(57)【要約】  本発明は、ａ）ピリミジルアミノベンズアミド化合物；およびｂ）ＨＤＡＣ阻害剤化合物を含む医薬組合せ、ならびにこのような組合せを使用する増殖性疾患の処置または予防のための方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）式（Ｉ）のピリミジルアミノベンズアミド化合物；および
ｂ）少なくとも１種のヒストンデアセチラーゼ阻害剤を含む医薬組合せ。
【請求項２】
薬剤ａ）が式（ＩＩ）
【化１】
2009504674.tif 000015
で示される４−メチル−３−［［４−（３−ピリジニル）−２−ピリミジニル］アミノ］−Ｎ−［５−（４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−３−（トリフルオロメチル）フェニル］ベンズアミドから選択される、請求項１に記載の医薬組合せ。
【請求項３】
薬剤ｂ）が式（ＩＶ）
【化２】
2009504674.tif 000016
で示されるＮ−ヒドロキシ−３−［４−［（２−ヒドロキシエチル）｛２−（１Ｈ−インドル−３−イル）エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド、またはその薬学的に許容される塩、式（Ｖ）
【化３】
2009504674.tif 000017
で示されるＮ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド、またはその薬学的に許容される塩、およびそれらの組合せから選択される、請求項２に記載の医薬組合せ。
【請求項４】
薬剤ｂ）がトラポキシン、テトラペプチド、クラミドシン、ＨＣトキシン、トリコスタチン、トリコスタチンＡ、アピシジン、スベロイラニリド・ヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、オキサムフラチン、ＭＳ−２７５、ピロキサミド、バルプロ酸、［４−（２−アミノ−フェニルカルバモイル）−ベンジル］−カルバミン酸ピリジン−３−イルメチルエステルおよびその誘導体、デプシペプチド、ＦＲ９０１２２８、ＣＩ−９９４、酪酸フェニル、酪酸ナトリウム、酪酸、３−（４−アロイル−１Ｈ−２ピロリル−Ｎ−ヒドロキシ−プロペンアミド、ＡＤＨＡ化合物８、（−）−デプデシン、スクリプタイド、ならびにサーチノールから選択される、請求項２に記載の医薬組合せ。
【請求項５】
増殖性疾患の処置または予防のための薬剤の製造のための、請求項１に記載の医薬組合せの使用。
【請求項６】
該疾患が白血病である、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
該疾患が慢性骨髄性白血病または急性リンパ性白血病である、請求項５に記載の使用。
【請求項８】
処置を必要とする対象における増殖性疾患の処置または予防のための方法であって、該対象に、例えば、同時にまたは連続して、治療有効量の少なくとも１種のヒストンデアセチラーゼ阻害剤および式（Ｉ）のピリミジルアミノベンズアミド化合物を共投与することを含む方法。
【請求項９】
該疾患が白血病である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ヒストンデアセチラーゼ阻害剤および４−メチル−３−［［４−（３−ピリジニル）−２−ピリミジニル］アミノ］−Ｎ−［５−（４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−３−（トリフルオロメチル）フェニル］ベンズアミドの組合せを投与することを含む、白血病の処置のための方法。
【請求項１１】
ヒストンデアセチラーゼ阻害剤および式（Ｉ）のピリミジルアミノベンズアミド化合物の組合せを投与することを含む白血病の処置のための方法であって、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤が式ＩＶ
【化４】
2009504674.tif 000018
で示されるＮ−ヒドロキシ−３−［４−［（２−ヒドロキシエチル）｛２−（１Ｈ−インドル−３−イル）エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド、またはその薬学的に許容される塩、式（Ｖ）
【化５】
2009504674.tif 000019
で示されるＮ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド、またはその薬学的に許容される塩、およびそれらの組合せから選択される方法。
【請求項１２】
ヒストンデアセチラーゼ剤がトラポキシンおよび他のテトラペプチド、例えば、クラミドシンおよびＨＣトキシン；トリコスタチンおよびその類似体、例えば、トリコスタチンＡ；アピシジン；スベロイラニリド・ヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）；オキサムフラチン；ＭＳ−２７５；ピロキサミド；バルプロ酸；［４−（２−アミノ−フェニルカルバモイル）−ベンジル］−カルバミン酸ピリジン−３−イルメチルエステルおよびその誘導体；デプシペプチド、ＦＲ９０１２２８；ＣＩ９９４；酪酸フェニル；酪酸ナトリウム；酪酸；３−（４−アロイル−１Ｈ−２ピロリル−Ｎ−ヒドロキシ−プロペンアミド；ＡＤＨＡ化合物８；−（−）デプデシン；スクリプタイド；ならびにサーチノールから選択される、請求項１０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、例えば、増殖性疾患、例えば、腫瘍、骨髄腫、白血病、乾癬、再狭窄、強皮症および線維症における、ピリミジルアミノベンズアミド化合物およびヒストンデアセチラーゼ阻害剤を含む医薬組合せ、ならびにこのような組合せの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
増殖性疾患患者に対する多数の処置の選択肢があるにもかかわらず、有効かつ安全な抗増殖剤の必要性および組合せ治療におけるそれらの優先的使用の必要性が残っている。
【０００３】
ヒストンの可逆的アセチル化は、転写因子のＤＮＡへの接近性を変えることにより作用する、遺伝子発現の主要な調節因子である。正常細胞では、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）およびヒストンアセチルトランスフェラーゼは、共に、ヒストンのアセチル化のレベルを制御し、バランスを維持する。ＨＤＡＣの阻害は、様々な細胞応答をもたらす高アセチル化ヒストンの蓄積をもたらす。ＨＤＡＣ阻害剤が癌細胞におけるそれらの治療効果に対して試験された。ＨＤＡＣ阻害剤研究の分野における最近の開発が、腫瘍の処置のために適当である、非常に有効かつ安定な活性化合物を提供した。
【発明の開示】
【０００４】
発明の概要
今回、例えば、下記に定義のとおりの少なくとも１種のピリミジルアミノベンズアミド化合物およびＨＤＡＣ阻害剤を含む組合せが、増殖性疾患、例えば、腫瘍、骨髄腫、白血病、乾癬、再狭窄、強皮症および線維症に有効な効果を有することを見いだした。
【０００５】
発明の詳細な説明
ピリミジルアミノベンズアミド化合物：
本発明は、キナーゼ依存性疾患の処置のための医薬組成物の製造のための、式（Ｉ）：
【化１】
2009504674.tif 000002
〔式中、
Ｒ１は水素、低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、アシルオキシ−低級アルキル、カルボキシ−低級アルキル、低級アルコキシカルボニル−低級アルキル、またはフェニル−低級アルキルを示し；
Ｒ２は水素、所望により１個またはそれ以上の同一のまたは異なるラジカルＲ３により置換されている低級アルキル、シクロアルキル、ベンズシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール基、または０、１、２または３個の環窒素原子および０または１個の酸素原子および０または１個の硫黄原子を含む単−もしくは二環式ヘテロアリール基を示し（該基はそれぞれの場合に非置換またはモノ−もしくはポリ置換である）；そしてＲ３はヒドロキシ、低級アルコキシ、アシルオキシ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、カルバモイル、Ｎ−モノ−もしくはＮ，Ｎ−ジ置換カルバモイル、アミノ、モノ−もしくはジ置換アミノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール基、または０、１、２または３個の環窒素原子および０または１個の酸素原子および０または１個の硫黄原子を含む単−もしくは二環式ヘテロアリール基（該基はそれぞれの場合に非置換またはモノ−もしくはポリ置換である）を示すか、または
Ｒ１およびＲ２は共に所望により低級アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、フェニル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、アミノ、モノ−もしくはジ置換アミノ、オキソ、ピリジル、ピラジニルまたはピリミジニルによりモノ−もしくはジ置換されている４、５または６個の炭素原子を有するアルキレン；４または５個の炭素原子を有するベンズアルキレン；１個の酸素および３または４個の炭素原子を有するオキサアルキレン；または１個の窒素および３または４個の炭素原子を有するアザアルキレン（ここで、窒素は非置換であるかまたは低級アルキル、フェニル−低級アルキル、低級アルコキシカルボニル−低級アルキル、カルボキシ−低級アルキル、カルバモイル−低級アルキル、Ｎ−モノ−もしくはＮ，Ｎ−ジ置換カルバモイル−低級アルキル、シクロアルキル、低級アルコキシカルボニル、カルボキシ、フェニル、置換フェニル、ピリジニル、ピリミジニル、またはピラジニルにより置換されている）を示し；
Ｒ４は水素、低級アルキル、またはハロゲンを示す〕
で示されるピリミジルアミノベンズアミド化合物、およびこのような化合物のＮ−オキシドまたは薬学的に許容される塩の使用に関する。
【０００６】
上記および下記で使用される一般用語は、他に記載のない限り、好ましくは本明細書内において下記の意味を有する：
【０００７】
接頭語“低級”は、最大７個まで（７を含む）、とりわけ最大４個まで（４を含む）の炭素原子を有するラジカルを示し、問題となる該ラジカルは直線または分岐（１個または複数の分岐）のいずれかである。
【０００８】
複数形が化合物、塩などに対して使用されるとき、これは１つの化合物、塩などの意味も含む。
【０００９】
すべての不斉炭素原子は（Ｒ）−、（Ｓ）−または（Ｒ，Ｓ）−配置、好ましくは（Ｒ）−または（Ｓ）−配置で存在し得る。化合物はしたがって異性体の混合物または純粋な異性体、好ましくはエナンチオマー−純粋なジアステレオマーとして存在し得る。
本発明はまた式（Ｉ）の化合物の可能である互変異性体に関する。
【００１０】
低級アルキルは好ましくは１（１を含む）から７個（７を含む）、好ましくは１（１を含む）から４個（４を含む）の炭素原子を有するアルキルであり、直線または分岐である；好ましくは、低級アルキルはブチル、例えば、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、プロピル、例えば、ｎ−プロピルまたはイソプロピル、エチルまたはメチルである。好ましくは低級アルキルはメチル、プロピルまたはｔｅｒｔ−ブチルである。
低級アシルは好ましくはホルミルまたは低級アルキルカルボニル、特に、アセチルである。
【００１１】
アリール基はラジカルの芳香環炭素原子に位置する結合を介して分子に結合している芳香族性ラジカルである。好ましい態様において、アリールは６から１４個の炭素原子を有する芳香族性ラジカル、とりわけフェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、フルオレニルまたはフェナントレニルであり、そして非置換であるかまたは、とりわけアミノ、モノ−もしくはジ置換アミノ、ハロゲン、低級アルキル、置換低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、フェニル、ヒドロキシ、エーテル化またはエステル化ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、エステル化カルボキシ、アルカノイル、ベンゾイル、カルバモイル、Ｎ−モノ−もしくはＮ，Ｎ−ジ置換カルバモイル、アミジノ、グアニジノ、ウレイド、メルカプト、スルホ、低級アルキルチオ、フェニルチオ、フェニル−低級アルキルチオ、低級アルキルフェニルチオ、低級アルキルスルフィニル、フェニルスルフィニル、フェニル−低級アルキルスルフィニル、低級アルキルフェニルスルフィニル、低級アルキルスルホニル、フェニルスルホニル、フェニル−低級アルキルスルホニル、低級アルキルフェニルスルホニル、ハロゲン−低級アルキルメルカプト、ハロゲン−低級アルキルスルホニル、例えば、とりわけトリフルオロメタンスルホニル、ジヒドロキシボラ（−Ｂ（ＯＨ）２）、ヘテロシクリル、単−もしくは二環式ヘテロアリール基および環の隣接したＣ−原子で結合しているジオキシ低級アルキレン、例えば、ジオキシメチレンから選択される、１個またはそれ以上、好ましくは３個まで、とりわけ１または２個の置換基により置換されている。アリールはさらに好ましくはフェニル、ナフチルまたはテトラヒドロナフチルであり、それぞれの場合において、非置換であるかまたは独立してハロゲン、とりわけフッ素、塩素、または臭素；ヒドロキシ；低級アルキル、例えば、メチル、ハロゲン−低級アルキル、例えば、トリフルオロメチル、またはフェニルによりエーテル化されたヒドロキシ；２個の隣接したＣ−原子に結合しているジオキシ低級アルキレン、例えば、ジオキシメチレン、低級アルキル、例えば、メチルまたはプロピル；ハロゲン−低級アルキル、例えば、トリフルオロメチル；ヒドロキシ−低級アルキル、例えば、ヒドロキシメチルまたは２−ヒドロキシ−２−プロピル；低級アルコキシ−低級アルキル；例えば、メトキシメチルまたは２−メトキシエチル；低級アルコキシカルボニル−低級アルキル、例えば、メトキシカルボニルメチル；低級アルキニル、例えば、１−プロピニル；エステル化カルボキシ、とりわけ低級アルコキシカルボニル、例えば、メトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニルまたはイソ−プロポキシカルボニル；Ｎ−モノ−置換カルバモイル、特に低級アルキル、例えば、メチル、ｎ−プロピルまたはイソ−プロピルによりモノ置換されているカルバモイル；アミノ；低級アルキルアミノ、例えば、メチルアミノ；ジ−低級アルキルアミノ、例えば、ジメチルアミノまたはジエチルアミノ；低級アルキレンアミノ、例えば、ピロリジノまたはピペリジノ；低級オキサアルキレン−アミノ、例えば、モルホリノ、低級アザアルキレン−アミノ、例えば、ピペラジノ、アシルアミノ、例えば、アセチルアミノまたはベンゾイルアミノ；低級アルキルスルホニル、例えば、メチルスルホニル；スルファモイル；またはフェニルスルホニルからなる群から選択される１または２個の置換基により置換されている。
