(57)【要約】本発明は１−（４−（２ピペリジニルエトキシ）フェノキシ）−２−（３−ヒドロキシフェニル）−６−ヒドロキシナフタレンメシル酸塩に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
１−（４−（２ピペリジニルエトキシ）フェノキシ）−２−（３−ヒドロキシフェニル）−６−ヒドロキシナフタレンメタンスルホン酸塩。
【請求項２】
結晶性かつ非溶媒和である、請求項１記載の塩。
【請求項３】
銅放射源（ＣｕＫα、λ＝０．１５４０５６ｎｍ）から得られるＸ線回折パターンが、１３．０±０．１、１３．６±０．１、１８．６±０．１、１９．０±０．１、２１．０±０．１及び２２．３±０．１０［°］の２θ回折角のピークを含んでなる、請求項２記載の塩。
【請求項４】
銅放射源（ＣｕＫα、λ＝０．１５４０５６ｎｍ）から得られるＸ線回折パターンが、６．４±０．１、７．９±０．１及び９．３±０．１０［°］の２θ回折角のピークを含んでなる、請求項２又は３記載の塩。
【請求項５】
子宮内膜症の治療方法であって、それを必要とする女性に有効量の請求項１から４のいずれか１項記載の塩を投与することを含んでなる方法。
【請求項６】
子宮筋腫の治療方法であって、それを必要とする女性に有効量の請求項１から４のいずれか１項記載の塩を投与することを含んでなる方法。
【請求項７】
子宮内膜症及び／又は子宮筋腫の治療において用いる、請求項１から４のいずれか１つの塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
子宮筋腫／子宮類線維疾患は、子宮線維症、子宮肥大、子宮平滑筋腫、子宮筋層肥大、線維症子宮及び線維性の子宮筋層炎を含んでなる種々の名称に関わる臨床的課題である。基本的に、子宮筋腫は、類線維組織が子宮壁に異常蓄積する症状である。この症状は女性の月経困難症及び不妊症の原因である。
【背景技術】
【０００２】
子宮内膜症は重篤な月経困難症の症状であり、激痛、子宮内膜又は腹腔へ出血を伴い、不妊症に至ることもある。症候の原因は、通常のホルモン制御に不適切に応答し不適切な組織に位置する異所性の子宮内膜成長であると見られる。子宮内膜成長の位置が不適切であるために、当該組織が局所的な炎症応答を開始し、マクロファージの浸潤及び疼痛応答に至るカスケードを引き起こすと思われる。子宮筋腫及び子宮内膜症の原因が類線維組織及び／又は子宮内膜組織のエストロゲンに対する不適当な反応であることを示唆する証拠がある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
過去１０年以内に公表された多くの文献（例えばＷＯ  ９８／０８７９７）は選択的エストロゲン受容体変調剤（ＳＥＲＭｓ）を開示している。しかしながら、特に閉経前の女性において、子宮の類線維疾患及び／又は子宮内膜症の治療のためのＳＥＲＭ化合物の臨床用途は、前記化合物が類繊維組織又は子宮内膜症処理に対する有効性を見るための必要量において有意に卵胞刺激性の作用を潜在的に有するため、妨げとなってきた。
【０００４】
ＷＯ  ９８／０８７９７は、特に関心のあるＳＥＲＭ化合物として、１−（４−（２−ピペリジニルエトキシ）フェノキシ）−２−（３−ヒドロキシフェニル）−６ヒドロキシナフタレン塩酸塩を開示している。この化合物は「実施例３」として開示される。実施例３は、１−（４−（２ピペリジニルエトキシ）フェノキシ）−２−（３−ヒドロキシフェニル）−６−ヒドロキシナフタレン（以下「ＧＳ−ＩＩ」と記載する）を含んでなる「残留物」から「アモルファスの」塩酸塩を調製することを記載した。ＧＳ−ＩＩ（及びその塩酸塩）はＷＯ  ９８／０８７９７における教示手順により調製され医薬品として使用可能であるが、結晶格子中に水も有機溶媒も含有しないＧＳ−ＩＩ結晶塩、すなわち吸湿性が無く、水溶性で、効率的に商業規模の調製が可能である形態を見いだすことには強い要望と大きな利点がある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は１−（４−（２ピペリジニルエトキシ）フェノキシ）−２−（３−ヒドロキシフェニル）−６−ヒドロキシナフタレンに関する。すなわち、次の化合物のメシル酸塩に関する。
【化１】
2009502935.tif 000002
以下、「ＧＳ−ＩＩメシル酸塩」と呼称する。
【０００６】
本発明は、さらに、２θ回折角が１３．０±０．１、１３．６±０．１、１８．６±０．１、１９．０±０．１、２１．０±０．１及び２２．３±０．１０［°］であるピークを含んでなるＸ線回折パターンにより特徴付けられ、ここに当該パターンは銅放射源（ＣｕＫα、λ＝０．１５４０５６ｎｍ）から得られるＧＳ−ＩＩメシル酸塩の結晶化非溶媒和化形態に関する。この同一の結晶形は２θ回折角が６．４±０．１、７．９±０．１及び９．３±０．１［°］であるピークによっても同定されうる。
【０００７】
本発明は本発明の塩を含んでなる医薬品組成物及び薬剤担体にも関する。他の実施形態においては、本発明の医薬品組成物は子宮内膜症及び／又は子宮筋腫の治療のために適応されうる。
【０００８】
本発明は、本発明の塩の有効量を必要とする患者に処方することを含んでなる子宮内膜症及び／又は子宮筋腫の予防及び治療方法にも関する。
【０００９】
