(57)【要約】式（Ｉ）2009514837.tif 000029で表される化合物又はその製薬的に許容し得る塩は、高血糖及び糖尿病の予防及び治療的処置において有用である。
2009514837.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2009514837.tif 000025
（Ｉ）
（式中、Ａは５−メチルピラジン−２−イル、５−メチルピリド−２−イル、５−クロロピリド−２−イル、ピリド−２−イル、５−メチルイソキサゾル−３−イル、イソキサゾル−３−イル、５−メチルチアゾール−２−イル及びピリミジン−４−イルから選択される含窒素ヘテロアリール環である）、
又はその製薬的に許容し得る塩。
【請求項２】
フェニル環及びシクロペンタノン含有側鎖とアミドカルボニル炭素とを連結している炭素原子が（Ｒ）−立体配置である、請求項１記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩。
【請求項３】
前記シクロペンタノン環の前記側鎖への結合部位である炭素原子が（Ｒ）−立体配置である、請求項１または２記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩。
【請求項４】
Ａが５−メチルピラジン−２−イルである、請求項１から３のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩。
【請求項５】
Ａが５−メチルピリド−２−イルである、請求項１から３のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩。
【請求項６】
Ａが５−クロロピリド−２−イルである、請求項１から３のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩。
【請求項７】
Ａがピリド−２−イルである、請求項１から３のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩。
【請求項８】
Ａが５−メチルイソキサゾル−３−イルである、請求項１から３のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩。
【請求項９】
Ａがイソキサゾル−３−イルである、請求項１から３のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩。
【請求項１０】
Ａが５−メチルチアゾール−２−イルである請求項１から３のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩。
【請求項１１】
Ａがピリミジン−４−イルである、請求項１から３のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩。
【請求項１２】
請求項１から１１のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩、及び製薬的に許容し得る担体を含んでなる医薬組成物。
【請求項１３】
ＧＫの活性化が望ましい症状の予防的若しくは治療的処置方法であって、有効量の請求項１から１１のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を投与する工程を含んでなる方法。
【請求項１４】
高血糖又は糖尿病の予防的若しくは治療的処置方法であって、有効量の請求項１から１１のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を投与する工程を含んでなる方法。
【請求項１５】
請求項１から１０のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩が、１つ以上の他の抗高血糖薬又は抗糖尿病薬との組み合わせで投与される、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
前糖尿病性高血糖又は耐糖能異常を示すヒトの糖尿病の予防方法であって、予防的有効量の請求項１から１１のいずれか１項記載の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を投与することを含んでなる方法。
【請求項１７】
式（Ｉ）の化合物
【化２】
2009514837.tif 000026
（Ｉ）
又はその製薬的に許容し得る塩の製造方法であって、式（ＩＩ）
【化３】
2009514837.tif 000027
（ＩＩ）
の化合物又はその活性化された誘導体と、
式（ＩＩＩ）
【化４】
2009514837.tif 000028
（ＩＩＩ）
の化合物又はその塩
（式中、Ａは請求項１に記載のとおりである）
との縮合を含んでなる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はトリ（シクロ）置換されたアミド化合物に関する。特に本発明は、
ｉ）カルボニル炭素の位置で、フェニル環及び炭素環に結合するエチル基で置換され、及び
ｉｉ）アミノ基の位置でヘテロアリール環を形成する窒素で置換されているアミド化合物であって、グルコキナーゼの調節物質として機能し、高血糖及び糖尿病（特に２型糖尿病）の予防的若しくは治療的な処置において有用な化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
グルコキナーゼ（“ＧＫ”）は、血漿グルコース値の体内調節において重要であると考えられている。主に肝臓及び膵臓に存在するＧＫは、グルコースの初期の代謝を触媒する４種類のヘキソキナーゼの１つである。ＧＫ経路は他のヘキソキナーゼ経路と比較し、高い血糖値にて飽和する（非特許文献１を参照）。ＧＫは哺乳類におけるグルコースのバランスの維持にとり重要である。ＧＫを発現しない動物では糖尿病が発症すると即座に死に至るが、一方ＧＫを過剰に発現する動物では耐糖能を有する。ＧＫの活性化により、高インスリン低血糖症に至る場合がある（例えば、非特許文献２を参照）。更に、若年層における２型の成人発症型糖尿病はＧＫ遺伝子変異による機能損失を原因として生じ、すなわちＧＫが、ヒトのグルコースセンサーとして機能することを示している（非特許文献３）。すなわち、ＧＫを活性化する化合物は、ＧＫのセンサーシステムの感度を増大させ、高血糖症、特に２型糖尿病に関連する高血糖症の治療に有用であると考えられる。従って、ＧＫを活性化して糖尿病を治療する新規な化合物、特に公知のＧＫ活性化剤と比較して医薬品にとり望ましい改善された特性を示す化合物の提供は望ましいことである。
【０００３】
