(57)【要約】式（Ｉ）2009514836.tif 000039で表される化合物、又はその薬理学的に許容できる塩は、高血糖及び糖尿病の予防及び治療的処置において有用である。
2009514836.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2009514836.tif 000034
（式中、Ａは５−メチルピラジン−２−イル、５−メチルピリド−２−イル、５−クロロピリド−２−イル、ピリド−２−イル、５−メチルイソキサゾル−３−イル、イソキサゾル−３−イル、５−メチルチアゾール−２−イル、６−メチルピリダジン−３−イル、１−メチルピラゾル−３−イル、ピラジン−２−イル及びピリミジン−４−イルから選択される含窒素ヘテロアリール環である）、
又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項２】
フェニル環及びテトラヒドロピランを有する側鎖を、アミドカルボニル炭素に結合させる炭素原子が（Ｒ）−立体配置である、請求項１記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項３】
Ａが５−メチルピラジン−２−イル基である、請求項１又は２記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項４】
Ａが５−メチルピリド−２−イル基である、請求項１又は２記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項５】
Ａが５−クロロピリド−２−イル基である、請求項１又は２記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項６】
Ａがピリド−２−イル基である、請求項１又は２記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項７】
Ａが５−メチルイソキサゾル−３−イル基である、請求項１又は２記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項８】
Ａがイソキサゾル−３−イル基である、請求項１又は２記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項９】
Ａが５−メチルチアゾール−２−イル基である、請求項１又は２記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項１０】
Ａが６−メチルピリダジン−３−イル基である、請求項１又は２記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項１１】
Ａが１−メチルピラゾル−３−イル基である、請求項１又は２記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項１２】
Ａがピラジン−２−イル基である、請求項１又は２記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項１３】
Ａがピリミジン−４−イル基である、請求項１又は２記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。
【請求項１４】
請求項１から１３のいずれか１項記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩、及び薬理学的に許容できる担体を含んでなる医薬組成物。
【請求項１５】
ＧＫの活性化が望ましい症状の予防若しくは治療的処置方法であって、有効量の請求項１から１３のいずれか１項記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与する処置を含んでなる方法。
【請求項１６】
高血糖又は糖尿病の予防若しくは治療的処置方法であって、有効量の請求項１から１３のいずれか１項記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与する処置を含んでなる方法。
【請求項１７】
請求項１から１３のいずれか１項記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩が、１つ以上の他の抗高血糖薬又は抗糖尿病性薬との組み合わせで投与される、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
前糖尿病性高血糖又は耐糖能異常を示すヒトの、糖尿病の予防方法であって、予防的有効量の請求項１から１３のいずれか１項記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含んでなる方法。
【請求項１９】
式（Ｉ）の化合物
【化２】
2009514836.tif 000035
又はその薬理学的に許容できる塩の調製方法であって、当該方法は式（ＩＩ）の化合物又はその活性化された誘導体と、
【化３】
2009514836.tif 000036
式（ＩＩＩ）の化合物
【化４】
2009514836.tif 000037
又はその塩
（式中、Ａは請求項１に記載のとおりである）
との縮合を含んでなる方法。
【請求項２０】
式（ＩＩ）の化合物又はその被保護若しくは活性化誘導体。
【化５】
2009514836.tif 000038
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はトリ（シクロ）置換されたアミド化合物に関する。特に本発明は、
ｉ）カルボニル炭素の位置で、フェニル環及び複素環式環に結合するエチル基で置換され、及びｉｉ）アミノ基の位置でヘテロアリール環を形成する窒素で置換されているアミド化合物であって、グルコキナーゼの調節物質として機能し、高血糖及び糖尿病（特に２型糖尿病）の予防若しくは治療的な処置において有用な化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
グルコキナーゼ（“ＧＫ”）は、血漿グルコース値の体内調節において重要であると考えられている。主に肝臓及び膵臓に存在するＧＫは、グルコースの初期の代謝を触媒する４種類のヘキソキナーゼの１つである。ＧＫ経路は他のヘキソキナーゼ経路と比較し、高い血糖値にて飽和する（非特許文献１を参照）。ＧＫは哺乳類におけるグルコースのバランスの維持にとり重要である。ＧＫを発現しない動物では糖尿病が発症すると即座に死に至るが、一方ＧＫを過剰に発現する動物では耐糖能を有する。ＧＫの活性化により、高インスリン低血糖症に至る場合がある（例えば、非特許文献２を参照）。更に、若年層における２型の成人発症型糖尿病はＧＫ遺伝子変異による機能損失を原因として生じ、すなわちＧＫが、ヒトのグルコースセンサーとして機能することを示している（非特許文献３）。すなわち、ＧＫを活性化する化合物は、ＧＫのセンサーシステムの感度を増大させ、高血糖症、特に２型糖尿病に関連する高血糖症の治療に有用であると考えられる。従って、ＧＫを活性化して糖尿病を治療する新規な化合物、特に公知のＧＫ活性剤と比較して医薬品にとり望ましい改善された特性を示す化合物の提供は望ましいことである。
【０００３】
