(57)【要約】本発明は、ホスホリパーゼ関連疾患の治療のための方法および組成物を提供する。特に、本発明は、動物被験体においてインスリン関連、体重関連疾患および／またはコレステロール関連疾患を治療する方法を提供する。該方法は、一般には、胃腸内腔に局在化される非吸収および／または流出ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを投与することを含む。本発明の１つの第１の態様は、ホスホリパーゼインヒビターを含む組成物に関する。本発明のこの第１の態様の好ましい実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、例えば、１以上の結合部分を介して、また所望により１以上の多官能性架橋部分を介して、相互に連結した、好ましくは相互に共有結合した２以上のホスホリパーゼ阻害部分を有する多価ホスホリパーゼインヒビターである。
2009514892.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホスホリパーゼインヒビターを含む組成物であって、該ホスホリパーゼインヒビターは置換された有機化合物またはその塩を含み、該置換された有機化合物は独立して選択される結合部分Ｌ１、Ｌ２．．．Ｌｎを介して式（Ｄ−Ｉ）：
【化１】
2009514892.tif 000245
によって表される多官能性架橋部分に連結された２以上の独立して選択されたホスホリパーゼ阻害部分Ｚ１、Ｚ２．．．Ｚｎを含み、
ここで、ｎは０〜１０の整数であり、
該２以上のホスホリパーゼ阻害部分Ｚ１、Ｚ２．．．Ｚｎは、それぞれ、結合部分Ｌ１、Ｌ２．．．Ｌｎを介して多官能性架橋部分に共有結合しており、
該多官能性架橋部分は該２以上のホスホリパーゼ阻害部分が結合した少なくとも（ｎ＋２）の反応部位を有し、該多官能性架橋部分はアルキル、フェニル、アリール、アルケニル、アルキニル、複素環基、アミン、エーテル、スルフィド、ジスルフィド、ヒドラジン、ならびに酸素、硫黄、スルホニル、ホスホニル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミン、チオール、エーテル、カルボニル、カルボキシル、エステル、アミド、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、複素環基、およびこれらの組合せを含む部分で置換された前記のいずれかよりなる群から選択される、組成物。
【請求項２】
ホスホリパーゼインヒビターを含む組成物であって、該ホスホリパーゼインヒビターは置換された有機化合物またはその塩を含み、該置換された有機化合物は独立して選択される結合部分Ｌ１、Ｌ２．．．Ｌｎを介して式（Ｄ−Ｉ）：
【化２】
2009514892.tif 000246
によって表される多官能性架橋部分に連結された２以上の独立して選択されたホスホリパーゼ阻害部分Ｚ１、Ｚ２．．．Ｚｎを含み、
ここで、ｎは１〜１０の整数であり、
該２以上のホスホリパーゼ阻害部分Ｚ１、Ｚ２．．．Ｚｎは、それぞれ、結合部分Ｌ１、Ｌ２．．．Ｌｎを介して多官能性架橋部分に共有結合しており、
該多官能性架橋部分は該２以上のホスホリパーゼ阻害部分が結合した少なくとも（ｎ＋２）の反応部位を有し、該多官能性架橋部分はアルキル、フェニル、アリール、アルケニル、アルキニル、複素環基、アミン、エーテル、スルフィド、ジスルフィド、ヒドラジン、ならびに酸素、硫黄、スルホニル、ホスホニル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミン、チオール、エーテル、カルボニル、カルボキシル、エステル、アミド、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、複素環基、およびこれらの組合せを含む部分で置換された前記のいずれかよりなる群から選択される、組成物。
【請求項３】
ホスホリパーゼインヒビターを含む組成物であって、該ホスホリパーゼインヒビターは置換された有機化合物、またはその塩であり、該置換された有機化合物は、式（Ｄ−Ｉ−Ａ）：
【化３】
2009514892.tif 000247
によって表される、結合部分Ｌによって接合された、２以上の独立して選択されたホスホリパーゼ阻害部分を含み、
ここで、該２以上のホスホリパーゼ阻害部分のそれぞれは該結合部分に共有結合しており、
該結合部分Ｌは、それを介して該２以上のホスホリパーゼ阻害部分Ｚ１、Ｚ２が接合された最短鎖中に少なくとも２０原子のリンカー長さを有する結合部分である、組成物。
【請求項４】
ホスホリパーゼインヒビターを含む組成物であって、該ホスホリパーゼインヒビターは置換された有機化合物、またはその塩であり、該置換された有機化合物は、式（Ｄ−Ｉ−Ａ）：
【化４】
2009514892.tif 000248
によって表される、結合部分によって接合された、２以上の独立して選択されるホスホリパーゼ阻害部分を含み、
ここで、該２以上のホスホリパーゼ阻害部分は該結合部分に共有結合しており、および
該結合部分Ｌは式（Ｄ−ＩＩ）：
【化５】
2009514892.tif 000249
によって表される結合部分であり、
ここで、ＲＬ１、ＲＬ２およびＲＬ３は、それぞれ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、炭素環基、複素環基、ポリ（エチレンオキシル）およびポリエステルよりなる群から独立して選択される部分であり、および
ＶはＮ、Ｏ、Ｓ、ジスルフィド、カルボニル、エステル、アミド、ウレタン、尿素、ヒドラジン、アルケン、およびアルキンよりなる群から独立して選択される部分である、組成物。
【請求項５】
各結合部分が、それを通じて該２以上のホスホリパーゼ阻害部分が接合された最短鎖中に少なくとも２０原子のリンカー長さを有する請求項１、２および４いずれか１項記載の発明。
【請求項６】
前記ホスホリパーゼインヒビターが、被験体への投与に際して、胃腸内腔に局在化される請求項１〜５いずれか１項記載の発明。
【請求項７】
前記ホスホリパーゼインヒビターが、被験体への投与に際して、該ホスホリパーゼインヒビターの実質的に全てが胃腸内腔に留まるように、胃腸内腔に局在化される請求項６記載の発明。
【請求項８】
前記ホスホリパーゼインヒビターが、被験体への投与に際して、該ホスホリパーゼインヒビターの少なくとも８０％が胃腸内腔に留まるように、胃腸内腔に局在化される請求項６記載の発明。
【請求項９】
前記ホスホリパーゼインヒビターが、被験体への投与に際して、該ホスホリパーゼインヒビターの少なくとも９０％が胃腸内腔に留まるように、胃腸内腔に局在化される請求項６記載の発明。
【請求項１０】
前記ホスホリパーゼインヒビターが、胃腸粘膜を通じて吸収されないことによって胃腸内腔に局在化される請求項６記載の発明。
【請求項１１】
前記ホスホリパーゼインヒビターが、胃腸粘膜細胞からの流出の結果として胃腸内腔に局在化される請求項６記載の発明。
【請求項１２】
前記ホスホリパーゼインヒビターが、該ホスホリパーゼインヒビターを胃腸粘膜細胞へ吸収し、次いで、該ホスホリパーゼインヒビターを胃腸粘膜細胞からが胃腸内腔へ流出させる方法によって胃腸内腔に局在化される請求項６記載の発明。
【請求項１３】
前記ホスホリパーゼ阻害部分が可溶性である請求項１〜１２いずれか１項記載の発明。
【請求項１４】
前記ホスホリパーゼインヒビターが、さらに：
（ａ）該ホスホリパーゼインヒビターは、胃腸管の少なくとも胃、十二指腸および小腸を通過する間に安定である；
（ｂ）該ホスホリパーゼインヒビターは胃腸内腔に存在する分泌されたカルシウム依存性ホスホリパーゼの活性を阻害する；
（ｃ）該ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼ−Ａ２ＩＢの活性を阻害する；
（ｄ）該ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼ−Ａ２の活性を阻害するが、他の胃腸粘膜結合ホスホリパーゼを実質的に阻害しない；
（ｅ）該ホスホリパーゼインヒビターは胃腸管の液相において不溶性である；
（ｆ）該ホスホリパーゼインヒビターは脂質−水界面と会合するように適合される；
（ｇ）該オリゴマーまたはポリマー部分は、陰イオン性である少なくとも１つのモノマーおよび疎水性である少なくとも１つのモノマーを含む；
（ｈ）該オリゴマーまたはポリマー部分はコポリマー部分であり、該コポリマー部分はランダムコポリマー部分、ブロックコポリマー部分、グラフト化コポリマー、疎水性コポリマー部分、およびその組合せである；および
（ｉ）組合せの各順列を含めたそれらの組合せである；
よりなる群から選択される１以上の特徴によって特徴付けられる請求項１〜１２いずれか１項記載の発明。
【請求項１５】
前記ホスホリパーゼインヒビター部分がホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分であって、該ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分が低分子である請求項１〜１４いずれか１項記載の発明。
【請求項１６】
前記ホスホリパーゼ阻害部分がホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分であって、該ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分がアラキドン酸アナログ、アラキドニルトリフルオロメチルケトン、メチルアラキドニルフルオロホスホネート、パルミトイルトリフルオロメチルケトン、ベンゼンスルホンアミド誘導体、ブロモエノールラクトン、臭化ｐ−ブロモフェニル、臭化ブロモフェナシル、トリフルオロメチルケトン、シアロ糖脂質およびプロテオグリカンから選択される少なくとも１つの化合物である請求項１〜１４いずれか１項記載の発明。
【請求項１７】
前記ホスホリパーゼ阻害部分がホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分であって、該ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分がリン脂質アナログまたは遷移状態アナログである請求項１〜１４いずれか１項記載の発明。
【請求項１８】
前記リン脂質アナログまたは前記遷移状態アナログが、該リン脂質アナログの、または該遷移状態のアナログの疎水性基を介してオリゴマーまたはポリマーに連結されている請求項１７記載の発明。
【請求項１９】
前記リン脂質アナログまたは前記遷移状態アナログが：
【化６】
2009514892.tif 000250
［式中、ＲはアルキルまたはＯ−アルキルであり；Ｒ１はアルキルまたはＣ（＝Ｏ）アルキルであり；Ｒ２はアルキルであり；Ｒ３は−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ３＋、（ＣＨ２）ｎ−ＯＨ、または−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（Ｒ’）３＋であり、ここで、ｎは２〜４であり、Ｒ’は水素またはアルキルであり；およびＲ４はオレイル、エライドイル、ペトロセライドイル、ガンマ−リネオイル、またはアラキドニルである］
よりなる群から選択される少なくとも１つの構造を含む請求項１７記載の発明。
【請求項２０】
前記リン脂質アナログまたは前記遷移状態アナログが：
【化７】
2009514892.tif 000251
から選択される少なくとも１つの構造である請求項１７記載の発明。
【請求項２１】
前記ホスホリパーゼ阻害部分がホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分であって、該ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分Ｚが：
【化８】
2009514892.tif 000252
から選択される少なくとも１つの構造である請求項１〜１４いずれか１項記載の発明。
【請求項２２】
前記ホスホリパーゼ阻害部分が、ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分であって、該ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分が：
【化９】
2009514892.tif 000253
および
【化１０】
2009514892.tif 000254
から選択される少なくとも１つの化合物である請求項１〜１４いずれか１項記載の発明。
【請求項２３】
前記ホスホリパーゼ阻害部分がホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分であって、該ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分が縮合５員環および６員環を有する置換された有機化合物を含む請求項１〜１４いずれか１項記載の発明。
【請求項２４】
前記ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分が、５員環の環構造内に、６員環の環構造内に、または５員および６員環のそれぞれの環構造内に、置換された１以上のヘテロ原子を有する縮合５員環および６員環を含む請求項２３記載の発明。
【請求項２５】
前記ホスホリパーゼ阻害部分がホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分であって、該ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分がインドール部分を含む請求項１〜１４、２３および２４いずれか１項記載の発明。
【請求項２６】
前記ホスホリパーゼ阻害部分がホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分であって、該ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分が式：
【化１１】
2009514892.tif 000255
［式中、縮合５員環および６員環コア構造は飽和または不飽和であり得、ここで、Ｒ１〜Ｒ７は、独立して、水素、酸素、硫黄、リン、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、置換された置換基、およびその組合せから選択される］
によって表される化合物、またはその塩を含む請求項１〜１４いずれか１項記載の発明。
【請求項２７】
Ｒ１〜Ｒ７が、独立して、２つの隣接置換基の間に独立して選択されるさらなる環を含み、そのようなさらなる環は、炭素環、複素環およびその組合せである独立して選択される５員環、６員環、および／または７員環である請求項２６記載の発明。
【請求項２８】
前記ホスホリパーゼインヒビターが式：
【化１２】
2009514892.tif 000256
【化１３】
2009514892.tif 000257
【化１４】
2009514892.tif 000258
［式中、式のそれぞれに関して、Ｒ１〜Ｒ７は、それぞれ、独立して、水素、ハライド、酸素、硫黄、リン、ヒドロキシル、アミン、チオール、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、エーテル、カルボニル、酸性基、カルボキシル、エステル、アミド、炭素環基、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、およびその組合せを含む部分よりなる群から選択され、
所望により、かつ式のそれぞれに関して好ましくは、Ｒ１〜Ｒ７は、独立して、水素、酸素、硫黄、リン、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、置換された置換基、およびその組み合わせよりなる群から選択される］
から選択されるインドール化合物、またはその塩を含むホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢインヒビターである請求項１〜１４いずれか１項記載の発明。
【請求項２９】
Ｒ１が水素、酸素、硫黄、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、複素環基、および置換された置換基よりなる群から選択され；
Ｒ２が水素、酸素、ハライド、カルボニル、アルキル、アルケニル、炭素環基、および置換された置換基よりなる群から選択され；
Ｒ３が水素、酸素、硫黄、アミン、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、および置換された置換基よりなる群から選択され；
Ｒ４およびＲ５が、それぞれ、独立して、水素、酸素、硫黄、リン、アミン、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、および置換された置換基よりなる群から選択され；
Ｒ６が水素、酸素、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、酸性基、アルキル、炭素環基、アシルアミノ、および置換された置換基よりなる群から選択され；および
Ｒ７が水素、ハライド、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、および置換された置換基よりなる群から選択される請求項２６〜２８いずれか１項記載の発明。
【請求項３０】
Ｒ１がアルキル、炭素環基および置換された置換基よりなる群から選択される請求項２６〜２９いずれか１項記載の発明。
【請求項３１】
Ｒ２がハライド、アルキルおよび置換された置換基よりなる群から選択される請求項２６〜３０いずれか１項記載の発明。
【請求項３２】
Ｒ３がカルボニル、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、および置換された置換基よりなる群から選択される請求項２６〜３１いずれか１項記載の発明。
【請求項３３】
Ｒ４およびＲ５が、それぞれ、独立して、酸素、ヒドロキシル（−ＯＨ）、酸性基、アルキル、および置換された置換基よりなる群から選択される請求項２６〜３２いずれか１項記載の発明。
【請求項３４】
Ｒ６がアミン、酸性基、アルキル、および置換された置換基よりなる群から選択される請求項２６〜３３いずれか１項記載の発明。
【請求項３５】
Ｒ７が炭素環基および置換された置換基よりなる群から選択される請求項２６〜３４いずれか１項記載の発明。
【請求項３６】
前記ホスホリパーゼインヒビターがホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターであって、該ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターが式：
【化１５】
2009514892.tif 000259
を有する化合物またはその塩である請求項１〜１４いずれか１項記載の発明。
【請求項３７】
前記ホスホリパーゼインヒビターがホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターであって、該ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターが：
【化１６】
2009514892.tif 000260
【化１７】
2009514892.tif 000261
【化１８】
2009514892.tif 000262
【化１９】
2009514892.tif 000263
【化２０】
2009514892.tif 000264
よりなる群から選択される式を有する化合物またはその塩であり、
あるいは該ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターが：
【化２１】
2009514892.tif 000265
【化２２】
2009514892.tif 000266
【化２３】
2009514892.tif 000267
【化２４】
2009514892.tif 000268
【化２５】
2009514892.tif 000269
【化２６】
2009514892.tif 000270
よりなる群から選択される式を有するホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分を有する化合物またはその塩である請求項１〜１４いずれか１項記載の発明。
【請求項３８】
置換された有機化合物またはその塩を含む組成物であって、該置換された有機化合物が：
【化２７】
2009514892.tif 000271
【化２８】
2009514892.tif 000272
よりなる群から選択される式によって表される組成物。
【請求項３９】
ホスホリパーゼインヒビターを含む組成物であって、該ホスホリパーゼインヒビターが請求項３８記載の置換された有機化合物またはその塩を含む組成物。
【請求項４０】
前記ホスホリパーゼインヒビターが約−５未満の透過係数を有する請求項１〜３７、および３９いずれか１項記載の発明。
【請求項４１】
前記ホスホリパーゼインヒビターが可逆的にホスホリパーゼ−Ａ２を阻害する請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項４２】
前記ホスホリパーゼインヒビターが不可逆的にホスホリパーゼ−Ａ２を阻害する請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項４３】
前記ホスホリパーゼインヒビターが胃腸内腔に存在する分泌されたカルシウム依存性ホスホリパーゼの活性を阻害する請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項４４】
前記ホスホリパーゼインヒビターが胃腸内腔に存在するホスホリパーゼ−Ａ２を阻害する請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項４５】
前記ホスホリパーゼインヒビターが胃腸内腔に存在する分泌されたカルシウム依存性ホスホリパーゼ−Ａ２の活性を阻害する請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項４６】
前記ホスホリパーゼインヒビターが胃腸内腔に存在するホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢの活性を阻害する請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項４７】
前記ホスホリパーゼインヒビターがホスホリパーゼＡ２およびホスホリパーゼＢを阻害する請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項４８】
前記ホスホリパーゼインヒビターがリパーゼを実質的に阻害しない請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項４９】
前記ホスホリパーゼインヒビターがホスホリパーゼ−Ｂを実質的に阻害しない請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項５０】
前記ホスホリパーゼインヒビターがホスホリパーゼＡ２の活性を阻害するが、リン脂質を異化する活性を有する他の胃腸ホスホリパーゼを阻害しない請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項５１】
前記ホスホリパーゼインヒビターがホスホリパーゼＡ２の活性を阻害するが、ホスファチジルコリンまたはホスファチジルエタノールアミンを異化する活性を有する他の胃腸ホスホリパーゼを阻害しない請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項５２】
前記ホスホリパーゼインヒビターがホスホリパーゼＡ２の活性を阻害するが、他の胃腸粘膜結合ホスホリパーゼを実質的に阻害しない請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項５３】
前記ホスホリパーゼインヒビターがホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢを阻害する請求項１〜３７、３９および４０いずれか１項記載の発明。
【請求項５４】
有効量の組成物をそれを必要とする被験体に投与することによってホスホリパーゼを阻害することを含む方法における請求項１〜５３いずれか１項記載の組成物の使用。
【請求項５５】
有効量のホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを用いて、ホスホリパーゼ−Ａ２活性の少なくとも約３０％を阻害する請求項１〜５３いずれか１項記載の発明の使用。
【請求項５６】
有効量のホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを用いて、ホスホリパーゼ−Ａ２の活性の少なくとも約５０％を阻害する請求項１〜５３いずれか１項記載の発明の使用。
【請求項５７】
有効量のホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを用いて、ホスホリパーゼ−Ａ２活性の少なくとも約７０％を阻害する請求項１〜５３いずれか１項記載の発明の使用。
【請求項５８】
前記インヒビターが、該インヒビターを与えられる被験体において、インスリン関連疾患の治療において治療的または予防的利点を生じる請求項１〜５３いずれか１項記載の発明の使用。
【請求項５９】
前記インヒビターが、該インヒビターを与えられる被験体において体重関連疾患の治療において治療的または予防的利点を生じる請求項１〜５３いずれか１項記載の発明の使用。
【請求項６０】
前記インヒビターが、該インヒビターを与えられる被験体においてコレステロール関連疾患の治療において治療的または予防的利点を生じる請求項１〜５３いずれか１項記載の発明の使用。
【請求項６１】
有効量の請求項１〜５３いずれか１項記載のホスホリパーゼインヒビターを被験体に投与し、次いで、被験体への投与に際して、ホスホリパーゼインヒビターの実質的に全てが胃腸内腔に留まるように、胃腸内腔にインヒビターを局在化することを含む疾患の治療方法。
【請求項６２】
有効量の請求項１〜５３いずれか１項記載のホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを被験体に投与することを含み、ここで、該ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターは胃腸内腔に存在する分泌されたカルシウム依存性ホスホリパーゼ−Ａ２の活性を阻害し、該ホスホリパーゼインヒビターは被験体への投与に際して胃腸内腔に局在化されることを特徴とする、被験体において脂肪、グルコースまたはコレステロールの代謝を調整する方法。
【請求項６３】
医薬として用いるための、請求項１〜５３いずれか１項記載のホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを含む薬物であって、該ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターは薬物の被験体への投与に際して胃腸内腔に局在化されることを特徴とする薬物。
【請求項６４】
医薬として用いるための薬物の製造のために請求項１〜５３記載のホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを用いる方法であって、該ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターは被験体への薬物の投与に際して胃腸内腔に局在化されることを特徴とする方法。
【請求項６５】
食用食材および請求項１〜５３いずれか１項記載のホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを含む食品であって、該ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターが食品の摂取に際して胃腸内腔に局在化されることを特徴とする食品。
【請求項６６】
請求項６〜１２、（請求項６〜１２のいずれかから従属する）１３、（請求項６〜１２いずれかから従属する）１４、５４および５８〜６４いずれか１項記載の発明であって、該被験体が哺乳動物であることを特徴とする発明。
【請求項６７】
前記被験体がヒトである請求項６６記載の発明。
【請求項６８】
前記ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターがその投与または摂取の後に実質的な脂肪便を誘導しない請求項６６または６７いずれか記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
関連出願
本願は、共有にかかり同時係属中の米国仮特許出願第１０／８３８，８７９号（Ｈｕｉらにより、２００４年５月３日に出願され、発明の名称は「Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  Ｌｏｃａｌｉｚｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｌｕｍｅｎ」である）、およびＰＣＴ国際出願第ＵＳ２００５／０１５４１８号（Ｉｌｙｐｓａ，Ｉｎｃ．により、２００５年５月３日に出願され、発明の名称は「Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  Ｌｏｃａｌｉｚｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｌｕｍｅｎ」である）に関連し、そのそれぞれを本明細書中でその全体を参考として援用する。
【０００２】
発明の背景
ホスホリパーゼは、多数の生化学過程（膜流動性および膜安定性の調節、リン脂質の消化および代謝、ならびに炎症経路、血行動態の調節、および他の細胞過程に関与する細胞内メッセンジャーの生成が含まれる）で重要な役割を果たす酵素群である。ホスホリパーゼは、それ自体が多数の機構（選択的リン酸化、ｐＨ、および細胞内カルシウムレベルが含まれる）によって調節される。ホスホリパーゼ活性を、その関連する生化学過程が調節されるように調整することができ、多数のホスホリパーゼインヒビターが開発されている。
【０００３】
ある種のホスホリパーゼ活性は胃腸内腔で起こり、例えば、ホスホリパーゼＡ２は胃腸内腔において食事のリン脂質の消化において作用し、ホスホリパーゼＢは遠位腸の先端粘膜において活性である。これらの酵素の活性は、糖尿病、体重増加およびコレステロール関連疾患を含む、多数のホスホリパーゼ関連疾患に影響を及ぼす。
【０００４】
糖尿病は、米国で１８２０万人が罹患し、これは人口の６％を超える。糖尿病は、インスリン産生するかインスリンを適切に使用する能力が無いことによって特徴づけられる。２型糖尿病（非インスリン依存性糖尿病またはＮＩＤＤＭとも呼ばれる）は、診断された糖尿病の８０〜９０％を占め、インスリン抵抗性に起因する。２型糖尿病におけるインスリン抵抗性は、血漿インスリンレベルが正常から高レベルであるにもかかわらず、所望の範囲内の血糖の維持を妨害する。
【０００５】
肥満は、２型糖尿病および他の疾患（冠状動脈性心疾患、骨関節炎、呼吸困難、および一定の癌が含まれる）の主な原因である。体重増加を調節する試みにもかかわらず、肥満は米国および他の先進工業国で深刻な健康上の懸念であり続けている。実際、米国の６０％を超える成人に過体重が認められ、これらのうちの２２％が肥満に分類される。
【０００６】
食事は、非ＨＤＬコレステロールを含むコレステロールの上昇した血漿中レベルに寄与する。非ＨＤＬコレステロールはアテローム発生、およびアテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、虚血性卒中、および先進国において最も一般的なタイプの病気として一緒に位置づけられる他の形態の心臓病を含めたその続発症に関連する。事実、米国において１２００万人の人々が冠状動脈疾患にかかっていると見積もられており、約３６００万人は上昇したコレステロールレベルについて治療を必要とする。
【０００７】
糖尿病、肥満、およびコレステロール関連疾患の高い蔓延に伴い、望まない副作用の低減を含めた、これらの疾患の１以上を治療するアプローチに対する要望が存在する。本発明は、ホスホリパーゼインヒビターを用いて、インスリン関連疾患（例えば、糖尿病）、体重関連疾患（例えば、肥満）およびまたはコレステロール関連疾患のようなホスホリパーゼ関連疾患を治療するための方法、組成物およびキットを提供する。
【０００８】
従って、より有益なホスホリパーゼインヒビター組成物、そのような組成物を用いる方法、およびそのような組成物を伴う治療に対して依然として当該分野において要望が存在する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
（発明の要旨）
本発明の１つの第１の態様は、ホスホリパーゼインヒビターを含む組成物に関する。本発明のこの第１の態様の好ましい実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、例えば、１以上の結合部分を介して、また所望により１以上の多官能性架橋部分を介して、相互に連結した、好ましくは相互に共有結合した２以上のホスホリパーゼ阻害部分を有する多価ホスホリパーゼインヒビターである。一般に、例えば、本発明のこの第１の態様の多価ホスホリパーゼインヒビターは式Ｄ−１：
【００１０】
【化２９】
2009514892.tif 000003
（式中、Ｌは一般には結合部分であって、Ｚは一般にホスホリパーゼ阻害部分である）
によって表すことができる。多官能性架橋部分はポリマー、またはオリゴマー、または非反復部分とすることができ、それぞれの場合において、２以上の、好ましくは少なくとも（ｎ＋２）の、それに対して２以上のホスホリパーゼ阻害部分が結合した、好ましくは共有結合した反応部分を有する。該ポリマーまたはオリゴマー部分は、アルキル（例えば、−ＣＨ２−）、置換アルキル（例えば、−ＣＨＲ−）、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、アリール、複素環基、アミン、エーテル、スルフィド、ジスルフィド、ヒドラジン、および酸素、硫黄、スルホニル、ホスホニル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミン、チオール、エーテル、カルボニル、カルボキシル、エステル、アミド、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、複素環基、ならびにその組合せを含む部分で置換された前記のいずれかから選択される反復部分よりなる反復単位を含むことができる。さらなるおよび好ましいポリマーおよびオリゴマー部分は、以下に記載する。一般には、非反復多官能性架橋部分は、アルキル、フェニル、アリール、アルケニル、アルキニル、複素環基、アミン、エーテル、スルフィド、ジスルフィド、ヒドラジンおよび酸素、硫黄、スフホニル、ホスホニル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミン、チオール、エーテル、カルボニル、カルボキシル、エステル、アミド、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、複素環基、および（各順列で）これらの組合せを含む部分で置換された前記のいずれかから選択される部分であり得る。非反復部分は、全体として、反復なくしてその部分またはセグメント内に反復単位（例えば、メチレン）を含むことができる。いくつかの実施形態において、整数ｎは最も好ましくは（ホスホリパーゼインヒビター部分の数が２〜１２の範囲であるように）０〜１０の範囲、または（ホスホリパーゼインヒビター部分の数が３〜１２の範囲であるように）１〜１０の範囲である。ｎが０〜１０、または１〜１０の範囲である実施形態において、多官能性架橋部分は、オリゴマー部分または非反復部分であるのが好ましいであろう。別の実施形態において、ｎは一般には０〜約５００、または１〜約５００、好ましくは０〜約１００、または１〜約１００、より好ましくは０〜約５０、または１〜約５０、なおより好ましくは０〜約２０、または１〜約２０の範囲であり得る。いくつかの特定の実施形態において、ホスホリパーゼインヒビター部分の数はより低く、例えば、２〜約１０（整数ｎは対応して０〜約８の範囲）、または３〜約１０（対応して、ｎは１〜約８の範囲）の範囲であり得る。いくつかの他の実施形態において、ホスホリパーゼ阻害部分の数は２〜約６（対応して、ｎは０〜約４の範囲）、または３〜約６（対応して、ｎは１〜約４の範囲）の範囲とすることができる。特定の実施形態において、ホスホリパーゼ阻害部分の数は２〜４（対応して、ｎは０〜２の範囲）、または３または４（対応して、ｎは１または２の範囲）の範囲とすることができる。
【００１１】
本発明の第１の態様内にある第１の好ましい実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは［請求項１］によって定義される。
【００１２】
本発明の第１の態様内にある第２の好ましい実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは［請求項２］によって定義される。
【００１３】
本発明の第１の態様内にある第３の好ましい具他例において、ホスホリパーゼインヒビターは［請求項３］によって定義される。
【００１４】
本発明の第１の態様内にある第４の好ましい実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは［請求項４］によって定義される。
【００１５】
第２の態様において、本発明は、置換された有機化合物またはその塩を含む組成物に関し、該置換された有機化合物は［請求項３８］に記載されたものの１以上から選択される式によって表される。
【００１６】
本発明のこの第２の態様のいくつかの実施形態において、本発明の第２の態様の化合物（または塩）は、その好ましい実施形態を含めた、本発明の第１の態様に関連する適用のためのホスホリパーゼインヒビター部分であり得る。
【００１７】
本発明の第１の態様の第１、第２、第３および第４の実施形態、ならびに本発明の第２の態様の実施形態を含めた好ましい実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、（被験体への投与に続いて）ホスホリパーゼインヒビターが胃腸内腔に位置するように適合させることができる。本発明のこれらの実施形態の第１の一般的アプローチ内に含まれるいくつかの実施形態において、インヒビターは胃腸粘膜を介して吸収されない。本発明のこれらの実施形態の第２の一般的アプローチ内に含まれる実施形態において、インヒビターは、胃腸粘膜細胞からの流出の結果として胃腸内腔に局在化する。
【００１８】
一般に、前記した第１の一般的アプローチまたは第２の一般的アプローチに関連する実施形態を含めた、（本発明の第１の態様または第２の態様を含めた）本発明の全ての実施形態において、インヒビターは内腔局在化機能性を有することができる。例えば、ホスホリパーゼインヒビターは、内腔局在化機能性をインヒビターに付与する（例えば、生物学的膜を横切る）低透過性のような化学的および物理的特性を有することができる。好ましくは、これらの実施形態のインヒビターは、加えて、または代替的に、（いずれの場合にも、被験体へのインヒビターへの投与の後に）ホスホリパーゼインヒビターの少なくとも約８０％が胃腸内腔に留まり、好ましくはホスホリパーゼインヒビターの少なくとも約９０％が胃腸内腔に留まるように、他の化学的および／または物理的特性を有することができる。そのような化学的および／または物理的特性は、例えば、オリゴマー部分、ポリマー部分、疎水性部分、親水性部分、荷電部分およびその組合せから選択される少なくとも１つの部分を含むインヒビターによって実現することができる。これらの実施形態は、種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中において前記したまたは後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００１９】
第１の一般的なアプローチまたは第２の一般的アプローチに関連する実施形態を含めた、本発明の第１および第２の態様の実施形態において、インヒビターは酵素阻害機能性を有することができる。一般には、例えば、その第１の一般的アプローチまたは第２の一般的アプローチに関連する実施形態を含めた本発明の実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、置換有機低分子、オリゴマー、ポリマー、いずれかのその部分、および前記のいずれかの組合せを含み、または実質的にそれよりなることができる。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、非吸収または非吸収性部分に、好ましくは本発明の第１の態様との関係で記載したような多価部分に、あるいはより一般的には、例えば、非吸収または非吸収性オリゴマー部分またはポリマー部分へ連結した（例えば、結合部分を用いて直接的にまたは間接的に共有結合した）ホスホリパーゼ阻害部分を含むことができる。これらの実施形態において、ホスホリパーゼ阻害部分は、例えば、阻害機能性を有する置換有機低分子の部分であり得る。これらの実施形態は、本明細書中において前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに、種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において用いることができる。
【００２０】
一般に、本発明の第１の態様、または本発明の第２の態様の実施形態は、特に、そのような化合物またはその塩がホスホリパーゼ阻害部分である場合、さらに、置換された有機化合物またはその塩に結合した、好ましくは共有結合したオリゴマーまたはポリマー（またはその部分）を含むことができる。該オリゴマーまたはポリマーは特異的に配置することができ、ホスホリパーゼインヒビターの内腔局在化機能性および／または酵素阻害機能性に寄与するように適合させることができる。該オリゴマー（またはオリゴマー部分）または該ポリマー（またはポリマー部分）は、一般には可溶性または不溶性であり得；一般には、架橋したオリゴマー（またはオリゴマー部分）または架橋したポリマー（またはポリマー部分）であり得；一般には、例えば、ランダムコポリマー部分およびブロックコポリマー部分を含めた、（２つのモノマー反復単位を有するポリマー、テルポリマーおよびより高次のポリマーを含めた）ホモポリマーまたはコポリマーであり得；一般には、１以上の陰イオン性モノマー部分のような１以上のイオン性モノマー部分を含むことができ；一般には１以上の疎水性モノマー部分を含むことができ；一般には、１以上の親水性モノマー部分を含むことができ；一般には、組み合わせた前記特徴のいずれかを含むことができる。オリゴマーまたはポリマー（またはその部分）の特に好ましい実施形態は、本発明の独立した態様との関係で後にさらに記載するが、同等に適用することができ、特に、（同様に、例えば、内腔局在化のための第１および第２の一般的アプローチ双方を含めた）本発明のこの第２の態様との関係で適用可能であると考えられる。これらの実施形態は、本明細書中において前記したまたは後に記載する他の態様および実施形態にて、種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において用いることができる。
【００２１】
オリゴマー部分またはポリマー部分のような非吸収または非吸収性部分に連結したホスホリパーゼ阻害部分を含むインヒビターでの実施形態を含めた、ホスホリパーゼインヒビターとしての（またはホスホリパーゼ阻害部分としての）置換有機低分子（またはその部分）を含む実施形態において、該低分子インヒビターまたは阻害部分は公知のまたは将来発見される、ホスホリパーゼ阻害活性を有する低分子であり得る。いくつかの好ましい実施形態において、低分子ホスホリパーゼインヒビターまたは阻害部分は、５員環の環構造内で、６員環の環構造内で、または５員または６員環のそれぞれの環構造内で置換された、およびそれぞれの場合において、ホスホリパーゼ阻害機能性を該部分に付与するのに効果的な置換基の群で置換された、１以上のヘテロ原子（例えば、窒素、酸素）を有する縮合した５員環および６員環、好ましくは縮合した５員環および６員環を有する置換された有機化合物の部分を含むことができる。好ましくは、そのような置換基の群は、内腔局在化機能性を該部分に付与するのにも効果的である。好ましい実施形態において、低分子ホスホリパーゼインヒビターまたは阻害部分は、置換インドール部分のような（本明細書中においては、インドール部分と交換可能にいう）インドール含有部分を含むことができる。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターまたは阻害部分は、リン脂質アナログまたは遷移状態アナログであり得る。いくつかの実施形態において、低分子インヒビターまたは阻害部分は、さらに、オリゴマー部分またはポリマー部分のような、非吸収または非吸収性部分に直接的にまたは間接的に連結するための機能性を有する少なくとも１つの置換基を含むことができる。例えば、リン脂質アナログまたは遷移状態アナログは、例えば、その疎水性基を介して非吸収部分に直接的にまたは間接的に連結させることができる。ホスホリパーゼインヒビターまたは阻害部分の特に好ましい実施形態は、本発明の独立した態様との関係で後にさらに記載するが、同等に適用可能であり、特に、その第１および第２の一般的アプローチ双方を含めた、本発明のこの第１の態様との関係で適用可能であると考えられる。また、これらの実施形態は種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中において前記したまたは後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００２２】
本発明の別の第３の態様はホスホリパーゼインヒビター（本発明の第１の態様内にあるホスホリパーゼインヒビターを含むか、本発明の第２の態様の化合物、塩または部分を含む）を含む組成物に関し、ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼ阻害部分に共有結合したオリゴマー部分またはポリマー部分または非反復部分を含み、ここで、ホスホリパーゼインヒビターは、（ａ）ホスホリパーゼインヒビターは、胃腸管の少なくとも胃、十二指腸、および小腸を通過する間、安定であること；（ｂ）ホスホリパーゼインヒビターは胃腸内腔に存在する分泌されたカルシウム依存性ホスホリパーゼの活性を阻害すること；（ｃ）ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢの活性を阻害すること；（ｄ）ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼ−Ａ２の活性を阻害するが、他の胃腸粘膜結合ホスホリパーゼを実質的には阻害しないこと；（ｅ）ホスホリパーゼインヒビターは胃腸管の流体相に不溶性であること；（ｆ）ホスホリパーゼインヒビターは脂質−水界面と会合するように適合されていること；（ｇ）オリゴマー部分またはポリマー部分は、陰イオン性である少なくとも１つのモノマー、および疎水性である少なくとも１つのモノマーを含むこと；（ｈ）オリゴマー部分またはポリマー部分はコポリマー部分であり、コポリマー部分はランダムコポリマー部分、ブロックコポリマー部分；疎水性コポリマー部分；およびその組合せであること；および（ｉ）組合せの各順列を含めたその組合せ、よりなる群から選択される１以上の特徴によってさらに特徴付けられる。これらの特徴は、前記した本発明の第１の態様内にある実施形態の特徴であることができる。逆に、本発明の第２の態様のポリマー部分および／またはホスホリパーゼ阻害部分を、それ自体、本発明の第１の態様との関係で既に前記した特徴によって特徴付けることができる。これらの実施形態は種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中において前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００２３】
（本発明の第１の態様に関連する、または本発明の第２の態様に関連する）いくつかの実施形態において、本発明はホスホリパーゼインヒビターを含む組成物に関し、ここで、ホスホリパーゼインヒビターは、式（Ａ）：
【００２４】
【化３０】
2009514892.tif 000004
（式中、ｎは整数であり、ｍは整数であり（そのｍまたはｎの少なくとも１つはゼロ以外の整数である）、Ｍはモノマー部分（すなわち、ポリマーの構成部分）であり（例えば、各Ｍは、第１のモノマー部分Ｍ１、第２のモノマー部分Ｍ２、第３のモノマー部分Ｍ３、第４のモノマー部分Ｍ４等のような１以上の特定のモノマー部分から独立して選択され、ここで、そのそれぞれは相互に異なることができる）、Ｌは任意の結合部分であり、Ｚは本発明の第１の態様または第２の態様のホスホリパーゼインヒビターのようなホスホリパーゼ阻害部分である）
を有する反復単位、オリゴマーまたはポリマーを含む。ホスホリパーゼインヒビターは、好ましくは、式（Ａ）を有するオリゴマーまたはポリマーを含む。本発明のこの第３の態様内に含まれる実施形態は種々のおよび特定の実施形態において、および各順列において、本明細書中において前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００２５】
（本発明の第１の態様に関連する、または本発明の第２の態様にも関連する）いくつかの実施形態において、本発明は、ホスホリパーゼインヒビターを含む組成物に関し、ここで、ホスホリパーゼインヒビターは式（Ｂ）：
【００２６】
【化３１】
2009514892.tif 000005
（式中、ｍはゼロ以外の整数であり、Ｍはモノマー部分であり（例えば、各Ｍは、第１のモノマー部分Ｍ１、第２のモノマー部分Ｍ２、第３のモノマー部分Ｍ３、第４のモノマー部分Ｍ４等のような１以上の特定のモノマー部分から独立して選択され、ここで、そのそれぞれは相互に異なることができる）、Ｌは任意の結合部分であって、Ｚはホスホリパーゼ阻害部分である）
の化合物を含む。本発明のこの第４の態様内に含まれる実施形態は、種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中において前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００２７】
（本発明の第１の態様、または本発明の第２の態様に関連する）いくつかの実施形態において、本発明はホスホリパーゼインヒビターを含むことができる組成物に関し、ここで、ホスホリパーゼインヒビターは式（Ｃ）：
【００２８】
【化３２】
2009514892.tif 000006
（式中、ｍはゼロ以外の整数であり、Ｍはモノマー部分であり（例えば、各Ｍは第１のモノマー部分Ｍ１、第２のモノマー部分Ｍ２、第３のモノマー部分Ｍ３、第４のモノマー部分Ｍ４等のような１以上の特定のモノマー部分から独立して選択され、ここで、そのそれぞれは相互に異なることができ、Ｌは、それぞれ、独立して選択された任意の結合部分であって、Ｚはそれぞれ、独立して選択されたホスホリパーゼ阻害部分である）
を有する化合物である。一般に、本発明のこの第５の態様に含まれるこれらの実施形態は種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中において前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００２９】
（本発明の第１の態様、または本発明の第２の態様に関連する）いくつかの実施形態において、本発明は、ホスホリパーゼインヒビターを含む組成物に関し、それはホスホリパーゼ阻害部分に共有結合したオリゴマー部分またはポリマー部分を含み、好ましくは、ホスホリパーゼインヒビターは、式（Ｃ−１）：
【００３０】
【化３３】
2009514892.tif 000007
（式中、ｍはゼロ以外の整数であり、ｎはゼロ以外の整数であり、ｐはゼロ以外の整数であり、Ｍはそれぞれ独立してモノマー部分から選択され（例えば、各Ｍは、独立して、第１のモノマー部分Ｍ１、第２のモノマー部分Ｍ２、第３のモノマー部分Ｍ３、第４のモノマー部分Ｍ４等のような１以上の特定のモノマー部分から選択され、ここで、そのそれぞれは相互に異なることができる）、Ｂは架橋部分であり、Ｌはそれぞれ、独立して選択された任意の結合部分であり、Ｚは、それぞれ、独立して選択されたホスホリパーゼ阻害部分である）
を有する化合物を含む。一般には、本発明のこの第６の態様に含まれるこれらの実施形態は、種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中に前記した、または後に記載する他の実施形態とともに用いることができる。
【００３１】
本発明のこれらの種々の実施形態のそれぞれにおいて、ホスホリパーゼインヒビターは、本発明の第１および／または第２の態様に関連して前記した特徴から選択される１以上の特徴によって、さらに特徴付けられる。これらの実施形態は種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中において前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００３２】
一般には、本発明の前記した態様または以下に議論する態様のいずれに関しても、ホスホリパーゼインヒビターは、それがホスホリパーゼの活性を阻害するように適合させることができ、特にかつ好ましくは、該インヒビターは：胃腸内腔に存在する分泌されたカルシウム依存性ホスホリパーゼの活性を阻害し；胃腸内腔に存在するホスホリパーゼ−Ａ２を阻害し；胃腸内腔に存在する分泌されたカルシウム依存性ホスホリパーゼ−Ａ２の活性を阻害し；胃腸内腔に存在するホスホリパーゼ−Ａ２ＩＢの活性を阻害し；ホスホリパーゼ−Ａ２ＩＢのようなホスホリパーゼＡ２を阻害し、ならびにホスホリパーゼＢを阻害し；および／またはその組合せであるように特徴付けられる。これらの実施形態は種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中において前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００３３】
また、本発明の態様のいずれに関しても、ホスホリパーゼインヒビターは、例えば、ホスホリパーゼーＡ２ＩＢのようなホスホリパーゼＡ２を阻害する活性を有することを含めて、比較的特異的または厳密に特異的であり得るが、ここで、ホスホリパーゼインヒビターは、以下のとおり、１以上の他の酵素を実質的に阻害しない；リパーゼを実質的に阻害しない；ホスホリパーゼ−Ｂを実質的に阻害しない；リン脂質を異化する活性を有する他の胃腸ホスホリパーゼを実質的に阻害しない；ホスファチジルコリンまたはホスファチジルエタノールアミンを異化する活性を有する他の胃腸ホスホリパーゼを実質的に阻害しない；および／または他の胃腸粘膜結合ホスホリパーゼを実質的に阻害しない、およびその組合せである。いくつかの実施形態において、インヒビターは胃腸粘膜に作用しない。これらの実施形態は種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中にて前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００３４】
一般に、本発明の態様のいずれかに含まれる実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、ここで、それらが、それぞれの場合において、当該インヒビターを与えられる被験体において、インスリン関連疾患（例えば、２型糖尿病）、体重関連疾患（例えば、肥満）、コレステロール関連疾患（例えば、高コレステロール血症）、およびその組合せの治療において治療的および／または予防的利点を生じることを特徴とすることができる。
【００３５】
本発明の別の第４の態様は、（例えば、本発明の第１から第７の態様内に含まれるホスホリパーゼインヒビターのいずれも含めた）ホスホリパーゼインヒビターを含む組成物を用いる方法を提供する。一般に、該方法は、有効量の組成物を、それを必要とする被験体に投与することによってホスホリパーゼを阻害することを含む。いくつかの実施形態において、該方法は、ホスホリパーゼを特異的または選択的に阻害することを含む（例えば、特異性の種々の態様は前記した通りである）。これらの方法の実施形態は種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中において、前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００３６】
別の第５の態様において、本発明は、有効量のホスホリパーゼインヒビターを被験体に投与し、被験体への投与に際して、ホスホリパーゼインヒビターの実質的に全てが胃腸内腔に残るようにインヒビターを胃腸内腔に局在化することを含む疾患を治療する方法に関する。好ましい実施形態において、本発明のこの態様は、１つの好ましいアプローチにおいて、有効量のホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを被験体に投与することを含む疾患を治療する方法を含むことができ、該ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターは好ましくはホスホリパーゼ−Ａ２ＩＢインヒビターであり、および、いずれの場合においてもホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターは、被験体への投与に際して、胃腸内腔に局在化される。本発明のこの態様は、第２の好ましいアプローチにおいて、被験体において脂肪、グルコースまたはコレステロールの代謝を調整する方法も含むことができ、該方法は有効量のホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを被験体に投与することを含み、ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターが胃腸内腔に存在する分泌されたカルシウム依存性ホスホリパーゼ−Ａ２の活性を阻害し、ホスホリパーゼインヒビターが被験体への投与に際して胃腸内腔に局在化される。好ましくは、かつ一般に、この方法の実施形態は、有効量のホスホリパーゼインヒビターをそれを必要とする被験体に投与することによって疾患を治療することを含むことができ、ここで、インヒビターは胃腸粘膜を通じて吸収されず、および／またはここで、インヒビターは胃腸粘膜細胞からの流出の結果として胃腸内腔に局在化される。そのようなホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼ関連疾患、好ましくはホスホリパーゼＡ２関連疾患、および食事によって誘導されるホスホリパーゼＡ２関連疾患の治療に用いることができる。好ましくは、治療される疾患はインスリン関連疾患（例えば、２型糖尿病）、体重関連疾患（例えば、肥満）、コレステロール関連疾患（例えば、高コレステロール血症）、およびその組合せである。これらの実施形態は種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中において前記したまたは以下に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００３７】
関連する第６の態様において、本発明は医薬として用いるためのホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを含む薬物に関する。該薬物のホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターは、好ましくは、被験体への薬物の投与に際して胃腸内腔に局在化され得る。好ましくは、薬物はホスホリパーゼ−Ａ２ＩＢインヒビターを含む。これらの実施形態は種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中において前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００３８】
別の第７の態様において、本発明は、医薬用の薬物を製造するためにホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを用いることを含む方法に関し、ここで、ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターは、薬物の被験体への投与に際して胃腸内腔に局在化される。好ましくは、該薬物はホスホリパーゼ−Ａ２ＩＢインヒビターを用いて製造される。これらの実施形態は種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中にて前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００３９】
本発明のさらなる第８の態様は、食用食材および（ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターのような）ホスホリパーゼインヒビターを含む食品組成物に関し、ここで、ホスホリパーゼインヒビター（またはホスホリパーゼ−Ａ２インヒビター）は、食品組成物の摂取に際して胃腸内腔に局在化される。好ましくは、該食材はホスホリパーゼ−Ａ２ＩＢインヒビターを含む。いくつかの実施形態において、該食材はビタミン補填剤およびホスホリパーゼインヒビターを含むことができる（または実質的にそれよりなることができる）。これらの実施形態は種々のおよび特定の組合せにおいて、および各順列において、本明細書中において前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００４０】
一般に、かつ好ましくは、本発明の第４から第８態様のいずれとの関係においても、ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターはその投与または摂取後に実質的な脂肪便を誘導しない。これらの実施形態は種々のおよび特定の実施形態において、および各順列において、本明細書中において前記した、または後に記載する他の態様および実施形態とともに用いることができる。
【００４１】
当業者は、本明細書中に記載の化合物が互変異性、配座異性、幾何異性、および／または光学異性の現象を示し得ることを認識するであろう。本発明は、本明細書中に記載の１つまたは複数の有用性を有する化合物の任意の互変異性体、配座異性体、光学異性体、および／または幾何異性体、ならびにこれらの種々の異なる形態の混合物を含むと理解すべきである。本明細書中に記載の化合物のプロドラッグおよび活性代謝産物も、本発明の範囲内に含まれる。
【００４２】
本発明の種々の態様をまとめるために種々の特徴を上に記載しているが、下記の多数のその詳細を、本発明を制限することなく、本発明の種々の各態様とともに使用することができることが意図される。本発明の他の特徴、目的、および利点は、その一部が当業者に自明であり、その一部を以後に指摘する。本明細書中に引用した全ての引用文献は、全ての目的のために参考として援用される。さらに、本明細書中に開示し、そして／または特許請求の範囲に記載の主題に関連する特許文献および非特許文献として、当業者は、かかる主題に関するさらなる指示が得られる多数の関連する引例を利用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４３】
発明の詳細な説明
本発明は、ホスホリパーゼインヒビター、そのようなホスホリパーゼインヒビターを含む（医薬処方物、薬物および食材を含めた）組成物、および種々の疾患の治療用の医薬としてのその使用と含めた、そのようなホスホリパーゼインヒビターおよび組成物を同定し、作成し、および使用する方法を提供する。本発明のホスホリパーゼインヒビターは、後に詳細に記載する、インスリン関連疾患（例えば、糖尿病）、体重関連疾患（例えば、肥満）、コレステロール関連障害およびそのいずれかの組合せを含めた、多数のホスホリパーゼ関連疾患の治療においてその用途を見出すことができる。
【００４４】
一般には、本発明のホスホリパーゼインヒビターは、内腔局在化機能性ならびに酵素阻害機能性の双方を有するために適合させるべきである。いくつかのスキームにおいて、そのような二重機能性のある態様は（例えば、同一の構造的特徴および／または電荷特徴を用いることによって）相乗的に達成することができ；他のスキームにおいて、内腔局在化機能性は酵素阻害機能性から（例えば、異なる構造的および／または電荷特徴を用いて）独立して達成することができる。
【００４５】
概説
本発明のホスホリパーゼインヒビターは（１つの態様において）多価ホスホリパーゼインヒビターである。多価インヒビターは内腔局在化に関して有利であり得る。なぜならば、それらは一般には物理的により大きな寸法であって、一般には一価（例えば、低分子）ホスホリパーゼインヒビターよりも大きな分子量を有するからである。興味深いことに、かつ予期せぬことに、理論に拘束されることなく、または特許請求の範囲で具体的に引用されていない性能基準に対して、多価ホスホリパーゼインヒビターの活性（例えば、ＩＣ５０）は、一価（例えば、低分子）ホスホリパーゼインヒビターの活性に、匹敵させることができるか、あるいは重量当たりのベースで、それを超えることができる。これは、それがインヒビターの寸法と改変するための小さな物理的空間であると認識されている、ホスホリパーゼインヒビターの分野内で許容される知恵に鑑みると特に驚くべきことである。というのは、インヒビターは、酵素と二脂質二層との間に存在する位置において活性であると考えられるからである。
【００４６】
本発明の第２の態様の化合物（またはその塩）は、ホスホリパーゼインヒビターとして、またはホスホリパーゼ阻害部分として有用である。１つの例において、例えば、（１以上の官能化された基を有する）それに由来する部分は、本発明の第１の態様との関係において用いて、多価ホスホリパーゼインヒビターを形成することができる。
【００４７】
ホスホリパーゼインヒビターは、いずれの態様または実施形態においても、被験体への投与に際して、ホスホリパーゼインヒビターが胃腸内腔に実質的に留まるように、好ましくは胃腸内腔に局在化される。投与に続いて、局在化されたホスホリパーゼインヒビターは、（胃腸管を介して身体の外へ通過するまで）胃、十二指腸、小腸および大腸を含めた胃腸管に留まることができ、それを自然に通過することができる。ホスホリパーゼインヒビターは、少なくとも胃および十二指腸を通過する間、（例えば、組成物に関しておよび／またはホスホリパーゼを阻害する機能性に関して）好ましくは実質的に安定であり、より好ましくは、胃腸管の胃、十二指腸および小腸を通過する間、実質的に安定であり、最も好ましくは、全胃腸管を通過する間、実質的に安定である。ホスホリパーゼインヒビターは胃腸内腔において作用して、例えば、ホスホリパーゼ基質を異化し、あるいはホスホリパーゼ消化の産物の吸収および／または下流活性を調整することができる。
【００４８】
本発明において、ホスホリパーゼインヒビターは、１つのアプローチにおいて、胃腸粘膜を通じて吸収されないことによって、胃腸内腔内に局在化される。いくつかの実施形態において、本発明のホスホリパーゼインヒビターは胃腸内腔に局在化することができ、また、細胞透過性でない、例えば、細胞に内部化されないことも可能である。別のアプローチとして、ホスホリパーゼインヒビターは粘膜細胞に吸収されることによって胃腸内腔に局在化し、次いで、流出によって胃腸内腔に戻すことができる。よって、いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは細胞透過性であり、例えば、細胞に内部化させることができ、また、胃腸内腔に局在化させる。これらの実施形態において、胃腸局在化を流出メカニズムによって促進することができる。胃腸局在化を達成するためのこれらの一般的アプローチのそれぞれを、さらに、後に記載する。
【００４９】
一般に、それによってホスホリパーゼインヒビターを内腔局在化することができる前記一般的アプローチの１以上への分類によって拘束されることなく、（本発明の種々の態様において考えられる）本発明の好ましいホスホリパーゼインヒビターは、一般には、本発明の第１または第２の態様に適切ないくつかの一般的実施形態様式によって認識することができる。１つの一般的な実施形態において、例えば、ホスホリパーゼインヒビターはオリゴマーまたはポリマーから実質的になることができる。別の実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、置換有機低分子部分のような、ホスホリパーゼ阻害部分に結合部分を介して直接的にまたは間接的に共有結合したオリゴマー部分またはポリマー部分を含むことができる。さらなる一般的実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、それ自体置換された有機低分子であり得る。これらの一般的実施形態のそれぞれを以下にさらに詳細に記載する。
【００５０】
本発明の種々の態様内に含まれる各実施形態では、一般に、インヒビターは、被験体への投与に際して、例えば、ヒトならびに他の哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、ハムスター、ネコ、イヌ、ブタ、家禽類、ウシおよびウマ）を含めた動物、好ましくは、哺乳動物のような被験体の胃腸内腔に局在化される。用語「胃腸内腔」は、本明細書中においては、用語「内腔」と相互交換可能に用いられ、動物の腸ともいうことができる消化管内の空間またはキャビティーをいう。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは胃腸粘膜を通じて吸収されない。「胃腸粘膜」とは、身体の残りの部分から胃腸内腔を分離する細胞の層をいい、小腸の粘膜のような胃および腸粘膜を含む。いくつかの実施形態において、内腔局在化は、胃腸粘膜細胞によるインヒビターの摂取に際して、胃腸内腔への流出によって達成される。本明細書中で用いる「胃腸粘膜細胞」とは、例えば、腸細胞、結腸細胞、先端腸細胞等のような消化管の上皮細胞を含めた胃腸粘膜のあらゆる細胞をいう。そのような流出は、非吸収性の正味の効果を達成し、用語、関連用語および文法上の変形形態として、本明細書中において用いられる。
【００５１】
一般に、本発明の種々の態様内に含まれる全ての実施形態において、本発明のホスホリパーゼインヒビターは、ホスホリパーゼ、好ましくは、胃区画、より好ましくは十二指腸および／または小腸を含めた、胃腸管に分泌されたまたは含有されたホスホリパーゼの触媒活性を調整または阻害（例えば、効果をなくする、または低下させる）ことができる。例えば、そのような酵素は、限定されるものではないが、膵臓ホスホリパーゼＡ２（ｐ−ＰＬ  Ａ２）ともいう、および本明細書中において「ＰＬ  Ａ２  ＩＢ」または「ホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢ」という分泌ＩＢ群ホスホリパーゼＡ２（ＰＬ  Ａ２−ＩＢ）；分泌ＩＩＡ群ホスホリパーゼＡ２（ＰＬ  Ａ２  ＩＩＡ）；ホスホリパーゼＡ１（ＰＬＡ１）；ホスホリパーゼＢ（ＰＬＢ）；ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）；およびホスホリパーゼＤ（ＰＬＤ）を含む。本発明のインヒビターは、好ましくは、少なくともホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢ酵素の活性を阻害する。
【００５２】
いくつかの実施形態において、本発明のインヒビターは、（例えば、ホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢを含めた）ホスホリパーゼＡ２活性のようなホスホリパーゼ活性を阻害することにつき特異的、または実質的に特異的である。例えば、いくつかの好ましい実施形態において、本発明のインヒビターは膵臓トリグリセリドリパーゼ（ＰＴＬ）およびカルボキシルエステルリパーゼ（ＣＥＬ）のようなリパーゼを阻害せず、または有意に阻害せず、または実質的に阻害しない。いくつかの好ましい実施形態において、本発明のインヒビターはＰＬ  Ａ２、好ましくはホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢを阻害するが、それぞれの場合において、他のホスホリパーゼを阻害せず、または有意に阻害せず、または実質的に阻害せず；いくつかの好ましい実施形態において、本発明のインヒビターはＰＬ  Ａ２、好ましくはホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢを阻害するが、それぞれの場合において、ＰＬＡ１を阻害せず、または有意に阻害せず、または実質的に阻害せず；いくつかの好ましい実施形態において、本発明のインヒビターはＰＬ  Ａ２、好ましくはホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢを阻害するが、ＰＬＢを阻害せず、または有意に阻害せず、または実質的に阻害しない。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは胃腸粘膜に作用せず、例えば、それは膜結合ホスホリパーゼを阻害せず、または有意に阻害せず、または実質的に阻害しない。
【００５３】
ＰＬ  Ａ２、ＰＬ  Ａ１およびＰＬＢの異なる活性は、一般には、当該分野においてよく特徴付けられており、理解されている。ＰＬ  Ａ２はｓｎ−２位においてリン脂質を加水分解し、１−アシルリゾリン脂質および脂肪酸を遊離し；ＰＬ  Ａ１はｓｎ−１位においてリン脂質に作用して、２−アシルリゾリン脂質および脂肪酸を放出し；ホスホリパーゼＢはｓｎ−１およびｓｎ−２位の双方においてリン脂質を切断して、グリセロールおよび２つの脂肪酸を形成する。例えば、Ｄｅｖｌｉｎ，Ｅｄｉｔｏｒ，Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｗｉｔｈ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃｏｒｒｅａｔｉｏｎｓ，５ｔｈ  ｅｄ．Ｐｐ  １１０４−１１１０（２００２）参照。
【００５４】
胃腸ＰＬ  Ａ１、（ホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢを含めた）ＰＬ  Ａ２、およびＰＬＢによって作用されたリン脂質基質はほとんどがホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミンタイプのものであり、食事または胆汁由来のものであり得、あるいは細胞膜が落ちることに由来しても良い。例えば、ホスファチジルコリン消化の場合には、ＰＬ  Ａ１はｓｎ−１位で作用して、２−アシルリゾホスファチジルコリンおよび遊離脂肪酸を生じ；ＰＬ  Ａ２はｓｎ−２位で作用して、１−アシルリゾホスファチジルオリンおよび遊離脂肪酸を生じ；他方、ＰＬＢは双方の位置において作用して、グリセロール３−ホスホリルコリンおよび２つの遊離脂肪酸を生じる（Ｄｅｖｌｉｎ，２００２）。
【００５５】
膵臓ＰＬ  Ａ２（およびホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢ）は、膵液を介して十二指腸に放出するために、膵臓外分泌腺の腺房細胞によって分泌される。ＰＬ  Ａ２（およびホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢ）はプロ酵素として分泌され、続いてプロテアーゼによって切断されて酵素の触媒部位を活性化するポリペプチド鎖を有する。ＰＬ  Ａ２イソ酵素についての記載されている構造−活性関係（ＳＡＲ）は、多数の共通した特徴を示す（例えば、それぞれ本明細書中に参考として組み込まれている、Ｇｅｌｂ  Ｍ．，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，２００１，１０１：２６１３−２６５３；Ｈｏｍａｎ，Ｒ．，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９５，１２：３１−６６；およびＪａｉｎ，Ｍ．Ｋ．，Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｌｉｐｉｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ａｎｄ  ｉｎｔｅｒｆａｃｉａｌ  ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｐｈｏｓｐｈｏｌｉａｓｅ  Ａ２，２００１，８１−１０４参照）。
【００５６】
本発明のインヒビターは、ホスホリパーゼの活性、特にＰＬ  Ａ２活性を阻害するこれらの共通の特徴のうち特定の利点を活用することができる。ＰＬ  Ａ２酵素の共通の特徴は約１３〜約１５ｋＤａのサイズ；熱に対する安定性；および６〜８のジスルフィド架橋を含む。ＰＬ  Ａ２酵素の共通の特徴は保存された活性部位構造およびカルシウム依存性活性、ならびにＨｉｓ−カルシウム−Ａｓｐ三つ組における、水分子およびカルシウム陽イオンに対するＨｉｓおよびＡｓｐ残基の協調された結合を含む触媒メカニズムも含む。リン脂質基質は、後により詳細に記載する（リジンおよびアルギニン残基を含めた）疎水性かつ陽イオン性残基によって包まれた溝を通じてその極性頭部基によって触媒部位に接近することができる。触媒部位内では、多配位カルシウムイオンはリン脂質基質のｓｎ−２位のアシルカルボニル基を活性化して、加水分解を引き起こす（Ｄｅｖｌｉｎ，２００２）。いくつかの好ましい実施形態において、本発明のインヒビターは、その触媒部位と相互作用することによってＰＬ  Ａ２のこの触媒活性を阻害する。
【００５７】
ＰＬ  Ａ２酵素は、主として例えば、そのいずれの１つもトリグリセリド、脂肪酸、胆汁酸、リン脂質、ホスファチジルコリン、リゾリン脂質、リソホスファチジルコリン、コレステロール、コレステロールエステル、他の両親媒性物質および／または他の食事代謝産物を含有することができる、脂肪球、エマルジョン滴、小胞、混合ミセル、および／またはディスクを含めた、胃腸内腔に見出される脂質凝集体の脂質−水界面においてリン脂質基質を異化するのに活性である。そのような酵素は、脂質−水界面に「ドッキング」される間に作用すると考えることができる。そのような脂質凝集体において、リン脂質基質は、典型的には、凝集体の外側表面の一部を形成する、上記に列挙した１以上の他の成分と一緒に単層にて、また二層にて配置される。触媒部位を担うホスホリパーゼの表面はこの界面と接触して、リン脂質基質への接近を促進する。ホスホリパーゼのこの表面はｉ−表面、すなわち、酵素の界面認識表面として知られている。ＰＬ  Ａ２のｉ−表面の構造的特徴は十分に記載されている。例えば、本明細書中に参考として組み込まれている、Ｊａｉｎ，Ｍ．Ｋ．ら，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．２３９，１９９５，５６８−６１４参照。本発明のインヒビターは、これらの構造的特徴を利用して、ＰＬ  Ａ２活性を阻害することができる。例えば、触媒部位を形成する溝の開口はｉ−表面に対して垂直である。該開口は、それ自体が（リジンおよびアルブミン残基を含めた）陽イオン性残基の環に含まれる、疎水性残基（主として、ロイシンおよびイソロイシン残基）の第１の冠によって囲まれる。いくつかの好ましい実施形態において、本発明のインヒビターは、このｉ−表面と、および／または脂質−水界面と相互作用することによってＰＬ  Ａ２のそのリン脂質基質への接近を妨げる。
【００５８】
そのような脂質−凝集体の表面に近接するリン脂質基質の消化におけるホスホリパーゼ（例えば、ＰＬ  Ａ２）の作用を考慮すると、本発明のいくつかの実施形態は、ホスホリパーゼインヒビターが脂質凝集体の水−脂質界面と会合し、それにより、インヒビターおよびそれに対して実質的に基部側のホスホリパーゼ−Ａ２の間の相互作用を可能とするアプローチを含むことができる。
【００５９】
多価ホスホリパーゼインヒビター
本発明の多価ホスホリパーゼインヒビターは、一般には、置換された有機化合物またはその塩を含むことができる。置換された有機化合物は、独立して選択される結合部分Ｌ１、Ｌ２．．．Ｌｎ（一般にＬという）を通じて、式（Ｄ−Ｉ）によって表される多価架橋部分に連結された、２以上（または３以上）の独立して選択されるホスホリパーゼ阻害部分Ｚ１、Ｚ２．．．Ｚｎ（一般にＺという）を含むことができる。
【００６０】
【化３４】
2009514892.tif 000008
ここで、ｎは０〜１０、または１〜１０の範囲の整数であり得、好ましい実施形態において、独立して選択されたホスホリパーゼ阻害部分の数は２〜１２、または３〜１２の範囲とすることができる。別の実施形態において、ｎは、一般に、０〜約５００、または１〜約５００、好ましくは０〜約１００、または１〜約１００、より好ましくは０〜約５０、または１〜約５０、なおより好ましくは０〜約２０または１〜約２０の範囲とすることができる。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼ阻害部分の数はより低く、例えば、２〜約１０（対応して、ｎは０〜約８の範囲である）または３〜約１０（対応して、ｎは１〜約８の範囲である）の範囲とすることができる。いくつかの他の実施形態において、ホスホリパーゼ阻害部分の数は２〜約６（対応して、ｎは０〜約４の範囲である）、または３〜約６（対応して、ｎは１〜約４の範囲である）の範囲とすることができる。ある実施形態において、ホスホリパーゼ阻害部分の数は２〜４（対応して、ｎは０〜２の範囲である）、または３〜４（対応して、ｎは１〜２である）の範囲とすることができる。
【００６１】
２以上のホスホリパーゼ阻害部分Ｚ１、Ｚ２．．．Ｚｎは、それぞれ、対応する結合部分Ｌ１、Ｌ２．．．Ｌｎを通じて多官能性架橋部分に結合することができ、好ましくは共有結合することができる。好ましいホスホリパーゼ阻害部分を以下に開示し、この態様に組み込む。好ましい結合部分を以下に開示し、この態様に組み込む。
【００６２】
好ましいアプローチにおいて、多官能性架橋部分は、２以上のホスホリパーゼ阻害部分が結合した少なくとも（ｎ＋２）の反応部位を有することができる。一般に、かつ好ましくは、多官能性架橋部分はアルキル、フェニル、アリール、アルケニル、アルキニル、複素環基、アミン、エーテル、スルフィド、ジスルフィド、ヒドラジン、ならびに酸素、硫黄、スルホニル、ホスホニル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミン、チオール、エーテル、カルボニル、カルボキシル、エステル、アミド、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、複素環基、およびこれらの組合せを含む部分で置換された前記のいずれかよりなる群から選択されることができる。多官能性架橋部分はポリマー部分、またはオリゴマー部分、または非反復部分であり得る。
【００６３】
好ましい多官能性架橋部分の例には、例えば、スルフィド部分、ジスルフィド部分、アミン部分、アリール部分、アルコキシル部分などが含まれる。特に好ましい多官能性架橋単位は、
【００６４】
【化３５】
2009514892.tif 000009
（式中、ｐ、ｑ、およびｒはそれぞれ、０〜約４８、好ましくは０〜約３６、０〜約２４、または０〜約１６の範囲の独立して選択された整数である）から選択される式によって示され得る。いくつかの実施形態では、ｐ、ｑ、およびｒはそれぞれ、０〜１２の範囲の独立して選択された整数であり得る。Ｒは、置換部分であり得る。置換部分は、一般に、ハライド、ヒドロキシル、アミン、チオール、エーテル、カルボニル、カルボキシル、エステル、アミド、炭素環基、複素環基、およびその組み合わせを含む部分から選択することができる。
いくつかの実施形態において、本発明は、多価ホスホリパーゼインヒビター化合物またはその塩を含む組成物であり得る。ホスホリパーゼインヒビターは置換された有機化合物、またはその塩を含むことができ、該置換された有機化合物は式（Ｄ−Ｉ−Ａ）：
【００６５】
【化３６】
2009514892.tif 000010
によって表される結合部分Ｌが連結した、２以上の独立して選択されるホスホリパーゼ阻害部分Ｚ１、Ｚ２を含み、該２以上のホスホリパーゼ阻害部分のそれぞれは結合部分に結合しており、好ましくは共有結合している。
【００６６】
そのような実施形態についての好ましいアプローチにおいて、少なくとも１つ、好ましくは各結合部分Ｌは、それを通じて２以上のホスホリパーゼ阻害部分Ｚ１、Ｚ２が連結する最も短い鎖において少なくとも２０原子のリンカー長さを有する。結合部分Ｌ内の炭素環および複素環の存在は、炭素環または複素環の計算された直径に最も綿密に近似する原子の全数としてカウントされる。例えば、リンカー配列内のベンゼン環はリンカー長さに関しては２つの原子とカウントすることができる。
【００６７】
本発明の第１の態様の第２の一般的な実施形態内の好ましい実施形態では、結合部分Ｌは、式（Ｄ−ＩＩ）、（Ｄ−ＩＩＩ）、および（Ｄ−ＩＶ）：
【００６８】
【化３７】
2009514892.tif 000011
（式中、
いずれの場合も独立して、且つ規定通りに、ＲＬ１、ＲＬ２、およびＲＬ３は、それぞれ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、炭素環基、複素環基、ポリ（エチレンオキシル）、およびポリエステルからなる群から独立して選択される部分であり得る）から選択される式によって示される結合部分であり得る。いくつかの実施形態では、ＲＬ１、ＲＬ２、およびＲＬ３はそれぞれ、独立して選択された非反復部分（例えば、オリゴマーまたはポリマー以外の部分）であり得、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、炭素環基、複素環基からなる群から独立して選択することができる。これらの実施形態では、Ｖは、本明細書中に一般的および具体的に記載される多官能性架橋部分であり得る。Ｖは、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ジスルフィド、カルボニル、エステル、アミド、ウレタン、尿素、ヒドラジン、アルケン、およびアルキンからなる群から独立して選択される部分であり得る。
【００６９】
例えば、いくつかの好ましい実施形態では、結合部分Ｌは、（Ｄ−ＩＩ−Ａ）、（Ｄ−ＩＩＩ−Ａ）、および（Ｄ−ＩＶ−Ａ）：
【００７０】
【化３８】
2009514892.tif 000012
（式中、
いずれの場合も独立して、且つ規定通りに、ｎ、ｍ、およびｐは、それぞれ独立して選択された０でない整数である）から選択される式によって示される結合部分であり得る。整数ｎ、ｍ、およびｐは、１〜５０、好ましくは１〜３０、好ましくは１〜２０、１〜１２、１〜８、または１〜４の範囲からそれぞれ独立して選択することができる。好ましくは、ｎ、ｍ、およびｐの和（いずれの場合にも規定どおり）は、少なくとも約１２、好ましくは少なくとも約１６、より好ましくは少なくとも約２０であり、いくつかの実施形態では、少なくとも約２４または少なくとも約３０である。各実施形態では、アルキル部分（例えば、−−（−−Ｃ−−）−−）は、示すように、置換または非置換アルキル部分であり得る。これらの実施形態では、Ｖは、本明細書中に一般的および具体的に記載される多官能性架橋部分であり得る。Ｖは、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ジスルフィド、カルボニル、エステル、アミド、ウレタン、尿素、ヒドラジン、アルケン、およびアルキンからなる群から独立して選択される部分であり得る。
【００７１】
別の（第３の）一般的な実施形態では、置換有機化合物は、それぞれ結合部分Ｌによって結合した３つまたはそれを超える独立して選択された多環構造Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３．．．．．Ｚｎを含み得る。１つの実施形態では、例えば、本発明の多価化合物は、それぞれ結合部分Ｌによって結合した３つまたはそれを超える独立して選択された多環構造Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３を含む三量体であり得、Ｌは、式（Ｄ−Ｖ）：
【００７２】
【化３９】
2009514892.tif 000013
によって示される結合部分であり得る。ここで、多環構造Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、結合部分に共有結合することができる。多環構造Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、それぞれ、上記および以下にさらに詳述するように、インドールまたはインドール関連化合物（例えば、多価ホスホリパーゼインヒビター）であり得る。ＲＬ１、ＲＬ２、およびＲＬ３は、それぞれ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、炭素環基、複素環基、ポリ（エチレンオキシル）、およびポリエステルからなる群から独立して選択される部分であり得る。いくつかの実施形態では、ＲＬ１、ＲＬ２およびＲＬ３はそれぞれ、独立して選択された非反復部分（例えば、オリゴマーまたはポリマー以外の部分）であり得、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、炭素環基、複素環基からなる群から独立して選択することができる。これらの実施形態では、Ｖは、本明細書中に一般的および具体的に記載される多官能性架橋部分であり得る。Ｖは、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ジスルフィド、カルボニル、エステル、アミド、ウレタン、尿素、ヒドラジン、アルケン、およびアルキンからなる群から独立して選択される部分であり得る。
【００７３】
例えば、いくつかの好ましい実施形態では、結合部分Ｌは、（Ｄ−Ｖ−Ａ）：
【００７４】
【化４０】
2009514892.tif 000014
（式中、ｎ、ｍ、およびｐは独立して選択された０でない整数である）から選択される式によって示された結合部分であり得る。整数ｎ、ｍ、およびｐは、それぞれ独立して、１〜５０、好ましくは１〜３０、好ましくは１〜２０、１〜１２、１〜８、または１〜４の範囲から選択することができる。好ましくは、整数ｎ、ｍ、およびｐのうちのいずれか２つの和（例えば、（ｎ＋ｍ）、（ｎ＋ｐ）、または（ｍ＋ｐ））は、少なくとも約１２、好ましくは少なくとも約１６、より好ましくは少なくとも約２０であり、いくつかの実施形態では、少なくとも約２４または少なくとも約３０である。各実施形態では、アルキル部分（例えば、−−（−−Ｃ−−）−−）は、示すように、置換または非置換アルキル部分であり得る。これらの実施形態では、Ｖは、本明細書中に一般的および具体的に記載される多官能性架橋部分であり得る。Ｖは、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ジスルフィド、カルボニル、エステル、アミド、ウレタン、尿素、ヒドラジン、アルケン、およびアルキンからなる群から独立して選択される部分であり得る。
【００７５】
一般に（全実施形態について）、多環構造Ｚ（例えば、多官能性架橋部分および／または結合部分Ｌが含まれる）の間の総原子間距離は、２つまたはそれを超える多環構造Ｚのうちの少なくとも２つが結合し、いくつかの実施形態では、いずれの場合にも、２つまたはそれを超える多環構造Ｚのそれぞれが結合する最も短い鎖中の少なくとも２０原子の長さであり得る。（例えば、炭素環または複素環の）環構造の原子間距離は、（例えば、炭素環または複素環の）環構造を横切る直線経路中のＣ−Ｃ結合の長さの最も近い概数に基づくと見なされる。いくつかの実施形態では、多環構造Ｚ（例えば、多官能性架橋部分および／または結合部分Ｌが含まれる）の間の総原子間距離は、いずれの場合にも、２つまたはそれを超える多環構造Ｚの少なくとも２つが結合し、いくつかの実施形態では、いずれの場合にも、２つまたはそれを超える多環構造Ｚのそれぞれが結合する最も短い鎖中の約２０〜約５００原子、好ましくは約２０〜約４００原子、約２０〜約３００原子、約２０〜約２００原子、約２０〜約１００原子、約２０〜約５０原子、約２０〜約４０原子、または約２０〜約３０原子の範囲の長さであり得る。
【００７６】
多価ホスホリパーゼインヒビターとして適当な本発明の第１の態様の好ましい化合物は、
【００７７】
【化４１】
2009514892.tif 000015
【００７８】
【化４２】
2009514892.tif 000016
【００７９】
【化４３】
2009514892.tif 000017
【００８０】
【化４４】
2009514892.tif 000018
【００８１】
【化４５】
2009514892.tif 000019
から選択される式によって表される化合物、またはその塩であり得る。
ホスホリパーゼインヒビターまたは部分として適切な他の化合物
本発明の第２の態様内の組成物は、置換された有機化合物またはその塩を含むことができ、ここで、置換された有機化合物は以下のもの内から選択される式によって表される。
【００８２】
ホスホリパーゼ阻害活性を有する特に好ましい部分を、例えば、
【００８３】
【化４６】
2009514892.tif 000020
【００８４】
【化４７】
2009514892.tif 000021
などのＣ−４酸性基を有する部分から選択することができる。
【００８５】
ホスホリパーゼ阻害活性を有する特に好ましい部分を、例えば、
【００８６】
【化４８】
2009514892.tif 000022
などのＣ−４アミド基を有する部分から選択することもできる。
【００８７】
ホスホリパーゼ阻害活性を有する特に好ましい部分を、例えば、
【００８８】
【化４９】
2009514892.tif 000023
【００８９】
【化５０】
2009514892.tif 000024
【００９０】
【化５１】
2009514892.tif 000025
などのアザインドールおよびアザインドール関連多環構造を有する部分から選択することもできる。
【００９１】
ホスホリパーゼ阻害活性を有する他の部分（例えば、
【００９２】
【化５２】
2009514892.tif 000026
【００９３】
【化５３】
2009514892.tif 000027
【００９４】
【化５４】
2009514892.tif 000028
【００９５】
【化５５】
2009514892.tif 000029
などの部分が含まれる）を選択することもできる。
【００９６】
特に、これらの化合物ならびに他の化合物は、ホスホリパーゼ阻害化合物として使用することができる。
【００９７】
非吸収による胃腸内腔内への局在化
好ましいアプローチにおいて、ホスフェートインヒビターは、胃腸内腔から胃腸粘膜細胞へ実質的に吸収されないインヒビターであり得る。それ自体、本明細書中で用いる「吸収されない」とは、有意な量、好ましくは統計学的に有意な量、より好ましくは実質的に全てのホスホリパーゼインヒビターが胃腸内腔に留まるように適合されたインヒビターをいうことができる。例えば、ホスホリパーゼインヒビターの少なくとも約８０％は胃腸内腔に留まり、ホスホリパーゼインヒビターの少なくとも約８５％は胃腸内腔に留まり、ホスホリパーゼインヒビターの少なくとも約９０％は胃腸内腔に留まり、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、好ましくは少なくとも約９９％、より好ましくは少なくとも約９９．５％は胃腸内腔に留まる（いずれの場合にも、統計学的に関連するデータ組に基づく）。逆に、血清の生物学的利用能の点で述べれば、生理学的に有意でない量のホスホリパーゼインヒビターが、被験体への投与の後に被験体の血清に吸収される。例えば、ホスホリパーゼインヒビターの被験体への投与に際して、ホスホリパーゼインヒビターの投与された量の約２０％以下が（例えば、投与後の検出される血清の生物学的利用能に基づいて）被験体の血清中にあり、好ましくはホスホリパーゼインヒビターの約１５％以下、最も好ましくはホスホリパーゼインヒビターの約１０％以下が、被験体の血清中にある。いくつかの実施形態において、約５％以下、約２％以下、好ましくは約１％以下、より好ましくは約０．５％以下が、（いずれの場合にも、統計学的に関連するデータ組に基づいて）被験体の血清中にある。いくつかの場合に、胃腸内腔への局在化とは、例えば、経細胞および傍細胞輸送の双方によって、ならびに能動輸送および／または受動輸送によって胃腸粘膜を横切る正味の移動の低下をいうことができる。そのような実施形態におけるホスホリパーゼインヒビターは、例えば、小腸の先端細胞を通っての経細胞輸送における胃腸粘膜の正味の透過から妨げられ；これらの実施形態におけるホスホリパーゼインヒビターは、内腔を裏打ちする胃腸粘膜細胞の間の傍細胞輸送において、「密着結合」を介して正味の透過からやはり妨げられる。用語「吸収しない（ｎｏｔ  ａｂｓｏｒｂｅｄ）」は、本明細書中においては、用語「非吸収（ｎｏｎ−ａｂｓｏｒｂｅｄ）」、「非吸収性（ｎｏｎ−ａｂｓｏｒｂｅｄｎｅｓｓ）」、「非吸収（ｎｏｎ−ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ）」およびその他の文法上の変形形態と相互交換可能に用いられる。
【００９８】
いくつかの実施形態において、以下にさらに詳細に述べるが、インヒビターまたは阻害部分は、ホスホリパーゼインヒビターの電荷および／またはサイズ、特に、ならびに加えて他の物理的または化学的パラメーターを変更することによって非吸収であるように適合させることができる。例えば、いくつかの実施形態では、胃腸粘膜を介した吸収を最小にするか無効にする分子構造を有するようにホスホリパーゼインヒビターを構築する。薬物の吸収特性を、薬物動態学の原理の適用（例えば、「ルールオブファイブ」としても公知のリピンスキーの法則の適用）によって選択することができる。一連のガイダンスとして、リピンスキーは、（ｉ）分子量、（ｉｉ）水素結合供与体数、（ｉｉｉ）水素結合受容体数、および（ｉｖ）水／オクタノール分配係数（Ｍｏｒｉｇｕｃｈｉ  ｌｏｇＰ）のそれぞれが一定の閾値を超える低分子薬物が、一般に、有意な全身濃度を示さないことを示す。Ｌｉｐｉｎｓｋｙら，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，４６，２００１  ３−２６（本明細書中に参考として組み込まれている）を参照のこと。したがって、１つまたは複数のリピンスキーの閾値、好ましくは２つまたはそれを超えるか、３つまたはそれを超えるか、４つまたはそれを超えるリピンスキーの閾値を超える分子構造を有するように非吸収ホスホリパーゼインヒビターを構築することができる。Ｌｉｐｉｎｓｋｉら，Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｅｓｔｉｍａｔｅ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｉｎ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｓｅｔｔｉｎｇｓ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，４６：３−２６（２００１）；およびＬｉｐｉｎｓｋｉ，Ｄｒｕｇ−ｌｉｋｅ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｃａｕｓｅｓ  ｏ  ｐｏｏｒ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｐｏｏｒ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．＆  Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，４４：２３５−２４９（２０００）（本明細書中に参考として組み込まれている）も参照のこと。いくつかの好ましい実施形態では、例えば、１つまたは複数の以下の特徴を特色とするように本発明のホスホリパーゼインヒビターを構築することができる。（ｉ）ＭＷが約５００Ｄａを超えること、（ｉｉ）ＮＨおよび／またはＯＨおよび／または他の潜在的水素結合供与体の総数が約５を超えること、（ｉｉｉ）Ｏ原子および／またはＮ原子および／または他の潜在的水素結合供与体の総数が約１０を超えること、および／または（ｉｖ）Ｍｏｒｉｇｕｃｈｉ分配係数が約１０５を超える（すなわち、ｌｏｇＰが約５を超える）こと。下記の当該分野で公知のホスホリパーゼインヒビターおよび／または任意のホスホリパーゼ阻害部分を、非吸収分子構造の構築に使用することができる。
【００９９】
好ましくは、化合物の透過性を、実験でスクリーニングする。当業者に公知の方法（例えば、Ｃａｃｏ−２細胞透過性アッセイが含まれる）によって、透過係数を決定することができる。ヒト結腸癌細胞株Ｃａｃｏ−２を使用して、腸薬物吸収をモデリングし、その透過性に基づいて化合物を順位づけすることができる。例えば、１×１０−７ｃｍ／秒またはそれ未満の範囲のＣａｃｏ−２単層で測定された見かけ上の透過性の値が、典型的に不十分なヒト吸収に相関することが示されている（Ａｒｔｕｒｓｓｏｎ  Ｐ，Ｋ．Ｊ．（１９９１）。胃腸粘膜モデルとして人工膜を使用して、透過性を決定することもできる。例えば、合成膜に、例えば、レシチンおよび／またはドデカンを添加して、胃腸粘膜の正味の透過特性を模倣することができる。この膜を使用して、ホスホリパーゼインヒビターを含む区画と透過率をモニタリングする区画とを分離することができる。“Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｏｒａｌ  ｄｒｕｇ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｉｎ  ｈｕｍａｎｓ  ａｎｄ  ａｐｐａｒｅｎｔ  ｄｒｕｇ．”Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  １７５（３）：８８０−８８５。）また、並行人工膜透過性アッセイ（ＰＡＭＰＡ）を、行うことができる。かかるｉｎ  ｖｉｔｒｏ測定は、ｉｎ  ｖｉｖｏでの実際の透過性を合理的に示すことができる。例えば、Ｗｏｈｎｓｌａｎｄら．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００１，４４：９２３−９３０；Ｓｃｈｍｉｄｔら，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  ｃｏｒｐ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｎｏｔｅ，２００２，ｎｏ  ＡＮ１７２５ＥＮ００，ａｎｄ  ｎｏ  ＡＮ１７２８ＥＮ００（本明細書中に参考として組み込まれている）を参照のこと。透過係数を、その常用対数（Ｌｏｇ  Ｐｅ）として報告する。
【０１００】
いくつかの実施形態では、Ｗｏｈｎｓｌａｎｄら．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００１，４４．９２３−９３０に記載の透過性実験で測定した場合、ホスホリパーゼインヒビターの透過係数Ｌｏｇ  Ｐｅは、好ましくは、約−４未満、約−４．５未満、または約−５未満、より好ましくは約−５．５未満、さらにより好ましくは約−６未満である。
【０１０１】
述べたように、１つの一般的な実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターはオリゴマーまたはポリマーを含み、または実質的にそれよりなることができる。一般に、そのようなポリマーインヒビターは非吸収であるようなサイズとすることができ、例えば、電荷特徴、親水性／疎水性特徴の相対的バランスおよび／または分布、および分子構造のような１以上の特徴、または特徴の組合せに基づいて、酵素阻害性となるように適合させることができる。オリゴマーまたはポリマーは、この一般的な実施形態においては、好ましくは可溶性であり、好ましくは、例えば、ランダムコポリマーまたはブロックコポリマーを含めた、（２つのモノマー反復単位を有するポリマー、テルポリマーおよびより高次のポリマーを含めた）コポリマーであり得る。オリゴマーまたはポリマーは、一般には、１以上の陰イオン性モノマー部分のような１以上のイオン性モノマー部分を含むことができる。オリゴマーまたはポリマーは、一般には、１以上の疎水性モノマー部分を含む。オリゴマーまたはポリマーインヒビターはホスホリパーゼと、例えば、その上の特異的部位と、好ましくは、リン脂質−Ａ２のようなホスホリパーゼの触媒部位担持フェース（例えば、該ｉ−表面と相互作用することができる。図１Ａ〜図１Ｄとの関係で後に記載するように、オリゴマーまたはポリマーは、例えば、ホスホリパーゼと相互作用することによって、またはリン脂質基質と相互作用することによって、またはホスホリパーゼおよびリン脂質双方と相互作用することによって、ホスホリパーゼのリン脂質への接近を妨げることができる。図１Ｃとの関係で後に記載するように、インヒビターは、例えば、胃腸管の水相のような流体内のホスホリパーゼをスカベンジするのに効果的であり得る。
【０１０２】
そのようなオリゴマーまたはポリマーインヒビターのための具体的ポリマーおよび具体的モノマーは、オリゴマー部分またはポリマー部分がホスホリパーゼ阻害部分に共有結合した一般的実施形態との関係で、以下の議論に含まれるものであり得る。
【０１０３】
第２の一般的実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、オリゴマー部分またはポリマー部分、または非反復多官能性架橋部分のような多官能性架橋部分に連結した、カップリングしたまたは結合したホスホリパーゼ阻害部分を含むことができ、ここで、そのようなオリゴマー部分またはポリマー部分、または非反復部分は疎水性部分、親水性部分、および／または荷電部分であり得る。（非常に多数のホスホリパーゼ阻害部分が示されるべき）いくつかの好ましい実施形態において、ホスホリパーゼ阻害部分はポリマー部分にカップリングされる。（比較的小さな数のホスホリパーゼ阻害部分が示されるべき）いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼ阻害部分は、前記したようにオリゴマー部分、または非反復多官能性架橋部分にカップリングされる。
