(57)【要約】  コリン欠乏症は、完全非経口栄養法を必要とする腸管不全患者における血栓症の発症の危険因子である。ＴＰＮを受けている患者にコリンを含む栄養液を投与することを含む、血栓症、好ましくは静脈血栓症を予防する方法が提供される。また、患者からサンプルを採取し、無血漿コリン濃度を検出することを含む、血栓症の危険性を診断する方法が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
完全非経口栄養法（ＴＰＮ）を受けている患者の静脈血栓症の危険性を減少する方法であって、ＴＰＮを受けている患者に治療上有効量のコリンを含む栄養液を非経口的に投与することを含む方法。
【請求項２】
治療上有効量のコリンが、患者の血漿ホモシステイン濃度を減少させる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
栄養液が、溶液１リットル当たり、約０．２５グラムから約８グラムのコリン塩を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
栄養液中のコリンが、コリンの医薬的に許容される塩、コリンの前駆体、コリンの代謝物またはそれらの組み合わせである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
栄養液中のコリンが、コリン塩である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
コリン塩が、塩化コリン、重酒石酸コリン、クエン酸二水素コリン、リン酸コリンまたは重炭酸コリンである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
完全非経口栄養法（ＴＰＮ）に伴うカテーテル血栓症を予防する方法であって、ＴＰＮを受けている患者に治療上有効量のコリンを含む栄養液を非経口的に投与することを含む方法。
【請求項８】
治療上有効量のコリンが、患者の血漿ホモシステイン濃度を減少させる、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
栄養液が、溶液１リットル当たり、約０．２５グラムから約８グラムのコリン塩を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
栄養液中のコリンが、コリンの医薬的に許容される塩、コリンの前駆体、コリンの代謝物またはそれらの組み合わせである、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
栄養液中のコリンが、コリン塩である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
コリン塩が、塩化コリン、重酒石酸コリン、クエン酸二水素コリン、リン酸コリンまたは重炭酸コリンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
ＴＰＮを受けている患者が、カテーテル血栓症の危険にさらされているかどうかを決定する方法であって、患者から血液または血漿サンプルを採取し、サンプル中の無血漿コリン濃度を検出し、およびサンプル中の無血漿コリン濃度を血栓症の危険性の有無と相関させることを含む方法。
【請求項１４】
無血漿コリン濃度が、ガスクロマトグラフィおよび質量分析、ＲＩＡまたはＨＰＬＣを使用して検出される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
正常な濃度と比較して減少したコリンの濃度が、カテーテル血栓症の危険性を示す、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
栄養液および治療上有効量のコリンを含むＴＰＮを受けている患者のカテーテル血栓症
を予防するためのキット。
【請求項１７】
ブドウ糖、電解質、アミノ酸類、微量元素類、ビタミン類および治療上有効量のコリンを含む栄養水溶液。
【請求項１８】
コリンがコリン塩である、請求項１７に記載の栄養水溶液。
【請求項１９】
コリン塩が、塩化コリン、重酒石酸コリン、クエン酸二水素コリン、リン酸コリンまたは重炭酸コリンである、請求項１８に記載の栄養水溶液。
【請求項２０】
コリンが、栄養水溶液１リットル当たり、約０．２５グラムから約８グラムの量で存在する、請求項１７に記載の栄養水溶液。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２００５年８月１６日に出願され、その全文が本明細書に組み込まれている米国出願番号６０／７０８，３９５の優先権を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、血栓症、好ましくは静脈血栓症を予防する方法に関する。より詳細には、本発明は、完全非経口栄養法（ＴＰＮ）を受けている患者において、ホモシステイン濃度を減少させ、血栓症を予防するためのコリンの使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
ＴＰＮは、胃腸管の重篤な大きな外傷に対する手術後に最初に使用される応急処置法として始まった。ＴＰＮは、様々な症状における腸管安静および栄養を提供する比較的一般的な手段となった。ＴＰＮは、当初は短期の一時的栄養手順として使用されたが、それはまた長期的な栄養プロトコルとしても広く使用されるようになった。
【０００４】
非経口的栄養は、それが完全であるか補充的であるかに関係なく、広範囲の慢性症状において使用されてきた。例えば、急性および慢性の炎症性腸疾患による栄養失調を何度も患っている患者は、完全非経口栄養法を必要とする。さらに、手術によって直ちに取り除くことができない胃腸管の部分的または全体的な障害を患う患者もまた、ＴＰＮに対する候補者である。ＴＰＮを受ける他の患者としては、重大なタンパク質の損失を生じる大きな火傷を患う人々、および栄養失調が彼らの生命に対する脅威であり、消化管から栄養素を受け取り、吸収することができない他の疾病を患う人々が挙げられる。
【０００５】
ＴＰＮの過程で患者に静脈内投与される栄養液または混合物は、一般に患者の個々の必要性および忍容性に適合させられる。一般に、栄養液は、ブドウ糖、アミノ酸類、電解質類、微量元素類およびビタミン類を含む水溶液である。２から３リットルの栄養液が、完全非経口栄養法の間、患者に静脈内投与される。栄養液の投与は、上大静脈または下大静脈に挿入される中心静脈カテーテル経由で一般に遂行される。
【０００６】
完全非経口栄養法は、多くの患者のための救命給食プログラムではあるけれども、発症し得る多くの合併症がある。患者は、栄養混合物中の成分のうちのいくつかに対する感受性により副作用を患い得、感染の可能性が常に存在する。発症し得る他の合併症としては、コリン欠乏症、電解質平衡異常、高血糖症、心臓への過負荷、脱水症、代謝性アシドーシス、心臓に対する物理的損傷、代謝性骨疾患および腎臓病が挙げられる。
【０００７】