特許文献１及び２では、ＧＫ活性剤としての（Ｅ）−２，３−二置換−Ｎ−へテロアリールアクリルアミドを記載している。特許文献３から６では、テトラゾリルフェニルアセトアミド系のＧＫ活性剤を記載している。特許文献７から９では、アリールシクロアルキルプロピオンアミド系のＧＫ活性剤を記載している。特許文献１０及び１１では、抗糖尿病薬としての、α−アシル及びα−へテロ原子置換のベンゼンアセトアミドのＧＫ活性剤を記載している。特許文献１２では、ヒダントイン含有ＧＫ活性剤を記載している。特許文献１３及び１４では、アルキニルフェニルヘテロ芳香族系のＧＫ活性剤を記載している。特許文献１５及び１６では、ｐ−アミン置換フェニルアミド系のＧＫ活性剤を記載している。特許文献１７から２０では、融合型のヘテロ芳香族系のＧＫ活性剤を記載している。特許文献２１及び２２では、イソインドリン−１−オン系のＧＫ活性剤を記載している。特許文献２３では、２型糖尿病の治療用の置換フェニルアセトアミド系のＧＫ活性剤を記載している。特許文献２４では、ｐ−アリール又はヘテロアリール置換フェニル系のＧＫ活性剤を記載している。特許文献２５では、ヒトＧＫの精製方法及びヒトＧＫの結晶構造を記載している。特許文献２６では、２型糖尿病の治療用のＧＫ活性剤としての、Ｎ−へテロアリールフェニルアセトアミド及び関連化合物を記載している。特許文献２７では、ＧＫ活性剤としてのシクロアルキルへテロアリールプロピオンアミドの調製方法を記載している。特許文献２８では、ビニルフェニル系のＧＫ活性剤を記載している。特許文献２９では、ＧＫ調節物質としてのアミノニコチン酸誘導体を記載している。特許文献３０では、ＧＫ調節物質としての化合物を記載している。特許文献３１では、２型糖尿病の治療における、ＧＫ活性剤とグルカゴンアンタゴニストとの併用方法を記載している。特許文献３２では、ＧＫ活性剤としてのアミド誘導体を記載している。特許文献３３では、糖尿病及び肥満症の治療用の、ＧＫ活性剤としてのアミノベンズアミド誘導体を記載している。特許文献３４では、ヒト肝臓由来のＧＫの結晶構造、及びその構造に基づいた医薬品設計への使用を記載している。特許文献３５では、ＧＫ活性剤としてのアリールカルボニル誘導体を開示している。特許文献３６及び３７では、ＧＫ活性剤としてのトリ（シクロ）置換アミド化合物を開示している。特許文献３８（本願の優先日後に公開）では、ｉ）カルボニル炭素の位置において、フェニル環及び炭素環に結合するエチル／エテニル基で置換され、及びｉｉ）アミノ基の位置において、ヘテロアリール又は不飽和ヘテロシクリル環を形成する窒素で置換されているアミド化合物であって、グルコキナーゼの調節物質として機能し、高血糖症及び糖尿病、特に２型糖尿病の予防的又は治療的処置において有用な化合物を開示している。
【特許文献１】国際公開第２００１／０４４２１６号
【特許文献２】米国特許第６３５３１１１号
【特許文献３】国際公開第２００２／０１４３１２号
【特許文献４】米国特許第６３６９２３２号
【特許文献５】米国特許第６３８８０８８号
【特許文献６】米国特許第６４４１１８０号
【特許文献７】国際公開第２０００／０５８２９３号
【特許文献８】欧州特許出願第１１６９３１２号
【特許文献９】米国特許第６３２００５０号
【特許文献１０】国際公開第２００２／００８２０９号
【特許文献１１】米国特許第６４８６１８４号
【特許文献１２】国際公開第２００１／０８３４７８号
【特許文献１３】国際公開第２００１／０８３４６５号
【特許文献１４】米国特許第６３８８０７１号
【特許文献１５】国際公開第２００１／０８５７０７号
【特許文献１６】米国特許第６４８９４８５号
【特許文献１７】国際公開第２００２／０４６１７３号
【特許文献１８】米国特許第６４３３１８８号
【特許文献１９】米国特許第第６４４１１８４号
【特許文献２０】米国特許第第６４４８３９９号
【特許文献２１】国際公開第２００２／０４８１０６号
【特許文献２２】米国特許第６４８２９５１号
【特許文献２３】国際公開第２００１／０８５７０６号
【特許文献２４】米国特許第６３８４２２０号
【特許文献２５】仏国特許第２８３４２９５号
【特許文献２６】国際公開第２００３／０９５４３８号
【特許文献２７】米国特許第６６１０８４６号
【特許文献２８】国際公開第２００３／０００２６２号
【特許文献２９】国際公開第２００３／０００２６７号
【特許文献３０】国際公開第２００３／０１５７７４号
【特許文献３１】国際公開第２００３／０４７６２６号
【特許文献３２】国際公開第２００３／０５５４８２号
【特許文献３３】国際公開第２００３／０８０５８５号
【特許文献３４】国際公開第２００３／０９７８２４号
【特許文献３５】国際公開第２００４／００２４８１号
【特許文献３６】国際公開第２００４／０７２０３１号
【特許文献３７】国際公開第２００４／０７２０６６号
【特許文献３８】国際特許出願ＰＣＴ／ＧＢ２００５／０５０１２９号
【非特許文献１】Ｒ．Ｌ．ｒｉｎｔｚ等，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｕｔｒ．，１３：４６３−４９６（１９９３）
【非特許文献２】Ｈ．Ｂ．Ｔ．Ｃｈｒｉｓｔｅｓｅｎ等，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，５１：１２４０−１２４６（２００２）
【非特許文献３】Ｙ．Ｌｉａｎｇ等，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，３０９：１６７−１７３（１９９５）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、周知のＧＫ活性剤と比較し、医薬製剤にとり望ましい改良された特性（例えば効力の増大）を示しうる新規なＧＫ活性剤の提供に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
式（Ｉ）で表される化合物：
【化１】
2009514836.tif 000003
又は、その薬学的に許容できる塩。それらは高血糖及び糖尿病（特に２型糖尿病）の予防若しくは治療的な処置において有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
本発明は式（Ｉ）で表される化合物：
【化２】
2009514836.tif 000004
（式中、Ａは５−メチルピラジン−２−イル、５−メチルピリド−２−イル、５−クロロピリド−２−イル、ピリド−２−イル、５−メチルイソキサゾル−３−イル、イソキサゾル−３−イル、５−メチルチアゾール−２−イル、６−メチルピリダジン−３−イル、１−メチルピラゾル−３−イル、ピラジン−２−イル及びピリミジン−４−イルから選択される含窒素ヘテロアリール環）、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩の提供に関する。Ａは好ましくは５−メチルピラジン−２−イル又はピラジン−２−イルである。本発明の一実施形態では、Ａは５−メチルピラジン−２−イルを意味する。
【化３】
2009514836.tif 000005
本発明の第２の実施形態では、Ａは５−メチルピリド−２−イルを意味する。
【化４】
2009514836.tif 000006
本発明の第３の実施形態では、Ａは５−クロロピリド−２−イルを意味する。
【化５】
2009514836.tif 000007
本発明の第４の実施形態では、Ａはピリド−２−イルを意味する。
【化６】
2009514836.tif 000008
本発明の第５の実施形態では、Ａは５−メチルイソキサゾル−３−イルを意味する。
【化７】
2009514836.tif 000009
本発明の第６の実施形態では、Ａはイソキサゾル−３−イルを意味する。
【化８】
2009514836.tif 000010
本発明の第７の実施形態では、Ａは５−メチルチアゾール−２−イルを意味する。
【化９】
2009514836.tif 000011
本発明の第８の実施形態では、Ａは６−メチルピリダジン−３−イルを意味する。
【化１０】
2009514836.tif 000012
本発明の第９の実施形態では、Ａは１−メチルピラゾル−３−イルを意味する。