【０１０４】
この一般的な実施形態内の１つのより特異的なアプローチでは、ポリマー部分は、比較的高分子量であり得る（例えば、約１０００Ｄａ〜約５００，０００Ｄａの範囲、好ましくは約５０００〜約２００，０００Ｄａの範囲、より好ましくは、胃腸粘膜を介した（正味の）吸収を妨害または排除するのに十分に高い）。（例えば、図２に関連して以下で考察するように）巨大なポリマー部分は、例えば、複数の阻害部分を有する比較的大きな可溶性または不溶性の（例えば、架橋）ポリマーに関する除去アプローチで有利であり得る。
【０１０５】
この一般的実施形態内にある別のより具体的アプローチにおいて、オリゴマー部分またはポリマー部分は、例えば、約５０００Ｄａ以下、好ましくは約３０００Ｄａ以下、いくつかの場合、約１０００Ｄａ以下の低分子量のものであってよい。好ましくは、このアプローチ内では、オリゴマー部分またはポリマーは疎水性ポリマーのブロックより実質的になることができ、またはそれを含むことができ、インヒビターが（例えば、図３Ａ〜３Ｃとの関係で以下に記載する脂質凝集体の）水−脂質界面と会合するのを可能とする。
【０１０６】
いずれの場合においても、特に、この一般的な実施形態のためのすぐ前に記載したより具体的なアプローチのそれぞれでは、ホスホリパーゼ阻害部分をポリマー部分の少なくとも１つの反復単位に連結させることができる。よって、ホスホリパーゼインヒビターは以下の式（Ａ）：
【０１０７】
【化５６】
2009514892.tif 000030
［式中、ｎおよびｍはそれぞれ整数であり（その少なくとも１つはゼロ以外の整数であり）、Ｍはモノマー部分を表し、Ｌは任意の結合部分（例えば、化学リンカー）であり、Ｚはホスホリパーゼ阻害部分、好ましくはＰＬ  Ａ２阻害部分、好ましくはＰＬ  Ａ２阻害部分、最も好ましくはＰＬ  Ａ２  １Ｂ阻害部分である］
に従って、反復単位、オリゴマーまたはポリマーを含むことができる。いくつかの実施形態において、該整数ｍはゼロである。一般に、ｎは１０００未満とすることができ；いくつかの実施形態において、ｎは約５００未満とすることができる。整数ｎは１〜５００、１〜４００、１〜３００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜２０または１〜１０の範囲とすることができる。好ましくは、ｎは少なくとも２、かつ約５００未満である。整数ｎは、２〜約４００、好ましくは２〜約３００、２〜約２００、より好ましくは２〜約１００、２〜約５０または２〜約３５、２〜約２０、または２〜約１０、または３〜約１０の範囲とすることができる。いくつかの特定の実施形態において、ホスホリパーゼ阻害部分の数はより低く、整数ｎは２〜約８、または３〜約８の範囲とすることができる。いくつかの他の実施形態において、ホスホリパーゼ阻害部分の数はなおより低く、ｎは２〜約６、または３〜約６の範囲である。ある実施形態において、整数ｎは２〜４、または３〜４の範囲とすることができる。
【０１０８】
一般に、ｎは１以上のモノマー部分を表す。従って、各Ｍは独立して第１のモノマー部分Ｍ１、第２のモノマー部分Ｍ２、第３のモノマー部分Ｍ３、第４のモノマー部分Ｍ４、第５のモノマー部分Ｍ５、第６のモノマー部分Ｍ６等のうちの１以上を含むことができ、それぞれの場合において、Ｍ１〜Ｍ６は相互に異なる。
【０１０９】
１つのアプローチにおいて、各Ｍは、ホスホリパーゼインヒビターが式（Ａ−１）：
【０１１０】
【化５７】
2009514892.tif 000031
［式中、ｍはゼロ以外の整数であり、ｎはゼロ以外の整数であり、Ｍ１は第１のモノマー部分であり、Ｍ２は第２のモノマー部分であり、第２のモノマー部分は第１のモノマー部分と同一、または異なり、Ｌは任意の結合部分であって、Ｚはホスホリパーゼ阻害部分である］
を有する反復単位、オリゴマーまたはポリマーを含むことができるように、１つのモノマー部分（同一タイプの反復単位）であり得る。この場合において、Ｍ１およびＭ２のそれぞれは同一であり得、それにより、ホスホリパーゼインヒビターはホモポリマー反復単位、オリゴマー部分またはポリマー部分を含む。代替的に、Ｍ１およびＭ２は異なり得、それにより、ホスホリパーゼインヒビターはコポリマー反復単位、オリゴマー部分またはポリマー部分を含む。コポリマー反復単位、オリゴマー部分またはポリマー部分はランダムコポリマー、またはブロックコポリマー反復単位、オリゴマーまたはポリマー部分であり得る。一般には、いくつかの実施形態において、ｎは約５００未満であり得る。好ましくは、ｎは少なくとも２かつ約５００未満である（好ましいｎは式Ａとの関係で上記した通りとすることができる）。
【０１１１】
好ましい実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、第１の反復単位および第の反復単位を有するオリゴマー部分またはポリマー部分を含むことができ、第１の反復単位は上記した式（Ａ−１）を有し、ここで、ｎは１であって、ｍは１以上であり、それにより、ホスホリパーゼインヒビターのオリゴマーまたはポリマー部分は、第１および第２の反復単位を含むランダムコポリマーである。好ましくは、ｍは４〜５０の範囲であり、ｎは２である。より好ましくは、ｍは少なくとも４であって、ｎは１である。第２の反復単位はいかなる適当なモノマータイプのものであってもよい。
【０１１２】
いくつかの好ましい実施形態において、例えば、オリゴマー部分またはポリマー部分が比較的低分子量のものである場合、オリゴマー部分またはポリマー部分は、（例えば、図３Ａ〜３Ｃとの関係で以下に記載する脂質凝集体の）水−脂質界面と会合するように適合された、仕立てられたオリゴマー部分またはポリマー部分であり得る。そのような実施形態において、オリゴマー部分またはポリマー部分は、比較的疎水性の特性を有する領域またはブロックより実質的になることができ、またはそれを含むことができ、脂質凝集体（例えば、ミセルまたは小胞）との一体的会合を可能とする。
【０１１３】
例えば、この点に関して、ホスホリパーゼインヒビターは式（Ｂ）：
【０１１４】
【化５８】
2009514892.tif 000032
［式中、ｍはゼロ以外の整数であり、Ｍはモノマー部分であり、Ｌは任意の結合部分であって、Ｚはホスホリパーゼ阻害部分である］
の化合物を含むことができる。単一の共有結合した阻害部分を有するそのようなオリゴマーまたはポリマー部分は、本明細書中においては、「シングレット」インヒビター（または一価インヒビター）ということができ、例えば、図３Ａおよび３Ｂとの関係で以下に説明し、議論するように、効果的であり得る。
【０１１５】
別の例として、ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼ阻害部分に共有結合したオリゴマー部分またはポリマー部分を含むことができ、該ホスホリパーゼインヒビターは式（Ｃ）：
【０１１６】
【化５９】
2009514892.tif 000033
［式中、ｍはゼロ以外の整数であり、Ｍはモノマー部分であり、Ｌは、それぞれ、独立して選択された任意の結合部分であって、Ｚはそれぞれ、独立して選択されたホスホリパーゼ阻害部分である］
を有する化合物を含む。さらなる例として、ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼ阻害部分に共有結合したオリゴマー部分またはポリマー部分を含むことができ、該ホスホリパーゼインヒビターは式（Ｃ−１）：
【０１１７】
【化６０】
2009514892.tif 000034
［式中、ｍはゼロ以外の整数であり、ｎはゼロ以外の整数であり、ｐはゼロ以外の整数であり、Ｍは、それぞれ、独立して選択されたモノマー部分であり、Ｂは架橋部分であり、Ｌは、それぞれ、独立して選択された任意の結合部分であって、Ｚは、それぞれ、独立して選択されたホスホリパーゼ阻害部分である］
を有する化合物を含む。これらの２つの場合のそれぞれにおいて、２つの共有結合した阻害部分を有するそのようなオリゴマー部分またはポリマー部分は、本明細書中においては、「二量体」インヒビターということができ、例えば、式Ｃとの関係で以下に説明し、議論するように、効果的であり得る。
【０１１８】
これらの直前のシングレットおよび二量体の実施形態において、Ｍは１以上のモノマー部分を表し、各Ｍは独立して第１のモノマー部分Ｍ１、第２のモノマー部分Ｍ２、第３のモノマー部分Ｍ３、第４のモノマー部分Ｍ４、第５のモノマー部分Ｍ５、第６のモノマー部分Ｍ６等のうちの１以上を含むことができ、いずれの場合にも、Ｍ１〜Ｍ６は相互に異なる。いくつかの場合において、Ｍは一般には少なくとも１つの第１のモノマー部分Ｍ１を含むことができ、所望により、さらに、それと組合せて、該第１のモノマー部分とは異なる第２のモノマー部分Ｍ２を含む。Ｍは第１のモノマーＭ１より実質的になることができ、それにより、ホスホリパーゼインヒビターはホモポリマーオリゴマーまたはポリマー部分（単数または複数）を含む。代替的に、Ｍは第１のモノマーＭ１、および該第１のモノマーとは異なる第２のモノマーＭ２を含むことができ、それにより、ホスホリパーゼインヒビターはコポリマーオリゴマーまたはポリマー部分（単数または複数）を含む。コポリマーオリゴマーまたはポリマー部分はランダムコポリマー、またはブロックコポリマー部分（単数または複数）であり得る。Ｍは一般には疎水性モノマー部分を含み、一般には、陰イオン性モノマー部分を含むこともできる。１つの特定の例において、Ｍは疎水性の第１のモノマーＭ１より実質的になる第１のブロックと、親水性の第２のモノマーＭ２より実質的になる第２のブロックとを含むことができ、該第２のブロックはホスホリパーゼ阻害部分（単数または複数）に対して基部側にある（例えば、式Ｂ、ＣおよびＣ−１の）これらの実施形態において、ｍは２〜約２００、好ましくは４〜約５０の範囲とすることができる。実施形態Ｃ−１においては、ｎは同様に２〜約２００、好ましくは４〜約５０の範囲とすることができ、ｐは１〜２０、好ましくは１〜１０、いくつかの場合には、１〜４の範囲とすることができる。
【０１１９】
よって、１つの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは式（Ｃ−２）：
【０１２０】
【化６１】
2009514892.tif 000035
［式中、ｍはゼロ以外の整数であり、ｎはゼロ以外の整数であり、ｐはゼロ以外の整数であり、Ｍ１は第１のモノマー部分であり、Ｍ２は第２のモノマー部分であり、第２のモノマー部分は第１のモノマー部分と同一または異なり、Ｂは架橋部分であり、Ｌは、それぞれ、独立して選択された任意の結合部分であって、Ｚは、それぞれ、独立して選択されたホスホリパーゼ阻害部分である］の化合物を含むことができる。この実施形態においては、ｍおよびｎは、それぞれ、２〜約５００、または４〜約５００の範囲の、好ましくは４〜約１００の範囲の、最も好ましくは４〜５０の範囲の独立して選択された整数であり得る。
【０１２１】
結合部分
結合部分Ｌは、（ホスホリパーゼ阻害部分が、ポリマー部分、オリゴマー部分、または非反復部分のような多官能性架橋に連結した実施形態を含めた）記載された実施形態のそれぞれにおいて、例えば、親水性および／または疎水性であり得る約１〜約１０原子を含む結合または他の部分のような化学的リンカーであり得る。いくつかの実施形態において、例えば、結合部分が架橋部分でもある場合を含めて、リンカーはより長くすることができ、例えば、親水性および／または疎水性であり得る１〜約１００原子を含む。いくつかの場合において、リンカー部分は、阻害部分の間の最も短い経路に沿って１０〜１００原子の範囲とすることができ、いくつかの実施形態においては、そのような最も短い経路に沿って少なくとも２０原子、好ましくは約２０〜約１００、または２０〜約５０原子である。結合部分はホスホリパーゼ阻害部分Ｚを別の阻害部分Ｚに、または非反復架橋部分に、またはオリゴマー部分に、またはポリマー部分に（例えば、ポリマー部分の骨格に）連結させ、カップリングさせ、または結合させる。１つの実施形態において、結合部分は、例えば、当該分野で知られたリビングフリーラジカル重合アプローチを用いて、ポリマー骨格にグラフティングしたポリマー部分であり得る。
【０１２２】
ポリマー部分
一般に、ポリマー部分を含む実施形態に関しては、例えば、合成および／または天然に存在する脂肪族、脂環式、および／または芳香族ポリマーを含めた多数のポリマーを用いることができる。好ましい実施形態において、ポリマー部分は胃腸（ＧＩ）管の生理学的条件下で安定である。「安定である」とは、ポリマー部分が、ＧＩ管の生理学的条件下で、分解せず、または有意に分解せず、または実質的に分解しないことを意味する。例えば、ポリマー部分の少なくとも約９０％、好ましくは少なくとも約９５％、より好ましくは少なくとも約９８％、なおより好ましくは少なくとも約９９％は、（いずれの場合にも、統計学的に関連するデータ組に基づいて）胃腸管において少なくとも約５時間、少なくとも約１０時間、少なくとも約２４時間、または少なくとも約４８時間後に分解されないままであるか、または無傷のまま留まる。胃腸管における安定性は、ＧＩ管内の１以上の場所における生理学的条件を近似的にモデル化する、胃腸模倣物、例えば、胃模倣物、または小腸の腸模倣物を用いて評価することができる。
【０１２３】
ポリマー部分は、例えば、コロイド粒子または（不溶性）巨視的ビーズのような分散したミセルまたは粒子として存在して、可溶性または不溶性であってよい。いくつかの実施形態において、ポリマー部分は不溶性の多孔性粒子として存在する。好ましい実施形態において、ポリマー部分は、例えば、ホスホリパーゼ阻害部分が、例えば、小腸の胃腸内腔内で作用するＧＩ管内の場所において、胃腸管の生理学的条件下で、可溶性であるか、またはコロイド分散液として存在する。
【０１２４】
ポリマー部分は疎水性、親水性、両親媒性、非荷電または非イオン性であるか、負にまたは正に荷電しているか、またはその組合せとすることができ、有機または無機であり得る。いくつかの場合においては、無機キャリアともよばれる無機ポリマーはシリカ（例えば、多層シリカ）、ケイソウ土、ゼオライト、炭酸カルシウム、タルク等を含むことがある。
【０１２５】
ポリマー部分のポリマー構造は、好ましくは、前記した所望の可溶性および／または安定性の特徴を生じるように選択された、線状、グラフト、クシ、ブロック、スターおよび／または樹状であり得る。該構造はマクロ分子足場を含むことができ、いくつかの実施形態において、該足場は多孔性または非多孔性であってよい粒子を形成してもよい。粒子は球状、楕円形、グローブ状または不規則な形状の粒子を含めたいかなる形状のものであってもよい。好ましくは、粒子は、例えば、スチレン、アクリル、メタクリル、アリルまたはビニルモノマーに由来する架橋した有機ポリマーから構成されるか、あるいはポリエステル、ポリアミド、メラミンおよびフェノールホルモール縮合物のような重縮合によって生じるか、または架橋したデキストランまたはアガロース（例えば、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（Ａｍｅｒｓｈａｍ））のような半合成セルロースおよびセルロース様材料に由来する。
【０１２６】
ポリマー部分に連結した、カップリングした、または結合したホスホリパーゼ阻害部分を含む好ましい粒子の実施形態において、粒子は、ホスホリパーゼ阻害部分のホスホリパーゼへの結合を可能とするのに十分利用できる表面積を提供する。例えば、治療的利点および／または予防的利点を生じさせるのに必要な量を低下させるのを助けるために、粒子は、約２ｍ２／ｇｒ〜約５００ｍ２／ｇｒ、好ましくは約２０ｍ２／ｇｒ〜約２００ｍ２／ｇｒ、より好ましくは約４０ｍ２／ｇｒ〜約１００ｍ２／ｇｒの範囲の比表面積を呈すべきである。
【０１２７】
ホスホリパーゼ阻害部分は、好ましくは、ポリマー部分の約０．０５ｍｍｏｌ／ｇ〜約４ｍｍｏｌ／ｇ、より好ましくはポリマー部分の約０．１ｍｍｏｌ／ｇ〜約２ｍｍｏｌ／ｇの密度にて、そのような粒子の表面上のポリマー部分に好ましくは連結し、カップリングされ、または結合される。ホスホリパーゼ阻害部分の密度は、例えば、食事の消化の間に、またはその直後に、ヒトＧＩにおいて、典型的に遭遇する全ＰＬＡ２酵素の量を考慮して決定することができる。ＰＬＡ２酵素負荷は消化相の間に約１５０〜４００ｍｇ／Ｌの範囲であり、全十二指腸／空腸容量は約１〜２リットルの範囲であると報告されている。（ＰＬＡ２インヒビターを食事の間にまたは直後に投与することを含む治療プロトコルにおける）約１：１０〜約１：１００の酵素／インヒビターの範囲のモル比率に基づき、ポリマー粒子内の固定化された阻害部分として表して、モルポリマーに対するインヒビターのモル含有量は約０．０１〜約１００ｍＥｑ、好ましくは約０．１〜約５０ｍＥｑの範囲とすることができる。阻害部分含有粒子の全容量は約０．０５〜約５ｍＥｑ／ｇ、好ましくは約０．１〜約２．５ｍＥｑ／ｇの間とすることができ、そのような阻害部分含有粒子の経口投与は約０．１ｇおよび１０ｇの間、好ましくは約０．５ｇ〜５ｇの範囲とすることができる。
【０１２８】
ポリマー部分が多孔性粒子、ビーズ、またはマトリックスを形成する場合において、孔寸法は孔内にホスホリパーゼ、例えば、ＰＬＡ２を収容するのに十分な大きさとすることができる。いくつかの実施形態において、例えば、多孔度は、最小孔サイズが少なくとも約２ｎｍ、好ましくは少なくとも約５ｎｍ、より好ましくは少なくとも約２０ｎｍであるように選択することができる。そのような材料は、サイズおよび多孔度を制御することができる希釈剤、ポロゲンおよび／または懸濁助剤のようなプロセス添加剤を用いて直接的または逆懸濁重合によって製造することができる。
【０１２９】
本発明の非吸収インヒビターを構築するのに有用なポリマー部分は、フリーラジカル重合、縮合、付加重合、開環重合によって製造することもでき、および／または糖ポリマーのような天然に生じるポリマーに由来することができる。さらに、いくつかの実施形態において、これらのいかなるポリマー部分を官能化することもできる。
【０１３０】
本発明に有用なポリサッカリドの例には、植物または動物由来の物質（セルロース物質、ヘミセルロース、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、カルボキシメチルセルロース、スルホエチルセルロース、デンプン、キシラン、アミロペクチン、コンドロイチン、ヒアルロン酸塩、ヘパリン、グアーガム、キサンタン、マンナン、ガラクトマンナン、キチン、および／またはキトサンが含まれる）が含まれる。上記のように、ＧＩ管の生理学的条件下で分解しないか、有意に分解しないか、本質的に分解しないポリマー部分（カルボキシメチルセルロース、キトサン、およびスルホエチルセルロースなど）がより好ましい。
【０１３１】
フリーラジカル重合を使用する場合、ポリマー部分を、種々のモノマークラス（例えば、アクリル酸、メタクリル酸、スチレン、ビニルジエン（ｖｉｎｙｌｉｑｕｅ  ｄｉｅｎｉｃ）、が含まれる）から調製することができ、その典型例を以下に示す：スチレン、置換スチレン、アルキルアクリレート、置換アルキルアクリレート、アルキルメタクリレート、置換アルキルメタクリレート、アクリロニトリル、メタクリロニトリル、アクリルアミド、メタクリルアミド、Ｎ−アルキルアクリルアミド、Ｎ−アルキルメタクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジアルキルメタクリルアミド、イソプレン、ブタジエン、エチレン、酢酸ビニル、およびこれらの組み合わせ。これらのモノマーの官能化バージョンも使用することができ、これらのモノマーのいずれかを、コモノマーとして他のモノマーと共に使用することができる。例えば、本発明で使用することができる特定のモノマーまたはコモノマーには、メチルメタクリレート、エチルメタクリレート、プロピルメタクリレート（全異性体）、ブチルメタクリレート（全異性体）、２−エチルヘキシルメタクリレート、イソボミル（ｉｓｏｂｏｍｙｌ）メタクリレート、メタクリル酸、ベンジルメタクリレート、フェニルメタクリレート、メタクリロニトリル、α−メチルスチレン、メチルアクリレート、エチルアクリレート、プロピルアクリレート（全異性体）、ブチルアクリレート（全異性体）、２−エチルヘキシルアクリレート、イソボミルアクリレート、アクリル酸、ベンジルアクリレート、フェニルアクリレート、アクリロニトリル、スチレン、グリシジルメタクリレート、２−ヒドロキシエチルメタクリレート、ヒドロキシプロピルメタクリレート（全異性体）、ヒドロキシブチルメタクリレート（全異性体）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエチルメタクリレート、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノエチルメタクリレート、トリエチレングリコールメタクリレート、イタコン酸無水物、イタコン酸、グリシジルアクリレート、２−ヒドロキシエチルアクリレート、ヒドロキシプロピルアクリレート（全異性体）、ヒドロキシブチルアクリレート（全異性体）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエチルアクリレート、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノエチルアクリレート、トリエチレングリコールアクリレート、メタクリルアミド、Ｎ−メチルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルメタクリルアミド、Ｎ−ｎ−ブチルメタクリルアミド、Ｎ−メチロールメタクリルアミド、Ｎ−エチロールメタクリルアミド、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルアクリルアミド、Ｎ−ｎ−ブチルアクリルアミド、Ｎ−メチロールアクリルアミド、Ｎ−エチロールアクリルアミド、４−アクリロイルモルホリン、ビニル安息香酸（全異性体）、ジエチルアミノスチレン（全異性体）、ａ−メチルビニル安息香酸（全異性体）、ジエチルアミノα−メチルスチレン（全異性体）、ｐ−ビニルベンゼンスルホン酸、ｐ−ビニルベンゼンスルホン酸塩、アルコキシおよびアルキルシラン官能性モノマー、マレイン酸無水物、Ｎ−フェニルマレイミド、Ｎ−ブチルマレイミド、ブタジエン、イソプレン、クロロプレン、エチレン、酢酸ビニル、ビニルホルムアミド、アリルアミン、ビニルピリジン（全異性体）、フッ素化アクリレート、メタクリレート、およびこれらの組み合わせが含まれる。主鎖ヘテロ原子ポリマー部分（ポリエチレンイミンおよびポリエーテル（ポリエチレンオキシドおよびポリプロピレンオキシドなど）、ならびにこれらのコポリマーが含まれる）も使用することができる。
【０１３２】
一般に、ポリマー部分に付着させたホスホリパーゼ阻害部分Ｚの数は約１〜約２０００、最も好ましくは約１〜約５００まで変化させることができる。これらのホスホリパーゼ阻害部分はポリマー部分の骨格に沿って規則的にまたはランダムに配置することができ、あるいはポリマー部分の１つの特定の領域に局在化させることができる。例えば、（Ｍ）および（Ｍ−Ｌ−Ｚ）反復単位はポリマー部分の骨格に沿って、例えば、順序通りに規則的に、あるいはランダムに配置することができる。もしブロックコポリマーを用いるならば、ホスホリパーゼ阻害部分は、別ブロックではなく１つのブロックに存在させることができる。
【０１３３】
ホスホリパーゼ阻害部分。一般に、ホスホリパーゼ阻害部分Ｚは当該分野で知られたいかなるホスホリパーゼ阻害部分、および／または本明細書中に記載されたいかなるホスホリパーゼ阻害部分であってもよい。好ましくは、ホスホリパーゼインヒビターが、例えば、胃腸内腔内で支配的なｐＨ範囲内で、すなわち、約５〜約８のｐＨ範囲内で、ＧＩ管の生理学的条件下で、好ましくは、例えば、小腸の胃腸内腔内でホスホリパーゼ阻害部分が作用するＧＩ管内の場所において支配的な生理学的条件下で活性なホスホリパーゼ阻害部分を含む。
【０１３４】
いくつかの実施形態において、本発明の非吸収ＰＬ  Ａ２インヒビターは当該分野で知られたＰＬ  Ａ２阻害部分を含む。当該分野で知られたＰＬ  Ａ２阻害部分は、例えば、ＦＰＬ  ６７０４７ＸＸおよび／またはＭＪ９９のようなホスホリパーゼＡ２の低分子インヒビターを含む。本発明の方法の実施に有用な他のホスホリパーゼインヒビターは、アラキドン酸アナログ（例えば、アラキドニルトリフルオロメチルケトン、メチルアラキドニルフルオロホスホネート、およびパルミトイルトリフルオロメチルケトン）、ベンゼンスルホンアミド誘導体、ブロモエノールラクトン、臭化ｐ−ブロモフェニル、臭化ブロモフェナシル、トリフルオロメチルケトン、シアログリコ脂質、プロテオグリカン等、ならびに本明細書中に参考として組み込まれているＷＯ  ０３／１０１４８７に開示されたホスホリパーゼＡ２インヒビターを含む。
【０１３５】
本発明で有用な当該分野で公知のＰＬ  Ａ２阻害部分は、例えば、（喘息を含めた）閉塞性呼吸器系病、結腸炎、クローン病、中枢神経系外傷、虚血性卒中、多発性硬化症、接触皮膚炎、乾癬、（アテローム性動脈硬化症を含めた）心血管疾患、自己免疫疾患、および他の炎症状態のような適応症のために、分泌されたＰＬ  Ａ２を標的とするように開発されたリン脂質アナログおよび構造を含む。
【０１３６】
本発明のいくつかのホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼ阻害部分として有用なリン脂質アナログは、リン脂質基質および／またはその遷移状態の構造的アナログを含み、これは、好ましくは、それらの長鎖疎水性基ではなくそれらの極性頭部基に似ている、リン脂質基質および／またはそれらの遷移状態に似ていることが当該分野で知られた化合物の１以上のクラスを含むことができる。そのようなアナログインヒビターは、例えば、本明細書中に参考として組み込まれている、Ｇｅｌｂ  Ｍ．，Ｊａｉｎ  Ｍ．，Ｂｅｒｇ  Ｏ．，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ  Ａ２  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｉｎｔｅｒｆａｃｉａｌ  ｅｎｚｙｍｅｓ，１９９７，２４：１２３−１２９に開示された化合物を含むことができ、例えば、その中の表１を参照のこと。いくつかの好ましい実施形態におけるＰＬ  Ａ２阻害部分の例を以下に掲げる：
【０１３７】
【化６２】
2009514892.tif 000036
式中、
ＲはアルキルまたはＯ−アルキルであり；
Ｒ１はアルキルまたはＣ（＝Ｏ）アルキルであり；
Ｒ２はアルキルであり；
Ｒ３は−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ３＋、（ＣＨ２）ｎ−ＯＨまたは−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（Ｒ’）３＋であり、ここで、ｎは２〜４であり、Ｒ’は水素またはアルキルであり；Ｒ４はオレイル、エライドイル、ペトロセライドイル、ガンマ−リネオイル、またはアラキドニルである。
【０１３８】
本発明のいくつかのホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼ阻害部分として有用なリン脂質アナログは、Ｌｉｎら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１５（１０）１９９３に開示されたもののようなホスホネート含有化合物、好ましくは以下に掲げる構造によって表される化合物も含む。
【０１３９】
【化６３】
2009514892.tif 000037
【０１４０】
【化６４】
2009514892.tif 000038
本発明のいくつかのリン脂質インヒビターのホスホリパーゼ阻害部分として有用な遷移状態アナログは、本明細書中に参考として組み込まれている、Ｊａｉｎ，Ｍら．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９１，３０：１０２５６−１０２６８に教示された１以上の化合物を含み、例えば、その中の表ＩＶ、ＶおよびＶＩを参照のこと。いくつかの好ましい実施形態において、本発明のインヒビターは、例えば、以下に示す構造を含めた、膵臓ＰＬ  Ａ２の強力なインヒビターであることが判明した、修飾されたグリセロール骨格に由来する部分を含む（例えば、Ｊａｉｎ，１９９１の表ＶＩ参照）。
【０１４１】
【化６５】
2009514892.tif 000039
以下に記載するいくつかの好ましい実施形態において、ホスホリパーゼ−Ａ２インヒビター（または阻害部分）はインドール化合物またはインドール関連化合物を含むことができる。
【０１４２】
一般に、従って、本発明の種々の態様の好ましい実施形態において、ホスホリパーゼインヒビター（または阻害部分）は、縮合した５員環および６員環を有する（またはその薬学的に許容可能な塩としての）置換された有機化合物（または置換された有機化合物に由来する部分）を含むことができる。好ましくは、インヒビター（または阻害部分）は、ホスホリパーゼ−Ａ２阻害機能性をインヒビター（または阻害部分）に付与するのに、好ましくはホスホリパーゼ−Ａ２  ＩＢ阻害機能性を付与するのに効果的な置換基も含む。好ましくは、ホスホリパーゼインヒビター（阻害部分）は、５員環の環構造内で、６員環の環構造内で、または５員および６員環のそれぞれの環構造内で置換された、（またはその薬学的に許容可能な塩としての）１以上のヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄）を有する縮合した５員環および６員環である。再度、好ましくは、インヒビター（または阻害部分）は、ホスホリパーゼ阻害機能性を部分に付与するのに効果的な置換基を含むことができる。
【０１４３】
（関連する実施例１０Ａ〜１０Ｃを含めた）実施例１０に示されるように、そのような縮合した５員環および６員環を有する置換された有機化合物（またはそれに由来する部分）は効果的なホスホリパーゼ−２Ａ  ＩＢインヒビターであり、表現型効果は遺伝子欠損ＰＬＡ２（−／−）マウスの効果に近づいており、および／または匹敵する。さらに、そのような化合物（またはそれに由来する部分）は、特に、肥満、真性糖尿病、インスリン抵抗性、耐糖能障害、高コレステロール血症および高トリグリセリド血症のような疾患を含めた、体重関連疾患、インスリン関連疾患およびコレステロール関連疾患のような疾患を治療するのに効果的である。
【０１４４】
特定の化合物、すなわち、図５に示された化合物２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸を、実施例１０に記載された研究においてｉｎ−ｖｉｖｏで評価したが、研究の結果はより広義の発明を裏付ける。なぜならば、インヒビターの効果が認識でき、以下に詳細に記載するように構造−活性関係を通じて理解できるからである。簡単に述べると、特許請求の範囲に具体的に引用されていない理論に拘束されないが、縮合した５員および６員環を含む化合物は、例えば、図６Ａに示されたインドール化合物の３位および４位における、および図６Ｂに示された縮合した５員および６員環を含むインドール関連化合物の−Ｒ３および−Ｒ４位における、置換基を位置決定するための適切な結合長さおよび結合角度を有利にも提供する構造を有する。そのようなインドール化合物の、およびそのようなインドール関連化合物の鏡像アナログもまた、以下に記載する本発明に関連して用いることができる。
【０１４５】
特に好ましい実施形態において、ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分は、以下の式（Ｉ）：
【０１４６】
【化６６】
2009514892.tif 000040
［式中、コア構造は（先に示したように）飽和または不飽和（図示せず）であり得、ここで、Ｒ１〜Ｒ７は、独立して、水素、酸素、硫黄、リン、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、置換された置換基、およびその組合せよりなる群から選択され；および加えて、または代替的に、ここで、Ｒ１〜Ｒ７は、所望により、２つの隣接する置換基の間に独立して選択されたさらなる環を含むことができ、そのようなさらなる環は、炭素環、複素環、およびその組合せである独立して選択された５、６、および／または７員の環である］
によって表される化合物としての（またはその薬学的に許容可能な塩としての）縮合した５員環および６員環を含むことができる。
【０１４７】
本明細書中において一般的に用いるように、先に示したインドール関連化合物におけるＲ１〜Ｒ７との関係で用いるものを含めて：
アミン基は第１級、第２級および第３級アミンを含むことができ；
ハライド基はフルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードを含むことができ；
カルボニル基は式：
【０１４８】
【化６７】
2009514892.tif 000041
によって表される（以下に定義する）さらなる置換を有するカルボニル部分であり得；
酸性基はプロトン供与体としての有機基であり得、水素結合でき、その非限定的例はカルボン酸、サルフェート、スルホネート、ホスホネート、置換ホスホネート、ホスフェート、置換ホスフェート、５−テトラゾリル、
【０１４９】
【化６８】
2009514892.tif 000042
を含み；
それ自体の、または別の置換基の一部としてのアルキル基は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、第３級ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、デシル、ドデシル、またはオクタデシルのような置換されたまたは置換されていない直鎖または分岐鎖の炭化水素であり得；
アルケニル基は、それ自体で、または他の基と組合せて、ビニル、プロペニル、クロトニル、イソペンテニル、および種々のブテニル異性体のような不飽和結合を含有する置換されたまたは置換されていない直鎖または分岐鎖の炭化水素であり得；
炭素環基は、シクロアルキル、シクロアルケニル、フェニル、スピロ［５．５］ウンデカニル、ナフチル、ノルボルナニル、ビシクロヘプタジエニル、トルリル、キシレニル、インデニル、スチルベニル、テルフェニリル、ジフェニルエチレニル、フェニル−シクロヘキセニル、アセナフチレニル、およびアントラセニル、ビフェニル、およびビベンジリルを含めた、その環形成原子が炭素原子のみである置換されたまたは置換されていない、飽和または不飽和の５−〜１４員有機核であり得；
複素環基は、ピロリル、ピロロジニル、ピペリジニル、フラニル、チオフェニル、ピラゾリル、イミダゾリル、フェニルイミダゾリル、トリアゾリル、イソキサゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、インドリル、カルバゾリル、ノルハルマニル、アザインドリル、ベンゾフラニル、ジベンゾフラニル、ジベンゾチオフェニル、インダゾリル、イミダゾピリジニル、ベンゾトリアゾリル、アントラニリル、１，２−ベンズイソキサゾリル、ベンズオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、プリニル、ピリジニル、ジピリジリル、フェニルピリジニル、ベンジルピリジニル、ピリミジニル、フェニルピリミジニル、ピラジニル、１，３，５−トリアジニル、キノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、モルホリノ、チオモルホリノ、ホモピペラジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、オキサカニル、１，３−ジオキソラニル、１，３−ジオキサニル、１，４−ジオキサニル、テトラヒドロチオフェネイル、ペンタメチレンスルファジル、１，３−ジチアニル、１，４−ジチアニル、１，４−チオキサニル、アゼチジニル、ヘキサメチレンイミニウム、ヘプタメチレンイミニウム、ピペラジニルおよびキノキサリニルを含めた、５〜１４の環原子を有し、かつ窒素、酸素または硫黄よりなる群から選択される１〜３のヘテロ原子を含有する単環式または多環式の、飽和または不飽和の、置換されたまたは置換されていない複素環核であり得；
アシルアミノ基は式：
【０１５０】
【化６９】
2009514892.tif 000043
によって表される２つのさらなる置換（後に定義）を有するアシルアミノ部分であり得；
オキシミル基は式：
【０１５１】
【化７０】
2009514892.tif 000044
によって表される２つのさらなる置換（後に定義）を有するオキシミル部分であり得；
ヒドラジル基は式：
【０１５２】
【化７１】
2009514892.tif 000045
によって表される３つのさらなる置換（後に定義）を有するヒドラジル部分であり得；
置換された置換基は、例えば、
【０１５３】
【化７２】
2009514892.tif 000046
のような−酸素−アルキル−酸性部分；
【０１５４】
【化７３】
2009514892.tif 000047
のような−カルボニル−アシルアミノ−水素部分；
【０１５５】
【化７４】
2009514892.tif 000048
のような−アルキル−炭素環−アルケニル部分；
【０１５６】
【化７５】
2009514892.tif 000049
のような−カルボニル−アルキル−チオール部分；
【０１５７】
【化７６】
2009514892.tif 000050
のような−アミン−カルボニル−アミン部分；
を含む部分を介して、列挙した置換基の群の１以上を組合せ；および
さらなる置換基は水素、酸素、硫黄、リン、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、置換された置換基、およびその組合せより選択された基を意味することができる。
【０１５８】
そのようなインドール関連化合物についての特に好ましい置換基Ｒ１〜Ｒ７を、好ましいインドール化合物との関連で後に記載する。
【０１５９】
好ましい実施形態において、ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分は、置換インドール部分のようなインドール化合物（例えば、インドール含有化合物、またはインドール部分を含有する化合物）を含むことができる。例えば、そのような実施形態においては、インドール含有化合物は（示されたように左から右に考えて）式ＩＩ、ＩＩＩ：
【０１６０】
【化７７】
2009514892.tif 000051
［式中、Ｒ１〜Ｒ７は、独立して：水素、酸素、硫黄、リン、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、置換された置換基、およびその組合せよりなる群から選択され；および加えて、あるいは代替的に、ここで、Ｒ１〜Ｒ７は、所望により、かつ独立して、２つの隣接する置換基の間にさらなる環を形成し、そのようなさらなる環は炭素環、複素環およびその組合せよりなる群から選択される５、６および７員環である］
によって表される化合物であり得る。
【０１６１】
いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼ−Ａ２阻害部分は、置換されたアザインドール部分のような、アザインドール化合物（例えば、アザインドール含有化合物、またはアザインドール部分を含有する化合物）であり得る。例えば、そのような実施形態において、アザインドール含有化合物は、
【０１６２】
【化７８】
2009514892.tif 000052
【０１６３】
【化７９】
2009514892.tif 000053
［式中、式のそれぞれに関しては、Ｒ１〜Ｒ７は、それぞれ、独立して、水素、ハライド、酸素、硫黄、リン、ヒドロキシル、アミン、チオール、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキル、エーテル、カルボニル、酸性基、カルボキシル、エステル、アミド、炭素環基、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、およびその組合せを含む部分よりなる群から選択され、所望により、かつ式のそれぞれに関して好ましくは、Ｒ１〜Ｒ７は、独立して、水素、酸素、リン、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、置換された置換基およびその組合せよりなる群から選択される］
から選択される式によって表される化合物であり得る。
【０１６４】
いくつかのインドール化合物（またはアザインドール化合物）は、記載したように、さらなる環を含むことができる。例えば、さらなる環を有するいくつかのインドール化合物は、例えば、（示されたように、上の列においては左から右にＩＶａ、ＩＶｂ、ＩＶｃと考えられ、および下の列においては、左から右側にＩＶｄ、ＩＶｅおよびＩＶｆと考えられる）式ＩＶａ〜ＩＶｆとして表される化合物を含む。
【０１６５】
【化８０】
2009514892.tif 000054
一般に、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、置換された置換基を含めた種々のタイプの置換基は、縮合した５員および６員環を有する（インドールおよびアザインドール化合物を含めた）インドール関連化合物との関係で前記した定義の通りとすることができる。
【０１６６】
縮合した５員および６員環を有するインドール関連化合物である化合物およびインドール化合物に関する場合を含めて、本発明の実施形態のそれぞれにおいて、好ましい置換基は以下の段落に記載した通りとすることができる。
【０１６７】
好ましいＲ１は以下の基：水素、酸素、硫黄、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、複素環基、置換された置換基およびその組合せから選択される。特に好ましいＲ１は以下の基：水素、ハライド、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、置換された置換基およびその組合せから選択される。Ｒ１は、特に好ましくは、アルキル、炭素環基および置換された置換基よりなる群から選択される。Ｒ１についての置換された置換基は、
【０１６８】
【化８１】
2009514892.tif 000055
のような特に好ましい化合物または部分である。
【０１６９】
好ましいＲ２は以下の基：水素、酸素、ハライド、カルボニル、アルキル、アルケニル、炭素環基、置換された置換基、およびその組合せから選択される。特に好ましいＲ２は以下の基：水素、ハライド、アルキル、アルケニル、炭素環基、置換された置換基およびその組合せから選択される。Ｒ２は、好ましくは、ハライド、アルキルおよび置換された置換基よりなる群から選択される。Ｒ２についての置換された置換基は：
【０１７０】
【化８２】
2009514892.tif 000056
のような特に好ましい化合物または部分である。
【０１７１】
好ましいＲ３は以下の基：水素、酸素、硫黄、アミン、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、置換された置換基およびその組合せから選択される。特に好ましいＲ３は以下の基：水素、酸素、アミン、ヒドロキシル（−ＯＨ）、カルボニル、アルキル、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、置換された置換基およびその組合せから選択される。Ｒ３は、好ましくは、カルボニル、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、および置換された置換基よりなる群から選択される。Ｒ３についての置換された置換基は：
【０１７２】
【化８３】
2009514892.tif 000057
のような特に好ましい化合物または部分である。
【０１７３】
好ましいＲ４およびＲ５は、独立して、以下の基：水素、酸素、硫黄、リン、アミン、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、複素環基、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、置換された置換基およびその組合せから選択される。特に好ましいＲ４およびＲ５は、独立して、以下の基：水素、酸素、硫黄、アミン、酸性基、アルキル、置換された置換基およびその組合せから選択される。Ｒ４およびＲ５は、それぞれ、好ましくは、独立して、酸素、ヒドロキシル（−ＯＨ）、酸性基、アルキル、および置換された置換基よりなる群から選択される。Ｒ４についての、およびＲ５についての置換された置換基は：
【０１７４】
【化８４】
2009514892.tif 000058
のような特に好ましい化合物または部分である。
【０１７５】
好ましいＲ６は以下の基：水素、酸素、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、酸性基、アルキル、炭素環基、アシルアミノ、置換された置換基およびその組合せから選択される。特に好ましいＲ６は以下の基：水素、酸素、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、酸性基、アルキル、アシルアミノ、置換された置換基およびその組合せから選択される。Ｒ６は、好ましくは、アミン、酸性基、アルキル、および置換された置換基よりなる群から選択される。Ｒ６についての置換された置換基は：
【０１７６】
【化８５】
2009514892.tif 000059
のような特に好ましい化合物または部分である。
【０１７７】
好ましいＲ７は以下の基：水素、酸素、硫黄、アミン、ハライド、ヒドロキシル（−ＯＨ）、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、複素環基、置換された置換基およびその組合せから選択される。特に好ましいＲ７は以下の基：水素、ハライド、チオール（−ＳＨ）、カルボニル、酸性基、アルキル、アルケニル、炭素環基、置換された置換基およびその組合せから選択される。Ｒ７は、好ましくは、炭素環基および置換された置換基よりなる群から選択される。Ｒ７についての置換された置換基は：
【０１７８】
【化８６】
2009514892.tif 000060
のような特に好ましい化合物または部分である。
【０１７９】
各置換基Ｒ１〜Ｒ７についての前記した好ましい選択は、各変形および順列において組み合わせることができる。ある好ましい実施形態において、例えば、本発明のインヒビターは置換基を含むことができ、ここで、Ｒ１〜Ｒ７は以下の通りである：Ｒ１は、好ましくは、アルキル、炭素環基および置換された置換基よりなる群から選択され；Ｒ２は、好ましくはハライド、アルキルおよび置換された置換基よりなる群から選択され；Ｒ３は、好ましくは、カルボニル、アシルアミノ、オキシミル、ヒドラジル、および置換された置換基よりなる群から選択され；Ｒ４およびＲ５は、それぞれ、好ましくは、独立して、酸素、ヒドロキシル（−ＯＨ）、酸性基、アルキル、および置換された置換基よりなる群から選択され；Ｒ６は、好ましくは、アミン、酸性基、アルキル、および置換された置換基よりなる群から選択され；Ｒ７は、好ましくは、炭素環基および置換された置換基よりなる群から選択される。
【０１８０】
特に好ましい実施形態において、Ｒ３は式（Ｃ３−ＩまたはＣ３−ＩＩ）：
【０１８１】
【化８７】
2009514892.tif 000061
［ＸはＯ、ＣおよびＮよりなる群から選択され；Ｒ３１は任意であり、存在する場合、水素、ハライド、ヒドロキシルおよびシアノよりなる群から選択され；Ｒ３２は任意であり、存在する場合、水素、ハライド、ヒドロキシルおよびシアノよりなる群から選択され；ＹはＯ、ＳおよびＮよりなる群から選択され；Ｒ３３は任意であって、存在する場合、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、置換Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシルおよび置換Ｃ１−Ｃ６アルコキシルよりなる群から選択され；Ｒ３４およびＲ３５は、それぞれ、独立して、水素、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキル、置換アルキル、アミン、およびアルキルスルホニルよりなる群から選択される］
によって表される部分である。
【０１８２】
いくつかの好ましい実施形態において、Ｒ３は、好ましくは、式（Ｃ３−Ｉ−ＡまたはＣ３−ＩＩ−Ａ）：
【０１８３】
【化８８】
2009514892.tif 000062
［ＸはＯ、ＣおよびＮよりなる群から選択され；Ｒ３１は任意であって、存在する場合、水素、ハライド、ヒドロキシルおよびシアノよりなる群から選択され；Ｒ３２は任意であって、存在する場合、水素、ハライド、ヒドロキシル、およびシアノよりなる群から選択され；ＹはＯ、ＳおよびＮよりなる群から選択され；Ｒ３３は任意であって、存在する場合、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、置換Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシルおよび置換Ｃ１−Ｃ６アルコキシよりなる群から選択される］
によって表される部分であり得る。
【０１８４】
Ｒ３は、最も好ましくは、
【０１８５】
【化８９】
2009514892.tif 000063
からなる群から選択される式によって示される部分であり得る。
【０１８６】
（特に好ましいＲ３が直前の段落に記載された通りである実施形態を含めた）特に好ましい実施形態において、Ｒ４は：
【０１８７】
【化９０】
2009514892.tif 000064
［適用可能であり、独立して各式から選択され；ｎは１〜５の範囲の整数であり；各ｎについては：Ｘは、独立して、Ｃ、Ｏ、ＳおよびＮよりなる群から選択され；Ｒ４１およびＲ４２は、それぞれ、任意であるが、存在する場合、独立して、水素、ハライド、アルキル、置換アルキル、フェニル、アリール、アミン、アルコキシル、アルキルスルホニル、アルキルホスホニル、アルキルカルボニル、カルボキシル、ホスホン酸基、スルホン酸基、カルボキシアミド、およびシアノよりなる群から選択される］
から選択される部分であり得る。
【０１８８】
特に、Ｒ４は酸性置換基であり得、好ましくは、（Ｃ４−Ｉ−Ａ）、（Ｃ４−Ｉ−Ｂ）および（Ｃ４−Ｉ−Ｃ）：
【０１８９】
【化９１】
2009514892.tif 000065
［いずれの場合にも、独立して、Ｃ４−Ｉ−Ａ、Ｃ４−Ｉ−ＢおよびＣ４−Ｉ−Ｃのそれぞれについて選択され：ｎは０〜５の範囲の整数であり；好ましくは０〜３の範囲の整数であり；ＸはＯ、ＣおよびＮよりなる群から選択され；Ａは酸性基であり；Ｒ４１は水素、ハライド、ヒドロキシルおよびシアノよりなる群から選択され；Ｒ４２は（ｉ）Ｃ２−Ｃ６アルキル、（ｉｉ）ハライド、ヒドロキシル、およびアミンから選択された１以上の置換基で置換されたＣ２−Ｃ６アルキル、（ｉｉｉ）ハライド、および（ｉｖ）カルボキシルよりなる群から選択される］
から選択される式によって表される部分であり得る。好ましいＲ４２はＣ２−Ｃ４アルキルおよび置換Ｃ２−Ｃ４アルキルから選択される部分である。Ｒ４２はＣ２−Ｃ４アルキル、およびハライド、ヒドロキシルおよびアミンから選択される１以上の置換基で置換されたＣ２−Ｃ４アルキルから選択される部分であり得る。特に好ましいＲ４２はエチル、プロピル、イソプロピル、イソブチルおよびｔｅｒｔブチルであり得る。
【０１９０】
特に好ましいＲ４は、
【０１９１】
【化９２】
2009514892.tif 000066
からなる群から選択される式によって示される部分であり得る。
【０１９２】
Ｒ４は加えて、または代替的にアミド置換基であり得、（Ｃ４−ＩＩ−Ａ）、（Ｃ４−ＩＩ−Ｂ）、（Ｃ４−ＩＩ−Ｃ）および（Ｃ４−ＩＩ−Ｄ）：
【０１９３】
【化９３】
2009514892.tif 000067
【０１９４】
【化９４】
2009514892.tif 000068
［適用可能であって、独立して各式について選択され：ｎは０〜５、好ましくは０〜３の範囲の整数であり；ＸはＯ、Ｃ、ＳおよびＮよりなる群から選択され；Ｒ４１は水素、ハライド、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキル、置換アルキル、カルボキシル、カルボキサミド、アルキルカルボニル、アミン、アルキルホスホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸基、ホスホン酸基およびシアノよりなる群から選択され；Ｒ４２はハライド、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキル、置換アルキル、カルボキシル、カルボキサミド、アルキルカルボニル、アミン、アルキルホスホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸基、ホスホン酸基およびシアノよりなる群から選択され、Ｒ４３は水素、フェニル、アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキル、および水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、スルホン酸基、ホスホン酸基およびシアノよりなる群から選択される部分で置換されたＣ１−Ｃ６アルキルよりなる群から選択される］
から選択された式によって表される部分であり得る。
【０１９５】
Ｒ４は（加えて、または代替的に）式（Ｃ４−ＩＩＩ−Ａ）、（Ｃ４−ＩＩＩ−Ｂ）、（Ｃ４−ＩＩＩ−Ｆ）または（Ｃ４−ＩＩＩ−Ｇ）：
【０１９６】
【化９５】
2009514892.tif 000069
【０１９７】
【化９６】
2009514892.tif 000070
［適用可能なように、独立して、各式につき選択され：ｎは０〜５、好ましくは０〜３の範囲の整数であり；Ｘは、独立して、Ｏ、Ｃ、ＳおよびＮよりなる群から選択され；Ｗは電子吸引基であり；Ｒ４１は水素、ハライド、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキル、置換アルキル、カルボキシル、カルボキサミド、アルキルカルボニル、アミン、アルキルホスホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸基、ホスホン酸基およびシアノよりなる群から選択され；（式Ｃ４−ＩＩＩ−ＡおよびＣ４−ＩＩＩ−Ｆについては）Ｒ４４は水素、フェニル、アリール、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルスルホニル、アルキルホスホニル、アミン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、および水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノよりなる群から選択される部分で置換されたＣ１−Ｃ６アルキルよりなる群から選択される］
によって表されるアミド置換基部分でもあり得る。
【０１９８】
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、式（Ｃ４−ＩＩＩ−Ｃ）または（Ｃ４−ＩＩＩ−Ｈ）：
【０１９９】
【化９７】
2009514892.tif 000071
（式中、各式について規定通り且つ独立して選択され、ｎは０〜５の範囲、好ましくは０〜３の範囲の整数であり、Ｘは、Ｏ、Ｃ、Ｓ、およびＮからなる群から独立して選択され、Ｗは電子求引基であり、Ｒ４１は、水素、ハライド、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキル、置換アルキル、カルボキシル、カルボキシアミド、アルキルカルボニル、アミン、アルキルホスホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択され、Ｒ４５は、水素、フェニル、アリール、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルスルホニル、アルキルホスホニル、アミン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ならびに水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される）によって示される部分であり得る。
【０２００】
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、式（Ｃ４−ＩＩＩ−Ｄ）または（Ｃ４−ＩＩＩ−Ｊ）：
【０２０１】
【化９８】
2009514892.tif 000072
（式中、各式について規定通り且つ独立して選択され、ｎは０〜５の範囲、好ましくは０〜３の範囲の整数であり、Ｘは、Ｏ、Ｃ、Ｓ、およびＮからなる群から独立して選択され、Ｗは電子求引基であり、Ｒ４１は、水素、ハライド、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキル、置換アルキル、カルボキシル、カルボキシアミド、アルキルカルボニル、アミン、アルキルホスホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択され、Ｒ４６は、水素、フェニル、アリール、アルキルスルホニル、アルキルホスホニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ならびに水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される）によって示される部分であり得る。
【０２０２】
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、式（Ｃ４−ＩＩＩ−Ｅ）または（Ｃ４−ＩＩＩ−Ｋ）：
【０２０３】
【化９９】
2009514892.tif 000073
（式中、各式について規定通り且つ独立して、ｎは０〜５の範囲、好ましくは０〜３の範囲の整数であり、Ｘは、Ｏ、Ｃ、Ｓ、およびＮからなる群から独立して選択され、Ｗは電子求引基であり、Ｒ４１は、水素、ハライド、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキル、置換アルキル、カルボキシル、カルボキシアミド、アルキルカルボニル、アミン、アルキルホスホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択され、Ｒ４７は、水素、フェニル、アリール、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ならびに水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される）によって示される部分であり得る。
【０２０４】
式Ｃ４−ＩＩＩ−Ａ、−Ｂ、−Ｃ、−Ｄ、−Ｅ、−Ｆ、−Ｇ、−Ｈ、−Ｊ、−Ｋの上記実施形態のいずれにおいても、規定通り且ついずれの場合にも独立して、Ｒ４１は、好ましくは、水素、ハライド、ハロアルキル、カルボキシル、カルボキシアミド、アルキルカルボニル、アミン、アルキルアルキルホスホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択され、Ｒ４２は、好ましくは、ハライド、ハロアルキル、カルボキシル、カルボキシアミド、アルキルカルボニル、アミン、アルキルアルキルホスホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択され、Ｒ４３は、好ましくは、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキルならびに水素、ヒドロキシル、アミン、スルホン酸基、およびホスホン酸基からなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され、Ｗは、好ましくは、ハライド、ヒドロキシル、アルコキシル、ハロアルキル、カルボキシル、カルボキシアミド、アルキルカルボニル、アミン、アルキルホスホニル、アルキルスルホニル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択され、Ｒ４４は、好ましくは、水素、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキルスルホニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルならびに水素、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、およびホスホン酸基からなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され、Ｒ４５は、好ましくは、水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され、Ｒ４５は、より好ましくは、水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択することができ、Ｒ４６は、好ましくは、水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される。Ｒ４６は、より好ましくは、水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択することができ、Ｒ４７は、好ましくは、水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され、Ｒ４７は、より好ましくは、水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択することができる。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、
【０２０６】
【化１００】
2009514892.tif 000074
（式中、置換アルキルは、水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである）からなる群から選択される式によって示される部分であり得る。
【０２０７】
いくつかの実施形態では、Ｒ４は、
【０２０８】
【化１０１】
2009514892.tif 000075
（式中、置換アルキルは、水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基、およびシアノからなる群から選択される部分に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである）からなる群から選択される式によって示される部分であり得る。
【０２０９】
いくつかの実施形態において、Ｒ４は：
【０２１０】
【化１０２】
2009514892.tif 000076
［置換アルキルは、水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、スルホン酸基、ホスホン酸基およびシアノよりなる群から選択される部分で置換されたＣ１−Ｃ６アルキルである］
よりなる群から選択される式によって表される部分である。
【０２１１】
特に好ましい実施形態では、Ｒ４は、
【０２１２】
【化１０３】
2009514892.tif 000077
からなる群から選択される式によって示される部分であり得る。
【０２１３】
（好ましいＲ３およびＲ４が直前の段落に記載された通りである実施形態を含めた）いくつかの特に好ましい実施形態において、Ｒ２は水素、ハライド、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ３アルキル、置換Ｃ１−Ｃ３アルキル、およびシアノよりなる群から選択され得る。Ｒ２は、好ましくは、水素、ハライド、およびＣ１−Ｃ３アルキルよりなる群から選択される。Ｒ２は：
【０２１４】
【化１０４】
2009514892.tif 000078
よりなる群から選択される式によって表される部分であり得る。
【０２１５】
（好ましいＲ２、Ｒ３およびＲ４が直前の段落に記載された通りである実施形態を含めた）いくつかの特に好ましい実施形態において、Ｒ５は水素、ハライド、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ３アルキルおよびシアノよりなる群から選択され得る。Ｒ５は、好ましくは、水素、クロリド、フルオリド、ヒドロキシル、メチルおよびシアノよりなる群から選択され得る。
【０２１６】
（好ましいＲ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が直前の段落に記載された通りである実施形態を含めた）いくつかの特に好ましい実施形態において、Ｒ１、Ｒ６、およびＲ７は、それぞれ、独立して、水素、ハライド、ヒドロキシル、アミン、カルボキシル、ホスホン酸基、スルホン酸基、アルキル、置換アルキル、アルコキシル、置換アルコキシル、アルキルカルボニル、置換アルキルカルボニル、炭素環基、複素環基およびその組合せを含む部分よりなる群から選択できる。
【０２１７】
Ｒ１は、好ましくは、Ｃ４〜Ｃ３６アルキル、置換Ｃ４〜Ｃ３６アルキル、炭素環基、複素環基、アルキルカルボニル、置換アルキルカルボニル、およびその組み合わせを含む部分からなる群から選択することができる。Ｒ１は、Ｃ４〜Ｃ３６アルキル、置換Ｃ４〜Ｃ３６アルキル、炭素環、およびその組み合わせを含む部分からなる群から選択することができる。
【０２１８】
Ｒ１は、
【０２１９】
【化１０５】
2009514892.tif 000079
からなる群から選択される式によって示される部分であり得る。
【０２２０】
Ｒ１は、多官能性架橋部分を含むか、多官能性架橋部分に結合した部分であり得る。
【０２２１】
Ｒ６は水素、ハライド、アミン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、置換Ｃ１−Ｃ３アルキル、酸性基、およびその組合せを含む部分よりなる群から選択され得る。Ｒ６は：
【０２２２】
【化１０６】
2009514892.tif 000080
よりなる群から選択される式によって表される部分であり得る。
【０２２３】
Ｒ６は、多官能性架橋部分を含む部分であり得る。
【０２２４】
Ｒ７は、Ｃ４〜Ｃ３６アルキル、置換Ｃ４〜Ｃ３６アルキル、炭素環基、複素環基、アルキルカルボニル、置換アルキルカルボニル、およびその組み合わせを含む部分からなる群から選択することができる。Ｒ７は、Ｃ４〜Ｃ３６アルキル、置換Ｃ４〜Ｃ３６アルキル、炭素環、およびその組み合わせを含む部分からなる群から選択することができる。Ｒ７は、炭素環部分であり得る。
【０２２５】
Ｒ７は：
【０２２６】
【化１０７】
2009514892.tif 000081
よりなる群から選択される式によって表される部分であり得る。
【０２２７】
Ｒ７は多官能性架橋部分を含む部分であり得る。
【０２２８】
ある種のインドールグリオキサミドは、いくつかの実施形態において、ＰＬ  Ａ２阻害部分として特に有用である。特に、図２に示され、代替的にここではＩＬＹ−４００１および／またはメチルインドキサムともいわれる［２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸］が、効果的なホスホリパーゼインヒビターまたは阻害部分であることが判明した。このインドール化合物は式（Ｖ）：
【０２２９】
【化１０８】
2009514892.tif 000082
として以下の構造によって表される。
【０２３０】
この化合物は、ｉｎ−ｖｉｔｒｏアッセイに基づいて、多数のＰＬＡ２クラスについてホスホリパーゼ活性を有することが示されており、ｉｎ−ｖｉｔｒｏにてマウスおよびヒトＰＬＡ２ＩＢ酵素の強いインヒビターである（Ｓｉｎｇｅｒ，Ｇｈｏｍａｓｈｃｈｉら，２００２；Ｓｍａｒｔ，Ｐａｎら，２００４）。このインドール化合物を合成し（実施例１Ａ参照）、マウスモデルにおいてホスホリパーゼ−Ａ２阻害についてｉｎ−ｖｉｖｏで評価した（実施例１０Ａ〜１０Ｃを含めた実施例１０参照）。このインドール化合物は、阻害活性、吸収および生物学的利用能に関して特徴付けられた（実施例１Ｂ−１、１Ｂ−２および１Ｂ−３を含めた実施例１Ｂ参照）。
【０２３１】
この化合物の生物学的利用能を低下させることができ、逆に、例えば、このインドール部分をポリマーに共有結合させることによって、本発明のこの第２の一般的実施形態に従って、内腔局在化を改良することができる（例えば、実施例１Ｄ参照）。
【０２３２】
他の化合物もまた、本発明のいずれかの実施形態に関連して用いるためのホスホリパーゼ阻害部分として特に好ましい。特に、例えば、ホスホリパーゼ阻害部分は：
【０２３３】
【化１０９】
2009514892.tif 000083
【０２３４】
【化１１０】
2009514892.tif 000084
【０２３５】
【化１１１】
2009514892.tif 000085
【０２３６】
【化１１２】
2009514892.tif 000086
【０２３７】
【化１１３】
2009514892.tif 000087
から選択される式によって表される部分であり得る。
【０２３８】
いくつかのスキームを以下に記載して、阻害部分としてのＩＬＹ−４００１インドール化合物をポリマー部分へ連結させることに基づく前記化合物についての内腔局在化アプローチをより十分に記載する。そのようなスキームを本明細書中に含めて、本発明の議論を拡張する；これらのスキームは本発明を限定するものではなく、特に、同様のスキームを他のインヒビター部分について使用することができる。
【０２３９】
１つのアプローチにおいて、官能化されたインヒビター部分を、本発明の第１の態様との関係で記載したように、結合部分を通じて多官能性架橋部分にカップリングさせることができる。
【０２４０】
別のポリマーベースのアプローチにおいて、官能化されたインヒビター部分は、市販のポリマービーズまたは可溶性ポリマーのような予め形成された官能化ポリマーにカップリングさせることができる。例えば、リンカーは、アミン官能化または活性化カルボン酸ビーズと反応させるためにハライドまたはアミンを保有する。
【０２４１】
【化１１４】
2009514892.tif 000088
さらなるポリマーアプローチにおいて、通常のモノマーを、重合性リンカーを有するインヒビターと共重合させる。このアプローチはランダムコポリマーを提供するか、あるいはリビング重合技術を適用する場合にはブロックコポリマーを提供することができ、代替的に、架橋剤を用いる場合にはそれは架橋されたコポリマーを提供することができる。通常のモノマーを選択し、該材料は疎水性、親水性、またはそれらの組合せとすることができよう。インヒビターは以下のスキームに示すようにインドールＮ１位のアルキル化によって合成することができる。
【０２４２】
【化１１５】
2009514892.tif 000089
さらなるポリマーアプローチにおいて、対照フリーラジカル重合を用いて、種々のポリマー構造を達成することができる。
【０２４３】
この第３のアプローチ内の第１のスキームにおいて、ポリマーで仕立てたインヒビターを調製することができる。フリーラジカル制御剤を有するホスホリパーゼ阻害部分は、例えば、塩化２−クロロ−プロピオニルでのＮ１アルキル化によって合成することができ、あるいはさらにチオウレタンに誘導体化することができる。原子移動ラジカル重合（ＡＴＲＰ）または逆付加−断片化鎖移動重合（ＲＡＦＴ）を使用して、モノマーおよび制御剤の比率によってポリマーの鎖の長さを制御することができる。鎖の末端基は、還元によって除去することができ、あるいは二量体化のために保持することができる。
【０２４４】
【化１１６】
2009514892.tif 000090
この第３のアプローチ内の第２のスキームにおいて、短鎖インヒビター二量体に対する別のアプローチを、以下に概略を示す経路によって達成することができる。市販の二臭化アルキルを、ブロミド、またはチオール末端官能基を持つリンカーとして用いる。次いで、アミン、スルフィド、またはジスルフィド結合によって２つのインヒビターを連結することができる。また、他の連結官能基をブロミドリンカーの誘導体化の後に適用することもできる。
【０２４５】
【化１１７】
2009514892.tif 000091
フリーラジカル重合を含むこの第３のアプローチ内の第３のスキームにおいて、ホスホリパーゼインヒビターで仕立てたスターコポリマーは以下のように調製することができる。この第３のアプローチ内の第１または第２のスキームからのポリマーで仕立てたインヒビターは、さらに、モノマーおよび架橋剤で重合して、以下に示すように、鎖末端においてインヒビターを持つスターコポリマー構造を達成することができる。
【０２４６】
【化１１８】
2009514892.tif 000092
フリーラジカル重合を含むこの第３のアプローチ内の第４のスキームにおいて超分岐コポリマーを以下のように形成することができる。制御剤連結ホスホリパーゼインヒビター、ＡＢ２タイプモノマー、および通常のモノマーの共重合は、以下に示すように、鎖末端にインヒビターを持つ超分岐コポリマーを供する。
【０２４７】
【化１１９】
2009514892.tif 000093
他の当該分野で知られたホスホリパーゼＡ２インヒビターはインドール化合物またはインドール関連化合物に基づく（例えば、本明細書中に参考として組み込まれている、Ｂｕｙｓｓｅらによって２００５年５月３日に出願された「Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｄｉｅｔ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ−Ａ２  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  Ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ  Ｉｎｄｏｌｅｓ  ａｎｄ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」なる表題の共同所有のＰＣＴ出願番号ＵＳ／２００５／０１５４１６に示された要約書参照）。
【０２４８】
（インドールおよびインドール関連化合物に加えて）他の当該分野で公知のホスホリパーゼＡ２インヒビターも、本発明のホスホリパーゼ阻害部分として有用であり、以下のクラスを含むことができる：アルキノイル安息香酸、−チオフェンカルボン酸、−フランカルボン酸および−ピリジンカルボン酸（例えば、ＵＳ５０８６０６７参照）；アミドカルボキシレート誘導体（例えば、ＷＯ９１０８７３７参照）；アミノ酸エステルおよびアミド誘導体（例えば、ＷＯ２００２００８１８９参照）；アミノテトラゾール（例えば、ＵＳ５９６８９６３参照）；アリールオキシアクルチアゾール（例えば、ＷＯ０００３４２５４参照）；アゼチジノン（例えば、ＷＯ９７０２２４２参照）；ベンゼンスルホン酸誘導体（例えば、ＵＳ５４７０８８２参照）；安息香酸誘導体（例えば、ＪＰ０８３２５１５４参照）；ベンゾチアフェン（例えば、ＷＯ０２０００６４１参照）；ベンジルアルコール（例えば、ＵＳ５１２４３３４参照）；ベンジルフェニルピリミジン（例えば、ＷＯ０００２７８２４参照）；ベンジルアミン（例えば、ＵＳ５０３９７０６参照）；桂皮酸化合物（例えば、ＪＰ０７２５２１８７参照）；桂皮酸誘導体（例えば、ＵＳ５５７８６３９参照）；シクロヘプタ−インドール（例えば、ＷＯ０３０１６２７７参照）；エタンアミン−ベンゼン；イミダゾリジノン、チアゾールジノンおよびピロリジノン（例えば、ＷＯ０３０３１４１４参照）；インドールグリオキサミド（例えば、ＵＳ５６５４３２６参照）；インドールグリオキサミド（例えば、ＷＯ９９５６７５２参照）；インドール（例えば、ＵＳ６６３０４９６およびＷＯ９９４３６７２参照）；インドリル（例えば、ＷＯ００３０４８１２２参照）；インドリル含有スルホンアミド；Ｎ−アシル−Ｎ−シンナモイルエチレンジアミン誘導体（例えば、ＷＯ９６０３３７１参照）；ナフィルアセトアミド（例えば、ＥＰ７７９２７参照）；Ｎ−置換グリシン（例えば、ＵＳ５２９８６５２参照）；リン脂質アナログ（例えば、ＵＳ５１４４０４５およびＵＳ６４９５５９６参照）；ピペラジン（例えば、ＷＯ０３０４８１３９参照）；ピリドンおよびピリミドン（例えば、ＷＯ０３０８６４００参照）；６−カルバモイルピコリン酸誘導体（例えば、ＪＰ０７２２４０３８参照）；アミノ含有側鎖を持つステロイドおよびそれらの環状炭化水素アナログ（例えば、ＷＯ８７０２３６７参照）；トリフルオロブタノン（例えば、ＵＳ６３５０８９２およびＵＳ２００２０６８７２２参照）；アビエチン酸誘導体（例えば、ＵＳ４９４８８１３参照）；ベンジルホスフィネートエステル（例えば、ＵＳ５５０４０７３参照）；そのそれぞれが本明細書中に参考として組み込まれている。
【０２４９】
これらのＰＬ  Ａ２インヒビタークラスのいくつかのホスホリパーゼ阻害部分の特定の例を、それに対応するＩＣ５０値と共に以下の表１に掲げる：
表１：ＰＬ  Ａ２インヒビタークラスからのホスホリパーゼ阻害部分の例
【０２５０】
【化１２０】
2009514892.tif 000094
【０２５１】
【化１２１】
2009514892.tif 000095
【０２５２】
【化１２２】
2009514892.tif 000096
【０２５３】
【化１２３】
2009514892.tif 000097
【０２５４】
【化１２４】
2009514892.tif 000098
【０２５５】
【化１２５】
2009514892.tif 000099
本発明のいくつかのホスホリパーゼインヒビターに有用なホスホリパーゼ阻害部分は、海綿Ｌｕｆｆａｒｉｅｌｌａ  ｖａｒｉａｂｉｌｉｓから抽出された海洋産物であるマノアライドのような天然産物、ならびにそれに関連する化合物も含み、以下にマノアライドの構造と共に示す。
【０２５６】
【化１２６】
2009514892.tif 000100
これらの化合物のいずれも、本発明のいくつかの実施形態において非吸収インヒビターのホスホリパーゼ阻害部分として用いることができる。先により詳細に記載したように、そのような部分は特定の質量、電荷および／または胃腸管を通っての（正味の）吸収を妨げるための他の物理的パラメータを有してもよく、および／または非吸収部分、例えば、ポリマー部分に連結することができる。さらに、本発明は、本明細書中に開示された組成物に限定されない。本発明に有用な他の組成物は本明細書中に提供された教示に基づいて当業者に明らかであり、本発明の範囲内にあると考えられる。
【０２５７】
ホスホリパーゼ阻害部分の非吸収部分、例えば、ポリマー部分への結合点は、ホスホリパーゼ阻害部分の阻害作用、例えば、ＰＬ  Ａ２の触媒活性をその効力を無くする、または低下させるその能力に干渉しないように選択することができる。例えば、リン脂質アナログをＺとして用いる場合、結合部分を、例えば、その極性頭部基ではなく、リン脂質アナログの疎水性基（例えば、その長鎖アルキル基）へ結合させることによって、活性の最小損失を達成することができる。特定の仮説に限定されることなく、リン脂質アナログは、リン脂質基質またはリン脂質アナログの疎水性基ではなく、極性頭部基を認識する、触媒部位についてリン脂質基質と競合することによってＰＬ  Ａ２を阻害することができる。かくして、弱く認識される疎水性基への結合は、リン脂質アナログの酵素阻害活性との干渉を最小化することができる。当業者であれば、他の当該分野で知られたホスホリパーゼ阻害部分についての他の適当な結合点を認識するであろう。
【０２５８】
例えば、適当な結合点を、入手可能な構造的情報によって同定することができる。ホスホリパーゼに結合したホスホリパーゼ阻害部分の共−結晶構造は、結合部分の結合がホスホリパーゼ阻害部分およびその標的の間の相互作用を妨げない部位を選択することを可能とする。例えば、種々のクラスの当該分野で知られたホスホリパーゼインヒビターから選択されたホスホリパーゼ阻害部分の好ましい結合点を以下に矢印で示す。
【０２５９】
【化１２７】
2009514892.tif 000101
【０２６０】
【化１２８】
2009514892.tif 000102
式中、
ＲはアルキルまたはＯ−アルキルであり；
Ｒ１はアルキルまたはＣ（＝Ｏ）アルキルであり；
Ｒ２はアルキルであり；
Ｒ３は−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ３＋、（ＣＨ２）ｎ−ＯＨまたは−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ（Ｒ’）３＋であり、ここで、ｎは２〜４であって、Ｒ’は水素またはアルキルであり；
Ｒ４はオレイル、エライドイル、ペトロセライドイル、ガンマ−リネオイル、またはアラキドニルである。
ここで、ＸはＯＰＯ３ＣＨ３、ＰＯ３ＣＨ３またはＰＯ２ＣＨ３である。
【０２６１】
【化１２９】
2009514892.tif 000103
【０２６２】
【化１３０】
2009514892.tif 000104
さらに、核磁気共鳴によるホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼへの結合の評価により、そのような結合相互作用に必須でない部位の同定が可能となる。加えて、当業者であれば、構造的変形が許される位置を示唆するホスホリパーゼインヒビターについての利用可能な構造−活性関係（ＳＡＲ）を用いることができる。候補ホスホリパーゼインヒビターのライブラリーは、例えば、多数の異なる配向にホスホリパーゼ阻害部分を示すように、前記した情報に基づき、ならびにランダムに選択されたホスホリパーゼ阻害部分の異なる結合点を特徴付けるように設計することができる。候補は、後により詳細に議論するように、ホスホリパーゼ阻害活性について評価して、ホスホリパーゼ阻害部分のポリマー部分または他の非吸収部分への適切な結合点を持つホスホリパーゼインヒビターを得ることができる。
【０２６３】
第３の一般的実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターまたは部分は有機低分子を含むことができる。第２の一般的実施形態のインヒビター部分との関係で前記したように、内腔に局在化される低分子阻害部分は、５員環の環構造内で、６員環の環構造内で、または５員および６員環のそれぞれの環構造内で置換された、縮合した５員環および６員環、好ましくは１以上のヘテロ原子（例えば、窒素、酸素）を有する縮合した５員環および６員環を有する置換された有機化合物に由来する部分を含むことができる。それぞれの場合において、阻害部分は、ホスホリパーゼ阻害機能性を該部分に付与するのに効果的な置換基を含むことができる。縮合した５員および６員環を有する好ましい化合物に関する従前の議論を参照のこと。
【０２６４】
好ましい実施形態において、低分子ホスホリパーゼインヒビターは置換インドールのようなインドールを含むことができる。好ましいインドール系化合物に関する先の議論を参照のこと。
【０２６５】
構造：
【０２６６】
【化１３１】
2009514892.tif 000105
によって表される１つの低分子有機化合物ＩＬＹ−４００１を合成し（例えば、実施例１Ａ参照）、生物学的利用能について評価した（例えば、実施例１Ｂ参照）。生物学的利用能は、例えば、ポリマーに対するこのインドール部分に適用された電荷修飾戦略によって本発明のこの第３の一般的な実施形態に従って低下させることができる（逆に内腔局在化を改良することができる）（例えば、実施例１Ｃ参照）。
【０２６７】
電荷修飾についての化学に関しては、インドール誘導体に対する一般的化学文献、例えば：Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３９，５１１９−５１３６；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３９，５１３７−５１５９；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３９，５１５９−５１７５において公知である。非吸収性のためにインドール誘導体上の荷電部分を増加させるための化学的アプローチは、カルボン酸、スルホネート、サルフェート、ホスホネート、ホスフェート、アミン等のような極性基でのインドールＣ４’、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、およびＮ１位の修飾（図５）を含み、例えば、その例として、インドールＣ５修飾は出発物質として市販の４−ヒドロキシインドールを用いる。臭化アリルでの４−ヒドロキシ位に対する選択的な温和な塩基アルキル化の後に、塩基として水素化ナトリウムを用いて２−フェニルベンジル基をＮ位に導入する。次いで、標準的グリオキサミド化を行う。引き続いてのクライゼン転位、およびｔｅｒｔ−ブチル保護アセテートのアルキル化により、さらなる極性基導入のためのＣ５アリル置換基を持つ中間体が得られる。
【０２６８】
【化１３２】
2009514892.tif 000106
Ｃ５アリル中間体は、種々の極性基への接近を提供するのみならず、ＳＡＲ研究のために基の長さを調整できる意味において広範に使用できる。例えば、経路Ａにおいて、標的分子はオレフィン異性化、オゾン分解、それに続くＣ５ギ酸誘導体を得るための酸化によって得ることができる。経路Ｂにおいては、アリル中間体をジヒドロキシル化、続いて、ペリオデート開裂によって対応するジオールに変換して、アルデヒドを得る。該アルデヒドをさらに酸化して、酢酸誘導体を得、あるいはさらに変換するために対応するヒドロキシル中間体にアルデヒドを還元して、アミン、スルホネート、ホスホネートを得る。経路Ｃにおいては、プロピオン酸誘導体を、オレフィンのホウ水素化、それに続く対応するアルコールの酸化によって得ることができる。経路Ｄにおいては、アリル中間体は、標的を得るために単にアミノヒドロキシル化することができる。
【０２６９】
【化１３３】
2009514892.tif 000107
流出を介する胃腸内腔への局在化
いくつかの実施形態においてホスホリパーゼインヒビターは、胃腸粘膜を通じてのその（正味の）吸収を妨げるように構築され、および／または前記したように非吸収部分へ連結された、カップリングされた、または結合されたホスホリパーゼ阻害部分を含む。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは流出により胃腸内腔に局在化される。いくつかの実施形態において、インヒビターは、細胞への進入に際して、胃腸粘膜細胞、例えば、腸および／または結腸細胞から流出し、非吸収の正味の効果を生じる。当該分野で公知のいかなるホスホリパーゼインヒビターおよび／または本明細書中に記載された、および／または検討されているいかなるホスホリパーゼ阻害部分も、これらの実施形態において用いることができる。例えば、表１に掲げるいかなる当該分野で公知のＰＬ  Ａ２インヒビターを用いることもできる。これらのおよび他の当該分野で公知のホスホリパーゼインヒビターおよび／または本明細書中に開示されたおよび／または検討されているいかなるホスホリパーゼ阻害部分も、それからの移動に際して、流出して胃腸内腔に戻るように構築することができる。
【０２７０】
いくつかの流出実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは能動輸送および／または受動輸送によって胃腸粘膜細胞により吸収されるか、あるいは能動輸送および／または受動輸送によって胃腸壁を通って透過され得るが、ホスホリパーゼインヒビターは胃腸内腔に局在化されたままである。ホスホリパーゼインヒビターは、いくつかの実施形態において、１以上の疎水性および／または親油性部分を有することができ、胃腸粘膜細胞の原形質膜を横切っての拡散を可能とする傾向がある。しかしながら、基底外側膜を横切ってのおよび門脈血液循環への引き続いての通過は、以下に詳細に議論する多数の物理的および分子的考慮によって調節することができる。例えば、腸および／または結腸細胞、例えば、先端腸細胞に入るホスホリパーゼインヒビターは引き続いて流出されて胃腸内腔に戻ることができる。
【０２７１】
いくつかの実施形態において、流出は、胃腸粘膜細胞に、例えば、胃腸管の先端腸細胞に局在化されたタンパク質および／または糖タンパク質トランスポーターによって達成される。タンパク質および／または糖タンパク質トランスポーターは限定されるものではないが、例えば、消化管の上皮細胞、例えば、胃腸管の先端腸細胞に局在化された、ＭＤＲ１（ＡＢＣＢ１遺伝子座の産物）およびＭＲＰ２を含めたＰ−糖タンパク質のようなＡＴＰ−結合カセット輸送タンパク質を含む。そのような輸送はポンプということもできる。
【０２７２】
いくつかの実施形態において、例えば、ホスホリパーゼインヒビターは、インヒビターを腸細胞の細胞質から流出させて、胃腸内腔に戻すタンパク質および／または糖タンパク質トランスポーターによって認識されるように構築することができる。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、腸細胞内で、例えば、代謝プロセスによる細胞内修飾を行って、修飾されたインヒビターが輸送についての標的として作用するように、タンパク質および／または糖タンパク質トランスポーターによる認識を促進するように構築される。消化管上皮のタンパク質および／または糖タンパク質トランスポーターによって認識されるモチーフは、当業者が決定することができる。例えば、ＭＤＲ１（ＡＢＣＢ１遺伝子座の産物）およびＭＲＰ２を含めたＰ−糖タンパク質のようなＡＴＰ−結合カセット輸送タンパク質についての認識モチーフを決定することができる。本発明のホスホリパーゼインヒビターは、認識モチーフ部分に連結された、カップリングされた、または結合されたホスホリパーゼ阻害部分を含むことができる。本明細書中で用いる「認識モチーフ部分」は、トランスポーターによって認識される、またはトランスポーターによって認識されるようになるように修飾することができるモチーフを含む部分をいう、ここで、該トランスポーターはＡＴＰ結合カセット輸送タンパク質、Ｐ−糖タンパク質、ＭＤＲ１、ＭＲＰ２等のような消化管上皮のタンパク質および／または糖タンパク質トランスポーターによって認識されるモチーフを含めた認識モチーフ部分を含む組成物の胃腸内腔への流出を行うことができる。いくつかの実施形態において、認識モチーフ部分は消化管上皮細胞のトランスポーターに対する標的として作用し、トランスポーターが細胞の内側からのホスホリパーゼインヒビターを胃腸内腔に戻すようにする。流出によって達成された内腔局在化は、かくして、ホスホリパーゼインヒビターの血液循環への吸収を妨げ、または防止することができる。
【０２７３】
好ましい実施形態において、流出は有意な量、好ましくは統計学的に有意な量、より好ましくは実質的に全てのホスホリパーゼインヒビターの胃腸内腔への内腔局在化を達成する。すなわち、実質的に全てのホスホリパーゼインヒビターは、胃腸内腔から外へ移動するあらゆるインヒビターのいくらか、ほとんど、および／または実質的に全ての流出によっても胃腸内腔に留まる。例えば、該効果は、ホスホリパーゼインヒビターの少なくとも約９０％が胃腸内腔に留まり、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、好ましくは少なくとも約９９％、より好ましくは少なくとも約９９．５％が胃腸内腔に留まるようなものとすることができる。
【０２７４】
いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは１以上のさらなる流出増強部分を含む。本明細書中で用いる「流出増強部分」とは、胃腸内腔への該部分の流出を増強させ、助け、増加させ、活性化し、促進し、または促進するように作用する流出増強剤を含む部分をいう。例えば、ホスホリパーゼインヒビターは、いくつかの実施形態において、トランスポーターの発現を活性化する部分、例えば、トランスポーターをコードする遺伝子の転写因子および／またはエンハンサーを含むことができる。例えば、プレグネートＸ受容体（ＰＸＲ）ともいわれる核受容体、プレグネートＸは高レベルのＭＤＲ１および／または関連トランスポーター（ＣＩＴＥ）を誘導する。いくつかの好ましい実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターは、例えば、核受容体に接触し、それに結合することによってＰＸＲを活性化する流出増強部分にカップリングされ、連結され、および／または結合される。生産されるＭＤＲ１および／または関連トランスポーターのレベルが高い場合、例えば、ＭＤＲ１についての認識モチーフも含むホスホリパーゼインヒビターの流出を増強することができる。本明細書中における教示に基づき、当業者は、本発明のこれらの態様で用いることができ、かつ、その範囲内で考えられる他の流出増強部分を認識するであろう。
【０２７５】
本発明のいくつかの実施形態は、非吸収および流出インヒビターの組合せを含む。そのような実施形態において、内腔局在化は、ホスホリパーゼインヒビターの非吸収、および胃腸内腔から外へ移動するあらゆるホスホリパーゼインヒビターのいくらか、ほとんど、および／または実質的に全ての流出の組合せによって達成される。
【０２７６】
内腔局在化は、投与されたインヒビターの量が非吸収および／または流出の不存在下で投与される量未満とできるように、ホスホリパーゼインヒビターの能力を改良することができる。いくつかの実施形態において、非吸収および／または流出はホスホリパーゼインヒビターの効果を改良する。特に、インヒビターは、非吸収および／または流出によって内腔に局在化された場合にホスホリパーゼの活性をかなりの程度低下させる。そのような実施形態において、用いるホスホリパーゼインヒビターの量は推奨される用量レベルと同一とすることができ、この用量よりも高く、または推奨される用量よりも低くすることができる。いくつかの実施形態において、非吸収および／または流出は用いるホスホリパーゼインヒビターの用量を減少させ、かくして、患者のコンプライアンスを増加させることができ、副作用を減少させることができる。
【０２７７】
内腔局在化ホスホリパーゼインヒビターによるホスホリパーゼ阻害
内腔局在化機能性に加えて、本発明のホスホリパーゼインヒビターは酵素阻害機能性も有する。
【０２７８】
一般に、用語「阻害する」およびその文法上の変形形態は酵素活性の完全な阻害を要求することを意図しない。例えば、それは、インヒビターの不存在下において酵素の活性の少なくとも約５０％、少なくとも約７５％、好ましくは少なくとも約９０％、より好ましくは少なくとも約９８％、なおより好ましくは少なくとも約９９％の酵素活性の低下をいうことができる。最も好ましくは、それは、有効量、すなわち、治療すべき少なくとも１つの疾患において治療的および／または予防的利点を生じさせるのに十分な量の酵素活性の低下をいう。例えば、本明細書中に開示する、ホスホリパーゼ阻害治療を受ける被験体において。逆に、句「阻害しない」およびその文法上の変形形態は、酵素活性に対する効果の完全な欠如を要求しない。例えば、それは、インヒビターの存在下において酵素活性の約２０％未満、約１０％未満、約５％未満、好ましくは約２％未満、より好ましくは約１％未満の低下が存在する状況をいう。最も好ましくは、それは、顕著な効果が観察されないような酵素活性の最小の低下をいう。さらに、句「有意に阻害しない」およびその文法上の変形形態は、インヒビターの存在下において酵素活性の約４０％未満、約３０％未満、約２５％未満、好ましくは約２０％未満、より好ましくは約１５％未満の低下が存在する状況をいう。さらに、句「実質的に阻害しない」およびその文法上の変形形態は、インヒビターの存在下において酵素活性の約３０％未満、約２５％未満、約２０％未満、好ましくは約１５％未満、より好ましくは約１０％未満の低下が存在する状況をいう。
【０２７９】
いくつかの実施形態において、本発明のホスホリパーゼインヒビターは、酵素のそのリン脂質基質への接近を妨げることによってホスホリパーゼＡ２のようなホスホリパーゼを阻害するように作用し；いくつかの実施形態において、それは、その基質に対する酵素の触媒活性を低下させることによって作用し；いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターはこれらの２つのアプローチの組合せによって作用する。
【０２８０】
先に議論したように、いくつかの胃腸ホスホリパーゼ、例えば、ほとんどのＰＬ  Ａ２酵素は、脂質凝集体の脂質−水界面に物理的に近い（例えば、「ドッキングされている」）間に、それらの基質に作用する。それ自体、触媒活性は、胃腸内腔中の脂質凝集体の外側表面への物理的接近を有する酵素に少なくとも部分的には依存し得る。図１Ａに示した模式的非限定的表示を参照し、例えば、ＰＬ  Ａ２酵素１０は脂質凝集体２０の脂質−水界面２２と相互作用することができる。酵素のｉ−表面の触媒部位１２は、脂質凝集体２０と相互作用する面上の「ノッチ」によって描かれる。
【０２８１】
本発明のいくつかの実施形態において、ＰＬ  Ａ２阻害は、脂質凝集体の外側表面から酵素を離しておき、それにより、リン脂質基質への接近を妨げることによって達成される。図１Ｂおよび１Ｃは、脂質−水界面においてリン脂質基質への酵素の接近を妨げることによって酵素活性を阻害することができる非吸収ポリマーホスホリパーゼインヒビターの２つの実施形態を示す。具体的には、図１Ｂを参照し、疎水性端部領域３２を有するポリマー部分から実質的になる非吸収ホスホリパーゼインヒビター３０は脂質−水界面２２と会合し、酵素１０の脂質−水界面２２への接近性を妨げる。図１Ｃは、ホスホリパーゼ酵素１０と相互作用するポリマーから実質的になり、かつ脂質−水界面２２への酵素１０の接近性を妨げる非吸収ホスホリパーゼインヒビター３０を示す。疎水性端部領域３２を有するポリマーから実質的になる非吸収ホスホリパーゼインヒビター３０は、図１Ｄに示したホスホリパーゼ酵素１０および脂質−水界面２２の双方と会合することができる。
【０２８２】
接近を妨げることによって作用する非吸収インヒビターは酵素の触媒部位に直接的に干渉する必要はなく、例えば、それは酵素の触媒部位、またはアロステリック部位のような酵素上のいずれかの他の特定の部位を認識し、および／またはそれに結合する必要はない。そうではなく、いくつかの実施形態において、本発明の非吸収ホスホリパーゼインヒビターは、胃腸内腔で見出された１以上のタイプの脂質凝集体の脂質−水界面において酵素の物理的吸着を防止し、または妨げることができる。「脂質−水界面」の例は、例えば、そのいずれもがトリグリセリド、脂肪酸、胆汁酸、リン脂質、ホスファチジルコリン、リゾリン脂質、リソホスファチジルコリン、コレステロール、コレステロールエステル、他の両親媒性物質および／または他の食事代謝産物を含有することができる、脂肪球、エマルジョン滴、小胞、混合ミセル、および／またはディスクを含めた、胃腸内腔で見出された脂質凝集体の外側表面を含む。
【０２８３】
好ましい実施形態において、インヒビターは、ホスホリパーゼおよび／または脂質凝集体の脂質−水界面のいずれかと相互作用することができるポリマー部分を含む。図１Ｂは、インヒビター３０が脂質−水界面２２に物理的に複合体化し、カップリングし、結合し、付着し、または吸収されるようになるように、それが脂質−水界面２２と相互作用する例を示す。インヒビター３０は、例えば、共有結合、イオン性結合、金属結合、水素結合、疎水性結合、および／またはファン・デル・ワールス結合を含めたいかなる結合相互作用を介しても界面２２と相互作用することができる。図１Ｂの例においては、脂質−水界面２２とのインヒビターの相互作用は疎水性結合によって促進される。この描かれた実施形態において、インヒビターは２つの端部領域３２を有し、そのそれぞれは、インヒビター３０の部分と二層の疎水性鎖との間の疎水性相互作用によって脂質層に包埋されるようになる、（実線の三角形で描かれた）疎水性部分、例えば、リン脂質アナログを有する。
【０２８４】
図１Ｃは、インヒビター３０がホスホリパーゼ酵素１０、例えば、ＰＬ  Ａ２と相互作用する例を示す。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビター３０は、脂質凝集体２０とのその相互作用を妨げるように、酵素１０に物理的に複合体化し、カップリングし、結合し、付着し、または吸着されるようになる部分を含む。インヒビター３０は溶液中の酵素を一掃して、それとの複合体を生じさせるものとして記載することができる。いくつかの実施形態において、インヒビター３０と相互作用する酵素１０は、例えば、界面２２へのそのアプローチが物理的に妨げられるゆえに、脂質−水界面２２においてそのリン脂質基質への接近から立体的に妨げられる。
【０２８５】
いくつかの実施形態において、インヒビターは、胃腸内腔の生理学的条件下で可溶性または不溶性であり得るポリマー部分を含み、例えば、先に詳細に記載したように、コロイド粒子または（不溶性）巨視的ビーズのような分散したミセルまたは粒子として存在することができる。図２を参照し、例えば、可溶性および不溶性インヒビター３０の双方を含めたホスホリパーゼインヒビター３０は、（模式的に「Ｉ＊」によって表される）ホスホリパーゼ阻害部分に共有結合したポリマー部分を含むことができる。ホスホリパーゼインヒビター３０は、例えば、胃腸脂質小胞に隣接した胃腸流体においてホスホリパーゼ−Ａ２  １０と相互作用することができる。
【０２８６】
さて、図３Ａ〜３Ｂを参照し、例えば、インヒビター３０は、シングレット実施形態としての（Ｉ＊によって模式的に表される）単一の阻害部分に、または二量体実施形態としての２つの阻害部分に共有結合したポリマー部分を含む（いずれの場合にも、前記した通りである）。図３Ａにおいて、ホスホリパーゼインヒビター３０は、インヒビター３０が、（脂質二層と実質的に一体となった疎水性ポリマー部分とともに示される）脂質小胞２０の脂質−水界面２０と会合するように適合させた疎水性ポリマー部分を含む。図３Ｂにおいて、ホスホリパーゼインヒビター３０は、第１の疎水性ブロックおよび第２の親水性ブロックを有するポリマー部分を含み、第２の親水性ブロックはホスホリパーゼ阻害部分に対して基部側にあり、（脂質二層と実質的に一体化した疎水性ブロックととともに、および脂質二層を囲む水相内で実質的に会合した親水性ブロックとともに示される）脂質小胞２０の脂質−水界面２２と会合するように適合される。図３Ｃを参照し、ホスホリパーゼインヒビター３０は、２つの阻害部分に共有結合し、かつインヒビター３０が（脂質二層と実質的に一体化し、かつ脂質二層を通ってループに形成された疎水性ポリマー部分とともに示された）脂質小胞２０の脂質−水界面と会合するように適合した疎水性ポリマー部分を含む。これらの実施形態は、阻害部分と、小胞表面に対して実質的に基部側にあるホスホリパーゼ−Ａ２との間の相互作用を可能とする。
【０２８７】
一般に、ポリマー部分を必要とする本発明のいずれの態様または実施形態においても、インヒビターのポリマー部分は、種々の様式の形状とすることができ、好ましくは、ホスホリパーゼとの複合体、例えば、ＰＬ  Ａ２との複合体の形成に好都合なように設計することができる。例えば、ポリマー部分は、ＰＬ  Ａ２のｉ−表面と相互作用するように設計されたマクロ分子足場を含むことができる。先に議論したように、ｉ−表面の構造的特徴は、触媒部位を形成する溝の開口がｉ−表面に対して垂直となるようなものである。該開口は、それ自体が（リジンおよびアルギニン残基を含めた）陽イオン性残基の環に含まれた疎水性残基（主として、ロイシンおよびイソロイシン残基）の第１の冠によって囲まれる。ポリマー部分は、（例えば、陽イオン性環に結合するように配置された）複数の陰イオン性部分、および／または（例えば、疎水性冠に結合するように配置された）複数の疎水性残基を含むマクロ分子足場として設計することができる。そのような実施形態において、インヒビターは、ホスホリパーゼの表面を有する触媒部位の上に位置するようになり、触媒部位に対する接近を妨げる。というのは、「蓋（キャップ）」は開口への接近を妨げるからである。
【０２８８】
先に議論したように、インヒビターは非吸収オリゴマーまたはポリマー部分、およびホスホリパーゼ阻害部分を含むことができる。ホスホリパーゼ阻害部分を非吸収部分にカップリングさせ、連結し、または付着させることができる。１つの実施形態において、阻害部分は、例えば、脂質−水界面と相互作用するポリマー部分、および／またはホスホリパーゼと相互作用するポリマー部分に連結させることができる。後者の場合には、ホスホリパーゼ阻害部分は、さらに、ホスホリパーゼ、例えば、ＰＬ  Ａ２のｉ−表面とのポリマー部分の相互作用を助けることができる。
【０２８９】
いくつかの実施形態において、例えば、ＰＬ  Ａ２阻害部分はポリマー部分のマクロ分子足場に連結され、カップリングされ、または結合されており、ここで、ＰＬ  Ａ２阻害部分はＰＬ  Ａ２の触媒部位と相互作用し、他方、マクロ分子足場は、触媒部位を囲むｉ−表面と相互作用する。ホスホリパーゼ阻害部分がリン脂質アナログまたは遷移状態アナログを含む場合、ホスホリパーゼ阻害部分は、好ましくはその疎水性基を介してカップリングされ、例えば、先に議論したＨｉｓ−カルシウム−Ａｓｐ三つ組を介して触媒部位に結合するのに利用可能な阻害部分の極性頭部基を生じる。
【０２９０】
ホスホリパーゼと相互作用するポリマー部分にカップリングしたホスホリパーゼ阻害部分を含むいくつかの実施形態は、ホスホリパーゼ阻害部分を有する中心または焦点に集中する、（例えば、疎水性冠に重なるように配置された）スペーサー部分に連結された（陽イオン性環に結合するように配置された）複数の陰イオン性部分を含む。いくつかのそのような実施形態は、式（Ｄ）：
【０２９１】
【化１３４】
2009514892.tif 000108
［式中、Ｚはホスホリパーゼ阻害部分、好ましくはＰＬ  Ａ２阻害部分であり；Ｌは結合部分、例えば、化学リンカーであり；Ｆは複数のセグメントＳＸｐからの共有結合が集中する焦点であり；Ｓはスペーサー部分であり；Ｘは陰イオン性部分、好ましくは、例えば、限定されるものではないが、カルボキシレート基、スルホネート基、サルフェート基、スルファメート基、ホスホルアミデート基、ホスフェート基、ホスホネート基、ホスフィネート基、グルコネート基等であり；ｐおよびｑはそれぞれ整数であり、好ましくは、ｐは１、２、３または４と等しく、好ましくは、ｑは２、３、４、５、６、７または８と等しい］
によって表すことができる。
【０２９２】
Ｆ−（ＳＸｐ）ｑセグメントは種々の立体配置、好ましくは、ホスホリパーゼの表面を有する触媒部位との相互作用を促進する立体配置を採ることができるいくつかの実施形態において、例えば、複数のスペーサー部分は、ポリマー部分のマクロ分子足場の中心にある焦点Ｆから放射状に伸びる。
