(57)【要約】CB1およびCB2受容体に対する作動薬である、水溶性および脂溶性のカンナビノイド化合物を提供する。該カンナビノイド化合物は、例えば、緑内障、糖尿病性網膜症および黄斑変性等の網膜神経変性障害の治療に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式 (I) を有する化合物：
2009538827.tif 000023
式中、
RはCH3、OH、Cl、F、Br、I、またはCF3であり；
R1はH、またはC1-C6アルキルであり；
Xはアルキル、分岐アルキル、シクロプロピル、またはシクロアルキルであり；
YはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
ZはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
pは0〜4であり；かつ
R2は下記である：
2009538827.tif 000024
式中、
R3はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
R4はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
mは1〜7であり；かつ
R5はCH3、OH、Cl、Br、I、CN、ONO、ONO2、NO2、ピラゾール、トリアゾール、モルホリン、ピペリジン、ピロリジン、またはイミダゾールである；
ただしRがOHであり、R1がHであり、Xがイソプロピルであり、pが0であり、R3がメチルであり、R4がメチルであり、mが4である場合、R5はCNではありえない。
【請求項２】
下記からなる群より選択される、請求項1記載の化合物：
2009538827.tif 000025
【請求項３】
網膜または視神経への損傷を特徴とする障害から患者を保護するための方法であって、それを必要とする患者に、下記式 (I) を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与する段階を含む方法：
2009538827.tif 000026
式中、
RはCH3、OH、Cl、F、Br、I、またはCF3であり；
R1はH、またはC1-C6アルキルであり；
Xはアルキル、分岐アルキル、シクロプロピル、またはシクロアルキルであり；
YはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
ZはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
pは0〜4であり；かつ
R2は下記である：
2009538827.tif 000027
式中、
R3はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
R4はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
mは1〜7であり；かつ
R5はCH3、OH、Cl、Br、I、CN、ONO、ONO2、NO2、ピラゾール、トリアゾール、モルホリン、ピペリジン、ピロリジン、またはイミダゾールである。
【請求項４】
化合物が下記からなる群より選択される、請求項3記載の方法：
2009538827.tif 000028
2009538827.tif 000029
【請求項５】
網膜または視神経への損傷を特徴とする障害から患者を保護するための方法であって、それを必要とする患者に、下記式 (II) を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与する段階を含む方法：
2009538827.tif 000030
式中、
Rはイミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、またはモルホリンである。
【請求項６】
化合物が下記からなる群より選択される、請求項5記載の方法：
2009538827.tif 000031
2009538827.tif 000032
【請求項７】
網膜神経節細胞を保護するための方法であって、下記式 (I) を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与する段階を含む方法：
2009538827.tif 000033
式中、
RはCH3、OH、Cl、F、Br、I、またはCF3であり；
R1はH、またはC1-C6アルキルであり；
Xはアルキル、分岐アルキル、シクロプロピル、またはシクロアルキルであり；
YはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
ZはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
pは0〜4であり；かつ
R2は下記である：
2009538827.tif 000034
式中、
R3はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
R4はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
mは1〜7であり；かつ
R5はCH3、OH、Cl、Br、I、CN、ONO、ONO2、NO2、ピラゾール、トリアゾール、モルホリン、ピペリジン、ピロリジン、またはイミダゾールである。
【請求項８】
化合物が下記からなる群より選択される、請求項7記載の方法：
2009538827.tif 000035
2009538827.tif 000036
【請求項９】
網膜神経節細胞を保護するための方法であって、下記式 (II) を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与する段階を含む方法：
2009538827.tif 000037
式中、
Rはイミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、またはモルホリンである。
【請求項１０】
化合物が下記からなる群より選択される、請求項9記載の方法：
2009538827.tif 000038
2009538827.tif 000039
【請求項１１】
網膜神経節細胞がインビボの細胞である、請求項7または9記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明の態様は、概して新規カンナビノイド化合物およびそれらの使用方法に関する。特に、本発明は、CB1およびCB2受容体の作動薬であり、かつ、例えば、緑内障、糖尿病性網膜症および黄斑変性を含む網膜神経変性障害またはその症状を治療または緩和するのに有用である、水溶性および脂溶性のカンナビノイド化合物を提供する。本発明の態様は、網膜神経変性障害に関連する眼圧（IOP）または周辺部網膜神経節細胞の損失を低減するために用いられ得る。本発明の態様は、これらの神経を保護するカンナビノイド作動薬を単独で、または他の薬剤と組み合わせて投与するためにも用いられ得る。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
