(57)【要約】  本発明は、様々な新規な置換ジペプチド誘導性窒素含有複素環式化合物、その薬学的に許容され得る塩誘導体、およびその使用方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2009522234.tif 000026
（式中、
Ｗは、−Ｃ（Ｒ５）（Ｒ５ａ）−；−Ｃ（Ｒ６）（Ｒ６ａ）−Ｃ（Ｒ７）（Ｒ７ａ）−；−Ｃ（Ｒ８）＝Ｃ（Ｒ９）−；−Ｎ（Ｒ１０）およびそれらの組み合わせからなる群から選択される構成部分であり；
Ｘは、−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−；−ＯＣ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｏ−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ４）−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ４）−；−Ｃ（Ｒ１ａ）（Ｒ３ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−およびそれらの組み合わせからなる群から選択される構成部分であり；
ＹおよびＺは、それぞれ互いに独立して、酸素（「Ｏ」）および硫黄（「Ｓ」）からなる群から選択される構成部分を表し；そして
Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３ａ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ５ａ、Ｒ６、Ｒ６ａ、Ｒ７、Ｒ７ａ、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、それぞれ互いに独立して、水素原子；アミノ酸側鎖；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルケニル；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキニル；（Ｃ５〜Ｃ１２）単環式または二環式アリール；（Ｃ５〜Ｃ１４）単環式または二環式アラルキル；単環式または二環式（Ｃ５〜Ｃ１４）ヘテロアラルキル；ならびにＮ、Ｏ、ＳおよびＰから選択されるヘテロ原子を５個まで有する（Ｃ１〜Ｃ１０）単環式または二環式ヘテロアリール基からなる群から選択される構成部分を表し、前記基は、非置換であるか、またはハロゲン原子、ＮＯ２、ＯＨ、アミジン、ベンズアミジン、イミダゾール、１，２，３−トリアゾール、アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ４）、アミノ、ピペラジン、ピペリジン、ジアルキルアミノ、グアニジン基、ビスアルキル化またはビスアシル化グアニド基、カルボン酸、カルボキサミド、エステル、ヒドロキサム酸、ホスフィン酸、ホスホナート、ホスホンアミダート、スルフヒドリルおよびそれらのいずれかの組み合わせからなる群から更に選択される置換基１〜６個により置換されていてもよい）を含むＰＬＡ２酵素を阻害する化合物、または薬学的に許容され得るその塩。
【請求項２】
式Ｉ：
【化２】
2009522234.tif 000027
（式中、
Ｗは、−Ｃ（Ｒ５）（Ｒ５ａ）−；−Ｃ（Ｒ６）（Ｒ６ａ）−Ｃ（Ｒ７）（Ｒ７ａ）−；−Ｃ（Ｒ８）＝Ｃ（Ｒ９）−；−Ｎ（Ｒ１０）およびそれらの組み合わせからなる群から選択される構成部分であり；
Ｘは、−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−；−ＯＣ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｏ−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ４）−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ４）−；−Ｃ（Ｒ１ａ）（Ｒ３ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−およびそれらの組み合わせからなる群から選択される構成部分であり；
ＹおよびＺは、それぞれ互いに独立して、酸素（「Ｏ」）および硫黄（「Ｓ」）からなる群から選択される構成部分を表し；そして
Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３ａ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ５ａ、Ｒ６、Ｒ６ａ、Ｒ７、Ｒ７ａ、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、それぞれ互いに独立して、水素原子；アミノ酸側鎖；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルケニル；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキニル；（Ｃ５〜Ｃ１２）単環式または二環式アリール；（Ｃ５〜Ｃ１４）単環式または二環式アラルキル；単環式または二環式（Ｃ５〜Ｃ１４）ヘテロアラルキル；ならびにＮ、Ｏ、ＳおよびＰから選択されるヘテロ原子を５個まで有する（Ｃ１〜Ｃ１０）単環式または二環式ヘテロアリール基からなる群から選択される構成部分を表し、前記基は、非置換であるか、またはハロゲン原子、ＮＯ２、ＯＨ、アミジン、ベンズアミジン、イミダゾール、１，２，３−トリアゾール、アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ４）、アミノ、ピペラジン、ピペリジン、ジアルキルアミノ、グアニジン基、ビスアルキル化またはビスアシル化グアニド基、カルボン酸、カルボキサミド、エステル、ヒドロキサム酸、ホスフィン酸、ホスホナート、ホスホンアミダート、スルフヒドリルおよびそれらのいずれかの組み合わせからなる群から更に選択される置換基１〜６個により置換されていてもよい）で示される化合物、または薬学的に許容され得るその塩を効果的な量で含む、患者の炎症状態を治療または予防する医薬組成物。
【請求項３】
薬学的に許容され得る担体、賦形剤、佐剤、別の生物活性剤またはそれらの組み合わせの少なくとも１つを更に含む、請求項２記載の医薬組成物。
【請求項４】
生物活性剤が、ステロイド、非ステロイド性抗炎症剤、アセチルサリチル酸（acetylsiacylic acid）、シクロオキシゲナーゼ阻害剤またはその組み合わせの少なくとも１つを含む、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項５】
治療薬が、薬学的に許容され得る形態で存在する、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項６】
薬学的に許容され得る形態が、腸溶性コーティングを含む錠剤またはカプセルを含む、請求項５記載の医薬。
【請求項７】
請求項２記載の医薬の効果的な量を、必要とする患者に投与することを含む、炎症疾患または状態の治療または予防の方法。
【請求項８】
医薬が、薬学的に許容され得る担体、賦形剤、佐剤、別の生物活性剤、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される別の成分の少なくとも１つを更に含む、請求項７記載の方法。
【請求項９】
生物活性剤が、ステロイド、非ステロイド性抗炎症剤、アセチルサリチル酸、シクロオキシゲナーゼ阻害剤またはその組み合わせを含む、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
医薬が、薬学的に許容され得る形態で投与される、請求項７記載の方法。
【請求項１１】
薬学的に許容され得る形態が、経口投与用の腸溶性コーティングを含む錠剤またはカプセルを含む、請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
医薬が、非経口投与される、請求項７記載の方法。
【請求項１３】
炎症疾患または状態が、組織傷害、慢性関節リウマチ、骨関節炎、湿疹、狼瘡、ＩＢＤ、クローン病、ＡＲＤＳ、大腸炎、乾癬、ぜん息、嚢胞性線維症、ＡＩＤＳ、狭窄、再狭窄、アルツハイマー病、パーキンソン病、癌、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症および心肺疾患からなる群から選択される、請求項７記載の方法。
【請求項１４】
炎症に関連する生理学的状態を治療または予防するための、複数の容器を含むキットであって、前記容器の少なくとも１個が、請求項２記載の医薬または薬学的に許容され得るその塩を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９（ｅ）の下で、２００５年１２月２９日に出願された表題「Compositions and Methods for Synthesizing Novel Heterocyclic Therapeutics」の米国仮特許出願第６０／７５５，６３１号；２００５年１２月２９日に出願された表題「Compositions and Methods for Treatment and Prevention of Disease」の米国仮特許出願第６０／７５５，６３２号；および２００５年１２月２９日に出願された表題「Compositions and Methods for the Inhibition of Phospholipase A2」の米国仮特許出願第６０／７５５，６２６号の利益を主張するものであり、それらは全て本明細書に参考として援用される。
【０００２】
本発明は、２００６年１２月２２日に出願された米国非仮特許出願「Compositions and Methods for the Treatment and Prevention of Disease」（Express Mail No.:EV 902583365 US）および２００６年１２月２２日に出願された「Compositions and Methods for Synthesizing Heterocyclic Therapeutic Compounds」（Express Mail No.:EV 902583374 US）に関し、それらは両者とも、本明細書に参考として援用される。
【０００３】
発明の分野
本発明は、ホスホリパーゼＡ２（ＰＬＡ２）の阻害に有用な７および８員環ジペプチド誘導性窒素含有複素環式化合物、ならびに薬学的に許容され得るその塩に関する。加えて本発明は、ＰＬＡ２酵素の阻害、患者の炎症の治療もしくは予防、またはその両方に有用な組成物に有用な組成物に関する。
【０００４】
背景
ホスホリパーゼＡ２酵素（ＰＬＡ２）は、リン脂質の加水分解を触媒して、遊離脂肪酸およびリゾリン脂質を放出する酵素である。この酵素反応は、プロスタグランジン、ロイコトリエン、トロンボキサン、血小板活性化因子、リポキシンまたはリゾホスファチド酸のような様々な生理学的および病理生理学的工程に関与する脂質の産生において必須である。ＰＬＡ２は、細胞内酵素（例えば、カルシウム依存性群IV  ＰＬＡ２およびカルシウム非依存性群VI  ＰＬＡ２）および分泌性ＰＬＡ２（ｓＰＬＡ２）の２群に分別することができる、Ｃａ２＋依存性触媒活性を備えた低分子量タンパク質である。今日まで、１２種のホ乳類ｓＰＬＡ２が同定され、３種の主な構造集団：群I/II/V/X、IIIおよびXIIに分類された。
