(57)【要約】  本発明は、置換された１，３−ジフェニルプロパン誘導体、それらを含有する医薬組成物および、特にヒトおよび動物の健康の分野におけるその治療的使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式：
【化５４】
2009541270.tif 000078
（式中、
Ｘ１は、ハロゲン原子、Ｒ１またはＧ１−Ｒ１基を表し；
Ｘ２は、ハロゲン原子、Ｒ２またはＧ２−Ｒ２基を表し；
Ｘ３は、Ｒ３またはＧ３−Ｒ３基を表し；
Ｘ４は、ハロゲン原子、Ｒ４またはＧ４−Ｒ４基を表し；
Ｘ５は、Ｒ５またはＧ５−Ｒ５基を表し；
Ｒ１は、ハロゲン化されたアルキル基を表し；
Ｒ２は、水素原子またはハロゲン化されていないアルキル基を表し；
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは相異なり、水素原子を表すかまたは、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表し；
Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３、Ｇ４およびＧ５は、同一であるかまたは相異なり、酸素原子または硫黄原子を表し；
但し、Ｘ３、Ｘ４またはＸ５の中の少なくとも１つの基は、Ｒ３、Ｇ３Ｒ３、Ｒ４、Ｇ４Ｒ４、Ｒ５またはＧ５Ｒ５式
（式中、Ｇ３、Ｇ４およびＧ５は前記したとおりであり、そして
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは相異なり、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す）
に相当し；
Ａは、
（ｉ）−ＣＲ６Ｒ７基（式中、Ｒ６は水素原子、アルキル基または−ＯＲ８基を表し、そしてＲ７はアルキル基、ヒドロキシ基または−ＯＲ８基を表し、Ｒ８は下記するとおりである）；
（ｉｉ）カルボニル基（ＣＯ）、
（ｉｉｉ）オキシム基（Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｈ）またはオキシムエーテル（Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｒ８）、
（Ｒ８は、同一であるかまたは相異なり、アリールまたはシクロアルキル基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表す）
を表し；
Ｄは、
（ｉ）２つの水素原子に連結された炭素原子（ＣＨ２）、
（ｉｉ）水素原子に連結されそして酸素化または硫黄化された複素環を形成するようにＧ２に連結された炭素原子、
を表し；
基１の置換基は−ＣＯＯＲ９および−ＣＯＮＲ９Ｒ１０の中から選ばれ；
基２の置換基は、−ＳＯ３Ｈおよび−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０の中から選ばれ；
Ｒ９およびＲ１０は、同一であるかまたは相異なり、水素原子を表すかまたは、少なくとも１つの基１または基２置換基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表す）
を有する置換された１，３−ジフェニルプロパンに由来する化合物、それらの純粋なもしくは混合した立体異性体（ジアステレオアイソマー、エナンチオマー）、ラセミ混合物、幾何異性体、互変異性体、塩、水和物、溶媒和物、固体形態およびそれらの混合物。
【請求項２】
Ａがカルボニル基（ＣＯ）を表すことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記化合物が、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｇ３Ｒ３、Ｇ４Ｒ４またはＧ５Ｒ５
（式中、Ｇ３、Ｇ４およびＧ５は請求項１に記載のとおりであり、そして
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、請求項１に定義されたとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す）
を表す基Ｘ３、Ｘ４またはＸ５の１つのみを与えることを特徴とする。請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘ３、Ｘ４およびＸ５のうちＸ４のみが、Ｒ４またはＧ４Ｒ４基を表し、
Ｇ４は請求項１に定義されたとおりであり、そして
Ｒ４は、請求項１に定義されたとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す、
ことを特徴とする、請求項１〜３の１つに記載の化合物。
【請求項５】
Ｇ３、Ｇ４および／またはＧ５が酸素原子を表すことを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
置換基が、請求項１に定義されたとおりの、基１置換基の中から選ばれることを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｘ３、Ｘ４およびＸ５基の１つのみが、式−ＯＣ（ＣＨ３）２ＣＯＯＲ９に相当し、Ｒ９は請求項１に定義されたとおりであることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｘ３およびＸ５が、同一であるかまたは相異なり、それぞれＲ３およびＲ５基を表し、Ｒ３およびＲ５は、請求項１に定義されたとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表すことを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｘ１がＲ１またはＧ１Ｒ１基を表し、Ｇ１は請求項１に定義されたとおりでありそしてＲ１がハロゲン化されたアルキル基を表すことを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｘ２が水素原子を表すことを特徴とする、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｄが−ＣＨ２基を表すことを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
前記化合物が、
２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸、
２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（トリフルオロメチルチオ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸、
２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−ブロモフェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸、
２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸、
２−［４−［３−［４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル］−３−オキソ−プロピル］フェニルチオ］−２−メチルプロパン酸、
２−［２−メチル−４−［３−［４−（３，３，３−トリフルオロプロピルオキシ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸、
２−［２，６−ジメチル−４−［３−ヒドロキシ−３−［４−（トリフルオロメチルチオ）フェニル］プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸、
２−［２，６−ジメチル−４−（３−（ピリジン−３−イルメトキシ）−３−［４−（トリフルオロメトキシ）フェニル］プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸、
２−［４−（３−（４−ヨードベンジルオキシ）−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ］−２−メチルプロパン酸、
２−［４−（３−（４−メトキシ）−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ］−２−メチルプロパン酸、
２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（３，３，３−トリフルオロプロピルオキシ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸、
２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（２，２，２−トリフルオロエチルチオ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（４−（３−（４−クロロ−２−（メチルチオ）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（４−（３−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（４−（３−（２−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（４−（３−（２−フルオロ−４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（２，６−ジメチル−４−（３−（２−メチル−４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）−３−オキソ−プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（４−（３−（２−メトキシ−４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（４−（３−（２−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（４−（３−（２−メトキシ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（２，６−ジメチル−４−（３−（２−イソプロピルオキシ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（２，６−ジメトキシ−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（４−（３−（２−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−メチル−２−（２−メチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメチルチオ）フェニル）プロピル）フェノキシ）プロパン酸、
２−メチル−２−（２−メチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）プロパン酸、
２−（４−（３−（２−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）フェニルチオ）−２−メチルプロパン酸、
２−メチル−２−（３−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）プロパン酸、
２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）プロパン酸、
２−［４−（３−ヒドロキシ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ］−２−メチルプロパン酸、
２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパンアミド、
２−（４−（３−ヒドロキシイミノ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
２−（４−（３−メトキシイミノ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸、
４−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２，２−ジメチル酪酸、
２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−テルチオブチルメチルプロピオン酸、
２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−イソプロピルメチルプロピオン酸、
２，２−ジフルオロ−２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）酢酸、
２−（２−メトキシ−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェニルチオ）−２−メチルプロパン酸
の中から選ばれることを特徴とする、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
医薬としての請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１４】
場合により１つまたは複数の他の治療的有効成分および／または化粧品有効成分とともに、請求項１〜１２に記載の化合物の少なくとも１つを、薬学的に許容されうる支持体中に含む医薬組成物。
【請求項１５】
下記のリスト：
−抗糖尿病薬、
−インスリン、
−脂質低下分子および／またはコレステロール低下分子、
−抗高血圧薬または抗低血圧薬、
−抗血小板薬、
−抗肥満薬、
−抗炎症薬、
−酸化防止薬、
−心不全の処置に使用される作用物質、
−冠不全の処置に使用される作用物質、
−抗癌薬、
−抗喘息薬、
−抗喘息薬、
−皮膚病理を処置するのに使用されるコルチコイド、
−血管拡張薬および／または抗虚血薬、
の中から選ばれる１つまたは複数の化合物とともに、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物の少なくとも１つを、薬学的に許容されうる支持体中に含む医薬組成物。
【請求項１６】
メタボリック症候群と関連した合併症、インスリン抵抗性、糖尿病、異脂肪血症、アテローム性動脈硬化症、心臓血管疾患、肥満、高血圧、炎症性疾患、神経変性病理または癌の処置のための、請求項１４または１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
異脂肪血症の処置のための、請求項１４または１５に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
脂質および／または糖質代謝の調節異常に関する心臓血管リスク因子を処置するための、請求項１４または１５に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、置換された１，３−ジフェニルプロパン誘導体、それらを含む医薬組成物、および特にヒトおよび動物の健康の分野におけるその治療的使用に関する。
【０００２】
本発明者等は、驚くべきことに、本発明に従う化合物が固有のＰＰＡＲアゴニストの性質を有することを示した。
【０００３】
