(57)【要約】  サンプルを準備するためのカセットは、細胞のサンプルを受け入れるための混合チャンバーと、保持チャンバーと、保持チャンバー内の酵素とを含む。酵素は、混合チャンバーへ移送されて、細胞を破壊し、細胞から核酸を解放して、バルク物質及びバルク物質内の核酸を生成する。第２の保持チャンバーは、磁気粒子を有し、磁気粒子は、混合チャンバーへ移送されて核酸と結合する。更に、磁気粒子を核酸と一緒に吸引し、混合チャンバーにおいて核酸をバルク物質から分離するための磁石も備えている。【選択図】図１
2009512447.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
サンプルを準備するためのカセットにおいて、
細胞のサンプルを受け入れるための少なくとも１つの混合チャンバーと、
第１の保持チャンバーと、
前記第１の保持チャンバー内の酵素であって、前記少なくとも１つの混合チャンバーへ移送されて、細胞を破壊し、細胞から核酸を解放し、バルク物質及びバルク物質内の核酸を生成することのできる酵素と、
第２の保持チャンバーと、
前記第２の保持チャンバー内の磁気粒子であって、前記少なくとも１つの混合チャンバーへ移送されて、核酸と結合することのできる磁気粒子と、
前記磁気粒子を核酸と一緒に吸引し、前記少なくとも１つの混合チャンバー内で核酸をバルク物質から少なくとも部分的に分離するように配置できる少なくとも１つの磁石と、
を備えたカセット。
【請求項２】
前記混合チャンバーは、頂面を有し、該頂面は、開口を有する、請求項１に記載のカセット。
【請求項３】
前記混合チャンバーの開口にアクセスするための取り外し可能な蓋を更に備えた、請求項２に記載のカセット。
【請求項４】
前記酵素は、プロテイナーゼＫを含む、請求項１に記載のカセット。
【請求項５】
前記第１の保持チャンバー及び第２の保持チャンバーに第１及び第２のプランジャーを更に備え、各プランジャーは、前記酵素及び磁気粒子を前記混合チャンバーへ各々移送するように移動できる、請求項１に記載のカセット。
【請求項６】
前記混合チャンバーは、破壊し得る薄膜であって、この薄膜の各破裂を通して酵素及び磁気粒子を前記混合チャンバーへ移送する薄膜を備えた、請求項１に記載のカセット。
【請求項７】
前記第１の保持チャンバー及び第２の保持チャンバーに第１及び第２のプランジャーを更に備え、各プランジャーは、薄膜を破壊するように移動でき、前記酵素及び磁気粒子を各々前記混合チャンバーへ移送する、請求項６に記載のカセット。
【請求項８】
前記プランジャーは、前記薄膜を破壊するためのピアス素子を含む、請求項７に記載のカセット。
【請求項９】
第３の保持チャンバー及び該第３の保持チャンバー内のリーシス溶液を更に備え、該リーシス溶液は、バルク物質を溶解するために前記混合チャンバーへ移送できる、請求項１に記載のカセット。
【請求項１０】
第４の保持チャンバー及び該第４の保持チャンバー内のバインディング溶液を更に備え、該バインディング溶液は、核酸を磁気粒子に結合するために前記混合チャンバーへ移送できる、請求項１に記載のカセット。
【請求項１１】
前記混合チャンバーを加熱するための加熱素子を更に備えた、請求項１に記載のカセット。
【請求項１２】
表面を有する第１の分離断片と、
空洞を伴う表面を有する第１の移送断片であって、前記少なくとも１つの磁石が、前記磁気粒子を核酸と共にこの第１の移送断片の表面の空洞へ移送し、該第１の移送断片は、前記第１の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に前記混合チャンバーから出て前記第１の分離断片の表面を越えて移動するようにする第１の移送断片と、
前記第１の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第１の受け入れチャンバーと、
を更に備えた請求項１に記載のカセット。
【請求項１３】
前記第１の移送断片は、前記第１の分離断片に対して回転可能である、請求項１２に記載のカセット。
【請求項１４】
表面を有する第２の分離断片と、
空洞を伴う表面を有する第２の移送断片であって、この第２の移送断片は、前記第２の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に前記第１の受け入れチャンバーから出て前記第２の分離断片の表面を越えて移動するようにする第２の移送断片と、
前記第２の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第２の受け入れチャンバーと、
を更に備えた請求項１２に記載のカセット。
【請求項１５】
前記第２の移送断片は、前記第２の分離断片に対して回転可能である、請求項１４に記載のカセット。
【請求項１６】
表面を有する第３の分離断片と、
空洞を伴う表面を有する第３の移送断片であって、この第３の移送断片は、前記第３の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に前記第２の受け入れチャンバーから出て前記第３の分離断片の表面を越えて移動するようにする第３の移送断片と、
前記第３の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第３の受け入れチャンバーと、
を更に備えた請求項１４に記載のカセット。
【請求項１７】
前記第３の移送断片は、前記第３の分離断片に対して回転可能である、請求項１６に記載のカセット。
【請求項１８】
前記第１の受け入れチャンバーは、洗浄チャンバーであり、更に、該洗浄チャンバー内に洗浄溶液を含む、請求項１２に記載のカセット。
【請求項１９】
前記第２の受け入れチャンバーは、洗浄チャンバーであり、更に、該洗浄チャンバー内に洗浄溶液を含む、請求項１４に記載のカセット。
【請求項２０】
前記第３の受け入れチャンバーは、溶出チャンバーであり、更に、磁気粒子及び核酸を分離するための溶出緩衝剤をこの溶出チャンバーに含む、請求項１６に記載のカセット。
【請求項２１】
前記溶出チャンバーを加熱するための加熱素子を更に備えた、請求項２０に記載のカセット。
【請求項２２】
サンプルを準備するためのカセットにおいて、
細胞のサンプルを受け入れるための少なくとも１つの混合チャンバーであって、この混合チャンバーに酵素が添加されて、細胞を破壊し、細胞から核酸を解放して、バルク物質及びバルク物質内の核酸を生成し、混合チャンバーに磁気粒子を添加して、核酸と結合させるような混合チャンバーと、
表面を有する第１の分離断片と、
空洞を伴う表面を有する第１の移送断片と、
磁気粒子を核酸と一緒に引き付けて、前記少なくとも１つの混合チャンバー内でバルク物質から核酸を少なくとも部分的に分離し、且つ磁気粒子を核酸と一緒に前記第１の移送断片の表面の空洞へ移送するように配置できる磁石であって、前記第１の移送断片を前記第１の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と一緒に前記混合チャンバーから出て前記第１の分離断片の表面を越えて移動するようにする磁石と、
前記第１の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第１の受け入れチャンバーと、
を備えたカセット。
【請求項２３】
前記第１の移送断片は、前記第１の分離断片に対して回転可能である、請求項２２に記載のカセット。
【請求項２４】
前記第１の受け入れチャンバーは、洗浄チャンバーであり、更に、この洗浄チャンバーに洗浄溶液を含む、請求項２２に記載のカセット。
【請求項２５】
溶出チャンバーと、この溶出チャンバー内にあって磁気粒子及び核酸を分離するための溶出緩衝剤と、表面を有する第２の分離断片と、空洞を伴う表面を有する第２の移送断片とを更に備え、この第２の移送断片は、前記第２の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に前記第１の受け入れチャンバーから出て前記第２の分離断片の表面を越えて移動するようにし、更に、前記溶出チャンバーは、前記第１の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる、請求項２４に記載のカセット。
【請求項２６】
前記第２の移送断片は、前記第２の分離断片に対して回転可能であり、磁気粒子が溶出チャンバーから出て、溶出チャンバーに核酸を残すようにする、請求項１９に記載のカセット。
【請求項２７】
前記第１の受け入れチャンバーは、溶出チャンバーであり、更に、磁気粒子及び核酸を分離するための溶出緩衝剤を溶出チャンバーに備えた、請求項２２に記載のカセット。
【請求項２８】
表面を有する第２の分離断片と、空洞を伴う表面を有する第２の移送断片であって、この第２の移送断片が前記第２の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に前記第１の受け入れチャンバーから出て前記第２の分離断片の表面を越えて移動するようにする第２の移送断片と、前記第２の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第２の受け入れチャンバーと、を更に備えた請求項２４に記載のカセット。
【請求項２９】
前記第２の移送断片は、前記第２の分離断片に対して回転可能である、請求項２８に記載のカセット。
【請求項３０】
表面を有する第３の分離断片と、空洞を伴う表面を有する第３の移送断片であって、この第３の移送断片が前記第３の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に前記第２の受け入れチャンバーから出て前記第３の分離断片の表面を越えて移動するようにする第３の移送断片と、前記第３の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第３の受け入れチャンバーと、を更に備えた請求項２８に記載のカセット。
