(57)【要約】  本発明は、ケモカイン、インターロイキン−８（ＩＬ−８）により介在される病態の治療に有用な新規化合物および組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2009534421.tif 000047
［式中：
Ｘは、ハロゲン、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、シアノ、ＣＦ３、およびＯＣＦ３からなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｃ３−６シクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリールからなる群から選択され、ここに、該フェニルまたはヘテロアリール基は、独立して、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＣＦ３、フェニルオキシおよびベンジルオキシからなる群から選択される置換基により１または２回置換されていてもよく；あるいは
Ｒ２は、メチレンジオキシまたは（ジ−ハロ−置換）−メチレンジオキシにより置換されているフェニルであり；
Ｒ１はＣ４−８ヘテロサイクリル（ＣＨ２）ｎであり、ここに、該ヘテロサイクリル基は、独立して、Ｃ１−３アルキル、Ｃ（Ｏ）ＯＲ４およびＣ（Ｏ）Ｒ５からなる群から選択される置換基により１または２回置換されていてもよく；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｃ１−３アルキルであり；
ｎは０または１であり；
あるいは
Ｒ１は、下記環系（ａ−ｋ）：
【化２】
2009534421.tif 000048
（式中、Ｒ３はＨまたはＣ１−３アルキルである）
から選択される］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項２】
Ｘがハロゲンである、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
ＸがＣｌである、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２が、独立して、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン、ＯＣＦ３およびフェニルオキシからなる群から選択される置換基により１または２回置換されていてもよい、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２が、３−フルオロ−２−メチルフェニル、２−トリフルオロメチルオキシフェニル、２−クロロ−３−フルオロフェニル、２−エチルフェニルまたは２−フェニルオキシフェニルからなる群から選択される、請求項４記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２が３−フルオロ−２−メチルフェニルまたは２−クロロ−３−フルオロフェニルである、請求項５記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２がハロゲンにより１回置換されていてもよいピリジルである、請求項１記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２が２−クロロ−３−ピリジルである、請求項７記載の化合物。
【請求項９】
ｎが０であり、Ｒ１がヘテロサイクリルである、請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１が、アゼチジニル、ピペリジニル、およびピロリジニルからなる群から選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
ｎが１であり、Ｒ１がピロリジニルである、請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ１が３−エキソ−８−メチル−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルまたは３−エキソ−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルである、請求項１記載の化合物。
【請求項１３】
Ｎ−（４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−｛［（３−エキソ）−８−メチル−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル］スルホニル｝フェニル）−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３−ピロリジニルメチル）スルホニル］フェニル｝−Ｎ’−｛２−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝尿素；
Ｎ−［３−（３−アゼチニルスルホニル）−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル］−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３−ピロリジニルメチル）スルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−［３−（３−アゼチニルスルホニル）−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル］−Ｎ’−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−４−イル）尿素；
Ｎ−［３−（３−アゼチニルスルホニル）−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３−ピロリジニルメチル）スルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２−エチルフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−｛２−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−エチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−４−イル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２−エチルフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−｛２−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−｛２−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−［２−（フェニルオキシ）フェニル］尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−［２−（フェニルオキシ）フェニル］尿素；
４−｛［６−クロロ−３−（｛［（３−フルオロ−２−メチルフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２−ヒドロキシフェニル］スルホニル｝−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
４−（｛６−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（｛［２−（フェニルオキシ）フェニル］アミノ｝カルボニル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−［２−（フェニルオキシ）フェニル］尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］尿素；
４−｛［６−クロロ−３−（｛［（２−クロロ−３−フルオロフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２−ヒドロキシフェニル］スルホニル｝−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］尿素；および
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２，３−ジクロロフェニル）尿素；
からなる群から選択される請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項１４】
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−［２−（フェニルオキシ）フェニル］尿素；
４−｛［６−クロロ−３−（｛［（３−フルオロ−２−メチルフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２−ヒドロキシフェニル］スルホニル｝−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
４−（｛６−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（｛［２−（フェニルオキシ）フェニル］アミノ｝カルボニル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−［２−（フェニルオキシ）フェニル］尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］尿素；
４−｛［６−クロロ−３−（｛［（２−クロロ−３−フルオロフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２−ヒドロキシフェニル］スルホニル｝−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］尿素；および
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２，３−ジクロロフェニル）尿素；
からなる群から選択される請求項１３記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項１５】
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］尿素；および
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２，３−ジクロロフェニル）尿素；
からなる群から選択される、請求項１４記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項１６】
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；および
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
からなる群から選択される、請求項１５記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項１７】
医薬上許容される塩が塩酸塩である、請求項１３〜１６いずれか１項記載の化合物。
【請求項１８】
請求項１または１３記載の化合物および医薬上許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項１９】
活性治療剤として用いるための請求項１または１３記載の化合物。
【請求項２０】
哺乳動物における、ケモカインがＩＬ−８αまたはβ受容体に結合するケモカイン介在疾患の治療において用いるための、請求項１または１３記載の化合物。
【請求項２１】
喘息、慢性閉塞性肺疾患、または成人呼吸窮迫症候群からなる群から選択される疾患の治療において用いるための、請求項１または１３記載の化合物。
【請求項２２】
ケモカイン介在疾患の治療において用いるための医薬の製造における請求項１または１３記載の化合物の使用。
【請求項２３】
疾患が喘息、慢性閉塞性肺疾患、または成人呼吸窮迫症候群からなる群から選択されるケモカイン介在疾患の治療において用いるための医薬の製造における、請求項１または１３記載の化合物の使用。
【請求項２４】
哺乳動物における、ケモカインがＩＬ−８αまたはβ受容体に結合するケモカイン介在疾患の治療方法であって、該哺乳動物に、有効量の請求項１または１３記載の化合物の使用を投与することを含む方法。
【請求項２５】
哺乳動物が、乾癬、アトピー性皮膚炎、変形性関節症、関節リウマチ、喘息、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫症候群、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性結腸炎、卒中、敗血性ショック、内毒素性ショック、グラム陰性菌敗血症、毒性ショック症候群、心臓および腎臓の再潅流傷害、糸球体腎炎、血栓症、移植片対宿主反応、アルツハイマー病、同種移植拒絶反応、マラリア、再狭窄、血管形成、アテローム性動脈硬化症、骨粗鬆症、歯肉炎、ライノウイルスのようなウイルス性疾患および望ましくない造血幹細胞放出からなる群から選択されるケモカイン介在疾患を患っている、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
哺乳動物が、喘息、慢性閉塞性肺疾患、または成人呼吸窮迫症候群を患っている請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
哺乳動物が、慢性閉塞性肺疾患を患っている請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
請求項１または１３記載の化合物および１または２個のさらなる治療剤を含む医薬組み合わせ。
【請求項２９】
さらなる治療剤がＣＸＣＲ３受容体アンタゴニストまたはＣＣＲ５受容体アンタゴニストである、請求項２８記載の組み合わせ。
【請求項３０】
請求項１または１３記載の化合物の製造方法であって：
Ａ）式（ＩＩ）：
【化３】
2009534421.tif 000049
で示されるスルフィドを式（ＩＩＩ）：
【化４】
2009534421.tif 000050
で示されるスルホンに酸化すること；
Ｂ）スルホンを式（ＩＶ）：
【化５】
2009534421.tif 000051
で示されるアミノフェノールに加水分解すること；および
Ｃ）アミノフェノールをイソシアネートまたはイソシアネート前駆体に曝して、最終生成物を得ること；
を含む方法。
【請求項３１】
式（ＩＩ）：
【化６】
2009534421.tif 000052
式（ＩＩＩ）：
【化７】
2009534421.tif 000053
および式（ＩＶ）：
【化８】
2009534421.tif 000054
からなる群から選択される中間体。
【請求項３２】
除去され、ついで再導入される酸に不安定な保護基によりＲ１基を保護する、請求項３０記載の化合物の製造方法。
【請求項３３】
【化９】
2009534421.tif 000055
［式中、Ｂｏｃは酸に不安的な保護基である］
からなる群から選択される中間体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規スルホン化合物、医薬組成物、その製造法およびＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２およびＥＮＡ−７８介在疾患の治療におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
インターロイキン−８（ＩＬ−８）に対しては様々な名称、例えば好中球誘引／活性化タンパク質−１（ＮＡＰ−１）、単球由来好中球走化性因子（ＭＤＮＣＦ）、好中球活性化因子（ＮＡＦ）およびＴ−細胞リンパ球走化性因子が用いられている。インターロイキン−８は、好中球、好塩基球およびＴ−細胞のサブセットに対する化学誘引物質である。これは、ＴＮＦ、ＩＬ−１α、ＩＬ−１βまたはＬＰＳに曝露されたマクロファージ、線維芽細胞、内皮細胞および上皮細胞を含むほとんどの有核細胞により、およびＬＰＳまたはＦＭＬＰのような走化性因子に曝露された場合に好中球自体により産生される。M. Baggiolini et al.,  J. Clin. Invest. 84, 1045 (1989); J. Schroder et al,  J. Immunol. 139, 3474 (1987)およびJ. Immunol. 144, 2223 (1990) ; Strieter, et al.,  Science 243, 1467 (1989)およびJ. Biol. Chem. 264, 10621 (1989); Cassatella et al.,  J. Immunol. 148, 3216 (1992)。
【０００３】
また、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２は、ケモカインファミリーに属する。ＩＬ−８と同様に、これらのケモカインも異なる名称により示されてきた。例えば、ＧＲＯα、β、γが、それぞれ、ＭＧＳＡα、βおよびγ（黒色腫増殖刺激活性）を意味している。Richmond et al., J. cell Physiology 129, 375 (1986)およびChang et al., J. Immunol 148, 451 (1992)を参照。ＣＸＣモチーフの直前にＥＬＲモチーフを有するαファミリーのケモカインはすべてＩＬ−８Ｂ受容体（ＣＸＣＲ２）に結合する。