さらに、本発明は、子宮内膜症及び／又は子宮筋腫の予防及び治療用の本発明の塩に関する。本発明は、さらに、子宮内膜症及び／又は子宮筋腫治療用医薬の製造のための本発明の塩の使用に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
出願人は、ＧＳ−ＩＩ塩酸塩が少なくとも２つの水和した結晶形（Ｆ−Ｉ及びＦ−ＩＩ）において調製されうることを見いだした。Ｆ−１はセスキ水和物、すなわち吸湿性Ｆ−ＩＩに転換しうる半水和物である。ＧＳ−ＩＩ塩酸塩のこれらの結晶形は医薬品として有効でありうるが、Ｆ−Ｉの水環境（湿気）に対する安定性欠如及びＦ−ＩＩの吸湿性は、これら２つの活性成分の大規模生産及び製剤における妨げとなる。
【００１１】
ＧＳ−ＩＩのＸ線回折（ＸＲＤ）解析及び生理条件下（ｉｎ  ｓｉｔｕ）での塩の自動スクリーニングにより、ＧＳ−ＩＩの無塩基体、クエン酸塩及びマレイン酸塩は固体結晶を形成しないことが判明した。加えて、ＧＳ−ＩＩ乳酸塩の結晶形が生理条件下でのスクリーニングにおいて発見されたが、前記塩は（示差熱／熱重量分析測定が当該乳酸塩について室温から１７５℃において３重量％の損失を計測したように）溶媒和していた。
【００１２】
結晶性の低い及び／又はアモルファス（多結晶）材料は、通常は、結晶性の高い材料よりも製剤処置には好適ではない。アモルファス材料は顕著な量の水を吸着する傾向があるため化学的及び物理的に不安定である。例えば、ゼラチンカプセル中アモルファス材料の水の吸着は、カプセルからアモルファス材料への水分移動によりカプセルを収縮変形させうる。加えて、アモルファス材料は含有溶液から容易に沈殿する傾向がある。送給溶液からアモルファス状の薬物が沈殿すると、当該薬品の溶解性及び生物学的利用の特性は悪影響を受けうる。
【００１３】
加えて、通常、被検者に対する潜在的毒性及び溶媒により医薬品の効力は変化することにより、有機溶媒の相当量を含んでなる医薬品を製剤することは、望ましくない。加えて、最終生産物の回収に濾過を経由する調製は全て、非結晶材料を調製することが望ましくない。この種の濾過は、回収する材料が非結晶であると実施がより困難である場合が多い。さらに、水和の段階は典型的には医薬品が生産及び貯蔵される相対湿度により部分的に影響されるので、相当量の水（水和物）を含んでいる医薬品を製剤することも、製造の観点から、通常は望ましくない。換言すれば、通常、特性変化は無水物形と比較して水和物において問題となる。
【００１４】
上述した生理条件下での塩のスクリーニングにより、ＧＳ−ＩＩ結晶フマル酸塩、スクシン酸塩、スルホン酸塩及びトシル酸塩は生理条件下での溶解度が相対的に低いことが判明した。経口経路から薬物を供給する時には、一般的に、当該薬物の水溶性形態を見いだすことが好適である。一般的には、水溶性が増加すると小腸での薬物吸収特性（及び最大の生物学的利用）も増加する。生物学的利用が高ければ、臨床現場におけるばらつきは低くなりうるので、内科医治療の範囲内において患者に正しく投薬しうる利点をもたらす。基準としての生理条件での可溶性及び自動単離される同一結晶形が頑丈であることを用いて、ＧＳ−ＩＩメシル酸塩、乳酸塩、酒石酸塩及びリン酸塩の結晶を、さらなる評価の候補とした。別に、ＧＳ−ＩＩ酢酸塩結晶を単離し、さらなる特性評価も実施した。
【００１５】
これらの塩の４つ（ＧＳ−ＩＩメシル酸塩、乳酸塩、酒石酸塩及びリン酸塩の結晶）をサルに投与し、ＧＳ−ＩＩ及びコンジュゲートの血中濃度を計測した。この研究において生体中ＧＳ−ＩＩの最大暴露（ＧＳ−ＩＩ及びコンジュゲート［ｎｇ時／ｍｌ］）を生じた塩の形態は、メシル酸塩（非溶媒）結晶であった。表１に、結晶性非溶媒ＧＳ−ＩＩメシル酸塩の諸物性を示す。
【００１６】
【表１】
2009502935.tif 000003
【００１７】
要約すると、ＧＳ−ＩＩメシル酸塩は、吸湿性が無く、サル生体中で有意に暴露可能な非溶媒和結晶の形態に調製されうる。
結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩のキャラクタリゼーション
【００１８】
非溶媒結晶の形態とは、結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩が無水塩の形態であると理解すべきである。
【００１９】
結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩のＸ線回折パターンは、結晶性の高い材料であることを示す鋭いピーク及び平坦なベースラインを特徴とする。表２に、結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩における最大ピークと等しいか又は１０％以上の強度を有する全ピークの、２θ角ピーク位置及び対応するＩ／Ｉ０データを示す。表２の全てのデータは２θ角において±０．１°の精度で表示してある。
【００２０】
【表２】
2009502935.tif 000004
【００２１】
いかなる所与の結晶形においても、回折ピークの相対強度が結晶のモルフォロジ及び晶癖等の因子から生じる優先配向により変化しうることは、結晶学では周知である。優先配向の効果が存在すると、ピーク強度は変えられるが、多形の特性ピークの位置は不変である。例えば、Ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ  ＃２３、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ  ＃１８、１８４３〜１８４４ページ、１９９５を参照。さらに、いかなる所与の結晶形においても、角度ピーク位置はわずかに変化しうることもまた、結晶学では周知である。例えば、ピーク位置は、試料が分析される温度、試料の置き換え、又は内部標準の有無の変化により移動しうる。本願明細書の場合は、２θ角における±０．１°のピーク位置変化は、結晶性非溶媒ＧＳ−ＩＩメシル酸塩を明白に同定する妨げにはならない潜在的変動と考慮される。
