(57)【要約】  本開示は、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる量の少なくとも１つのフィトステロールを、それを必要とする被験体に投与することを含む、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる方法に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる量の少なくとも１つのフィトステロールを、それを必要とする被験体に投与することを含む、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる方法。
【請求項２】
前記少なくとも１つのフィトステロールが、経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記少なくとも１つのフィトステロールが、組成物の成分として投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記組成物が、薬剤組成物及び摂取可能物から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記摂取可能物が、食物及び飲料から選択される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記摂取可能物が、飲料である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記飲料が、柑橘果汁である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記少なくとも１つのフィトステロールが、１日約２グラムという全日用量を達成するように投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記用量が、１回の用量又は分割した用量から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記少なくとも１つのフィトステロールの前記投与を繰り返すことをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記少なくとも１つのフィトステロールが、植物ステロール及び植物スタノールから選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記少なくとも１つのフィトステロールが、シトステロール、カンペステロール、スピノステロール、タンポポ属ステロール、ブラシカステロール、デモステロール、カリノステロール、ポリフェラステロール、クリノステロール、エルゴステロール、及びその混合物から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記少なくとも１つのフィトステロールが、遊離植物ステロール及び遊離植物スタノールから選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記少なくとも１つのフィトステロールが、植物油ステロールに由来する、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記少なくとも１つのフィトステロールが、ベータ−シトステロール、カンペステロール、及びスチグマステロールを含む遊離植物ステロールの混合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記被験体が、人間である、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる量の少なくとも１つのフィトステロールを投与して、血清コレステロールのレベルを低下させることをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
Ｃ反応性タンパク質を低減させる量の少なくとも１つのフィトステロールを含む組成物を、それを必要とする被験体に投与することを含む、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる方法。
【請求項１９】
前記組成物が、薬剤組成物及び摂取可能物から選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記組成物が、担体、充填剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、溶解遅延剤、吸収促進剤、湿潤剤、吸収剤、潤滑剤、安定剤、着色剤、緩衝薬、分散剤、防腐剤、有機酸、水溶性及び不溶性ポリマー、腸溶剤及び非腸溶剤、コーティング、栄養素、香味料、着色剤、炭酸成分、防腐剤、ガム、乳化剤、及びその混合物から選択される任意選択の成分をさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記組成物が、前記少なくとも１つのフィトステロール以外の少なくとも１つの活性剤をさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる量の少なくとも１つのフィトステロールを、それを必要とする被験体に投与することを含む、血管炎症を治療又は予防する方法。
【請求項２３】
Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる量の少なくとも１つのフィトステロールを含む飲料を、それを必要とする被験体に投与することを含む、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる方法。
【請求項２４】
Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる量の少なくとも１つのフィトステロールを含む単独療法を、それを必要とする被験体に施すことを含む、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる方法。
【請求項２５】
Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる量の少なくとも１つのフィトステロールの実質的に安定した分散、及び水性材料を含む飲料を、それを必要とする被験体に投与することを含む、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる方法であって、
前記少なくとも１つのフィトステロールが、植物ステロール及び植物スタノールから選択され、前記実質的に安定した分散の粉末状の味を回避するために、前記少なくとも１つのフィトステロールの粒子サイズが０．１ミクロンから約３０ミクロンであり、前記少なくとも１つのフィトステロール粒子の大部分が、約０．２ミクロンから約１０ミクロンの範囲内にあり、鐘形曲線の分布に従うものである方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００３年６月１１日出願の米国特許出願第１０／４５８，６９２号及び２００３年１０月２４日出願の第１０／６９１、５８１号の一部継続出願であり、それに対する優先権を主張する２００５年１２月２３日出願の米国特許出願第１１／３１５，２０６号に対する優先権を主張する。上記出願の内容は参照により本明細書に組み込むものとする。
【０００２】
本開示は、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低減させるために、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低減させる少なくとも１つのフィトステロールの量を、それを必要とする被験体に投与することを含む方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
炎症は、アテローム性動脈硬化症（心臓血管疾患）で重大な役割を果たし、アテローム性動脈硬化症の発生段階、すなわち急性冠症候群の脂肪線条の全体に炎症が存在することを示唆する証拠がある。Ｒ．Ｒｏｓｓの「Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：Ａｎ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ」、３４０  Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１１５−２６（１９９）；Ｐ．Ｌｉｂｂｙの「Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ」、４２０  Ｎａｔｕｒｅ  ８６８−７４（２００２）を参照されたい。炎症を示す信号が広く行き渡ると、それは予防、進行、さらには監視の目的で重要な手がかりを提供することができる。多数の研究によると、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）は、血中に存在して、心臓血管疾患の評価に役立てることができる炎症マーカである。
