(57)【要約】本発明は、新規な式（Ｉ）のトマイマイシン誘導体、これらの調製方法及びこれらの治療的使用に関する。2009524636.tif 000126
2009524636.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2009524636.tif 000115
［式中、
−−−−は、任意の単結合を表し、
・・・・は、単結合又は二重結合のいずれかを表し、
但し、・・・・が単結合を表すとき、同じである又は異なったＵ及びＵ’は、独立してＨを表し、同じである又は異なったＷ及びＷ’は、独立して、ＯＨ、エーテル、例えば−ＯＲ、エステル（例えば、アセタート）、例えば−ＯＣＯＲ、カルボナート、例えば−ＯＣＯＯＲ、カルバマート、例えば−ＯＣＯＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式カルバマート、尿素、例えば、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、チオカルバマート、例えば−ＯＣＳＮＨＲ、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式チオカルバマート、−ＳＨ、スルフィド、例えば−ＳＲ、スルホキシド、例えば−ＳＯＲ、スルホン、例えば−ＳＯＯＲ、スルホナート、例えば−ＳＯ３−、スルホンアミド、例えば−ＮＲＳＯＯＲ、アミン、例えば−ＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような場合により環式のアミン、ヒドロキシルアミン誘導体、例えば−ＮＲＯＲ’、アミド、例えば−ＮＲＣＯＲ、アジド、例えば−Ｎ３、シアノ、ハロ、トリアルキル又はトリアリールホスホニウム、アミノ酸誘導基からなる群から選択され、及び・・・・が二重結合を表すとき、Ｕ及びＵ’は存在せず、Ｗ及びＷ’はＨを表し、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’は、同じであるか又は異なっており、ハライド若しくは１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、アリール、Ｈｅｔ、Ｓ（Ｏ）ｑＲによって場合により置換されたアルキルから独立して選択され、又はＲ１とＲ２及びＲ１’とＲ２’とは、一緒に、それぞれ基＝Ｂ及び＝Ｂ’を含有する二重結合を形成し、
Ｂ及びＢ’は、同じであるか又は異なっており、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、Ｒ、、ＣＦ３、ＯＲ、アリール、Ｈｅｔ、Ｓ（Ｏ）ｑＲによって場合により置換されたアルケニルから独立して選択され又はＢ及びＢ’は、酸素原子を表し、
Ｘ、Ｘ’は、同じであるか又は異なっており、１個以上の−Ｏ−、−ＮＲ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）ｑ−から独立して選択され、
Ａ、Ａ’は、同じであるか又は異なっており、酸素、窒素又は硫黄原子を場合により含有し、それぞれが、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、アリール、Ｈｅｔ、アルキル、アルケニルによって場合により置換されている、アルキル又はアルケニルから独立して選択され、
Ｙ、Ｙ’は、同じであるか又は異なっており、Ｈ、ＯＲから独立して選択され、
Ｔは、−ＮＲ−、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）ｑ−若しくは４から１０員のアリール、シクロアルキル、複素環式若しくはヘテロアリール（それぞれは、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、及び／若しくはリンカーによって場合により置換されている）又は１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ及び／若しくはリンカーによって場合により置換された分枝鎖アルキル、又は１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ及び／若しくはリンカーによって場合により置換された直鎖アルキルであり、
等しい又は異なるｎ、ｎ’は０又は１であり、
ｑは０、１又は２であり、
Ｒ、Ｒ’は、等しいか又は異なっており、Ｈ、アルキル、アリール（それぞれは、Ｈａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、Ｒ、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、アリール、Ｈｅｔによって場合により置換されている）から独立して選択される］
の化合物又はこれらの医薬的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶性構造物又はこれらの光学異性体、ラセミ化合物、ジアステレオマー若しくはエナンチオマー。
【請求項２】
下記の式（ＩＩ）：
【化２】
2009524636.tif 000116
［Ｙ、Ｙ’、Ｘ、Ｘ’、ｎ、ｎ’、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ、Ｒ’、Ｔは、請求項１に記載の通りであり、同じであるか又は異なったＷ、Ｗ’は、ＯＨ、エーテル、例えば−ＯＲ、エステル（例えば、アセタート）、例えば−ＯＣＯＲ、−ＣＯＯＲ、カルボナート、例えば−ＯＣＯＯＲ、カルバマート、例えば−ＯＣＯＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式カルバマート、尿素、例えば、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、チオカルバマート、例えば−ＯＣＳＮＨＲ、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式チオカルバマート、−ＳＨ、スルフィド、例えば−ＳＲ、スルホキシド、例えば−ＳＯＲ、スルホン、例えば−ＳＯＯＲ、スルホナート、例えば−ＳＯ３−、スルホンアミド、例えば−ＮＲＳＯＯＲ、アミン、例えば−ＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような場合により環式のアミン、ヒドロキシルアミン誘導体、例えば−ＮＲＯＲ’、アミド、例えば−ＮＲＣＯＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、アジド、例えば−Ｎ３、シアノ、ハロ、トリアルキル又はトリアリールホスホニウム、アミノ酸誘導基からなる群から独立して選択される］
を有する、請求項１に記載の誘導体。
【請求項３】
式：
【化３】
2009524636.tif 000117
（式中、Ｘ、Ｘ’、Ａ、Ａ’、Ｙ、Ｙ’、Ｔ、ｎ、ｎ’は、請求項１のように定義される）
の請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
式：
【化４】
2009524636.tif 000118
（式中、Ｘ、Ｘ’、Ａ、Ａ’、Ｙ、Ｙ’、Ｔ、ｎ、ｎ’は、請求項１のように定義される）
の請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｘ＝Ｘ’である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｘ＝Ｘ’＝Ｏである、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ａ＝Ａ’である、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ａ＝Ａ’＝直鎖の置換されていないアルキルである、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｙ＝Ｙ’である、請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙ＝Ｙ’＝Ｏアルキルである、請求項１から９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｔが、それぞれが、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、Ｒ、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、アルキル、及び／又はリンカーによって場合により置換されている、４から１０員のアリール、シクロアルキル、複素環式若しくはヘテロアリールである、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｔが、それぞれが、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、Ｒ、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ及び／又はリンカーによって場合により置換されている、フェニル又はピリジルである、請求項１から１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
前記リンカーが、ジスルフィド基、チオエーテル基、酸不安定基、光不安定基、ペプチダーゼ不安定基及びエステラーゼ不安定基を含有するものから選択される、請求項１から１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
前記リンカーが、チオール−、スルフィド−又はジスルフィド含有置換基を含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
前記リンカーが、式：
−Ｇ−Ｄ−（Ｚ）ｐ−Ｓ−Ｚ’
［式中、
Ｇは、単若しくは二重結合、−Ｏ−、−Ｓ−又は−ＮＲ−であり、
Ｄは、単結合又は−Ｅ−、−Ｅ−ＮＲ−、−Ｅ−ＮＲ−Ｆ−、−Ｅ−Ｏ−、−Ｅ−Ｏ−Ｆ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−Ｆ−、−Ｅ−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｅ−、−Ｅ−ＣＯ−Ｆ−、−Ｅ−Ｓ−、−Ｅ−Ｓ−Ｆ−、−Ｅ−ＮＲ−Ｃ−Ｓ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＳ−Ｆ−であり、
式中、Ｅ及びＦは、同じであるか又は異なっており、直鎖又は分枝鎖の−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−アルキル−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉシクロアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ複素環式（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉヘテロアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−、−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉシクロアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ複素環式（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉヘテロアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−シクロアルキル−アルキル−、−アルキル−シクロアルキル−、−複素環式−アルキル−、−アルキル−複素環式−、−アルキル−アリール−、−アリール−アルキル−、−アルキル−ヘテロアリール−、−ヘテロアリール−アルキル−（式中、同じである又は異なったｉ及びｊは、整数であり、０、１から２０００から独立して選択される）から独立して選択され、
Ｚは、直鎖又は分枝鎖−アルキル−であり、
ｐは０又は１であり、
Ｚ’は、Ｈ、チオール保護基、例えば、ＣＯＲ、Ｒ２０又はＳＲ２０（式中、Ｒ２０は、Ｈ、メチル、アルキル、場合により置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又は複素環式を表す）を表し、但し、Ｚ’がＨであるとき、前記化合物は、ＰＢＤ部分の１個のイミン結合−ＮＨ＝へのチオール基−ＳＨの付加から得られる分子内環化によって形成される対応する化合物と平衡状態にある］
のものである、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｇが、単結合又は−Ｏ−若しくは−ＮＲ−である、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｇが−Ｏ−である、請求項１５又は１６に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｄが、単結合又は−Ｅ−、−Ｅ−ＮＲ−、−Ｅ−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｅ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−である、請求項１５、１６又は１７に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｄが、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−である、請求項１５から１８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｅが、直鎖又は分枝鎖の−アルキル−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−又は−アルキル−複素環式である、請求項１５から１９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｚが、−（ＣＨ２）２−Ｃ（ＣＨ３）２−である、請求項１５から２０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２】
ｐが１である、請求項１５から２１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｚ’が、Ｈ又はＳＲ２０（式中、Ｒ２０は、アルキル、アリール、複素環式又はヘテロアリールを表す）である、請求項１５から２２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
前記リンカーが、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｙ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＮＲ１９ＣＯ）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＯＣＯ）（Ｒ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＯ）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＯＮＲ１９）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フェニル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−オキサゾリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チアゾリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チエニル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−イミダゾリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−モルホリノ−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−ピペラジノ−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フェニル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チアゾリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チエニル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−モルホリノ−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’又は
−Ｏ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｏ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＮＲ１９ＣＯ）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｏ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｏ−フェニル−ＱＳＺ’、−Ｏ−フリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−チエニル−ＱＳＺ’、−Ｏ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−Ｏ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−Ｏ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、
−ＯＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＮＲ１９ＣＯ）ｖ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＯＣＯ−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＯＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＯＣＯ−フェニル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−フリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−チエニル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’又は
−ＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＣＯ−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＣＯ−フェニル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−フリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−チエニル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＣＯ−ピペリジノ−ＱＳＺ’、−ＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、
−ＮＲ１９（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯ−フェニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−フリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−チエニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ピペリジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−フェニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−フリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−チエニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−ピペリジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−フェニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−チエニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−ピペリジノ−ＱＳＺ’、
−Ｓ（Ｏ）ｑ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｓ（Ｏ）ｑ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＳＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＳＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＳＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＳＣＯ−ピペリジノ−ＱＳＺ’及び−ＳＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’［式中、
Ｚ’は、Ｈ、チオール保護基、Ｒ２０’又はＳＲ２０’（式中、Ｒ２０’は、アルキル、アリール、複素環式又はヘテロアリールを表す）であり、
Ｑは、直接結合又は１から１０個の炭素原子を有する直鎖アルキル若しくは分枝鎖アルキル又は２から２０個の繰り返しエチレンオキシ単位を有するポリエチレングリコールスペーサーであり、
Ｒ１９及びＲ１２は、同じであるか又は異なっており、１から１０個の炭素原子を有する直鎖アルキル、分枝鎖アルキル若しくは環式アルキル又は単純な若しくは置換されたアリール若しくは複素環式であり、Ｒ１２は、更にＨであってよく、
Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、同じであるか又は異なっており、Ｈ又は１から４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分枝鎖アルキルであり、
Ｒ１７及びＲ１８は、Ｈ又はアルキルであり、
ｕは、１から１０の整数であり、０であってもよく、
ｔは、１から１０の整数であり、０であってもよく、
ｙは、１から２０の整数であり、０であってもよい］
から選択される、請求項１４又は１５に記載の化合物。
【請求項２５】
８，８’−［１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−メトキシ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［１，４−ブタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［３−メチル−１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［２，６−ピリジンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピルオキシ）−２，６−ピリジンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（３−アミノプロピルオキシ）−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピル）−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−｛５−［３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）プロピルオキシ］−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）｝−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−アセチルチオメチル−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
ビス−｛２−［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−５−オキソ−１，３，，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イルオキシ］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、
８，８’−［３−（２−アセチルチオエチル）−１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−４−メルカプト−４，４−ジメチルブタノイル）アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）−アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メルカプト−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（２−（４−メルカプト−４−メチル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−ブトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−［メチル−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−アミノ］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
並びに対応するメルカプト誘導体又はこれらの医薬的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶性構造物又はこれらの光学異性体、ラセミ化合物、ジアステレオマー若しくはエナンチオマーから選択される、請求項１から２４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６】
結合基を含むリンカーを介して細胞結合剤に化学的に結合されている１種以上のトマイマイシン誘導体を含むコンジュゲート。
【請求項２７】
トマイマイシン誘導体が、式（Ｉ’）：
【化５】
2009524636.tif 000119
［式中、
−−−−は、任意の単結合を表し、
・・・・は、単結合又は二重結合を表し、
但し、・・・・が単結合を表すとき、同じである又は異なったＵ及びＵ’は、独立してＨを表し、同じである又は異なったＷ及びＷ’は、ＯＨ、エーテル、例えば−ＯＲ、エステル（例えば、アセタート）、例えば−ＯＣＯＲ、カルボナート、例えば−ＯＣＯＯＲ、カルバマート、例えば−ＯＣＯＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式カルバマート、尿素、例えば、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、チオカルバマート、例えば−ＯＣＳＮＨＲ、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式チオカルバマート、−ＳＨ、スルフィド、例えば−ＳＲ、スルホキシド、例えば−ＳＯＲ、スルホン、例えば−ＳＯＯＲ、スルホナート、例えば−ＳＯ３−、スルホンアミド、例えば−ＮＲＳＯＯＲ、アミン、例えば−ＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような場合により環式のアミン、ヒドロキシルアミン誘導体、例えば−ＮＲＯＲ’、アミド、例えば−ＮＲＣＯＲ、アジド、例えば−Ｎ３、シアノ、ハロ、トリアルキル又はトリアリールホスホニウム、アミノ酸誘導基からなる群から独立して選択され、及び・・・・が二重結合を表すとき、Ｕ及びＵ’は存在せず、Ｗ及びＷ’はＨを表し、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’は、同じであるか又は異なっており、ハライド若しくは１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、アリール、Ｈｅｔ、Ｓ（Ｏ）ｑＲによって場合により置換されたアルキルから独立して選択され、又はＲ１とＲ２及びＲ１’とＲ２’とは、一緒に、それぞれ基＝Ｂ及び＝Ｂ’を含有する二重結合を形成し、
Ｂ及びＢ’は、同じであるか又は異なっており、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、アリール、Ｈｅｔ、Ｓ（Ｏ）ｑＲによって場合により置換されたアルケニルから独立して選択され、又はＢ及びＢ’は、酸素原子を表し、
Ｘ、Ｘ’は、同じであるか又は異なっており、１個以上の−Ｏ−、−ＮＲ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）ｑ−から独立して選択され、
Ａ、Ａ’は、同じであるか又は異なっており、酸素、窒素又は硫黄原子を場合により含有し、及びそれぞれが、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、アリール、Ｈｅｔ、アルキル、アルケニルによって場合により置換されている、アルキル又はアルケニルから独立して選択され、
Ｙ、Ｙ’は、同じであるか又は異なっており、Ｈ、ＯＲから独立して選択され、
Ｔは、−アルキル−、−ＮＲ−、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）ｑ−若しくは４から１０員のアリール、シクロアルキル、複素環式若しくはヘテロアリールであり、それぞれは、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、Ｒ、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲによって場合により置換されており、及び１個以上の前記リンカーによって置換されており、
等しい又は異なるｎ、ｎ’は０又は１であり、
ｑは０、１又は２であり、
Ｒ、Ｒ’は、等しいか又は異なっており、Ｈ、アルキル、アリール（それぞれは、Ｈａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、Ｒ、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、アリール、Ｈｅｔによって場合により置換されている）から独立して選択される］
のもの又はこれらの医薬的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶性構造物又はこれらの光学異性体、ラセミ化合物、ジアステレオマー若しくはエナンチオマーであり、
前記誘導体が、前記結合基を含む前記リンカーを介して細胞結合剤に共有結合されている、請求項２６に記載のコンジュゲート。
【請求項２８】
前記細胞結合剤が、抗体若しくは少なくとも１個の結合部位を含有する抗体のフラグメント、リンホカイン、ホルモン、成長因子、栄養輸送分子又は全ての他の細胞結合分子若しくは物質から選択される、請求項２６又は２７に記載のコンジュゲート。
【請求項２９】
前記細胞結合剤が、モノクローナル抗体；キメラ抗体；ヒト化抗体；完全ヒト抗体；一本鎖抗体；抗体のフラグメント、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖ；インターフェロン；ペプチド；リンホカイン、例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６；ホルモン、例えば、インスリン、ＴＲＨ（チロトロピン放出ホルモン）、ＭＳＨ（メラニン細胞刺激ホルモン）、ステロイドホルモン、例えば、アンドロゲン及びエストロゲン；成長因子及びコロニー刺激因子、例えば、ＥＧＦ、ＴＧＦα、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−Ｉ、ＩＧＦ−ＩＩ）、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ及びＧＭ−ＣＳＦ；ビタミン、例えば、ホレート及びトランスフェリンから選択される、請求項２６、２７又は２８に記載のコンジュゲート。
【請求項３０】
Ｕ、Ｕ’、Ｗ、Ｗ’、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｙ、Ｙ’、Ｘ、Ａ、Ａ’、Ｘ’、ｎ、ｎ’、−−−−、・・・・、Ｔ及び前記リンカーが、請求項２から２５のいずれか一項に於けるように定義される、請求項２６から２９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３１】
前記結合基が、チオール、スルフィド又はジスルフィド含有基である、請求項２６から３０のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項３２】
式（ＩＩＩ）：
【化６】
2009524636.tif 000120
（式中、Ｙ、Ｙ’、Ｘ、Ｘ’、Ａ、Ａ’、Ｘ’、Ｕ、Ｕ’、Ｗ、Ｗ’、−−−−、・・・・、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、ｎ、ｎ’は、式（Ｉ）に於ける通りに定義され、Ｔ’は、官能基が保護されているＴに対応する）
の対応する化合物を脱保護し、及び式（Ｉ）の所望の化合物を場合により単離する段階を含む、請求項１から２５のいずれか一項に記載の化合物の調製方法。
【請求項３３】
式（ＩＩＩ）の化合物が、式（ＩＶ）、（ＩＶ’）及び（Ｖ）：
【化７】
2009524636.tif 000121
（式中、Ｕ、Ｕ’、Ｗ、Ｗ’、Ｙ、Ｙ’、Ａ、Ａ’、ｎ、ｎ’、Ｔ’、−−−−、・・・・、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’は、式（ＩＩＩ）に於ける通りに定義され、及びＬｇは、脱離基である）
の対応する化合物を結合することから得られる、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
式（ＩＩＩ’）：
【化８】
2009524636.tif 000122
（式中、Ｙ、Ｙ’、Ｘ、Ｘ’、Ａ、Ａ’、Ｘ’、Ｕ、Ｕ’、Ｗ、Ｗ’、−−−−、・・・・、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’、ｎ、ｎ’は、式（Ｉ）に於ける通りに定義され、Ｔ”は、Ｔの場合により保護された前駆体基である）
の対応する化合物から、式（Ｉ）の所望の化合物を場合により単離する、請求項１から２５のいずれか一項に記載の化合物の調製方法。
【請求項３５】
式（ＩＩＩ’）の化合物を、式（ＩＶ）、（ＩＶ’）及び（Ｖ’）：
【化９】
2009524636.tif 000123
（式中、Ｕ、Ｑ、Ｗ、Ｗ’、Ｙ、Ｙ’、Ａ、Ａ’、ｎ、ｎ’、−−−−、・・・・、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’は、式（Ｉ）に於ける通りに定義され、Ｔ”は、Ｔの場合により保護された前駆体基であり、及びＬｇは、脱離基である）
の対応する化合物を結合することから得ることができる、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
式（ＶＩＩＩ）：
【化１０】
2009524636.tif 000124
（式中、Ｙ、Ｙ’、Ｘ、Ａ、Ａ’、Ｘ’、ｎ、ｎ’、Ｔ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’は、式（Ｉ）に於ける通りに定義される）
の対応する化合物を環化する段階を含む、請求項１から２５のいずれか一項に記載の化合物の調製方法。
【請求項３７】
式（ＶＩＩＩ）の化合物を、式（ＩＸ）：
【化１１】
2009524636.tif 000125
（式中、Ｙ、Ｙ’、Ａ、Ａ’、ｎ、ｎ’、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｔは、式（Ｉ）の通りに定義される）
の対応する化合物から得ることができる、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
Ｔが、スルフィド、ジスルフィド若しくはチオール基、又はこれらの前駆体を含む、請求項１に於いて定義された通りの式（Ｉ）の化合物を、ジスルフィド又はチオールに対して反応性である官能基を含む細胞結合剤と反応させて、前記化合物と前記細胞結合剤とが、スルフィド又はジスルフィド結合によって一緒に結合されるようにする段階を含む、請求項２７から３１のいずれか一項に記載のコンジュゲートの調製方法。
【請求項３９】
医薬的に許容される担体と一緒に、請求項２６から３１のいずれか一項に定義されたコンジュゲート分子、又は請求項１から２５のいずれか一項に定義された式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物。
【請求項４０】
標的細胞又は標的細胞を含有する組織を接触させることを含む、細胞を殺す又は細胞の成長を阻害するための医薬の調製のための、請求項２６から３１のいずれか一項に於いて定義されたコンジュゲート分子又は請求項１から２５のいずれか一項に於いて定義された式（Ｉ）の化合物の有効量の使用。
【請求項４１】
癌の治療のための医薬の調製のための、請求項２６から３１のいずれか一項に定義されたコンジュゲート分子又は請求項１から２５のいずれか一項に定義された式（Ｉ）の化合物の有効量の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な細胞障害剤及びこれらの治療的使用に関する。更に特に、本発明は、トマイマイシン誘導体を含む新規な細胞障害剤及びこれらの治療的使用に関する。これらの新規な細胞障害剤は、トマイマイシン誘導体を細胞結合剤に化学的に結合することによって、標的化方式で特定の細胞集団にトマイマイシン誘導体を配布する結果として、治療的用途を有する。
【背景技術】
【０００２】
多くの報告が、モノクローナル抗体−薬物コンジュゲートによる腫瘍細胞の意図された特異標的化で出現している（Ｓｅｌａ  ｅｔ  ａｌ，ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ，１８９−２１６（Ｃ．Ｖｏｇｅｌ，ｅｄ．１９８７）；Ｇｈｏｓｅ  ｅｔ  ａｌ，ｉｎ  Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇｓ  １−２２（Ｅ．Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，ｅｄ．１９８３）；Ｄｉｅｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ，ｉｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍｓ，１−２３（Ｊ．Ｒｏｄｗｅｌｌ，ｅｄ．１９８８）；Ｐｉｅｔｅｒｓｚ  ｅｔ  ａｌ，ｉｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍｓ，２５−５３（Ｊ．Ｒｏｄｗｅｌｌ，ｅｄ．１９８８）；Ｂｕｍｏｌ  ｅｔ  ａｌ，ｉｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍｓ，５５−７９（Ｊ．Ｒｏｄｗｅｌｌ，ｅｄ．１９８８）；Ｇ．Ａ．Ｐｉｅｔｅｒｓｚ  ＆  Ｋ．Ｋｒａｕｅｒ，２，Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ，１８３−２１５（１９９４）；Ｒ．Ｖ．Ｊ．Ｃｈａｒｉ，３１  Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｓ．，８９−１０４（１９９８）；Ｗ．Ａ．Ｂｌａｔｔｌｅｒ  ＆  Ｒ．Ｖ．Ｊ．Ｃｈａｒｉ，ｉｎ  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ａｇｅｎｔｓ，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，３１７−３３８，ＡＣＳ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  ７９６，及びＩ．Ｏｊｉｍａ  ｅｔ  ａｌ  ｅｄｓ，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ２００１）。本発明に引用された全ての文献及び特許は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００３】
細胞障害薬物、例えば、メトトレキセート、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、メルファラン、マイトマイシンＣ、及びクロラムブシルは、種々のマウスモノクローナル抗体にコンジュゲートされた。幾つかの場合に、この薬物分子は、中間の担体分子、例えば、血清アルブミン（Ｇａｒｎｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ，４６，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２４０７−２４１２（１９８６）；Ｏｈｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ  ２３，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．８１−８６（１９８６）；Ｅｎｄｏ  ｅｔ  ａｌ，４７  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１０７６−１０８０（１９８０））、デキストラン（Ｈｕｒｗｉｔｚ  ｅｔ  ａｌ，２  Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２５−３５（１９８０）；Ｍａｎａｂｉ  ｅｔ  ａｌ，３４  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２８９−２９１（１９８５）；  Ｄｉｌｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ，４６  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，４８８６−４８９１（１９８６）；Ｓｈｏｖａｌ  ｅｔ  ａｌ，８５，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，８２７６−８２８０（１９８８））、又はポリグルタミン酸（Ｔｓｕｋａｄａ  ｅｔ  ａｌ，７３，Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃ．Ｉｎｓｔ．，７２１−７２９（１９８４）；Ｋａｔｏ  ｅｔ  ａｌ  ２７  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１６０２−１６０７（１９８４）；Ｔｓｕｋａｄａ  ｅｔ  ａｌ，５２，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，１１１−１１６（１９８５））により抗体分子に結合された。
【０００４】
広範囲の多数のリンカー技術が、このようなイムノコンジュゲートの調製のために使用され、開裂性及び非開裂性リンカーの両方が研究されてきた。しかしながら、ほとんどの場合に、標的部位で変性されない形でコンジュゲートから薬物分子が放出され得る場合、薬物の全細胞障害能力が観察できるのみである。
【０００５】
抗体−薬物コンジュゲートの調製のために使用された開裂性リンカーの１種は、異なった細胞内コンパートメント、例えば、受容体媒介エンドサイトーシスの間に遭遇されるエンドソーム及びリソソームの酸性環境を利用するシス−アコニット酸をベースにする酸不安定（ａｃｉｄ−ｌａｂｉｌｅ）リンカーである。Ｓｈｅｎ及びＲｙｓｅｒは、ダウノルビシンと巨大分子担体とのコンジュゲートの調製のために、この方法を導入した（１０２  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１０４８−１０５４（１９８１））。Ｙａｎｇ及びＲｅｉｓｆｅｌｄは、ダウノルビシンを抗メラノーマ抗体にコンジュゲートするために、同じ技術を使用した（８０  Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃ．Ｉｎｓｔ．１１５４−１１５９（１９８８））。Ｄｉｌｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．は、また、ダウノルビシンと抗Ｔ細胞抗体とのコンジュゲートを調製するために、同様の方式で酸不安定リンカーを使用した（４８  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６０９７−６１０２（１９８８））。
【０００６】
Ｔｒｏｕｅｔ  ｅｔ  ａｌによって探求された代替アプローチには、ダウノルビシンをペプチドスペーサーアームを介して抗体に結合することが含まれた（７９  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．６２６−６２９（１９８２））。これは、遊離の薬物が、このようなコンジュゲートから、リソソームペプチダーゼの作用によって放出され得るという前提の下でなされた。
【０００７】
しかしながら、インビトロ細胞障害試験に於いて、抗体−薬物コンジュゲートが、遊離のコンジュゲートしていない薬物と同じ細胞障害効能をまれに達成したことが明らかになった。これは、薬物分子が抗体から放出される機構が、非常に非能率であり得ることを示唆した。イムノトキシンの領域に於いて、モノクローナル抗体と触媒的に活性のタンパク質トキシンとの間のジスルフィド架橋を介して形成されたコンジュゲートが、他のリンカーを含有するコンジュゲートよりも、一層細胞障害性であることが示された。Ｌａｍｂｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ，２６０  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１２０３５−１２０４１（１９８５）；Ｌａｍｂｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ，ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｔｏｘｉｎｓ  １７５−２０９（Ａ．Ｆｒａｎｋｅｌ，ｅｄ．１９８８）；Ｇｈｅｔｉｅ  ｅｔ  ａｌ，４８，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２６１０−２６１７（１９８８）参照。これは、抗体分子とトキシンとの間のジスルフィド結合の有効な開裂に寄与するグルタチオンの高い細胞内濃度に帰せられた。これにもかかわらず、薬物と巨大分子との間のコンジュゲートの調製のために、ジスルフィド架橋を使用することのごく僅かな報告された例が存在する。Ｓｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ（２６０，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１０９０５−１０９０８（１９８５））は、メルカプトエチルアミン誘導体へのメトトレキセートの転換、続くジスルフィド結合によるポリ−Ｄ−リジンとのコンジュゲーションを記載した。他の報告は、抗体とのトリスルフィド含有毒性薬物カリケアマイシンのコンジュゲートの調製を記載した（Ｈｉｎｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，５３  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．３３３６−３３４２（１９９３））。
【０００８】
ジスルフィド結合抗体−薬物コンジュゲートの欠落についての一つの理由は、ジスルフィド架橋を介して薬物を抗体に結合させるために容易に使用できる、硫黄原子含有部分を有する細胞障害薬物を入手できないことである。更に、現存する薬物の化学的変性は、これらの細胞障害能力を減少させること無しでは困難である。
【０００９】
現存する抗体−薬物コンジュゲートでの他の主な欠点は、標的にされた抗原の限定された数並びにメトトレキセート、ダウノルビシン及びビンクリスチンのような制癌性（ｃａｎｃｅｒｏｓｔａｔｉｃ）薬物の比較的穏和な細胞毒性のために、標的部位に薬物の十分な濃度を配布することのこれらの無能力である。顕著な細胞毒性を達成するために、抗体への直接的な又はポリマー性担体分子を介した多数の薬物分子の結合が必要になる。しかしながら、このような大幅に変性した抗体は、しばしば、標的抗原への減少した結合及び血流からの速いインビボクリアランスを示す。
【００１０】
上記の困難性にもかかわらず、細胞結合部分を含む有用な細胞障害剤及びメイタンシノイドとして知られている細胞障害薬物のグループが報告された（ＵＳＰ５，２０８，０２０、ＵＳＰ５，４１６，０６４、及びＲ．Ｖ．Ｊ．Ｃｈａｒｉ，３１  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ８９−１０４（１９９８））。同様に、細胞結合部分を含む有用な細胞障害剤並びに強力な抗腫瘍抗生物質性（ａｎｔｉｂｏｔｉｃ）ＣＣ−１０６５の類似体及び誘導体も報告された（ＵＳＰ５，４７５，０９２、ＵＳＰ５，５８５，４９９及びＵＳＰ６，７５６，３９７）。
【００１１】
トマイマイシン誘導体は、ＤＮＡの副溝内でグアニンのＮ２に共有結合することによって、これらの生物学的特性を発揮する化合物の公知のクラスであるピロロ［１，４］ベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）である。ＰＢＤには、多数の副溝バインダー、例えば、アントラマイシン、ネオトラマイシン（ｎｅｏｔｈｒａｍｙｃｉｎ）及びＤＣ−８１が含まれる。しかしながら、トマイマイシン抗腫瘍活性は、その正常細胞に向けた非特異的毒性のために制限される。従って、トマイマイシン化合物の、治療的活性を増加させ、及び非特異毒性効果を減少させるための要求が存在する。本発明者らは、この要求を、トマイマイシン化合物を細胞結合剤に結合することによるトマイマイシン化合物の標的化配布によってかなえることができることを示した。更に、水溶液中で可溶性であり、及び安定であるトマイマイシン誘導体を開発するための要求が存在する。更に、トマイマイシンは、細胞結合剤のコンジュゲート中で使用するためには、あまり強力ではない。
【００１２】
最近、僅かな新規なＰＢＤ誘導体及び前臨床モデルに於けるこれらの抗腫瘍活性が開示された（ＷＯ００／１２５０８及びＷＯ２００５／０８５２６０）。しかしながら、ヒトに於ける初期臨床試行は、このクラスの化合物が、ヒトに投薬できる非常に低い用量に基づいて、非常に毒性であることを示している（Ｉ．Ｐｕｚａｎｏｖ，Ｐｒｏｃ．ＡＡＣＲ−ＮＣＩ−ＥＯＲＴＣ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＵＳＡ  ２００５，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ＃Ｂ１１７）。従って、一層強力であり及び／又は細胞結合剤に結合させることができる代替誘導体を提供することが望まれている。
【００１３】
従って、これらの細胞毒性を弱めることなくこれらの副作用が減少しているトマイマイシン誘導体による疾患の治療方法が、非常に求められている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
第一の実施形態に於いて開示されるように、本発明の一つの目的は、非常に毒性であり、更に多くの疾患の治療に於いて有効に使用することができるトマイマイシン誘導体を提供することである。
【００１５】
本発明の他の目的は、場合により細胞結合剤に結合可能である又は結合された新規なトマイマイシン誘導体を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
第二の実施形態に於いて、本発明は、
（Ａ）場合により細胞結合剤に結合可能である又は結合された１種以上のトマイマイシン誘導体の有効量、及び
