(57)【要約】  本発明は、ＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬの増殖促進機能を抑制するのに十分な量のＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を、処置を必要とする患者に投与することを含んで成る、過剰増殖性疾患及び癌、例えば多発性骨髄腫及びヴァルデンストレームマクログロブリン血症を処置するための方法及び組成物を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）ＢｌｙＳに結合するＴＡＣＩ細胞外ドメイン又はそのフラグメント；及び
（ｉｉ）多発性骨髄腫を処置するのに有効な量のヒト免疫グロブリン定常領域、
を含んで成る融合分子を含んで成る組成物を患者に投与することを含んで成る、多発性骨髄腫を処置する方法。
【請求項２】
（ｉｉｉ）ＢｌｙＳに結合するＴＡＣＩ細胞外ドメイン又はそのフラグメント；及び
（ｉｖ）ヴァルデンストレームマクログロブリン血症を処置するのに有効な量のヒト免疫グロブリン定常領域、
を含んで成る融合分子を含んで成る組成物を患者に投与することを含んで成る、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症を処置する方法。
【請求項３】
ＴＡＣＩ細胞外ドメインが配列番号：１の配列を有する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
ＴＡＣＩ細胞外ドメインが、配列番号：１と少なくとも５０％の同一性である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項５】
ヒト免疫グロブリン定常領域が、配列番号：２の配列を有する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項６】
前記組成物を、患者の体重１ｋｇあたり０．０１ｍｇから患者の体重１ｋｇあたり１０ｍｇの量で投与する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項７】
前記組成物を、４週間の間隔の間に５回、前記の量で投与する、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記組成物を、多サイクルの間、前記の量で投与し、各サイクルが、４週間の間隔の間に５回、前記の量の組成物を投与することを含んで成る、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記方法が、薬剤を患者に投与することを更に含んで成る、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１０】
前記薬剤が、ビスフォスフォネート、エリスロポエチン、顆粒球成長因子、顆粒球コロニー刺激因子、疼痛の管理のための薬剤、メルファラン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、サリドマイド、ヌクレオシドアナログ、及びボルテゾミブを含むがこれに限定されないプロテアソーム阻害剤から成る群から選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物を、皮下、経口又は静脈内投与する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１２】
患者がヒトである、請求項１又は２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００５年８月９日付で出願された米国特許仮出願第６０／７０６，８８８号の利益を主張し、これは、引用文献により本明細書中に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、ＴＮＦファミリーの成長因子の機能をブロックするＴＡＣＩ−Ｉｇ融合タンパク質を投与することを含んで成る、疾病及び疾患、例えば過剰増殖性疾患、癌、炎症性疾病又は疾患及び免疫系の疾病を処置するための方法及び組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
ＢｌｙＳ  リガンド／レセプターファミリー
３つのレセプター、ＴＡＣＩ（膜貫通アクチベーター又はＣＡＭＬ−インターラクター（ｉｎｔｅｒａｃｔｏｒ）、ＢＣＭＡ（Ｂ細胞成熟抗原）及びＢＡＦＦ−Ｒ（ＴＮＦファミリーに属する、Ｂ細胞活性化因子のためのレセプター）は、２つの成長因子であるＢｌｙＳ（Ｂ−リンパ球刺激因子）及びＡＰＲＩＬ（増殖誘導性リガンド）に対して独特の結合親和性を有するものとして同定された（Ｍａｒｓｔｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｕｒｒ  Ｂｉｏｌ  ２０００；１０（１３）：７８５−７８８；Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００１；２９３−２１  ０８−２１１１）。ＴＡＣＩ及びＢＣＭＡは、ＢＬｙＳ及びＡＰＲＩＬの双方に結合し、一方、ＢＡＦＦ−Ｒは、ＢＬｙＳのみに高い親和性で結合することができるようである（Ｍａｒｓｔｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｕｒｒ  Ｂｉｏｌ  ２０００；１０（１３）:７８５−７８８；Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００１；２９３:２１０８−２１１１）。結果として、ＢＬｙＳは３つの全てのレセプターを通してシグナル伝達することができ、一方、ＡＰＲＩＬは、ＴＡＣＩ及びＢＣＭＡを通してシグナル伝達することができるようである。更に、ＢＬｙＳ及びＡＰＲＩＬの循環するヘテロ三量体複合体（３つのタンパク質のグループ化、ＢＬｙＳ及びＡＰＲＩＬの１つ又は２つのコピーを含む）は、全身性免疫ベースリウマチ性疾患を有する患者から採取した血清試料中で同定され、インビトロでＢ細胞増殖を誘導することが示された（Ｒｏｓｃｈｋｅ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００２；１６９:４３１４−４３２１）。
【０００４】
ＢＬｙＳ及びＡＰＲＩＬは、Ｂ細胞の成熟、増殖及び生存の有力な刺激因子である（Ｍｏｏｒｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９９；２８５（５４２５）：２６０−２６３；Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １９９９；１８９（１１）：１７４７−１７５６；Ｄｏ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  ２０００；１９２（７）:９５３−９６４）。ＢＬｙＳ及びＡＰＲＩＬは、自己免疫疾患、特にＢ細胞に関連するものの持続に必要であるかもしれない。ＢＬｙＳを高いレベルで発現するように遺伝子組換えした遺伝子組換えマウスは、免疫細胞疾患を示し、全身性エリテマトーデスを有する患者に診られるものと類似の症状を示す（Ｇｒｏｓｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ２０００；４０４:９９５−９９９；Ｍａｃｋａｙ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅ  １９９９；１９０（１１）；１６９７−１７１０）。同様に、増大したレベルのＢＬｙＳ／ＡＰＲＩＬは、全身性エリテマトーデス患者、及び関節リウマチのような様々な自己免疫疾患を有する他の患者から採取した血清試料中で測定され（Ｒｏｓｃｈｋｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００２；１６９:４３１４−４３２１； Ｃｈｅｅｍａ  ｅｔ  ａｌ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ  ２００１；４４（６）：１３１３−  １３１９；Groom  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  ２００２；１０９（１）:５９−６８；Ｍａｒｉｅｔｔｅ  Ｘ，Ａｎｎ  Ｒｈｅｕｍ  Ｄｉｓ  ２００３；６２（２）:１６８−１７１）、ＢＬｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬ及びＢ細胞介在性疾患の関連性を動物モデルからヒトへと伸ばす。