【０００４】
ＣＲＰは、リウマチ病、すなわちリウマチ様疾患の活動の監視に長らく使用されており、最近、心臓血管疾患の独立したマーカであることが判明した。例えば、Ｉｓｈｗａｒｌａｌ  Ｊｉａｌ他の「Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ：Ｒｉｓｋ  Ｍａｒｋｅｒ  ｏｒ  Ｍｅｄｉａｔｏｒ  ｉｎ  Ａｔｈｅｒｏｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ」、４４  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ６−１１（２００４）を参照されたい。実際、アメリカ心臓協会及び疾病管理予防センタが、フラミンガム危険指数が１０％と２０％の間の心臓血管疾患の危険マーカとしてＣＲＰを使用するよう勧告する声明を出した。その勧告に基づき、１ｍｇ／Ｌ未満のＣＲＰレベルが低リスクと見なされ、１から３ｍｇ／Ｌのレベルは平均的リスクを表し、３ｍｇ／Ｌを超えるレベルは高リスクと見なされる。
【０００５】
ＣＲＰは、タンパク質のペントラキシンファミリーのメンバーであり、ペントラキシンは、ペンタメリック複合体を形成することが周知であり、多数の配位子を結合できることを特徴とする。Ａ．Ｋ．Ｓｈｒｉｖｅの「Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｎｄ  ＳＡＰ−ｌｉｋｅ  Ｐｅｎｔｒａｘｉｎ  ａｒｅ  Ｂｏｔｈ  Ｐｒｅｓｅｎｔ  ｉｎ  Ｌｉｍｕｌｕｓ  Ｐｏｌｙｐｈｅｍｕｓ  Ｈａｅｍｏｌｙｍｐａ：Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  Ｌｉｍｕｌｕｓ  ＳＡＰ」、２９０  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ．９９７−１００８（１９９９）。例えば、ＣＲＰの環状ペンタメリック構造は、中心穴の周囲に配置された５つの非共有結合プロトマーを含み、分子量は約１１８０００Ｄａである。Ｄ．Ｔｈｏｍｐｓｏｎ他の「Ｔｈｅ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｉｔｓ  Ｃｏｍｐｌｅｘ  ｗｉｔｈ  Ｐｈｏｓｐｈｏｃｈｏｌｉｎｅ」、７  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  １６９−７７（１９９９）。ＣＲＰは、非グリコシル化され、染色体１にマッピングされる。Ｓｅｎｔｈｉｌ  Ｋｕｍａｒ他の「Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｏｎ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌｓ：Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ａ  Ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ，Ｐｒｏａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ  Ｒｏｌｅ」、１４  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ  ＆  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ３３，３４（２００５）。
【０００６】
歴史的研究によると、ＣＲＰの生成は肝臓に属して、インタロイキン（ＩＬ）−６によって作動し、幹細胞中でＩＬ−１の相乗効果がある。Ｉ．Ｋｕｓｈｎｅｒ他の「Ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｃｕｔｅ  Ｐｈａｓｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ：Ｃ−  Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｙｎｔｅｈｓｉｓ  ｂｙ  Ｉｓｏｌａｔｅｄ  Ｐｅｒｆｕｓｅｄ  Ｒａｂｂｉｔ  Ｌｉｖｅｒｓ」、９６  Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｅｄ．１０３７−１０４５（１９８０）；Ｉ．Ｋｕｓｈｎｅｒ他の「Ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｃｕｔｅ  Ｐｈａｓｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ：Ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ  Ｄｕｒｉｎｇ  Ａｃｕｔｅ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｒａｂｂｉｔ」、１４８  Ｊ．Ｅｘ．Ｍｅｄ．４６６−７７（１９７８）。しかし、最近の研究に基づき、ＣＲＰ生成は、アテローム性動脈硬化性障害、肺胞マクロファージ、神経細胞、管状上皮細胞、及び人間の大動脈内皮細胞などの他の組織にも見ることができる。Ｋ．Ｙａｓｏｊｉｍａ他の「Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ  ｉｎ  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ  Ｐｌａｑｕｅｓ」、１５８  Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１０３９−５１（１９８９）；Ｓ．Ｋｏｂａｙａｓｈｉの「Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  Ｓｔｒｅｓｓ  ａｎｄ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｉｎ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ｐｌａｑｕｅ  Ｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ：Ｉｍｐｏｒｔａｎｔ  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ」、２３  Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ  Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．１３９８−１４０４（２００３）；Ｇ．Ｄ．Ｒｅｙｎｏｌｄｓ及びＲ．Ｐ．Ｖａｎｃｅの「Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｎｏｒｍａｌ  ａｎｄ  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ  Ｈｕｍａｎ  Ａｏｒｔａｓ」、１１１  Ａｒｃｈ．Ｐａｔｈｏｌ．Ｌａｂ．Ｍｅｄ．２６５−６９（１９８７）；Ｑ．Ｄｏｎｇ及びＪ．Ｒ．Ｗｒｉｇｈｔの「Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｂｙ  Ａｌｖｅｏｌａｒ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ」、１５６  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４８１５−２０（１９９６）；Ｋ．Ｙａｓｏｊｉｍａ他の「Ｈｕｍａｎ  Ｎｅｕｒｏｎｓ  Ｇｅｎｅｒａｔｅ  Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ａｍｙｌｏｉｄ  Ｐ：Ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ」、８８７  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．８０−８９（２０００）；Ｗ．Ｊ．Ｊａｂｓ他の「Ｔｈｅ  Ｋｉｄｎｅｙ  ａｓ  ａ  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｓｉｔｅ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｃ−  Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｉｎ  Ｖｉｖｏ」、３３  Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２−６１；及びＳｅｎｔｈｉｌ  Ｋｕｍａｒ  Ｖｅｎｕｇｏｐａｌ他の「Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ  Ｍｅｄｉｕｍ  Ｉｎｄｕｃｅｓ  ｔｈｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ��−  Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ａｏｒｔｉｃ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｃｅｌｌｓ」、１６６  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊ．Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  １２６５−７１（２００５）。データは、ＣＲＰの生成が脂質過酸化、感染、及びサイトメガロウィルス、単純疱疹ウィルス、クラミジア肺炎、及びピロリ菌などのウィルス作用因子によってトリガされることがあることも示唆する。