緑内障は、米国において、防ぐことができる失明の一番多い原因であり、世界で二番目に多い失明の原因である。緑内障は、全ての年齢層の人々で発症する可能性があるが、65歳を超える成人で、特定の民族集団で、糖尿病および／または近視と診断された人々で発症することが多い。種々の異なる種類の緑内障があるが、緑内障を特徴付ける共通する特徴は、眼の杯状陥凹（optic cupping）および視野欠損に関連する眼圧（IOP）の上昇である。
【０００３】
緑内障患者が経験する視力低下は、網膜損傷の結果であり、かつびまん性網膜神経節細胞（RGC）萎縮によって最も直接的に引き起こされる。神経節細胞軸索の損失は、視神経における軸索損失につながる。治療せずに放置すると、緑内障は網膜および視神経に著しい損傷をもたらし、患眼を完全に失明させる可能性がある。一般に、IOPが高いほど、視覚機能を失いやすくなる。高IOPを30〜40%下げることは、緑内障を発症する危険性を、65%を超える確率まで低減する。危険性の低減は、緑内障の進行を遅くするが、網膜の健康を表すものではない。緑内障に対する現在の薬理学的治療および外科的治療は、主にIOPを下げることに焦点をおいている。現在の薬理学的治療は、緑内障を患う多くの人々におけるIOPを下げることに成功してきたが、これらの薬の副作用の可能性を無視することはできす、個々の患者について慎重に勘案しなければならない。全緑内障患者の半数は、単一の薬物療法、例えばチモロール単独で維持することができず、患者のほとんどが、彼らのIOPを調節するために2種または3種の薬物の使用を必要とする。加えて、IOPを低くすることにうまく反応しない患者がいる。
【０００４】
緑内障に関する高IOPを管理するための現在の療法は、アドレナリン作動薬に限定される。これらのアドレナリン薬物はIOPを下げるが、持続時間が短い。カンナビノイドはIOPを調節し、CB受容体系を活性化することにより効果を現す。それらは強力な降圧剤であり、かつそれらの効果は少なくとも2時間持続するので、それらはそれらの対照薬よりも低濃度で投与され得る。IOPへの臨床的に有意な効果を達成するために必要なのは、ごく少量の薬物であり、かつ長時間持続する効果のおかげで、局所投与レジメンも減らし得ることから、これは大きな利点である。アドレナリン作動系のかわりにCB受容体系を標的とすることは、有効性および持続性の問題を解決し得る。過去15年で、カンナビノイドがそれにより効果を現す機構を理解することに、大きな進展があった。2種のカンナビノイドI受容体、すなわちCNSおよび末梢に局在するCB1受容体、およびに末梢のみで確認されているCB2受容体が配列決定されている。CB系は、ほんの数例を挙げると、疼痛知覚、認知過程、神経伝達物質の調節、食欲制御、IOPの調節、および報酬系（reward system）における生理学的役割を果たす。CB1受容体に対する選択的な拮抗薬であるSR 141716A、およびCB2受容体に対する選択的な拮抗薬であるSR 144528の開発は、受容体の作用機構を解明するための重要な手段であった。CB1カンナビノイド受容体は、RT-PCR法を用いて、ラットの眼全体で、具体的には、毛様体および虹彩で発見された。アラキドニルエタノールアミド（アナンドアミド）、2-アラキドノイルグリセロール（2-AG）、およびパルミトイルエタノールアミド（PEA）を含む、いくつかの内因性カンナビノイドの発見は、内因性カンナビノイド系の存在を示唆する。
【０００５】
さらに、失明または付加的な視野欠損は、IOPの調節治療にもかかわらず、緑内障患者の約25〜38%で実際に起こり続ける。網膜および視神経への緑内障性損傷は、正常なIOPを維持する療法の後でさえ進行する。患者が服薬指示によく従い、IOPを慎重に調節しても、緑内障が進行し続けることが多いため、多くは、他の因子が関与し得ることを認める。神経保護剤は、神経線維への損傷を予防することによるか、または現存する網膜神経節細胞の生存を高めることにより、視神経の生存を助ける。未処置ラットと比較して、カンナビノイドではない神経保護薬であるアミノグアニジンで処置したラットでは、周辺部網膜神経節細胞損失は26%より低かった。従って、神経保護剤は、緑内障患者の療法および治療における非常に大きな可能性を有し得た。
【０００６】
大麻、またはマリファナは、1970年から医薬としての使用に関して大規模に研究されてきた。しかしながら、マリファナの吸入に関連する様々な望ましくない全身性副作用により、医薬としてのマリファナの使用は、論争が続いている。緑内障は神経変性疾患であるため、理想的な治療は、IOPを下げるだけではなく、加えて視神経の生存を高めるべきである。最も大規模に研究されたカンナビノイドは、マリファナ中の活性成分、すなわちΔ9-テトラヒドロカンナビノール（THC）である。THCの経角膜フラックス（transcorneal flux）に対する媒体（vehicle）の効果は、摘出したウサギ角膜で評価されており（Kearse, 2000）、ネコ角膜を通過するTHCの能力も実証された（Green, 1977）。THCとは異なり、本明細書で記載する新規カンナビノイドは、新しい分類のカンナビノイド模倣剤であり、他の天然カンナビノイドの構造とは異なる構造を有する。本明細書により新規カンナビノイドとして分類されるこれらの薬物は、強力なカンナビノイド受容体（CB）作動薬である。本明細書で記載する新規なカンナビノイドは、IOPを下げることにおける治療学的水準を達成するだけでなく、驚いたことに網膜を、具体的には網膜神経節細胞（RGC）を保護することも示した。この神経保護作用は、緑内障を治療するための従来の液剤を超えるこれらの新規カンナビノイドが保持する、重要な利点である。
【発明の開示】
【０００７】
発明の概要
本発明の化合物は、失明および眼の損傷にいたる可能性のある疾患、例えば、緑内障、糖尿病性網膜症および黄斑変性等の治療に有用である。これらの状態は、網膜および視神経の変性に関連することが多い。IOPの上昇は緑内障の主な危険因子である。IOPは正常であるが、網膜損傷が増大している緑内障患者も多数存在する。これは、IOPとは無関係に網膜および視神経への損傷をもたらす、緑内障における直接の構成要素を示すものである。本明細書で記載するカンナビノイドは、IOPを下げ、および／または網膜を保護するという予期せぬ有益な結果を提供することが発見された。
【０００８】
本発明の化合物としては、強力なカンナビノイド受容体（CB）作動薬が挙げられる。それらは、IOPを下げるそれらの作用とは関係なく網膜を保護するという、驚くべき、かつ予期せぬ能力を有する。眼への局所投与の後、それらは全身性副作用を示さない。IOPを下げるためのカンナビノイドを開発する従来の試みを挫折させてきた、多くの全身性副作用を、局所適用が回避し得ることから、これは重要である。
【０００９】
一態様において、本発明は、下記式 (I) を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩を提供する。
