(57)【要約】強化された効力を有するラパマイシン組成物を調製する方法が提供される。本方法は、1.5％未満の酸化および加水分解のラパマイシン不純物を有するラパマイシン化合物を選択し、その選択されたラパマイシンを抗酸化物質および任意の賦形剤と共に処方する工程を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
強化された効力を有するラパマイシン組成物を調製する方法であって、
1.5％未満の酸化および加水分解のラパマイシン不純物を有するラパマイシン化合物を選択する工程；および
選択されたラパマイシンを、抗酸化物質および任意の賦形剤と共に処方する工程
を含む、前記方法。
【請求項２】
前記選択する工程が、高速液体クロマトグラフィーアッセイにおいてラパマイシンをスクリーニングする工程を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抗酸化物質が、トコフェロール、ビタミンC、2,6-ジ-tert-ブチル-4-メチルフェノールおよびこれらの混合物からなる群より選択される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記抗酸化物質がα-トコフェロールである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記選択されたラパマイシンが0.5％未満の酸化不純物を有する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記選択されたラパマイシンが非経口送達のために処方される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記選択されたラパマイシンが液体濃縮物として処方される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記選択されたラパマイシンがd,l-α-トコフェロール、無水クエン酸、無水アルコールおよびプロピレングリコールと共に処方される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記選択されたラパマイシンが経口送達のために処方される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
強化された効力を有するラパマイシン組成物を調製する方法であって、
1.5％未満の酸化および加水分解のラパマイシン不純物を有するラパマイシン化合物を選択する工程；
選択されたラパマイシンを少なくとも２種の抗酸化物質および任意の賦形剤と共に処方する工程
を含む、前記方法。
【請求項１１】
前記抗酸化物質のうちの少なくとも１種が、ビタミンCまたは2,6-ジ-tert-ブチル-4-メチルフェノールである。請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記少なくとも２種の抗酸化物質が、ビタミンCおよび2,6-ジ-tert-ブチル-4-メチルフェノールである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記ラパマイシンがラパマイシンおよびCCI-779からなる群より選択される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
発明の背景
3-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)-2-メチルプロピオン酸とのラパマイシン42-エステル(CCI-779)は、抗腫瘍剤として発展する可能性を有する。この化合物は、現在、テムシロリムス（temsirolimus）の名称で一般に知られている(Wyeth)。ラパマイシンのヒドロキシエステル（テムシロリムスを含む）の調製および使用は、米国特許第5,362,718号および同第6,277,983号に記載されている。
【０００２】
静脈内製剤としては、CCI-779、α-トコフェロール、クエン酸およびエタノールのプロピレングリコール溶液が挙げられる。ラパマイシンおよび関連化合物は、薬物物質の合成および精製の間、または製剤として処方されるときに、酸化および加水分解の分解を受けやすくなる場合がある。酸化は、一般的には、ラパマイシンおよびその誘導体（例えば、CCI-779）の1-7炭素ポリエン領域中の不飽和炭素の過酸化を介して開始される。一般的には、初期の過酸化に続いて、多くの酸化物、水酸化物およびアルデヒドの分解生成物が形成される。
【０００３】
総称して、これらの分解生成物または不純物は、「グループII」または「酸化および加水分解」の分解生成物もしくは不純物といわれる。これらの不純物／分解生成物の存在によりその薬物の分解が触媒され、その結果、多量に存在するとその薬物は不安定化され得る。
【０００４】
薬物物質への加工処理の間、および最終薬物生成物に抗酸化物質を添加すると、分解生成物または不純物によって引き起こされる分解を阻害することができる。しかし、これらの分解／不純物レベルが臨界値に達する場合、薬物生成物のさらなる分解を実用的手段によって阻害するのは困難である。経口生成物に関して、このことは特に制限となる。なぜならば、処方物中で使用される抗酸化物質および他の安定化剤のレベルは、多くの場合に安全上の懸念によって制限され、新規生成物中のそれらのレベルは、以前のヒトの安全経験から制限される場合があるからである。薬物生成物の効力および純度に対する酸化／加水分解の分解生成物の負の影響のために、最終薬物生成物の組成物においてそれらの量を限定することが有益である。
【０００５】