【００１２】
シクロアルキル基は好ましくはシクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチルであり、非置換であるかまたは１個またはそれ以上の、とりわけ１または２個のアリールに対する置換基として上記されている基から選択される置換基、もっとも好ましくは低級アルキル、例えば、メチル、低級アルコキシ、例えば、メトキシまたはエトキシ、またはヒドロキシ、そしてさらにオキソにより置換されているか、またはベンゾ環、例えば、ベンゾシクロペンチルまたはベンゾシクロヘキシルと縮合していてよい。
【００１３】
置換アルキルは、１個またはそれ以上、とりわけ３個までの置換基は、主にハロゲン、とりわけフッ素、アミノ、Ｎ−低級アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−低級アルキルアミノ、Ｎ−低級アルカノイルアミノ、ヒドロキシ、シアノ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、およびフェニル−低級アルコキシカルボニルから選択される基が存在し得る、前記のアルキル、とりわけ低級アルキル、好ましくはメチルである。トリフルオロメチルがとりわけ好ましい。
【００１４】
モノ−もしくはジ置換アミノは、とりわけ互いに独立して低級アルキル、例えば、メチル；ヒドロキシ−低級アルキル、例えば、２−ヒドロキシエチル；低級アルコキシ低級アルキル、例えば、メトキシエチル；フェニル−低級アルキル、例えば、ベンジルまたは２−フェニルエチル；低級アルカノイル、例えば、アセチル；ベンゾイル；置換ベンゾイル（該フェニルラジカルはとりわけニトロ、アミノ、ハロゲン、Ｎ−低級アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−低級アルキルアミノ、ヒドロキシ、シアノ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルカノイル、およびカルバモイルから選択される１個またはそれ以上、好ましくは１または２個の置換基により置換されている）；およびフェニル−低級アルコキシカルボニル（該フェニルラジカルは非置換であるかまたはとりわけニトロ、アミノ、ハロゲン、Ｎ−低級アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−低級アルキルアミノ、ヒドロキシ、シアノ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルカノイル、およびカルバモイルから選択される１個またはそれ以上、好ましくは１または２個の置換基により置換されている）；好ましくはＮ−低級アルキルアミノ、例えば、Ｎ−メチルアミノ、ヒドロキシ−低級アルキルアミノ、例えば、２−ヒドロキシエチルアミノまたは２−ヒドロキシプロピル、低級アルコキシ低級アルキル、例えば、メトキシエチル、フェニル−低級アルキルアミノ、例えば、ベンジルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−低級アルキルアミノ、Ｎ−フェニル−低級アルキル−Ｎ−低級アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−低級アルキルフェニルアミノ、低級アルカノイルアミノ、例えば、アセチルアミノ、またはベンゾイルアミノおよびフェニル−低級アルコキシカルボニルアミノからなる群から選択される置換基（該フェニルラジカルはそれぞれの場合において非置換であるかまたはとりわけニトロまたはアミノ、またはハロゲン、アミノ、Ｎ−低級アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−低級アルキルアミノ、ヒドロキシ、シアノ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルカノイル、カルバモイルまたはアミノカルボニルアミノにより置換されている）から選択される１または２個のラジカルにより置換されているアミノである。ジ置換アミノはまた低級アルキレンアミノ、例えば、ピロリジノ、２−オキソピロリジンノまたはピペリジノ；低級オキサアルキレン−アミノ、例えば、モルホリノ、または低級アザアルキレン−アミノ、例えば、ピペラジノまたはＮ−置換ピペラジノ、例えば、Ｎ−メチルピペラジノまたはＮ−メトキシカルボニルピペラジノである。
【００１５】
ハロゲンはとりわけフッ素、塩素、臭素、またはヨウ素、とりわけフッ素、塩素、または臭素である。
エーテル化ヒドロキシはとりわけＣ８−Ｃ２０アルキルオキシ、例えば、ｎ−デシルオキシ、低級アルコキシ（好ましい）、例えば、メトキシ、エトキシ、イソプロピルオキシ、またはｔｅｒｔ−ブチルオキシ、フェニル−低級アルコキシ、例えば、ベンジルオキシ、フェニルオキシ、ハロゲン−低級アルコキシ、例えば、トリフルオロメトキシ、２，２，２−トリフルオロエトキシまたは１，１，２，２−テトラフルオロエトキシ、または１または２個の窒素原子を含む単−もしくは二環式ヘテロアリールにより置換されている低級アルコキシ、好ましくはイミダゾリルにより置換されている低級アルコキシ、例えば、１Ｈ−イミダゾール−１−イル、ピロリル、ベンゾイミダゾリル、例えば、１−ベンゾイミダゾリル、ピリジル、とりわけ２−、３−もしくは４−ピリジル、ピリミジニル、とりわけ２−ピリミジニル、ピラジニル、イソキノリニル、とりわけ３−イソキノリニル、キノリニル、インドリルまたはチアゾリルである。
【００１６】
エステル化ヒドロキシはとりわけ低級アルカノイルオキシ、ベンゾイルオキシ、低級アルコキシカルボニルオキシ、例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ、またはフェニル−低級アルコキシカルボニルオキシ、例えば、ベンジルオキシカルボニルオキシである。
エステル化カルボキシはとりわけ低級アルコキシカルボニル、例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、イソ−プロポキシカルボニル、メトキシカルボニルまたはエトキシカルボニル、フェニル−低級アルコキシカルボニル、またはフェニルオキシカルボニルである。
【００１７】
アルカノイルは一級アルキルカルボニル、とりわけ低級アルカノイル、例えば、アセチルである。
Ｎ−モノ−もしくはＮ，Ｎ−ジ置換カルバモイルはとりわけ独立して低級アルキル、フェニル−低級アルキルおよびヒドロキシ−低級アルキル、または低級アルキレン、オキサ−低級アルキレンまたはアザ−低級アルキレンから選択される１または２個の置換基により置換されており、所望により末端窒素原子で置換されている。
【００１８】
０、１、２または３個の環窒素原子および０または１個の酸素原子および０または１個の硫黄原子を含む単−もしくは二環式ヘテロアリール基（該基はそれぞれの場合に非置換またはモノ−もしくはポリ置換である）は、ヘテロアリールラジカルを式（Ｉ）の残りの分子に結合している環において不飽和であり、好ましくは環、結合している環、所望によりまたなんらかの縮合環において、少なくとも１個の炭素原子が窒素、酸素および硫黄からなる群から選択されるヘテロ原子により置換されているヘテロ環式部分を意味する；該結合している環は好ましくは５から１２個、より好ましくは５または６個の環原子を有する；非置換であるかまたはアリールに対して置換基として上記定義のもの、もっとも好ましくは低級アルキル、例えば、メチル、低級アルコキシ、例えば、メトキシまたはエトキシ、またはヒドロキシの群から選択される１個またはそれ以上、とりわけ１または２個の置換基により置換されていてよい。好ましくは単もしくは二環式ヘテロアリール基は２Ｈ−ピロリル、ピロリル、イミダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ピラゾリル、インダゾリル、プリニル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、４Ｈ−キノリジニル、イソキノリル、キノリル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリル、キナゾリニル、キノリニル、プテリジニル、インドリジニル、３Ｈ−インドリル、インドリル、イソインドリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フラザニル、ベンゾ［ｄ］ピラゾリル、チエニルおよびフラニルから選択される。より好ましくは単−もしくは二環式ヘテロアリール基はピロリル、イミダゾリル、例えば、１Ｈ−イミダゾール−１−イル、ベンゾイミダゾリル、例えば、１−ベンゾイミダゾリル、インダゾリル、とりわけ５−インダゾリル、ピリジル、とりわけ２−、３−もしくは４−ピリジル、ピリミジニル、とりわけ２−ピリミジニル、ピラジニル、イソキノリニル、とりわけ３−イソキノリニル、キノリニル、とりわけ４−もしくは８−キノリニル、インドリル、とりわけ３−インドリル、チアゾリル、ベンゾ［ｄ］ピラゾリル、チエニル、およびフラニルからなる群から選択される。本発明の１つの好ましい態様において、ピリジルラジカルはオルト位の窒素原子でヒドロキシにより置換されており、したがって少なくとも部分的にピリジン−（１Ｈ）２−オンである対応する互変異性体形で存在する。他の好ましい態様において、ピリミジニルラジカルは２および４位の両方をヒドロキシにより置換されており、したがっていくつかの互変異性体形、例えば、ピリミジン−（１Ｈ，３Ｈ）−２，４−ジオンで存在する。
【００１９】
ヘテロシクリルはとりわけ窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１または２個のヘテロ原子を有する５、６または７員ヘテロ環式系であり、不飽和または完全にもしくは部分的に飽和であり得、そして非置換であるかまたはとりわけ低級アルキル、例えば、メチル、フェニル−低級アルキル、例えば、ベンジル、オキソ、またはヘテロアリール、例えば、２−ピペラジニルにより置換されている；ヘテロシクリルはとりわけ２−もしくは３−ピロリジニル、２−オキソ−５−ピロリジニル、ピペリジニル、Ｎ−ベンジル−４−ピペリジニル、Ｎ−低級アルキル−４−ピペリジニル、Ｎ−低級アルキル−ピペラジニル、モルホリニル、例えば、２−もしくは３−モルホリニル、２−オキソ−１Ｈ−アゼピン−３−イル、２−テトラヒドロフラニル、または２−メチル−１，３−ジオキソラン−２−イルである。
塩はとりわけ式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容される塩である。
【００２０】
このような塩は、例えば、酸付加塩として、好ましくは、塩基性窒素原子を有する式（Ｉ）の化合物と有機酸または無機酸との塩、とりわけ薬学的に許容される塩として形成される。適当な無機酸は、例えば、ハロゲン酸、例えば、塩酸、硫酸、またはリン酸である。適当な有機酸は、例えば、カルボン酸、ホスホン酸、スルホン酸またはスルファミン酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、グリコール酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アミノ酸、例えば、グルタミン酸またはアスパラギン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、メチルマレイン酸、シクロヘキサンカルボン酸、アダマンタンカルボン酸、安息香酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、フタル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、ケイ皮酸、メタン−もしくはエタン−スルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、１，５−ナフタレン−ジスルホン酸、２−、３−もしくは４−メチルベンゼンスルホン酸、メチル硫酸、エチル硫酸、ドデシル硫酸、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸、Ｎ−メチル−、Ｎ−エチル−もしくはＮ−プロピル−スルファミン酸、または他の有機プロトン酸、例えば、アスコルビン酸である。
【００２１】
負に帯電したラジカル、例えば、カルボキシまたはスルホの存在下において、塩はまた塩基と、例えば、金属またはアンモニウム塩、例えば、アルカリ金属またはアルカリ土類金属塩、例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウムまたはカルシウム塩またはアンモニアまたは適当な有機アミンとのアンモニウム塩、例えば、三級モノアミン、例えば、トリエチルアミンまたはトリ（２−ヒドロキシエチル）アミン、またはヘテロ環式塩基、例えば、Ｎ−エチル−ピペリジンまたはＮ，Ｎ’−ジメチルピペラジンと形成できる。
