(57)【要約】本発明は、熱帯果物バイオマス副産物の酸加水分解により製造されたキシロースとアラビノースとを含む加水分解糖化液を利用して、キシリトールを製造する方法に関する。さらに詳細には、本発明は、ココナッツ殻、パーム殻、パームオイル副産物(Oil Palm Empty Fruit Bunch；OPEFB)のような熱帯果物バイオマス副産物の有効利用のための前処理方法として、酸(0.2〜5%))加水分解及び電気透析(ED；Electrodialysis)、イオン精製によりキシロースとアラビノースを製造する方法と、これらが含まれている加水分解糖化液を炭素源として利用し、繰り返し回分式発酵工程により、高い収率のキシリトールを製造する方法に関する。付加的には、キシロースとアラビノースの製造時に生じる副産物である熱帯果物皮の加水分解残余物を、一定温度で炭化及び活性化して製造された活性炭(active carbon)及びその製造方法に関する。【代表図】    図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
熱帯果物バイオマス副産物を酸加水分解する段階と、
前記酸加水分解によりキシロース及びアラビノースを含む加水分解糖化液を得る段階と、
前記加水分解糖化液を、電気透析装置または電気透析工法を利用して分離精製する段階と、
を含むことを特徴とする、キシロースとアラビノースとを含む加水分解糖化液の製造方法。
【請求項２】
前記熱帯果物皮バイオマス副産物が、ココナッツ殻(Coconut shell)またはパーム殻(Palm shell)またはパームオイル副産物(Oil Palm Empty Fruit Bunch；OPEFB)であることを特徴とする、請求項１に記載の加水分解糖化液の製造方法。
【請求項３】
前記酸加水分解を、酸濃度０．２〜５％、温度１００〜２００℃、及び３０分〜１０時間の範囲で行うことを特徴とする、請求項１に記載の加水分解糖化液の製造方法。
【請求項４】
前記電気透析装置が、イオン交換膜、電極板、流量調節ポンプ及び整流器を含んで構成されることを特徴とする、請求項１に記載の加水分解糖化液の製造方法。
【請求項５】
前記イオン交換膜が、陽イオン交換膜と陰イオン交換膜から構成されることを特徴とする、請求項４に記載の加水分解糖化液の製造方法。
【請求項６】
前記分離精製段階が、沈殿法、電気透析工法、イオン交換法の順になされることを特徴とする、請求項１に記載の加水分解糖化液の製造方法。
【請求項７】
熱帯果物の皮を酸加水分解して得られた加水分解残余物を、５００〜１，０００℃で７２〜１６８時間炭化及び活性化して活性炭を製造することを特徴とする活性炭の製造方法。
【請求項８】
前記熱帯果物の皮が、ココナッツ殻、パーム殻であることを特徴とする、請求項７に記載の活性炭の製造方法。
【請求項９】
請求項７に記載の方法により製造されることを特徴とする活性炭。
【請求項１０】
請求項１乃至６のいずらか１つに記載の加水分解糖化液を醗酵する段階を含むことを特徴とする、キシリトールの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、熱帯果物バイオマス副産物の酸加水分解により製造されたキシロースとアラビノースとを含む加水分解糖化液を利用して、キシリトールを製造する方法に関する。さらに詳細には、本発明は、ココナッツ殻、パーム殻、パームオイル副産物(Oil Palm Empty Fruit Bunch；以下、OPEFBという)のような熱帯果物バイオマス副産物の有効利用のための前処理方法として、酸(0.2〜5%))加水分解及び電気透析(ED；Electrodialysis)、イオン精製によりキシロースとアラビノースを製造する方法と、これらが含まれている加水分解糖化液を炭素源として利用し、繰り返し回分式発酵工程により、高い収率のキシリトールを製造する方法に関する。付加的には、キシロースとアラビノースの製造時に生じる副産物である熱帯果物皮の加水分解残余物を、一定温度で炭化及び活性化して製造された活性炭(active carbon)及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
キシリトールは、植物性原料である白樺、トウモロコシの穂軸などのヘミセルロース加水分解物を化学的に還元させるか、微生物を用いた生物学的転換により、産業的に生産している。しかしながら、化学的方法は、キシロースまたはキシリトールとヘミセルロース部分から生じる他の加水分解物との分離及び精製が難しく、その収率も５０〜６０％程度と低くて、かつアルカリを利用した高温高圧の反応であるため、危険性と廃棄物の問題が存在する短所がある。
