(57)【要約】式Ｉ：2009538873.tif 000081で示される４−ピリドン（４−ピリジノン）誘導体およびその医薬上許容される誘導体、その調製法、その医薬処方およびマラリアなどのある種の寄生虫感染症の化学療法におけるその使用が提供される。
2009538873.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2009538873.tif 000073
［式中：
Ｒ１はハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；
Ｒ４はハロを表し；
Ｒ２およびＲ３の一方はメチルを表し、もう一方は−（ＣＨ２）ｎＯＨまたは−ＨＣ＝Ｎ−ＯＲ５を表し；
Ｒ５はＨまたはＣ１−３アルキルを表し；
ｎは４を表す］
で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項２】
Ｒ１がＢｒ、Ｃｌ、Ｆ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項３】
Ｒ４がＢｒまたはＣｌを表す、請求項１または請求項２記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項４】
Ｒ２およびＲ３の一方がメチルを表し、もう一方が−（ＣＨ２）ｎＯＨを表し、ｎが１〜４を表す、前記の請求項のいずれかに記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項５】
Ｒ３がメチルを表し、Ｒ２が−（ＣＨ２）ｎＯＨを表し、ｎが１〜４を表す、前記の請求項のいずれかに記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項６】
Ｒ５がＨまたはメチルを表す、前記の請求項のいずれかに記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項７】
ｎが１または３を表す、前記の請求項のいずれかに記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項８】
化合物が、
３−クロロ−６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン；
３−クロロ−６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン；
３−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン；
３−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−５−（４−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝フェニル）−４（１Ｈ）−ピリジノン；
５−クロロ−６−メチル−４−オキソ−３−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジンカルバルデヒド  オキシム；
５−クロロ−６−メチル−４−オキソ−３−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジンカルバルデヒド−Ｏ−メチルオキシム；
３−クロロ−６−メチル−４−オキソ−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジンカルバルデヒド  オキシム；および
３−クロロ−６−（３−ヒドロキシプロピル）−２−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノンからなる群より選択される、請求項１記載の化合物、またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項９】
３−クロロ−６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノンである化合物。
【請求項１０】
薬物療法に用いるための請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体。
【請求項１１】
マラリアの治療のための医薬の製造における請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用。
【請求項１２】
マラリアが、プラスモジウム・ファルシパルム感染によって引き起こされる請求項１１記載の使用。
【請求項１３】
マラリアに罹患しているヒトまたは動物対象の治療方法であって、該ヒトまたは動物対象に有効量の請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体を投与することを含む、方法。
【請求項１４】
マラリアが、プラスモジウム・ファルシパルム感染によって引き起こされる請求項１３記載の使用。
【請求項１５】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体ならびに１種または複数の医薬上許容される担体および／または賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１記載の式Ｉの化合物の調製方法であって、
（Ａ）Ｒ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式ＩＩの化合物をハロゲン供与体と反応させるか；
【化２】
2009538873.tif 000074
または
（Ｂ）Ｒ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式ＸＶの化合物をハロゲン供与体と反応させるか；
【化３】
2009538873.tif 000075
または
（Ｃ）適当な塩基の存在下において、Ｒ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し、Ｒ４がハロを表す、式ＸＸの化合物を、Ｒ５がＨまたはＣ１−３アルキルを表す、ＮＨ２ＯＲ５．ＨＣｌと反応させるか；
【化４】
2009538873.tif 000076
または
（Ｄ）適当な塩基の存在下において、Ｒ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し、Ｒ４がハロを表す、式ＸＸＩの化合物を、Ｒ５がＨまたはＣ１−３アルキルを表す、ＮＨ２ＯＲ５．ＨＣｌと反応させるか；
【化５】
2009538873.tif 000077
または
（Ｅ）適当な触媒の存在下において、Ｒ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し、Ｒ４がハロを表す、式ＸＸＩＩの化合物を、水素化反応に付す；
【化６】
2009538873.tif 000078
ことを含む、方法。
【請求項１７】
Ｒ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式ＩＩの化合物の調製方法であって、適当な条件下で、式ＸＸＩＶの化合物を還元的開環に付し、次いで、中間体エナミンを環化することによる、方法。
【化７】
2009538873.tif 000079
【請求項１８】
式ＸＸＩＶの化合物が、式ＸＸＶの化合物をアシル化することによって調製される、請求項１７記載の方法。
【化８】
2009538873.tif 000080
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、複素環化合物および化学療法におけるその使用に関する。より具体的には、本発明は、ある種の４−ピリドン（４−ピリジノン）誘導体、その調製法、その医薬処方およびマラリアなどのある種の寄生虫感染症、特に、プラスモジウム・ファルシパルム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）による感染症の化学療法におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
寄生性原虫感染症は、ヒトにおけるマラリアおよびトリ、魚および動物における種々のコクジシウム症を含む、広範な医学的および獣医学的に重要な疾患に関与する。多数の疾患は、宿主の命にかかわり、アイメリア属（Ｅｉｍｅｒｉａ）種、タイレリア属（Ｔｈｅｉｌｅｒｉａ）種、バベシア属（Ｂａｂｅｓｉａ）種、クリプトスポリジウム属（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）種、トキソプラズマ属（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ）種（例えば、トキソプラズマ・ブルーセイ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｂｒｕｃｅｉ）、アフリカ睡眠病およびトキソプラズマ・クルーズ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｃｒｕｚｉ）、シャーガス病）およびプラスモジウム属（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）種（例えば、プラスモジウム・ファルシパルム）などの畜産において相当な経済的損害、ならびにリーシュマニア属（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ）種（例えば、ドノバン・リーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｄｏｎｏｖａｎｉ））などの鞭毛虫上綱を引き起こす。関心が高まっている別の寄生生物は、ニューモシスティス・カリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉ）であり、ＨＩＶ感染するものを含む、免疫不全または免疫障害の宿主において致死的肺炎をよく引き起こす。
【０００３】
マラリアは、発展途上国世界の重大な疾患問題の一つである。ヒトにおける最も発症率の高いマラリア原因寄生虫は、寄生虫プラスモジウム・ファルシパルムであり、毎年何億もの件数のマラリアの原因であり、毎年１００万を超える死者をもたらすと考えられている、Ｂｒｅｍａｎ，Ｊ．Ｇ．，ら，（２００１）  Ａｍ．Ｔｒｏｐ．Ｍｅｄ．Ｈｙｇ．６４，１−１１。マラリアの治療で見られるある問題点は、利用可能な薬物に対する寄生虫による耐性の構築である。したがって、新規の抗マラリア薬を開発する必要がある。
【０００４】
一群の３，５−ジハロ−２，６−ジアルキル−４−ピリジノール誘導体（４−ピリドンの互変異性型）は、抗コクシジウム活性を有するとして米国特許第３，２０６，３５８号に記載されている。
【０００５】
欧州特許出願番号第１２３２３９号は、増強比で前述の４−ピリジノール誘導体と抗原虫薬ナフトキノン、例えば、抗マラリア薬ナフトキノンとの組み合わせを開示する。
【０００６】
ＰＣＴ特許出願ＷＯ  ９１／１３８７３  Ａ１は、原虫に対する、特に、マラリア原虫プラスモジウム・ファルシパルム、およびアイメリア属ならびに寄生生物ニューモシスティス・カリニに対する活性を示す、４−ピリドン誘導体のクラスを開示する。一般にＷＯ  ９１／１３８７３  Ａ１に開示され、特定の置換パターンを有する本発明に記載の化合物は、ＷＯ  ９１／１３８７３  Ａ１に具体的に開示される化合物を超える改善された特性を示すことが見出されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国特許第３，２０６，３５８号明細書
【特許文献２】欧州特許出願第１２３２３９号明細書
【特許文献３】ＰＣＴ特許出願ＷＯ  ９１／１３８７３  Ａ１
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｂｒｅｍａｎ，Ｊ．Ｇ．，ら，（２００１）  Ａｍ．Ｔｒｏｐ．Ｍｅｄ．Ｈｙｇ．６４，１−１１
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、ある種の４−ピリドン誘導体、その調製法、かかる化合物を含む医薬組成物およびマラリアなどのある種の寄生虫感染症、特にプラスモジウム・ファルシパルムによる感染症の化学療法における化合物の使用を対象とする。
【００１０】
本発明は、式Ｉ：
【化１】
2009538873.tif 000003
［式中：
Ｒ１はハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；
Ｒ４はハロを表し；
Ｒ２およびＲ３の一方はメチルを表し、もう一方は−（ＣＨ２）ｎＯＨまたは−ＨＣ＝Ｎ−ＯＲ５を表し；
Ｒ５はＨまたは−Ｃ１−Ｃ４アルキルを表し；
ｎは１〜４を表す］
で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
用語および定義
本明細書に用いられるように、基または一部の基としての「アルキル」なる語は、所定の炭素数を含有する、直線状または分岐飽和炭化水素基をいう；かかる基の例として、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルなどが挙げられる。
【００１２】
本明細書に用いられるように、「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨード基をいう。
【００１３】
本明細書に記載の本発明の全ての態様および実施態様は、特に明記しない限り、式Ｉの化合物に関する。
【００１４】
Ｒ１は、フェニル環の任意の位置の置換基を表す。本発明の一の態様において、Ｒ１は、フェニル基のメタ位またはパラ位の置換基を表す。本発明の別の態様において、Ｒ１は、フェニル基のパラ位の置換基を表す。
【００１５】
本発明の一の態様において、Ｒ１は、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す。本発明の別の態様において、Ｒ１は、Ｃｌ、Ｆ、ＣＦ３またはＣＦ３を表す。本発明のさらなる態様において、Ｒ１は、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す。本発明のよりさらなる態様において、Ｒ１はＯＣＦ３を表す。
【００１６】
本発明の一の態様において、Ｒ４はＢｒまたはＣｌを表す。本発明の別の態様において、Ｒ４はＣｌを表す。
【００１７】
本発明の一の態様において、Ｒ２およびＲ３の一方はメチルを表し、もう一方は−（ＣＨ２）ｎＯＨを表す；別の態様において、Ｒ２およびＲ３の一方はメチルを表し、もう一方は−ＨＣ＝Ｎ−ＯＲ５を表す。
【００１８】
本発明の一の態様において、Ｒ２はメチルを表し、Ｒ３は−（ＣＨ２）ｎＯＨまたは−ＨＣ＝Ｎ−ＯＲ５を表す。本発明の別の態様において、Ｒ２はメチルを表し、Ｒ３は−（ＣＨ２）ｎＯＨを表す。
【００１９】
本発明の一の態様において、Ｒ３はメチルを表し、Ｒ２は−（ＣＨ２）ｎＯＨまたは−ＨＣ＝Ｎ−ＯＲ５を表す。本発明の別の態様において、Ｒ３はメチルを表し、Ｒ２は−（ＣＨ２）ｎＯＨを表す。
【００２０】
本発明の一の実施態様において、Ｒ５はＨまたはメチルを表す。
【００２１】
本発明の一の態様において、ｎは１または３を表す。本発明のさらなる態様において、ｎは１を表す。
【００２２】
特に明記しない限り、式Ｉ、またはそのいずれかの下位式における、ある場合での官能基またはその置換基の意味は、他の場合でのその意味または他の官能基もしくは置換基の意味と独立したものである。本発明が、上記の本発明の異なる態様に記載の基の全ての組み合わせを包含することは理解されるべきである。
【００２３】
本発明の一の態様において、化合物、またはその医薬上許容される誘導体が提供され、ここで、化合物は、
３−クロロ−６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン；
３−クロロ−６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン；
３−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン；
３−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−５−（４−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝フェニル）−４（１Ｈ）−ピリジノン；
５−クロロ−６−メチル−４−オキソ−３−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジンカルバルデヒド  オキシム；
５−クロロ−６−メチル−４−オキソ−３−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジンカルバルデヒド−Ｏ−メチルオキシム；
３−クロロ−６−メチル−４−オキソ−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジンカルバルデヒド  オキシム；および
３−クロロ−６−（３−ヒドロキシプロピル）−２−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノンからなる群より選択される。
【００２４】
本明細書に用いられるように、「医薬上許容される誘導体」なる語は、レシピエントに投与すると、式Ｉの化合物、またはその活性代謝物もしくは残渣を（直接的または間接的に）提供しうる、式Ｉの化合物の医薬上許容される塩、溶媒和物、またはプロドラッグ、例えば、エステルまたは炭酸塩を意味する。過度の実験を行うことなく、かかる誘導体は当業者であれば認識できる。にもかかわらず、Ｂｕｒｇｅｒ’ｓ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，第５版，Ｖｏｌ  １：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅの教示を参照し、かかる誘導体を教示する範囲を出典明示により本明細書の一部とする。本発明の一の態様において、医薬上許容される誘導体は、塩、溶媒和物、エステルおよびカルバメートである。本発明の別の態様において、医薬上許容される誘導体は、塩、溶媒和物およびエステルである。さらなる態様において、医薬上許容される誘導体は、塩および溶媒和物である。よりさらなる態様において、医薬上許容される誘導体は、塩である。一の態様において、ピリジノン環の窒素の医薬上許容される誘導体には、−ＯＣ１−６アルキルおよび−Ｏ（ＣＯ）Ｃ１−６アルキルが含まれる。別の態様において、Ｒ２またはＲ３が−（ＣＨ２）ｎＯＨである場合、Ｒ２またはＲ３のＯＨ基の医薬上許容される誘導体には、−Ｏ（ＣＯ）Ｃ１−６アルキル（例えば、−Ｏ（ＣＯ）ＣＨ３）および−Ｏ（ＣＯ）Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−Ｃ１−２アルキル−Ｎ＋Ｈ２（Ｃ１−６アルキル）が挙げられる。さらなる態様において、４−ピリジノール互変異性型のヒドロキシ基の医薬上許容される誘導体には、−Ｏ（ＣＯ）Ｃ１−６アルキル（例えば、−Ｏ（ＣＯ）ＣＨ３）および−Ｏ（ＣＯ）Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−Ｃ１−２アルキル−Ｎ＋Ｈ２（Ｃ１−６アルキル）が含まれる。
