(57)【要約】  少なくとも１種類の抗酸化物質を場合によりプロバイオティックまたはプレバイオティックのうち１種類以上と併せて動物に投与することにより、炎症性腸疾患(IBD)を有しているかまたはそのリスクを伴う動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させる方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
炎症性腸疾患(IBD)を有しているかまたはそのリスクを伴う動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させる方法であって、少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物を動物に投与することを含む方法。
【請求項２】
向上が、有益細菌のレベルの増大および有害細菌のレベルの低下を含む、請求項１の方法。
【請求項３】
有益細菌が、乳酸杆菌属（Lactobacillus）菌種およびビフィドバクテリウム属（Bifidobacterium）菌種のうち１以上を含む、請求項２の方法。
【請求項４】
有害細菌が、クロストリジウム属（Clostridium）菌種、デスルホビブリオ属（Desulfovibrio）菌種、ヘリコバクター属（Helicobacter）菌種および病原型大腸菌（Escherichia coli）のうち１以上を含む、請求項２の方法。
【請求項５】
向上が炎症の軽減に関連する、請求項１の方法。
【請求項６】
炎症の軽減が、動物の体液または組織における炎症バイオマーカーの減少および／または抗炎症バイオマーカーの増加により証明される、請求項５の方法。
【請求項７】
血清のCRP、酸化型グルタチオン、アルケナール類、アミロイドおよびTNF-αのうち少なくとも１種類が減少し、および／または血清の還元型グルタチオン、ORAC類、TGF-βおよびIL-10のうち少なくとも１種類が増加する、請求項６の方法。
【請求項８】
抗酸化物質が、ビタミンE、ビタミンCおよびカロテノイドのうち１種類以上を含む、請求項１の方法。
【請求項９】
乾燥物質基準で、動物が摂取する食物のグラム当たり
a．全トコフェロール量で約50〜約1000μgのビタミンE；
b．約30〜約400μgの量のビタミンC；および
c．約0.1〜約5μgの量のβ-カロテン
のうち少なくとも１種類を供給する量の組成物を投与する、請求項８の方法。
【請求項１０】
乾燥物質基準で、動物が摂取する食物のグラム当たり
a．全トコフェロール量で約100〜約800μgのビタミンE；
b．約50〜約200μgの量のビタミンC；および
c．約0.2〜約2μgの量のβ-カロテン
のうち少なくとも１種類を供給する量の組成物を投与する、請求項８の方法。
【請求項１１】
さらに、プロバイオティックおよびプレバイオティックうち少なくとも１種類を動物に投与することを含む、請求項１の方法。
【請求項１２】
ビフィドバクテリウム属（Bifidobacterium）菌種および乳酸杆菌属（Lactobacillus）菌種のうち１以上を含めた有益細菌を含有するプロバイオティックを投与する、請求項１１の方法。
【請求項１３】
乾燥物質基準で、動物が摂取する食物のグラム当たり約106〜約1012cfuの量のプロバイオティックを動物に投与することを含む、請求項１２の方法。
【請求項１４】
オリゴ糖、ガラクタンまたはβ-グルカンのうち１種類以上を含有するプレバイオティックを投与する、請求項１１の方法。
【請求項１５】
組成物が、食物、サプリメント、スナック、おやつ、または少なくとも部分的に食べられる玩具である、請求項１の方法。
【請求項１６】
組成物が動物の食事の一部として経口投与される食物である、請求項１の方法。
【請求項１７】
食物が、乾燥物質基準で
a．全トコフェロール量で約50〜約1000μg/gのビタミンE；
b．約30〜約400μg/gの量のビタミンC；および
c．約0.1〜約5μg/gの量のβ-カロテン
のうち少なくとも１種類を含む、請求項１６の方法。
【請求項１８】
食物が、乾燥物質基準で
a．全トコフェロール量で約100〜約800μg/gのビタミンE；
b．約50〜約200μg/gの量のビタミンC；および
c．約0.2〜約2μg/gの量のβ-カロテン
のうち少なくとも１種類を含む、請求項１６の方法。
【請求項１９】
食物がさらにプロバイオティックおよびプレバイオティックのうち少なくとも１種類を含む、請求項１６の方法。
【請求項２０】
食物中に、ビフィドバクテリウム属（Bifidobacterium）菌種および乳酸杆菌属（Lactobacillus）菌種のうち１以上を含めた有益細菌を含有するプロバイオティックが存在する、請求項１９の方法。
【請求項２１】
食物中に、乾燥物質基準で約106〜約1012cfu/gの量のプロバイオティックが存在する、請求項１９の方法。
【請求項２２】
オリゴ糖、ガラクタンまたはβ-グルカンのうち１種類以上を含有するプレバイオティックが食物中に存在する、請求項１９の方法。
【請求項２３】
組成物を１種類以上の抗IBD薬の投与と併せて投与する、請求項１の方法。
【請求項２４】
動物がイヌ類またはネコ類である、請求項１の方法。
【請求項２５】
IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるための組成物の調製における、少なくとも１種類の抗酸化物質の使用。
【請求項２６】
乾燥物質基準で
a．全トコフェロール量で約50〜約1000μg/gのビタミンE；
b．約30〜約400μg/gの量のビタミンC；および
c．約0.1〜約5μg/gの量のβ-カロテン
のうち少なくとも１種類を含み、さらに少なくとも１種類のプロバイオティックおよびプレバイオティックを含む、食物組成物。
【請求項２７】
乾燥物質基準で
a．全トコフェロール量で約100〜約800μg/gのビタミンE；
b．約50〜約200μg/gの量のビタミンC；および
