(57)【要約】  本発明は、強力なＣＯＭＴ阻害作用を有する、一般式（Ｉ）〔式中、Ｒ１およびＲ２は、それぞれ水素、低級アシル、低級アルコキシカルボニル等であり；Ｒ３は、低級アルキル、ハロ低級アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、置換されてもよいアリール、置換されてもよいヘテロアリール等であり；Ｒ４は、シアノ、低級アルコキシカルボニル、カルボキシ等である〕で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩、それを含有する医薬組成物およびそれらの用途を提供する。2010001821.tif 000035
2010001821.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
2010001821.tif 000034
〔式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素原子、低級アシル基、低級アルコキシカルボニル基、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２を表すか、あるいはＲ１およびＲ２が一緒になって−Ｃ（Ｏ）−を形成し；
Ｒ３は、以下のａ）〜ｍ）：
ａ）低級アルキル基、
ｂ）ハロ低級アルキル基、
ｃ）シクロアルキル基、
ｄ）ヒドロキシシクロアルキル基、
ｅ）ヘテロシクロアルキル基、
ｆ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、シアノ基、低級アシル基、低級アルコキシ基、水酸基、および低級アルコキシカルボニル基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアリール基、
ｇ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、低級アルコキシ基、および水酸基から独立して選択される１〜３個の基で環が置換されるヘテロアリール基、
ｈ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアラルキル基、
ｉ）低級アルコキシ基、
ｊ）ハロ低級アルコキシ基、
ｋ）低級アルコキシ低級アルコキシ基、
ｌ）シクロアルキルオキシ基、または
ｍ）−ＮＲ１１Ｒ１２であり；
Ｒ４は、以下のａ）〜ｆ）：
ａ）シアノ基、
ｂ）低級アルコキシカルボニル基、
ｃ）ハロ低級アルコキシカルボニル基、
ｄ）低級アルコキシ低級アルコキシカルボニル基、
ｅ）シクロアルキルオキシカルボニル基、または
ｆ）カルボキシ基であり、
Ｒ１１およびＲ１２は、それぞれ独立して、水素原子、低級アルキル基、シクロアルキル基、フェニル基またはアラルキル基を表すか、あるいはＲ１１およびＲ１２が、それらが結合している窒素原子と一緒になって、環状アミノ基を形成する〕で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１およびＲ２が、水素原子である、請求項１に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ３が、以下のａ）〜ｉ）：
ａ）低級アルキル基、
ｂ）ハロ低級アルキル基、
ｃ）シクロアルキル基、
ｄ）ヘテロシクロアルキル基、
ｅ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、シアノ基、低級アシル基、低級アルコキシ基、および低級アルコキシカルボニル基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアリール基、
ｆ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜３個の基で環が置換されるヘテロアリール基、
ｇ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアラルキル基、
ｈ）低級アルコキシ基、または
ｉ）−ＮＲ１１Ｒ１２である、請求項２記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ４が、以下のａ）〜ｃ）：
ａ）シアノ基、
ｂ）低級アルコキシカルボニル基、または
ｃ）カルボキシ基である、請求項３記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ３が、以下のａ）〜ｃ）：
ａ）シクロアルキル基、
ｂ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、シアノ基、低級アシル基、低級アルコキシ基、および低級アルコキシカルボニル基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアリール基、または
ｃ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜３個の基で環が置換されるヘテロアリール基である、請求項４記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項６】
以下からなる群：
２−ベンゾイル−４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロ安息香酸エチル；
２−ベンゾイル−４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロ安息香酸メチル；
４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロ−２−（チオフェン−２−カルボニル）安息香酸エチル；
４，５−ジヒドロキシ−２−（４−メチルベンゾイル）−３−ニトロベンゾニトリル；
２−シクロヘキサンカルボニル−４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロベンゾニトリル；
４，５−ジヒドロキシ−２−（イソオキサゾール−５−カルボニル）−３−ニトロ安息香酸エチル；
４，５−ジヒドロキシ−２−（イソオキサゾール−５−カルボニル）−３−ニトロ安息香酸イソプロピル；
４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロ−２−（チアゾール−２−カルボニル）安息香酸エチル；および
４，５−ジヒドロキシ−２−イソブチリル−３−ニトロベンゾニトリルから選択される化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩と、Ｌ−ドパおよび芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ阻害剤から選択される少なくとも１種とを組み合わせてなる医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ阻害作用を有する新規なカテコール誘導体、それを含有する医薬組成物およびそれらの用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
パーキンソン病は中高年齢者に好発する進行性の神経変性疾患であり、高齢化社会の進展とともにその患者数が増加している。パーキンソン病は、安静時振戦、固縮、無動、姿勢反射障害などの協調性運動機能障害を主症状とする疾患であり、その病因は中脳黒質ドパミン性神経細胞の変性による線条体ドパミンの欠乏に起因すると考えられている。このようなことから、パーキンソン病の治療薬として、Ｌ−ドパおよびドパミンレセプター刺激薬などが使用されている。【０００３】
Ｌ−ドパは、ドパミンの前駆物質であり、脳内でドパミンに代謝されて効果を示す薬剤であるが、血中半減期が非常に短い欠点を有する。そのため、Ｌ−ドパは、通常Ｌ−ドパの代謝酵素阻害剤である、末梢性芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ阻害剤および／またはカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ阻害剤とともに使用されている。カテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（以下、ＣＯＭＴと称する）は、その補酵素であるＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンからカテコール基質へのメチル基の転送を触媒する酵素であり、この酵素を阻害することによりＬ−ドパから３−Ｏ−メチル−Ｌ−ドパへの代謝が阻害され、Ｌ−ドパの血中半減期が増加し、さらには血液脳関門を透過するＬ−ドパ量が増加することが知られている。このようにＣＯＭＴ阻害剤は、Ｌ−ドパと一緒に投与することにより、Ｌ−ドパの生体内利用率を増加させ、その作用時間を延長させることが知られている（例えば、非特許文献１参照）。【０００４】
ＣＯＭＴ阻害剤は、また、尿中ナトリウム排泄促進作用を有するので高血圧症の治療薬として有用であると期待されている（例えば、非特許文献２参照）。ＣＯＭＴ阻害剤は、また、うつ病の治療薬として有用であると期待されている（例えば、非特許文献３参照）。【０００５】
近年、種々のＣＯＭＴ阻害剤が報告されている。今日まで知られている最も強力なＣＯＭＴ阻害剤は、トルカポン（３，４−ジヒドロキシ−４’−メチル−５−ニトロベンゾフェノン，特許文献１参照）およびエンタカポン（（Ｅ）−２−シアノ−Ｎ，Ｎ−ジエチル−３−（３，４−ジヒドロキシ−５−ニトロフェニル）アクリルアミド，特許文献２参照）であり、これら２剤がパーキンソン病患者に使用されている。しかしながら、トルカポンは、重篤な肝機能障害が認められたことから、厳重な肝機能の監視下での投与が必要とされている（例えば、非特許文献４参照）。また、エンタカポンは、トルカポンに比べて効果が弱く、さらに作用持続時間が短い問題点を有している（例えば、非特許文献５参照）。このようなことから、安全性が高く、強力なＣＯＭＴ阻害作用を有する新規なＣＯＭＴ阻害剤が望まれている。【０００６】
特許文献３は、ＣＯＭＴ阻害作用を有する置換ニトロカテコール誘導体として、炭酸  ４，５−ジベンゾイル−２−エトキシカルボニルオキシ−３−ニトロフェニル エステル エチルエステル；（６−ベンゾイル−３，４−ジヒドロキシ−２−ニトロフェニル）フェニルメタノン；（３，４−ジヒドロキシ−２−ニトロフェニル）フェニルメタノンなどを開示している（特許文献３の実施例４および６１参照）。しかしながら特許文献３に開示された表２の結果によればこれらの化合物の肝ＣＯＭＴ阻害活性はエンタカポンに比べて弱いものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】欧州特許出願公開第２３７９２９号明細書
【特許文献２】英国特許出願公開第２２００１０９号明細書
【特許文献３】国際公開第２００１／９８２５０号パンフレット
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Nutt J.G.ら，「Lancet」, 1998年, 351巻, 9111号, p.1221-1222
【非特許文献２】Eklof A.C.ら, 「Kidney Int.」, 1997年, 52巻, 3号, p.742-747
【非特許文献３】Moreau J.L.ら, 「Behav. Pharmacol.」, 1994年, 5巻, 3号, p.344-350
【非特許文献４】Benabou R.ら, 「Expert Opin. Drug Saf.」, 2003年, 2巻, 3号, p.263-267
【非特許文献５】Forsberg M.ら, 「J. Pharmacol. Exp. Ther.」, 2003年, 304巻, 2号, p.498-506
【非特許文献６】Koga K.ら，「Eur. J. Pharmacol.」， 2000年， 408巻， p.249-255
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、強力なＣＯＭＴ阻害作用を有し、好ましくは高い安全性を有する新規な化合物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、一般式（Ｉ）で表されるカテコール誘導体が、優れたＣＯＭＴ阻害作用を有し、さらには高い安全性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。【００１１】
すなわち、本発明は、一般式（Ｉ）：
【化１】
2010001821.tif 000003
〔式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素原子、低級アシル基、低級アルコキシカルボニル基、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２を表すか、あるいはＲ１およびＲ２が一緒になって−Ｃ（Ｏ）−を形成し；
Ｒ３は、以下のａ）〜ｍ）：
ａ）低級アルキル基、
ｂ）ハロ低級アルキル基、
ｃ）シクロアルキル基、
ｄ）ヒドロキシシクロアルキル基、
ｅ）ヘテロシクロアルキル基、
ｆ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、シアノ基、低級アシル基、低級アルコキシ基、水酸基、および低級アルコキシカルボニル基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアリール基、
ｇ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、低級アルコキシ基、および水酸基から独立して選択される１〜３個の基で環が置換されるヘテロアリール基、
ｈ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアラルキル基、
ｉ）低級アルコキシ基、
ｊ）ハロ低級アルコキシ基、
ｋ）低級アルコキシ低級アルコキシ基、
ｌ）シクロアルキルオキシ基、または
ｍ）−ＮＲ１１Ｒ１２であり；
Ｒ４は、以下のａ）〜ｆ）：
ａ）シアノ基、
ｂ）低級アルコキシカルボニル基、
ｃ）ハロ低級アルコキシカルボニル基、
ｄ）低級アルコキシ低級アルコキシカルボニル基、
ｅ）シクロアルキルオキシカルボニル基、または
ｆ）カルボキシ基であり、
Ｒ１１およびＲ１２は、それぞれ独立して、水素原子、低級アルキル基、シクロアルキル基、フェニル基またはアラルキル基を表すか、あるいはＲ１１およびＲ１２が、それらが結合している窒素原子と一緒になって、環状アミノ基を形成する〕
で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩に関する。【００１２】
また、本発明は、一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物に関する。【００１３】
また、本発明は、一般式（I）に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、カテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ阻害剤に関する。【００１４】
また、本発明は、一般式（I）に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩と、Ｌ−ドパおよび芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ阻害剤から選択される少なくとも１種とを組み合わせてなる医薬に関する。【００１５】
また、本発明は、一般式（I）に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、パーキンソン病、うつ病または高血圧症の治療または予防剤に関する。【００１６】
また、本発明は、パーキンソン病、うつ病または高血圧症の治療または予防剤を製造するための、一般式（I）に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用に関する。【００１７】
また、本発明は、パーキンソン病、うつ病または高血圧症の治療または予防方法に関し、該方法は、一般式（I）に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を包含する。
【発明の効果】
【００１８】
本発明の化合物は、強力なＣＯＭＴ阻害作用を有する。また、本発明の化合物は、肝への影響が軽微であり、高い安全性を有する。従って本発明の化合物は、パーキンソン病、うつ病、高血圧症の治療または予防剤として有用であり、特に本発明の化合物と、Ｌ−ドパとを組み合わせて使用することにより、Ｌ−ドパの生体内利用率を増加させることができるので、パーキンソン病の治療または予防に好適である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
一般式（Ｉ）で表される化合物において、下記の用語は、特に断らない限り、以下の意味を有する。
【００２０】
本明細書において、「低級」との用語は、特に断らない限り、炭素数１〜６個を有することを意味する。
【００２１】
「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を表す。
【００２２】
「低級アルキル基」とは、直鎖または分岐鎖状のＣ１−６アルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、tert−ペンチル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基、１，２−ジメチルプロピル基、ヘキシル基、イソヘキシル基などが挙げられる。
【００２３】
「ハロ低級アルキル基」とは、１〜３個の同種または異種のハロゲン原子で置換されたＣ１−６アルキル基を意味し、例えば、フルオロメチル基、ジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基などが挙げられ、好適にはジフルオロメチル基またはトリフルオロメチル基である。
【００２４】
「シクロアルキル基」とは、３〜７員の飽和環状炭化水素を意味し、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基およびシクロヘプチル基が挙げられる。
【００２５】
「ヒドロキシシクロアルキル基」とは、水酸基で置換された、３〜７員の飽和環状炭化水素を意味し、例えば、３−ヒドロキシシクロペンチル基、２−ヒドロキシシクロヘキシル基、３−ヒドロキシシクロヘキシル基、４−ヒドロキシシクロヘキシル基などが挙げられる。
【００２６】
「ヘテロシクロアルキル基」とは、環内に−ＮＨ−、−Ｏ−または−Ｓ−を含有し、炭素原子を介して結合する４〜７員の飽和複素環基を意味し、例えば、テトラヒドロフリル基、テトラヒドロチエニル基、テトラヒドロピラニル基、ピロリジン−２−イル基、ピロリジン−３−イル基、ピペリジン−２−イル基、ピペリジン−３−イル基、ピペリジン−４−イル基などが挙げられる。
【００２７】
「アリール基」とは、炭素数６〜１０個の芳香族炭化水素を意味し、フェニル基、１−ナフチル基、２−ナフチル基が挙げられ、好適にはフェニル基である。
【００２８】
「アラルキル基」とは、アリール基で置換されたＣ１−６アルキル基を意味し、ベンジル基、フェネチル基、１−フェニルエチル基、３−フェニルプロピル基、４−フェニルブチル基、ナフチルメチル基などが挙げられる。
【００２９】
「ヘテロアリール基」とは、１〜５個の炭素原子ならびにＯ、ＮおよびＳ原子からなる群から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する５〜６員の単環式芳香族複素環、あるいは１〜９個の炭素原子ならびにＯ、ＮおよびＳ原子からなる群から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する８〜１０員の二環式芳香族複素環を意味し、但し、これらの環は、隣接する酸素原子および／または硫黄原子を含まない。単環式芳香族複素環としては、例えば、ピロリル、フリル、チエニル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、テトラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、１，２，３−チアジアゾリル、トリアゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジルおよびピリダジニルなどが挙げられ、好適にはチエニル、イソオキサゾリルまたはチアゾリルである。二環式芳香族複素環としては、例えば、インドリル、インダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾチアゾリル、キノリル、イソキノリル、フタラジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリルなどが挙げられる。これらの複素環の全ての位置異性体が考えられる（例えば、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジルなど）。
【００３０】
「低級アシル基」とは、（Ｃ１−６アルキル）−Ｃ（Ｏ）−で表される基を意味し、例えば、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、ピバロイル基、バレリル基、イソバレリル基などが挙げられる。
【００３１】
「低級アルコキシ基」とは、直鎖または分岐鎖状のＣ１−６アルコキシ基を意味し、例えば、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、sec−ブトキシ基、tert−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基などが挙げられる。
【００３２】
「ハロ低級アルコキシ基」とは、１〜３個の同種または異種のハロゲン原子で置換されたＣ１−６アルコキシ基を意味し、例えば、ジフルオロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基、２，２，２−トリフルオロエトキシ基などが挙げられる。
【００３３】
「低級アルコキシ低級アルコキシ基」とは、Ｃ１−６アルコキシ基で置換されたＣ１−６アルコキシ基を意味し、例えば、２−メトキシエトキシ基、２−エトキシエトキシ基、３−メトキシプロポキシ基、４−メトキシブトキシ基などが挙げられる。
