、その次の下流アミノ酸が３８位である等のように、漸増順序で連続的に番号づけられる。上記で論じたように、ＧＬＰ−１（７−３７）とも称されるＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨとＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２はどちらも同じ活性を有する。便宜上、「ＧＬＰ−１」および「天然ＧＬＰ−１」という用語は、これらの生物活性形態の両方を指すために使用される。
ここで使用する「ＧＬＰ−１」化合物は、ＧＬＰ−１類似体を含み、および１またはそれ以上の付加的な成分（たとえばインビボで化合物の半減期を延長させる成分）を含み得る分子を指す。
【００６０】
「ＧＬＰ−１活性」という語句またはその文法上の等価物は、広くＧＬＰ−１に関連する活性を指す。そのような活性の例は、インスリン分泌刺激活性、胃の運動性の抑制、胃液分泌の抑制、β細胞の増殖と複製の促進、β細胞量の増加、ＧＬＰ−１を被験体に投与したときの満腹感の上昇と食物摂取の低下を含むが、これらに限定されない。
【００６１】
ここで使用するとき、「ＧＬＰ−１類似体」という用語は、天然ＧＬＰ−１（７−３７）−ＯＨまたはＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２のアミノ酸配列の１またはそれ以上の変化を有するが、天然ＧＬＰ−１の少なくとも１つの活性を保持するポリペプチドを指す。ここで提供し、説明するＧＬＰ−１類似体は、たとえばＧＬＰ−１の特定残基における特定アミノ酸置換を含む。類似体の一部はまた、Ｃ末端に付加アミノ酸残基を含み、また別の類似体はＣ末端が短縮されている。ここで提供するＧＬＰ−１類似体は、様々なインビボモデルにおいて血糖値を顕著に低下させ、天然ＧＬＰ−１に比べて長い半減期を有する。ここで述べるように、ＧＬＰ−１類似体は、類似体のインビボでの半減期を上昇させるためにポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の１またはそれ以上の分子でペグ化され得る。あるいは、ＧＬＰ−１類似体は、ここで述べるような融合タンパク質を形成するためにもう１つ別のポリペプチドに結合され得る。ここで列挙する式において、Ｒ１は、カルボキシル基、アミン、エステル、または置換アミンであり得る。それゆえ、ここで提供するＧＬＰ−１類似体は、そのＣ末端にカルボキシル基またはアミド基を有し得る。
【００６２】
ある実施形態では、ここで提供するＧＬＰ−１類似体は、以下の特徴の１またはそれ以上を有する：
１）ＧＬＰ−１に対する１またはそれ以上のアミノ酸置換（たとえば１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個）；
２）ＧＬＰ−１のＣ末端またはＮ末端における１またはそれ以上の追加アミノ酸残基の付加（たとえば１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のアミノ酸）；
３）ＮまたはＣ末端における１またはそれ以上のアミノ酸のトランケーション（典型的には１、２、３、４または５個のアミノ酸）；および／または
４）類似体内の特定アミノ酸上の側鎖の間で形成される環構造。
【００６３】
提供される一部のＧＬＰ−１類似体は、たとえば、以下の置換を含むがこれらに限定されない、８、２２、２３、２６、３３、３４、３５、３６および／または３７位の１またはそれ以上における特定アミノ酸置換を含む：
８Ａｌａ：Ｇｌｙ、２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）またはβ−アミノプロピオン酸（ｂＡｌａ）による置換；
２２Ｇｌｙ：２−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、α−α−二置換アミノ酸または２−アミノアジピン酸による置換；
２３Ｇｌｎ：Ｃｙｓによる置換；
２６Ｌｙｓ：オルニチンまたはホモリシンによる置換；
３３Ｖａｌ：Ｌｙｓによる置換；
３４Ｌｙｓ：Ａｓｎによる置換；
３６Ａｒｇ：Ｇｌｙによる置換；
３７Ｇｌｙ：Ｐｒｏによる置換。
【００６４】
ＧＬＰ−１類似体の一部は、たとえば３７位のアミノ酸へのＣｙｓ、Ｃｙｓ−Ａｌａ、Ｃｙｓ−Ｇｌｙ、Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ、Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（配列番号２７８）、またはＧｌｙ−Ｃｙｓの付加（前記の各々はアミノ末端からカルボキシル末端方向に列記されている）を含む、特定Ｃ末端伸長を含む。
【００６５】
他のＧＬＰ−１類似体は、ＧＬＰ−１のＮ末端におけるＭｅｔ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＴｒｐまたはＰｈｅの付加のような特定Ｎ末端付加を含む。一部の類似体は、ＭＱ、ＭＲ、ＭＫ、ＭＨ、ＭＹ、ＭＩ、ＭＤ、ＭＬ、ＭＮ、ＭＥ、ＭＷ、ＭＦまたはＭＭジペプチドの付加によってアミノ末端へとＮ末端で伸長される。さらなる他の類似体は、アミノ末端に付加されたＭＨＨトリペプチドを有する。
【００６６】
ＧＬＰ−１類似体は、論議を容易にするために、特定の構造特徴を共有する分子の特定ファミリーに分類できる。これらは、以下に提供する一般式によって最も容易に表すことができる。
【００６７】
１つのファミリーは、たとえば、式Ｉ：
Ｘａａ７−Ｇｌｙ−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｃｙｓ−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｇｌｙ−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式Ｉ、配列番号５）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ３３は、ＶａｌまたはＬｙｓであり；  
Ｘａａ３４は、ＬｙｓまたはＡｓｎであり；
Ｘａａ３６は、ＡｒｇまたはＧｌｙであり；
Ｘａａ３７は、ＧｌｙまたはＰｒｏである］
に示すアミノ酸配列を含むまたは前記アミノ酸配列から成り、その化合物はＧＬＰ−１活性を有する。
【００６８】
ここで列挙する式において、Ｒ１は、カルボキシル基、アミン、エステル、または置換アミンであり得る。それゆえ、ここで提供するＧＬＰ−１類似体は、そのＣ末端にカルボキシル基またはアミド基を有し得る。
【００６９】
ＧＬＰ−１類似体の２番目のファミリーは、式ＩＩ：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩ、配列番号９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓである］
に示すアミノ酸配列を含むまたは前記アミノ酸配列から成り、その化合物はＧＬＰ−１活性を有する。
【００７０】
ＧＬＰ−１類似体の３番目のファミリーは、式ＩＩＩ（配列番号１３）：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｇｌｙ−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＩＩ、配列番号１３）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、２−アミノイソ酪酸、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、α−α−二置換アミノ酸または２−アミノアジピン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３８位のＸａａは、Ｃｙｓ、Ｇｌｙであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
３８、３９、４０または４１位のアミノ酸が除かれているとき、そのアミノ酸の下流の各々のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
に示すアミノ酸配列を含むまたは前記アミノ酸配列から成り、その化合物はＧＬＰ−１活性を有する。それゆえ、たとえば３８位のアミノ酸が除かれている場合、３９−４１位のアミノ酸も存在しない。同様に、３９位のアミノ酸が除かれている場合、４０および４１位のアミノ酸も存在しない。および４０位のアミノ酸が除かれている場合、４１位のアミノ酸は存在しない。
【００７１】
ＧＬＰ−１類似体のもう１つのファミリーは、類似体内の２個のアミノ酸が、典型的にはそれらの側鎖を通して、一緒に連結されたときに形成される環または環式構造を含む。側鎖は、互いに直接連結されるかまたはリンカーを通して連結され得る。
【００７２】
このファミリーの中の一部のＧＬＰ−１類似体は、式Ｖ：
【００７３】
【化１】
2009534423.tif 000056
［式中、
Ｘは、−Ｎ（Ｚ１）−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｚ１）−であり；    
Ｚ１は、水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；  
Ｘ１は、少なくとも１１個のアミノ酸であり；  
Ｘ２は、１個のアミノ酸であり；
Ｘ３は、結合または１−５個のアミノ酸であり；
Ｘ４は、１個のアミノ酸であり；  
Ｘ５は、少なくとも１０個のアミノ酸であり；  
Ｚ２は、−ＯＺ３または−ＮＺ４Ｚ５であり；および  
Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
およびＸ１およびＸ５を含むアミノ酸は、それぞれＧＬＰ−１のアミノ部分およびカルボキシル部分からのアミノ酸に対応する］
に示す一般構造、または天然ＧＬＰ−１内のアミノ酸が式Ｘ−Ｙに示すようなアミノ酸で置換されている類似配列を有する。
【００７４】
一部の環状ＧＬＰ−１類似体は、たとえば、式ＩＶ：
Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０−Ｘａａ２１−Ｘａａ２２−Ｘａａ２３−Ｘａａ２４−Ｘａａ２５−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８−Ｘａａ２９−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ｘａａ３３−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６−Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ｘａａ４１−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＩＶ、配列番号２９）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
７位のＸａａは、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノ−ヒスチジン、２−アミノ−ヒスチジン、３−ヒドロキシ−ヒスチジン、ホモヒスチジン、α−フルオロメチル−ヒスチジンまたはα−メチル−ヒスチジンであり；
８位のＸａａは、Ｇｌｙ、ｂＡｌａ（２−アミノプロピオン酸）、１−アミノ−シクロペンタンカルボン酸、２−アミノイソ酪酸またはα−α−二置換アミノ酸であり；
９位のＸａａは、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＨｉｓであり；
１１位のＸａａは、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１２位のＸａａは、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、ＰｈｅまたはＴｙｒであり；
１３位のＸａａは、ＴｈｒまたはＧｌｙであり；
１４位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；
１６位のＸａａは、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
１９位のＸａａは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２０位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２１位のＸａａは、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２２位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２４位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２５位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２６位のＸａａは、Ｌｙｓ、ホモリシン、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２７位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２８位のＸａａは、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