c．約0.2〜約2μg/gの量のβ-カロテン
のうち少なくとも１種類を含む、請求項２６の組成物。
【請求項２８】
ビフィドバクテリウム属（Bifidobacterium）菌種および乳酸杆菌属（Lactobacillus）菌種のうち１以上を含めた有益細菌を含有するプロバイオティックを含む、請求項２６の組成物。
【請求項２９】
乾燥物質基準で約106〜約1012cfu/gの量のプロバイオティックを含む、請求項２６の組成物。
【請求項３０】
オリゴ糖、ガラクタンまたはβ-グルカンのうち１種類以上を含有するプレバイオティックを含む、請求項２６の組成物。
【請求項３１】
イヌ類またはネコ類のペットフードである、請求項２６の組成物。
【請求項３２】
(1)少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物、ならびに(2)下記のうち少なくとも１種類：
a．プロバイオティック；
b．プレバイオティック；
c．基礎食物；
d．抗IBD薬；ならびに
e．IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物に、胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために、抗酸化物質を含む組成物および場合によりキットの他の構成要素を投与するための指示
を含む、キット。
【請求項３３】
a．少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物を、場合により（i）プロバイオティック、（ii）プレバイオティックおよび（iii）抗IBD薬のうち１種類以上と併せて、IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物にその動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために投与すること；
b．少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物を、（i）プロバイオティック、（ii）プレバイオティック、（iii）抗IBD薬、および（iv）基礎食物のうち１種類以上と混合して、IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物にその動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために投与する組合わせを供給すること；ならびに
c．IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために、請求項３２のキットを使用すること
のうち１以上に関する情報および／または指示を伝達するための手段であって、これらの情報および／または指示を収容した文書、ディジタル記憶媒体、光学記憶媒体、オーディオプレゼンテーションおよびビジュアルディスプレーのうち１以上を含む手段。
【請求項３４】
表示されたウェブサイト、パンフレット、製品ラベル、パッケージ挿入物、広告、またはビジュアルディスプレーを含む、請求項３３の手段。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
発明の分野
[0001]  本発明は、動物、より具体的には炎症性腸疾患(IBD) を有しているかまたはIBDのリスクを伴う動物において、胃腸管（腸管）の細菌叢を調節し、場合により胃腸の炎症を軽減する方法に関する。ある態様において、本発明方法は食事介入を伴う；したがって本発明はさらに、それらの方法を実施するのに有用な食物組成物に関する。さらにまた本発明は、本発明を実施するのに有用なキットおよび伝達手段に関する。
【０００２】
関連技術の記述
[0002]  IBDは腸内細菌叢の変化と関連づけられている；しかし、Marteau et al. (2004), Aliment. Pharmacol. Ther. 20(Suppl. 4):18-23による概説報文中で結論されるように、これは困難な課題であり、より多くの研究が求められている。Marteauの報文中で概説されている多様な研究は、プロバイオティックの投与による細菌叢の調節がIBDに与える効果を指摘している。
【０００３】
[0003]  Kruis (2004), Aliment. Pharmacol. Ther. 20(Suppl. 4):75-78には、IBDにおけるプロバイオティックの療法効果の臨床試験が概説されている。ある研究は説得力のある療法効果を示したが、他は示さなかったと報告された。
【０００４】
[0004]  Jergens (1999), Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice 29(2):501-521による他の概説報文に、”現在のところ、イヌ類／ネコ類のIBDにおける細菌マイクロフローラの役割の証拠はない”と述べられている。Jergensは、オメガ-6脂肪酸とオメガ-3脂肪酸の比率および繊維補給を調節した低アレルギー食に焦点を絞った、IBDのための食事療法を記載している。
【０００５】
[0005]  Fernandez-Banares et al. (1989), Amer. J. Gastroenterol. 84(7):744-748には、IBDを伴うヒト患者ではビタミンCおよびβ-カロテンを含めた特定のビタミンの血漿濃度が健康な対照より低いが、ビタミンEは低くないと報告されている。
【０００６】
[0006]  Buffinton & Doe (1995), Free Radical Biology & Medicine 19(6):911-918には、IBDを伴う患者において抗酸化防御が低下していることが報告され、たとえばそのプロドラッグであるスルファサラジン（sulfasalazine）の形でIBD療法に広く用いられている抗炎症薬5-アミノサリチル酸(5-ASA)は有効な抗酸化能をもつと指摘されている。抗酸化剤療法の予備試験が引用され、”IBD治療のための抗酸化剤投与計画のいっそうの探査を勧める”と述べられている。
