(57)【要約】  様々な態様において、本発明は、例えば、必要とする患者にＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を投与することを含む、関節リウマチを含む自己免疫疾患の治療のための方法及び組成物を提供する。ある態様において、当該ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子は、ＢＩｙＳ及びＡＰＲＩＬの増殖誘導機能を鈍く、抑制又は阻害するために十分量で投与される。
2009537563.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者の関節リウマチの治療方法であって、以下の：
（ｉ）ＢｌｙＳに結合するＴＡＣＩ細胞外ドメイン又はその断片；並びに
（ｉｉ）ヒト免疫グロブリン定常領域、
を含む融合分子を含む組成物を、当該関節を治療するために有効量で投与することを含む、上記方法。
【請求項２】
前記ＴＡＣＩ細胞外ドメインが配列番号１に示される配列を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＴＡＣＩ細胞外ドメインが、配列番号１の配列と少なくとも５０％一致する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ヒト免疫グロブリン定常領域が、配列番号２に示される配列を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記組成物が、患者の体重１ｋｇあたり約０．０１ｍｇ〜約１０ｍｇの量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記組成物が、前記量で、１２週間間隔の間に７回投与される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記組成物が前記量で１２週間間隔の間に７回投与され、その後、前記組成物が前記量でさらに投与される、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記組成物が、前記量で、４週間間隔の間に３回投与される、請求項５に記載の方法。
【請求項９】
前記組成物が前記量で４週間間隔の間に３回投与され、その後、前記組成物が前記量でさらに投与される、請求項５に記載の方法。
【請求項１０】
前記組成物が、２〜３０週間の間に隔週、前記量で投与される、請求項５に記載の方法。
【請求項１１】
前記方法が、前記患者に第２薬剤を併用投与することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記第２薬剤が、ヒドロキシクロロキン、スルファラジン、メトトレキサート、レフルノミド、リツキシマブ、インフリキシマブ、アザチオプリン、Ｄ−ペニシラミン、ゴールド（経口又は筋肉内）、ミノサイクリン、シクロスポリン、コルチコステロイド、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ）、サイトカイン、抗サイトカイン、及びインターフェロンからなる群より選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記組成物が、皮下、経口又は静脈内で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記患者が人間である、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は２００６年５月１５日に出願された米国仮出願第６０／７４７，２７０号に基づく利益を主張し、当該基礎出願をここに全体として本願明細書中に援用する。
【０００２】
本発明の分野
様々な態様において、本発明は、ＴＮＦファミリーの増殖因子の機能を阻害するＴＡＣＩ−Ｉｇ融合タンパク質を投与することを含む、自己免疫疾患又は免疫系の障害を治療するための方法及び組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
ＢｌｙＳリガンド／受容体ファミリー
３つの受容体、ＴＡＣＩ（膜貫通活性化因子又はカルシウム変調サイクロフィンリガンド相互作用因子）、ＢＣＭＡ（Ｂ細胞成熟抗原）、及びＢＡＦＦ−Ｒ（ＴＮＦファミリーに属する、Ｂ細胞活性因子のための受容体）は、２つの増殖因子、ＢｌｙＳ（Ｂリンパ球刺激因子）及びＡＰＲＩＬ（増殖誘導リガンド）の固有の結合親和力を有するものと同定されている（Ｍａｒｓｔｅｒｓら，Ｃｕｒｒ  Ｂｉｏｌ  ２０００；１０（１３）：７８５−７８８；Ｔｈｏｍｐｓｏｎら，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００１；２９３:２１０８−２１１１）。結果として、ＢｌｙＳは、３つの受容体を通じてシグナルを伝達することができるが、一方ＡＰＲＩＬは、ＴＡＣＩ及びＢＣＭＡのみを通じてシグナルを伝達することが可能である。さらに、ＢＬｙＳ及びＡＰＲＩＬの循環ヘテロ三量体複合体（３つのタンパク質の集団、ＢＬｙＳ及びＡＰＲＩＬの各々の１又は２のコピーを含む）は、全身性免疫ベースのリウマチ障害の患者から摂取された血清サンプル中に同定され、インビトロでＢ細胞増殖を導くことが示されている（Ｒｏｓｃｈｋｅら，Ｊ  ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００２；１６９：４３１４−４３２１）。全３つの受容体のためのＩｇ融合タンパク質のうち、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５のみが、前記ヘテロ三量体複合体の生物活性を阻害した（Ｒｏｓｃｈｋｅら，Ｊ  ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００２；１６９：４３１４−４３２１）。
【０００４】
ＢＬｙＳ、及びＡＰＲＩＬは、Ｂ細胞成熟、増殖、及び生存の強力な刺激因子である（Ｇｒｏｓｓら，Ｎａｔｕｒｅ ２０００；４０４：９９５−９９９．Ｇｒｏｓｓら，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２００１；１５（２）：２８９−３０２．Ｇｒｏｏｍら，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  ２００２；１０９（１）：５９−６８）。ＢＬｙＳ、及びＡＰＲＩＬは、自己免疫疾患、特にＢ細胞に関するものの持続性のための必要となり得る。高レベルのＢＬｙＳを発現するように処理されたトランスジェニックマウスは、免疫細胞障害を示し、全身性紅斑性狼瘡の患者にみられるものと似たような症状を示す（Ｃｈｅｓｏｎら，Ｒｅｖｉｓｅｄ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｂｌｏｏｄ  １９９６；８７：４９９０−４９９７．Ｃｈｅｅｍａら，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ  ２００１；４４（６）：１３１３-１３１９）。
【０００５】
同様に、ＢＬｙＳ／ＡＰＲＩＬの増大レベルは、ＳＬＥ患者、及び関節リウマチのような様々な自己免疫疾患の患者から採られた血清サンプル中に測定されており（Ｒｏｓｃｈｋｅら，Ｊ  ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００２；１６９：４３１４−４３２１；Ｍａｒｉｅｔｔｅ  Ｘ．，Ａｎｎ  Ｒｈｅｕｍ  Ｄｉｓ  ２００３；６２（２）：１６８−１７１；Ｈａｈｎｅら，Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １９９８；１８８（６）：１１８５−１１９０）、動物モデルからヒトへのＢＬｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬ、及びＢ細胞媒介疾患の協会を拡大している。