上記の起こりうる合併症に加えて、長期的なＴＰＮを必要とする腸管不全を有する患者は、合併症として静脈炎およびカテーテル血栓症を発症する傾向があることが注目されてきた。中心静脈カテーテル血栓症は、長期的な完全非経口栄養法（ＴＰＮ）を必要とする患者では度々起こる合併症である。Ｂｕｃｈｍａｎ  ＡＬ，Ｇｏｏｄｓｏｎ  Ｂ，Ｈｅｒｚｏｇ  Ｆ，Ａｍｅｎｔ  ＭＥ。Ｃａｔｈｅｔｅｒ  ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｓｕｐｅｒｉｏｒ／ｉｎｆｅｒｉｏｒ  ｖｅｎａ  ｃａｖａ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ  ａｒｅ  ｒａｒｅ  ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ。（１９９４）Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ。１３：３５６−３６０。少なくとも２つの主要な脈管の再発性血栓症および損失は、小腸移植のためのメディケアの承認を受けた適応症である。Ｂｕｃｈｍａｎ  ＡＬ，Ｓｃｏｌｏｐ
ｉｏ  Ｊ，Ｆｒｙｅｒ  Ｊ．Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｓｈｏｒｔ  ｂｏｗｅｌ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ  ａｎｄ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ。（２００３）Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １２４：１１１１−１１３４。高ホモシステイン血症は、静脈血栓症の発症に対する危険因子である。Ｄｅｎ  Ｈｅｉｊｅｒ  Ｍ，Ｋｏｓｔｅｒ  Ｔ，Ｂｌｏｍ  ＨＪ，ｅｔ  ａｌ．Ｈｙｐｅｒｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅｍｉａ  ａｓ  ａ  ｒｉｓｋ  ｆａｃｔｏｒ  ｆｏｒ  ｄｅｅｐ−ｖｅｉｎ  ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ。（１９９６）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３３４：７５９−７６２；Ｅｉｃｈｉｎｇｅｒ  Ｓ．Ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，ｖｉｔａｍｉｎ  Ｂ６  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｒｉｓｋ  ｏｆ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ  ｖｅｎｏｕｓ  ｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｉｓｍ。（２００３）Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌ  Ｈａｅｍｏｓｔ  Ｔｈｒｏｍｂ  ３３：３４２−４；Ｕｎｌｕ  Ｙ，  Ｋｅｌｅｓ  Ｓ，Ｂｅｃｉｔ  Ｎ，ｅｔ  ａｌ。Ｈｙｐｅｒｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎａｅｍｉａ  ａｓ  ａ  ｒｉｓｋ  ｆａｃｔｏｒ  ｆｏｒ  ｄｅｅｐ−ｖｅｉｎ  ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ。Ｅｕｒ  Ｊ  Ｖａｓｃ  Ｅｎｄｏｖａｓｃ  Ｓｕｒｇ  ２００５（ｉｎ  ｐｒｅｓｓ）。コリン欠乏症については、長期間の完全非経口栄養法を必要とし、肝臓異常（Ｂｕｃｈｍａｎ  ＡＬ，Ｄｕｂｉｎ  Ｍ，Ｊｅｎｄｅｎ  Ｄ，ｅｔ  ａｌ。Ｌｅｃｉｔｈｉｎ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ｃａｕｓｅｓ  ａ  ｄｅｃｒｅａｓｅ  ｉｎ  ｈｅｐａｔｉｃ  ｓｔｅａｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ  ｌｏｎｇ  ｔｅｒｍ  ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ。（１９９２）Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １０２：１３６３−７０；Ｂｕｃｈｍａｎ  ＡＬ，Ｄｕｂｉｎ  Ｍ，  Ｍｏｕｋａｒｚｅｌ  Ａ，ｅｔ  ａｌ。Ｃｈｏｌｉｎｅ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ：ａ  ｃａｕｓｅ  ｏｆ  ｈｅｐａｔｉｃ  ｓｔｅａｔｏｓｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  ｔｈａｔ  ｃａｎ  ｂｅ
ｒｅｖｅｒｓｅｄ  ｗｉｔｈ  ａｎｄ  ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ  ｃｈｏｌｉｎｅ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ。（１９９５）Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ
２２：１３９９−１４０３；Ｂｕｃｈｍａｎ  ＡＬ，Ｓｏｈｅｌ  Ｍ，Ｄｕｂｉｎ  Ｍ，Ｊｅｎｄｅｎ  ＤＪ，Ｒｏｃｈ  Ｍ。Ｃｈｏｌｉｎｅ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｃａｕｓｅｓ  ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｈｅｐａｔｉｃ  ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｄｕｒｉｎｇ  ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ：ｐｒｏｏｆ  ｏｆ  ａ  ｈｕｍａｎ  ｃｈｏｌｉｎｅ  ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ；ａ  ｐｌａｃｅｂｏ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｔｒｉａｌ。（２００１）ＪＰＥＮ  ２５：２６０−２６８；  Ｂｕｃｈｍａｎ  ＡＬ，Ｓｏｈｅｌ  Ｍ，Ｂｒｏｗｎ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ。Ｖｅｒｂａｌ  ａｎｄ  ｖｉｓｕａｌ  ｍｅｍｏｒｙ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ａｆｔｅｒ  ｃｈｏｌｉｎｅ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｔｏｔａｌ  ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ：ａ  ｐｉｌｏｔ  ｓｔｕｄｙ。（２００１）ＪＰＥＮ  ２５：３０−３５）および神経精神異常を発現する患者において、以前に記載した。Ｂｕｃｈｍａｎ  ＡＬ，ｅｔ  ａｌ。（２００１）ＪＰＥＮ  ２５：３０−３５。げっ歯類では、コリン欠乏症は、高ホモシステイン血症を伴う。Ｄａ  Ｃｏｓｔａ  ＫＡ，Ｇａｆｆｎｅｙ  ＣＥ，Ｆｉｓｃｈｅｒ  ＬＭ，  Ｚｅｉｓｅｌ  ＳＨ。Ｃｈｏｌｉｎｅ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ａｎｄ  ｈｕｍａｎｓ  ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｐｌａｓｍａ  ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ａｆｔｅｒ  ａ  ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  ｌｏａｄ。