【００２５】
式Ｉの化合物のエステルは、ヒト体内のインビボ条件下で加水分解しうる。適当な医薬上許容されるインビボ加水分解エステル基には、ヒト体内で容易に分解され、親酸またはその塩を分離するものが含まれる。エステルは、対応する酸との反応に関与する当該分野にてよく知られている方法を用いて式Ｉの化合物のヒドロキシ基（ＯＨ）で形成されうる。例えば、エステルは、Ｃ１−６アルキルエステルであってもよく、ここで、アルキルは本明細書に定義されるとおりである、例えば、メチルエステル、エチルエステルなど。
【００２６】
本発明の化合物は弱両性であるので、式Ｉに記載の化合物のある種の医薬上許容される塩が調製されうることは明らかであろう。実際、本発明のある実施態様において、かかる塩が、分子に対しより良い安定度または溶解度を与えることにより、処方を容易に剤形にするので、式Ｉに記載の化合物の医薬上許容される塩は、各遊離塩基または遊離酸より好ましい。本発明の化合物はまた、医薬上許容される塩として投与されうる。したがって、本発明はさらに、式Ｉに記載の化合物の医薬上許容される塩を対象とする。
【００２７】
本明細書に用いられるように、「医薬上許容される塩」なる語は、目的化合物の所望の生物活性を維持し、最小限の望ましくない毒性効果を示す塩をいう。適当な塩の総説については、Ｂｅｒｇｅら，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９７７，６６，１−１９を参照。「医薬上許容される塩」なる語には、医薬上許容される酸付加塩および医薬上許容される塩付加塩両方が含まれる。これらの医薬上許容される塩は、化合物の最終的単離および精製の間にインサイツで、あるいは、その遊離酸または遊離塩基形態中の精製された化合物をそれぞれ適当な塩基または酸と単独で反応させることにより調製されうる。塩は溶液から沈殿し、濾過により回収されうるかまたは溶媒の蒸発により回収されうる。
【００２８】
ある実施態様において、式Ｉに記載の化合物は、酸性官能基を含有していてもよく、したがって、適当な塩基での処理により医薬上許容される塩基付加塩を形成可能であってもよい。医薬上許容される塩基付加塩は、所望により有機溶媒などの適当な溶媒中で、式Ｉの化合物と適当な強無機塩基との反応により形成され、例えば、結晶化および濾過により単離されうる塩基付加塩を得てもよい。医薬上許容される塩基性塩には、医薬上許容される塩、例えば、水酸化物、ナトリウム、カリウム、リチウムなどの医薬上許容されるアルカリ金属またはアルカリ土類金属塩が含まれる。
【００２９】
ある実施態様において、式Ｉに記載の化合物は、塩基性官能基を含有してもよく、したがって、適当な酸との処理により医薬上許容される酸付加塩を形成可能であってもよい。医薬上許容される酸付加塩は、所望により有機溶媒などの適当な溶媒中で、式Ｉの化合物と適当な強無機酸または強有機酸（例えば、臭化水素酸、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、過塩素酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸（例えば、２−ナフタレンスルホン酸））との反応により形成され、例えば、結晶化または濾過により通常単離される塩を得てもよい。医薬上許容される酸付加塩には、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、過塩素酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩またはナフタレンスルホン酸塩（例えば、２−ナフタレンスルホン酸塩）が含まれる。一の実施態様において、式Ｉの化合物の医薬上許容される酸付加塩には、強酸、例えば、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩が含まれる。
【００３０】
本発明は、式Ｉの化合物の塩の全ての可能な化学量論的および非化学量論的形態をその範囲内に含む。
【００３１】
本明細書に用いられるように、「本発明の化合物（複数形）」なる語は、式Ｉに記載の化合物およびその医薬上許容される誘導体を意味する。「本発明の化合物（単数形）」なる語は、上記の本発明の化合物のいずれか１つを意味する。
【００３２】
本発明の化合物は、固体または液体として存在してもよく、その両方とも本発明に含まれる。固体状態において、本発明の化合物は、非晶質または結晶形のいずれかとして、あるいはその混合物として存在しうる。本発明の化合物の医薬上許容される溶媒和物が、結晶化の間に溶媒分子が結晶格子に組み込まれて形成されうることは明らかであろう。溶媒和物は、エタノール、イソプロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、酢酸、エタノールアミン、および酢酸エチルなどの非水性溶媒を含みうるか、あるいは、それらは、結晶格子に組み込まれる溶媒として水を含みうる。水が結晶格子に組み込まれる溶媒である溶媒和物は、典型的には、「水和物」として称される。本発明には、全てのかかる溶媒和物が含まれる。
【００３３】
本発明の化合物が、異なる互変異性型として存在しうることは明らかであろう。特に、式Ｉの化合物は、以下のとおり４−ピリジノール互変異性型で存在しうる：
【化２】
2009538873.tif 000004
【００３４】
式Ｉの化合物の全ての可能な互変異性型が、本発明の範囲内にあることを意図とする。本発明の一の態様において、４−ピリドン互変異性型の式Ｉの化合物が提供される。本発明の別の態様において、４−ピリジノール互変異性型の式Ｉの化合物が提供される。本発明のさらなる態様において、４−ピリドンおよび４−ピリジノール互変異性型の式Ｉの化合物の混合物が提供される。本発明のよりさらなる態様において、式Ｉの化合物の４−ピリドンおよび４−ピリジノール互変異性型の混合物は、平衡混合物である。
【００３５】
さらに、二重結合、例えば、オキシム二重結合を含有する本発明の化合物が、二重結合についての配置に関して、ＥおよびＺ異性体の混合物として存在しうることは明らかであろう。混合物は等量のＥおよびＺ異性体を含有しうるか、あるいは、混合物は過剰のＺまたはＥ異性体を含みうる。あるいは、本発明の化合物は、各二重結合について各々純粋なＥおよびＺ幾何異性体で存在しうる。
【００３６】
多形体、エナンチオマーおよびその混合物として存在しうる本発明の化合物全てが、本発明の範囲内にあることを意図とすることも明らかであろう。
【００３７】
ある本発明の化合物は、改善された薬物動態プロファイルを有しうる（例えば、それらは、より経口投与可能でありうるか、または、改善された経口暴露を示しうる）。
【００３８】
本発明の別の態様にしたがって、ヒトまたは獣医学的薬物療法に用いるための式Ｉの化合物またはその医薬上許容される誘導体が提供される。
【００３９】
本発明の化合物は、マラリア原虫プラスモジウム・ファルシパルム、アイメリア種、ニューモシスティス・カリニ、トリパノソーマ・クルーズ、トリパノソーマ・ブルーセイまたはドノバン・リーシュマニアによる寄生性原虫感染症などのある寄生虫感染症の治療に有用でありうる。特に、本発明の化合物は、プラスモジウム・ファルシパルムによる感染症の治療に有用でありうる。したがって、本発明は、かかる病態を治療する方法を対象とする。
【００４０】
本発明の一の態様において、療法、例えば、マラリアなどの寄生性原虫感染症、例えば、プラスモジウム・ファルシパルムによる感染症の治療に用いるための、式Ｉの化合物またはその医薬上許容される誘導体が提供される。
【００４１】
本発明の別の態様において、マラリアなどの寄生性原虫感染症、例えば、プラスモジウム・ファルシパルムによる感染症によって引き起こされる病態の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用が提供される。
【００４２】
本発明の別の態様において、マラリアなどの寄生性原虫感染症、例えば、プラスモジウム・ファルシパルムによる感染症を罹患しているヒトまたは動物対象の治療方法であって、有効量の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される誘導体、あるいは式Ｉの化合物またはその医薬上許容される誘導体を含む医薬組成物をヒトまたは動物対象に投与することを含む方法が提供される。
【００４３】
本発明の治療方法は、安全かつ有効な量の式Ｉに記載の化合物またはその医薬上許容される誘導体をそれを必要とする患者に投与することを含む。
【００４４】
本明細書に用いられるように、「治療」は、（１）治療を受けている病態または治療を受けている病態の１または複数の生物学的兆候の緩和または予防、（２）（ａ）治療を受けている病態をもたらすかもしくは関与する生物学的カスケードにおける１もしくは複数の地点または（ｂ）１また複数の治療を受けている病態の生物学的兆候の障害、あるいは（３）１または複数の治療を受けている病態に付随する症状または効果の軽減を意味する。「予防」が絶対的用語ではないことを当業者は分かるであろう。医学分野において、「予防」は、病態またはその生物学的兆候の可能性または重篤度を実質的に軽減するか、あるいは、かかる病態またはその生物学的兆候の開始を遅らせるための薬物の予防的投与をいうと理解されている。
【００４５】
本明細書に用いられるように、「安全かつ有効な量」は、適切な医学的判断の範囲内の、治療を受ける病態における積極的な改善を有意に誘導するのに十分であるが、重大な副作用を回避するのに十分低量な（妥当な利益／危険性の割合の）化合物の量を意味する。安全かつ有効な量の本発明の化合物は、選択される特定の化合物（例えば、化合物の効力、有効性および半減期に応じて）；選択される投与経路；治療を受けている感染症および／または病態の特性；治療を受けている感染症および／または病態の重篤度；治療を受けている患者の年齢、大きさ、体重および健康状態；治療を受けている患者の病歴；治療期間；併用療法の性質；所望の治療効果；および同様の因子によって変化しうるが、当業者により慣用的に決定されうる。
【００４６】
本明細書に用いられるように、「患者」は、ヒトまたは他の動物をいう。
【００４７】
本発明の化合物は、全身投与を含む、いずれかの適当な投与経路により投与されうる。全身投与には、経口投与、非経口投与、経皮投与、直腸投与、および吸入による投与が含まれる。非経口投与は、腸内、経皮、または吸入による投与以外の投与経路をいい、典型的には注射または注入による。非経口投与には、静脈内、筋肉内、および皮下注射または注入が含まれる。吸入は、口を通って吸入されるかそれとも鼻腔を通って吸入される患者の肺への投与をいう。局所投与には、皮膚への皮膚用途ならびに眼球内、口腔（例えば、舌下）、直腸、膣内、および鼻腔内投与が含まれる。
【００４８】
本発明の化合物は、１回のみかまたは多量の投与量を所定の時間で時間の間隔を変えて投与する投与計画にしたがって投与されうる。例えば、投与量は、１日当たり１、２、３、または４回投与されうる。投与量は、所望の治療効果を達成するまで投与されうるかまたは所望の治療効果を無期限に維持するために投与されうる。投与量はまた、所望の治療の性質にしたがって変化するであろう、ここで、「治療」は下記のとおりであり、例えば、多用量の化合物は、治療を受けている病態の予防と比べて改善されうる。本発明の化合物の適当な投与計画は、当業者により決定されうる、吸収、分布、および半減期などの該化合物の薬物動態特性による。加えて、かかる計画を投与する期間を含む、本発明の化合物の適当な投与計画は、化合物の投与経路、治療を受けている病態、治療を受けている病態の重篤度、治療を受けている患者の年齢および健康状態、治療を受ける患者の病歴、併用療法の性質、所望の治療効果、ならびに当業者の知見および専門知識中の同様の因子による。適当な投与計画が、投与計画に対する個々の患者の応答を鑑み、あるいは、個々の患者の要求の変化に応じて調整を必要としうることはかかる当業者によりさらに理解されるであろう。本発明の化合物を、さらに下記の１種または複数の付加的な活性治療薬と組み合わせて用いるならば、本発明の化合物の投与計画がまた、必要に応じて、１種または複数の付加的な治療薬の特性および用量にしたがって変化しうることもまた分かるであろう。
【００４９】
典型的な１日投与量は、選択される特定の投与経路によって変化しうる。経口投与のための典型的な１日投与量は、約０．０１〜約２５ｍｇ／ｋｇ、一の実施態様において、約０．１〜約１４ｍｇ／ｋｇの範囲である。非経口投与のための１日投与量は、約０．００１〜約１０ｍｇ／ｋｇ、一の実施態様において、約０．０１〜約６ｍｇ／ｋｇの範囲である。一の実施態様において、化合物の１日投与量範囲は、１００〜１０００ｍｇ／日である。
【００５０】
式Ｉの化合物はまた、他の活性治療薬と組み合わせて用いられうる。したがって、本発明は、さらなる態様において、式Ｉの化合物またはその医薬上許容される誘導体と一緒にさらなる活性治療薬を含む組み合わせを提供する。式Ｉの化合物またはその医薬上許容される誘導体が、同一の疾患病態に対して活性である第２の活性治療薬と組み合わせて用いられる場合、各化合物の投与量は、化合物が単独で用いられる場合とは異なる。適当な投与量は当業者であれば容易に分かるであろう。治療に用いるのに必要な本発明の化合物の量は、治療を受けている病態の性質ならびに患者の年齢および病態によって変化するであろうし、最終的にはかかりつけ医または獣医の判断になるであろう。
【００５１】
本発明の化合物は、単独または他の抗寄生虫薬、例えば、抗マラリア薬などの、１種もしくは複数の付加的な活性治療薬と組み合わせて用いられうる。
【００５２】
適当な他の活性治療薬には、抗マラリア薬、例えば、葉酸塩（例えば、クロロキン、メフロキン、プリマキン、ピリメタミン、キニーネ、アルテミシニン、ハロファントリン、ドキシサイクリン、アモジキン（ａｍｏｄｉｑｕｉｎｅ）、アトバクオン、タフェノキン）および葉酸拮抗薬（例えば、ダプソーン、プログアニル、スルファドキシン、ピリメタミン、クロルシクログアニル（ｃｈｌｏｒｃｙｃｌｏｇｕａｎｉｌ）、シクログアニル）が含まれる。
【００５３】
上記の組み合わせは、便宜上、医薬処方の形態で用いるために存在してもよいので、上記の組み合わせと一緒に医薬上許容される担体および／または賦形剤を含む医薬処方は、本発明のさらなる態様を含む。かかる組み合わせの個々の成分は、いずれかの有利な経路により個々のまたは合した医薬処方で連続してまたは同時に投与されうる。
【００５４】
連続して投与する場合、本発明の化合物または１種もしくは複数の付加的な活性治療薬（群）は、最初に投与されうる。同時に投与する場合、組み合わせは、同一または異なる医薬組成物で投与されうる。同一処方で合する場合、本発明の化合物および１種または複数の付加的な活性治療薬（群）が安定であって、相互および処方の他の成分と混合可能であることは明らかであろう。個々に処方される場合、本発明の化合物および１種または複数の付加的な活性治療薬（群）は、便宜上、当該分野にてかかる化合物について知られているような手法でいずれか有利な処方にて提供される。
【００５５】
組成物
本発明の化合物は通常、患者への投与前に医薬組成物中に処方されるであろうが、必ずしも処方されるとは言えない。一の態様において、本発明は、本発明の化合物を含む医薬組成物を対象とする。別の態様において、本発明は、本発明の化合物および１種または複数の医薬上許容される担体および／または賦形剤を含む医薬組成物を対象とする。
【００５６】
担体および／または賦形剤は、処方の他の成分と混合可能であり、そのレシピエントに無害であるという意味で「許容」されなければならない。
【００５７】
本発明の医薬組成物は調製され、バルク形態で包装されてもよく、ここで、安全かつ有効な量の本発明の化合物は抽出され、次いで、例えば、粉末またはシロップで患者に与えられうる。あるいは、本発明の医薬組成物は調製され、単位剤形で包装されてもよく、ここで、各物理的不連続な単位量は、安全かつ有効な量の本発明の化合物を含有する。単位剤形で調製される場合、本発明の医薬組成物は、典型的には、本発明の化合物の約０．１〜１００ｍｇ、別の態様において、０．１ｍｇ〜約５０ｍｇを含有する。
【００５８】
本発明の医薬組成物は、典型的には、１種の本発明の化合物を含有する。しかしながら、ある実施態様において、本発明の医薬組成物は、１種以上の本発明の化合物を含有する。例えば、ある実施態様において、本発明の医薬組成物は、２種の本発明の化合物を含有する。加えて、本発明の医薬組成物は、所望により１種または複数の付加的な活性治療化合物をさらに含みうる。本発明の医薬組成物は、典型的には、１種以上の医薬上許容される賦形剤を含有する。しかしながら、ある実施態様において、本発明の医薬組成物は、１種の医薬上許容される賦形剤を含有する。
【００５９】
本明細書に用いられるように、「医薬上許容される」なる語は、医薬用途に適当であることを意味する。
【００６０】
本発明の化合物および医薬上許容される賦形剤または複数の賦形剤は、典型的には、所望の投与経路によって患者への投与に適する剤形中に処方されるであろう。例えば、剤形には、（１）錠剤、カプセル剤、カプレット、ピル、トローチ、粉末、シロップ、エリキシル剤、懸濁液、溶液、乳液、サシェ、およびカシェなどの経口投与；（２）滅菌溶液、懸濁液、および復元用粉末などの非経口投与；（３）経皮パッチなどの経皮投与；（４）坐剤などの直腸投与；（５）エアロゾルおよび溶液などの吸入；および（６）クリーム、軟膏、ローション、溶液、ペースト、スプレー、泡沫およびゲルなどの局所投与に適しているものが含まれる。
【００６１】
