(57)【要約】  双極性障害、うつ病又は不安障害等の情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤が同定される。情動障害を診断及びモニタリングする方法も提供される。この方法は、情動障害で異なる発現をする１つ又は複数の遺伝子の発現の変化に基づく。【選択図】図１
2009521211.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法であって、
（ａ）細胞に候補治療剤を接触させること、又は候補治療剤を生物に投与すること、
（ｂ）１つ又は複数の以下の遺伝子：ＰＲＥＰＬ、ＵＳＰ１４、ＳＹＴ１、ＰＪＡ２、ＧＣＧ、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＣＲＥＢ１、ＳＬＣ２９Ａ１及びＭＹＴ１
の発現が、前記候補治療剤に応じて前記細胞又は前記生物で調節されるか否かを判定すること、並びに
（ｄ）１つ又は複数の前記遺伝子の発現が調節される場合に、潜在的治療剤として前記候補を同定することを含む、方法。
【請求項２】
前記候補が、１つ又は複数の以下の第１の遺伝子：ＰＲＥＰＬ、ＵＳＰ１４、ＳＹＴ１、ＰＪＡ２、ＦＺＤ３、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＣＲＥＢ１、及びＳＬＣ２９Ａ１
の発現が増大される場合に、及び／又は
１つ又は複数の以下の第２の遺伝子：ＧＣＧ、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ及びＭＹＴ１
の発現が減少される場合に、潜在的治療剤として同定される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記１つ又は複数の遺伝子が、１つ（more）又は複数のＰＲＥＰＬ、ＵＳＰ１４、ＳＹＴ１、ＰＪＡ２及びＧＣＧを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記候補が、大多数の前記遺伝子の発現が該候補に応じて調節される場合に、潜在的治療剤として同定される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記候補が、大多数の前記遺伝子、又は最少の（least）試験される遺伝子の発現が請求項２に記載されるように、１つ又は複数の第１の遺伝子の発現の増大及び／又は請求項２に記載されるように１つ又は複数の第２の遺伝子の発現の減少によって調節される場合に、治療剤として同定される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記候補治療剤の存在下及び非存在下で、前記１つ又は複数の遺伝子の発現レベルを比較することを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
（ａ）が前記候補を生物に投与することを含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記１つ又は複数の遺伝子の発現が前記生物の眼窩前頭皮質で変化しているか否かを決定することを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記生物が非ヒト生物である、請求項７又は８に記載の方法。
【請求項１０】
前記生物が情動障害の動物モデルである、請求項７〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記候補の投与によって引き起こされる任意の副作用を同定することをさらに含む、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
（ａ）が細胞を前記候補に接触させることを含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記細胞が、神経細胞、グリア細胞若しくは他の脳細胞、又は末梢細胞である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
アレイが、前記１つ又は複数の遺伝子の発現が変化しているか否かを判断するのに用いられる、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法であって、
（ａ）請求項１に記載の１つ又は複数の遺伝子を発現することができるシステムを準備すること、
（ｂ）候補化合物の存在下及び非存在下で前記１つ又は複数の遺伝子の発現レベルを評価すること、並びに
（ｃ）請求項２に記載の１つ又は複数の第１の遺伝子が上方調節され、及び／又は請求項２に記載の１つ又は複数の第２の遺伝子が下方調節されるように、発現が前記候補化合物の存在下で調節される場合に、該候補化合物を潜在的治療剤として同定すること
を含む、方法。
【請求項１６】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法であって、
（ａ）請求項１に記載の遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質を候補化合物に接触させること、及び
（ｂ）前記候補化合物の存在下及び非存在下で前記１つ又は複数のタンパク質の活性を測定すること
を含み、該候補化合物が、請求項２に記載の第１の遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質の活性が高められる場合、及び／又は請求項２に記載の第２の遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質の活性が阻害される場合に、潜在的治療剤として同定される、方法。
【請求項１７】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法であって、
（ａ）候補化合物の非存在下及び存在下で請求項１に記載の遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質を前記タンパク質の結合パートナーと接触させること、並びに
（ｂ）前記候補化合物の非存在下及び存在下で、前記結合パートナーとの前記タンパク質の結合を評価すること
を含み、該候補が、請求項２に記載の第１の遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質のその結合パートナーとの相互作用が高められる場合、及び／又は請求項２に記載の第２の遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質のその結合パートナーとの相互作用が阻害される場合に、潜在的治療剤として同定される、方法。
【請求項１８】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤として候補結合パートナーを同定する方法であって、請求項１に記載の遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質を、候補結合パートナーを含むサンプルに接触させること、及び該候補結合パートナーが該１つ又は複数のタンパク質と結合するか否かを評価することを含む、方法。 
【請求項１９】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、１つ又は複数の以下のタンパク質又は核酸：
（ｉ）請求項１に記載の遺伝子によってコードされるタンパク質又はその断片、
（ｉｉ）上記の（ｉ）のタンパク質をコードする核酸、又は該核酸の断片、及び／又は
（ｉｉｉ）（ｉｉ）に記載の核酸にハイブリダイズすることができる核酸
の使用。
【請求項２０】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、請求項１に記載の１つ又は複数の遺伝子によってコードされる任意のタンパク質の発現の調節因子の使用。
【請求項２１】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、
（ａ）請求項１９の（ｉ）に記載の遺伝子によってコードされるタンパク質若しくはその断片、又は
（ｂ）請求項１９の（ｉｉ）若しくは（ｉｉｉ）に記載の核酸
の結合パートナーの使用。
【請求項２２】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、請求項１９の（ｉｉ）又は（ｉｉｉ）に記載の核酸を含む発現ベクターの使用。
【請求項２３】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、請求項１９の（ｉｉ）又は（ｉｉｉ）に記載の核酸を発現することができる細胞又は細胞株の使用。
【請求項２４】
前記細胞が、神経細胞、グリア細胞、脳細胞、又は末梢細胞である、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
請求項１に記載の１つ又は複数の遺伝子の発現レベルが、対応する野生型の非ヒト哺乳動物又は他の非ヒトの脊椎動物若しくは無脊椎動物の発現レベルに比べて変化している、遺伝子組み換えした非ヒト哺乳動物又は他の非ヒトの脊椎生物若しくは無脊椎生物。
【請求項２６】
２つ以上の前記遺伝子の発現が変化している、請求項２５に記載の哺乳動物又は他の生物。
【請求項２７】
霊長類、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウサギ及び齧歯類、例えばテンジクネズミ、ラット又はマウスから選択される、請求項２５又は２６に記載の哺乳動物。
【請求項２８】
情動障害、好ましくは双極性障害の動物モデルとしての、請求項２５〜２７のいずれか１項に記載の哺乳動物又は他の生物の使用。
【請求項２９】
遺伝子組換え細胞であって、請求項１に記載の１つ又は複数の遺伝子の発現レベルが、対応する野生型細胞のレベルに比べて変化している、遺伝子組換え細胞。
【請求項３０】
２つ以上の前記遺伝子の発現が変化している、請求項２９に記載の細胞。
【請求項３１】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、請求項２５〜２８のいずれか１項に記載の哺乳動物、又はそれらから得ることができる細胞（複数可）、或いは請求項２９又は３０に記載の細胞の使用。
【請求項３２】
被験体が情動障害であるか、又は情動障害を発症する危険性があるか否かを診断する方法における結合パートナーの使用であって、該結合パートナーが、
（ｉ）前記遺伝子の発現レベルを測定するための請求項１に記載の遺伝子をコードする核酸の結合パートナー、又は
