(57)【要約】  本発明は、ポリソルベート８０と、無水ドセタキセル（Ｉ）またはその３水和物と、分解阻害剤としてのｐＫａ２．５〜４．５の有機酸と、を含有する医薬組成物に関する。  前記医薬組成物は、７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）の形成を阻害するだけでなく、１５〜３０℃±１℃の室温における安定性が著しく向上されたものである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ドセタキセルと、ポリソルベート８０と、前記ドセタキセルの分解阻害剤と、を含んで、１５〜３０℃±１℃の温度で保存されたときに３０ヶ月以上滅菌状態を維持する、長期保存性に優れた安定した注射用濃縮医薬組成物であって、
前記分解阻害剤が、クエン酸、酒石酸、アスコルビン酸、および、それらの酸の混合物からなる群から選ばれ、かつ、前記ドセタキセルのエピマー化反応、および、７−エピ−ドセタキセルの形成を阻害するに有効な量で含有されていることを特徴とする注射用濃縮医薬組成物。
【請求項２】
前記ドセタキセルの濃度が、約３６〜約４４ｍｇ／ｍＬであることを特徴とする請求項１に記載の注射用濃縮医薬組成物。
【請求項３】
前記組成物が、ポリソルベート８０を約９６８．４〜約１３４５ｍｇ含有することを特徴とする請求項１に記載の注射用濃縮医薬組成物。
【請求項４】
前記ドセタキセルの分解阻害剤が、クエン酸であることを特徴とする請求項１に記載の注射用濃縮医薬組成物。
【請求項５】
前記組成物が、前記クエン酸を約１．９３〜約５．５９ｍｇ含有することを特徴とする請求項４に記載の注射用濃縮医薬組成物。
【請求項６】
前記ドセタキセルの分解阻害剤が、酒石酸であることを特徴とする請求項１に記載の注射用濃縮医薬組成物。
【請求項７】
前記組成物が、前記酒石酸を約１．９３〜約５．５９ｍｇ含有することを特徴とする請求項６に記載の注射用濃縮医薬組成物。
【請求項８】
前記ドセタキセルの分解阻害剤が、アスコルビン酸であることを特徴とする請求項１に記載の注射用濃縮医薬組成物。
【請求項９】
前記組成物が、前記アスコルビン酸を約１．９３〜約５．５９ｍｇ含有することを特徴とする請求項８に記載の注射用濃縮医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１に記載の注射用濃縮医薬組成物の製造方法であって、前記ドセタキセルの分解阻害剤を、前記ドセタキセル、および、前記ポリソルベート８０に添加することを特徴とする注射用濃縮医薬組成物の製造方法。
【請求項１１】
請求項１に記載の注射用濃縮医薬組成物の製造方法であって、前記ドセタセル、および、前記ポリソルベート８０を、前記ドセタキセルの分解阻害剤に添加することを特徴とする注射用濃縮医薬組成物の製造方法。
【請求項１２】
ドセタキセルを含有する長期保存性に優れた安定した注射用濃縮医薬組成物中に７−エピ−ドセタキセルの形成を防止するための方法であって、
ドセタキセルを提供し；
ポリソルベート８０を提供し；
クエン酸、酒石酸、アスコルビン酸、および、それらの酸の混合物からなる群から選ばれるドセタキセルの分解阻害剤を、前記ドセタキセルと前記ポリソルベート８０とのエピマー化反応による分解を阻害するに有効な量だけ提供し；そして、
前記ポリソルベート８０を酸性化するに十分な量の前記分解阻害剤と、前記ポリオソルベート８０と、を混合させ、前記ドセタキセルと前記ポリソルベート８０とのエピマー化反応による分解を防止する
ことを特徴とする方法。
【請求項１３】
前記ドセタキセルの濃度が、約３３〜約４４ｍｇ／ｍＬであることを特徴とする請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ポリソルベート８０の量が、約９６８．４〜約１３４５ｍｇであることを特徴とする請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記ドセタキセルの分解阻害剤の量が、約１．９３〜約５．５９ｍｇであることを特徴とする請求項１２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬組成物、および、そのような医薬組成物の製造方法に関する。