【化１１】
2009514836.tif 000013
本発明の第１０の実施形態では、Ａはピラジン−２−イルを意味する。
【化１２】
2009514836.tif 000014
本発明の第１１の実施形態では、Ａはピリミジン−４−イルを意味する。
【化１３】
2009514836.tif 000015
【０００７】
フェニル環及びテトラヒドロピランを有する側鎖を、アミドカルボニル炭素に結合させる炭素原子はキラル中心である。したがって、この中心の存在により、化合物はラセミ化合物として存在する場合もあり、又は（Ｒ）−若しくは（Ｓ）−立体配置のうちのいずれか１つの鏡像異性体として存在する場合もある。（Ｒ）−鏡像異性体が好適である。
【０００８】
「薬理学的に許容できる塩」という用語には、無機及び有機酸などの、薬理学的に許容できる非毒性の酸から調製される塩が包含される。かかる酸としては例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファスルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素、塩化水素、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタン硫酸、ムコ酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが挙げられる。特に好適には、クエン酸、臭化水素、塩化水素、マレイン酸、リン酸、硫酸、メタン硫酸及び酒石酸である。
【０００９】
上記の式の化合物及びその薬理学的に許容できる塩が溶媒和物又は多形形態で存在する場合、本発明には考えられるあらゆる溶媒和物及び多形形が包含される。溶媒和物を形成する溶媒のタイプは、その溶媒が薬理的に許容できる限り特に限定されない。例えば水、エタノール、プロパノール、アセトン等が使用できる。
【００１０】
式（Ｉ）の化合物は製薬用途であるため、実質的に純粋な形で調製するのが好適であり、例えば少なくとも６０％純度、好適には少なくとも７５％純度、より好適には少なくとも９５％純度、特に好適には少なくとも９８％純度である（％はｗ／ｗ）。
【００１１】
本発明にはまた、薬理学的に許容できる担体と組み合わせた形の、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を含有する医薬組成物が包含される。
【００１２】
好ましくは、当該組成物は、薬理学的に許容できる担体、及び非毒性かつ治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を含有する。
【００１３】
更に、この実施形態において、本発明には、ＧＫの活性化に基づく、高血糖及び糖尿病（特に２型糖尿病）の予防又は治療用の医薬組成物であって、薬理学的に許容できる担体、及び非毒性かつ治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を含有する医薬組成物が包含される。
【００１４】
本発明はまた、医薬としての、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩の使用の提供に関する。
【００１５】
本発明の化合物及び組成物は、哺乳類（例えばヒト）の高血糖及び糖尿病（特に２型糖尿病）の治療に効果的である。
【００１６】
本発明はまた、ＧＫの活性化を必要とする症状の予防若しくは治療的な処置方法であって、有効量の式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含んでなる方法の提供に関する。
【００１７】
本発明はまた、有効量の式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含んでなる、高血糖又は糖尿病（特に２型糖尿病）の予防若しくは治療的な処置方法の提供に関する。
【００１８】
本発明はまた、前糖尿病性高血糖又は耐糖能異常を示すヒトの、糖尿病（特に２型糖尿病）の予防方法であって、予防的有効量の式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含んでなる方法の提供に関する。
【００１９】
本発明はまた、ＧＫ活性剤としての、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩の使用の提供に関する。
【００２０】
本発明はまた、高血糖又は糖尿病（特に２型糖尿病）の予防若しくは治療的な処置への、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩の使用の提供に関する。
【００２１】
本発明はまた、前糖尿病性高血糖又は耐糖能異常を示すヒトにおける糖尿病（特に２型糖尿病）の予防のための、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩の使用の提供に関する。
【００２２】
本発明はまた、ＧＫ活性化用の薬剤の製造への、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩の使用の提供に関する。
【００２３】
本発明はまた、高血糖又は糖尿病（特に２型糖尿病）の予防若しくは治療的な処置のための薬剤の製造への、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩の使用の提供に関する。
【００２４】
本発明はまた、前糖尿病性高血糖又は耐糖能異常を示すヒトにおける糖尿病（特に２型糖尿病）を予防するための薬剤の製造への、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩の使用の提供に関する。
【００２５】
本発明の化合物及び組成物は、１つ以上の他の抗糖尿病薬又は抗高血糖薬と任意に組み合わせて使用でき、例えばスルホニル尿素（例えばグリブリド、グリメピリド、グリピリド、グリピジド、クロルプロパミド、グリクラジド、グリソキセピド、アセトヘキサミド、グリボルヌリド、トルブタミド、トラザミド、カルブタミド、グリキドン、グリヘキサミド、フェンブタミド、トリシクラミドなど）、ビグアナイド（例えばメトホルミン、フェンホルミン、ブホルミンなど）、グルカゴンアンタゴニスト（例えばペプチド又は非ペプチド系のグルカゴンアンタゴニスト）、グルコシダーゼ阻害剤（例えばアカルボース、ミグリトールなど）、インシュリン分泌促進物質、インシュリン感作物質（例えばトログリタゾン、ロシグリタゾン、ピオグリタゾンなど）、又は抗肥満薬（例えばシブトラミン、オルリスタットなど）が挙げられる。本発明に係る化合物及び組成物、並びに他の抗糖尿病薬又は抗高血糖薬を、同時に、連続的に又は別個に投与してもよい。
【００２６】
本発明の医薬組成物は、有効成分としての式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩、薬理学的に許容できる担体及び任意に他の治療的な成分若しくは補助剤を含んでなる。当該組成物としては、経口投与、直腸内投与、局所投与及び非経口投与（皮下、筋肉内、静脈内投与を含む）、並びに吸引投与に適する組成物が挙げられるが、いかなるケースにおいても、最も適切な投与経路は具体的な宿主、及び有効成分を投与しようとする症状の特徴及び重症度に依存するのは言うまでもない。医薬組成物はユニットドーズ形態として存在してもよく、あらゆる公知の製薬技術を用いて調製することができる。
【００２７】
本発明による医薬組成物は、好適には経口投与に適する形態である。
【００２８】
