(57)【要約】皮膚および粘膜吸収性に優れたフリーラジカル性疾患用外用剤を提供する。  ３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンにその皮膚および／または粘膜における薬物代謝を抑制する代謝抑制剤を組み合せて外用剤とする。
2009041714.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン、製薬上許容されるその塩および誘導体から選ばれる少なくとも１種の化合物、および皮膚および／または粘膜において該化合物に対する残存代謝活性を、本来該化合物に対して示される代謝活性の８０％以下に抑制する代謝抑制剤を含有することを特徴とするフリーラジカル性疾患用外用剤である。
【請求項２】
代謝抑制剤を該化合物に対し０．０５〜２５のモル比で含有することを特徴とする請求項１記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項３】
代謝抑制剤がアミノ酸類、アゾール化合物、亜硫酸塩、キレート剤から選ばれる少なくとも１種の化合物である請求項１または２記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項４】
アミノ酸類がシステイン、メチオニン、アルギニン、Ｎ−アセチル−Ｌ−システインそれらの製薬上許容される塩および誘導体から選ばれる少なくとも１種の化合物である請求項３記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項５】
アゾール化合物がベンゾトリアゾール、２−メルカプトベンゾイミダゾールおよびそれらの製薬上許容される塩および誘導体から選ばれる少なくとも１種の化合物である請求項３記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項６】
亜流酸塩が亜硫酸水素ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウムおよび亜硫酸ナトリウムから選ばれる少なくとも１種の化合物である請求項３記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項７】
キレート剤がエデト酸カルシウム２ナトリウムおよび／またはエデト酸２ナトリウムである請求項３記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項８】
さらにシクロデキストリンを含有する請求項１〜７記載のいずれか１項記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項９】
さらにエタノールを含有する請求項１〜８記載のいずれか１項記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項１０】
フリーラジカル性疾患用外用剤が経皮吸収剤、経鼻吸収剤、経肺吸収剤、口腔粘膜吸収剤、点眼剤、眼軟膏剤、坐剤および／または膣剤である請求項１〜９記載のいずれか１項記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項１１】
投与形態が液、固形、半固形、乳、懸濁状または貼付剤のいずれかである請求項１〜１０のいずれか１項記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項１２】
３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン、製薬上許容されるその塩および誘導体から選ばれる少なくとも１種の化合物を必須成分として含有するフリーラジカル性疾患用外用剤に対する残存代謝活性を本来該化合物に対して示される代謝活性の８０％以下に抑制する代謝抑制剤を含有させることにより該化合物の代謝を抑制し、該化合物の皮膚および／または粘膜への移行および吸収を増大させることを特徴とするフリーラジカル性疾患用外用剤における必須成分の皮膚および／または粘膜への移行および吸収を増大させる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体内のフリーラジカルに起因した疾患の予防および／または治療用の径皮または／および経粘膜吸収の外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンのエダラボンの名称で、生体内フリーラジカルに由来する疾患に対する治療薬として点滴用注射剤の形で実用されている。一方、本発明者等は３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン、その許容される塩または／および誘導体（以下、これを「３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン」と称す）が皮膚および粘膜を介して効果的に吸収されることを知見し、そのフリーラジカル性疾患用外用剤としての使用を提案した（特開２００４−９９４８６号公報）。
【発明の開示】
【０００３】
発明の目的
投与の簡単な外用剤として皮膚または粘膜を介して３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンをフリーラジカル性疾患の治療または予防に用いるためには、十分な薬物量で吸収されることが強く望まれる。