ここにおいては、無水ドセタキセル(化Ｉ、anhydrous docetaxel）［化学名として、4-acetoxy-2-α- benzoyloxy-5β-20-epoxy-l, 7-β-10-β-trihidroxy-9-oxo-tax-ll-en-13α-il (2R,3S) 3-tert-butoxycarbonylamino-2-hydroxy-3-phenylpropionate ester］、または、その３水和物(doxetasel trihydrate)を含む滅菌状態の安定した溶液を製造するために、賦形剤（excipient）と共に分解阻害剤を使用することを特徴とする。そのようにして得られた溶液は、主たる分解産物である７−エピ−ドセタキセル（化ＩＩ）［化学名として、4-acetoxy-2-α- benzoyloxy-5β-20-epoxy-l, 7-α-10-β-trihidroxy-9-oxo-tax-ll-en-13α-il (2R,3S) 3-tert-butoxycarbonylamino-2-hydroxy-3-phenylpropionate ester］の濃度を減少させると共に、優れた安定性を示す。
【０００２】
【化Ｉ】
2009524700.tif 000002
【０００３】
【化ＩＩ】
2009524700.tif 000003
【０００４】
本発明の第１の具体例は、１５〜３０℃±１℃の温度で３０ヶ月以上置かれた場合にも高度に安定した医薬組成物を製造することに関する。
【０００５】
本発明の第２の具体例は、ドセタキセル（Ｉ）、または、その３水和物を含む最終産物（最終製品）内に存在する主たる分解産物である７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）の濃度が非常に減少される事実に基づく。
【０００６】
７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）の形成は著しく減少する。本発明によって得られた組成物（formulation）中に存在する前記化合物の量は、従来技術に比べて１〜５％程度に減少されている。このことは、分解阻害剤（degradation inhibitor）を添加することによって達成される。より好ましくは、分解阻害剤として、２．５〜４．５のｐＫａを有する有機酸、および／または、抗酸化剤を用いる。
【０００７】
本発明にかかる溶液は、有効成分である化合物（Ｉ）、または、その３水和物を生体適合性溶媒（biocompatible vehicle）、好ましくは、分解阻害剤で処理したポリソルベート８０（polysorbate 80）の中に溶解させ、その後、０．２２μｍ以下の空隙率（porosity）を有する膜（membrane）を用いてろ過させ、その後、適当な容器などに充填させる。
【０００８】
本発明の別の具体例として、室温（ここでは、１５〜３０℃±１℃として定義されている。）で高度に安定した滅菌溶液が提供される。このような溶液は、有効成分の分解、および、７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）の形成を妨げる１つ以上の化学物質を添加することにより得ることができる。
【背景技術】
【０００９】
有効成分である無水ドセタキセル（Ｉ）、および、その３水和物は、化学半合成により合成することができ、そして、抗がん剤、および、抗白血病剤としての用途を有するタキサン（taxane）誘導体である。前述の化合物は様々ながんや新生物形成（neoplasia）などにおいてのその活性または効果が明らかにされている。
【００１０】
ＵＳ特許第５，５０４，１０２号（譲受人：Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ社、出願日：１９９６年４月２日）には、酸、特に、ＨＣｌまたはＨＮＯ3のような鉱酸（mineral acid）を添加するか、または、Ｃｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（登録商標）を酸化アルミニウム層と接触させることによって、アルカリ度の低いポリエトキシ化されたヒマシ油（castor oil）を製造する方法、並びに、前記媒質中に抗−新生物形成剤の溶液を製造する方法が記載されている。本発明においては、ドセタキセル（Ｉ）、または，その