（ｉｉ）前記遺伝子の発現レベルを測定するための請求項１に記載の遺伝子によってコードされるタンパク質の結合パートナー
である、使用。
【請求項３３】
被験体が情動障害であるか、又は情動障害を発症する危険性があるか否かを診断する方法であって、該被験体から採取した生物学的サンプルにおいて、請求項１に記載の１つ又は複数の遺伝子の発現レベルを評価することを含む、方法。
【請求項３４】
情動障害に罹りやすいか、又は罹患している被験体において、治療的介入に対する応答をモニタリングする方法であって、該被験体から採取した生物学的サンプルにおいて、請求項１に記載の１つ又は複数の遺伝子の発現レベルを評価することを含む、方法。
【請求項３５】
前記発現レベルが、被験体から採取した生物学的サンプルに存在する前記１つ又は複数の遺伝子のｍＲＮＡのレベルを評価することによって評価される、請求項３３又は３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記発現レベルが、被験体から採取した生物学的サンプルに存在する１つ又は複数のタンパク質のレベルを評価することによって評価され、該１つ又は複数のタンパク質が前記１つ又は複数の遺伝子によってコードされる、請求項３０又は３１に記載の方法。
【請求項３７】
前記生物学的サンプルが、前記発現レベルが前記眼窩前頭皮質における前記遺伝子の発現レベルと相関がある組織又は細胞を含む、請求項３３〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記生物学的サンプルが、血液、血清、血漿、脳脊髄液、尿及び涙液から選択される、請求項３３〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
請求項１に記載の１つ又は複数の遺伝子から転写されるｍＲＮＡに特異的にハイブリダイズすることができる１つ又は複数のプローブのアレイが付着される基板を備える、装置。
【請求項４０】
同一プローブが前記基板上の複数の場所で固定化される、請求項３９に記載の装置。
【請求項４１】
異なるプローブが前記基板上の複数の場所のそれぞれで固定化される、請求項３９に記載の装置。
【請求項４２】
請求項１に記載の１つ又は複数の遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質或いはその断片が付着される基板を備える、装置。
【請求項４３】
同一タンパク質が前記基板上の複数の場所で固定化される、請求項４２に記載の装置。
【請求項４４】
異なるタンパク質が、前記基板上の複数の場所のそれぞれで固体化される、請求項４２に記載の装置。
【請求項４５】
請求項１に記載の１つ又は複数の遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質の１つ又は複数の結合パートナーが付着される基板を備える、装置。
【請求項４６】
前記１つ又は複数の結合パートナーがタンパク質、好ましくは抗体である、請求項４５に記載の装置。
【請求項４７】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法、又は情動障害を診断する方法、又は情動障害をモニタリングする方法、又は情動障害における治療的介入の有効性をモニタリングする方法、又は臨床試験の候補を選択する方法における、請求項３９〜４６のいずれか１項に記載の装置の使用。
【請求項４８】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤の有効性を測定する臨床試験の参加者を選択する方法であって、前記候補参加者から得られた生物学的サンプルにおける、請求項１に記載の１つ又は複数の遺伝子の発現レベルを測定すること、及び該遺伝子（複数可）の発現レベルが正常な被験体のレベルに比べて変化している場合、該臨床試験の参加者として該候補を選択することを含む、方法。
【請求項４９】
情動障害を予防、治療又は改善する方法であって、このような予防、治療又は改善が必要な被験体の前記脳、特に前記眼窩前頭皮質における１つ又は複数の以下のタンパク質：ＦＺＤ３、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ及び／又はＳＬＣ２９Ａ１のレベル又は活性を増大させることを含む、方法。
【請求項５０】
情動障害を予防、治療又は改善する方法であって、このような予防、治療又は改善が必要な被験体の前記脳、特に前記眼窩前頭皮質における１つ又は複数の以下のタンパク質：ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５；ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ及び／又はＭＹＴ１のレベル又は活性を減少させることを含む、情動障害を予防、治療又は改善する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、双極性障害（ＢＤ）、うつ病及び不安障害等の情動障害の治療に有用な薬剤を同定する方法、並びに情動障害を診断する方法に関する。本発明は、情動障害のバイオマーカー、並びに潜在的治療剤をスクリーニングする方法、診断、予後の評価、臨床試験の候補被験体の選択、及び治療的介入に対する応答のモニタリングにおけるこれらの使用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
双極性情動障害（ＢＤ）は、推定生涯リスクが約１％である重度の再発寛解型精神障害である。この障害は、躁病及びうつ病のエピソードの変化が特徴であり、統合失調症で見られるものと区別できない精神病性特徴を示すことが多い。ＢＤのコストは、金銭面及び生活環境面（human terms）の両方において膨大である。ＢＤに対しては強い遺伝的要素が存在するが、環境因子もこの障害を引き起こすのに重大な役割を果たすと考えられている。多くの連鎖研究及び関連研究が、ＢＤの病態生理に関与するか、又はそれぞれに感受性を付与する特異的遺伝子及び／又は染色体領域を同定するために行われている。しかし、研究は１８ｐ、２２ｑ１２及びＸｑ２８１〜２等の染色体領域に関係があるとしているが、特異的遺伝子はまだこの障害と確実に結び付いてはいない。広域な研究努力にもかかわらず、ＢＤの基礎となる病態生理は分かりにくいままである。
【０００３】
１９９２年に世界保健機関により出版された精神及び行動の障害のＩＣＤ−１０分類（The ICD-10 Classification of Mental and Behavioural Disorders）は、精神衛生状態を診断するのに欧州の精神科医によって最も一般的に使用されるマニュアルである。米国精神医学会（Washington D.C.）により１９９４年に出版された精神障害の診断及び統計マニュアル第四版（The Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders fourth edition）（ＤＳＭ  ＩＶ）には、精神衛生障害の診断基準、亜型、関連する特徴並びに識別診断に関する基準が記載されている。
【０００４】
双極性疾病の２つの亜型は、それら自体のＤＳＭカテゴリー、すなわち双極性Ｉ及び双極性ＩＩが付与されるのに十分明確に規定されている。双極性Ｉは、躁病エピソード、躁うつサイクルの「高（high）」を特徴とする障害である。概して、この躁病期間後に、うつ状態の期間が続くが、双極性Ｉ個人によっては、大うつ病エピソードを経験しない場合がある。躁病症状又は軽躁病症状及びうつ病症状が同時に起こる混合状態もまた、双極性Ｉ患者に頻繁に見られる（例えば、躁病の思考の早まり（racing thoughts）を伴ううつ病）。また、不快性躁病が一般的であり、これは、怒り及び興奮性を特徴とする躁病である。
【０００５】
双極性ＩＩ：この障害は、大うつ病エピソードが躁病のより穏やかな形態である軽躁病エピソードと交互に起こることを特徴とする。軽躁病エピソードは、あまり崩壊的でない形態の躁病である可能性があり、躁病の低レベルの非精神病性症状（例えば、活力の増大又は通常よりも高揚した気分）を特徴とし得る。軽躁病エピソードは、日常的に活動をする個人の能力に影響を及ぼし得ない。軽躁病に関する基準は、それらのより短い持続期間（１週間ではなくて少なくとも４日）及びより穏やかな重篤性（顕著な機能障害、入院又は精神病性特徴なし）のみが、躁病に関する基準と異なる。
【０００６】
うつ病症状及び躁病症状の交互のエピソードが２年間続き、且つ大うつ病エピソード又は躁病エピソードに関する基準を満たさない場合、診断は、双極性情動障害のあまり重篤でない形態である気分循環性障害と分類される。気分循環性障害は、２年にわたって診断され、安定期で隔てられ、短期間で軽躁病症状とうつ病症状とが頻発することを特徴とする。
【０００７】
急速交代型は、個人の気分が、間に安定期をほとんど有さずに又は安定期を全く有さずに、間断なくうつ状態から軽躁病状態又は躁病状態へ変動する場合に見られる。或る年に、大うつ病エピソード、躁病エピソード、混合エピソード又は軽躁病エピソードに関する基準を満たす４回以上のエピソードがあった場合には、急速交代型を経験したと言われる。急速交代型の人々によっては、月１回、週１回又はさらには毎日、極性の移行を経験し得る可能性もある（超急速交代型と呼ばれることもある）。
【０００８】
双極性ＩＩＩの診断は、自発的ではなくて、抗うつ薬の投薬を行った結果として起こる躁病エピソードを類別するのに使用されている。紛らわしいことに、双極性ＩＩＩの診断はまた、大うつ病を伴わずに個人が軽躁病又は気分循環症（すなわち、あまり重篤でない躁病）を経験する状況でも使用されている。
【０００９】
ＤＳＭ  ＩＶは、大うつ病を臨床上規定する多数の基準が存在することを提示している。この状態は、少なくとも２週間は明白である必要があり、以下の症状のうち５つを有さなくてはならない：ほとんど毎日、ほぼ一日中のうつ気分、ほとんど毎日、ほぼ全ての活動における興味又は喜びの損失、体重及び食欲の変化、睡眠障害、身体活動の低下、疲労及び活力の損失、倦怠感又は過剰な罪悪感、集中力の欠如、自殺願望。
【００１０】
うつ気分及び日常活動における興味の損失は共に、大うつ病を特徴付ける５つの症状の内の２つとして明白でなくてはならない。躁うつ病のうつ気分を患う個人の症状と大うつ病を患う個人の症状とを識別することは困難である。気分変調性障害は、単極性うつ病よりはあまり重篤でないうつ病であるが、より持続的であり得る。
【００１１】