本発明の目的は、上記した課題を解決することにある。
発明の要約
本発明者等は、３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンを皮膚および粘膜に適応したとき投与部位における薬物代謝を抑制することによって意外にも従来の技術に比べ投与部位の薬物量を増加し、皮膚吸収性および粘膜吸収性を増大することを知見し、本発明に到達した。
即ち、本発明は３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン、製薬上許容されるその塩および誘導体から選ばれる少なくとも１種の化合物、および皮膚および／または粘膜において該化合物に対する残存代謝活性を、本来該化合物に対して示される代謝活性の８０％以下に抑制する代謝抑制剤を含有することを特徴とするフリーラジカル性疾患用外用剤である。
本発明のフリーラジカル性疾患用外用剤は、さらにシクロデキストリン、エタノールおよび／または非イオン性界面活性剤も共存させることが好ましい。
発明の効果
本発明の外用剤は皮膚および粘膜に投与されたとき皮膚および粘膜からの３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの体内吸収量が顕著に増大し、その結果、フリーラジカルを主体とする疾患に適した種々の投与形態で最適の予防および治療を行うことが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【０００４】
図１は実施例１における代謝抑制剤の有無による代謝活性の差を示すグラフである。
図２は実施例２における代謝抑制剤の有無による皮膚透過性の差を示すグラフである。
図３は実施例３における代謝抑制剤の量と代謝活性の関係を示すグラフである。
図４は実施例４における代謝抑制剤の有無による口腔粘膜吸収性の差を示すグラフである。
図５は実施例５における代謝抑制剤の有無による直腸吸収性の差を示すグラフである。
図６は参考例における代謝抑制剤の有無による安定性の差を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００５】
本発明においてフリーラジカル性疾患とは、生体内フリーラジカルによる疾患であれば特に限定されないが、例えば神経因性疼痛、エネルギー代謝障害、炎症、細胞または細胞膜障害による各種疾患および白血病、異常ヘモグロビン症、敗血症などの血液疾患、脳浮腫、脳梗塞、脳出血、パーキンソン病などの脳神経系疾患、心筋梗塞、不整脈、動脈硬化、などの心血管系病変、肺炎、喫煙障害、気道閉塞性障害などの呼吸器疾患、胃粘膜障害、大腸炎、肝硬変、膵炎などの消化器疾患、糸球体腎炎、溶血性腎障害などの腎疾患、糖尿病、ストレス反応などの内分泌系疾患、白内障、角膜潰瘍などの眼疾患、アトピー性疾患、関節リウマチ、膠原病など自己免疫疾患、アレルギー、放射線障害による疾患、感染症など生体内フリーラジカルが関与する疾患を指す。
本発明では３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの皮膚および／または粘膜局所における薬物代謝を抑制することが不可欠であり、その機能を示す代謝抑制剤が併用される。
本発明で用いる代謝抑制剤は皮膚および／または粘膜部位において３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの代謝を抑制することが可能であれば特に限定されないが、その代謝抑制効果は、３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンに対する残存代謝活性が本来該化合物に対して示される代謝活性の８０％以下であり、好ましくは７０％以下、さらに好ましくは６０％以下である。
皮膚または粘膜を介して３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンをフリーラジカル性疾患の治療または予防に用いるための該化合物の皮膚および／または粘膜局所における薬物代謝を抑制する代謝抑制剤の含有量は、該化合物に対する代謝抑制剤のモル比が０．０５〜２５であり、好ましくは０．１〜１５、さらに好ましくは０．２〜１０である。
本発明で用いる代謝抑制剤は皮膚および／または粘膜部位において３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの代謝を抑制することが可能であれば特に限定されないが、通常アミノ酸類、アゾール化合物、亜硫酸塩、キレート剤、亜硝酸塩、ビタミン類、チオール化合物、フェノール性抗酸化剤、界面活性剤から選択できる。好ましい代謝抑制剤の例としては塩基性アミノ酸、含流アミノ酸および／またはその塩および／または誘導体、トリアゾールおよび／または誘導体、イミダゾールおよび／または誘導体、亜硫酸水素ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウム、亜硫酸アンモニウム、亜硫酸鉄、エデト酸塩、さらに好ましくはアルギニン、システイン、システイン塩酸塩、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン、メチオニン、アラニン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、リジン、ベンゾトリアゾール、２−メルカプトベンゾイミダゾール、エデト酸カルシウム２ナトリウム、エデト酸２ナトリウムがある。