特許文献１及び２では、ＧＫ活性化剤としての（Ｅ）−２，３−二置換−Ｎ−へテロアリールアクリルアミドを記載している。特許文献３から６では、テトラゾリルフェニルアセトアミド系のＧＫ活性化剤を記載している。特許文献７から９では、アリールシクロアルキルプロピオンアミド系のＧＫ活性化剤を記載している。特許文献１０及び１１では、抗糖尿病薬としての、α−アシル及びα−へテロ原子置換のベンゼンアセトアミドのＧＫ活性化剤を記載している。特許文献１２では、ヒダントイン含有ＧＫ活性化剤を記載している。特許文献１３及び１４では、アルキニルフェニルヘテロ芳香族系のＧＫ活性化剤を記載している。特許文献１５及び１６では、ｐ−アミン置換フェニルアミド系のＧＫ活性化剤を記載している。特許文献１７から２０では、融合型のヘテロ芳香族系のＧＫ活性化剤を記載している。特許文献２１及び２２では、イソインドリン−１−オン系のＧＫ活性化剤を記載している。特許文献２３では、２型糖尿病の治療用の置換フェニルアセトアミド系のＧＫ活性化剤を記載している。特許文献２４では、ｐ−アリール又はヘテロアリール置換フェニル系のＧＫ活性化剤を記載している。特許文献２５では、ヒトＧＫの精製方法及びヒトＧＫの結晶構造を記載している。特許文献２６では、２型糖尿病の治療用のＧＫ活性化剤としての、Ｎ−へテロアリールフェニルアセトアミド及び関連化合物を記載している。特許文献２７では、ＧＫ活性化剤としてのシクロアルキルへテロアリールプロピオンアミドの調製方法を記載している。特許文献２８では、ビニルフェニル系のＧＫ活性化剤を記載している。特許文献２９では、ＧＫ調節物質としてのアミノニコチン酸誘導体を記載している。特許文献３０では、ＧＫ調節物質としての化合物を記載している。特許文献３１では、２型糖尿病の治療における、ＧＫ活性化剤とグルカゴンアンタゴニストとの併用方法を記載している。特許文献３２では、ＧＫ活性化剤としてのアミド誘導体を記載している。特許文献３３では、糖尿病及び肥満症の治療用の、ＧＫ活性化剤としてのアミノベンズアミド誘導体を記載している。特許文献３４では、ヒト肝臓由来のＧＫの結晶構造、及びその構造に基づいた医薬品設計への使用を記載している。特許文献３５では、ＧＫ活性化剤としてのアリールカルボニル誘導体を開示している。特許文献３６及び３７では、ＧＫ活性化剤としてのトリ（シクロ）置換アミド化合物を開示している。特許文献３８（本願の優先日後に公開）では、ｉ）カルボニル炭素の位置において、フェニル環及び炭素環に結合するエチル／エテニル基で置換され、及びｉｉ）アミノ基の位置において、ヘテロアリール又は不飽和ヘテロシクリル環を形成する窒素で置換されているアミド化合物であって、グルコキナーゼの調節物質として機能し、高血糖症及び糖尿病、特に２型糖尿病の予防的又は治療的処置において有用な化合物を開示している。
【非特許文献１】Ｒ．Ｌ．ｒｉｎｔｚ等．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｕｔｒ．，１３：４６３−４９６（１９９３）
【非特許文献２】Ｈ．Ｂ．Ｔ．Ｃｈｒｉｓｔｅｓｅｎ等．，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，５１：１２４０−１２４６（２００２）
【非特許文献３】Ｙ．Ｌｉａｎｇ等．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，３０９：１６７−１７３（１９９５）
【特許文献１】国際公開第２００１／０４４２１６号
【特許文献２】米国特許第６３５３１１１号
【特許文献３】国際公開第２００２／０１４３１２号
【特許文献４】米国特許第６３６９２３２号
【特許文献５】米国特許第６３８８０８８号
【特許文献６】米国特許第６４４１１８０号
【特許文献７】国際公開第２０００／０５８２９３号
【特許文献８】欧州特許出願第１１６９３１２号
【特許文献９】米国特許第６３２００５０号
【特許文献１０】国際公開第２００２／００８２０９号
【特許文献１１】米国特許第６４８６１８４号
【特許文献１２】国際公開第２００１／０８３４７８号
【特許文献１３】国際公開第２００１／０８３４６５号
【特許文献１４】米国特許第６３８８０７１号
【特許文献１５】国際公開第２００１／０８５７０７号
【特許文献１６】米国特許第６４８９４８５号
【特許文献１７】国際公開第２００２／０４６１７３号
【特許文献１８】米国特許第６４３３１８８号
【特許文献１９】米国特許第第６４４１１８４号
【特許文献２０】米国特許第第６４４８３９９号
【特許文献２１】国際公開第２００２／０４８１０６号
【特許文献２２】米国特許第６４８２９５１号
【特許文献２３】国際公開第２００１／０８５７０６号
【特許文献２４】米国特許第６３８４２２０号
【特許文献２５】仏国特許第２８３４２９５号
【特許文献２６】国際公開第２００３／０９５４３８号
【特許文献２７】米国特許第６６１０８４６号
【特許文献２８】国際公開第２００３／０００２６２号
【特許文献２９】国際公開第２００３／０００２６７号
【特許文献３０】国際公開第２００３／０１５７７４号
【特許文献３１】国際公開第２００３／０４７６２６号
【特許文献３２】国際公開第２００３／０５５４８２号
【特許文献３３】国際公開第２００３／０８０５８５号
【特許文献３４】国際公開第２００３／０９７８２４号
【特許文献３５】国際公開第２００４／００２４８１号
【特許文献３６】国際公開第２００４／０７２０３１号
【特許文献３７】国際公開第２００４／０７２０６６号
【特許文献３８】国際特許出願ＰＣＴ／ＧＢ２００５／０５０１２９号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、周知のＧＫ活性化剤と比較し、医薬製剤にとり望ましい改良された特性（例えば効力の増大、ｉｎ  ｖｉｖｏ効果の増大、及び／又は半減期の長期化）を示しうる新規なＧＫ活性化剤を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
式（Ｉ）で表される化合物：
【化１】
2009514837.tif 000003
（Ｉ）
又はその薬学的に許容できる塩は、高血糖及び糖尿病（特に２型糖尿病）の予防的若しくは治療的処置において有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
本発明は式（Ｉ）で表される化合物：
【化２】
2009514837.tif 000004
（Ｉ）
（式中、Ａは５−メチルピラジン−２−イル、５−メチルピリド−２−イル、５−クロロピリド−２−イル、ピリド−２−イル、５−メチルイソキサゾル−３−イル、イソキサゾル−３−イル、５−メチルチアゾール−２−イル及びピリミジン−４−イルから選択される含窒素ヘテロアリール環）、
およびそれらの製薬的に許容し得る塩に関する。
【０００７】
Ａは好ましくは５−メチルピラジン−２−イル、５−メチルピラド−２−イル、５−メチルチアゾル−２−イル、より好ましくは５−メチルピラジン−２−イルである。
【０００８】
本発明の一態様では、Ａは５−メチルピラジン−２−イルを表する。
【化３】
2009514837.tif 000005