【０００４】
ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２およびＥＮＡ−７８は、インビトロで多くの機能を刺激する。これらはすべて好中球に対して化学誘引性を有することが示されたが、ＩＬ−８およびＧＲＯαは、Ｔ−リンパ球および好塩基球走化性活性が示された。加えて、ＩＬ−８は正常な個体およびアトピー性個体由来の両方の好塩基球からのヒスタミン放出を誘発しうる。加えて、ＧＲＯ−αおよびＩＬ−８は、好中球からのリソソーム酵素放出および呼吸バーストを誘発しうる。また、ＩＬ−８は、新たにタンパク質を合成することなく、好中球上でのＭａｃ−１（ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８）の表面発現を増加させることが示された。このことは、好中球が血管内皮細胞に付着することを増加させる一因になりうる。多くの既知の疾患が、大量の好中球浸潤により特徴付けられる。ＩＬ−８、Ｇｒｏα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２は、好中球の蓄積および活性化を促進するので、これらのケモカインは、乾癬および関節リウマチを含む広範囲に及ぶ急性および慢性炎症性障害と関係付けられてきた。Baggiolini et al., FEBS Lett. 307, 97 (1992) ；Miller et al., Crit. Rev. Immunol. 12, 17 (1992)；Oppenheim et al., Annu. Rev. Immunol. 9, 617 (1991); Seitz et al., J. Clin. Invest. 87, 463 (1991) ；Miller et al., Am. Rev. Respir. Dis. 146, 427 (1992)；Donnely et al., Lancet 341, 643 (1993)。加えて、ＥＬＲケモカイン（ＣＸＣモチーフの直前にアミノ酸ＥＬＲモチーフを含有するもの）はまた、血管形成とも関連付けられてきた。Strieter et al., Science 258, 1798 (1992)。
【０００５】
インビトロで、ＩＬ−８、Ｇｒｏα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２は、７回膜貫通型Ｇ−タンパク質結合ファミリーの受容体と、特に、ＩＬ−８受容体、最も顕著には、ＩＬ−８β受容体（ＣＳＣＲ２）と結合してそれを活性化することにより、好中球形状変化、走化性、顆粒放出および呼吸バーストを誘発する。Thomas et al.,  J. Biol. Chem. 266, 14839 (1991)；およびHolmes et al., Science 253, 1278 (1991)。この受容体ファミリーのメンバーに対する非ペプチド性小型分子アンタゴニストの開発が進められてきた。総説については、R. Freidinger in:  Progress in Drug Research, Vol. 40, pp. 33-98, Birkhauser Verlag, Basel 1993.  Henceを参照。ＩＬ−８受容体は新規抗炎症剤の開発のための有望な標的である。
【０００６】
２つの高親和性ヒトＩＬ−８受容体（７７％相同性）が特徴付けられている：ＣＸＣＲ１は、ＩＬ−８のみと高親和性で結合し、ＣＸＣＲ２はＩＬ−８に対して高親和性で結合し、ならびにＧＲＯ−α、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２に関しても同様である。Holmes et al., supra; Murphy et al., Science 253, 1280 (1991)；Lee et al., J. Biol. Chem. 267, 16283 (1992) ； LaRosa et al., J. Biol. Chem. 267, 25402 (1992) ；およびGayle et al., J. Biol. Chem. 268, 7283 (1993)を参照。
【０００７】
当該分野において、ＣＸＣＲ１および／またはＣＸＣＲ２受容体に結合することができる化合物に対する処理が依然として必要とされている。したがって、ＩＬ−８産生の増加（好中球およびＴ−細胞サブセットの炎症部位への走化性に関与する）に付随する症状は、ＩＬ−８受容体結合の阻害剤である化合物により恩恵が得られるだろう。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、式（Ｉ）で示される新規ＩＬ−８受容体アンタゴニストならびに本発明の化合物および医薬上許容される担体または希釈剤を含む組成物を含む。
本発明はまた、式（Ｉ）で示される新規ＩＬ−８受容体アンタゴニストならびに本発明の化合物および１種またはそれ以上のさらなる治療成分を含む組み合わせを含む。
本発明は、さらに、ケモカインがＩＬ−８αまたはβ受容体に結合するケモカイン介在疾患の治療方法であって、有効量の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を投与することを含む方法を含む。
本発明は、また、ＩＬ−８のその受容体への結合の阻害が必要な哺乳動物における該阻害方法であって、該哺乳動物に、有効量の式（Ｉ）で示される化合物を投与することを含む方法に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明で有用な式（Ｉ）で示される化合物は、構造式：
【化１】
2009534421.tif 000002
［式中：
Ｘは、ハロゲン、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、シアノ、ＣＦ３、およびＯＣＦ３からなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｃ３−６シクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリールからなる群から選択され、ここに、該フェニルまたはヘテロアリール基は、独立して、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＣＦ３、フェニルオキシおよびベンジルオキシからなる群から選択される置換基により１または２回置換されていてもよく；あるいは
Ｒ２は、メチレンジオキシまたは（ジ−ハロ−置換）−メチレンジオキシにより置換されているフェニルであり；
Ｒ１はＣ４−８ヘテロサイクリル（ＣＨ２）ｎであり、ここに、該ヘテロサイクリル基は、独立して、Ｃ１−３アルキル、Ｃ（Ｏ）ＯＲ４およびＣ（Ｏ）Ｒ５からなる群から選択される置換基により１または２回置換されていてもよく；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｃ１−３アルキルであり；
ｎは０または１であり；
あるいは
Ｒ１は、下記環系（ａ−ｋ）：
【化２】
2009534421.tif 000003
（式中、Ｒ３はＨまたはＣ１−３アルキルである）
から選択される］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本明細書において用いられる場合、「Ｃ１−３アルキル」は、１〜３個の炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖の炭化水素基を意味する。かかる基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、またはイソプロピルが挙げられる。
本明細書において用いられる場合、「シクロアルキル」は、３〜６個の炭素原子の飽和単環式環を意味する。かかる基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等が挙げられる。
【００１１】
本明細書において用いられる場合、「ヘテロサイクリル」は、酸素、窒素または硫黄から選択される１〜３個のヘテロ原子を含有する、４−８員の飽和または非芳香族、不飽和単環式環を意味する。かかる基の例としては、ピロリジニル、アゼチジニル、ピラゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル等が挙げられる。
【００１２】
本明細書において用いられる場合、「ヘテロアリール」は、酸素、窒素または硫黄から選択される１〜３個のヘテロ原子を含有する、５−６員の単環式芳香環を意味する。かかる単環式芳香環の例としては、ピリジル、ピロリル、ピラニル、ピラゾリル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジニル等が挙げられる。
【００１３】
本明細書において用いられる場合、「ハロゲン」または「ハロ」は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを意味する。
本明細書において用いられる場合、「Ｃ１−３アルコキシ」は、１〜３個の炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖アルコキシ基を意味する。アルコキシの例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシおよびプロプ−２−オキシ等が挙げられる。
【００１４】
本明細書において用いられる場合、「置換されていてもよい」は、特記しない限り、個々の場合において、独立して、ハロゲン、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、ヘテロサイクリル、アリール、およびヘテロアリールのような基により１〜３回置換されていてもよいことを意味し、ハロゲンを除く任意の置換基は、さらに独立して、ハロゲンまたはＣ１−２アルキルにより１〜３回置換されていてもよい。
【００１５】
本発明の化合物は、１個またはそれ以上の不斉炭素原子を含有することができ、ラセミ体および光学活性体として存在しうる。これらのすべての化合物およびジアステレオマーは、本発明の範囲内に含まれる。
【００１６】
適当には、Ｘは、ハロゲン、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシシアノ、ＣＦ３、およびＯＣＦ３からなる群から選択される。
【００１７】
一の具体例において、Ｘはハロゲンである。
さらなる具体例において、ＸはＦ、ＣｌおよびＢｒからなる群から選択される。
さらなる具体例において、ＸはＣｌである。
【００１８】
適当には、Ｒ２は、Ｃ３−６シクロアルキル、フェニルおよびヘテロアリールからなる群から選択され、ここに、該フェニルまたはヘテロアリール基は、独立して、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＣＦ３、フェニルオキシおよびベンジルオキシからなる群から選択される置換基により１または２回置換されていてもよく；あるいは
Ｒ２は、メチレンジオキシまたは（ジ−ハロ−置換）−メチレンジオキシにより置換されているフェニルである。
【００１９】
一の具体例において、Ｒ２は、独立して、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン、ＯＣＦ３またはフェニルオキシからなる群から選択される置換基により１または２回置換されていてもよいフェニルを意味する。
一の具体例において、Ｒ２は、ハロゲンにより１回置換されていてもよいピリジルを意味する。
【００２０】
さらなる具体例において、Ｒ２は、クロロにより置換されたピリジルを意味する。
さらなる具体例において、Ｒ２は、ジフルオロメチレンジオキシにより置換されたフェニルである。
【００２１】
さらなる具体例において、Ｒ２はＣ３−６シクロアルキルである。
さらなる具体例において、Ｒ２は、ハロメチルフェニル、トリハロメチルオキシフェニル、ジハロフェニル、エチルフェニルまたはフェニルオキシフェニルである。
【００２２】
さらなる具体例において、Ｒ２は、３−フルオロ−２−メチルフェニル、２−トリフルオロメチルオキシフェニル、２−クロロ−３−フルオロフェニル、２−エチルフェニルまたは２−フェニルオキシフェニルである。
さらなる具体例において、Ｒ２はハロピリジルである。
さらなる具体例において、Ｒ２は２−クロロ−３−ピリジルである。
【００２３】
適当には、Ｒ１は、Ｃ４−８ヘテロサイクル（ＣＨ２）ｎであり、ここに該ヘテロサイクリル基は、独立して、Ｃ１−３アルキル、Ｃ（Ｏ）ＯＲ４およびＣ（Ｏ）Ｒ５からなる群から選択される置換基により置換されていてもよく；
ここに、Ｒ４およびＲ５が、独立して、Ｃ１−３アルキルであり；ｎが０または１である；
あるいは
Ｒ１は、以下の環系（ａ−ｋ）：
【化３】
2009534421.tif 000004
［式中、Ｒ３はＨまたはＣ１−３アルキルである］
からなる群から選択される。
【００２４】
一の具体例において、Ｒ１ヘテロサイクリル基はピロリジニルである。
一の具体例において、Ｒ１ヘテロサイクリル基は、アゼチジニル、ピペリジニルおよびピロリジニルからなる群から選択される。
【００２５】
さらなる具体例において、Ｒ１は、ピロリジニルメチル、アゼチジニル、ピペリジニル、ピロリジニルおよびエチル−１−ピペリジニルカルボキシレートからなる群から選択される。
【００２６】
さらなる具体例において、Ｒ１は、３−ピロリジニルメチル、３−アゼチジニル、４−ピペリジニル、３−ピペリジニル、３−ピロリジニルおよびエチル−１−ピペリジニルカルボキシレートからなる群から選択される。
適当には、ｎは０または１である。
【００２７】
一の具体例において、ｎは０である。
さらなる具体例において、ｎは１である。
【００２８】
一の具体例において、Ｒ１は、２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプチル、８−アザビシクロ［３．２．１］オクチル、８−メチル−８−アザビシクロ［３．２．１］オクチル、３−アザビシクロ［３．２．１］オクチル、２−アザビシクロ［２．２．２］オクチル、および２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．２］オクチルからなる群から選択されるヘテロサイクリル基である。
【００２９】
さらなる具体例において、Ｒ１は、３−エキソ−８−メチル−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルまたは３−エキソ−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルである。
【００３０】
適当な医薬上許容される塩は当業者によく知られており、無機および有機酸塩、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酢酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、乳酸、シュウ酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、サリチル酸、フェニル酢酸およびマンデル酸の塩を含む。加えて、式（Ｉ）で示される化合物の医薬上許容される塩はまた、例えば、置換基がカルボキシ基を含む場合、医薬上許容されるカチオンと形成される。適当な医薬上許容されるカチオンは当業者によく知られており、アルカリ、アルカリ土類、アンモニウムおよび第４級アミンカチオンが含まれる。
【００３１】
本発明の代表的な化合物は、限定するものではないが：
Ｎ−（４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−｛［（３−エキソ）−８−メチル−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル］スルホニル｝フェニル）−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３−ピロリジニルメチル）スルホニル］フェニル｝−Ｎ’−｛２−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝尿素；
Ｎ−［３−（３−アゼチニルスルホニル）−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル］−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３−ピロリジニルメチル）スルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−［３−（３−アゼチニルスルホニル）−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル］−Ｎ’−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−４−イル）尿素；