（２００５）Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｎｕｔｒ  ８１：４４０−４４４；Ｃｈｅｎ  ＡＨ，  Ｉｎｎｉｓ  ＳＭ，Ｄａｖｉｄｓｏｎ  ＡＧ，Ｊａｍｅｓ  ＳＪ。Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｃｈｏｌｉｎｅ  ａｎｄ  ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｅｘｃｒｅｔｉｏｎ  ｉｓ  ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｉｎ  ｃｈｉｌｄｒｅｎ  ｗｉｔｈ  ｃｙｓｔｉｃ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｐｌａｓｍａ  ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，  Ｓ−ａｄｅｎｏｓｙｌｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，ａｎｄ  Ｓ−ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ。（２００５）Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｎｕｔｒ  ８１：６８６−６９１；Ｍｏｎｓｅｒｒａｔ  ＡＪ，
Ｍｕｓｓｏ  ＡＭ，Ｔａｒｔａｓ  Ｎ，ｅｔ  ａｌ。Ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ  ｃｏａｇｕｌｏｐａｔｈｙ  ｉｎ  ａｃｕｔｅ  ｒｅｎａｌ  ｆａｉｌｕｒｅ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｈｙｐｏｌｉｐｏｔｒｏｐｉｃ  ｄｉｅｔｓ。（１９８１）Ｎｅｐｈｒｏｎ  ２８：２７６−２８４；およびＶａｒｅｌａ−Ｍｏｒｅｉｒａｓ  Ｇ，Ｒａｇｅｌ  Ｃ，Ｐｅｒｅｚ  ｄｅ  Ｍｉｇｕｅｌｓａｎｚ  Ｊ。Ｃｈｏｌｉｎｅ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｍａｒｋｅｄ
ｂｕｔ  ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｃｈａｎｇｅｓ  ｉｎ  ｈｅｐａｔｉｃ  ｆｏｌａｔｅ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ，ｓｅｒｕｍ  ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ  ａｎｄ  ＤＮＡ  ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ  ｒａｔｅｓ  ｉｎ  ｒａｔｓ。（１９９５）Ｊ  Ａｍ
Ｃｏｌｌ  Ｎｕｔｒ  １４：４８０−４８５。経口投与によるコリンの補充は、早発性動脈血管病の患者群中の血漿ホモシステイン濃度を減少させ（Ｄｕｄｍａｎ  ＮＰ，Ｗｉｌｃｋｅｎ  ＤＥ，Ｗａｎｇ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ。動脈血栓症および静脈血栓症は異なる事象であり、しかしながら動脈血栓症が非常に稀であって孤立しているのに対して、静脈血栓症は、ＴＰＮを受けている患者では比較的に解説される。Ｄｉｓｏｒｄｅｒｅｄ  ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ／ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  ｐｒｅｍａｔｕｒｅ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｉｔｓ  ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ，  ｃｏｆａｃｔｏｒ  ｔｈｅｒａｐｙ，ａｎｄ  ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ。（１９９３）Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ  Ｔｈｒｏｍｂ  １３：１２５３−１２６０。）、健常人のグループで血漿ホモシステイン濃度を減少させた（Ｏｌｔｈｏｆ  ＭＲ，Ｂｒｉｓｋ  ＥＪ，Ｋａｔａｎ  ＭＢ，Ｖｅｒｈｏｅｆ  Ｐ。Ｃｈｏｌｉｎｅ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ  ａｓ
ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｄｅｃｒｅａｓｅｓ  ｆａｓｔｉｎｇ  ａｎｄ  ｐｏｓｔｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ−ｌｏａｄｉｎｇ  ｐｌａｓｍａ  ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｈｅａｌｔｈｙ  ｍｅｎ。（２００５）Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｎｕｔｒ  ８２：１１１−１１７。）。したがって、コリン欠乏症は、カテーテル血栓症の発症の際、腸管不全の患者におけるカテーテル血栓症の発症に関して、疑いのある重要な危険要因である。
【０００８】
したがって、血液中のホモシステイン濃度を減少させるために、完全非経口栄養法を受けている患者の無血漿コリン濃度を増加させることができる、簡単で有効な治療を提供することが望ましい。さらに、高ホモシステイン血症を減少させるのに有効な治療を提供して、それにより長期間の完全非経口栄養法から生じるコリン欠乏症を伴うカテーテル血栓症を予防することが望ましい。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
発明の要約
本発明によれば、ＴＰＮを受ける患者の無血漿コリン濃度と（１）高ホモシステイン血症および（２）カテーテル血栓症の発生率とに関連があることが発見された。我々は、完全非経口栄養法を受けている患者での無血漿コリン濃度の減少した、または正常以下の濃度が、カテーテル血栓症、初期血栓症および再発性血栓症の危険性または増加した危険性と相関することを示す。他の人達は、上昇したホモシステイン濃度を有する静脈血栓症の危険性を示した。したがって、無血漿コリンの減少した、または低い濃度は、高ホモシステイン血症に関係していると推論される。例えば、非経口的に患者に投与される栄養液中にコリンを含ませることによって、正常な濃度に、またはその濃度の近辺に増加した、および／または正常な濃度に、またはその濃度の近辺に維持された無血漿コリン濃度は、したがって、無血漿コリン濃度を正常な範囲内に維持するのみならず、血中のホモシステイン濃度を減少させ、それによりカテーテル血栓症を予防および／または抑制するのに有効であろう。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明の１態様では、コリンは、好ましくは塩化コリンまたは他のコリン塩の形態で、完全非経口栄養法を受けている患者に投与される。コリンは栄養液に加えてもよいし、または別々に非経口的に注入してもよい。１日に患者に投与される栄養液の通常の投薬量は、おおよそ２から３リットルの溶液である。本発明の特徴として、治療上有効量の塩化コリンまたは他のコリン塩が、非経口的に注入される、または溶液１リットル当たり、０．２５グラムから約８グラムのコリンを供給するのに十分な量で栄養液に添加される。