（Ｂ）医薬的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤
を含む治療組成物を提供する。
【００１７】
第三の実施形態に於いて、本発明は、標的細胞又は標的細胞を含有する組織を、場合により細胞結合剤に結合可能である又は結合された、１種以上のトマイマイシン誘導体を含む細胞障害剤の細胞障害量と接触させることを含む、選択された細胞集団を殺す方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
本発明は、高い細胞毒性を保有し、及び細胞結合剤に有効に結合することができる新規なトマイマイシン誘導体の合成に基づいている。以前に、高度に細胞障害性の薬物の、開裂性結合、例えば、ジスルフィド結合を使用する抗体への結合が、細胞の内側での完全に活性の薬物の放出を確実にし、及びこのようなコンジュゲートが抗原特異方式で細胞障害性であることが示されている（ＵＳＰ６，３４０，７０１、ＵＳＰ６，３７２，７３８及びＵＳＰ６，４３６，９３１）。しかしながら、当分野は、現存する薬物を、これらの細胞障害潜在能力を低下させることなく変性することが、極めて困難であることを明らかにしている。開示された本発明は、開示されたトマイマイシン誘導体を化学部分によって変性することによって、この問題点を克服する。その結果、開示された新規なトマイマイシン誘導体は、トマイマイシン誘導体の細胞障害能力を保持し、及び或る場合には増強さえできる。細胞結合剤−トマイマイシン誘導体錯体は、望まない細胞のみに対して標的化方式で適用されるべきトマイマイシン誘導体の細胞障害作用の全尺度を許容し、従って、非標的化健康細胞への損傷に起因する副作用を回避する。従って、本発明は、殺されるべき又は溶解されるべき病気に罹っている又は異常な細胞、例えば、腫瘍細胞（特に固体腫瘍細胞）の除去のための有用な試薬を提供する。
【００１９】
本発明に従った細胞障害剤は、結合基を介して細胞結合剤に場合により結合可能である又は結合された、１種以上のトマイマイシン誘導体を含む。この結合基は、一般的な方法によってトマイマイシン誘導体に共有結合されている化学部分の一部である。好ましい実施形態に於いて、この化学部分は、ジスルフィド結合によってトマイマイシン誘導体に共有結合させることができる。
【００２０】
本発明に於いて有用なトマイマイシン誘導体は、下記に示す式（Ｉ）：
【００２１】
【化１２】
2009524636.tif 000003
［式中、
−−−−は、任意の単結合を表し、
・・・・は、単結合又は二重結合のいずれかを表し、
但し、・・・・が単結合を表すとき、同じである又は異なったＵ及びＵ’は、Ｈを表し、同じである又は異なったＷ及びＷ’は、ＯＨ、エーテル、例えば−ＯＲ、エステル（例えば、アセタート）、例えば−ＯＣＯＲ、カルボナート、例えば−ＯＣＯＯＲ、カルバマート、例えば−ＯＣＯＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式カルバマート、尿素、例えば、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、チオカルバマート、例えば−ＯＣＳＮＨＲ、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式チオカルバマート、−ＳＨ、スルフィド、例えば−ＳＲ、スルホキシド、例えば−ＳＯＲ、スルホン、例えば−ＳＯＯＲ、スルホナート、例えば−ＳＯ３−、スルホンアミド、例えば−ＮＲＳＯＯＲ、アミン、例えば−ＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような場合により環式のアミン、ヒドロキシルアミン誘導体、例えば−ＮＲＯＲ’、アミド、例えば−ＮＲＣＯＲ、アジド、例えば−Ｎ３、シアノ、ハロ、トリアルキル又はトリアリールホスホニウム、アミノ酸誘導基からなる群から独立して選択され、好ましくはＷ及びＷ’は、同じであるか又は異なっており、及びＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＮＨＣＯＮＨ２、ＳＭｅであり、及び・・・・が二重結合を表すとき、Ｕ及びＵ’は存在せず、Ｗ及びＷ’はＨを表し、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’は、同じであるか又は異なっており、ハライド若しくは１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、アリール、Ｈｅｔ、Ｓ（Ｏ）ｑＲによって場合により置換されたアルキルから独立して選択され又はＲ１とＲ２及びＲ１’とＲ２’とは、一緒に、それぞれ基＝Ｂ及び＝Ｂ’を含有する二重結合を形成し、好ましくは、Ｒ１とＲ２及びＲ１’とＲ２’とは、一緒に、それぞれ基＝Ｂ及び＝Ｂ’を含有する二重結合を形成し、
Ｂ及びＢ’は、同じであるか又は異なっており、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、アリール、Ｈｅｔ、Ｓ（Ｏ）ｑＲによって場合により置換されたアルケニルから独立して選択され又はＢ及びＢ’は、酸素原子を表し、好ましくは、Ｂ＝Ｂ’であり、更に好ましくは、Ｂ＝Ｂ’＝＝ＣＨ２又は＝ＣＨ−ＣＨ３であり、
Ｘ、Ｘ’は、同じであるか又は異なっており、１個以上の−Ｏ−、−ＮＲ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）ｑ−から独立して選択され、好ましくは、Ｘ＝Ｘ’であり、更に好ましくは、Ｘ＝Ｘ’＝Ｏであり、
Ａ、Ａ’は、同じであるか又は異なっており、酸素、窒素又は硫黄原子を場合により含有し、それぞれが、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、アリール、Ｈｅｔ、アルキル、アルケニルによって場合により置換されているアルキル又はアルケニルから独立して選択され、好ましくは、Ａ＝Ａ’であり、更に好ましくは、Ａ＝Ａ’＝線状の置換されていないアルキルであり、
Ｙ、Ｙ’は、同じであるか又は異なっており、及びＨ、ＯＲから独立して選択され、好ましくは、Ｙ＝Ｙ’であり、更に好ましくは、Ｙ＝Ｙ’＝Ｏアルキル、更に好ましくはＯメチルであり、
Ｔは、−ＮＲ−、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）ｑ−若しくは４から１０員のアリール、シクロアルキル、複素環式若しくはヘテロアリール（それぞれは、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、Ｒ、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、及び／若しくはリンカーによって場合により置換されている）又は１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ及び／若しくはリンカーによって場合により置換された分枝鎖アルキル、又は１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ及び／若しくはリンカーによって置換された直鎖アルキルであり、好ましくは、Ｔは、１個以上のリンカーによって場合により置換された、４から１０員のアリール又はヘテロアリール、更に好ましくはフェニル又はピリジルである］
を有する。
【００２２】
該リンカーには結合基が含まれている。適切な結合基は、当分野で周知であり、チオール、スルフィド、ジスルフィド基、チオエーテル基、酸不安定基、光不安定基、ペプチダーゼ不安定基及びエステラーゼ不安定基を含む。ジスルフィド基及びチオエーテル基が好ましい。
【００２３】
結合基がチオール−、スルフィド（若しくは、所謂チオエーテル−Ｓ−）−又はジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−）−含有基であるとき、チオール、スルフィド又はジスルフィド基を有する側鎖は、直鎖、又は分枝鎖、芳香族又は複素環式であってよい。当業者は、適切な側鎖を容易に同定することができる。
【００２４】
好ましくは、該リンカーは、式：
−Ｇ−Ｄ−（Ｚ）ｐ−Ｓ−Ｚ’
［式中、
Ｇは、単若しくは二重結合、−Ｏ−、−Ｓ−又は−ＮＲ−であり、
Ｄは、単結合又は−Ｅ−、−Ｅ−ＮＲ−、−Ｅ−ＮＲ−Ｆ−、−Ｅ−Ｏ−、−Ｅ−Ｏ−Ｆ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−Ｆ−、−Ｅ−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｅ−、−Ｅ−ＣＯ−Ｆ−、−Ｅ−Ｓ−、−Ｅ−Ｓ−Ｆ−、−Ｅ−ＮＲ−Ｃ−Ｓ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＳ−Ｆ−であり、
式中、Ｅ及びＦは、同じであるか又は異なっており、直鎖又は分枝鎖の−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−アルキル−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉシクロアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ複素環式（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉヘテロアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−、−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉシクロアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ複素環式（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉヘテロアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−シクロアルキル−アルキル−、−アルキル−シクロアルキル−、−複素環式−アルキル−、−アルキル−複素環式−、−アルキル−アリール−、−アリール−アルキル−、−アルキル−ヘテロアリール−、−ヘテロアリール−アルキル−（式中、同じである又は異なったｉ及びｊは、整数であり、及び０、１から２０００から独立して選択される）から独立して選択され、
Ｚは、直鎖又は分枝鎖−アルキル−であり、
ｐは０又は１であり、
Ｚ’は、Ｈ、チオール保護基、例えば、ＣＯＲ、Ｒ２０又はＳＲ２０（式中、Ｒ２０は、Ｈ、メチル、アルキル、場合により置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又は複素環式を表す）を表す］
のものである。但し、Ｚ’がＨであるとき、該化合物は、ＰＢＤ部分の１個のイミン結合−ＮＨ＝へのチオール基−ＳＨの付加から得られる分子内環化によって形成される対応する化合物と平衡状態にある。
【００２５】
等しい又は異なるｎ、ｎ’は０又は１であり、
ｑは０、１又は２であり、
Ｒ、Ｒ’は、等しいか又は異なっており、及びＨ、アルキル、アリール（それぞれは、Ｈａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、Ｒ、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、アリール、Ｈｅｔによって場合により置換されている）から独立して選択される；
又はこれらの医薬的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶性構造物又はこれらの光学異性体、ラセミ化合物、ジアステレオマー若しくはエナンチオマー。
【００２６】
本発明は、下記の好ましい実施形態又はこれらの何れかの任意の組合せを指す。
−Ｇは、単結合又は−Ｏ−若しくは−ＮＲ−である。
−Ｇは、−Ｏ−である。
−Ｄは、単結合又は−Ｅ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−、−ＥＣＯ−、−ＣＯ−Ｅ−である。
−Ｄは、−Ｅ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−である。
−Ｄは、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−である。
−Ｅは、直鎖又は分枝鎖の−アルキル−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−又は−アルキル−複素環式である。
−Ｅは、直鎖又は分枝鎖の−アルキル−である。
−Ｚは、−（ＣＨ２）２−Ｃ（ＣＨ３）２−である。
−ｐは０又は１である。
−Ｚ’は、Ｈ又はＳＲ２０（式中、Ｒ２０は、アルキル、アリール、複素環式又はヘテロアリールを表す）である。
−Ｚ’は、Ｈ又はＳＲ２０（式中、Ｒ２０はアルキルを表す）である。
チオール−、スルフィド−又はジスルフィド−含有リンカーの特別の例には、下記のものが含まれる。
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｙ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＮＲ１９ＣＯ）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＯＣＯ）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＯ）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＯＮＲ１９）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フェニル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−オキサゾリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チアゾリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チエニル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−イミダゾリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−モルホリノ−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔピペラジノ−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−Ｎ−メチル−ピペラジン−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フェニル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チアゾリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チエニル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−モルホリノ−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’−、又は
−Ｏ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｏ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＮＲ１９ＣＯ）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｏ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｏ−フェニル−ＱＳＺ’、−Ｏ−フリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−チエニル−ＱＳＺ’、−Ｏ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−Ｏ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−Ｏ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、
−ＯＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＮＲ１９ＣＯ）ｖ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＯＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＯＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＯＣＯ−フェニル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−フリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−チエニル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’−、又は
−ＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＣＯ−フェニル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−フリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−チエニル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＣＯ−ピペリジノ−ＱＳＺ’、−ＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、
−ＮＲ１９（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯ−フェニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−フリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−チエニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ピペリジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−フェニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−フリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−チエニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−ピペリジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−フェニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−チエニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−ピペリジノ−ＱＳＺ’、
−Ｓ（Ｏ）ｑ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｓ（Ｏ）ｑ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＳＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＳＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＳＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＳＣＯ−ピペリジノ−ＱＳＺ’−、及び−ＳＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’［式中、
Ｚ’は、Ｈ、チオール保護基、例えば、ＣＯＲ、Ｒ２０’又はＳＲ２０’（式中、Ｒ２０’は、Ｈ、アルキル、アリール、複素環式又はヘテロアリールを表す）であり、
Ｑは、直接結合又は１から１０個の炭素原子を有する直鎖アルキル若しくは分枝鎖アルキル又は２から２０個の繰り返しエチレンオキシ単位を有するポリエチレングリコールスペーサーであり、
Ｒ１９及びＲ１２は、同じであるか又は異なっており、及び１から１０個の炭素原子を有する直鎖アルキル、分枝鎖アルキル若しくは環式アルキル、又は単純な若しくは置換されたアリール若しくは複素環式であり、及びＲ１２は、更にＨであってよく、
Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、同じであるか又は異なっており、及びＨ又は１から４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分枝鎖アルキルであり、
Ｒ１７及びＲ１８は、Ｈ又はアルキルであり、
ｕは、１から１０の整数であり、及び０であってもよく、
ｔは、１から１０の整数であり、及び０であってもよく、
ｙは、１から２０の整数であり、及び０であってもよい］。
【００２７】
式（Ｉ）の化合物が、イオンの形（例えば、スルホナート）であるとき、対イオン（例えば、Ｎａ＋又はＫ＋）が存在してもよい。
【００２８】
好ましい態様に従って、本発明の化合物は、式中、Ｔ＝１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、Ｒ、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、及び／又はリンカーによって場合により置換されたアリールであり、及びＡ、Ａ’、Ｘ、Ｘ’、Ｕ、Ｕ’、Ｗ、Ｗ’、ｍ、ｍ’、ｎ、ｎ’、−−−−、・・・・が、前記の通り定義される、式（Ｉ）のものである。
【００２９】
他の好ましい態様に従って、本発明の化合物は、下記の群から選択される。
８，８’−［１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−メトキシ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［１，４−ブタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［３−メチル−１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［２，６−ピリジンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピルオキシ）−２，６−ピリジンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（３−アミノプロピルオキシ）−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピル）−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−｛５−［３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）プロピルオキシ］−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）｝−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−アセチルチオメチル−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
ビス−｛２−［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−５−オキソ−１，３，，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イルオキシ］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、
８，８’−［３−（２−アセチルチオエチル）−１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−４−メルカプト−４，４−ジメチルブタノイル）アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）−アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メルカプト−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（２−（４−メルカプト−４−メチル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−ブトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−［メチル−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−アミノ］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
並びに対応するメルカプト誘導体、又はこれらの医薬的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶性構造物又はこれらの光学異性体、ラセミ化合物、ジアステレオマー若しくはエナンチオマー。
【００３０】
好ましい化合物は、式：
【００３１】
【化１３】
2009524636.tif 000004
又は
【００３２】
【化１４】
2009524636.tif 000005
（式中、Ｘ、Ｘ’、Ａ、Ａ’、Ｙ、Ｙ’、Ｔ、ｎ、ｎ’は、前記の通り定義される）
のものである。
【００３３】
前又は後で使用されるとき、
Ａｌｋは、アルキル、アルケン又はアルキンを表す。
【００３４】
「アルキル」は、鎖中に１から２０個の炭素原子を有する直鎖若しくは分枝鎖又は３から１０個の炭素原子を有する環式であってよい、脂肪族炭化水素基を意味する。好ましいアルキル基は、鎖中に１から１２個の炭素原子を有する。「分枝鎖」は、１個以上の低級アルキル基、例えば、メチル、エチル又はプロピルが、線状アルキル鎖に結合されていることを意味する。代表的アルキル基には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、３−ペンチル、オクチル、ノニル、デシル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが含まれる。
【００３５】
「アルケン」は、炭素−炭素二重結合を含有し、及び鎖中に２から１５個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖であってよい、脂肪族炭化水素基を意味する。好ましいアルケニル基は、鎖中に２から１２個の炭素原子を有し、及び更に好ましくは、鎖中に約２から４個の炭素原子を有する。代表的アルケニル基には、エテニル、プロペニル、ｎ−ブテニル、ｉ−ブテニル、３−メチルブト−２−エニル、ｎ−ペンテニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニルが含まれる。
【００３６】
「アルキン」は、炭素−炭素三重結合を含有し、及び鎖中に２から１５個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖であってよい、脂肪族炭化水素基を意味する。好ましいアルキニル基は、鎖中に２から１２個の炭素原子を有し、及び更に好ましくは、鎖中に約２から４個の炭素原子を有する。代表的アルキニル基には、エチニル、プロピニル、ｎ−ブチニル、２−ブチニル、３−メチルブチニル、ｎ−ペンチニル、ヘプチニル、オクチニル及びデシニルが含まれる。
【００３７】
「ハロゲン原子」は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素原子を指し、好ましくは、フッ素及び塩素原子を指す。
【００３８】
「アリール」は、６から１４個の炭素原子、好ましくは６から１０個の炭素原子の芳香族単環式又は多環式炭化水素環系を意味する。代表的アリール基には、フェニル又はナフチルが含まれる。
【００３９】
「Ｈｅｔ」は、複素環又はヘテロアリールを意味する。
【００４０】
本明細書中に使用されるとき、用語「複素環」又は「複素環式」は、飽和、部分的不飽和又は不飽和の、非芳香族の安定な３から１４員、好ましくは５から１０員のモノ、ビ又は多環式環（環の少なくとも１個の員は、ヘテロ原子である）を指す。典型的に、ヘテロ原子には、これらに限定されないが、酸素、窒素、硫黄、セレン、及びリン原子が含まれる。好ましいヘテロ原子は、酸素、窒素及び硫黄である。
【００４１】
適切な複素環は、Ｔｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ、７６ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，１９９５−１９９６、第２−２５から２−２６頁（この開示は、ここに参照して組み込まれる）に開示されている。
【００４２】
好ましい非芳香族複素環式には、これらに限定されないが、ピロリジニル、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、オキシラニル、テトラヒドロフラニル、ジオキソラニル、テトラヒドロピラニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリニル、ピラニル、イミダゾリニル、ピロリニル、ピラゾリニル、チアゾリジニル、テトラヒドロチオピラニル、ジチアニル、チオモルホリニル、ジヒドロ−ピラニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロピリジル、ジヒドロピリジル、テトラヒドロピリニジニル、ジヒドロチオピラニル、アゼパニル、並びにフェニル基との縮合から得られる縮合系が含まれる。
【００４３】
本明細書中に使用されるとき、用語「ヘテロアリール」又は芳香族複素環は、５から１４員、好ましくは５から１０員の芳香族ヘテロ、モノ−、ビ−又は多環式環を指す。例には、ピロリル、ピリジル、ピラゾリル、チエニル、ピリミジニル、ピラジニル、テトラゾリル、インドリル、キノリニル、プリニル、イミダゾリル、チエニル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、フラニル、ベンゾフラニル、１，２，４−チアジアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソキノリル、ベンゾチエニル、イソベンゾフリル、ピラゾリル、カルバゾリル、ベンゾイミダゾリル、イソキサゾリル、ピリジル−Ｎ−オキシド、並びにフェニル基との縮合から得られる縮合系が含まれる。
【００４４】
「アルキル」、「シクロアルキル」、「アルケニル」、「アルキニル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「複素環」などはまた、２個の水素原子の除去によって形成される対応する「アルキレン」、「シクロアルキレン」、「アルケニレン」、「アルキニレン」、「アリーレン」、「ヘテロアリーレン」、「ヘテロシクレン」などを指す。
【００４５】
本明細書中に使用されるとき、表現「細胞結合剤に結合可能」は、トマイマイシン誘導体を細胞結合剤に結合するために適している少なくとも１個の結合基を含むトマイマイシン誘導体、又はその前駆体を指し、好ましい結合基は、チオール、スルフィド若しくはジスルフィド結合、又はこれらの前駆体である。
【００４６】
本明細書中に使用されるとき、表現「細胞結合剤に結合された」は、適切な結合基、又はその前駆体を介して細胞結合剤に結合された少なくとも１種のトマイマイシン誘導体を含むコンジュゲート分子を指し、好ましい結合基は、チオール若しくはジスルフィド結合又はその前駆体である。
【００４７】
本明細書中に使用されるとき、所与の基の「前駆体」は、任意の脱保護、化学的変性、又は結合反応によってその基に至ることができる任意の基を指す。
【００４８】
本明細書中に使用されるとき、用語「患者」は、本明細書中に記載された１種以上の疾患及び状態によって苦しめられている又は苦しめられる可能性を有する動物、例えば、増殖、親交（ｃｏｍｐａｎｙ）若しくは保護目的のために価値のある動物、又は好ましくは人若しくは人の子供を指す。
【００４９】
本明細書中に使用されるとき、「治療的に有効量」は、本明細書中に記載された疾患及び状態の症状を防止する、減少する、除く、治療する又は制御する際に有効である本発明の化合物の量を指す。用語「制御する」は、本明細書中に記載された疾患及び状態の進行の遅延、遮断、抑制、又は停止が存在し得る全てのプロセスを指すように意図されるが、必ずしも、全ての疾患及び状態症状の全排除を示さず、及び予防処置を含むように意図される。
【００５０】
本明細書中に使用されるとき、用語「医薬的に許容される」は、適切な医学判定の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応又は他の厄介な問題無しに人間及び動物の組織と接触させるために適しており、妥当な利益／危険比に相応するこれらの化合物、材料、賦形剤、組成物又は剤形を指す。
【００５１】
本明細書中に使用されるとき、「医薬的に許容される塩」は、開示された化合物の誘導体を指し、ここで親化合物は、これらの酸塩又は塩基塩を作ることによって変性される。医薬的に許容される塩には、例えば、非毒性の無機酸又は有機酸から形成される親化合物の従来の非毒性塩又は第四級アンモニウム塩が含まれる。例えば、このような従来の非毒性塩には、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などから誘導されるもの、並びに有機酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、グルコロン酸（ｇｌｕｃｏｒｏｎｉｃ）、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、トルエンスルホン酸、シュウ酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸などから調製される塩が含まれる。更なる付加塩には、アンモニウム塩、例えば、トロメタミン、メグルミン、エポラミンなど、金属塩、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、亜鉛又はマグネシウムが含まれる。
【００５２】
本発明の医薬的に許容される塩は、従来の化学的方法により塩基性又は酸性部分を含有する親化合物から合成することができる。一般的に、このような塩は、これらの化合物の遊離酸又は塩基形を化学量論的量の適切な塩基又は酸と、水中若しくは有機溶媒中、又はこの２種の混合物中で反応させることによって調製することができる。一般的に、非水性媒体、例えば、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、又はアセトニトリルが好ましい。適切な塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１７ｔｈ  ｅｄ．、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、ペンシルベニア州Ｅａｓｔｏｎ、１９８５、第１４１８頁（この開示は、参照してここに組み込まれる）に見出される。
【００５３】
幾何異性体及び立体異性体を有する一般式（Ｉ）の化合物も、本発明の一部である。
【００５４】
式（Ｉ）のトマイマイシン誘導体のＮ−１０、Ｃ−１１二重結合は、可逆方式で、水、アルコール、チオール、第一級又は第二級アミン、尿素及び他の求核剤の存在下で対応するイミン付加物に容易に転換性であることが知られている。このプロセスは、可逆的であり、及び脱水剤の存在下で、非プロトン性有機溶媒中で、真空中又は高温度で対応するトマイマイシン誘導体を容易に再生することができる（Ｚ．Ｔｏｚｕｋａ，３６，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２７６（１９８３））。
【００５５】
従って、本発明は、また、一般式（ＩＩ）：
【００５６】
【化１５】
2009524636.tif 000006
［式中、Ａ、Ｘ、Ｙ、ｎ、Ｔ、Ａ’、Ｘ’、Ｙ’、ｎ’、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’は、式（Ｉ）の通りに定義され、及びＷ、Ｗ’は、同じであるか又は異なっており、及びＯＨ、エーテル、例えば−ＯＲ、エステル（例えば、アセタート）、例えば−ＯＣＯＲ、−ＣＯＯＲ、カルボナート、例えば−ＯＣＯＯＲ、カルバマート、例えば−ＯＣＯＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式カルバマート、尿素、例えば、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、チオカルバマート、例えば−ＯＣＳＮＨＲ、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式チオカルバマート、−ＳＨ、スルフィド、例えば−ＳＲ、スルホキシド、例えば−ＳＯＲ、スルホン、例えば−ＳＯＯＲ、スルホナート、例えば−ＳＯ３−、スルホンアミド、例えば−ＮＲＳＯＯＲ、アミン、例えば−ＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような場合により環式のアミン、ヒドロキシルアミン誘導体、例えば−ＮＲＯＲ’、アミド、例えば−ＮＲＣＯＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、アジド、例えば−Ｎ３、シアノ、ハロ、トリアルキル又はトリアリールホスホニウム、アミノ酸誘導基からなる群から選択される］
のトマイマイシン誘導体の可逆性誘導体を提供する。好ましくはＷ及びＷ’は、同じであるか又は異なっており、及びＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＮＨＣＯＮＨ２、ＳＭｅである。
【００５７】
従って、式（ＩＩ）の化合物は、溶媒が水であるとき、水を含む溶媒和物と考えることができ、これらの溶媒和物は特に有用である。
【００５８】
更に別の目的に従って、本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の製造方法に関する。
【００５９】
本発明の化合物及び方法は、当業者に周知の多数の手段で調製することができる。この化合物は、例えば、当業者によって認識されるような下記の方法、又はこれらへの変形の適用又は適合によって合成することができる。適切な変性及び置換は、当業者にとって、容易に明らかであり、周知であるか若しくは科学文献から容易に得ることができる。
【００６０】
特に、このような方法は、Ｒ．Ｃ．Ｌａｒｏｃｋ，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９９９に見出される。
【００６１】
本発明の化合物は、１個以上の非対称的に置換されている炭素原子を含有してよく、及び光学活性形又はラセミ形で単離することができ、従って、特別の立体化学又は異性体形が特に示されていない限り、全てのキラル、ジアステレオマー、ラセミ形及び構造の全ての幾何学的異性形が意図される。このような光学的に活性の形を調製し単離する方法は、当分野で周知である。例えば、立体異性体の混合物を、これらに限定されないが、ラセミ形の分割、通常、逆相、及びキラルクロマトグラフィー、優先的塩形成、再結晶などを含む標準的技術により又はキラル出発物質からのキラル合成により若しくは目標キラル中心の意図的合成により分離することができる。
【００６２】
本発明の化合物は、種々の合成経路により調製することができる。試薬及び出発物質は、市販されているか、又は当業者により周知の技術により容易に合成することができる。他の方法で示されない限り、全ての置換基は、前に定義されている通りである。
【００６３】
以下に記載する反応に於いて、最終生成物に於いて、反応に於けるこれらの望まない関与を回避することが望まれる場合、反応性官能基、例えば、ヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオ又はカルボキシ基を保護することが必要であり得る。従来の保護基を、標準的実施に従って使用することができる。例えば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ及びＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、３ｒｄ  ｅｄ．、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９９；Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，１９７３参照。
【００６４】
幾つかの反応は、塩基の存在下で実施することができる。この反応で使用すべき塩基の性質への特別の制限は存在せず、及びこの形式の反応に於いて従来使用される何れの塩基も、それが、分子の他の部分への悪影響を有しない限り、ここで等しく使用することができる。適切な塩基の例には、水酸化ナトリウム、炭酸カリウム、トリエチルアミン、アルカリ金属水素化物、例えば、水素化ナトリウム及び水素化カリウム；アルキルリチウム化合物、例えば、メチルリチウム及びブチルリチウム、並びにアルカリ金属アルコキシド、例えば、ナトリウムメトキシド及びナトリウムエトキシドが含まれる。
【００６５】
通常、反応は、適切な溶媒中で実施される。それが、この反応又は含有される試薬への悪影響を有しない限り、種々の溶媒を使用することができる。適切な溶媒の例には、芳香族、脂肪族又は脂環式炭化水素であってよい炭化水素、例えば、ヘキサン、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン及びキシレン；アミド、例えば、ジメチルホルムアミド；アルコール、例えば、エタノール及びメタノール並びにエーテル、例えば、ジエチルエーテル及びテトラヒドロフランが含まれる。
【００６６】
この反応は、温度の広い範囲に亘って行うことができる。一般的に、本発明者らは、−２０℃から１５０℃（更に好ましくは、ほとんど室温から１００℃まで）の温度で、この反応を実施することが便利であることを見出す。この反応のために必要な時間もまた、多くの要因、特に、反応温度及び試薬の性質に依存して、広範囲に変化させることができる。しかしながら、反応を、前記略述した好ましい条件下で達成できる限り、３時間から２０時間の期間が、通常十分である。
【００６７】
このようにして調製された化合物は、従来の手段によって反応混合物から回収することができる。例えば、この化合物は、反応混合物から溶媒を留去することにより、又は必要な場合に、反応混合物から溶媒を留去した後、残渣を水の中に注ぎ、続いて水非混和性有機溶媒によって抽出し、及び抽出液から溶媒を留去することにより回収することができる。更に、所望により、生成物を、種々の周知の技術、例えば、再結晶、再沈殿又は種々のクロマトグラフィー技術、特に、カラムクロマトグラフィー若しくは分取薄層クロマトグラフィーによって更に精製することができる。
【００６８】
本発明の式（Ｉ）の化合物の調製方法は、本発明の別の目的である。
【００６９】
第一態様に従って、式（Ｉ）の化合物の調製方法は、式（ＩＩＩ）：
【００７０】
【化１６】
2009524636.tif 000007
（式中、Ｙ、Ｙ’、Ｘ、Ａ、Ａ’、Ｘ’、ｎ、ｎ’、Ｗ、Ｗ’、Ｕ、Ｕ’、−−−−、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’、・・・・は、式（Ｉ）に於ける通りに定義され、及びＴ’は、官能基が保護されているＴに対応する）
の対応する化合物を脱保護する段階を含む。
【００７１】
好ましくは、ＳＨ官能基は保護され、及び好ましくは、この保護基は、アセチル、ベンゾイル、メタンスルホニル、メチルチオ、ピリジルチオ、ニトロピリジルチオ、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）である。一般的に、脱保護段階は、古典的条件、例えば、アセチル、ベンゾイル及びメタンスルホニル保護基を除去するための塩基、メチルチオ保護基を開裂するための還元剤、例えば、ジチオトレイトール若しくはトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）を使用して又はこの化合物をＴＩＰＳを除去するためにフッ化アンモニウムと反応させることにより実施される。
【００７２】
式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＶ）、（ＩＶ’）及び（Ｖ）：
【００７３】
【化１７】
2009524636.tif 000008
（式中、Ｙ、Ｙ’、Ａ、Ａ’、ｎ、ｎ’、Ｔ’、Ｗ、Ｗ’、Ｕ、Ｕ’、−−−−、・・・・、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’は、式（ＩＩＩ）に於ける通りに定義され、及びＬｇは、脱離基、例えば、ハロゲン、ＯＭｓ、ＯＴｓ又はＯＰＰｈ３＋（ミツノブ反応に於いて形成される中間体）である）
の対応する化合物を結合することから得ることができる。
【００７４】
式（ＩＶ）及び（ＩＶ’）の化合物は、例えば、特許出願ＷＯ００／１２５０８、ＷＷ００／１２５０７、ＷＯ２００５／０４０１７０、ＷＯ２００５／０８５２６０に開示されているように一般的に公知であり、又は市販されており、及び／又は全合成（Ｍ．Ｍｏｒｉ  ｅｔ  ａｌ、４２  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，３７９３−３８０６，１９８６）により入手可能であり又は特に、下記のフランス特許Ｆｒ．１，５１６，７４３手順に従ってＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ種によって産生され又は実施例に示した例示手順の適用若しくは適合によって調製することができる。
【００７５】
式（Ｖ）の化合物は、式（ＶＩ）：
ＨＯ−Ａｎ−Ｔ’−Ａ’ｎ’−ＯＨ              （ＶＩ）
（式中、Ａ、Ａ’、ｎ、ｎ’、Ｔ’は、式（ＩＩＩ）に於ける通りに定義される）
の対応する化合物から得ることができる。
【００７６】
この反応は、一般的に、ＰＰｈ３及びＣＨａｌ４の存在下で又は塩基、例えば、トリエチルアミン又は水酸化カリウム、好ましくはトリエチルアミンの存在下でクロロスルホナートとの反応によって実施される。
【００７７】
式（ＶＩ）の化合物は、式（ＶＩＩ）：
ＨＯ−Ａｎ−Ｔ”−Ａ’ｎ’−ＯＨ              （ＶＩＩ）
（式中、Ａ、Ａ’、ｎ、ｎ’は、式（ＩＩＩ）に於ける通りに定義され、Ｔ”は、Ｔの前駆体基である）
の対応する化合物から得ることができる。Ｔの前駆体基は、任意の脱保護、化学的変性、又は結合によってＴに至り得る任意の基を指す。好ましくは、Ｔは、Ｔ’を、相補的部分と結合させることによって得られ、ここで、Ｔ’及び相補的部分は、お互いに対して反応性である官能基を含み、例えば、Ｔ’はアミン官能基を含み、及び相補的部分は酸官能基を含む。
【００７８】
この反応の代表例は、
【００７９】
【化１８】
2009524636.tif 000009
である。
【００８０】
一般的に、この反応は、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド及びＨＯＢＴの存在下で実施される。
【００８１】
式（ＶＩＩ）の化合物は、市販されているか又は公知の方法の適合若しくは適用により若しくは実施例に従って製造することができる。
【００８２】
本発明の方法のこの実施形態のための代表的非限定のスキームを、下記に示す。
【００８３】
【化１９】
2009524636.tif 000010
第二態様に従って、式（Ｉ）の化合物を、式（ＩＩＩ’）：
【００８４】
【化２０】
2009524636.tif 000011
（式中、Ｙ、Ｙ’、Ｘ、Ａ、Ａ’、Ｘ’、ｎ、ｎ’、Ｗ、Ｗ’、Ｕ、Ｕ’、−−−−、・・・・、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’は、式（Ｉ）に於ける通りに定義され、及びＴ”は、Ｔの場合により保護された前駆体基である）
の対応する化合物から得ることができる。
【００８５】
Ｔの前駆体基は、化学的変性、又は結合によってＴに至り得る任意の基を指す。好ましくは、Ｔは、Ｔ’を対応する相補的部分と結合させることによって得られ、ここで、Ｔ’及び相補的部分は、お互いに対して反応性である官能基を含み、例えば、Ｔ’はアミン官能基を含み、及び相補的部分は酸官能基を含む。
【００８６】
一般的に、この反応は、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド及びＨＯＢＴの存在下で実施される。
【００８７】
式（ＩＩＩ’）の化合物は、式（ＩＶ）、（ＩＶ’）及び（Ｖ’）：
【００８８】
【化２１】
2009524636.tif 000012
（式中、Ｙ、Ｙ’、Ａ、Ａ’、ｎ、ｎ’、Ｗ、Ｗ’、Ｕ、Ｕ’、−−−−、・・・・、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’は、式（ＩＩＩ’）に於ける通りに定義され、Ｔ”は、Ｔの場合により保護された前駆体基であり、及びＬｇは、脱離基、例えば、ハロゲン又はＯＭｓ、ＯＴｓ若しくはＰＰｈ３＋（ミツノブ反応に於いて形成される中間体）である）
の対応する化合物を結合することから得ることができる。
【００８９】
式（ＩＶ）及び（ＩＶ’）の化合物は、一般的に公知であり、及び全合成（Ｍ．Ｍｏｒｉ  ｅｔ  ａｌ，４２  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，３７９３−３８０６，１９８６）により入手可能であり又は特に、下記のフランス特許Ｆｒ．１，５１６，７４３手順に従って、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ種によって製造することができる。
【００９０】
式（Ｖ’）の化合物は、式（ＶＩＩ）：
ＨＯ−Ａｎ−Ｔ”−Ａ’ｎ’−ＯＨ              （ＶＩＩ）
（式中、Ａ、Ａ’、ｎ、ｎ’は、式（Ｉ）に於ける通りに定義され、Ｔ”は、Ｔ’の場合により保護された前駆体基である）
の対応する化合物から得ることができる。
【００９１】
この反応は、一般的に、ＰＰｈ３及びＣＨａｌ４の存在下で実施される。
【００９２】
式（ＶＩＩ）の化合物は、市販されているか又は公知の方法の適合若しくは適用により若しくは実施例に従って製造することができる。
【００９３】
第三態様に従って、式（Ｉ）の化合物の調製方法は、式（ＶＩＩＩ）：
【００９４】
【化２２】
2009524636.tif 000013
（式中、Ｙ、Ｙ’、Ｘ、Ａ、Ａ’、Ｘ’、ｎ、ｎ’、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｔは、式（Ｉ）に於ける通りに定義される）
の対応する化合物を環化する段階を含む。一般的に、この反応は、ヒドロ亜硫酸ナトリウム（Ｎａ２Ｓ２Ｏ４）のような試薬の存在下で、適切な溶媒、例えば、ＴＨＦと水との混合物中で実施し、続いてメタノール及びＡｃＣｌを添加する。
【００９５】
式（ＶＩＩＩ）の化合物は、式（ＩＸ）：
【００９６】
【化２３】
2009524636.tif 000014
（式中、Ｙ、Ｙ’、Ａ、Ａ’、ｎ、ｎ’、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｔは、式（Ｉ）に於ける通りに定義される）
の対応する化合物から得ることができる。一般的に、この反応は、ＤＩＢＡＬ−Ｈのような試薬の存在下で適切な溶媒、例えば、トルエン中で実施される。
【００９７】
式（ＩＸ）の化合物は、式（Ｘ）及び（ＸＩ）：
【００９８】
【化２４】
2009524636.tif 000015
（式中、Ｙ、Ｙ’、Ａ、Ａ’、ｎ、ｎ’、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｔは、式（Ｉ）に於ける通りに定義される）
の対応する化合物を結合することから得ることができる。
【００９９】
一般的に、この反応は、（Ｘ）に、塩化オキサリルのような試薬を、適切な溶媒、例えば、ＤＭＦ中で添加し、続いて、適切な溶媒、例えば、ＴＨＦ中で（ＸＩ）を添加することによって行われる。
【０１００】
代表的なスキームを下記に示す。
【０１０１】
【化２５】
2009524636.tif 000016
上記の反応は、以下の実施例に示す方法を適用又は適合させることによって当業者により実施することができる。
【０１０２】