【請求項３１】
前記第３の移送断片は、前記第３の分離断片に対して回転可能である、請求項３０に記載のカセット。
【請求項３２】
前記第２の受け入れチャンバーは、洗浄チャンバーであり、更に、該洗浄チャンバーに洗浄溶液を含む、請求項２８に記載のカセット。
【請求項３３】
前記第３の受け入れヤンバーは、溶出チャンバーであり、更に、磁気粒子及び核酸を分離するための溶出緩衝剤をこの溶出チャンバーに含む、請求項３０に記載のカセット。
【請求項３４】
サンプルを準備するためのカセットにおいて、
エンクロージャーを備え、該エンクロージャーは、
核酸を有する細胞のサンプルを受け入れる開口を含む混合チャンバーと、
中身を有する複数の保持チャンバーであって、これら複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバーの中身は磁気粒子を含み、そしてこれら複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバーの中身はプロテイナーゼＫ溶液を含むものである複数の保持チャンバーと、
前記複数の保持チャンバーの１つに各々対応して、それら複数の保持チャンバーの中身を前記混合チャンバーへ移送する複数のプランジャーであって、プロテイナーゼＫ溶液が細胞を破壊して核酸を解放し、そして核酸が前記混合チャンバーにおいて磁気粒子に結合するようにさせる複数のプランジャーと、
前記混合チャンバーに結合された第１のバルブであって、磁気粒子を吸引するための配置可能な磁石を含む第１のバルブと、
前記第１のバルブに結合された洗浄チャンバーと、
前記第１の洗浄チャンバーに結合された第２のバルブであって、磁気粒子を吸引するための配置可能な磁石を含む第２のバルブと、
前記第２のバルブに結合された溶出チャンバーであって、該溶出チャンバーから核酸を除去するための開口を含む溶出チャンバーと、
を含むものである、カセット。
【請求項３５】
前記複数の保持チャンバーの１つは、バインディング溶液を含み、そして前記複数の保持チャンバーの１つは、リーシス溶液を含み、更に、前記複数のプランジャーの１つは、バインディング溶液を前記混合チャンバーへ移送し、そして前記複数のプランジャーの１つは、リーシス溶液を前記混合チャンバーへ移送する、請求項３４に記載のカセット。
【請求項３６】
サンプルを準備するためのカセットにおいて、
細胞のサンプルを受け入れるための反応チャンバーと、
第１保持チャンバーと、
前記第１保持チャンバー内の酵素であって、これを前記反応チャンバーへ移送して細胞を破壊し、細胞から核酸を解放して、バルク物質及びバルク物質内の核酸を生成する酵素と、
粒子チャンバーと、
前記粒子チャンバーにおいて核酸と結合する粒子と、
第２の保持チャンバーと、
前記第２の保持チャンバー内にあって粒子から核酸を解放するための溶出緩衝剤と、
前記溶出緩衝剤及び解放された核酸を受け入れるための溶出チャンバーと、
を備え、前記溶出緩衝剤は、前記反応チャンバーへの保持チャンバーから、前記粒子チャンバーを経て、前記溶出チャンバーへと移送可能である、カセット。
【請求項３７】
第３の保持チャンバー及び該第３の保持チャンバー内のリーシス溶液を更に含み、このリーシス溶液は、前記反応チャンバーへ移送されて、バルク物質を溶解することができる、請求項３６に記載のカセット。
【請求項３８】
第４の保持チャンバー及び該第４の保持チャンバー内のバインディング溶液を含み、このバインディング溶液は、前記反応チャンバーへ移送されて、核酸を粒子に結合することができる、請求項３６に記載のカセット。
【請求項３９】
前記反応チャンバーは、前記粒子チャンバーと整列され、そして前記溶出チャンバーは、前記粒子チャンバーと整列可能である、請求項３６に記載のカセット。
【請求項４０】
酵素及びバルク物質を受け入れるための廃物チャンバーを更に備えた、請求項３６に記載のカセット。
【請求項４１】
前記反応チャンバーの中身を、前記粒子チャンバーを経て、前記廃物チャンバーへ移送するためのプランジャーを更に備えた、請求項４０に記載のカセット。
【請求項４２】
前記反応チャンバーの中身を、前記粒子チャンバーを経て、前記溶出チャンバーへ移送するためのプランジャーを更に備えた、請求項３６に記載のカセット。
【請求項４３】
前記第１及び第２の各保持チャンバーの中身を前記反応チャンバーへ転送するためのバルブを前記第１及び第２の保持チャンバーの各々に更に備えた、請求項３６に記載のカセット。
【請求項４４】
前記バルブは、そのバルブから前記反応チャンバーへ中身を移送するためのプランジャーを含む、請求項４３に記載のカセット。
【請求項４５】
サンプルを準備するためのカセットにおいて、
エンクロージャーを備え、このエンクロージャーは、
核酸を有する細胞のサンプルを受け入れるための開口を含む反応チャンバーと、
複数の保持チャンバーと、
前記複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバー内の酵素と、
前記複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバー内のリーシス緩衝剤と、
前記複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバー内のバインディング緩衝剤と、
前記複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバー内の溶出緩衝剤と、
粒子チャンバーと、
前記粒子チャンバー内の粒子であって、核酸と解放可能に結合する粒子と、
解放された核酸を受け入れるための溶出チャンバーであって、エンクロージャーから核酸を除去する開口を含む溶出チャンバーと、
を含むものである、カセット。
【請求項４６】
前記エンクロージャーは、廃物チャンバーを更に含む、請求項４５に記載のカセット。
【請求項４７】
前記複数の保持チャンバーの各々は、複数の保持チャンバーの中身を前記反応チャンバーへ移送するためのプランジャーを含む、請求項４５に記載のカセット。
【請求項４８】
前記複数の保持チャンバーのうちの１つ以上の保持チャンバーに１つ以上の洗浄緩衝剤を含む、請求項４５に記載のカセット。
【請求項４９】
前記反応チャンバーは、前記粒子チャンバーに整列され、そして前記溶出チャンバーは、前記粒子チャンバーに整列可能である、請求項４５に記載のカセット。
【請求項５０】
サンプルを準備するためのカセットにおいて、
細胞のサンプルを受け入れるための反応チャンバーと、
第１の保持チャンバーと、
前記第１の保持チャンバー内の酵素であって、前記反応チャンバーへ移送して細胞を破壊し、細胞から核酸を解放し、バルク物質及びバルク物質内の核酸を生成する酵素と、
粒子チャンバーと、
前記粒子チャンバー内で核酸と結合する粒子と、
第２の保持チャンバーと、
前記第２の保持チャンバー内にあって、粒子から核酸を解放する溶出緩衝剤と、
溶出緩衝剤及び解放された核酸を受け入れるための溶出チャンバーと、
を備え、前記保持チャンバーの各々は、第１チャンバー及び少なくとも１つの開口を有する外側ハウジングを含み、その第１チャンバーは、バルブを受け入れ、このバルブは、
第２チャンバー及び少なくとも１つの開口を有する内側ハウジングを含み、
この内側ハウジングは、前記外側ハウジングに対して回転可能であり、前記内側ハウジングの少なくとも１つの開口は、前記外側ハウジングの少なくとも１つの開口と整列可能であり、前記第２チャンバーは中身を有し、更に、
前記内側ハウジングの少なくとも１つの開口と、前記外側ハウジングの少なくとも１つの開口が整列されたときに、前記内側ハウジングの少なくとも１つの開口及び前記外側ハウジングの少なくとも１つの開口を通して前記第２チャンバーの中身を移送するためのプランジャーを前記第２チャンバーに備えた、カセット。
【請求項５１】
第３の保持チャンバー及び該第３の保持チャンバー内のリーシス溶液を更に備え、このリーシス溶液は、前記反応チャンバーへ移送されて、バルク物質を溶解することができる、請求項５０に記載のカセット。
【請求項５２】
第４の保持チャンバー及び該第４の保持チャンバー内のバインディング溶液を更に備えこのバインディング溶液は、前記反応チャンバーへ移送されて、核酸を粒子に結合することができる、請求項５０に記載のカセット。
【請求項５３】
酵素及びバルク物質を受け入れるための廃物チャンバーを更に備えた、請求項５０に記載のカセット。
【請求項５４】
前記反応チャンバーの中身を、前記粒子チャンバーを経て前記廃物チャンバーへ移送するためのプランジャーを更に備えた、請求項５３に記載のカセット。
【請求項５５】
前記反応チャンバーの中身を、前記粒子チャンバーを経て前記溶出チャンバーへ移送するためのプランジャーを更に備えた、請求項５０に記載のカセット。
【請求項５６】
前記反応チャンバーは、前記粒子チャンバーに整列され、そして前記溶出チャンバーは、前記粒子チャンバーに整列可能である、請求項５０に記載のカセット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バイオテクノロジー装置の分野に係り、より詳細には、サンプルを準備するための装置及び方法に係る。
【０００２】