2009538827.tif 000002
式中、
RはCH3、OH、Cl、F、Br、I、またはCF3であり；
R1はH、またはC1-C6アルキルであり；
Xはアルキル、分岐アルキル、シクロプロピル、またはシクロアルキルであり；
YはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
ZはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
pは0〜4であり；かつ
R2は下記である：
2009538827.tif 000003
式中、
R3はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
R4はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
mは1〜7であり；かつ
R5はCH3、OH、Cl、Br、I、CN、ONO、ONO2、NO2、ピラゾール、トリアゾール、モルホリン、ピペリジン、ピロリジン、またはイミダゾールである；
ただしRがOHであり、R1がHであり、Xがイソプロピルであり、pが0であり、R3がメチルであり、R4がメチルであり、mが4である場合、R5はCNではありえない。
【００１０】
別の態様において、化合物は以下より選択される。
2009538827.tif 000004
【００１１】
別の態様において、本発明は、網膜または視神経への損傷を特徴とする障害から患者を保護するための方法であって、それを必要とする患者に、下記式 (I) を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与する段階を含む方法を提供する。
2009538827.tif 000005
式中、
RはCH3、OH、Cl、F、Br、I、またはCF3であり；
R1はH、またはC1-C6アルキルであり；
Xはアルキル、分岐アルキル、シクロプロピル、またはシクロアルキルであり；
YはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
ZはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
pは0〜4であり；かつ
R2は下記である：
2009538827.tif 000006
式中、
R3はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
R4はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
mは1〜7であり；かつ
R5はCH3、OH、Cl、Br、I、CN、ONO、ONO2、NO2、ピラゾール、トリアゾール、モルホリン、ピペリジン、ピロリジン、またはイミダゾールである。
【００１２】
別の態様において、本発明は、網膜または視神経への損傷を特徴とする障害から患者を保護するための方法であって、それを必要とする患者に、以下より選択される化合物の有効量を投与する段階を含む方法を提供する。
2009538827.tif 000007
2009538827.tif 000008
【００１３】
別の態様において、本発明は、網膜または視神経への損傷を特徴とする障害から患者を保護するための方法であって、それを必要とする患者に、下記式 (II) を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与する段階を含む方法を提供する。
2009538827.tif 000009
式中、
Rはイミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、またはモルホリンである。
【００１４】
別の態様において、本発明は、網膜または視神経への損傷を特徴とする障害から患者を保護するための方法であって、それを必要とする患者に、以下より選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与する段階を含む方法を提供する。
2009538827.tif 000010
2009538827.tif 000011
【００１５】
別の態様において、本発明は、網膜神経節細胞を保護するための方法であって、下記式 (I) を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与する段階を含む方法を提供する。
2009538827.tif 000012
式中、
RはCH3、OH、Cl、F、Br、I、またはCF3であり；
R1はH、またはC1-C6アルキルであり；
Xはアルキル、分岐アルキル、シクロプロピル、またはシクロアルキルであり；
YはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
ZはH、アルキル、または分岐アルキルであり；
pは0〜4であり；かつ
R2は下記である：
2009538827.tif 000013
式中、
R3はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
R4はH、アルキル、または分岐アルキルであり；
mは1〜7であり；かつ
R5はCH3、OH、Cl、Br、I、CN、ONO、ONO2、NO2、ピラゾール、トリアゾール、モルホリン、ピペリジン、ピロリジン、またはイミダゾールである。
【００１６】
別の態様において、本発明は、網膜神経節細胞を保護するための方法であって、以下より選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与する段階を含む方法を提供する。
2009538827.tif 000014
2009538827.tif 000015
【００１７】
別の態様において、本発明は、網膜神経節細胞を保護するための方法であって、下記式 (II) を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与する段階を含む方法を提供する。
2009538827.tif 000016
式中、
Rはイミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、またはモルホリンである。
【００１８】
別の態様において、本発明は、網膜神経節細胞を保護するための方法であって、以下より選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与する段階を含む方法を提供する。
2009538827.tif 000017
2009538827.tif 000018
【００１９】
別の態様において、本発明は、網膜神経節細胞を保護するための方法であって、該網膜神経節細胞がインビボの細胞である方法を提供する。
【００２０】
発明の詳細な説明