【０２９３】
いくつかの好ましい実施形態において、スペーサー部分Ｓは、例えば、ＰＬ  Ａ２のｉ−表面の疎水性冠に結合するように配置された複数の疎水性残基を提供し、いくつかの好ましい実施形態において陰イオン性部分Ｘは、ＰＬ  Ａ２のｉ−表面の陽イオン性環に結合するように配置される。いくつかの実施形態は、分岐し、焦点Ｆから収束するスペーサー部分を含む樹状マクロ分子足場を含む。いくつかの実施形態の例を、以下に掲げられる構造によって表すことができる。
【０２９４】
【化１３５】
2009514892.tif 000109
本発明の実施に有用な樹状構造の他の例は当該分野で公知である。例えば、本明細書中に参考として組み込まれている、Ｇｒａｙｓｏｎ  Ｓ．Ｍ．ら  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，２００１、１０１：３８１９−３８６７；およびＢｏｓｍａｎ  Ａ．Ｗ．ら，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｒｅｖｉｅｗｓ，１９９９，９９；１６６５−１６８８を参照のこと。加えて、本発明に用いるのに適切な他の例は、本明細書中に提供された開示に照らして当業者に認識され、本発明の範囲内にあると考えられる。
【０２９５】
いくつかの実施形態において、ポリマー部分のマクロ分子足場は粒子を形成することができる。そのような実施形態において、ホスホリパーゼ阻害部分は、好ましくは、そのような粒子の外側表面にカップリングされる。ホスホリパーゼ阻害部分がリン脂質アナログまたは遷移状態アナログである場合、ホスホリパーゼ阻害部分は、好ましくは、先に議論したようにその疎水性基を介して連結される。そのように形成された粒子は、先により詳細に議論したように多孔性または非多孔性であってよく、球状、楕円状、グローブ状、または不規則な形状の粒子のようないかなる形状であってもよい。粒子は、本明細書中に開示するポリマーのいずれかを含めた、１以上の有機または無機ポリマー部分から構成することができる。好ましい粒子の実施形態において、粒子表面は性質が疎水性であり、先に定義した酸性基Ｘを有する。
【０２９６】
非吸収ホスホリパーゼインヒビターがホスホリパーゼ上の特定の部位、例えば、ＰＬ  Ａ２の触媒部位と相互作用する部分を含む他の実施形態において、インヒビターは酵素のその基質への接近を妨げる必要はないが、たとえ酵素が基質を含有する脂質−水界面に近づき、および／またはそれに「ドッキング」されるようになったとしても、その基質に作用する酵素の活性を低下させることによって作用することができる。そのようなインヒビターの実施形態は、好ましくは、ポリマー部分、および１以上のホスホリパーゼ阻害部分、例えば、当該分野で公知のホスホリパーゼインヒビターおよび／または本明細書中に記載した、および／または検討されるいずれかのホスホリパーゼインヒビターを含む。特定の仮説に拘束されるものではないが、例えば、そのようなインヒビターは、可逆的および／または不可逆的阻害によってホスホリパーゼ活性を低下させるように作用することができる。
【０２９７】
本発明のホスホリパーゼインヒビターによる可逆的阻害は、（例えば、インヒビターがホスホリパーゼの触媒部位に結合する場合は）競合的であり、（例えば、インヒビターがホスホリパーゼのアロステリック部位に結合して、アロステリックな変化をもたらす場合は）非競合的であり、および／または（インヒビターがホスホリパーゼとその基質との間の複合体に結合する場合は）不競合的であろう。酵素から解離することなく、有意に解離することなく、または実質的に解離することなく、ホスホリパーゼインヒビターがホスホリパーゼ上の部位に結合したままであり、または有意に結合したままであり、または実質的に結合したままである場合、阻害は不可逆的でもあり得る。
【０２９８】
先に議論したように、ＰＬ  Ａ２酵素は保存された活性部位構造およびＨｉｓおよびＡｓｐ残基の水分子およびカルシウム陽イオンへの共同の結合を含む触媒メカニズムを有する。リン脂質基質は、疎水性および陽イオン性残基によって包まれた溝を通じてその極性頭部基によって触媒部位に接近することができる。触媒部位内で、多配位カルシウムイオンがリン脂質基質のｓｎ−２位のアシルカルボニル基を活性化して、加水分解を引き起こす。ある実施形態において、ＰＬ  Ａ２阻害部分は、リン脂質基質および／またはその遷移状態に似た構造を含む。
【０２９９】
特定の仮説に限定されるものではないが、そのような部分は、触媒部位に対して、リン脂質基質と可逆的に競合することによってＰＬ  Ａ２を阻害することができる。すなわち、リン脂質基質の構造的アナログ、好ましくは、極性頭部基の構造的アナログおよび／またはリン脂質基質遷移状態の構造的アナログは、触媒部位に可逆的に結合することができ、リン脂質基質の接近を阻害する。さらに、先に詳細に記載したように、アナログホスホリパーゼ阻害部分は、触媒部位に結合するアナログの能力に干渉せず、アナログの阻害活性を最小化する結合点において、非吸収部分、例えば、ポリマー部分に結合することができる。
【０３００】
（実施例５Ａ〜５Ｃを含めた）実施例５に示したかなりの研究データと一緒に考慮すると、ホスホリパーゼ−Ａ２酵素についての実質的構造−活性関係の研究を考慮し、当業者であればＩＬＹ−４００１の観察された阻害効果は、（同一のコア構造を有する）本発明の他のインドール化合物において、ならびに縮合した５員環および６員環を含むインドール関連化合物において、実現することができることを認識することができる。特に、特許請求の範囲に明示的に引用されていない理論に拘束されることなく、当業者であれば、図６Ａを参照して、例えば、インドール構造の３位および４位および５位における置換基を選択し、（カルシウム依存性ホスホリパーゼ活性と関連する）酵素およびカルシウムイオンとの極性相互作用に効果的であると評価することができることを認識できる。同様に、当業者は、インドール構造の１位および２位における置基換を選択し、比較的疎水性であると評価することができることを認識できる。組み合わせて考えると、３位、４位および５位における極性基、および１位および２位における比較的疎水性の基は、その極性頭部基が疎水性および陽イオン性残基によって包まれた溝を通して向けられて、その極性領域が酵素ポケットに効果的に位置させることができるように、（疎水性領域を介して）インヒビター（または阻害部分）を親水性脂質−水界面と効果的に会合させ、またインヒビター（または阻害部分）を向けることができる。同様に、図６Ｂを参照し、例えば、そこに示されたインドール関連化合物上の対応する基が同一の機能性を有することができることを認識することができる。具体的には、当業者は、インドール関連構造のＲ３位、Ｒ４位およびＲ５位における置換基を選択し、酵素との、およびカルシウムイオンとの極性相互作用について効果的であると評価することができ、インドール関連構造のＲ１位およびＲ２位における置換基を選択し、比較的疎水性であると評価することができることを認識できる。
【０３０１】
同様に、図６Ｃおよび６Ｄを参照し、注目される対応するインドールのコア構造の鏡像アナログである前記した逆インドール化合物、および対応するインドールまたは関連化合物のコア構造の別の鏡像アナログである前記した逆インドール化合物および逆インドール関連化合物は、同様に、極性置換基および疎水性置換基を配置して、本発明の範囲内にある別のインドール構造および別のインドール関連構造を提供することができる。
【０３０２】
さらに、当業者は、公知のアッセイおよび評価アプローチを用いて本発明の範囲内にある特定のインヒビターを評価することができる。たとえば、本発明のインヒビターの阻害の程度は、ｉｎ−ｖｉｔｒｏアッセイ（例えば、実施例１Ｂ−１参照）および／ｉｎ−ｖｉｖｏ研究（例えば、実施例１０参照）を用いて評価することができる。
【０３０３】
さらに、これらの実施形態のいくつかにおいて、ホスホリパーゼインヒビターは、胃腸粘膜を通って分泌されたホスホリパーゼＡ２の再吸収を低下させる。
【０３０４】
ホスホリパーゼインヒビターを同定するためのスクリーニングアッセイ
胃腸ホスホリパーゼ、特にホスホリパーゼＡ２の異なる活性は、特定のホスホリパーゼを阻害し、かつ本発明の実施において用いて、インスリン関連疾患（例えば、糖尿病）、体重関連疾患（例えば、肥満）、コレステロール関連疾患またはその組合せを選択的に治療することができる阻害化合物についてのスクリーニングを可能とする。
【０３０５】
本発明のある種のアプローチは、候補部分をＰＬ  Ａ２酵素またはその断片、好ましくは酵素の触媒および／またはアロステリック部位を含有し、より好ましくは触媒部位のＨｉｓおよびＡｓｐ残基を含有する断片と接触させることによってＰＬ  Ａ２を阻害する部分を選択し；候補部分がＰＬ  Ａ２またはその断片と相互作用するか否かを決定し；次いで、選択された候補部分を、胃腸内腔に局在化されたホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼＡ２阻害部分として用いることを含む、胃腸内腔に局在化されたホスホリパーゼインヒビターを製造し、または同定する方法を提供する。
【０３０６】
本発明のある種の他のアプローチは、候補部分を、脂質凝集体またはその断片の脂質−水界面と接触させることによってＰＬ  Ａ２を阻害する部分を選択し；候補部分が該界面と相互作用するか否かを決定し；次いで、選択された候補部分を、胃腸内腔に局在化されたホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼＡ２阻害部分として用いることを含む、胃腸内腔に局在化されたホスホリパーゼインヒビターを製造し、または同定する方法を提供する。
【０３０７】
本発明のある種のアプローチは、候補部分をＰＬＢ酵素またはその断片と接触させることによってＰＬＢを阻害する部分を選択し；候補部分がＰＬＢまたはその断片と相互作用するか否かを決定し；次いで、選択された候補部分が、胃腸内腔に局在化されたホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼＢ阻害部分として用いることを含む、胃腸内腔に局在化されたホスホリパーゼインヒビターを製造し、または同定する方法を提供する。
【０３０８】
本発明のある種のアプローチは、候補部分をＰＬ  Ａ２酵素またはその断片、好ましくは酵素の触媒および／またはアロステリック部位を含有し、より好ましくは触媒部位のＨｉｓおよびＡｓｐ残基を含む断片と接触させることによってＰＬ  Ａ２を優先的に阻害する部分を選択し、候補部分がＰＬ  Ａ２またはその断片と相互作用するか否かを決定し；候補をＰＬ  Ａ２またはその断片と相互作用するか否かを決定し；候補をＰＬＢ酵素またはその断片と接触させ、候補がＰＬＢまたはその断片と相互作用するか否を決定し；ＰＬ  Ａ２と相互作用するが、ＰＬＢと相互作用せず、ＰＬＢと有意に相互作用せず、または実質的にＰＬＢと相互作用しないあらゆる候補を選択し；次いで、選択された候補部分を、胃腸内腔に局在化されたホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼＡ２阻害部分として用いることを含む、胃腸内腔に局在化されたホスホリパーゼインヒビターを製造し、または同定する方法を提供する。
【０３０９】
本発明のある種の他のアプローチは、候補を脂質凝集体の脂質−水界面と接触させることによってＰＬ  Ａ２を優先的に阻害する部分を選択し、候補部分が該界面と相互作用するか否かを決定し；候補部分をＰＬＢ酵素またはその断片と接触させ、候補部分がＰＬＢまたはその断片と相互作用するか否かを決定し；脂質−水界面と相互作用し、ＰＬＢと相互作用しないが、ＰＬＢと有意に相互作用せず、またはＰＬＢと実質的に相互作用しないあらゆる候補部分を選択し；次いで、選択された候補部分を、胃腸内腔に局在化されたホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼＡ２阻害部分として用いることを含む、胃腸内腔に局在化されたホスホリパーゼインヒビターを製造し、または同定する方法を提供する。
【０３１０】
例えば、本明細書中に開示された、および／または本明細書中で教示された手法によって同定されたホスホリパーゼ阻害部分を含む内腔局在化ホスホリパーゼインヒビターを動物モデルに用いて、例えば、インスリン関連疾患（例えば、糖尿病）および／または高コレステロール血症および／または体重関連疾患の抑制を示すことができる。およそ１μＭ未満の範囲において、ＰＬ  Ａ２阻害アッセイで阻害活性を示す内腔局在化ホスホリパーゼインヒビターが好ましい。より好ましくは、そのようなインヒビターは、本明細書中に開示された、または当該分野で知られたいかなるアッセイにおいても、非吸収性、例えば、低い透過性を示す。適切な動物モデルの例を、以下により詳細に記載する。
【０３１１】
本発明の非吸収および／または流出ホスホリパーゼインヒビターは、組成物を投与することによって被験体を治療する方法に用途を見出す医薬組成物およびキットの基礎を形成することができる。好ましくは、そのような組成物は、胃腸ホスホリパーゼの活性を調整し、例えば、胃腸ホスホリパーゼＡ２および／または１以上の他のホスホリパーゼの活性を低下させる。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼＡ２を阻害する。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼＡ２およびホスホリパーゼＢを阻害する。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼＡ２を阻害するが、ホスホリパーゼＢを阻害せず、または有意に阻害せず、または実質的に阻害しない。いくつかの実施形態において、ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼＡ２を阻害するが、他の胃腸ホスホリパーゼを阻害せず、または有意に阻害せず、または実質的に阻害しない。
【０３１２】
ホスホリパーゼ関連疾患を治療する方法
本発明は、ホスホリパーゼ関連疾患を治療する方法を提供し、ここで、インヒビターが胃腸内腔に局在化される。好ましくは、そのようなインヒビターは、好ましくは、食事の間に、または食事の後まもなくＰＬＡ２インヒビターを投与することを含む治療プロトコルにおいて経口投与される。
【０３１３】
本明細書中で用いる用語「ホスホリパーゼ関連疾患」とは、ホスホリパーゼの活性および／または再吸収の調整、および／またはホスホリパーゼの１以上の産物の産生および／または効果の調整が望ましい疾患をいう。好ましい実施形態において、本発明のインヒビターはホスホリパーゼの活性および／または再吸収を低下させ、ホスホリパーゼの１以上の産物の産生および／または効果を低下させる。本明細書中で用いる用語「ホスホリパーゼＡ２関連疾患」とは、ホスホリパーゼＡ２の活性および／または再吸収の調整が望ましく、および／またはホスホリパーゼＡ２活性の１以上の産物の産生および／または効果の調整が望ましい疾患をいう。好ましい実施形態において、本発明のインヒビターはホスホリパーゼＡ２の活性および／または再吸収を低下させ、および／またはホスホリパーゼＡ２の１以上の産物の産生および／または効果を低下させる。ホスホリパーゼＡ２関連疾患の例は、限定されるものではないが、インスリン関連疾患（例えば、糖尿病）、体重関連疾患（例えば、肥満）および／またはコレステロール関連疾患、およびそのあらゆる組合せを含む。
【０３１４】
本発明は、動物被験体の治療のための方法、医薬組成物、およびキットを提供する。本明細書中で使用される用語「動物被験体」には、ヒトおよび他の哺乳動物が含まれる。例えば、哺乳動物を、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、ハムスター、ネコ、イヌ、ブタ、家禽類、ウシ、およびウマ、ならびにこれらの組み合わせから選択することができる。
【０３１５】
本明細書中で用いる用語「治療する」は、治療的利点および／または予防的利点を達成することを含む。治療的利点とは、治療すべき根底の障害の根絶または軽減を意味する。例えば、糖尿病患者においては、治療的利点は根底となる糖尿病の根絶または軽減を含む。また、治療的利点は、患者が基礎障害を依然として罹っているかもしれないという事実に関わらず、患者において改善が観察されるような、基礎障害に関連する生理学的症状の１以上の根絶または軽減によって達成される。例えば、糖尿病に関しては、ＰＬ  Ａ２活性の低下が、インスリン抵抗性が矯正される場合のみならず、疲労、視力障害、または手または足のひりひり感のような糖尿病に伴う他の障害に関して患者における改善が観察される場合にも、治療的利点を提供することができる。予防的利点としては、本発明のホスホリパーゼインヒビターは、診断していなかったかもしれないとしても、ホスホリパーゼ関連疾患、例えば、糖尿病、肥満、または高コレステロール血症を発症する危険性がある患者にまたはそのような疾患の生理学的症状の１以上を報告している患者に投与することができる。
【０３１６】
本発明は、胃腸粘膜を通じて吸収されず、および／または胃腸粘膜細胞からの流出の結果として胃腸内腔に局在化されるホスホリパーゼインヒビターを含む組成物を提供する。好ましい実施形態において、本発明のホスホリパーゼインヒビターは、ホスホリパーゼ活性を阻害することによって１以上の疾患の治療において、予防的利点、治療的利点、または双方のいずれかを含めた利点を生じる。
【０３１７】
本明細書中に記載のホスホリパーゼの有効な阻害方法を、任意のホスホリパーゼ関連疾患（すなわち、ホスホリパーゼの活性および／もしくは再吸収の調整ならびに／またはホスホリパーゼの１つまたは複数の産物の産生および／または影響の調整が望ましい任意の疾患）に適用することができる。好ましくは、かかる疾患には、食事によって誘導されるホスホリパーゼ−Ａ２関連疾患および／またはホスホリパーゼＡ２関連疾患（すなわち、食事によって引き起こされるか、促進されるか、悪化するか、もしくは影響をうける疾患）が含まれる。ホスホリパーゼ−Ａ２関連疾患には、糖尿病、体重増加、およびコレステロール関連疾患、ならびに高脂血症、高コレステロール血症、心血管疾患（心臓疾患および卒中など）、高血圧症、癌、睡眠時無呼吸、骨関節炎、胆嚢疾患、脂肪肝、２型糖尿病、および他のインスリン関連疾患が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、１つまたは複数のこれらの疾患は、高脂肪食または洋食の消費の結果として起こり得る。いくつかの実施形態では、１つまたは複数のこれらの疾患は、遺伝子的原因、代謝障害、環境因子、行動要因、またはこれらの任意の組み合わせの結果として起こり得る。
【０３１８】
洋食および洋風の食事（ＷＥＳＴＥＲＮ−ＲＥＬＡＴＥＤ  ＤＩＥＴＳ）
一般に、本発明のいくつかの実施形態は、１つまたは複数の高炭水化物食、高糖類食、高脂肪食、および／または高コレステロール食の種々の組み合わせに関する。かかる食事を、本明細書中で一般に、「高リスク食」という（例えば、洋食が含まれ得る）。かかる食事は、対象患者の１つまたは複数の疾患（肥満関連疾患、インスリン関連疾患、および／またはコレステロール関連疾患が含まれる）のリスクプロフィールを高め得る。特に、かかる高リスク食には、いくつかの実施形態では、１つまたは複数の高糖類食、高脂肪食、および／または高コレステロール食と共に少なくとも１つの高炭水化物食が含まれ得る。高リスク食には、高脂肪食および／または高コレステロール食の一方または両方と組み合わせた高糖類食も含まれ得る。高リスク食には、高コレステロール食と組み合わせた高脂肪食も含まれ得る。いくつかの実施形態では、高リスク食には、高炭水化物食、高糖類食、および高脂肪食の組み合わせが含まれ得る。他の実施形態では、高リスク食には、高炭水化物食、高糖類食、および高コレステロール食が含まれ得る。他の実施形態では、高リスク食には、高炭水化物食、高脂肪食、および高コレステロール食が含まれ得る。さらなる実施形態では、高リスク食には、高糖類食、高脂肪食、および高コレステロール食が含まれ得る。いくつかの実施形態では、高リスク食には、高炭水化物食、高糖類食、高脂肪食、および高コレステロール食が含まれ得る。
【０３１９】
一般に、対象の食事は、総カロリー量（ｔｏｔａｌ  ｃａｌｏｒｉｃ  ｃｏｎｔｅｎｔ）（例えば、１日の総カロリー量）を含み得る。いくつかの実施形態では、本件の食事は、高脂肪食であり得る。かかる実施形態では、総カロリー量の少なくとも約５０％が脂肪に由来し得る。他のかかる実施形態では、総カロリー量の少なくとも約４０％、少なくとも約３０％、少なくとも約２５％、または少なくとも約２０％が脂肪に由来し得る。いくつかの実施形態では、高脂肪食を高炭水化物食、高糖類食、または高コレステロール食の１つまたは複数と組み合わせる場合、総カロリー量の少なくとも約１５％または少なくとも約１０％が脂肪に由来し得る。
【０３２０】
同様に、いくつかの実施形態では、食事は高炭水化物食であり得る。かかる実施形態では、総カロリー量の少なくとも約５０％が炭水化物に由来し得る。他のかかる実施形態では、総カロリー量の少なくとも約４０％、少なくとも約３０％、少なくとも約２５％、または少なくとも約２０％が炭水化物に由来し得る。いくつかの実施形態では、高炭水化物食を高脂肪食、高糖類食、または高コレステロール食の１つまたは複数と組み合わせる場合、総カロリー量の少なくとも約１５％または少なくとも約１０％が炭水化物に由来し得る。
【０３２１】
さらに、いくつかの実施形態では、食事は高糖類食であり得る。複数の実施形態では、総カロリー量の少なくとも約５０％が糖類に由来し得る。他のかかる実施形態では、総カロリー量の少なくとも約４０％、少なくとも約３０％、少なくとも約２５％、または少なくとも約２０％が糖類に由来し得る。いくつかの実施形態では、高糖類食を高脂肪食、高炭水化物食、または高コレステロール食の１つまたは複数と組み合わせる場合、総カロリー量の少なくとも約１５％または少なくとも約１０％が糖類に由来し得る。
【０３２２】
同様に、いくつかの実施形態では、食事は高コレステロール食であり得る。かかる実施形態では、食事は、少なくとも約１％のコレステロール（脂肪に対してｗｔ／ｗｔ）を含み得る。他のかかる実施形態では、食事は、少なくとも約０．５％、少なくとも約０．３％、少なくとも約０．１％、または少なくとも約０．０７％のコレステロール（脂肪に対してｗｔ／ｗｔ）を含み得る。いくつかの実施形態では、高コレステロール食を、高脂肪食、高炭水化物食、または高糖類食の１つまたは複数と組み合わせる場合、食事は、少なくとも約０．０５％または少なくとも約０．０３％のコレステロール（脂肪に対してｗｔ／ｗｔ）を含み得る。
【０３２３】
例として、高脂肪食には、例えば、精肉、乳製品、およびアルコール、場合により、加工食材、赤身の肉、炭酸飲料、菓子類、精製穀物、デザート類、および高脂肪乳製品が多い食事（例えば、カロリーの少なくとも２５％が脂肪に由来し、且つ少なくとも約８％が飽和脂肪に由来するか、カロリーの少なくとも約３０％が脂肪に由来し、且つ少なくとも約１０％が飽和脂肪に由来するか、カロリーの少なくとも約３４％が脂肪に由来し、且つ少なくとも約１２％が飽和脂肪に由来するか、カロリーの少なくとも約４２％が脂肪に由来し、且つ少なくとも約１５％が飽和脂肪に由来するか、カロリーの少なくとも約５０％が脂肪に由来し、且つ少なくとも約２０％が飽和脂肪に由来する）が含まれ得る。１つのかかる高脂肪食は、「洋食」であり、これは、先進工業国の食事（例えば、典型的な米国の食事、西欧諸国の食事、オーストラリアの食事、および／または日本の食事が含まれる）をいう。洋食の１つの特定の例は、少なくとも約１７％の脂肪および少なくとも約０．１％のコレステロール（ｗｔ／ｗｔ）を含むか、少なくとも約２１％の脂肪および少なくとも約０．１５％のコレステロール（ｗｔ／ｗｔ）を含むか、少なくとも約２５％の脂肪および少なくとも約０．２％のコレステロール（ｗｔ／ｗｔ）を含む。
【０３２４】
かかる高リスク食は、１つまたは複数の高リスク食材を含み得る。
【０３２５】
食材に関して考慮すると、一般に、本発明のいくつかの実施形態は、高炭水化物食材、高糖類食材、高脂肪食材、および／または高コレステロール食材の１つまたは複数の種々の組み合わせに関する。かかる食材を、本明細書中で一般に、「高リスク食材」（例えば、洋食の食材が含まれる）という。かかる食材は、対象患者の１つまたは複数の疾患（肥満関連疾患、インスリン関連疾患、および／またはコレステロール関連疾患が含まれる）のリスクプロフィールを高め得る。特に、かかる高リスク食材には、いくつかの実施形態では、高糖類食材、高脂肪食材、および／または高コレステロール食材の１つまたは複数と共に少なくとも１つの高炭水化物食材が含まれ得る。高リスク食材には、高脂肪食材および／または高コレステロール食材の一方または両方と組み合わせた高糖類食材も含まれ得る。高リスク食材には、高コレステロール食材と組み合わせた高脂肪食材も含まれ得る。いくつかの実施形態では、高リスク食材には、高炭水化物食材、高糖類食材、および高脂肪食材の組み合わせが含まれ得る。他の実施形態では、高リスク食材には、高炭水化物食材、高糖類食材、および高コレステロール食材が含まれ得る。他の実施形態では、高リスク食材には、高炭水化物食材、高脂肪食材、および高コレステロール食材が含まれ得る。さらなる実施形態では、高リスク食材には、高糖類食材、高脂肪食材、および高コレステロール食材が含まれ得る。いくつかの実施形態では、高リスク食材には、高炭水化物食材、高糖類食材、高脂肪食材、および高コレステロール食材が含まれ得る。
【０３２６】
したがって、食品組成物は、総カロリー量を有する食材を含み得る。いくつかの実施形態では、食材は高脂肪食材であり得る。かかる実施形態では、総カロリー量の少なくとも約５０％が脂肪に由来し得る。他のかかる実施形態では、総カロリー量の少なくとも約４０％、少なくとも約３０％、少なくとも約２５％、または少なくとも約２０％が脂肪に由来し得る。いくつかの実施形態では、高脂肪食材を高炭水化物食材、高糖類食材、または高コレステロール食材の１つまたは複数と組み合わせる場合、総カロリー量の少なくとも約１５％または少なくとも約１０％が脂肪に由来し得る。
【０３２７】
同様に、いくつかの実施形態では、食材は高炭水化物食材であり得る。かかる実施形態では、総カロリー量の少なくとも約５０％が炭水化物に由来し得る。他のかかる実施形態では、総カロリー量の少なくとも約４０％、少なくとも約３０％、少なくとも約２５％、または少なくとも約２０％が炭水化物に由来し得る。いくつかの実施形態では、高炭水化物食材を高脂肪食材、高糖類食材、または高コレステロール食材の１つまたは複数と組み合わせる場合、総カロリー量の少なくとも約１５％または少なくとも約１０％が炭水化物に由来し得る。
【０３２８】
さらに、いくつかの実施形態では、食材は、高糖類食材であり得る。かかる実施形態では、総カロリー量の少なくとも約５０％が糖類に由来し得る。他のかかる実施形態では、総カロリー量の少なくとも約４０％、少なくとも約３０％、少なくとも約２５％、または少なくとも約２０％が糖類に由来し得る。いくつかの実施形態では、高糖類食材を高脂肪食材、高炭水化物食材、または高コレステロール食材の１つまたは複数と組み合わせる場合、総カロリー量の少なくとも約１５％または少なくとも約１０％が糖類に由来し得る。
【０３２９】
同様に、いくつかの実施形態では、食材は高コレステロール食材であり得る。かかる実施形態では、食材は、少なくとも約１％のコレステロール（脂肪に対してｗｔ／ｗｔ）を含み得る。他のかかる実施形態では、食材は、少なくとも約０．５％、少なくとも約０．３％、少なくとも約０．１％、または少なくとも約０．０７％のコレステロール（脂肪に対してｗｔ／ｗｔ）を含み得る。いくつかの実施形態では、高コレステロール食材を高脂肪食材、高炭水化物食材、または高糖類食材の１つまたは複数と組み合わせる場合、食材は、少なくとも約０．０５％または少なくとも約０．０３％のコレステロール（脂肪に対してｗｔ／ｗｔ）を含み得る。
【０３３０】
上記のように、本発明の方法を、他の方法（例えば、インスリン関連疾患、体重関連疾患、および／またはコレステロール関連疾患（一般に、異常脂質血症が含まれる）、ならびにこれらの任意の組み合わせの治療に広範に関連する方法が含まれる）と共に有利に使用することができる。かかる疾患の態様を、以下に記載する。
【０３３１】
インスリン関連疾患の治療
本明細書中で使用される用語「インスリン関連障害」は、インスリンが体内で産生されず、そして／または適切に使用されない糖尿病などの疾患をいう。典型的には、空腹時血漿グルコース試験（ＦＰＧ）および／または経口耐糖能試験（ＯＧＴＴ）の使用によって、患者の前糖尿病または糖尿病を診断する。ＦＰＧ試験の場合、約１００ｍｇ／ｄＬと約１２５ｍｇ／ｄＬとの間の空腹時血糖値が前糖尿病を示し得る一方で、約１２６ｍｇ／ｄＬまたはそれを超える空腹時血糖値の患者は糖尿病を示し得る。ＯＧＴＴ試験の場合、患者の血糖値を、空腹時およびグルコースの多い飲料の飲用から２時間後に測定することができる。約１４０ｍｇ／ｄＬと約１９９ｍｇ／ｄＬとの間の２時間後の血糖値が前糖尿病を示し得る一方で、約２００ｍｇ／ｄＬまたはそれを超える２時間後の血糖値は糖尿病を示し得る。
【０３３２】
特定の実施形態では、本発明の内腔局在化ホスホリパーゼインヒビターにより、インスリン関連疾患（例えば、糖尿病、好ましくは２型糖尿病）の治療で利点が得られる。例えば、かかる利点には、インスリン感受性の増加および耐糖能の改善が含まれ得るが、これらに限定されない。他の利点には、空腹時血中インスリンレベルの減少、組織グルコースレベルの増加、および／またはインスリン刺激グルコース代謝の増加が含まれ得る。
【０３３３】
いかなる特定の仮説にも限定されないが、これらの利点は、ＰＬ  Ａ２活性の減少によって引き起こされる多数の影響（例えば、胃腸粘膜を通過するリン脂質の膜輸送の減少および／または１−アシルリゾリン脂質（１−アシルリゾホスファチジルコリンなど）産生の減少および／またはリゾリン脂質（１−アシルリゾホスファチジルコリンなど）輸送の減少が含まれる）（これらの物質は糖尿病または他のインスリン関連疾患に関与するその後の経路においてシグナル伝達分子として作用し得る）に起因し得る。
【０３３４】
いくつかの実施形態では、ホスホリパーゼＡ２を阻害するが、ホスホリパーゼＢを阻害しないか、有意に阻害しないか、本質的に阻害しない内腔局在化ホスホリパーゼインヒビターを使用する。いくつかの実施形態では、ホスホリパーゼインヒビターは、ホスホリパーゼＡ２を阻害するが、他の胃腸ホスホリパーゼを阻害しない（ホスホリパーゼＡ１を阻害しないか、有意に阻害しないか、本質的に阻害しないことおよびホスホリパーゼを阻害しないか、有意に阻害しないか、本質的に阻害しないことが含まれる）。
【０３３５】
体重関連疾患の治療
本明細書中で使用される用語「体重関連疾患」は、望ましくない体重増加（過体重が含まれる）、肥満、および／または高脂血性疾患（ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉｃ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ）、特に、高脂肪食または洋食に起因する体重増加をいう。典型的には、個体が過体重および／または肥満であるかどうかを決定するための基準として体格指数（ＢＭＩ）を使用する。成人は、例えば、少なくとも約２５の体格指数で過体重と見なされ、少なくとも約３０のＢＭＩで肥満と見なされる。小児では、年齢別の体格指数チャートを使用し、ＢＭＩが約８５パーセンタイルを超える場合に「過体重のリスクあり」と見なされ、ＢＭＩが約９５パーセンタイルを超える場合に「肥満」と見なされる。
【０３３６】
特定の実施形態では、本発明の内腔局在化ホスホリパーゼＡ２インヒビターを使用して、体重関連疾患（望ましくない体重増加および／または肥満が含まれる）を治療することができる。特定の実施形態では、内腔局在化ホスホリパーゼＡ２インヒビターは、洋食に特有の食事の後の脂肪吸収を減少させる。特定の実施形態では、内腔局在化ホスホリパーゼＡ２インヒビターは、洋食時の被験体からの脂質の排出を増加させる。特定の好ましい実施形態では、ホスホリパーゼインヒビターは、（典型的な）洋食時の被験体の体重増加を減少させる。特定の実施形態では、本発明の実施により、特定の組織および器官の体重増加を優先的に減少させることができる（例えば、いくつかの実施形態では、ホスホリパーゼＡ２インヒビターは、洋食時の被験体の白色脂肪の体重増加を減少させることができる）。
【０３３７】
いかなる特定の仮説にも限定されないが、これらの利点は、ＰＬ  Ａ２活性の減少によって引き起こされる多数の影響に起因し得る。例えば、ＰＬ  Ａ２活性の阻害により、胃腸内腔を介した（例えば、小腸先端膜を介した）リン脂質輸送が減少し得、これは、特に高脂肪食を与えた哺乳動物における腸細胞中のリン脂質（例えば、ホスファチジルコリン）プールの枯渇を引き起こす。かかる場合、リン脂質のｄｅ  ｎｏｖｏ合成は、例えば、カイロミクロン中での輸送によってトリグリセリドの輸送に必要なリン脂質（例えば、ホスファチジルコリン）の高代謝回転を維持するのに十分ではないかもしれない（Ｔｓｏ，ｉｎ  Ｆａｔ  Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ，１９８６，ｃｈａｐｔ．６  １７７−１９５，Ｋｕｋｓｉｓ  Ａ．，Ｅｄ．（本明細書中に参考として組み込まれている）を参照のこと）。
【０３３８】
ＰＬ  Ａ２阻害はまた、脂肪吸収のその後の上方制御経路（例えば、さらなる消化酵素またはホルモン（例えば、セクレチン）の放出が含まれる）においてシグナル伝達分子として作用し得る１−アシルリゾリン脂質（１−アシルリゾホスファチジルコリンなど）の産生を減少させることができる。Ｈｕｇｇｉｎｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｇａｉｎｓｔ  ｄｉｅｔ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  ｏｂｅｓｉｔｙ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  Ｇｒｏｕｐ  １Ｂ−ＰＬ  Ａ２−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  ｍｉｃｅ，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．２８３：Ｅ９９４−Ｅ１００１（２００２）（本明細書中に参考として組み込まれている）を参照のこと。
【０３３９】
本発明の別の態様は、体重増加による食事誘導性糖尿病の発症を減少または遅延させるための組成物、キット、および方法を提供する。無検査の高脂肪食は、体重増加を引き起こし得るだけでなく、糖尿病性インスリン抵抗性に寄与し得る。この抵抗性を、被験体中のインスリンおよびレプチンレベルの減少によって認識することができる。本明細書中に開示のホスホリパーゼインヒビター、組成物、キット、および方法を、食事誘導性糖尿病または他のインスリン関連疾患の予防的処置（例えば、洋食時の被験体におけるインスリンおよび／またはレプチンレベルの減少）に使用することができる。
【０３４０】
いくつかの実施形態では、ホスホリパーゼＡ２を阻害するが、ホスホリパーゼＢを阻害しないか、有意に阻害しないか、本質的に阻害しない内腔局在化ホスホリパーゼインヒビターを使用する。いくつかの実施形態では、ホスホリパーゼインヒビターは、ホスホリパーゼＡ２を阻害するが、他の胃腸ホスホリパーゼを阻害しない（ホスホリパーゼＡ１を阻害しないか、有意に阻害しないか、本質的に阻害しないことおよびホスホリパーゼＢを阻害しないか、有意に阻害しないか、本質的に阻害しないことが含まれる）。
【０３４１】
コレステロール関連疾患の治療
本明細書中で用いる用語「コレステロール関連疾患」とは、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の活性の調整が望ましく、および／またはＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の１以上の産物の産生および／または効果の調整が望ましい疾患をいう。好ましい実施形態において、本発明のホスホリパーゼインヒビターはＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の活性を低下させ、および／またはＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の１以上の産物の産生および／または効果を低下させる。例えば、コレステロール関連疾患はコレステロール、特に、血漿中の非ＨＤＬコレステロールレベルの上昇（例えば、ＬＤＬコレステロールレベルの上昇および／またはＶＬＤＬ／ＬＤＬレベルの上昇）を含むことができる。典型的には、患者は多数の基準に基づいて高いまたは上昇したコレステロールレベルを有すると考えられる。例えば、本明細書中に参考として組み込まれている、Ｐｅａｒｌｍａｎ  ＢＬ，Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ，Ｐｏｓｔｇｒａｄ  Ｍｅｄ．，２００２；１１２（２）；１３−２６参照。ガイドラインはＨＤＬレベルと比較したＬＤＬのような血清脂質プロフィールを含む。
【０３４２】
コレステロール関連疾患の例には、高コレステロール血症、脂質障害（高脂血症など）アテローム発生および心血管疾患のその続発症（アテローム性動脈硬化症が含まれる）、他の血管炎症状態、心筋梗塞、虚血性卒中、閉塞性卒中、および末梢血管疾患、ならびにコレステロールの減少が有益であり得る他の疾患が含まれる。本発明の組成物、キット、および方法を使用して治療可能な他のコレステロール関連疾患には、現在スタチンを使用して治療されている疾患ならびにコレステロール吸収の減少によって利点を得ることができる他の疾患が含まれる。
【０３４３】
ある実施形態において、本発明の内腔局在化ホスホリパーゼインヒビターを用いて、例えば、コレステロール吸収を低下させることによって、コレステロールレベル、特に非ＨＤＬ血漿コレステロールレベルを低下させることができる。いくつかの好ましい実施形態において、組成物はホスホリパーゼＡ２、および好ましくはホスホリパーゼＢのような、またホスホリパーゼＡ１、ホスホリパーゼＣ、および／またはホスホリパーゼＤのような、ホスホリパーゼＡ２に加えて少なくとも１つの他の胃腸ホスホリパーゼを阻害する。
【０３４４】
本発明の他の実施形態では、ホスホリパーゼの差分活性を使用して、他のホスホリパーゼの阻害に起因する望ましくない副作用を起こすことなく一定のホスホリパーゼ関連疾患を治療することができる。例えば、特定の実施形態では、ＰＬ  Ａ２を阻害するが、例えば、ＰＬＡ１、ＰＬＢ、ＰＬＣ、またはＰＬＤを阻害しないか、有意に阻害しないか、本質的に阻害しないホスホリパーゼインヒビターを使用して、ホスホリパーゼ阻害治療を受けた被験体（例えば、高脂肪食の被験体の場合）のコレステロール吸収に影響を与えないか、有意に影響を与えないか、本質的に影響を与えないで、インスリン関連疾患（例えば、糖尿病）および／または体重関連疾患（例えば、肥満）を治療することができる。
【０３４５】
特に興味深い他のコレステロール関連疾患には、異常脂質血症性疾患（高トリグリセリド血症など）が含まれる。肝臓トリグリセリド合成は、利用可能な脂肪酸、グリコーゲン貯蔵、およびインスリン−グルカゴン比によって調整される。高グルコース食を摂取した患者（例えば、高炭水化物食または高糖類食を摂取した患者および／または典型的にかかる食事を消費することが公知の集団中の患者が含まれる）は、過剰なインスリンを維持し、グリコーゲン貯蔵も構築するようなホルモンのバランスを有する可能性が高く、これらの両方により、肝臓トリグリセリド合成が増強される。さらに、糖尿病患者は特に感受性が高く、これは、糖尿病患者がしばしば過体重であり、且つカロリー過多の状態であるからである。したがって、本発明は、本明細書中に記載の各実施形態では、高トリグリセリド血症に関する治療に特に重要である。
【０３４６】
特許請求の範囲に明確に引用されていない理論に拘束されないが、本発明のホスホリパーゼＡ２インヒビターは、１つを超える機械的経路を介してトリグリセリドおよびコレステロールを調整することができる。例えば、本発明のホスホリパーゼＡ２インヒビターは、胃腸管からのコレステロール吸収およびトリグリセリド吸収を調整することができ、例えば、直接および／またはインスリンなどの他のホルモンと併せて操作されるリゾホスファチジルコリン（ホスファチジルコリンのＰＬＡ２触媒加水分解の反応生成物）などのシグナル伝達分子を介して脂肪およびグルコースの代謝を調整することもできる。かかる代謝調整は、高脂肪／高二糖類食または高脂肪／高炭水化物食における患者の血清コレステロールおよびトリグリセリドレベルに直接影響を及ぼし得る。ＶＬＤＬは、肝臓から周辺組織への内因性循環のために肝臓に含まれるリポタンパク質である。ＶＬＤＬは、その周囲のアポリポタンパク質Ｂ１００、Ｃ１、ＣＩＩ、ＣＩＩＩ、およびＥに沿ったコアにトリグリセリド、コレステロール、およびホスホリパーゼを含む。トリグリセリドはＶＬＤＬの半分を超える重量で構成され、ＶＬＤＬのサイズを、トリグリセリドの量によって決定する。非常に巨大なＶＬＤＬは、過剰なトリグリセリドが存在するので、カロリー過剰状態でアルコール消費後の真性糖尿病の肝臓によって分泌される。そのようなものとして、ホスホリパーゼＡ２活性の阻害は、代謝（例えば、肝臓トリグリセリド合成が含まれる）に影響を及ぼし得る。トリグリセリド合成の調整（例えば、増加の減少または少なくとも相対的減少）は、血清トリグリセリドレベルおよび／または血清コレステロールレベルの調整の基礎を提供することができ、さらに、高トリグリセリド血症および／または高コレステロール血症の治療の基礎を提供することができる。かかる治療は、糖尿病患者（典型的には、その炭水化物制限を脂肪がより高い食事に置換する患者）および高トリグリセリド血症患者（典型的には、脂肪を高炭水化物食に置換する患者）の両方に有益であろう。これに関して、タンパク質の増加した食事のみでは、通常、ほとんどの糖尿病患者および／または高トリグリセリド血症患者を長期間維持できない。
【０３４７】
さらに、血清トリグリセリドレベルの調整は、アテローム性動脈硬化症などの心血管疾患に有利な影響を及ぼし得る。肝臓に含まれて肝臓から循環に放出されるＶＬＤＬ中に含まれるトリグリセリドは、リポタンパク質リパーゼによって加水分解され、その結果、ＶＬＤＬはＶＬＤＬ残留物（＝ＩＤＬ）に変換される。ＶＬＤＬ残留物は、肝臓に入るか（巨大なものは優先的に肝臓に入る）、ＬＤＬを生じ得る。したがって、循環中のＶＬＤＬの上昇によってＨＤＬが低下し、これが逆コレステロール輸送を担う。高トリグリセリド血症がＬＤＬレベルの上昇に寄与し、ＨＤＬレベルの低下にも寄与するので、高トリグリセリド血症は、アテローム性動脈硬化症および冠状動脈疾患などの心血管疾患（特に、上記）の危険因子である。したがって、本発明のホスホリパーゼ−Ａ２インヒビターを使用した高トリグリセリド血症の調整により、かかる心血管疾患の治療の基礎も得られる。
【０３４８】
本明細書中に開示のホスホリパーゼインヒビター、方法、およびキットを、ホスホリパーゼ関連疾患の治療に使用することができる。いくつかの好ましい実施形態では、これらの影響を、被験体の食事および／または活動を変化させることなく実現することができる。例えば、胃腸内腔中のＰＬ  Ａ２の活性を阻害して、被験体がＰＬ  Ａ２阻害治療を受けていない場合と比較して、洋食を摂取した被験体の脂肪吸収を減少させ、そして／または体重増加を低下させることができる。より好ましくは、この減少および／または低下は、被験体のエネルギー消費および／または食物摂取を変化させないか、有意に変化させないか、本質的に変化させないか、被験体の体温を変化させないか、有意に変化させないか、本質的に変化させないで起こる。さらに、好ましい実施形態では、本発明のホスホリパーゼインヒビターを使用して、非高脂肪食の通常の代謝態様に影響を及ぼすことなく高脂肪食の一定の負の欠陥を相殺することができる。
【０３４９】
本発明はまた、ホスホリパーゼ関連疾患、好ましくは、食事によって誘導されるホスホリパーゼＡ２関連疾患またはホスホリパーゼ関連疾患（インスリン関連疾患（例えば、糖尿病、特に２型糖尿病）、体重関連疾患（例えば、肥満）および／またはコレステロール関連疾患が含まれるが、これらに限定されない）を治療するために使用することができるキットを含む。これらのキットは、少なくとも１つの本発明の組成物および本明細書中に記載の種々の方法にしたがったキットの使用を教示する説明書を含む。
【０３５０】
縮合５員環および６員環を含むインヒビターを使用した治療
いくつかの好ましい実施形態において、５員環の環構造内で、６員環の環構造内で、または５員および６員環のそれぞれの環構造内で置換された、縮合した５員環および６員環、好ましくは１以上のヘテロ原子（例えば、窒素、酸素）を有する縮合した５員環および６員環を有する置換された有機化合物を含む、またはそれに由来する有機低分子ホスホリパーゼインヒビターまたは阻害部分を含む内腔局在化インヒビターを用いて、ホスホリパーゼ関連疾患を治療することができる（特に、高脂肪食を消費し、従って、肥満、糖尿病、インスリン抵抗性、および耐糖能障害のような食事誘導性疾患の危険性がある集団に多い食事関連疾患）。それぞれの場合において、阻害部分は、ホスホリパーゼ阻害機能性を該部分に付与するのに効果的な置換基を含むことができる。阻害部分は、ポリマー部分に直接的にまたは間接的に連結させるための機能性を有する置換基を含むこともできる。特に好ましい実施形態において、ホスホリパーゼ関連疾患は、置換インドール部分のようなインドール部分を含むホスホリパーゼインヒビターまたは阻害部分を用いて治療することができる。そのような低分子インヒビターまたは阻害部分は、ホスホリパーゼ関連疾患の治療において特に効果的であることが判明している（例えば、Ｂｕｙｓｓｅらによって２００５年５月３日に出願された「Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｄｉｅｔ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ−Ａ２  Ｉｎｈｉｖｉｔｏｒｓ  Ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ  Ｉｎｄｏｌｅｓ  ａｎｄ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」の表題のＰＣＴ出願番号ＵＳ／２００５／０１５４１６参照；また、Ｃｈａｒｍｏｔらによって２００５年５月３日に出願された「Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ，Ｈｙｐｅｒｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｍｉａ  ａｎｄ  Ｃａｒｄｏｖａｓｃｕｌａｒ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ−Ａ２  Ｉｎｈｉｖｉｔｏｒｓ」の表題のＰＣＴ出願番号ＵＳ／２００５／０１５２８１参照；そのそれぞれが本明細書中に参考として組み込まれている）。
【０３５１】
インヒビターの処方、投与経路、および有効量
本発明で有用なホスホリパーゼインヒビターまたはその薬学的に許容可能な塩を、多数の投与経路または投与様式を使用して患者に送達することができる。用語「薬学的に許容可能な塩」は、本発明で使用した化合物の生物学的有効性および性質を保持し、且つ生物学的または他の点で望ましくないわけではない塩を意味する。かかる塩には、無機酸または有機酸（塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸、硫酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酢酸、フマル酸、コハク酸、乳酸、マンデル酸、リンゴ酸、クエン酸、酒石酸、またはマレイン酸）との塩が含まれる。さらに、本発明で使用される化合物がカルボキシル基または他の酸性基を含む場合、化合物を、無機塩基または有機塩基との薬学的に許容可能な付加塩に変換することができる。適切な塩基の例には、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア、シクロヘキシルアミン、ジシクロヘキシル−アミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、およびトリエタノールアミンが含まれる。
【０３５２】
必要であるか望ましい場合、ホスホリパーゼインヒビターを、１つまたは複数の他の治療薬と組み合わせて投与することができる。本発明の組成物と同時投与することができる治療薬の選択は、治療される疾患に一部依存するであろう。例えば、肥満または他の体重関連疾患の治療のために、本発明のいくつかの実施形態のホスホリパーゼインヒビターを、スタチン、フィブラート、胆汁酸結合剤、エゼチミブ（ｅｚｉｔｉｍｉｂｅ）（例えば、Ｚｅｔｉａなど）、サポニン、リパーゼインヒビター（例えば、Ｏｒｌｉｓｔａｔなど）、および／または食欲減衰薬などと組み合わせて使用することができる。インスリン関連疾患（例えば、糖尿病）の治療に関して、本発明のいくつかの実施形態のホスホリパーゼインヒビターを、ビグアニド（例えば、Ｍｅｔｆｏｒｍｉｎ）、チアゾリジンジオン、および／またはα−グルコシダーゼインヒビターなどと組み合わせて使用することができる。
【０３５３】
ホスホリパーゼインヒビター（またはその薬学的に許容可能な塩）自体を投与するか、活性化合物が１つまたは複数の薬学的に許容可能なキャリア、賦形剤、または希釈剤との混合物である医薬組成物の形態で投与することができる。本発明に従って使用するための医薬組成物を、薬学的に使用することができる調製物への活性化合物の処理を容易にする賦形剤および助剤を含む１つまたは複数の生理学的に許容可能なキャリアを使用した従来の様式で処方することができる。適切な処方物は、選択した投与経路に依存する。
【０３５４】
ホスホリパーゼインヒビターを、直接配置（ｄｉｒｅｃｔ  ｐｌａｃｅｍｅｎｔ）、経口、および／または直腸に投与することができる。好ましくは、ホスホリパーゼインヒビターまたはホスホリパーゼインヒビターを含む医薬組成物を、経口投与する。ホスホリパーゼインヒビターを投与する経口形態には、粉末、錠剤、カプセル、溶液、または乳濁液が含まれ得る。有効量を、単回用量または適切な時間間隔（数時間など）に分割した一連の用量で投与することができる。
【０３５５】
経口投与のために、化合物を、活性化合物と当該分野で周知の薬学的に許容可能なキャリアとの組み合わせによって容易に処方することができる。かかるキャリアは、本発明の化合物を、治療すべき患者による経口摂取のための錠剤、丸薬、ドラジェ、カプセル、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液、およびウェハースなどとして処方することができる。いくつかの実施形態では、インヒビターを、徐放性調製物として処方することができる。経口用の薬学的調製物を、固体賦形剤として得ることができ、任意選択的に粉砕して混合物にし、顆粒の混合物を処理し、必要に応じて適切な助剤を添加して、錠剤またはドラジェコアを得ることができる。適切な賦形剤は、特に、糖（ラクトース、スクロース、マンニトール、またはソルビトールが含まれる）；セルロース調製物（例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、イネデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）など）などの充填剤である。必要に応じて、崩壊剤（架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはその塩（アルギン酸ナトリウムなど）など）を添加することができる。
【０３５６】
ドラジェコアを、適切なコーティングを使用して得ることができる。この目的のために、濃縮糖液を使用することができ、これは、任意選択的に、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタン、ラッカー液、および適切な有機溶媒または溶媒混合物を含み得る。活性化合物用量の異なる組み合わせを識別する、または特徴づけるために、染料および色素を錠剤またはドラジェコーティングに添加することができる。いくつかの実施形態では、経口処方物は、腸溶コーティングを含まない。
【０３５７】
経口で使用することができる薬学的調製物には、ゼラチンでできた押し込み式のカプセルならびにゼラチンおよび可塑剤（グリセロールまたはソルビトールなど）でできた密閉軟カプセルが含まれる。押し込み式カプセルは、ラクトースなどの充填剤、デンプンなどの結合剤、および／またはタルクまたはステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、ならびに、任意選択的に、安定剤と混合した有効成分を含み得る。軟カプセルでは、活性化合物を、適切な液体（脂肪油、流動パラフィン、または液体ポリエチレングリコールなど）に溶解するか懸濁することができる。さらに、安定剤を添加することができる。経口投与のための全処方物は、投与に適切な投薬量でなくてはならない。
【０３５８】
経口投与および非経口投与のための液体投薬形態の処方で使用される適切なキャリアには、非水性の薬学的に許容可能な極性溶媒（炭化水素、アルコール、アミド、オイル、エステル、エーテル、ケトン、および／またはその混合物など）、ならびに水、生理食塩水、電解質溶液、デキストロース溶液（例えば、ＤＷ５）、および／または任意の他の水性の薬学的に許容可能な液体が含まれる。
【０３５９】
適切な非水性の薬学的に許容可能な極性溶媒には、以下が含まれるが、これらに限定されない：アルコール（例えば、２〜３０個の炭素原子を有する脂肪族または芳香族アルコール（メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ｔ−ブタノール、ヘキサノール、オクタノール、ベンジルアルコール、アミレン水和物、グリセリン（グリセロール）、グリコール、ヘキシレングリコール、ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、テトラヒドロフルフリルアルコール、脂肪アルコールの脂肪酸エステル（ポリアルキレングリコール（例えば、ポリエチレングリコールおよび／またはポリプロピレングリコールなど）、ソルビタン、コレステロール、およびスクロースなど）；アミド（例えば、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ベンジルベンゾアートＤＭＡ、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドアミド、２−ピロリジノン、ポリビニルピロリドン、および１−メチル−２−ピロリジノンなど）；エステル（例えば、２−ピロリジノン、１−メチル−２−ピロリジノン、および酢酸エステル（モノアセチン、ジアセチン、およびトリアセチンなど）、脂肪族または芳香族エステル（ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、アルキルオレアート、カプリル酸エチル、安息香酸エチル、酢酸エチル、オクタノアート、安息香酸ベンジル、酢酸ベンジル、グリセリンのエステル（クエン酸または酒石酸モノ、ジ、トリグリセリルなど）、炭酸エチル、オレイン酸エチル、乳酸エチル、Ｎ−メチルピロリジノンなど）、脂肪酸エステル（ミリスチン酸イソプロピル、ソルビタンの脂肪酸エステル、モノステアリン酸グリセリルなど）グリセリドエステル（モノ、ジ、トリグリセリドなど）、脂肪酸由来ＰＥＧエステル（ＰＥＧ−ヒドロキシステアラートおよびＰＥＧ−ヒドロキシオレアートなど）、プルロニック６０、ポリオキシエチレンソルビトールオレイン酸ポリエステル、ポリオキシエチレンソルビタンエステル（ポリオキシエチレン−ソルビタンモノオレアート、ポリオキシエチレン−ソルビタンモノステアラート、ポリオキシエチレン−ソルビタンモノラウラート、ポリオキシエチレン−ソルビタンモノパルミタートなど）、アルキレンオキシ修飾脂肪酸エステル（ポリオキシル４０硬化ヒマシ油およびポリオキシエチル化ヒマシ油など）、糖脂肪酸エステル（すなわち、単糖類、二糖類、または少糖類の脂肪酸との縮合生成物）（例えば、飽和脂肪酸（カプリル酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、カプリン酸、ラウリン酸、およびステアリン酸など）および不飽和脂肪酸（パルミトオレイン酸、オレイン酸、エライジン酸、エルカ酸、およびリノール酸など））、またはステロイダルエステルなど）；アルキル、アリール、または環状エーテル（例えば、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、およびジメチルイソソルビドなど）；グリコフロール（テトラヒドロフルフリルアルコールポリエチレングリコールエーテル）；ケトン（例えば、アセトン、メチルイソブチルケトン、およびメチルエチルケトンなど）；脂肪族、脂環式、または芳香族炭化水素（例えば、ベンゼン、シクロヘキサン、ジクロロメタン、ジオキソラン、ヘキサン、ｎ−ヘキサン、ｎ−デカン、ｎ−ドデカン、スルホラン、テトラメチレンスルホキシド、テトラメチレンスルホン、トルエン、テトラメチレンスルホキシド、およびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）など）；鉱物油、動物油、植物油、精油、または合成油（例えば、鉱物油（精製パラフィン油、脂肪族またはワックスベースの炭化水素、脂肪族炭化水素、ならびに混合脂肪族および芳香族炭化水素など）、植物油（リンシード油、ダイズ油、ヒマシ油、ナタネ油、ココナッツ油、キリ油、ベニバナ油、綿実油、ラッカセイ油、ヤシ油、オリーブ油、トウモロコシ油、トウモロコシ胚芽油、ゴマ油、杏仁油、およびラッカセイ油など）など）、ならびにグリセリド（モノ、ジ、またはトリグリセリドなど）、動物油（タラ肝油、ハリバーオイル（ｈａｌｉｖｅｒ）、魚油（ｆｉｓｈ）、魚油（ｍａｒｉｎｅ）、精子、スクアレン、スクアラン、ポリオキシエチル化ヒマシ油、サメ肝油、およびオレイン酸油など）；アルキルまたはアリールハライド（例えば、塩化メチレン）；モノエタノールアミン；トロラミン；石油ベンジン；ω−３多価不飽和脂肪酸（例えば、α−リノレン酸、ドコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、およびエイコサペンタエン酸）；１２−ヒドロキシステアリン酸のポリグリコールエステル；ポリエチレングリコール；およびポリオキシエチレングリセロールなど。
【０３６０】
例えば、直接配置のために本発明のホスホリパーゼインヒビターの医薬組成物の処方に使用することができる他の薬学的に許容可能な溶媒は、当業者に周知である（例えば、Ｍｏｄｅｒｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，（Ｇ．Ｂａｎｋｅｒら，ｅｄｓ．，３ｄ  ｅｄ．）（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９９５），Ｔｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．；Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，（Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ，ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ），Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｄ．，１９ｔｈ  ｅｄ．）（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９９５），Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，（Ｈ．Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら，ｅｄｓ．，）（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９８０）；およびＴｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ  ２４，Ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ  １９，（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，２０００を参照のこと）。
【０３６１】
直腸投与のための処方物を、胃腸管（例えば、小腸）へのホスホリパーゼインヒビターの放出のための座剤、軟膏、腸溶剤、錠剤、またはクリームの形態で調製することができる。直腸用座剤を、１つまたは複数の本発明のホスホリパーゼインヒビターまたはその薬学的に許容可能な塩と許容可能なビヒクル（例えば、ココアバター）（融点を変化させるためのワックスを添加するか添加しない）との混合によって作製することができる。許容可能なビヒクルには、通常の保存温度で固体であり、体内（直腸など）でホスホリパーゼインヒビターを放出するのに適切な温度で液体であるグリセリン、サリチル酸塩、および／またはポリエチレングリコールも含まれ得る。軟ゼラチン型の直腸処方物および座剤にオイルを使用することもできる。水溶性座剤基剤（種々の分子量のポリエチレングリコールなど）も使用することができる。水、生理食塩水、水性デキストロースおよび関連糖溶液、グリセロール、懸濁剤（ペクチン、カルボマー、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、またはカルボキシメチルセルロースなど）、ならびに緩衝液および防腐剤を使用する懸濁処方物を調製することができる。
【０３６２】
本発明での使用に適切な医薬組成物には、有効成分が有効量（すなわち、少なくとも１つの治療される疾患において治療的利点および／または予防的利点を得るのに十分な量）で存在する組成物が含まれる。特定の適用のための実際の有効量は、治療される疾患および投与経路に依存するであろう。有効量の決定は、特に、本明細書中の開示を考慮して、十分に当業者の能力の範囲内である。例えば、上記の表１に示したＩＣ５０値および範囲は、当業者が対応するホスホリパーゼ阻害部分の有効な投薬量を選択するためのガイダンスを提供する。
【０３６３】
ホスホリパーゼインヒビターに関する場合の有効量は、一般に、医学または薬学分野の種々の規制機関または諮問機関（例えば、ＦＤＡ、ＡＭＡ）または製造者もしくは供給者のいずれかによって推薦または承認されている投与範囲、投与様式、処方などを意味するであろう。ホスホリパーゼインヒビターの有効量を、例えば、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅに見出すことができる。ホスホリパーゼ関連疾患（インスリン関連疾患（例えば、糖尿病），体重関連疾患（例えば、肥満）および／またはコレステロール関連疾患など）の治療で利点を得ることに言及する場合の有効量は、一般に、医学または薬学分野の種々の規制機関または諮問機関（例えば、ＦＤＡ、ＡＭＡ）または製造者もしくは供給者のいずれかによって推薦または承認された臨床結果を達成するレベルを意味するであろう。
【０３６４】
当業者は、当該分野で公知の技術を使用して、ホスホリパーゼインヒビターの有効量を決定することができる。本発明では、胃腸内腔に局在したホスホリパーゼインヒビターの有効量は、かかる局在の非存在下での投与量よりも少なくてよい。ホスホリパーゼインヒビターの投与量の少しの減少でさえ、本発明に有用と見なされる。ホスホリパーゼインヒビターの有効量の有意な減少または統計的に有意な減少が特に好ましい。本発明のいくつかの実施形態では、ホスホリパーゼインヒビターは、ホスホリパーゼ活性を、非内腔局在化インヒビターと比較してより広い範囲で減少させる。ホスホリパーゼインヒビターの内腔局在化により、ホスホリパーゼ関連疾患（インスリン関連疾患（例えば、糖尿病），体重関連疾患（例えば、肥満）、および／またはコレステロール関連疾患など）の治療に必要な有効量を、約５〜約９５％減少させることができる。ホスホリパーゼインヒビターの使用量は、推奨投薬量と同一であるか、この用量より高いか、推奨用量より低くてよい。
【０３６５】
いくつかの実施形態では、ホスホリパーゼインヒビターの推奨投薬量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日と約１，０００ｍｇ／ｋｇ／日との間である。ヒトのための有効量を、動物モデルから決定することができる。例えば、動物（例えば、マウスモデル）に有効であることが見出された循環および／または胃腸濃度（以下のサンプル中に記載の濃度など）が達成されるようにヒトのための用量を処方することができる。
【０３６６】
当業者は、ホスホリパーゼ産物（例えば、リゾホスファチジルコリン（ＬＰＣ）（ＰＬ  Ａ２の産物））の量の測定によってホスホリパーゼ阻害を決定することができる。ＬＰＣ量を、例えば、食事後の小腸レベル、リンパレベル、および／または血清レベルの測定によって決定することができる。ホスホリパーゼ阻害量の別の決定技術は、胃腸管から流動物サンプルを直接採取することを含む。当業者は、例えば、血清コレステロールおよび／またはトリグリセリドレベルのモニタリングによって患者における本発明のホスホリパーゼインヒビターの影響をモニタリングすることもできるであろう。他の技術が当業者に明らかであろう。ホスホリパーゼ阻害の測定および／またはいくつかの実施形態のホスホリパーゼインヒビターの影響の証明のための他のアプローチを、以下の実施例にさらに例示する。
【実施例】
【０３６７】
実施例１Ａ：ＩＬＹ−４００１［２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸］の合成
本実施例は、ホスホリパーゼインヒビターまたは阻害部分として使用するための化合物を合成した。具体的には、図７に示す化合物２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸を合成した。本化合物を、ＩＬＹ−４００１としてこれらの実施形態で示し、あるいは、本明細書中でメチルインドキサムという。
【０３６８】
ＩＬＹ−４００１の全合成スキームを概説している図７を参照する。図７に示す各化合物の下の数字は、以下の実験の説明中の各化合物の化学名に関連した括弧内の数字に対応する。
【０３６９】
２−メチル−３−メトキシアニリン（２）［０４−０３５−１１］。撹拌した冷却（約５℃）ヒドラジン水和物（１５９．７ｇ、３．１９ｍｏｌ）に、１０〜２０℃の８５％ギ酸（１７２．８ｇ、３．１９ｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を、亜鉛粉（１０４．３ｇ、１．５９５ｍｏｌ）を含む２−メチル−３−ニトロアニソール（１）（５３．３４ｇ、０．３１９ｍｏｌ）のメタノール溶液（１０００ｍＬ）の撹拌懸濁液に滴下した。発熱反応が起こった。添加完了後、反応混合物をさらに２時間（温度が６１℃から室温に低下するまで）撹拌し、沈殿物を濾過して取り出し、メタノール（３×１５０ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧濃縮して、約２５０ｍＬの体積にした。残渣を、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）およびＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（５００ｍＬ）で処理した。水相を分離して取り出し、破棄した。有機相を水（３００ｍＬ）で洗浄し、１Ｎ  ＨＣｌ（８００ｍＬ）で抽出した。酸性抽出物を、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で洗浄し、Ｋ２ＣＯ３（９０ｇ）で塩基性にした。遊離塩基２をＥｔＯＡｃ（３×２００ｍＬ）で抽出し、合わせた抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させた。濾過および濾液からの溶媒の除去後、赤色油として生成物２を得て、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。収率：４２．０ｇ（９６％）。
【０３７０】
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−２−メチル−３−メトキシアニリン（３）［０４−０３５−１２］。アミン２（４２．５８ｇ、０．３１ｍｏｌ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナート（６５．４８ｇ、０．３０ｍｏｌ）を含むＴＨＦ（３００ｍＬ）の撹拌溶液を加熱して、還流を４時間保持した。室温に冷却後、反応混合物を減圧濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）に溶解した。得られた溶液を、０．５Ｍクエン酸（２×１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（２００ｍＬ）、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。濾過および濾液からの溶媒の除去後、残渣（赤色油、７３．６ｇ）をヘキサン（５００ｍＬ）に溶解し、シリカゲルのパッド（ＴＬＣ用）で濾過した。濾液を減圧下で蒸発させて、黄色固体としてＮ−Ｂｏｃアニリン３を得た。収率：６８．１ｇ（９６％）。
【０３７１】
４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（５）［０４−０３５−１３］。Ｎ−Ｂｏｃアニリン３（５８．１４ｇ、０．２４５ｍｏｌ）を含む無水ＴＨＦ（４００ｍＬ）の撹拌した冷却（−５０℃）溶液に、−４８〜−５０℃の１．４Ｍのｓｅｃ−ＢｕＬｉを含むシクロヘキサン（０．４９１ｍｏｌ、３５０．７ｍＬ）溶液を滴下し、反応混合物を−２０℃に加温した。−６０℃への冷却後、−５７〜−６０℃のＮ−メトキシ−Ｎ−メチルアセトアミド（２５．３０ｇ、０．２４５ｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を−６０℃で１時間撹拌し、１５℃まで１時間加温した。−１５℃への冷却後、２Ｎ  ＨＣｌ（２４５ｍＬ）で反応を停止させ、得られた混合物を、２Ｎ  ＨＣｌで約ｐＨ７に調整した。有機相を分離して取り出し、確保した。水相をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機溶液を減圧濃縮し、残存する青白い油をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）に溶解し、ＥｔＯＡｃ抽出物と合わせた。得られた溶液を、水（２×２００ｍＬ）、０．５Ｍクエン酸（１００ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（１００ｍＬ）、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。濾過および濾液からの溶媒の除去後、青白い油として出発物質であるＮ−Ｂｏｃアニリン３と中間体であるケトン４との混合物（約１：１ｍｏｌ／ｍｏｌ）を得た（６７．０５ｇ）。
【０３７２】
得られた油を無水ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）に溶解し、溶液を０〜−５℃に冷却した。トリフルオロ酢酸（６５ｍＬ）を滴下し、反応混合物を室温まで加温した。１６時間の撹拌後、さらなるトリフルオロ酢酸部分（３５ｍＬ）を添加し、１６時間撹拌し続けた。反応混合物を減圧濃縮し、赤色油状の残渣をＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）に溶解した。得られた溶液を水（３×２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。シリカゲル６０パッドでの濾過および減圧下での濾液の蒸発により、黄色固体として粗生成物５（２７．２ｇ）を得た。ドライクロマトグラフィ（ＴＬＣ用のシリカゲル、２０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）による精製により、白色固体としてインドール５を得た。収率：２１．１ｇ（５３％）
１−［（１，１’−ビフェニル）−２−イルメチル］−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（６）［０４−０３５−１４］。インドール５（１６．１２ｇ、０．１０ｍｏｌ）を含む無水ＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液を、水素化ナトリウム（０．１５ｍｏｌ、６．０ｇ、６０％鉱物油、反応前に１００ｍＬのヘキサンで洗浄）を含むＤＭＦ（５０ｍＬ）の撹拌冷却（約１５℃）懸濁液に滴下し、反応混合物を室温で０．５時間撹拌した。約５℃への反応混合物の冷却後、２−フェニルベンジルブロミド（２５．０ｇ、０．１０１ｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。水（１０ｍＬ）で反応を停止させ、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）を添加した。反応混合物を水（２×２００ｍＬ＋３×１００ｍＬ）、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。濾過および減圧下での濾液からの溶媒の除去後、残渣（３５．５ｇ、高粘度の赤色油）を、ドライクロマトグラフィ（ＴＬＣ用のシリカゲル、５％→２５％ＣＨ２Ｃｌ２を含むヘキサン）によって精製して、青白い油として生成物６を得た。収率：２３．７１ｇ（７２％）。
【０３７３】
１−［（１，１’−ビフェニル）−２−イルメチル］−４−ヒドロキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（７）［０４−０３５−１５］。メトキシ誘導体６（２３．６１ｇ、７２．１ｍｍｏｌ）を含む無水ＣＨ２Ｃｌ２（２５０ｍＬ）の撹拌冷却（約１０℃）溶液に、１５〜２０℃の１ＭのＢＢｒ３を含むＣＨ２Ｃｌ２（３００ｍｍｏｌ、３００ｍＬ）溶液を滴下し、暗色反応混合物を室温で５時間撹拌した。減圧下での反応混合物の濃縮後、暗色油状残渣を約５℃に冷却し、予め冷却した（１５℃）ＥｔＯＡｃ（４５０ｍＬ）に溶解した。得られた冷却溶液を水（３×２００ｍＬ）、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。濾過および減圧下での濾液からの溶媒の除去後、残渣（２６．１ｇ、暗色半固体）を、ドライクロマトグラフィ（ＴＬＣ用のシリカゲル、５％→２５％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、褐色固体として生成物７を得た。収率：４．３０ｇ（１９％）
２−｛１−［（１，１’−ビフェニル）−２−イルメチル］−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル｝｝｝オキシ｝−酢酸メチルエステル（８）［０４−０３５−１６］。水素化ナトリウム（０．５４９ｇ、１３．７ｍｍｏｌ、６０％鉱物油）を含む無水ＤＭＦ（１５ｍＬ）の撹拌懸濁液に、化合物７（４．３０ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液を滴下し、得られた混合物を室温で４０分間撹拌した。ブロモ酢酸メチル（２．１０ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で２１時間撹拌し続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、水（４×２００ｍＬ）、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。濾過および減圧下での濾液からの溶媒の除去後、残渣（５．３７ｇ、暗色半固体）を、ドライクロマトグラフィ（ＴＬＣ用のシリカゲル、５％→３０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、黄色固体として生成物８を得た。収率：４．７１ｇ（８９％）。
【０３７４】
２−｛［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−１−［（１，１’−ビフェニル）−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル］オキシ｝−酢酸メチルエステル（９）［０４−０３５−１７］。塩化オキサリル（１．５５ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）を含む無水ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）の撹拌溶液に、化合物８を含むＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）溶液を滴下し、反応混合物を室温で８０分間撹拌した。反応混合物を−１０℃に冷却した後、ＮＨ３の飽和ＣＨ２Ｃｌ２溶液（１０ｍＬ）を滴下し、次いで、反応混合物を約０℃のＮＨ３（気体）で飽和した。沈殿の形成が認められた。反応混合物を室温まで加温し、減圧濃縮によって乾燥させた。暗色固体残渣（６．５０ｇ）を、ドライクロマトグラフィ（ＴＬＣ用のシリカゲル、３０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン→１００％ＥｔＯＡｃ）に供して、黄色固体として生成物９を得た。収率：４．６４ｇ（８３％）。
【０３７５】
２−｛［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−１−［（１，１’−ビフェニル）−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル］オキシ｝−酢酸（ＩＬＹ−４００１）［０４−０３５−１８］。化合物９（４．６１ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（５０ｍＬ）と水（１０ｍＬ）との混合物の撹拌溶液に、水酸化リチウム一水和物（０．８４８ｇ、２０．２ｍｍｏｌ）を含む水溶液（２０ｍＬ）を小分けにして添加し、反応混合物を室温で２時間撹拌した。水（７０ｍＬ）の添加後、反応混合物を減圧濃縮して、約１００ｍＬの体積にした。黄色沈殿の形成が認められた。残存する黄色スラリーに、２Ｎ  ＨＣｌ（２０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）を添加し、得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。帯黄色−帯緑色の沈殿物を濾過によって取り出し、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）、Ｅｔ２Ｏ（２０ｍＬ）、およびヘキサン（２０ｍＬ）で洗浄した。真空乾燥後、青白い固体として生成物（２．７５ｇ）を得た。ＭＳ：４４３．２７（Ｍ＋＋１）。元素分析：Ｃ２６Ｈ２２Ｎ２Ｏ５＋Ｈ２Ｏの計算値：Ｃ，６７．８２；Ｈ，５．２５；Ｎ，６．０８。実測値：Ｃ，６８．５０；Ｈ，４．９６；Ｎ，６．０１．ＨＰＬＣ：純度９６．５％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）７．８０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．７２−７．２５（ｍ，９Ｈ），７．０７（ｔ，１Ｈ），６．９３（ｄ，１Ｈ），６．５７（ｄ，１Ｈ），６．４３（ｄ，１Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），４．６８（ｓ，２Ｈ），２．３８（ｓ，３Ｈ）。
【０３７６】
濾液の水相を分離して取り出し、有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。濾過および減圧下での濾液からの溶媒の除去後、帯緑色固体残渣をＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）、Ｅｔ２Ｏ（１０ｍＬ）、およびヘキサン（１０ｍＬ）で洗浄した。真空乾燥後、帯緑色固体として生成物のさらなる部分（１．１３ｇ）を得た。
全収率：２．７５ｇ＋１．１３ｇ＝３．８８ｇ（８７％）。
【０３７７】
実施例１Ｂ：特徴づけ研究−ＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）
本実施例は、ＩＣ５０アッセイ（実施例１Ｂ−１）によって決定する場合は活性に関して、ｉｎ−ｖｉｔｒｏ  Ｃａｃｏ−２アッセイ（実施例１Ｂ−２）によって決定する場合は細胞吸収に関して、ｉｎ−ｖｉｖｏマウス研究（実施例１Ｂ−３）を使用して決定する場合には生物学的利用能に関してＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）（あるいは、本明細書中でメチルインドキサムと呼ばれる）を特徴づけた。
【０３７８】
実施例１Ｂ−１：ＩＣ−５０研究−ＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）
本実施例は、ＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）（あるいは、本明細書中でメチルインドキサムと呼ばれる）のＩＣ５０活性値を評価した。
【０３７９】
文献に記載のＰＬＡ２活性の連続的蛍光定量アッセイを使用して、ＩＣを決定した（Ｌｅｓｌｉｅ，ＣＣ  ａｎｄ  Ｇｅｌｂ，ＭＨ（２００４）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ“Ａｓｓａｙｉｎｇ  ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ  Ａ２  ａｃｔｉｖｉｔｙ”，２８４：２２９−２４２，Ｓｉｎｇｅｒ，ＡＧら（２００２）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ“Ｉｎｔｅｒｆａｃｉａｌ  ｋｉｎｅｔｉｃ  ａｎｄ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｓｅｔ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ａｎｄ  ｍｏｕｓｅ  ｇｒｏｕｐｓ  Ｉ，ＩＩ，Ｖ，Ｘ，ａｎｄ  ＸＩＩ  ｓｅｃｒｅｔｅｄ  ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅｓ  Ａ２”，２７７：４８５３５−４８５４９，Ｂｅｚｚｉｎｅ，Ｓら．（２０００）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ“Ｅｘｏｇｅｎｏｕｓｌｙ  ａｄｄｅｄ  ｈｕｍａｎ  ｇｒｏｕｐ  Ｘ  ｓｅｃｒｅｔｅｄ  ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ  Ａ（２）ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｔｈｅ  ｇｒｏｕｐ  ＩＢ，ＩＩＡ，ａｎｄ  Ｖ  ｅｎｚｙｍｅｓ  ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｌｙ  ｒｅｌｅａｓｅ  ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ  ａｃｉｄ  ｆｒｏｍ  ａｄｈｅｒｅｎｔ  ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｃｅｌｌｓ”，２７５：３１７９−３１９１）およびその参考文献。
【０３８０】
一般に、本アッセイは、ｓｎ−２脂肪アシル鎖の末端にピレンフルオロフォアを有するホスファチジルグリセロール（またはホスファチジルメタノール）基質を使用した。理論に拘束されないが、リン脂質小胞中の隣接リン脂質からピレンが極めて近いために、単量体ピレンと比較してスペクトル特性が変化した。ウシ血清アルブミンは水相に存在し、ＰＬＡ２触媒反応によってグリセロール骨格から遊離する場合に、ピレン脂肪酸を捕捉した。しかし、このアッセイでは、強力なインヒビターが、グリセロール骨格からのピレン脂肪酸の遊離を阻害することができる。したがって、図８Ａに示すスキーム１に示すように、かかる特徴により、アルブミン結合ピレン脂肪酸の蛍光のモニタリングによって高感度のＰＬＡ２阻害アッセイが可能である。任意の所与のホスホリパーゼに及ぼす所与のインヒビターおよびインヒビター濃度の影響を決定することができる。
【０３８１】
本実施例では、以下の試薬および装置を、以下の供給元から得た。
１．ブタＰＬＡ２  ＩＢ
２．１−ヘキサデカノイル−２−（１−ピレンデカノイル）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホグリセロール（ＰＰｙｒＰＧ）
３．１−ヘキサデカノイル−２−（１−ピレンデカノイル）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホメタノール（ＰＰｙｒＰＭ）
４．ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ、脂肪酸非含有）
５．２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール塩酸塩（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ）
６．塩化カルシウム
７．塩化カリウム
８．溶媒：ＤＭＳＯ、トルエン、イソプロパノール、エタノール
９．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＳＰＥＣＴＲＡｍａｘ  マクロプレート分光蛍光光度計
１０．Ｃｏｓｔａｒ  ９６ウェルブラックウォール／クリアボトムプレート
本実施例では、以下の試薬を調製した。
１．ＰＰｙｒＰＧ（またはＰＰｙｒＰＭ）ストック溶液（１ｍｇ／ｍＬ）を含むトルエン：イソプロパノール（１：１）
２．インヒビターストック溶液（１０ｍＭ）を含むＤＭＳＯ
３．３％（ｗ／ｖ）ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）
４．ストック緩衝液：５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、５０ｍＭ  ＫＣｌおよび１ｍＭ  ＣａＣｌ２
本実施例では、以下のように手順を実施した。
１．３ｍＬの３％ＢＳＡを４７ｍＬストック緩衝液に添加することによってアッセイ緩衝液を調製した。
２．連続希釈したインヒビターをアッセイ緩衝液に添加することによって溶液Ａを調製した。インヒビターを、１５μＭから８回３倍に連続希釈した。
３．ＰＬＡ２をアッセイ緩衝液に添加することによって溶液Ｂを調製した。酵素の失活を最小にするために、この溶液を使用直前に調製した。
４．３０μＬのＰＰｙｒＰＧストック溶液を９０μＬのエタノールに添加することによって溶液Ｃを調製した。次いで、１２０μＬの全ＰＰｙｒＰＧ溶液を約１分間にわたって連続的に撹拌した８．８２ｍＬアッセイ緩衝液に滴下して、最終濃度が４．２μＭのＰＰｙｒＰＧ小胞溶液を形成させた。
５．ＳＰＥＣＴＲＡｍａｘミクロプレート分光蛍光光度計を、３７℃に設定した。
６．１００μＬの溶液Ａを、ｃｏｓｔａｒ９６ウェルブラックウォール／クリアボトムプレートの各阻害アッセイウェルに添加した。
７．１００μＬの溶液Ｂを、ｃｏｓｔａｒ９６ウェルブラックウォール／クリアボトムプレートの各阻害アッセイウェルに添加した。
８．１００μＬの溶液Ｃを、ｃｏｓｔａｒ９６ウェルブラックウォール／クリアボトムプレートの各阻害アッセイウェルに添加した。
９．プレートを、分光蛍光光度計の室内で３分間インキュベートした。
１０．３４２ｎｍの励起および３９５ｎｍの放射を使用して、蛍光を読み取った。
【０３８２】
本実施例では、ＢｉｏＤａｔａＦｉｔ１．０２（Ｆｏｕｒ  Ｐａｒａｍｅｔｅｒ  Ｍｏｄｅｌ）ソフトウェアパッケージを使用して、ＩＣ５０を計算した。カーブフィットの作成のために使用される式は、
【０３８３】
【化１３６】
2009514892.tif 000110
である。式中、αは上の漸近線の値であり、βは下の漸近線の値であり、κは倍率であり、γは、
【０３８４】
【化１３７】
2009514892.tif 000111
での変曲点のｘ座標を示す因数である（α、β、κ、γ＞０、β＜α、およびβ＜γ＜αの制限がある）。
【０３８５】
図８Ｂに示す結果は、５０％最大ＰＬＡ２活性が得られるＩＬＹ−４００１濃度が０．０６２μＭと算出されたことを示す。
【０３８６】
実施例１Ｂ−２：ＣＡＣＯ−２吸収研究−ＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）
本実施例は、Ｃａｃｏ−２細胞を使用したｉｎ−ｖｉｔｒｏアッセイを使用して、ＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）（あるいは、本明細書中でメチルインドキサムと呼ばれる）の腸吸収を評価した。
【０３８７】
簡潔に述べれば、ヒト結腸癌細胞株Ｃａｃｏ−２を使用して、腸薬物吸収をモデル化した。１×１０−７ｃｍ／秒またはそれ未満の範囲のＣａｃｏ−２単層中で測定された見かけ上の透過値が、典型的に比較的低いヒト吸収と相関することが示されている（Ａｒｔｕｒｓｓｏｎ，Ｐ．，Ｋ．Ｐａｌｍら（２００１）．“Ｃａｃｏ−２  ｍｏｎｏｌａｙｅｒｓ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ  ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｄｒｕｇ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ．”Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ  ４６（１−３）：２７−４３）。
【０３８８】
化合物の透過性を決定するために、Ｃａｃｏ−２細胞（ＡＴＣＣ）を、２４ウェルのトランスウェル（Ｃｏｓｔａｒ）に６×１０４細胞／ｃｍ２の密度で播種した。単層を、２０％ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、および１００ｕｇ／ｍＬストレプトマイシンを補足したＭＥＭ（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ）中にて、３７℃、湿度９５％、９５％大気、および５％ＣＯ２で成長および分化させた。培養培地を、４８時間毎に交換した。２１日後、細胞を、ＨＥＰＥＳを含むＨＢＳＳで構成された輸送緩衝液で洗浄し、各ウェルの経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）の測定によって単層の完全性を評価した。３５０Ω−ｃｍ２またはそれより良好なＴＥＥＲ値を有するウェルをアッセイした。
【０３８９】
ＩＬＹ−４００１およびプロプラノロール（経細胞輸送コントロール）を、輸送緩衝液で５０μｇ／ｍＬに希釈し、尖側のウェルに個別に添加した。ＬＣ／ＭＳ分析のために、１５分、３０分、４５分、１時間、３時間、および６時間の時点で、１５０μＬのサンプルを、基底側のウェルから回収した。各サンプリング後に、前述の体積を予め加温した輸送緩衝液と置換した。見かけ上の透過性（ｃｍ／ｓ）を、以下の式：
Ｐａｐｐ＝（ｄＱ／ｄｔ）×（１／Ｃ０）×（１／Ａ）
（式中、ｄＱ／ｄｔは経時的なサンプリング体積について補正した透過率であり、Ｃ０は初期濃度であり、Ａは単層の表面積（０．３２ｃｍ２）である）に基づいて計算した。実験終了後、ＴＥＥＲを再度測定し、３５０Ω−ｃｍ２未満のウェルは単層完全性の低下を示し、その結果、これらのウェル由来のデータは分析に有効でなかった。最後に、ウェルを輸送緩衝液で洗浄し、１００μＭのＬｕｃｉｆｅｒ  Ｙｅｌｌｏｗを尖側のウェルに添加した。１５分、３０分、および４５分の時点でサンプリングし、ＬＣ／ＭＳによって分析して傍細胞輸送を決定した。
【０３９０】
ＩＬＹ−４００１についてのＣａｃｏ−２透過性研究からの結果を、図９Ａに示す。この図でＩＬＹ−４００１の見かけ上の透過性（ｃｍ／ｓ）は約１．６６×１０−７と決定された。傍細胞輸送および経細胞輸送コントロールとしてのＬｕｃｉｆｅｒ  Ｙｅｌｌｏｗおよびプロプラノロール透過性の結果も決定し、図９Ｂに示す。この図で、決定された見かけ上の透過性（ｃｍ／ｓ）は、プロプラノロールについては約１．３２×１０−５であり、Ｌｕｃｉｆｅｒ  Ｙｅｌｌｏｗについては約２．８２×１０−７＋／−０．３７×１０−７であった。
【０３９１】
実施例１Ｂ−３：薬物動態学研究−ＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）（メチルインドキサム）。
【０３９２】
本実施例は、ＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）（あるいは、本明細書中でメチルインドキサムと呼ばれる）の生物学的利用能を評価した。具体的には、投与後の全身循環における不変のＩＬＹ−４００１画分を決定するために、薬物動態学研究を行った。
【０３９３】
ＡＵＣ−経口／ＡＵＣ−静脈内（ＩＶ）比として、生物学的利用能を計算した。この比を決定するために、第１の動物被験体組に、一定の静脈内（ＩＶ）用量のＩＬＹ−４００１を投与し、その後、投与後の種々の時点（例えば、５分〜２４時間）での血中ＩＬＹ−４００１レベルを決定した。別の第２の動物組に経口投与を使用して同様に投与し、投与後の種々の時点（例えば、３０分〜２４時間）での血中ＩＬＹ−４００１レベルを決定した。全身循環中のＩＬＹ−４００１レベルを、一般的に許容された方法（例えば、Ｅｖａｎｓ，Ｇ．，Ａ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｂｉｏａｎａｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ（２００４）に記載の方法）によって決定した。具体的には、液体シンチレーション／質量分析／質量分析（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）分析法を使用して、経口投与後および静脈内投与後の血漿ＩＬＹ−４００１濃度を定量した。測定した薬物動態学的パラメーターには、Ｃｍａｘ、ＡＵＣ、ｔｍａｘ、ｔ１／２、およびＦ（生物学的利用能）が含まれる。
【０３９４】
この手順では、静脈内に３ｍｇ／ｋｇおよび経口で３０ｍｇ／ｋｇのＩＬＹ−４００１を投与した。表２にまとめた本研究の結果は、測定された生物学的利用能が元の経口用量の２８％であることを示した。これは、ＩＬＹ−４００１が胃腸管から全身循環へ約７２％のレベルで吸収されないことを示した。
表２：ＩＬＹ−４００１の薬物動態学研究の結果
【０３９５】
【化１３８】
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実施例１Ｃ：内腔局在化を改善するためのＩＬＹ−４００１の電荷修飾：３−（３−アミノオキサリル−１−ビフェニル−２−イルメチル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−プロピオン酸の合成
本実施例は、その内腔局在化を改善するための、本明細書中においてはメチルインドキサムともいうＩＬＹ−４００１［２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸の電荷修飾のためのアプローチを記載する。具体的には、ＩＬＹ−４００１はある置換基において修飾することができ、例えば、イオン電荷を変化させること、および改善された内腔局在化を付与することを含む。この実施例においては、あるスキームが示され、それにより、ＩＬＹ−４００１は（図５に示したように）５位においてプロパン酸部分を付加するように修飾して、３−（３−アミノオキサリル−１−ビフェニル−２−イルメチル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−プロピオン酸を形成することができる。
【０３９６】
３−（３−アミノオキサリル−１−ビフェニル−２−イルメチル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−プロピオン酸を調製するための全合成スキームを概説する図１０を参照する。図１０に示される各化合物の下の数字は、以下の実験の記載における各化合物についての化学名と組み合わせた括弧に入れた数字に対応する。（括弧（７）で示される）図１０に示した出発化合物は、図７に示し、実施例１Ａとの関連で記載したように調製することができる。
【０３９７】
１０ｍＬのＴＨＦおよび７５ｍＬのＤＭＦ中の１．０ｇ（４ｍｍｏｌ）の７の溶液を２００ｍｇのＮａＨ（鉱物油中６０％；５ｍｍｏｌ）と共に１０分間、次いで、０．４ｍＬ（４．６ｍｍｏｌ）の臭化アリルと共に２時間攪拌する。溶液を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で蒸発させ、カラムクロマトグラフィによって精製して、化合物１０を得る。この物質を２０ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルアニリン中で１９時間加熱還流し、冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ、Ｈ２Ｏ、およびブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮し、カラムクロマトグラフィによって精製して、化合物１１を得る。この物質（３．４ｍｍｏｌ）を６０ｍＬのＤＭＦおよび１０ｍＬのＴＨＦに溶解させ、１５０ｍｇのＮａＨ（鉱物油中６０％；３．７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５分間攪拌し、０．４ｍＬ（３．６ｍｍｏｌ）のブロモ酢酸エチルを加え、攪拌をさらに２．５時間継続する。溶液を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で蒸発させ、カラムクロマトグラフィによって精製して、化合物１２を得る。室温にて、無水ＴＨＦ（１ｍＬ）中の１２（０．０２２ｍｍｏｌ）の溶液にＢＨ３・ＴＨＦ（０．４４ｍＬ）錯体（２．０当量、ＴＨＦ中１Ｍ溶液、０．０４４ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を室温にて２時間攪拌し、過剰の３０％過酸化水素水溶液および１５％ＮａＯＨ水溶液を滴下して注意深く反応を停止させる。次いで、混合物を室温にて３０分間激しく攪拌する。得られた混合物を抽出し、蒸発させ、カラムクロマトグラフィによって精製する。ＴＨＦ中の得られたアルコールをＰＣＣ溶液に滴下し、３時間攪拌する。次いで、反応混合物を精製して、化合物１３を得る。無水ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中の塩化オキサリル（１．２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中の化合物１３の溶液を滴下し、反応混合物を室温にて８０分間攪拌する。反応混合物を−１０℃まで冷却した後、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中のＮＨ３の飽和溶液を滴下し、次いで、反応混合物を約０℃にてＮＨ３（ガス）で飽和させる。反応混合物を室温まで温め、減圧下で濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィによって精製して、化合物１４を得る。ＴＨＦ（５ｍＬ）および水（１ｍＬ）の混合液中の化合物１４（１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、水（２ｍＬ）中の水酸化リチウム一水和物（２ｍｍｏｌ）の溶液を小分けにして添加し、反応混合物を室温にて２時間攪拌する。水（７ｍＬ）の添加の後に、反応混合物を減圧下で約１００ｍＬの容量まで濃縮した。次いで、残存する黄色スラリーに、２Ｎ  ＨＣｌ（２ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を加え、得られた混合物を室温で２４時間攪拌し、続いてカラムクロマトグラフィによって化合物１５を得る。
【０３９８】
実施例１Ｄ：内腔局在化を改善するためのポリマー連結ＩＬＹ−４００１の合成：［３−アミノオキサリル−２−メチル−１−（２’−ビニル−ビフェニル−２−イルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸、スチレン、およびスチレンスルホン酸ナトリウム塩のランダムコポリマーの合成
本実施例は、その内腔局在化を改善するための、本明細書中においてはメチルインドキサムともいうＩＬＹ−４００１［２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸］に共有結合したオリゴマーまたはポリマー部分を含むホスホリパーゼインヒビターを合成するためのアプローチを記載する。具体的には、ＩＬＹ−４００１をポリマー連結して、改善された内腔局在化を付与した。この実施例においては、スキームを示し、それにより、ＩＬＹ−４００１をランダムコポリマーに連結させて、［３−アミノオキサリル−２−メチル−１−（２’−ビニル−ビフェニル−２−イルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸、スチレン、およびスチレンスルホン酸ナトリウム塩のランダムコポリマーを形成することができる。
【０３９９】
図１１を参照し、全合成スキームをポリマー連結ＩＬＹ−４００１について解説する。図１１に示された各化合物の下の数字は、以下の実験の記載における各化合物についての化学名と組み合わせた括弧に入れた数字に対応する。（括弧（１６）で示される）図１１に示された出発化合物は文献から得ることができる。
【０４００】
無水ＤＭＦ（１００ｍＬ）中の文献による手順（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００４，１２，１７３７−１７４９）から得られた化合物１６（０．１０モル）を、ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の水素化ナトリウム（０．１５モル，６．０ｇ，鉱物油中６０％，反応前に１００ｍＬのヘキサンで洗浄）の攪拌冷却（約１５℃）懸濁液に滴下し、反応混合物を室温にて０．５時間攪拌する。反応混合物を約５℃まで冷却した後、塩化２−（２−ビニルフェニル）ベンジル（０．１０１モル）を滴下し、反応混合物を室温で１８時間攪拌する。反応を水（１０ｍＬ）で停止させ、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）を加える。得られた混合物を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥する。濾過、および減圧下での濾液からの溶媒の除去の後に、残渣をドライクロマトグラフィによって精製して、生成物１７を得る。１５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中の（１ｍｍｏｌ）の１７の溶液に２ｍＬのトリフルオロ酢酸を加える。この混合物を１．５時間攪拌し、溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をＥｔＯＡｃおよび水で希釈する。有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で蒸発させ、カラムクロマトグラフィによって精製して、化合物１８を得る。（合計１ｍｍｏｌにおいて）１：１：８のモル比率の１８、スチレンスルホン酸ナトリウム塩、およびスチレンの混合物を２ｍＬの混合溶媒（水／ＤＭＦ＝２／８ｖ／ｖ）に溶解させる。混合物にＡＩＢＮ（２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、０．０１ｍｍｏｌ）を加える。得られた溶液を１６時間で７５℃まで加熱する。反応物を室温まで冷却した後、それをイソプロピルアルコールに２回沈殿させ、減圧下で乾燥させて、コポリマーを得る。
【０４０１】
実施例２：インヒビター部分への連結：［３−アミノオキサリル−２−メチル−１−（４−ビニル−ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（２１）の合成；（１−アクリロイル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（２３）の合成；｛３−アミノオキサリル−２−メチル−１−［２−（ピラゾール−１−カルボチオイルスルファニル）プロピオニル］−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ｝−酢酸（２６）の合成
本実施例は、ホスホリパーゼ阻害部分を結合部分に共有結合させるためのアプローチを記載する。
【０４０２】
本明細書中においてはメチルインドキサムともいうＩＬＹ−４００１  ［２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸］を（その改善された内腔局在化を有する化合物を形成するためのプロセスでの第１の工程として）種々の結合部分に連結させることができる。この実施例においては、スキームが示され、それにより、ＩＬＹ−４００１に結合基を設けて、［３−アミノオキサリル−２−メチル−１−（４−ビニル−ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（２１）を形成することができる；（１−アクリロイル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（２３）の合成；｛３−アミノオキサリル−２−メチル−１−［２−（ピラゾール−１−カルボチオイルスルファニル）プロピオニル］−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ｝−酢酸（２６）の合成。