【０００７】
ＣＲＰの生成がトリガされるので、ＣＲＰが単球／マクロファージ、内皮細胞、及び平滑筋細胞に作用することを示唆する証拠がある。これらの細胞では、ＣＲＰが多種多様な炎症誘発性分子の分泌を刺激する。これらの炎症誘発性分子は、アテローム性動脈硬化症の様々な段階で存在することが示されている。Ｉｓｔｈｗａｒｌａｌ  Ｊｉａｌａｌ他の「Ｃ−Ｒｅａｃｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ：Ｒｉｓｋ  Ｍａｒｋｅｒ  ｏｒ  Ｍｅｄｉａｔｏｒ  ｉｎ  Ａｔｈｅｒｏｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ？」、４４  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ６−１１（２００４）。実際、データは、ＣＲＰが心臓血管疾患の危険マーカであるばかりでなく、アテローム発生でも役割を果たし得ることを示唆している。同上。データによると、内皮血管反応は、ＣＲＰレベルと逆相関を示す。Ｓ．Ｆｉｃｈｔｉｓｃｈｅｒｅｒ他の「Ｅｌｅｖａｔｅｄ  Ｃ−Ｒｅａｃｒｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｌｅｖｅｌｓ  ａｎｄ  Ｉｍｐａｉｒｅｄ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｖａｓｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ａｒｔｅｒｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ」、１０２  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １０００−１００６（２０００）；Ｓ．Ｊ．Ｃｌｅｌａｎｄ他の「Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｓ  ａ  Ｐｏｓｓｉｂｌｅ  Ｌｉｎｋ  Ｂｅｔｗｅｅｎ  Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｌｅｖｅｌｓ  ａｎｄ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ」、９８  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  （Ｌｏｎｄｏｎ）５３１−３５（２０００）；Ｆ．Ｔｏｍａｉ他の「Ｕｎｓｔａｂｌｅ  Ａｎｇｉｎａ  ａｎｄ  Ｅｌｅｖａｔｅｄ  Ｃ−  Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｌｅｖｅｌｓ  Ｐｒｅｄｉｃｔ  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｖａｓｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｕｌｐｒｉｔ  Ｌｅｓｉｏｎ」、１０４  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １４７１−７６（２００１）。
【０００８】
現時点で、肥満個体の体重減少などの治療、及び特定の薬物、すなわち３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル補酵素Ａ還元酵素阻害剤（ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤）、例えばスタチン、ペルオキシソーム増殖活性化受容体αアゴニスト（すなわち繊維質）、ペルオキシソーム増殖活性化受容体αアゴニスト（すなわちグリタゾン）、アスピリン、及び高用量のＲＲＲ−α−トコフェロールを使用して、高感度（ｈｓ）−ＣＲＰのレベルを調整することができる。しかし、これらの治療はそれぞれ、潜在的な限界及び欠点を有する。
【０００９】
例えば、スタチン治療中の患者は、どのタイプの薬剤治療とも同様に、必然的に個々の薬物の副作用及び／又は有害事象の危険、すなわち安全性の懸念があり、例えば高齢者など、一部の人には他の人よりも問題を引き起こす可能性が高い。また、スタチンは長期にわたって摂取することが多く、長期の潜在的効果はまだ明らかではない。スタチンの場合は、横紋筋融解症など、筋肉の問題の発症に関する懸念が増大する。横紋筋融解症は、腎臓にとって有害な筋肉組織の深刻な破壊を招き、最終的に腎不全及び死亡につながることがある。最近、高用量に関連する横紋筋融解症の発生率上昇に基づいて、さらにゲムフィブロジルとの組合せ用量から、スタチンセリバスタチンが市場から除去された。スタチン治療の他の一般的副作用には、認知の問題、胃腸及び神経への作用、及び免疫作用が含まれる。少なくともこれらの懸念に基づき、潜在的な副作用及び安全性の考慮事項が、少なくともいくつかの場合で治療の利点を上回ることがある。
【００１０】
これらの治療の大部分は、相当の進歩が理解されているが、ＣＲＰのレベルを低減させ、それと同時に様々な従来の治療に伴う少なくとも１つの副作用を軽減することが依然として望ましい。アテローム性動脈硬化症を予防及び／又は軽減する方法を研究する間に、本発明の発明者は、植物ステロール及び／又はスタノール、すなわちフィトステロールが、Ｃ反応性タンパク質の減少に有用であることを発見した。
【００１１】
植物ステロールは、自然では植物油中に発生する。植物スタノールも自然に発生するが、対応する植物ステロールの水素添加化合物である。１９５０年代には既に、科学文献は、植物ステロールが哺乳類のアテローム性動脈硬化事象の軽減、すなわち人の血清コレステロールの減少、及びアテローム性動脈硬化症心臓病の青少年の血清コレステロールの減少に多少の効果があることを報告している。Ｏ．Ｊ．Ｐｏｌｌａｋの「Ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ  ａｎｄ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｒａｂｂｉｔ」、７  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ６９６−７０１（１０５３）；Ｆａｒｑｕｈａｒ他の「Ｔｈｅ  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｂｅｔａ  Ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｓｅｒｕｍ  Ｌｉｐｉｄｓ  ｏｆ  Ｙｏｕｎｇ  Ｍｅｎ  ｗｉｔｈ  Ａｒｔｈｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ」、１４  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ７７−８２（１９５６）。植物ステロール及びスタノールは、小腸でのコレステロール吸収を防止することによりコレステロールを低下させる効果を呈することが周知である。例えば、ＦＨ  Ｍａｔｔｓｏｎ，ＳＭ  Ｇｒｕｎｄｙ及びＪＥ  Ｃｒｏｕｓｅの「Ｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｐｌａｎｔ  ｓｔｅｒｏｌｓ  ｏｎ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍａｎ」、３５  Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔ．６９７−７００（１９８２）を参照されたい。植物ステロール及びスタノールが実際に、人間の血清コレステロールのレベルを低下させるが、水溶性が低いので、これらの植物ステロール又はスタノールを含み、人間及び獣医学的摂取に適切な製品を調製することは困難であったことを立証する他の科学文献もある。
【００１２】