本発明は、例えば、緑内障、糖尿病性網膜症および黄斑変性等の失明にいたる可能性のある疾患の治療に有用である、水溶性および脂溶性のカンナビノイド化合物を提供する。これらの状態は、全て網膜および視神経の変性に関連する。IOPの上昇は緑内障の主な危険因子である。IOPは正常であるが、網膜損傷が増大している緑内障患者も多数存在する。これは、IOPとは無関係に網膜および視神経への損傷をもたらす、緑内障の直接の構成要素を示すものである。本明細書で記載する本発明の化合物は、IOPを下げ、かつ網膜を保護するという予期せぬ有益な結果を提供することが発見された。
【００２１】
好ましい態様において、局所投与経路が薬物を送達する。特定の態様において、例えば、硝子体内注射として公知である硝子体腔内への薬物の直接注射等の代替投与経路を使用してもよい。薬物の有効性は類似しており、かつ投与経路とは無関係である。緑内障、糖尿病性網膜症および黄斑変性が最も多く見られるが、その上、例えば、未熟児網膜症（ROP）、高血圧性網膜症、加齢性黄斑変性、UV誘発性網膜損傷および薬物関連網膜症等の他の眼球変性疾患が治療され得る。さらなる態様において、これらのカンナビノイドは、例えば、アレキサンダー病、アルパース病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、毛細血管拡張性運動失調、バッテン病（シュピールマイアー‐フォークト‐シェーグレン‐バッテン病（Spielmeyer-Vogt-Sjogren-Batten disease）としても知られる）、ウシの海綿状脳症（BSE）、キャナヴァン病、コケーン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルト‐ヤコブ病、ハンチントン病、HIVに関連する認知症、ケネディ病、クラッベ病、レヴィー小体認知症、マチャド‐ジョセフ病（脊髄小脳性運動失調3型）、多発性硬化症、多系統萎縮症、神経ボレリア症、パーキンソン病、ペリツェーウス‐メルツバッヒャー病、ピック病、原発性側索硬化症、プリオン病（Prion disease）、レフサム病、ザンドホフ病、シルダー病、統合失調症、シュピールマイアー‐フォークト‐シェーグレン‐バッテン病（バッテン病としても知られる）、脊髄小脳運動失調（さまざまな特徴を伴う複合型）、脊髄性筋萎縮症、スティール‐リチャードソン‐オルスゼフスキー病および脊髄ろう等の他の神経変性障害を治療するために用いてもよい。
【００２２】
本発明は、必要とする患者に本発明の化合物の治療的有効量を投与することにより、ニューロパシーの進行を治療および／または遅らせる安全で有効な方法を提供する。「治療的有効量」とは、その所望の目的を達成するために有効である化合物および／または組成物の量のことをいう。「ニューロパシー」とは、神経または特定の神経群における機能障害のことをいう。「患者」とは、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトのことをいい、男性および女性、ならびに子供および成人が包含される。本発明の化合物は、別々に投与してもよいし、またはさらに担体を含む、1種またはそれ以上の組成物の形態で投与してもよい。本発明の化合物は、患者に毎日またはそれより少ない頻度で投与してもよい。本発明の薬学的組成物の温血動物への投与は、間欠的、あるいは段階的に、または連続的、一定もしくは制御した速度であってもよい。さらに、医薬製剤を投与する、時刻および1日当りの回数は変化してもよい。
【００２３】
一態様において、本発明は、約120 mg/日〜約6000 mg/日の量で化合物を含む、連日投与または摂取のための化合物を提供する。別の態様において、本発明は、眼の刺激を低減する活性化合物を含有する、サブミクロン乳剤を、眼に局所投与する段階を含む方法を提供する。これにより、投与する薬物の量を、望ましくない刺激を伴わずに増やすことができる。さらに別の態様において、本発明は、硝子体腔内への薬物の直接注射、または硝子体内注射のための方法を提供する。本発明の化合物の組み合わせを含む組成物が、IOPおよび網膜ニューロパシーの治療において相乗（すなわち、相加を超える）効果を提供し得ることを、予期せず発見した。
【００２４】
当業者には分かるように、例えば、患者の状態、体格および年齢、治療される症状の重篤度、ならびに薬学的組成物を投与する様式等の因子に応じて、有効量は変化してもよい。ヒト患者に対して、本明細書で上述した式の化合物の用量は、一般に、約0.01〜約100 mg/24時間/患者、好ましくは約0.1〜約25 mg/24時間/患者、より好ましくは約1〜約10 mg/24時間/患者の範囲の投薬量で投与され得る。好ましくは、該投薬量を、それぞれ24時間にわたり、間隔をおいて投与されるいくつかのより小さい投薬量に分割してもよく、標準的な持続放出性製剤を利用してもよい。経口投与は、活性成分を可溶化した、標準的な水性または非水性の薬理学的な液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤およびエリキシル剤等を用いて達成され得る。本発明の化合物の投与は、例えば、Remington：The Science and Practice of Pharmacy、フィラデルフィア科学大学、2005年5月、第21版に記載されるような当技術分野で公知の標準的な方法を用いて決定およびもたらされ得る。
【００２５】
本発明の化合物および／または組成物は、任意の利用できかつ有効な送達システムにより投与され得、所望により標準的な無毒の薬学的に許容される担体、補助剤および賦形剤を含有する投薬単位製剤で、経口的、口腔的、非経口的、吸入噴霧による、局所適用による、注射による、経皮的、または直腸内の（例えば、坐薬の使用による）送達システムを含むが、これらに限定されない。非経口のものとしては、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内の注射または注入法が挙げられる。種々の化合物を、種々の送達システムにより、および／または種々の投薬形態により投与してもよい。
【００２６】
経口投与のための固形投薬形態としては、カプセル剤、徐放性カプセル剤、錠剤、徐放性錠剤、咀嚼錠、舌下錠、発泡錠、丸剤、散剤、顆粒剤およびゲル剤を挙げることができる。このような固形投薬形態において、活性化合物を、例えば、ショ糖、乳糖またはデンプン等の、少なくとも1種の不活性な希釈剤と混合してもよい。このような投薬形態は、通常の実践でのように、不活性な希釈剤以外の添加物、例えば、ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤も含んでもよい。カプセル剤、錠剤、発泡錠、および丸剤の場合、投薬形態は緩衝剤も含んでもよい。軟ゼラチンカプセル剤は、本発明の活性化合物または組成物と植物油との混合物を含有するように調製され得る。硬ゼラチンカプセル剤は、活性化合物の顆粒を、例えば、乳糖、白糖、ソルビトール、マンニトール、バレイショデンプン、トウモロコシデンプン、アミロペクチン、ゼラチンのセルロース誘導体等の固形粉末担体と組み合わせて含有してもよい。錠剤および丸剤は、腸溶性コーティングを用いて調製されてもよい。