【００２２】
塩基性基および酸性基が同じ分子中に存在するとき、式（Ｉ）の化合物はまた内部塩を形成し得る。
単離または精製の目的のために、薬学的に許容されない塩、例えば、ピクリン酸塩または過塩素酸塩を使用することもできる。治療的使用のために、薬学的に許容される塩または遊離化合物のみが使用され（適当なとき医薬品の形態で）、そしてこれらが好ましい。
【００２３】
遊離形の新規化合物と、例えば、新規化合物の精製または同定における中間体として使用され得る塩を含む、それらの塩形との密接な関係を考慮して、上記および下記遊離化合物の言及は適当および好都合なとき、対応する塩もまた意味すると理解されるべきである。
式（Ｉ）の範囲内の化合物およびそれらの製造のための方法は２００４年１月１５日公開ＷＯ  ０４／００５２８１に記載されている（出典明示により本出願に包含させる）。好ましい化合物は構造（ＩＩ）
【化２】
2009504674.tif 000003
を有する４−メチル−３−［［４−（３−ピリジニル）−２−ピリミジニル］アミノ］−Ｎ−［５−（４−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−３−（トリフルオロメチル）フェニル］ベンズアミド（下記“化合物（ＩＩ）”）である。
【００２４】
ＨＤＡＣ阻害剤化合物
本発明の組合せの使用のための特に興味あるＨＤＡＣ化合物は下記式（ＩＩＩ）に記載のヒドロキサメート化合物またはその薬学的に許容される塩である：
【化３】
2009504674.tif 000004
〔式中、
Ｒ１はＨ；ハロ；または直鎖Ｃ１−Ｃ６アルキル、とりわけメチル、エチルまたはｎ−プロピルであり（このメチル、エチルおよびｎ−プロピル置換基は非置換であるか、アルキル置換基について下記の１個またはそれ以上の置換基により置換されている）；
Ｒ２はＨ；Ｃ１−Ｃ１０アルキル、好ましくはＣ１−Ｃ６アルキル、例えば、メチル、エチルまたは−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＨ；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキルアルキル；シクロアルキルアルキル、例えば、シクロプロピルメチル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えば、ベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチル；−（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）Ｒ６；−（ＣＨ２）ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ６；アミノアシル；ＨＯＮ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ＝Ｃ（Ｒ１）−アリール−アルキル−；および−（ＣＨ２）ｎＲ７から選択され；
Ｒ３およびＲ４は同じまたは異なって、独立して、Ｈ；Ｃ１−Ｃ６アルキル；アシル；またはアシルアミノであるか；または
Ｒ３およびＲ４はそれらが結合している炭素と共に、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝ＳまたはＣ＝ＮＲ８を示すか；または
Ｒ２は結合している窒素と共に、およびＲ３は結合している炭素と共に、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；ヘテロアリール；ポリヘテロアリール；非芳香族性ポリヘテロ環；または混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環を形成でき；
Ｒ５はＨ；Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；アシル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えば、ベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチル；芳香族性多環式；非芳香族性多環式；混合アリールおよび非アリール多環式；ポリヘテロアリール；非芳香族性ポリヘテロ環；および混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環から選択され；
ｎ、ｎ１、ｎ２およびｎ３は同じまたは異なって、独立して０−６から選択され（ここで、ｎ１が１−６のとき、それぞれの炭素原子は所望により独立してＲ３および／またはＲ４で置換されている）；
ＸおよびＹは同じまたは異なって、独立してＨ；ハロ；Ｃ１−Ｃ４アルキル、例えば、ＣＨ３およびＣＦ３；ＮＯ２；Ｃ（Ｏ）Ｒ１；ＯＲ９；ＳＲ９；ＣＮ；およびＮＲ１０Ｒ１１から選択され；
Ｒ６はＨ；Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；シクロアルキルアルキル、例えば、シクロプロピルメチル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えば、ベンジルおよび２−フェニルエテニル；ヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチル；ＯＲ１２；およびＮＲ１３Ｒ１４から選択され；
【００２５】
Ｒ７はＯＲ１５；ＳＲ１５；Ｓ（Ｏ）Ｒ１６；ＳＯ２Ｒ１７；ＮＲ１３Ｒ１４；およびＮＲ１２ＳＯ２Ｒ６から選択され；
Ｒ８はＨ；ＯＲ１５；ＮＲ１３Ｒ１４；Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えば、ベンジル；およびヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチルから選択され；
Ｒ９はＣ１−Ｃ４アルキル、例えば、ＣＨ３およびＣＦ３；Ｃ（Ｏ）−アルキル、例えば、Ｃ（Ｏ）ＣＨ３；およびＣ（Ｏ）ＣＦ３から選択され；
Ｒ１０およびＲ１１は同じまたは異なって、独立してＨ；Ｃ１−Ｃ４アルキル；および−Ｃ（Ｏ）−アルキルから選択され；
Ｒ１２はＨ；Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキルアルキル；アリール；混合アリールおよび非アリール多環式；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えば、ベンジル；およびヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチルから選択され；
Ｒ１３およびＲ１４は同じまたは異なって、独立してＨ；Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えば、ベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチル；アミノアシルから選択されるか；または
Ｒ１３およびＲ１４はそれらが結合している窒素と共に、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；ヘテロアリール；ポリヘテロアリール；非芳香族性ポリヘテロ環；または混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環であり；
Ｒ１５はＨ；Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル；ヘテロアリールアルキル；および（ＣＨ２）ｍＺＲ１２から選択され；
Ｒ１６はＣ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；ポリヘテロアリール；アリールアルキル；ヘテロアリールアルキル；および（ＣＨ２）ｍＺＲ１２から選択され；
Ｒ１７はＣ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；アリール；芳香族性多環式；ヘテロアリール；アリールアルキル；ヘテロアリールアルキル；ポリヘテロアリールおよびＮＲ１３Ｒ１４から選択され；
ｍは０−６から選択される整数であり；そして
ＺはＯ；ＮＲ１３；Ｓ；およびＳ（Ｏ）から選択される〕。
【００２６】
必要に応じて、“非置換”は置換基がないかまたは置換基が水素のみであることを意味する。
ハロ置換基はフルオロ、クロロ、ブロモおよびヨード、好ましくはフルオロまたはクロロから選択される。
【００２７】
アルキル置換基は直線−および分岐−Ｃ１−Ｃ６アルキルを、特記されない限り含む。適当な直線−および分岐−Ｃ１−Ｃ６アルキル置換基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、２−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチルなどを含む。特記されない限り、アルキル置換基は、非置換アルキル基、および、不飽和、すなわち、単またはさらに二重もしくは三重Ｃ−Ｃ結合；アシル；シクロアルキル；ハロ；オキシアルキル；アルキルアミノ；アミノアルキル；アシルアミノ；およびＯＲ１５、例えば、アルコキシを含む、１個またはそれ以上の適当な置換基により置換されているアルキル基の両方を含む。アルキル基に対して好ましい置換基は、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、オキシアルキル、アルキルアミノおよびアミノアルキルを含む。
【００２８】
シクロアルキル置換基はＣ３−Ｃ９シクロアルキル基、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを、特記されない限り含む。特記されない限り、シクロアルキル置換基は、非置換シクロアルキル基、および、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、アミノアルキル、オキシアルキル、アルキルアミノおよびＯＲ１５、例えば、アルコキシを含む、１個またはそれ以上の適当な置換基により置換されているシクロアルキル基の両方を含む。シクロアルキル基に対して好ましい置換基は、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、オキシアルキル、アルキルアミノおよびアミノアルキルを含む。
【００２９】
上記アルキルおよびシクロアルキル置換基はまた、他の置換基のアルキル部分、例えば、限定はしないが、アルコキシ、アルキルアミン、アルキルケトン、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、アルキルスルホニルおよびアルキルエステル置換基などに適用される。
【００３０】
ヘテロシクロアルキル置換基は窒素、硫黄、酸素から選択される１−３個のヘテロ原子を含む３から９員脂肪族環、例えば、４から７員脂肪族環を含む。適当なヘテロシクロアルキル置換基の例は、ピロリジル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロチオフラニル、ピペリジル、ピペラジル、テトラヒドロピラニル、モルホリノ、１，３−ジアザパン、１，４−ジアザパン、１，４−オキサゼパンおよび１，４−オキサチアパンを含む。特記されない限り、環は非置換であるか、またはＣ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えば、ベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチル；ハロ；アミノ；アルキルアミノおよびＯＲ１５、例えば、アルコキシを含む、１個またはそれ以上の適当な置換基による炭素原子で置換されている。特記されない限り、窒素ヘテロ原子は非置換であるか、またはＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル；アリールアルキル、例えば、ベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチル；アシル；アミノアシル；アルキルスルホニル；およびアリールスルホニルにより置換されている。
【００３１】
シクロアルキルアルキル置換基は式−（ＣＨ２）ｎ５−シクロアルキル（ここで、ｎ５は１−６の数である）の化合物を含む。適当なアルキルシクロアルキル置換基はシクロペンチルメチル、シクロペンチルエチル、シクロヘキシルメチルなどを含む。このような置換基は非置換であるか、またはアルキルおよびシクロアルキルに対して上記のものを含む適当な置換基によりアルキル部分またはシクロアルキル部分で置換されている。
【００３２】
アリール置換基は非置換フェニル、および、Ｃ１−Ｃ６アルキル；シクロアルキルアルキル、例えば、シクロプロピルメチル；Ｏ（ＣＯ）アルキル；オキシアルキル；ハロ；ニトロ；アミノ；アルキルアミノ；アミノアルキル；アルキルケトン；ニトリル；カルボキシアルキル；アルキルスルホニル；アミノスルホニル；アリールスルホニルおよびＯＲ１５、例えば、アルコキシを含む１個またはそれ以上の適当な置換基により置換されているフェニルを含む。好ましい置換基はＣ１−Ｃ６アルキル；シクロアルキル、例えば、シクロプロピルメチル；アルコキシ；オキシアルキル；ハロ；ニトロ；アミノ；アルキルアミノ；アミノアルキル；アルキルケトン；ニトリル；カルボキシアルキル；アルキルスルホニル；アリールスルホニルおよびアミノスルホニルを含む。適当なアリール基の例はＣ１−Ｃ４アルキルフェニル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシフェニル、トリフルオロメチルフェニル、メトキシフェニル、ヒドロキシエチルフェニル、ジメチルアミノフェニル、アミノプロピルフェニル、カルボエトキシフェニル、メタンスルホニルフェニルおよびトリルスルホニルフェニルを含む。
【００３３】