ＤＳＭ  ＩＶに分類されるような不安障害としては、広場恐怖症、強迫性障害に対するパニック障害、外傷後ストレス障害、及び全般性不安傷害を含む広範な障害が挙げられる。ＩＣＤ−１０では、これらの障害は「神経症ストレス関連身体表現性障害」と分類される。
【００１２】
何千もの遺伝子の発現レベルを同時に評価することができることから、マイクロアレイ技術を用いた遺伝子発現プロファイリングが複雑な障害の研究に対する有望なアプローチになっている。精神障害を患った患者から得られた死後脳の発現プロファイリング試験は既に公開されていて、大部分は統合失調症の脳における変化を報告している３〜７。他では、統合失調症及び双極性障害の両方が研究されているが、今までのところＢＤ８〜１２、うつ病又は不安障害に焦点を当てた研究はほんのわずかである。
【００１３】
前頭前皮質由来の死後脳サンプルを用いたＢＤのマイクロアレイ分析によって、受容体遺伝子、チャンネル遺伝子及びトランスポーター遺伝子を主に下方調節させながらのストレス応答タンパク質及びシャペロンをコードする遺伝子の上方調節が報告された９。
【００１４】
多くの乏突起膠細胞関連遺伝子及び髄鞘形成遺伝子がＢＤ及び統合失調症で変化していることが見出されている１１。９つのこのような遺伝子は、ＱＰＣＲを用いてＢＤで変化していることが分かったが、マイクロアレイでは２つの遺伝子しか確認されなかった（ＦＤＲ補正はこの研究では適用されなかった）。この過去の研究によって、髄鞘形成の変化に関するサブグループが存在するであろうことが示され、これはすなわち患者によっては極めて顕著な転写の下方調節を示したが、少数の患者では顕著な増大を示したということであった。したがって、サブグループの存在、及び代替的なスプライス変異体が、マイクロアレイ技術を用いて髄鞘形成を検出することを難しくしている可能性がある。
【００１５】
ミトコンドリア関連遺伝子の変化が、ＢＤ患者のＤＬＰＦＣ８及び海馬１０の両方で観察されており、初期の統合失調症研究３とは対照的に、ＢＤ患者では双極性脳のミトコンドリア機能不全に関する潜在的証拠は見出されなかった。しかし、ユビキチン経路遺伝子の下方調節が、共通の疾患経路を示す双極性障害、アルコール依存症及び総合失調症患者の幾つかの群でこれまでに観察されている。ＢＤに対する候補遺伝子及び経路を同定する近年の機能的ゲノミクスアプローチによって、シグナル伝達、神経伝達物質及びシナプス遺伝子を含む幾つかの変化が見出された４８。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
情動障害の原因論は十分に理解されていない。双極性障害、うつ病及び不安障害等の情動障害を治療する薬剤のスクリーニング及び開発に使用することができるマーカー及び標的の同定が必要である。このようなマーカーには、情動障害を診断及びモニタリングする方法の改善、並びに治療的介入に対する応答の評価が必要とされる。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法であって、
（ａ）細胞（複数可）に候補治療剤を接触させること、又は
（ｂ）候補治療剤を生物（複数可）に投与すること、
（ｃ）１つ又は複数の以下の遺伝子：ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１及びＭＹＴ１
の発現が、候補治療剤に応じて細胞（複数可）又は生物（複数可）で調節されるか否かを判定すること、並びに
（ｄ）１つ又は複数の遺伝子の発現が調節される場合に、潜在的治療剤として該候補を同定することを含む、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法を提供する。
【００１８】
情動障害には、双極性障害、うつ病及び不安障害が挙げられる。
【００１９】
１つ又は複数の遺伝子の発現の調節は、候補治療剤の存在下及び非存在下で、遺伝子（複数可）の発現レベルを比較することによって評価することができる。「調節」という用語は、遺伝子発現の上方調節又は下方調節という意味で本明細書中で用いられる。「モジュレータ」という用語は、遺伝子発現の上方調節因子又は下方調節因子の意味で本明細書中で用いられる。
【００２０】
１つ又は複数の以下の遺伝子：
ＦＺＤ３、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ及び／又はＳＬＣ２９Ａ１の発現が増大する場合、及び／又は
１つ又は複数の以下の遺伝子：
ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ及び／又はＭＹＴ１の発現が減少する場合、該候補が潜在的治療剤として同定される。
【００２１】
大多数の遺伝子の発現が候補治療剤への曝露に応じて調節される場合、該候補が潜在的治療剤として同定され得る。本明細書で用いられる「大多数」という用語は、該遺伝子の５０％超、好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％、さらにより好ましくは少なくとも９５％、最も好ましくは全ての遺伝子を意味する。
【００２２】
細胞（複数可）は、神経細胞、グリア細胞若しくは他の脳細胞、又は末梢細胞、例えばＴ細胞から成る群より選択することができる。
【００２３】
生物は、非ヒト生物、例えば非ヒト動物、又は情動障害の動物モデルであり得る。動物モデルには、例えばアンフェタミン等の刺激剤の動物への投与によってシミュレートされるものが含まれる。任意の好適な動物は、非ヒト動物、例えば非ヒト霊長類、ウマ、ウシ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、イヌ、ネコ、魚（例えばゼブラフィッシュ）、齧歯類、例えばテンジクネズミ、ラット又はマウス、昆虫（例えばショウジョウバエ）、両生類（例えばアフリカツメガエル）又はシノラブディス・エレガンス（C.elegans）が、被験体として用いられ得る。
【００２４】
本発明の方法及びアッセイは、遺伝子発現の変化を測定するのに適した任意の方法を用いて行うことができる。遺伝子の発現レベルを測定する方法は当該技術分野で周知である。発現の調節は、ｍＲＮＡ、ｍＲＮＡ由来の核酸、又はｍＲＮＡから翻訳されたタンパク質の量又は濃度を評価することによって同定することができる。
【００２５】
遺伝子発現は、逆転写およびポリメラーゼ連鎖反応（「ＲＴ−ＰＣＲ」）、例えば定量ＰＣＲ（特にリアルタイム定量ＰＣＲ）、並びにノーザンブロッティングを含む方法を用いて、ｍＲＮＡレベルを評価することによって測定され得る。ｍＲＮＡの発現レベルを測定するのに好適な方法の１つでは、総ＲＮＡサンプルが細胞（複数可）又は生物（複数可）から得られ、ｃＤＮＡが対象の遺伝子（複数可）のｍＲＮＡから合成され、ｃＤＮＡがリアルタイム定量ＰＣＲ分析に用いられ、サンプルの対象のｍＲＮＡのレベルを測定する。このような方法を実施するためのシステム及びキットは市販されている。
【００２６】
タンパク質の発現レベルを測定するのに好適な方法の一例は、抗体、又は対象のタンパク質と特異的に結合することができる抗体断片を伴う免疫学的方法である。好適な免疫学的方法には、ペプチドの検出が異なるエピトープを認識する２つの抗体を用いて行われるサンドイッチＥＬＩＳＡ等のサンドイッチ免疫測定法、放射免疫測定法（ＲＩＡ）、直接または競合の酵素免疫測定吸着法（ＥＬＩＳＡ）、酵素免疫測定法（ＥＩＡ）、ウェスタンブロッティング法、免疫沈降法、及び任意の粒子ベースの免疫測定法（例えば金粒子、銀粒子、又はラテックス粒子、磁性粒子又は量子ドットを用いる）が含まれる。免疫学的方法は、例えばマイクロタイタープレート又はストリップフォーマットで行うことができる。
【００２７】
本発明による潜在的治療剤を同定する方法は、アレイフォーマットで行うことができ、このことは、候補治療剤に応じて複数の遺伝子の発現レベルの変化が評価される実施形態が特に好ましい。
【００２８】
好ましい実施形態において、遺伝子（複数可）の発現が生物の眼窩前頭皮質（ＯＦＣ）で変化しているか否かが判定される。本発明者等は、１５人の双極性患者及び１５人の適合対照の死後脳の眼窩前頭皮質由来のサンプルでトランスクリプトミクス試験を行った。２２０００を超える配列を含むマイクロアレイであるＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  ＨＧ−Ｕ  １３３Ａ遺伝子チップを用いてサンプルを分析した。ＯＦＣは、双極性障害のマイクロアレイ試験ではこれまでに研究されていない。広範の患者の人口統計学的変数は、潜在的交絡因子として試験され、後の統計分析で検討された。眼窩前頭皮質では、３９３個の異なる発現をした転写産物がマイクロアレイ分析で同定され、代表的なサブセットが定量リアルタイムＰＣＲで検証された。経路分析によって、Ｇタンパク質共役受容体シグナル伝達に関与する遺伝子の有意な上方調節及び刺激剤に対する応答（特に免疫応答）が示された一方で、ユビキチンサイクル及び細胞内輸送に関連する遺伝子は、双極性障害における同時下方調節を示した。さらにシナプス機能に関与する幾つかの遺伝子は、双極性障害において有意に下方調節された。
【００２９】
これらの知見によって、眼窩前頭皮質が、双極性障害、うつ病及び不安障害等の情動障害に深く関与する領域と見なされ、生物学的経路の変化によって、様々なプロセスが影響を受けることが示された。概して、この結果は、ユビキチン経路及びシナプス機能の異常調節が疾患プロセスの中心的なものである可能性があることを示唆している。
【００３０】
本発明による方法は、候補治療剤の投与によって引き起こされる副作用（複数可）の同定をさらに含み得る。
【００３１】
本発明は、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法であって、
（ａ）１つ又は複数の以下の遺伝子：ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１又はＭＹＴ１
を発現することができるシステムを準備すること、
（ｂ）候補化合物の存在下及び非存在下で遺伝子（複数可）の発現レベルを評価すること、並びに
（ｃ）
（ｉ）１つ又は複数の以下の遺伝子：ＦＺＤ３、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ及び／又はＳＬＣ２９Ａ１が上方調節されるように、及び／又は
（ｉｉ）１つ又は複数の以下の遺伝子：ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ及び／又はＭＹＴ１が下方調節されるように、
発現が候補化合物の存在下で調節される場合、候補化合物を潜在的治療剤として同定することを含む方法も提供する。
【００３２】