【０４０３】
図１２を参照し、全合計スキームを、種々の結合基を備えたＩＬＹ−４００１を調製するために概説する。図１２に示された各化合物の下の数字は、以下の実験の記載における各化合物についての化学名と組み合わせた括弧に入れた数字に対応する。（括弧（１６）で示される）図１２に示された出発物質は文献から得ることができる。
【０４０４】
無水ＤＭＦ（１００ｍＬ）中の化合物１６（０．１０モル）を、ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の水素化ナトリウム（０．１５モル、６．０ｇ、鉱物油中６０％、反応前に１００ｍＬのヘキサンで洗浄）の攪拌した冷却（約１５℃）懸濁液に滴下し、反応混合物を室温にて０．５時間攪拌する。反応混合物を約５℃まで冷却した後、塩化４−ビニルベンジル（０．１０１モル）を滴下し、反応混合物を室温にて１８時間攪拌する。反応を水（１０ｍＬ）で停止させ、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）を加える。得られた混合物を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥する。濾過、および減圧下での濾液からの溶媒の除去の後に、残渣をドライクロマトグラフィによって精製して、生成物２０を得る。１５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中の（１ｍｍｏｌ）の２０の溶液に２ｍＬのトリフルオロ酢酸を加え、この混合物を１．５時間攪拌し、溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をＥｔＯＡｃおよび水で希釈する。有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で蒸発させ、カラムクロマトグラフィによって精製して、化合物２１を得る。
【０４０５】
同様の手法を用いて、化合物２３を調製する。
【０４０６】
磁気攪拌棒およびＰＥストッパーを備えた１００ｍＬ丸底フラスコに、周囲温度（２５℃）にて、ピラゾール（３ｍｍｏｌ）、水酸化ナトリウム（０．１２ｇ）およびＤＭＳＯ（５ｍＬ）を充填する。二硫化炭素（０．１８０ｍＬ）をフラスコに滴下する。混合物をさらに１時間攪拌する。次いで、ＮａＯＨ溶液で処理した後に同様のこれまでの手法から得られたＤＭＳＯ中の化合物２５を反応混合物にゆっくりと加える。反応物を２時間攪拌する。溶液を１００ｍＬの水に注ぎ、酢酸エチルで抽出する。有機層をさらに水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥する。溶媒を減圧下で除去し、生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィによってさらに精製する。
【０４０７】
実施例３：ポリマー連結インヒビターの合成
本実施例は、結合部分に共有結合したオリゴマーまたはポリマー部分を含むポリマー連結インヒビターを調製するためのアプローチを記載し、ここで、ポリマー部分は可溶性ランダムコポリマー（実施例３Ａ）、または不溶性架橋ランダムコポリマー（実施例３Ｂ）である。
【０４０８】
実施例３Ａ：可溶性ランダムコポリマーを備えたポリマー連結インヒビターの合成：（１−アクリロイル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（２３）およびジメチルアクリルアミドのコポリマーの合成
本実施例においては、阻害部分に共有結合したオリゴマーまたはポリマー部分を含むホスホリパーゼインヒビターを合成するためのアプローチを概説し、ここで、ポリマー部分は可溶性ランダムコポリマーである。具体的には、（１−アクリロイル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（２３）およびジメチルアクリルアミドのコポリマーを合成するためのスキームを提供する。
【０４０９】
本実施例のための出発化合物は、実施例２との関係で記載したように調製された結合基を有する化合物２３からのものであり得る。形成されたポリマーは模式的化学式によって表すことができる。
【０４１０】
【化１３９】
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簡単に述べると、（合計１ｍｍｏｌにおける）１：９のモル比率の２３およびジメチルアクリルアミドの混合物を２ｍＬのイソプロパノールに溶解させる。混合物にＡＩＢＮ（２：２’−アゾビスイソブチロニトリル０．０１ｍｍｏｌ）を加える。得られた溶液を８時間で７５℃まで加熱する。反応物を室温まで冷却した後、それを１００ｍＬの水で希釈し、水に対して４８時間透析する。次いで、溶液を凍結乾燥して、コポリマーを得る。
【０４１１】
実施例３Ｂ：不溶性（架橋）ランダムコポリマーを備えたポリマー連結インヒビターの合成：ジビニルベンゼンで架橋した、［３−アミノオキサリル−２−メチル−１−（４−ビニル−ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（２１）、スチレン、およびスチレンスルホン酸ナトリウム塩のランダムコポリマーの合成
本実施例は、阻害部分に共有結合したオリゴマーまたはポリマー部分を含むホスホリパーゼインヒビターを合成するためのアプローチを記載し、ここで、該ポリマー部分は不溶性の架橋ランダムコポリマーである。具体的には、ジビニルベンゼンで架橋した、［３−アミノオキサリル−２−メチル−１−（４−ビニル−ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（２１）、スチレン、およびスチレンスルホン酸ナトリウム塩のコポリマーを合成するためのスキームが提供される。
【０４１２】
本実施例のための出発化合物は、実施例２との関係で記載したように調製された結合基を有する化合物２１からのものであり得る。形成されたポリマーは模式的化学式によって表すことができる。
【０４１３】
【化１４０】
2009514892.tif 000114
（合計１０ｍｍｏｌにおける）１：１：７．９：０．１のモル比の２１、スチレンスルホン酸ナトリウム塩、スチレン、ジビニルベンゼンの混合物を２０ｍＬの混合溶媒（水／ＤＭＦ＝２／８ｖ／ｖ）に溶解させる。混合物に、ＡＩＢＮ（２，２’−アゾビスイソブチロニトリル０．１ｍｍｏｌ）を加える。得られた溶液を２４時間で７５℃まで加熱する。反応物を室温まで冷却した後、得られた架橋固体物質を機械的に粉砕してゲルとし、過剰量の水で洗浄し、減圧下で乾燥して、コポリマーを得る。
【０４１４】
実施例４：ポリマー−粒子修飾によるポリマー連結インヒビターの合成：（３−アミノオキサリル−１−ドデシル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸修飾ＣＡＶＩＬＩＮＫＴＭビーズの合成
本実施例は、阻害部分に共有結合したオリゴマーまたはポリマー部分を含むホスホリパーゼインヒビターを合成するためのアプローチを記載し、ここで、ポリマー部分は不溶性粒子であって、阻害部分は粒子に連結されている。具体的には、（３−アミノオキサリル−１−ドデシル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸修飾ＣａｖｉｌｉｎｋＴＭビーズの合成のためのスキームを提供する。
【０４１５】
形成されたポリマーは模式図によって表すことができる。
【０４１６】
【化１４１】
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市販のポリスチレンＣａｖｉｌｉｎｋＴＭビーズ（１ｇ）を室温にてエタノールに懸濁させる。溶液に、インヒビター化合物（１００ｍｇ）（反応体として先に矢印で示す；生成物化合物において「Ｉ」として示される）を加え、２４時間攪拌する。ビーズを濾過し、ＵＶによってインヒビターが検出されなくなるまで過剰のエタノールで洗浄する。次いで、ビーズを減圧下で乾燥する。
【０４１７】
実施例５：グラフトコポリマーを備えたポリマー連結インヒビターの合成：（１−アクリロイル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−４−イルオキシ）−酢酸、Ｎ−ブチルアクリレート、ジメチルアクリルアミド、およびＮ−（２−アクリロイルアミノ−エチル）−アクリルアミドのスターコポリマーの合成
本実施例は、阻害部分に共有結合したオリゴマーまたはポリマー部分を含むホスホリパーゼインヒビターを合成するためのアプローチを記載し、ここで、ポリマー部分はグラフトコポリマーを用いて連結される。特に、（１−アクリロイル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸、ｎ−ブチルアクリレート、ジメチルアクリルアミド、およびＮ−（２−アクリロイルアミノ−エチル）−アクリルアミドのスターコポリマーの合成のためのスキームが提供される。
【０４１８】
合成スキームおよびそれにより形成されたポリマーは模式図によって表すことができる。
【０４１９】
【化１４２】
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（合計１０ｍｍｏｌにおける）０．０４：０．４８：０．４８のモル比の２６、ジメチルアクリルアミド、およびｎ−ブチルアクリレートの混合物を２０ｍＬのＤＭＦに溶解させる。混合物に、ＡＩＢＭ（２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、化合物２６に対して１０ｍｍｏｌ％）を加え、８時間で７５℃まで加熱する。得られた黄色溶液に、１ｍｍｏｌのジメチルアクリルアミドおよびエチレンビス−ジアクリルアミド（１：１）を加え、さらに８時間攪拌する。反応物を室温まで冷却した後、反応混合物を２回沈殿させ、減圧下で乾燥して、コポリマーを得る。
【０４２０】
実施例６Ａ：仕立てられたポリマー−シングレットの合成：ポリ−Ｎ−ブチルアクリレートで仕立てた（１−アクリロイル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸の合成
本実施例は、単一阻害部分に共有結合したオリゴマーまたはポリマー部分を含むホスホリパーゼインヒビターを合成して、ホスホリパーゼインヒビター「シングレット」を形成するためのアプローチを記載する。具体的には、ポリ−ｎ−ブチルアクリレートで仕立てた（１−アクリロイル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸の合成のためのスキームが提供される。
【０４２１】
合成スキームおよびそれにより形成されたポリマーは模式図によって表すことができる。
【０４２２】
【化１４３】
2009514892.tif 000117
（合計１０ｍｍｏｌにおける）０．０４：０．９６のモル比の２６およびｎ−ブチルアクリレートの混合物を２０ｍＬのＤＭＦに溶解させる。混合物に、ＡＩＢＮ（２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、化合物２６に対して１０ｍｍｏｌ％）を加え、１６時間で７５℃まで加熱する。反応物を４５℃まで冷却した後、得られた黄色溶液に、２ｍＬの１０％ＮａＯＨ溶液を加え、さらに８時間攪拌する。反応物を室温まで冷却した後、反応混合物を２回沈殿させ、減圧下で乾燥して、コポリマーを得る。
【０４２３】
実施例６Ｂ：仕立てられたポリマー−二量体の合成
本実施例は、２つの阻害部分に共有結合したオリゴマーまたはポリマー部分を含むホスホリパーゼインヒビターを合成して、ホスホリパーゼインヒビター「二量体」を形成するための種々のアプローチを記載する。具体的には、第１のアプローチにおいて、ポリ−ｎ−ブチルアクリレートで仕立てられた（１−アクリロイル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸のジスルフィド二量体の合成のためのスキームが開示される（実施例６Ｂ−１）。第２のアプローチにおいては、（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［１２−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルジスルファニル］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（３１）の合成のためのスキーム。
【０４２４】
実施例６Ｂ−１：仕立てられたポリマー−二量体の合成：ポリ−Ｎ−ブチルアクリレートで仕立てられた（１−アクリロイル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸のジスルフィド二量体の合成
合成スキームおよびそれにより形成されたポリマーは模式図によって表すことができる。
【０４２５】
【化１４４】
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イソプロパノール（１０ｍＬ中の）２７（１ｍｍｏｌ）の溶液にヨウ素（１２７ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）を加える。２時間後に、反応混合物を濃縮し、ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）に再溶解させる。溶液をＮａ２Ｓ２Ｏ４（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空中で濃縮する。生成物を沈殿によって精製して、ジスルフィド２８を得る。
【０４２６】
実施例６Ｂ−２：仕立てられた−ポリマー−二量体の合成：（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［１２−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルジスルファニル］−ドデシル｝−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸（３１）の合成
合成スキームおよびそれにより形成されたポリマーは模式図によって表すことができる。
【０４２７】
【化１４５】
2009514892.tif 000119
無水ＤＭＦ（１００ｍＬ）中の化合物１６（１０モル）を、ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の水素化ナトリウム（０．０１５モル、６００ｍｇ、鉱物油中６０％、反応前に１０ｍＬのヘキサンで洗浄）の攪拌された冷却（約１５℃）懸濁液に滴下し、反応混合物を室温にて０．５時間攪拌する。反応混合物を約５℃まで冷却した後、１，１２−ジブロモドデカン（１０．１ｍｍｏｌ）を一度に加え、反応混合物を室温にて１８時間攪拌する。反応を水（１０ｍＬ）で停止させ、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）を加える。得られた混合物を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥する。濾過、および減圧下での濾液からの溶媒の除去の後、残渣をドライクロマトグラフィによって精製して、生成物２９を得る。３０ｍＬのＥｔＯＨ中の（１ｍｍｏｌ）の２９の溶液に、１．１ｍｍｏｌのジチオカルボン酸エチルエステルカリウム塩を加える。この混合物を１２時間攪拌し、次いで、反応物を４５℃まで加熱する。得られた黄色溶液に２ｍＬの１０％ＮａＯＨ溶液を加え、さらに８時間攪拌する。反応物を室温まで冷却した後、溶媒を除去し、ＥｔＯＡｃで抽出する。得られた混合物を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥して、粗生成物を得る。１５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中の（１ｍｍｏｌ）の該粗生成物の溶液に２ｍＬのトリフルオロ酢酸を加える。この混合物を１．５時間攪拌し、溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をＥｔＯＡｃおよび水で希釈する。有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で蒸発させ、カラムクロマトグラフィによって精製して、化合物３０を得る。イソプロパノール（１０ｍＬ）中の３０（１ｍｍｏｌ）の溶液にヨウ素（１２７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を加える。２時間後に、反応混合物を濃縮し、ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）に再溶解させる。溶液をＮａ２Ｓ２Ｏ４（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空中で濃縮する。生成物をカラムクロマトグラフィによって精製して、ジスルフィド３１を得る。
【０４２８】
実施例７：マウスモデルにおけるインスリン抵抗性の減少
ホスホリパーゼインヒビター（例えば、本明細書中に開示のホスホリパーゼ阻害部分を含む組成物）をマウスモデルで使用して、例えば、糖尿病の食事誘導性発症に関する食事誘導性インスリン抵抗性の抑制を証明することができる。ホスホリパーゼインヒビターを、一定の投薬量（例えば、約１ｍＬ／ｋｇ体重未満または約２５〜約５０μＬ／用量）の固形飼料サプリメントとして、および／または経口細管栄養ＢＩＤによって動物被験体に投与することができる。インヒビター懸濁液に典型的なビヒクルは、約５〜約１３ｍｇ／ｍＬのインヒビター濃度で、約０．９％カルボキシメチルセルロース、約９％ＰＥＧ−４００、および約０．０５％Ｔｗｅｅｎ８０を含む。この懸濁液を、日常の固形飼料へのサプリメントとして添加することができ（例えば、食事の約０．０１５重量％未満）、そして／または経口細管栄養ＢＩＤによって投与することができる（例えば、約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約９０ｍｇ／ｋｇ体重の１日量）。
【０４２９】
使用したマウス固形飼料は、洋食（高脂肪および／または高コレステロール食）を代表する組成物を有し得る。例えば、固形飼料は、食事中に約２１重量％の乳脂肪および約０．１５重量％のコレステロールを含むことができ、総カロリーの４２％が脂肪に由来する。例えば、Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ，ｄｉｅｔ  ＴＤ８８１３７を参照のこと。インヒビターを固形飼料に混合する場合、インヒビターを含むか含まないビヒクルを固形飼料と混合し、研究期間中に毎日マウスに与えることができる。
【０４３０】
研究の継続期間は、典型的には、約６〜約８週間であり、この期間中に毎日動物被験体に投与する。典型的な投与群（約６〜約８匹の動物／群を含む）は、非処置コントロール群、ビヒクルコントロール群、および約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約９０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の投与処置群から構成され得る。
【０４３１】
約６〜約８週間の研究期間の終了時に、経口耐糖能試験および／またはインスリン感受性試験を以下のように行うことができる。
【０４３２】
経口耐糖能試験−一晩の絶食後、各投与群由来のマウスに、グルコースボーラスを含む約５０μＬの生理食塩水を与えることができる（例えば、約２ｇ／ｋｇ体重を使用した胃細管栄養による）。グルコース投与前、投与から約１５分後、約３０分後、約６０分後、および約１２０分後に血液サンプルを尾静脈から得ることができる。次いで、種々の時点での血糖値を決定することができる。
【０４３３】
インスリン感受性試験−午前中の約６時間の絶食後、各投与群のマウスに、例えば、腹腔内投与を使用して、ウシインスリン（例えば、約１Ｕ／ｋｇ体重）を投与することができる。インスリン投与前、投与から約１５分後、約３０分後、約６０分後、および約１２０分後に血液サンプルを尾静脈から得ることができる。次いで、例えば、放射免疫アッセイによって、種々の時点での血漿インスリンレベルを決定することができる。
【０４３４】
非吸収ホスホリパーゼインヒビター（例えば、ホスホリパーゼＡ２インヒビター）の影響は、インスリン抵抗性の減少（すなわち、例えば、コントロール群の動物と比較した洋食（高脂肪／高コレステロール食）を与えた用量処置群の細胞および動物におけるグルコース代謝効率の増加によるグルコース攻撃誘発に対するより良好な抵抗性）である。有効な投薬量も決定することができる。
【０４３５】
実施例８：マウスモデルにおける脂肪吸収の減少
ホスホリパーゼインヒビター（例えば、本明細書中に開示のホスホリパーゼ阻害部分を含む組成物）をマウスモデルで使用して、例えば、洋食を摂取した被験体の脂肪吸収の減少を証明することができる。ホスホリパーゼインヒビターを、一定の投薬量（例えば、約１ｍＬ／ｋｇ体重未満または約２５〜約５０μＬ／用量）の固形飼料サプリメントとして、および／または経口細管栄養ＢＩＤによって動物被験体に投与することができる。インヒビター懸濁液に典型的なビヒクルは、約５〜約１３ｍｇ／ｍＬのインヒビター濃度で、約０．９％カルボキシメチルセルロース、約９％ＰＥＧ−４００、および約０．０５％Ｔｗｅｅｎ８０を含む。この懸濁液を、日常の固形飼料のサプリメントとして添加することができ（例えば、食事の約０．０１５重量％未満）、そして／または経口細管栄養ＢＩＤによって投与することができる（例えば、約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約９０ｍｇ／ｋｇ体重の１日量）。
【０４３６】
使用したマウス固形飼料は、洋食（高脂肪および／または高コレステロール食）を代表する組成物を有し得る。例えば、固形飼料は、食事中に約２１重量％の乳脂肪および約０．１５重量％のコレステロールを含むことができ、総カロリーの４２％が脂肪に由来する。例えば、Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ，ｄｉｅｔ  ＴＤ８８１３７を参照のこと。インヒビターを固形飼料に混合する場合、インヒビターを含むか含まないビヒクルを固形飼料と混合し、研究期間中に毎日マウスに与えることができる。
【０４３７】
約６〜約８週間の期間にトリグリセリドを測定することができ、この期間中に毎日動物被験体に投与する。典型的な投与群（約６〜約８匹の動物／群を含む）は、非処置コントロール群、ビヒクルコントロール群、および約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約９０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の投与処置群から構成され得る。１週間を基本として、血漿サンプルを動物被験体から採取し、例えば、血液循環への脂質の吸収量を決定するために、総トリグリセリドについて分析することができる。
【０４３８】
非吸収ホスホリパーゼインヒビター（例えば、ホスホリパーゼＡ２インヒビター）の影響は、脂質血漿レベルの正味の減少であり、これは、コントロール群の動物と比較した洋食（高脂肪／高コレステロール食）を与えた用量処置群の動物における脂肪吸収の減少を示す。有効な用量も決定することができる。
【０４３９】
実施例９：マウスモデルにおける食事誘導性高コレステロール血症の減少
ホスホリパーゼインヒビター（例えば、本明細書中に開示のホスホリパーゼ阻害部分を含む組成物）をマウスモデルで使用して、例えば、食事誘導性高コレステロール血症の抑制を証明することができる。ホスホリパーゼインヒビターを、固形飼料サプリメントとして、および／または経口細管栄養ＢＩＤによって動物被験体に投与することができる（例えば、約１ｍＬ／ｋｇ体重または約２５〜約５０μＬ／用量）。インヒビター懸濁液に典型的なビヒクルは、約５〜約１３ｍｇ／ｍＬのインヒビター濃度で、約０．９％カルボキシメチルセルロース、約９％ＰＥＧ−４００、および約０．０５％Ｔｗｅｅｎ８０を含む。この懸濁液を、日常の固形飼料のサプリメントとして添加することができ（例えば、食事の約０．０１５重量％未満）、そして／または経口細管栄養ＢＩＤによって投与することができる（例えば、約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約９０ｍｇ／ｋｇ体重の１日量）。
【０４４０】
使用したマウス固形飼料は、洋食（高脂肪および／または高コレステロール食）を代表する組成物を有し得る。例えば、固形飼料は、食事中に約２１重量％の乳脂肪および約０．１５重量％のコレステロールを含むことができ、総カロリーの４２％が脂肪に由来する。例えば、Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ，ｄｉｅｔ  ＴＤ８８１３７を参照のこと。インヒビターを固形飼料に混合する場合、インヒビターを含むか含まないビヒクルを固形飼料と混合し、研究期間中に毎日マウスに与えることができる。
【０４４１】
約６〜約８週間の期間にコレステロールおよび／またはトリグリセリドを測定することができ、この期間中に毎日動物被験体に投与する。典型的な投与群（約６〜約８匹の動物／群を含む）は、非処置コントロール群、ビヒクルコントロール群、および約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約９０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の投与処置群から構成され得る。１週間を基本として、血漿サンプルを動物被験体から採取し、例えば、血液循環へのコレステロールおよび／または脂質の吸収量を決定するために、総コレステロールおよび／またはトリグリセリドについて分析することができる。マウス中のほとんどの血漿コレステロールがＨＤＬに関連するので（ヒトにおけるほとんどのコレステロールがＬＤＬに関連するのと対照的）、血漿非ＨＤＬレベル（例えば、ＶＬＤＬ／ＬＤＬ）の低下における非吸収ホスホリパーゼインヒビターの有効性の決定を補助するために、ＨＤＬおよび非ＨＤＬ画分を分離することができる。
【０４４２】
非吸収ホスホリパーゼインヒビター（例えば、ホスホリパーゼＡ２インヒビター）の影響は、コントロール群の動物と比較した洋食（高脂肪／高コレステロール食）を与えた用量処置群の動物における高コレステロール血症の正味の減少である。有効投薬量も決定することができる。
【０４４３】
実施例１０：ＰＬＡ２−ＩＢインヒビターとしておよび食事関連疾患の治療についてのＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）のｉｎ−ｖｉｖｏ評価
本実施例は、図７に示す化合物２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸が有効なホスホリパーゼ−２Ａ  ＩＢインヒビターであり、表現型の影響が遺伝子欠損ＰＬＡ２（−／−）マウスの影響に近いおよび／または匹敵することを証明した。本実施例はまた、本化合物が体重関連疾患、インスリン関連疾患、およびコレステロール関連疾患などの疾患（特に、肥満、真性糖尿病、インスリン抵抗性、耐糖能低下、高コレステロール血症、および高トリグリセリド血症などの疾患が含まれる）の治療で有効であることも証明した。本実施例では、化合物２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸を、ＩＬＹ−４００１（あるいは、本明細書中でメチルインドキサムという）と示す。
【０４４４】
ＩＬＹ−４００１（図７）を、野生型マウスおよび遺伝子欠損ＰＬＡ２（−／−）マウス（本明細書中で、ＰＬＡ２ノックアウト（ＫＯ）マウスともいう）を使用した一連の実験でＰＬＡ２  ＩＢインヒビターとして評価した。これらの実験では、野生型およびＰＬＡ２（−／−）マウスを、高脂肪／高スクロース食で維持した（詳細を以下に記載する）。
【０４４５】
１−パルミトイル−２−（１０−ピレンデカノイル）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホグリセロールアッセイにおいて、ＩＬＹ−４００１のＩＣ５０測定値は、ヒトＰＬＡ２  ＩＢ酵素に対して約０．２μＭであり、マウスＰＬＡ２  ＩＢ酵素に対しては０．１５μＭであり、このアッセイは、ＰＬＡ２  ＩＢ酵素で処置した小胞からのピレン基質の放出を測定する（Ｓｉｎｇｅｒ，Ｇｈｏｍａｓｈｃｈｉら．２００２）。実証研究において、約０．０６２のＩＣ−５０値が決定された。（実施例１Ｂ−１を参照のこと）。マウスおよびヒト膵臓ＰＬＡ２に対するその活性に加えて、メチルインドキサムは低ｐＨで安定であり、そのようなものとして、胃を通過して生存すると予想されるであろう。Ｃａｃｏ−２アッセイ（実施例１Ｂ−２を参照のこと）および薬物動態学研究（実施例１Ｂ−３を参照のこと）に基づいて、ＩＬＹ−４００１は胃腸内腔からの吸収が比較的低い。
【０４４６】
この実施例１０の研究では、以下の表３に示す処置群を使用して、２４匹のマウスを研究した。簡潔に述べれば、それぞれ６匹のマウスを有する４群を準備した。３群は、各群に６匹の野生型ＰＬＡ２（＋／＋）マウスを含み（全部で１８匹）、１群は６匹の遺伝子欠損ＰＬＡ２（−／−）マウスを含んでいた。野生型群のうちの１つを、野生型コントロール群として使用し、ＩＬＹ−４００１で処置しなかった。他の２つの野生型群をＩＬＹ−４００１で処置し、そのうちの一方の群を２５ｍｇ／ｋｇ／日の低用量で処置し（表１中で「Ｌ」として示す）、他方の群を９０ｍｇ／ｋｇ／日の高用量で処置した（表１中で「Ｈ」として示す）。ＰＬＡ２（−／−）マウスを含む群を、正のコントロール群として使用した。
表３−ＩＬＹ−４００１研究の治療群
【０４４７】
【化１４６】
2009514892.tif 000120
本実験で使用した実験プロトコルを以下に示した。４つのマウス群（野生型および同系ＰＬＡ２（−／−）Ｃ５７ＢＬ／Ｊマウスが含まれる）を、低脂肪食／低炭水化物食に３日間馴化させた。３日間の馴化後、動物を一晩絶食させ、ベースライン体重と共に、ベースライン血清コレステロール、トリグリセリド、および血糖値を確立するために、血清サンプルを採取した。次いで、各処置群のマウスに、高脂肪／高スクロース糖尿病誘発食（研究用食Ｄ１２３３１）を与えた。１０００ｇの高脂肪／高スクロースＤ１２３３１食は、カゼイン（２２８ｇ）、ＤＬ−メチオニン（２ｇ）、マルトデキストリン１０（１７０ｇ）、スクロース（１７５ｇ）、ダイズ油（２５ｇ）、硬化ココナッツ油（３３３．５ｇ）、ミネラルミックスＳ１０００１（４０ｇ）、重炭酸ナトリウム（１０．５ｇ）、クエン酸カリウム（４ｇ）、ビタミンミックスＶ１０００１（１０ｇ）、およびコリン酒石酸（２ｇ）から構成されていた。２５ｇのマウスによって摂取される化合物の平均１日量が、０ｍｇ／ｋｇ／日（野生型コントロール群およびＰＬＡ２（−／−）コントロール群）、２５ｍｇ／ｋｇ／日（低用量野生型処置群）、または９０ｍｇ／ｋｇ／日（高用量野生型処置群）であるように、この食事にＩＬＹ−４００１処置を補足した。動物を、この高脂肪／高スクロース食（ＩＬＹ−４００１補給飼料と指定する）で１０週間維持した。
【０４４８】
処置開始時ならびに研究開始から４週間後および１０週間後に、全ての処置群およびコントロール群の全ての動物の体重を測定した（実施例１０Ａを参照のこと）。処置開始時（ベースライン）ならびに研究開始から４週間後および１０週間後に採血も行い、空腹時グルコースを決定した（実施例１０Ｂを参照のこと）。処置開始時（ベースライン）および１０週間後に採取した血液からコレステロールおよびトリグリセリドレベルを決定した（実施例１０Ｃを参照のこと）。
【０４４９】
実施例１０Ａ：ＰＬＡ２−ＩＢインヒビターとしてのＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）のｉｎ−ｖｉｖｏ評価における体重増加
上記の実施例１０に一般に記載の研究では、処置開始時ならびに研究開始から４週間後および１０週間後に、全ての処置群およびコントロール群の全ての動物の体重を測定した。高脂肪／高スクロース糖尿病誘発食に補足したＩＬＹ−４００１を使用した上記の治療プロトコルを使用して、体重増加の顕著な減少が認められた。
【０４５０】
図１３Ａに関して、ＩＬＹ−４００１を投与していない野生型マウス（群１、野生型コントロール）の体重増加は、研究開始時から４週間後までの実質的な体重増加および１０週間後までの体重増加のさらなる倍増の予想パターンに従った。対照的に、ＩＬＹ−４００１を投与せずに同一の食事で飼育されたＰＬＡ２（−／−）マウス（ＰＬＡ２  ＫＯマウス）（群４、ＰＬＡ２（−／−）コントロール）の体重増加も、４〜１０週間で実質的に有意に変化せず、研究期間にわたって体重はわずかしか増加しなかった（５ｇ未満）。２つの処置群（２５ｍｇ／ｋｇ／日および９０ｍｇ／ｋｇ／日）は、野生型コントロール群と比較して、研究から４週間後および１０週間後に体重増加が有意に減少した。両処置群は、４週間後にＰＬＡ２（−／−）マウスで達成された体重増加に近い範囲に調整された体重増加を示した。低用量処置群は、１０週間後にＰＬＡ２（−／−）マウスで達成された体重増加に匹敵する範囲に調整された体重増加を示した。
【０４５１】
実施例１０Ｂ：ＰＬＡ２−ＩＢインヒビターとしてのＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）のｉｎ−ｖｉｖｏ評価における空腹時血清グルコース
上記の実施例１０に一般に記載の研究では、処置開始時（ベースライン）ならびに研究開始から４週間後および１０週間後に採血して、空腹時グルコースを決定した。高脂肪／高スクロース糖尿病誘発食に補足したＩＬＹ−４００１を使用した上記の治療プロトコルを使用して、空腹時血清グルコースレベルの顕著な減少が認められた。
【０４５２】
図１３Ｂに関して、野生型コントロールマウス（群１）で高血漿グルコースレベルが維持され、これは、４週間後および１０週間後の両方の高脂肪／高スクロース糖尿病誘発食と一致し、且つその傾向がある。対照的に、ＰＬＡ２（−／−）ＫＯマウス（群４）は、４週間後および１０週間後の両方で空腹時血糖値の統計的に有意な減少が認められ、これは、この糖尿病誘発食で飼育されたマウスで通常は認められないインスリンに対する感受性の増加を反映した。高用量ＩＬＹ−４００１処置群（群３）は、４週間後および１０週間後の両方で空腹時血糖値の類似の減少が認められ、これは、高脂肪／高スクロース食で飼育した野生型マウスと比較してこの群のインスリン感受性が改良されたこと、およびＰＬＡ２（−／−）ＫＯマウスで認められた表現型に近いことを示した。低用量ＩＬＹ−４００１処置群（群２）は、中等度の有益な影響が４週間後に見られたが、１０週間後には見られなかった。
【０４５３】
実施例１０Ｃ：ＰＬＡ２−ＩＢインヒビターとしてのＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）のｉｎ−ｖｉｖｏ評価における血清コレステロールおよびトリグリセリド
上記の実施例１０に一般に記載の研究では、処置開始時（ベースライン）および研究開始から１０週間後採血して、コレステロールおよびトリグリセリドレベルを決定した。高脂肪／高スクロース糖尿病誘発食に補足したＩＬＹ−４００１を使用した上記の治療プロトコルを使用して、血清コレステロールレベルおよび血清トリグリセリドレベルの両方の顕著な減少が認められた。
【０４５４】
図１３Ｃおよび１３Ｄに関して、高脂肪／高スクロース食の１０週間後に、野生型コントロール動物（群１）は、研究開始時に取ったベースライン測定値と比較して、循環コレステロールレベル（図１３Ｃ）およびトリグリセリドレベル（図１３Ｄ）の両方が顕著且つ実質的に増加した。ＰＬＡ２（−／−）ＫＯ動物（群４）は、対照的に、これらの脂質の同一の増加は認められず、コレステロール値およびトリグリセリド値はそれぞれ、野生型コントロール群で認められた値の１／２〜１／３であった。有意には、低用量および高用量のＩＬＹ−４００１での処置（それぞれ、群２および群３）は、コレステロールおよびトリグリセリドの血漿レベルを実質的に減少させ、これは、ＰＬＡ２（−／−）ＫＯマウスに匹敵するレベルの有益な影響に類似していた。
【０４５５】
実施例１１：多価インドールおよびインドール関連化合物の合成
本実施例は、それぞれ多官能性架橋部分に共有結合した２つまたはそれを超えるインドールまたはインドール関連部分（例えば、ホスホリパーゼ阻害部分）を含む多価インドールまたはインドール関連化合物の調製を示す。
【０４５６】
実施例１１．１：（中間体）ＴＥＲＴ−ブチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（８−ブロモオクチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）アセテート
【０４５７】
【化１４７−１】
2009514892.tif 000121
以下の実施例の出発物質として、ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（８−ブロモオクチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）アセテートを、以下のように調製した。
【０４５８】
出発インドール（３．３ｇ、１０ｍｍｏｌ）を含む１０ｍＬの無水ＤＭＦ溶液を、氷浴中で冷却し、乾燥水素化ナトリウム（２９０ｍｇ、１２ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。窒素下にて０℃で３０分間撹拌後、混合物を、氷浴で冷却した１，８−ジブロモオクタン（２．２ｍＬ、３．３ｇ、１２ｍｍｏｌ、１．２当量）を含む５ｍＬの無水ＤＭＦ溶液に滴下した。得られた有機混合物を、窒素下にて０℃で４時間撹拌し、次いで、室温に加温した。室温で一晩の撹拌後、反応混合物の反応を、１５ｍＬのＮＨ４Ｃｌで停止させ、減圧濃縮した。次いで、１００ｍＬのＤＣＭで希釈し、ＮＨ４Ｃｌ（４０ｍＬ）およびブラインで２回（２×４０ｍＬ）洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、橙色油として粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィ（Ｈ／ＥＡ：３／２、１／１、その後２／３）によって精製して、黄色固体として純粋なブロモアルキル（２．６ｇ、５０％）を得た。
【０４５９】
【化１４７−２】
2009514892.tif 000122
ＭＳ（ＥＳＩ，ＭｅＯＨ）：ｍ／ｚ５４５．２［Ｍ＋Ｎａ］＋（１００％，７９Ｂｒ同位体），５４７．２［Ｍ＋Ｎａ］＋（９７％，８１Ｂｒ同位体）。
【０４６０】
実施例１１．２：（中間体）ＴＥＲＴ−ブチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（１２−ブロモドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）アセテートの合成
【０４６１】
【化１４８】
2009514892.tif 000123
他の実施例で使用するための出発物質として、ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（１２−ブロモドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）アセテートを以下のように調製した。
【０４６２】
出発インドール中間体（２．５４ｇ、７．６５ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）に、０℃の窒素下で、９５％水素化ナトリウム（０．２３３ｇ、９．２２ミリモル）を添加した。暗色混合物を、０℃で０．５時間撹拌し、次いで、０℃の１，１２−ジブロモドデカン（４．５ｇ、１３．７１ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液に１０分間にわたって滴下した。混合物を０℃で５時間および室温で１９時間撹拌した。反応物を０℃に冷却し、塩化アンモニウム溶液（１０ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈した。混合物を塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、水相をジクロロメタン（４×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて赤褐色の液体を得て、これを高真空下でさらに蒸発させた。残渣は高粘度の赤褐色の半固体であり、これを、溶離液としてクロロホルム／ヘキサン（８：１）を使用したシリカゲルのクロマトグラフィによって精製して、橙褐色の半固体として生成物を得た（２．００ｇ、４５％）。
【０４６３】
実施例１１．３：化合物（５−２７）。
【０４６４】
【化１４９】
2009514892.tif 000124
第１に、ｔ−Ｂｕ保護化合物［３−アミノオキサリル−１−（１２−｛２−［１２−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−フェノキシ｝−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２）を、以下のように調製した。
【０４６５】
カテコール（０．０５４ｇ、０．４９ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（６ｍＬ）を、０℃の窒素下で、９５％水素化ナトリウム（０．０２７ｇ、１．０８ミリモル）に添加した。混合物を０℃で０．５時間撹拌し、次いで、ブロミド１（０．６００ｇ、１．０３ミリモル）（実施例１１Ｂのように調製）を含む乾燥ＤＭＦ（７ｍＬ）を３分間にわたって添加した。混合物を０℃で８時間撹拌し、一晩にわたって室温にゆっくり加温した。混合物を０℃に冷却し、塩化アンモニウム溶液（５ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）および塩化アンモニウム（４５ｍＬ）で希釈した。有機相を分離し、水相をジクロロメタン（６×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を蒸発させてほぼ乾燥させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、水（５０ｍＬ）で洗浄した。水相をジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、乾燥させて、赤褐色の半固体を得た。溶離液としてクロロホルム／ヘキサン（７：１〜４：１）を使用したシリカゲルのクロマトグラフィによって精製して、橙褐色の半固体として生成物を得た（０．０２９ｇ、５％）。
【０４６６】
以下のように、上記スキーム中のジエステル２を脱保護して、［３−アミノオキサリル−１−（１２−｛２−［１２−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−フェノキシ｝−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸３（化合物５−２７）を形成した。
【０４６７】
ジエステル２（０．０２９ｇ、０．０２６ミリモル）および１，３−ジメトキシベンゼン（０．０２ｍＬ、０．１５２ミリモル）を含む乾燥ジクロロメタン（３ｍＬ）を、室温の窒素下で、トリフルオロ酢酸（３ｍＬ、３８．９ミリモル）に添加した。溶液を１時間撹拌し、２５℃未満で溶媒を蒸発させた。残渣をエーテル（１０ｍＬ）でトリチュレート（ｔｒｉｔｕｒａｔｅ）し、濾過によって固体を取り出した。固体をエーテル（２０ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させて、ベージュ色の固体として所望の化合物を得た（０．０１２ｇ、４６％）。
１Ｈ  ｎｍｒ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．７１（ｂｒｓ，２Ｈ），７．３８（ｂｒｓ，２Ｈ），７．１１（ｄｄ，２Ｈ），７．０６（ｄｄ，２Ｈ），６．９１（ｍ，２Ｈ），６．８３（ｍ，２Ｈ），６．５１（ｄ，２Ｈ），４．６２（ｓ，４Ｈ），４．１４（ｍ，４Ｈ），３．９０（ｍ，４Ｈ），２．５４（ｓ，６Ｈ），１．６６（ｍ，８Ｈ），１．４０（ｍ，４Ｈ），１．２８，１．２３（２ｍ，２８Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳ＋）１０１７．５８（Ｍ＋Ｎａ），９９６．５１（Ｍ＋１），９９５．５４（Ｍ）。
【０４６８】
実施例１１．４：化合物（５−２５）
【０４６９】
【化１５０】
2009514892.tif 000125
以下のように、ｔ−Ｂｕ保護化合物（ｔｅｒｔ−ブチル２，２’−（１，１’−（１２，１２’−（ブタン−１，４−ジイルビス（スルファンジイル））ビス（ドデカン−１２，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）ジアセテート（２））を最初に調製した。
【０４７０】
１，４−ブタンジチオール（０．０６ｍＬ、０．５１ミリモル）を、０℃の窒素下で、９５％水素化ナトリウム（０．０２８ｇ、１．１０ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（４ｍＬ）に添加した。０．５時間後、この混合物を、０℃の窒素下で、ブロミド１（０．６０２ｇ、１．０３ミリモル）（実施例１１Ｂのように調製）を含む乾燥ＤＭＦ（６ｍＬ）に添加した。反応物を０℃で９時間保持し、一晩にわたって室温にゆっくり加温した。混合物を０℃に冷却し、塩化アンモニウム溶液（５ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（５０ｍＬ）および塩化アンモニウム溶液（４０ｍＬ）で希釈した。有機相を分離し、水相をジクロロメタン（５×４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、赤褐色のシロップを得た。溶離液としてクロロホルム／酢酸エチル（２：１〜１：１）を使用したシリカゲルのクロマトグラフィによって精製して、橙褐色の半固体として生成物を得た（０．２２４ｇ、３９％）。
【０４７１】
次いで、上記スキーム中の得られたジエステル２を脱保護して、２，２’−（１，１’−（１２，１２’−（ブタン−１，４−ジイルビス（スルファンジイル））ビス（ドデカン−１２，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）二酢酸（３）（化合物５−２５）を形成した。
【０４７２】
ジエステル２（０．０５１ｇ、０．０４５ミリモル）および１，３−ジメトキシベンゼン（０．０２ｍＬ、０．１５２ミリモル）を含む乾燥ジクロロメタン（２ｍＬ）を、室温の窒素下で、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ、２５．９ミリモル）に添加した。溶液を１時間撹拌し、２５℃未満で溶媒を蒸発させた。残渣をエーテル（２０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過によって固体を取り出した。固体をエーテル（２０ｍＬ）で洗浄し、エーテル（７ｍＬ）と１時間撹拌した。濾過によって生成物を取り出し、真空乾燥させて、ベージュ色の固体として所望の生成物を得た（０．０２９ｇ、６４％）。
１Ｈ  ｎｍｒ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．７１（ｂｒｓ，２Ｈ），７．３８（ｂｒｓ，２Ｈ），７．１２（ｄｄ，２Ｈ），７．０７（ｄｄ，２Ｈ），６．５２（ｄ，２Ｈ），４．６２（ｓ，４Ｈ），４．１５（ｍ，４Ｈ），２．５４（ｓ，６Ｈ），２．４５（ｍ，８Ｈ），１．６６（ｍ，４Ｈ），１．５７（ｍ，４Ｈ），１．４８（ｍ，４Ｈ），１．２９，１．２３（２ｍ，３２Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳ＋）１０３０．３５（Ｍ＋Ｎａ），１００８．３５（Ｍ＋１），１００７．３９（Ｍ）。
【０４７３】
実施例１１．５：化合物（５−２６）
【０４７４】
【化１５１】
2009514892.tif 000126
ｔ−Ｂｕ保護化合物ｔｅｒｔ−ブチル２，２’−（１，１’−（１２，１２’−（オクタン−１，８−ジイルビス（スルファンジイル））ビス（ドデカン−１２，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）ジアセテート（２）を以下のように調製した。
【０４７５】
１，８−オクタンジチオール（０．１１５ｍＬ、０．６２ミリモル）を、０℃の窒素下で、９５％水素化ナトリウム（０．０３５ｇ、１．３８ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）に添加した。０．５時間後、この混合物を、０℃の窒素下で、ブロミド１（０．７６０ｇ、１．３１ミリモル）（実施例１１Ｂのように調製）を含む乾燥ＤＭＦ（９ｍＬ）に添加した。反応物を０℃で９時間保持し、一晩にわたって室温にゆっくり加温した。混合物を０℃に冷却し、塩化アンモニウム溶液（１０ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、塩化アンモニウム溶液（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を分離し、水相をジクロロメタン（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて褐色シロップを得た。溶離液としてクロロホルム／酢酸エチル（２：１〜１：１）を使用したシリカゲルのクロマトグラフィによって精製して、黄色固体として生成物を得た（０．４２２ｇ、５８％）。
【０４７６】
以下のように、上記スキーム中の得られたジエステル２を脱保護して、２，２’−（１，１’−（１２，１２’−（オクタン−１，８−ジイルビス（スルファンジイル））ビス（ドデカン−１２，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）二酢酸（３）（化合物５−２６）を形成した。
【０４７７】
ジエステル２（０．０９２ｇ、０．０７８ミリモル）および１，３−ジメトキシベンゼン（０．０４ｍＬ、０．３１２ミリモル）を含む乾燥ジクロロメタン（３ｍＬ）を、室温の窒素下で、トリフルオロ酢酸（３ｍＬ、３８．９ミリモル）に添加した。溶液を２時間撹拌し、２５℃未満で溶媒を蒸発させた。残渣をエーテル（３０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過によって固体を取り出した。固体をエーテル（２０ｍＬ）で洗浄し、エーテル（６ｍＬ）と１時間撹拌した。濾過によって生成物を取り出し、エーテル（２０ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥させて、ベージュ色の固体として所望の化合物を得た（０．０６０ｇ、７２％）。
１Ｈ  ｎｍｒ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．７１（ｂｒｓ，２Ｈ），７．３８（ｂｒｓ，２Ｈ），７．１２（ｄｄ，２Ｈ），７．０８（ｄｄ，２Ｈ），６．５２（ｄ，２Ｈ），４．６３（ｓ，４Ｈ），４．１６（ｍ，４Ｈ），２．５５（ｓ，６Ｈ），２．４５（ｍ，８Ｈ），１．６６（ｍ，４Ｈ），１．４９（ｍ，８Ｈ），１３０，１．２３（２ｍ，４０Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳ＋）１０６４．４２（Ｍ＋１），１０６３．４５（Ｍ）。
【０４７８】
実施例１１．６：化合物（５−２４）
【０４７９】
【化１５２】
2009514892.tif 000127
ｔ−Ｂｕ保護化合物ｔｅｒｔ−ブチル２，２’−（１，１’−（８，８’−（オクタン−１，８−ジイルビス（スルファンジイル））ビス（オクタン−８，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）ジアセテート（２）を、以下のように調製した。
【０４８０】
１，８−オクタンジチオール（０．７３ｍＬ、３．９４ミリモル）を、０℃の窒素下で、水素化ナトリウム（０．２１ｇ、８．７５ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（１２ｍＬ）溶液に添加した。０．５時間後、この混合物を、０℃の窒素下で、ブロミド１（４．３ｇ、８．２１ミリモル）（実施例１１Ａのように調製）を含む乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）に添加した。反応物を０℃で８時間保持し、冷凍庫で一晩保存した。混合物を０℃に冷却し、塩化アンモニウム溶液（１５ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を分離し、水相をジクロロメタン（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、黄橙色のシロップを得た。溶離液としてクロロホルム／酢酸エチル（２：１〜３：２）を使用したシリカゲルのクロマトグラフィによって精製して、黄色固体として生成物を得た（２．７９ｇ、３２％）。
【０４８１】
以下のように、上記スキーム中の得られたジエステル２を脱保護して、２，２’−（１，１’−（８，８’−（オクタン−１，８−ジイルビス（スルファンジイル））ビス（オクタン−８，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）二酢酸（３）（化合物５−２４）を形成した。
【０４８２】
ジエステル２（１．９７ｇ、１．８５ミリモル）および１，３−ジメトキシベンゼン（０．７４ｍＬ、５．６５ミリモル）を含む乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）を、室温の窒素下で、トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ、３８．９ミリモル）に添加した。溶液を１時間撹拌し、２５℃未満で溶媒を蒸発させた。残渣をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過によって固体を取り出し、エーテル（１００ｍＬ）で洗浄した。固体をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過し、エーテル（５０ｍＬ）で洗浄した。生成物を真空乾燥させて、ベージュ色の固体として所望の化合物を得た（１．５７ｇ、８９％）。
１Ｈ  ｎｍｒ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．７０（ｂｒｓ，２Ｈ），７．３８（ｂｒｓ，２Ｈ），７．１３（ｄｄ，２Ｈ），７．０８（ｄｄ，２Ｈ），６．５２（ｄ，２Ｈ），４．６３（ｓ，４Ｈ），４．１５（ｍ，４Ｈ），２．５４（ｓ，６Ｈ），２．４４（ｍ，８Ｈ），１．６６（ｍ，４Ｈ），１．４８（ｍ，８Ｈ），１．２９，１．２６（２ｍ，２４Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳ＋）９５２．２６（Ｍ＋１），９５１．２６（Ｍ）。
【０４８３】
実施例１１．７ａ：化合物（５−２８）
【０４８４】
【化１５３】
2009514892.tif 000128
２，２’−（１，１’−（１２，１２’−ジスルファンジイルビス（ドデカン−１２，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）二酢酸（ＩＬＹ−Ｖ−２８）。（１ｍｍｏｌ）の１を含む３０ｍＬのＥｔＯＨ溶液に、１．１ｍｍｏｌのチオアセテートのナトリウム塩を添加した。この混合物を１２時間撹拌し、次いで、反応物を４５℃に加熱した。得られた黄色溶液に、２ｍＬの１０％ＮａＯＨ溶液を添加し、さらに８時間撹拌した。反応物を室温に冷却後、溶媒を除去し、ＥｔＯＡｃで抽出した。得られた混合物を、水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて粗生成物を得た。（１ｍｍｏｌ）の粗生成物を含む１５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２溶液に、２ｍＬのトリフルオロ酢酸を添加した。この混合物を１．５時間撹拌し、溶媒を減圧蒸発させ、残渣をＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧蒸発させ、カラムクロマトグラフィによって精製して、脱保護化合物を得た。脱保護化合物（１ｍｍｏｌ）を含むイソプロパノール（１０ｍＬ）溶液に、ヨウ素（１２７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、反応混合物を濃縮し、ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）に再溶解した。溶液をＮａ２Ｓ２Ｏ４（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空濃縮する。生成物をカラムクロマトグラフィによって精製して、ジスルフィドＩＬＹ−Ｖ−２８を得る。
【０４８５】
実施例１１．７ｂ：化合物（５−２８）
【０４８６】
【化１５４】
2009514892.tif 000129
［３−アミノオキサリル−１−（１２−メトキシカルボニルスルファニル−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２）：［３−アミノオキサリル−１−（１２−ブロモ−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１）（０．１８ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）と酢酸カリウム（０．０３６ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）との混合物を、７０℃の乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ）中にてＮ２下で５時間加熱した。混合物を冷却し、高真空濃縮して乾燥させた。得られたシロップを、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液に懸濁し、次いで、ＥｔＯＡｃ（１０×３ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（１０×２ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。減圧下で溶媒を除去し、残渣を７０％酢酸エチルを含むヘキサンで溶離するシリカゲルカラムでのクロマトグラフィに供して、透明なシロップとして中間体２を得た。収率：０．１８ｇ、９８％。
【０４８７】
（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［１１−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ウンデシルジスルファニル］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３）：中間体（２）（０．１０ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＯＨ（５ｍＬ）と触媒量のヨウ素（０．００１ｇ）との混合物を、１Ｎ  ＮａＯＭｅメタノール溶液で処理した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。溶媒を除去し、残渣を、７０％酢酸エチルを含むヘキサンで溶離するシリカゲルカラムでのクロマトグラフィに供して、オフホワイトの固体として中間体３を得た。収率：０．０７ｇ、３８％。
【０４８８】
（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［１１−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ウンデシルジスルファニル］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（Ｉｌｙ−Ｖ−２８）：中間体（３）（０．０６ｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）を含むＨＣＯ２Ｈ水溶液（８８％、２ｍＬ）の混合物を、室温で６時間撹拌した。混合物を、高真空濃縮して乾燥させ、水（２×２ｍＬ）と同時蒸発させた。次いで、ゴム状物質を含むフラスコを凍結乾燥機に移し、高真空下で一晩保持して、淡緑色の固体として表題化合物Ｉｌｙ−Ｖ−２８を得た。収率：０．０５ｇ、９２％。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６），δ，ｐｐｍ：（５−３７−１５９）δ７．７２（ｂｓ，１Ｈ），７．４１（ｂｓ，１Ｈ），７．１７（ｔ，１Ｈ），７．１０（ｔ，１Ｈ），６．４６（ｄ，１Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），４．０８（ｔ，３Ｈ），２．６２（ｔ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ），１．７０−１．６０（ｍ，２Ｈ），１．４８−１．４１（ｍ，２Ｈ），１．３８−１．１５（ｍ，４０Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９５１．３（Ｍ＋１）
実施例１１．８ａ：化合物（５−２９）
【０４８９】
【化１５５】
2009514892.tif 000130
２，２’−（１，１’−（１２，１２’−チオビス（ドデカン−１２，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）二酢酸（ＩＬＹ−Ｖ−２９）。（１ｍｍｏｌ）の１を含む３０ｍＬのＥｔＯＨ溶液に、１．１ｍｍｏｌのチオアセテートのナトリウム塩を添加した。この混合物を１２時間撹拌し、次いで、反応物を４５℃に加熱した。得られた黄色溶液に、２ｍＬの１０％ＮａＯＨ溶液を添加し、さらに８時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、溶媒を除去し、ＥｔＯＡｃで抽出した。得られた混合物を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、粗生成物を得た。次いで、この物質をカラムクロマトグラフィによって精製して、２を得た。
【０４９０】
化合物２（０．９ミリモル）を、０℃の窒素下で、水素化ナトリウム（１．２ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（１２ｍＬ）に添加した。０．５時間後、この混合物を、０℃の窒素下で、ブロミド１（０．９５ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）に添加した。反応物を、０℃で８時間保持し、塩化アンモニウム溶液（１５ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を分離し、水相をジクロロメタン（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて黄橙色シロップを得た。溶離液としてクロロホルム／酢酸エチルを使用したシリカゲルでのクロマトグラフィによって精製して、保護二量体生成物を得た。
【０４９１】
二量体生成物（０．９ミリモル）および１，３−ジメトキシベンゼン（３ミリモル）を含む乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）を、室温の窒素下で、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）に添加した。溶液を１時間撹拌し、２５℃未満で溶媒を蒸発させる。残渣をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過によって固体を取り出し、エーテル（１００ｍＬ）で洗浄する。固体をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過し、エーテル（５０ｍＬ）で洗浄する。生成物を真空乾燥させて、ＩＬＹ−Ｖ−２９を得る。
【０４９２】
実施例１１．８ｂ：化合物（５−２９）
【０４９３】
【化１５６】
2009514892.tif 000131
（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［１２−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドイル−１−イル）−ドデシルスルファニル］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−４−イルオキシ−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２）：［３−アミノオキサリル−１−（１２−ブロモ−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１）（０．２８５ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）と硫化ナトリウム（０．０１ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）との混合物を、７０℃の乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ）中でＮ２下にて５時間加熱した。反応混合物を冷却し、濃縮した。得られたシロップを飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液に懸濁し、ＣＨ２Ｃｌ２（１０×３ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水（５×２ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下で溶媒を除去し、残渣を、７０％酢酸エチルを含むヘキサンで溶離するシリカゲルカラムでのクロマトグラフィに供して、オフホワイトの固体として中間体５を得た。収率：０．１３ｇ、９６％。
【０４９４】
（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［１２−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルスルファニル］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（Ｉｌｙ−Ｖ−２９）：中間体（２）（０．０４ｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）のＨＣＯ２Ｈ（８８％、２ｍＬ）水溶液を、室温で６時間撹拌した。混合物を、高真空濃縮して乾燥させ、水（２×２ｍＬ）と同時蒸発させた。次いで、ゴム状物質を含むフラスコを凍結乾燥機に移し、高真空下で一晩保持して、淡黄色粉末として表題化合物Ｉｌｙ−Ｖ−２９を得た。収率：０．０３ｇ、９０％。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６），δ，ｐｐｍ：（５−３７−１４５）δ７．７０（ｂｓ，１Ｈ），７．４０（ｂｓ，１Ｈ），７．１５（ｔ，１Ｈ），７．１０（ｔ，１Ｈ），６．４６（ｄ，１Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），４．１８（ｔ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ），２．２０（ｔ，２Ｈ），１．７０−１．６０（ｍ，２Ｈ），１．４８−１．４１（ｍ，２Ｈ），１．３９−１．１５（ｍ，４０Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９２０．３（Ｍ＋１）
実施例１１．９ａ（化合物５−３０）
【０４９５】
【化１５７】
2009514892.tif 000132
２，２’−（１，１’−（１２，１２’−（４，４’−（プロパン−２，２−ジイル）ビス（４，１−フェニレン））ビス（オキシ）ビス（ドデカン−１２，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）二酢酸（ＩＬＹ−Ｖ−３０）。ビスフェノールＡ（１ミリモル）を、０℃の窒素下で、水素化ナトリウム（２．２ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（１２ｍＬ）に添加した。０．５時間後、この混合物を、０℃の窒素下で、ブロミド１（２．０５ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）に添加した。反応物を０℃で８時間保持し、塩化アンモニウム溶液（１５ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を分離し、水相をジクロロメタン（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて黄橙色シロップを得た。溶離液としてクロロホルム／酢酸エチルを使用したシリカゲルのクロマトグラフィによって精製して、保護二量体生成物を得た。
【０４９６】
二量体生成物（０．９ミリモル）および１，３−ジメトキシベンゼン（３ミリモル）を含む乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）を、室温の窒素下で、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）に添加した。溶液を１時間撹拌し、２５℃未満で溶媒を蒸発させた。残渣をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過によって固体を取り出し、エーテル（１００ｍＬ）で洗浄した。固体をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過し、エーテル（５０ｍＬ）で洗浄した。生成物を真空乾燥させてＩＬＹ−Ｖ−３０を得た。
【０４９７】
実施例１１．９ｂ（化合物５−３０）
【０４９８】
【化１５８】
2009514892.tif 000133
（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［４−（１−｛４−［１２−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−フェニル｝−１−メチル−エチル）−フェノキシ］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２）：ビスフェノール（１０．２７ｇ、０．０４５モル）を含む無水ＤＭＦ（７００ｍＬ）溶液に、炭酸セシウム（１４７ｇ、０．４５モル）を添加した。混合物を、室温で３０分間撹拌した。［３−アミノオキサリル−１−（１２−ブロモ−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１）（５７．８ｇ、０．１０モル）とヨウ化ナトリウム（３３．５ｇ、０．２２５モル）との混合物を添加した。反応混合物を、室温で１８時間撹拌した。混合物を、酢酸エチル（３．５Ｌ）で希釈し、水（４×７００ｍＬ）およびブライン（１×７００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（２：１  ＥｔＯＡｃ：ＣＨＣｌ３）によって精製して、白色固体として中間体（２）を得た。収率：４８ｇ、８７％。
【０４９９】
（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［４−（１−｛４−［１２−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−フェニル｝−１−メチル−エチル）−フェノキシ］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（Ｉｌｙ−Ｖ−３０）：中間体（２）（２３ｇ、０．０１８７モル）を含むジクロロメタン（１Ｌ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２３０ｍＬ、１．１３１モル）を滴下した。反応混合物を、室温で３時間撹拌した。反応溶媒を蒸発させ、褐色の高粘度残渣を、ジエチルエーテル（７００ｍＬ）中で２時間撹拌した。得られた固体を濾過によって回収し、１８時間高真空乾燥させて、桃色固体としてＩｌｙ−Ｖ−３０を得た。収率：２２．１ｇ＞１００％（いくらかの無機塩を含む）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，ｐｐｍ：１２．８６（ｂｒｓ，２Ｈ），７．７２（ｓ，２Ｈ），７．４０（ｓ，２Ｈ），７．１８−７．０４（ｍ，８Ｈ），６．７８（ｄ，４Ｈ），６．５０（ｄ，２Ｈ），４．４２（ｓ，４Ｈ），４．１７（ｂｒｔ，４Ｈ），３．８７（ｔ，４Ｈ），２．５０（ｓ，６  Ｈ），１．７８−１．２０（ｍ，２２Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１１１３．２８（Ｍ＋１）
実施例１１．１０．１ａ：化合物（５−３１）
【０５００】
【化１５９】
2009514892.tif 000134
２，２’−（１，１’−（１２，１２’−（ベンジラザンジイル）ビス（ドデカン−１２，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）二酢酸（ＩＬＹ−Ｖ−３１）。ベンジルアミン（１ミリモル）を、室温の窒素下で、ブロミド１（２．０５ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（１２ｍＬ）に添加する。反応物を５０℃で８時間保持し、塩化アンモニウム溶液（１５ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄する。有機相を分離し、水相をジクロロメタン（２×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて黄橙色シロップを得た。溶離液としてクロロホルム／酢酸エチルを使用したシリカゲルのクロマトグラフィによって精製して、保護二量体生成物を得ることができる。
【０５０１】
保護二量体生成物（０．９ミリモル）および１，３−ジメトキシベンゼン（３ミリモル）を含む乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）を、室温の窒素下で、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）に添加する。溶液を１時間撹拌し、２５℃未満で溶媒を蒸発させた。残渣をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過によって固体を取り出し、エーテル（１００ｍＬ）で洗浄する。固体をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過し、エーテル（５０ｍＬ）で洗浄する。生成物を真空乾燥させて、ＩＬＹ−Ｖ−３１を得る。
【０５０２】
実施例１１．１０．１ｂおよび１１．１０．２：化合物（５−３１）および（５−４５）
【０５０３】
【化１６０】
2009514892.tif 000135
（２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ベンジルエステル（２）：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール（３．０ｇ、０．０２モル）、ブロモ−酢酸ベンジルエステル（４．６ｇ、０．０２モル）、炭酸カリウム（２．８ｇ、０．０２モル）の混合物を含むアセトンを、４８時間還流した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（１０：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、中間体（２）を得た。収率：３．５ｇ、５８％。
【０５０４】
［１−（１２−ブロモドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ベンジルエステル（３）：水素化ナトリウム（６０％鉱物油、０．０９３ｇ、６．４５ミリモル）を含むＤＭＦ（１０ｍＬ）の懸濁液に、（２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ベンジルエステル（２）（０．８４５ｇ、２．３ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、ジブロモドデカン（０．７６５ｇ、２．３ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（１０：１、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、中間体３を得た。収率：０．７０８ｇ、４５％。
【０５０５】
［３−アミノオキサリル−１−（１２−ブロモドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ベンジルエステル（４）：中間体３（０．７０８ｇ、１．３１ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（０．１６６ｇ、１．３１ミリモル）を滴下した。混合物を２時間撹拌し、次いで、混合物にアンモニアを１５分間バブリングした。反応混合物を蒸発させて、粗混合物として中間体４（１．０ｇ）を得て、これを、さらに精製せずに次の反応で使用した。
【０５０６】
［３−アミノオキサリル−１−（１２−｛［１２−（３−アミノオキサリル−４−ベンジルオキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシル］−ベンジルアミノ｝−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ベンジルエステル（５）：中間体４（１．０ｇ、前の工程由来の粗物質）、ベンジルアミン（０．０８ｇ、０．７４ミリモル）、ヨウ化ナトリウム（０．００５ｇ）、ヒューニッヒ塩基（０．０８４ｇ、０．６５ミリモル）の混合物を含むアセトニトリル（１０ｍＬ）を、１２時間還流した。混合物を濃縮し、残渣を、カラムクロマトグラフィ（１００％ＣＨ３ＣＮ）によって精製して、固体として中間体５を得た。収率：０．４１ｇ、２工程で２６％。
【０５０７】
（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［１２−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルアミノ］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（Ｉｌｙ−Ｖ−４５）：中間体５（０．０９８ｇ、０．０８４ミリモル）を含むエタノール（１０ｍＬ）溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％、５０ｍｇ）を添加した。混合物を、バルーンを使用して、水素雰囲気下で３０分間撹拌した。混合物をセライトで濾過し、濾液を蒸発させた。得られた固体をクロロホルムおよびヘキサンで洗浄して、Ｉｌｙ−Ｖ−４５を得た。収率：０．０２２ｇ、２７％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，ｐｐｍ：８．４０（ｂｒｓ，１Ｈ），７．７８（ｂｒｓ，２Ｈ），７．４１（ｂｒｓ，２Ｈ），７．０１−７．１２（ｍ，４Ｈ），６．４５（ｄ，２Ｈ），４．６１（ｓ，４Ｈ），４．１８（ｔ，４Ｈ），２．８０（ｔ，４Ｈ），２．５４（ｓ，６Ｈ），１．６２（ｍ，４Ｈ），１．４５（ｍ，４Ｈ），１．１１−１．１８（ｍ，３２Ｈ）ｐｐｍ．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９０２．１５（Ｍ＋１）．
［３−アミノオキサリル−１−（１２−｛［１２−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシル］−ベンジルアミノ｝−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（Ｉｌｙ−Ｖ−３１）：中間体５（０．２０４ｇ、０．２０４ミリモル）を含むＴＨＦ／ＭｅＯＨ（５ｍＬ／５ｍＬ）溶液に、水酸化カリウム（０．２０ｇ、３．５７ミリモル）の水溶液（１ｍＬ）を添加した。反応混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ５に酸性化した。溶媒を蒸発させ、残渣をジエチルエーテル（２×１０ｍＬ）で洗浄した。濾過によって固体を回収し、乾燥させて、黄色固体としてＩｌｙ−Ｖ−３１を得た。収率：０．１９０ｇ、９３％．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，ｐｐｍ：７．７８（ｂｒｓ，２Ｈ），７．４０−７．００（ｍ，１１Ｈ），６．５０（ｄ，２Ｈ），４．６０（ｓ，４  Ｈ），４．１８（ｂｒｓ，４Ｈ），３．６３（ｂｒｓ，２Ｈ），３．４２−３．２０（ｍ，４Ｈ），２．５５（ｓ，６Ｈ），１．６５（ｂｒｓ，４Ｈ），１．４２（ｂｒｓ，４Ｈ），１．３８−１．０８（ｍ，１４Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９９３．３８（Ｍ＋１）。
【０５０８】
実施例１１．１１ａ：化合物（５−３２）
【０５０９】
【化１６１】
2009514892.tif 000136
２，２’，２’’−（１，１’，１’’−（１２，１２’，１２’’−（ベンゼン−１，３，５−トリイルトリス（オキシ））トリス（ドデカン−１２，１−ジイル））トリス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））トリス（オキシ）三酢酸（ＩＬＹ−Ｖ−３２）。脱水フロログルシノール（１ミリモル）を、０℃の窒素下で、水素化ナトリウム（３．３ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（１２ｍＬ）に添加する。０．５時間後、この混合物を、０℃の窒素下で、ブロミド１（３．１ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）に添加する。反応物を０℃で８時間保持し、塩化アンモニウム溶液（１５ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄する。有機相を分離し、水相をジクロロメタン（２×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、黄橙色シロップを得た。溶離液としてクロロホルム／酢酸エチルを使用したシリカゲルでのクロマトグラフィによる精製によって、保護二量体生成物を得ることができる。
【０５１０】
保護二量体生成物（０．９ミリモル）および１，３−ジメトキシベンゼン（３ミリモル）を含む乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）を、室温の窒素下で、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）に添加する。溶液を１時間撹拌し、２５℃未満で溶媒を蒸発させた。残渣をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過によって固体を取り出し、エーテル（１００ｍＬ）で洗浄する。固体をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過し、エーテル（５０ｍＬ）で洗浄する。生成物を真空乾燥させて、ＩＬＹ−Ｖ−３２を得る。
【０５１１】
実施例１１．１１ｂ：化合物（５−３２）
【０５１２】
【化１６２】
2009514892.tif 000137
［３−アミノオキサリル−１−（１２−｛３，５−ビス−［１２−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−フェノキシ｝−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル：［３−アミノオキサリル−１−（１２−ブロモドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１）（０．７０ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１．０ｇ、過剰量）、およびフロログルシノール（０．０３ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）の混合物を、５５℃の乾燥ＤＭＦ（８ｍＬ）中にてＮ２下で１２時間加熱した。混合物を冷却し、濃縮して乾燥させた。シロップをＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）中に懸濁し、セライトで濾過した。濾液を水（１０×２ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。減圧下で溶媒を除去し、残渣を、７０％酢酸エチルを含むヘキサンで溶離するシリカゲルカラムでのクロマトグラフィに供して、オフホワイトの固体として中間体を得た。収率：０．０９ｇ、３０％。
【０５１３】
［３−アミノオキサリル−１−（１２−｛３，５−ビス−［１２−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−フェノキシ｝−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（Ｉｌｙ−Ｖ−３２）：中間体（０．０８ｇ，０．０４９ｍｍｏｌ）を、ＨＣＯ２Ｈ水溶液（８８％、２ｍＬ）に溶解し、混合物を室温で６時間撹拌した。混合物を、高真空下で濃縮して乾燥させ、水（２×２ｍＬ）と同時蒸発させた。次いで、ゴム状物質を含むフラスコを凍結乾燥機に移し、高真空下で一晩保持して、淡緑色ゴムとして表題化合物Ｉｌｙ−Ｖ−３２を得た。収率：０．０３ｇ、４０％。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６），δ，ｐｐｍ：（５−３７−１４７）δ７．７１（ｂｓ，３Ｈ），７．４０（ｂｓ，３Ｈ），７．２０−７．０５（ｍ，６Ｈ），６．４８（ｄ，３Ｈ），６．０１（ｓ，３Ｈ），４．６２（ｓ，６Ｈ），４．１８（ｔ，６Ｈ），３．８３（ｔ，６Ｈ），２．４７（ｓ，９Ｈ），１．７０−１．６０（ｍ，６Ｈ），１．３８−１．０５（ｍ，６０Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１４５２．８（Ｍ＋１）。
【０５１４】
実施例１１．１２ａ：化合物（５−３３）
【０５１５】
【化１６３】
2009514892.tif 000138
２，２’−（１，１’−（１２，１２’−（１，２−フェニレンビス（オキシ））ビス（ドデカン−１２，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）ビス（３−メチルブタン酸）（ＩＬＹ−Ｖ−３３）。ヒドロキシインドール（１）（１ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−３−メチルブタノアート（１ｍｍｏｌ）を、１０ｍＬアセトンに溶解する。室温のこの溶液に、無水炭酸カリウム（２ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌混合物を１２時間還流する。濾過によって固体を取り出し、カラムクロマトグラフィに供して２を得る。
【０５１６】
化合物２（１ミリモル）を、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解する。この溶液に塩化オキサリル（１．１ミリモル）を添加する。混合物を、室温で２時間撹拌する。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で１時間撹拌する。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して３を得る。
【０５１７】
インドール中間体３（１ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）を、０℃の窒素下で、９５％水素化ナトリウム（１．２ミリモル）に添加する。混合物を０℃で０．５時間撹拌し、次いで、０℃の１，１２−ジブロモドデカン（１．５ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液を１０分間にわたって滴下した。混合物を０℃で５時間および室温で１９時間撹拌する。反応物を０℃に冷却し、塩化アンモニウム溶液（１０ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈する。混合物を塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、水相をジクロロメタン（４×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて赤褐色の液体を得、これを高真空下でさらに蒸発させる。残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィによって精製して、４を得る。
【０５１８】
カテコール（１ミリモル）を、０℃の窒素下で、水素化ナトリウム（２．２ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（１２ｍＬ）に添加した。０．５時間後、この混合物を、０℃の窒素下で、ブロミド４（２．０５ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）に添加する。反応物を０℃で８時間保持し、塩化アンモニウム溶液（１５ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄する。有機相を分離し、水相をジクロロメタン（２×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、黄橙色シロップを得る。溶離液としてクロロホルム／酢酸エチルを使用したシリカゲルでのクロマトグラフィによって精製して、保護二量体生成物を得る。
【０５１９】
保護二量体生成物（０．９ミリモル）および１，３−ジメトキシベンゼン（３ミリモル）を含む乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）を、室温の窒素下で、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を添加する。溶液を１時間撹拌し、２５℃未満で溶媒を蒸発させた。残渣をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過によって固体を取り出し、エーテル（１００ｍＬ）で洗浄する。固体をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過し、エーテル（５０ｍＬ）で洗浄する。生成物を真空乾燥させて、ＩＬＹ−Ｖ−３３を得る。
【０５２０】
実施例１１．１２ｂ：化合物（５−３３）
【０５２１】
【化１６４】
2009514892.tif 000139
３−メチル−２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酪酸エチルエステル（２）：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール（１）（１．５ｇ、０．０１０モル）、２−ブロモ−３−メチル−酪酸エチルエステル（２．２ｇ、０．０１０モル）、および炭酸カリウム（過剰量）の混合物を含むアセトン（５０ｍＬ）を、３日間還流した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（２０：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、中間体２を得た。収率：１．８８ｇ、７１％。
【０５２２】
２−［１−（１２−ブロモ−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−３−メチル酪酸エチルエステル（３）：ＮａＨ（６０％鉱物油、０．４２ｇ、１０ミリモル）を含む無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）の混合物に、３−メチル−２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酪酸エチルエステル（２）（１．８８ｇ、７．０ミリモル）およびジブロモドデカン（２．３０ｇ、７．０ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（１０：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、中間体（３）を得た。収率：中間体（３）：１．３２ｇ、３５％、副生成物（４）：１．５６ｇ、３１％。
【０５２３】
２−［３−アミノオキサリル−１−（１２−ブロモ−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−３−メチル−酪酸エチルエステル（５）：中間体３（０．５０ｇ、０．９５９ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（２００ｍＬ）溶液に、０℃の塩化オキサリル（０．１２ｇ、０．９５ミリモル）を添加した。混合物を１時間撹拌した。反応混合物にアンモニアを２０分間バブリングした。混合物をさらに１時間撹拌し、濃縮した。残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、水（３×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、黄色固体として中間体（５）を得た。収率：０．４４ｇ、７７％。
【０５２４】
２−｛３−アミノオキサリル−１−［１２−（２−｛１２−［３−アミノオキサリル−４−（１−エトキシカルボニル−２−メチル−プロポキシ）−２−メチル−インドール−１−イル］−ドデシルオキシ｝−フェノキシ）−ドデシル］−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ｝−３−メチル−酪酸エチルエステル（６）：中間体５（４７４ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、カテコール（４０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（過剰量）の混合物を含むＤＭＦ（５ｍＬ）を、室温で７２時間撹拌した。反応物を濾過し、濾液をかち割り氷（２０ｍＬ）に注いだ。混合物をジクロロメタン（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（１％ＭｅＯＨを含むＣＨＣｌ３）によって精製して、中間体（６）を得、中間体（５）を回収した（２０５ｍｇ）。収率：０．０６０ｇ、７％。
【０５２５】
２−｛３−アミノオキサリル−１−［１２−（２−｛１２−［３−アミノオキサリル−４−（１−カルボキシ−２−メチル−プロポキシ）−２−メチル−インドール−１−イル］−ドデシルオキシ｝−フェノキシ）−ドデシル］−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ｝−３−メチル−酪酸（Ｉｌｙ−Ｖ−３３）：中間体６（５５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ／ＣＨ３ＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１：１、２ｍＬ：２ｍＬ：２ｍＬ）の溶液に、水酸化カリウム（０．０６ｇ、０．１１ミリモル）を添加した。混合物を、室温で４時間撹拌した。溶液を蒸発させ、残渣を０℃の１Ｍ  ＨＣｌで中和した。濾過によって固体を回収し、水、次いでヘキサンで洗浄して、黄色固体としてＩｌｙ−Ｖ−３３を得た。収率：０．０３５ｇ、６７％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６），δ，ｐｐｍ：δ１２．５１（ｂｒｓ，２Ｈ），８．１０（ｂｒｓ，２Ｈ），７．６２（ｂｒｓ，２Ｈ），７．１１−７．１４（ｍ，４Ｈ），７．９２−７．９６（ｍ，２Ｈ），７．８１−７．８４（ｍ，２Ｈ），６．４２（ｄ，２Ｈ），４．６８（ｄ，２Ｈ），４．１５（ｔ，４Ｈ），３．９２（ｔ，４Ｈ），２．４４（ｓ，６Ｈ），２．２３（ｍ，２Ｈ），１．６２（ｍ，４Ｈ），１．２０−１．４３（ｍ，３６Ｈ），１．０８（ｄ，６Ｈ），０．９８（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１０７９．４４（Ｍ＋１）。
【０５２６】
実施例１１．１３：化合物（５−２３）
【０５２７】
【化１６５−１】
2009514892.tif 000140
２，２’−（１，１’−（８，８’−（ブタン−１，４−ジイルビス（スルファンジイル））ビス（オクタン−８，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）二酢酸（ＩＬＹ−Ｖ−２３）。１，４−ブタンジチオール（２８０μＬ、２．４ｍｍｏｌ、２９０ｍｇ）を含む５ｍＬの無水ＤＭＦ溶液を、氷浴中で冷却し、乾燥水素化ナトリウム（１２５ｍｇ、５．２３ｍｍｏｌ、２．２当量）を添加した。窒素下にて０℃で１５分間撹拌後、混合物を、氷浴で冷却したＮ１−ブロモアルキルインドール１（２．６ｇ、５．０ｍｍｏｌ、２．１当量）を含む１０ｍＬの無水ＤＭＦ溶液に滴下した。得られた橙色混合物を、窒素下にて０℃で８時間撹拌した。−２０℃で一晩の冷却後、反応混合物の反応を１０ｍＬのＮＨ４Ｃｌで停止させ、室温に加温した。これを、５０ｍＬのＤＣＭで希釈し、ＮＨ４Ｃｌ（２５ｍＬ）で１回およびブライン（２×３０ｍＬ）で２回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、橙色油として粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィ（Ｈ／ＥＡ：２／３、３／７、および１／４）によって精製して、黄色固体として純粋な二量体（１．２ｇ、５１％）を得た。
【０５２８】
【化１６５−２】
2009514892.tif 000141
ＭＳ（ＥＳＩ，ＭｅＯＨ）：ｍ／ｚ  １０２９．５［Ｍ＋Ｎａ］＋．
保護二量体２（１．０ｇ、１ｍｍｏｌ）を、窒素下でＴＦＡ（７．５ｍＬ、１１ｇ、１００ｍｍｏｌ、１００当量）と共に、室温で４５分間撹拌した。次いで、過剰なＴＦＡを減圧蒸発させて、黄褐色油として粗生成物を得た。逆相クロマトグラフィ（水／アセトニトリル：７５／２５から５５／４５への１２０分にわたる連続的勾配；生成物は６５／３５で溶離された）によって精製して、純粋な２，２’−（１，１’−（８，８’−（ブタン−１，４−ジイルビス（スルファンジイル））ビス（オクタン−８，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）二酢酸（ＩＬＹ−Ｖ−２３）（７０ｍｇ、８％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（（ＣＤ３）２ＣＳ，３００ＭＨｚ）：δ７．７０（ｂｒ  ｓ，２Ｈ，ＮＨ２），７．３５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ，ＮＨ２），７．０８（ｍ，４Ｈ，Ｈ−６＋Ｈ−５），６．４９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．５１Ｈｚ，Ｈ−７），４．５７（ｓ，４Ｈ，Ｈ−１０），４．１２（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ−１４），２．５１（ｓ，６Ｈ，Ｈ−９），２．４４（ｍ，８Ｈ，Ｓ−ＣＨ２），１．６５（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２），１．５４（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２），１．４６（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２），１．２６（ｍ，１６Ｈ，ＣＨ２）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（（ＣＤ３）２ＣＳ，７５．５ＭＨｚ）：δ１８９．９（１２），１７１．４（１１），１６９．２（１３），１５２．５（４），１４４．２（１），１３７．８（８），１２３．４（３），１１６．７（６），１１０．７（５），１０４．５（７＋２），６７．８（１０），４３．６（１４），３１．７（ＣＨ２），３１．３（ＣＨ２），２９．９（ＣＨ２），２９．７（ＣＨ２），２９．３（ＣＨ２），２９．２（ＣＨ２），２８．８（ＣＨ２），２６．９（ＣＨ２），２５．８（ＣＨ２），１１．９（９）．
ＭＳ（ＥＳＩ，ＭｅＯＨ）：ｍ／ｚ  ９１７．４  ［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０５２９】
実施例１１．１４：（化合物  ５−４４）
【０５３０】
【化１６６】
2009514892.tif 000142
２−（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［３−アミノオキサリル−４−（１−エトキシカルボニル−２−メチル−プロポキシ）−２−メチル−インドール−１−イル］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチル−酪酸エチルエステル（４）：中間体３（０．２０ｇ、０．２７８ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、０℃の塩化オキサリル（０．０３５ｇ，０．２７８ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（２０ｍＬ）を滴下した。混合物を１時間撹拌した。混合物にアンモニアを２０分間バブリングし、１時間撹拌した。反応混合物を蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィ（１０：１  ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）によって精製して、黄色固体として中間体（４）を得た。収率：０．２１２ｇ、９１％。
【０５３１】
２−（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［３−アミノオキサリル−４−（１−カルボキシ−２−メチル−プロポキシ）−２−メチル−インドール−１−イル］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチル−酪酸（Ｉｌｙ−Ｖ−４４）：中間体４（１００ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ／ＣＨ３ＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１：１，３ｍＬ：３ｍＬ：３ｍＬ）溶液を、２．２当量のＫＯＨと共に室温で４時間撹拌した。溶液を蒸発させ、得られた残渣を０℃の５％ＨＣｌで中和した。得られた固体を濾過によって回収し、水、その後にヘキサンで洗浄して、黄色固体としてＩｌｙ−Ｖ−４４を得た。収率：０．０６７ｇ、７２％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，ｐｐｍ：１２．５１（ｂｒｓ，２Ｈ），８．０２（ｂｒｓ，２Ｈ），７．６１（ｂｒｓ，２Ｈ），７．１１−７．１４（ｍ，４Ｈ），６．４２（ｄ，２Ｈ），４．４２（ｄ，２Ｈ），４．１６（ｔ，４Ｈ），２．４１（ｓ，６Ｈ），２．２３（ｍ，２Ｈ），１．６２（ｍ，４Ｈ），１．２０−１．３２（ｍ，１６Ｈ），１．０７（ｄ，６Ｈ），０．９６（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝８０３．１２（Ｍ＋１）。
【０５３２】
実施例１１．１５：化合物（５−４１）
【０５３３】
【化１６７】
2009514892.tif 000143
１２−｛２−［１２−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−フェノキシ｝−ドデカン酸ベンジルエステル（２）：［３−アミノオキサリル−１−（１２−ブロモ−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１）（０．６５４ｇ、１．１２ｍｍｏｌ）、１２−ブロモベンジルドデセタート（１２−ｂｒｏｍｏｂｅｎｙｌｄｏｄｅｃｅｔａｔｅ）（０．４１６ｇ、１．１２ｍｍｏｌ）、カテコール（０．０９８ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（２．０ｇ、過剰量）の混合物を、５５℃の乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）中にてＮ２下で１２時間加熱した。混合物を冷却し、乾燥するまで濃縮した。シロップをＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）に懸濁し、セライトで濾過した。濾液を水（１０×２ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。減圧下で溶媒を除去し、残渣を８０％酢酸エチルを含むヘキサンで溶離するシリカゲルカラムでのクロマトグラフィに供して、オフホワイトの固体として中間体２を得た。収率：０．１８ｇ、１８％。
【０５３４】
