(57)【要約】  動物、特にヒトを含む哺乳動物の、筋肉退化、筋萎縮および他の付随する筋疾患に繋がる筋肉の消耗の予防および治療のためのニュートラシューティカル組成物の製造における、ＥＧＣＧ、ヒドロキシチロソール、レスベラトロール、および、それらの誘導体、代謝物または類似体からなる群より選択される少なくとも１種の成分の使用。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
動物、特にヒトを含む哺乳動物の、筋肉退化、筋萎縮および他の付随する筋疾患に繋がる筋肉の消耗の予防および治療のためのニュートラシューティカル組成物の製造における、ＥＧＣＧ、ヒドロキシチロソール、レスベラトロール、および、それらの誘導体、代謝物または類似体からなる群より選択される少なくとも１種の成分の使用。
【請求項２】
請求項１に記載のレスベラトロール、その誘導体、代謝物または類似体の使用であって、ＥＧＣＧ、ヒドロキシチロソールおよびそれらの誘導体、代謝物または類似体からなる群より選択される少なくとも１種の追加成分と組み合わせる使用。
【請求項３】
前記ニュートラシューティカル組成物が、β−カロテン、ルテイン、ゼアキサンチン、リコピンおよびβ−クリプトキサンチンからなる群からの少なくとも１種のカロテノイドをさらに含有する請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
請求項１に記載のレスベラトロール、その誘導体、代謝物または類似体の使用であって、ＥＧＣＧおよびヒドロキシチロソールから選択される少なくとも１種の追加成分と組み合わせた使用。
【請求項５】
ＥＧＣＧと組み合わせた、請求項１に記載のレスベラトロールの使用。
【請求項６】
前記レスベラトロールが、投与する対象の体重１ｋｇ当たり０．０３ｍｇ〜約１０ｍｇの１日量を投与するのに十分な量で使用され、前記ＥＧＣＧが、投与する対象の体重１ｋｇ当たり０．１ｍｇ〜約２０ｍｇの１日量を投与するのに十分な量で使用され、前記ヒドロキシチロソールが、投与する対象の体重１ｋｇ当たり０．０３ｍｇ〜約１０ｍｇの１日量を投与するのに十分な量で使用される請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
前記カロテノイドが、投与する対象の体重１ｋｇ当たり０．０００７〜０．７ｍｇの１日量を投与するのに十分な量で使用される請求項３に記載の使用。
【請求項８】
前記ニュートラシューティカル組成物が、食品もしくは飲料、または、食品もしくは飲料用栄養補助食品組成物である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
前記ニュートラシューティカル組成物が、薬剤組成物である請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、有効成分として、ＥＧＣＧ、ヒドロキシチロソール、レスベラトロール、および、それらの誘導体、代謝物または類似体からなる群より選択される少なくとも１種の成分を含むニュートラシューティカル組成物の新規な使用に関する。
【０００２】
本発明の組成物は、動物、特にヒトを含む哺乳動物における筋肉退化、筋萎縮および他の付随する筋疾患に繋がる筋肉消耗の予防および治療を特に意図したものである。
【０００３】
用語「ニュートラシューティカル」は、ここでは、栄養学分野および薬学分野双方の応用に有用であることを意味する。したがって、新規なニュートラシューティカル組成物は、食品および飲料に加える栄養補助食品、健康補助食品として、また経口もしくは非経口用薬剤（カプセルもしくは錠剤などの固形製剤、溶液もしくは懸濁液などの液体製剤のいずれであってもよい）として使用することができる。上記のことから明らかなように、ニュートラシューティカル組成物という用語には、上記の特定の有効成分を含有する食品および飲料も含まれる。
【０００４】