【００２２】
ピーク位置と同様にピーク強度に基づいて、非溶媒ＧＳ−ＩＩメシル酸塩結晶は、銅放射源（λ＝０．１５４０５６ｎｍ）から得られるパターンにおいて、２θ角１３．０±０．１、１３．６±０．１、１８．６±０．１、１９．０±０．１、２１．０±０．１及び２２．３±０．１［°］のピークの存在から同定されうる。非溶媒ＧＳ−ＩＩメシル酸塩結晶の存在は、銅放射源（λ＝０．１５４０５６ｎｍ）から得られるパターンにおいて、２θ角６．４±０．１、７．９±０．１及び９．３±０．１［°］のピークの存在からも同定されうる。
【００２３】
非溶媒ＧＳ−ＩＩメシル酸塩結晶のキャラクタリゼーションには、固体ＮＭＲスペクトロスコピーを用いてもよい。固体１３Ｃ化学シフトは結晶中分子の分子構造及び電子的環境を反映する。非溶媒ＧＳ−ＩＩメシル酸塩結晶のスペクトルは４１．９、１１１．０、１１４．６、１１５．２、１１６．０、１１７．３、１１９．１、１１９．９、１２１．１、１２２．４、１２５．７、１２７．９、１２８．５、１２９．９、１３７．７、１４０．４、１４６．８、１５３．０及び１５７．４ｐｐｍの化学シフト位置に等方ピークを含んでなる。
【００２４】
解析法
ＣｕＫα（λ＝０．１５４０５６ｎｍ）を装備したＢｒｕｋｅｒ  Ｄ４  ＥｎｄｅａｖｅｒＸ線粉末回折計を用い、２θ角３〜４０°のＸ線回折パターンを獲得した。
【００２５】
１３Ｃ交差分極マジックアングルスピニング（ＣＰ／ＭＡＳ）ＮＭＲ（固体ＮＭＲ又はＳＳＮＭＲ）スペクトルは、炭素周波数１００．５７８ＭＨｚで動作し固体用アクセサリを完備したＶａｒｉａｎ  Ｕｎｉｔｙ  ４００ＭＨｚ  ＮＭＲスペクトロメータ及びＣｈｅｍａｇｎｅｔｉｃｓ  ４．０ｍｍ  Ｔ３プローブを用いて獲得した。取り込みパラメータは、水素核９０°パルス幅４．０μｓ、接触時間２．０ｍｓ、パルス繰り返し時間２０秒、ＭＡＳ周波数１０ｋＨｚ、スペクトル幅５０ｋＨｚ及び取り込み時間５０ｍｓである。化学シフト標準は、試料置換したヘキサメチルベンゼンのメチル基（δ＝１７．３ｐｐｍ）である。
【実施例】
【００２６】
合成
＜調製１＞
１−（４−（２−ピペリジニルエトキシ）フェノキシ）−２−（３−メトキシフェニル）−６−メトキシナフタレン
【化２】
2009502935.tif 000005
【００２７】
１２リットル４ネック型丸底フラスコに、メカニカル・スターラー、熱電対、環流濃縮器及び窒素源・実験室真空系と接続する三方バルブを装備し、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ；３７５０ｍｌ）中、室温で６−メトキシ−α−テトラロン（７５０ｇ、４．２６モル）を入れる。真空吸引して穏やかな環流が見られるまで溶液を脱気する。三方バルブを介して丸底を窒素パージする。この手順をさらに２回繰り返す。固体ビスパラジウム（０）トリス（ジベンジリデンアセトン）（Ｐｄ２（ｄｂａ）３；１９．５ｇ、０．０２１３モル、０．００５当量）及びビス［２−（ジフェニルホスフィノ）フェニル］エーテル（ＤＰＥ−Ｐｈｏｓ；２３．０ｇ、０．０４２６モル、０．０１当量）を入れ、生成溶液は前もって脱気する。固体ナトリウムｔ−ブトキシド（４２１ｇ、４．３８モル、１．０３当量）を入れ、直ちに、無希釈３−ブロモ・アニソール（８２０ｇ、５５５ｍｌ、４．３８モル、１．０３当量）を添加する。反応溶液を３回脱気した後、窒素加圧下で激しく撹拌する。反応体を３５℃まで冷却し、次いでマントルヒーターを用いて４日間３２℃に維持する。マントルヒーターを外し、反応温度を３６℃以下に保つ速度で反応混合物に徐々に水（２Ｌ）を加えてクエンチする。容器内容物を撹拌機付き２２Ｌ底出口付きフラスコに移す。酢酸エチル（４Ｌ）及び水（４Ｌ）を加え、内容物を撹拌する。水層を分離し、酢酸エチル（２Ｌ）で抽出する。有機層を合わせ水洗（４Ｌ）し、次いで飽和塩化ナトリウム水溶液（４Ｌ）で洗浄する。有機層を粒状硫酸ナトリウムで乾燥し、焼結ガラス漏斗（深さ約５．１ｃｍ、約２インチ）中１００〜２００メッシュＦｌｏｒｉｓｉｌパッド４４０ｇにて直接濾過する。パッドを酢酸エチル（２Ｌ）で洗浄し、濾過物を真空下で濃縮する。油分をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（４Ｌ）に溶解し、焼結ガラス漏斗（深さ約５．１ｃｍ）中１００〜２００メッシュＦｌｏｒｉｓｉｌパッド５００ｇにて徐々に濾過する。１２Ｌ４ネック型フラスコにメカニカル・スターラー及び加圧窒素インレットを備え、濾過物を移す。溶液を室温で１６時間徐々に撹拌し、生成物結晶を生成させる。固形物を濾過し、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（５００ｍＬ）ですすぐ。真空下４０℃で当該物質を乾燥し、６−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）−３，４ジヒドロ−２Ｈ−ナフタレン−１−オン、８４４ｇ（７０％）を得る。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、３００ＭＨｚ）：δ２．１７−２．３９（ｍ、２Ｈ）、２．８８−２．９６（ｍ、１Ｈ）、３．０１−３．１２（ｍ，１Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、３．７８−３．８４（ｍ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、６．７０−６．７８（ｍ、２Ｈ）、６．７９−６．８２（ｍ、１Ｈ）、６．８９−６．９２（ｍ、２Ｈ）、７．１７−７．２３（ｍ、１Ｈ）、７．８４−７．８７（ｄｄ、１Ｈ）