【０００５】
多発性骨髄腫
多発性骨髄腫（ＭＭ）は、骨髄中のモノクローナル形質細胞の集積により特徴付けられる形質細胞新生物であり、モノクローナル免疫グロブリンの合成及び溶骨性骨病変の多発に関連する。ＭＭ細胞の過成長は、多発性腫瘍部位において、免疫不全及び骨皮質の破壊をもたらす。従来、ＭＭは高齢者の疾病であったが、若年患者においても次第にみられるようになってきた。診断された患者は、一般的に平均余命は短い。従来の化学療法で処置された患者の平均生存期間は、約４２ヶ月である。自己幹細胞移植による高用量治療の使用は、若年患者において平均生存期間を６０ヶ月まで増大させる。しかし、この疾病は未だ治療不能である。
【０００６】
多発性骨髄腫の原因は分かっていない。毎年世界中で約７４，０００件の新たな発病例がみられ、ほとんどの西側先進国では、１年あたり４．５／１００，０００の全発生率である。男性対女性の比率は、３対２であり、発生率は、白人よりアフリカ系アメリカ人で約２倍高い。診断の平均年齢は、６８歳である。ＭＭは、全ての悪性腫瘍の１％である。
【０００７】
溶骨性病変、貧血、腎不全及び再発性細菌感染は、多発性骨髄腫の最も一般的な臨床特徴である。これらの全ての合併症、特に感染及び腎不全も、死亡の主な原因である。これらの臨床特徴の病因は、細胞間接触、接着及びサイトカインによる、骨髄腫細胞と骨髄の微環境の間の相互作用、或いは循環するモノクローナル免疫グロブリン又は軽鎖の直接的な効果に依存する。Ｍタンパク質は、この疾病の特徴である。Ｍタンパク質は、過剰酸性される同種免疫グロブリン又は免疫グロブリンフラグメントである。モノクローナルタンパク質は、骨髄腫負荷及び動態の算出、骨髄腫患者の病期分類、及びそれらの処置に対する応答を立証するのに用いられる。ＭＭの異なる免疫学的サブタイプは、以下のものである：ＩｇＧ（約５５％の場合）、１９Ａ（約２６％の場合）、Ｂｅｎｃｅ−Ｊｏｎｅｓ又は遊離の軽鎖のみ（約１４％の場合）及びＩｇＤ（２％の場合）。非分泌骨髄腫は、骨髄腫症例の１〜５％を占め、ＩｇＭ、ＩｇＥ又は２クローン性ＭＭは極めて稀である。血清ベータ−２ミクログロブリン濃度、Ｃ−反応性タンパク質濃度、血清アルブミン濃度、形質細胞標識率（ＰＣＬＩ）及び第１３染色体異常の存在は、多発性骨髄腫に関する予後因子である。
【０００８】
メルファラン及びシクロホスファミドのような二官能性アルキル化剤は、多発性骨髄腫における標準的な治療の基礎であった；メルファラン及びプレドニゾンの典型的な組み合わせは、いまだほとんどの患者に対する標準的な処置である（Ｄｕｒｉｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ  Ｊ  ２００４；４:３７９−３９８）。
【０００９】
ビンクリスチン、ドキソルビシン及びデキサメタゾン（ＶＡＤ）療法又はＶＡＤ様療法は、誘導治療のプレ幹細胞回収及び移植として一般的に用いられている。代替療法は、デキサメタゾンのみ、より最近では、サリドマイド／デキサメタゾンである。実際に、最近では、サリドマイドは、疾病の様々な段階において、様々なＭＭを有する患者に対する、単独の又は併用される効果的な薬物として認識されている（Ｂａｒｌｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ  ２００１；９８:４９２−４９４）。
【００１０】
自己末梢血液幹細胞（ＰＢＳＣ）移植によりサポートされる高用量化学療法は、６５歳未満の患者に対する重要な処置法として許容されてきた。更に、タンデム（ダブル）自己感細胞移植のアプローチは、特に１つの移植を受けた後に非常に良好な部分的応答を有さない患者において、完全な応答率及び生存率を改善することを試みることも追及される。自己幹細胞移植は、安全な方法であるが、骨髄腫細胞による自己移植片の汚染がいまだ心配されている。コルチコステロイド又はＩＦＮ−αによる移植後の維持療法は、再発を遅延させるためにしばしば処方される。
【００１１】
同種移植は、幹細胞の腫瘍細胞汚染の問題を排除する。更に、同種移植による移植片対骨髄腫効果の証拠が存在する。標準的な骨髄機能廃絶同種移植は、わずかな比率の患者において長期の無病期間をもたらすことができるが、移植片対宿主疾病からの高い処置関連死亡率及び顕著な毒性は、骨髄腫の処置におけるこの方法の役割を限定してきた。陽性結果は、低い急性毒性を導く非骨髄機能廃絶療法（ミニ−同種移植）を用いて報告された。
【００１２】
プロテアソーム阻害剤であるＶｅｌｃａｄｅ（登録商標）（ボルテゾミブ）は、多くの標準的及び高用量療法に無効な骨髄腫において活性を有する新規のクラスの薬剤を象徴する。重要な第二相試験において、３５％の全応答率が報告され、１２ヶ月の反応期間中央値であった（Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｎ  Ｅｎｇ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２００３；３４８（２６）:２６０９２６１７）。更に、多発性骨髄腫に対する研究中の実験的治療法としては、サリドマイド誘導体、ワクチン接種、モノクローナル抗体及びアンチセンス薬剤が挙げられる。支持療法は、この疾病の症状及び合併症に対処する。ＭＭにおいて一般的に用いられる支持療法としては、ビスフォスフォネート、成長因子、抗生物質、静脈内免疫グロブリン、プラスマフェレーシス及び疼痛管理手段が挙げられる。従って、この分野においては、多発性骨髄腫を処置又は改善するための効果的な方法を開発することが長年必要とされている。
【００１３】
ヴァルデンストレームマクログロブリン血症
ヴァルデンストレームマクログロブリン血症（ＷＭ）は、ＭＭに関連する症状であり、モノクローナルＩｇＭを産生するリンパ球及び形質細胞の増殖の結果である。提示の年齢中央値は６３歳であり、患者の６０％以上は男性である。多くの臨床的特徴は、上昇したＩｇＭ濃度による血液の過粘稠の結果である。ＷＭは、血清中のＩｇＭの過剰分泌により特徴付けられる；骨髄中の過剰のリンパ形質細胞様細胞、及び肝臓及び脾臓を含む内臓器官の関与。全身性治療を必要とする患者に対する主な治療法としては、アルキル化剤又はヌクレオシドアナログ、例えばクラドリビン及びフルダラビンが挙げられる。ステロイドは、単独で又はアルキル化剤と併用して用いることができる。プラズマフェレーシスは、症候性過粘稠の処置に適応される。現在、ＷＭ患者のための治療法は存在しない。従って、ＷＭを処置又は改善するための新規の方法を開発することが長年必要とされている。
【発明の開示】
【００１４】
発明の概要
本発明は、癌又は免疫疾患、例えば多発性骨髄腫及びヴァルデンストレームマクログロブリン血症を処置又は改善する方法を含む。この方法において、患者に、ヒト免疫グロブリン定常鎖並びにＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合するＴＡＣＩ細胞外ドメイン又はそのフラグメントを含んで成る、融合ポリペプチド分子、ＴＡＣＩ−Ｉｇを含んで成る有効量の組成物を投与する。
【００１５】