２９位のＸａａは、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３０位のＸａａは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、ホモリシン、オルニチン、４−カルボキシ−フェニルアラニン、β−グルタミン酸、β−ホモグルタミン酸、α，γ−ジアミノ酪酸またはホモグルタミン酸であり；
３１位のＸａａは、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３２位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３４位のＸａａは、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３５位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３６位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＨｉｓであり；
３７位のＸａａは、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、ＡｓｐまたはＬｙｓであり；
３８位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｌｙｓ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
３９位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓであるか、または除かれており；
４０位のＸａａは、Ｇｌｙ、Ｃｙｓであるかまたは除かれており；
４１位のＸａａは、Ｇｌｙであるかまたは除かれており；
Ｘａａ１８、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２２、Ｘａａ２３、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、Ｘａａ２８、Ｘａａ２９およびＸａａ３０から選択される２個のアミノ酸は、結合して環を形成しており、および環を形成する２個のアミノ酸は、０、１、２、３、４または５個のアミノ酸によって分離されている］
に示すアミノ酸配列を含むまたは前記アミノ酸配列から成り、その化合物はＧＬＰ−１活性を有する。
【００７５】
分離に関与するアミノ酸の数を数えるとき、側鎖が結合している２個のアミノ酸は除外される。それゆえ、たとえば側鎖が結合して環を形成している２個のアミノ酸は、それらの２個のアミノ酸が互いに隣り合うとき（たとえばＸａａ１８とＸａａ１９の位置のアミノ酸が結合して環を形成しているとき）、それらを分離する０個のアミノ酸を有する。
【００７６】
特定実施形態では、結合して環を形成する２個のアミノ酸は、たとえば：  
Ｘａａ１８が、Ｘａａ２２またはＸａａ２３のいずれかと結合する；または
Ｘａａ１９が、Ｘａａ２３またはＸａａ２４のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２０が、Ｘａａ２４またはＸａａ２５のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２１が、Ｘａａ２５またはＸａａ２６のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２２が、Ｘａａ２６またはＸａａ２７のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２３が、Ｘａａ２７またはＸａａ２８のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２４が、Ｘａａ２８またはＸａａ２９のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２５が、Ｘａａ２９またはＸａａ３０のいずれかと結合する；または
Ｘａａ２６が、Ｘａａ３０またはＸａａ３１のいずれかと結合する
ときを含めて、３または４個のアミノ酸によって分離される。
【００７７】
多種多様なアミノ酸、アミノ酸類似体（たとえば非天然アミノ酸）をこれらの位置に挿入することができる。アミノ酸または類似体は、互いに直接にまたはリンカーを通して反応して環を形成することができる、側鎖内の反応性官能基を有するように選択される。一部の環状類似体における環は、たとえば１個のアミノ酸または類似体の側鎖内のカルボキシル基を２番目のアミノ酸または類似体の側鎖内のアミノ基と反応させて環状ラクタムを形成することによって形成される。それゆえ、たとえばある実施形態では、環構造は、以下に例示するように、上記で特定した位置にあるＧｌｕ（Ｅ）、Ａｓｐ（Ｄ）、Ｌｙｓ（Ｋ）、オルニチン（Ｏ）、４−カルボキシ−フェニルアラニン（Ｃｐａ）、β−ホモグルタミン酸（Ｂ）、α，γ−ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、およびホモグルタミン酸（Ｊ）のいずれか２個の側鎖の間で形成される：
【００７８】
【化２】
2009534423.tif 000057
図１は、たとえば、結合して環状ラクタムを形成することができる、３個のアミノ酸によって分離されたＧＬＰ−１内の位置の例を示す。
【００７９】
図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対が結合して環を形成している化学構造を示す。特定対合は、上記に示す他の対合のいずれかならびに他の対合で置換され得ることは当業者に認識される。
【００８０】
結合して環状ラクタムを形成することができる適切な位置に必要なアミノ酸を有するＧＬＰ−１類似体の配列の特定例を配列番号３０−２４６に提示し、また表２に示しており、結合して環を形成することができる２個のアミノ酸を太字の下線付き活字で示す。
【００８１】
一部のＧＬＰ−１類似体は２個の環状構造を含む。一例は、
ＨＧＥＧＴ  ＦＴＳＤＶ  ＳＳＹＬＥ  ＧＱＡＫＫ  ＥＦＩＡＷ  ＬＥＫＧＲ  Ｋ（配列番号２７７）
である。この類似体において、最初のＥとＫの対（それぞれ２１位と２５位）が１個の環状ラクタムを形成し、２番目のＥとＫの対（それぞれ３３位と３７位）が２番目の環状ラクタムを形成する。Ｇｌｕ（Ｅ）およびＬｙｓ（Ｋ）残基の１つの対または両方の対が、環状ラクタム環を形成するために上記で列挙し、例示したようなその他のアミノ酸またはアミノ酸類似体で置換され得る。
【００８２】
ＧＬＰ−１類似体の最後のファミリーは、式ＶＩ：
Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｈｉｓ７−Ａｌａ８−Ｇｌｕ９−Ｇｌｙ１０−Ｔｈｒ１１−Ｐｈｅ１２−Ｔｈｒ１３−Ｓｅｒ１４−Ａｓｐ１５−Ｖａｌ１６−Ｓｅｒ１７−Ｓｅｒ１８−Ｔｙｒ１９−Ｌｅｕ２０−Ｇｌｕ２１−Ｇｌｙ２２−Ｇｌｎ２３−Ａｌａ２４−Ａｌａ２５−Ｌｙｓ２６−Ｇｌｕ２７−Ｐｈｅ２８−Ｉｌｅ２９−Ａｌａ３０−Ｔｒｐ３１−Ｌｅｕ３２−Ｖａｌ３３−Ｌｙｓ３４−Ｇｌｙ３５−Ａｒｇ３６−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１（式ＶＩ、配列番号２７６）
［式中、
Ｒ１は、ＯＲ２またはＮＲ２Ｒ３であり；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素または（Ｃ１−Ｃ８）アルキルであり；
４位のＸａａは、Ｍｅｔであるかまたは除かれており；
５位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ｈｉｓであるかまたは除かれており；
６位のＸａａは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＴｒｐまたはＰｈｅであり；
５位のアミノ酸が除かれているとき、４位のアミノ酸も除かれていることを条件とする］
に示すアミノ酸配列を含むまたは前記アミノ酸配列から成り、その化合物はＧＬＰ−１活性を有する。
【００８３】
一部のＧＬＰ−１類似体を表２に示す。表２に列挙する配列のいくつかは、Ｃ末端アミドを有することが示されている。しかし、表２に列挙する配列および本明細書中の別の箇所で述べる配列のすべてがＣ末端カルボキシル基またはＣ末端アミド基を有し得ることは了解されるべきである。表２において使用するとき、ｂＡｌａはβ−アミノプロピオン酸であり；Ａａｄは２−アミノアジピン酸であり；ＺはＡｉｂ（２−アミノイソ酪酸）であろ；Ｏはオルニチンであり；Ｃｐａは４−カルボキシ−フェニルアラニンであり；Ｄａｂはα，γ−ジアミノ酪酸であり；およびＢはβホモグルタミン酸であり；Ｊはホモグルタミン酸である。［Ｋ／Ｏ／Ｃ］は、アミノ酸配列が、場合によりこの位置にリシン、オルニチンまたはシステインのいずれかを含むが、これらのアミノ酸を全く含まなくてもよいことを意味する。太字と下線で強調されている残基は、結合して（典型的にはそれらの側鎖によって）環または環状構造を形成するアミノ酸を示す。
【００８４】
【表２−１】
2009534423.tif 000058
【００８５】
【表２−２】
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【００８６】
【表２−３】
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【００８７】
【表２−４】
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【００８８】
【表２−５】
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【００８９】
【表２−６】
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【００９０】
【表２−７】
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【００９１】
【表２−８】
2009534423.tif 000065
「ＧＬＰ−１類似体」という用語はまた、変異体、フラグメントまたは誘導体が類似アミノ酸配列を有し（たとえば保存的置換を含む）、ＧＬＰ−１類似体の少なくとも１つの活性を、ある程度まで、保持するという点で前記ＧＬＰ−１類似体の１つの機能的等価物である、前記ＧＬＰ−１類似体の変異体、フラグメントおよび誘導体を包含する。
【００９２】
「ＧＬＰ−１変異体」は、上記および表２に列挙するファミリー中のＧＬＰ−１類似体と「実質的に同一」（上記の定義参照）であるポリペプチドを含む。そのような変異体は、欠失、挿入および／または置換などのアミノ酸変化を有するタンパク質を含む。典型的には、そのような変化は、変異体ポリペプチドの活性がここで開示するＧＬＰ−１類似体の１つと実質的に類似する（たとえばインスリン分泌刺激活性のようなＧＬＰ−１活性を有する）ように、本来は保存的である（たとえばＣｒｅｉｇｈｔｏｎ，１９８４，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙおよび上記考察参照）。置換の場合、もう１つ別のアミノ酸を置換するアミノ酸は、通常、類似の構造および／または化学的性質を有する。上記ファミリーの中に列挙されるＧＬＰ−１類似体に対する挿入および欠失は、典型的には１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のアミノ酸を含む。別の場合には、１、２、３、４または５個のアミノ酸の挿入または欠失が存在する。
【００９３】