【００２８】
１２リットル４ネック型丸底フラスコに、メカニカル・スターラー、環流濃縮器、マントルヒーター、熱電対及び窒素インレットを装備し、６−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ナフタレン−１−オン（７６０ｇ、２．６９モル）、Ｈｙｆｌｏ（登録商標）（１９０ｇ）及びトルエン（３８００ｍｌ）を入れ、気泡管を介し窒素封入し、懸濁液を激しく撹拌する。目盛付きシリンダーを介して混合物にすばやくＰＢｒ３（８０１ｇ、２８０ｍｌ、２．９６モル、１．１当量）を添加する。反応混合物を加熱環流し一晩撹拌する。１８時間後、マントルヒーターを外し、反応混合物を３５℃まで冷却する。３Ｌ焼結漏斗内で深さ１インチ（２．５４ｃｍ）のＨｙｆｌｏ（登録商標）パッド上でスラリーを濾過する。オレンジ色の濾過物に水（８Ｌ）中ＮａＣｏ３（１．５ｋｇ）溶液を徐々に添加する。２層混合物を４０分間激しく撹拌し。オレンジ色の層を分離する。オレンジ色の層を水（４Ｌ）中Ｎａ２Ｃｏ３（５００ｇ）溶液で２回洗浄する。粒状硫酸ナトリウムで有機層を乾燥し、濾過紙、真空濃縮して、粗製４−ブロモ−７−メトキシ−３−（３−メトキシフェニル）−１，２−ジヒドロナフタレン８０４ｇを得る。
【００２９】
ｔｅｒｔ−ブチル・ジメチルエーテル（３１８２ｍＬ）中に、４−ブロモ−７−メトキシ−３−（３−メトキシフェニル）−１，２ジヒドロナフタレン１５９１ｇをスラリー化する。スラリーを３５℃に加温して２時間撹拌し、次いで室温に冷却して一晩撹拌する。スラリーを濾過し、生成物を４０℃で４８時間真空乾燥すると、固体として４−ブロモ−７−メトキシ−３−（３−メトキシフェニル）−１，２−ジヒドロナフタレン１．０７３ｋｇ（５８．４％）を得る。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、３００ＭＨｚ）：δ２．６４−２．７０（ｍ、２Ｈ）、２．９０−２．９４（ｍ、２Ｈ）、３．８（ｓ、３Ｈ）、３．８１（ｓ、３Ｈ）、６．８５−６．９（ｍ、３Ｈ）、６．９２−６．９７（ｍ、２Ｈ）、７．３１−７．３６（ｍ、１Ｈ、７．５３−７．５６（ｄｄ、１Ｈ）
【００３０】
４−ブロモ−７−メトキシ−３−（３−メトキシフェニル）−１，２−ジヒドロナフタレン（５３６．６６ｇ、１．５５モル）を、メカニカル・スターラー、環流濃縮器、熱電対、マントルヒーター及び加圧窒素インレットを装備する１２リットル４ネック型丸底フラスコに入れ、室温で内容物を撹拌する。ジクロロジシアノキノン（ＤＤＱ；３６６ｇ、１．６１モル、１．０４当量）を溶液に加えて混合物を４０℃に加温する。反応物を４０℃で一晩撹拌する。ＤＤＱ（４ｇ）をさらに添加して反応物を３時間撹拌する。ＤＤＱ（１０ｇ）をさらに添加して反応物を３日間激しく撹拌する。０．５Ｍ水酸化ナトリウム溶液（５３６５ｍｌ、２．７モル）を加えて反応混合物を４０℃で一晩撹拌する。混合物を室温に冷却し、酢酸エチル（８Ｌ）を添加する。有機層を分離して０．５Ｎ  ＮａＯＨ（４Ｌ）溶液で２回洗浄した後、水（４Ｌ）で洗浄し、次いで飽和食塩水（４Ｌ）で洗う。有機層を粒状Ｎａ２ＳＯ４で一晩乾燥し、濃縮して半固体を得る。クロロホルムを用いて半固体をシリカゲル３ｋｇのクロマトグラフィーに供する。画分を回収し、タンパク色の固体を得る。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（１．５Ｌ）中に固体をスラリー化する。濾過して固体生成物を単離し、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（１５０ｍＬ）で洗浄する。残渣を４０℃で一晩真空乾燥し、１−ブロモ−６−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）ナフタレン５００ｇ、９４％を得る。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、３００ＭＨｚ）：δ３．７８（ｓ、３Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、６．９６−７．００（ｍ、３Ｈ）、７．３３−７．４６（ｍ、４Ｈ）、７．８８−７．９１（ｄ、１Ｈ）、８．１６−８．２０（ｄ、１Ｈ）
【００３１】