【００３４】
「シクロアルキルオキシ基」とは、（シクロアルキル）−Ｏ−で表される基を意味し、例えば、シクロプロピルオキシ基、シクロブチルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基などが挙げられる。
【００３５】
「低級アルコキシカルボニル基」とは、（Ｃ１−６アルコキシ）−Ｃ（Ｏ）−で表される基を意味し、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、sec−ブトキシカルボニル基、tert−ブトキシカルボニル基、ペンチルオキシカルボニル基、ヘキシルオキシカルボニル基などが挙げられる。
Ｒ４における低級アルコキシカルボニル基は、好適にはメトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基またはイソプロポキシカルボニル基であり、さらに好適にはメトキシカルボニル基またはエトキシカルボニル基である。
【００３６】
「ハロ低級アルコキシカルボニル基」とは、（ハロＣ１−６アルコキシ）−Ｃ（Ｏ）−で表される基を意味し、例えば、２，２，２−トリフルオロエチルオキシカルボニル基、２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル基などが挙げられる。
【００３７】
「シクロアルキルオキシカルボニル基」とは、（シクロアルキル）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−で表される基を意味し、例えば、シクロペンチルオキシカルボニル基、シクロヘキシルオキシカルボニル基などが挙げられる。
【００３８】
「低級アルコキシ低級アルコキシカルボニル基」とは、（Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルコキシ）−Ｃ（Ｏ）−で表される基を意味し、２−メトキシエトキシカルボニル基、２−エトキシエトキシカルボニル基、３−メトキシプロポキシカルボニル基などが挙げられる。
【００３９】
「環状アミノ基」とは、環内に−ＮＨ−、−Ｏ−または−Ｓ−を含んでもよい、５〜７員の飽和環状アミンを意味し、例えば、１−ピロリジル基、ピペリジノ基、ピペラジノ基、モルホリノ基、チオモルホリノ基などが挙げられる。当該環状アミノ基は、必要に応じて１〜２個の低級アルキル基、低級アルコキシカルボニル基で置換されてもよく、このような置換された環状アミノ基として、例えば、４−エトキシカルボニルピペラジノ基、４−メチルカルボニルピペラジノ基などが挙げられる。
【００４０】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物において１つまたはそれ以上の不斉炭素原子が存在する場合、本発明は各々の不斉炭素原子がＲ配置の化合物、Ｓ配置の化合物、およびそれらの任意の組み合せの化合物のいずれも包含する。またそれらのラセミ化合物、ラセミ混合物、単一のエナンチオマー、ジアステレオマー混合物が本発明の範囲に含まれる。本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物において幾何学異性が存在する場合、本発明はその幾何学異性体のいずれも包含する。本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物においてアトロプ異性体が存在する場合、本発明はそのアトロプ異性体のいずれも包含する。さらに本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物には、水和物やエタノール等の医薬品として許容される溶媒との溶媒和物も含まれる。
【００４１】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物は、塩の形態で存在することができる。このような塩としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの鉱酸との酸付加塩、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、プロピオン酸、クエン酸、コハク酸、酒石酸、フマル酸、酪酸、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、炭酸、グルタミン酸、アスパラギン酸等の有機酸との酸付加塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等の無機塩基との塩、トリエチルアミン、ピペリジン、モルホリン、リジン等の有機塩基との塩を挙げることができる。
【００４２】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物のひとつの実施態様において、
Ｒ１およびＲ２は、好ましくは水素原子であり；
Ｒ３は、好ましくは、以下のａ）〜ｉ）：
ａ）低級アルキル基、
ｂ）ハロ低級アルキル基、
ｃ）シクロアルキル基、
ｄ）ヘテロシクロアルキル基、
ｅ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、シアノ基、低級アシル基、低級アルコキシ基、および低級アルコキシカルボニル基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアリール基、
ｆ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜３個の基で環が置換されるヘテロアリール基、
ｇ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアラルキル基、
ｈ）低級アルコキシ基、または
ｉ）−ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ３は、さらに好ましくは、以下のａ）〜ｃ）：
ａ）シクロアルキル基、
ｂ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、シアノ基、低級アシル基、低級アルコキシ基、および低級アルコキシカルボニル基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアリール基、または
ｃ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜３個の基で環が置換されるヘテロアリール基であり；あるいは
Ｒ４は、好ましくは、以下のａ）〜ｃ）：
ａ）シアノ基、
ｂ）低級アルコキシカルボニル基、または
ｃ）カルボキシ基である。
【００４３】
本発明の好ましい実施態様では、
Ｒ１およびＲ２は、水素原子である。
【００４４】
本発明のさらに好ましい実施態様では、
Ｒ１およびＲ２は、水素原子であり、
Ｒ３は、以下のａ）〜ｉ）：
ａ）低級アルキル基、
ｂ）ハロ低級アルキル基、
ｃ）シクロアルキル基、
ｄ）ヘテロシクロアルキル基、
ｅ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、シアノ基、低級アシル基、低級アルコキシ基、および低級アルコキシカルボニル基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアリール基、
ｆ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜３個の基で環が置換されるヘテロアリール基、
ｇ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアラルキル基、
ｈ）低級アルコキシ基、または
ｉ）−ＮＲ１１Ｒ１２である。
【００４５】
本発明のなおさらに好ましい実施態様では、
Ｒ１およびＲ２は、水素原子であり、
Ｒ３は、以下のａ）〜ｉ）：
ａ）低級アルキル基、
ｂ）ハロ低級アルキル基、
ｃ）シクロアルキル基、
ｄ）ヘテロシクロアルキル基、
ｅ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、シアノ基、低級アシル基、低級アルコキシ基、および低級アルコキシカルボニル基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアリール基、
ｆ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜３個の基で環が置換されるヘテロアリール基、
ｇ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアラルキル基、
ｈ）低級アルコキシ基、または
ｉ）−ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ４が、以下のａ）〜ｃ）：
ａ）シアノ基、
ｂ）低級アルコキシカルボニル基、または
ｃ）カルボキシ基である。
【００４６】
本発明の特に好ましい実施態様では、
Ｒ１およびＲ２は、水素原子であり、
Ｒ３は、以下のａ）〜ｃ）：
ａ）シクロアルキル基、
ｂ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、シアノ基、低級アシル基、低級アルコキシ基、および低級アルコキシカルボニル基から独立して選択される１〜５個の基で環が置換されるアリール基、または
ｃ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基、および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜３個の基で環が置換されるヘテロアリール基であり、
Ｒ４が、以下のａ）〜ｃ）：
ａ）シアノ基、
ｂ）低級アルコキシカルボニル基、または
ｃ）カルボキシ基である。
【００４７】
本発明の好ましい実施態様の具体例は、以下からなる群から選択される化合物またはその薬理学的に許容される塩である：
２−ベンゾイル−４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロ安息香酸エチル；
２−ベンゾイル−４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロ安息香酸メチル；
４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロ−２−（チオフェン−２−カルボニル）安息香酸エチル；
４，５−ジヒドロキシ−２−（４−メチルベンゾイル）−３−ニトロベンゾニトリル；
２−シクロヘキサンカルボニル−４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロベンゾニトリル；
４，５−ジヒドロキシ−２−（イソオキサゾール−５−カルボニル）−３−ニトロ安息香酸エチル；
４，５−ジヒドロキシ−２−（イソオキサゾール−５−カルボニル）−３−ニトロ安息香酸イソプロピル；
４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロ−２−（チアゾール−２−カルボニル）安息香酸エチル；および
４，５−ジヒドロキシ−２−イソブチリル−３−ニトロベンゾニトリル。
【００４８】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物は、スキーム１から５に示す方法により製造することができる。
【００４９】
【化２】
2010001821.tif 000004
（式中、Ｒ３およびＲ４は前記と同義であり、Ｒ１０は低級アシル基、低級アルコキシカルボニル基または−ＣＯＮＲ１１Ｒ１２を表し、Ｒ１１およびＲ１２は前記と同義であり、Ｂｎはベンジル基を表す。）
【００５０】
工程１−１
ケトン誘導体（X）のベンジル基を、適切な溶媒中、水素雰囲気下、金属触媒の存在下に除去することにより、フェノール誘導体（XI）が得られる。本反応に用いられる溶媒としては、例えば、エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフランなどが挙げられる。金属触媒としては、例えば、パラジウム炭素、酸化白金などが挙げられる。その反応温度は、通常、室温〜８０℃であり、反応時間は使用する原料や溶媒、反応温度等により異なるが、通常、３０分〜１２時間である。
また、この脱ベンジル化は、ケトン誘導体（X）を、不活性溶媒（例えば、塩化メチレン、トルエンなど）中、酸またはルイス酸（例えば、臭化水素、塩化アルミニウム、四塩化チタンなど）を用いて処理することによっても行うことができる。その反応温度は、通常、０℃〜８０℃であり、反応時間は使用する原料や溶媒、反応温度等により異なるが、通常１５分〜２４時間である。
【００５１】
工程１−２
フェノール誘導体（XI）を、不活性溶媒中、ニトロ化剤を用いニトロ化することにより、ニトロフェノール誘導体（XII）が得られる。本反応に用いられる不活性溶媒としては、例えば、塩化メチレン、１，２−ジクロロエタン、酢酸エチル、酢酸、テトラヒドロフランなどが挙げられる。ニトロ化剤としては、例えば、硝酸、発煙硝酸、テトラフルオロホウ酸ニトロニウムなどが挙げられる。その反応温度は、通常、−４０℃〜８０℃であり、反応時間は、使用する原料や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常、５分〜１２時間である。また、本反応は必要に応じて、無水酢酸、硫酸などの添加剤を加えて行ってもよい。
【００５２】
工程１−３
ニトロフェノール誘導体（XII）を、不活性溶媒中、脱メチル化剤を用いて脱メチル化することにより、化合物（Ia）が得られる。本反応に用いられる不活性溶媒としては、例えば、酢酸エチル、ピリジン、１，４−ジオキサンなどが挙げられる。脱メチル化剤としては、例えば、塩化アルミニウム−ピリジン、三臭化ほう素などが挙げられる。その反応温度は、通常、−２０℃〜１２０℃であり、反応時間は、使用する原料や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常、１時間〜２４時間である。
またこの脱メチル化は、ニトロフェノール誘導体（XII）を、酢酸溶媒中または無溶媒下、臭化水素酸またはヨウ化水素酸で処理することによっても行うことができる。その反応温度は、通常、２０℃〜還流温度であり、反応時間は、使用する原料、反応温度などにより異なるが、通常、１時間〜２４時間である。
【００５３】
工程１−４
化合物（Ia）を、アシル化剤を用いてアシル化することにより、化合物（Ib）が得られる。このようなアシル化は、当業者には周知であり、例えば、T.W.GreeneおよびP.G.H.Wuts,「Protective Groups in Organic Synthesis」第４版に記載された方法に従って行うことができる。
【００５４】
本発明の化合物（Ｉ）のうち化合物（Ic）および化合物（Id）はスキーム２に示す方法により合成することができる。
【００５５】
【化３】
2010001821.tif 000005
（式中、Ｒ３およびＢｎは前記と同義であり、Ｒ４０は低級アルキル、シクロアルキル、ハロ低級アルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、Ｘは塩素または臭素原子を表す。）
【００５６】
工程２−１
アルデヒド（XIII）を適切な溶媒中、ヨウ素化剤（例えばヨウ素、Ｎ−ヨードこはく酸イミド、一塩化よう素など）の存在下ヨウ素化することによりヨードベンズアルデヒド(XIV)が得られる。本反応に用いられる溶媒としては、例えば、塩化メチレン、メタノール、酢酸などが挙げられる。その反応温度は、通常、２０℃〜還流温度であり、反応時間は、使用する原料、反応温度などにより異なるが、通常、１５分〜２４時間である。また、本反応は必要に応じて、トリフルオロ酢酸、トリフルオロ酢酸銀などの添加剤を加えて行ってもよい。
【００５７】
工程２−２
ヨードベンズアルデヒド（XIV）を適切な溶媒中、酸化剤を用いて酸化することによりカルボン酸（XV）が得られる。本反応に用いられる溶媒として、例えば塩化メチレン、アセトニトリル、水、メタノールなどが挙げられる。酸化剤として、過マンガン酸カリウム、二酸化マンガン、亜塩素酸ナトリウム−過酸化水素、亜塩素酸ナトリウム−ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。その反応温度は、通常、０℃〜８０℃であり、反応時間は、使用する原料や溶媒、酸化剤、反応温度によって異なるが、通常１５分〜３日である。また、本反応は必要に応じて、リン酸水素ナトリウム、硫酸などの添加剤を加えて行ってもよい。
【００５８】
工程２−３
カルボン酸（XV）を不活性溶媒中、塩基の存在下、ヨウ化アルキル（XVI）と反応させることにより、ヨード安息香酸エステル誘導体（XVIII）が得られる。本反応に用いられる不活性溶媒としては、例えば、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１，２−ジメトキシエタン、テトラヒドロフランなどが挙げられる。塩基としては、例えば、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、炭酸カリウムなどが挙げられる。その反応温度は、通常、０℃〜１００℃であり、反応時間は、使用する原料や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常、５分〜２４時間である。
また、ヨード安息香酸エステル誘導体（XVIII）は、カルボン酸（XV）およびアルコール(XVII)を、不活性溶媒中（例えば、塩化メチレン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなど）、縮合剤の存在下に縮合させることによっても得ることができる。縮合剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩、シアノリン酸ジエチル、アジ化ジフェニルホスホリルなどが挙げられる。また、本反応は必要に応じて、トリエチルアミンなどの塩基を加えて行ってもよい。
【００５９】
工程２−４
エステル誘導体（XIX）を適切な溶媒中、ヨウ素化剤（例えば、ヨウ素、Ｎ−ヨードこはく酸イミド、一塩化よう素など ）の存在下ヨウ素化することによりヨード安息香酸エステル誘導体（XVIII）が得られる。本反応に用いられる溶媒としては、例えば、塩化メチレン、メタノール、酢酸などが挙げられる。その反応温度は、通常、２０℃〜還流温度であり、反応時間は、使用する原料、反応温度などにより異なるが、通常、１５分〜２４時間である。また、本反応は必要に応じて、トリフルオロ酢酸、トリフルオロ酢酸銀などの添加剤を加えて行ってもよい。
【００６０】
工程２−５
ヨード安息香酸エステル誘導体（XVIII）を不活性溶媒中、有機マグネシウム試薬と反応させ、その後、酸ハライド（XX）または酸無水物（XXI）と反応させることにより、ケトン誘導体（XXII）が得られる。本反応に用いられる不活性溶媒としては、例えば、テトラヒドロフランなどが挙げられる。有機マグネシウム試薬としてはイソプロピルマグネシウムクロリドなどが挙げられる。その反応温度は通常−７８℃〜５０℃であり、反応時間は、使用する原料や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１５分〜２時間である。
【００６１】
工程２−６
ケトン誘導体（XXII）を、工程１−１と同様にして、脱ベンジル化することにより、フェノール誘導体（XXIII）が得られる。
【００６２】
工程２−７
フェノール誘導体（XXIII）を、塩基の存在下、適切な溶媒中で加水分解することにより、カルボン酸誘導体（XXIV）が得られる。本反応に用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、水、テトラヒドロフラン、それらの混合溶媒などが挙げられる。塩基としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウムなどが挙げられる。その反応温度は通常、室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料や溶媒、反応温度等により異なるが、通常１０分〜２４時間である。
【００６３】
工程２−８
ケトン誘導体（XXII）を、工程２−７と同様にして、加水分解することにより、カルボン酸誘導体（XXV）が得られる。
【００６４】
工程２−９
カルボン酸誘導体（XXV）を、工程１−１と同様にして、脱ベンジル化することにより、カルボン酸誘導体（XXIV）が得られる。
【００６５】
以下、スキーム１の工程１−２〜工程１−３と同様にして、エステル誘導体（XXIII）から化合物(Ic)を合成することができる。また、カルボン酸誘導体（XXIV）から化合物(Id)を合成することができる。
【００６６】
本発明の化合物（Ｉ）のうち化合物（Ic）は、スキーム３に示す方法によって合成することができる。
【００６７】
【化４】
2010001821.tif 000006
（式中、Ｒ３、Ｒ４０およびＢｎは前記と同義であり、Ｌ１は臭素原子、ヨウ素原子またはトリフルオロメタンスルホニルオキシ基を表す。）
【００６８】
工程３−１
化合物（XXVI）およびアルコール（XVII）を、不活性溶媒中、一酸化炭素雰囲気下、塩基、パラジウム触媒および配位子の存在下に縮合させることにより、エステル誘導体（XXII）が得られる。本反応に用いられる不活性溶媒としては、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１，４−ジオキサン、１，２−ジメトキシエタン、テトラヒドロフラン、トルエンなどが挙げられる。塩基としては、例えば、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンなどが挙げられる。パラジウム触媒としては、例えば、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、酢酸パラジウムなどが挙げられる。配位子としては、例えば、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン、トリフェニルホスフィンなどが挙げられる。その反応温度は、通常、８０℃〜１１０℃であり、反応時間は使用する原料や溶媒、反応温度等により異なるが、通常、１時間〜２４時間である。
【００６９】