更に、本発明の方法はまた式（Ｉ）及び（ＩＩ）の化合物を単離する追加の段階を含んでいてよい。これは、公知の従来の手段、例えば、前記の回収方法の何れかによって当業者により行うことができる。
【０１０３】
出発物質は、市販されているか又は任意の公知の方法又は実施例中に記載されているものを適用又は適合させることによって得ることができる。
【０１０４】
この合成は、多成分反応としてワンポットで実施することもできる。
【０１０５】
別の目的に従って、本発明は、結合基によって細胞結合剤に共有結合された少なくとも１種のトマイマイシン誘導体を含むコンジュゲート分子に関する。該コンジュゲートは、結合基、例えば、−Ｓ−又は−Ｓ−Ｓ−を含むリンカーを提示する本発明に従った１種以上のトマイマイシン誘導体を含む。該結合基は、細胞結合剤を、トマイマイシン誘導体のリンカーと共有結合させる。好ましい態様に従って、該トマイマイシン誘導体は、式（Ｉ’）：
【０１０６】
【化２６】
2009524636.tif 000017
［式中、
−−−−は、任意の単結合を表し、
・・・・は、単結合又は二重結合のいずれかを表し、
但し、・・・・が単結合を表すとき、同じである又は異なったＵ及びＵ’は、独立してＨを表し、及び同じである又は異なったＷ及びＷ’は、ＯＨ、エーテル、例えば−ＯＲ、エステル（例えば、アセタート）、例えば−ＯＣＯＲ、カルボナート、例えば−ＯＣＯＯＲ、カルバマート、例えば−ＯＣＯＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式カルバマート、尿素、例えば、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、チオカルバマート、例えば−ＯＣＳＮＨＲ、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような環式チオカルバマート、−ＳＨ、スルフィド、例えば−ＳＲ、スルホキシド、例えば−ＳＯＲ、スルホン、例えば−ＳＯＯＲ、スルホナート、例えば−ＳＯ３−、スルホンアミド、例えば−ＮＲＳＯＯＲ、アミン、例えば−ＮＲＲ’、Ｎ１０及びＣ１１が環の一部であるような場合により環式のアミン、ヒドロキシルアミン誘導体、例えば−ＮＲＯＲ’、アミド、例えば−ＮＲＣＯＲ、アジド、例えば−Ｎ３、シアノ、ハロ、トリアルキル又はトリアリールホスホニウム、アミノ酸誘導基からなる群から独立して選択され、好ましくはＷ及びＷ’は、同じであるか又は異なっており、及びＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＮＨＣＯＮＨ２、ＳＭｅであり、及び・・・・が二重結合を表すとき、Ｕ及びＵ’は存在せず、及びＷ及びＷ’はＨを表し、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１’、Ｒ２’は、同じであるか又は異なっており、及びハライド若しくは１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、アリール、Ｈｅｔ、Ｓ（Ｏ）ｑＲによって場合により置換されたアルキルから独立して選択され、又はＲ１とＲ２及びＲ１’とＲ２’とは、一緒に、それぞれ基＝Ｂ及び＝Ｂ’を含有する二重結合を形成し、好ましくは、Ｒ１とＲ２及びＲ１’とＲ２’とは、一緒に、それぞれ基＝Ｂ及び＝Ｂ’を含有する二重結合を形成し、
Ｂ及びＢ’は、同じであるか又は異なっており、及び１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、アリール、Ｈｅｔ、Ｓ（Ｏ）ｑＲによって場合により置換されたアルケニルから独立して選択され又はＢ及びＢ’は、酸素原子を表し、好ましくは、Ｂ＝Ｂ’であり、更に好ましくは、Ｂ＝Ｂ’＝＝ＣＨ２又は＝ＣＨ−ＣＨ３であり、
Ｘ、Ｘ’は、同じであるか又は異なっており、及び１個以上の−Ｏ−、−ＮＲ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）ｑ−から独立して選択され、好ましくは、Ｘ＝Ｘ’であり、更に好ましくは、Ｘ＝Ｘ’＝Ｏであり、
Ａ、Ａ’は、同じであるか又は異なっており、及びそれぞれ、酸素、窒素又は硫黄原子を場合により含有し、及び１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、アリール、Ｈｅｔ、アルキル、アルケニルによって場合により置換されているアルキル又はアルケニルから独立して選択され、好ましくは、Ａ＝Ａ’であり、更に好ましくは、Ａ＝Ａ’＝線状の置換されていないアルキルであり、
Ｙ、Ｙ’は、同じであるか又は異なっており、及びＨ、ＯＲから独立して選択され、好ましくは、Ｙ＝Ｙ’であり、更に好ましくは、Ｙ＝Ｙ’＝Ｏアルキル、更に好ましくはＯメチルであり、
Ｔは、−アルキル−、−ＮＲ−、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）ｑ−若しくは４から１０員のアリール、シクロアルキル、複素環式若しくはヘテロアリールであり、それぞれは、１個以上のＨａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、Ｒ、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲによって場合により置換されており、及び１個以上のリンカーによって置換されており、好ましくは、Ｔは、１個以上のリンカーによって置換された、４から１０員のアリール又はヘテロアリール、更に好ましくはフェニル又はピリジルである］
のものである。
【０１０７】
該リンカーには結合基が含まれている。適切な結合基は、当分野で周知であり、及びチオール、スルフィド、ジスルフィド基、チオエーテル基、酸不安定基、光不安定基、ペプチダーゼ不安定基及びエステラーゼ不安定基を含む。ジスルフィド基及びチオエーテル基が好ましい。
【０１０８】
結合基がチオール−、スルフィド−又はジスルフィド−含有基であるとき、チオール又はジスルフィド基を有する側鎖は、直鎖、又は分枝鎖、芳香族又は複素環式であってよい。当業者は、適切な側鎖を容易に同定することができる。好ましくは、該リンカーは、式：
−Ｇ−Ｄ−（Ｚ）ｐ−Ｓ−Ｚ’
［式中、
Ｇは、単若しくは二重結合、−Ｏ−、−Ｓ−又は−ＮＲ−であり、
Ｄは、単結合又は−Ｅ−、−Ｅ−ＮＲ−、−Ｅ−ＮＲ−Ｆ−、−Ｅ−Ｏ−、−Ｅ−Ｏ−Ｆ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−Ｆ−、−Ｅ−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｅ−、−Ｅ−ＣＯ−Ｆ−、−Ｅ−Ｓ−、−Ｅ−Ｓ−Ｆ−、−Ｅ−ＮＲ−Ｃ−Ｓ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＳ−Ｆ−であり、
式中、Ｅ及びＦは、同じであるか又は異なっており、直鎖又は分枝鎖の−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−アルキル−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉシクロアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ複素環式（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉヘテロアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−、−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉシクロアルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ複素環式（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−アルキル（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉヘテロアリール（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−シクロアルキル−アルキル−、−アルキル−シクロアルキル−、−複素環式−アルキル−、−アルキル−複素環式−、−アルキル−アリール−、−アリール−アルキル−、−アルキル−ヘテロアリール−、−ヘテロアリール−アルキル−（式中、同じである又は異なったｉ及びｊは、整数であり、及び０、１から２０００から独立して選択される）から独立して選択され、
Ｚは、直鎖又は分枝鎖−アルキル−であり、
ｐは０又は１であり、
Ｚ’は、Ｈ、チオール保護基、例えば、ＣＯＲ、Ｒ２０又はＳＲ２０（式中、Ｒ２０は、Ｈ、メチル、アルキル、場合により置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又は複素環式を表す）を表す］
のものである。但し、Ｚ’がＨであるとき、該化合物は、ＰＢＤ部分の１個のイミン結合−ＮＨ＝へのチオール基−ＳＨの付加から得られる分子内環化によって形成される対応する化合物と平衡状態にある。
【０１０９】
等しい又は異なるｎ、ｎ’は０又は１であり、ｍ＝ｍ’及びｎ＝ｎ’であり、
ｑは０、１又は２であり、
Ｒ、Ｒ’は、等しいか又は異なっており、及びＨ、アルキル、アリール（それぞれは、Ｈａｌ、ＣＮ、ＮＲＲ’、ＣＦ３、Ｒ、ＯＲ、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、アリール、Ｈｅｔによって場合により置換されている）から独立して選択される；
又はこれらの医薬的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶性構造物又はこれらの光学異性体、ラセミ化合物、ジアステレオマー若しくはエナンチオマーで、
該誘導体は、該リンカーを介して細胞結合剤に共有結合されている。
【０１１０】
好ましくは、リンカーは、チオール、スルフィド又はジスルフィド結合に対して反応性である官能基を介して細胞結合剤に結合されている。
【０１１１】
本発明は、下記の好ましい実施形態又はこれらの何れかの任意の組合せを指す。
【０１１２】
Ｇは、単結合又は−Ｏ−若しくは−ＮＲ−である。
【０１１３】
Ｇは、−Ｏ−である。
【０１１４】
Ｄは、単結合又は−Ｅ−、−Ｅ−ＮＲ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−、−Ｅ−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｅ−である。
【０１１５】
Ｄは、−Ｅ−、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｅ−、−Ｅ−ＣＯ−である。
【０１１６】
Ｄは、−Ｅ−ＮＲ−ＣＯ−である。
【０１１７】
Ｅは、直鎖又は分枝鎖の−アルキル−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−又は−アルキル−複素環式である。
【０１１８】
Ｅは、直鎖又は分枝鎖の−アルキル−である。
【０１１９】
Ｚは、−（ＣＨ２）２−Ｃ（ＣＨ３）２−である。
【０１２０】
ｐは０又は１である。
【０１２１】
Ｚ’は、Ｈ又はＳＲ２０（式中、Ｒ２０は、アルキル、アリール、複素環式又はヘテロアリールを表す）である。
【０１２２】
Ｚ’は、Ｈ又はＳＲ２０（式中、Ｒ２０はアルキルを表す）である。
【０１２３】
チオール−、スルフィド−又はジスルフィド−含有リンカーの特別の例には、下記のものが含まれる。
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｙ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＮＲ１９ＣＯ）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＯＣＯ）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＯ）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＯＮＲ１９）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フェニル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−オキサゾリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チアゾリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チエニル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−イミダゾリル−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−モルホリノ−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−ピペラジノ−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＣＯ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フェニル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−フリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チアゾリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−チエニル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−モルホリノ−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、
−（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’−，又は
−Ｏ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｏ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＮＲ１９ＣＯ）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｏ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｏ−フェニル−ＱＳＺ’、−Ｏ−フリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−チエニル−ＱＳＺ’、−Ｏ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−Ｏ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−Ｏ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−Ｏ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、
−ＯＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＮＲ１９ＣＯ）ｖ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＯＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＯＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＯＣＯ−フェニル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−フリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−チエニル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＯＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’−，又は
−ＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＣＯ−フェニル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−フリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−チエニル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＣＯ−ピペリジノ−ＱＳＺ’、−ＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、
−ＮＲ１９（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＮＲ１９ＣＯ−フェニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−フリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−チエニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ピペリジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−フェニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−フリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−チエニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−イミダゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−ピペリジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−フェニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−オキサゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−チアゾリル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−チエニル−ＱＳＺ’、−ＮＲ１９ＣＯ−ＮＲ１２−ピペリジノ−ＱＳＺ’、
−Ｓ（Ｏ）ｑ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−Ｓ（Ｏ）ｑ（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１７＝ＣＲ１８）（ＣＲ１５Ｒ１６）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＳＣＯＮＲ１２（ＣＲ１３Ｒ１４）ｔ（ＣＲ１５Ｒ１６）ｕ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｙＳＺ’、
−ＳＣＯ−モルホリノ−ＱＳＺ’、−ＳＣＯ−ピペラジノ−ＱＳＺ’、−ＳＣＯ−ピペリジノ−ＱＳＺ’−、及び−ＳＣＯ−Ｎ−メチルピペラジノ−ＱＳＺ’−、［式中、
Ｚ’は、Ｈ、チオール保護基、例えば、ＣＯＲ、Ｒ２０’又はＳＲ２０’（式中、Ｒ２０’は、アルキル、アリール、複素環式、又はヘテロアリールを表す）であり、
Ｑは、直接結合又は１から１０個の炭素原子を有する直鎖アルキル若しくは分枝鎖アルキル又は２から２０個の繰り返しエチレンオキシ単位を有するポリエチレングリコールスペーサーであり、
Ｒ１９及びＲ１２は、同じであるか又は異なっており、及び１から１０個の炭素原子を有する直鎖アルキル、分枝鎖アルキル若しくは環式アルキル、又は単純な若しくは置換されたアリール若しくは複素環式であり、及びＲ１２は、更にＨであってよく、
Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５及びＲ１６は、同じであるか又は異なっており、及びＨ又は１から４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分枝鎖アルキルであり、
Ｒ１７及びＲ１８は、Ｈ又はアルキルであり、
ｕは、１から１０の整数であり、及び０であってもよく、
ｔは、１から１０の整数であり、及び０であってもよく、
ｙは、１から２０の整数であり、及び０であってもよい］。
【０１２４】
この目的に従って、式（Ｉ’）の代表的化合物は、下記のものである。
【０１２５】
８，８’−｛５−［３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）プロピルオキシ］−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）｝−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−アセチルチオメチル−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［３−（２−アセチルチオエチル）−１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
，８’−［５−（Ｎ−４−メルカプト−４，４−ジメチルブタノイル）アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）−アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メルカプト−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（２−（４−メルカプト−４−メチル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−ブトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（２−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−［メチル−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−アミノ］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（４−（３−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、
８，８’−［（１−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
並びに対応するメルカプト誘導体、又はこれらの医薬的に許容される塩、水和物、若しくは水和塩、又はこれらの化合物の多形結晶性構造物又はこれらの光学異性体、ラセミ化合物、ジアステレオマー若しくはエナンチオマー。
【０１２６】
細胞結合剤は、どのような種類のものであってもよく、及びペプチド及び非ペプチドを含む。一般的に、これらは、抗体（特に、モノクローナル抗体）若しくは少なくとも１個の結合部位を含有する抗体のフラグメント、リンホカイン、ホルモン、成長因子、栄養輸送分子（例えば、トランスフェリン）、又は全ての他の細胞結合分子若しくは物質であってよい。使用することができる細胞結合剤の更に特別の例には、モノクローナル抗体；キメラ抗体；ヒト化抗体；完全ヒト抗体；一本鎖抗体；抗体のフラグメント、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’−）２及びＦｖ｛Ｐａｒｈａｍ，１３１  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８９５−２９０２（１９８３）；Ｓｐｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ，１１３  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４７０−４７８（１９７４）；Ｎｉｓｏｎｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ，８９  Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２３０−２４４（１９６０）｝；インターフェロン；ペプチド；リンホカイン、例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６；ホルモン、例えば、インスリン、ＴＲＨ（チロトロピン放出ホルモン）、ＭＳＨ（メラニン細胞刺激ホルモン）、ステロイドホルモン、例えば、アンドロゲン及びエストロゲン；成長因子及びコロニー刺激因子、例えば、ＥＧＦ、ＴＧＦα、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−Ｉ、ＩＧＦ−ＩＩ）、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ及びＧＭ−ＣＳＦ｛Ｂｕｒｇｅｓｓ，５  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  １５５−１５８（１９８４）｝；ビタミン、例えば、ホレート及びトランスフェリン｛Ｏ’Ｋｅｅｆｅ  ｅｔ  ａｌ，２６０  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９３２−９３７（１９８５）｝が含まれる。
【０１２７】
本明細書に含まれる表現「細胞結合剤」には、また、変性された細胞結合剤が含まれる。ここで、該細胞結合剤は、該細胞結合剤の、トマイマイシン誘導体のリンカーの結合基の方への反応性を改良するために、変性剤によって変性されている。該変性剤には、後で検討するような、Ｎ−スルホスクシンイミジル−４−（５−ニトロ−２−ピリジルジチオ）ブタノアート（ＳＳＮＰＢ）、スクシンイミジル  ４−［Ｎ−マレイミドメチル］シクロヘキサン−１−カルボキシラート（ＳＭＣＣ）、４−（２−ピリジルジチオ）ブタン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＳＰＤＢ）などが含まれる。
【０１２８】
モノクローナル抗体技術によって、特異モノクローナル抗体の形での極めて選択的な細胞結合剤の製造が可能になる。特に、マウス、ラット、ハムスター又は任意の他のほ乳動物に、関心の抗原、例えば、健全な標的細胞、標的細胞から単離された抗原、全ウイルス、弱毒全ウイルス、及びウイルスタンパク質、例えば、ウイルスコートタンパク質によって免疫性を与えることによって製造されるモノクローナル抗体を作るための技術は、当分野で周知である。
【０１２９】
適切な細胞結合剤の選択は、標的化されるべき特別の細胞集団に依存する選択の問題であるが、一般的に、適切なものが入手できる場合には、モノクローナル抗体が好ましい。
【０１３０】
例えば、モノクローナル抗体ＭＹ９は、特異的にＣＤ３３抗原に結合するマウスＩｇＧ１抗体であり｛Ｊ．Ｄ．Ｇｒｉｆｆｉｎ  ｅｔ  ａｌ  ８  Ｌｅｕｋｅｍｉａ  Ｒｅｓ．，５２１（１９８４）｝、及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の疾患に於けるように、標的細胞がＣＤ３３を発現する場合に、使用することができる。同様に、モノクローナル抗体抗Ｂ４は、Ｂ細胞上のＣＤ１９抗原に結合するマウスＩｇＧ１であり｛Ｎａｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ，１３１  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４４−２５０（１９８３）｝、及び標的細胞がＢ細胞又はこの抗原を発現する罹病細胞である場合、例えば、非ホジキンリンパ腫又は慢性リンパ芽球性白血病に於いて使用することができる。前記のように、ＭＹ９及び抗Ｂ４抗体は、マウス、キメラ、ヒト化又は完全ヒトであってよい。
【０１３１】
更に、骨髄性細胞に結合するＧＭ−ＣＳＦは、急性骨髄性白血病からの罹病細胞のための細胞結合剤として使用することができる。活性化Ｔ細胞に結合するＩＬ−２は、移植片拒絶の予防のために、移植片対宿主病の治療及び予防のために、並びに急性Ｔ細胞白血病の治療のために使用することができる。メラノサイトに結合するＭＳＨは、メラノーマの治療のために使用することができる。
【０１３２】
本発明のコンジュゲート分子は、任意の技術を使用して形成することができる。本発明のトマイマイシン誘導体は、酸不安定リンカーを経て、又は光不安定リンカーにより抗体又は他の細胞結合剤に結合することができる。この誘導体を、適切な配列を有するペプチドと縮合させ、及び続いて細胞結合剤に結合させてペプチダーゼ不安定リンカーを製造することができる。このコンジュゲートは、第一級ヒドロキシル基を含有するように製造することができ、このヒドロキシル基はスクシニル化し、及び細胞結合剤に結合して細胞内エステラーゼによって開裂させて遊離誘導体を遊離することができるコンジュゲートを製造することができる。好ましくは、この誘導体は、遊離の又は保護されたチオール基を含有するように合成し、及び次いで、１個以上のジスルフィド又はチオール含有誘導体を、それぞれ、ジスルフィド結合又はチオエーテル結合を介して細胞結合剤に共有結合させる。
【０１３３】
コンジュゲーションの多数の方法が、ＵＳＰ５，４１６，０６４及びＵＳＰ５，４７５，０９２に教示されている。トマイマイシン誘導体を変性して遊離アミノ基を得、及び次いで、酸不安定リンカー又は光不安定リンカーを介して抗体又は他の細胞結合剤に結合することができる。遊離アミノ基又はカルボキシル基を有するトマイマイシン誘導体をペプチドと縮合させ、及び続いて細胞結合剤に結合してペプチダーゼ不安定リンカーを製造することができる。リンカー上に遊離ヒドロキシル基を有するトマイマイシン誘導体をスクシニル化し、及び細胞結合剤に結合して細胞内エステラーゼによって開裂させて遊離薬物を遊離することができるコンジュゲートを製造することができる。最も好ましくは、このトマイマイシン誘導体は、遊離の又は保護されたチオール基を作るように処理し、及び次いで、ジスルフィド又はチオール含有トマイマイシンダイマーをジスルフィド結合を介して細胞結合剤に結合させる。
【０１３４】
本発明の代表的コンジュゲートは、抗体−トマイマイシン誘導体、抗体フラグメント−トマイマイシン誘導体、表皮成長因子（ＥＧＦ）−トマイマイシン誘導体、メラノサイト刺激ホルモン（ＭＳＨ）−トマイマイシン誘導体、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）−トマイマイシン誘導体、エストロゲン−トマイマイシン誘導体、エストロゲン類似体−トマイマイシン誘導体、アンドロゲン−トマイマイシン誘導体、アンドロゲン類似体−トマイマイシン誘導体、及びホレート−トマイマイシン誘導体である。
【０１３５】
抗体、抗体フラグメント、タンパク質又はペプチドホルモン、タンパク質又はペプチド成長因子及び他のタンパク質のトマイマイシン誘導体コンジュゲートは、公知の方法によって同じ手段で製造される。例えば、ペプチド及び抗体を、公知の方法により、架橋試薬、例えば、Ｎ−スクシンイミジル３−（２−ピリジルジチオ）プロピオナート、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルジチオ）ペンタノアート（ＳＰＰ）、４−スクシンイミジル−オキシカルボニル−α−メチル−α−（２−ピリジルジチオ）トルエン（ＳＭＰＴ）、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）ブチラート（ＳＤＰＢ）、スクシンイミジルピリジルジチオプロピオナート（ＳＰＤＰ）、４−（２−ピリジルジチオ）ブタン酸Ｎ−ヒドロスクシンイミドエステル（ＳＰＤＢ）、スクシンイミジル  ４−［Ｎ−マレイミドメチル］シクロヘキサン−１−カルボキシラート（ＳＭＣＣ）、Ｎ−スルホスクシンイミジル−３−（２−（５−ニトロ−２−ピリジルジチオ）ブチラート（ＳＳＮＰＢ）、２−イミノチオラン、又はＳ−アセチルコハク酸無水物で変性することができる。Ｃａｒｌｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，１７３  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．７２３−７３７（１９７８）；Ｂｌａｔｔｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ，２４  Ｂｉｏｃｈｅｍ．１５１７−１５２４（１９８５）；Ｌａｍｂｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ，２２  Ｂｉｏｃｈｅｍ．３９１３−３９２０（１９８３）；Ｋｌｏｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，９６  Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．６０５（１９６２）；及びＬｉｕ  ｅｔ  ａｌ，１８  Ｂｉｏｃｈｅｍ．６９０（１９７９）、Ｂｌａｋｅｙ及びＴｈｏｒｐｅ，１  Ａｎｔｉｂｏｄｙ，Ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ＆  Ｒａｄｉｏ−ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，１−１６（１９８８），Ｗｏｒｒｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．１  Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  １７９−１８４（１９８６）参照。次いで、このようにして誘導された遊離の又は保護されたチオール含有細胞結合剤を、ジスルフィド−又はチオール含有トマイマイシン誘導体と反応させてコンジュゲートを製造する。このコンジュゲートは、ＨＰＬＣにより又はゲル濾過により精製することができる。
【０１３６】
好ましくは、モノクローナル抗体−又は細胞結合剤−トマイマイシン誘導体コンジュゲートは、前記のようにジスルフィド結合を介して結合され、トマイマイシン誘導体を配布することができるものである。このような細胞結合コンジュゲートは、公知の方法により、例えば、モノクローナル抗体をスクシンイミジルピリジル−ジチオプロピオナート（ＳＰＤＰ）で変性することによって調製される（Ｃａｒｌｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，１７３  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．７２３−７３７（１９７８））。次いで、得られるチオピリジル基を、チオール含有トマイマイシン誘導体での処理によって置換してジスルフィド結合コンジュゲートを製造する。その代わりに、アリールジチオ−トマイマイシン誘導体の場合に、細胞結合コンジュゲートの形成は、前もって抗体分子の中に導入したスルフヒドリル基によるトマイマイシン誘導体のアリールチオールの直接置換により実施される。ジスルフィド架橋を介して結合された１から１０個のトマイマイシン誘導体薬物を含有するコンジュゲートが、何れかの方法によっても容易に調製される。
【０１３７】
更に特に、２ｍＭ  ＥＤＴＡを含有するｐＨ７．５で、０．０５Ｍリン酸カリウム緩衝液中の２．５ｍｇ／ｍＬの濃度の、ジチオ−ニトロピリジル変性抗体の溶液を、チオール含有トマイマイシン誘導体（１．３モル等量／ジチオピリジル基）で処理する。変性抗体からのチオ−ニトロピリジンの放出は、３２５ｎｍで分光光度法的にモニターされ、及び約１６時間内に完結する。この抗体−トマイマイシン誘導体コンジュゲートを精製し、及び未反応の薬物及び他の低分子量物質を、セファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）Ｇ−２５又はセファクリル（Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ）Ｓ３００のカラムに通すゲル濾過によって除去する。抗体分子当たりに結合したトマイマイシン誘導体部分の数は、２３０ｎｍでの吸収と２７５ｎｍでの吸収の比を測定することによって決定できる。平均１から１０個のトマイマイシン誘導体分子／抗体分子を、この方法によってジスルフィド結合を介して結合させることができる。
【０１３８】
抗原発現細胞への結合アフィニティへのコンジュゲーションの影響は、Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，９３  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８６１８−８６２３（１９９６）によって以前に記載された方法を使用して決定することができる。トマイマイシン誘導体及びこれらの抗体コンジュゲートの細胞系に対する細胞毒性は、Ｇｏｌｄｍａｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ，１３５  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３６４８−３６５１（１９８５）に記載されているような細胞増殖曲線の逆外挿法によって測定することができる。これらの化合物の付着細胞系に対する細胞毒性は、Ｇｏｌｄｍａｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ，１０２  Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１３１２−１３１９（１９８６）に記載されているような、クローン産生性アッセイによって決定することができる。
【０１３９】
本発明の代表的なコンジュゲートは、抗体、抗体フラグメント、表皮成長因子（ＥＧＦ）、メラノサイト刺激ホルモン（ＭＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、エストロゲン、エストロゲン類似体、アンドロゲン、及びアンドロゲン類似体とのトマイマイシン誘導体のコンジュゲートである。
【０１４０】
誘導体及び細胞結合剤の種々のコンジュゲートの調製の代表的な実施例を、以下に記載する。
【０１４１】
ジスルフィドリンカー：例えば、モノクローナル抗体ＭＹ９は、特異的にＣＤ３３抗原に結合するマウスＩｇＧ１抗体であり｛Ｊ．Ｄ．Ｇｒｉｆｆｉｎ  ｅｔ  ａｌ  ８  Ｌｅｕｋｅｍｉａ  Ｒｅｓ．，５２１（１９８４）｝、及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の疾患に於けるように標的細胞がＣＤ３３を発現する場合に使用することができる。同様に、モノクローナル抗体抗Ｂ４は、Ｂ細胞上のＣＤ１９抗原に結合するマウスＩｇＧ１であり｛Ｎａｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ，１３１  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４４−２５０（１９８３）｝、及び標的細胞が、Ｂ細胞又はこの抗原を発現する罹病細胞である場合、例えば、非ホジキンリンパ腫又は慢性リンパ芽球性白血病に於いて使用することができる。
【０１４２】
更に、骨髄性細胞に結合するＧＭ−ＣＳＦは、急性骨髄性白血病からの罹病細胞のための細胞結合剤として使用することができる。活性化Ｔ細胞に結合するＩＬ−２は、移植片拒絶の予防のために、移植片対宿主病の治療及び予防のために、並びに急性Ｔ細胞白血病の治療のために使用することができる。メラノサイトに結合するＭＳＨは、メラノーマの治療のために使用することができる。
【０１４３】
抗体又は他の細胞結合剤は、前記のように、Ｎ−スクシンイミジル−３−ピリジルジチオプロピオナートで変性して｛Ｊ．Ｃａｒｌｓｓｏｎ，Ｈ．Ｄｒｅｖｉｎ  ＆  Ｒ．Ａｘｅｎ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，１７３−７２３（１９７８）｝、抗体分子当たり平均で４個のピリジルジチオ基を導入する。この変性された抗体は、チオール含有誘導体と反応してジスルフィド結合したコンジュゲートを製造する。
【０１４４】
その代わりに、このコンジュゲートは、ＷＯ２００４／１０３２７２（その教示は、参照して本明細書に取り込まれる）に開示されている方法の適用及び／又は適合によって調製することができる。
【０１４５】
チオエーテルリンカー：本発明のチオール含有誘導体は、以前記載されたように、チオエーテル結合を介して抗体及び他の細胞結合剤に結合することができる（ＵＳＰ５，２０８，０２０）。この抗体又は他の細胞結合剤は、市販の化合物、例えば、Ｎ−スクシンイミジル４−（マレイミドメチル）シクロヘキサンカルボキシラート（ＳＭＣＣ）、Ｎ−スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシ−（６−アミドカプロアート）（これは、ＳＭＣＣの「長鎖」類似体（ＬＣ−ＳＭＣＣ）である）で変性することができる。これらの架橋試薬は、マレイミド系部分から誘導される非開裂性リンカーを形成する。
【０１４６】
ハロアセチル系部分を含む架橋試薬には、Ｎ−スクシンイミジル−４−（ヨードアセチル）−アミノベンゾアート（ＳＩＡＢ）、Ｎ−スクシンイミジルヨードアセタート（ＳＩＡ）、Ｎ−スクシンイミジルブロモアセタート（ＳＢＡ）及びＮ−スクシンイミジル３−（ブロモアセトアミノ）プロピオナート（ＳＢＡＰ）が含まれる。これらの架橋試薬は、ハロアセチル系部分から誘導される非開裂性リンカーを形成する。
【０１４７】
酸−不安定リンカー：本発明のアミノ基含有誘導体は、以前記載されたように、酸不安定リンカーを介して抗体及び他の細胞結合剤に結合することができる｛Ｗ．Ａ．Ｂｌａｔｔｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２４，１５１７−１５２４（１９８５）；ＵＳＰ４，５４２，２２５、ＵＳＰ４，５６９，７８９、ＵＳＰ４，６１８，４９２、ＵＳＰ４，７６４，３６８｝。
【０１４８】
同様に、本発明のヒドラジド基含有誘導体は、酸不安定ヒドラゾンリンカーを介して抗体及び他の細胞結合剤の炭水化物部分に結合することができる｛ヒドラゾンリンカーの例について、Ｂ．Ｃ．Ｌａｇｕｚｚａ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３２，５４８−５５５（１９８９）；Ｒ．Ｓ．Ｇｒｅｅｎｆｉｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，５０、６６００−６６０７（１９９０）参照｝。
【０１４９】
光−不安定リンカー：本発明のアミン基含有誘導体は、以前記載されたように、光不安定リンカーを介して抗体及び他の細胞結合剤に結合することができる｛Ｐ．Ｓｅｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ及びＰｈｏｔｏｂｉｏｌｏｇｙ，４２，２３１−２３７（１９８５）；ＵＳＰ４，６２５，０１４｝。
【０１５０】
ペプチダーゼ−不安定リンカー：本発明のアミン基含有誘導体は、また、ペプチドスペーサーを介して細胞結合剤に結合することができる。薬物と巨大分子タンパク質担体との間の短いペプチドスペーサーは、血清中で安定であるが分子内ペプチダーゼにより容易に加水分解されることが、以前示された｛Ａ．Ｔｒｏｕｅｔ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，７９，６２６−６２９（１９８２）｝。アミノ基含有誘導体は、縮合剤、例えば、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド−ＨＣｌ（ＥＤＣ−ＨＣｌ）を使用してペプチドと縮合させて細胞結合剤に結合させることができるペプチド誘導体を得ることができる。
【０１５１】
エステラーゼ−不安定リンカー：ヒドロキシアルキル基を有する本発明の誘導体を、コハク酸無水物によってスクシニル化し、及び次いで、細胞結合剤に結合して細胞内エステラーゼによって開裂して遊離薬物を遊離することができるコンジュゲートを製造することができる｛例えば、Ｅ．Ａｂｏｕｄ−Ｐｉｒａｋ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，３８，６４１−６４８（１９８９）参照｝。
【０１５２】
上記の方法によって製造されたコンジュゲートは、標準的クロマトグラフィー技術、例えば、これらに限定されないが、イオン交換、疎水性相互作用クロマトグラフィー、アフィニティクロマトグラフィー、セラミックヒドロキシアパタイト若しくはポラパック（Ｐｏｒａｐａｋ）上でのクロマトグラフィーを含むサイズ排除吸着クロマトグラフィー又はＨＰＬＣにより精製することができる。透析又は膜分離による精製を使用することもできる。
【０１５３】
好ましくは、モノクローナル抗体又は細胞結合剤と本発明の誘導体との間のコンジュゲートは、前記のように、ジスルフィド結合を介して連結されているものである。このような細胞結合コンジュゲートは、公知の方法、例えば、モノクローナル抗体をスクシンイミジルピリジル−ジチオプロピオナート（ＳＰＤＰ）で変性することにより調製される｛Ｃａｒｌｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，１７３  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．７２３−７３７（１９７８）｝。次いで、得られるチオピリジル基を、チオール含有誘導体による処理によって置換してジスルフィド結合コンジュゲートを製造する。ジスルフィド架橋を介して結合された１から１０個の誘導体を含有するコンジュゲートが、この方法によって容易に調製される。この方法によるコンジュゲーションは、ＵＳＰ５，５８５，４９９（参照して取り込まれる）に完全に記載されている。
【０１５４】
好ましい態様に従って、細胞結合剤は、抗体、特にモノクローナル抗体である。
【０１５５】
他の好ましい態様に従って、細胞結合剤は、抗原特異性抗体フラグメント、例えば、ｓＦＶ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、又はＦ（ａｂ’）２である。
【０１５６】
別の目的に従って、本発明は、また、医薬的に許容される担体と一緒に、本発明のコンジュゲート分子又は前記定義された通りの式（Ｉ）の化合物を含む、医薬組成物に関する。
【０１５７】
別の目的に従って、本発明は、また、細胞、好ましくは、選択された細胞集団を殺す又は細胞の成長を阻害する方法であって、標的細胞又は標的細胞を含有する組織を、本発明に従った医薬組成物の有効量と接触させることを含む方法に関する。
【０１５８】
選択された細胞集団は、癌性及び／又は増殖性細胞である。
【０１５９】
別の目的に従って、本発明は、また、本発明に従った医薬組成物の有効量を、その必要性がある患者に投薬することを含む、癌の治療、好ましくは選択的治療のための方法に関する。
【０１６０】
本発明に従って、「癌の選択的治療」は、正常な及び／又は非増殖性の細胞を実質的に殺すことなく、癌性及び／又は増殖性細胞を殺すことを指す。
【０１６１】
別の目的に従って、本発明は、また、癌を治療するための医薬の調製のための、本発明のコンジュゲート分子又は前記定義された通りの式（Ｉ）の化合物の使用に関する。
【０１６２】
選択された細胞集団の成長を阻害するための方法は、インビトロ、インビボ、又はエクスビボで実施することができる。
【０１６３】
インビトロ使用の例には、標的抗原を発現しない所望の変種を除く全ての細胞を殺すための、又は望ましくない抗原を発現する変種を殺すための、細胞培養の処理が含まれる。
【０１６４】
非臨床的インビトロ使用の条件は、当業者により容易に決定される。
【０１６５】
エクスビボ使用の例には、罹病細胞又は悪性細胞を殺すための同じ患者の中へのこれらの移植の前の自己骨髄の治療、コンピテントＴ細胞を殺し、及び移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を予防するためのこれらの移植の前の骨髄の治療が含まれる。
【０１６６】
癌治療若しくは自己免疫疾患の治療に於ける自己移植の前の骨髄から腫瘍細胞若しくはリンパ球様細胞を除去するための、又はＧＶＨＤを予防するために移植の前に同種異系骨髄若しくは組織からＴ細胞及び他のリンパ球様細胞を除去するための、臨床的エクスビボ治療は、下記のようにして実施することができる。骨髄を、患者又は他の個体から採取し、及び次いで、本発明の細胞障害剤を約１０μＭから１ｐＭの濃度範囲で添加した血清を含有する媒体中で、約３０分から約４８時間、約３７℃で温置する。濃度及び温置の時間（＝ドーズ（ｄｏｓｅ））の正確な条件は、当業者により容易に決定される。温置の後、骨髄細胞を、血清を含有する媒体で洗浄し、及び公知の方法に従って、静脈内注入によってこの患者に戻す。患者が、他の治療、例えば、骨髄の採取と処理した細胞の再注入の間の除去（ａｂｌａｔｉｖｅ）化学療法又は全身照射の過程を受ける状況に於いて、処理した骨髄細胞を、標準医学装置を使用して液体窒素中で凍結保存する。
【０１６７】
臨床的インビボ使用のために、本発明の細胞障害剤は、無菌性及びエンドトキシンレベルについて試験する溶液として又は注射のために滅菌水中に再溶解することができる凍結乾燥した固体として供給される。コンジュゲート投薬の適切なプロトコルの例は、下記の通りである。コンジュゲートは、週に一度６週間、静脈内濃縮塊（ｂｏｌｕｓ）として与えられる。濃縮塊用量は、ヒト血清アルブミン（例えば、ヒト血清アルブミンの濃厚溶液０．５から１ｍＬ、１００ｍｇ／ｍＬ）を添加することができる規定食塩水５０から４００ｍＬ中で与えられる。用量は、１週当たり約５０μｇから１０ｍｇ／体重ｋｇ、静脈内（１回注射当たり１０μｇから１００ｍｇ／ｋｇの範囲）である。治療して６週後に、この患者は治療の第二コースを受ける。投薬の経路、賦形剤、希釈剤、用量、時間などに関する特別の臨床プロトコルは、臨床状況保証として当業者により決定することができる。
【０１６８】
選択された細胞集団を殺すインビボ又はエクスビボ方法に従って治療することができる医学状態の例には、例えば、肺、乳房、結腸、前立腺、腎臓、膵臓、卵巣及びリンパ器官の癌；メラノーマ；自己免疫疾患、例えば、全身性ループス、関節リウマチ、及び多発性硬化症；移植片拒絶、例えば、腎蔵移植拒絶、肝蔵移植拒絶、肺移植拒絶、心臓移植拒絶、及び骨髄移植拒絶；移植片対宿主病；ウイルス感染、例えば、ＣＭＶ感染、ＨＩＶ感染、ＡＩＤＳなど；細菌感染；並びに寄生虫感染、例えば、ジアルジア症、アメーバ症、住血吸虫症、並びに当業者により決定されるような他のものを含む、任意の種類の悪性度が含まれる。
【０１６９】
本明細書に記載した疾患及び状態の治療が必要であるこれらの被検者の同定は、十分に、当業者の能力及び知識内である。当分野で熟練して獣医又は医師は、臨床試験、物理的試験、医学的／家族履歴又は生物学的及び診断的試験の使用により、このような治療が必要である被検者を容易に同定することができる。
【０１７０】
治療的有効量は、主治医診断医により、当業者として、従来の技術の使用により、及び類似の状況下で得られる結果を観察することにより、容易に決定することができる。治療的有効量を決定する際に、これらに限定されないが、被検者の種；そのサイズ、年齢、及び一般的健康；含まれる特別の疾患；疾患の含有又は酷度の程度；個々の被検者の反応；投薬される特定の化合物；投薬の様式；投薬される製剤のバイオアベイラビリティ特性；選択される用量処方；併用薬の使用；並びに他の関連状況を含む多数の要因が、主治医診断医によって考慮される。
【０１７１】
所望の生物学的効果を達成するために必要である、式（Ｉ）の化合物又はコンジュゲートの量は、使用する化合物の化学的特性（例えば、疎水性）、化合物の効能、疾患の種類、患者が属する種、患者の罹病状態、投薬の経路、選択された経路による化合物のバイオアベイラビリティ、投薬すべき必要な用量、配布及び処方を指定する全ての要因を含む多数の要因に依存して変化する。
【０１７２】
「医薬的に」又は「医薬的に許容される」は、動物、又はヒトに適切に投薬したとき、逆の、アレルギー性の又は他の不利な反応をもたらさない分子実体及び組成物を指す。
【０１７３】
本明細書中に使用されるとき、「医薬的に許容される賦形剤」には、任意の担体、希釈剤、添加剤、又はビヒクル、例えば、保存剤又は酸化防止剤、充填剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、溶媒、分散媒体、被覆剤、抗菌剤及び抗真菌剤、等張及び吸収遅延剤などが含まれる。医薬活性物質用のこのような媒体及び試薬の使用は、当分野で公知である。任意の従来の媒体又は試薬が、活性成分と非相溶性である範囲を除いて、治療組成物中のその使用が意図される。補助的活性成分も、適切な治療的組合せとして組成物中に含有させることができる。