実際には、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩は、有効成分として、従来公知の製薬技術における医薬用担体との組合せで均一な混合物として調製できる。当該担体は、所望の投与形態（例えば経口投与又は非経口投与（静脈内投与を含む））に応じて多様な形態をとることができる。すなわち本発明の医薬組成物は、経口投与に適する別々の投薬単位（例えば所定量の各有効成分を含むカプセル、カシェ剤又は錠剤）として調製してもよい。更に当該組成物は、粉末状、顆粒状、溶液状、水懸濁液状、非水溶液状、水中油型エマルジョン状、又は油中水エマルジョン状の形態で調製してもよい。上記の一般的な剤形に加えて、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩は、制御放出手段及び／又は輸送手段を用いて投与してもよい。当該組成物は、いかなる製薬技術を用いて調製してもよい。かかる方法は通常、１つ以上の必要な成分を構成する担体と有効成分を混合する工程を含んでなる。通常、当該組成物は均一かつ親密に、有効成分と、液体担体若しくは微粉砕した固体担体又はその両方とを混合することにより調製される。当該生成物を更に、所望の形態に簡便に成形できる。
【００２９】
すなわち、本発明の医薬組成物は、薬理学的に許容できる担体、及び式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を含有してもよい。式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩は、１つ以上の他の治療的活性を有する化合物との組み合わせで医薬組成物に含有させてもよい。
【００３０】
本発明の医薬組成物には、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を含有する薬理学的に許容できるリポソーム型製剤が包含される。
【００３１】
使用される医薬用担体には、例えば固体担体、液体担体又はガス状の担体が包含される。固体担体の例としては、ラクトース、白土、蔗糖、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム及びステアリン酸が挙げられる。液体担体の例としては、シュガーシロップ、ピーナッツオイル、オリーブオイル及び水が挙げられる。ガス状の担体の例としては、二酸化炭素及び窒素が挙げられる。
【００３２】
経口投与用の組成物の調製において、いかなる有用な製薬用媒体も使用できる。例えば、水、グリコール、油、アルコール、香料、防腐剤、着色剤、などを用いて経口投与用の液体製剤（例えば懸濁液、エリキシル及び溶液）を形成してもよく、一方で、澱粉、糖、微結晶セルロース、希釈剤、粒状化剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などの担体を用いて経口投与用の固体製剤（例えば粉、カプセル及び錠剤）を形成してもよい。投与の簡便性の理由から、錠剤及びカプセルが好適な経口投与用の投与単位であり、ゆえに固体状の医薬用担体が使用される。任意に、錠剤に標準的な水性又は非水性のコーティング技術を適用してもよい。
【００３３】
本発明の組成物を含んでいる錠剤は、任意に１つ以上のアクセサリ成分又は補助剤を添加して、圧縮又は成形により調製してもよい。圧縮された錠剤は、適切な装置を用いて、粉末又は顆粒などの流動形態の有効成分、任意に結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、表面活性剤もしくは分散剤、又はその他賦形剤を混合し、圧縮することにより調製できる。当該賦形剤としては例えば、不活性希釈剤（例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウム）、顆粒化剤及び崩壊剤（例えばコーンスターチ又はアルギン酸）、結合剤（例えばデンプン、ゼラチン又はアラビアゴム）、並びに潤滑剤（例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルク）が挙げられる。錠剤にはコーティングを施さなくともよいが、施す場合には、崩壊及び消化管の吸収を遅延させる公知の技術を用いてコーティングしてもよく、それにより長期間にわたり一定の動態を維持することが可能となる。例えば、グリセリルモノステアレート塩又はグリセリルジステアレートなどの徐放性材料を用いてもよい。
【００３４】
堅質ゼラチンカプセル中で、有効成分と、不活性な固体希釈剤（例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリン）とを混合状態で存在させてもよい。軟ゼラチンカプセル中で、有効成分と、水又は油性媒体（例えばピーナッツ油、流動パラフィン又はオリーブ油）とを混合状態で存在させてもよい。粉末状の化合物の混合物を不活性液体希釈剤で湿らせ、適切な装置を用いて錠剤を成形してもよい。各錠剤は有効成分を約０．０５ｍｇ〜約５ｇ含有するのが好ましく、又はカプセルは有効成分を約０．０５ｍｇ〜約５ｇ含有するのが好ましい。
【００３５】
例えば、ヒトへの経口投与を目的とする製剤は、約０．５ｍｇ〜約５ｇの活性薬剤と、組成物全体の約５〜約９５％の範囲の適当量の担体材料とを含んでなる。ユニットドーズは通常、約１ｍｇ〜約２ｇの有効成分、典型的には２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ又は１０００ｍｇの有効成分を含有する。
【００３６】
非経口投与に適する本発明の医薬組成物は、活性化合物の水溶液又は水懸濁液として調製してもよい。適切な界面活性剤としては、例えばヒドロキシプロピルセルロースが挙げられる。グリセロール、液体ポリエチレングリコール及びそれらの油中混合物中に分散液を調製することができる。更に、防腐剤を含有させることにより、微生物の好ましくない増殖を防止できる。
【００３７】
本発明の医薬組成物を注射用途に用いる場合、滅菌された水溶液又は分散液を使用する。更に、かかる滅菌された注射用溶液又は分散液の即時調製のために、当該組成物を無菌の粉末状態にしてもよい。全ての場合において、最終的な注射用形態は無菌でなければならず、シリンジ操作の簡便化のために充分に流動的でなければならない。医薬組成物は製造及び保存条件下で安定でなければならず、好ましくは、微生物（例えばバクテリア及び菌類）の混入から保護されなければならない。担体は溶媒又は分散媒であってもよく、例えば水、エタノール、多価アルコール（例えばグリセロール、プロピレングリコール及び液体ポリエチレングリコール）、植物油及びそれらの適切な混合物が挙げられる。
【００３８】
本発明の医薬組成物は、局所投与用の形態（例えばエアゾール、クリーム、軟膏、ローション剤、消毒用散布剤など）であってもよい。更に、当該組成物は、経真皮投与陽の形態であってもよい。これらの製剤は、式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を利用して、従来の製剤工程を介して調製してもよい。例えば、式（Ｉ）の化合物を５重量％〜約１０重量％、並びに親水性材料及び水を混合することにより、所望の粘度を有するクリーム又は軟膏が調製される。
【００３９】
本発明の医薬組成物は、固体担体を用いて直腸投与用に調製してもよい。好ましくは当該混合物をユニットドーズとして坐薬に形成する。好適な担体として、従来技術において通常使用されるカカオバター及び他の材料が挙げられる。当該坐薬は、最初に組成物を軟化若しくは溶融した１つ以上の担体と混合し、更に冷却し、鋳型中で成型することにより簡便に調製できる。
【００４０】