米国特許第6,605,613 B2号は、種々の抗酸化物質を使用したマクロライドの安定化を考察している。この特許の主な焦点は、薬物の調製および最終単離の間に薬物を安定化することである。
【０００６】
ラパマイシン誘導体の酸化および加水分解の間に生じる種々の分解経路と、ラパマイシンおよび関連化合物が種々の異性体を形成する能力のために、酸化／加水分解の分解生成物／不純物を、個々の物質として単離および定量化するのは困難である。この理由のため、単一の個々の化合物としてではなくグループとして、酸化／加水分解の分解生成物を定量化することが、多くの場合必要である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
当該分野で必要とされているのは、分解不純物が少ないラパマイシン組成物を調製するための代替方法である。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の要旨
１つの態様において、本発明は、強化された効力を有するラパマイシン組成物を調製する方法を提供する。
【０００９】
別の態様において、本発明は、1.5％以下の酸化および加水分解のラパマイシン不純物を含むラパマイシン化合物を、抗酸化物質および任意の賦形剤とともに処方することによって強化された効力を有するラパマイシン組成物を調製するための方法を提供する。
【００１０】
本発明の他の態様および利点は、以下の本発明の詳細な説明から容易に明らかになる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
発明の詳細な説明
本発明は、安定性の向上したラパマイシン組成物を調製する方法を提供する。本明細書において使用される場合、「向上した安定性（increased stability）」とは、そこに含まれるラパマイシン化合物の濃度が経時的にほとんど低下せず、当該分野のラパマイシン組成物と比較した場合に分解生成物がほとんどないか、または分解生成物のレベルがより低いラパマイシン組成物をいう。好ましくは、本発明のラパマイシン組成物は、出発物質中の酸化／加水分解不純物が制御されていない組成物と比較して、25℃または40℃で保存した後に最小限の分解を示す。
【００１２】
本明細書中で使用される場合、用語「ラパマイシン化合物」は、以下に示される基本的なラパマイシン核を含む免疫抑制性化合物のクラスを定義する。
【００１３】
【化１】
2009520818.tif 000002
【００１４】
本発明のラパマイシン化合物は、ラパマイシン核の誘導体として化学的または生物学的に改変されているが、依然として免疫抑制特性を保持している化合物を含む。従って、用語ラパマイシン化合物は、ラパマイシン、ならびにラパマイシンのエステル、エーテル、カルバメート、オキシム、ヒドラゾンおよびヒドロキシルアミン、ならびにラパマイシン核上の官能基が、例えば還元または酸化によって改変されているラパマイシンを含む。
【００１５】
用語ラパマイシン化合物はまた、42エステルおよび／または31エステル、ならびに以下の特許（これらは、全て本明細書において参考として援用される）に記載されるようなラパマイシンのエーテルも包含する：アルキルエステル(米国特許第4,316,885号);アミノアルキルエステル(米国特許第4,650,803号);フッ素化エステル(米国特許第5,100,883号);アミドエステル(米国特許第5,118,677号);カルバメートエステル(米国特許第5,118, 678号);シリルエステル(米国特許第5,120,842号);アミノジエステル(米国特許第5,162,333号);スルホン酸および硫酸のエステル(米国特許第5,177,203号);エステル(米国特許第5,221,670号);アルコキシエステル(米国特許第5,233,036号);O-アリールエーテル、O-アルキルエーテル、O-アルケニルエーテルおよびO-アルキニルエーテル(米国特許第5,258,389号);炭酸エステル(米国特許第5,260,300号);アリールカルボニルカルバメートおよびアルコキシカルボニルカルバメート(米国特許第5,262,423号);カルバメート(米国特許第5,302,584号);ヒドロキシエステル(米国特許第5,362,718号);ヒンダードエステル（hindered ester）(米国特許第5,385,908号);複素環式エステル(米国特許第5,385,909号); gem置換エステル(米国特許第5,385,910号);アミノアルカン酸エステル(米国特許第5,389,639号);ホスホリルカルバメートエステル(米国特許第5,391,730号);カルバメートエステル(米国特許第5,411,967号); カルバメートエステル(米国特許第5,434,260号);アミジノカルバメートエステル(米国特許第5,463,048号); カルバメートエステル(米国特許第5,480,988号);カルバメートエステル(米国特許第5,480,989号);カルバメートエステル(米国特許第5,489,680号);ヒンダードN-オキシドエステル(米国特許第5,491,231号);ビオチンエステル(米国特許第5,504,091号);O-アルキルエーテル(米国特許第5,665,772号);およびラパマイシンのPEGエステル(米国特許第5,780,462号)。これらのエステルおよびエーテルの調製は、上記に列挙された特許に開示されている。
【００１６】
