(57)【要約】  本発明は、新規クラスの化合物、該化合物を含む医薬組成物および該化合物を用いて、異常なまたは無秩序なTPO活性と関連した疾患または障害、特に、血小板減少症を含む疾患または障害を処置または予防する方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式I:
【化１】
2009504758.tif 000034
［式中、
nは、0、1、2および3から選択され;
Zは、NおよびCR8から選択され;ここで、R8は、水素、ハロ、C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルから選択され;ここで、R8の任意のアルキルは、所望により、-S(O)0-2-、-C(O)-、-NR9-および-O-から選択される原子または基で置換されたメチレンを有し;ここで、R9は、水素およびC1-6アルキルから選択され;
R1、R2、R4およびR5は、独立して、水素、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、-XNR9R10、C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキル、C1-6アルコキシおよびハロ-置換-C1-6アルコキシから選択され;ここで、Xは、一重結合およびC1-6アルキレンから選択され;そして、R9およびR10は、独立して、水素およびC1-6アルキルから選択され;
R3は、水素、C1-6アルキル、C3-8ヘテロシクロアルキル、C5-10ヘテロアリール、-OS(O)2R11、-NR11S(O)2R12、-NR11C(O)R12、-NR11C(O)NR11R12、-NR11C(O)C(O)OR12、-NR11C(O)OR12、-OC(O)NR11R12、-C(O)OR11、-C(O)R13、-NR11R12、NR11R13、-S(O)2NR11R12および-C(O)NR11R12から選択され;ここで、R11およびR12は、独立して、C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、シアノ-C1-6アルキル、ヒドロキシ-C1-6アルキルおよび-NR9R10で置換されたC1-6アルキルから選択され;R13は、所望により、1個から3個のC1-6アルキル基で置換されたC3-8ヘテロシクロアルキルであり;ここで、任意のヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、所望により、さらに、独立して、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、シアノ-C1-6アルキル、ヒドロキシ-C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルおよびハロ-置換-C1-6アルコキシから選択される1個から3個の基で置換され得て;
R6は、ハロおよびC1-6アルキルから選択され;そして、
R7は、ハロ、シアノ、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、ハロ-置換-C1-6アルキル、C6-10アリール、C5-10ヘテロアリール、C3-8ヘテロシクロアルキルおよびC3-12シクロアルキルから選択され;ここで、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望により、独立して、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、シアノ-C1-6アルキル、ヒドロキシ-C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルコキシ、-NR14R15、-XOR14、-S(O)2R14、C3-12シクロアルキル、C3-8ヘテロシクロアルキル、C6-10アリールおよびC3-8ヘテロアリールから選択される1個から5個の基で置換され;ここで、Xは、単結合またはC1-6アルキレンであり、そして、R14およびR15は、独立して、C1-6アルキル、シアノ-C1-6アルキル、ヒドロキシ-C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルおよびハロ-置換-C1-6アルコキシから選択され;ここで、R7の任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクロアルキル置換基は、所望により、さらに、独立して、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、シアノ-C1-6アルキル、ヒドロキシ-C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルおよびハロ-置換-C1-6アルコキシから選択される1個から3個の基で置換される］
で示される化合物、および薬学的に許容されるその塩、水和物、溶媒和物および異性体。
【請求項２】
式Ia:
【化２】
2009504758.tif 000035
［式中、
nは、0、1、2および3から選択され;
mは、0、1、2、3、4および5から選択され;
Zは、NおよびCR8から選択され;ここで、R8は、水素、ハロ、C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルから選択され;ここで、R8の任意のアルキルは、所望により、-S(O)0-2-、-C(O)-、-NR9-および-O-から選択される原子または基で置換されたメチレンを有し;ここで、R9は、水素およびC1-6アルキルから選択され;
R1、R2、R4およびR5は、独立して、水素、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、-XNR9R10、C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルから選択され;ここで、Xは、単結合およびC1-6アルキレンから選択され;そして、R9およびR10は、独立して、水素およびC1-6アルキルから選択され;
R3は、-XCOOR9、-XCONR9R10、-NR11S(O)2R12、-S(O)2NR11R12、-NR11C(O)R12、-NR11C(O)NR11R12、-NR11C(O)C(O)OR12および-NR11C(O)OR12から選択され;ここで、Xは、単結合およびC1-6アルキレンから選択され;そして、R9およびR10は、独立して、水素およびC1-6アルキルから選択され;
R6は、ハロおよびC1-6アルキルから選択され;そして、
R20は、ハロおよびC1-6アルキルから選択される］
で示される請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
R6が、フルオロであり、そして、R20が、フルオロ、メチルおよびブチルから選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
R3が、カルボキシル、アミノ-カルボニル、アミノ-スルホニル、メチル-スルホニル-アミノおよびアミノから選択され;そして、R4が、水素、ヒドロキシル、ニトロおよびアミノから選択される、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-ベンズアミド; 4-[7-フルオロ-6-(4-フルオロ-3-メチル-フェニル)-1H-インドル-2−イル]-安息香酸; 4-[7-フルオロ-6-(4-フルオロ-3-メチル-フェニル)-1H-インドル-2−イル]-ベンゼンスルホンアミド; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-3-エチル-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-3-イソプロピル-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-3-メチル-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-1H-ベンゾイミダゾール-2−イル]-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-1H-ベンゾイミダゾール-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸; N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-フェニル}-メタンスルホンアミド; N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-フェニル}-アセトアミド; N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-クロロ-フェニル}-アセトアミド; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-クロロ-フェニルアミン;および、2-アミノ-4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-安息香酸から選択される、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
薬学的に許容される賦形剤との組合せで、治療上有効量の請求項１に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項７】
増加した血中血小板レベルが、病理および/または症状を阻害するか、または軽減する、動物における疾患を処置する方法であって、該動物に治療上有効量の請求項１に記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項８】