【０００７】
[0007]  Lih-Brody et al. (1996), Digestive Diseases & Sciences 41(10):2078-2086には、IBD患者の結腸粘膜における反応性酸素中間体（reactive oxygen intermediate (ROI)）の研究が報告され、ROIおよび抗酸化物質である微量養素（micronutrient）の形成の平衡異常が”抗酸化剤による治療調節の論理的根拠となる可能性がある”と述べられている。
【０００８】
[0008]  D’Odorico et al. (2001), Scand. J. Gastroenterol. 36(12):1289-1294には、IBD患者の血漿中では対照と比較して抗酸化物質（ビタミンEおよびβ-カロテンを含む）濃度が低下していることが報告され、抗酸化物質の枯渇がIBDの病態生理において重要であるらしいと結論されている。
【０００９】
[0009]  Gonzalez et al. (2001), Int. J. Vitam. Nutr. Res. 71(4):243-250には、ラットモデルにおいてビタミンEの補給が炎症に関連する酸化的ストレスから結腸を保護したと報告されている。
【００１０】
[0010]  当技術分野では、IBDを有しているかまたはIBDのリスクを伴う動物において、腸内細菌叢を調節する新規方法、特に腸内の有益細菌と有害細菌（たとえば病原菌）のバランスを有益菌種に有利に調整する方法が依然として求められている。
【００１１】
発明の概要
[0011]  本発明は、IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させる方法であって、少なくとも１種類の抗酸化物質、たとえばビタミンE、ビタミンCおよび／またはカロテノイドを含む組成物を動物に投与することを含む方法を提供する。
【００１２】
[0012]  ある態様において、本発明方法により起きる向上は炎症の軽減に関連する。
[0013]  場合により、本発明方法はさらに、プロバイオティック（probiotic）およびプレバイオティック（prebiotic）のうち少なくとも１種類を動物に投与することを含む。
【００１３】
[0014]  本発明は、IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるための組成物の調製における、少なくとも１種類の抗酸化物質の使用をも提供する。
【００１４】
[0015]  乾燥物質基準で
a．全トコフェロール量で約50〜約1000μg/gのビタミンE；
b．約30〜約400μg/gの量のビタミンC；および
c．約0.1〜約5μg/gの量のβ-カロテン
のうち少なくとも１種類を含み、さらにプロバイオティックおよびプレバイオティックのうち少なくとも１種類を含む食物組成物も提供される。
【００１５】
[0016]  さらに、(1)少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物、ならびに(2)下記のうち少なくとも１種類：
a．プロバイオティック；
b．プレバイオティック；
c．基礎食物；
d．抗IBD薬；ならびに
e．IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物に、胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために、抗酸化物質を含む組成物および場合によりキットの他の構成要素を投与するための指示
を含む、キットが提供される。
【００１６】
[0017]  さらに、
ａ.（1）少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物を、場合により（i）プロバイオティック、（ii）プレバイオティックおよび（iii）抗IBD薬のうち１種類以上と併せて、IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物にその動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために投与すること；
b．少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物を、（i）プロバイオティック、（ii）プレバイオティック、（iii）抗IBD薬、および（iv）基礎食物のうち１種類以上と混合して、IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物にその動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために投与する組合わせを調製すること；ならびに
c．IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために、キットを使用すること
のうち１以上に関する情報および／または指示を伝達するための手段であって、これらの情報および／または指示を収容した文書、ディジタル記憶媒体、光学記憶媒体、オーディオプレゼンテーションおよびビジュアルディスプレーを含む手段が提供される。
【００１７】
発明の詳細な記述
[0018]  本発明方法は、IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させる方法である。この方法は、少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物を動物に投与することを含む。
【００１８】
