(57)【要約】  本発明は、ａ）セファドロキシル水溶液および滴定液を結晶化容器に入れて、結晶化容器内のｐＨを７〜９に保つステップと、ｂ）結晶形のβ−ラクタム化合物の懸濁液を得るために、結晶化容器のｐＨを５〜６．５の値に低下させるステップを含んでなる、結晶形のセファドロキシルを調製する方法に関する。本発明は、本発明に従った方法によって得られる結晶形のセファドロキシルにさらに関する。本発明はまた、２５℃の温度で少なくとも１ヶ月保存された場合に、ＣＩＥ  ｂ値が１２未満である結晶形のセファドロキシルにも関する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）セファドロキシル水溶液を適切な滴定液によりｐＨ７〜９にするステップと、
ｂ）結晶形のセファドロキシルの懸濁液を得るために、ｐＨを５〜６．５の値に低下させるステップ
を含んでなる、結晶形のセファドロキシルを調製する方法。
【請求項２】
ステップａ）およびステップｂ）が５〜２５℃の温度で実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ステップｂ）のｐＨを低下させるステップが２０〜６０分の時間内に実施される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
ステップｂ）で得られた水中の結晶形のセファドロキシルの懸濁液が１０〜１２０分間にわたり撹拌される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
結晶形のセファドロキシルが、ステップｂ）で得られた懸濁液から単離されることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法によって得られる、結晶形のセファドロキシル。
【請求項７】
ＣＩＥ  ｂ値が６未満である、結晶形のセファドロキシル。
【請求項８】
２５℃の温度で少なくとも１ヶ月保存された場合に、ＣＩＥ  ｂ値が１２未満である、結晶形のセファドロキシル。
【請求項９】
請求項６〜８のいずれか一項で定義される、または請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法によって生成される、セファドロキシルを含んでなる医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、セファドロキシルを結晶化する方法、および結晶形のセファドロキシルに関する。
【０００２】
セファドロキシルは化合物７−［Ｄ−α−アミノ−α−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−アセトアミド］デスアセトキシセファロスポラン酸の名称である。セファドロキシルなどのβ−ラクタム化合物を結晶化する方法は、例えば国際公開第９９／２４４４１号パンフレットから知られている。国際公開第９９／２４４４１号パンフレットは、β−ラクタム化合物の溶液および対応する滴定液を結晶化容器に同時に入れて結晶化混合物を形成する、前記β−ラクタム化合物を結晶化する方法を開示している。国際公開第９９／５５７１０号パンフレットで開示されている方法では、例えばセファドロキシルなどの結晶性β−ラクタム化合物が、硝酸溶液へのアルカリ性溶液の添加によって硝酸溶液から調製される。
【０００３】
当該技術分野で知られている結晶化法によるセファドロキシルの結晶化は、大きな粒度分布、多量の色、および低い色安定性があるセファドロキシルの凝集塊をもたらすことが分かった。本発明の目的は、小さな粒度分布、わずかな色、および高い色安定性がある結晶性セファドロキシルをもたらす、セファドロキシルの結晶化の代案の方法を提供することである。この目的は、
ａ）セファドロキシル水溶液を適切な滴定液によりｐＨ７〜９にするステップと、
ｂ）結晶形のセファドロキシルの懸濁液を得るために、ｐＨを５〜６．５の値に低下させるステップと
を含んでなる、結晶形のセファドロキシルを調製する方法によって、本発明に従って達成される。
【０００４】
ステップａ）において水溶液のｐＨを所望の値に保つことで、セファドロキシル結晶の破裂が防止され、小さな粒度分布、わずかな色、および高い色安定性があるセファドロキシル結晶がもたらされることが分かった。