減少した血中血小板レベルが、疾患または状態の病理および/または症状の原因となる、動物における疾患を処置するための医薬の製造における請求項１に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、35 U.S.C. §119(e)の下で、2005年8月15日に出願した米国仮特許出願第60/708,438号に基づく優先権の利益を主張する。本優先出願の開示は、その全体をあらゆる目的のために引用により本明細書の一部とする。
【０００２】
発明の背景
発明の分野
本発明は、新規クラスの化合物、該化合物を含む医薬組成物および該化合物を用いて、異常なまたは無秩序なTPO活性と関連した疾患または障害、特に、血小板減少症を含む疾患または障害を処置または予防する方法を提供する。
【背景技術】
【０００３】
背景
巨核球は、循環血液血小板の産生に関与する骨髄由来細胞である。造血サイトカインであるトロンボポエチン(TPO)は、造血幹細胞の細胞増殖および分化の過程を支持し、巨核球の制御のために必要である。
【０００４】
TPO模倣剤としての本発明の新規化合物は、血液または血中血小板の減少が予測される、および/または、それらを生じる疾患または状態の処置において有用であり、該疾患または状態は、非限定的に、放射線療法、化学療法、免疫療法、癌、ウイルス感染、ならびに移植、例えば、骨髄移植および幹細胞移植を含む。
【発明の開示】
【０００５】
発明の要約
ある局面では、本発明は、式I:
【化１】
2009504758.tif 000002
［式中、
nは、0、1、2および3から選択され;
Zは、NおよびCR8から選択され;ここで、R8は、水素、ハロ、C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルから選択され;ここで、R8の任意のアルキルは、所望により、S(O)0-2、C(O)、NR9およびOから選択される原子または基で置換されたメチレンを有し;ここで、R9は、水素およびC1-6アルキルから選択され;
R1、R2、R4およびR5は、独立して、水素、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、-XNR9R10、C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキル、C1-6アルコキシおよびハロ-置換-C1-6アルコキシから選択され;ここで、Xは、一重結合およびC1-6アルキレンから選択され;そして、R9およびR10は、独立して、水素およびC1-6アルキルから選択され;
R3は、水素、C1-6アルキル、C3-8ヘテロシクロアルキル、C5-10ヘテロアリール、OS(O)2R11、NR11S(O)2R12、NR11C(O)R12、NR11C(O)NR11R12、NR11C(O)C(O)OR12、NR11C(O)OR12、OC(O)NR11R12、C(O)OR11、C(O)R13、NR11R12、NR11R13、S(O)2NR11R12およびC(O)NR11R12から選択され;ここで、R11およびR12は、独立して、C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、シアノ-C1-6アルキル、ヒドロキシ-C1-6アルキルおよびNR9R10で置換されたC1-6アルキルから選択され;R13は、所望により、1個から3個のC1-6アルキル基で置換されたC3-8ヘテロシクロアルキルであり;ここで、任意のヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、所望により、さらに、独立して、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、シアノ-C1-6アルキル、ヒドロキシ-C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルおよびハロ-置換-C1-6アルコキシから選択される1個から3個の基で置換され得て;
R6は、ハロおよびC1-6アルキルから選択され;そして、
R7は、ハロ、シアノ、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、ハロ-置換-C1-6アルキル、C6-10アリール、C5-10ヘテロアリール、C3-8ヘテロシクロアルキルおよびC3-12シクロアルキルから選択され;ここで、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望により、独立して、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、シアノ-C1-6アルキル、ヒドロキシ-C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルコキシ、NR14R15、XOR14、S(O)2R14、C3-12シクロアルキル、C3-8ヘテロシクロアルキル、C6-10アリールおよびC3-8ヘテロアリールから選択される1個から5個の基で置換され;ここで、Xは、単結合またはC1-6アルキレンであり、そして、R14およびR15は、独立して、C1-6アルキル、シアノ-C1-6アルキル、ヒドロキシ-C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルおよびハロ-置換-C1-6アルコキシから選択され;ここで、R7の任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクロアルキル置換基は、所望により、さらに、独立して、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、シアノ-C1-6アルキル、ヒドロキシ-C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルおよびハロ-置換-C1-6アルコキシから選択される1個から3個の基で置換される］
で示される化合物、およびN-オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、保護誘導体、個々の異性体およびその異性体の混合物;該化合物の薬学的に許容される塩および溶媒和物(水和物)を提供する。
【０００６】
第2の局面では、本発明は、式Iの化合物またはN-オキシド誘導体、個々の異性体およびその異性体の混合物;または、薬学的に許容されるその塩を、1個またはそれ以上の適当な賦形剤との混合物で含む医薬組成物を提供する。
【０００７】
第3の局面では、本発明は、増加した血小板レベルが疾患または状態の病理および/または症状を阻害するか、または軽減し得る動物での疾患または状態を処置する方法を提供し、該方法は、該動物に治療上有効量の式Iの化合物またはN-オキシド誘導体、個々の異性体およびその異性体の混合物、または、薬学的に許容されるその塩を投与することを含む。
【０００８】
第4の局面では、本発明は、減少した血小板レベルが疾患または状態の病理および/または症状の原因である、動物における疾患または状態を処置するための医薬の製造における式Iの化合物の使用を提供する。
【０００９】
第5の局面では、本発明は、式Iの化合物およびN-オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、保護誘導体、個々の異性体およびその異性体の混合物、ならびに、薬学的に許容されるその塩の製造法を提供する。
【００１０】
発明の詳細な説明
定義
基および他の基の構造要素としての“アルキル”、例えば、ハロ-置換-アルキルおよびアルコキシは、直鎖であるか、または、分枝であり得る。C1-4-アルコキシは、メトキシ、エトキシなどを含む。ハロ-置換アルキルは、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルなどを含む。
【００１１】
“アリール”は、6個から10個の環炭素原子を含む、集合した単環式または縮合二環式芳香環を意味する。例えば、アリールは、フェニルまたはナフチル、好ましくは、フェニルであり得る。“アリーレン”は、アリール基由来の二価の基を意味する。
【００１２】
“ヘテロアリール”は、上記アリールに関して定義したとおりであり、該環員の1個またはそれ以上が、ヘテロ原子である。例えば、ヘテロアリールは、ピリジル、インドリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾ[1,3]ジオキソール、イミダゾリル、ベンゾ-イミダゾリル、ピリミジニル、フラニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、チエニルなどを含む。
【００１３】
“シクロアルキル”は、示された環原子の数を含む、集合した飽和または部分不飽和、単環式、縮合二環式または架橋多環式環を意味する。例えば、C3-10シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。
【００１４】
“ヘテロシクロアルキル”は、本出願で定義したシクロアルキルを意味する(ただし、示された環炭素の1個またはそれ以上が、-O-、-N=、-NR-、-C(O)-、-S-、-S(O)-または-S(O)2-から選択される部分で置換され、ここで、Rは、水素、C1-4アルキルまたは窒素保護基である)。例えば、本発明の化合物を記載するために本出願で使用するC3-8ヘテロシクロアルキルは、モルホリノ、ピロリジニル、ピロリジニル-2-オン、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニルオン、1,4-ジオキサ-8-アザ−スピロ[4.5]デク-8−イルなどを含む。
【００１５】
“ハロゲン”(または、ハロ)は、好ましくは、クロロまたはフルオロを表すが、また、ブロモまたはヨードでもあり得る。
【００１６】
“トロンボポエチン(TPO)”はまた、c-Mplリガンド、mplリガンド、メガポエチン、ならびに巨核球成長および発生因子として当業者に既知である。
【００１７】
“処置する”、“処置すること”および“処置”は、疾患および/またはその付随する症状を軽減または低減する方法のことを言う。
【００１８】
好ましい態様の説明
本発明は、血小板減少症の処置に関する化合物、組成物および方法を提供する。血小板減少症は、健康な個体にとって正常なまたは望まれると考えられる数以下の、血中血小板の数のなんらかの減少として、広く解釈し得る。