芳香族性多環式はナフチル、および、Ｃ１−Ｃ６アルキル；アルキルシクロアルキル、例えば、シクロプロピルメチル；オキシアルキル；ハロ；ニトロ；アミノ；アルキルアミノ；アミノアルキル；アルキルケトン；ニトリル；カルボキシアルキル；アルキルスルホニル；アリールスルホニル；アミノスルホニルおよびＯＲ１５、例えば、アルコキシを含む１個またはそれ以上の適当な置換基により置換されているナフチルを含む。
【００３４】
ヘテロアリール置換基はＮ、ＯおよびＳから選択される１個またはそれ以上のヘテロ原子、例えば、１−４個のヘテロ原子を含む５から７員芳香環を有する化合物を含む。典型的なヘテロアリール置換基はフリル、チエニル、ピロール、ピラゾール、トリアゾール、チアゾール、オキサゾール、ピリジン、ピリミジン、イソオキサゾリル、ピラジンなどを含む。特記されない限り、ヘテロアリール置換基は非置換であるか、またはアルキル、上記アルキル置換基、および他のヘテロアリール置換基を含む１個またはそれ以上の適当な置換基による炭素原子で置換されている。窒素原子は非置換であるか、例えば、Ｒ１３により置換されている；とりわけ有用なＮ置換基はＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、アシル、アミノアシルおよびスルホニルを含む。
【００３５】
アリールアルキル置換基は式−（ＣＨ２）ｎ５−アリール、−（ＣＨ２）ｎ５−１−（ＣＨ−アリール）−（ＣＨ２）ｎ５−アリールまたは−（ＣＨ２）ｎ５−１ＣＨ（アリール）（アリール）（ここで、アリールおよびｎ５は上記定義のとおりである）の基を含む。このようなアリールアルキル置換基はベンジル、２−フェニルエチル、１−フェニルエチル、トリル−３−プロピル、２−フェニルプロピル、ジフェニルメチル、２−ジフェニルエチル、５，５−ジメチル−３−フェニルペンチルなどを含む。アリールアルキル置換基は非置換であるか、アルキル部分またはアリール部分でアルキルおよびアリール置換基の両方に対して上記のとおりに置換されている。
【００３６】
ヘテロアリールアルキル置換基は式−（ＣＨ２）ｎ５−ヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールおよびｎ５は上記定義のとおりである）の基を含み、架橋基がヘテロアリール部分、例えば、２−、３−もしくは４−ピリジルメチル、イミダゾリルメチル、キノリルエチルおよびピロリルブチルの炭素または窒素に結合している。ヘテロアリール置換基は非置換であるか、ヘテロアリールおよびアルキル置換基に対して上記のとおりに置換されている。
【００３７】
アミノアシル置換基は式−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｈ）（ＮＲ１３Ｒ１４）−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ５（ここで、ｎ、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ５は上記のとおりである）の基を含む。適当なアミノアシル置換基は天然および非天然アミノ酸、例えば、グリシン、Ｄ−トリプトファン、Ｌ−リシナル、Ｄ−もしくはＬ−ホモセリニル、４−アミノ酪酸アシルおよび±−３−アミン−４−ヘキセノイルを含む。
【００３８】
非芳香族性多環式置換基はそれぞれの環が４−から９−員であり得、そしてそれぞれの環が０、１個またはそれ以上の二重および／または三重結合を含み得る二環式および三環式縮合環系を含む。非芳香族性多環式の適当な例はデカリン、オクタヒドロインデン、ペルヒドロベンゾシクロヘプテンおよびペルヒドロベンゾ−［ｆ］−アズレンを含む。このような置換基は非置換であるか、シクロアルキル基に対して上記のとおりに置換されている。
【００３９】
混合アリールおよび非アリール多環式置換基はそれぞれの環が４−から９−員であり得、そして少なくとも１個の環が芳香族性である二環式および三環式縮合環系を含む。混合アリールおよび非アリール多環式の適当な例はメチレンジオキシフェニル、ビスメチレンジオキシフェニル、１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン、ジベンゾスベラン、ジヒドロアントラセンおよび９Ｈ−フルオレンを含む。このような置換基は非置換であるか、ニトロによりまたはシクロアルキル基に対して上記のとおりに置換されている。
【００４０】
ポリヘテロアリール置換基は、それぞれの環が独立してＯ、ＮまたはＳから選択される、１個またはそれ以上のヘテロ原子、例えば、１、２、３、または４個のヘテロ原子を含む５または６員であり得、縮合環系が芳香族であるような二環式および三環式縮合環系を含む。ポリヘテロアリール環系の適当な例はキノリン、イソキノリン、ピリドピラジン、ピロロピリジン、フロピリジン、インドール、ベンゾフラン、ベンゾチオフラン、ベンゾインドール、ベンゾオキサゾール、ピロロキノリンなどを含む。特記されない限り、ポリヘテロアリール置換基は非置換であるか、アルキル、上記アルキル置換基および式−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２））１−３Ｈの置換基を含む、１個またはそれ以上の適当な置換基による炭素原子で置換されている。窒素原子は非置換であるか、例えば、Ｒ１３により置換されており、とりわけ有用なＮ置換基はＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、アシル、アミノアシルおよびスルホニルを含む。
【００４１】
非芳香族性ポリヘテロ環式置換基は、それぞれの環はＯ、ＮまたはＳから選択される１個またはそれ以上のヘテロ原子、例えば、１、２、３または４個のヘテロ原子を含む４−から９−員であり得、０または１個またはそれ以上のＣ−Ｃ二重または三重結合を含む二環式および三環式縮合環系を含む。非芳香族性ポリヘテロ環の適当な例はヘキシトール、シス−ペルヒドロ−シクロヘプタ［ｂ］ピリジニル、デカヒドロ−ベンゾ［ｆ］［１，４］オキサゼピニル、２，８−ジオキサビシクロ［３．３．０］オクタン、ヘキサヒドロ−チエノ［３，２−ｂ］チオフェン、ペルヒドロピロロ［３，２−ｂ］ピロール、ペルヒドロナフチリジン、ペルヒドロ−１Ｈ−ジシクロペンタ［ｂ，ｅ］ピランを含む。特記されない限り、非芳香族性ポリヘテロ環式置換基は非置換であるか、アルキルおよび上記アルキル置換基を含む１個またはそれ以上の置換基による炭素原子で置換されている。窒素原子は非置換であるか、例えば、Ｒ１３により置換されており、とりわけ有用なＮ置換基はＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、アシル、アミノアシルおよびスルホニルを含む。
【００４２】
混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環置換基はそれぞれの環はＯ、ＮまたはＳから選択される１個またはそれ以上のヘテロ原子を含む４−から９−員であり得、そして少なくとも１個の環が芳香族でなければならない二環式および三環式縮合環系を含む。混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環の適当な例は２，３−ジヒドロインドール、１，２，３，４−テトラヒドロキノリン、５，１１−ジヒドロ−１０Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピン、５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピン、１，２−ジヒドロピロロ［３，４−ｂ］［１，５］ベンゾジアゼピン、１，５−ジヒドロ−ピリド［２，３−ｂ］［１，４］ジアゼピン−４−オン、１，２，３，４，６，１１−ヘキサヒドロ−ベンゾ［ｂ］ピリド［２，３−ｅ］［１，４］ジアゼピン−５−オンを含む。特記されない限り、混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環式置換基は非置換であるか、−Ｎ−ＯＨ、＝Ｎ−ＯＨ、アルキルおよび上記アルキル置換基を含む１個またはそれ以上の適当な置換基により炭素原子で置換されている。窒素原子は非置換であるか、例えば、Ｒ１３により置換されている；とりわけ有用なＮ置換基はＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、アシル、アミノアシルおよびスルホニルを含む。
【００４３】
アミノ置換基は一級、二級および三級アミンおよび塩形、四級アミンを含む。アミノ置換基の例はモノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−アリールアルキルアミノ、アリール−アリールアルキルアミノ、アルキル−アリールアミノ、アルキル−アリールアルキルアミノなどを含む。
【００４４】
スルホニル置換基はアルキルスルホニルおよびアリールスルホニル、例えば、メタンスルホニル、ベンゼンスルホニル、トシルなどを含む。
【００４５】
アシル置換基は式−Ｃ（Ｏ）−Ｗ、−ＯＣ（Ｏ）−Ｗ、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＷまたはＣ（Ｏ）ＮＲ１３Ｒ１４を含む（ここで、ＷはＲ１６、Ｈまたはシクロアルキルアルキルである）。
【００４６】
アシルアミノ置換基は、式−Ｎ（Ｒ１２）Ｃ（Ｏ）−Ｗ、Ｎ（Ｒ１２）Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｗおよび−Ｎ（Ｒ１２）Ｃ（Ｏ）−ＮＨＯＨの置換基を含む（ここで、Ｒ１２およびＷは上記定義のとおりである）。
【００４７】
Ｒ２の置換基ＨＯＮ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ＝Ｃ（Ｒ１）−アリール−アルキル−は式
【化４】
2009504674.tif 000005
の基である。
【００４８】
それぞれの置換基に対して好ましいものは下記を含む：
Ｒ１がＨ、ハロまたは直鎖Ｃ１−Ｃ４アルキルであり；
Ｒ２がＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）Ｒ６、アミノアシルおよび−（ＣＨ２）ｎＲ７から選択され；
Ｒ３およびＲ４が同じまたは異なって、独立してＨおよびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または
Ｒ３およびＲ４がそれらが結合している炭素と共にＣ＝Ｏ、Ｃ＝ＳまたはＣ＝ＮＲ８を示し；
Ｒ５がＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、芳香族性多環式、非芳香族性多環式、混合アリールおよび非アリール多環式、ポリヘテロアリール、非芳香族性ポリヘテロ環、ならびに混合アリールおよび非アリールポリヘテロ環から選択され；
ｎ、ｎ１、ｎ２およびｎ３が同じまたは異なって、独立して０−６から選択され（ここで、ｎ１が１−６であるとき、それぞれの炭素原子は非置換であるか、または独立してＲ３および／またはＲ４で置換されている）；
ＸおよびＹが同じまたは異なって、独立してＨ、ハロ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、ＣＦ３、ＮＯ２、Ｃ（Ｏ）Ｒ１、ＯＲ９、ＳＲ９、ＣＮおよびＮＲ１０Ｒ１１から選択され；
Ｒ６がＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、アルキルシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ＯＲ１２およびＮＲ１３Ｒ１４から選択され；
Ｒ７がＯＲ１５、ＳＲ１５、Ｓ（Ｏ）Ｒ１６、ＳＯ２Ｒ１７、ＮＲ１３Ｒ１４およびＮＲ１２ＳＯ２Ｒ６から選択され；
Ｒ８がＨ、ＯＲ１５、ＮＲ１３Ｒ１４、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルおよびヘテロアリールアルキルから選択され；
Ｒ９がＣ１−Ｃ４アルキルおよびＣ（Ｏ）−アルキルから選択され；
Ｒ１０およびＲ１１が同じまたは異なって、独立してＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）−アルキルから選択され；
Ｒ１２がＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルおよびヘテロアリールアルキルから選択され；
Ｒ１３およびＲ１４が同じまたは異なって、独立してＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよびアミノアシルから選択され；
Ｒ１５がＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよび（ＣＨ２）ｍＺＲ１２から選択され；
Ｒ１６がＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよび（ＣＨ２）ｍＺＲ１２から選択され；
Ｒ１７がＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルおよびＮＲ１３Ｒ１４から選択され；
ｍが０−６から選択される整数であり；そして
ＺがＯ、ＮＲ１３、ＳおよびＳ（Ｏ）から選択される；
またはその薬学的に許容される塩。
【００４９】
式（Ｉ）の有用な化合物は、それぞれのＲ１、Ｘ、Ｙ、Ｒ３およびＲ４がＨであり、ｎ２およびｎ３の一方が０であり、もう一方が１であり、とりわけＲ２がＨまたは−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨであるものを含む。
【００５０】
ヒドロキサメート化合物の１つの適当な種類は、式（ＩＩＩａ）
【化５】
2009504674.tif 000006
〔式中、
ｎ４は０−３であり；
Ｒ２はＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）Ｒ６、アミノアシルおよび−（ＣＨ２）ｎＲ７から選択され；そして