このシステムは、遺伝子の転写、及び／又は遺伝子によってコードされるタンパク質をコードするｍＲＮＡの翻訳が可能であるｉｎ  ｖｉｔｒｏシステムであり得る。好ましいシステムは、細胞、例えばヒト患者、又は動物若しくは動物モデル由来の細胞、又は培養細胞若しくは細胞株である。好ましくはこの細胞は、神経細胞、グリア細胞若しくは他の脳細胞又は細胞株、又は末梢細胞（すなわち、任意の非中枢神経系細胞）、例えばＴ細胞、Ｂ細胞、他の血液細胞、又は線維芽細胞；或いは神経細胞、グリア細胞若しくは他の脳細胞又は細胞株、又は末梢細胞に典型的な発現プロファイルを有する細胞である。代替的にはこの細胞は、神経細胞、グリア細胞若しくは他の脳細胞又は細胞株、又は末梢細胞に典型的な発現プロファイルを生じるように操作することができる細胞であり得る。
【００３３】
発現の調節は、細胞等のシステムにおける細胞の表現型に対する影響によって検出することができ、これは例えば細胞を刺激した後に、例えば受容体の活性化又は遮断によって、例えば抗体、増殖因子、ホルモン又は他のシグナル伝達分子を用いて検出することができる。対象の遺伝子（複数可）がユビキチンサイクルに関与する場合、ユビキチンサイクル遺伝子の調節によって、タンパク質凝集、タンパク質輸送及びタンパク質局在化が変化し、タンパク質のプロセシング及び折り畳みに影響を与える可能性がある。
【００３４】
本発明は、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法であって、
（ａ）ＦＺＤ３、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ及びＭＹＴ１から選択される遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質に接触させること、並びに
（ｂ）候補化合物の存在下及び非存在下でタンパク質（複数可）の活性を測定することであって、以下の遺伝子：ＦＺＤ３、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ及び／又はＳＬＣ２９Ａ１によってコードされる１つ又は複数のタンパク質の活性が高められる場合；及び／又は以下の遺伝子：ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲ１Ｐ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ及び／又はＭＹＴ１によってコードされる１つ又は複数のタンパク質の活性が増強される場合、候補化合物が潜在的治療剤として同定される、方法をさらに提供する。
【００３５】
タンパク質の活性を評価するのに適した方法は当該技術分野で既知である。活性の評価は、好適な基質上でタンパク質の触媒活性又は酵素活性を検出すること、レポーター遺伝子（例えば、タンパク質に応答性があり、検出可能なマーカー、例えばルシフェラーゼをコードする核酸と動作可能に連結している（operably linked）調節因子）の誘導を検出すること、又は遺伝子産物に関連する細胞応答、例えばＧタンパク質共役受容体シグナル伝達の誘発、又はこのようなシグナル伝達に関連する下流事象を検出することによって為され得る。
【００３６】
候補化合物は、候補化合物の存在下と非存在下とでタンパク質活性を比較することによって、タンパク質活性の調節因子として、したがって潜在的治療剤として同定することができる。
【００３７】
本発明は、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法をさらに提供し、該方法は、
（ａ）候補化合物の非存在下及び存在下で、ＦＺＤ３、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ及びＭＹＴ１から選択される遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質をタンパク質の結合パートナーに接触させること、並びに
（ｂ）候補化合物の非存在下及び存在下でタンパク質のその結合パートナーとの結合を評価することを含み、１つ又は複数の以下のタンパク質：ＦＺＤ３、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳ１Ｐ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ及び／又はＳＬＣ２９Ａ１のその結合パートナーとの相互作用が高められる場合、及び／又は
１つ又は複数の以下のタンパク質：ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ及び／又はＭＹＴ１のその結合パートナーとの相互作用が阻害される場合、候補調節因子が潜在的治療剤として同定される。
【００３８】
本明細書に記載の幾つかの方法において、遺伝子の発現産物の結合パートナーを用いて、この発現産物のレベルを検出することができる。
【００３９】
結合パートナーはタンパク質であってもよく、好ましくは抗体である。本明細書で用いられるような「抗体」という用語には、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、ヒト化抗体又はキメラ抗体、一本鎖抗体、Ｆａｂ断片及びＦ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ発現ライブラリで生じる断片、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、並びに上記のいずれかのエピトープ結合断片が含まれるが、これらに限定されない。本明細書中で用いられるような「抗体」という用語は、免疫グロブリン分子及び免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分、すなわち抗原と特異的に結合する抗原結合部位を含有する分子も表す。本発明の免疫グロブリン分子は、免疫グロブリン分子の任意のクラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ及びＩｇＡ）又はサブクラスに属し得る。
【００４０】
結合パートナーは、アプタマー、又はオリゴヌクレオチド、又は任意の合成化学受容体、又は遺伝子の発現産物（ｍＲＮＡ又はタンパク質であり得る）と特異的に結合することができる化合物であり得る。結合パートナーは、発光標識、蛍光標識又は放射性標識及び／又はアフィニティタグ等の検出可能な標識を含み得る。
【００４１】
さらに本発明は、候補結合パートナーを情動障害の予防、治療又は改善の治療剤として同定する方法であって、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１及びＭＹＴ１から選択される遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質を候補結合パートナーを含むサンプルに接触させること、及び候補結合パートナーがタンパク質と結合するか否かを評価することを含む方法を提供する。
【００４２】
さらに、本発明は、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、１つ又は複数の以下のタンパク質又は核酸：
ｉ）ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１、及びＭＹＴ１
から選択される遺伝子又はその断片によってコードされるタンパク質；又は
ｉｉ）上記の（ｉ）のタンパク質をコードする核酸又は当該核酸の断片；及び／又は
ｉｉｉ）（ｉｉ）による核酸にハイブリダイズすることができる核酸
の使用を提供する。
【００４３】
この態様によれば、核酸は一本鎖又は二本鎖の核酸であり、ＤＮＡ、ＲＮＡ又はＤＮＡ／ＲＮＡ二本鎖であり得る。生物学的サンプルの核酸発現産物のレベルを測定することができるように、核酸は、核酸発現産物、又はそれらと相補的な若しくはそれらに由来する核酸に特異的に（例えば高ストリンジェント条件下で）ハイブリダイズするべきである。好適な核酸結合パートナーは、遺伝子のｍＲＮＡからの逆転写によるｃＤＮＡの合成に用いられるようなオリゴヌクレオチドプライマーである。幾つかの好ましい実施形態では、遺伝子の核酸発現産物のレベルが、この核酸発現産物の増幅によって、例えばＰＣＲによって測定される。したがって、核酸発現産物を増幅することができるプライマーが本発明により提供される。
【００４４】
本発明は、ＲＮＡｉ分子、すなわち本明細書に記載されるような遺伝子から転写されたｍＲＮＡ配列に相補的な核酸配列を含む二本鎖ＲＮＡ分子も提供する。ＲＮＡｉ分子は、典型的には約１０〜約４０ヌクレオチド長の範囲、好適には約２０〜約３０ヌクレオチド長の範囲である。ＲＮＡｉ分子を用いて、本明細書に記載されるような遺伝子によってコードされるタンパク質の発現を調節し得る。このようにして、ＲＮＡｉ分子は、本明細書に記載されるような情動障害で過剰発現する１つ又は複数の遺伝子の発現を減少する治療化合物として利用され得る。好適には、このようなＲＮＡｉは髄腔内投与され得る。本発明は、好ましくは髄腔内投与用に処方された、１つ又は複数のＲＮＡｉと、薬学的に許容可能な担体とを含む薬学的組成物をさらに提供する。
【００４５】
さらに、ＲＮＡｉ分子を用いて、例えば本発明による遺伝子組み換えした動物又は細胞で、本明細書に記載されるような遺伝子の発現を下方調節、すなわちノックダウンし得る。
【００４６】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１及びＭＹＴ１から選択される遺伝子によってコードされるタンパク質発現の調節因子の使用も本発明の範囲内である。
【００４７】
本発明は、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、
（ｉ）ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１及びＭＹＴ１から選択される遺伝子又はその断片によってコードされるタンパク質；又は
ｉｉ）上記（ｉ）のタンパク質をコードする核酸、又は当該核酸の断片；及び／又は
ｉｉｉ）（ｉｉ）による核酸にハイブリダイズすることができる核酸
の結合パートナーの使用も提供する。
【００４８】
さらに本発明は、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法における、本発明による核酸を含む発現ベクターの使用を提供する。
【００４９】
加えて本発明は、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、本発明による核酸を発現することができる細胞又は細胞株の使用を提供する。