適当な医薬上許容される賦形剤は、選択される特定の剤形により変化するであろう。加えて、適当な医薬上許容される賦形剤は、組成物中で作用しうる特定の機能で選択されうる。例えば、ある医薬上許容される賦形剤は、均一剤形の製造を容易にする能力で選択されうる。ある医薬上許容される賦形剤は、適当な剤形の製造を容易にする能力で選択されうる。患者に投与するとすぐに、ある医薬上許容される賦形剤は、ある器官、または身体の部分から別の器官、または身体の部分への本発明の化合物または化合物の運搬または輸送を容易にする能力で選択されうる。ある医薬上許容される賦形剤は、患者のコンプライアンスを高める能力で選択されうる。
【００６２】
適当な医薬上許容される賦形剤には、以下の種類の賦形剤：結合剤、崩壊剤、潤滑剤、流動促進剤、造粒剤、コーティング剤、湿潤剤、溶媒、共溶媒、懸濁化剤、乳化剤、甘味剤、香味剤、香味マスキング剤、着色剤、アンチケーキング剤、保湿剤、キレート剤、可塑剤、増粘剤、抗酸化剤、保存剤、安定化剤、界面活性剤、および緩衝剤が含まれる。ある医薬上許容される賦形剤が、処方中にどのくらい賦形剤が存在するか、または処方中に他のどんな成分が存在するかに応じて、１以上の機能または代替的機能を果たしうることは当業者であれば分かるであろう。
【００６３】
当業者は、本発明において用いるための適切な量の適当な医薬上許容される賦形剤を選択できるだけの、当該分野における知識および技術を有する。加えて、医薬上許容される賦形剤を記載しており、適当な医薬上許容される賦形剤を選択するのに有用でありうる、当業者が入手可能な多数の供給源がある。例として、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、Ｔｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ（Ｇｏｗｅｒ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）、およびＴｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ）が挙げられる。
【００６４】
本発明の医薬組成物は、当業者に既知の技法および方法を用いて調製されうる。当該分野にて一般に用いられるいくつかの方法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）に記載されている。
【００６５】
一の態様において、本発明は、安全かつ有効な量の本発明の化合物および担体を含む、液体、錠剤、ロゼンジまたはカプセルなどの固体または液体経口剤形を対象とする。担体は、希釈剤または充填剤の形態であってもよい。適当な希釈剤および充填剤には、一般的に、ラクトース、スクロース、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、デンプン（例えば、トウモロコシデンプン、じゃがいもデンプン、およびプレゼラチン化デンプン）、セルロースおよびその誘導体（例えば、微結晶性セルロース）、硫酸カルシウム、および第二リン酸カルシウムが含まれる。液体剤形は、一般に、化合物または医薬上許容される誘導体の液体担体、例えば、エタノール、オリーブ油、グリセリン、グルコース（シロップ）または水中懸濁液または溶液（例えば、加えた香味剤、懸濁化剤、または着色剤と一緒に）からなりうる。組成物が錠剤またはロゼンジの形態である場合、固体処方を調製するために通常用いられるいずれかの医薬担体が用いられうる。かかる担体の例として、ステアリン酸マグネシウム、白土、タルク、ゼラチン、アカシア、ステアリン酸、デンプン、ラクトースおよびスクロースが含まれる。組成物がカプセルの形態である場合、所定のカプセル化は、例えば、上記の担体または半固体、例えば、カプリル酸のモノ、ジ−グリセリド、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ（商標）およびＬａｂｒａｓｏｌ（商標）、あるいは硬カプセルシェル、例えば、ゼラチンを用いることが適当である。組成物が軟カプセルシェル、例えば、ゼラチンの形態である場合、分散液または懸濁液を調製するのに通常用いられる医薬担体は、例えば、水性ゴムまたは油が考えられ、軟カプセルシェルの一部となりうる。
【００６６】
経口固体剤形は、結合剤の形態で賦形剤をさらに含みうる。適当な結合剤には、デンプン（例えば、トウモロコシデンプン、じゃがいもデンプン、およびプレゼラチン化デンプン）、ゼラチン、アカシア、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、トラガカント、グァーガム、ポビドンおよびセルロースならびにその誘導体（例えば、微結晶性セルロース）が含まれる。経口固体剤形は、崩壊剤の形態で賦形剤をさらに含みうる。適当な崩壊剤には、クロスポビドン、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロース、アルギン酸およびカルボキシメチルセルロースナトリウムが含まれる。経口固体剤形は、潤滑剤の形態で賦形剤をさらに含みうる。適当な潤滑剤には、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、およびタルクが含まれる。
【００６７】
本発明により、医薬組成物を調製する方法がさらに提供され、該方法は、少なくとも１種の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される誘導体を、医薬上許容される担体および／または賦形剤と一緒に混合することを含む。
【００６８】
経口投与用製剤は、適当には、活性化合物の制御／持続された放出を得るために処方されうる。
【００６９】
略語
本発明を記載するのに、化学元素は、元素周期表にしたがって特定されている。本明細書で用いられる略語および記号は、当業者によるかかる略語および記号の共通使用に従う。以下の略語は、本明細書で用いられる：
【００７０】
ＡｃＯＥｔ，ＥｔＯＡｃ          酢酸エチル
ａｐｐｒｏｘ．                  約
バール                          １ｘ１０５Ｐａ（パスカル）
ブライン                        飽和水性塩化ナトリウム
ｎ−ＢｕＬｉ                    ｎ−ブチルリチウム
ｔ−ＢｕＯＭｅ                  ｔｅｒｔ−ブチル−メチル−エーテル
ｃａｔ．ｒｅｆ．                カタログ番号
ＣＤＣｌ３                      重水素化クロロホルム
ＣＤ３ＯＤ                      重水素化メタノール
ｃｏｎｃ．                      濃度
ｃｐｍ                          カウント／分（放射能単位）
ＤＣＭ                          ジクロロメタン
ＤＩＢＡＨ                      水素化ジイソブチルアルミニウム
ＤＭＦ                          Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ                        ジメチルスルホキシド
ＤＭＳＯ−ｄ６                  重水素化ジメチルスルホキシド
ＥＳ  ＭＳ                      エレクトロスプレー質量分析
ＥｔＯＨ                        エタノール
ｈ                              時間（複数も可）
ヒト血清ＡＢ                    ヒト血液型ＡＢ型から得られる血清
ＨＥＰＥＳ                      ４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−
エタンスルホン酸
ＨＰＬＣ                        高速液体クロマトグラフィー
ＨＴ                            ヒポキサンチン
ＨＴサプリメント                ０．１５ｍＭヒポキサンチンおよび２４μＭチミジン
、（ＧＩＢＣＯ（商標）カタログ番号：４１０６５）
不十分な献血                    研究に用いられる４５０ｍｌより少ない血液量
Ｌ                              リットル（複数も可）
ＬＤＡ                          リチウムジイソプロピルアミド
ＭｅＯＨ                        メタノール
ｍｉｎ．                        分（複数も可）
タウロコール酸Ｎａ              タウロコール酸ナトリウム
ＮＢＳ                          Ｎ−ブロモスクシンイミド
ＮＣＳ                          Ｎ−クロロスクシンイミド
ＮＭＰ                          Ｎ−メチル−ピロリジノン
ＮＭＲ                          核磁気共鳴分光学
Ｐａ                            パスカル（圧力のＳＩ単位：ｍ−１．ｋｇ．ｓ−２）
ＰＲＢＣｓ                      寄生された赤血球
ｐＨ                            水素イオン濃度の−Ｌｏｇ１０
ＲＢＣｓ                        赤血球
ＴＢＤＭＳ                      ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル
ＴＢＤＰＳ                      ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル
ＴＣＣＡ                        トリクロロイソシアヌル酸
ＴＭＨＤ                        ２，２，６，６−テトラメチル−ヘプタン−３，５
−ジオン
ＲＰＭＩ                        Ｒｏｓｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  
Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ培地＊
ＴＨＦ                          テトラヒドロフラン
ｖ／ｖ                          容量比
ｗ／ｗ                          重量比、例えば、重量％
＊（該培地について詳しくは、Ｄｉｖｏ，Ａ．Ａ．ら，Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｏｆ  Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ  ｉｎ  ｃｕｌｔｕｒｅ．Ｉ．Ｅｘｏｇｅｎｏｕｓｌｙ  ｓｕｐｐｌｉｅｄ  ｄｉａｌｙｚａｂｌｅ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ  ｎｅｃｅｓｓａｒｙ  ｆｏｒ  ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  ｇｒｏｗｔｈ．Ｊ  Ｐｒｏｔｏｚｏｏｌ，１９８５．３２（１）：ｐ．５９−６４を参照）。
【００７１】
化合物調製
式Ｉ：
【化３】
2009538873.tif 000005
で示される化合物を合成するのに用いられる一般的製法は、反応スキーム１−２４に記載され、実施例にて説明される。
【００７２】
本明細書において、一般式は、ローマ数字Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶなどで指定されている。式Ｉの化合物のサブセットは、Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ、ＩｄおよびＩｅとして定義され；別の式のサブセットは同様に表される。
【００７３】
スキーム１にしたがって、Ｒ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；Ｒ４がハロを表し；Ｒ２が−ＣＨ２ＯＨを表し；およびＲ３がメチルを表す、式Ｉの化合物である、式Ｉａの化合物は、ジクロロメタンおよびメタノールの混合物などの適当な溶媒中で、ＩＩをハロスクシンイミド（ＮＢＳ、ＮＣＳ）、トリクロロイソシアヌル酸（ＴＣＣＡ）または臭素などの適当なハロゲン化試薬と反応させることにより、Ｒ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式ＩＩの化合物から調製されうる。
【化４】
2009538873.tif 000006
【００７４】
スキーム２にしたがって、式ＩＩの化合物は、例えば、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨなどの、適当な溶媒において、適当には加圧および高温下、例えば、１２０℃〜１６０℃で、水性アンモニアの存在下において、保護基ＰＧを同時に脱保護する、アミノ分解により、Ｒ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し、ＰＧが立体障害のヒドロキシ保護基、例えば、ＴＢＤＭＳまたはＴＢＤＰＳである、式ＩＩＩの化合物から調製されうる。
【化５】
2009538873.tif 000007
【００７５】
スキーム３にしたがって、式ＩＩＩの化合物は、ＰＧが式ＩＩＩの記載と同義である、式ＩＶの化合物とＲ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式Ｖのボロン酸化合物の間の鈴木クロスカップリング反応を用いて調製されうる。式ＩＶの化合物は、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムなどの塩基、および適当なパラジウム触媒の存在下において、トルエン、エタノール、ＤＭＦまたはその混合液などの適当な溶媒中でＶと、例えば、５０℃〜１００℃の温度で加熱されうる。一の態様において、パラジウム触媒は、塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）である。
【化６】
2009538873.tif 000008
【００７６】
スキーム４にしたがって、式ＩＶの化合物は、炭酸ナトリウムまたはカリウムなどの適当な塩基の存在下において、ジメチルホルムアミドなどの適当な溶媒中で、ＶＩを弱トリフルオロメタンスルホニル化試薬で処理することにより、ＰＧが式ＩＩＩの記載と同義である、式ＶＩの化合物から調製されうる。一の態様において、トリフルオロメタンスルホニル化試薬は、Ｎ−フェニル−トリフルオロメタンスルホンイミドである。
【化７】
2009538873.tif 000009
【００７７】
スキーム５にしたがって、式ＶＩの化合物は、ＶＩＩを選択的脱保護反応に付し、ＰＧを除去することにより、ＰＧが式ＩＩＩの記載と同義であり、ＰＧ１がＰＧとは異なるヒドロキシ保護基である、式ＶＩＩの化合物から調製されうる。例えば、ＰＧ１がベンジルである場合、酢酸エチルなどの適当な溶媒中で、適当な触媒、例えば、炭素担体パラジウムの存在下において、水素化を用いて脱保護が行われうる。
【化８】
2009538873.tif 000010
【００７８】
スキーム６にしたがって、式ＶＩＩの化合物は、式ＶＩＩＩのヒドロキシ基を適当な保護基ＰＧで保護する反応により、ＰＧ１が式ＶＩＩの記載と同義である、式ＶＩＩＩの化合物から調製されうる。例えば、保護基ＰＧがＴＢＤＭＳである場合、式ＶＩＩＩの化合物は、ＤＭＦなどの適当な溶媒中で、塩基、例えば、イミダゾールの存在下において、ＴＢＤＭＳＣｌで処理されうる。
【化９】
2009538873.tif 000011
【００７９】
スキーム７にしたがって、式ＶＩＩＩの化合物は、式ＩＸの化合物から調製されうる。化合物ＩＸは、水性水酸化ナトリウムなどの適当な塩基の存在下において、ホルムアルデヒドで処理され、次いで、得られた中間体生成物は、保護反応に付され、ＰＧ１が導入されうる。例えば、ＰＧ１がベンジルである場合、中間体生成物は、臭化テトラ−Ｎ−ブチルアンモニウムなどの、適当な触媒の存在下において、塩化ベンジルまたは臭化ベンジルで処理されうる。
【化１０】
2009538873.tif 000012
【００８０】
スキーム８にしたがって、式ＩＸの化合物は、高温、例えば、５０℃〜９０℃にて水などの適当な溶媒中で濃ＨＣｌの存在下において、亜鉛とのＩＸの反応により、式Ｘの化合物から調製されうる。
【化１１】
2009538873.tif 000013
【００８１】
スキーム９にしたがって、式Ｘの化合物は、式ＸＩの化合物を塩化チオニル（ＳＯＣｌ２）または塩化ホスホリル（ＰＯＣｌ３）などの塩素化試薬と反応させることにより調製されうる。
【化１２】
2009538873.tif 000014
【００８２】
スキーム１０にしたがって、式Ｖのボロン酸は、−６０℃〜−７８℃でＴＨＦなどの適当な溶媒中にてトリ−イソプロピルホウ酸塩の存在下において、ＸＩＩをｎ−ＢｕＬｉなどの適当な塩基で処理し、次いで、例えば、６Ｎ  ＨＣｌで酸加水分解することにより、Ｒ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式ＸＩＩの化合物から調製されうる。
【化１３】
2009538873.tif 000015
【００８３】
スキーム１１にしたがって、式ＸＩＩの化合物は、商業的に入手可能である式ＸＩＩＩの４−ブロモフェニル化合物と、商業的に入手可能でもある、Ｒ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式ＸＩＶのヨードフェニル化合物の間のウルマンカップリングにより調製されうる。化合物ＸＩＩＩは、８０℃〜１１０℃などの高温にて、Ｎ−メチル−ピロリジノン（ＮＭＰ）などの適当な溶媒中で、塩化銅（Ｉ）などの銅（Ｉ）塩および炭酸セシウムなどの塩基および２，２，６，６−テトラメチル−ヘプタン−３，５−ジオン（ＴＭＨＤ）などの添加剤の存在下において、ＸＩＶと反応されうる、例えば、Ｌｅｙ  Ｖ．Ｓ．およびＴｈｏｍａｓ  Ａ．Ｗ．，（２００３）  Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４２，５４００−５４４９に記載の製法に従う。
【化１４】
2009538873.tif 000016
【００８４】