用語「レスベラトロール、および、それらの誘導体、代謝物または類似体」は、ここでは、一般式
【化１】
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（式中、Ａは炭素−炭素単結合または二重結合を示し、後者はトランスであってもシスであってもよく、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は互いに独立して水素原子、水酸基、エーテル化された水酸基またはエステル化された水酸基を示す）に包含される化合物を含む。Ａが二重結合（−ＣＨ＝ＣＨ−）である化合物Ｉが好ましい。
【０００５】
エーテル化またはエステル化された水酸基は、炭素原子１〜２６個を有する直鎖もしくは分岐鎖状の非置換もしくは置換アルキル基、または、炭素原子１〜２６個を有する直鎖もしくは分岐鎖状の非置換もしくは置換脂肪族、アリール脂肪族もしくは芳香族カルボン酸から誘導することができる。エーテル化された水酸基は、さらにグリコシド基であってもよく、エステル化された水酸基は、さらにグルクロニド基または硫酸基であってもよい。Ａが−ＣＨ＝ＣＨ−である式Ｉで示される化合物の例としては、レスベラトロール（Ｒ１、Ｒ３およびＲ５＝水素原子、Ｒ２、Ｒ４およびＲ６＝水酸基）；ピセアタンノール（Ｒ３およびＲ５＝水素原子、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ６＝水酸基）、並びにラポンティゲニン（Ｒ５＝水素原子、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６＝水酸基、並びにＲ２＝メトキシ基）が挙げられる。Ａが−ＣＨ２−ＣＨ２−である式Ｉで示される化合物の例としては、ジヒドロレスベラトロール（Ｒ１、Ｒ３およびＲ５＝水素原子；Ｒ２、Ｒ４およびＲ６＝水酸基）、ジヒドロピセアタンノール（Ｒ３およびＲ５＝水素原子、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ６＝水酸基）、並びにトリスチン（Ｒ３およびＲ５＝水素原子；Ｒ２、Ｒ４およびＲ６＝水酸基、並びにＲ１＝メトキシ基）が挙げられる。これらの化合物はよく知られており、商業的に入手可能であるか、または、この分野で知られている方法により得ることができる。
【０００６】
用語「ＥＧＣＧ」は、ここでは、（−）−エピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）および／または、その１種以上の誘導体（エステル化物、グリコシド、硫酸塩）を含むものである。ＥＧＣＧは、緑茶に含まれる主要なカテキンである。緑茶が健康に良い効果を有するのは、主にカテキンによるとされている。マウスでは、茶カテキンは血漿レプチン値、トリグリセリド値および血糖値ばかりでなく食餌性体重増加や内臓脂肪塊を低減させた。茶カテキンは、また、ラットでエネルギー消費を増大させることが知られている。ヒトでは、茶カテキンが、体重、内臓脂肪塊、血漿コレステロール値、インシュリン濃度および血糖値を低下させることが示されている。健康な男子では、緑茶抽出物が、エネルギー消費および脂肪燃焼をかなりの程度増大させることが示されている。さらに、ラットの褐色脂肪組織では、ＥＧＣＧが代謝活性および酸素消費を促進させることが示されている。また、いくつかの動物実験で、カテキンがコレステロールの吸収を抑制し、血漿コレステロール値を低下させることが実証されている。さらに、エピカテキンは、コレステロールおよび総脂質の糞便中への排出を増加させる。したがって、ＥＧＣＧは、熱産生の促進および／または脂肪吸収の変化によって、抗肥満作用を示すものである。
【０００７】