【００１１】
栄養液中のコリンの上記濃度は、患者における忍容性が良好であり、長期の総タンパク質栄養療法の間、無血漿コリン濃度を正常範囲内に維持するのに有効であるコリンの１日投薬量を提供する。米国特許第５，５６７，７３６号参照。コリンを先の投薬量濃度で栄養液に添加することは、慢性のコリン欠乏症に罹患している患者のホモシステイン濃度を減少させ、カテーテル血栓症を予防または抑制するのに有効であることが発見された。
【００１２】
本発明の特徴として、改善された栄養液は、十分な塩化コリンまたはコリンの他の塩をＴＰＮ患者の通常の栄養液に添加することにより提供される。複雑な製剤化手順または困難な混合工程は、本発明を実施するためには必要ではない。所望の投薬量の塩化コリンまたはコリンの他の塩が、通常の慣行に従ってＴＰＮ患者に投与されるコリン濃縮液を用いて栄養水溶液に添加される。
【００１３】
塩化コリンは、ブドウ糖、アミノ酸類、電解質類、微量元素類、ビタミン類および完全非経口栄養液中で典型的に見られる他の化合物と反応しないか、もしくは副作用を及ぼさない。さらに、コリンは通常の条件下で保存された場合、栄養液中で比較的安定である。コリンは、比較的長い期間、劣化しないか、もしくはその活性を失わない。その結果、コリンは、薬剤師または医者によってＴＰＮ栄養液に添加されてもよいし、または、その液剤の投与直前に患者によって添加されてもよい。ＴＰＮ栄養液への補助としてのコリンの使用は、長期および短期の両方の完全非経口栄養法を必要とする状況に容易に組み込まれる。
【００１４】
本発明の別の態様では、栄養液および一般に容器中に含まれる治療上有効量のコリンを含むＴＰＮを受けている患者において、ホモシステイン濃度を減少させる、および／または血栓症、好ましくは静脈血栓症を予防するためのキットが提供される。
【００１５】
本発明の別の態様では、血栓症、好ましくは静脈血栓症の危険性を診断するために、ＴＰＮを受けている患者のコリン濃度を監視する方法がある。好ましい実施形態では、その方法は、ＴＰＮを受けている患者から血液または血漿サンプルを得て、コリン濃度を検出することを含み、そこで正常な濃度と比較して低いまたは減少した無血漿コリン濃度は、血栓症の増加した危険性を示すものである。コリン濃度は、血栓症の危険性の決定的な要因としてコリン濃度における傾向を検知するために、または血栓症の危険性を減少させる予防処置としてコリン注入の有効性を監視するために、経時的に監視されてもよい。
【００１６】
本発明の上記で議論された特徴および他の多くの特徴ならびに付随する利点は、添付図面と共に考慮して詳細な説明を参照することによって一層よく理解されるようになるであろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
発明の詳細な説明
本発明は、コリン欠乏症が腸管不全の患者におけるカテーテル血栓症の発症に関係していることを初めて示すものである。さらに、再発性血栓症の患者における無血漿コリン濃度を低くする傾向もまた観察された。本明細書で引用された刊行物、特許および特許出願のすべては、上記または下記を問わず、参照することによってその全体が本明細書に組み
込まれる。
【００１８】
本明細書および添付の特許請求の範囲において、用語「コリン」は、コリン、コリン塩、コリン前駆体およびコリン代謝物を含み、コリン前駆体およびコリン代謝物は、ＴＰＮ溶液と混合された場合、または生体内に導入された場合、コリンに転換されることができる。
【００１９】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、用語「正常濃度」は約１０ｎｍｏｌ／ｍｌから約１５ｎｍｏｌ／ｍｌの範囲内のコリンを意味する。
【００２０】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、用語「非経口的」および「非経口的に」は、胃腸管経由によるのとは別の何らかの手段によることを意味し；特に静脈注射、皮下注射、筋肉注射、髄内注射により患者の中へ物質を導入することを指す。
【００２１】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、用語「患者」はヒトを含むが、それに限定されない動物界の成員を含む。
【００２２】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、用語「治療上有効量」は、無血漿コリンを正常濃度またはその濃度の近辺まで増加させるのに十分な量を意味する。
【００２３】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、「血栓症」は、血管内の凝固の形成または存在を意味し、それは血管によって補給される組織の梗塞を引き起こし得る。好ましくは、血栓症は、上大静脈および／または下大静脈の静脈血栓症を指す。最も好ましくは、血栓症は静脈カテーテル血栓症、初期血栓症および／または再発性血栓症を指す。
【００２４】
本発明の１態様では、患者に治療上有効量のコリンを非経口的に投与することを含む、完全非経口栄養法（ＴＰＮ）を受けている患者のホモシステイン濃度を減少させる方法が提供される。本発明の別の態様では、患者に治療上有効量のコリンを非経口的に投与することを含む、完全非経口栄養法（ＴＰＮ）を受けている患者において血栓症、好ましくは静脈血栓症を予防する方法が提供される。好ましくは、治療上有効量のコリンは、患者の血漿ホモシステイン濃度を減少させる。別の好ましい実施形態では、治療上有効量のコリンは、血栓症を予防する。
【００２５】
コリンは栄養液と一緒に、または別々に投与されてもよい。１実施形態では、コリンは、患者に栄養液とは別に注入されてもよい。好ましくは、コリンは、約０．２５グラムから約８グラムの１日の合計投薬量で投与される。別の実施形態では、栄養液はコリンで補充されてもよいし、コリンが補充された栄養液を患者に注入してもよい。
【００２６】
完全非経口栄養法（ＴＰＮ）によって患者に与えるのに使用される栄養液は、周知である。栄養液に含まれる特定の成分は、患者の栄養の必要性および患者の病状に依存して広く変動する。一般に、最も一般的な栄養液中の成分は、ブドウ糖であって、より少量のアミノ酸類、電解質類、微量元素類およびビタミン類が含まれる。一般に、栄養液は、１０から３５容量％ブドウ糖液を含む。ブドウ糖液は、溶液１リットル当たり、１０グラムから３５グラムのブドウ糖を含む水性溶液である。そのようなブドウ糖液は、Ａｂｂｏｔｔ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｂａｘｔｅｒ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｃｏｒｐ．，ＭｃＧａｗ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓその他から市販されている。 
【００２７】
栄養液はまた、典型的には約２から５重量％のアミノ酸類を含む。栄養液に使用されるアミノ酸類は、任意の必須アミノ酸であることができ、様々な濃度および混合物として含