スキーム１２にしたがって、Ｒ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；Ｒ４がハロを表し；Ｒ２がメチルを表し；およびＲ３が−ＣＨ２ＯＨを表す、式Ｉの化合物である、式Ｉｂの化合物は、ジクロロメタンおよびメタノールの混合物などの適当な溶媒中で、ＸＶをハロスクシンイミド（ＮＢＳ、ＮＣＳ）、トリクロロイソシアヌル酸（ＴＣＣＡ）または臭素などの適当なハロゲン化試薬と反応させることにより、Ｒ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式ＸＶの化合物から調製されうる。
【化１５】
2009538873.tif 000017
【００８５】
スキーム１３にしたがって、式ＸＶの化合物は、エタノールまたはメタノールなどの適当な溶媒中で、適当には加圧下で加熱しながら、所望によりマイクロ波放射の存在下において、化合物ＸＶを水性アンモニアで処理することにより、Ｒ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式ＸＶＩの化合物から調製されうる。一の態様において、高温で１〜８時間スチール製反応器にて反応を行う。別の態様において、高温でマイクロ波オーブンにて、例えば、３０−９０分間反応を行う。
【化１６】
2009538873.tif 000018
【００８６】
スキーム１４にしたがって、式ＸＶの化合物は、式ＸＶＩＩの化合物と、Ｒ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式Ｖのボロン酸化合物の間の鈴木クロスカップリング反応を用いて調製されうる。式ＩＶの化合物は、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムなどの塩基、および適当なパラジウム触媒の存在下において、トルエン、エタノール、ＤＭＦまたはその混合液などの適当な溶媒中でＶと、例えば、５０℃〜１００℃の温度で加熱されうる。一の態様において、パラジウム触媒は、塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）である。
【化１７】
2009538873.tif 000019
【００８７】
スキーム１５にしたがって、式ＸＶＩＩの化合物は、炭酸ナトリウムまたはカリウムなどの適当な塩基の存在下において、ジメチルホルムアミドなどの適当な溶媒中で、弱トリフルオロメタンスルホニル化試薬とのＸＶＩＩの処理により、式ＸＶＩＩＩの化合物から調製されうる。一の態様において、トリフルオロメタンスルホニル化試薬は、Ｎ−フェニル−トリフルオロメタンスルホンイミドである。
【化１８】
2009538873.tif 000020
【００８８】
スキーム１６にしたがって、式ＸＶＩＩＩの化合物は、高温、例えば、５０℃〜９０℃で、水などの適当な溶媒中で濃ＨＣｌの存在下において、亜鉛とのＸＶＩＩＩの反応により、式ＸＩＸの化合物から調製されうる。
【化１９】
2009538873.tif 000021
【００８９】
スキーム１７にしたがって、式ＸＩＸの化合物は、式Ｘの化合物から調製されうる。化合物ＸＩＸは、水性水酸化ナトリウムなどの適当な塩基の存在下において、ホルムアミドで処理されうる。
【化２０】
2009538873.tif 000022
【００９０】
スキーム１８にしたがって、Ｒ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；Ｒ４がハロを表し、Ｒ２が−ＨＣ＝Ｎ−ＯＲ５を表し；Ｒ３がメチルを表し；Ｒ５がＨまたはＣ１−３アルキルを表す、式Ｉの化合物である、式Ｉｃの化合物は、高温、例えば、５０℃〜還流温度で、ＥｔＯＨなどの適当な溶媒中にてピリジンなどの適当な塩基の存在下において、ＸＸをＲ５がＨまたはＣ１−３アルキルを表す、ＮＨ２ＯＲ５．ＨＣｌと反応させることにより、Ｒ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；Ｒ４がハロを表す、式ＸＸの化合物から調製されうる。
【化２１】
2009538873.tif 000023
【００９１】
スキーム１９記載の酸化反応により、式ＸＸの化合物は、適当な溶媒、例えば、ＤＭＳＯおよびＤＣＭの混合液中で、トリエチルアミンなどの塩基の存在下において、三酸化硫黄−ピリジン複合体などの適当な酸化剤で処理することにより、式Ｉａの化合物から調製されうる。
【化２２】
2009538873.tif 000024
【００９２】
スキーム２０にしたがって、Ｒ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；Ｒ４がハロを表し；Ｒ２がメチルを表し；Ｒ３が−ＨＣ＝Ｎ−ＯＲ５を表し；Ｒ５がＨまたはＣ１−３アルキルを表す、式Ｉの化合物である、式Ｉｄの化合物は、高温、例えば、５０℃〜還流温度で、ＥｔＯＨなどの適当な溶媒中にてピリジンなどの適当な塩基の存在下において、ＸＸＩをＲ５がＨまたはＣ１−３アルキルを表す、ＮＨ２ＯＲ５．ＨＣｌと反応させることにより、Ｒ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；Ｒ４がハロを表す、式ＸＸＩの化合物から調製されうる。
【化２３】
2009538873.tif 000025
【００９３】
スキーム２１記載の酸化反応によって、式ＸＸＩの化合物は、適当な溶媒、例えば、ＤＭＳＯおよびＤＣＭの混合液中でトリエチルアミンなどの塩基の存在下において、Ｉａを三酸化硫黄−ピリジン複合体などの適当な酸化剤で処理することにより、式Ｉｂの化合物から調製されうる。
【化２４】
2009538873.tif 000026
【００９４】
スキーム２２にしたがって、Ｒ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；Ｒ４がハロを表し；Ｒ２が−（ＣＨ２）ｎＯＨを表し、ここで、ｎは３を表し；Ｒ３がメチルを表し；Ｒ５がＨまたはＣ１−３アルキルを表す、式Ｉの化合物である、式Ｉｅの化合物は、ＥｔＯＡｃなどの適当な溶媒中で、適当な触媒、例えば、炭素担体パラジウムの存在下において、ＸＸＩＩを水素化することによりＲ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；Ｒ４がハロを表す、式ＸＸＩＩの化合物から調製されうる。
【化２５】
2009538873.tif 000027
【００９５】
スキーム２３にしたがって、式ＸＸＩＩの化合物は、冷却しながら、例えば、２０℃〜−２０℃で、ＴＨＦなどの適当な溶媒中でＸＩＩをＤＩＢＡＨと反応することにより、Ｒ１がフルオロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；Ｒ４がハロを表し；ＲＹがアルキル、例えば、メチル、エチルまたはｔｅｒｔ−ブチルを表す、式ＸＸＩＩＩの化合物から調製されうる。該反応は、式Ｉｅの化合物に変換する前に分離または精製を必要としない、式ＸＸＩＩおよびＩｅの化合物の混合物を生成しうる。
【化２６】
2009538873.tif 000028
【００９６】
スキーム２４にしたがって、式ＸＸＩＩＩの化合物は、ＤＣＭなどの適当な溶媒中でＲＹがアルキル、例えば、メチル、エチルまたはｔｅｒｔ−ブチルを表す、（カルボアルコキシメチレン）−トリフェニルホスホランＰｈ３Ｐ＝ＣＨＣＯ２ＲＹと反応するＸＸのウィッティヒ反応により上記の式ＸＸの化合物から調製されうる。
【化２７】
2009538873.tif 000029
【００９７】
Ｒ１がフルオロ、クロロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表し；Ｒ４がハロを表し；Ｒ２が−（ＣＨ２）ｎＯＨを表し、ここで、ｎは２〜４を表し；Ｒ３がメチルを表し；Ｒ５がＨまたはＣ１−３アルキルを表す、式Ｉの化合物は、式Ｉｅについてスキーム２２−２４に記載の製法と類似の製法を用いて、すなわち、化合物ＸＸのウィッティヒ反応、次いで、そのように形成されたアルケンの還元、例えば、水素化の方法により調製されうる。
【００９８】
別法として、スキーム２５にしたがって、式ＩＩの化合物は、ＸＸＩＶを還元的開環し、その後、例えば、ｉ）活性炭素担体パラジウムなどの適当な触媒の存在下における水素、またはｉｉ）ＥｔＯＨなどの適当な溶媒中でヘキサカルボニルモリブテンを用いて保護された中間エナミンを環化することにより、Ｒ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式ＸＸＩＶの化合物から調製されうる。
【化２８】
2009538873.tif 000030
【００９９】
スキーム２６にしたがって、式ＸＸＩＶの化合物は、アシル化反応によりＲ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式ＸＸＶの化合物から調製されうる。化合物ＸＸＶは、所望によりＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミンおよび塩化リチウムなどの適当なリチウム塩の存在下において、ｎ−ＢｕＬｉもしくはＬＤＡまたはｎ−ＢｕＬｉとＬＤＡの混合物などの適当な塩基で処理され、次いで、ＴＨＦなどの適当な溶媒中で−６０℃〜−７８℃などの低温にてＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−アセタミドまたは酢酸エチルなどのアシル化剤で処理されうる。
【化２９】
2009538873.tif 000031
【０１００】
式ＩＩの化合物は、式ＸＸＩＶの中間化合物を単離および精製することなく、式ＸＸＶの化合物から得られうる。
【０１０１】
スキーム２７にしたがって、式ＸＸＶの化合物は、式ＸＸＶＩの化合物とＲ１がハロ、ＣＦ３またはＯＣＦ３を表す、式Ｖの間のカップリング反応の方法により調製されうる。化合物ＸＸＶＩおよびＶは、適当な溶媒、例えば、ＥｔＯＨまたはＥｔＯＨとトルエンの混合液中で高温、例えば、７０℃〜９０℃にて炭酸水素ナトリウムまたは炭酸ナトリウムなどの適当な塩基の存在下において、活性炭素担体パラジウムまたは塩化ビス（トリフェニルホスホリン）パラジウム（ＩＩ）などの適当な触媒の存在下で一緒に反応されうる。
【化３０】
2009538873.tif 000032
【０１０２】
スキーム２８にしたがって、式ＸＸＶＩの化合物は、式ＸＸＶＩＩの化合物のヨウ素化反応により調製されうる。化合物ＸＸＶＩＩは、高温下、例えば、３０℃〜６０℃で、ＤＣＭなどの適当な溶媒中でトリフルオロ酢酸銀などの適当な触媒の存在下において、ヨウ素で処理されうるか、あるいは、高温、例えば、６０℃〜７０℃でトリフルオロ酢酸などの強有機酸の存在下において、水などの適当な溶媒中で一塩化ヨウ素にて処理されうる。
【化３１】
2009538873.tif 000033
【０１０３】
スキーム２９にしたがって、化合物ＸＸＶＩＩは、商業的に入手可能な化合物ＸＸＶＩＩＩの還元により調製されうる。化合物ＸＸＶＩＩＩは、ＥｔＯＨなどの適当な溶媒中で適当な還元剤、例えば、水素化ホウ素ナトリウムで処理されうる。
【化３２】
2009538873.tif 000034
【０１０４】
式Ｉのさらなる化合物は、上記の方法に類似の方法を用いて、または、本明細書に記載の実施例に詳述の実験製法を参照することにより、または、ＰＣＴ特許出願番号ＷＯ  ９１／１３８７３  Ａ１で既に報告された方法に類似の方法を用いて調製されうることを当業者は容易に分かるであろう。
【０１０５】
式Ｉの化合物またはその医薬上許容される誘導体の調製において、好ましくない副反応を防ぐために分子または適当な中間体中の１個または複数の感受性基を保護することが必要および／または好ましいことは当業者であれば分かるであろう。本発明にしたがって用いるための適当な保護基は、当業者によく知られており、従来の方法で用いられうる。例えば、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓによる「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  ｓｏｎｓ  １９９１）またはＰ．Ｊ．Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉによる「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ」（Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ  １９９４）を参照。適当なアミノ保護基の例として、アシル型保護基（例えば、ホルミル、トリフルオロアセチル、アセチル）、芳香族ウレタン型保護基（例えば、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）および置換Ｃｂｚ）、脂肪族ウレタン保護基（例えば、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、イソプロピルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル）およびアルキルまたはアラルキル型保護基（例えば、ベンジル、トリチル、クロロトリチル）が挙げられる。適当な酸素保護基の例として、例えば、トリメチルシリルまたはｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルなどのアルキルシリル基；テトラヒドロピラニルまたはｔｅｒｔ−ブチルなどのアルキルエーテル；または酢酸塩などのエステルが挙げられる。
【実施例】
【０１０６】
以下の実施例は本発明を説明する。これらの実施例は、本発明の範囲を限定することを意図とするものではなくむしろ本発明の化合物、組成物および方法を調製および使用するための指針を当業者に提供するものである。本発明の特定の実施態様が記載されるが、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、種々の変更および修飾が行われうることは当業者に明らかであろう。
【０１０７】
実験欄
中間体１（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ９，２００１，５６３−５７３）
【化３３】
2009538873.tif 000035
２−（クロロメチル）−５−ヒドロキシ−４Ｈ−ピラン−４−オン
コウジ酸（ＦＬＵＫＡ，１ｇ）に、塩化チオニル（ＡＬＤＲＩＣＨ，１．０２７ｍＬ）を加えた。黄色混合物を室温で２時間攪拌した。沈殿を濾過し、次いで、ヘキサンで洗浄し、真空乾燥し、淡黄色固体として１．０８ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：９．２８（ｂｄ，１Ｈ）；８．１２（ｓ，１Ｈ）；６．５６（ｓ，１Ｈ）；４．６５（ｓ，２Ｈ）
【０１０８】
中間体２（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ９，２００１，５６３−５７３）
【化３４】
2009538873.tif 000036
５−ヒドロキシ−２−メチル−４Ｈ−ピラン−４−オン
５０℃で中間体１（１．０７ｇ）の水（３０ｍＬ）中懸濁液に、亜鉛末（ＰＡＮＲＥＡＣ，８７１ｍｇ）を加えた。混合物を７０℃で１時間加熱した。次いで、濃ＨＣｌ（５ｍＬ）を滴下し、混合物を７０−８０℃で５時間加熱した。過剰の亜鉛を熱濾過により除去し、淡黄色濾液を氷／水混合物上に注いだ。水層をジクロロメタン（３ｘ３０ｍＬ）で抽出し、合した有機抽出液をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を真空中で除去し、淡黄色固体として０．５３ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：７．７６（ｓ，１Ｈ）；６．２４（ｓ，１Ｈ）；２．２８（ｓ，３Ｈ）
【０１０９】
中間体３（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ９，２００１，５６３−５７３；ＵＳ  ６，４２６，４１８  Ｂ１）
【化３５】
2009538873.tif 000037
２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−３−［（フェニルメチル）オキシ］−４Ｈ−ピラン−４−オン
１Ｌの３口丸底フラスコは、機械スターラーおよび滴下漏斗を装備された。１Ｎ  ＮａＯＨ（４９８ｍＬ）をフラスコに加え、次いで、中間体２（５７．１５ｇ）を滴下した。帯赤色混合物を氷浴中で（約３０分）冷却し、３７％水性ホルムアルデヒド溶液（ＡＬＤＲＩＣＨ，３７．３６ｍＬ）を（３０分かけて）滴下し、溶液を室温で１８時間攪拌した。混合物を０℃で冷却し、臭化テトラ−Ｎ−ブチルアンモニウム（ＡＬＤＲＩＣＨ，３６５ｍｇ）を、次いで、臭化ベンジル（ＡＬＤＲＩＣＨ，５９．２ｍＬ）を加えた。溶液を６０℃で２時間加熱し、次いで、室温に冷却し、一晩攪拌し、ジクロロメタン（３ｘ５００ｍＬ）で抽出した。合した有機抽出液を、飽和水性ＮａＣｌ（１ｘ５００ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮し、１１７ｇの淡黄色固体を得た。該固体を、８０：２０  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（２５０ｍＬ）でトリチュレートし、次いで、濾過した。該製法を７０：３０  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（２５０ｍＬ）で繰り返し、真空下で乾燥した後、白色固体として８４．１５ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．３８（ｍ，５Ｈ）；６．２５（ｓ，１Ｈ）；５．４３（ｔ，１Ｈ）；５．００（ｓ，２Ｈ）；４．２５（ｄ，２Ｈ）；２．２５（ｓ，３Ｈ）
【０１１０】
中間体４
【化３６】
2009538873.tif 000038
２−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−６−メチル−３−［（フェニルメチル）オキシ］−４Ｈ−ピラン−４−オン
