(57)【要約】Ｄ−カルノシン親油性誘導体は、Ｌ−カルノシンに比べて高いバイオアベイラビリティー（bioavailability）を特徴とし、肺への分布を目的とし、そこでタバコの煙によって誘発される細胞毒性カルボニル化合物に対して解毒活性を発揮することができることが開示されている。
2009541296.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）の化合物
【化１】
2009541296.tif 000005
式中、
Ｒ2およびＲ3は、同一または異なっていてよく、
Ｒ4がヒドロキシ基を表す場合を除いては、水素；
Ｒ4がヒドロキシ基を表す場合のアセチル基を除いては、１個以上の二重結合を場合によって含む直鎖もしくは分枝状Ｃ1〜Ｃ20または環状Ｃ3〜Ｃ7アルキルカルボニル基；
アリールカルボニル基またはアリールアルキルカルボニル基；
１個以上の二重結合を場合によって含む、直鎖もしくは分枝状Ｃ1〜Ｃ10または環状Ｃ3〜Ｃ7アルコキシカルボニル基；
アリールアルコキシカルボニル基；
アミノ基；
ヒドロキシ基；
一般式ＩＶの基；
【化２】
2009541296.tif 000006
ここで、Ｙは、窒素、酸素または硫黄であり、Ａは、水素またはアミノ基であり；
であり
Ｒ4は、
Ｒ2またはＲ3が水素またはアセチル基を表す場合を除いては、ヒドロキシ基；
場合によって一置換または二置換されているアミノ基；
１個以上の二重結合を場合によって含む、直鎖もしくは分枝状Ｃ1〜Ｃ20または環状Ｃ3〜Ｃ7アルキル基；
アリールアルキル基；
１個以上の二重結合を場合によって含む、直鎖もしくは分枝状Ｃ1〜Ｃ20、好ましくはＣ4〜Ｃ10、または環状Ｃ3〜Ｃ7アルコキシ基；
直鎖状、分枝状または環状のアルキルを有する、アルコキシカルボニルオキシアルコキシ基またはアルキルカルボニルオキシアルコキシ基；
アリールアルコキシ基；
である、
医薬的に許容できるその塩およびその金属錯体。
【請求項２】
Ｒ2およびＲ3が、同一または異なっていてよく、
Ｒ4がヒドロキシ基を表す場合を除いては、水素；
Ｒ4がヒドロキシ基を表す場合のアセチル基を除いては、１個以上の二重結合を場合によって含む、直鎖もしくは分枝状Ｃ1〜Ｃ20または環状Ｃ3〜Ｃ7アルキルカルボニル基；
アリールカルボニル基またはアリールアルキルカルボニル基；
１個以上の二重結合を場合によって含む、直鎖もしくは分枝状Ｃ1〜Ｃ10または環状Ｃ3〜Ｃ7アルコキシ基；
アリールアルコキシカルボニル基；
アミノ基；
であり、
Ｒ4が、
Ｒ2またはＲ3が水素またはアセチル基を表す場合を除いては、ヒドロキシ基；
１個以上の二重結合を場合によって含む、直鎖もしくは分枝状Ｃ1〜Ｃ20または環状Ｃ3〜Ｃ7アルコキシ基；
直鎖状、分枝状または環状のアルキルを有する、アルコキシカルボニルオキシアルコキシ基またはアルキルカルボニルオキシアルコキシ基；
アリールアルコキシ基
である、
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ4が、
Ｒ2またはＲ3が水素またはアセチル基を表す場合を除いては、ヒドロキシ基；
１個以上の二重結合を場合によって含む、直鎖もしくは分枝状Ｃ4〜Ｃ16または環状Ｃ3〜Ｃ7アルコキシ基
である、
請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ4が、直鎖または分枝状Ｃ4〜Ｃ10アルコキシ基である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｄ−カルノシンエチルエステルおよびその塩
Ｄ−カルノシンオクチルエステルおよびその塩
Ｄ−カルノシンメチルエステルおよびその塩
Ｄ−カルノシンｎ−ブチルエステルおよびその塩
Ｎ−アセチル−Ｄ−カルノシンエチルエステル
Ｎ−アセチル−Ｄ−カルノシンメチルエステル
Ｎ−アセチル−Ｄ−カルノシンオクチルエステル
Ｎ−Ｅｏｃ−Ｄ−カルノシンおよびその塩
Ｎ−Ｅｏｃ−Ｄ−カルノシンメチルエステル
Ｎ−Ｅｏｃ−Ｄ−カルノシンベンジルエステル