１２−｛２−［１２−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−フェノキシ｝−ドデカン酸（Ｉｌｙ−Ｖ−４１）：化合物２（０．１２ｇ、０．１３３ｍｍｏｌ）を、Ｐｄ−Ｃ（１０％、０．０１ｇ）の存在下にてＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中で１時間水素化し、次いで、セライトで濾過した。濾液を濃縮して透明のシロップを得た。次いで、ＨＣＯ２Ｈ水溶液（８８％、２ｍＬ）に溶解し、混合物を室温で６時間撹拌した。混合物を高真空下で濃縮して乾燥させ、水（２×２ｍＬ）で同時蒸発させた。次いで、ゴム状物質を含むフラスコを凍結乾燥機に移し、高真空下で一晩保持して、白色固体として表題化合物Ｉｌｙ−Ｖ−４１を得た。収率：０．８ｇ、７９％。１Ｈ  ＮＭＲ：（ＤＭＳＯ−ｄ６），δ，ｐｐｍ：（５−３７−１９１）δ７．７０（ｂｓ，３Ｈ），７．４０（ｂｓ，３Ｈ），７．２０−７．０５（ｍ，２Ｈ），６．９５−６．８０（ｍ，４Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），４．１８（ｔ，２Ｈ），３．８３（ｔ，４Ｈ），２．４７（ｓ，３Ｈ），２．０９（ｔ，２Ｈ），１．７０−１．０５（ｍ，５４Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７５１．２（Ｍ＋１）
実施例１１．１６：化合物（５−３６）
【０５３５】
【化１６８】
2009514892.tif 000144
［３−アミノオキサリル−１−（１２−｛４’−［１２−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−ビフェニル−４−イルオキシ｝−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２）：４，４’−ジヒドロキシビフェニル（０．１８ｇ、０．９６６ミリモル）を含むＤＭＦ（４ｍＬ）溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、２．１２ｍＬ、２．１２ミリモル）を滴下した。混合物を、０℃で２０分間撹拌した。［３−アミノオキサリル−１−（１２−ブロモ−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１）（１．１ｇ、１．８９ミリモル）を含むＤＭＦ／ＴＨＦ（１０ｍＬ／５ｍＬ）溶液を、混合物に速やかに添加した。混合物を、０℃で１０時間撹拌した。０℃の塩化アンモニウム溶液（２０ｍＬ）で反応を停止させ、水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（２：１  ＣＨＣｌ３：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、琥珀色の半固体として中間体（２）を得た。収率：０．１５７ｇ、１４％。
【０５３６】
［３−アミノオキサリル−１−（１２−｛４’−［１２−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−ビフェニル−４−イルオキシ｝−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（Ｉｌｙ−Ｖ−３６）：中間体（２）（０．１２５ｇ、０．１０５ミリモル）を含むジクロロメタン溶液に、９０％ギ酸（３５ｍＬ）を添加した。混合物を、室温で８時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、残渣をジエチルエーテル（３０ｍＬ）中で撹拌した。形成された固体を濾過によって回収し、高真空下で乾燥させて、固体としてＩｌｙ−Ｖ−３６を得た。収率：０．０７６ｇ、６８％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，ｐｐｍ：７．７２（ｓ，２Ｈ），７．５０（ｓ，４Ｈ），７．４０（ｓ，２Ｈ），７．１５−７．０５（ｍ，４Ｈ），６．９５（ｄ，４Ｈ），６．５０（ｄ，２Ｈ），４．６２（ｓ，４Ｈ），４．１７（ｍ，４Ｈ），３．９７（ｍ，４Ｈ），２．５５（ｓ，６Ｈ），１．７５−１．６０（ｍ，８Ｈ），１．４５−１．２０（ｍ，３２Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１０７０．３３（Ｍ−１）。
【０５３７】
実施例１１．１７：化合物（５−３７）
【０５３８】
【化１６９】
2009514892.tif 000145
［３−アミノオキサリル−１−（１２−｛２’−［１２−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−ビフェニル−２−イルオキシ｝−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２）：中間体１（３２．６２ｇ、５６．２８ｍｍｏｌ）を含むジメチルスルホキシド（３００ｍＬ）溶液を調製した。混合物に、２，２’−ヒドロキシビフェニル（３．５２ｇ、１８．７６ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２６．４５ｇ、０．１８７モル）を添加した。混合物を、５５℃で１８時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（１Ｌ）で希釈し、塩化アンモニウム溶液（３×１Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（１：１  ＣＨＣｌ３：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色固体として中間体２を得た。収率：１７．６３ｇ、８０％。
【０５３９】
［３−アミノオキサリル−１−（１２−｛２’−［１２−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ドデシルオキシ］−ビフェニル−２−イルオキシ｝−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（Ｉｌｙ−Ｖ−３７）：中間体２（１．０ｇ、０．８４６ｍｍｏｌ）を含む無水ジクロロメタン（４０ｍＬ）溶液を調製した。混合物に、１，３−ジメトキシベンゼン（０．２５ｍＬ、１．７１ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を添加した。混合物を、室温で３時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をジエチルエーテル（５０ｍＬ）中で３０分間撹拌した。濾過によって固体を回収し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させて、緑色固体としてＩｌｙ−Ｖ−３７を得た。収率：０．８ｇ、８８％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，ｐｐｍ：１２．８５（ｂｒ，２Ｈ），７．７０（ｓ，２Ｈ），７．５０（ｄ，４Ｈ），７．３８（ｓ，２Ｈ），７．１８−７．０５（ｍ，４Ｈ），６．９５（ｄ，４Ｈ），６．５５（ｄ，２Ｈ），４．６２（ｓ，４Ｈ），４．２０−４．０５（ｍ，４Ｈ），４．００−３．９０（ｍ，４Ｈ），２．５５（ｓ，６Ｈ），１．７８−１．６０（ｍ，８Ｈ），１．４０−１．１５（ｍ，３２Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１０７１．２６（Ｍ＋１）。
【０５４０】
実施例１２：ヒト、マウス、およびブタホスホリパーゼＡ２の阻害についてのｉｎ−ｖｉｔｒｏアッセイ
本実施例では、蛍光定量アッセイ手順を使用して、ヒト、マウス、およびブタ由来の１Ｂ群ホスホリパーゼＡ２（ＰＬＡ２）のインヒビターとしての本発明のインドールおよびインドール関連化合物を評価した。本アッセイの説明は、以下の文献で見出される：Ｌｅｓｌｉｅ，ＣＣ  ａｎｄ  Ｇｅｌｂ，ＭＨ（２００４）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ“Ａｓｓａｙｉｎｇ  ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ  Ａ２  ａｃｔｉｖｉｔｙ”，２８４：２２９−２４２；Ｓｉｎｇｅｒ，ＡＧら（２００２）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ“Ｉｎｔｅｒｆａｃｉａｌ  ｋｉｎｅｔｉｃ  ａｎｄ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｓｅｔ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ａｎｄ  ｍｏｕｓｅ  ｇｒｏｕｐｓ  Ｉ，ＩＩ，Ｖ，Ｘ，ａｎｄ  ＸＩＩ  ｓｅｃｒｅｔｅｄ  ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅｓ  Ａ２”，２７７：４８５３５−４８５４９（本明細書中に参考として組み込まれている）。
【０５４１】
一般に、本アッセイは、ｓｎ−２脂肪アシル鎖の末端にピレンフルオロフォアを有するホスファチジルメタノール基質を使用した。理論に拘束されないが、リン脂質小胞中の隣接リン脂質からピレンが極めて近いために、単量体ピレンと比較してスペクトル特性が変化した。ウシ血清アルブミンは水相に存在し、ＰＬＡ２触媒反応によってグリセロール骨格から遊離する場合に、ピレン脂肪酸を捕捉した。しかし、強力なインヒビターが、グリセロール骨格からのピレン脂肪酸の遊離を阻害することができる。したがって、かかる特徴により、アルブミン結合ピレン脂肪酸の蛍光のモニタリングによって高感度のＰＬＡ２阻害アッセイが可能である。ヒト、マウス、およびブタホスホリパーゼに及ぼす所与のインヒビターおよびインヒビター濃度の影響を決定した。
【０５４２】
組換えヒトおよびマウス１Ｂ群ＰＬＡ２をクローン化し、不溶性封入体として大腸菌で発現させた。溶解緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．０）、２５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．５％Ｔｒｉｔｏｎ  １００）中での細胞ペレットの超音波処理、１２，０００×ｇでの遠心分離、および洗浄緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．０）、２５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．５％Ｔｒｉｔｏｎ  １００）中での３回の洗浄によって、封入体を単離および精製した。次いで、封入体を、溶解緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．０）、２５０ｍＭ  ＮａＣｌ、６Ｍグアニジン−ＨＣｌ、１ｍＭ  ＤＴＴ）に溶解し、４℃の１０倍体積のリフォールディング緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．０）、２５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．５Ｍグアニジン−ＨＣｌ、５％（ｗ／ｗ）グリセロール、２ｍＭ還元グルタチオン、および０．４ｍＭ酸化グルタチオン）に対して４回透析した。正確にリフォールディングされたタンパク質を、窒素圧下（７０ｐｓｉ未満）でＡｍｉｃｏｎ  Ｓｔｉｒｒｅｄ  ｃｅｌｌを使用して濃縮し、１０倍体積の５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．０）、２５０ｍＭ  ＮａＣｌ、および５％（ｗ／ｗ）グリセロールに対して透析した。ヒトおよびマウス１Ｂ群ＰＬＡ２を、Ｈｉｇｈ  Ｓイオン交換カラムおよびゲル濾過カラムによってさらに精製した。
【０５４３】
以下の試薬および装置を、以下の供給元から得た。
１．ブタ１Ｂ群ホスホリパーゼＡ２
２．１−ヘキサデカノイル−２−（１−ピレンデカノイル）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホメタノール（ＰＰｙｒＰＭ）
３．ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ、脂肪酸なし）
４．２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール塩酸塩（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ）
５．塩化カルシウム
６．塩化カリウム
７．溶媒：ＤＭＳＯ、トルエン、イソプロパノール、エタノール
８．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  ＳＰＥＣＴＲＡｍａｘマクロプレート分光蛍光光度計
９．Ｃｏｓｔａｒ  ９６ウェルブラックウォール／クリアボトムプレート
以下の試薬を調製した。
１０．ＰＰｙｒＰＭストック溶液（１ｍｇ／ｍＬ）を含むトルエン：イソプロパノール（１：１）
１１．ＩＬＹ１０４インヒビターストック溶液（１０ｍＭ）を含むＤＭＳＯ
１２．３％（ｗ／ｖ）ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）
１３．ストック緩衝液：５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、５０ｍＭ  ＫＣｌ、および１ｍＭ  ＣａＣｌ２
評価した化合物の阻害潜在性を評価するために、以下の手順を行った。
１４．３ｍＬの３％ＢＳＡを４７ｍＬストック緩衝液に添加することによってアッセイ緩衝液を調製した。
１５．連続希釈したインヒビターをアッセイ緩衝液に添加することによって溶液Ａを調製した。インヒビターを、ストック緩衝液で１５μＭから８回３倍に連続希釈した。
１６．ヒト、マウス、およびブタＰＬＡ２をアッセイ緩衝液に添加することによって溶液Ｂを調製した。酵素の失活を最小にするために、この溶液を使用直前に調製した。
１７．３０μＬのＰＰｙｒＰＭストック溶液を９０μＬのエタノールに添加することによって溶液Ｃを調製した。次いで、１２０μＬの全ＰＰｙｒＰＭ溶液を約１分間にわたって連続的に撹拌した８．８２ｍＬアッセイ緩衝液に滴下して、最終濃度が４．２μＭのＰＰｙｒＰＭ小胞溶液を形成させた。
１８．ＳＰＥＣＴＲＡｍａｘマクロプレート分光蛍光光度計を、３７℃に設定した。
１９．１００μＬの溶液Ａを、ｃｏｓｔａｒ９６ウェルブラックウォール／クリアボトムプレートの各阻害アッセイウェルに添加した。
２０．１００μＬの溶液Ｂを、ｃｏｓｔａｒ９６ウェルブラックウォール／クリアボトムプレートの各阻害アッセイウェルに添加した。
２１．１００μＬの溶液Ｃを、ｃｏｓｔａｒ９６ウェルブラックウォール／クリアボトムプレートの各阻害アッセイウェルに添加した。
２２．プレートを、分光蛍光光度計の室内で３分間インキュベートした。
２３．３４２ｎｍの励起および３９５ｎｍの放射を使用して、蛍光を読み取った。
【０５４４】
評価した化合物を２連で試験し、その値を平均して阻害曲線にプロットし、ＩＣ５０を計算した。非阻害コントロールと比較して、試験反応物中の３９５ｎｍでの放射におけるより低い蛍光シグナルは、ＰＬＡ２の阻害を示す。反応物中の化合物の最終濃度が典型的には１５μＭ〜０．００７μＭの範囲であったにもかかわらず、より強力なインヒビターがはるかに低い濃度に希釈された。最初に活性であることが見出された化合物について、その阻害活性を繰り返し確認した。ＢｉｏＤａｔａＦｉｔ  １．０２（Ｆｏｕｒ  Ｐａｒａｍｅｔｅｒ  Ｍｏｄｅｌ）ソフトウェアパッケージを使用して、ＩＣ５０を計算した。阻害曲線フィッティングを作成するために使用した式は、
【０５４５】
【化１７０】
2009514892.tif 000146
である。式中、αは上の漸近線の値であり、βは下の漸近線の値であり、κは倍率であり、γは、
【０５４６】
【化１７１】
2009514892.tif 000147
での変曲点のｘ座標を示す因数である（α、β、κ、γ＞０、β＜α、およびβ＜γ＜αの制限がある）。ＩＣ５０値が試験で１５μＭの化合物濃度に到達しなかった実験では、１５μＭでの阻害率を報告した。
【０５４７】
評価した化合物による膵臓分泌性ヒト、マウス、およびブタ１Ｂ群ＰＬＡ２についての阻害アッセイの結果を、表４にまとめる。
表４：膵臓分泌性ヒト、マウス、およびブタＰＬＡ２の阻害
【０５４８】
【化１７２】
2009514892.tif 000148
【０５４９】
【化１７３】
2009514892.tif 000149
これらのデータは、本発明の多価インドールおよびインドール関連化合物がホスホリパーゼＡ２の阻害に活性であることを証明する。
【０５５０】
実施例１３：多価インドールまたはインドール関連化合物の生物学的利用能
本実施例は、ホスホリパーゼインヒビターである本発明の多価インドールまたはインドール関連化合物（実施例１２を参照のこと）が有意に吸収されない（すなわち、実質的に内腔局在化される）ことを示す。
【０５５１】
化合物５−２４（ＩＬＹ−Ｖ−２４）の生物学的利用能を、以下のように決定した。一般に、生物学的利用能を、静脈内（ＩＶ）投与後のマウス血清中の試験化合物の濃度の経時時間と試験化合物の経口投与後の濃度の経時時間との比較によって計算した。ＩＶ用量は約３ｍｇ／ｋｇであり、経口用量は約３０ｍｇ／ｋｇであった。
【０５５２】
物質。経口およびＩＶ用処方物の調製のために以下の物質を使用した。
【０５５３】
【化１７４】
2009514892.tif 000150
経口処方物。経口処方物を以下のように調製した。滅菌フラスコに、９０ｍＬの滅菌Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水を添加した。９ｍＬのＰＥＧ−４００を添加した（最終濃度９％）。５０μＬのＴｗｅｅｎ−８０を添加した（最終濃度０．０５％）。０．９ｇのＣＭＣを秤量し、添加した（最終濃度０．９％ｗ／ｖ）。清潔な撹拌棒を添加し、室温で一晩の撹拌によってＣＭＣを効率的に溶解した。約３０ｍｇの試験化合物を、４０ｍＬガラスバイアル中に秤量した。約１０ｍＬの経口処方物を添加した（被験物質の最終濃度は３ｍｇ／ｍＬ）。バイアルをボルテックスし、次いで、加温超音波処理浴中で３０分間超音波処理した。この後、大半の被験物質が懸濁したが、バイアルの底にいくらかの沈殿が認められた。この調製物をさらに１時間超音波処理し、投与前に粒子の沈殿をチェックし、投与中に十分な混合状態を保持した。
【０５５４】
静脈内（ＩＶ）処方物。静脈内処方物を以下のように調製した。滅菌フラスコに、６０ｍＬの滅菌Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水を添加した。３０ｍＬのＰＥＧ−３００を添加した（最終濃度３０％）。５ｍＬのＥｔＯＨを添加した（最終濃度５％）。これによってＩＶ処方物が得られた（−ＤＭＳＯ）。試験化合物を以下のように溶解した。約３ｍｇの被験物質を１０ｍＬのガラスバイアルに秤量し、約５００μＬのＤＭＳＯを添加した。約９．５ｍＬの上記ＩＶ処方物（−ＤＭＳＯ）を、４０ｍＬガラスバイアルに添加し、１０ｍＬのＩＶ処方物中の被験物質の最終濃度を３ｍｇにした（５％ＤＭＳＯを含む）。投与前に処方物をボルテックスした。
【０５５５】
研究デザイン。生物学的利用能研究を以下のようにデザインした。３つの雄ＣＤ−１ハツカネズミ群（Ｎ＝１８、２４、または３）を、各研究のために使用した。研究０日目に、全動物の体重を測定し、投薬量を計算し、以下の表５に概説のように経口経路（ＰＯ）または（ＩＶ）で動物に投与した。ＰＯ処方物を、投与１時間前に加温した超音波処理浴中で超音波処理した。ＩＶ処方物を、投与直前に５分間ボルテックスした。指定の時間間隔で血漿サンプル（０．５ｍＬ／サンプル）を回収し、抗凝固剤としてカリウム−ＥＤＴＡを含むラベルを付けたＥｐｐｅｎｄｏｒｆ（登録商標）チューブに入れ、遠心分離し、ラベルを付けたＥｐｐｅｎｄｏｒｆ（登録商標）チューブにピペットで移し（少なくとも０．２ｍＬの血漿）、−８０℃で凍結した。
表５：生物学的利用能研究の詳細
【０５５６】
【化１７５】
2009514892.tif 000151
計算。生物学的利用能を以下のように計算した。投与日に測定した平均体重に基づいて、各用量を計算した。試験化合物の血清濃度および実際の投与溶液濃度を、液体クロマトグラフィ後の二次元質量分析（ＬＣ  ＭＳ／ＭＳ）を使用して測定した。各被験物質について方法を至適化し、全ての場合において内部標準を使用した。
【０５５７】
最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）および最高血漿中濃度に到達する時間（Ｔｍａｘ）を、生データの目視検査によって得た。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ４．０ソフトウェア、これに含まれる半減期（ｔ１／２）、および時間０から最終時点までの濃度−時間曲線下領域（ＡＵＣ０−ｔ）を使用して薬物動態学パラメーターを計算した。データの目視検査により、全ての場合で、ＡＵＣ０−ｔが全ての被験物質で０から無限大までの濃度−時間曲線下領域（ＡＵＣ０−∞）と非常に類似したことを示す。
【０５５８】
生物学的利用能（％Ｆ）を、以下の関係を使用して計算した。
【０５５９】
％Ｆ＝（ＡＵＣ０−ｔ，経口／ＡＵＣ０−ｔ，ｉｖ）×（用量ｉｖ／用量経口）×１００
（式中、％Ｆは生物学的利用能であり、ＡＵＣ０−ｔは測定可能な最終時点での濃度−時間曲線下面積であり、ＩＶは静脈内をいう。）
結果。化合物５−２４（ＩＬＹ−Ｖ−２４）の生物学的利用能は、約４〜８％であった。
【０５６０】
実施例１４：Ｃ４−酸性インドールおよびインドール関連化合物の合成ならびにヒト、マウス、およびブタホスホリパーゼＡ２阻害のための一定のかかる化合物についてのｉｎ−ｖｉｔｒｏアッセイ
本実施例では、特定のＣ４−酸性部分を有する種々の好ましいインドールおよびインドール関連化合物を調製する。
【０５６１】
実施例１４．１（化合物４−２０）
【０５６２】
【化１７６】
2009514892.tif 000152
１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール（１）（５０ｇ、０．３３９モル）を、無水ＤＭＦ（１Ｌ）に溶解した。混合物に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（２７．９ｇ、０．６９７モル）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌した。混合物に、臭化ベンジル（８２．７ｍＬ、０．６９７モル）を滴下した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（４Ｌ）で希釈し、水（５×５００ｍＬ）、その後にブライン（１Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。橙色の油状残渣を、カラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色油として８６ｇ（７２％）の２を得た。
【０５６３】
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）：１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）（８６ｇ、０．２６３モル）を、酢酸エチル（１．５Ｌ）およびメタノール（３００ｍＬ）に希釈した。混合物に、１０％Ｐｄ／Ｃ（湿潤型）（１８ｇ）を添加した。次いで、反応物を、室温および１ａｔｍの水銀バブラーを通したＨ２ガスに供した。混合物を６時間撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、クリーム状の固体として３（３０ｇ、４９％）を得た。
【０５６４】
２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−１インドール−４−イルオキシ）−酪酸（ｂｕｔｒｉｃ  ａｃｉｄ）エチルエステル（４）：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（０．５ｇ、２．１ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）に溶解した。この溶液に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（０．１１ｇ、２．７３ミリモル）の溶液を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、エチル−２−ブロモブチラート（０．４ｍＬ、２．７３ミリモル）を添加した。混合物を、室温で７２時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（８：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、橙色油として４（０．３２ｇ、４３％）を得た。
【０５６５】
２−（３−アミノオキサリル−１−−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酪酸エチルエステル（１０）：塩化オキサリル（０．１ｍＬ、１．０９ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液に、２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−１インドール−４−イルオキシ）−酪酸エチルエステル４（０．３２ｇ、０．９１４ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液を滴下した。混合物を、室温で１時間撹拌した。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングした。混合物を、室温で１８時間撹拌した。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（２×３００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、緑色固体として１０（０．３５ｇ、９１％）を得た。
【０５６６】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酪酸（Ｉｌｙ−ＩＶ−２０）：２−（３−アミノオキサリル−１−−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酪酸エチルエステル（１０）（０．２ｇ、０．４７７ミリモル）を、ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）に溶解した。混合物に、水酸化リチウム一水和物（０．０２４ｇ、０．５７３ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。混合物を、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ３に酸性化した。得られた沈殿物を濾過によって回収し、水で洗浄し、乾燥させて、黄色固体としてＩｌｙ−ＩＶ−２０（０．０４３ｇ、２３％）を得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−２４９．１：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ１２．６３（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．９５（ｓ，１Ｈ），７．５５（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．３５−７．００（ｍ，７Ｈ），６．４７（ｄ，１Ｈ），５．５０（ｓ，２Ｈ），３．４（ｍ，１Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ），１．９５（ｍ，２Ｈ），１．００（ｍ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ＋）３９５．０２
実施例１４．２（化合物４−２４）
【０５６７】
【化１７７】
2009514892.tif 000153
１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール（１）（５０ｇ、０．３３９モル）を、無水ＤＭＦ（１Ｌ）に溶解した。混合物に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（２７．９ｇ、０．６９７モル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、臭化ベンジル（８２．７ｍＬ、０．６９７モル）を滴下した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（４Ｌ）で希釈し、水（５×５００ｍＬ）、その後にブライン（１Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。橙色の油状残渣を、カラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色油として８６ｇ（７２％）の２を得た。
【０５６８】
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）：１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）（８６ｇ、０．２６３モル）を、酢酸エチル（１．５Ｌ）およびメタノール（３００ｍＬ）に溶解した。混合物に、１０％Ｐｄ／Ｃ（湿潤型）（１８ｇ）を添加した。次いで、反応物を、室温および１ａｔｍの水銀バブラーを通したＨ２ガスに供した。混合物を６時間撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、クリーム状の固体として３（３０ｇ、４９％）を得た。
【０５６９】
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フルオロ−酢酸エチルエステル（６）：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（０．３ｇ、１．２６ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）に溶解した。溶液に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（６６ｍｇ、１．６５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、エチル−２−ブロモフルオロアセテート（０．２ｍＬ、１．６５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色油として６（０．１４ｇ、３２％）を得た。
【０５７０】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フルオロ−酢酸エチルエステル（１２）：塩化オキサリル（０．０４２ｍＬ、０．４７８ミリモル）溶液を、無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）で希釈した。溶液に、（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フルオロ−酢酸エチルエステル（６）（０．１４ｇ、０．３９８ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）を滴下した。混合物を、室温で２時間撹拌した。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で１．５時間撹拌した。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（２×３００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、分取ＴＬＣ（３：１  ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ）によって精製して、黄色固体として１２（０．０２ｇ、１２％）を得た。極性生成物も単離された（Ｒｆ約０．２）。
【０５７１】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フルオロ−酢酸（Ｉｌｙ−ＩＶ−２４）：（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フルオロ−酢酸エチルエステル（１２）（０．０６ｇ、０．１４５ミリモル）を、無水エタノール（１０ｍＬ）に溶解した。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液を添加した（０．１５ｍＬ、０．１５２ミリモル）。混合物を、室温で３０分間撹拌した。エタノールを蒸発させ、Ｈ２Ｏ（５ｍＬ）を添加した。溶液を、０．５Ｍ  ＨＣｌでｐＨ２に酸性化した。混合物を、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。有機物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で洗浄し、分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、緑色固体としてＩｌｙ−ＩＶ−２４（５ｍｇ、９％）を得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−２８７．１：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ７．７０（ｓ，１Ｈ），７．４０−６．９０（ｍ，９Ｈ），６．２０（ｄ，１Ｈ），５．５０（ｓ，２Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ＋）３８４．９４
実施例１４．３（化合物４−２２）
【０５７２】
【化１７８】
2009514892.tif 000154
１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール（１）（５０ｇ、０．３３９モル）を、無水ＤＭＦ（１Ｌ）に溶解した。混合物に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（２７．９ｇ、０．６９７モル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、臭化ベンジル（８２．７ｍＬ、０．６９７モル）を滴下した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（４Ｌ）で希釈し、水（５×５００ｍＬ）、その後にブライン（１Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。橙色の油状残渣を、カラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色油として８６ｇ（７２％）の２を得た。
【０５７３】
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）：１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）（８６ｇ、０．２６３モル）を、酢酸エチル（１．５Ｌ）およびメタノール（３００ｍＬ）に希釈した。混合物に、１０％Ｐｄ／Ｃ（湿潤型）（１８ｇ）を添加した。次いで、反応物を、室温および１ａｔｍの水銀バブラーを通したＨ２ガスに供した。混合物を６時間撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、クリーム状の固体として３（３０ｇ、４９％）を得た。
【０５７４】
２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチル−酪酸エチルエステル（７）：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（０．３ｇ、１．２６ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解した。溶液に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（６６ｍｇ、１．６５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、エチル−２−ブロモイソバレラート（０．３４４ｍＬ、１．６５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（１０：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、７：エチル−２−ブロモイソバレラートの１：１混合物を得た。カラムクロマトグラフィ（１０：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によるさらなる精製により、黄色油として７（０．０９ｇ、１９％）を得た。
【０５７５】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドリルオキシ）−３−メチル−酪酸エチルエステル（１３）：２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチル−酪酸エチルエステル（７）（０．０９ｇ、０．２４７ミリモル）を、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解した。溶液に、塩化オキサリル（０．０２６ｍＬ、０．２９６ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で１時間撹拌した。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、黄色固体（無機塩を含む）として１３（０．２３ｇ、＞１００％）を得た。物質を、さらに精製することなく次の工程で使用した。
【０５７６】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベニル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチル−酪酸（Ｉｌｙ−ＩＶ−２２）：２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドリルオキシ）−３−メチル−酪酸エチルエステル（１３）（０．１５ｇ、０３４５ミリモル）を、無水エタノール（１０ｍＬ）に溶解した。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液（０．４ｍＬ、０．４０３ミリモル）を添加した。混合物を、室温で７２時間撹拌した。反応混合物を、高真空下で蒸発させた。残渣をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解し、２Ｍ  ＨＣｌで酸性化した。混合物を、３０分間撹拌した。濾過によって沈殿物を回収し、Ｈ２Ｏで洗浄して、黄色固体としてＩｌｙ−ＩＶ−２２（０．０３ｇ、２１％）を得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−２７０．１：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ１２．６０（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），８．００（ｓ，１Ｈ），７．６０（ｓ，１Ｈ），７．４０−７．００（ｍ，７Ｈ），６．５０（ｄ，１Ｈ），５．５０（ｓ，２Ｈ），４．４７（ｄ，１Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｍ，１Ｈ），１．１０−０．９０（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ＋）４０９．００
実施例１４．４（化合物４−３３）
【０５７７】
【化１７９】
2009514892.tif 000155
１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール（１）（５０ｇ、０．３３９モル）を、無水ＤＭＦ（１Ｌ）に溶解した。混合物に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（２７．９ｇ、０．６９７モル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、臭化ベンジル（８２．７ｍＬ、０．６９７モル）を滴下した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（４Ｌ）で希釈し、水（５×５００ｍＬ）、その後にブライン（１Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。橙色の油状残渣を、カラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色油として８６ｇ（７２％）の２を得た。
【０５７８】
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）：１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）（８６ｇ、０．２６３モル）を、酢酸エチル（１．５Ｌ）およびメタノール（３００ｍＬ）に希釈した。混合物に、１０％Ｐｄ／Ｃ（湿潤型）（１８ｇ）を添加した。次いで、反応物を、室温および１ａｔｍの水銀バブラーを通したＨ２ガスに供した。混合物を６時間撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、クリーム状の固体として３（３０ｇ、４９％）を得た。
【０５７９】
２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−ペンタン二酸１−メチルエステル５−メチルエステル（９）：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（０．３ｇ、１．２６ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解した。溶液に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（６６ｍｇ、１．６５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、ジメチル−２−ブロモグルタラート（０．３ｍＬ、１．２５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、白色固体として９（０．４９ｇ、９７％）を得た。
【０５８０】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−ペンタン二酸（ｐｅｎｔａｅｄｉｏｉｃ  ａｃｉｄ）ジメチルエステル（１５）：２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−ペンタン二酸１−メチルエステル５−メチルエステル（９）（０．１５ｇ、０．３８ミリモル）を、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解した。溶液に、塩化オキサリル（０．０３７ｍＬ、０．３９６ミリモル）を添加した。混合物を、室温で２時間撹拌した。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で１時間撹拌した。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、白色固体として１５（０．１７ｇ、９６％）を得た。
【０５８１】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベニル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−ペンタン二酸（Ｉｌｙ−ＩＶ−３３）：２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−ペンタン二酸ジメチルエステル（１５）（０．０８ｇ、０．１７２ミリモル）を、ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）に溶解した。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液（０．４８ｍＬ、０．４９５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で７２時間撹拌した。反応混合物を乾燥するまで蒸発させ、次いで、Ｈ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解し、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ４に酸性化した。得られた沈殿物を濾過によって回収し、乾燥させて、黄色固体としてＩｌｙ−ＩＶ−３３（０．０３ｇ、４０％）を得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−２８８．２：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ８．４０（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．９２（ｓ，１Ｈ），７．４０−７．２０（ｍ，３Ｈ），７．１０−６．９０（ｍ，４Ｈ），６．４０（ｄ，１Ｈ），５．４５（ｓ，２Ｈ），４．２０（ｔ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ），２．４０−１．９０（ｍ，４Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ−）４３６．９８（ＥＳ＋）４６０．９１（Ｍ＋Ｎａ＋）。
【０５８２】
実施例１４．５（化合物４−３２）
【０５８３】
【化１８０】
2009514892.tif 000156
１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール（１）（５０ｇ、０．３３９モル）を、無水ＤＭＦ（１Ｌ）に溶解した。混合物に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（２７．９ｇ、０．６９７モル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、臭化ベンジル（８２．７ｍＬ、０．６９７モル）を滴下した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（４Ｌ）で希釈し、水（５×５００ｍＬ）、その後にブライン（１Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。橙色の油状残渣を、カラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色油として８６ｇ（７２％）の２を得た。
【０５８４】
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）：１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）（８６ｇ、０．２６３モル）を、酢酸エチル（１．５Ｌ）およびメタノール（３００ｍＬ）に溶解した。混合物に、１０％Ｐｄ／Ｃ（湿潤型）（１８ｇ）を添加した。次いで、反応物を、室温および１ａｔｍの水銀バブラーを通したＨ２ガスに供した。混合物を６時間撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、クリーム状の固体として３（３０ｇ、４９％）を得た。
【０５８５】
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フェニル−酢酸メチルエステル（８）：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（０．３ｇ、１．２６ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解した。溶液に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（６６ｍｇ、１．６５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、ブロモ−フェニル−酢酸メチルエステル（０．２４ｍＬ、１．５１２ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（１０：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、白色固体として８（０．３ｇ、６２％）を得た。
【０５８６】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−フェニル−酢酸メチルエステル（１４）：（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フェニル−酢酸メチルエステル（８）（０．１５ｇ、０．３８９ミリモル）を、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解した。溶液に、塩化オキサリル（０．０４ｍＬ、０．４２８ミリモル）を添加した。混合物を、室温で２時間撹拌した。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で１時間撹拌した。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、黄色固体として１４（０．１５ｇ、８５％）を得た。
【０５８７】
（３−アミノオキサリル−１−ベニル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フェニル−酢酸（Ｉｌｙ−ＩＶ−３２）：（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−フェニル−酢酸メチルエステル（１４）（０．１５ｇ、０．３３ミリモル）を、ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）に溶解した。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液（０．４８ｍＬ、０．４９５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応混合物を、乾燥するまで蒸発させた。残渣をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解し、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ４に酸性化した。濾過によって得られた沈殿物を回収し、Ｈ２Ｏで洗浄し、乾燥させて、黄色固体としてＩｌｙ−ＩＶ−３２（０．０８ｇ、５５％）を得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−２８１．１：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ１２．９０（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．９０（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．６５（ｄ，２Ｈ），７．５０−７．００（ｍ，１１  Ｈ），６．６０（ｄ，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），５．５０（ｓ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ＋）４４３．０２
実施例１４．６ａ、１４．７ａ、１４．８−１４．１０（化合物４−４７、４−４６、４−８、４−１、および４−１９）
【０５８８】
【化１８１】
2009514892.tif 000157
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−４−メチルペンタン酸（ＩＬＹ−ＩＶ−４７）；２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３，３−ジメチルブタン酸（ＩＬＹ−ＩＶ−４６）；２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）マロン酸（ＩＬＹ−ＩＶ−８）；２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−ホスホノ酢酸（ＩＬＹ−ＩＶ−１）；２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）コハク酸（ＩＬＹ−ＩＶ−１９）を、上記スキームおよび以下の説明にしたがって調製することができる。
【０５８９】
アルキル化：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（１ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解する。溶液に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（１．２ミリモル）を添加する。混合物を、室温で１時間撹拌する。混合物に、対応するブロモ−酢酸メチルエステル（１．２ミリモル）を添加する。混合物を、室温で１８時間撹拌する。反応物を、酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮する。残渣をカラムクロマトグラフィによって精製して、１５を得る。
【０５９０】
グリオキサミド化（Ｇｌｙｏｘａｍｉｄａｔｉｏｎ）：対応する酢酸メチルエステル（１５）（１ミリモル）を、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解する。溶液に、塩化オキサリル（１．１ミリモル）を添加する。混合物を、室温で２時間撹拌する。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で１時間撹拌する。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、１６を得る。
【０５９１】
脱保護：化合物１６（１ミリモル）を、ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）に溶解する。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液を添加する。混合物を、室温で１８時間撹拌する。反応混合物を、乾燥するまで蒸発させる。残渣をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解し、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ４に酸性化する。濾過によって得られた沈殿物を回収し、Ｈ２Ｏで洗浄し、乾燥させて、Ｉｌｙ−ＩＶ−４７、Ｉｌｙ−ＩＶ−４６、Ｉｌｙ−ＩＶ−８、Ｉｌｙ−ＩＶ−１、およびＩｌｙ−ＩＶ−１９を得る。
【０５９２】
実施例１４．６ｂ（化合物４−４７）
【０５９３】
【化１８２】
2009514892.tif 000158
２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−４−メチル−ペンタン酸メチルエステル（２）：Ｋ２ＣＯ３（０．５６３ｇ、４．２２ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０３１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、および１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（１）（０．５００ｇ、２．１１ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＭＦ（１５ｍＬ）の撹拌懸濁液に、（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２ＢｒＣＨＣＯ２Ｍｅ（０．６６ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を、７０℃で７時間加熱し、室温に冷却し、水（３０ｍＬ）を添加した。混合物を、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、水（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。１０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン〜２０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサンを使用したシリカゲルでの残渣のフラッシュクロマトグラフィにより、淡黄色固体として生成物２を得た。収率：０．５４ｇ（７０％）。
【０５９４】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−４−メチル−ペンタン酸メチルエステル（３）：２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−４−メチル−ペンタン酸メチルエステル（２）（２４３ｍｇ、０．６７１ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）溶液を調製した。この混合物に、塩化オキサリル（０．０７５ｍＬ、０．８５ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を、室温で１時間撹拌した。アンモニアを混合物に３０分間バブリングし、さらに１時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を、ＣＨＣｌ３／ヘキサン（１：１）からの結晶化によって精製して、黄色固体として中間体（３）を得た。収率：０．２２０ｇ（７６％）。
【０５９５】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−４−メチル−ペンタン酸（Ｉｌｙ−ＩＶ−４７）：２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−４−メチル−ペンタン酸メチルエステル（３）（１５０ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（５ｍＬ／５ｍＬ／５ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（０．０４１ｇ、１．７２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、蒸発させ、次いで、１Ｎ  ＨＣｌで酸性化して（ｐＨ＝４）白色沈殿物を形成させ、これを濾過して取り出し、水で洗浄し、真空乾燥させて、黄色固体として生成物Ｉｌｙ−ＩＶ−４７を得た。収率：１２５ｍｇ（８６％）。１Ｈ  ＮＭＲ：０５−０５６−０６９（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ，ｐｐｍ：０．８８（ｄ，３Ｈ），０．９５（ｄ，３Ｈ），１．５５−１．６５（ｍ，１Ｈ），１．７６−２．０４（ｍ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ），４．７０（ｍ，１Ｈ），５．４８（ｓ，２Ｈ），６．５４（ｄ，１Ｈ），７．００−７．１８（ｍ，４Ｈ），７．２０−７．３８（ｍ，３Ｈ），７．５８（ｓ，１Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ）（ＣＯＯＨは示さず）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４２２．９９（Ｍ＋１）。
【０５９６】
実施例１４．７ｂ（化合物４−８）
【０５９７】
【化１８３】
2009514892.tif 000159
２−ブロモ−マロン酸ジベンジルエステル（２）：マロン酸ジベンジル（９．８ｇ、３４．４６ミリモル）を含む四塩化炭素（２５ｍＬ）溶液に、臭素（１０．１４ｇ、６３．４ミリモル）を室温で４時間にわたって滴下した。添加時に、反応混合物を１５０Ｗのランプで照射した。反応混合物の反応を、水で停止させた。有機層を分離し、水相をジクロロメタン（３×３０ｍＬ）でさらに抽出した。有機抽出物を合わせ、炭酸水素ナトリウム溶液（３×５０ｍＬ）およびブライン溶液（３×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（９：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、橙色油として中間体２を得た。収率：３．８ｇ、３０％。
【０５９８】
２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−マロン酸ジベンジルエステル（４）：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（１．０ｇ、４．２２ミリモル）を含むＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（０．２８５ｇ、５．４８ミリモル、６０％を含む鉱物油）を添加した。混合物を、室温で４５分間撹拌した。反応混合物に、２−ブロモ−マロン酸ジベンジルエステル（２）（１．９ｇ、５．４８ミリモル）を含むＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液を滴下した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３×５０ｍＬ）およびブライン（３×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（３：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、出発物質（２）と中間体（４）との混合物を得た。粗物質を、さらに精製することなく以後の工程で使用した。
【０５９９】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−マロン酸ジベンジルエステル（５）：２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−マロン酸ジベンジルエステル（４）（０．２ｇ、粗物質）を含むジクロロメタン（５０ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（０．１ｍＬ、１．０６ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１．５時間撹拌した。アンモニアガスを溶液に３０分間バブリングした。次いで、混合物をさらに１時間撹拌した。溶媒を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、水（３×５０ｍＬ）およびブライン（３×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（１：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色固体として中間体（４）を得た。収率：０．１２ｇ。
【０６００】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−マロン酸（Ｉｌｙ−ＩＶ−８）：２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−マロン酸ジベンジルエステル（５）（０．０７ｇ、０．１２０６ミリモル）を含むメタノール（７５ｍＬ）溶液に、水酸化パラジウム（０．０１７ｍｇ、５０％水湿潤型）を添加した。次いで、水素を１ａｔｍおよび室温で３０分間混合物にバブリングした。反応混合物をセライトで濾過し、濾液を濃縮して、黄色固体（０．０３０ｍｇ）を得た。１Ｈ  ＮＭＲによる分析は、約３０％の一脱炭酸反応が起こったことを示した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，ｐｐｍ：７．４７（ｂｒｓ，１Ｈ），７．３５−６．９５（ｍ，８Ｈ），６．２８（ｄ，１Ｈ），５．５０（ｓ，２Ｈ），４．９２（ｓ，１Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４１０．９４（Ｍ＋１）。
【０６０１】
実施例１４．１１（化合物４−４４）
【０６０２】
【化１８４】
2009514892.tif 000160
３−アミノ−２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）プロパン酸（ＩＬＹ−ＩＶ−４４）。１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール３（１ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解する。水素化ナトリウム溶液に、６０％鉱物油（１．２ミリモル）を添加する。混合物を、室温で１時間撹拌する。混合物に、対応するブロモ−酢酸メチルエステル（１．２ミリモル）を添加する。混合物を、室温で１８時間撹拌する。反応物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮する。残渣をカラムクロマトグラフィによって精製して、１７を得る。
【０６０３】
対応する酢酸メチルエステル（１７）（１ミリモル）を、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解する。溶液に、塩化オキサリル（１．１ミリモル）を添加する。混合物を、室温で２時間撹拌した。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で１時間撹拌する。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、１８を得る。
【０６０４】
化合物１８（１ミリモル）を、ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）に溶解する。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液を添加する。混合物を、室温で１８時間撹拌する。反応混合物を、乾燥するまで蒸発させる。乾燥混合物および１，３−ジメトキシベンゼン（７ミリモル）を含む乾燥ジクロロメタン（３０ｍＬ）を、室温の窒素下で、トリフルオロ酢酸（３０ｍＬ）に添加する。溶液を１時間撹拌し、２５℃未満で溶媒を蒸発させる。残渣をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解し、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ４に酸性化する。濾過によって得られた沈殿物を回収し、Ｈ２Ｏで洗浄し、乾燥させて、Ｉｌｙ−ＩＶ−４４を得る。
【０６０５】
実施例１４．１２（化合物４−４８）
【０６０６】
【化１８５】
2009514892.tif 000161
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−（トリメチルアミノ）酢酸塩酸塩（ＩＬＹ−ＩＶ−４８）。１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（１ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解する。溶液に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（１．２ミリモル）を添加する。混合物を、室温で１時間撹拌する。混合物に、クロロ−ブロモ−酢酸メチルエステル（１．２ミリモル）を添加する。混合物を、室温で１８時間撹拌する。反応物を、酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮する。残渣をカラムクロマトグラフィによって精製して、１９を得る。
【０６０７】
対応する酢酸メチルエステル（１９）（１ミリモル）を、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解する。溶液に、塩化オキサリル（１．１ミリモル）を添加する。混合物を、室温で２時間撹拌する。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で１時間撹拌する。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、２０を得る。
【０６０８】
化合物２０（１ミリモル）を、ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）に溶解する。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液を添加する。混合物を、室温で１８時間撹拌する。反応混合物を、乾燥するまで蒸発させる。残渣をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解し、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ４に酸性化する。濾過によって得られた沈殿物を回収し、Ｈ２Ｏで洗浄し、乾燥させて、２１を得る。
【０６０９】
化合物２１（１ミリモル）を、圧力管中のトリメチルアミンメタノール溶液（１５ｍＬ）に溶解する。混合物を５０℃で１２時間撹拌する。反応混合物を、乾燥するまで蒸発させる。残渣をエーテルでトリチュレートし、乾燥させて、ＩＬＹ−ＩＶ−４８を得る。
【０６１０】
実施例１４．１３（化合物２−１１）
【０６１１】
【化１８６】
2009514892.tif 000162
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１４）：１−ベンジル−２−メチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（９）（１．０ｇ、４．２０ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロエタン（５００ｍＬ）に溶解した。混合物に、Ｒｈ２（ＯＣＯＣＦ３）４（１３２ｍｇ、０．２０２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を加熱還流し、次いで、反応混合物にｔｅｒｔ−ブチルジアゾアセテート（０．６５ｍＬ、４．２０ｍｍｏｌ）を含む乾燥ジクロロエタン（５０ｍＬ）溶液を還流下で１６時間にわたって滴下した。添加後、反応混合物を、還流下で１時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温に冷却した。混合物を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル、３：１）によって残渣を精製して、（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１４）を得た。収率：７００ｍｇ、（５１％）。
【０６１２】
２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１５）：（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１４）（２００ｍｇ、０．５６８ｍｍｏｌ）を、乾燥テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解し、−７８℃に冷却した。混合物に、−７８℃のＬｉＮ（Ｓｉ（ＣＨ３）３）２（１．７０ｍＬ）のテトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ）を滴下した。反応混合物を、−７８℃〜−５℃で１時間撹拌し、次いで、−５０℃のヨードエタン（０．１５ｍＬ、１．８４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（５ｍＬ）を滴下した。混合物を、−５０℃〜室温で４時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル、４：１）によって精製して、２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１５）を得た。収率：５０ｍｇ、（２３％）。
【０６１３】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６）：２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１５）（１３４ｍｇ、０．３５２ｍｍｏｌ）を、乾燥クロロホルム（１０ｍＬ）に溶解した。混合物に、塩化オキサリル（０．１０ｍＬ、１．１３ｍｍｏｌ）を含むクロロホルム（５ｍＬ）溶液を室温で滴下した。次いで、ピリジン（０．０５ｍＬ）を、混合物に室温でゆっくり添加した。添加後、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を、氷冷２０％ＮＨ４ＯＨ溶液（１００ｍＬ）に注ぎ、１時間撹拌した。混合物を、ジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、水相をジクロロメタン（２×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させた。混合物を濾過した。濾液を濃縮し、残渣を、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル、勾配１：１）によって精製して、黄色固体として、２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６）を得た。収率：６２ｍｇ、（３９％）。
【０６１４】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−１１）：２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６）（２６ｍｇ、０．０５７６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解した。混合物に、１，３−ジメトキシベンゼン（０．０２３ｍＬ、０．１７２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。混合物を、０℃で３０分間冷却した。混合物に、トリフルオロ酢酸（０．０１５ｍＬ、０．２３４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。添加後、混合物を０℃で１時間撹拌した。次いで、混合物を室温まで加温し、室温で２時間撹拌した。次いで、さらなるトリフルオロ酢酸（０．１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、Ｈ−ＮＭＲは、反応が完了していないことを示した。残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に再溶解し、次いで、トリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）を室温で添加した。混合物を、室温で６時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を、シリカゲル分取薄層クロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル、１：１）によって精製して、淡黄色固体として２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−１１）を得た。収率：１１ｍｇ、（４８％）。１Ｈ  ＮＭＲ：０５−４３−１２８−２，（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．０９（ｂｒ，ｓ，１Ｈ，ＮＨ），７．７２（ｄ，１Ｈ），７．５４（ｂｒ，ｓ，１Ｈ，ＮＨ），７．２０−７．３８（ｍ，３Ｈ），７．１８（ｄ，１Ｈ），７．０８（ｄ，２Ｈ），５．５０（ｂｒ，ｓ，２Ｈ，ＰｈＣＨ２Ｎ），５．０２（ｔ，１Ｈ，ＣＨＯＡｒ），２．４１（ｂｒ，ｓ，３Ｈ，Ｍｅ），１．９２（ｑ，２Ｈ，Ｅｔ），１．０２（ｔ，３  Ｈ，Ｅｔ），ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳ）：３９５．９８［Ｍ＋１］。
【０６１５】
実施例１４．１４Ａ（化合物５−３３）
【０６１６】
【化１８７】
2009514892.tif 000163
２，２’−（１，１’−（１２，１２’−（１，２−フェニレンビス（オキシ））ビス（ドデカン−１２，１−ジイル））ビス（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４，１−ジイル））ビス（オキシ）ビス（３−メチルブタン酸）（ＩＬＹ−Ｖ−３３）。ヒドロキシインドール（１）（１ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−３−メチルブタノアート（１ｍｍｏｌ）を、１０ｍＬアセトンに溶解する。室温のこの溶液に、無水炭酸カリウム（２ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌混合物を１２時間還流する。濾過によって固体を取り出し、その後にカラムクロマトグラフィに供して２を得る。
【０６１７】
化合物２（１ミリモル）を、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解する。溶液に、塩化オキサリル（１．１ミリモル）を添加する。混合物を、室温で２時間撹拌する。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で１時間撹拌する。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、３を得る。
【０６１８】
インドール中間体３（１ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）を、０℃の窒素下で、９５％水素化ナトリウム（１．２ミリモル）に添加する。混合物を０℃で０．５時間撹拌し、次いで、０℃の１，１２−ジブロモドデカン（１．５ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液に、１０分間にわたって滴下する。混合物を０℃で５時間および室温で１９時間撹拌する。反応物を０℃に冷却し、塩化アンモニウム溶液（１０ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈する。混合物を塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、水相をジクロロメタン（４×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて赤褐色の液体を得、これを高真空下でさらに蒸発させる。残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィによって精製して、４を得る。
【０６１９】
カテコール（１ミリモル）を、０℃の窒素下で、水素化ナトリウム（２．２ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（１２ｍＬ）に添加した。０．５時間後、この混合物を、０℃の窒素下で、ブロミド４（２．０５ミリモル）を含む乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）に添加する。反応物を０℃で８時間保持し、塩化アンモニウム溶液（１５ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄する。有機相を分離し、水相をジクロロメタン（２×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、黄橙色シロップを得る。溶離液としてクロロホルム／酢酸エチルを使用したシリカゲルでのクロマトグラフィによって精製して、保護二量体生成物を得ることができる。
【０６２０】
二量体生成物（０．９ミリモル）および１，３−ジメトキシベンゼン（３ミリモル）を含む乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）を、室温の窒素下で、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）に添加する。溶液を１時間撹拌し、２５℃未満で溶媒を蒸発させる。残渣をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過によって固体を取り出し、エーテル（１００ｍＬ）で洗浄する。固体をエーテル（５０ｍＬ）でトリチュレートし、濾過し、エーテル（５０ｍＬ）で洗浄する。生成物を真空乾燥させて、ＩＬＹ−Ｖ−３３を得る。
【０６２１】
実施例１４．１４Ｂ（化合物５−３３）
【０６２２】
【化１８８】
2009514892.tif 000164
３−メチル−２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酪酸エチルエステル（２）：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール（１）（１．５ｇ、０．０１０モル）、２−ブロモ−３−メチル−酪酸エチルエステル（２．２ｇ、０．０１０モル）、および炭酸カリウム（過剰量）の混合物を含むアセトン（５０ｍＬ）の混合物を、３日間還流した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（２０：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、中間体２を得た。収率：１．８８ｇ、７１％。
【０６２３】
２−［１−（１２−ブロモ−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−３−メチル酪酸エチルエステル（３）：ＮａＨ（６０％鉱物油、０．４２ｇ、１０ミリモル）を含む無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）の混合物に、３−メチル−２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酪酸エチルエステル（２）（１．８８ｇ、７．０ミリモル）およびジブロモドデカン（２．３０ｇ、７．０ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（１０：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、中間体（３）を得た。収率：中間体（３）：１．３２ｇ、３５％、副生成物（４）：１．５６ｇ、３１％。
【０６２４】
２−［３−アミノオキサリル−１−（１２−ブロモ−ドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−３−メチル−酪酸エチルエステル（５）：中間体３（０．５０ｇ、０．９５９ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（２００ｍＬ）溶液に、０℃の塩化オキサリル（０．１２ｇ、０．９５ミリモル）を添加した。混合物を１時間撹拌した。反応混合物にアンモニアを２０分間バブリングした。混合物をさらに１時間撹拌し、濃縮した。残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、水（３×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、黄色固体として中間体（５）を得た。収率：０．４４ｇ、７７％。
【０６２５】
２−｛３−アミノオキサリル−１−［１２−（２−｛１２−［３−アミノオキサリル−４−（１−エトキシカルボニル−２−メチル−プロポキシ）−２−メチル−インドール−１−イル］−ドデシルオキシ｝−フェノキシ）−ドデシル］−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ｝−３−メチル−酪酸エチルエステル（６）：中間体５（４７４ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、カテコール（４０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（過剰量）の混合物を含むＤＭＦ（５ｍＬ）を、室温で７２時間撹拌した。反応物を濾過し、濾液をかち割り氷（２０ｍＬ）に注いだ。混合物をジクロロメタン（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（１％ＭｅＯＨを含むＣＨＣｌ３）によって精製して、中間体（６）を得、中間体（５）を回収した（２０５ｍｇ）。収率：０．０６０ｇ、７％。
【０６２６】
２−｛３−アミノオキサリル−１−［１２−（２−｛１２−［３−アミノオキサリル−４−（１−カルボキシ−２−メチル−プロポキシ）−２−メチル−インドール−１−イル］−ドデシルオキシ｝−フェノキシ）−ドデシル］−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ｝−３−メチル−酪酸（Ｉｌｙ−Ｖ−３３）：中間体６（５５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ／ＣＨ３ＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１：１、２ｍＬ：２ｍＬ：２ｍＬ）の溶液に、水酸化カリウム（０．０６ｇ、０．１１ミリモル）を添加した。混合物を、室温で４時間撹拌した。溶液を蒸発させ、残渣を０℃の１Ｍ  ＨＣｌで中和した。濾過によって固体を回収し、水、次いでヘキサンで洗浄して、黄色固体としてＩｌｙ−Ｖ−３３を得た。収率：０．０３５ｇ、６７％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６），δ，ｐｐｍ：δ１２．５１（ｂｒｓ，２Ｈ），８．１０（ｂｒｓ，２Ｈ），７．６２（ｂｒｓ，２Ｈ），７．１１−７．１４（ｍ，４Ｈ），７．９２−７．９６（ｍ，２Ｈ），７．８１−７．８４（ｍ，２Ｈ），６．４２（ｄ，２Ｈ），４．６８（ｄ，２Ｈ），４．１５（ｔ，４Ｈ），３．９２（ｔ，４Ｈ），２．４４（ｓ，６Ｈ），２．２３（ｍ，２Ｈ），１．６２（ｍ，４Ｈ），１．２０−１．４３（ｍ，３６Ｈ），１．０８（ｄ，６Ｈ），０．９８（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１０７９．４４（Ｍ＋１）。
【０６２７】
実施例１４．１５（化合物４−５５）
【０６２８】
【化１８９】
2009514892.tif 000165
メチル２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−ブロモ−２，３，３−トリフルオロプロパノアート（３）：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（１）（０．５ｇ、２．１ミリモル）を含むＤＭＦ（２５ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（６０％鉱物油、０．１１ｇ、２．７５ミリモル）を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。メチル−２−ブロモ−２，３，３，３−テトラフルオロプロピオナート（０．５ｍＬ、２．９０ミリモル）を混合物に添加し、室温で１８時間撹拌し続けた。反応物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３×５０ｍＬ）およびブライン（３×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（４：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、中間体（３）を得た。収率：０．１４０ｇ（１７％）。
【０６２９】
メチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−ブロモ−２，３，３−トリフルオロプロパノアート（４）：メチルエステル（３）（０．１４ｇ、０．３１ミリモル）を含むジクロロメタン（６０ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（０．３９ｇ、０．３１ミリモル）を含むジクロロメタン（５ｍＬ）を０℃で滴下した。混合物を２時間撹拌した。溶液にアンモニアガスを３０分間バブリングし、次いで、さらに１時間撹拌した。反応溶媒を蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィによって精製して、固体として中間体（４）を得た。０．１２２ｇ、７５％。
【０６３０】
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−ブロモ−２，３，３−トリフルオロプロパン酸（ＩＬＹ−ＩＶ−５５）：メチルエステル（４）（０．９５ｇ，０．１８ミリモル）を含むＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（４：１、１０ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（０．０１ｇ，０．２４ミリモル）を添加した。混合物を、室温で３０分間撹拌した。ＴＨＦを蒸発させ、混合物を、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ３に酸性化した。水層を、酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、固体として中間体（ＩＬＹ−ＩＶ−５５）を得た。収率：（０．０９ｇ、９８％）。
【０６３１】
実施例１４．１６（化合物５−４４）
【０６３２】
【化１９０】
2009514892.tif 000166
２−（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［３−アミノオキサリル−４−（１−エトキシカルボニル−２−メチル−プロポキシ）−２−メチル−インドール−１−イル］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチル−酪酸エチルエステル（４）：中間体３（０．２０ｇ、０．２７８ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、０℃の塩化オキサリル（０．０３５ｇ，０．２７８ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（２０ｍＬ）を滴下した。混合物を１時間撹拌した。混合物にアンモニアを２０分間バブリングし、１時間撹拌した。反応混合物を蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィ（１０：１  ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）によって精製して、黄色固体として中間体（４）を得た。収率：０．２１２ｇ、９１％。
【０６３３】
２−（３−アミノオキサリル−１−｛１２−［３−アミノオキサリル−４−（１−カルボキシ−２−メチル−プロポキシ）−２−メチル−インドール−１−イル］−ドデシル｝−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチル−酪酸（Ｉｌｙ−Ｖ−４４）：中間体４（１００ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ／ＣＨ３ＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１：１，３ｍＬ：３ｍＬ：３ｍＬ）溶液を、２．２当量のＫＯＨと共に室温で４時間撹拌した。溶液を蒸発させ、得られた残渣を０℃の５％ＨＣｌで中和した。得られた固体を濾過によって回収し、水、その後にヘキサンで洗浄して、黄色固体としてＩｌｙ−Ｖ−４４を得た。収率：０．０６７ｇ、７２％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，ｐｐｍ：１２．５１（ｂｒｓ，２Ｈ），８．０２（ｂｒｓ，２Ｈ），７．６１（ｂｒｓ，２Ｈ），７．１１−７．１４（ｍ，４Ｈ），６．４２（ｄ，２Ｈ），４．４２（ｄ，２Ｈ），４．１６（ｔ，４Ｈ），２．４１（ｓ，６Ｈ），２．２３（ｍ，２Ｈ），１．６２（ｍ，４Ｈ），１．２０−１．３２（ｍ，１６Ｈ），１．０７（ｄ，６Ｈ），０．９６（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝８０３．１２（Ｍ＋１）。
【０６３４】
実施例１４．１７（化合物４−４０）
【０６３５】
【化１９１】
2009514892.tif 000167
４−［２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−アセチルスルファモイル］−酪酸（Ｉｌｙ−ＩＶ−４０）
１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）：水素化ナトリウム（６０％鉱物油、２７．９ｇ、０．６９モル）を含む無水ＤＭＦ（５００ｍＬ）の懸濁液に、４−ヒドロキシル−２−メチルインドールを添加し、室温で１時間撹拌した。臭化ベンジル（８２．７ｍＬ、０．６９モル）を含むＤＭＦ（５００ｍＬ）溶液を、混合物に滴下した。反応物を、室温で１８時間撹拌した。反応混合物を、酢酸エチル（４Ｌ）で希釈し、水（７×５００ｍＬ）およびブライン（１×５００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、橙色油として中間体（２）を得た。収率：６５ｇ（５８％）。
【０６３６】
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）：１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）（３５ｇ、０．１０７モル）を含むメタノール（１Ｌ）および酢酸エチル（５００ｍＬ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％、１７ｇ）を添加した。水素を、室圧および室温で６時間混合物にバブリングした。反応混合物を、セライトで濾過した。濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィ（６：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、橙色固体として中間体（３）を得た。収率：２２ｇ（６０％）。
【０６３７】
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（４）：Ｋ２ＣＯ３（１１．７ｇ、８４．７ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．６３３ｇ、４．２２ｍｍｏｌ）、および１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（１０．０ｇ、４２．２ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＭＦ（１００ｍＬ）の撹拌懸濁液に、ブロモ酢酸エチル（５．１０ｍＬ、４６．０ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を、室温で２０時間撹拌した。水（１５０ｍＬ）で反応を停止させ、混合物をＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、水（１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。残渣を、１０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン〜２５％ＥｔＯＡｃを含むヘキサンを使用したシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、淡黄色固体として中間体４を得た。収率：１０．３ｇ（７６％）。
【０６３８】
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（５）：（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（４）（０．８０ｇ、２．４８ミリモル）を含むＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（４：１，１０ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物を添加した（０．１１８ｇ、４．９６ミリモル）。混合物を、室温で１時間撹拌した。ＴＨＦを蒸発させ、次いで、水性混合物にかち割り氷を添加した。得られた固体を濾過によって回収して、固体として中間体（５）を得た。収率：０．６７ｇ、９２％。１Ｈ  ＮＭＲ：０５−０３８−０５５
４−［２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−アセチルスルファモイル］−酪酸メチルエステル（６）：（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（５）（０．１８９ｇ、０．６４ミリモル）を含むジクロロメタン（１５ｍＬ）溶液に、４−スルファモイル−酪酸メチルエステル（０．２３２ｇ、１．２８ミリモル）、ＥＤＣＩ（０．１２２ｇ、０．６４ミリモル）、およびＤＭＡＰ（０．０７８ｇ、０．６４ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。ジクロロメタンを、元の体積の半分まで蒸発させ、混合物を水（２×１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、蒸発させた。残渣を、カラムクロマトグラフィ（１０：１  ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ）によって精製して、固体として中間体（６）を得た。収率：０．１５ｇ、５１％。
【０６３９】
４−［２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−アセチルスルファモイル］−酪酸メチルエステル（７）：４−［２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−アセチルスルファモイル］−酪酸メチルエステル（６）（０．１５ｇ、０．３２ミリモル）を含むジクロロメタン（６０ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（０．４１ｇ、０．３２ミリモル）を含むジクロロメタン（５ｍＬ）を０℃で滴下した。混合物を２時間撹拌した。溶液にアンモニアガスを３０分間バブリングし、次いで、さらに１時間撹拌した。反応溶媒を蒸発させ、残渣を、カラムクロマトグラフィ（２％ＭｅＯＨを含むＣＨＣｌ３）によって精製して、固体として中間体（７）を得た。収率：０．１２５ｇ、７２％。
【０６４０】
４−［２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−アセチルスルファモイル］−酪酸（Ｉｌｙ−ＩＶ−４０）：中間体（７）（１２５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（４：１、１０ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（０．０１２ｇ，０．５２８ミリモル）を添加した。混合物を、室温で３０分間撹拌した。ＴＨＦを蒸発させ、得られた残渣を０℃の５％ＨＣｌで中和した。濾過によって緑色固体を回収し、水（２×２０ｍＬ）およびヘキサン（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有色夾雑物を、残渣のメタノールへの溶解および炭との３０分間の撹拌によって除去した。混合物をセライトで濾過し、濾液を濃縮して、淡黄色固体としてＩｌｙ−ＩＶ−４０を得た。収率：０．０６５ｇ、５３％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，ｐｐｍ：１２．２１（ｂｒｓ，１Ｈ），１１．４５（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９８（ｂｒｓ，１Ｈ），７．６１（ｂｒｓ，１Ｈ），７．２３−７．３５（ｍ，４Ｈ），７．０３−７．１８（ｍ，３Ｈ），６．４６（ｄ，１Ｈ），５．４５（ｓ，２Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），３．４０（ｔ，２Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｔ，２Ｈ），１．６８（ｔ，２Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５１５．９８（Ｍ＋１）．
一定のかかるＣ４−酸性インドールおよびインドール関連化合物を、実施例１２のプロトコルを使用して、ホスホリパーゼ活性について評価した。結果を、表６に示す。
表６：膵臓分泌性ヒト、マウス、およびブタＰＬＡ２の阻害
【０６４１】
【化１９２】
2009514892.tif 000168
実施例１５：Ｃ４−アミドインドールおよびインドール関連化合物の合成ならびにヒト、マウス、およびブタホスホリパーゼＡ２阻害のための一定のかかる化合物についてのＩＮ−ＶＩＴＲＯアッセイ
本実施例では、特定のＣ４−アミド部分を有する種々の好ましいインドールおよびインドール関連化合物を調製する。
【０６４２】
実施例１５．１（化合物４−２８）
【０６４３】
【化１９３】
2009514892.tif 000169
１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール（１）（５０ｇ、０．３３９モル）を、無水ＤＭＦ（１Ｌ）に溶解した。混合物に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（２７．９ｇ、０．６９７モル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、臭化ベンジル（８２．７ｍＬ、０．６９７モル）を滴下した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（４Ｌ）で希釈し、水（５×５００ｍＬ）、その後にブライン（１Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。橙色の油状残渣を、カラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色油として８６ｇ（７２％）の２を得た。
【０６４４】
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）：１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）（８６ｇ、０．２６３モル）を、酢酸エチル（１．５Ｌ）およびメタノール（３００ｍＬ）に溶解した。混合物に、１０％Ｐｄ／Ｃ（湿潤型）（１８ｇ）を添加した。次いで、反応物を、室温および１ａｔｍの水銀バブラーを通したＨ２ガスに供した。混合物を６時間撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、クリーム状の固体として３（３０ｇ、４９％）を得た。
【０６４５】
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フルオロ−酢酸エチルエステル（６）：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（０．３ｇ、１．２６ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）に溶解した。溶液に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（６６ｍｇ、１．６５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、エチル−２−ブロモフルオロアセテート（０．２ｍＬ、１．６５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色油として６（０．１４ｇ、３２％）を得た。
【０６４６】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−フルオロ−アセトアミド（Ｉｌｙ−ＩＶ−２８）：塩化オキサリル（０．０４２ｍＬ、０．４７８ミリモル）溶液を、無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）で希釈した。溶液に、（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フルオロ−酢酸エチルエステル（６）（０．１４ｇ、０．３９８ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）を滴下した。混合物を、室温で２時間撹拌した。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で１．５時間撹拌した。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（２×３００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、分取ＴＬＣ（３：１  ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ）によって精製して、Ｉｌｙ−ＩＶ−２８（０．０５０ｇ，３３％）を得た。
【０６４７】
実施例１５．２〜１５．４および１５．５ａ（化合物４−４１、４−４２、４−４３、および４−４５）
【０６４８】
【化１９４】
2009514892.tif 000170
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２，２−ジフルオロアセトアミド（ＩＬＹ−ＩＶ−４１）；２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３，３，３−トリフルオロプロパンアミド（ＩＬＹ−ＩＶ−４２）；２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２，３，３，３−テトラフルオロプロパンアミド（ＩＬＹ−ＩＶ−４３）；２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチルブタンアミド（ＩＬＹ−ＩＶ−４５）
アルキル化：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（１ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解する。溶液に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（１．２ミリモル）を添加する。混合物を、室温で１時間撹拌する。混合物に、対応するブロモ−酢酸メチルエステル（１．２ミリモル）を添加する。混合物を、室温で１８時間撹拌する。反応物を、酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮する。残渣をカラムクロマトグラフィによって精製して、７を得る。
【０６４９】
グリオキサミド化およびアミド化：対応する酢酸メチルエステル（７）（１ミリモル）を、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解する。溶液に、塩化オキサリル（１．１ミリモル）を添加する。混合物を、室温で２時間撹拌する。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で５時間撹拌する。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、Ｉｌｙ−ＩＶ−４１、Ｉｌｙ−ＩＶ−４２、Ｉｌｙ−ＩＶ−４３、およびＩｌｙ−ＩＶ−４５を得る。
【０６５０】
実施例１５．５ｂ（化合物４−４５）
【０６５１】
【化１９５】
2009514892.tif 000171
１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール１（５０ｇ、０．３３９モル）を、無水ＤＭＦ（１Ｌ）に溶解した。混合物に、水素化ナトリウム  ６０％を含む鉱物油（２７．９ｇ、０．６９７モル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、臭化ベンジル（８２．７ｍＬ、０．６９７モル）を滴下した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（４Ｌ）で希釈し、水（５×５００ｍＬ）、その後にブライン（１Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。橙色の油状残渣を、カラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色油として８６ｇ（７２％）の２を得た。
【０６５２】
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）：１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール（２）（８６ｇ、０．２６３モル）を、酢酸エチル（１．５Ｌ）およびメタノール（３００ｍＬ）に溶解した。混合物に、１０％Ｐｄ／Ｃ（湿潤型）（１８ｇ）を添加した。次いで、反応物を、室温および１ａｔｍの水銀バブラーを通したＨ２ガスに供した。混合物を６時間撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、クリーム状の固体として３（３０ｇ、４９％）を得た。
【０６５３】
２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチル−酪酸エチルエステル（７）：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（０．３ｇ、１．２６ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解した。溶液に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（６６ｍｇ、１．６５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。混合物に、エチル−２−ブロモイソバレラート（０．３４４ｍＬ、１．６５ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（１０：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、７：エチル−２−ブロモイソバレラートの１：１混合物を得た。カラムクロマトグラフィ（１０：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によるさらなる精製により、黄色油として７（０．０９ｇ、１９％）を得た。
【０６５４】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドリルオキシ）−３−メチル−酪酸エチルエステル（１３）：２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチル−酪酸エチルエステル（７）（０．０９ｇ、０．２４７ミリモル）を、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解した。溶液に、塩化オキサリル（０．０２６ｍＬ、０．２９６ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で１時間撹拌した。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、黄色固体（無機塩を含む）として１３（０．２３ｇ、＞１００％）を得た。物質を、さらに精製することなく次の工程で使用した。
【０６５５】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベニル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチル−酪酸（１４）：２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドリルオキシ）−３−メチル−酪酸エチルエステル（１３）（０．１５ｇ、０３４５ミリモル）を、無水エタノール（１０ｍＬ）に溶解した。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液（０．４ｍＬ、０．４０３ミリモル）を添加した。混合物を、室温で７２時間撹拌した。反応混合物を、高真空下で蒸発させた。残渣をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解し、２Ｍ  ＨＣｌで酸性化した。混合物を、３０分間撹拌した。濾過によって沈殿物を回収し、Ｈ２Ｏで洗浄して、黄色固体として１４（０．０３ｇ、２１％）を得た。
【０６５６】
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチルブタンアミド（ＩＬＹ−ＩＶ−４５）。２−（３−アミノオキサリル−１−ベニル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−３−メチル−酪酸（１４）（０．０３ｇ、０．０７４ミリモル）を、無水ジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解した。溶液に、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングした。混合物を、室温で２時間撹拌した。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×５０ｍＬ）およびブライン（１×３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、粗ＩＬＹ−ＩＶ−４５を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィ後、黄色固体として純粋な生成物を０．０２９ｇ（９９％）単離した。
【０６５７】
実施例１５．６（化合物４−４９）
【０６５８】
【化１９６】
2009514892.tif 000172
２−（４−（２−アミノ−１−（トリメチルアミノ）−２−オキソエトキシ）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソアセトアミド塩酸塩（ＩＬＹ−ＩＶ−４９）。１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（３）（１ミリモル）を、無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解する。溶液に、水素化ナトリウム６０％を含む鉱物油（１．２ミリモル）を添加する。混合物を、室温で１時間撹拌する。混合物に、クロロ−ブロモ−酢酸メチルエステル（１．２ミリモル）を添加する。混合物を、室温で１８時間撹拌する。反応物を、酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮する。残渣をカラムクロマトグラフィによって精製して、８を得る。
【０６５９】
対応する酢酸メチルエステル（８）（１ミリモル）を、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解する。溶液に、塩化オキサリル（１．１ミリモル）を添加する。混合物を、室温で２時間撹拌する。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、室温で３時間撹拌する。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、９を得る。
【０６６０】
化合物９（１ミリモル）を、圧力管中のトリメチルアミンメタノール溶液（１５ｍＬ）に溶解する。混合物を５０℃で１２時間撹拌する。反応混合物を、乾燥するまで蒸発させる。残渣を、エーテルでトリチュレートし、乾燥させて、ＩＬＹ−ＩＶ−４９を得る。
【０６６１】
実施例１５．７（化合物４−５２）
【０６６２】
【化１９７】
2009514892.tif 000173
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−フルオロ−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミド（ＩＬＹ−ＩＶ−５２）。塩化オキサリル（０．４７８ミリモル）溶液を、無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）で希釈する。溶液に、（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フルオロ−酢酸エチルエステル（６）（０．３９８ミリモル）を含む無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）を滴下する。混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、０℃に冷却する。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングする。混合物を、０℃で２時間撹拌する。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（２×３００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮する。残渣を精製して７を得る。
【０６６３】
化合物７（１ミリモル）を、ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）に溶解する。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液を添加する。混合物を、室温で１８時間撹拌する。反応混合物を、乾燥するまで蒸発させる。残渣をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解し、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ４に酸性化する。得られた沈殿物を濾過によって回収し、Ｈ２Ｏで洗浄し、乾燥させて、８を得る。
【０６６４】
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−フルオロ酢酸（８）（２．３ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン／ジメチルホルムアミド混合物（４：１、１０ｍＬ）溶液に、４−ジメチルアミノピリジン（３．４ｍｍｏｌ）、メタンスルホンアミド（４．５ｍｍｏｌ）、および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（２．３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で撹拌する。２４時間後、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで２回洗浄する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空蒸発させる。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィに供して、ＩＬＹ−ＩＶ−５２を得る。
【０６６５】
実施例１５．８（化合物４−５３）
【０６６６】
【化１９８】
2009514892.tif 000174
２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−ブロモ−３，３，３−トリフルオロ−プロピオン酸メチルエステル（４）：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール（１）（０．５ｇ、２．１ミリモル）を含むＤＭＦ（２５ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（６０％鉱物油、０．１１ｇ、２．７５ミリモル）を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。メチル−２−ブロモ−２，３，３，３−テトラフルオロプロピオナート（０．５ｍＬ、２．９０ミリモル）を混合物に添加し、室温で１８時間撹拌し続けた。反応物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３×５０ｍＬ）およびブライン（３×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（４：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、橙色油として中間体（４）を得た。中間体（３）は、予想される生成物ではなかった。収率：０．１４０ｇ（１７％）。
【０６６７】
２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−ブロモ−３，３，３−トリフルオロ−プロピオン酸（５）：２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−ブロモ−３，３，３−トリフルオロ−プロピオン酸メチルエステル（４）（０．０７ｇ，０．１７７ミリモル）を含むＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（４：１，１０ｍＬ）溶液に、水酸化リチウム一水和物（０．０１ｇ，０．２３８ミリモル）を添加した。混合物を、室温で３０分間撹拌した。ＴＨＦを蒸発させ、混合物を、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ３に酸性化した。水層を、酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、桃色固体として中間体（５）を得た。収率：（０．０６６ｇ、９７％）。
【０６６８】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−ブロモ−３，３，３−トリフルオロ−プロピオンアミド（Ｉｌｙ−ＩＶ−５３）：２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−ブロモ−３，３，３−トリフルオロ−プロピオン酸（５）（０．０６６ｇ、０．１７３ミリモル）を含むジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（０．０３５ｍＬ、０．３８１ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１時間撹拌した。アンモニアを反応混合物に３０分間バブリングし、１時間撹拌した。ジクロロメタンを蒸発させた。残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３×５０ｍＬ）およびブライン（３×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（３：１  ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ）によって精製して、黄色固体としてＩｌｙ−Ｖ−５３を得た。収率：０．０２ｇ（２２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，ｐｐｍ：８．２５（ｂｒｓ，１Ｈ），８．１５（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９０（ｂｒｓ，１Ｈ），７．６２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．５２（ｄ，１Ｈ），７．３８−７．１８（ｍ，４Ｈ），７．１０−６．９５（ｍ，２Ｈ），５．５７（ｓ，２Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５１３．８４（Ｍ＋１）．
一定のかかるＣ４−アミドインドールおよびインドール関連化合物を、実施例１２のプロトコルを使用して、ホスホリパーゼ活性について評価した。結果を、表７に示す。
表７：膵臓分泌性ヒト、マウス、およびブタＰＬＡ２の阻害
【０６６９】
【化１９９】
2009514892.tif 000175
実施例１６：アザインドールおよびアザインドール関連化合物の合成ならびにヒト、マウス、およびブタホスホリパーゼＡ２阻害のための一定のかかる化合物についてのＩＮ−ＶＩＴＲＯアッセイ
本実施例では、種々の好ましいアザインドールおよびアザインドール関連化合物を調製する。
【０６７０】
実施例１６．１（化合物７−１）
【０６７１】
【化２００】
2009514892.tif 000176
エチルα−アジド−β−（４−メトキシピリド−３−イル）−アクリレート（２）。３−ホルミル−４−メトキシピリジン（１）（７．０ｇ、５４．７ｍｍｏｌ）およびアジド酢酸エチル（５．０ｇ、３６．４ｍｍｏｌ）を含む無水ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）の均一な混合物を、滴下漏斗によって、Ｎａ（０．１．２４ｇ、５４．７ｍｍｏｌ）を含む無水ＥｔＯＨ（３０ｍＬ）を含む十分に撹拌した溶液に−１５℃のＮ２下で添加した。混合物を、この温度で４時間撹拌した。この間に、沈殿した固体を濾過し、氷冷エタノール（３０ｍＬ）で洗浄した。化合物を真空オーブン下で３時間乾燥させて、白色結晶固体として表題化合物２を得た。Ｍｐ９２〜９５℃；収率：４．８ｇ、５３％；ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ２４８．９（Ｍ＋１）．
２−エトキシカルボニル−４−メトキシピロロ−［２，３−ｂ］ピリジン（３）。エチル−α−アジド−β−（４−メトキシピリド−３−イル）−アクリレート（２）（３．７ｇ、１４．９ｍｍｏｌ）を含む乾燥ｏ−キシレン（３５ｍＬ）の撹拌溶液を、１７０℃の油浴中で２５分間加熱した。この間に、フラスコの内容物は、赤煉瓦色が増した。冷却後、混合物を高真空濃縮した。得られた褐色残渣を、５％メタノールを含むＣＨ２Ｃｌ２を使用したシリカゲルカラムで精製して、赤煉瓦色の固体として３を得た。Ｍｐ１９５〜１９７℃；収率：３．３ｇ、８２％；ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ２２０．９（Ｍ＋１）．
（４−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イル）メタノール（４）。２−エトキシカルボニル−４−メトキシピロロ−［２，３−ｂ］ピリジン（３）（１．９０ｇ、８．６２ｍｍｏｌ）を含む無水ＴＨＦ（２５ｍＬ）の懸濁液に、Ｎ２雰囲気下で、ＬｉＡｌＨ４（０．２１８ｇ，１７．２ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。混合物を、還流温度で５０分間撹拌した。冷却後、冷却Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（４×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。濾過後、濾液を乾燥するまで濃縮し、残渣を、５％メタノールを含むＣＨ２Ｃｌ２を使用したシリカゲルカラムでのクロマトグラフィに供して、白色固体として４を得た。Ｍｐ２１０〜２１２℃；収率：１．１０ｇ、７１％；ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １７８．９（Ｍ＋１）．
４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（５）。４ＮのＨＣｌ水溶液（１０ｍＬ）を含む（４−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イル）メタノール（４）（０．９０ｇ、５．０５ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２（１００ｍｇ）を含むメタノールの懸濁液を、水素圧（５０ｐｓｉ）下で３６時間水素化した。酸性混合物の反応を、１Ｎ  ＮａＯＨで停止させた。セライトでの濾過後、濃縮および５％メタノールを含むＣＨ２Ｃｌ２を使用したシリカゲルカラムでの精製により、淡黄色シロップとして５を得た。収率：０．６８ｇ、８３％；ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  １６３．０１（Ｍ＋１）．
１−ベンジル−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（６）。水素化ナトリウム（０．２９２ｇ、９．２４ｍｍｏｌ）を含む乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（１０ｍＬ）の懸濁液に、Ｎ２下で、４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（５）（０．６０ｇ、３．７０ｍｍｏｌ）を含む同一溶媒（５ｍＬ）の溶液を滴下した。混合物を、室温で４５分間撹拌した。この後、溶液を氷浴中で冷却し、臭化ベンジル（１．２５ｇ、７．３０ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。溶液を室温に加温し、１２時間撹拌した。次いで、これを冷水（３０ｍＬ）に注ぎ、３０分間撹拌し、沈殿した固体を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を、水およびブラインで洗浄した。濃縮および２０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したシリカゲルカラムでの精製により、白色固体として純粋な表題化合物６を得た。収率：０．７０ｇ、６８％；ｍｐ１２９〜１３１℃；ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ２５３．０（Ｍ＋１）．
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オール（７）。化合物１−ベンジル−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（６）（０．４５ｇ、１．７８ｍｍｏｌ）を含む無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、Ｎ２下でＮａＳＭｅ（０．３７ｇ，５．３５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、８０℃で４５分間撹拌した。冷却後、混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（２０ｍＬ）に注ぎ、ｐＨ４〜５になるまで１Ｎ  ＨＣｌ（３〜４ｍＬ）を添加した。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（５×３０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物をＨ２Ｏ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。減圧下で溶媒を除去し、残渣を、溶離液として５％メタノールを含むＣＨ２Ｃｌ２を使用したシリカゲルカラムのクロマトグラフィに供して、無定形白色固体として７を得た。収率：０．３０ｇ、７０％；ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ２３８．９（Ｍ＋１）．
エチル２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イルオキシ）アセテート（８）。１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オール（７）（０．３０ｇ、１．２６ｍｍｏｌ）、２−ブロモ酢酸エチル（１．０５ｇ、６．２９ｍｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（２．０ｇ）の混合物を含む無水アセトン（１５ｍＬ）を、Ｎ２下で６時間加熱還流した。冷却後、混合物をセライトによって濾過し、濾液を濃縮してシロップを得た。次いで、これを酢酸エチルに再溶解し、水（１０×２ｍＬ）、ブラインで洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。減圧下で溶媒を除去し、残渣を、４０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用して溶離するシリカゲルカラムのクロマトグラフィに供して、無定形白色固体として表題化合物８を得た。収率：０．２５ｇ、６１％；ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ３２５．０（Ｍ＋１）．
２−（１−ベンジル−４−イルオキシ酢酸エチルエステル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−２−オキソアセトアミド（９）。エチル２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イルオキシ）アセテート（８）（０．１０ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を含む無水ＣＨＣｌ３（５ｍＬ）の氷冷溶液に、塩化オキサリル（０．０５ｍＬ、０．６１ｍｍｏｌ）およびその後に無水ピリジン（０．０４ｍＬ、０．６０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温にし、さらに５時間撹拌した。混合物を真空濃縮して、過剰量の非反応塩化オキサリルを除去した。得られたシロップをＣＨＣｌ３（２０ｍＬ）に懸濁し、０℃で１５分間の冷却によってアンモニアガスを通過させた。有機層を水（１０×２ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。減圧下で溶媒を除去し、残渣を、２％エタノールを含むＣＨ２Ｃｌ２で溶離するシリカゲルカラムのクロマトグラフィに供して、白色固体として表題化合物９を得た。収率：０．０６５ｇ、５３％；ｍｐ１３９〜１４１℃；ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ  ３９５．９（Ｍ＋１）．
２−（１−ベンジル−４−イルオキシ酢酸−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−２−オキソアセトアミド（１０）（Ｉｌｙ−ＶＩＩ−１）。２−（１−ベンジル−４−イルオキシ酢酸エチルエステル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−２−オキソアセトアミド（９）（０．０３５ｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ−Ｈ２Ｏ（１：１，３ｍＬ）の懸濁液に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（０．００５ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）溶液を添加し、混合物を室温で６時間撹拌した。この間、内容物は均一であった。１Ｎ  ＨＣｌ溶液（０．５ｍＬ）を使用して、塩基性溶液をｐＨ４〜５に設定した。分離した淡黄色固体を濾過し、Ｈ２Ｏ（１ｍＬ）で洗浄し、真空オーブン中にて５０℃で一晩乾燥させて、高純度の淡黄色固体として表題化合物１０を得た。収率：０．０２６ｇ、７９％；ＥＳＩ  ＭＳ：ｍ／ｚ３６７．９（Ｍ＋１）；ＨＰＬＣ：純度９１．７％；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：（５−３７−７５）δ８．２０（ｄ，１Ｈ），７．９２（ｓ，１Ｈ），７．４３（ｓ，１Ｈ），７．３２−７．２２（ｍ，３Ｈ），７．１８−７．１０（ｍ，２Ｈ），６．７０（ｄ，１Ｈ），５．５８（ｓ，２Ｈ），４．７６（ｓ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０６７２】
実施例１６．２（化合物２−１）
【０６７３】
【化２０１】
2009514892.tif 000177
４−オキソ−ペンタナール（２）：室温のピリジニウムクロロクロマート（５３８ｇ、２．４９ｍｏｌ）を含むジクロロメタン（４０００ｍＬ）の撹拌懸濁液に、３−アセチル−１−プロパノール（２００ｇ、１．９６ｍｏｌ）を５時間にわたって滴下した。形成された暗色混合物を、室温で１時間撹拌し、次いで、シリカゲルパッドで濾過した。シリカゲルパッドを、生成物が残存しなくなるまで、ジクロロメタンで洗浄した。ジクロロメタン溶液を濃縮して、緑色液体として粗生成物を得た。粗生成物を、真空蒸留によって精製して、無色透明の油として４−オキソ−ペンタナール（２）を得た。収率：９４．６ｇ（５１％）。
【０６７４】
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロール（３）：室温の４−オキソ−ペンタナール（９４．６ｇ、０．９４５ｍｏｌ）を含む乾燥メタノール（４００ｍＬ）およびモレキュラーシーブ（４Ａ、１００ｇ）の撹拌混合物に、ベンジルアミン溶液（１２５ｍＬ、１．１３ｍｏｌ）を含む乾燥メタノール（１２５ｍＬ）を滴下した。形成された暗色溶液を、室温で１８時間撹拌し、次いで、反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル、３：１）によって精製して、淡黄色油として１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロール（３）を得た。収率：９４ｇ（５８％）。
【０６７５】
１−ベンジル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド（４）：ＰＯＣｌ３（２３．４６ｍＬ、２４６ｍｍｏｌ）を、０℃の撹拌したＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０４ｍＬ）に滴下した。添加後、混合物をさらに９０分間撹拌した。混合物に、１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロール（３）（２．７１ｇ、４５ｍｍｏｌ）を含むテトラヒドロフラン（１１５０ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を、０℃〜室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、酢酸エチル（２Ｌ）に再溶解した。混合物を、飽和Ｎａ２ＣＯ３（２×５００ｍＬ）で洗浄した。Ｎａ２ＣＯ３溶液を、酢酸エチル（７×１Ｌ）で抽出した。有機層を合わせ、濃縮した。粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル、７：１）によって精製して、淡黄色液体として１−ベンジル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド（４）を得た。収率：３０．８ｇ（８１％）。
【０６７６】
３−（１−ベンジル−５−メチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）−アクリル酸メチルエステル（５）：ナトリウム（１４．４５ｇ、６２８ｍｍｏｌ）を、乾燥メタノール（４２０ｍＬ）に少しずつ添加した。新たに形成されたナトリウムメトキシド溶液に、トリメチルホスホノアセテート（５０ｍＬ、３０２ｍｍｏｌ）を含むテトラヒドロフラン（１０５ｍＬ）溶液を室温で滴下した。添加後、混合物を室温でさらに６０分間撹拌した。反応混合物に、１−ベンジル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド（４）（３０．８ｇ、１５４ｍｍｏｌ）を含むテトラヒドロフラン（６３０ｍＬ）溶液を室温で滴下した。反応混合物を、室温で２時間撹拌した。混合物を濃縮し、酢酸エチル（１Ｌ）に再溶解した。混合物を、１Ｍ  ＨＣｌ溶液、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機溶液を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、次いで濾過し、濃縮して、淡黄色固体として粗生成物３−（１−ベンジル−５−メチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）−アクリル酸メチルエステル（５）を得た。収率：４０ｇ。
【０６７７】
１−ベンジル−２−メチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（６）：３−（１−ベンジル−５−メチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）−アクリル酸メチルエステル（５）（４０ｇ）を、テトラヒドロフラン（４００ｍＬ）とメタノール（４００ｍＬ）との混合物に溶解した。混合物に、水酸化リチウム一水和物（２０ｇ、４７６ｍｍｏｌ）の水溶液（２００ｍＬ）を添加した。添加後、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を、２Ｍ  ＨＣｌによってｐＨ４〜５に酸性化した。混合物を濃縮し、酢酸エチル（２Ｌ）に再溶解した。混合物を、Ｈ２Ｏで洗浄した。水層を、酢酸エチル（２×１Ｌ）で抽出した。有機物を合わせ、濃縮して黄色固体を得、これをジクロロメタンで洗浄して生成物（２２．６６ｇ）を得た。洗浄ジクロロメタン溶液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル（１：３）、その後に酢酸エチル原液）によって精製して、淡黄色固体として、３−（１−ベンジル−５−メチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）−アクリル酸（６）（５．９ｇ）を得た。収率：２８．５６ｇ、（７７％、２工程）。
【０６７８】
１−ベンジル−２−メチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（９）：３−（１−ベンジル−５−メチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）−アクリル酸（６）（２６．７２ｇ、１１０．９ｍｍｏｌ）を、乾燥アセトン（１０５０ｍＬ）に溶解した。懸濁混合物にトリエチルアミン（３５ｍＬ）を添加し、透明な溶液を形成させた。反応混合物を０℃に冷却し、次いで、冷却した反応混合物に、クロロギ酸エチル（３０ｍＬ、３０４ｍｍｏｌ）を含む乾燥アセトン（６５０ｍＬ）溶液を１時間にわたって滴下した。添加後、反応混合物を０℃で４時間撹拌した。次いで、反応混合物に、アジ化ナトリウム（１４．５２ｇ、２２３ｍｍｏｌ）水溶液（１７５ｍＬ）を３０分間にわたって滴下した。反応混合物を、０℃で２時間撹拌した。反応混合物を、氷水（１Ｌ）に注いだ。次いで、混合物をジクロロメタン（３×１Ｌ）で抽出した。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。混合物を濾過し、濃縮して、黄色固体として粗８（３２ｇ）を得た。２０５℃に予熱したジフェニルエーテル（１７５ｍＬ）とトリブチルアミン（３１ｍＬ）との混合物に、粗８を含むジフェニルエーテル（２５０ｍＬ）溶液を２０５℃で１時間滴下した。添加後、混合物を、２０５℃でさらに１時間撹拌した。混合物を室温に冷却し、固体を形成させた。ジエチルエーテル（５００ｍＬ）を反応混合物に添加して、さらなる固体を形成させた。混合物を濾過し、固体をジエチルエーテルで洗浄して生成物（８．８１ｇ）を得た。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル（勾配１：１〜１：３）、次いで、メタノールを含むジクロロメタン（１％〜５％））によって精製して、黄色固体として１−ベンジル−２−メチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（９）（４．７ｇ）を得た。収率：１３．５１ｇ、（５１％）。
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（１０）：１−ベンジル−２−メチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（９）（５１２ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロエタン（３００ｍＬ）に溶解した。混合物に、Ｒｈ２（ＯＣＯＣＦ３）４（６４ｍｇ、０．０９７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を加熱還流し、次いで、反応混合物にジアゾ酢酸エチル（０．２５ｍＬ、２．１５ｍｍｏｌ）を含む乾燥ジクロロエタン（３０ｍＬ）を、還流下で６時間にわたって滴下した。添加後、反応混合物を、還流下で１．５時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温に冷却した。混合物を濃縮し、残渣を、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル（５：１））によって精製して、（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（１０）を得た。収率：３４５ｍｇ、（４９％）。
【０６７９】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（１１）：（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（１０）（３７０ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）を、乾燥クロロホルム（３７ｍＬ）に溶解した。混合物に、塩化オキサリル（０．３０ｍＬ、３．４３ｍｍｏｌ）を含むクロロホルム（１０ｍＬ）溶液を室温で滴下した。次いで、ピリジン（０．１３３ｍＬ）を、室温で混合物にゆっくり添加した。添加後、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル（勾配１：１〜１：３））によって精製して、黄色固体として（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（１１）を得た。収率：２８０ｍｇ、（６２％）。
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−１）：（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（１１）（９０ｍｇ、０．２２７ｍｍｏｌ）を、メタノール（２０ｍＬ）に溶解した。混合物に、ＫＯＨ溶液（１Ｍ、０．２５ｍＬ）を室温で添加した。添加後、混合物を室温で１８時間撹拌した。水酸化リチウム一水和物（９０ｍｇ）の水溶液（５ｍＬ）を添加した。さらに１時間の撹拌後、混合物を濃縮し、残渣をメタノール（１０ｍＬ）およびエタノール（１０ｍＬ）に再溶解した。混合物を濾過し、濾液を、塩酸を含むエーテル（１．０Ｍ）によってｐＨ３〜４に酸性化した。溶媒を蒸発させ、残渣を、ジクロロメタン：エーテル（１：１）の混合物、次いで、水（５ｍＬ）およびエーテルで洗浄して、淡黄色固体として、（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−１）を得た。収率：２９ｍｇ、（３５％）。
１Ｈ  ＮＭＲ：０５−４３−６７，（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ，１２．９６（ｂｒ，ｓ，１Ｈ，ＣＯＯＨ），７．９７（ｂｒ，ｓ，１Ｈ，ＮＨ），７．７９（ｄ，１Ｈ），７．５６（ｂｒ，ｓ，１Ｈ，ＮＨ），７．２２−７．３９（ｍ，４Ｈ），７．０８−７．１２（ｍ，２Ｈ），５．５７（ｂｒ，ｓ，２Ｈ，ＰｈＣＨ２Ｎ），４．８０（ｂｒ，ｓ，２Ｈ，ＣＨ２ＯＡｒ）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳ）：３６７．９９［Ｍ＋１］。
【０６８０】
実施例１６．３（化合物２−７）
【０６８１】
【化２０２】
2009514892.tif 000178
２−［１−ベンジル−４−（２−メタンスルホニルアミノ−２−オキソ−エトキシ）−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド（Ｉｌｙ−ＩＩ−７）：（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−１）（２７ｍｇ、０．０７３６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２ｍＬ）に懸濁した。混合物に４−ジメチルアミノピリジン（３５ｍｇ、０．２８６ｍｍｏｌ）を室温で添加し、その後に、メタンスルホンアミド（３０ｍｇ、０．２９６ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ”−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（４５ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）を添加した。添加後、混合物を室温で２４時間撹拌した。ジクロロメタン（２０ｍＬ）を添加して、反応混合物を希釈した。次いで、反応混合物溶液を、１．０Ｍ  ＨＣｌ、水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。混合物を濾過した。濾液を濃縮し、残渣を、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル（勾配１：１〜１：２）、次いで、メタノールを含むジクロロメタン（５％〜１５％））によって精製して、オフホワイトの固体として２−［１−ベンジル−４−（２−メタンスルホニルアミノ−２−オキソ−エトキシ）−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド（Ｉｌｙ−ＩＩ−７）を得た。収率：９ｍｇ、（２８％）。
１Ｈ  ＮＭＲ：０５−４３−１０１−２，（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ，１１．６２（ｂｒ，ｓ，１Ｈ，ＮＨＳＯ２），８．１６（ｂｒ，ｓ，１Ｈ，ＮＨ），７．８０（ｄ，１Ｈ），７．６８（ｂｒ，ｓ，１Ｈ，ＮＨ），７．２６−７．４０（ｍ，４Ｈ），７．０６−７．１２（ｍ，２Ｈ），５．５８（ｂｒ，ｓ，２Ｈ，ＰｈＣＨ２Ｎ），４．８５（ｂｒ，ｓ，２Ｈ，ＣＨ２ＯＡｒ），３．２０（ｂｒ，ｓ，３Ｈ，ＳＯ３ＣＨ３）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＩ）：４４４．８５［Ｍ＋１］，４４２．８４［Ｍ−１］
実施例１６．４（化合物２−４）
【０６８２】
【化２０３】
2009514892.tif 000179
（１−ベンジル−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（２）。１−ベンジル−２−メチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（１）（２．０ｇ、８．４ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（７０ｍＬ）の撹拌懸濁液にＭｅ３ＯＢＦ４（３．８ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を４８時間撹拌し、次いで、ＣＨ２Ｃｌ２（７０ｍＬ）で希釈した。混合物を、水（１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。１０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン〜２５％ＥｔＯＡｃを含むヘキサンを使用したシリカゲルでの残渣のフラッシュクロマトグラフィにより、淡黄色固体として生成物２を得た。収率：１．６ｇ（７５％）。
【０６８３】
４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（３）。（１−ベンジル−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（２）（０．８８７ｍｇ、３．５２ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（１０ｍＬ）の撹拌溶液に、ＤＭＳＯ（２．５ｍＬ）、その後にＫＯｔＢｕ（２５ｍＬ、１．０Ｍを含むＨＦ）を滴下し、次いで、反応混合物をＯ２で室温にて１５分間処理し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）で反応を停止させ、ＥｔＯＡｃ（３×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、水（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。２０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン〜４０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサンを使用したシリカゲルでの残渣のフラッシュクロマトグラフィにより、黄色固体として生成物３を得た。収率：５６０ｍｇ（９８％）。
【０６８４】
１−ビフェニル−２−イルメチル−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（４）。ＮａＨ（９８ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ、６０％鉱物油）を含むＴＨＦ（１０ｍＬ）の撹拌懸濁液に、４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（３）（２８０ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（３ｍＬ）を添加した。混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで、２−フェニル臭化ベンジル（０．４０ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）を添加し、１８時間撹拌し続けた。反応混合物の反応を飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）で停止させ、ＥｔＯＡｃ（３×４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、水（４０ｍＬ）、ブライン（４０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。１０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン〜２５％ＥｔＯＡｃを含むヘキサンを使用したシリカゲルでの残渣のフラッシュクロマトグラフィにより、黄色泡として生成物４を得た。収率：３７５ｍｇ（６６％）。
【０６８５】
１−ビフェニル−２−イルメチル−２−メチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（５）。１−ビフェニル−２−イルメチル−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（４）（３７０ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）を含むＡｃＯＨ（１５ｍＬ）の撹拌溶液に、４８％のＨＢｒ（５ｍＬ）を添加した。反応混合物を１０５℃に加熱し、次いで、１６時間撹拌し、室温に冷却し、蒸発させた。得られた残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させて粗生成物５を得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。収率：３５５ｍｇ（１００％）。
【０６８６】
（１−ビフェニル−２−イルメチル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（６）。１−ビフェニル−２−イルメチル−２−メチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（５）（０．３５５ｇ、１．１３ｍｍｏｌ）を含むＣｌＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ（４０ｍＬ）の撹拌溶液に、［Ｒｈ（ＯＣＯＣＦ３）２］２（４８ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、Ｎ２ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ（０．１３ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）を含むＣｌＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ（８ｍＬ）溶液を、シリンジポンプを介して１６時間にわたって添加した。反応混合物を室温に冷却し、蒸発させた。１０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン〜２５％ＥｔＯＡｃを含むヘキサンを使用したシリカゲルでの残渣のフラッシュクロマトグラフィにより、黄色固体として生成物６を得た。ｅｌｄ：１０５ｍｇ（２２％）。
【０６８７】
（３−アミノオキサリル−１−ビフェニル−２−イルメチル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（７）。（１−ビフェニル−２−イルメチル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（６）（１００ｍｇ、０．２５０ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）の撹拌溶液に、（ＣＯＣｌ）２（８０μＬ、０．９１ｍｍｏｌ）、その後にピリジン（４０μＬ）を滴下し、次いで、反応混合物を室温で１６時間撹拌し、ＮＨ３（ｇ）で３０分間処理し、さらに１時間撹拌した。得られた混合物を、ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させる。５０％ヘキサンを含むＥｔＯＡｃ〜２５％ヘキサンを含むＥｔＯＡｃを使用したシリカゲルでの残渣のフラッシュクロマトグラフィにより、黄色固体として生成物７を得た。ｅｌｄ：３０ｍｇ（２５％）。
【０６８８】
（３−アミノオキサリル−１−ビフェニル−２−イルメチル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−４）。（３−アミノオキサリル−１−ビフェニル−２−イルメチル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（７）（３０ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ／ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（２ｍＬ／２ｍＬ／２ｍＬ）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（１６ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、蒸発させ、次いで、１Ｎ  ＨＣｌで酸性化して（ｐＨ４）沈殿を形成させ、これを濾過して取り出し、水で洗浄し、真空下で乾燥させて、黄色固体として生成物Ｉｌｙ−ＩＩ−４を得た。
収率：１２ｍｇ（４３％）。
１Ｈ  ＮＭＲ：０５−０５６−０４３（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ２．３２（ｓ，３Ｈ），４．７８（ｓ，２Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），６．４２（ｄ，１Ｈ），７．０４（ｄ，１Ｈ），７．２０−７．６０（ｍ，９Ｈ），７．７４（ｄ，１Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ），１２．６（ｓ，１Ｈ）．
ＭＳ：４４４．０２（Ｍ＋Ｈ）。
【０６８９】
実施例１６．５（化合物２−８）
【０６９０】
【化２０４】
2009514892.tif 000180
（１−ベンジル−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（２）。１−ベンジル−２−メチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（１）（２．０ｇ、８．４ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（７０ｍＬ）の撹拌懸濁液にＭｅ３ＯＢＦ４（３．８ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を４８時間撹拌し、次いで、ＣＨ２Ｃｌ２（７０ｍＬ）で希釈した。混合物を、水（１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。１０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン〜２５％ＥｔＯＡｃを含むヘキサンを使用したシリカゲルでの残渣のフラッシュクロマトグラフィにより、淡黄色固体として生成物２を得た。収率：１．６ｇ（７５％）。
【０６９１】
４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（３）。（１−ベンジル−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（２）（０．８８７ｍｇ、３．５２ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（１０ｍＬ）の撹拌溶液に、ＤＭＳＯ（２．５ｍＬ）、その後にＫＯｔＢｕ（２５ｍＬ、１．０Ｍを含むＴＨＦ）を滴下し、次いで、反応混合物をＯ２で室温にて１５分間処理し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）で反応を停止させ、ＥｔＯＡｃ（３×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、水（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。２０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン〜４０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサンを使用したシリカゲルでの残渣のフラッシュクロマトグラフィにより、黄色固体として生成物３を得た。収率：５６０ｍｇ（９８％）。
【０６９２】
４−メトキシ−２−メチル−１−オクチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（８）。ＮａＨ（９８ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ、６０％鉱物油）を含むＴＨＦ（１０ｍＬ）の撹拌懸濁液に、４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（３）（２８０ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（３ｍＬ）を添加した。混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで、１−ヨードオクタン（０．４１ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）を添加し、１８時間撹拌し続けた。反応混合物の反応を飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）で停止させ、ＥｔＯＡｃ（３×４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、水（４０ｍＬ）、ブライン（４０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。１０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン〜２０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサンを使用したシリカゲルでの残渣のフラッシュクロマトグラフィにより、黄色油として生成物８を得た。収率：２３１ｍｇ（４９％）。
【０６９３】
２−メチル−１−オクチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（９）。４−メトキシ−２−メチル−１−オクチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（８）（０．２２ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を含むＡｃＯＨ（１０ｍＬ）の撹拌溶液に、４８％のＨＢｒ（５ｍＬ）を添加した。反応混合物を１０５℃に加熱し、次いで、１６時間撹拌し、室温に冷却し、蒸発させた。得られた残渣をＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ）に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させて、粗生成物９を得た。これを次の工程でさらに精製することなく使用した。収率：２０７ｍｇ（１００％）。
【０６９４】
（２−メチル−１−オクチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（１０）。２−メチル−１−オクチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（９）（０．２０７ｇ、０．８００ｍｍｏｌ）を含むＣｌＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ（４０ｍＬ）の撹拌溶液に、［Ｒｈ（ＯＣＯＣＦ３）２］２（３０ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、Ｎ２ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ（０．１０ｍＬ．０．９６ｍｍｏｌ）を含むＣｌＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ（８ｍＬ）溶液を、シリンジポンプを介して１６時間にわたって添加した。反応混合物を室温に冷却し、蒸発させた。１０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン〜２５％ＥｔＯＡｃを含むヘキサンを使用したシリカゲルでの残渣のフラッシュクロマトグラフィにより、黄色油として生成物１０を得た。収率：７０ｍｇ（２５％）。
【０６９５】
（３−アミノオキサリル−２−メチル−１−オクチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（１１）。（２−メチル−１−オクチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（１０）（６８ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）の撹拌溶液に、（ＣＯＣｌ）２（６０μＬ、０．６８ｍｍｏｌ）、その後にピリジン（３０μＬ）を滴下し、次いで、反応混合物を室温で１６時間撹拌し、ＮＨ３（ｇ）で３０分間処理し、さらに１時間撹拌した。沈殿した混合物を、ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。５０％ヘキサンを含むＥｔＯＡｃ〜２５％ヘキサンを含むＥｔＯＡｃを使用したシリカゲルでの残渣のフラッシュクロマトグラフィにより、黄色固体として生成物１１を得た。収率：４５ｍｇ（５５％）。
【０６９６】
（３−アミノオキサリル−２−メチル−１−オクチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−８）。（３−アミノオキサリル−２−メチル−１−オクチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（１１）（４２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ／ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（３ｍＬ／３ｍＬ／３ｍＬ）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（１７ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、蒸発させ、次いで、１Ｎ  ＨＣｌで酸性化して（ｐＨ４）沈殿を形成させ、これを濾過して取り出し、水で洗浄し、真空乾燥させて、黄色固体として生成物Ｉｌｙ−ＩＩ−８を得た。収率：３０ｍｇ（７７％）。
１Ｈ  ＮＭＲ：０５−０５６−０４１（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ０．８５（ｔ，３Ｈ），１．２０−１．４０（ｍ，１０Ｈ），１．５５−１．７５（ｍ，２Ｈ），２．５８（ｓ，３Ｈ），４．２０（ｔ，２Ｈ），４．７８（ｓ，２Ｈ），７．２４（ｄ，１Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），７．７８（ｄ，１Ｈ），７．８７（ｓ，１Ｈ），１２．７（ｓ，１Ｈ）．
ＭＳ：３９０．０４（Ｍ＋Ｈ）。
【０６９７】
実施例１６．６（化合物２−１１）
【０６９８】
【化２０５】
2009514892.tif 000181
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１４）：１−ベンジル−２−メチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（９）（１．０ｇ、４．２０ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロエタン（５００ｍＬ）に溶解した。混合物に、Ｒｈ２（ＯＣＯＣＦ３）４（１３２ｍｇ、０．２０２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を加熱還流し、次いで、反応混合物にｔｅｒｔ−ブチルジアゾアセテート（０．６５ｍＬ、４．２０ｍｍｏｌ）を含むジクロロエタン（５０ｍＬ）溶液を還流下で１６時間にわたって滴下した。添加後、反応混合物を、還流下で１時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温に冷却した。混合物を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル、３：１）によって残渣を精製して、（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１４）を得た。収率：７００ｍｇ、（５１％）。
【０６９９】
２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１５）：（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１４）（２００ｍｇ、０．５６８ｍｍｏｌ）を、乾燥テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解し、−７８℃に冷却した。混合物に、−７８℃のＬｉＮ（Ｓｉ（ＣＨ３）３）２（１．７０ｍＬ）のテトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ）を滴下した。反応混合物を、−７８℃〜−５℃で１時間撹拌し、次いで、−５０℃のヨードエタン（０．１５ｍＬ、１．８４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（５ｍＬ）を滴下した。混合物を、−５０℃〜室温で４時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル、４：１）によって精製して、２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１５）を得た。収率：５０ｍｇ、（２３％）。
【０７００】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６）：２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１５）（１３４ｍｇ、０．３５２ｍｍｏｌ）を、乾燥クロロホルム（１０ｍＬ）に溶解した。混合物に、塩化オキサリル（０．１０ｍＬ、１．１３ｍｍｏｌ）を含むクロロホルム（５ｍＬ）溶液を室温で滴下した。次いで、ピリジン（０．０５ｍＬ）を、混合物に室温でゆっくり添加した。添加後、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を、氷冷２０％ＮＨ４ＯＨ溶液（１００ｍＬ）に注ぎ、１時間撹拌した。混合物を、ジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈した。有機相を分離し、水相をジクロロメタン（２×２０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させた。混合物を濾過した。濾液を濃縮し、残渣を、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル、勾配１：１）によって精製して黄色固体として、２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６）を得た。収率：６２ｍｇ、（３９％）。
【０７０１】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−１１）：２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６）（２６ｍｇ、０．０５７６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解した。混合物に、１，３−ジメトキシベンゼン（０．０２３ｍＬ、０．１７２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。混合物を、０℃で３０分間冷却した。混合物に、トリフルオロ酢酸（０．０１５ｍＬ、０．２３４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。添加後、混合物を０℃で１時間撹拌した。次いで、混合物を室温まで加温し、室温で２時間撹拌した。次いで、さらなるトリフルオロ酢酸（０．１ｍＬ）を添加し、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、Ｈ−ＮＭＲは、反応が完了していないことを示した。残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に再溶解し、次いで、トリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）を室温で添加した。混合物を、室温で６時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を、シリカゲル分取薄層クロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル、１：１）によって精製して、淡黄色固体として、２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酪酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−１１）を得た。収率：１１ｍｇ、（４８％）。
１Ｈ  ＮＭＲ：０５−４３−１２８−２，（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ，８．０９（ｂｒ，ｓ，１Ｈ，ＮＨ），７．７２（ｄ，１Ｈ），７．５４（ｂｒ，ｓ，１Ｈ，ＮＨ），７．２０−７．３８（ｍ，３Ｈ），７．１８（ｄ，１Ｈ），７．０８（ｄ，２Ｈ），５．５０（ｂｒ，ｓ，２Ｈ，ＰｈＣＨ２Ｎ），５．０２（ｔ，１Ｈ，ＣＨＯＡｒ），２．４１（ｂｒ，ｓ，３Ｈ，Ｍｅ），１．９２（ｑ，２Ｈ，Ｅｔ），１．０２（ｔ，３Ｈ，Ｅｔ），ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳ）：３９５．９８［Ｍ＋１］。
【０７０２】
実施例１６．７：化合物（２−９）
【０７０３】
【化２０６】
2009514892.tif 000182
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）酢酸（ＩＬＹ−ＩＩ−９）
５，６−ジクロロヘキサン−３−オン（１２）。−５℃のプロピオニルクロリド（８．８６ｍＬ、１０２ｍｍｏｌ）およびアリルクロリド（１１５ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（５００ｍＬ）溶液に、塩化アルミニウム（１１５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を５時間撹拌し、次いで、０℃に加温した。溶媒の蒸発後、残渣をエーテル（３×１５０ｍＬ）によって抽出した。合わせた抽出物を水（２×２００ｍＬ）で洗浄し、その後に溶媒除去し、乾燥させて、１４ｇの粗１２を得た。
【０７０４】
１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロール（１３）：室温の粗１２（１４ｇ、８３ｍｍｏｌ）を含む乾燥ベンゼン（２００ｍＬ）に、ベンジルアミン溶液（１２．５ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１１ｇ、１１０ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を６５℃に到達するまで加熱し、１８時間撹拌した。得られた反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロール（１３）（９．２４ｇ（５０ｍｍｏｌ）（２工程で６０％））を得た。
【０７０５】
１−ベンジル−５−エチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド（１４）：ＰＯＣｌ３（２３．４６ｍＬ、２４６ｍｍｏｌ）を、撹拌したＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０４ｍＬ）に０℃で添加した。添加後、混合物をさらに９０分間撹拌した。混合物に、１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロール（１３）（８．３３ｇ、４５ｍｍｏｌ）を含むテトラヒドロフラン（１１５０ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を、０℃〜室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、酢酸エチル（２Ｌ）に再溶解した。混合物を、飽和Ｎａ２ＣＯ３（２×５００ｍＬ）で洗浄した。Ｎａ２ＣＯ３溶液を、酢酸エチル（７×１Ｌ）で抽出した。有機層を合わせ、濃縮した。粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル（７：１））によって精製して、１−ベンジル−５−エチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド（１４）を得た。収率：６ｇ（５６％）。
【０７０６】
（Ｅ）−メチル３−（１−ベンジル−５−エチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）アクリレート（１５）：ナトリウム（０．７５ｇ、３２ｍｍｏｌ）を、乾燥メタノール（３０ｍＬ）に少しずつ添加した。新たに形成されたナトリウムメトキシド溶液に、トリメチルホスホノアセテート（２．６ｍＬ、１５．２ｍｍｏｌ）を含むテトラヒドロフラン（７ｍＬ）溶液を室温で滴下した。添加後、混合物を室温でさらに６０分間撹拌した。次いで、反応混合物に、１−ベンジル−５−エチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド（１４）（２ｇ）を含むテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）溶液を室温で滴下した。反応混合物を、室温で２時間撹拌した。混合物を濃縮し、酢酸エチル（２００Ｌ）に再溶解した。混合物を、１Ｍ  ＨＣｌ溶液、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機溶液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、次いで濾過し、濃縮して、粗生成物（Ｅ）−メチル３−（１−ベンジル−５−エチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）アクリレート（１５）を得た。収率：２ｇ。
【０７０７】
（Ｅ）−３−（１−ベンジル−５−エチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）アクリル酸（１６）：（Ｅ）−メチル３−（１−ベンジル−５−エチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）アクリレート（１５）（２ｇ）を、テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）とメタノール（４０ｍＬ）との混合物に溶解した。混合物に、水酸化リチウム一水和物（１ｇ、２５ｍｍｏｌ）の水溶液（２０ｍＬ）を添加した。添加後、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を、２Ｍ  ＨＣｌによってｐＨ４〜５に酸性化した。混合物を濃縮し、酢酸エチルに再溶解した。混合物を、Ｈ２Ｏで洗浄した。水層を、酢酸エチル（２×２５０ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせ、濃縮して黄色固体を得た。これをジクロロメタンで洗浄し、その後にシリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル（１：３）、その後に酢酸エチル原液）によって精製して、（Ｅ）−３−（１−ベンジル−５−エチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）アクリル酸（１６）（１．４８ｇ）を得た。
【０７０８】
１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１９）：３（Ｅ）−３−（１−ベンジル−５−エチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）アクリル酸（１６）（１．４８ｇ、５．８ｍｍｏｌ）を、乾燥アセトン（７０ｍＬ）に溶解した。懸濁混合物に、トリエチルアミン（１．９ｍＬ）を添加して、透明な溶液を形成させた。反応混合物を０℃に冷却し、次いで、冷却した反応混合物にクロロギ酸エチル（１６ｍｍｏｌ）を含む乾燥アセトン（６５ｍＬ）溶液を１時間にわたって滴下した。添加後、反応混合物を０℃で４時間撹拌した。次いで、反応混合物に、アジ化ナトリウム（７７０ｍｇ、１１．７ｍｍｏｌ）の水溶液（１７ｍＬ）を３０分間にわたって滴下した。反応混合物を、０℃で２時間撹拌した。反応混合物を、氷水（５００ｍＬ）に注いだ。次いで、混合物をジクロロメタン（３×２５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。混合物を濾過し、濃縮して、粗１８を得た。２０５℃に予熱したジフェニルエーテル（１７ｍＬ）とトリブチルアミン（１．６５ｍＬ）との混合物に、粗１８を含むジフェニルエーテル（２５ｍＬ）の溶液を２０５℃で１時間滴下した。添加後、混合物を、２０５℃でさらに１時間撹拌した。混合物を室温に冷却し、固体を形成させた。ジエチルエーテル（５０ｍＬ）を反応混合物に添加して、さらなる固体を形成させた。混合物を濾過し、固体をジエチルエーテルで洗浄して、生成物を得た。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１９）（６００ｍｇ）を得た。
【０７０９】
エチル２−（１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）アセテート（２０）：１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１９）（６００ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロエタン（３００ｍＬ）に溶解した。混合物に、Ｒｈ２（ＯＣＯＣＦ３）４（７１ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を加熱還流し、次いで、反応混合物にジアゾ酢酸エチル（２．３７ｍｍｏｌ）を含む乾燥ジクロロエタン（３０ｍＬ）溶液を、還流下で６時間にわたって滴下した。添加後、反応混合物を、還流下で１．５時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温に冷却した。混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、エチル２−（１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）アセテート（２０）を得た。収率：３９０ｍｇ、（４４％）。
【０７１０】
エチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）アセテート（２１）：エチル２−（１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）アセテート（２０）（３９０ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を、乾燥クロロホルム（３７ｍＬ）に溶解した。混合物に、塩化オキサリル（０．３０ｍＬ、３．４５ｍｍｏｌ）を含むクロロホルム（１０ｍＬ）溶液を室温で滴下した。次いで、ピリジン（０．１４０ｍＬ）を室温で混合物にゆっくり添加した。添加後、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、エチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）アセテート（２１）を得た。収率：９３ｍｇ、（２０％）。
【０７１１】
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）酢酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−９）：エチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）アセテート（２１）（９３ｍｇ、０．２２７ｍｍｏｌ）を、メタノール（２０ｍＬ）に溶解する。混合物に、ＫＯＨ（１Ｍ，０．２５ｍＬ）溶液を室温で添加する。添加後、混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、水酸化リチウム一水和物（９０ｍｇ）の水溶液（５ｍＬ）を添加する。さらに１時間の撹拌後、混合物を濃縮し、残渣をメタノール（１０ｍＬ）およびエタノール（１０ｍＬ）に再溶解する。混合物を濾過し、濾液を塩酸を含むエーテル（１．０Ｍ）でｐＨ３〜４に酸性化した。溶媒を蒸発させ、残渣をジクロロメタン：エーテル（１：１）の混合物、次いで水（５ｍＬ）およびエーテルで洗浄して、２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）酢酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−９）を得る。
【０７１２】
実施例１６．８：化合物（２−１０）
【０７１３】
【化２０７】
2009514892.tif 000183
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）酢酸（ＩＬＹ−ＩＩ−１０）
５，６−ジクロロヘキサン−３−オン（１２）。−５℃のプロピオニルクロリド（８．８６ｍＬ、１０２ｍｍｏｌ）およびアリルクロリド（１１５ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（５００ｍＬ）溶液に、塩化アルミニウム（１１５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を５時間撹拌し、次いで、０℃に加温した。溶媒の蒸発後、残渣をエーテル（３×１５０ｍＬ）によって抽出した。合わせた抽出物を水（２×２００ｍＬ）で洗浄し、その後に溶媒除去し、乾燥させて、１４ｇの粗１２を得た。
【０７１４】
１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−エチル−１Ｈ−ピロール（１３）：室温の粗１２（１４ｇ、８３ｍｍｏｌ）を含む乾燥ベンゼン（２００ｍＬ）に、ビフェニル−２−イルメタンアミン溶液（１００ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１１０ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を６５℃に到達するまで加熱し、１８時間撹拌する。得られた反応混合物を濾過し、濃縮する。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、１３を得た。
【０７１５】
１−（ビフェニル−２−イルメチル）−５−エチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド（１４）：ＰＯＣｌ３（２３．４６ｍＬ、２４６ｍｍｏｌ）を、撹拌したＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０４ｍＬ）に０℃で滴下した。添加後、混合物をさらに９０分間撹拌する。混合物に、１３（４５ｍｍｏｌ）を含むテトラヒドロフラン（１１５０ｍＬ）溶液を滴下する。反応混合物を、０℃〜室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、酢酸エチル（２Ｌ）に再溶解した。混合物を、飽和Ｎａ２ＣＯ３（２×５００ｍＬ）で洗浄した。Ｎａ２ＣＯ３溶液を、酢酸エチル（７×１Ｌ）で抽出した。有機層を合わせ、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、１４を得た。
【０７１６】
（Ｅ）−メチル３−（１−（ビフェニル−２−イルメチル）−５−エチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）アクリレート（１５）：ナトリウム（０．７５ｇ、３２ｍｍｏｌ）を、乾燥メタノール（３０ｍＬ）に少しずつ添加する。新たに形成されたナトリウムメトキシド溶液に、トリメチルホスホノアセテート（２．６ｍＬ、１５．２ｍｍｏｌ）を含むテトラヒドロフラン（７ｍＬ）溶液を室温で滴下する。添加後、混合物を、室温でさらに６０分間撹拌する。次いで、反応混合物に、１４（２ｇ）を含むテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）溶液を室温で滴下する。反応混合物を、室温で２時間撹拌する。反応物を濃縮し、酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解する。混合物を１Ｍ  ＨＣｌ溶液で洗浄し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３、Ｈ２Ｏで洗浄する。有機溶液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、次いで濾過し、濃縮して、粗生成物１５を得る。
【０７１７】
（Ｅ）−３−（１−（ビフェニル−２−イルメチル）−５−エチル−１Ｈ−ピロロ−２−イル）アクリル酸（１６）：化合物１５（２ｇ）を、テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）とメタノール（４０ｍＬ）との混合物に溶解する。混合物に、水酸化リチウム一水和物（１ｇ、２５ｍｍｏｌ）の水溶液（２０ｍＬ）を添加する。添加後、反応混合物を室温で１８時間撹拌する。反応混合物を、２Ｍ  ＨＣｌによってｐＨ４〜５に酸性化する。混合物を濃縮し、酢酸エチルに再溶解する。混合物を、Ｈ２Ｏで洗浄する。水層を、酢酸エチル（２×２５０ｍＬ）で抽出する。有機物を合わせ、濃縮して黄色固体を得る。これをジクロロメタンで洗浄し、その後にシリカゲルクロマトグラフィでの精製により、１６を得る。
【０７１８】
１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１９）：化合物１６（５．８ｍｍｏｌ）を、乾燥アセトン（７０ｍＬ）に溶解する。懸濁混合物にトリエチルアミン（１．９ｍＬ）を添加して、透明な溶液を得る。反応混合物を０℃に冷却し、次いで、冷却した反応混合物に、クロロギ酸エチル（１６ｍｍｏｌ）を含む乾燥アセトン（６５ｍＬ）溶液を１時間にわたって滴下する。添加後、反応混合物を０℃で４時間撹拌する。次いで、反応混合物に、アジ化ナトリウム（７７０ｍｇ、１１．７ｍｍｏｌ）の水溶液（１７ｍＬ）を３０分間にわたって滴下する。反応混合物を、０℃で２時間撹拌する。反応混合物を、氷水（５００ｍＬ）に注ぐ。次いで、混合物を、ジクロロメタン（３×２５０ｍＬ）で抽出する。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。混合物を濾過し、濃縮して、粗１８を得る。２０５℃に予熱したジフェニルエーテル（１７ｍＬ）とトリブチルアミン（１．６５ｍＬ）との混合物に、粗１８を含むジフェニルエーテル（２５ｍＬ）の溶液を２０５℃で１時間滴下する。添加後、混合物を２０５℃でさらに１時間撹拌する。混合物を室温に冷却し、固体を形成させる。ジエチルエーテル（５０ｍＬ）を反応混合物に添加して、さらなる固体を形成させる。混合物を濾過し、固体をジエチルエーテルで洗浄して、生成物を得る。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィによって精製して１９を得る。
【０７１９】
エチル２−（１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）アセテート（２０）：化合物１９（２．３８ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロエタン（３００ｍＬ）に溶解する。混合物に、Ｒｈ２（ＯＣＯＣＦ３）４（７１ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を加熱還流し、次いで、反応混合物に、ジアゾ酢酸エチル（２．３７ｍｍｏｌ）を含む乾燥ジクロロエタン（３０ｍＬ）溶液を還流下で６時間にわたって滴下する。添加後、反応混合物を、還流下で１．５時間撹拌する。次いで、反応混合物を室温に冷却する。反応物を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、２０を得る。
【０７２０】
エチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）アセテート（２１）：化合物２０（１．１５ｍｍｏｌ）を、乾燥クロロホルム（３７ｍＬ）に溶解する。混合物に、塩化オキサリル（０．３０ｍＬ、３．４５ｍｍｏｌ）を含むクロロホルム（１０ｍＬ）溶液を、室温で滴下する。次いで、ピリジン（０．１４０ｍＬ）を、室温で混合物にゆっくり添加する。添加後、混合物を、室温で１８時間撹拌する。反応物を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、２１を得る。
【０７２１】
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）酢酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−１０）：化合物２１（０．２２７ｍｍｏｌ）を、メタノール（２０ｍＬ）に溶解する。混合物に、ＫＯＨ（１Ｍ，０．２５ｍＬ）溶液を室温で添加する。添加後、混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、水酸化リチウム一水和物（９０ｍｇ）の水溶液（５ｍＬ）を添加する。さらに１時間の撹拌後、混合物を濃縮し、残渣をメタノール（１０ｍＬ）およびエタノール（１０ｍＬ）に再溶解する。混合物を濾過し、濾液を塩酸を含むエーテル（１．０Ｍ）でｐＨ３〜４に酸性化した。溶媒を蒸発させ、残渣を、ジクロロメタン：エーテル（１：１）の混合物、次いで、水（５ｍＬ）およびエーテルで洗浄して、２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）酢酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−１０）を得る。
【０７２２】
実施例１６．９ａ：化合物（２−１２）
【０７２３】
【化２０８】
2009514892.tif 000184
２−（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）アセトアミド）コハク酸（ＩＬＹ−ＩＩ−１２）
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）酢酸（ＩＬＹ−ＩＩ−１）（１．５ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン／ジメチルホルムアミド（５：１）溶液に、アスパラギン酸ジベンジルエステル（３１３ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（１８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２０２ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（２８６ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）をそれぞれ添加し、反応混合物を室温で撹拌する。６時間後、反応物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで２回洗浄する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空蒸発させる。残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィに供して、表題化合物２を得る。
【０７２４】
２（０．２５ｍｍｏｌ）を含むエタノール１０ｍＬの溶液を、Ｐｄ／Ｃ  ５０ｍｇの存在下でバルーンを使用して水素雰囲気下で撹拌する。１８時間の撹拌後、セライトで触媒を濾過し、溶媒を蒸発させて、標的化合物（２−（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）アセトアミド）コハク酸）（ＩＬＹ−ＩＩ−１２）を得る。
【０７２５】
実施例１６．９ｂ：化合物（２−１２）
【０７２６】
【化２０９】
2009514892.tif 000185
３−［２−（７−アミノオキサリル−５−ベンジル−６−メチル−５Ｈ−［２］ピリジン−１−イルオキシ）−アセチルアミノ］−ペンタン二酸ジベンジルエステル（２）：
Ｉｌｙ−ＩＩ−１（０．０５２ｇ、０．１７７ミリモル）を含むジクロロメタン（１０ｍＬ）ＤＭＡＰ（０．０４５ｇ、０．３５４ミリモル）の混合物に、Ｌ−アスパラギン酸ジベンジルエステルｐ−トルエンスルホナート（０．１７３ｇ、０．３５４ミリモル）、ＥＤＣＩ（０．０６８ｇ、０．３５４ミリモル）、およびＨＢＴＵ（０．０４８ｇ、０．３５４ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応混合物を、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を、１Ｍ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）、次いで水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（４：１  ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製して、黄色固体として中間体（２）を得た。収率：０．０３ｇ、２６％。
【０７２７】
２−［２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−アセチルアミノ］−マロン酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−１２）：中間体（２）（０．０４０ｇ、０．０６０４ミリモル）を含むメタノール（１０ｍＬ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％、０．０１５ｇ）を添加した。水素を、１ａｔｍおよび室温で１．５時間混合物に通した。反応混合物を、セライトで濾過した。濾液を濃縮して白色固体を得、これをメタノール（１０ｍＬ）に溶解し、ＰＴＦＥフィルターに通した。濾液を濃縮して、黄色固体としてＩｌｙ−ＩＩ−１２を得た。収率：０．０２０ｇ、６８％。１Ｈ  ＮＭＲ：０５−０４３−１４６−２（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ，ｐｐｍ：８．１５−８．０５（ｍ，２Ｈ），７．２２（ｄ，１Ｈ），７．３５−７．２２（ｍ，４Ｈ），７．０７（ｄ，２Ｈ），５．５８（ｓ，２Ｈ），５．２０（ｄ，１Ｈ），４．８０（ｄ，１Ｈ），４．３０（ｂｒ，１Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４８２．９４（Ｍ＋１）．化合物（２−１２）
実施例１６．１０：化合物（２−１３）
【０７２８】
【化２１０】
2009514892.tif 000186
２−（４−（２−アミノ−２−オキソエトキシ）−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−３−イル）アセトアミド（ＩＬＹ−ＩＩ−１３）
ＩＬＹ−ＩＩ−１の撹拌溶液に、エチルエステル（１）（０．２２ｍｍｏｌ）を含むジクロロエタン（７ｍＬ）、Ｅｔ３ＳｉＨ（０．５ｍＬ）、およびＣＦ３ＣＯ２Ｈ（０．５ｍＬ）を添加する。混合物を８５℃に加熱し、３時間撹拌し続ける。反応混合物を室温に冷却し、蒸発させる。得られた残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、冷飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させて、粗生成物２を得る。これを次の工程でさらに精製することなく使用する。
【０７２９】
１（０．２２ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ／ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（３ｍＬ／３ｍＬ／３ｍＬ）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（５３ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を、室温で２時間撹拌し、蒸発させ、次いで、１Ｎ  ＨＣｌで酸性化して（ｐＨ４）沈殿を形成させ、これを濾過によって取り出し、水で洗浄し、真空乾燥させて、生成物Ｉｌｙ−ＩＩ−１３を得る。
【０７３０】
実施例１６．１１ａ：化合物（２−１４）
【０７３１】
【化２１１】
2009514892.tif 000187
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミド（ＩＬＹ−ＩＩ−１４）
２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−エチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）酢酸（Ｉｌｙ−ＩＩ−１０）（２．３ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン／ジメチルホルムアミド混合物（４：１、１０ｍＬ）の溶液に、４−ジメチルアミノピリジン（３．４ｍｍｏｌ）、メタンスルホンアミド（４３１ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）、および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（４３３ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で撹拌する。２４時間後、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで２回洗浄する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空蒸発させる。残渣を、シリカゲルでのクロマトグラフィ（ＣＨＣｌ３〜４％ＭｅＯＨを含むＣＨＣｌ３）に供して、２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−Ｎ−（メチルスルホニル）アセトアミド（ＩＬＹ−ＩＩ−１４）を得る。
【０７３２】
実施例１６．１１ｂ：化合物（２−１４）
【０７３３】
【化２１２】
2009514892.tif 000188
１−ベンジル−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（２）：１−ベンジル−２−メチル−１，５−ジヒドロ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン（１）（３．４８ｇ、１６．６２ミリモル）を含むジクロロメタン（１６０ｍＬ）の混合物に、トリメチルオキソニウムテトラフルオロボラート（４．５２ｇ、２９．２４ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。さらなるトリメチルオキソニウムテトラフルオロボラート（２．２５ｇ、１４．５５ミリモル）を添加し、１８時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（２０：１  ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ）によって精製して、中間体（２）を得た。収率：１．３１ｇ、３５％。
【０７３４】
４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（３）：１−ベンジル−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（２）（０．８８７ｇ、３．５１ミリモル）を含む無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、ジメチルスルホキシド（２５ｍＬ）を（シリンジによって）ゆっくり添加し、混合物を０℃に冷却した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１Ｍを含むＴＨＦ、２５ｍＬ、２５ミリモル）をゆっくり添加した。酸素を混合物に４５分間バブリングした。飽和塩化アンモニウム溶液で反応を停止させ、混合物を酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、中間体（３）を得た。収率：１．０６ｇ（＞１００％）。
【０７３５】
１−ビフェニル−２−イルメチル−４−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン（４）：中間体（３）（０．７０ｇ、４．６９ミリモル）を含む無水ＤＭＦ（４０ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（６０％鉱物油、０．２８ｇ、７．０４ミリモル）を添加し、混合物を１時間撹拌した。混合物に、２−フェニル臭化ベンジル（０．９５ｍＬ、５．１６ミリモル）を滴下した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム溶液（２００ｍＬ）で反応を停止させ、混合物を酢酸エチル（３×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色固体として中間体（４）を得た。収率：１．１ｇ、７１％。
【０７３６】
１−ビフェニル−２−イルメチル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オール（５）：中間体（４）を含む酢酸（４５ｍＬ）の溶液に、臭化水素（４８％溶液、１５ｍＬ）を添加した。混合物を１０５℃で１８時間加熱した。反応混合物を濃縮し、次いで、ジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、塩化アンモニウム溶液（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して、固体として中間体（５）を得た。収率：０．６５ｇ、６２％。