Ｒ５はヘテロアリール；ヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチル；芳香族性多環式；非芳香族性多環式；混合アリールおよび非アリール多環式；ポリヘテロアリールまたは混合アリール；および非アリールポリヘテロ環である〕
で示されるもの、またはその薬学的に許容される塩である。
【００５１】
ヒドロキサメート化合物の他の適当な種類は、式（ＩＩＩａ）
【化６】
2009504674.tif 000007
〔式中、
ｎ４は０−３であり；
Ｒ２はＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）Ｒ６、アミノアシルおよび−（ＣＨ２）ｎＲ７から選択され；
Ｒ５’はアリール；アリールアルキル；芳香族性多環式；非芳香族性多環式および混合アリール；および非アリール多環式、とりわけアリール、例えば、ｐ−フルオロフェニル、ｐ−クロロフェニル、ｐ−Ｏ−Ｃ１−Ｃ４アルキルフェニル、例えば、ｐ−メトキシフェニル、およびｐ−Ｃ１−Ｃ４アルキルフェニル；およびアリールアルキル、例えば、ベンジル、オルト−、メタ−またはパラ−フルオロベンジル、オルト−、メタ−またはパラ−クロロベンジル、オルト−、メタ−またはパラ−モノ、ジ−またはトリ−Ｏ−Ｃ１−Ｃ４アルキルベンジル、例えば、オルト−、メタ−またはパラ−メトキシベンジル、ｍ，ｐ−ジエトキシベンジル、ｏ，ｍ，ｐ−トリメトキシベンジルおよびオルト−、メタ−またはパラ−モノ、ジ−またはトリ−Ｃ１−Ｃ４アルキルフェニル、例えば、ｐ−メチル、ｍ，ｍ−ジエチルフェニルである〕
で示されるもの、またはその薬学的に許容される塩である。
【００５２】
他の興味ある種類は、式（ＩＩＩｂ）
【化７】
2009504674.tif 000008
〔式中、
Ｒ２’はＨ；Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ６シクロアルキル；シクロアルキルアルキル、例えば、シクロプロピルメチル；（ＣＨ２）２−４ＯＲ２１から選択され（ここで、Ｒ２１はＨ、メチル、エチル、プロピルおよびｉ−プロピルである）；そして
Ｒ５”は非置換１Ｈ−インドル−３−イル、ベンゾフラン−３−イルもしくはキノリン−３−イル、または置換１Ｈ−インドル−３−イル、例えば、５−フルオロ−１Ｈ−インドル−３−イルまたは５−メトキシ−１Ｈ−インドル−３−イル、ベンゾフラン−３−イルまたはキノリン−３−イルである〕
で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩である。
【００５３】
ヒドロキサメート化合物の他の興味ある種類は、式（ＩＩＩｃ）
【化８】
2009504674.tif 000009
〔式中、
Ｚ１を含む環は芳香族性または非芳香族性であり（該非芳香環は飽和または不飽和である）、
Ｚ１はＯ、ＳまたはＮ−Ｒ２０であり；
Ｒ１８はＨ；ハロ；Ｃ１−Ｃ６アルキル（メチル、エチル、ｔ−ブチル）；Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；アリール、例えば、非置換フェニルまたは４−ＯＣＨ３もしくは４−ＣＦ３により置換されているフェニル；またはヘテロアリール、例えば、２−フラニル、２−チオフェニルまたは２−、３−もしくは４−ピリジルであり；
Ｒ２０はＨ；Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ１−Ｃ６アルキル−Ｃ３−Ｃ９シクロアルキル、例えば、シクロプロピルメチル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えば、ベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチル；アシル、例えば、アセチル、プロピオニルおよびベンゾイル；またはスルホニル、例えば、メタンスルホニル、エタンスルホニル、ベンゼンスルホニルおよびトルエンスルホニルであり；
Ａ１は独立してＨ；Ｃ１−Ｃ６アルキル；−ＯＲ１９；ハロ；アルキルアミノ；アミノアルキル；ハロ；またはヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチルである、１、２または３個の置換基であり；
Ｒ１９はＨ；Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えば、ベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチルおよび（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２））１−３Ｈから選択され；
Ｒ２はＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル、Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、−（ＣＨ２）ｎＣ（Ｏ）Ｒ６、アミノアシルおよび−（ＣＨ２）ｎＲ７から選択され；
ｖは０、１または２であり；
ｐは０−３であり；そして
ｑは１−５であり、ｒは０であるか；または
ｑは０であり、ｒは１−５である〕
で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩である。他の変化可能な置換基は上記定義のとおりである。
【００５４】
とりわけ式（ＩＩＩｃ）の有用な化合物は、Ｒ２がＨ、または（ＣＨ２）ｐＣＨ２ＯＨであり、ｐが１−３であり、とりわけＲ１がＨであるもの；例えば、Ｒ１がＨであり、ＸおよびＹがそれぞれＨであり、ｑが１−３であり、ｒが０であるか、またはｑが０であり、ｒが１−３であり、とりわけＺ１がＮ−Ｒ２０であるものである。これらの化合物の中で、Ｒ２が好ましくはＨまたはＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨであり、そしてｑおよびｒの合計が好ましくは１である。
【００５５】
ヒドロキサメート化合物の他の興味ある種類は、式（ＩＩＩｄ）
【化９】
2009504674.tif 000010
〔式中、
Ｚ１はＯ、ＳまたはＮ−Ｒ２０であり；
Ｒ１８はＨ；ハロ；Ｃ１−Ｃ６アルキル（メチル、エチル、ｔ−ブチル）；Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；アリール、例えば、非置換フェニルまたは４−ＯＣＨ３もしくは４−ＣＦ３により置換されているフェニル；またはヘテロアリールであり；
Ｒ２０はＨ；Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキル−Ｃ３−Ｃ９シクロアルキル、例えば、シクロプロピルメチル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えば、ベンジル；ヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチル；アシル、例えば、アセチル、プロピオニルおよびベンゾイル；またはスルホニル、例えば、メタンスルホニル、エタンスルホニル、ベンゼンスルホニル、トルエンスルホニル）であり；
Ａ１は独立してＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＯＲ１９またはハロである１、２または３個の置換基であり；
Ｒ１９はＨ；Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ４−Ｃ９シクロアルキル；Ｃ４−Ｃ９ヘテロシクロアルキル；アリール；ヘテロアリール；アリールアルキル、例えば、ベンジル；およびヘテロアリールアルキル、例えば、ピリジルメチルから選択され；
ｐは０−３であり；そして
ｑは１−５であり、そしてｒは０であるか；または
ｑは０であり、そしてｒは１−５である〕
で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩である。他の変化可能な置換基は上記定義のとおりである。
【００５６】
とりわけ式（ＩＩＩｄ）の有用な化合物は、Ｒ２がＨまたは（ＣＨ２）ｐＣＨ２ＯＨであり（ｐが１−３である）、とりわけＲ１がＨであるもの；例えば、Ｒ１がＨであり、ＸおよびＹがそれぞれＨであり、ｑが１−３であり、ｒが０であるか、またはｑが０であり、ｒが１−３であるものである。これらの化合物の中で、Ｒ２が好ましくはＨまたは−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨであり、そしてｑおよびｒの合計が好ましくは１である。
【００５７】
本発明は、さらに式（ＩＩＩｅ）
【化１０】
2009504674.tif 000011
で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩に関する。変化可能な置換基は上記定義のとおりである。
【００５８】
とりわけ式（ＩＩＩｅ）の有用な化合物は、Ｒ１８がＨ、フルオロ、クロロ、ブロモ、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、置換Ｃ１−Ｃ４アルキル基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、非置換フェニル、パラ位を置換されているフェニル、またはヘテロアリール、例えば、ピリジル環であるものである。
【００５９】
式（ＩＩＩｅ）の有用な化合物の他の基は、Ｒ２がＨまたは（ＣＨ２）ｐＣＨ２ＯＨであり、ｐが１−３であり、とりわけＲ１がＨであるもの；例えば、Ｒ１がＨであり、ＸおよびＹがそれぞれＨであり、ｑが１−３であり、ｒが０であるか、またはｑが０であり、ｒが１−３であるものである。これらの化合物の中で、Ｒ２が好ましくはＨまたは−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨであり、ｑおよびｒの合計が好ましくは１である。これらの化合物の中で、ｐが好ましくは１であり、Ｒ３およびＲ４が好ましくはＨである。
【００６０】
式（ＩＩＩｅ）の有用な化合物の他の基は、Ｒ１８がＨ、メチル、エチル、ｔ−ブチル、トリフルオロメチル、シクロヘキシル、フェニル、４−メトキシフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、２−フラニル、２−チオフェニル、または２−、３−もしくは４−ピリジルであり（２−フラニル、２−チオフェニルおよび２−、３−または４−ピリジル置換基が非置換であるか、またはヘテロアリール環に対して上記のとおり置換されている）；Ｒ２がＨまたは−（ＣＨ２）ｐＣＨ２ＯＨであり（ｐが１−３である）；とりわけＲ１がＨであり、ＸおよびＹがそれぞれＨであり、ｑが１−３であり、ｒが０であるか、またはｑが０であり、ｒが１−３であるものである。これらの化合物の中で、Ｒ２が好ましくはＨまたは−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨであり、ｑおよびｒの合計が好ましくは１である。
【００６１】
式（ＩＩＩｅ）の化合物（式中、Ｒ２０がＨまたはＣ１−Ｃ６アルキル、とりわけＨである）が上記式（Ｉｅ）の化合物のサブグループのそれぞれの重要なメンバーである。
【００６２】
Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［（２−ヒドロキシエチル）［２−（１Ｈ−インドル−３−イル）エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド、Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（１Ｈ−インドル−３−イル）エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミドおよびＮ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド、またはその薬学的に許容される塩は、式（ＩＩＩｅ）の重要な化合物である。
【００６３】
本発明は、さらに式（ＩＩＩｆ）
【化１１】
2009504674.tif 000012
で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩に関する。変化可能な置換基は上記定義のとおりである。
【００６４】
式（ＩＩＩｆ）の有用な化合物は、Ｒ２がＨまたは（ＣＨ２）ｐＣＨ２ＯＨであり、ｐが１−３であり、とりわけＲ１がＨであるもの；例えば、Ｒ１がＨであり、ＸおよびＹがそれぞれＨであり、ｑが１−３であり、ｒが０であるか、またはｑが０であり、ｒが１−３であるものを含む。これらの化合物の中で、Ｒ２が好ましくはＨまたは−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨであり、ｑおよびｒの合計が好ましくは１である。
【００６５】
Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（ベンゾフル−３−イル）−エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド、またはその薬学的に許容される塩は、式（ＩＩＩｆ）の重要な化合物である。
【００６６】
上記化合物は、しばしば薬学的に許容される塩の形態で使用される。薬学的に許容される塩は、適当なとき、薬学的に許容される塩基付加塩および酸付加塩、例えば、金属塩、例えば、アルカリおよびアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、有機アミン付加塩およびアミノ酸付加塩およびスルホン酸塩を含む。酸付加塩は、無機酸付加塩、例えば、塩酸塩、硫酸塩およびリン酸塩；および有機酸付加塩、例えば、硫酸アルキル、硫酸アリール、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩および乳酸塩を含む。金属塩の例は、アルカリ金属塩、例えば、リチウム塩、ナトリウム塩およびカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えば、マグネシウム塩およびカルシウム塩、アルミニウム塩および亜鉛塩である。アンモニウム塩の例は、アンモニウム塩およびテトラメチルアンモニウム塩である。有機アミン付加塩の例は、モルホリンおよびピペリジンとの塩である。アミノ酸付加塩の例は、グリシン、フェニルアラニン、グルタミン酸およびリシンとの塩である。スルホン酸塩はメシル酸塩、トシル酸塩およびベンゼンスルホン酸塩を含む。
