(57)【要約】生産性に優れ、また複雑な工程と高温高圧を要することがなく、比較的安価に得られるω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法を提供する。α−リノレン酸を含有する飼料を陸封型淡水魚、特にニジマスおよび／または内・海水面養殖鮭鱒類に与える工程、該淡水魚から得た油からω３系列高度不飽和脂肪酸を抽出する工程、を包含するω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。α−リノレン酸を含有する飼料が、亜麻仁油を含有する飼料である。亜麻仁油を含有する飼料が亜麻種子を含有する飼料である。また、亜麻仁油に代えて、又は亜麻仁油と共にシソ油、エゴマ油を含有することもできる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
α−リノレン酸を含有する飼料を陸封型淡水魚に与える工程、該淡水魚から得た油からＥＰＡ、ＤＨＡおよびＤＰＡからなる群から選択される少なくとも一種を抽出する工程、を包含するω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。
【請求項２】
α−リノレン酸を含有する飼料が、亜麻仁油を含有する飼料である請求項１に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。
【請求項３】
前記亜麻仁油を含有する飼料が、亜麻種子を含有する飼料である請求項２に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。
【請求項４】
前記亜麻種子を含有する飼料が、 亜麻種子および／またはその粉砕物、または亜麻種子の圧搾油粕および／またはその粉砕物を配合する飼料である請求項３に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。
【請求項５】
α−リノレン酸を含有する飼料が、シソ油又はエゴマ油を含有する飼料である請求項１に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。
【請求項６】
前記シソ油又はエゴマ油を含有する飼料が、シソ種子および／またはその粉砕物、またはシソ種子の圧搾油粕および／またはその粉砕物、エゴマ種子および／またはその粉砕物、またはエゴマ種子の圧搾油粕および／またはその粉砕物を配合する飼料である請求項５に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。
【請求項７】
前記陸封型淡水魚が、ニジマス又は内・海水面養殖の鮭鱒類である請求項１に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イコサペンタエン酸或いはエイコサペンタエン酸（以下ＥＰＡと称する。）、ドコサペンタエン酸（以下ＤＰＡと称する。）、およびドコサヘキサエン酸（以下ＤＨＡと称する。）からなるω３系列から選択される少なくとも一種を高濃度で含有する鮭鱒類等の陸封型淡水魚を養殖して、養殖淡水魚体内のＥＰＡ（エイコサペンタエン酸）、ＤＰＡ（ドコサペンタエン酸）およびＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）を増量・強化し、ＥＰＡ及びＤＰＡ／又はＤＨＡを養殖淡水魚および／または海面養殖の鮭鱒類から得る方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
水界における魚介類水産物は、決して無尽蔵な資源ではない。海流の流れの移動、水温の上昇、水質の汚濁等、環境条件の変異による他、漁獲量の増大とか漁具・漁法の改良、卵および稚仔魚の生存率、親魚の産卵の多寡等によって資源量は大きく変動し、減少する傾向にある。【０００３】