【０００５】
ここでの用法では小さな粒度分布（ｐｓｄ）がある結晶形のセファドロキシルは、１０〜１５０μｍのｐｓｄと定義される。結晶形のセファドロキシルのｐｓｄは、好ましくは１０〜１００μｍ、より好ましくは２０〜８０μｍ、より好ましくは２５〜６０μｍ、最も好ましくは３０〜５０μＭである。
【０００６】
ここでの用法では、わずかな色がある結晶形のセファドロキシルとは、セファドロキシル結晶が好ましくは６未満、好ましくは５．５未満、より好ましくは５未満、より好ましくは４．５未満、より好ましくは４未満、より好ましくは３未満で、通常１を超えるＣＩＥ  ｂ値を有することを意味する。
【０００７】
高い色安定性とは、セファドロキシル結晶が、好ましくは２５℃の温度で、少なくとも１ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも２ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも３ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも４ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも５ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも６ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも７ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも８ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも９ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも１０ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも１１ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも１２ヶ月にわたり保存された場合に、１２未満、より好ましくは１１未満、より好ましくは１０未満、より好ましくは９未満、より好ましくは８未満、より好ましくは７未満、より好ましくは６未満、より好ましくは５未満で、通常１を超えるＣＩＥ  ｂ値を有することを意味する。
【０００８】
本発明の方法のステップａ）で使用されるセファドロキシル水溶液は、例えば８〜９．５、例えば８．５〜９、例えば８．６〜８．９のｐＨを有するなどのアルカリ性であってもよい。代案としては、セファドロキシル水溶液は、１〜４、例えば１．５〜３、例えば１．５〜２．５のｐＨを有するなどの酸性であってもよい。
【０００９】
本発明に従った方法のステップａ）のｐＨは、好ましくは７〜９、好ましくは７．１〜８．９、好ましくは７．２〜８．８、好ましくは７．３〜８．７、より好ましくは７．４〜８．６、より好ましくは７．５〜８．５、より好ましくは７．６〜８．４、より好ましくは７．７〜８．３、より好ましくは７．８〜８．２、より好ましくは７．９〜８．１のｐＨにされる。ステップａ）のｐＨを７〜９のｐＨにする適切な滴定液は、ギ酸、クエン酸、酢酸、硫酸または塩酸などのあらゆる適切な酸性滴定液であってもよい。適切な滴定液は好ましくはギ酸である。代案としてはｐＨを７〜９の値にする適切な滴定液は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、または例えば三級ブチルアミン、三級オクチルアミン、ベンズヒドリルアミンなどのモノアミン、または例えばＮ，Ｎ’−ジイソプロピルエチレンジアミン、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−１，２−ジアミノエタンまたはビス（２−（ジメチルアミノ）エチル）エーテルなどのジアミンのようなアミンなどのあらゆる適切なアルカリ性滴定液であってもよい。当業者は、本発明の方法のステップａ）で使用されるセファドロキシル水溶液のｐＨ次第で、所望のｐＨ値に到達するために酸性またはアルカリ性滴定液が必要かもしれないことを理解する。
【００１０】