【０００６】
関節リウマチ
関節リウマチ（ＲＡ）は、末梢関節の非特異的で、通常左右対称の炎症により特徴付けられる慢性炎症性疾患であり、関節及び関節周辺の構造の進行性破壊をもたらす。人口の約１％が影響を受け、男性の２〜３倍超が女性である。当該疾患の正確な因果関係はわかりにくいが、強力な証拠はＲＡが自己免疫疾患であることを示唆する。いくつかの自己抗体は、より重篤な疾患に頻繁に関連するリウマチ因子（ＲＦ）、抗核因子、及び天然コラーゲンＩＩ型とシトルリン化ペプチドに対する抗体を含むＲＡに関連する。
【０００７】
ＲＡの発症において重要となり得る顕著な免疫異常は、滑液細胞及び血管炎にみつかった免疫複合体を含む。これらの複合体への寄与は、滑膜組織に浸透する及び炎症性サイトカインを産生する血しょう細胞、及びＴヘルパー細胞により産生される抗体（例えばＲＦ）である。マクロファージ、及びそのサイトカイン（例えば、ＴＮＦ、ＧＭＣＳ−Ｆ）も、罹患滑膜において豊富である。接着分子の増大レベルは、炎症細胞移動、及び滑膜組織内の滞留に寄与する。増大されたマクロファージ由来の上皮細胞も、いくつかのリンパ球と共に、有名である。
【０００８】
ＲＡの発症におけるＴ細胞の役割は既に確立されている一方、Ｂ細胞の役割は、よく知られていない。にもかかわらず、Ｂ細胞は、ＲＡ発症において多くの潜在的役割を果たし、抗原提示細胞として作用すること、炎症性サイトカインを分泌すること、リウマチ因子自己抗体産生すること、及びＴ細胞を活性化することを含む。Ｂ細胞の潜在的な役割は、ＲＡ患者において、ＣＤ２０に関するモノクローナル抗体であるリツキシマブを試験する臨床試験の陽性結果によりさらに支持され、メトトレキサート又はシクロホスファミドとの組み合わせで与えられるとき最も顕著である。これらの発見は、Ｂ細胞がＲＡの治療的介入ための適切な標的であることを示唆する。
【０００９】
ＲＡの確立された治療は、ヒドロキシクロロキン、スルファラジン、メトトレキサート、レフルノミド、リツキシマブ、インフリキシマブ、アザチオプリン、Ｄ−ペニシラミン、ゴールド（経口又は筋肉内）、ミノサイクリン、及びシクロスポリン、プレドニゾンの如きコルチコステロイドの如き疾患修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、並びに非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ）を含む。これらの治療は、通常非特異的であり、重大な副作用に頻繁に関連し、そして関節破壊の進行に著しくは影響を与えない。結果として、ＲＡを治療するための新たな方法を開発するための必要性が、当該分野において長年に渡り必要とされている。
【発明の開示】
【００１０】
発明の概要
様々な態様において、本発明は、自己免疫疾患を治療する方法に関する。例証として、本発明の方法は、ヒト免疫グロブリン定常領域、並びにＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合するＴＡＣＩ細胞外ドメイン又はその断片を含む組成物を患者に投与することを含む。
【００１１】
他の態様において、本発明は、ＴＡＣＩ細胞外ドメイン、又はＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合する能力を保持するそのいずれかの断片を含むＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を使用して、ＲＡを含む自己免疫疾患を治療する方法を含む。
【００１２】
他の態様において、本発明は、ヒト免疫グロブリン定常鎖、及びＴＡＣＩ細胞外ドメイン、あるいはＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合するＴＡＣＩ細胞外ドメインの断片を含む融合分子の有効量を必要とする患者に投与することを含む、ＲＡを治療する方法を含む。ある態様において、ＴＡＣＩの細胞外ドメインの断片は、１又は２のシステイン反復モチーフを含む。他の態様において、前記断片は、ＴＡＣＩの細胞外ドメインの３０〜１１０のアミノ酸を含む断片である。さらに他の態様において、前記断片は、ＴＡＣＩの細胞外ドメインの１〜１５４のアミノ酸を含む断片である（配列番号１）。
【００１３】
他の態様において、本発明は、配列番号２の配列を有するヒト免疫グロブリン定常領域であるＦｃ５、及び配列番号１の配列を有するＴＡＣＩ細胞外ドメインを含む融合ポリペプチドＴＡＣＩ−Ｆｃ５を含む組成物を患者に投与することによりＲＡを治療する方法を含む。
【００１４】
本発明の他の態様において、本発明は、配列番号２の配列を有するヒト免疫グロブリン定常領域。並びにＢｌｙＳ、及び／又はＡＰＲＩＬに結合し、配列番号１の配列と少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は少なくとも９９％一致するポリペプチドを含む融合ポリペプチドを含む組成物を患者に投与することによりＲＡを治療する方法を含む。
【００１５】
他の自己免疫疾患は、ヒト免疫グロブリン定常鎖、並びにＴＡＣＩ細胞外ドメイン又はＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合するＴＡＣＩ細胞外ドメインの断片を含む融合ポリペプチドを患者に投与することによる本発明の方法により治療され得る。かかる自己免疫疾患は、非制限的に、全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）、グレーブス病、Ｉ型及びＩＩ型糖尿病、多発性硬化症、シェーグレン症候群、強皮症、糸球体腎炎、移植による拒絶反応、例えば、器官及び組織同種並びに異種移植による拒絶反応、そして移植片対宿主拒絶反応を含む。
【００１６】
他の態様において、本発明の方法は、患者の体重１ｋｇにつき約０．０１ｍｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量でＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子をＲＡの患者に投与することを含む。当該ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子は、所定の間隔で繰り返し投与され得る。例証として、当該分子は、１２週間の間に７回又はそれ超の回数、投与され得る。このＴＡＣＩ−Ｉｇ融合ポリペプチドによる初期治療に続いて、少なくともさらに２週間超の間に隔週（１週間おき）頻度でポリペプチドが投与され得る、例えば、当該ポリペプチドは、さらに２〜３０週間の間に隔週頻度で投与され得る。あるいは、当該ポリペプチドは、週１回又は毎日の頻度で投与され得る。
【００１７】
本発明の方法に従って、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合ポリペプチドは、皮下、経口又は静脈内で、並びに他の薬剤と組み合わせで、ＲＡの患者に投与され得る。かかる薬剤は、非制限的にヒドロキシクロロキン、スルファラジン、メトトレキサート、レフルノミド、リツキシマブ、インフリキシマブ、アザチオプリン、Ｄ−ペニシラミン、ゴールド（経口又は筋肉内）、ミノサイクリン、及びシクロスポリンの如きＤＭＡＲＤ、プレドニゾンの如きコルチコステロイド、ＮＳＡＩＤＳ、サイトカイン、抗サイトカイン、並びにインターフェロンを含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
本発明の詳細な説明
様々な態様において、本発明は、ＢｌｙＳ、及び／又はＡＰＲＩＬとそれらの受容体との相互作用を阻害することによる、患者の自己免疫疾患を治療するための方法に関する。当該患者は、ヒトの如き哺乳類となり得る。
【００１９】