[0019]腸内細菌叢、すなわち胃腸管内に定住する細菌群落は、有益細菌と有害細菌の両方の型または種を含む。腸内細菌叢の特定のメンバーが特定の状況でその動物の健康に有益か、有害か、または重要でないかは、多数の要因に依存する可能性があるが、本発明の目的に関してはある型または種の細菌を有益とみなし、他を有害とみなすことができる。腸内細菌叢の有益なメンバーの例には、ビフィズス菌（ビフィドバクテリウム属（Bifidobacterium）の菌種）、および乳酸菌、より具体的には乳酸杆菌属（Lactobacillus）の菌種が含まれる。有害細菌には、病原性細菌が含まれる。腸内細菌叢の有害なメンバーの例には、クロストリジウム属（Clostridium）菌種、デスルホビブリオ属（Desulfovibrio）菌種（限定ではないが、デスルホビブリオ・デスルフリカンス(D. desulfuricans)、デスルホビブリオ・インテスチナリス(D. intestinalis)およびデスルホビブリオ・ブルガリス(D. vulgaris)が含まれる）、ヘリコバクター属（Helicobacter）菌種（限定ではないが、ヘリコバクター・ビゾゼロニイ(H. bizzozeronii)、ヘリコバクター・フェリス(H. felis)、ヘリコバクター・ハイルマニイ(H. heilmannii)、ヘリコバクター・ピロリ(H. pylori)およびヘリコバクター・サルモニス(H. salomonis)が含まれる）、および病原型大腸菌（Escherichia coli）が含まれる。
【００１９】
[0020]  胃腸管の健康は、一般に有益細菌と有害細菌の適切なバランスの維持に依存する。有害細菌集団の増加および／または有益細菌集団の減少は、胃腸管の健康状態の衰退に関連する可能性がある。逆に、有益細菌集団の増加および／または有害細菌集団の減少は、胃腸管の健康状態の改善、たとえばIBDなどの胃腸障害を有している動物における健康の回復もしくは寛解、またはそのような障害に対するリスクを伴う動物における疾患発症の阻止に関連する可能性がある。本発明に関して用語”関連する”は、必ずしも因果関係を示すわけではなく、したがって有益細菌と有害細菌の適切なバランスは病因に関係する可能性があり、あるいは胃腸管障害の症状にすぎない可能性がある。
【００２０】
[0021]  本明細書においてバランスを”向上させる”または”向上”は、バランスを有益細菌に有利に移行させることを意味し、したがって有益細菌の増加おおよび／または害細菌の減少を伴う可能性がある。本発明のある態様においてバランスの向上は、有害（たとえば病原性）細菌の減少と有益細菌の増加の両方によって起きる。
【００２１】
[0022]  腸内細菌叢における細菌集団は、当技術分野で既知のいずれかの方法で推定できる。たとえば、糞便試料を伝統的な平板培養で培養することができ、あるいはたとえば蛍光インサイチューハイブリダイゼーション(FISH)法による。
【００２２】
[0023]  本発明方法による対象動物は、”IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う”動物である。IBDを有している動物は、IBDの１形態と認められる炎症性胃腸疾患および障害のスペクトルのうちいずれか１つが専門的に診断された動物、またはそのような診断と一致する症状を示している動物である。そのような疾患および障害には、限定ではないが、過敏性腸症候群(IBS)、潰瘍性結腸炎およびクローン病が含まれる。慢性IBDを有しているけれども本発明方法の適用時には寛解している動物は、本明細書において”IBDを有している”とみなされる。IBDのリスクを伴う動物は、IBDの病歴がなく、またはIBD症状を示していないが、IBDの発症しやすさの指標となる１以上のリスク因子をもつ動物である。そのようなリスク因子には、遺伝因子（たとえばIBDの家族歴）および生理的因子（たとえば、１種類以上の炎症バイオマーカーのレベルの増大および／または１種類以上の抗炎症バイオマーカーのレベルの低下）が含まれる。
【００２３】
[0024]  動物はヒトまたはヒト以外の動物であってもよく、鳥類、ウシ類、イヌ類、ウマ類、ネコ類、ヤギ類、ネズミ類、ヒツジ類、およびブタ類などの動物が含まれる。ある態様において、動物は愛玩動物、たとえばイヌ類およびネコ類、特にイヌまたはネコであってもよい。
【００２４】
[0025]  本発明方法によれば、少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物を動物に投与する。投与は適切ないかなる経路であってもよく、これには経口または非経口経路が含まれるが、一般に経口経路である。ある態様において、組成物は経口投与される食物である。少なくとも１種類の抗酸化物質を含むそのような食物は、動物の食事の実質部分に相当するものであってもよい。たとえば、少なくとも１種類の抗酸化物質が、動物により毎日摂取されて実質的にその動物の完全な栄養を供給する食物または一連の食物中に存在してもよい。あるいは、またはさらに、少なくとも１種類の抗酸化物質が栄養サプリメントとして投与されてもよく、または規定食とは別に動物に与えられるスナック、おやつ（褒美、treat）、もしくは少なくとも部分的に食べられる玩具中に存在してもよい。
【００２５】
[0026]  栄養的に許容できる抗酸化物質をいずれも使用できる。ある態様においては、薬理学的特性をもつもの（5-ASAまたはそのプロドラッグなどの薬物の場合のように）以外の抗酸化物質を使用する。ある態様においては、ポリフェノール以外の抗酸化物質を使用する；ただし、タキシフォリン（taxifolin）などのポリフェノール系抗酸化物質は場合により非ポリフェノール系抗酸化物質のほかに存在してもよい。フリーラジカルを消滅または吸収する能力を示す多様な物質（たとえば果実、野菜、ある種のビタミン、および他の化合物）を抗酸化物質として使用できる。酸素ラジカル吸収性の高い含有物を含む原料成分には、たとえば生ホウレンソウ搾りかす（pomace）、生トマト搾りかす、生柑橘果肉、生ブドウ搾りかす、生ニンジン粒、生ブロッコリ、生緑茶、生コーングルテンミール、および生コメぬか（糠）が含まれる。フリーラジカルを消滅または吸収する能力を示す食物または食品には、たとえばホウレンソウ（たとえばホウレンソウ搾りかす）、トマト（たとえばトマト搾りかす）、柑橘果実（たとえば柑橘果肉）、ブドウ（たとえばブドウ搾りかす）、ニンジン（たとえばニンジン粒）、ブロッコリ、コーングルテンミール、およびコメぬかが含まれる。フリーラジカルを消滅または吸収する能力を示す化合物には、たとえばビタミンE、ビタミンC、カロテノイド、コエンザイムQ10(ユビキノン)、グルタチオン、L-カルニチン、α-リポ酸、N-アセチルシステイン、S-アデノシルメチオニン、大豆イソフラボンおよびタウリンが含まれる。