セファドロキシル水溶液を結晶化容器に入れる際に、結晶化容器は少量の水を含んでいてもよい。結晶化はまた、少量の結晶形のセファドロキシルを含んでいて、水溶液中のセファドロキシルの種としての役割を果たしてもよい。
【００１１】
本発明に従った方法のステップｂ）のｐＨは、好ましくは５．２〜６．４、好ましくは５．４〜６．３、好ましくは５．６〜６．２、より好ましくは５．８〜６．１のｐＨ値に低下される。
【００１２】
ステップｂ）において、ｐＨは、例えばギ酸、クエン酸、酢酸、硫酸または塩酸などのあらゆる適切な滴定液を使用して低下されてもよい。好ましくはステップｂ）のｐＨを低下させるために、ギ酸が使用される。
【００１３】
本発明に従った方法のステップｂ）のｐＨを低下させるステップは、あらゆる適切な時間内で実施してもよい。好ましくはステップｂ）のｐＨを低下させるステップは、５分間から４時間、好ましくは１０分間から３時間、好ましくは１５分間から２時間、好ましくは２０分間から６０分間以内に起きてもよい。
【００１４】
本発明に従った方法のステップａ）のセファドロキシル水溶液は、セファドロキシル合成のためのあらゆる適切な化学的または酵素的アシル化法から得られてもよい。セファドロキシル合成のための化学的アシル化法については、例えば欧州特許第０２９５３３３号明細書で開示されている。好ましくはセファドロキシル水溶液は、セファドロキシル合成のための酵素的方法から得られ、７−アミノ−３−デスアセトキシセファロスポラン酸（７−ＡＤＣＡ）は、遊離または固定形態の適切なアシラーゼの存在下で、活性化形態のＤ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシン（ＨＰＧ）によりアシル化される。活性化形態のＨＰＧは、例えばメチルエステルなどのＨＰＧアミドまたはエステルであってもよい。セファドロキシルの酵素的合成法については、参照によってここに援用する、欧州特許第０８６５４４３Ｂ１号明細書、欧州特許第０７７１３５７Ｂ１号明細書、欧州特許第５３７２５５号明細書、および国際公開第９９／２０７８６号パンフレットに記載されている。
【００１５】
本発明に従った方法のステップａ）においてセファドロキシル水溶液を結晶化容器に入れるステップは、例えば入れる水溶液の総容積次第で、あらゆる適切な時間にわたり実施されてもよい。適切な時間は、５分間から４時間、例えば１０分間から３時間、例えば１５分間から２時間、例えば２０分間から１．５時間の範囲であってもよい。
【００１６】
本発明に従った方法において、ステップａ）でセファドロキシル水溶液を結晶化容器に入れるステップ、およびステップｂ）でｐＨを低下させるステップは、あらゆる適切な温度で実施されてもよい。好ましくはステップａ）の温度は、５〜２５℃、より好ましくは１０〜２０℃の温度で実施される。好ましくはステップｂ）の温度は、５〜２５℃、より好ましくは１０〜２０℃の温度で実施される。本発明に従った方法では、セファドロキシル結晶は、各ステップ中に水溶液から形成されてもよい。例えば温度およびｐＨ値次第で、調製される結晶形のセファドロキシルの量は、ステップａ）またはｂ）のいずれかにおいて、より高くてもまたはより低くてもよい。通常、多量の結晶形のセファドロキシルが、ステップｂ）において水溶液から調製される。
【００１７】
本発明に従った方法のステップｂ）で得られる結晶形のセファドロキシルの懸濁液は、例えば１０〜１２０分間、好ましくは１５〜９０分間、好ましくは２０〜６０分間、好ましくは２５〜５０分間の適切な時間にわたり撹拌されてもよい。結晶形のセファドロキシルの懸濁液を撹拌することは、結晶形のセファドロキシルの収率増大をもたらすことが分かった。結晶形のセファドロキシルは、当該技術分野で知られているあらゆる適切な方法によって、懸濁液から単離されてもよい。通常、セファドロキシル結晶は水で洗浄されて、不純物が除去される。
【００１８】
セファドロキシル結晶を単離するステップは、例えば４０〜５０℃の温度で結晶を乾燥させるステップをさらに含んでいてもよい。好ましくはβ−ラクタム結晶は乾燥前にアセトンで洗浄され、多量の水が除去される。
【００１９】