まれることができる。栄養液に使用される好ましいアミノ酸類としては、トレオニン、セリン、プロリン、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、リジン、ヒスチジンおよびアルギニンが挙げられる。ブドウ糖とアミノ酸類に加えて、大部分の栄養液は、カリウム、ナトリウム、塩化物、マグネシウム、酢酸塩、カルシウム、およびリン、ならびに他のものなどの電解質類を含む。これらの電解質類は、一般におおよそ１％以下の比較的少量が含まれる。
【００２８】
微量元素類およびビタミン類はまた、たいていの栄養液に含まれる。代表的な微量元素類としては、セレン、クロム、マンガン、亜鉛および他の元素が挙げられる。通常栄養液に含まれるビタミン類としては、Ａ、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ６、Ｂ１２、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ビオチン、パントテン酸などが挙げられる。これらの元素は、通常おおよそ１％の１／１０未満の濃度で存在する。ビタミン類は、確立された周知のビタミンの１日所要量を満たすのに十分な量で一般的に存在する。
【００２９】
本発明によれば、コリン、好ましくは塩化コリンまたは別のコリン塩は、患者にコリンを直接静脈内に導入するために栄養液に添加される。塩化コリンは、栄養液に添加されるコリンの好ましい形態であるが、重酒石酸コリン、クエン酸二水素コリン、リン酸コリンまたは重炭酸コリンなどの他のコリン塩と同様に、当業者の知っている他の医薬用塩類を使用してもよい。さらに、ホスファチジルコリン、ＣＤＰ−コリン、大豆レシチンなどのコリン前駆体およびコリン代謝物が使用されてもよい。
【００３０】
栄養液に添加されるコリンの量は、患者の無血漿コリン濃度、高ホモシステイン血症の程度、およびコリン欠乏症に関連した他の医学的問題の重症度に依存して変化し得る。
【００３１】
一般に、栄養液に添加されるコリンの量は、溶液１リットル当たり、約０．２５グラムから約８グラムのコリンの溶液中濃度を提供するのに十分であることが好まれる。コリンのこの濃度は、患者が毎日、２から３リットルの栄養液を摂取する場合、コリンの許容される１日投薬量レベルを提供する。望ましい１日の合計コリン投薬量は、おおよそ約０．５グラムから約８グラムのコリンであるべきである。
【００３２】
栄養液の患者への非経口的投与は、完全非経口栄養法のための栄養液の投与に関する充分に確立された技術によって遂行される。栄養液の総量は、その日の異なる時間帯に個別の一定分量として投与されてもよい。しかしながら、２から３リットルの投薬量の栄養液が、毎晩６から１０時間かけて、または連続する２４時間に投与されることが好ましい。
【００３３】
栄養液に添加されるコリンは、好ましくは溶液として添加される。コリンの適切な量が、秤量され、米国薬局方（ＵＳＰ）の注射用滅菌水に溶解されてコリンの重量比で約５０％の溶液を形成する。次いで、得られたコリン溶液は、０．２μｍの孔径の滅菌フィルタを通過させられ、無菌のバイアル中に詰められる。コリン溶液のろ過に適切なフィルタとしては、Ｐａｌｌ  Ｕｌｔｒａｆｉｎｅ  Ｃｏｒｐ．（Ｇｌｅｎ  Ｃｏｖｅ，Ｎ．Ｙ．）によって製造されたものなどの０．２μｍナイロン６６滅菌フィルタカートリッジが挙げられる。他のナイロンフィルタも、酢酸セルロースおよびポリスルフォンなどの他の材料から作られたフィルタと同様に使用されてもよい。
【００３４】
使用に先立って、適切な量のコリン溶液は、無菌バイアルから移され、一般にＴＰＮバッグに含まれている栄養液に添加される。塩化コリンは、少なくとも３０日間、様々なＴＰＮ栄養液において安定であることが分かっており、また、ＴＰＮ溶液の濁度、ｐＨまたはアミノ酸濃度に悪影響はなかった。
【００３５】
コリン水溶液は、ＴＰＮ溶液と別に保存され、溶液を調製するその日に栄養液に添加す
るのが好ましい。栄養液中のコリン濃度は、投与される溶液の総量に依存して変化し得る。好ましくは、患者に投与される栄養液に添加されるコリン溶液の量は、約０．５グラムから８グラムの間のコリンの１日の合計投薬量を提供すべきである。おおよそ１グラムから６グラムのコリンの１日の合計投薬量が、たいていの療法に適切であろう。
【００３６】
本発明はまた、当業者によって使用される、または開発される栄養液にコリンを添加する他の方法も包含する。ＴＰＮ用の栄養液は、また、その内容物の成分として既にコリンを含むように製造されてもよい。
【００３７】
さらに別の態様では、本発明は、ＴＰＮを受ける患者の血栓症を予防するためのキットを提供する。１実施形態では、栄養液および治療上有効量のコリンは、一般に適切な容器内に含まれるキットで提供される。キットの成分は、いずれも水性媒体中にパッケージされてもよい。キットの包含手段は、一般に、バイアル、試験管、フラスコ、バッグ、ボトル、注射器または他の包含手段などの少なくとも１つの包含手段を含み、その中に栄養液およびコリンを入れてもよい。好ましくは、栄養液は、コリンとは別に保存される。
【００３８】
本発明のなお別の態様では、血栓症、好ましくは静脈血栓症の危険性を診断する方法が提供される。好ましい実施形態では、その方法は、ＴＰＮを受けている患者から生体サンプルを採取し、サンプル中のコリン濃度を検出し、サンプル中のコリン濃度を血栓症の危険性の有無に相関させることを含む。コリンが正常濃度より低いことは、血栓症の危険性と相関し、コリン濃度が低くなればなるほど、危険性はより大きくなる。反対に、コリンの正常濃度またはそれより上の濃度は、血栓症の危険性が無いこと、および／または血栓症の危険性が低いことと相関する。生体サンプルは、血液、血漿、血清および尿などの任意の生体液サンプルを含んでもよい。
【００３９】
好ましくは、検出されるコリンは無血漿コリンであるが、しかし、リン脂質結合コリンおよびリン酸コリンもまた検出され得る。無血漿コリンは、好ましくは、Ｊｅｎｄｅｎ  ＤＪ，Ｒｏｃｈ  Ｍ，Ｂｏｏｔｈ  ＲＡ．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  ａｎｄ  ｄｅｕｔｅｒｉｕｍ−ｌａｂｅｌｅｄ  ｔｒａｃｅｒ  ｖａｒｉａｎｔｓ  ｏｆ  ｃｈｏｌｉｎｅ  ａｎｄ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｉｎ  ｓｕｂｐｉｃｏｍｏｌｅ  ｑｕａｎｔｉｔｉｅｓ  ｂｙ  ｇａｓ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ．（１９７３）Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ５５：４３８−４４８，１９７３およびＦｒｅｅｍａｎ  ＪＪ，Ｃｈｏｉ  ＲＬ，Ｊｅｎｄｅｎ  ＤＪ．（１９７５）Ｐｌａｓｍａ  ｃｈｏｌｉｎｅ，ｉｔｓ  ｔｕｒｎｏｖｅｒ  ａｎｄ  ｅｘｃｈａｎｇｅ  ｗｉｔｈ  ｂｒａｉｎ  ｃｈｏｌｉｎｅ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  ２４：７２９−７３４に記載された方法に準拠してガスクロマトグラフィ／質量分析（ＧＣ／ＭＳ）を使用して検出される。放射免疫測定（ＲＩＡ）および高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）もまた、コリンを検出するために使用されてもよい。
【００４０】