【０００５】
ｓＰＬＡ２活性の顕著な上昇が、敗血症性ショック、慢性関節リウマチ、急性膵臓炎、多発外傷、鎌状赤血球病患者における急性胸部症候群、および急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）患者の気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）の血清において検出されたが、生理−病理学的工程におけるｓＰＬＡ２の厳密な機能は、定かでない。ＧIIＡは、グラム陽性菌膜を加水分解する際に非常に強力であり、微生物からの宿主防御に関与し得ると考えられている。重要なこととして、高濃度のｈＧIIＡが、免疫特権器官である目において見出されている。
【０００６】
多くの重要な生理学的および病理学的状態でのＰＬＡ２機能に関連付ける研究が増え続けている。そのためＰＬＡ２阻害剤の開発は、ＰＬＡの機能的および病理生理学的役割の研究および更なる解明だけでなく、ＰＬＡ２機能が関与する状態（例えば炎症疾患）の処置用の治療薬を開発するためにも不可欠であろう。
【０００７】
ＰＬＡ２の機能様式（即ち、酵素活性の阻害、Ｍ型受容体の配位子へのアロステリック変化の導入）の一方を分別し得る治療薬を設計および開発すること、あるいは両方の様式に影響を与えてｓＰＬＡ２機能全てを阻害する治療薬を開発することも求められている。
【０００８】
発明の概要
本発明は、患者の疾患を治療および／または予防するのに有効な化合物、およびその化合物を合成する方法に関する。一つの態様において、本発明は、本発明の方法を用いて合成された新規なジペプチド誘導性複素環式化合物に関する。本発明は、前記化合物を効果的な量含む医薬組成物、およびそれらを必要とする患者に投与することを含む治療方法にも関する。
【０００９】
一つの態様において、本発明は、式Ｉ：
【００１０】
【化３】
2009522234.tif 000002
【００１１】
（式中、
Ｗは、−Ｃ（Ｒ５）（Ｒ５ａ）−；−Ｃ（Ｒ６）（Ｒ６ａ）−Ｃ（Ｒ７）（Ｒ７ａ）−；−Ｃ（Ｒ８）＝Ｃ（Ｒ９）−；−Ｎ（Ｒ１０）およびそれらの組み合わせからなる群から選択される構成部分であり；
Ｘは、−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−；−ＯＣ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｏ−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ４）−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ４）−；−Ｃ（Ｒ１ａ）（Ｒ３ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−およびそれらの組み合わせからなる群から選択される構成部分であり；
ＹおよびＺは、それぞれ互いに独立して、酸素（「Ｏ」）および硫黄（「Ｓ」）からなる群から選択される構成部分を表し；そして
Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３ａ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ５ａ、Ｒ６、Ｒ６ａ、Ｒ７、Ｒ７ａ、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、それぞれ互いに独立して、水素原子；アミノ酸側鎖；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルケニル；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキニル；（Ｃ５〜Ｃ１２）単環式または二環式アリール；（Ｃ５〜Ｃ１４）単環式または二環式アラルキル；単環式または二環式（Ｃ５〜Ｃ１４）ヘテロアラルキル；ならびにＮ、Ｏ、ＳおよびＰから選択されるヘテロ原子を５個まで有する（Ｃ１〜Ｃ１０）単環式または二環式ヘテロアリール基からなる群から選択される構成部分を表し、前記基は、非置換であるか、またはハロゲン原子、ＮＯ２、ＯＨ、アミジン、ベンズアミジン、イミダゾール、１，２，３−トリアゾール、アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ４）、アミノ、ピペラジン、ピペリジン、ジアルキルアミノ、グアニジン基、ビスアルキル化またはビスアシル化グアニド基、カルボン酸、カルボキサミド、エステル、ヒドロキサム酸、ホスフィン酸、ホスホナート、ホスホンアミダート、スルフヒドリルおよびそれらのいずれかの組み合わせからなる群から更に選択される置換基１〜６個により置換されていてもよい）で示される新規なジペプチド誘導性複素環式化合物の合成方法に関する。
【００１２】
好ましい実施形態のいずれかにおいて、本発明は、先の式により記載されたジペプチド誘導性複素環式化合物の、遊離塩基または酸形態およびそれらの塩を包含する。本発明は、先の式で記載された化合物の光学異性体、類似体および誘導体も包含する。本発明の更なる実施形態において、単一の製造工程、組合せまたは相互交換から得られる鏡像異性体および／またはジアステレオ異性体の混合物が包含される。本発明の更なる実施形態において、式Ｉにより記載される化合物は、薬学的に許容され得る形態に含まれ、場合により少なくとも１つの他の成分、例えば、適切な担体、賦形剤、別の薬学活性成分またはそれらの組み合わせを包含する。
【００１３】
本発明は、上記類似体および誘導体のプロドラッグ形態も提供するが、そのプロドラッグは、インビボで代謝されて先に示された類似体または誘導体を製造する。事実、上記類似体または誘導体の幾つかは、別の類似体または誘導体のプロドラッグであってもよい。
【００１４】
用語「プロドラッグ」は、当該技術分野で十分に理解されており、ホ乳類系において本発明の薬学活性化合物に変換される化合物を包含する。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 1980, vol. 16, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 61 and 424を参照されたい。
【００１５】
本発明の別の態様において、上記化合物を含む組成物が提供される。好ましくは該組成物は、適切な担体または賦形剤を含むことにより、医薬使用または農業使用に適するように配合される。
【００１６】
本発明の更に別の態様において、疾患を治療および／または予防するために、本明細書に記載された化合物の薬学的に許容され得る形態の適切な量を、必要とするホ乳類（例えばヒト）に投与する方法が提供される。実施形態の一つにおいて、本発明は、ＰＬＡ２酵素を阻害する方法を含む。
【００１７】
別の実施形態において、本発明は、炎症疾患を治療および／または予防するために、本明細書に記載された化合物の薬学的に許容され得る形態の適切な量を、必要とするホ乳類に投与する方法を含む。
【００１８】
本発明の系、方法および工程に関連する更なる有利な特徴および機能性は、以下の詳細な説明から明白となろう。
【００１９】
発明の詳細な説明
本発明の化合物、組成物および方法を説明する際、以下の用語は、他に断りがない限りは以下の意義を有する。
【００２０】
「薬学的に許容され得る塩」は、親化合物の生物学的有効性および特性を保持し、投与される用量として生物学的にも他についても有害でないそれらの塩を意味する。本発明の化合物は、それぞれアミノ基およびカルボキシ基の存在により酸塩および塩基塩の両方を形成することができる。薬学的に許容され得る塩基付加塩は、無機および有機塩基から製造してもよい。無機塩基から誘導される塩としては、非限定的に、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩およびマグネシウム塩が挙げられる。有機塩基から誘導される塩としては、非限定的に、第１級、第２級および第３級アミン、置換アミン（天然置換アミンなど）および環状アミンの塩、例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジメチルアミノエタノール、トロメタミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、Ｎ−アルキルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジンおよびＮ−エチルピペリジンの塩が挙げられる。他のカルボン酸誘導体（例えば、カルボキサミド、低級アルキルカルボキサミド、ジ（低級アルキル）カルボキサミドなどのカルボン酸アミドなど）が、本発明の実践に有用であることも理解すべきである。
【００２１】
薬学的に許容され得る酸付加塩は、無機および有機酸から製造されてもよい。無機酸から誘導される塩としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などが挙げられる。有機酸から誘導される塩としては、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などが挙げられる。
【００２２】
本明細書で用いられる用語「処置」は、動物、特にホ乳類、より特にヒトの状態または疾患の処置を包含し、
（ｉ）疾患に罹り易いがまだ罹っていると診断されていない対象において、疾患または状態が起こるのを防ぐこと；
（ii）疾患もしくは状態を阻害すること（即ち、発症を阻止すること）；疾患もしくは状態を緩和すること（即ち、状態を緩解させること）；または疾患により生じた状態（即ち、疾患の症状）を緩和すること、
を包含する。
【００２３】
用語「薬学上効果的な量」は、そのような処置を必要とするホ乳類に投与する際の、本明細書に定義された処置を実行するのに十分な量を指す。薬学上効果的な量は、処置される対象および疾患状態、病気の重症度ならびに投与の手段に応じて変動し、当業者により日常的に決定されてもよい。
【００２４】
「複素環」は、炭素原子を４〜９個有し、Ｎ、ＯまたはＳからなる群から選択されるヘテロ原子を少なくとも１個有する複素環基を指す。
【００２５】
「アルキル」は、炭素原子を１〜６個有する分枝状または非分枝状アルキル基、炭素原子を１〜６個有する分枝状または非分枝状アルケニル基、炭素原子を１〜６個有する分枝状または非分枝状アルキニル基を指す。
【００２６】
「ヒドロキシル」は、有機化合物中の置換基であるなら、官能基：−ＯＨを指す。
【００２７】
「複素環基」は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ケト、チオケト、カルボキシ、カルボキシアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、複素環、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、ＳＯ２−アリール、オキソ（＝Ｏ）、および−ＳＯ２−ヘテロアリールからなる群から選択される置換基１〜５個、好ましくは１〜３個で場合により置換されていてもよい。そのような複素環基は、単環または多環式縮合環を有していてもよい。好ましい複素環としては、モルホリノ、ピペリジニルなどが挙げられる。
【００２８】
窒素系複素環およびヘテロアリールの例としては、非限定的に、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、モルホリノ、ピペリジニル、テトラヒドロフラニルなど、およびＮ−アルコキシ窒素含有複素環が挙げられる。