本発明はまた、本発明に従った方法によって得られる結晶形のセファドロキシルにも関する。本発明に従った方法によって得られる結晶形のセファドロキシルは、６未満、好ましくは５．５未満、より好ましくは５未満、より好ましくは４．５未満、より好ましくは４未満、より好ましくは３未満で通常１を超えるＣＩＥ  ｂ値を有することが、意外にも分かった。
【００２０】
セファドロキシル結晶が、色安定性試験において非常に安定していることもまた意外にも分かった。本発明に従った方法によって得られる結晶形のセファドロキシルは、好ましくは２５℃の温度で、少なくとも１ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも２ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも３ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも４ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも５ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも６ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも７ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも８ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも９ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも１０ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも１１ヶ月にわたり、より好ましくは少なくとも１２ヶ月にわたり保存された場合に、１２未満、より好ましくは１１未満、より好ましくは１０未満、より好ましくは９未満、より好ましくは８未満、より好ましくは７未満、より好ましくは６未満、より好ましくは５未満で、通常１を超えるＣＩＥ  ｂ値を有することが分かった。
【００２１】
さらに本発明に従った結晶形のセファドロキシルは、１５０μｍ未満、好ましくは１００μｍ未満、および好ましくは１０μｍを超える粒度分布を有する。結晶形のセファドロキシルは好ましくは１０〜１５０μｍ、より好ましくは１０〜１００μｍ、より好ましくは２０〜８０μｍ、より好ましくは２５〜６０μｍ、最も好ましくは３０〜５０μＭである。
【００２２】
本発明に従った結晶形のセファドロキシルは、好ましくはセファドロキシル一水和物である。
【００２３】
［材料と方法］
［ＣＩＥ  ｂ値の測定］
ＣＩＥは、国際照明委員会（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ  ｏｎ  Ｉｌｌｕｍｉｎａｔｉｏｎ）のフランス語名称「Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｄｅ  Ｉ’Ｅｃｌａｉｒａｇｅ」の略語である。ＣＩＥ  ｂは、当業者に知られている結晶の色を測定する尺度である。ＣＩＥ比色定量システムの原理の概要は、オーノ（Ｏｈｎｏ），Ｙ．、ＩＳ＆Ｔ  ＮＩＯ１６会議のための論文（Ｐａｐｅｒ  ｆｏｒ  ＩＳ＆Ｔ  ＮＩＯ１６  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ）、バンクーバー、カナダ、２０００年１０月１６〜２０日、１〜５頁にある。
【００２４】
ＣＩＥ  ｂ値は、米国４９５１２ミシガン州グランド・ラピッズ４４番街ＳＥ４３００番地のエックスライト社（Ｘ−Ｒｉｔｅ  Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ（４３００  ４４ｔｈ  Ｓｔ．ＳＥ，Ｇｒａｎｄ  Ｒａｐｉｄｓ，ＭＩ  ４９５１２  ＵＳＡ））（ｗｗｗ．ｘｒｉｔｅ．ｃｏｍ）からのエックスライト（Ｘ−Ｒｉｔｅ）（登録商標）９１８装置を使用して判定された。セファドロキシル結晶の２ｇのサンプルを装置の適切な場所に置いて、ＣＩＥ  ｂ値を読み取った。２回の別々の読み取りの平均を計算した。
【００２５】
［実施例］
［セファドロキシル溶液の調製］