米国特許第5,256,790号において考察されるラパマイシンの27-エステルおよびエーテルもさらに、用語ラパマイシン化合物の定義のなかに含まれる。対応するアルコールに還元されるC-27ケトンラパマイシンも記載されており、これは、次に対応するエステルまたはエーテルに変換される。これらのエステルおよびエーテルの調製は、上記に提供される特許において考察されている。米国特許第5,373,014号、同第5,378,836号、同第5,023,264号および同第5,563,145号において考察されるラパマイシンのオキシム、ヒドラゾンおよびヒドロキシルアミンもまた含まれる。これらのオキシム、ヒドラゾンおよびヒドロキシルアミンの調製は、上記に列挙された特許において考察されている。42-オキソラパマイシンの調製は、米国特許第5,023,263号において考察されている。
【００１７】
用語ラパマイシン化合物は、異なるラパマイシンまたはラパマイシンもしくはその任意の誘導体を含む化学的化合物の任意の組合せもさす。
【００１８】
本発明において使用され得るラパマイシン化合物の具体的な例としては、なかでも、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ラパマイシン、CCI-779、ノルラパマイシン（norrapamycin）、デオキソラパマイシン、デスメチルラパマイシン、デスメトキシラパマイシン、もしくは米国特許公開公報第2006-0135549 (米国仮特許出願第60/637,666からの優先権を主張)および米国特許公開公報第2006-013550 A1 (米国仮特許出願第60/638,004からの優先権を主張)（これらは、本明細書において参考として援用される）に記載されるラパマイシン、またはその薬学的に受容可能な塩、プロドラッグもしくは代謝産物。
【００１９】
用語「デスメチルラパマイシン」とは、１以上のメチル基を欠いているラパマイシン化合物のクラスをいう。本発明に従って使用され得るデスメチルラパマイシンの例としては、なかでも、3-デスメチルラパマイシン(米国特許第6,358,969号)、7-O-デスメチル-ラパマイシン(米国特許第6,399,626号)、17-デスメチルラパマイシン(米国特許第6,670,168号)、および32-O-デスメチルラパマイシンが挙げられる。
【００２０】
用語「デスメトキシラパマイシン」とは、１以上のメトキシ基を欠いているラパマイシン化合物のクラスをいい、これらとしては、32-デスメトキシラパマイシンが挙げられるが、これに限定されない。
【００２１】
本発明のラパマイシン組成物は、以下に同定される状態および疾患を処置するのに十分な量のラパマイシン化合物を含む。具体的には、ラパマイシン化合物は、約0.1〜30 wt％、0.5〜25 wt％、1〜20 wt％、5〜15 wt％または7〜12 wt％ (wt/wt)で、ラパマイシン組成物中に存在する。好ましくは、上記ラパマイシン化合物は、2〜約500 mg、5 mg〜250 mg、10 mg〜100 mg、15 mg〜50 mgまたは約20 mg〜25 mgの量で存在する。
【００２２】
本発明のラパマイシン化合物は、微粉化された形態でもよいし、微粉化されていない形態でもよく、上記ラパマイシン化合物の互変異性形態も含み得る。本発明はまた、ラパマイシンの誘導体（エステル、カルバメート、スルフェート、エーテル、オキシム、カルボネートなどが挙げられるが、これらに限定されない）も含む。
【００２３】
ラパマイシン化合物は、細胞または患者がラパマイシンを処理することによって形成される特有の生成物である「代謝産物」も包含し得る。好ましくは、代謝産物はインビボで形成される。
【００２４】
本発明の組成物中のラパマイシン化合物は、当該分野の組成物中のラパマイシン化合物よりも分解の程度が低いことも好ましい。もちろん、本発明の組成物中のラパマイシン化合物の濃度は維持されることが最も好ましい。しかし、本発明の組成物中のラパマイシン化合物の濃度は、25℃で3〜5ヶ月間または40℃で1ヶ月間保存した後に、約２％未満が分解し、より好ましくは約1％未満が分解する。
【００２５】
本発明者らは、出発物質中に1.5％未満（すなわち、0％または0.01％、0.01〜1.5％）の酸化および加水分解の不純物を含むラパマイシン化合物が利用される場合、より効力のあるラパマイシン組成物が得られることを見出した。実際、0.5〜1％またはそれ以下の酸化および加水分解の不純物を含むラパマイシン化合物を利用することによって、ラパマイシンの分解は顕著に低減したか、または除去された。より好ましくは、上記ラパマイシン化合物は、約1％未満、約0.5％未満、約0.4％未満、約0.3％未満、約0.2％未満または約0.1％の酸化不純物を含む。より好ましくは、上記ラパマイシンは、約0.5％未満の酸化不純物を含む。
【００２６】
用語「ラパマイシンの酸化および加水分解の不純物」またはこの用語のバリエーションは、本明細書において使用される場合、ラパマイシン組成物中で形成される化学的化合物（chemical compound）をいう。これらの不純物は、以下に同定されるラパマイシンのC1-6領域に関連する酸素付加化合物またはそれらのアナログのグループを含み得る。従って、これらの不純物は、ラパマイシンまたはラパマイシン誘導体のアルデヒド、エポキシド、ヒドロキシドおよびそれらの組合せも含み得る。これらの不純物は、C1-6領域について上記に記載された酸素付加改変を含むラパマイシンまたはラパマイシンアナログの開環構造（ring-opened form）も含み得る。
【００２７】
【化２】
2009520818.tif 000003
【００２８】
これらの酸化および加水分解の不純物の存在は、代表的には、紫外線（UV）または質量分光（MS）の検出とともに高速液体クロマトグラフィー（HPLC）を使用することによって測定される。具体的には、酸化および分解の不純物は、HPLC/UVまたはHPLC/MSのいずれかを用いて定量することができる。より具体的には、酸化および加水分解の不純物は、保持時間の特定の範囲にわたって共溶出物質の混合物として定量することができる（HPLC/UV）。例えば、１つの実施形態において、CCI-779異性体Bピークの保持時間は、適切なクロマトグラフィーカラム（例えば、逆相カラム）を使用すると18分と24分との間にあるはずである。１酸素、２酸素、３酸素、１酸素＋水、および水の取り込みの程度を付加生成物のm/zに基づいて分析することによる代替的な定量も採用される。