【０１７４】
本発明の関連で、本明細書中に使用されるとき、用語「治療する」又は「治療」は、この用語が適用される異常症若しくは状態、又はこのような異常症若しくは状態の１種以上の症状の進行を逆にする、緩和する、阻害する、又はこのような状態等を予防することを意味する。
【０１７５】
「治療的に有効量」は、本明細書中に参照した病理学的状態を予防又は治療する際に有効な本発明に従った化合物／医薬の量を意味する。
【０１７６】
本発明に従って、用語「患者」又は「それが必要である患者」は、本明細書中に参照した病理学的状態により影響を受けている又は影響を受けていると思われる動物又はヒトについて意図される。好ましくは、患者はヒトである。
【０１７７】
一般的項目で、本発明の化合物は、非経口投薬のために、０．１から１０％ｗ／ｖの化合物を含有する生理学的緩衝水溶液中で提供される。典型的な用量範囲は、１日当たり１μｇ／体重ｋｇから０．１ｇ／体重ｋｇであり、好ましい用量範囲は、１日当たり０．０１ｍｇ／体重ｋｇから１０ｍｇ／体重ｋｇ又はヒトの子供で等価用量である。投薬すべき薬物の好ましい用量は、疾患又は異常症の種類及び進行の程度、特別の患者の全体健康状態、選択された化合物の相対生物学的効能、化合物の配合、投薬の経路（静脈内、筋肉内、又はその他）、選択された配布経路による化合物の薬物動力学的特徴、並びに投薬の速度（濃縮塊又は連続注入）及びスケジュール（所与の時間内の繰り返しの数）のような変数に依存すると思われる。
【０１７８】
本発明の化合物は、また、単位剤形で投薬することができる。ここで、用語「単位剤形」は、患者に投薬することができ、以下に記載するように、活性化合物自体を含む物理的に及び化学的に安定な単位用量として、又は医薬的に許容される組成物として留まるように、容易に取扱い、及び包装できる１回用量を意味する。そのようなものとして、典型的な合計１日用量範囲は、０．０１から１００ｍｇ／体重ｋｇである。一般的なガイダンスとして、ヒトのための単位用量は、１ｍｇから３０００ｍｇ／日の範囲である。好ましくは、単位用量範囲は、１日１から６回投薬で１から５００ｍｇであり、及びなお更に好ましくは、１日１回で１０ｍｇから５００ｍｇである。ここで提供される化合物は、１種以上の医薬的に許容される賦形剤と混合することによって医薬組成物に配合することができる。このような単位用量組成物は、経口投薬により、特に、錠剤、単純カプセル若しくは軟質ゲルカプセルの形で、又は鼻腔内に、特に、散剤、点鼻剤、若しくはエーロゾルの形で；又は皮膚的に、例えば、軟膏、クリーム、ローション、ゲル若しくはスプレーで局所的に又は経皮パッチにより使用するために調製することができる。
【０１７９】
この組成物は、単位剤形で便利に投薬することができ、及び医薬分野に於いて周知の方法、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  及び  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，第２０版；Ｇｅｎｎａｒｏ，Ａ．Ｒ．，編；Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ：ペンシルベニア州フィラデルフィア、２０００に記載されているような方法の何れかによって製剤することができる。
【０１８０】
好ましい配合物には、本発明の化合物が、経口又は非経口投薬のために配合される医薬組成物が含まれる。
【０１８１】
経口投薬のために、錠剤、丸剤、散剤、カプセル剤、トローチ剤などには、下記の成分、又は同様の性質の化合物；バインダー、例えば、微結晶性セルロース、又はトラガカントゴム；希釈剤、例えば、デンプン又はラクトース；崩壊剤、例えば、デンプン及びセルロース誘導体；滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム；グリダント（ｇｌｉｄａｎｔ）、例えば、コロイド状二酸化ケイ素；甘味剤、例えば、スクロース又はサッカリン；又は香味剤、例えば、ペパーミント若しくはサリチル酸メチルの何れか１種以上を含有していてよい。カプセル剤は、硬質カプセル剤又は軟質カプセル剤（これらは一般的に、場合により可塑剤とブレンドされたゼラチンブレンドから製造される）、及びデンプンカプセルの形であってよい。更に、用量単位剤形には、用量単位の物理的形態を修正する種々の他の材料、例えば、砂糖、シェラック又は腸溶剤の皮膜が含有されていてよい。他の経口用量剤形、シロップ剤又はエリキシル剤には、甘味剤、保存剤、染料、着色剤、及び香味剤が含有されていてよい。更に、この活性化合物は、速溶解性、修正放出性又は徐放出性製剤及び配合物の中に含有させることができ、及びこのような徐放出性配合物は、好ましくは二峰性である。好ましい錠剤には、ラクトース、コーンスターチ、ケイ酸マグネシウム、クロスカルメロス・ナトリウム（ｃｒｏｓｃａｒｍｅｌｌｏｓｅ  ｓｏｄｉｕｍ）、ポビドン（ｐｏｖｉｄｏｎｅ）、ステアリン酸マグネシウム、又はタルクが、任意の組合せで含有されている。
【０１８２】
非経口投薬のための液体製剤には、滅菌水性又は非水性の溶液、懸濁液、及びエマルジョンが含まれる。液体組成物には、また、バインダー、緩衝剤、保存剤、キレート化剤、甘味剤、香味剤及び着色剤などが含まされていてよい。非水性溶媒には、アルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、例えば、オリーブ油、及び有機エステル、例えば、オレイン酸エチルが含まれる。水性担体には、アルコールと水との混合物、緩衝された媒体、及び食塩水が含まれる。特に、生体適合性、生分解性ラクチドポリマー、ラクチド／グリコリドコポリマー、又はポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーが、活性化合物の放出を制御するための有用な賦形剤である。静脈内ビヒクルには、流体及び栄養補給剤、電解質補給剤、例えば、リンゲルデキストロースをベースにするものなどが含まれてよい。これらの活性化合物のための他の潜在的に有用な非経口配布システムには、エチレン−酢酸ビニルコポリマー粒子、浸透圧ポンプ、移植性注入システム、及びリポソームが含まれる。
【０１８３】
投薬の代替方式には、乾燥粉末、エーロゾル、又は滴剤のような手段を含む吸入のための配合物が含まれる。これらは、例えば、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル、グリココーラート及びデオキシコーラートを含有する水溶液、又は点鼻剤の形での投薬のための油性溶液、又は鼻腔内に適用するゲルとしてであってよい。頬側投薬のための配合物には、例えば、ロゼンジ剤又はトローチ剤が含まれ、及びまた、芳香ベース、例えば、スクロース又はアラビアゴム、及び他の賦形剤、例えば、グリココーラートが含有されていてよい。直腸投薬のために適している配合物は、好ましくは、固体系担体、例えば、ココアバターを含有する単位用量坐剤として提示され、及びサリチラートを含有していてよい。皮膚への局所適用のための配合物は、好ましくは、軟膏、クリーム、ローション、ペースト、ゲル、スプレー、エーロゾル、又は油の形態を取る。使用できる担体には、石油ジェリー、ラノリン、ポリエチレングリコール、アルコール、又はこれらの組合せが含まれる。経皮投薬のために適した配合物は、別個のパッチとして提示することができ、及びポリマー又は接着剤中に溶解及び／又は分散された親油性エマルジョン又は緩衝された水溶液であってよい。
【０１８４】
本発明を更に示すが、下記の実施例に於ける説明によって制限されない。
【０１８５】
実験部
方法Ａ１：高圧液体クロマトグラフィー−質量分析法（ＬＣＭＳ）
Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘソフトウエアを使用し、及び分析は、０．８ｍＬ／分の流量で、（Ａ）アセトニトリル及び（Ｂ）水／０．１％ギ酸の混合物による勾配溶離（勾配：５％Ａ：９５％Ｂ  ５分間かけて９５％Ａ：５％Ｂまで上げる、０．５分間９５％Ａ：５％Ｂ、９５％Ａ：５％Ｂ  １分間かけて５％Ａ：９５％Ｂまで下げる、０．５分間５％Ａ：９５％Ｂ）を使用する、ＴＨＥＲＭＯ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ  Ｇｏｌｄ  Ｃ１８  ３μｍカラム（５０×３ｍｍ）を取り付けたＡｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズＨＰＬＣ；Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ（ポジティブ及びネガティブイオン化）を取り付けたＷａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍ  Ｉ、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ又はＺＱ分光計；インラインＤｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ（１９０から４９０ｎｍ）；補助検出器Ｓｅｄｅｒｅ（フランス）モデルＳＥＤＥＸ６５蒸発光散乱（ＥＬＳ）検出器で実施する。
【０１８６】
方法Ａ２：高圧液体クロマトグラフィー−質量分析法（ＬＣＭＳ）
Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘソフトウエアを使用し、及び分析は、１．１ｍＬ／分の流量で、（Ａ）メタノール及び（Ｂ）水／０．１％ギ酸の混合物による勾配溶離（勾配：５％Ａ：９５％Ｂ  １０分間かけて９５％Ａ：５％Ｂまで上げる、９５％Ａ：５％Ｂ  １分間かけて５％Ａ：９５％Ｂまで下げる、２分間５％Ａ：９５％Ｂ）を使用する、ＷＡＴＥＲＳ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ３．５μｍカラム（１００×３ｍｍ）を取り付けたＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＨＰＬＣ；Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ（ポジティブ及びネガティブイオン化）を取り付けたＷａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ分光計；インラインＤｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ（１９０から５００ｎｍ）；補助検出器Ｓｅｄｅｒｅ（フランス）モデルＳＥＤＥＸ８５蒸発光散乱（ＥＬＳ）検出器で実施する。
【０１８７】
方法Ａ３：高圧液体クロマトグラフィー−質量分析法（ＬＣＭＳ）
Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘソフトウエアを使用し、及び分析は、１．１ｍＬ／分の流量で、（Ａ）アセトニトリル及び（Ｂ）水／０．１％ギ酸の混合物による勾配溶離（勾配：５％Ａ：９５％Ｂ  ５分間かけて１００％Ａまで上げる、０．５分間１００％Ａ、１００％Ａ  １分間かけて５％Ａ：９５％Ｂまで下げる、０．５分間５％Ａ：９５％Ｂ）を使用する、ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ２．５μｍカラム（５０×３ｍｍ）を取り付けたＡｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズＨＰＬＣ；Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙを取り付けたＷａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ分光計；インラインＤｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ（２１０−２５４ｎｍ）で実施する。
【０１８８】
方法Ｂ：高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）精製
ＨＰＬＣ精製を、１５ｍＬ／分の流量（方法Ｂ１）又は２０ｍＬ／分（方法Ｂ２）で、（Ａ）アセトニトリル及び（Ｂ）水の混合物で溶離する（勾配：５分間５％Ａ：９５％Ｂ、５％Ａ：９５％Ｂ  ２０分間かけて１００％Ａまで上げる、８分間１００％Ａ、１００％Ａ  １分間かけて５％Ａ：９５％Ｂに、１１分間５％Ａ：９５％Ｂ）、Ｍａｃｈｅｒｅｙ  Ｎａｇｅｌ  Ｎｕｃｌｅｏｄｕｒ  Ｃ１８  Ｇｒａｖｉｔｙ  ５μＭカラム（２１×１００ｍｍ、カタログ番号７６２１０１）で実施した。
【０１８９】
方法Ｃ：電子イオン化（ＥＩ）質量スペクトル
ＥＩ質量スペクトルは、Ｆｉｎｎｉｇａｎ  ＳＳＱ  ７０００質量分析計（ＥＩモード：７０ｅＶ、源温度＝１５０℃、ダイレクトイントロダクション）を使用して記録した。
【０１９０】
方法Ｄ：化学イオン化（ＣＩ）質量スペクトル
ＣＩ質量スペクトルは、Ｆｉｎｎｉｇａｎ  ＳＳＱ  ７０００質量分析計（アンモニア）を使用して記録した。
【０１９１】
方法Ｅ：１Ｈ  核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル
１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  Ｄｒｘ−５００、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  Ｄｒｘ−４００又はＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＤＲＸ−３００分光計で記録した。
【０１９２】
方法Ｆ：高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）精製
ＨＰＬＣ精製を、７０ｍＬ／分の流量で、（Ａ）アセトニトリル及び（Ｂ）水／ＨＣＯＯＮＨ４  ０．０１Ｍ／ＮＨ４ＯＨ  ｐＨ９−１０の混合物で溶離する（勾配：３分間１０％Ａ：９０％Ｂ、１０％Ａ：９０％Ｂ  ３７分間かけて９５％Ａ：５％Ｂまで上げる、８分間９５％Ａ：５％Ｂ、９５％Ａ：５％Ｂ  １分間かけて１０％Ａ：９０％Ｂに、１分間１０％Ａ：９０％Ｂ）、Ｍａｃｈｅｒｅｙ  Ｎａｇｅｌ  ＶＰ  ２５０／４０ｍｍ  ＮＵＣＬＥＯＤＵＲ  ＧＲＡＶＩＴＹ  １００−１０Ｃ１８（カタログ番号７６２２５０）で実施した。
【０１９３】
方法Ｇ１：高圧液体クロマトグラフィー−質量分析法（ＬＣＭＳ）
Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘソフトウエアを使用し、及び分析は、１．１ｍＬ／分の流量で、（Ａ）アセトニトリル及び（Ｂ）水／０．１％ギ酸の混合物による勾配溶離（勾配：５％Ａ：９５％Ｂ  ４．７分間かけて９５％Ａ：５％Ｂまで上げる、９５％Ａ：５％Ｂ  ０．５分間かけて５％Ａ：９５％Ｂまで下げる、０．８分間５％Ａ：９５％Ｂ）を使用する、Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８  １．７μｍカラム（２．１×１００ｍｍ）を取り付けたＡｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ；Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙを取り付けたＱｕａｔｔｒｏ  Ｐｒｅｍｉｅｒ分光計；インラインＤｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ（２１０から４００ｎｍ）で実施する。
【０１９４】
方法Ｇ２：高圧液体クロマトグラフィー−質量分析法（ＬＣＭＳ）
Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＭａｓｓＬｙｎｘソフトウエアを使用し、及び分析は、０．６ｍＬ／分の流量で、（Ａ）アセトニトリル及び（Ｂ）水／０．１％ギ酸の混合物による勾配溶離（勾配：５％Ａ：９５％Ｂ  １０分間かけて９５％Ａ：５％Ｂまで上げる、９５％Ａ：５％Ｂ  １分間かけて５％Ａ：９５％Ｂまで下げる、２分間５％Ａ：９５％Ｂ）を使用する、Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８  １．７μｍカラム（２．１×１００ｍｍ）を取り付けたＡｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ；Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙを取り付けたＱｕａｔｔｒｏ  Ｐｒｅｍｉｅｒ分光計；インラインＤｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ（２１０から４００ｎｍ）で実施する。
【０１９５】
方法Ｈ：高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）精製方法
ＨＰＬＣ精製を、２０ｍＬ／分の流量で、（Ａ）水及び（Ｂ）アセトニトリルの混合物で溶離する、Ｋｒｏｍａｓｉｌ  １６μｍ  Ｃ１８  カラム（２５０×２１．２ｍｍ、ＰＮ  Ａ０４９０−２５０×２１２、ロット番号ＤＴ０２５９、ＳＮ９７７２１９６）を使用するＶａｒｉａｎ  ＨＰＬＣで実施した。収集サイズは８０秒であった。化合物の質量スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｅｓｑｕｉｒｅ３０００計器で得た。ＮＭＲスペクトルは、４００ＭＨｚで操作するＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ分光計で記録した。
【０１９６】
カラムを溶離するための勾配
１．８，８’−［５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）−アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の精製
８分間５５％Ａ：４５％Ｂ、５５％Ａ：４５％Ｂ  １４分間かけて５０％Ａ：５０％Ｂに、５０％Ａ：５０％Ｂ  ４分間かけて１０％Ａ：９０％Ｂに、５分間１０％Ａ：９０％Ｂ、１０％Ａ：９０％Ｂ  １分間かけて５５％Ａ：４５％Ｂに、３分間５５％Ａ：４５％Ｂ。
【０１９７】
２．８，８’−［５−（Ｎ−４−メルカプト−４，４−ジメチルブタノイル）−アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の精製
４分間６０％Ａ：４０％Ｂ、６０％Ａ：４０％Ｂ  ５分間かけて５５％Ａ：４５％Ｂに、４分間５５％Ａ：４５％Ｂ、５５％Ａ：４５％Ｂ  １３分間かけて５０％Ａ：５０％Ｂに、５０％Ａ：５０％Ｂ  １０秒間かけて１０％Ａ：９０％Ｂに、５分間１０％Ａ：９０％Ｂ、１０％Ａ：９０％Ｂ  １０秒間かけて６０％Ａ：４０％Ｂに、３分間６０％Ａ：４０％Ｂ。
【０１９８】
３．８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の精製
８分間６０％Ａ：４０％Ｂ、６０％Ａ：４０％Ｂ  １６分間かけて４５％Ａ：５５％Ｂに、４５％Ａ：５５％Ｂ  ２分間かけて１０％Ａ：９０％Ｂに、５分間１０％Ａ：９０％Ｂ、１０％Ａ：９０％Ｂ  １分間かけて６０％Ａ：４０％Ｂに、３分間６０％Ａ：４０％Ｂ。
【０１９９】
４．８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メルカプト−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の精製
６５％Ａ：３５％Ｂ  ８分間かけて６０％Ａ：４０％Ｂに、６０％Ａ：４０％Ｂ  １９分間かけて５０％Ａ：５０％Ｂに、５０％Ａ：５０％Ｂ  １０秒間かけて１０％Ａ：９０％Ｂに、５分間１０％Ａ：９０％Ｂ、１０％Ａ：９０％Ｂ  １０秒間かけて６５％Ａ：３５％Ｂに、３分間６５％Ａ：３５％Ｂ。
【０２００】
（実施例１）
８，８’−［１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０２０１】
【化２７】
2009524636.tif 000018
炭酸カリウム（２２．８ｍｇ）、α，α’−ジブロモ−ｍ−キシレン（７．３ｍｇ）及びヨウ化カリウム（９．１ｍｇ）を、ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中のプレ−トマイマイシン（１５ｍｇ）の攪拌した溶液に添加した。この反応物を、３０℃で２０時間撹拌した。固体を濾別し、ジメチルホルムアミド（０．２ｍＬ）で２回洗浄し、次いで廃棄した。水（０．４ｍＬ）を、一緒にしたジメチルホルムアミド溶液に添加し、得られた溶液を、方法Ｂ１に従って、ＨＰＬＣ精製のために注入した。適切なフラクションを一緒にし、Ｊｏｕａｎ  Ｍｏｄｅｌ  ＲＣ１０．１０．装置上で遠心蒸発によって濃縮して、８，８’−［１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］を、白色粉末（３．３３ｍｇ）として得た。
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝６４７ＭＨ＋
保持時間＝３．５３分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，７５（ｄ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，６Ｈ）；２，９６（ｍ，４Ｈ）；３，８９（ｍ，２Ｈ）；３，９６（ｓ，６Ｈ）；４，２７（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，１７（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，２３（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，６０（ｍ，２Ｈ）；６，８５（ｓ，２Ｈ）７，３６から７，４３（ｍ，３Ｈ）；７，５１（ｓ  ブロード，１Ｈ）；７，５３（ｓ，２Ｈ）；７，６３（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）。
【０２０２】
（実施例２）
８，８’−［５−メトキシ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０２０３】
【化２８】
2009524636.tif 000019
８，８’−［５−メトキシ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、１，３−ビス−ブロモメチル−５−メトキシ−ベンゼンで出発して、８，８’−［１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（実施例１）の調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝６７７  ＭＨ＋
保持時間＝４．１７分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，７５（ｄ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，６Ｈ）；２，９６（ｍ，４Ｈ）；３，８１（ｓ，３Ｈ）；３，８９（ｍ，２Ｈ）；３，９６（ｓ，６Ｈ）；４，２６（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，１４（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，２１（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，６０（ｍ，２Ｈ）；６，８２（ｓ，２Ｈ）；６，９５（ｓ  ブロード，２Ｈ）；７，０７（ｓ  ブロード，１Ｈ）；７，５３（ｓ，２Ｈ）；７，６３（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）。
【０２０４】
１，３−ビス−ブロモメチル−５−メトキシ−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０２０５】
【化２９】
2009524636.tif 000020
四臭化炭素（６６３ｍｇ）を、無水ジクロロメタン（１０ｍＬ）中の１−ブロモメチル−３−ヒドロキシメチル−５−メトキシ−ベンゼン（４２０ｍｇ）の攪拌した溶液に、アルゴン下で添加した。得られた溶液を０℃で冷却した後、無水ジクロロメタン（１０ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（５００ｍｇ）の溶液を、滴下により添加した。この反応混合物を室温で２０時間攪拌し、次いで真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＦｌａｓｈ  ３０ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ、ジクロロメタン／ヘプタン、４０：６０で溶離した）によって精製して、１，３−ビス−ブロモメチル−５−メトキシ−ベンゼン（１７０ｍｇ）を得た。
ＥＩ（方法Ｃ）：ｍ／ｚ＝２９２  Ｍ＋．
ｍ／ｚ＝２１３［Ｍ−Ｂｒ］＋．
ｍ／ｚ＝１３４［２１３−Ｂｒ］＋．
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：３，７７（ｓ，３Ｈ）；４，６５（ｓ，４Ｈ）；６，９８（ｓ  ブロード，２Ｈ）；７，１０（ｓ  ブロード，１Ｈ）
１−ブロモメチル−３−ヒドロキシメチル−５−メトキシ−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０２０６】
【化３０】
2009524636.tif 000021
四臭化炭素（３．４７ｇ）を、無水ジクロロメタン（１６ｍＬ）中の１，３−ジヒドロキシメチル−５−メトキシ−ベンゼン（８００ｍｇ）の攪拌した溶液に、アルゴン下で添加した。得られた溶液を０℃で冷却した後、無水ジクロロメタン（１６ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（２．６８ｇ）の溶液を、滴下により添加した。この反応混合物を室温で２０時間攪拌し、次いで真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＰｒｅｐ  ９０ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ、メタノール／ジクロロメタン、４：９６で溶離した）によって精製して、１−ブロモメチル−３−ヒドロキシメチル−５−メトキシ−ベンゼン（４２０ｍｇ）を得た。
ＥＩ（方法Ｃ）：ｍ／ｚ＝２３０  Ｍ＋．
ｍ／ｚ＝１５１［Ｍ−Ｂｒ］＋．
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：３，７５（ｓ，３Ｈ）；４，４６（ｄ  ブロード，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，６５（ｓ，２Ｈ）；５，２２（ｔ  ブロード，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，１Ｈ）；６，８３（ｓ  ブロード，１Ｈ）；
６．８８（ｓ  ブロード，１Ｈ）；６，９７（ｓ  ブロード，１Ｈ）
【０２０７】
（実施例３）
８，８’−［１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０２０８】
【化３１】
2009524636.tif 000022
炭酸カリウム（２２．８ｍｇ）及び１，５−ヨードペンタン（８．２μＬ）を、ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中のプレ−トマイマイシン（１５ｍｇ）の攪拌した溶液に添加した。この反応物を、室温で２０時間撹拌し、炭酸カリウムの追加の部分（８ｍｇ）を添加した。この反応物を、室温で更に２０時間攪拌した。
【０２０９】
固体を濾別し、ジメチルホルムアミド溶液を、方法Ｂ２に従って、ＨＰＬＣ精製のために注入した。適切なフラクションを一緒にし、Ｊｏｕａｎ  Ｍｏｄｅｌ  ＲＣ１０．１０．装置上で遠心蒸発によって濃縮して、８，８’−［１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］を、白色粉末（４ｍｇ）として得た。
【０２１０】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ２）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝６１３  ＭＨ＋
保持時間＝９．０４分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，６６（ｍ部分的にマスクされた，２Ｈ）；１，７５（ｄ  ブロード，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，６Ｈ）；１，９６（ｍ，４Ｈ）；２，９７（ｄ  ブロード，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，４Ｈ）；
３．８９（ｍ，２Ｈ）；３，９４（ｓ，６Ｈ）；４，０６（ｍ，２Ｈ）；４，１３（ｍ，２Ｈ）；４，２６（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，６０（ｍ，２Ｈ）；６，８０（ｓ，２Ｈ）；７，５０（ｓ，２Ｈ）；７，６６（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）
【０２１１】
（実施例４）
８，８’−［１，４−ブタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０２１２】
【化３２】
2009524636.tif 000023
８，８’−［１，４−ブタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、１，４−ジヨードブタンで出発して、８，８’−［１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（実施例３）の調製のための手順に従って調製できる。
【０２１３】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝５９９  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝３１８．５（Ｍ＋Ｈ＋Ｋ）２＋／２
保持時間＝３．２３分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ＣＨ，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，７５（ｄ  ブロード，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，６Ｈ）；２，１０（ｍ，４Ｈ）；２，９８（ｄ  ブロード，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，４Ｈ）；３，９０（ｍ，２Ｈ）；３，９３（ｓ，６Ｈ）；４，１１（ｍ，２Ｈ）；４，２０（ｍ，２Ｈ）；４，２７（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，６０（ｍ，２Ｈ）；６，８２（ｓ，２Ｈ）；７，５０（ｓ，２Ｈ）；７，６６（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）
【０２１４】
（実施例５）
８，８’−［３−メチル−１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０２１５】
【化３３】
2009524636.tif 000024
８，８’−［３−メチル−１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、１，５−ジブロモ−３−メチルペンタンで出発して、８，８’−［１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（実施例１）の調製のための手順に従って調製できる。
【０２１６】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝６２７  ＭＨ＋
保持時間＝３．９２分
【０２１７】
（実施例６）
８，８’−［２，６−ピリジンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０２１８】
【化３４】
2009524636.tif 000025
８，８’−［２，６−ピリジンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、２，６−ビス−ブロモメチル−ピリジンで出発して、８，８’−［１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（実施例１）の調製のための手順に従って調製できる。
【０２１９】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、ＺＱ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝６４８  ＭＨ＋
保持時間＝３．２１分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，７５（ｄ  ブロード，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；２，９４から２，９９（ｍ，４Ｈ）；３，９０（ｍ，２Ｈ）；３，９９（ｓ，６Ｈ）；４，２７（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，３２（ｓ，４Ｈ）；５，６０（ｍ，２Ｈ）；６，８６（ｓ，２Ｈ）；７，４８（ｄ，Ｊ＝８，０  Ｈｚ，２Ｈ）；７，５６（ｓ，２Ｈ）；７，６４（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）；７，７４（ｔ，Ｊ＝８，０  Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２２０】
（実施例７）
８，８’−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピルオキシ）−２，６−ピリジンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０２２１】
【化３５】
2009524636.tif 000026
ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中のプレ−トマイマイシン（３０ｍｇ）の攪拌した溶液に、炭酸カリウム（４５．７ｍｇ）、ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中の４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（トシルオキシメチル）−ピリジン（４１ｍｇ）の溶液及びヨウ化カリウム（１８．３ｍｇ）を添加した。この反応物を、３０℃で２０時間攪拌した。固体を濾別し、ジメチルホルムアミド（０．２ｍＬ）で洗浄した。水（０．５ｍＬ）を、一緒にしたジメチルホルムアミド溶液に添加し、ギ酸を、沈殿が完全に溶解するまで添加した。得られた溶液を、方法Ｂ１に従って、ＨＰＬＣ精製のために注入した。適切なフラクションを一緒にし、Ｊｏｕａｎ  Ｍｏｄｅｌ  ＲＣ１０．１０．装置上で遠心蒸発によって濃縮して、８，８’−［４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピルオキシ）−２，６−ピリジンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（８．３ｍｇ）を得た。
【０２２２】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  Ｉ）：
ＥＳ：ｍ／ｚ＝８５７  ＭＨ＋＋２Ｈ２Ｏ
ｍ／ｚ＝８３９  ＭＨ＋＋Ｈ２Ｏ
ｍ／ｚ＝８２１  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝７２１  ［Ｍ−Ｃ５Ｏ２Ｈ８］＋Ｈ＋
保持時間＝３．６７分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＯ２Ｄ−ｄ４，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，４１（ｓ，９Ｈ）；１，７１（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；２，０８（ｍ，２Ｈ）；２，９５（ｍ，４Ｈ）；３，３４（ｍ，２Ｈ）；３，９０（ｓ，６Ｈ）；４，０６（ｍ，２Ｈ）；４，１８（ｍ，２Ｈ）；４，２４から４，３６（ｍ，４Ｈ）；４，４３（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；５，５０（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，６１（ｍ，２Ｈ）；６，８０から７，７０（ｍ非常にブロード，２Ｈ）；６，９５（ｓ  ブロード，２Ｈ）；７，４８から７，５８（ｍ，４Ｈ）．
４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（トシルオキシメチル）−ピリジンは、下記のようにして調製できる
【０２２３】
【化３６】
2009524636.tif 000027
ジクロロメタン（０．７ｍＬ）中の４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン（７６ｍｇ）の予備冷却した（０℃）溶液に、水（０．３ｍＬ）中の水酸化カリウム（３０ｍｇ）の溶液を添加した。トシルクロリド（９３．７ｍｇ）を添加し、得られた不均一混合物を、１時間激しく振盪し、次いで、ジクロロメタン及び水を使用して、分液漏斗の中に洗浄した。層を分離し、水性層をジクロロメタンで３回抽出した。一緒にした有機溶液を、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で濃縮して、残渣を得た。この残渣を、ヘプタン（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）の混合物による勾配溶離（勾配：９０％Ａ：１０％Ｂ、５０％Ａ：５０％Ｂまで上げる）を使用する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｎｔｅｒｃｈｒｏｍ  Ｐｕｒｉｆｌａｓｈ  １０ｇカラム、ＳｉＯＨ  １５−３５μｍ）によって精製して、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（トシルオキシメチル）−ピリジン（５６ｍｇ）を得た。
【０２２４】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  Ｉ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝６２１  ＭＨ＋
保持時間＝４．９０分
４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、下記のようにして調製できる。
【０２２５】
【化３７】
2009524636.tif 000028
無水エタノール（５ｍＬ）中の４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ビス−ジカルボン酸ジエチルエステル（１５０ｍｇ）の溶液に、ホウ水素化ナトリウム（４３ｍｇ）及び塩化カルシウム（１２８ｍｇ）を添加した。４時間攪拌した後、水素発生が終わり、この反応物を水でクエンチした。溶媒を、減圧下で蒸発させた。次いで、残渣を、ジクロロメタン及び水を使用して、分液漏斗の中に洗浄した。層を分離し、水性層をジクロロメタンで３回抽出した。一緒にした有機溶液を、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で濃縮して、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）ピリジン（８０ｍｇ）を得た。
【０２２６】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、ＺＱ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝３１３  ＭＨ＋
保持時間＝１．９０分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，３７（ｓ，９Ｈ）；１，８４（ｍ，２Ｈ）；３，０８（ｑ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，０５（ｔ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４５（ｄ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，４Ｈ）；５，３２（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；６，８４（ｓ，２Ｈ）；６，９０（ｔ  ブロード，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，１Ｈ）。
【０２２７】
４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ビス−ジカルボン酸ジエチルエステルは、下記のようにして調製できる。
【０２２８】
【化３８】
2009524636.tif 000029
ケリダミン酸（ｃｈｅｌｉｄａｍｉｃ  ａｃｉｄ）のジエチルエステル（Ｓｃｒｉｍｉｎ，Ｐ．；Ｔｅｃｉｌｌａ，Ｐ．；Ｔｏｎｅｌｌａｔｏ，Ｕ．；Ｖｅｎｄｒａｍｅ，Ｔ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８９，５４，５９８８）（１５０ｍｇ）を、乾燥ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中に溶解させた。３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ−アミノ）−プロピルブロミド（１６４ｍｇ）及び炭酸カリウム（１３０ｍｇ）を添加した。得られた混合物を７０℃で１５時間攪拌した。この反応物を、飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、次いで、酢酸エチルを使用して分液漏斗の中に洗浄した。層を分離し、水性層を酢酸エチルで３回抽出した。一緒にした有機溶液を、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、ヘプタン（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）の混合物による勾配溶離（勾配：６０％Ａ：４０％Ｂ、５０％Ａ：５０％Ｂまで上げる）を使用する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＦｌａｓｈ  ３０ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ）によって精製して、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ビス−ジカルボン酸ジエチルエステル（１５０ｍｇ）を得た。
Ｃｌ  （方法Ｄ）：ｍ／ｚ＝３９７  ＭＨ＋
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，３４（ｔ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，６Ｈ）；１，３６（ｓ，９Ｈ）；１，８６（ｍ，２Ｈ）；３，１０（ｑ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，２１（ｔ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，３７（ｑ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，４Ｈ）；６，８９（ｍ  ブロード，１Ｈ）；７，７１（ｓ，２Ｈ）
【０２２９】
（実施例８）
８，８’−［５−（３−アミノプロピルオキシ）−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０２３０】
【化３９】
2009524636.tif 000030
ジメチルホルムアミド（０．７ｍＬ）中のプレ−トマイマイシン（２１ｍｇ）の攪拌した溶液に、炭酸カリウム（３２ｍｇ）、１−（３−アリルオキシカルボニルアミノ−プロピルオキシ）−３，５−ビス−（ブロモメチル）−ベンゼン（１６．２ｍｇ）及びヨウ化カリウム（１２．８ｍｇ）を添加した。この反応物を、３０℃で２０時間攪拌した。固体を濾別し、ジメチルホルムアミド（０．２ｍＬ）で２回洗浄し、次いで廃棄した。水（０．５ｍＬ）を、一緒にしたジメチルホルムアミド溶液に添加し、得られた沈殿を濾別し、水で洗浄し、Ｊｏｕａｎ  Ｍｏｄｅｌ  ＲＣ１０．１０．装置上で遠心蒸発によって乾燥した。
【０２３１】
ジメチルホルムアミド（０．８ｍＬ）中に溶解させた、この粗製化合物（２７ｍｇ）に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（２ｍｇ）、トリフェニルホスフィン（０．９ｍｇ）及びピロリジン（５．６μＬ）を添加した。３０℃で１５時間攪拌した後、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（２ｍｇ）、トリフェニルホスフィン（１ｍｇ）及びピロリジン（２．８μＬ）を添加し、この反応混合物を、室温で更に１５時間攪拌した。水（０．４ｍＬ）を、このジメチルホルムアミド溶液に添加し、ギ酸を、沈殿が完全に溶解するまで添加した。得られた溶液を、方法Ｂ１に従って、ＨＰＬＣ精製のために注入した。適切なフラクションを一緒にし、Ｊｏｕａｎ  Ｍｏｄｅｌ  ＲＣ１０．１０．装置上で遠心蒸発によって濃縮して、８，８’−［５−（３−アミノプロピルオキシ）−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（０．２ｍｇ）を得た。
【０２３２】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝８００  ＭＨ＋
保持時間＝２．８４分
１−（３−アリルオキシカルボニルアミノ−プロピルオキシ）−３，５−ビス−（ブロモメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０２３３】
【化４０】
2009524636.tif 000031
ジクロロメタン（３ｍＬ）中の１−（３−アリルオキシカルボニルアミノ−プロピルオキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（７０ｍｇ）の懸濁液に、四臭化炭素（２４８ｍｇ）及びジクロロメタン（２ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（１９９ｍｇ）の溶液を添加した。３時間環流させた後、反応混合物を、ジクロロメタンで溶離する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＦｌａｓｈ  ２５ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ）によって精製して、１−（３−アリルオキシカルボニルアミノ−プロピルオキシ）−３，５−ビス−（ブロモメチル）−ベンゼン（５２ｍｇ）を得た。
【０２３４】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝４２０  ＭＨ＋
保持時間＝４．５０分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，８５（ｍ，２Ｈ）；３，１５（ｑ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；３，９９（ｔ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４６（ｄ  ブロード，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，６５（ｓ，４Ｈ）；５，１６（ｄ  ブロード，Ｊ＝１１，０  Ｈｚ，１Ｈ）；５，２６（ｄ  ブロード，Ｊ＝１７，５  Ｈｚ，１Ｈ）；５，９０（ｍ，１Ｈ）；６，９６（ｄ，Ｊ＝１，５  Ｈｚ，２Ｈ）；７，０９（ｔ，Ｊ＝１，５  Ｈｚ，１Ｈ）；７，２９（ｔ  ブロード，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，１Ｈ）．
１−（３−アリルオキシカルボニルアミノ−プロピルオキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０２３５】
【化４１】
2009524636.tif 000032
５−（３−フタルイミド−プロピルオキシ）−１，３−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（１．４５ｇ）を、ジクロロメタン及びエタノールの混合物（２５ｍＬ、２５：７５）中に溶解させた。ヒドラジン一水和物（０．６２ｍＬ）を添加し、この反応混合物を１時間還流させた。溶媒を真空中で除去し、残渣をジクロロメタン中に溶解させた。不溶性残渣を濾別し、メタノール／ジクロロメタン、２０：８０、次いで水酸化アンモニウム／メタノール／ジクロロメタン、０．５：２５：７５で溶離する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＰｒｅｐ  ７０ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ）によって精製して、更なる変換のために適している、１−（３−アミノ−プロピルオキシ）−３．５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（１ｇ）を得た。
【０２３６】
１−（３−アミノ−プロピルオキシ）−３．５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンのサンプル（１００ｍｇ）を、メタノール（５ｍＬ）中に溶解させた。この冷却した（０℃）溶液に、水（５ｍＬ）中の炭酸ナトリウム（１２０ｍｇ）の溶液及びクロロギ酸アリル（４２μＬ）を添加した。０℃で３０分間撹拌した後、この反応混合物を室温で更に１５時間攪拌した。溶媒を真空中で除去した。次いで、残渣を、酢酸エチル及び水を使用して、分液漏斗の中に洗浄した。層を分離し、水性層を酢酸エチルで２回抽出した。一緒にした有機溶液を、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で濃縮して、５−（３−アリルオキシカルボニルアミノ−プロピルオキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（７５ｍｇ）を得た。
Ｅｌ  （方法Ｃ）：ｍ／ｚ＝２９５  Ｍ＋．
ｍ／ｚ＝１４２（Ｍ−Ｃ８Ｈ９Ｏ３）＋
ｍ／ｚ＝４１  Ｃ３Ｈ５＋
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（３００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，８５（ｍ，２Ｈ）；３，１４（ｑ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；３，９６（ｔ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４１から４，４８（ｍ，６Ｈ）；５，１１（部分的にマスクされたｔ，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，１６  （ｑｄ，Ｊ＝１，５  および  １０，５  Ｈｚ，１Ｈ）；５，２６  （ｑｄ，Ｊ＝１，５  および  １７，０  Ｈｚ，１Ｈ）；５，９０（ｍ，１Ｈ）；６，７２（ｓ  ブロード，２Ｈ）；６，８３（ｓ  ブロード，１Ｈ）；７，２６  （ｔ  ブロード，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，１Ｈ）
５−（３−フタルイミド−プロピルオキシ）−１，３−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０２３７】
【化４２】
2009524636.tif 000033