【００５０】
好ましくは、細胞（複数可）は神経細胞、グリア細胞若しくは他の脳細胞、又は末梢細胞、又はこれらに由来する細胞株である。
【００５１】
本発明の好ましい実施形態において、潜在的治療剤のスクリーニングは、候補治療剤を培養細胞又は細胞株に接触させることによって行われる。
【００５２】
好ましくは、細胞は神経細胞、グリア細胞若しくは他の脳細胞又は細胞株、又はこれらの種の細胞に典型的な発現プロファイルを有する細胞であるか、或いは代替的には細胞は、これらの種の細胞に典型的な発現プロファイルを生じるように操作することができる細胞であり得る。細胞（複数可）は、本明細書に記載されるように遺伝子改変され得る。また、用いられる細胞又は細胞株は好ましくは、１つ又は複数の既知の抗精神剤（例えば、バルプロエート、ハロペリドール、ピレンゼピン、ペラジン、リスペルドール、ファモチジン、ジプレキサ、クロザリル、メソリダジン、クエチアピン、リスペリドン、オランザピン、又はクロザピン）に接触させると、それらの遺伝子発現プロファイルで再現性のある変化が生じる。特に好ましい実施形態では、これらの変化は情動障害、特に双極性障害で観察されるものとは反対の変化である。すなわち、このような実施形態では、双極性障害等の情動障害においてより高レベルで通常発現される遺伝子（又はこれらのホモログ）は好ましくは、既知の抗精神剤と接触させた細胞又は細胞株においてはより低いレベルで発現し、逆もまた同様である（vice ersa）。
【００５３】
代替的にまた、細胞又は細胞株は、情動障害、特に双極性障害の患者から、又は双極性障害等の情動障害の動物モデルから、例えば上記のように遺伝子組み換えした非ヒト動物から得られ得る。
【００５４】
本発明の方法で用いられる細胞又は細胞株は、慎重に保存、増殖及び操作して、細胞及び細胞株の表現型の維持を確実にする必要がある。
【００５５】
本発明は、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１、ＭＹＴ１から選択される１つ又は複数の遺伝子の発現レベルが、対応する野生型の非ヒト哺乳動物の発現レベルに比べて変化している、遺伝子組み換えした非ヒト哺乳動物又は他の非ヒトの脊椎生物若しくは無脊椎生物をさらに提供する。本発明のこの態様の幾つかの実施形態では、２つ以上の遺伝子の発現が変化している。
【００５６】
遺伝子組み換えした動物の遺伝子（複数可）の発現は、対象の遺伝子に応じて増大又は減少し得る。遺伝子組み換えとは、１つ又は複数の遺伝子が、例えばＲＮＡｉを用いてノックダウンされるか、又は欠失若しくは他の不活性化によって「ノックアウト」されるようなものであり得る。１つ又は複数の遺伝子が、例えばより強力なプロモータを与えることによって上方調節され得るか、又は「ノックイン」され得る。このような遺伝子操作を動物に与える方法は当業者に周知である。
【００５７】
遺伝子組み換えした非ヒト哺乳動物は、非ヒト霊長類、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウサギ、齧歯類、例えばテンジクネズミ、ラット又はマウスから好適に選択される。
【００５８】
好ましくは、ＦＺＤ３、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ及びＳＬＣ２９Ａ１から選択される１つ又は複数の遺伝子の発現は、遺伝子組み換えした組み換え動物で減少される。
【００５９】
好ましくは、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５；ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ及びＭＹＴ１から選択される１つ又は複数の遺伝子の発現は、遺伝子組み換えした動物で増大される。
【００６０】
本発明は、情動障害、好ましくは双極性障害の動物モデルとしての本発明による遺伝子組み換えした非ヒト動物又は他の脊椎生物若しくは無脊椎生物の使用も提供する。
【００６１】
本発明の他の好ましい実施形態において、潜在的治療剤のスクリーニングが、候補治療剤を生物、好ましくは非ヒト動物（例えばマウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、例えばサル、テンジクネズミ、イヌ又はネコ）に投与することによって行われるが、状況によっては、例えば臨床試験の一部として、候補治療剤をヒトに投与することが望まれ得る。
【００６２】
非ヒトの細胞、生物又は抽出物が本発明に従って用いられる場合、特定のタンパク質及び遺伝子は通常、ヒトの双極性障害患者の眼窩前頭皮質で異常に発現されるものとして本明細書で同定されるヒトタンパク質又は遺伝子の適切なホモログ（すなわち、この非ヒト細胞又は生物における同等のタンパク質及び遺伝子）を表すことが理解されるであろう。幾つかの実施形態では（例えばスクリーニングアッセイ及び本明細書に記載の方法の幾つかの実施形態では）、ヒトの遺伝子（複数可）又はタンパク質（複数可）は、非ヒトの生物、細胞、系、又は抽出物で発現され得る。
【００６３】
本発明は、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１及びＭＹＴ１から選択される１つ又は複数の遺伝子の発現レベルが、対応する野生型の細胞でのレベルに比べて変化している、遺伝子組み換え細胞も提供する。本発明のこの態様の幾つかの実施形態では、２つ以上の遺伝子の発現が変化している。
【００６４】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、本発明による遺伝子組み換えした非ヒト哺乳動物、又はそれから得られるか、若しくはそれに由来する細胞（複数可）、又は本発明による細胞の使用がさらにまた提供される。
【００６５】
本発明は、被験体が情動障害であるか、又はそれを発症する危険性があるか否かを診断する方法における、
（ｉ）遺伝子の発現レベルを測定するための、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１及びＭＹＴ１から選択される任意の遺伝子をコードする核酸の結合パートナー、又は
（ｉｉ）遺伝子の発現レベルを測定するための、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１及びＭＹＴ１から選択される遺伝子によってコードされるタンパク質の結合パートナーの使用も提供する。
【００６６】
本発明は、被験体が情動障害であるか、又はそれを発症する危険性があるか否かを診断する方法であって、被験体から採取した生物学的サンプルにおけるＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１及びＭＹＴ１から選択される１つ又は複数の遺伝子の発現レベルを評価することを含む方法を提供する。
【００６７】
情動障害に罹りやすいか、又はそれを患う被験体における治療的介入に対する応答をモニタリングする方法であって、被験体から採取した生物学的サンプルにおけるＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１及びＭＹＴ１から選択される１つ又は複数の遺伝子の発現レベルを評価することを含む方法も提供される。
【００６８】
発現レベルは、被験体から採取した生物学的サンプルに存在する１つ又は複数の遺伝子のｍＲＮＡレベルを評価することによって評価することができる。代替的には又は付加的には、発現レベルは、被験体から採取した生物学的サンプルに存在する１つ又は複数のタンパク質のレベルを評価することによって評価することができ、当該タンパク質は１つ又は複数の遺伝子によってコードされる。
【００６９】
好適には生物学的サンプルは、発現レベルが眼窩前頭皮質における遺伝子の発現レベルと相関がある組織又は細胞を含む。
【００７０】
生物学的サンプルは、血液、血清、血漿、ＣＳＦ、尿及び涙液から成る群より選択することができる。
【００７１】
診断方法において、遺伝子（複数可）の発現レベルが表２で示される（及び遺伝子発現プロファイリングで明らかになる遺伝子発現の変化の要約に記載される）ように調節される場合、情動障害、特に双極性障害であるか、又はそれらを発症する危険性があると見なすことができる。治療的介入に対する応答をモニタリングする方法では、対象の遺伝子（複数可）の発現レベルが、表２に記載される（及び遺伝子発現プロファイリングで明らかになる遺伝子発現の変化の要約に記載される）変化とは反対に調節される場合、すなわち、遺伝子の発現レベルが正常な被験体の発現レベルに向けて調節される場合、障害の安定化又は改善が同定され得る。
【００７２】
本発明の方法は、アレイフォーマットで、例えばチップ上で、又はマルチウェルアレイとして行うことができる。方法は、単独試験又は複数の同一試験若しくは複数の異なる試験のためにプラットフォーム、システム又はキットに適合することができ、ハイスループットフォーマットで行うことができる。本発明の方法は、結果を確認又は除外するのに、さらに１つ又は複数の異なる試験を行うことを含み得る。
【００７３】
本発明は、情動障害を予防、治療又は改善する方法であって、このような予防、治療又は改善が必要である被験体の脳、特に眼窩前頭皮質における、１つ又は複数の以下のタンパク質：ＦＺＤ３、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ及び／又はＳＬＣ２９Ａ１のレベル又は活性を増大することを含む方法も提供する。
【００７４】
本発明は、情動障害を予防、治療又は改善する方法であって、このような予防、治療又は改善が必要である被験体の脳、特に眼窩前頭皮質における１つ又は複数の以下のタンパク質：ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＳＴＸ１１、ＴｌＭＭ１７Ａ及び／又はＭＹＴ１のレベル又は活性を減少することを含む方法も提供する。
【００７５】
例えば、アレイ形態での固形担体であって、ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、Ｈ１Ｐ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１及びＭＹＴ１からなる群のみから選択される１つ又は複数の遺伝子から転写されるｍＲＮＡに特異的にハイブリダイズすることができる１つ又は複数のプローブが付着する基板を含む固形担体も本発明によって提供される。
【００７６】