ある態様において、前記方法は、（１）ＴＡＣＩ細胞外ドメイン又はＢｌｙＳ及び／若しくはＡＰＲＩＬと結合するその断片と少なくとも部分的に一致するドメインを含むポリペプチド、並びに（２）ヒト免疫グロブリン定常鎖を含む阻害剤を利用する。
【００２０】
ある態様において、本発明の方法は、ヒト免疫グロブリン定常鎖、及びＴＡＣＩ細胞外ドメインとの少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、あるいは少なくとも約９９％の配列同一性を有するいずれかのポリペプチドを含む融合分子を利用する。米国特許番号第５，９６９，１０２号、同第６，３１６，２２２号、及び同第６，５００，４２８号、並びに米国特許第特許出願第０９／５６９，２４５号、及び同第０９／６２７，２０６号（その全内容は、本願明細書中に援用される。）は、ＴＡＣＩの細胞外ドメインのための配列、並びにＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬを含むＴＡＣＩリガンドと相互作用するＴＡＣＩ細胞外ドメインの特異的断片を開示する。ＴＡＣＩの細胞外ドメインのある例証的な断片は、１又は２のシステイン反復モチーフを含む。他の例証的な断片は、ＴＡＣＩの細胞外ドメインの３０〜１００アミノ酸又はその断片を含む断片である。さらに他の例証的な断片は、ＴＡＣＩ（配列番号１）の細胞外ドメインの１−１５４アミノ酸又はその断片を含む断片である。
【００２１】
本発明の方法に有用な他の融合分子は、以下の：ヒト免疫グロブリン定常鎖と完全ＴＡＣＩ細胞外ドメイン又はそのオルソログとの融合ポリペプチド、あるいはヒト免疫グロブリン定常鎖とＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬリガンドと結合できる細胞外ＴＡＣＩドメインのいずれかの断片との融合ポリペプチドを含む。本発明の方法において使用される当該融合分子のいずれかは、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子として言及される。
【００２２】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、本発明の方法において有用なＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子の内の１つである。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、配列番号１における約１番のアミノ酸から約１５４番のアミノ酸の受容体ＴＡＣＩの細胞外、リガンド結合部分、並びにヒトＩｇＧのＦｃ修飾部分であるＦｃ５（配列番号２）を含む組換え融合ポリペプチドである。本発明の方法に有用な他のＴＡＣＩ−Ｉｇ分子は、配列番号２のポリペプチドを含む融合分子と、ＢｌｙＳに結合し得、かつ配列番号１と少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、あるいは少なくとも約９９％の一致するポリペプチドを含む。
【００２３】
本発明の態様は、ＲＡを治療するためのＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を使用する方法を含む。本発明の方法により治療されうる他の自己免疫疾患は、全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）、グレーブス病、Ｉ型及びＩＩ型糖尿病、多発性硬化症、シェーグレン症候群、強皮症、糸球体腎炎、器官及び組織の同種や異種拒絶の如き移植による拒絶反応、移植片対宿主拒絶反応、あるいはかかる疾患に関する循環成熟Ｂ細胞、及び免疫グロブリン分泌細胞、及び溶解性免疫グロブリンの数を低減することにより治療され得るいずれかの他の自己免疫疾患を含む。
【００２４】
本発明の態様は、ヒト免疫グロブリン−定常領域、並びにＢｌｙＳ、及び／又はＡＰＲＩＬに結合し得るＴＡＣＩ細胞外ドメインのいずれかの断片を含むポリペプチドを含む融合分子を患者に投与することによる治療方法を含む。
【００２５】
ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子は、経口、静脈内又は皮下を非制限的に含む、いずれかの好適な投与経路により患者に投与され得る。
【００２６】
本発明の方法に有用なＴＡＣＩ−Ｉｇ製剤は、製造され、冷凍、滅菌、等張液として保存され得る。かかる製剤は、塩化ナトリウム、リン酸緩衝液、及び水酸化ナトリウム又はＯ−リン酸（ｐＨ６．０）を含み得る。ＴＡＣＩ−Ｉｇ製剤は、他の薬剤との組み合わせで患者に投与され得る。かかる薬剤は、非制限的に、ヒドロキシクロロキン、スルファラジン、メトトレキサート、レフルノミド、リツキシマブ、インフリキシマブ、アザチオプリン、Ｄ−ペニシラミン、ゴールド（経口又は筋肉内）、ミノサイクリン、及びシクロスポリンの如きＤＭＡＲＤ、プレドニゾンの如きコルチコステロイド、ＮＳＡＩＤＳ、並びに痛みを緩和するための薬剤を含む。本発明の方法は、自己免疫疾患を治療する他の方法との組み合わせで使用され得る。かかる他の治療方法は、非制限的に、外科手術、針治療、理学療法、及び遺伝子療法を含む。ＴＡＣＩ−Ｉｇ製剤は、他の治療方法の前、同時又は続いて投与され得る。
【００２７】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで、Ｂ細胞増殖のＢｌｙＳ活性化を阻害することを示している。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５によるマウスの治療は、骨髄、及び抹消血Ｔ細胞、単球、及び好中球を含む他の細胞系統におけるＢ細胞前駆体にわずかな影響を与えるＢ細胞の成長における部分的阻害をもたらす。血液中にＴＡＣＩ受容体の可溶型を過剰発現するように処理されたトランスジェニックマウスは、より少ない成熟Ｂ細胞を産生し、低減されたレベルの循環抗体を示す。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５トランスジェニックは、胸腺、骨髄、及び腸間膜リンパ節において正常な数の細胞を有した。胸腺、リンパ節、及び脾臓内のＴ細胞数において著しい違いはなかった（Ｇｒｏｓｓら，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２００１；１５(２)：２８９−３０２）。
【００２８】
さらに、ＴＡＣＩ−Ｉｇは、抗原に対する一次応答間に投与されようと２次応答間に投与されようと、マウスの免疫応答において抗原特異的抗体産生を阻害し得る。これらの研究において、生体外抗原投与に対するＴ細胞応答に影響は観察されなかった。全身性紅斑性狼瘡の動物モデルにおいて、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合タンパク質による治療は、当該疾患の発現及び進行を制限することに効果的であった（Ｇｒｏｓｓら，Ｎａｔｕｒｅ ２０００；４０４：９９５−９９９）。同様に、コラーゲン誘導関節炎のマウスモデルにおいて、ＴＡＣＩ−Ｉｇは、コラーゲン特異的抗体の成長を阻害可能であり、炎症事例と疾患の発生率の両方を低減可能であった（Ｇｒｏｓｓら，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２００１;１５(２)：２８９−３０２）。
【００２９】
ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を含む組成物は、ある期間にわたり、患者に１回投与され得るか、繰り返し投与され得る。例えば、患者は、患者の症状が観察され得たあとに、ＴＡＣＩ−Ｉｇ分子の１回の皮下注射を受けるかもしれない。症状の改善又は少なくとも安定を実証する患者は、さらなる期間にわたり、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を繰り返し投与され得る。当該さらなる期間は、約２〜約３０週間となり得る。例えば、患者は、４週間の間に、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を３回投与され得る。あるいは、患者は、１２週間の間にＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を７回投与され得る。患者へのＴＡＣＩ−Ｉｇ分子の投与は、毎日、一日おき、毎週、隔週、毎月、隔月などとなり得る。
【００３０】
ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子は、患者の症状を治療するために効果的な量で、患者に投与される。ある態様において、与えられた疾患又は障害に関する用語「治療」は、非制限的に、疾患又は障害の発達を止めることの如き当該疾患又は障害を阻害すること；疾患又は障害の回帰を引き起こすことの如き当該疾患又は障害を阻害すること；あるいは、疾患又は障害の徴候を緩和、阻害、治療することの如き当該疾患又は障害により引き起こされるかそれによりもたらされる症状を緩和することを含む。他の態様において、量は、患者の体重１ｋｇあたり０．０１ｍｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲となり得る。ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子による治療の最適な用量は、実施例５においてさらなる詳細を記載するが、図１の図表を使用することにより改良され得る。
【００３１】
融合ＴＡＣＩ−Ｉｇ分子は、好適な方法においてデリバリーされ得る。ある態様において、分子は腹膜注入によりデリバリーされる。ある態様において、腹膜注入は、皮下注射を介する。他の態様において、腹膜注入は、腹部前壁に投与される。用量を投与するために複数の注入が必要とされるとき、当該注入は、できるだけ近くのように、数センチメートル離れて時間内にかなり近くに投与され得る。繰り返し薬剤投与のために、腹部前壁上の投与部位は、循環又は変化させられ得る。腹部前壁への皮下注射の例示的領域を図２に示し、それは、右上外部領域、左下外部領域、右下外部領域、左上外部領域、中央下外部領域、並びに右及び左の大腿部及び上腕を含む（図２）。あるいは、本発明のＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子は、タブレット、カプレット、液組成又はゲルなどの形態で、静脈注射又は経口を介してデリバリーされ得る。
【実施例】
【００３２】
実施例１
実験動物モデルにおけるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の薬理学、毒物学、及び薬物動態学試験
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を、免疫系の機能的制限を直接評価する機会を提供する宿主抵抗モデルにおいて評価した。マウスを、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５治療の間、インフルエンザウイルスで負荷した。ポジティブ対照として使用されるデキサメタゾンは、強化及び延長されたウイルス感染をもたらした。皮下経路によるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回投与は、循環Ｂ細胞、総ＩｇＧ及びＩｇＭ、並びにインフルエンザ特異的ＩｇＧ及びＩｇＭを低減したが、ウイルス感染を除去する動物の能力を低減しなかった。
【００３３】
主要安全性薬理学試験は、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５が、最大８０ｍｇ／ｋｇのＳＣ用量まで、マウス又はサルにおける神経系、呼吸器系、及び循環系の主要な変化を導かないことを示した。マウスにおいてのみ、８０ｍｇ／ｋｇで軽微で一時的な刺激効果を提示し得る僅かに増大した超覚醒かつ自発運動を示したが、２０ｍｇ／ｋｇと等しい無影響量（ＮＯＥＬ）であった。
【００３４】
静脈内（ＩＶ）又はＳＣ経路による単回投与としてマウスに投与したとき、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、最も高い技術的に可能な用量の１２００ｍｇ／ｋｇまで、動物の死亡又はかなりの全般的又は局所的異常効果を誘発しなかった。
【００３５】
２４０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでのＳＣ経路による単回投与としてのＴＡＣＩ−Ｆｃ５のサルへの投与は、死亡又は他の主要な毒作用をもたらさなかった。
【００３６】
２日おきに５、２０、及び８０ｍ／ｋｇの用量でマウスに皮下経路でＴＡＣＩ−Ｆｃ５を投与した２又は４週間後に得られた結果に基づいて、この化合物は最大８０ｍｇ／ｋｇまでの用量でこの種において許容され得ることが結論づけられ得る。
【００３７】
免疫系に限定される治療関連変化を、全用量で明らかとした。これらの変化は、Ｂ細胞の総数、及び成熟Ｂ細胞の数、及びＩｇＧ及びＩｇＭ血清レベルにおける低減に関係した。脾臓、及びリンパ節において実施された免疫組織学試験は、Ｔ細胞の数を変化させることなく、Ｂ細胞に限定された減少を裏付けた。これらの全変化、ある場合には時間及び用量関連の変化は、非常に高用量のＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与後の反応種において期待されるのと同程度に拡大された薬理効果と考えられた。全体としては、これらの効果は、経時的な進行の主な徴候なしで、治療の２及び４週間後に示された。それらは、低減されたＢ細胞数を除き、治療停止の４週間後、ほぼ完全に元に戻った。
【００３８】
Ｂ細胞の変化可逆性を確認するために、マウスにおけるさらなる試験を、１日おきに４週間与えられた５及び２０ｍｇ／ｋｇの用量で、より長い回復期間において実施した。総Ｂ細胞数及び成熟循環Ｂ細胞数の回復は、５ｍｇ／ｋｇの停止２ヶ月後、及び２０ｍｇ／ｋｇの停止４ヵ月後に達成された。さらに、注入は、媒体対照と比較して、全用量における注入部位での炎症性変化の僅かな増大を導いた。
【００３９】
サルにおけるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の皮下投与は、連続４週間与えたとき、２日おきに５、２０又は８０ｍｇ／ｋｇのいずれの用量でも、毒性の主な徴候を導かなかった。
【００４０】
局所的な忍容性は、最も高用量の試験まで及びそれを含むと十分に考えられた。炎症源（主に血管周囲単核細胞、及び好酸性細胞浸潤物）の用量関連かつ可逆的な僅かな又は中程度の変化を導入したが、外因性タンパク質の局所的存在に主に関連すると考えられた。高用量でのみ、数匹の動物が、それらの内の１つにおけるのう胞形成に関連する僅かな又は中程度の亜急性炎症を示した。
【００４１】
リンパ球サブセット定量での循環Ｂ細胞数減少、並びに脾臓辺縁帯領域（Ｂ細胞依存領域として知られる）の組織学的減少、そして総ＩｇＧ及びＩｇＭ血清レベルを示した。それらは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏの薬理実験により示されたように、ＴＡＣＩ−ＦｃＳの薬理特性の結果とみなされた。それらの程度を、動物に高用量の試験化合物を投与する毒物学試験において予想されるように、拡大した。低血清ＩｇＧ及びＩｇＭレベルと脾臓リンパ球枯渇は停止後１ヶ月内に明らかな回復傾向を示したが、総Ｂ細胞数及び成熟循環Ｂ細胞数は、回復のためのより長期間の必要性を示唆し、似たような状態を示さなかった。
【００４２】
治療期間（４週間）の最後に、高用量群（８０ｍｇ／ｋｇ）の雌雄は、対照と比較して、平均総タンパク質値において、僅かなしかし統計的に有意な減少を示した。減少への僅かな傾向も、週に２回の同用量で、及び回復期間の最後で見られた。