【００２９】
本発明の方法は、ラパマイシン組成物中で使用するための上記のラパマイシン化合物を選択することによってラパマイシン組成物を調製する工程を含む。好ましくは、上記ラパマイシン化合物は、1.5％未満の酸化および加水分解のラパマイシン不純物を有する。所望のラパマイシン化合物を選択した後、それは、１種以上の抗酸化物質とともに処方される。
【００３０】
本発明のラパマイシン組成物中で使用され得る抗酸化物質としては、クエン酸、α-トコフェロール、BHA、BHT（2,6-ジ-tert-ブチル-4-メチルフェノール）、モノチオグリセロール（monothioglycerol）、ビタミンCおよび没食子酸プロピルが挙げられるが、これらに限定されない。１つの実施形態において、ビタミンCはアスコルビン酸である。しかし、当業者は、アスコルビン酸の代わりに薬学的に受容可能なその塩を使用することができる。好ましくは、上記抗酸化物質はd,l-α-トコフェロールである。１つの実施形態において、上記抗酸化物質は、0.0005 wt％〜3 wt％、好ましくは0.001 wt％〜3 wt％の濃度範囲で使用することができる。
【００３１】
本発明のラパマイシン組成物は、適切な賦形剤も含有することができる。これらとしては、水溶性ポリマー、pH調整剤、キレート剤、界面活性剤、充填剤、結合剤、崩壊剤などが挙げられるが、これらに限定されない。本発明で有用な任意の所定のラパマイシン組成物は、各クラスの構成要素の複数の成分を含み得る。例えば、いくつかの組成物は、１種以上の抗酸化物質を含むことができる。
【００３２】
pH調整剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：クエン酸、クエン酸ナトリウム、酢酸、乳酸、希HCl、およびラパマイシン化合物を含有する溶液を緩衝して、pHを約4〜約6の範囲にすることができる他の弱酸または弱塩基。
【００３３】
キレート剤および金属イオンを結合し得る他の物質も、本発明のラパマイシン組成物に含まれ得る。好ましくは、このキレート剤は、ラパマイシン化合物の安定性を向上させる。特定の実施形態において、本発明の処方物の抗酸化物質成分は、キレート活性を提示し得る。キレート剤の例としては、クエン酸およびアスコルビン酸（本処方物において典型的な抗酸化物質およびキレート剤の両方として機能し得る）が挙げられるが、これらに限定されない。他のキレート剤としては、溶液中で金属イオンと結合し得るような物質（例えば、エチレンジアミン四酢酸（EDTA））、その塩、またはラパマイシン化合物の安定性を向上させ得るグリシンなどのアミノ酸が挙げられる。代表的には、キレート剤は、本明細書に提供される抗酸化物質成分についての濃度範囲の下端で使用される。１つの例において、クエン酸は、0.01％ w/v未満の濃度で利用される。さらに、このようなキレート剤は、本発明の抗酸化物質成分の一部として他の抗酸化物質と組み合わせて使用することができる。例えば、受容可能な処方物は、クエン酸とd,l-α-トコフェロールとの両方を含むことができる。選択した抗酸化物質についての最適濃度は、本明細書において提供された情報に基づいて、当業者によって容易に決定することができる。
【００３４】
界面活性剤としては、ポリソルベート80、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム、レシチンと合わせることができる胆汁酸の塩（タウロコール酸塩、グリココール酸塩、コール酸塩、デオキシコール酸塩など）、ビタミンE TPGS、および／またはポロキサマーを挙げることができる。上記界面活性剤は、ラパマイシン組成物中に0.5〜10 wt％、1〜8 wt％または3〜5 wt％ (wt/wt)で存在する場合もあるし、または、最大約50 wt％までのこれらの範囲の下端〜上端の量で存在する場合もある。
【００３５】
結合剤、充填剤および崩壊剤としては、以下を挙げることができる：スクロース、ラクトース、微結晶性セルロース、クロスカルメロースナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、アラビアゴム、コレステロール、トラガカント、ステアリン酸、ゼラチン、カゼイン、レシチン（ホスファチド）、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、非結晶性セルロース、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、セチルエステルワックス、デキストレート（dextrate）、デキストリン、ラクトース、デキストロース、グリセリルモノオレエート、グリセリルモノステアレート、グリセリルパルミトステアレート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンステアレート、およびポリビニルアルコール。
【００３６】
代表的な水溶性ポリマーとしては、ポリビニルピロリドン(PVP)、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、ポリエチレングリコール(PEG)、およびシクロデキストリンまたはその混合物が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、上記水溶性ポリマーはPVPであり、2.5キロダルトンと60キロダルトンとの間の分子量を有する。