このようなアレイにおいて、同一のプローブを固形担体上の複数の場所で固定することができるか、又は異なるプローブを固形担体上の複数の場所のそれぞれで固定することができる。好適なプローブは対象のｍＲＮＡに特異的にハイブリダイズすることができる核酸である。
【００７７】
本発明は、タンパク質アレイなどの固形担体であって、１つ又は複数の以下の遺伝子：ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１及び／又はＭＹＴ１によってコードされる１つ又は複数のタンパク質又はその断片を含む固形担体も提供する。
【００７８】
本発明によるタンパク質アレイでは、同一のタンパク質を固形担体上の複数の場所で固定することができるか、又は異なるタンパク質を固形担体上の複数の場所のそれぞれで固定することができる。タンパク質という用語は、全長タンパク質、及びまたそれらの断片、例えば好適には、約１０〜約８０アミノ酸長の範囲のドメイン若しくは他のタンパク質断片の両方を表す。
【００７９】
１つ又は複数の以下の遺伝子：ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２、ＦＺＤ３、ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１、ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１、ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５、ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳ１Ｐ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１、ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ、ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１、及び／又はＭＹＴ１によってコードされる１つ又は複数のタンパク質の１つ又は複数の結合パートナーを含む結合パートナーアレイ等の１つ又は複数のタンパク質の１つ又は複数の結合パートナーを含む固形担体も本発明で提供される。
【００８０】
アレイ中に含まれる好適な結合パートナーとしては抗体が挙げられる。
【００８１】
本明細書で用いられるような「抗体」という用語には、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、ヒト化抗体又はキメラ抗体、一本鎖抗体、Ｆａｂ断片及びＦ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ発現ライブラリで生じる断片、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、及び上記のいずれかのエピトープ結合断片が含まれるが、これらに限定されない。本明細書で用いられるような「抗体」という用語は、免疫グロブリン分子、及び免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分、すなわち抗原と特異的に結合する抗原結合部位を含有する分子も表す。本発明の免疫グロブリン分子は、免疫グロブリン分子の任意のクラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ及びＩｇＡ）又はサブクラスに属し得る。
【００８２】
本発明のさらなる態様は、本明細書に記載されるような遺伝子によってコードされるタンパク質又はペプチドに特異的に結合することができる天然化合物又は化学合成化合物等の新規の結合パートナー、すなわちリガンドを提供する。本発明による結合パートナーは、タンパク質又はペプチドと特異的に結合することができる、ペプチド、抗体若しくはその断片、又はアプタマー若しくはオリゴヌクレオチドを含み得る。抗体は、タンパク質又はペプチドと特異的に結合することができるモノクローナル抗体又はその断片であり得る。本発明による結合パートナーは、発光マーカー、蛍光マーカー又は放射性マーカー等の検出可能なマーカーで標識することができ、代替的には又は付加的には本発明による結合パートナーはアフィニティタグを含み得る。
【００８３】
本発明によるアレイ等の支持体は、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法で、又は情動障害を診断する方法で、又は情動障害をモニタリングするのに、又は情動障害における治療的介入の有効性をモニタリングするのに、又は臨床試験の候補を選択するのに用いることができる。
【００８４】
このような方法は、例えば本明細書に記載される１つ又は複数の遺伝子によってコードされるタンパク質又はその断片が固定されたアレイ形態で固形担体を準備すること、候補治療剤の存在下で、固定したタンパク質又はその断片をその結合パートナーでプロービングすること、及び結合の調節を検出することを包含し、固定化タンパク質とプローブ結合パートナーとの間の結合を調節、すなわち阻害又は増大することができる場合、候補治療剤は潜在的治療剤として同定される。代替的な立体構造では、結合パートナーが整列し、プローブは本明細書に記載の遺伝子によってコードされるタンパク質又はその断片であり、結合パートナー及びプローブは阻害剤の非存在下で結合することができる。
【００８５】
好適には、プローブは検出可能なマーカーで標識され、プローブの結合は検出可能なマーカーの検出によって評価される。好ましい実施形態では、検出可能なマーカーは発光マーカー、蛍光マーカー又は放射性マーカーである。検出可能なマーカーは、アップコンバート蛍光物質及び／又は量子ドット等の微粒子標識であり得る。
【００８６】
プローブの結合は、直接又は間接的な免疫学的方法によって、或いは表面プラズモン共鳴によって評価され得る。
【００８７】
代替的には、プローブ又は固定部分は、抗体若しくはそのバイオマーカー結合断片等のリガンド（複数可）又は他のペプチド、或いはプローブ又は固定部分と特異的に結合することができるリガンド、例えばアプタマー又はオリゴヌクレオチドとの相互作用によって、直接又は間接的に検出することができる。リガンドは、発光標識、蛍光標識又は放射性標識等の検出可能な標識、及び／又はアフィニティタグを保有し得る。
【００８８】
本発明は、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法、或いは情動障害を診断又はモニタリングする方法における使用のためのキット又は他のシステム（ハイスループット又は別の方法）も提供し、キット又はシステムは本明細書で特定される１つ又は複数の遺伝子の発現産物、又は核酸発現産物由来の核酸を検出する手段を含む。
【００８９】
このようなキット又はシステムは、本発明によるアレイを含み得る。
【００９０】
本発明によるキットと他のシステムは、
ｉ）キットの使用のための使用説明書、及び／又は
ｉｉ）標準として使用するための請求項１で特定される１つ又は複数の遺伝子の所定量の単離発現産物、或いは対照
を含み得る。
【００９１】
本発明は、情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤の有効性を測定する臨床試験の参加者を選択する方法であって、候補参加者から得られた生物学的サンプルにおける、本明細書に明記される１つ又は複数の遺伝子の発現レベルを測定すること、及び遺伝子（複数可）の発現レベルが、正常な被験体のレベルに比べて変化している場合、候補者を臨床試験の参加者として選択することを含む、臨床試験の参加者を選択する方法をさらに提供する。
【００９２】
以下の実施例は本発明を例示する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００９３】
組織回収及びＲＮＡ抽出
全ての手順がこれまでに記載されている１３。要するに、１５人の双極性個体及び１５人の十分に適合した対照個体由来の新鮮凍結眼窩前頭皮質を、スタンリー脳コレクションの神経病理協会（Neuropathology Consortium of the Stanley brain collection）（Stanley Medical Research Institute，US）から入手した。重要な人口統計学的特性は表１で要約される。
【００９４】
総ＲＮＡは、Ｔｒｉ試薬（Sigma，UK）又はトリゾール（Gibco-Brl）を用いて、双極性患者及び適合対照由来の死後眼窩前頭皮質（ブロードマン領域１１）から抽出された。ＲＮＡの質は、高分解能電気泳動システム（Agilent Technologies，Palo Alto，CA，USA）を用いて評価された。
マイクロアレイ分析
総ＲＮＡの単離は、Affymetrixの調製プロトコル１４によって行われ、ＨＧＵ１３３Ａ遺伝子チップ（Affymetrix CA，USA）にハイブリダイズされ、ストリンジェントなサンプル及びこれまでに記載された１３ようなデータの品質管理工程に従った。
マイクロアレイデータの前処理
AffymetrixのMicroarray Suite 5（ＭＡＳ５）は画像処理及びデータ収集に用いられた。厳密な品質管理手順１３、１５によって、９つのＯＦＣサンプルが（診断に関係なく（blind to diagnosis））排除された。これらの異常な（outlier）チップの排除の後に、ロバストマルチチップ平均（ＲＭＡ）法１６を用いて、発現量をコンピュータで計算した。最後に、遺伝子発現マトリクスをフィルタにかけて対照のプローブセットを取り除き、「Ａ群」に割り当てられた、すなわちその１１個の内の少なくとも９つのプローブが標的転写配列と完全に適合するプローブセットのみを含むようにした。このフィルタリング工程によって、遺伝子発現マトリクスが１９５３７個のプローブセットに減少した。
異なる発現をした遺伝子の検出
双極性障害で全く異なる調節をする転写産物を同定するために、交絡臨床変数及び人口統計学的変数の影響に対して制御することが重要であった。死後脳サンプルのマイクロアレイ研究で最も重大な交絡変数は、全体的な発現プロファイルに対するその影響が一次的な利益の要因、すなわち疾患状態の影響よりも大きくなり得ることから１７、１８、組織ｐＨである。薬物の効果も考慮された。リチウム及びナトリウムバルプロエートへの曝露に関するデータは全ての患者に利用可能というわけではないので、フルフェナジン当量（ｍｇで及びｌｏｇ１０に変換して測定される）が薬物治療手段として用いられた。共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）を用いて、交絡変数の影響を調節しつつ、異なる発現をした遺伝子を同定した。これは、交絡因子、生物学的ノイズ及び実験ノイズに起因する変動による障害に起因する変動を分配させるための各プローブセットの発現に対して、線形モデルを適合させることに関係する。データが不安定である（すなわち反復数が各治療の組合せにおいて一定ではない）ので、ＡＮＣＯＶＡのＩＩＩ型二乗和が、Ｓ−Ｐｌｕｓ６（Insightful Corporation，Seattle，WA，USA）におけるｓｓＴｙｐｅ３関数を用いて適用された。Ｐ値は、バイオコンダクター２０パッケージ「ｍｕｌｔｔｅｓｔ」２１で行われるように、ベンジャミン・ホッホバーグ誤検出率（false discovery rate）（ＦＤＲ）制御手順１９を用いて調整された。