【００２９】
用語「チオール」は、基：−ＳＨを指す。
【００３０】
用語「チオアルコキシ」は、基：−Ｓ−アルキルを指す。
【００３１】
「アミノ酸」は、アミノ酸官能基およびカルボン酸官能基の両方を含むいずれかの分子を指し、Ｄ、ＬまたはＤＬ形態の天然アミノ酸（例えば、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｈｙｌ、Ｈｙｐ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＶａｌ）のいずれかを包含する。天然アミノ酸の側鎖は、当該技術分野で周知であり、例えば、水素（例えば、グリシン中など）、アルキル（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン中など）、置換アルキル（例えば、トレオニン、セリン、メチオニン、システイン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、アルギニンおよびリジン中など）、アルカリール（例えば、フェニルアラニンおよびトリプトファン中など）、置換アリールアルキル（例えば、チロシン中など）、およびヘテロアリールアルキル（例えば、ヒスチジン中など）が挙げられる。
【００３２】
「アミジン」は、同一炭素原子に結合した２個のアミン基を有し、炭素−窒素二重結合を１個有する官能基：ＨＮ＝ＣＲ’−ＮＨ”２を指す。
【００３３】
「アルコキシル」は、酸素に結合したアルキル基、つまりＲ−Ｏ−（式中、Ｒは、アルキルである）を指す。
【００３４】
「置換アルキル」は、炭素原子を１〜１０個有し、ヒドロキシル、メルカプト、カルビルメルカプト、ハロゲン、カルビルオキシ、アミノ、アミド、カルボキシル、シクロアルキル、スルホまたはアシルからなる群から選択される置換基１個以上により置換された分枝状または非分枝状アルキル、アルケニルまたはアルキニル基を指す。これらの置換基の一般群は、本明細書に定義された対応する基の定義と同一の意義を有する。
【００３５】
「ハロゲン」は、フッ素、臭素、塩素、およびヨウ素原子を指す。
【００３６】
「アシル」は、基：−Ｃ（Ｏ）Ｒｅ（式中、Ｒｅは、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキルであるが、これらの一般群は、この説明で定義された対応する基の定義と同一の意義を有する）を示す。
【００３７】
「アシルオキシ」は、基：−ＯＡｃ（式中、Ａｃは、アシル、置換アシル、ヘテロアシルまたは置換へテロアシルであるが、これらの一般群は、この説明で定義された対応する基の定義と同一の意義を有する）を示す。
【００３８】
「アルキルアミノ」は、基：−ＮＲｆＲｇ（式中、互いに独立したＲｆおよびＲｇは、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールを表すが、これらの置換基は、本明細書で定義された対応する基の定義と同一の意義を有する）を示す。
【００３９】
「アリール」は、炭素原子を１〜１８個有し、少なくとも１個の芳香環で、または少なくとも１個が芳香族である多環式縮合環で構成されている、芳香族炭素環基を指す。
【００４０】
「置換アリール」は、炭素原子を１〜１８個有し、少なくとも１個の芳香環で、または少なくとも１個が芳香族である多環式縮合環で構成されている、芳香族炭素環基を指す。その環は、ハロゲン、アルキル、ヒドロキシル、カルビルメルカプト、アルキルアミノ、カルビルオキシ、アミノ、アミド、カルボキシル、ニトロ、メルカプトまたはスルホからなる群から選択される置換基１個以上で場合により置換されているが、これらの一般置換基は、この説明で定義された対応する基の定義と同一の意義を有する。
【００４１】
「ヘテロアリール」は、炭素原子を４〜９個、およびＮ、ＯまたはＳからなる群から選択されるヘテロ原子を少なくとも１個有する複素環基であって、この基の少なくとも１個の環が芳香族である複素環基を指す。
【００４２】
「置換ヘテロアリール」は、炭素原子を４〜９個、およびＮ、ＯまたはＳからなる群から選択されるヘテロ原子を少なくとも１個有する複素環基であって、この基の少なくとも１個の環が芳香族であり、この基がハロゲン、アルキル、カルビルオキシ、カルビルメルカプト、アルキルアミノ、アミド、カルボキシル、ヒドロキシ、ニトロ、メルカプトまたはスルホからなる群から選択される置換基１個以上で置換されている複素環基を指すが、これらの一般置換基は、この説明で定義された対応する基の定義と同一の意義を有する。
【００４３】
「カルボキシル」は、基：−Ｃ（Ｏ）ＯＲｊ（式中、Ｒは、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールであるが、これらの一般置換基は、本明細書で定義された対応する基の定義と同一の意義を有する）を示す。
【００４４】
「シクロアルキル」は、炭素原子を３〜１５個含む単環式または多環式アルキル基を指す。
【００４５】
「置換シクロアルキル」は、炭素原子を３〜１５個含み、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、カルビルオキシ、カルビルメルカプト、アリール、ニトロ、メルカプトまたはスルホからなる群から選択される置換基１個以上で置換されている単環式または多環式アルキル基を指すが、これらの一般置換基は、この説明で定義された対応する基の定義と同一の意義を有する。
【００４６】
「ヘテロシクロアルキル」は、環構造の少なくとも１個の環炭素原子が、Ｎ、Ｏ、ＳまたはＰからなる群から選択されるヘテロ原子で置換された、炭素原子を３〜１５個含む単環式または多環式アルキル基を指す。
【００４７】
「置換ヘテロシクロアルキル」は、環構造の少なくとも１個の環炭素原子が、Ｎ、Ｏ、ＳまたはＰからなる群から選択されるヘテロ原子で置換された、炭素原子を３〜１５個含む単環式または多環式アルキル基であって、その基がハロゲン、アルキル、置換アルキル、カルビルオキシ、カルビルメルカプト、アリール、ニトロ、メルカプトまたはスルホからなる群から選択される置換基を１個以上含む単環式または多環式アルキル基を指すが、これらの一般的置換基は、この説明で定義された対応する基の定義と同一の意義を有する。
【００４８】
用語「アリール」は、単環（例えばフェニル）または多環式縮合環を有し、少なくとも１個の環が、芳香族（例えば、ナフチル、ジヒドロフェナントレニル、フルオレニルまたはアントリル）である、炭素原子６〜２０個の不飽和芳香族炭素環基を指す。好ましいアリールとしては、フェニル、ナフチルなどが挙げられる。
【００４９】
用語「アルケニル」は、炭素原子を２〜４０個、より好ましくは炭素原子を２〜１０個、さらにより好ましくは炭素原子を２〜６個有する分枝状または非分枝状不飽和炭化水素基のモノラジカルを指す。好ましいアルケニル基としては、エテニル（−ＣＨ＝ＣＨ２）、ｎ−プロペニル（−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）、イソプロペニル（−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２）などが挙げられる。
【００５０】
「イミダゾール」は、一般式：Ｃ３Ｈ４Ｎ２で示される複素環式塩基を指す。
【００５１】
「アラルキル基」は、例えば、炭素原子を６〜１０個有する芳香族炭化水素環１または２個に結合し、炭素原子を総数で７〜１４個有するＣ１〜Ｃ６アルキル基、例えば、ベンジル、α−ナフチルメチル、インデニルメチル、ジフェニルメチル、２−フェネチル、２−α−ナフチルエチル、３−フェニルプロピル、３−α−ナフチルプロピル、フェニルブチル、４−α−ナフチルブチルまたは５−フェニルペンチル基を指す。
【００５２】
「グアニジン」は、一般にアミド炭酸のアミジンを指し、一般式：Ｃ（ＮＨ２）３を有する。
【００５３】
用語「アラルキル」および「ヘテロアリールアルキル」は、先の定義によるアリールまたはヘテロアリールと、アルキルおよび／またはヘテロアルキルおよび／または炭素環および／またはヘテロシクロアルキル環系の両方を含む基を指す。
【００５４】
本発明は、以下のとおりの一般式Ｉ：
【００５５】
【化４】
2009522234.tif 000003
【００５６】
（式中、
Ｗは、−Ｃ（Ｒ５）（Ｒ５ａ）−；−Ｃ（Ｒ６）（Ｒ６ａ）−Ｃ（Ｒ７）（Ｒ７ａ）−；−Ｃ（Ｒ８）＝Ｃ（Ｒ９）−；−Ｎ（Ｒ１０）およびそれらの組み合わせからなる群から選択される構成部分であり；
Ｘは、−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−；−ＯＣ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｏ−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ４）−；−Ｎ（Ｒ１ａ）Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ４）−；−Ｃ（Ｒ１ａ）（Ｒ３ａ）Ｃ（＝Ｙ）Ｎ（Ｒ４）−およびそれらの組み合わせからなる群から選択される構成部分であり；
ＹおよびＺは、それぞれ互いに独立して、酸素（「Ｏ」）および硫黄（「Ｓ」）からなる群から選択される構成部分を表し；そして
Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３ａ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ５ａ、Ｒ６、Ｒ６ａ、Ｒ７、Ｒ７ａ、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、それぞれ互いに独立して、水素原子；アミノ酸側鎖；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルケニル；（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキニル；（Ｃ５〜Ｃ１２）単環式または二環式アリール；（Ｃ５〜Ｃ１４）単環式または二環式アラルキル；単環式または二環式（Ｃ５〜Ｃ１４）ヘテロアラルキル；ならびにＮ、Ｏ、ＳおよびＰから選択されるヘテロ原子を５個まで有する（Ｃ１〜Ｃ１０）単環式または二環式ヘテロアリール基からなる群から選択される構成部分を表し、前記基は、非置換であるか、またはハロゲン原子、ＮＯ２、ＯＨ、アミジン、ベンズアミジン、イミダゾール、１，２，３−トリアゾール、アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ４）、アミノ、ピペラジン、ピペリジン、ジアルキルアミノ、グアニジン基、ビスアルキル化またはビスアシル化グアニド基、カルボン酸、カルボキサミド、エステル、ヒドロキサム酸、ホスフィン酸、ホスホナート、ホスホンアミダート、スルフヒドリルおよびそれらのいずれかの組み合わせからなる群から更に選択される置換基１〜６個により置換されていてもよい）により表される窒素含有複素環式化合物に関する。
【００５７】
記載された方法における中間体および所望の化合物は、単離して、有機合成化学において従来から用いられる精製法（例えば、中和、ろ過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶化および様々な種類のクロマトグラフィー）により精製することができる。中間体は、精製せずに次の反応に供してもよい。