ＧＬＰ−１変異体は、変異体がまだＧＬＰ−１活性を有することを条件として、ここで述べるＧＬＰ−１類似体（すなわち上記で列挙する種々のファミリー中の類似体および表２に列挙するもの）と少なくとも７５％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有し得る。たとえば変異体は、アミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２３、またはＸａａ３８  −Ｘａａ４５  のいずれかが変化していないことを条件として、配列番号７または８のＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有し得る。他の変異体は、アミノ酸Ｘａａ８またはＸａａ３８−Ｘａａ４１  のいずれかが変化していないことを条件として、配列番号１１または１２のＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有する。一部の他の変異体は、アミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２２、またはＸａａ３８  −Ｘａａ４１のいずれかが、存在するとき、変化していないことを条件として、配列番号１６−２８のいずれか１つのＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有する。さらなる他の変異体は、Ｘａａ１８、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２２、Ｘａａ２３、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、Ｘａａ２８、Ｘａａ２９およびＸａａ３０から選択される２個のアミノ酸が結合して環を形成していることを条件として、配列番号３０−２４６のいずれか１つのＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有する。さらなる他の変異体は、アミノ酸Ｘａａ４、Ｘａａ５またはＸａａ６が、存在するとき、変化していないことを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２４７−２６７のいずれか１つのＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有する。さらなる他の変異体は、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２６８−２７５のいずれか１つのＧＬＰ−１類似体と少なくとも７５％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有する。
【００９４】
ある実施形態では、ＧＬＰ−１変異体は、保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２３、またはＸａａ３８  −Ｘａａ４５  のいずれかではなく、および変異体がＧＬＰ−１活性（たとえばインスリン分泌刺激活性）を有することを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号７または８を含む。
【００９５】
ある実施形態では、ＧＬＰ−１変異体は、保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８またはＸａａ３８−Ｘａａ４１  のいずれかではなく、および変異体がＧＬＰ−１活性（たとえばインスリン分泌刺激活性）を有することを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号１１または１２を含む。
【００９６】
ある実施形態では、ＧＬＰ−１変異体は、保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ８、Ｘａａ２２、またはＸａａ３８  −Ｘａａ４１のいずれかではないことを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号１６−２８のいずれか１つを含む。
【００９７】
ある実施形態では、ＧＬＰ−１変異体は、Ｘａａ１８、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２２、Ｘａａ２３、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、Ｘａａ２８、Ｘａａ２９およびＸａａ３０から選択される２個のアミノ酸が結合して環を形成していることを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号３０−２４６のいずれか１つを含む。
【００９８】
ある実施形態では、ＧＬＰ−１変異体は、保存的アミノ酸置換がアミノ酸Ｘａａ４、Ｘａａ５またはＸａａ６ではないことを条件として、１、２、３、４または５以下の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２４７−２６７のいずれか１つを含む。
【００９９】
ここで使用する「ＧＬＰ−１誘導体」は、１またはそれ以上のアミノ酸が、１）対応するＤ−アミノ酸で置換されている、２）非天然に生じるアミノ酸残基に変化している、および／または３）化学修飾されている、上記ファミリーおよび表２に列挙されるＧＬＰ−１類似体の１つを指す。化学修飾の例は、ペプチド骨格および／またはアミノ酸側鎖のアルキル化、アシル化、脱アミド化、エステル化、リン酸化およびグリコシル化を含むが、これらに限定されない。
【０１００】
「ＧＬＰ−１フラグメント」は、上記ファミリーまたは表２に列挙されるＧＬＰ−１類似体のトランケート形態またはその変異体または誘導体を指す。フラグメントは、典型的には上記ファミリーに示すＧＬＰ−１類似体に対して１、２、３、４または５個のアミノ酸がトランケートされている。トランケーションは、アミノ末端および／またはカルボキシル末端のいずれでもよい。
【０１０１】
ここで提供するＧＬＰ−１化合物は、適切な二価金属カチオンと錯体形成することができる。ここで提供するＧＬＰ−１化合物の二価金属錯体は、懸濁液として皮下投与することができ、ここで提供するＧＬＰ−１化合物のそのような錯体は一般にほぼ生理的ｐＨの水溶液に不溶性であるので、インビボで低い放出速度を有する。ここで提供するＧＬＰ−１化合物と錯体形成するのに適した二価金属カチオンの非限定的な例は、Ｚｎ＋＋、Ｍｎ＋＋、Ｆｅ＋＋、Ｃａ＋＋、Ｃｏ＋＋、Ｃｄ＋＋、Ｎｉ＋＋等を含む。ここで提供するＧＬＰ−１化合物の二価金属錯体は、たとえば、参照によりここに組み込まれる、国際公開公報第ＷＯ０１／９８３３１号に述べられているような手法を用いて入手できる。
【０１０２】
提供されるＧＬＰ−１化合物は、単にここで開示するＧＬＰ−１類似体を含み得るかまたは、典型的にはインビボでの類似体の半減期を延長させるように選択される、付加的な成分を含み得る。一部のＧＬＰ−１化合物は、たとえば、分子の半減期を延長させるおよび／またはクリアランスを低減するためにペグ化される。他のＧＬＰ−１類似体は、ＰＥＧ以外の水溶性ポリマーで修飾される。適切な水溶性ポリマーまたはそれらの混合物は、Ｎ結合型またはＯ結合型糖鎖、糖類（たとえばキトサン、キサンタンガム、セルロースおよびその誘導体、アカシアガム、カラヤガム、グアーガム、カラギーナンおよびアガロースなどの様々な多糖類）、リン酸塩、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）（モノ−（Ｃ１−Ｃ１０）、アルコキシ−またはアリールオキシ−ポリエチレングリコールを含む、タンパク質を誘導体化するために使用されてきたＰＥＧの形態を含む）、モノメトキシ−ポリエチレングリコール、デキストラン（たとえば約６ｋＤの、低分子量デキストラン）、セルロース、または他の糖鎖ベースのポリマー、ポリ−（Ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（たとえばグリセロール）、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン、ポリビニルアルコール、および前記のコポリマーを含むが、これらに限定されない。ＧＬＰ−１化合物は、たとえば、ＧＬＰ−１類似体のインビボでの半減期を上昇させるように選択される様々な成分を含み得る。
【０１０３】
さらにもう１つの選択肢は、ＧＬＰ−１類似体をもう１つ別のポリペプチドまたはポリペプチドドメインに融合することである。それゆえ、ＧＬＰ−１化合物は、ここで開示するＧＬＰ−１類似体が、免疫グロブリンのＦｃ領域、トランスフェリン、または血清アルブミン（たとえばヒト血清アルブミン）などの血液成分のような様々なタンパク質、またはこれらのタンパク質のフラグメントに融合している融合タンパク質であり得る。ヒトアルブミンについての例示的アミノ酸配列は、Ｌａｗｎら、１９８１，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ９：６１０２−６１１４；Ｍｅｌｏｕｎら、１９７５，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．５８：１３６；およびＭｉｎｇｈｅｔｔｉら、１９８６，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６１：６７４７）において論じられている。そのような融合タンパク質は、ここで述べるようなおよび当技術分野で公知の標準組換え手法を用いて作製できる。
【０１０４】
融合は、ＧＬＰ−１類似体のアミノ末端、カルボキシル末端または両方末端で実施し得る。融合は、リンカーまたはアダプター分子なしで直接であり得るかまたはリンカーまたはアダプター分子を通してであり得る。リンカーまたはアダプター分子は、１またはそれ以上のアミノ酸残基、典型的には約２０−約５０アミノ酸残基であり得る。リンカーまたはアダプター分子はまた、融合部分の分離を可能にする、ＤＮＡ制限エンドヌクレアーゼのためまたはプロテアーゼのための切断部位と共に設計され得る。ひとたび構築されれば、融合ポリペプチドはここで述べる方法に従って誘導体化され得ることが認識される。
【０１０５】
Ｂ．ペグ化
ある実施形態では、ここで提供するＧＬＰ−１類似体はペグ化される。ここで使用するとき、「ペグ化」という用語は、当技術分野におけるそれらの一般的な意味を有し、一般に、たとえば、ポリエチレングリコールまたはその誘導体の１またはそれ以上の分子の共有結合によって、たとえばポリアルキレングリコール、好ましくは活性化ポリアルキレングリコールを、アミノ酸、たとえばリシンなどの適切な反応基または部分と反応させて共有結合を形成することによって、ここで述べるようにＧＬＰ−１類似体を化学修飾する工程を指す。「ペグ化」は、しばしばポリエチレングリコールまたはメトキシポリエチレングリコールのようなその誘導体を用いて実施されるが、ここで使用する用語は、たとえばポリプロピレングリコールなどの、他の何らかの有用なポリアルキレングリコールも包含する。ここで使用するとき、「ＰＥＧ」は、当技術分野で理解されているポリエチレングリコールおよびその誘導体を指す（たとえば米国特許第５，４４５，０９０号、同第５，９００，４６１号、同第５，９３２，４６２号、同第６，４３６，３８６号、同第６，４４８，３６９号、同第６，４３７，０２５号、同第６，４４８，３６９号、同第６，４９５，６５９号、同第６，５１５，１００号および同第６，５１４，４９１号参照）。
【０１０６】
ここで提供するＧＬＰ−１類似体は、ペプチド内のランダムな位置でまたは分子内のあらかじめ定められた位置でペグ化することができ、１またはそれ以上の結合分子、典型的には１、２、３、４または５個の分子を含み得る。
【０１０７】
ペグ化のために使用されるポリマーはいかなる分子量であってもよく、分枝状または非分枝状のいずれでもよい。ポリエチレングリコールに関しては、一般に分子量は、取扱いおよび製造の容易さのために約１ｋＤａ−約１００ｋＤａ（「約」という用語は、ポリエチレングリコールの製剤において、一部の分子は言及される分子量を超え、一部の分子は言及される分子量より低いことを指示する）である。たとえばポリエチレングリコールは、約１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０または１００ｋＤａの平均分子量を有し得る。一部のＧＬＰ−１化合物は、４０、３０または２０ｋＤａ未満の１またはそれ以上の分子でペグ化される。所望する治療プロフィールに依存して（たとえば所望する循環半減期の期間、もしあれば、生物活性への作用、取扱いの容易さ、抗原性の程度または欠如、および治療タンパク質または類似体へのポリエチレングリコールの他の公知の作用）、他の大きさも使用できる。
【０１０８】
ＰＥＧ分子（またはここで述べる他の水溶性ポリマー）は、ポリペプチドまたはタンパク質の機能的または抗原性ドメインへの作用を考慮してＧＬＰ−１類似体に結合すべきである。たとえばＰＥＧは、遊離アミノ基、カルボキシル基またはスルフヒドリル基などの反応性基によりアミノ酸残基を通して共有結合され得る。反応性基は、活性化ＰＥＧ分子が結合され得るものである。遊離アミノ基を含む天然に生じるアミノ酸残基の例は、リシン残基およびＮ末端アミノ酸残基を含む；遊離カルボキシル基を有するものは、アスパラギン酸残基、グルタミン酸残基およびＣ末端アミノ酸残基を含む。スルフヒドリル基（たとえばシステイン上の）も、ポリエチレングリコール分子を結合するための反応性基として使用できる。ＰＥＧ分子はまた、共役により、非天然アミノ酸として合成によって導入された反応性官能基に組み込み得るか、あるいはＰＥＧは、ペプチド合成の間に直交法（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  ｍｅｔｈｏｄｓ）を用いてペプチドに共役し得る。