【０７３７】
（１−ビフェニル−２−イルメチル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（６）：中間体（５）（０．５５７ｇ、１．７７ミリモル）を含む１，２−ジクロロエタン（２５０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸ロジウム（ＩＩ）二量体（０．０５８ｇ、０．０８８５ミリモル）を添加し、反応物を加熱還流した。次いで、ジアゾ酢酸エチル（９０％、０．２ｍＬ、１．７７ミリモル）を含むジクロロエタン（３５ｍＬ）溶液を、シリンジポンプを介して、１６時間にわたって混合物に添加した。反応混合物を、さらに２時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、黄色固体として中間体（６）を得た。収率：０．２７２ｇ、３８％。
【０７３８】
（３−アミノオキサリル−１−ビフェニル−２−イルメチル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル（７）：中間体（６）（０．２５５ｇ、０．６３７ミリモル）を含むクロロホルム（２０ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（０．１６９ｍＬ、１．８９８ミリモル）を含むクロロホルム（６ｍＬ）を滴下し、その後にピリジン（０．１ｍＬ）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応混合物を氷冷塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（５０ｍＬ）を添加し、混合物を１時間撹拌した。有機層を分離し、水層をクロロホルム（３×５０ｍＬ）でさらに抽出した。有機画分を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（３：１  ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ）によって精製して、黄色固体として中間体（７）を得た。収率：０．１８ｇ、６０％。
【０７３９】
（３−アミノオキサリル−１−ビフェニル−２−イルメチル−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−４−イルオキシ）−酢酸（８）：中間体（７）（０．１８ｇ、０．３８２ミリモル）を含むＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１０ｍＬ／１０ｍＬ）の溶液に、水酸化リチウム一水和物（０．０３５ｇ、０．８５２ミリモル）を添加した。反応混合物を、室温で１．５時間撹拌した。混合物を、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ１〜２に酸性化し、次いで、１Ｍ  ＫＯＨ溶液でｐＨ６．５に調整した。溶媒を蒸発させ、水を静かに注ぎ出した。残渣を水（２×５ｍＬ）で洗浄し、その後にジエチルエーテル（２×５ｍＬ）で洗浄した。濾過によって固体を回収し、高真空下で乾燥させて、黄色固体として中間体（８）を得た。収率：０．１３ｇ、７２％。
【０７４０】
２−［１−ビフェニル−２−イルメチル−４−（２−メタンスルホニルアミノ−２−オキソ−エトキシ）−２−メチル−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−３−イル］−２−オキソ−アセトアミド（Ｉｌｙ−ＩＩ−１４）：中間体（８）（０．１３ｇ、０．２９５ミリモル）を含むジクロロメタン（１０ｍＬ）の混合物に、ＤＭＡＰ（０．０６５ｇ、０．４５ミリモル）、メタンスルホンアミド（０．０５６ｇ、０．５８ミリモル）、および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（ＥＤＡＣ）（０．０５６ｇ、０．２９３ミリモル）を添加した。混合物を、室温で１８時間撹拌した。溶媒を濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（１０：１  ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ）によって精製して、Ｉｌｙ−ＩＩ−１４を得た。収率：０．０３５ｇ、２３％。１Ｈ  ＮＭＲ：０５−０４３−１６７−２ａ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ，ｐｐｍ：７．９６（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｄ，１Ｈ），７．６０−７．２２（ｍ，１０Ｈ），７．０２（ｄ，１Ｈ），６．４２（ｄ，１Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ），４．７５（ｓ，２Ｈ），３．００（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ）．ＥＳ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５２０．９５（Ｍ＋１）．
一定のかかるアザインドールおよびアザインドール関連化合物を、実施例８のプロトコルを使用して、ホスホリパーゼ活性について評価した。結果を、表８に示す。
表８：膵臓分泌性ヒト、マウス、およびブタＰＬＡ２の阻害
【０７４１】
【化２１３】
2009514892.tif 000189
実施例１７：ホスホリパーゼ阻害部分の調製
本実施例は、ホスホリパーゼ阻害部分として用いるのに適した種々の化合物の合成を示す。
【０７４２】
実施例１７Ａ：化合物３−１
【０７４３】
【化２１４】
2009514892.tif 000190
１−ベンジル−４−メトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸メチルエステル２（中間体）：（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル１（７００ｍｇ，２．２６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解させた。混合物を０℃まで冷却した。混合物に、塩化ジエチルアルミニウム溶液（ヘキサン中１．０Ｍ、１２ｍＬ）を０℃にて滴下した。滴下の後、混合物を０℃で３０分間攪拌した。ジクロロメタン（１５ｍＬ）中のクロロギ酸メチル（０．９ｍＬ，１０ｍｍｏｌ）の溶液を０℃にて反応混合物に滴下した。次いで、反応混合物溶液を０℃にて２時間攪拌した。反応を、水を加えることによって停止させた。反応混合物を、さらにジクロロメタンを添加して希釈した。有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。混合物を濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン〜ヘキサン：酢酸エチル、勾配１：３〜１：１）によって残渣を精製して、１−ベンジル−４−メトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸メチルエステル２をオフホワイトの固体として得た。
収率：５４０ｍｇ（６５％）
１−ベンジル−４−メトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸ＩＩｙ−ＩＩＩ−１（化合物３−１）：１−ベンジル−４−メトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸メチルエステル２（５４０ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（３ｍＬ）およびメタノール（３ｍＬ）の混合液に溶解させた。混合物に、ＫＯＨ（１０．０Ｍ、３ｍＬ）の溶液を室温で加えた。添加の後、混合物を室温で１８時間攪拌した。混合物を濃塩酸によってｐＨ＝１〜２まで酸性化した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで抽出した。有機溶液を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣をメタノール：酢酸エチル（１：１）およびエーテルの混合液で洗浄して、１−ベンジル−４−メトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸ＩＩｙ−ＩＩＩ−１をオフホワイトの固体として得た。収率：９８ｍｇ（２％）
１Ｈ  ＮＭＲ：０４−７３−２３０−５，（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ，７．２０−７．３９（ｍ，４Ｈ），７．１４（ｔ，１Ｈ），７．０２（ｑ，２Ｈ），６．７２（ｑ，１Ｈ），５．５７（ｂｒ，ｓ，２Ｈ，ＰｈＣＨ２Ｎ），４．８６（ｂｒ，ｓ，２Ｈ，ＣＨ２ＯＡｒ），２．６２（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳ）：３３７．９１［Ｍ−１］。
【０７４４】
実施例１７Ｂ：化合物５−５
【０７４５】
【化２１５】
2009514892.tif 000191
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシメチル）−ホスホン酸ジエチルエステル２（中間体）：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール１（０．３ｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解させた。混合物に、鉱物油中水素化ナトリウム６０％（６６ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌した。混合物に、ジエチルヨードメチルホスフェート（０．３５ｍＬ、１．６５ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１８時間攪拌した。反応物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５×１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（３：１  ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ）によって精製した。得られた褐色液体（０．３８ｇ）は混合物２：１  ジエチルヨードメチルホスフェート：２であった。該物質をさらに精製することなく次の工程で用いた。
【０７４６】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシメチル）−ホスホン酸ジエチルエステル３（中間体）：（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシメチル）−ホスホン酸ジエチルエステル２（０．１９ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）に溶解させた。混合物に、塩化オキサリル（０．０４５ｍＬ、０．５１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温にて１時間攪拌した。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングし、混合物を室温で１時間攪拌した。ジクロロメタンを蒸発させた。残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解させ、Ｈ２Ｏ（３×１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して３（０．１５ｇ、９６％）を得た。
【０７４７】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシメチル）−ホスホン酸ＩＩｙ−Ｖ−５（化合物５−５）：（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシメチル）−ホスホン酸ジエチルエステル３（０．１５ｇ、０．３２７ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させた。混合物に、ブロモトリメチルシラン（０．３３ｍＬ、２．５５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１８時間攪拌した。反応混合物を蒸発させた。残渣をアセトニトリル（５ｍＬ）、ジエチルエーテル（５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３滴）中で攪拌した。得られた沈殿を濾過によって回収して、ＩＩｙ−Ｖ−５（０．０２２ｇ、１７％）を褐色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ７．８５（ｓ，１Ｈ），７．５０（ｓ，１Ｈ），７．３５−７．２５（ｍ，３Ｈ），７．１５−７．００（ｍ，４  Ｈ），６．９２（ｄ，２Ｈ），５．５０（ｓ，２Ｈ），４．２５（ｄ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ＋）４０２．９５。
【０７４８】
実施例１７Ｃ：化合物４−３
【０７４９】
【化２１６】
2009514892.tif 000192
２−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド２：無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の塩化オキサリル（２．１６ｍＬ、２４．８ｍｍｏｌ）の溶液に、無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール１（２．８０ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。混合物を室温にて１時間攪拌させた。次いで、ＮＨ３ガスを混合物に１時間バブリングした。混合物を室温にて１８時間攪拌させた。ジクロロメタンを蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１Ｌ）に溶解させ、Ｈ２Ｏ（４×５００ｍＬ）およびブライン（５００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、２（２．０ｇ、５５％）を黄色固体として得た。
【０７５０】
２−（１−ベンジル−５−ブロモー４−ヒドロキシ−２メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド２４および２−（１−ベンジル−７−ブロモ−４−ヒドロキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド３：２−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド２（５．０ｇ、１６．２３ｍｍｏｌ）を無水アセトニトリル（７００ｍＬ）中で混合した。混合物に、Ｎ−ブロモスクシンイミド（２．８７ｇ、１６．２３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて２．５時間攪拌した。アセトニトリルを蒸発させた。残渣を酢酸エチル（２Ｌ）に溶解させ、Ｈ２Ｏ（３×１Ｌ）およびブライン（１Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ほぼ（３００ｍＬ）の容量まで濃縮した。混合物に、メタノール（５０ｍＬ）を加え、混合物を室温まで冷却した。得られた沈殿を濾過によって回収し、ジエチルエーテルで洗浄して、３（３．３５ｇ、５３％）を橙色固体（ほぼ９０％純度）として得た。濾液を蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィ（３：１  ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ）によって精製して、４（０．５ｇ、８％）を黄色固体として得た。
【０７５１】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−５−ブロモ−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル５：２−（１−ベンジル−５−ブロモ−４−ヒドロキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド３（０．１ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解させた。混合物に、酸化バリウム（０．０８ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）、水酸化バリウム水和物（０．０８ｇ、０．２５７ｍｍｏｌ）およびヨウ化ナトリウム（２０ｍｇ）を加えた。混合物を室温にて３０分間攪拌した。混合物に、メチル−２−ブロモアセテート（０．０４ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温にて４時間攪拌した。反応物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５×１５０ｍＬ）およびブライン（１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、５（０．１１ｇ、９３％）を橙色固体として得た。
【０７５２】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−５−ブロモ−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ＩＩｙ−ＩＶ−３（化合物４−３）：（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−５−ブロモ−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル５（０．１ｇ、０．２１７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）中で混合した。混合物に、水酸化リチウム一水和物（０．０１５ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌した。反応混合物を高真空下で蒸発乾固した。残渣をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解させた。溶液を２Ｍ  ＨＣｌで酸性化した。得られた沈殿を濾過によって回収し、Ｈ２Ｏおよびジエチルエーテルで洗浄し、乾燥して、ＩＩｙ−ＩＶ−３（０．０４２ｇ、４３％）を黄色固体として得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−１８１．１：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ１２．７０（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ），７．６０（ｓ，１Ｈ），７．４０−７．２０（ｍ，５Ｈ），７．０５（ｄ，２Ｈ），５．５５（ｓ，２Ｈ），４．６０（ｓ，２Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ＋）４４４．９４，４４６．９６
実施例１７Ｄ：化合物４−９
【０７５３】
【化２１７】
2009514892.tif 000193
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−７−ブロモ−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル６：２−（１−ベンジル−７−ブロモ−４−ヒドロキシ−２メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド４（０．２５７ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解させた。混合物に、酸化バリウム（０．０８ｇ、１．３ｍｍｏｌ）、水酸化バリウム八水和物（０．０８ｇ、０．６４２ｍｍｏｌ）およびヨウ化ナトリウム（４０ｍｇ）を加えた。混合物を室温にて３０分間攪拌した。混合物に、メチル−２−ブロモアセテート（０．０４ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて１８時間攪拌した。反応物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５×１５０ｍＬ）およびブライン（１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣を酢酸エチルで洗浄し、濾過によって回収して、６（０．１４６ｇ、４８％）を橙色固体として得た。
【０７５４】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−７−ブロモ−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ＩＩｙ−ＩＶ−９（化合物４−９）：（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−７−ブロモ−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル６（０．１９ｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１で（１０ｍＬ）中で攪拌した。混合物に、水酸化リチウム一水和物（０．１ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて３０分間攪拌した。反応混合物を蒸発乾固し、残渣をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解させ、２Ｍ  ＨＣｌで酸性化した。混合物を１時間攪拌した。得られた沈殿を濾過によって回収し、Ｈ２Ｏおよびジエチルエーテルで洗浄して、ＩＩｙ−ＩＶ−９（０．１０６ｇ、５７％）を橙色固体として得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−２１５．１：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ１３．００（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．３８−７．２０（ｍ，４Ｈ），６．９２（ｄ，２Ｈ），６．５２（ｄ，１Ｈ），５．９０（ｓ，２Ｈ），４．７０（ｓ，２Ｈ），２．４０（ｓ，３Ｈ）。
【０７５５】
実施例１７Ｅ：化合物４−１６
【０７５６】
【化２１８】
2009514892.tif 000194
４−アリルオキシ−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール２：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール１（２．０ｇ、８．４３ｍｍｏｌ）を無水ジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）に溶解させた。混合物に、鉱物油中水酸化ナトリウム６０％（０．４５ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間攪拌した。混合物に、臭化アリル（０．９４ｍＬ、１０．９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にて１８時間攪拌させた。１Ｈ  ＮＭＲは反応が完了したことを示す。反応混合物を酢酸エチル（７００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５×１５０ｍＬ）およびブライン（１×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、２（２．３ｇ、９８％）を橙色固体として得た。
【０７５７】
５−アリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール３：４−アリルオキシ−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール２（２．３ｇ、８．３ｍｍｏｌ）を無水ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）に溶解させた。溶液を密封したチューブに入れた。反応容器をマイクロ波リアクター中で３５ｐｓｉにて１５０℃に４０分間付した。反応混合物を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、３（２．３ｇ、１００％）を橙色油として得た。
【０７５８】
（５−アリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル４：５−アリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール３（２．３ｇ，８．３ｍｍｏｌ）を無水ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）に溶解させた。反応混合物に、鉱物油中水素化ナトリウム６０％（０．４ｇ、９．９６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて１時間攪拌した。混合物に、ブロモ酢酸メチル（０．９１５ｍＬ、９．９６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて４８時間攪拌させた。反応混合物を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（６：１へキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、４（１．８ｇ、６２％）を橙色油として得た。
【０７５９】
（５−アリル−３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル５：無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の塩化オキサリル（０．２６ｍＬ、３．００ｍｍｏｌ）の溶液に、無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）中のメチル（５−アリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル４（１．０ｇ、２．８６ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。混合物を室温で１時間攪拌させた。混合物に、ＮＨ３ガスを３０分間バブリングした。混合物を室温で２時間攪拌した。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解させた。有機層をＨ２Ｏ（３×３００ｍＬ）およびブライン（１×２００ｍＬ）で洗浄した。有機物を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、５（１．１ｇ、９１％）を黄色固体として得た。
【０７６０】
（５−アリル−３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ＩＩｙ−ＩＶ−１６（化合物４−１６）：（５−アリル−３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル５（０．２９ｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）に溶解させた。混合物に、水酸化リチウム一水和物（０．１３ｇ、３．０１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて３０分間攪拌した。溶液を２Ｍ  ＨＣｌで酸性化し、室温にて１時間攪拌した。ＴＨＦを蒸発させ、得られた固体を濾過によって回収し、ジエチルエーテルで洗浄して、ＩＩｙ−ＩＶ−１６（０．１９ｇ、６８％）を黄色固体として得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−２１７：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ１２．５０（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．９０（ｓ，１Ｈ），７．５８（ｓ，１Ｈ），７．４０−７．２０（ｍ，４Ｈ），７．１０−６．９０（ｍ，３Ｈ），５．９５（ｍ，１Ｈ），５．５０（ｓ，２Ｈ），５．００（ｍ，２Ｈ），４．３５（ｓ，２Ｈ），３．５０（ｍ，２Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ＋）４０７．０５
実施例１７Ｆ：化合物４−２７
【０７６１】
【化２１９】
2009514892.tif 000195
［３−アミノオキサリル−１−ベンジル−５−（２，３−ジヒドロキシ−プロピル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸メチルエステル６：（５−アリル−３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル５（０．３ｇ、０．７１２ｍｍｏｌ）をアセトン：Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）に溶解させた。混合物に、Ｎ−メチルモルホリンＮ−オキサイド（０．１ｇ、０．８１５ｍｍｏｌ）および四酸化オスミウム（５粒）を加えた。混合物を室温で１８時間攪拌した。反応混合物を蒸発させ、酢酸エチルに溶解させ、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、６（０．１５ｇ、４６％）を固体として得た。
【０７６２】
［３−アミノオキサリル−１−ベンジル−５−（２，３−ジヒドロキシ−プロピル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（リチウム塩）ＩＩｙ−ＩＶ−２７：［３−アミノオキサリル−１−ベンジル−５−（２，３−ジヒドロキシ−プロピル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸メチルエステル６（０．０７２ｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）に溶解させた。混合物に、０．１７０５Ｍ  ＬｉＯＨ溶液（０．９２９ｍＬ、０．１５８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて３０分間攪拌した。反応混合物を高真空下で蒸発乾固した。残渣をジエチルエーテル中で攪拌し、濾過によって回収して、ＩＩｙ−ＩＶ−２７（０．０４１ｇ、５８％）を黄色固体として得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−２５０：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ８．３２（ｓ，１Ｈ），７．５０−７．００（ｍ，８Ｈ），５．４５（ｓ，２Ｈ），５．１５（ｓ，１Ｈ），５．０５（ｓ，１Ｈ），３．９０（ｑ，２Ｈ），３．５５（ｓ，１Ｈ），３．１５（ｓ，ｂｒｏａｄ，２Ｈ），２．９０−２．７０（ｍ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ＋）４４７．０６。
【０７６３】
実施例１７Ｇ：化合物４−７
【０７６４】
【化２２０】
2009514892.tif 000196
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル７：（５−アリル−３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル５（０．３２ｇ、０．７６２ｍｍｏｌ）をジオキサン：Ｈ２Ｏ  ３：１（８ｍＬ）に溶解させた。混合物に、２，６−ルチジン（０．１７ｍＬ、１．４３７ｍｍｏｌ）、過ヨウ素酸ナトリウム（０．６７ｇ、３．１２８ｍｍｏｌ）および四酸化オスミウム（５粒）を加えた。混合物を室温にて４８時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、次いで、Ｈ２Ｏ（３×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ  ３：１  ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ  １％Ｅｔ３Ｎによって精製して、７（０．１ｇ、３４％）を黄色固体として得た。
【０７６５】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（カリウム塩）ＩＩｙ−ＩＶ−７：（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル７（０．０４ｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）を無水エタノール（１０ｍＬ）に溶解させた。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液（０．１９３ｍＬ、０．０９８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて２．５時間攪拌した。反応混合物を高真空下で蒸発乾固した。残渣をジエチルエーテル中で３０分間攪拌し、濾過によって回収した。固体を分取ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ  １００％）によって精製して、ＩＩｙ−ＩＶ−７（０．０２０ｍｇ、４７％）を橙色固体として得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−２６５．３：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ１０．６０（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，１Ｈ），７．５２−７．４７（ｍ，２Ｈ），７．３３−７．２６（ｍ，４Ｈ），７．０６（ｍ  ２Ｈ），５．５３（ｓ，２Ｈ），４．１０（ｓ，２Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ−）３９３．０２，（ＥＳ＋）３９５．０２（Ｈ＋），４１７．００（Ｎａ＋），４３２．９６（Ｋ＋）。
【０７６６】
実施例１７Ｈ：化合物４−２
【０７６７】
【化２２１】
2009514892.tif 000197
３−アミノオキサリル−１−ベンジル−４−メトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸８：（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−５−ホルミル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸メチルエステル７（０．０５ｇ、０．１２２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１０ｍＬ）中で混合した。混合物に、過酸化水素３０重量％（０．０１２ｍＬ、０．１２２５ｍｍｏｌ）および０．０３３Ｍ  ＮａＨ２ＰＯ４溶液（１ｍＬ、０．０３３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を氷浴で冷却した。混合物に、０．１７７Ｍ  ＮａＣｌＯ２溶液（１ｍＬ、０．１７７ｍｍｏｌ）を３０分間にわたって滴下した。混合物を室温にて２４時間攪拌した。反応混合物に亜硫酸ナトリウムを加え、次いで、溶液を２Ｍ  ＨＣｌで酸性化した。アセトニトリルを蒸発させ、混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出し、有機層をＨ２Ｏ（２×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（３：１  ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ）によって精製して、８（４０ｍｇ、７７％）を黄色固体として得た。
【０７６８】
３−アミノオキサリル−１−ベンジル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸ＩＩｙ−ＩＶ−２：３−アミノオキサリル−１−ベンジル−４−メトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸８（０．０３５ｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）に溶解させた。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液（０．２ｍＬ、０．２０１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて３０分間攪拌した。反応混合物を高真空下で蒸発乾固した。残渣をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解させ、溶液を２Ｍ  ＨＣｌで酸性化した。得られた固体を濾過によって回収し、Ｈ２Ｏおよびジエチルエーテルで洗浄し、乾燥して、ＩＩｙ−ＩＶ−２（０．０１１ｇ、３２％）を黄色固体として得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−２６９．１：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ７．７１（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．６３（ｍ，１Ｈ），７．５５（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．４０−７．２０（ｍ，４Ｈ），７．０５（ｍ，２Ｈ），５．５５（ｓ，２Ｈ），４．５５（ｓ，２Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ−）４０８．９７。
【０７６９】
実施例１７Ｉ：化合物４−２３
【０７７０】
【化２２２】
2009514892.tif 000198
１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール２：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール１（５０ｇ、０．３３９モル）を無水ＤＭＦ（１Ｌ）に溶解させた。混合物に、鉱物油中水素化ナトリウム６０％（２７．９ｇ、０．６９７モル）を加えた。混合物を室温にて１時間攪拌させた。混合物に、臭化ベンジル（８２．７ｍＬ、０．６９７モル）を滴下した。混合物を室温にて１８時間攪拌させた。反応物を酢酸エチル（４Ｌ）で希釈し、水（５×５００ｍＬ）、次いで、ブライン（１Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。橙色油状残渣をカラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、８６ｇ（７２％）の２を黄色油として得た。
【０７７１】
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール３：１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール２（８６ｇ、０．２６３モル）を酢酸エチル（１．５Ｌ）およびメタノール（３００ｍＬ）に溶解させた。混合物に、１０％Ｐｄ／Ｃ（湿潤型）（１８ｇ）を加えた。次いで、反応物を、水銀バブラーを通るＨ２ガスに室温および１ａｔｍで付した。混合物を６時間攪拌させた。反応混合物を、セライトで濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（３：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、３（３０ｇ、４９％）をクリーム状の固体として得た。
【０７７２】
２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−メチル−プロピオン酸エチルエステル５：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール３（０．３ｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を無水ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）に溶解させた。溶液に、鉱物油中水素化ナトリウム６０％（６６ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて１時間攪拌した。混合物に、エチル−２−ブロモイソブチレート（０．２４３ｍＬ，１．６５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて１８時間攪拌した。反応物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、５（０．０７ｇ、１６％）を黄色油として得た。
【０７７３】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−イルオキシ）−２−メチル−プロピオン酸エチルエステル６：無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）中の塩化オキサリル（０．０２ｍＬ、０．２１８ｍｍｏｌ）の溶液に、無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）中の２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−メチル−プロピオン酸エチルエステル５（０．０７ｇ、０．１９９ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。混合物を室温にて２時間攪拌させた。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングした。混合物を室温にて１．５時間攪拌させた。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解させ、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、６（０．１ｇ、＜１００％）を（無機塩を含有する）黄色固体として得た。該物質をさらに精製することなく次の工程で用いた。
【０７７４】
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−メチル−プロピオン酸Ｉｄｌｙ−ＩＶ−２３：２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−イルオキシ）−２−メチル−プロピオン酸エチルエステル６（０．１２ｇ、０．２８４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）に溶解させた。混合物に、水酸化リチウム一水和物（０．０４２ｇ、１．００ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて１８時間攪拌させた。反応物を５０℃にて１８時間加熱した。混合物を２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ３まで酸性化した。得られた沈殿を濾過によって回収し、水で洗浄して、ＩＩｙ−ＩＶ−２３（０．０３０ｇ、２７％）を黄色固体として得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０２５９．２：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ７．８５（ｓ，１Ｈ），７．５５（ｓ，１Ｈ），７．３５−６．９５（ｍ，７Ｈ），６．３２（ｄ，１Ｈ），５．４８（ｓ，２Ｈ），２．２５（ｓ，３Ｈ），１．５５（ｓ，６Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ＋）３９５．０７
実施例１７Ｊ：化合物４−３２
【０７７５】
【化２２３】
2009514892.tif 000199
１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール２：４−ヒドロキシ−２−メチルインドール１（５０ｇ、０．３３９モル）を無水ＤＭＦ（１Ｌ）に溶解させた。混合物に、鉱物油中水素化ナトリウム６０％（２７．９ｇ、０．６９７モル）を加えた。混合物を室温にて１時間攪拌させた。混合物に、臭化ベンジル（８２．７ｍＬ、０．６９７モル）を滴下した。混合物を室温で１８時間攪拌させた。反応物を酢酸エチル（４Ｌ）で希釈し、水（５×５００ｍＬ）、次いで、ブライン（１Ｌ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。橙色油状残渣をカラムクロマトグラフィ（６：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、８６ｇ（７２％）の２を黄色油として得た。
【０７７６】
１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール３：１−ベンジル−４−ベンジルオキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール２（８６ｇ、０．２６３モル）を酢酸エチル（１．５Ｌ）およびメタノール（３００ｍＬ）で溶解させた。１０％Ｐｄ／Ｃ（湿潤型）（１８ｇ）の混合物に、溶液を加えた。次いで、反応物を、水銀バブラーを通るＨ２ガスに室温および１ａｔｍで付した。混合物を６時間攪拌させた。反応混合物を、セライトで濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（３：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、３（３０ｇ、４９％）をクリーム状の固体として得た。
【０７７７】
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フェニル−酢酸メチルエステル８：１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール３（０．３ｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解させた。溶液に、鉱物油中の水素化ナトリウム６０％（６６ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて１時間攪拌した。混合物に、ブロモ−フェニル−酢酸メチルエステル（０．２４ｍＬ、１．５１２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて１８時間攪拌した。反応物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（１０：１  ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって精製して、８（０．３ｇ、６２％）を白色固体として得た。
【０７７８】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−フェニル−酢酸メチルエステル１４：（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フェニル−酢酸メチルエステル８（０．１５ｇ、０．３８９ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解させた。溶液に、塩化オキサリル（０．０４ｍＬ、０．４２８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて２時間攪拌させた。次いで、ＮＨ３ガスを溶液に３０分間バブリングした。混合物を室温にて１時間攪拌させた。ジクロロメタンを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解させ、Ｈ２Ｏ（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、１４（０．１５ｇ、８５％）を黄色固体として得た。
【０７７９】
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−フェニル−酢酸ＩＩｙ−ＩＶ−３２：（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−２−フェニル−酢酸メチルエステル１４（０．１５ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ：Ｈ２Ｏ  ４：１（１０ｍＬ）に溶解させた。混合物に、０．５０５４Ｎ水酸化カリウム溶液（０．４８ｍＬ、０．４９５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温にて１８時間攪拌させた。反応混合物を蒸発乾固した。残渣をＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解させ、２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ４まで酸性化した。得られた沈殿を濾過によって回収し、Ｈ２Ｏで洗浄し、乾燥して、ＩＩｙ−ＩＶ−３２（０．０８ｇ、５５％）を黄色固体として得た。
Ｒｅｆ：０４−０９０−２８１．１：１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ１２．９０（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．９０（ｓ，ｂｒｏａｄ，１Ｈ），７．６５（ｄ，２Ｈ），７．５０−７．００（ｍ，１１Ｈ），６．６０（ｄ，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），５．５０（ｓ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ＋）４４３．０２
実施例１７Ｋ：化合物３−２０
【０７８０】
【化２２４】
2009514892.tif 000200
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル２。乾燥ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のＫ２ＣＯ３（１１．７ｇ、８４．７ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．６３３ｇ、４．２２ｍｍｏｌ）および１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール１（１０．０ｇ、４２．２ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に、ブロモ酢酸エチル（５．１０ｍＬ、４６．０ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を２０時間攪拌し、次いで、水（１５０ｍＬ）を加えた。混合物をＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。（ヘキサン中の１０％ＥｔＯＡｃまたはヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃを用いる）残渣のシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィにより、生成物２を淡黄色固体として得た。
収率：１０．３ｇ（７６％）
（１−ベンジル−４−エトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−酢酸３。ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中の（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル２（１００ｍｇ、０．３１０ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、（ＣＯＣｌ）２（４０μＬ、０．４６ｍｍｏｌ）を滴下し、次いで、反応混合物を室温で２時間攪拌し、蒸発させて、粗生成物３を白色固体として得、これをさらに精製することなく次の工程で用いた。
収率：１２０ｍｇ（１００％）
（１−ベンジル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−酢酸（ＩＩｙ−ＩＩＩ−２０）。ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（８ｍＬ／８ｍＬ）中の（１−ベンジル−４−エトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−酢酸３（１２０ｍｇ、０．３１０ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＬｉＯＨ（３７ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温にて２時間攪拌し、蒸発させ、次いで、１Ｎ  ＨＣｌで酸性化（ｐＨ＝４）して、白色沈殿を形成し、これを濾過し、水で洗浄し、真空中で乾燥して、生成物ＩＩｙ−ＩＩＩ−２０を淡黄色固体として得た。収率：９６ｍｇ（８４％）
１Ｈ  ＮＭＲ：０５−０１３−２６１ｄｉａｃｉｄｓ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ２．５８（ｓ，３Ｈ），４．６６（ｓ，２Ｈ），５．５４（ｓ，２Ｈ），６．５８（ｄ，１Ｈ），７．０２−７．３８（ｍ，７Ｈ）（ＣＯＯＨは示さず）．
ＭＳ：３６６．０４（Ｍ−Ｈ）。
【０７８１】
実施例１７Ｌ：化合物３−２２
【０７８２】
【化２２５】
2009514892.tif 000201
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル２。乾燥ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のＫ２ＣＯ３（１１．７ｇ、８４．７ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．６３３ｇ、４．２２ｍｍｏｌ）および１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール１（１０．０ｇ、４２．２ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に、ブロモ酢酸エチル（５．１０ｍＬ、４６．０ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を２０時間攪拌し、次いで、水（１５０ｍＬ）を加えた。混合物をＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。（ヘキサン中の１０％ＥｔＯＡｃまたはヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃを用いる）残渣のシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィにより、生成物２を淡黄色固体として得た。収率：１０．３ｇ（７６％）
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル３。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中の（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル２（４００ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、（ＣＯＣｌ）２（０．１４ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を滴下し、次いで、反応混合物を室温にて１時間攪拌し、ＮＨ３（ｇ）で３０分間処理し、さらに１時間攪拌した。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させて、粗生成物３を黄色固体として得、これをさらに精製することなく次の工程で用いた。収率：４６５ｍｇ（９５％）。
【０７８３】
（１−ベンジル−３−カルバモイルメチル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル４。ＣｌＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ（７ｍＬ）中の（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル３（８５ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｅｔ３ＳｉＨ（０．５ｍＬ）およびＣＦ３ＣＯ２Ｈ（０．５ｍＬ）を加えた。混合物を８５℃まで加熱し、攪拌を３時間継続した。反応混合物を室温まで冷却し、蒸発させた。得られた残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、冷飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させて、粗生成物４を淡黄色固体として得、これをさらに精製することなく次の工程で用いた。収率：８３ｍｇ（１００％）
（１−ベンジル−３−カルバモイルメチル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（ＩＩｙ−ＩＩＩ−２２）。ＴＨＦ／ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（３ｍＬ／３ｍＬ／３ｍＬ）中の（１−ベンジル−３−カルバモイルメチル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル４（８２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＬｉＯＨ（５３ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、蒸発させ、次いで、１Ｎ  ＨＣｌで酸性化（ｐＨ＝４）して、沈殿を形成し、これを濾過し、水で洗浄し、真空中で乾燥して、生成物ＩＩｙ−ＩＩＩ−２２を淡い桃色固体として得た。収率：５５ｍｇ（７１％）
１Ｈ  ＮＭＲ：０５−０１３−２７５  ａｃｉｄ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ２．２６（ｓ，３Ｈ），３．６５（ｓ，２Ｈ），４．７５（ｓ，２  Ｈ），５．３８（ｓ，２Ｈ），６．４４（ｄ，１Ｈ），６．７８（ｓ，１Ｈ），６．８８−７．０３（ｍ，４Ｈ），７．０６（ｓ，１Ｈ），７．１８−７．３２（ｍ，３Ｈ），１３．２（ｓ，１Ｈ）．
ＭＳ：３５２．９９（Ｍ＋Ｈ）。
【０７８４】
実施例１７Ｍ：化合物３−２３
【０７８５】
【化２２６】
2009514892.tif 000202
（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル２。乾燥ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のＫ２ＣＯ３（１１．７ｇ、８４．７ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．６３３ｇ、４．２２ｍｍｏｌ）および１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−オール１（１０．０ｇ、４２．２ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に、ブロモ酢酸エチル（５．１０ｍＬ、４６．０ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を２０時間攪拌し、次いで、水（１５０ｍＬ）を加えた。混合物をＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃまたはヘキサン中２５％ＥｔＯＡｃを用いる）残渣のシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィにより、生成物２が淡黄色固体として得られた。収率：１０．３ｇ（７６％）
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル３。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中の（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル２（４００ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、（ＣＯＣｌ）２（０．１４ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を滴下し、次いで、反応混合物を室温にて１時間攪拌し、ＮＨ３で３０分間処理し、さらに１時間攪拌した。沈殿した混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発して、粗生成物３を黄色固体として得、これをさらに精製することなく次の工程で用いた。収率：４６５ｍｇ（９５％）
［１−ベンジル−３−（カルバモイル−ヒドロキシ−メチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸エチルエステル４。ＥｔＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ／３ｍＬ）中の（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル３（５０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＮａＢＨ４（６．６ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃にて２時間攪拌し、蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、水（１０ｍＬ）、ブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。ヘキサン中の１５％ＥｔＯＡｃまたはヘキサン中の４０％ＥｔＯＡｃを用いる残渣のシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィにより、生成物４を白色固体として得た。収率：４０ｍｇ（８０％）
［１−ベンジル−３−（カルバモイル−ヒドロキシ−メチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（ＩＩｙ−ＩＩＩ−２３）。ＴＨＦ／ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（３ｍＬ／３ｍＬ／３ｍＬ）中の［１−ベンジル−３−（カルバモイル−ヒドロキシ−メチル）−２−（１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸エチルエステル４（４０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＬｉＯＨ（２４ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温にて２時間攪拌し、蒸発させ、次いで、１Ｎ  ＨＣｌで酸性化（ｐＨ＝４）して、白色沈殿を形成し、これを濾過し、水で洗浄し、真空中で乾燥して、生成物ＩＩｙ−ＩＩＩ−２３をオフホワイトの固体として得た。収率：３２ｍｇ（８７％）
１Ｈ  ＮＭＲ：０５−０１３−２９５（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）δ２．３２（ｓ，３Ｈ），４．５６（ＡＢ  ｑ，２Ｈ），５．３６（ｓ，２Ｈ），５．４３（ｓ，１Ｈ），６．４８（ｄ，１Ｈ），６．８８−７．０２（ｍ，４Ｈ），７．０５（ｓ，１Ｈ），７．１８−７．３３（ｍ，３Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ）（ＣＯＯＨは示さず）．
ＭＳ：３６６．９８（Ｍ−Ｈ）
実施例１７Ｎ：化合物４−２１
【０７８６】
【化２２７】
2009514892.tif 000203
（ｉ）ＢｎＢｒ、ＤＭＦ、ＮａＨ、室温  （ｉｉ）Ｐｄ／Ｃ、Ｈ２、ＥｔＯＡｃ  （ｉｉｉ）ＢｒＣＨ２ＣＯＯＥｔ、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、５００Ｃ  （ｉｖ）ＬｉＯＨ、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ、室温  （ｖ）メタンスルホンアミド、ＥＤＣＩ、ＤＭＡＰ、ＤＣＭ／ＤＭＦ、室温  （ｖｉ）ＤＣＭ，塩化オキサリル、ＮＨ３（ｇ）
１−ベンジル−２−メチル−４−メタンスルホンアミドイルメチルオキシ−１Ｈ−インドール−３−グリオキシルアミド（ＩＬＹ−ＩＶ−２１）。ジクロロメタン／ジメチルホルムアミド混合物（４：１、１０ｍＬ）中の２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸（６、６７０ｍｇ，２．３ｍｍｏｌ）の溶液に、４−ジメチルアミノピリジン（４１５ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）、メタンスルホンアミド（４３１ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（４３３ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温にて攪拌した。２４時間後、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで２回洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、真空中で蒸発させた。残渣をシリカゲル（ＣＨＣｌ３またはＣＨＣｌ３中４％ＭｅＯＨ）上のクロマトグラフィに付して、１−ベンジル−２−メチル−４−メタンスルホンアミドイルメチルオキシ−１Ｈ−インドール（７、４８５ｍｇ、５７％）を得た。
【０７８７】
２０ｍＬのジクロロメタン中の１−ベンジル−２−メチル−４−メタンスルホンアミドイルメチルオキシ−１Ｈ−インドール（７、１９０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液を０℃にて攪拌し、４ｍＬのジクロロメタン中の塩化オキサリル（７８ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。溶液を室温にて１時間攪拌させた。アンモニアを３０分間溶液にバブリングし、続いて、反応混合物をジエチルエーテルで希釈した。こうして得られた固体を濾過して、淡黄色の固体を得、シリカゲル（ＣＨＣｌ３中の６％ＭｅＯＨ）上のクロマトグラフィの後に、純粋なＩＬＹ−ＩＶ−２１を７５％の収率（１７０ｍｇ）で得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８５（ｂｒｓ，１Ｈ），７．５２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．２２−７．３９（ｍ，３Ｈ），７．０２−７．１９（ｍ，４Ｈ），６．４４（ｄ，１Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），４．４０（ｓ，２Ｈ），２．９６（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４４３．９５（Ｍ＋１）。
【０７８８】
実施例１７Ｏ：化合物４−２６
【０７８９】
【化２２８】
2009514892.tif 000204
（ｉ）ｐ−トルエンスルホンアミド、ＥＤＣＩ、ＤＭＡＰ、ＤＣＭ／ＤＭＦ、室温  （ｉｉ）ＤＣＭ、塩化オキサリル、ＮＨ３（ガス）
１−ベンジル−２−メチル−４−ｐ−トルエンスルホンアミドイルメチルオキシ−１Ｈ−インドール−３−グリオキシルアミド（ＩＬＹ−ＩＶ−２６）。ジクロロメタン／ジメチルホルムアミド（４：１、８ｍＬ）中の２−（１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸（６、２００ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）の溶液に、４−ジメチルアミノピリジン（１４６ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホンアミド（２７３ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１５３ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温にて攪拌させた。２４時間後に、反応物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで２回洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、真空中で蒸発させた。残渣をシリカゲル（ＣＨＣｌ３またはＣＨＣｌ３中２％ＭｅＯＨ）上のクロマトグラフィに付して、化合物８（１７０ｍｇ、５６％）を得た。
【０７９０】
２０ｍＬのジクロロメタン中の１−ベンジル−２−メチル−４−パラ−トルエンスルホンアミドイルメチルオキシ−１Ｈ−インドール（８、１６７ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で攪拌し、４ｍＬのジクロロメタン中の塩化オキサリル（５６ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下し、溶液を室温にて１時間攪拌させた。反応物をジエチルエーテルで希釈した後に、アンモニアを３０分間溶液にバブリングし、固体を濾過して淡黄色の固体を得、シリカゲル（ＣＨＣｌ３中５％ＭｅＯＨ）上のクロマトグラフィの後に、純粋な６９％収率のＩＬＹ−ＩＶ−２６（１３３ｍｇ）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．９１（ｂｒｓ，１Ｈ），８．００（ｂｒｓ，１Ｈ），７．５９−  ７．６４（ｍ，３Ｈ），７．２４−７．３６（ｍ，５Ｈ），７．２０（ｄ，１Ｈ），７．１５（ｄ，２Ｈ），６．９８（ｔ，１Ｈ），６．２３（ｄ，１Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），４．６１（ｓ，２Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ５２０．０１（Ｍ＋１）。
【０７９１】
実施例１７Ｐ：化合物４−３０
【０７９２】
【化２２９】
2009514892.tif 000205
（ｉ）ＬｉＯＨ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ  （ｉｉ）ＥＤＣＩ、ＤＭＡＰ、ＨＯＢｔ、ＤＣＭ／ＤＭＦ、室温  （ｉｉｉ）Ｐｄ／Ｃ、Ｈ２
１−ベンジル−２−メチル−４−アスパラギン酸ジベンジルエステルアミドイルメチルオキシ−１Ｈ−インドール−３−グリオキシルアミド３。ジクロロメタン／ジメチルホルムアミド（５：１）中の２−［［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル−２−メチル−１−（ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ］酢酸２（５４９ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液に、それぞれ、アスパラギン酸ジベンジルエステル（３１３ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（１８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２０２ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２８６ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で攪拌させた。６時間後に、反応物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで２回洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、真空中で蒸発させた。残渣をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ：へキサン４０〜６０％）上のクロマトグラフィに付して、表題化合物３（６２０ｍｇ、６２％）を得た。
【０７９３】
１−ベンジル−２−メチル−４−アスパラギン酸アミドイルメチルオキシ−１Ｈ−インドール−３−グリオキシルアミド（ＩＬＹ−ＩＶ−３０）。エタノール１０ｍＬ中の３（１７０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｐｄ／Ｃ  ５０ｍｇの存在下でバルーンを用いて水素雰囲気下で撹拌した。１８時間撹拌した後、触媒を、セライトで濾過し、溶媒を蒸発させて、標的化合物ＩＬＹ−ＩＶ−３０  １０３ｍｇ（８４％収率）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４５（ｄ，１Ｈ），７．９６（ｂｒｓ，１Ｈ），７．４２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．２０−７．３８（ｍ，４Ｈ），７．００−７．１８（ｍ，３Ｈ），６．６１（ｄ，１Ｈ），５．４５（ｓ，２Ｈ），４．６１−４．６３（ｍ，１Ｈ），４．４８（ｓ，２Ｈ），２．６１−２．６７（ｍ，１Ｈ），２．７８−２．８１（ｍ，１Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４８１．９５（Ｍ＋１）。
【０７９４】
実施例１７Ｑ：化合物４−３１
【０７９５】
【化２３０】
2009514892.tif 000206
（ｉ）ＥＤＣＩ、ＤＭＡＰ、ＨＯＢｔ、ＤＣＭ／ＤＭＦ、室温  （ｉｉ）ＬｉＯＨ
１−ベンジル−２−メチル−４−ロイシンメチルエステルアミドイルメチルオキシ−１Ｈ−インドール−３−グリオキシルアミド４。ジクロロメタン／ジメチルホルムアミド混合物（５：１）中の２−［［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル−２−メチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ］酢酸２（２７０ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）の溶液に、ロイシンメチルエステル塩酸塩（１３４ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（１０８ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（９９ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１３９ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）を加えた。６時間後、反応物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで２回洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、真空中で蒸発させた。残渣を、ヘキサン中のＥｔＯＡｃ：へキサンの勾配５０〜７０％を用いるシリカゲルのクロマトグラフィに付して、４（２１７ｍｇ、６０％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ、質量およびＨＰＬＣデータ：０３−０３８−１０５
１−ベンジル−２−メチル−４−ロイシンアミドイルメチルオキシ−１Ｈ−インドール−３−グリオキシルアミド（ＩＬＹ−ＩＶ−３１）。ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ  ４：１中の４（２００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）の溶液を２．２当量のＬｉＯＨと共に室温にて３０分間撹拌した。反応の完了の後に、ＴＨＦを蒸発させ、得られた残渣を０℃にて希塩酸で中和した。そのようにして得られた黄色固体を濾過し、水、次いで、ヘキサンで洗浄して、１１０ｍｇ（５６％収率）のＩＬＹ−ＩＶ−３１を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  １２．５９（ｂｒｓ，１Ｈ），８．４２（ｄ，１Ｈ），８．０７（ｂｒｓ，１Ｈ），７．６１（ｂｒｓ，１Ｈ），７．１８−７．３３（ｍ，４Ｈ），７．０３−７．１３（ｍ，３Ｈ），６．６４（ｄ，１Ｈ），５．４５（ｓ，２Ｈ），４．５９（ｓ，２Ｈ），４．２１（ｔ，１Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ），１．６１−１．６９（ｍ，１Ｈ），１．４７−１．５０（ｍ，２Ｈ），０．７８（ｄ，３Ｈ），０．７４（ｄ，３Ｈ）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４８０．００（Ｍ＋１）。
【０７９６】
実施例１７Ｒおよび１７Ｓ：化合物４−２９および４−３４
【０７９７】
【化２３１】
2009514892.tif 000207
（ｉ）ＤＣＭ，塩化オキサリル、ＮＨ３（ｇ）、（ｉｉ）ＣＨ３ＣＯＯＨ／ＨＮＯ３／Ｈ２ＳＯ４  （ｉｉｉ）ＬｉＯＨ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ
２−［［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル−２−メチル−７および５−ニトロ−１−（ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ］エチルアセテート（３  および４）。２−［［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル−２−メチル−１−（ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ］エチルアセテート２（４００ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの氷酢酸に懸濁させ、懸濁液を氷−水混合物中で冷却した。２ｍＬの酢酸中の９０％発煙硝酸（７２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下し、続いて、１０ｍｇのＨ２ＳＯ４を加えた。４５分間撹拌した後、反応物をかち割り氷に注ぎ、黄色の固体を濾過し、冷水で反復して洗浄した。粗生成物を、ＥｔＯＡｃ：へキサン勾配（ヘキサン中２０％〜６０％ＥｔＯＡｃ）を用いるシリカゲルで精製して、２５％および２０％単離収率にてパラ３（１１２ｍｇ）およびメタ４（８９ｍｇ）異性体の混合物を得た。
【０７９８】
２−［［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル−２−メチル−７−ニトロ−１−（ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ］酢酸５（ＩＬＹ−ＩＶ−２９）。ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ  ４：１中の３（５５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の溶液を２．２当量のＬｉＯＨと共に撹拌し、溶液を室温にて３０分間撹拌させた。反応の完了の後に、ＴＨＦを蒸発させ、得られた残渣を０℃にて希塩酸で中和した。こうして得られた黄色固体を濾過し、水で洗浄し、次いで、ジエチルエーテルで洗浄して、３４ｍｇ（６７％収率）のＩＬＹ−ＩＶ−２９を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１６（ｂｒｓ，１Ｈ），７．７１（ｄ，１Ｈ），７．５６（ｂｒｓ，１Ｈ），７．２２−７．３５（ｍ，３Ｈ），６．６８（ｍ，２Ｈ），６．６１（ｄ，１Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），４．４８（ｓ，２Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４１１．９７（Ｍ＋１）．
２−［［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル−２−メチル−５−ニトロ−１−（ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ］酢酸６（ＩＬＹ−ＩＶ−３４）。ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ  ４：１中の４（８０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）の溶液を２．２当量のＬｉＯＨと共に撹拌し、溶液を室温にて３０分間撹拌させた。反応の完了の後、ＴＨＦを蒸発させ、得られた残渣を０℃にて希塩酸で中和した。こうして得られた黄色固体を濾過し、水、次いで、ジエチルエーテルで洗浄して、ＩＬＹ−ＩＶ−３４（５０ｍｇ、６５％収率）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．２１（ｓ，１Ｈ），７．８１（ｂｒｓ，１Ｈ），７．４５（ｂｒｓ，１Ｈ），７．２９（ｓ，１Ｈ），７．２５−７．２８（ｍ，３Ｈ），７．２０−７．２３（ｍ，２Ｈ），５．６２（ｓ，２Ｈ），４．６７（ｓ，２Ｈ），２．４１（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４１２．０３（Ｍ＋１）。
【０７９９】
実施例１７Ｔおよび１７Ｕ：化合物４−３５および４−３６
【０８００】
【化２３２】
2009514892.tif 000208
２−［［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル−２−メチル−６および７−アミノ−１−（ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ］エチルアセテート（７および８）。パラおよびメタ異性体（５および６、８００ｍｇ）の混合物を無水エタノール（２０ｍＬ）に溶解させ、ラネー（Ｎｉ）２００ｍｇの存在下で５０ａｔｍにて水素化した。６時間撹拌した後、反応物を、セライトパッドで濾過し、溶媒を蒸発させた。アミン異性体の混合物を、酢酸エチルおよびヘキサンの勾配（ヘキサン中６０〜８０％酢酸エチル）を用いるカラムクロマトグラフィによって分離した。
【０８０１】
２−［［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル−２−メチル−７−アミノ−１−（ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ］酢酸９（ＩＬＹ−ＩＶ−３５）。ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ  ４：１中の７（６０ｍｇ）の溶液を２．２当量のＫＯＨと共に撹拌し、溶液を室温にて３０分間撹拌させた。反応の完了の後、ＴＨＦを蒸発させ、得られた残渣を０℃にて希塩酸で中和した。こうして得られた透明な溶液を蒸発させ、エタノールで抽出して、４ｍｇ（７％収率）のＩＬＹ−ＩＶ−３５を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＨ３ＯＨ−ｄ４）δ７．２６−７．３２（ｍ，３Ｈ），７．００−７．７．０２（ｍ，２Ｈ），６．４２（ｄ，１Ｈ），７６．３８（ｄ，１Ｈ），５．６４（ｓ，２Ｈ），４．４１（ｓ，２Ｈ），２．４１（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３８１．９６（Ｍ＋１）．
２−［［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル−２−メチル−６−アミノ−１−（ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ］酢酸１０（ＩＬＹ−ＩＶ−３６）。ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ  ４：１中の８（４０ｍｇ）の溶液を２．２当量のＬｉＯＨと共に撹拌し、溶液を室温にて３０分間撹拌させた。反応の完了の後、ＴＨＦを蒸発させ、得られた残渣を０℃にて希塩酸で中和した。こうして得られた褐色固体を濾過し、水、次いで、ジエチルエーテルで洗浄して、ＩＬＹ−ＩＶ−３６（１７ｍｇ，４５％収率）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．４５（ｂｒｓ，１Ｈ），７．２９−７．３４（ｍ，３Ｈ），７．１５−７．１９（ｍ，２Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），６．４２（ｓ，１Ｈ），５．４３（ｓ，２Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），２．４１（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３８１．９８（Ｍ＋１）。
【０８０２】
実施例１７Ｖ：化合物４−３７
【０８０３】
【化２３３】
2009514892.tif 000209
２−［［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル−２−メチル−７−メタンスルホンアミド−１−（ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ］エチルアセテート１１。無水ジクロロメタン（７ｍＬ）中の７（１００ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の溶液をトリエチルアミン（２４ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）と共に撹拌し、次いで、ジクロロメタン中のメタンスルホンアミド（１３．９ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の溶液を０℃にて滴下し、反応を室温にて進行させた。６時間後、０．１２ｍｍｏｌのメタンスルホンアミドを再度加え、撹拌を継続した。反応の完了の後、溶液を蒸発させ、得られた残渣を、勾配（純粋なクロロホルムまたはクロロホルム中５％メタノール）としてメタノールクロロホルムを用いるカラムクロマトグラフィによって精製して、化合物１１（６０ｍｇ、５０％収率）を淡黄色固体として得た。
【０８０４】
２−［［３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル−２−メチル−７−メタンスルホンアミド−１−（ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ］酢酸（ＩＬＹ−ＩＶ−３７）。ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ  ４：１中の１１（５５ｍｇ）の溶液を２．２当量のＬｉＯＨと共に撹拌し、溶液を室温で３０分間撹拌させた。反応の完了の後、ＴＨＦを蒸発させ、得られた残渣を０℃にて希塩酸で中和した。各得られた褐色固体を濾過し、水、次いで、ジエチルエーテルで洗浄して、ＩＬＹ−ＩＶ−３７（３５ｍｇ、６８％収率）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  １２．９８（ｂｒｓ，１Ｈ），９．０１（ｂｒｓ，１Ｈ），７．７７（ｂｒｓ，１Ｈ），７．４２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．２９−７．３４（ｍ，３Ｈ），６．９３（ｄ，１Ｈ），６．８４−６．８９（ｍ，２Ｈ），６．５１（ｄ，１Ｈ），５．９１（ｓ，２Ｈ），４．６０（ｓ，２Ｈ），２．９２（ｓ，３Ｈ），２．３９（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４５９．８５（Ｍ＋１）。
【０８０５】
実施例１７Ｗ：ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル−１−（８−ブロモオクチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）アセテートの合成
【０８０６】
【化２３４−１】
2009514892.tif 000210
ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（８−ブロモオクチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）アセテート：１０ｍＬの無水ＤＭＦ中の出発インドール（３．３ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液を氷浴中で冷却し、乾燥した水素化ナトリウム（２９０ｍｇ、１２ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。０℃での３０分間、窒素下で撹拌した後、混合物を、やはり氷浴中で冷却した５ｍＬの無水ＤＭＦ中の１，８−ジブロモオクタン（２．２ｍＬ、３．３ｇ、１２ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液に滴下して移した。得られた橙色混合物を窒素下で０℃にて４時間撹拌し、次いで、それを室温まで温めた。室温で一晩撹拌した後、反応混合物を１５ｍＬのＮＨ４Ｃｌで反応を停止させ、減圧下で濃縮した。次いで、それを１００ｍＬのＤＣＭで希釈し、ＮＨ４Ｃｌ（４０ｍＬ）およびブライン（２×４０ｍＬ）で２回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、真空中で濃縮して、粗生成物を橙色油として得た。フラッシュクロマトグラフィ（Ｈ／ＥＡ：３／２、１／１、次いで、２／３）により、純粋なブロモアルキル（２．６ｇ、５０％）を黄色固体として得た。
【０８０７】
【化２３４−２】
2009514892.tif 000211
ＭＳ（ＥＳＩ，ＭｅＯＨ）：ｍ／ｚ  ５４５．２［Ｍ＋Ｎａ］＋（１００％、７９Ｂｒ同位体）、５４７．２［Ｍ＋Ｎａ］＋（９７％、８１Ｂｒ同位体）。
【０８０８】
実施例１７Ｘ：ｔｅｒｔ−ブチル２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（１２−ブロモドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）アセテートの合成
【０８０９】
【化２３５】
2009514892.tif 000212
ｔｅｒｔ−ブチル−２−（３−（２−メチル−２−オキソアセチル）−１−（１２−ブロモドデシル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）アセテート。窒素下で０℃にて、乾燥したＤＭＦ（１０ｍＬ）中の出発インドール中間体（２．５４ｇ、７．６５ｍｍｏｌ）に９５％水素化ナトリウム（０．２３３ｇ、９．２２ｍｍｏｌ）を加えた。暗色混合物を０℃にて０．５時間撹拌し、次いで、０℃にて１０分間にわたって、乾燥したＤＭＦ（２０ｍＬ）中の１，１２−ジブロモドデカン（４．５ｇ、１３．７１ｍｍｏｌ）の溶液に滴下した。混合物を０℃にて５時間、次いで、室温にて１９時間撹拌した。反応物を０℃まで冷却し、塩化アンモニウム溶液（１０ｍＬ）で反応を停止させ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈した。混合物を塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、水相をジクロロメタン（４×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて赤色／褐色液体とし、これをさらに高真空下で蒸発した。残渣は濃厚な赤色／褐色半固体であり、これを、クロロホルム／へキサン（８：１）を溶離剤として用いるシリカゲルのクロマトグラフィによって精製して、生成物を橙色／褐色半固体（２．００ｇ、４５％）として得た。
【０８１０】
実施例１７Ｙ：アルキル−インドールの合成
【０８１１】
【化２３６】
2009514892.tif 000213
アルキル−インドール（２）の合成のための一般的手法：２００ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）のインドール１およびＮａＨ（２６ｍｇ、鉱物油中６０％分散）を含有するテフロン（登録商標）で密閉した反応バイアルにＴＨＦ／ＤＭＳＯ（１．５、５ｍＬ）を加えた。反応溶液を室温にて４５分間撹拌し、次いで、適切なアルキル化剤（純物）で処理した。１時間撹拌した後、反応物を水で希釈し、酢酸エチル（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。勾配０〜６０％のＥｔＯＡｃ／ヘプタンで溶出するシリカゲル（Ｉｓｃｏ  ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ）上の粗製物の精製により、所望の付加物を得た。
【０８１２】
【化２３７】
2009514892.tif 000214
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２ａ）：収率１９０ｍｇ、７５％；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ）δ１．４７（ｓ，９Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），５．３０（ｓ，２Ｈ），６．５２（ｄ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ，１Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝８．２５Ｈｚ，１Ｈ），７．００−７．０５（ｍ，２Ｈ），７．０８（ｔ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ），７．２４−７．３２（ｍ，３Ｈ）；１３Ｃ−ＮＭＲδ１１．６４，２７．９８，４６．９４，６６．０８，８２．０５，１０４．０５，１０４．３０，１１０．６２，１１６．７０，１２３．５１，１２６．０３，１２７．６９，１２８．８９，１３５．８２，１３８．１２，１４４．３３，１５１．７１，１６７．７０，１６８．１６，１８８．０７；  ＭＳ（ＥＳＩ＋）４２２．９（Ｍ＋Ｈ）．
【０８１３】
【化２３８】
2009514892.tif 000215
（３−アミノオキサリル−１−ビベンジル−４−イルメチル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２ｂ）：収率２２０ｍｇ、７３％；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ）δ１．４８（ｓ，９Ｈ），２．５９（ｓ，３Ｈ），４．６３（ｓ，２Ｈ），５．３６（ｓ，２Ｈ），６．５５（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ，１Ｈ），７．０８−７．１５（ｍ，３Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１  Ｈ），７．４０−７．４６（ｍ，２Ｈ），７．４９−７．５７（ｍ，４Ｈ）；１３Ｃ−ＮＭＲδ１１．７２，２８．０３，４６．７７，６６．１５，８２．０８，１０４．０９，１０４．４０，１１０．７２，１１６．７８，１２３．６０，１２６．５２，１２７．００，１２７．４２，１２７．６５，１２８．７７，１３４．８１，１３８．１７，１４０．３７，１４０．７８，１４４．３０，１５１．７８，１６７．５８，１６８．１３，１８８．０５；ＭＳ（ＥＳＩ＋）４９８．９（Ｍ＋Ｈ）．
【０８１４】
【化２３９】
2009514892.tif 000216
（３−アミノオキサリル−２−メチル−１−オクチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２ｃ）：本実施例はゆっくりと進行し、８０〜９０％完了に到達するのに一晩の反応時間を要した。収率１２０ｍｇ、４５％（回収された出発物質に基づいて５５％）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ）δ０．８３−０．９２（ｍ，３  Ｈ），１．２２−１．４２（ｍ，１０  Ｈ），１．４５（ｓ，９  Ｈ），１．６９−１．８１（ｍ，２  Ｈ），２．５９（ｓ，３  Ｈ），４．００−４．１０（ｍ，２  Ｈ），４．５９（ｓ，２  Ｈ），６．５２（ｄ，Ｊ＝７．９１  Ｈｚ，１  Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝８．１５  Ｈｚ，１  Ｈ），７．１１（ｔ，Ｊ＝８．０５  Ｈｚ，１  Ｈ）；  ＭＳ（ＥＳＩ＋）４４５．１（Ｍ＋Ｈ）．
【０８１５】
【化２４０】
2009514892.tif 000217
［３−アミノオキサリル−１−（３−メトキシ−ベンジル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２ｄ）：収率１２０ｍｇ、４５％；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ）δ１．４８（ｓ，９Ｈ），２．５６（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），４．６２（ｓ，３Ｈ），５．２９（ｓ，２Ｈ），６．５４（ｄ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ，１Ｈ），６．５７−６．６３（ｍ，２Ｈ），６．７８−６．８３（ｍ，１Ｈ），６．９１−６．９５（ｍ，１Ｈ），７．１０（ｔ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ），７．２１（ｔ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）４５３．０（Ｍ＋Ｈ）．
【０８１６】
【化２４１】
2009514892.tif 000218
（３−アミノオキサリル−２−メチル−１−ナフタレン−２−イルメチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２ｅ）：収率１４６ｍｇ、５１％；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ）δ１．４８（ｓ，９Ｈ），２．５９（ｓ，３Ｈ），４．６４（ｓ，２Ｈ），５．４８（ｓ，２Ｈ），６．５６（ｄ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ，１Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝８．２０Ｈｚ，１Ｈ），７．０９（ｔ，Ｊ＝８．０５Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｄｄ，Ｊ＝８．５２，１．７３Ｈｚ，１Ｈ），７．４２（ｓ，１Ｈ），７．４４−７．５１（ｍ，２Ｈ），７．７３（ｄｄ，Ｊ＝６．０８，３．４４Ｈｚ，１Ｈ），７．７７−７．８５（ｍ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）４７３．０（Ｍ＋Ｈ）．
【０８１７】
【化２４２】
2009514892.tif 000219
インドール（２）のｔｅｒｔ−ブチルエステルをＴＦＡ−媒介開裂させて３を得るための一般的手法：室温にて、ＤＣＭ（３〜５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルエステルの懸濁液をＴＦＡ（２ｍＬ）で処理した。混合物を４５分間撹拌し、その後、さらにＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。反応物をさらに１５分間撹拌し、水（３ｍＬ）で反応を停止した。溶媒を濃縮し、生成物をＤＣＭ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を水、ブラインで洗浄し、デカントし、濃縮した。（０．１％ギ酸でスパイクした）メタノールおよび水の勾配混合物（４０７法〜４５：５５）で溶出する逆相半分取ＨＰＬＣによる精製によって、所望の固体付加物を得た。
【０８１８】
【化２４３】
2009514892.tif 000220
（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（３ａ）：収率６５ｍｇ、７５％；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．５０（ｓ，３Ｈ），４．５７（ｓ，２Ｈ），５．４９（ｓ，２Ｈ），６．５２（ｄ，Ｊ＝７．７１Ｈｚ，１Ｈ），７．０５（ｔ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，３Ｈ），７．０８−７．１４（ｍ，１Ｈ），７．２５（ｔ，Ｊ＝７．２５Ｈｚ，１Ｈ），７．３２（ｔ，Ｊ＝７．３０Ｈｚ，２Ｈ）７．４３（ｓ，１Ｈ），７．８１（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）３６７．２（Ｍ＋Ｈ），３８９．２（Ｍ＋Ｎａ＋）；ＨＰＬＣ（ＵＶ＝１００％），（ＥＬＳＤ＝１００％）．
【０８１９】
【化２４４】
2009514892.tif 000221
（３−アミノオキサリル−１−ビフェンジル−４−イルメチル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（３ｂ）：収率９０ｍｇ、９２％；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．５４（ｓ，３Ｈ），４．６３（ｓ，２Ｈ），５．５４（ｓ，２Ｈ），６．５４（ｄ，Ｊ＝７．６６Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｔ，Ｊ＝７．８８Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ＝６．９８Ｈｚ，３Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝７．１０Ｈｚ，１Ｈ），７．３９−７．５１（ｍ，３Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ＝７．７６Ｈｚ，４Ｈ），７．７９（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）４４３．３（Ｍ＋Ｈ），４６５．３（Ｍ＋Ｎａ＋）；ＨＰＬＣ（ＵＶ＝１００％），（ＥＬＳＤ＝１００％）．
【０８２０】
【化２４５】
2009514892.tif 000222
（３−アミノオキサリル−２−メチル−１−オクチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（３ｃ）：収率７３ｍｇ、７６％；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．８０−０．９０（ｍ，３Ｈ），１．１７−１．３９（ｍ，１２Ｈ），１．６０−１．７５（ｍ，２Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），４．１６（ｔ，Ｊ＝７．４２Ｈｚ，２Ｈ），４．６１（ｓ，２Ｈ），６．５２（ｄ，Ｊ＝７．６１Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｔ，Ｊ＝７．９３Ｈｚ，１Ｈ），７．１２−７．１７（ｍ，１Ｈ），７．３８（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）３８９．３（Ｍ＋Ｈ），４１１．３（Ｍ＋Ｎａ＋）；ＨＰＬＣ（ＵＶ＝１００％），（ＥＬＳＤ＝１００％）．
【０８２１】
【化２４６】
2009514892.tif 000223
［３−アミノオキサリル−１−（３−メトキシ−ベンジル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（３ｄ）：収率５８．６ｍｇ、６１％；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．５０（ｓ，３Ｈ），３．７０（ｓ，３Ｈ），４．６０（ｓ，２Ｈ），５．４６（ｓ，２Ｈ），６．５３（ｄ，Ｊ＝７．６１Ｈｚ，２Ｈ），６．６６（ｓ，１Ｈ），６．８３（ｄｄ，Ｊ＝８．２２，２．０７Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｔ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ，１Ｈ），７．０９−７．１５（ｍ，１Ｈ），７．２２（ｔ，Ｊ＝７．９３Ｈｚ，１Ｈ），７．４１（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）３９７．１（Ｍ＋Ｈ）；ＨＰＬＣ（ＵＶ＝９８．９％），（ＥＬＳＤ＝９８．８％）．