【００５８】
本発明は、互変異性体などの全ての可能な異性体およびその混合物を包含する。キラル炭素が、２種の異なる鏡像異性体に用いられる場合、両方の鏡像異性体および２種の鏡像異性体を分離する手順も含まれる。
【００５９】
化合物の塩が望ましく、その化合物が所望の塩の形態で製造される場合も、それを精製に供することができる。化合物が遊離状態で製造され、その塩が望ましい場合、その化合物は、適切な有機溶媒に溶解または懸濁され、その後、酸または塩基の付加により塩を形成する。
【００６０】
本発明は、式Ｉで示される薬学的に許容され得る塩、ラセミ体および光学異性体にも関する。本発明の化合物は、代表的にはキラル中心を１個以上含む。したがって本発明は、ラセミ混合物、ジアステレオマー、鏡像異性体、および１種以上の立体異性体が高濃度である混合物を包含するものとする。明細書に記載され請求された本発明の範囲は、該化合物のラセミ形態だけでなく、各鏡像異性体およびその非ラセミ混合物も包含する。
【００６１】
本発明の更なる態様において、上記類似体および誘導体の使用方法、ならびに組成物が提供される。これらの方法は、ＰＬＡ２酵素を阻害してヒトおよび農業的疾患および状態またはその両方を治療または予防する本発明の化合物の使用を包含する。ヒト疾患および状態の例としては、非限定的に、炎症、敗血症性ショック、慢性関節リウマチ、急性膵臓炎、鎌状赤血球病患者における急性胸部症候群、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、肥満、肥満関連のインスリン抵抗性、痛覚過敏、肺浮腫、大腸炎、虚血再灌流、胸膜炎、微生物感染、慢性関節リウマチ、皮膚炎、乾癬、癌、骨粗しょう症、ぜん息、自己免疫疾患、ＨＩＶ、ＡＩＤＳ、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、Ｉ型インスリン依存性糖尿病、組織移植、マラリア、アフリカ睡眠病、シャーガス病、トキソプラズマ症、乾癬、再狭窄、美容上の抑制のための望ましくない毛髪増殖の阻害、上皮小体機能亢進症、炎症、胃潰瘍の処置、緑内障、アルツハイマー病、心房頻脈の抑制、腸運動の刺激または阻害、クローン病および他の炎症性腸疾患、高血圧（血管拡張）、卒中、てんかん、不安症、神経変性疾患、痛覚過敏状態、聴覚喪失（特に癌化学療法による聴覚喪失）の防御、コカイン増強の薬理学的操作、コカイン依存および過剰投与を処置する際の渇望、ならびに他の真菌、ウイルスおよび寄生虫疾患が挙げられる。
【００６２】
本発明の別の態様において、上記化合物を含む組成物が提供される。好ましくは該組成物は、適切な担体または賦形剤を含むことにより、医薬または農業的使用に適するように配合される。
【００６３】
本発明の更に別の態様において、疾患を治療および／または予防するために、本明細書に記載された化合物の薬学的に許容され得る形態の適切な量を、必要とするホ乳類（例えばヒト）に投与する方法が提供される。一つの実施形態において、本発明は、ＰＬＡ２酵素を阻害する方法を含む。別の実施形態において、本発明は、ＰＬＡ２の阻害に有用な、表Ｉに列挙された分子を含む。特に、分子：４９、３３、４０、９、５、４および３は、群：Ｖ  ｓＰＬＡ２およびＸ  ｓＰＬＡ２の阻害に有用である。それらの分子では、ｓＰＬＡ２阻害がそれぞれ以下の序列：
【数１】
2009522234.tif 000004
であることが実証された。
【００６４】
別の実施形態において、本発明は、炎症疾患を治療および／または予防するために、本明細書に記載された化合物の薬学的に許容され得る形態の適切な量を、必要とするホ乳類に投与する方法を含む。
【００６５】
選択されたファーマコフォアを三次元空間に効率的に分布させ得る環式／多環式分子類のコンビナトリアル化学技術による設計および合成は、生物学的工程を調整し得る小分子を同定して、生物学的経路を分離するための重要な方法である。ペプチドから誘導された小環または中環を組入れた分子（例えば２，５−ジケトピペラジン）は、接近が容易であること、ペプチド誘導体の化学および立体化学的多様性、ならびに付随的操作により得られる高い多様性があるため、特に興味深い。ペプチド基質により達成され得る更なる骨格多様性を拡張するために、我々は、高密度で官能基化された（５箇所の多様性）ジペプチド誘導性１，３，５−トリアゼパン−２，６−ジオンスカホールドの合成を研究し、ＰＬＡ２に対する小さな「探査」ライブラリーをスクリーニングすることにより、その有用性を実証した。
【００６６】
本明細書に含まれる実施形態の説明は、例示として示されており、本発明の範囲を限定するものではない。本発明の系、方法および工程に関連する更なる有利な特徴および機能性は、以下の実施例から明白となろう。
【００６７】
実施例
今日まで、１２種のホ乳類ｓＰＬＡ２が同定され、３種の主な構造集団：群Ｉ／II／Ｖ／Ｘ、III、およびXIIに分類された。
【００６８】
ｓＰＬＡ２活性の顕著な上昇が、敗血症性ショック、慢性関節リウマチ、急性膵臓炎、多発外傷、鎌状赤血球病患者における急性胸部症候群、および急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）患者の気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）の血清において検出されたが、生理−病理学的工程におけるｓＰＬＡ２の厳密な機能は、定かでない。ＧIIＡは、グラム陽性菌膜を加水分解する際に非常に強力であり、微生物からの宿主防御に関与し得ると考えられている。重要なこととして、高濃度のｈＧIIＡが、免疫特権器官である目において見出されている。
【００６９】
ＧＩＢは、膵臓中に高レベルで見出され、デオキシコラート（胆汁中に見出される界面活性剤）の存在下で基質への高い活性を有し、トリプシンにより腸内で活性化される。こうして、リン脂質消化におけるＧＩＢの機能が示唆された。この酵素をコードする遺伝子をノックアウトすると、一見したところ脂質吸収における実質的な役割が示されなくなるが、高脂食を与えたマウスから、ＧＩＢノックアウトマウスが肥満および肥満関連のインスリン抵抗性を発症する可能性が低くなることが実証された。
【００７０】
様々なホ乳類細胞型にＧＶおよびＧＸを外部から添加すると、ｃＰＬＡ２を活性化せずに、アラキドナートが放出され、エイコサノイドが生成される。加えて、ＧＶノックアウトマウスから得たジモサン処置の腹腔マクロファージでは、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）およびロイコトリエンＣ４（ＬＴＣ４）産生が低下した。それゆえ、ＧＶおよびＧＸは、特定の条件下で、エイコサノイドの産生に関与する可能性がある。ＧIIＣ、ＧIIＥ、ＧIIＦ、ＧIII、ＧXIIＡおよびＧXIIＢの生理学的役割は、まだ分類されていないが、幾つかの証拠から、いずれかの酵素活性が欠如した場合でも、ＧXIIが脊椎の神経発達に関与する可能性が示唆された。
【００７１】
近年の証拠から、ＰＬＡ２タンパク質が、リン脂質を加水分解するだけでなく、異なる結合タンパク質へのリガンドとして働き得ることが示唆された。最もよく知られるｓＰＬＡ２結合タンパク質が、Ｍ型受容体（ＭｔＲ）である。この受容体は、最初は、マクロファージマンノース受容体による一般的特性を有する膜貫通型糖タンパク質としてクローニングされ、より近年になり、受容体：Ｅｎｄｏ−１８０およびＤｅｃ−２０５としてクローニングされた。この受容体は、Ｎ末端システイン・リッチ・ドメイン、フィブロネクチン様II型ドメイン、８種のＣ型レクチン様ドメイン（ＣＴＬＤ）、単一の膜貫通ドメインおよび短い細胞質尾部を含む大きな細胞外ドメインを有する。Ｍ型受容体は、ｓＰＬＡ２を急速に内在化することもでき、ｓＰＬＡ２クリアランスにおける役割が示唆される。ｓＰＬＡ２結合に関する酵素活性を阻害し得るその受容体の可溶性形態を同定した場合も、この見解と一致する。その上、その受容体の遺伝子標的から得られた結果および膵臓ｓＰＬＡ２を用いた他の試験から、例えば、ＭＡＰＫカスケードを活性化して、前炎症性表現型を導入し、Ｆａｓリガンドの細胞表面発現をアップレギュレートすることにより、Ｍ型受容体がｓＰＬＡ２結合を通した細胞内シグナリング分子として作用することが示唆された。
【００７２】
群：IIＡに特異的なｓＰＬＡ２阻害剤を発見するための、構造に基づく研究から、ナノモル親和力によりこのｓＰＬＡ２を阻害するインドール類似体が同定された。一つの類似体であるＬＹ３１１７２７は、マクロファージ、好酸球および上皮細胞を含むモルモットＢＡＬ液に関して、外部添加されたｈＧIIＡが惹起したトロンボキサンＡ２の放出を阻害することができた。ＬＹ３１１７２７は、ＡＲＤＳのモルモットモデルにおいてリポ多糖により誘発されたｓＰＬＡ２活性を阻害することも可能であった。その上、ｈＧIIＡを過剰発現するトランスジェニックマウスにＬＹ３１１７２７を静脈内投与すると、血中のＰＬＡ２触媒活性が喪失するため、この阻害剤が、これらの動物の少なくとも血液循環中では、インビボで活性であり得ることが実証された。ネズミトキソプラズマ症の実験モデルは、ＬＹ３１１７２７注入によってより早期に死亡したため、これらのマウスにおいてこの阻害剤に感受性のｓＰＬＡ２の少なくとも１種による防御的役割が示唆された。加えて、痛覚過敏の３種の異なる実験ラットモデルにＬＹ３１１７２７を腰部髄腔内投与すると、観察された炎症関連の症状が全て軽減した。
【００７３】
Ｓ−５９２０／ＬＹ３１５９２０Ｎａと呼ばれる第２世代のインドール誘導性阻害剤は、オレイン酸により誘導されたウサギ急性肺傷害モデルの肺の合併症、肺浮腫、血管貫通性および肺サーファクタント変性を有意に軽減した。ｓＰＬＡ２の他の２種の阻害剤であるＬＹ３３３０１３（Ｓ−３０１３）および５−（４−ベンジルオキシフェニル）−４ｓ−（７−フェニルヘプタノイルアミノ）ペンタン酸は、ラットをデキストラン硫酸誘導性およびトリニトロベンゼンスルホン酸による大腸炎から防御した。５−（４−ベンジルオキシフェニル）−４ｓ−（７−フェニルヘプタノイルアミノ）ペンタン酸の経口投与は、ラットの腸を虚血および再灌流による傷害からも保護した。
【００７４】
ｍＧIIＡ、ｍＧIIＤ、ｍＧIIＥ、ｍＧＶおよびｍＧＸの強力な阻害剤であることで知られる分子：ＹＭ−２６７３４により、マウスのテトラセノイルホルボール−１３−アセタートによる耳浮腫が低減した。この同薬物は、カラゲーニン（carageenin）誘導性胸膜炎ラットモデルの滲出液および白血球の蓄積も有意に減少させた。ｓＰＬＡ２阻害剤の有望な効果にもかかわらず、Ｓ−５９２０／ＬＹ３１５９２０Ｎａを敗血症および臓器不全のヒトに関する臨床試験で用いた場合、ＰＬＡ２阻害剤処置群とプラセボ群の間に有意差は見出されなかった。しかし、ＧIIＡ  ｓＰＬＡ２は抗菌性を有し、微生物感染による敗血症性ショックを引き起こすため、ｓＰＬＡ２阻害剤を敗血症性ショック治療薬として用いることが意味をなすかどうかは、議論の余地がある。
【００７５】
近年になり、慢性関節リウマチの患者に別のｓＰＬＡ２阻害剤、つまり経口分布のＬＹ３３３０１３を用いた臨床試験では、治験の第一週目に病理が有意に低下したが、その利益はその後喪失した。この最後の報告で、著者は、阻害剤を静脈内投与した場合の病理に対する正の影響を報告した。この同阻害剤は、ぜん息患者への吸入抗原負荷に対し利益を示すことができなかった。ＬＹ３３３０１３が、これらの患者において良好に耐容されたことに留意することが重要である。