したがって、本発明に記載の分子は、特に、メタボリック症候群合併症、インスリン抵抗性、糖尿病、異脂肪血症（dyslipidemias）、アテローム性動脈硬化症、心臓血管疾患、肥満、高血圧、炎症性疾患（喘息等）、神経変性疾患（アルツハイマー病等）、癌等の処置ならびに全体的リスクを減少させることにおいて特に関心がある。本発明に従う化合物は、好ましくは異脂肪血症を処置するために使用されるべきである。
【０００４】
糖尿病、肥満および異脂肪血症（高い血漿ＬＤＬコレステロールおよびトリグリセリドレベルおよび低いＨＤＬコレステロールレベル等）は、人に心臓血管疾患を発生させやすくしうる明白に同定された心臓血管リスク因子のいくつかである（Mensah M, 2004）。タバコの使用、座りがちなライフスタイルおよび偏食などのライフスタイルリスク因子も考慮されるべきである。これらの因子は、相乗的効果を有する：即ち、これらの機能のいくつかの同時の存在は、心臓血管のリスクを劇的に増加させる。したがって、心臓血管疾患の全体的リスクは対処されるべき価値がある。２００４年に、異脂肪血症の有病率は先進国の人口の４３．６％に達した。糖尿病の急な増加は、現在糖尿病を心臓血管疾患の疫学において引き続き重要な因子にしている：２０１０年までに人口の７．６％が糖尿病になるであろうと評価されている（Fox-Tucker J, 2005）。
【０００５】
国際アテローム性動脈硬化症学会（Internationaal Atherosclerosis Society, 2003）によれば、心臓血管疾患は、先進国における主要な死亡原因でありそして常に発展途上国においた常に広がりつつある。主要な心臓血管疾患は、心臓疾患、脳虚血および末梢動脈疾患である。
【０００６】
したがって、これらのデータは、心臓血管罹患率および死亡率を有意に減少させるために効果の強烈な手段を取ることを正当化しそしてライフスタイル改変と共に有効な処置を見出す必要を示す。心臓血管疾患およびその結果に対するリスク因子を考慮すると、これは世界的な急を要する事態である。
【０００７】
本発明に従う化合物は、それらのＰＰＡＲアゴニスト性の故に、糖尿病、肥満、異脂肪血症または炎症などの脂質および／または糖質代謝の調節異常（deregulations）に関係する病理の処置のためならびに全体的な心臓血管リスクを減少させるために特に興味深い。
【０００８】
ＰＰＡＲｓ（α、γおよびδ）は、このタイプの病理に関与していることが知られている（Kota BP et al., 2005）：したがってこれらの病理のためのリガンドおよびレセプターが市販されており（Lefebvre P et al., 2006）、そして選択的または非選択的な種々のＰＰＡＲモデュレーター、アゴニストまたはアンタゴニストが最近高度に開発されている。インスリン抵抗性、肥満、異脂肪血症、高血圧および／または炎症に対する有利な効果を有するＰＰＡＲモデュレーターを、メタボリック症候群（症候群Ｘ）の処置に使用することができる（Liu Y and Miller A, 2005）。
【０００９】
ＰＰＡＲｓのファミリーは、α、γおよびδとして知られた（βとしても知られた）３つのアイソフォームを含み、各々は異なる遺伝子によりコードされている。これらのレセプターは、ある種の脂肪酸および／またはそれらの脂質代謝物と接触すると活性化される核内レセプターおよび転写因子スーパーファミリーに属する。活性化されたＰＰＡＲｓは９−シスレチノイン酸レセプター（ＲＸＲまたはレチノイドＸレセプター）とヘテロダイマーを形成しそしてターゲット遺伝子のプロモーターの特異的応答エレメント（ＰＰＲＥまたはペルオキシソーム増殖因子応答エレメント）に結合し、かくして、転写のコントロールを可能とする。
【００１０】
ＰＰＡＲαは脂質代謝（肝臓および筋肉）およびグルコースのホメオスタシスをコントロールし、脂質ホメオスタシスに関与するタンパク質をコードする遺伝子の転写を直接コントロールすることにより脂質および糖質の細胞内代謝に影響を与え、抗炎症性効果および抗増殖効果を有し、そしてコレステロール流出（efflux）を刺激することによりマクロファージにおけるコレステロールの蓄積のアテローム発生促進効果を阻止する（Lefebvre P, Chinetti G, Fruchart JC and Staeles B, 2006）。ＰＰＡＲαを介して、フィブラート（フェノフィブラート、ベンザフイブラート、シプロフイブラート、ゲムフィブロジル）を臨床医療で使用して、トリグリセリドレベルを低下させそしてＨＤＬ（高密度リポタンパク質）レベルを上昇させることによりある種の異脂肪血症を処置する。
【００１１】
ＰＰＡＲγは、脂質生成の重要な調節因子である。更に、それは成熟脂肪細胞の脂質代謝、グルコースホメオスタシス、特にインスリン抵抗性、炎症、マクロファージコレステロール蓄積および細胞増殖に関与している（Lehrke M and Lazar MA, 2005）。したがって、ＰＰＡＲγは、肥満、インスリン抵抗性および糖尿病の発病における役割を演じる。チアゾリジンジオン（ロシグリタゾーン、トログリタゾーン等）は、２型糖尿病の処置に使用されるＰＰＡＲγリガンドである。
【００１２】
ＰＰＡＲδリガンド（最近臨床開発中のＬ−１６５０４１、ＧＷ５０１５１６）があるが、ＰＰＡＲδリガンドは薬物として現在使用されていない。しかしながら、このレセプターは、異脂肪血症、アテローム性動脈硬化症、肥満およびインスリン抵抗性の処置用の使用可能な薬物の開発のための魅力的な目標である：ＰＰＡＲδは、事実、脂質および炭水化物代謝コントロール、エネルギーバランス、神経変性、肥満、マクロファージフォーム細胞の形成および炎症に関与している（Gross B et al., 2005）。
【００１３】
脂質および糖質代謝の調節においてＰＰＡＲリガンドが演じる直接の役割以外に、これらの分子は、ＰＰＡＲターゲット遺伝子の大きな多様性による多面性作用スペクトルを有する。これらの多数の性質は、ＰＰＡＲｓを、アテローム性動脈硬化症、脳虚血、高血圧、血管新生に関連した疾患（網膜症、糖尿病等）、炎症性疾患および自己免疫疾患（クローン病、乾癬、多発性硬化症、喘息等）、腫瘍疾患（発癌等）、神経変性疾患、メタボリック症候群と関連した合併症、インスリン抵抗性、糖尿病、異脂肪血症、心臓血管疾患、肥満等などの疾患の処置に関する興味ある治療ターゲットおよび全体的リスクを減少させるための興味ある治療ターゲットにする。
【００１４】
本発明に従う化合物は、それらのＰＰＡＲアゴニスト性故に、脂質および／または糖質代謝、特に異脂肪血症の調節異常に関係する病理の処置を改善するためならびに全体的心臓血管のリスクを減少させるための有利な治療ツールである。
【００１５】
更に一般的には、いくつかの調節プロセスに同時に作用することにより、本発明に従う化合物は、メタボリック症候群（その特徴は、肥満、特に異常な肥満、異常な濃度の血中脂質（高いトリグリセリドレベルおよび／または低いＨＤＬコレステロールレベル（異脂肪血症））、高血糖症および／またはインスリン抵抗性および高血圧である）と関連した合併症、アテローム性動脈硬化症、心臓血管疾患、インスリン抵抗性、肥満、高血圧、糖尿病、異脂肪血症、心臓血管疾患、炎症性疾患、（喘息等）、神経変性病理（アルツハイマー病等）、癌等の処置のため並びに全体的リスクを減少させるための有利な治療手段である。
【００１６】
本発明は、下記一般式：
【化１】
2009541270.tif 000002
（式中、
Ｘ１は、ハロゲン原子、Ｒ１またはＧ１−Ｒ１基を表し；
Ｘ２は、ハロゲン原子、Ｒ２またはＧ２−Ｒ２基を表し；
Ｘ３は、Ｒ３またはＧ３−Ｒ３基を表し；
Ｘ４は、ハロゲン原子、Ｒ４またはＧ４−Ｒ４基を表し；
Ｘ５は、Ｒ５またはＧ５−Ｒ５基を表し；
Ｒ１は、ハロゲン化されたアルキル基を表し；
Ｒ２は、水素原子またはハロゲン化されていないアルキル基を表し；
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは相異なり、水素原子を表すかまたは、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表し；
Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３、Ｇ４およびＧ５は、同一であるかまたは相異なり、酸素原子または硫黄原子を表し；
但し、Ｘ３、Ｘ４またはＸ５の中の少なくとも１つの基は、Ｒ３、Ｇ３Ｒ３、Ｒ４、Ｇ４Ｒ４、Ｒ５またはＧ５Ｒ５式
（式中、Ｇ３、Ｇ４およびＧ５は前記したとおりであり、そして
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは相異なり、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す）
に相当し；
Ａは、
（ｉ）−ＣＲ６Ｒ７基（式中、Ｒ６は水素原子、アルキル基または−ＯＲ８基を表し、そしてＲ７はアルキル基、ヒドロキシル基または−ＯＲ８基を表し、Ｒ８は下記するとおりである）；
（ｉｉ）カルボニル基（ＣＯ）、
（ｉｉｉ）オキシム基（Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｈ）またはオキシムエーテル（Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｒ８）、
（Ｒ８は、同一であるかまたは相異なり、アリールまたはシクロアルキル基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表す）
を表し；
Ｄは、
（ｉ）２つの水素原子に連結された炭素原子（ＣＨ２）、
（ｉｉ）酸素化または硫黄化された複素環を形成するように、水素原子に連結されそしてＧ２に連結された炭素原子、
を表し；
基１の置換基は−ＣＯＯＲ９および−ＣＯＮＲ９Ｒ１０の中から選ばれ；
基２の置換基は、−ＳＯ３Ｈおよび−ＳＯ２ＮＲ９Ｒ１０の中から選ばれ；
Ｒ９およびＲ１０は、同一であるかまたは相異なり、水素原子を表すかまたは、少なくとも１つの基１または基２置換基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表す）
を有する１，３−ジフェニルプロパンに由来する化合物、それらの純粋なまたは混合した立体異性体（ジアステレオアイソマー、エナンチオマー）、ラセミ混合物（racemic mixtures）、幾何異性体、互変異性体、塩、水和物、溶媒和物、固体形態およびそれらの混合物を指向する。
【００１７】
本発明に関して、用語「アルキル」は、飽和した線状もしくは分岐状または環状の、ハロゲン化されているかもしくはハロゲン化されていない、特に１〜２４個の炭素原子、好ましくは１、２、3、４、５、６、７、８、９または１０個の炭素原子を有する炭化水素基、例えば、メチル、トリフルオロメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、テルチオ（ｔｅｒｔｉｏ）ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシルまたはシクロヘキシルを示す。
【００１８】
用語「シクロアルキル」は、上記したアルキル基を示しそして少なくとも１つの環を形成する（例えば、３〜８個の炭素原子を有するシクロアルキル基：シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチル）。
【００１９】
用語「アルキルオキシ」は、酸素原子（エーテル結合）により分子に連結されたアルキル鎖を指す。このアルキル鎖は、前記した定義に相当する。メトキシ、トリフルオロメトキシ、エトキシ、ｎ−プロピルオキシ、イソプロピルオキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、テルチオ（ｔｅｒｔｉｏ）−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシまたはヘキシルオキシを例として挙げることができる。
【００２０】
用語「アリール」は、好ましくは５〜１４個、有利には６〜１４個の炭素原子を含む芳香族基であって、Ｎ、Ｏ、ＳまたはＰの中から選ばれる１つまたは複数のヘテロ原子によって場合により中断されていてもよい芳香族基（更に詳しくは、「ヘテロアリール」と呼ばれる）を指す。それらは、一般に、単環式もしくは二環式でありそして有利には６〜１４個の炭素原子を含み、例えばフェニル、α−ナフチル、β−ナフチル、アントラセニルまたはフルオレニルである。
【００２１】
用語「酸素化された複素環または硫黄化された複素環」は、ＯおよびＳの中から選ばれる１つまたは複数のヘテロ原子により中断されている上記したシクロアルキル基を示す。チオピランまたはピランを例として挙げることができる。
【００２２】
ハロゲン原子とは、臭素、塩素、フッ素またはヨウ素と理解される。
【００２３】
ハロゲン化されたアルキル基は、少なくとも１個のハロゲン原子を含むかまたは完全にハロゲン化されている（過ハロゲン化されている）上記したアルキル基である。
【００２４】
したがって、Ｒ３、Ｇ３Ｒ３、Ｒ４、Ｇ４Ｒ４、Ｒ５またはＧ５Ｒ５式
（式中、Ｇ３、Ｇ４およびＧ５は前記したとおりであり、そして
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは相異なり、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す）
に相当する基Ｘ３、Ｘ４またはＸ５の少なくとも１つを与える一般式（Ｉ）の化合物は、それゆえ、それぞれ１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表すＸ３、Ｘ４またはＸ５の基Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の少なくとも１つを有する。
【００２５】
本発明の１つの特定の局面は、Ａがカルボニル基（ＣＯ）を表す一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００２６】
本発明の他の特定の局面は、Ａがオキシム基（Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｈ）またはオキシムエーテル（Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｒ８）を表し、Ｒ８はアリールまたはシクロアルキル基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。好ましくは、Ｒ８はメチル基を表す。
【００２７】
本発明の他の特定の局面は、Ａが−ＣＲ６Ｒ７基を表し、Ｒ６は水素原子を表しそしてＲ７はヒドロキシル基、アルキル基または−ＯＲ８基を表し、Ｒ８はアリールもしくはシクロアルキルにより置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表す一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００２８】
好ましくは、本発明は、Ａが−ＣＲ６Ｒ７基を表し、Ｒ６は水素原子を表しそしてＲ７はヒドロキシル基を表す一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００２９】
本発明の他の好ましい局面は、Ａが−ＣＲ６Ｒ７基を表し、Ｒ６は水素原子を表しそしてＲ７は−ＯＲ８基を表し、Ｒ８は上記のとおりである、一般式（Ｉ）の化合物に関する。特に、Ｒ８は、優先的には１、２、３または４個の炭素原子を含むアルキル基を表す。なお更に好ましくは、Ｒ８はアリールまたはシクロアルキルにより置換されているアルキル基を表し、該アリールまたはシクロアルキル基は特に６個の炭素原子を含む。
【００３０】