【０８２２】
【化２４７】
2009514892.tif 000224
（３−アミノオキサリル−２−メチル−１−ナフタレン−２−イルメチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（３ｅ）：収率８３ｍｇ、８５．６％；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．５６（ｓ，３Ｈ），４．６４（ｓ，２Ｈ），５．６６（ｓ，２Ｈ），６．５５（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｔ，Ｊ＝８．０５Ｈｚ，１Ｈ），７．１８（ｄ，Ｊ＝８．２０Ｈｚ，１Ｈ），７．２４（ｄｄ，Ｊ＝８．５２，１．６８Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），７．４６−７．５２（ｍ，２Ｈ），７．５８（ｓ，１Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｄｄ，Ｊ＝６．１０，３．４７Ｈｚ，１Ｈ），７．８５−７．９１（ｍ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）４１７．２（Ｍ＋Ｈ）；ＨＰＬＣ（ＵＶ＝１００％），（ＥＬＳＤ＝１００％）。
【０８２３】
実施例１７Ｚ
【０８２４】
【化２４８】
2009514892.tif 000225
［１−（４−アセトキシ−ブチル）−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル。ＤＭＦ（３．８ｍＬ）中のインドール（２５０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（鉱物油中６０％分散液、３６ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）を加えた。２５分後に、酢酸４−ブロモブチル（０．１２ｍＬ、０．８３ｍｍｏｌ）を加え、１５分後に、反応を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１０ｍＬ）で停止させた。溶液をＥｔＯＡｃ（０．１Ｌ）で抽出し、３×２０ｍＬ  Ｈ２Ｏ、２０ｍＬ飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して、褐色油を得た。該油をシリカゲル（１２ｇカラム、ヘプタン中０〜８０％ＥｔＯＡｃ、４０分にわたる）上のクロマトグラフィに付して、出発インドール（３０ｍｇ、１２％）と所望のアセテート（０．２３ｇ、７０％）との混合物を黄色固体として得た。Ｒｆ＝０．２９（２５：７５ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δｐｐｍ７．１１−７．１６（ｍ，Ｊ＝８．１，８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）６．５４（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）４．６０（ｓ，２Ｈ）４．０８−４．１４（ｍ，４Ｈ）２．５９（ｓ，３Ｈ）２．０５（ｓ，３Ｈ）１．８１−１．９０（ｍ，２Ｈ）１．７２（ｄｄ，Ｊ＝８．８，６．１Ｈｚ，２Ｈ）１．４７（ｓ，９Ｈ）．
［３−アミノオキサリル−１−（４−ヒドロキシ−ブチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル。ＤＭＦ（０．７０ｍＬ）中のアセテート（９９ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）の溶液に、メタノール（１．５ｍＬ）中のＫ２ＣＯ３の飽和溶液を加えた。反応物を１時間後にＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して、黄色固体を得た。固体をシリカゲル（４ｇカラム、ヘプタン中５０〜１００％ＥｔＯＡｃ、１０分間にわたる、次いで、１０分間はＥｔＯＡｃ）上のクロマトグラフィに付して、所望のアルコールを黄色固体（２７ｍｇ、３０％、ＨＰＬＣによると９０％純度）として得た。Ｒｆ＝０．１１（ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δｐｐｍ７．１０−７．１５（ｍ，１Ｈ）６．９４−７．００（ｍ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．５２−６．５６（ｍ，１Ｈ）４．６１（ｓ，２Ｈ）４．１０−４．１６（ｍ，２Ｈ）３．６９（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）２．６０（ｓ，３Ｈ）１．８４−１．９０（ｍ，Ｊ＝３．１Ｈｚ，２Ｈ）１．６２−１．６７（ｍ，２Ｈ）１．４７（ｓ，９Ｈ）；ＭＳ（ＥＩ）３０４（Ｍ-ＣＯ２ｔ−Ｂｕ）。
【０８２５】
実施例１７ＡＡ
【０８２６】
【化２４９】
2009514892.tif 000226
｛アミノオキサリル−１−［３−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イル）−プロピル］−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ｝−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル。ＤＭＦ（４．５ｍＬ）中のインドール（０．３０ｇ、０．９０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（鉱物油中６０％分散液、４３ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、臭化アルキル（０．２７ｇ、０．９９ｍｍｏｌ）を加えた。さらなるＮａＨ（８．０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）および臭化アルキル（０．０５０ｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を２時間後に加え、反応物を７０℃まで加熱した。反応物を２５℃まで冷却し、１６時間後に７０℃にて、ＥｔＯＡｃ（０．１Ｌ）で希釈し、３  １０ｍＬ  Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して、黄色固体を得た。固体をシリカゲル（１２ｇカラム、ヘプタン中２５〜１００％ＥｔＯＡｃ，３５分にわたる）上のクロマトグラフィに付して、出発インドール（２５ｍｇ、８％）と所望のフタルイミド（０．３３ｇ、７０％）との混合物を黄色固体として得た。Ｒｆ＝０．１９（２５：７５ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．８２−７．８６（ｍ，２Ｈ）７．７８−７．８２（ｍ，２Ｈ）７．０６−７．１３（ｍ，２Ｈ）６．５１（ｄｄ，Ｊ＝７．０，１．６Ｈｚ，１Ｈ）４．６２（ｓ，２Ｈ）４．２５−４．３２（ｍ，２Ｈ）３．８０（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）２．６０（ｓ，３Ｈ）２．１２−２．２１（ｍ，４Ｈ）１．４５（ｓ，９Ｈ）．
｛３−アミノオキサリル−１−［３−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イル）−プロピル］−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ｝−酢酸。ＣＨ２Ｃｌ２（６．１ｍＬ）中のｔ−ブチルエステル（０．２１ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の溶液にＴＦＡ（０．８１ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を加えた。４５分後に、さらにＴＦＡ（０．８１ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応物をさらに４５分間室温に維持し、次いで、真空中で濃縮して、黒色油を得た。水を加え、緑色懸濁液を真空中で濃縮して、緑色固体を得た。固体を１：９  ＤＭＳＯ／ＭｅＯＨに溶解させ、逆相ＨＰＬＣ（１％ＴＥＡ緩衝液、７分、２８ｍＬ／分、５分間にわたって水中の５％ＭｅＯＨまたは１００％ＭｅＯＨ）上のクロマトグラフィに付して、生成物を褐色油（０．１１ｇ、４６％、逆相ＨＰＬＣによると８２％純度、ＵＶ検出）として得た。注意：逆相ＨＰＬＣでのこの化合物についての最良の精製方法は、１％ギ酸での０７２８方法を用いる。しかしながら、ギ酸の存在下では生成物の溶解度が低いため、最良の精製方法を用いることができない。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．８５−７．８８（ｍ，２Ｈ）７．７９−７．８２（ｍ，２Ｈ）７．００−７．０９（ｍ，２Ｈ）６．５７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）４．４９（ｓ，２Ｈ）４．２６−４．３１（ｍ，２Ｈ）３．８０（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）２．６１（ｓ，３Ｈ）２．１７（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＩ）４６４（Ｍ＋Ｈ）。
【０８２７】
実施例１７ＡＢ
【０８２８】
【化２５０】
2009514892.tif 000227
（１−アリル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル。ＤＭＦ（１．７ｍＬ）中のインドール（０．１１ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（５５ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の加熱された（６０℃）混合物に、臭化アリル（０．０３０ｍＬ）を加えた。さらに臭化アリル（０．１０ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）を３時間後に加え、反応物を６０℃にて１６時間維持し、その後、２５℃まで冷却した。次いで、混合物を１５ｍＬのＥｔＯＡｃに希釈し、４×１０ｍＬのＨ２Ｏ、１０ｍＬ飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して、黄色固体を得た。固体をシリカゲル（４ｇカラム、１０分間にわたって５０〜７５％ＥｔＯＡｃ、次いで、１５分間は７５％ＥｔＯＡｃ）上のクロマトグラフィに付して、出発インドール（９ｍｇ、８％）と所望のアルケン（９５ｍｇ、７７％）との混合物を黄色固体として得た。Ｒｆ＝０．２４（２５：７５  ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δｐｐｍ７．１２（ｄｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）６．９４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）６．５３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）５．８７−５．９７（ｍ，１Ｈ）５．２０（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，０．７Ｈｚ，１Ｈ）４．９６（ｄｄ，Ｊ＝１７．１，０．６Ｈｚ，１Ｈ）４．６７−４．７２（ｍ，２Ｈ）４．６１（ｓ，２Ｈ）２．５６（ｓ，３Ｈ）１．４７（ｓ，９Ｈ）．
（１−アリル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸。ＣＨ２Ｃｌ２（６．０ｍＬ）中のｔ−ブチルエステル（７５ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の溶液にＴＦＡ（０．８０ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後に、反応物を真空中で濃縮して、褐色油を得た。水を加え、懸濁液を真空中で濃縮して、固体を得た。該固体を１：９  ＤＭＳＯ／ＭｅＯＨに溶解させ、逆相ＨＰＬＣ（１％ＴＥＡ緩衝液、７分、２８ｍＬ／分、５分間にわたって水中の５％ＭｅＯＨ〜１００％ＭｅＯＨ）上のクロマトグラフィに付して、酸を淡い白色固体（７ｍｇ、１１％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．１１（ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）７．０１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）６．６０（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）５．９４−６．０６（ｍ，１Ｈ）５．１２−５．１９（ｍ，１Ｈ）４．８７−４．９０（ｍ，１Ｈ）４．６０（ｓ，２Ｈ）３．１９（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）２．５９（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＩ）３１７（Ｍ＋Ｈ）。
【０８２９】
実施例１７ＡＣ：
【０８３０】
【化２５１】
2009514892.tif 000228
［３−アミノオキサリル−１−（２，３−ジヒドロキシ−プロピル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル。ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中のアルケン（０．１７ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）およびＮＭＯ（５８ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｈ２Ｏ中のＯｓＯ４（０．０３０ｍＬ、４．５×１０−６モル、［０．１６］）の溶液を加えた。２１時間後に、反応物をシリカゲルカラム（１２ｇ）に直接負荷し、フラッシュクロマトグラフィ（２０分間にわたりヘプタン中２０〜１００％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、ジオールを淡黄色固体（０．１６ｇ、８５％）として得た。Ｒｆ＝０．０６（１：１  ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．１０−７．１８（ｍ，２Ｈ）６．５４（ｄｄ，Ｊ＝７．３，１．２Ｈｚ，１Ｈ）４．６５（ｓ，２Ｈ）４．３８（ｄｄ，Ｊ＝１４．８，３．７Ｈｚ，１Ｈ）４．１４−４．２２（ｍ，１Ｈ）３．９６−４．０３（ｍ，１Ｈ）３．６１（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）２．９９（ｓ，２Ｈ）２．８６（ｄ，Ｊ＝０．６Ｈｚ，１Ｈ）２．６６（ｓ，３Ｈ）１．４６（ｓ，９Ｈ）．
［３−アミノオキサリル−１−（２，３−ジヒドロキシ−プロピル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中のｔ−ブチルエステル（０．１６ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の溶液にＴＦＡ（１．６ｍＬ、０．０２０モル）を加えた。４０分後に、反応物を真空中で濃縮して、油を得た。該油を１：１  Ｈ２Ｏ／ＭｅＯＨに溶解させ、逆相ＨＰＬＣ（３５５酸方法）上のクロマトグラフィに付して、酸を淡黄色油（４ｍｇ、３％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．１０−７．１４（ｍ，２Ｈ）６．５７−６．６２（ｍ，１Ｈ）４．６１（ｓ，２Ｈ）４．３７（ｄｄ，Ｊ＝１４．８，３．８Ｈｚ，１Ｈ）４．１３−４．２１（ｍ，１Ｈ）３．９６−４．０３（ｍ，１Ｈ）３．６１（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ）２．６６（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＩ）３５１（Ｍ＋Ｈ）。
【０８３１】
実施例１７ＡＤ
【０８３２】
【化２５２】
2009514892.tif 000229
酢酸［３−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−プロピル］−トリエチル−アンモニウム。ＴＨＦ：ＤＭＳＯ［１：５］（０．５ｍＬ：２．５ｍＬ）中の３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インド−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（鉱物油中６０％分散液、４ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で撹拌させた。３０分後に、臭化（３−ブロモプロピル）トリエチルアンモニウム（８０％、３０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃にて１６時間加熱した。反応混合物を２×１０ｍＬのＥｔ２Ｏでトリチュレートした。油状残渣をＣＨ３ＯＨ：Ｈ２Ｏ［１：１］（４ｍＬ：４ｍＬ）に溶解させ、溶離剤としてＨ２Ｏ中の５％ＣＨ３ＯＨで出発する逆相ＨＰＬＣによって精製した。濃縮により、酢酸３−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−プロピル］−トリエチル−アンモニウムを得た：黄色油、６０．２ｍｇ；ＬＣＭＳ  ４７４（Ｍ＋）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．０５−７．２５（ｍ，２Ｈ），６．５７（ｄｄ，Ｊ＝６．９６，１．５４Ｈｚ，１Ｈ），４．６６（ｓ，２Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝７．０３Ｈｚ，２Ｈ），３．１７−３．２９（ｍ，８Ｈ），２．６０（ｓ，３Ｈ），２．０７−２．１９（ｍ，２Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），１．１８（ｔ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，９Ｈ）．
［３−アミノオキサリル−１−（３−トリエチルアンモニウムプロピル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］アセテート。トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）中の酢酸３−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−プロピル］−トリエチル−アンモニウム（６０．２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液を調製し、室温にて撹拌させた。３０分後に、Ｈ２Ｏ（４ｍＬ）を加え、混合物を濃縮した。残渣をＨ２Ｏ（４ｍＬ）に再溶解させ、再度濃縮した。濁った残渣を、０．１％ギ酸を双方の溶離剤相に加え、溶離剤としてのＨ２Ｏ中の５％ＣＨ３ＯＨで出発する逆相ＨＰＬＣによって精製した。濃縮により、３−アミノオキサリル−１−（３−トリエチルアンモニウムプロピル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］アセテートを得た：黄色油、８．８ｍｇ、（１９％）；ＬＣＭＳ  ４１８（Ｍ＋）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ８．３３（ｓ，１Ｈ），７．１３（ｔ，Ｊ＝８．００Ｈｚ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．２０Ｈｚ，１Ｈ），６．６１（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，１Ｈ），４．５８（ｓ，２Ｈ），４．１９（ｔ，Ｊ＝６．７１Ｈｚ，２Ｈ），３．１２−３．２９（ｍ，Ｊ＝７．０１，７．０１，７．０１Ｈｚ，８Ｈ），２．５８（ｓ，３Ｈ），２．１１（ｓ，２Ｈ），１．１７（ｔ，Ｊ＝７．０５Ｈｚ，９Ｈ）。
【０８３３】
実施例１７ＡＥ：
【０８３４】
【化２５３】
2009514892.tif 000230
酢酸［３−（３−アミオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル−プロピル）−トリメチル−アンモニウム。ＴＨＦ：ＤＭＳＯ［１：５］（０．５ｍＬ：２．５ｍＬ）中の３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インド−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１００ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（鉱物油中６０％分散液、８ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で撹拌させた。３０分後、臭化（３−ブロモプロピル）トリメチルアンモニウム（６０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃にて１６時間加熱した。反応混合物を３×１０ｍＬのＥｔ２Ｏでトリチュレートした。油状残渣をＣＨ３ＯＨに溶解させ、最初の溶離剤としてＨ２Ｏ中の３０％ＣＨ３ＯＨで出発する逆相ＨＰＬＣによって精製した。濃縮により、酢酸３−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−プロピル］−トリメチル−アンモニウムを得た：褐色油、３７ｍｇ；ＬＣＭＳ  ４３２（Ｍ＋）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．０７−７．２２（ｍ，２Ｈ），６．５７（ｄｄ，Ｊ＝７．０８，１．４２Ｈｚ，１Ｈ），４．６６（ｓ，２Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝７．０８Ｈｚ，２Ｈ），３．３５−３．４８（ｍ，２Ｈ），３．０９（ｓ，９Ｈ），２．６１（ｓ，３Ｈ），２．１９−２．３２（ｍ，２Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ）。
【０８３５】
実施例１７ＡＦ
【０８３６】
【化２５４】
2009514892.tif 000231
酢酸［５−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ペンチル］−トリメチル−アンモニウム。ＴＨＦ：ＤＭＳＯ［１：５］（１ｍＬ：５ｍＬ）中の３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インド−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２００ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（鉱物油中６０％分散液、１６ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温にて撹拌させた。４５分後に、臭化（５−ブロモペンチル）トリメチルアンモニウム（１９１ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃にて１８時間加熱した。反応混合物を３×１５ｍＬのＥｔ２Ｏでトリチュレートした。褐色ガムをＣＨ３ＯＨ：Ｈ２Ｏ［１：１］（６ｍＬ：６ｍＬ）に溶解させ、最初の溶離剤としてＨ２Ｏ中の１０％ＣＨ３ＯＨで出発する逆相ＨＰＬＣによって精製した。濃縮により、酢酸５−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−ペンチル］−トリメチル−アンモニウムを得た：橙色油、１１５．１ｍｇ（３７％）；ＬＣＭＳ  ４６０（Ｍ＋）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．０５−７．１８（ｍ，２Ｈ），６．５４（ｄｄ，Ｊ＝６．９８，１．５６Ｈｚ，１Ｈ），４．６５（ｓ，２Ｈ），４．１８（ｔ，Ｊ＝７．１３Ｈｚ，２Ｈ），３．１４−３．２４（ｍ，２Ｈ），３．０３（ｓ，９Ｈ），２．５９（ｓ，３Ｈ），１．９３（ｓ，３Ｈ），１．７６−１．８８（ｍ，２Ｈ），１．６０−１．７２（ｍ，２Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），１．３３−１．４３（ｍ，２Ｈ）。
【０８３７】
実施例１７ＡＧ：
【０８３８】
【化２５５】
2009514892.tif 000232
３−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−プロパン−１−スルホン酸トリエチルアンモニウム。ＴＨＦ：ＤＭＳＯ［１：５］（１ｍＬ：５ｍＬ）中の３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インド−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２００ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（鉱物油中６０％分散液、１６ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温にて撹拌させた。４５分後に、ブロモプロパンサルフェート、ナトリウム塩（１４９ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃にて１８時間加熱した。反応混合物を４×１５ｍＬ  Ｅｔ２Ｏでトリチュレートした。褐色ガムをＣＨ３ＯＨ（１４ｍＬ）に溶解させ、０．１％トリエチルアミンを双方の溶離剤相に加えて、最初の溶離剤としてＨ２Ｏ中の５％ＣＨ３ＯＨで出発する逆相ＨＰＬＣによって精製した。濃縮により、３−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イル）−プロパン−１−スルホン酸トリエチルアンモニウムを得た：４１．５ｍｇ（１２％）；ＬＣＭＳ  ３９９（Ｍ−ｔＢｕ＋Ｈ）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．２０−７．２７（ｍ，１Ｈ），７．１４（ｔ，Ｊ＝８．００Ｈｚ，１Ｈ），６．５５（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，１Ｈ），４．６５（ｓ，２Ｈ），４．３５−４．４４（ｍ，２Ｈ），３．１３（ｑ，Ｊ＝７．２２Ｈｚ，４Ｈ），２．８９（ｔ，Ｊ＝７．２２Ｈｚ，２Ｈ），２．６５（ｓ，３Ｈ），２．１７−２．２７（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．２５（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，６Ｈ）。
【０８３９】
実施例１７ＡＨ：
【０８４０】
【化２５６】
2009514892.tif 000233
４−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イルメチル）−安息香酸メチルエステル。ＴＨＦ：ＤＭＳＯ［１：５］（０．５ｍＬ：２．５ｍＬ）中の３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インド−４−イルオキシ）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（鉱物油中６０％分散液、４ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温にて撹拌した。３０分後、４−ブロモメチル安息香酸、メチルエステル（３８ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にて１８時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３０ｍＬ）の間で分配し、水相を２×３０ｍＬの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を順次Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）、次いで、飽和ＮａＣｌ水溶液（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。濃縮により、淡黄色油が得られ、これを、初期溶離剤としてＨ２Ｏ中の３０％ＣＨ３ＯＨで出発する逆相ＨＰＬＣによってさらに精製して、４−（３−アミノオキサリル−４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イルメチル）−安息香酸メチルエステルを得、これをさらに精製することなく用いた：３９．２ｍｇ（６０％）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．９０−７．９８（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．２５Ｈｚ，２Ｈ），７．１１（ｔ，Ｊ＝８．０５Ｈｚ，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．２５Ｈｚ，１Ｈ），６．５７（ｄ，Ｊ＝７．８１Ｈｚ，１Ｈ），５．５６（ｓ，２Ｈ），４．６８（ｓ，２Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），２．５６（ｓ，３Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）．
４−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イルメチル）−安息香酸。ＴＨＦ（５ｍＬ）中の４−（３−アミノオキサリル４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメトキシ−２−メチル−インドール−１−イルメチル）−安息香酸メチルエステル（３９．２ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の氷冷懸濁液に、０．２Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（１．２ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）を加え、溶液を０℃にて３０分間撹拌させ、次いで、室温で１８時間撹拌させた。次いで、混合物を飽和ＮａＣｌ水溶液（１５ｍＬ）中の氷冷０．２Ｎ  ＨＣｌで処理し、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＣｌ水溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、濃縮して黄色固体とした。逆相ＨＰＬＣによる精製により、４−（３−アミノオキサリル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−インドール−１−イルメチル）−安息香酸を得た：３ｍｇ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δ２．５７（ｓ，３Ｈ），４．６０（ｓ，２Ｈ），５．５４（ｓ，２Ｈ），６．６１（ｄ，Ｊ＝８．００Ｈｚ，１Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝８．１０Ｈｚ，１Ｈ），７．０９（ｔ，Ｊ＝８．０３Ｈｚ，１Ｈ），７．１５（ｄ，Ｊ＝８．３５Ｈｚ，２Ｈ），７．９４（ｄ，Ｊ＝８．３５Ｈｚ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ＋）４１１．２（Ｍ＋Ｈ）；ＨＰＬＣ（ＵＶ＝９８．４％），（ＥＬＳＤ＝９６．６％）。
【０８４１】
実施例１７ＡＩ：
２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−プロピオン酸（ＸＸＩＩ）；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３９，５１５９−５１５７。２ドラムバイアル中で、２−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド（ＸＸ）（０．２０００ｇ、０．０００６４９モル，１当量）、炭酸カリウム（０．０９８６ｇ、０．０００７１４モル、１．１当量）、ブロモプロピオン酸メチル（０．０８０ｍＬ、０．０００７１４モル、１．１当量）およびＤＭＦ（４ｍＬ）を合わせる。反応混合物を撹拌し、一晩で７５℃まで加熱する。
【０８４２】
この時点の後、反応物を室温まで冷却した。粗製物質をメタノール（６ｍＬ）で希釈し、ＨＰＬＣによって精製した。ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ  ３９５（Ｍ＋Ｈ）。単離された２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−プロピオン酸メチルエステル（ＸＸＩ）の量：５５．２ｍｇ（０．０００１４モル、収率＝２２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）δｐｐｍ７．２８−７．３５（ｍ，３Ｈ），７．０１−７．１１（ｍ，３Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝８．１０Ｈｚ，１Ｈ），６．４９（ｄ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ，１Ｈ），５．３３（ｓ，２Ｈ），４．９３（ｑ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，１Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ），１．７０（ｄ，Ｊ＝６．８３Ｈｚ，３Ｈ）．
１００ｍＬの丸底フラスコ中で、２−（３−アミノオキサリル−１−ベンジル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−プロピオン酸メチルエステル（ＸＸＩ）（０．０７２３ｇ、０．０００１８３ｍｏｌ、１当量）、エタノール（２１ｍＬ）、ＴＨＦ（７ｍＬ）および２Ｎ水酸化ナトリウム（１．７４１ｍＬ、０．００３４８３ｍｏｌ、１９当量）を合わせる。反応物を室温にて２時間半撹拌した。その時点の後、反応物を１Ｎ  ＨＣｌで酸性化し、酢酸エチルで抽出した（３回、１５ｍＬ）。十分に乾燥し、生成物を得た。ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ  ４０３（Ｍ＋Ｎａ）。単離されたＸＸＩＩの量：４３．６ｍｇ（０．０００１１５ｍｏｌ、収率＝６３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．１９−７．３７（ｍ，４Ｈ），７．００−７．１３（ｍ，３Ｈ），６．５７（ｄ，Ｊ＝７．７６Ｈｚ，１Ｈ），５．４８（ｓ，２Ｈ），４．９５（ｑ，Ｊ＝６．６５Ｈｚ，１Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），１．７０（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ）。
【０８４３】
実施例１７ＡＪ：
【０８４４】
【化２５７】
2009514892.tif 000234
２−（１−ベンジル−４−カルバモイルメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド（ＸＸＩＩＩ）。２ドラムバイアル中で、２−（１−ベンジル−４−ヒドロキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソ−アセトアミド（ＸＸ）（０．３０００ｇ、０．０００９７３ｍｏｌ、１当量）、炭酸カリウム（０．１４７９ｇ、０．００１０７ｍｏｌ、１．１当量）、ブロモアセトアミド（０．１４７７ｇ、０．００１０７ｍｏｌ、１．１当量）およびＤＭＦ（４ｍＬ）を合わせる。反応混合物を攪拌し一晩で７５℃まで加熱する。この後、反応物を室温まで冷却した。粗製物質をメタノール（６ｍＬ）で希釈し、ＨＰＬＣによって精製した。ＬＣＭＳ  ｍ／ｅ  ３６６（Ｍ＋Ｈ）。ＨＰＬＣ純度９７％。単離されたＸＸＩＩＩの量：６９．８ｍｇ（０．０００１９１ｍｏｌ，収率＝２０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）δｐｐｍ７．２２−７．３６（ｍ，３Ｈ），７．１２（ｔ，Ｊ＝８．０５Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝６．７４Ｈｚ，２Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝８．１５Ｈｚ，１Ｈ），６．６２（ｄｄ，Ｊ＝７．９３，０．７１Ｈｚ，１Ｈ），５．４８（ｓ，２Ｈ），２．６４（ｓ，３Ｈ），２．１５（ｓ，２Ｈ）．
一定のかかるアザインドールおよびアザインドール関連化合物を、実施例１２のプロトコルを使用して、ホスホリパーゼ活性について評価した。結果を、表８に示す。
表８：膵臓分泌性ヒト、マウス、およびブタＰＬＡ２の阻害
【０８４５】
【化２５８】
2009514892.tif 000235
【０８４６】
【化２５９】
2009514892.tif 000236
【０８４７】
【化２６０】
2009514892.tif 000237
実施例１８：マウス薬物動態学研究
静脈内（ＩＶ、３ｍｇ／ｋｇ）および経口（ＰＯ、３０ｍｇ／ｋｇ）投与経路後のインドールおよびインドール関連被験物質（ＴＡ）への雄ＣＤ−１マウスの血漿曝露を測定した。このモデルを使用して、マウスにおけるインドールおよびインドール関連ＴＡの生物学的利用能を調査した。マウスはヒトでの使用が意図される薬物の前臨床評価で頻繁に使用されている許可された種であるので、マウスを研究のために使用した。
【０８４８】
雄ＣＤ−１マウス（７−８週齢）を、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）から入手した。２群（Ｎ＝１８および２７）の雄ＣＤ−１マウスを研究に使用した。到着時に、動物を、Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ  ５００１（Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）で飼育した。
【０８４９】
研究−１日目に、経口またはＩＶ投与用のインドールおよびインドール関連ＴＡを、表１０．１に記載の比率での処方物の成分と被験物質との混合によって処方した。成分を、温浴中での６０分のボルテックスおよび超音波処理によって混合した。動物を、研究開始前に一晩絶食させた。研究１日目に、確実に投与前に視覚可能な粒子が存在しないか、存在する場合、確実に懸濁液中に均一に分散されるように処方物を１時間超音波処理した。処方された被験物質を、投与中に撹拌し続けた。
表１０．１：経口およびＩＶ投与処方物
【０８５０】
【化２６１】
2009514892.tif 000238
試験１日目に全動物の体重を測定し、体重を記録し、用量計算のために使用した。表１０．２に概説のように、動物に、ＰＯまたはＩＶ経路のいずれかによって投与した。指定の時間間隔で、ラベルを付けた黄色のキャップのＭｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ管に血液サンプル（０．５ｍＬ）を採取した。管を、遠心分離した（８，０００×ｇ、１０分）。次いで、血清を、ラベルを付けたＥｐｐｅｎｄｏｒｆ（登録商標）チューブにピペットで移し、−８０℃で凍結した。必要に応じて、臨床所見を記録した。
表１０．２：経口およびＩＶ投与スケジュール
【０８５１】
【化２６２】
2009514892.tif 000239
血清サンプルの分析を、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ（Ｗａｔｅｒｓ  Ｑｕａｔｔｒｏ  Ｐｒｅｍｉｅｒ，Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）によって行った。各化合物の定量限界（ＬＯＱ）を、表１０．３に列挙する。曲線下面積（ＡＵＣ）を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ４を使用して計算した。生物学的利用能を、以下の式を使用して計算した。
（生物学的利用能）＝（ＡＵＣ０−ｔ，経口／ＡＵＣ０−ｔ，ｉｖ）×（用量ｉｖ／用量経口）×１００
（式中、ＡＵＣ０−ｔ＝測定可能な最終時点での総曲線下面積）
ＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって分析した血清レベルに基づいて、ＣＤ−１マウスにおけるインドールおよびインドール関連ＴＡの生物学的利用能の計算値を、表１０．３にまとめる。
表１０．３：化合物の生物学的利用能
【０８５２】
【化２６３】
2009514892.tif 000240
実施例１９：マウス食事誘導性肥満
最初にＳｕｒｗｉｔ  ａｎｄ  ｃｏｌｌｅａｇｕｅｓによって導入された高脂肪食を与えたヒト糖尿病のＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスモデル（Ｓｕｒｗｉｔ，ＲＳら（１９８８）“Ｄｉｅｔ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｔｙｐｅ  ＩＩ  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｉｎ  Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ  ｍｉｃｅ”，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ３７：１１６３−１１６７）は、高脂肪食開始から３週間後の早さで肥満、異常脂質血症、グルコースおよびインスリン抵抗性を誘導する、広く受け入れられた臨床的に妥当な多遺伝子モデルである（Ｗｉｎｚｅｌｌ，ＭＳ  ａｎｄ  Ａｈｒｅｎ，Ｂ（２００４）“Ｔｈｅ  ｈｉｇｈ−ｆａｔ  ｄｉｅｔ−ｆｅｄ  ｍｏｕｓｅ：ａ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ｓｔｕｄｙｉｎｇ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｉｍｐａｉｒｅｄ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｔｏｌｅｒａｎｃｅ  ａｎｄ  ｔｙｐｅ  ２  ｄｉａｂｅｔｅｓ”，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ５３  Ｓｕｐｐｌ  ３：Ｓ２１５−２１９）。このモデルを使用して、インドールおよびインドール関連被験物質の影響を調査した。アバンディア（ロシグリタゾン）を、コントロール被験物質として使用した。
【０８５３】
メスＣ５７Ｂｌａｃｋ／６Ｊマウス（５〜６週齢）を、Ｊａｃｋｓｏｎ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）から入手した。到着時に、動物を、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ  ５００１（Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）で飼育した。一連の研究を通して、飼料と水を自由に与えた。動物を少なくとも７日間馴化させ、動物を体重に基づいてそれぞれ８匹ずつ１２群に無作為に分類した。各動物群を、表１１に記載の被験物質を含むか含まない飼料で飼育した。Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ  ５００１以外の全飼料を、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ（Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ）から得た。
【０８５４】
これらの研究およびこれにともなう数値において、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＤｉｅｔｓのＤｉｅｔ  Ｄ１２３２８を、「低脂肪」またはコントロール食／固形飼料と呼び、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＤｉｅｔｓのＤｉｅｔ  Ｄ１２３３１を、「高脂肪」食と呼ぶ。群１〜６に、薬物を含まないか（群１）種々の量の被験物質を含む（群２〜６）Ｄ１２３２８食を与えた。群７〜１２に、薬物を含まないか（群７）種々の量の被験物質を含む（群８〜１２）Ｄ１２３３１食を与えた。動物による自由な消費によって表１１に列挙した用量に近い用量が送達されるように、被験物質の含有量を計算した（被験物質（ｍｇ）／ｋｇ動物体重／日）。
【０８５５】
本実施例および他の実施例では、被験物質ＩＬＹ４００８は化合物ＩＬＹ−Ｖ−２６（５−２６）であり、被験物質ＩＬＹ４０１３は化合物ＩＬＹ−Ｖ−３２（５−３２）であり、ｌ被験物質ＩＬＹ４０１１は化合物ＩＬＹ−Ｖ−３０（５−３０）であり、被験物質ＩＬＹ４０１６は化合物ＩＬＹ−ＩＶ−４０（４−４０）である。
表１１：マウス食事誘導性肥満アッセイ飼料
【０８５６】
【化２６４】
2009514892.tif 000241
動物を、この飼料で１１週間まで維持した。体重を毎週記録した。点灯から１〜２時間以内に絶食せずに採血した。血清を、グルコース、総コレステロール、トリグリセリド（ＴＧ）、およびリゾリン脂質（ＬＰＣ）含有量について分析した。
【０８５７】
ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ４．０３．（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して統計分析を行った。２組の統計分析を行った。第１に、低脂肪固形飼料の非処置群を、スチューデントの両側Ｔ検定によって、高脂肪、高スクロース食の非処置群と比較した。全数値において、低脂肪固形飼料上の「ａ」は、処置カラムは値が高脂肪高スクロース食の非処置群と有意に異なる（ｐ＜０．０５）ことを示さない。第２に、一元配置分散分析およびその後のダネットの事後検定（ｐｏｓｔ−ｔｅｓｔ）によって、高脂肪高スクロース食の全処置群を、この食事の非処置群と比較した。グラフカラム上の「ｂ」は、値がこの食事を与えた非処置群と有意に異なる（ｐ＜０．０５）ことを示す。
【０８５８】
被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）の結果を、図１４Ａ、１４Ｂ、１４Ｃ、および１４Ｄに示す。被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）の結果を、図１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、および１５Ｄに示す。被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）の結果を、図１６Ａ、１６Ｂ、および１６Ｃに示す。被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）の結果を、図１７Ａ、１７Ｂ、および１７Ｃに示す。
【０８５９】
低脂肪コントロール食を与えた動物を、ＩＬＹ４００８、ＩＬＹ４０１１、ＩＬＹ４０１３、またはＩＬＹ４０１６を含む低脂肪コントロール食を与えた動物と比較した場合、影響は全くまたはほとんど認められなかった。この所見により、いくつかの実施形態が高リスク食条件下で有効であるが、低リスク食条件下では観察可能な影響は認められないことが示唆される。
【０８６０】
実施例２０：ＬＤＬ受容体ノックアウトマウス
マウスは、ヒトで認められる酵素（コレステロールエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）を欠き、この酵素は、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）からＡｐｏＢ含有リポタンパク質（超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）および低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）など）へのコレステロールの転送を担う。その結果として、野生型マウスのＬＤＬコレステロールレベルは、ヒトで認められるレベルと比較して非常に低い。低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬＲ）は、ＬＤＬおよびａｐｏＥを含むリポタンパク質残留物の清浄に関与する。ＬＤＬＲが不活化される場合、ＬＤＬコレステロールレベルはヒトで認められるレベルに上昇する。正常なげっ歯類食では、ＬＤＬＲ欠損マウスにおけるＬＤＬコレステロールレベルは、野生型マウスと比較して高い。ＬＤＬＲ欠損マウスに高レベルの脂肪およびコレステロールを含む西洋型の飼料を与えた場合、総コレステロールおよびＬＤＬコレステロールレベルは非常に上昇するようになり、それぞれ、１０００ｍｇ／ｄＬおよび３００ｍｇ／ｄＬを超える。このモデルを使用して、インドールおよびインドール関連被験物質の影響を調査した。Ａｖａｎｄｉａ（ロシグリタゾン）およびＺｅｔｉａ（エゼチミブ）を、コントロール被験物質として使用した。
【０８６１】
雄ＬＤＬ受容体ノックアウトマウス（Ｂ６．１２９Ｓ７−Ｌｄｌｒｔｍ１Ｈｅｒ）を、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ（Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）から入手した。到着時に、動物を、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ  ５００１（Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）で飼育した。一連の研究を通して、飼料と水を自由に与えた。動物を少なくとも７日間馴化させ、動物を体重に基づいてそれぞれ７匹ずつ１４群に無作為に分類した。各動物群を、表１２に記載の被験物質を含むか含まない飼料で飼育した。Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ  ５００１以外の全飼料を、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ（Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ）から得た。
【０８６２】
これらの研究およびこれに伴う数値において、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＤｉｅｔｓのＤｉｅｔ  Ｄ１２３２８を、「低脂肪」またはコントロール食と呼び、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＤｉｅｔｓのＤｉｅｔ  Ｄ１２０７９Ｂを、「洋」食と呼ぶ。群１〜７に、薬物を含まないか（群１）種々の量の被験物質を含む（群２〜７）Ｄ１２３２８食を与えた。群８〜１４に、薬物を含まないか（群８）種々の量の被験物質を含む（群８〜１４）Ｄ１２０７９食を与えた。動物による自由な消費によって表１２に列挙した用量に近い用量が送達されように、被験物質の含有量を計算した（被験物質（ｍｇ）／ｋｇ動物体重／日）。
表１２：ＬＤＬ受容体ノックアウトマウスアッセイ飼料
【０８６３】
【化２６５】
2009514892.tif 000242
動物を、この飼料で８週間維持した。体重を毎週記録した。点灯から１〜２時間以内に絶食せずに採血した。血清を、総コレステロール、ＬＤＬコレステロール、ＨＤＬ  コレステロール、トリグリセリド（ＴＧ）、遊離脂肪酸（ＦＦＡ）、およびリゾリン脂質（ＬＰＣ）含有量について分析した。
【０８６４】
ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ４．０３．（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して統計分析を行った。２組の統計分析を行った。第１に、低脂肪固形飼料の非処置群を、スチューデントの両側Ｔ検定によって、洋食の非処置群と比較した。全数値において、低脂肪固形飼料上の「ａ」は、処置カラムは値が洋食の非処置群と有意に異なる（ｐ＜０．０５）ことを示さない。第２に、一元配置分散分析およびその後のダネットの事後検定（ｐｏｓｔ−ｔｅｓｔ）によって、洋食の全処置群を、この食事の非処置群と比較した。グラフカラム上の「ｂ」は、値がこの食事を与えた非処置群と有意に異なる（ｐ＜０．０５）ことを示す。
【０８６５】
被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）の結果を、図１８Ａ、１８Ｂ、１８Ｃ、１８Ｄ、１８Ｅ、および１８Ｆに示す。被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）の結果を、図１９Ａ、１９Ｂ、１９Ｃ、１９Ｄ、１９Ｅ、および１９Ｆに示す。被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）の結果を、図２０Ａ、２０Ｂ、２０Ｃ、および２０Ｄに示す。被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）の結果を、図２１Ａ、２１Ｂ、２１Ｃ、および２１Ｄに示す。
【０８６６】
低脂肪コントロール食を与えた動物を、ＩＬＹ４００８、ＩＬＹ４０１１、ＩＬＹ４０１３、またはＩＬＹ４０１６を含む低脂肪コントロール食を与えた動物と比較した場合、影響は全くまたはほとんど認められなかった。この所見により、いくつかの実施形態が高リスク食条件下で有効であるが、低リスク食条件下では観察可能な影響は認められないことが示唆される。
【０８６７】
実施例２１：ＩＩ型糖尿病のＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬＴＪマウスモデル
ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウス系統（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ，Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ  ＭＥ）は、ヒト２型糖尿病をモデル化するために特別に開発された組換え共通遺伝子系統である。レプチンシグナル伝達経路が特異的に欠損した他のマウス系統（例えば、ＢＫＳ．Ｃｇ−ｍ＋／＋Ｌｅｐｒｄｂ／Ｊ、Ｂ６．Ｖ−Ｌｅｐｏｂ／Ｊ、およびＫＫ．Ｃｇ−Ａｙ／Ｊ）は、優れた一遺伝子肥満モデルであり、２型糖尿病の研究に有効であるが、これらは、より一般的なヒト肥満誘導性糖尿病（ダイアベシティ（ｄｉａｂｅｓｉｔｙ））症候群を反映しない。一般的なヒトダイアベシティ症候群は、多遺伝子性であって一遺伝子性ではなく、一遺伝子性モデルの臨床表現型は極端である：過剰な肥満および過食（循環中のレプチンが高いか存在しない）ならびに高インスリン血症。対照的に、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪは、挙動および内分泌表現型が中等度であり、雄は過食または生殖障害を引き起こすことなく耐糖能障害から安定な非絶食高血糖への成体発症型の移行を示し、血漿中のインスリンおよびレプチン濃度が穏やかにしか上昇しない（Ｌｅｉｔｅｒ，ＥＨら（２００５）“Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｔｏ  Ｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  Ｎｅｗ  Ｍｏｕｓｅ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  Ｔｙｐｅ  ２  Ｄｉａｂｅｔｅｓ”，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，Ｌｅｉｔｅｒ，ＥＨ  ａｎｄ  Ｒｅｉｆｓｎｙｄｅｒ，ＰＣ（２００４）“Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｌｅｖｅｌｓ  ｏｆ  ｄｉａｂｅｔｏｇｅｎｉｃ  ｓｔｒｅｓｓ  ｉｎ  ｔｗｏ  ｎｅｗ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  ｔｙｐｅ  ２  ｄｉａｂｅｔｅｓ”，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ５３  Ｓｕｐｐｌ  １：Ｓ４−１１）。また、他の研究で使用される食事誘導性肥満（ＤＩＯ）モデルと対照的に、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪ雄マウスは、標準的な実験げっ歯類用固形飼料と比較して脂肪量が中等度に高い飼料を与えた場合、強い高血糖およびインスリンの上昇を示す。このモデルを使用して、インドールおよびインドール関連被験物質の影響を調査した。Ａｖａｎｄｉａ（ロシグリタゾン）を、コントロール被験物質として使用した。
【０８６８】
雄ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウス（５週齢）を、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ（Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）から入手した。到着時に、動物を、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ  ５Ｋ２０（Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）で飼育した。一連の研究を通して、飼料と水を自由に与えた。動物を少なくとも４週間馴化させ、研究１日目に体重を測定した。範囲外の体重の動物を、研究から除去した。残りの動物を、体重に基づいてそれぞれ７匹ずつ６群に無作為に分類した。各動物群を、表１３に記載の被験物質を含むか含まない飼料で飼育した。全飼料を、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ（Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ）から得た。５Ｋ２０食への被験物質の添加後のペレット中の組成変更を補助するために、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓにマルトデキストリン（５重量％）を添加した。
【０８６９】
動物による自由な消費によって表１３に列挙した用量に近い用量が送達されように、被験物質の含有量を計算した（被験物質（ｍｇ）／ｋｇ動物体重／日）。
【０８７０】
動物を、この飼料で２ヶ月まで維持した。体重を毎週記録した。眼窩後出血によって採血した。これらの採血のために、動物を一晩是食させた。血清を、グルコース、インスリン、レプチン、総コレステロールおよびトリグリセリド（ＴＧ）含有量について分析した。
表１３：ＩＩ型糖尿病アッセイ飼料のＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスモデル
【０８７１】
【化２６６】
2009514892.tif 000243
ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ４．０３．（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して統計分析を行った。全数値において、グラフカラム上の「ａ」は、一元配置分散分析およびその後のダネットの事後検定によって、被験物質を添加しなかった５Ｋ２０を与えた群と値が有意に異なる（ｐ＜０．０５）ことを示す。
【０８７２】
被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）の結果を、図２２Ａ、２２Ｂ、２２Ｃ、２２Ｄ、および２２Ｅに示す。被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）の結果を、図２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｃ、２３Ｄ、および２３Ｅに示す。被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）の結果を、図２４Ａ、２４Ｂ、２４Ｃ、２４Ｄ、および２４Ｅに示す。被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）の結果を、図２５Ａ、２５Ｂ、２５Ｃ、２５Ｄ、および２５Ｅに示す。
【０８７３】
実施例２２：ハムスター食事誘導性異常脂質血症
Ｇｏｌｄｅｎ  Ｓｙｒｉａｎハムスターは、０．５％コレステロールを補足した標準げっ歯類飼料を与えて１週間以内に、高コレステロール血症を発症する（ｖａｎ  Ｈｅｅｋ，Ｍら（２００１）“Ｅｚｅｔｉｍｉｂｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｉｎ  ｒｏｄｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｒｅｓｅｎｃｅ  ａｎｄ  ａｂｓｅｎｃｅ  ｏｆ  ｅｘｏｃｒｉｎｅ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ”，Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １３４：４０９−４１７）。野生型マウスと対照的に、ハムスターは、コレステロールエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）を発現し、ヒトと類似した脂質代謝プロフィールを有する。したがって、ハムスターは、ヒト脂質およびコレステロール代謝の優れた非霊長類モデルであると見なされている（Ｓｐａｄｙ，ＤＫ  ａｎｄ  Ｄｉｅｔｓｃｈｙ，ＪＭ（１９８８）“Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｉｅｔａｒｙ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ａｎｄ  ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｅｐａｔｉｃ  ｌｏｗ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｈａｍｓｔｅｒ”，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  ８１：３００−３０９，Ｓｐａｄｙ，ＤＫ  ａｎｄ  Ｄｉｅｔｓｃｈｙ，ＪＭ（１９８９）“Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｇｉｎｇ  ａｎｄ  ｄｉｅｔａｒｙ  ｆａｔ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌｏｗ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｈａｍｓｔｅｒ”，Ｊ  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ  ３０：５５９−５６９）。このモデルを使用して、インドールおよびインドール関連被験物質の影響を調査した。Ｚｅｔｉａ（エゼチミブ）を、コントロール被験物質として使用した。動物による自由な消費によって表１４に列挙した用量に近い用量が送達されように、被験物質の含有量を計算した（被験物質（ｍｇ）／ｋｇ動物体重／日）。
【０８７４】
Ｇｏｌｄｅｎ  Ｓｙｒｉａｎハムスターを、１０日間の馴化期間にＬａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ  ５００１（Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）で飼育した。一連の研究を通して、飼料と水を自由に与えた。馴化後、採血し、血清コレステロールレベルを測定した。範囲外のコレステロールレベルの動物を、研究から除去し、残りの動物を、マチナル（ｍａｔｉｎａｌ）血清コレステロールに基づいてそれぞれ６匹ずつ８群に無作為に分類した。各動物群を、表１４に記載の被験物質を含むか含まない飼料で飼育した。全飼料を、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ（Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ）から得た。軽く落ち着かせたハムスターに対する眼窩後出血による採血を、ベースライン（無作為化のための食事前投与）ならびに研究７日目、１４日目、おいよび２１日目の点灯からの２時間以内に行った。２８日目に、絶食から２４時間後に、最後の心臓穿刺によって最後の採血を行った。したがって、２８日目の採血由来の結果は、両側分散分析に含めなかった。血清を、総コレステロール、ＬＤＬ−コレステロール、ＨＤＬ−コレステロール、およびトリグリセリド（ＴＧ）含有量について分析した。
表１４：ハムスター食事誘導性異常脂質血症アッセイ飼料
【０８７５】
【化２６７】
2009514892.tif 000244
ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ４．０３．（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して統計分析を行った。全数値において、グラフカラム上の「＊」は、両側分散分析およびその後のボンフェローニの事後検定によって、群２（０．５％コレステロールを補足し、被験物質を添加していないＰｕｒｉｎａ５００１）と値が有意に異なる（ｐ＜０．０５）ことを示す。２８日目（絶食）の値は、両側分散分析に含めなかった。
【０８７６】
被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）、被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）、被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）、被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）、および被験物質ＩＬＹ４０１７（ＩＬＹ−Ｖ−３７）の結果を、図２６Ａおよび２６Ｂに示す。
【０８７７】
実施例２３：毒物学
本研究の目的は、経口細管栄養による連続して５日間マウスに毎日投与した場合のインドールおよびインドール関連被験物質の毒性を評価することであった。
【０８７８】
毒性評価は、死亡率、臨床的徴候、体重、飼料消費、臨床病理学、および巨視的病変データに基づいた。
【０８７９】
全動物は、予定の屠殺日に生存していた。処置に関連する臨床所見は認められなかった。体重および飼料消費データに顕著な変化は無かった。
【０８８０】
臨床病理学データは、一般に、特徴がなく、群間で類似していた。ビヒクルコントロール群と任意の被験物質（ＩＬＹ４００８、ＩＬＹ４０１１、ＩＬＹ４０１３、ＩＬＹ４０１６、およびＩＬＹ４０１７）の投与に寄与し得る処置群との間に相違はなかった。
【０８８１】
剖検において巨視的所見は認められなかった。本研究で使用した投与レベルでは、任意の被験物質に関連する毒性の証拠は無かった。
【０８８２】
非毒性所見は、低吸収または非吸収の特徴を有する実施形態と一致する。
【０８８３】
本明細書中に記載の全ての刊行物、特許、および特許出願は、各刊行物、特許、および特許出願が参考として組み込まれるように具体的且つ個別に示されるのと同一の程度に、本明細書中に参考として組み込まれる。
【０８８４】
添付の特許請求の範囲の精神または範囲を逸脱することなく、多数の変更形態および修正形態を実施可能であり、かかる変更形態および修正形態が本発明の範囲内であることが意図されると当業者に認識され得る。
【図面の簡単な説明】
【０８８５】
【図１Ａ】図１Ａ〜１Ｄは、（ｉ）ホスホリパーゼの脂質−水界面との相互作用（図１Ａ）；（ｉｉ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターの脂質−水界面との相互作用（図１Ｂ）；（ｉｉｉ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼ酵素との相互作用（図１Ｃ）；および（ｉｖ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターの脂質−水界面およびホスホリパーゼ酵素の両方との相互作用（図１Ｄ）の略図である。
【図１Ｂ】図１Ａ〜１Ｄは、（ｉ）ホスホリパーゼの脂質−水界面との相互作用（図１Ａ）；（ｉｉ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターの脂質−水界面との相互作用（図１Ｂ）；（ｉｉｉ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼ酵素との相互作用（図１Ｃ）；および（ｉｖ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターの脂質−水界面およびホスホリパーゼ酵素の両方との相互作用（図１Ｄ）の略図である。
【図１Ｃ】図１Ａ〜１Ｄは、（ｉ）ホスホリパーゼの脂質−水界面との相互作用（図１Ａ）；（ｉｉ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターの脂質−水界面との相互作用（図１Ｂ）；（ｉｉｉ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼ酵素との相互作用（図１Ｃ）；および（ｉｖ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターの脂質−水界面およびホスホリパーゼ酵素の両方との相互作用（図１Ｄ）の略図である。
【図１Ｄ】図１Ａ〜１Ｄは、（ｉ）ホスホリパーゼの脂質−水界面との相互作用（図１Ａ）；（ｉｉ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターの脂質−水界面との相互作用（図１Ｂ）；（ｉｉｉ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターのホスホリパーゼ酵素との相互作用（図１Ｃ）；および（ｉｖ）非吸収ホスホリパーゼインヒビターの脂質−水界面およびホスホリパーゼ酵素の両方との相互作用（図１Ｄ）の略図である。
【図２】図２は、ホスホリパーゼ阻害部分に共有結合しているポリマー部分（「Ｉ＊」と略記）を含むホスホリパーゼインヒビターの略図であり、ここで、ポリマー部分は可溶性または不溶性であるものとして示され、さらに、胃腸の脂質小胞の近傍の胃腸液におけるホスホリパーゼインヒビターとホスホリパーゼ−Ａ２との相互作用を示す。
【図３Ａ】図３Ａ〜図３Ｃは、（「Ｉ＊」によって模式的に表される）１以上のホスホリパーゼ阻害部分に共有結合したポリマー部分を含むホスホリパーゼインヒビターを説明する模式図であり、ここで、（ｉ）ホスホリパーゼインヒビターは、（疎水性ポリマー部分が脂質二重層と実質的に一体化されていることで示される）脂質小胞の脂質−水界面とインヒビターが会合するように適合された疎水性ポリマーを含み（図３Ａ）；（ｉｉ）ホスホリパーゼインヒビターは、第１の疎水性ブロックおよび第２の親水性ブロックを有するポリマー部分を含み、第２の親水性ブロックは、インヒビターが、（疎水性ブロックは脂質二重層と実質的に一体化されており、親水性ブロックは脂質二重層を囲む水相内で実質的に会合していることで示される）脂質小胞の脂質−水界面と会合するように適合されたホスホリパーゼ阻害部分に対して基部側にあり（図３Ｂ）；および（ｉｉｉ）ホスホリパーゼインヒビターは２つの阻害部分に共有結合し、かつインヒビターが、（疎水性ポリマーは脂質二重層と実質的に一体化しており、かつそれを通じてループを形成していることで示される）脂質小胞の脂質−水界面と会合するように適合された疎水性ポリマー部分を含み（図３Ｃ）；およびいずれの場合にも（ｉ）、および（ｉｉｉ）において、阻害部分と、小胞表面に対して実質的に基部側にあるホスホリパーゼ−Ａ２との間の相互作用を可能とする。
【図３Ｂ】図３Ａ〜図３Ｃは、（「Ｉ＊」によって模式的に表される）１以上のホスホリパーゼ阻害部分に共有結合したポリマー部分を含むホスホリパーゼインヒビターを説明する模式図であり、ここで、（ｉ）ホスホリパーゼインヒビターは、（疎水性ポリマー部分が脂質二重層と実質的に一体化されていることで示される）脂質小胞の脂質−水界面とインヒビターが会合するように適合された疎水性ポリマーを含み（図３Ａ）；（ｉｉ）ホスホリパーゼインヒビターは、第１の疎水性ブロックおよび第２の親水性ブロックを有するポリマー部分を含み、第２の親水性ブロックは、インヒビターが、（疎水性ブロックは脂質二重層と実質的に一体化されており、親水性ブロックは脂質二重層を囲む水相内で実質的に会合していることで示される）脂質小胞の脂質−水界面と会合するように適合されたホスホリパーゼ阻害部分に対して基部側にあり（図３Ｂ）；および（ｉｉｉ）ホスホリパーゼインヒビターは２つの阻害部分に共有結合し、かつインヒビターが、（疎水性ポリマーは脂質二重層と実質的に一体化しており、かつそれを通じてループを形成していることで示される）脂質小胞の脂質−水界面と会合するように適合された疎水性ポリマー部分を含み（図３Ｃ）；およびいずれの場合にも（ｉ）、および（ｉｉｉ）において、阻害部分と、小胞表面に対して実質的に基部側にあるホスホリパーゼ−Ａ２との間の相互作用を可能とする。
【図３Ｃ】図３Ａ〜図３Ｃは、（「Ｉ＊」によって模式的に表される）１以上のホスホリパーゼ阻害部分に共有結合したポリマー部分を含むホスホリパーゼインヒビターを説明する模式図であり、ここで、（ｉ）ホスホリパーゼインヒビターは、（疎水性ポリマー部分が脂質二重層と実質的に一体化されていることで示される）脂質小胞の脂質−水界面とインヒビターが会合するように適合された疎水性ポリマーを含み（図３Ａ）；（ｉｉ）ホスホリパーゼインヒビターは、第１の疎水性ブロックおよび第２の親水性ブロックを有するポリマー部分を含み、第２の親水性ブロックは、インヒビターが、（疎水性ブロックは脂質二重層と実質的に一体化されており、親水性ブロックは脂質二重層を囲む水相内で実質的に会合していることで示される）脂質小胞の脂質−水界面と会合するように適合されたホスホリパーゼ阻害部分に対して基部側にあり（図３Ｂ）；および（ｉｉｉ）ホスホリパーゼインヒビターは２つの阻害部分に共有結合し、かつインヒビターが、（疎水性ポリマーは脂質二重層と実質的に一体化しており、かつそれを通じてループを形成していることで示される）脂質小胞の脂質−水界面と会合するように適合された疎水性ポリマー部分を含み（図３Ｃ）；およびいずれの場合にも（ｉ）、および（ｉｉｉ）において、阻害部分と、小胞表面に対して実質的に基部側にあるホスホリパーゼ−Ａ２との間の相互作用を可能とする。
【図４】図４は、ホスホリパーゼ−Ａ２酵素（ＰＬＡ２）がリン脂質の対応するリゾリン脂質への加水分解を触媒する化学反応の模式図である。
【図５】図５は、本明細書中においてはＩＬＹ−４００１およびメチルインドキサムともいう［２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸］についての化学式である。
【図６Ａ】図６Ａ〜６Ｄは、インドール化合物（図６Ａ、図６Ｃ、および図６Ｄ）およびインドール関連化合物（図６Ｂ）を示す化学式を含む略図である。
【図６Ｂ】図６Ａ〜６Ｄは、インドール化合物（図６Ａ、図６Ｃ、および図６Ｄ）およびインドール関連化合物（図６Ｂ）を示す化学式を含む略図である。
【図６Ｃ】図６Ａ〜６Ｄは、インドール化合物（図６Ａ、図６Ｃ、および図６Ｄ）およびインドール関連化合物（図６Ｂ）を示す化学式を含む略図である。
【図６Ｄ】図６Ａ〜６Ｄは、インドール化合物（図６Ａ、図６Ｃ、および図６Ｄ）およびインドール関連化合物（図６Ｂ）を示す化学式を含む略図である。
【図７】図７は、実施例１Ａに記載のＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）の全合成スキームを概説した化学式を含む略図である。
【図８Ａ】図８Ａおよび８Ｂは、ＰＬＡ２  ＩＢ酵素阻害を評価するためのｉｎ−ｖｉｔｒｏ蛍光アッセイの略図（図８Ａ）およびＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）を評価するためにこのアッセイで使用した図６Ａの結果を示すグラフ（図８Ｂ）である。
【図８Ｂ】図８Ａおよび８Ｂは、ＰＬＡ２  ＩＢ酵素阻害を評価するためのｉｎ−ｖｉｔｒｏ蛍光アッセイの略図（図８Ａ）およびＩＬＹ−４００１（２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸）を評価するためにこのアッセイで使用した図６Ａの結果を示すグラフ（図８Ｂ）である。
【図９】図９Ａおよび９Ｂは、ＩＬＹ−４００１［２−（３−（２−アミノ−２−オキソアセチル）−１−（ビフェニル−２−イルメチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）酢酸］（図９Ａ）についての、および傍細胞輸送および経細胞輸送コントロールとしての、Ｌｕｃｉｆｅｒ  Ｙｅｌｌｏｗおよびプロプラノロール（図９Ｂ）についての、実施例６Ｂのｉｎ−ｖｉｔｒｏのＣａｃｏ−２透過性研究からの結果を示すグラフである。
【図１０】図１０は、実施例１Ｃに記載した３−（３−アミノオキサリル−１−ビフェニル−２−イルメチル−４−カルボキシメトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イル）−プロピロン酸を調製するための全合成スキームを概説する化学式を含めた模式図である。
【図１１】図１１は、実施例１Ｄに記載した、ポリマー連結ＩＬＹ−４００１、すなわち、［３−アミノオキサリル−２−メチル−１−（２’−ビニル−ビフェニル−２−イルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸、スチレン、およびスチレンスルホン酸ナトリウム塩のランダムコポリマーを調製するための全合成スキームを概説する化学式を含めた模式図である。
【図１２】図１２は、実施例２に記載した、それによって、ＩＬＹ−４００１に結合基を設けて、［３−アミノオキサリル−２−メチル−１−（４−ビニル−ベンジル）−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ］−酢酸（２１）を形成する全合成スキーム；（１−アクリロイル−３−アミノオキサリル−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ）−酢酸（２３）の合成；｛３−アミノオキサリル−２−メチル−１−［２−（ピラゾール−１−カルボチオイルスルファニル）プロピオニル］−１Ｈ−インドール−４−イルオキシ｝−酢酸（２６）の合成を概説する化学式を含めた模式図である。
【図１３−１】図１３Ａ〜１３Ｄは：野生型コントロール群（コントロール）と比較した、および遺伝子欠損ＰＬＡ２（−／−）ノックアウトマウス（ＰＬＡ２  ＫＯ）と比較した、低用量（４００１−Ｌ）および高用量（４００１−Ｈ）においてＩＬＹ−４００１を受けるマウスの群での体重増加を示す実施例１０Ａの結果を説明するグラフ（図１３Ａ）；野生型コントロール群（コントロール）と比較した、および遺伝子欠損ＰＬＡ２（−／−）ノックアウトマウス（ＰＬＡ２  ＫＯ）と比較した、低用量（４００１−Ｌ）および高用量（４００１−Ｈ）でＩＬＹ−４００１を受けるマウスの群での空腹時血清グルコースレベルを示す実施例１０Ｂの結果を説明するグラフ（図１３Ｂ）；および野生型コントロール群（コントロール）と比較した、および遺伝子欠損ＰＬＡ２（−／−）ノックアウトマウス（ＰＬＡ２  ＫＯ）と比較した、低用量（４００１−Ｌ）および高用量（４００１−Ｈ）においてＩＬＹ−４００１を受けるマウスの群での血清コレステロールレベル（図１３Ｃ）および血清トリグリセリドレベル（図１３Ｄ）を示す実施例１０Ｃの結果を説明するグラフを含めた、実施例１０のｉｎ−ｖｉｖｏ研究の結果をまとめるグラフである。
【図１３−２】図１３Ａ〜１３Ｄは：野生型コントロール群（コントロール）と比較した、および遺伝子欠損ＰＬＡ２（−／−）ノックアウトマウス（ＰＬＡ２  ＫＯ）と比較した、低用量（４００１−Ｌ）および高用量（４００１−Ｈ）においてＩＬＹ−４００１を受けるマウスの群での体重増加を示す実施例１０Ａの結果を説明するグラフ（図１３Ａ）；野生型コントロール群（コントロール）と比較した、および遺伝子欠損ＰＬＡ２（−／−）ノックアウトマウス（ＰＬＡ２  ＫＯ）と比較した、低用量（４００１−Ｌ）および高用量（４００１−Ｈ）でＩＬＹ−４００１を受けるマウスの群での空腹時血清グルコースレベルを示す実施例１０Ｂの結果を説明するグラフ（図１３Ｂ）；および野生型コントロール群（コントロール）と比較した、および遺伝子欠損ＰＬＡ２（−／−）ノックアウトマウス（ＰＬＡ２  ＫＯ）と比較した、低用量（４００１−Ｌ）および高用量（４００１−Ｈ）においてＩＬＹ−４００１を受けるマウスの群での血清コレステロールレベル（図１３Ｃ）および血清トリグリセリドレベル（図１３Ｄ）を示す実施例１０Ｃの結果を説明するグラフを含めた、実施例１０のｉｎ−ｖｉｖｏ研究の結果をまとめるグラフである。
【図１４−１】図１４Ａ、１４Ｂ、１４Ｃ、および１４Ｄは、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス肥満モデルにおける被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）の結果を示すグラフである。
【図１４−２】図１４Ａ、１４Ｂ、１４Ｃ、および１４Ｄは、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス肥満モデルにおける被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）の結果を示すグラフである。
【図１５−１】図１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、および１５Ｄは、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス肥満モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）の結果を示すグラフである。
【図１５−２】図１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、および１５Ｄは、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス肥満モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）の結果を示すグラフである。
【図１６−１】図１６Ａ、１６Ｂ、および１６Ｃは、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス肥満モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）の結果を示すグラフである。
【図１６−２】図１６Ａ、１６Ｂ、および１６Ｃは、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス肥満モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）の結果を示すグラフである。
【図１７−１】図１７Ａ、１７Ｂ、および１７Ｃは、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス肥満モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）の結果を示すグラフである。
【図１７−２】図１７Ａ、１７Ｂ、および１７Ｃは、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス肥満モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）の結果を示すグラフである。
【図１８−１】図１８Ａ、１８Ｂ、１８Ｃ、１８Ｄ、１８Ｅ、および１８Ｆは、ＬＤＬ受容体ノックアウトマウスモデルにおける被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）の結果を示すグラフである。
【図１８−２】図１８Ａ、１８Ｂ、１８Ｃ、１８Ｄ、１８Ｅ、および１８Ｆは、ＬＤＬ受容体ノックアウトマウスモデルにおける被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）の結果を示すグラフである。
【図１８−３】図１８Ａ、１８Ｂ、１８Ｃ、１８Ｄ、１８Ｅ、および１８Ｆは、ＬＤＬ受容体ノックアウトマウスモデルにおける被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）の結果を示すグラフである。
【図１９−１】図１９Ａ、１９Ｂ、１９Ｃ、１９Ｄ、１９Ｅ、および１９Ｆは、ＬＤＬ受容体ノックアウトマウスモデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）の結果を示すグラフである。
【図１９−２】図１９Ａ、１９Ｂ、１９Ｃ、１９Ｄ、１９Ｅ、および１９Ｆは、ＬＤＬ受容体ノックアウトマウスモデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）の結果を示すグラフである。
【図１９−３】図１５Ｅおよび１５Ｆは、ＬＤＬ受容体ノックアウトマウスモデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）の結果を示すグラフである。
【図２０−１】図２０Ａ、２０Ｂ、２０Ｃ、および２０Ｄは、ＬＤＬ受容体ノックアウトマウスモデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）の結果を示すグラフである。
【図２０−２】図２０Ａ、２０Ｂ、２０Ｃ、および２０Ｄは、ＬＤＬ受容体ノックアウトマウスモデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）の結果を示すグラフである。
【図２１−１】図２１Ａ、２１Ｂ、２１Ｃ、および２１Ｄは、ＬＤＬ受容体ノックアウトマウスモデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）の結果を示すグラフである。
【図２１−２】図２１Ａ、２１Ｂ、２１Ｃ、および２１Ｄは、ＬＤＬ受容体ノックアウトマウスモデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）の結果を示すグラフである。
【図２２−１】図２２Ａ、２２Ｂ、２２Ｃ、２２Ｄ、および２２Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）の結果を示すグラフである。
【図２２−２】図２２Ａ、２２Ｂ、２２Ｃ、２２Ｄ、および２２Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）の結果を示すグラフである。
【図２２−３】図２２Ａ、２２Ｂ、２２Ｃ、２２Ｄ、および２２Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）の結果を示すグラフである。
【図２３−１】図２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｃ、２３Ｄ、および２３Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）の結果を示すグラフである。
【図２３−２】図２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｃ、２３Ｄ、および２３Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）の結果を示すグラフである。
【図２３−３】図２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｃ、２３Ｄ、および２３Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）の結果を示すグラフである。
【図２４−１】図２４Ａ、２４Ｂ、２４Ｃ、２４Ｄ、および２４Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）の結果を示すグラフである。
【図２４−２】図２４Ａ、２４Ｂ、２４Ｃ、２４Ｄ、および２４Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）の結果を示すグラフである。
【図２４−３】図２４Ａ、２４Ｂ、２４Ｃ、２４Ｄ、および２４Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）の結果を示すグラフである。
【図２５−１】図２５Ａ、２５Ｂ、２５Ｃ、２５Ｄ、および２５Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）の結果を示すグラフである。
【図２５−２】図２５Ａ、２５Ｂ、２５Ｃ、２５Ｄ、および２５Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）の結果を示すグラフである。
【図２５−３】図２５Ａ、２５Ｂ、２５Ｃ、２５Ｄ、および２５Ｅは、ＮＯＮｃＮＺＯ１０／ＬｔＪマウスＩＩ型糖尿病モデルにおける被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）の結果を示すグラフである。
【図２６Ａ】図２６Ａおよび２６Ｂは、ハムスター食事誘導性異常脂質血症モデルにおける、被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）、被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）、被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）、被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）、および被験物質ＩＬＹ４０１７（ＩＬＹ−Ｖ−３７）の結果を示すグラフである。
【図２６Ｂ】図２６Ａおよび２６Ｂは、ハムスター食事誘導性異常脂質血症モデルにおける、被験物質ＩＬＹ４０１６（ＩＬＹ−ＩＶ−４０）、被験物質ＩＬＹ４００８（ＩＬＹ−Ｖ−２６）、被験物質ＩＬＹ４０１３（ＩＬＹ−Ｖ−３２）、被験物質ＩＬＹ４０１１（ＩＬＹ−Ｖ−３０）、および被験物質ＩＬＹ４０１７（ＩＬＹ−Ｖ−３７）の結果を示すグラフである。
【図１Ａ】
2009514892.tif 000273
【図１Ｂ】
2009514892.tif 000274
【図１Ｃ】
2009514892.tif 000275
【図１Ｄ】
2009514892.tif 000276
【図２】
2009514892.tif 000277
【図３Ａ】
2009514892.tif 000278
【図３Ｂ】
2009514892.tif 000279
【図３Ｃ】
2009514892.tif 000280
【図４】
2009514892.tif 000281
【図５】
2009514892.tif 000282
【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
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【図７】
2009514892.tif 000287
【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
2009514892.tif 000289
【図９】
2009514892.tif 000290
【図１０】
2009514892.tif 000291
【図１１】
2009514892.tif 000292
【図１２】
2009514892.tif 000293
【図１３−１】
2009514892.tif 000294
【図１３−２】
2009514892.tif 000295
【図１４−１】
2009514892.tif 000296
【図１４−２】
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【図１５−１】
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【図１５−２】
2009514892.tif 000299
【図１６−１】
2009514892.tif 000300
【図１６−２】
2009514892.tif 000301
【図１７−１】
2009514892.tif 000302
【図１７−２】
2009514892.tif 000303
【図１８−１】
2009514892.tif 000304
【図１８−２】
2009514892.tif 000305
【図１８−３】
2009514892.tif 000306
【図１９−１】
2009514892.tif 000307
【図１９−２】
2009514892.tif 000308
【図１９−３】
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【図２０−１】
2009514892.tif 000310
【図２０−２】
2009514892.tif 000311
【図２１−１】
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【図２１−２】
2009514892.tif 000313
【図２２−１】
2009514892.tif 000314
【図２２−２】
2009514892.tif 000315
【図２２−３】
2009514892.tif 000316
【図２３−１】
2009514892.tif 000317
【図２３−２】
2009514892.tif 000318
【図２３−３】
2009514892.tif 000319
【図２４−１】
2009514892.tif 000320
【図２４−２】
2009514892.tif 000321
【図２４−３】
2009514892.tif 000322
【図２５−１】
2009514892.tif 000323
【図２５−２】
2009514892.tif 000324
【図２５−３】
2009514892.tif 000325
【図２６Ａ】
2009514892.tif 000326
【図２６Ｂ】
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【手続補正書】
【提出日】平成20年7月28日(2008.7.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
状態を処置するための、有効量のホスホリパーゼインヒビターを含む組成物であって、該ホスホリパーゼインヒビターは、胃腸内腔に存在する分泌されたカルシウム依存性ホスホリパーゼ−Ａ２の活性を阻害し、該ホスホリパーゼインヒビターは置換された有機化合物またはその塩を含み、該置換された有機化合物は、式（Ｄ−Ｉ）：
【化１】
2009514892.tif 000328
によって表されるように、独立して選択される結合部分Ｌを介して多官能性架橋部分に連結された２以上の独立して選択されたホスホリパーゼ阻害部分Ｚを含み、
ここで、ｎは０〜１０の整数であり、
該多官能性架橋部分は該２以上のホスホリパーゼ阻害部分が結合する少なくとも（ｎ＋２）の反応部位を有し、
ここで、投与後に該ホスホリパーゼインヒビターが胃腸内腔に留まり、そして胃腸内腔を通過するように、該インヒビターは胃腸内腔に局在化され、
該組成物は、被験体に経口投与される、組成物。
【請求項２】
前記多官能性架橋部分は、オリゴマー部分でもポリマー部分でもない、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記多官能性架橋部分は、アルキル、フェニル、アリール、アルケニル、アルキニル、複素環基、アミン、エーテル、スルフィド、ジスルフィド、ヒドラジン、ならびに酸素、硫黄、スルホニル、ホスホニル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミン、チオール、エーテル、カルボニル、カルボキシル、エステル、アミド、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、複素環基、およびこれらの組合せを含む部分で置換された前記のいずれかよりなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記ホスホリパーゼインヒビターは、ホスホリパーゼ−Ａ２ＩＢを阻害する、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
実質的に全てのホスホリパーゼインヒビターが、胃腸内腔に局在化される、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
被験体への投与に際して、前記ホスホリパーゼインヒビターの少なくとも約８０％が胃腸内腔に留まるように、該ホスホリパーゼインヒビターが胃腸内腔に局在化される請求項１記載の組成物。
【請求項７】
被験体への投与に際して、前記ホスホリパーゼインヒビターの少なくとも約９０％が胃腸内腔に留まるように、該ホスホリパーゼインヒビターが胃腸内腔に局在化される請求項１記載の組成物。
【請求項８】
前記ホスホリパーゼインヒビターが、胃腸管の少なくとも胃、十二指腸および小腸を通過する間に安定である、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼ−Ａ２の活性を阻害するが、他の胃腸粘膜結合ホスホリパーゼを実質的に阻害しない、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記状態が、インスリン関連状態、体重関連状態、コレステロール関連状態、および異常脂質血症関連状態からなる群より選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
有効量のホスホリパーゼインヒビターを用いて、ホスホリパーゼ−Ａ２活性の少なくとも約３０％を阻害する請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
有効量のホスホリパーゼインヒビターを用いて、ホスホリパーゼ−Ａ２の活性の少なくとも約５０％を阻害する請求項１０に記載の組成物。
【請求項１３】
有効量のホスホリパーゼインヒビターを用いて、ホスホリパーゼ−Ａ２活性の少なくとも約７０％を阻害する請求項１０に記載の組成物。
【請求項１４】
前記被験体がヒトである、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１５】
ｎが０〜４の範囲の整数である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
前記ホスホリパーゼインヒビターは二量体化インドール部分を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１７】
前記ホスホリパーゼインヒビターは三量体化インドール部分を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】
被験体の状態を処置するために有効な薬学的組成物であって、該薬学的組成物はホスホリパーゼインヒビターを含み、該ホスホリパーゼインヒビターは置換された有機化合物またはその塩を含み、該置換された有機化合物は、式（Ｄ−Ｉ）：
【化１】
2009514892.tif 000329
によって表されるように、独立して選択される結合部分Ｌを介して多官能性架橋部分に連結された２以上の独立して選択されたホスホリパーゼ阻害部分Ｚを含み、
ここで、ｎは０〜１０の整数であり、
該多官能性架橋部分は該２以上のホスホリパーゼ阻害部分が結合する少なくとも（ｎ＋２）の反応部位を有し、
該ホスホリパーゼインヒビターは、胃腸内腔に存在する分泌されたカルシウム依存性ホスホリパーゼの活性を阻害し、
ここで、該被験体への投与後に該ホスホリパーゼインヒビターが胃腸内腔に留まり、そして胃腸内腔を通過するように、該インヒビターは胃腸内腔に局在化される、組成物。
【請求項１９】
前記多官能性架橋部分は、オリゴマー部分でもポリマー部分でもない、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記多官能性架橋部分は、アルキル、フェニル、アリール、アルケニル、アルキニル、複素環基、アミン、エーテル、スルフィド、ジスルフィド、ヒドラジン、ならびに酸素、硫黄、スルホニル、ホスホニル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミン、チオール、エーテル、カルボニル、カルボキシル、エステル、アミド、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、複素環基、およびこれらの組合せを含む部分で置換された前記のいずれかよりなる群から選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２１】
前記ホスホリパーゼインヒビターは、ホスホリパーゼ−Ａ２ＩＢを阻害する、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２２】
前記ホスホリパーゼインヒビターは、ホスホリパーゼ−Ａ２ＩＢを可逆的に阻害する、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２３】
前記ホスホリパーゼインヒビターは、ホスホリパーゼ−Ａ２ＩＢを不可逆的に阻害する、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２４】
前記ホスホリパーゼインヒビターは、ホスホリパーゼ−Ａ２およびホスホリパーゼＢを阻害する、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２５】
前記ホスホリパーゼインヒビターは、実質的にはリパーゼを阻害しない、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２６】
前記ホスホリパーゼインヒビターは、実質的にはホスホリパーゼＢを阻害しない、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２７】
前記ホスホリパーゼインヒビターがホスホリパーゼＡ２の活性を阻害するが、リン脂質を異化する活性を有する他の胃腸ホスホリパーゼを実質的には阻害しない、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２８】
前記ホスホリパーゼインヒビターはホスホリパーゼＡ２の活性を阻害するが、他の胃腸粘膜結合ホスホリパーゼを実質的に阻害しない、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２９】
前記ホスホリパーゼインヒビターは、約−５未満の透過係数を有する、請求項１８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記ホスホリパーゼインヒビターは少なくとも１つのインドール部分を含む、請求項１８に記載の組成物。
【請求項３１】
前記状態が、インスリン関連状態、体重関連状態、コレステロール関連状態、および異常脂質血症関連状態からなる群より選択される、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
ｎが０〜４の範囲の整数である、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３３】
前記ホスホリパーゼインヒビターは二量体化インドール部分を含む、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３４】
前記ホスホリパーゼインヒビターは三量体化インドール部分を含む、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３５】
前記被験体がヒトである、請求項３０に記載の組成物。
【国際調査報告】
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