トルエン（３．００Ｌ）及び１−ブロモ−６−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）ナフタレン（２．６１ｋｇ、１．４６モル）及び４−（２−ピペリジン−１−イル−エトキシ）フェノール（３４１．０９ｇ、１．５４ｍｍｏｌ、１．０６当量）を、ディーンスターク・トラップ及び窒素通気口を装備した１２リットル４ネック型丸底フラスコに入れ、上方撹拌を開始する。炭酸セシウム（５７０．３２ｇ、１．７５モル）及び塩化第一銅（７．２７ｇ、７３．４４ｍｍｏｌ）を加えて撹拌し、ディーンスターク・トラップ中に水を収集して生成混合物を４８時間加熱還流する。反応物を室温に一晩冷却し、２２Ｌ底出口付きフラスコに移す。１Ｎ水酸化ナトリウム（９Ｌ）を加えて混合物を１５分間撹拌し、１時間層分離させる。下方水層を、界面のタール状物質と共に除去する。同様にしてＮａＯＨ（９Ｌ）にて第２の洗浄を実施し、次いで１０％アンモニウム水（９Ｌ）で洗浄する。乳状物が形成される時は穏やかに揺すってこれを潰す。層分離し、有機層をＨｙｆｌｏ（登録商標）で濾過しトルエン（２Ｌ）でリンスする。有機溶液全体を１２Ｌ３ネック型容器に移し、加熱還流し、約４Ｌの溶液が残るまで溜分を集める。溶液を冷却して５０℃に維持し、酢酸エチル（４．５Ｌ）、次いでエタノール（２Ｂ−３、１６４ｍＬ、１３０ｇ、２．８２モル）を添加する。これを撹拌しながら塩化アセチル（０．２１Ｌ、０．２３ｋｇ、２．８８モル）を１時間かけて添加する。混合物を１時間かけて２０〜２５℃に冷却し、室温で一晩撹拌する。生成スラリーを濾過洗浄し、残渣をトルエン：酢酸エチル１：１混合液（４Ｌ）で洗浄し、４０時間真空乾燥して黄褐色固体９２３．０ｇ（１．７７モル、６７．７％）を得る。この固体を１２Ｌ丸底フラスコに加えてアセトニトリル（１．５Ｌ）を添加する。生成スラリーを加熱し３０分間環流し、次いで５℃に冷却して２時間撹拌する。濾過してさらに３日間真空乾燥し、題記組成物を黄褐色固体７８１．９ｇ（１．５０モル、５７．４％）として得る。
【００３２】
＜実施例１＞
結晶非溶媒和１−（４−（２−ピペリジニルエトキシ）フェノキシ）−２−（３−ヒドロキシフェニル）−６ヒドロキシナフタレンメタンスルホン酸塩
【化３】
2009502935.tif 000006
【００３３】
１−（４−（２−ピペリジニルエトキシ）フェノキシ）−２−（３−メトキシフェニル）−６メトキシナフタレン塩酸塩（５０１．３ｇ、９６３．９ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３．５Ｌ）を１２Ｌ  ３ネック型丸底フラスコに添加する。生成溶液を加熱し、乾燥窒素下で還流し、ジクロロメタン１０００ｍＬを集める。溜分を排出し、溶液を窒素加圧下で５℃以下に冷却する。６℃以下で、三塩化ホウ素（６７７．３ｇ、７６８モル、６当量）を固体表面下に添加する。生成溶液を室温まで加温して２５時間撹拌し、次いで５℃以下に冷却し、脱気し予冷（１．７℃）したメタノール（３．５Ｌ）を窒素下で１時間かけて滴下し、温度を１０℃以下に維持する。生成溶液を３５℃で２．５Ｌが除去されるまで真空蒸溜する。脱気メタノール（５Ｌ）を追加し、真空下で５Ｌの溜分を集めるまで蒸溜し続ける。生じたメタノール溶液を、ＦＭＩポンプを介してメチルイソブチルケトン（４Ｌ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１３Ｌ）の混合物に撹拌しながら添加する。追加終了後に層分離させて有機層を一晩遠心分離する。有機層を５０℃に加温してメタンスルホン酸（６４ｍＬ、６９３．９１ｍｍｏｌ。１．０当量）を３０分かけて加え、次いで標題の化合物の種を加えてさらに３０分撹拌する。生じたスラリーを５０℃で真空蒸溜し２２００ｍＬの溜分を集める。メチルイソブチルケトン（２．５Ｌ）を加えた後、５０℃で２回目の真空蒸溜を行い、さらに２１００ｍＬの溜分を集める。さらにメチルイソブチルケトン（１．５ｍＬ）を加え、生じたスラリーを１．５時間かけて室温まで冷却する。スラリーを０℃に冷却し、この温度に１時間保持し、次いで濾過する。濾過残渣をメチルイソブチルケトン（１Ｌ）ですすぎ、さらに残渣から吸気して乾燥する。さらに固体を６５℃で１２時間真空乾燥し、１−（４−（２−ピペリジニルエトキシ）フェノキシ）−２−（３−ヒドロキシフェニル）−６−ヒドロキシナフタレン（９４２．６１ｍｍｏｌ、９７．８％）を黄褐色の固体として得る。融点：２２３．０〜２２４．５℃、効力（平均２ラン）：９５．８１％、収率補正効力：４９８．２１ｇ、９３．７％
【００３４】
上述実験の１−（４−（２−ピペリジニルエトキシ）フェノキシ）−２−（３−メトキシフェニル）−６ヒドロシキナフタレンメタンスルホン酸塩（４８８．９０ｇ、効力９５．８１％）を、濃縮機、上方撹拌羽根及び内蔵熱電対を備える５Ｌ４ネック型丸底フラスコに添加する。メタノール（１．５Ｌ）を加え、生じるスラリーを撹拌する。メチルイソブチルケトン（１．５Ｌ）を加え、生じるスラリーをタイマーを用いて１６時間還流する。スラリーを室温で一晩冷却し、次いで０℃に冷却してこの温度に１時間保持する。次いで濾過し、濾過残渣を室温においてメチルイソブチルケトン（１Ｌ）ですすぎ、残渣から吸気して乾燥する。さらに固体を６０℃で一晩真空乾燥し、標題の化合物を淡泊色固体４０２．４ｇ（９０６．３５ｍｍｏｌ、８２．３ｇ）として得る。融点：２２５．９〜２２６．９℃、効力（平均２ラン）：９９．１８％、収率補正効力：３９９．１０ｇ、８１．６％
【００３５】
製剤（医薬組成物）