通常、植物ステロール及びスタノールは、その疎水性のために、マーガリン及び他のいわゆるスプレッド又は同様の食品に使用されている。ともにＥｌｉ  Ｌｉｌｌｙに譲渡された米国特許第３，８８１，００５号及び第４，１９５，０８４号は、可溶性を向上させるための植物ステロールの粉砕又は微粉砕について説明している。Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙは、かつて、トール油、後には大豆油由来で、血清コレステロールを約９％低下させるステロール製品をＣｙｔｅｌｌｉｎという商標で販売していた。Ｋｕｃｃｏｄｋａｒ他の「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｐｌａｎｔ  Ｓｔｅｒｏｌｓ  ｏｎ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  Ｍａｎ」、２３  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ２３９−４８（１９７６）。しかし、この製品が広く受け入れられることはなかった。
【００１３】
Ｖｕｌｆｓｏｎ他の国際特許出願第ＷＯ００／４１４９１号は、オレオマーガリン製品、飲み物、スープ、ソース、ディップ、サラダ用ドレッシング、マヨネーズ、菓子製品、パン、ケーキ、ビスケット、朝食用シリアル、及びヨーグルトタイプの製品などの食品及び飲料のサプリメントとして、植物ステロール及びリコピンなどの疎水性化合物を開示している。Ｖｕｌｓｏｎ他は、植物ステロール又はリコピンと製品との組合せで、水酸基及びカルボキシ基の両方を有する食品が、ステロール又はリコピンの表面と相互作用することを理論化した。
【００１４】
米国特許第６，５７２，８７６号は、また、植物ステロール、大豆タンパク質、及びイソフラボン及びその組合せを含み、ＬＤＬコレステロール及び総コレステロール血中濃度を低下させ、アテローム性動脈硬化の発現を予防するか、最小限に抑えるのに有用である組成物に関する。植物ステロール及び／又はスタノールは、血清コレステロールのレベルに影響することは知られていたが、植物ステロール及び／又はスタノールが、ＣＲＰのレベルに効果的であることは知られていなかった。
【００１５】
実際、Ｓｔｅｖｅｎ  Ｅ．Ｎｉｓｓｅｎ他の「Ｓｔａｔｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ，ＬＤＬ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ａｒｔｅｒｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ」、３５２  Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２９−３８（２００５）では、データが、ＣＲＰのレベル及びＬＤＬコレステロールのレベルの変化が、スタチン治療でのプラーク退縮の独立した予測量であることを示唆している。同様に、Ｐａｕｌ  Ｍ．Ｒｉｄｋｅｒ他の「Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｌｅｖｅｌｓ  ａｎｄ  Ｏｕｔｃｏｍｅｓ  Ａｆｔｅｒ  Ｓｔａｔｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ」、３５２  Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２０，２６（２００５）では、「ＣＲＰレベルは、全てのＬＤＬコレステロールのレベルで、及びフラミンガム危険カテゴリの全範囲で、最初の冠状動脈事象の危険を単独で予測し、ＣＲＰレベルは、活性冠症候群の患者の予後値を有する」という主張をデータが裏付けている。したがって、ＬＤＬコレステロールとＣＲＰとの関連は失われ、ＣＲＰは、心臓血管疾患の独立したマーカと見なされる。
【非特許文献１】Ｏ．Ｊ．Ｐｏｌｌａｋの「Ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ  ａｎｄ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｒａｂｂｉｔ」、７  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ６９６−７０１（１０５３）
【非特許文献２】Ｆａｒｑｕｈａｒ他の「Ｔｈｅ  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｂｅｔａ  Ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｓｅｒｕｍ  Ｌｉｐｉｄｓ  ｏｆ  Ｙｏｕｎｇ  Ｍｅｎ  ｗｉｔｈ  Ａｒｔｈｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ」、１４  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ７７−８２（１９５６）
【非特許文献３】ＦＨ  Ｍａｔｔｓｏｎ，ＳＭ  Ｇｒｕｎｄｙ及びＪＥ  Ｃｒｏｕｓｅの「Ｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｐｌａｎｔ  ｓｔｅｒｏｌｓ  ｏｎ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍａｎ」、３５  Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔ．６９７−７００（１９８２）
【非特許文献４】Ｋｕｃｃｏｄｋａｒ他の「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｐｌａｎｔ  Ｓｔｅｒｏｌｓ  ｏｎ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  Ｍａｎ」、２３  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ２３９−４８（１９７６）
【非特許文献５】Ｓｔｅｖｅｎ  Ｅ．Ｎｉｓｓｅｎ他の「Ｓｔａｔｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ，ＬＤＬ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ａｒｔｅｒｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ」、３５２  Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２９−３８（２００５）
【非特許文献６】Ｐａｕｌ  Ｍ．Ｒｉｄｋｅｒ他の「Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｌｅｖｅｌｓ  ａｎｄ  Ｏｕｔｃｏｍｅｓ  Ａｆｔｅｒ  Ｓｔａｔｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ」、３５２  Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２０，２６（２００５）
【特許文献１】米国特許第３，８８１，００５号
【特許文献２】第４，１９５，０８４号
【特許文献３】国際特許出願第ＷＯ００／４１４９１号
【特許文献４】米国特許第６，５７２，８７６号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
したがって、本開示は、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させるために、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる少なくとも１つのフィトステロールの量を、それを必要とする被験体に投与することを含む方法を提案する。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
したがって、本開示は、特に、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる少なくとも１つのフィトステロールの量を、それを必要とする被験体に投与することを含む、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる方法に関する。
【００１８】
他の実施形態では、本開示は、血管炎症を治療又は予防するために、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる少なくとも１つのフィトステロールの量を、それを必要とする被験体に投与することを含む方法に関する。
【００１９】
本開示の別の実施形態は、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させるために、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる量の少なくとも１つのフィトステロールの実質的に安定した分散、及び水性材料を含む飲料を、それを必要とする被験体に投与することを含む方法に関し、少なくとも１つのフィトステロールは、植物ステロール及び植物スタノールから選択され、実質的に安定した分散の粉末状の味を回避するために、少なくとも１つのフィトステロールの粒子サイズは、０．１ミクロンから約３０ミクロンであり、少なくとも１つのフィトステロールの大部分は、約０．２ミクロンから約１０ミクロンの範囲内で、鐘形曲線の分布に従う。