Ｎ−［３−（３−アゼチニルスルホニル）−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３−ピロリジニルメチル）スルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２−エチルフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−｛２−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−エチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−４−イル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２−エチルフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−｛２−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−｛２−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−［２−（フェニルオキシ）フェニル］尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−［２−（フェニルオキシ）フェニル］尿素；
４−｛［６−クロロ−３−（｛［（３−フルオロ−２−メチルフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２−ヒドロキシフェニル］スルホニル｝−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
４−（｛６−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（｛［２−（フェニルオキシ）フェニル］アミノ｝カルボニル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−［２−（フェニルオキシ）フェニル］尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］尿素；
４−｛［６−クロロ−３−（｛［（２−クロロ−３−フルオロフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２−ヒドロキシフェニル］スルホニル｝−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］尿素；および
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２，３−ジクロロフェニル）尿素
またはその医薬上許容される塩を含む。
適当な塩は塩酸塩である。
【００３２】
一の具体例において、本発明の化合物は、限定するものではないが：
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−［２−（フェニルオキシ）フェニル］尿素；
４−｛［６−クロロ−３−（｛［（３−フルオロ−２−メチルフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２−ヒドロキシフェニル］スルホニル｝−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
４−（｛６−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（｛［２−（フェニルオキシ）フェニル］アミノ｝カルボニル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−［２−（フェニルオキシ）フェニル］尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］尿素；
４−｛［６−クロロ−３−（｛［（２−クロロ−３−フルオロフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）−２−ヒドロキシフェニル］スルホニル｝−１−ピペリジンカルボン酸エチル；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｒ）−３−ピロリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］尿素；および
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２，３−ジクロロフェニル）尿素
またはその医薬上許容される塩を含む。
【００３３】
さらなる具体例において、本発明の化合物は、限定するものではないが：
Ｎ−｛３−［（３−エキソ）−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イルスルホニル］−４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］尿素；および
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（３−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２，３−ジクロロフェニル）尿素；
またはその医薬上許容される塩を含む。
【００３４】
さらなる具体例において、本発明の化合物は、限定するものではないが：
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素；
Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素；および
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝尿素；
またはその医薬上許容される塩を含む。
【００３５】
製造方法
本発明の化合物は、工程：
Ａ）式（ＩＩ）：
【化４】
2009534421.tif 000005
で示されるスルフィドを式（ＩＩＩ）：
【化５】
2009534421.tif 000006
で示されるスルホンに酸化すること；
Ｂ）スルホンを式（ＩＶ）：
【化６】
2009534421.tif 000007
で示されるアミノフェノールに加水分解すること；および
Ｃ）アミノフェノールをイソシアネートまたはイソシアネート前駆体に曝して、最終生成物を得ること；
を含む方法により合成することができる。
【００３６】
本発明はまた、式（ＩＩ）：
【化７】
2009534421.tif 000008
式（ＩＩＩ）：
【化８】
2009534421.tif 000009
および式（ＩＶ）：
【化９】
2009534421.tif 000010
からなる群から選択される新規中間体に関する。
【００３７】
式（Ｉ）で示される化合物は、下記スキーム１に説明する合成法を適用することにより得ることができる。これらのスキームに示される合成は、種々の異なる基を有する式（Ｉ）で示される化合物の製造に適用することができ、これらは、適当に保護された任意の置換基を用いて反応させることにより、本明細書に記載の反応との整合性が得られる。これらの場合、続いて脱保護して、一般に開示した性質の化合物を得ることができる。尿素核が確立すると、これらの式で示される化合物は、当該分野でよく知られた官能基の相互変換に関する標準的な方法を用いて調製することができる。
【００３８】
【化１０】
2009534421.tif 000011
【００３９】
Ｒ１が３級または芳香族アミン基である実施例において、式（Ｉ）で示される化合物はスキーム１に従って調製することができる。
【００４０】
スルホニルクロライド１（ＷＯ０１／６８０３３Ａ２（スキーム１、１化合物の調製に関する教示の範囲で出典明示により本明細書に組み入れる）に従って調製した）を、対応するチオール２に、ＤＭＦ中トリフェニルホスフィンのような条件下で還元する。別法として、化合物２を、対応リチウムアニオン（ＷＯ０１／６８０３３Ａ２（スキーム１、１化合物の調製に関する教示の範囲で出典明示により本明細書に組み入れる）を参照）を硫黄（Ｓ８）でクエンチングすることにより調製することができる。ついで、２のアルキル化を、Ｒ１−ＬＧ（ここに、ＬＧは、クロロ、ブロモ、ヨウドまたはスルホネートのような脱離基を示す）で、塩基の存在下で処理することにより行う。得られたスルフィド３を、スルホン４に、過酸化水素のような酸化剤に曝すことにより酸化した。ベンゾオキサゾール基を加水分解して、アミノフェノール５を得、ついで、イソシアネートまたは適当なイソシアネート前駆体に曝して、系内でイコシアネートに変換することができる。この反応により最終尿素６を得る。
【００４１】
Ｂｏｃ基または同様の酸に不安定な保護基により保護されたＲ１が１級または２級アミンである場合、化合物はスキーム２のように調製することができる。スルホン形成および加水分解を上記のように行うが、後者はＢｏｃ基を除去するので、Ｂｏｃ無水物および水酸化ナトリウムのような適当な反応条件下で再導入して、化合物５ａを得る。尿素形成の後、１，４−ジオキサン中４Ｎ塩酸のような酸性条件下でＢｏｃ基を除去して所望の生成物７を得る。最後に、得られたアミンをさらに当業者に公知の還元アミノ化に付して、２級または３級アミン８を得る。
【００４２】
【化１１】
2009534421.tif 000012
スキーム２における中間体４ａ、５ａ、６ａ、７および８は新規中間体である。
【００４３】
合成実施例
以下に実施例は本発明を説明する。これらの実施例は本発明の範囲を何ら限定するものではなく、むしろ当業者に本発明の化合物、組成物および方法に対するガイダンスを与えるためのものである。本発明の特定の実施例が記載されている場合、当業者は、種々の変更および修飾を、本発明の精神および範囲から逸脱することなく行うことができることは明らかだろう。
【００４４】
すべてのエーテルは、ジエチルエーテルに言及し；ブラインは飽和ＮａＣ水溶液を意味し、ＤＣＭはジクロロメタンを意味し、ＴＨＦはテトラヒドロフランを意味し、ＥｔＯＡｃは酢酸エチルを意味し、ＨｅｘおよびＨｘはヘキサンを意味し、ＩＭＳは工業用変性アルコールを意味し、ＴＢＭＥはｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを意味し、ＤＭＦはジメチルホルムアミドを意味し、ＢＯＣおよびＢｏｃはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルを意味する。特記しない限り、すべての温度は℃（摂氏）で表される。すべての反応は、特記しない限り、不活性雰囲気下室温にて行われる。
【００４５】
１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、Ｊｅｏｌ  Ｄｅｌｔａ２（３００ＭＨｚ）スペクトロメーターで記録した。化学シフトは、百万分率（ｐｐｍ，δ単位）で示す。分裂パターンは見かけの多重度で記載し、ｓ（シングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｑ（カルテット）、ｑｕｉｎｔ（クインテット）、ｍ（マルチプレット）、ｂｒ（ブロード）で表す。
【００４６】
特記しない限り、「フラッシュ」および「カラムクロマトグラフィー」は、規定の溶媒系を用いるシリカのフラッシュカラムクロマトグラフィーを意味する。
ＬＣ−ＭＳデータは、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＬＣ  システム（ＳＣＬ−１０Ａ  ＣｏｎｔｒｏｌｌｅｒおよびデュアルＵＶ検出器）を備えたＰＥ  Ｓｃｉｅｘ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ  ＬＣ／ＭＳ  ＡＰＩ−１５０、またはＷａｔｅｒｓ２６９５セパレーションモジュールを備えたＷａｔｅｒｓマイクロマスＺＱのいずれかで得た。
【００４７】
出発物質１：
Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−２，２−ジメチルプロパンアミド：
３，４−ジクロロアニリン（１５０ｇ）を１．０ＬのＴＢＭＥに溶解し、溶液を１０℃に冷却した。水酸化ナトリウム（１４０．７ｇの３０％水溶液）を、機械的に撹拌しながら加えた。塩化ピバロイル（１２５．９ｍＬ）を、内部温度を３５℃以下に保ちながら滴下した。添加後、反応物の温度を３０−３５℃にさらに３０分間維持した。ついで、反応混合物を室温に冷却し、ついで、０−５℃で１時間保持した。得られた沈殿物を濾過し、６００ｍＬの水／ＭｅＯＨ（９０／１０）、ついで、９００ｍＬの水で洗浄した。得られた固体を、減圧オーブンにて５５℃で４日間乾燥した。収量：１６２ｇ．１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．４６（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６５（ｄｄ，Ｊ＝９．０．２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），１．２２（９Ｈ，ｓ）
【００４８】
出発物質２：
６−クロロ−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−ベンゾオキサゾール−７−スルホニルクロライド：
Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−２，２−ジメチルプロパンアミド（１２１ｇ）を７２０ｍＬのＴＨＦ中に溶解し、溶液を−５０℃に冷却した。ブチルリチウム（４３３ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｎ）を、内部温度を−４５℃と−３５℃の間に保ちながら加え（最終温度：−３５℃）。−２５℃で４０分間保持した。反応混合物をＨＰＬＣでチェックして、５−１０％の出発物質が残っていることがわかった。さらに３５ｍＬのブチルリチウムを−３０℃で加え、反応物を−３０〜−２５℃でさらに３０分間保持した（ＨＰＬＣ：有意な変化は無かった）。反応混合物を−４５℃に冷却し、ＳＯ２を溶液に、飽和するまで通気した。ついで、反応混合物を−１０〜０℃で４５分間撹拌した。アルゴン（２ダブルバルーン容量）を溶液にバブリングし、ついで、反応混合物を−５℃に冷却した。塩化スルフリル（５８．８ｍＬ）を、温度を２２℃以下に保持しながら加えた。ついで、反応混合物を１０−１５℃に１時間保持した（ＨＰＬＣ：完了）。ＥｔＯＡｃを加え、混合物を濃縮して、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、溶媒を減圧下で蒸発した。粗物質が結晶化し、これを熱ヘキサンでトリチュレートした。収量：８７．２ｇ；１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．６０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），１．４３（９Ｈ，ｓ）
【００４９】
中間体１：
【化１２】
2009534421.tif 000013
出発物質１，Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）−２，２−ジメチルプロパンアミド（ＷＯ０１／６８０３３Ａ２（出発物質１の合成の教示の範囲で出典明示により本明細書に組み入れる）に従って調製し、また、上記も記載されている）を乾燥ＴＨＦ（４００ｍＬ）中に溶解し、ついで、−７５℃にアルゴン雰囲気下で冷却した。ｎ−ＢｕＬｉ（１６０ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ、５当量）を、温度を−６０℃以下に保ちながら滴下した。すべてのｎ−ＢｕＬｉを加えると、反応物を−５℃１．５時間撹拌し、ついで、−７０℃で撹拌し、硫黄（「硫黄華」）（１３ｇ）を加え、ついで、−７０℃〜室温で一晩撹拌した。反応混合物を−１０℃で撹拌した後、溶液は黄色から褐色／橙色に変化した。反応混合物を０℃に冷却し、２ＮのＨＣｌ溶液（２００ｍＬ）でクエンチし、１０分間撹拌した。有機層を分離し、２ＮのＮａＯＨ溶液でｐＨ１２−１３に塩基性化し、ついで、ＥｔＯＡｃで洗浄した。水層を、２ＭのＨＣｌ溶液で、約ｐＨ１に再び酸性化し、ジクロロメタン（２×）で抽出し、これを水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗生成物を、１：５（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）を用いるカラムクロマトグラフィーにより精製した。収量：６ｇ（３０％、橙色油）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．３９−７．３０（ｍ，２Ｈ），４．０８（ｓ，１Ｈ），１．５０（９Ｈ，ｓ）
【００５０】
別法として、中間体１を以下の方法で調製した：
トリフェニルホスフィン（８９ｇ）をＤＣＭ（２００ｍｌ）およびＤＭＦ（２．２ｍｌ）中に溶解した。溶液を氷／メタノール浴で−１℃に冷却した。これに、６−クロロ−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−ベンゾオキサゾール−７−スルホニルクロライド，出発物質２（ＷＯ０１／６８０３３Ａ２（出発物質２の合成の教示の範囲で出典明示により本明細書に組み入れる）に従って調製し、また、上記も記載されている）（３５ｇ）のＤＣＭ（１００ｍｌ）中溶液を、温度を１５℃以下に保ちながら３０分にわたって加えた。反応混合物を窒素雰囲気下１８時間室温にて撹拌した。反応混合物を２Ｎ塩酸（２００ｍｌ）を用いてクエンチした。相を分離し、有機相を減圧下で蒸発させた。残渣を２Ｎ水酸化ナトリウム（４００ｍｌ）中に懸濁させ、３時間強く撹拌した。固体を濾過により除去し、水で洗浄した。合した濾液および洗浄液を、氷／水浴で冷却し、５Ｎ塩酸を用いて約ｐＨ１に酸性化した。これを、ＴＢＭＥ（４００ｍｌ）を用いて抽出した。有機相を、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で蒸発させて、中間体１（２２．８５ｇ）を褐色固体として得た。