３水和物についての場合、前記鉱酸の使用が有効でなく、また、望まれない分解産物が形成されるということに着目した。
【００１１】
ＵＳ特許第５，６９８，５８２号（譲受人：Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｅｃ−Ｒｏｒｅｒ社、出願日：１９９７年１２月１７日）には、界面活性剤中にタクサン誘導体を含有する組成物の製造方法、および、かん流剤（perfusion）の用途について記載されている。この特許は、酸を用いることについて一切考慮していない。かかるかん流剤を製造する前に得られる溶液は、本発明に記載した範囲においては、長期保存を可能とする室温安定性を欠いている。
【００１２】
ＦＲ  第９４  ０８４７０号（出願人：Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ  Ｓ．Ａ．社）には、炭素数１〜３の脂肪族アルコールと、水との混合物中に再結晶化し、予め定められた温度、圧力、および、湿度の条件下において、前記再結晶化から得られた生成物を乾燥させることによって、化合物（Ｉ）の３水和物を製造する方法が記載されている。しかしながら、この特許文献には、無水ドセタキセル（Ｉ）、または、その３水化物を含む医薬組成物に対し有機酸を添加することによって前記医薬組成物の安定性をさらに高めることについては何ら記載されておらず、示唆もされていない。
【００１３】
特許出願第ＰＣＴ／ＢＲ／２００４／０００２４２号には、酸化化したポリソルベート８０中に有効成分（Ｉ）を含有する医薬組成物、かかる医薬組成物の製造方法、および、かかる医薬組成物を用いて慢性病（infirmity）を治療することなどについて記載されている。
【００１４】
しかしながら、前記文献には、もっぱら冷蔵の条件下において安定した挙動を示す熱不安定性の水和物を形成する化合物を得ることについて記載されているだけである。したがって、従来技術においては、保存温度、特に、室温において優れた長期安定性を有する、有効成分（Ｉ）を含む、組成物については全く知られていない。さらに、主たる分解産物である（ＩＩ）の形成が著しく減少した医薬組成物についても全く知られていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
したがって、本発明は、有効成分であるタキサン化合物、特に、化（Ｉ）に表した化合物の保存安定性を高めた医薬組成物、および、その製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明にかかる製造方法および生成物は、従来技術において記載された製造方法および生成物に比べて、室温において優れた安定性を示すこと、並びに、有効成分である無水ドセタキセル（Ｉ）、または、その３水和物の、そのエピマー（ＩＩ)への分解が減少されることから、有利である。生成された医薬組成物は、従来に知られていた組成物に比べて高度の純度を有する医薬組成物である。
【発明の効果】
【００１７】
このような医薬組成物を用いることで、医薬組成物の長期保存性を増加させ、それにより、望まれない分解生産物の形成を防止すると共に前記有効成分の安定性を高めることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
タキサンの化学反応性、および、構造−活性相関関係は以前２５年間も研究されてきた。それらの関する情報については、例えば、次のような文献を参考することができる：Kingston, D. G. I. Trends Biotechnol . 1994, 12, 222.; Kingston, D. G. I. Recent Advances in the Chemistry and Structure-Activity Relationships of Paclitaxel. In Taxane Anticancer Agents: Basic Science and Current Status, Goerg, G. I.; Chen, T. T.; Ojima, I.; Vyas, D. M., Eds.; ACS Symposium Series 583, American Chemical Society: Washington, DC, 1995, pp. 203. and Gueritte-Vogelin, F.; Guenard, D; Dubois, J.; Marder, R.; Thoret, S.; and Potier, P. Chemistry and Biological Activity of Anti-tumor Taxoids, Advances in Natural Sciences, Vol. 2, No. 2, 2001, pp. 81-85。これらの文献にタキサンの化学的変換、および、タキサンの構造活性相関関係に関する情報が載っているという点から我々は前記文献に記載した内容を参考までにこの明細書に引用する。