【００２０】
本開示の追加の利点が、一部は以下の説明で述べられ、一部は説明から明らかになるか、本開示の実践によって学習することができる。本開示の利点は、特許請求の範囲で特に指摘された要素及び組合せによって実現され、達成される。
【００２１】
以上の一般的説明及び以下の詳細な説明は両方とも、例示的及び説明的にすぎず、特許請求の範囲による本開示を制限するものではないことを理解されたい。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
したがって、本開示は、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させるために、Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる少なくとも１つのフィトステロールの量を、それを必要とする被験体に投与することを含む方法に関する。少なくとも１つのフィトステロールを投与するために、少なくとも１つのフィトステロールは、組成物の一成分であってよい。例えば、組成物は、薬剤及び摂取可能な食品、例えば固体又は半固体の食品、ニュートラシューティカル、すなわち機能性食品、又は液体製品、例えば、飲料から選択される形態であってもよい。
【００２３】
少なくとも１つの実施形態では、組成物は、毎日摂取できる栄養物質、すなわち摂取可能な製品及び／又はニュートラシューティカル組成物である。例えば、栄養飲料、ソフトドリンク、果物の飲料及び果汁、電解質含有飲料、プリン、焼き物、焼き物以外、サラダ用ドレッシング、シリアル製品、香辛料、菓子、スナック食品、ディップ及びスプレッド、アイスクリーム、凍菓及びノベルティ商品、ヨーグルトなどの乳製品、マーガリン様のスプレッド、及び調味料に言及しておく。さらに、本開示では、無脂肪、低脂肪及び低カロリー版のこれらの食品及び飲料も想定される。
【００２４】
他の例として、本開示の少なくとも１つのフィトステロールは、錠剤、注射薬、又は少なくとも１つのフィトステロールを投与するために当業者に周知の任意の他の媒介物などの薬剤組成物に取り入れることができる。薬剤組成物は、組成物が即効性、変性、及び緩効性プロファイルから選択される放出プロファイルを呈するように、当業者に周知の方法で配合することもできる。
【００２５】
また、投与は、被験体による少なくとも１つのフィトステロールの摂取を容易にすると考えられる当業者に周知の任意の他の媒介物の形態をとることができる。
【００２６】
本開示の方法により治療できる適切な被験体の例としては、人間、犬、又は他の動物などの哺乳類が挙げられる。
【００２７】
入手可能なデータは、植物ステロール及びスタノールがコレステロールを阻害するメカニズムを識別しているが、植物ステロール及びスタノールがＣＲＰレベルを調整するメカニズムは理解されていない。いかなる特定の理論にも束縛されないよう願い、本発明の発明者は、フィトステロールの通常の摂取レベルは、ＣＲＰのレベルにはほとんど影響しないが、例えば通常のレベルを超える、及び／又は特定の形態のフィトステロールを摂取すると、正常な身体機能を通してＣＲＰのレベルに影響し得ると考える。
【００２８】
組成物の調製
本明細書では、「フィトステロール」という用語は、遊離及び例えばシトステロールの脂肪酸エステルでエステル化した形態の植物ステロール及び植物スタノールを指す。本明細書で開示される少なくとも１つのフィトステロールは、遊離形で使用することができる。植物ステロールは、果実、野菜、堅果、種子、シリアル、豆果及び植物油などのいくつかの食物源に少量存在する天然産出の化合物である。科学文献は少なくとも４４の植物ステロールについて述べ、当業者は、任意の植物ステロールを、本開示の実践時に使用可能なものから選択することができる。本開示は、また、当技術分野で使用される植物ステロールのいくつかを使用することを含む。例えば、シトステロール、カンペステロール、スチグマステロール、スピノステロール、タンポポ属ステロール、ブラシカステロール、デモステロール、カリノステロール、ポリフェラステロール、クリオナステロール、及びエルゴステロールを含む植物ステロールに言及しておく。本開示は、また、２つの成分、３つの成分、及び４つの成分の混合物などの植物ステロールの混合物を使用する。
【００２９】
上記及び他の植物ステロールの源は、例えば、米ぬか、コーンブラン、トウモロコシの胚芽、小麦胚芽油、コーン油、ベニバナ油、オート麦油、オリーブオイル、綿実油、大豆油、ピーナツ油、紅茶、緑茶、里芋、ケール、ブロッコリ、ゴマ種子、シアバターノキ油、ブドウの種油、菜種油、亜麻仁油、キャノーラ油、トール油、及び木材パルプから得た他の油であってもよい。以下の表Ｉは、Ｒｉｃｈａｒｄ  Ｅ．Ｏｓｔｌｕｎｄ他の「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｔｒａｃｅ  Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ  ｏｆ  Ｄｉｅｔａｒｙ  Ｆａｔ  ｏｎ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ：Ｐｈｙｔｏｓｔｅｒｏｌｓ，Ｏｘｙｓｔｅｒｏｌｓ，ａｎｄ  Ｓｑｕａｌｅｎｅ」、６０  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ３４９−５９（２００２）という論文で提供されているいくつかの一般的な植物脂肪のフィトステロール含量を要約している。   
【表１】
2009521495.tif 000002
【００３０】
少なくとも１つの実施形態では、本開示の少なくとも１つのフィトステロールの源は植物油である。
【００３１】
植物ステロールに水素添加して、植物スタノールを生成することもできる。したがって、本開示の植物スタノールは、シトステロールなどの様々な植物ステロールの水素添加生成物と言うことができるが、植物ステロールに水素添加することなく、当技術分野で使用されている様々な植物から天然に得ることもできる。それ故、植物スタノールに適用され、本明細書で使用する「植物ステロールの水素添加生成物」という用語は、合成植物スタノールばかりでなく天然源から得られたものも含む。例えば、シトスタノール、カンペスタノール、スチグマスタノール、スピノスタノール、タンポポ属スタノール、ブラシカスタノール、デスモスタノール、カリノスタノール、ポリフェラスタノール、クリオナスタノール、及びエルゴスタノールを含む植物スタノールに言及しておく。当業者は、入手可能なものから任意の植物スタノールを選択することもできる。また、本開示は、２つの成分、３つの成分、及び４つの成分の混合物などの植物スタノールの混合物、さらに２つの成分、３つの成分、及び４つの成分の混合物などの植物ステロールと植物スタノールの混合物を使用することもできる。
【００３２】
植物ステロール及び植物スタノールは両方とも、α及びβ異性体などの当技術分野で使用されている様々な位置の異性体及び立体異性体の形態、さらに小さい（炭素原子１個から約４個の）側鎖を含む植物ステロール及び植物スタノールを含む。例えば、異性体β−シトステロール及びβ−シトスタノールはそれぞれ、少なくとも１つのフィトステロールとして使用することができる。１つの実施形態では、この少なくとも１つのフィトステロールは、植物油からのβ−シトステロール、コンペステロール、及びスチグマステロールを含む遊離植物ステロールの混合物である。
【００３３】
フィトステロールの投与が魅力的であるのは、フィトステロールが天然産出の化合物であり、身体が基本的にこれを吸収せず、その結果、正常な排出を通して排除されるからである。したがって、例えば血管炎症を伴うようなＣ反応性タンパク質のレベルを、少なくとも１つのフィトステロールでの食事経路で予防又は軽減することが望ましい。
【００３４】
少なくとも１つの実施形態では、本開示の組成物は飲料である。しかし、本開示は、飲料の投与のみに限定されず、以上で提供されたように、本開示による組成物は、薬剤、機能性食品及び／又は固体又は半固体の摂取可能な食品のように他の形態であってもよい。
【００３５】
したがって、組成物が飲料である場合、これは、植物ステロール及び植物スタノールから選択される少なくとも１つのフィトステロールのＣ反応性タンパク質のレベルを低下させる量を含む。飲料で使用される実質的に安定した分散を生成するプロセスは、例えば、内容を参照により本明細書に組み込むものとする米国特許出願公開第２００３／０２３２１１８号及び第２００４／０１４２０８７号に記載されているように、少なくとも１つのフィトステロール及び水性材料、例えば水性飲料濃縮物、例えば濃縮果汁を含む。プロセスは、第１の分散を形成するために、少なくとも１つのフィトステロールを水性材料と混合することを含む。次のステップは、加熱した混合物を形成するために、第１の分散を加熱することを含み、その後に粒子の第２の分散を得るために、加熱した混合物を均質化する。この場合、第１の分散及び第２の分散中にある少なくとも１つのフィトステロールの粒子サイズは、約０．１ミクロンから約３０ミクロンである。