【００４３】
投与期間の終了時の高用量の雌における血清蛋白質の変化は、グロブリンの減少、並びにアルブミンパーセンテージ及びアルファ−１−グロブリン画分の増大を含んだ。アルファ−１−グロブリン画分も、第３群の雌（２０ｍｇ／ｋｇ）における対照よりも高く示された。
【００４４】
ＴＡＣＩ−Ｆｓの免疫原性は、マウス（数匹の雌のみが、治療期間中及び治療期間後、低い値の循環結合抗体を示した。）、及びサル（数匹において回復期間後に低い値がみられた）の両方のおいて低かった。いずれの種においても抗体を無力化する証拠はなかった。
【００４５】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を、再生及び生殖能力（雌雄のマウスにおける生殖能力試験、交配の前と最中から注入期間まで、５、２０、及び８０ｍｇ／ｋｇ／一日おきの用量でＳＣ経路により処理した）、並びに胚−胎生期発達（雌のマウス及びウサギにおける胚−胎児発達試験、器官形成期に５、２０、及び８０ｍｇ／ｋｇ／一日おきの用量でＳＣ経路により処理した）の毒物を検出するためにｉｎ  ｖｉｖｏ試験の標準バッテリーで試験した。
【００４６】
マウスにおける受胎試験は、対照群と比較して、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の２０及び８０ｍｇ／ｋｇ／一日おきの暴露後、注入前と後の死において、用量依存的増大を示した。
【００４７】
胚−胎児発達試験のマウスにおいて得られたデータの評価は、いずれの用量においても胚−毒作用がみられず、化合物依存性胎児の奇形を導かなかったことを示した。
【００４８】
ウサギにおいて、胚−胎児発達試験は、２０又は８０ｍｇ／ｋｇ／１日おきで処理された妊娠動物において、用量依存的低体重増量、及び低飼料消費を引き起こしたことを示した。上記母体変化を、２つの高用量において、吸収と低胎児体重との増大比と関連付けた。
【００４９】
これらの結果は、子宮におけるマウス胚盤胞の移植に関するＴＡＣＩ−Ｆｃ５の可能性のある効果を示唆する。母体体重増量と飼料消費に関するＴＡＣＩ−Ｆｃ５の観察される効果は、器官形成の間２０又は８０mg／Kg／１日おきに曝されたウサギにおけるに同腹生存能力関する観察効果に適当に関与し、胎児に関するＴＡＣＩ−Ｆｃ５の直接的毒性はなかった。これらの２つの動物種において、奇形はＴＡＣＩ−Ｆｃ５処理のせいではなかった。
【００５０】
さらに、雌雄性腺と副性器の組織学的検査を、マウスとサルにおいて、ＳＣ経路により行われる２週間及び１ヶ月の毒性試験において実施した、当該試験において、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を各々１日おき又は２日おきに投与し、処理依存的効果の証拠はなかった。
【００５１】
ウサギにおける局所耐性試験は、７０ｍｇｍＬで、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５製剤を皮下経路によりウサギに注入するときに局所的に耐えることを示した。
【００５２】
ＩＶ及びＳＣ経路による雄マウスにおける単回投与の薬物動態学試験を、１ｍｇ／ｋｇの用量での静脈内経路、又は１、５、１５ｍｇ／ｋｇの皮下経路のいずれかにより、実施した。
【００５３】
最大吸収までの時間（ｔｍａｘ）を、約４０〜５０時間となるように計算されるｔ１／２と共に、４時間〜１６時間で見積もった。
【００５４】
融合様プロフィールを、ＩＶボーラス投与後、最初の３０分間に観察し、その後、４４時間の排出半減期でＴＡＣＩ−Ｆｃ５を体から除去した。皮下投与後、１、５、及び１５ｍｇ／ｋｇの３回投与で得られたＡＵＣ（曲線下面積）間の比は、１：５：８対１：５：１５の用量比であって、高用量での用量比例性の損失を示唆する。
【００５５】
皮下経路によるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の生物学的利用能は、マウスにおいて、１、及び５ｍｇ／ｋｇの用量で７６、及び８９％だったが、１５ｍｇ／ｋｇで予想されたよりも低かった（０、４２；静脈内１ｍｇ／ｋｇ用量に対して計算した）。明らかな排出半減期が変化しないので、高用量で観察されるより低い生物学的利用能を、クリアランスと分布量の両方の増大により、より可能性があるのは注入部位での製剤沈殿に起因する低減された吸収により、説明できた。
【００５６】
ＩＶ及びＳＣ経路による雄サルにおける単回投与の薬物動態学試験を、１ｍｇ／ｋｇの用量での静脈内経路、又は１、５、１５ｍｇ／ｋｇの皮下経路のいずれかにより、実施した。
【００５７】
６匹の雄サルを３匹の２つの群に分け、２週間のウォッシュアウト期間により分離された２回の投与を受けさせた。第１期間の処理は１ｍｇ／ｋｇＩＶ（第１群）、及び１ｍｇ／ｋｇＳＣ（第２群）であり、第２期間の処理は５ｍｇ／ｋｇＳＣ（第１群）、及び１５ｍｇ／ｋｇＳＣ（第２群）であった。
【００５８】
最大吸収までの時間（ｔｍａｘ）を、約１２０〜１９０時間となるように計算されるｔ１／２と共に、６時間〜８時間で見積もった。
【００５９】
融合様プロフィールを、ＩＶボーラス投与後、最初の１５分間、３匹のサルの内２匹において観察し、その後、１７９±２９時間の排出半減期でＴＡＣＩ−Ｆｃ５を体から除去した。定常状態で分配量、Ｖｓｓは、３８２±８２ｍＬ／ｋｇの細胞内液量に近い量であった。
【００６０】
皮下投与後、ＡＵＣ対１用量比例性はよかった、すなわち、５、及び１５ｍｇ／ｋｇのＳＣ投与について２１６、１１８２、及び２７３２μｇ／ｍＬだった。皮下経路によるＴＡＣＩ−Ｆｃ５生物学的利用能（１ｍｇ／ｋｇのＩＶ用量に対して計算された）は、低、中、及び高用量で、０．９２、１．０２、及び０．７７だった。それ故、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、皮下経路によりほとんど完全に吸収された。
【００６１】
低レベルのＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、全６匹のサルについて、第２期間の投与前サンプル中に見出された（ＩＶ又はＳＣ経路による１ｍｇ／ｋｇ用量、第１期間と、各々５又は１５ｍｇ／ｋｇの用量、第２期間の間）、というのは、２週間のウォッシュアウト期間にたった２半減期が経過するだけなので、投与された化合物の完全除去に不十分だからである（５半減期が必要である）。しかしながら、以前の投与のＡＵＣ寄与を、第２期間での総ＡＵＣのたった約２％を表すように見積もることができる。
【００６２】
ＩｇＧの血清レベルは、ＩＶ投与後、１０．２％の減少を示した。１５ｍｇ／ｋｇのＳＣ投与は僅かに高い効果を示したが、１と５ｍｇ／ｋｇの間のＳＣ投与では違いが観察されなかった（１、５、及び１５ｍｇ／ｋｇで投与後、各々、８．６％、８．４％、及び１２．３％の減少）。ＩｇＭの血清レベルは、ＩＶ投与後、１８．０％の減少を示した。３つのＳＣ投与の間においては違いが観察されなかった（１、５、及び１５ｍｇ／ｋｇで投与後、各々、２３．５％、２３．０％、及び２４．２％）。
【００６３】
実施例２
健康な志願者におけるＴＡＣＩ−ＦｃＳ耐線量の検出
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の第１相研究は、現在のところ完了している。これは、健康な男性志願者に皮下投与されたＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回投与の二重盲検法、プラセボ対照試験、用量漸増法、安全性を調査する逐次投与研究、薬物動態学、及び薬理学である。研究計画の概要を有用なデータの要約と共に以下に示す。