【００５１】
中間体２：（一般手順Ａ）
【化１３】
2009534421.tif 000014
（Ｒ）−（＋）−３−ヒドロキシピペリジン塩酸塩（１ｇ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中懸濁液に、Ｅｔ３Ｎ（３．０４ｍＬ）、ついで、ＢＯＣ２Ｏ（１．７５ｇ）を０℃で加え、これを週末の間静置した。水（５０ｍＬ）を加え、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で抽出した。合した有機物を水（２×５０ｍＬ）ついで、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。残渣を、カラムに付した（フラッシュ、０１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭの勾配で溶出）。収量：１．５５ｇ．１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ３．７４−３．６９（２Ｈ，ｍ），３．５６−３．４８（１Ｈ，ｍ），３．１８−３．０３（２Ｈ，ｍ），１．９２−１．８３（１Ｈ，ｍ），１．７９−１．７１（２Ｈ，ｍ），１．５５−１．４５（１Ｈ，ｍ），１．４３（９Ｈ，ｓ）
【００５２】
中間体３：（一般手順Ｂ）
【化１４】
2009534421.tif 000015
中間体２（１ｇ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液に、Ｅｔ３Ｎ（１．３８ｍＬ）、ついで、ＭｓＣｌ（０．４６ｍＬ）を０℃で滴下した。０℃で１時間撹拌した後、反応物を室温に加温し、水（１０ｍＬ）でクエンチし、分離した。水層をＤＣＭ（２×２０ｍＬ）で抽出した。合した有機物を水（４０ｍＬ）で洗浄し、シリカのへらを加え、乾燥し（ＮａＳＯ４）および濃縮した。収量：１．４１４８ｇ；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．７１（１Ｈ，ｂｒｓ），３．６２（２Ｈ，ｂｒｄ），３．４９−３．２７（２Ｈ，ｍ），３．０４（３Ｈ，ｓ），２．０１−１．７６（３Ｈ，ｍ），１．７９−１．７１（２Ｈ，ｍ），１．５５−１．４５（１Ｈ，ｍ），１．４５（９Ｈ，ｓ）
【００５３】
中間体４：（一般手順Ｃ）
【化１５】
2009534421.tif 000016
ＮａＨ（０．３０ｇ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中懸濁液に、中間体１（出発物質１を用いる）（１．２２ｇ）を滴下した。１時間撹拌した後ＴＨＦ中の、中間体３（１．４１ｇ）を加え、反応物を８０℃に加熱し、一晩静置した。反応混合物を室温に冷却し、ついで、ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）でクエンチした。反応混合物をＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合した有機物を水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＮａＳＯ４）、濃縮した。残渣をカラムに付した（フラッシュ、２０％ＥｔＯＡＣ／Ｈｘ、シリカ）。収量：９４６．９ｍｇ；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．５０（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．５５−３．４５（ｍ，１Ｈ），３．００−２．８０（ｍ，２Ｈ）
【００５４】
中間体５：（一般手順Ｄ）
【化１６】
2009534421.tif 000017
中間体４（９４６．９ｍｇ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液に、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｍＣＰＢＡ（２．３１ｇ）を−１０℃で加えた。反応物を−１０℃で１時間撹拌し、ついで、室温に加温した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）でクエンチし、ついで、ＤＣＭ（２×７０ｍＬ）で抽出した。合した有機物を水（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。残渣を、カラムに付した（フラッシュ、３０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｘ、シリカ）。収量３５３．６ｍｇ（３５％、黄色油）；ＭＳ（ｍ／ｚ，ＥＳ＋，Ｍ＋Ｈ）：４５７．０８
【００５５】
中間体６：（一般手順Ｅ）
【化１７】
2009534421.tif 000018
中間体５（３５３ｍｇ）のＩＭＳ（５ｍＬ）中溶液に、濃ＨＣｌ（５ｍＬ）を加えた。ついで、反応物を８０℃で加熱し、一晩静置した。反応混合物を室温に冷却し、濃縮して、ＩＭＳを除去した。残渣を、飽和ＮａＯＨ水溶液でｐＨ１２に塩基性化し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）、ＢＯＣ２Ｏ（１当量、０．１７ｇ）を０℃で加え、一晩静置した。反応混合物を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出した。合した有機物を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。残渣をカラムに付した（フラッシュ、１０％−３０％ＥＡ／Ｈｘ勾配で溶出）。収量：２つの生成物含有フラクションを単離した：５８．０ｍｇおよび１８０．９ｍｇ．ＭＳ（ｍ／ｚ，ＥＳ＋，Ｍ＋Ｈ）：２９１．０１
【００５６】
中間体７：（一般手順Ｆ）
【化１８】
2009534421.tif 000019
３−フルオロ−２−メチルアニリン（７．４ｇ）をＤＣＭ（２２０ｍＬ）中に、アルゴン雰囲気下、室温にて溶解した。０℃に冷却した後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２２０ｍＬ）、ついで、トリホスゲン（５．８５ｇ）を加えた。反応物を０℃で１時間撹拌した。反応物を０℃で１時間撹拌した。この後、生成物をＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機フラクションを合し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、溶媒を減圧下で除去して、黄色油を得た。ヘキサンを加え、白色塩を沈殿させ、濾過した。ヘキサンを減圧下で除去して、黄色油を得たｌ（７．６９ｇ、８６％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．０９（ｄｄ，１Ｈ），６．９２−６．８５（ｍ，２Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ）
【００５７】
中間体８：（一般手順Ｇ）
【化１９】
2009534421.tif 000020
中間体６（６０ｍｇ）のＤＣＭ（３ｍＬ）中溶液に中間体７（７０ｍｇ）を加え、反応物を週末の間そのままにした。反応混合物を濃縮し、残渣をカラムに付した（フラッシュ、２０％−３０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｘの勾配で溶出）。収量：５６．２ｍｇ．ＭＳ（ｍ／ｚ，ＥＳ＋，Ｍ＋Ｈ）：５４２．０１
【００５８】
実施例１：Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）尿素．（一般手順Ｈ）
【化２０】
2009534421.tif 000021
中間体８（５６．２ｍｇ）および４ＮのＨＣｌ／ジオキサン（３ｍＬ）を室温にて一緒に撹拌し、一晩置いた。中間体６、５、４、３および２を上記のように調製した。中間体１を、実施例１の合成用の出発物質１を用いて調製した。反応混合物を濃縮し、残渣を最小限の量のＭｅＯＨ中に溶解し、Ｅｔ２Ｏを加えた。固体を砕き、濾過し、乾燥した。粗収量：２８．４ｍｇ。粗生成物を最小限の量のＭｅＯＨ中に溶解し、Ｅｔ２Ｏを加えた。固体を砕き、溶媒をデカンテーションし、固体を乾燥させた。収量：１８．８ｍｇ．ＭＳ（ｍ／ｚ，ＥＳ＋，Ｍ＋Ｈ）：４４１．９８．ＮＭＲ（ＭｅＯＤ）δ８．４０（１Ｈ，ｄ，ＡｒＨ），７．４６（１Ｈ，ｄ，ＡｒＨ），７．１９−７．１５（２Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），６．８５（１Ｈ，ｔ，ＡｒＨ），４．１４（１Ｈ，ｄｔ，ＣＨ），３．６６（１Ｈ，ｄｄ，ＣＨ），３．３７（２Ｈ，ｄ，ＣＨ２），３．０４（１Ｈ，ｄｔ，ＣＨ），２．１９（３Ｈ，Ｓ，ＡｒＣＨ３），２．１４−１．６９（４Ｈ，ｍ，２ｘＣＨ２）
【００５９】
中間体９：
【化２１】
2009534421.tif 000022
ＤＣＭ（４０ｍＬ）中のトリホスゲン（７．７ｇ）を、ＤＣＭ（２００ｍＬ）中の３−アミノ−２−クロロピリジン（１０ｇ）および飽和ＮａＣＨＯ３水溶液（２００ｍＬ）中に０℃で加えた。ついで、反応物を１時間撹拌した。ついで、生成物をＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を減圧下で除去して、灰白色固体を得た。ヘキサンでトリチュレートし、ついで、固体を濾過し、溶媒を蒸発させて、生成物を無色油として得た。生成物をアルゴンでフラッシュし、冷蔵庫に置いた後、白色結晶性固体を得た（６ｇ）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．２２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．４５（ｄ，１Ｈ），７．２７−７．２０（ｍ，１Ｈ）
【００６０】
中間体１０：
【化２２】
2009534421.tif 000023
中間体６（６０ｍｇ）のＤＣＭ（３ｍＬ）中溶液に、中間体９（７１ｍｇ）を加え、反応物を週末の間置いた。反応混合物を濃縮し、残渣をカラムに付した（フラッシュ、２０−３０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｘ、シリカ）。収量：６０．０ｍｇ．ＭＳ（ｍ／ｚ，ＥＳ＋，Ｍ＋Ｈ）：５４４．９７
【００６１】
実施例２．Ｎ−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝−Ｎ’−（２−クロロ−３−ピリジニル）尿素
【化２３】
2009534421.tif 000024
中間体１０（６０ｍｇ）および４ＮのＨＣｌ／ジオキサン（３ｍＬ）を室温にて一緒に撹拌し、一晩置いた。中間体６、５、４、３および２を上記のように調製した。中間体１を、実施例２を合成するための出発物質１を用いて調製した。反応混合物を濃縮し、残渣を最小限の量のＭｅＯＨおよびＥｔＯＡｃを加えた。固体を砕き、溶媒をデカンテーションし、固体を乾燥させた。収量：９．１ｍｇ；ＭＳ（ｍ／ｚ，ＥＳ＋，Ｍ＋Ｈ）：４４４．９１．ＮＭＲ（ＭｅＯＤ）δ８．５７（１Ｈ，ｄｄ，ＡｒＨ），８．４５（１Ｈ，ｄ，ＡｒＨ），８．０４（１Ｈ，ｄｄ，ＡｒＨ），７．３５（１Ｈ，ｄｄ，ＡｒＨ），７．１９（１Ｈ，ｄ，ＡｒＨ），４．１７−４．０９（１Ｈ，ｍ，ＣＨ），３．６４（１Ｈ，ｄｄ，ＣＨ），３．３９−３．３３（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２），３．０５（１Ｈ，ｄｔ，ＣＨ），２．１５−１．７４（４Ｈ，ｍ，２ｘＣＨ２）
【００６２】
中間体１１：
【化２４】
2009534421.tif 000025
中間体６（６０ｍｇ）のＤＣＭ（３ｍＬ）中の懸濁液に、２−クロロ−３−フルオロフェニルイソシアネート（７９ｍｇ）を加え、反応物を週末の間置いた。反応混合物を濃縮し、残渣をカラムに付した（フラッシュ、０−３０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｘで溶出した）。収量：７１．２ｍｇ；Ｒｆ：０．５１（５０％ＥＡ／Ｈｘ）；ＭＳ（ｍ／ｚ、ＥＳ＋，Ｍ＋Ｈ）：５６１．９５
【００６３】
実施例３．Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（３Ｓ）−３−ピペリジニルスルホニル］フェニル｝尿素
【化２５】
2009534421.tif 000026
中間体１１（７１．２ｍｇ）および４ＮのＨＣｌ／ジオキサン（３ｍＬ）を室温にて一緒に撹拌し、一晩置いた。中間体６、５、４、３および２を上記のように調製した。中間体１を、実施例３を合成するための出発物質１を用いて調製した。反応混合物を濃縮し、残渣を最小限の量のＭｅＯＨに溶解し、Ｅｔ２Ｏを加えた。固体を砕き、濾過し、乾燥した。収量：５０．１ｍｇ（灰白色固体）。ＭＳ（ｍ／ｚ，ＥＳ＋，Ｍ＋Ｈ）：４６１．９６．ＮＭＲ（ＭｅＯＤ）δ８．４２（１Ｈ，ｄ，ＡｒＨ），７．９３（１Ｈ，ｄ，ＡｒＨ），７．２６（１Ｈ，ｄｔ，ＡｒＨ），７．１８（１Ｈ，ｄ，ＡｒＨ），６．９５（１Ｈ，ｄｔ，ＡｒＨ），４．２１−４．１１（１Ｈ，ｍ，ＣＨ），３．６６（１Ｈ，ｄｄ，ＣＨ），３．３９−３．３１（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２），３．０３（１Ｈ，ｄｔ，ＣＨ），２．１７−１．７２（４Ｈ，ｍ，２ｘＣＨ２）
【００６４】
表１．中間体を一般手順Ａ−Ｅに従って調製した。
【表１】
2009534421.tif 000027
【００６５】
中間体１８：
【化２６】
2009534421.tif 000028
２バッチの２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−４−アミン（１ｇおよび３．５８ｇ）を、トリホスゲン（５６６ｍｇおよび２．０４ｍｇ）およびＤＣＭ（２０ｍＬおよび８０ｍＬ）中の飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２０ｍＬおよび８０ｍＬ）で、中間体９に記載のようにで処理して、２つのバッチを合して、３．２７ｇの所望の生成物を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．０５（ｔ，１Ｈ），６．９０（ｄ，１Ｈ），６．８２（ｄ，１Ｈ）
【００６６】
中間体１を、すべての合成に関して出発物質１を用いて調製した。
表２．表１の中間体から実施例を調製した。
【表２】
2009534421.tif 000029
【００６７】
【表３】
2009534421.tif 000030
【００６８】
【表４】
2009534421.tif 000031
【００６９】
【表５】
2009534421.tif 000032
【００７０】
中間体１９：
【化２７】
2009534421.tif 000033
Ｎ−Ｂｏｃ−ノルトロピノン（６．３ｇ）をＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）中に溶解し、０℃に冷却した。ＮａＢＨ４を加え、反応混合物を０℃で２．５時間撹拌した。反応物を水でクエンチし、ｐＨ３に酸性化し、ＤＣＭ（×３）で抽出した。合した有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、所望の生成物を得た（５．０ｇ、７９％、白色固体）。Ｒｆ：０．３８（ＥｔＯＡｃ／Ｈｘ：１／１）
【００７１】
中間体２０：
【化２８】
2009534421.tif 000034
中間体１９を、中間体１８および中間体１（出発物質１を用いる）から、一般手順Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥに従って調製した。全体の収量：２９％、ＭＳ（ｍ／ｚ，ＥＳ＋，Ｍ＋Ｈ）：３１６．９９。
【００７２】
中間体２１：
【化２９】
2009534421.tif 000035
１００ｍＬの丸底フラスコに、（Ｒ）−（−）−Ｎ−Ｂｏｃ−３−ピロリジノール（１．５ｇ）をアルゴン雰囲気下で加えた。ついで、ＣＢｒ４（１．５ｇ）、ついで乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）を加え、混合物を５℃に冷却した。ついで、ＰＰｈ３を５分にわたって加え、ＴＬＣにより進行を追った。固体を濾過により除去し、エーテルで洗浄した。濾液を濃縮し、１：３ＥｔＯＡｃ：Ｈｘで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製した。収量：２．３ｇ（＞１００％、さらに精製することなく用いた）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．４８（ｂｒｓ，１Ｈ），３．８２−３．６５（ｍ，２Ｈ），３．６２−３．４６（ｍ，２Ｈ），２．３８−２−１８（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）
【００７３】
中間体２２：（一般手順Ｉ）
【化３０】
2009534421.tif 000036