以下、スキーム１の工程１−１〜工程１−３と同様にして、エステル誘導体（XXII）から化合物(Ic)を合成することができる。
【００７０】
本発明の化合物（Ｉ）のうち化合物（Ie）は、スキーム４に示す方法によって合成することができる。
【００７１】
【化５】
2010001821.tif 000007
（式中、Ｒ３、ＢｎおよびＸは前記と同義である。）
【００７２】
工程４−１
ヨードベンズアルデヒド（XIV）を適切な溶媒中、ヒドロキシルアミンの存在下オキシム化することにより、オキシム（XXVII）が得られる。本反応に用いられる溶媒としては、例えば、エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフランなどが挙げられる。その反応温度は、通常、２０℃〜還流温度であり、反応時間は、使用する原料、反応温度などにより異なるが、通常、１５分〜２４時間である。また、本反応は必要に応じて、酢酸ナトリウムなどの添加剤を加えて行ってもよい。
【００７３】
工程４−２
オキシム（XXVII）を不活性溶媒中、塩基の存在下もしくは塩基を溶媒として、酸無水物、酸ハライド、スルホン酸無水物、スルホニルクロリドもしくは塩化チオニルと反応させることによりニトリル誘導体（XXVIII）が得られる。本反応に用いられる不活性溶媒としては、例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、トルエンなどが挙げられる。塩基としては、例えば、トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンなどが挙げられる。酸無水物としては、例えば、無水酢酸、トリフルオロ酢酸無水物などが挙げられる。酸ハライドとしては、アセチルクロリド、トリフルオロメタンスルホニルクロリドなどが挙げられる。スルホン酸無水物としては、例えば、トリフルオロメタンスルホン酸無水物 などが挙げられる。スルホニルクロリドとしては、例えば、メタンスルホニルクロリド、ｐ−トルエンスルホン酸クロリド、トリフルオロメタンスルホニルクロリドなどが挙げられる。その反応温度は、通常、−２０℃〜１１０℃であり、反応時間は使用する原料や溶媒、反応温度等により異なるが、通常３０分〜２４時間である。
【００７４】
工程４−３
カルボン酸（XV）を、不活性溶媒中、縮合剤の存在下にアンモニア、アンモニア水、アンモニアの塩および塩基（例えば、トリエチルアミンなど）と縮合させることにより、アミド誘導体（XXIX）が得られる。本反応に用いられる不活性溶媒としては、例えば、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、塩化メチレン、およびそれらの混合溶媒などが挙げられる。縮合剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩、シアノリン酸ジエチル、アジ化ジフェニルホスホリルなどが挙げられる。
また、アミド誘導体（XXIX）は、カルボン酸（XV）を、常法に従って、その反応性誘導体（例えば、酸ハライド、酸無水物、ベンゾトリアゾール−１−イルエステル、４−ニトロフェニルエステル、２，５−ジオキサピロリジンエステルなど）に変換後、塩基の存在下または非存在下にアンモニア水、アンモニア、アンモニアの塩と縮合させることによっても得ることができる。この縮合反応に用いられる溶媒としては、例えば、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、塩化メチレン、およびそれらの混合溶媒などが挙げられる。塩基としては、例えば、炭酸カリウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリンなどが挙げられる。その反応温度は、通常、−２０℃〜還流温度であり、反応時間は使用する原料や溶媒、反応温度等により異なるが、通常、１５分〜２４時間である。
【００７５】
工程４−４
アミド誘導体（XXIX）を、不活性溶媒中、塩基の存在下もしくは塩基を溶媒として、酸無水物、酸ハライド、スルホン酸無水物、スルホニルクロリドもしくは塩化チオニルと反応させることにより、ニトリル誘導体（XXVIII）が得られる。本反応に用いられる不活性溶媒としては、例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、トルエンなどが挙げられる。塩基としては例えばトリエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンなどが挙げられる。酸無水物としては、例えば、無水酢酸、トリフルオロ酢酸無水物が挙げられる。酸ハライドとしてはアセチルクロリド、トリフルオロメタンスルホニルクロリドなどが挙げられる。スルホン酸無水物としては、例えば、トリフルオロメタンスルホン酸無水物などが挙げられる。スルホニルクロリドとしてはメタンスルホニルクロリド、ｐ−トルエンスルホン酸クロリド、トリフルオロメタンスルホニルクロリドなどが挙げられる。その反応温度は、通常、−２０℃〜１１０℃であり、反応時間は使用する原料や溶媒、反応温度等により異なるが、通常３０分〜２４時間である。
【００７６】
工程４−５
ニトリル誘導体（XXVIII）を、不活性溶媒中、有機マグネシウム試薬と反応させ、その後、酸ハライド（XX）または酸無水物（XXI）と反応させることにより、ケトン誘導体（XXX）が得られる。本反応に用いられる不活性溶媒としては、例えば、テトラヒドロフランなどが挙げられる。有機マグネシウム試薬としては、イソプロピルマグネシウムクロリドなどが挙げられる。その反応温度は、通常、−７８℃〜５０℃であり、反応時間は、使用する原料や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１５分〜２時間である。
【００７７】
以下、スキーム１の工程１−１〜工程１−３と同様にして、ニトリル誘導体（XXX）から化合物(Ie)を合成することができる。
【００７８】
本発明の化合物（Ｉ）のうち化合物（Ie）は、スキーム５に示す方法によって合成することができる。
【００７９】
【化６】
2010001821.tif 000008
（式中、Ｒ３、ＢｎおよびＬ１は前記と同義である。）
【００８０】
工程５−１
化合物（XXVI）を、不活性溶媒中、シアノ化剤、パラジウム触媒、配位子の存在下に縮合させることにより、ニトリル誘導体（XXX）が得られる。本反応に用いられる不活性溶媒としては、例えば、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１，２−ジメトキシエタン、１−メチル−２−ピロリジノンなどが挙げられる。シアノ化剤としては、例えば、シアン化第一銅、シアン化カリウムなどが挙げられる。触媒としては、例えば、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）などが挙げられる。配位子としては、例えば、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンなどが挙げられる。その反応温度は、通常、８０℃〜１１０℃であり、反応時間は、使用する原料や溶媒、反応温度等により異なるが、通常１時間〜２４時間である。また、本反応は、必要に応じて、シアン化テトラエチルアンモニウムなどの添加剤を加えて行ってもよい。
【００８１】
以下、スキーム１の工程１−１〜工程１−３と同様にして、ニトリル誘導体（XXX）から化合物(Ie)を合成することができる。
【００８２】
上記に示したスキームは、本発明の化合物またはその製造中間体を製造するための方法のいくつかの例示であり、当業者には容易に理解され得るようにこれらのスキームの様々な改変が可能である。
【００８３】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物、および当該化合物を製造するために使用される中間体は、必要に応じて、当該分野の当業者には周知の単離・精製手段である溶媒抽出、結晶化、再結晶、クロマトグラフィー、分取高速液体クロマトグラフィーなどの操作を行うことにより、単離・精製することができる。
【００８４】
このようにして製造される本発明の化合物は、優れたＣＯＭＴ阻害作用を有するのでパーキンソン病の治療または予防薬として有用であり、好適にはＬ−ドパと組み合わせて使用される。また、本発明の化合物およびＬ−ドパと、芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ阻害剤とを組み合わせて使用してもよい。本発明のＣＯＭＴ阻害剤と組み合わせて使用できる芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ阻害剤としては、例えば、カルビドパ、ベンセラジドなどが挙げられる。
また、必要に応じて、ＣＯＭＴ阻害剤およびＬ−ドパ以外のパーキンソン治療剤をさらに組み合わせて使用してもよい。このようなパーキンソン病治療薬としては、例えば、ドロキシドパ、メレボドパ、スレオドプス；ドパミンＤ２受容体アゴニスト（例えば、カベルゴリン、メシル酸ブロモクリプチン、テルグリド、塩酸タリペキソール、塩酸ロピニロール、メシル酸ペルゴリド、塩酸プラミペキソール、ロチゴチンなど）；抗コリン剤（例えば、プロフェナミン、塩酸トリヘキシフェニジル、塩酸マザチコール、ピペリデン、塩酸ピロヘプチン、塩酸メチキセンなど）；アデノシンＡ２Ａ拮抗剤（例えば、イストラデフィリンなど）；ＮＭＤＡ拮抗剤（例えば、ブジピンなど）；モノアミンオキシダーゼＢ阻害剤（例えば、塩酸セレギリン、メシル酸ラサギリン、メシル酸サフィナミドなど）；ゾニサミド；塩酸アマンタジンなどが挙げられる。
【００８５】
本発明の化合物は、また、うつ病の治療または予防薬として有用である。本発明の化合物は、また、尿中ナトリウム排泄促進作用を有するので高血圧症の治療薬として有用である。
【００８６】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物は、用法に応じ種々の剤型のものが使用される。このような剤型としては例えば、散剤、顆粒剤、細粒剤、ドライシロップ剤、錠剤、カプセル剤、注射剤、液剤、軟膏剤、坐剤、貼付剤などを挙げることができ、経口または非経口的に投与される。
【００８７】
これらの医薬組成物は、その剤型に応じ製剤学的に公知の手法により、適切な賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤などの医薬品添加物と適宜混合または希釈・溶解することにより調剤することができる。
【００８８】
一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩の投与量は、患者の年齢、性別、体重、疾患および治療の程度等により適宜決定されるが、経口投与の場合成人１日当たり約１０ｍｇ〜約３０００ｍｇの範囲で、非経口投与の場合は、成人１日当たり約５ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲で、一回または数回に分けて適宜投与することができる。
【００８９】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩と、Ｌ−ドパおよび芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ阻害剤から選択される少なくとも１種とを組み合わせてなる医薬は、これらの有効成分を一緒に含有する製剤、またはこれらの有効成分の各々を別々に製剤化した製剤として投与することができる。別々に製剤化した場合、それらの製剤を別々にまたは同時に投与することができる。また、別々に製剤化した場合、それらの製剤を使用時に希釈剤などを用いて混合し、同時に投与することができる。
【００９０】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩と、Ｌ−ドパおよび芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ阻害剤から選択される少なくとも１種とを組み合わせてなる医薬において、薬剤の配合比は、患者の年齢、性別、および体重、症状、投与時間、剤形、投与方法、薬剤の組み合わせなどにより、適宜選択することができる。
【００９１】
本発明の内容を以下の参考例、実施例および試験例でさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの内容に限定されるものではない。
【実施例】
【００９２】
参考例１−１
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシベンズアルデヒド
４−ベンジルオキシ−３−メトキシベンズアルデヒド(10g)、トリフルオロ酢酸銀(11.4g)および塩化メチレン(105mL)の混合物にヨウ素(13.1g)を室温下加えた。２時間撹拌した後、混合物をセライト（登録商標）層を通して濾過した。濾液を亜硫酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール:水＝４:１にて粉砕し、表題化合物(13.2g)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.91(3H, s), 5.19(2H, s), 7.30-7.50(7H, m), 9.86(1H, s)【００９３】
４−ベンジルオキシ−３−メトキシベンズアルデヒドの代わりに対応するジオキシベンゼンを用い参考例１−１と同様の方法により、参考例１−２〜参考例１−３を合成した。これらを表１に示した。【００９４】
【表１】
2010001821.tif 000009
【００９５】
参考例１−２〜参考例１−３の物性値を以下に示した。【００９６】
参考例１−２
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.95(3H, s), 5.16(2H, s), 7.29-7.47(6H, m), 7.48(1H, s), 9.84(1H, s)【００９７】
参考例１−３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.89(3H, s), 3.91(3H, s), 5.15(2H, s), 7.30-7.50(7H, m)【００９８】
参考例２−１
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシベンズアルデヒドオキシム
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシベンズアルデヒド（参考例１−１）(12.2g)、塩酸ヒドロキシルアミン(2.54g)、酢酸ナトリウム(6g)およびエタノール(170mL)の混合物を７０℃で１．５時間撹拌した。混合物を減圧下濃縮した。残渣に水を加え、混合物を室温で３０分撹拌した。固形物を濾取し、表題化合物(12.8g)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.88(3H, s), 5.13(2H, s), 7.19(1H, s), 7.29(1H, s), 7.30-7.50(6H, m), 8.30(1H, s)【００９９】
参考例３−１
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシベンゾニトリル
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシベンズアルデヒドオキシム（参考例２−１）(20.8g)、トリエチルアミン(22.7mL)およびテトラヒドロフラン(181mL)の混合物に氷冷下、トリフルオロ酢酸無水物(23mL)を加えた。室温で１時間撹拌した後、混合物に2mol/L塩酸、酢酸エチルを加えた。有機層を食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をメタノールで粉砕し表題化合物(10.25g)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.87(3H, s), 5.15(2H, s), 7.05(1H, s), 7.31(1H, s), 7.30-7.42(5H, m)【０１００】
参考例３−１は参考例４−１に示す方法によっても合成することができる。
参考例４−１
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシベンゾニトリル
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシベンズアミド(参考例６−３)(5.25g)および塩化メチレン(70mL)の混合物に０℃でトリエチルアミン(8.2mL)およびトリフルオロメタンスルホン酸無水物(4.6mL)を加えた。混合物を０℃で２０分、室温で３．５時間、還流下で１時間撹拌した。０℃まで冷却後、混合物にトリエチルアミン(4mL)および トリフルオロメタンスルホン酸無水物(2.3mL)を加えた。室温で終夜撹拌した後、混合物に氷水、1mol/L塩酸を加えた。混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を1mol/L塩酸および食塩水で順次洗浄した後、減圧下濃縮した。残渣、酢酸エチル、塩化メチレン、シリカゲルおよびアミノプロピルシリカゲルの混合物を３０分撹拌した。混合物をセライト（登録商標）層に通した。濾液を減圧下濃縮した。残渣をメタノールで粉砕し表題化合物(3.72g)を得た。【０１０１】
参考例５−１
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシ安息香酸
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシベンズアルデヒド（参考例１−１）(20g)、ジメチルスルホキシド(19mL)、濃硫酸(3mL)、水(30mL)およびアセトニトリル(181mL)の混合物に亜塩素酸ナトリウム(9.8g)および水(30mL)の混合物を加えた。室温で３０分撹拌した後、混合物に水を加えた。不溶物を濾取し、表題化合物(20.3g)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.88(3H, s), 5.15(2H, s), 7.31-7.46(6H, m), 7.56(1H, s)【０１０２】
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシベンズアルデヒドの代わりに対応するベンズアルデヒドを用い参考例５−１と同様の方法により、参考例５−２〜参考例５−３を合成した。これらを表２に示した。【０１０３】
【表２】
2010001821.tif 000010
【０１０４】
参考例５−２〜参考例５−３の物性値を以下に示した。【０１０５】
参考例５−２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：3.84(3H, s), 5.11(2H, s), 7.30-7.50(6H, m), 7.56(1H, s), 13.00(1H, br)【０１０６】
参考例５−３
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：3.91(3H, s), 5.25(2H, s), 7.33-7.47(5H, m), 7.51(1H, s), 7.67(1H, s), 13.59(1H, br s)【０１０７】
参考例６−１
（５−ベンジルオキシ−２−ヨード−４−メトキシフェニル）ピペリジン−１−イルメタノン
５−ベンジルオキシ−２−ヨード−４−メトキシ安息香酸（参考例５−２）(1.92g)、ピペリジン（0.74mL）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(12mL)の混合物に１−ヒドロキシベンゾトリアゾール(676mg)および１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩(1.44g)を室温で加え、混合物を室温下６時間撹拌した。酢酸エチルを加え、混合物を2mol/L塩酸に注いだ。有機層を水、炭酸水素ナトリウム水溶液、食塩水で順次洗浄後、減圧下濃縮した。残渣、アミノプロピルシリカゲルおよび塩化メチレンの混合物を３０分撹拌した後、不溶物を濾去した。濾液を減圧下濃縮し、表題化合物(2.13g)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.21-1.71(6H, m), 2.97-3.14(2H, m), 3.56-3.81(2H, m), 3.88(3H, s), 5.05-5.18(2H, m), 6.70(1H, s), 7.22(1H, s), 7.27-7.40(5H, m)【０１０８】
５−ベンジルオキシ−２−ヨード−４−メトキシ安息香酸およびピペリジンの代わりに対応するカルボン酸およびアミンを用い参考例６−１と同様の方法により、参考例６−２〜参考例６−９を合成した。これらを表３に示した。【０１０９】
【表３】
2010001821.tif 000011
【０１１０】
参考例６−２〜参考例６−９の物性値を以下に示した。【０１１１】
参考例６−２
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.34(3H, s), 3.42(3H, brs), 3.94(3H, s), 5.22(2H, s), 7.08(1H, s), 7.12(1H, s), 7.25-7.45(5H, m)【０１１２】
参考例６−３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.88(3H, s), 5.13(2H, s), 5.50-6.20(2H, m), 7.13(1H, s), 7.25-7.50(6H, m)【０１１３】
参考例６−４
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.93(3H, m), 1.27(3H, m), 3.04-3.20(2H, m), 3.48-3.61(2H, m), 3.92(3H, s), 5.21(2H, s), 6.86(1H, s), 7.09(1H, s), 7.30-7.41(5H, m)【０１１４】
参考例６−５