関連出願へのクロスレファレンス：本出願は、２００５年１０月１９日に出願された“METHOD AND APPARATUS FOR ISOLATING NUCLEIC ACID”と題する米国プロビジョナル特許出願第６０／７２８，５６９号；２００５年１２月２２日に出願された“CASSETTE FOR SAMPLE PREPARATION”と題する米国プロビジョナル特許出願第６０／７５３，６２２号；及び２００５年１２月２２日に出願された“CASSETTE FOR SAMPLE PREPARATION”と題する米国プロビジョナル特許出願第６０／７５３，６１８号の利益を主張するもので、これら特許出願は、参考としてここに援用される。
【背景技術】
【０００３】
ＤＮＡは、新たな薬品を開発したり、誰かを犯罪に結び付けたりするのに利用できる。しかしながら、これを行なえる以前に、ＤＮＡをサンプルから分離しなければならない。これらサンプルは、例えば、血液、尿、人間の細胞、髪、バクテリア、イースト及び組織を含む。これらサンプルの各々は、核酸を含む細胞を含む。核酸は、遺伝子情報を運ぶヌクレオチド鎖である。核酸のほとんどの形式は、ＤＮＡ及びＲＮＡである。
【０００４】
核酸をサンプルから分離するために、従来の装置は、多数の露出空洞を有するトレーを使用している。空洞の１つにサンプルが入れられ、従来の処理ステップを使用して、サンプルからＤＮＡを分離する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
この従来のシステムは、汚染を含む多数の欠点がある。空洞が露出されるので、汚染物がＤＮＡに容易に影響を及ぼすことになる。更に、従来のシステムは、一度の多数のサンプルを準備することを必要とする。従来の装置を使用して一度に１つ又は２つのサンプルを準備することは困難である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
サンプルを準備するためのカセットが開示される。このカセットは、細胞のサンプルを受け入れるための少なくとも１つの混合チャンバーと、第１の保持チャンバーと、該第１の保持チャンバー内の酵素であって、前記少なくとも１つの混合チャンバーへ移送して、細胞を破壊し、細胞から核酸を解放して、バルク物質及びバルク物質内の核酸を生成できる酵素と、第２の保持チャンバーと、該第２の保持チャンバー内の磁気粒子であって、前記少なくとも１つの混合チャンバーへ移送して核酸と結合できる磁気粒子と、該磁気粒子を核酸と一緒に吸引し、前記少なくとも１つの混合チャンバーにおいて核酸をバルク物質から少なくとも部分的に分離するように配置できる少なくとも１つの磁石と、を備えている。
【０００７】
混合チャンバーは、頂面を有し、該頂面は、開口を有する。混合チャンバーの開口にアクセスするための取り外し可能な蓋も設けられる。酵素は、プロテイナーゼＫである。第１の保持チャンバー及び第２の保持チャンバーには、第１及び第２のプランジャーも設けられ、各プランジャーは、酵素及び磁気粒子を混合チャンバーへ各々移送するように移動できる。破壊し得る薄膜であって、該薄膜の各破裂を通して酵素及び磁気粒子を混合チャンバーへ移送できる薄膜も設けられる。第１の保持チャンバー及び第２の保持チャンバーにおける第１及び第２のプランジャーであって、その各々が薄膜を破壊するよう移動でき、酵素及び磁気粒子を各々混合チャンバーへ移送するような第１及び第２のプランジャーも設けられる。第３の保持チャンバー及び該第３の保持チャンバー内のリーシス溶液も設けられ、該リーシス溶液は、混合チャンバーへ移送して、バルク物質を溶解することができる。第４の保持チャンバー及び該第４の保持チャンバー内のバインディング溶液も設けられ、該バインディング溶液は、混合チャンバーへ移送して、核酸を磁気粒子に結合することができる。混合チャンバーを加熱するための加熱素子も設けられる。
【０００８】
又、カセットは、表面を有する第１の分離断片と、空洞を伴う表面を有する第１の移送断片であって、前記少なくとも１つの磁石が、前記磁気粒子を核酸と共にこの第１の移送断片の表面の空洞へ移送し、この第１の移送断片は、第１の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に混合チャンバーから出て第１の分離断片の表面を越えて移動するようにする第１の移送断片と、前記第１の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第１の受け入れチャンバーも備えている。更に、カセットは、表面を有する第２の分離断片と、空洞を伴う表面を有する第２の移送断片であって、この第２の移送断片は、第２の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に第１の受け入れチャンバーから出て第２の分離断片の表面を越えて移動するようにする第２の移送断片と、前記第２の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第２の受け入れチャンバーも備えている。更に、カセットは、表面を有する第３の分離断片と、空洞を伴う表面を有する第３の移送断片であって、この第３の移送断片は、第３の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に第２の受け入れチャンバーから出て第３の分離断片の表面を越えて移動するようにする第３の移送断片と、前記第３の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第３の受け入れチャンバーも備えている。
【０００９】
第１の受け入れチャンバーは、洗浄チャンバーであり、カセットは、更に、洗浄チャンバー内に洗浄溶液を含む。第２の受け入れチャンバーは、洗浄チャンバーであり、カセットは、更に、洗浄チャンバー内に洗浄溶液を含む。第３の受け入れチャンバーは、溶出チャンバーであり、カセットは、更に、磁気粒子及び核酸を分離するための溶出緩衝剤を溶出チャンバーに含む。
【００１０】
サンプルを準備するためのカセットが開示される。このカセットは、細胞のサンプルを受け入れるための少なくとも１つの混合チャンバーであって、この混合チャンバーに酵素が添加されて、細胞を破壊し、細胞から核酸を解放して、バルク物質及びバルク物質内の核酸を生成し、混合チャンバーに磁気粒子を添加して、核酸と結合させるような混合チャンバーと、表面を有する第１の分離断片と、空洞を伴う表面を有する第１の移送断片と、磁気粒子を核酸と一緒に引き付けて、少なくとも１つの混合チャンバーにおいてバルク物質から核酸を少なくとも部分的に分離し、且つ磁気粒子を核酸と一緒に第１の移送断片の表面の空洞へ移送するように配置できる磁石であって、第１の移送断片を第１の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と一緒に混合チャンバーから出て第１の分離断片の表面を越えて移動するようにする磁石と、第１の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第１の受け入れチャンバーと、を備えている。
【００１１】
第２の断片は、第１の断片に対して回転可能である。第１の受け入れチャンバーは、洗浄チャンバーであり、カセットは、更に、この洗浄チャンバーに洗浄溶液を含む。又、カセットは、溶出チャンバーと、この溶出チャンバー内にあって、磁気粒子及び核酸を分離するための溶出緩衝剤も備えている。又、カセットは、表面を有する第２の分離断片と、空洞を伴う表面を有する第２の移送断片も備え、この第２の移送断片は、第２の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に第１の受け入れチャンバーから出て第２の分離断片の表面を越えて移動するようにし、更に、溶出チャンバーは、第１の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる。第２の移送断片は、第２の分離断片に対して移動して、磁気粒子が溶出チャンバーから出て、溶出チャンバーに核酸を残すようにする。
【００１２】
第２のチャンバーは、溶出チャンバーであり、カセットは、更に、磁気粒子及び核酸を分離するための溶出緩衝剤を溶出チャンバーに備えている。又、カセットは、表面を有する第２の分離断片と、空洞を伴う表面を有する第２の移送断片であって、この第２の移送断片が第２の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に第１の受け入れチャンバーから出て第２の分離断片の表面を越えて移動するようにする第２の移送断片と、第２の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第２の受け入れチャンバーも備えている。更に、カセットは、表面を有する第３の分離断片と、空洞を伴う表面を有する第３の移送断片であって、この第３の移送断片が第３の分離断片に対して移動して、磁気粒子が核酸と共に第２の受け入れチャンバーから出て第３の分離断片の表面を越えて移動するようにする第３の移送断片と、第３の分離断片の表面を越えて移動した後に磁気粒子及び核酸を受け入れる第３の受け入れチャンバーも備えている。第２の受け入れチャンバーは、洗浄チャンバーであり、カセットは、更に、洗浄チャンバーに洗浄溶液を含む。第３の受け入れヤンバーは、溶出チャンバーであり、カセットは、更に、磁気粒子及び核酸を分離するための溶出緩衝剤を溶出チャンバーに含む。
【００１３】