【００３６】
例えば、少なくとも１つのフィトステロールは、伝導性粒子の第１の分散を形成するために、少なくとも１つのフィトステロールを水性飲料濃縮物と約−１０℃から約１００℃（約１４°Ｆから約２１２°Ｆ）、又は約０℃から約８２℃（約３２°Ｆから約１８０°Ｆ）、又は約１８℃から約６４℃（約６４°Ｆから約１４８°Ｆ）、又は約２４℃から約５７℃（約７５°Ｆから約１３５°Ｆ）の温度で約０．１分から約１２０分、又は約５分から約６０分、又は約１５分から約３０分混合し、第１の分散を形成することにより、飲料に取り入れられる。
【００３７】
少なくとも１つのフィトステロールの粒子と飲料濃縮物などの水性材料の第１の分散を作成するために使用される装置は、高剪断混合機（Ａｒｄｅ−Ｂａｒｉｎｃｏ  Ｍｏｄｅｌ  ＃ＣＪ−４など）又は任意の大容量（例えば、約５０から約３００ガロン）の高剪断混合機を備える。第１の分散を作成する商用装置は、例えば、ＡＰＶ，ａｎ  Ｉｎｖｅｎｓｙｓ  ＣｏｍｐａｎｙがＡＰＶ  Ｌｉｑｕｉｖｅｒｔｅｒモデル２００  ＣＬＶという商標で製造した「Ｌｉｑｕｉｖｅｒｔｅｒ」（登録商標）であってもよい。
【００３８】
少なくとも１つの実施形態では、提供される少なくとも１つのフィトステロールは、約０．５ミクロンから約１０ミクロンのサイズまで超微粉砕することができる。
【００３９】
第１の分散と第２の分散の両方で、少なくとも１つのフィトステロールの粒子サイズは、当業者に周知の鐘形曲線の粒子サイズ分布に実質的に従ってもよい。
【００４０】
水性材料は、水、追加の化合物入りの水、及び水中の固体の分散として、又は水中の液体又は液体中の水という乳剤として、それに溶解又は分散した組成物を含むことができる。これは、少なくとも１つの疎水性植物ステロールと混合する前の本開示の水性材料を規定する。化合物又は組成物が溶解又は分散した水性材料を使用する場合、水性飲料濃縮物などの水性材料の固体含量は、水性材料１リットル当たり約２００グラムから水性材料１リットル当たり約１０００グラム、又は１リットル当たり約４００グラムから１リットル当たり約９００グラム、又は１リットル当たり約６００グラムから１リットル当たり約８００グラムである。また、本開示の「水性材料」に適用する場合、「固体含量」という用語は、本明細書で定義された通りの乳剤タイプの「水性材料」を形成する際に使用される水に添加される任意の液体を含むことができる。
【００４１】
組成物に少なくとも１つのフィトステロールを取り入れる他の技術にも言及しておく。例えば、以下の通りである。
【００４２】
内容を参照により本明細書に組み込むものとするＴｉａｉｎｅｎ他の米国特許第６，１２９，９４４号は、水溶液中で微結晶性植物ステロール及び甘味剤の均質な懸濁物を形成することにより、植物ステロールを含む製品を生成する方法について説明している。
【００４３】
内容を参照により本明細書に組み込むものとするＨａａｒａｓｉｌｔａ他の国際特許出願第ＷＯ９８／５８５５４号は、食品産業で使用され、微粉砕植物ステロール、及び従来の食品原料成分、例えば、果実、野菜又はベリータイプの材料などを特に粉末形態で含むプレミックス、及びプレミックスの調製方法について説明している。内容を参照により本明細書に組み込むものとするフィンランド特許出願第ＦＩ９６３９０４号及び第ＦＩ９３２８５３号に開示された方法及び装置により、植物ステロール、及びベリー、果実又は野菜などの食品を粉砕し、粉砕機がＭｅｇａｔｒｅｘ  Ｏｙによって製造されたＡｔｒｅｘミルなどのいわゆる衝撃微粉砕原理で作動すると、この結果が生じる。本発明の発明者は、本発明のプロセスを、植物ステロールと組み合わせたシリアルに適用すると、穀粒にかかる機械的エネルギーの効果により、シリアル穀粒の温度が上昇し、それにより穀粒に粉砕と組み合わせた熱処理を提供する。
【００４４】
内容を参照により本明細書に組み込むものとするＺａｗｉｓｔｏｗｓｋｉの国際特許出願第ＷＯ００／４５６４８号は、半流動性、流動性又は粘性媒介物中に植物ステロール及び植物スタノールを分散させて、懸濁させ、このように形成した媒介物を衝撃力に曝露することにより、植物ステロール及び植物スタノール、又は両方の混合物の微細粒子を調製する方法について説明している。この方法は、適切な半流動性、流動性又は粘性媒介物に植物ステロール及び／又は植物スタノールを分散させるか、または他の方法で懸濁させ、その後に媒介物に衝撃力を加えて、微細粒子を生成することを含む。Ｚａｗｉｓｔｏｗｓｋｉは、空気噴霧ノズル、空気圧ノズル、高剪断混合機、又はコロイドミルで高剪断力を生成することにより、このような衝撃力を発生させているが、マサチューセッツ州ニュートンのＭｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ  Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社から販売されている微細流動化装置が好ましい。
【００４５】
本開示によると、ＣＲＰレベルを低下させるために有効な量の少なくとも１つのフィトステロールを投与する。本明細書では、「Ｃ反応性タンパク質のレベルを低下させる量」という用語は、変調させること、すなわち血管炎症の進行を遅延させるか、停止させる、及び／又はＣ反応性タンパク質のレベルを低下させることなど、投与者が求めている組織、システム、対象の生体応答又は医学的応答を誘発する能力を有する少なくとも１つのフィトステロールの濃度を意味する。
【００４６】
少なくとも１つのフィトステロールを有するこのような組成物を得るために、例えば、少なくとも１つのフィトステロールは、第１の分散及び／又は第２の分散中に、水性材料、濃縮物、又は飲料製品の１リットル当たり約１グラムから約１００グラム、又は１リットル当たり約１０グラムから約６０グラム、又は１リットル当たり約２０グラムから約３０グラムの量で存在してもよい。１つの実施形態では、少なくとも１つのフィトステロールは、第１の分散及び／又は第２の分散中に、水性材料、濃縮物、又は飲料製品の１リットル当たり約１５グラムから約３０グラムの量で存在してもよい。
【００４７】
少なくとも１つのフィトステロールの全日用量、さらに用量頻度は、使用される特定の投与形態、及び投与経路により変わる。投与の量及び頻度は、被験体の年令、体重、及び状態及び応答によっても変わる。用量及び投与頻度は、不当な実験をせずに、適格な医師が容易に決定することができる。臨床医又は治療する医師には、被験体の応答と組み合わせて治療を中断、調節、又は終了する方法及びタイミングが分かることにも留意されたい。
【００４８】
概して、全日用量は、最大で２グラム以上、又は約１ｍｇから約３ｇ、又は約１ｍｇから５ｇ、又は１ｇから１０ｇ又はこれらの範囲の間にある任意の量である。ある実施形態では、少なくとも１つのフィトステロールの全日用量は、最大２グラムであってもよい。
【００４９】
ある実施形態では、少なくとも１つのフィトステロールを飲料として投与する場合、少なくとも１つのフィトステロールは、組成物全体に対して最大約１００重量％、例えば、約０．５重量％から約８０重量％、さらに、約１重量％から約５０重量％、又はこれらの範囲の間にある任意の分数の量で存在してもよい。他の例として、少なくとも１つのフィトステロールを組成物として投与する場合、少なくとも１つのフィトステロールは、組成物の総重量に対して最大１００重量％、例えば、約０．１重量％から約７５重量％、又はこれらの範囲の間にある任意の分数の量で存在してもよい。
【００５０】
少なくとも１つの疎水性植物ステロールの粒子と水性飲料濃縮物との第２の分散を得るために第１の分散を均質化するには、例えば、ホモジナイザ（ＡＰＶモデル＃ＡＰＶ１０００など）内で実行することができ、これは分散を高圧で小さいオリフィスに強制的に通すことによって機能することができる。均質化は、約１００ｐｓｉから約１４，５００ｐｓｉ、又は約５００ｐｓｉから約１０，０００ｐｓｉ、又は約１，０００ｐｓｉから約５，０００ｐｓｉの圧力で実行することができる。１つの実施形態では、均質化は、約２，０００ｐｓｉから約５，０００ｐｓｉの圧力で実行される。
【００５１】
種々の飲料濃縮物を水性材料として使用することができるが、１つの実施形態では、プロセスは、少なくとも１つのフィトステロール、及びオレンジ果汁濃縮物などの水性柑橘類果汁濃縮物を含む実質的に安定した分散を生成することを含む。
【００５２】
１つの実施形態では、水性材料は、水、および栄養素、香味料、甘味料、二酸化炭素及び他の気体と組み合わせた水、及びその組合せを含む。さらに例えば、水性材料には、果汁又は果実香味料、例えば、オレンジ、レモン、ライム、タンジェリン、マンダリン及びグレープフルーツ果汁を含む柑橘類果汁、及び他の果汁及び果実風味の濃縮物、例えば、アセロラ、ブドウ、梨、パッションフルーツ、パイナップル、バナナ、リンゴ、クランベリー、チェリー、ラズベリー、桃、プラム、ブドウ、スグリ、クランベリー、ブラックベリー、ブルーベリー、イチゴ、ミラベル、スイカ、ハネデュー、カンタロープ、マンゴ、パパイヤ、植物香味料、例えば、コーラ、茶、コーヒー、チョコレート、バニラ、アーモンド、野菜汁から引き出した香味料、及びトマト、キャベツ、セロリ、キュウリ、ほうれん草、人参、レタス、オランダガラシ、タンポポ、ルバーブ、ビート、ココナ、グアバ、漢果などの香味料、及び２つの成分、３つの成分、及び４つの成分の混合物などのこれらの混合物が挙げられるが、これに限定されない。