【００１９】
ドセタキセル（Ｉ）、および、その３水和物、並びに、その他のタキサン類が様々な条件下において分解を受けやすいことや、そのような変化（例えば、温度、酸性媒質、塩基性媒質、酸化剤、還元剤、光条件など）に伴って、時には前記化合物の活性および／または毒性が著しく減少してしまうということに注目すべきである。当該技術分野において既に知られている経路について次に示す。（この化ＩＩＩにおいて、ドセタキセルの骨格における数字は主な化学変化が起こる場所を示す。）
【００２０】
【化ＩＩＩ】
2009524700.tif 000004
【００２１】
ドセタキセルの分解については次のように説明することができる：
−酸性媒質、または、求電子試薬の存在下において、ＤリングおよびＢリングの開環反応、および／または、再配置（再配列）が見られるが、これは用いられた条件による。
−塩基性媒質においては、２，４、および／または、１３位置のエステル基の切断（分裂）が見られる。
−主な分解経路の１つとして、アルカリ性、中性、または、強酸性媒質の中で、７位置のヒドロキシル基のエピマー化反応が起こり、その結果、レトロアルドール反応（retro-aldol reaction）を通じて７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）が形成される。
【００２２】
ドセタキセルが分解されると、完全に活性を失った生成物、または、活性が減少された生成物が得られる。このように得られた化合物は前記有効成分（Ｉ）とは異なる薬理学的、および、毒性学的プロファイルを示す。
【００２３】
前記医薬組成物がヒトに用いられる目的で製造されるという事実を考慮すると、前述した変換は、深刻な結果をもたらすに間違いない。
【００２４】
ここで、我々は、一例として、１つの論文［Drug Metabolism and Disposition, Vol. 30, No. 11, pp. 1149-1152, 2002］を引用する。前記論文はＢｏｒｎｉｑｕｅ  ＆  Ｌｅｍａｒｉｅにより書かれたものである。この研究は、ドセタキセル（Ｉ）、および、そのエピマーである７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）と、組み換えヒトシトクロムＰ４５０  １Ｂ１（ｈＣＹＰ１Ｂ１）との相互作用について行なわれたものである。
【００２５】
前記シトクロムは様々なヒト腫瘍において発見され、今は、ドセタキセル（Ｉ）を含む化学療法剤に対する腫瘍細胞の耐性の進行（development）を担うものと考えられている。
【００２６】
その著者は、測定手段として７−エトキシレソルフィン・Ｏ−デスエチラーゼ（7-ethyoxyresorufin O-desethylase）（ＥＲＯＤ活性を持つ）を用いて、ドセタキセルがインビトロにおいてｈＣＹＰ１Ｂ１により代謝されないということを見出した。しかしながら、１０μＭの濃度において、７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）はｈＣＹＰ１Ｂ１の活性を７倍以上増加させ、それにより、化合物（ＩＩ）が前記酵素の有効な誘導物質であることが確認された。
【００２７】
この実験から、この発明の著者が、前記化合物（Ｉ)を含む医薬組成物に含まれた７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）が、有効成分であるドセタキセル（Ｉ）、および／または、その３水和物に対する腫瘍細胞の耐性の獲得、または、進行に深く関与する因子であるということが分かる。かかる研究結果から分かるように、ドセタキセル（Ｉ）、および／または、その３水和物を含む医薬組成物に含まれた７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）を除去するか、または、その量を減らすことが好ましい。