【０１０９】
様々な戦略がＧＬＰ−１類似体のペグ化のために使用できる（たとえば国際公開公報第ＷＯ２００５／０４２０２７号、同第ＷＯ２００４／０６０３８６号、Ｖｅｒｏｎｅｓｅ，  ２００１，Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２２：４０５−４１７；Ｒｏｂｅｒｔｓら、２００２，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ５４：４５９−４７６参照；また。欧州特許第０  ４０１  ３８４号（Ｇ−ＣＳＦへのＰＥＧの結合）、およびＭａｌｉｋら、１９９２，Ｅｘｐ．Ｈｅｍａｔｏｌ．２０：１０２８−１０３５（塩化トレシルを使用したＧＭ−ＣＳＦのペグ化を報告している）も参照のこと）。たとえばＰＥＧは、リシン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸またはシステイン残基への共有結合によってＧＬＰ−１類似体に連結され得る。１またはそれ以上の反応化学が、ＧＬＰ−１類似体の特定アミノ酸残基（たとえばリシン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸またはシステイン）またはＧＬＰ−１類似体の２種類以上のアミノ酸残基（たとえばリシン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、システインおよびそれらの組合せ）にポリエチレングリコールを結合するために使用できる。
【０１１０】
１つのそのような戦略は、ＧＬＰ−１類似体の一部であるシステインにＰＥＧを結合することである。上記に示すように、提供されるＧＬＰ−１類似体のいくつかは、ＰＥＧを結合できるＣ末端にまたはＣ末端の近くにシステイン残基を含む。システインへの結合は様々なアプローチを用いて実施できる。１つの一般的な方法は、ＰＥＧ−マレイミドをシステインのチオール基に反応させることを含む。
【０１１１】
もう１つのアプローチは、酵素カップリングによってＧＬＰ−１類似体のカルボキシ末端にＰＥＧを結合することである（たとえば米国特許第４，３４３，８９８号参照）。
【０１１２】
直接または介在リンカーによってＰＥＧをＧＬＰ−１類似体に結合することができる。ポリエチレングリコールをタンパク質およびポリペプチドに結合するための無リンカー系は、Ｄｅｌｇａｄｏら、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓ．９：２４９−３０４，１９９２；Ｆｒａｎｃｉｓら、１９９８，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｊ．  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｌ．６８：１−１８；米国特許第４，００２，５３１号；米国特許第５，３４９，０５２号；国際公開公報第ＷＯ９５／０６０５８号；および国際公開公報第ＷＯ９８／３２４６６号に述べられている。
【０１１３】
介在リンカーを伴わずにＰＥＧをＧＬＰ−１類似体のアミノ酸残基に直接結合するための１つの方法は、塩化トレシル（ＣｌＳＯ２ＣＨ２ＣＦ３）を使用したモノメトキシポリエチレングリコール（ＭＰＥＧ）の修飾によって生成される、トレシル化ＭＰＥＧを使用する。タンパク質またはポリペプチドとトレシル化ＭＰＥＧの反応後、ポリエチレングリコールをタンパク質またはポリペプチドのアミン基に直接結合する。それゆえＧＬＰ−１類似体−ＰＥＧ複合体は、ＧＬＰ−１類似体を、２，２，２−トリフルオロエタンスルホニル基を有するＰＥＧ分子と反応させることによって生成できる。
【０１１４】
ＰＥＧはまた、多くの異なる介在リンカーを使用してＧＬＰ−１類似体に結合することができる。たとえば米国特許第５，６１２，４６０号は、ＰＥＧをＧＬＰ−１類似体に結合するためのウレタンリンカーを開示する。ＰＥＧがリンカーによってＧＬＰ−１類似体に結合しているＧＬＰ−１類似体−ＰＥＧ複合体はまた、ＭＰＥＧ−スクシンイミジルスクシネート、１，１’−カルボニルジイミダゾールで活性化されたＭＰＥＧ、ＭＰＥＧ−２，４，５−トリクロロペニルカルボネート、ＭＰＥＧ−．ｒｈｏ．−ニトロフェノールカルボネート、および様々なＭＰＥＧ−スクシネート誘導体などの化合物とＧＬＰ−１類似体の反応によって生成され得る。ポリエチレングリコールをタンパク質およびポリペプチドに結合するための多くの付加的なポリエチレングリコール誘導体および反応化学が、国際公開公報第ＷＯ９８／３２４６６号に述べられている。
【０１１５】
各々のＧＬＰ−１類似体に結合されるポリエチレングリコール部分の数（すなわち置換の程度）も変化させ得る。たとえばペグ化ＧＬＰ−１類似体は、平均して、１、２、３、４または５個、またはそれ以上のポリエチレングリコール分子に結合され得る。置換の程度を決定するための方法は、たとえばＤｅｌｇａｄｏら、１９９２，Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓ．９：２４９−３０４において論じられている。
【０１１６】
ＧＬＰ−１類似体へのＰＥＧの共有結合を生じさせるためには、ＰＥＧのヒドロキシル末端基を最初に反応性官能基に変換しなければならない。この工程はしばしば「活性化」と称され、その生成物は「活性化ＰＥＧ」と呼ばれる。末端で反応性官能基によってキャップされた、メトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）がしばしば使用される。そのような活性化ＰＥＧの１つは、ＰＥＧのスクシンイミジルスクシネート誘導体（ＳＳ−ＰＥＧ）である。Ａｂｕｃｈｏｗｓｋｉら、１９８４，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．７：１７５−１８６；およびポリエチレングリコール−Ｎ−スクシンイミドカルボネートおよびその製剤を開示する米国特許第５，１２２，６１４号も参照のこと。
【０１１７】
以下の実施例の章は、ここで開示するＧＬＰ−１化合物をペグ化するための戦略に関する詳細な指針を提供する。
【０１１８】
ＩＶ．ＧＬＰ−１化合物および類似体を作製するための核酸および方法
提供されるＧＬＰ−１類似体は、化学合成および／または組換え法を含む、当技術分野で確立されている様々な方法を用いて生成することができる。ＰＥＧをペプチドに結合するための種々の戦略は上記に示されている。
【０１１９】
ＧＬＰ−１類似体を化学合成によって作製する場合、そのような方法は、典型的には固相アプローチを含むが、溶液ベースの化学または固相アプローチと溶液アプローチの組合せも利用できる。以下の実施例の章は、環を含む様々な環状化合物を含めて、ここで述べるＧＬＰ−１化合物の合成に関する詳細な指針を含む。
【０１２０】
タンパク質を合成するための固相法の例は、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，１９６４，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９；およびＨｏｕｇｈｔｏｎ，１９８５，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８２：５１３２によって述べられている。ＧＬＰ−１類似体のフラグメントも合成することができ、その後それらを連結することができる。そのような反応を実施するための方法は、Ｇｒａｎｔ，１９９２，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ａ  Ｕｓｅｒ  Ｇｕｉｄｅ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ．；および“Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”１９９３（ＢｏｄａｎｓｋｙとＴｒｏｓｔ編集），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｉｎｃ．Ｎ．Ｙ．によって記述されている。ここで述べるＧＬＰ−１類似体の作製において当業者を導くために十分な、ペプチドを製造するための方法に関するさらなるガイダンスは、Ｌｉｕら、１９９６，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１８：３０７−３１２；Ｋｕｌｌｍａｎｎ，１９８７，Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，ｐ．４１−５９；Ｄｒｙｌａｎｄら、１９８６，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１：１２５−１３７；Ｊｏｎｅｓ，１９９１，Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｃｌａｒｅｎｄｏｎ  Ｐｒｅｓｓ；およびＢｏｄａｎｓｚｋｙ，Ｍ．とＢｏｄａｎｓｚｋｙ  Ａ．，１９９４，Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第２版、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇによって提供される。
【０１２１】
あるいは、ＧＬＰ−１類似体は、確立された組換え手法を用いて作製することができる。たとえば、ＧＬＰ−１類似体をコードする組換え核酸構築物を細胞に導入することにより、ＧＬＰ−１類似体を宿主細胞において発現させ得る。そのような実施形態によれば、細胞は、たとえばポリヌクレオチドをウイルス（またはウイルスベクター）にパッケージングし、そのウイルス（またはベクター）で宿主細胞を形質転換することを含む、ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための何らかの方法を使用して、または米国特許第４，３９９，２１６号、同第４，９１２，０４０号、同第４，７４０，４６１号および同第４，９５９，４５５号（いかなる目的に関しても参照によりここに組み込まれる）によって例示されているような、当技術分野で公知のトランスフェクション手順によって、組換え核酸構築物で形質転換される。使用される形質転換手順は、形質転換される細胞に依存し得る。哺乳動物細胞への異種ポリヌクレオチドの導入のための方法は当技術分野において周知であり、デキストラン媒介性トランスフェクション、リン酸カルシウム沈殿法、ポリブレン媒介性トランスフェクション、プロトプラスト融合、電気穿孔、リポソームへのポリヌクレオチドの封入、核酸を正に荷電した脂質と混合すること、および細胞および細胞核へのＤＮＡの直接的微量注入を含むが、これらに限定されない。
【０１２２】
ＧＬＰ−１類似体アミノ酸配列の全部または機能的部分をコードする核酸分子を、従来の組換え遺伝子手法を用いて適切な発現ベクターに挿入することができる。ベクターは、典型的には使用される特定宿主細胞において機能性であるように選択される（すなわちベクターは宿主細胞機構と適合性であり、遺伝子の増幅および／または発現を許容する）。発現ベクターの総説については、ＮｏｌａｎとＳｈａｔｚｍａｎ，１９９８，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．９：４４７−４５０参照。
【０１２３】
発現ベクターは、市販のベクターなどの好都合な出発ベクターから構築され得る。そのようなベクターは、所望隣接配列全部を含んでもよくまたは必ずしも全部を含まなくてもよい。ここで述べる隣接配列の１またはそれ以上が既にベクター内に存在しない場合、それらを個別に入手し、ベクターに連結し得る。隣接配列の各々を得るために使用される方法は当業者に周知である。
【０１２４】
ベクターが構築され、ＧＬＰ−１類似体をコードする核酸分子がベクターの適切な部位に挿入された後、完成されたベクターを増幅および／またはポリペプチド発現のために適切な宿主細胞に挿入し得る。ＧＬＰ−１類似体をコードする発現ベクターの選択宿主細胞への形質転換は、トランスフェクション、感染、塩化カルシウム法、電気穿孔、微量注入、リポフェクション、ＤＥＡＥ−デキストラン法などの方法、または上述したような他の公知の手法を含む周知の方法によって達成し得る。選択される方法は、一部には、使用される宿主細胞の種類に依存する。これらの方法および他の適切な方法は当業者に周知であり、たとえばＳａｍｂｒｏｏｋら、２００１，  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＣＬＯＮＩＮＧ：  Ａ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＭＡＮＵＡＬ，  ３ｄ  ｅｄ．，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．に示されている。