メチルエチルケトン（１０ｍＬ）中の中間体１（１．０ｇ）、中間体２１（１．２４ｇ）およびＫ２ＣＯ３（０．４９ｇ）を、室温にて一晩撹拌した。中間体１を出発物質１を用いて調製した。反応物を水でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗生成物を、１：４ＥｔＯＡｃ：Ｈｘで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製した。収量：０．６０ｇ（３６％、褐色油）；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．５３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），４．１５−４．０５（ｍ，１Ｈ），３．７０−３．５０（ｍ，２Ｈ），３．５０−３．２７（ｍ，２Ｈ），２．２８−２．１０（ｍ，１Ｈ），１．９０−１．７７（ｍ，１Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）
【００７４】
中間体２３：
【化３１】
2009534421.tif 000037
中間体２２（０．４０ｇ）をＤＣＭ（４ｍＬ）中−１０℃で撹拌し、ｍＣＰＢＡ（０．６８ｇ）を加えた。得られた混合物を−１０℃で３０分間撹拌した。反応物をＮａＨＣＯ３溶液でクエンチし、ＤＣＭで抽出し、水で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、１：３ＥｔＯＡｃ：Ｈｘで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製した。収量：０．３０ｇ（６９％、白色固体）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ，Ｍ＋Ｈ）：４４３
【００７５】
中間体２４：（一般手順Ｊ）
【化３２】
2009534421.tif 000038
中間体２３（０．３０ｇ）をＴＨＦ（２ｍＬ）中で撹拌し、ついで、濃ＨＣｌを加え、８０℃に一晩加熱した。反応混合物を冷却し、溶媒を除去し、残った混合物を５０％ＮａＯＨ水溶液で塩基性化した。混合物を０℃に冷却し、ＥｔＯＡｃ、ついで、ＢＯＣ２Ｏ（０．１５５ｇ）を加え、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、有機相を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗生成物を、ヘキサン中３３−７５％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製した。０．２５ｇ（当量）．ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ，Ｍ＋Ｈ−ｔＢｕ）：３２１．００
【００７６】
中間体２５：
【化３３】
2009534421.tif 000039
中間体２５を中間体１（０．５ｇ）およびＮ−Ｂｏｃ−４−ブロモピペリジン（０．５９ｇ）から、一般手順Ｉ、ＤおよびＪに従って調製した。収量：０．５０ｇ（全体で５８％）。中間体１を出発物質１を用いて調製した。
【００７７】
実施例２７．４−（｛６−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（｛［２−（フェニルオキシ）フェニル］アミノ｝カルボニル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−１−ピペリジンカルボン酸エチル．（一般手順Ｋ）
【化３４】
2009534421.tif 000040
中間体２５（０．２５ｇ）および２−フェノキシフェニルイソシアネート（０．１７５ｇ）をＤＭＦ（３ｍＬ）中に溶解し、反応混合物を室温にて一晩撹拌した。過剰のＤＭＦを蒸発させ、残った混合物をカラムに充填し、１：３ＥｔＯＡｃ：Ｈｘで溶出した。収量：４００ｍｇ（当量、白色固体）ＭＳ（ｍ／ｚ，ＥＳ＋，Ｍ＋Ｈ）：５７４．１７
【００７８】
実施例２８．Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（４−ピペリジニルスルホニル）フェニル］−Ｎ’−［２−（フェニルオキシ）フェニル］尿素
【化３５】
2009534421.tif 000041
実施例２７（０．２０ｇ）をＣＨＣｌ３（２ｍＬ）中、アルゴン雰囲気下室温にて撹拌した。ヨウドトリメチルシラン（０．２１ｇ）を加え、混合物を一晩還流した。反応が進行しなかったので、２バッチのクロロトリメチルシラン（０．０３７ｇ  ｐｒ．バッチ）およびＮａＩ（０．０５１ｇ  ｐｒ．バッチ）を加え、反応物を７５℃にさらに６時間加熱した。この後、ＭｅＯＨを加え、混合物をさらに３０分間撹拌し、溶媒を除去した。メタノール中アンモニアを加えた。混合物をＤＣＭで抽出し、有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗生成物をＤＣＭ／エーテルで抽出し、ついで、メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製した。収量：１０ｍｇ（６％、明褐色固体）ＭＳ（ｍ／ｚ，ＥＳ＋，Ｍ＋Ｈ）：５０２．０６。
【００７９】
中間体４〜６、８、１０〜１７、２０、２２〜２５は新規中間体である。
表３．実施例を中間体２０、２４および２５から調製した。
【表６】
2009534421.tif 000042
【００８０】
【表７】
2009534421.tif 000043
【００８１】
【表８】
2009534421.tif 000044
【００８２】
治療方法
式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩は、ヒトまたは他の哺乳動物における、かかる哺乳動物の細胞、例えば、限定するものではないが、単球および／またはマクロファージ、またはＩ型受容体もしくはＩＩ型受容体とも称されるＩＬ−８α受容体もしくはβ受容体に結合する他のケモカインによる過剰または未制御のＩＬ−８サイトカイン産生により悪化するかまたは引き起こされる病態の予防または治療的処置用の医薬の製造において用いることができる。
【００８３】
したがって、本発明は、ケモカインがＩＬ−８αまたはβ受容体に結合するケモカイン介在疾患の治療方法であって、有効量の式（Ｉ）で示される化合物または医薬上許容される塩を投与することを含む方法を提供する。特に、ケモカインは、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８である。
【００８４】
式（Ｉ）で示される化合物は、サイトカイン機能、特に、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８を阻害して、生理学的機能を正常なレベルまたは場合によっては正常下レベルに生物学的にダウンレギュレートして病態を改善するのに十分な量で投与される。例えば、本発明に関するＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８の異常なレベルとは、（ｉ）１ピコグラム／ｍＬ以上の遊離ＩＬ−８のレベル；（ｉｉ）正常な生理学的レベルより高いいずれかの細胞性ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８；または（ｉｉｉ）ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８を各々産生する細胞または組織における基底レベル以上のＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８の存在である。
【００８５】
過剰または非制御ＩＬ−８産生が、疾患の悪化および／または発生に関与している多くの病態がある。ケモカイン介在疾患は、乾癬、アトピー性皮膚炎、変形性感染症、関節リウマチ、喘息、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫症候群、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、卒中、敗血性ショック、内毒素性ショック、グラム陰性菌敗血症、毒性ショック症候群、心臓性および腎性再潅流傷害、糸球体腎炎、血栓症、移植片対宿主反応、アルツハイマー病、同種移植拒絶反応、マラリア、再狭窄、血管形成、アテローム性動脈硬化症、骨粗鬆症、歯肉炎、ウイルス性疾患、例えば、ライノウイルスまたは望ましくない造血幹細胞放出を含む。
【００８６】
これらの疾患は、主に、大量の好中球浸潤、Ｔ細胞浸潤または新生血管成長により特徴付けられ、好中球の炎症部位への走化性または内皮細胞の定方向増殖を引き起こすＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８産生の増加に付随する。他の炎症性サイトカイン（ＩＬ−１、ＴＮＦおよびＩＬ−６）とは対照的に、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８は、好中球走化性、限定するものではないがエラスターゼ放出を包含する酵素放出ならびにスーパーオキシド産生および活性化を促進する独特の性質を有する。ＩＬ−８Ｉ型またはＩＩ型受容体を介して作用するα−ケモカイン、特に、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８は、内皮細胞の定方向増殖を促進することにより腫瘍の新生血管形成を促進することができる。したがって、ＩＬ−８誘発性走化性または活性化の阻害は、好中球浸潤を直接的に減少させる。
【００８７】
最近の証拠は、また、ＨＩＶ感染症の治療におけるケモカインの役割を示している。Littleman et al., Nature 381, pp. 661 (1996)およびKoup et al., Nature 381, pp. 667 (1996)。
【００８８】
また、最近の証拠は、アテローム性動脈硬化症の治療におけるＩＬ−８阻害剤の使用を示している。第１の文献、Boisvert et al., J. Clin. Invest, 1998, 101:353-363は、骨髄移植を介して、幹細胞（および、したがって、単球／マクロファージ）上にＩＬ−８受容体が存在しないことがＬＤＬ受容体欠損マウスにおいてアテローム性硬化性斑の進行を減少させることを証明している。さらなる支持文献には以下のものがある：Apostolopoulos, et al., Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 1996, 16:1007-1012; Liu, et al., Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol, 1997, 17:317-323; Rus, et al., Atherosclerosis. 1996, 127:263-271; Wang et al. ,J. Biol. Chem. 1996, 271:8837-8842; Yue, et al., Eur. J. Pharmacol. 1993, 240:81-84; Koch ,et al., Am. J. Pathol., 1993, 142:1423-1431; Lee, et al., Immunol. Lett., 1996, 53, 109-113;およびTerkeltaub et al., Arterioscler. Thromb., 1994, 14:47-53。
【００８９】
また、本発明は、式（Ｉ）で示されるケモカイン受容体アンタゴニスト化合物による、ＣＮＳ損傷の治療方法を提供する。かかる治療は、急性発症における、ならびにＣＮＳ損傷に罹患し易いと考えられる個体における損傷の予防を提供する。
【００９０】
本明細書で定義されるＣＮＳ損傷は、手術によるような開放性もしくは穿通性頭部外傷、または頭部への損傷によるような非開放性頭部外傷の両方を含む。また、特に、脳領域の虚血性発作もまたこの定義に含まれる。
【００９１】
虚血性卒中は、通常、血管の塞栓、血栓または局所性アテローム性閉鎖の結果として、特定の脳領域への不十分な血液供給により引き起こされる限局性神経障害であると定義できる。この領域における炎症性サイトカインの役割が明らかになってきており、本発明は、これらの損傷の有効な治療方法を提供する。これらのような急性損傷について利用可能な治療法は比較的少ない。
【００９２】
ＴＮＦ−αは、内皮白血球接着分子発現を含む炎症誘発作用を有するサイトカインである。白血球は虚血性脳病変へ浸潤し、したがって、ＴＮＦのレベルを阻害するかまたは減少させる化合物は、虚血性脳損傷の治療に有用である。Liu et al., Stroke, Vol. 25., No.7, pp. 1481-88 (1994)（出典明示により本明細書に組み入れる）を参照のこと。
【００９３】
非開放性頭部損傷のモデルおよび５−ＬＯ／ＣＯ混合薬剤での処置は、Shohami et al., J. of Vaisc & Clinical Physiologyand Pharmacology, Vol.3, No.2, pp.99-107 (1992)において検討されている。浮腫形成を減少させる処置は、これらの治療される動物における機能的結果を改善することが見出された。
【００９４】
式（Ｉ）で示される化合物を、例えば、好中球走化性および活性化の減少により証明されるような、ＩＬ−８αまたはβ受容体と結合するＩＬ−８がこれらの受容体と結合するのを阻害するのに十分な量で投与する。式（Ｉ）で示される化合物がＩＬ−８結合の阻害剤であるという知見は、本明細書において記載するインビトロ受容体結合検定における式（Ｉ）で示される化合物の効果に基づいている。式（Ｉ）で示される化合物はＩＬ−８ＩＩ型受容体の阻害剤であることが明らかにされた。
【００９５】
本明細書において用いる場合、「ＩＬ−８により媒介される疾患または病態」なる用語は、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８が、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８その物を産生することにより、またはＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８が限定するものではないがＩＬ−１、ＩＬ−６またはＴＮＦなどの別のモノカインを放出させることにより役割を果たす全ての病態を意味する。したがって、例えば、ＩＬ−１が主成分であり、その産生または作用がＩＬ−８に応答して悪化または分泌される病態は、ＩＬ−８により媒介される病態であると考えられる。
【００９６】
本明細書において用いる場合、「ケモカインにより媒介される疾患または病態」なる用語は、ＩＬ−８αまたはβ受容体と結合するケモカイン、例えば、限定するものではないがＩＬ−８、ＧＲＯ−α、ＧＲＯ−β、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８などが役割を果たす全ての病態を意味する。これは、ＩＬ−８が、ＩＬ−８その物を産生することにより、またはＩＬ−８が、限定するものではないがＩＬ−１、ＩＬ−６またはＴＮＦ等の別のモノカインを放出させることにより役割を果たす病態を含む。したがって、例えば、ＩＬ−１が主成分であり、その産生または作用がＩＬ−８に応答して悪化または分泌される病態は、ＩＬ−８により媒介される病態であると考えられる。
【００９７】
本明細書において用いる場合、「サイトカイン」なる用語は、細胞の機能に影響を与え、免疫、炎症または造血応答における細胞間の相互作用を調節する分子である分泌ポリペプチドを意味する。サイトカインは、限定するものではないが、どの細胞が産生するかにかかわらず、モノカインおよびリンホカインを含む。例えば、モノカインは、一般に、単核細胞、例えば、マクロファージおよび／または単球により産生および分泌されるものをいう。しかしながら、ナチュラルキラー細胞、線維芽細胞、好塩基球、好中球、内皮細胞、脳星状細胞、骨髄ストローマ細胞、表皮性ケラチノサイトおよびＢ−リンパ球などの多くの他の細胞もまたモノカインを産生する。リンホカインは、一般に、リンパ球により産生されるものをいう。サイトカインの例としては、限定するものではないが、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）および腫瘍壊死因子ベータ（ＴＮＦ−β）が挙げられる。
【００９８】
本明細書において用いる場合、「ケモカイン」なる用語は、上記した「サイトカイン」なる用語と同様に、細胞の機能に影響を与え、免疫、炎症または造血応答における細胞間の相互作用を調節する分子である分泌ポリペプチドを意味する。ケモカインは主に細胞膜貫通を介して分泌され、特定の白血球、好中球、単球、マクロファージ、Ｔ−細胞、Ｂ−細胞、内皮細胞および平滑筋細胞の走化性および活性化を引き起こす。ケモカインの例としては、限定するものではないが、ＩＬ−８、ＧＲＯ−α、ＧＲＯ−β、ＧＲＯ−γ、ＮＡＰ−２、ＥＮＡ−７８、ＩＰ−１０、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−β、ＰＦ４、ならびにＭＣＰ１、２および３が挙げられる。
【００９９】
式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を治療において用いるためには、通常、これを標準的な医薬手法に従って医薬組成物に処方する。したがって、また、本発明は、有効で非毒性である量の式（Ｉ）で示される化合物および医薬上許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物に関する。
【０１００】