サンプルを準備するためのカセットが開示される。このカセットは、エンクロージャーを備え、該エンクロージャーは、核酸を有する細胞のサンプルを受け入れる開口を含む混合チャンバーと、中身を有する複数の保持チャンバーであって、これら複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバーの中身は磁気粒子を含み、そしてこれら複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバーの中身はプロテイナーゼＫ溶液を含むものである複数の保持チャンバーと、複数の保持チャンバーの１つに各々対応して、複数の保持チャンバーの中身を混合チャンバーへ移送する複数のプランジャーであって、プロテイナーゼＫ溶液が細胞を破壊して核酸を解放し、そして核酸が混合チャンバーにおいて磁気粒子に結合するようにさせる複数のプランジャーと、混合チャンバーに結合された第１のバルブであって、磁気粒子を吸引するための配置可能な磁石を含む第１のバルブと、この第１のバルブに結合された洗浄チャンバーと、この第１の洗浄チャンバーに結合された第２のバルブであって、磁気粒子を吸引するための配置可能な磁石を含む第２のバルブと、この第２のバルブに結合された溶出チャンバーであって、該溶出チャンバーから核酸を除去するための開口を含む溶出チャンバーと、を含む。
【００１４】
複数の保持チャンバーの１つは、バインディング溶液を含み、そして複数の保持チャンバーの１つは、リーシス溶液を含み、更に、複数のプランジャーの１つは、バインディング溶液を混合チャンバーへ移送し、そして複数のプランジャーの１つは、リーシス溶液を混合チャンバーへ移送する。
【００１５】
サンプルを準備するためのカセットが開示される。このカセットは、細胞のサンプルを受け入れるための反応チャンバーと、第１保持チャンバーと、該第１保持チャンバー内の酵素であって、反応チャンバーへ移送して細胞を破壊し、細胞から核酸を解放し、バルク物質及びバルク物質内の核酸を生成する酵素と、粒子チャンバーと、該粒子チャンバーにおいて核酸と結合する粒子と、第２の保持チャンバーと、該第２の保持チャンバー内にあって粒子から核酸を解放するための溶出緩衝剤と、該溶出緩衝剤及び解放された核酸を受け入れるための溶出チャンバーとを備え、前記溶出緩衝剤は、反応チャンバーへの保持チャンバーから、粒子チャンバーを経て、溶出チャンバーへと移送可能である。
【００１６】
カセットは、第３の保持チャンバー、及び該第３の保持チャンバー内のリーシス溶液を含み、このリーシス溶液は、反応チャンバーへ移送して、バルク物質を溶解することができる。
【００１７】
カセットは、第４の保持チャンバー、及び該第４の保持チャンバー内のバインディング溶液を含み、このバインディング溶液は、反応チャンバーへ移送して、核酸を粒子に結合することができる。
【００１８】
反応チャンバーは、粒子チャンバーと整列され、そして溶出チャンバーは、粒子チャンバーと整列可能である。
【００１９】
カセットは、酵素及びバルク物質を受け入れるための廃物チャンバーを含む。
【００２０】
カセットは、反応チャンバーの中身を、粒子チャンバーを経て、廃物チャンバーへ移送するためのプランジャーを含む。
【００２１】
カセットは、反応チャンバーの中身を、粒子チャンバーを経て、溶出チャンバーへ移送するためのプランジャーを含む。
【００２２】
カセットは、第１及び第２の各保持チャンバーの中身を反応チャンバーへ転送するためのバルブを第１及び第２の保持チャンバーの各々に含む。
【００２３】
バルブは、バルブから反応チャンバーへ中身を移送するためのプランジャーを含む。
【００２４】
又、サンプルを準備するための別のカセットも開示される。このカセットは、エンクロージャーを備え、このエンクロージャーは、核酸を有する細胞のサンプルを受け入れるための開口を含む反応チャンバーと、複数の保持チャンバーと、これら複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバーにおける酵素と、複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバーにおけるリーシス緩衝剤と、複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバーにおけるバインディング緩衝剤と、複数の保持チャンバーのうちの１つの保持チャンバーにおける溶出緩衝剤と、粒子チャンバーと、粒子チャンバーにおける粒子であって、核酸と解放可能に結合する粒子と、解放された核酸を受け入れるための溶出チャンバーであって、エンクロージャーから核酸を除去する開口を含む溶出チャンバーとを含む。
【００２５】
エンクロージャーは、廃物チャンバーを含む。
【００２６】
複数の保持チャンバーの各々は、複数の保持チャンバーの中身を反応チャンバーへ移送するためのプランジャーを含む。
【００２７】
カセットは、複数の保持チャンバーのうちの１つ以上の保持チャンバーに、１つ以上の洗浄緩衝剤を含む。
【００２８】
反応チャンバーは、粒子チャンバーに整列され、そして溶出チャンバーは、粒子チャンバーに整列可能である。
【００２９】
又、サンプルを準備するための更に別のカセットも開示される。このカセットは、細胞のサンプルを受け入れるための反応チャンバーと、第１の保持チャンバーと、該第１の保持チャンバー内の酵素であって、反応チャンバーへ移送して細胞を破壊し、細胞から核酸を解放し、バルク物質及びバルク物質内の核酸を生成する酵素と、粒子チャンバーと、該粒子チャンバー内で核酸と結合する粒子と、第２の保持チャンバーと、該第２の保持チャンバー内にあって、粒子から核酸を解放する溶出緩衝剤と、溶出緩衝剤及び解放された核酸を受け入れるための溶出チャンバーと、を備え、保持チャンバーの各々は、第１チャンバー及び少なくとも１つの開口を有する外側ハウジングを含み、第１チャンバーは、バルブを受け入れ、このバルブは、第２チャンバー及び少なくとも１つの開口を有する内側ハウジングを含み、この内側ハウジングは、外側ハウジングに対して回転可能であり、内側ハウジングの少なくとも１つの開口は、外側ハウジングの少なくとも１つの開口と整列可能であり、第２チャンバーは中身を有し、更に、内側ハウジングの少なくとも１つの開口と、外側ハウジングの少なくとも１つの開口が整列されたときに、内側ハウジングの少なくとも１つの開口及び外側ハウジングの少なくとも１つの開口を通して第２チャンバーの中身を移送するためのプランジャーを第２チャンバーに備えている。
【００３０】
カセットは、第３の保持チャンバー及び該第３の保持チャンバー内のリーシス溶液を含み、このリーシス溶液は、反応チャンバーへ移送されて、バルク物質を溶解することができる。
【００３１】
カセットは、第４の保持チャンバー及び該第４の保持チャンバー内のバインディング溶液を含み、このバインディング溶液は、反応チャンバーへ移送されて、核酸を粒子に結合することができる。
【００３２】
カセットは、酵素及びバルク物質を受け入れるための廃物チャンバーを含む。
【００３３】
カセットは、反応チャンバーの中身を、粒子チャンバーを経て廃物チャンバーへ移送するためのプランジャーを含む。
【００３４】
カセットは、反応チャンバーの中身を、粒子チャンバーを経て溶出チャンバーへ移送するためのプランジャーを含む。
【００３５】
反応チャンバーは、粒子チャンバーに整列され、そして溶出チャンバーは、粒子チャンバーに整列可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３６】
以下、添付図面を参照して、本発明の実施形態を詳細に説明する。
【００３７】
図１は、細胞サンプルを準備するのに使用できるカセット１０を示す。このカセット１０は、ハウジング１２と、混合チャンバー１４と、第１、第２、第３及び第４の保持チャンバー１６、１８、２０及び２２と、第１、第２、第３及び第４のプランジャー２４、２６、２８及び３０と、第１、第２及び第３のバルブ３２、３４及び３６と、第１及び第２の洗浄チャンバー３８及び４０と、溶出チャンバー４２と、第１、第２、第３及び第４のポンプ４４、４６、４８及び５０と、第１及び第２の蓋５２及び５４と、第１及び第２の加熱素子５６及び５８と、磁石６０とを備えている。
【００３８】
チャンバー１４、１６、１８、２０、２２、３８、４０及び４２、プランジャー２４、２６、２８及び３０、バルブ３２、３４及び３６、ポンプ４４、４６、４８及び５０、並びに加熱素子５６及び５８は、各々、ハウジング内に包囲される。蓋５２及び５４は、ハウジング１２に移動可能に取り付けられる。磁石６０は、第１バルブ３２、第２バルブ３４及び第３バルブ３６に取り外し可能に配置することができる。
【００３９】
混合チャンバー１４は、頂面６２、底面６４及び対向側面６６、６８を有する。混合チャンバーの頂面６２は、開口７０を含む。
【００４０】
第１の蓋５２は、混合チャンバーの頂面６２にある開口７０へのアクセスを与えるように構成される。第１の蓋５２及び開口７０は、同軸的である。第１の蓋５２は、ハウジング１２に移動可能に取り付けられて示されており、蓋５２が開かれ又は外されると、開口７０にアクセスすることができ、そして蓋５２が閉じられ又は設けられると、開口７０にアクセスすることはできない。
【００４１】
薄膜７４は、混合チャンバー１４の１つの壁を形成する。薄膜７４は、壊すことができ、薄膜７４が壊され又は破られると、混合チャンバー１４にアクセスすることができる。
【００４２】
第１保持チャンバー１６、第２保持チャンバー１８、第３保持チャンバー２０及び第４保持チャンバー２２は、混合チャンバー１４に隣接配置され、互いに垂直方向に整列されて示されている。保持チャンバー１６、１８、２０、２２の各々は、混合チャンバー１４の薄膜７４に隣接して開口７６を有する。
【００４３】
カセット１０は、更に、磁気鉄ビードの形態の磁気鉄粒子を第１保持チャンバー１６に含む。カセット１０は、更に、バインディング溶液を第２保持チャンバー１８に含む。カセット１０は、更に、リーシス溶液を第３保持チャンバー２０に含む。カセット１０は、更に、プロテイナーゼＫ（ＰＫ）溶液を第４保持チャンバー２２に含む。