用語「ヒドロキシチロソール」は、ここでは、ヒドロキシチロソールおよび／または、１種以上のその誘導体（エステル化物、グリコシド、硫酸塩）、例えばオレウロペインなどを含む。ヒドロキシチロソール、または、その誘導体もしくは類似体の１つは、単一化合物または精製した植物抽出物、特にオリーブの抽出物の形態である。ヒドロキシチロソールは、オリーブに含まれる主要なポリフェノールである。ヒドロキシチロソールは、最も高いフリーラジカル捕捉能（ケルセチンの２倍、エピカテキンの３倍超）を有する抗酸化剤であると考えられている。オリーブの加工過程で発生した排水に高濃度のヒドロキシチロソールが含まれており、それからヒドロキシチロソールを回収して、ヒドロキシチロソール抽出物を製造することができる。ヒドロキシチロソールは、他のポリフェノールと同じ健康増進作用、すなわちアテローム性動脈硬化症の予防、腸および呼吸器の健康増進、並びに癌の予防の作用を有する。ヒドロキシチロソールは、また、喫煙に起因する酸化ストレスを軽減する。
【０００８】
用語「その誘導体、代謝物および類似体」は、ここで使用する場合は、レスベラトロール、ＥＧＣＧおよびヒドロキシチロソールから化学反応によって誘導される化合物、または非常に似た構造を有するものであって、動物に対し同一もしくは類似の薬理活性を示す化合物を包含する。
【０００９】
筋肉の消耗は、進行性の筋肉量の減少、筋肉、特に骨格筋ないし随意筋および心筋の弱体化および変性により特徴付けられる。
【００１０】
筋肉の萎縮と肥大が起きる過程は、全ての哺乳動物で同じである。げっ歯動物およびヒトの両者の筋萎縮過程では、同じ基本的な分子的、細胞的および生理学的過程が起きていることが、多くの研究で実証されている。こうしたことから、げっ歯動物の骨格筋萎縮モデルが、ヒトの萎縮応答の理解および予測に使用され、良い結果を得ている。
【００１１】
筋肉の消耗には様々な原因があり、種々の病変、疾患および疾病と関連している。これらとしては、限定されるものではないが、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、進行性筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、デジュリン・ランドゥジー筋ジストロフィー、エルブ筋ジストロフィーおよび乳児神経軸索性筋ジストロフィーなどの遺伝性疾患により引き起こされる筋ジストロフィーが挙げられる。筋肉の消耗は、また、慢性疾患や加齢により引き起こされる。身体が年を経るにしたがって、骨格筋が繊維組織で置き換えられる割合が増大する。したがって、ヒトの正常な加齢は、骨格筋の量と強度を徐々に減少させ、弱体化と減少をもたらすサルコペニアと呼ぶ症状を伴うことになる。
【００１２】
さらに、高血圧、耐糖能障害および糖尿病などの加齢に伴う障害、肥満、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、並びに、循環器疾患も、また、筋肉量の減少を伴う。
【００１３】
また、癌、自己免疫疾患、感染症、ＨＩＶ感染症、エイズ、慢性炎症、関節炎、栄養失調症、腎臓病、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、骨軟化症、慢性腰痛、末梢神経損傷、脊髄損傷、化学損傷、中枢神経系（ＣＮＳ）障害などの他の病気が、筋肉の消耗をもたらすか、または、その原因となり得る。最後に、筋肉の消耗をもたらす状態が、車椅子の使用、ベッドでの長期療養、骨折または外傷などの病気または障害により長期間動けないといった、筋肉を使用しない状況から生じることがある。外科手術後のベッドでの療養で１週間に約１０％の量の骨格筋が減少すると推測されている。
【００１４】
筋肉が消耗する病気を治療しないと、健康に対する深刻な結果をもたらすおそれがある。
【００１５】
筋肉の消耗過程で起こる変化は、身体状態を衰弱させ、身体能力の低下や健康への有害な影響をもたらすおそれがある。
【００１６】
