(57)【要約】  本発明は、IL-6インヒビターとしての一般式(I)で示される新規ヘテロ環式化合物、それらの誘導体、それらの類似体、それらの互変異性型、それらの立体異性体、それらの多形、それらの水和物、それらの溶媒和物、それらの薬学上許容し得る塩および組成物、それらの代謝産物およびプロドラッグに関するものである。さらに詳細には、本発明は、一般式(I)で示される新規ヘテロ環式化合物を提供する。上記の式(I)の化合物の有効量を投与することを含む、癌、癌の悪液質および免疫疾患を包含する炎症性疾患、特に、IL-6のようなサイトカインにより仲介される疾患を、哺乳動物において、pSTAT3阻害を介して治療する方法もまた包含される。
2009511562.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
pSTAT3/IL-6インヒビターとしての、一般式(I)：
【化１】
2009511562.tif 000063
［式中、Bは、
【化２】
2009511562.tif 000064
から選ばれる置換または非置換基を表し、そしてR4は、水素、アルキル、およびベンジルを表し；
Zは、-CH2、-CH-CH3、-C=O、
【化３】
2009511562.tif 000065
を表し、そしてRは、CH2、CH3、およびNHを表し；
nは、0ないし2から選ばれる整数であり；
Aは、水素、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ等を含む直鎖または分岐(C1-C4)アルコキシ基から選ばれるアルコキシ基；フェニル、ナフチル、ベンジル等を含むアリール基から選ばれる置換または非置換基；任意に置換されたベンジル等を含むアラルキル基；任意に置換された、フェノキシ、ナフトキシ等から選ばれるアリールオキシ基；任意に置換された、ピリジル、チエニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、インドリル、インドリニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾピラジニル等を含むヘテロアリール基；任意に置換された、ピロリジニル、N-メチルピロリジニル、チアゾリジニル、オキサゾリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル等を含むヘテロシクリル基；任意に置換された、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル等を含むシクロアルキル基；任意に置換された、ピロリジニル、チアゾリジニル、オキサゾリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル等を含むヘテロシクリル基を表し；
mは、0ないし1から選ばれる整数であり、
さらに、環であるAは、置換または非置換5ないし10員環系を表し、且つこの環は、O、SおよびN等から選ばれる1ないし4個のヘテロ原子を含む、単環式または二環式、飽和または部分飽和または芳香族であり、
環Aは任意に、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、アジド、ニトロソ、アミノ、アミジノ、ヒドラジン、ホルミル、アルキル基(例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル等)；アリール、シクロアルキル、アルコキシ基(メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ等を含む)；フェノキシ、ナフトキシ等を含むアリールオキシ基；アラルキル(例えばベンジル)、アラルコキシ(例えばベンジルオキシ)、アシル、アシルオキシアシル、カルボアルコキシ(例えばアシルオキシ)、カルボキシアルキル(例えばエステル)、カルボキサミド、アミノカルボニル、カルボニル、アルキレンジオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロアリール基(ピリジル、チエニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、インドリル、インドリニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾピラジニル等を含む)；ヘテロアラルキル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアラルコキシ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アシルアミノ、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、アルキルチオ、アリールチオ、スルファニル、スルフィニル、スルホニル、スルファモイル、チオール、アルコキシアルキル基、カルボン酸およびその誘導体で置換されていてもよく、さらに、置換基は、ニトロ、ハロゲンのような基でさらに置換されている］
で示されるヘテロ環式化合物、その誘導体、類似体、互変異性型、立体異性体、多形、水和物、溶媒和物、ならびに薬学上許容し得るそれらの塩および組成物。
【請求項２】
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)-アミノ]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[2-(4-メチルフェノキシ)エチル]アミノ｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-ピペラジン-1-イルプロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-(6,7-ジヒドロチエノ[3,2-c]ピリジン-5(4H)-イル)プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[ベンジル(メチル)アミノ]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-ピロリジン-1-イルプロパン-2-オール；
3-[(4-ベンジルピペラジン-1-イル)]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル)プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[(1R)-1-フェニルエチル]アミノ｝プロパン-2-オール；
1-(4-アセチルピペラジン-1-イル)-3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
t-ブチル 4-[2-ヒドロキシ-3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロピル]ピペラジン-1-カルボキシラート；
3-[(1-ベンジルピペリジン-4-イル)アミノ]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
2-[(3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル)アミノ]-4-ニトロフェノール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-(シクロプロピルアミノ)プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(4,6-ジメチルピリミジン-2-イル)アミノ]プロパン-2-オール；
4-｛[(3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル)アミノ]メチル｝安息香酸；
1-[4-(1,3-ベンゾジオキソール-5-イルメチル)ピペラジン-1-イル]-3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
1-[ベンジル-2,4-(ジメトキシベンジル)アミノ]-3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
1-(1H-ベンズイミダゾール-2-イルアミノ)-3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-1-[(5-メルカプト-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)アミノ]プロパン-2-オール；
3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-1-｛[5-(2-フリル)-1H-ピラゾール-3-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-1-(2,1,3-ベンゾチアジアゾール-5-イルアミノ)プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-ベンジルアミノプロパン-2-オール；
(2R)-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)アミノ]プロパン-2-オール；
(2S)-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)アミノ]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(5-ニトロ-2-フリル)メチル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(5-ニトロ-2-チエニル)メチル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(チアゾール-2-イル)メチル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(シクロプロピルメチル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(3,5-ジメトキシベンジル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(3,4-ジフルオロベンジル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(4-ブロモ-2-フルオロベンジル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(4-メチルチオベンジル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(2,4,6-トリメトキシベンジル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-(5-ニトロ-2-フロイル)ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(5-ニトロ-1H-ピラゾール-3-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(2-フロイル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(1H-インドール-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(チオフェン-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[5-(4-ニトロフェニル)-2-フロイル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(ピラジン-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(3,4-ジメトキシベンゾイル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(4-メトキシフェニル)アセチル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(ペンタフルオロフェニル)アセチルピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(2E)-3-(1,3-ベンゾジオキソール-5-イル)アクリロイル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(キノキサリン-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(6-シアノニコチン-3-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(ピリジン-3-イルアセチル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(チオフェン-3-イルアセチル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(1,3-ベンゾジオキソール-5-イルカルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[3-(1H-インドール-2-カルボニル)プロパノイル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(4-フルオロ-1H-インドール-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(3-フルオロ-4-ヒドロキシフェニル)アセチルピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
3-[4-(1-ベンゾフラン-2-イルカルボニル)ピペラジン-1-イル]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(4-フルオロフェニル)アセチルピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
3-[4-(5-ブロモチオフェン-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
3-[4-(3-アミノプロパノイル)ピペラジン-1-イル]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-(5-メチル-1,3-チアゾール-2-イル)アセトアミド；
2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-(4-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)アセトアミド；
2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-(4-メチル-1,3-チアゾール-2-イル)アセトアミド；
2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-(4-メトキシ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)アセトアミド；
2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-フェニルアセトアミド；