式（Ｉ）で示される化合物、その医薬上許容される塩およびこれを配合した医薬組成物は、好都合には、薬剤投与に慣用的に用いられる経路のいずれか、例えば、経口、局所、非経口または吸入によって投与される。式（Ｉ）で示される化合物は、それを慣用的な方法に従って標準的医薬担体と組み合わせることにより調製される慣用的な投与剤形で投与される。式（Ｉ）で示される化合物は、また、公知の第２の治療上活性な化合物と組合せて慣用的な投与形態で投与することができる。これらの方法は、成分を、所望の調製物に適するように混合し、造粒し、ついで、圧縮または溶解させることからなる。医薬上許容される担体または希釈剤の形態および特性は、組合せる有効成分の量、投与経路および他のよく知られている要因に依存すると考えられる。担体は、他の処方成分と適合し、レシピエントに有害でないという意味で「許容され」なければならない。
【０１０１】
用いられる医薬担体は、例えば、固体または液体のいずれでもよい。固体担体の例は、ラクトース、白土、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などである。液体担体の例は、シロップ、落花生油、オリーブ油、水などである。同様に、担体または希釈剤は、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリンなどの当該分野で公知の遅延性物質を単独でまたはワックスと共に含んでもよい。
【０１０２】
広範囲に及ぶ医薬形態を用いることができる。したがって、固体担体を用いる場合、製剤は、錠剤にしたり、粉末またはペレット形態でハードゼラチンカプセル中に入れたり、トローチまたはロゼンジの形態にすることができる。固体担体の量は、広範囲に及ぶが、好ましくは、約２５ｍｇ〜約１ｇである。液体担体を用いる場合、製剤は、シロップ、エマルジョン、ソフトゼラチンカプセル、滅菌注射液、例えば、アンプルまたは非水性液体懸濁液の形態にされる。
【０１０３】
式（Ｉ）で示される化合物は、局所的に、すなわち、非全身性投与により投与される。これは、式（Ｉ）で示される化合物の表皮へまたは口腔内への外用、およびかかる化合物の耳、目および鼻への滴下注入を含み、化合物が著しく血流に入らないようにする。これに対して、全身性投与は、経口、静脈内、腹腔内および筋肉内投与を意味する。
【０１０４】
局所投与に適した処方は、皮膚を通して炎症部位へ浸透するのに適した液体または半液体製剤、例えば、塗布剤、ローション、クリーム、軟膏またはペースト、および目、耳または鼻への投与に適した滴剤を含む。有効成分は、局所投与の場合、処方物の０．００１％ｗ／ｗ〜１０％ｗ／ｗ、例えば、１重量％〜２重量％を含む。しかしながら、それを処方物の１０％ｗ／ｗほども含んでもよいが、好ましくは、５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは、０．１％〜１％ｗ／ｗ含む。
【０１０５】
本発明のローションは、皮膚または目への適用に適したものを含む。眼ローションは、所望により殺菌剤を含んでもよい無菌水溶液を含み、滴剤の調製法と類似の方法により調製される。皮膚へ適用するためのローションまたは塗布剤は、また、アルコールまたはアセトンなどの皮膚の乾燥を促進し、冷却する薬剤および／またはグリセロールなどの保湿剤またはヒマシ油もしくは落花生油などの油を含んでもよい。
【０１０６】
本発明のクリーム、軟膏またはペーストは、外用のための有効成分を含む半固体処方物である。これらは、有効成分を微粉末または粉末形態で、単独または水性または非水性流体中溶液または懸濁液の形態で、適当な機械を用いて、グリース状または非グリース状基剤と混練することにより調製される。基剤は、炭化水素、例えば、固型、軟または流動パラフィン、グリセロール、ミツロウ、金属石鹸；漿剤；扁桃油、トウモロコシ油、落花生油、ヒマシ油またはオリーブ油などの天然起源の油；羊毛脂もしくはその誘導体またはステアリン酸もしくはオレイン酸などの脂肪酸などをアルコール、例えば、プロピレングリコールまたはマクロゲルとともに含んでもよい。処方物は、いずれの適当な界面活性剤、例えば、アニオン、カチオンまたは非イオン性界面活性剤、例えば、ソルビタンエステルまたはそのポリオキシエチレン誘導体を配合してもよい。懸濁化剤、例えば、天然ガム、セルロース誘導体または無機物質、例えば、ケイ酸質シリカ（ｓｉｌｉｃａｃｅｏｕｓ  ｓｉｌｉｃａｓ）および他の成分、例えばラノリンを含んでいてもよい。
【０１０７】
本発明の滴剤は、滅菌水性または油性溶液または懸濁液を含んでいてもよく、有効成分を殺菌剤および／または殺真菌剤および／または他の適当な保存剤の適当な水溶液に溶かし、好ましくは、界面活性剤を配合することにより調製される。ついで、得られた溶液を濾過により清澄化し、適当な容器に移し、ついで、これを密封し、オートクレーブ処理または９８〜１００℃に半時間維持することにより滅菌する。別法として、溶液を濾過滅菌し、無菌技法により容器に移す。滴剤に配合するのに適した殺菌剤および殺真菌剤の例は、硝酸フェニル水銀または酢酸フェニル水銀（０．００２％）、塩化ベンザルコニウム（０．０１％）および酢酸クロルヘキシジン（０．０１％）である。油性溶液の調製に適した溶媒としては、グリセロール、希アルコールおよびプロピレングリコールが挙げられる。
【０１０８】
式（Ｉ）で示される化合物は、非経口的、すなわち、静脈内、筋肉内、皮下、鼻内、直腸内、膣内または腹腔内投与により投与される。皮下および筋肉内形態の非経口投与が一般に好ましい。かかる投与に適する投与剤形は慣用技術により調製される。式（Ｉ）で示される化合物は、また、吸入、すなわち、鼻内または経口吸入投与によっても投与することができる。エアゾール処方物または定量型吸入器などのかかる投与に適した投与形態は、慣用的な技術により調製される。
【０１０９】
式（Ｉ）で示される化合物に関して本明細書に記載したあらゆる使用法に関して、１日の経口投与量は、好ましくは、全体重１ｋｇあたり約０．０１〜約８０ｍｇである。１日の非経口投与量は、全体重１ｋｇあたり約０．００１〜約８０ｍｇである。１日の局所投与量は、好ましくは、０．１ｍｇ〜１５０ｍｇであり、１日に１〜４回、好ましくは、２または３回投与する。１日の吸入量は、好ましくは、１日に約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇである。式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の最適量および個々の投与間隔は、治療する症状の性質および程度、投与の形態、経路および部位、ならびに治療する個々の患者により決定されること、およびこのような最適値は慣用技術により決定できることも当業者には理解できるであろう。また、最適な治療単位、すなわち、特定の日数の間、１日につき投与される式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の投与回数は、慣用的な治療単位決定試験を用いて当業者により確認できることも、当業者には理解できるであろう。
【０１１０】
組み合わせ
本発明の化合物および医薬処方はまた、１種またはそれ以上の他の治療剤、例えば抗炎症剤、抗コリン剤（特に、Ｍ１／Ｍ２／Ｍ３受容体アンタゴニスト）、β２−アドレナリン受容体アゴニスト、抗感染症薬、例えば抗生物質、抗ウイルス剤、または抗ヒスタミン剤と組み合わせて用いることができる。かくして、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩、溶媒和物または医薬上許容される誘導体と、例えば、抗炎症剤、例えばコルチコステロイドまたはＮＳＡＩＤ、抗コリン剤、β２−アドレナリン受容体アゴニスト、抗感染症薬、例えば、抗生物質または抗ウイルス剤、または抗ヒスタミン剤から選択される１種またはそれ以上の他の治療活性剤との組み合わせを提供する。本発明の一の具体例は、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体とβ２−アドレナリン受容体アゴニスト、および／または抗コリン作用薬、および／またはＰＤＥ−４阻害剤、および／または抗ヒスタミン剤の組み合わせを包含する。
【０１１１】
当業者には、適宜、他の治療成分（複数でも可）を、治療成分の活性および／または安定性および／または物理的特性、例えば溶解度を最適化するために、例えば、アルカリ金属もしくはアミン塩として、または酸付加塩、またはプロドラッグまたはエステル、例えば、低級アルキルエステル、または溶媒和物、例えば水和物の形態で用いることができることは明らかだろう。また、適宜、治療成分を光学的に純粋な形態で用いることができることも明らかだろう。
【０１１２】
一の具体例において、本発明は、本発明の化合物とβ２−アドレナリン受容体アゴニストの組み合わせを包含する。
【０１１３】
β２−アドレナリン受容体アゴニストの例としては、サルメテロール（ラセミ体または単独のエナンチオマーであってもよい、例えばＲ−エナンチオマー）、サルブタモール（ラセミ体または単独のエナンチオマーであってもよい、例えばＲ−エナンチオマー）、フォルモテロール（ラセミ体または単独のジアステレオマーであってもよい、例えばＲ，Ｒ−ジアステレオマー）、サルメファモール、フェノテロール、カルモテロール、エタンテロール、ナミンテロール、クレンブテロール、ピルブテロール、フレルブテロール、レプロテロール、バンブテロール、インダカテロール、テルブタリンおよびその塩、例えば、サルメテロールのキシナホ酸（１−ヒドロキシ−２−ナフタレンカルボキシレート）塩、サルブタモールの硫酸塩もしくは遊離塩基またはフォルモテロールのギ酸塩が挙げられる。一の具体例において、β２−アドレナリン受容体アゴニストは、長期活性β２−アドレナリン受容体アゴニスト、例えば１２時間またはそれ以上の間有効な気管支拡張作用を与える化合物である。他のβ２−アドレナリン受容体アゴニストは、ＷＯ２００２／０６６４２２、ＷＯ２００２／０７０４９０、ＷＯ２００２／０７６９３３、ＷＯ２００３／０２４４３９、ＷＯ２００３／０７２５３９、ＷＯ２００３／０９１２０４、ＷＯ２００４／０１６５７８、ＷＯ２００４／０２２５４７、ＷＯ２００４／０３７８０７、ＷＯ２００４／０３７７７３、ＷＯ２００４／０３７７６８、ＷＯ２００４／０３９７６２、ＷＯ２００４／０３９７６６、ＷＯ２００１／４２１９３およびＷＯ２００３／０４２１６０に記載されているものを含む。
【０１１４】
さらに、β２−アドレナリン受容体アゴニストの例としては：
３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル｝アミノ）
ヘキシル］オキシ｝ブチル）ベンゼンスルホンアミド；
３−（３−｛［７−（｛（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル）フェニル］エチル｝−アミノ）ヘプチル］オキシ｝プロピル）ベンゼンスルホンアミド；
４−｛（１Ｒ）−２−［（６−｛２−［（２，６−ジクロロベンジル）オキシ］エトキシ｝ヘキシル）アミノ］−１−ヒドロキシエチル｝−２−（ヒドロキシメチル）フェノール；
４−｛（１Ｒ）−２−［（６−｛４−［３−（シクロペンチルスルホニル）フェニル］ブトキシ｝ヘキシル）アミノ］−１−ヒドロキシエチル｝−２−（ヒドロキシメチル）フェノール；
Ｎ−［２−ヒドロキシル−５−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−［［２−４−［［（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル］アミノ］フェニル］エチル］アミノ］エチル］フェニル］ホルムアミド；
Ｎ−２｛２−［４−（３−フェニル−４−メトキシフェニル）アミノフェニル］エチル｝−２−ヒドロキシ−２−（８−ヒドロキシ−２（１Ｈ）−キノリノン−５−イル）エチルアミン；および
５−［（Ｒ）−２−（２−｛４−［４−（２−アミノ−２−メチル−プロポキシ）−フェニルアミノ］−フェニル｝−エチルアミノ）−１−ヒドロキシ−エチル］−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン
が挙げられる。
【０１１５】
β２−アドレナリン受容体アゴニストは、硫酸、塩酸、フマル酸、ヒドロキシナフトエ酸（例えば、１−または３−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸）、桂皮酸、置換桂皮酸、トリフェニル酢酸、スルファミン酸、スルファニル酸、ナフタレンアクリル酸、安息香酸、４−メトキシ安息香酸、２−または４−ヒドロキシ安息香酸、４−クロロ安息香酸および４−フェニル安息香酸から選択される医薬上許容される酸と形成した塩の形態であってもよい。
【０１１６】
適当な抗炎症剤は、コルチコステロイド類を含む。本発明の化合物と組み合わせて用いることができるコルチコステロイド類の例としては、抗炎症活性を有する、経口および吸入コルチコステロイド類およびこれらのプロドラッグが挙げられる。
【０１１７】
例としては、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プロピオン酸フルチカゾン、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７α−［（４−メチル−１，３−チアゾール−５−カルボニル）オキシ］−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル（フルチカゾンフロアート）、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−プロピオニルオキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−（２−オキソ−テトラヒドロ−フラン−３Ｓ−イル）エステル、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−（２，２，３，３−テトラメチルシクロプロピルカルボニル）オキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−シアノメチルエステルおよび６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７α−（１−メチルシクロプロピルカルボニル）オキシ−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル、ベクロメタゾンエステル（例えば、１７−プロピオン酸エステルまたは１７，２１−ジプロピオン酸エステル）、ブデソニド、フルニソリド、モメタゾンエステル（例えば、フロ酸モメタゾン）、トリアムシノロンアセトニド、ロフレポニド、シクレソニド（１６α，１７−［［（Ｒ）−シクロヘキシルメチレン］ビス（オキシ）］−１１β，２１−ジヒドロキシ−プレグナ−１，４−ジエン−３，２０−ジオン）、プロピオン酸ブチキソコート、ＲＰＲ−１０６５４１、およびＳＴ−１２６が挙げられる。一の具体例において、コルチコステロイドは、プロピオン酸フルチカゾン、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７α−［（４−メチル−１，３−チアゾール−５−カルボニル）オキシ］−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−（２，２，３，３−テトラメチルシクロプロピルカルボニル）オキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−シアノメチルエステルおよび６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７α−（１−メチルシクロプロピルカルボニル）オキシ−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステルを含む。一の具体例において、コルチコステロイドは、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロ��チルエステルである。
【０１１８】
また、コルチコステロイドの例としては、ＷＯ２００２／０８８１６７、ＷＯ２００２／１００８７９、ＷＯ２００２／１２２６５、ＷＯ２００２／１２２６６、ＷＯ２００５／００５４５１、ＷＯ２００５／００５４５２、ＷＯ２００６／０７２５９９およびＷＯ２００６／０７２６００に記載のものが挙げられる。
【０１１９】
転写促進よりも転写抑制に選択性があるグルココルチコイド作用性を有し、組み合わせ療法に有用でありうる非ステロイド化合物は、以下の公開された特許出願および特許：ＷＯ２００３／０８２８２７、ＷＯ１９９８／５４１５９、ＷＯ２００４／００５２２９、ＷＯ２００４／００９０１７、ＷＯ２００４／０１８４２９、ＷＯ２００３／１０４１９５、ＷＯ２００３／０８２７８７、ＷＯ２００３／０８２２８０、ＷＯ２００３／０５９８９９、ＷＯ２００３／１０１９３２、ＷＯ２００２／０２５６５、ＷＯ２００１／１６１２８、ＷＯ２０００／６６５９０、ＷＯ２００３／０８６２９４、ＷＯ２００４／０２６２４８、ＷＯ２００３／０６１６５１、ＷＯ２００３／０８２７７、ＷＯ２００６／０００４０１、ＷＯ２００６／０００３９８およびＷＯ２００６／０１５８７０に記載のものを含む。
【０１２０】