【００５３】
また、本開示の水性材料は、典型的なスポーツ飲料の濃縮物、及び病気による流体の損失の治療に使用される飲料を含むことができ、これは、ショ糖シロップ、ブドウ糖−果糖シロップ、クエン酸、クエン酸ナトリウム、１カリウムリン酸塩及びカリウム塩、及び失われた電解質を補給する他の材料を、水の添加を必要とする生成物として、又は水との混合物中に含む。
【００５４】
本開示の濃縮物は、水で希釈してジュース又はドリンク類を形成することができる。例えば、濃縮物が糖又は糖の混合物を含む場合は、水で約２ブリックス度から約２０ブリックス度、又は約６ブリックス度から約１６ブリックス度、又は約１１ブリックス度から約１３ブリックス度に希釈することができる。本開示により使用される糖は、通常、果糖、ショ糖、ブドウ糖などの炭水化物材料、さらにＭｃＭｕｒｒｙのＯｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ第３版９１６〜９５０ページ、Ｈａｗｌｅｙ’ｓ  Ｃｏｎｄｅｎｓｅｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ第１２版１１００ページ、及びＨａｃｋｈ’ｓ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ第３版８１５〜８１７ページに記載されているように当技術分野で使用されている他の糖を含むことができる。また、非栄養素の高甘味度甘味料、天然又は合成甘味料も使用することができる。２つの成分、３つの成分、又は４つの成分の混合物などの糖及び／又は甘味料の混合物も使用することができる。
【００５５】
本開示によって想定される組成物は、様々な任意選択の成分を含むことができる。このような任意選択の成分は、種々の形態の組成物、すなわち薬剤組成物又は他の摂取可能物中に分散、可溶化、又は他の方法で混合することができる。本明細書で使用するのに適切な任意選択の成分の非制限的な例を以下に挙げる。
【００５６】
組成物が薬剤組成物の場合、任意選択の成分としては、担体、充填剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、溶解遅延剤、吸収促進剤、湿潤剤、吸収剤、潤滑剤、安定剤、着色剤、緩衝薬、分散剤、防腐剤、有機酸、水溶性及び不溶性ポリマー、腸溶剤及び非腸溶剤、コーティング、及び任意選択の薬剤成分として通常使用される任意の他の１つ又は複数の成分が挙げられるが、これに限定されない。
【００５７】
組成物が、食品又は飲料などの摂取可能物である場合、任意選択の成分としては、ビタミン及びミネラルなどの栄養素、香味料、着色剤、炭酸成分、防腐剤、ガム、乳化剤、及び任意選択の摂取可能物成分として通常使用される任意の他の１つ又は複数の成分が挙げられるが、これに限定されない。
【００５８】
例えば、本開示の組成物は、少なくとも１つの水溶性ビタミン、例えばビタミンＣ、ビタミンＢ６及び／又はビタミンＢ１２、葉酸、及び／又は少なくとも１つの油溶性ビタミン、例えばビタミンＡ、ベータカロチン、ビタミンＢ、例えばＤビタミン、ビタミンＥ、及びビタミンＫ，例えば、２つの成分、３つの成分、及び４つの成分の混合物を含むことができる。１回の摂取量当たりの各ビタミンについてＲＤＡの約１％から約１００％、又は約５から約３０％、又は約１５から約２０％のＲＤＡを得るために、ビタミンＢ及びＥなどのビタミンの添加が変化する。
【００５９】
Ｃ反応性タンパク質の検定及び方法は、当業者にとって周知である。さらに、Ｃ反応性タンパク質のレベルを分析する方法は、米国特許第５，３５８，８５２号、第６，０４０，１４７号及び第６，２７７，５８４号に記載されている。その内容は参照により本明細書に組み込むものとする。ＣＲＰの高感度の検定は、Ｄａｄｅ  Ｂｅｈｒｉｎｇ，Ｉｎｃ．社、Ａｂｂｏｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社及びＲｏｃｈｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社などのいくつかの専門業者から市販されている。
【００６０】
例えば、ＣＲＰのレベルは、Ｂｅｃｋｍａｎ  ＬＸ２０ＰＲＯを使用し、高感度のＮｅａｒ  Ｉｎｆｒａｒｅｄ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  Ｒａｔｅ（ＮＩＰＩＡ）方法を使用して実行する高感度ＣＲＰ（ｈｓ−ＣＲＰ）検定を使用して測定することができる。この方法によると、抗ＣＲＰ抗体被覆粒子が、血漿サンプル中のＣＲＰと結合し、その結果、不溶性凝集体を形成して、濁りを引き起こす。Ｂｅｃｋｍａｎ  ＣｏｕｌｔｅｒによるＰｒｏｄｕｃｔ  Ｂｒｏｃｈｕｒｅ  ｆｏｒ  Ｈｉｇｈ  Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  Ｃ−Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＣＲＰＨ）を参照されたい。９４０ｎｍにおける吸収の変化を監視することにより、サンプル中のＣＲＰの濃度を割り出すことができる。すなわち吸収率の変化は、ＣＲＰの濃度に比例する。ＬＸ  ＰＲＯシステムは、１点で調節し、予め割り出した較正曲線に基づいて、ＣＲＰ濃度を表す。
【００６１】
本開示は、さらに、少なくとも１つのフィトステロールで治療しているのと同じ症状を治療可能にできる化合物などの組成物に、少なくとも１つのフィトステロール以外の少なくとも１つの活性剤を添加すること、例えば、少なくとも１つのスタチンを添加すること、さらに異なる又は関連する状態を想定する。このような活性剤としては、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル補酵素Ａ還元酵素阻害剤（スタチン）、ペルオキシソーム増殖活性化受容体αアゴニスト（繊維質）、ペルオキシソーム増殖活性化受容体αアゴニスト（グリタゾン）、アスピリン、及び高用量のＲＲＲ−αトコフェロールが挙げられるが、これに限定されない。本開示は、単独療法として投与される少なくとも１つのフィトステロール、すなわち少なくとも１つのフィトステロールのみを投与することも想定する。
【００６２】
別の方法としては、このような追加の作用物質を提供する場合、これは別個の配合で、本開示の組成物と同時に被験体に投与することができる。このような別個の配合は、本開示の組成物の投与前、投与後、又は投与と同時に投与することができる。
【００６３】
使用例の場合以外、又は他に指示されている場合、本明細書及び特許請求の範囲で使用されている成分の量、反応条件などを表す数字は、全ての場合に「約」という用語で調整されているものと理解されたい。したがって他の状態が指示されていない限り、本明細書及び特許請求の範囲で述べられている数値パラメータは、本開示によって得ようとする所望の特性により変化し得る近似値である。せめて、特許請求の範囲の等価物の原則の用途を制限するものでもなく、各数値パラメータは、有効桁数及び通常の四捨五入の方法に鑑みて解釈されたい。
【００６４】
本開示の広義の範囲を示す数値範囲及びパラメータは近似値であるが、特定の例で示される数値は、可能な限り正確に報告されている。しかし、いずれの数値も、個々の試験測定に見られる標準偏差の結果として必然的に生じる特定の誤差を本質的に含む。
【００６５】
以下の例は、本開示を非制限的な方法で例示する働きをする。
【００６６】
フィトステロール飲料の調製
その後に本開示の飲料の第１の分散を形成する処理をする前に、以下の成分を組み合わせて、フィトステロールと水性材料の基本的混合物を提供した。
【００６７】
組成物は、以下が得られるように配合した。
基本成分：
所望の量          ０．７５ガロン
水                １８０．３グラム
オレンジ濃縮物    ３３６３．０グラム
（屈折計ブリックス度、６５（酸について補正）；酸３７．１％（ｗｔ．／ｗｔ．））
オレンジ香味料    ５３．１グラム
オレンジ油        ２．７グラム
フィトステロール  ７６．７グラム
合計              ３６７５．８グラム
【００６８】
完成品成分：
所望の量          ４．８ガロン
水                ４．０５ガロン
ベース            ０．７５ガロン
【表２】
2009521495.tif 000003
【００６９】
少なくとも１つのフィトステロール及び水性材料としてのオレンジ果汁濃縮物の実質的に安定した分散は、６１．１５ブリックスの濃度であった（屈折計ブリックス、酸について補正）。
【００７０】