【０００９】
本発明の第２の態様では、Ａは５−メチルピリド−２−イルを表する。
【化４】
2009514837.tif 000006
【００１０】
本発明の第３の態様では、Ａは５−クロロピリド−２−イルを表する。
【化５】
2009514837.tif 000007
【００１１】
本発明の第４の態様では、Ａはピリド−２−イルを表する。
【化６】
2009514837.tif 000008
【００１２】
本発明の第５の態様では、Ａは５−メチルイソキサゾル−３−イルを表する。
【化７】
2009514837.tif 000009
【００１３】
本発明の第６の態様では、Ａはイソキサゾル−３−イルを表する。
【化８】
2009514837.tif 000010
【００１４】
本発明の第７の態様では、Ａは５−メチルチアゾール−２−イルを表する。
【化９】
2009514837.tif 000011
【００１５】
本発明の第８の態様では、Ａは４−ピリミジニルを表する。
【化１０】
2009514837.tif 000012
【００１６】
フェニル環及びシクロペンタノン含有側鎖とアミドカルボニル炭素とを連結している炭素原子はキラル中心である。したがって、この中心の存在により、化合物はラセミ化合物として存在する場合もあり、又は（Ｒ）−若しくは（Ｓ）−立体配置のうちのいずれか１つの鏡像異性体として存在する場合もある。（Ｒ）−鏡像異性体が好適である。
【００１７】
「製薬的に許容し得る塩」という用語には、無機及び有機酸などの、製薬的に許容し得る非毒性の酸から調製される塩が包含される。かかる酸としては例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファスルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素、塩化水素、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタン硫酸、ムコ酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが挙げられる。特に好適には、クエン酸、臭化水素、塩化水素、マレイン酸、リン酸、硫酸、メタン硫酸及び酒石酸である。
【００１８】
上記の式の化合物及びその製薬的に許容し得る塩が溶媒和物又は多形形態で存在する場合、本発明には考えられるあらゆる溶媒和物及び多型が包含される。溶媒和物を形成する溶媒のタイプは、その溶媒が薬理的に許容できる限り特に限定されない。例えば水、エタノール、プロパノール、アセトン等が使用できる。
【００１９】
式（Ｉ）の化合物は製薬用途であるため、実質的に純粋な形で調製するのが好適であり、例えば少なくとも６０％純度、好適には少なくとも７５％純度、より好適には少なくとも９５％純度、特に好適には少なくとも９８％純度である（％はｗ／ｗ）。
【００２０】
本発明にはまた、製薬的に許容し得る担体と組み合わせた形の、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を含有する医薬組成物が包含される。
【００２１】
好ましくは、当該組成物は、製薬的に許容し得る担体、及び非毒性かつ治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を含有する。
【００２２】
更に、この態様において、本発明には、ＧＫの活性化に基づく、高血糖及び糖尿病（特に２型糖尿病）の予防又は治療用の医薬組成物であって、製薬的に許容し得る担体、及び非毒性かつ治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を含有する医薬組成物が包含される。
【００２３】
本発明はまた、医薬としての、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。
【００２４】
本発明の化合物及び組成物は、哺乳類（例えばヒト）の高血糖及び糖尿病（特に２型糖尿病）の治療に効果的である。
【００２５】
本発明はまた、ＧＫの活性化を必要とする症状の予防的若しくは治療的な処置方法であって、有効量の式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００２６】
本発明はまた、有効量の式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を投与することを含んでなる、高血糖又は糖尿病（特に２型糖尿病）の予防的若しくは治療的な処置方法を提供する。
【００２７】
本発明はまた、前糖尿病性高血糖又は耐糖能異常を示すヒトの、糖尿病（特に２型糖尿病）の予防方法であって、予防的有効量の式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００２８】
本発明はまた、ＧＫ活性化剤としての、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。
【００２９】
本発明はまた、高血糖又は糖尿病（特に２型糖尿病）の予防的若しくは治療的な処置のための、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。
【００３０】
本発明はまた、前糖尿病性高血糖又は耐糖能異常を示すヒトにおける糖尿病（特に２型糖尿病）の予防のための、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。
【００３１】
本発明はまた、ＧＫ活性化のための医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。
【００３２】
本発明はまた、高血糖又は糖尿病（特に２型糖尿病）の予防的若しくは治療的な処置のための医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。
【００３３】
本発明はまた、前糖尿病性高血糖又は耐糖能異常を示すヒトにおける糖尿病（特に２型糖尿病）を予防するための医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。
【００３４】
本発明の化合物及び組成物は、１つ以上の他の抗糖尿病薬又は抗高血糖薬と任意に組み合わせて使用でき、例えばスルホニル尿素（例えばグリブリド、グリメピリド、グリピリド、グリピジド、クロルプロパミド、グリクラジド、グリソキセピド、アセトヘキサミド、グリボルヌリド、トルブタミド、トラザミド、カルブタミド、グリキドン、グリヘキサミド、フェンブタミド、トリシクラミドなど）、ビグアナイド（例えばメトホルミン、フェンホルミン、ブホルミンなど）、グルカゴンアンタゴニスト（例えばペプチド又は非ペプチド系のグルカゴンアンタゴニスト）、グルコシダーゼ阻害剤（例えばアカルボース、ミグリトールなど）、インシュリン分泌促進物質、インシュリン感作物質（例えばトログリタゾン、ロシグリタゾン、ピオグリタゾンなど）、又は抗肥満薬（例えばシブトラミン、オルリスタットなど）が挙げられる。本発明に係る化合物及び組成物、並びに他の抗糖尿病薬又は抗高血糖薬を、同時に、連続的に又は別個に投与してもよい。