【００２６】
[0027]  ある態様において、投与される組成物はビタミンE、ビタミンCおよびカロテノイドのうち１種類以上を含む。
[0028]  本明細書において用語”ビタミンE”には、動物が摂取するのに適切ないずれかの形のビタミンEが含まれる；これには下記のいずれかのトコフェロールまたはトコトリエノール化合物、そのいずれかの鏡像異性体またはラセミ体、ならびにビタミンE活性をもつこのような化合物の混合物が含まれるが、これらに限定されない：α-トコフェロール(5,7,8-トリメチルトコール)、β-トコフェロール(5,8-ジメチルトコール)、γ-トコフェロール(7,8-ジメチルトコール)、δ-トコフェロール(8-メチルトコール)、α-トコトリエノール(5,7,8-トリメチルトコトリエノール)、β-トコトリエノール(5,8-ジメチルトコトリエノール)、γ-トコトリエノール(7,8-ジメチルトコトリエノール)、およびδ-トコトリエノール(8-メチルトコトリエノール)。ビタミンEは、前記化合物のうちいずれか１種類もしくは混合物として、またはその多様な誘導体、たとえばエステルの形で投与することができ、これにはビタミンEの酢酸エステル、コハク酸エステル、パルミチン酸エステルなど、動物が摂取した後にビタミンE活性を示す化合物が含まれる。一般に、本発明方法に用いるビタミンEにはα-トコフェロールまたはそのエステルが含まれる。ビタミンEの量は国際単位(IU)で表わすことができ、その際、1 IUは1 mgの酢酸DL-α-トコフェリルに等しいビタミンE活性をもつビタミンEの量である。あるいは、ビタミンE量を全トコフェロールとして表わすことができる。
【００２７】
[0029]  本明細書において用語”ビタミンC”には、動物が摂取するのに適切ないずれかの形のビタミンCが含まれる；これには、アスコルビン酸、L-アスコルビン酸、ならびにその多様な誘導体、たとえばリン酸カルシウム塩、コレステリル塩、およびアスコルビン酸-2-リン酸が含まれるが、これらに限定されない。ビタミンCの塩類には、ナトリウム塩、カルシウム塩、亜鉛塩、および鉄(II)塩が含まれる。エステルには、ステアリン酸エステル、パルミチン酸エステル、およびこれらに類する誘導体が含まれる。ビタミンCは、液体、半固体、固体、または患者が摂取した後にビタミンC活性を示す熱安定形態など、いかなる物理的形態であってもよい。ビタミンCの量は、本明細書中でアスコルビン酸として表わされる。
【００２８】
[0030]  本明細書において用語”カロテノイド”には、動物が摂取するのに適切ないずれかの形のカロテノイドが含まれる；これには、植物、藻類、葉、根、草木、トマトミール、レッドパーム油（red palm oil）、トマト粉末、およびトマト搾りかす／果肉中の黄橙色色素に由来する天然および合成カロテノイドが含まれるが、これらに限定されない。カロテノイドであるβ-カロテンは、植物中に天然に存在するビタミンAの前駆物質である。カロテノイドの抗酸化活性は、それらが動物により代謝されてビタミンAになった結果として備える可能性のあるいずれかのビタミンA活性とは一般に関係ない。これに関して、特にネコはβ-カロテンをビタミンAに変換できないことが指摘される。他のカロテノイドには、アスタキサンチン、α-カロテン、クリプトキサンチン、ルテイン、リコペンおよびゼアキサンチンが含まれる。
【００２９】
[0031]  本発明において投与するのに適切な１種類以上の抗酸化物質の量は、動物が摂取する食物の量（一般に乾燥物質規準で表わす）と関連づけて表わすことができる。たとえば、抗酸化物質を含有する組成物は、乾燥物質規準で、摂取する食物のグラム当たり
a．全トコフェロール量で約50〜約1000μg、たとえば約100〜約800μg、または約200〜約600μgのビタミンE；
b．約30〜約400μg、たとえば約50〜約200μg、または約75〜約150μgの量のビタミンC；および
c．約0.1〜約5μg、たとえば約0.2〜約2μg、または約0.5〜約1.5μgの量のカロテノイド、たとえばβ-カロテン
のうち１種類以上を供給する量で投与することができる。
【００３０】
[0032]  本発明方法により投与される組成物が動物の食事の実質部分を形成する食物である場合、食物は一般に、乾燥物質規準で
a．全トコフェロール量で約50〜約1000μg、たとえば約100〜約800μg、または約200〜約600μgのビタミンE；
b．約30〜約400μg、たとえば約50〜約200μg、または約75〜約150μgの量のビタミンC；および
c．約0.1〜約5μg、たとえば約0.2〜約2μg、または約0.5〜約1.5μgの量のカロテノイド、たとえばβ-カロテン
のうち１種類以上を含むべきである。
【００３１】
[0033]  １態様においては、ビタミンE、ビタミンCおよびカロテノイド（たとえばβ-カロテン）の3種類すべてが、たとえば前記に示した量で存在する。
[0034]  ビタミンE、ビタミンCおよび／またはカロテノイドを含む組成物が、動物の食事の実質部分を形成する食物以外のものである場合、それを一般に、動物が摂取する食物の量との関係において、前記に述べたものと一致する量で投与すべきである。一般に、サプリメント、スナック、おやつ、もしくは少なくとも部分的に食べられる玩具の場合、組成物は前記に述べたものより高い濃度の抗酸化物質（１種類以上）を含有する。そのような組成物の摂取量全体は、食事の実質部分を形成する食物の場合より実質的に低いからである。