したがって、筋萎縮は、患者の動けない状態からのリハビリテーションを大きく制限するおそれがある。慢性疾患による筋肉の消耗は、早期の運動能力の喪失に繋がり、かつ、病気に関連する病的状態となるリスクが増大するおそれがある。既に加齢により筋肉機能や筋肉量が低下しているおそれのある高齢者にとっては、使用しないことによる筋肉の消耗は、骨折の割合が増加するのみならず、永久的な障害や早期の死に繋がるなど、特に重大な問題である。この疾患は臨床的に重要であるにもかかわらず、この疾患を予防あるいは回復させる治療法はほとんど存在しない。
【００１７】
今や、意外なことに、ＥＧＣＧ、ヒドロキシチロソール、レスベラトロール、およびそれらの誘導体、代謝物または類似体からなる群より選択される少なくとも１種の成分を有効成分として含む組成物が、動物、特にヒトを含む哺乳動物における筋肉退化、筋萎縮および付随する筋疾患に繋がる筋肉の消耗の予防および治療に有用であることが見出された。
【００１８】
本発明の特定の実施形態では、ニュートラシューティカル組成物は、上で定義した有効成分に加えて、β−カロテン、ルテイン、ゼアキサンチン、リコピンおよびβ−クリプトキサンチンからなる群からの少なくとも１種のカロテノイドを含有する。
【００１９】
本発明に関連する哺乳類およびヒトは別にして、特に対象となる動物の群としては、例えば、馬、ラクダ、ヒトコブラクダ、犬、猫および鳥などの家畜や、動物園で飼育されている動物が挙げられる。家畜、ペットおよび動物園の動物は、飲み水を含む、餌、例えば、ペットフードから、有効成分を摂取することが好ましい。
【００２０】
さらに、本組成物は、筋肉退化の過程の異なるクリティカルパスで作用することが見出された。動物モデルでは、本発明の組成物により、赤身の筋肉量および筋力が増加している。
【００２１】
したがって、本発明は、例えば、筋ジストロフィー、癌、エイズ、関節リウマチ、腎不全、尿毒症、慢性心不全、加齢によるサルコペニア、長期のベッド療養、脊髄損傷、脳梗塞および骨折による筋肉の消耗を含む筋肉消耗疾患の治療用組成物を提供するものである。本発明は、また、肥満、糖尿病、高血糖および骨量減少を含む代謝性疾患の治療法を提供するものである。
【００２２】
本発明の好ましい実施形態では、組成物は、ＥＧＣＧとレスベラトロール、ヒドロキシチロソールとレスベラトロール、ＥＧＣＧとリコピン、ＥＧＣＧとβ−クリプトキサンチン、または、ヒドロキシチロソールとリコピンの組み合わせを含む。さらに、ある種の食習慣では不足する必須栄養素を十分に摂取するために、本発明の栄養補助食品に各種のビタミンおよびミネラルを含んだ補助食品を加えてもよい。各種ビタミンおよびミネラルを含んだ補助食品は、病気の予防や、生活習慣から来る栄養損失および栄養不足の予防に有用である。
【００２３】
別の実施形態では、本発明のニュートラシューティカル組成物は、レスベラトロール、その誘導体、代謝物または類似体と、ＥＧＣＧ、ヒドロキシチロソールおよびそれらの誘導体、代謝物または類似体から選択される少なくとも１種の追加成分、特にレスベラトロールとＥＧＣＧを含む。それらは、そのようなレスベラトロール化合物、特にレスベラトロールを、成人（体重約７０ｋｇ）に約０．５ｍｇ／日〜約２０００ｍｇ／日、好ましくは約５ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日投与できるだけの量を含有する。したがって、ニュートラシューティカル組成物が食品または飲料であれば、それに含まれるレスベラトロール化合物、特にレスベラトロールの量は、１回当たり約０．２ｍｇ〜約５００ｍｇの範囲が適当である。ニュートラシューティカル組成物が薬剤処方であれば、そうした処方には、１固形投与単位当たり、例えば１カプセルまたは１錠当たり、約０．５ｍｇ〜約５００ｍｇ、あるいは、液体製剤の１日量当たり約０．５ｍｇ〜約２０００ｍｇ含有させることができる。ＥＧＣＧは、成人（体重約７０ｋｇ）の１日の消費量が１０ｍｇ／日〜２０００ｍｇ／日の範囲となるような濃度で使用することが好ましい。食品または飲料では、１回当たり約２ｍｇ〜約５００ｍｇのＥＧＣＧを含有させることが好ましい。ニュートラシューティカル組成物が薬剤処方であれば、そうした処方には、１投与単位当たり、例えば１カプセルまたは１錠当たり約５ｍｇ〜約５００ｍｇ、あるいは、液体製剤の１日量当たり約１０ｍｇ〜約２０００ｍｇの量のＥＧＣＧを含有させることができる。