【００３７】
本明細書において記載されるラパマイシン組成物は、ラパマイシン化合物の薬学的有効量を使用して、所望の送達経路に適切な任意の形態で処方することができる。例えば、本発明の組成物は、経口、皮膚、経皮、気管支内、鼻内、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、腹腔内、鼻内、膣、直腸、舌下、頭蓋内、硬膜外、気管内などの経路によって、または持続放出によって送達することができる。
【００３８】
ラパマイシン組成物について適切な経口処方物は、国際公開第2004/026280および米国特許公開公報第2004-0077677 A1（これらは、本明細書において参考として援用される）に記載されるように、CCI-779について記載されるように調製することができる。１つの実施形態において、上記組成物は、0.1〜30 wt％、0.5〜25 wt％、1〜20 wt％、5〜15 wt％または7〜12 wt％ (wt/wt)のラパマイシン化合物、および0.001 wt％〜1 wt％、0.01 wt％〜1 wt％または0.1 wt％〜0.5 wt％ (wt/wt)の抗酸化物質を含有する。上記組成物は、必要に応じて、0.5〜50 wt％、1〜40 wt％、5〜35 wt％、10〜25 wt％または15〜20 wt％ (wt/wt)の水溶性ポリマー、および0.5〜10 wt％、1〜8 wt％または3〜5 wt％ (wt/wt)の界面活性剤を含有し得る。しかし、他の実施形態は、これらの成分をより多く含む場合もあるし、より少なく含む場合もある。
【００３９】
経口処方物は、慣用的に使用される任意の経口形態を含み、これらとしては、錠剤、カプセル、口腔形態、トローチ、ロゼンジおよび経口の液体、懸濁剤または溶液を挙げることができる。カプセルは、ラパマイシン化合物と不活性充填剤および／または希釈剤（例えば、薬学的に受容可能なデンプン（例えば、トウモロコシ、ジャガイモまたはタピオカのデンプン）、糖類、人工甘味料、粉末セルロース（例えば、結晶性セルロースおよび微結晶性セルロース）、小麦粉、ゼラチン、ゴムなど）との混合物を含むことができる。有用な錠剤処方物は、慣用的な圧縮、湿式造粒法または乾燥造粒法によって作製され得、薬学的に受容可能な希釈剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、表面改変剤（界面活性剤を含む）、懸濁剤または安定化剤を利用することができ、これらとしては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ラウリル硫酸ナトリウム、微結晶性セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、アルギン酸、アラビアゴム、キサンタンゴム、クエン酸ナトリウム、コンプレックスシリケート（complex silicate）、炭酸カルシウム、グリシン、デキストリン、スクロース、ソルビトール、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、ラクトース、カオリン、マンニトール、塩化ナトリウム、タルク、乾燥デンプンおよび粉砂糖が挙げられるが、これらに限定されない。表面改変剤としては、非イオン性および陰イオン性の表面改変剤を挙げることができる。表面改変剤の代表的な例としては、ポロキサマー１８８、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、コロイド状二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、およびトリエタノールアミンが挙げられるが、これらに限定されない。本明細書における経口処方物は、標準的な遅延放出または持続放出の処方物を利用して、ラパマイシンの吸収を変化させることができる。上記経口処方物は、必要に応じて適切な可溶化剤もしくは乳化剤を含む水またはフルーツジュースも含み得る。
【００４０】
いくつかの場合において、エアロゾルの形態で、ラパマイシン組成物を気道に直接投与することが望ましい場合もある。
【００４１】
ラパマイシン組成物は、非経口的に、または腹腔内に投与することもできる。遊離塩基もしくは薬理学的に受容可能な塩としてのラパマイシン化合物の溶液または懸濁液は、界面活性剤（例えば、ヒドロキシ−プロピルセルロース）と適切に混合した水の中で調製することができる。懸濁剤は、グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびこれらの混合物（油中）中で調製することもできる。保存および使用の通常の条件下において、これらの調製物は、微生物の増殖を防止するための保存薬を含む。
【００４２】
注射用途のために適切な薬学的な形態としては、滅菌性の水溶液または分散液および滅菌性の注射溶液または分散液のその場での調製のための滅菌粉末が挙げられる。全ての場合において、上記の形態は滅菌されていなければならず、そして容易に注射が可能な程度まで流動性がなければならない。上記の形態は、製造および保存の条件下で安定でなければならず、細菌および真菌などの微生物のコンタミ作用から保護されていなければならない。キャリアは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、その適切な混合物および植物油を含む溶媒または分散媒体であり得る。
【００４３】