【００２７】
経口投与のための液体投薬形態としては、例えば、水等の一般に当技術分野で用いられる不活性な希釈剤を含有する、薬学的に許容される乳剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤、およびエリキシル剤を挙げることができる。このような組成物は、例えば、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤等の補助剤、ならびに甘味剤、香味剤および芳香剤も含んでもよい。
【００２８】
注射用製剤、例えば、無菌注射用の水性または油性懸濁剤は、適した分散剤、湿潤剤、および／または懸濁化剤を用いて、公知の技術に従って処方され得る。無菌注射用製剤は、例えば、1,3-ブタンジオールの溶液のような、無毒の非経口的に許容される希釈剤または溶剤の無菌注射用の溶液または懸濁液でもあってもよい。許容される賦形剤および溶剤のうちで、用いてもよいのは、水、リンゲル液、および等張食塩水である。無菌不揮発性油も、溶剤または懸濁化媒介物として通常に用いられる。
【００２９】
組成物のバイオアベイラビリティは、適した補形剤、または、例えばリン脂質もしくは界面活性剤等の薬剤の存在下で、粉砕、摩砕および噴霧乾燥等の従来技術を用いた製剤の微粉末化により、促進され得る。
【００３０】
本発明の化合物および組成物は、塩の形態として処方されてもよい。塩としては、例えば、アルカリ金属塩、および遊離酸もしくは遊離塩基の付加塩が挙げられる。適した酸付加塩は、無機酸から、または有機酸から調製され得る。このような無機酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、炭酸、硫酸およびリン酸等が挙げられるが、これらに限定されない。適当な有機酸としては、脂肪族の、脂環式の、芳香族の、複素環式のカルボン酸およびスルホン酸の分類の有機酸、例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、グルクロン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、安息香酸、アントラニル酸、メシル酸、サリチル酸、p-ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボン酸（パモ酸）、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パントテン酸、トルエンスルホン酸、2-ヒドロキシエタンスルホン酸、スルファニル酸、ステアリン酸、アルゲン酸、β-ヒドロキシ酪酸、シクロヘキシルアミノスルホン酸、ガラクタル酸およびガラクツロン酸等が挙げられるが、これらに限定されない。適した塩基付加塩としては、アルミニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛から形成される金属塩、あるいは第一級アミン、第二級アミンおよび第三級アミン、環状アミン、N,N'-ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（N-メチルグルカミン）、ならびにプロカイン等が挙げられるが、これらに限定されない。これらの塩の全てが、例えば、適当な酸または塩基を化合物と反応させることにより、相当する化合物から従来の方法により調製され得る。
【００３１】
個々に必要なものは多様であり得るが、化合物および／または組成物の有効量に関する最適な範囲の決定は、当業者の範囲内である。一般に、化合物および組成物の有効量を提供するために必要な投薬量は、当業者により調節され得、年齢、健康状態、身体状態、性別、食生活、体重、受容者の機能障害の程度、治療の頻度、ならびに機能障害もしくは疾患の本質および範囲、患者の病状、投与の経路、例えば、用いた特定の化合物の活性、有効性、薬物動態および毒性プロフィール等の薬理学的考察、薬物送達システムを用いるかどうか、ならびに化合物が薬物の組み合わせの一部として投与されるかどうかによって変わるであろう。
【００３２】
I. 実施例
物質および方法
ラット緑内障モデル
急性試験と比較して、緑内障の慢性ラットモデルを作成した。3本の渦静脈を結紮することにより、ラットを緑内障の状態にした（Hosseini, A. et al. (2006), Chronic topical administration of WIN-55-212-2 maintinas a reduction in IOP in a rat glaucoma model without adverse effects. Exp. Eye Res. 82(5):753- 9）。より具体的には、Sprague-Dawleyラットで、3 mg/Kgのアセプロマジンおよび20 mg/Kgのケタミンでの麻酔下、右眼の4本の強膜上静脈のうち3本を、9.0ナイロン縫合糸を用いて結紮することにより、高眼圧症を誘発させた。6週間以内で、施術した眼におけるIOPを少なくとも5 mm Hgまで上昇させた。この介入は、施術した眼におけるIOPを少なくとも30%上昇させて、かつ最大60週間までの間持続させた。この間に、網膜機能の30%を喪失したことをERGにより記録した。これらの網膜の組織学的分析は、RGCの40%を損失したことを明らかにした。従って、このモデルは、緑内障の患者で起こる進行性損傷を正しく再現している。
【００３３】
眼圧の測定
ラット用に改良した目盛付きGoldmann眼圧計を用いて、IOPの上昇を軽度の鎮静下で測定した。それぞれの眼に関して3回の測定を平均した。日内変動を評価するために、全IOP値を、期間を通して日周中の午前11時と午後1時の間測定した。
【００３４】
心拍数および血圧
BPおよびHRをテイル・カフ装置（tail cuff apparatus）で測定し、データをDasy Lab software（DasyTEC、アマースト、ニューハンプシャー州）を用いて分析した。
【００３５】
治療レジメン
IOPの測定（局所適用）のために、基準IOP、心拍数、血圧、および正常な眼の解剖学的構造を薬物投与の前に記録した。薬物WIN 55-212-2（0.1%, 1.0%）、O-1812（0.01%, 0.1%, 1.0%）、O-2545（0.1%, 1.0%）は、全てTocrisolve（商標）（媒体）に溶解した、IOP、心拍数および血圧を、局所投与の前、ならびに30分後、60分後および120分後に測定した。反対側の眼を、媒体で処置した対照とした。
【００３６】
細隙灯生体顕微鏡検査／デジタル写真