本発明における製剤中の３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン含有量は、通常０．０１〜７０Ｗ／Ｗ％であり、好ましくは０．１５〜６０Ｗ／Ｗ％、さらに好ましくは０．７〜３０Ｗ／Ｗ％である。
本発明における製剤中の代謝抑制剤の含有量は皮膚および／または粘膜における薬物代謝を抑制するに足る量であり、通常０．００１〜４０Ｗ／Ｗ％であり、好ましくは０．００２〜３５Ｗ／Ｗ％、さらに好ましくは０．０１〜３０Ｗ／Ｗ％の範囲から選択される。
本発明におけるフリーラジカル疾患用外用剤は３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンとこの化合物の皮膚および／または粘膜における薬物代謝を抑制する代謝抑制剤を含有することを必須とするが、さらにシクロデキストリン（その誘導体も含む）を含むことが好ましい。シクロデキストリンとしては３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンと錯体を形成しうるものが好ましく用いられる。
それらの例としては、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、それらのアルキル化誘導体、アシル化誘導体、窒素を含む誘導体、ハロゲン化誘導体、６−デオキシ誘導体、イオウを含む誘導体、シリル化誘導体、カルボン酸基を含む誘導体、カーボネートおよびカーバメート、グルコシル−シクロデキストリン等があげられ、さらに好ましくはメチル、エチル、プロピル、アリル、ヒドロキシアルキル、ベンジルトリチル化等の誘導体、アセチル、ベンゾイル、トシル、メシル、サクシニル、シンナモイル、グルタリル、ラウリル等の誘導体、アミノ、アルキルアミノ、アジド、イミダゾイル、ピペリジル、アデニル、ヒスタミニル、ピリジン等の誘導体、ジメチルシリル、トリメチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル等の誘導体等があげられる。
シクロデキストリンは３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン１モルに対し約０．５〜４モルの量を用いることが好ましい。またシクロデキストリンの代わりに、またはシクロデキストリンと共にエタノールを用いることも好ましい。エタノールの量は１〜６０Ｗ／Ｗ％から適宜選択しうる。
また、該化合物の薬物代謝を抑制する代謝抑制を含有した製剤に非イオン性界面活性剤を単独、シクロデキストリンとの併用、エタノールと併用することも好ましい。非イオン性界面活性剤としては自己乳化型モノステアリン酸グリセリン、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンノニルフェニルエーテル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、モノグリセリン脂肪酸エステル、ラウロマクロゴール、レシチン、水添レシチンなどがあげられ、それらのＨＢＬ値は３以上、好ましくは６以上、さらに好ましくは８以上が好ましい。
本発明における半固形状、液状および懸濁状における液性は特に限定されないが、通常ｐＨ３〜１２であり、好ましくはｐＨ３〜８、さらに好ましくはｐＨ３．５〜７に調整することもできる。
本発明の外用剤は、非経口投与可能であれば特に限定されないが、経皮吸収剤、経粘膜吸収剤、点眼剤および眼軟膏剤などがあげられる。経粘膜吸収剤としては経肺吸収剤、経鼻吸収剤、口腔粘膜吸収剤、坐剤、膣剤などがあげられる。半固形状製剤は軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤等、液状製剤は溶液、懸濁液、ローション、乳液等、固形剤としてはスチック剤、シート剤、口腔内錠、膣錠等があげられ、貼付剤としては、ハップ剤、プラスター剤、パッチ剤、口腔内貼付剤等があげられ、必要に応じリポソーム化の技術やマイクロおよび／またはナノ粒子化の製剤技術を用いることもできる。また、溶液、懸濁液、ローション、乳液等は点眼剤、エアゾールまたはスプレー剤とすることもできる。
本発明の製剤中に通常の外用剤と同様に吸収促進剤を配合しうる。その種類は特に限定されない。具体的にはカプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸などの脂肪酸およびその塩、ジメチルポリシロキサン、ひまし油、ハッカ油、アジピン酸ジイソプロピル、セバシン酸ジエチル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、中鎖脂肪酸トリグリセリド、モノテルペン、ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミン、ミリスチン酸セチル、ミリスチン酸ミリスチル、コレステロール、クロタミトン、スクワラン、スクワレン、炭酸プロピレン等の親油性成分、アルキルアリルポリエーテルアルコール、高級アルコール硫酸化物、Ｎ−コイル−Ｌ−アルギニンエチルエステルＤＬ−ピロリドンカルボン酸塩、自己乳化型モノステアリン酸グリセリン、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンノニルフェニルエーテル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、モノグリセリン脂肪酸エステル、ラウロマクロゴール、ラウリル硫酸ナトリウム、四級アンモニウム塩、レシチン、水添レシチン等の界面活性剤、コール酸、グリココール酸、タウロコール酸、ウルソデオキシコール酸、デオキシコール酸などの胆汁酸およびその塩、カプリルアルコール、ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、リノリルアルコール等の高級アルコール、グリセリン、プロピレングリコール、ジプロプレングリコール、１，３−ブチレングリコール等の多価アルコール、ベンジルアルコール、ステアリルアルコール、ゲラニオール変性アルコール、メタノール変性アルコール、八アセチルしょ糖変性アルコール、イソプロピルアルコール、メタノール等の前記したエタノール以外のアルコール等が必要に応じて用いられる。
本発明における外用剤中に配合される吸収促進剤の量は０．０５〜８０Ｗ／Ｗ％であり、好ましくは０．５〜７０Ｗ／Ｗ％、さらに好ましくは１〜６０Ｗ／Ｗ％の範囲から適宜選択しうる。
本発明における製剤中に任意成分として製剤上許容される適宜の添加成分を配合することができる。これらの任意成分としては製剤学上通常用いられる基剤、添加剤等があげられる。これら基剤、添加剤はなんら限定されるものではないが、例えば親水軟膏、吸水軟膏をはじめとする乳剤性基剤、ポリエチレングリコール等の親水性基剤、ワックス、ワセリン、プラスチベース、ミツロウ、生ゴム、ＲＳＮｏ１生ゴム、アクリル酸メチルｎ−ブチルコポリマー、脂環族飽和炭化水素樹脂、脂肪族炭化水素樹脂、スチレンイソプレンゴム、スチレン・イソプレン・スチレンブロック共重合体、スチレンブタジエンゴム、ステアリン酸ナトリウム、天然ゴム、天然ゴムラテックス、テルペン樹脂、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸部分中和物、ポリイソブチレン、ポリイソプレン、流動パラフィン、ゼラチン、シリコン系樹脂、アクリル系樹脂等の基剤、白糖、ブドウ糖、キシリトール、マルチトール、マルトース、Ｄ−マンニトール、乳糖、セルロース等の賦形剤、アスコルビン酸およびその塩または誘導体、亜硝酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、塩酸シスチン、酢酸トコフェロール、天然ビタミンＥ、ＢＨＴ、ＢＨＡ、オキシベンゾン、サリチル酸、サリチル酸ナトリウム、エリソルビン酸およびその塩、クエン酸およびその塩等の安定化剤、プルラン、ペクチン、キサンタンガム、アルギン酸およびその塩または誘導体、アラビアゴム、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等の多糖類、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カーボポール等の増粘剤およびＮ−メチルピロリドン、有機アミン、高級アルコール、エタノール等低級アルコール、多価アルコール、精製水等の溶剤のほか、シクロデキストリン、水素添加ロジングリセリンエステル、石油樹脂、ロジン、水系アクリルエマルション、アクリル酸・アクリル酸オクチルエステル共重合体、アクリル酸エステル・酢酸ビニルコポリマー、アクリル酸２−エチルヘキシル・ビニルピロリドン共重合体、アクリル酸２−エチルヘキシル・メタクリル酸ドデシル共重合体等の添加剤を用いることができる。また、緩衝剤、ｐＨ調整剤、保存剤、エチレン・酢酸ビニル共重合体等の放出制御膜等も必要に応じて用いることができる。
半固形状製剤中に配合される任意成分としては製剤上許容される適宜の添加成分がある。それらの成分はなんら限定されたものではない。具体的には、親水軟膏、吸水軟膏をはじめとする乳剤性基剤、ポリエチレングリコール等の親水性基剤、ワックス、ワセリン、プラスチベース、ミツロウ、高級アルコール、脂肪酸およびその塩等の油性基剤、流動プラフィン等の基剤、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カーボポール等の増粘剤、低級アルコール、多価アルコール、精製水等の溶剤、界面活性剤、安定化剤、多糖類、増粘剤、緩衝剤、ｐＨ調整剤等を必要に応じて用いることができる。
液状および懸濁状製剤中に配合される任意成分としては製剤上許容される適宜の添加成分がある。これらの成分もなんら限定されたものではない。具体的には、流動パラフィン等高級アルコール、脂肪酸およびその塩等の油性基剤、流動パラフィン、ポリアクリル酸部分中和物等の基剤、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カーボポール等の親水性高分子、低級アルコール、多価アルコール、精製水等の溶剤、界面活性剤、安定化剤、多糖類、増粘剤、緩衝剤、ｐＨ調整剤等が必要に応じて用いられる。
固形剤中に配合される任意成分としては製剤上通常用いられる適宜の添加成分である。それらの成分も何ら限定されたものではないが、ポリエチレングリコール等の親水性基剤、ワックス、ワセリン、プラスチベース、ミツロウ、高級アルコール、脂肪酸およびその塩等の油性基剤、流動パラフィン等の基剤、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カーボポール等の増粘剤、低級アルコール、多価アルコール、精製水等の溶剤、賦形剤、界面活性剤、安定化剤、多糖類、増粘剤、緩衝剤、ｐＨ調整剤等が必要に応じて用いられる。