Ｄ−カルノシン−１−（エトキシカルボニルオキシ）エチルエステル
Ｅｏｃ−Ｄ−カルノシン−１−（エトキシカルボニルオキシ）エチルエステル
Ｚ−Ｄ−カルノシンおよびその塩
Ｚ−Ｄ−カルノシンメチルエステル
Ｚ−Ｄ−カルノシンオクチルエステル
から選択される、請求項１から３に記載の化合物。
【請求項６】
請求項１から５に記載の１種以上の化合物の有効量を、適当な賦形剤と組み合わせて含む組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｄ−ヒスチジンを含むジペプチド誘導体、およびそれらを含む組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
タバコの煙は、アセトアルデヒド（１１１０〜２１０１μｇ／タバコ）、アクロレイン（２３８〜４６８μｇ／タバコ）、ホルムアルデヒド（８７．０〜２４３μｇ／タバコ）、プロパナール（８７．０〜１７６μｇ／タバコ）、マロンジアルデヒド（１８．９〜３６．０μｇ／タバコ）、メチルグリオキサール（１３．４〜５９．６μｇ／タバコ）およびグリオキサール（１．９３〜６．９８μｇ／タバコ）を含むカルボニル化合物の混合物を含む（Fujioka K. et al., Environ Toxicol. 2006 Feb; 21(1):47-54）。
【０００３】
これらのアルデヒドの中には、求電子性Ｃ３を特徴とするα，β−不飽和アルデヒドであるアクロレイン、ならびにジアルデヒド類のグリオキサールおよびメチルグリオキサールなど、反応性および細胞毒性が極めて高いものがある（O'Brien PJ. et al., Crit Rev Toxicol. 2005 Aug; 35(7):609-62）。特に、アクロレインはＤＮＡの塩基と反応して６環系付加物を形成し、この付加物はタバコの煙によって誘発される突然変異生成および発癌において主要な役割を果たす可能性がある（Cohen SM. et al., Cancer Res. 1992 Jul 1;52(13):3577-81；Yang IY. et al., Biochemistry. 2002 Nov 19;41(46):13826-32；Yang IY. et al., Biochemistry. 2002; 41(46):13826-32）。
アクロレインはまた、
１）内皮細胞を侵すアポトーシスの過程を伴う、血管の一酸化窒素の急速な増加；前記過程は、タバコの煙によって誘発される血管障害を一部説明し得る（Misonou Y. et al., Nitric Oxide. 2006 Mar; 14(2); 180-7）；
２）Ｔ−細胞応答の阻害とその結果として起こる免疫抑制効果（Lambert C. et al., J Allergy Clin Immunol. 2005 Oct; 116(4):916-22）；
ｃ）共有結合性付加物および架橋の形成による、タンパク質およびペプチドの機能的変化（Uchida K. Trends Cardiovasc Med. 1999 Jul; 9(5):109-13）
などの、多くの他の有害な生物学的効果を有する。
【０００４】
喫煙者の肺組織はまた、煙に含まれる二酸化窒素などの酸化種によって誘発される酸化過程にさらされている。これらの種は多価不飽和脂肪酸に影響を及ぼす脂質過酸化過程の原因となっており、４−ヒドロキシ−トランス−ノネナール（ＨＮＥ）などの、同様に細胞毒性および反応性が極めて高い、アルデヒドの第２の基（a second group）の形成を伴う（2: Iles KE. et al., Free Radic Biol Med. 2005 Aug 1;39(3):355-64）。アクロレインと同様に、ＨＮＥは、α，β−不飽和アルデヒドであり、ＤＮＡと共有結合性付加物を形成することができ、突然変異生成および発癌を誘発し（Kowalczyk P. et al., Mutat Res. 2004 Jun 4;550(1-2):33-48）、細胞機能障害および肺組織への損傷に至る種々の分子過程に関与している。肺上皮細胞のＨＮＥ含量と肺機能との間の有意な相関関係も認められている（Rahman I. et al., Am J Respir Crit Care Med. 2002 Aug 15;166(4):490-5）。