【００２８】
従来技術は、有効成分であるドセタキセル３水和物の再結晶化を行なう際に、アスコルビン酸を加えることについて言及しているが、本発明の特徴といえるところは、無水ドセタキセル（Ｉ）、または、その３水和物を含有する医薬組成物を製造する際に、１つ以上の弱有機酸、および／または、抗酸化剤を添加することが有利であるという知見に基づく。前記添加により、前述した不利な効果をもたらす７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）へのエピマー化反応が妨げられる。
【００２９】
実時間安定性テスト（real time stability testing）により、分解阻害剤の添加が、室温（１５〜３０℃±１℃）にて保存される最終製品の保存期間を延ばすと共に、化合物（Ｉ）および／またはその３水和物の７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）へのエピマー化反応を防止するということが分かった。この結果から、医薬組成物の長期保存性を向上させ、それにより、望まれない分解生産物の形成を防止すると共に、前記有効成分の安定性を高めることができる、といった、本発明の有利な点が確認された。表１および２はこれらの研究の結果を示す。
【００３０】
使用可能な分解阻害剤として、例えば、クエン酸、酒石酸、および、アスコルビン酸、または、ｐＫａ２．５〜４．５のその他の有機酸などがある。
【００３１】
以下に示す表１は、様々な有機酸を添加したときの、ポリソルベート８０中の無水ドセタキセル（Ｉ）の溶液の安定性と、時間の関数として形成された７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）の各々の濃度とに対して比較研究を行なった結果を示す。また、表２は、様々な有機酸を添加したときの、ポリソルベート８０中のドセタキセル３水和物の溶液の安定性と、時間の関数として形成された７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）の各々の濃度とに対して比較研究を行なった結果を示す。
【００３２】
【表１】
2009524700.tif 000005
【００３３】
【表２】
2009524700.tif 000006
【００３４】
考察１：ＤＣＴＸ＝無水ドセタキセル；ＤＣＴＸ−３Ｈ2Ｏ＝ドセタキセル３水和物；７−エピ＝７−エピ−ドセタキセル
考察２：全ての溶液は、３．５〜４．５の酸を用いてポリソルベートのｐＨを予め調整することによって用意した。その後、無水ドセタキセル（Ｉ）、または、その３水和物を溶解させ、無水塩基（anhydrous base）上において最終濃度４０ｍｇ／ｍＬを得た。
考察３：サンプルをボロシケイトグラス（borosilicate glass）製の透明なバイアルに入れて、３０℃±１℃にて保存した。
考察４：（Ｉ）および（ＩＩ）の分析は、以下の分析条件下においてＨＰＬＣにより測定された：カラムＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂ（登録商標）ＲＰ  １８４．６ｘ２５０ｍｍ、粒子の大きさ５μｍ；移動相、溶液Ａ（アセトニトリル：Ｈ2Ｏ＝２：３ｖ／ｖ）、溶液Ｂ（アセトニトリル１００％）を用いた勾配溶出（gradient elution）。前記勾配は１００％溶液で始め、７０分間１０％溶液Ａおよび９０％溶液Ｂとなるまでに行なわれた。流速（流量）１．５ｍＬ／分；検出２２７ｎｍ；ループ２０μＬ；データは修正なしに面積％として表す。
考察５：医薬組成物の安定性を定義するために採用された許容可能な限界値は“ラベル上に示された量（４０ｍｇ／ｍＬ）の少なくとも９０％を含むもの”であった。
【００３５】
表１および２に示したデータを検討すると、本発明において提案された特徴を持つもののうち少なくとも１つの分解阻害剤、例えば、特定の有機酸を添加することにより、７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）の形成を阻害するだけでなく、医薬組成物の安定性を高める効果が得られるということが明らかになった。最高の効果は、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸を添加したときに得られた。この場合、何ら分解阻害剤も含まない医薬組成物に比べて、著しく低い濃度（含量）の７−エピ−ドセタキセル（ＩＩ）が得られると共に、３０℃±１℃の温度で３０ヶ月以上安定した状態が維持された。