【００３５】
本発明の医薬組成物は、有効成分としての式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩、製薬的に許容し得る担体及び任意の他の治療的な成分若しくは補助剤を含んでなる。当該組成物としては、経口投与、直腸内投与、局所投与及び非経口投与（皮下、筋肉内、静脈内投与を含む）、並びに吸引投与に適する組成物が挙げられるが、いかなるケースにおいても、最も適切な投与経路は具体的な宿主、及び有効成分を投与しようとする症状の特徴及び重症度に依存するのは言うまでもない。医薬組成物は単位投与剤型として存在してもよく、あらゆる公知の製薬技術を用いて調製することができる。
【００３６】
本発明による医薬組成物は、好適には経口投与に適する形態である。
【００３７】
実際には、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩は、有効成分として、従来公知の製薬技術における医薬用担体との組合せで均一な混合物として調製できる。当該担体は、所望の投与形態（例えば経口投与又は非経口投与（静脈内投与を含む））に応じて多様な形態をとることができる。すなわち本発明の医薬組成物は、経口投与に適する別々の投薬単位（例えば所定量の各有効成分を含むカプセル、カシェ剤又は錠剤）として調製してもよい。更に当該組成物は、粉末状、顆粒状、溶液状、水懸濁液状、非水溶液状、水中油型エマルジョン状、又は油中水エマルジョン状の形態で調製してもよい。上記の一般的な剤形に加えて、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩は、制御放出手段及び／又は輸送手段を用いて投与してもよい。当該組成物は、いかなる製薬技術を用いて調製してもよい。かかる方法は通常、１つ以上の必要な成分を構成する担体と有効成分を混合する工程を含んでなる。通常、当該組成物は均一かつ親密に、有効成分と、液体担体若しくは微粉砕した固体担体又はその両方とを混合することにより調製される。当該生成物を更に、所望の形態に都合良くに成形できる。
【００３８】
すなわち、本発明の医薬組成物は、製薬的に許容し得る担体、及び式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を含有してもよい。式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩は、１つ以上の他の治療活性を有する化合物との組み合わせで医薬組成物に含有させてもよい。
【００３９】
本発明の医薬組成物には、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を含有する製薬的に許容し得るリポソーム型製剤が包含される。
【００４０】
使用される医薬用担体には、例えば固体担体、液体担体又はガス状の担体が包含される。固体担体の例としては、ラクトース、白土、蔗糖、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム及びステアリン酸が挙げられる。液体担体の例としては、シュガーシロップ、ピーナッツオイル、オリーブオイル及び水が挙げられる。ガス状の担体の例としては、二酸化炭素及び窒素が挙げられる。
【００４１】
経口投与用の組成物の調製において、いかなる有用な製薬用媒体も使用できる。例えば、水、グリコール、油、アルコール、香料、防腐剤、着色剤、などを用いて経口投与用の液体製剤（例えば懸濁液、エリキシル及び溶液）を形成してもよく、一方で、澱粉、糖、微結晶セルロース、希釈剤、粒状化剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などの担体を用いて経口投与用の固体製剤（例えば粉、カプセル及び錠剤）を形成してもよい。投与の簡便性の理由から、錠剤及びカプセルが好適な経口投与用の投与単位であり、ゆえに固体状の医薬用担体が使用される。任意の錠剤に標準的な水性又は非水性のコーティング技術を適用してもよい。
【００４２】
本発明の組成物を含んでいる錠剤は、任意の１つ以上のアクセサリ成分又は補助剤を添加して、圧縮又は成形により調製してもよい。圧縮錠剤は、適切な装置を用いて、粉末又は顆粒などの流動形態の有効成分、任意に結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、表面活性化剤もしくは分散剤、又はその他賦形剤を混合し、圧縮することにより調製できる。当該賦形剤としては例えば、不活性希釈剤（例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウム）、顆粒化剤及び崩壊剤（例えばコーンスターチ又はアルギン酸）、結合剤（例えばデンプン、ゼラチン又はアラビアゴム）、並びに潤滑剤（例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルク）が挙げられる。錠剤にはコーティングを施さなくともよいが、施す場合には、崩壊及び消化管の吸収を遅延させる公知の技術を用いてコーティングしてもよく、それにより長期間にわたり一定の動態を維持することが可能となる。例えば、グリセリルモノステアレート塩又はグリセリルジステアレートなどの徐放性材料を用いてもよい。
【００４３】
硬質ゼラチンカプセル中で、有効成分と、不活性な固体希釈剤（例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリン）とを混合状態で存在させてもよい。軟ゼラチンカプセル中で、有効成分と、水又は油性媒体（例えばピーナッツ油、流動パラフィン又はオリーブ油）とを混合状態で存在させてもよい。粉末状の化合物の混合物を不活性液体希釈剤で湿らせ、適切な装置を用いて錠剤を成形してもよい。各錠剤は有効成分を約０．０５ｍｇ〜約５ｇ含有するのが好ましく、又はカプセルは有効成分を約０．０５ｍｇ〜約５ｇ含有するのが好ましい。
【００４４】
例えば、ヒトへの経口投与を目的とする製剤は、約０．５ｍｇ〜約５ｇの活性成分と、組成物全体の約５〜約９５％の範囲の適当量の担体材料とを含んでなる。単位投与剤型は通常、約１ｍｇ〜約２ｇの有効成分、典型的には２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ又は１０００ｍｇの有効成分を含有する。
【００４５】
非経口投与に適する本発明の医薬組成物は、水中の活性化合物の溶液又は懸濁液として調製してもよい。適切な界面活性化剤としては、例えばヒドロキシプロピルセルロースが挙げられる。グリセロール、液体ポリエチレングリコール及びそれらの油中混合物中に分散液を調製することができる。更に、防腐剤を含有させることにより、微生物の好ましくない増殖を防止できる。