貼付剤中に配合される任意成分としては製剤上通常用いられる適宜の添加成分がある。それらの成分も何ら限定されたものではない。具体的には生ゴム、ＲＳＮｏ１生ゴム、アクリル水系エマルション、アクリル酸メチルｎ−ブチルコポリマー、脂環族飽和炭化水素樹脂、脂肪族炭化水素樹脂、スチレンイソプレンゴム、スチレン・イソプレン、スチレンブロック共重合体、スチレンブタジエンゴム、ステアリン酸ナトリウム、天然ゴム、天然ゴムラテックス、テルペン樹脂、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸部分中和物、ポリイソブチレン、ポリイソプレン、流動パラフィン、ゼラチン、シリコン系樹脂、アクリル系樹脂等の基剤、澱粉、アルギン酸ナトリウム、セルロース等の多糖類、水素添加ロジングリセリンエステル、石油樹脂、ロジン、アクリル酸・アクリル酸オクチルエステル共重合体、アクリル酸エステル・酢酸ビニルコポリマー、アクリル酸２−エチルヘキシル・ビニルピロリドン共重合体、アクリル酸２−エチルヘキシル・メタクリル酸ドデシル共重合体、等の添加剤を用いることができる。また、緩衝剤、ｐＨ調整剤、保存剤、エチレン・酢酸ビニル共重合体等の放出制御膜等も必要に応じて用いることができる。
本発明の３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンとこの化合物の皮膚および／または粘膜における薬物代謝を抑制する代謝抑制剤を含有する本発明のフリーラジカル性疾患用外用剤は皮膚、粘膜に投与されたとき投与部位における薬物の代謝を抑制し、投与部位の薬物量を増加させることによって薬物の体内吸収量を増大させるためフリーラジカル性疾患を予防および治療するに十分な薬物量を吸収させることが可能であると共に簡便で早期の病態から有効かつ安全に投与できるフリーラジカル性疾患を予防および治療に極めて有用である。
【実施例】
【０００６】
本発明を例証するために、実施例をあげて説明する。ただし、これらは本発明の一具体例であり、本発明はこれになんら限定されるものではない。
実施例１
ヘアレスラットの摘出皮膚をホモジナイズし、１０，０００ｇで２０分間遠心分離した上澄液０．２５ｍＬにｐＨ７．５リン酸緩衝液０．１７５ｍＬ、代謝抑制剤溶液または懸濁液（亜硫酸ナトリウム（ＳＳｉ）、システイン（Ｃｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、ベンゾトリアゾール（ＢＴＡ）、２−メルカプトベンゾイミダゾール（ＭＢＩ））０．０５ｍＬ（１μモル）を添加し３７℃で３０分間インキュベーションした後、３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン溶液を０．０２５ｍＬ（６０ｎモル）を添加して３７℃で３０分間インキュベーションした。この上澄液中の３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン量をＨＰＬＣで測定した。
結果は、代謝抑制剤の添加したときの残存する代謝活性を代謝抑制剤未添加による本来該化合物に対して示される代謝活性（コントロール）に対する率で表した。
その結果を図１に示す。
図からも明らかなように、亜硫酸ナトリウム、システイン、アルギニン、ベンゾトリアゾール、２−メルカプトベンゾイミダゾールの添加によって残存する皮膚の３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン代謝活性はいずれもコントロールに比べ低下した。このことによって代謝抑制剤によって皮膚中３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン量が増加することがわかった。
実施例２
フランツ型拡散セルにヘアレスラット摘出皮膚を挟みドナー側には３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン（０．７Ｗ／Ｗ％）、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（１０Ｗ／Ｗ％）、亜硫酸水素ナトリウム（０．１Ｗ／Ｗ％）およびＬ−システイン（０．６Ｗ／Ｗ％）含有液剤１ｍＬを入れた。また、レシーバー側には精製水を用い、皮膚を透過した３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン量をＨＰＬＣで測定し、代謝抑制剤の含有による皮膚透過性改善効果を検討した。
その結果を図２に示す。
図５の結果からも明らかなように、代謝抑制剤を添加した液剤において３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの皮膚透過性が改善されることがわかった。
実施例３
ヒトから採取した唾液を遠心分離し、その上澄液０．２５ｍＬにｐＨ７．５リン酸緩衝液０．１７５ｍＬ、代謝抑制剤溶液（システイン（Ｃｙｓ））０．０５ｍＬ（１−０．０１μモル）を添加し３７℃で３０分間インキュベーションした後、３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン溶液を０．０２５ｍＬ（６０ｎモル）を添加し３７℃で３０分間インキュベーションした。この上澄液中の３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン量をＨＰＬＣで測定した。