従って、魚介類は原料食材として利用する上で、陸上農産物に比べ著しく不安定である。そのため、魚介類の養殖が近年になって重要視されている。【０００４】
魚油資源としてもイワシの漁獲量の減少にともなって、イワシ油の産量が減少している。最盛期に年産としてイワシ漁獲量は４００万トン超に達していたものが、現在数万トンを産するほどに減少している。また、ニシンおよびニシン油の産量についても、無尽蔵といわれていたものが、今は昔の物語として伝えられているに過ぎない。【０００５】
それ故に、魚資源を確保していくためにも、必要魚種の養殖が、ハマチ、タイ、マグロに見られるように現在行われ、その実績を挙げている。【０００６】
ところで、魚油の構成脂肪酸は大変複雑であるが、それをメチル基末端ω炭素から最初にみられる二重結合位置によって不飽和脂肪酸を大別すると、ω３系列、ω６系列、ω７系列、ω９系列に分類することができる。（鹿山光編、総合脂質科学、必須脂肪酸、ｐｐ.２６７−２９３、恒星社厚生閣、東京（１９８９）、非特許文献１）
前２者の親酸であるαーリノレン酸（Ｃ１８：３ω３）およびリノール酸（Ｃ１８：２ω６）は魚類でも生合成できないが、それらを不飽和化と２炭素鎖延長することにより、α−リノレン酸からＥＰＡ（Ｃ２０：５ω３）、ＤＰＡ（Ｃ２２：５ω３）を経てＤＨＡ（Ｃ２２：６ω３）へ、またリノール酸からγ−リノレン酸（Ｃ１８：３ω６）、ジホモ−γ−リノレン酸（Ｃ２０：３ω６）を経てアラキドン酸（Ｃ２０：４ω６）へ、魚種によって可否、強弱の違いはあっても変換することが可能である。以上のこれら多価不飽和脂肪酸は必須脂肪酸である。【０００７】
後２者は、魚類によっても容易に、de novo合成されるパルミチン酸の不飽和化によってパルミトオレイン酸（Ｃ１６：１ω７）とその系列脂肪酸へ、またパルミチン酸が２炭素鎖延長されたステアリン酸の不飽和化によってオレイン酸（Ｃ１８：１ω９）とその系列脂肪酸へ変換することができるので、これらは非必須脂肪酸である。【０００８】
以上の魚油脂肪酸の中で魚自身にとって、さらにヒトの栄養にとっても重要なものは必須脂肪酸であるω３系列とω６系列の多価不飽和脂肪酸であり、なかんずく、ω３系列の高度不飽和脂肪酸であるＥＰＡ、ＤＰＡおよびＤＨＡである。【０００９】
従来、微生物によって高度不飽和脂肪酸を生合成する方法が提案されている。例えば、特開平６−１０５６５９号公報（特許文献１）には、藻類を利用してＤＨＡを含有するオイルを抽出する方法が提案されている。【００１０】
しかし、このような培養方法では、大量に培養する困難さと、大量培養ができたとしても、概して微細藻類の脂質含有量は少なく、量的生産に問題がある。【００１１】
また、工業化学的にＥＰＡとかＤＨＡを有機合成する方法も提案されている。
例えば、特開平８−１００１９１号公報（特許文献２）には、脂肪酸混合物からＥＰＡおよび／またはＤＨＡを含有する混合脂肪酸を得る方法が提案されている。【００１２】
しかし、この方法は、複雑な工程と高温高圧を要し、価格面でも困難である。【００１３】
また、特許第２５１５６８０号公報（特許文献３）には、亜麻種子および／またはその粉砕物、または亜麻種子の圧搾油粕および／またはその粉砕物を配合する飼料が記載されている。【００１４】
しかし、この特許文献３には、ＥＰＡおよびＤＰＡ／またはＤＨＡの製造方法が開示もされていない。
【非特許文献１】鹿山光編、総合脂質科学、必須脂肪酸、ｐｐ．２６７−２９３、恒星社厚生社閣、東京（１９８９）
【特許文献１】特開平６−１０５６５９号公報
【特許文献２】特開平８−１００１９１号公報
【特許文献３】特許第２５１５６８０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明は、上記問題点を解決しようとするものであり、養殖淡水魚体内のＥＰＡ、ＤＰＡやＤＨＡを増量、強化して、鮭鱒類等の陸封型淡水魚からこれらＥＰＡ及びＤＰＡ／又はＤＨＡを採取する方法を提供することを目的とする。【００１６】