2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-(2,4-ジメトキシベンジル)アセトアミド；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(5-ニトロ-2-フロイル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(1-メチル-1H-ピロール-2-カルボニル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(4-フルオロフェニル)アセチル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(3,4-ジメトキシベンゾイル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
3-｛[1-(1,3-ベンゾジオキソール-5-イルカルボニル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(ペンタフルオロフェニル)アセチルピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(6-シアノニコチン-3-カルボニル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(4-メトキシフェニルアセチル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
N-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-3,4-ジメトキシ-N-メチルベンズアミド；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[3,5-ジメトキシベンジル(メチル)アミノ]プロパン-2-オール；
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニルスルホニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；および、
3-[4-(4-アセチルフェニルスルホニル)ピペラジン-1-イル]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール、
より成る群から選ばれる、請求項1に記載のヘテロ環式化合物。
【請求項３】
式(I)：
【化４】
2009511562.tif 000066
［式中、Aは2,4-ジメトキシフェニル環であり、mは1であり、Zは-CH2であり、nは1であり、Bは-NHである］
で示されるラセミ化合物およびその薬学上許容し得る塩。
【請求項４】
式(I)：
【化５】
2009511562.tif 000067
［式中、Aは2,4-ジメトキシフェニル環であり、mは1であり、Zは-CH2であり、nは1であり、Bは-NHであり、キラル中心の立体配置はRである］
で示される化合物およびその薬学上許容し得る塩。
【請求項５】
式(I)：
【化６】
2009511562.tif 000068
［式中、Aは2,4-ジメトキシフェニル環であり、mは1であり、Zは-CH2であり、nは1であり、Bは-NHであり、キラル中心の立体配置はSである］
で示される化合物およびその薬学上許容し得る塩。
【請求項６】
薬学上許容し得る担体、希釈剤、賦形剤または溶媒和物と共に、活性成分としての請求項1に記載の式(I)の化合物を含む、薬用組成物。
【請求項７】
該組成物が、錠剤、カプセル剤、散剤、シロップ剤、溶液、エアロゾルまたは懸濁液の形態である、請求項6に記載の薬用組成物。
【請求項８】
組成物中の請求項1に記載の化合物の量が70重量%未満である、請求項6に記載の薬用組成物。
【請求項９】
請求項1に記載の化合物の有効量を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、IL-6の血漿中濃度を低下させる方法。
【請求項１０】
請求項1に記載の化合物の有効量を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、免疫疾患を包含する炎症性疾患、特にIL-6のようなサイトカインにより仲介される疾患を、pSTAT3阻害を介して治療する方法。
【請求項１１】
請求項1に記載の化合物の有効量を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における自己免疫疾患、神経疾患、炎症性疾患、例えば関節リウマチ、乾癬、糸球体腎炎、キャッスルマン病；骨喪失、高カルシウム血症、浮腫；敗血症ショック、トキシックショック、多発性骨髄腫、膵炎、癌、癌の悪液質；骨粗鬆症、貧血、白血病、糖尿病、肝臓疾患、炎症性腸疾患、神経障害、腎炎、カポジ肉腫、肝炎、大腸炎、子宮内膜症および感染症の予防または治療方法。
【請求項１２】
構成的に活性なpSTAT3を有する癌細胞における単剤療法としての、癌の治療方法。
【請求項１３】
これらのpSTAT3インヒビターと、他の臨床的に関連する細胞毒性物質または非細胞毒性シグナル伝達インヒビターとの組み合わせによる、癌の治療方法。
【請求項１４】
癌、および癌の悪液質の予防、治療および／または防止方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、pSTAT3/IL-6インヒビターとしての一般式(I)で示される新規ヘテロ環式化合物、それらの誘導体、類似体、互変異性型、立体異性体、多形、水和物、溶媒和物、薬学上許容し得るそれらの塩および組成物、代謝産物およびプロドラッグに関するものである。
【化１】
2009511562.tif 000003
【０００２】
さらに本発明は、式(I)で示される上記の新規ヘテロ環式化合物、それらの誘導体、類似体、互変異性型、立体異性体、多形、水和物、溶媒和物、薬学上許容し得るそれらの塩および組成物、代謝産物およびプロドラッグの製造方法を提供する。この発明はさらに、このような化合物の製造に有用な中間体に関するものである。
【０００３】
本発明は一般に、新規ヘテロ環式化合物および医薬組成物、そしてさらに詳細には、pSTAT3/IL-6インヒビター、免疫系の調節物質および抗癌剤としてのそれらの使用に関するものである。
【背景技術】
【０００４】
発明の背景
癌は全ての年齢の人間が罹患し得るが、老化したDNAにおいてはDNAの損傷がより明らかになるという事実のため、年齢と共に危険性が上がる傾向がある。それは先進国において主たる死因の一つであり、年に1100万人が癌と診断され、2020年までには新たな症例が毎年1600万人になるであろうと見積もられている。癌は全世界で毎年700万人の死、または死亡の12.5%を引き起こす。癌は、全世界、特に非工業化世界よりも工業化世界の大勢の人々を冒す第一位の死因である。2005年において全世界の合計5800万人の死亡のうち、癌が760万人(または13%)を占める。全体としての癌の死亡に繋がる主要な癌の種類は、肺(1300万人の死亡/年)、胃(ほぼ100万人の死亡/年)、肝臓(662000人の死亡/年)、結腸(655000人の死亡/年)および乳房(502000人の死亡/年)である。世界の癌による死亡は増加し続けると予想されており、2015年には推定900万人が、そして2030年には1140万人が癌で死亡すると見積もられている(Parkin D et al, 2002)。
【０００５】
あらゆる細胞は常に決定を迫られている。分割すべきか？分化すべきか？または死すべきか(アポトーシス)？適正な発達および組織のホメオスタシスは、分割とアポトーシス間の正しい均衡に依拠している。アポトーシスが多すぎればアルツハイマー病のように組織の萎縮が導かれる。増殖過多または少なすぎるアポトーシスは癌に繋がる。癌は、制御されない細胞分割を特徴とする、多因子起源の疾患である。身体の臓器における制御されない増殖のため、癌細胞が空間的制約に直面する時、癌細胞が血流またはリンパ系によって運搬されるステージである「転移」と定義されるプロセスにより、他の異なる組織に浸潤する細胞の能力が出現する。
【０００６】
容易にアクセスできる癌に対する最も一般的な治療は、罹患組織の外科的除去および照射である。アクセス不可能な腫瘍に対する治療の選択枝は化学療法である。さらに、転移の範囲にアクセスするのは困難であるため、化学療法は殆どの癌に対する追加保険として行われる。
【０００７】
診療所で現在使用されている最も臨床的関連性のある抗癌薬は細胞分割を妨害し、よって癌細胞に極めて選択的という訳ではなく、また、化学療法がやがて二次癌を導く潜在的可能性がある。さらに、化学療法中の患者においては生活の質が妨げられ、生活の質を落とさずに癌患者の治療を行う、満たされていない医学的必要性がある(Hill R P et al., 2005およびKleinsmith, L J, 2006)。
【０００８】
近年、細胞周期の脱制御および癌細胞増殖の分子的基礎が徹底的に開拓されてきている。シグナル伝達の阻害は、脱制御された増殖シグナル伝達と、これに続く異常な増殖、浸潤、腫瘍由来の血管新生および転移を導く、多くの異なる種類の癌における多数の体細胞突然変異の発見に基づく医生物学的癌研究における実行可能且つ魅力的な達成手段となっている。現在開発されている非細胞毒性薬物の殆どは、グリベック、イレッサおよびタルセバのような蛋白キナーゼインヒビター、レフルノミドのようなチロシンキナーゼインヒビターを包含する。グリベック（登録商標）(STI571)は、bcr-ablキナーゼおよびCMLのインヒビターである。これに対してPKI166はEGFレセプター(HER1)およびerbB(HER2)の二重インヒビターである。EGFレセプターおよびPTK787、VEGFレセプター2(KDR)の強力なインヒビターは、腫瘍の血管新生の抑制によって腫瘍増殖を抑制でき、また、これらの物質は腫瘍患者での治験に入っている(Alex Matter, M.D., 2002)。これらの種類の経口活性な且つ比較的よく寛容される化合物は、単一の薬剤として、または他の充分に確立された細胞毒性物質と組み合わせて、診療所で使用することができる。
【０００９】
サイトカインは多細胞生物の細胞間のコミュニケーションで重要な役割を果たしている。初期の研究は、B細胞系列が宿主免疫防御機構に応答してIL6を分泌する傾向があることを指摘しているが、ここ10年の間に、研究によって、様々な癌表現型におけるIL6レベルの上昇が指摘されている。IL6は、STAT3の燐酸化を介して或る種の癌細胞株の生存および増殖を促進する(Bharti et al., Verma et al., Kerr et al.)。Jak/Stat経路のインヒビターは、癌の潜在的治療標的を表していると思われる(Catlett Falcone et al., 1999; Alas and Bonavida, 2003; Burdelya et al., 2002)。
【００１０】
IL6は、多発性骨髄腫細胞の成長因子であることが判明しており、抗IL6抗体は、白血病患者において骨髄腫細胞の増殖を遮断することが示された(Lkein et al., Blood, 78, (5), pp1198-1204, 1991およびLu et al., Eur. J. Immunol., 22, 2819-24, 1992)。IL6で仲介されるStat3の活性化を低濃度で遮断し、そして多くの悪性疾患において過剰発現、再配列、または突然変異を受けるc-mycのようなプロトオンコジーンの発現を抑制する化合物に対する必要性が存在する(Hallek et al., 1998; Selvanayagam et al., 1988; Jernberg-Wiklund et al., 1992; Kuehl et al., 1997)。
【００１１】
炎症性サイトカイン、特にIL-6およびTNF-αのレベル上昇はさらに、脂肪および骨格筋組織の喪失を含みカロリー摂取の増加に応答しない症候群である、癌に関連する悪液質に随伴して現れる。悪液質は、急性期蛋白の役割にも関連しているかも知れない。急性期反応および急性期蛋白(例えば、C-反応性蛋白[CRP])の産生はIL-6によって仲介される。IL-6のレベル上昇は急性期蛋白を上昇させ、興味深いことにこれは、体重減少および生存減少の増大とも関連しているという事を、研究が関連づけている。したがって、IL-6レベル上昇と共に、アミノ酸代謝は、末梢組織から離れて肝臓が急性期蛋白を産生するような方向に向かう。するとこれが、悪液質の要素である筋肉の萎縮を導く。このように、サイトカインの誘導する急性期反応は、癌関連悪液質の主たる要素であり得る。さらに、動物モデルにおけるIL-6活性の低下または遮断は悪液質を減弱させ、この事は、この症候群の発現においてIL-6の果たす必須の役割をさらに証明するものである。
【００１２】
AG490は、Jak2/Stat3シグナル伝達を阻害するキナーゼインヒビターである。AG490による、標的とされたJak/Stat経路の阻害は、腫瘍細胞の増殖を阻害し、アポトーシス刺激に対する感受性を増大させる。AG490は動物実験においては活性が限定されており、Jak/Stat3シグナル伝達阻害および抗腫瘍活性を示すためには高濃度(〜50-100μM)で使用せねばならない(Burdelya et al., 2002; Meydan et al., 1996; Constantin et al., 1998)。このようにIL6阻害活性を有していると、化合物は、種々の炎症性疾患、敗血症、多発性骨髄腫、形質細胞様白血病、骨粗鬆症、悪液質、乾癬、腎炎、カポジ肉腫、関節リウマチ自己免疫疾患、子宮内膜症および固形癌に有用となり得る(PCT: WO02/074298 A1)。
【００１３】
シグナル伝達物質および転写活性化物質(STAT)：
STAT蛋白は、細胞質から核へと移行することにより、活性化されたサイトカインおよび成長因子レセプターから標的遺伝子へとシグナルを伝達する。STAT3は、細胞周期の進行および細胞生存に関わる遺伝子を調節し、通常、ヒトの腫瘍において過活性化されるが、この事は、STAT3が、有効で魅力的、有望な癌標的であることを示唆している。
【００１４】
シグナル伝達物質および転写活性化物質(STAT)は、細胞外シグナルを伝達し転写を直接調節するという両能力において特異な７つの蛋白より成るファミリー(STAT1、2、3、4、5a、5b、および6)である。STATは、インターロイキン-6およびインターフェロンのようなサイトカイン、または血小板由来成長因子(PDGF)および上皮成長因子(EGF)のような成長因子からの細胞外シグナルを伝達する。これらのレセプターが活性化すると、STATは細胞膜に動員され、そこでレセプターチロシンキナーゼにより、直接保存チロシン残基の燐酸化を介して活性化される。
【００１５】
正常な細胞においてSTAT蛋白は、免疫反応、炎症、増殖、分化、発生、細胞生存、およびアポトーシスといった様々な生理機能の重要な調節物質として同定されている(Ihle and Kerr, 1995; Schindler and Darnell, 1995; Horvath and Darnell, 1997; Stark et al., 1998)。STATシグナル伝達は、正常細胞においては、上流のシグナル伝達蛋白の阻害(例えば、レセプターのインターナライゼーション)、またはSrcおよびJAK蛋白の負の調節物質、例えばSOCS蛋白、ならびにSrcファミリーおよびJAKホスファターゼ(例えば、CD45およびSHP-2)によって厳密に調節されている(Irie-Sasaki et al., 2001; Myers et al., 2001; Lefebvre et al., 2003; Lehmann et al., 2003)。しかしながら腫瘍細胞および組織では、STAT、特にSTAT3およびSTAT5の脱調節および構成的活性化が、腫瘍細胞の増殖および抗アポトーシス活性にとって重要であることが証明されている(Bowman and Jove, 1999; Turkson and Jove, 2000)。
【００１６】