３，５−ビス−ヒドロキシメチルフェノール（Ｆｅｌｄｅｒ，Ｄ．；Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ  Ｎａｖａ，Ｍ．；ｄｅｌ  Ｐｉｌａｒ  Ｃａｒｒｅｏｎ，Ｍ．；Ｅｃｋｅｒｔ，Ｊ．Ｆ．；Ｌｕｃｃｉｓａｎｏ，Ｍ．；Ｓｃｈａｌｌ，Ｃ．；Ｍａｓｓｏｎ，Ｐ．；Ｇａｌｌａｎｉ，Ｊ．Ｌ．；Ｈｅｉｎｒｉｃｈ，Ｂ．；Ｇｕｉｌｌｏｎ，Ｄ．；Ｎｉｅｒｅｎｇａｒｔｅｎ，Ｊ．Ｆ．、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ  ２００２，８５，２８８）（２．３５ｇ）、Ｎ−（３−ブロモ−プロピル）−フタルイミド（４．４９ｇ）及び炭酸カリウム（１０．５３ｇ）を、アセトニトリル（２５ｍＬ）中で混合し、１２時間還流させた。この反応混合物を室温にまで冷却し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、ジクロロメタン中に再溶解し、不溶性残渣を濾別した。濾液を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、メタノール／ジクロロメタン、４：９６で溶離する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＰｒｅｐ  ９０ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ）によって精製して、５−（３−フタルイミド−プロピルオキシ）−１，３−ビス−（ヒドロキシメチル）ベンゼン（１．４５ｇ）を得た。
【０２３８】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝３４２  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝３２４（ＮＨ＋−Ｈ２Ｏ）
保持時間＝２．９０分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（３００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：２，０５（ｍ，２Ｈ）；３，７６（ｔ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；３，９９（ｔ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４０（ｄ，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，４Ｈ）；５，０９（ｔ，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，２Ｈ）；６，５９（ｓ  ブロード，２Ｈ）；６，８２（ｓ  ブロード，１Ｈ）；７，８０から７，９０（ｍ，４Ｈ）
【０２３９】
（実施例９）
８，８’−［５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピル）−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０２４０】
【化４３】
2009524636.tif 000034
ジクロロメタン（２ｍＬ）中の、５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピル）−１，３−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（５０ｍｇ）及びトリエチルアミン（１１３μＬ）の冷却した（０℃）溶液に、メタンスルホニルクロリド（２６μＬ）を添加した。３０分間後に、この反応混合物を、水で２回洗浄し、得られたジクロロメタン溶液を、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で粘稠な油（５０．３ｍｇ）にまで濃縮した。
【０２４１】
ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中のプレ−トマイマイシン（１５ｍｇ）の溶液を、この粗製化合物（１３ｍｇ）、炭酸カリウム（２３ｍｇ）及びヨウ化カリウム（９ｍｇ）の混合物に添加した。この反応混合物を、３０℃で２０時間攪拌した。上記粗製化合物の他のサンプル（６ｍｇ）を添加し、この反応混合物を、３０℃で更に２０時間攪拌した。固体を濾別し、ジメチルホルムアミド（０．２ｍＬ）で洗浄し、次いで廃棄した。水（０．４ｍＬ）、ギ酸１滴及び他の水（１．５ｍＬ）を、一緒にしたジメチルホルムアミド溶液に添加した。
【０２４２】
得られた懸濁液のサンプル（２ｍＬ）を濾過し、得られた固体を真空下で乾燥して、８，８’−［５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピルオキシ）−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（３．１ｍｇ）を得た。
【０２４３】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝８１８  ＭＨ＋
保持時間＝４．１１分
５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピル）−１，３−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０２４４】
【化４４】
2009524636.tif 000035
テトラヒドロフラン（２ｍＬ）中の５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステル（１００ｍｇ）の冷却した（−５℃）溶液に、ジエチルエーテル中の水素化アルミニウムリチウムの１Ｍ溶液（０．５５ｍＬ）をゆっくり添加した。添加が終わって１０分間後に、硫酸ナトリウム１０水和物を、ガス発生が終了するまで添加した。固体を濾別し、酢酸エチルで２回洗浄し、一緒にした有機溶液を真空中で濃縮して、５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピル）−１，３−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（６６．８ｍｇ）を粘稠な油として得た。
ＣＩ（方法Ｄ）：        ｍ／ｚ＝３２７  ＭＮＨ４＋
ｍ／ｚ＝３１０  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝２７１（ＭＮＨ４＋−Ｃ４Ｈ８）
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（３００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，３７（ｓ  ブロード，９Ｈ）；１，７５（ｍ，２Ｈ）；２．４５から２．５４（マスクされたｍ  ２Ｈ）；２，７７（ｓ，３Ｈ）；３，１８（ｔ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４５（ｄ，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，４Ｈ）；５，０８（ｔ，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，２Ｈ）；７，００（ｓ  ブロード，２Ｈ）；７，０８（ｓ  ブロード，１Ｈ）
５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステルは、下記のようにして調製できる。
【０２４５】
【化４５】
2009524636.tif 000036
メタノール（１０ｍＬ）中の５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピン−１−イル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステル（８９０ｍｇ）の溶液に、炭素上パラジウム１０％（８９ｍｇ）を添加し、この溶液を、室温で水素雰囲気（１バール）下で１８時間攪拌した。固体を濾別し、溶媒を真空中で除去して、５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステル（７６７ｍｇ）を黄色油として得た。
Ｅｌ  （方法Ｃ）：ｍ／ｚ＝３６５  Ｍ＋．
ｍ／ｚ＝３０９（Ｍ−Ｃ４Ｈ８）＋．
ｍ／ｚ＝２６５（ｍ／ｚ＝３０９−ＣＯ２）＋．
ｍ／ｚ＝４４  Ｃ２Ｈ６Ｎ＋
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，３２（ｓ  ブロード，９Ｈ）；１，７９（ｍ，２Ｈ）；２，７０（ｔ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，２Ｈ）；２，７６（ｓ，３Ｈ）；３，１６（ｍ，２Ｈ）；３，８７（ｓ，６Ｈ）；８，０６（ｄ，Ｊ＝２，０  Ｈｚ，２Ｈ）；８，３２（ｔ，Ｊ＝２，０  Ｈｚ，１Ｈ）
５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピン−１−イル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステルは、下記のようにして調製できる。
【０２４６】
【化４６】
2009524636.tif 000037
５−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−イソフタル酸ジメチルエステル（Ｂｏｄｗｅｌｌ，Ｇ．Ｊ．；Ｆｌｅｍｉｎｇ，Ｊ．Ｊ．；Ｍａｎｎｉｏｎ，Ｍ．Ｒ．；Ｍｉｌｌｅｒ，Ｄ．Ｏ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０００，６５（１７），５３６０）（１ｇ）を、アセトニトリル２ｍＬ中に溶解した。Ｎ−メチル−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルプロパルギルアミン（Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｂ．Ｊ．；Ｂａｕｍｇｏｌｄ，Ｊ．；Ｊａｃｏｂｓｅｎ，Ｋ．Ａ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９０，３３（２），７４１）（６４３ｍｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムクロリド（２０５ｍｇ）、ヨウ化銅（５６ｍｇ）及びトリエチルアミン（５９１ｍｇ）を添加した。得られた混合物を、室温で１５時間攪拌した。溶媒を、減圧下での蒸発によって除去し、次いで、残渣を、酢酸エチル及び水を使用して、分液漏斗の中に洗浄した。層を分離し、水性層を酢酸エチルで１回抽出した。一緒にした有機溶液を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ  ＦＬＡＳＨ  ４０＋Ｍ  １００ｇ  カラム、ＳｉＯＨ  ３２−６３μｍ、酢酸エチル／ヘプタン、２０：８０で溶離）によって精製して、５−（Ｎ−メチル−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノプロピン−１−イル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステル（８９６ｍｇ）を得た。
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（３００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，４３（ｓ，９Ｈ）；２，９０（ｓ，３Ｈ）；３，９０（ｓ，６Ｈ）；４，３０（ｓ，２Ｈ）；８，１６（ｄ，Ｊ＝１，５  Ｈｚ，２Ｈ）；８，４２（ｔ，Ｊ＝１，５  Ｈｚ，１Ｈ）
【０２４７】
（実施例１０）
８，８’−｛５−［３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）プロピルオキシ］−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）｝−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０２４８】
【化４７】
2009524636.tif 000038
ジクロロメタン（１．５ｍＬ）中の、１−［３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−プロピルオキシ］−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（４５ｍｇ）及びトリエチルアミン（４９μＬ）の冷却した（０℃）溶液に、メタンスルホニルクロリド（１９μＬ）を添加した。３０分間後に、この反応混合物を水で２回洗浄し、得られたジクロロメタン溶液を、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で粘稠な油（３９ｍｇ）にまで濃縮した。ジメチルホルムアミド（０．９ｍＬ）中のプレ−トマイマイシン（２６ｍｇ）の溶液に、炭酸カリウム（４０ｍｇ）、ヨウ化カリウム（１６ｍｇ）及びこの粗製化合物のサンプル（３１ｍｇ）を添加した。この反応混合物を、３０℃で２０時間攪拌した。上記粗製化合物の他のサンプル（６ｍｇ）を添加し、この反応混合物を、３０℃で更に２０時間攪拌した。固体を濾別し、ジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）で洗浄し、次いで廃棄した。水（１．６ｍＬ）を、一緒にしたジメチルホルムアミド溶液に添加し、得られた固体を濾過し、水で洗浄し、真空中で乾燥して、残渣を得た。この残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｎｔｅｒｃｈｒｏｍ  Ｐｕｒｉｆｌａｓｈ  ２ｇ  カラム、ＳｉＯＨ  １５−３５μｍ、ジクロロメタン／メタノール、９５：５で溶離）次いでシリカゲルクロマトグラフィー（Ｃｈｒｏｍａｂｏｎｄ  ＯＨ  ２ｇ  カラム、４５μｍ、ジクロロメタンで溶離）による他の精製によって精製して、８，８’−｛５−［３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）プロピルオキシ］−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）｝−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（０．２ｍｇ）を得た。
【０２４９】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  Ｉ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝８９６  ＭＨ＋
保持時間＝４．０９分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，２９（ｓ，６Ｈ）；１，７５（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；１，９２から２，０３（ｍ，４Ｈ）；２，２８（ｍ，２Ｈ）；２，３９（ｓ，３Ｈ）；２，９７（ｍ，４Ｈ）；３，４５（ｑ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；３，８９（ｑ，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，２Ｈ）；３，９６（ｓ，６Ｈ）；４，０４（ｔ，Ｊ＝５，０  Ｈｚ，２Ｈ）；４，２７（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，１４（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，２０（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，６０（ｍ，２Ｈ）；５，８４  （ｔ  ブロード，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，１Ｈ）；６，８３（ｓ，２Ｈ）；６，９４（ｓ，２Ｈ）；７，０９（ｓ，１Ｈ）；７，５３（ｓ，２Ｈ）；７，６４（ｄ，Ｊ＝５，０  Ｈｚ，２Ｈ）。
【０２５０】
１−［３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−プロピルオキシ］−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン
【０２５１】
【化４８】
2009524636.tif 000039
ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中の１−（３−アミノ−プロピルオキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（５０ｍｇ）の溶液に、４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタン酸（４４ｍｇ）、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（３５ｍＬ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（５．８ｍｇ）を添加した。室温で１５時間後に、この反応混合物に水を添加し、この水溶液を酢酸エチルで２回抽出した。一緒にした有機溶液を、飽和塩化ナトリウム水溶液によって洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、メタノール／ジクロロメタン、５：９５で溶離する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｎｔｅｒｃｈｒｏｍ  Ｐｕｒｉｆｌａｓｈ  ５ｇ  カラム、ＳｉＯＨ  １５−３５μｍ）によって精製して、１−［３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−プロピルオキシ］−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（４８ｍｇ）を得た。
【０２５２】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、ＺＱ）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝３８８  ＭＨ＋
保持時間＝３．０３分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（３００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，２４（ｓ，６Ｈ）；１，７６から１，８７（ｍ，４Ｈ）；２，１６（ｍ，２Ｈ）；２，４０（ｓ，３Ｈ）；３，１９（ｑ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；３，９５（ｔ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４４（ｄ  ブロード，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，４Ｈ）；５，１２（ｄ，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，２Ｈ）；６，７３（ｓ  ブロード，２Ｈ）；６，８３（ｓ  ブロード，１Ｈ）；７，９２（ｔ  ブロード，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，１Ｈ）
【０２５３】
（実施例１１）
出発生成物及び／又は中間体の調製
【０２５４】
【化４９】
2009524636.tif 000040
無水ジクロロメタン（８０ｍＬ）及びＴＨＦ（５ｍＬ）中の４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−２−ニトロ安息香酸（４．８ｇ、１６ミリモル）の溶液に、塩化オキサリル（２．８ｍＬ、３２ミリモル）及びＤＭＦ（３０μＬ、０．３８ミリモル）を、室温で添加した。ＤＭＦを添加した後、大量の泡が生成した。この混合物を一晩撹拌し、次いで、溶媒を、真空中での回転蒸発によって除去した。残渣を、無水ジクロロメタンの添加によって、２回以上共蒸発させて、塩化アセチルを黄色固体として得た。
【０２５５】
無水ＴＨＦ（８０ｍＬ）中の、４−メチレン−Ｌ−プロリンメチルエステル、化合物Ａ（３．９５ｇ、１５．５ミリモル）の溶液に、トリエチルアミン（６．７ｍＬ、４８ミリモル）を０℃で添加した。２分間後に、無水ＴＨＦ（８０ｍＬ）中の上記の塩化アセチルを、同じ温度で、カニューレを経て１０分以内に迅速に添加した。得られた黄色の濁った溶液を、０から５℃で３０分間、次いで、室温で４時間撹拌した。この反応溶液を、酢酸エチル及び水で希釈した。水性層を酢酸エチルで２回抽出し、一緒にした有機層を、２％  ＨＣｌ溶液及び食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。これを濾過し、溶媒を除去した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ、１：１、１：１．５）によって精製して、（２Ｓ）−４−（メチレン）−１−［５−メトキシ−２−ニトロ−４−（フェニルメトキシ）−ベンゾイル］−２−ピロリジンカルボン酸メチルエステルを、黄色固体（５．６ｇ、ｙ＝８５％）として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）：この化合物は、一対の別個のロトマー（ｒｏｔｏｍｅｒ）として出現する。  δ  ７．７６（ｓ，０．７Ｈ），７．７３（ｓ，０．３Ｈ），７．４３−７．２９（ｍ，５Ｈ），６．８３（ｓ，０．７Ｈ），６．８０（ｓ，０．３Ｈ），５．１７（ｓ，１．４Ｈ），５．１６（ｓ，０．６Ｈ），５．１０−４．８９（ｍ，２．７Ｈ），４．５７（ｄ，Ｊ＝１６  Ｈｚ，０．３Ｈ），４．１９−４．１２（ｍ，０．７Ｈ），３．９５−３．７７（ｍ，６．３Ｈ），３．５７（ｓ，１Ｈ），３．０６−２．９６（ｍ，１Ｈ），２．７３−２．６２（ｍ，１Ｈ）；  １３Ｃ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）：１７１．８，１７１．７，１６６．５，１６６．２，１５４．９，１５４．４，１４８．２５，１４８．１８，１４１．７，１４１．３，１３７．１９，１３７．１３，１３５．３，１３５．２，１２８．７，１２８．４３，１２８．４１，１２７．５，１２７．３，１０９．５，１０９．１，１０９．０，１０８．９，７１．３，６０．６，５８．１，５６．７，５６．５，５２．３９，５２．３７，５２．０，５０．２，３７．１，３５．５；  ＭＳ  （ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ４４９．３（ｍ＋Ｎａ）＋．
【０２５６】
【化５０】
2009524636.tif 000041
無水ジクロロメタン（９ｍＬ）及びトルエン（２７ｍＬ）中の上記のエステル（３．１５ｇ、７．３９ミリモル）の溶液に、ｄｉｂａｌ−Ｈ（１５ｍＬ、トルエン中１．０Ｍ）を、注射器ポンプを経て、３０分間以内に−７８℃で滴下により添加した。この混合物を、−７８℃で２時間撹拌を続け、ＴＬＣ（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ、１：１．５）は、全ての出発材料が消費されたことを示した。この反応物を、メタノール（０．３ｍＬ、７．４ミリモル）で−７８℃でクエンチし、５％  ＨＣｌ（２０ｍＬ）を添加し、続いてＡｃＯＥｔ（５０ｍＬ）を添加した。ドライアイス／アセトン浴を取り除き、この混合物を０℃まで加温し、１５分間撹拌した。水性層をＡｃＯＥｔで２回抽出し、一緒にした有機層を冷５％ＨＣｌ及び食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。これをセライトに通して濾過し、溶媒を除去した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ、１：１、１：１．５、１：２、１：３、１：５、１００％ＡｃＯＥｔ）によって精製して、（２Ｓ）−４−（メチレン）−１−［５−メトキシ−２−ニトロ−４−（フェニルメトキシ）ベンゾイル］−２−ピロリジンカルボキサルデヒドをふわふわした黄色固体（２．６９ｇ、ｙ＝９２％）として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）：この化合物は、一対の別個のロトマーとして出現する。  δ  ９．７５（ｓ，０．７Ｈ），９．３２（ｓ，０．３Ｈ），７．７６（ｓ，０．７Ｈ），７．６９（ｓ，０．３Ｈ），７．４５−７．３１（ｍ，５Ｈ），６．８５（ｓ，０．７Ｈ），６．８０（ｓ，０．３Ｈ），５．１９−４．８２（ｍ，４．７Ｈ），４．５６（ｄ，Ｊ＝１６  Ｈｚ，０．３Ｈ），４．１４−  ３．７９（ｍ，５Ｈ），２．９９−２．６８（ｍ，２Ｈ）；  １３Ｃ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）：１９８．３，１９７．１，１６７．１，１５５．０，１５４．６，１４８．４，１４１．３，１４０．４，１３７．２，１３５．２，１２８．７，１２８．５，１２８．４，１２７．５，１２６．９，１２６．６，１０９．８，１０９．４，１０９．３，１０９．２，１０９．１．７１．３，６６．６，６４．３，５６．７，５６．６，５２．２，５０．６，３３．２，３１．９；  ＭＳ  （ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ４１９．２（ｍ＋Ｎａ）＋．
【０２５７】
【化５１】
2009524636.tif 000042
手順１：ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（ｖ／ｖ、１．７：１、０．０３Ｍ）中の、（２Ｓ）−４−（メチレン）−１−［５−メトキシ−２−ニトロ−４−（フェニルメトキシ）ベンゾイル］−２−ピロリジンカルボキサルデヒド（１．０当量）の溶液に、ヒドロ亜硫酸ナトリウム（５から８当量）を、室温で少しずつ２分以内に添加した。この混合物を６から２０時間更に撹拌し、ＴＬＣ（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ  １：２及びＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ  ５：１）によってモニターした。アルデヒドが殆ど消費された後、反応物を、メタノール（使用したＴＨＦと殆ど同じ体積）でクエンチした。溶媒を真空中で回転蒸発により（温度＜４０℃）除去し、残留固体を高真空に置き、それを完全に乾燥した。この固体を、無水メタノール（０．０３Ｍ）中に懸濁させ、ＡｃＣｌ（８から１０当量）を、室温で滴下により添加した。１５分間攪拌した後、濁った溶液を濾過し、固体を無水メタノールで洗浄した。透明な黄色濾液を、室温で１から２時間撹拌し、飽和重炭酸ナトリウムでクエンチした。回転蒸発によって、メタノールの大部分が除去された後、残留物をジクロロメタン及び水で希釈した。水性層をＡｃＯＥｔで抽出した。一緒にした有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。溶媒を除去し、残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ、１：３、１：５）によって精製して、（１１ａＳ）−７−メトキシ−２−メチレン−８−（フェニルメトキシ）−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オンを、７０％から８５％収率で得た。ＮＭＲスペクトルは、報告された文献と一致する。ＭＳ  （ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ３７１．２（Ｍ＋Ｎａ）＋．ＭＳ  （ＥＳＩ，  ＣＨ３ＯＨで）：ｍ／ｚ  ４０３．３（Ｍ＋ＣＨ３ＯＨ＋Ｎａ）＋．ＭＳ  （ＥＳＩ，水で）：ｍ／ｚ  ３８９．２（Ｍ＋Ｈ２Ｏ＋Ｎａ）＋．
【０２５８】
手順２：ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（ｖ／ｖ、３．２：１、０．０３Ｍ）中の、（２Ｓ）−４−（メチレン）−１−［５−メトキシ−２−ニトロ−４−（フェニルメトキシ）ベンゾイル］−２−ピロリジンカルボキサルデヒド（１．０当量）の溶液に、ヒドロ亜硫酸ナトリウム（６から８当量）を、室温で少しずつ２分以内に添加し、続いてヒドロ硫酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｈｙｄｒｏｓｕｌｆａｔｅ）（０．５から１．０当量）を添加した。この混合物を１２から２０時間更に撹拌し、ＴＬＣ（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ  １：２及びＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ  ５：１）によってモニターした。中間体［ＭＳ（ＥＳＩ）：４５９．０（Ｍ−Ｈ）−］が殆ど消費された後、反応物を、飽和重炭酸ナトリウムでｐＨ５から６にクエンチした。溶媒を真空中で回転蒸発により（温度＜４０℃）除去し、残留固体を高真空に置き、それを完全に乾燥した。この固体を、無水メタノール（０．０３Ｍ）中に懸濁させ、ＡｃＣｌ（８から１０当量）を、室温で滴下により添加した。１５分間攪拌した後、濁った溶液を濾過し、固体を無水メタノールで洗浄した。透明な黄色濾液を、室温で１から２時間撹拌し、飽和重炭酸ナトリウムでクエンチした。回転蒸発によって、メタノールの大部分が除去された後、残留物をジクロロメタン及び水で希釈した。水性層をＡｃＯＥｔで抽出した。一緒にした有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。溶媒を除去し、残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ、１：３、１：５）によって精製して、（１１ａＳ）−７−メトキシ−２−メチレン−８−（フェニルメトキシ）−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オンを、６５％から８０％収率で得た。
【０２５９】
【化５２】
2009524636.tif 000043
無水ジクロロメタン（２ｍＬ）中のこの出発材料（９８ｍｇ、０．２８ミリモル）の溶液に、無水ジクロロメタン（４ｍＬ）中のメタンスルホン酸（２ｍＬ）の新しく混合した溶液を室温で添加した。この混合物を室温で１．５時間攪拌し、氷（約３０ｇ）の上に注ぎ、飽和ＮａＨＣＯ３でクエンチし、ジクロロメタンで希釈した。水性層をジクロロメタンで１度抽出し、一緒にした有機層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒を除去した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、１５：１）によって精製して、生成物を黄色固体（２９ｍｇ）として得た。上記の水性層を室温で一晩撹拌し、ジクロロメタン及び続いてＡｃＯＥｔで抽出した。一緒にしたジクロロメタン及びＡｃＯＥｔを無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒を除去して、（１１ａＳ）−８−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン（２５ｍｇ）を得た。合計収率は７４％である。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．６５（ｄ，Ｊ＝４．８  Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），６．８７（ｓ，１Ｈ），６．３５（ｂｓ，１Ｈ），５．１７（ｔ，Ｊ＝１．６  Ｈｚ，１Ｈ），５．１４（７，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．２６（ｓ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．８７−３．８３（ｍ，１Ｈ），３．１２−３．０５（ｍ，１Ｈ），２．９１（ｄ，Ｊ＝１６  Ｈｚ，１Ｈ）；  ＭＳ  （ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ２８１．０（Ｍ＋Ｎａ）＋．ＭＳ  （ＥＳＩ，水で）：ｍ／ｚ  ２５８．９（Ｍ＋Ｈ）＋，ｍ／ｚ  ２９９．１（Ｍ＋Ｈ２Ｏ＋Ｎａ）＋．
【０２６０】
（実施例１２）
８，８’−［５−アセチルチオメチル−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０２６１】
【化５３】
2009524636.tif 000044
無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（５７７ｍｇ、２．２ミリモル）の溶液に、アゾジカルボン酸ジエチル（トルエン中２．２Ｍ、７９１μＬ、１．７ミリモル）を、０℃で滴下により添加した。０℃で５０分間撹拌した後、乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）中の、１，３，５−トリ（ヒドロキシメチル）ベンゼン（２６９ｍｇ、１．６ミリモル、ＴＨＦ中で、水素化アルミニウムリチウムによる、トリメチル  １，３，５−ベンゼントリカルボキシラートの還元により調製した、使用の前の結合時間（ｃｏｕｐｌｅ  ｈｏｕｒｓ）の間、乾燥ベンゼンと共に共蒸発させ、高真空で乾燥した）及びチオ酢酸（１０８μＬ、１．４５ミリモル）の溶液を、滴下により添加した。１時間後に、氷／水浴を取り除き、反応物を室温で１５時間攪拌した。溶媒を、真空中で回転蒸発により除去した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５−アセチルチオメチル−１，３−ビス（ヒドロキシメチル）−ベンゼンを無色固体（１１０ｍｇ）として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．１３−６．９９（ｍ，３Ｈ），４．４５（ａｐｔ，Ｊ＝２０．４  Ｈｚ，４Ｈ），３．９８（ａｐｔ，Ｊ＝２０．４  Ｈｚ，４Ｈ），３．７３（ｂｓ，２Ｈ），２．２４（ａｐｔ，Ｊ＝２０．４  Ｈｚ，３Ｈ）；  ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ２４９．０（Ｍ＋Ｎａ）＋．
【０２６２】
【化５４】
2009524636.tif 000045
無水ＴＨＦ（０．３ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（２８ｍｇ、０．１ミリモル）の溶液に、アゾジカルボン酸ジイソプロピル（１９μＬ、０．０９ミリモル）を、０℃で滴下により添加した。０℃で３５分間撹拌した後、乾燥ＴＨＦ（０．２ｍＬ）中の、（１１ａＳ）−８−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン、化合物５、（１８ｍｇ、０．０７ミリモル、使用の前の結合時間の間、乾燥ベンゼンと共に共蒸発させ、高真空で乾燥した）を添加した。この混合物を、１０分間撹拌し続け、その後、乾燥ＴＨＦ（０．２ｍＬ）中の、５−アセチルチオメチル−１，３−ビス（ヒドロキシメチル）−ベンゼン、化合物６、（６．６ｍｇ、０．０３ミリモル、使用の前の結合時間の間、乾燥ベンゼンと共に共蒸発させ、高真空で乾燥した）を添加した。この反応混合物を、０℃で３５分間撹拌した。氷／水浴を取り除き、溶液を室温で２１時間攪拌した。溶媒を、真空中で回転蒸発により除去した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、粗製生成物を得、これを、分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム、ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）によって更に精製して、８，８’−［５−アセチルチオメチル−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］、化合物７、０．７ｍｇを得た。ＭＳ  （ＥＳＩ，水で）：ｍ／ｚ  ７６５．３（ｍ＋２Ｈ２Ｏ＋Ｎａ）＋，７４７．３（Ｍ＋Ｈ２Ｏ＋Ｎａ）＋，７２９．２（Ｍ＋Ｎａ）＋，７０７．３（Ｍ＋Ｈ）＋，６６３．２（Ｍ−Ａｃ）−．
【０２６３】
（実施例１３）
ビス−｛２−［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−５−オキソ−１，３，，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イルオキシ］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
スキーム１
【０２６４】
【化５５】
2009524636.tif 000046
【０２６５】
化合物１：塩化チオニル（５．６ｍＬ、７６．３ミリモル）を、乾燥メタノール（７６ｍＬ）に−２０℃で滴下により添加し、続いて、トランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン（５．０ｇ、３８．１ミリモル）を添加した。得られた混合物を室温にまで加温し、２０時間攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を高真空下で更に乾燥して、トランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンメチルエステル１を、白色固体として得た。
１ＨＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ１  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ２．１８−２．２３（ｍ，２Ｈ），３．０６（ｍ，１Ｈ），３．３２−３．３６（ｍ，２Ｈ），３．７６（ｓ，３Ｈ），４．４２（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），４．４８（ｄｄ，Ｊ＝５．４，８．１Ｈｚ，１Ｈ），５．５６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）；  ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  １４６（［Ｍ］＋＋１）．
【０２６６】
化合物２：無水ＤＭＦ（４２ｍＬ）中の、トランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンメチルエステル１（４．４８ｇ、３０．９ミリモル）及び重炭酸ナトリウム（１．５６ｇ、１８．５ミリモル）の溶液に、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の（ＢＯＣ）２Ｏの溶液を、０℃でアルゴン下に添加した。室温で一晩撹拌した後、反応物を、０℃でＨ２Ｏ１００ｍＬの添加によってクエンチし、ＥｔＯＡｃ（４×８０ｍＬ）で抽出した。一緒にした有機層を、食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、ロタベーパー（ｒｏｔａｖａｐｏｒ）で濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１：１  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）によって精製して、Ｎ−ＢＯＣ保護したトランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンメチルエステル２を、無色油として得た。
１ＨＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，回転異性体）  δ  １．３８  および  １．４３  （２  ｘ  ｓ，９Ｈ），２．０４−２．０７（ｍ，１Ｈ），２．２３−２．２７（ｍ，２Ｈ），３．５４−３．６３（ｍ，２Ｈ），３．７０（ｓ，３Ｈ），４．３４−４．３８（ｍ，１Ｈ），４．４６  （ｂｒ．ｓ，１Ｈ）．
【０２６７】
化合物３：（Ｆｒａｎｃｏ  Ｍａｎｆｒｅ，Ｊｅａｎ−Ｍａｒｃ  Ｋｅｒｎ及びＪｅａｎ−Ｆｒａｎｃｏｉｓ  Ｂｉｅｌｌｍａｎｎ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９２，５７，２０６０−２０６５）。Ｎ−ＢＯＣ保護したトランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンメチルエステル、化合物２（３．２４ｇ、１３．２ミリモル）を、ＣＨ２Ｃｌ２（１３２ｍＬ）中に溶解し、０℃に冷却した。ピリジン及びＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナンを添加し、ＴＬＣが、ＳＭが残っていないことを示すまで、撹拌を続けた。この反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（３×５０ｍＬ）、１Ｎ  ＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）、食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、７：３  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）による残渣の精製によって、Ｎ−ＢＯＣ保護した４−オキソ−Ｌ−プロリンメチルエステル３を、明黄色油として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，回転異性体）  δ  １．４４（ｓ，９Ｈ），２．５３−２．５７（ｍ，１Ｈ），２．８５−２．９６（ｍ，１Ｈ），３．７２  および  ３．７４  （２  ｘ  ｓ，３Ｈ），３．８５−３．８７（ｍ，２Ｈ），４．６７−４．７７（ｍ，１Ｈ）．
【０２６８】
化合物４：（Ｋｕｅｉ−Ｙｉｎｇ  Ｌｉｎ，Ｍａｒｋ  Ｍａｔｔｅｕｃｃｉ、ＵＳ５，４１４，０７７）  無水ＴＨＦ（４０ｍＬ）中のカリウム−ｔ−ブトキシド（２．５１ｇ、２２．３ミリモル）の溶液を、ＴＨＦ（４０ｍＬ）中のメチルトリフェニルホスホニウムブロミド（７．９９ｇ、２２．３ミリモル）の懸濁液に、０℃で添加した。得られた黄色イリド（ｙｌｉｄｅ）懸濁液を、０℃で２時間攪拌し、その後、ＴＨＦ（３２ｍＬ）中のＮ−ＢＯＣ保護した４−オキソ−Ｌ−プロリンメチルエステル３（２．７２ｇ、１１．２ミリモル）の溶液を添加した。室温で１時間撹拌した後、この反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（８０ｍＬ）、食塩水（８０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、９：１  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）による残渣の精製によって、Ｎ−ＢＯＣ保護した４−メチレン−Ｌ−プロリンメチルエステル、化合物４を、無色油として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，回転異性体）  δ  １．４０  および  １．４５  （２  ｘ  ｓ，９Ｈ），２．５８−２．６２（ｍ，１Ｈ），２．８８−２．９８（ｍ，１Ｈ），３．６９  および  ３．７０  （２  ｘ  ｓ，３Ｈ），４．０３−４．０６（ｍ，２Ｈ），４．３６−４．４９（ｍ，１Ｈ），４．９７−４．９９（ｍ，２Ｈ）；  ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ２６４  （［Ｍ］＋＋Ｎａ）．
【０２６９】
化合物５：Ｎ−ＢＯＣ保護した４−メチレン−Ｌ−プロリンメチルエステル、化合物４、（０．８ｇ、３．３１ミリモル）を、ＣＨ２Ｃｌ２（６．５ｍＬ）中に溶解し、０℃まで冷却した。ＣＨ２Ｃｌ２（６．５ｍＬ）中のトリフルオロ酢酸の溶液を、滴下により添加し、得られた混合物を、室温で１．５時間撹拌した。ロタベーパーで揮発性溶媒を除去した後、褐色残渣をＨ２Ｏ  １０ｍＬ中に溶解し、Ｅｔ２Ｏ（３×５ｍＬ）で洗浄した。水溶液を濃縮し、これを高真空下で更に乾燥して、４−メチレン−Ｌ−プロリンメチルエステル５を、ＴＦＡ塩として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，回転異性体）  δ  ２．８３−２．８７（ｍ，１Ｈ），３．０５−３．１１（ｍ，１Ｈ），３．８０  および  ３．８１  （２  ｘ  ｓ，３Ｈ），４．００−４．１０（ｍ，２Ｈ），４．５５  （ｄｄ，Ｊ＝５．７，５．７  Ｈｚ，１Ｈ），５．１７−５．２１（ｍ，２Ｈ）；  １３ＣＮＭＲ  （５３４．０，４９．１，５３．８，５９．３，１１１．７，１３７．６，１６９．８；  ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  １４２  （［Ｍ］＋＋１）．
【０２７０】
化合物６：（Ｋａｍａｌ，Ａ．；ｅｔ  ａｌ、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００２，４５，４６７９−４６８８）  ジエタノールアミン（３．５７ｇ、３４ミリモル）を、メタノール（２０ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ３Ｎ（４．７ｍＬ、３４ミリモル）及びトリフルオロ酢酸エチル（４．９０ｇ、３４ミリモル）で、室温で２０時間処理し、続いてＣＦ３ＣＯＯＥｔ更に１ｍＬを添加した。更に２０時間後に、高真空下での揮発性溶媒の除去によって、Ｎ−トリフルオロアセチルジエタノールアミン、化合物６を、明黄色油として得、これを更に精製することなく使用した。
【０２７１】
化合物７：アゾジカルボン酸ジエチル（７．６６ｇ、４４ミリモル）を、無水ＴＨＦ（５７ｍＬ）中の、バニリン酸メチル（７．３０ｇ、４０．１ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（１５．６７ｇ、５９．７ミリモル）の攪拌した溶液に、０℃で滴下により添加し、得られた混合物をこの温度で１時間攪拌し、続いて、無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＮ−トリフルオロアセチル−ジエタノールアミン６（７．３０ｇ、４０．１ミリモル）の溶液を添加した。室温で一晩撹拌した後、反応物を、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）でクエンチし、Ｅｔ２Ｏ（３×８０ｍＬ）で抽出した。一緒にしたＥｔ２Ｏ層を、食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、８：２−７：３  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）による残渣の精製によって、Ｎ−トリフルオロセチル−Ｎ，Ｎ−ジ［２−（４−メトキシカルボニル−２−メトキシ−フェノキシ）エチル］アミン、化合物７を、白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ３．８１（ｓ，３Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），４．０４−４．０８（ｍ，４Ｈ），４．２８−４．３２（ｍ，４Ｈ），６．８４  および  ６．８５  （２  ｘ  ｄ，Ｊ＝６．３  Ｈｚ，２Ｈ），７．５０  および  ７．５１  （２  ｘ  ｄ，Ｊ＝１．５  Ｈｚ，２Ｈ），７．６１  （ｄｄ，Ｊ＝１．５，６．３  Ｈｚ，２Ｈ）．
【０２７２】
化合物８：固体Ｃｕ（ＮＯ３）２・ｘＨ２Ｏ（２．３３ｇ、１２．４１ミリモル）を、無水酢酸（５０ｍＬ）中のＮ−トリフルオロセチル−Ｎ，Ｎ−ジ［２−（４−メトキシカルボニル−２−メトキシフェノキシ）エチル］アミン７（２．６２ｇ、４．９６ミリモル）の攪拌した溶液に、０℃で添加した。この反応混合物を０℃で１時間、室温で２時間撹拌し、次いで、氷水２００ｍＬの中に注いだ。撹拌を更に１時間続けた。得られた黄色沈殿を、濾過によって集めた。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、６：４  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）による更なる精製によって、Ｎ−トリフルオロセチル−Ｎ，Ｎ−ジ［２−（４−メトキシカルボニル−２−メトキシ−５−ニトロ−フェニルオキシ）エチル］アミン、化合物８を、明黄色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ３．８６（ｓ，３Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），３．８８６（ｓ，３Ｈ），３．８９０（ｓ，３Ｈ），４．０４−４．０９（ｍ，４Ｈ），４．３０−４．３５（ｍ，４Ｈ），６．９８  および  ６．９９  （２  ｘ  ｓ，２Ｈ），７．３７  および  ７．４０  （２  ｘ  ｓ，２Ｈ）．
【０２７３】
化合物９：ＴＨＦ−ＭｅＯＨ（１：２、４８ｍＬ）中のＮ−トリフルオロセチル−Ｎ，Ｎ−ジ［２−（４−メトキシカルボニル−２−メトキシ−５−ニトロ−フェニルオキシ）エチル］アミン８（２．５８ｇ、４．１６ミリモル）の溶液を、１０％Ｋ２ＣＯ３水溶液（１６ｍＬ）で、室温で１２時間処理した。ロタベーパーによって揮発物質を除去した後、残渣をＨ２Ｏ  １００ｍＬで希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。一緒にしたＥｔＯＡｃ層を、食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮して、Ｎ，Ｎ−ジ［２−（４−メトキシカルボニル−２−メトキシ−５−ニトロ−フェニルオキシ）エチル］アミン、化合物９を、黄色固体として得、これを更に精製することなく使用した。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ３．１７（ｔ，Ｊ＝３．９  Ｈｚ，４Ｈ），３．８９（ｓ，６Ｈ），３．９３（ｓ，６Ｈ），４．１９（ｔ，Ｊ＝３．９  Ｈｚ，４Ｈ），７．０５（ｓ，２Ｈ），７．４７（ｓ，２Ｈ）．
【０２７４】
化合物１０：Ｎ，Ｎ−ジ［２−（４−メトキシカルボニル−２−メトキシ−５−ニトロフェニルオキシ）エチル］アミン、化合物９、（粗製、４．１６ミリモル）及びＮａＨＣＯ３（２１０ｍｇ、２．５０ミリモル）を、ＴＨＦ中に懸濁させ、（ＢＯＣ）２Ｏ（９９９ｍｇ、４．５８ミリモル）で０℃で処理し、撹拌を室温で３時間続けた。ＴＨＦを除去した後、残渣を、Ｈ２ＯとＥｔＯＡｃ（１００／１００ｍＬ）との間に分配させた。水性層を、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で更に抽出した。一緒にしたＥｔＯＡｃ層を、食塩水（８０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、６：４  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）による残渣の精製によって、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ，Ｎ−ジ［２−（４−メトキシカルボニル−２−メトキシ−５−ニトロ−フェニルオキシ）エチル］アミン、化合物１０を、明黄色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  １．４４（ｓ，９Ｈ），３．７７（ｍ，４Ｈ），３．８３，３．８６  および  ３．８７（３  ｘ  ｓ，１２Ｈ），４．２０  および  ４．２６  （２  ｘ  ｔ，Ｊ＝３．９  Ｈｚ，４Ｈ），６．９７  および  ６．９９  （２  ｘ  ｓ，２Ｈ），７．３６  および  ７．４０  （２  ｘ  ｓ，２Ｈ）；  ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ６４６  （［Ｍ］＋＋Ｎａ）．
【０２７５】