本発明の方法は、多発性骨髄腫又はヴァルデンストレームマクログロブリン血症患者に対して、ヒト免疫グロブリン定常領域及び配列番号：１のポリペプチドを含んで成る融合分子を投与することも含んで成る。本発明の方法は、多発性骨髄腫又はヴァルデンストレームマクログロブリン血症患者に対して、ヒト免疫グロブリン定常領域、並びにＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合し且つ配列番号：１に対して少なくとも５０％の同一性を有する、好ましくは配列番号：１に対して６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％の同一性を有するペプチドを含んで成る融合分子を投与することも含んで成る。
【００１６】
１つの実施態様において、本発明の方法は、多発性骨髄腫又はヴァルデンストレームマクログロブリン血症患者に対して、配列番号：２のヒト免疫グロブリン定常領域、Ｆｃ５、及び配列番号：１のポリペプチドを含んで成る融合分子を投与することを含んで成る。別の実施態様において、多発性骨髄腫又はヴァルデンストレームマクログロブリン血症患者に対して、配列番号：２のヒト免疫グロブリン定常領域、並びにＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合し且つ配列番号：１に対して少なくとも５０％の同一性を有する、好ましくは配列番号：１に対して６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％の同一性を有するペプチドを含んで成る融合分子を投与することを含む。
【００１７】
本発明の方法は、患者に、患者の体重１ｋｇあたり０．０１ｍｇ〜患者の体重１ｋｇあたり１０ｍｇの量のＴＡＣＩ−Ｉｇを、複数の間隔で、好ましくは４週間の間に５回の間隔で投与し、その後、４週間患者の疾病安定又は改善と相関関係があるマーカーの変化を観察することも含んで成る。相関的変化としては、１つ以上の以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：患者血液試料中の免疫グロブリンＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ又はＩｇＤの遊離軽鎖の減少；患者血液試料中のＭ−タンパク質（免疫固定により測定）の減少；患者血液試料中のＭ−タンパク質（電気泳動法により測定）の減少；患者血液試料中のＬＤＨ、溶解性シンデカン−１又はベータ−２ミクログロブリンの減少；フローサイトメトリーにより測定して数えた患者リンパ球の減少；患者尿試料中のベンス・ジョーンズタンパク質（免疫固定又は電気泳動法により検出）の減少；患者骨髄試料中の形質細胞又はリンパ球、ＰＣＬＩ、Ｋｉ−６７又はＢｌｙＳ／ＡＰＲＩＬレセプターの比率の減少。最初の処置サイクルの終わりに症状が安定又は改善する患者は、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子による処置の少なくとも２回以上のサイクルの対象となり得る。
【００１８】
本発明の方法で用いられる場合、ＴＡＣＩ−Ｉｇは、静脈内、経口又は皮下的に投与することができる。皮下投与される場合、好ましくは、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子は、以下の任意の前腹壁の領域内に投与される：右上外部領域、左下外部領域、右下外部領域、左上外部領域又は正中下部領域。
【００１９】
本発明の方法は、ＴＡＣＩ−Ｉｇが他の薬剤又は処置方法と組み合わせて患者に投与される方法も含む。このような他の薬剤としては、ビスフォスフォネート、エリスロポエチン、顆粒球成長因子、顆粒球コロニー刺激因子、疼痛の管理のための薬剤、メルファラン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、サリドマイド、ヌクレオシドアナログ、及びボルテゾミブを含むがこれに限定されないプロテアソーム阻害剤が挙げられる。このような他の処置方法としては、他の化学療法剤、放射線治療及び遺伝子治療が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の方法によれば、ＴＡＣＩ−Ｉｇは、患者が他の処置方法を受ける前、それと同時又はその後に投与することができる。
【００２０】
本発明の１つの実施態様において、ＴＡＣＩ−Ｉｇは、ボルテゾミブと併用して投与される。ＴＡＣＩ−Ｉｇは上記のように投与され、ボルテゾミブは、２週間、週に２回、１．３ｍｇ／ｍ2の用量で投与され、その後１０日間の休息期間へと続く。これが、処置の１サイクルである。好ましくは、ボルテゾミブは静脈内に投与される。処置の応答は、ＴＡＣＩ−Ｉｇ単独に関して説明したように観察し、更なるＴＡＣＩ−Ｉｇ及びボルテゾミブを投与することができる。ＴＡＣＩ−Ｉｇは、上記の用量又はより低い用量で、上記の用量又はより低い用量のボルテゾミブと併用して投与することができる。ＴＡＣＩ−Ｉｇ及びボルテゾミブの投与は、同時に、或いはＴＡＣＩ−Ｉｇその後の１サイクルのボルテゾミブ、又は１サイクルのボルテゾミブその後の１サイクルのＴＡＣＩ−Ｉｇの交互の投与において投与することができる。この投与は繰り返すことができる。
【００２１】
ＴＡＣＩ−Ｉｇは、他の処置方法（例えば、ボルテゾミブが挙げられるが、これに限定されない）に対して耐性又は応答しない患者に投与することができる。
【００２２】
本発明のこれらの及び他の実施態様について、以下で更に詳細に説明する。
【００２３】
発明の詳細な説明
本発明は様々な形態で具体化することができるが、以下のいくつかの実施態様に関する説明は、本開示が本発明の例示として考慮され、本発明を説明される具体的な実施態様に限定することを意図するものでないという理解の下でなされる。見出しは便宜のためだけに提供され、本発明を限定するものとして解釈されるべきでない。任意の見出しの下で説明される実施態様は、任意の他の見出しの下で説明される実施態様と組み合わせることができる。
【００２４】
別段明確に示唆されない限り、本出願で特定される様々な範囲の値の使用は、あたかも記述された範囲内の最小値及び最大値が、両方とも用語「約」を前に置かれるかのように、近似として記述される。この方法では、記述された範囲を超える又はそれ未満のわずかな変動値を用いても、その範囲内の値と実質的に同じ結果を達成することができる。本明細書中で用いる場合、用語「約（ａｂｏｕｔ）」及び「およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」は、数値に言及する場合、医薬科学又は問題の範囲又は要素に関連する分野の当業者にとって、平易で通常の意味を有するだろう。また、範囲の開示は、列挙される最小値と最大値の間の全ての値を含む連続的な範囲、並びにそれにより形成可能な任意の範囲であることが意図される。
【００２５】
本発明は、ＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬのそれらのレセプターとの相互作用を阻害することにより多発性骨髄腫及びヴァルデンストレームマクログロブリン血症を処置する方法に関する。具体的には、この方法は、ＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬに結合するＴＡＣＩ細胞外ドメイン又はそのフラグメント、及び２）ヒト免疫グロブリン定常領域を含んで成る融合分子である阻害剤を利用する。本発明の方法は、ヒト免疫グロブリン定常領域、及びＢｌｙＳ及び／又はＡＰＲＩＬリガンドに結合することのできるＴＡＣＩ細胞外ドメインに対して少なくとも５０％の同一性、好ましくは６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％の同一性を有する任意のポリペプチドを含んで成る融合分子を利用する。米国特許第５,９６９,１０２号、同第６,３１６,２２２号及び同第６,５００,４２８号及び米国特許出願第０９／５６９,２４５号及び同第０９／６２７,２０６号（これらの教示は、引用文献によりその全てが本明細書中に組み込まれる）は、ＴＡＣＩリガンド、例えばＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬと相互作用するＴＡＣＩの細胞外ドメイン並びにＴＡＣＩ細胞外ドメインの具体的なフラグメントに関する配列を開示する。ＴＡＣＩの細胞外ドメインの１つの好ましいフラグメントは、１つ又は２つのシステイン繰り返しモチーフを含んで成る。別の好ましいフラグメントは、ＴＡＣＩの細胞外ドメインのアミノ酸３０−１１０を含んで成るフラグメントである。別の好ましいフラグメントは、ＴＡＣＩの細胞外ドメインのアミノ酸１−１５４（配列番号：１）を含んで成るフラグメントである（配列番号：１）。本発明の方法で用いられる任意の融合分子は、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子と称される。