【００４６】
本発明の医薬組成物を注射用途に用いる場合、滅菌された水溶液又は分散液を使用する。更に、かかる滅菌された注射用溶液又は分散液の即時調製のために、当該組成物を無菌の粉末状態にしてもよい。全ての場合において、最終的な注射用形態は無菌でなければならず、シリンジ操作の簡便化のために充分に流動的でなければならない。医薬組成物は製造及び保存条件下で安定でなければならず、好ましくは、微生物（例えばバクテリア及び菌類）の混入から保護されなければならない。担体は溶媒又は分散媒であってもよく、例えば水、エタノール、多価アルコール（例えばグリセロール、プロピレングリコール及び液体ポリエチレングリコール）、植物油及びそれらの適切な混合物が挙げられる。
【００４７】
本発明の医薬組成物は、局所投与用の形態（例えばエアゾール、クリーム、軟膏、ローション剤、消毒用散布剤など）であってもよい。更に、当該組成物は、経真皮投与用の形態であってもよい。これらの製剤は、式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を利用して、従来の製剤工程を介して調製してもよい。例えば、式（Ｉ）の化合物を５重量％〜約１０重量％、並びに親水性材料及び水を混合することにより、所望の粘度を有するクリーム又は軟膏が調製される。
【００４８】
本発明の医薬組成物は、固体担体を用いて直腸投与用に調製してもよい。好ましくは当該混合物を単位投与剤型として坐薬に形成する。好適な担体として、従来技術において通常使用されるカカオバター及び他の材料が挙げられる。当該坐薬は、最初に組成物を軟化若しくは溶融した１つ以上の担体と混合し、更に冷却し、鋳型中で成型することにより簡便に調製できる。
【００４９】
本発明の医薬組成物を、吸入投与用に調製してもよい。かかる投与は、例えば以下の文献に記載されている形で行ってもよく、そこで用いられている担体を用いてもよい：１）Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｄｒｙ  Ｐｏｗｄｅｒ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ，Ｘｉａｎ  Ｚｅｎｇ  ら、２０００，Ｔａｙｌｏｒ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｃｉｓ，２）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ  Ａｅｒｏｓｏｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ａｎｔｈｏｎｙ  Ｈｉｃｋｅｙ，１９９２，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，３）Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，１９９０，Ｅｄｉｔｏｒ：Ｐ．Ｒ．Ｂｙｒｏｎ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ．
【００５０】
上記の担体成分に加えて、上記の医薬組成物に、１つ以上の追加的な担体成分（例えば希釈剤、バッファ、香料、結合剤、界面活性化剤、増粘剤、潤滑剤、防腐剤（酸化防止剤を含む））を適宜含有させてもよい。更に他の補助剤を含有させ、製剤を意図された受容者の血液と等張にしてもよい。式（Ｉ）の化合物又はその製薬的に許容し得る塩を含有している組成物は、粉末又は濃縮液の形態で調製してもよい。
【００５１】
通常、１日当たり１患者あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ体重オーダーの投与量、あるいは１日当たり約０．５ｍｇ〜約１０ｇの投与量が、上記の症状の治療において有用である。例えば２型糖尿病の場合、１患者あたり、化合物を約０．０１ｍｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日、あるいは０．５ｍｇ〜約７ｇ／ｋｇ体重／日で投与することにより、効果的に治療することができる。
【００５２】
しかしながら、特定の患者のための具体的な投与量は、年齢、体重、健康状態、性別、食事、投与回数、投与経路、排出速度、薬剤の組合せ及び糖尿病治療を受けている患者の疾病の重症度などの様々な要因に依存することが理解される。更に、本発明の化合物及びその塩は、高血糖症状となる予想に基づいて、予防を目的として、治療的な量以下のレベルで投与できるものと理解される。
【００５３】
式（Ｉ）の化合物は周知のグルコキナーゼ活性化剤と比較して有利な特性を示し、かかる特性は、本願明細書に記載のアッセイ、又は当業者に公知の他のアッセイにおいて示される。特に本発明の化合物は、Ｋｍ、Ｖｍａｘ、ＥＣ５０、最大活性（グルコース濃度＝５ｍＭ）、最大血糖値から血糖値への減少及び／又は経口ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）における食後のグルコースピークの減少の数値的な改良、又は、周知のＧＫ活性化剤と比較した他の有利な薬理学的特性（例えば水溶性の向上、血漿タンパク質との結合の減少及び／又は代謝安定性の向上など）をもたらす。本発明の化合物は、周知の化合物と比較して、低い神経毒性、活性の長期化（例えば半減期の長期化／高い血漿タンパク質との結合性）、高い生物学的利用能、及び／又は高い薬効（例えばｉｎ  ｖｉｔｒｏ若しくはｉｎ  ｖｉｖｏ）などの特性の１つ以上を示す。
【００５４】
実験
本発明にしたがって、式（Ｉ）の化合物を、下記の反応式１に示されるプロトコルに従い調製できる。
＜反応式１＞
【化１１】
2009514837.tif 000013
【００５５】
カルボン酸ＩＩ又はその活性化誘導体を、アミンＩＩＩ又はその塩（例えば塩酸塩）と、当業者に公知の様々な結合条件を用いて縮合させることができる。例えば、エナンチオ純粋なカルボン酸ＩＩを、ごくわずかなラセミ化を生じさせる試薬（例えばベンゾトリアゾル−ｌ−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（Ｊ．Ｃｏｓｔｅら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，１９９０，３１，２０５−２０８））を使用してアミンＩＩＩ又はその塩と縮合させ、式（Ｉ）のエナンチオ的に純粋なアミドを調製することができる。あるいは、カルボン酸ＩＩを、例えばジクロロメタン中の（ＣＯＣｌ）２及びＤＭＦ（例えば−４５℃）で処理し、更にアミンＩＩＩ及びピリジンを添加する。
【００５６】
あるいは、アミドのラセミ混合物をラセミ体のカルボン酸ＩＩから調製し、更にキラル固相（例えばダイセル化学工業社製、東京、日本）を使用したキラル高速液体クロマトグラフィで分離し、所望の式（Ｉ）の化合物を得ることも可能である。