【０１２５】
宿主細胞は、適切な条件下で培養されたとき、ＧＬＰ−１類似体を合成し、このタンパク質の収集を所望する場合は、その後培地から収集するか（宿主細胞がタンパク質を培地に分泌する場合）またはタンパク質を生産する宿主細胞から直接収集することができる。適切な宿主細胞の選択は、たとえば所望発現レベル、活性のために望ましいまたは必要なポリペプチド修飾（グリコシル化またはリン酸化など）および生物活性分子への折りたたみの容易さなどの、多くの異なる因子に依存する。
【０１２６】
発現のための宿主細胞として使用可能な哺乳動物細胞系は当技術分野において周知であり、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）より入手可能な多くの不死化細胞系、たとえばチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎（ＢＨＫ）細胞、サル腎細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞癌細胞（たとえばＨｅｐ  Ｇ２）、および多くの他の細胞系を含むが、これらに限定されない。ある実施形態では、細胞系は、いずれの細胞系がＧＬＰ−１類似体の高発現レベルを有するかを判定することを通して選択され得る。
【０１２７】
Ｖ．例示的治療用途
ＧＬＰ−１に関連する様々な活性（背景技術参照）を考慮して、ここで述べるＧＬＰ−１化合物は、一般に以下の生物活性の１またはそれ以上を達成するために使用できる：１）インスリン放出を刺激する、２）血糖値を低下させる、３）血漿インスリンレベルを上昇させる、４）β細胞特異的遺伝子（たとえばＧＬＵＴ−１輸送体、インスリン受容体およびヘキソキナーゼ−１）の転写を刺激する、５）β細胞のアポトーシスを阻害し、β細胞の増殖と複製を上昇させることによってβ細胞の量を増加させる、６）満腹感を誘導し、それによって食物摂取を減少させ、体重減少を促進する、７）胃液の分泌を低下させる、８）胃排出を遅延させる、および９）胃の運動性を低下させる。
【０１２８】
ＧＬＰ−１化合物は、それゆえ、Ｉ型またはＩＩ型糖尿病、耐糖能異常、インスリン抵抗性、成人潜伏性自己免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ）、妊娠糖尿病、代謝症候群、および若年者の成人発症糖尿病（ＭＯＤＹ）を含むが、これらに限定されない、多くの異なる形態の糖尿病またはそれと密接に関連する疾患を治療するために使用できる。そこで、ＧＬＰ−１化合物は、感染、ストレス、発作に起因する、または妊娠中に誘導される感受性低下による、インスリンに対する低い感受性を有する個体を治療するために使用できる。治療できる他の種類の糖尿病は、糖尿病がグルカゴノーマ、原発性アルドステロン症、クッシング症候群およびソマトスタチノーマなどのもう１つ別の内分泌疾患に関連するもの、または特定の薬剤またはホルモン（たとえばエストロゲン含有薬剤、精神活性薬剤、高血圧薬、およびサイアザイド利尿薬）の投与によって生じる糖尿病である。
【０１２９】
ＧＬＰ−１化合物はまた、冠疾患および、たとえば高血圧、冠動脈疾患、高脂血症、心臓血管疾患、アテローム性動脈硬化症および高コレステロール血症および心筋梗塞を含む、脂質障害に関連する疾患を治療するために使用できる。
【０１３０】
骨障害、骨粗しょう症および他の関連疾患もＧＬＰ−１組成物で治療することができる。
【０１３１】
ＧＬＰ−１化合物で治療できるさらなる疾患は、肥満、過敏性腸症候群、発作、手術後の異化作用の変化、心筋梗塞および高血糖症を含む。ＧＬＰ−１化合物はまた、鎮静剤として使用することもできる。
【０１３２】
ＧＬＰ−１化合物はまた、上記に列挙したような疾患を発症する危険度が高い個体を治療することを含めて、予防的に使用することができる。具体例として、前記化合物は、インスリン非依存性糖尿病または肥満になる危険度が高い個体に予防的に投与できる。そのような個体は、たとえば耐糖能異常を有するもの、過体重であるもの、および前記疾患に対する遺伝的素因を有するもの（糖尿病の病歴を有する家族からの個体）を含む。
【０１３３】
多種多様な被験体がＧＬＰ−１化合物で治療できる。ここで使用する「被験体」または「患者」という用語は、典型的には哺乳動物を指し、しばしば前記疾患の１つを有するまたは前記疾患の１つに対する危険度が高いヒトであるが、必ずしもそうでなくてもよい。被験体は、しかしながら、非ヒト霊長動物（たとえば類人猿、サル、ゴリラ、チンパンジー）でもよい。被験体はまた、家畜（たとえばウマ、ウシ、ヒツジまたはブタ）、ペット動物（たとえばネコまたはイヌ）または実験動物（たとえばマウスまたはラット）などの、霊長動物以外の哺乳動物でもよい。
【０１３４】
ＶＩ．医薬組成物
Ａ．組成物
ここで提供するＧＬＰ−１化合物は、治療用途の章で列挙した疾患の治療のために製剤された医薬組成物における有効成分として使用できる。それゆえ、開示されるＧＬＰ−１化合物は、上記に列挙したものを含む様々な治療適用における使用のための薬剤の製造において使用できる。
【０１３５】
ＧＬＰ−１化合物に加えて、医薬組成物はまた、ＧＬＰ−１化合物が有用性を有する様々な疾患の１またはそれ以上を治療する上で有用な１またはそれ以上の他の治療薬を含み得る。特定のＧＬＰ−１組成物と組み合わせることができる他の治療薬の一般的なクラスは、インスリン放出薬、グルカゴン分泌の阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、グルカゴン拮抗薬、抗肥満薬、カロリー摂取を低下させる化合物、選択的エストロン受容体調節薬、ステロイドまたは非ステロイドホルモン、成長因子、および食物栄養素を含むが、これらに限定されない。
【０１３６】
そのような付加的な治療薬は、たとえば高血糖症、糖尿病、高血圧、肥満および骨障害を治療するための薬剤を含み得る。組成物に含有され得る、糖尿病を治療するための他の治療薬の例は、脂質障害を治療するときに使用されるものを含む。そのような薬剤の具体例は、胆汁酸抑制剤（たとえばコレスチラミン、リポスタビル、テトラヒドロリプスタチン）、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤（たとえば米国特許第４，３４６，２２７号；同第５，３５４，７７２号；同第５，１７７，０８０号；同第５，３８５，９２９号；および同第５，７５３，６７５号参照）、ニコチン酸、ＭＴＰ阻害剤（たとえば米国特許第５，５９５，８７２号；同第５，７６０，２４６号；同第５，８８５，９８３号；および同第５，９６２，４４０号参照）、リポキシゲナーゼ阻害剤、フィブリン酸誘導体、コレステロール吸収阻害剤、スクアレンシンテターゼ阻害剤（たとえば米国特許第４，８７１，７２１号；同第５，７１２，３９６号；および同第４，９２４，０２４号）、および回腸ナトリウム／胆汁酸共輸送体を含むが、これらに限定されない。組成物に組み込むことができる他の抗糖尿病薬は、メグリチニド、チアゾリジンジオン、ビグアナイド、インスリン分泌促進薬、インスリン抵抗性改善薬、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、ＰＰＡＲ−αアゴニスト、ＰＰＡＲ−γアゴニストを含む。
【０１３７】
ジペプチジルペプチダーゼＩＶ活性の阻害剤も、ＧＬＰ−１類似体のＮ末端での切断を阻害するために含有され得る。
【０１３８】
医薬組成物は、所望製剤に依存して、動物またはヒト投与のために医薬組成物を製剤するために一般的に使用されるビヒクルと定義される、医薬的に許容される非毒性担体または希釈剤を含み得る。希釈剤は、配合剤の生物活性に影響を及ぼさないように選択される。そのような希釈剤の例は、蒸留水、緩衝水、生理的食塩水、ＰＢＳ、リンガー液、デキストロース溶液、およびハンクス液である。加えて、医薬組成物または製剤は、他の担体、アジュバント、または非毒性、非治療性、非免疫原性安定剤、賦形剤等を含み得る。組成物はまた、ｐＨ調節剤および緩衝剤、毒性調節剤、湿潤剤および界面活性剤などの、生理的条件に近付けるための付加的な物質も含み得る。
【０１３９】
組成物はまた、たとえば抗酸化剤などの、様々な安定剤のいずれかを含み得る。医薬組成物がポリペプチド（たとえばＧＬＰ−１類似体）を含む場合、ポリペプチドは、ポリペプチドのインビボでの安定性を高める、またはその薬理的性質を高める（たとえばポリペプチドの半減期を上昇させる、その毒性を低減する、溶解度または再取込みを増強する）、様々な周知の化合物と錯体形成することができる。そのような修飾または錯化剤の例は、硫酸塩、グルコン酸塩、クエン酸塩およびリン酸塩を含む。組成物のＧＬＰ−１類似体はまた、それらのインビボでの属性を高める分子と錯体形成することができる。そのような分子は、たとえば炭水化物、ポリアミン、アミノ酸、他のペプチド、イオン（たとえばナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン）、および脂質を含む。
【０１４０】
医薬組成物はまた、制御放出システムの一部として製剤され得る。そのようなシステムは、移植可能な浸透圧ポンプ、リポソームまたは経皮パッチを含み得る。ポンプを使用した送達のための方法は、たとえばＬａｎｇｅｒ，１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−３３；およびＳａｕｄｅｋら、１９８９，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５７４によって述べられている。リポソームを使用するための送達選択肢は、たとえばＴｒｅａｔら、１９８９，ｉｎ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｔｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｉｎｆｅｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ，（Ｌｏｐｅｚ−ＢｅｒｅｓｔｅｉｎとＦｉｄｌｅｒ編集），Ｌｉｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐ．３５３−６５；およびＬａｎｇｅｒ，１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−３３）によって論じられている。
【０１４１】
様々な種類の投与に適する製剤についてのさらなるガイダンスは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９８５，Ｍａｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．第１７版に見出される。薬剤送達のための方法の簡単な総説については、Ｌａｎｇｅｒ，１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−１５３３参照。
【０１４２】
２．用量
上述したように、医薬組成物は予防的および／または治療的処置のために投与できる。「有効量」は、一般に、所望効果を達成するために十分であるが非毒性である有効成分（たとえばＧＬＰ−１化合物またはＧＬＰ−１類似体）の量を指し、前記所望効果は、症状の重症度および／または頻度の低減または排除、および／または損傷の改善または矯正である。「治療有効量」は、疾患状態または症状を改善する、または疾患または他の何らかの望ましくない症状の進行を予防する、妨げる、遅延させるまたは逆転させるために十分な量を指す。「予防有効量」は、疾患状態または症状の発症を予防する、妨げるまたは遅延させるために有効な量を指す。
【０１４３】
一般に、ＧＬＰ−１化合物の毒性および治療効果は、たとえばＬＤ５０（集団の５０％に致死的な用量）およびＥＤ５０（集団の５０％において治療上有効な用量）を測定することを含む、細胞培養および／または実験動物における標準医薬手順に従って決定され得る。毒性と治療効果の間の用量比が治療指数であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０比として表わすことができる。大きな治療指数を示す組成物が望ましい。
【０１４４】
細胞培養および／または実験動物から得られたデータは、ヒトのための用量範囲を策定するときに使用できる。有効成分の用量は、典型的には、ほとんどまたは全く毒性を伴わないＥＤ５０を含む循環濃度範囲内に存する。用量は、使用される投与形態および使用される投与経路に依存してこの範囲内で変化し得る。
【０１４５】
投与される有効成分の量は、疾患の重症度、治療される被験体の年齢と大きさ、および特定の疾患自体などの、主治医によって評価され得る様々な因子に依存する。一般に、しかし、投与されるＧＬＰ−１類似体自体の総量は、典型的には１μｇ／ｋｇ体重／日−１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。一部の場合には、用量は１０μｇ／ｋｇ／日−１０  ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。他の治療レジメンでは、ＧＬＰ−１化合物は、５０μｇ／ｋｇ／日−５ｍｇ／ｋｇ／日または１００μｇ／ｋｇ／日−１ｍｇ／ｋｇ／日で投与される。