【００１９】
ある態様では、式Iの化合物と関連して、式Ia:
【化２】
2009504758.tif 000003
［式中、
nは、0、1、2および3から選択され;
mは、0、1、2、3、4および5から選択され;
Zは、NおよびCR8から選択され;ここで、R8は、水素、ハロ、C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルから選択され;ここで、R8の任意のアルキルは、所望により、S(O)0-2、C(O)、NR9およびOから選択される原子または基で置換されたメチレンを有し;ここで、R9は、水素およびC1-6アルキルから選択され;
R1、R2、R4およびR5は、独立して、水素、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、-XNR9R10、C1-6アルキル、ハロ-置換-C1-6アルキルから選択され;ここで、Xは、単結合およびC1-6アルキレンから選択され;そして、R9およびR10は、独立して、水素およびC1-6アルキルから選択され;
R3は、XCOOR9、XCONR9R10、NR11S(O)2R12、S(O)2NR11R12、NR11C(O)R12、NR11C(O)NR11R12、NR11C(O)C(O)OR12およびNR11C(O)OR12から選択され;ここで、Xは、単結合およびC1-6アルキレンから選択され;そして、R9およびR10は、独立して、水素およびC1-6アルキルから選択され;
R6は、ハロおよびC1-6アルキルから選択され;そして、
R20は、ハロおよびC1-6アルキルから選択される］
で示される化合物がある。
【００２０】
他の態様では、R6が、フルオロであり、そして、R20が、フルオロ、メチルおよびブチルから選択される。
【００２１】
他の態様では、R3が、カルボキシル、アミノ-カルボニル、アミノ-スルホニル、メチル-スルホニル-アミノおよびアミノから選択され;そして、R4が、水素、ヒドロキシル、ニトロおよびアミノから選択される。
【００２２】
本発明の好ましい化合物は、4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-ベンズアミド; 4-[7-フルオロ-6-(4-フルオロ-3-メチル-フェニル)-1H-インドル-2−イル]-安息香酸; 4-[7-フルオロ-6-(4-フルオロ-3-メチル-フェニル)-1H-インドル-2−イル]-ベンゼンスルホンアミド; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-3-エチル-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-3-イソプロピル-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-3-メチル-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-1H-ベンゾイミダゾール-2−イル]-安息香酸; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-1H-ベンゾイミダゾール-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸; N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-フェニル}-メタンスルホンアミド; N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-フェニル}-アセトアミド; N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-クロロ-フェニル}-アセトアミド; 4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-クロロ-フェニルアミン; および2-アミノ-4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-安息香酸から選択される。
【００２３】
さらに好ましい本発明の化合物は、下記の実施例および表において詳細に説明している。
【００２４】
薬理および有用性
血小板減少症は、健康な個体にとって正常なまたは望まれると考えられる数以下の、血中血小板の数のなんらかの減少として、広く解釈し得る。血小板減少症は、非限定的に、放射線療法、化学療法、免疫療法、免疫性血小板減少性紫斑病、骨髄異形成症候群(MDS)、再生不良性貧血、AML、CML、ウイルス感染(非限定的に;HIV、C型肝炎、パルボウイルスを含む)肝臓疾患、骨髄除去、骨髄移植、幹細胞移植、末梢血細胞移植、前駆細胞欠損、幹細胞および前駆細胞における多型、TPOの欠損、好中球減少、樹状細胞動員、増殖、活性化または分化を含む多くの原因因子を有することが知られている。
【００２５】
TPOは、減少した血小板数を有する患者の処置における顕著な治療価値を示す。特に、多くの型の癌を有する患者は、骨髄抑制化学療法または放射線治療のため血小板減少症を患い、それは、出血のリスクの増加を生じ得て、しばしば、強化化学療法または骨髄移植を受けるときに与えられ得る化学療法剤の用量を制限する。
【００２６】
本発明の化合物は、該状態を生じる一つまたは複数の因子にかかわらず、血小板減少症を処置するのに有用である。本発明の化合物はまた、該状態の一つまたは複数の原因因子が既知ではないか、または、まだ同定されていないとき、血小板減少症を処置するのに有用である。本発明の化合物は、血液または血中血小板の減少(非限定的に、移植手術、手術、生誕前の麻酔および内臓保護を含む)が予期されるときはいつでも有用である。
【００２７】
血小板(栓球)は、血液凝固のために必要であり、それらの数が非常に少ない場合、患者は、壊滅的な出血により死の危険性があるので、本発明のTPO模倣剤は、様々な血液障害、例えば、主に血小板欠損が原因の疾患の処置における有用な適用を示す。
【００２８】
上記にしたがって、本発明はさらに、該処置を必要とする対象における上記に記載した疾患または障害のいずれかを予防または処置する方法を提供し、該方法は、該対象に治療上有効量の式Iの化合物または薬学的に許容されるその塩を投与することを含む(下記の“投与および医薬組成物”を参照のこと)。上記使用のすべてに関して、必要とされる量は、投与形態、処置される特定の状態および望む効果に依存して変わる。
【００２９】
投与および医薬組成物
一般に、本発明の化合物を、単独でまたは1個またはそれ以上の治療剤との組合せで、当業者に既知の通常のおよび許容される形態のいずれかにより、治療上有効量で投与する。治療上有効量は、広く、疾患の重篤度、対象の年齢および相対的な健康、使用する化合物の有効性ならびに他の因子に依存して変わり得る。一般に、満足のいく結果は、全身的に、体重あたり約0.03 mg/kgから2.5mg /kgの1日投与量で得られることが示されている。大型哺乳動物、例えば、ヒトで示される1日投与量は、約0.5mgから約100mgの範囲内で、例えば、1日4回までの分割投与でまたは遅延型で、便利に投与される。経口投与のための適当な単位用量型は、約1mgから50mgの有効成分を含む。
【００３０】
本発明の化合物は、任意の慣用的な経路で、特に、経腸的に、例えば、経口で、例えば、錠剤もしくはカプセルの形態で、または非経腸的に、例えば、注射可能溶液もしくは懸濁液の形態で、局所的に、例えば、ローション、ゲル、軟膏もしくはクリームの形態で、または経鼻もしくは座薬の形態で医薬組成物として投与し得る。本発明の化合物を、遊離形または薬学的に許容される塩形で、少なくとも1個の薬学的に許容される担体または希釈剤と共に含む医薬組成物は、混合、造粒または被覆する方法による慣用的な方法で製造し得る。例えば、経口組成物は、a)希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび/またはグリシン; b) 滑剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウムまたはカルシウム塩および/またはポリエチレングリコール;錠剤に関してはまた、c) 結合剤、例えば、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースおよび/またはポリビニルピロリドン;所望により、d) 崩壊剤、例えば、デンプンアガー、アルギン酸またはそのナトリウム塩、または発砲混合物; および/またはe) 吸収剤、着色剤、香味料および甘味料と共に有効成分を含む、錠剤またはゼラチンカプセルであり得る。注射用組成物は、水性等張溶液または懸濁液であり得て、座薬は、脂肪エマルジョンまたは懸濁液から製造し得る。組成物は、滅菌し得ておよび/または保存剤、安定化剤、湿潤剤もしくはエマルジョン化剤のようなアジュバント、溶液プロモーター、浸透圧を制御するための塩および/またはバッファーを含み得る。さらに、それらはまた、他の治療上有効な物質を含み得る。経皮適用のための適当な組成物は、有効量の本発明の化合物を担体と共に含む。担体は、吸収性の薬理学的に許容される溶媒を含み得て、宿主の皮膚を介して通過するのを補助する。例えば、経皮デバイスは、裏打ち材、所望により担体と共に本化合物を含む貯蔵部、所望により長期間にわたって制御した予め決定した速度で、該化合物を宿主の皮膚に送達する速度制御バリア、および皮膚にデバイスを固定するための手段を含む、バンデージの形である。マトリックス経皮組成物を、また、使用し得る。局所適用、例えば、皮膚および目への適用のための適当な組成物は、好ましくは、当業者に既知の水性溶液、軟膏、クリームまたはゲルである。そのようなものは、可溶化剤、安定化剤、等張化増強剤、バッファーおよび防腐剤を含み得る。
【００３１】
本発明の化合物は、1個またはそれ以上の治療剤との組合せ(医薬的組合せ)で、治療上有効量で投与し得る。本発明のTPO模倣化合物はまた、生存または増殖に関して細胞へ作用することが既知である他の薬剤と併用して、生存または増殖に関する細胞への作用において有用である。そのような他の薬剤は、非限定的に、次のものを含む: G-CSF、GM-CSF、TPO、M-CSF、EPO、Gro-ベータ、IL-11、SCF、FLT3リガンド、LIF、IL-3、IL-6、IL-1、プロジェニポエチン(Progenipoietin)、NESP、SD-01、またはIL-5または前記薬剤のいずれかの生物学的に活性な誘導体。