STATは、全てのレベルの腫瘍形成において積極的役割を果たしていることが示されている。STATは増殖性シグナルの生成を司っており(例えば、サイクリンD1、サービビン；Sinibaldi et al., 2000; Aoki et al., 2003)、抗アポトーシス蛋白をアップレギュレートすることが示されている(例えば、Bcl-XL、Bcl-2; Catlett-Falcone et al., 1999)。
【００１７】
加えて、STAT3は、血管新生および腫瘍血管系の維持に必要なVEGF発現をアップレギュレートすることが証明された(Niu et al., 2002)。殆どの腫瘍は、新たに形成された血管から酸素および栄養を供給されない限り、その成長を維持することができない。最も強力な血管新生誘導シグナルの一つは血管内皮成長因子(VEGF)である。これは通常癌細胞によって高レベルに産生され、VEGFは内皮細胞上の膜貫通レセプターチロシンキナーゼに結合し、内皮細胞の移動と増殖を活性化して新血管を形成させる。このSTAT3は、VEGF遺伝子の直接的転写因子であることが示されている。STAT3シグナル伝達の遮断は、SRCおよびIL6で誘発されるVEGFアップレギュレーションを阻害し、故に、上流に存在する他のチロシンキナーゼ経路によるVEGFの誘導を廃絶するかも知れない(Niu et al., Oncogene, 21:2000-2008, 2002およびWei, D et al., Oncogene 22:319-329, 2003)。最後に、STAT3は、プロ炎症因子の発現を遮断することによる、腫瘍成長に対する免疫反応の阻害に関与している(Wang et al., 2004)。
【００１８】
STAT3およびSTAT5の非調節性活性化が、特に乳癌、前立腺癌、メラノーマ、多発性骨髄腫、および白血病を包含する種々の腫瘍タイプで証明されている(Shuai et al., 1996; Garcia et al., 1997, 2001; Catlett-Falcone et al., 1999; Mora et al., 2002; Niu et al., 2002a)。STAT3の構成的活性化が乳癌細胞株でしばしば検出されるが、正常な乳房上皮細胞では検出されない(Gracia et al., Cell. Growth. Differ. 8:1267(1997); Bowman et al., Oncogene 19:2474, 2000)。乳房腫瘍のおよそ60%が、持続的に活性化しているSTAT3を含むと報告されている(Dechow et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA 101:10602, 2004)。
【００１９】
活性化したSTAT3シグナル伝達は、癌の悪性進行に直接貢献している。STAT3オンコジーン機能は、Mcl-1、Bcl-2、およびBcl-XLといったプロ生存蛋白を介して作用し、アポトーシスの阻止を引き起こす(Real et al., Oncogene 21:7611(2002); Aoki et al., Blood 101:1535(2003); Epling-Burnette et al., J. Clin. Invest. 107:351(2001); Neilsen et al., Leukemia 13:735, 1999)。
【００２０】
分子標的としてのSTAT3が、アンチセンスアプローチを用いて(WO2006/012625 A2)、そしてワクチン候補物質として(WO2004/080394 A2)さらに解明された。
【００２１】
STAT3デコイオリゴヌクレオチドを含む組成物は、STATが活性化されている癌、例えば頭頸部の扁平上皮癌を包含する扁平上皮癌の治療に有用である(WO2006/012625 A2)。
【００２２】
STAT3アンタゴニストおよび癌に対するワクチンとしてのそれらの使用：癌を予防および治療するためのEx vivo免疫治療法は、腫瘍細胞におけるSTAT3発現および／または機能の低下、ならびに予防および／または治療を必要とする対象にこのような細胞を投与することを含んでいる。この方法はさらに、T細胞を、STAT3の発現または機能が低下した腫瘍細胞と共に培養することにより、T細胞を活性化することをも含んでいる。それはさらに、抗原提示細胞においてSTAT3発現または機能を低下させ、腫瘍細胞と、この低下したSTAT3機能を持つ抗原提示細胞を患者に同時投与することを含む方法を包含する(WO2004/080394 A2)。
【００２３】
アティプリモド(N-N-ジエチル-8,8-ジプロピル-2-アザスピロ[4.5]デカン-2-プロパンアミン)は、インターロイキン(IL)-6の産生およびラット関節炎および自己免疫動物モデルにおける炎症を有意に阻害する、経口で生物活性なカチオン性両親媒性化合物である。ヒト多発性骨髄腫(MM)細胞に対するアティプリモドの効果が特性解明されている。アティプリモドは、薬物感受性および薬物耐性MM細胞株ならびにMM親細胞において、増殖と、誘発されたカスパーゼ仲介アポトーシスを有意に阻害した。アティプリモドは、IL-6により誘導されるSTAT3およびAktの燐酸化を阻害するが、ERK1/2の燐酸化は阻害しない。それはさらに、腫瘍壊死因子(TNF-α)により誘導されるNFkB p65燐酸化を阻害する。重要なことにアティプリモドは、MM細胞の結合により誘導されるBMSCにおけるIL-6および血管内皮成長因子(VEGF)分泌の両方を阻害し、ヒト臍帯静脈細胞(HUVEC)における血管新生をも阻害する。最後に、アティプリモドは、SCIDマウスにおいてヒトMM細胞増殖に対するインビボ抗腫瘍活性を示す(Makoto Hamasaki et al., Blood First Edition Onsine February 10, 2005; DOI 10.1182/blood-2004-09-3794)。
【００２４】
天然化合物であるクルクミン(化学的にはジフェルロイルメタン)は、ヒトにおいて薬理学的に安全な物質として証明されており、IL6の誘導するSTAT3燐酸化および結果として起こるSTAT3の転位を阻害し、そのようにしてMM増殖の抑制における役割を果たす。或る種の多発性骨髄腫細胞で見いだされたSTAT3の構成的燐酸化もまたクルクミンによる処理によって廃絶された。また、この阻害は可逆的であった(US2005/0049299 A1)。
【００２５】
STAT3の上流調節物質、例えばJanusキナーゼ、特にJak2を阻害する試みもまた行われている(Blaskovich et al., Cancer Res. 63:1270(2000))。高い細胞透過性、STAT3活性化を直接遮断する安定性を有する、STAT3の構造に基づくSTAT3の小分子インヒビターを開発する必要がある。
【００２６】
最も近い化合物を開示する幾つかの先行技術文献を記載する：
i) WO98/09625は、選択的β3アドレナリン作動性アゴニストとしての式(I) ：
【化２】
2009511562.tif 000004
［式中、X1は、-OCH2-、-SCH2、または結合であり；X2は結合であるか、または1ないし5個の炭素原子を有する直鎖または分岐アルキレンであり；X3は、O、S、または結合であり；R1は、式：
【化３】
2009511562.tif 000005
で示される融合ヘテロ環であり；R3は、水素またはC1-C4アルキルであり；R4は、任意に置換されたヘテロ環、または本明細書に記載の構造より成る群から選ばれる部分であり；R5は、水素またはC1-C4アルキルであり；R6は、水素、アルキル等を表す］
で示される化合物を開示している。
【００２７】
ii) US4503067は、式(I)：
【化４】
2009511562.tif 000006
［式中、R1は、水素、低級アルカノイルまたはアロイルであり；R2は、水素、低級アルキルまたはアリールアルキルであり；R3は、水素または低級アルキルであり；R4は、水素または低級アルキルであるか、またはXが酸素である時、R4はR5と一緒にCH2--O--を表し；Xは、原子価結合、--CH2--、酸素または硫黄であり；Arは、単環式または二環式アリールまたはピリジルであり；R5およびR6は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキル、アミノカルボニル、低級アルコキシ、アラルキルオキシ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルフィニルまたは低級アルキルスルホニルから個別に選ばれ；R5およびR6は、一緒にメチレンジオキシを表すことができる］
で示されるカルバゾリル-(4)-オキシプロパノールアミン化合物およびそれらの生理学的に許容し得る酸との塩は、循環器系および心臓疾患、例えば高血圧および狭心症の予防および治療に極めて有効であることを開示している。
【００２８】
iii) WO01/62705は、消化管に選択的な交感神経作動性、抗潰瘍、抗膵炎、脂肪分解、抗尿失禁および抗頻尿活性を有する、有用なアミノアルコール誘導体としての式(I)：
【化５】
2009511562.tif 000007
［式中、X1は、結合または-O(CH2)m-［式中、mは整数1、2または3である］であり、X2は、結合、-(CH2)n-または-CH2O-［式中、nは整数1、2または3である］であり、R1は水素またはアミノ保護基であり；R2は、水素、低級アルキルまたは低級アルコキシまたは低級アルキルであり；Aは、フェニル、ピリジル、インドリルまたはカルバゾリル（それぞれ置換されていてもよい）であり、そしてBは、フェニルまたはピリジル（それぞれ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ等より成る群から選ばれる1または2個の置換基で置換されていてもよい）である］
で示される化合物およびその塩、ならびに医薬として有用な薬学上許容し得るその塩を開示している。
【発明の開示】
【００２９】
発明の目的
満たされていない医学的必要性の故に、そして我々全てが知悉しているように、癌は今日の社会における死因の第一位であるが故に、本発明者等は、特にpSTAT3およびIL-6インヒビターに狙いを定めて、新規な小分子抗癌剤の同定に注意を集中した。本発明者等の絶えざる努力は、式(I)で示される新規な抗癌剤を産み出した。STAT活性化はチロシン燐酸化に依存しており、それは、2個のSTAT単量体間のホスホチロシン(pTyr)-SH2相互作用を介した二量体化を誘導し、特異的DNA応答要素との結合の必要条件である。例えば、AG-490、NSC-521777、JSI-124、ISS-221、ISS-637、ISS-610およびISS-593といった分子のうち幾つかがSTATインヒビターとして文献で報告されたが、これらは全て前臨床段階である。様々なヒトの癌は構成的に活性なpSTAT3に関連しているため、pSTAT3は癌治療の魅力的な標的である。抗癌剤の殆どは、細胞毒性薬物での治療時に抗アポトーシス遺伝子の活性化によって耐性を誘導する。抗アポトーシス遺伝子標的の多くはホスホ-STAT3の制御下にあり、したがってpSTAT3の小分子インヒビターは、臨床的に関連する細胞毒性抗癌剤と相乗作用する。これらの参考文献、および小分子インヒビター開発に対する本発明者等の意志に基づき、本発明者等はこのプロジェクトのための分子標的としてpSTAT3を選択する。
【００３０】
本発明のもう一つの目的は、式(I)で示される新規なヘテロ環式化合物、ならびに毒性作用のない、または毒性作用の低下した、増強された活性を有する薬学上許容し得るそれらの塩および組成物を提供することである。
【００３１】
本発明のさらに別の目的は、式(I)で示される新規なヘテロ環式化合物ならびに薬学上許容し得るそれらの塩および組成物の製造方法を提供することである。
【００３２】
発明の要約
本発明は、pSTAT3/IL-6インヒビターとしての、式(I)：
【化６】
2009511562.tif 000008
［式中、Bは、
【化７】
2009511562.tif 000009
から選ばれる置換または非置換基を表し、そしてR4は、水素、アルキル、およびベンジルを表し；Zは、-CH2、-CH-CH3、-C=O、
【化８】
2009511562.tif 000010
［式中、------- は、任意の結合を表す］、
【化９】
2009511562.tif 000011
を表し、そしてRは、CH2、アルキル、およびNR5［式中、R5は水素およびアルキルを表す］を表し；nは、0ないし2から選ばれる整数であり；環Aは、水素、アルコキシ、および、アリール、アラルキル、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクリルおよびシクロアルキルから選ばれる置換または非置換基を表し；mは、0ないし1から選ばれる整数である］
で示される新規ヘテロ環式化合物、それらの誘導体、類似体、互変異性型、立体異性体、多形、水和物、溶媒和物、ならびに薬学上許容し得るそれらの塩および組成物に関するものである。
【００３３】
前記の事柄は、単に本発明の或る側面を要約しているに過ぎず、決して本発明を限定しようとするものではなく、また、そのように解釈すべきものでもない。本明細書に引用した特許およびその他の刊行物は全て引用によりそれらの全体を本明細書の一部とする。
【００３４】
発明の詳細な説明
本発明は、pSTAT3/IL-6インヒビターとしての、式(I)：
【化１０】
2009511562.tif 000012
［式中、Bは、
【化１１】
2009511562.tif 000013
から選ばれる置換または非置換基を表し、そしてR4は、水素、アルキル、およびベンジルを表し；
Zは、-CH2、-CH-CH3、-C=O、
【化１２】
2009511562.tif 000014
［式中、------- は、任意の結合を表す］、
【化１３】
2009511562.tif 000015
を表し、そしてRは、CH2、アルキル、およびNR5［式中、R5は水素およびアルキルを表す］を表し；
nは、0ないし2から選ばれる整数であり；
Aは、水素、アルコキシ基、例えばメトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ等のような直鎖または分岐(C1-C4)アルコキシ基；フェニル、ナフチル、ベンジル等のようなアリール基から選ばれる置換または非置換基；置換されていてもよいベンジル等のようなアラルキル基；置換されていてもよい、フェノキシ、ナフトキシ等のようなアリールオキシ基；置換されていてもよい、ピリジル、チエニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、インドリル、インドリニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾピラジニル等のようなヘテロアリール基；置換されていてもよい、ピロリジニル、N-メチルピロリジニル、チアゾリジニル、オキサゾリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル等のようなヘテロシクリル基；置換されていてもよい、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル等のようなシクロアルキル基；置換されていてもよい、ピロリジニル、チアゾリジニル、オキサゾリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル等のようなヘテロシクリル基を表し；      mは、0ないし1から選ばれる整数である］
で示される新規ヘテロ環式化合物、それらの誘導体、類似体、互変異性型、立体異性体、多形、水和物、溶媒和物、ならびに薬学上許容し得るそれらの塩および組成物に関するものである。
【００３５】