【００３６】
ビタミンＥを用いる実験を行なったが、その実験から、分解阻害剤として単に抗酸化剤を添加するだけでは所期の目的ないし結果を得るに十分でないことが分かった。この事実と、検討した全ての酸類が従来に知られていたものより優れた安定性を得るに十分なものではないということに基づくと、より高い安定性を得るためには、特定の特徴を有する１つ以上の酸を用いるべきであるという結論が導き出される。これは、組成物の成分間の複雑な相互作用の結果であり、そして、ｐＫａ、酸化還元転位、立体障害、求核性（nucleophilicity）、溶解度、および、反応性などの因子にもかかわる。
【実施例１】
【００３７】
分解阻害剤としての酒石酸を添加したポリソルベート８０中に無水ドセタキセルを含有する医薬組成物を製造する
らせん状空気圧攪拌器（helical pneumatic agitation）を備えたビーカー内に、窒素雰囲気下で、１００ｍＬのポリソルベート８０を加えて、その後、そこに酒石酸を加えてｐＨ３．９に酸性化させた。その後、無水ドセタキセル４．０ｇをゆっくりと添加し、加えた化合物が完全に溶けるまでに攪拌を続けた。それにより得られた溶液を加圧容器に移して、滅菌雰囲気の下、加圧条件下で、０．２２μｍの滅菌性膜（sterilizing membrane）を通してろ過させた。その後、通常のプロセスによりバイアル内に充填させた。そのようにして得られた溶液は、表１に示したように、１５〜３０℃±１℃の温度で保存された場合に３０ヶ月間安定した状態を維持した。
【実施例２】
【００３８】
分解阻害剤としてのクエン酸を添加したポリソルベート８０中に無水ドセタキセルを含有する医薬組成物を製造する
前記実施例１と類似した方法を用いて、クエン酸を添加してｐＨ４．１にした。そのように製造した溶液は、表１に示したように、１５〜３０℃±１℃の温度で保存された場合に３０ヶ月間安定した状態を維持した。
【実施例３】
【００３９】
分解阻害剤としてのアスコルビン酸を添加したポリソルベート８０中に無水ドセタキセルを含有する医薬組成物を製造する
前記実施例１と類似した方法を用いて、アスコルビン酸を添加してｐＨ３．８にした。そのように製造した溶液は、表１に示したように、１５〜３０℃±１℃の温度で保存された場合に３０ヶ月間安定した状態を維持した。
【実施例４】
【００４０】
分解阻害剤としての酒石酸を添加したポリソルベート８０中にドセタキセル３水和物を含有する医薬組成物を製造する
らせん状空気圧攪拌器を備えたビーカー内に、窒素雰囲気下で、１００ｍＬのポリソルベート８０を加えて、その後、そこに酒石酸を加えてｐＨ３．８に酸性化した。その後、ドセタキセル３水和物４．２７ｇをゆっくりと添加し、加えた化合物が完全に溶けるまでに攪拌を続けた。それにより得られた溶液を加圧容器に移して、滅菌雰囲気の下、加圧条件下で、０．２２μｍの滅菌性膜（sterilizing membrane）を通してろ過させた。その後、通常のプロセスによりバイアル内に充填させた。そのようにして得られた溶液は、表２に示したように、１５〜３０℃±１℃の温度で保存された場合に３０ヶ月間安定した状態を維持した。
【実施例５】
【００４１】
分解阻害剤としてのクエン酸を添加したポリソルベート８０中にドセタキセル３水和物を含有する医薬組成物を製造する
前記実施例４と類似した方法を用いて、クエン酸を添加してｐＨ４．１にした。その用に製造した溶液は、表２に示したように、１５〜３０℃±１℃の温度で保存された場合に３０ヶ月間安定した状態を維持した。
【実施例６】
【００４２】
分解阻害剤としてのアスコルビン酸を添加したポリソルベート８０中にドセタキセル３水和物を含有する医薬組成物を製造する
前記実施例４と類似した方法を用いて、アスコルビン酸を添加してｐＨ３．８にした。そのように製造した溶液は、表２に示したように、１５〜３０℃±１℃の温度で保存された場合に３０ヶ月間安定した状態を維持した。
【国際調査報告】
2009524700.tif 000007
2009524700.tif 000008