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.82-1.89(2H, m), 1.93-2.00(2H, m), 3.18(2H, t, J=6.7Hz), 3.65(2H, t, J=7.0Hz), 3.92(3H, s), 5.20(2H, s), 6.96(1H, s), 7.10(1H, s), 7.31-7.42(5H, m)【０１１５】
参考例６−６
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.38-1.53(2H, m), 1.60-1.75(4H, m), 3.09-3.27(2H, m), 3.62-3.79(2H, m), 3.92(3H, s), 5.19(2H, s), 6.91(1H, s), 7.09(1H, s), 7.31-7.42(5H, m)【０１１６】
参考例６−７
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.40-1.64(6H, m), 1.80-1.86(2H, m), 3.18(2H, t, J=6.0Hz), 3.67(2H, t, J=5.9Hz), 3.92(3H, s), 5.21(2H, s), 6.84(1H, s), 7.09(1H, s), 7.30-7.40(5H, m)【０１１７】
参考例６−８
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.22(2H, m), 3.58(2H, m), 3.78(4H, m), 3.93(3H, s), 5.21(2H, s), 6.91(1H, s), 7.10(1H, s), 7.31-7.40(5H, m)【０１１８】
参考例６−９
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.28(3H, t, J=7.0Hz), 3.14-3.84(8H, m), 3.93(3H, s), 4.17(2H, q, J=7.0Hz), 5.21(2H, s), 6.91(1H, s), 7.11(1H, s), 7.32-7.40(5H, m)【０１１９】
参考例７−１
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシ安息香酸エチル
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシ安息香酸（参考例５−１）(2g)、２−ヨードエタン(0.5mL)、炭酸カリウム(1.08g)およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(17mL)の混合物を室温で２時間撹拌した。混合物に水を加えた。不溶物を濾取し、表題化合物(2.07g)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.41(3H, t, J=7.1Hz), 3.89(3H, s), 4.38(2H, q, J=7.1Hz), 5.15(2H, s), 7.30-7.46(7H, m)【０１２０】
参考例７−２
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシ安息香酸イソプロピル
２−ヨードエタンの代わりに２−ヨードプロパンを用い参考例７−１と同様の方法により表題化合物を合成した。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.39(6H, d, J=6.3Hz), 3.89(3H, s), 5.15(2H, s), 5.21-5.29(1H, m), 7.30-7.45(7H, m)【０１２１】
参考例８−１
４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−２−（ピペリジン−１−カルボニル）安息香酸イソプロピル
トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）(157mg)、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン(380mg)およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(10mL)の混合物をアルゴン雰囲気下１０分撹拌した。混合物に（５−ベンジルオキシ−２−ヨード−４−メトキシフェニル）ピペリジン−１−イルメタノン（参考例６−１）(1.55g)、２−プロパノール(10mL)およびトリエチルアミン(1.44mL)を加えた。一酸化炭素雰囲気下、混合物を９０℃で１４時間撹拌した。室温まで冷却した後、混合物に酢酸エチルおよび2mol/L塩酸を加えた。分取した有機層を水、2mol/L水酸化ナトリウム水溶液、炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：１５％−４５％酢酸エチル／ヘキサン、グラジエント溶出）で精製して表題化合物(258mg)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.10-1.80(12H, m), 2.82-3.30(3H, m), 3.94(3H, s), 4.05-4.20(1H, m), 5.10-5.30(3H, m), 6.71(1H, s), 7.28-7.42(5H, m), 7.52(1H, s)【０１２２】
参考例８−２
４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−２−（ピペリジン−１−カルボニル）安息香酸エチル
２−プロパノールの代わりにエタノールを用い参考例８−１と同様の方法により、表題化合物を合成した。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.10-1.75(9H, m), 2.91-3.50(3H, m), 3.91-4.05(4H, m), 4.31(2H, q, J=7.0Hz), 5.20(2H, br s), 6.72(1H, s), 7.28-7.45(5H, m), 7.53(1H, s)【０１２３】
参考例９−１
（５−ベンジルオキシ−２−ブロモ−４−メトキシフェニル）ｐ−トリルメタノール
５−ベンジルオキシ−２−ブロモ−４−メトキシベンズアルデヒド(1g)およびテトラヒドロフラン(10mL)の混合物に塩氷浴下、ｐ−トリルマグネシウムブロミド(1mol/L テトラヒドロフラン溶液、3.7mL)を滴下した。同温にて１０分撹拌した後、混合物に塩化アンモニア水溶液、酢酸エチルおよび2mol/L塩酸を加えた。分取した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（溶出溶媒：０％−５０％酢酸エチル／ヘキサン、グラディエント溶出）で精製し、表題化合物(1.27g)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：2.32(3H, s), 3.85(3H, s), 5.04-5.20(2H, m), 6.03(1H, d, J=3.3Hz), 6.99(1H, s), 7.06-7.17(5H, m), 7.27-7.39(5H, m)【０１２４】
参考例９−２
（５−ベンジルオキシ−２−ブロモ−４−メトキシフェニル）シクロヘキシルメタノール
ｐ−トリルマグネシウムブロミドの代わりにシクロヘキシルマグネシウムブロミドを用い参考例９−１と同様の方法により、表題化合物を合成した。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.95-1.18(5H, m), 1.29-1.36(1H, m), 1.46-1.81(7H, m), 3.86(3H, s), 4.70-4.76(1H, m), 5.10-5.23(2H, m), 6.98(1H, s), 7.27-7.45(5H, m)【０１２５】
参考例１０−１
（５−ベンジルオキシ−２−ブロモ−４−メトキシフェニル）ｐ−トリルメタノン
（５−ベンジルオキシ−２−ブロモ−４−メトキシフェニル）ｐ−トリルメタノール（参考例９−１）(1.27g)、二酸化マンガン(2.67g)および塩化メチレン(30mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。不溶物をセライト（登録商標）層を通して濾去した。濾液を減圧下濃縮し、表題化合物(1.11g)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：2.42(3H, s), 3.94(3H, s), 5.09(2H, s), 6.91(1H, s), 7.10(1H, s), 7.22(2H, d, J=7.8Hz), 7.29-7.40(5H, m), 7.64(2H, d, J=8.3Hz)【０１２６】
参考例１０−２
（５−ベンジルオキシ−２−ブロモ−４−メトキシフェニル）シクロヘキシルメタノン
（５−ベンジルオキシ−２−ブロモ−４−メトキシフェニル）シクロヘキシルメタノール（参考例９−２）(580mg)、トリエチルアミン(0.797mL)およびジメチルスルホキシド(21mL)の混合物に水冷下、三酸化硫黄ピリジン錯体(684mg)を加えた。室温で１時間撹拌した後、混合物に水、酢酸エチルを加えた。有機層を水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ(溶出溶媒:０%−５０％酢酸エチル/ヘキサン、グラディエント溶出)で精製し、表題化合物(348mg)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.14-1.44(5H, m), 1.59-1.87(5H, m), 2.92-3.05(1H, m), 3.89(3H, s), 5.13(2H, s), 6.88(1H, s), 7.04(1H, s), 7.23-7.44(5H, m)【０１２７】
参考例１１−１
２−ベンゾイル−４−ベンジルオキシ−５−メトキシ安息香酸エチル
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシ安息香酸エチル（参考例７−１）(1g)およびテトラヒドロフラン(25mL)の混合物にアルゴン雰囲気下−７８℃で、イソプロピルマグネシウムクロリド(2.0mol/L  テトラヒドロフラン溶液、1.58mL)を加えた。−７８℃で１０分撹拌した後、混合物に無水安息香酸(1.1g)を加えた。−７８℃で３０分、室温で３０分撹拌した後、混合物に水、2mol/L塩酸および酢酸エチルを加えた。分取した有機層を食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０−５０％酢酸エチル／ヘキサン、グラジエント溶出）で精製して表題化合物(848mg)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.98(3H, t, J=7.2Hz), 3.93-4.05(6H, m), 5.18(2H, s), 6.93(1H, s), 7.28-7.66(11H, m)【０１２８】
４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシ安息香酸エチルおよび無水安息香酸の代わりに対応するヨードベンゼンおよび酸無水物あるいは酸塩化物を用い参考例１１−１と同様の方法により、参考例１１−２〜参考例１１−３１を合成した。これらを表４に示した。【０１２９】
【表４】
2010001821.tif 000012
2010001821.tif 000013
2010001821.tif 000014
【０１３０】
参考例１１−２〜参考例１１−３１の物性値を以下に示した。【０１３１】
参考例１１−２
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.52(3H, s), 3.99(3H, s), 5.17(2H, s), 6.95(1H, s), 7.27-7.65(11H, m)【０１３２】
参考例１１−３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.95(6H, d, J=6.3Hz), 3.99(3H, s), 4.85-4.97(1H, m), 5.16(2H, s), 6.89(1H, s), 7.29-7.44(7H, m), 7.49-7.59(2H, m), 7.69-7.76(2H, m)【０１３３】
参考例１１−４
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.09(3H, t, J=7.2Hz), 3.98(3H, s), 4.07(2H, q, J=7.2Hz), 5.17(2H, s), 6.94(1H, s), 7.00-7.15(1H, m), 7.15-7.25(1H, m), 7.25-7.45(5H, m), 7.45-7.60(2H, m), 7.60-7.75(1H, m)【０１３４】
参考例１１−５
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.04(3H, t, J=7.2Hz), 3.95-4.10(5H, m), 5.18(2H, s), 6.89(1H, s), 7.15-7.50(9H, m), 7.55(1H, s)【０１３５】
参考例１１−６
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.00(3H, t, J=7.2Hz), 2.40(3H, s), 3.95-4.10(5H, m), 5.16(2H, s), 6.91(1H, s), 7.15-7.25(2H, m), 7.25-7.45(5H, m), 7.54(1H, s), 7.55-7.65(2H, m)【０１３６】
参考例１１−７
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.01(6H, d, J=6.3Hz), 3.99(3H, s), 4.89-5.01(1H, m), 5.16(2H, s), 6.85(1H, s), 7.28-7.43(5H, m), 7.50-7.61(5H, m)【０１３７】
参考例１１−８
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.96(6H, d, J=6.3Hz), 3.95(3H, s), 4.01(3H, s), 4.85-5.00(1H, m), 5.17(2H, s), 6.88(1H, s), 7.20-7.50(5H, m), 7.57(1H, s), 7.70-7.85(2H, m), 8.00-8.15(2H, m)【０１３８】
参考例１１−９
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.13(6H, d, J＝6.3Hz), 3.99(3H, s), 4.95−5.10(1H, m), 5.13(2H, s), 6.92(1H, s), 7.20−7.45(9H, m), 7.55−7.70(1H, m)【０１３９】
参考例１１−１０
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.04(6H, d, J=6.3Hz), 4.02(3H, s), 4.89-5.01(1H, m), 5.19(2H, s), 6.84(1H, s), 7.30-7.42(5H, m), 7.51-7.58(2H, m), 7.78-7.83(1H, m), 7.90-7.93(1H, m), 7.95-8.00(1H, m)【０１４０】
参考例１１−１１
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.02(6H, d, J=6.3Hz), 4.00(3H, s), 4.90-4.99(1H, m), 5.18(2H, s), 6.85(1H, s), 7.29-7.41(5H, m), 7.55(1H, s), 7.68-7.70(2H, m), 7.78-7.80(2H, m)【０１４１】
参考例１１−１２
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.07(3H, t, J=7.1Hz), 3.99(3H, s), 4.09(2H, q, J=7.1Hz), 5.19(2H, s), 6.98(1H, s), 7.00-7.10(1H, m), 7.10-7.20(1H, m), 7.25-7.50(5H, m), 7.53(1H, s), 7.60-7.70(1H, m)【０１４２】
参考例１１−１３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.05(3H, t, J=7.1Hz), 3.99(3H, s), 4.06(2H, q, J=7.1Hz), 5.19(2H, s), 6.95(1H, s), 7.25-7.60(9H, m)【０１４３】
参考例１１−１４
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.16(3H, t, J=7.2Hz), 4.00(3H, s), 4.13(2H, q, J=7.2Hz), 5.20(2H, s), 6.77(1H, d, J=1.7Hz), 7.04(1H, s), 7.25-7.50(5H, m), 7.53(1H, s), 8.31(1H, d, J=1.7Hz)【０１４４】
参考例１１−１５
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.19(3H, t, J=7.1Hz), 2.48(3H, d, J=1.2Hz), 3.98(3H, s), 4.14(2H, q, J=7.1Hz), 5.18(2H, s), 6.50-6.55(1H, m), 7.08(1H, s), 7.25-7.55(6H, m)【０１４５】
参考例１１−１６
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.13(6H, d, J=6.3Hz), 4.00(3H, s), 4.96-5.05(1H, m), 5.20(2H, s), 6.76(1H, d, J=1.8Hz), 7.01(1H, s), 7.33-7.47(5H, m), 7.54(1H, s), 8.31(1H, d, J=1.8Hz)【０１４６】
参考例１１−１７
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.06(3H, t, J=7.2Hz), 3.90-4.10(5H, m), 5.19(2H, s), 7.14(1H, s), 7.25-7.50(5H, m), 7.54(1H, s), 7.66(1H, d, J=3.0Hz), 7.93(1H, d, J=3.0Hz)【０１４７】
参考例１１−１８
MS (ESI, m/z) ：315(M+H)+【０１４８】
参考例１１−１９
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.11(9H s), 1.35(3H, t, J=7.1Hz), 3.95(3H, s), 4.31(2H, q, J=7.1Hz), 5.21(2H, s), 6.57(1H, s), 7.20-7.45(5H, m), 7.50(1H, s)【０１４９】
参考例１１−２０
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.11(9H, s), 1.33(6H, d, J=6.3Hz), 3.95(3H, s), 5.15-5.21(3H, m), 6.57(1H, s), 7.25-7.40(5H, m), 7.47(1H, s)【０１５０】
参考例１１−２１
MS (ESI, m/z) ：383(M+H)+【０１５１】
参考例１１−２２
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.03-3.07(2H, m), 3.22-3.26(2H, m), 3.96(3H, s), 5.18(2H, s),7.19-7.43(12H, m)【０１５２】
参考例１１−２３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.14(6H, d, J=6.9Hz), 3.35-3.50(1H, m), 3.97(3H, s), 5.26(2H, s), 7.20(1H, s), 7.30-7.50(6H, m)【０１５３】
参考例１１−２４
MS (ESI, m/z) ：324(M+H)+【０１５４】
参考例１１−２５
MS (ESI, m/z) ：336(M+H)+【０１５５】
参考例１１−２６
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.39-1.87(12H, m), 3.21-3.29(1H, m), 3.97(2H, s), 5.28(2H, s), 7.20(1H, s), 7.29(1H, s), 7.32-7.45(5H, m)【０１５６】
参考例１１−２７
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.57-1.93(4H, m), 3.29-3.51(3H, m), 5.29(2H, s), 7.20(1H, s), 7.30(1H, s), 7.32-7.44(5H, m)【０１５７】
参考例１１−２８
MS (ESI, m/z) ：335(M+H)+【０１５８】
参考例１１−２９
MS (ESI, m/z) ：349(M+H)+【０１５９】
参考例１１−３０
MS (ESI, m/z) ：350(M+H)+【０１６０】
参考例１１−３１
MS (ESI, m/z) ：350(M+H)+【０１６１】
参考例１２−１
４−ベンジルオキシ−２−（２−フルオロベンゾイル）−５−メトキシベンゾニトリル