さらに、環であるAは、置換または非置換5ないし10員環系を表し、そしてさらにこの環は、O、SおよびN等から選ばれる1ないし4個のヘテロ原子を含む、単環式または二環式、飽和または部分飽和または芳香族であってよい。
【００３６】
環Aが置換されている場合、置換されたという語は、1またはそれ以上の水素原子が、ハロゲン(例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素)、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、アジド、ニトロソ、アミノ、アミジノ、ヒドラジン、ホルミル、アルキル基(例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル等)；アリール、シクロアルキル、アルコキシ基(例えば、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ等)；フェノキシ、ナフトキシ等のようなアリールオキシ基；アラルキル(例えばベンジル)、アラルコキシ(例えばベンジルオキシ)、アシル、アシルオキシアシル、カルボアルコキシ(例えばアシルオキシ)、カルボキシアルキル(例えばエステル)、カルボキサミド、アミノカルボニル、カルボニル、アルキレンジオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロアリール基(例えば、ピリジル、チエニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、インドリル、インドリニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾピラジニル等)；ヘテロアラルキル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアラルコキシ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アシルアミノ、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、アルキルチオ、アリールチオ、スルファニル、スルフィニル、スルホニル、スルファモイル、チオール、アルコキシアルキル基、カルボン酸およびその誘導体を包含する(但しこれらに限定される訳ではない)置換基に置き換えられていることを意味する。さらに、置換基は、ニトロ、ハロゲンのような基でさらに置換されていてもよい。
【００３７】
類似体という語は、親構造と1またはそれ以上のC、N、OまたはS原子が異なっている化合物を包含する。したがって、親構造中のN原子のうち1個がS原子に置き換わっている化合物は、その親構造の類似体である。
【００３８】
立体異性体という語は、原子が空間に配置されている様式が相互に異なっているが他の点ではその化学式および構造が同一である異性体を包含する。立体異性体はエナンチオマーおよびジアステレオマーを包含する。
【００３９】
互変異性体という語は、平衡状態にある化合物の、容易に相互変換可能な異性体型を包含する。エノール-ケト互変異性が一例である。
【００４０】
多形という語は、化学的に同一構造を有する化合物の結晶学的に異なる形態を包含する。  
【００４１】
薬学上許容し得る溶媒和物という語は、溶媒分子と溶質化合物の分子またはイオンの組み合わせを包含する。
【００４２】
誘導体という語は、式(I)で示される化合物、それらの類似体、互変異性型、立体異性体、多形、水和物、薬学上許容し得る塩または薬学上許容し得る溶媒和物から、1またはそれ以上の官能基を変換する単純な化学工程、例えば酸化、水素化、アルキル化、エステル化、ハロゲン化等によって得られる化合物を指す。
【００４３】
本発明に係る薬学上許容し得る塩は、Li、Na、およびK塩のようなアルカリ金属塩、CaおよびMg塩のようなアルカリ土類金属塩、ジエタノールアミン、α-フェニルエチルアミン、ベンジルアミン、ピペリジン、モルホリン、ピリジン、ヒドロキシエチルピロリジン、ヒドロキシエチルピペリジン、グアニジン、コリン等のような有機塩基の塩、アンモニウムまたは置換アンモニウム塩、アルミニウム塩を包含する。塩はさらに、グリシン、アラニン、システイン、リジン、アルギニン、フェニルアラニン等のようなアミノ酸塩を包含する。塩には、硫酸塩、硝酸塩、燐酸塩、過塩素酸塩、硼酸塩、ハロゲン化水素酸塩、酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、琥珀酸塩、蓚酸塩、パルモアート、メタンスルホン酸塩、トシル酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、アスコルビン酸塩、グリセロ燐酸塩、ケトグルタル酸塩等が包含され得る。薬学上許容し得る溶媒和物は、水和物であってよく、またはアルコールのような他の結晶化溶媒を含むことができる。
【００４４】
特に有用な本発明の化合物は、以下のものを包含する：
1. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)-アミノ]プロパン-2-オール；
2. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[2-(4-メチルフェノキシ)エチル]アミノ｝プロパン-2-オール；
3. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-ピペラジン-1-イルプロパン-2-オール；
4. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-(6,7-ジヒドロチエノ[3,2-c]ピリジン-5(4H)-イル)プロパン-2-オール；
5. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[ベンジル(メチル)アミノ]プロパン-2-オール；
6. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-ピロリジン-1-イルプロパン-2-オール；
7. 3-[(4-ベンジルピペラジン-1-イル)]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
8. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル)プロパン-2-オール；
9. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[(1R)-1-フェニルエチル]アミノ｝プロパン-2-オール；
10. 1-(4-アセチルピペラジン-1-イル)-3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
11. t-ブチル 4-[2-ヒドロキシ-3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロピル]ピペラジン-1-カルボキシラート；
12. 3-[(1-ベンジルピペリジン-4-イル)アミノ]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
13. 2-[(3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル)アミノ]-4-ニトロフェノール；
14. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-(シクロプロピルアミノ)プロパン-2-オール；
15. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(4,6-ジメチルピリミジン-2-イル)アミノ]プロパン-2-オール；
16. 4-｛[(3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル)アミノ]メチル｝安息香酸；
17. 1-[4-(1,3-ベンゾジオキソール-5-イルメチル)ピペラジン-1-イル]-3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
18. 1-[ベンジル-2,4-(ジメトキシベンジル)アミノ]-3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
19. 1-(1H-ベンズイミダゾール-2-イルアミノ)-3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
20. 3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-1-[(5-メルカプト-1,3,4-チアジアゾール-2-イル)アミノ]プロパン-2-オール；
21. 3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-1-｛[5-(2-フリル)-1H-ピラゾール-3-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
22. 3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-1-(2,1,3-ベンゾチアジアゾール-5-イルアミノ)プロパン-2-オール；
23. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-ベンジルアミノプロパン-2-オール；
24. (2R)-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)アミノ]プロパン-2-オール；
25. (2S)-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)アミノ]プロパン-2-オール；
26. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(5-ニトロ-2-フリル)メチル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
27. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(5-ニトロ-2-チエニル)メチル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
28. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(チアゾール-2-イル)メチル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
29. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(シクロプロピルメチル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
30. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(3,5-ジメトキシベンジル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
31. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(3,4-ジフルオロベンジル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
32. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(4-ブロモ-2-フルオロベンジル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
33. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(4-メチルチオベンジル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
34. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(2,4,6-トリメトキシベンジル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
35. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-(5-ニトロ-2-フロイル)ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
36. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(5-ニトロ-1H-ピラゾール-3-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
37. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(2-フロイル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
38. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(1H-インドール-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
39. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(チオフェン-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
40. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[5-(4-ニトロフェニル)-2-フロイル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
41. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(ピラジン-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
42. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(3,4-ジメトキシベンゾイル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
43. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(4-メトキシフェニル)アセチル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
44. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(ペンタフルオロフェニル)アセチルピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
45. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(2E)-3-(1,3-ベンゾジオキソール-5-イル)アクリロイル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
46. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(キノキサリン-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
47. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(6-シアノニコチン-3-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
48. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(ピリジン-3-イルアセチル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
49. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(チオフェン-3-イルアセチル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
50. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(1,3-ベンゾジオキソール-5-イルカルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
51. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[3-(1H-インドール-2-カルボニル)プロパノイル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オール；
52. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(4-フルオロ-1H-インドール-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
53. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(3-フルオロ-4-ヒドロキシフェニル)アセチルピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
54. 3-[4-(1-ベンゾフラン-2-イルカルボニル)ピペラジン-1-イル]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-プロパン-2-オール；
55. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(4-フルオロフェニル)アセチルピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；
56. 3-[4-(5-ブロモチオフェン-2-カルボニル)ピペラジン-1-イル]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
57. 3-[4-(3-アミノプロパノイル)ピペラジン-1-イル]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
58. 2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-(5-メチル-1,3-チアゾール-2-イル)アセトアミド；
59. 2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-(4-メチル-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)アセトアミド；
60. 2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-(4-メチル-1,3-チアゾール-2-イル)アセトアミド；
61. 2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-(4-メトキシ-1,3-ベンゾチアゾール-2-イル)アセトアミド；
62. 2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-フェニルアセトアミド；
63. 2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-ピペラジン-1-イル｝-N-(2,4-ジメトキシベンジル)アセトアミド；
64. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(5-ニトロ-2-フロイル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
65. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(1-メチル-1H-ピロール-2-カルボニル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
66. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(4-フルオロフェニル)アセチル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
67. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(3,4-ジメトキシベンゾイル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
68. 3-｛[1-(1,3-ベンゾジオキソール-5-イルカルボニル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール；
69. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(ペンタフルオロフェニル)アセチルピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
70. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(6-シアノニコチン-3-カルボニル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
71. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(4-メトキシフェニルアセチル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オール；
72. N-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-3,4-ジメトキシ-N-メチルベンズアミド；
73. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[3,5-ジメトキシベンジル(メチル)アミノ]プロパン-2-オール；
74. 1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニルスルホニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オール；および、
75. 3-[4-(4-アセチルフェニルスルホニル)ピペラジン-1-イル]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール。
【００４５】
上の化合物のリストのための好ましい塩は、塩酸塩、クエン酸塩、ホスホン酸塩、メシル酸塩、ベシル酸塩、トシル酸塩、および蓚酸塩である。
【００４６】
本発明の別の特徴によれば、一般式(I)[式中、全ての基は先に定義のとおりである]で示される新規ヘテロ環式化合物の製造のための、以下の反応式で示される方法が提供される。
【００４７】
【化１４】
2009511562.tif 000016
【００４８】
式1(a)で示される化合物を、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチル、DMSO、アセトニトリルのような適当な溶媒中で、ピリジン、トリエチルアミン、DIPEA、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化ナトリウムのような適当な塩基を用いて、式1(b)で示される化合物と縮合させると、式1(c)で示される化合物が生成し、これを、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチル、THF、アセトンのような適当な溶媒中で、ピリジン、トリエチルアミン、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムのような適当な塩基の存在下で、式1(d)で示されるアミンとさらに反応させると、式1の化合物が生成した。
【００４９】
式1(c)の化合物を、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチル、THF、アセトンのような適当な溶媒中で、ピリジン、トリエチルアミン、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムのような適当な塩基の存在下で、メチルアミンと反応させると、式1(e)で示される化合物が得られ、これを、EDCI、HOBt、DIPEAの存在下、且つTHF、DMF、酢酸エチルのような溶媒の存在下で酸とさらに反応させると、式1の化合物が生成した。
【００５０】
或いは、式1(e)の化合物を、THF、DCM、メタノール、エタノールのような適当な溶媒中、水素化硼素トリアセトキシナトリウム、トリエチルアミン、酢酸の存在下でアルデヒドと反応させると、式1の化合物が生成した。
【００５１】
式1(c)の化合物を、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチル、THF、アセトンのような適当な溶媒中で、ピリジン、トリエチルアミン、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムのような適当な塩基の存在下で、4-アミノ-1-ベンジルピペリジンとさらに反応させると、式1(f)で示される化合物が生成した。メタノール、エタノール、イソプロパノールのような適当な溶媒の存在下でH2圧力下でPd/Cを用いる式1(f)の化合物の脱ベンジル化、または、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチル、THF、アセトンのような溶媒の存在下での、クロロ蟻酸1-クロロエチルとの反応と、その後の、THF、DMF、酢酸エチルのような溶媒の存在下、且つEDCI、HOBt、DIPEAの存在下での酸とのカップリングは、式1の化合物を生成した。
【００５２】
【化１５】
2009511562.tif 000017
【００５３】
式1(c)の化合物を、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチルのような適当な溶媒中で、ピリジン、トリエチルアミン、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化カリウムのような適当な塩基の存在下で、
【化１６】
2009511562.tif 000018
と反応させると、式1(g)で示される化合物が生成し、これをさらに、EDCI、HOBt、DIPEAの存在下、且つTHF、DMF、酢酸エチルのような溶媒の存在下で、酸と反応させると、式1の化合物が生成した。
【００５４】
或いは、式1(g)の化合物を、THF、DCM、メタノール、エタノールのような適当な溶媒中で、水素化硼素トリアセトキシナトリウム、トリエチルアミン、酢酸の存在下で、アルデヒドと反応させると、式1の化合物が生成した。
【００５５】
式1(g)の化合物を、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチルのような適当な溶媒中で、ピリジン、トリエチルアミン、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化カリウムのような適当な塩基の存在下で、RSO2Clと反応させると、式1の化合物が生成した。
【００５６】
式1(g)の化合物を、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチルのような適当な溶媒中で、ピリジン、トリエチルアミン、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化カリウムのような適当な塩基の存在下で、ブロモアセチルブロミドと反応させると、式1(h)で示される化合物が生成し、これをさらに、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチルのような適当な溶媒中で、ピリジン、トリエチルアミン、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化カリウムのような適当な塩基の存在下で、アミンと縮合させると、式1の化合物が生成した。
【実施例】
【００５７】
実施例1  1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)-アミノ]プロパン-2-オールの合成
【化１７】
2009511562.tif 000019
【００５８】
工程1：4-(オキシラン-2-イルメトキシ)-9H-カルバゾールの製造
【化１８】
2009511562.tif 000020
4-ヒドロキシカルバゾール(0.05458mole、10g)およびエピクロロヒドリン(0.10916mole、8.5ml)の混合物にIPA(70ml)を加えた。上の反応混合物に炭酸カリウム(0.13645mole、18.85g)を加え、撹拌した。その後反応混合物を75-85℃に加熱した。6時間後、反応が完結したならば、反応混合物を徐々に室温まで冷却し、濾過した。濾液の容量を80%に減じ、室温で撹拌し、固体が形成されるのでこれを濾過して生成物を得た。
【００５９】
工程2：1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)-アミノ]プロパン-2-オールの製造
【化１９】
2009511562.tif 000021
IPA(20ml)に入れたエポキシカルバゾール(5g、0.0209mole)の撹拌溶液に2,4-ジメトキシベンジルアミン(9.42ml、0.06276mole)を加え、反応混合物を3時間加熱還流した。その後反応混合物を冷却し、IPAを除去した。得られた半固体残留物に酢酸エチル(50ml)を加え、全てが溶解するまでこれを1.5時間還流した。最終的に淡黄色の透明な溶液が得られ、これを室温で5時間攪拌すると、白色固体(8g、94.2%)として完全に結晶化した。m.p.: 152-154℃、1H NMR(400MHz, CDCl3): δ 2.89(m, 1H)、2.99(d, 1H)、3.74(s, 3H)、3.78(s, 3H)、3.81(d, 2H)、4.27(m, 3H)、6.42(m, 2H)、6.65(d, 1H)、7.08(d, 1H)、7.14(m, 2H)、7.29(m, 1H)、7.35(d, 1H)、7.43(d, 1H)、8.22(d, 1H)、9.42(s, 1H)；m/zM+1 406。
【００６０】
実施例1に記載の方法に従い、以下の化合物を製造した。
【表１】
2009511562.tif 000022
【表２】
2009511562.tif 000023
【表３】
2009511562.tif 000024
【表４】
2009511562.tif 000025
【表５】
2009511562.tif 000026
【００６１】
実施例1のラセミ混合物は、HPLCで測定したところ49.67:50.33の比率の2種類の異性体で構成されていた。本発明者等はさらに、下記のように、光学活性エピクロロヒドリンから出発して個々の異性体を合成した。
【００６２】