セファドロキシルの合成のための酵素的方法によって、セファドロキシルを得た。国際公開第９９／２０７８６号パンフレットに記載されているように、７−アミノ−３−デスアセトキシセファロスポラン酸（７−ＡＤＣＡ）を固定化Ｐｅｎ  Ｇアシラーゼの存在下で、Ｄ−ｐ−ヒドロキシフェニルグリシンメチルエステルによってアシル化した。
【００２６】
縮合ステップの終わりに、母液および水洗液の５００ｇのサンプルを酵素的反応器から採取した。サンプルは１６．３４％（ｗ／ｗ）の溶解セファドロキシルを含有した。ｐＨは８．７〜８．８であった。
【００２７】
［参考実験Ａ：一段階結晶化］
上述のように調製されたセファドロキシル溶液の５００ｇのサンプルを結晶化反応器に２５〜７０分間入れた。結晶化反応器は、撹拌ができるように少量の水を含有した。７〜１０℃の温度で、ギ酸によってｐＨを７．１０〜７．３０の値に保った。セファドロキシル懸濁液を３０分間撹拌した。セファドロキシル懸濁液を遠心分離して乾燥させた。ｔ＝０におけるセファドロキシル凝集塊の色を後述するように測定した。ＣＩＥ  ｂ値は６．２であった。
【００２８】
［実施例１］
［セファドロキシルの二段階結晶化］
［ステップａ）］
５ｇのセファドロキシル一水和物（種として使用）および６０ｍｌの新鮮な水（ｐＨ＝５．５０〜５．７０）を結晶化容器に装填し、温度を１５℃に調節した。上述のように調製されたセファドロキシル溶液の５００ｇのサンプルを結晶化容器に４５分間入れた。６．９ｍｌのギ酸（８５％ｖ／ｖ）での滴定により、ｐＨを７．９に保った。
【００２９】
［ステップｂ）］
ｐＨが３０分以内で６．０に低下するように、２．５ｍｌのギ酸をステップ（ａ）で得られた懸濁液に添加した。このようにして得られたセファドロキシル懸濁液を３０分間撹拌した。懸濁液を濾過してケークを５０ｍｌの水で洗浄し、３４ｍｌのアセトンがそれに続いた。乾燥後、７６．４ｇのセファドロキシルを得た（収率８４．０ｗ／ｗ％）。
【００３０】
セファドロキシル結晶のＣＩＥ  ｂ値は４．６８であった。
【００３１】
［実施例２］
［セファドロキシルの二段階結晶化］
［ステップａ）］
上述のように調製されたセファドロキシル溶液の５００ｇサンプルの３３ｍｌ、および２７ｍｌの新鮮な水を結晶化反応器に入れた。温度を１５℃に調節した。引き続いてセファドロキシル溶液の５００ｇサンプルの残存部分を結晶化反応器に３５分間入れた。４．５ｍｌのギ酸（８５％ｖ／ｖ）での滴定により、ｐＨを７．９に保った。
【００３２】
［ステップｂ）］
ｐＨが３０分以内で６．０に低下するように、８．４ｍｌのギ酸（８５％ｖ／ｖ）をステップ（ａ）で得られたセファドロキシル溶液に添加した。得られたセファドロキシル懸濁液を３０分間撹拌した。懸濁液を濾過してケークを５０ｍｌの水で洗浄し、３４ｍｌのアセトンがそれに続いた。乾燥後、７２．８ｇのセファドロキシルを得た（収率８４．７％（ｗ／ｗ））。セファドロキシル結晶のＣＩＥ  ｂ値は４．５２であった。
【００３３】
［実施例３］
［色安定性試験］
［４．１  ストレス条件：４０℃での保存］
参考実験Ａの一段階結晶化法、および本発明に従った二段階結晶化法によって得られたセファドロキシル（ＣＤＸ）結晶を４０℃の温度で保存した。異なるセファドロキシル結晶のＣＩＥ  ｂ値を表１に示す異なる時間間隔で判定した。ＣＤＸ（１）〜（３）は、３種の異なる結晶化法から得られた。
【００３４】
【表１】
2009537589.tif 000002
【００３５】
［４．２  ２５℃での保存］
参考実験Ａの一段階結晶化法、および本発明に従った二段階結晶化法によって得られたセファドロキシル結晶を２５℃の温度で保存した。ＣＩＥ  ｂ値を表２に示す異なる時間間隔で判定した。
【００３６】
【表２】
2009537589.tif 000003
【００３７】
表１および２の結果は、セファドロキシル結晶を２５℃および４０℃で保存した場合、本発明に従った二段階結晶化法で得られたセファドロキシル結晶のＣＩＥ  ｂ値が、一段階結晶化法で得られたセファドロキシル結晶のＣＩＥ  ｂ値よりも低いままであったことを示す。したがって本発明に従った方法で調製されたセファドロキシル結晶の色安定性は、参考実験Ａの一段階結晶化法で調製されたものよりも高かった。
【国際調査報告】
2009537589.tif 000004
2009537589.tif 000005
2009537589.tif 000006