(57)【要約】  ストレス性尿失禁および混合尿失禁の治療において使用するための医薬品を得るための式（I）に対応する化合物または前記化合物の薬学的に許容させる塩の使用；【化１】2009512678.tif 000006    ここで、Rは水素、またはアルキル、アルキレン、アルキリジン、シクロアルキル、シクロアルキレン、シクロアルキリジンおよび-CONH2基、および-COR'および-COOR'基から選択される基を表し、ここで、R'は、アルキル、アルキレン、アルキリジン、シクロアルキル、シクロアルキレンおよびシクロアルキリジン基から選択され、前記基Rおよび／またはR'は、-O-、-COO-、-OCO-、-NHCO-または-CONH-官能基で置換および／または割り込まれることが可能である。【選択図】なし
2009512678.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ストレス性尿失禁および混合尿失禁の治療において使用されるための医薬品を得るための式（Ｉ）に対応する化合物または前記化合物の薬学的に許容される塩の使用：
【化１】
2009512678.tif 000005
ここで、Rは水素、またはアルキル、アルキレン、アルキリジン、シクロアルキル、シクロアルキレン、シクロアルキリジンおよび -CONH2 基、および-COR' および -COOR’基から選択される基を表し、R'は、アルキル、アルキレン、アルキリジン、シクロアルキル、シクロアルキレンおよびシクロアルキリジン基から選択され、前記基Rおよび／またはR'は、-O-、-COO-、-OCO-、-NHCO-または-CONH-官能基で置換および／または割り込まれることが可能である。
【請求項２】
請求項１に記載の使用であって、Rがn-プロピル基であることを特徴とする使用。
【請求項３】
請求項１または２に記載の使用であって、それが、式（I）に対応する２つの化合物の併用であることを特徴とする使用。
【請求項４】
請求項３に記載の使用であって、それが、RがHを表す式（I）の化合物とRがn-プロピル基を表す式（I）の化合物との併用であることを特徴とする使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の開示】
【０００１】
本発明は、N−(4−ピリジニル)−1H−インドール−1−アミンの泌尿器科的投与に関し、より詳しくは、ストレス性尿失禁または混合尿失禁の治療におけるその使用に関する。
【０００２】
下位尿路の機能は、尿を貯蔵し、適切な時期に尿を放出することである。即ち、膀胱は、充填物で受動的に膨張する平滑筋貯蔵所（排尿筋）である。充填相の間、膀胱の閉鎖は、尿道平滑筋および外横紋括約筋（横紋筋性括約筋）の収縮により確保される。当該下位尿路は、中枢および末梢神経系の両者による膀胱および尿道の平滑筋および骨格筋の調節に関連する高度に協調された過程系を通して機能する[Burgard et al、"New pharmacological treatments for urinary incontinence and overactive bladder"、Curr. Opin. Investig. Drugs. 6、81-89（2005）]。
【０００３】
正常な状態において、尿充填に関する感覚情報は、Aδ求心性線維を介して中枢神経系（CNS）にまで主に伝達される。膀胱の容積が臨界的な閾値に到達した場合、および排尿が行動的および環境的に適切である場合、脊髄延髄脊髄反射が活性化され、神経筋ジャンクションでのアセチルコリンの放出を招き、膀胱収縮を生じる。同時に、尿道が開き、続いて、平滑筋および横紋性括約筋の両者が弛緩し、貯蔵された尿の放出が可能となる。
【０００４】
尿の貯蔵能力における機能障害は、根底にある機能不全とは完全に異なる２つの主な障害に分け得る症状に帰着する：ストレス性尿失禁症（stress urinary incontinence）および切迫性尿失禁症（urge-related disorders）。
【０００５】
ストレス性尿失禁は、咳、笑い、くしゃみまたは腹腔内圧を増加する他の何れかの物理的な活動に対する反応における尿の損失である。ストレス性尿失禁の根底にある病理は、多くの場合、横紋筋性括約筋に関係する。
【０００６】