【００３２】
[0035]  本発明によれば、ビタミンE、ビタミンCおよびβ-カロテンを強化した食物の投与によって、動物の腸内細菌叢における有益細菌と有害細菌のバランスを、これらの抗酸化物質のレベルがより低い比較食物と対比して向上させうることが予想外に見いだされた。ある場合、向上は有益細菌集団の増加と有害細菌集団の減少の両方を伴う。
【００３３】
[0036]  本発明のある態様において、本発明の実施により起きる腸内細菌叢バランスの向上は、炎症の軽減、より具体的には胃腸炎症、たとえば結腸粘膜炎症の軽減を伴う。炎症の軽減は、たとえば結腸鏡検査法によって直接観察でき、あるいは動物の体液または組織における１種類以上の炎症バイオマーカーの減少および／または１種類以上の抗炎症バイオマーカーの増加により証明できる。血清中の減少させることができる炎症バイオマーカーの例には、C反応性タンパク質(CRP)、酸化型グルタチオン(GSSG)、アルケナール類、血清アミロイドA (SAA)および腫瘍壊死因子アルファ(TNF-α、炎症性サイトカイン)が含まれる。血清中の増加させることができる抗炎症バイオマーカーの例には、還元型グルタチオン(GSH)、酸素ラジカル吸収能(ORAC)、ならびに抗炎症性サイトカインであるトランスフォーミング増殖因子ベータ(TGF-β)およびインターロイキン10(IL-10)が含まれる。
【００３４】
[0037]  場合により本発明方法は、抗酸化物質を含む組成物の投与のほか、プロバイオティックおよびプレバイオティックのうち１種類以上の投与を含む。
[0038]  プロバイオティックは、生存微生物、たとえば細菌、糸状菌または酵母を含む調製物または組成物である。本発明において重要なプロバイオティックは、少なくとも１種類の有益細菌、たとえばビフィズス菌および／または乳酸菌を含む。１態様において、本発明に有用なプロバイオティックは、ビフィドバクテリウム属菌種および乳酸杆菌属菌種のうち１以上を含む有益細菌を含む。適切な種には、限定ではないが、ビフィドバクテリウム・アニマリス(Bifidobacterium animalis)（ビフィドバクテリウム・アニマリス亜種を含み、時にはビフィドバクテリウム・ラクチス(B. lactis)と呼ばれる）、ビフィドバクテリウム・ロングム(Bifidobacterium longum)（ビフィドバクテリウム・インファンチス(B. infantis)を含む）、ビフィドバクテリウム・サーモフィラム(Bifidobacterium thermophilum)、ラクトバシラス・アシドフィルス(Lactobacillus acidophilus)、ラクトバシラス・アニマリス(Lactobacillus animalis)、ラクトバシラス・カゼイ(Lactobacillus casei)、ラクトバシラス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)、ラクトバシラス・ロイテリ(Lactobacillus reuteri)、およびラクトバシラス・ラムノサス(Lactobacillus rhamnosus)が含まれる。
【００３５】
[0039]  プロバイオティックを、抗酸化物質と同一の組成物、たとえば食物組成物中に含有させることができ、あるいは別個に投与することができる。プロバイオティックの適量は一般に、乾燥物質基準で、動物が摂取する食物のグラム当たり約106〜約1012 cfu（コロニー形成単位）である。
【００３６】
[0040]  抗酸化物質との組合わせにおいて、プロバイオティックは、単に有益細菌集団を増加させるための接種物として作用することにより、および／または有害細菌の増殖に拮抗することにより、腸内細菌叢のバランスを向上させることができる。ある態様においては抗酸化物質とプロバイオティックの相互作用が起きる可能性があり、これはある状況下では抗酸化物質とプロバイオティックの相乗作用をもたらす場合があるが、このような相乗作用は本発明において必要条件ではない。
【００３７】
[0041]  プレバイオティックは、有益細菌の増殖を優先的に刺激する非消化性物質である。大部分のプレバイオティックは発酵性炭水化物である；その例には、オリゴ糖、ガラクタンおよびβ-グルカンが含まれ、多様な植物源および微生物源から得ることができる。具体例には、アラビノガラクタン、フルクトオリゴ糖（FOS）、およびFOSを生成する多糖イヌリンが含まれる。プレバイオティックを、抗酸化物質と別個に、または同一組成物、たとえば食物組成物中において、投与することができる。
【００３８】
[0042]  さらに他の態様において本発明方法は、抗酸化物質ならびに場合によりプロバイオティックおよび／またはプレバイオティックを含む組成物のほか、抗IBD薬の投与を含む。本明細書において”抗IBD薬”は、たとえば炎症の軽減、痛みおよび／または下痢などの症状の緩和において、IBD患者に療法効果をもたらす薬理作用薬、一般に薬物または植物調製物である。限定ではないが、適切な例には、ステロイド、たとえばベクロメタゾン（beclomethasone）、ブデソニド（budesonide）、プレドニソロン（prednisolone）、プレドニソン（prednisone）およびチキソコルトール（tixocortol）；5-ASA放出製剤、たとえばメサラミン（mesalamine）、オルサラジン（olsalazine）およびスルファサラジン（sulfasalazine）；メトロニダゾール（metronidazole）；アザチオプリン（azathioprine）が含まれる。抗IBD薬は、経口、非経口、経皮および直腸経路を含めたいずれか適切な経路により投与することができる。所望により、経口投与に適切な抗IBD薬を抗酸化物質と同一の組成物に含有させることができる。
【００３９】
[0043]  本発明の観点は、IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるための組成物の調製における、少なくとも１種類の抗酸化物質の使用でもある。前記に本発明方法に関して記載または列記したすべての態様が、このような使用に同様に適用される。