【００５７】
アミンＩＩＩは、市販品を購入するか、又は周知の技術を使用して容易に調製できる。
【００５８】
カルボン酸ＩＩは、下記の反応式２に示されるプロトコルに従い調製できる（（Ｒ）−異性体を用いて示す）。
＜反応式２＞
【化１２】
2009514837.tif 000014
【００５９】
式ＩＶの化合物は例えば、加熱下で、ジオキサン中の硫酸水溶液で処理することによりスルファニルカルボン酸Ｖに変換することができる。スルファニル基のスルホニル基への変換は、周知の方法に従って実施してもよく、例えばジクロロメタンなどの溶媒中でｍＣＰＢＡ（３−クロロペルオキシ安息香酸）で酸化し、スルホニル基カルボン酸ＩＩを得ることができる。
【００６０】
式ＩＶの化合物は、下記の反応式３に示されるプロトコルに従い調製できる（（Ｒ）−異性体を用いて示す）。
＜反応式３＞
【化１３】
2009514837.tif 000015
【００６１】
式ＶＩのアミドと式ＶＩＩの化合物との反応は、無水ＴＨＦなどの溶媒中で、リチウムビス（トリメチルシリル）アミドなどの試薬の存在下で便利に実施できる。
【００６２】
式ＶＩＩの化合物（７（Ｓ）−ヨードメチル−２（Ｓ），３（Ｓ）−ジフェニル−１，４−ジオキサスピロ［４，４］ノナン）は、国際公開第２００３／０９５４３８号に記載の方法に従って調製できる。
【００６３】
式ＶＩのアミドは、下記の反応式４において示されるプロトコルに従い調製できる。
＜反応式４＞
【化１４】
2009514837.tif 000016
【００６４】
式ＶＩＩＩのフェニル酢酸を炭酸カリウムの存在下で、（１（Ｒ），２（Ｒ））−（−）−シュードエフェドリンの添加前に、アセトンなどの溶媒中のトリメチルアセチルクロライドと反応させ、式ＶＩの化合物を調製する。
【００６５】
当業者であれば、式ＶＩＩＩのフェニル酢酸は、例えば、国際公開第２００４／０１８１０６７号に記載の方法に従って、エチル（４−シクロプロピルスルファニルフェニル）オキソアセテートから容易に調製することができる。
【００６６】
式（Ｉ）の化合物の調製に関する詳細を実施例に記載する。
【００６７】
式（Ｉ）の化合物の合成の間、中間体化合物中の反応しやすい官能基（例えばヒドロキシ基、オキソ基、カルボキシル基及びアミノ基）を保護してもよい。保護群は、式（Ｉ）の化合物の合成の任意の工程で脱離してよく、又は式（Ｉ）の最終化合物に存在していてもよい。反応を受けやすい様々な官能基の保護方法、及び得られる被保護誘導体の切断方法に関する一般的な議論が、例えば「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，（１９９１）Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ」に記載されている。
【００６８】
すべての刊行物（本願明細書に引用される特許及び特許出願を含むがこれに限らない）は、あたかも個々の刊行物を具体的かつ個別に本願明細書に引用したものと示すかのように、参照によって本願明細書に援用される。
【実施例】
【００６９】
略語及び頭字語：Ａｃ：アセチル、ｔＢＭＥ：ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ＡＴＰ：アデノシン５’−トリホスフェート、ＤＭＥ：ジメチルホルムアミド、Ｅｔ：エチル、ＧＫ：グルコキナーゼ、Ｇｌｃ：グルコース、Ｇ６Ｐ：グルコース−６−ホスフェート、Ｇ６ＰＤＨ：グルコース−６−ホスフェート脱水素酵素、ＧＳＴ−ＧＫ：グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ−グルコキナーゼ融合タンパク質、ＮＡＤＰ（Ｈ）：β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（還元）、ｒｔ：室温。
【００７０】
製造例１：（４−シクロプロピルスルファニルフェニル）オキソ酢酸
【化１５】
2009514837.tif 000017
２ＭのＮａＯＨ（１６３ｍＬ）水溶液をエチル（４−シクロプロピルスルファニルフェニル）オキソアセテート（４０．６２ｇ、１６２．５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２００ｍＬ）中の溶液に添加し、混合物を撹拌しながら６０℃で２時間加熱した。冷却後、混合物を１５０ｍＬまで濃縮し、エーテル（２×１００ｍＬ）で洗浄した。更に充分濃縮されたＨＣｌを添加してｐＨを１に調整し、得られる沈殿物をＥｔＯＡｃ（２×３００ｍＬ）で抽出した。混合有機相を水（３×１００ｍＬ）、塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。溶媒を除去し、標題化合物を得た：ｍ／ｚ（ＥＳ’）＝２２１．０［Ｍ−Ｈ＋］’。
【００７１】
製造例２：（４−シクロプロピルスルファニルフェニル）酢酸
【化１６】
2009514837.tif 000018
ヒドラジン水和物（１４．１９ｇ、２８３．５ｍｍｏｌ）を−５０℃に冷却し、（４−シクロプロピルスルファニルフェニル）オキソ酢酸（製造例１、１２．６ｇ、５６．７ｍｍｏｌ）の一部を添加した。スラリーを激しく撹拌し、最初に室温に加温し、次に８０℃で５分間加熱した。固体のＫＯＨ（８．７６ｇ、１５６．５ｍｍｏｌ）を４等分して添加し、更に得られる溶液を１００℃で２０時間加熱した。室温に冷却した後、水（２５ｍＬ）を添加し、水性相をＥｔ２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄した。エーテル相を水（２×１５ｍＬ）で洗浄し、水性相に充分濃縮したＨＣｌを添加し、ｐＨを１に調整した。更に得られる沈殿物をＥｔＯＡｃ（２ｘ３００ｍＬ）で抽出し、混合有機相を水（３ｘ１００ｍＬ）及び塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、更に乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。溶媒を蒸発させ、標題化合物を得た：ｍ／ｚ（ＥＳ’）＝２０７．１［Ｍ−Ｈ＋］’。
【００７２】
製造例３：２−（４−シクロプロピルスルファニルフェニル）−Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｒ）−メチル−２−フェニルエチル）−Ｎ−メチルアセトアミド
【化１７】
2009514837.tif 000019