【００２６】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、本発明の方法に有用なＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子の１つである。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、ＴＡＣＩ細胞外ドメインの約１のアミノ酸から約１５４のアミノ酸（配列番号：１）及びヒトＩｇＧの修飾Ｆｃ部分（配列番号：２）を含んで成る融合ポリペプチド分子である。本発明の方法に有用な他のＴＡＣＩ−Ｉｇ分子は、配列番号：２のポリペプチド、及び配列番号：１として記載された配列に対して少なくとも５０％、好ましくは６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含んで成る融合分子を含む。
【００２７】
本発明の好ましい実施態様は、多発性骨髄腫（ＭＭ）及びヴァルデンストレームマクログロブリン血症（ＷＭ）、他の血液悪性疾患、自己免疫疾患、例えば関節リウマチ及び全身性エリテマトーデスを処置するための、或いはこのような疾患に関連する循環する成熟Ｂ細胞及び免疫グロブリン分泌細胞及び可溶性免疫グロブリンの数を減少させるためのＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を用いる方法を含む。
【００２８】
ＭＭ及びＷＭ患者をＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子により処置する場合、図１に示されるプロトコルを用いることができる。患者は、２〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲の濃度のＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子が注射される。このプロトコルの更なる詳細については、実施例３で説明される。５回の注射を受けた後、患者は、その後の４週間、疾患の改善又は安定性の徴候が観察される。ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子による処置に対する応答により、患者を５つの異なる群に分類する：完全な応答（ＣＲ）、非常に良好な部分的応答（ＶＧＰＲ）、部分的応答（ＰＲ）、安定型疾患（ＳＤ）、進行性疾患（ＰＤ）。５つの各群に対する基準を、以下の表４に列挙する。
【００２９】
【表１】
2009504668.tif 000003
【００３０】
【表２】
2009504668.tif 000004
【００３１】
患者の症状は、以下のいずれかが生じた場合に、「完全な応答からの再発」として分類される：少なくとも２つの更なる調査により確認される、免疫固定又はルーチンの電気泳動法における血清又は尿中のパラプロテインの再発、オリゴクローナル免疫再構成を除く；骨髄穿刺液中の又はトレフィン骨生検における、＞５％の形質細胞；新規の溶解性骨病変又は軟組織形質細胞腫の発達、或いは残存する骨病変の大きさの明確な増大；又は、任意の他の原因に起因しない、高カルシウム血症の発達（補正された血清カルシウム＞１１．５ｍｇ／ｄｌ又は２．８ｍｍｏｌ／ｌ）。
【００３２】
患者の症状は、以下の１つ以上のものが生じた場合に、「進行性疾患」（完全な応答でない患者に対して）として分類される：血清モノクローナルパラプロテインの濃度の増大、これは、少なくとも５ｇ／ｌの確かな増大であり、少なくとも１回の繰り返し調査により確認されなければならない；２４時間以内に尿の軽鎖排泄が≧２５％、これは２４時間以内に少なくとも２００ｍｇの確かな増大であり、少なくとも１回の繰り返し調査により確認されなければならない；骨髄穿刺液中の又はトレフィン生検における、≧２５％の形質細胞の増大、これは、少なくとも１０％確かな増大でもなければならない；存在する骨病変又は軟組織形質細胞腫の大きさの確かな増大（圧迫骨折の発達は、継続的応答を排除せず、進行を示唆していないかもしれない）；新規の骨病変又は軟組織形質細胞腫の発達（圧迫骨折の発達は、継続的応答を排除せず、進行を示唆していないかもしれない）；任意の他の原因に起因しない、高カルシウム血症の発達（補正された血清カルシウム＞１１．５ｍｇ／ｄｌ又は２．８ｍｍｏｌ／ｌ）。
【００３３】
患者の症状は、最初の５回の注射の後に、以下のいずれかが検出された場合に、改善されたと分類され得る：患者血液試料中の免疫グロブリンＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ又はＩｇＤ遊離軽鎖の減少；患者血液試料中の免疫グロブリンＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ又はＩｇＤ遊離軽鎖の減少；患者血液試料中の、免疫固定により測定した場合の、Ｍタンパク質の減少；患者血液試料中の、電気泳動法により測定した場合の、Ｍタンパク質の減少；患者血液試料中のＬＤＨ、可溶性シンデカン−１又はベータ−２ミクログロブリンの減少；フローサイトメトリーにより測定した場合の、患者のリンパ球数の減少；患者の尿試料中の、免疫固定又は電気泳動法により検出した場合の、ベンス・ジョーンズタンパク質の減少；患者の骨髄試料中の形質細胞又はリンパ球、ＰＣＬＩ、Ｋｉ−６７又はＢｌｙＳ／ＡＰＲＩＬレセプターの比率の減少。
【００３４】
表５は、ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子による処置の有効性を評価するための典型的なスケジュールを提供する。
【００３５】
【表３】
2009504668.tif 000005
【００３６】
ＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子による処置の後に症状が少なくとも安定であると分類された患者は、この融合分子による少なくとも追加の２サイクルの処置を受けることができる。図４及び５は、このような追加のサイクルの処置に関するプロトコルの１つの例を提供する。その後のサイクルの各１日目において、患者は、２〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲の濃度でＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子を注射される。５回の注射を受けた後、患者は、その後の４週間、症状の改善又は安定化の徴候を観察される。以下のいずれかが検出された場合に、このような改善が生じたと結論付けることができる：患者血液試料中の免疫グロブリンＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ又はＩｇＤ遊離軽鎖の減少；患者血液試料中の免疫固定により測定したＭタンパク質の減少；患者血液試料中の電気泳動法により測定したＭタンパク質の減少；患者血液試料中のＬＤＨ、溶解性シンデカン−１又はベータ−２ミクログロブリンの減少；フローサイトメトリーにより測定した患者のリンパ球数の減少；患者尿試料中の免疫固定又は電気泳動法により検出したベンス・ジョーンズタンパク質の減少；患者骨髄試料中の形質細胞又はリンパ球、ＰＣＬＩ、Ｋｉ−６７又はＢｌｙＳ／ＡＰＲＩＬの比率の減少。
【００３７】