【０００５】
喫煙者の肺組織はα，β−不飽和アルデヒド化合物（タバコに存在するか、またはタバコによって誘発される）に継続的に曝露されており、そして、これらの化合物は変異原性、発癌性および組織機能障害の過程の原因の一部となっているので、肺組織中のα，β−不飽和アルデヒドを狙いとする解毒過程の増加が、予防薬理学的なアプローチを代表する可能性があろう。
【０００６】
以前の研究は、カルノシン（β−アラニル−Ｌ−ヒスチジン）が、反応性を欠き、その結果細胞毒性を欠く、対応するマイケル付加物を形成することで（ＨＮＥのＣ３とイミダゾール環のＮτとの反応による）、α，β−不飽和アルデヒドに対して重要で特異的な解毒の役割を果たしているということを、実証している（Aldini G. et al., Biofactors. 2005; 24(1-4):77-87；Aldini G. et al., Biochem Biophys Res Commun. 2002 Nov 15;298(5):699-706）。この解毒機構は、酸化損傷を受けた筋肉組織において、最近実証された（Orioli M. et al., J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2005 Nov 15;827(1):109-18）。
【０００７】
グルタチオンと共に、タバコの煙によって誘発される／タバコの煙に存在するα，β−不飽和アルデヒドの解毒に関与することができるカルノシンは、肺組織には存在しないが、骨格筋、心筋および脳の一部分などの他の組織に高濃度で存在している（Jackson MC. et al., Inflamm Res. 1996 Mar; 45(3):132-5）。肺組織でのカルノシンの欠乏は、構成している２つのアミノ酸の形成とともに、ジペプチドの加水分解過程の原因となる、カルノシナーゼの存在によって説明することができる（Lenney JF. Biochim Biophys Acta. 1976 Mar 11;429(1):214-9）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Fujioka K. et al., Environ Toxicol. 2006 Feb; 21(1):47-54
【非特許文献２】O'Brien PJ. et al., Crit Rev Toxicol. 2005 Aug; 35(7):609-62
【非特許文献３】Cohen SM. et al., Cancer Res. 1992 Jul 1;52(13):3577-81
【非特許文献４】Yang IY. et al., Biochemistry. 2002 Nov 19;41(46):13826-32
【非特許文献５】Yang IY. et al., Biochemistry. 2002; 41(46):13826-32
【非特許文献６】Misonou Y. et al., Nitric Oxide. 2006 Mar; 14(2); 180-7
【非特許文献７】Lambert C. et al., J Allergy Clin Immunol. 2005 Oct; 116(4):916-22
【非特許文献８】Uchida K. Trends Cardiovasc Med. 1999 Jul; 9(5):109-13
【非特許文献９】2: Iles KE. et al., Free Radic Biol Med. 2005 Aug 1;39(3):355-64
【非特許文献１０】Kowalczyk P. et al., Mutat Res. 2004 Jun 4;550(1-2):33-48
【非特許文献１１】Rahman I. et al., Am J Respir Crit Care Med. 2002 Aug 15;166(4):490-5
【非特許文献１２】Aldini G. et al., Biofactors. 2005; 24(1-4):77-87