【００６４】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を、健康な男性志願者に皮下投与されたＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回投与の二重盲検法、プラセボ対照試験、用量漸増法、安全性を調査する逐次投与研究、薬物動態学、及び薬理学において、健康な志願者に投与した。
【００６５】
４群の対象を採用した。各用量群において、プラセボ注入を受けるために１の対象を無作為に選び、他はＴＡＣＩ−Ｆｃ５を受けた。投与後24時間で研究棟から退院した後、対象者に、計画された７週間の評価を基に、外来患者の用件を聞いた。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の全身性、及び局所耐容性を、理学的検査所見、注入部位の痛み、注入部位での局所的耐容性（赤み、腫れ、損傷、及びそう痒）、生命兆候、１２−リードＥＣＧ（心電図）、安全性臨床検査評価、及び有害事象の記録により測定した。
【００６６】
薬物動態及び薬力学マーカーを、投与後７週間を通して測定した。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の薬力学効果を、ＦＡＣＳ分析によるリンパ球サブセット｛プラズマ細胞（ＣＤｌ３８＋）、未成熟Ｂ細胞（ＣＤ１９＋、ＩｇＤ−）、成熟Ｂ細胞（ＣＤ１９＋、ＩｇＤ＋）、Ｔヘルパー細胞（ＣＤ５＋、ＣＤ４＋）、細胞障害性Ｔ細胞（ＣＤ５＋、ＣＤ８＋）、総Ｔ細胞（ＣＤ５＋）｝、遊離ＢＩｙＳ、ＢＬｙＳ／ＴＡＣＩ−Ｆｃ５複合体、ＩｇＧ、ＩｇＭ、抗ＴＡＣＩ−Ｆｃ５抗体を含む多くのマーカーを使用して測定した。
【００６７】
投与後３週間のデータの再検討に基づいて、用量増加を、研究プロトコールのアルゴリズムにより導いた。４つの群：２．１ｍｇを受けた第１群；７０ｍｇを受けた第２群；２１０ｍｇを受けた第３群；６３０ｍｇを受けた第４群に投与した。
【００６８】
結論：健康な男性の志願者に、０．０３ｍｇ／ｋｇ〜９ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を単回皮下投与した。安全性及び耐容性データを、３週間のリンパ球サブセットのＦＡＣＳ分析と共に使用し、群間の用量増加を導いた。４つの群を試験し、表１に示した。
【００６９】
【表１】
2009537563.tif 000003
ａ各投与レベルで、対象が標準的な投与を受けるように７０ｋｇの通常体重を仮定した。
ｂ希釈の間違いにより、第１群に投与された用量が計画（０．３ｍｇ／ｋｇ）していたよりも１０分の１になった。この間違いは第１群の薬物動態データの再検討により発覚したが、第２群の投与後だった。
ｃプラセボの１の対象を含む。
ｄ注入前に１の対象が退場した。
【００７０】
人口学的基準特性を群による母集団として要約し、表２に示す。
【００７１】
【表２】
2009537563.tif 000004
【００７２】
全体として、平均＋；ＳＤ年齢は３０．７＋７．４年で、平均体格指数は２４．８ｋｇ／ｍ２だった。
【００７３】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、全群においていい耐容性だった。理学的検査所見、生命兆候又は１２リードＥＣＧに関する明確な作用はなかった。
【００７４】
【表３】
2009537563.tif 000005
【００７５】
数人の患者において、投与部位で一時的な赤みや腫れを観察し、第３群及び第４群の全対象に赤みがでた。注入部位の事象はより高用量群において明らかに増大していたが、このことは注入の増大された量（及び回数）に関することだと思われる。
【００７６】
４８の処置における緊急有害事象が、７週間後に報告された。これらの大部分（４４事象、９１．７％）は軽度であり、残りは中程度であった（４事象、８．３％）を含めて、だった。この期間内に重篤な有害事象、及び重大な有害事象はなかった。投与されたＴＡＣＩ−Ｆｃ５の用量と有害事象の発生、強度又は指定関係の間には明らかに関連がなかった。期日までに報告された当該有害事象を表３に要約した。
【００７７】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、生じる著しい安全上の注意もなく、最大６３０ｍｇまでの用量で良い耐容性を示すと考えられる。これらのデータは、提案された対象試験の目的用量を支持する。
【００７８】
ＴＡＣＩ血清濃度のノンコンパートメント分析を実施した。この予備的分析を、仮のサンプリング時間を使用して実施した。対象２、６、及び１３は、測定可能な投与前濃度を有し、それ故、分析前に、投与後の全測定から基準濃度を差し引いた。２．１、７０、２１０、及び６３０ｍｇの単回皮下投与後の薬物動態パラメーターを表４に要約する。薬物濃度は、この用量レベルでデータ値を制限するＴＡＣＩ−Ｆｃ５の２．１ｍｇ投与後のアッセイの定量の限界に近かった。７０ｍｇ及び上記の用量で、Ｔｍａｘ（最大吸収までの時間）は１６〜３６時間の範囲であり、全ての中間ｔ１／２（曲線の終末部から計算される）は３０３時間だった。さらに、ＡＵＣ（無限まで外挿される）及びＣｍａｘは、用量比法よりも増大した。
【００７９】
【表４】
2009537563.tif 000006
【００８０】
薬力学分析は、７０、２１０又は６３０ｍｇの単回投与後７週間における基準ＩｇＭレベルにおいて減少を示した。明確な用量反応関係は少ないサンプルサイズで確立され得なかったけれども、ＩｇＭ減少の程度は、高用量群において最も高かった。７０ｍｇ用量群における対象は、投与後７週間までに基準に対してＩｇＭレベルの回復を明らかに示した。残りのより多い用量群におけるレベルは、この点において、抑制された。ＦＡＣＳにより測定されたＩｇＧレベル又はリンパ球亜集団に関する明らかな効果はなかった。
【００８１】
サンプリング期間のＢＬｙＳ／ＴＡＣＩ−Ｆｃ５複合体のレベルにおいて比例した増大があり、投与後約６００時間までに安定に達した。結論として、健康な男性志願者において得られたヒトデータは、最大６３０ｍｇまでの投与でＴＡＣＩ−Ｆｃ５が安全であり被験者が耐えられることを示した。自然で、起こりやすく、重篤な有害事象は、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５処置群とプラセボとの間で同程度だった。理学的検査所見、生命兆候、１２−リードＥＣＧにおいて又は安全性研究所パラメーターにおいて、臨床的に重大な変化はなかった。投与部位の局所的耐容性は良かった。これらのデータは、ＢＣＭの被験者における提案された用量を支持する。
【００８２】
健康な男性被験者における単回投与後、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、用量比例法において増大された１６〜２０時間のＡＵＣでＴｍａｘに達した。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の平均半減期は、約３００時間だった。薬力学効果は、７０、２１０、及び６３０ｍｇの用量でのＩｇＭレベルに関して注目される。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回投与後のＩｇＧ又はリンパ球亜集団に関する処置の明らかな効果はなかった。設定された試験プロトコールにおいて既に考慮されていない特に重篤又は重大な既知の若しくは予想されるリスクはなかった。
【００８３】
実施例３
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５組成物によるＲＡ患者の治療