結果は、代謝抑制剤の添加したときの残存する代謝活性を代謝抑制剤未添加による本来該化合物に対して示される代謝活性（コントロール）に対する率で表した。その結果を図３に示す。
図３からも明らかなように、システインの添加によって残存する唾液中の３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン代謝活性はいずれもコントロールに比べ低下した。このことによって代謝抑制剤によって口腔粘膜中３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン量が増加することがわかった。
実施例４
雄性ウィスターラット（３００〜３３０ｇ）を麻酔下で保定し、代謝抑制剤を含まない３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン（２Ｗ／Ｗ％）、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（４０Ｗ／Ｗ％）含有液剤、代謝抑制剤を含む３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン（２Ｗ／Ｗ％）、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（４０Ｗ／Ｗ％）、亜硫酸水素ナトリウム（０．３Ｗ／Ｗ％）およびＬ−システイン（０．６Ｗ／Ｗ％）含有液剤をラット口腔内に噴霧した。液剤噴霧後１．５分〜６０分にラット頸静脈から採血し、血漿中の３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン量をＨＰＬＣで測定し、代謝抑制剤を含有による吸収性改善効果を検討した。
その結果を図４に示す。
図４の結果からも明らかなように、代謝抑制剤を添加した液剤の３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンのラット口腔粘膜吸収性は増加し、代謝抑制剤の添加は３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの粘膜吸収性を改善することがわかった。
実施例５
雄性ウィスターラット（３００〜３３０ｇ）を麻酔下で保定し、代謝抑制剤を含まない３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン（１Ｗ／Ｗ％）、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（２０Ｗ／Ｗ％）含有液剤、３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン（１Ｗ／Ｗ％）、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（２０Ｗ／Ｗ％）、亜硫酸水素ナトリウム（１．０Ｗ／Ｗ％）およびＬ−システイン（０．６Ｗ／Ｗ％）含有液剤をラット直腸内に投与した。投与後１．５分〜６０分にラット頸静脈から採血し、血漿中の３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン量をＨＰＬＣで測定し、代謝抑制剤を含有による吸収性改善効果を検討した。
その結果を図５に示す。
図５の結果からも明らかなように、代謝抑制剤を添加した液剤の３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンのラット直腸吸収性は増加し、代謝抑制剤の添加は３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの粘膜吸収性を改善することがわかった。
参考例
上記した実施例の結果が３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの経時的含有量の変化によるものではないことを確認するため８０℃３０分における代謝抑制剤添加の有無による３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの安定性を比較した。また、安定性の試験においては３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン含有液剤（代謝抑制剤未添加）、３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンおよび亜硫酸水素ナトリウム含有液剤（代謝抑制剤添加）を用いた。その結果を図６に示す。
図６の結果からも明らかなように、代謝抑制剤添加の有無にかかわらず３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの８０℃３０分における残存率はいずれも９５％以上であった。
このことから皮膚、粘膜、唾液等における３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの代謝抑制、皮膚透過性および粘膜吸収性改善３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの安定化による効果ではないことがわかった。