【非特許文献１３】Aldini G. et al., Biochem Biophys Res Commun. 2002 Nov 15;298(5):699-706
【非特許文献１４】Orioli M. et al., J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2005 Nov 15;827(1):109-18
【非特許文献１５】Jackson MC. et al., Inflamm Res. 1996 Mar; 45(3):132-5
【非特許文献１６】Lenney JF. Biochim Biophys Acta. 1976 Mar 11;429(1):214-9
【発明の概要】
【０００９】
驚いたことに、発明者らは最近、カルノシナーゼに耐性を示す、Ｌ−カルノシンのペプチド模倣薬である、Ｄ−カルノシン（β−アラニル−Ｄ−ヒスチジン）が、経口投与後に肺に分布されることを、ラットにおいて実証した。Ｄ−カルノシンはまた、Ｌ−カルノシンと同様の、α，β−不飽和カルボニル化合物の解毒を行うことも実証されている。しかしながら、Ｄ−カルノシンの治療への適用は、その乏しい消化管吸収によってかなり制限される。このことは、三連四重極質量分析計とともにＥＳＩ源を介して接続された液体クロマトグラフィー試験を用いて、血漿中カルノシン含量をモニターすることにより、実験動物で実施される薬物動態研究によって最近実証されている。
【００１０】
発明の説明
本発明は、Ｌ−カルノシンより優れたバイオアベイラビリティー（bioavailability）を特徴とし、肺に分布され、そこで、タバコの煙によって誘発される細胞毒性カルボニル化合物を解毒する、Ｄ−カルノシンの親油性誘導体に関する。
【００１１】
本発明の化合物は、一般式Ｉを有する。
【００１２】
【化１】
2009541296.tif 000003
【００１３】
式中、
Ｒ2およびＲ3は、同一または異なっていてよく、
Ｒ4がヒドロキシ基を表す場合を除いては、水素；
Ｒ4がヒドロキシ基を表す場合のアセチル基を除いては、１個以上の二重結合を場合によって含む直鎖もしくは分枝状Ｃ1〜Ｃ20または環状Ｃ3〜Ｃ7アルキルカルボニル基；
アリールカルボニル基またはアリールアルキルカルボニル基；
１個以上の二重結合を場合によって含む、直鎖もしくは分枝状Ｃ1〜Ｃ10または環状Ｃ3〜Ｃ7アルコキシカルボニル基；
アリールアルコキシカルボニル基；
アミノ基；
ヒドロキシ基；
一般式ＩＶの基；
【００１４】
【化２】
2009541296.tif 000004
【００１５】
ここで、Ｙは、窒素、酸素または硫黄であり、Ａは、水素またはアミノ基であり；
であり
Ｒ4は、
Ｒ2またはＲ3が水素またはアセチル基を表す場合を除いては、ヒドロキシ基；
場合によって一置換または二置換されているアミノ基；
１個以上の二重結合を場合によって含む、直鎖もしくは分枝状Ｃ1〜Ｃ20または環状Ｃ3〜Ｃ7アルキル基；
アリールアルキル基；
１個以上の二重結合を場合によって含む、直鎖もしくは分枝状Ｃ1〜Ｃ20、好ましくはＣ4〜Ｃ10、または環状Ｃ3〜Ｃ7アルコキシ基；
直鎖状、分枝状または環状のアルキルを有する、アルコキシカルボニルオキシアルコキシ基またはアルキルカルボニルオキシアルコキシ基；
アリールアルコキシ基
である。
【００１６】
本発明はまた、一般式１の化合物の医薬的に許容できる塩、および亜鉛または銅などの金属カチオンを有するその錯体も含む。
【００１７】
上記定義のアリール基、アリール−アルキル基、アリールカルボニル基、アリールアルキルカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アリールアルキルオキシカルボニル基、アリールオキシ基、アリールアルコキシ基のアリール部分は、単環式または多環式であってよく、
ヒドロキシ基、Ｃ1〜Ｃ5−アルコキシ基、Ｃ1〜Ｃ5−アルコキシカルボニル基；
アミノ基、Ｃ1〜Ｃ5−モノ−またはジ−アルキルアミノ基、Ｃ1〜Ｃ5−アシルアミノ基；
Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉなどのハロゲン原子；
直鎖状、分枝状または環状のアルキル基；
場合によって置換されているアリール基
から選択される１個以上の置換基で場合によって置換されていてもよい。
【００１８】
好ましいアルキル基、アルコキシ基またはアルキルカルボニル基は、アルキル残基が、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−オクチル、ｎ−デシル、ｎ−ヘキサデシルで表される基である。
【００１９】
好ましいシクロアルキル基は、シクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルである。
【００２０】
「アリール基または残基」とは、好ましくはフェニルまたはナフチルを意味し、より好ましくはフェニルを意味し、場合によっては、ヒドロキシ基、メチル基、シクロプロピル基、メトキシ基、アミノ基、ジメチルアミノ基、メチルアミノ基、エチルアミノ基、ジエチルアミノ基、アセチルアミノ基、ホルミルアミノ基、プロピオニルアミノ基、ブタノイルアミノ基、またはハロゲン原子で置換されていることを意味する。
【００２１】
好ましいアラルキル基は、ベンジルまたはフェネチルである。
【００２２】
より特に好ましい化合物は、Ｄ−カルノシンＣ4〜Ｃ10エステルである。
【００２３】
本発明の化合物は、メチルイミダゾール置換基を有する不斉中心の立体配置が（Ｒ）でなければならないが、存在するその他の不斉中心は、化合物によって（Ｒ）または（Ｓ）の立体配置を有することができることを特徴とする。
【００２４】
所望の用途に応じ、式Ｉの化合物は、経口、非経口、局所または経皮経路による投与に適した、従来の医薬組成物、化粧用組成物または栄養組成物に、都合よく調剤される。前記組成物は、本発明のさらなる目的である。前記組成物の例は、カプセル剤、錠剤、シロップ剤、注射用液剤または懸濁剤、軟膏、坐剤、制御放出剤形など、水溶性造粒剤である。前記剤形は、製剤技術において使用される担体および賦形剤に加えて、場合によっては、当該病変の治療／予防に対して、相補的またはとにかく有用な活性を有する他の活性成分を、含むことができる。
【００２５】
本発明の化合物は、よく知られている技術を使用して調製することができ、式（Ｉ）の分子の場合には、残基Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4が上記定義の意味を有する適当なＤ−ヒスチジンおよび３−アミノプロピオン酸中間体から出発するか、または３−アミノプロピオニル−Ｄ−ヒスチジンから出発し、続いて必要な置換基を導入することができる。
【００２６】
例えば、本発明の化合物は、
例えばHouben Weil、「Synthesis of peptides and peptidomimetics」、E 22a chapter 3に記載されているようなカップリング方法を使用して、
窒素の位置において適当に置換してある、３−アミノプロピオン酸誘導体と、
場合によって適当に保護してある、適切なＲ4置換基を有するＤ−ヒスチジン誘導体とを、
カップリングすることによって調製することができる。
【００２７】
別の方法として、化合物（Ｉ）は、
３−アミノプロピオニル−Ｄ−ヒスチジンから出発し、
カルボキシル基およびアミノ基の官能基化に関してT.Greene, P. Wuts、「Protective Groups in Organic Chemistry」に報告されている手法などの、確立された手法を使用して、
必要な置換基を、続いて導入することによって調製することができる。
【００２８】
実験の部
Ｄ−カルノシンエチルエステル塩酸塩
Ｄ−カルノシン０．８ｇを５０ｍｌの二口丸底フラスコに入れ、ＥｔＯＨ（１６ｍｌ）に溶かし、次いで１滴のＤＭＳＯおよび２ｍｌのＨＣｌ飽和Ｅｔ2Ｏを加える。
【００２９】
その混合物を氷浴で５℃に冷却し、次いで塩化チオニル０．４６ｇをその中にゆっくり滴下する（温度は１０℃を超えるべきではない）。その混合物を６０℃で還流させ、ＴＬＣによって反応の進行をモニターする。反応終了後、その混合物を室温で冷却するために放置し、そして溶媒を減圧下で蒸発させる。