２Ｌの反応器中に、中間体３（６６．６５ｇ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５００ｍＬ）を加えた。混合物を窒素雰囲気下で攪拌し、溶液を得、次いで、イミダゾール（５５．２８ｇ）および塩化ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（４８．９４ｇ）を加え、次いで、乾Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）を加えた。３時間攪拌した後、酢酸エチル（９００ｍＬ）および１Ｎ  ＮＨ４Ｃｌ（７００ｍＬ）を加えた。二層を分配し、有機層を１Ｎ  ＮＨ４Ｃｌ（２ｘ９００ｍＬ）およびブライン（９００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮乾固し、淡黄色油として１０３．６８ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：７．３５（ｍ，５Ｈ）；６．２０（ｓ，１Ｈ）；５．１６（ｓ，２Ｈ）；４．３９（ｓ，２Ｈ）；２．２６（ｓ，３Ｈ）；０．８７（ｓ，９Ｈ）；０．０４（ｓ，６Ｈ）
【０１１１】
中間体５
【化３７】
2009538873.tif 000039
２−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−３−ヒドロキシ−６−メチル−４Ｈ−ピラン−４−オン
Ｎ２雰囲気下、中間体４（２３．７１ｇ）の酢酸エチル（６００ｍＬ）中溶液に、活性炭素担体１０重量％パラジウム（ＦＬＵＫＡ，７００．９ｍｇ）を加えた。混合物を、１．８ｘ１０５Ｐａ（１．８バール）で３時間水素化した。触媒を濾去し、溶媒を真空下で蒸発乾固し、１６．７２ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：６．４３（ｂｄ，１Ｈ）；６．２３（ｓ，１Ｈ）；４．７０（ｓ，２Ｈ）；２．３２（ｓ，３Ｈ）；０．９１（ｓ，９Ｈ）；０．１２（ｓ，６Ｈ）
【０１１２】
中間体６
【化３８】
2009538873.tif 000040
２−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−６−メチル−４−オキソ−４Ｈ−ピラン−３−イル  トリフルオロメタンスルホン酸塩
５００ｍＬ丸底フラスコ中に、乾Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１７０ｍＬ）中の中間体５（１６．７２ｇ）を加え、溶液をＮ２雰囲気下で１０分間攪拌した。次いで、Ｎ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（ＦＬＵＫＡ，２３．８５ｇ）および炭酸カリウム末（ＡＬＤＲＩＣＨ，１０．６８ｇ）を滴下した。１．５時間攪拌した後、炭酸カリウムを濾去し、ｔｅｒｔ−ブチル−メチル−エーテル（３００ｍＬ）で洗浄した。濾液を、１００ｍＬのｔｅｒｔ−ブチル−メチル−エーテルで希釈し、１Ｎ  ＮＨ４Ｃｌ（２ｘ４００ｍＬ）で洗浄した。水層を、ｔｅｒｔ−ブチル−メチル−エーテル（２００ｍＬ）で抽出した。合した有機抽出液を、Ｎａ２ＣＯ３（３ｘ４００ｍＬ）およびブライン（４００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮し、淡橙色固体として２４．７ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：６．２９（ｓ，１Ｈ）；４．６６２４（ｓ，２Ｈ）；２．３４（ｓ，３Ｈ）；０．９２（ｓ，９Ｈ）；０．１３（ｓ，６Ｈ）
【０１１３】
中間体７ａ
【化３９】
2009538873.tif 000041
２−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−６−メチル−３−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４Ｈ−ピラン−４−オン
１Ｌ丸底フラスコ中に、中間体６（１１．８ｇ）および乾トルエン（９０ｍＬ）を加え、得られた溶液を、１５分間その中でアルゴンを発泡させることにより脱酸素化した。塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（ＡＬＤＲＩＣＨ，１．０３ｇ）を加え、混合物を再度、３０分間その中でアルゴンを発泡させることにより脱酸素化した。次いで、中間体１９（１０．５ｇ）の乾エタノール（２００ｍＬ）中溶液を加えた。最後に、炭酸ナトリウム（１２．４５ｇ）を加えた。アルゴン雰囲気下で８０℃にて２時間４５分加熱した後、混合物を室温で一晩攪拌し、次いで、濾過し、真空下で濃縮乾固した。粗生成物を、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（７００ｍＬ）で溶解し、１Ｎ  ＮａＯＨ（２ｘ５００ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（５００ｍＬ）およびブライン（４５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、セライト層に通して濾過された暗色溶液を得た。得られた溶液を濃縮乾固し、暗色油状残渣を得、酢酸エチル／ヘキサン（０−５０％）の混合液で溶出しながらシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーに付して精製した。褐色固体として１０．３ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：７．２８（ｄ，２Ｈ）；７．２０（ｄ，２Ｈ）；７．０７−７．０２（ｍ，４Ｈ）；６．２５（ｓ，１Ｈ）；４．３９（ｓ，２Ｈ）；２．３３（ｓ，３Ｈ）；０．８９（ｓ，９Ｈ）；０．０５（ｓ，６Ｈ）
【０１１４】
中間体７ｂ
【化４０】
2009538873.tif 000042
２−（｛［（１，１−ジメチルエチル）（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−６−メチル−３−（４−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝フェニル）−４Ｈ−ピラン−４−オン
２５ｍＬの２口丸底フラスコ中に、中間体６（５００ｍｇ）および乾トルエン（４ｍＬ）を加え、得られた溶液を、１５分間その中でアルゴンを発泡させることにより脱酸素化した。塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（ＡＬＤＲＩＣＨ，４３．５ｍｇ）および中間体２０（４２０ｍｇ）の乾エタノール（９ｍＬ）中溶液を加え、得られた混合物を再度、１５分間アルゴンを発泡させることにより脱酸素化し、次いで、炭酸カリウム（５２５ｍｇ）を加えた。アルゴン雰囲気下で８０℃にて３時間１５分加熱した後、混合物を室温に冷却し、濾過し、トルエン／メタノールで洗浄し、濃縮乾固した。粗生成物をｔｅｒｔ−ブチル−メチルエーテルで溶解し、１Ｎ  ＮａＯＨ（２ｘ）、Ｈ２ＯおよびＮａＯＨで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮乾固した。カラメル色油状残渣を、酢酸エチル／ヘキサン（０−７０％）混合液で溶出しながらシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーに付して精製した。カラメル色油として４６０ｍｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：７．４６（ｍ，１Ｈ）；７．３６（ｍ，１Ｈ）；７．３２−７．２９（ｍ，３Ｈ）；７．２４−７．２０（ｍ，１Ｈ）；７．０５（ｄ，２Ｈ）；６．２５（ｓ，１Ｈ）；４．３９（ｓ，２Ｈ）；２．３３（ｓ，３Ｈ）；０．８９（ｓ，９Ｈ）；０．０４（ｓ，６Ｈ）
【０１１５】
中間体８ａ
【化４１】
2009538873.tif 000043
２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−３−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン
方法Ａ
中間体７ａ（１０．１ｇ）のエタノール（６０ｍＬ）中溶液に、３０％水性アンモニア（２００ｍＬ）を加えた。得られた懸濁液を、スチール製反応器中に加え、２０バール（３００ｐｓｉ）圧下で１４０℃にて８．５時間加熱し、次いで、一晩室温に冷却した。沈渣を濾過し、Ｈ２Ｏ（７００ｍＬ）および酢酸エチル（２０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥し、真空下で乾燥した後、灰色粉末として５．３９ｇの標記化合物を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．８４（ｂｄ，１Ｈ）；７．３９（ｄ，２Ｈ）；７．２１（ｄ，２Ｈ）；７．１２（ｄ，２Ｈ）；７．０２（ｄ，２Ｈ）；５．９８（ｓ，１Ｈ）；５．４９（ｂｄ，１Ｈ）；４．２２（ｓ，２Ｈ）；２．２４（ｓ，３Ｈ）。
【０１１６】
方法Ｂ
中間体２３（０．３６５ｇ）の乾ＴＨＦ（１０ｍｌ）中溶液を、アルゴン雰囲気下で−７５℃に冷却した。ｎ−ＢｕＬｉ（１．４ｍｌ、ヘキサン中１．７８Ｍ）の溶液を加え、混合物を、アルゴン下で４０分間攪拌し、次いで、０．１６ｍｌのＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−アセタミドを加えた。混合物を、−７５℃で３時間攪拌した。ＨＰＬＣ分析は、出発物質が残っていることを示した。追加量のｎ−ＢｕＬｉ（１．４ｍｌ，ヘキサン中１．７８Ｍ）およびＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−アセタミド（０．０５０ｍｌ）を順次加え、混合物を、アルゴン雰囲気下で−７５℃にて１時間攪拌した。２Ｎ  ＨＣｌ（５ｍｌ）を加え、混合物を室温で１時間攪拌し、次いで、水（５０ｍｌ）およびｔ−ＢｕＯＭｅ（５０ｍｌ）を加え、混合物を分配した。有機層を、水（５０ｍｌ）、１０％ＮａＨＣＯ３（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄した。それをＮａ２ＳＯ４で乾燥し、次いで、濃縮乾固し、０．４２５ｇの橙色油を得た。ｔ−ＢｕＯＭｅ（２０ｍｌ）で溶解し、活性炭素（０．３ｇ）を加えた。混合物を、室温で３時間攪拌し、濾過し、蒸発乾固した。該方法にて、０．３８ｇの粗物質を得、さらに精製することなく次の工程に用いた。上記のとおりに得られた粗生成物（０．３８ｇ）をＥｔＯＨ（２０ｍｌ）で溶解し、活性炭素担体１０％パラジウム（５０ｍｇ）を溶液に加えた。そのようにして得られた混合物を、（２バール圧の水素で）６時間水素化した。さらなるＰｄ（Ｃ）（５０ｍｇ）を加え、混合物を、同一条件下で１８時間水素化した。触媒を濾過し、溶媒を蒸発させ、乾燥し、０．３７５ｇの粗生成物を得、ＥｔＯＡｃ（３ｍｌ）で溶解し、室温で一晩、次いで、冷蔵庫で６時間結晶化した。生成物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、真空下で乾燥した。白色固体として０．１７ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．８４（ｂｄ，１Ｈ）；７．３９（ｄ，２Ｈ）；７．２１（ｄ，２Ｈ）；７．１２（ｄ，２Ｈ）；７．０２（ｄ，２Ｈ）；５．９８（ｓ，１Ｈ）；５．４９（ｂｄ，１Ｈ）；４．２２（ｓ，２Ｈ）；２．２４（ｓ，３Ｈ）。
【０１１７】
方法Ｃ
アルゴン雰囲気下、中間体２３（０．５４８ｇ）および無水塩化リチウム（０．５７２ｇ）の乾テトラヒドロフラン（１５ｍｌ）中混合物に、再蒸留ジイソプロピルアミン（０．６３ｍｌ）を加え、混合物を−７５℃に冷却した。ｎ−ＢｕＬｉ（２ｍｌ、ヘキサン中１．７Ｍ）の溶液を滴下し、混合物を、アルゴン雰囲気下で−７５℃にて１時間攪拌し、次いで、Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルアセタミド（０．２２５ｍｌ）を滴下し、混合物を−７５℃で４時間攪拌した。２Ｎ  ＨＣｌ（１０ｍｌ）を加え、混合物を室温で０．５時間攪拌し、次いで、１Ｎ  ＨＣｌ（７５ｍｌ）およびｔ−ＢｕＯＭｅ（７５ｍｌ）を加え、混合物を分配した。有機層を１Ｎ  ＨＣｌ（２ｘ７５ｍｌ）、１０％ＮａＨＣＯ３（７５ｍｌ）、水（７５ｍｌ）およびブライン（７５ｍｌ）で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発乾固し、粗生成物として０．６２ｇの淡褐色油を得、さらに精製することなく次の工程に用いた。
粗生成物（０．６２ｇ）をＥｔＯＨ（２５ｍｌ）で溶解し、活性炭素担体１０％パラジウム（６０ｍｇ）を窒素雰囲気下で溶液に加えた。そのように得られた混合物を、Ｐａｒｒ装置中で（２バールのＨ２圧にて）８時間水素化した。さらに活性炭素担体１０％パラジウム（６０ｍｇ）を加え、混合物を同一条件下で１４時間水素化した。
混合物を、ナイロン製０．４５μｍ膜に通して濾過し、２：１  ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（３ｘ５ｍｌ）で洗浄した。溶媒を除去し、乾燥し、０．６１ｇの粗生成物を得、ＥｔＯＡｃ（５ｍｌ）で溶解した。該溶液に、１ｍｌのヘキサンを加え、次いで、室温で結晶化し、次いで、一晩冷蔵庫中に静置した。得られた固体を濾去し、３：２  ヘキサン／酢酸エチル混合液（２ｘ４ｍｌ）で洗浄し、真空下で乾燥し、白色固体として０．４２ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．８４（ｂｄ，１Ｈ）；７．３９（ｄ，２Ｈ）；７．２１（ｄ，２Ｈ）；７．１２（ｄ，２Ｈ）；７．０２（ｄ，２Ｈ）；５．９８（ｓ，１Ｈ）；５．４９（ｂｄ，１Ｈ）；４．２２（ｓ，２Ｈ）；２．２４（ｓ，３Ｈ）。
【０１１８】
方法Ｄ
中間体２３（１６０ｍｇ）の乾テトラヒドロフラン（２ｍｌ）中溶液を、アルゴン雰囲気下で−７８℃に冷却した。ｎ−ＢｕＬｉ（０．４４ｍｌ、ヘキサン中２．５Ｍ）の溶液を滴下し、混合物を、アルゴン雰囲気下で−７８℃にて３０分間攪拌し、次いで、Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルアセトアミド（０．０５６ｍｌ）を加え、混合物を攪拌した。約３０分後、混合物は高粘度ゲルとなり、反応物を２時間かけて−５０℃まで加温し、混合物はより流動性になった。反応混合物を−５℃に加温し、６Ｎ  ＨＣｌ（１０ｍｌ）を加えた。混合物を２時間攪拌し、次いで、１０％ＮａＨＣＯ３で（約ｐＨ７−８に）中和し、ｔ−ＢｕＯＭｅで３回抽出した。合した有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。残渣を、１０：９０〜５０：５０  ＥｔＯＡｃ−ヘキサンで溶出しながらシリカゲル上のクロマトグラフィーに付して精製し、黄色油として４５ｍｇ（２８％）の出発中間体２３および１２１ｍｇ（６７％）の１−｛３−（ヒドロキシメチル）−４−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−５−イソオキサゾリル｝−２−プロパノンを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ  ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．３４（ｄ，２Ｈ）；７．２２（ｄ，２Ｈ）；７．０６（ｄ，２Ｈ）；７．０５（ｄ，２Ｈ）；４．７２（ｄ，２Ｈ）；３．８８（ｓ，２Ｈ）；２．４５（ｂｓ，２Ｈ）；２．２６（ｓ，３Ｈ）。
【０１１９】
上記の生成物（０．１１４ｇ）をＥｔＯＨ（２０ｍｌ）で溶解し、活性炭素担体１０％パラジウム（１５ｍｇ）を溶液に加えた。そのようにして得られた混合物を、Ｐａｒｒ装置中で（２バールＨ２圧で）６時間水素化した。さらに、活性炭素担体１０％パラジウム（１５ｍｇ）を加え、混合物を同一条件下で１６時間水素化した。混合物を、ナイロン製０．４５μｍフィルターに通して濾過した。溶媒を除去し、乾燥し、ＥｔＯＡｃ（１ｍｌ）でトリチュレートされた０．１ｇの粗生成物を得た。得られた固体を濾去し、真空下で乾燥し、帯黄色固体として０．０６１ｇの標記化合物（中間体８ａ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．９７（ｂｄ，１Ｈ）；７．３９（ｄ，２Ｈ）；７．２１（ｄ，２Ｈ）；７．１２（ｄ，２Ｈ）；７．０２（ｄ，２Ｈ）；５．９８（ｓ，１Ｈ）；５．４９（ｂｄ，１Ｈ）；４．２２（ｓ，２Ｈ）；２．２４（ｓ，３Ｈ）。
【０１２０】
中間体８ｂ
【化４２】
2009538873.tif 000044
２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−３−｛４−［３−（トリフルオロメチル）フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン
中間体７ｂ（４５５ｍｇ）のエタノール（１３ｍＬ）中溶液に、３０％水性アンモニア（６０ｍＬ）を加えた。得られた懸濁液を、スチール製反応器中に加え、１４０℃で加熱した。８．５時間加熱した後、反応器を一晩室温に冷却した。有機溶媒を真空下で除去し、得られた水性溶液を凍結乾燥し、３１６ｍｇの褐色固体を得た。該固体を酢酸エチル（１２ｍＬ）で洗浄し、濾過し、真空下で乾燥し、白色固体として１６１ｍｇの純粋な化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．９７（ｂｄ，１Ｈ）；７．６３（ｔ，１Ｈ）；７．４８（ｄ，１Ｈ）；７．３３−７．３０（ｍ，２Ｈ）；７．２４（ｄ，２Ｈ）；７．０６（ｄ，２Ｈ）；５．９６（ｓ，１Ｈ）；５．５２（ｔ，１Ｈ）；４．２２（ｓ，２Ｈ）；２．２４（ｓ，３Ｈ）
【０１２１】
中間体９（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．；ＥＮ；１２１；３０；１９９９；７０２０−７０２５．）
【化４３】
2009538873.tif 000045
３−ヒドロキシ−２，６−ビス（ヒドロキシメチル）−４Ｈ−ピラン−４−オン
１００ｍＬ丸底フラスコ中に、コウジ酸（ＦＬＵＫＡ，５ｇ）、１Ｎ  ＮａＯＨ（３９ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）を加えた。混合物を（氷／水浴で）冷却し、３７％水性ホルムアルデヒド（ＡＬＤＲＩＣＨ，２．９ｍＬ）を滴下した。室温で３４時間後、さらに３７％水性ホルムアルデヒド（ＡＬＤＲＩＣＨ，０．５ｍＬ）を滴下し、溶液を１８時間攪拌した。混合物を、濃ＨＣｌを加えて酸性化し、溶媒を除去し、真空下で乾燥し、粗生成物を得、冷水で処理し、沈殿した固体を得、濾過し、真空乾燥した。白色固体として３．０５６ｇの標記化合物を得た。濾液を真空下で濃縮し、第二群の固体を分離した。さらに１．１５４ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤ３ＯＤ）：６．４６（ｓ，１Ｈ）；４．６１（ｓ，２Ｈ）；４．４３（ｓ，２Ｈ）