無水アセトン（１４８ｍＬ）を、（４−シクロプロピルスルファニルフェニル）酢酸（製造例２、１６．４１ｇ、７８．８ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（３２．６７ｇ、２３６．４ｍｍｏｌ）に添加しスラリーを形成し、撹拌しながら−１０℃に冷却した。無水の塩化トリメチルアセチル（１０．２ｍＬ、８２．７４ｍｍｏｌ）を滴下して添加し、添加の間に温度が−１０℃を越えないようにした。反応混合物を−１０℃で２０分間撹拌し、２０分かけて０℃に加温し、更に−１５℃に冷却し、固体状の（１（Ｒ），２（Ｒ））−（−）−シュードエフェドリン（１９．５３ｇ、１１８．２ｍｍｏｌ）を添加した。１０分後に反応混合物を室温にし、撹拌を１．５時間継続させた。水（１００ｍＬ）を添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で抽出した。有機相を水（２×ｌ００ｍＬ）で洗浄し、混合水性層をＥｔＯＡｃ（２×２５０ｍＬ）によって逆抽出した。更に混合有機層を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。溶媒を除去し、ＥｔＯＡｃ−１Ｈで固体状の黄色の残余物を再結晶させ、標題化合物を得た：ｍ／ｚ（ＥＳ＋）＝３５６．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７３】
製造例４：２（Ｒ）−（４−シクロプロピルスルファニルフェニル）−３−（３（Ｒ）−オキソシクロペンチル）プロピオン酸
【化１８】
2009514837.tif 000020
ＬＨＭＤＳ（ＴＨＦ（１６２ｍｍｏｌ）中の１Ｍ溶液、１６２ｍＬ）を無水ＴＨＦ（１６１ｍＬ）で希釈し、撹拌しながら−２０℃に冷却した。２−（４−シクロプロピルスルファニルフェニル）−Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｒ）−メチル−２−フェニルエチル）−Ｎ−メチルアセトアミド（３．３０ｇ、８４．４ｍｍｏｌ、調製）の無水ＴＨＦ（２４５ｍＬ）中の溶液を、１０分間にわたり、カニューレを介して添加し、反応温度が添加工程全体にわたり−１５℃となるように維持した。反応液を３０分かけて−７℃にし、更に−１２℃に冷却し、７（５）−ヨードメチル−２（５），３（５）−ジフェニル−１，４−ジオキサスピロ［４，４］ノナン（２７ｇ、６４．２ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１１１ｍＬ）及びＤＭＰＵ（１８．９ｍｌ）の混合液中の溶液に、１０分にわたりカニューレを介して添加し、温度が添加工程全体にわたり−７℃となるように維持した。反応液を２℃に加温し、４．５時間撹拌し、更にトルエン（７７０ｍＬ）及び２０％のＮＨ４Ｃｌ水溶液（５５０ｍＬ）の混合液中に注入した。激しく撹拌した後、有機層を分離し、２０％のＮＨ４Ｃｌ水溶液（５５０ｍＬ）及び塩水（１００ｍＬ）で洗浄した。水性相を混合し、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で抽出し、分離の後、塩水（１００ｍＬ）で洗浄した。連結された有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させ、得られる油状物をフラッシュクロマトグラフィ（ＩＨ−ＥｔＯＡｃ、９：１〜１：１に逐次変化）で精製し、２（Ｒ）−（４−シクロプロピルスルファニルフェニル）−３−（２（５），３（５）−ジフェニル−１，４−ジオキサスピロ［４．４］ノン−７（Ｒ）−イル）−Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｒ）−メチル−２−フェニルエチル）−Ｎ−ミチルプロピオンアミドを得た：ｍ／ｚ（ＥＳ＋）＝６４８．３［Ｍ＋Ｈ］＋。１，４−ジオキサン（６２ｍＬ）中のこのアミド（３０．７ｇ、４７．３８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液を４．５ＭのＨ２ＳＯ４水溶液（６１．５ｍＬ）で希釈し、得られる混合液を１８時間穏やかに還流加熱した。氷上で冷却した後、水（１６２ｍＬ）を添加し、混合液をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で抽出した。水性層は分離し、ＥｔＯＡｃ（２×１５０ｍＬ）で更に抽出し、混合有機相を水（３×２００ｍＬ）で、最終的な洗浄液がｐＨ中性になるまで洗浄し、更に塩水（１００ｍＬ）で洗浄した。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過した後、溶媒を除去し、残余物をフラッシュクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２、ＣＨ２Ｃｌ２−ＴＨＦ（５：１〜３：１に変化）で精製し、標題化合物を得た：ｍ／ｚ（ＥＳ＋）＝３０５．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７４】
製造例５：２（Ｒ）−（４−シクロプロパンスルホニルフェニル）−３−（３（Ｒ）−オキソシクロペンチル）プロピオン酸
【化１９】
2009514837.tif 000021
２（Ｒ）−（４−シクロプロピルスルファニルフェニル）−３−（３（Ｒ）−オキソシクロペンチル）プロピオン酸（製造例４、５．０ｇ、１６．４３ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２５０ｍＬ）中の撹拌溶液を氷上で１℃に冷却し、７０％のｍＣＰＢＡ（８．０９９ｇ、３２．８５ｍｍｏｌ）を徐々に添加し、３℃以下に温度を維持した。６時間後に溶媒を除去し、残余物をフラッシュクロマトグラフィ（ＣＨ２Ｃｌ２、ＴＨＦ中の１％ＡｃＯＨ）で精製し、標題化合物を得た：ｍ／ｚ（ＥＳ＋）＝３３７．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７５】
［実施例］
２（Ｒ）−（４−シクロプロパンスルホニルフェニル）−３−（３（Ｒ）−オキソシクロペンチル）プロピオン酸（製造例５）を、以下の方法を使用して、２−アミノ−５−メチルピラジン、２−アミノ−５−メチルピリジン、３−アミノイソキサゾール、２−アミノ−５−メチルチアゾール及び４−アミノピリミジンから選択されるアミンとカップリングさせ、実施例１から５を得た。
【００７６】
ＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）及びＤＭＦ（０．０８ｍＬ、１．０６４ｍｍｏｌ、１．２当量）を−１０℃に冷却し、オキサリルクロライド（０．０９ｍＬ、０．４６５モル、１．２当量）を徐々に添加した。１５分間撹拌した後、反応混合物を−３０℃に冷却し、（２Ｒ）−２−（４−シクロプロパンスルホニルフェニル）−３−（テトラヒドロピラン−４−イル）プロピオン酸（製造例８、０．３００ｇ、０．８８６ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。反応液を−３０℃で４５分間撹拌し、更にピリジン（１．３９５モル、１ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中０．３１ｍＬ、４．５当量）及びアミン（１．２〜５．０当量）を−４０℃で同時に徐々に添加した。反応混合液を１５分間撹拌し、次にアイスバスを除去した。室温になるまで反応混合液を２時間撹拌した。不十分な真空条件下で溶媒を除去し、得られる粗混合物をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）及びＨＣｌ水溶液（１．５ｍＬ）に溶解させた。層を分離し、水性相をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で抽出した。有機分画を混合し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×１０ｍＬ）、水（５ｍＬ）及び塩水（５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｍｇ２ＳＯ４）。フラッシュクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ヘプタン＝２：１）及び／又は再結晶により精製した。
【表１】
2009514837.tif 000022
【表２】
2009514837.tif 000023
【００７７】
２（Ｒ）−（４−シクロプロパンスルホニルフェニル）−３−（３（Ｒ）−オキソシクロペンチル）プロピオン酸（製造例５）を、上記の方法を使用して２−アミノ−５−クロロピリジン、２−アミノピリジン及び３−アミノ−５−メチルイソキサゾールから選択されるアミンとカップリングさせて実施例６から８を調製してもよい。
【表３】
2009514837.tif 000024
【００７８】
アッセイ
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＧＫ活性
国際公開第２０００／５８２９３号に記載の手順と同様の手順を用い、ＧＳＴ−ＧＫによるＧ６Ｐの製造と、共役酵素としてＧ６ＰＤＨによるＮＡＤＨの生成を共役させることによりＧＫ活性を測定した。
【００７９】
アッセイは、最終濃度５％ＤＭＳＯ中、２５ｍＭのＨｅｐｅｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭのＫＣｌ、５ｍＭのＤ−グルコース、１ｍＭのＡＴＰ、１ｍＭのＮＡＤＰ、２ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのジチオスレイトール、ヒト肝臓ＧＫ由来の精製された０．２μｇのＧＳＴ−ＧＫ、及び種々濃度の活性化剤を含んでなる溶液合計１００μＬを用い、透明な平底９６ウェルプレートにおいて室温条件下（２３℃）で実施した。インキュベーション時間は反応が線形を示す１５分間とした。ＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ  １９０マイクロプレート分光光度計（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ｃｏｒｐ社製）を用い、ＧＫ活性の間接的な測定値として、ＮＡＤＨの生成をＯＤ３４０にて測定した。
【００８０】
典型的には、最終濃度５％のＤＭＳＯ溶液中で１００〜０．００４μＭの１０個の希釈系列を用い、化合物を試験した。活性化の程度は、５％のＤＭＳＯのみを用いた対照試験に対する割合として算出した。得られた数値は、４パラメータのロジスティックモデルを用いて構築される用量反応曲線から誘導される、ＧＫの２倍の活性化を生じるのに必要な化合物の濃度を示す。更に、活性化の最大倍数（ｍａｘｉｍｕｍ  ｆｏｌｄ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ）及びＥＣ５０（活性の最大倍数の半分となるのに必要な濃度）を、同一の用量反応曲線から算出した。
【００８１】
典型的な実施例に係る式（Ｉ）の化合物では、５００ｎＭ未満のＥＣ５０値を示した。
【００８２】
ｉｎ  ｖｉｖｏ  ＧＫ活性（Ｉ）
４．５時間の絶食後、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、１０ｍｇ／ｋｇ体重のＧＫ活性化剤を経口的に経管栄養によって投与し、更に２ｇ／ｋｇでグルコースを投与した。投薬後２．５時間の験期間中に血糖測定を３回実施した。
【００８３】
マウス（ｎ＝９）を秤量し、経口処置の前に４．５時間にわたり絶食させた。ＧＫ活性化剤を、１ｍｇ／ｍＬの濃度でＧｅｌｕｃｉｒｅ４４／１４−水（１：９ｖ／ｖ）に溶解した。マウスに対して、体重１ｋｇあたり１０ｍｇ／ｋｇの用量となるように１０ｍＬに調製した溶液を経口投与した。投薬の１５分前、動物の尾部の一部（＜１ｍｍ）を切り取り、２０μＬの血液をサンプリングし、投与前血糖値を測定した。ＧＫ活性化剤処置後、投与後０．５、１．０及び２．５時間において、更に同一の尾部の創傷からサンプリングし、血糖値を測定した。試験期間における、ビークル処置されたマウスと、ＧＫ活性化剤処置したマウスとの平均血糖値を比較することによって、結果を評価した。式（Ｉ）の化合物の代表例は、投与後の２つの連続するアッセイ時点についてビークル賦形剤との比較で統計的に有意な血糖値の減少を示した。
【００８４】
ｉｎ  ｖｉｖｏ  ＧＫ活性（ＩＩ）
本発明のＧＫ活性化剤の例が示す血糖降下作用を、生後７〜８週間のオスのＣ５７Ｂｌ／６  ｏｂ／ｏｂマウスに対する経口耐糖能試験で評価した。端的には、マウス（ｎ＝６）を秤量し、そのベース血糖値を、尾部をカットしてサンプリングした２０μＬの血液から測定した（Ｔ−２７時間）。２２時間後（Ｔ−５時間）、食餌を撤去し、マウスを、自由に水を摂取できる新しいケージに移した。尾部の創傷からサンプリングした２０μＬの血液を用いＴ−０．７５時間における血糖値を測定した。ＧＫ活性化剤を、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ４４／１４−水（１：９のｖ／ｖ）混合物に、１ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解し、その後、Ｔ−０．５時間にて、マウスに対して体重１ｋｇあたり１０ｍｇ／ｋｇ当量の１０ｍＬの製剤を経口投与した。Ｔ−０時間にて、マウスから血糖値分析用の血液をサンプリングし（２０μＬ）、直後にグルコース（２ｇ／ｋｇ）を経口投与した。更に血糖値分析用の血液サンプル（２０μＬ）を、Ｔ＝＋０．５、＋１．０、＋１．５、＋２．０、＋３．０及び＋４．０において各々の動物からサンプリングした。式（Ｉ）の化合物の代表例は、典型的に、グルコースの投与後２時間で、グルコース濃度曲線下の面積が少なくとも２０％減少した。
【国際調査報告】
2009514837.tif 000030
2009514837.tif 000031
2009514837.tif 000032
2009514837.tif 000033