実施例24  (2R)-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)アミノ]プロパン-2-オールの合成
【化２０】
2009511562.tif 000027
【００６３】
工程1：(R)-(-)-4-(2,3-エポキシプロポキシ)カルバゾールの製造
【化２１】
2009511562.tif 000028
4-ヒドロキシカルバゾール(10.98g、0.06mole)のIPA(60mL)溶液に、K2CO3(20.73g、0.15mole)、続いて(S)-(+)-エピクロロヒドリン(7ml、0.09mole)を加え、反応混合物を徐々に80-90℃に加熱し、次いで5時間還流した。その後、反応混合物を室温に冷却し、濾過してK2CO3固体を除去し、濾液をEtOAc(100mL)で希釈し、水洗した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮し、減圧乾燥して茶色の固体を得た。この固体をEtOAc(150mL)に溶解し、ヘキサンを加えて茶色の沈殿を得、濾液をデカンテーションし、茶色の沈殿を再度EtOAcに溶解し、ヘキサンで沈殿させた。最後にこの沈殿を濾過し、合した濾液を蒸発させて淡茶色の固体を得、これをEtOAcから結晶化することによってさらに精製した。淡茶色結晶を集め、濾液を蒸発させ、EtOAcからさらに結晶化して淡茶色の結晶を得た。この反復結晶化プロセスにより、求める化合物が淡茶色の固体として得られた(7.1g、50%)。
キラル純度：99.3%
SOR：-54.4(ピリジン)
SOR理論値：-63.4(c=1；ピリジン)(参照：米国特許4824963)
【００６４】
工程2：
(2R)-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)アミノ]プロパン-2-オールの製造
【化２２】
2009511562.tif 000029
(R)-(-)-4-(2,3-エポキシプロポキシ)-カルバゾール(7g、0.029mole)のEtOAc/IPA(40/80mL)溶液に2,4-ジメトキシベンジルアミン(8.7mL、0.058mole)を加え、反応混合物を徐々に80-90℃に加熱し、次いで5時間還流した。続いてこの反応混合物を半量に濃縮し、室温に冷却して無色固体を得た。この固体を濾過し、還流によりEtOAc(60mL)に再溶解し、40mLに濃縮し、室温に冷却して形成させた無色沈殿を濾過し乾燥した。濾液から得られた残留物の再結晶を、最大量の固体が回収されるまで反復した。合した固体をジエチルエーテルと共に6時間攪拌することにより磨砕し、その後濾過すると、無色固体の所望化合物5.5g(収率46%)が得られた。m.p: 152-153℃。1H NMR(400MHz, CDCl3): δ 2.17(s, 1H)、2.86-2.92(m, 1H)、2.99-3.02(m, 1H)、3.74-3.86(m, 8H)、4.18-4.32(m, 3H)、6.38-6.44(m, 2H)、6.67(d, 1H, J=8.0Hz)、7.04(d, 1H, J=8.0Hz)、7.12(d, 1H, J=8.0Hz)、7.18-7.41(m, 4H)、8.09(s, 1H)、8.21(d, 1H, J=8.0Hz)。；MS m/z: 407.1(M+1)。キラル純度：99.99%。
【００６５】
実施例25  (2S)-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)アミノ]プロパン-2-オールの合成
【化２３】
2009511562.tif 000030
【００６６】
工程1：(S)-(-)-4-(2,3-エポキシプロポキシ)カルバゾールの製造
【化２４】
2009511562.tif 000031
IPA(60mL)に溶解した4-ヒドロキシカルバゾール(10.98g、0.06mole)の溶液に、K2CO3(20.73g、0.15mole)、続いて(R)-(-)-エピクロロヒドリン(7mL、0.09mole)を加え、反応混合物を徐々に80-90℃に加熱し、その後5時間還流した。その後反応混合物を室温に冷却し、後処理し、実施例23の合成の工程Iの記載と同様の方法に従い精製すると、淡茶色固体の所望化合物が得られた(7.56g、53%)。
【００６７】
工程2：(2S)-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[(2,4-ジメトキシベンジル)アミノ]プロパン-2-オールの製造
【化２５】
2009511562.tif 000032
(S)-(+)-4-(2,3-エポキシプロポキシ)-カルバゾール(7.56g、0.031mole)のEtOAc/IPA(40/80mL)溶液に2,4-ジメトキシベンジルアミン(9.48mL、0.063mole)を加え、反応混合物を徐々に80-90℃に加熱し、次いで5時間還流した。その後反応混合物を室温に冷却し、実施例23の合成の工程IIの記載と同様の方法に従い精製すると、無色固体の所望化合物が得られた(6g、48%)。m.p: 152-154℃。1H NMR(400MHz, CDCl3): δ 2.17(s, 1H)、2.88-2.92(m, 1H)、2.98-3.00(m, 1H)、3.74-3.87(m, 8H)、4.18-4.32(m, 3H)、6.38-6.45(m, 2H)、6.67(d, 1H, J=8.0Hz)、7.05(d, 1H, J=8.0Hz)、7.12(d, 1H, J=8.0Hz)、7.18-7.40(m, 4H)、8.08(s, 1H)、8.21(d, 1H, J=8.0Hz)。；MS m/z: 407.1(M+1)。キラル純度：99.96%。
【００６８】
実施例26  1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(5-ニトロ-2-フリル)メチル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オールの合成
【化２６】
2009511562.tif 000033
【００６９】
工程1：3-[(4-ベンジルピペラジン-1-イル)]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オールの製造
【化２７】
2009511562.tif 000034
室温の、4-(2,3-エポキシプロポキシ)-カルバゾール(5g、21mmol)のTHF(25mL)溶液にN-ベンジルピペラジン(5.5g、31.3mmol)を加え、反応混合物を還流下に撹拌した。12時間後、反応塊を室温に冷却し、酢酸エチル(200mL)で希釈し、水およびブライン溶液で洗浄した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮すると、淡茶色ペーストの粗製化合物が得られた。この粗製化合物にジイソプロピルエーテル(100mL)を加え、室温で撹拌し、次いで濾過してオフホワイト色の固体を得、これをさらに40℃のイソプロピルエーテル(3x50mL)で洗浄すると、無色固体の所望化合物8.0g(収率92%)が得られた。
【００７０】
工程2：1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-ピペラジン-1-イルプロパン-2-オールの製造
【化２８】
2009511562.tif 000035
3-[(4-ベンジルピペラジン-1-イル)]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール(実施例26工程Iに記載の方法に従って製造。8.0g、19.3mmol)のメタノール(100mL)溶液に、500mLパール振盪フラスコ中で10% Pd/C(1.6g)を加えた。フラスコを脱気し、40psiのH2圧をかけ、8時間振盪した。反応混合物をセライト層(2.0g)で濾過し、得られた溶液を濃縮して、無色ペーストの粗製化合物を得た。この粗製化合物をヘキサン(100mL)と共に室温で撹拌し、デカンテーションし、同様にイソプロピルアルコール(3x50mL)、続いてジエチルエーテル(2x50mL)で磨砕すると、無色固体の標題化合物5.5g(収率88%)が得られた。
【００７１】
工程3：1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-[(5-ニトロ-2-フリル)メチル]ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オールの製造
【化２９】
2009511562.tif 000036
THF(10mL)に入れた1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-ピペラジン-1-イルプロパン-2-オール(0.5g、1.54mmol)の混合物に、氷酢酸2-3滴、続いて5-ニトロフルフラール(0.325g、2.3mmol)を加えた。上の溶液に室温でNa(OAc)3BH(0.98g、4.6mmol)を注意深く加え、反応混合物を室温で6時間攪拌した。その後反応混合物をジクロロメタン(50mL)で希釈し、水およびブライン溶液で洗浄した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮し、ジクロロメタン/MeOH(9:1)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製すると、黄色固体の標題化合物(0.2g、収率29%)が得られた。m.p: 54-59℃。1H NMR(400MHz, CDCl3): δ 2.40-2.65(m, 6H)、2.70-2.80(m, 4H)、3.67(s, 2H)、4.20-4.25(m, 1H)、4.27-4.34(m, 2H)、6.49(d, 1H, J=3.6Hz)、6.67(d, 1H, J=8.0Hz)、7.06(d, 1H, J=8.0Hz)、7.20-7.50(m, 5H)、8.27(s, 1H)、8.30(d, 1H, J=8Hz)。；MS m/z: 451(M+1)。
【００７２】
実施例26に記載の方法に従い、以下の化合物を製造した。
【表６】
2009511562.tif 000037
【表７】
2009511562.tif 000038
【００７３】
実施例35
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛4-(5-ニトロ-2-フロイル)ピペラジン-1-イル｝プロパン-2-オールの合成
【化３０】
2009511562.tif 000039
5-ニトロフロ酸(1.56g、9.9mmol)のDMF(30mL)溶液に、DIPEA(4.3mL、24.8mmol)、EDCI(3.18g、16.5mmol)、HOBt(0.44g、3.3mmol)、その後1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-ピペラジン-1-イルプロパン-2-オール(2.7g、8.3mmol。上記の実施例26工程IIに記載の方法に従って製造)を加えた。反応混合物を室温で12時間攪拌し、DCM(100mL)で希釈し、水およびブライン溶液で洗浄した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮し、ヘキサン/EtOAc(4:6)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製すると、黄色固体の標題化合物(2.0g、収率51%)が得られた。m.p: 178-181℃。1H NMR(400MHz, DMSO): δ 2.30-2.60(m, 4H)、2.67-2.69(m, 2H)、3.63-3.69(m, 4H)、4.13-4.21(m, 3H)、5.08(s, 1H)、6.69(d, 1H, J=8.0Hz)、7.06(d, 1H, J=8.0Hz)、7.14(t, 1H, J=8.0Hz)、7.24-7.36(m, 3H)、7.44(d, 1H, J=8.0Hz)、7.66(d, 1H, J=4.0Hz)、8.22(d, 1H, 8.0Hz)、11.25(s, 1H)。；MS m/z: 464.8(M+1)。
【００７４】
実施例35に記載の方法に従い、以下の化合物を製造した。
【表８】
2009511562.tif 000040
【表９】
2009511562.tif 000041
【表１０】
2009511562.tif 000042
【表１１】
2009511562.tif 000043
【表１２】
2009511562.tif 000044
【００７５】
実施例58  2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]ピペラジン-1-イル｝-N-(5-メチル-1,3-チアゾール-2-イル)アセトアミドの合成
【化３１】
2009511562.tif 000045
【００７６】
工程1：2-ブロモ-N-(5-メチル-1,3-チアゾール-2-イル)アセトアミドの製造
【化３２】
2009511562.tif 000046
0℃に冷却した2-アミノ-5-メチルチアゾール(1g、8.75mmol)のジクロロメタン(56mL)溶液に、ブロモアセチルブロミド(0.9mL、10.5mmol)およびTEA(1.83mL、13.1mmol)を同温で撹拌しつつ同時に1時間かけて滴下した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、水およびブライン溶液で洗浄した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮すると、オフホワイト固体の粗製化合物1.6g(収率78%)が得られた。
【００７７】
工程2：2-｛4-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]ピペラジン-1-イル｝-N-(5-メチル-1,3-チアゾール-2-イル)アセトアミドの製造
【化３３】
2009511562.tif 000047
2-ブロモ-N-(5-メチル-1,3-チアゾール-2-イル)アセトアミド(実施例58工程Iに記載の方法に従って製造。0.2g、0.92mmol)のTHF(10mL)溶液にNaI(0.06g、0.38mmol)を加え、反応混合物を室温で1時間攪拌し、続いてK2CO3(0.05g、0.38mmol)を加え、撹拌をさらに10-15分間続けた。上の溶液に、THF(10mL)中の1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-ピペラジン-1-イルプロパン-2-オール(実施例26工程IIに記載の方法に従って製造。0.25g、0.76mmol)を滴下し、その後TEA(0.32mL、2.3mmol)を加え、これを室温で3時間攪拌した。次にこの反応混合物を濃縮し、EtOAc(50mL)で希釈し、水およびブラインで洗浄した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮し、ジクロロメタン/MeOH(9.2:0.8)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製すると、黄色吸湿性固体の標題化合物(0.152g、収率42%)が得られた。1H NMR(400MHz, CDCl3): δ 2.42(s, 3H)、2.51-3.00(m, 10H)、3.26(s, 2H)、4.23-4.36(m, 3H)、6.68(d, 1H, J=8.0Hz)、7.06-7.10(m, 2H)、7.27-7.42(m, 3H)、8.20(s, 1H)、8.26(d, 1H, J=8.0Hz)、10.16(s, 1H)。；MS m/z: 480.1(M+1)。
【００７８】
実施例58に記載の方法に従い、以下の化合物を製造した。