【００４０】
[0044]  さらに他の態様において本発明は、たとえば本明細書に記載する方法の実施に有用な食物組成物を提供する。この態様の食物組成物は一般に、それを動物の食事の実質部分として適切なものにする代謝可能なエネルギーおよび栄養素を含有する。この組成物は、乾燥物質規準で(1)下記のうち少なくとも１種類：
a．全トコフェロール量で約50〜約1000μg、たとえば約100〜約800μg、または約200〜約600μgのビタミンE；
b．約30〜約400μg、たとえば約50〜約200μg、または約75〜約150μgの量のビタミンC；および
c．約0.1〜約5μg、たとえば約0.2〜約2μg、または約0.5〜約1.5μgの量のカロテノイド、たとえばβ-カロテン；
ならびに（2）プロバイオティックおよびプレバイオティックのうち少なくとも１種類を含む。
【００４１】
[0045]  例示態様において本発明組成物は、ビフィドバクテリウム属菌種および乳酸杆菌属菌種のうち１以上の有益細菌を含有するプロバイオティックを含む。プロバイオティックの適量は一般に、乾燥物質基準で約106〜約1012cfu/gである。
【００４２】
[0046]  他の例示態様において本発明組成物は、オリゴ糖、ガラクタンまたはβ-グルカンのうち１種類以上を含有するプレバイオティックを含む。
[0047]  本発明の食物組成物は一般に、意図する動物に適切な量およびバランスの栄養素を含有する。１態様において、組成物はペットフード、たとえばイヌ類またはネコ類などの愛玩動物に与えるために栄養的および／または官能特性的に適合させた食物である。
【００４３】
[0048]  本発明のキットは、(1)少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物、ならびに(2)下記のうち少なくとも１種類：
a．プロバイオティック；
b．プレバイオティック；
c．基礎食物；
d．抗IBD薬；ならびに
e．IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物に、胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために、抗酸化物質を含む組成物および場合によりキットの他の構成要素を投与するための指示
を含む。
【００４４】
[0049]  キットの構成要素を単一の外側パッケージ内で別個の容器に入れて、さもなければ互いに束ねて、一緒に包装することができる。あるいは、キットの構成要素を別個に包装し、ただし消費者がすべての必要な構成要素を求めることができるように入手可能にする（たとえば販売する、販売のために提供する、または市販する）ことができる。これは、たとえば”仮想パッケージ”により達成でき、この場合、キットの物理的構成要素とは別個の媒体における指示が、物理的キット構成要素の使用に関連する。指示のための媒体は、印刷物、ラジオまたはテレビの放送、ウェブサイト、またはたとえば販売地点でのビジュアルディスプレーであってもよいが、これらに限定されない。
【００４５】
[0050]  １態様においてキットは、基礎食物、少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物、ならびにプロバイオティックおよびプレバイオティックのうち１種類以上を含む。基礎食物は、意図する動物に適切な量およびバランスの栄養素を含有するが、低濃度の抗酸化物質を含有し、これは一般に胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスの向上させるのには不十分である。本発明の抗酸化物質を含有する組成物は、基礎食物への添加またはそれとの混合のためのサプリメントとして用いられ、目的とする向上をもたらすことができる抗酸化物質強化食物を提供する。プロバイオティックおよび／またはプレバイオティックがキットに含まれる場合、これらはこのサプリメント中に、または基礎食物中に、または別個の容器内に存在することができる。この態様のキットは、場合によりさらに、基礎食物へのサプリメントの添加もしくは混合のための指示、および／またはそのような添加もしくは混合の有益性についての情報を含むことができる。
【００４６】
[0051]  さらに他の態様においては、
ａ.（1）少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物を、場合により（i）プロバイオティック、（ii）プレバイオティックおよび（iii）抗IBD薬のうち１種類以上と併せて、IBDまたはそのリスクを伴う動物にその動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために投与すること；
b．少なくとも１種類の抗酸化物質を含む組成物を、（i）プロバイオティック、（ii）プレバイオティック、（iii）抗IBD薬、および（iv）基礎食物のうち１種類以上と混合して、IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物にその動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために投与する組合わせを調製すること；ならびに
c．IBDを有しているかまたはそのリスクを伴う動物の胃腸管における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させるために、本発明のキットを使用すること
のうち１以上に関する情報および／または指示を伝達するための手段であって、これらの情報および／または指示を収容した文書、ディジタル記憶媒体、光学記憶媒体、オーディオプレゼンテーションおよびビジュアルディスプレーのうち１以上を含む手段が提供される。たとえば、これらの手段は表示されたウェブサイト、パンフレット、製品ラベル、パッケージ挿入物、広告、またはビジュアルディスプレーを含むことができる。