混合物を、Ａｒｄｅ−Ｂａｒｉｎｃｏ  Ｍｏｄｅｌ  Ｎｏ．ＣＪ−４高剪断混合機を使用し、７０００ｒｐｍで約１５分間攪拌し、８秒で８２．２℃（１８０°Ｆ）まで加熱して、約５秒で約４３．３℃から約６０℃（約１１０°Ｆから１４０°Ｆ）まで冷却し、約１０ミクロンの平均粒子サイズ、及び約０．５ミクロンから約３０ミクロンの粒子サイズ分布を有し、最大粒子サイズが約３０ミクロンの第１の分散を生成した。
【００７１】
ＡＰＶ  Ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ  Ｇｒｏｕｐ（ａｎ  Ｉｎｖｅｎｓｙｓ  Ｃｏ．）のＡＰＶホモジナイザ、モデルＮｏ．ＡＰＶ１０００内で、第１の分散を６０℃（１４０°Ｆ）、３４００ｐｓｉ、次に６００ｐｓｉで均質化して、第２の分散を生成した。
【００７２】
第２の分散は、少なくとも１つのフィトステロール及び水性材料としてオレンジ果汁濃縮物を含む実質的に安定した分散を含んでいた。水を実質的に安定した分散に添加して、１２．００ブリックス度のオレンジジュース製品を生成した。この製品は、以下の仕様で製造される。
【表３】
2009521495.tif 000004
【００７３】
研究Ｉ：フィトステロール飲料
このプラセボ対照二重盲検無作為試験には、７２人の被験体が参加した。Ｓｒｉｄｅｖｉ  Ｄｅｖａｒａｊ他の「Ｐｌａｎｔ  Ｓｔｅｒｏｌ−Ｆｏｒｔｉｆｉｅｄ  Ｏｒａｎｇｅ  Ｊｕｉｃｅ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ  Ｌｏｗｅｒｓ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｌｅｖｅｌｓ  ｉｎ  Ｍｉｌｄｌｙ  Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉｃ  Ｈｅａｌｔｈｙ  Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ」、２４  Ａｒｔｈｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．ｅ２４−ｅ２８（２００４）。その内容は参照により本明細書に組み込むものとする。研究には、正常な全血算定、ＬＤＬコレステロール、＞１００ｍｇ／ｄＬ、正常な肝臓及び腎臓の機能（正常なトランスアミナーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、クレアチニン）、出血体質なし、正常な甲状腺機能（正常なＴＳＨ）の成人が含まれた。
【００７４】
全被験体は、２週間の導入段階を経験し、ここで栄養補強されていない飲料を受けた。次に、目隠し状態で無作為化し、フィトステロールで強化した飲料（すなわちフィトステロール飲料群）又はプラセボ飲料を次の８週間受けた。目標とする粒子サイズが分布したフィトステロール飲料を、以上で例示したプロセスを使用してジュースに懸濁させた。被験体には、１８日間持つのに十分な飲料が与えられた。分析研究は、完成した飲料が有効寿命の最後まで、飲料中に残ったフィトステロールを示すことを実証した。
【００７５】
各被験体には、１日２回、食事とともにその飲料を２４０ｍＬ摂取するよう要求した。これは、フィトステロール飲料中にフィトステロールが１日約２ｇあることに相当する。
【００７６】
また、被験体には、研究に入る前４週間、及び研究期間中は、Ｂｅｎｅｃａｌ（登録商標）又はＴａｋｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ（登録商標）などの強化マーガリンの任意の他の源を摂取しないように要求した。空腹時の血液サンプルを、研究の基線（５から７日間隔で平均２サンプル）、２週間後、及び１０週間後（５から７日間隔で平均２サンプル）に取得した。プラセボ飲料及びフィトステロール飲料の組成を、以下の表ＩＩに提供する。
【表４】
2009521495.tif 000005
【００７７】
研究の過程で採取した個々のサンプルのＣＲＰレベルを検査するために、６００ｇで１５分間遠心分離した後、赤血球から血漿を分離した。分析は全て、Ｂｅｃｋｍａｎ  ＬＸ２０ＰＲシステムのＮｅａｒ  Ｉｎｆｒａｒｅｄ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  Ｒａｔｅ方法を使用して実行した。７５人の被験体が研究に参加したが、個人的理由で３人（２人がフィトステロール群、１人がプラセボ群）が離脱し、７２人（ｎ＝３６／群）が研究を完了した。両群の被験体は、年令、性、及び肥満度指数を一致させてある。表ＩＩＩには、両群の被験体のＣＲＰ値が与えられている。
【表５】
2009521495.tif 000006
【００７８】
基線及び投与後のプラセボ飲料とフィトステロール飲料の統計学的比較にウィルコクソンの符号付きランク試験を使用して、ＣＲＰ値の変化を評価した。Ｆ．Ｗｉｌｃｏｘｏｎの「Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ  ｂｙ  Ｒａｎｋｉｎｇ  Ｍｅｔｈｏｄｓ」、１  Ｂｉｏｍｅｔｒｉｃｓ  ８０−８３（１９４５）を参照されたい。ウィルコクソンの符号付きランク試験は、調査の前後に収集したデータの差を試験するために使用されることが多く、対のスチューデントｔ試験の代替物である。基線でのフィトステロール飲料を投与後と比較して分析すると、Ｐ値が、＜０．０００１という結果になった。Ｐ値は、仮説が真である場合に、帰無仮説を拒絶する（すなわち基線と投与後でＣＲＰレベルに差がない）推定確率である。
【００７９】
通常、＜０．０５のＰ値は、統計学的有意性を示し、＜０．００１のＰ値、すなわち誤りの可能性が１／１０００未満であることは、統計学的に高い有意性を示す。この場合、Ｐ値が小さいので、帰無仮説は間違いのようである。研究が二重盲検であることを考慮すると、＜０．０００１というＰ値は、結果が偶然には起こりそうになく、統計学的有意性が高い、すなわちＣＲＰの低下が偶然に起こったものではないことを示唆する。
【００８０】
研究ＩＩ：低カロリーのフィトステロール飲料
このプラセボ対照二重盲検査無作為化試験には、７２人の被験体が参加した。研究には、正常な全血算定（ＣＢＣ）、ＬＤＬコレステロール＞１００ｍｇ／ｄＬ、正常な肝臓及び腎臓の機能（正常なトランスアミナーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、クレアチニン）、出血体質なし、正常な甲状腺機能（正常なＴＳＨ）の成人が含まれた。
【００８１】
被験体は、目隠し状態で無作為化し、飲料組成物全体に対して少なくとも２重量％を含むフィトステロール入り低カロリー飲料又はプラセボを次の８週間受けた。目標とする粒子サイズが分布したフィトステロールを、上述したように低カロリー飲料中に懸濁させた。被験体には、１８日間持つのに十分な飲料が与えられた。
【００８２】
各被験体には、１日２回、食事とともにその飲料を２４０ｍＬ摂取するよう要求した。これは、フィトステロールが１日約２ｇあることに相当する。また、被験体には、研究に入る前４週間、及び研究期間中は、Ｂｅｎｅｃｏｌ（登録商標）又はＴａｋｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ（登録商標）などの強化マーガリンの任意の他の源を摂取しないように要求した。
【００８３】
空腹時の血液サンプルを、研究の基線（５から７日間隔で平均２サンプル）、４週間後、及び８週間後（５から７日間隔で平均２サンプル）に取得した。プラセボ飲料及びフィトステロール飲料の組成を、以下の表ＩＶに提供する。
【表６】
2009521495.tif 000007
【００８４】
研究の過程で採取した個々のサンプルのＣＲＰレベルを検査するために、６００ｇで１５分間遠心分離した後、赤血球から血漿を分離した。分析は全て、Ｂｅｃｋｍａｎ  ＬＸ２０ＰＲＯシステムのＮｅａｒ  Ｉｎｆｒａｒｅｄ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  Ｒａｔｅ方法を使用して実行した。７７人の被験体が研究に参加したが、個人的理由で５人（２人がフィトステロール群、３人がプラセボ群）が離脱し、７２人（ｎ＝３６／群）が研究を完了した。両群の被験体は、年令、性、及び肥満度指数を一致させてある。表Ｖには、両群のＣＲＰ値が与えられている。
【表７】
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【００８５】
基線及び投与後のプラセボ飲料とフィトステロール飲料との比較から得られるように、ＣＲＰレベル中央値は、プラセボと比較して、低カロリーフィトステロール飲料の方が低下した。ウィルコクソンの符号付きランク試験を使用して、基線でのフィトステロール飲料を投与後と比較して分析すると、Ｐ値が０．０００６という結果になった。Ｐ値が小さく、研究は二重盲検であったので、帰無仮説を拒絶することができ、ＣＲＰの減少は偶然ではないようである。
【国際調査報告】
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