本発明の塩、特に結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩は、好適には服用単位すなわち個別の給送担体中の形態で製剤される。例えば、投薬される患者への処方前、好適には経口処方前において、錠剤又はカプセルである。用語「患者」は人間の女（女性）及びペット動物（犬、猫、馬及び同様）等の人間以外の女の動物を意味する。好適な患者は女性である。子宮筋腫及び／又は子宮内膜症治療の状況において特に好適な患者は閉経前の女性である。骨粗鬆症の状況において特に好適な患者は閉経後の女性である。
【００３６】
本発明の医薬組成物は、好適には公知の入手可能な成分を用いて調製される。本願明細書に形容詞として用いる用語「医薬」は実質的に有害ではないことを意味する。本発明の組成物の製造において、本発明の塩（好適には結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩）は普通は担体と混合され、又は担体により希釈され、又は担体内に封入される。希釈剤として使用する時には、当該担体は有効成分に対して形状付与剤、賦形剤又は媒体として機能する固体、半固体、又は液体である。組成物は好適には錠剤又はカプセル等の経口的な送達に適した形態である。
【００３７】
製剤例
【００３８】
製剤１
【表３】
2009502935.tif 000007
【００３９】
１０重量％ＳＬＳ水溶性噴霧溶液を調製する。マンニトール、ＭＣＣ、結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩及びＨＰＭＣを、保護スクリーンを通じて粉砕容器中でふるい分ける。粉砕器中の内容物を混合する。混合中に噴霧溶液を混合粉末に添加する。噴霧溶液の添加を完了した後に、水に換えて粉砕過程が完了するまで噴霧を継続する。粉砕した材料を折り目の付いた紙トレー上に展開して乾燥するか又は流動層乾燥機中で粉砕材料を乾燥する。乾燥した粉体及びミルを取り出す。粉砕した材料を適切な混合機に配置する。デンプングリコール酸ナトリウムを保護スクリーンに通過させ、この成分を混合機に添加する。５分間混合する。ステアリン酸マグネシウムを保護スクリーンに通過させ、この成分を混合機に添加する。３分間混合する。完成した粉末をゼラチンカプセルに充填する。
【００４０】
製剤２
【表４】
2009502935.tif 000008
【００４１】
１０重量％ＳＬＳ水溶性噴霧溶液を調製する。マンニトール、ＭＣＣ、結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩及び部分アルファー化デンプンを、保護スクリーンを通じて粉砕容器中でふるい分ける。混合中に噴霧溶液を混合粉末に添加する。噴霧溶液の添加を完了した後に、水に換えて粉砕過程が完了するまで噴霧を継続する。粉砕した材料を折り目の付いた紙トレー上に展開して乾燥するか又は流動層乾燥機中で粉砕材料を乾燥する。乾燥した粉体及びミルを取り出す。粉砕した材料を適切な混合機に配置する。デンプングリコール酸ナトリウムを保護スクリーンに通過させ、この成分を混合機に添加する。３分間混合する。ステアリン酸ナトリウムを保護スクリーンに通過させ、この成分を混合機に添加する。５分間混合する。完成した粉末をゼラチンカプセルに充填する。
【００４２】
バイオアッセイ
Ｉｓｈｉｋａｗａ細胞（Ｉｓｈｉｋａｗａ  ｃｅｌｌ）増殖アッセイ
このアッセイは、本発明の塩の単独存在下でのアゴニストモード、及び、本発明の塩の活性が成長のエストラジオール刺激をブロックするアンタゴニストモードの両方において、細胞増殖を計測する。このアッセイは、Ｉｓｈｉｋａｗａヒト子宮内膜腫瘍細胞を利用し、アルカリホスファターゼ終点を介する内在性ＥＲレセプターへのアゴニスト及びアンタゴニスト効果を計測する（Ｌｉｔｔｌｅｆｉｅｌｄら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１２７巻、２７５７−２７６２ページ、１９９０）。アルカリホスファターゼ活性は、アゴニストモード及びアンタゴニストモードの両方における相対的なエストロゲン刺激の終点として計測され、エストラジオール刺激性活性をブロックする被検組成物の活性が計測される（Ｋ．Ｓ．Ｂｒａｍｌｅｔｔ、Ｊ．Ｂｕｒｒｉｓ、Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｍｏｌｅｃ．  Ｂｉｏｌ．、８６巻、２７−３４ページ、２００３）。
【００４３】
Ｉｓｈｉｋａｗａ  ｃｅｌｌを、ＭＥＭ（Ｍｉｎｉｍｕｍ  Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  Ｍｅｄｉｕｍ、Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、米国ミズリー州）（１０％ｖｏｌ／ｖｏｌウシ胎児血清（ＦＢＳ）（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ）を補い、Ｅａｒｌｅ’ｓ塩及びＬ−グルタチオンを含む）中に維持する。アッセイの１日前に、成長培地をアッセイ培地（ＤＭＥＭＩＦ−１２（３：１）、５％デキストランコート・チャコール処理済みウシ胎児血清（ＤＣＣ−ＦＢＳ）（Ｈｙｃｌｏｎｅ、Ｌｏｇｅｎ、米国ユタ州）、Ｌ−グルタミン（２ｍＭ）、ＭＥＭピルビン酸ナトリウム（１ｍＭ）、ＨＥＰＥＳ（Ｎ−［２−ヒドロキシエチル］ピペリジン−Ｎ’−［２−エタンスルホン酸］、２ｍＭ）（全てＧｉｂｃｏ  ＢＲＬ）を補う）に交換する。一晩インキュベート後、Ｉｓｈｉｋａｗａ  ｃｅｌｌをＣａ２＋及びＭｇ２＋を除いたダルベッコリン酸バッファ塩水（１Ｘ）（Ｄ−ＰＢＳ）（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ）ですすぎ、フェノールレッド不含０．２５％トリプシン／ＥＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ）を用いて３分間インキュベートし、トリプシン処理する。セルをアッセイ培地に再度サスペンドし、２５０，０００セル／ｍＬに調節する。セルを９６ウェルの平底マイクロカルチャープレートに、培地（Ｃｏｓｔａｒ  ３５９６）１００μＬあたり２５，０００セルの濃度で加え、５％ＣＯ２加湿インキュベータにて２４時間３７℃でインキュベートする。