【０１４６】
Ｃ．投与
ここで述べる医薬組成物は様々な方法で投与することができる。例は、経口、鼻内、直腸、局所、腹腔内、静脈内、筋肉内、皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ，ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）、髄腔内、および頭蓋内投与法によって医薬的に許容される担体を含有する組成物を投与することを含む。
【０１４７】
経口投与に関しては、有効成分は、カプセル、錠剤および粉末などの固体投与形態で、またはエリキシル、シロップおよび懸濁液などの液体投与形態で投与することができる。活性成分を、グルコース、ラクトース、スクロース、マンニトール、デンプン、セルロースまたはセルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、サッカリンナトリウム、滑石、炭酸マグネシウムなどの、不活性成分および粉末担体と共にゼラチンカプセルに封入することができる。望ましい色、味、安定性、緩衝能力、分散または他の公知の望ましい特徴を与えるために添加し得る付加的な不活性成分の例は、べんがら、シリカゲル、ラウリル硫酸ナトリウム、二酸化チタン、および食用白色インクである。同様の希釈剤が圧縮錠剤を作製するために使用できる。錠剤およびカプセルのいずれもが、数時間にわたって薬剤の持続的放出を提供する持続放出製剤として製造できる。圧縮錠剤は、不快な味を隠し、大気から錠剤を保護するために糖被覆またはフィルム被覆することができ、または消化管での選択的崩壊のために腸溶被覆することができる。経口投与のための液体投与形態は、患者の受け入れを高めるために着色料および着香料を含有し得る。
【０１４８】
単独または他の適切な成分と組み合わせた有効成分は、吸入によって投与されるエアロゾル製剤（すなわちそれらは「噴霧」され得る）に製造することができる。エアロゾル製剤は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などの許容される加圧推進薬に含め得る。
【０１４９】
直腸投与のための適切な製剤は、たとえば坐薬基剤と共に充填された有効成分から成る坐薬を含む。適切な坐薬基剤は、天然または合成トリグリセリドまたはパラフィン系炭化水素を含む。加えて、たとえば液体トリグリセリド、ポリエチレングリコールおよびパラフィン系炭化水素を含む、基剤と充填有効成分の組合せから成るゼラチン直腸カプセルを使用することも可能である。
【０１５０】
たとえば関節内（関節の中）、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内および皮下経路などの非経口投与に適する製剤は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌薬、および製剤を意図する受容者の血液と等張にする溶質を含有し得る、水性および非水性等張滅菌注射溶液、および懸濁化剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤および防腐剤を含有し得る、水性および非水性滅菌懸濁液を含む。
【０１５１】
医薬組成物を製剤するために使用される成分は、好ましくは高純度であり、潜在的に有害な夾雑物を実質的に含まない（たとえば少なくともＮａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｏｄ（ＮＦ）グレード、一般には少なくとも分析グレード、より典型的には少なくとも医薬品グレード）。さらに、インビボでの使用を意図される組成物は通常無菌である。所与の化合物が使用前に合成されなければならない限り、生じる生成物は、典型的には、合成または精製工程の間に存在し得る、いかなる潜在的毒性物質も、特にいかなる内毒素も実質的に含まない。非経口投与のための組成物も無菌であり、実質的に等張で、ＧＭＰ条件下にて製造される。
【実施例】
【０１５２】
実施される実験および達成される結果を含む、以下の実施例は、説明のみを目的として提供され、本発明を限定すると解釈されるべきではない。
【０１５３】
（実施例１）
ＧＬＰ−１化合物の合成
ペプチド合成
ここで述べるＧＬＰ−１類似体を生成するために以下のプロトコールを使用した。Ｎα−Ｆｍｏｃ、側鎖保護アミノ酸、Wang樹脂、およびRinkアミド樹脂を使用した。以下の側鎖保護戦略を用いた：Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）、Ａｒｇ（Ｐｂｆ）、Ｃｙｓ（Ａｃｍ）、Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）、Ｇｌｕ（Ｏ２−ＰｈｉＰｒ）、Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）、Ｌｙｓ（Ｎε−Ｂｏｃ）、Ｌｙｓ（Ｎε−Ｍｔｔ）、Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）、Ｔｈｒ（ＯｔＢｕ）およびＴｙｒ（ＯｔＢｕ）。ＧＬＰ−１ペプチド誘導体は、Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロ−ホスフェート（ＨＢＴＵ）／Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）カップリング化学を０．２ｍｍｏｌ当量の樹脂スケール（Ｆｍｏｃ脱保護リンクアミド樹脂）で使用して、ペプチド固相合成法（ＳＰＰＳ）によりＡＢＩ４３３ペプチドシンセサイザーで段階的に合成した。各々のカップリングサイクルについて、Ｎα−Ｆｍｏｃアミノ酸１ｍｍｏｌ、ＤＩＥＡ  ４ｍｍｏｌおよびＨＢＴＵの１ｍｍｏｌ当量を使用した。ＨＢＴＵ活性化Ｆｍｏｃアミノ酸の濃度はＤＭＦ中０．５Ｍであり、カップリング時間は４５分であった。Ｆｍｏｃ脱保護は、ＤＭＦ溶液中の３０％ピペリジンを最初に２分間、その後さらに２０分間使用する２回の処理で実施した。
【０１５４】
ラクタム形成
側鎖−側鎖ラクタム形成を、構築したＮ末端Ｆｍｏｃ保護ペプチド樹脂上で実施した。ペプチド−樹脂をＤＣＭ中で３０分間溶媒和し、排液した（ｄｒａｉｎｅｄ）。Ｍｔｔおよび２−ＰｈｉＰｒ基（特定ラクタム結合形成部位で保護する）を、５％ＴＩＳを含むＤＣＭ溶液中１％ＴＦＡで除去した。ＤＣＭ溶液中１％ＴＦＡによるペプチド−樹脂の処理を３０分ずつ８回反復し、各々の処理の後に十分なＤＣＭ洗浄を実施した。次に、遊離カルボキシル基およびアミノ基を、０．５Ｍベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）５当量の添加によって縮合し、ＤＭＦ中のＤＩＥＡ  １０当量をペプチド樹脂に添加して、２４時間放置した。その後樹脂をＤＭＦ、ＤＣＭおよびＤＣＭ／ＭｅＯＨで十分に洗浄し、乾燥させた。
【０１５５】
側鎖の脱保護と樹脂からの切断
合成と修飾後、樹脂を排液し、ＤＣＭ、ＤＭＦ、ＤＣＭで洗浄し、その後真空中で乾燥させた。ペプチド−樹脂を脱保護し、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／１，２−エタンジチオール（ＥＤＴ）／トリイソプロピル−シラン（ＴＩＳ）／Ｈ２Ｏ（９２．５：２．５：２．５：２．５ｖ／ｖ）溶液で室温にて９０分間処理することによって樹脂から遊離させた。次に揮発性物質を窒素ガス流で除去し、粗ペプチドをジエチルエーテルで２回沈殿させ、遠心分離によって収集した。
【０１５６】
Ａｃｍ脱保護
粗ＧＬＰ−１  Ｃｙｓ（Ａｃｍ）保護ペプチドを、新鮮添加した酢酸水銀（ＩＩ）（１５ｍｇ／ｍＬ）を含む１０％ＡｃＯＨ水溶液に溶解した。溶液を周囲温度で４時間攪拌した。次に２−メルカプトエタノールの８０％水溶液を添加して２０％ｖ／ｖの組成物を生成し、十分に混合して、一晩放置した。次に０．１％ＴＦＡ水溶液で希釈し、水銀塩を含む灰色沈殿物を遠心分離とろ過によって除去した。脱保護されたペプチドを、その後、逆相ＨＰＬＣ精製に供した。
【０１５７】
特定実施例
環を含まないＧＬＰ−１化合物を合成するための合成プロトコールを図３に示しており、この図は、８位にＧｌｙ置換、２２位にＡｉｂ置換、およびＣ末端にシステインとアラニンの付加を含む類似体（すなわち配列番号１８）を合成するためのアプローチを例示する。
【０１５８】
図４−１１は、様々な環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを例示する。図４は、たとえば、グルタミン酸とリシン残基の側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を形成するためのスキームを示す。図５は、グルタミン酸とオルニチンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図６は、アスパラギン酸の側鎖とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図７は、アスパラギン酸の側鎖とオルニチンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図８は、リシンの側鎖とグルタミン酸鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図９は、ホモグルタミン酸の側鎖とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図１０は、４−カルボキシ−フェニルアラニンの側鎖とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。図１１は、β−ホモグルタミン酸の側鎖とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を合成するためのアプローチを提供する。
【０１５９】
逆相ＨＰＬＣ精製
逆相高速液体クロマトグラフィーを分析カラム（Ｃ１８、５μｍ、０．４６ｃｍ×２５ｃｍ）または分取カラム（Ｃ１８、１０μｍ、２．２ｃｍ×２５ｃｍ）で実施した。典型的には、解析的分析については１ｍＬ／分の流速にて３５分間で５−９５％、および分取分離については２０ｍＬ／分の流速にて９０分間で５−６５％の、緩衝液Ａ中の緩衝液Ｂ（Ａ＝０．１％ＴＦＡ水溶液；Ｂ＝０．０９％ＴＦＡを含む９０％ＡＣＮ水溶液）の直線勾配を使用してクロマトグラフィー分離を達成した。分析および分取ＨＰＬＣ画分をＥＳＭＳおよびフォトダイオードアレイ（ＰＤＡ）ＨＰＬＣによって特性決定し、選択した画分を合わせ、凍結乾燥した。
【０１６０】
質量分析法
イオンスプレイ大気圧イオン化源を備えたシングル四重極質量分析計で質量スペクトルを取得した。試料（２５μＬ）を、溶融シリカキャピラリーのインターフェース（内径５０μｍ）によってイオン化源に直接結合された移動溶媒（１０μＬ／分；３０：５０：２０  ＡＣＮ／ＭｅＯＨ／０．０５％ＴＦＡ）に注入した。試料の小滴を５ｋＶの正電位でイオン化し、インターフェースプレートを通しておよびその後６０Ｖの電位でオリフィス（直径１００−１２０μｍ）を通して分析計に導入した。フルスキャン質量スペクトルを、０．１Ｄａのスキャンステップサイズで４００−２２００Ｄａの質量範囲にわたって取得した。認められたｍ／ｚ値から分子量を導いた。
【０１６１】
ペグ化
チオエーテル結合ＰＥＧペプチドを、所望結合部位で操作された反応性システインチオールを有するＧＬＰ類似体から導いた（表２参照）。活性化ＰＥＧ誘導体はすべて、５ｋＤ−４０ｋＤの分子量を有する単官能性メトキシＰＥＧ−マレイミド（ｍＰＥＧ−ｍａｌ）であった。結合は、ｐＨ６でのアルキル化によって達成された。簡単に述べると、ペプチドをアミン不含緩衝液（５０ｍＭリン酸ナトリウム、５ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ６）に２ｍｇ／ｍｌで溶解し、ｍＰＥＧ−ｍａｌを控え目な化学量論的過剰量（１．２−１．５倍）で添加し、室温で０．５−２時間反応させた。反応を逆相ＨＰＬＣによって観測し、５ｍＭ  β−メルカプトエタノールで反応停止させて、さらに３０分間室温で放置してインキュベートし、その後精製した。
【０１６２】
精製は、ＳＰセファロースＨＰ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用し、０−５００ｍＭの直線塩化ナトリウム勾配で溶出する分取陽イオン交換クロマトグラフィーによって実施した。溶出されたＰＥＧペプチドをＲＰ−ＨＰＬＣおよびＳＤＳ−ＰＡＧＥによって評価し、プールして、その後濃縮し、１０ｍＭ酢酸ナトリウム、５％ソルビトール、ｐＨ４に透析した。ＲＰ−ＨＰＬＣにより、すべての最終プールについて＞９９％の純度が測定された。標的結合部位の各々におけるＰＥＧとの結合を確認するためにペプチドマッピングと塩基配列決定を使用した。