５−ベンジルオキシ−２−シアノ−４−メトキシ安息香酸（参考例５−３）(502mg)、２−フルオロフェニルボロン酸(297mg)、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）(205mg)、ピロ炭酸ジメチル (2mL)および１，４−ジオキサン(10mL)の混合物をアルゴン雰囲気下８０℃で１．２５時間撹拌した。混合物に酢酸エチルおよびフロリジル（登録商標）(2g)を加えた。１５分撹拌した後、その混合物をセライト（登録商標）層に通し、濾液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（溶出溶媒：５％−３０％酢酸エチル／ヘキサン、グラディエント溶出）で精製し、表題化合物(338mg)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.98(3H, s), 5.16(2H, s), 7.08-7.13(1H, m), 7.21-7.22(2H, m), 7.25-7.29(1H, m), 7.34-7.35(5H, m), 7.55-7.61(2H, m)【０１６２】
参考例１３−１
２−ベンゾイル−４−ベンジルオキシ−５−メトキシベンゾニトリル
５−ベンジルオキシ−２−シアノ−４，Ｎ−ジメトキシ−Ｎ−メチルベンズアミド（参考例６−２）(203mg)およびテトラヒドロフラン(3.1mL)の混合物に氷冷下フェニルマグネシウムブロミド（1.08mol/Lテトラヒドロフラン溶液、0.7mL）を加えた。混合物を１．５時間撹拌した。混合物に０℃でフェニルマグネシウムブロミド（1.08mol/Lテトラヒドロフラン溶液、0.3mL）を加えた。氷冷下５０分撹拌した後、混合物を室温で終夜撹拌した。混合物にフェニルマグネシウムブロミド（1.08mol/Lテトラヒドロフラン溶液、0.35mL）を加えた。０℃で１．５時間撹拌した後、混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液、1mol/L塩酸および酢酸エチルを加えた。有機層を1mol/L塩酸、水、食塩水で順次洗浄した後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ(溶出溶媒:０％−３０％酢酸エチル/ヘキサン、グラディエント溶出)で精製し、表題化合物(112mg)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：4.00(3H, s), 5.18(2H, s), 7.14(1H, s), 7.25(1H, s), 7.30-7.50(7H, m), 7.55-7.70(3H, m)【０１６３】
参考例１４−１
２−（４−アセチルベンゾイル）−４−ベンジルオキシ−５−メトキシ安息香酸イソプロピル
４−ベンジルオキシ−２−（４−ブロモベンゾイル）−５−メトキシ安息香酸イソプロピル（参考例１１−７）(253mg)、１−エトキシビニルトリ−Ｎ−ブチルスズ(420mg)、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）(90mg)およびトルエン(5mL)の混合物を撹拌しながらマイクロ波を照射し、１８０℃で１０分間加熱した。混合物を減圧濃縮した。残渣、2mol/L塩酸(5mL)およびテトラヒドロフラン(5mL)の混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ(溶出溶媒:１０％−１００％酢酸エチル/ヘキサン、グラディエント溶出)で精製し、表題化合物(198mg)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.98(6H, d, J=6.3Hz), 2.63(3H, s), 4.00(3H, s), 4.88-4.98(1H, m), 5.17(2H, s), 6.88(1H, s), 7.28-7.42(5H, m), 7.56(1H, s), 7.80(2H, d, J=8.5Hz), 7.97(2H, d, J=8.5Hz)【０１６４】
参考例１４−２
２−アセチル−４−ベンジルオキシ−５−メトキシベンゾニトリル
４−ベンジルオキシ−２−（４−ブロモベンゾイル）−５−メトキシ安息香酸イソプロピルの代わりに４−ベンジルオキシ−２−ヨード−５−メトキシベンゾニトリル（参考例３−１）を用い参考例１４−１と同様の方法により表題化合物を合成した。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：2.63(3H, s), 3.97(3H, s), 5.25(2H, s), 7.19(1H, s), 7.32-7.44(5H, m), 7.45(1H, s)【０１６５】
参考例１５−１
４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−２−（４−メチルベンゾイル）ベンゾニトリル
（５−ベンジルオキシ−２−ブロモ−４−メトキシフェニル）ｐ−トリルメタノン（参考例１０−１）(1.11g)、シアン化第一銅(967mg)および１−メチル−２−ピロリジノン(2mL)の混合物を撹拌しながらマイクロ波を照射し、２００℃で１０分間加熱した。混合物に水、２８％アンモニア水および酢酸エチルを加えた。分取した有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をジエチルエーテルで粉砕し、表題化合物(1.08g)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：2.44(3H, s), 3.99(3H, s), 5.17(2H, s), 7.14(1H, s), 7.20-7.25(3H, m), 7.32-7.40(5H, m), 7.58(2H, d, J=8.3Hz)【０１６６】
参考例１５−２
４−ベンジルオキシ−２−（２−シアノベンゾイル）−５−メトキシ安息香酸イソプロピル
４−ベンジルオキシ−２−（２−ブロモベンゾイル）−５−メトキシ安息香酸イソプロピル（参考例１１−９）(600mg)、シアン化第一銅(445mg)、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム(114mg)、シアン化テトラエチルアンモニウム(194mg)、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン(206mg)および１，４−ジオキサン(73mL)の混合物をアルゴン雰囲気下にて還流下終夜撹拌した。混合物をセライト(登録商標)層に通し、濾液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶出溶媒:５％−３０％酢酸エチル/ヘキサン、グラディエント溶出)で精製して表題化合物(412mg)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.02(6H, d, J=6.3Hz), 4.00(3H, s), 4.85-5.05(1H, m), 5.19(2H, s), 6.93(1H, s), 7.20-7.50(6H, m), 7.50-7.70(3H, m), 7.80-7.90(1H, m)【０１６７】
（５−ベンジルオキシ−２−ブロモ−４−メトキシフェニル）ｐ−トリルメタノンもしくは４−ベンジルオキシ−２−（２−ブロモベンゾイル）−５−メトキシ安息香酸イソプロピルの代わりに対応するハロベンゼンを用い参考例１５−１または参考例１５−２と同様の方法により、参考例１５−３〜参考例１５−５を合成した。これらを表５に示した。【０１６８】
【表５】
2010001821.tif 000015
【０１６９】
参考例１５−３〜参考例１５−５の物性値を以下に示した。【０１７０】
参考例１５−３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：4.00(3H, s), 5.24(2H, s), 7.19(1H, s), 7.30-7.47(5H, m), 7.54(1H, s), 10.23(1H, s)【０１７１】
参考例１５−４
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.29-1.86(9H, m), 2.07-2.57(1H, m), 3.02-3.56(1H, m), 3.96(3H, s), 5.26(2H, s), 7.31-7.46(6H, m)【０１７２】
参考例１５−５
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.96(3H, s), 3.97(3H, s), 5.23(2H, s), 7.19(1H, s), 7.30-7.50(5H, m), 7.65(1H, s)【０１７３】
参考例１６−１
２−ベンゾイル−４−ベンジルオキシ−５−メトキシ安息香酸
２−ベンゾイル−４−ベンジルオキシ−５−メトキシ安息香酸エチル（参考例１１−１）(947mg)、2mol/L水酸化ナトリウム水溶液(3.64mL)およびエタノール(12mL)の混合物を７０℃で３時間撹拌した。混合物に酢酸エチルおよび2mol/L塩酸を加えた。分取した有機層を水、食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮し表題化合物(0.87g)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.99(3H, s), 5.17(2H, s), 6.90(1H, s), 7.29-7.44(7H, m), 7.50-7.57(1H, m), 7.61(1H, s), 7.67-7.72(2H, m)【０１７４】
２−ベンゾイル−４−ベンジルオキシ−５−メトキシ安息香酸エチルの代わりに対応する安息香酸エステルを用い参考例１６−１と同様の方法により、参考例１６−２〜参考例１６−３を合成した。これらを表６に示した。【０１７５】
【表６】
2010001821.tif 000016
【０１７６】
参考例１６−２〜参考例１６−３の物性値を以下に示した。【０１７７】
参考例１６−２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：3.88(3H, s), 6.79(1H, s), 7.11-7.19(1H, m), 7.23-7.29(1H, m), 7.44(1H, s), 7.95-8.02(1H, m), 10.23(1H, s)【０１７８】
参考例１６−３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.98(3H, s), 5.24(2H, s), 7.23(1H, s), 7.30-7.50(5H, m), 7.70(1H, s)【０１７９】
参考例１７−１
２−ベンゾイル−４−ヒドロキシ−５−メトキシ安息香酸エチル
２−ベンゾイル−４−ベンジルオキシ−５−メトキシ安息香酸エチル（参考例１１−１）(848mg)および塩化メチレン(30mL)の混合物に四塩化チタン(0.31mL)を室温下で加えた。３０分間撹拌した後、混合物に2mol/L塩酸および酢酸エチルを加えた。分取した有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：１０−１００％ 酢酸エチル／ヘキサン、グラジエント溶出）で精製して表題化合物(550mg)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.98(3H, t, J=7.2Hz), 3.97-4.05(5H, m), 7.38-7.45(2H, m), 7.50-7.56(2H, m), 7.73-7.79(2H, m)【０１８０】
２−ベンゾイル−４−ベンジルオキシ−５−メトキシ安息香酸エチルの代わりに対応するベンジルエーテルを用い参考例１７−１と同様の方法により、参考例１７−２〜参考例１７−４６を合成した。これらを表７に示した。【０１８１】
【表７】
2010001821.tif 000017
2010001821.tif 000018
2010001821.tif 000019
2010001821.tif 000020
【０１８２】
参考例１７−２〜参考例１７−４６の物性値を以下に示した。【０１８３】
参考例１７−２
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.54(3H, s), 4.02(3H, s), 6.95(1H, s), 7.38-7.46(2H, m), 7.50-7.56(2H, m), 7.71-7.78(2H, m)【０１８４】
参考例１７−３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.95(6H, d, J=6.3Hz), 4.02(3H, s), 4.89-4.98(1H, m), 6.90(1H, s), 7.37-7.46(2H, m), 7.49-7.58(2H, m), 7.74-7.81(2H, m)【０１８５】
参考例１７−４
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.09(3H, t, J=7.2Hz), 4.01(3H, s), 4.10(2H, q, J=7.2Hz), 6.02(1H, s), 6.93(1H, s), 7.00-7.15(1H, m), 7.15-7.25(1H, m), 7.45-7.60(2H, m), 7.70-7.85(1H, m)【０１８６】
参考例１７−５
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.04(3H, t, J=7.2Hz), 3.95-4.15(5H, m), 6.08(1H, s), 6.91(1H, s), 7.15-7.70(5H, m)【０１８７】
参考例１７−６
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.00(3H, t, J=7.2Hz), 2.40(3H, s), 3.95-4.10(5H, m), 6.04(1H, s), 6.91(1H, s), 7.15-7.25(2H, m), 7.54(1H, s), 7.60-7.70(2H, m)【０１８８】
参考例１７−７
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.98(6H, d, J=6.3Hz), 2.64(3H, s), 4.03(3H, s), 4.89-4.99(1H, m), 6.90(1H, s), 7.57(1H, s), 7.86(1H, d, J=8.5Hz), 7.99(1H, d, J=8.5Hz)【０１８９】
参考例１７−８
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.96(6H, d, J=6.3Hz), 3.94(3H, s), 4.03(3H, s), 4.85-5.05(1H, m), 6.07(1H, s), 6.90(1H, s), 7.57(1H, s), 7.75-7.90(2H, m), 8.00-8.15(2H, m)【０１９０】
参考例１７−９
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.03(6H, d, J=6.3Hz), 4.03(3H, s), 4.90-5.05(1H, m), 6.07(1H, s), 6.94(1H, s), 7.50-7.70(4H, m), 7.80-7.95(1H, m)【０１９１】
参考例１７−１０
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.04(6H, d, J=6.3Hz), 4.04(3H, s), 4.91-5.02(1H, m), 6.88(1H, s), 7.55-7.61(2H, m), 7.79-7.84(1H, m), 7.96-7.99(1H, m), 8.04-8.08(1H, m)【０１９２】
参考例１７−１１
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.02(6H, d, J=6.2Hz), 4.03(3H, s), 4.92-5.00(1H, m), 6.09(1H, s), 6.88(1H, s), 7.56(1H, s), 7.70-7.74(2H, m), 7.85-7.88(2H, m)【０１９３】
参考例１７−１２
1H NMR (DMSO-d６) d ppm：3.95(3H, s), 6.79(1H, s), 7.50-7.56(3H, m), 7.61-7.69(3H, m)【０１９４】
参考例１７−１３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.07(3H, t, J=7.2Hz), 4.02(3H, s), 4.10(2H, q, J=7.2Hz), 6.04(1H, s), 7.00(1H, s), 7.00-7.10(1H, m), 7.25-7.35(1H, m), 7.54(1H, s), 7.60-7.70(1H, m)【０１９５】
参考例１７−１４
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.05(3H, t, J=7.2Hz), 4.01(3H, s), 4.07(2H, q, J=7.2Hz), 6.03(1H, s), 6.97(1H, s), 7.25-7.40(1H, m), 7.45-7.60(2H, m), 7.60-7.70(1H, m)【０１９６】
参考例１７−１５
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.16(3H, t, J=7.1Hz), 4.03(3H, s), 4.13(2H, q, J=7.1Hz), 6.09(1H, s), 6.80-6.90(1H, m), 7.05(1H, s), 7.54(1H, s), 8.30-8.40(1H, m)【０１９７】
参考例１７−１６
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.18(3H, t, J=7.2Hz) 2.48(3H, d, J=0.6Hz), 4.00(3H, s), 4.14(2H, q, J=7.2Hz), 6.02(1H, s), 6.50-6.60(1H, m), 7.05(1H, s), 7.50(1H, s)【０１９８】
参考例１７−１７
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.13(6H, d, J=6.3Hz), 4.03(3H, s), 4.97-5.06(1H, m), 6.10(1H, s), 6.83(1H, d, J=1.9Hz), 7.02(1H, s), 7.54(1H, s), 8.33(1H, d, J=1.9Hz)【０１９９】
参考例１７−１８
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.06(3H, t, J=7.2Hz), 3.95-4.10(5H, m), 6.02(1H, s), 7.11(1H, s), 7.55(1H, s), 7.66(1H, d, J=3.1Hz), 7.93(1H, d, J=3.1Hz)【０２００】
参考例１７−１９
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：2.49(3H, s), 3.87(3H, s), 3.97(3H, s), 6.02(1H, s), 6.94(1H, s), 7.34(1H, s)【０２０１】
参考例１７−２０
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.24(9H, s), 1.35(3H, t, J=7.2Hz), 3.97(3H, s), 4.32(2H, q, J=7.2Hz), 6.03(1H, s), 6.72(1H, s), 7.49(1H, s)【０２０２】
参考例１７−２１
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.24(9H, s), 1.34(6H, d, J=6.3Hz), 3.97(3H, s), 5.15-5.24(1H, m), 6.01(1H, s), 6.72(1H, s), 7.46(1H, s)【０２０３】
参考例１７−２２
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.36(3H, t, J=7.1Hz), 4.02(3H, s), 4.38(2H, q, J=7.1Hz), 6.11(1H, brs), 6.96(1H, s), 7.50(1H, s)【０２０４】
参考例１７−２３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.35(3H, t, J=7.0Hz), 1.40-1.75(6H, m), 3.00-3.58(3H, m), 3.90-4.10(4H, m), 4.32(2H, q, J=7.0Hz), 6.27(1H, s), 6.80(1H, s), 7.51(1H, s)【０２０５】
参考例１７−２４
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.32(6H, d, J=6.3Hz), 1.36-1.81(6H, m), 2.92-3.36(3H, m), 3.93-4.24(4H, m), 5.14-5.24(1H, m), 6.31(1H, s), 6.79(1H, s), 7.50(1H, s)【０２０６】
参考例１７−２５
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：4.03(3H, s), 6.09(1H, brs), 7.20(1H, s), 7.25(1H, s), 7.45-7.55(2H, m), 7.55-7.70(1H, m), 7.75-7.85(2H, m)【０２０７】
参考例１７−２６
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：2.44(3H, s), 4.02(3H, s), 7.19(1H, s), 7.24(1H, s), 7.29(2H, d, J=8.1Hz), 7.71(2H, d, J=8.1Hz)【０２０８】