本発明の他の特定の局面は、Ａが−ＣＲ６Ｒ７基を表し、Ｒ６がアルキル基または−ＯＲ８基を表しそしてＲ７がヒドロキシ基、アルキル基または−ＯＲ８基を表し、Ｒ８がアリールまたはシクロアルキル基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表す一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３１】
本発明他の特定の主題は、Ｘ３およびＸ５が、同一であるかまたは相異なり、それぞれＲ３およびＲ５基を表し、特定的にはＲ３およびＲ５は水素原子を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３２】
本発明の他の特定の主題は、一般式（Ｉ）のＸ３またはＸ５が、同一であるかまたは相異なり、それぞれＲ３およびＲ５基を表し、Ｒ３およびＲ５は、同一であるかまたは相異なり、前記したとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３３】
好ましくは、Ｘ３およびＸ５が、同一であるかまたは相異なり、それぞれＲ３およびＲ５基を表し、Ｒ３およびＲ５は、同一であるかまたは相異なり、好ましくは１、２、３または４個の炭素原子を含む置換されていないアルキル基を表す。なお更に好ましくは、Ｘ３およびＸ５は、同一であるかまたは相異なり、それぞれメチル基を表す。
【００３４】
本発明の他の特定の局面は、Ｘ３およびＸ５が、同一であるかまたは相異なり、それぞれＧ３Ｒ３およびＧ５Ｒ５基を表し、
Ｇ３およびＧ５は前記したとおりであり、そして
Ｒ３およびＲ５は水素原子を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３５】
本発明の他の特定の局面は、Ｘ３およびＸ５が、同一であるかまたは相異なり、それぞれＧ３Ｒ３およびＧ５Ｒ５基を表し、
Ｇ３およびＧ５が前記したとおりであり、そして
Ｒ３およびＲ５が、前記したとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３６】
本発明の他の特定の局面は、Ｘ３およびＸ５が、同一であるかまたは相異なり、それぞれＧ３Ｒ３およびＧ５Ｒ５基を表し、
Ｇ３およびＧ５が前記したとおりであり、そして
Ｒ３およびＲ５が、同一であるかまたは相異なり、前記したとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３７】
本発明の他の特定の局面は、Ｘ４がハロゲン（臭素、塩素、フッ素、ヨウ素）を表す一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３８】
本発明の他の特定の局面は、Ｘ４がＲ４またはＧ４−Ｒ４基を表し、
Ｇ４が前記したとうりであり、そして
Ｒ４が水素原子を表す、
一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３９】
本発明の他の特定の局面は、Ｘ４がＲ４またはＧ４−Ｒ４基を表し、
Ｇ４が前記したとおりであり、そして
Ｒ４が前記したとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基または置換されていないアルキル基を表す、
一般式（Ｉ）の化合物に関する
【００４０】
本発明の他の特定の局面は、
Ｘ４がＲ４またはＧ４−Ｒ４基を表し、
Ｇ４が前記したとおりであり、そして
Ｒ４が１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。好ましくは、Ｇ４は酸素原子を表しおよび／またはＲ４は基１置換基、特にＣＯＯＨにより置換されているアルキル基を表す。なお更に好ましくは、Ｘ４は−ＯＣ（ＣＨ３）２ＣＯＯＨ、−ＯＣＨ２ＣＯＯＨまたは−ＳＣ（ＣＨ３）２ＣＯＯＨ基を表す。
【００４１】
本発明の他の特定の主題は、Ｘ３、Ｘ４およびＸ５基の１つのみがＲ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｇ３Ｒ３、Ｇ４Ｒ４、またはＧ５Ｒ５基を表し、
Ｇ３、Ｇ４およびＧ５は前記したとおりであり、そして
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは相異なり、前記したとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４２】
本発明の他の特定の主題は、Ｘ３、Ｘ４およびＸ５基のＸ４のみが、Ｒ４またはＧ４Ｒ４を表し、
Ｇ４は前記したとおりであり、そして
Ｒ４は、前記したとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４３】
本発明の他の特定の主題は、Ｘ３、Ｘ４およびＸ５基の２つまたは３つがＲ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｇ３Ｒ３、Ｇ４Ｒ４、またはＧ５Ｒ５基を表し、
Ｇ３、Ｇ４およびＧ５は前記したとおりであり、そして
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、同一であるかまたは相異なり、前記したとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４４】
本発明の他の特定の局面は、Ｇ３、Ｇ４および／またはＧ５が酸素原子を表す一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４５】
優先的には、本発明は、Ｘ３、Ｘ４またはＸ５の１つのみがＧ３Ｒ３、Ｇ４Ｒ４、またはＧ５Ｒ５式に相当し、
Ｇ３、Ｇ４およびＧ５は酸素原子を表し、そして
Ｒ３、Ｒ４またはＲ５は、同一であるかまたは相異なり、前記したとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４６】
なお更に優先的には、本発明は、Ｘ３、Ｘ４およびＸ５のＸ４のみがＧ４Ｒ４式に相当し、
Ｇ４は水素原子を表し、そして
Ｒ４は、前記したとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４７】
本発明の他の優先的な局面は、Ｘ３、Ｘ４またはＸ５基の２つまたは３つがＧ３Ｒ３、Ｇ４Ｒ４、またはＧ５Ｒ５式に相当し、
Ｇ３、Ｇ４およびＧ５が酸素原子を表し、そして
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が、前記したとおりの、１つまたは複数の基１または基２置換基により置換されているアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４８】
本発明の特定の局面は、置換基が基１置換基の中から選ばれる一般式（Ｉ）の化合物に関する。優先的には、基１置換基は−ＣＯＯＲ９型であり、Ｒ９は前記したとおりでありそして好ましくは水素原子または１、２、３、４、５または６個の炭素原子を含むアルキル基を表す。
【００４９】
本発明の特定の局面は、Ｘ３、Ｘ４またはＸ５基の１つのみが式−ＯＣ（ＣＨ３）２ＣＯＯＲ９に相当し、Ｒ９は前記したとおりでありそして優先的には水素原子または１、２、３、４、５または６個の炭素原子を含むアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００５０】
なお更に優先的には、Ｘ４は−ＯＣ（ＣＨ３）２ＣＯＯＲ９ｇ１を表し、Ｒ９は前記したとおりでありそして優先的には水素原子または１、２、３、４、５または６個の炭素原子を含むアルキル基を表す。
【００５１】
本発明の１つの特定の局面は、Ｘ１がＲ１またはＧ１Ｒ１カルボニル基を表し、
Ｇ１が前記したとおりであり、そして
Ｒ１がハロゲン化されたアルキル基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００５２】
優先的には、Ｒ１は１、２または３個の炭素原子を含むハロゲン化されたアルキル基を表す。
【００５３】
なお更に優先的には、Ｘ１は−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＳＣＦ３、−ＯＲＣＦ３基を表し、Ｒは上記したアルキル基を表す。
【００５４】
本発明の特定の局面は、Ｘ１がハロゲン原子（臭素、塩素、フッ素、ヨウ素）を表す一般式（Ｉ）の化合物に関する。好ましくは、Ｘ１は塩素または臭素の原子を表す。
【００５５】
本発明の特定の局面は、Ｘ２が水素原子を表す一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００５６】
本発明の特定の局面は、Ｘ２がハロゲン原子（臭素、塩素、フッ素、ヨウ素）を表す一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００５７】
本発明の特定の主題は、Ｘ２がＲ２またはＧ２Ｒ２基を表し、Ｒ２およびＧ２が前記したとおりである、一般式（Ｉ）の化合物に関する。優先的には、Ｒ２は水素原子、−ＣＦ３基または１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を含むアルキル基を表す。なお更に優先的には、Ｘ２は−ＯＲ’基を表し、Ｒ’はアルキル基、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＨを表す。
【００５８】
本発明の特定の局面は、ＤがＣＨ２基を表す、一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００５９】
本発明の他の特定の主題は、Ｇ２およびＤが酸素化されたまたは硫黄化された複素環を形成して下記式（ＩＩ）
【化２】
2009541270.tif 000003
を有する化合物を形成する、一般式（Ｉ）の化合物に関する。好ましくは、Ｇ２は一般式（ＩＩ）において硫黄原子を表す。
【００６０】
本発明の特定の態様に従えば、好ましい化合物を下記に示す。
【００６１】
化合物１：２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（トリフルオロメチルオキシ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチル−プロパン酸
【化３】
2009541270.tif 000004
【００６２】
化合物２：２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（トリフルオロメチルチオ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化４】
2009541270.tif 000005
【００６３】
化合物３：２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−ブロモフェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化５】
2009541270.tif 000006
【００６４】
化合物４：２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化６】
2009541270.tif 000007
【００６５】
化合物５：２−［４−［３−［４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル］−３−オキソ−プロピル］フェニルチオ］−２−メチルプロパン酸
【化７】
2009541270.tif 000008
【００６６】
化合物６：２−［２−メチル−４−［３−［４−（３，３，３−トリフルオロプロピルオキシ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化８】
2009541270.tif 000009
【００６７】
化合物７：２−［２，６−ジメチル−４−［３−ヒドロキシ−３−［４−（トリフルオロメチルチオ）フェニル］プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化９】
2009541270.tif 000010
【００６８】
化合物８：２−［２，６−ジメチル−４−（３−（ピリジン−３−イルメトキシ）−３−［４−（トリフルオロメトキシ）フェニル］プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化１０】
2009541270.tif 000011
【００６９】
化合物９：２−［４−（３−（４−ヨードベンジルオキシ）−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化１１】
2009541270.tif 000012
【００７０】
化合物１０：２−［４−（３−メトキシ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化１２】
2009541270.tif 000013
【００７１】
化合物１１：２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（３，３，３−トリフルオロプロピルオキシ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化１３】
2009541270.tif 000014
【００７２】
化合物１２：２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化１４】
2009541270.tif 000015
【００７３】
化合物１３：２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（２，２，２−トリフルオロエチルチオ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化１５】
2009541270.tif 000016
【００７４】
化合物１４：２−（４−（３−（４−クロロ−２−（メチルチオ）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化１６】
2009541270.tif 000017
【００７５】
化合物１５：２−（４−（３−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化１７】
2009541270.tif 000018
【００７６】
化合物１６：２−（４−（３−（２−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化１８】
2009541270.tif 000019
【００７７】
化合物１７：２−（４−（３−（２−フルオロ−４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化１９】
2009541270.tif 000020
【００７８】
化合物１８：２−（２，６−ジメチル−４−（３−（２−メチル−４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）−３−オキソ−プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化２０】
2009541270.tif 000021
【００７９】
化合物１９：２−（４−（３−（２−メトキシ−４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化２１】
2009541270.tif 000022
【００８０】
化合物２０：２−（４−（３−（２−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化２２】
2009541270.tif 000023
【００８１】