【００３２】
ヒト樹状細胞は、TPO受容体を発現することが示されており、TPOは、有力な樹状細胞の可動化因子である。本発明のTPO模倣剤化合物は、また、それらが樹状細胞の活性および可動性を増加させるという点で、ワクチンアジュバントとして有用である。薬学的に活性な本発明の化合物は、樹状細胞の活性および可動性を増加させることにより、免疫学的アジュバントとして有用であり、経口、経皮または皮下送達ワクチンおよび/または免疫モジュレーターとの組合せで与えられる。
【００３３】
TPOは、巨核球、血小板および幹細胞での抗-アポトーシス/生存効果、ならびに、幹細胞および巨核球細胞での増殖性効果を含む様々な効果を有することが知られている。したがって、本発明のTPOおよび/またはTPO模倣剤は、効果的に、幹細胞および前駆細胞の数を増加させ、その結果、TPOが、分化を誘導する他のサイトカインとの結合で使用されるとき、相乗効果を示す。
【００３４】
本発明の化合物は、他の治療との結合で投与されるとき、共投与化合物の用量は、当然に、共使用する薬剤の型、使用する特異的薬剤、処置される状態などに依存して変わる。
【００３５】
本発明はまた、医薬組成物、例えば、a)本明細書で開示した本発明の化合物である第1薬剤(遊離形または薬学的に許容される塩形)、および、b)少なくとも1個の共薬剤を含むキットを提供する。
【００３６】
本明細書で使用する“共投与”または“組合せ投与”などの用語は、単独の患者への選択された治療剤の投与を包含することを意味し、薬剤が、必ずしも同じ投与経路または同時に投与されるとは限らない処置レジメンを含むことを意図する。
【００３７】
本明細書で使用する、“医薬組合せ剤”なる用語は、2以上の有効成分の混合または組合せから生じる産物を意味し、有効成分の固定および非固定組合せの両方を含む。“固定組合せ”なる用語は、有効成分、例えば、式Iの化合物および共薬剤の両方が、単一物または単一用量で、患者に同時に投与されることを意味する。“非固定組合せ”なる用語は、有効成分、例えば、式Iの化合物および共薬剤の両方が、別々の物として、特定の時間の制限を有さずに、同時に、共にまたは連続して、患者に同時に投与されることを意味する(ここで、そのような投与は、患者の体内で治療上有効なレベルの2個の化合物を提供する)。後者はまた、カクテル療法、例えば、3個またはそれ以上の有効成分の投与に適用する。
【００３８】
本発明の化合物の製造法
本発明はまた、本発明の化合物の製造法を含む。記載した反応では、反応性官能基、例えば、ヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオまたはカルボキシ基(これらは、最終生成物で望まれる)を保護し、反応へのそれらの望まない参加を避けることが必要とされ得る。慣用的な保護基は、標準的な慣習(例えば、T.W. Greene and P. G. M. Wuts in “Protective Groups in Organic Chemistry”, John Wiley and Sons, 1991を参照のこと)に従って使用され得る。
【００３９】
式Iの化合物(ここで、Zは、Nである)は、下記反応スキームI:
【化３】
2009504758.tif 000004
［式中、
nおよびR1からR7は、本発明の要約で定義したとおりである］
で示した手順により製造し得る。式Iの化合物は、適当な溶媒(例えば、DMAなど)中、亜硫酸水素ナトリウムの存在下、式2の化合物と式3の化合物を反応させることにより合成し得る。反応は、約100℃から約180℃の温度範囲内で開始し、完成まで約24時間かかり得る。
【００４０】
式Iの化合物(ここで、Zは、CR8である)は、下記反応スキームII:
【化４】
2009504758.tif 000005
［式中、
nおよびR1からR8は、本発明の要約で定義したとおりである］
で示した手順により製造し得る。式Iの化合物は、適当な溶媒(例えば、酢酸、エタノールなど)中、適当なルイス酸(例えば、塩化亜鉛など)またはプロトン酸(例えば、HClなど)の存在下、式2の化合物と式5の化合物を反応させることにより合成し得る。反応は、約80℃から約120℃の温度範囲内で開始し、完成まで約72時間かかり得る。
【００４１】
式Iの化合物の合成の詳細な例は、下記の実施例で見出し得る。
【００４２】
本発明の化合物のさらなる製造法
本発明の化合物は、該化合物の遊離塩基形を薬学的に許容される無機酸または有機酸と反応させることにより、薬学的に許容される酸付加塩として製造し得る。
あるいは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩基付加塩は、該化合物の遊離酸形を薬学的に許容される無機塩基または有機塩基と反応させることにより製造し得る。
【００４３】
あるいは、本発明の化合物の塩形を、出発物質または中間体の塩を用いて製造し得る。
【００４４】
本発明の化合物の遊離酸形または遊離塩基形は、それぞれ、相当する塩基付加塩または酸付加塩から製造し得る。例えば、酸付加塩形での本発明の化合物は、適当な塩基(例えば、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど)で処理することにより、相当する遊離塩基に変換し得る。塩基付加塩形での本発明の化合物は、適当な酸(例えば、塩酸など)で処理することにより、相当する遊離酸に変換し得る。
【００４５】
非酸化型での本発明の化合物は、適当な不活性有機溶媒(例えば、アセトニトリル、エタノール、水性ジオキサンなど)中、還元剤(例えば、硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、ホウ化水素リチウム、水素化ホウ素ナトリウム、三塩化リン、トリブロマイドなど)を用いて、0℃から80℃で処理することにより、本発明の化合物のN-オキシドから製造し得る。
【００４６】
本発明の化合物のプロドラッグ誘導体を、当業者に既知の方法により製造し得る(例えば、さらなる詳細のために、Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985を参照のこと)。例えば、適当なプロドラッグは、本発明の非誘導体化化合物を適当なカルバミル化剤(例えば、1,1-アシルオキシアルキルカルバノクロリデート、パラ-ニトロフェニル炭酸塩など)と反応させることにより製造し得る。
【００４７】
本発明の化合物の保護誘導体は、当業者により製造し得る。保護基の作製およびそれらの除去に適用可能な技術の詳細な記載は、T. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999に見出し得る。
【００４８】
本発明の化合物は、便利には、本発明の製造の間に、溶媒和物(例えば、水和物)として製造するか、または、形成し得る。本発明の化合物の水和物は、便利には、ジオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールのような有機溶媒を用いて、水性/有機溶媒混合物からの再結晶により製造し得る。
【００４９】
本発明の化合物は、該化合物のラセミ混合物を、所望により、活性な溶解剤と反応させ、一対のジアステレオマー化合物を形成し、該ジアステレオマーを分離し、そして、所望により、純粋エナンチオマーを回収することにより、それらの個々の立体異性体として製造し得る。エナンチオマーの分割は、本発明の化合物の共有結合ジアステレオマー誘導体を用いて行い得るが、解離できる複合体(例えば、結晶性ジアステレオマー塩)が好ましい。ジアステレオマーは、異なる物理的特性(例えば、融点、沸点、溶解性、反応性など)を有し、そして、これらの相違点を利用することにより、容易に分離し得る。ジアステレオマーは、クロマトグラフィーまたは、好ましくは、溶解性の相違に基づく分離/分割技術により分離し得る。次いで、所望により、分割剤と共に、ラセミ化を生じない任意の実用的な手段により、純粋エナンチオマーを回収する。ラセミ混合物からの化合物の立体異性体の分割に適用できる技術に関するより詳細な記載は、Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions”, John Wiley And Sons, Inc., 1981に見出し得る。
【００５０】
要約すると、式Iの化合物は、下記を含む工程により製造し得る:
(a)反応スキームIまたはIIの工程;ならびに
(b)所望により、本発明の化合物を薬学的に許容される塩に変換すること;
(c)所望により、本発明の化合物の塩形を非塩形に変換すること;
(d)所望により、本発明の化合物の非酸化型を薬学的に許容されるN-オキシドに変換すること;
(e)所望により、本発明の化合物のN-オキシド型を非酸化型に変換すること;
(f)所望により、本発明の個々の化合物の異性体を異性体の混合物から分離すること;
(g)所望により、本発明の非誘導体化化合物を薬学的に許容されるプロドラッグ誘導体に変換すること;および、
(h)所望により、本発明の化合物のプロドラッグ誘導体を非誘導体型に変換すること。
【００５１】
出発物質の製造として特に記載されていない限りは、該化合物は、既知であるか、または、当業者に既知の方法もしくは下記実施例で開示した方法と同じように製造し得る。
【００５２】
当業者は、上記変換が、単に、本発明の化合物の製造法を代表するものであり、他の既知の方法を同様に使用し得ることを理解するであろう。
【実施例】
【００５３】
実施例
本発明をさらに、非限定的に、本発明に記載した式Iの化合物の製造を例示する下記の実施例により例示する。
【００５４】
実施例1
4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-安息香酸
【化５】
2009504758.tif 000006
工程1: 4-(6-クロロ-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル)-安息香酸メチルエステル:
【化６】
2009504758.tif 000007
(3-クロロ-2-フルオロ-フェニル)-ヒドラジンヒドロクロライド(Apollo Scientific, Ltd.、221 mg、1.12 mmol)および4-アセチル-安息香酸メチルエステル(200 mg、1.12 mmol)を、無水ZnCl2(382 mg、2.81 mmol)および酢酸(10 mL)で処理する。反応物を、105℃で48時間、加熱する。室温まで冷却した後、反応物を酢酸エチルで希釈し、順次、H2O(5x)で洗浄し、その後、飽和水性NaClで洗浄する。次いで、有機物をNa2SO4で乾燥させ、ろ過する。濃縮後、粗生成物を分取RP LC-MSで精製し、4-(6-クロロ-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル)-安息香酸メチルエステルを黄白色固体として得る: ESMS m/z 304.0 (M + H+)。
【００５５】
工程2および工程3: ジオキサン(4 mL)中、工程1の4-(6-クロロ-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル)-安息香酸メチルエステル(37 mg、0.122 mmol)、4-n-ブチルフェニル-ボロン酸(43 mg、0.244 mmol)、および炭酸セシウム(159mg、0.487 mmol)の混合物に、CombiPhos-Pd6パラジウム触媒(Combiphos Catalysts Inc.、3mg)を加える。混合物をN2で5分間パージし、密閉管中、120℃で7時間加熱する。室温まで冷却後、反応物を酢酸エチルで希釈し、順次、1N HCl、H2O、そして飽和水性NaClで洗浄する。次いで、有機物をNa2SO4で乾燥させ、ろ過し、濃縮する。生じた残渣を、エタノール/H2O(2 mL/1 mL)、次いで、LiOH(26 mg、0.609 mmol)で処理する。この混合物を、50℃で1時間、加熱する。室温まで冷却後、反応物を酢酸エチルで希釈し、1N水性HClで洗浄する。有機層をNa2SO4で乾燥させ、ろ過する。濃縮後、粗生成物を、分取RP LC-MSで精製し、4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-安息香酸を白色固体として得る: 1H NMR (400 MHz, アセトン-d6) δ 11.13 (bs, 1H), 8.10-8.05 (m, 4H), 7.59 (d, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.32 (d, 2H), 7.18-7.12 (m, 2H), 2.71 (t, 2H), 1.70-1.63 (m, 2H), 1.49-1.40 (m, 2H), 0.98 (t, 3H); ESMS m/z 388.2 (M + H+)。
【００５６】
実施例2
4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-ベンズアミド
【化７】
2009504758.tif 000008
工程1: (4'-ブチル-2-フルオロ-ビフェニル-3−イル)-ヒドラジンヒドロクロライド
【化８】
2009504758.tif 000009
ジオキサン(16 mL)およびN-メチルピロリジノン(8 mL)の混合物を、その中に窒素流を通すことにより、15分間、脱酸素化する。3-クロロ-2-フルオロアニリン(3 g、20.6 mmol)の試料を、三方活栓により容器を密閉することができる、ねじぶた付きのアダプターを装備した250 mL丸底フラスコに入れる。次いで、アニリンを、4-ブチルフェニルボロン酸(5.5 g、30.9 mmol)、フッ化セシウム(7.82 g、51.5 mmol)およびビス-(トリ-tert-ブチルホスフィオノ)パラジウム(527 mg、1.03 mmol)で処理する。フラスコを真空にし、窒素を再充填し、密閉する。フラスコを、130℃に前加熱した油浴中に置き、4時間、撹拌する。冷却後、反応物を、セライトのパッドを介してろ過し、次いで、EtOAcですすぐ。その後、有機物を、回転蒸発により除去する。粗反応物を、水で希釈し、EtOAcで抽出する。層を分離し、有機物をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、濃縮する。生じた油状物を、ジエチルエーテルで希釈し、ジオキサン中、過剰の4M HCl溶液で処理する。生じた固体を収集し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させ、4'-ブチル-2-フルオロ-ビフェニル-3−イルアミンヒドロクロライドを白色固体として得る: [M+H]+ C16H19FNに関して計算したLC/MS: 244.3、実測値: 244.2。濃縮水性HCl(50 ml)中、4'-ブチル-2-フルオロ-ビフェニル-3−イルアミンヒドロクロライド(5.4 g、0.019 mol)の0℃の混合物を、H2O (20 ml)中、亜硝酸ナトリウム(1.3 g、0.019 mol)の滴下による添加で、10分間、処理する。生じた溶液を0℃で1時間撹拌し、次いで、濃縮水性HCl(14 ml)中、塩化スズ(II) (13.0 g、0.058 mol)の0℃の溶液の滴下による添加で処理する。この混合物を15分間撹拌し、その後、ろ過する。単離した固体を冷飽和水性NaClで洗浄し、次いで、50% NaOHに懸濁する。結果物のスラリーをH2Oで希釈し、Et2Oで抽出する。有機層をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、濃縮する。生じた残渣を100 mlのEt2Oに溶解し、0℃まで冷却する。ジオキサン(15 ml)中、4.0 M HClを、この溶液に滴下により加え、生じた沈殿を収集し、4.58 g (81%)の望むヒドラジンヒドロクロライドを得る。C16H20FN2に関して計算したLC/MS: 259.3 、結果: 259.2。
【００５７】
工程2: 工程1から得た(4'-ブチル-2-フルオロ-ビフェニル-3−イル)-ヒドラジンヒドロクロライド(90 mg、0.306 mmol)および4-アセチル-ベンズアミド(Sigman, M. E. et al.  J. Am. Chem. Soc.  1988, 110, 4297.)(50 mg、0.306 mmol)を、無水ZnCl2 (418 mg、3.06 mmol)および酢酸(4 mL)で処理する。反応は、105℃で48時間、加熱する。室温まで冷却後、反応物を酢酸エチルで希釈し、順次、H2O (5x)、1N 水性HCl、および飽和水性 NaClで洗浄する。次いで、有機層をNa2SO4で乾燥させ、ろ過する。濃縮後、粗生成物を分取RP LC-MSで精製し、4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-ベンズアミドを黄褐色固体として得る: 1H NMR (400 MHz, アセトン-d6) δ 11.11 (bs, 1H), 8.08-8.01 (m, 4H), 7.59-7.43 (m, 4H), 7.38-7.29 (m, 2H), 7.18-7.12 (m, 2H), 6.65 (bs, 1H), 2.74-2.63 (m, 2H), 1.76-1.64 (m, 2H), 1.50-1.38 (m, 2H), 1.04-0.93 (m, 3H); ESMS m/z 387.2 (M + H+)。
【００５８】
実施例3
4-[7-フルオロ-6-(4-フルオロ-3-メチル-フェニル)-1H-インドル-2−イル]-安息香酸
【化９】
2009504758.tif 000010
適当な出発物物質を用いて、実施例2に記載した手順を繰り返すことにより、4-[7-フルオロ-6-(4-フルオロ-3-メチル-フェニル)-1H-インドル-2−イル]-安息香酸を、白色固体として得る: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.09 (d, 2H), 7.98 (d, 2H), 7.52-7.42 (m, 3H), 7.18-7.05 (m, 3H), 2.32 (s, 3H); ESMS m/z 364.1 (M + H+)。
【００５９】
実施例4
4-[7-フルオロ-6-(4-フルオロ-3-メチル-フェニル)-1H-インドル-2−イル]-ベンゼンスルホンアミド
【化１０】
2009504758.tif 000011
適当な出発物物質を用いて、実施例2に記載した手順を繰り返すことにより、4-[7-フルオロ-6-(4-フルオロ-3-メチル-フェニル)-1H-インドル-2−イル]-ベンゼンスルホンアミドを、黄褐色固体として得る: 1H NMR (400 MHz, アセトン-d6) δ 11.12 (bs, 1H), 8.18-8.13 (m, 2H), 8.06-7.98 (m, 2H), 7.59-7.48 (m, 3H), 7.22-7.12 (m, 3H), 6.68 (bs, 2H), 2.33 (s, 3H); ESMS m/z 399.1 (M + H+)。
【００６０】
実施例5
4-[6-(4-ブチル-フェニル)-3-エチル-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸
【化１１】
2009504758.tif 000012
工程1: 2-ヒドロキシ-4-ヨード-安息香酸
【化１２】
2009504758.tif 000013
4-アミノ-2-ヒドロキシサリチル酸 (10 g、65.3 mmol)の試料を、大きな撹拌子を備え付けた2リットルErlenmeyerフラスコに入れ、氷/水浴中で冷却し、濃硫酸(20 mL)および十分な水で処理し、自由流動性懸濁液(〜50 mL)を作る。20分間撹拌後、反応物を、水(20 mL)中、亜硝酸ナトリウム(4.55 g、66.0 mmol)の溶液で、10分間、処理する。さらに3分間撹拌した後、反応物を、水(30 mL)中、ヨウ化カリウム(16.9 g、101 mmol)の溶液で、15分間、処理する。冷却槽を除去し、反応物が、かなりの量の窒素ガスを産生するように、それを注意深くモニターし、撹拌する。反応が終結後、一時的に70℃まで加熱し、その後、室温まで冷却し、一晩置く。生じた固体をろ過により収集し、水で洗浄し、乾燥させ、粗2-ヒドロキシ-4-ヨード-安息香酸を得る(さらなる精製なしに、次の反応で使用する): ESMS m/z 265.0 (M + H+)。