過敏性膀胱（OAB）および関連する切迫尿失禁の状態は、貯蔵機能の他の主要な障害を表す。それらは、そうすることへの激しい切迫性（尿意切迫）および夜間の排尿の必要性を伴う排尿（頻度）の頻繁な必要性により特徴付けられる。ストレス性尿失禁に反して、OABおよび切迫尿失禁は、尿道の括約筋調節に関連するものではなく、寧ろ膀胱機能およびこれらの制御における障害に関係する。
【０００７】
混合尿失禁は、ストレス性および切迫性の両方の症状を合併する。
【０００８】
現在、ストレス性尿失禁および切迫関連障害の薬理学的治療は完全に異なる。幾つかの選択肢が切迫尿失禁／OABには存在し、その中心は抗ムスカリン薬である。
【０００９】
ストレス性尿失禁のための治療アプローチは、単独またはバイオフィードバックまたは電気刺激との併用された会陰括約筋のリハビリテーションに基づく。非常に衰弱しているストレス性尿失禁の場合には、外科的な処置が提案され得る(Prise en charge de l'incontinence urinaire de la femme en medecine generale [Management of female urinary incontinence in general medicine], Recommendations of the ANAES, May 2003)。
【００１０】
最近まで、ストレス性尿失禁の最前線の薬理学的治療は存在しなかった。仮にリハビリテーションが失敗した場合には、エストロゲン補充療法および／またはα-アドレナリン作動性化合物の使用が閉経期の女性に処方される。
【００１１】
ストレス性尿失禁の治療のための薬理学的アプローチの目的は、尿道緊張を増加することである。
【００１２】
ストレス性尿失禁のために特異的に認められているただ一つの治療は、ダロキセチン（duloxetine；Yentreve）であり、セロトニン取り込みおよびノルエピネフリン取り込みの混合阻害剤である。前臨床および臨床試験は、この化合物が尿道の閉鎖を増強し、膀胱括約筋の協調を保存することを示している。他方、この化合物は、その使用を大きく制限する有害作用を有する。
【００１３】
尿失禁は、それに罹患する個人の日常生活において有害な影響を有し、より有効であり、よりよい利益／リスク比を有する医薬品が未だに捜し求められている。
【００１４】
本発明の目的は、ストレス性尿失禁および混合尿失禁の治療において使用するための医薬品を得るための化合物系統の使用にある。
【００１５】
本発明の化合物は、式（I）に対応する：
【化２】
2009512678.tif 000003
【００１６】
ここで、Rは、アルキル、アルキレン、アルキリジン、シクロアルキル、シクロアルキレン、シクロアルキリジンおよび-CONH2 基、および-COR’および-COOR’基から選択され、ここで、R’は、アルキル、アルキレン、アルキリジン、シクロアルキル、シクロアルキレンおよびシクロアルキリジン基から選択され、前記基Rおよび／またはR'は、-O-、-COO-、-OCO-、-NHCO-または-CONH-官能基で置換および／または割り込まれることが可能である。
【００１７】
これらの化合物の薬学的に許容される塩もまた、本発明の一部分である。事実上、当該活性化合物に対応する塩、例えば、薬学的に許容される塩を製造、精製および／または貯蔵することは好ましい。薬学的に許容される塩の例は、バーグらの文献に記載される（Berge et al., "Pharmaceutically acceptable salts", J. Pharm. Sci., 66, 1-19 (1977)）。例として、サリチル酸、塩酸およびフマル酸塩が言及されてよい。
【００１８】
有利な変形に従うと、本発明は、一般式（Ｉ）のN-(4-ピリジニル)-1H-インドール-1-アミン型の化合物、基Rが水素原子に等しい場合、N-(4-ピリジニル)-1H-インドール-1-アミン(化合物 HP748)、または当該n-プロピル基に等しい場合、N-プロピル-N-(4-ピリジニル)-1H-インドール-1-アミンまたはベシピルジン（化合物 HP749）、およびそれらの薬学的に許容される塩に関し、より詳細には、ストレス性尿失禁および混合尿失禁に関連する症状の治療において使用するための医薬品を得るためのそれらの使用に関する。
【００１９】