【０１２２】
中間体１０
【化４４】
2009538873.tif 000046
３−ヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−４Ｈ−ピラン−４−オン
５０℃で中間体９（６．５６ｇ）の水（２２．８ｍＬ）中懸濁液に、亜鉛末（ＰＡＮＲＥＡＣ，４．９８ｇ）を加え、濃ＨＣｌ（１１．４３ｍＬ）を滴下し、混合物を７０−８０℃で５時間加熱した。過剰の亜鉛をセライトに通して熱濾過により除去し、濾過ケークを冷水で洗浄した。固体が分離するまで、水性溶液に固体ＮａＣｌを加えた。該固体を濾去し、真空下で乾燥し、３．１６ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．６９（ｓ，１Ｈ）；６．２６（ｓ，１Ｈ）；５．６３（ｔ，１Ｈ）；４．２６（ｄ，２Ｈ）；２．２６（ｓ，３Ｈ）
【０１２３】
中間体１１
【化４５】
2009538873.tif 000047
６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−４−オキソ−４Ｈ−ピラン−３−イル  トリフルオロメタンスルホン酸塩
Ｎ２雰囲気下、中間体１０（１８０ｍｇ）の乾Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（９ｍＬ）中溶液に、炭酸カリウム（ＡＬＤＲＩＣＨ，４７８ｍｇ）およびＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（ＦＬＵＫＡ，４１２ｍｇ）を加えた。室温で０．５時間攪拌した後、１Ｎ  ＮＨ４Ｃｌを加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を、１Ｎ  ＮＨ４Ｃｌ（４ｘ）、０．５Ｎ  ＮａＯＨおよびブラインで洗浄し、Ｍｇ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（９６％ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）に付して精製し、白色固体として１６６ｍｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：６．５７（ｓ，１Ｈ）；４．５１（ｄ，２Ｈ）；２．８３（ｔ，１Ｈ）；２．４２（ｓ，３Ｈ）
【０１２４】
中間体１２ａ
【化４６】
2009538873.tif 000048
６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−３−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４Ｈ−ピラン−４−オン
２口丸底フラスコ中に、中間体１１（１６０ｍｇ）、乾トルエン（１．７ｍＬ）および乾エタノール（０．５ｍＬ）を加えた。得られた溶液を、Ｎ２を発泡させることにより脱酸素化した。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（ＡＬＤＲＩＣＨ，３８ｍｇ）、次いで、中間体１９（２１５ｍｇ）の乾エタノール（４ｍＬ）中溶液および炭酸ナトリウム（２３５ｍｇ）を加えた。混合物を、Ｎ２雰囲気下で脱酸素化し、８０℃で４時間加熱した。混合物を濃縮乾固し、１Ｎ  ＮＨ４Ｃｌおよび酢酸エチルを加え、１０分間攪拌した。水層を酢酸エチルで抽出し、合した有機抽出液をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（１％、２％メタノール／ジクロロメタン）に付して精製し、橙色油として２０２ｍｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：７．２３−７．１９（ｍ，４Ｈ）；７．０８−７．０２（ｍ，４Ｈ）；６．４９（ｓ，１Ｈ）；５．３０（ｓ，１Ｈ）；４．５０（ｄ，２Ｈ）；２．４６（ｔ，１Ｈ）；２．２４（ｓ，３Ｈ）
【０１２５】
中間体１２ｂ
【化４７】
2009538873.tif 000049
６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−３−（４−｛［３（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝フェニル）−４Ｈ−ピラン−４−オン
中間体１２ｂを、トルエン（２４ｍＬ）中の中間体１１（２．３ｇ）、触媒として塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（ＡＬＤＲＩＣＨ，２８０ｍｇ）、ＥｔＯＨ（５５．８６ｍＬ）中の中間体２０（２．７ｇ）および炭酸ナトリウム（３．３８ｇ）を用いて中間体１２ａに記載の方法に類似の方法により調製した。混合物を８５℃で４０分間加熱し、冷却し、セライト層に通して濾過し、酢酸エチルで洗浄し、溶媒を蒸発させた。粗生成物をＥｔＯＡｃで溶解し、１Ｎ  ＮＨ４Ｃｌ（１ｘ）、Ｈ２Ｏ（１ｘ）、飽和ＮａＨＣＯ３（１ｘ）およびＮａＣｌ（１ｘ）で洗浄し、（ＭｇＳＯ４）乾燥し、真空下で濃縮した。カラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−ヘキサン  ０−１００％）に付して精製し、不純物の試料と一緒に第１画分の９３１ｍｇの標記化合物を得、さらにカラムクロマトグラフィーに付して再精製し、さらに黄色固体として５１０ｍｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：７．４９−７．３３（ｍ，３Ｈ）；７．２３（ｍ，３Ｈ）；７．０５（ｄ，２Ｈ）；６．５３（ｓ，１Ｈ）；４．５１（ｓ，２Ｈ）；２．２５（ｓ，３Ｈ）。
【０１２６】
中間体１３ａ
【化４８】
2009538873.tif 000050
６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−３−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン
１９５ｍｇの中間体１２ａのメタノール（２ｍＬ）中懸濁液を、電磁攪拌しながらマイクロ波管中に加えた。３０％水性アンモニア（３ｍＬ）を加え、得られた懸濁液を、マイクロ波放射下で１４０℃にて３０分間加熱した。冷却すると、粗生成物を水で希釈し、真空下で濾過した。固体をアセトニトリルで洗浄し、灰白色固体として９２ｍｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．０９（ｂｄ，１Ｈ）；７．３９（ｄ，２Ｈ）；７．１９（ｄ，２Ｈ）；７．１２（ｄ，２Ｈ）；７．０２（ｄ，２Ｈ）；６．０７（ｓ，１Ｈ）；５．５１（ｂｄ，１Ｈ）；４．３３（ｂｄ，２Ｈ）；２．１０（ｓ，３Ｈ）
【０１２７】
中間体１３ｂ
【化４９】
2009538873.tif 000051
６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−３−（４−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝フェニル）−４（１Ｈ）−ピリジノン
中間体１２ｂ（２００ｍｇ）のメタノール（１．５ｍＬ）中溶液に、攪拌しながら商業用３０％水性アンモニア（３．５ｍＬ）を加えた。マイクロ波放射下で１４０℃にて３０分間反応を行った。冷却すると、粗生成物を水で希釈し、真空下で濾過した。固体をアセトニトリルで洗浄し、灰白色固体として１０４ｍｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ(δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．０８（ｂｓ，１Ｈ）；７．６２（ｍ，１Ｈ）；７．４８（ｄ，１Ｈ）；７．３２（ｍ，２Ｈ）；７．２１（ｄ，２Ｈ）；７．０６（ｄ，２Ｈ）；６．０７（ｍ，１Ｈ）；５．５（ｍ，１Ｈ）；４．３２（ｓ，２Ｈ）；２．０９（ｓ，３Ｈ）。
【０１２８】
中間体１４
【化５０】
2009538873.tif 000052
５−クロロ−６−メチル−４−オキソ−３−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジンカルバルデヒド
実施例１（０．５０６ｇ）のジクロロメタン（５ｍＬ）中溶液に、ＤＭＳＯ（３．４９ｍＬ）およびトリエチルアミン（１．２６ｍＬ）を滴下した。該混合物を０℃に冷却し、それに三酸化硫黄−ピリジン複合体を少量ずつ加えた（０．９４７ｇ）。反応温度を室温に加温し、混合物を２１時間攪拌した。混合物をジクロロメタンで希釈し、水（３ｘ４０ｍＬ）で洗浄した。有機相を、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、真空下で濃縮し、褐色油を得、第１溶出液としてジクロロメタン、次いで、メタノール／ジクロロメタン（ｖ／ｖ  １：６００、１：５００、１：４００および１：２００）を用いてシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーに付して精製した。適当な画分中の溶媒を蒸発させた後、総量４２４ｍｇの標記化合物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：９．６６（ｓ，１Ｈ），９．０３（ｂｓ，１Ｈ），７．４１（ｄ，２Ｈ），７．２３（ｄ，２Ｈ），７．１２−７．０６（ｍ，４Ｈ），２．６０（ｓ，３Ｈ）；［ＥＳ  ＭＳ］  ｍ／ｚ  ４２４（ＭＨ＋）。
【０１２９】
中間体１５
【化５１】
2009538873.tif 000053
３−クロロ−６−メチル−４−オキソ−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジンカルバルデヒド
アルゴン雰囲気下、実施例３（０．４２２ｇ）のジクロロメタン（４．２５ｍＬ）中懸濁液に無水ＤＭＳＯ（３ｍＬ）を加えた。得られた溶液を氷−水浴中で冷却し、テトラエチルアミン（１ｍＬ）を、次いで、三酸化硫黄−ピリジン複合体（０．７８８ｇ）を加えた。混合物を、一晩室温に加温した。２０時間の攪拌後、混合物を水（５ｘ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮乾固した。黄色粉末として３８０ｍｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：１０．３３（ｓ，１Ｈ）；７．２２（ｍ，４Ｈ）；７．０６（ｍ，４Ｈ）；２．３０（ｓ，３Ｈ）。
【０１３０】
中間体１６
【化５２】
2009538873.tif 000054
（２Ｅ）−３−｛５−クロロ−６−メチル−４−オキソ−３−［４−（｛４−［トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジニル｝−２−プロペン酸エチル
アルゴン雰囲気下、中間体１４（０．１５４ｇ）のジクロロメタン（７．２０ｍＬ）中溶液に、（カルボエトキシメチレン）−トリフェニルホスホラン（０．１９０ｇ）を加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、次いで、水（３ｘ５ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、真空下で濃縮し、トランス／シス  α，β−不飽和エステルの混合物を得た。粗生成物を、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（溶出液ＣＨ３ＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２  ０−５％）に付して精製した。黄色固体として０．０５８ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：１３．４１（ｓ，１Ｈ），７．２６（ｄ，２Ｈ），７．２０（ｄ，２Ｈ），７．０８（ｄ，２Ｈ），７．０３（ｄ，２Ｈ），６．７２（ｄ，１Ｈ），６．００（ｄ，１Ｈ），４．２３（ｑ，２Ｈ），２．５６（ｓ，３Ｈ），１．３７（ｔ，３Ｈ）
【０１３１】
中間体１７
【化５３】
2009538873.tif 000055
１−ブロモ−４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）ベンゼン
アルゴン雰囲気下、４−ブロモフェノール（０．１７３ｇ）の４ｍＬの１−メチル−２−ピロリドン中溶液を、４−（トリフルオロメトキシ）ヨードベンゼン（０．３１３ｍＬ）、２，２，６，６−テトラメチルヘプタン−３，５−ジオン（０．０４６ｍＬ）および炭酸セシウム（０．６５２ｇ）で処理した。１５分間アルゴンを発泡させることによりスラリーを脱気し、塩化銅（Ｉ）（０．０９９ｇ）を加えた。１５分間アルゴンを発泡させることにより反応混合物を脱気し、次いで、アルゴン下で５時間１００℃に加熱した。反応物を室温に冷却し、３０ｍＬのｔｅｒｔ−ブチル−メチル−エーテルに滴下した。スラリーを濾過し、固体をｔｅｒｔ−ブチル−メチル−エーテル（３ｘ２０ｍＬ）で洗浄した。合した濾液を、１Ｎ  ＮａＯＨ（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）、２Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）、１Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で順次洗浄した。得られた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、粗生成物を得、ヘキサンで溶出しながらシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーに付して精製し、無色液体として０．１５ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：７．４５（ｍ，２Ｈ）；７．２０（ｍ，２Ｈ）；６．９９（ｍ，２Ｈ）；６．９０（ｍ，２Ｈ）
【０１３２】
中間体１８
【化５４】
2009538873.tif 000056
１−［（４−ブロモフェニル）オキシ］−３−（トリフルオロメチル）ベンゼン
２口丸底フラスコ中に、アルゴン雰囲気下で４−ブロモフェノール（ＡＬＤＲＩＣＨ，５００ｍｇ）および１−メチル−２−ピロリドン（ＡＬＤＲＩＣＨ，１２ｍＬ）を加えた。次いで、３−ヨードベンジルトリフルオリド（ＡＬＤＲＩＣＨ，１．１８ｇ）、２，２，６，６−テトラメチル−３，５−ヘプタンジオン（ＡＬＤＲＩＣＨ，０．１３３ｍＬ）および炭酸セシウム末（ＡＬＤＲＩＣＨ、１．８８ｇ）を加え、混合物をアルゴン雰囲気下で１５分間攪拌した。最後に、塩化銅（Ｉ）（ＡＬＤＲＩＣＨ、１４３ｍｇ）を加え、混合物をアルゴン雰囲気下で２０分間攪拌した。得られた混合物を１０５℃で３．５時間加熱し、室温で冷却した。ｔｅｒｔ−ブチル−メチルエーテル（６０ｍＬ）を加え、混合物を１５分間攪拌し、固体（銅塩）を濾去し、ｔｅｒｔ−ブチル−メチル−エーテルで洗浄した。濾液を、２Ｎ  ＨＣｌ（７０ｍＬ）、１Ｎ  ＨＣｌ（７０ｍＬ）、２Ｎ  ＮａＯＨ（２ｘ６０ｍＬ）およびブライン（７０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発させ、９６４ｍｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：７．４８（ｄ，２Ｈ）；７．４４（ｄ，１Ｈ）；７．３６（ｄ，１Ｈ）；７．２４（ｓ，１Ｈ）；７．１５（ｍ，２Ｈ）；６．９１（ｄ，２Ｈ）
【０１３３】
中間体１９
【化５５】
2009538873.tif 000057
［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］ボロン酸
−７５℃で、中間体１７（４．５３ｇ）の乾テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中溶液にホウ酸トリイソプロピル（４．１ｍＬ）を加えた。混合物を−７８℃に冷却し、それにヘキサン中１．４７Ｍ  ｎ−ブチルリチウム（１１．１ｍＬ）を滴下した。混合物を−７５℃で３時間攪拌し、次いで、６Ｎ  ＨＣｌ（１２ｍＬ）を加えることによりクエンチし、アセトンおよび固形二酸化炭素の浴槽中で一晩攪拌する間に、反応物を室温に加温した。混合物を、酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）の間に分配し、層を分離し、有機層を水（２ｘ２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、次いで、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発乾固した。得られた固体を、２Ｎ  ＮａＯＨ（６０ｍＬ）で処理し、数分間攪拌し、水（２５０ｍＬ）で希釈し、観察された白色固体沈殿を溶解し、溶液を０．４５μｍナイロン製フィルターに通して濾過した。濾液をペンタン（２ｘ２００ｍＬ）で洗浄し、水層を６Ｎ  ＨＣｌでｐＨ１．５に酸性化し、沈殿を濾去し、水で洗浄し、真空下で乾燥し、淡黄色固体として３．２３ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：８．０１（ｂｓ，２Ｈ）；７．８５−７．７８（ｍ，２Ｈ）；７．４３−７．３３（ｍ，２Ｈ）；７．１５−７．０７（ｍ，２Ｈ）；７．０２−６．９４（ｍ，２Ｈ）。
【０１３４】
中間体２０
【化５６】
2009538873.tif 000058
（４−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝フェニル）ボロン酸