【００６１】
工程2: 2-ヒドロキシ-4-ヨード-安息香酸メチルエステル
【化１３】
2009504758.tif 000014
THF (25 ml)およびMeOH (25ml)中、2-ヒドロキシ-4-ヨード-安息香酸(4.0 g、0.015 mol)の溶液を、(トリメチルシリル)-ジアゾメタン(Et2Oで2.0M、15 ml)の滴下添加により処理し、室温で2.5時間、撹拌する。揮発物を真空で除去し、粗残渣をEtOAcで希釈する。有機層を、順次、飽和水性NaHCO3(3x)、飽和水性NaCl(1x)、H2O(1x)で洗浄する。有機層をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、濃縮する。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中、0-80% 酢酸エチル勾配)で精製し、2-ヒドロキシ-4-ヨード-安息香酸メチルエステルを得る: ESMS m/z 279.0 (M + H+)。
【００６２】
工程3: 2-ヒドロキシ-4-ビニル-安息香酸メチルエステル
【化１４】
2009504758.tif 000015
THF (184 ml)およびH2O (46 ml)中、2-ヒドロキシ-4-ヨード-安息香酸メチルエステル(8.01 g、0.0288 mol)の溶液を、ビニル-ボロン酸ジ-ブチルエステル(9.53 ml、0.0432 mol、1.5 当量)、NaCO3 (21.37 g、0.201 mol、7 当量)、およびジクロロ-ビス(トリフェニル-ホスフィン)パラジウム(1.01 g、1.44 mmol、5 mol%)で処理する。溶液を、N2(g)で5分間パージし、還流で2時間加熱する。反応物を、真空で濃縮し、EtOAcで希釈し、順次、H2Oおよび飽和水性NaClで洗浄する。有機層を、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、濃縮する。粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中、5% 酢酸エチル)で精製し、2-ヒドロキシ-4-ビニル-安息香酸メチルエステルを得る: ESMS m/z 179.1 (M + H+)。
【００６３】
工程4: 4-ホルミル-2-ヒドロキシ-安息香酸メチルエステル
【化１５】
2009504758.tif 000016
O2(g)の安定した気流を、CH2Cl2 (50 ml)中、2-ヒドロキシ-4-ビニル-安息香酸メチルエステル(3.28 g、0.0184 mol)の冷(-78℃)溶液を通過させる。5分後、O3(g)を、溶液の色が青色/灰色に変わるまで、該溶液中でバブリングする。次いで、溶液を、O2(g)で5分間パージし、DMS (4.05 ml、0.0552 mol)で処理し、室温で一晩、温める。すべての揮発物質を真空で除去し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中、0-100% 酢酸エチル勾配)で精製し、4-ホルミル-2-ヒドロキシ-安息香酸メチルエステルを得る: ESMS m/z 181.0 (M + H+)。
【００６４】
工程5: 2-ヒドロキシ-4-(1-ヒドロキシ-ブチル)-安息香酸メチルエステル
【化１６】
2009504758.tif 000017
4-ホルミル-2-ヒドロキシ-安息香酸メチルエステル(360 mg、2mmol)を、THF (無水、10 mL)に溶解する。溶液を-78℃まで冷却し、窒素下、撹拌する。この溶液に、n-プロピル-塩化マグネシウム(THF中、2M、2 mL、2 mmol)を、注射器による滴下で加える。反応混合物を、-78℃で1時間、撹拌し、次いで、その時点の後、室温まで1時間にわたって段階的に温め、反応を、飽和水性塩化アンモニウムを加えることによりクエンチする。生じた混合物を、EtOAc (3 x 15 mL)で抽出する。合わせた有機層を、飽和水性NaClで洗浄し、Na2SO4で乾燥させる。濃縮後、粗生成物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中、10-20% 酢酸エチル勾配)で精製し、2-ヒドロキシ-4-(1-ヒドロキシ-ブチル)-安息香酸メチルエステルを無色油状物として得る: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.74 (s, 1H), 7.79 (d, 1H, J = 8.4Hz), 6.95 (d, 1H, J = 1.2 Hz), 6.86 (dd, 1H, J = 1.6, 8 Hz), 4.67 (t, 1H, J = 6.8 Hz), 3.94 (s, 3H), 1.82 (br, 1H), 1.80-1.62 (m, 1H), 1.46-1.28 (m, 2H), 0.93 (t, 3H, J = 7.2 Hz)。
【００６５】
工程6: 4-ブチリル-2-ヒドロキシ-安息香酸メチルエステル
【化１７】
2009504758.tif 000018
DCM (6 mL)中、2-ヒドロキシ-4-(1-ヒドロキシ-ブチル)-安息香酸メチルエステル(132 mg、0.59 mmol)の溶液に、PDC (245 mg、1.1 mmol)を一度に加える。反応物を、一晩撹拌する。反応混合物を、溶離剤としてDCMを用いたシリカゲルプラグを介してろ過する。ろ液を濃縮し、4-ブチリル-2-ヒドロキシ-安息香酸メチルエステルを白色固体として得る: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.77 (s, 1H), 7.92 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.52 (d, 1H, J = 1.6 Hz), 7.44 (dd, 1H, J = 1.6, 8 Hz), 3.99 (s, 3H), 2.93 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 1.76 (qt, 2H, J = 7.6 Hz), 1.00 (t, 3H, J = 7.6 Hz)。
【００６６】
工程7: 4-(6-クロロ-3-エチル-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル)-2-ヒドロキシ-安息香酸メチルエステル
【化１８】
2009504758.tif 000019
酢酸(2 mL)中、4-ブチリル-2-ヒドロキシ-安息香酸メチルエステル(60 mg、0.27 mmol)、(3-クロロ-2-フルオロ-フェニル)-ヒドラジン(Apollo Scientific, Ltd.、54 mg、0.27 mmol)、および塩化亜鉛(110 mg、0.8 mmol)の混合物を、窒素で5分間パージし、次いで、密閉管で120℃、2時間、加熱する。混合物を室温まで冷却し、酢酸エチルで希釈する。生じた混合物を、順次、飽和水性Na2CO3および飽和水性NaClで洗浄し、そして最後に、硫酸ナトリウムで乾燥させる。濃縮後、粗生成物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中、10% 酢酸エチル)で精製し、4-(6-クロロ-3-エチル-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル)-2-ヒドロキシ-安息香酸メチルエステルを淡黄色固体として得る: ESMS m/z 348.1 (M + H+)。
【００６７】
工程8および工程9: ジオキサン(3 mL、無水)中、4-(6-クロロ-3-エチル-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル)-2-ヒドロキシ-安息香酸メチルエステル(50 mg、0.14 mmol)、4-n-ブチル-フェニルボロン酸(50 mg、0.28 mmol)、およびフッ化セシウム(78 mg、0.52 mmol)の混合物に、パラジウムビス(トリ-tert-ブチル-ホスフィン)(6 mg、10 mol%)を加える。この混合物を、N2で3分間パージし、次いで、密閉管で、120℃、4時間、加熱する。混合物を室温まで冷却し、ろ過し、そして、ろ液を濃縮する。生じた残渣を、エタノール / H2O (1 mL / 0.1 mL)で溶解し、マイクロ波管に移す。LiOH (12mg、0.54 mmol)を添加し、混合物を、マイクロ波放射の下、120℃、6分間、加熱する。粗生成物混合物をろ過する。ろ液の濃縮後、粗生成物を、分取RP LC-MSで精製し、4-[6-(4-ブチル-フェニル)-3-エチル-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸を、黄色固体として得る: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.96 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.50 (d, 2H, J = 8 Hz), 7.42(d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.24 (d, 2H, J = 8 Hz), 7.21-7.20 (m, 2H), 7.10 (dd, 1H, J = 8, 8 Hz), 2.95 (q, 2H, J = 7.6 Hz), 2.66 (t, 2H, J = 8 Hz), 1.65 (m, 2H), 1.40 (m, 2H), 1.34 (t, 3H, J = 7.6 Hz), 0.97 (t, 3H, J = 7.6 Hz); ESMS m/z 432.2 (M + H+)。
【００６８】
実施例6