本発明のなお別の態様では、コリン検出方法を利用する血栓症の危険性監視方法が提供される。したがって、例えば、ＴＰＮを受けている患者からの生体サンプル中のコリン濃度を経時的に測定することにより、血栓症の危険性の変化を監視すること、および／または血栓症を予防することを目指したコリン注入などの特定の治療法が有効かどうかを判断することが可能である。正常濃度より低いコリンは、血栓症の危険性と相関し、コリン濃度が低くなればなるほど、危険性はより大きくなる。反対に、正常濃度以上の濃度のコリンは、血栓症の危険性が無いこと、および／または血栓症の危険性が低いことと相関する。
【実施例】
【００４１】
以下の実施例は例示の目的のために示され、本発明がそれらの正確な実施形態に制限されるものではないことを理解すべきである。以下の実施例で開示された技術は、本発明の実施に際して良好に機能するための技術を表わしており、したがって、その実施のための好ましい形態を構成すると考えることができることが、当業者によって認識されるべきである。しかしながら、当業者は、本開示に照らして、発明の精神および範囲から逸脱することなく、多くの変更が、開示される特定の実施形態中で行なわれることができ、やはり同様または類似の結果を得ることができることを認識すべきである。実施例は以下の通りである：
実施例１：高ホモシステイン血症およびコリン欠乏症の間の相関性
長期的な在宅ＴＰＮ患者の無作為群の無血漿コリン濃度に関する前方視的研究 （Ｂｕｃｈｍａｎ  ＡＬ，Ｍｏｕｋａｒｚｅｌ  Ａ，Ｊｅｎｄｅｎ  ＤＪ，ｅｔ  ａｌ．Ｌｏｗ
ｐｌａｓｍａ  ｆｅｅ  ｃｈｏｌｉｎｅ  ｉｓ  ｐｒｅｖａｌｅｎｔ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ  ｌｏｎｇ  ｔｅｒｍ  ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｈｅｐａｔｉｃ  ａｍｉｎｏｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ  ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ．（１９９３）Ｃｌｉｎ  Ｎｕｔｒ．１２：３３−３７．）および５２７人の在宅ＴＰＮ患者群のカテーテル血栓症発生率の遡及研究（Ｂｕｃｈｍａｎ  ＡＬ，ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ．１３：３５６−３６０．）の過程で得られたデータは、高ホモシステイン血症およびコリン欠乏症の間の相関性を示す。研究された患者は、これらの被験者、すなわち１９９１年に無血漿コリン濃度を測定した被験者の部分集合を表わす。患者の診断結果は、下記の表１に表示される。
【００４２】
【表１】
2009505987.tif 000002
被験者の患者に使用されたカテーテルはすべて、Ｈｉｃｋｍａｎ（登録商標）またはＢｒｏｖｉａｃ（登録商標）タイプであり；経皮的穿刺中心静脈カテーテル（ＰＩＣＣ）はなかった。不適切な文書化のために、使用された単一内腔カテーテルの正確な数が確定できなかったけれども、全部ではないが大部分は、単一内腔であった。カテーテル先端は、挿入時に蛍光透視法によって、次いで全部ではないが殆どの患者において、胸部Ｘ線画像により、上大静脈または下大静脈のいずれかの中で確認された。ＴＰＮは、ブドウ糖（１５％から２５％の最終濃度）、遊離アミノ酸類（３．５％から５％の最終濃度）、電解質
類、ミネラル類、微量金属類および総合ビタミン剤の混合物を含む単一の１Ｌから３Ｌのバッグから成るものであった。脂質乳剤（２０％）は、「ピギーバック」様式で送達され；３：１乳剤は使用されなかった。１人を除き全ての患者は、個々の栄養素および／または流動液の必要性に依存して、１週当たり３から７日間、８から１２時間の周期的な夜間注入を受けた。ヘパリンは、全ての患者においてカテーテルフラッシュとして常套的に使用された。患者は彼らのカテーテル血栓症の前にはヘパリンまたはワルファリンを投与されていなかった。ヒドロコーチゾンはＴＰＮ溶液に添加されなかった。
【００４３】
カテーテルの困難なフラッシングもしくは注入、または手足、首もしくは顔の浮腫を根拠として臨床的に疑われたカテーテル血栓症が、カテーテルを通して、およびカテーテルの近位の両方での対比静脈造影法により確認された。対比静脈造影法により血栓症が証明されない患者は、この研究に含まれなかった。カテーテル内腔当たりウロキナーゼ５，０００の注入により解決した限局的血栓症に基づくだけの症状を有する患者は本研究では含まれなかったように、位置異常のカテーテルに関係する血栓症の患者は除外された。
【００４４】
２３１カテーテル年（１年間カテーテル留置の１人の患者＝１カテーテル年）を有する４１人の被験者がこの研究に含まれた。これには、５．８±５．０年間、在宅でＴＰＮを受けた２１人の男性（３４±２６歳）および５．６±４．１年間、在宅でＴＰＮを受けた２０人の女性（５５．１±１８．１歳）が含まれ、研究された。１６人（３９％）の患者が、カテーテル血栓症を発症し、５人が再発性カテーテル血栓症を有していた。これは、最初の血栓症研究における５２７人の患者（１１５４カテーテル年）の１１％に匹敵した。（Ｂｕｃｈｍａｎ  ＡＬ，ｅｔ．ａｌ．，（１９９４）Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ．１３：３５６−３６０．）年齢、性別、ＴＰＮ持続期間、およびＴＰＮ適応症は、カテーテル血栓症を発症した患者とそうでなかった患者との間では類似していた。  
【００４５】
血栓性素因の評価は、標準技術を使用して、血小板算定数、タンパク質Ｃ濃度、タンパク質Ｓ濃度、プラスミノーゲン濃度、抗トロンビンＩＩＩ濃度、ならびに抗カルディオリピン抗体および抗リン脂質抗体の測定によって試みられた。血小板増多症は、＞４５０，０００／ｍＬの血小板算定数として定義された。
【００４６】
１晩８時間から１０時間の絶食後、ヘパリン加血が無血漿のリン脂質結合コリンの測定のために得られた。検体は、直ちに氷の上に置いて、収集の２０分以内に４℃で３０００×ｇで遠心分離した；血漿は傾斜法で除去した。無血漿コリンは、ガスクロマトグラフィ／質量分析（ＧＣ／ＭＳ）（Ｊｅｎｄｅｎ  ＤＪ，Ｒｏｃｈ  Ｍ，Ｂｏｏｔｈ  ＲＡ．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  ａｎｄ  ｄｅｕｔｅｒｉｕｍ−ｌａｂｅｌｅｄ  ｔｒａｃｅｒ  ｖａｒｉａｎｔｓ  ｏｆ  ｃｈｏｌｉｎｅ  ａｎｄ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｉｎ  ｓｕｂｐｉｃｏｍｏｌｅ  ｑｕａｎｔｉｔｉｅｓ  ｂｙ  ｇａｓ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ．（１９７３）Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ５５：４３８−４４８；およびＦｒｅｅｍａｎ  ＪＪ，Ｃｈｏｉ  ＲＬ，Ｊｅｎｄｅｎ  ＤＪ．Ｐｌａｓｍａ  ｃｈｏｌｉｎｅ，ｉｔｓ  ｔｕｒｎｏｖｅｒ  ａｎｄ  ｅｘｃｈａｎｇｅ  ｗｉｔｈ  ｂｒａｉｎ  ｃｈｏｌｉｎｅ．（１９７５）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  ２４：７２９−７３４．）を使用して測定され、リン脂質結合コリンは、以下のＦｏｌｃｈら（Ａ  ｓｉｍｐｌｅ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌｉｐｉｄｓ  ｆｒｏｍ  ａｎｉｍａｌ  ｔｉｓｓｕｅ．（１９５７）Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２２６：４９７−５０９．）によって記載された抽出、およびＪｏｐｅおよびＪｅｎｄｅｎ（Ｊｏｐｅ  ＲＳ，Ｊｅｎｄｅｎ  ＤＪ．Ｃｈｏｌｉｎｅ  ａｎｄ  ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｉｎ  ｒａｔ  ｂｒａｉｎ．（１９７９）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｒｅｓ  ４：６９−８２）による加水分解に従って測定され