【００９５】
サンプルを分析したが、ＯＦＣサンプルに関して、患者群と対照群との間の平均組織ｐＨに差は見られなかった（表１）。したがって、ＯＦＣサンプルに関して、各遺伝子に適合したＡＮＣＯＶＡモデルは、患者群及びフルフェナジン当量のみに対する主な効果を含んでいた。
異なる発現をした遺伝子の機能的プロファイリング
上方調節遺伝子及び下方調節遺伝子のリストの機能的プロファイリングが、ＧｏＳｕｒｆｅｒ２２、２３及びＯｎｔｏ−Ｅｘｐｒｅｓｓ２４、２５を用いて行われた。ＧｏＳｕｒｆｅｒは、遺伝子オントロジー（ＧＯ）用語によるAffymetrixのプローブセット識別子のユーザー入力リストに関連し、結果は階層木として視覚化される。異なる調節をする遺伝子に対するプローブセット識別子のリストに加えて、ＧｏＳｕｒｆｅｒには、プローブセット識別子が遺伝子名、Ｕｎｉｇｅｎｅ番号、Ｌｏｃｕｓｌｉｎｋ番号及びＧＯ用語で注記された遺伝子情報表も必要である。
【００９６】
この遺伝子情報表は、Ｃｈｉｐｌｎｆｏ２８を用いて、ＮｅｔＡｆｆｘデータベース２６（更新日２００４年１２月７日）及びＧＯデータベース２７（更新日２００５年３月２２日）が抱えるデータから作成した。ＧｏＳｕｒｆｅｒを用いて、上方調節遺伝子のリスト及び下方調節転写物のリストを同時に提出することによって、ＢＤで特異的に上方調節又は下方調節するＧＯカテゴリーを明らかにした。
【００９７】
Ｏｎｔｏ−Ｅｘｐｒｅｓｓは、上方調節遺伝子及び下方調節遺伝子に関して別々に作動させた。インプットファイル及び参照ファイルが「Ａ群」プローブセット全てに対する遺伝子記号のリストであったので、遺伝子記号のリストが提出された。超幾何分布及びＦＤＲオプションは、プログラムを作動させる前に選択された。カスタム抽象化レベルをＧｏＳｕｒｆｅｒ出力と直接比較して選択することができる場合、結果は階層木及び同期図（synchronized views）２９で検査した。
【００９８】
異なる発現をした遺伝子のリストを手動で検査し、機能的なプロファイリングツールの出力を確認し、双極性障害に関連し得る他の遺伝子を同定した。
ＱＰＣＲ検証
リアルタイム定量ポリメラーゼ連鎖反応（ＱＰＣＲ）において、相補ＤＮＡは、オリゴヌクレオチドデオキシチミジンプライマー及びスーパースクリプト一本鎖合成系（Invitrogen）によって総ＲＮＡ３μｇから合成された。８つのＴａｑＭａｎ（登録商標）遺伝子発現アッセイ（表３で詳述される）が、重要なマイクロアレイ遺伝子リスト及び遺伝子オントロジーカテゴリーからの検証に対して選択された。標的遺伝子とマイクロアレイ発現レベルが類似し、全てのサンプルを通じて一貫した３つの内因性対照が選択された。内因性対照アッセイのＱＰＣＲの結果によって、疾患群と対照群とのサイクル閾値（Ｃｔ）の値の間には有意差が存在しなかったことが確認された。トランスフェリン受容体（ＴＦＲＣ）遺伝子は、最も好適な対照遺伝子であり、ＯＦＣ脳領域で全ての標的遺伝子の正規化に用いられることが見出された。標準曲線はそれぞれのアッセイに対して構築され、増幅効率が１００％近くであり、全てのアッセイを通して同程度になるようにした。ＱＰＣＲは、製造業者の使用説明書に従って、Applied Biosystemsの1700 Expression Array Systemを用いて行われた。比較Ｃｔ法は、転写産物の発現レベルの定量化に利用された３０。６つのアッセイに対しては三重のΔＣｔ値を求め、２つのアッセイに対しては二重で求めた。それぞれの場合の中央値は後の分析に用いられた。反復の標準偏差が１よりも大きい場合は、サンプルを分析から排除した。このようにして、２−ΔΔＣＴ値が算出され、ボックス状のプロットがそれぞれのサンプル群で構築された。一貫した異常値が研究され、４つのサンプルがＯＦＣデータセットから排除された。２つはｃＤＮＡプロファイルが悪く、２つは本発明者等の組織内マイクロアレイＱＣ手順に失敗した。スチューデントｔ検定を用いて、相対発現を求めた。定方向変化が予測された場合、片側検定がＯＦＣサンプルで行われた。
結果
双極性患者由来の１５人の死後脳サンプル及び１５人の健常な対照がマイクロアレイ技術を用いて研究された。
【００９９】
ＯＦＣにおいて、３９３個の転写産物が、異なる発現をするものとして分類され（ｐ＜０．０５）、２３８個の転写産物が双極性障害で上方調節され、１５５個が下方調節された。死後脳組織の遺伝子発現変化は、精神障害の研究において通常中程度（２倍未満）であり９、３１、この研究では１個の上方調節された転写産物及び４３個の下方調節した転写産物が疾患群と対照群との間で１．５倍を超えて変化した。
【０１００】
シナプトタグミンＩ（ＳＹＴ１）、ＡＴＰアーゼＨ＋輸送リソソームの７０ｋＤａのＶ１サブユニットＡ（ＡＴＰ６Ｖ１Ａ）及び父親性発現３（ＰＥＧ３）の３つの転写産物が、２倍を超えて減少された。
経路分析
ＧｏＳｕｒｆｅｒを用いた経路分析によって、４つの主要なＧＯカテゴリー（生物学的プロセス分岐）が双極性患者のＯＦＣで有意に変化する（ｐ＜０．０１）ことが示された。２つのカテゴリー、すなわちＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）シグナル伝達及び刺激剤に対する応答（特に免疫応答）が有意に上方調節される一方で、他の２つのカテゴリー、すなわち細胞内輸送及びユビキチンサイクルが下方調節された。これらの経路は、Ｏｎｔｏ−Ｅｘｐｒｅｓｓを用いた異なる発現をする転写産物リストで最も過剰に提示されたとしても同定された。ＧＰＣＲシグナル伝達経路は、刺激剤に対して応答するように（補正ｐ＝０．０３３）有意に上方調節された（補正ｐ＝０．００３）一方で、免疫応答によって、有意に上方調節される傾向が示された（補正ｐ＝０．０６２）。３つ全てのカテゴリーで同定された遺伝子の数は、ＧｏＳｕｒｆｅｒによるそれぞれのカテゴリーで挙げられた上方調節された遺伝子の数に対応する。しかし、それぞれのＧＯ用語で注記された遺伝子の総数はいずれのプログラムでも与えられず、有意性の算出に影響を与える。細胞内輸送は下方調節されると報告され（補正ｐ＝０．０１２）、Ｏｎｔｏ−Ｅｘｐｒｅｓｓは、ＧｏＳｕｒｆｅｒでは１５個であったのに比べて、このカテゴリーでは１１個の遺伝子を注記した。同様に、ユビキチンサイクルによって、下方調節される傾向が示されたが（補正ｐ＝０．０６６）、ＧｏＳｕｒｆｅｒで注記されたのは１１個であったのに比べて、７つの遺伝子しかこのカテゴリーに含まれていなかった。ＧｏＳｕｒｆｅｒ遺伝子のオントロジー注記は、他の源によって確認された３２。したがって、Ｏｎｔｏ−Ｅｘｐｒｅｓｓで報告された補正ｐ値が、細胞内輸送及びユビキチンサイクル経路に対して過小評価される可能性がある。したがって、本発明者等は、本明細書で示された経路がＢＤで有意に変化すると確信している。
【０１０１】
ＧＰＣＲシグナル伝達経路内で、２１個の転写産物がＢＤで上方調節され、これらの内の１５個がドーパミン受容体Ｄ２及びセロトニン受容体７を含む受容体をコードした（表２）。オピオイド受容体ｍｕ１（ＯＰＲＭ１）及びオピエート受容体様１（ＯＰＲＬ１）に対する転写産物が双極性群で増大した。両方の遺伝子は痛覚伝達の制御に関与し、或る特定の神経集団で同時に発現する３３。注目すべき他の上方調節転写産物としては、ソマスタチンに対する受容体（ＳＳＴＲ５）、アルギニンバソプレシンに対する受容体（ＡＶＰＲ２）、オキシトシンに対する受容体（ＯＸＴＲ）及び血管活性腸管ペプチドに対する受容体（ＶＩＰＲ２）が挙げられる。
【０１０２】
免疫応答に関与する２０個の転写産物は、双極性障害の患者で上方調節された（表２）。これらには、６つの遺伝子と、炎症プロセスに関与する調節タンパク質であるＳＯＣＳ５と共にインターロイキンファミリーの受容体とが含まれ、サイトカインシグナル伝達の抑制に関与する。好中球由来のリソソーム顆粒タンパク質であるアズロシジン１（ＡＺＵ１）の上方調節によって、循環好中球の数の増加が示され得る。免疫応答に関連する他の上方調節転写産物としては、幾つかの補体カスケード成分（ＯＲＭ２、ＰＦＣ及びＣ８Ａ）並びにＢ細胞生存及び自己免疫に関連する腫瘍壊死因子受容体ファミリーメンバーであるＴＮＦＲＳＦ１７が挙げられる。
【０１０３】
細胞内輸送に関与する遺伝子に対する１５個の転写産物は、双極性障害の被験体の脳で減少した（表２）。これらの内の７つが、核細胞質間輸送のより特異的なプロセスに関する。正確な細胞標的化に極めて重要なタンパク質の核内輸送は、輸送分子のカリオフェリン（インポルチン）ファミリーで介在される３４。カリオフェリン（インポルチン）β１（ＫＰＮＢ１）及びインポルチン７（ＩＰＯ７）は、転写物レベルで下方調節された。ＩＰＯ７の有意性の高い下方調節は、２つの独立したプローブセット（ｐ＝０．０００３６及びｐ＝０．０１８）で検出され、遺伝子は、連鎖の数及び遺伝子関連研究３５によってＢＤで示された領域である１１ｐ１５に位置している（ＯＭＩＭ  １２５４８０）。さらに、ＲＡＮ結合タンパク質２（ＲＡＮＢＰ２）に対する転写産物によって、ＢＤ群での１．５８倍の減少が示され、インポート／エクスポート複合体が集合化及び分解されるスカフォールドタンパク質をコードする。
【０１０４】
ユビキチンサイクルに関連する１３個の転写産物が双極性障害で下方調節された（表２）。これらの内の３つがユビキチン結合酵素ファミリー（Ｅ２）の遺伝子を表す：ユビキチン結合酵素Ｅ２Ｇ  １（ＵＢＥ２Ｇ１）、ハンチンチン相互作用タンパク質２（ＨＩＰ２）及び機能未知タンパク質（ＦＬＪ１１０１１）。ＨＩＰ２は、ハンチントン病３６及びアルツハイマー病３７の両方に影響を与え得る。ＢＤで減少した６つの転写産物は、ユビキチンタンパク質リガーゼ活性を有する（ＷＷＰ１、ＴＲＩＭ２３、ＰＪＡ２、ＰＣＧＦ４、ＨＩＰ２及びＶＰＳ４１）。リガーゼ（Ｅ３）は、ユビキチン化における重要な調節決定因子である３８。ＢＤで下方調節した別の遺伝子は、ユビキチン特異的プロテアーゼ１４（ＵＳＰ１４）であり、脱ユビキチン化酵素をコードし、ＢＤ及び統合失調症の両方に対して十分に確立された感受性遺伝子座である染色体１８ｐ１１にマッピングされる３９。「ユビキチンサイクル」というＧＯ用語で注記されないが、ＲＡＤ２３ホモログＢ（サッカロマイセス・セレヴィシエ）は２６Ｓプロテアソームと相互作用するＮ末端ユビキチン様ドメイン（ＵｂＩ）を含有する４０。ＲＡＤ２３Ｂに対する転写産物は、ＢＤで１．４倍下方調節され、タンパク質産物によって、ユビキチン化基質がプロテアソームに往復すると考えられる４１。