【００２４】
組成物には、ＥＧＣＧに代えて、あるいは、ＥＧＣＧに加えて、ヒドロキシチロソールを含有させることができる。この組成物中のヒドロキシチロソールの量は、１日の投与量が、投与する対象の体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇ〜約６０ｍｇとなるようにすることができる。食品または飲料には、１回当たり約０．３ｍｇ〜約１２５０ｍｇのヒドロキシチロソールを含有させることが適当である。ニュートラシューティカル組成物が薬剤処方であれば、そうした処方には、１投与単位当たり、例えば１カプセルまたは１錠当たり、約１ｍｇ〜約４０００ｍｇ、あるいは、液体製剤の１日量当たり約１ｍｇ〜約４０００ｍｇの量のヒドロキシチロソールを含有させることができる。
【００２５】
β−カロテン、ルテイン、ゼアキサンチン、リコピンおよびβ−クリプトキサンチンからなる群からのカロテノイドの場合、そのようなカロテノイドは、ヒト（例えば、体重約７０ｋｇ）を含む動物の１日の消費量が０．０５ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日（１日量約０．０００７〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重に対応）、より好ましくは０．５ｍｇ／日〜３０ｍｇ／日の範囲となるような濃度で使用することが好ましい。ニュートラシューティカル組成物は、１回当たり、０．０５ｍｇ〜５０ｍｇのカロテノイドを含有することが好ましい。組成物が薬剤組成物であれば、そうした組成物は、１投与単位当たり、例えば１カプセルまたは１錠当たり、あるいは、１液体製剤単位当たり０．５ｍｇ〜５０ｍｇのカロテノイドを含むことが好ましい。
【００２６】
用語「１回」は、ここでは、成人が１回の食事で通常摂取する食品または飲料の量を意味し、例えば、約１００ｇ〜約５００ｇの範囲である。
【００２７】
上で定義された組成物の有効成分は異なる作用機構を有しているので、哺乳動物、特にヒトの筋肉退化、筋萎縮および付随する筋疾患の予防に相乗効果を発揮する。
【００２８】
以下の実施例で本発明をさらに説明する。
【００２９】
［実施例１］
Ｃ５７ＢＬＫＳ／Ｊ  ｄｂ／ｄｂマウス（ｎ＝２０／グループ）への３ヶ月の給餌研究で、レスベラトロール、ＥＧＣＧおよび両化合物の組み合わせの筋肉量に及ぼす効果を試験した。Ｃ５７ＢＬＫＳ／Ｊ  ｄｂ／ｄｂマウスは、レプチン受容体の欠陥による重篤な代謝疾患を患っており、加齢に伴い筋肉量が減少している。筋肉の消耗は、慢性代謝異常を伴う。さらに、多様な手段で誘起された筋肉の消耗は、げっ歯類とヒトの両者で、筋肉の構造、断面積、機能、繊維タイプの切り替わり、収縮性タンパク質の発現、そして組織において類似の変化を示す。また、いくつかの薬物が、げっ歯類およびヒトの両者において、骨格筋の萎縮を調節することが示されている。これらの薬物としては、タンパク同化ステロイド、成長ホルモン、インシュリン様成長因子１およびベータアドレナリン作動薬が挙げられる。データは、骨格筋萎縮が、げっ歯類とヒトの両者で共通のメカニズムで発生していることを示した。したがって、筋肉の消耗を抑制する化合物の効果を調べるのにげっ歯類モデルを使用することができる。
【００３０】