4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-3-イソプロピル-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸
【化１９】
2009504758.tif 000020
適当な出発物物質を用いて、実施例5に記載した手順を繰り返すことにより、4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-3-イソプロピル-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸を、黄色固体として得る: 1H NMR (400 MHz, アセトン-d6) δ 10.64 (s, 1H), 8.01 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.68 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.55 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 7.31 (d, 2H, J = 8 Hz), 7.23-7.13 (m, 3H), 3.46 (m, 1H), 2.68 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 1.66 (m, 2H), 1.51 (d, 6H, J = 7.2 Hz), 1.40 (m, 2H), 0.96 (t, 3H, J = 7.6 Hz); ESMS m/z 446.2 (M + H+)。
【００６９】
実施例7
4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸
【化２０】
2009504758.tif 000021
適当な出発物物質を用いて、実施例5に記載した手順を繰り返すことにより、4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸を、黄色固体として得る: 1H NMR (400 MHz, アセトン-d6) δ 11.12 (bs, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.60-7.53 (m, 4H), 7.48 (d, 1H), 7.32 (d, 2H), 7.18-7.10 (m, 2H), 2.67 (t, 2H), 1.72-1.61 (m, 2H), 1.49-1.37 (m, 2H), 0.98 (t, 3H); ESMS m/z 404.2 (M + H+)。
【００７０】
実施例8
4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-3-メチル-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸
【化２１】
2009504758.tif 000022
適当な出発物物質を用いて、実施例5に記載した手順を繰り返すことにより、4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-3-メチル-1H-インドル-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸を、黄色固体として得る: 1H NMR (400 MHz, アセトン-d6) δ 10.75 (bs, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.57-7.15 (m, 8H), 2.74-2.62 (m, 2H), 2.58 (s, 3H), 1.71-1.61 (m, 2H), 1.43-1.35 (m, 2H), 0.98 (t, 3H); ESMS m/z 418.2 (M + H+)。
【００７１】
実施例9
4-[6-(4-ブチル-フェニル)-1H-ベンゾイミダゾール-2−イル]-安息香酸
【化２２】
2009504758.tif 000023
工程1: 4'-ブチル-3-ニトロ-ビフェニル-4−イルアミン
【化２３】
2009504758.tif 000024
4-ブロモ-2-ニトロアニリン(205 mg、0.945 mmol)、4-ブチルフェニルボロン酸(336 mg、1.89 mmol)、フッ化セシウム(430 mg、2.83 mmol)、ビス(トリ-t-ブチル-ホスフィン)-パラジウム(24.1 mg、0.0472 mmol)、およびジオキサン(2 ml)を入れたSmith Process Vialを、アルゴン(g)で5分間、パージし、次いで、マイクロ波で、120℃、15分間、加熱する。粗反応物を、溶離剤としてEtOAcを用いて、セライトを介してろ過する。ろ液を真空で濃縮し、粗生成物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中、0-100% 酢酸エチル勾配)で精製し、4'-ブチル-3-ニトロ-ビフェニル-4−イルアミンを得る: ESMS m/z 271.2 (M + H+)。
【００７２】
工程2: 4'-ブチル-ビフェニル-3,4-ジアミン
【化２４】
2009504758.tif 000025
2:1 v/v MeOH / EtOAc (4 ml)中、4'-ブチル-3-ニトロ-ビフェニル-4−イルアミン(117 mg、3.70 mmol)および10% Pd/C (10 mg)を、安定したH2 (g)の泡で15分間、処理する。反応を、1atmのH2下で1時間、撹拌しながら維持する。反応物を、セライトを介してろ過し、ろ液を真空で濃縮し、4'-ブチル-ビフェニル-3,4-ジアミンを得る: ESMS m/z 241.2 (M + H+)。
【００７３】
工程3: DMA (250 μL)中、4-ホルミル-安息香酸メチルエステル(21.0 mg、0.129 mmol)およびNaHSO3 (20.1 mg、0.193 mmol、1.5 当量)の加熱(140℃)混合物を、DMA (100 μL)中、4'-ブチル-ビフェニル-3,4-ジアミン(31 mg、0.129 mmol)の滴下添加で、10分間、処理する。生じた混合物を、140℃で1時間、撹拌し、次いで、H2O (1 ml)で処理し、さらに1時間、撹拌する。反応物をEtOAcで希釈し、層を分離する。有機層をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、濃縮する。粗ベンゾイミダゾール生成物を、95% エタノール(0.5 ml)およびTHF (1 ml)で希釈し、LiOH (15.4 mg、0.645 mmol、5 当量)を含むSmith-Process Vialに移す。反応槽を、マイクロ波照射下、5分間、165℃まで加熱する。濃縮後、粗生成物を、分取RP LC-MSで精製し、4-[6-(4-ブチル-フェニル)-1H-ベンゾイミダゾール-2−イル]-安息香酸を得る: 1H NMR (400 MHz, CD3OD)  δ  9.00 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.91 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.31 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 8.23 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.62 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.38 (dd, J = 7.8, 7.7 Hz, 1H), 2.69 (dd, J = 7.8, 7.6 Hz, 1H), 2.35 (m, 1H), 2.09 (m, 1H), 1.66 (dd, J = 7.4, 7.3 Hz, 3H), 1.41 (m, 1H), 0.97 (dd, J = 7.3, 6.9 Hz, 2H); ESMS m/z 371.2 (M + H+)。
【００７４】
実施例10
4-[6-(4-ブチル-フェニル)-1H-ベンゾイミダゾール-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸
【化２５】
2009504758.tif 000026
適当な出発物物質を用いて、実施例5および9に記載した手順を繰り返すことにより、4-[6-(4-ブチル-フェニル)-1H-ベンゾイミダゾール-2−イル]-2-ヒドロキシ-安息香酸を得る: ESMS m/z 387.1 (M + H+)。
【００７５】
実施例11
N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-フェニル}-メタンスルホンアミド
【化２６】
2009504758.tif 000027
適当な出発物物質を用いて、実施例2に記載した手順を繰り返すことにより、N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-フェニル}-メタンスルホンアミドを、黄褐色固体として得る: 1H NMR (400 MHz, アセトン-d6) δ 11.00 (bs, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.99 (d, 2H), 7.55 (d, 2H), 7.52-7.44 (m, 3H), 7.32 (d, 2H), 7.15 (dd, 1H), 7.01 (s, 1H), 3.09 (s, 3H), 2.72 (t, 2H), 1.75-1.64 (m, 2H), 1.47-1.36 (m, 2H), 0.99 (t, 3H); ESMS m/z 437.2 (M + H+)。
【００７６】
実施例12
N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-フェニル}-アセトアミド
【化２７】
2009504758.tif 000028