【００７６】
つまり、阻害剤ごとに選択される投与経路（例えば、経口、非経口、経腸、経皮、静脈内、経肛門など）および生物系が、有効性に影響を与え得ると思われる。例えば、ＧIIＡおよびｃＰＬＡ２の両方の阻害剤であるＢＭＳ−１８８１１６２は、ホルボールエステルへの反復暴露により誘導された慢性皮膚炎のマウスモデルにおいて局所剤として用いられると、非常に強力な抗炎症活性を有する。この同阻害剤は、乾癬患者では効果はなかった。志願者において標識したＢＭＳ−１８８１１６２を使用すると、識別可能な薬物の浸透はほとんど示されなかったが、それはおそらくマウスに比較してとヒトでは角質層が厚いためと思われる。
【００７７】
インドキサム（ＩＤＸ）と呼ばれるインドール阻害剤は、ラット胃上皮細胞において、ＴＧＦ−αおよびＩＬ−１により誘導されたＰＧＥ２産生を阻害した。インドキサムの誘導体であるＭｅ−インドキサム（Ｍｅ−ＩＤＸ）は、ｈＧIIＡの阻害がＬＹ３１１７２７よりも約２０倍強力である。このインドール類似体は、ホ乳類細胞での試験に適しており、ｈＧIIＡだけでなく、他の群：Ｉ／II／Ｖ／Ｘ  ｓＰＬＡ２の酵素活性も阻害する。ＩＤＸおよびその関連のインドール化合物がホ乳類細胞および動物モデルの様々な炎症シグナルに影響を与えるという事実から、群：Ｉ／II／Ｖ／Ｘの少なくとも１つのｓＰＬＡ２が、これらの工程に関与することが示唆される。
【００７８】
Ｍｅ−ＩＤＸは、ｓＰＬＡ２の触媒溝（catalytic groove）に結合してそこから突出していることが公知であるため、リン脂質以外の分子とのｓＰＬＡ２相互作用を妨害することができる。事実、ＩＤＸが、Ｍ型受容体を発現するマウス細胞への、ブタ膵臓の群ＩＢおよび群Ｘ  ｓＰＬＡ２の結合を良好な効率で阻害し得ることが示された（ＩＣ５０は、それぞれ１３０nMおよび９００nM）。しかし、例えばマウスのｓＰＬＡ２およびＭ型受容体を用いて、この観察を内在の構成の他のｓＰＬＡ２に当てはまり得るかどうかは不明である。幾つかの病理生理学的障害が、この受容体に結合するｓＰＬＡ２に関与し得るため、この検査は非常に重要である。事実、Ｍ型受容体を欠損するマウスは、内毒素ショックに抵抗性であり、Ｍ型受容体発現マウスに比較して、ＬＰＳ処置後に循環ＩＬ−１およびＴＮＦ−αの濃度が低下する。しかしながら、野生型マウスへのリポ多糖注入により誘導された敗血症性ショックは、インドキサム処置により軽減させることができる。近年になり、我々は、群：ＩＢおよびIIＡ  ｓＰＬＡだけでなく、複数の別のマウスの群：Ｉ／II／Ｖ／ＸのｓＰＬＡ２が、最初、ヘビ毒ｓＰＬＡ２  ＯＳ２で同定されたＭ型受容体に結合し得ることが見出されたことから、１種以上のｓＰＬＡ２がこれらの工程に関与する可能性があり、インドキサムの効果が、酵素活性の阻害またはＭ型受容体への結合の阻害のどちらかによる可能性があるとの仮説が得られた。
【００７９】
Ｍｅ−ＩＤＸの存在下で細胞膜で放射線標識したホ乳類ｓＰＬＡ２の直接結合性を分析して得られた結果、およびｓＰＬＡ２の阻害剤として知られる他の様々な分子の阻害効果の評価から、異なる試験でのｓＰＬＡ２阻害剤で観察された効果が、ｓＰＬＡ２触媒活性の阻害によるだけでなく、それらの受容体へのｓＰＬＡ２結合性の調節による可能性が強く示された。
【００８０】
ジアゼピンおよびトリアゼピン骨格を含む分子により示された顕著な生物活性から、ジペプチド誘導性１，３，５−トリアゼパン−２，６−ジオンスカホールドの設計および評価への関心が生まれた。特に７員環尿素は、近年になり、ＨＩＶ−プロテアーゼおよび逆転写酵素阻害剤、因子Ｘａ阻害剤、β−ラクタマーゼ阻害剤、ホスホリパーゼＣ阻害剤、ならびにケモカイン受容体アンタゴニストの開発での適用に関して非常に大きな関心が寄せられた。
【００８１】
以下の試験から、本発明の新規な７および８員環窒素含有複素環式化合物が、ＰＬＡ２の阻害に有用であり、炎症疾患の治療および予防に効果的となり得ることが確立された。
【００８２】
Ｉ．［３Ｈ］−オレイン酸でのE. coli膜の標識
【００８３】
１）Luria Broth（ＬＢ）ｗ／またはｗ／ｏアンピシリン中のE. coli菌株の単一コロニーからの一夜前培養液１０mlを調製した。ＤＨ１０ＢおよびＸＬ−１菌株は、ＪＭ１０１菌株よりも良好と思われ、即ちそれらは、よりバックグランドの小さい膜を提供し、ＰＬＡ２アッセイの後にペレット化が容易であった。飽和した一夜前培養液のＯＤ６００nmは、約２ＵＤＯであった。１／５希釈を調製し、ＯＤ６００nmを測定した。
【００８４】
２）新しいＬＢ  １００ml中の前培養液を０．０５ＵＯＤ６００nmに希釈し、［３Ｈ］−オレイン酸（ＮＥＴ２８９、ＮＥＮ、５mCi/ml、アルコール溶液）２５０μlを添加した。フードの下で放射性原液を含むバイアルを開け、Ｎ２でバイアルをフラッシュした後閉じた。後に取り込まれたオレイン酸を定量するために、培養液のアリコート１０μlを保存した。
【００８５】
３）激しく振とうしながら（２００〜２３０rpm）３７℃で約５時間細胞を１ＵＯＤ６００nmまで増殖させた。
【００８６】
４）１５分／４０００rpm／５０mlファルコン管／室温で培養液を遠心分離した。取り込まれたオレイン酸を定量するために、上清５０μlを保存した。上清を廃棄して、ペレットをＬＢ５０mlに懸濁させ、振とうしながら３７℃で更に３０分間細胞を増殖させた（このステップにより、残りの取り込まれていない標識オレイン酸をリン脂質に取り込ませた）。
【００８７】
５）再度、上記のとおり遠心分離した。後の定量のために、上清５０μlを保存した。上清を廃棄して、ペレットを洗浄緩衝液５０mlに再懸濁させた。
【００８８】
６）上記のとおり遠心分離した。後の定量のために、上清５０μlを保存した。上清を廃棄して、ＢＳＡを含まない洗浄緩衝液２mlにペレットを再懸濁させた。カウントのためにアリコート２μlを保存し、残りの溶液をCorexガラス管に移した。アルミホイルのカップに入れて、オートクレーブにかけた（２０分、１２０℃、１．５バール）。このステップは、一晩実行することができる。
【００８９】
７）翌日、カウントのために別のアリコート２μlを保存し、残りの溶液をエッペンドルフ管２本に移した。Corex管を洗浄緩衝液１mlですすぎ、溶液２mlと混合した。
【００９０】
８）１４，０００rpm（室温）で１分間遠心分離した。後の定量のために上清１０μlを保存した。上清を廃棄して、各ペレットを洗浄緩衝液１．５mlに再懸濁させた。このステップを更に４回繰り返した。
【００９１】
９）ペレットを洗浄緩衝液５mlに再懸濁させ、取り込まれたオレイン酸を定量するために５μlをカウントした。溶液を１００，０００dpm/μlに希釈し、３０μlのアリコートを調製した。
【００９２】
１０）異なる上清をカウントし、投入量に対するステップ９の放射線量の割合％を計算した。通常、取り込まれた放射線量は、ステップ２で添加された投入放射線量の３０〜４０％を超えていた。
【００９３】
II．ＰＬＡ２アッセイ
１）基質の調製
必要な量の放射線をピペットで取り出し（反応あたりの標識膜の１００，０００ｄｐｍ×反応回数）、エッペンドルフ管でＰＬＡ２活性緩衝液１mlに希釈した。
【００９４】
１４，０００rpm（室温）で１分間遠心分離した。上清を廃棄した。ペレットをＰＬＡ２活性緩衝液１５０μlに注意深く再懸濁させ、反応の全回数に対するＰＬＡ２活性緩衝液を添加した。プールを室温で保存した（プールはあらかじめ過剰に調製しなかった）
【００９５】
２）ＰＬＡ２アッセイ反応
エッペンドルフ管内で代表的反応物を製造したが、それは、ＰＬＡ２活性緩衝液５０μl、無視できる容量の酵素溶液、および上記の基質プール１００μlで製造された全量１５０μlで構成されていた（かなり大容量の基質をマルチピペットで添加すると十分に混合されるため、基質を添加した後ボルテックスにかける必要はなかった）。
【００９６】
反応混合物を２５℃または３７℃で１時間までの様々な時間、異なる量の酵素と共にインキュベートした（インキュベートは、室温で日常的に実施した）。インキュベーション時間および試料の容量は、酵素アッセイの直線性の範囲内での加水分解速度が確保されるように調整した（代表的には全ての基質の加水分解量の１０〜２０％）。添加されるｓＰＬＡ２が存在しない対照インキュベーションを同時に実施して、特異的加水分解を計算するのに用いた。
【００９７】
３）停止緩衝液を３００μl添加することにより、反応を停止させた。管を室温、１４，０００rpmで３分間遠心分離した。遊離した標識オレイン酸を含む上清を回収し、カウントした。
【００９８】
基質のプール１００μlのアリコート３または４本もカウントして、注入された放射線／反応物の全量を決定した。
【００９９】
先の上清でのカウントが、膜リン脂質から放出された遊離［３Ｈ］−オレイン酸に対応すると、我々が日常的に判断していることに留意されたい。遊離オレイン酸とリン脂質とを分離し得る条件下で、シリカゲル６０での薄層クロマトグラフィーを実施することにより、これらのカウントが実際の遊離オレイン酸であることを検証してもよい。
【０１００】
このプロトコルでは、ｓＰＬＡ２活性が特異的に検出されず、細胞質型ＰＬＡ２の活性を検出できることにも留意されたい。
【０１０１】
材料
ＤＨ１０ＢまたはＸＬ−１  E. coli菌株（保有する菌株であり、プラスミドではない）；［３Ｈ］−オレイン酸（ＮＥＴ２８９、ＮＥＮ、エタノール中５mCi/ml）；分画Ｖ脂肪酸不含ＢＳＡ（Sigma #A6003またはA7511）；分画Ｖ  ＢＳＡ（Sigma#A7906）；Corexガラス管または均等物。緩衝液：洗浄緩衝液：０．１Ｍ  トリス／ＨＣｌ  pH８．０、脂肪酸不含ＢＳＡを０．５％含む１mM  ＥＤＴＡ；ＰＬＡ２活性緩衝液：０．１Ｍ  トリス／ＨＣｌ  pH８．０、１０mM  ＣａＣｌ２、０．１％ＢＳＡ；停止緩衝液：脂肪酸不含ＢＳＡを０．２％含む０．１Ｍ  ＥＤＴＡ。
【０１０２】
治療薬の投与
本発明の一つの実施形態は、ＰＬＡ２酵素を阻害する方法を包含する。本発明の別の実施形態は、本発明の化合物を薬学的に許容され得る形態で含む医薬組成物を包含する。更に別の実施形態において、本発明は、薬学的に許容され得る形態の本発明の化合物の適切な量を投与することを含む、ホ乳類（例えばヒト）の疾患（例えば炎症疾患）を治療および／または予防する方法を包含する。本発明の化合物は、場合により、担体、賦形剤、別の生物活性剤またはそれらの混合物の少なくとも１つと共に投与してもよい。
【０１０３】
適切な投与経路としては、経口、経直腸、脈管内、局所（眼内、口腔内および舌下など）、経膣および非経口（皮下、筋肉内、硝子体内、静脈内、皮内、髄内および硬膜外など）が挙げられる。好ましい投与経路は、患者の状態、化合物の毒性および感染部位、とりわけ臨床医に知られる他の判断基準に依存する。
【０１０４】
本発明の治療組成物は、活性成分を約１〜約９５％含み、単回投与形態は好ましくは活性成分を約２０〜約９０％含み、単回ではない投与形態は好ましくは活性成分を約５％〜約２０％含む。単位投与形態は、例えば、コート錠、錠剤、アンプル、バイアル、坐剤またはカプセルである。別の投与形態は、例えば、軟膏、クリーム、ペースト、フォーム、チンキ剤、リップスティック、ドロップ、スプレー、分散剤などである。例は、活性成分を約０．０５ｇ〜約１．０ｇ含むカプセルである。
【０１０５】
本発明の医薬組成物は、それ自体が公知の手法、例えば、従来の混合、造粒、コーティング、溶解または凍結乾燥法により調製される。
【０１０６】