【０００３】
現在の化学工程による生産方法に対し、価額競争力を持てると予測される代替生物学的方法の一つとして、一定量以上の糖分が含有された再生資源を利用して、生物学的な方法によりキシリトールを生産することができれば、生産コストの節減及び資源の再活用という側面で脚光を浴びられると思われるが、未だ、再生資源を用いた生物学的な方法によるキシリトールの生産方法に対しての満足する研究はなされていないのが現状である。また、繊維性バイオマスから高効率の糖化工程を開発するために、数多い研究が進行されてきたが、そのほとんどが、組織の柔軟な稲わら、トウモロコシの茎などを使用している。
【０００４】
バイオマス(biomass)は、エネルギー専用の作物と木、農産品と飼料作物、農作廃棄物と滓、林産廃棄物と屑、水草、動物の排泄物、都市ゴミ、その他の廃棄物から抽出された再生可能な有機物質であって、現在エネルギー源として使用されている木材、植物、農・林産副産物、都市ゴミと産業廃棄物内の有機成分などをいう。
【０００５】
自然界の繊維性バイオマス(Fibrous biomass)の中、草木は、葉、茎、根などであって、セルロース、ヘミセルロース(hemicellulose)、リグニン(lignin)、の三つの主成分及びその他の樹脂などから構成されている。これらを分解あるいは転換して、経済的且つキシロース含量の高い再生資源である繊維素系糖化液を得ることができて、また、キシロース生産から生じるアラビノース(arabinose)の生産も可能である。したがって、これらの三つの成分を分離、分解して利用するためには、まず、これらの間の結合を破壊、分解して、転換反応を行わなければならない。
【０００６】
今までキシロースは、木材、稲わら、トウモロコシの穂軸などに存在するヘミセルロースから酸加水分解されて、脱色及びイオン精製、結晶化工程により製造されてきた。このような酸加水分解を通じて得られる加水分解糖化液には、キシロースとアラビノースの他にも、多量の無機イオンが存在して、これらの無機イオンを精製するための工程が要求されている。
【０００７】
従来の糖化液から、キシロースを含む有用糖成分を精製する方法は、酸加水分解糖化液に中和剤を添加し、ｐＨを３．０〜７．０に調整して、沈殿物を形成させて、沈殿された塩をろ過器(filter)を通じて分離した後、活性炭処理などにより色度物質を除去し、陽イオン交換樹脂と陰イオン交換樹脂と混合樹脂が充填されたイオン交換樹脂塔を順に通過させることにより、糖化液からキシロースを含む有用糖成分を分離し出す方法が通常的に使用された。
【０００８】
このような工程において、加水分解液内に存在していたイオン成分が全てイオン交換樹脂に結合されると、酸と塩基を通過させて、イオン交換樹脂に吸着されたイオン成分を脱離し、樹脂を再生するようになる。イオン交換樹脂塔で精製された有用糖類を含有する前記溶液は、ジビニルベンゼンが架橋された硫酸化ポリスチレン形態のＮａ＋イオン型クロマトグラフィ分離用樹脂を充填した分離塔に通液させて、キシロース高含有液分画とアラビノース分画との二つの分画に分離することができる。分画されたキシロースとアラビノースをブリックス(Brix)６０〜８０により濃縮した後、それぞれ結晶化して、キシロース結晶とアラビノース結晶を得ることができる。
【０００９】
前記精製方法において、沈殿法は、溶液内に存在する無機イオンと不溶性塩を形成できる化学物質を添加した後、沈殿された塩をろ過器(filter)により分離し、塩濃度を低める方法であるが、沈殿にならなく残留する少量の塩が後続の濃縮工程で析出されスケールを形成することにより、生産性が落ちてしまう問題点がある。また、以上のようにイオン交換樹脂法による精製は、酸加水分解液など、総イオン含量の高いサンプルを処理するためには、多量のイオン交換樹脂が必要であり、イオン交換樹脂の再生過程において、多量の酸/アルカリ溶液が使用されることにより、高濃度塩を含有する廃水の発生が増加するにつれて、廃水処理に対する負担を加重させている。したがって、化学物質の使用量と廃水の発生量を低減できる代替技術の開発が求められている。
【００１０】
また他の精製方法として、電気透析法(ED；Electrodialysis)がある。電気透析法は、直流電圧を利用してコロイドなどの溶液に含まれた不純物を除去、精製する方法であって、イオン交換膜(Ion-exchange membrane)を主に利用する。
【００１１】