【０１６３】
（実施例２）
インビボアッセイ
ＧＬＰ−１構築物のインビトロでの効果
Ａ．ＧＬＰ−１Ｒレポーターアッセイ
ＧＬＰ−１と試験化合物の力価を比較するため、ヒトまたはマウスＧＬＰ−１受容体を発現するレポーター細胞系を生成した。ルシフェラーゼレポーター遺伝子の発現増強を通してｃＡＭＰレベルの上昇を測定した。簡単に述べると、環状ＡＭＰレベルによって調節されるルシフェラーゼレポーター遺伝子構築物を担持することに加えて、マウスまたはヒトＧＬＰ−１受容体を発現するＣＨＯＫ１細胞を、アッセイの２日前にプレートし、その後３７℃、５％ＣＯ２で培養した。アッセイの前日の晩に、細胞を洗浄し、培地を、０．５％プロテアーゼ不含ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含む無血清培地と交換し、その後一晩培養した。細胞を、０．５％プロテアーゼ不含ＢＳＡおよび１００μＭ  ＩＢＭＸを含む培地にて３７℃で６時間、一連の濃度の試験化合物またはＧＬＰ−１に暴露した。細胞溶解産物を、Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を使用してルシフェラーゼ活性に関して検定した。ルシフェラーゼ活性はＬｕｍｉｎｏｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍａｒｉｅｔｔａ，ＯＨ）を用いて測定した。生じた化合物濃度曲線の非線形回帰分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて実施した。「ＥＣ５０」は、最大活性の５０パーセントが達成される化合物の濃度を表わす。
【０１６４】
Ｂ．構築物のインビトロでのＧＬＰ−１受容体結合
膜の作製。ヒトまたはマウスのＧＬＰ−１受容体を発現するＣＨＯＫ１細胞を、ＰＢＳを使用して１５０ｍｍ培養皿から採集した。細胞を１５００ｒｐｍで１０分間沈降させた。生じたペレットを氷冷スクロース緩衝液（２５ｍＭトリス−ＨＣｌ、０．３２Ｍスクロース、０．２５ｇ／Ｌアジ化ナトリウム、ｐＨ７．４）１５ｍｌ中で、モータ付きガラス張り（ｇｌａｓｓ  ｆｉｔｔｅｄ）テフロン（登録商標）ホモジナイザで均質化した。ホモジネートを４８，０００×ｇにて４℃で１０分間遠心分離し、Ｔｉｓｓｕｅ−Ｔｅａｒｏｒ（Ｂｉｏｓｐｅｃ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を用いてアッセイ緩衝液（５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０ｍｇ／ｍｌプロテアーゼ不含ＢＳＡ、０．１ｍｇ／ｍｌ  ＳＴＩ、および０．１ｍｇ／ｍｌ  Ｐｅｆａｂｌｏｃ、ｐＨ７．４）２５ｍｌに再懸濁して、その後再び４８，０００×ｇで１０分間遠心分離した。ペレットを、Ｔｉｓｓｕｅ−Ｔｅａｒｏｒを用いてアッセイ緩衝液１５ｍｌ中で３回目の均質化に供し、再び４８，０００×ｇで１０分間遠心分離した。生じたペレットを４ｍｇ／ｍｌの湿重量濃度でアッセイ緩衝液に再懸濁した。
【０１６５】
リガンド結合アッセイ。結合アッセイを９６穴Ｕ底プレートにおいて実施した。膜（組織２００μｇ）を、総容量１００μｌで、０．２ｎＭ  １２５Ｉ−ＧＬＰ−１（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）を含むアッセイ緩衝液中、一連の濃度の試験化合物またはＧＬＰ−１と共に室温で２時間インキュベートした。加えて、１μＭの非標識ＧＬＰ−１の存在下で非特異的結合を評価した。あらかじめ０．５％ポリエチレンイミンに浸したＵｎｆｉｌｔｅｒ−９６  ＧＦ／Ｃガラス繊維フィルタープレート（ＦｉｌｔｅｒＭａｔｅ  １９６  Ｐａｃｋａｒｄ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ，ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｓｈｅｌｔｏｎ，ＣＴ）を通しての速やかなろ過によって反応を終了させ、その後低温５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４の３００μｌで３回洗浄した。結合放射能を、ＴｏｐＣｏｕｎｔ（マイクロプレートシンチレーションおよびルミネセンス計数器（Ｐａｃｋａｒｄ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ，ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｓｈｅｌｔｏｎ，ＣＴ）を用いて測定した。生じた濃度曲線の非線形回帰分析を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて実施した。「ＩＣ５０」は、最大特異的１２５Ｉ−ＧＬＰ−１結合を５０パーセント低下させる化合物の濃度を表わす。
【０１６６】
（実施例３）
インビボアッセイ
Ａ．ｄｂ／ｄｂマウス：
食後血糖値に関してＧＬＰ−１化合物をさらに検討するため、ｄｂ／ｄｂ糖尿病マウスモデルをこのスクリーニングにおいて使用し、この測定を１、２、４、６および２４時間目に観測した。ｄｂ／ｄｂマウスは、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ＪＡＸ（登録商標）  ＧＥＭＭ（登録商標）  Ｓｔｒａｉｎ  −  Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  Ｃｏｎｇｅｎｉｃ  Ｍｉｃｅより市販されており、糖尿病の偶発突然変異に関してホモ接合である（Ｌｅｐｒｄｂ）。これらのマウスは約３−４週齢で特定可能に肥満になった。試験に含めるための各マウスについての選択判定基準は、少なくとも３００ｍｇ／ｄＬの血糖値であった。８．５週齢（慢性１−２週間試験のため）から約１０−１１週齢（急性１−３日間試験のため）のｄｂ／ｄｂマウスに各々の試験化合物を１回（急性実験）または複数回（慢性実験）注射した。実験当日、午前９時にマウスから採血し（基線値）、その後直ちにマウスを注射者に引き渡して、注射者は適切なＧＬＰ−１化合物または陽性／陰性対照を注射した。次にマウスを、摂食行動に関連する血糖値の変動性を制限するため、食餌を含まない新鮮ケージに入れた。通常は１時間、４時間、６時間および２４時間の時点で採血した。２４時間の時点で血糖値が開始時より低い時は、血糖値が基線レベルに戻るまで２４時間ごとにさらなる時点で採血した。６時間の時点の後、通常食を与えた。
【０１６７】
多回注射によってタキフィラキシーを測定した。血糖値が十分に開始時の基線レベルに戻った後、化合物の２回目の注射を実施した。この時点で、化合物が同じ効果／有効性を有するか、または何らかの顕著なタキフィラキーがあるかどうかは明白であった。
【０１６８】
Ｂ．Ｃ５７ｂ１６マウス：
Ｃ５７Ｂ１６（正常やせ型）マウスを１０−１２週齢で使用した。これらのマウスは、Ｊａｃｋｓｏｎ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓまたはＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒなどの業者から市販されており、正常であるとみなされる。「やせ型」という用語は、これらのマウスを肥満ｄｂ／ｄｂマウスと対比するために使用する。Ｃ５７Ｂ１６マウスを体重に関して無作為化した。基線血糖値を測定するために午前９時に採血を実施し、ＧＬＰ−１化合物またはＰＢＳを投与したあと、食餌を含まないケージにマウスを収容した。４−５時間後、２ｇ／ｋｇのグルコース用量を使用して腹腔内ブドウ糖負荷試験（ブドウ糖負荷試験は、ブドウ糖を代謝する身体能力を測定する）を実施した。ブドウ糖負荷の投与後３０分および９０分目および２４時間目に、または血糖値がもとの値に戻るまで、血糖値を測定した。これらの試験から、陰性対照であるＰＢＳに比べて、グルコースを利用する上でのＧＬＰ−１の効果増強作用が認められる。
【０１６９】
（実施例４）
式Ｉに関するＧＬＰ−１化合物についての結果
８位にグリシン置換、２２位にシステイン置換および可変Ｃ末端を有する分子のクラスに関して受容体結合と力価を測定するため、インビトロ実験を実施した。実施例２で述べたように実験を実施し、結果を以下の表３に要約する。
【０１７０】
【表３−１】
2009534423.tif 000066
【０１７１】
【表３−２】
2009534423.tif 000067
表３に示すように、これらの分子の一部は種々の形態のＰＥＧに結合されており、結合は２３位のシステインで生じた。たとえば２０ｋ  ＰＥＧ二量体は２個のペプチドを有する単一２０ｋＤ直鎖ＰＥＧポリマーであり、２個のペプチドはどちらもフォークのように同じ末端で結合する。「フォーク状（ｆｏｒｋｅｄ）」ＰＥＧ−（マレイミド）２はＮｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，ＡＬ，カタログ番号２Ｄ２ＭＯＰＯＦ）から入手でき、以下の構造を有する：
【０１７２】
【化３】
2009534423.tif 000068
「分枝」ＰＥＧ複合体は、単一ペプチド上の同じ部位で結合した２個のポリマーである。分枝ＰＥＧ２−マレイミドも、カタログ番号２Ｄ３Ｘ０Ｐ１１でＮｅｋｔａｒ  Ｔｈｅａｒｐｅｕｔｉｃｓ（Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，ＡＬ）より入手でき、以下の構造を有する。
【０１７３】
【化４】
2009534423.tif 000069
他の分子（たとえばｃｇＧＬＰ−３）は、「ダンベル状」ＰＥＧ複合体である。この立体配置では、２個のペプチドが、ダンベルのように、各々の末端で１つずつ、８ｋＤ  ＰＥＧに結合している。８ｋＤのｍａｌ−ＰＥＧ−ｍａｌポリマーも、カタログ番号ＺＦ−０６６−０５でＮｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，ＡＬ）より入手でき、以下の構造を有する：
【０１７４】
【化５】
2009534423.tif 000070
（実施例５）
式ＩＩに関するＧＬＰ−１化合物についての結果
８位の置換およびＣＳＧまたはＣＳＧＧのいずれかのＣ末端付加を有するＧＬＰ−１化合物に関して受容体結合と力価を測定するため、インビトロ実験を実施した。ペグ化分子を３８位のシステインで結合した。実施例２で述べたように実験を実施し、結果を以下の表４に要約する。
【０１７５】
【表４】
2009534423.tif 000071
（実施例６）
式ＩＩＩに関する化合物についての結果
２２位にＡｉｂ（２−アミノイソ酪酸）またはＡａｄ（２−アミノアジピン酸）置換および場合により８位とＣ末端に置換を有するＧＬＰ−１化合物に関して受容体結合と力価を測定するため、インビトロ実験を実施した。ペグ化分子を３８位のシステインで結合した。実施例２で述べたように実験を実施し、結果を以下の表５に要約する。
【０１７６】
【表５】
2009534423.tif 000072
（実施例７）
環状ＧＬＰ−１化合物に関する結果
一部のアミノ酸の側鎖が結合して環（環状ラクタム）を形成している様々なＧＬＰ−１化合物に関して受容体結合と力価を測定するため、インビトロ実験を実施した。実施例２で述べたように実験を実施した。試験した環状化合物の配列を結果と共に表６に示す。環状ラクタムの形成に関与するアミノ酸の側鎖を太字と下線で示している。表６に列挙する化合物のうちで、ｍｇＧＬＰ−２４だけがペグ化されていた。
【０１７７】
【表６】
2009534423.tif 000073
（実施例８）
Ｎ末端伸長を有するＧＬＰ−１化合物に関する結果
Ｎ末端伸長を有するＧＬＰ−１化合物に関して受容体結合と力価を測定するため、インビトロ実験を実施した。実施例２で述べたように実験を実施し、結果を以下の表７に要約する。表７に列挙する化合物はいずれもペグ化されていなかった。
【０１７８】
【表７】
2009534423.tif 000074
（実施例９）
インビボ結果−時間と血糖値への作用
ここで開示する種々のクラスからの代表化合物（たとえば上述した式Ｉ−ＩＶの一般構造を有する化合物）を含む様々なＧＬＰ−１化合物を、血糖値に影響を及ぼすそれらの能力に関して試験した。これらの実験では、実施例３で述べたようにｄｂ／ｄｂマウスにおいて血糖を測定した。
【０１７９】
図１２は、ｃｇＧＬＰ−１７、ｃｇＧＬＰ−１８、ｃｇＧＬＰ−１９、ｍｇＧＬＰ−０９Ａ（配列およびＰＥＧの大きさと種類については表４および５参照）およびｍｇ−ＧＬＰ−０９Ａが７２時間の期間にわたって血糖を低下させる能力を示す。これらの化合物の各々は対照と比べて血糖を低下させ、ｃｇ−ＧＬＰ−１９が最も長い時間にわたって血糖を低下させた（マウスにおける血糖値が正常レベルに戻るのに１０μｇ／マウス用量で７２時間を要した）。もうひと組の実験をｃｇＧＬＰ−１９、ｃｇＧＬＰ−２０、ｃｇＧＬＰ−２３、ｃｇＧＬＰ−２４（配列およびＰＥＧの大きさと種類については表５参照）に関して実施した。ＧＬＰ−１化合物１０μｇを各マウスに注射した。図１３に示すように、これら４つのＧＬＰ−１化合物は、経時的に血糖値を低下させる同様の能力を示し、各々が４８時間にわたって血糖値の有意の低下を生じさせた。