化合物２１：２−（４−（３−（２−メトキシ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化２３】
2009541270.tif 000024
【００８２】
化合物２２：２−（２，６−ジメチル−４−（３−（２−イソプロピルオキシ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化２４】
2009541270.tif 000025
【００８３】
化合物２３：２−（２，６−ジメトキシ−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化２５】
2009541270.tif 000026
【００８４】
化合物２４：２−（４−（３−（２−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジｍエトキシフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化２６】
2009541270.tif 000027
【００８５】
化合物２５：２−メチル−２−（２−メチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメチルチオ）フェニル）プロピル）フェノキシ）プロパン酸
【化２７】
2009541270.tif 000028
【００８６】
化合物２６：２−メチル−２−（２−メチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）プロパン酸
【化２８】
2009541270.tif 000029
【００８７】
化合物２７：２−（４−（３−（２−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−オキソ−プロピル）フェニルチオ）−２−メチルプロパン酸
【化２９】
2009541270.tif 000030
【００８８】
化合物２８：２−メチル−２−（３−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）プロパン酸
【化３０】
2009541270.tif 000031
【００８９】
化合物２９：２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）プロパン酸
【化３１】
2009541270.tif 000032
【００９０】
化合物３０：２−［４−（３−ヒドロキシ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化３２】
2009541270.tif 000033
【００９１】
化合物３１：２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパンアミド
【化３３】
2009541270.tif 000034
【００９２】
化合物３２：２−（４−（３−ヒドロキシイミノ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化３４】
2009541270.tif 000035
【００９３】
化合物３３：２−（４−（３−メトキシイミノ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化３５】
2009541270.tif 000036
【００９４】
化合物３４：４−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２，２−ジメチル酪酸
【化３６】
2009541270.tif 000037
【００９５】
化合物３５：２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸テルチオブチルエステル
【化３７】
2009541270.tif 000038
【００９６】
化合物３６：２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸イソプロピル  エステル
【化３８】
2009541270.tif 000039
【００９７】
化合物３７：２，２−ジフルオロ−２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）酢酸
【化３９】
2009541270.tif 000040
【００９８】
化合物３８：２−（２−メトキシ−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェニルチオ）−２−メチルプロパン酸
【化４０】
2009541270.tif 000041
【００９９】
本発明は、より好ましくは以下の化合物に関する：
化合物１：２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸；
化合物２：２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（トリフルオロメチルチオ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸；
化合物３：２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−ブロモフェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸；
化合物４：２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸
化合物６：２−［２−メチル−４−［３−［４−（３，３，３−トリフルオロプロピルオキシ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸
化合物１１：２−［２，６−ジメチル−４−［３−［４−（３，３，３−トリフルオロプロピルオキシ）フェニル］−３−オキソ−プロピル］フェノキシ］−２−メチルプロパン酸
化合物２６：２−メチル−２−（２−メチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）プロパン酸
化合物３６：２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸イソプロピルエステル
【０１００】
本発明の化合物は、それらの純粋なまたは混合した立体異性体（ジアステレオアイソマー、エナンチオマー）、ラセミ形態、それらの幾何異性体、それらの互変異性体、それらの塩、それらの水和物、それらの溶媒和物、それらの固体形態、およびそれらの混合物を含む。
【０１０１】
本発明に従う化合物は、１個または複数の不斉中心を含むことができる。本発明は、純粋なまたは混合した立体異性体（ジアステレオアイソマー、エナンチオマー）ならびにラセミ形態および幾何異性体を含む。エナンチオマー的に純粋な（enantimerically pure）（または濃縮された）混合物が所望されるときは、それは、最終製品もしくはキラル中間体の精製によりまたは当業者により知られている方法（例えば、試薬およびキラル触媒を使用して）に従う不斉合成により得ることができる。本発明に従ういくらかの化合物は、異なる安定なそれらの互変異性形態を有することができ、そしてすべてのこれらの形態およびそれらの混合物は本発明に含まれる。
【０１０２】
本発明は、本発明に従う化合物の「薬学的に許容されうる」塩にも関する。一般に、この用語は、有機または無機塩基または酸から得られるわずかに毒性または無毒性の塩を示す。これらの塩は、本発明に従う化合物の最終精製工程期間中に得ることができ、または精製された化合物に塩を取り込ませることにより得ることができる。
【０１０３】
本発明に従ういくらかの化合物およびそれらの塩は、いくつかの固体形態で安定であることができる。本発明は、無定形、多形、単結晶形態および多結晶形態を含む本発明に従う化合物のすべての固体形態を含む。
【０１０４】
本発明に従う化合物は、非溶媒形態または、例えば水（水和物）またはエタノールなどの薬学的に許容されうる溶媒との溶媒和形態で存在することができる。
【０１０５】
１つ以上の同位元素で標識された本発明に従う化合物も本発明に含まれる：これらの化合物は、構造的には同一であるが、構造の少なくとも１つの原子が同位元素（放射性または放射性ではない）により置換されているということにより異なる。本発明に従う化合物の構造に含まれうる同位元素の例は、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｏ、１７Ｏ、３５Ｓなどの水素、炭素、酸素および硫黄の中から選ばれうる。放射性同位元素は、特に好ましい。なぜならばそれらは製造することが容易でありそして物質のｉｎ  ｖｉｖｏバイオアベイラビリティー研究の範囲内で検出することが容易であるからである。重同位元素（２Ｈなど）は、分析研究における内部標準としてのその使用の故に特に好ましい。
【０１０６】
本発明は、前記した一般式（Ｉ）の化合物の合成方法にも関する。
【０１０７】
本発明の方法は、
（ｉ）式（Ａ）の少なくとも１つの化合物を、式（Ｂ）
【化４１】
2009541270.tif 000042
（式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４およびＸ５は前記した定義を有する）
の少なくとも１つの化合物と塩基性または酸性媒体中で混合する工程、
（ｉｉ）得られる化合物を還元する工程、および最後に
（ｉｉｉ）官能基の連結を可能とする工程、
を含む。
【０１０８】
酸性または塩基性媒体中の工程（ｉ）および工程（ｉｉ）のための実験条件は、当業者が実行するのに容易であり、そして大きく変わることができる。合成方法は、特に本発明の「実施例」に述べた合成方法であることができる。
【０１０９】
２つの化合物の混合は、有利には化学量論的に行われる。これは、好ましくは室温（約１８℃〜２５℃）および常圧で行われる。
【０１１０】
塩基性媒体においては、反応は、好ましくは、水酸化ナトリウムのようなアルカリ金属水酸化物またはナトリウムエチラートのようなアルカリ金属アルコラートなどの強塩基の存在下に行われる。
【０１１１】
酸性媒体においては、反応は、好ましくは、塩酸などの強酸の存在下に行われる。
【０１１２】
得られる化合物は、当業者の古典的な方法により単離されうる。次いでそれらは例えば医薬または化粧品として使用されうる。
【０１１３】
本発明は、医薬として上記したような化合物も指向する。
【０１１４】
本発明の他の主題は、薬学的に許容されうる支持体中に、場合により１つまたは複数の他の治療有効成分および／または化粧品有効成分とともに、前記した少なくとも１つの化合物を含む医薬組成物にも関する。
【０１１５】
本発明は、好ましくは、メタボリック症候群と関連した合併症、インスリン抵抗性、糖尿病、異脂肪血症、アテローム性動脈硬化症、心臓血管疾患、肥満、高血圧、炎症性疾患（喘息等）、神経変性病理（アルツハイマー病等）または癌等の処置のための医薬組成物に関する。本発明に従う医薬組成物は、好ましくは異脂肪血症を処置するために使用される。
【０１１６】
本発明は、好ましくは、全体的リスクを減少ささせることにより、脂質および／または糖質代謝障害（高脂血症、二型糖尿病、肥満等）の調節異常に関係した心臓血管リスク因子を処置するための医薬組成物である。
【０１１７】
本発明の他の主題は、上記した少なくとも１つの化合物を含む栄養組成物に関する。
【０１１８】
本発明の他の主題は、多発性病理、特に代謝障害に関係した多発性病理（例えば、異脂肪血症）を処置することを意図した医薬組成物の製造のための前記した少なくとも１つの化合物の使用に関する。更に一般的には、本発明の主題は、全体的リスクを減少させるための、脂質および／または糖質代謝障害に関係した心臓血管リスク因子を処置することを意図した医薬組成物の製造のための前記した少なくとも１つの化合物の使用に関する。
【０１１９】
例えば（しかし限定的にではなく）本発明に従う化合物は、理想的には、
−抗糖尿病薬：分泌促進薬（スルホニル尿素、（グリベンクラミド、グリメピリド、グリクラジド等）およびグリニド（glinides）（レパグリニド、ナテグリニド等））、α−グルコシダーゼ阻害剤、ＰＰＡＲγアゴニスト（チアゾリジンジオン、例えばロシグリタゾン、ピオグリタゾン）混合ＰＰＡＲα／γアゴニスト（テサグリタザール）、ムラグリタザール）、ｐａｎ−ＰＰＡＲｓ（３つのＰＰＡＲアイソフォームを同時に活性化する化合物）、ビグアニド（メトホルミン）、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害剤（ＭＫ−４３１、ビルダグリプチン）、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）アゴニスト（エキセナチド）等、
−インスリン、
−ｉｐｉｄ低下分子および／またはコレステロール低下分子：フィブラート（フェノフィブラート、ゲムフィブロジル）、ＨＭＧ  ＣｏＡレダクターゼインヒビターもしくはヒドロキシイメチルグルタリル補酵素Ａレダクターゼ（スタチン、例えばアトルバスタチン、シムバスタチン、フルバスタチン）、コレステロール吸収阻害剤（エゼチミブ、フィトステロール）、ＣＥＴＰ阻害剤またはコレステロールエステル輸送タンパク質阻害剤（トルセトラピブ）、ＡＣＡＴもしくはアシルコエンザイムＡコレステロールアシルトランスフェラーゼ（アバシミブ、エフルシミブ）、ＭＴＰ（ミクロソームトリグリセリド輸送タンパク質）阻害剤、胆汁酸、金属イオン封鎖剤（コレスチラミン）、ビタミンＥ、ポリ不飽和脂肪酸、ω−３脂肪酸、ニコチン酸型誘導体（ナイアシン）等、
−抗高血圧剤および抗低血圧剤：ＡＣＥ（アンギオテンシン転換酵素）阻害剤（カプトプリル、エナラプリル、ラミプリルまたはキナプリル）、アンギオテンシンＩＩレセプターアンタゴニスト（ロサルタン、バルサルタン、テルミサルタン、エポサルタン、イルベサルタン等）、βブロッカー（アテノロール、メトプロロール、ラベタロール、プロプラノロール）、チアジドおよび非チアジド利尿薬（フロセミド、インダパミド、ヒドロクロロチアジド、抗アルドステロン）、血管拡張剤、カルシウムチャンネルブロッカー（ニフェジピン、フェロジピンもしくはアムロジピン、ジルチアゼムまたはベラパミル）等、
−抗血小板剤：アスピリン、チクロピジン、ジピリダモール、クロピドグレル、フルルビプロフェン等、
−抗肥満剤：シブトラミン、リパーゼ阻害剤（オルリスタット）、ＰＰＡＲδ、カンナビノイドＣＢ１レセプターアンタゴニスト（リモナバント）等、
−抗炎症剤：例えば、コルチコイド（プレドニゾン、βメタゾン、デキサメタゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、ヒドロコルチゾン等）、インドールに由来するＮＳＡＩＤｓまたは非ステロイド抗炎症薬（インドメタシン、スリンダック）、アリールカルボン酸基のＮＳＡＩＤｓ（チアプロフェン酸、ジクロフェナック、エトドラック、フルルビプロフェン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ナプロキセン、ナブメトン、アルミノプロフェン）、オキシカムに由来するＮＳＡＩＤＳ（メロキシカム、ピロキシカム、テノキシカム）、フェナメート基に由来するＮＳＡＩＤｓ、ＣＯＸ２選択性阻害剤（セレコキシブ、ロフェコキシブ）等、
−酸化防止剤：例えばプロブコ−ル等、
−心不全の処置に使用される作用物質：チアジドおよび非チアジド利尿薬（フロセミド、インダパミド、ヒドロクロルチアジド、抗アルドステロン）、ＡＣＥ阻害剤（カプトプリル、エナラプリル、ラミプリルまたはキナプリル）、ジギタリス薬物（ジゴキシン、ジギトキシン）、βブロッカー（アテノロール、メトプロロール、ラベタロール、プロプラノロール）、ホスホジエステラーゼ阻害剤（エノキシモン、ミルリノン）等、