化合物１１：Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ，Ｎ−ジ［２−（４−メトキシカルボニル−２−メトキシ−５−ニトロ−フェニルオキシ）エチル］アミン、化合物１０（２．１１ｇ、３．３９ミリモル）を、ＴＨＦ−ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ（３：１：１、６５ｍＬ）中に懸濁させ、１Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（１４ｍＬ）で、室温で３時間処理した。揮発性溶媒を除去した後、残渣をＨ２Ｏ（２５ｍＬ）で希釈した。得られた水溶液を、濃ＨＣｌによってｐＨ約１にまで酸性にした。沈殿したＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ，Ｎ−ジ［２−（４−カルボキシ−２−メトキシ−５−ニトロ−フェニルオキシ）エチル］アミン、化合物１１を、濾過によって集め、Ｈ２Ｏで洗浄し、高真空下で更に乾燥した。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，回転異性体）  δ  １．３９（ｓ，９Ｈ），３．７０（ｍ，４Ｈ），３．８８  および  ３．８９（２  ｘ  ｓ，６Ｈ），４．２９（ｍ，４Ｈ），７．２９  および  ７．３１  （２  ｘ  ｓ，２Ｈ），７．６３（ｓ，２Ｈ），１３．６０  （ｂｒ．ｓ，２Ｈ）；  １３ＣＮＭＲ  δ２７．８，４６．２  および  ４６．６，５６．３  および  ５６．４，６７．２，７９．２，１０７．９  および  １０８．０，１１１．３，１４１．４  
および  １４１．５，１４９．１，１５１．７，１５４．５，１６５．９；  ＨＲＭＳ  ｍ／ｚＣ２５Ｈ２９Ｎ３Ｏ１４Ｎａについての計算値６１８．１５４７，実測値６１８．１５５２  （［Ｍ］＋＋Ｎａ）．
【０２７６】
化合物１２：ＤＭＦの触媒量（２滴）を、無水ＴＨＦ（６．５ｍＬ）中の、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ，Ｎ−ジ［２−（４−カルボキシ−２−メトキシ−５−ニトロ−フェニルオキシ）エチル］アミン１１（１９４ｍｇ、０．３３ミリモル）及び塩化オキサリル（７２．７μＬ、０．８１ミリモル）の溶液に添加し、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。過剰のＴＨＦ及び塩化オキサリルを、ロタベーパーによって除去した。塩化アクチル（ａｃｔｙｌ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）を、新しいＴＨＦ（４ｍＬ）中に再懸濁させ、ＴＨＦ（１ｍＬ）中の、４−メチレン−Ｌ−プロリンメチルエステル５（２０６．７ｍｇ、０．８１ミリモル）、Ｅｔ３Ｎ（０．１９ｍＬ、１．３９ミリモル）及びＨ２Ｏ（０．４ｍＬ）の溶液に、０℃でアルゴン雰囲気下で滴下により添加した。この反応混合物を、室温にまで加温し、撹拌を２時間続けた。ＴＨＦを除去した後、残渣を、Ｈ２ＯとＥｔＯＡｃ（１０／１０ｍＬ）との間に分配させた。水性層を、ＥｔＯＡｃ（２×８ｍＬ）で更に抽出した。一緒にした有機層を、食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、２：８  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）による残渣の精製によって、ビス｛２−［５−メトキシ−２−ニトロ−４−［（Ｓ）−４−メチレン−２−メトキシカルボニル−１−ピロリジニルカルボニル］−フェニルオキシ］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１２を、明黄色油（回転異性体）として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，回転異性体）  δ  １．４６（ｓ，９Ｈ），２．６８−２．７５（ｍ，２Ｈ），２．９９−３．１０（ｍ，２Ｈ），３．６０−４．２８（ｍ，２４Ｈ），４．５６−５．１２（ｍ，６Ｈ），６．７８−６．８３（ｍ，２Ｈ），７．６３−７．７１（ｍ，２Ｈ）；  ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ８６４（［Ｍ］＋＋Ｎａ）．
【０２７７】
化合物１３：無水トルエン（２．４ｍＬ）中のビス｛２−［５−メトキシ−２−ニトロ−４−［（Ｓ）−４−メチレン−２−メトキシカルボニル−１−ピロリジニルカルボニル］フェニルオキシ］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１２（１００ｍｇ、０．１２ミリモル）の激しく撹拌した溶液に、ＤＩＢＡＬ−Ｈの溶液（トルエン中の１Ｍ溶液４８０μＬ）を−７８℃でアルゴン雰囲気下で、滴下により添加した。この混合物を更に４５分間撹拌した後、メタノール５滴、続いて５％ＨＣｌ（４ｍＬ）の添加によって、過剰の試薬を分解させた。得られた混合物を、０℃まで加温した。層を分離し、水性層をＣＨ２Ｃｌ２（３×３ｍＬ）で更に抽出した。一緒にした有機層を、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、９５：５  ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ）による残渣の精製によって、ビス｛２−［５−メトキシ−２−ニトロ−４−［（Ｓ）−４−メチレン−２−ホルミル−１−ピロリジニルカルボニル］フェニルオキシ］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１３を、明黄色油（８４ｍｇ、９１％）として得た。
【０２７８】
化合物１４：ビス｛２−［５−メトキシ−２−ニトロ−４−［（Ｓ）−４−メチレン−２−ホルミル−１−ピロリジニルカルボニル］フェニルオキシ］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１３（１８０ｍｇ、０．２３ミリモル）、Ｎａ２Ｓ２Ｏ４（１．８４ミリモル、８当量）、ＴＨＦ３．５ｍＬ及びＨ２Ｏ２．２ｍＬの混合物を、室温で２０時間攪拌した。溶媒を高真空下で除去した。残渣を、ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中に再懸濁させ、ＡｃＣｌを、ｐＨ約２まで滴下により添加した。得られた混合物を室温で１時間攪拌した。この反応物を、ＭｅＯＨの大部分を除去することによって仕上げ、次いでＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈した。ＥｔＯＡｃ溶液を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、９７：３  ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ）による残渣の精製によって、ビス−｛２−［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−５−オキソ−１，３，，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イルオキシ］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１４を、白色固体（８６ｍｇ、５０％）として得た。
【０２７９】
（実施例１４）
（１１ａＳ）−７−（５−ブロモペンチルオキシ）−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン
スキーム２
【０２８０】
【化５６】
2009524636.tif 000047
【０２８１】
化合物１５：アセトン（２００ｍＬ）中のバニリン酸メチル（９．１０９ｇ、５０ミリモル）の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（２７．６４ｇ、２００ミリモル）及び１，５−ジブロモペンタン（２０．４ｍＬ、１５０ミリモル）を添加した。得られた混合物を還流まで加熱した。６時間後に、ＴＬＣによって、出発材料が残留しなかったことが示された。この混合物を室温にまで冷却し、固体を濾過によって除去した。濾液を濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、８：２  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）による精製によって、４−（５−ブロモペンチルオキシ）−３−メトキシ−安息香酸メチルエステル１５を、白色固体（１３．６５ｇ、８２％）として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  １．６０−１．６６（ｍ，２Ｈ），１．８５−１．９７（ｍ，４Ｈ），３．４２（ｔ，Ｊ＝５．０  Ｈｚ，２Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），４．０６（ｔ，Ｊ＝５．０  Ｈｚ，２Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝６．３  Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝１．５  Ｈｚ，１Ｈ），７．６３  （ｄｄ，Ｊ＝６．３，１．５  Ｈｚ，１Ｈ）；  ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ３５３  および  ３５５  （［Ｍ］＋＋Ｎａ）．
【０２８２】
化合物１６：固体Ｃｕ（ＮＯ３）２・ｘＨ２Ｏ（３．６４ｇ、１９．４２ミリモル）を、無水酢酸（８１ｍＬ）中の４−（５−ブロモペンチルオキシ）−３−メトキシ−安息香酸メチルエステル１５（５．３６ｇ、１６．１８ミリモル）の攪拌した溶液に、０℃で添加した。この反応混合物を、０℃で１時間、室温で２時間撹拌し、次いで、氷−水２００ｍＬの中に注いだ。撹拌を更に１時間続けた。得られた黄色沈殿を、濾過によって集め、水で洗浄した。高真空下で更に乾燥して、４−（５−ブロモペンチルオキシ）−５−メトキシ−２−ニトロ−安息香酸メチルエステル、化合物１６を、明黄色固体（５．９８ｇ）として得、これを次の段階に直接使用した。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  １．５９−１．７０（ｍ，２Ｈ），１．８５−１．９８（ｍ，４Ｈ），  ３．４３（ｔ，Ｊ＝５．１  Ｈｚ，２Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），４．０８（ｔ，Ｊ＝４．８  Ｈｚ，２Ｈ），７．０５（ｓ，１Ｈ），７．４２（ｓ，１Ｈ）．ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ３９８  および  ４００  （［Ｍ］＋＋Ｎａ）．
【０２８３】
化合物１７：４−（５−ブロモペンチルオキシ）−５−メトキシ−２−ニトロ−安息香酸メチルエステル１６（５．９８ｇ、１５．９ミリモル）を、ＴＨＦ−ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ（３：１：１、１５７ｍＬ）中に懸濁させ、１Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（３１ｍＬ）で、室温で５時間処理した。揮発性溶媒を除去した後、残渣をＨ２Ｏ（７０ｍＬ）で希釈した。得られた水溶液を、濃ＨＣｌによってｐＨ約２にまで酸性にした。沈殿した４−（５−ブロモペンチルオキシ）−５−メトキシ−２−ニトロ−安息香酸１７を、濾過によって集め、Ｈ２Ｏで洗浄し、高真空下で更に乾燥した（５．４７ｇ）。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ１．６４−１．６８（ｍ，２Ｈ），１．８７−１．９８（ｍ，４Ｈ），３．４３（ｔ，Ｊ  
＝４．８  Ｈｚ，２Ｈ），４．０８（ｓ，３Ｈ），４．１０（ｔ，Ｊ＝５．１  Ｈｚ，２Ｈ），７．２１（ｓ，１Ｈ），７．３５（ｓ，１Ｈ），１３．６０  （ｂｒ．ｓ，１Ｈ）；  ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ３８４  および  ３８６（［Ｍ］＋Ｎａ）．
【０２８４】
化合物１８：ＤＭＦの触媒量（２滴）を、無水ＴＨＦ（７．５ｍＬ）中の、４−（５−ブロモペンチルオキシ）−５−メトキシ−２−ニトロ−安息香酸１７（２７０ｍｇ、０．７４ミリモル）及び塩化オキサリル（８０μＬ、０．８９ミリモル）の溶液に添加し、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。過剰のＴＨＦ及び塩化オキサリルを、ロタベーパーによって除去した。塩化アセチルを、新しいＴＨＦ（６ｍＬ）中に再懸濁させ、ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中の、４−メチレン−Ｌ−プロリンメチルエステル５（２２８ｍｇ、０．８９ミリモル）、Ｅｔ３Ｎ（０．３２ｍＬ、２．３１ミリモル）及びＨ２Ｏ（０．１５ｍＬ）の溶液に、０℃でアルゴン雰囲気下で滴下により添加した。この反応混合物を、室温にまで加温し、撹拌を４時間続けた。ＴＨＦを除去した後、残渣を、Ｈ２ＯとＥｔＯＡｃ（２０／２０ｍＬ）との間に分配させた。水性層を、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で更に抽出した。一緒にした有機層を、食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、６：４  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）による残渣の精製によって、１−［４−（５−ブロモペンチルオキシ）−５−メトキシ−２−ニトロ−ベンゾイル］−４−メチレン−Ｌ−プロリンメチルエステル１８を、明黄色油（回転異性体）として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，回転異性体）  δ  １．６２−１．６８（ｍ，２Ｈ），１．８６−１．９８（ｍ，４Ｈ），２．６４−２．７５（ｍ，１Ｈ），２．９９−３．０８（ｍ，１Ｈ），３．４３（ｔ，Ｊ＝５．１  Ｈｚ，２Ｈ），３．５９−３．９６（ｍ，７Ｈ），４．０５−４．２１（ｍ，３Ｈ），４．５７−４．６１  および  ４．９０−５．１２（ｍ，３Ｈ），６．８０  および  ６．８３  （２  ｓ，１Ｈ），７．６４  および  ７．６７  （２  ｓ，１Ｈ）；  ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ５０７  および  ５０９  （［Ｍ］＋＋Ｎａ）．
【０２８５】
化合物１９：無水トルエン−ＣＨ２Ｃｌ２（３：１、２．５ｍＬ）中の１−［４−（５−ブロモペンチルオキシ）−５−メトキシ−２−ニトロ−ベンゾイル］−４−メチレン−Ｌ−プロリンメチルエステル１８（６１ｍｇ、０．１２ミリモル）の激しく撹拌した溶液に、ＤＩＢＡＬ−Ｈの溶液（トルエン中の１Ｍ溶液１８８μＬ）を−７８℃でアルゴン雰囲気下で、滴下により添加した。この混合物を更に４５分間撹拌した後、メタノール３滴、続いて５％ＨＣｌ（２ｍＬ）の添加によって、過剰の試薬を分解させた。得られた混合物を、０℃まで加温した。層を分離し、水性層をＣＨ２Ｃｌ２（３×２ｍＬ）で更に抽出した。一緒にした有機層を、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１：１  ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）による残渣の精製によって、（Ｓ）−１−［４−（５−ブロモペンチルオキシ）−５−メトキシ−２−ニトロ−ベンゾイル］−４−メチレン−２−ピロリジンカルボキサルデヒド１９を、明黄色油（４４ｍｇ、８０％）として得た。
【０２８６】
化合物２０：（Ｓ）−１−［４−（５−ブロモペンチルオキシ）−５−メトキシ−２−ニトロ−ベンゾイル］−４−メチレン−２−ピロリジンカルボキサルデヒド１９（４３．７ｍｇ、０．０９６ミリモル）、Ｎａ２Ｓ２Ｏ４（０．５８ミリモル、６当量）、ＴＨＦ１．５ｍＬ及びＨ２Ｏ  ０．９ｍＬの混合物を、室温で１８時間攪拌した。溶媒を高真空下で除去した。残渣を、ＭｅＯＨ（６ｍＬ）中に再懸濁させ、ＡｃＣｌを、ｐＨ約２まで滴下により添加した。得られた混合物を室温で１時間攪拌した。この反応物を、ＭｅＯＨの大部分を除去することによって仕上げ、次いでＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈した。ＥｔＯＡｃ溶液を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、食塩水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、９８：２  ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ）による残渣の精製によって、（１１ａＳ）−７−（５−ブロモペンチルオキシ）−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン２０を、明黄色油（３１ｍｇ、７４％）として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  ／δ１．５８−１．６６（ｍ，２Ｈ），１．８４−１．９９（ｍ，４Ｈ），２．９１−２．９５（ｍ，１Ｈ），３．０８−３．１４（ｍ，１Ｈ），３．４２（ｔ，Ｊ＝５．１  Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．８７−４．２７（ｍ，５Ｈ），５．１５  （ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．１８  （ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．８４（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝４．０  Ｈｚ，１Ｈ）；  ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ４２９  および  ４３１  （［Ｍ］＋＋Ｎａ）．
次いで、化合物２０を、実施例１１に於けるようにして調製されたＰＢＤ単位と結合させて、本発明の化合物を形成することができる。
【０２８７】
（実施例１５）
８，８’−［３−（２−アセチルチオエチル）−１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０２８８】
【化５７】
2009524636.tif 000048
無水ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（１．７７ｇ、６．８ミリモル）の溶液に、アゾジカルボン酸ジエチル（トルエン中２．２Ｍ、２．４ｍＬ、５．４ミリモル）を、０℃で滴下により添加した。０℃で５５分間撹拌した後、乾燥ＴＨＦ（７ｍＬ）中の、３−（２−ヒドロキシエチル）ペンタン−１，５−ジオール（７４０ｍｇ、５ミリモル）及びチオ酢酸（３３５μＬ、４．５ミリモル）の溶液を滴下により添加した。１時間後に、氷／水浴を取り去り、反応物を室温で１６時間攪拌した。溶媒を回転蒸発によって真空中で除去した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ、２０：１、１５：１、１０：１、４：１）によって精製して、３−（２−アセチルチオエチル）ペンタン−１，５−ジオールを白色固体（３５０ｍｇ）として得、出発材料トリオール（４０６ｍｇ）を回収した。
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ３．６５−３．６３（ｍ，４Ｈ），３．４５  （ｂｓ，２Ｈ），２．８４−２．８０（ｍ，２Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），１．７３−１．６７（ｍ，１Ｈ），１．５５−１．４９（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ  （ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ２２９．０（Ｍ＋Ｎａ）＋．
【０２８９】
【化５８】
2009524636.tif 000049
無水ＴＨＦ（０．４ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（５３ｍｇ、０．２ミリモル）の溶液に、アゾジカルボン酸ジイソプロピル（３６μＬ、０．１７ミリモル）を、０℃で滴下により添加した。０℃で２５分間撹拌した後、乾燥ＴＨＦ（０．２ｍＬ）中の、（１１ａＳ）−８−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン、ＰＢＤモノマー、（３８ｍｇ、０．１４ミリモル、使用の前の結合時間の間、乾燥ベンゼンと共に共蒸発させ、高真空で乾燥した）を添加した。この混合物を、１０分間撹拌し続け、その後、乾燥ＴＨＦ（０．２ｍＬ）中の、チオ酢酸エステル化合物（１２ｍｇ、０．０５８ミリモル、使用の前の結合時間の間、乾燥ベンゼンと共に共蒸発させ、高真空で乾燥した）を添加した。この反応混合物を、０℃で３５分間撹拌した。氷／水浴を取り除き、溶液を室温で１２時間攪拌した。溶媒を、真空中で回転蒸発により除去した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ、１００：１、５０：１、２５：１、２０：１）によって精製して、８，８’−［３−（２−アセチルチオエチル）−１，５−ペンタンジイルビス（オキシ）］−ビス［（Ｓ）−２−メチレン−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（１９ｍｇ、ｙ＝４７％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．６６（ｄ，Ｊ＝４．４  Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｓ，２Ｈ），６．７８（ｓ，２Ｈ），５．１７（ｓ，２Ｈ），５．１４（ｓ，２Ｈ），４．２６（ｓ，４Ｈ），４．１７−４．０９（ｍ，４Ｈ），３．８８（ｓ，
６Ｈ），３．８７−３．８３（ｍ，２Ｈ），３．１３−３．０６（ｍ，２Ｈ），２．９４−２．９０（ｍ，４Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），  １．９５  （ｂｓ，３Ｈ），１．６８  （ｂｓ，４Ｈ）．ＭＳ  （ＥＳＩ，ｗｉｔｈ  Ｈ２Ｏ）：ｍ／ｚ  ７４５．３（ｍ＋２Ｈ２Ｏ＋Ｎａ）＋，７２７．３（Ｍ＋Ｈ２Ｏ＋Ｎａ）＋，７０９．２（Ｍ＋Ｎａ）＋．
【０２９０】
（実施例１６）
８，８’−［５−（Ｎ−４−メルカプト−４，４−ジメチルブタノイル）アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０２９１】
【化５９】
2009524636.tif 000050
水（０．３ｍＬ）中のトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ、５２ｍｇ、０．１８ミリモル）の懸濁液に、飽和重炭酸ナトリウム（約０．６ｍＬ）を滴下により添加して、ｐＨを６から７に調節した。次いで、これに、リン酸塩緩衝液（ｐＨ７．０、１０ｍＭ、Ｎａ２ＨＰＯ４／Ｈ３ＰＯ４、０．５ｍＬ）を添加した。この得られたＴＣＥＰ溶液を、メタノール（２．２ｍＬ）中の８，８’−［５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）−アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（２９ｍｇ、０．０３６ミリモル）の混合物に添加し、室温で３時間攪拌した。この反応物をリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）でクエンチし、ジクロロメタンで抽出した。一緒にした有機層を、食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、白色固体を得た。この固体を、ジクロロメタン／ＭｅＯＨ（２：１）中に溶解し、再び蒸発させた。ジクロロメタンを添加し、蒸発させた。残渣を高真空にし、逆相Ｃ１８カラム｛ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ、固体をＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（３：１、２ｍＬ）中に溶解し、３０分間攪拌し、その後、カラムに担持｝によって精製して、８，８’−［５−（Ｎ−４−メルカプト−４，４−ジメチルブタノイル）アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（１１ｍｇ）を、白色固体として得た（方法Ｈ）。
ＭＳ  （ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝７８６．３  ＭＮａ＋
ｍ／ｚ＝８０４．２  ＭＮａ＋＋Ｈ２Ｏ
８，８’−［５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０２９２】
【化６０】
2009524636.tif 000051
無水ＤＭＦ（２ｍＬ）中に溶解した５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）−アミノ−１，３−ビス（メシルオキシメチル）−ベンゼン（８９ｍｇ、０．１８ミリモル）の溶液に、８−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン（９３ｍｇ、０．３６ミリモル）、炭酸カリウム粉末（１００ｍｇ、０．７２ミリモル）、ヨウ化カリウム粉末（１５ｍｇ、０．０９ミリモル）及びテトラブチルアンモニウムヨージド（１３ｍｇ、０．０３６ミリモル）を、室温で添加した。この混合物を１時間攪拌した後、８−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オンの第二部分（２２ｍｇ、０．０８５ミリモル）を添加した。この溶液を、室温で更に３時間、撹拌し続けた。次いで、この反応物を水でクエンチし、ジクロロメタンで希釈した。有機層を分離し、水性層をジクロロメタンで抽出した。一緒にした有機層を、食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。これを濾過し、濾液を減圧下で、続いて高真空で蒸発させて、残留ＤＭＦを除去した。次いで、残渣を、逆相Ｃ１８カラム（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）によって精製して、８，８’−［５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（２９ｍｇ）を白色固体として得た（方法Ｈ）。
ＭＳ  （ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝８３２．２  ＭＮａ＋
ｍ／ｚ＝８５０．２  ＭＮａ＋＋Ｈ２Ｏ
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，  ｉｎ  δ  ｐｐｍ）：７．６７  （ｂｓ，２Ｈ），７．５８−７．２６（ｍ，５Ｈ），６．８２（ｓ，２Ｈ），５．２１−５．１４（ｍ，８Ｈ），４．３０（ｓ，４Ｈ），  ４．０２−３．８８（ｍ，９Ｈ），３．１６−３．１０（ｍ，２Ｈ），２．９７−２．９３（ｍ，２Ｈ），２．４５−２．４０（ｍ，５Ｈ），２．０９−２．０３（ｍ，２Ｈ），１．３４（ｓ，６Ｈ）
５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）アミノ−１，３−ビス（メシルオキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０２９３】
【化６１】
2009524636.tif 000052
無水ジクロロメタン（７ｍＬ）中の５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）−アミノ−１，３−ビス（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（３２９ｍｇ、１．０ミリモル）の懸濁液に、トリエチルアミン（３４８μＬ、２．５ミリモル）、続いてメタンスルホニルクロリド（１９３μＬ、２．５ミリモル）を、−２℃で１０分間かけて滴下により添加した。この溶液を、０℃で更に３０分間攪拌し、次いで氷と水との混合物でクエンチした。この混合物を冷ジクロロメタンで抽出し、一緒にしたジクロロメタン層を、冷水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。これを濾過し、濾液を真空中で回転蒸発によって蒸発させた。残渣を、短いシリカゲルカラム（ジクロロメタン／ヘキサン／酢酸エチル、１：２：４）によって迅速に精製して、５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）−アミノ−１，３−ビス（メシルオキシメチル）−ベンゼンを、無色油（４１０ｍｇ）として得た。
ＭＳ  （ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝５０８．０  ＭＮａ＋
ｍ／ｚ＝４８３．９  Ｍ−Ｈ
ｍ／ｚ＝５１９．９  Ｍ−Ｈ＋２Ｈ２Ｏ
５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）−アミノ−１，３−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０２９４】
【化６２】
2009524636.tif 000053
メタノール（５０ｍＬ）中の５−ニトロ−ｍ−キシレン−α，α’−ジオール（８９０ｍｇ、５．４ミリモル）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％、２８７ｍｇ）を添加した。水素雰囲気を導入し、この混合物を、加圧（Ｈ２、５から８ｐｓｉ）下で、室温で５時間水素化した。この溶液を、セライトに通して濾過し、濾液を真空中で回転蒸発によって蒸発させて、５−アミノ−ｍ−キシレン−α，α’−ジオールを得、次いで、これをＴＨＦ（１０ｍＬ）／ＤＭＦ（１５ｍＬ）中に溶解させた。ＴＨＦ（５ｍＬ）中に溶解させた４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタン酸（１．０５ｇ、５．４ミリモル）を、室温で添加し、続いて１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２．１ｇ、１０．８ミリモル）及び４−ジメチルアミノピリジン（６６ｍｇ、０．５４ミリモル）を添加した。得られた混合物を、室温で一晩撹拌し、次いで１０％塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチルで抽出し、洗浄し、乾燥した。これを濾過し、溶媒を真空中で回転蒸発により除去した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、１５：１、１０：１、７：１）によって精製して、５−（Ｎ−４−メチルジチオ−４，４−ジメチルブタノイル）−アミノ−１，３−ビス（ヒドロキシメチル）−ベンゼンを白色固体（７２９ｍｇ）として得た。
ＭＳ  （ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３５２．１  ＭＮａ＋
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，ｉｎ  δ  ｐｐｍ）：７．４７（ｓ，２Ｈ），７．１０（ｓ，１Ｈ），４．５８（ｓ，４Ｈ），２．５２−２．４７（ｍ，２Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．０２−１．９８（ｍ，２Ｈ），１．３４（ｓ，６Ｈ）．
【０２９５】
（実施例１７）
８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メルカプト−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０２９６】
【化６３】
2009524636.tif 000054
水（０．０５ｍＬ）中のトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ、６４ｍｇ、０．２２ミリモル）の懸濁液に、飽和重炭酸ナトリウム（約０．７ｍＬ）を滴下により添加して、ｐＨを６から７に調節した。次いで、これに、リン酸塩緩衝液（ｐＨ７．０、１０ｍＭ、Ｎａ２ＨＰＯ４／Ｈ３ＰＯ４、０．８ｍＬ）を添加した。この得られたＴＣＥＰ溶液を、メタノール（５ｍＬ）中の８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（３５ｍｇ、０．０４５ミリモル）の混合物に添加し、室温で４．５時間攪拌した。この反応物をリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）でクエンチし、ジクロロメタンで抽出した。一緒にした有機層を、食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、白色固体を得た。この固体を、ジクロロメタン／ＭｅＯＨ（２：１）中に溶解し、再び蒸発させた。ジクロロメタンを添加し、蒸発させた。残渣を高真空にし、逆相Ｃ１８カラム｛ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ、固体をＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（３：１、２ｍＬ）中に溶解し、３０分間攪拌し、その後、カラムに担持｝によって精製して、８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メルカプト−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（１０．５ｍｇ、ｙ＝３２％）を、白色固体として得た（方法Ｈ）。
ＭＳ  （ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝７５８．２  ＭＮａ＋
ｍ／ｚ＝７７６．２  ＭＮａ＋＋Ｈ２Ｏ
ｍ／ｚ＝７９４．３  ＭＮａ＋＋２Ｈ２Ｏ
８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０２９７】
【化６４】
2009524636.tif 000055
無水ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中に溶解した５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ビス（メシルオキシメチル）−ベンゼン（１０５ｍｇ、０．２３ミリモル）の溶液に、８−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン（１１９ｍｇ、０．４６ミリモル）、炭酸カリウム粉末（１２７ｍｇ、０．９２ミリモル）、ヨウ化カリウム粉末（２０ｍｇ、０．１２ミリモル）及びテトラブチルアンモニウムヨージド（１７ｍｇ、０．０４６ミリモル）を、室温で添加した。この混合物を１．５時間攪拌した後、８−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オンの第二部分（２３ｍｇ、０．０８９ミリモル）を添加した。この溶液を、室温で更に４．５時間、撹拌し続けた。次いで、この反応物を水でクエンチし、ジクロロメタンで希釈した。有機層を分離し、水性層をジクロロメタンで抽出した。一緒にした有機層を、食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。この溶液を濾過し、濾液を減圧下で蒸発させ、次いで高真空に付して、残留ＤＭＦを除去した。残渣をＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（１０：１）中に懸濁させ、濾過した。濾液を蒸発させ、粗製生成物を、逆相Ｃ１８カラム（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）によって精製して、８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（３９ｍｇ）を白色固体として得た（方法Ｈ）。
ＭＳ  （ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝８０４．２  ＭＮａ＋
ｍ／ｚ＝８２２．２  ＭＮａ＋＋Ｈ２Ｏ
ｍ／ｚ＝８４０．２  ＭＮａ＋＋２Ｈ２Ｏ
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，ｉｎ  δ  ｐｐｍ）：７．６４  （ｂｓ，２Ｈ），７．５０（ｓ，２Ｈ），６．８３−６．７６（ｍ，５Ｈ），５．１８−５．１０（ｍ，８Ｈ），４．２７（ｓ，４Ｈ），３．９５（ｓ，６Ｈ），３．９０−３．８４（ｍ，３Ｈ），３．５１（ｓ，２Ｈ），３．１３−３．０７（ｍ，２Ｈ），３．０１（ｓ，３Ｈ），２．９４−２．９０（ｍ，２Ｈ），  ２．４１（ｓ，３Ｈ），１．３０（ｓ，６Ｈ）
５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ビス（メシルオキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０２９８】
【化６５】
2009524636.tif 000056
無水ジクロロメタン（３ｍＬ）中の５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ビス（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（１３５ｍｇ、０．４５ミリモル）の溶液に、トリエチルアミン（１５３μＬ、１．１ミリモル）、続いてメタンスルホニルクロリド（８７μＬ、１．１ミリモル）を、−２℃で１０分間かけて滴下により添加した。この溶液を、０℃で更に３０分間攪拌し、次いで氷／水でクエンチした。この混合物を冷ジクロロメタンで抽出し、一緒にしたジクロロメタン層を、冷水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。次いでこれを濾過し、濾液を真空中で回転蒸発によって蒸発させた。残渣を、分取ＴＬＣプレート（ヘキサン／酢酸エチル、１：１．５）によって精製して、５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ビス（メシルオキシメチル）−ベンゼンを、無色油（１０５ｍｇ）として得た。
【０２９９】
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝４８０．０  ＭＮａ＋
５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ビス（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０３００】
【化６６】
2009524636.tif 000057
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の５−（Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ビス（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（２２６ｍｇ、０．７８ミリモル）の溶液に、ヨードメタン（１４９μＬ、２．４ミリモル）、続いて炭酸カリウム粉末（１０８ｍｇ、０．７８ミリモル）を添加した。室温で４日間撹拌した後、この混合物を、飽和塩化アンモニウムでクエンチし、次いでジクロロメタンで希釈した。有機層を分離し、水性層を酢酸エチルで抽出した。一緒にした有機層を食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。この溶液を濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、１：２）によって精製して、５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ビス（ヒドロキシメチル）ベンゼンを白色フォーム（１５２ｍｇ）として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３２４．１  ＭＮａ＋
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  Ｈｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，ｉｎ  δ  ｐｐｍ）：６．７０（ｓ，２Ｈ），６．６６（ｓ，１Ｈ），４．０６（ｓ，４Ｈ），３．５４（ｓ，２Ｈ），３．０４（ｓ，３Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ），１．３７（ｓ，６Ｈ）
【０３０１】
５−（Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ビス（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０３０２】
【化６７】
2009524636.tif 000058
無水エタノール（２５ｍＬ）中の５−アミノ−１，３−ビス−ヒドロキシメチル−ベンゼン（７６５ｍｇ、５ミリモル）の溶液に、２−（メチルジチオ）−イソブチルアルデヒド（７５１ｍｇ、５ミリモル）を添加した。室温で４時間攪拌した後、この溶液を氷／水浴で０℃まで冷却し、ホウ水素化ナトリウム（２２０ｍｇ、５．８ミリモル）を添加した。この混合物を０℃で１時間撹拌し続け、次いで、冷５％塩酸でクエンチし、ジクロロメタンで希釈した。飽和重炭酸ナトリウムを添加して、溶液を僅かに塩基性にした。有機層を分離し、水性層をジクロロメタンで抽出した。一緒にした有機層を食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液を濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、１５：１、１０：１）によって精製して、５−（Ｎ−（２−メチルジチオ−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ビス（ヒドロキシメチル）−ベンゼンを、無色油（８３２ｍｇ）として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３１０．０  ＭＮａ＋
【０３０３】
（実施例１８）
８，８’−［（４−（２−（４−メルカプト−４−メチル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０３０４】
【化６８】
2009524636.tif 000059
メタノール（１．６ｍＬ）中の８，８’−［（４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（６０ｍｇ）の溶液に、ＤＭＦ（０．２ｍＬ）及び水０．２ｍＬ中のトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（４８ｍｇ）の溶液を添加した。この反応混合物を室温で１８時間攪拌し、溶媒を真空中で除去して残渣を得、この残渣を、メタノール（Ａ）／ジクロロメタン／アセトニトリル（Ｂ）の混合物による勾配溶離（勾配：１００％Ｂから１０％Ａ：９０％Ｂまで下げる）を使用する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＦｌａｓｈ  １０ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ）によって精製して、８，８’−［（４−（２−（４−メルカプト−４−メチル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（１７ｍｇ）を得た。
【０３０５】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、ＺＱ）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝８５５  ＭＨ＋＋Ｈ２Ｏ
ｍ／ｚ＝８３７  ＭＨ＋
保持時間＝３．７０分
【０３０６】
８，８’−［（４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０３０７】
【化６９】
2009524636.tif 000060
ジクロロメタン（４ｍＬ）中の４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン（３６０ｍｇ）及びトリエチルアミン（８１０μＬ）の冷却した（０℃）溶液に、ジクロロメタン（４ｍＬ）中のメタンスルホニルクロリド（２９８μＬ）を添加した。２時間後に、水を添加した。層を分離し、水性層をジクロロメタンで２回抽出した。一緒にした有機溶液を、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、メタノール（Ａ）／ジクロロメタン（Ｂ）の混合物による勾配溶離（勾配：１００％Ｂから３％Ａ：９７％Ｂまで下げる）を使用する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｎｔｅｒｃｈｒｏｍ  Ｐｕｒｉｆｌａｓｈ  ２０ｇ  カラム、ＳｉＯＨ  １５−３５μｍ）によって精製して、メシラート化合物２８０ｍｇを得た。ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中のプレ−トマイマイシン（１２０ｍｇ）の溶液に、炭酸カリウム（２４４ｍｇ）、ヨウ化カリウム（１４７ｍｇ）及びこのメシラート化合物のサンプル（１３７ｍｇ）を添加した。この反応混合物を、３０℃で２０時間攪拌した。水（２０ｍＬ）を添加し、得られた固体を濾過し、水で洗浄し、真空中で乾燥して、残渣を得た。この残渣を、メタノール（Ａ）／ジクロロメタン（Ｂ）の混合物による勾配溶離（勾配：１００％Ｂから６％Ａ：９４％Ｂまで下げる）を使用する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｎｔｅｒｃｈｒｏｍ  Ｐｕｒｉｆｌａｓｈ  ２０ｇ  カラム、ＳｉＯＨ  １５−３５μｍ）によって精製して粗製化合物を得、これを水／アセトニトリル１：１中に溶解し、次いで真空中で濃縮して、８，８’−［（４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（１２０ｍｇ）を得た。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ１、ＺＱ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝９１９  ＭＨ＋＋２  Ｈ２Ｏ
ｍ／ｚ＝９０１  ＭＨ＋＋Ｈ２Ｏ
ｍ／ｚ＝８８３  ＭＨ＋
保持時間＝３．８２分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２８（ｓ，６Ｈ）；１，７５（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；１，９４（ｍ，２Ｈ）；２，２９（ｍ，２Ｈ）；２，３９（ｓ，３Ｈ）；２，９７（ｍ，４Ｈ）；３，５０から４，２０（ｍ，６Ｈ）；４，００（ｓ，６Ｈ）；４，２７（ｓ，４Ｈ）；５，２７（ｍ，４Ｈ）；５，６１（ｍ，２Ｈ）；５，８７  （ｔ  ブロード，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，１Ｈ）；６，８３（ｓ，２Ｈ）；６，９７（ｓ，２Ｈ）；７，５５（ｓ，２Ｈ）；７，６４（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）。
【０３０８】
４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、下記のようにして調製できる。
【０３０９】
【化７０】
2009524636.tif 000061
ジオキサン（３．５ｍＬ）中の４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン（６５６ｍｇ）の溶液に、ジオキサン（５．５ｍＬ）中の塩酸４Ｎの溶液を添加した。室温で２０時間後に、この反応混合物を真空中で残渣（６０３ｍｇ）にまで濃縮した。
【０３１０】
ジメチルホルムアミド（３．５ｍＬ）中の上記の残渣（１５０ｍｇ）のサンプルの溶液に、トリエチルアミン（２６７μＬ）、４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタン酸（１４９ｍｇ）、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（１１９μＬ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（４９ｍｇ）を添加した。室温で１５時間後に、この反応混合物に水を添加し、この水溶液を酢酸エチルで３回抽出した。一緒にした有機溶液を、飽和塩化ナトリウム水溶液によって洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、メタノール（Ａ）／ジクロロメタン（Ｂ）の混合物による勾配溶離（勾配：１００％Ｂから１０％Ａ：９０％Ｂまで下げる）を使用する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｎｔｅｒｃｈｒｏｍ  Ｐｕｒｉｆｌａｓｈ  ２０ｇ  カラム、ＳｉＯＨ  １５−３５μｍ）によって精製して、４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン（８１ｍｇ）を得た。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝３７５  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝１５６  Ｃ７Ｈ１０ＮＯ３＋
保持時間＝２．２分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２２（ｓ，６Ｈ）；１，７９（ｍ，２Ｈ）；２，１９（ｍ，２Ｈ）；２，３９（ｓ，３Ｈ）；３，４３（ｑ，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，０６（ｔ，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４５  （ｄ  ブロード，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，４Ｈ）；５，３３（ｄ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；６，８４（ｓ，２Ｈ）；８，１３  （ｔ  ブロード，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，１Ｈ）。
【０３１１】
４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０３１２】
【化７１】
2009524636.tif 000062
４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルで出発して、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝２９９  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝１５６  Ｃ７Ｈ１０ＮＯ３＋
保持時間＝１．７分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（３００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３９（ｓ，９Ｈ）；３，３２  （部分的にマスクされたｍ，２Ｈ）；４，０３（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４６（ｄ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，４Ｈ）；５，３０（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；６，８３（ｓ，２Ｈ）；７，００  （ｔ  ブロード，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，１Ｈ）。
【０３１３】
４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステル
【０３１４】
【化７２】
2009524636.tif 000063
４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルは、２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エチルブロミドを使用して、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝３８３  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝２４０  Ｃ１１ＨＩ４ＮＯ５＋