【０１８０】
もうひと組の実験をｍｇＧＬＰ−２０、ｃｇＧＬＰ−２６、ｍｇＧＬＰ−２２およびｍｇＧＬＰ−２４（配列およびＰＥＧの大きさと種類については表５および６参照）を用いて実施した。用量は１０μｇ／マウスであった。図１４に示すように、各化合物は血糖値を低下させたが、低下の仕方は異なっていた。この例では、ｍｇＧＬＰ−２０およびｍｇＧＬＰ−２４が最も長い時間グルコースを低下させた。これらの２つの化合物に関しては、血糖値が正常レベルに戻るのに７２時間を要した。
【０１８１】
（実施例１０）
用量依存的な血糖の低下
実施例３で述べたように、ｄｂ／ｄｂマウスに種々の用量（５および１０μｇ／マウス）のｍｇＧＬＰ−３２（配列とＰＥＧの大きさについては表５参照）を注射した。図１５に示すように、ｍｇＧＬＰ−３２は、２４時間にわたって用量依存的に血糖値を低下させた。
【０１８２】
（実施例１１）
やせ型ＧＴＴ実験
インスリン放出へのＧＬＰ−１の作用は、グルコースの不在下よりもグルコースの存在下でより大きい。Ｃ５７Ｂ１６マウスは正常血糖を有しており、種々のＧＬＰ−１類似体の間での効果の相違を測定することが難しい（効果についてのウインドウがあまり広くない）。試験したＧＬＰ−１類似体の間で効果を測定するために、実施例３で述べたようにＧＬＰ−１類似体またはＰＢＳの注射の５２時間後にＣ５７Ｂ１６マウスにおいてブドウ糖負荷試験（ＧＴＴ）を実施した。図１６は、ｍｇＧＬＰ−２０、ｍｇＧＬＰ−２２およびｍｇＧＬＰ−２４が、ＧＬＰ−１類似体またはＰＢＳの注射後最初の５２時間に血糖を同程度に低下させたことを示す（配列およびＰＥＧ分子の大きさと種類については表５および６参照）。ＧＴＴに入って３０分目に、ビヒクル処置マウスとＧＬＰ−１類似体処置マウスのグルコースレベルの間で分離が起こり、血糖低下へのＧＬＰ−１類似体の予想された作用を明らかにした。また、３０分目に、ＧＴＴの間の血糖低下においてｍｇＧＬＰ−２４はｍｇＧＬＰ−２２より大きな効果を示し、ｍｇＧＬＰ−２２はｍｇＧＬＰ−２０より大きな効果を示した。
【０１８３】
（実施例１２）
多回投与実験
タキフィラキシーが長時間作用形態のＧＬＰ−１化合物に関する問題であるかどうかを調べるため、ｄｂ／ｄｂマウスにおいて多回投与実験を実施した。ＧＬＰ−１化合物の２回目のボーラスを、翌日、２４時間目の血糖測定の直後に注射したことを除き、実施例３で述べた方法を使用した。図１７に示すように、血糖は、２日目にｍｇＧＬＰ−３３（配列とＰＥＧの大きさについては表５参照）で同程度に低下した。試験したＧＬＰ−１化合物に関してタキフィラキシーは認められなかった。ｍｇＧＬＰ−２０（配列およびＰＥＧの大きさと種類については表５参照）に関しても同じ結果を認めた。
【０１８４】
加えて、ｍｇＧＬＰ−３２（配列およびＰＥＧの大きさと種類については表５参照）に関する４日間の多回投与実験を正常Ｃ５７Ｂ１６マウスにおいて実施した。また、効果を測定するため、１回目の注射後にＧＴＴを実施し、４回目の注射後に２回目のＧＴＴを実施した。ＧＴＴは実施例３で述べたように実施した。血糖に対するＧＬＰ−１類似体の効果を示す結果を図１８に示す。
【０１８５】
図１９に示すように、ｍｇＧＬＰ−２０に関しては４時間の絶食中に血糖が低下した。また、ｍｇＧＬＰ−２０で処置したマウスでは１回目と２回目のＧＴＴの間に血糖スパイクは見られなかった。ｍｇＧＬＰ−２０の４回目の投与後、タキフィラキシーは認められなかった。
【０１８６】
（実施例１３）
ペグ化試験
活性化ＰＥＧポリマーはすべてＮｅｋｔａｒ  Ｔｈｅａｒｐｅｕｔｉｃｓ（Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，ＡＬ）より入手した。使用した種々の形態のＰＥＧ分子の説明は実施例４に述べられている。
【０１８７】
５−４０ｋＤにわたる大きさの数多くのＰＥＧ−マレイミドポリマーが入手可能であり、それらは分枝ＰＥＧポリマーを含み得る、または多価官能基を有し得る。受容体結合への影響を最小限にとどめる改善された薬物動態のための、ＰＥＧの大きさ、ポリマーの分枝およびペプチド原子価の最適のバランスを判定するためにこれらのポリマーを使用した。ＧＬＰ−１類似体を、５ｋＤ、１０ｋＤ、２０ｋＤおよび３０ｋＤの直鎖単官能性ＰＥＧ−マレイミドから作製した。また、４０ｋＤ分枝ＰＥＧ（２×２０ｋＤポリマー）マレイミドも試験した。インビトロ結合アッセイは、ＰＥＧの大きさと受容体親和性の間の逆相関を明らかにし、分枝４０ｋＤポリマーは受容体結合に極めて有意の影響を及ぼす（表３−５）。同様に、ＰＥＧの大きさはインビボでのグルコース低下の期間に影響を及ぼし、より大きなポリマーが、典型的には、最大期間を達成する（データは示していない）。しかし、この作用には限界があり、分枝４０ｋＤポリマーを有する最も大きいＰＥＧ−ＧＬＰ類似体（ｃｇＧＬＰ−２９）はインビボで最も活性ではなかった。
【０１８８】
図２０および２１は、１）「ダンベル」のように、各々の末端に１個ずつ、２個の８ｋＤ  ＰＥＧポリマー；２）２０ｋＤ  ＰＥＧポリマー；３）３０ｋＤ  ＰＥＧポリマー；または４）４０ｋＤ分枝ＰＥＧポリマーにそれぞれ結合した配列番号６および１０によるヒトＧＬＰ−１受容体の活性化についてのＧＬＰ−１レポーターアッセイの結果を示す。興味深いことに、配列番号１０は２０、３０および４０ｋＤのＰＥＧ複合体に関して同様の機能的活性を示し、配列番号６は２０ｋＤ複合体の活性で目立った減少を示し、４０ｋＤの分枝複合体は３０ｋＤおよび８ｋＤのダンベル複合体と類似の力価を示す。これは、受容体結合親和性とＰＥＧの大きさの間で認められた逆相関と著しく異なる。図２２は、１）５ｋＤ  ＰＥＧポリマー；２）１０ｋＤ  ＰＥＧポリマー；３）２０ｋＤ  ＰＥＧポリマー；４）３０ｋＤ  ＰＥＧポリマー；または５）４０ｋＤ分枝ＰＥＧポリマーに結合した配列番号２２を使用したＧＬＰ−１受容体機能アッセイからの同様の結果を示す。これらの結果に対応するＥＣ５０値が表３−５に要約されている。これらのペプチド複合体に関して、非複合ペプチドと同様の力価を有する５ｋＤ  ＰＥＧ複合体を除き、すべての大きさのＰＥＧ複合体に関して同様のインビトロ力価が認められる。ＰＥＧの種々の大きさと形状がグルコースレベルを低下させる能力に及ぼす影響を調べるため、ｃｇＧＬＰ−２５（５ｋＤａ  ＰＥＧ）、ｃｇＧＬＰ−２６（１０ｋＤａ  ＰＥＧ）、ｃｇＧＬＰ−２７（２０ｋＤａ  ＰＥＧ）およびｃｇＧＬＰ−２８（分枝４０ｋＤａ  ＰＥＧ）を用いてインビボでのひと組の実験を実施した。これらの化合物の各々は、配列番号２２のアミノ酸配列を有するが、指示されているように、結合しているＰＥＧの大きさまたは形状が異なる。実施例３で述べたようにｄｂ／ｄｂマウスにおいて血糖を測定した。異なる化合物は異なる形で血糖を低下させ、ｃｇＧＬＰ−２７は最も長期間血糖を低下させた（図２３）。
【０１８９】
ここで述べる実施例および実施形態は説明だけを目的とするものであり、それらに照らして様々な修正または変更が当業者に示唆され、それらの修正または変更は本出願の精神と範囲内および付属の特許請求の範囲内に包含されることが了解される。ここで引用するすべての出版物、特許および特許出願は、各々個々の出版物、特許または特許出願が参照によりここに組み込まれることが特定して個別に指示されているのと同じように、すべての目的に関してそれらの全体が参照によりここに組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【０１９０】
【図１】図１は、結合して環状ラクタムを形成することができる、３個のアミノ酸によって分離されたＧＬＰ−１内の位置の例の図式的表示である。
【図２Ａ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｂ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｃ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｄ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｅ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｆ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｇ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｈ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図２Ｉ】図２Ａ−２Ｉは、グルタミン酸／リシンアミノ酸対の側鎖が結合して環を形成している例示的ＧＬＰ−１類似体の化学構造を示す。ＧＬＰ−１残基は１文字表記で示しており、伸長アミノ酸についての原子は、元素に関する通常の化学表記を用いて示している。エチレングリコール反復単位−［ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ］ｎ−の数は、所望するポリエチレングリコールの大きさ（たとえば５ｋＤａ−６０ｋＤａ）に依存して異なり得る。
【図３】図３は、８位にＧｌｙ置換、２２位にＡｉｂ置換、およびＣ末端にシステインとアラニンの付加を含む類似体（すなわち配列番号１８）を合成するための例示的アプローチを示す。
【図４】図４は、グルタミン酸とリシン残基の側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図５】図５は、グルタミン酸とオルニチンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図６】図６は、アスパラギン酸とリシン残基の側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図７】図７は、アスパラギン酸とオルニチンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図８】図８は、リシンとグルタミン酸残基の側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図９】図９は、ホモグルタミン酸とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図１０】図１０は、４−カルボキシ−フェニルアラニンとリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図１１】図１１は、β−ホモグルタミン酸とリシンの側鎖が結合して環状ラクタムを形成している環状ＧＬＰ−１化合物を作製するための例示的合成スキームを提供する。
【図１２】図１２は、ｃｇＧＬＰ−１７、ｃｇＧＬＰ−１８、ｃｇＧＬＰ−１９またはｃｇＧＬＰ−０９Ａで処置したマウスにおける血糖値を表すグラフを示す。
【図１３】図１３は、ｃｇＧＬＰ−１９、ｃｇＧＬＰ−２０、ｃｇＧＬＰ−２３またはｃｇＧＬＰ−２４で処置したマウスにおける血糖値を表すグラフを示す。
【図１４】図１４は、ｍｇＧＬＰ−２０、ｃｇＧＬＰ−２６、ｍｇＧＬＰ−２２またはｍｇＧＬＰ−２４で処置したマウスにおける血糖値を描画したグラフを示す。
【図１５】図１５は、ｍｇＧＬＰ３２で処置したマウスにおける血糖値を表すグラフを示す。
【図１６】図１６は、ｍｇＧＬＰ−２０、ｍｇＧＬＰ−２２またはｍｇＧＬＰ−２４で処置したマウスに関して実施したひと組のＧＴＴ（ブドウ糖負荷試験）実験の間の血糖値を描画したグラフを示す。
【図１７】図１７は、ｍｇＧＬＰ−３３で処置したマウスにおける血糖値を描画したグラフを示す。
【図１８】図１８は、ｍｇＧＬＰ−３２で処置したマウスにおける血糖値を描画したグラフを示す。
【図１９】図１９は、ｍｇＧＬＰ−２０で処置したマウスにおける血糖値を描画したグラフを示す。
【図２０】図２０は、一部のｃｇＧＬＰ−３、ｃｇＧＬＰ−１、ｃｇＧＬＰ−７およびｃｇＧＬＰ−２へのＰＥＧの大きさと形状の影響を描画したグラフを示す。
【図２１】図２１は、ｃｇＧＬＰ−６、ｃｇＧＬＰ−４、ｃｇＧＬＰ−８、ｃｇＧＬＰ−５へのＰＥＧの大きさと形状の影響を描画したグラフを示す。
【図２２】図２２は、ｃｇＧＬＰ−２５、ｃｇＧＬＰ−２６、ｃｇＧＬＰ−２４、ｃｇＧＬＰ−２８、ｃｇＧＬＰ−２９へのＰＥＧの大きさと形状の影響を描画したグラフを示す。
【図２３】図２３は、配列番号２２に示すアミノ酸配列を有するＧＬＰ−１化合物およびｃｇＧＬＰ−２５、ｃｇＧＬＰ−２６、ｃｇＧＬＰ−２７、ｃｇＧＬＰ−２９のいずれかで処置したｄｂ／ｄｂマウスへのインビボでのＰＥＧの大きさと形状の影響を描画したグラフを示す。
【国際調査報告】
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