好ましくは活性成分の溶液、加えて懸濁液または分散液、特に等張の水溶液、分散液または懸濁液を用い、例えば活性物質を単独で、または担体（例えばマンニトール）と一緒に含む凍結乾燥組成物の場合には、これらを使用前に調製することができる。該医薬組成物は、滅菌されており、そして／または賦形剤、例えば、防腐剤、安定化剤、湿潤剤および／もしくは乳化剤、可溶化剤、浸透圧を調節する塩ならびに／または緩衝液を含むことができ、それらは、それ自体が公知の手法、例えば従来の溶解または凍結乾燥法で調製される。上述の溶液または懸濁液は、増粘物質、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルピロリドンまたはゼラチンを含むことができる。
【０１０７】
薬学的に許容され得る形態としては、例えば、ゲル、ローション、スプレー、粉末、ピル、錠剤、制御放出錠、持続放出錠、律速放出錠、腸溶性コーティング、エマルション、液体、塩、ペースト、ジェリー、エアロゾル、軟膏、カプセル、ゲルカップ、または当業者に明白な他の適切な形態が挙げられる。
【０１０８】
油中の懸濁液は、油性成分として、注入目的で慣用的な植物油、合成油または半合成油を含む。上述の油は、特に、炭素原子を８〜２２個、特に１２〜２２個有する長鎖脂肪酸、例えばラウリン酸、トリデシル酸、ミリスチン酸、ペンタデシル酸、パルミチン酸、マルガリン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ベヘン酸または対応する不飽和酸、例えば、オレイン酸、エライジン酸、ユール酸、ブラシジン酸またはリノール酸を酸成分として含有する液体脂肪酸エステルであり、適宜、酸化防止剤、例えばビタミンＥ、β−カロテンまたは３,５−ジ−tert−ブチル−４−ヒドロキシトルエンを添加する。これらの脂肪酸エステルのアルコール成分は、６個以下の炭素原子を有し、一価または多価アルコール、例えば一価、二価または三価アルコール、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールもしくはペンタノール、またはその異性体であるが、特にグリコールおよびグリセロールである。そのため、脂肪酸エステルは、例えば、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、"Labrafil M 2375"（パリのGattefosee；ポリオキシエチレングリセリン＝トリオレアート）、"Labrafil M 1944 CS"（パリのGattefosee；アプリコット種油の加アルコール分解により調製され、グリセリドおよびポリエチレングリコールエステルからなる不飽和ポリグリコール酸グリセリド）、"Labrasol"（パリのGattefosee；ＴＣＭの加アルコール分解により調製され、グリセリドおよびポリエチレングリコールエステルからなる飽和ポリグリコール酸グリセリド）および／または"Miglyol 812"（ドイツ、Huls AGの、鎖長Ｃ８〜Ｃ１２の飽和脂肪酸のトリグリセリド）、そして特に、植物油、例えば、綿実油、アーモンド油、オリーブ油、ヒマシ油、ゴマ油、大豆油、そして特に落花生油である。
【０１０９】
注射用組成物の製造は、例えば、アンプルまたはバイアルへの充填や容器を封止する際、滅菌条件下、慣用法で実施される。
【０１１０】
例えば、経口使用される医薬組成物は、活性成分を１種以上の固形担体と配合し、適宜、得られた混合物を造粒し、所望ならば、適宜、更なる賦形剤を添加することにより、その混合物または顆粒を錠剤またはコート錠コアに加工することにより得ることができる。
【０１１１】
適切な担体は、特に、糖などの充填剤、例えば、ラクトース、スクロース、マンニトールまたはソルビトール、セルロース調製物および／またはリン酸カルシウム、例えば、リン酸三カルシウム、またはリン酸水素カルシウム、更にデンプンなどの結合剤、例えば、トウモロコシ、小麦、米もしくはジャガイモデンプン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび／もしくはポリビニルピロリドン、ならびに／または所望ならば、上述のデンプンなどの崩壊剤、更にはカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、アルギン酸もしくはその塩、例えばアルギン酸ナトリウムである。更なる賦形剤は、特に、流出調整剤および滑剤、例えばサリチル酸、タルク、ステアリン酸もしくはその塩（例えば、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸カルシウム）、および／またはポリエチレングリコールもしくそれらの誘導体である。
【０１１２】
コート錠コアは、適宜、胃液に抵抗性の適切なコーティングを備えることができ、使用されるコーティングは、とりわけ、適宜、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールおよび／もしくは二酸化チタンを含む濃縮糖溶液、適切な有機溶媒もしくは溶媒混合物中のコーティング溶液、または胃液に抵抗性のコーティングを調製する場合は、適切なセルロース調製物の溶液、例えば、フタル酸アセチルセルロースまたはフタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロースである。
【０１１３】
「制御放出」は、本発明の目的では、治療活性化合物が、制御的速度で、もしくは特定の部位（例えば腸）で、またはその両方で、調製物から放出されるため、治療上有益な血液レベル（しかし毒性レベル未満）が、長期間にわたり保持され、例えば１２時間〜２４時間投与形態を提供することを意味する。
【０１１４】
本明細書で用いられる用語「律速ポリマー」は、化合物の放出をインビボで遅延できる親水性ポリマー、疎水性ポリマー、または親水性および／もしくは疎水性ポリマーの混合物を包含する。加えて、同ポリマーの多くは、薬物、薬物懸濁液、または薬物マトリックスの腸溶性コーティングを調製するのに使用することができる。過度に実験を行わずに、コーティング厚、透過性および溶解性を改良して、所望の制御放出プロファイル（例えば、薬物放出速度および部位）を提供するのは、当該技術の範囲内である。
【０１１５】
本発明で用いられる適切な制御放出ポリマーの例としては、ヒドロキシアルキルセルロース（例えば、ヒドロキシプロピルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロース）；ポリ（エチレン）オキシド；アルキルセルロース（例えば、エチルセルロースおよびメチルセルロース）；カルボキシメチルセルロース；親水性セルロース誘導体；ポリエチレングリコール；ポリビニルピロリドン；酢酸セルロース；酢酸酪酸セルロース；酢酸フタル酸セルロース；酢酸トリメリト酸セルロース；酢酸フタル酸ポリビニル；フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース；酢酸コハク酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース；ポリ（メタクリル酸アルキル）；およびポリ（酢酸ビニル）が挙げられる。他の適切な疎水性ポリマーとしては、アクリル酸またはメタクリル酸エステルから得られるポリマーまたはコポリマー、アクリル酸およびメタクリル酸エステルのコポリマー、ゼイン、ワックス、シェラック、ならびに水添植物油が挙げられる。
【０１１６】
正しい放出速度を確実に実行するために、本発明の制御放出調製物は、制御放出ポリマーを約５〜７５重量％、好ましくは約２０〜５０重量％、より好ましくは約３０〜４５重量％、および活性化合物を約１〜４０重量％、好ましくは約３〜２５重量％含む。本発明の制御放出調製物は、好ましくは補助剤、例えば希釈剤、滑剤および／または融解結合剤を含んでいてもよい。好ましくは賦形剤は、調製物の水分量を最小限に抑えるように選択される。好ましくは調製物は、酸化防止剤を含む。適切な希釈剤としては、薬学的に許容され得る不活性充填剤、例えば、微結晶セルロース、ラクトース、二塩基性リン酸カルシウム、サッカライド、および／または前述のものの混合物が挙げられる。希釈剤は、適切には水溶性希釈剤である。希釈剤の例としては、微結晶セルロース（例えば、Avicel ph112、Avicel pH101およびAvicel pH102）；ラクトース（例えば、ラクトース一水和物、ラクトース無水物、およびPharmatose DCL21）；二塩基性リン酸カルシウム（例えば、Emcompress）；マンニトール；デンプン；ソルビトール；スクロース；およびグルコースが挙げられる。希釈剤は、各配合を圧縮性への留意点と一致させるように注意深く選択される。圧縮される力の流動性に作用する薬剤など適切な滑剤は、例えば、コロイド状二酸化ケイ素（例えばAerosil 200）；タルク；ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸カルシウムである。適切な低温融解結合剤としては、ポリエチレングリコール（例えば、PEG6000）；セトステアリルアルコール；セチルアルコール；ポリオキシエチレンアルキルエーテル；ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル；ステアリン酸ポリオキシエチレン；ポロキサマー；およびワックスが挙げられる。
【０１１７】
制御放出調製物の安定性を改善するために、酸化防止化合物を含ませることができる。適切な酸化防止剤としては、メタ重亜硫酸ナトリウム；トコフェロール（例えば、α、βまたはδ−トコフェロールエステルおよび酢酸α−トコフェロール）；アスコルビン酸または薬学的に許容され得るその塩；パルミチン酸アスコルビル；没食子酸アルキル（例えば没食子酸プロピル）、Tenox PG、Tenox s-1；亜硫酸または薬学的に許容され得るその塩；ＢＨＡ；ＢＨＴ；およびモノチオグリセロールが挙げられる。
【０１１８】
本発明の制御放出調製物は、好ましくは、該化合物を制御放出ポリマーおよび補助賦形剤と混和し、その後、直接圧縮することにより製造することができる。その調整物を製造する他の方法としては、融解造粒が挙げられる。好ましい融解造粒法としては、律速ポリマーおよび希釈剤を一緒に融解造粒し、その後、顆粒を圧縮すること、ならびに律速ポリマーおよび希釈剤を引き続き混和して融解造粒し、次に混和物を圧縮することが挙げられる。所望なら圧縮の前に、容易に流動可能な均一混合物が得られるまで、混和物および／または顆粒をスクリーニングし、そして／または補助剤と混合してもよい。
【０１１９】
本発明の制御放出調製物の経口投与形態は、錠剤、コート錠、腸溶性コーティング錠の形態であってもよく、または多粒子（例えば、ペレットまたはミニタブレットの形態）であってもよい。所望なら、カプセル（例えば、ハードまたはソフトゼラチンカプセル）が、多粒子を含んでいてもよい。所望なら、多粒子経口投与形態が、インビトロおよび／またはインビボ放出プロファイルにおいて異なる制御放出を有するペレットまたはミニタブレットの少なくとも２種の集合体のブレンドを含んでいてもよい。所望なら、ペレットまたはミニタブレット集合体の一つが、直後放出多粒子（例えば、従来の手段により形成される多粒子）を含んでいてもよい。
【０１２０】
所望なら、本発明の制御放出マトリックス錠または多粒子は、制御放出ポリマー層でコーティングされることで、更なる制御放出性を与えることができる。この制御放出層を形成するのに用いられ得る適切なポリマーとしては、先に列挙された律速ポリマーが挙げられる。