また、本発明は、生産性に優れ、また複雑な工程と高温高圧を要することがなく、比較的安価に得られるω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
上記目的を達成するために、本発明は、例えば、以下の手段を提供する：
項目１．α−リノレン酸を含有する飼料を鮭鱒類等の陸封型淡水魚に与える工程、該淡水魚から得た油からＥＰＡ、ＤＨＡおよびＤＰＡの少なくとも一種を抽出する工程、を包含するω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。【００１８】
項目２．α−リノレン酸を含有する飼料が、亜麻仁油を含有する飼料である項目１に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。【００１９】
項目３．前記亜麻仁油を含有する飼料が、亜麻種子を含有する飼料である項目２に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。【００２０】
項目４．前記亜麻仁油を含有する飼料が、亜麻種子および／またはその粉砕物、または亜麻種子の圧搾油粕および／またはその粉砕物を配合する飼料である項目２に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。【００２１】
項目５．α−リノレン酸を含有する飼料が、シソ油又はエゴマ油を含有する飼料である項目１に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。【００２２】
項目６．前記シソ油又はエゴマ油を含有する飼料が、シソ種子および／またはその粉砕物、またはシソ種子の圧搾油粕および／またはその粉砕物、エゴマ種子および／またはその粉砕物、またはエゴマ種子の圧搾油粕および／またはその粉砕物を配合する飼料である項目５に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。【００２３】
項目７．前記陸封型淡水魚が、ニジマス、内・海水面養殖の鮭鱒類である項目１に記載のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。
【発明の効果】
【００２４】
魚油中には、ＥＰＡ、ＤＰＡ、およびＤＨＡ等のω３系列高度不飽和脂肪酸が含有されるが、代謝的にはα−リノレン酸から誘導されるものである。【００２５】
従って、本発明者らは、ω３高度不飽和脂肪酸を生物によって生合成する方法として、適当する魚種にα−リノレン酸を飼料として投与し、ＥＰＡ，ＤＰＡおよびＤＨＡを生合成する方法を検討した。【００２６】
本発明は、ニジマスを用いてのα−リノレン酸からＥＰＡ、ＤＰＡ、およびＤＨＡへの変換能を利用した、ω３高度不飽和脂肪酸に富んだニジマス（スーパーω３リッチトラウト）の育成とそのニジマス油の製造に関するもので、本発明は、その他の魚類によるω３高度不飽和脂肪酸の製造に関するものに及ぶものである。【００２７】
本発明のω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法は、α−リノレン酸を含有する飼料を陸封型淡水魚に与え、該淡水魚から得た油からＥＰＡおよびＤＰＡ／またはＤＨＡを抽出するので、生産性に優れ、また複雑な工程と高温高圧を要することがなく、比較的安価にＥＰＡおよびＤＰＡ／またはＤＨＡを製造することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】ニジマス肝臓におけるω３系多価不飽和脂肪酸の経日的変化を示すグラフ。
【図２】ニジマス可食部におけるω３系多価不飽和脂肪酸の経日的変化を示すグラフ。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２９】
以下、本発明を詳細に説明する。【００３０】