ラパマイシン化合物を含む特に適切な注射可能な処方物は、国際公開第2004/011000および米国特許公開公報第2004-0167152 A1（これらは本明細書において参考として援用される）に記載の様式と同様の様式で調製することができる。この実施形態において、本発明において有用な注射処方物は、上記に記載の非経口的に受容可能な溶媒と抗酸化物質とを含むラパマイシン組成物の共溶媒濃縮物、およびラパマイシン化合物、非経口的に受容可能な共溶媒、抗酸化物質、希釈溶媒および界面活性剤を含む非経口処方物を提供する。例えば、非経口的に受容可能な溶媒は、非アルコール性溶媒、アルコール性溶媒、またはその混合物を含み得る。適切な非アルコール性溶媒の例としては、ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、またはこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。アルコール性溶媒の例としては、処方物のアルコール性溶媒成分としての１種以上のアルコールが挙げられるが、これらに限定されない。上記処方物の発明において有用な溶媒の例としては、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール300、ポリエチレングリコール400、ポリエチレングリコール600、ポリエチレングリコール1000またはこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、エタノールおよびプロピレングリコールを合わせて、可燃性の低い生成物を生成することができる。これらの後者の２つの共溶媒が特に好ましい。なぜならば、これらの共溶媒については、酸化による分解およびラクトン切断が低い程度でしか起こらないからである。混合物中のエタノールの量が多いと、一般的には化学安定性が良好である。混合物中において30〜100％ v/vのエタノール濃度が所望される。
【００４４】
非経口的に受容可能なアルコール性共溶媒中のラパマイシン化合物の安定性は、その処方物に抗酸化物質を添加することによって向上させることができる。一般的には、本発明において有用な非経口処方物は、共溶媒濃縮物の0.001％〜3％ w/vまたは0.01％〜0.1％ w/vの濃度で抗酸化物質成分を含むが、より低い濃度またはより高い濃度が所望される場合もある。抗酸化物質のうち、d,l-α-トコフェノールが特に好ましく、これは、0.01〜0.1％ w/vの濃度で、0.075％ w/vの共溶媒濃縮物の濃度とともに使用されるのが最も好ましい。
【００４５】
投薬レジメンは、投与の経路に従って異なることが予想される。例えば、経口投与のための投薬量は、静脈内(i.v.)投与についての投薬量の5倍〜10倍であることが多い。１つの実施形態において、ラパマイシン化合物の投薬量は、成人について、約2〜約500 mg/日、5 mg/日〜75 mg/日、10 mg/日〜50 mg/日、15 mg/日〜35 mg/日、または約20 mg/日〜25 mg/日であり得る。しかし、この投薬量は、処置される適応症、患者のサイズ、および当業者に公知である他の因子に依存して、当業者によって上方にも下方にも調整することができる。
【００４６】
本発明で有用な非経口処方物の特定の実施形態において、水溶性注入溶液または血液で希釈する場合のラパマイシン化合物の沈殿は、希釈溶液中に含まれる界面活性剤の使用によって防止される。希釈剤の最も重要な成分は、非経口的に受容可能な界面活性剤である。特に好ましい界面活性剤は、ポリソルベート20またはポリソルベート80である。しかし、当業者は、必要に応じてレシチンと合わせられる胆汁酸の塩（タウロコール酸塩、グリココール酸塩、コール酸塩、デオキシコール酸塩など）の中から他の適切な界面活性剤を容易に選択することができる。あるいは、エトキシ化植物油、例えば、ペグ化ヒマシ油（例えば、Cremophor EL（BASF）の名称で販売されているPEG-35ヒマシ油など）、ビタミンEトコフェロールプロピレングリコールスクシネート(ビタミンE TGPS)、およびポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックコポリマーが、ポリソルベートファミリーの他のメンバー（例えば、ポリソルベート20またはポリソルベート60）と同様に、希釈剤中で界面活性剤として使用され得る。上記希釈剤の他の成分としては、水、エタノール、ポリエチレングリコール300、ポリエチレン400、ポリエチレン600、ポリエチレン1000または１種以上のこれらのポリエチレングリコールを含むブレンド、プロピレングリコールおよび他の非経口的に受容可能な共溶媒または溶液オスモル濃度を調整するための薬剤、例えば、塩化ナトリウム、ラクトース、マンニトールまたは他の非経口的に受容可能な糖類、ポリオールおよび電解質が挙げることができる。界面活性剤は、少なくとも5％ w/v、少なくとも10％ w/vまたは少なくとも5％ w/vの希釈溶液を含むことが予測される。好ましくは、上記界面活性剤は、2〜100％ w/v、5〜80％ w/v、10〜75％ w/vまたは15〜60 ％ w/vの希釈溶液を含む。
【００４７】