【表１３】
2009511562.tif 000048
【００７９】
実施例64  1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(5-ニトロ-2-フロイル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オールの合成
【化３４】
2009511562.tif 000049
【００８０】
工程1：3-[(1-ベンジルピペリジン-4-イル)アミノ]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オールの製造
【化３５】
2009511562.tif 000050
5-10℃に冷却した4-(2,3-エポキシプロポキシ)カルバゾール(1g、4.1mmol)のTHF(30mL)溶液にLiClO4(0.44g、4.1mmol)を加え、反応混合物を15分間撹拌した。上の反応混合物に4-アミノ-1-ベンジルピペリジン(1.26mL、6.2mmol)を室温で滴下し、撹拌を12時間続けた。この反応混合物に飽和NH4Cl 50mLを加え、5分間撹拌を続け、その後溶液をジクロロメタン(100mL)で抽出し、水およびブライン溶液で洗浄した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮して淡茶色ペーストの粗製化合物を得た。この粗製化合物をDCM/MeOH(7:3)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製すると、薄黄色固体の標題化合物(1.2g、収率65%)が得られた。
【００８１】
工程2：1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-(ピペリジン-4-イルアミノ)プロパン-2-オールの製造
【化３６】
2009511562.tif 000051
3-[(1-ベンジルピペリジン-4-イル)アミノ]-1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)プロパン-2-オール(実施例64工程Iに記載の方法に従って製造。0.5g、1.16mmol)のメタノール(100mL)溶液に、500mLパール振盪フラスコ中で10%Pd/C(0.15g)を加えた。フラスコを脱気し、40psiのH2圧をかけ、10時間振盪した。反応混合物をセライト層(2.0g)で濾過し、得られた溶液を濃縮して、薄茶色ペーストの粗製化合物を得た。この粗製化合物をヘキサン(2x20mL)で磨砕すると、薄黄色固体の所望化合物(0.31g、収率87%)が得られた。
【００８２】
工程3：1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-｛[1-(5-ニトロ-2-フロイル)ピペリジン-4-イル]アミノ｝プロパン-2-オールの製造
【化３７】
2009511562.tif 000052
5-ニトロフロ酸(0.14g、0.88mmol)のDMF(6mL)溶液に、TEA(0.17mL、1.2mmol)、EDCI(0.2g、1.0mmol)、HOBt(0.031g、0.23mmol)、その後1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-(ピペリジン-4-イルアミノ)プロパン-2-オール(0.2g、0.6mmol。実施例64工程IIに記載の方法に従って製造)を加えた。反応を室温で12時間攪拌し、DCM(25mL)で希釈し、水およびブライン溶液で洗浄した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮し、DCM/MeOH(9.5:0.5)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製すると、赤色ペーストの標題化合物(45mg、収率32%)が得られた。1H NMR(400MHz, DMSO): δ 1.20-1.80(m, 3H)、1.90-2.30(m, 2H)、2.50-3.60(m, 6H)、4.00-4.60(m, 3H)、6.72(d, 1H, J=8.0Hz)、6.90-7.60(m, 6H)、7.77(d, 1H, J=3.6Hz)、8.22(d, 1H, J=8.0Hz)、11.30(s, 1H)。MS m/z: 478.1(M+)。
【００８３】
実施例64に記載の方法に従い、以下の化合物を製造した。
【表１４】
2009511562.tif 000053
【表１５】
2009511562.tif 000054
【００８４】
実施例72  N-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-3,4-ジメトキシ-N-メチルベンズアミドの合成
【化３８】
2009511562.tif 000055
【００８５】
工程1：1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-(メチルアミノ)プロパン-2-オールの製造
【化３９】
2009511562.tif 000056
0℃に冷却した4-(2,3-エポキシプロポキシ)カルバゾール(1g、4.18mmol)のTHF(10mL)溶液に、LiClO4(0.445g、4.18mmol)、続いてTHF(12mL、41.8mmol)に入れた11% w/wメチルアミンを加え、反応混合物を室温で12時間攪拌した。この反応混合物に飽和NH4Cl 30mLを加え、5分間撹拌し、次いで溶液をジクロロメタン(100mL)で抽出し、水およびブライン溶液で洗浄した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮すると、薄黄色ペーストの粗製化合物(0.9g、80%)が得られた。
【００８６】
工程2：N-[3-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-2-ヒドロキシプロピル]-3,4-ジメトキシ-N-メチルベンズアミドの製造
【化４０】
2009511562.tif 000057
3,4-ジメトキシ安息香酸(0.2g、1.11mmol)のDMF(5mL)溶液に、DIPEA(0.48mL、2.8mmol)、EDCI(0.355g、1.85mmol)、HOBt(0.05g、0.37mmol)、その後、上の実施例72工程Iに記載の方法に従って製造した1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-(メチルアミノ)プロパン-2-オール(0.25g、0.925mmol))を加えた。反応を室温で12時間攪拌し、DCM(50mL)で希釈し、水およびブライン溶液で洗浄した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮した。この粗製化合物をジクロロメタン(3mL)に溶解し、ジイソプロピルエーテル(5mL)およびヘキサン(10mL)を加えて沈殿化することにより精製した。得られた白色固体を濾過し、乾燥すると、所望化合物(0.15g、38%)が得られた。m.p:77-80℃。1H NMR(400MHz, CDCl3): δ(ppm): 3.10-3.40(m, 3H)、3.70-4.10(m, 7H)、4.07(s, 1H)、4.20-4.25(m, 1H)、4.38(s, 1H)、4.56(s, 1H)、4.76(s, 1H)、6.74(s, 1H)、6.87(s, 1H)、6.90-7.15(m, 4H)、7.20-7.49(m, 3H)、8.17(s, 1H)、8.30(s, 1H)。MS m/z: 435.0(M+)。
【００８７】
実施例73  1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[3,5-ジメトキシベンジル(メチル)アミノ]プロパン-2-オールの合成
【化４１】
2009511562.tif 000058
氷酢酸2-3滴およびNa(OAc)3BH(0.157g、0.578mmol)の存在下で1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-(メチルアミノ)プロパン-2-オール(0.20g、0.74mmol)と3,5-ジメトキシベンズアルデヒド(0.185g、1.11mmol)を反応させ、その後実施例26に記載の方法と類似の方法をとると、茶色ペーストの標題化合物(0.045g、収率13%)が得られた。1H NMR(400MHz, DMSO): δ 2.25(s, 3H)、3.40-3.60(m, 2H)、3.51(s, 2H)、3.65(s, 6H)、4.10-4.13(m, 1H)、4.15-4.25(m, 2H)、5.00(s, 1H)、6.31(s, 1H)、6.49(d, 2H, J=1.6Hz)、6.67(d, 1H, J=8.0Hz)、7.05-7.12(m, 2H)、7.25-7.35(m, 2H)、7.43(d, 1H, J=8Hz)、8.17(d, 1H, J=8.0Hz)、11.23(s, 1H)。MS m/z: 421.0(M+1)。
【００８８】
実施例74  1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニルスルホニル)ピペラジン-1-イル]プロパン-2-オールの合成
【化４２】
2009511562.tif 000059
1-(9H-カルバゾール-4-イルオキシ)-3-ピペラジン-1-イルプロパン-2-オール(0.2g、0.614mmol)のDMF(4mL)溶液に、DIPEA(0.05mL、0.301mmol)の添加およびその後の3-トリフルオロメチルベンゼンスルホニルクロリド(0.098g、0.61mmol)の滴下を室温で行い、反応混合物を3時間攪拌した。その後反応混合物を酢酸エチル(30mL)で希釈し、水およびブライン溶液で洗浄した。有機層を無水Na2SO4で乾燥し、濃縮し、ヘキサンを加えて化合物をジクロロメタンから沈殿化することにより精製すると、薄黄色固体の所望化合物(0.102g、収率30%)が得られた。1H NMR(400MHz, DMSO): δ 2.30-2.90(m, 6H)、3.00-3.30(m, 4H)、4.00-4.30(m, 4H)、5.00(s, 1H)、6.61(d, 1H, J=8Hz)、7.00-7.20(m, 2H)、7.25-7.40(m, 2H)、7.42(d, 1H, J=8.0Hz)、7.80-8.00(m, 2H)、8.06(d, 1H, J=8Hz)、8.20-8.30(m, 2H)、11.26(d, 1H, J=12Hz)。MS m/z: 534.1(M+1)。
【００８９】
実施例74に記載の方法に従い、以下の化合物を製造した。
【表１６】
2009511562.tif 000060
【００９０】
上記反応のいずれにおいても、基質分子中の任意の反応基を常套的な化学的実務に従って保護できるということが理解できる。任意の上記反応において、好適な保護基は当分野で常套的に使用される保護基である。このような保護基の形成および除去方法は、保護される分子にとって適切な常套的方法である。保護基は、当該分子の残りの部分に影響を及ぼさない条件下に除去する。
【００９１】
薬学上許容し得る塩は、式(I)の化合物を、エーテル、テトラヒドロフラン、メタノール、t-ブタノール、ジオキサン、イソプロパノール、エタノール等のような溶媒中で、水酸化ナトリウム、ナトリウムメトキシド、水素化ナトリウム、カリウムt-ブトキシド、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム等のような塩基1ないし10当量と反応させることにより製造する。溶媒の混合物を使用してもよい。ジエタノールアミン、α-フェニルエチルアミン、ベンジルアミン、ピペリジン、モルホリン、ピリジン、ヒドロキシエチルピロリジン、ヒドロキシエチルピペリジン、コリン、グアニジン等のような有機塩基、アンモニウムまたは置換アンモニウム塩、アルミニウム塩。グリシン、アラニン、システイン、リジン、アルギニン、フェニルアラニン等のようなアミノ酸を、アミノ酸塩の製造のために使用できる。或いは、適用可能であればいかなる酸付加塩も、酢酸エチル、エーテル、アルコール類、アセトン、テトラヒドロフラン、ジオキサン等のような溶媒中、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、燐酸、p-トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、酢酸、クエン酸、マレイン酸、サリチル酸、ヒドロキシナフトエ酸、アスコルビン酸、パルミチン酸、琥珀酸、安息香酸、ベンゼンスルホン酸、酒石酸、蓚酸等で処理することによって製造される。溶媒の混合物もまた使用できる。
【００９２】
本発明化合物は互変異性型で存在できる基を含み得、一つの形態が本明細書に指摘され、記載され、示され、そして／または特許請求されていたとしても、本質的に全ての互変異性型が、かかる名称、記述、表示および／または請求項に包含されることを意図しているということに留意すべきである。
【００９３】
本発明の一部を形成している化合物の立体異性体は、本件の中にある単一のエナンチオ型の反応体を使用することによって製造できる。4-ヒドロキシカルバゾールは、(S)-(+)-エピクロロヒドリンで処理すると(R)-(-)-4-(2,3-エポキシプロポキシ)カルバゾールを生成したが、それぞれのアミンと反応させると純粋なR異性体を生成した(実施例24)。同様に、類似条件下で(R)-(-)-エピクロロヒドリンを使用すると、S異性体が生成した(実施例25)。
【００９４】
本化合物の立体異性体は、単一のエナンチオ型の試薬または触媒の存在下で反応を実施することによって、または、立体異性体混合物を常法で分割することによって製造することもできる。好ましい方法の幾つかは、微生物による分割の利用、キラル酸、例えばマンデル酸、カンファースルホン酸、酒石酸、乳酸等による(適用可能であれば)、生成したジアステレオマー塩の分割、または、ブルシン、シンコナアルカロイド、それらの誘導体等のようなキラル塩基の使用を包含する。一般的に利用される方法は、Jaques et alの“Enantiomers, Racemates and Resolution”(Wiley Interscience, 1981)にまとめられている。
【００９５】
式(I)の化合物のプロドラッグもまた本発明によって意図されている。プロドラッグとは、そのプロドラッグを患者に投与した後に、インビボの生理作用、例えば加水分解、代謝等によって化学修飾されて本発明化合物となる、活性または不活性化合物である。プロドラッグの製造および使用に含まれる適合性および技術は当業者に周知である。
【００９６】
本発明の一部を形成する、一般式(I)の化合物の様々な多形は、様々な条件下で式(I)の化合物を結晶化することによって製造できる。例えば、様々な一般に使用される溶媒またはその混合物を再結晶に使用すること；異なる温度での結晶化；結晶化の際の、非常に迅速から非常に緩徐までの範囲の様々な冷却方式。化合物を加熱または融解し、その後徐々にまたは直ちに冷却することによっても、多形を取得できる。多形の存在は、固体プローブNMR分光法、IR分光法、示差走査熱量測定および粉末X線回折またはその他の同様技術によって決定できる。
【００９７】
本発明はさらに、上に定義した一般式(I)の化合物、その誘導体、類似体、互変異性型、立体異性体、多形、水和物、代謝産物、プロドラッグ、薬学上許容し得る塩、および薬学上許容し得る溶媒和物の1またはそれ以上を、通常の薬学的に使用される担体、希釈剤などと組み合わせて含有する、癌、癌の悪液質および免疫疾患を包含する炎症性疾患の予防および／または治療に有用な薬用組成物を提供する。
【００９８】