以上のように３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン（その塩および／または誘導体を包含する）の皮膚および／または粘膜における薬物代謝を抑制する代謝抑制剤を含有するフリーラジカル性疾患用外用剤は、３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンの皮膚、粘膜内薬物量を増加させると共に吸収性を増大し、安全に投与でき薬物治療にきわめて有用な外用剤である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【手続補正書】
【提出日】平成21年6月29日(2009.6.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン、製薬上許容されるその塩および誘導体から選ばれる少なくとも１種の化合物、３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンと錯体を形成するシクロデキストリン化合物および皮膚および／または粘膜において該化合物に対する残存代謝活性を、本来該化合物に対して示される代謝活性の８０％以下に抑制する代謝抑制剤を含有すると共に、該代謝抑制剤がアミノ酸類、アゾール化合物、亜流酸塩およびキレート剤から選ばれる少なくとも１種の化合物であることを特徴とするフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項２】
代謝抑制剤を該化合物に対し０．０５〜２５のモル比で含有することを特徴とする請求項１記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項３】
（削除）
【請求項４】
代謝抑制剤がシステイン、メチオニン、アルギニン、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン、それらの製薬上許容される塩および誘導体から選ばれる少なくとも１種の化合物である請求項１または２記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項５】
代謝抑制剤がベンゾトリアゾール、２−メルカプトベンゾイルイミダゾール、それらの製薬上許容される塩および誘導体から選ばれる少なくとも１種の化合物である請求項１または２記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項６】
代謝抑制剤が亜硫酸水素ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリムおよび亜硫酸ナトリウムから選ばれる少なくとも１種の化合物である請求項１または２記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項７】
代謝抑制剤がエデト酸カルシウム２ナトリウムおよび／またはエデト酸２ナトリウムである請求項１または２記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項８】
（削除）
【請求項９】
さらにエタノールを含有する請求項１、２、４〜６のいずれか１項記載のフリーラジアカル性疾患用外用剤。
【請求項１０】
フリーラジカル性疾患用外用剤が経皮吸収剤、経鼻吸収剤、経肺吸収剤、口腔粘膜吸収剤、点眼剤、眼軟膏剤、坐剤および／または膣剤である請求項１、２、４〜７、９のいずれか１項記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項１１】
投与形態が液、固形、半固形、乳、懸濁状または貼付剤のいずれかである請求項１、２、４〜７、９、１０のいずれか１項記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項１２】
フリーラジカル性疾患が、脳梗塞、筋委縮性側索硬化症、神経因性疼痛、逆流性食道炎、虚血性腸疾患、炎症性腸疾患、糖尿病、動脈硬化症、心筋梗塞、腎障害、関節リウマチ、膠原病または放射線障害用外用剤である請求項１、２、４〜７、９〜１１のいずれか１項記載のフリーラジカル性疾患用外用剤。
【請求項１３】
３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン、製薬上許容されるその塩および誘導体から選ばれる少なくとも１種の化合物を必須成分として含有するフリーラジカル性疾患用外用剤における必須成分の皮膚および／または粘膜への移行および吸収を増大させる方法において、該化合物に、３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オンと錯体を形成するシクロデキストリン化合物とアミノ酸塩、アゾール化合物、亜流酸塩およびキレート剤から選ばれる少なくとも１種の化合物を残存代謝活性を本来該化合物に対して示される代謝活性の８０％以下に抑制するに十分な量を含有させ、該化合物の皮膚および／または粘膜への移行および吸収を増大させることを特徴とするフリーラジカル性疾患用外用剤における必須成分の皮膚および／または粘膜への移行および吸収を増大させる方法。
【国際調査報告】
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