参考例１７−２７
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.06-3.10(2H, m), 3.25-3.29(2H, m), 4.00(3H, s), 6.05(1H, s), 7.19-7.30(6H, m), 7.43(1H, s)【０２０９】
参考例１７−２８
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：4.02(3H, s), 6.08(1H, s), 7.12-7.17(1H, m), 7.22-7.23(1H, m), 7.24(1H, s), 7.28-7.32(1H, m), 7.55-7.61(1H, m), 7.63-7.67(1H, m)【０２１０】
参考例１７−２９
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：2.55(3H, s), 3.90(3H, s), 7.46(1H, s), 7.49(1H, s), 10.53(1H, s)【０２１１】
参考例１７−３０
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.22(6H, d, J=6.8Hz), 3.35-3.55(1H, m), 4.00(3H, s), 6.08(1H, s), 7.22(1H, s), 7.42(1H, s)【０２１２】
参考例１７−３１
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.31(9H, s), 3.97(3H, s), 6.10(1H, s), 7.01(1H, s), 7.14(1H, s)【０２１３】
参考例１７−３２
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.50-1.85(4H, m), 1.85-2.05(4H, m), 3.50-3.70(1H, m), 4.00(3H, s), 6.06(1H, brs), 7.22(1H, s), 7.47(1H, s)【０２１４】
参考例１７−３３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.30-1.94(10H, m), 3.11-3.23(1H, m), 3.98(3H, s), 7.20(1H, s), 7.41(1H, s)【０２１５】
参考例１７−３４
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.47-1.99(12H, m), 3.28-3.39(1H, m), 4.00(3H, s), 7.21(1H, s), 7.39(1H, s)【０２１６】
参考例１７−３５
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.89-2.08(4H, m), 2.80-2.94(1H, m), 3.45-3.56(2H, m), 3.93(3H, s), 3.99-4.09(2H, m), 6.80(1H, s), 7.03(1H, s)【０２１７】
参考例１７−３６
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：4.06(3H, s), 6.14(1H, s), 7.13(1H, d, J=2.0Hz), 7.30(1H, s), 7.71(1H, s), 8.44(1H, d, J=2.0Hz)【０２１８】
参考例１７−３７
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：2.50-2.60(3H, m), 4.03(3H, s), 6.07(1H, s), 6.50-6.60(1H, m), 7.27(1H, s), 7.95(1H, s)【０２１９】
参考例１７−３８
MS (ESI, m/z) ：260(M+H)+【０２２０】
参考例１７−３９
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：4.03(3H, s), 6.13(1H, s), 7.10-7.20(1H, m), 7.25(1H, s), 7.35(1H, s), 7.55-7.65(1H, m), 7.75-7.85(1H, m)【０２２１】
参考例１７−４０
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.12(3H, t, J=7.2Hz), 1.28(3H, t, J=7.2Hz), 3.23(2H, q, J=7.2Hz), 3.58(2H, q, J=7.2Hz), 3.96(3H, s), 6.19(1H, s), 6.94(1H, s), 7.09(1H, s)【０２２２】
参考例１７−４１
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.78-1.91(4H, m), 3.22(2H, t, J=6.4Hz), 3.45(2H, t, J=6.8Hz), 3.84(3H, s), 6.88(1H, s), 7.40(1H, s), 10.53(1H, br s)【０２２３】
参考例１７−４２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.46-1.61(6H, m), 3.08-3.23(2H, m), 3.58(2H, br s), 3.84(3H, s), 6.79(1H, s), 7.41(1H, s), 10.57(1H, br s)【０２２４】
参考例１７−４３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.54-1.69(6H, m), 1.83-1.89(2H, m), 3.31-3.34(2H, m), 3.69-3.72(2H, m), 3.95(3H, s), 6.32(1H, s), 6.93(1H, s), 7.09(1H, s)【０２２５】
参考例１７−４４
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：3.17-3.27(2H, m), 3.48-3.72(6H, m), 3.84(3H, s), 6.84(1H, s), 7.43(1H, s), 10.63(1H, br s)【０２２６】
参考例１７−４５
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.27(3H, t, J=7.1Hz), 3.23-3.40(2H, m), 3.45-3.70(4H, m), 3.70-3.90(2H, m), 3.97(3H, s), 4.17(2H, q, J=7.1Hz), 6.21(1H, s), 6.98(1H, s), 7.11(1H, s)【０２２７】
参考例１７−４６
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.97(3H, s), 4.00(3H, s), 6.05(1H, s), 7.20(1H, s), 7.66(1H, s)【０２２８】
参考例１８−1  
２−ベンゾイル−４−ヒドロキシ−５−メトキシ−３−ニトロ安息香酸エチル
２−ベンゾイル−４−ヒドロキシ−５−メトキシ安息香酸エチル（参考例１７−１）(550mg)および塩化メチレン(10mL)の混合物に発煙硝酸(85μL)を室温下、加えた。２０分撹拌した後、混合物に水、塩化メチレンを加えた。分取した有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、表題化合物(806mg)を得た。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.26(3H, t, J=7.2Hz), 4.07(3H, s), 4.12(2H, q, J=7.2Hz), 7.41-7.47(2H, m), 7.52-7.59(1H, m), 7.74-7.82(2H, m), 10.81(1H, s)【０２２９】
２−ベンゾイル−４−ヒドロキシ−５−メトキシ安息香酸エチルの代わりに対応するフェノール用い参考例１８−１と同様の方法により、参考例１８−２〜参考例１８−４７を合成した。これらを表８に示した。【０２３０】
【表８】
2010001821.tif 000021
2010001821.tif 000022
2010001821.tif 000023
2010001821.tif 000024
【０２３１】
参考例１８−２〜参考例１８−４７の物性値を以下に示した。【０２３２】
参考例１８−２
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：3.64(3H, s), 4.07(3H, s), 7.42-7.48(2H, m), 7.53-7.59(1H, m), 7.75-7.80(3H, m), 10.85(1H, s)【０２３３】
参考例１８−３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.90-1.02(6H, m), 4.07(3H, s), 4.94-5.03(1H, m), 7.41-7.48(2H, m), 7.52-7.59(1H, m), 7.76-7.84(3H, m), 10.82-10.84(1H, m)【０２３４】
参考例１８−４
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.99(3H, t, J=7.0Hz), 3.95-4.10(5H, m), 7.20-7.45(2H, m), 7.61(1H, s), 7.65-7.80(2H, m)【０２３５】
参考例１８−５
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.95(3H, t, J=7.0Hz), 3.90-4.10(5H, m), 7.40-7.70(5H, m)【０２３６】
参考例１８−６
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.93(3H, t, J=7.1Hz), 2.38(3H, s), 3.94(2H, q, J=7.1Hz), 4.02(3H, s), 7.25-7.40(2H, m), 7.50-7.70(3H, m)【０２３７】
参考例１８−７
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：0.95-1.06(6H, m), 2.65(3H, s), 4.08(3H, s), 4.94-5.06(1H, m), 7.81(1H, s), 7.85-7.92(2H, m), 8.01-8.05(2H, m), 10.87-10.89(1H, m)【０２３８】
参考例１８−８
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.89(6H, d, J=6.3Hz), 3.89(3H, s), 4.04(3H, s), 4.70-4.90(1H, m), 7.65(1H, s), 7.75-7.95(2H, m), 8.00-8.20(2H, m)【０２３９】
参考例１８−９
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0,75-1.10(6H, m), 4.02(3H, s), 4.75-4.90(1H, m), 7.61(1H, s), 7.65-7.90(3H, m), 8.00-8.15(1H, m)【０２４０】
参考例１８−１０
MS (ESI, m/z) ：383(M-H)-【０２４１】
参考例１８−１１
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.04(6H, d, J=6.1Hz), 4.08(3H, s), 4.97-5.06(1H, m), 7.74-7.77(2H, m), 7.80(1H, s), 7.88-7.91(2H, m), 10.84(1H, s)【０２４２】
参考例１８−１２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：4.00(1H, s), 7.44-7.54(2H, m), 7.57-7.67(3H, m), 7.70-7.76(1H, m)【０２４３】
参考例１８−１３
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.98(3H, t, J=7.2Hz), 3.90-4.15(5H, m), 7.10-7.25(1H, m), 7.35-7.45(1H, m), 7.62(1H, s), 8.05-8.15(1H, m)【０２４４】
参考例１８−１４
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.53(3H, t, J=7.1Hz), 3.90-4.10(5H, m), 7.35-7.45(1H, m), 7.60(1H, s), 7.60-7.70(1H, m), 7.95-8.10(1H, m), 11.40-12.00(1H, br)【０２４５】
参考例１８−１５
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.08(3H, t, J=7.1Hz), 4.03(3H, s), 4.10(2H, q, J=7.1Hz), 7.21(1H, d, J=2.0Hz), 7.65(1H, s), 8.83(1H, d, J=2.0Hz)【０２４６】
参考例１８−１６
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.09(3H, t, J=7.2Hz), 4.02(3H, s), 4.09(2H, q, J=7.2Hz), 6.70-6.80(1H, m), 7.60(1H, s), 11.00-12.50(1H, br)【０２４７】
参考例１８−１７
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.06(6H, d, J=6.3Hz), 4.03(3H, s), 4.85-4.95(1H, m), 7.22(1H, d, J=2.0Hz), 7.63(1H, s), 8.84(1H, d, J=2.0Hz), 11.94(1H, br s)【０２４８】
参考例１８−１８
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.98(3H, t, J=7.2Hz), 3.90-4.10(5H, m), 7.61(1H, s), 8.05(1H, d, J=3.0Hz), 8.26(1H, d, J=3.0Hz), 11.50-12.50(1H, br)【０２４９】
参考例１８−１９
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：4.00(3H, s), 7.12-7.17(1H, m), 7.32-7.37(1H, m), 7.61(1H, s), 7.99-8.04(1H, m), 11.65(1H, br. s.)【０２５０】
参考例１８−２０
MS (ESI, m/z) ：268(M-H)-【０２５１】
参考例１８−２１
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.09(9H, s), 1.30(3H, t, J=7.0Hz), 3.96(3H, s), 4.15-4.45(2H, m), 7.57(1H, s), 11.50-12.00(1H, br)【０２５２】
参考例１８−２２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.09(9H, s), 1.32(6H, d, J=6.3Hz), 3.97(3H, s), 5.02-5.11(1H, m), 7.53(1H, s), 11.70(1H, br s)【０２５３】
参考例１８−２３
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.32(3H, t, J=7.0Hz), 4.02(3H, s), 4.37(2H, q, J=7.0Hz), 7.62(1H, s)【０２５４】
参考例１８−２４
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.27(3H, t, J=7.0Hz), 1.35-1.67(6H, m), 2.94-3.28(3H, m), 3.66-3.73(1H, m), 3.96(3H, s), 4.26(2H, q, J=7.0Hz), 7.58(1H, s), 11.61(1H, br s)【０２５５】
参考例１８−２５
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.10-1.80(12H, m), 3.03-3.40(3H, m), 4.01(3H, s), 4.06-4.13(1H, m), 5.17-5.26(1H, m), 7.67(1H, s), 10.07(1H, br s)【０２５６】
参考例１８−２６
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：4.00(3H, s), 7.50-7.65(2H, m), 7.70-7.90(4H, m)【０２５７】
参考例１８−２７
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：2.44(3H, s), 4.05(3H, s), 7.27-7.33(3H, m), 7.67(2H, d, J=8.3Hz)【０２５８】
参考例１８−２８
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：2.90-2.94(2H, m), 3.20-3.24(2H, m), 3.98(3H, s), 7.14-7.31(5H, m), 7.74(1H, s)【０２５９】
参考例１８−２９
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：3.99(3H, s), 7.37-7.42(2H, m), 7.73-7.82(3H, m)【０２６０】
参考例１８−３０
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：2.66(3H, s), 4.02(3H, s), 7.25(1H, s)【０２６１】
参考例１８−３１
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.11(6H, d, J=6.8Hz), 3.00-3.15(1H, m), 3.97(3H, s), 7.71(1H, s)【０２６２】
参考例１８−３２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.17(9H, s), 3.93(3H, s), 7.66(1H, s)【０２６３】
参考例１８−３３
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.45-1.95(8H, m), 3.25-3.50(1H, m), 3.97(3H, s), 7.70(1H, s)【０２６４】
参考例１８−３４
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.50-2.01(10H, m), 2.52-2.65(1H, m), 4.01(3H, s), 7.27(1H, s)【０２６５】
参考例１８−３５
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.41-1.61(6H, m), 1.73-1.86(4H, m), 1.97-2.07(2H, m), 2.71-2.81(1H, m), 7.27(1H, s), 10.81(1H, s)【０２６６】
参考例１８−３６
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.50-1.63(2H, m), 1.68-1.76(2H, m), 3.07-3.18(1H, m), 3.29-3.38(2H, m), 3.84-3.92(2H, m), 3.98(3H, s), 7.78(1H, s)【０２６７】
参考例１８−３７
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：3.98(3H, s), 7.44(1H, d, J=2.0Hz), 7.70(1H, s), 8.93(1H, d, J=2.0Hz)【０２６８】
参考例１８−３８
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：2.45-2.55(3H, m), 4.00(3H, s), 6.85-6.90(1H, m), 7.78(1H, s)【０２６９】
参考例１８−３９
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：3.98(3H, s), 7.45-7.55(1H, m), 7.65-7.80(2H, m), 8.30-8.40(1H, m)【０２７０】
参考例１８−４０
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：4.00(3H, s), 7.20-7.35(1H, m), 7.60-7.70(1H, m), 7.78(1H, s), 8.20-8.30(1H, m)【０２７１】
参考例１８−４１
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.08-1.13(6H, m), 3.19-3.25(2H, m), 3.39-3.47(2H, m), 3.95(3H, s), 7.71(1H, s), 12.14(1H, br s)【０２７２】