具体的な患者の症状を処置するための最適用量の選択のために、用量増加デシジョンツリー（図３）を開発した。デザインツリー（図３）によると、所定の集団における３人のうち０人の対象が用量規定毒性（ＤＬＴ）を経験した場合、次の順次的な集団に増加を進めることができる。所定の集団における３人のうち１人の対象がＤＬＴを経験した場合、更に３人の対象が、その用量集団に加えられるだろう。６人のうち１人の対象がＤＬＴを経験した場合、次の用量に増加を進めることができる。６人のうち＞１人の対象がＤＬＴを経験した場合、用量緩和が起こり、３人の患者が、ＤＬＴを誘発した中間用量及び次に低い用量で処置されるだろう。中間用量で３人のうち０人の対象がＤＬＴを経験した場合、加入を停止し、中間用量はＭＬＤ（最大耐量）であると判断される。中間用量で３人のうち１人の対象がＤＬＴを経験した場合、加入を停止し、低いレベルの用量をＭＬＤと判断する。所定の集団において３人のうち＞１人の対象がＤＬＴを経験した場合、用量緩和が起こり、３人の患者が、ＤＬＴを誘発した用量と次に低い用量の間の安全性モニタリング委員会により特定された中間用量で処置されるだろう。３人のうち０人の対象が中間用量でＤＬＴを経験した場合、加入を停止し、中間用量がＭＬＤであると判断される。３人のうち１人の対象が中間用量でＤＬＴを経験した場合、加入を停止し、低いレベルの用量をＭＬＤと判断する。開始用量でＤＬＴが観察される場合にも、緩和が適用されるだろう。
【００３８】
融合ＴＡＣＩ−Ｉｇ分子は、注射器、好ましくは２５Ｇ針を備えた１．５ｍｌの注射器を用いて、皮下注射により、前腹壁に供給することができる。ある用量を投与するのに、１回以上の注射が必要とされる場合、数センチメートル間隔で、時間内にできる限り接近して注射される。薬物投与を繰り返す場合、前腹壁上で投与部位を変えることが望ましい。前腹壁への皮下注射のための可能な領域は、図６に描かれており、右上外部領域、左下外部領域、右下外部領域、左上外部領域、正中下部領域を含む。或いは、本発明のＴＡＣＩ−Ｉｇ融合分子は、皮下注射又は経口により、錠剤、カプレット、液体組成物又はゲルの形態で供給することができる。
【００３９】
本発明の方法は、ＭＭ及びＷＭ処置の他の方法、例えば化学療法、放射線療法又は外科手術と組み合わせることができる。患者は、化学療法、放射線療法又は外科手術の前または同時又は後、好ましくは後に、本発明の方法により処置されることができる。本発明の融合分子は、患者に有益な他の薬剤と併用して投与することができる。このような薬剤としては、ビスフォスフォネート、エリスロポエチン、顆粒球成長因子又は顆粒球コロニー刺激因子又は疼痛の管理のための薬剤、メルファラン、ビンクリスチン、ドキソルビシン、サリドマイド、ヌクレオシドアナログ、及びボルテゾミブを含むがこれに限定されないプロテアソーム阻害剤が挙げられる。
【００４０】
ＴＡＣＩ−Ｉｇは、ボルテゾミブと併用して投与することができる。ＴＡＣＩ−Ｉｇは上記のように投与され、ボルテゾミブは、２週間、週に２回、１．３ｍｇ／ｍ2の用量で投与され、その後１０日間の休息期間へと続くことができる。これが、処置の１サイクルである。好ましくは、ボルテゾミブは静脈内に投与される。処置の応答は、ＴＡＣＩ−Ｉｇ単独に関して説明したように観察し、追加の処置サイクルのＴＡＣＩ−Ｉｇ及びボルテゾミブを投与することができる。ＴＡＣＩ−Ｉｇは、上記の用量又はより低い用量で、上記の用量又はより低い用量のボルテゾミブと併用して投与することができる。ＴＡＣＩ−Ｉｇ及びボルテゾミブの用量は、同時に、或いはＴＡＣＩ−Ｉｇその後の１サイクルのボルテゾミブ、又は１サイクルのボルテゾミブその後の１サイクルのＴＡＣＩ−Ｉｇの交互の投与において投与することができる。この投与は繰り返すことができる。
【００４１】
ＴＡＣＩ−Ｉｇは、他の処置方法、例えばボルテゾミブによる処置（これに限定されない）に耐性の又は応答しない多発性骨髄腫患者に投与することができる。
【００４２】
本明細書中に列挙される全ての米国特許及び公開特許出願は、それらの全てが引用文献により組み込まれる。
【００４３】
本発明の様々な実施態様を例示する以下の実施例は、本発明を限定するものとして解釈されるべきでない。
【実施例】
【００４４】
実施例１
実験動物モデルにおいてＴＡＣＩ−Ｆｃ５の薬理作用、毒性及び薬物動態を試験する
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の呼吸パラメータへの効果を試験するために、覚醒マウスにおけるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の呼吸パラメータへの無影響量（ＮＯＥＬ）を試験し、皮下経路により投与した場合に少なくとも８０ｍｇ／ｋｇであることを見出した。
【００４５】
行動アーウィン試験（Ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ  Ｉｒｗｉｎ  Ｔｅｓｔ）及び体温への作用を、８匹の雄性マウスの群に、皮下経路で、５、２０及び８０ｍｇ／ｋｇのＴＡＣＩ−Ｆｃ５を単回投与することにより実施した。これらの注射のＮＯＥＬは、行動アーウィン試験及び体温への作用に対して、皮下経路により２０ｍｇ／ｋｇであった。軽い一時的な刺激効果は、８０ｍｇ／ｋｇの高用量で見られた。
【００４６】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の血圧及び心拍数への作用を測定するために、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を、覚醒シノモグラス（ｃｙｎｏｍｏｇｌｕｓ）サルに、皮下経路で、２０及び８０ｍｇ／ｋｇの用量で投与した。この注射は、動脈圧、心拍数又は心電図において変化を誘導しなかった。覚醒シノモグラスサルにおいて皮下経路により投与した場合の循環器系パラメータに対するＮＯＥＬは、少なくとも８０ｍｇ／ｋｇに相当する。
【００４７】
静脈内（ＩＶ）又は皮下（ＳＣ）経路による単回投与としてマウスに投与した場合、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、この動物において、最も高い技術的に可能な用量：１２００ｍｇ／ｋｇまで、死亡又は感知され得る全体的若しくは局所的な異常効果を誘導しなかった。更に、２４０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでのＳＣ経路による単回投与としてのＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与は、死亡を引き起こさず、主な毒性効果ももたらさなかった。
【００４８】
２又は４週間の５、２０及び８０ｍｇ／ｋｇ／隔日の用量での皮下経路によるマウスへのＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与、その後の４週間の回復の後に得られる結果に基づいて、この化合物が、この種において、８０ｍｇ／ｋｇまでの用量で十分に耐性であると結論付けられた。免疫系に限定される処置関連の変化は、全ての用量において明らかにされた。これらの変化は、全ての成熟Ｂ細胞数及びＩｇＧ及びＩｇＭ血清濃度の減少を伴う。脾臓及びリンパ節において実施された免疫組織化学試験は、Ｂ細胞に限定された減少、及びＴ細胞数は変化しないことを確認した。ある場合において時間と用量に関連するこれらの全ての変化は、非常に高用量のＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与後に、応答性の種において予測されたように誇張された薬理効果として考慮された。
【００４９】
全体的に、これらの効果は、処置の２及び４週間後に見られ、主な経時的な進行の徴候はなかった。Ｂ細胞数の減少を除いて、それらは、処置の中止の４週間後では、ほぼ完全に元に戻ったようであった。
【００５０】