本発明に従うと、上記で言及された2つの化合物は、有利に関連または併用される。好ましい関連または併用は、当該化合物HP748は化合物HP749のヒトにおける代謝により得られるという知識において、Rが水素原子を表す式（I）の化合物（HP748）およびRがn-プロピル基を表す式（I）の化合物（HP749）を含む。活性の組み合わせは、特に、ストレス性尿失禁および混合尿失禁に関連する症状の治療において使用するための医薬品を得るために都合がよい。
【００２０】
本発明の化合物（I）は、米国特許4 970 218に記載される通りの方法により得られる。
【００２１】
下の例は、本発明に従う化合物の効果および泌尿器科分野における適用が見出されている公知の化合物と比較した最近の利点を説明している。従って、試験された化合物は、以下の表に記載された物質であり、当該化合物HP184は、書類WO 02/064126に記載されており、化合物HP183はHP184の代謝産物である。
【表１】
2009512678.tif 000004
【００２２】
当該化合物を、ウサギ尿道において実施されたエキソビボ試験において試験された。
【００２３】
例１：当該化合物の尿道の神経性収縮における効果
試験は、以下のように得たウサギ尿道の単離物において実施した。
【００２４】
尿道全体を切除し、洗浄して脂肪および結合組織を取り除き、次に、直径約４mmのリングに、１つは尿道の中央レベルで、もう一つは尿道の遠位レベルで切断した。
【００２５】
α１-アドレナリン受容体の活性化による収縮における効果
この試験では、上述された４つの化合物単独でのα-アドレナリン受容体の活性化により尿道の収縮を誘導するそれぞれの能力を、ポジティブコントロールとして使用したノルエピネフリンと比較して測定する。
【００２６】
試験プロトコールの説明：
続くプロトコールは、バン・ダー・グラフにより記載されたプロトコールに適応する(Van der Graaf et al. (Eur. J. Pharmacol., 327: 25-32, 1997)）。
【００２７】
クレブス-ヘンセライト(Krebs-Henseleit)溶液を、β-アドレナリン受容体、カテコール-O-メチルトランスフェラーゼ、並びにノルアドレナリン１型（神経）および２型（神経以外）の取り込みを夫々ブロックするためにプロパノロール(1μM)、ノルメタネフリン(1μM)、デシプラミン（0.1μM）およびデオキシコルチコステロン(3μM)を添加することにより改変した。
【００２８】
1gの初期力を当該サンプルに対して適用する。60分の平衡期間の後、当該リングを、60分間の洗浄により分離して2回、継続的にノルエピネフリン（30μM）と接触させる。1g未満の収縮性応答を有する当該リングは処分し、新たなリングを随意用意する。30分間の洗浄の後、試験される化合物を0.01から100μMまでの範囲の累積濃度で添加する。
【００２９】
並行して、それに次いで、当該化合物の溶媒（蒸留水またはDMSO）をコントロール曲線を得るために試験する。
【００３０】
HP748の場合では、更なる試験を、プラゾシン(1μM)、α１-アドレナリン受容体アンタゴニスト、をHP748の添加前の30分間に亘りインキュベートすることにより実施した。
【００３１】
試験の結果
結果は、当該濃度の化合物の機能として30μMでのノルエピネフリンの第2の添加により誘導された収縮のパーセンテージとして表す。
【００３２】
後者は、対数目盛りで、mol/lの値の対数により表す。
【００３３】
それらは以下の図において示す。
【００３４】
図１： 
黒四角はHP748 (n=5)であり、黒三角はDMSO (n=5)である。
【００３５】
図２:
黒四角はHP748 (n=5)であり、黒三角はHP748＋プラゾシン (n=4)である。
【００３６】
化合物HP749、HP183 およびHP184は効果がなかった。
【００３７】
HP748のみが、有意な収縮を誘導することが観察される。この収縮は、1μMのプラゾシンでのプレインキュベーションの後に完全に遮断され、この効果がα１-アドレナリン受容体により媒介されることが確認される。
【００３８】
ノルエピネフリンにより誘導される収縮を増強する能力
この試験では、化合物HP749、HP183およびHP184のノルエピネフリンにより誘導される尿道収縮を増強する能力を測定する。そのような活性は、ノルエピネフリン取り込み阻害剤の特徴であり、尿路緊張の増強を可能にすることが知られている。