【０１０５】
対象の他の調節異常転写産物は、シナプス小胞タンパク質であるシナプトタグミンＩ（ＳＹＴ１）を含んでいた。ＳＹＴ１は、双極性障害における発現が２．４４倍減少したことが示され、これは同定された全ての異なる発現をした転写産物の倍数変化で最も大きかった。
【０１０６】
プロリルエンドペプチダーゼ様（ＰＲＥＰＬ）が、双極性患者で１．７倍減少し、プロリルエンドペプチダーゼ（ＰＲＥＰ）自体の転写産物によって、疾患群で発現の減少が示されたが、有意性には達しなかった。ＰＲＥＰは、サブスタンスＰ、オキシトシン、バソプレシン及びアンギオテンシンを含むその神経ペプチド基質の成熟及び分解に関与すると思われる４２。
ＱＰＣＲ検証
ＱＰＣＲを用いて、試験された８つの遺伝子の内の５つの遺伝子の有意な下方調節がＯＦＣで確認された。これらの遺伝子は、ＰＪＡ２、ＵＳＰ１４、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ及びＳＹＴ１であった。さらに、マイクロアレイ及びＱＰＣＲ研究に由来するデータを用いて得られた倍数変化は全て同程度であった（表２）。ＨＴＲ７の上方調節はＱＰＣＲでは検証することができなかった。これは、疾患サンプル及び対照サンプルの両方におけるこの転写産物の発現レベルが低いためである可能性が高かった。
【０１０７】
ＱＰＣＲによって、２つのユビキチン関連遺伝子が背側前頭前皮質ＤＬＰＦＣ由来のサンプルで有意に減少したことが示された。
【０１０８】
要するに、多くの細胞表面受容体の発現の増大によって、神経伝達物質を含む細胞外刺激剤に対する応答が影響を受ける可能性がある。下流効果には、最終的に転写パターンが変わる二次メッセンジャーシグナル伝達カスケード内の妨害が含まれ得る。ＢＤにおけるシグナル伝達の異常、特に転写レベルで観察される受容体の上方調節に対応し得る応答の増大に対する強力な証拠が存在する。
【０１０９】
プロリルエンドペプチダーゼ様（ＰＲＥＰＬ）によって、双極性障害における発現の大きな減少も示され、これはマイクロアレイによって約１．７０倍の減少として及びＯＦＣにおけるＱＰＣＲによって約１．８３倍の減少として測定された。ヒト脳におけるプロリルエンドペプチダーゼ（ＰＲＥＰ）の活性は、前頭皮質、頭頂葉皮質及び後頭皮質で最も高く４３、この酵素の血漿濃度は躁病で上昇し、うつ病で減少する４４。特に幾つかの神経ペプチド（サブスタンスＰ、ソマトスタチン及びバソプレシン）のレベルが情動障害で変化することも報告されているので、神経ペプチドシグナル伝達分子の成熟／分解におけるＰＲＥＰの役割は重要であり得る４５、４６。興味深いことに、ニューロンに対する３つの主流の気分安定剤（リチウム、ナトリウムバルプロエート及びカルバマゼピン）の共通の作用は、ＰＲＥＰ活性を阻害することによって破壊された４７。
【０１１０】
【表１】
2009521211.tif 000003
【０１１１】
【表２−１】
2009521211.tif 000004
【０１１２】
【表２−２】
2009521211.tif 000005
【０１１３】
【表２−３】
2009521211.tif 000006
【０１１４】
【表２−４】
2009521211.tif 000007
【０１１５】
【表２−５】
2009521211.tif 000008
【０１１６】
【表３】
2009521211.tif 000009
【０１１７】
遺伝子発現プロファイリングによって同定された遺伝子発現の変化の要約
Ｇタンパク質共役受容体シグナル伝達経路
増大
ＡＶＰＲ２、ＡＺＵ１、ＣＥＬＳＲ１、ＤＲＤ２、ＦＺＤ２、ＧＣＧ、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ４、ＨＴＲ７、ＩＬ８ＲＢ、ＭＳ４Ａ２、ＯＰＮ１ＭＷ／／／ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ３Ａ２、ＯＸＴＲ、ＰＡＲＤ３、ＲＧＳ１６、ＳＳＴＲ５、ＳＳＸ２、ＶＩＰＲ２
減少
ＦＺＤ３
免疫応答
増大
ＡＺＵ１、Ｃ８Ａ、ＣＤ７、ＣＤ７２、ＣＲＩＰ１＊、ＧＢＸ２、ＨＬＡ−Ｅ、ＩＬ１Ｒ２、ＩＬ２ＲＡ、ＩＬ４、ＩＬ４Ｒ、ＩＬ５、ＩＬ８ＲＢ、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＮＧ１、ＭＳ４Ａ２、ＯＲＭ１／／／ＯＲＭ２、ＰＦＣ、ＰＲＬＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７
減少
ＳＯＣＳ５、ＷＷＰ１
ユビキチンサイクル
減少
ＡＰＧ１２Ｌ、ＦＬＪ１１０１１、ＨＩＰ２、ＰＣＧＦ４、ＰＪＡ２、ＳＥＮＰ６、ＴＲＩＭ２３、ＵＢＥ２Ｇ１、ＵＳＰ１４、ＶＰＳ４１、ＷＷＰ１
増大
ＦＢＸＬ８、ＦＬＪ２０３１５
細胞内輸送
減少
ＢＣＡＰ２９、Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＣＯＰＡ、ＦＵＳＩＰ１、Ｇ３ＢＰ２、ＧＲＰ５８、ＨＳＰＣＡ、ＩＰＯ７、ＫＩＡＡ１０１２、ＫＰＮＢ１、ＲＡＢ２、ＲＡＮＢＰ２、ＲＢＭ８Ａ、ＳＴＡＭ、ＶＰＳ４１
増大
ＳＴＸ１１、ＴＩＭＭ１７Ａ
その他
減少
ＳＹＴ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＥＰＬ、ＳＬＣ２９Ａ１
増大
ＭＹＴ１
【図面の簡単な説明】
【０１１８】
【図１】検証遺伝子の定量リアルタイムＰＣＲ結果のプロット図を示す。
【図１】
2009521211.tif 000010
【手続補正書】
【提出日】平成20年9月19日(2008.9.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法であって、
（ａ）細胞に候補治療剤を接触させること、又は候補治療剤を生物に投与すること、
（ｂ）ＰＲＥＰＬ、ＵＳＰ１４及びＳＹＴ１から選ばれる遺伝子の発現が、前記候補治療剤に応じて前記細胞又は前記生物で調節されるか否かを判定すること、並びに
（ｄ）１つ又は複数の前記遺伝子の発現が調節される場合に、潜在的治療剤として前記候補を同定することを含む、方法。
【請求項２】
前記候補が、遺伝子の発現が増大される場合に、潜在的治療剤として同定される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記候補治療剤の存在下及び非存在下で、前記遺伝子の発現レベルを比較することを含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
（ａ）が前記候補を生物に投与することを含み、前記遺伝子の発現が前記生物の眼窩前頭皮質で変化しているか否かを決定することを含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
（ａ）が細胞を前記候補に接触させることを含み、前記細胞が、神経細胞、グリア細胞若しくは他の脳細胞、又は末梢細胞である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法であって、
（ａ）請求項１に記載の遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質を候補化合物に接触させること、及び
（ｂ）前記候補化合物の存在下及び非存在下で前記１つ又は複数のタンパク質の活性を測定すること
を含み、該候補化合物が、遺伝子によってコードされる１つ又は複数のタンパク質の活性が高められる場合に、潜在的治療剤として同定される、方法。
【請求項７】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、１つ又は複数の以下のタンパク質又は核酸：
（ｉ）請求項１に記載の遺伝子によってコードされるタンパク質又はその断片、
（ｉｉ）上記の（ｉ）のタンパク質をコードする核酸、又は該核酸の断片、及び／又は
（ｉｉｉ）（ｉｉ）に記載の核酸にハイブリダイズすることができる核酸
の使用。
【請求項８】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法において、
（ａ）請求項１に記載の遺伝子によってコードされるタンパク質若しくはその断片、又は
（ｂ）請求項７の（ｉｉ）若しくは（ｉｉｉ）に記載の核酸
の結合パートナーの使用。
【請求項９】
被験体が情動障害であるか、又は情動障害を発症する危険性があるか否かを診断する方法であって、該被験体から採取した生物学的サンプルにおいて、請求項１に記載の遺伝子の発現レベルを評価することを含む、方法。
【請求項１０】
情動障害に罹りやすいか、又は罹患している被験体において、治療的介入に対する応答をモニタリングする方法であって、該被験体から採取した生物学的サンプル、好ましくは、血液、血清、血漿、脳脊髄液、尿及び涙液から選択される生物学的サンプルにおいて、請求項１に記載の遺伝子の発現レベルを評価することを含む、方法。
【請求項１１】
前記生物学的サンプルが、前記発現レベルが前記眼窩前頭皮質における前記遺伝子の発現レベルと相関がある組織又は細胞を含む、請求項９又は１０に記載の方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の遺伝子から転写されるｍＲＮＡに特異的にハイブリダイズすることができる１つ又は複数のプローブのアレイが付着される基板を備える、装置。
【請求項１３】
情動障害の予防、治療又は改善のための潜在的治療剤を同定する方法、又は情動障害を診断する方法、又は情動障害をモニタリングする方法、又は情動障害における治療的介入の有効性をモニタリングする方法、又は臨床試験の候補を選択する方法における、請求項１２に記載の装置の使用。
【請求項１４】
情動障害を予防、治療又は改善する方法であって、このような予防、治療又は改善が必要な被験体の前記脳、特に前記眼窩前頭皮質におけるＵＳＰ１４、ＳＹＴ１及びＰＲＥＰＬから選ばれるタンパク質のレベル又は活性を増大させることを含む、方法。
【請求項１５】
前記情動障害が、双極性障害である、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法又は使用。
【国際調査報告】
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