Ｂ細胞の調節の回復を確かめるために、マウスにおける更なる試験を、４週間、５及び２０ｍｇ／ｋｇの用量を１日おきに投与し、より長い回復期間によって実施した。５ｍｇ／ｋｇでは使用中止の２ヶ月後、２０ｍｇ／ｋｇでは４ヶ月後に、全体の成熟した循環Ｂ細胞の回復が達成された。更に、この注射は、ビヒクル対照と比較して、全ての用量の注射部位において、炎症性変化のわずかな増大を誘導した。
【００５１】
サルにおけるＴＡＣＩ−Ｆｃ５の皮下投与は、連続４週間投与し、その後４週間回復させた場合に、試験したいずれの用量（５、２０又は８０ｍｇ／ｋｇ／２日おき）においても毒性の主な徴候を誘導しなかった。
【００５２】
局所的耐性は、試験した最も高い用量まで満足できるものであった。炎症性起源の用量依存性の可逆的でわずかな又は穏やかな変化（主に、血管周囲単核細胞及び好酸性細胞の浸潤）が誘導されたが、外因性タンパク質の局所的存在に主に関連していた。高用量においてのみ、いくつかの動物が、嚢胞形成に関連するわずかな又は穏やかな亜急性炎症を示した。
【００５３】
リンパ球サブセット測定における循環Ｂ細胞数の減少、並びに脾臓濾胞辺縁帯（Ｂ細胞依存性領域であることが知られている）の組織学的減少及びＩｇＧ及びＩｇＭの総血清濃度の減少が見られた。インビトロ及びインビボでの薬理学的実験により示されるように、それらは、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の薬力学的特性の結果であった。動物に高用量の試験化合物が意図的に投与される毒性試験において予想されたように、それらの程度は強調されていた。血清中のＩｇＧ及びＩｇＭの低い濃度並びに脾臓リンパ球枯渇が、１ヶ月の使用中止期間内に回復への明確な傾向を示す一方で、全体の成熟循環Ｂ細胞は同様の挙動を示さず、これは、回復のためにより長い期間を必要とすることを示唆している。
【００５４】
処置期間の終わり（４週間目）に、高用量群（８０ｍｇ／ｋｇ）の雄性及び雌性は、対象群と比較して、平均総タンパク質値のわずかであるが統計学的に有意な減少を示した。減少へのわずかな傾向は、２週間目における同じ用量、及び回復期間の終わりにおいても見られた。
【００５５】
投与期間の終わりの高用量の雌性における血清タンパク質の変化は、グロブリンの減少並びにアルブミン比率及びアルファ１グロブリン画分の増大を含んでいた。アルファ１グロブリン画分は、グループ３の雌性（２０ｍｇ／ｋｇ）においても、対照よりも高いようであった。
【００５６】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の免疫原性は、両方のマウスで低かった。いずれの種においても抗体を中和する証拠は存在しなかった。
【００５７】
２週目及び４週目のＳＣ毒性試験からのマウスの生殖器官の組織学的検査は、処置関連の効果のシグナルを示さなかった。
【００５８】
局所的耐性試験は、７０ｍｇ／ｍＬの用量でウサギに皮下経路で注射した場合に、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５が十分に局所的に耐性であったことを示した。
【００５９】
単回投与薬物動態試験を、１ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内経路により、又は１、５及び１５ｍｇ／ｋｇの用量で皮下経路により、マウスにおいて実施した。
【００６０】
最大吸収までの時間（ｔmax）を、４時間〜１６時間の間において評価し、算出されたＴ1/2は４０〜５０時間であった。
【００６１】
注入様（ｉｎｆｕｓｉｏｎ−ｌｉｋｅ）プロファイルが、ＩＶボーラス投与後の最初の３０分間で観察され、その後、４４時間の排出半減期で、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５が体内から排出された。皮下投与の後の、１、５及び１５ｍｇ／ｋｇの３つの用量において得られた濃度曲線下面積の比率は、１：５：１５の用量比に対して１：５：８であり、これは、高用量において用量比例が失われることを示唆している。
【００６２】
皮下経路によるＴＡＣＩ−Ｆｃ５のバイオアベイラビリティは、１及び５ｍｇ／ｋｇの用量で、それぞれ７６％及び８９％であり、マウスにおける１５ｍｇ／ｋｇ（０．４２；静脈内の１ｍｇ／ｋｇの用量に対して計算した）で予想されるよりも低かった。明らかな排出半減期は変わらなかったので、高用量で観察されるより低いバイオアベイラビリティは、クリアランスと分配量の両方の増大により、より高い確実性で、注入部位における蓄積に起因する吸収の減少により説明することができる。
【００６３】
単回投与薬物動態試験は、１ｍｇ／ｋｇの用量を静脈内経路により、又は１、５及び１５ｍｇ／ｋｇの用量を皮下経路により注入した６匹の雄性カニクイザルにおいて実施した。
【００６４】
６匹のサルは、各３匹の動物の２つのグループに分けられ、２週間のウォッシュ・アウト期間により分けられた２回の投与を受けた。期間１の処置は、１ｍｇ／ｋｇのＩＶ（グループ１）及び１ｍｇ／ｋｇのＳＣ（グループ２）  であり、期間２の処置は、５ｍｇ／ｋｇのＳＣ（グループ１）及び１５ｍｇ／ｋｇのＳＣ（グループ２）であった。最大吸収までの時間（tmax）を、６〜８時間の間で評価し、算出されたｔ1/2は、約１２０〜１９０時間であった。
【００６５】
注入様プロファイルが、３匹のサルのうち２匹において、ＩＶボーラス投与の初めの１５分間で観察され、その後、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、１７９±２９時間の排出半減期で体内から排出された。定常状態の分配量（Ｖss）は、細胞内液の体積に近い体積である３８２±８２ｍＬ／ｋｇであった。
【００６６】
皮下投与後の、濃度曲線下面積（ＡＵＣ）対用量の比例は優れており、すなわち、１、５及び１５ｍｇ／ｋｇのＳＣ投与に対して２１６、１１８２及び２７３２ ｈ μｇ／ｍＬであった。皮下経路によるＴＡＣＩ−Ｆｃ５のバイオアベイラビリティ（１ｍｇ／ｋｇのＩＶ投与に対して計算した）は、低用量、中間用量及び高用量において、０.９２、１.０２及び０.７７であった。これは、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５が、皮下経路によりほぼ完全に吸収されたことを実証している。
【００６７】
２週間のウォッシュ・アウト期間では、２倍の半減期しか経過せず、投与化合物の完全な排出（５倍の半減期が必要とされる）には不十分であったので、６匹全てのサルに関する期間２（期間１のＩＶ又はＳＣ経路による１ｍｇ／ｋｇの投与と、期間２の５又は１５ｍｇ／ｋｇの投与のそれぞれの間）の投与前試料中では、低濃度のＴＡＣＩ−Ｆｃ５が見出された。しかし、前回の投与の濃度曲線下面積の寄与は、期間２の全濃度曲線下面積の約２％しか示さないことを評価することができた。
【００６８】
ＩｇＧの血清中濃度は、ＩＶ投与後に１０．２％の減少を示した。１５ｍｇ／ｋｇのＳＣ投与はわずかに高い効果を示したが、１〜５ｍｇ／ｋｇのＳＣ投与では相違は観察されなかった（１、５及び１５ｍｇ／ｋｇのそれぞれの投与後に、８.６％、８.４％及び１２.３％の減少）。ＩｇＭの血清中濃度は、ＩＶ投与後に１８．０％の減少を示した。３つのＳＣ投与の間で相違は観察されなかった（１、５及び１５ｍｇ／ｋｇのそれぞれの投与後に、２３.５％、２３.０％及び２４.２％の減少）。
【００６９】
実施例２
健康なボランティアにおけるＴＡＣＩ−Ｆｃ５耐容量の測定
単回漸増用量試験を、健康なボランティアにおいて実施した。具体的には、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を、二重盲検法でヒトにおいて試験した（健康な男性ボランティアにおける単回漸増用量試験）。この試験において、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、２．１ｍｇ、７０ｍｇ、２１０ｍｇ及び６３０ｍｇ（約０．０３、１、３及び９ｍｇ／ｋｇの容量と同等）の容量で、安全且つ十分に耐性であることが示された。この試験の詳細については、以下の表１において概説する。
【００７０】
【表４】
2009504668.tif 000006