【００６７】
式（Ｉ）の範囲内のさらなるＨＤＡＩ化合物およびそれらの合成は、２００２年３月２１日公開のＷＯ  ０２／２２５７７に記載されている（出典明示によりその内容を本明細書に包含させる）。ＷＯ  ０２／２２５７７の範囲内の２個の好ましい化合物は
【化１２】
2009504674.tif 000013
であるＮ−ヒドロキシ−３−［４−［（２−ヒドロキシエチル）｛２−（１Ｈ−インドル−３−イル）エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド、またはその薬学的に許容される塩（下記“化合物（ＩＶ）”）、および
【化１３】
2009504674.tif 000014
であるＮ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（２−メチル−１Ｈ−インドル−３−イル）−エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミド、またはその薬学的に許容される塩（下記“化合物（Ｖ）”）である。
【００６８】
本発明の他の態様において、ＨＤＡＣ阻害剤化合物は、ヒストンデアセチラーゼを阻害するなんらかの化合物、例えば、トラポキシンおよび他のテトラペプチド、例えば、クラミドシンおよびＨＣトキシン；トリコスタチンおよびその類似体、例えば、トリコスタチンＡ；アピシジン；スベロイラニリド・ヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）；オキサムフラチン；ＭＳ−２７５；ピロキサミド；バルプロ酸；［４−（２−アミノ−フェニルカルバモイル）−ベンジル］−カルバミン酸ピリジン−３−イルメチルエステルおよびそれらの誘導体；デプシペプチドＦＲ９０１２２８；ＣＩ９９４；酪酸フェニル；酪酸ナトリウム；酪酸；J. Med. Chem. 45(9):1778-84 (Apr 25, 2002)に記載の３−（４−アロイル−１Ｈ−２ピロリル−Ｎ−ヒドロキシ−プロペンアミド；ＡＤＨＡ化合物８；−（−）デプデシン；スクリプタイド；およびサーチノールから選択される化合物から選択され得る。
【００６９】
特許文献の引用が上記に挙げられているそれぞれの場合において、化合物に関する物質は出典明示により本明細書に包含させる。記載されている、それらの薬学的に許容される塩、対応するラセミ体、ジアセテレオマー、エナンチオマー、互変異性体、ならびに存在するとき上記化合物の対応する結晶変態、例えば、溶媒和物、水和物および多形体も同様に含む。本発明の組合せにおける活性成分として使用される化合物は各々、引用文献に記載されているとおりに製造され、投与され得る。また、上記の２種以上の別々の活性成分の組合せ、すなわち、医薬組合せは本発明の範囲内であり、３種以上の活性成分を含むものも本発明の範囲内である。
【００７０】
本発明の特定の発見にしたがって、下記を提供する
１．ａ）式（Ｉ）のピリミジルアミノベンズアミド化合物；および
ｂ）少なくとも１種のヒストンデアセチラーゼ阻害剤を含む医薬組合せ。
２．処置を必要とする対象における増殖性疾患の処置または予防のための方法であって、該対象に、例えば、同時にまたは連続して、治療有効量の式（Ｉ）のピリミジルアミノベンズアミド化合物および例えば、上記のとおりのＨＤＡＣ阻害剤を共投与することを含む方法。
増殖性疾患の例は、例えば、腫瘍、白血病、乾癬、再狭窄、強皮症および線維症を含む。
３．例えば、上記２）の下に定義されている方法で使用するための上記１）の下に定義されている医薬組合せ。
４．上記２）の下に定義されている方法で使用するための医薬の製造における使用のための上記１）の下に定義されている医薬組合せ。
【００７１】
上記特定のとおりの方法における本発明の組合せの有用性は、例えば、下記の方法にしたがって動物試験方法ならびに臨床で立証され得る。
【００７２】
今回、驚くべきことにピリミジルアミノベンズアミド化合物およびＨＤＡＣ阻害剤の組合せが特に増殖性疾患に対する処置として有用であることを示す治療的特性を有することを見いだした。
【００７３】
他の態様において、本発明は増殖性疾患の処置のための方法であって、処置を必要とする哺乳動物に治療有効量のピリミジルアミノベンズアミド化合物およびＨＤＡＣ阻害剤またはそれらの薬学的に許容される塩またはプロドラッグの組合せを投与することを含む方法を提供する。
【００７４】
好ましくは本発明は増殖性疾患に罹患している哺乳動物、とりわけヒトを処置するための方法であって、処置を必要とする哺乳動物に阻害量のピリミジルアミノベンズアミド化合物およびＨＤＡＣ阻害剤またはそれらの薬学的に許容される塩の組合せを投与することを含む方法を提供する。
【００７５】
本明細書の記載において、“処置”なる用語は疾患に罹患するリスクのある患者または疾患ならびに病気に罹患している疑いのある患者の処置を含む、防止または予防処置ならびに治癒または疾患抑制処置の両方を含む。この用語はさらに疾患の進行の遅延のための処置を含む。
【００７６】
本明細書で使用される“治癒”なる用語は、増殖性疾患を含む進行する症状の発現の処置において有効であることを意味する。
“防止”なる用語は増殖性疾患を含む疾患の発症または再発の予防を意味する。
【００７７】
本明細書で使用される“進行の遅延”なる用語は、処置すべき疾患の前段階または初期にある患者への組み合わせ物の投与を意味し、ここで、該患者は、例えば、対応する疾患の前形態であることが診断されているか、または、該患者は、例えば医学的処置または事故に起因する状態にあって対応する疾患を発症しそうな状態にある。
【００７８】
特性の予測できない範囲は、ピリミジルアミノベンズアミド化合物およびＨＤＡＣ阻害剤の組合せの使用が増殖性疾患の処置のための薬剤の製造のために特に興味深いことを意味する。
ピリミジルアミノベンズアミド化合物およびＨＤＡＣ阻害剤の組合せが、優れた治療利点および他の利点で増殖性疾患の処置のために特に適当であることを立証するために、臨床試験を当業者に既知の方法で実施できる。
【００７９】
Ａ．組合せ処置
適当な臨床試験は、増殖性疾患を有する患者における、例えば、オープンラベル、用量漸増試験である。このような試験は特に本発明の組合せの活性成分の相乗効果を証明する。有利な効果は当業者に既知であるこれらの試験の結果を介して直接的に測定され得る。このような試験は、特に、活性成分を使用する単剤療法および本発明の組合せの効果を比較することが適当である。好ましくは、薬剤（ａ）の用量は最大耐性用量に到達するまで漸増させ、薬剤（ｂ）は固定された量で投与される。あるいは、薬剤（ａ）は固定された量で投与され、薬剤（ｂ）の用量を漸増させる。それぞれの患者は毎日または断続的にのいずれかで薬剤（ａ）を投与される。処置の効果は、このような試験における、６週ごとの、例えば、１２、１８または２４週後の症状スコアの評価により測定され得る。
【００８０】
本発明の医薬組合せの投与は、本発明の組合せで使用される薬学的活性成分の１種のみを使用する単剤療法と比較して、例えば、症状の緩和、進行の遅延または阻害に関して有利な効果、例えば、相乗的治療効果をもたらすだけでなく、さらに驚くべきことに有利な効果、例えば、少ない副作用、生活の質の改善または死亡率の減少をもたらす。
【００８１】
さらなる利点は本発明の組合せの活性成分の用量が少量で使用され得る、例えば、必要量がしばしば少量になるだけでなく頻度を減少させ、副作用の発生または重度を減少させ得る。これは処置される患者の要望および要求に一致する。
【００８２】
本明細書で使用される“共投与”または“組合せ投与”などなる用語は選択される複数の治療剤を一人の患者に投与することを含むことを意味し、薬剤は必ずしも同じ投与経路または同じ時点により投与されない処置レジメンを含むことを意図する。
【００８３】
本発明の１つの目的は、本発明の組合せを増殖性疾患を標的または予防する共同で治療有効量を含む医薬組成物を提供することである。この組成物において、薬剤（ａ）および薬剤（ｂ）は共に、一方の後に他方を、または１つの組合せ単位投与形態もしくは２つの個別の単位投与形態で別々に投与され得る。単位投与形態は、また、固定された組合せであり得る。
【００８４】
本発明の薬剤（ａ）および薬剤（ｂ）の別々の投与または少なくとも２種の組合せパートナー（ａ）および（ｂ）を含む固定された組合せ、すなわち、単一のガレヌス組成物の投与のための医薬組成物は、自体公知の方法で製造され得、ヒトを含む哺乳動物（温血動物）への経腸、たとえば経口または経直腸および非経腸投与に適したものであり、例えば、上記のとおりの単独または１もしくはそれ以上の薬学的に許容される担体または希釈剤、とりわけ経腸または非経腸投与に適したものと組み合わせた少なくとも１種の薬理学的に活性な組合せパートナーの治療有効量を含む。
【００８５】
適当な医薬組成物は、例えば、約０．１％から約９９．９％、好ましくは約１％から約６０％の活性成分を含む。経腸または非経腸投与用組合せ治療のための医薬品は、例えば、単位用量形のもの、例えば、糖被覆錠剤、錠剤、カプセルまたは坐剤、またはアンプル剤である。他に記載のない限り、これらはそれ自体既知の方法、例えば、慣用の混合、造粒、糖被覆、溶解または凍結乾燥法の手段により製造される。必要な有効量が複数の投与単位の投与により到達し得るため、それぞれの投与形の個々の用量に含まれる組合せパートナーの単位量はそれ自体で有効量を構成する必要はないと理解される。
【００８６】
特に、本発明の組合せの各組合せパートナーの治療有効量は、同時にまたは任意の順番で連続して投与され得、そしてその構成成分は別々にまたは固定された組合せとして投与され得る。例えば、本発明の増殖性疾患を予防または処置する方法は、同時にまたは任意の順番で連続して、共同で治療有効量で、好ましくは相乗的有効量で、例えば、本明細書に記載した量に対応する１日用量または断続的用量で、（ｉ）遊離または薬学的に許容される塩の形態の第一の薬剤（ａ）の投与；および（ｉｉ）遊離または薬学的に許容される塩の形態の薬剤（ｂ）の投与を含み得る。本発明の組合せの個々の組合せパートナーは、分割または単一組合せ形態で、治療過程の異なる時点で別々に、または同時一体的に投与され得る。さらに、投与なる用語は、また、組合せパートナー自体にインビボで変換される組合せパートナーのプロドラッグの使用を包含する。したがって、本発明は、同時的または代替的処置のすべてのかかるレジメンを包含するものとして理解されるべきであり、そして“投与”なる用語は、それにしたがって解釈されるべきである。
【００８７】
本発明の組合せにおいて使用される各組合せパートナーの有効量は、使用される特定の化合物または医薬組成物、投与経路、処置される状態、処置される状態の重症度に依存して変化し得る。したがって、本発明の組合せの投与レジメンは、投与経路ならびに患者の腎および肝機能を含む様々な因子にしたがって選択される。通常の知識を有する臨床医または医師であれば、容易に、状態の進行を予防、対抗または阻止するのに必要な単一の活性成分の有効量を決定し、そして処方することができる。毒性なしに効果を生じる範囲内の活性成分の濃度を達成する最適精度は、標的部位への活性成分の利用能の動力学に基づくレジメンを必要とする。
【００８８】
薬剤（ａ）または（ｂ）に対する１日用量は、もちろん様々な因子、例えば、選択される化合物、処置される特定の状態および所望の効果に依存して変化し得る。しかしながら、一般的に、満足な結果が単回投与または分割投与として１日あたり約０．０３−５ｍｇ／ｋｇ、特に１日あたり０．１−５ｍｇ／ｋｇ、例えば、１日あたり０．１−２．５ｍｇ／ｋｇの慣用の１日投与割合での薬剤（ａ）の投与で達成される。薬剤（ａ）および薬剤（ｂ）はなんらかの慣用の経路、特に、経腸的、例えば、経口的に、例えば、錠剤、カプセル、飲用溶液の形態で、または非経腸的に、例えば、注入溶液または懸濁液の形態で投与され得る。適当な経口投与用の単位投与形態は、約０．０２−５０ｍｇ、通常０．１−３０ｍｇの活性成分、例えば、薬剤（ａ）または（ｂ）と共にそれらの１種またはそれ以上の薬学的に許容される希釈剤または担体を含む。
【００８９】
薬剤（ｂ）はヒトに０．５−１，０００ｍｇの１日用量範囲で投与され得る。経口投与用の適当な単位投与形は、約０．１−５００ｍｇの活性成分と共にそれらの１種またはそれ以上の薬学的に許容される希釈剤または担体を含む。
【００９０】
本発明の医薬組合せの投与は、例えば、血液幹細胞の無秩序な増殖の阻害または白血病、例えば、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）または急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の進行、または腫瘍の増殖の減速に関して有利な効果、例えば、相乗的な治療効果をもたらすだけでなく、本発明の組合せにおいて使用される薬学的活性成分１種のみで使用する単剤療法と比較して、さらなる驚くべき有利な効果、例えば、副作用の減少、生活の質の向上または死亡率の減少をももたらす。
【００９１】
さらなる利点は、少ない用量の本発明の組合せの活性成分が使用されること、例えば、しばしば必要な用量が減少するだけでなく、頻度も減少すること、または副作用の発生を減少させるために使用され得ることである。これは処置される患者の要望および必要性に一致する。
【００９２】
ピリミジルアミノベンズアミド化合物およびＨＤＡＣ阻害剤の組合せは独立して、または、１種またはそれ以上の薬学的に許容される担体および、所望により、１種またはそれ以上の他の慣用の医薬アジュバントと共に組み合わされ得、経腸的に、例えば、経口的に、錠剤、カプセル、カプレットなどの形態で、または非経腸的に、例えば、腹腔内にまたは静脈内に、滅菌注入溶液または懸濁液の形態で投与され得る。経腸および非経腸組成物は慣用の方法により製造され得る。