この薬用組成物は、通常使用される形態、例えば錠剤、カプセル剤、散剤、シロップ剤、溶液、懸濁液等であってよく、適当な固体もしくは液体担体もしくは希釈剤中に香料、甘味料等を含有でき、または適当な無菌媒質中で注射溶液もしくは懸濁液を形成する。この組成物は当分野で既知の方法によって製造できる。組成物中の活性成分の量は、70%(重量)未満とすることができる。このような組成物は典型的には1ないし25%、好ましくは1ないし15%(重量)の活性化合物を含有し、組成物の残量は薬学上許容し得る担体、希釈剤、賦形剤または溶媒である。
【００９９】
好適な薬学上許容し得る担体は、固体増量剤または希釈剤および無菌の水性または有機溶液を包含する。活性化合物は、上記のような範囲の所望容量を与えるに充分な量の薬用組成物中に存在する。したがって、経口投与のためには、該化合物を適当な固体または液体担体または希釈剤と一緒に、カプセル剤、錠剤、散剤、シロップ剤、溶液、懸濁液などを形成させる。薬用組成物は、任意に、香料、甘味料、賦形剤等のようなさらなる成分を含有させることもできる。非経口投与のためには、該化合物を無菌の水性または有機媒質と一緒に、注射溶液または懸濁液を形成させることができる。例えば、該化合物の、胡麻油または落花生油、水性プロピレングリコール等に入れた溶液、ならびに、水溶性の薬学上許容し得る酸付加塩またはアルカリもしくはアルカリ土類金属塩の水溶液を使用できる。その後、このようにして調製された注射溶液を、静脈内、腹腔内、皮下、または筋肉内投与できるが、ヒトにおいては筋肉内投与が好ましい。
【０１００】
本発明に係る薬用組成物は、インビトロ試験で示されるように、pSTAT3阻害を介してIL-6レベルを低下させるのに有効である。本発明に係る薬用組成物はさらに、癌、癌の悪液質および免疫疾患を包含する炎症性疾患の予防および／または治療に有効である。一般に、患者の特定の状態を治療するための有効用量は、その状態または疾患の症状または適応を軽減させるための処置の最中に医師によって容易に決定および調節され得る。一般に、約0.01ないし1000mg/kg(体重)の範囲の活性成分の日用量が、有効な結果を得るための投与として適切である。日用量は、一回投与で、または数回の分割用量に分けて投与できる。幾つかの場合には、個体の反応に応じて、最初に処方された日用量よりも上方または下方に逸脱させる必要があるかも知れない。典型的な薬用製剤は通常、用量当たり、式Iの活性化合物および／またはその薬学的に活性な塩もしくは溶媒和物約0.2ないし約500mgを含有する。
【０１０１】
本発明化合物は唯一の活性な薬用物質として投与できるものの、これらは1またはそれ以上の本発明化合物またはその他の物質と組み合わせて使用することもできる。組み合わせて投与する場合、治療物質を同時または別々に投与する別個の組成物として調合でき、また、この治療物質群を単一の組成物として投与することもできる。したがって本発明化合物は、構成的に活性なSTAT3を有する癌細胞における単剤療法として；または、これらのpSTAT3インヒビターと他の臨床的に関連する細胞毒性物質または非細胞毒性シグナル伝達インヒビターと組み合わせて、癌の治療に使用することができる。
【０１０２】
「治療有効量」または「有効量」という語は、治療を必要とする動物に、単独で、または他の治療と組み合わせて投与した時に、下記に定義する治療を奏功させるに充分な式(I)の化合物またはその混合物の量を指す。より具体的には、pSTAT3阻害によって、IL-6のようなサイトカインを低下させ、免疫疾患を包含する炎症性疾患、癌および癌の悪液質を治療するのに充分な量である。
【０１０３】
本明細書で使用する「動物」という語は、全ての哺乳動物、特に人間を包含する事を意味する。このような動物はさらに、治療を必要とする対象または患者を指す。治療有効量は、治療される対象および疾患の状態、対象の体重および年齢、疾患状態の重篤度、選ばれた式(I)の個別化合物、従うべき投与レジメン、投与時期、投与方法などに応じて変わり、これらは全て当業者が容易に決定することができる。
【０１０４】
「治療」または「治療する」という語は、
a) 疾患を防止、即ち、疾患の臨床症状が発現しないようにする；
b) 疾患を阻害、即ち、臨床症状の発現を遅延または停止させる；および／または、
c) 疾患を軽減、即ち、臨床症状の消退を惹起する、
を包含する、哺乳動物における疾患の任意の処置を意味する。
【０１０５】
前記の内容から、当業者は本発明の本質的な特徴を容易に確認でき、その精神および範囲から逸脱することなく、本発明の様々な変更および修飾を行って、それを種々の用途および条件に適合させることができる。
【０１０６】
下に記載する実施例によって本発明を提供するが、これらは例示のためにのみ供するものであって、本発明の範囲を限定するものと考えてはならない。当業者にとって明らかである変形および変更は、付記する請求項に定義されている本発明の範囲および性格の範囲内にあることを意図している。
【０１０７】
抗癌実験方法
抗癌スクリーニング
実験薬物を3つの細胞株における抗癌活性についてスクリーニングして、GI50、TGIおよびLC50値を求める(各化合物につき5種類の濃度を使用)。細胞株は、10%牛胎児血清を含有するDMEMに維持する。96ウェル微量定量プレートに100μLの細胞を接種し、5%CO2、95%空気および100%相対湿度、37℃で24時間維持する。5000 HCT116細胞／ウェル、5000 NCIH460細胞／ウェルおよび5000 U251細胞／ウェルを蒔く。これらの細胞株を有する別のプレートにも接種して、化合物添加前の細胞生存性を決定する(T0)(表Iを参照されたい)。
【０１０８】
実験薬物の添加：
24時間のインキュベーション後、96ウェルプレートに実験薬物を加える。各々のプレートには上の細胞株のうち一つおよび以下のものがトリプリケートで入っている：5種類の異なる濃度(0.01、0.1、1、10および100μM)の4種類の異なる化合物、適当な希釈の細胞毒性標準および対照(非処置)ウェル。薬物を添加する日に化合物をDMSOに溶解して20mM保存溶液を作製し、-20℃で凍結する。完全増殖培地でこれらの20mM保存溶液の連続希釈を作製し、最終濃度0.01、0.1、1、10および100μMの、これら薬物の培地中溶液100μLを、細胞にトリプリケートで添加できるようにする。その抗癌活性が充分立証され、通常使用されている標準薬物は、ドキソルビシンおよびSAHAである(表Iを参照されたい)。
【０１０９】
終点の測定：
T0測定のため、細胞接種の24時間後に、ウェルあたり10μL の3-(4,5-ジメチル-2-チアゾリル)-2,5-ジフェニル-2H-テトラゾリウム(MTT)溶液を添加し、37℃、5%CO2、95%空気および100%相対湿度で遮光して3時間インキュベートする。化合物と共に48時間インキュベートした細胞を、ウェルあたり20μLのMTT溶液を添加する以外は同様に処置し、その後、同条件でインキュベートする。3時間のMTTインキュベートの後、ウェル内容物を注意深く吸引し、ウェルあたり150μLのDMSOを加える。プレートを振盪してホルマザン結晶のDMSO溶液の生成を確実とし、570nmの吸光度を読み取る(表Iを参照されたい)。
【０１１０】
GI50、TGIおよびLC50の算出：
対照およびゼロ測定ウェルに対する増殖パーセントを各化合物の濃度について算出する(T0；化合物添加直前の生存性)。被験ウェルのO.D.値が、その細胞株についてのT0測定値より大であるならば、
増殖% = (試験−ゼロ)／(対照−ゼロ) x 100
である。
被験ウェルのO.D.値が、その細胞株についてのT0測定値より小であるならば、
増殖% = (試験−ゼロ)／ゼロ x 100
である。
【０１１１】
実験薬物濃度に対して増殖%をプロットする時、GI50は、増殖%を50%低下させるのに必要な濃度であり；TGIは、増殖%を100%低下させるのに必要な濃度であり、そしてLC50は、増殖%を150%低下させるのに必要な濃度である(表Iを参照されたい)。
【０１１２】
【表１７】
2009511562.tif 000061
【０１１３】
培養上清中のIL-6を測定するためのプロトコル
ヒト肺癌細胞株(NCIH 460)をIL-6測定に使用する。5000細胞／ウェルを96ウェルプレートに蒔き、37℃のCO2インキュベーター中で24時間インキュベートした。24時間のインキュベートの後、全ウェルから培地を完全に除去し、10%FCSを含有する新鮮なDMEM 100μLを加えた。異なる濃度の薬物100μLを加え、37℃のCO2インキュベーター中で5時間インキュベートした。5時間インキュベートした後、上清を集め、-80℃で保存した。上清中のIL-6濃度をELISAキットを用いて測定し、用量反応曲線から化合物のIC50値を決定した(表IIを参照されたい)。
【０１１４】
【表１８】
2009511562.tif 000062
【０１１５】
前立腺(DU 145)および卵巣癌(SKOV-3)細胞株におけるpSTAT3の阻害を決定するためのウェスタンブロット分析
ウェスタンブロット分析をKammer W et. al(J Biol Chem 271, 23634-23637、およびJ Biol Chem 273, 31222-31229)の記載のようにして実施した。簡潔に述べると、全細胞抽出物60μgを5-10分間煮沸したLaemmeli緩衝液(50mM Tris/HCl、pH6.8、2% SDS、10%グリセロール、1mM DTT、1Xプロテアーゼインヒビターカクテル、SET-3(Calbiochem)、1mMオルトバナジウム酸ナトリウム)に溶解し、10または12%アクリルアミドSDSゲル上で分離した。蛋白の移動後、ニトロセルロース膜をブロッキング緩衝液中で2時間ブロックした(1X TBS、0.1% Tween-20、5% BSA)。STAT3 P-Tyr705（Santa Cruz Biotech）、STAT3（H-190、Santa Cruz Biotech）およびアクチン（C-2、Santa Cruz Biotech）抗体を1:300希釈で含有するブロッキング緩衝液中で〜20時間インキュベートした。検出は、1:3000希釈のHRPコンジュゲートした抗マウス／抗ウサギIgG（Santa Cruz Biotech）で1時間実施した。増強化学ルミネセンス検出キット(Amersham)を用いて視覚化を行った。添付の図面を参照されたい：図1および2。
【０１１６】
HepG2細胞株におけるpSTAT3レベルを測定するための酵素結合免疫吸着検定(ELISA)
R & D System社製ELISAキット(DuoSet IC, Cat. No: DYC1799-2)に記載のような製造者のプロトコルに基づいて検定を実施した。簡潔に述べると、この検定は以下のように実施した。
【０１１７】
プレートの調製／検定手順
捕捉抗体をPBS中2.0μg/mLの作用濃度に希釈した。100μL/ウェルの抗体を使用して96ウェル微量プレートを被覆し；プレートをシールし室温で一夜インキュベートした。洗浄緩衝液でプレートウェルを洗浄した後、試薬希釈液(300μL)を用いてこれらをブロックし、1-2時間インキュベートした。このプレートは、洗浄緩衝液で2-3回洗浄した後に準備が整った。HepG2細胞由来の核抽出物を、製造者のプロトコルに従って集めた。滅菌遠心管中で、この核抽出物50μgにビオチン標識化dsオリゴヌクレオチド3μLを添加した後、溶解緩衝液を用いて容量を30μLとした。次いで試料を室温で約30分間インキュベートした。標識していないdsオリゴヌクレオチド3μLを用いて、競合による特異性の決定を行った。試薬希釈液200μLを各試料に加え、穏やかに混合した。上の試料から100μLを各ウェルに加え、プレートをシールし室温で2時間インキュベートした。プレートを洗浄緩衝液で洗浄した後、ストレプトアビジン-HRP抗体100μLを各ウェルに加え、室温、暗所で20分間インキュベートした。洗浄緩衝液でプレートを5回洗浄した後、TMB基質100μLを用いて検出した。各ウェルに停止溶液50μLを添加して反応を停止させ、マイクロプレートリーダーを用いて450nmのODを測定した。
【０１１８】
この結果により、実施例1および25はpSTAT3阻害によって作用することが明らかとなった(添付の図面を参照されたい：図1および2)。
【０１１９】
異種移植モデルを用いたインビボ抗癌活性のための方法
実験は6-8週齢の雌性胸腺欠損SCID(重症複合免疫不全)マウスを用いて実施した。マウスを一定の温度および湿度の層流室(個別換気ケージに収容)で飼育した。これらは餌および水に自由にアクセスできた。腫瘍をATCCから取得し、報告済みの標準法に従い、健康なマウスで腫瘍フラグメント(約2 X 2 X 2 mm)の皮下継代により維持した。各実験群は、両側性腫瘍を持つ6/8匹のマウスを含んでいた。0日目に腫瘍を移植し、腫瘍の直径をノギスで2週間に1回測定することにより、腫瘍の成長を追跡した。腫瘍体積(TV)を以下の式に従って算出した：TV(mm3) = d2 XD/2 ［式中、dおよびDは、それぞれ腫瘍の短径および長径である］。腫瘍がちょうど測定可能となった時に薬物処置を開始した(平均TV = 150-200 mm3)。
【０１２０】
被験化合物／標準薬物は全て10mL容量/kgを強制栄養によって投与した。薬物は、21日目まで、毎日1回投与した。対照マウスは薬物溶媒／媒質で処置した。腫瘍サイズを隔日、そして体重を毎日記録する。投薬中止後さらに30日間、有効性を立証するために薬物処置後を検討する。
【０１２１】
被験化合物の有効性を、例えば以下のような種々のパラメータによって評価した：
a) 腫瘍体積阻害(TVI)：80%を上回るTVI値は活性化合物であることを示す。
b) T/C%は、もう一つの活性指標である。再現性のある20% T/Cは、治療活性であると考えられる。
c) Log Cell Kill（LCK）：1より大きなLCK値は活性化合物であることを示す。
d) 相対腫瘍体積(RTV)、腫瘍遅延および腫瘍体積変化%もまた、価値あるさらなる評価のパラメータと考えられる。
e) 薬物処置の毒性効果を体重減少%で評価した。
f) 致死毒性は、対照の死亡前に出現する処置群の死亡として定義した。マウスは、死亡および臨床的毒性徴候について毎日調査した。
【０１２２】
異種移植研究の結果：
実施例1の化合物は、IL-6阻害を伴う良好なインビボ抗癌活性を示し、作用メカニズムはpSTAT3阻害によるものであった。それは、NCI H460異種移植モデルに対して52%の阻害を示した。このことは本発明者等にさらなる類似体である実施例1の化合物へと目を向けさせ、本発明者等は、実施例24および25の化合物を合成し、類似のNCI H460異種移植モデルを用いてそれらのインビボ抗癌活性を調べた(添付の図面を参照されたい：図3)。これらの研究は、実施例24の化合物が良好な抗癌活性を示すこと；実施例25の化合物が良好な抗癌活性、極めて良好なIL-6阻害を示すこと、そしてさらにこれがpSTAT3阻害を介して働くこと；さらに、実施例24および25の化合物において、体重減少が観察されないことを明らかにした(添付の図面を参照されたい：図4)。
【図面の簡単な説明】
【０１２３】
（原文記載なし）
【図１】
2009511562.tif 000069
【図２】
2009511562.tif 000070
【図３】
2009511562.tif 000071
【図４】
2009511562.tif 000072
【国際調査報告】
2009511562.tif 000073
2009511562.tif 000074
2009511562.tif 000075
2009511562.tif 000076
2009511562.tif 000077
2009511562.tif 000078
2009511562.tif 000079
2009511562.tif 000080
2009511562.tif 000081
2009511562.tif 000082