【００７１】
４つのグループの被験者を採用した。各投与グループにおいて、１人の被験者を無作為に選び、偽薬注射を受けさせ、その他の全ての被験者はＴＡＣＩ−Ｆｃ５を受けた。投与から２４時間後の治験場所からの退院後、被験者は、外来患者として、７週間の定期的な評価に参加した。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５に関する全身及び局所的耐容性を、身体診察所見、注射部位疼痛、注射部位における局所的耐容性応答（発赤、腫れ、挫傷及びそう痒）、バイタルサイン、１２誘導心電図、安全性臨床検査評価及び有害事象の記録により観察した。
【００７２】
投与後７週間にわたり、薬物動態マーカー及び薬理学マーカーを観察した。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の薬力学的効果を、以下のものを含む多くのマーカーを用いて観察した：ＦＡＣＳ分析によるリンパ球サブセット：形質細胞（ＣＤ１３８＋）、未成熟Ｂ細胞（ＣＤ１９＋、ＩｇＤ−）、成熟Ｂ細胞（ＣＤ１９＋、ＩｇＤ＋）、Ｔヘルパー細胞（ＣＤ５＋、ＣＤ４＋）、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＤ５＋、ＣＤ８＋）、全Ｔ細胞（ＣＤ５＋）、遊離ＢＬｙＳ、ＢＬｙＳ／ＴＡＣＩ−Ｆｃ５複合体、ＩｇＧ、ＩｇＭ、抗ＴＡＣＩ−Ｆｃ５抗体。
【００７３】
用量漸増は、投与後３週間の検査に基づいて、試験プロトコル内のアルゴリズム（グループ１を除く）により導かれた。４グループが投与された：グループ１は２．１ｍｇを受けた（約０．０３ｍｇ／ｋｇと同等）；グループ２は７０ｍｇを受けた（約１ｍｇ／ｋｇと同等）、グループ３は２１０ｍｇを受けた（約３ｍｇ／ｋｇと同等）、グループ４は６３０ｍｇを受けた（約９ｍｇ／ｋｇと同等）。
【００７４】
この試験は、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５が全てのグループにおいて十分に耐容性であることを示した。身体診察所見、バイタルサイン又は１２誘導心電図において明確な効果は存在しなかった。
【００７５】
一時的な発赤及び腫れが、いくつかの対象の投与部位において観察され、発赤は集団３及び４における全ての被験者に影響を及ぼした。注射部位のこの発生は、高用量グループにおいて増大するようであるが、これは増大した体積（及び数）の注射に関連すると考えられる。
【００７６】
４８個の処置中に発生した有害反応は、投与後７週間以内に報告された。これらの大部分（４４個の事象、９１．７％）は穏やかであり、残りは中程度であった（４個の事象、８．３％）。この期間内に、重度の有害事象及び重篤な有害事象は存在しなかった。投与したＴＡＣＩ−Ｆｃ５の用量と有害事象の発生率、強度又は指定された関係との間に明確な関係は存在しなかった。今までに報告された有害事象を、表２にまとめる。
【００７７】
【表５】
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【００７８】
要約すると、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、著しい安全性の懸念もなく、６３０ｍｇの用量まで十分に耐性であった。
【００７９】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５濃度の非コンパートメント解析も実施した。被験者２、６及び１３に存在した投与前濃度の減算後に、この予備分析を、名目上のサンプリング時間を用いて実施した。試験における２．１ｍｇ〜６３０ｍｇの単回皮下投与後の薬物動態パラメータを、表３にまとめる。薬物濃度は、２．１ｍｇのＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与後の試験の定量限界に近く、この用量レベルのデータの値を限定した。７０ｍｇ以上の用量では、Ｔmax（最大吸収時間）は、１６〜３６時間の範囲であり、全体の中央値ｔ1/2（曲線の末端部分から算出）は、３０３時間であった。更に、濃度曲線下面積（無限に外挿される）及びＣmaxは、用量比例よりも大きな様式で増大した。
【００８０】
【表６】
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【００８１】
薬力学分析は、７０、２１０又は６３０ｍｇの単回投与後の７週間におけるベースラインＩｇＭ濃度の減少を示した。明確な用量応答関係は、試験における小標本サイズについて確立することができなかったが、ＩｇＭ減少の程度は、最も高い用量グループにおいて最も大きかった。７０ｍｇの投与グループにおける被験者は、投与後７週間までにベースラインまでＩｇＭ濃度が回復することを示したようであった。より高い用量グループにおける濃度は、この時点において抑制されたままであった。ＩｇＧ濃度、又はＦＡＣＳにより測定されたリンパ球亜集団における明確な効果は存在しなかった。
【００８２】
ＢＬｙＳ／ＴＡＣＩ−Ｆｃ５複合体の濃度は、サンプリング期間に比例して増大することが示され、投与後約６００時間までにプラトーに達した。
【００８３】
健康な男性被験者に対する７０〜６３０ｍｇ（約１〜９ｍｇ／ｋｇ用量と同等）のＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回皮下注射後に、Ｔmax（最大吸収時間）は１６〜３６時間の範囲であり、全体の中央値ｔ1/2（曲線の末端部分から算出）は３０３時間であった。更に、濃度曲線下面積（無限に外挿される）及びＣmaxは、用量比例よりも大きな様式で増大した。薬力学効果は、７０、２１０又は６３０ｍｇの用量におけるＩｇＭ濃度に関して注目された。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の単回投与後のＩｇＧ又はリンパ球亜集団における処置の明確な効果は存在しなかった。
【００８４】
実施例３
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５組成物を用いて多発性骨髄腫（ＭＭ）患者及びヴァルデンストレームマクログロブリン血症（ＷＭ）患者を処置する
ＭＭ患者及びＷＭ患者は、図１に示したプロトコルにより、連続５週間のＴＡＣＩ−Ｆｃ５の投与を受けた。処置は、図２に概要を示した逐次用量漸増コホート設計に従った。３人の患者は、最初の用量レベル（２ｍｇ／ｋｇ）で登録された。いったん最後の患者が彼／彼女の５回の注射を受けると、用量は増大された。
【００８５】
初期に投与れた用量レベルは、２、４、７又は１０ｍｇ／ｋｇであった（図２）。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５は、５７日サイクルの１、８、１５、２２及び２９日目で皮下注射により投与された。全部で１６人の患者が試験に入り、１１人のＭＭ患者及び４人のＷＭ患者が処置された。用量規定毒性は観察されず、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５に関連する重度の有害事象も報告されなかった。５人のＭＭ患者及び３人のＷＭ患者は、最初の処置サイクルの後に安定した疾病を有した；残りの患者は進行した。８人の患者は延長段階に入った：４人は２つの更なるサイクルを受け、４人は１５週間の注射を受けた。８人の患者のうち７人は、延長段階を完了した：４人の患者は安定な疾病を有し（３人のＭＭ及び１人のＷＭ）、２人の患者は振興した疾病を有し、１人のＷＭ患者は最小応答を有した（２５％を超えるＭ−要素の減少）。全てのＭＭ患者中のポリクローナル免疫グルブリン及び２／５のＭＭ患者中の可溶性シンデカン−１は、処置の間、顕著な減少を示し、一方、Ｃ−応答性タンパク質は処置により影響されなかった。リンパ球サブセット分析は、プラズマ細胞が選択的に減少する一方で、Ｔリンパ球は変わらないことを示した。
【００８６】