５００ｍＬ丸底フラスコ中に、アルゴン雰囲気下で中間体１８（１７．５７６ｇ）の乾テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中溶液、１００ｍＬ以上のテトラヒドロフランおよびホウ酸トリイソプロピル（ＡＬＤＲＩＣＨ，１６．６３ｍＬ）を加えた。混合物を−７８℃で冷却し、１．６５Ｍ  ｎ−ブチルリチウム（ＡＬＤＲＩＣＨ，４０．３ｍＬ）を滴下した。溶液を−７８℃で４時間４５分攪拌し、次いで、６Ｎ  ＨＣｌ（５５ｍＬ）を滴下し、混合物を室温で一晩攪拌した。テトラヒドロフランを減圧下で除去し、ｔｅｒｔ−ブチル−メチル−エーテル（５００ｍＬ）および水（４００ｍＬ）を加えた。有機層を、Ｎａ２Ｓ２Ｏ５（４００ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（４００ｍＬ）およびブライン（４００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発させた。得られた粗生成物に、ナトリウム塩を形成するために２Ｎ  ＮａＯＨ（３２５ｍＬ）を、それを溶解するために（６００ｍＬ）を加えた。ある不純物を除去するために水性溶液をペンタン（２ｘ５００ｍＬ）で抽出し、それを２Ｎ  ＨＣｌ（３２５ｍＬ，ｐＨ＝１）を加えることで酸性化した。白色沈殿を濾過し、水で洗浄し、真空下で乾燥し、白色固体として１１．０４８３ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．０４（ｓ，２Ｈ）；７．８３（ｄ，２Ｈ）；７．６２（ｍ，１Ｈ）；７．４９（ｄ，１Ｈ）；７．３０（ｍ，２Ｈ）；７．０２（ｄ，２Ｈ）
【０１３５】
中間体２１
【化５７】
2009538873.tif 000059
（５−メチル−３−イソオキサゾリル）メタノール
５−メチル−３−イソオキサゾールカルボン酸メチル（９ｇ，ＡＢＣＲから入手可能）の乾エタノール（９０ｍｌ）中懸濁液に、アルゴン下氷浴中で水素化ホウ素ナトリウム（３．６ｇ）を滴下し、混合物を室温で３時間攪拌した。混合物を氷浴で冷却し、ｐＨ＜７まで１Ｎ  ＨＣｌ（１２０ｍｌ）を加えることにより慎重に加水分解した。エタノールを除去するために混合物を真空下で濃縮し、得られた水性溶液をｐＨ６−７まで水性ＮａＯＨ（最初に５Ｎ、次いで、１Ｎ）で中和した。水性溶液をＤＣＭ（６ｘ５０ｍｌ）で抽出し、合した有機層をブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮乾固し、帯黄色油として標記化合物を得た（６ｇ）。水層をＤＣＭ（３ｘ５０ｍｌ）で再抽出し、新しく合した有機層を再度、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒を蒸発乾固した。帯黄色油としてさらなる量（１ｇ）の標記化合物を得た。両試料（総量７ｇ）を次の工程に一緒に用いた。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：６．０３（ｓ，１Ｈ）；４．７０（ｓ，２Ｈ）；２．４２（ｓ，３Ｈ）
【０１３６】
中間体２２
【化５８】
2009538873.tif 000060
（４−ヨード−５−メチル−３−イソオキサゾリル）メタノール
方法Ａ
室温でトリフルオロ酢酸銀（１３．２５ｇ）の乾ＤＣＭ（１７５ｍｌ）中懸濁液に、中間体２１（６．２５ｇ）の乾ＤＣＭ（２５ｍｌ）中溶液を加えた。３０分攪拌した後、ヨウ素（１５．２５ｇ）を滴下し、混合物を室温で３０分間攪拌し、次いで、窒素下で３時間４８℃に加熱した。さらなる量のトリフルオロ酢酸銀（１．３ｇ）およびヨウ素（１．５ｇ）を加え、２時間加熱し続け、次いで、室温で一晩攪拌した。混合物をＤＣＭ（６０ｍｌ）で希釈し、濾去し、ＤＣＭ（３ｘ３０ｍｌ）で洗浄した。得られた濾液および洗浄物を、水（２００ｍｌ）、１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ５（２００ｍｌ）、１０％ＮａＨＣＯ３（２００ｍｌ）、水（２００ｍｌ）およびブライン（２００ｍｌ）で順次洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮乾固し、１４．５５ｇの油状物質を得、固体になった。それをヘプタン（８ｍｌ）でトリチュレートし、得られた固体を濾過し、真空下で乾燥した。該方法で白色固体として第一群（６．２ｇ）の所望の化合物を得た。合した有機洗浄物を蒸発乾固し、７．５ｇの油状残渣を得、ヘキサンおよびヘキサン／ＥｔＯＡｃ  ４：１で溶出しながら、短層のシリカゲルに通した。適当な画分の溶媒を蒸発させ、油状物質を得、ＭｅＯＨ（１５ｍｌ）で溶解し、１Ｎ  ＨＣｌ（１０ｍｌ）および１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ５（１０ｍｌ）で３０分間処理した。溶媒を除去し、乾燥し、残渣をＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）と１Ｎ  ＨＣｌ（１００ｍｌ）の間に分配した。有機層を、１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ５（１００ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍｌ）およびブライン（１００ｍｌ）で順次洗浄し、次いで、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮乾固し、４．７５ｇの帯黄色固体を得、ヘプタン（６ｍｌ）でトリチュレートし、濾過し、ヘプタン（４ｍｌ）で洗浄し、真空下で乾燥し、白色固体として第２群（４．５ｇ）の所望の化合物を得た。
【０１３７】
方法Ｂ
ＩＣｌ（６．３ｇ）の水（７５ｍｌ）中懸濁液に、ヒドロキシメチル−メチルイソオキサゾール（３．４ｇ）、次いで、ＴＦＡ（１１．１ｍｌ）を加えた。混合物を、窒素下で６５℃にて加熱した。２時間の加熱後、さらなるＩＣｌ（１ｇ）を加え、混合物を２．５時間加熱した。混合物を、室温に冷却し、次いで、水（１５０ｍｌ）で希釈し、１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ５（２５ｍｌ）で処理した。混合物を、固体Ｎａ２ＣＯ３（１５ｇ）を滴下することで塩基性にし（ｐＨ＝７．５−８．０）、次いで、ジクロロメタン（１ｘ１００ｍｌ＋２ｘ７５ｍｌ）で抽出した。合した有機層を、水（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮乾固し、帯白色固体として６．５８ｇの標記化合物を得た（収率９１％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：４．６８（ｄ，２Ｈ）；２．４７（ｓ，３Ｈ）；２．１２（ｔ，１Ｈ）
【０１３８】
中間体２３
【化５９】
2009538873.tif 000061
｛５−メチル−４−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−３−イソオキサゾリル｝メタノール
中間体２２（５．９７６ｇ）、中間体１９（７．９７ｇ）および活性炭素担体１０％パラジウム（１．２５ｇ）のエタノール（１５０ｍｌ）中混合物を、３０分間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次いで、１０％ＮａＨＣＯ３溶液（７５ｍｌ）をそれに滴下した。混合物を窒素雰囲気下で５時間８５℃に加熱し、次いで、室温に冷却し、一晩攪拌した。混合物をナイロン膜（０．４５μｍ）に通して濾過し、濾過ケークをＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ２：１（３ｘ７５  ｍｌ）で洗浄した。１Ｎ  ＮａＯＨ（１５ｍｌ）を加え、有機溶媒を減圧下で除去した。黒色固体が出現し、濾去した。濾過ケークを一部のＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ２：１混合液で洗浄した。水（６０ｍｌ）を加え、有機溶媒を除去し続け、固体沈殿を含有する水性懸濁液を得た。固体を濾過し、次いで、１Ｎ  ＮａＯＨ（３ｘ５０ｍｌ）および水（４ｘ５０ｍｌ）で洗浄した。真空下で乾燥させるとすぐに、固体をヘプタン（３ｘ５０ｍｌ）で洗浄し、最終的に乾燥した。白色固体として８．８２８ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤＣｌ３）：７．３７（ｍ，２Ｈ）；７．２５（ｍ，２Ｈ）；７．０６（ｍ，４Ｈ）；４．７２（ｄ，２Ｈ）；２．４６（ｓ，３Ｈ）；２．１１（ｔ，１Ｈ）
【０１３９】
実施例１
【化６０】
2009538873.tif 000062
３−クロロ−６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン
５００ｍＬ丸底フラスコ中に、中間体８ａ（５．２５ｇ）を容量比２：１ジクロロメタン／メタノール（１３５ｍＬ）で溶解した。混合物を、攪拌しながらアルゴン雰囲気下で０℃にて冷却し、３０分後、クロロイソシアヌル酸（ＡＬＤＲＩＣＨ，１．２６ｇ）を加えた。溶液を窒素雰囲気下で５０分間攪拌し、濾過し、容量比２：１ジクロロメタン／メタノール（６０ｍＬ）で洗浄した。濾液を蒸発乾固し、１０％炭酸ナトリウムを加え（３０ｍＬ）、混合物を攪拌した。固体を濾過し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）、１０％Ｎａ２ＣＯ３（２ｘ３０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２ｘ５０ｍＬ）およびアセトニトリル（２ｘ１５ｍＬおよび１ｘ２０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥し、灰白色粉末として４．６６ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ  δ  ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６：１１．５０（ｂｄ，１Ｈ）；７．４０（ｄ，２Ｈ）；７．２４（ｄ，２Ｈ）；７．１４（ｄ，２Ｈ）；７．０４（ｄ，２Ｈ）；５．５８（ｂｄ，１Ｈ）；４．２３（ｓ，２Ｈ）；２．４４（ｓ，３Ｈ）。［ＥＳ  ＭＳ］  ｍ／ｚ  ４２６（ＭＨ＋）。
【０１４０】
実施例２
【化６１】
2009538873.tif 000063
３−クロロ−６−（ヒドロキシメチル）−２−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン
２５ｍＬ丸底フラスコ中に、中間体８ｂ（１５５ｍｇ）を容量比２：１ジクロロメタン／メタノール（９ｍＬ）で溶解した。混合物を、アルゴン雰囲気下で０℃にて冷却し、トリクロロイソシアヌル酸（ＡＬＤＲＩＣＨ，４０ｍｇ）を加えた。溶液を、窒素雰囲気下で０℃にて５５分環攪拌し、濾過し、容量比２：１ジクロロメタン／メタノール（１３ｍＬ）で洗浄した。濾液を蒸発乾固し、１０％炭酸ナトリウムを加え、混合物を攪拌した。固体を濾過し、１０％Ｎａ２ＣＯ３（２ｘ）およびアセトニトリル（６ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥し、白色固体として１３０ｍｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．５０（ｂｄ，１Ｈ）；７．６４（ｔ，１Ｈ）；７．５０（ｄ，１Ｈ）；７．３４−７．３２（ｍ，２Ｈ）；７．２６（ｄ，２Ｈ）；７．０８（ｄ，２Ｈ）；５．５９（ｂｄ，１Ｈ）；４．２４３（ｓ，２Ｈ）；２．４５（ｓ，３Ｈ）。
【０１４１】
実施例３
【化６２】
2009538873.tif 000064
３−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン
中間体１３ａ（８０ｍｇ）の容量比２：１ジクロロメタン／メタノール（５ｍＬ）中溶液に、窒素下０℃でトリクロロイソシアヌル酸（ＡＬＤＲＩＣＨ，１９．５ｍｇ）を加えた。溶液を窒素雰囲気下０℃で２時間攪拌し、濾過し、容量比２：１ジクロロメタン／メタノール（６０ｍＬ）で洗浄した。濾液を蒸発乾固し、クロマトグラフィー（３、５および１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）に付して精製し、白色固体として５５．１ｍｇの標記化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．３０（ｂｄ，１Ｈ）；７．４０（ｄ，２Ｈ）；７．２１（ｄ，２Ｈ）；７．１４（ｄ，２Ｈ）；７．０４（ｄ，２Ｈ）；５．８９（ｂｄ，１Ｈ）；４．５８（ｓ，２Ｈ）；２．１６（ｓ，３Ｈ）。
【０１４２】
実施例４
【化６３】
2009538873.tif 000065
３−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）−６−メチル−５−（４−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝フェニル）−４（１Ｈ）−ピリジノン
０℃で中間体１３ｂ（２１４ｍｇ）の容量比２：１ジクロロメタン／メタノール混合液中溶液に、トリクロロイソシアヌル酸（５３ｍｇ）を加えた。混合物を該温度で４０分間攪拌した。粗生成物を濾過し、濃縮し、得られた混合物を、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール５％）に付して精製した。適当な画分中の溶媒を蒸発させ、固体を得、アセトニトリルでトリチュレートし、濾過し、次いで、真空下で乾燥し、白色固体として標記化合物を得た（８５ｍｇ）。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．３１（ｂｓ，１Ｈ）；７．６４（ｍ，１Ｈ）；７．５０（ｄ，１Ｈ）；７．３４（ｍ，２Ｈ）；７．２１（ｄ，２Ｈ）；７．０８（ｄ，２Ｈ）；５．８９（ｍ，１Ｈ）；４．５８（ｍ，２Ｈ）；２．１６（ｓ，３Ｈ）。［ＥＳ  ＭＳ］  ｍ／ｚ  ４１０（ＭＨ＋）。
【０１４３】
実施例５
2009538873.tif 000066
５−クロロ−６−メチル−４−オキソ−３−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジンカルバルデヒド  オキシム
アルゴン雰囲気下、中間体１４（０．２０４ｇ）およびヒドロキシルアミン塩酸塩（０．１６７ｇ）をエタノール（３．３７ｍＬ）中で合し、次いで、ピリジン（０．１６７ｍＬ）を加え、１時間加熱還流した（７５−８０℃）。反応混合物を真空下で濃縮し、ベージュ色粉末を得、水でトリチュレートし、濾過した。得られた固体を水で洗浄し、次いで、真空下で乾燥し、白色粉末として０．１６６ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤ３ＯＤ）：７．６６（ｓ，１Ｈ），７．３１−７．２５（ｍ，４Ｈ），７．１５（ｄ，２Ｈ），７．１０（ｄ，２Ｈ），２．５７（ｓ，３Ｈ）。［ＥＳ  ＭＳ］  ｍ／ｚ  ４３９（ＭＨ＋）。
【０１４４】
実施例６
【化６４】
2009538873.tif 000067
５−クロロ−６−メチル−４−オキソ−３−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジンカルバルデヒド−Ｏ−メチルオキシム（立体化学未知）
アルゴン雰囲気下、中間体１４（０．１００ｇ）およびメトキシルアミン塩酸塩（０．０７９ｇ）をエタノール（１．６５ｍＬ）中で合し、次いで、ピリジン（０．０７９ｍＬ）を加え、７５℃で２時間加熱した。反応混合物を真空下で濃縮し、シロップを得、メタノールで溶解した。該溶液に、ジクロロメタン／ヘキサンの２：１混合液を加えた。粗生成物を真空下で濃縮し、黄色固体を得、濾過し、水で洗浄し、次いで、真空下で乾燥し、白色粉末として０．０８８ｇの標記化合物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＣＤ３ＯＤ）：７．６７（ｓ，１Ｈ），７．３１−７．２４（ｍ，４Ｈ），７．１５−７．０７（ｍ，４Ｈ），４．０２（ｓ，３Ｈ），２．６０（ｓ，３Ｈ）。［ＥＳ  ＭＳ］  ｍ／ｚ  ４５３（ＭＨ＋）
【０１４５】
実施例７
【化６５】
2009538873.tif 000068
３−クロロ−６−メチル−４−オキソ−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−１，４−ジヒドロ−２−ピリジンカルバルデヒド  オキシム（立体化学未知）
不活性雰囲気下、中間体１５をＥｔＯＨ（２．８ｍＬ）で溶解した。次いで、ヒドロキシルアミン塩酸塩（１３９ｍｇ）およびピリジン（０．１３９ｍＬ）を加え、混合物を約２時間加熱還流した。混合物を冷却し、濃縮乾固した。得られた粗生成物を水で希釈し、水で数回洗浄した。次いで、得られた固体をアセトニトリルで２時間トリチュレートし、次いで、濾過し、アセトニトリルで洗浄し、真空乾燥し、灰白色固体として標記化合物を得た（５０ｍｇ）。
１Ｈ−ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１２．３５（ｓ，１Ｈ）；１１．５２（ｓ，１Ｈ）；８．３２（ｓ，１Ｈ）；７．４０（ｄ，２Ｈ）；７．２０（ｄ，２Ｈ）；７．１５（ｄ，２Ｈ）；７．０５（ｄ，２Ｈ）；２．１７（ｓ，３Ｈ）。［ＥＳ  ＭＳ］  ｍ／ｚ  ４３９（ＭＨ＋）。
【０１４６】
実施例８
【化６６】
2009538873.tif 000069
３−クロロ−６−（３−ヒドロキシプロピル）−２−メチル−５−［４−（｛４−［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝オキシ）フェニル］−４（１Ｈ）−ピリジノン
アルゴン雰囲気下０℃で、中間体１６（０．１１３ｇ）のＴＨＦ（１．５０ｍＬ）中溶液に、１．５Ｍの水素化ジイソブチルアルミニウムのヘキサン中溶液（ＤＩＢＡＨ，０．８９ｍＬ）を徐々に加えた。反応混合物を室温に加温し、一晩攪拌した。２２時間後、混合物を水でクエンチし、酢酸エチル（３ｘ２０ｍＬ）で抽出した。合した有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮し、褐色油状粗生成物を得、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（溶出液  ジクロロメタン／メタノール、０−５％）に付して精製した。０．０３２ｇの標記生成物および部分的に水素化された３−ヒドロキシ−１−プロペニル誘導体の混合物を得た。反応を完了するために、Ｎ２雰囲気下、該混合物の酢酸エチル（２．５ｍＬ）中溶液に活性炭素担体１０重量％パラジウム（０．００８ｇ）を加え、溶液を１．３８ｘ１０５Ｐａ（２０ｐｓｉ）の水素ガスで２１時間反応させた。酢酸エチル（２ｘ５ｍＬ）およびメタノール（１ｘ５ｍＬ）で順次洗浄しながら触媒を濾去し、溶媒を真空下で蒸発乾固し、黒色油を得、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（溶出液  メタノール／ジクロロメタン０−５％およびメタノール／ジエチルエーテル０−５％）に付して精製した。黄色固体として０．０１３ｇの純標記生成物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（δ，ｐｐｍ，ＤＭＳＯ）：７．４０（ｄ，２Ｈ），７．１７（ｄ，２Ｈ），７．１４（ｄ，２Ｈ），７．０５（ｄ，２Ｈ），３．２６−３．２４（ｍ，２Ｈ），２．３８（ｓ，５Ｈ），１．６３−１．５３（ｍ，２Ｈ）。［ＥＳ  ＭＳ］  ｍ／ｚ  ４５４（ＭＨ＋）。