本発明の医薬組成物を、吸入投与用に調製してもよい。かかる投与は、例えば以下の文献に記載されている形で行ってもよく、そこで用いられている担体を用いてもよい：１）Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｄｒｙ  Ｐｏｗｄｅｒ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ，Ｘｉａｎ  Ｚｅｎｇ  ら、２０００，Ｔａｙｌｏｒ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｃｉｓ，２）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ  Ａｅｒｏｓｏｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ａｎｔｈｏｎｙ  Ｈｉｃｋｅｙ，１９９２，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，３）Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，１９９０，Ｅｄｉｔｏｒ：Ｐ．Ｒ．Ｂｙｒｏｎ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ．
【００４１】
上記の担体成分に加えて、上記の医薬組成物に、１つ以上の追加的な担体成分（例えば希釈剤、バッファ、香料、結合剤、界面活性剤、増粘剤、潤滑剤、防腐剤（酸化防止剤を含む））を適宜含有させてもよい。更に他の補助剤を含有させ、製剤を意図された受容者の血液と等張にしてもよい。式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を含有している組成物は、粉末又は濃縮液の形態で調製してもよい。
【００４２】
通常、１患者あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ体重オーダーの１日当たり投与量、あるいは約０．５ｍｇ〜約１０ｇの１日当たり投与量が、上記の症状の治療において有用である。例えば２型糖尿病の場合、１患者あたり、化合物を約０．０１ｍｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日、あるいは０．５ｍｇ〜約７ｇ／ｋｇ体重／日で投与することにより、効果的に治療することができる。
【００４３】
しかしながら、特定の患者のための具体的な投与量は、年齢、体重、健康状態、性別、食事、投与回数、投与経路、排出速度、薬剤の組合せ及び糖尿病治療を受けている患者の疾病の重症度などの様々な要因に依存することが理解される。更に、本発明の化合物及びその塩は、高血糖症状となる予想に基づいて、予防を目的として、治療的な量以下のレベルで投与できるものと理解される。
【００４４】
式（Ｉ）の化合物は周知のグルコキナーゼ活性剤と比較して有利な特性を示し、かかる特性は、本願明細書に記載のアッセイ、又は当業者に公知の他のアッセイにおいて示される。特に本発明の化合物は、Ｋｍ、Ｖｍａｘ、ＥＣ５０、最大活性（グルコース濃度＝５ｍＭ）、最大血糖値から血糖値への減少及び／又は経口ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）における食後のグルコースピークの減少の数値的な改良、又は、周知のＧＫ活性剤と比較した他の有利な薬理学的特性（例えば水溶性の向上、血漿タンパク質との結合の減少及び／又は代謝安定性の向上など）をもたらす。本発明の化合物は、周知の化合物と比較して、低い神経毒性、活性の長期化（例えば半減期の長期化／高い血漿タンパク質との結合性）、高い生物学的利用能、及び／又は高い薬効（例えばｉｎ  ｖｉｔｒｏ若しくはｉｎ  ｖｉｖｏ）などの特性の１つ以上を示す。
【００４５】
（調製例）
本発明では、式（Ｉ）の化合物は、下記の反応式１に例示されるプロトコルに従い調製できる。
【００４６】
＜反応式１＞
【化１４】
2009514836.tif 000016
カルボン酸ＩＩ又はその活性化誘導体を、アミンＩＩＩ又はその塩（例えば塩酸塩）と、当業者に公知の様々な結合条件を用いて縮合させることができる。例えば、エナンチオ純粋なカルボン酸ＩＩを、ごくわずかなラセミ化を生じさせる試薬（例えばベンゾトリアゾル−ｌ−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（Ｊ．Ｃｏｓｔｅら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，１９９０，３１，２０５−２０８））を使用してアミンＩＩＩ又はその塩と縮合させ、式（Ｉ）のエナンチオ的に純粋なアミドを調製することができる。あるいは、カルボン酸カルボン酸ＩＩを、例えばジクロロメタン中の（ＣＯＣｌ）２及びＤＭＦ（例えば−４５℃）で処理し、更にアミンＩＩＩ及びピリジンを添加する。
【００４７】
あるいは、アミドのラセミ混合物をラセミ体のカルボン酸ＩＩから調製し、更にキラル固相（例えばダイセル化学工業社製、東京、日本）を使用したキラル高速液体クロマトグラフィで分離し、所望の式（Ｉ）の化合物を得ることも可能である。
【００４８】
アミンＩＩＩは、市販品を購入するか、又は周知の技術を使用して容易に調製できる。
【００４９】
カルボン酸ＩＩは、下記の反応式２に例示されるプロトコルに従い調製できる。
【００５０】
＜反応式２＞
【化１５】
2009514836.tif 000017
式ＩＶの化合物は通常、触媒的水素化処理（ｉ）、次に鏡像異性的に純粋なキラル試薬との反応従来の技術を使用したジアステレオマーの分離、及び最後にキラル分離剤（ｉｉ）の除去によって、鏡像異性的に純粋なカルボン酸Ｖ（（Ｒ）異性体として例示する）に変換される。
【００５１】
触媒的水素化処理では通常パラジウム触媒を使用する。例えば、ラセミ化合物Ｖをキラルオキサゾリジノン誘導体（例えば、Ｆ．Ｔ．Ｂｉｚｚａｒｒｏらの国際公開第００／５８２９３号を参照）と縮合させ、ジアステレオ異性体イミドの混合物を生成し、任意の従来技術（例えばカラムクロマトグラフィ）によって分離することができる。純粋なイミドの加水分解により、立体的に純粋な（Ｒ）及び（Ｓ）−カルボン酸が得られ、更にヘテロアリールアミンＩＩＩと縮合させることができる。
【００５２】
あるいは、式ＩＶの化合物を、非対称還元（ｉｉｉ）によって、直接鏡像異性的に純粋なカルボン酸ＩＩに変換させることもできる。
【００５３】
化合物ＩＶの合成は、下記の反応式３において例示されるプロトコルに従い調製できる。
【００５４】
＜反応式３＞
【化１６】
2009514836.tif 000018
化合物ＶＩのシクロプロピル化を、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９７７  ９９：３０８０−３０８７に記載のような方法に従い実施し、化合物ＶＩＩを調製することができる。簡潔には、水酸化カリウムの存在下でＢｒ（ＣＨ２）３Ｃｌで処理し、更にＦｅＮＯ３の存在下でＫＮＨ２で処理する。
【００５５】
その後化合物ＶＩＩを、４つの処理（Ｆｒｉｅｄｅｌ−Ｃｒａｆｔｓ、酸化、Ｗｉｔｔｉｇ、鹸化）工程に供し、式ＩＶの酸に変換することができる。第１のフリーデル−クラフツ処理は、国際公開第０３／９５４３８号に記載された方法と類似する方法で実施でき、すなわち化合物ＶＩＩを、ＡｌＣｌ３の存在下で、溶媒（例えばクロロホルム）中でエチルクロロオキソアセテートで処理し、（３−クロロ−４−シクロプロピルスルファニル−フェニル）オキソ酢酸  エチルエステルを調製することができる。次の工程として、国際公開第２００４／０７２０３１号に記載の方法と類似した方法を実施し、化合物ＩＶ（調製２２及び２３）の塩素化されていない同等物を調製してもよい。
【００５６】