本発明で使用する飼料は、α−リノレン酸を含有するものであり、例えば、亜麻仁油を含有する飼料を使用することができる。具体的には、亜麻種子を含有する飼料であり、例えば、亜麻種子および／またはその粉砕物、または亜麻種子の圧搾油粕および／またはその粉砕物を配合する飼料を使用することができる。【００３１】
また亜麻仁油の他、シソ油とかエゴマ油を含有する飼料も使用することができる。【００３２】
具体的には、シソ種子および／またはその粉砕物、またはシソ種子の圧搾油粕および／またはその粉砕物、エゴマ種子および／またはその粉砕物、またはエゴマ種子の圧搾油粕および／またはその粉砕物を配合する飼料である。【００３３】
亜麻種子、シソ種子、エゴマ種子は、そのままのもの、脱皮処理したもの、１００〜２００℃で加熱、いわゆる焙煎処理したもの等いずれの形態のものでも使用できる。【００３４】
飼料中のこれら油（例えば、亜麻仁油）の配合量は通常１〜６０重量％、好ましくは１０〜３０重量％であり、他の成分としては、公知の配合飼料の魚粉、脱脂大豆、小麦粉、ビール酵母等の成分あるいは油脂成分、蛋白質成分を使用することができる。【００３５】
本発明において、α−リノレン酸としての添加量は、飼料中に１〜３０重量％が好ましく、さらに好ましくは５〜１５重量％である。【００３６】
添加量が上記範囲未満の場合には、ＥＰＡ、ＤＰＡ及び／又はＤＨＡの増強効果が得られにくく、上記範囲を超える場合には、生成物によるフィードバック制御が働き、また養殖淡水魚の索餌活動に減退傾向が生じる傾向がみられる。【００３７】
上記亜麻種子（およびシソ種子、エゴマ種子）の粉砕物を配合することもできる。その粉砕物の粒子サイズは、２０メッシュの篩を１００％で通過し、かつ１００メッシュの篩を５０％以上で通過するものになるよう粉砕するのが好ましい。なお、サイズの小さい魚種あるいは稚仔魚を対象とする飼料を製造する場合には、粉砕物は５０メッシュの篩を１００％で通過する粒度にしておくことが望ましい。粉砕物を得るためには、高剪断力で粉砕する方式、例えば高速回転する刃を有するミキサー、ブレンダーあるいはサイレントカッターのような粉砕機を用いればよい。【００３８】
また、亜麻種子の圧搾油粕を原料成分とすることもできる。圧搾油粕はそのままで、もしくはそれを粉砕して、あるいは両者を併用して飼料に配合できる。【００３９】
亜麻種子の圧搾油粕は、亜麻種子をそのまま、あるいは亜麻種子を予熱後、粗砕、圧扁し、さらに必要に応じて１００〜１５０℃に加熱した後、通常の圧搾機を用いて圧搾し、油分を採取した残渣として得られる。【００４０】
亜麻種子およびその加工物においては、油脂成分が種子の組織中に内包された状態で存在するため、その酸化劣化が避けられているものと考えられる。【００４１】
シソ種子およびエゴマ種子も、上記の亜麻種子と同様に処理したものを使用することができる。【００４２】
次に、本発明に係わる亜麻種子、シソ種子、エゴマ種子およびその加工物を用いて陸封型淡水魚用飼料を製造する方法を説明する。【００４３】
従来の配合飼料成分である魚粉、魚油、脱脂大豆、大豆粉、ビール酵母、小麦粉、澱粉等の一部または全部を、亜麻種子および／またはその粉砕物、あるいは亜麻種子の圧搾油粕および／またはその粉砕物で置き換えることが可能である。通常は前述のように、亜麻種子および／またはその粉砕物の場合には１〜８０％（重量％、以下同じ）、好ましくは２０〜６０％、また圧搾油粕および／またはその粉砕物の場合には１〜８０％、好ましくは３０〜７０％を配合し、残量分はいずれも従来の他の飼料成分を配合する。【００４４】
なお、亜麻種子に代えて又は亜麻種子と共に、シソ種子、エゴマ種子も上記と同様に配合することができる。【００４５】
以上の原料成分を常法により混合し、必要に応じて粉末状、ペレット状、モイスト状等に成形して飼料を製造することができる。飼料は、従来の淡水魚用飼料と同様の方法で使用できる。【００４６】