参考例１８−４２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.80-1.94(4H, m), 3.20-3.46(4H, m), 3.96(3H, s), 7.72(1H, s), 12.14(1H, br s)【０２７３】
参考例１８−４３
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.53-1.64(6H, m), 3.50-3.61(2H, m), 3.95(3H, s), 7.70(1H, s) 【０２７４】
参考例１８−４４
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.50-1.73(8H, m), 3.24-3.58(4H, m), 3.95(3H, s), 7.71(1H, s)【０２７５】
参考例１８−４５
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：3.26-3.68(8H, m), 3.95(3H, s), 7.73(1H, s)【０２７６】
参考例１８−４６
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.19(3H, t, J=7.1Hz), 3.29-3.68(8H, m), 3.95(3H, s), 4.07(2H, q, J=7.1Hz), 7.73(1H, s)【０２７７】
参考例１８−４７
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：4.01(3H, s), 4.04(3H, s), 7.25(1H, s), 9.56(1H, br s)【０２７８】
実施例１−１
２−ベンゾイル−４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロ安息香酸エチル（化合物１−１）
２−ベンゾイル−４−ヒドロキシ−５−メトキシ−３−ニトロ安息香酸エチル（参考例１８−１）(806mg)および酢酸エチル(10mL)の混合物に塩化アルミニウム(610mg)およびピリジン(0.889mL)を加えた。混合物を７７℃で２時間撹拌した。室温に冷却した後、混合物に2mol/L塩酸を加えた。分取した有機層を食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をヘキサン:ジエチルエーテル=4:1にて粉砕し表題化合物(430mg)を得た。
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.91(3H, t, J=7.1Hz), 3.91(2H, q, J=7.1Hz), 7.45-7.52(3H, m), 7.56(1H, s), 7.59-7.68(2H, m)【０２７９】
２−ベンゾイル−４−ヒドロキシ−５−メトキシ−３−ニトロ安息香酸エチルの代わりに対応する３−ニトロベンゼン−１−メトキシ−２−オールを用い、実施例１−１と同様の方法により、化合物１−２〜化合物１−４７を合成した。これらを表９に示した。【０２８０】
【表９】
2010001821.tif 000025
2010001821.tif 000026
2010001821.tif 000027
2010001821.tif 000028
【０２８１】
化合物１−２〜化合物１−４７の物性値を以下に示した。【０２８２】
化合物１−２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：3.45(3H, s), 7.45-7.51(2H, m), 7.54(1H, s), 7.59-7.66(3H, m)【０２８３】
化合物１−３
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.88(6H, d, J=6.3Hz), 4.71-4.80(1H, m), 7.47-7.54(2H, m), 7.58(1H, s), 7.61-7.70(3H, m)【０２８４】
化合物１−４
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.99(3H, t, J=7.1Hz), 4.00(2H, q, J=7.1Hz), 7.20-7.40(2H, m), 7.54(1H, s), 7.60-7.80(2H, m), 10.50-12.00(2H, br)【０２８５】
化合物１−５
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.96(3H, t, J=7.1Hz), 3.96(2H, q, J=7.1Hz), 7.40-7.65(5H, m), 10.50-12.00(2H, br)【０２８６】
化合物１−６
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.94(3H, t, J=7.1Hz), 2.37(3H, s), 3.92(2H, q, J=7.1Hz), 7.25-7.40(2H, m), 7.30-7.65(3H, m), 10.50-12.00(2H, br)【０２８７】
化合物１−７
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.92(2H, d, J=6.3Hz), 2.62(3H, s), 4.72-4.84(1H, m), 7.60(1H, s), 7.81(2H, d, J=8.4Hz), 8.05(2H, d, J=8.4Hz)【０２８８】
化合物１−８
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.90(6H, d, J=6.3Hz), 3.88(3H, s), 4.50-4.90(1H, m), 7.59(1H, s), 7.75-7.95(2H, m), 8.00-8.20(2H, m), 10.50-12.00(2H, br)【０２８９】
化合物１−９
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.70-1.10(6H, m), 4.70-4.90(1H, m), 7.56(1H, s), 7.60-7.90(3H, m), 7.95-8.15(1H, m), 10.50-12.50(2H, br)【０２９０】
化合物１−１０
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.94(6H, d, J=6.3Hz), 4.75-4.83(1H, m), 7.70-7.77(1H, m), 8.00-8.17(4H, m)【０２９１】
化合物１−１１
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.94(6H, d, J=6.2Hz), 4.73-4.83(1H, m), 7.59(1H, s), 7.85(2H, d, J=8.6Hz), 7.99(2H, d, J=8.6Hz), 11.38(2H, br)【０２９２】
化合物１−１２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：7.44-7.51(2H, m), 7.54(1H, s), 7.57-7.65(3H, m)【０２９３】
化合物１−１３
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.98(3H, t, J=7.1Hz), 3.98(2H, q, J=7.1Hz), 7.10-7.25(1H, m), 7.30-7.45(1H, m), 7.53(1H, s), 8.00-8.10(1H, m), 10.50-12.00(2H, br)【０２９４】
化合物１−１４
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.96(3H, t, J=7.2Hz), 3.95(2H, q, J=7.2Hz), 7.30-7.45(1H, m), 7.55-7.70(1H, m), 7.95-8.05(1H, m), 10.50-12.00(2H, br)【０２９５】
化合物１−１５
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.08(3H, t, J=7.1Hz), 4.07(2H, q, J=7.1Hz), 7.17(1H, d, J=1.9Hz), 7.58(1H, s), 8.81(1H, d, J=1.9Hz), 10.50-12.50(2H, br)  【０２９６】
化合物１−１６
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.09(3H, t, J=7.2Hz), 2.40-2.60(3H, m), 4.05(2H, q, J=7.2Hz), 6.65-6.75(1H, m), 7.52(1H, s), 10.50-12.00(2H, br)【０２９７】
化合物１−１７
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.06(6H, d, J=6.3Hz), 4.82-4.92(1H, m), 7.19(1H, d, J=2.0Hz), 7.57(1H, s), 8.83(1H, d, J=2.0Hz), 11.46(1H, br s)【０２９８】
化合物１−１８
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：0.98(3H, t, J=7.0Hz), 3.97(2H, q, J=7.0Hz), 7.54(1H, s), 8.04(1H, d, J=3.0Hz), 8.23(1H, d, J=3.0Hz), 10.50-12.00(2H, br)【０２９９】
化合物１−１９
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：7.15-7.22(1H, m), 7.50-7.56(1H, m), 7.70(1H, s), 8.06-8.12(1H, m)【０３００】
化合物１−２０
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：2.41(3H, s), 3.82(3H, s), 7.52(1H, s), 11.16(1H, br. s.)【０３０１】
化合物１−２１
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.08(9H, s), 1.28(3H, t, J=7.1Hz), 4.10-4.40(2H, m), 7.53(1H, s), 10.60-12.00(2H, br)  【０３０２】
化合物１−２２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.08(9H, s), 1.29(6H, d, J=6.3Hz), 4.99-5.08(1H, m), 7.50(1H, s), 11.16(2H, br s)  【０３０３】
化合物１−２３
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.29(3H, t, J=7.1Hz), 4.32(2H, q, J=7.1Hz), 7.54(1H, s)【０３０４】
化合物１−２４
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.25(3H, t, J=7.0Hz), 1.34-1.65(6H, m), 2.93-3.25(3H, m), 3.66-3.72(1H, m), 4.22(2H, q, J=7.0Hz), 7.52(1H, s), 11.07(2H, br s)【０３０５】
化合物１−２５
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.21-1.27(6H, m), 1.32-1.68(6H, m), 2.90-3.17(3H, m), 3.77-3.83(1H, m), 4.98-5.08(1H, m), 7.51(1H, s), 11.04(2H, br s)【０３０６】
化合物１−２６
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：7.33(1H, s), 7.50-7.65(2H, m), 7.65-7.85(3H, m)【０３０７】
化合物１−２７
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：2.41(3H, s), 7.29-7.42(3H, m), 7.67(2H, d, J=8.3Hz)【０３０８】
化合物１−２８
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：2.89-2.92(2H, m), 3.16-3.20(2H, m), 7.13-7.30(6H, m)【０３０９】
化合物１−２９
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：7.29(1H, s), 7.36-7.40(2H, m), 7.70-7.80(2H, m)  【０３１０】
化合物１−３０
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：2.55(3H, s), 7.27(1H, s)【０３１１】
化合物１−３１
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.09(6H, d, J=7.1Hz), 2.95-3.15(1H, m), 7.27(1H, s)  【０３１２】
化合物１−３２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.16(9H, s), 7.28(1H, s)【０３１３】
化合物１−３３
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.45-1.95(8H, m), 3.25-3.45(1H, m), 7.28(1H, s)【０３１４】
化合物１−３４
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.09-1.86 (10H, m), 2.74-2.86(1H, m), 7.30(1H, s)【０３１５】
化合物１−３５
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.48-1.77(5H, m), 3.02-3.14(2H, m), 3.28-3.37(2H, m), 3.83-3.91(2H, m), 7.26(1H, s)【０３１６】
化合物１−３６
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.34-1.71(6H, m), 1.79-1.90(2H, m), 2.94-3.06(1H, m), 7.29(1H, s)【０３１７】
化合物１−３７
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：7.30(1H, s), 7.42(1H, d, J=2.0Hz), 8.91(1H, d, J=2.0Hz)【０３１８】
化合物１−３８
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：2.40-2.60(3H, m), 6.80-6.90(1H, m), 7.31(1H, s)【０３１９】
化合物１−３９
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：7.31(1H, s), 7.45-7.55(1H, m), 7.65-7.80(1H, m), 8.30-8.40(1H, m)【０３２０】
化合物１−４０
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：7.20-7.35(2H, m), 7.60-7.70(1H, m), 8.15-8.30(1H, m)【０３２１】
化合物１−４１
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.07-1.12(6H, m), 3.18-3.50(4H, m), 7.28(1H, s), 11.41(1H, br s)【０３２２】
化合物１−４２
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.81-1.93(4H, m), 3.21-3.46(4H, m), 7.28(1H, s), 11.37(1H, br s)【０３２３】
化合物１−４３
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.46-1.64(6H, m), 7.27(1H, s)【０３２４】
化合物１−４４
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.52-1.70(8H, m), 3.24-3.57(4H, m), 7.28(1H, s), 11.36(1H, br s)【０３２５】
化合物１−４５
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：3.25-3.67(8H, m), 7.28(1H, s)【０３２６】
化合物１−４６
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：1.19(3H, t, J=7.0Hz), 3.28-3.67(8H, m), 4.07(2H, q, J=7.0Hz), 7.27(1H, s)  【０３２７】
化合物１−４７
１H-NMR（DMSO-d６）δ ppm：3.82(3H, s), 7.28(1H, s)【０３２８】
実施例２−１
５−エトキシカルボニルオキシ−２−（２−フルオロベンゾイル）−４−ヒドロキシ−３−ニトロベンゾニトリル（化合物２−１）
２−（２−フルオロベンゾイル）−４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロベンゾニトリル（化合物１−２９）(70mg)、クロロ炭酸エチル(30mg)およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(1mL)の混合物を50℃で３時間撹拌した。混合物に水および酢酸エチルを加えた。有機層を水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ(溶出溶媒:５０%−１００%  酢酸エチル／ヘキサン、グラディエント溶出)で精製し、表題化合物(60mg)を得た。構造式を表１０に示した。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.42 (3H , t, J=7.0Hz), 4.38(2H, q, J=7.0Hz), 7.06-7.16(1H, m), 7.35-7.44(1H, m), 7.62-7.71(1H, m), 7.78(1H, s), 8.13-8.21(1H, m), 11.18(1H, br)【０３２９】
２−（２−フルオロベンゾイル）−４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロベンゾニトリルの代わりに対応するニトロカテコールを用い実施例２−１と同様の方法により、化合物２−２〜２−４を合成した。構造式を表１０に示した。【０３３０】
化合物２−２〜化合物２−４の物性値を以下に示した。【０３３１】
化合物２−２
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.39-1.45(3H, m), 1.50-1.83(6H, m), 3.16-3.36(2H, m), 3.70-3.90(2H, m), 4.33-4.44(2H, m), 7.63-7.75(1H, m)【０３３２】
化合物２−３
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.24 (3H, t, J=7.2 Hz), 1.42(3H, t, J = 7.2Hz), 4.20-4.28(2H, m), 4.38(2H, q, J=7.1Hz), 7.11(1H, d, J=2.0Hz), 8.22(1H, s), 8.41(1H, d, J=1.9Hz)【０３３３】
化合物２−４
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.42 (9H, s), 7.10 (1H, ddd, J=11.3, 8.5, 1.0Hz), 7.36-7.41 (1H, m), 7.63-7.69 (2H, m), 8.17 (1H, dt, J=7.7, 1.8Hz), 11.13 (1H, br)【０３３４】
実施例３−１
４，５−ビス（エトキシカルボニルオキシ）−２−（２−フルオロベンゾイル）−３−ニトロベンゾニトリル（化合物３−１）
２−（２−フルオロベンゾイル）−４，５−ジヒドロキシ−３−ニトロベンゾニトリル（化合物１−２９）(70mg)およびテトラヒドロフラン(2.0mL)の混合物に、氷冷撹拌下にてクロロギ酸エチル(70μL)およびトリエチルアミン(110μL)を加えた。その混合物を３０分間撹拌した後、室温で二日間撹拌した。その反応混合物を酢酸エチルで希釈し、１mol/L塩酸および食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下にて濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：０%−３０%  酢酸エチル／ヘキサン、グラディエント溶出）で精製して、表題化合物(103mg)を得た。構造式を表１０に示した。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.41(3H, t, J=7.1Hz), 1.43(3H, t, J=7.1Hz), 4.40(2H, q, J=7.1Hz), 4.41(2H, q, J=7.1Hz), 7.15(1H, ddd, J=11.0, 8.4, 0.9Hz), 7.35-7.39(1H, m), 7.65-7.71(1H, m), 7.98(1H, s), 8.04(1H, dt, J=7.6, 1.6Hz)【０３３５】