【００３９】
試験プロトコールの説明：
続くプロトコールは、フォアマンおよびマクナルティにより記載されたプロトコールに適応される（Foreman and McNulty (Life Sci. 53: 193-200, 1993))。
【００４０】
クレブス-ヘンセライト(Krebs-Henseleit)溶液を、それぞれ、β-アドレナリン受容体およびカテコール-O-メチルトランスフェラーゼをブロックするためにプロパノロール(1μM)およびノルメタネフリン(1μM)を添加することにより改変した。
【００４１】
1gの初期力をサンプルに適用する。60分間の平衡期間の後に、当該リングを、60分間の洗浄により分離して2回、継続的にノルエピネフリン（30μM）に接触させる。1g未満の収縮性応答を有する当該リングは処分し、新しいリングを随時用意する。30分間の洗浄の後、0.01から100μMのノルエピネフリンの累積濃度についての用量反応曲線を各リングについて得た。更なる30分間の洗浄の後、試験される各化合物または溶媒を所定の濃度（HP749については1μM、HP183およびHP184については100μM）で30分間インキュベートし、ノルエピネフリンに対する新たな用量反応曲線を得る。
【００４２】
試験の結果：
当該結果は、試験される化合物またはコントロールの添加の前後のノルエピネフリン用量反応曲線のEC50値を比較することにより評価する。プロトコールは、ノルエピネフリン取り込みの選択的阻害剤であるトモキセチン(tomoxetine)を試験することにより妥当性を検査した。
【００４３】
結果は以下の図に示す：
図３：
黒四角は第一のノルエピネフリン曲線(n=4)であり、
黒三角はノルエピネフリン＋１μMのトモキセチン(n=4)である。
【００４４】
図４: 
黒四角は第一のノルエピネフリン曲線(n=5)であり、
黒三角は、ノルエピネフリン＋１μMのHP749(n=5)である。
【００４５】
Figure 5: 
黒四角は第一のノルエピネフリン曲線(n=5)であり、
黒三角はノルエピネフリン＋100μMのHP184(n=5)である。
【００４６】
図６: 
黒四角は第一のノルエピネフリン(n=5)であり、
黒三角はノルエピネフリン＋100μMのHP183(n=5)である。
【００４７】
HP749のみ効果を有することが示され、ノルエピネフリンの用量反応曲線のEC50値を有意に(p<0.0001)減少させることが観察される。実際は、HP749でのインキュベーションの前後のpEC50(-logEC50)の値は、それぞれ5.02 (4.88 - 5.15、95% C.I.)および5.60 (5.47 - 5.74、95% C.I.)である。並行した試験では、HP749の溶媒（蒸留水）は、EC50値において影響を示されなかった。
【００４８】
HP749の効果は、参照化合物であるトモキセチンにより誘導されたものと同様であり、トモキセチンでのインキュベーション前後でpEC50 値は5.43 (5.28 - 5.57、95% C.I.)から6.04 (5.90 - 6.19; 95% C.I.)を示す。
【００４９】
例２：刺激された膀胱状態下での横紋括約筋機能におけるHP749およびダロキセチンの比較効果
HP749(0、1、3および5mg/kg i.v.)またはダロキセチン(0、1および2mg/kg i.v.)の累積用量の電気的筋運動記録および膀胱内圧測定パラメータにおける効果は、麻酔下で(0.5％の酢酸の持続的な経膀胱注入)刺激された状態の雌性ニュージーランド白色ウサギ(n=12/群)において評価した。試験は、ヘルシンキ宣言の倫理基準に従って行った。
【００５０】
膀胱内圧測定法
継続的な膀胱内圧測定を、皮下膀胱瘻設置術を用いて横臥位動物で行った。Tチューブを20ゲージ針を用いて、多穴プラグに接続し、TRA021圧力トランスデューサーおよびマイクロインジェクションポンプに直結した。室温の希酢酸を1.4ml/hrの速度で、膀胱に注入し、反復性の排尿を誘発し、多くの排尿周期についてデータを収集した。継続的な膀胱内圧測定をPowerLab4/25で記録した。
【００５１】