【００４４】
第１、第２、第３及び第４保持チャンバー１６、１８、２０及び２２には、第１、第２、第３及び第４プランジャー２４、２６、２８及び３０が各々配置されている。
【００４５】
プランジャー２４、２６、２８及び３０の各々は、ベース７８、シャフト８０及びピアス素子８２を含む。シャフト８０は、ベース７８から延びる。ピアス素子８２は、ベース７８とは反対のシャフト８０の端にあり、先がとがっている。ピアス素子８２は、混合チャンバー１４の薄膜７４を壊し又は破るように構成される。
【００４６】
第１ポンプ４４は、ポンピング部分及びノズル部分を有するベローポンプである。第１ポンプ４４のノズル部分は、混合チャンバー１４内に配置される。第１ポンプ４４のポンピング部分は、このポンピング部分を操作できるように混合チャンバー１４の外部に配置される。
【００４７】
混合チャンバー１４の底面６４には、混合チャンバー１４の中身を加熱するために加熱素子５６が設けられる。加熱素子５６は、可変の加熱素子でよい。
【００４８】
混合チャンバー１４の対向側面６８も、開口８４を含む。混合チャンバー１４の側面６８のこの開口８４と、第１洗浄チャンバー３８との間には、第１バルブ３２が設けられている。
【００４９】
第１バルブ３２は、第１の固定断片８６及び第２の可動断片８８を有し、第２の断片８８は、第１の断片８６に対して移動可能である。第１の固定断片８６は、第１開口９０及び第２開口９２を含み、そして表面９４を有している。第２の断片８８は、磁石６０を受け入れるための開口９４を有する。第２の断片８８は、空洞９８を伴う表面９６を有する。磁石６０は、第２の断片８８の開口９４に対応する形状とされる。磁石６０は、第２の断片８８の開口９４において移動可能で、第２の断片８８から取り外すことができる。
【００５０】
カセット１０は、洗浄溶液を第１洗浄チャンバー３８に含む。第２ポンプ４６もベローポンプであり、第２ポンプ４６のノズル部分は、第１洗浄チャンバー３８に配置される。
【００５１】
第１洗浄チャンバー３８と第２洗浄チャンバー４０との間には、第２バルブ３４が設けられる。この第２バルブ３４は、第１バルブ４３と構造的及び機能的に同じであり、第１の固定断片８６及び第２の可動断片８８を含む。第１の固定断片８６は、第１開口９０及び第２開口９２を含み、そして表面９４を有している。第２の可動断片８８は、空洞９８を伴う表面９６を有する。
【００５２】
カセット１０は、洗浄溶液を第２洗浄チャンバー４０に含む。第３ポンプ４８もベローポンプであり、第３ポンプ４８のノズル部分は、第２洗浄チャンバー４０に配置される。
【００５３】
第２洗浄チャンバー４０と溶出チャンバー４２との間には、第３バルブ３６が設けられる。この第３バルブ３６は、第１バルブ３２及び第２バルブ３４と構造的及び機能的に同じであり、第１の固定断片８６及び第２の可動断片８８を備えている。第１の固定断片８６は、第１開口９０及び第２開口９２を含み、表面９４を有している。第２の可動断片８８は、空洞９８を伴う表面９６を有する。
【００５４】
カセット１０は、洗浄溶液を溶出チャンバー４２に含む。第４ポンプ５０もベローポンプであり、そして第４ポンプ５０のノズル部分は、溶出チャンバー４２に配置される。
【００５５】
溶出チャンバー４２の底面には、溶出チャンバー４２の中身を加熱するために加熱素子５８が設けられる。加熱素子５８は、可変の加熱素子でよい。
【００５６】
溶出チャンバー４２は、溶出チャンバー４２の中身にアクセスするための開口１００をその頂面に含む。
【００５７】
第２の蓋５４は、溶出チャンバー４２の頂面にある開口１００へのアクセスを与えるように構成される。第２の蓋５４は、開口１００と同軸的である。第２の蓋５４は、ハウジング１２に移動可能に取り付けられて示されており、蓋５４が開かれ又は外されると、開口１００にアクセスすることができ、そして蓋５４が閉じられ又は設けられると、開口１００にアクセスすることはできない。
【００５８】
図２を参照すれば、上述したように、カセット１０は、ハウジング１２を備えている。ハウジング１２は、第１の組立コンポーネント１０２、第２の組立コンポーネント１０４、及び第３の組立コンポーネント１０６を含む。
【００５９】
第１の組立コンポーネント１０２は、混合チャンバー１４と、洗浄チャンバー３８及び４０と、溶出チャンバー４２と、バルブ３２、３４及び３６各々の第１固定断片８６とを含む。又、第１の組立コンポーネント１０２は、一端に取り付け部品１０８、１１０（図１を参照）を、そして取り付け断片１１２（図１を参照）を含む。
【００６０】
第２の組立コンポーネント１０４は、保持チャンバー１６、１８、２０及び２２と、第１ポンプ４４を受け入れる開口とを含む。又、第２の組立コンポーネント１０４は、取り付け受け入れ部品１１４、１１６（図１を参照）も含む。
【００６１】
第３の組立コンポーネント１０６は、第２、第３及び第４ポンプ４６、４８及び５０を各々受け入れるための開口を含むと共に、蓋５２及び５４を含む。
【００６２】
カセット１０は、第１の組立コンポーネント１０２の取り付け部品１０８、１１０を、第２の組立コンポーネント１０４の取り付け受け入れ部品１１４、１１６へ各々挿入することによりアッセンブルされる。次いで、第３の組立コンポーネント１０６が、取り付け断片１１２を使用して第１の組立コンポーネントに固定され、図２に示すように組み立てられたカセット１０を形成する。プランジャー２４、２６、２８及び３０、ポンプ４４、４６、４８及び５０、並びに各バルブ３２、３４及び３６の第２可動断片８８がカセット１０に挿入される。
【００６３】
使用中、図３に示すように、第１の蓋５２が除去され、混合チャンバー１４の開口７０へアクセスできるようにされる。ピペット１１８を使用して、組み立てられたカセット１０へ細胞のサンプルが入れられる。サンプルの細胞は、核酸を含む。サンプルを有するピペット１１８は、混合チャンバー１４に入れられる。サンプルがピペット１１８から解放される。
【００６４】
図４に示すように、カセット１０は、第１の蓋５２を閉じることにより閉じられる。次いで、カセット１０は、同様のカセット１０と一緒に、一連のカセット１０を収容するためのマガジン１２０又はラックに入れられる。
【００６５】
図５に示すように、マガジン１２０は、装置１２２に入れられる。装置１２２においてカセット１０内にサンプルを準備するためのプロトコルを選択することができる。
【００６６】
図６に示すように、サンプルにＰＫ溶液が添加される。ＰＫ溶液は、第４の保持チャンバー２２におけるプランジャー３０を移動することにより添加される。プランジャー３０のベース７８に力を加えて、プランジャー３０を移動する。プランジャー３０のピアス素子８２が混合チャンバー１４に向かって進むにつれて、ピアス素子８２が薄膜７４を破裂させ破る。薄膜７４が壊れると、混合チャンバー１４へのアクセスを与える。プランジャー３０が動き続けると、第１の保持チャンバー２２の中身（例えば、ＰＫ溶液）が混合チャンバー１４へ移送される。
【００６７】
第１ポンプ４４で混合物をポンピングすることにより、ＰＫ溶液がサンプルと混合される。ＰＫ溶液は、サンプルの細胞の壁を破壊し、バルク物質、及びバルク物質内の核酸を生成する。
【００６８】
図７に示すように、リーシス溶液がサンプルに添加される。プランジャー２８は、プランジャー３０と同様に動作して、第３の保持チャンバー２０のリーシス溶液を混合チャンバー１４へ移送する。サンプルがポンピングされ、リーシス緩衝剤をＰＫ溶液及び細胞のサンプルと混合させる。リーシス溶液は、通常、塩又は洗剤である。リーシス溶液は、バルク物質を溶解するのに使用される。リーシス溶液は、通常、たんぱく質を溶解しない。
【００６９】
加熱素子５６は、リーシス溶液及びサンプルを加熱するのに使用される。加熱素子５６は、装置１２２によって制御される。上述したように、加熱素子５６の温度は、可変であり、リーシス溶液の有効性を最適化するように選択される。
【００７０】
図８に示すように、バインディング溶液が、サンプル、ＰＫ溶液及びリーシス緩衝溶液に添加される。プランジャー２６は、プランジャー３０と同様に動作して、第２の保持チャンバー１８のバインディング溶液を混合チャンバー１４へ移送させる。この溶液がポンピングされ、バインディング溶液をＰＫ溶液、リーシス溶液及びサンプルと混合させる。バインディング溶液は、通常、疎水性であり、溶液中の塩を増加させる。バインディング溶液は、核酸を磁気的にチャージさせる。
【００７１】
図９に示すように、磁気ビードが溶液に添加され、約２分間ポンピングされる。プランジャー２４は、プランジャー３０と同様に動作し、第１の保持チャンバー１８のリーシス溶液を混合チャンバー１４へ移送させる。磁気ビードは、磁気的にチャージされた核酸に結合する。
【００７２】
図１０に示すように、磁気ビードは、核酸と一緒に、第１バルブ３２に結合される。取り外し可能に配置できる磁石６０は、第１バルブ３２に配置され、そして核酸に結合された磁気ビードを混合チャンバー１４から第１バルブ３２へ吸引する第１バルブ３２の位置へスライドされる。
【００７３】
図１１に示すように、磁気ビードは、核酸と共に、混合チャンバー１４から移動され、第１の洗浄チャンバー３８に受け入れられる。
【００７４】
図１２は、バルブ３２、３４、３６の詳細な図で、混合チャンバー１４から第１の洗浄チャンバー３８への磁気ビードの移動を示している。上述したように、バルブ３２、３４、３６の各々は、第１の固定断片８６及び第２の可動断片８８を含み、第２断片８８は、第１断片８６に対して移動可能である。
【００７５】