た。
【００４７】
結果はすべて、平均±標準偏差として示される。＜０．０５のｐ値は、統計学的な有意性を表示するものとして定義された。
【００４８】
無血漿コリンは、４１人の被験者のうちの３３人において正常値（１１．４±３．７  ｎｍｏｌ／ｍｌ）より下であり、カテーテル血栓症の既往歴がない患者では７．７±２．７ｎｍｏｌ／ｍｌであり、以前にカテーテル血栓症に罹患した患者では６．２±１．７ｎｍｏｌ／ｍｌであった（Ｗｉｌｃｏｘｉｎの順位和検定でｐ＝０．０７６）。その差は統計学的には有意ではなかったが、無血漿コリン濃度は、＞１の血栓を有する患者および１つの事象だけを有する患者よりもより低い傾向があった（６．０±１．８ｎｍｏｌ／ｍｌ対７．７±２．７ｎｍｏｌ／ｍｌ）。無血漿コリン濃度と、カテーテル持続を制御した後の凝固の頻度との間の偏相関分析は、ｒ＝−０．３３、ｐ＝０．０３８であった。
【００４９】
血漿リン脂質結合コリン濃度は、４１人の被験者のうちの３４人において正常であり、以前にカテーテル血栓症に罹患した患者では２１９１．７±６７９．０ｎｍｏｌ／ｍｌであり、カテーテル血栓症の病歴のない患者（ｐ＝ＮＳ）では、２１０３．３±５３１．２ｎｍｏｌ／ｍｌであった。  
【００５０】
患者は血小板増多症、タンパク質Ｃ欠乏症、タンパク質Ｓ欠乏症、プラスミノーゲン欠乏症、または抗トロンビンＩＩＩ欠乏症、血小板増多症、抗カルディオリピン抗体もしくは抗リン脂質抗体、活性型の炎症性腸疾患または悪性腫瘍を有していなかった。第Ｖ因子Ｌｅｉｄｅｎ遺伝子変異アッセイおよびプロトロンビン遺伝子突然変異アッセイは、データ収集の時点では利用可能ではなかった。ホモシステイン濃度は、研究が試みられた時点では、高い血漿ホモシステイン濃度が動脈血栓症または静脈血栓症のいずれかの危険要因を示すということがその時に知られていなかったので測定されなかったし、患者の多くは、今では死亡している。
【００５１】
カテーテル血栓症の患者はすべて、最初にヘパリンで、続いてカテーテルの除去および置換の前にワルファリンで血液凝固が阻止された。しかしながら、再発性カテーテル血栓症の患者はすべてではないが、再発の際には治療用プロトロンビンを服用していた。ある試みが初期血栓症の後での抗凝固療法でなされたとすれば、コリンの状態は抗凝固療法にもかかわらず変わらなかっただろうから、この抗凝固療法は、後の血栓形成の危険性の減少につながり、したがって、コリンと血栓症の間の相関性を減少させたように思われる。したがって、我々は、我々の最初の報文（Ｂｕｃｈｍａｎ  ＡＬ，ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ．１３：３５６−３６０．）からの患者のこの部分集合においてカテーテル血栓症の発生率がはるかに大きい理由が、我々の研究の患者がＴＰＮのはるかに大きな持続期間（５．７年対０．６年）を有していたという事実に主として関係があるのではないかということに対しては疑問視する。
【００５２】
血漿ホモシステイン濃度は我々の患者では測定されなかったが、Ｃｏｍｐｈｅｒら（Ｈｙｐｅｒｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅｍｉａ  ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｖｅｎｏｕｓ  ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｓｈｏｒｔ  ｂｏｗｅｌ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ．（２００１）ＪＰＥＮ  ２５：１−７．）によって報告されたＴＰＮ依存性の短腸症候群の患者における高い血漿ホモシステインとカテーテル血栓症の発生率との間の相関性があるとすると、こうした研究者が観察した血漿ホモシステインの上昇は、実際、コリン欠乏症によって引き起こされたように思える。我々の患者が十分な静脈内の葉酸、ピリドキシン（Ｂ６）およびＢ１２の補充を既に受けたとすれば、コリン欠乏症は恐らく、我々が観察した血栓症の事象の多くに対する最大の理由であった。
【００５３】
ホモシステイン代謝は、再メチル化のためのメチル供与体を要求するので、コリンなどのメチル供与体の欠乏は、高ホモシステイン血症を引き起こし得る。Ｃｏｍｐｈｅｒらによって観察されたホモシステイン濃度の増加は、肝臓のトランスサルフレーション経路における欠陥と一致する。それは、代謝を要求する栄養素が門脈循環を回避し、静脈内に送達される場合に生じる。Ｓｔｅｇｉｎｋ  ＬＤ，Ｄｅｎ  Ｂｅｓｔｅｎ  Ｌ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｃｙｓｔｅｉｎｅ  ｆｒｏｍ  ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ  ｉｎ  ｎｏｒｍａｌ  ａｄｕｌｔ  ｓｕｂｊｅｃｔｓ：ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｒｏｕｔｅ  ｏｆ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．（１９７２）Ｓｃｉｅｎｃｅ  １７８：５１４−５１５；  およびＣｈａｗｌａ  ＲＫ，Ｂｅｒｒｙ  ＣＪ，Ｋｕｔｎｅｒ  ＭＨ，Ｒｕｄｍａｎ  Ｄ．Ｐｌａｓｍａ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｓｕｌｆｕｒａｔｉｏｎ  ｐａｔｈｗａｙ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ  ｄｕｒｉｎｇ  ｎａｓｏｅｎｔｅｒａｌ  ａｎｄ  ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ  ｈｙｐｅｒａｌｉｍｅｎｔａｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｌｎｏｕｒｉｓｈｅｄ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．（１９８５）Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｎｕｔｒ  ４２：５７７−５８４。高い血漿ホモシステイン濃度が静脈血栓症の危険性を増加させるメカニズムは確かではないが、それは、トロンボモジュリン依存性のタンパク質Ｃの活性化の阻害（Ｒｏｄｇｅｒｓ  ＧＭ，Ｃｏｎｎ  ＭＴ．Ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，ａｎ  ａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ  ｓｔｉｍｕｌｕｓ，ｒｅｄｕｃｅｓ  ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｂｙ  ａｒｔｅｒｉａｌ  ａｎｄ  ｖｅｎｏｕｓ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ．（１９９０）Ｂｌｏｏｄ  ７５：８９５−９０１．）または内皮の一酸化窒素産生の阻害を伴い得る。Ｓｔａｍｌｅｒ  ＪＳ，Ｏｓｂｏｒｎｅ  ＪＡ，Ｊａｒａｋｉ  Ｏ，ｅｔ  ａｌ．Ａｄｖｅｒｓｅ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ  ａｒｅ  ｍｏｄｕｌａｔｅｄ  ｂｙ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｒｅｌａｘｉｎｇ  ｆａｃｔｏｒ  ａｎｄ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｏｘｉｄｅｓ  ｏｆ  ｎｉｔｒｏｇｅｎ．（１９９３）Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  ９１：３０８−３１８；およびＵｐｃｈｕｒｃｈ  ＧＲ，Ｗａｌｃｈ  ＧＮ，Ｆａｂｉａｎ  ＡＪ，ｅｔ  ａｌ．Ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ  ｄｅｃｒｅａｓｅｓ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｅ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｂｙ  ａ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ
ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ．（１９９７）Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７２：１７０１２−１７０１７。
【００５４】
歴史的に見ると、葉酸欠乏症、ビタミンＢ１２欠乏症またはビタミンＢ６欠乏症だけが高い血漿ホモシステイン濃度をもたらすことが示唆されてきた。Ｓｔｉｐａｎｕｋ  ＭＨ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｏｆ  ｓｕｌｆｕｒ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ．（１９８６）Ａｎｕ  Ｒｅｖ  Ｎｕｔｒ  ６：１７９−２０９；およびＳｅｌｈｕｂ  Ｊ，Ｊａｃｑｕｅｓ  ＰＦ，Ｗｉｌｓｏｎ  ＰＷＦ，ｅｔ  ａｌ．Ｖｉｔａｍｉｎ  ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  ｉｎｔａｋｅ  ａｓ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ  ｏｆ  ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅｍｉａ  ｉｎ  ａｎ  ｅｌｄｅｒｌｙ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．（１９９３）ＪＡＭＡ  ２７０：２６９３−２６９８。血清葉酸濃度およびビタミンＢ１２濃度は測定されなかったけれども、我々の患者はすべてＴＰＮ（１つのバッグ当たり、葉酸０．６ｍｇ／日、ピリドキシン６ｍｇおよびＢ１２５ｍｇ）でこれらを摂取していた。これらの投薬量が、同様の経口投与量からのはるかに低い利用能と比較して、それらの送達の性質から１００％生物学的に利用できるとすれば、それは患者に存在したいずれかのビタミンの欠乏ではないようである。
【００５５】
実施例２：カテーテル血栓症を予防する方法
低い無血漿コリン濃度を有することが知られており、長時間の在宅ＴＰＮを受けている患者は、コリン補充ＴＰＮ溶液を投与される。コリン塩が補充された栄養液（溶液１リットル当たり、約０．２５グラムから約８グラムのコリン塩を有する）は患者の静脈内に投与される。栄養液に添加されるコリンの量は、患者の無血漿コリン濃度、高ホモシステイ
ン血症の程度、およびコリン欠乏症に関連した他の医療問題の重篤度に依存して変えられてもよい。コリン補充栄養液は、１０時間から２４時間の時間をかけて、単回投与として投与される。
【００５６】
実施例３：カテーテル血栓症を予防する方法
低い無血漿コリン濃度を有することが知られており、長時間の在宅ＴＰＮを受けている患者は、治療上有効量のコリンを投与される。コリン塩溶液（溶液１リットル当たり、約０．２５グラムから約８グラムのコリン塩を有する）は、患者の静脈内に投与される。溶液中のコリンの量は、患者の無血漿コリン濃度、高ホモシステイン血症の程度、およびコリン欠乏症に関連した他の医療問題の重篤度に依存して変えられてもよい。コリン溶液は、１０時間から２４時間の時間をかけて、単回投与として投与される。
【００５７】
実施例４：カテーテル血栓症の危険性を診断する方法
血液または血清のサンプルはＴＰＮを受けている患者から得られ、サンプル中の無血漿コリン濃度は、Ｊｅｎｄｅｎ  ＤＪ，Ｒｏｃｈ  Ｍ，Ｂｏｏｔｈ  ＲＡ。Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  ａｎｄ  ｄｅｕｔｅｒｉｕｍ−ｌａｂｅｌｅｄ  ｔｒａｃｅｒ  ｖａｒｉａｎｔｓ  ｏｆ  ｃｈｏｌｉｎｅ
ａｎｄ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｉｎ  ｓｕｂｐｉｃｏｍｏｌｅ  ｑｕａｎｔｉｔｉｅｓ  ｂｙ  ｇａｓ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ．（１９７３）Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ５５：４３８−４４８，１９７３および Ｆｒｅｅｍａｎ  ＪＪ，Ｃｈｏｉ  ＲＬ，Ｊｅｎｄｅｎ  ＤＪ．（１９７５）Ｐｌａｓｍａ  ｃｈｏｌｉｎｅ，ｉｔｓ  ｔｕｒｎｏｖｅｒ  ａｎｄ  ｅｘｃｈａｎｇｅ  ｗｉｔｈ  ｂｒａｉｎ  ｃｈｏｌｉｎｅ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  ２４：７２９−７３４に記載された方法に従って、ガスクロマトグラフィ／質量分析（ＧＣ／ＭＳ）を使用して検出される。正常な濃度と比較して、無血漿コリンの低い、または減少した濃度は、カテーテル血栓症の増加した危険性を示す。経時的なコリン濃度の変化も、コリン注入による予防処置の有効性を追跡するために監視してもよく、および／またはカテーテル血栓症の危険性における決定的な要因としてコリン濃度における傾向を検知してもよい。
【００５８】
実施例５：高ホモシステイン血症を減少または予防する方法
２人の女性の正常なボランティアが、Ｃ−１３で標識されたコリンを注入され、注入の前後にホモシステインの血漿濃度の測定を受けた。ホモシステインの血漿濃度は、６．６２μｍｏｌ／Ｌおよび７．４７μｍｏｌ／Ｌから５．１４μｍｏｌ／Ｌおよび６．６４μｍｏｌ／Ｌにそれぞれ減少したが、このことはコリンの投与が高ホモシステイン血症の危険性を減少させる、あるいは高ホモシステイン血症を予防することができることを証明している。
【国際調査報告】
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