【００４７】
[0052]  本明細書に記載した特定の方法、プロトコルおよび試薬は変更できるので、本発明はそれらに限定されない。さらに、本明細書中で用いた専門用語は特定の態様を記述するためのものにすぎず、本発明の範囲を限定するためのものではない。本明細書および特許請求の範囲で用いる単数形には、そうではないことが状況から明示されない限り、複数表示が含まれる。用語”含む（comprise、comprises、comprising）”も除外ではなく包括と解釈すべきである。
【００４８】
[0053]  別途定義しない限り、本明細書中で用いるすべての技術用語および科学用語および頭字語は、本発明の分野の当業者が一般に理解しているものと同じ意味をもつ。本明細書に記載したものと類似または均等な方法および物質をいずれも本発明の実施に使用できるが、好ましい方法、デバイスおよび物質を本明細書に記載する。
【００４９】
[0054]  本明細書中に述べたすべての特許、特許出願および刊行物を、それらに開示された、本発明に関して使用できる化合物、処理、手法、操作、技術、物品、ならびに他の組成物および方法を記述および開示するために、法律が許す範囲で本明細書に援用する。しかし、本明細書中のいずれも、本発明が先の発明によるそのような開示に先行する資格をもたないと認めたものと解釈すべきではない。
【００５０】
実施例
[0055]  以下の本発明の好ましい態様の例により本発明をさらに説明することができるが、これらの例は説明のために含まれるにすぎず、別途明示しない限り、本発明の範囲を限定するためのものではないことは理解されるであろう。
【００５１】
実施例１
[0056]  健康な（IBDを有する）ネコ11匹およびIBDと診断されたネコ11匹について試験を実施する。抗酸化物質を強化した、または強化していない、標準的なネコ用缶詰ペットフード（表１中の分析を参照）をネコに2週間与え、続いて他方の飼料に入れ換え、それをさらに2週間与える。
【００５２】
【表１】
2009522311.tif 000002
【００５３】
[0057]  各2週間の給餌期間の終了時に、血液試料を各ネコから採取する。血清中の酸化型および還元型グルタチオン(それぞれGSHおよびGSSG)の濃度を、抗酸化物質バイオマーカーとして測定する。平均濃度を表２に示す。同様に、非特異的マイトジェンであるコンカナバリンA (ConA)およびアメリカヤマゴボウマイトジェン（pokeweed mitogen）(PWM)に応答したＴリンパ球増殖レベルを、炎症応答のバイオマーカーとして測定する。平均応答レベルを表３に示す。
【００５４】
【表２】
2009522311.tif 000003
【００５５】
【表３】
2009522311.tif 000004
【００５６】
[0058]  表２に示すように、抗酸化物質強化飼料を与えると、健康なネコおよびIBDを有するネコの両方においてGSH濃度が上昇する。対照（強化していない）飼料を与えた場合、IBDを有するネコのGSH濃度は健康なネコにおける濃度より低い；抗酸化物質強化飼料を与えると、IBDを有するネコのGSH濃度は対照飼料を与えた健康なネコの濃度に匹敵する濃度まで上昇する。
【００５７】
[0059]  表３に示すように、IBDを有するネコに抗酸化物質強化飼料を与えると、Ｔリンパ球増殖応答が健康なネコにみられるものに近いレベルになる。しかし、この応答は完全には正常化しない（健康なネコのものと等しくはならなかった）。
【００５８】
実施例２
[0060]  健康なネコ11匹およびIBDと診断されたネコ11匹について試験を実施する。実施例１と同じ対照（強化していない）および被験（抗酸化物質強化）飼料をネコに4週間与え、続いて他方の飼料に入れ換え、それをさらに4週間与える。各4週間の給餌期間の開始時と終了時に糞（大便）試料を採集し、伝統的な平板培養法を用いる細菌培養を行う。2種類の有害細菌（クロストリジウム菌および大腸菌）および2種類の有益細菌（乳酸菌およびビフィズス菌）の個数を求める。結果を表４に示す。
【００５９】
【表４】
2009522311.tif 000005
【００６０】
[0061]  表４に示すように、IBDを有するネコから得た試料は健康なネコから得た試料の場合より大腸菌集団が約3 log単位（約1000倍）高い。抗酸化物質強化飼料を与えたネコは、対照飼料と比較して約0.8〜約1 log単位の大腸菌集団減少を示す。抗酸化物質強化飼料にはクロストリジウム菌集団を減少させる傾向もあるが、この効果はIBDを有するネコより健康なネコにおいて、より顕著である。一方、有益細菌（乳酸菌およびビフィズス菌の両方）は、抗酸化物質強化飼料を与えたIBDを有するネコにおいて、対照飼料を与えたネコのものと比較して増加する。健康なネコでは、この試験においてビフィズス菌のみが抗酸化物質強化飼料に対する応答の増大を示す。
【００６１】
[0062]  この試験から、IBDを有するネコへの抗酸化物質強化食の投与は、腸内細菌叢における有益細菌と有害細菌のバランスを向上させうると結論できる。そのような向上は、たとえば抗酸化物質強化食に乳酸杆菌属菌種またはビフィドバクテリウム属菌種などの有益細菌を含有する１種類以上のプロバイオティックを補給することによってさらに支援することができる。
【００６２】
[0063]  本明細書には、本発明の代表的な好ましい態様を開示し、特定の用語を用いたが、それらは一般的な説明の意味で用いたにすぎず、限定のためのものではなく、本発明の範囲は特許請求の範囲に記載されている。明らかに、以上の教示からみて本発明の多数の改変および変更が可能である。したがって、特許請求の範囲の記載の範囲内で、具体的に記載した以外の形で本発明を実施できることを理解すべきである。
【国際調査報告】
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2009522311.tif 000007