眼毒性は、細隙灯検査を用いて測定し、かつ修正した眼球刺激に関するMacDonald-Shadduckの半定量スケール（MacDonald-Shadduck semi-quantitative scale）（Mazulli および MaibachのDermatotoxicology. 3rd Ed. Pp 641-696.ワシントンDC: Hemisphere中のMcDonald, T.O. および Shadduck, J. A. (1987)、Eye irriation.）を用いて遂行した。角膜、結膜および前房のデジタル写真のために、全ての眼を、カラーデジタル写真機を装着した細隙灯により検査した。デジタルビデオシステム（Lombart Instruments DVS System）を用いて画像を保存して分析した。基準時、およびその薬物投与の後に、結膜充血、結膜の分泌物（conjunctival discharge）、角膜浮腫、房水フレア、線維素、および虹彩充血に関して、眼を検査した（Samudre, S. S. ら、 (2004) Comparison of Topical Steroids for Acute Anterior Uveitis. J. Ocul. Pharmacol. Ther. 20 (6):533 -547）。ゼロが正常を符号化したものであり、1＝軽度の併発、2＝中程度の併発および3＝重度の併発である、半定量的4点スケールで、知識のある、誰であるか分からなくした観察者が、それぞれの因子を評価した。結果を、処置の前に遂行した正常である基準評定と比較し、かつ未処置の反対側の眼とも比較した。
【００３７】
（表Ｉ）眼毒性：眼球刺激を採点するためのMacDonald-Shadduck系を用いた眼の比較
2009538827.tif 000019
グレード1である角膜刺激が両目、例えば、処置および未処置の両目で観察された。この所見は、繰り返してのGoldmann眼圧計の適用による可能性が高かった。
【００３８】
（表ＩＩ）60分時点での全化合物のIOPの下降プロフィール
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*基準より有意に低い、p＜0.05。全身投与に関連するこれらの変化とは違って、全ての合成カンナビノイドがIOPを下げ、かつBPまたはHRへの影響はなかった。0-1812 1.0%およびWIN 55-212-2 1.0%が最も有効であった。角膜、結膜および前房では、眼炎症の兆候がなく、正常であった。
【００３９】
（表ＩＩＩ）
CB1およびCB2受容体に対する結合親和力（平均値±SE、N=3）を下記に提示する。自発運動（SA）を抑制する、テイル・フリック法（TF）での痛覚抑制を引き起こす、および相対的不動性（relative immobility）（RI）を引き起こす、類似体の能力をED50値（mg/kg）として以下に提示する。これらの類似体は、若干の低体温を相対的に引き起こした（データは示していない）。
2009538827.tif 000021
【００４０】
（表ＩＶ）ラット緑内障モデルにおけるIOPへのチモロールと本発明の化合物の併用効果
2009538827.tif 000022
*基準より有意に低い、p＜0.05。
†O-1812 1.0%単独より有意に低い、p＜0.05。
‡O-2545 1.0%単独より有意に低い、p＜0.05。
【００４１】
共焦点顕微鏡検査
線維素、過剰屈折性体、ならびに上皮細胞、間質細胞および内皮細胞の形態における変化だけでなく、炎症細胞の存在、位置および数を関して、角膜および前眼部のインビボでの反復的・非侵襲的可視化を共焦点顕微鏡検査により遂行した。圧平前に、ラットを鎮静状態にして、0.5%のプロパラカインを局所適用した。メタモルフ・イメ−ジング・システム（Metamorph imaging system）（Universal Imaging、ダウニングタウン、ペンシルバニア州）を用いて、データを分析した。
【００４２】
ラットNMDAモデル
ラットモデルにおいて、IOPを悪化させる可能性のある作用を伴わずに、網膜の緑内障性損傷を再現するために、網膜損傷をNMDAにより誘発させた。例えば、IOP、ERG、細隙灯、眼底写真、心拍数および血圧の基準測定の後、N-メチル-D-アスパラギン酸（NMDA、10ｍMを2μl）を硝子体内に注射して、RGC損傷を誘発させた。識別を目的として、それぞれのラットに、マイクロチップを皮下の適当な位置に所持させた。確実に識別するために、被験ラットに、毎回ハンド・スキャナを使用した。処置群ついては、実験者に隠すと考えられることから、これが必要であった。処置群は、NMDAのみ（対照）、O-1812（0.1%）もしくはO-2545（0.1%）、O-1812（0.1%）＋SR-141716（2mM）、O-2545（0.1%）＋SR-141716（2mM）、O-1812（0.1%）＋SR-144258（2mM）、およびO-2545（0.1%）＋SR-144258（2mM）のいずれかからなる。全ての実験は、実験における動物の使用についてのInstitutional Animal Care and Use Committeeの指針およびARVOの指針に従って実施された。注射の1週間前、注射の1週間および2週間後に、最低限2回の基準ERG測定を記録した。それぞれの実験の最後に、ラットを犠牲にして、網膜および視神経へ作用の組織学的評価のために、それらの眼を保存した。
【００４３】
網膜電図
正常な網膜において、全領域の網膜電図検査（ERG）で、杆体（a波）および錐体（b波）の両方に刺激を与える。それらの振幅の減少は網膜機能の損傷を意味する。暗順応ERGの変化を、少なくとも4時間暗順応させたラットで測定した。次いで、1%のアトロピンで眼を拡張させた後、0.5%のプロパラカインおよびメチルセルロース・ゲル（GPS 2.5%）を局所適用した。特注のAgCl電極を角膜の頂点に置いた。弱毒化していない白色光の10μsecの閃光から構成される刺激を、Ganzfeldボウル・フォト・スティムレーター（Ganzfeld bowl photo stimulator）により発生させた。それぞれの眼からのデータは、駆動増幅器で別々に記録し、DASYLabを用いたデジタル処理で取得した。反対側の正常な眼を、年齢を適合させた陰性対照して、例えば、正常な損傷していない眼における反応に用いた。施術した眼とその反対側の眼の間のa波およびb波の振幅の差は、ANOVA検定およびt-検定により計算して分析した。
【００４４】
組織構造
網膜のフラット・マウント（flat mount）のために、ホルマリンで固定した全眼から網膜を切開し、superfrostスライドガラス上にマウントし、ヘマトキシリンとエオシンで染色し、そのデジタル写真を撮った。分析のために、網膜を4つの四半部（quadrant）に分割した。1四半部当り、最低限5つの50μm2切片を、細胞数を数えるために用いた。この細胞切片は、眼杯から全四半部に対して等距離となるように選択した。視神経の実験のために、視神経を視神経円板の縁で切開し、クライオ（cryo）培地中に埋め込んだ。10μmの厚さの切片を切り取り、superfrostスライドガラス上にマウントし、ヘマトキシリンとエオシンで染色した。スライドのデジタル写真を撮った。
【００４５】
ICRマウスおよび材料