ＲＡ患者を、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与前に臨床的に評価する。基礎評価を、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の最初の投与の直前に行われる評価として定義する。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５投与の最初の日を「第１日」として設定する。以下の手順を、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５薬剤を患者に最初に投与する前に完了する：ＥＣＧ；バイタルサイン（ＶＳ）測定；身体検査；疾患活動性の評価（実施例６を参照のこと）；身長と体重の測定（最初の投与及び追加の者のみ）；日常検査（表５を参照のこと）；尿中ヒドロキシピリジノリン／リジルピリジノリン（ＨＰ／ＬＰ）比の計算；遊離及び総ＴＡＣＩ−Ｆｃ５血清濃度、遊離のＡＰＲＩＬ及びＢｌｙＳ、ＢｌｙＳ／ＴＡＣＩ−Ｆｃ５複合体の血清レベルの薬物動態（ＰＫ）及び薬力学（ＰＤ）測定、フローサイトメトリーによる細胞カウント、並びにＴＡＣＩ抗体の測定（最初の投与のみ）；そして、リンパ球サブセット（血液は３つの管に分けられ、表６のようにＦＡＣＳ分析により表現される）、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ（サブタイプを含む）、抗シトルリン化ペプチド自己抗体、リウマチ因子（ＩｇＡ−ＲＦ、ＩｇＭ−ＲＦ、ＩｇＧ−ＲＦ）、Ｃ−反応性タンパク質（ＣＲＰ）、ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−６、ＩＬ−１、ＩＬ−１２、及びＩＬ−８を含む血液中のバイオマーカーの測定。患者のサブセットにおいて、針穿刺による関節鏡視誘導滑膜生検又は滑液サンプリングを実施し、その滑液中、ＰＫ、ＰＤ、及びバイオマーカー評価を実施する。反復投与群において、これら測定の多くの又は全てを、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の次の投与の直前に実施する。
【００８４】
【表５】
2009537563.tif 000007
１：患者は、トリグリセリド測定前の約１０時間絶食すべきである。
２：白血球数は、分化白血球数を含むべきである。
３：もしタンパク質、血液又は白血球（ＲＢＣ又はＷＢＣ）が存在するならば、標本の顕微鏡検査を実施する。
【００８５】
【表６】
2009537563.tif 000008
【００８６】
投与後約６時間、第６群を除いて、以下の評価：ＥＣＧ；ＶＳ；並びにＰＫ及びＰＤサンプリング（単回投与群に対してのみ）を実施する。
【００８７】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５による処置は、図１に概要を示した逐次投与増加群の設定の後である。第１群は第１日にＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回７０ｍｇ投与を受ける。以下の群は、最大２９４０ｍｇの投与量まで用量増加アルゴリズムに基づく投与を受ける。第２群は、１ヶ月の間に３回のＴＡＣＩ−Ｆｃ５の７０ｍｇ投与を受ける。第３群は、２１０ｍｇのＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回投与を受ける。第４群は１ヶ月の間に３回のＴＡＣＩ−Ｆｃ５の２１０ｍｇ投与を受ける。第５群は６３０ｍｇのＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回投与を受ける。第６群は３ヶ月の間に３回のＴＡＣＩ−Ｆｃ５の４２０ｍｇ投与を受ける。
【００８８】
ＰＫ、ＰＤ、及びバイオマーカーサンプルの回収、並びに安全性及び疾患活動性評価を含む投与後評価を、投与後最長１４週間まで（単回投与群）、最長１８週間（反復投与群２及び４）、最長２６週間（反復投与群６）の事前に設定された間隔で、全群から完了する。表７は、第１、３、及び５群の、第２日から始まる投与後評価計画を記載する。表８は、第２、及び４群の、最終投与日（第３０日）後の第１日から始まる投与後評価計画を記載する。表９は、第６群の、第２投与（第１５日）の日から始まる投与後評価計画を記載する。注入部位反応、有害事象及び併用薬、並びに手順を全群に対する試験を通して測定する。有害事象データを、患者により同時に提供される情報に基づき患者の質問を通じて、身体検査の後、計画された又は無計画の試験訪問者で得る。
【００８９】
因果関係にもかかわらず、たとえ治験薬を投与していなくても、しるし、兆候、異常検査所見又は基準（すなわち初回訪問時）と比較して問題となるか悪化している疾患の形でいずれかの厄介な医学的発生として、有害事象を定義する。有害事象の重篤度は、以下の定義を使用して評価され得る：（１）軽度、患者が事象又は兆候に気づいている；（２）中程度、日常活動レベルを妨げる又は低減するような不快感を患者が十分経験する；（３）重篤、患者が日常生活をできないほどの機能の著しい障害；及び（４）非常に重篤、その事象により患者の生命が危険にさらされる。
【００９０】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与と有害事象の関係は、以下の定義を使用して評価され得る：（１）そう推定される、因果関係が臨床的／生物学的に非常にもっともらしく、有害事象の始まりとＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与と間のもっともらしい時間系列がある；（２）可能性あり、因果関係が臨床的／生物学的にもっともらしく、有害事象の始まりとＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与と間のもっともらしい時間系列がある；（３）関係ありそうにない、因果関係が関係ありそうになく、有害事象の別の確認された理由が最も関係ありそうである；及び（４）関係なし、因果関係が決定的に排除され得、有害事象の別の確認された理由が最も関係ありそうである。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与の間、重篤度又は頻度においてより悪化しない基準で存在する病状は、有害事象と考えない。そう推定されるか又は可能性があることがＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与と関係ある場合を除き、ＲＡの悪化を疾患評価の一環としてとらえ、有害事象とは考えない。
【００９１】
【表７】
2009537563.tif 000009
【表８】
2009537563.tif 000010
Ａ：病気に関する身体検査
Ｂ：ＡＤＡ＝血清中のＣＲＰ、ＥＳＲ、及び尿中ＨＰ／ＬＰ比により測定される疾患活動性の評価
Ｃ：ＶＩＳ＝ワクチン接種状態
【００９２】
【表９】
2009537563.tif 000011
Ａ：病気に関する身体検査
Ｂ：ＡＤＡ＝血清中のＣＲＰ、ＥＳＲ、及び尿中ＨＰ／ＬＰ比により測定される疾患活動性の評価
Ｃ：ＶＩＳ＝ワクチン接種状態
【００９３】
【表１０】
2009537563.tif 000012
Ａ：病気に関する身体検査
Ｂ：ＡＤＡ＝血清中のＣＲＰ、ＥＳＲ、及び尿中ＨＰ／ＬＰ比により測定される疾患活動性の評価
Ｃ：ＶＩＳ＝ワクチン接種状態
【００９４】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の用量、投与計画、及び投与経路を、表１０に示した。簡単に、１８〜７０歳の７２人の男女のＲＡ患者が含まれる。当該患者は、少なくとも６ヶ月間、活動的、中程度から重篤なＲＡの確定診断を受け、５以下のＤＭＡＲＤが機能せず、第１日より４週間又はそれ超の間、メトトレキサート以外のＤＭＡＲＤを使用していない。さらに、当該患者は、ＲＦ陽性であり、試験の間、及びＴＡＣＩ−Ｆｃ５の最終投与後３ヶ月まで、妊娠していない。これらの患者を６つの群に分ける。その群の３つは、８人の患者であり、２つの群は１２人の患者であり、１つの群は２４人の患者である。
【００９５】
【表１１】
2009537563.tif 000013
【００９６】
実施例４