なお、飼料中に、酸化、腐敗を防ぎ保存性を上げるための抗酸化剤、抗菌剤の添加、栄養価を高めるためのビタミン、ミネラルを添加しても良い。【００４７】
なお、本発明でいう淡水魚とは、ニジマス、ヤマメ、ヒメマス等の淡水魚、および／またはギンザケのように淡水養殖の対象となるもの、および／または内・海水面で養殖する鮭鱒類を指し、とりわけ本発明の飼料はニジマスに有用である。
【実施例】
【００４８】
以下、実施例により本発明を具体的に示すが、本発明はこれら実施例により何ら限定されるものではない。以下の実施例において、特に明記しないかぎり「％」は重量％である。
（実施例１）
ニジマス用ペレット（７Ｐ）に亜麻仁油を２０％含有させて配合飼料を得た。なお、亜麻仁油はα−リノレン酸を５３％含有するものである。亜麻仁油は、亜麻仁油フラオー（キャナ株式会社）を用いた。【００４９】
この飼料を、ニジマス養殖場の７０匹のニジマスに、４週間毎日朝に１回ずつ任意に投与した。【００５０】
１、３、７、１４、２８日間飼育した後に、ニジマスから常套法に基づいて魚油を採取し、魚油の脂肪酸組成をガスクロマト分析した。【００５１】
すなわち、供試ニジマスの体長、体重を先ず測定し、魚体を解剖し、肝臓、その他内臓、背肉、腹肉、可食部（背肉と腹肉を等量混和）それぞれから脂質を抽出し、混合脂肪酸のメチルエステルをガスクロマト分析した。【００５２】
この結果を図１、図２および表１、表２に示す。【００５３】
【表１】
2009038029.tif 000002
【００５４】
【表２】
2009038029.tif 000003
図１には、肝臓におけるω３系多価不飽和脂肪酸の経日的変化を示した。また図２には、可食部におけるω３系多価不飽和脂肪酸の経日的変化を示した。【００５５】
１、３、７、１４、２８日後のＥＰＡ、ＤＨＡおよびＤＰＡのそれぞれの含有量を百分率で表した。【００５６】
これらの結果から以下のことがわかる。【００５７】
図１の肝臓においては、亜麻仁油として添加されたα−リノレン酸の増加は、１日、３日とゆるやかに増加して、７日、１４日になると１０％を超え、２８日目には実に３１．６６％に達した。【００５８】
ＥＰＡの増加は、７日目で当初の６倍強の５．５１％を含有し、その後は減少して２８日目には１．７８％にまでフィードバック制御によって低下することが見られた。【００５９】
ＤＨＡについては７日目に最高に到達し、イニシャルの１０倍強の２６．８１％に達した。その後はＥＰＡと同じくα−リノレン酸の増加と反比例的にＥＰＡと同じくフィードバック制御によって７．１０％まで減少することをみた。【００６０】
図２の可食部における経日的変化は、イニシャルで４．４６％であったＤＨＡが３日でその４倍強に増加し、７日で更に増えて４．７倍に達した。【００６１】
表１はω３系とω６系の多価不飽和脂肪酸をそれぞれ加算してΣω３とΣω６系列として表示したものである。【００６２】
さらに両者の比（Σω３／Σω６）を求めてみると、肝臓では７日目で４．１１の最高値に、また可食部では3日目で２．６８、７日目で２．４５と最大値が見られた。【００６３】
いずれにしても、ニジマスにおいてはω６系の多価不飽和脂肪酸よりも、ω３系の多価不飽和脂肪酸が凌駕していた。従って、ニジマスとりわけ、亜麻仁油を投与されたものが、ω３系多価不飽和脂肪酸の給源として、有用な魚として評価される。【００６４】
すなわち、ＥＰＡ、ＤＨＡおよびＤＰＡの含有量は、肝臓で７日目に５．５１％、１．４７％、２６．８１％、可食部で７日目に３．５９％、１．３４％、１９．５３％であった。【００６５】
以上の結果から、α−リノレン酸を含有する亜麻仁油を飼料として使用することにより、従来の飼料と比較して著しくＥＰＡ、ＤＰＡおよびＤＨＡを増量できることが明らかになった。
（実施例２）
ニジマス用ペレット（７Ｐ）にシソ種子の粉砕物を３０％含有させて配合飼料を得た。【００６６】