本発明において有用な非経口処方物は、単一の溶液として調製することができ、または好ましくは、ラパマイシン化合物、アルコール性溶媒および抗酸化物質を含む共溶媒濃縮物として調製することもでき、これはその後に希釈溶媒および適切な界面活性剤を含む希釈剤と合わせられる。使用する前に、上記共溶媒濃縮物は、希釈溶媒を含む希釈剤および界面活性剤と混合される。ラパマイシン化合物が本発明に従って共溶媒濃縮物として調製される場合、上記濃縮物は、0.05 mg/mL〜、2.5 mg/mL〜、5 mg/mL〜、10 mg/mL〜または25 mg/mL〜最大約50 mg/mLまでの濃度のラパマイシン化合物を含み得る。上記濃縮物は、希釈剤と混合して、１部の希釈剤に対して最大約１部の濃縮物として、1 mg/mL〜、5 mg/mL〜、10 mg/mL〜、20 mg/mL〜最大約25 mg/mLのラパマイシン化合物の濃度を有する非経口の処方物を提供することができる。例えば、非経口処方物中のラパマイシン化合物の濃度は、約2.5〜10 mg/mLであり得る。本発明はまた、共溶媒濃縮物中のラパマイシン化合物の濃度がより低い処方物の使用、および濃縮物の一部が、１部を越える希釈剤と混合されて（例えば、濃縮物：希釈剤の比が約1：1.5、1：2、1：3、1：4、1：5または1：9 v/vなど）、ラパマイシン化合物の検出の最低レベルまで低下した濃度を有するラパマイシン化合物非経口処方物となる処方物の使用も包含する。代表的には、上記抗酸化物質は、処方物のうちの約0.0005〜0.5％ w/vで含まれ得る。例えば、界面活性剤は、処方物のうちの約0.5 ％〜約10％ w/vで含まれる。アルコール性溶媒は、例えば、処方物のうちの約10％〜約90％ w/vで含まれ得る。
【００４８】
本発明において有用な非経口処方物を使用して、直接的な注射か、または静脈内注入のための滅菌性注入液への添加のいずれかによって、投与に適切な製剤を作製することができる。
【００４９】
経皮投与は、身体の表面および身体通路の内壁（上皮組織および粘膜組織が挙げられる）を通過する全ての投与を包含する。このような投与は、本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩を、ローション、泡沫、パッチ、懸濁液、溶液および坐剤（直腸および膣）の形態で使用して行うことができる。経皮投与は、活性化合物と活性化合物に対して不活性であるキャリアとを含む経皮パッチの使用を介して達成することができる。このパッチは、皮膚に対して非毒性であり、皮膚を通して薬剤を血流に送達して全身吸収を可能にする。上記キャリアは、クリームおよび軟膏、ペースト、ゲルおよび閉塞デバイス（occlusive device）などの様々な形態をとることができる。クリームおよび軟膏は、水中油型または油中水型のいずれかの粘性液体または半固形エマルジョンであり得る。活性成分を含む石油または親水性石油（hydrophilic petroleum）の中に分散した吸収性粉末を含むペーストもまた適切であり得る。種々の閉塞デバイス（例えば、活性成分を含む（キャリアを含む、または含まない）リザーバを覆う半透膜または活性成分を含むマトリクス）を使用して、血流に活性成分を放出することができる。他の閉塞デバイスは、文献において公知である。
【００５０】
坐剤処方物は、従来の材料（ココアバター（坐剤の融点を変化させるためのワックスの添加あり、または添加なし）およびグリシンが挙げられる）から作製することができる。水溶性の坐剤ベース（例えば、種々の分子量のポリエチレングリコール）もまた使用することができる。
【００５１】
本発明のラパマイシン化合物は、任意の適切な送達の経路およびビヒクルのために処方することができ、キットの要素の形態に組み立てられる（assemble）場合もある。
【００５２】
従って、本発明のラパマイシン組成物は、抗腫瘍剤として有用であり得、従って、固形腫瘍（肉腫および癌腫が挙げられる）の処置に有用であり得、より具体的には、神経膠星状細胞腫、前立腺癌、乳癌、結腸癌、小細胞肺癌、および卵巣癌に対する処置；および成人T細胞白血病／リンパ腫に対する処置に有用であり得る。上記ラパマイシン化合物含有組成物はまた、腎臓、心臓、肝臓、肺、骨髄、膵臓（島細胞）、角膜、小腸、および皮膚同種移植、および心臓弁異種移植などの移植拒絶反応の処置または防止；対宿主性移植片病の処置または防止；狼瘡、慢性関節リウマチ、真性糖尿病、重症筋無力症および多発性硬化症などの自己免疫疾患、乾癬、皮膚炎、湿疹、脂漏症、炎症性腸疾患、肺炎症（ぜん息、慢性閉塞性肺疾患、気腫、急性呼吸促迫症候群、気管支炎などが挙げられる）および眼のブドウ膜炎などの炎症の疾患；成人T細胞白血病／リンパ腫；真菌感染；再狭窄などの過剰増殖性血管疾患；血管移植アテローム性動脈硬化症；および心臓血管疾患、脳血管疾患、および末梢血管疾患、例えば、冠動脈疾患、脳血管疾患、動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症、非アテローム性動脈硬化症または免疫媒介性血管損傷につながる細胞事象に由来する血管壁損傷の処置または防止；および脳卒中または多発梗塞性痴呆の阻害にも有用である。
【００５３】
以下の実施例は、単なる説明であり、本発明に対する限定する意図はない。
【実施例】
【００５４】
実施例１  −  CCI-779サンプル中に存在する酸化不純物を評価するための一般的手順
CCI-779サンプル中の酸化および加水分解の不純物は、特定の範囲の保持時間にわたって共溶出物質の混合物として定量することができる。使用する方法は、逆相勾配HPLC/UV手順である。クロマトグラフィーの条件は、以下に略述する。
【００５５】
【表１】
2009520818.tif 000004
2009520818.tif 000005
【００５６】
【表２】
2009520818.tif 000006
【００５７】
HPLC/UVに対する代替として、付加生成物のm/zに基づいて１酸素、２酸素、３酸素、１酸素＋水、および水の取り込みの程度を分析することがによってサンプル中のCCI-779を定量した。
【００５８】
【表３】
2009520818.tif 000007
2009520818.tif 000008
【００５９】
実施例２  −  各種レベルの不純物