【００９３】
ピリミジルアミノベンズアミド化合物およびＨＤＡＣ阻害剤の組合せは、これらの病状において使用するために単独または少なくとも１種の他の薬学的に活性な化合物と組み合わせて使用され得る。これらの活性な化合物は、組合せパートナーが独立してまたは別々の量の組合せパートナーと別々の固定された組合せの使用により、すなわち、同時にまたは異なる時点で投与されるという意味で、同じ医薬品、または、組合せ製品“複数パーツのキット”として組み合わせられ得る。複数パーツのキットのパーツは、例えば、同時にまたは相互に順番に、異なる時点でおよび複数パーツのキットのいずれかのパーツに対して等しいまたは異なる時間間隔で、投与され得る。ピリミジルアミノベンズアミド化合物およびＨＤＡＣ阻害剤の組合せと組み合わせて使用するために引用され得る化合物の非限定的な例は、細胞毒性化学療法剤、例えば、シトシナラビノシド、ダウノルビシン、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ＶＰ−１６またはイマチニブなどである。さらに、ピリミジルアミノベンズアミド化合物およびＨＤＡＣ阻害剤の組合せは、有意な相乗効果をもたらすであろうことを予期する、シグナル形質導入の他の阻害剤または他の癌遺伝子標的剤と組み合わせられ得る。
【００９４】
Ｂ．処置される疾患
“増殖性疾患”なる用語は限定されないが腫瘍、乾癬、再狭窄、強皮症および線維症を含む。
血液悪性疾患なる用語は、特に白血病、とりわけＢｃｒ−Ａｂｌ、ｃ−ＫｉｔまたはＨＤＡＣを発現するもの（またはＢｃｒ−Ａｂｌ、ｃ−ＫｉｔまたはＨＤＡＣに依存するもの）を意味し、限定されないが、ＣＭＬおよびＡＬＬ、とりわけフィラデルフィア染色体陽性ＡＬＬ（Ｐｈ＋ＡＬＬ）、ならびにイマチニブ−抵抗性白血病を含む。とりわけ好ましいことは白血病、例えば、ＣＭＬ、ＡＬＬまたはＡＭＬに対する本発明の組合せの使用である。もっともとりわけ好ましいことはイマチニブに対して抵抗性を示す疾患における使用である（イマチニブはＧｌｅｅｖｅｃ（登録商標）の名の下に販売されている）。
【００９５】
“固形腫瘍疾患”なる用語はとりわけ卵巣癌、乳癌、大腸癌、一般に胃腸の癌、子宮頸癌、肺癌、例えば、小細胞肺癌および非小細胞肺癌、頭頸部癌、膀胱癌、前立腺癌またはカポジ肉腫を意味する。
【００９６】
記載のタンパク質キナーゼ活性、とりわけ上記および下記チロシンタンパク質キナーゼを阻害する本発明の組合せは、したがって、タンパク質キナーゼ依存疾患の処置において使用され得る。タンパク質キナーゼ依存疾患はとりわけ増殖性疾患、好ましくは良性またはとりわけ悪性腫瘍（例えば、腎臓、脳、肝臓、副腎、膀胱、乳、胃腸（とりわけ胃の腫瘍）、卵巣、大腸、直腸、前立腺、膵臓、肺（とりわけＳＣＬＣ）、膣または甲状腺の癌腫、肉腫、多発性骨髄腫、グリア芽腫および多数の頭頸部の腫瘍、ならびに白血病）；とりわけ大腸癌腫または結腸直腸アデノーマ、または頭頸部の腫瘍、表皮過形成、とりわけ乾癬、前立腺過形成、腫瘍形成、とりわけ上皮性特性の、好ましくは乳癌、または白血病である。それらは腫瘍の退行を引き起こし、腫瘍転移の形成および転移（微少転移）の増殖を予防することができる。加えて、それらは表皮過形成（例えば、乾癬）、前立腺過形成、および腫瘍、とりわけ上皮性特性の、例えば、乳癌の処置において使用され得る。本発明の組合せを、いくつかの、または、とりわけ、個々のチロシンタンパク質キナーゼが含まれる範囲の免疫系の疾患の処置において使用することもできる；さらに、本発明の組合せは、またとりわけ具体的に記載されているものから選択される少なくとも１種のチロシンタンパク質キナーゼによるシグナル伝達を含む、中枢または末梢神経系の疾患の処置において使用され得る。
【００９７】
ＣＭＬにおいて、造血幹細胞（ＨＳＣ）における相互に釣り合った染色体転座はＢｃｒ−Ａｂｌハイブリッド遺伝子を製造する。該遺伝子は発癌性Ｂｃｒ−Ａｂｌ融合タンパク質をコードしている。Ａｂｌは細胞増殖、接着およびアポトーシスを制御する重要な役割を果たす非常に制御されたタンパク質チロシンキナーゼをコードするが、Ｂｃｒ−Ａｂｌ融合遺伝子は、ＨＳＣを無秩序なクローン増殖を示す表現型を製造し、骨髄間質への付着能力を減少させ、そして変異誘発刺激に対するアポトーシス応答を減少するものへの形質転換をする、構造的に活性化されたキナーゼをコードし、徐々に悪性形質転換体を蓄積する。得られる顆粒球は成熟リンパ球へ発達せず、循環系へ放出され、成熟細胞の不足および感染に対する感受性の増加をもたらす。Ｂｃｒ−ＡｂｌのＡＴＰ−拮抗阻害剤はキナーゼを細胞分裂および抗アポトーシス経路の活性化から妨げ（例えば、Ｐ−３キナーゼおよびＳＴＡＴ５）、Ｂｃｒ−Ａｂｌ細胞表現型の死をもたらし、したがってＣＭＬに対して有効な治療を提供することが記載されている。本発明の組合せは、したがってとりわけ過剰発現に関する疾患、とりわけ白血病、例えば、白血病、例えば、ＣＭＬまたはＡＬＬの治療のために適当である。
【００９８】
本発明の広い意味において、増殖性疾患は過増殖性状態、例えば、白血病、過形成、線維症（とりわけ肺疾患、線維症、例えば、腎臓線維症の他の型も）、血管形成、乾癬、血管のアテローム性動脈硬化症および平滑筋増殖、例えば、狭窄または血管形成術後の再狭窄を含む。さらなる局面において、本発明の組合せは関節炎を処置するために使用され得る。
【００９９】
本発明の組合せはまた、線維形成疾患、例えば、強皮症（全身性硬化症）；タンパク質凝集およびアミロイド形成と関連する疾患、例えば、ハンチントン病の処置または予防；Ｃ型肝炎ウイルスの複製の阻害およびＣ型肝炎の処置；ウイルス感染、例えば、ヒト乳頭腫ウイルス感染と関連する腫瘍の処置；および熱ショックタンパク質に依存するウイルスの阻害のために使用され得る。
【０１００】
本発明の組合せは、主に血管の増殖を阻害し、例えば、無秩序な血管形成と関連する多くの疾患、とりわけ眼の血管形成に起因する疾患、とりわけ網膜症、例えば、糖尿病性網膜症または加齢黄斑変性症、乾癬、血管芽細胞腫、例えば、血管腫、メサンギウム細胞増殖性疾患、例えば、慢性または急性腎臓疾患、例えば、糖尿病性腎症、悪性腎硬化症、血栓性微小血管症症候群または移植拒絶反応、またはとりわけ炎症性腎臓疾患、例えば、糸球体腎炎、とりわけメサンギウム増殖性糸球体腎炎、溶血性尿毒症性症侯群、糖尿病性腎症、高血圧性腎硬化、アテローム、動脈再狭窄、自己免疫性疾患、糖尿病、子宮内膜症、慢性喘息、およびとりわけ腫瘍性疾患（固形腫瘍、白血病および他の血液悪性腫瘍も）、例えば、とりわけ乳癌、大腸癌、肺癌（とりわけ小細胞肺癌）、前立腺癌またはカポジ肉腫に対して有効である。本発明の組合せは、腫瘍の増殖を阻害し、とりわけ腫瘍の転移拡散および微小転移の増殖の阻害に適当である。
【０１０１】
本発明の組合せは、特に下記の処置のために使用され得る：
（ｉ）乳腫瘍；類表皮腫瘍、例えば、類表皮頭頚部腫瘍または口腔腫瘍；肺腫瘍、例えば、小細胞または非小細胞肺腫瘍；消化器腫瘍、例えば、結腸直腸腫瘍；または尿生殖器腫瘍、例えば、前立腺腫瘍、とりわけホルモン抵抗性前立腺腫瘍；
（ｉｉ）他の化学療法での処置に対して抵抗性である増殖性疾患；または
（ｉｉｉ）多剤耐性により他の化学療法での処置に対して抵抗性である腫瘍。
【実施例】
【０１０２】
試薬および抗体：化合物（Ｖ）および化合物（ＩＩ）はNovartis Pharmaceuticals（East Hanover, NJ）により提供される。ポリクローナル抗−ＰＡＲＰ、抗−カスパーゼ−９、抗−カスパーゼ−３、および抗−ｐ−ＥＲＫ１／２抗体はCell Signaling Technology（Beverly, MA）から購入する。ポリクローナル抗−ＳＴＡＴ−５およびヤギポリクローナル抗−Ｐｉｍ−２抗体、ならびにモノクローナル抗−ｃ−Ｍｙｃおよび抗−Ａｂｌ抗体はSanta Cruz Biotechnology（Santa Cruz, CA）から購入する。モノクローナル抗−ｐ−ＳＴＡＴ５抗体はUpstate Biotechnology（Lake Placid, NY）から購入する。ｐ２１、ｐ２７、ｐ−ＣｒｋＬ、ＣｒｋＬ、ｐ−ＡＫＴ、ＡＫＴ、Ｂｉｍ、Ｂｃｌ−ｘＬおよびＥＲＫ１／２のイムノブロット解析のための抗体は前記のとおりに得られる。
【０１０３】
細胞系および細胞培養：Ｂｃｒ−Ａｂｌ−発現、ＣＭＬ  ＬＡＭＡ−８４およびＫ５６２細胞はAmerican Tissue Culture Collection（Manassas, VA）から得られ、１０％のウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ培地中での培養を維持し、１週間に２回経代する。マウス  プロ−Ｂ  ＢａＦ３細胞をＩＬ−３の源として１０％のＷＥＨＩ培地で補った完全ＲＰＭＩ１６４０培地で培養する。本明細書に記載の試験のために、対数増殖期細胞を化合物（ＩＩ）および／または化合物（Ｖ）の指定された濃度に暴露する。これらの処置後、細胞または細胞ペレットを試験実施前に薬剤無しで洗浄する。
【０１０４】
部位特異的突然変異誘発およびヌクレオフェクション：３つのｐ２１０Ｂｃｒ−Ａｂｌ構築物を本試験に使用する。ｐ２１０Ｂｃｒ−ＡｂｌＷＴおよびｐ２１０Ｂｃｒ−Ａｂｌ（Ｔ３１５Ｉ）構築物を生成する。ｐ２１０Ｂｃｒ−Ａｂｌ（Ｅ２５５Ｋ）変異体を製造業者の指示に従ってＱｕｉｋＣｈａｎｇｅＩＩ  ＸＬキット（Stratagene, Cedar Creek, TX）を使用して、ｐＳＶｎｅｏ構築物を含むＢｃｒ−Ａｂｌの部位特異的突然変異誘発により創造し、得られたクローンを点変異を行うためにシーケンシングする。ｐ２１０Ｂｃｒ−Ａｂｌ構築物のＢａＦ３細胞への遺伝子導入のために、１００μＬのヌクレオファクター溶液Ｖ（Amaxa, Gaithersburg, MD）中の５百万個のＢａＦ３細胞をキュベット中で５μｇのｐ２１０Ｂｃｒ−ＡｂｌＷＴ、ｐ２１０Ｂｃｒ−Ａｂｌ（Ｔ３１５Ｉ）、またはｐ２１０Ｂｃｒ−Ａｂｌ（Ｅ２５５Ｋ）と混合し、プログラムＧ−１６を使用して遺伝子導入する。遺伝子導入後、細胞を１×１０６細胞／ｍＬの濃度でＩＬ−３の源として１０％のＷＥＨＩ培地で補った完全ＲＰＭＩ１６４０培地で、一晩インキュベートし、回収する。Ｂｃｒ−ＡｂｌのＷＴまたは変異体（すなわち、Ｔ３１５ＩまたはＥ２５５Ｋ）を発現するＢａＦ３細胞の安定な形質転換体を１０％の血清、１．０Ｕ／ｍＬのペニシリン、１μｇ／ｍＬのストレプトマイシンおよび０．７５ｍｇ／ｍＬのＧ４１８を補ったＲＰＭＩ１６４０中で維持する。次いで安定発現細胞をさらにＩＬ−３の除去により選択する。イムノブロット解析によるＢｃｒ−Ａｂｌ発現確認後、細胞を本明細書に記載の試験に使用する。
【０１０５】
原発性ＣＭＬ−ＢＣ細胞およびＮＢＭＣ：イマチニブ−抵抗性Ｐｈ染色体陽性ＣＭＬ−ＢＣ（イマチニブ−抵抗性フィラデルフィア染色体陽性慢性骨髄性白血病−急性転化）の臨床基準に合った１０人の患者の末梢血および／または骨髄由来白血病細胞を回収し、精製する。さらに、ＮＢＭＣを回収し、精製する。南部フロリダ大学の施設内治験審査委員会（ＩＲＢ）により承認されている臨床プロトコールの一部として、これらの実験のためにこれらの細胞を使用することについてインフォームドコンセントを全ての患者に署名させる。
【０１０６】
ＣＭＬ−ＢＣ細胞におけるＢｃｒ−Ａｂｌのシーケンシング：Ｔｒｉｚｏｌ法（Invitrogen, Carlsbad, CA）を使用して、全ＲＮＡをイマチニブおよび化合物（ＩＩ）での処置に応答しないためＢｃｒ−Ａｂｌ  Ｔ３１５Ｉ変異を有する疑いのある、２人の患者由来の１０００−１５００万個の細胞から単離した。全ＲＮＡ（５μｇ）をファーストストランドｃＤＮＡ合成キット（Invitrogen）で逆転写する。逆転写したｃＤＮＡをポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）増幅を使用して、Ｂｃｒ結合領域およびｃ−Ａｂｌキナーゼ領域を含むＢｃｒ−Ａｂｌの断片を増幅させる。増幅した配列をアガロースゲル精製し、ｐＣＲ４−ＴＯＰＯプラスミドに導入する。得られたプラスミドを大腸菌Ｍａｃｈ１細胞（Invitrogen）に一晩３７℃で形質転換する。それぞれのサンプルに対する１０個のコロニーをコロニーＰＣＲによりチェックし、二次培養し、プラスミドを単離する。単離したプラスミドはｃ−Ａｂｌキナーゼドメイン変異をＴ３およびＴ７プライマーで立証した配列がある。
【０１０７】
懸濁液培養物またはコロニー増殖阻害：記載の濃度の化合物（ＩＩ）および／または化合物（Ｖ）で４８時間処理後、未処理および薬剤処理細胞をＲＰＭＩ１６４０培地中で洗浄する。この後、細胞を懸濁液培養物中に２０００００細胞／ｍＬの濃度で４日間おく。このインキュベーション後、細胞濃度および細胞数の増加率を測定する。あるいは、薬剤で処理後、それぞれの条件下で処理した約２００個の細胞を１０％のＦＢＳを含む１００μＬのＲＰＭＩ１６４０培地中で再懸濁し、次いで製造業者の指示に従って、ウェルあたり１．０ｍＬのメソカルト（Methocult）培地（Stem Cell Technologies, Vancouver、Canada）を含む１２ウェルプレート中でウェル２つずつにおく。プレートをインキュベーター中に３７℃で５％のＣＯ２下で１０日間おく。このインキュベーション後、それぞれのウェルにおいて５０個またはそれ以上の細胞からなるコロニーを倒立顕微鏡によりカウントし、未処理コントロール細胞と比較してコロニー増殖阻害の割合を計算する。
【０１０８】
生存不可細胞の割合の評価：細胞をトリパンブルー（Sigma, St Louis, MO）で染色する。生存不可細胞の数を血球計でトリパンブルー吸収を示した細胞をカウントすることにより決定し、未処理コントロール細胞の割合として記録する。
【０１０９】
アネキシンＶ染色によるアポトーシス評価：未処理および薬剤処理細胞をアネキシンＶおよびＰＩで染色し、アポトーシス細胞の割合をフローサイトメトリーにより測定する。Ｋ５６２およびＬＡＭＡ−８４細胞のアポトーシスの誘導において化合物（ＩＩ）と化合物（Ｖ）の相乗効果の分析を市販のソフトウェア（Calcusyn; Biosoft, Ferguson, MO）を使用するChouとTalalayの中央用量効果分析により実施する。