24〜30gの体重の雄性ICRマウス（Harlan Laboratories、インディアナポリス、インディアナ州）を、全ての実験において用いた。マウスを、14時間：10時間の明暗サイクルで、餌と水を好きなだけ与えた状態で維持した。全ての試験群は、6〜12匹のマウスから構成された。類似体を、1：1：18の比率でエタノール、emulphorおよび生理食塩水からなる媒体に溶解した。受容体結合試験のための全ての化学品は、以下を除いては、Sigma（セントルイス、ミズーリ州）から購入した：GIBCO BRL（グランドアイランド、ニューヨーク州）からダルベッコ改変イーグル培地（Dulbeco's modified Eagle's medium）（DMEM）、Fischer Scientific（ピッツバーグ、ペンシルベニア州）からWhatman GF/B ガラス繊維ろ紙、HyClone Laboratories（ローガン、ユタ州）からウシ胎仔血清（FCS）およびウシ胎児血清（FBS）、ならびにRPI Corp.（マウントプロスペクト、イリノイ州）からBudget-Solveシンチレーション液。
【００４６】
膜標本
ヒトCB1受容体を安定発現したHEK-293細胞を、10% FBSを含むDMEM中でインキュベートし、ヒトCB2受容体を安定発現したチャイニーズハムスター卵巣（CHO）細胞を、10% FCSを含むDMEM中で培養した。1 mM EDTAを含有する冷リン酸緩衝生理食塩水を含む培地に交換することにより、細胞を採取した後、4℃で5分間、1000×gで遠心分離した。ペレットを、320 mMショ糖、2 mM EDTA および5 mM MgCl2（pH 7.4）を含有する50 mM Tris-HCl（遠心分離用緩衝液）に再懸濁し、次いで4℃で10分間、1000×gで遠心分離し、生じた上清を保存した。この過程を2回繰り返した。上清画分を合わせて、4℃で30分間、40,000×gで遠心分離した。生じたP2ペレットをアッセイ用緩衝液（50 mM Tris-HCl（pH 7.4）、3 mM MgCl2、0.2 mM EGTA、および100 mM NaCl）に再懸濁し、タンパク質を測定した。膜は、使用するまで-80℃で保管した。
【００４７】
受容体結合
BSA（5 mg/ml）を含有する0.5 mlの緩衝液中、種々の濃度（1 nM〜10μM）の試験化合物の存在下、膜ホモジネート（50μg）を0.5 nM[3H] CP55,940とともに培養した。非特異的結合を1μM CP55,940の存在下で測定した。アッセイは、30℃で1時間、インキュベートし、氷冷した50 mM Tris-HCl＋BSA（1 mg/ml）（pH 7.4）の添加により停止させた後、Whatman GF/B ガラス繊維ろ紙を通して、冷Tris緩衝液で3回洗浄しながら、真空下で濾過した。Budget-Solveシンチレーション液で試料を30〜60分間振盪することにより抽出した後、結合した放射活性を、50%の効率で、液体シンチレーション分光分析により定量した。データは、それぞれ三重で遂行した3回の実験の平均値±SEMとして報告した。Ki値は、EBDA（平衡結合データ分析（Equilibrium Binding Data Analysis）；BIOSOFT、ミルタウン、ニュージャージー州）を用いた変位データから計算した。
【００４８】
行動評価
全ての動物を終夜で観察室に慣れさせた。行動的影響を、自発運動（SA）の減少、痛覚抑制［テイル・フリック法、TF］、直腸温度（RT）、および相対的不動性（RI）カタレプシーにおける力価（potency）を測定するための4匹組のモデルにおいて評価した。テイル・フリック潜時（2〜4秒）および直腸温度に関する基準を、静脈内注射の前に決定した。基準直腸温度は、遠隔温度計および25 mmまで挿入した温度計プローブ（Yellow Springs Instrument Co.、イエロ−スプリングス、オハイオ州）を用いて測定した。類似体で静脈内処置したマウスを、5分後に個別のフォトセル・アクティビティ・チェンバー（photocell activity chamber）に入れた。チェンバーごとに16本のフォトセル・ビームを妨害した回数により測定されるというデジスキャン・アニマル・アクティビティ・モニター（Digiscan Animal Activity Monitor）（Omnitech Electronice, Inc.、コロンバス、オハイオ州）中で、自発運動を10分間監視した。10分の間にビームを妨害した総回数を求め、総数として表した。次いで、静脈内注射後20分で、熱刺激へのテイル・フリック反応時間を用いて、痛覚抑制に関してマウスを評価した。尻尾の傷害を避けるために、10秒の最大潜時を用いた。結果はMPE（%）として提示し、以下の式で計算した：MPE（%）＝［（試験潜時−対照潜時）／（10秒−対照潜時）］×100。
【００４９】
直腸温度は、静脈内注射後30分で測定した。類似体投与後の直腸温度における変化（Δ℃）を、それぞれの動物で計算した。相対不動性（カタレプシー）は、静脈内注射後40分で、リング-インモービリティ・テスト（ring-immobility test）により測定した。架台に16 cmの高さで取り付けた直径5.5 cmのリング上にマウスを置いた。5分の試行（procedure）の間にマウスがリング上で静止した時間を、ヒゲの運動を含むが呼吸を除く全ての随意運動の欠如として定義される、不動性の判定基準を用いて測定した。不動性の割合は、不動性（%）＝［不動時間（秒）］／［セッションの長さ（秒）］×100として計算した。リングから落ちたマウスまたは積極的に跳躍したマウスには、5回の試行を許可した。5回目の逃亡後、これらのマウスをリングから排除して、計算には含めなかった。データは、試験したそれぞれの状態に関して6〜12匹のマウスから集めた。
【００５０】
皮内注射または脳室内注射後、同様な手順を類似体の効果を決定するために用いた。HyldenとWilcoxの方法（HyldenおよびWilcox、1980）を、脊髄のL5とL6の間に30ゲージの針で5μlの溶液を皮内注射するために用いた。脳室内注射は、先に記載したように遂行した（Pedigo ら、1975）。マウスを2.5%イソフルランで麻酔して、頭皮に横切開を施した。フリーハンドで5 mlの薬物注射を側脳室中に施した。前記のように、注射の5〜15分後、アクティビティ・チェンバー中でマウスを試験した。痛覚抑制、体温、およびカタレプシーを、注射の20分後、20分後および40分後に、それぞれ定量した。
【００５１】
全ての試験は、ヘルシンキ宣言、および米国国立健康研究所で採用され、公表された実験動物の管理と使用の指針（Guide for the Care and Use of Laboratory Animals）に従って実行した。
【００５２】
データ分析