適当な出発物物質を用いて、実施例2に記載した手順を繰り返すことにより、N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-フェニル}-アセトアミドを、黄褐色固体として得る: 1H NMR (400 MHz, アセトン-d6) δ 10.95 (bs, 1H), 9.32 (bs, 1H), 7.92 (d, 2H), 7.81 (d, 2H), 7.57 (d, 2H), 7.43 (d, 1H), 7.32 (d, 2H), 7.16 (dd, 1H), 6.97 (s, 1H), 2.70 (t, 2H), 1.69-1.62 (m, 2H), 1.42-1.33 (m, 2H), 0.96 (t, 3H); ESMS m/z 401.1 (M + H+)。
【００７７】
実施例13
N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-クロロ-フェニル}-アセトアミド
【化２８】
2009504758.tif 000029
適当な出発物物質を用いて、実施例2に記載した手順を繰り返すことにより、N-{4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-クロロ-フェニル}-アセトアミドを、固体として得る: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.91 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.19 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 2.1Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 8.6, 2.1 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 8.1, 1.6 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.03 (dd, J = 8.1, 6.9 Hz, 1H), 6.91 (dd, J = 3.3, 2.3 Hz, 1H), 2.56 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.54 (m, 2H), 1.28 (m, 2H), 0.83 (t, J = 7.3 Hz, 3H); ESMS m/z 435.2 (M + H+)。
【００７８】
実施例14
4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-クロロ-フェニルアミン
【化２９】
2009504758.tif 000030
適当な出発物物質を用いて、実施例2に記載した手順を繰り返すことにより、4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-クロロ-フェニルアミンを、固体として得る: ESMS m/z  393.3 (M + H+)。
【００７９】
実施例15
2-アミノ-4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-安息香酸
【化３０】
2009504758.tif 000031
工程1: 1-(3-ニトロ-4-ビニル-フェニル)-エタノン
【化３１】
2009504758.tif 000032
THF/H2O(12 mL/4 mL)中、4'-ブロモ-3'-ニトロアセトフェノン(600 mg、2.46 mmol)、ビニルボロン酸ジブチルエステル(680 mg、3.69 mmol)、および炭酸ナトリウム(1.83 g、17.22 mmol)の混合物に、ジクロロビス(トリフェニルホスピン)パラジウム(II)(86 mg、5% mmol)を加える。反応管を密閉し、混合物をN2で3分間パージし、70℃で1.5h加熱する。次いで、混合物を室温まで冷却し、飽和塩化アンモニウム水溶液を注ぐ。混合物を酢酸エチル(3 x 20 mL)で抽出する。有機抽出物を混合し、塩水で洗浄し、濃縮する。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し(ヘキサン中、20% 酢酸エチル)、1-(3-ニトロ-4-ビニル-フェニル)-エタノンを得る(黄色固体、収率87%): ESMS m/z 192.0 (M + H+)。
【００８０】
工程2: 4-アセチル-2-ニトロ-安息香酸メチルエステル
【化３２】
2009504758.tif 000033
工程1で取得した1-(3-ニトロ-4-ビニル-フェニル)-エタノン(410mg、2.14 mmol)をDCM (20 mL)に溶解し、-78℃まで冷却する。MeOH (5 mL)中、NaOH (429 mg、10.7 mmol)を加える。O3(g)を、溶液の色が青色/灰色になるまで、溶液中でバブリングする。次いで、溶液を、青色が消えるまでN2(g)でパージする。溶液を室温まで温め、濃縮し、4-アセチル-2-ニトロ-安息香酸メチルエステルを無色油状物として得る: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 (d, 1H, J = 1.6 Hz), 8.19 (dd, 1H, J = 7.6, 1.6 Hz), 7.79 (d, 1H, J = 8 Hz), 3.91 (s, 3H), 2.66 (s, 3H)。
【００８１】
工程3-工程5: 実施例2に記載した手順の後、4-アセチル-2-ニトロ-安息香酸メチルエステル(工程2で取得したもの)および(4'-ブチル-2-フルオロ-ビフェニル-3−イル)-ヒドラジンヒドロクロライド(実施例2、工程1)の試料を使用し、4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-2-ニトロ-安息香酸メチルエステルを形成する。相当するアミンにおけるニトロ基の水素化(1 atm H2、Pd/C)、その後のNaOH (EtOH / H2O)を用いたメチルエステルの鹸化および分取RP LC-MSを用いた最終精製により、2-アミノ-4-[6-(4-ブチル-フェニル)-7-フルオロ-1H-インドル-2−イル]-安息香酸を固体として得る: 1H NMR (400 MHz, アセトン-d6) δ 11.07 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.53 (dd, 2H), 7.45 (d, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.31 (d, 2H), 7.19-7.13 (m, 2H), 7.02-7.00 (m, 1H), 2.67 (t, 2H), 1.67-1.62 (m, 2H), 1.42-1.37 (m, 2H), 0.94 (t, 3H); ESMS m/z  403.1 (M + H+)。
【００８２】
アッセイ
本発明の化合物を、ヒトTPO受容体(TPO-R)をトランスフェクトしたマウスBaF3細胞株を用いたインビトロ増殖アッセイにおいて、TPO模倣剤としてのそれらの有効性を測定するためにアッセイする。
【００８３】
ルシフェラーゼレポーターアッセイ
Ba/F3-TpoR細胞を洗浄し、8 x 104細胞/mLで、1%または20%のFBS、MS、HSまたは(ヒト血清アルブミン + アルファ1酸性糖タンパク質)、1% Pen-Strep-Gluおよび1 mMまたは25 μM ZnSO4を補充したRPMI-1640で再懸濁し、50 mL/ウェルで384-ウェルプレートに分注し、一晩(18-20 hr)飢餓状態にする。2日後、飢餓細胞を、0.5 mLのDMSO、化合物またはrhTpo (30 ng/mL)を用いて、37℃、5% CO2で7時間、処理する。水で60%まで希釈したPerkin Elmer Britelite (25 mL)を各ウェルに加え、数分後、プレートをCLIPRで読み取り、蛍光シグナルを記録する。
【００８４】
増殖アッセイ
Ba/F3-TpoR細胞を洗浄し、8 x 104細胞/mLで、1%FBS、1% Pen-Strep-Gluおよび1 mMまたは25 μM ZnSO4を補充したRPMI-1640で再懸濁し、50 mL/ウェルで384-ウェルプレートに分注し、一晩(18-20 hr)飢餓状態にする。2日後、飢餓細胞を、0.5 mLのDMSO、化合物またはrhTpo (30 ng/mL)を用いて、37℃、5% CO2で48時間、処理する。Alamar Blue試薬(〜7% 最終濃度で3.5μL)を各ウェルに加え、プレートを4時間インキュベートし、Analyst GTで読み取り、蛍光シグナルを記録する。
【００８５】
CFU-Megアッセイ
CD34+ 細胞およびMegaCult-Cキット(StemCell Technologies, Inc., Vancouver, Canada)を、アッセイのために使用する。CD34+細胞を、製造者のプロトコールに従って、スライドあたり104細胞で、MegaCult-Cコラーゲン溶液と混合する。異なる濃度でのTPOまたは本発明の化合物の添加後、スライドを、37℃、5% CO2で12日間、インキュベートし、固定し、ヒトCFU-Megに関して染色し、倒立顕微鏡を用いてコロニーを定量する。
【００８６】
遊離形または薬学的に許容される塩形での式Iの化合物は、有益な薬理学的特性、例えば、本出願で記載したインビトロ試験で示したような特性を示す。本発明の化合物は、好ましくは、1 x 10-9から1 x 10-5M、好ましくは、500nM以下、より好ましくは、250nM以下の範囲におけるIC50を有するTPO模倣剤活性を示す。式Iの化合物は、TPOと比較して、25%から150%の範囲における有効性を示す。
【００８７】
本明細書に記載した実施例および態様は、説明に役立てる目的のためだけの使用であり、それを踏まえた様々な修飾または変化が当業者に示され、それらは、本出願の精神および視野ならびに添付した請求項の範囲内にあるべきものと理解される。本明細書で引用したすべての出版物、特許、および特許出願は、あらゆる目的のために引用により本明細書の一部とする。
【国際調査報告】
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