【０１２１】
所望なら、本発明の錠剤、ペレットまたはミニタブレットは、光防御および／または化粧品フィルムコーティング（例えば、フィルム形成剤、顔料、抗付着剤および可塑化剤）を用いて提供することができる。そのようなフィルム形成剤は、速溶解性成分、例えば、低粘度ヒドロキシプロピルメチルセルロース（例えば、Methocel E5もしくはD14、またはPharmacoat 606（Shin-Etsu））からなってもよい。そのフィルムコーティングは、フィルムコーティング手順において慣用的な賦形剤、例えば光防御顔料（例えば、酸化鉄または二酸化チタン）、抗付着剤（例えば、タルク）、および適切な可塑化剤（例えば、PEG400、PEG6000、フタル酸ジエチルまたはクエン酸トリエチル）を含んでいてもよい。
【０１２２】
本発明の制御放出ポリマーは、ヒドロゲルマトリックスからなってもよい。例えば該化合物は、律速ポリマー（例えばＨＰＭＣ）または膨潤するとヒドロゲルを形成するポリマーの混合物を含む投与形態に圧縮することができる。この投与形態からの放出速度は、膨潤された錠剤塊からの拡散、および時間経過による錠剤表面からの浸蝕の両方により制御される。放出速度は、錠剤ごとのポリマーの量、および用いられたポリマー固有の粘度の両方により制御してもよい。
【０１２３】
例えば、異なる用量の活性成分を同定または特徴づけするために、染色剤または顔料を錠剤またはコート錠のコーティングに混和してもよい。
【０１２４】
経口使用できる医薬組成物には、ハードゼラチンカプセルおよびソフト密閉ゼラチンカプセルならびに可塑剤（例えば、グリセリンまたはソルビトール）もある。ハードカプセルは、顆粒の形態の活性成分を、充填剤（例えばトウモロコシデンプン）、結合剤および／または滑剤（例えば、タルクまたはステアリン酸マグネシウム）、ならびに適宜、安定化剤と混和して含有することができる。ソフトカプセルでは、活性成分は、好ましくは適切な液体賦形剤、例えば脂肪性油、パラフィン油、液体ポリエチレングリコール、またはエチレングリコールもしくはプロピレングリコールの脂肪酸エステルに溶解または懸濁されているが、同様に、例えばポリエチレンソルビタン脂肪酸エステル型の安定化剤および洗剤を添加することが可能である。
【０１２５】
他の経口投与形態は、例えば、慣用法で調製されるシロップであり、これは、活性成分を例えば懸濁形態で、約５％〜２０％、好ましくは約１０％または類似の濃度で含むため、例えば５または１０mlを測り取ると、適切な単位用量をもたらす。他の形態には、例えば、振とう物（例えばミルクセーキ）の調製用の粉体または液体濃縮物もある。そのような濃縮物は、単位用量で包装することもできる。
【０１２６】
経直腸使用できる医薬組成物は、例えば、活性成分と坐剤用基剤との配合物を含む坐剤である。適切な坐剤用基剤は、例えば、天然または合成トリグリセリド、パラフィン炭化水素、ポリエチレングリコールまたは高級アルカノールである。
【０１２７】
非経口投与に適した組成物は、水溶性形態（例えば水溶性塩）の活性成分の水溶液、または水性注射用懸濁液であり、これらは増粘物質、例えばカルボキシメチルセルロースナトルム、ソルビトールおよび／またはデキストラン、ならびに適宜、安定化剤を含む。活性成分は、ここでは適宜、賦形剤と共に凍結乾燥形態で存在することもでき、非経口投与の前に適切な溶媒を添加して溶解させることもできる。例えば、非経口投与に使用されるような溶液は、点滴溶液として使用することもできる。好ましい防腐剤は、例えば、酸化防止剤（例えばアスコルビン酸）または抗菌剤（例えばソルビン酸または安息香酸）である。
【０１２８】
軟膏は、水または水相を７０％以下、好ましくは２０〜５０％含む水中油エマルションである。脂肪相は、特に炭化水素、例えばワセリン、パラフィン油または硬質パラフィンからなり、それは好ましくは、適切なヒドロキシ化合物、例えば脂肪アルコールまたはそのエステル（例えば、セチルアルコールまたは羊毛ロウなどの羊毛ロウアルコール）を含めることで、水結合能が改善される。乳化剤は、ソルビタン脂肪酸エステル（Spans）などの対応する親油性物質、例えば、オレイン酸ソルビタンおよび／またはイソステアリン酸ソルビタンである。水相への添加剤は、例えば、ポリアルコールなどの湿潤剤（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールおよび／またはポリエチレングリコール）、または防腐剤および芳香物質である。
【０１２９】
脂肪性軟膏は無水物であり、基剤として特に炭化水素、例えばパラフィン、ワセリンもしくはパラフィン油、更に、天然もしくは半合成脂肪、例えば水添ココナッツ脂肪酸トリグリセリド、または好ましくは水添油、例えば水添落花生油もしくはヒマシ油、更にグリセロールの脂肪酸部分エステル、例えば、モノおよび／もしくはジステアリン酸グリセリン、ならびに、例えば脂肪アルコールを含む。それらは、乳化剤、および／または軟膏に関連して記載された、水の取り込みを増大させる添加剤も含む。
【０１３０】
クリームは、５０％を超える水を含む水中油エマルションである。使用した油性基剤は、特に、脂肪アルコール（例えば、ラウリル、セチルまたはステアリルアルコール）、脂肪酸（例えばパルミチン酸またはステアリン酸）、液体〜固形ワックス（例えば、ミリスチン酸イソプロピル、羊毛ロウまたは蜂ロウ）、および／または炭化水素（例えば、ワセリン（ペトロラタム）またはパラフィン油）である。乳化剤は、主に親水性を有する界面活性物質であり、例えば、対応する非イオン性乳化剤（例えば、ポリアルコールの脂肪酸エステルまたはそのエチレンオキシ付加物、例えば、ポリグリセリン酸脂肪酸エステルまたはポリエチレンソルビタン脂肪エステル（Tween）、更に、ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテルまたはポリオキシエチレン脂肪酸エステル）、または対応するイオン性乳化剤（例えば、脂肪アルコール硫酸エステルのアルカリ金属塩、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、セチル硫酸ナトリウムまたはステアリル硫酸ナトリウム）であり、それらは、通常、脂肪アルコール（例えば、セチルステアリルアルコールまたはステアリルアルコール）の存在下で使用される。水相への添加物は、とりわけ、クリームが乾燥するのを防ぐ薬剤であり、例えば、ポリアルコール（例えば、グリセリン、ソルビトール、プロピレングリコールおよび／またはポリエチレングリコール）、更に、防腐剤および芳香物質である。
【０１３１】
ペーストは、分泌−吸収性粉末成分を有するクリームおよび軟膏（例えば、金属酸化物、例えば酸化チタンまたは酸化亜鉛、更にはタルクおよび／またはケイ酸アルミニウム）であり、存在する水分または分泌物と結合する働きを有する。
【０１３２】
フォームは、加圧容器から投与され、それらは、エアロゾル形態で存在する液体水中油エマルションである。噴射ガスとして、ハロゲン化炭化水素、例えば、クロロフルオロ−低級アルカン（例えば、ジクロロジフルオロメタンおよびジクロロテトラフルオロエタン）、または好ましくは非ハロゲン化気体炭化水素、空気、Ｎ２Ｏまたは二酸化炭素が使用される。使用される油相は、とりわけ、軟膏およびクリームに関して先に記載されたものであり、そこに記載された添加物も同様に使用される。
【０１３３】
チンキ剤および溶液は、通常、水性エタノール性基剤を含み、それに、蒸発を抑えるための湿潤剤、例えばポリアルコール（例えば、グリセリン、グリコールおよび／またはポリエチレングリコール）、および再油化物質（例えば、低級ポリエチレングリコールとの脂肪酸エステル）即ち、エタノールにより皮膚から除去される脂肪物質を補填するための、水性混合物に可溶性の親油性物質、そして必要に応じ、他の賦形剤および添加物が混和される。
【０１３４】
本発明は、上述の疾患状態の処置工程または方法にも関する。該化合物は、それ自体を、または医薬組成物の形で、好ましくは上記疾患に対して有効な量で、予防的またな治療的に投与することができる。そのような処置を必要とする温血動物（例えばヒト）に、該化合物が、特に医薬組成物の形で使用される。本発明の化合物の日用量約０.１〜約５ｇ、好ましくは約０.５ｇ〜約２ｇが、この場合、約７０kgの体重に投与される。
【０１３５】
本明細書に記載された実施例および実施形態が、例示の目的に過ぎないこと、そして本明細書に照らして様々な置換、改良または変更が当業者に示唆され、それらが本願の精神および目的に含まれ、そして添付の特許請求の範囲内と見なされることは理解されよう。以下の実施例は、好ましい実施形態の例を示すものであり、本明細書の限定と見なすべきではない。例えば、成分の相対量は、異なる所望の効果を実現するために変動してもよく、追加の成分を添加してもよく、そして／または類似の成分を記載された成分１種以上に置き換えてもよい。本明細書に引用された発行物、特許および特許出願の全てが、全ての目的のために、全体が本明細書に参考として援用される。
【０１３６】
一般的合成スキームおよび手順の実施例
【０１３７】
実施例１：［１，３，５］オキサジアゼパン−２，６−ジオン（式Ｉa）の合成
【０１３８】
【化５】
2009522234.tif 000005
【０１３９】
Ｉaの一般的合成スキーム
【０１４０】
【化６】
2009522234.tif 000006
【０１４１】
ａ）ビストリフルオロ酢酸ヨードベンゼン（ＩＢＴＦＡ）、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ；ｂ）Ｂｏｃ２Ｏ；ｃ）ｐ−ニトロフェニルクロロホルマート、ＣＨ２Ｃｌ２、ジイソプロピルエチルアミン；ｄ）トリフルオロ酢酸；ｅ）ＤＩＥＡ、ＨＯＢｔ；ｆ）ＮａＨ、Ｒ３Ｂｒ。
【０１４２】
実施例２：２−チオキソ−［１，３，５］トリアゼパン−６−オン（式Ｉｂ）の合成
【０１４３】
【化７】
2009522234.tif 000007
【０１４４】
Ｉｂの一般的合成スキーム
【０１４５】
【化８】
2009522234.tif 000008
【０１４６】
ステップａ）ジペプチドアミド：Ｉｂ−ｐ１をＴＨＦ／水（３：１）に溶解し、ビストリフルオロ酢酸ヨードベンゼン（１．２当量）で３時間処理し、その後、出発原料が消費された。溶媒を真空除去し、Ｅｔ２Ｏを添加した。形成した固体を回収し、Ｅｔ２Ｏで洗浄して、対応するgem−ジアミノ誘導体を生成させ、それを更に精製せずに、次のステップで用いた。定量的収率。
【０１４７】
ステップｂ）ビス（ベンゾトリアゾール−１−イル）メタンチオン（１当量）を、室温でＣＨ２Ｃｌ２に溶解した。これまで合成されたgem−ジアミノ誘導体を滴下して、反応混合物を１８時間撹拌した。溶媒を真空除去し、残渣をＥｔＯＡｃに再溶解し、５％水性炭酸ナトリウム、水およびブラインで洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を真空除去し、１ｂ−ｐ２を酢酸エチルで再結晶化させた。
【０１４８】
ステップｃ）１−チオカルバモイルベンゾトリアゾールを０℃のＴＦＡで処理した。３０分後、ヘキサンとの共蒸着によりＴＦＡを除去し、ジエチルエーテルを添加することによりＴＦＡ塩を沈殿させた。得られた塩：Ｉｂ−ｐ３をろ過により回収し、高真空下で乾燥させた。それを更に精製せずに、次のステップで用いた。
【０１４９】