−冠不全の処置に使用される作用物質：βブロッカー（アテノロール、メトプロロール、ラベタロール、プロプラノロール）、カルシウムチャンネルブロッカー（ニフェジピン、フェロジピンもしくはアムロジピン、ベプリジル、ジルチアゼムまたはベラパミル）等、ＮＯ（酸化窒素）ドナー（トリニトリン、イソソルビドジナイトレート、モルシドミン）、アミオダロン等、
−抗癌薬：細胞毒性剤（ＤＮＡ（デオキシリボ核酸）と相互作用する作用物質）、アルキル化剤、シスプラチンおよび誘導体）、細胞分裂抑制剤（ＧｎＲＨ（性腺刺激ホルモン放出ホルモン）アナログ、ソマトスタチンアナログ、プロゲスチン、抗エストロゲン薬物、アロマターゼ阻害剤等）、免疫応答モデュレーター（インターフェロン、ＩＬ２等）、
−抗喘息薬、例えば気管支拡張剤（β２レセプターアゴニスト）、コルチコイド、クロモグリケート、ロイコトリエンレセプターアンタゴニスト（モンテルカスト）等、
−乾癬および皮膚炎などの皮膚病理の処置に使用されるコルチコイド、
−血管拡張薬および／または抗虚血薬、（ブフロメディル、イチョウエキス、ナフチドロフリル、ペントキシフィリン、ピルベディル）等、
などの現在市販されているか開発中の他の治療剤および／または化粧品剤と組み合わせて有利に投与することができる。
【０１２０】
本発明は、被検体、特にヒトに有効量の上記した化合物または医薬組成物を投与することを含む脂質および／または糖質代謝に関係する病理を処置するための方法にも関する。本発明の文脈内では、用語「有効量」は、所望の生物学的結果を生じるのに十分な化合物の量を指す。本発明の文脈内では、用語「被検体」は、哺乳動物、更に特定的にはヒトを意味する。
【０１２１】
用語「処置」は、治癒的処置、症状の処置または予防処置を示す。したがって、本発明の化合物は、宣告された疾患を有する被検体（哺乳動物、特にヒトなどの）に使用することができる。本発明の化合物は、疾患の進行を遅延させるかまたは遅くするためまたは疾患の更なる進行を予防するのに使用することもでき、かくして被検体の状態を改善する。したがって、本発明の化合物は、結局、普通に疾患を発生するかもしれない健康な被検体または疾患を発生する有意なリスクを有する健康な被検体に投与されうる。
【０１２２】
本発明に従う医薬組成物は、有利には、薬学的文脈内で（例えば、薬学的使用に適合しそして当業者に周知の食塩溶液、生理学的溶液、等張性溶液等）許容されうる１種または複数の賦形剤またはビヒクルを含む。組成物は、分散剤、可溶化剤、安定剤、保存剤等の中から選ばれる１つまたは複数の作用物質またはビヒクルを含むことができる。これらの処方（液体および／または注射可能なおよび／または固体）のために有用な作用物質またはビヒクルは、特にメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリソルベート８０、マンニトール、ゼラチン、ラクトース、植物油、アカシア、リポソーム等である。組成物は、結局長期の放出および／または徐放を確実にするガレヌス形態または装置によって、注射懸濁剤、ゲル剤、油剤、丸剤、坐剤、散剤、ジェルキャップ剤、カプセル剤、エアゾル剤等の形態で処方されうる。この種の処方のために、セルロース、カーボネートまたはデンプンなどの作用物質を有利に使用することができる。
【０１２３】
本発明に従う化合物または組成物は、種々の方法および種々の形態で投与することができる。したがって、例えば、それらは、系統的方法で、経口で、非経口的に、吸入によりまたは注射により、例えば静脈内に、筋肉内経路により、皮下経路により、経皮経路により、動脈内経路等により投与されうる。注射用には、化合物は、例えば、注射器または灌流を使用して注射されうる液体懸濁剤の形態で一般に調節される。
【０１２４】
注射に関する速度および用量は、患者、病理、投与の形態等の関数として当業者により適合させることができる。典型的には、化合物は、投与当たり１μg〜２g、優先的には投与当たり０．１mg〜１gの範囲で変わる用量で投与される。投与は、１日毎にまたは必要ならば、１日に数回すら行うことができる。更に、本発明に従う組成物は、他の作用物質または有効成分を含むことができる。
【図面の簡単な説明】
【０１２５】
以下の図において使用される略号：
Ｃｐｄ＝化合物
Ｃｔｒｌ＝コントロール
mpk＝mg／kg／日
ＬＤＬコレステロール＝低密度リポタンパク質コレステロール
ＨＤＬコレステロール＝高密度リポタンパク質コレステロール
ＶＬＤＬコレステロール＝超低密度リポタンパク質コレステロール
【０１２６】
図１−１〜図１−１８：用量に従う本発明の化合物のＰＰＡＲ活性化性のｉｎ-ｖｉｔｒｏ評価
ＰＰＡＲｓの活性化は、酵母のＧａｌ４転写因子のＤＮＡ結合ドメインおよび異なるＰＰＡＲｓのリガンドへの結合ドメインから構成されるキメラの転写活性を測定することにより、サル腎臓繊維芽細胞系（ＣＯＳ−７）を使用してｉｎ  ｖｉｔｒｏで評価される。
【０１２７】
化合物は、Ｇａｌ４−ＰＰＡＲα、γおよびδキメラに関して１０−７〜１００μMの用量で試験される。誘導係数、即ち、化合物により誘導される発光とコントロールにより誘導される発光との比を、各条件について測定する。誘導係数が高ければ高い程、化合物はより高いＰＰＡＲ活性化性を有する。
【図１−１】化合物１のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−２】化合物１のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−３】化合物１のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−４】化合物２のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−５】化合物２のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−６】化合物２のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−７】化合物３のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−８】化合物３のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−９】化合物３のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−１０】化合物４のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−１１】化合物４のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−１２】化合物４のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−１３】化合物５のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−１４】化合物５のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−１５】化合物５のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−１６】化合物７のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−１７】化合物７のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【図１−１８】化合物７のＰＰＡＲα、γ、δ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価。
【０１２８】
図２−１〜２−７：本発明に従う化合物の体重性、低脂血症性およびＨＤＬコレステロールの合成を刺激する性質のＡｐｏＥ２／Ｅ２マウスでのｉｎ−ｖｉｖｏ評価
本発明に従う化合物の効果を、Ｅ２アイソフォームアポリポタンパク質Ｅによりヒト化されたマウス（Ｅ２／Ｅ２）でｉｎ  ｖｉｖｏで評価する。
異脂肪血症Ｅ２／Ｅ２マウスの体重、全コレステロールの比、トリグリセリドの比および血漿遊離脂肪酸の比を、本発明に従う化合物による経口処置の８日後に測定する。これらのパラメーターを、コントロール動物（本発明に従う化合物で処理されていない動物）から得られるパラメーターと比較する：測定された差は、本発明に従う化合物の体重に対する効果および低脂肪血症効果を示す。
【図２−１】５、１０および５０mpkで投与される化合物１による処理の八日後の体重増加。
【図２−２】５、１０および５０mpkで投与される化合物１による処理の八日後の血漿コレステロールレベル。
【図２−３】５、１０および５０mpkで投与される化合物１による処理の八日後の血漿ＨＤＬコレステロールレベル。
【図２−４】５、１０および５０mpkで投与される化合物１による処理の八日後の血漿トリグリセリドレベル。
【図２−５】５、１０および５０mpkで投与される化合物１による処理の八日後の血漿遊離脂肪酸レベル。
【０１２９】
本発明に従う化合物の有効性は、肝臓組織において、脂質および／または糖質代謝およびエネルギー消費に関与する遺伝子の発現を測定することによっても評価される。遺伝子発現の各レベルは、参照遺伝子３６Ｂ４の発現レベルに関して正規化される。誘導係数、即ち、相対的シグナル（本発明に従う化合物により誘導される）とコントロール群で得られた相対的値の平均との比を次いで計算する。誘導係数が高ければ高い程、化合物は肝臓での遺伝子発現をより大きく促進する。最終結果は、各実験グループで得られた誘導値の平均として表わされる。
【図２−６】５、１０および５０mpkで投与される化合物１による処理の８日後の、Ｅ２／Ｅ２マウスの肝臓組織におけるＰＤＫ４（ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ、アイソフォーム４）の発現。
【図２−７】５、１０および５０mpkで投与される化合物１による処理の８日後の、Ｅ２／Ｅ２マウスの肝臓組織におけるＡｐｏＣＩＩＩ（アポリポタンパク質Ｃ３）の発現。
【０１３０】
図３−１〜３−５：本発明に従う化合物の、体重性、低脂血症およびＨＤＬコレステロールの合成を刺激する性質のＣ５７Ｂ１６マウスでのｉｎ−ｖｉｖｏ評価
本発明に従う化合物の効果を、本発明に従う化合物による経口処理の１４日後の、体重進展、血漿ＨＤＬコレステロールおよびトリグリセリドレベルを測定することによりＣ５７Ｂ１６マウスでｉｎ  ｖｉｖｏで評価する。これらのパラメーターをコントロール動物（本発明に従う化合物で処理されていない動物）で得られたパラメーターと比較する：測定された差は、本発明に従う化合物が体重に対して有する効果を示し、そしてそれらの低脂血症効果を示す。
【図３−１】３、１０および３０mpkで投与された化合物１による処理の１４日後の体重
【図３−２】３、１０および３０mpkで投与された化合物１による処理の１４日後の血漿ＨＤＬコレステロールレベル
【図３−３】３、１０および３０mpkで投与された化合物１による処理の１４日後の血漿トリグリセリドレベル。
【０１３１】
本発明に従う化合物の有効性は、肝臓組織において、脂質代謝に関与する遺伝子の発現を測定することによっても評価される。遺伝子発現の各レベルを、参照遺伝子３６Ｂ４の発現レベルに関して正規化する。次いで誘導係数を計算する。誘導係数が高ければ高い程、化合物は、肝臓での遺伝子発現をより大きく促進する。最終結果は、各実験グループで得られた誘導値の平均として表わされる。
【図３−４】３、１０および３０mpkで投与された化合物１による処理の１４日後の、Ｃ５７Ｂ１６マウスの肝臓組織におけるＰＤＫ４の発現
【図３−５】３、１０および３０mpkで投与された化合物１による処理の１４日後の、Ｃ５７Ｂ１６マウスの肝臓組織におけるＡｐｏＣＩＩＩの発現。
【０１３２】
図４−１〜４−９：本発明に従う化合物の、体重性、抗糖尿病性、低脂血症性およびＨＤＬコレステロールの合成を刺激する性質の、ｄｂ／ｄｂマウスでのｉｎ  ｖｉｖｏ評価
本発明に従う化合物の効果を、本発明に従う化合物による経口処理の２８日後の、体重進展、グルコースレベル、インスリンレベル、血漿全コレステロールおよびトリグリセリドレベルを測定することにより、および異なる血漿リポタンパク質画分におけるコレステロールの分布を解析することにより、ｄｂ／ｄｂマウスでｉｎ  ｖｉｖｏで評価する。これらのパラメーターをコントロール動物（本発明に従う化合物で処理されていない動物）で得られたパラメーターと比較する：測定された差は、本発明に従う化合物が体重、インスリン抵抗性に対して有する効果を示しそしてそれらの低脂血症効果を示す。
【図４−１】５０mpkで投与された化合物１による処理の２８日後の体重増加。
【図４−２】５０mpkで投与された化合物１による処理の２８日後の血糖症。
【図４−３】５０mpkで投与された化合物１による処理の２８日後のインスリン血症。
【図４−４】５０mpkで投与された化合物１および化合物３による処理の１４日後の血漿コレステロールレベル。
【図４−５】５０mpkで投与された化合物１および化合物３による処理の２８日後の異なる血漿リポタンパク質画分間のコレステロールの分布。
【図４−６】５０mpkで投与された化合物１および化合物３による処理の２８日後の血漿トリグリセリドレベル。
【図４−７】５０mpkで投与された化合物１および化合物３による処理の２８日後の血漿遊離脂肪酸レベル。
【０１３３】
本発明に従う化合物の有効性を、肝臓および筋肉（骨格）組織において、脂質および／または糖質代謝およびエネルギー散逸に関与する遺伝子の発現を測定することによっても評価する。遺伝子発現の各レベルを、肝臓組織における参照遺伝子３６Ｂ４の発現レベルに関して正規化し、または腓腹筋骨格筋（gastrocnemius skeletal muscle）における参照遺伝子１８Ｓの発現レベルに関して正規化する。誘導係数、即ち、相対的シグナル（本発明に従う化合物により誘導される）とコントロールグループで得られた相対的値の平均との比を次いで計算する。誘導係数が高ければ高い程、化合物は遺伝子発現をより大きく促進する。最終結果は、各実験グループで得られた誘導値の平均として表わされる。
【図４−８】５０mpkで投与された化合物１および化合物３による処理の２８日後のｄｂ／ｄｂマウスの肝臓組織におけるＰＤＫ４の発現。
【図４−９】５０mpkで投与された化合物１および化合物３による処理の２８日後のｄｂ／ｄｂマウスの骨格筋組織におけるＵＣＰ２（脱共役タンパク質２）の発現。
【図５】本発明に従う化合物で処理されそしてＰＭＡで刺激された単球によるＭＣＰ１の分泌を測定することによる本発明に従う化合物の抗炎症性のｉｎ−ｖｉｖｏ評価。
【０１３４】
本発明に従う化合物の抗炎症性効果を、本発明に従う化合物で２４時間処理されそしてＰＭＡ（細胞における炎症性応答およびマクロファージへのそれらの分化を促進するホルボール１２−ミリステート１３−アセテート）で同時に刺激されたＴＨＰ１単球によるＭＣＰ１（単球走化性タンパク質１）の分泌を測定することにより評価する。ＭＣＰ−１が少なく分泌されればされる程、本発明に従う化合物は炎症性反応をより大きく阻害する。
【０１３５】
統計的解析
統計的検定は、スチューデントのｔ検定（°/°°/°°°）および／または単変量ＡＮＯＶＡ分散分析、続くテューキー検定（*/**/***）からなる。結果をパラメーターｐの値：°/*：ｐ＜０．０５；°°/**：ｐ＜０．０１；°°°/***：ｐ＜０．００１に従ってコントロールグループと比較する。
【０１３６】
実施例