【００４４】
翌日、被検組成物の系統的希釈物をアッセイ培地に調製する（アッセイ中、６倍の最終濃度とする）。アゴニストモードにおいては、プレートは２５μＬ／ウェルのアッセイ培地を受け、次いで２５μＬ／ウェルの希釈被検組成物を受けた（６倍の最終濃度）。アンタゴニストモードにおいては、プレートは２５μＬ／ウェルの６ｎＭ  Ｅ２（β−エストラジオール、Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、米国ミズリー州）を受け、次いで２５μＬ／ウェルの希釈被検組成物を受けた（６倍の最終濃度）。さらに３７℃で４８時間インキュベートした後、培地をウェルから吸い出し、１００μＬの新鮮なアッセイ培地を各マイクロカルチャーに添加した。上述のように、被検組成物の系統的希釈物をセルに添加した。さらに３７℃で７２時間インキュベートし、培地を除去してアッセイを停止し、ダルベッコリン酸バッファ塩水（Ｄ−ＰＢＳ、Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ）で２回すすいだ。
【００４５】
プレートを５分間乾燥させ、−７０℃で少なくとも１時間凍結させた。次いでプレートを冷凍機から取り出し、室温で解凍した。各ウェルに、１００μＬの１−Ｓｔｅｐ（登録商標）ＰＮＰＰ（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、米国イリノイ州）及びＤＰＳＳ（Ｇｉｂｃｏ）１：１溶液を添加した。２０分インキュベートした後、プレートを分光光度計上４０５ｎｍにおいて読み取った。データは、アンタゴニストモードにおいて直線補間しＩＣ５０値を導くようフィッティングした。アゴニストモードにおいては、被検組成物の有効性パーセンテージを、１００ｎＭタモキシフェンアルカリホスフェート刺激に対して、１００×（被検組成物−対照）／（タモキシフェン−対照）として計算した。アンタゴニストモードにおいては、被検組成物の有効性パーセンテージを、Ｅ２（１ｎＭ）単体に対して、１００×（Ｅ２−被検組成物）／（Ｅ２−参照）として計算した。
【００４６】
結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩を用いた２つのアッセイについて、アンタゴニスト応答は１００％（±０．６％）、ＩＣ５０値２．４ｎＭ（±０．４）であり、アゴニスト応答は１３．８％（±１１．５％）であった。
【００４７】
３日齢ラットの子宮におけるアンタゴニスト
生後１９〜２１日の雌Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットのグループあたり６匹に、エチニルエストラジオール（ＥＥ、０．１ｍｇ／ｋｇ）及び被検組成物１０、１、０．１、又は０．０１ｍｇ／ｋｇを３日間経口投与する。被検組成物は２０％ｗ／ｖβ−ヒドロキシシクロデキストリン水に溶解し、毎日０．２ｍＬの体積にて経口投与する（ＥＥ投与の１５分前）。ラット６匹のグループはまた、ネガティブコントロールとして賦形剤を、ポジティブコントロールとしてＥＥ単独で与える。動物は一晩断食の後に最終投薬する。翌朝、動物を秤量し、次いで安楽死（二酸化炭素窒息により）させ、次いで子宮を素早く回収し（腹部正中切開）、脂肪組織を除き、吸取紙に内腔液を吸わせて除去し、秤量する。
【００４８】
子宮重量／体重比（ＵＷＲ）をそれぞれの動物ごとに算出する。次いで、エストロゲン誘発反応の抑制パーセンテージを次式により計算する。抑制パーセント＝１００×（ＵＷＲＥＥ−ＵＷＲ被検組成物／ＵＷＲＥＥ−ＵＷＲ参照）。投薬反応曲線の直線関係の片対数回帰分析からＥＤ５０値を導出する。結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩を伴った２つのアッセイにおいて、ＥＤ５０はいずれの場合も０．２２ｍｇ／ｋｇであった。
【００４９】
８週齢成熟ＯＶＸラット子宮及び骨部影響