実施例３−２
４，５−ビス（ジエチルカルバモイルオキシ）−３−ニトロ−２−（ピペリジン−１−カルボニル）安息香酸エチル（化合物３−２）
クロロ炭酸エチルの代わりに、塩化ジエチルカルバミルを用いて、実施例３−１と同様な方法により、表題化合物を合成した。構造式を表１０に示した。
１H-NMR（CDCl３）δ ppm：1.16-1.25(12H, m), 1.36(6H, t, J=7.2Hz), 1.45-1.79(6H, m), 3.05-3.15(1H, m), 3.20-3.50(10H, m), 3.85-3.95(1H, m), 4.30-4.40(2H, m), 8.09(1H, s)【０３３６】
【表１０】
2010001821.tif 000029
【０３３７】
試験例１
ヒトCOMT阻害活性
１）組換えヒトＣＯＭＴの調製
（１）組換えヒトカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼの調製
完全長のヒトカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（以下、ＣＯＭＴ）をコードする、ＮＣＢＩ（National Center for Biotechnology Information）上に登録されている受入番号ＢＣ０１１９３５のＤＮＡ配列に基づき、配列番号１記載の組換えヒトＣＯＭＴをコードするＤＮＡ配列を増幅するために２つのオリゴヌクレオチドプライマーを設計した。５’プライマーの配列を配列番号３に、３’プライマーの配列を配列番号４に示した。これらのプライマーは、所望のベクター中に該当ＰＣＲ産物を挿入しやすくするために制限酵素部位（５’側はＢａｍＨ  Ｉ、３’側はＥｃｏＲ  Ｉ）を含んでいる。
配列番号３記載の５’プライマーおよび配列番号４記載の３’プライマーの各々を、ＴＥ緩衝液で希釈して15pmol/μL溶液とした。Ｈ２Ｏ（ＰＣＲ用, 34.8μL）、25mmol/L  ＭｇＳＯ４(2.0μL)、2mmol/L ｄＮＴＰｓ(5.0μL)、１０倍濃縮のＤＮＡポリメラーゼ  ＫＯＤ  ｐｌｕｓ緩衝液(5.0μL、東洋紡)を混合し、ＰＣＲ反応用混合物を調製した。次いでヒト肝臓ｃＤＮＡ（5.0μL、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）、更に各々のプライマー対（1μL、15pmol）を上記混合物に加え、最後に1.0μLのＫＯＤ  ｐｌｕｓ（東洋紡）を加えた。その後、ＰＣＲ反応を行った。ＰＣＲ反応は９４℃２分間の処置後、９４℃１５秒間、５９℃３０秒間、６８℃１分間でこのサイクルを４０サイクル行った。次いで６８℃５分間、４℃１０分間で終了した。
ＰＣＲ産物をＱＩＡｑｕｉｃｋ  ＰＣＲ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）にて精製した。所望のインサートＤＮＡは同キットのＥＢ緩衝液（30μL）で溶出した。【０３３８】
（２）組換えヒトＣＯＭＴインサートＤＮＡおよびｐＧＥＸ−２Ｔベクターの二重消化
組換えヒトＣＯＭＴインサートＤＮＡ(1.5μg)に、１０倍濃縮のＥｃｏＲ  Ｉ緩衝液(3.0μL、Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂ)、Ｈ２Ｏ(11.1μL)、ＢａｍＨ  Ｉ(1.5μL、15U、10U/μL)とＥｃｏＲ  Ｉ(1.0μL、15U、10U/μL)を加え混合した。その混合溶液を３７℃で１．５時間加熱した。更にその溶液に１０倍濃縮のローディング緩衝液を加えた。混合溶液を電気泳動にて分離し、当該消化断片を有するＤＮＡを含むゲルの部分を切り出し、ＭｉｎＥｌｕｔｅ  Ｇｅｌ  Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）を使用して精製した。  ｐＧＥＸ−２ＴベクターＤＮＡ(1.5μg、Ａｍｅｒｓｈａｍ)についても同様に二重消化を行い精製した。【０３３９】
（３）ライゲーションと大腸菌ＪＭ１０９の形質転換
二重消化したｐＧＥＸ−２Ｔベクター（2.0μL、50ng）およびインサートＤＮＡ(1.24μL、33.4ng)を、２倍濃縮のライゲーション緩衝液(3.24μL、Ｐｒｏｍｅｇａ)に加えて混合した。次いで、Ｔ４リガーゼ(1.0μL、3U/μL、Ｐｒｏｍｅｇａ)を混合溶液に加え、その混合物を２５℃で１時間インキュベーションした。次に、大腸菌ＪＭ１０９(100μL)を０℃にて溶解し、リガーゼで反応させた上記混合溶液(5μL)をＪＭ１０９懸濁液に加え、穏やかに混合し、０℃で３０分間静置した。この混合物に強く振盪すること無しに４２℃で４０秒間の熱ショックを与え、０℃で１０分間冷却した。次いで、450μLのＳＯＣ溶液を熱ショック後の溶液に加え３７℃で１時間振盪した。振盪後、混合溶液の50μLと200μLを、ＬＢ−アンピシリン培地のプレート上(直径9cm、アンピシリン濃度100μg/mL)にそれぞれ播種し、３７℃で１６時間の静置培養を行った。その結果、プレート上にはコロニーが出現していた。【０３４０】
（４）ＧＳＴ融合組換えヒトＣＯＭＴプラスミドによるＪＭ１０９形質転換後のコロニーセレクション
上記の静置培養後のプレートから適当数のコロニーを選択し、それらを滅菌爪楊枝にてＬＢ−アンピシリン液体培地（各2mL、アンピシリン濃度100μg/mL）に植菌し、３７℃で１６時間振盪培養した。それぞれから200μLを1.5mLマイクロチューブに分取し、フェノール抽出法によってプラスミドを抽出した。抽出されたプラスミドは、ＴＥ緩衝液に再溶解し、電気泳動に供した。検出されたバンドの泳動位置が、インサートＤＮＡのないｐＧＥＸ−２Ｔベクターのそれと近いものを一次陽性コロニーと判定し、以下の制限酵素二重消化による再確認を行った。
上記の一次陽性コロニー由来のＤＮＡ溶液（各7μL）を、１０倍濃縮のＥｃｏＲ  Ｉ緩衝液（0.9μL、Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂ）と混和し、次いでＢａｍＨ  Ｉ(0.5μL、10U/μL) とＥｃｏＲ  Ｉ(0.5μL、15U/μL)を添加した。その溶液は、３７℃で１時間加温した後、電気泳動を行った。およそ６７０ｂｐの位置にバンドが検出された試料が由来するコロニーを、二次陽性コロニーと判定した。【０３４１】
（５）ＧＳＴ融合組換えヒトＣＯＭＴプラスミドの大腸菌ＪＭ１０９からの抽出と精製
（４）で二次陽性コロニーと判定された、ＧＳＴ融合組換えヒトＣＯＭＴプラスミドでの形質転換ＪＭ１０９の培養液は、一部(100μL)をグリセロールストックとし、残りの培養液は12000rpmで１０分間遠心を行い、大腸菌ペレットを得た。得られた大腸菌ペレットから、ＱＩＡＧＥＮ  Ｐｌａｓｍｉｄ  ｍｉｎｉ  ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）を用いてプラスミドＤＮＡを精製した。その濃度はＯＤ２６０ｎｍによって決定され247ng/μLであった。常法に従い配列確認を行なったところ、配列番号２のＤＮＡ配列が所望の位置に挿入されていた。【０３４２】
（６）ＧＳＴ融合組換えヒトＣＯＭＴプラスミドＤＮＡの大腸菌ＢＬ２１  ＣＯＤＯＮ  ＰＬＵＳ  （ＤＥ３）ＲＰへの形質転換
（５）で精製され配列確認が終了したＧＳＴ融合組換えヒトＣＯＭＴプラスミドＤＮＡ1μL(1ng/μL)を０℃で融解した大腸菌ＢＬ２１  ＣＯＤＯＮ  ＰＬＵＳ  （ＤＥ３）ＲＰ細胞懸濁液50μLに加え、（３）と同様に形質転換を行い、プレート培養を行った。【０３４３】
（７）ＧＳＴ融合組換えヒトＣＯＭＴの発現
形質転換後の大腸菌ＢＬ２１  ＣＯＤＯＮ  ＰＬＵＳ  （ＤＥ３）ＲＰのプレートからコロニーを拾い上げ、5mLのＬＢ−アンピシリン培地（アンピシリン濃度100μg/mL）に投入し、３７℃にて１５時間振盪培養を行った。培養液の一部50μLをグリセロールストックとし、−８０℃で保存した。使用時にこのグリセロールストックの一部を150mLのＬＢ−アンピシリン培地（アンピシリン濃度100μg/mL）に植菌し、３７℃にて１６時間振盪培養を行った。この培養液を500mLずつ７本のＬＢ−アンピシリン培地（アンピシリン濃度100μg/mL）で希釈し、２０℃にて４．５時間振盪培養を行った。培養液の６００ｎｍ吸光度が０．４４となっていることを確認した後、各50μLのイソプロピル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド（1mol/L）を添加し、２０℃にて１８時間振盪培養を行った。この培養液を9000rpmで２０分間遠心して大腸菌ペレットを回収し、4gずつ４本に分けて使用時まで−８０℃で凍結保存した。【０３４４】
（８）ＧＳＴ融合組換えヒトＣＯＭＴのトロンビン処理
（７）から得られた大腸菌ペレットに40mLのＢｕｇＢｕｓｔｅｒ溶液(Ｎｏｖａｇｅｎ)、30μLのＢｅｎｚｏｎａｓｅ(Ｎｏｖａｇｅｎ)および1μLのｒＬｙｓｏｚｙｍｅ(Ｎｏｖａｇｅｎ)を添加し、１５分間室温にて穏やかに撹拌しながら処理した。得られたライゼートを12000rpm、４℃、２０分間遠心し、上澄み液を回収した。次いで、予めＤ−ＰＢＳ（Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline）にて平衡化し、Ｄ−ＰＢＳで５０％に再懸濁させた、20mLのグルタチオン４ＢＳｅｐｈａｒｏｓｅ（レジンベッドボリューム10mL）を上記上澄み溶液に加え、得られた混合物を４℃にて1時間振盪した。振盪後の混合物をフィルターによりレジンと濾液に分別した。得られたレジンを30mLのＤ−ＰＢＳで5回洗浄し、30mLのトロンビン処理用緩衝液（150mmol/L  ＮａＣｌ、50mmol/L  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０、10％ｇｌｙｃｅｒｏｌ、2.5mmol/L  ＣａＣｌ２、0.5％  β−オクチル−Ｄ−グルコピラノシド）で３回洗浄した。次いで、レジンにトロンビン処理用緩衝液を加え30mLとし、トロンビン（アマシャムバイオサイエンス）３０ユニットを加えた。レジン混合液を４℃で１５時間穏やかに撹拌した後、レジンを濾過し、濾液として得られた組換えヒトＣＯＭＴの溶液を使用時まで−８０℃で保管した。【０３４５】
２）ヒトCOMT阻害作用の測定
ヒトCOMT阻害作用の測定は、Zurcher Gらの方法（J. Neurochem., 1982年, 38巻, P.191-195）を一部改変して実施した。１）で調製した組換えヒトCOMT（約1mg/mL）0.25μL、リン酸カリウム緩衝液（500mmol/L、pH7.6）40μL、塩化マグネシウム（100mmol/L）10μL、ジチオスレイトール（62.5mmol/L）10μL、アデノシンデアミナーゼ（2550ユニット/mL）0.5μLと試験化合物の混合物を３７℃で５分間プレインキュベートした。対照サンプルは同様の方法で調製したが、試験化合物の代わりにジメチルスルホキシド（5μL）を加えた。[3H]-S-アデノシル-L-メチオニン（12.5mmol/L、1.2Ci/mol；アマシャムバイオサイエンス社製）20μLの添加後、カテコール基質（7mmol/L）25μLを加えることにより反応を開始した。反応混合液（終容量0.25mL）は、３７℃で３０分間インキュベートした。反応は氷冷した0.1g/Lのグアイアコールを含む1mol/L塩酸(0.25mL)を加えることで停止させた。シンチレーター（オプティフロー（登録商標）0；パッカード社製）2.5mLを加え、次いで1分間勢い良く振とうした後、パッカード社製液体シンチレーションカウンター（TRICARB 1900CA）で有機層に存在する放射活性を直接計数した。ブランクはカテコール基質の非存在下でインキュベートした（基質を反応停止後に加えた）。IC５０値は酵素活性を50％阻害するのに要した濃度を示す。比較例として、トルカポン、エンタカポン、ならびに特許文献３記載の３，４−ジヒドロキシ−２−ニトロフェニル）フェニルメタノン；（６−ベンゾイル−３，４−ジヒドロキシ−２−ニトロフェニル）フェニルメタノン；および炭酸 ４，５−ジベンゾイル−２−エトキシカルボニルオキシ−３−ニトロフェニル エステル エチルエステルをそれぞれ比較例１、２および３として、同様に試験した。これらの結果を表１１に示した。【０３４６】
【表１１】
2010001821.tif 000030
【０３４７】
試験例２
ＣＯＭＴ阻害剤によるラット脳および肝臓のＣＯＭＴ活性阻害
１）投薬とサンプリング
７週齢（体重200gから250g）の雄性Sprague-Dawley ラット（日本チャールス・リバー）を１６時間絶食した。すべての試験化合物は、ジメチルスルホキシド／ポリエチレングリコール４００／0.1mol/Lアルギニン水溶液＝0.5／20／79.5に経口投与直前に溶解した（2mg/mL）。化合物投与（10mg/kg）から１時間後および５時間後に動物を断頭によって屠殺し、COMT活性測定用に脳および肝臓を摘出した。未処置の動物から採取した臓器サンプルを対照とした。すべての臓器は直ちに液体窒素にて凍結させた。 凍結臓器を４倍量（w/v）の氷冷ホモジナイズバッファー（0.5mmol/Lのジチオスレイトールを含むダルベッコリン酸緩衝食塩液）でホモジナイズした。ホモジネートを、900gで１０分間遠心分離（４℃）した（クボタ社製、ハイキャパシティー冷却遠心機８８００使用）。上清画分はS-COMT（可溶性COMT）とMB-COMT（膜結合型COMT）の両方を含み（すなわち総COMT画分）、測定するまで−８０℃で保存した。各サンプルのタンパク濃度はBCAタンパク定量法（ピアス社製）により測定した。【０３４８】
２）COMT活性の測定
COMTアッセイは、Zurcher Gらの方法（J. Neurochem., 1982年, 38巻, P.191-195）を一部改変して実施した。ホモジネート標品（標品のタンパク濃度は脳、肝臓それぞれで約15mg/mLおよび約35mg/mL）の一部（脳、肝臓でそれぞれ約50mLおよび約3.5mL）、リン酸カリウム緩衝液（500mmol/L, pH7.6）40mL、塩化マグネシウム（100mmol/L）10mL、ジチオスレイトール（62.5mmol/L）10mLおよびアデノシンデアミナーゼ（2550ユニット/mL）0.5mLの混合物を３７℃、５分間プレインキュベートした。20mLの[３H]-S-アデノシル-L-メチオニン（12.5mmol/L、44.4GBq/mol；アマシャムバイオサイエンス社製）の添加後、カテコール基質（7mmol/L）25mLを加えることにより反応を開始した。反応混合液（終容量0.25mL）は、３７℃で９０分間（脳）または３０分間（肝臓）インキュベートした。反応は氷冷した0.1g/Lのグアイアコールを含む1mol/L塩酸(0.25mL)を加えることで停止させた。シンチレーター（オプティフロー（登録商標）0；パッカード社製）2.5mLを加え、次いで１分間勢い良く振とうした後、パッカード社製液体シンチレーションカウンター（TRICARB 1900CA）で有機層に存在する放射活性を直接計数した。対照サンプルはカテコール基質の非存在下でインキュベートした（基質を反応停止後に加えた）。ＣＯＭＴ活性％はブランクを１００％としたときのＣＯＭＴ活性の割合を示す。比較例として、トルカポンおよびエンタカポンを同様に試験した。これらの結果を表１２に示した。【０３４９】
【表１２】
2010001821.tif 000031
【０３５０】
これらの試験の結果、本発明の化合物は、トルカポンおよびエンタカポンに比べて、より持続的かつ強力な肝COMT阻害作用を示した。【０３５１】
試験例3
ラット肝細胞毒性
-150℃に保存されたラット凍結肝細胞３ｘ１０−６cells/vialを37℃に暖め、グルコース含有thawing medium(10mL)に加えて混合した後、1000rpmで１分間遠心した。上清を除去した後、細胞沈査をWilliams E.medium(15mL)に懸濁させた。薬物はジメチルスルホキシド用いて45、15、4.5、1.5、0.45mmol/Lに調製後、各薬物溶液およびコントロール（ジメチルスルホキシド）を2.0μLずつ試験管に分注した、この試験管に上記の細胞の懸濁液(300μL)を分注して混合させた。各懸濁液を９６ウェルプレートに100μLずつ分注し、37℃にて４時間CO２インキュベータ中でインキュベートした。Promega社のCell Viability Assay法に従いATP活性を測定した。コントロールの５０％ATP活性を示す濃度をEC５０値として表した。これらの結果を表１３に示した。【０３５２】
【表１３】
2010001821.tif 000032
【０３５３】
これらの試験の結果、本発明の化合物は、トルカポンまたはエンタカポンに比べて極めて軽微な肝細胞毒性しか示さないことが示唆された。【０３５４】
試験例４
片側性６−ヒドロキシドパミン損傷の片側パーキンソン病ラットにおけるL−ドパ薬効増強作用
（１）薬物
以下の薬物を使用した：
６−ヒドロキシドパミン塩酸塩（６−ＯＨＤＡ，シグマ）；デシプラミン塩酸塩（デシプラミン，シグマ）；Ｌ−アスコルビン酸（シグマ）；ペントバルビタールナトリウム（ネンブタール注，大日本住友製薬）；アポモルヒネ塩酸塩１／２水和物（アポモルヒネ，シグマ）；ジヒドロキシフェニルアラニン（Ｌ−ドパ，シグマ）；カルビドパ一水和物（カルビドパ，ケンプロテック）；０．５％メチルセルロース（和光純薬工業）。
６−ＯＨＤＡは、０．２％のＬ−アスコルビン酸を含んだ生理食塩水中に、2mg/mLで溶解した。デシプラミンは、温水浴中で蒸留水中に１０mg／ｍLで溶解した。アポモルヒネは、生理食塩水中に0.1mg/mLで溶解した。L−ドパ／カルビドパは、０．５％メチルセルロース水溶液中に懸濁した。試験化合物は、０．５％のジメチルスルホキシド、２０％のポリエチレングリコールおよび７９．５％の0.1mol/Lのアルギニン水溶液を含んだ溶液中に溶解した。【０３５５】
（２）６−ＯＨＤＡ損傷モデルの作成
６−ＯＨＤＡ損傷モデルの作成は、非特許文献６の方法を一部改変して実施した。雄性のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系ラット（6週齢、日本チャールスリバー）を腹膜内ペントバルビタールナトリウム（45mg/kg）で麻酔して、定位フレーム（ナリシゲ、東京、日本）に固定した。ノルアドレナリンニューロンの６−ＯＨＤＡによる損傷を防ぐために、腹膜内デシプラミン注射（25mg/kg）を６−ＯＨＤＡ注入の３０分前に施した。頭頂部中央部切開を経たブレグマ識別の後、６−ＯＨＤＡ注入部位に歯科用ドリルを用いて頭蓋骨に穴を開けた。損傷は左側の内側前脳束にマイクロシリンジ（ハミルトン）に接続した注入用カニューレ（３０ゲージの針）を用いて６−ＯＨＤＡ（１分間あたり１μLの速度で４μL中の８μｇ）を注入することによって行った（損傷部位の座標；ブレグマ点および頭蓋骨表面から前後−２．５ｍｍ、左右−１．８ｍｍ、深さ−８．０ｍｍ）。カニューレは損傷部位に５分間静置した後、動物から慎重に取り除いた。頭蓋骨の穴に歯科用セメントを補充し、消毒後、頭皮の切開部位を外科的に縫合した。麻酔から回復した動物は、実験日まで通常通り飼育した。【０３５６】
（３）回転行動の評価
損傷の３週間後、皮下投与された0.1mg/kgのアポモルヒネに反応した対側回転（一回転は３６０度の回転と定義）に基づいて、ラットを試験した。行動観察の際には、ラットを半径２０センチメートルのプラスチック製円筒内に入れ、回転行動をビデオ撮影し、ラット旋回運動自動計測装置Ｒ−ＲＡＣＳ（キッセイウェルコム）によって定量化した。一時間に１００カウント以上回転した動物を更なる実験に用いた。実験日には、動物は一晩絶食され、試験化合物は、10mg/kgの用量で経口投与され、同時にL−ドパ 5mg/kgおよびカルビドパ 30mg/kgが経口投与された。投与後、対側回転数を測定した。１０分間あたりの回転数が１０カウント以上となったときを作用が発現、１０カウント以下となる状態が６０分間持続したときを作用が消失したものとみなし、作用の持続時間と総回転数を薬効の強さの指標とした。作用の持続時間は、１０分間あたりの回転数が１０カウント以上となった時間から１０カウント以下の時間帯が６０分間持続する時間帯の直前の時間までとした。総回転数は、作用持続中の回転数の総和とした。
総回転数および持続時間を表１４に示した。同様にL−ドパおよびカルビドパのみの群をコントロールとして示した。【０３５７】
【表１４】
2010001821.tif 000033
【０３５８】
これらの試験の結果、L−ドパ／カルビドパのみのコントロールに比べて、本発明の化合物と、L−ドパ／カルビドパとを組み合わせて使用することにより顕著な薬効の増強が認められた。
【産業上の利用可能性】
【０３５９】
本発明の化合物は、優れたＣＯＭＴ阻害作用を有するので、パーキンソン病、うつ病、高血圧症の治療または予防剤として有用である。特に本発明の化合物と、Ｌ−ドパとを組み合わせて使用することにより、Ｌ−ドパの生体内利用率を増加させることができるので、パーキンソン病の治療および予防に好適である。
【配列表フリーテキスト】
【０３６０】
<配列番号１>
配列番号１は、組換えヒトカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼの配列である。
<配列番号２>
配列番号２は、配列番号１の組換えヒトカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼを発現するように配列番号３および４のプライマーを用いて増幅されたＤＮＡ配列である。
<配列番号３>
配列番号３は、配列番号２のＤＮＡを増幅するために使用された５’プライマーの配列である。
<配列番号４>
配列番号４は、配列番号２のＤＮＡを増幅するために使用された３’プライマーの配列である。
【配列表】
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【国際調査報告】
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2010001821.tif 000038
2010001821.tif 000039
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