【０１４７】
生物学的アッセイ
本発明の化合物を、所定の薬理効果を有する必要がある化合物の濃度を測定するために複数の生物学的アッセイの一つで試験してもよい。
【０１４８】
プラスモジウム・ファルシパルムに対するインビトロでの抗マラリア活性
ＩＣ５０アッセイ／［３Ｈ］−ヒポキサンチンアッセイ
Ｉ．材料
寄生虫．
プラスモジウム・ファルシパルム系統．
【０１４９】
培地．
培地は、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、重炭酸ナトリウムおよびグルタミン（ＧＩＢＣＯ（商標）  カタログ番号：５２４００）を有するＲＰＭＩ  １６４０を含み、１０％の貯蔵ヒト血清ＡＢ（Ｉｒｖｉｎｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，カタログ番号：５００９）およびＨＴサプリメント（０．１５ｍＭヒポキサンチンおよび２４μＭチミジン）、（ＧＩＢＣＯ（商標）  カタログ番号：４１０６５）が追加された。ヒト血清を、５６℃で３０分失活し、アリコートし、該培地中で使用するまで−２０℃で冷凍保存した。
【０１５０】
培地（「完全培地」）は通常、使用直前に新しく調製され、３７℃に予め加温された。
【０１５１】
赤血球．
赤血球Ｏ＋ストック懸濁液を、スペイン赤十字により提供される不十分な献血（サンプリング後２５日未満）からもたらされる全血バックから調製した．該「全血」をアリコートし、４℃で保存した。
【０１５２】
アッセイにおける赤血球を調製するために、全血を遠心分離し、血清不含ＲＰＭＩで３回洗浄した。赤血球を含有する上清を除去した。洗浄された赤血球を、完全培地中の５０％懸濁液として保持した。調製された赤血球を４℃で保存し、調製の４日後までいつでもアッセイに用いた。
【０１５３】
ＩＩ．化合物．
化合物調製
試験化合物を、アッセイ当日に１００％ＤＭＳＯ中で２ｍｇ／ｍｌにて溶解した。必要に応じて、微温（混合物を３７℃未満の温度で加熱した）および超音波処理（超音波処理浴）で完全に溶解を達成した。
【０１５４】
試験化合物を寄生虫に加える前に、化合物溶液におけるＤＭＳＯの割合を、完全培地について上記されるように同様に調製される培地で溶液をさらに希釈することにより低下させたが、ヒポキサンチンを含有しなかった。寄生虫の増殖に対し検出可能な望ましくない効果をもたらすことがないように、アッセイプレートにおけるＤＭＳＯの最終濃度は、０．２％を超えることが許されなかった。ＩＣ５０測定について、１０シリアルの２倍希釈液を、一定量のＤＭＳＯの存在下において完全培地中で調製した。溶液をアッセイ培地中で希釈すると１００％ＤＭＳＯ中ストック溶液の不溶性または沈殿のいくつかの明らかな兆候が記録された。
【０１５５】
ＩＩＩ．プラスモジウム・ファルシパルム培養（寄生虫）
プラスモジウム・ファルシパルム系統を、ＴｒａｇｅｒおよびＪｅｎｓｅｎ（１）ならびにＴｒａｅｇｅｒ（２）によって刊行された出典の方法を用いて連続培養にて５％のヘマトクリットの完全培地中に維持した。
【０１５６】
寄生虫血を、光学顕微鏡法で寄生された赤血球の割合をカウントすることにより計算した。薄層塗抹標本を、各培養フラスコから毎日作製し、メタノールで固定し、ｐＨ７．２緩衝水中にて１０％Ｇｉｅｍｓａ（Ｍｅｒｃｋ，カタログ番号：１．０９２０４）で１０分間染色した。スライドガラスを観察し、１００倍油浸対物レンズを装備した光学顕微鏡（Ｎｉｋｏｎ，Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｅ２００）でカウントした。
【０１５７】
培養液を５％のヘマトクリットで維持し、培地を毎日交換し、寄生虫血が約５％に到達した場合には希釈した。寄生虫集団は非同期性であり、安定な割合（約７０％）の早期栄養体（輪状体）から構成され、寄生虫の初期数を１日に３〜３．５倍にする一定の増殖速度を示した。
【０１５８】
低酸素雰囲気下（５％ＣＯ２、５％Ｏ２、９５％Ｎ２）、３７℃でインキュベートされた培養フラスコ（カントネック，Ｃｏｒｎｉｎｇ）中で増殖を達成した。
【０１５９】
ＩＶ．ＩＣ５０アッセイ
［３Ｈ］ヒポキサンチン取り込みアッセイは、出典Ｄｅｓｊａｒｄｉｎｓら（３）の方法を用いて実施した。該アッセイは９６ウェルフラットボトムマイクロプレート中で実施した。
【０１６０】
１．試験化合物の連続希釈液（５０μｌの５×溶液／ウェル）を二つ組でセットした。本発明の化合物を該アッセイにて試験した。クロロキンおよびアトバクオンを各アッセイのための対照化合物として用いた。
【０１６１】
２．接種材料は、完全培地について前記したものと同様に調製したがヒポキサンチン不含の培養培地中の２．５％のヘマトクリットおよび０．５％の寄生虫血の寄生された赤血球（ＰＲＢＣ）の懸濁液として調製した。
【０１６２】
３．［３Ｈ］−ヒポキサンチン（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，カタログ番号：ＴＲＫ７４）を１μＣｉ／ｍｌ（０．２５μＣｉ／ウェルに相当）の濃度で接種材料懸濁液に即座に加えた。得られた懸濁液の２００μｌを各ウェル（下記の対照ウェルＨ１２以外）に分配し、２％のヘマトクリットおよび０．５％の寄生虫血の１ウェルあたり２５０μｌの最終容量をもたらした。
【０１６３】
４．各プレート中、２つのカラムを対照ウェル用として確保した：
【０１６４】
・カラム１１：正対照ウェル：ＰＲＢＣおよび０．２％ＤＭＳＯ−（ｉ）寄生虫増殖におけるＤＭＳＯ溶媒（０．２％の最終濃度）の効果の測定および（ｉｉ）試験化合物で処理した培養液との比較。
【０１６５】
・カラム１２（ウェルＡ１２−Ｈ１２を含む）：
Ａ１２−Ｄ１２−バックグラウンド値ウェル：非感染ＲＢＣ−寄生虫なしＲＢＣから読み取るバックグラウンドを得るためのブランク対照。
【０１６６】
Ｅ１２−Ｇ１２−溶媒効果ウェル：ＤＭＳＯなしＰＲＢＣ−これらのウェルをカラム１１ウェルと比較することによるＰＲＢＣにおけるＤＭＳＯ溶媒の効果の測定。
【０１６７】
Ｈ１２−非−放射性ウェル：冷ヒポキサンチンを有するＰＲＢＣ−（ｉ）薄層塗抹標本を作製し、顕微鏡法によりインキュベーション後の寄生虫血値を測定すること、および（ｉｉ）アッセイの間、寄生虫が適切に増殖していることを確認すること。（［３Ｈ］−ヒポキサンチンの代わりに非−トリチウム化ヒポキサンチンを用いることを除き、２００μｌの接種材料懸濁液を上記のとおり調製し（項目２および３）、次いで、該ウェルに加え、最終容量２５０μｌとした）。
【０１６８】
５．低酸素雰囲気下、プレートを３７℃で４８時間インキュベートした。アッセイの終わりに、寄生虫の増殖の視覚対照のために、非−放射性試料（ウェルＨ１２）を用いて薄層標本を作製した。プレートを一晩−８０℃で凍結することにより取り込みを終了した。
【０１６９】
６．寄生虫の核酸中への［３Ｈ］−ヒポキサンチンの取り込みレベルを測定することにより、増殖を定量化した。プレートを解凍した後、半自動セルハーベスター（Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ９６，ＴＯＭＴＥＣ）を用いて、ガラスファイバーフィルター（Ｗａｌｌａｃ，カタログ番号：１４５０−４２１）上にウェルの中身を回収した。そのフィルターを乾燥し、Ｍｅｌｔ−ｏｎシンチレーター（Ｍｅｌｔｉｌｅｘ（登録商標）Ａ，ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒカタログ番号：１４５０−４４１）で処理した。β−カウンター（Ｗａｌｌａｃ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ，ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて放射能の取り込みを測定した。
【０１７０】
アッセイを少なくとも独立して３回繰り返した。
【０１７１】
Ｖ．データ分析
絶対値からバックグラウンド値を差し引くことにより、各ウェルの値を補正した。バックグラウンドは、非感染対照ウェルのｃｐｍ単位の平均値として各プレートについて算出した。
【０１７２】
所定の試験化合物の各濃度について、二つ組試料の平均（中間）値を算出した。
【０１７３】
次いで、各試験化合物の各濃度について、ＤＭＳＯで希釈して同じウェル容量としたが試験化合物不含でＰＲＢＣ含有の対照ウェルから得られた値と比較することにより、阻害の割合を算出した。ここで用いられた対照ウェルは上記のカラム１１のウェルである（カラム１１のウェル全ての平均値をとる）。
【０１７４】
ＥｘｃｅｌおよびＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ３．０ソフトウェアを用いてデータ分析を行った。結果は、異なる日に実施した少なくとも３つの独立した実験の平均±標準偏差として示した。
【０１７５】
ＶＩ．参考文献
１．Ｔｒａｇｅｒ  Ｗ，Ｊｅｎｓｅｎ  ＪＢ．Ｈｕｍａｎ  ｍａｌａｒｉａ  ｐａｒａｓｉｔｅｓ  ｉｎ  ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  ｃｕｌｔｕｒｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．１９７６  Ａｕｇ  ２０；１９３（４２５４）：６７３−５．
２．Ｔｒａｇｅｒ  Ｗ．Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｌａｒｉａ  ｐａｒａｓｉｔｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１９９４；４５：７−２６．
３．Ｄｅｓｊａｒｄｉｎｓ  ＲＥ，Ｃａｎｆｉｅｌｄ  ＣＪ，Ｈａｙｎｅｓ  ＪＤ，Ｃｈｕｌａｙ  ＪＤ．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｎｔｉｍａｌａｒｉａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｂｙ  ａ  ｓｅｍｉａｕｔｏｍａｔｅｄ  ｍｉｃｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  １９７９  Ｄｅｃ；１６（６）：７１０−８．
【０１７６】
化合物溶解度測定
Ｉ．材料
化合物
９５％以上のＬＣ−ＭＳ純度を有する３ｍｇの固体化合物が必要であった。この量を３つの異なるガラスバイアル（各１．８ｍｌ容量）へ分割し、各々１ｍｇの化合物を加えた。
【０１７７】
溶媒およびバッファー
ＨＰＬＣグレードの有機溶媒を用いた。超純水（Ｍｉｌｌｉ−Ｑグレード）を用いた。超純水を用いてバッファーを調製し、０．４５μのナイロンフィルターを用いて濾過した。該アッセイにおいて用いられた各溶媒の組成は、下記のとおりである（パートＩＩＩ）。
【０１７８】
ＩＩ．手順
１．全溶解度測定のための手順：
ａ）デジタルピペット（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｐｒｏ）を用いて、１００μｌの溶媒を各バイアルに加えた。
ｂ）その後、混合物を１分間ボルテックスし、５分間超音波分解した。
ｃ）各バイアルの最終容量が１ｍｌに達するまで工程ａ）およびｂ）を繰り返した。
ｄ）顕微鏡を各バイアル中の試料を調べるために用いた。
ｅ）各試料中の化合物の溶解度を、全試料が溶解した後の最終濃度より大きく、および最終溶媒添加前の濃度より小さく、算出した。
ｆ）化合物の溶解度を３つのバイアル試料の平均値として算出した。
【０１７９】
２．平衡溶解度の測定（所望の溶媒中の化学安定性は問題ではないと想定する）
化合物が完全に溶解した、上記のとおりに調製した３つのバイアル試料の各々につき、以下の手順を続けて実施した：
ａ）少量（約０．１ｍｇ）のさらなる固体化合物をバイアルに加え、非溶解固体の形態の過剰な化合物を混合物中に維持した。
ｂ）試料を２４時間磁気攪拌した。所望により、さらなる固体化合物（０．１ｍｇ）を加え、その過剰量を維持しておき、次いで、試料を再度攪拌した。
ｃ）次いで、試料を濾過し（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｍｉｌｅｘ  フィルターナイロン  ０．２ｕｍ）、３種のアリコートを作製し（３つのバイアルの各々から１つ）、ＬＣ−ＭＳにより分析した。
ｄ）ｐＨ−メーター（ＷＴＷ  ｐＨ３３０ｉおよびｐＨ−電極  Ｓｅｎｔｉｘ４１）を用いて、各試料中の最終溶液のｐＨを測定した。
【０１８０】
３．定量分析のためのＬＣ−ＭＳアッセイ
濾過した全アリコートをＬＣ−ＭＳにより分析した。Ｗａｔｅｒｓ  ＺＭＤ−２０００  ＭＳ分光計と接続したＨＰ１１００  ＨＰＬＣ装置と、Ｌｕｎａ  ５μＣ１８（２）  カラム  ４．６×１５０ｍｍを用いて、分析を行った。上記のように調製した最終的な試料の濃度を、研究中の化合物のＤＭＳＯ（Ａｌｄｒｉｃｈ  カタログ番号：２７６８５−５）ストック溶液中２ｍＭ溶液の連続希釈から得られた参照検量線の濃度から算出した。
【０１８１】
４．データ分析
ＭａｓｓＬｙｎｘ３．４ソフトウェアを用いて全ＬＣ−ＭＳデータの分析を行った。Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌを用いて統計およびグラフ分析を行った。試料からのピーク面積および検量線からのピーク面積を用いて、各化合物についての濃度（ｕＭ）および溶解度（ｕｇ／ｍｌ）を算出した
【０１８２】
ＩＩＩ．これらのアッセイに用いられる溶媒の組成
Ａ）ＦａＳＳＩＦは絶食状態の腸液を刺激する溶媒である（ＦａＳＳＩＦ：Ｆａｓｔｅｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｆｌｕｉｄ）。その組成を下記表に示す。
【表１】
2009538873.tif 000070
【０１８３】
ＦａＳＳＩＦ調製手順．
１．１ＬのｐＨ６．８バッファー溶液の調製
１．ａ．  リン酸カリウム３．９４７ｇおよび塩化カリウム１６．４０１ｇを約９００ｍｌの水で溶解した。
１．ｂ．  磁気攪拌しながら、０．１Ｎ水酸化ナトリウム（Ｓｃｈａｒｌａｕ  ＳＯ  ０４４１０１０Ｃ）を徐々に加えることにより、ｐＨを６．８に調整した。
１．ｃ．  混合物を水で１０００ｍｌ容量に希釈した。
【０１８４】
２．１００ｍｌのＦａＳＳＩＦの調製
２．ａ．  タウロコール酸Ｎａ（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｔ−４００９）２６９ｍｇを約８０ｍｌのｐＨ６．８バッファーで溶解した。
２．ｂ．  レシチン（Ｓｉｇｍａ  Ｐ−７３１８）１１４ｍｇを該タウロコール酸Ｎａ／バッファー溶液で溶解した（これは窒素充填したグローブバッグを用いて実施した）。
２．ｃ．  得られた混合物を、さらにｐＨ６．８バッファーで１００ｍｌ容量に希釈した。
２．ｄ．  最終的な溶液を、窒素または代替的な不活性ガスの層で覆った。ボトルをパラフィルムで密封し、４℃で保存した。
【０１８５】
Ｂ）ＦｅＳＳＩＦは、摂食状態の腸液を刺激する溶媒である（ＦｅＳＳＩＦ：Ｆｅｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｆｌｕｉｄ）。その組成を下記表に示す。
【表２】
2009538873.tif 000071
【０１８６】
参考文献：Ｇａｌｉａ，Ｎｉｃｏｌａｉｄｅｓ，Ｈｏｒｔｅｒ，Ｌｏｂｅｎｂｅｒｇ，Ｒｅｐｐａｓ，ａｎｄ  Ｄｒｅｓｓｍａｎ  −Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．１５，Ｎｏ．５，１９９８
【０１８７】
ＦｅＳＳＩＦ調製手順
１．１ＬのｐＨ５バッファー溶液の調製
１．ａ．  塩化カリウム１５．２ｇおよび氷酢酸８．２５ｍｌを約９００ｍｌの水で溶解した。
１．ｂ．  磁気攪拌しながら、０．１ＮのＮａＯＨ（Ｓｃｈａｒｌａｕ  ＳＯ  ０４４１０１０Ｃ）を徐々に加えることにより、ｐＨ５に調整した。
１．ｃ  混合物を水で１０００ｍｌ容量に希釈した。
【０１８８】
２．１００ｍｌのＦｅＳＳＩＦの調製
２．ａ．  タウロコール酸Ｎａ（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｔ−４００９）８０６．５ｍｇを８０ｍｌのｐＨ５バッファーで溶解した。
２．ｂ．  レシチン（Ｓｉｇｍａ  Ｐ−７３１８）２８８ｍｇを該タウロコール酸Ｎａ／バッファー溶液で溶解した（窒素充填したグローブバッグを用いて実施した）。
２．ｃ．  得られた溶液を、ｐＨ５バッファーで１００ｍｌ容量に希釈した。
２．ｄ．  最終的な溶液を、窒素または代替的な不活性ガスの層で覆った。ボトルをパラフィルムで密封し、４℃で保存した。
【０１８９】
Ｃ）ｐＨ７．４における溶解度をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）（Ｆｌｕｋａ  カタログ番号：７９３８３）中で測定した。
【０１９０】
Ｄ）ｐＨ１．０における溶解度を０．１ＮのＨＣｌ溶液（Ｓｃｈａｒｌａｕ  ＡＬ０７４４０１０Ｃ）中で測定した。
【０１９１】
Ｅ）ｐＨ４．５における溶解度をクエン酸ナトリウム０．５Ｍ溶液（Ａｌｄｒｉｃｈ  ２５，１２７−５）中で測定した。
【０１９２】
インビトロ活性アッセイおよび溶解度測定アッセイの結果
インビトロアッセイ
上記の本発明の全実施例（実施例１〜８）は７５ｎｇ／ｍｌ未満のＩＣ５０値を有することが見出された。
【０１９３】
溶解度測定アッセイ
本発明の全実施例（実施例１〜８）の溶解度は、２種の溶媒ＦａＳＳＩＦおよびＦｅＳＳＩＦそれぞれで試験された。データを下記表に示す。
【表３】
2009538873.tif 000072
【０１９４】
表の要点
Ｓ＝μｇ／ｍｌ単位の溶解度
Ｓ＜１              ＊
１＜Ｓ＜５          ＊＊
５＜Ｓ＜１０        ＊＊＊
１０＜Ｓ＜５０      ＊＊＊＊
【国際調査報告】
2009538873.tif 000082
2009538873.tif 000083
2009538873.tif 000084