体重約２７０ｇの処女６月齢ＳＤ雌ラット（Ｈａｒｌａｎ、米国インディアナ州）を無作為化して投与グループとし、イソフルラン麻酔を用いて両側卵巣摘出を実施する。投与は卵巣摘出の３日後に開始する。グループに毎日８週間、２０％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン賦形剤中ＧＳ−ＩＩメシル酸塩を経口投与する。椎骨及び大腿骨を剖検時に切り取り、腰椎Ｌ−４の中央横断面及び遠位大腿骨骨幹端を５０％エタノール／生理的食塩水中にて定量的コンピュータ断層撮影法（ＱＣＴ）で走査する（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｍ、Ｎｏｒｌａｎｄ／Ｓｔｒａｔｅｃ、Ｆｔ．  Ａｔｋｉｎｓｏｎ、米国ウィスコンシン州）。断面積（Ｘ−Ａｒｅａ）、骨無機質含量（ＢＭＣ、ｍｇ）及び体積ＢＭＤ（ｖＢＭＤ、ｍｇ／ｃｍ３）を、上述のようにボクセル寸法１４８ｘ１４８ｘ５００μｍを用いて定量する（Ｍ．Ｓａｔｏ、Ｂｏｎｅ、１７巻、１５７Ｓ−１６２Ｓページ、１９９５）。遠位大腿骨骨幹端（キャンセル用の骨計測）及び第５腰椎をコンピュータ断層撮影（ＣＴ）でスキャンし、骨計測を実施する（Ｓａｔｏ、１９９５及びＳａｔｏら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、４２巻、１−２４ページ、１９９９）。
【００５０】
結晶性ＧＳ−ＩＩメシル酸塩にて８週間処理後の子宮の含水重量変化は極小であった。子宮無処理（ｓｈａｍ群）のラットと比較すると、卵巣切除されたラットへの結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩投与は、１０ｍｇ／ｋｇ投与におけるＯＶＸコントロールに対してわずか８．７％の刺激という結果であった。加えて、結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩投与を０．０１ｍｇ／ｋｇに低下させてもＢＭＣ及びＢＭＤとも顕著に保存された。腰椎においては統計的に顕著なＢＭＣ変化は起こらなかったが、ＢＭＤの保存はラット腰椎においても見られた。
【００５１】
利用
本願明細書に使用の用語「治療」「治療する」は、本願明細書に記載の病理的症状又はその後遺症の進行又は重症度を緩和するか、回復させるか、禁止するか、抑制するか、減速するか、止めるか又は逆転させることを意味する。用語「防止」は、ＧＳ−ＩＩメシル酸塩、好適には結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩の受容者が招く、発現する、又は再発する（二次的防止）本願明細書に記載のいかなる病理学的症状又は後遺症の可能性（リスク）をも減らすことに関連する。子宮内膜症及び／又は子宮筋腫の状況に置ける好適な防止の態様は二次的防止である。
【００５２】
ＧＳ−ＩＩメシル酸塩が治療に有効である当該疾患、不調又は症状は以下を含んでなる。（１）子宮及び／又は乳癌、（２）子宮内膜症、（３）子宮平滑筋腫、及び（４）骨粗鬆症。本願明細書に記載の子宮平滑筋腫の治療は、痛み、頻尿及び子宮出血等の付随症候を減らしうる。
【００５３】
本願明細書に記載の治療法の「必要とする患者」又は「必要とする女性」とは、列挙した病的症状（又はその後遺症）又はその後遺症を被っている患者／女性であるか、又は医用診断による確定、すなわち主治医による確定としてリスクが認識された患者／女性である。
【００５４】
服用及び投薬経路
本願明細書に記載のように、用語「有効量」は、本願明細書に記載の症状を治療又は予防しうる本発明の塩の量を意味する。
【００５５】
投与される個々の服用量は、それぞれの状況をとりまく特定の事情により確定する。この事情には、投与の経路、受容者の以前の医療履歴、治療中又は予防中の病理的症状又は症候、治療中症状／症候の重症度、及び受容者の年齢を含む。受容者である患者の医師は、関連する状況を考慮して投与される治療量を決定すべきである。
【００５６】
経口経路で投薬される場合、結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩の１日の有効最小量は約１５ｍｇを超える。通常は、このような（経口投与）の１日最大量は約２４０ｍｇを上回らない。当初は化合物の少量を投与し、徐々に所望の治療的効果が観測されるまで投与量を増加させるという、受容者への「投与量滴定」という医療技術における標準作業方法に従って、正確な投与量が決定されてもよい。
【００５７】
結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩は、好適には経口経路で投与される。
【００５８】
組合せ治療法
ＧＳ−ＩＩメシル酸塩、好適には結晶性非溶媒和ＧＳ−ＩＩメシル酸塩の組合せ治療法は、疾患の治療又は当該組成物が有効である条件において、他の薬剤との組合せで用いられてもよい。そのような他の薬剤は、通常用いられる量及び経路により、ＧＳ−ＩＩメシル酸塩と同時期に又は順次的に投与されてもよい。ＧＳ−ＩＩメシル酸塩が１以上の他の薬剤と同時期に用いられる時は、本発明の化合物に加えて他の薬剤を含める薬剤単位服用量の形態が好適である。従って、本発明の薬剤組成には１以上の他の有効成分を含むものが包含される。
【００５９】
別々に投与されるか又は同一の薬剤組成により本発明の化合物と組合せてもよい別の他の有効成分の一例としては、子宮内膜症及び／又は子宮筋腫の治療に用いられる酢酸ロイプロリド、ダナゾール等の試薬、処方箋及び店頭取引の鎮痛剤、及びプロゲスチンのみの経口避妊薬、又はプロゲステロン受容体変調剤が挙げられる。
【図面の簡単な説明】
【００６０】
【図１】結晶性非溶媒和化ＧＳ−ＩＩメシル酸塩の代表的Ｘ線回折パターンである。
【図１】
2009502935.tif 000009
【国際調査報告】
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2009502935.tif 000011
2009502935.tif 000012