膀胱内圧測定の開始時に、膀胱を空にした。周期的な排尿を安定化するために液体の注入を少なくとも60分間維持し、連続的に膀胱内圧測定図を記録した。次に、プラセボを静脈内に投与し、膀胱内圧測定図を40分間記録した。ダロキセチンまたはHP749の連続した用量を40分間の間隔で投与した。
【００５２】
横紋括約筋の筋電図検査(SS-EMG)
2つの電極(30ゲージ針)を経皮的に横紋肛門括約筋に側方から肛門まで約5-10mmで設置した。電気信号はML136前値増幅器(ADInstruments, PanLab, Barcelona, Spain)で増幅し、1Hz未満および5kHz以上をフィルタし、PowerLab windowに表示した。SS-EMGは膀胱内圧測定中に連続して記録した。
【００５３】
薬物投与
ビヒクル（生理食塩水）または薬物投与のために、静脈内カニューレを、耳静脈に接続した。薬物は、各実験前に生理食塩水中に新たに調製した。薬物は1mlの量で静脈内に投与し、続いて1mlの新鮮な生理食塩水を投与した。
【００５４】
統計学的解析
全ての値は、平均値±SEMで示した。ダロキセチンまたはHP749の効果は、コントロール（生理食塩水）値と比較して、ウィルコクソン・ランク検定(Wilcoxon rank test)を使用して解析した。マン-ホワイトニーU検定(Mann-Whitney U test)をダロキセチンとHP-749の効果を比較するために実施した。統計学的有意性は、P<0.05のときにあるとみなした。
【００５５】
結果
再現性のある膀胱内圧測定パターンが得られた。ビヒクルの静脈内注射は膀胱内圧測定パラメータまたはSS-EMG活性の何れにおいても影響を示さなかった。
【００５６】
図７および８に示す通りのダロキセチンの効果
ダロキセチンは、用量依存的に膀胱容量を増加した(p<0.01)。更に、SS-EMG活性は、ダロキセチンの2mg/kgで有意に増加された(p<0.01)。
【００５７】
図７および８に示す通りのHP749の効果
HP749は用量依存的に膀胱容量を、1mg/kgでコントロールの172％から5mg/kgでコントロールの235％まで増加した(p<0.01)。SS-EMGも、試験された全ての用量で2.5倍増加した(p<0.01)。
【００５８】
膀胱用量およびSS-EMGにおけるHP749の効果は、ダロキセチンの効果よりも有意に高いものであった(p<0.05)。
【００５９】
結論として、これらの結果は、HP749は横紋括約筋の活性を1mg/kgから増強し、並行して、膀胱容量を増加することを示す。これは、HP749が、尿道閉鎖を増強することを示す。ダロキセチンに比べて、HP749はSS-EMG活性および膀胱内圧測定パラメータの両方においてより高い効果を有した。
【図面の簡単な説明】
【００６０】
【図１】黒四角はHP748 (n=5)であり、黒三角はDMSO (n=5)である。
【図２】黒四角はHP748 (n=5)であり、黒三角はHP748＋プラゾシン (n=4)である。
【図３】黒四角は第一のノルエピネフリン曲線(n=4)であり、黒三角はノルエピネフリン＋１μMのトモキセチン(n=4)である。
【図４】黒四角は第一のノルエピネフリン曲線(n=5)であり、黒三角は、ノルエピネフリン＋１μMのHP749(n=5)である。
【図５】黒四角は第一のノルエピネフリン曲線(n=5)であり、黒三角はノルエピネフリン＋100μMのHP184(n=5)である。
【図６】黒四角は第一のノルエピネフリン(n=5)であり、黒三角はノルエピネフリン＋100μMのHP183(n=5)である。
【図７】図７および８に示す通りのダロキセチンの効果、図７および８に示す通りのHP749の効果。
【図８】図７および８に示す通りのダロキセチンの効果、図７および８に示す通りのHP749の効果。
【図１】
2009512678.tif 000007
【図２】
2009512678.tif 000008
【図３】
2009512678.tif 000009
【図４】
2009512678.tif 000010
【図５】
2009512678.tif 000011
【図６】
2009512678.tif 000012
【図７】
2009512678.tif 000013
【図８】
2009512678.tif 000014
【国際調査報告】
2009512678.tif 000015
2009512678.tif 000016