転写促進よりも転写抑制に選択性があるグルココルチコイド作用性を有し、組み合わせ療法に有用でありうる非ステロイド化合物は、以下の特許：ＷＯ２００３／０８２８２７、ＷＯ１９９８／５４１５９、ＷＯ２００４／００５２２９、ＷＯ２００４／００９０１７、ＷＯ２００４／０１８４２９、ＷＯ２００３／１０４１９５、ＷＯ２００３／０８２７８７、ＷＯ２００３／０８２２８０、ＷＯ２００３／０５９８９９、ＷＯ２００３／１０１９３２、ＷＯ２００２／０２５６５、ＷＯ２００１／１６１２８、ＷＯ２０００／６６５９０、ＷＯ２００３／０８６２９４、ＷＯ２００４／０２６２４８、ＷＯ２００３／０６１６５１およびＷＯ２００３／０８２７７に記載のものを含む。
【０１２１】
抗炎症剤の例としては、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）を含む。
【０１２２】
ＮＳＡＩＤの例としては、クロモグリク酸ナトリウム、ネドクロミルナトリウム、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）阻害剤（例えば、テオフィリン、ＰＤＥ４阻害剤またはＰＤＥ３／ＰＤＥ４混合阻害剤）、ロイコトリエンアンタゴニスト、ロイコトリエン合成の阻害剤（例えば、モンテルカスト（ｍｏｎｔｅｌｕｋａｓｔ））、ｉＮＯＳ阻害剤、トリプターゼおよびエラスターゼ阻害剤、ベータ−２インテグリンアンタゴニストおよびアデノシン受容体アゴニストまたはアンタゴニスト（例えば、アデノシン２ａアゴニスト）、サイトカインアンタゴニスト（例えば、ケモカインアンタゴニスト、例えば、ＣＣＲ３アンタゴニスト）またはサイトカイン合成の阻害剤または５−リポキシゲナーゼ阻害剤が挙げられる。一の具体例において、本発明は、経口投与用のｉＮＯＳ（酸化窒素シンターゼ）阻害剤を含みうる。ｉＮＯＳ阻害剤の例としては、ＷＯ１９９３／１３０５５、ＷＯ１９９８／３０５３７、ＷＯ２００２／５００２１、ＷＯ１９９５／３４５３４およびＷＯ１９９９／６２８７５に記載されているものを含む。ＣＣＲ３阻害剤の例としては、ＷＯ２００２／２６７２２に記載されているものを含む。
【０１２３】
一の具体例において、本発明は、例えば吸入に適した処方の場合において、式（Ｉ）で示される化合物のホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）阻害剤と組み合わせた使用を提供する。本発明のこの態様において有用なＰＤＥ４阻害剤は、ＰＤＥ４阻害剤として、例えばＰＤＥ４Ｂおよび／またはＰＤＥ４Ｄの阻害剤として作用することが知られている、または見出されたいずれの化合物であってもよい。
【０１２４】
ＰＤＥ４阻害化合物は、ｃｉｓ−４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸、２−カルボメトキシ−４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ｄｉフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オンおよびｃｉｓ−［４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オール］を含む。また、ｃｉｓ−４−シアノ−４−［３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］シクロヘキサン−１−カルボン酸（シロミラストとしても知られている）およびその塩、エステル、プロドラッグまたは物理形態（１９９６年９月３日公開の米国特許第５，５５２，４３８号に記載されている）が挙げられる。
【０１２５】
他のＰＤＥ４阻害化合物は、ＡＷＤ−１２−２８１（Ｎ−（３，５−ジクロロ−４−ピリジニル）−１−［４−フルオロフェニル）メチル］−５−ヒドロキシ−α−オキソ−１Ｈ−インドール−３−アセトアミド）（Ｅｌｂｉｏｎ社）（Hofgen, N. et al. 15th EFMC Int Symp Med Chem (Sept 6-10, Edinburgh) 1998, Abst P.98；ＣＡＳリファレンスＮｏ．２４７５８４０２０−９）；９−ベンジルアデニン誘導体（ＮＣＳ−６１３で指定（ＩＮＳＥＲＭ））；Ｄ−４４１８（Ｃｈｉｒｏｓｃｉｅｎｃｅ社およびＳｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ社）；ベンゾジアゼピンＰＤＥ４阻害剤（ＣＩ−１０１８として同定されている（ＰＤ−１６８７８７）、Ｐｆｉｚｅｒ社）；ベンゾジオキソール誘導体（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ、ＷＯ９９／１６７６６に開示されている；Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ社、Ｋ−３４）；Ｖ−１１２９４Ａ（Ｎａｐｐ）（Landells, L. J. et al. Eur Resp J [Annu Cong Eur Resp Soc (Sept 19-23, Geneva) 1998] 1998, 12 (Suppl. 28) :Abst P2393）；ロフルミラスト（３−（シクロプロピルメトキシ）−Ｎ−（３，５−ジクロロ−４−ピリジニル）−４−（ジフルオロメトキシ）ベンズアミド）（ＥＰ０７０６５１３Ｂ１を参照、Ｂｙｋ  Ｇｕｌｄｅｎ  Ｌｏｍｂｅｒｇ，例えば、その実施例５を参照）；フタルアジノン（ＷＯ１９９９／４７５０５）（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ社）；プマフェントリン，（−）−ｐ−［（４ａＲ＊，１０ｂＳ＊）−９−エトキシ−１，２，３，４，４ａ，１０ｂ−ヘキサヒドロ−８−メトキシ−２−メチルベンゾ［ｃ］［１，６］ナフチリジン−６−イル］−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルベンズアミド（混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４阻害剤である）（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ社、現在Ａｌｔａｎａ社により調製され、公開された）；アロフィリン（Ａｌｍｉｒａｌｌ−Ｐｒｏｄｅｓｆａｒｍａ開発）；ＶＭ５５４／ＵＭ５６５（Ｖｅｒｎａｌｉｓ社）；またはＴ−４４０（Tanabe Seiyaku; Fuji, K. et al. J Pharmacol Exp Ther, 1998, 284 (1):162）およびＴ２５８５を含む。
【０１２６】
さらに、ＰＤＥ４阻害化合物は、公開された国際特許出願ＷＯ２００４／０２４７２８、ＷＯ２００４／０５６８２３、ＷＯ２００４／１０３９９８（例えば、ここに開示されている実施例３９９または５４４）、ＷＯ２００５／０５８８９２、ＷＯ２００５／０９０３４８、ＷＯ２００５／０９０３５３、およびＷＯ２００５／０９０３５４（すべてＧｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）に記載されている。
【０１２７】
抗コリン剤の例としては、ムスカリン性受容体でアンタゴニストとして作用する化合物、特に、Ｍ１またはＭ３受容体のアンタゴニスト、Ｍ１／Ｍ３またはＭ２／Ｍ３のデュアルアンタゴニスト、Ｍ１／Ｍ２／Ｍ３受容体の受容体またはｐａｎ−アンタゴニストである化合物が挙げられる。吸入用投与様の代表的な化合物は、イプラトロピウム（例えば、臭化物として、ＣＡＳ２２２５４−２４−６、Ａｔｒｏｖｅｎｔとして販売されている）、オキシトロピウム（例えば、臭化物として、ＣＡＳ３０２８６−７５−０）およびチオトロピウム（例えば、臭化物として、ＣＡＳ１３６３１０−９３−５、Ｓｐｉｒｉｖａとして販売されている）が挙げられる。また、レバトロペート（例えば、塩酸塩として、ＣＡＳ２６２５８６−７９−８）およびＬＡＳ−３４２７３（ＷＯ２００１／０４１１８に開示されている）が挙げられる。経口投与用の代表的な化合物は、ピレンゼピン（ＣＡＳ２８７９７−６１−７）、ダリフェナシン（ＣＡＳ１３３０９９−０４−４、またはＣＡＳ１３３０９９−０７−７（臭化水素塩、Ｅｎａｂｌｅｘとして販売されている））、オキシブチニン（ＣＡＳ５６３３−２０−５、Ｄｉｔｒｏｐａｎとして販売されている）、テロジリン（ＣＡＳ１５７９３−４０−５）、トルテロジン（ＣＡＳ１２４９３７−５１−５、またはＣＡＳ１２４９３７−５２−６（酒石酸塩）、Ｄｅｔｒｏｌとして販売されている）、オチロニウム（例えば、臭化物、ＣＡＳ２６０９５−５９−０、Ｓｐａｓｍｏｍｅｎとして販売されている）、トロスピウムクロライド（ＣＡＳ１０４０５−０２−４）およびソリフェナシン（ＣＡＳ２４２４７８−３７−１、またはＣＡＳ２４２４７８−３８−２（クエン酸塩として）、またＹＭ−９０５、Ｖｅｓｉｃａｒｅとして販売されている））が挙げられる。
【０１２８】
さらに化合物は、ＷＯ２００５／０３７２８０、ＷＯ２００５／０４６５８６およびＷＯ２００５／１０４７４５に記載されている。本発明の組み合わせは、限定するものではないが：
（３−エンド）−３−（２，２−ジ−２−チエニルエテニル）−８，８−ジメチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンヨウダイド；
（３−エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンブロマイド；
４−［ヒドロキシ（ジフェニル）メチル］−１−｛２−［（フェニルメチル）オキシ］エチル｝−１−アゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンブロマイド；および
（１Ｒ，５Ｓ）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニルエチル）−８−メチル−８−｛２−［（フェニルメチル）オキシ］エチル｝−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンブロマイド
を含む。
【０１２９】
他の抗コリン剤は、米国特許出願第６０／４８７９８１号（出典明示により本明細書に組み入れる）に記載されている化合物を含む。
これらは、例えば：
（エンド）−３−（２−メトキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨウダイド；
３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピオニトリル；
（エンド）−８−メチル−３−（２，２，２−トリフェニル−エチル）−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン；
３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピオンアミド；
３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピオン酸；
（エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨウダイド；
（エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンブロマイド；
３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロパン−１−オール；
Ｎ−ベンジル−３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピオンアミド；
（エンド）−３−（２−カルバモイル−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨウダイド；
１−ベンジル−３−［３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−尿素；
１−エチル−３−［３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−尿素；
Ｎ−［３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−ベンズアミド；
３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−プロピオニトリル；
（エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨウダイド；
Ｎ−［３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−ベンゼンスルホンアミド；
［３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−尿素；
Ｎ−［３−（（エンド）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−メタンスルホンアミド；および／または
（エンド）−３−｛２，２−ジフェニル−３−［（１−フェニル−メタノイル）−アミノ］−プロピル｝−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンブロマイド
を含む。
【０１３０】
さらに、化合物は：
（エンド）−３−（２−メトキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨウダイド；
（エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨウダイド；
（エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンブロマイド；
（エンド）−３−（２−カルバモイル−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨウダイド；
（エンド）−３−（２−シアノ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨウダイド；および／または
（エンド）−３−｛２，２−ジフェニル−３−［（１−フェニル−メタノイル）−アミノ］−プロピル｝−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンブロマイド
を含む。
【０１３１】
一の具体例において、本発明は、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩と、Ｈ１アンタゴニストを含む組み合わせを提供する。Ｈ１アンタゴニストの例としては、限定するものではないが、アメレキサノックス、アステミゾール、アザタジン、アゼラスチン、アクリバスチン、ブロムフェニラミン、セチリジン、レボセチリジン、エフレチリジン、クロルフェニラミン、クレマスチン、シクリジン、カレバスチン、シプロヘプタジン、カルビノキサミン、デスカルボエトキシロラタジン、ドキシラミン、ジメチンデン、エバスチン、エピナスチン、エフレチリジン、フェキソフェナジン、ヒドロキシジン、ケトチフェン、ロラタジン、レボカバスチン、ミゾラスチン、メキタジン、ミアンセリン、ノベラスチン、メクリジン、ノルアステミゾール、オロパタジン、ピクマスト、ピリラミン、プロメタジン、テルフェナジン、トリペレナミン、テメラスチン、トリメプラジンおよびトリプロリジン、特にセチリジン、レボセチリジン、エフレチリジンおよびフェキソフェナジンが挙げられる。さらなる具体例において、本発明は、式（Ｉ）で示される化合物、またはその医薬上許容される塩と、Ｈ３アンタゴニスト（および／または逆アゴニスト）を含む組み合わせを提供する。Ｈ３アンタゴニストの例としては、例えば、ＷＯ２００４／０３５５５６およびＷＯ２００６／０４５４１６に記載の化合物が挙げられる。本発明の化合物と組み合わせて用いることができる他のヒスタミン受容体アンタゴニストは、Ｈ４受容体のアンタゴニスト（および／または逆アゴニスト）、例えばJablonowski et al., J. Med. Chem. 46:3957-3960 (2003）に記載の化合物を含む。
【０１３２】
一の具体例において、本発明は、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩とＣＣＲ５受容体アンタゴニスト、例えば４，４−ジフルオロ−Ｎ−（（１Ｓ）−３−｛３−［３−メチル−５−（１−メチルエチル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−イル］−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−８−イル｝−１−フェニルプロピル）シクロヘキサンカルボキサミド：
【化３６】
2009534421.tif 000045
を含む組み合わせを提供する。
【０１３３】
一の具体例において、本発明は、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩と、ＣＸＣＲ３受容体アンタゴニスト、例えばＮ−（（１Ｒ）−１−｛３−［４−（エチルオキシ）フェニル］−４−オキソ−３、４−ジヒドロピリド［２、３−ｄ］ピリミジン−２−イル｝エチル）−Ｎ−（３−ピリジニルメチル）−２−｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝アセトアミド：
【化３７】
2009534421.tif 000046
を含む組み合わせを提供する。
【０１３４】
かくして、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）で示される化合物および／またはその医薬上許容される塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体と、ＰＤＥ４阻害剤を含む組み合わせを提供する。