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５注入手順
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５をデリバリーするためにもし皮下投与経路を選択したならば、分子は、以下の図（図２）に従って循環される腹壁、及び腹部に皮下に注入される。血管内に注入しないように注意する。皮膚を健康に保つには部位を循環することが非常に重要である。同じ部位における反復注入は、脂肪組織の傷や硬化を引き起こす。以下の領域は、注入のために使用され、下記のように循環されるべき（図２）である：左上外部領域への第１注入（図２、位置１）；右下外部領域への第２注入（図２、位置２）；左下外部領域への第３注入（図２、位置３）；右上外部領域への第４注入（図２、位置４）；及び中央下領域への第５注入（図２、位置５）。上述の循環スキームは、さらなる注入のために繰り返される。
【００９７】
１用量につき１回超の注入を必要とする患者について、注入は、前記注入のために設定された部位領域（図２、位置１〜５）の１２時の位置で始まり、１用量についての注入の必要な回数に応じて２時間、４時間、６時間、８時間、及び／又は１０時間の位置といったように、連続して時計回りに循環する。注入は、互いに少なくとも２．５ｃｍ（１インチ）離し、時間内にできるだけ間に合わせて注入する必要がある。１の注入部位に１．５ｍｌ超の注入はできない。もし患者の腹部への注入が困難ならば、注入し得る別の領域は、大腿部と上腕である。
【００９８】
注入反応部位の共通兆候は、当該注入部位でのそう痒、圧痛、高温、及び／又は赤みを含む。
【００９９】
実施例５
ＴＡＣＩ−Ｉｇ分子を投与するための用量増加プロトコール
ＲＡにおけるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の評価のためのこの用量増加プロトコールで、第１群における６人の患者への投与を実施した。第１群は７０ｍｇの単回投与を受け、その後４週間を観察期間とする。安全性審査委員会（ＳＲＢ）が投与後４週間で回収される安全性データを審査し、ＳＲＢの推薦で、用量を、２１０ｍｇに増加させ、１ヶ月間に渡り（第２群）又は単回投与として（第３群）投与する。第２群として９人の患者に投与し、第３群として６人の患者に投与する。次いで、ＳＲＢが投与後６週間で第３群から回収される安全性データを審査し、ＳＲＢの推薦で、用量を、６３０ｍｇに増加させ、１ヶ月間に渡り（第４群）又は単回投与として（第５群）投与する。第４群として９人の患者に投与し、第５群として６人の患者に投与する。次いで、ＳＲＢが投与後６週間で第５群から回収される安全性データを審査し、ＳＲＢの推薦で、３ヶ月間に渡り2940ｍｇを第６群に投与する。第６群として１８人の患者に投与する。
【０１００】
選択された用量は、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は５、２０、及び８０ｍｇ／ｋｇで耐容性があることを示す、カニクイザル及びマウスにおける反復ＳＣ毒物学試験に合理的に基づく。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５薬力学活性の予想結果である免疫細胞における効果は別として、唯一見出されるものは、サルにおける８０ｍｇ／ｋｇの最も高用量のＳＣ投与での血しょう総タンパク質の著しい低減及び僅かな皮下反応、並びに８０ｍｇ／ｋｇの用量でのマウスにおけるＩｒｗｉｎ試験の一時的多動性であった。それ故、２０ｍｇ／ｋｇが、両方の種において、不都合な調査結果と関連しない最も高用量である。
【０１０１】
さらに、２．１、７０、２１０、及び６３０ｍｇの用量を、健康な志願者に単回皮下投与で投与する。これらの用量で見られた安全性又は耐容性の問題はない。健康な志願者における前臨床データ及び予備研究結果に基づいて、ＲＡの患者に対する適当な出発用量として７０ｍｇを選択している。
【０１０２】
本発明のＲＡ患者において見られる用量及び投与計画は、月に２回、１ｍｇ／ｋｇ〜９ｍｇ／ｋｇの範囲であり（７０ｋｇの人間を標準とした場合である）、サルにおいて試験された用量範囲とよく合致するものである。サルにおける反復投与は、明らかな用量反応関係を示している。
【０１０３】
実施例６
疾患進行の評価
疾患の進行は、疾患活動性指数、疾患活動性の医師の全体的評価、疾患活動性の患者の全体的評価、朝のこわばり、並びに痛み、疾患活動性、及び身体機能の患者の評価、により測定される。
【０１０４】
疾患活動性指数（ＤＡＳ）は、ＲＡの患者における疾患活動性を測定するために開発された統合インデックスである。それは、ＥＵＬＡＲ応答基準との組み合わせにおける臨床試験における使用のために、広範囲にわたって有効とされる。原型のＤＡＳは、リッチー関節指数、４４関節腫脹数、ＥＳＲ、及びＶＡＳに対する全体的な健康評価を含んだ。圧痛及び腫れに対する２８非等級関節数の検証後、ＤＡＳ２８は２８関節指数を含むように開発されている。ＤＡＳ及びＤＡＳ２８の結果について、直接的に互換性はない。
【０１０５】
ＤＡＳを使用するとき、いくつかの閾値は、高疾患活動、低疾患活動又は寛解のために開発されている。さらに、応答基準はＤＡＳに基づき開発されており、それ故、患者のＤＡＳを２つの時点で測定するとき、応答基準を評価し得る。
【０１０６】
前記ＤＡＳ２８を計算するために必要とされる疾患変数は、以下の：関節腫脹数（２８関節）；圧痛関節数（２８関節）；ＥＳＲ（１時間後、ｍｍ）；患者の全体的健康（ＧＨ）又は全体的疾患活動性｛１００ｍｍの視覚アナログ尺度（ＶＡＳ）｝、本発明において疾患活動性の患者の全体的評価と名付けられている、である。２８関節腫脹指数及び圧痛間接指数は、以下の関節：肩；肘；手首；中手指節関節；近位指節間関節；及びひざを含む。
【０１０７】
ＤＡＳを計算するために使用される式は、以下の：ＤＡＳ２８＝０．５６＊ｓｑｒｔ（圧痛２８）＋０．２８＊ｓｑｒｔ（腫脹２８）＋０．７０＊Ｉｎ（ＥＳＲ）＋０．０１４＊ＧＨである。当該ＤＡＳは、関節リウマチの現在の活動を含む０〜１０の大きさの数を提供する。５．１超のＤＡＳ２８は高疾患活動性を意味し、３．２未満のＤＡＳ２８は、低疾患活動性を示す。寛解は、２．６未満のＤＡＳ２８により達成される。２つの時点上の１人の患者からのＤＡＳ２８を比較して、改善又は応答を定義することが可能である。
【０１０８】
痛みの患者の評価、及び疾患活動性の患者の全体的評価を、視覚アナログ尺度（ＶＡＳ）を使用して評価する。
【０１０９】
疾患活動性の医師の全体的評価は、５ポイントの等級化した尺度を使用して、患者の現在の疾患活動性を測定する、ここで当該等級化した尺度｛リッカート（Ｌｉｋｅｒｔ）尺度｝とは、０＝無症候、１＝軽度、２＝中程度、３＝重篤、４＝非常に重篤である。
【０１１０】
身体機能の患者の評価は、前週に渡る、身支度や身づくろい、食べること、歩くこと、及びかその患者が前記動作のいずれかをするために助力又は道具を必要とするかどうかの如き、日常動作を実施する患者の能力に関して患者に質問する健康状態質問表（ＨＡＱ）に対する患者の応答に基づいて、測定される。
【０１１１】
朝のこわばりの存在は、患者へのインタビューにより評価され、もしあれば持続時間を記録する。
【図面の簡単な説明】
【０１１２】
【図１】図１は、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５治療の用量漸増樹形図を示す。
【図２】図２は、ＴＡＣＩ−Ｉｇ分子の皮下注射のために使用され得る患者の体部の図を示す。
【図１】
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【図２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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