【００３０】
最終残渣：１．２５ｇ、Ｍ．Ｗ．３６３．６、収率９７％。
【００３１】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）：ｐｐｍ  １．１７  ｔ  ３Ｈ；２．５５  ｔ  ２Ｈ；２．９５  ｍ  ２Ｈ；３．０〜３．２  ｍ  ２Ｈ；４．１  ｑ  ２Ｈ；４．５５  ｍ  １Ｈ；７．４  ｓ  １Ｈ；８．７８  ｄ  １Ｈ。
【００３２】
Ｄ−カルノシンオクチルエステル塩酸塩
磁気撹拌子を備えた丸底フラスコに、Ｄ−カルノシン０．７ｇを入れ、１５ｍｌの１−オクタノール、および１．７５ｍｌのＨＣｌ飽和Ｅｔ2Ｏを加える。その混合物を氷浴で５℃に冷却し、次いで塩化チオニル０．４８ｇを滴下する（温度は１０℃を超えるべきではない）。
【００３３】
次いで、その混合物を９０℃に加熱し、ＴＬＣによって反応の進行をモニターする。反応終了後、その混合物を室温で冷却するために放置し、溶媒を留去する（Ｔ＝３０℃、Ｐ＝１ｍｍＨｇ）。
【００３４】
得られた残渣をヘキサンに入れ、濾過して白色固体１．１１ｇを得る。
【００３５】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）ｐｐｍ  ０．８  ｔ  ３Ｈ；１．２  ｍ  １０Ｈ；１．４５  ｍ  ２Ｈ；２．３  ｔ  ２Ｈ；２．８５  ｍ  ２Ｈ；１．９〜３．２  ｄｑ  ２Ｈ；３．９５  ｔ  ２Ｈ；４．５２  ｍ  １Ｈ；７．４０  ｓ  １Ｈ；８．７５  ｄ  １Ｈ。
【００３６】
Ｄ−カルノシンメチルエステル塩酸塩
５０ｍｌの反応器にメタノール（１２ｍｌ）に溶かしたＤ−カルノシン０．６ｇを入れ、次いで１滴のＤＭＳＯおよび１．５ｍｌのＨＣｌ飽和Ｅｔ2Ｏを加える。その混合物を氷浴で５℃に冷却し、次いで塩化チオニル０．２ｍｌを滴下する（温度は１０℃を超えるべきではない）。次いで、その混合物を６０℃に加熱し、ＴＬＣによって反応の進行をモニターする。反応終了後、溶媒を減圧下で蒸発させて透明油状物０．８８ｇを得る。
【００３７】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）：ｐｐｍ  ２．５５  ｔ  ２Ｈ；２．９５  ｍ  ２Ｈ；３．０５〜３．２  ｍ  ２Ｈ；３．６５  ｓ  ３Ｈ；４．１  ｍ  １Ｈ；７．４  ｓ  １Ｈ；８．８  ｄ  １Ｈ。
【００３８】
Ｎ−アセチル−Ｄ−カルノシンエチルエステル
Ｄ−カルノシンエチルエステル塩酸塩１ｇを丸底フラスコに入れ、ＥｔＯＨ（６０ｍｌ）に溶かす。この溶液に無水酢酸０．４２ｇおよび炭酸水素カリウム１．３８ｇを加え、その混合物を室温で撹拌し、ＴＬＣによって反応の進行をモニターする。反応終了後、その固体を除去し、その溶媒を蒸発させる。最終残渣をアセトンで処理することによって、白色残渣が得られ、これを濾過分離し、一方、その溶媒を蒸発させて半固体残渣０．３３ｇを得る。
【００３９】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）：ｐｐｍ  １．１  ｔ  ３Ｈ；１．７５  ｓ  ３Ｈ；２．２８  ｔ  ２Ｈ；２．８１〜２．９７  ｍ  ２Ｈ；３．１８  ｍ  ２Ｈ；４．０５  ｑ  ２Ｈ；４．４  ｍ  １Ｈ；７．５  ｓ  １Ｈ；８．４５  ｍ  １Ｈ。
【００４０】
以下の化合物は類似の方法（analogously）で調製される。
【００４１】
Ｎ−アセチル−Ｄ−カルノシンメチルエステル
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）：ｐｐｍ  １．７８  ｓ  ３Ｈ；２．１５  ｔ  ２Ｈ；２．７８〜２．９５  ｍ  ２Ｈ；３．１７  ｍ  ２Ｈ；３．５８  ｓ  ３Ｈ；４．４  ｍ  １Ｈ；７．４  ｓ  １Ｈ；８．６  ｄ  １Ｈ。
【００４２】
Ｎ−アセチル−Ｄ−カルノシンオクチルエステル