かくして、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）で示される化合物および／またはその医薬上許容される塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体と、β２−アドレナリン受容体アゴニストを含む組み合わせを提供する。
かくして、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）で示される化合物および／またはその医薬上許容される塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体と、コルチコステロイドを含む組み合わせを提供する。
【０１３５】
かくして、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）で示される化合物および／またはその医薬上許容される塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体と、非ステロイド性ＧＲアゴニストを含む組み合わせを提供する。
かくして、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）で示される化合物および／またはその医薬上許容される塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体と、抗コリン作用薬を含む組み合わせを提供する。
かくして、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）で示される化合物および／またはその医薬上許容される塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体と、抗ヒスタミン剤を含む組み合わせを提供する。
【０１３６】
かくして、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）で示される化合物および／またはその医薬上許容される塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体と、ＰＤＥ４阻害剤およびβ２−アドレナリン受容体アゴニストを含む組み合わせを提供する。
かくして、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）で示される化合物および／またはその医薬上許容される塩、溶媒和物または生理学的に機能的な誘導体と、抗コリン作用薬およびＰＤＥ−４阻害剤を含む組み合わせを提供する。
【０１３７】
上に言及した組み合わせは、有利には、医薬処方の形態での使用用に提供されてもよく、かくして、上記組み合わせと医薬上許容される希釈剤または担体を含む医薬処方が本発明のさらなる態様を与える。
【０１３８】
かかる組み合わせの個々の化合物は、連続してまたは同時に、別個にまたは組み合わせ医薬処方で投与することができる。一の具体例において、個々の化合物は、組み合わせ医薬処方で同時に投与されるだろう。公知の治療剤の適当な投与量は、当業者に容易に明らかになるだろう。
【０１３９】
かくして、本発明は、さらなる態様において、本発明の化合物と、他の治療活性剤を含む医薬組成物を提供する。
かくして、本発明は、さらなる態様において、本発明の化合物と、ＰＤＥ４阻害剤を含む医薬組成物を提供する。
かくして、本発明は、さらなる態様において、本発明の化合物と、β２−アドレナリン受容体アゴニストを含む医薬組成物を提供する。
【０１４０】
かくして、本発明は、さらなる態様において、本発明の化合物と、コルチコステロイドを含む医薬組成物を提供する。
かくして、本発明は、さらなる態様において、本発明の化合物と、非ステロイド性ＧＲアゴニストを含む医薬組成物を提供する。
かくして、本発明は、さらなる態様において、本発明の化合物と、抗コリン作用薬を含む医薬組成物を提供する。
かくして、本発明は、さらなる態様において、本発明の化合物と、抗ヒスタミン剤を含む医薬組成物を提供する。
【０１４１】
かくして、本発明は、さらなる態様において、本発明の化合物と、ＣＸＣＲ３受容体アンタゴニストを含む医薬組成物を提供する。
かくして、本発明は、さらなる態様において、本発明の化合物と、ＣＣＲ５受容体アンタゴニストを含む医薬組成物を提供する。
【０１４２】
単なる例示であり、本発明の範囲を限定するものではない以下の生物学的実施例を引用して本発明を記載する。
【０１４３】
生物学的実施例
本発明の化合物のＩＬ−８、およびＧＲＯ−αケモカイン阻害効果を、以下のインビボアッセイにより測定した。
【０１４４】
受容体結合アッセイ：
［１２５Ｉ］ＩＬ−８（ヒト組み換え）を、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅから入手した（比活性２０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）。他のすべての薬品は分析グレードであった。高レベルの組み換えヒトＣＸＣＲ１（ＩＬ−８α型）およびＣＸＣＲ２（ＩＬ−８β型）受容体は、個々に、非付着性チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞においてすでに記載されているように発現させた（Holmes, et al., Science, 1991, 253, 1278）。膜をHaour, et al., J. Biol. Chem., 249 pp2195-2205 (1974)（膜調製に必要な範囲において出典明示により本明細書に組み入れる）に記載のプロトコルに従って調製した。ただし、ホモジナイゼーション緩衝液を４０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣＬ（ｐＨ７．５），１ｍＭのＭｇＳ０４，０．５ｍＭのＥＧＴＡ（エチレン−グリコール−ビス（２−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’テトラ−酢酸），１ｍＭのＰＭＳＦ（α−トルエンスルホニルフルオライド），２．５ｍｇ／Ｌのロイペプチンおよび０．１ｍｇ／ｍｌのアプロチニンに修飾した。細胞をホモジナイズし、２，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離に付した。上清を１００，０００ｘｇで１時間遠心分離に付した。上清を廃棄し、膜を−８０℃で貯蔵した。膜蛋白質濃度を、ＢｉｏＲａｄ試薬を用いて、標準としてウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を用いる製造プロトコールで測定した。
【０１４５】
ＩＬ−８結合を、９６ウェルプレートフォーマットでのコムギ胚芽凝集ビーズを用いるシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）を用いて行った。膜ＣＨＯ−ＣＸＣＲ１またはＣＨＯ−ＣＸＣＲ２を、結合緩衝液中で３０分間４℃でビーズと予めインキュベートした。緩衝液は、１ｍＭのＭｇＳＯ４、０．１ｍＭのＥＤＴＡおよび２５ｍＭのＮａＣｌを含有する２０ｍＭのＢｉｓ−トリスプロパン緩衝液（ｐＨ８．０）を含有した。化合物を、ＤＭＳＯで最終的に２０倍に希釈した（最終化合物濃度は、１ｎＭ〜３０ｕＭであり、最終ＤＭＳＯ濃度は５％）。アッセイを、９６ウェルプレート（Ｏｐｔｉｐｌａｔｅ９６、Ｐａｃｋａｒｄ）で、室温にて、膜および０．０４％のＣＨＡＰＳ（３−［（３−コルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート）、０．００２５％のＢＳＡおよび０．２３ｎＭの［１２５Ｉ］ＩＬ−８を含む０．１ｍｌの結合緩衝液中で行った。プレートを１時間プラットホームで振盪させ、インキュベーションの終わりに、プレートを２，０００ｒｐｍで５分間回転させ、トップコートカウンターで計数した。本明細書において、組み換えＩＬ−８Ｒα、ＣＸＣＲ１またはＩ型受容体はまた、非許容性受容体と称され、組み換えＩＬ−８Ｒβ、ＣＸＣＲ２またはＩＩ型受容体は、許容性受容体と称される。
【０１４６】
式（Ｉ）で示される代表的な化合物、実施例１〜３８は、このアッセイにおいて、ＩＣ５０レベル＜３０ｕＭで正の阻害活性を示し、活性であると考えられる。
【０１４７】
走化性アッセイ：
これらの化合物のインビトロ阻害特性を、好中球走化性アッセイで試験した。主要なヒトの好中球は、パーコール不連続勾配遠心分離法、デキストラン沈降および低張性溶解を用いる抹消全血から単離した。化学誘導物質ＩＬ−８（ＣＸＣＬ８）またはＧＲＯ−α（ＣＸＣＬ１）を、９６マルチウェルチャンバー（ＣｈｅｍｏＴｘ  Ｓｙｓｔｅｍ、Ｎｅｕｒｏ  Ｐｒｏｂｅ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）のボトムチャンバーに置いた。用いたアゴニスト濃度はＥＣ８０濃度であった。２つのチャンバーは、５ｕｍポリカーボネート膜で分離されている。本発明の化合物を試験する場合、これらは、フィルターの上部に置く前に、細胞と予めインキュベートした。走化性は加湿インキュベーター中３７℃で５％ＣＯ２と４５分間で進行することが認められた。インキュベーション期間の最後に、膜を除去し、ボトムチャンバー中の移行細胞を９６ウェルプレートに移した。これらの細胞を発光細胞生存アッセイ（Ｃｅｌｌｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ、Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を用いて測定した。個々の試料を多重に試験し、個々の化合物を少なくとも３回繰り返した。ポジティブ対照細胞は、化合物添加がない細胞であり、最大走化性応答を示す。ネガティブ対照（非刺激）は、ケモカインをボトムチャンバーに添加しない。ポジティブ対照とネガティブ細胞の違いは、細胞の走化性活性を意味する。
実施例１〜３をこのアッセイにて試験した。化合物は、ＩＣ５０値が＜５ｕＭである場合活性と考えられる。
【０１４８】
ＣＤ１１ｂヒト全血アッセイ：
指定の化合物を、ヒト全血中の好中球でのインテグリンＣＤ１１ｂＧＲＯα−誘導発現を阻害する能力について試験した。
バタフライ針および０．２ｍＬのナトリウムヘパリンを含む１０ｍｌシリンジを用いて採血した（９ｍｌ）。血液を、以下の工程５で氷にオクマで３７℃に保った。化合物貯蔵溶液を１２倍希釈し、最大最終濃度は１２０ｕＭであった。ビヒクルでハーフログ連続希釈を行った。１０マイクロリットルの化合物希釈液またはビヒクルを、約１２×７５ポリプロピレンチューブに加えた。チューブ当たり百マイクロリットルの全血を加え、１０分間３７℃水浴でインキュベートし、最初に（ゆっくり）撹拌し、５分で再び撹拌した。ＧＲＯαストックを０．１％ＢＳＡ−ＤＰＢＳで「１２×」濃度１２０ｎＭに１：１６６．６６希釈し、１０ｕｌのＧＲＯα希釈液または０．１％ＢＳＡ−ＤＰＢＳを適当なチューブに加え、最終ＧＲＯα濃度を１０ｎＭにした。チューブを１０分間３７℃でインキュベートし、手でゆっくりと撹拌し、５分で再び撹拌した。ついで、試料を氷に置き、２５０ｕｌの氷冷ＣｅｌｌＦｉｘ処理希釈液を加え、ついで、氷上で１分インキュベートした。適当な抗体を添加することによるＧＲＯαインキュベーションの間に、１．５ｍｌエッペンドルフチューブを準備した。すべてのチューブに１０ｕｌのＣＤ１１ｂ−ＦＩＴＣおよび５ｕｌのＣＤ１６−ＰＥを加えた：ただし、イソ型対照には、ＣＤ１１ｂの代わりに１０ｕｌのＩｇＧ２ａ−ＦＩＴＣを加えた。個々のチューブからの５０ｕｌの固定血を適当なエッペンドルフチューブに加えた。ついで、試料を２０分間４℃で暗所でインキュベートした。血液／抗体混合物を５００ｕｌの冷ＤＰＢＳに加え、これを適当に標識化した１２ｘ７５ポリスチレンチューブに加えた。得られた混合物を氷上で保持した。ＬＤＳストック（１０ｕｌ）を加え、混合物を１０分間４℃でインキュベートし、ついで、フロー分析した。試料を暗所に保持した。試料をフロー血球計算機に集めながらＬＤＳ添加をずらし、試料をＬＤＳ添加後約１０〜２０分間走らせた。
【０１４９】
培地流速を、フローコレクションに用い、ＦＬ３閾値を高くして、ＬＤＳシグナルを用いる分析から赤血球細胞を除外した。色調補正を、未標識試料および単色試料を用いて適切にセットして、ＰＥに流出するＬＤＳおよびＦＩＴＣに流出するＰＥおよびＰＥに流出するＦＩＴＣを差し引いた。ＢＤ  ＬＳＲ血球計算機に関しては、ＬＤＳ＝ＦＬ３、ＰＥ＝ＦＬ２、ＦＩＴＣ＝ＦＬ１である。ＳＳＣ対ＦＳＣによる顆粒球ゲートを満足し、ＦＬ２シグナルによりＣＤ１６ポジティブである最小限の２０００−３０００イベントを収集した。
【０１５０】
式（Ｉ）で示される代表的な化合物、実施例１−３、１２、１７、１８、２３および２６は、このアッセイで＜５ｕＭのＩＣ５０値で正の阻害活性を示し、活性であると考えられる。上記のアッセイにより試験された実施例１−３、１２、１７、１８、２３および２６の化合物は、上記アッセイにおいて、約２ｕＭ〜約０．５ｕＭのＩＣ５０値を有していた。
【０１５１】
ＣＸＣＲ２およびＧα１６を安定に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞におけるカルシウム動員：
ＣＸＣＲ２およびＧα１６を安定に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞を、インキュベーター中５％ＣＯ２、３７℃を維持して、ＤＭＥＭ／Ｆ１２（ＨＡＭ’ｓ）１：１、ｗ／１０％のＦＣＳ（熱不活性化）、ｗ／２ｍＭのＬ−グルタミン、ｗ／０．４ｍｇ／ｍｌのＧ４１８中８０％の密集度に成長させた。アッセイ前２４時間で、細胞を収穫し、９６ウェル・黒壁・透明底プレート（Ｐａｃｋａｒｄ  Ｖｉｅｗ）のウェルあたり４０，０００細胞を加え、ＣＯ２インキュベーターに戻した。アッセイの日、化合物を、１００％ＤＭＳＯで、所望のアッセイ濃度に３００Ｘ希釈した。成長培地を吸引し、１００ｕｌのロード培地（アール塩ｗ／Ｌ−グルタミン、０．１％ＢＳＡ、（Ｂｏｖｕｍｉｎａｒ  Ｃｏｈｅｎ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｖ  Ｓｅｒｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐ．）、４ｕＭのＦｌｕｏ−４−アセトキシメチルエステル蛍光指示染料（Ｆｌｕｏ−４  ＡＭ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）、および２．５ｍＭのプロベネシドを含むＥＭＥＭ）で置換し、ＣＯ２インキュベーター中３７℃で１時間インキュベートした。ロード培地を吸引し、アール塩ｗ／Ｌ−グルタミン、０．１％ゼラチン、および２．５ｍＭプロベネシド含有１００ｕＬのＥＭＥＭで置換し、さらに１０分間インキュベートした。ＤＭＳＯで３００Ｘ連続希釈した化合物（３ｕｌ）を、２９７マイクロリットルのＫＲＨ（１２０ｍＭのＮａＣｌ、４．６ｍＭのＫＣｌ、１．０３ｍＭのＫＨ２ＰＯ４、２５ｍＭのＮａＨＣＯ３、１．０ｍＭのＣａＣｌ２、１．１ｍＭのＭｇＣｌ２、１１ｍＭグルコース、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４））ｗ／２．５ｍＭプロベネシドおよび０．１％ゼラチン（化合物は３Ｘ）を含有する９６ウェルプレートに移した。培地を吸引し、細胞をＫＲＨｗ／２．５ｍＭプロベネシド、ｗ／０．１％ゼラチンで３回洗浄した。ＫＲＨ（１００ｕｌ）ｗ／０．１％ゼラチンを含む２．５ｍＭプロベネシドをウェルに加え、ついで、５０ｕｌのＫＲＨｗ／２．５ｍＭプロベネシドおよび０．１％ゼラチン中３Ｘ化合物をウェルに加え（化合物は１Ｘ）、ＣＯ２インキュベーター中で１０分間インキュベートした。プレートを、（Sarau et al., 1999）に記載のような分析用のＦＬＩＰＲ（蛍光｛けいこう｝イメージングプレートリーダー、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ  ＣＡ）に置いた。１．０ｎＭのＩＬ−８により誘発される最大ヒトＩＬ−８誘導Ｃａ２＋動員のパーセント（ＣＸＣＲ２に関するＥＣ８０濃度）を、個々の化合物の濃度に関して測定し、試験化合物の濃度としてＩＣ５０（１．０ｎＭのＩＬ−８により誘発される最大応答の５０％を阻害する濃度）を計算した。実施例１〜３８は、正の阻害活性をこのアッセイにおいて示し、ＩＣ５０値は＜１０ｕＭであり、活性であると考えられる。上記アッセイにより試験した化合物１〜３８は、約６０００ｎＭ〜約５ｎＭのＩＣ５０を有する。
【０１５２】
本明細書にて引用した特許および特許出願を包含するがこれらに限定されない全ての刊行物は、個々の刊行物が十分に開示されているかの如く具体的かつ個別的に出典明示により本明細書の一部とすることが明示されているかのように出典明示により本明細書の一部とする。
【０１５３】
好ましい実施態様を包含する上記記載事項は本発明を十分に開示する。本明細書に具体的に開示した実施態様の変更および改良は特許請求の範囲の範囲内に含まれる。さらに推敲することなく、当業者は上記記載事項を用いて本発明を最大限に利用することができると考えられる。したがって、本明細書における実施例は単に例示的であって、如何なる場合も本発明の範囲を制限するものではないと考えられる。排他的性質および優先権を主張する本発明の実施態様は特許請求の範囲に定義するとおりである。
【国際調査報告】
2009534421.tif 000056