古典的試薬および触媒は市販されている（Aldrich, Alfa Aesar, Acros, FlukaまたはLancaster）。
【０１３７】
プロトンの核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ１Ｈ）は、Bruker AC300P分光計で測定された。化学シフトはｐｐｍ（百万当りの部）で表されそしてＮＭＲシグナルの分裂は通常の略号により表された。
【０１３８】
実施例１：本発明に従う化合物の合成のための一般的方法
本発明に従う化合物の大部分は、ＵＳ２００５１７６８０８特許に請求されおよび／または記載された化合物を使用して、下記する方法の１つに従って、特に還元により得られた。
他の化合物は、当業者が利用可能な類似した周知の製造方法に従って容易に得られた。
【０１３９】
一般的方法Ａ：トリエチルシランによるジフェニルプロペン−２−オンの還元
ジクロロメタン中のジフェニルプロパン−２−オンの溶液に、トリエチルシランを加え、次いでトリフルオロ酢酸を１滴ずつ（７．５当量）加えた。反応混合物を室温で攪拌しそして薄層クロマトグラフィーにより反応追跡を行った。反応混合物を水で洗浄した。水性層をジクロロメタンで抽出した。一緒にした有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥しそして真空中で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにかけた（分取ＨＰＬＣ、lichrospher(Merck) ＲＰ１８ １２μm100Å、カラム：25*250mm）。
【０１４０】
一般的方法Ｂ：テトラクロロシランによるジフェニルプロペン−２−オンの還元
アセトニトリル中のジフェニルプロパン−２−オンの溶液に、ヨウ化ナトリウムを加え、次いでテトラクロロシランを１滴ずつ加えた。反応混合物を室温で攪拌しそして薄層クロマトグラフィーにより反応追跡を行った。３０分〜２時間後に、混合物をクロロホルムと水とに分配した。水性層クロロホルムで抽出した。一緒にした有機相を亜硫酸ナトリウム上で乾燥し、次いで硫酸マグネシウム上で乾燥しそして真空中で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにかけた（分取ＨＰＬＣ、lichrospher(Merck) ＲＰ１８ １２μm100Å、カラム：25*250mm）。
【０１４１】
一般的方法Ｃ：炭素上のパラジウムによるジフェニルプロペン−２−オンの還元
エタノール中のジフェニルプロペン−２−オンの溶液に、触媒量の炭素上のパラジウム（１０％）を加えた。反応混合物を常圧で水素下に室温で攪拌する。触媒をろ過し、ろ液を真空中で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにかけた。
【０１４２】
一般的方法Ｄ：アルコール合成
エタノール中のジフェニルプロパン−３−オンの溶液に、水素化ホウ素ナトリウムを加えた。反応混合物を５０℃（１２２°Ｆ）で１６時間攪拌した。冷却した後に、反応混合物を加水分解しそして真空中で濃縮した。残留物をジクロロメタンと希塩酸溶液とに分配した。有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥しそして真空中で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにかけた（分取ＨＰＬＣ、lichrospher(Merck) ＲＰ１８ １２μm100Å、カラム：25*250mm）。
【０１４３】
一般的方法Ｅ：エーテル合成
触媒量のトリフルオロ酢酸の存在下に１／３：２／３水／アルコール混合物中のジフェニルプロパン−３−オールの溶液を60℃で16時間攪拌した。次いで反応混合物を真空中で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにかけた（分取ＨＰＬＣ、lichrospher(Merck) ＲＰ１８ １２μm100Å、カラム：25*250mm）。
【０１４４】
一般的方法Ｆ：オキシムおよびオキシムエーテルを使用する合成
ピリジン中のジフェニルプロパン−３−オンの溶液に、Ｏ−アルキルヒドロキシルアミン塩酸塩を加えた。１６時間の還流後に、反応混合物を真空中で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにかけた。
【０１４５】
実施例２：本発明に従う化合物の合成
化合物１：２−[２，６−ジメチル−４−[３−[４−（トリフルオロメトキシ）フェニル]−３−オキソ−プロピル]フェノキシ]−２−メチルプロパン酸
【化４２】
2009541270.tif 000043
この化合物を、２−[２，６−ジメチル−４−[３−[４−（トリフルオロメトキシ）フェニル]−３−オキソ−プロプ−２−エニル]フェノキシ]−２−メチルプロパン酸、１５当量のヨウ化ナトリウムおよび１５当量のテトラクロロシランを使用して、一般的方法Ｂに従って製造した。
外観：白色固体；Ｆ＝６４〜６６℃
【表１】
2009541270.tif 000044
【０１４６】
化合物２：２−[２，６−ジメチル−４−[３−[４−（トリフルオロメチルチオ）フェニル]−３−オキソ−プロピル]フェノキシ]−２−メチルプロパン酸
【化４３】
2009541270.tif 000045
この化合物を、２−[２，６−ジメチル−４−[３−[４−（トリフルオロメチルチオ）フェニル]−３−オキソ−プロプ−２−エニル]フェノキシ]−２−メチルプロパン酸および１当量のトリエチルシランを使用して一般的方法Ａに従って製造した。
外観：白色固体；Ｆ＝８３〜８５℃。
【表２】
2009541270.tif 000046
【０１４７】
化合物３：２−[２，６−ジメチル−４−[３−[４−ブロモフェニル]−３−オキソ−プロピル]フェノキシ]−２−メチルプロパン酸
【化４４】
2009541270.tif 000047
この化合物を、２−[２，６−ジメチル−４−[３−[４−ブロモフェニル]−３−オキソ−プロプ−２−エニル]フェノキシ]−２−メチルプロパン酸および１当量のトリエチルシランを使用して、一般的方法Ａに従って製造した。
外観：白色粘性油
【表３】
2009541270.tif 000048
【０１４８】
化合物４：２−[２，６−ジメチル−４−[３−[４−（トリフルオロメチル）フェニル]−３−オキソ−プロピル]フェノキシ]−２−メチルプロパン酸
【化４５】
2009541270.tif 000049
この化合物を、２−[２，６−ジメチル−４−[３−[４−（トリフルオロメチル）フェニル]−３−オキソ−プロプ−２−エニル]フェノキシ]−２−メチルプロパン酸および１当量のトリエチルシランを使用して一般的方法Ａに従って製造した。
外観：黄色がかった粘性油。
【表４】
2009541270.tif 000050
【０１４９】
化合物５：２−[４−[３−[４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル]−３−オキソ−プロピル]フェニルチオ]−２−メチルプロパン酸
【化４６】
2009541270.tif 000051
この化合物を、２−[４−[３−[４−クロロ−２−ヒドロキシフェニル]−３−オキソ−プロプ−２−エニル]フェニルチオ]−２−メチルプロパン酸および５当量のヨウ化ナトリウムおよび５当量のテトラクロロシランを使用して一般的方法Ｂに従って製造した。
外観：白色固体；Ｆ＝１３６〜１３７℃。
【表５】
2009541270.tif 000052
【０１５０】
化合物６：２−[２−メチル−４−[３−[４−（３，３，３−トリフルオロプロピルオキシ）フェニル]−３−オキソ−プロピル]フェノキシ]−２−メチルプロパン酸
【化４７】
2009541270.tif 000053
この化合物を、２−（４−（３−（４−ヒドロキシフェニル）−３−オキソ−プロプ−１−エニル）−２−メチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸テルチオブチルエステルを使用して一般的方法Ｃに従う還元、次いでＵＳ２００５／１７６８０８に記載の方法に従うこのフェノールのＯ−アルキル化およびテルチオブチルエステルの酸加水分解により製造した。
外観：無色の粘性油
【表６】
2009541270.tif 000054
【０１５１】
化合物１０：２−[４−（３−メトキシ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ]−２−メチルプロパン酸
【化４８】
2009541270.tif 000055
この化合物を、水／メタノールの１／３：２／３混合物中の２−（４−（３−ヒドロキシ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸の溶液を使用して一般的方法Ｅに従って製造した。
外観：無色粘性油
【表７】
2009541270.tif 000056
【０１５２】
化合物１２：２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化４９】
2009541270.tif 000057
この化合物を、２−（４−（３−（４−ヒドロキシフェニル）−３−オキソ−プロプ−１−エニル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸テルチオブチルエステルを使用する一般的方法Ｃに従う還元、次いでＵＳ２００５１７６８０８に従うこのフェノールのＯ−アルキル化およびテルチオブチルエステルの酸加水分解により製造した。
外観：白色固体；Ｆ＝９８〜９９℃。
【表８】
2009541270.tif 000058
【０１５３】
化合物１７：２−（４−（３−（２−フルオロ−４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）−３−オキソ−プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化５０】
2009541270.tif 000059
この化合物を、２−（４−（３−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−３−オキソ−プロプ−１−エニル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸テルチオブチルエステルを使用する一般的方法Ｃに従う還元、次いで特許ＵＳ２００５１７６８０８に従うこのフェノールのＯ−アルキル化およびテルチオブチルエステルの酸加水分解により製造した。
外観：無色粘性油
【表９】
2009541270.tif 000060
【０１５４】
化合物３０：２−[４−（３−ヒドロキシ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ]−２−メチルプロパン酸
【化５１】
2009541270.tif 000061
この化合物を、２−[２，６−ジメチル−４−[３−[４−（トリフルオロメチルオキシ）フェニル]−３−オキソ−プロピル]フェノキシ]−２−メチルプロパン酸および４当量の水素化ホウ素ナトリウムを使用して一般的方法Ｄに従って製造した。
外観：無色粘性油
【表１０】
2009541270.tif 000062
【０１５５】
化合物３３：２−（４−（３−（メトキシイミノ）−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）−２，６−ジメチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化５２】
2009541270.tif 000063
この化合物を、２−[２，６−ジメチル−４−[３−[４−（トリフルオロメトキシ）フェニル]−３−オキソ−プロピル]フェノキシ]−２−メチルプロパン酸を使用して一般的方法Ｆに従って製造した。
外観：黄色がかった粘性油
【表１１】
2009541270.tif 000064
【０１５６】
化合物３５：２−（２，６−ジメチル−４−（３−オキソ−３−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロピル）フェノキシ）−２−メチルプロパン酸テルチオブチルエステル
【化５３】
2009541270.tif 000065
この化合物を、３−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメチルフェニル）−１−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）プロパン−１−オンを使用する一般的方法Ｃに従う還元、次いで特許ＵＳ２００５１７６８０８に従うこのフェノールのＯ−アルキル化およびテルチオブチルエステルの酸加水分解により製造した。
外観：無色粘性油
【表１２】
2009541270.tif 000066
他の化合物は、方法Ａ〜Ｆと同様なそして当業者が実施するのが容易な方法にしたがって得られた。
【０１５７】
実施例３：本発明に従う化合物のＰＰＡＲ活性化性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価
本発明に従う化合物のＰＰＡＲ活性化性をｉｎ  ｖｉｔｒｏで評価する。
原理
酵母のＧａｌ４転写因子のＤＮＡ結合ドメインおよび異なるＰＰＡＲｓのリガンドへの結合ドメインからなるキメラの転写活性を測定することにより、サル腎臓繊維芽細胞系（ＣＯＳ−７）を使用してＰＰＡＲｓの活性化をｉｎ  ｖｉｔｒｏで評価する。化合物を、Ｇａｌ４−ＰＰＡＲα、γおよびδキメラに対して１０−７〜１００μMの用量で試験する。
【０１５８】
プロトコール
細胞の培養
ＣＯＳ−７細胞は、ＡＴＣＣ（American type culture collection）から得られそしてウシ胎仔血清１０％（容積／容積）、ペニシリン１００U/ml（Gibco, Paisley, UK）およびＬ−グルタミン２mM（Gibco, Paisley, UK）を補充されたＤＭＥＭ（ダルベッコの改変イーグル培地）培地中で培養される。細胞を、５％ＣＯ２を含有する湿った雰囲気中で３７℃にてインキュベーションする。
【０１５９】
トランスフェクションで使用されるプラスミドの説明
プラスミドGal4(RE)_TkpGL3、pGal4-hPPARα、pGal4-hPPARγ、pGal4-hPPARδおよびpGal4-φは、文献に記載されている（Raspe E et al., 1999）。構築物pGal4-hPPARα、pGal4-hPPARγ、pGal4-hPPARδは、ＰＣＲにより増幅されそしてヒトＰＰＡＲα、ＰＰＡＲγおよびＰＰＡＲδ核内レセプターのＤＥＦドメインに相当するＤＮＡフラグメントのpGal4-φベクターにおけるクローニングにより得られた。
【０１６０】
トランスフェクション
懸濁液中のＣＯＳ−７細胞を、１０％ウシ胎仔血清の存在下に１／１０のpGal4-PPAR／Gal4(RE)_TkpGL3比で、ウエル当たりＤＮＡ１５０ngでトランスフェクションする。細胞を９６ウエルプレート（４×１０４細胞／ウエル）においてプレートし、次いで３７℃で２４時間インキュベーションする。試験化合物による活性化を血清なしの培地中で３７℃で２４時間行う。実験の終りに、細胞を溶解させそしてルシフェラーゼ活性を、Steady-Lite（商標）HTS（Perkin Elmer）またはSteady Glow Luciferase（Promega）を使用して供給者の推奨に従って決定する。
【０１６１】
結果
本発明に従う化合物を、３つのＰＰＡＲアイソフォームに関して試験した。化合物１、２、３、４、５および７で得られる結果は、図（１−１）〜（１−８）に詳しく述べられている。