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：ｐｐｍ  １．８５  ｔ  ３Ｈ；２．２８  ｍ  １０Ｈ；２．５５  ｍ  ２Ｈ；２．９０  ｓ  ３Ｈ；３．３５  ｔ  ３Ｈ；３．９〜４．１  ｄｑ  ２Ｈ；４．３５  ｍ  ２Ｈ；５．０５  ｍ  ２Ｈ；５．６５  ｍ  １Ｈ；７．８５  ｓ  １Ｈ；８．６０  ｓ  １Ｈ。
【００４３】
Ｎ−Ｅｏｃ−Ｄ−カルノシン
丸底フラスコに、Ｄ−カルノシン２ｇおよび無水エタノール３０ｍｌを入れ、次いで炭酸水素塩（bicarbonate）２．７ｇを加え、その溶液を５℃に冷却する。続いて、ＴＨＦ５ｍｌに溶かしたクロロギ酸エチル１．１ｇを、その中に滴下する。その混合物を室温に暖め、この温度で１時間、次いで５０℃で３時間反応させる。無機塩類を濾過分離し、溶媒を減圧下で蒸発させて海綿状固体２．１７ｇを得る。
【００４４】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）ｐｐｍ  １．１５  ｔ  ３Ｈ；２．２５  ｔ  ２Ｈ；２．８０〜３．０５  ｄｑ  ２Ｈ；３．１５  ｑ  ２Ｈ；３．９５  ｑ  ２Ｈ；４．４２  ｍ  １Ｈ；６．８５  ｓ  １Ｈ；７．７５  ｓ  １Ｈ。
【００４５】
以下の化合物は類似の方法（analogously）で調製される。
【００４６】
Ｎ−Ｅｏｃ−β−アラニン
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）ｐｐｍ  １．１２  ｔ  ３Ｈ；２．３５  ｔ  ２Ｈ；３．１８  ｑ  ２Ｈ；３．９５  ｑ  ２Ｈ；７．０５  ｂｒ．ｓ  １Ｈ。
【００４７】
Ｎ−Ｅｏｃ−Ｄ−カルノシンメチルエステル
５０ｍｌの二口丸底フラスコにＤ−ヒスチジンメチルエステル塩酸塩１ｇを入れ、これを無水ＤＭＦ約１０ｍｌに溶かし、次いでＮ−メチルモルホリン０．７３ｇを加え、温度を０℃にする。
【００４８】
その後、Ｎ−Ｅｏｃ−β−アラニン０．７ｇを加え、無水ＤＭＦ３ｍｌに溶かしたＤＣＣ０．９ｇを滴下する。その混合物を０℃で約３時間反応させ、５℃で一晩放置し、次いで濾過し、その溶媒を蒸発させる。
【００４９】
その残渣をクロロホルムに入れ、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３０ｍｌ×３回）および水で洗浄する。次いで有機相を乾燥し蒸発させる。
【００５０】
得られた残渣を、溶離液としてＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨＣｌ3  ９５／５の混合物を使用し、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製する。
【００５１】
純粋な画分を混ぜ合わせ、その溶媒を蒸発させて海綿状固体残渣１ｇを得る。
【００５２】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）ｐｐｍ  １．２２  ｔ  ３Ｈ；２．４２  ｔ  ２Ｈ；３．１  ｍ  ２Ｈ；３．４５  ｍ  ２Ｈ；３．７０  ｓ  ３Ｈ；４．１０  ｑ  ２Ｈ；４．８０  ｍ  １Ｈ；６．８０  ｓ  １Ｈ；７．６  ｓ  １Ｈ。
【００５３】
以下の化合物は類似の方法（analogously）で調製される。
【００５４】
Ｎ−Ｅｏｃ−Ｄ−カルノシンベンジルエステル
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：１．３２  ｔ  ３Ｈ；２．４２  ｔ  ２Ｈ；３．１  ｄ  ２Ｈ；３．４５  ｍ  ２Ｈ；４．１０  Ｑ  ２Ｈ；４．３５  ｍ  １Ｈ；５．０９〜５．１８  ｄｄ  ２Ｈ；６．５２  ｓ  １Ｈ；７．１２  ｄ  １Ｈ；７．３０〜７．４０  ｍ  ４Ｈ；７．５２  ｓ  １Ｈ。
【国際調査報告】
2009541296.tif 000007
2009541296.tif 000008
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