あるいは、式Ｖの化合物は、反応式４に示すように調製してもよい。
【００５７】
＜反応式４＞
【化１７】
2009514836.tif 000019
上記の（３−クロロ−４−シクロプロピルスルファニルフェニル）オキソ酢酸エチルエステルを鹸化し、対応するカルボン酸を調製してもよい。この化合物のオキソ基はＷｏｌｆｆ−Ｋｉｓｈｎｅｒプロトコルによりメチレンに変化する。得られるフェニル酢酸を（１Ｒ，２Ｒ）−（−）−シュード−エフェドリンとカップリングし、ＶＩＩＩを得る。４−ヨードメチルテトラヒドロピランによるこの化合物の非対称アルキル化によりアミドＩＸが得られ、更に酸水溶液で加水分解してエナンチオ純粋なチオエーテル酸が得られ、更にエナンチオ純粋な酸Ｖに酸化される。
【００５８】
式（Ｉ）の化合物の調製に関する詳細を実施例に記載する。
【００５９】
式（Ｉ）の化合物の合成の間、中間体化合物中の反応しやすい官能基（例えばヒドロキシ基、オキソ基、カルボキシル基及びアミノ基）を保護してもよい。保護群は、式（Ｉ）の化合物の合成のいかなる工程段階でも除去してもよく、又は式（Ｉ）の最終化合物に存在してもよい。反応を受けやすい様々な官能基の保護方法、及び得られる被保護誘導体の切断方法に関する一般的な議論が、例えば「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，（１９９１）Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ」に記載されている。
【００６０】
上記のいかなる新規な中間体も本発明に包含される。すなわち本発明は、式（ＩＩ）で表される新規な中間体、その保護若しくは活性化された誘導体、及び新規なＧＫ活性剤の合成へのかかる化合物の使用の提供に関する。特に本発明は、化合物（２Ｒ）−２−（３−クロロ−４−シクロプロパンスルホニルフェニル）−３−（テトラヒドロピラン−４−イル）プロピオン酸、その被保護又は活性化誘導体の提供に関する。
【００６１】
すべての刊行物（本願明細書に引用される特許及び特許出願を含むがこれに限らない）は、あたかも個々の刊行物を具体的かつ個別に本願明細書に引用したものと示すかのように、参照によって本願明細書に援用される。
【実施例】
【００６２】
略語及び頭字語：Ａｃ：アセチル、ｔＢＭＥ：ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ＡＴＰ：アデノシン５’−トリホスフェート、ＤＭＥ：ジメチルホルムアミド、Ｅｔ：エチル、ＧＫ：グルコキナーゼ、Ｇｌｃ：グルコース、Ｇ６Ｐ：グルコース−６−ホスフェート、Ｇ６ＰＤＨ：グルコース−６−ホスフェート脱水素酵素、ＧＳＴ−ＧＫ：グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ−グルコキナーゼ融合タンパク質、ＮＡＤＰ（Ｈ）：β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（還元）、ｒｔ：室温、ＴＨＦ：テトラヒドロフラン。
【００６３】
調製１：１−クロロ−２−（３−クロロプロピルスルファニル）ベンゼン
【化１８】
2009514836.tif 000020
テトラブチルアンモニウムクロリド（１ｇ、０．００３５モル、０．００２当量）を、２−ブロモ−３−クロロプロパン（２６２ｇ、１．６６０モル、１．２当量）、ＫＯＨ（５０８ｇ、３．６８０モル、２．６６当量）及びｔＢＭＥ（３．０Ｌ）の混合物に添加した。室温条件下、２−クロロチオフェノール（２００ｇ、１．３８３モル、１当量）をｔＢＭＥ（０．２Ｌ）に溶解した溶液を添加し、次に、Ｈ２Ｏの第１の部分（０．００３Ｌ）を添加し、ガスを発生させ、反応温度を上昇させた。更なる量のＨ２Ｏ（０．０２７Ｌ）を、３０℃未満の温度を維持しつつ注意して添加した。反応混合物を一晩撹拌し、懸濁液をフリットで濾過した。濾液を真空下で濃縮し、標題の化合物を得た。δＨ（ＣＤＣｌ３）：２．１０−２．２０（ｍ，２Ｈ），３．１３（ｔ，２Ｈ），３．７４（ｔ，２Ｈ），７．１７（ｔ，１Ｈ），７．２２（ｔ，１Ｈ），７．３５（ｄ，１Ｈ），７．４１（ｄ，１Ｈ）。
【００６４】
調製２：１−クロロ−２−シクロプロピルスルファニルベンゼン
【化１９】
2009514836.tif 000021
Ｗ．Ｅ．Ｔｒｕｃｅ等，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９６８，３３（１）４３の方法に従って調製１から調製した。δＨ（ＣＤＣｌ３）：０．７０−０．８０（ｍ，２Ｈ），１．１２−１．２０（ｍ，２Ｈ），２．１２−２．２１（ｍ，１Ｈ），７．０７（ｔ，１Ｈ），７．２３−７．３６（ｍ，２Ｈ），７．５８（ｄ，１Ｈ）。
【００６５】
調製３：エチル（３−クロロ−４−シクロプロピルスルファニルフェニル）オキソアセテート
【化２０】
2009514836.tif 000022
ＡｌＣｌ３（７０ｇ、０．５２５モル、１．５当量）をジクロロエタン（０．８Ｌ）に懸濁させた懸濁液を５℃に冷却した。オキサリルエステルクロリド（７１．７ｇ、０．５２５モル、１．５当量）を添加し、溶液を得た。調製２（４８．５ｇ、０．２６２モル、１当量）をジクロロエタン（０．１Ｌ）に溶解した溶液を、５℃未満の温度を維持しつつ１０分間にわたり添加した。冷却浴を取り除き、反応物を室温条件下で１．５時間撹拌した。反応物を氷でクエンチし、ＨＣｌ水溶液（１Ｍ）で酸性化し、層を分離させた。有機層をＨ２Ｏ（２×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ２、６５０ｇ）によって精製し、真空濃縮し、標題の化合物を得た。δＨ（ＣＤＣｌ３）：０．７７−０．８３（ｍ，２Ｈ），１．２１−１．２９（ｍ，２Ｈ），１．４８（ｔ，３Ｈ），２．１３−２．２２（ｍ，１Ｈ），４．４４（ｑ，２Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），７．９４（ｄ，１Ｈ），７．９９（ｓ，１Ｈ）。
【００６６】
調製４：（３−クロロ−４−シクロプロピルスルファニルフェニル）オキソ酢酸
【化２１】
2009514836.tif 000023
ＮａＯＨ水溶液（０．３５８Ｌ、２Ｍ、２当量）を、エタノール（０．５Ｌ）中における調製３（１０２ｇ、０．３５８モル、１当量）に添加し、反応混合物を室温条件下で１時間撹拌した。その後、エタノールを蒸留除去し、氷冷Ｈ２Ｏ（８０．５ｍＬ）を添加した。懸濁液をイソプロピルアセテート（３×１００ｍＬ）で洗浄し、水性層をＨＣｌ水溶液で酸性化した。生成物をイソプロピルアセテート（３×２００ｍＬ）で抽出し、有機相を回収し、Ｈ２Ｏ（０．０５Ｌ）及びブライン（０．０５Ｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。最小限のｔＢＭＥ、次にヘプタンを添加し、シーディング（ｓｅｅｄｉｎｇ）して結晶性の懸濁液を得、これを０℃に冷却した。結晶性の物質をろ過し、室温下で一晩乾燥させ、標題の化合物を得た。母液を僅かな真空下で濃縮し、標題の化合物の次の生成物を沈殿させた。δＨ（ＣＤＣｌ３）：０．７８−０．８４（ｍ，２Ｈ），１．２２−１．３０（ｍ，２Ｈ），２．１５−２．２３（ｍ，１Ｈ），７．７３（ｄ，１Ｈ），８．３８−８．４１（ｍ，２Ｈ）。
【００６７】
調製５：（３−クロロ−４−シクロプロピルスルファニルフェニル）酢酸
【化２２】
2009514836.tif 000024