磁石６０は、第２の断片８８の開口９４へ挿入される。磁石６０は、第１の断片８６の開口９０及び９２に対応する位置に挿入される。磁石６０は、混合チャンバー１４から、第１の断片８６の開口９０を通して、第２の断片８８の空洞９８へ磁気ビードを引き付ける。第２の断片８８が回転され、磁気ビードが、第２の断片８８の空洞９８において第２の断片８８と第１の断片８６との表面間にシールされる。第２の断片８８は、第１の断片８６の表面を越えて回転され、第１の断片８６の開口９２において空洞９８にアクセスできるようにされる。次いで、磁石６０が第２の断片８８の開口９４から除去され、第２の断片８８の空洞９８から磁気ビードが解放される。
【００７６】
図１３に示すように、磁気ビード及び核酸は、第２ポンプ４６で洗浄溶液をポンピングすることにより洗浄溶液で洗浄される。次いで、磁気ビードは、核酸と共に、図１２を参照して上述したように、磁石６０を第２バルブ３４へ挿入することにより、第２バルブ３４へ結合される。
【００７７】
図１４に示すように、磁気ビードは、核酸と共に、第２バルブ３４を使用して第１洗浄チャンバー３８から第２洗浄チャンバー４０へ移動される。第２バルブ３４は、図１２を参照して述べたように、第１洗浄チャンバー３８から第２洗浄チャンバー４０へ磁気ビード及び核酸を移送する。
【００７８】
図１５に示すように、磁気ビード及び核酸は、次いで、第３ポンプ４８で洗浄溶液をポンピングすることにより、洗浄溶液で２回目に洗浄される。次いで、磁気ビードは、核酸と共に、図１２を参照して上述したように、磁石６０を第２バルブ３４へ挿入することにより、第３バルブ３６へ結合される。
【００７９】
図１６に示すように、磁気ビード及び核酸は、第２の洗浄チャンバー４０から溶出チャンバー４２へ移動される。磁気ビード及び核酸は、図１２を参照して述べた手順を使用して、第２の洗浄チャンバー４０から溶出チャンバー４２へ移送される。
【００８０】
次いで、溶出緩衝溶液を第４ポンプ５０でポンピングすることにより、この溶液が磁気ビード及び核酸と混合される。加熱素子５８を使用して、溶出緩衝溶液、磁気ビード及び核酸が加熱される。加熱素子５８は、装置１２２により制御される。温度は、可変であり、磁気ビードからの核酸の解放を最適にするように選択できる。
【００８１】
次いで、図１２を参照して上述したように、磁石６０を第２バルブ３４に配置することにより、磁気ビードが単独で第３バルブ３６へ再び結合される。
【００８２】
図１７に示すように、次いで、磁気ビードが単独で溶出チャンバー４２から第２の洗浄チャンバー４０へ戻され、溶出チャンバー４２に核酸を残す。磁気ビードは、図１２を参照して述べた手順を使用して、溶出チャンバー４２から第２の洗浄チャンバー４０へ移送される。
【００８３】
図１８に示すように、準備された核酸サンプルは、第２のピペット１２４を使用してアクセスされる。第２の蓋５４が除去されて、溶出チャンバー４２の開口１００へのアクセスが与えられる。ピペット１２４は、開口１００へ挿入され、そして準備された核酸サンプルが引き出される。
【００８４】
図１９に示すように、多チャンネルピペット１２６を使用して、複数のカセット１０から複数のサンプルにアクセスすることができる。
【００８５】
図２０は、カセット１０の別の実施形態を示す。図２０のカセット１０ａは、組立コンポーネント１０４ａがシール１３０を含み、プランジャー２４ａ、２６ａ、２８ａ及び３０ａの各々がシール１３２、１３４、１３６及び１３８を各々含み、そしてバルブ３２ａ、３４ａ及び３６ａが以下に述べるように異なる構成を有するという点で、図１に示すカセット１０とは相違する。
【００８６】
図２１は、組立コンポーネント１０４ａを詳細に示す。組立コンポーネント１０４ａは、シール１３０を含む。図示されたシール１３０は、組立コンポーネント１０４ａの周囲に沿って延びる二重エラストマーである。
【００８７】
図２２は、プランジャー２４ａを詳細に示す。このプランジャー２４ａは、シール１３２を含む。図示されたシール１３２も、プランジャー２４ａの周囲に沿って延びる二重エラストマーである。プランジャー２６ａ、２８ａ及び３０ａの各々も、同様の構成を有することが明らかであろう。
【００８８】
図２３及び２４は、バルブ３２ａを詳細に示す。バルブ３４ａ及び３６ａも同様の構成を有することが明らかであろう。バルブ３２ａは、磁石６０ａ、ハウジング１４２及びシャフト１４４を含む。ハウジング１４２は、磁石６０ａを受け入れるための第１開口（図示せず）と、磁石６０ａを露出しそして粒子１４６を受け入れるための第２開口１４８とを含む。磁石６０ａは、開口１４８に対応する形状とされ、そして粒子１４６を吸引するように選択される。又、ハウジング１４２は、シャフト１４４を受け入れるための第３開口（図示せず）も含む。図２４に示すように、シャフト１４４は、キー付き素子１５０を含む。このキー付き素子１５０は、カセット１０ａに係合する形状とされる。シャフトは、取り外し可能であってもよいし、バルブ３２ａの一体化素子であってもよいことが明らかであろう。或いは、ハウジング１４２がキー付き素子を含んでもよいことが明らかであろう。
【００８９】
シャフト１４４は、ハウジング１４２及び磁石６０ａに係合可能で、ハウジング１４２及び磁石６０ａをカセット１０ａに対して回転し、粒子１４６を混合チャンバー１４ａから洗浄チャンバー３８ａへ移動することができる。バルブ３４ａ及び３６ａは、同様に動作して、粒子１４６を洗浄チャンバー３８ａから洗浄チャンバー４０ａへそして洗浄チャンバー４０ａから溶出チャンバー４２ａへ各々移送することが明らかである。
【００９０】
一実施形態では、合計約２００μＬのサンプルがカセットに入れられる。このサンプルは、このサンプルとＰＫ溶液の混合物を約１分間ポンピングすることにより、合計約５０μＬのＰＫ溶液と混合される。合計約２００μＬのリーシス溶液がサンプル及びＰＫ溶液に添加され、そして溶液が約１分間ポンピングされて、溶液を混合する。次いで、混合物は、約６０℃に約１０分間加熱され、そして混合物が約５分間冷却することが許される。混合物は、その冷却中に更にポンピングされる。合計約５００μＬのバインディング溶液が混合物に添加される。溶液は、約１分間ポンピングされる。磁気ビードが溶液に添加され、約２分間ポンピングされる。磁気ビードは、上述したように移送されて洗浄される。合計約７００μＬの洗浄溶液が各洗浄チャンバーに与えられる。合計約２００μＬの溶出溶液が溶出チャンバーに与えられる。混合物を約１分間ポンピングすることにより、磁気ビードが溶出溶液と混合される。次いで、混合物は、約９０℃において約２分間加熱される。プロセスは、上述したように続けられる。
【００９１】
カセット１０は、混合チャンバー１４と、２つの洗浄チャンバー３８及び４０と、溶出チャンバー４２とを有するものとして説明されたが、１つの洗浄チャンバーのみが設けられてもよいし、或いは洗浄チャンバーがなくてもよいことが明らかであろう。
【００９２】
カセットは、単一の除去可能な磁石６０を使用するものとして説明されたが、磁石を除去する必要がないように、各バルブが配置可能な磁石を含んでもよいことが明らかであろう。磁石６０は、回転可能で、バルブの第２の断片を回転するのに使用されてもよい。或いは又、磁石は、各バルブの内側でスライドするだけでよく、第２の断片が磁石とは独立して回転されてもよい。
【００９３】
ここに述べるようにバルブを使用しないカセット１０を使用して、磁気粒子を混合チャンバーから溶出チャンバーへ移送することも考えられる。このような実施形態では、スライド可能な磁石を設けて、磁石粒子をあるチャンバーから別のチャンバーへ移送することができる。
【００９４】
カセット１０は、ＰＫ溶液、リーシス溶液、バインディング溶液及び磁気ビードを使用して、核酸及び磁気ビードを解放するものとして説明されたが、上述した溶液の各々を使用せずに本発明を実施できることも考えられる。更に、溶液は、ＰＫ溶液を使用して細胞を分断するものとして説明されたが、細胞を分断して核酸を解放する酵素であれば、いかなる酵素を本発明に使用してもよいことが考えられる。
【００９５】
手順が見えるように、ハウジング１２が透明であることも考えられる。
【００９６】
一実施形態では、薄膜７４は、ラミネーションである。
【００９７】
一実施形態では、蓋５２及び５４は、ねじ蓋でよい。又、一実施形態では、蓋５２、５４は、ガスは蓋を通して通気するのを許すが、液体はカセット１００から脱出するのを許さない疎水性メンブレーンを含む。
【００９８】
一実施形態では、ポンプ５０は、開口１００へ挿入することができる。又、一実施形態では、ポンプ５０は、カセット１０からサンプルを除去するためのピペットとして使用することもできる。
【００９９】
又、混合チャンバー１４は、破裂可能な薄膜７４をもたずに設けることも考えられる。このような実施形態では、プランジャー２４、２６、２８及び３０は、ピアス素子８２を必要としない。むしろ、プランジャー２４、２６、２８及び３０は、そのプランジャーが移動されるまで、各プランジャー２４、２６、２８及び３０に各々関連した保持チャンバー１６、１８、２０及び２２の中身の漏れを防止するために、シール素子を有することになる。
【０１００】
図２５は、細胞サンプルを準備するのに使用できるカセット２００を示す。このカセット２００は、ハウジング２０２と、第１、第２、第３、第４、第５、第６、第７及び第８の保持チャンバー２０４ａ−ｈとを備えている。保持チャンバー２０４ａ−ｈの各々は、バルブアッセンブリ２０６ａ−ｈを含む。ロック素子２０７も設けられる。
【０１０１】
図２６は、カセット２００を詳細に示している。カセット２００は、更に、反応チャンバー２０８と、粒子チャンバー２１０と、廃物チャンバー２１２と、廃物オーバーフローチャンバー２１４と、溶出チャンバー２１６と、プランジャー２１８と、第１及び第２の蓋２２０及び２２２とを備えている。又、カセット２００は、１つ以上の加熱素子（図示せず）も含む。