保持時間＝３．６分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（３００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２３（ｔ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，６Ｈ）；１，３７（ｓ，９Ｈ）；３，３３  （部分的にマスクされたｍ，２Ｈ）；４，２２（ｔ，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，３８（ｑ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，４Ｈ）；７，０１  （ｔ  ブロード，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，１Ｈ）；７，７１（ｓ，２Ｈ）。
【０３１５】
（実施例１９）
８，８’−［（１−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０３１６】
【化７３】
2009524636.tif 000064
８，８’−［（１−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、１−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンで出発して、８，８’−［（４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  Ｉ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝８８２  ＭＨ＋
保持時間＝４．１３分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：１，３０（ｓ，６Ｈ）；１，７５（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；１，９６（ｍ，２Ｈ）；２，３１（ｍ，２Ｈ）；２，４０（ｓ，３Ｈ）；２，９７（ｍ，４Ｈ）；３，６６（ｍ，２Ｈ）；３，８９（ｍ，２Ｈ）；３，９７（ｓ，６Ｈ）；４，０４（ｔ，Ｊ＝５，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，２７（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，１４（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，１９（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，６１（ｍ，２Ｈ）；５，９３（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，１Ｈ）；６，８２（ｓ，２Ｈ）；６，９４（ｓ  ブロード，２Ｈ）；７，０９（ｓ  ブロード，１Ｈ）；７，５３（ｓ，２Ｈ）；７，６４（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）。
【０３１７】
１−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン
【０３１８】
【化７４】
2009524636.tif 000065
１−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、１−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンを使用して、４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる。
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２２（ｓ，６Ｈ）；１，８０（ｍ，２Ｈ）；２，２０（ｍ，２Ｈ）；２，３９（ｓ，３Ｈ）；３，４０（ｑ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；３，９５（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４４（ｄ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，４Ｈ）；５，１１  （ｔ  ブロード，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；６，７３（ｓ  ブロード，２Ｈ）；６，８４（ｓ  ブロード，１Ｈ）；８，０９  （ｔ  ブロード，１Ｈ）。
【０３１９】
１−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン
【０３２０】
【化７５】
2009524636.tif 000066
１−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エチルブロミドを使用して、５−（３−フタルイミド−プロポキシ）−１，３−ビス−（ヒドロキシメチル）ベンゼンの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝２９８  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝２４２（Ｍ＋２Ｈ−ｔＢｕ）＋
ｍ／ｚ＝２２４（ｍ／ｚ＝２４２−Ｈ２Ｏ）＋
ｍ／ｚ＝２０６（ｍ／ｚ＝２２４−Ｈ２Ｏ）＋
ｍ／ｚ＝１６２（ｍ／ｚ＝２０６−ＣＯ２）＋
保持時間＝２．７分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３９（ｓ，９Ｈ）；３，２８（ｑ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；３，９１（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４４（ｄ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，４Ｈ）；５，１４（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；６，７２  （ε  ブロード，２Ｈ）；６，８３（ｓ  ブロード，１Ｈ）；７，０１  （ｔ  ブロード，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，１Ｈ）。
【０３２１】
（実施例２０）
８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０３２２】
【化７６】
2009524636.tif 000067
ジクロロメタン（２ｍＬ）中の、４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン（５５ｍｇ）及びトリエチルアミン（９９μＬ）の冷却した（０℃）溶液に、メタンスルホニルクロリド（３６μＬ）を添加した。３０分間後に、水を添加した。層を分離し、水性層をジクロロメタンで２回抽出した。一緒にした有機溶液を、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣（９５ｍｇ）にまで濃縮した。
【０３２３】
ジメチルホルムアミド（０．７５ｍＬ）中のプレ−トマイマイシン（５０ｍｇ）の撹拌した溶液に、炭酸カリウム（１１４ｍｇ）、ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中の上記の残渣（５５ｍｇ）及びヨウ化カリウム（４６ｍｇ）を添加した。この反応物を、３０℃で２０時間攪拌した。固体を濾別し、ジメチルホルムアミドで洗浄した。水を、一緒にしたジメチルホルムアミド溶液に添加し、ギ酸を、沈殿が完全に溶解するまで添加した。得られた溶液を、方法Ｂに従ったＨＰＬＣ精製のために注入した。適切なフラクションを一緒にし、Ｊｏｕａｎ  Ｍｏｄｅｌ  ＲＣ１０．１０．装置上で遠心蒸発によって濃縮して、８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（１３．５ｍｇ）を得た。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝８９７  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝６６４（Ｍ−Ｃ１０Ｈ２０ＮＯＳ２＋２Ｈ）＋
ｍ／ｚ＝２３４  Ｃ１０Ｈ２０ＮＯＳ２＋
保持時間＝３．７分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＯＯＤ−ｄ４，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２５（ｓ，６Ｈ）；１，６０から２，２０  （部分的にマスクされたｍ，１０Ｈ）；２，３５（ｍ，５Ｈ）；２，８０から４，４４（ｍ，１４Ｈ）；３，９１（ｓ，６Ｈ）；５，４０（ｓ，４Ｈ）；５，６２（ｍ，２Ｈ）；６，８３から７，９５（ｍ，８Ｈ）。
【０３２４】
４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０３２５】
【化７７】
2009524636.tif 000068
４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンを使用して、４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる：
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝３８９  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝２３４（Ｍ−Ｃ７Ｈ８ＮＯ３）＋
ｍ／ｚ＝１５６  Ｃ７Ｈ１０ＮＯ３＋
保持時間＝２．３分
実施例２０の化合物から誘導されるチオール（ＳＨ）誘導体は、式：
【０３２６】
【化７８】
2009524636.tif 000069
の化合物と平衡状態にある。
【０３２７】
（実施例２１）
８，８’−［（４−（４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−ブトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０３２８】
【化７９】
2009524636.tif 000070
８，８’−［（４−（４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−ブトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、４−（４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−ブトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンを使用して、８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ１，Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝９４７  ＭＨ＋＋２  Ｈ２Ｏ
ｍ／ｚ＝９２９  ＭＨ＋＋Ｈ２Ｏ
ｍ／ｚ＝９１１  ＭＨ＋
保持時間＝３．７４分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＯＯＤ−ｄ４，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２６（ｓ，６Ｈ）；１，５９から１，７６（ｍ，８Ｈ）；１，８１から１，９４（ｍ，４Ｈ）；２，３５（ｍ，５Ｈ）；２，８０から４，４０（ｍ，１４Ｈ）；３，９２（ｓ，６Ｈ）；５，３９（ｍ，４Ｈ）；５，５０（ｍ，２Ｈ）；６，７２から７，９５（ｍ，８Ｈ）。
【０３２９】
４−（４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−ブトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０３３０】
【化８０】
2009524636.tif 000071
４−（４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−ブトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ブトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンを使用して、４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝４０３  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝２４８（Ｍ−Ｃ７Ｈ８ＮＯ３）＋
ｍ／ｚ＝１５６  Ｃ７Ｈ１０ＮＯ３＋
保持時間＝２．３分
【０３３１】
４−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ブトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０３３２】
【化８１】
2009524636.tif 000072
４−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ブトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ブトキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルで出発して、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝４１１  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝３５５（Ｍ＋２Ｈ−ｔＢｕ）＋
ｍ／ｚ＝２４０  Ｃ１１Ｈ１４ＮＯ５＋
保持時間＝３．９分
【０３３３】
４−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ブトキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステル
【０３３４】
【化８２】
2009524636.tif 000073
４−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ブトキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルは、メタンスルホン酸４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ブチルエステル（Ｃａｚｅｎａｖｅ  Ｇａｓｓｉｏｔ，  Ａ．；  Ｃｈａｒｔｏｎ，Ｊ．；Ｇｉｒａｕｌｔ−Ｍｉｚｚｉ，Ｓ．；Ｇｉｌｌｅｒｏｎ，Ｐ．；Ｄｅｂｒｅｕ−Ｆｏｎｔａｉｎｅ，Ｍ−Ａ．；Ｓｅｒｇｈｅｒａｅｒｔ，Ｃ．；Ｍｅｌｎｙｋ，Ｐ．、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｅｍ．Ｌｅｔｔ．２００５，１５（２１），４８２８）を使用して、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝３２７  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝２７１（Ｍ＋２Ｈ−ｔＢｕ）＋
ｍ／ｚ＝１５６  Ｃ７Ｈ１０ＮＯ３＋
保持時間＝２．０分
【０３３５】
（実施例２２）
８，８’−［（４−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０３３６】
【化８３】
2009524636.tif 000074
８，８’−［（４−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、４−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンを使用して、８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝９５０  ＭＨ＋
保持時間＝３．３２分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３２（ｓ，６Ｈ）；１，７６（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；１，８０（ｍ，２Ｈ）；１，９４（ｍ，２Ｈ）；２，２７から２，４６（ｍ，１１Ｈ）；２，６７（ｍ，２Ｈ）；２，９７（ｍ，４Ｈ）；３，４０から３，７０（ｍ，４Ｈ）；３，９０（ｍ，２Ｈ）；４，００（ｓ，６Ｈ）；４，２７（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，２９（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，６０  （ｑ  ブロード，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；６，８６（ｓ，２Ｈ）；７，３０（ｓ，２Ｈ）；７，５６（ｓ，２Ｈ）；７，６５（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）。
【０３３７】
４−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、下記のようにして調製できる。
【０３３８】
【化８４】
2009524636.tif 000075
ジオキサン（１０ｍＬ）中の４−（３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン（６１０ｍｇ）の溶液に、ジオキサン（２．５ｍＬ）中の塩酸４Ｎの溶液を添加した。室温で４時間後に、この反応混合物を真空中で残渣（５６０ｍｇ）にまで濃縮した。
【０３３９】
ジメチルホルムアミド（２．５ｍＬ）中の上記の残渣（１６０ｍｇ）のサンプルの溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１８１μＬ）、４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタン酸（１５８ｍｇ）、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（８８μＬ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１５ｍｇ）を添加した。室温で１５時間後に、固体を濾別し、ジメチルホルムアミド溶液を、方法Ｆに従ったＨＰＬＣ精製のために注入した。適切なフラクションを一緒にし、凍結乾燥によって濃縮して、４−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン（１０５ｍｇ）を得た。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝４４２  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝２６６（Ｍ＋２Ｈ−Ｃ７Ｈ１３ＯＳ２）＋
保持時間＝２．３分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２７（ｓ，６Ｈ）；１，７０から１，８３（ｍ，４Ｈ）；２，２５から２，３９（ｍ，８Ｈ）；２，４０（ｓ，３Ｈ）；２，６３（ｍ，２Ｈ）；３，４３（ｍ，４Ｈ）；４，４９（ｓ，４Ｈ）；５，２８（ｍ  ブロード，２Ｈ）；７，１８（ｓ，２Ｈ）。
【０３４０】
４−（３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０３４１】
【化８５】
2009524636.tif 000076
４−（３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルで出発して、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）ピリジンの製造のための手順に従って製造できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝３６６  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝３１０（Ｍ＋２Ｈ−ｔＢｕ）＋
ｍ／ｚ＝２６６（Ｍ＋２Ｈ−ＣＯ２ｔＢｕ）＋
保持時間＝０．５分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３９（ｓ，９Ｈ）；１，７３（ｍ，２Ｈ）；２，２９（ｍ，６Ｈ）；２，６１（ｍ，２Ｈ）；３，３０  （部分的にマスクされたｍ，４Ｈ）；４，４９（ｄ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，４Ｈ）；５，３０  （ｔ  ブロード，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；７，１８（ｓ，２Ｈ）。
【０３４２】
４−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステル
【０３４３】
【化８６】
2009524636.tif 000077
４−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルは、４−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロプ−１−イニル］−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルで出発して、５−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メチル−アミノ−プロピル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステルの製造のための手順に従って製造できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝４５０  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝３９４（Ｍ＋２Ｈ−ｔＢｕ）＋
ｍ／ｚ＝３５０（Ｍ＋２Ｈ−ＣＯ２ｔＢｕ）＋
保持時間＝２．４分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄδ，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３５（ｔ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，６Ｈ）；１，３９（ｓ，９Ｈ）；１，７９（ｍ，２Ｈ）；２，２７（ｍ，６Ｈ）；２，８０（ｍ，２Ｈ）；３，２９（ｍ，４Ｈ）；４，３９（ｑ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，４Ｈ）；８，１２（ｓ，２Ｈ）。
【０３４４】
４−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロプ−１−イニル］−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステル
【０３４５】
【化８７】
2009524636.tif 000078
４−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロプ−１−イニル］−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルは、４−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステル及びｔｅｒｔ−ブチル−４−プロパルギル−ピペラジン−１−カルボキシラート（Ｚｈｅｎｇ，Ｈ．；Ｗｅｉｎｅｒ，Ｌ．Ｍ．；Ｂａｒ−Ａｍ，Ｏ．；Ｅｐｓｚｔｅｊｎ，Ｓ．；Ｃａｂａｎｔｃｈｉｋ，Ｚ．Ｉ．；Ｗａｒｓｈａｗｓｋｙ，Ａ．；Ｙｏｕｄｉｍ，Ｍ．Ｂ．Ｈ．；及びＦｒｉｄｋｉｎ，Ｍ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００５，３，７７３）で出発して、５−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メチル−アミノ−プロピン−１−イル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステルの調製のための手順に従って製造できる。
Ｅｌ  （方法Ｃ）  ｍ／ｚ＝４４５  Ｍ＋．
ｍ／ｚ＝３８８（Ｍ−Ｃ４Ｈ９）＋
ｍ／ｚ＝３４４（ｍ／ｚ＝３８８−ＣＯ２）＋
ｍ／ｚ＝５７  Ｃ４Ｈ９＋
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，４６（ｔ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，６Ｈ）；１，４８（ｓ，９Ｈ）；２，６０（ｍ  ブロード，４Ｈ）；３，５２（ｍ  ブロード，４Ｈ）；３，６２（ｓ  ブロード，２Ｈ）；４，４９（ｑ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，４Ｈ）；８，２３（ｓ，２Ｈ）。
【０３４６】
４−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルは、下記のようにして製造できる。
【０３４７】
【化８８】
2009524636.tif 000079
ピリジン（３５ｍＬ）中のケリダミン酸ジエチルエステル（Ｃｈａｕｂｅｔ，Ｆ．；Ｎｇｕｙｅｎ  ｖａｎ  ｄｕｏｎｇ，Ｍ．；Ｇｒｅｆ，Ａ．；Ｃｏｕｒｔｉｅｕ，Ｊ．；Ｃｒｕｍｂｌｉｓｓ，Ａ．Ｌ．；Ｇａｕｄｅｍｅｒ，Ａ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９９０，３１（４０），５７２９−５７３２）（３．５ｇ）の冷却した（０℃）溶液に、トリフルオロメタンスルホニルクロリド（２．６ｍＬ）を滴下により添加した。次いで、この反応物を室温で３時間攪拌した。水及び酢酸エチルを添加した。層を分離し、水性層を酢酸エチルで２回抽出した。一緒にした有機溶液を、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、ジクロロメタンで溶離する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＰｒｅｐ  ９０ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ）によって精製して、４−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステル（４．２ｇ）を得た。
【０３４８】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝３７２  ＭＨ＋
保持時間＝４．３８分
【０３４９】
（実施例２３）
８，８’−［（１−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０３５０】
【化８９】
2009524636.tif 000080
８，８’−［（１−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、１−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンを使用して、８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝９４９  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝４７５，３（Ｍ＋２Ｈ）２＋／２
保持時間＝３．３分
１−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン
【０３５１】
【化９０】
2009524636.tif 000081
１−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、１−（３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンで出発して、４−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝４４１  ＭＨ＋
保持時間＝２．４分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２６（ｓ，６Ｈ）；１，７１（ｍ，２Ｈ）；１，７９（ｍ，２Ｈ）；２，２２から２，４０（ｍ，８Ｈ）；２，３９（ｓ，３Ｈ）；２，５８（ｍ，２Ｈ）；３，４４（ｍ，４Ｈ）；４，４５（ｄ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，４Ｈ）；５，０９（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；７，００（ｓ  ブロード，２Ｈ）；７，０８（ｓ  ブロード，１Ｈ）。
【０３５２】
１−（３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン
【０３５３】
【化９１】
2009524636.tif 000082
１−（３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、５−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−イソフタル酸ジメチルエステルで出発して、５−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メチル−アミノ−プロピル）−１，３−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝３６５  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝３０９（Ｍ＋２Ｈ−ｔＢｕ）＋
保持時間＝２．０分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（３００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３９（ｓ，９Ｈ）；１，７１（ｍ，２Ｈ）；２，２８（ｍ，６Ｈ）；２，５７（ｍ，２Ｈ）；３，２９  （部分的にマスクされたｍ，４Ｈ）；４，４４（ｄ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，４Ｈ）；５，０８（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；７，００（ｓ  ブロード，２Ｈ）；７，０８（ｓ  ブロード，１Ｈ）。
【０３５４】
５−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−イソフタル酸ジメチルエステル
【０３５５】
【化９２】
2009524636.tif 000083
５−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−イソフタル酸ジメチルエステルは、５−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロプ−１−イニル］−イソフタル酸ジメチルエステルで出発して、５−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メチル−アミノ−プロピル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステルの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝４２１  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝３６５（Ｍ＋２Ｈ−ｔＢｕ）＋
ｍ／ｚ＝３２１（Ｍ＋２Ｈ−ＣＯ２ｔＢｕ）＋
保持時間＝２．７分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３９（ｓ，９Ｈ）；１，７４（ｍ，２Ｈ）；２，２８（ｍ，６Ｈ）；２，７５（ｍ，２Ｈ）；３，３０  （部分的にマスクされたｍ，４Ｈ）；３，８９（ｓ，６Ｈ）；８，０８（ｄ，Ｊ＝２，０  Ｈｚ，２Ｈ）；８，３２（ｔ，Ｊ＝２，０  Ｈｚ，１Ｈ）。
【０３５６】
５−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロプ−１−イニル］−イソフタル酸ジメチルエステル
【０３５７】
【化９３】
2009524636.tif 000084
５−［３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル）−プロプ−１−イニル］−イソフタル酸ジメチルエステルは、ｔｅｒｔ−ブチル−４−プロパルギル−ピペラジン−１−カルボキシラートで出発して、５−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メチル−アミノ−プロピン−１−イル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステルの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝４１７  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝３６１（Ｍ＋２Ｈ−ｔＢｕ）＋
ｍ／ｚ＝３１７（Ｍ＋２Ｈ−Ｃ０２ｔＢｕ）＋
保持時間＝３．１分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，４０（ｓ，９Ｈ）；２，５０  （マスクされたｍ，４Ｈ）；３，３５（ｍ，４Ｈ）；３，６１（ｓ，２Ｈ）；３，９０（ｓ，６Ｈ）；８，１４（ｓ  ブロード，２Ｈ）；８，４０（ｓ  ブロード，１Ｈ）。
【０３５８】
（実施例２４）
８，８’−［（４−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０３５９】
【化９４】
2009524636.tif 000085
８，８’−［（４−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、４−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンを使用して、８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝９７１  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝４８６，３（Ｍ＋２Ｈ）２＋／２
保持時間＝３．６０分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２８（ｓ，６Ｈ）；１，７６（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；１，９４（ｍ，２Ｈ）；２，２６（ｍ，２Ｈ）；２，４０（ｓ，３Ｈ）；２，９８（ｍ，４Ｈ）；３，３６から３，９５（ｍ，１２Ｈ）；４，００（ｓ，６Ｈ）；４，１８（ｍ，２Ｈ）；４，２８（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，２７（ｍ，４Ｈ）；５，６１（ｍ，２Ｈ）；５，９７（ｍ  ブロード，１Ｈ）；６，８４（ｓ，２Ｈ）；７，０１（ｓ  ブロード，２Ｈ）；７，５６（ｓ，２Ｈ）；７，６４（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）．
【０３６０】
４−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０３６１】
【化９５】
2009524636.tif 000086
４−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−（２−｛２−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンで出発して、４−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝４６３  ＭＨ＋
保持時間＝２．３分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２２（ｓ，６Ｈ）；１，７９（ｍ，２Ｈ）；２，１５（ｍ，２Ｈ）；２，３９（ｓ，３Ｈ）；３，１８（ｑ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；３，４０（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；３，５２（ｍ，２Ｈ）；３，６０（ｍ，２Ｈ）；３，７６（ｍ，２Ｈ）；４，１８（ｍ，２Ｈ）；４，４５（ｓ，４Ｈ）；５，３２（ｍ  ブロード，２Ｈ）；６，８５（ｓ，２Ｈ）；７，９０  （ｔ  ブロード，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，１Ｈ）。
【０３６２】
４−（２−｛２−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０３６３】
【化９６】
2009524636.tif 000087
４−（２−｛２−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−（２−｛２−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルで出発して、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝３８７  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝３３１（Ｍ＋２Ｈ−ｔＢｕ）＋
保持時間＝２．０分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３７（ｓ，９Ｈ）；３，０７（ｑ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；３，３９（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；３，５１（ｍ，２Ｈ）；３，５９（ｍ，２Ｈ）；３，７３（ｍ，２Ｈ）；４，１８（ｍ，２Ｈ）；４，４５（ｄ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，４Ｈ）；５，３１（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；６，７３  （ｔ  ブロード，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，１Ｈ）；６，８５（ｓ，２Ｈ）。
【０３６４】
４−（２−｛２−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルは、下記のようにして調製できる。
【０３６５】
【化９７】
2009524636.tif 000088
酢酸エチル（１８ｍＬ）中の４−（２−｛２−［２−アジド−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステル（Ｒｏｙ，Ｂ．Ｃ．；Ｓａｎｔｏｓ，Ｍ．；Ｍａｌｌｉｋ，Ｓ．；Ｄ．Ｃａｍｐｉｇｌｉａ，Ａ．Ｄ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００３，６８（１０），３９９９）（９００ｍｇ）の溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカルボナート（５４５ｍｇ）及び炭素上パラジウム１０％（７３ｍｇ）を添加した。この溶液を、室温で水素雰囲気（２バール）下で１８時間攪拌した。固体を濾別し、溶媒を真空中で残渣にまで除去した。残渣を、ジクロロメタン（Ａ）及びメタノール（Ｂ）の混合物による勾配溶離（勾配：１００％Ａから９７．５％Ａ：２．５％Ｂまで下げる）を使用する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ａｎａｌｏｇｉｘ  Ｓｕｐｅｒ  Ｆｌａｓｈ  ＳｉＯ２  ＳＦ２５−３４ｇ）によって精製して、４−（２−｛２−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステル（７６０ｍｇ）を得た。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝４７１  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝４１５（Ｍ＋２Ｈ−ｔＢｕ）＋
ｍ／ｚ＝３７１（Ｍ＋２Ｈ−ＣＯ２ｔＢｕ）＋保持時間＝３．６分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（３００  ＭＨｚ１  ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３２（ｔ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，６Ｈ）；１，３６（ｓ，９Ｈ）；３，０４（ｑ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；３，３８（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；３，５１（ｍ，２Ｈ）；３，５９（ｍ，２Ｈ）；３，７９（ｍ，２Ｈ）；４，２５  （マスクされたｍ，２Ｈ）；４，２９（ｑ，Ｊ＝７，０  Ｈｚ，４Ｈ）；６，７０  （ｔ  ブロード，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，１Ｈ）；７，７３（ｓ，２Ｈ）。
【０３６６】
（実施例２５）
８，８’−［（１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０３６７】
【化９８】
2009524636.tif 000089
８，８’−［（１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンを使用して、８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝１１０２  ＭＨ＋
保持時間＝４．４９分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３０（ｓ，６Ｈ）；１，７５（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；１，９５（ｍ，２Ｈ）；２，２８（ｍ，２Ｈ）；２，４１（ｓ，３Ｈ）；２，９７（ｍ，４Ｈ）；３，３３から３，９６（ｍ，２４Ｈ）；３，９６（ｓ，６Ｈ）；４，１２（ｍ，２Ｈ）；４，２７（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，０７から５，２４（ｍ，４Ｈ）；５，６０（ｍ，２Ｈ）；６，２１（ｍ  ブロード，１Ｈ）；６，８１（ｓ，２Ｈ）；６，９６（ｓ，２Ｈ）；７，０７（ｓ，１Ｈ）；７，５１（ｓ，２Ｈ）；７，６５（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）。
【０３６８】
１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン
【０３６９】
【化９９】
2009524636.tif 000090
１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−アミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンで出発して、１−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンの調製のための手順に従って調製できる。
【０３７０】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ｇ１）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝５９４  ＭＨ＋
保持時間＝１．９分
【０３７１】
１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−アミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０３７２】
【化１００】
2009524636.tif 000091
ＴＨＦ（５．５ｍＬ）中の１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−アジド−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（５４０ｍｇ）の溶液に、トリフェニルホスフィン（３２０ｍｇ）及び水（２２μＬ）を添加した。この溶液を室温で１８時間撹拌し、溶媒を真空中で残渣にまで除去した。この残渣を、ジクロロメタン／メタノール９５：５、次いでジクロロメタン／メタノール／ＮＨ４ＯＨ  ７５：２５：２．５で溶離する、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＦｌａｓｈ  ３０ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ）によって精製して、１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−アミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（４３０ｍｇ）を得た。
【０３７３】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ３）：ＥＳ：  ｍ／ｚ＝４１８  ＭＨ＋
保持時間＝１．３及び１．７分
【０３７４】
１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−アジド−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０３７５】
【化１０１】
2009524636.tif 000092
ジクロロメタン（４０ｍＬ）中の、２−［２−（２−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エタノール（１．６ｇ）及びトリエチルアミン（１．４５ｍＬ）の冷却した（０℃）溶液に、メタンスルホニルクロリド（６１７μＬ）を添加した。１時間後に、水を添加した。層を分離し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣（１．８３ｇ）にまで濃縮した。
【０３７６】
残渣のサンプル（１．４ｇ）、３，５−ビス−ヒドロキシメチルフェノール（５１０ｍｇ）及び炭酸カリウム（６８６ｍｇ）を、ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）中で混合し、７０℃で１５時間加熱した。この反応混合物を室温にまで冷却し、水を添加し、水溶液を酢酸エチルで３回抽出した。一緒にした有機溶液を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、メタノール（Ａ）／ジクロロメタン（Ｂ）の混合物で溶離する（勾配：２％Ａ：９８％Ｂ→１０％Ａ：９０％Ｂ）、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＰｒｅｐ  ７０ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ）によって精製して、１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−アジド−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（５４０ｍｇ）を得た。
ＣＩ（方法Ｄ）：ｍ／ｚ＝４６１  ＭＮＨ４＋
【０３７７】
２−［２−（２−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エタノールは、下記のようにして調製できる。
【０３７８】
【化１０２】
2009524636.tif 000093
ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中の２−［２−（２−｛２−［２−（２−トシルオキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エタノール（Ｌｏｉｓｅａｕ，Ｆ．Ａ．；Ｈｉｉ，Ｋ．Ｋ．；Ｈｉｌｌ，Ａ．Ｍ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００４，６９，６３９）（４．５ｇ）の溶液に、アジ化ナトリウム（０．８９ｇ）を添加した。この溶液を７０℃で１８時間攪拌し、次いで溶媒を真空中で残渣にまで除去した。ジクロロメタンを添加し、得られた沈殿を濾別した。有機層を真空中で濃縮して、２−［２−（２−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エタノール（３．１ｇ）を得た。
ＣＩ（方法Ｄ）：ｍ／ｚ＝３２５  ＭＮＨ４＋
【０３７９】
（実施例２６）
８，８’−［（１−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０３８０】
【化１０３】
2009524636.tif 000094
８，８’−［（１−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、１−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンを使用して、８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝９７０  ＭＨ＋
保持時間＝３．８９分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２７（ｓ，６Ｈ）；１，７５（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；１，９４（ｍ，２Ｈ）；２，２６（ｍ，２Ｈ）；２，４０（ｓ，３Ｈ）；２，９８（ｍ，４Ｈ）；３，３５から３，９２（ｍ，１２Ｈ）；３，９６（ｓ，６Ｈ）；４，１５（ｍ，２Ｈ）；４，２８（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，１０から５，２３（ｍ，４Ｈ）；５，６０  （ｑ  ブロード，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；６，０５  （ｔ  ブロード，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，１Ｈ）；６，８１（ｓ，２Ｈ）；６，９８（ｓ，２Ｈ）；７，０９（ｓ，１Ｈ）；７，５３（ｓ，２Ｈ）；７，６４（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）。
【０３８１】
１−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン
【０３８２】
【化１０４】
2009524636.tif 000095
１−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、１−（２−｛２−［２−アミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンで出発して、１−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンの調製のための手順に従って調製できる。
【０３８３】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ３）：ＥＳ：  ｍ／ｚ＝４６２  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝４４４（Ｍ＋Ｈ−Ｈ２Ｏ）＋
保持時間＝３．０分
１−（２−｛２−［２−アミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン
【０３８４】
【化１０５】
2009524636.tif 000096
１−（２−｛２−［２−アミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、１−（２−｛２−［２−アジド−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンで出発して、１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−アミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンの調製のための手順に従って調製できる。
【０３８５】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ３）：ＥＳ：  ｍ／ｚ＝２８６  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝２６８（Ｍ＋Ｈ−Ｈ２Ｏ）＋
保持時間＝０．８分
１−（２−｛２−［２−アジド−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン
【０３８６】
【化１０６】
2009524636.tif 000097
１−（２−｛２−［２−アジド−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エタノール（Ｒｏｙ，Ｂ．Ｃ；Ｓａｎｔｏｓ，Ｍ．；Ｍａｌｌｉｋ，Ｓ．；Ｄ．Ｃａｍｐｉｇｌｉａ，Ａ．Ｄ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００３，６８（１０），３９９９）で出発して、１−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−アジド−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンの調製のための手順に従って調製できる。
ＣＩ（方法Ｄ）ｍ／ｚ＝３２９  ＭＮＨ４＋
【０３８７】
（実施例２７）
８，８’−［（４−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０３８８】
【化１０７】
2009524636.tif 000098
８，８’−［（４−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、４−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンを使用して、８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝１１０３  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝５５２（Ｍ＋２Ｈ）２＋／２
保持時間＝３．７分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２９（ｓ，６Ｈ）；１，７５（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；１，９４（ｍ，２Ｈ）；２，２８（ｍ，２Ｈ）；２，４０（ｓ，３Ｈ）；２，９７（ｍ，４Ｈ）；３，３３から３，９５（ｍ，２４Ｈ）；３，９９（ｓ，６Ｈ）；４，１８（ｍ，２Ｈ）；４，２８（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，２７（ｍ，４Ｈ）；
５，６０（ｍ，２Ｈ）；６，１９（ｍ  ブロード，１Ｈ）；６，８２（ｓ，２Ｈ）；７，００（ｓ  ブロード，２Ｈ）；７，５５（ｓ，２Ｈ）；７，６４（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）。
【０３８９】
４−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０３９０】
【化１０８】
2009524636.tif 000099
４−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンで出発して、４−（３−［４−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−ピペラジン−１−イル］−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる。
【０３９１】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ３）：ＥＳ：  ｍ／ｚ＝５９６  ＭＨ＋
保持時間＝２．４分
４−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０３９２】
【化１０９】
2009524636.tif 000100
４−（２−｛２−［２−（２−｛２−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルで出発して、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる。
【０３９３】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ３）：ＥＳ：  ｍ／ｚ＝５１９  ＭＨ＋
保持時間＝２．２分
４−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステル
【０３９４】
【化１１０】
2009524636.tif 000101
４−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルは、４−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルで出発して、４−（２−｛２−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルの調製のための手順に従って調製できる。
【０３９５】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝６０３  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝２７１（Ｍ＋２Ｈ−ＣＯ２ｔＢｕ）＋
保持時間＝３．６分
４−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルは、下記のようにして調製できる。
【０３９６】
【化１１１】
2009524636.tif 000102
ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中のケリダミン酸ジエチルエステル（１．０３ｇ）の溶液に、メタンスルホン酸２−［２−（２−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エチルエステル（１．８２ｇ）及び炭酸カリウム（８９３ｍｇ）を添加した。得られた混合物を７０℃で１５時間加熱し、次いで、室温にまで冷却した。水を添加し、水溶液を酢酸エチルで３回抽出した。一緒にした有機溶液を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、メタノール（Ａ）／ジクロロメタン（Ｂ）の混合物で溶離する（勾配：３％Ａ：９７％Ｂ→５％Ａ：９５％Ｂ）、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＰｒｅｐ  ７０ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ）によって精製して、４−｛２−［２−（２−｛２−［２−（２−アジド−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステル（２．１９ｇ）を得た。
【０３９７】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ３）：ＥＳ：  ｍ／ｚ＝５２９  ＭＨ＋
保持時間＝３．４分
【０３９８】
（実施例２８）
８，８’−［（１−（２−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０３９９】
【化１１２】
2009524636.tif 000103
８，８’−［（１−（２−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−エトキシ）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、１−（２−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンを使用して、８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  Ｉ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝８７２  ＭＨ＋＋Ｈ２Ｏ  
ｍ／ｚ＝８５４  ＭＨ＋
保持時間＝３．４０分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３１（ｓ，６Ｈ）；１，７５（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；２，３９（ｓ，３Ｈ）；２，４５（ｓ，３Ｈ）；２，６２（ｓ，２Ｈ）；２，９２（ｔ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；２，９７（ｍ，４Ｈ）；３，８９（ｍ，２Ｈ）；３，９６（ｓ，６Ｈ）；４，０６（ｔ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；４，２６（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，１２（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，１９（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，６０  （ｑ  ブロード，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；６，８２（ｓ，２Ｈ）；６，９５（ｓ  ブロード，２Ｈ）；７，０６（ｓ  ブロード，１Ｈ）；７，５２（ｓ，２Ｈ）；７，６４（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）。
【０４００】
１−（２−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０４０１】
【化１１３】
2009524636.tif 000104
ホルムアルデヒド（２２８μＬ）中の１−（２−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（２８０ｍｇ）の冷却した（５℃）懸濁液に、ギ酸（３１９μＬ）を添加した。得られた混合物を、１００℃で１時間１５分間加熱し、次いで、室温にまで冷却した。水及び氷を添加し、続いて水酸化ナトリウムの水溶液をｐＨ＝１２まで添加した。得られた水溶液を酢酸エチルで３回抽出し、一緒にした有機溶液を、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で残渣にまで濃縮した。この残渣を、メタノール（Ａ）／ジクロロメタン（Ｂ）の混合物で溶離する（勾配：２％Ａ：９８％Ｂ→５％Ａ：９５％Ｂ）、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＦｌａｓｈ  ２５ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ）によって精製して、１−（２−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（２１０ｍｇ）を得た。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ３）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝３４６  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝２１２（Ｍ＋２Ｈ−Ｃ５Ｈ１１Ｓ２）＋
ｍ／ｚ＝１３５  Ｃ５Ｈ１１Ｓ２＋
保持時間＝２．１分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２７（ｓ，６Ｈ）；２，３９（ｓ，３Ｈ）；２，４０（ｓ，３Ｈ）；２，６０（ｓ，２Ｈ）；２，８５（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；４，０２（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４４（ｄ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，４Ｈ）；５，１０（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；６，７２（ｓ  ブロード，２Ｈ）；６，８２（ｓ  ブロード，１Ｈ）。
【０４０２】
１−（２−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンは、下記のようにして調製できる。
【０４０３】
【化１１４】
2009524636.tif 000105
テトラヒドロフラン（４．５ｍＬ）中の１−（２−アミノ−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン塩酸塩（９００ｍｇ）の懸濁液に、トリエチルアミン（１．０７ｍＬ）を添加した。１５分間撹拌した後、２−（メチルジチオ）イソブチルアルデヒド（５３０μＬ）及びチタンイソプロポキシド（１．４２ｍｇ）を添加し、得られた混合物を室温で２時間攪拌した。エタノール（９ｍＬ）及びシアノホウ水素化ナトリウム（２４２ｍｇ）を添加し、この新しい混合物を室温で１８時間攪拌した。固体を濾別し、濾液を真空中で残渣にまで濃縮した。次いで、この残渣を酢酸エチル中に希釈し、得られた固体を濾別した。次いで、有機溶液を水及び飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、マグネシウムで乾燥し、真空中で新しい残渣にまで濃縮し、この残渣を、メタノール（Ａ）／ジクロロメタン（Ｂ）の混合物で溶離する（勾配：４％Ａ：９６％Ｂ→１０％Ａ：９０％Ｂ）、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋ  ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＦｌａｓｈ  ３０ｇカラム、Ｓｉ６０  １５−４０μｍ）によって精製して、１−（２−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼン（２９０ｍｇ）を得た。
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２７（ｓ，６Ｈ）；１，８２（ｍ  ブロード，１Ｈ）；２，３９（ｓ，３Ｈ）；２，６７（ｓ，２Ｈ）；２，９１（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；４，００（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；４，４３（ｄ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，４Ｈ）；５，１０（ｔ，Ｊ＝６，０  Ｈｚ，２Ｈ）；６，７３（ｓ  ブロード，２Ｈ）；６，８３（ｓ  ブロード，１Ｈ）．
【０４０４】
（実施例２９）
８，８’−［（４−（３−［メチル−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−アミノ］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０４０５】
【化１１５】
2009524636.tif 000106
８，８’−［（４−（３−［メチル−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−アミノ］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、４−（３−［メチル−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−アミノ］−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンを使用して、８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３２（ｓ，６Ｈ）；１，７５（ｄ，Ｊ＝６，５Ｈｚ，６Ｈ）；１，９４（ｍ，４Ｈ）；２，２０から４，３０（ｍ，１８Ｈ）；４，００（ｓ，６Ｈ）；４，２７（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，２１から５，６８（ｍ，６Ｈ）；６，８０から７，７０（ｍ，８Ｈ）。
【０４０６】
４−（３−［メチル−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−アミノ］−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０４０７】
【化１１６】
2009524636.tif 000107
４−（３−［メチル−（４−メチル−４−メチルジスルファニル−ペンタノイル）−アミノ］−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンを使用して、４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる。
【０４０８】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ３）：ＥＳ：  ｍ／ｚ＝３８７  ＭＨ＋
保持時間＝２．５分
４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０４０９】
【化１１７】
2009524636.tif 000108
４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピル）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピル）−ピリジン−２，６−ビス−ジカルボン酸ジエチルエステルを使用して、４−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロポキシ）−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンの調製のための手順に従って調製できる。
【０４１０】
ＣＩ（方法Ｄ）：ｍ／ｚ＝３１１  ＭＨ＋
４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピル）−ピリジン−２，６−ビス−ジカルボン酸ジエチルエステル
【０４１１】
【化１１８】
2009524636.tif 000109
４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロピル）−ピリジン−２，６−ビス−ジカルボン酸ジエチルエステルは、４−［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロプ−１−イニル］−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルで出発して、５−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メチル−アミノ−プロピル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステルの調製のための手順に従って調製できる。
【０４１２】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ｇ２）：ＥＳ：  ｍ／ｚ＝３９５  ＭＨ＋
ｍ／ｚ＝３３９（Ｍ＋２Ｈ−ｔＢｕ）＋
保持時間＝７．５分
４−［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロプ−１−イニル］−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステル
【０４１３】
【化１１９】
2009524636.tif 000110
４−［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−プロプ−１−イニル］−ピリジン−２，６−ジカルボン酸ジエチルエステルは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メチル−プロパルギルアミンで出発して、５−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メチル−アミノ−プロピン−１−イル）−ベンゼン−１，３−ジカルボン酸ジエチルエステルの調製のための手順に従って調製できる。
【０４１４】
ＣＩ（方法Ｄ）：ｍ／ｚ＝３９１  ＭＨ＋
【０４１５】
（実施例３０）
８，８’−［（４−（３−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］
【０４１６】
【化１２０】
2009524636.tif 000111
８，８’−［（４−（３−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−プロピル）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、４−｛３−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−プロピル｝−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンを使用して、８，８’−［（４−（３−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−プロポキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，２８（ｓ，６Ｈ）；１，６５  （部分的にマスクされたｍ  ２Ｈ）；１，７５（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；２，２９（ｓ，３Ｈ）；２，３８（ｓ，３Ｈ）；２，４６（ｍ，４Ｈ）；２，６５（ｍ，２Ｈ）；２，９７（ｍ，４Ｈ）；３，８９（ｍ，２Ｈ）；４，００（ｓ，６Ｈ）；４，２７（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，２９（ｓ，４Ｈ）；５，６０  （ｑ  ブロード，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；６，８６（ｓ，２Ｈ）；７，３０（ｓ，２Ｈ）；７，５５（ｓ，２Ｈ）；７，６４（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）。
【０４１７】
４−｛３−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−プロピル｝−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジン
【０４１８】
【化１２１】
2009524636.tif 000112
Ｐ−３４４０９−０３４−３
４−｛３−［メチル−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ］−プロピル｝−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンは、４−｛３−［メチル−アミノ］−プロピル｝−２，６−ビス−（ヒドロキシメチル）−ピリジンを使用して、１−（２−（２−メチル−２−メチルジスルファニル−プロピル）−アミノ−エトキシ）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンの調製のための手順に従って調製できる。
【０４１９】
ＬＣ／ＭＳ（方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  ＩＩ）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝３４５  ＭＨ＋
保持時間＝１．１５分
【０４２０】
（実施例３１）
８，８’−［（１−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド）−ベンゼン−３，５−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、下記のようにして調製できる。
【０４２１】
【化１２２】
2009524636.tif 000113
８，８’−［（１−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド）−ベンゼン−３，５−ジメチル］−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］は、（１−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド）−３，５−ビス−（ヒドロキシメチル）−ベンゼンで出発して、    ８，８’−［（４−（２−（４−メチル−４−メチルジスルファニル）−ペンタンアミド−エトキシ）−ピリジン−２，６−ジメチル）−ジオキシ］−ビス［（Ｓ）−２−エタ−（Ｅ）−イリデン−７−ジメトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］の調製のための手順に従って調製できる。
ＬＣ／ＭＳ  （方法Ａ１、Ｐｌａｔｆｏｒｍ  Ｉ）：ＥＳ：ｍ／ｚ＝８３８  ＭＨ＋
保持時間＝４．１１分
１Ｈ  Ｎ．Ｍ．Ｒ．（５００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ１，δ  ｉｎ  ｐｐｍ）：δ＝１，３３（ｓ，６Ｈ）；１，７６（ｄ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，６Ｈ）；２，０３（ｍ，２Ｈ）；２，４３（ｓ，３Ｈ）；２，４６（ｍ，２Ｈ）；２，９７（ｍ，４Ｈ）；３，８９（ｍ，２Ｈ）；３，９５（ｓ，６Ｈ）；４，２７（ｓ  ブロード，４Ｈ）；５，１４（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，１９（ｄ，Ｊ＝１２，５  Ｈｚ，２Ｈ）；５，６０（ｑ，Ｊ＝６，５  Ｈｚ，２Ｈ）；６，８１（ｓ，２Ｈ）；７，２０から７，６０（ｍ，６Ｈ）；７，６４（ｄ，Ｊ＝４，５  Ｈｚ，２Ｈ）
実施例１９−３１の化合物の対応するメルカプト化合物は、実施例１８に記載した手順の応用によって調製することができる。
【０４２２】
（実施例Ａ）
コンジュゲート調製のための一般的手順
ヒトリンパ腫細胞の表面上に優先的に発現するＣＤ１９抗原に結合する抗Ｂ４抗体が、トマイマイシン誘導体のコンジュゲーションのために選択される。
【０４２３】
第一段階に於いて、抗体を、変性剤であるＮ−スルホスクシンイミジル  ５−ニトロ−２−ピリジルジチオブタノアート（ＳＳＮＰＢ）と反応させてニトロピリジルジチオ基を導入する。０．０５Ｍリン酸カリウム、０．０５Ｍ塩化ナトリウム及び２ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有する水性緩衝液、ｐＨ６．５（６５．６ｍＬ）中の、８ｍｇ／ｍＬの濃度のｈｕＣ２４２抗体の溶液を、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）中のＳＳＮＰＢの溶液の８倍モル過剰で処理する。この反応混合物を、室温で９０分間撹拌し、次いで、０．０５Ｍリン酸カリウム、０．０５Ｍ塩化ナトリウム及び２ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する水性緩衝液、ｐＨ７．５の中に予め平衡化させた、セファデックスＧ２５ゲル濾過カラム（５０ｍｍ×３５．５ｍｍ、カラム）に載せる。変性抗体含有フラクションを集め、及びプールして生成物を得る。この変性抗体の小さいアリコートを、ジチオトレイトールで処理してニトロ−ピリジルジスルフィドを開裂し、及び放出されたニトロ−ピリジン−２−チオンを、分光光度法的に分析する（ε３２３ｎｍ＝４，２９９Ｍ−１ｃｍ−１、化合物についてε２８０ｎｍ＝５６５Ｍ−１ｃｍ−１及び抗体についてε２８０ｎｍ＝２１７，５６０Ｍ−１ｃｍ−１）。平均で４から６個のニトロ−ピリジルジスルフィド分子が、典型的に抗体の１分子当たりに結合している。
【０４２４】
変性抗体を、上記の緩衝液中でｐＨ７．５で２．５ｍｇ／ｍＬにまで希釈し、次いで、ＤＭＡ中のトマイマイシン誘導体の溶液で処理して、緩衝液中のＤＭＡの最終濃度が２０％であるようにする。このコンジュゲーション混合物を、室温で１６時間攪拌する。この反応混合物を、セファクリルＳ３００ゲル濾過カラム（ｐＨ６．５でリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）緩衝液中で予め平衡化させた５０ｍｍ×４２ｃｍのカラム）に通過させることによって精製する。モノマー性抗体−トマイマイシン誘導体コンジュゲートを含有するフラクションをプールし、及びＰＢＳ緩衝液の中に透析する。最終コンジュゲートを、それぞれのトマイマイシン誘導体について別々に決定される消衰係数を使用して分光光度法的に分析する。
【０４２５】
本発明の化合物のＳＰＤＢ−ＰＢＤ及びＳＭＣＣ−ＰＢＤコンジュゲート
ｈｕＢ４−ＳＰＤＢ−実施例１６の化合物
（実施例Ａ１）
ヒトリンパ腫細胞の表面上で優先的に発現するＣＤ１９抗原に結合する抗Ｂ４抗体が、トマイマイシン誘導体のコンジュゲーションのために選択される。
【０４２６】
抗体を、最初に、４−（２−ピリジルジチオ）ブタン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＳＰＤＢ）で変性して、ピリジルジチオ基を導入した。ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）（５０μＬ）中のＳＰＤＢ  ４．５倍モル過剰（０．２５μモル、８１．１μｇ）を、５０ｍＭリン酸カリウム、５０ｍＭ塩化ナトリウム及び２ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有する水性緩衝液、ｐＨ６．５（０．９５ｍＬ）中の、ｈｕＢ４（８ｍｇ、０．０５５μモル）の溶液に添加した。最終タンパク質濃度は、緩衝液中５％ＤＭＡで８ｍｇ／ｍＬであった。この変性を、室温で９０分間回転させ、次いで、５０ｍＭリン酸カリウム、５０ｍＭ塩化ナトリウム及び２ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する水性緩衝液、ｐＨ７．５中で平衡化させたセファデックスＧ２５ゲル濾過カラムで精製した。この変性抗体の小さいアリコートを、ジチオトレイトール（ＤＴＴ）で処理してピリジルジスルフィド基を開裂した。変性された抗体及び放出されたピリジンチオールを、分光光度法的に分析した（放出されたピリジンチオールについてε３４３＝８，０８０Ｍ−１ｃｍ−１、変性されたピリジルジチオ基についてε２８０＝５１００Ｍ−１ｃｍ−１及び抗体についてε２８０＝２２２，９６０Ｍ−１ｃｍ−１）。抗体の１分子当たり、平均で３．３６個のピリジルジスルフィド分子が結合していた。
【０４２７】
変性抗体（２．２９ｍｇ、０．０１６μモル）を、上記のｐＨ７．５の緩衝液（７３２．８μＬ）及びＤＭＡ（９．１６μＬ、１０％ｖ／ｖ）中に希釈し、次いで、ＤＭＡ（９１．６μＬ、１０％ｖ／ｖ）中の８，８’−［５−（Ｎ−４−メルカプト−４，４−ジメチルブタノイル）アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（実施例１６の化合物）（０．１５７μモル、０．１２ｍｇ）の溶液で処理した。最終タンパク質濃度は、緩衝液中２０％ＤＭＡで２．５ｍｇ／ｍＬであった。このコンジュゲーションを、室温で一晩回転させ、次いで、沈降（１３，２００ＲＰＭ、４分間）によって清澄にした。次いで、上澄み液を、ｐＨ６．５でリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）緩衝液中で平衡化させたセファデックスＧ２５ゲル濾過カラムで精製した。精製したコンジュゲートを、４種の緩衝液交換物を有するＰＢＳ  ｐＨ６．５緩衝液（約１：６５０希釈）の中に透析した。このコンジュゲートを、０．２２μｍ注射器フィルターに通して清澄にし、及び分光光度法的に分析した（ε２８０＝７７４３Ｍ−１ｃｍ−１、ＰＢＤについてε３１８＝９１３７Ｍ−１ｃｍ−１、及び抗体についてε２８０＝２２２，９６０Ｍ−１ｃｍ−１）。抗体の１分子当たり、平均で１．７６個のＰＢＤ分子（実施例１６の化合物）が結合していた。
【０４２８】
ｈｕＢ４−ＳＭＣＣ−実施例１６の化合物
（実施例Ａ２）
ヒトリンパ腫細胞の表面上で優先的に発現するＣＤ１９抗原に結合する抗Ｂ４抗体が、トマイマイシン誘導体のコンジュゲーションのために選択される。
【０４２９】
第一段階で、抗体を、変性剤スクシンイミジル  ４−［Ｎ−マレイミドメチル］シクロヘキサン−１−カルボキシラート（ＳＭＣＣ）と反応させてマレイミド基を導入する。０．０５Ｍリン酸カリウム、０．０５Ｍ塩化ナトリウム及び２ｍＭ  エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有する水性緩衝液、ｐＨ６．７（１ｍＬ）中の、６ｍｇ／ｍＬの濃度のｈｕＢ４抗体の溶液を、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）中のＳＭＣＣの溶液の６．５倍モル過剰で処理する。この反応混合物を室温で９０分間攪拌し、次いで、０．１０Ｍ  Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）を含有する水性緩衝液、ｐＨ８．０の中に予め平衡化させたセファデックスＧ２５ゲル濾過カラム（ＮＡＰ１０）に載せる。変性抗体含有フラクションを集め、及びプールして生成物を得る。この変性抗体の小さいアリコートを、β−メルカプトエタノールで１０分間処理し、続いて５，５’−ジチオビス−２−ニトロ安息香酸（ＤＴＮＢ）を添加し、残留するチオールを分析する（５−チオ−２−ニトロ安息香酸（ＴＮＢ）についてε４１２ｎｍ＝１４，１５０Ｍ−１ｃｍ−１、及び抗体についてε２８０ｎｍ＝２２２，９６０Ｍ−１ｃｍ−１）。（抗体無しの対照と比較した）抗体上でマレイミドとの反応で消費されたチオールの量は、抗体に結合したマレイミドのモル数に等しい（減法式エルマンアッセイ）。抗体当たり、約３．２個の反応性マレイミド基が結合した。
【０４３０】
変性抗体（３ｍｇ、０．０２１μモル）を、ｐＨ８．０のＨＥＰＥＳ緩衝液中で３．０ｍｇ／ｍＬにまで希釈し、次いで、ＤＭＡ中の実施例１６の化合物の溶液（５ｍＭ）で処理して、緩衝液中のＤＭＡの最終濃度が１５％であるようにする。８，８’−［５−（Ｎ−４−メルカプト−４，４−ジメチルブタノイル）アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（実施例１６の化合物）３モル当量を、リンカー（抗体当たり９．６当量、０．２０２μモル、１４９μｇ）当たり添加した。このコンジュゲーション混合物を、室温で２０時間攪拌する。この反応混合物を、０．０５リン酸カリウム（ＫＰｉ）、０．０５Ｍ  ＮａＣｌ、０．００２Ｍ  ＥＤＴＡ緩衝液中でｐＨ６．７で予め平衡化させたＧ２５カラム（ＮＡＰ５）に通過させることによって精製する。ｈｕＢ４−実施例１６の化合物コンジュゲートを含有するフラクションをプールし、及び３種の交換物についてＫＰｉ緩衝液の中に透析する（２４時間）。最終コンジュゲート（２．２ｍｇ、２．３ｍｇ／ｍＬ）を、実施例１６の化合物（ε３１８ｎｍ＝９，１３７Ｍ−１ｃｍ−１、ε２８０ｎｍ＝７，７４３Ｍ−１ｃｍ−１）及びＢ４抗体（ε２８０ｎｍ＝２２２，９６０Ｍ−１ｃｍ−１）について決定される消衰係数を使用して分光光度法的に分析する。抗体の１分子当たり、平均で２．８個のＰＢＤ分子（実施例１６の化合物）が結合していた。
【０４３１】
ｈｕＢ４−ＳＰＤＢ−実施例１７の化合物
（実施例Ａ３）
ヒトリンパ腫細胞の表面上で優先的に発現するＣＤ１９抗原に結合する抗Ｂ４抗体が、トマイマイシン誘導体のコンジュゲーションのために選択される。
【０４３２】
抗体を、最初に、４−（２−ピリジルジチオ）ブタン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＳＰＤＢ）で変性してピリジルジチオ基を導入した。ＤＭＡ（２５μＬ）中のＳＰＤＢ  ４．５倍モル過剰（０．１２４μモル、４０．６μｇ）を、５０ｍＭリン酸カリウム、５０ｍＭ塩化ナトリウム及び２ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する水性緩衝液、ｐＨ６．５（０．４７５ｍＬ）中のｈｕＢ４（４ｍｇ、０．０２８μモル）の溶液に添加した。最終タンパク質濃度は、緩衝液中５％ＤＭＡで８ｍｇ／ｍＬであった。この変性を、室温で９０分間回転させ、次いで、５０ｍＭリン酸カリウム、５０ｍＭ塩化ナトリウム及び２ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する水性緩衝液、ｐＨ７．５中で平衡化させたセファデックスＧ２５ゲル濾過カラムで精製した。この変性抗体の小さいアリコートを、ＤＴＴで処理してピリジルジスルフィド基を開裂した。変性された抗体及び放出されたピリジンチオールを分光光度法的に分析した（放出されたピリジンチオールについてε３４３＝８，０８０Ｍ−１ｃｍ−１、変性されたピリジルジチオ基についてε２８０＝５１００Ｍ−１ｃｍ−１及び抗体についてε２８０ｎｍ＝２２２，９６０Ｍ−１ｃｍ−１）。抗体の１分子当たり、平均で３．３１個のピリジルジスルフィド分子が結合していた。
【０４３３】
変性抗体（３．０６ｍｇ、０．０２１μモル）を、上記のｐＨ７．５の緩衝液（０．９７６ｍＬ）及びＤＭＡ（１２２μＬ、１０％ｖ／ｖ）中に希釈し、次いで、ＤＭＡ（１２２μＬ、１０％ｖ／ｖ）中の８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メルカプト−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ））−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（実施例１７の化合物）（０．２０９μモル、０．１５４ｍｇ）の溶液で処理した。最終タンパク質濃度は、緩衝液中２０％ＤＭＡで２．５ｍｇ／ｍＬであった。このコンジュゲーションを、室温で一晩回転させ、次いで、沈降（１３，２００ＲＰＭ、４分間）によって清澄にした。次いで、上澄み液を、ｐＨ６．５でＰＢＳ緩衝液中で平衡化させた、セファデックスＧ２５ゲル濾過カラムで精製した。精製したコンジュゲートを、３種の緩衝液交換物を有するＰＢＳ  ｐＨ６．５緩衝液（約１：１２００希釈）の中に透析した。このコンジュゲートを、０．２２μｍ注射器フィルターに通して清澄にし、及び分光光度法的に分析した（ε２８０＝１０７３６Ｍ−１ｃｍ−１、ＰＢＤについてε３１８＝１２０５３Ｍ−１ｃｍ−１、及び抗体についてε２８０＝２２２，９６０Ｍ−１ｃｍ−１）。抗体の１分子当たり、平均で３．０５個のＰＢＤ分子（実施例１７の化合物）が結合していた。
【０４３４】
ｈｕＢ４−ＳＭＣＣ−実施例１７の化合物
（実施例Ａ４）
ヒトリンパ腫細胞の表面上で優先的に発現するＣＤ１９抗原に結合する抗Ｂ４抗体が、トマイマイシン誘導体のコンジュゲーションのために選択される。
【０４３５】
第一段階で、抗体を、変性剤スクシンイミジル４−［Ｎ−マレイミドメチル］シクロヘキサン−１−カルボキシラート（ＳＭＣＣ）と反応させてマレイミド基を導入する。０．０５Ｍリン酸カリウム、０．０５Ｍ塩化ナトリウム及び２ｍＭ  エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有する水性緩衝液、ｐＨ６．７（１ｍＬ）中の６ｍｇ／ｍＬの濃度のｈｕＢ４抗体の溶液を、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）中のＳＭＣＣの溶液の７倍モル過剰で処理する。この反応混合物を室温で９０分間攪拌し、次いで、０．１０Ｍ  Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）を含有する水性緩衝液、ｐＨ８．０の中に予め平衡化させたセファデックスＧ２５ゲル濾過カラム（ＮＡＰ１０）に載せる。変性抗体含有フラクションを集めプールして、生成物を得る。この変性抗体の小さいアリコートを、β−メルカプトエタノールで１０分間処理し、続いて５，５’−ジチオビス−２−ニトロ安息香酸（ＤＴＮＢ）を添加し残留するチオールを分析する（５−チオ−２−ニトロ安息香酸（ＴＮＢ）についてε４１２ｎｍ＝１４，１５０Ｍ−１ｃｍ−１、及び抗体についてε２８０ｎｍ＝２２２，９６０Ｍ−１ｃｍ−１）。（抗体無しの対照と比較した）抗体上でマレイミドとの反応で消費されたチオールの量は、抗体に結合したマレイミドのモル数に等しい（減法式エルマンアッセイ）。抗体当たり、約３．７個の反応性マレイミド基が結合した。
【０４３６】
変性抗体（４．４ｍｇ、０．０３μモル）を、ｐＨ８．０のＨＥＰＥＳ緩衝液中で８．７ｍｇ／ｍＬにまで希釈し、次いで、ＤＭＡ中の実施例１７の化合物の溶液（５．４ｍＭ）で処理して、緩衝液中のＤＭＡの最終濃度が２０％であるようにする。８，８’−［５−（Ｎ−メチル−Ｎ−（２−メルカプト−２，２−ジメチルエチル）アミノ−１，３−ベンゼンジイル（メチレンオキシ））−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（実施例１７の化合物）２モル当量を、リンカー（抗体当たり７．４当量、０．２２２μモル、１６４μｇ）当たり添加した。このコンジュゲーション混合物を、室温で２０時間攪拌する。この反応混合物を、０．０５リン酸カリウム（ＫＰｉ）、０．０５Ｍ  ＮａＣｌ、０．００２Ｍ  ＥＤＴＡ緩衝液中でｐＨ６．７で予め平衡化させたＧ２５カラム（ＮＡＰ５）に通過させることによって精製する。ｈｕＢ４−実施例１７の化合物コンジュゲートを含有するフラクションをプールし、及び３種の交換物についてＫＰｉ緩衝液の中に透析する（２４時間）。最終コンジュゲート（２．２５ｍｇ、２．２５ｍｇ／ｍＬ）を、実施例１７の化合物（ε３１８ｎｍ＝１２，０５３Ｍ−１ｃｍ−１、ε２８０ｎｍ＝１０，７３６Ｍ−１ｃｍ−１）及びＢ４抗体（ε２８０ｎｍ＝２２２，９６０Ｍ−１ｃｍ−１）について決定される消衰係数を使用して分光光度法的に分析する。抗体の１分子当たり、平均で２．８個のＰＢＤ分子（実施例１７の化合物）が結合していた。
【０４３７】
ｈｕＭｙ９−６−ＳＰＤＢ−実施例１６の化合物
（実施例Ａ５）
抗体を、最初に、４−（２−ピリジルジチオ）ブタン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＳＰＤＢ）で変性してピリジルジチオ基を導入した。ＤＭＡ（５０μＬ）中のＳＰＤＢ  ４．５倍モル過剰（０．２４６μモル、８０．１μｇ）を、５０ｍＭリン酸カリウム、５０ｍＭ塩化ナトリウム及び２ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する水性緩衝液、ｐＨ６．５（０．９５０ｍＬ）中のｈｕＭｙ９−６（８ｍｇ、０．０５５μモル）の溶液に添加した。最終タンパク質濃度は、緩衝液中５％ＤＭＡで８ｍｇ／ｍＬであった。この変性を、室温で９０分間回転させ、次いで、５０ｍＭリン酸カリウム、５０ｍＭ塩化ナトリウム及び２ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する水性緩衝液、ｐＨ８．５中で平衡化させたセファデックスＧ２５ゲル濾過カラムで精製した。この変性抗体の小さいアリコートをＤＴＴで処理してピリジルジスルフィド基を開裂した。変性された抗体及び放出されたピリジンチオールを分光光度法的に分析した（放出されたピリジンチオールについてε３４３＝８，０８０Ｍ−１ｃｍ−１、変性されたピリジルジチオ基についてε２８０＝５１００Ｍ−１ｃｍ−１及び抗体についてε２８０＝２０６，４６０Ｍ−１ｃｍ−１）。抗体の１分子当たり、平均で３．３２個のピリジルジスルフィド分子が結合していた。
【０４３８】
変性抗体（３．０５ｍｇ、０．０２０８μモル）を、上記のｐＨ８．５の緩衝液（９７６μＬ）及びＤＭＡ（１２２μＬ、１０％ｖ／ｖ）中に希釈し、次いで、ＤＭＡ（１２２μＬ、１０％ｖ／ｖ）中の８，８’−［５−（Ｎ−４−メルカプト−４，４−ジメチルブタノイル）アミノ−１，３−ベンゼンジイルビス（メチレンオキシ）］−ビス［７−メトキシ−２−メチレン−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン］（実施例１６の化合物）（０．２０７μモル、０．１５８ｍｇ）の溶液で処理した。最終タンパク質濃度は、緩衝液中２０％ＤＭＡで２．５ｍｇ／ｍＬであった。このコンジュゲーションを、室温で一晩回転させ、次いで、沈降（１３，２００ＲＰＭ、４分間）によって清澄にした。次いで、上澄み液を、ｐＨ６．５でＰＢＳ緩衝液中で平衡化させた、セファデックスＧ２５ゲル濾過カラムで精製した。精製したコンジュゲートを、３種の緩衝液交換物を有するＰＢＳ  ｐＨ６．５緩衝液（約１：６００希釈）の中に透析した。このコンジュゲートを、０．２２μｍ注射器フィルターに通して清澄にし、及び分光光度法的に分析した（ε２８０＝７７４３Ｍ−１ｃｍ−１、ＰＢＤについてε３１８＝９１３７Ｍ−１ｃｍ−１、及び抗体についてε２８０＝２０６，４６０Ｍ−１ｃｍ−１）。抗体の１分子当たり、平均で２．５８個のＰＢＤ分子（実施例１６の化合物）が結合していた。
【０４３９】
（実施例Ｂ）
結合アッセイ
抗原発現Ｒａｍｏｓ細胞上の抗Ｂ４抗体とそのトマイマイシンコンジュゲートとの相対結合アフィニティを、蛍光ベースアッセイを使用して決定する。抗体−トマイマイシンコンジュゲート及び裸の抗体を、１  ａ  １０−７Ｍの出発濃度で、９６ウエル丸底プレートに添加し、及びそれぞれの濃度で複製が存在するようにして３回逐次希釈を使用して滴定する。Ｒａｍｏｓ細胞は、ウエル当たり５０，０００個の細胞で、抗体又はコンジュゲートの種々の濃度を含有するそれぞれウエル、及び対照ウエルに添加する。プレートを、氷上で３時間温置する。温置時間の後、プレート内の細胞を洗浄し、及び抗Ｂ４のようなヒト化ＩｇＧに結合している蛍光標識二次抗体を添加し、及びプレートを氷上で１時間温置する。温置時間の後、再びプレートを洗浄し、及び細胞を１％ホルムアルデヒド／ＰＢＳ溶液で固定する。プレートのそれぞれのウエル内の蛍光を、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ蛍光アナライザーを使用して読み取る。データを、抗体又はコンジュゲートの最高濃度で得られる最大蛍光のパーセントとしてプロットする。
【０４４０】
（実施例Ｃ）
トマイマイシン誘導体又はトマイマイシン誘導体コンジュゲートのインビトロ効能及び特異性。使用すべき一般的プロトコル
遊離トマイマイシン誘導体又はトマイマイシン誘導体コンジュゲートのサンプルを、９６ウエル平底組織培養プレートに添加し、及び１×１０−１２Ｍから３×１０−７Ｍの範囲内の逐次希釈を使用して滴定する。抗原ポジティブ腫瘍細胞又は抗原ネガティブ腫瘍細胞を、それぞれの細胞系のためにそれぞれの薬物濃度についての三重サンプルが存在するような方法で、ウエルに添加する。このプレートを５％ＣＯ２の雰囲気内で３７℃で４日間温置する。
【０４４１】
温置期間の終わりに、テトラゾリウム試薬ＷＳＴ−８（２−（２−メトキシ−ニトロフェニル）−３−（４−ニトロフェニル）−５−（２，４−ジスルホフェニル）−２−テトラゾリウム一ナトリウム塩）の２０μＬを、それぞれのウエルに添加し、及びこのプレートを２時間インキュベーターに戻す。次いで、プレートのそれぞれのウエル内の吸光度を、モレキュラー・デバイスズ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）プレートリーダーを使用して４５０ｎｍで測定する。トマイマイシン誘導体又はコンジュゲートのそれぞれの濃度で細胞の生存分率をプロットする。
【０４４２】
【表１】
2009524636.tif 000114
ＭＯＬＴ−４及びＢＪＡＢ又はＨＬ６０／ＧＣ及びＲａｍｏｓ細胞系に対する本発明の化合物対コンジュゲートの特異細胞毒性を試験した。結果を図１ａ−ｃ、２ａ−ｃ及び３ａ−ｂに示す。
【０４４３】
図１ａは、抗原ポジティブＢＪＡＢ細胞及び抗原ネガティブＭＯＬＴ−４細胞に関するｈｕＢ４−ＳＰＤＢ−実施例１６の化合物のインビトロ効能を表す。
【０４４４】
図１ｂは、抗原ポジティブＢＪＡＢ細胞及び抗原ネガティブＭＯＬＴ−４細胞に関するｈｕＢ４−ＳＭＣＣ−実施例１６の化合物のインビトロ効能を表す。
【０４４５】
図１ｃは、ＢＪＡＢ及びＭＯＬＴ−４細胞に関する実施例１６の遊離化合物のインビトロ効能を表す。
【０４４６】
図２ａは、抗原ポジティブＢＪＡＢ細胞及び抗原ネガティブＭＯＬＴ−４細胞に関するｈｕＢ４−ＳＰＤＢ−実施例１７の化合物のインビトロ効能を表す。
【０４４７】
図２ｂは、抗原ポジティブＢＪＡＢ細胞及び抗原ネガティブＭＯＬＴ−４細胞に関するｈｕＢ４−ＳＭＣＣ−実施例１７の化合物のインビトロ効能を表す。
【０４４８】
図２ｃは、ＢＪＡＢ及びＭＯＬＴ−４細胞に関する実施例１７の遊離化合物のインビトロ効能を表す。
【０４４９】
図３ａは、抗原ポジティブＨＬ６０／ＧＣ細胞及び抗原ネガティブＲａｍｏｓ細胞に関するｈｕＭｙ９−６−ＳＰＤＢ−実施例１６の化合物のインビトロ効能を表す。
【０４５０】
図３ｂは、ＨＬ６０／ＧＣ及びＲａｍｏｓ細胞に関する実施例１６の遊離化合物のインビトロ効能を表す。
【０４５１】
（実施例Ｄ）
トマイマイシン誘導体又はトマイマイシン誘導体コンジュゲートのインビボ効能
この試験は、ＷＯ２００４／１０３２７２に記載されているプロトコルの適用及び／又は適合によって、抗体としてｈｕＢ４及び適切な抗原ポジティブ細胞系、例えば、Ｒａｍｏｓ及びＲａｊｉｉ  Ｂｕｒｋｉｔｔ’ｓ  リンパ腫細胞系で実施することができる。
【図面の簡単な説明】
【０４５２】
【図１ａ】抗原ポジティブＢＪＡＢ細胞及び抗原ネガティブＭＯＬＴ−４細胞に関する、ｈｕＢ４−ＳＰＤＢ−実施例１６の化合物のインビトロ効能を表す。
【図１ｂ】抗原ポジティブＢＪＡＢ細胞及び抗原ネガティブＭＯＬＴ−４細胞に関する、ｈｕＢ４−ＳＭＣＣ−実施例１６の化合物のインビトロ効能を表す。
【図１ｃ】ＢＪＡＢ及びＭＯＬＴ−４細胞に関する、実施例１６の遊離化合物のインビトロ効能を表す。
【図２ａ】抗原ポジティブＢＪＡＢ細胞及び抗原ネガティブＭＯＬＴ−４細胞に関する、ｈｕＢ４−ＳＰＤＢ−実施例１７の化合物のインビトロ効能を表す。
【図２ｂ】抗原ポジティブＢＪＡＢ細胞及び抗原ネガティブＭＯＬＴ−４細胞に関する、ｈｕＢ４−ＳＭＣＣ−実施例１７の化合物のインビトロ効能を表す。
【図２ｃ】ＢＪＡＢ及びＭＯＬＴ−４細胞に関する、実施例１７の遊離化合物のインビトロ効能を表す。
【図３ａ】抗原ポジティブＨＬ６０／ＧＣ細胞及び抗原ネガティブＲａｍｏｓ細胞に関する、ｈｕＭｙ９−６−ＳＰＤＢ−実施例１６の化合物のインビトロ効能を表す。
【図３ｂ】ＨＬ６０／ＧＣ及びＲａｍｏｓ細胞に関する、実施例１６の遊離化合物のインビトロ効能を表す。
【図１ａ】
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【図１ｂ】
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【図１ｃ】
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【図２ａ】
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【図２ｂ】
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【図２ｃ】
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【図３ａ】
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【図３ｂ】
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【国際調査報告】
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