ステップｄ）ＴＦＡ塩：Ｉｂ−ｐ３をＭｅＣＮに溶解し、その後、ジイソプロピルエチルアミン（２．５当量）を添加して、反応混合物を２４時間撹拌した。溶媒を真空除去し、残渣をＥｔＯＡｃに再溶解し、５％水性炭酸ナトリウム、１Ｍ  ＨＣｌ、水およびブラインで洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を真空除去し、環状Ｉｂ−１をＣＨ２Ｃｌ２／ジイソプロピルエーテルで再結晶化させて精製した。
【０１５０】
実施例３：４−ベンジル−６−メチル−［１，３，６］オキサジアゾカン−２，５−ジオン（式Ｉｂ−１）の合成
【０１５１】
【化９】
2009522234.tif 000009
【０１５２】
Ｉｂ−１の一般的合成スキーム
【０１５３】
【化１０】
2009522234.tif 000010
【０１５４】
ステップａ）ジペプチドアミド：Ｉｂ−ｐ１をＴＨＦ／水（３：１）に溶解し、ビストリフルオロ酢酸ヨードベンゼン（１．２当量）で３時間処理し、その後、出発原料が消費された。溶媒を真空除去し、Ｅｔ２Ｏを添加した。形成した固体を回収し、Ｅｔ２Ｏで洗浄して、対応するgem−ジアミノ誘導体を生成させ、それを更に精製せずに、次のステップで用いた。定量的収率。
【０１５５】
ステップｂ）ビス（ベンゾトリアゾール−１−イル）メタンチオン（１当量）を、室温でＣＨ２Ｃｌ２に溶解した。これまで合成されたgem−ジアミノ誘導体を滴下して、反応混合物を１８時間撹拌した。溶媒を真空除去し、残渣をＥｔＯＡｃに再溶解し、５％水性炭酸ナトリウム、水およびブラインで洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を真空除去し、１ｂ−ｐ２を酢酸エチルで再結晶化させた。
【０１５６】
ステップｃ）１−チオカルバモイルベンゾトリアゾールを０℃のＴＦＡで処理した。３０分後、ヘキサンとの共蒸着によりＴＦＡを除去し、ジエチルエーテルを添加することによりＴＦＡ塩を沈殿させた。得られた塩Ｉｂ−ｐ３をろ過により回収し、高真空下で乾燥させた。それを更に精製せずに、次のステップで用いた。
【０１５７】
ステップｄ）ＴＦＡ塩：Ｉｂ−ｐ３をＭｅＣＮに溶解し、その後、ジイソプロピルエチルアミン（２．５当量）を添加して、反応混合物を２４時間撹拌した。溶媒を真空除去し、残渣をＥｔＯＡｃに再溶解し、５％水性炭酸ナトリウム、１Ｍ  ＨＣｌ、水およびブラインで洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を真空除去し、環状Ｉｂ−１をＣＨ２Ｃｌ２／ジイソプロピルエーテルで再結晶化させて精製した
【０１５８】
実施例４：２−チオキソ−［１，３，５］オキサジアゼパン−６−オン（式Ｉｃ）の合成
【０１５９】
【化１１】
2009522234.tif 000011
【０１６０】
Ｉｃの一般的合成スキーム
【０１６１】
【化１２】
2009522234.tif 000012
【０１６２】
ａ）ビストリフルオロ酢酸ヨードベンゼン（ＩＢＴＦＡ）、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ；ｂ）ビス（ベンゾトリアゾリル）メタンエチオン、ＣＨ２Ｃｌ２；ｃ）トリフルオロ酢酸；ｄ）ジイソプロピルエチルアミン、ＭｅＣＮ、ＮａＨ。
【０１６３】
実施例５：［１，３，６］オキサジアキソカン−２，５−ジオン（式Ｉｄ）の合成
【０１６４】
【化１３】
2009522234.tif 000013
【０１６５】
Ｉｄの一般的合成スキーム
【０１６６】
【化１４】
2009522234.tif 000014
【０１６７】
ａ）クロロギ酸ｐ−ニトロフェニル（２当量）、ピリジン（１．１当量）、ＣＨ２Ｃｌ２、ＴＡ一晩；ｂ）ＴＦＡ、ＴＡ３０分；ｃ）ＤＩＥＡ（２．６当量）、ＨＯＢｔ（１当量）、ＭｅＣＮ、ＴＡ３jours。
【０１６８】
実施例６：４−ベンジル−６−メチル−［１，３，６］オキサジアゾカン−２，５−ジオン（式Ｉｄ−１）の合成
【０１６９】
【化１５】
2009522234.tif 000015
【０１７０】
Ｉｄ−１の一般的合成スキーム
【０１７１】
【化１６】
2009522234.tif 000016
【０１７２】
ａ）クロロギ酸ｐ−ニトロフェニル（２当量）、ピリジン（１．１当量）、ＣＨ２Ｃｌ２、ＴＡ一晩；ｂ）ＴＦＡ、ＴＡ３０分；ｃ）ＤＩＥＡ（２．６当量）、ＨＯＢｔ（１当量）、ＭｅＣＮ、ＴＡ３jours。
【０１７３】
１）炭酸ｐ−ニトロフェニル前駆体：Ｉｄ−ｐ２の合成
【０１７４】
【化１７】
2009522234.tif 000017
【０１７５】
出発原料：ジペプチドアルコール：Ｉｄ−ｐ１（３００mg、０．９３mmol、１当量）を、ＣＨ２Ｃｌ２  ５mLおよびピリジン８２μL（１．０２mmol、１．１当量）に溶解した。２mL中のクロロギ酸４−ニトロフェニル（０．３７ｇ、１．８６mmol、２当量）の溶液。
【０１７６】
２４時間撹拌した後、反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２  １５mLで希釈し、１Ｎ  ＮａＨＣＯ３で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、フラッシュクロマトグラフィー（溶離液  １：２ＡＥ／シクロヘキサン）により精製して、純粋な炭酸塩：Ｉｄ−ｐ２を５９％の収率で生成させた。ＨＰＬＣ  ｔＲ１４．１（勾配  ３０−１００％Ｂ、２０分）。
【０１７７】
【表１】
2009522234.tif 000018
【０１７８】
【表２】
2009522234.tif 000019
【０１７９】
２）Ｉｄ−ｐ１への環化
炭酸ｐ−ニトロフェニル：Ｉｄ−ｐ２をトリフルオロ酢酸で３０分間処理した。エーテルを添加して、対応するＴＦＡ塩を白色固体として沈殿させて得た。それをろ過して、更に精製せずに次のステップで用いた。ＴＦＡ塩（２２０mg、０．４４mmol、１当量）をＭｅＣＮ（１０mL）に溶解し、ＭｅＣＮ  ２５mL中のジイソプロピルエチルアミン（１９４μL、１．１４mmol、２．６当量）およびヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（６０mg、０．４４mmol、１当量）の溶液に緩やかに添加した。反応混合物を３日間撹拌し、真空濃縮した。その後、ＣＨ２Ｃｌ２を添加して、有機相を１Ｎ  ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、真空濃縮した。その後、残渣（１１０mg）をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。
【０１８０】
［ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ（２０：０．５：０．１）、その後、puis  ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ（２０：１）］により、Ｉｄ−１  ４２mgを得た。
【０１８１】
ＨＰＬＣｔＲ（Ｉｄ−１）５．８８（勾配３０−１００％Ｂ、２０分）
【０１８２】
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ではＣ１３Ｈ１６Ｎ２Ｏ３の計算値が２４９．１２３４、測定値が２４９．１２３０であった。
【０１８３】
【表３】
2009522234.tif 000020
【０１８４】
【表４】
2009522234.tif 000021
【０１８５】
実施例７：１，１−ジオキソ−１λ６−［１，２，５，８］チアトリアゾカン−４−オン（式Ｉｆ）の合成
【０１８６】
【化１８】
2009522234.tif 000022
【０１８７】
Ｉｆの一般的合成スキーム
【０１８８】
【化１９】
2009522234.tif 000023
【０１８９】
ｉ）（ａ）ＴＦＡ；（ｂ）飽和ＮａＨＣＯ３、ＤＣＭ；ii）Burgess試薬（２．５当量）、ＴＨＦ、７０℃で２時間
【０１９０】
実施例８：１０−メチル−６，６，１１−トリオキソ−８，９，１０，１１，１１ａ，１２−ヘキサヒドロ−５Ｈ−６λ６−チア−５ａ，７，１０−トリアザシクロオクタ［ｂ］ナフタレン−７−カルボン酸メチルエステル（式Ｉｆ−１）の合成
【０１９１】
【化２０】
2009522234.tif 000024
【０１９２】
Ｉｆ−１の一般的合成スキーム
【０１９３】
【化２１】
2009522234.tif 000025
【０１９４】
ｉ）Ｎ−Ｂｏｃ保護ジペプチドアルコールを、０℃で３０分間ＴＦＡで処理した。ＴＦＡを真空除去し、残渣をＡｃＯＥｔに溶解した。撹拌しながら飽和ＮａＨＣＯ３を添加し、１０分後に有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、Ｉｆ−ｐ１を得た。
【０１９５】
ii）化合物Ｉｆ−ｐ１（１７５mg、０．７５mmol、１当量）を無水ＴＨＦ１０mLに溶解し、Burgess試薬（５３４mg、２．２４mmol、２．５当量）を添加した。その後、溶液を約７０℃〜約９０℃で２日間加熱還流した。その後、反応混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（４０mL）に注いだ。混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＨ２Ｏで洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。その後、粗混合物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ（１８：１：０．２））で精製して、Ｉｆ−１を得た。
【図面の簡単な説明】
【０１９６】
【図１】１，３，５−トリアゼパン−２，６−ジオンスカホールド：Ｂと２，５−ジケトピペラジン：Ａとの比較。
【図２】ａ）ＥｔＯＣＯＣｌ、ＮＭＭ、ＴＨＦ、−２０℃、その後Ｈ２Ｏ中のＮａＮ３；ｂ）トルエン、６５℃、その後、ＨＯＳｕおよびピリジン；ｃ）ＴＦＡ、３０分；ｄ）ＤＩＥＡ、ＭｅＣＮ；ｅ）ＰＳ−ＤＩＥＡ、ＣＨ２Ｃｌ２、ｇ＝ｇｅｍは、ChorevおよびGoodmanが提案した命名法による対応するアミノ酸の２−アルキルgem−ジアミノ誘導体を指す。
【図３】代表的な１，３，５−トリアゼパン−２，６−ジオン：４、７および９のＸ線結晶構造。
【図４】ａ）ＮａＨ（４当量）、ＲＸ（４当量）；ｂ）ＫＦ／Ａｌ２Ｏ３（１０当量）またはＮａＨ（２当量）、ＲＸ（１．５当量）。
【図５】Ｍｅ−ＩＤＸに比較した阻害剤分子の半最大阻害曲線（ＩＣ５０）。ＰＬＡ２酵素：ｈＧＸとｈＧＶとの比較（Ｙ軸は、ＰＬＡ２の活性の％値であり、Ｘ軸は、阻害剤濃度である）；阻害剤分子数（例えば「モル３３＃」）により、表Ｉで用いられた特定の化合物が同定された。
【図６】Ｍｅ−ＩＤＸに比較した阻害剤分子の半最大阻害曲線（ＩＣ５０）。ＰＬＡ２酵素：ｈＧＸとｈＧＶとの比較（Ｙ軸は、ＰＬＡ２の活性の％値であり、Ｘ軸は、阻害剤濃度である）；阻害剤分子数（例えば「モル３３＃」）により、表Ｉで用いられた特定の化合物が同定された。
【図１】
2009522234.tif 000028
【図２】
2009522234.tif 000029
【図３】
2009522234.tif 000030
【図４】
2009522234.tif 000031
【図５】
2009522234.tif 000032
【図６】
2009522234.tif 000033
【国際調査報告】
2009522234.tif 000034
2009522234.tif 000035
2009522234.tif 000036
2009522234.tif 000037