【０１０２】
保持チャンバー２０４ａ−ｈ、バルブアッセンブリ２０６ａ−ｈ、反応チャンバー２０８、粒子チャンバー２１０、廃物チャンバー２１２、廃物オーバーフローチャンバー２１４、及びプランジャー２１８の各々は、ハウジング２０２内に包囲される。蓋２２２、２２４は、ハウジング２０２に移動可能に又は取り外し可能に取り付けられる。
【０１０３】
反応チャンバー２０８は、頂面２２６、底面２２８、及び対向する側面２３０、２３２を有する。
【０１０４】
反応チャンバー２０８の頂面２２６は、開口２３４を含む。第１の蓋２２２は、反応チャンバー２０８の頂面２２６にある開口２３４へのアクセスを与えるように構成される。図示された蓋２２２は、ねじ蓋であるが、開口２３４へのアクセスを与える他の蓋（取り外し可能）でもよい。
【０１０５】
反応チャンバー２０８の底面２２８は、開口２３６を含む。この開口２３６は、反応チャンバー２０８を粒子チャンバー２１０と流体連通できるようにする。
【０１０６】
側面２３２は、開口２３８ａ−ｈを含む。これら開口２３８ａ−ｈは、反応チャンバー２０８を保持チャンバー２０４ａ−ｈと各々流体連通できるようにする。
【０１０７】
カセット２００は、保持チャンバー２０４ａにバインディング溶液を含む。カセット２００は、更に、保持チャンバー２０４ｂにリーシス溶液を含む。カセット２００は、更に、保持チャンバー２０４ｃにプロテイナーゼＫ（ＰＫ）溶液を含む。カセット２００は、更に、保持チャンバー２０４ｄ−ｅの１つ以上に洗浄溶液を含む。カセット２００は、更に、保持チャンバー２０４ｆに溶出溶液を含む。
【０１０８】
プランジャー２１８及び第１の蓋２２２は、一体的なプランジャーシステムを形成するように互いに取り付けられて示されている。プランジャー２１８は、反応チャンバー２０８の中身をポンピングするように圧縮可能である。或いは又、個別のポンプを設けて、反応チャンバー２０８の中身をポンピングしてもよい。又、プランジャー２１８は、反応チャンバー２０８内で移動可能であって、粒子チャンバー２１０を通して反応チャンバー２０８の中身をプッシュすることもできる。
【０１０９】
保持チャンバー２０４ａ−ｈは、カセット２００のハウジング２０２に形成される。保持チャンバー２０４ａ−ｈの各々は、バルブアッセンブリ２０６の対応スロットに係合可能なガイド２４０ａ−ｈを含む。又、保持チャンバー２０４ａ−ｈは、バルブアッセンブリ２０６ａ−ｈの対応開口に係合可能な少なくとも１つの開口２４２ａ−ｈを含む。又、ハウジング２０２は、バルブアッセンブリ２０６ａ−ｈの対応ガイドに係合可能なスロット２４４ａ−ｈを含む。
【０１１０】
粒子チャンバー２１０は、第１開口２５２、第２開口２５４、及び複数の粒子２５６を有する本体２５０を備えている。粒子は、カセット２００の用途に基づいて、磁性であってもよいし、非磁性であってもよい。粒子は、例えば、セルロースでも、プラスチックでも、鉄でもよい。粒子チャンバー２１０は、反応チャンバー２０８に整列されて示されている。
【０１１１】
廃物チャンバー２１２及び溶出チャンバー２１６は、互いに一体化され、そしてハウジング２０２に対して回転可能である。廃物オーバーフローチャンバー２１４は、廃物チャンバー２１２の付近に配置され、廃物チャンバー２１２と流体連通することができる。廃物チャンバー２１２及び溶出チャンバー２１６は、粒子チャンバーと整列され、粒子チャンバー２１０と流体連通することができる。
【０１１２】
廃物チャンバー２１２は、頂面２７０、底面２７２、内面２７４、及び外面２７６を有する。廃物オーバーフローチャンバー２１４は、頂面２７８、底面２８０、及び対向する側面２８２、２８４を有する。又、溶出チャンバー２１６も、頂面２８６、底面２８８、内面２９０、及び外面２９２を有する。
【０１１３】
廃物チャンバー２１２の外面２７６及び溶出チャンバー２１６の外面２９２は、互いに一体化されることが明らかであろう。又、廃物チャンバー２１２の内面２７４は、溶出チャンバー２１６の内面２９０と同じであることも明らかであろう。
【０１１４】
廃物チャンバー２１２の頂面２７０及び溶出チャンバー２１６の頂面２８６は、各々、開口２９４、２９６を有する。これらの開口２９４、２９６は、粒子チャンバー２１０の開口２５２と整列でき、粒子チャンバー２１０と廃物チャンバー２１２と溶出チャンバー２１６との間に流体連通路を与える。
【０１１５】
廃物チャンバー２１２の外面２７６は、開口２９８を含む。廃物オーバーフローチャンバー２１４の側面２８２、２８４の一方は、開口３００を含む。これらの開口２９８及び３００は、整列可能であり、廃物チャンバー２１２へ流れ込む流体は、廃物チャンバー２１２から廃物オーバーフローチャンバー２１４へ流れることができる。
【０１１６】
溶出チャンバー２１６の底面２８８は、開口３０２を含む。第２の蓋２２４は、溶出チャンバー２１６の底面２８８にある開口３０２へのアクセスを与えるように構成される。図示された蓋２２４は、ねじ蓋であるが、開口３０２へのアクセスを与える（除去可能に）ものであれば、他の蓋でもよい。
【０１１７】
図２７及び２８は、バルブアッセンブリ２０６を詳細に示す。このバルブアッセンブリ２０６は、ハウジング３１０を含む。ハウジング３１０は、チャンバー３１２と、スロット３１４と、ハウジングから延びる突起３１６とを含む。チャンバー３１２は、ポンプ３１８を含む。ハウジングの端には、チャンバー３１０をシールするために蓋３２０が設けられる。この蓋は、これを貫通して延びてチャンバー３１２との流体連通を与える第１及び第２の開口３２２、３２４を含む。
【０１１８】
開口３２２、３２４が開口２３８ａ−ｈと整列されないときには、チャンバー３１２の中身がバルブアッセンブリ内にシールされるが、開口３２２、３２４が開口２３８ａ−ｈと整列されるときには、チャンバー３１２の中身がチャンバー３１２から解放される。スロット３１４は、開口３２２、３２４を、該開口が開口２３８ａ−ｈと整列される位置へガイドするのに使用される。ポンプ３１８は、チャンバー３１２からの中身を、開口３２２、３２４を経て反応チャンバー２１４へ移送するのに使用される。
【０１１９】
カセット２００は、バルブアッセンブリ２０６ａ−ｈをハウジングの保持チャンバー２０４ａ−ｈへ挿入することによりアッセンブルされる。ロック素子２０７をハウジングに接続して、バルブアッセンブリ２０６ａ−ｈを保持チャンバー２０４ａ−ｈに固定することができる。廃物チャンバー及び溶出チャンバー２１６のアッセンブリがハウジング２０２へ挿入され、そして蓋２２４がハウジング２０２へ固定される。又、プランジャー２１８が反応チャンバー２０８へ挿入され、そして蓋２２２がハウジングに固定される。
【０１２０】
使用中に、図２９に示すように、第１の蓋２２２が除去され、反応チャンバー２０８の開口２３４へのアクセスを与える。細胞のサンプル３５０が、ピペット３５２を使用してカセット２００へ入れられる。サンプルの細胞は、核酸を含む。サンプルを有するピペット３５２は、反応チャンバー２０８に入れられる。サンプルは、ピペット３５２から解放される。
【０１２１】
図３０に示すように、ＰＫ溶液がサンプルに添加される。ＰＫ溶液は、バルブアッセンブリ２０６ｃをハウジング２０２に対して回転することにより添加される。バルブアッセンブリ２０６ｃの開口３２２、３２４の少なくとも１つが保持チャンバー２０４ｃの開口２４２ｃと整列され、保持チャンバー２０４ｃからのＰＫ溶液を、ハウジング２０２の開口２３８ｃを経て反応チャンバー２０８へ解放する。
【０１２２】
ＰＫ溶液は、プランジャー２１８で混合物をポンピングすることによりサンプルと混合される。上述したように、ＰＫ溶液は、壁を破壊し、ひいては、サンプルの細胞を破壊して、バルク物質及びバルク物質内の核酸を生成する。
【０１２３】
図３１に示すように、リーシス溶液がサンプルに添加される。バルブアッセンブリ２０６ｂは、バルブアッセンブリ２０６ｃと同様に動作し、保持チャンバー２０４ｂのリーシス溶液を反応チャンバー２０８へ移送する。サンプルは、通常、リーシス溶液を、ＰＫ溶液及びサンプルの混合物と混合するようにポンピングされる。リーシス溶液は、通常、塩又は洗剤であり、上述したように、バルク物質を溶解するのに使用される。
【０１２４】
図３２に示すように、バインディング溶液が、サンプル、ＰＫ溶液及びリーシス溶液に添加される。バルブアッセンブリ２０６ａは、バルブアッセンブリ２０６ｃと同様に動作して、保持チャンバー２０４ａのバインディング溶液を反応チャンバー２０８へ移送する。この溶液がポンピングされて、バインディング溶液をＰＫ溶液、リーシス溶液及びサンプルに混合させる。バインディング溶液は、通常、疎水性であり、溶液中の塩を増加させる。
【０１２５】
図３３に示すように、溶液は、粒子チャンバー２１０内の粒子を通してポンピングされる。核酸は、粒子チャンバー内の粒子に結合し、一方、残りの溶液は、廃物チャンバー２１２、必要に応じて、廃物オーバーフローチャンバー２１４へ流れ込む。上述したように、廃物チャンバー２１２の開口２９８が廃物オーバーフローチャンバー２１４の開口３００に整列されると、溶液は、廃物チャンバー２１２から廃物オーバーフローチャンバー２１４へ流れ込む。
【０１２６】
図３４に示すように、バルブアッセンブリ２０６ｃと同様にバルブアッセンブリ２０６ｄを動作して保持チャンバー２０４ｄから反応チャンバー２０８へ洗浄溶液を移送することにより、反応チャンバー２０８に洗浄溶液が添加される。
【０１２７】
図３５に示すように、第１の洗浄溶液は、粒子チャンバー２１０を経て廃物チャンバー２１２へそして必要に応じて廃物オーバーフローチャンバー２１４へポンピングされる。
【０１２８】