上記配合飼料を用いたこと以外は、実施例１と同様にニジマスに投与し、ニジマスから魚油を採取し、魚油の脂肪酸組成をガスクロマト分析した。【００６７】
その結果、ニジマスの肝臓、可食部でのＥＰＡ、ＤＨＡおよびＤＰＡのそれぞれの含有量は、亜麻仁油を使用した実施例１に比べて、約７０％であった。【００６８】
以上の結果から、α−リノレン酸を含有するシソ種子の粉砕物を飼料として使用することにより、従来の飼料と比較して著しくＥＰＡ、ＤＰＡおよびＤＨＡを増量できることが明らかになった。
（実施例３）
ニジマス用ペレット（７Ｐ）にシソ油を１０％含有させて配合飼料を得た。【００６９】
上記配合飼料を用いたこと以外は、実施例１と同様にニジマスに投与し、ニジマスから魚油を採取し、魚油の脂肪酸組成をガスクロマト分析した。【００７０】
その結果、ニジマスの肝臓、可食部でのＥＰＡ、ＤＨＡおよびＤＰＡのそれぞれの含有量は、亜麻仁油を使用した実施例１に比べて、約８０％であった。【００７１】
以上の結果から、α−リノレン酸を含有するシソ油を飼料として使用することにより、従来の飼料と比較して著しくＥＰＡ、ＤＰＡおよびＤＨＡを増量できることが明らかになった。
（実施例４）
ニジマス用ペレット（７Ｐ）にエゴマ種子の粉砕物を４０％含有させて配合飼料を得た。【００７２】
上記配合飼料を用いたこと以外は、実施例１と同様にニジマスに投与し、ニジマスから魚油を採取し、魚油の脂肪酸組成をガスクロマト分析した。【００７３】
その結果、ニジマスの肝臓、可食部でのＥＰＡ、ＤＨＡおよびＤＰＡのそれぞれの含有量は、亜麻仁油を使用した実施例１に比べて、約６０％であった。【００７４】
以上の結果から、α−リノレン酸を含有するエゴマ種子の粉砕物を飼料として使用することにより、従来の飼料と比較して著しくＥＰＡ、ＤＰＡおよびＤＨＡを増量できることが明らかになった。
（実施例５）
ニジマス用ペレット（７Ｐ）に亜麻種子の粉砕物を４０％含有させて配合飼料を得た。【００７５】
上記配合飼料を用いたこと以外は、実施例１と同様にニジマスに投与し、ニジマスから魚油を採取し、魚油の脂肪酸組成をガスクロマト分析した。【００７６】
その結果、ニジマスの肝臓、可食部でのＥＰＡ、ＤＨＡおよびＤＰＡのそれぞれの含有量は、亜麻仁油を使用した実施例１に比べて、約９０％であった。【００７７】
以上の結果から、α−リノレン酸を含有する亜麻種子の粉砕物を飼料として使用することにより、従来の飼料と比較して著しくＥＰＡ、ＤＰＡおよびＤＨＡを増量できることが明らかになった。【００７８】
このように、本発明の好ましい実施形態を用いて本発明を例示してきたが、本発明は、この実施形態に限定して解釈されるべきものではない。本発明は、特許請求の範囲によってのみその範囲が解釈されるべきであることが理解される。当業者は、本発明の具体的な好ましい実施形態の記載から、本発明の記載および技術常識に基づいて等価な範囲を実施することができることが理解される。本明細書において引用した特許出願は、その内容自体が具体的に本明細書に記載されているのと同様にその内容が本明細書に対する参考として援用されるべきであることが理解される。
【図１】
2009038029.tif 000004
【図２】
2009038029.tif 000005
【手続補正書】
【提出日】平成21年7月16日(2009.7.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１】
α−リノレン酸を含有する飼料を陸封型淡水魚に与えて１−１４日間飼育する工程、
該淡水魚を飼育する工程の後、該淡水魚から魚油を採取する工程、
該淡水魚から得た油からＥＰＡ、ＤＨＡおよびＤＰＡからなる群から選択される少なくとも一種を抽出する工程、を包含するω３系列高度不飽和脂肪酸の製造方法。
【国際調査報告】
2009038029.tif 000006
2009038029.tif 000007
2009038029.tif 000008
2009038029.tif 000009