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５による処置は、患者に投与した用量レベルで十分耐性であった。顕著な生物学的応答が、予想されたＴＡＣＩ−Ｆｃ５モードの作用により観察された。
【００８７】
実施例４
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５処置に対する患者の応答の評価
ＴＡＣＩ−Ｆｃ５薬剤の初回投与の前に、以下の評価を実施した：病状に対する身体検査、例えば体重及びバイタルサインＥＣＯＧ一般状態、ルーチンの実験室試験、例えば血液学、血液化学尿検査、ＰＫ／ＰＤパラメータを決定するための血液採取、併用薬の記録及び有害事象の記録。
【００８８】
１日目の投与後、患者は、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の初回投与後の最初の２４時間の間、臨床研究ユニットに入院した。この期間、以下の評価を実施した：バイタルサインを含む病状に対する身体検査：投与後、１時間、２時間、４時間、８時間、１６時間及び２４時間；投与後の６〜１２時間と２４時間の間の２時間、４時間における、ＰＫパラメータの決定のための血液採取、併用薬の記録及び有害事象の記録。
【００８９】
３日目又は４日目において、以下の方法を実施した：バイタルサインを含む病状に対する身体検査：投与後４８時間又は７２時間；ＰＫパラメータの決定のための血液採取：ＴＡＣＩ−Ｆｃ５の初回投与後の４８時間又は７２時間。
【００９０】
投与前の８日目、１５日目、２２日目及び２９日目において、以下の方法を実施した：不満に対する身体検査、例えば体重及びバイタルサイン；ルーチンの実験室試験、例えば血液学、血液化学、尿検査、具体的な疾病評価実験室試験、免疫グロブリン定量化のための血液採取、血清遊離軽鎖、免疫固定によるＭタンパク質の検出、電気泳動法によるＭタンパク質の定量化、Ｃ−応答性タンパク質、ＬＤＨ、可溶性シンデカン−１、ベータ−２ミクログロブリン、フローサイトメトリーによるリンパ球のカウント、タンパク尿（２４時間−尿）のための尿採取、免疫固定によるベンス・ジョーンズタンパク質の検出、電気泳動法によるベンス・ジョーンズタンパク質の定量化、骨髄吸引：形質細胞の測定（％）、ＰＣＬＩ、Ｋｉ６７；フローサイトメトリーによるリンパ球のカウント；ＰＫ／ＰＤパラメータの測定のための血液採取；併用薬の記録及び有害事象の記録。
【００９１】
８、１５、２２及び２９日目において、初日の処置において投与したものと同じ濃度のＴＡＣＩ−Ｆｃ５の更なる注射を投与した。
【００９２】
処置サイクルの３０日目において、各患者のＰＫパラメータを、各患者の血液試料を分析することによって測定した。
【００９３】
３６、４３、５０及び５７日目において、不満に対する身体検査、例えば体重及びバイタルサインを実施した。５７日目において、１２誘導心電図、骨検査（Ｘ線）及びＭＲＩを実施した。５７日目のＷＭ患者においては、胸部／腹部／骨盤領域のＣＴスキャン及び／又は超音波スキャンによる腫瘍病変の測定も実施した。
【００９４】
全ての患者は、ルーチンで疾病特異的実験室試験、例えば免疫グロブリン定量化、血清遊離軽鎖定量化、免疫固定によるＭタンパク質の検出、電気泳動法によるＭタンパク質の定量化、Ｃ−応答性タンパク質、ＬＤＨ、可溶性シンデカン−１、ベータ−２ミクログロブリン、フローサイトメトリーによるリンパ球のカウント、タンパク尿のための尿採取（２４時間−尿）、免疫固定によるベンス・ジョーンズタンパク質の検出、電気泳動法によるベンス・ジョーンズタンパク質の定量化、形質細胞の測定（％）のための骨髄吸引、ＰＣＬＩ、Ｋｉ６７、フローサイトメトリーによるリンパ球のカウント、ＲＴ−ＰＣＲ及びフローサイトメトリーによるＢｌｙＳ及びＡＰＲＩＬレセプターの対象とされた。
【００９５】
様々なＭＭ及びＷＭ疾病関連マーカーを、５７日目の患者において測定した。ＴＡＣＩ−ＦＣ５による処置が、分析により以下の変化のいずれかが明らかにされた患者に対して有益であることが決定された：患者血液試料中の免疫グロブリンＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ又はＩｇＤ遊離軽鎖の減少；患者血液試料中の電気泳動法により測定したＭタンパク質の減少；患者血液試料中のＬＤＨ、可溶性シンデカン−１又はベータ−２ミクログロブリンの減少；患者のリンパ球数のフローサイトメトリーにより測定した場合の減少；患者の尿試料中の免疫固定又は電気泳動法により検出した場合のベンス・ジョーンズタンパク質の減少；患者の骨髄試料中の形質細胞又はリンパ球、ＰＣＬＩ、Ｋｉ−６７又はＢｌｙＳ／ＡＰＲＩＬレセプターの比率の減少。ＴＡＣＩ−Ｆｃ５による最初の処置サイクルの有益な結果を有する患者は、少なくとも２つの更なる処置サイクルを受けた。
【００９６】
実施例５
Ｔａｃｉ−Ｆｃ５処置に対して初期の有益な応答を有する患者の更なる処置
疾病の改善又は少なくとも安定化を示した患者は、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５による少なくとも更に２ラウンドの注射を受けた（図４）。初期に投与された用量レベルは、２、４、７又は１０ｍｇ／ｋｇであった（図４）。５７日間のサイクルの１、８、１５、２２及び２９日目に、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５を皮下注射により投与した（図５）。各サイクルを通して患者を観察した。一般的な毒性はＣＴＣＡＥ基準を用いて評価し、血液毒性は、Ｃｈｅｓｏｎ（１９９６）基準を用いて評価した。用量規定毒性は、リンパ球減少に関連するものを除いて、グレード３の非血液学的又はグレード３の血液学的毒性を含む。１回目及び５回目の注射の後に、完全なＰＫプロファイルを評価した。生物学的パラメータ評価は、Ｍタンパク質、血清及び尿遊離軽鎖、可溶性シンデカン−１、ベータ２−ミクログルブリン、ポリクローナル免疫グロブリン、Ｃ−応答性タンパク質及びＦＡＣＳ分析によるリンパ球亜集団のカウントを含んでいた。通常の安全性パラメータ、例えば潜在的な抗ＴＡＣＩ抗体を評価した。応答性の評価を、サイクル１及び３の最後に、改良したＢｌａｄｅ基準を用いて評価した。以下のいずれかが検出された場合に、患者の症状が改善又は少なくとも安定化したと分類した：患者血液試料中の免疫グロブリンＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ又はＩｇＤ遊離軽鎖の減少；患者血液試料中の免疫固定により測定したＭタンパク質の減少；患者血液試料中の電気泳動法により測定したＭタンパク質の減少；患者血液試料中のＬＤＨ、可溶性シンデカン−１又はベータ−２ミクログロブリンの減少；患者のリンパ球数のフローサイトメトリーにより測定した場合の減少；患者の尿試料中の免疫固定又は電気泳動法により検出した場合のベンス・ジョーンズタンパク質の減少；患者の骨髄試料中の形質細胞又はリンパ球、ＰＣＬＩ、Ｋｉ−６７又はＢｌｙＳ／ＡＰＲＩＬレセプターの比率の減少。
【図面の簡単な説明】
【００９７】
【図１】図１は、ＴＡＣＩ−Ｆｃ５処置のためのスケジュールである。
【図２】図２は、ＴＡＣＩ−Ｉｇ処置の用量漸増スキームである。
【図３】図３は、ＴＡＣＩ−Ｉｇ処置のための、３＋３デザインの用量漸増デシジョンツリーである。
【図４】図４は、ＴＡＣＩ−Ｉｇ処置に対する初期の有益な応答を有する患者のための更なる処置の概要である。
【図５】図５は、ＴＡＣＩ−Ｉｇに対する初期の有益な応答を有する患者のための更なるＴＡＣＩ−Ｉｇ処置のスケジュールである。
【図６】図６は、ＴＡＣＩ−Ｉｇの投与である。皮下注射の可能な領域。１−右上外部領域、２−左下外部領域、３−右下外部領域、４−左上外部領域、５−正中下部領域。
【図７】図７は、配列番号：１である。
【図８】図８は、配列番号：２である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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