【０１１０】
タンパク質のウエスタン分析：ウエスタン分析を以前に報告されているプロトコールにしたがって特異的抗血清またはモノクローナル抗体を使用して実施し、水平走査濃度測定をウエスタンブロット法で実施する。
【０１１１】
Ｂｃｒ−Ａｂｌの免疫沈降およびイムノブロット解析：記載の薬剤処理後、細胞を溶解バッファー（２０ｍＭのトリス［ｐＨ８］、１５０ｎＭの塩化ナトリウム、１％のＮＰ４０、０．１Ｍのフッ化ナトリウム、１ｍＭのＰＭＳＦ、１ｍＭのオルトバナジウム酸ナトリウム、２．５μｇ／ｍＬのロイペプチン、５μｇ／ｍＬのアプロチニン）中に３０分間氷上で溶解させ、そして核および細胞切片を遠心により取り除く。細胞溶解物（２００μｇ）をＡｂｌ−特異的モノクローナル抗体と１時間４℃でインキュベーションする。これに、洗浄したタンパク質Ｇアガロースビーズを加え、一晩４℃でインキュベーションする。免疫沈降物を３回溶解バッファーで洗浄し、タンパク質をＳＤＳサンプルローディングバッファーに溶離させ、抗Ａｂｌまたは抗ホスホチロシン抗体に対する特定の抗体でイムノブロット解析する。
【０１１２】
統計分析：異なる実験条件で処理された白血病細胞の集団で得られた値間の有意な差をスチューデントｔ検定を使用して測定する。．０５未満のＰ値を有意と指定する。
【０１１３】
化合物（ＩＩ）および化合物（Ｖ）はＫ５６２およびＬＡＭＡ−８４細胞のアポトーシスを誘導する：培養したおよび初代ＣＭＬ−ＢＣ細胞における化合物（ＩＩ）および／または化合物（Ｖ）の効果を測定する。Ｋ５６２およびＬＡＭＡ−８４細胞の化合物（Ｖ）または化合物（ＩＩ）単独での処置のアポトーシス効果を測定する。化合物（Ｖ）または化合物（ＩＩ）単独の暴露はＫ５６２およびＬＡＭＡ−８４細胞のアポトーシスを用量依存的に誘導する。データはまた化合物（ＩＩ）がＫ５６２およびＬＡＭＡ−８４細胞のアポトーシスを誘導するイマチニブよりも約１０倍以上の効果があることを示す。ＬＡＭＡ−８４細胞の化合物（ＩＩ）での処置は、Ｂｃｒ−Ａｂｌのレベルに影響せず、用量依存的にチロシンリン酸化Ｂｃｒ−Ａｂｌのレベルを阻害した。化合物（ＩＩ）処置はまたＡＭＮ１０７がＢｃｒ−ＡｂｌのＴＫ活性を阻害することを示すｐ−ＣｒｋＬ（下記参照）のレベルを阻害した。化合物（ＩＩ）での処置はｐ−ＳＴＡＴ５のレベルを減少させ、ならびにＳＴＡＴ５により転写活性化されるｃ−ＭｙｃおよびＢｃｌ−ｘＬの発現を低下させた。化合物（ＩＩ）での処置はまたｐ−ＡＫＴのレベルを阻害したが、ｐ２７レベルの誘導と関連するＡＫＴを阻害しなかった。これをまたイマチニブに暴露後、観察した。化合物（ＩＩ）の同様の効果はまたＫ５６２細胞で観察された。
【０１１４】
化合物（Ｖ）および化合物（ＩＩ）での共処置は優れた抗Ｂｃｒ−Ａｂｌ活性を発揮し、相乗的にＫ５６２およびＬＡＭＡ−８４細胞のアポトーシスを誘導する：次に、Ｂｃｒ−ＡｂｌならびにＢｃｒ−Ａｂｌのシグナル伝達タンパク質下流のレベルに対する化合物（Ｖ）および化合物（ＩＩ）での共処置の効果を測定する。いずれか１つの薬剤での処置と比較して、２４時間、相対的に低い濃度の化合物（Ｖ）（２０ｎＭ）および化合物（ＩＩ）（５０ｎＭ）でＢｃｒ−Ａｂｌのさらなる減少を引き起こし、Ｋ５６２細胞のｐ２７レベルをさらに誘導する。対照的に、ｐ２１レベルは、化合物（Ｖ）単独での処置と比較して、化合物（ＩＩ）および化合物（Ｖ）での組合せ処置により同程度に誘導される。化合物（Ｖ）および化合物（ＩＩ）での組合せ処置はまたｐ−ＣｒｋＬ、Ｂｃｌ−ｘＬ、およびｃ−Ｍｙｃのレベルのさらなる減少を引き起こし、さらにＢｉｍを誘導した。化合物（ＩＩ）および化合物（Ｖ）での共処置後、同時のＢｉｍの誘導およびＢｃｌ−ｘＬの減少はアポトーシス中のエフェクターカスパーゼ３および７の活性の増加によるＰＡＲＰ開裂と関連する。化合物（Ｖ）および化合物（ＩＩ）の同様の効果がまたＬＡＭＡ−８４細胞に対して観察される。Ｋ５６２細胞の懸濁液培養およびコロニー増殖における化合物（Ｖ）および／または化合物（ＩＩ）のアポトーシス効果を測定する。化合物（ＩＩ）および化合物（Ｖ）での共処置は、いずれかの薬剤単独での処置より有意にコロニー増殖の阻害を引き起こす（Ｐ＜．０５）。組合せの同様の効果がまたＫ５６２細胞の懸濁液培養増殖に対して観察される。Ｋ５６２およびＬＡＭＡ−８４細胞における化合物（ＩＩ）および化合物（Ｖ）での組合せ処置のアポトーシス効果（アネキシンＶ−陽性細胞の割合の増加）を測定する。中央用量効果併用効果分析により測定したとき、特に、化合物（ＩＩ）および化合物（Ｖ）の組合せへの暴露はＫ５６２およびＬＡＭＡ−８４細胞において相乗的アポトーシス効果を発揮した。化合物（ＩＩ）および化合物（Ｖ）に対して、組合せ指標値はそれぞれの細胞型において１．０未満である。Ｋ５６２に対するＣＩ値は０．４７、０．３６、０．４５、０．４５、および０．４５、各々であり、ＬＡＭＡ８４に対するＣＩ値は０．８５、０．２２、０．２１、および０．１６、各々である。化合物（ＩＩ）および／または化合物（Ｖ）の効果をまたＮＢＭＣに対して測定する。化合物（ＩＩ）は効果がないが（１．０μＭまで）、２０および５０ｎＭの化合物（Ｖ）の４８時間の暴露でＮＢＭＣの１３．１％および１５．９％（デュプリケートで実施した実験の２つのサンプルの平均）の生存の減少を誘導した。化合物（ＩＩ）との共処置は、５０ｎＭの化合物（Ｖ）への暴露のため、ＮＢＭＣの生存の減少が有意に増加しない（Ｐ＞．０５）。
【０１１５】
化合物（Ｖ）は変異Ｂｃｒ−Ａｂｌレベルを涸渇させ、Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５ＩまたはＢｃｒ−ＡｂｌＥ２５５Ｋを発現するＩＭ耐性ＢａＦ３細胞のアポトーシスを誘導する：Ｂｃｒ−Ａｂｌの変異無しまたはＢｃｒ−ＡｂｌＥ２５５ＫもしくはＢｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉの点変異のいずれかの異所性発現を有するＢａＦ３細胞における化合物（Ｖ）および／または化合物（ＩＩ）での処置の効果を測定する。Ｂｃｒ−Ａｂｌの内在発現を有するＫ５６２およびＬＡＭＡ８２４細胞において見られる効果と同様に、化合物（ＩＩ）は用量依存的にＢａＦ３／Ｂｃｒ−Ａｂｌ細胞のアポトーシスを誘導した。さらに、化合物（ＩＩ）および化合物（Ｖ）での共処置はいずれかの薬剤のみより有意にＢａＦ３／Ｂｃｒ−Ａｂｌ細胞のさらなるアポトーシスを誘導した。イマチニブに対する暴露がＢａＦ３／Ｂｃｒ−Ａｂｌ細胞を用量依存的にアポトーシスを誘導するが、ＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉ細胞は１０μＭまでの高さのレベルのイマチニブに対して抵抗性である。対照的に、ＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉ細胞は化合物（Ｖ）単独での処置により誘導されるアポトーシスに対してＢａＦ３／Ｂｃｒ−Ａｂｌ細胞と同じくらい感受性である。５０ｎＭの化合物（Ｖ）での４８時間の処置は約３０％のＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉ細胞においてアポトーシスを誘導した。低いレベルのＬＢＨ５８９は有効性が低い。対照的に、ＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉ細胞は２，０００ｎＭまでの化合物（ＩＩ）レベルに対して抵抗性である。特に、１００ｎＭではなく２，０００ｎＭの化合物（ＩＩ）での共処置は有意にＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉ細胞の化合物（Ｖ）−誘導アポトーシスを増加した。ＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＥ２５５Ｋ細胞に対して、１００ｎＭの化合物（ＩＩ）は有効でないが、２００および５００ｎＭの化合物（ＩＩ）への暴露は細胞、各々の２６．０％および４３．０％のアポトーシスを誘導した。さらに、１００ｎＭの化合物（ＩＩ）での共処置はあまり有効でないが、化合物（ＩＩ）（５００ｎＭ）および化合物（Ｖ）（５０ｎＭ）での共処置はいずれかの薬剤単独での処置より有意にＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＥ２５５Ｋ細胞のアポトーシスを誘導した（Ｐ＜．０１）。高い濃度の化合物（ＩＩ）（１．０または２．０μＭ）での共処置はまたＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＥ２５５Ｋの化合物（Ｖ）−誘導アポトーシスを誘導した。化合物（ＩＩ）および／または化合物（Ｖ）のアポトーシス効果はＢａＦ３／Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＥ２５５Ｋ、およびＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉ細胞におけるＢｃｒ−Ａｂｌレベルと関連している。化合物（ＩＩ）単独で試験した全てのレベルでの処置で３つの細胞型の全てにおいてＢｃｒ−Ａｂｌのレベルが減少しなかった。化合物（ＩＩ）への暴露はまたｐ−ＣｒｋＬまたはＣｒｋＬのレベルに影響しなかった。対照的に、５０ｎＭの化合物（Ｖ）への２４時間の暴露は全ての３つのＢａＦ３形質転換体においてＢｃｒ−Ａｂｌレベルを低下させた。特に、いずれかの薬剤単独での処置と比較して、化合物（Ｖ）および化合物（ＩＩ）での共処置はＢａＦ３／Ｂｃｒ−Ａｂｌ細胞においてＢｃｒ−��ｂｌのさらなる減少を誘導した。特に、化合物（Ｖ）および化合物（ＩＩ）での組合せ処置は、ＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５ＩおよびＢａＦ３／Ｂｃｒ−ＡｂｌＥ２５５Ｋ細胞、各々における、Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５ＩのレベルおよびＢｃｒ−ＡｂｌＥ２５５Ｋのレベルのさらなる明白な減少を引き起こした。同様の効果はＣｒｋＬレベではなくｐ−ＣｒｋＬレベルで示される。
【０１１６】
化合物（ＩＩ）および化合物（Ｖ）での共処置はいずれかの薬剤単独よりさらにＢｃｒ−Ａｂｌの減少および初代イマチニブ耐性ＣＭＬ細胞の生存率の減少を引き起こす：イマチニブ耐性ＣＭＬ−ＢＣを再発した１０人の患者由来の末梢血および／または骨髄サンプルから単離した初代ＣＭＬ細胞に対する化合物（Ｖ）および／または化合物（ＩＩ）の抗白血病効果を測定する。３つのこれらのサンプルがＢｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉの発現を有することを立証する（サンプル８、９、および１０）。ＩＭ難治性原発性ＣＭＬ細胞の残りのサンプル（サンプル１から７）において、Ｂｃｒ−Ａｂｌの突然変異状態は不適当なサンプルサイズのため測定できなかった。サンプル１から７において、化合物（ＩＩ）および化合物（Ｖ）の両方が用量依存的に細胞生存率の減少を引き起こした。さらに、これらのサンプルにおいて、化合物（Ｖ）（２０または５０ｎＭ）および化合物（ＩＩ）での共処置がいずれかの薬剤単独での処置よりさらに細胞生存率の減少を引き起こした。サンプル７は化合物（ＩＩ）の低い濃度に対して相対的に抵抗性であるが化合物（Ｖ）に感受性である。Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉ変異体を有する３つのサンプル（サンプル８、９、および１０）において、４８時間の化合物（Ｖ）単独への暴露が顕著に用量依存的に細胞生存率を阻害するが、化合物（ＩＩ）での処置は細胞生存率の減少を増加させなかった。特に、これらのサンプル（８、９、および１０）において、５０または１００ｎＭの化合物（ＩＩ）での共処置は化合物（Ｖ）−誘導細胞生存率の減少を増加しなかった。サンプル（９）において、２．０μＭの化合物（ＩＩ）への暴露でさえ効果がないが、５０ｎＭの化合物（Ｖ）の２．０μＭの化合物（ＩＩ）との共処置は、５０ｎＭの化合物（Ｖ）単独で処置された細胞の４２．０％のアポトーシスと比較して、細胞の６３．７％のアポトーシスを誘導した。５０ｎＭの化合物（Ｖ）および１００ｎＭの化合物（ＩＩ）での２４時間共処置がいずれかの薬剤単独での処置よりＢｃｒ−Ａｂｌ、ｐ−ＣｒｋＬ、およびｐ−ＳＴＡＴ５のさらなる減少をもたらすことを、サンプル５の全細胞溶解物のウエスタンブロット分析が示した。対照的に、サンプル９において、５０ｎＭの化合物（Ｖ）および化合物（Ｖ）での共処置が顕著にＢｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉ、ならびにｐ−ＣｒｋＬおよびｐ−ＳＴＡＴ５のレベルを涸渇させるが、１０００ｎＭの化合物（ＩＩ）単独での処置でさえＢｃｒ−Ａｂｌ、ｐ−ＣｒｋＬ、およびｐ−ＳＴＡＴ５のレベルにおいてほとんど効果がなかった。これらの発見はＢｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉの異所性発現を有するＢａＦ３細胞において同様である。
【０１１７】
本実施例において、全ＨＤＡＣ阻害剤化合物（Ｖ）およびＢｃｒ−Ａｂｌ  ＴＫ阻害剤化合物（ＩＩ）の組合せ処置は相乗的に未成熟Ｂｃｒ−Ａｂｌの異所性および内在発現を有する培養マウスプロＢ  ＢａＦ３およびヒトＣＭＬ細胞のアポトーシスを誘導することを立証する。組合せはまた変異体Ｂｃｒ−ＡｂｌＥ２５５ＫまたはＢｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉの異所性発現を有するＢａＦ３細胞、ならびにイマチニブ耐性初代ＣＭＬ細胞に対していずれかの薬剤単独での処置より活性である。
【国際調査報告】
2009504674.tif 000020
2009504674.tif 000021
2009504674.tif 000022