本発明者等は、プラスミドpGal4-hPPARでトランスフェクションされそして本発明に従う化合物で処理された細胞におけるルシフェラーゼ活性の有意なかつ用量依存性の増加を示した。
意外にも、提示された実験データは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで、本発明に従う化合物はｉｎ  ｖｉｔｒｏでＰＰＡＲｓに結合しそして転写活性の活性化を誘導することを示す。
【０１６２】
実施例４：本発明に従う化合物の、体重性、低脂血症性およびＨＤＬコレステロールの合成を刺激する性質の、ＡｐｏＥ２／Ｅ２マウスでのｉｎ−ｖｉｖｏ評価
原理
本発明に従う化合物の、体重および低脂血症性をもたらす性質を、本発明に従う化合物による異脂肪血症Ｅ２／Ｅ２マウスの処理後に体重および血漿脂質を測定することにより、そしてＰＰＡＲｓの遺伝子ターゲットの遺伝子発現を解析することによりｉｎ  ｖｉｖｏで評価する。
【０１６３】
使用されたマウスモデルは、ＡｐｏＥ２／Ｅ２マウス、即ち、ヒトアポリポタンパク質ＥアイソフォームＥ２を有するトランスジェニックマウス（Sullivan PM et al., 1998）である。ヒトでは、このアポリポタンパク質、低密度リポタンパク質および超低密度リポタンパク質（ＬＤＬ−ＶＬＤＬ）の構成成分は、３つのアイソフォームＥ２、Ｅ３およびＥ４において存在する。Ｅ２形態は位置１５８のアミノ酸に影響を与える突然変異を与え、これはレセプターのためのこのタンパク質のＬＤＬレセプターへのアフィニティーを相等弱くする。したがって、ＶＬＤＬクリアランスは、殆ど存在しない。次いで低密度リポタンパク質の蓄積が、タイプＩＩＩとして知られた混合高脂血症（高いコレステロールおよびトリグリセリド比）と共に起こる。
【０１６４】
ＰＰＡＲαは、脂質の輸送（ＡＰＯ  Ａｌ、ＡＰＯ  ＡｌｌおよびＡｐｏ  ＣＩＩＩなどのアポリポタンパク質、ＦＡＴなどの膜輸送体）および脂質の異化作用（ＡＣＯ、ＣＰＴ−ＩまたはＣＰＴ−ＩＩ、脂肪酸β酸化酵素）に関与する遺伝子の発現を調節する。従って、ヒトおよびげっ歯類におけるＰＰＡＲαアクチベーターによる処理は、循環しているトリグリセリドレベルの減少をもたらす。本発明に従う化合物による処理後に血漿脂質比を測定することは、本発明に従う化合物のＰＰＡＲアゴニスト性および低脂血症効果を評価することを可能とする。
【０１６５】
げっ歯類におけると同じくヒトにおけるＰＰＡＲアクチベーターによる処理は、時には血漿ＨＤＬコレステロール比の上昇ももたらす。したがって、血漿ＨＤＬコレステロール比を測定することは、ＨＤＬコレステロール合成に対する本発明に従う化合物の刺激効果を示すことを可能とする。
【０１６６】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏで先に測定されたＰＰＡＲαのアゴニスト性は、肝臓において、直接ＰＰＡＲαのコントロール下にターゲット遺伝子の過発現をもたらすであろう。この実健で本発明者等が研究した遺伝子は、Ａｐｏ  ＣＩＩＩ（脂質代謝に関与するアポリポタンパク質）およびＰＤＫ−４（糖質代謝酵素に関与する酵素）である。したがって、本発明に従う化合物による処理後に、ＰＰＡＲαターゲット遺伝子の転写活性を測定することは、本発明に従う化合物の低脂血症性を評価することを可能とする。
【０１６７】
プロトコール
動物の処理
ＡｐｏＥ２／Ｅ２トランスジェニックマウスを２０±３℃の定温で１２時間／１２時間明／暗サイクルに保った。１週間の順応期間後に、マウスを体重測定しそして、実験前に決定された体重および血漿脂質比の分布を均一にするように選ばれた６匹の動物のグループに分けた。試験された化合物をカルボキシメチルセルロース（Sigma C4888）中に懸濁させそして選ばれた投薬量で８日間１日１回、胃内管供給により投与する。動物は、食物および水（標準食餌）への自由な接近を有していた。食物の摂取および体重増加を実験全体にわたり記録する。実験の終りに、動物を４時間絶食後に麻酔し、（ＥＤＴＡ）抗凝固薬を使用して血液サンプルを採取した、次いでマウスを体重測定しそして安楽死させた。３０００回転／分での２０分間の遠心により血漿を調製した。サンプルを＋４℃に保った。
肝臓サンプルを取り出し、液体窒素中で凍結させ、次いでその後の解析のために−８０℃に保った。
【０１６８】
血漿脂質の測定
血漿脂質濃度（全コレステロールおよびトリグリセリド）は、供給者の推奨に従って酵素投薬量（enzymatic dosages）（bioMerieux-Lyon-France）により測定する。
血漿コレステロールおよびトリグリセリトド比を、本発明に従う化合物による経口処理の８日後に測定する。これらの比を、コントロール動物（本発明に従う化合物で処理されていない）で得られる比と比較する。測定された差は、本発明に従う化合物の低脂血症効果を示す。
【０１６９】
ＨＤＬコレステロールの測定
低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬおよびＬＤＬ）を、リンタングステン酸塩により沈澱させる。沈澱を、遠心により除去する。上清中に存在するＨＤＬコレステロールは、供給者の推奨に従って酵素投薬量 （bioMerieux-Lyon-France）により測定する。
【０１７０】
定量的ＲＴ−ＰＣＲによる遺伝子発現解析
全ＲＮＡを、製造者の指示に従ってNucleoSpin（登録商標）９６RNAキット（Macherey Nagel, Hoerdt, France）を使用することにより肝臓断片から抽出する。
【０１７１】
次いで、全ＲＮＡ１μg（Ribogreen RNA 定量キット（Molecular Probes）を使用することにより定量された）を、１Ｘバッファー（Sigma）、ＤＴＴ１．５mM、ｄＮＴＰｓ（Promega）０．１８mM、ｐｄＮ６（Amersham）２００ng、ＲＮａｓｅ阻害剤（Sigma）３０UおよびＭＭＬＶ−ＲＴ（Sigma）１μlを含有する２０μlの全容積において３７℃で１時間の反応によって相補性ＤＮＡに逆転写する。
【０１７２】
ＭｙｉＱ単色リアルタイムＰＣＲ検出システム（Biorad, Marnes-la-Coquette, France）を使用してＰＣＲ定量実験を行い、そして製造者の推奨に従ってｉQ SYBR Green Supermixキットを使用して、９６ウエルプレートにおいて希釈した逆転写溶液５μlにおいて５５℃のハイブリダイゼーション温度で行なった。研究された遺伝子の特定のプライマー対を使用した：
【表１３】
2009541270.tif 000067
2009541270.tif 000068
【０１７３】
放射された蛍光の量は、反応の開始時に存在しそしてＰＣＲ期間中増幅されたｃＤＮＡの量に直接比例している。研究された各ターゲットについて、ある範囲の溶液が、数μlの異なる逆転写溶液からなる混合物の逐次希釈により行われる。かくして、各ターゲットの相対的発現レベルは、ＰＣＲ溶液の範囲に対して点で得られた有効性曲線を使用することにより決定される。
次いで、関心のある遺伝子の発現レベルを参照遺伝子３６Ｂ４（その特異的プライマーは、
【表１５】
2009541270.tif 000069
である）
の１つに関して正規化する。
誘導係数：即ち、相対的シグナル（本発明に従う化合物により誘導された）とコントロールグループで得られた相対的値の平均との比を、次いで各サンプルについて計算する。誘導係数が高ければ高い程、化合物は遺伝子発現をより大きく促進する。最終結果は、各実験グルー得られた誘導値の平均として表わされる。
【０１７４】
結果
体重
図２〜１は、５、１０および５０mpkで投与された化合物１による処理の８日後に動物の重量増加をコントロール動物の体重の増加と比較する。意外にも、化合物１で処理された動物において重量損失が測定された。
血漿脂質の測定
図２−２および２−３は、５、１０および５０mpkで化合物１による処理の８日後に、血漿全コレステロールおよびＨＤＬコレステロール比を、コントロール動物で得られた比と比較する。意外にも、循環している全コレステロール比は有意に減少しそしてＨＤＬコレステロール比は処理により有意に増加した。
【０１７５】
図２〜４および２〜５は、５、１０および５０mpkで投与された化合物１による処理の８日後に血漿トリグリセリドおよび遊離脂肪酸比をコントロール動物で得られた比と比較する。意外にも、循環しているトリグリセリドおよび遊離脂肪酸の比は処理により極めて有意に減少した。
【０１７６】
定量ＲＴ−ＰＣＲによる遺伝子発現解析
本発明者等は、本発明に従う化合物が、ｉｎ  ｖｉｖｏで、ＰＰＡＲｓターゲット遺伝子発現のレギュレーターであることを示した。図２〜６および２〜７に提示された結果は、Ｅ２／Ｅ２マウスに８日間５、１０および５０mpkで投与された化合物１がＰＤＫ４をコードする遺伝子の肝臓での発現の有意な増加を誘導し（図２〜６）そしてＡｐｏＣＩＩＩをコードする遺伝子の肝臓での発現の減少を誘導する（図２〜７）ことを示す。脂質および糖質代謝に特異的に関与する酵素のためのすべてのコード遺伝子およびその発現が本発明に従う化合物によりモデュレーションされるという事実は、これらの化合物がメタボリック病理の処置のための大きな潜在力を与えるという考えを強化する。
【０１７７】
結論
意外にも、提示された実験データは、本発明に従う化合物が、ｉｎ  ｖｉｖｏで、体重損失を誘導しそしてＨＤＬコレステロール合成および低脂血症効果（トリグリセリドおよび遊離脂肪酸の血漿レベルの減少）を刺激することを示す。更に、提示された実験データは、本発明に従う化合物が、脂質および糖質代謝に特異的に関与する酵素をコードするＰＰＡＲｓの活性化により調節される遺伝子の発現をモデュレーションすることを示す。
【０１７８】
実施例５：本発明に従う化合物の、体重性、低脂血症性、およびＨＤＬコレステロールの合成を刺激する性質の、Ｃ５７Ｂ１６マウスでのｉｎ  ｖｉｖｏ評価
原理
本発明に従う化合物の体重に対する効果およびそれらの低脂血症性を、本発明に従う化合物で異脂肪血症Ｃ５７Ｂ１６マウス処理後に、体重および血漿脂質を測定することによりおよびＰＰＡＲｓターゲット遺伝子の遺伝子発現を解析することにより、ｉｎ  ｖｉｖｏで評価する。
【０１７９】
プロトコール
動物の処理
雌Ｃ５７Ｂ１６マウスを２０±３℃の定温で１２時間／１２時間明／暗サイクルに保った。１週間の順応期間の後に、マウスを、実験の前に決定された体重および血漿脂質の分布が均一であるように選ばれた６匹の動物のグループに分けた。試験される化合物をカルボキシメチルセルロース（Sigma C4888）中に懸濁させそして選ばれた用量で１４日間１日１回、胃ガバージュにより動物に投与する。動物は、食物および水（標準食餌）への自由な接近を有していた。食物の摂取および体重増加を実験全体にわたり記録する。実験の終りに、４時間絶食後に動物を麻酔し、抗凝固薬（ＥＤＴＡ）に基づいて血液サンプルを採取した。次いでマウスを体重測定しそして安楽死させた。３０００回転／分での２０分間の遠心により血漿を分離した。サンプルを＋４℃に保った。
肝臓組織サンプルを取り出し、液体窒素中に凍結し、次いで後の解析のために−８０℃に保った。
【０１８０】
ＨＤＬコレステロールの測定
低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬおよびＬＤＬ）を、リンタングステン酸塩により沈澱させる。沈澱を、遠心により除去する。上清中に存在するＨＤＬコレステロールは、供給者の推奨に従って酵素アッセイ（bioMerieux-Lyon-France）により測定する。
【０１８１】
血漿トリグリセリドの測定
供給者の推奨に従って酵素アッセイ（bioMerieux-Lyon-France）により、血漿トリグリセリド濃度を測定した。
【０１８２】
定量的ＲＴ−ＰＣＲによる遺伝子発現解析
全ＲＮＡを、製造者の指示に従ってNucleoSpin（登録商標）９６ＲＮＡキット（Macherey Nagel, Hoerdt, France）を使用することにより肝臓断片から抽出する。
【０１８３】
次いで、全ＲＮＡ１μg（分光光度法により定量された）を、１Ｘバッファー（Sigma）、ＤＴＴ１．５mM、ｄＮＴＰｓ（Promega）０．１８mM、ｐｄＮ６（Amersham）２００ng、ＲＮａｓｅ阻害剤（Sigma）３０UおよびＭＭＬＶ−ＲＴ（Sigma）１μlを含有する２０μlの全容積において３７℃で１時間の反応によってｃＤＮＡに逆転写する。
【０１８４】
ＰＣＲ定量実験を、ＭｙｉＱ単色リアルタイムＰＣＲ検出システム（Biorad, Marnes-la-Coquette, France）を使用して行いそして供給者の推奨に従ってｉQ SYBR Green Supermixキットを使用して、９６ウエルプレートで希釈した逆転写溶液５μlにおいて５５℃のハイブリダイゼーション温度で行なった。研究された遺伝子の特異的プライマー対を使用した：
【表１６】
2009541270.tif 000070
【表１７】
2009541270.tif 000071
【０１８５】
放射された蛍光の量は、反応の開始時に存在しそしてＰＣＲ期間中増幅されたｃＤＮＡの量に直接比例している。研究された各ターゲットについて、ある範囲の溶液が、数μlの異なる逆転写溶液からなる混合物の逐次希釈により行われる。かくして、各ターゲットの発現の相対的レベルは、上記範囲に対して点で得られた有効性曲線を使用することにより決定される。
次いで、関心のある遺伝子の発現レベルを参照遺伝子３６Ｂ４（その特異的プライマーは、
【表１８】
2009541270.tif 000072
である）
の発現レベルに関して正規化した。
次いで各サンプルに対する誘導係数を計算した。誘導係数が高ければ高い程、化合物は遺伝子発現をより大きく促進する。最終結果は、各実験グループで得られた誘導値の平均として表わされる。
【０１８６】
結果
体重
図３〜１は、３、１０および３０mpkで投与された化合物１による処理の１４日後に動物の重量増加をコントロール動物の体重の増加と比較する。意外にも、重量損失を化合物１で処理された動物において測定した。
【０１８７】
血漿脂質の測定
図３−２は、３、１０および３０mpkで投与された化合物１による処理の１４日後に、血漿ＨＤＬコレステロール比を、コントロール動物で得られた比と比較する。意外にも、循環しているＨＤＬコレステロールの比は処理により極めて有意に増加した。
【０１８８】
図３−３は、３、１０および３０mpkで投与された化合物１による処理の１４日後に、血漿トリグリセリド比を、コントロールで得られた比と比較する。意外にも、循環しているトリグリセリド比は処理により極めて有意に減少した。
【０１８９】
定量ＲＴ−ＰＣＲによる遺伝子発現解析
本発明者等は、本発明に従う化合物が、ｉｎ  ｖｉｖｏで、ＰＰＡＲｓターゲット遺伝子発現のレギュレーターであることも示した。図３〜４および３〜５に提示された結果は、Ｃ５７Ｂ１６マウスに１４日間３、１０および３０mpkで投与された化合物１がＰＤＫ４をコードする遺伝子の肝臓での発現の有意な増加を誘導し（図３〜４）そしてＡｐｏＣＩＩＩをコードする遺伝子の肝臓での発現の減少を誘導する（図３〜５）ことを示す。脂質および糖質代謝に特異的に関与する酵素をコードするすべての遺伝子およびそれらの発現が本発明に従う化合物によりモデュレーションされるという事実は、これらの化合物がメタボリック病理の処置のための大きな潜在力を有するという考えを強化する。
【０１９０】
結論
意外にも、提示された実験データは、本発明に従う化合物が、ｉｎ  ｖｉｖｏで、体重損失を誘導し、ＨＤＬコレステロール合成を刺激し、低脂血症効果（トリグリセリドの血漿レベルの減少）を有することを示す。更に、提示された実験データは、本発明に従う化合物が、脂質および炭水化物代謝に特異的に関与する酵素をコードするＰＰＡＲｓの活性化により調節される遺伝子の発現をモデュレーションすることを示す。