雄のｄｂ／ｄｂマウスを、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（バー・ハーバー、メイン州、米国（Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ，ＵＳＡ））より入手した。実験には、８週齢の成体マウスを使用した。マウスは、ベッド付きプラスチックケージの中で個々に飼育し、標準のげっ歯類用飼料および水道水を自由に摂れるようにした。動物室は、温度（２４℃）、湿度（５５％）および照明（１２時間の明暗サイクル）を調節した。動物をランダムに４グループに分けた。レスベラトロールおよびＥＧＣＧを飼料に混合して投与した。トウモロコシのセルロース（給餌量の１％）がレスベラトロールおよびＥＧＣＧの担体となり、また、単独で使用されるときはプラセボとなった。グループ１にはプラセボを与え、グループ２には０．０８％のレスベラトロールを含有する餌を与え、グループ３には０．０８％のＥＧＣＧを含有する餌を与え、グループ４には０．０８％のレスベラトロールおよび０．０８％のＥＧＣＧを含有する餌を与えた。研究期間を通して、体重および餌摂取量を測定した。３ヶ月の治療後、総筋肉量を核磁気共鳴（ＮＭＲ）により測定した。研究期間を通じて、グループ間の餌摂取量の違いはなかった。
【００３１】
各治療グループの体重および筋肉組織重量を表１に示す。
【００３２】
【表１】
2009511522.tif 000003
【００３３】
治療しなかった動物（対照）では、筋肉量は２％減少した。対照的に、レスベラトロール、ＥＧＣＧおよびレスベラトロール＋ＥＧＣＧグループの筋肉量は、それぞれ６％、３％および９％増加した。したがって、レスベラトロール、ＥＧＣＧおよびこの２つの組み合わせを投与することによって、マウスの筋肉の退化が阻止される。レスベラトロールとＥＧＣＧの組み合わせは、筋肉量を大幅に増加させ、どの単一化合物を単独で使用したときよりも効果的であった。
【００３４】
［実施例２：薬剤組成物（下記に示す成分を使用して、従来の製剤方法により調製することができる）］
［ソフトゼラチンカプセル］
下記に示す成分を使用して、従来の方法によりソフトゼラチンカプセルを調製する：
有効成分：レスベラトロール１０ｍｇおよびビタミンＥ５０ｍｇ
他の成分：グリセロール、水、ゼラチン、植物油。
【００３５】
［ハードゼラチンカプセル］
下記に示す成分を使用して、従来の方法によりハードゼラチンカプセルを調製する：
有効成分：レスベラトロール５ｍｇ、ＥＧＣＧ１００ｍｇ、ゲニステイン５ｍｇ、ビタミンＥ５０ｍｇおよびビタミンＫ１ｍｇ
他の成分：賦形剤：ラクトースまたはセルロースもしくはセルロース誘導体、離型剤：必要に応じてステアリン酸マグネシウム（０．５％）
【００３６】
［錠剤］
下記に示す成分を使用して、従来の方法により錠剤を調製する：
有効成分：レスベラトロール５ｍｇ、ＥＧＣＧ５０ｍｇおよびビタミンＥ２０ｍｇ
他の成分：微結晶性セルロース、二酸化ケイ素（ＳｉＯ２）、ステアリン酸マグネシウムおよびクロスカルメロースナトリウム。
【００３７】
［実施例３：食品は、下記に示す成分を使用して、従来の方法により調製することができる］
レスベラトロール、ＥＧＣＧおよびヒドロキシチロソールを含むソフトドリンクは、以下のように調製することができる：
【００３８】
【表２】
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【００３９】
空気が混入しないようにして、濃縮フルーツジュースと水溶性フレーバーを混合する。着色剤を脱イオン水に溶解させる。アスコルビン酸とクエン酸を水に溶解させる。安息香酸ナトリウムを水に溶解させる。攪拌しながらペクチンを加え、沸騰させて溶解させる。溶液を冷却する。オレンジオイルおよび油溶性フレーバーを混合する。１．６に記載した有効成分を攪拌しながら濃縮フルーツジュース混合物（１．１）に加える。
【００４０】
ソフトドリンク複合物を調製するために、１．１〜１．６の全ての成分を混合し、その後、Ｔｕｒｒａｘ、次いで高圧ホモジナイザー（ｐ１＝２００ｂａｒ、ｐ２＝５０ｂａｒ）を使用して均質化する。
【国際調査報告】
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2009511522.tif 000006
2009511522.tif 000007
2009511522.tif 000008