図３６に示すように、バルブアッセンブリ２０６ｃと同様にバルブアッセンブリ２０６ｅを動作して保持チャンバー２０４ｅから反応チャンバー２０８へ洗浄溶液を移送することにより、反応チャンバー２０８に第２洗浄溶液が添加される。
【０１２９】
図３７に示すように、第２の洗浄溶液は、粒子チャンバー２１０を経て廃物チャンバー２１２へそして必要に応じて廃物オーバーフローチャンバー２１４へポンピングされる。
【０１３０】
図３８に示すように、バルブアッセンブリ２０６ｃと同様にバルブアッセンブリ２０６ｆを動作して保持チャンバー２０４ｆから反応チャンバー２０８へ洗浄溶液を移送することにより、反応チャンバー２０８に溶出溶液が添加される。
【０１３１】
廃物チャンバー及び溶出チャンバーのアッセンブリを回転して、溶出チャンバー２１６の開口２９６を粒子チャンバー２１０の開口２５２に整列させ、溶出溶液を溶出チャンバー２１６へ移送できるようにする。溶出溶液を反応チャンバー２０８に添加する前又は後に開口２９６を開口２５２に整列できることが明らかである。
【０１３２】
図３９に示すように、溶出溶液は、粒子チャンバー２１０を経てポンピングされ、結合された核酸を溶出させる。核酸及び溶出溶液は、溶出チャンバー２１６へ流れ込む。
【０１３３】
図４０に示すように、準備された核酸サンプルは、ピペット３５４を使用してアクセスすることができる。第２の蓋２２４が除去されて、溶出チャンバー２１６の開口３０２へのアクセスが与えられる。ピペット３５４は、開口３０２へ挿入され、準備された核酸サンプルが引き出される。
【０１３４】
カセット２００は、同様のカセットと共に、一連のカセットを収容するためのマガジン又はラックに配置できることが明らかであろう。マガジン又はラックは、装置へ配置することができ、装置内のカセット２００にサンプルを準備するためのプロトコルを選択することができる。
【０１３５】
カセット２００は、カセット１００について上述したように１つ以上の加熱素子を含むことができる。
【０１３６】
カセット１００、２００は、使い捨てでよい。
【０１３７】
カセット１００、２００は、細胞を破壊して核酸を抽出することに関して説明したが、細胞を破壊して他の細胞成分、例えば、たんぱく質を抽出するのにも使用できることが明らかであろう。又、リーシス溶液は、細胞を破壊するのに使用されるものとして説明されたが、細胞を破壊できるものであれば、例えば、試薬、酵素、カタトロピック塩(catatropic salts)、他のリーシス溶液、等のいかなる物質でもよいことが明らかであろう。
【０１３８】
ここに述べたカセットは、それが閉じられるので、効果的である。プロセス中にサンプルの汚染がない。更に、１つ程度のサンプルを含む少数のサンプルを準備することができる。
【０１３９】
添付図面を参照した以上の説明は、ここに述べる方法の考えられる実施形態を例示するものに過ぎない。当業者であれば、本発明の精神及び範囲内に包含される他の多数の特定の実施形態も考えられることが明らかであろう。本発明の範囲は、以上の説明ではなく、特許請求の範囲により指示される。特許請求の範囲の等効物の意味及び範囲内に入る全ての変更は、本発明の範囲内に包含されるとみなす。
【図面の簡単な説明】
【０１４０】
【図１】本発明の実施形態によりサンプルを準備するためのカセットの断面側面図である。
【図２】本発明の実施形態によりサンプルを準備するためのカセットの斜視図である。
【図３】本発明の実施形態によりピペットを使用してカセットに入れられるサンプルを示す断面側面図である。
【図４】本発明の実施形態により図１のカセットが使用されるマガジンの斜視図である。
【図５】本発明の実施形態により図４のマガジンが使用される装置の斜視図である。
【図６】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により混合チャンバーへのＰＫ溶液の移送を示す図である。
【図７】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により混合チャンバーへのリーシス溶液の移送を示す図である。
【図８】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により混合チャンバーへのバインディング溶液の移送を示す図である。
【図９】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により混合チャンバーへの金属性ビードの移送を示す図である。
【図１０】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により第１バルブへ結合される金属性ビードを示す図である。
【図１１】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により混合チャンバーから洗浄チャンバーへの金属性ビードの移送を示す図である。
【図１２】本発明の実施形態により図１のカセットに使用するためのバルブの端面斜視図である。
【図１３】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により第２バルブへ結合される金属性ビードを示す図である。
【図１４】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により第１洗浄チャンバーから第２洗浄チャンバーへの金属性ビードの移送を示す図である。
【図１５】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により第３バルブへ結合される金属性ビードを示す図である。
【図１６】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により第２洗浄チャンバーから溶出チャンバーへの金属性ビードの移送を示す図である。
【図１７】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により溶出チャンバーから第２洗浄チャンバーへの金属性ビードの移送を示す図である。
【図１８】図１のカセットの断面側面図で、本発明の実施形態により溶出チャンバーからの準備されたサンプルの除去を示す図である。
【図１９】多チャンネルピペットを使用して、複数のカセットから複数のサンプルにアクセスするマガジンの斜視図である。
【図２０】本発明の実施形態による図１のカセットの別の実施形態を示す断面斜視図である。
【図２１】本発明の実施形態による図２０のカセットの組立コンポーネントを示す詳細な斜視図である。
【図２２】本発明の実施形態による図２０のカセットのプランジャーを示す詳細な斜視図である。
【図２３】本発明の実施形態によるカセットのバルブの詳細な斜視図である。
【図２４】本発明の実施形態による図２３のバルブの詳細な斜視図である。
【図２５】本発明の一実施形態によりサンプルを準備するためのカセットの斜視図である。
【図２６】図２５のカセットの部分断面図である。
【図２７】図２５のカセットに使用するためのバルブの部分断面斜視図である。
【図２８】図２５のバルブの部分断面側面図である。
【図２９】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、混合チャンバーへのサンプルの追加を示す図である。
【図３０】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、混合チャンバーへのＰＫ溶液の移送を示す図である。
【図３１】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、混合チャンバーへのリーシス溶液の移送を示す図である。
【図３２】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、混合チャンバーへのバインディング溶液の移送を示す図である。
【図３３】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、粒子を経て廃物チャンバーへ至るサンプルの移送を示す図である。
【図３４】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、混合チャンバーへの洗浄緩衝剤のポンピングを示す図である。
【図３５】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、粒子を通しての洗浄緩衝剤のポンピングを示す図である。
【図３６】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、混合チャンバーへの第２洗浄緩衝剤のポンピングを示す図である。
【図３７】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、粒子を通しての第２洗浄緩衝剤のポンピングを示す図である。
【図３８】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、混合チャンバーへの溶出緩衝剤のポンピングを示す図である。
【図３９】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、粒子を経て溶出チャンバーへ至る溶出緩衝剤のポンピングを示す図である。
【図４０】本発明の実施形態による図２５のカセットの断面斜視図で、溶出チャンバーからのサンプルの除去を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【国際調査報告】
2009512447.tif 000043
2009512447.tif 000044