多数のこれまでに得た、カンナビノイドでのインビボ試験から得たデータに基づいて、それぞれのインビボの薬理学的手法におけるカンナビノイドの最大作用を以下のように推定した：90％の自発運動抑制、テイル・フリック法で100% MPE、および直腸温度で−6℃の変化。平均値および標準誤差（S.E.）を、MPE（%）、フォトセル途絶の回数、リング-インモービリティ（%）およびΔ℃に関して計算した。分散の分析（ANOVA）を用いて対照と処置群との間の有意差を決定した後、Dunnett's t-検定の事後分析を行った。StatView、version 5.0（SAS Institute、ゲーリー、ノースカロライナ州）を用いて統計分析を遂行した。有意性を「p」＜0.05として定義した。ED50の値は最大作用の半分が生じる用量として定義した。1種またはそれ以上のカンナビノイドの効果を引き起こす薬物に対して、ED50の値を、4匹組のマウスにおけるそれぞれの測定に関する用量効果曲線の直線部分で最小二乗線形回帰を用いて、別々に計算し、用量のlog10変換に対してプロットした。
【００５３】
併用療法
IOPを下げることでともに公知であるカンナビノイドおよびチモロールは、異なる作用機構を有するため、相乗効果の可能性がある。高眼圧症の慢性ラットモデルにおいて、IOPを下げるためのチモロールと合成カンナビノイド（WIN55 212-2、O-1812、またはO-2545）の組み合わせを検討した。Sprague Dawleyラットの片目の4本の強膜上静脈のうち3本を外科的に結紮して、IOPの上昇を長期間持続させた（＞44週間）。基準（−30）、0、30、60および120分で、IOPをGoldmann眼圧計により測定し、同様に心拍数および血圧も測定した。併用療法のために、基準IOPの測定後、チモロール0.5%を局所適用し、その30分後にWIN55 212-2 1.0%、O-1812 1.0%、またはO-2545 1.0%を適用した。別の実験で、O-1812 1.0%とO-2545 1.0%を同時に投与した。眼球刺激に関する分析を、基準および150分で、細隙灯検査（SLE）により遂行した。先の実験において、チモロールは、このモデルにおける30分間だけIOPを有意に下げた。
【００５４】
II. 結果
高眼圧症モデルにおいて、WIN 55-212-2およびO-1812の局所適用は有効な無毒の高眼圧症治療剤である。脂溶性のO-1812は、最も急激に発現するが、より水溶性あるO-2545は作用の持続時間が最も長い。それらの薬物動態の特徴に基づき、表IIIに挙げる新規エイコサノイドが有効なものとして、可能性としてO-1812およびO-2545より強力であると、期待される。
【００５５】
チモロール単独と比較して、チモロールとカンナビノイドとの併用療法は、IOPへのそれらの作用の時間および大きさの両方を持続させた。しかしながら、2種の合成カンナビノイドの組み合わせは、相乗効果も有した。カンナビノイドを用いる多剤療法の可能性は、より大きな利益を提供し得る。
【００５６】
本発明を詳細に記述してきたが、当業者は、多くの変更および改変を本発明に与え得ること、ならびにこのような変更および改変が本発明の精神および範囲から逸脱することなく成され得ることを理解するであろう。
【図面の簡単な説明】
【００５７】
【図１】O-1812の眼圧（IOP）プロフィール。局所投与した場合に、全濃度のO-1812（アナンドアミド類似体）が、基準または媒体と比較してIOPを有意に下げた（n=5）。0.01%のO-1812も、IOPを有意に下げたが、この下降は60分を超えて維持されなかった（n=5）。1.0%のO-1812が最も有効であった。
【図２】O-2545のIOPプロフィール。30分で、0.1 %および1.0 %のO-2545（THC類似体）の両方が、媒体と比較してIOPを有意に下げた（それぞれp=0.03および0.05）（n=7）。基準または媒体と比較した場合に、0.1 %および1.0 %は、最大120分までIOPを有意に下げた（p＜0.05、n=7）。
【図３】WIN 55-212-3のIOPプロフィール。WIN 55-212-3は、WIN 55-212-2の活性の低いエナンチオマーである。30分で、基準または媒体と比較してIOPは有意に低下した（p＜0.01、n=8）。IOPにおけるこの下降は、最大120分間まで維持された（p＜0.01、n=8）。
【図４】WIN 55-212-2のIOPプロフィール。30分で、1.0 %のみが、基準と比較してIOPを有意に下げた（p=0.01、n=11）。基準（p＜0.01、n=11）または媒体（p=0.01、n=11）と比較した場合、60分で、1.0 %は有意に下げた。IOPにおけるこの下降は、最大120分間まで維持された（p＜0.01、n=11）。0.1 %はIOPを有意に下げたが、該下降は、媒体または基準に対して有意差があるとはいえなかった（p=0.11、n=4）。
【図５】全身性作用。局所適用の後、基準と比較して、心拍数（HR）、最大血圧または最低血圧に影響した薬物はなかった（p＞0.6、n=5）。
【図６】インビボの共焦点顕微鏡検査により測定した角膜の厚さ。角膜の厚さは、WIN 55-212-2 1.0%で処置した眼（OD）および反対側の対照（OS）で測定した。角膜の厚さは、処置前（p=0.321）および処置後（p=0.263）で変化しないままであった。
【図７】神経保護（ERGのA波プロフィール）。新規カンナビノイドは、網膜機能を保護する。脂溶性でCB1作動薬であるO-1812は、網膜機能をより有効に保持した。反対側の正常な眼（OS）のパーセンテージとしてデータを示す。（OD）は処置した眼である。
【図８】CB1拮抗薬SR-141716の影響（ERGのA波プロフィール）。CB1拮抗薬は、O-1812およびO-2545の両方の作用を有効に阻害した。有意なa波の機能低下が第1週目で見られた。エラーバーは、平均値の＜0.5%であったため、示していない。
【図９】CB2拮抗薬SR-144258の影響（ERGのA波プロフィール）。CB2拮抗薬は、O-1812の作用に効果がなかった。O-2545の作用は、CB2拮抗薬の存在に影響を受けた。NMDAのみの処置は有意な機能低下をもたらした。エラーバーは、平均値の＜0.5%であったため、示していない。
【図１０】網膜神経節細胞の網膜のフラット・マウント。NMDA処置は網膜神経節細胞（RGC）に毒性があり、細胞密度が49%まで減少した。O-1812およびO-2545の両方が、RGCの数を保った。O-1812の治療は最大83%までRGCを保持した。全て倍率40×である。
【図１１】視神経。NMDA処置は視神経に損傷を与えた。この損傷は視神経の直径を小さくした。O-1812およびO-2545の両方が、NMDA誘発性損傷の多くを予防した。
【図１２】併用療法。カンナビノイドとチモロールでは付加的効果が認められ、一方、2種の合成カンナビノイドでは相乗効果が認められた。30分以内に、全ての併用がIOPを有意に下げた。チモロール単独とは違って、カンナビノイドの添加後、IOPの下降が120分を超える時間維持された。O-1812とO-2545の併用は、最大の効果を有した。眼球刺激または全身性作用を引き起こした併用はなかった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【国際調査報告】
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