調製４（１９．３ｇ、０．０７５モル、１当量）及びヒドラジン水和物（１８．８ｇ、０．３７６モル、５当量）を８０℃に加熱した。かかる懸濁液に対してＫＯＨ（３．３７ｇ、０．０５１モル、０．６８当量）を添加し、混合物を８０℃で撹拌した。２０分間隔で、ＫＯＨを３回に分けて添加し（各々３．３７ｇ、０．０５１モル、０．６８当量）、温度が１１０℃に上昇した。一晩撹拌した後、反応混合物を、濃ＨＣｌ水溶液の低温部分で酸性化した。生成物をｔＢＭＥ（２×１００ｍＬ）で抽出し、有機相を回収し、Ｈ２Ｏ（２×５０ｍＬ）及びブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、真空下で濃縮した。これにより所望の生成物の結晶を自己集合させ、これをフリットで濾過し、標題の化合物を得た。δＨ（ＣＤＣｌ３）：０．７５−０．８０（ｍ，２Ｈ），１．１５−１．２０（ｍ，２Ｈ），２．１０−２．２０（ｍ，１Ｈ），３．６０（ｓ，２Ｈ），７．２０（ｄ，１Ｈ），７．２５（ｓ，１Ｈ），７．５６（ｄ，１Ｈ）。
【００６８】
調製６：３−クロロ−Ｎ−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−メチル−２−フェニルエチル］−Ｎ−メチル−４−（シクロプロピルチオ）ベンゼンアセトアミド
【化２３】
2009514836.tif 000025
１，１’−カルボニルジイミダゾール（５０．４ｇ、０．３１１モル、１．２当量）を調製５（６３．１ｇ、０．２６０モル、１当量）及びＴＨＦ（０．５Ｌ）に添加し、反応物を室温条件下で２時間撹拌し、その後、（１Ｒ，２Ｒ）−（−）−シュード−エフェドリン（４２．９ｇ、０．２６０モル、１当量）を添加し、反応混合物を一晩撹拌した。その後、ＴＨＦを真空下で蒸発させた。粗生成物をＥｔＯＡｃ（０．４Ｌ）に溶解し、クエン酸水溶液（１Ｍ、０．３Ｌ）、Ｈ２Ｏ（２×１００ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、減圧下で濃縮して、フォームをもたらした。粗生成物を更に精製することなく、次のステップで使用した。δＨ（ＣＤＣｌ３）：０．７０−０．８０（ｍ，２Ｈ），０．８２（ｄ，１Ｈ），１．００−１．１０（ｍ，４Ｈ），２．００−２．１０（ｍ，１Ｈ），２．７６（ｓ，２．２５Ｈ），２．８４（ｓ，０．７５Ｈ），３．５４（ｓ，１．５Ｈ），３．６７（ｓ，０．５Ｈ），３．９２−４．０２（ｍ，０．５Ｈ），４．３８−４．６０（ｍ，１．５Ｈ），６．９６−７．３６（ｍ，７Ｈ），７．４０（ｄ，１Ｈ）。
【００６９】
調製７：（αＲ）−３−クロロ−α−（テトラヒドロピラン−４−イルメチル）−Ｎ−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−メチル−２−フェニルエチル］−Ｎ−メチル−４−（シクロプロピルチオ）ベンゼンアセトアミド
【化２４】
2009514836.tif 000026
調製６（５２．０ｇ、０．１３３モル、１当量）及びＴＨＦ（０．５Ｌ）を−５０℃に冷却し、リチウムジイソプロピルアミド（２００ｍＬ、２Ｍ、０．４００モル、３当量）の溶液を添加した。反応物を−４０℃で撹拌し、４−ヨードメチルテトラヒドロピラン（国際公開第２００４／０７２０３１号記載、３０．２ｇ、０．１３３モル、１当量）をＴＨＦ（０．１５Ｌ）に溶解した溶液を添加した。冷却浴を取り除き、反応物を一晩撹拌した。ＴＨＦを減圧下で蒸発させ、粗生成物をクエン酸水溶液（１Ｌ、０．２Ｍ）で粉末にし、その後ｔＢＭＥ（０．５Ｌ）で抽出した。層を分離させ、有機分をＨ２Ｏ（２×１００ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。生成物をカラムクロマトグラフィ（１ｋｇのＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ  １：１）によって精製し、標題の化合物を得た。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）＝４８８、４９０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７０】
調製８：（Ｒ）−２−（３−クロロ−４−シクロプロピルスルファニルフェニル）−３−（テトラヒドロピラン−４−イル）プロピオン酸
【化２５】
2009514836.tif 000027
ジオキサン（６５ｍＬ）及び濃ＨＣｌ水溶液（６５ｍＬ、１２Ｍ）中における調製７（１２．６ｇ、０．０２４２モル）を１００℃で３時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）を添加して希釈した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、層を分離させ、有機層をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）及びブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、減圧濃縮して、標題の化合物を得た。δＨ（ＣＤＣｌ３）：０．７０−０．７８（ｍ，２Ｈ），１．１２−１．８０（ｍ，９Ｈ），１．９９−２．０９（ｍ，１Ｈ），３．２９−３．３９（ｍ，２Ｈ），３．７５−３．８０（ｍ，１Ｈ），３．９０−４．００（ｍ，２Ｈ），７．２０（ｄ，１Ｈ），７．２８（ｓ，１Ｈ），７．５４（ｄ，１Ｈ）。
【００７１】
調製９：（Ｒ）−２−（３−クロロ−４−シクロプロパンスルホニルフェニル）−３−（テトラヒドロピラン−４−イル）プロピオン酸
【化２６】
2009514836.tif 000028
調製８（９．２ｇ、０．０２１６モル）を酢酸（９５ｍＬ）に溶解させた撹拌溶液に対して、マグネシウムモノペルフタレート（１６．７ｇ、２７ミリモル）を一部添加した。撹拌を室温で２０時間継続した。水（１００ｍＬ）を添加し、次に、硫化ナトリウムの飽和水溶液を、更なる過酸化物が反応混合物中において検出不可能となるまで添加した。水（５００ｍＬ）を添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（３×５００ｍＬ）で抽出した。有機層を回収し、水（３×１００ｍＬ）及びブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発させた。残留物をフラッシュクロマトグラフィで精製し（ＥｔＯＡｃ／酢酸＝５０／１）、その後、生成物を含む部分蒸発フラクションを結晶化し、標題の化合物を得た。δＨ（ＣＤＣｌ３）：０．９５−１．０５（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．４５（ｍ，５Ｈ），１．５０−１．６０（ｍ，２Ｈ），１．６１−１．６９（ｍ，１Ｈ），１．９５−２．０５（ｍ，１Ｈ），２．９０−３．００（ｍ，１Ｈ），３．２０−３．３０（ｍ，２Ｈ），３．７５−３．８０（ｍ，１Ｈ），３．８５−３．９５（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｄ，１Ｈ），７．４６（ｓ，１Ｈ），７．９１（ｄ，１Ｈ）；［α］Ｄ２０−４９．４（ｃ＝０．９１、ＤＭＳＯ）。
（実施例）
【００７２】
（２Ｒ）−２−（３−クロロ−４−シクロプロパンスルホニルフェニル）−３−（テトラヒドロピラン−４−イル）プロピオン酸（調製９）を、以下の手順によって２−アミノ−５−メチルピラジン、３−アミノ−５−メチルイソオキサゾール、３−アミノイソオキサゾール、２−アミノ−５−メチルチアゾール、３−アミノ−６−メチルピリダジン、１−メチル−３−アミノピラゾール、２−アミノピラジン及び４−アミノピリミジンから選択されるアミンとカップリングさせ、実施例１〜８を得た。
【００７３】
ＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）及びＤＭＦ（０．０８ｍＬ、１．０６４ミリモル、１．２当量）を−１０℃に冷却し、オキサリルクロリドを徐々に添加した（０．０９ｍＬ、０．４６５モル、１．２当量）。１５分の撹拌後、反応混合物を−３０℃に冷却し、（２Ｒ）−２−（４−シクロプロパンスルホニルフェニル）−３−（テトラヒドロピラン−４−イル）プロピオン酸（製剤８、０．３００ｇ、０．８８６ミリモル、１．０当量）を添加した。反応物を−３０℃で４５分間撹拌し、その後、ピリジン（１．３９５モル、１ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中において０．３１ｍＬ、４．５当量）及びアミン（４．４３ミリモル、５．０当量）を、同時に−４０℃で徐々に添加した。反応混合物を１５分間撹拌し、その後、氷浴を取り除いた。反応混合物を、室温に到達するまで２時間に亘って撹拌した。溶剤を不完全真空下で除去し、粗混合物をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）及びＨＣｌ水溶液（１．５ｍＬ）に溶解させた。層を分離させ、水性層をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で抽出した。有機相を回収し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×１０ｍＬ）、水（５ｍＬ）及びブライン（５ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ４）。フラッシュクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ヘプタン＝２：１）及び／又は再結晶化によって精製した。
【００７４】
【表１】
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【表２】
2009514836.tif 000030
【表３】
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【表４】
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【００７５】
（２Ｒ）−２−（３−クロロ−４−シクロプロパンスルホニルフェニル）−３−（テトラヒドロピラン−４−イル）プロピオン酸（製剤９）を、上記の手順によって、２−アミノ−５−メチルピリジン、２−アミノ−５−クロロピリジン及び２−アミノピリジンから選択されるアミンとカップリングさせ、実施例９〜１１を得た。
【００７６】
【表５】
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【００７７】
アッセイ：
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＧＫ活性
ＧＫ活性は、国際公開第２０００／５８２９３号に記載の手順に類似の手順に従い、カップリング酵素としてのＧ６ＰＤＨを用いた、ＧＳＴ−ＧＫによるＧ６Ｐの製造と、ＮＡＤＨの生成とのカップリングによって測定可能できる。
アッセイは、２５ｍＭのＨｅｐｅｓ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭのＫＣｌ、５ｍＭのＤ−グルコース、１ｍＭのＡＴＰ、１ｍＭのＮＡＤＰ、２ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのジチオスレイトール、ヒト肝臓ＧＫ由来の精製された０．２μｇのＧＳＴ−ＧＫ、及び様々な濃度の活性剤濃縮物を含んでなる、最終濃度５％ＤＭＳＯ中溶液合計１００μＬを用い、透明な平底９６ウェルプレートにおいて室温条件下（２３℃）で実施した。１５分間培養し、その時点で反応が一次関数的となった。ＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ  １９０マイクロプレート分光光度計（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ｃｏｒｐ社製）を用い、ＯＤ３４０にてＮＡＤＨの生成を測定し、ＧＫ活性を間接的に定量した。
典型的には、最終濃度５％のＤＭＳＯ溶液中で１００〜０．００４μＭの１０個の希釈系列を用い、化合物を試験した。活性の程度は、５％のＤＭＳＯのみの対照試験区における反応に対する割合として算出した。得られた数値は、４パラメータのロジスティックモデルを用いて構築される用量反応曲線から誘導される、ＧＫの活性を倍加させるのに必要となる化合物の濃度を示す。更に、活性の最大倍数（ｍａｘｉｍｕｍ  ｆｏｌｄ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ）及びＥＣ５０（活性の最大倍数の半分となるのに必要な濃度）を、同一の用量反応曲線から算出することができた。
【００７８】
ｉｎ  ｖｉｖｏ  ＧＫ活性（Ｉ）
４．５時間の絶食後、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、１０ｍｇ／ｋｇ体重のＧＫ活性剤を経口的に経管栄養によって投与し、更に２ｇ／ｋｇでグルコースを投与した。２．５時間の後、投与試験期間中に血糖測定を３回実施した。マウス（ｎ＝９）を秤量し、経口処置の前に４．５時間にわたり絶食させた。ＧＫ活性剤を、１ｍｇ／ｍＬの濃度でＧｅｌｕｃｉｒｅ４４／１４−水（１：９ｖ／ｖ）に溶解した。マウスに対して、体重１ｋｇあたり１０ｍｇ／ｋｇの用量となるように１０ｍＬに調製した溶液を経口投与した。投薬の１５分前、動物の尾部の一部（＜１ｍｍ）を切り取り、２０μＬの血液をサンプリングし、投与前血糖値を測定した。ＧＫ活性剤処理後、投与後０．５、１．０及び２．５時間において、更に同一の尾部の創傷からサンプリングし、血糖値を測定した。試験期間における、賦形剤処理されたマウスと、ＧＫ活性剤処理されたマウスとの平均血糖値を比較することによって、結果を評価した。化合物の投与後における２つの連続するアッセイ時点における賦形剤との比較で、当該化合物により血糖値の統計的に有意な低下を示した場合に、その化合物は活性であるとみなした。
【００７９】
ｉｎ  ｖｉｖｏ  ＧＫ活性（ＩＩ）
本発明のＧＫ活性剤が示す、実施例に記載の血糖降下作用は、生後７〜８週間のオスのＣ５７Ｂｌ／６  ｏｂ／ｏｂマウスに対する経口耐糖能試験で評価してもよい。端的には、マウス（ｎ＝６）を秤量し、そのベース血糖値を、尾部を切断してサンプリングした２０μＬの血液から測定する（Ｔ−２７時間）。２２時間後（Ｔ−５時間）、食餌を撤去し、マウスを、自由に水を摂取できる新しいケージに移した。尾部の創傷からサンプリングした２０μＬの血液を用いＴ−０．７５時間における血糖値を測定した。ＧＫ活性剤を、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ４４／１４−水（１：９のｖ／ｖ）混合物に、１ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解し、その後、Ｔ−０．５時間にて、マウスに対して体重１ｋｇあたり１０ｍｇ／ｋｇ当量の１０ｍＬの調剤を経口投与した。Ｔ−０時間にて、マウスから血糖値分析用の血液をサンプリングし（２０μＬ）、直後にグルコース（２ｇ／ｋｇ）を経口投与した。更に血糖値分析用の血液サンプル（２０μＬ）を、Ｔ＝＋０．５、＋１．０、＋１．５、＋２．０、＋３．０及び＋４．０において各々の動物からサンプリングした。グルコースの投与後２時間における、グルコース濃度曲線下の面積の少なくとも２０％の減少が、ＧＫ活性剤による典型的な結果として得られた。
【国際調査報告】
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