【０１９１】
実施例６：本発明に従う化合物の、体重性、抗糖尿病性、低脂血症性およびＨＤＬコレステロールの合成を刺激する性質の、ｄｂ／ｄｂマウスでのｉｎ  ｖｉｖｏ評価
原理
本発明に従う化合物の体重、インスリン抵抗性に対する効果およびそれらの低脂血症性を、本発明に従う化合物によるｄｂ／ｄｂマウスの経口処理後に、体重および血漿グルコースおよびインスリンの比、血漿脂質の比を測定することにより、そして異なる血漿リポタンパク質画分におけるコレステロールの分布およびＰＰＡＲｓターゲット遺伝子の遺伝子発現の分布を解析することにより、ｉｎ  ｖｉｖｏで評価する。
【０１９２】
プロトコール
動物の処理
雌ｄｂ／ｄｂマウスを２０±３℃の定温で１２時間／１２時間明／暗サイクルに保った。１週間の順応期間の後に、マウスを、体重測定し、そして実験の前に決定されたマウスの体重および血漿脂質比の分布を均一にするように選ばれた８匹の動物のグループに分けた。試験される化合物をカルボキシメチルセルロース（Sigma C4888）中に懸濁させそして選ばれた用量で２８間１日１回、胃内管供給により投与する。動物は、食物および水（標準食餌）に自由に接近できた。食物の摂取および体重増加を実験全体にわたり記録する。実験の終りに、４時間絶食後に動物を麻酔し、抗凝固薬（ＥＤＴＡ）を使用して血液サンプルを採取し、次いでマウスを体重測定しそして安楽死させた。３０００回転／分での２０分間の遠心により血漿を分離した。サンプルを＋４℃に保った。
肝臓組織および骨格筋組織サンプルを採取し、液体窒素中に直ちに凍結し、次いで後の解析のために−８０℃で保存した。
【０１９３】
血漿血糖症およびインスリン血症の測定
グルコースＲＴＵキット（Biomerieux）を使用する酵素比色法に従ってマウス血漿グルコースを測定する。グルコースを、グルコースオキダーゼの作用下にグルコン酸に転換し；この反応は過酸化水素を放出する。ペルオキシダーゼの作用下に、かつフェノールとアミノ−４−アンチピリンの存在下に水と着色生成物、キノンイミンを生成するトリンダー反応に従って過酸化水素を測定する。キノンイミンによる色強度は、サンプル中に存在するグルコースの量に比例する。
【０１９４】
ＥＬＩＳＡ法（供給者Crystal chemからのINSKR020キットを使用して）を使用してマウスインスリンを測定する。マイクロプレートをマウス抗インスリン抗体でコーティングする。次いで、インスリンについてアッセイされるべき血清をプレート上に置く。モルモット抗インスリン抗体を使用して、マウスインスリンと抗インスリンモノクローナル抗体により形成された複合体を認識する。最後に、ペルオキダーゼで標識された抗モルモット抗体を加えそしてモルモット抗インスリン抗体に結合させる。ＯＰＤ（オルトフェニルジアミン）酵素基質を加えることにより比色反応を行う。色の強度はサンプル中に存在するインスリンの量に比例する。
【０１９５】
血漿脂質の測定
供給者の推奨に従って酵素アッセイ（bioMerieux-Lyon-France）により、血漿脂質濃度（全コレステロールおよびトリグリセリド）を測定する。
【０１９６】
血漿リポタンパク質画分へのコレステロールの分布の解析
血漿中の異なる脂質画分（ＶＬＤＬ、ＬＤＬ、ＨＤＬ）を、ゲルろ過クロマトグラフィーを使用して分離した。次いでコレステロール濃度を、供給者の推奨に従う酵素アッセイ（bioMerieux-Lyon-France）により各画分について測定した。
【０１９７】
定量的ＲＴ−ＰＣＲによる遺伝子発現解析
肝臓組織
全ＲＮＡを、製造者の指示に従ってNucleoSpin（登録商標）９６RNAキット（Macherey Nagel, Hoerdt, France）を使用することにより肝臓断片から抽出する。
【０１９８】
骨格組織
全ＲＮＡを、製造者の指示に従ってRNeasy（登録商標） Fibrous Tissue kit（Qiagen）を使用する腓腹筋骨格筋画分から抽出した。
【０１９９】
次いで、全ＲＮＡ（分光光度法により定量された）１μgを、１Ｘバッファー（Sigma）、ＤＴＴ１．５mM、ｄＮＴＰｓ（Promega）０．１８mM、ｐｄＮ６（Amersham）２００ng、ＲＮａｓｅ阻害剤（Sigma）３０UおよびＭＭＬＶ−ＲＴ（sigma）１μlを含有する２０μlの全容積において３７℃で１時間の反応によって相補性DNAに逆転写した。
【０２００】
ＰＣＲ定量実験を、MyiQ単色リアルタイムＰＣＲ検出システム（Biorad, Marnes-la-Coquette, France）を使用して行いそして製造者の推奨に従ってｉQ SYBR Green Supermixキットを使用して、９６ウエルプレートにおいて希釈された逆転写溶液５μl中で５５℃のハイブリダイゼーション温度で行なった。研究されるべき遺伝子の特異的プライマー対を使用した：
【表１９】
2009541270.tif 000073
【表２０】
2009541270.tif 000074
【０２０１】
放射された蛍光の量は、反応の開始時に存在しそしてＰＣＲ期間中増幅された相補性ＤＮＡの量に直接比例している。研究された各ターゲットについて、ある範囲の溶液が、数μlの異なる逆転写溶液の混合物の逐次希釈により行われる。かくして、各ターゲットの相対的発現レベルは、ＰＣＲ溶液の範囲に対して点で得られた有効性曲線を使用することにより決定される。
【０２０２】
次いで、関心のある遺伝子の発現レベルを、肝臓において、参照遺伝子３６Ｂ４（その特異的プライマーは、
【表２１】
2009541270.tif 000075
である）の発現レベルに関して正規化し、そして骨格筋組織において、参照遺伝子３６Ｂ４（その特異的プライマーは、
【表２２】
2009541270.tif 000076
である）の発現レベルに関して正規化する。次いで各サンプルに対する誘導係数を計算した。誘導係数が高ければ高い程、化合物は遺伝子発現をより多く促進する。最終結果は、各実験グループ内の誘導値の平均として表わされる。
【０２０３】
結果
体重
図４〜１は、５０mpkで投与された化合物１による処理の２８日後に動物の重量増加をコントロール動物の重量増加と比較する。意外にも、重量損失が化合物１で処理された動物において認められた。
【０２０４】
血糖症およびインスリン血症の測定
図４−２および４−３は、５０mpkで投与された化合物１による処理の２８日後の血漿グルコースおよびインスリンレベルを比較する。意外にも、血糖症およびインスリン血症は、処理により有意に減少する。
【０２０５】
血漿脂質の測定
図４−４は、５０mpkで投与された化合物１および３による処理の２８日後に、全血漿コレステロール比を、コントロール動物で得られた比と比較する。意外にも、全コレステロール比は有意に増加した。
図４−５は、全血漿コレステロールのこの増加は、５０mpkで投与された化合物１および３による動物の処理により誘導されたＨＤＬコレステロール画分の有意な増加に相当することを示す。
図４−６および４７は、５０mpkで投与された化合物１および３による処理の２８日後に血漿トリグリセリドおよび遊離脂肪酸比を、コントロール動物から得られた比と比較する。以外にも、循環しているトリグリセリドおよび遊離脂肪酸比は処理により極めて有意に減少した。
【０２０６】
定量ＲＴ−ＰＣＲによる遺伝子発現解析
本発明者等は、本発明に従う化合物が、ｉｎ  ｖｉｖｏで、ＰＰＡＲｓターゲット遺伝子発現のレギュレーターであることも示した。図４−８および４−９に提示された結果は、ｄｂ／ｄｂマウスに２８日間５０mpkで投与された化合物１および３がＰＤＫ４をコードする遺伝子の肝臓での発現の有意な増加を誘導し（図４−８）、そして骨格筋においてＵＣＰ２をコードする遺伝子の発現の減少を誘導する（図４−９）ことを示す。脂質および糖質代謝ならびにエネルギー消費に特異的に関与する酵素をコードするすべての遺伝子、およびそれらの発現が本発明に従う化合物によりモデュレーションされるという事実は、これらの化合物がメタボリック病理の処置のための大きな潜在力を有するという考えを強化する。
【０２０７】
結論
意外にも、提示された実験データは、本発明に従う化合物が、ｉｎ  ｖｉｖｏで、体重損失およびインスリン感受性の改善を誘導し、そしてＨＤＬコレステロール合成を刺激しそして低脂血症効果を有する（血漿トリグリセリド比の減少をもたらす）ことを示す。更に、提示された実験データは、本発明に従う化合物が、ＰＰＡＲｓの活性化により調節されそして脂質および糖質代謝ならびにエネルギー消費に特異的に関与する酵素をコードする遺伝子の発現をモデュレーションすることを示す。
【０２０８】
実施例７：本発明に従う化合物の抗炎症性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ評価
原理
本発明に従う化合物の抗炎症性効果は、本発明従う化合物で２４時間処理されそしてＰＭＡ（細胞における炎症性応答およびマクロファージへの細胞の分化を促進するホルボール１２−ミリステート１３−アセテート）により同時に刺激された単球によるＭＣＰ−１（単球化学走化性タンパク質１）の分泌を測定することにより評価された。ＭＣＰ−１の分泌が少なければ少ない程、本発明に従う化合物による炎症性反応の阻害はより大きい。
【０２０９】
プロトコール
ＴＨＰ−１細胞の培養および処理
ＴＨＰ−１ヒト単球系（ＡＴＣＣソース）を、２５mM Hｅｐｅｓ（Gibco; 42401-018）、１％グルタミン（Gibco; 25030-24）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Biochrom AG; A2213）および補充されていない（decomplemented）１０％ウシ胎仔血清（SVF. Gibco; 26050-088）を有するＲＰＭＩ１６４０培地中で培養する。
【０２１０】
細胞を、８７０，０００細胞／ウエルの密度で２４ウエルプレート（Primaria BD Falcon）でプレートし、次いで、ホルボール１２−ミリステート１３−アセテート（ＰＭＡ）５ng/mlおよび本発明に従う化合物３、１μM、の存在下に０．２％ウシ胎仔血清を含有する培養培地中で２４時間３７℃および５％ＣＯ２でインキュベーションした。本発明に従う化合物をジメチルスルホキシド（DMSO, Fluka; 41640）中に溶解する。本発明に従う化合物の効果をＤＭＳＯのみの効果と比較する。
【０２１１】
ＭＣＰ−１の分泌の測定
処理培地を回収しそしてＭＣＰ−１濃度を、製造者の推奨に従ってＥＬＩＳＡキット≪Human MCP-1 ELISA Set≫（BD OptEIA; 555179）を使用して測定する。
【０２１２】
ＭＣＰ−１をプレート上に置きそして抗ＭＣＰ−１特異的抗体により認識される。この特異的抗体は、ペルオキシダーゼ酵素とカップリングされた第２抗体によりそれ自体特異的に認識される。酵素活性から生じる着色は、固定されたＭＣＰ１の量に比例しそして分光光測により測定されうる。範囲は既知の濃度を表わす点から行われ、そしてそれから各サンプルのＭＣＰ１濃度が計算される。
【０２１３】
次いで、誘導係数、即ち、本発明に従う化合物により誘導されるシグナルとコントロールグループにより誘導されるシグナルとの比を計算する。この係数が弱ければ弱い程、化合物はＭＣＰ１の分泌をより大きく阻害する。最終結果は、各実験グループで得られた誘導値の平均として表わされる。
【０２１４】
結果
本発明者等は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ単球で、本発明に従う化合物が抗炎症性効果を有することを示した。図５に提示された結果は、本発明に従う化合物３が、１μMで、単球により分泌されるＭＣＰ１の有意な減少を誘導することを示す。
【０２１５】
結論
意外にも、開示された実験データは、本発明に従う化合物がＰＭＡにより刺激された単球に対する抗炎症性効果を有することを示す。
【０２１６】
一般的結論
本発明者等は、本発明に従う化合物が、体重損失をもたらし、低脂血症性を有し、コレステロールおよび血漿トリグリセリドのレベルを減少させ、ＨＤＬコレステロール合成を刺激し、そして抗糖尿病性を有することを示した。更に、本発明者等は、本発明に従う化合物が、脂質および糖質代謝並びにエネルギー消費に特異的に関与する酵素をコードする遺伝子の発現の調節を可能とすることを示した。
【０２１７】
本発明者等は、本発明に従う化合物が抗炎症性を有することも示した。
【０２１８】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏで得られたこれらの結果は、異脂肪血症、二型糖尿病および肥満などの主要な病理を処置するための本発明に従う化合物の治療的潜在力を証明する。
【０２１９】
【表２３】
2009541270.tif 000077
【図１−１】
2009541270.tif 000079
【図１−２】
2009541270.tif 000080
【図１−３】
2009541270.tif 000081
【図１−４】
2009541270.tif 000082
【図１−５】
2009541270.tif 000083
【図１−６】
2009541270.tif 000084
【図１−７】
2009541270.tif 000085
【図１−８】
2009541270.tif 000086
【図１−９】
2009541270.tif 000087
【図１−１０】
2009541270.tif 000088
【図１−１１】
2009541270.tif 000089
【図１−１２】
2009541270.tif 000090
【図１−１３】
2009541270.tif 000091
【図１−１４】
2009541270.tif 000092
【図１−１５】
2009541270.tif 000093
【図１−１６】
2009541270.tif 000094
【図１−１７】
2009541270.tif 000095
【図１−１８】
2009541270.tif 000096
【図２−１】
2009541270.tif 000097
【図２−２】
2009541270.tif 000098
【図２−３】
2009541270.tif 000099
【図２−４】
2009541270.tif 000100
【図２−５】
2009541270.tif 000101
【図２−６】
2009541270.tif 000102
【図２−７】
2009541270.tif 000103
【図３−１】
2009541270.tif 000104
【図３−２】
2009541270.tif 000105
【図３−３】
2009541270.tif 000106
【図３−４】
2009541270.tif 000107
【図３−５】
2009541270.tif 000108
【図４−１】
2009541270.tif 000109
【図４−２】
2009541270.tif 000110
【図４−３】
2009541270.tif 000111
【図４−４】
2009541270.tif 000112
【図４−５】
2009541270.tif 000113
【図４−６】
2009541270.tif 000114
【図４−７】
2009541270.tif 000115
【図４−８】
2009541270.tif 000116
【図４−９】
2009541270.tif 000117
【図５】
2009541270.tif 000118
【配列表】
2009541270000001.app
【国際調査報告】
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2009541270.tif 000123
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