本実施例においては、３種のラパマイシン組成物（各々が、CCI-779  2.5％、d,l-α-トコフェロール 0.075％、無水クエン酸 0.0025％、無水アルコール 39.5％、およびプロピレングリコール（適量）を、各種レベルの不純物と共に含む））を、約3〜5ヶ月の期間にわたってモニタリングし、種々の温度および湿度での安定性を測定した。これらのバッチは、それぞれ、約0.5％、約1％および約2％の酸化／加水分解の不純物を含んでいた。
【００６０】
上記組成のアリコートをガラスバイアルに分割し、栓をしてシールをし、5°C, 25℃／60％ 相対湿度 (RH)、または40℃／75％ RHで保存した。サンプルを、以下の（i）〜（v）についてモニタリングした：(i)外見および種類（description）、(ii)水分、(iii)強度、全体的な関連化合物（非酸化性）、(iv)酸化／加水分解不純物、ならびに(v) α-トコフェロールの含有量。これらのデータから、最初に約0.5％の不純物を含むサンプルについて、1ヶ月後（40℃）には、全体的な（非酸化的）分解および酸化／加水分解の分解がわずかに増加したことが説明される。3ヶ月後および5ヵ月後（25℃）、処方物は安定であった。すなわち、効力は、全体的に分解したものと同じであった。
【００６１】
約1％の不純物を最初に含むサンプルについて、3ヶ月後、酸化／加水分解の分解生成物は、約1.94％まで増加した。この傾向は、5ヶ月（25℃）まで続き、全体的な非酸化的分解産物および酸化／加水分解の分解生成物は、それぞれ1.65％と2.3％に増加した。
【００６２】
約2％の不純物を最初に含むサンプルについて、全体的な非酸化的分解および酸化／加水分解の分解は、1ヶ月後に（40 °C／75％ RH）それぞれ8％と4.3％まで増加した。3ヶ月後、全体的な非酸化的分解および酸化／加水分解の分解生成物の両方が、25℃／60％RHのサンプルについて、それぞれ3.3％と4.2％に増加した。図３は、1ヶ月と3ヶ月の保存の後に、CCI-779の安定性に対して入力薬物原材料が一因となる最初の酸化／加水分解の分解レベルの効果を説明する。
【００６３】
要約すると、より高い初期濃度の酸化／加水分解不純物は、CCI-779サンプルの安定性に有利に影響することが見出された。実際、最も高い安定性のCCI-779含有サンプルは、ラパマイシン組成物中の酸化不純物の初期濃度が0.5％以下のときに生じた。従って、初期の酸化不純物を減少させると、処方されたCCI-779生成物の保存期限は顕著に延びる。
【００６４】
実施例３  −  α-トコフェロールの各種濃度
ラパマイシン組成物中の酸化不純物の効果をさらに調査するために、ラパマイシン組成物中の各種濃度のα-トコフェロールによって検討を行った。
【００６５】
0.2％、0.5％および1ｄのd,l-α-トコフェロール(Eisai)を含むCCI-779のサンプルを、2 mLフリントガラスバイアルに入れ、13 mm West Teflon Faced 4432/50 ストッパーで栓をした。ラパマイシン組成物に対するα-トコフェロール濃度の上昇の影響を、1ヶ月にわたって40℃でモニタリングした。約5℃または約40℃で、サンプルを真っすぐにして保存した。
【００６６】
40℃で1ヶ月後、全てのサンプルにおいて、α-トコフェロール濃度は顕著に低下したことがデータから説明される。しかし、0.2％と0.5％のα-トコフェロールを含有するサンプルについて、酸化不純物の濃度は、実質的に変化しないままであった。すなわち、酸化不純物の濃度は、上昇しなかった。しかし、他の分解生成物の形成に起因して、サンプルの効力は全体的に失われた。
【００６７】
1%のα-トコフェロールを含有するサンプルについて、存在する酸化不純物は、8.42％まで劇的に上昇した。
【００６８】
要約すると、サンプル中のα-トコフェロールの濃度を0.2％および0.5％に上昇させると、酸化不純物の増加は遅くなるが、酸化不純物のレベルが3％以上である場合は、他のメカニズムを介したCCI-779の分解は阻害されない。先の実施例で示されるように、非酸化不純物の阻害は、薬物物質中の酸化／加水分解の不純物の初期量を制限することによって制御された。
【００６９】
本明細書において列挙される全ての文献は、本明細書において参考として援用される。本発明は、特定の実施形態に言及して記載されているが、本発明の趣旨から逸脱することなく改変がなされ得ることが理解される。このような改変は、添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれることが意図される。
【図面の簡単な説明】
【００７０】
【図１】図１は、例示的なテムシロリムス（CCI-779）サンプル調製物のLC/UVクロマトグラフ（溶媒に対して補正されたもの）である。
【図２】図２は、例示的なテムシロリムス（CCI-779）サンプル調製物のLC/MSクロマトグラフである。特に、酸化／加水分解の分解についてのこのHPLC/MSクロマトグラフは、以下のカラム中時間（time in column）（TIC）の範囲を有する：m/z 1044.7〜1076.7。
【図３】図３は、0.5%、1%または2%の初期の酸化／加水分解の分解物を含む薬物物質で調製されたテムシロリムス（CCI-779）の非経口薬物生成物に関する、全体の非酸化的分解物および酸化／加水分解の分解物の時間に対するプロットである。この図面において、「OD」は、薬物物質中の最初の酸化／加水分解の分解物のパーセント（％）をいう。
【図１】
2009520818.tif 000009
【図２】
2009520818.tif 000010
【図３】
2009520818.tif 000011
【国際調査報告】
2009520818.tif 000012
2009520818.tif 000013
2009520818.tif 000014
2009520818.tif 000015