従来の電気透析工程の商業的利用には、高いエネルギー(電力)費用と高価のイオン交換膜の使用という経済的な制限要素があった。しかし、１９８０年代以後、多様なイオン交換膜の開発がなされ、日本の旭ケミカル(Asahi Chemical)、旭硝子(Asahi Glass)、株式会社トクヤマ(Tokuyama Co.)、及び米国のアイオニクス(Ionics)、デュポン(Dupont)などから５０余種のイオン交換膜が製造されつつ、工程が経済性を持つようになった。電気透析技術を利用して出願された特許技術は、「有機酸の回収方法」(大韓民国特許出願第1998-53421号)、「電気透析によるリジンの回収及びリジン−塩酸塩の製造方法」(大韓民国特許出願第1998-11107号)、「電気透析を利用したフェニルアラニン分離精製方法」(大韓民国特許出願第1999-1349号)、「電気透析工程による乳酸回収方法」(大韓民国特許出願第2000-28758号)、「電気透析によるアミノ酸含有溶液の精製方法」(大韓民国特許出願第2002-7005661号)などがあると知られている。
【００１２】
一方、一般に有機物は、炭素(C)が含まれているため、燃焼され得て、燃焼され得る物質なら何でも活性炭の原料となりえる。主に使用される原料としては、木材、褐炭、無煙炭などがあって、これを炭化させて炭を製造することにより、活性炭を生産する。炭は、木材が炭化される過程で、不完全酸化により炭素が主成分となり、木材の種類と焼く温度によって、炭の形態が定められる。原料となる木材としては、オーク、竹、広葉樹、ヤシの木、ヤシの実などを含む木が利用されて、特にオークで作った炭が、広葉樹、竹、ヤシの木、ヤシの実で作った炭に比べ、浄水、浄化、燃料、園芸作物などに対し処理効果がよいと知られている。
【００１３】
活性炭の製造時、最も重要な工程は、炭化工程と活性化工程であって、炭化工程は、原料を約５００〜７００℃程度に加熱すると、脱水、脱酸などの分解が起こって、表面酸素が水、一酸化炭素、二酸化炭素などの形態として放出され、揮発分が除去される工程であって、固定炭素が残るようになる。活性化工程は、８００〜１，０００℃の温度範囲で起こる炭素の酸化反応により炭化物の表面を浸食させて、炭化物の微孔構造を発達させる工程である。
【００１４】
熱帯果物のバイオマス副産物を活用して炭を製造することに関する特許としては、大韓民国特許公開２００２−９５８０９号「ヤシ炭とその製造方法」、大韓民国特許公開２０００−５５００３号「天然ヤシの実を利用した黄土炭及びその製造方法」、大韓民国特許公開２０００−１２８２５号「ヤシ炭粉を利用した成形炭の製造方法」、大韓民国特許公開２００５−３１３１０号「ヤシ炭粉を利用した着火炭及びその製造方法」など、ヤシ炭粉を原材料として多様な圧着成形炭に活用できることを示す特許などがあるが、熱帯果物のバイオマス副産物からキシロースを抽出して残った残余物を活用して炭を製造し、ひいては高付加価値の活性炭を製造することに関する特許は、未だ出されていない。
【特許文献１】大韓民国特許出願第1998-53421号「有機酸の回収方法」
【特許文献２】大韓民国特許出願第1998-11107号「電気透析によるリジンの回収及びリジン−塩酸塩の製造方法」
【特許文献３】大韓民国特許出願第1999-1349号「電気透析を利用したフェニルアラニン分離精製方法」
【特許文献４】大韓民国特許出願第2000-28758号「電気透析工程による乳酸回収方法」
【特許文献５】大韓民国特許出願第2002-7005661号「電気透析によるアミノ酸含有溶液の精製方法」
【特許文献６】大韓民国特許公開２００２−９５８０９号「ヤシ炭とその製造方法」
【特許文献７】大韓民国特許公開２０００−５５００３号「天然ヤシの実を利用した黄土炭及びその製造方法」
【特許文献８】大韓民国特許公開２０００−１２８２５号「ヤシ炭粉を利用した成形炭の製造方法」
【特許文献９】大韓民国特許公開２００５−３１３１０号「ヤシ炭粉を利用した着火炭及びその製造方法」
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
前記従来技術において、沈殿法工程は、スケールの発生による生産性低下を招来する可能性がある。また、酸処理して得られた酸加水分解液内の無機塩類及び有機酸などは、電気的に電荷を帯びるようになるため、イオン交換樹脂法を利用して除去することができるが、このような酸加水分解液に存在する多量のイオン成分をイオン交換樹脂工法で除去するためには、頻繁な樹脂再生及びこれによる多量の酸/アルカリ再生廃液発生による廃水処理費用の増加などの問題点がある。
【００１６】
本発明の目的は、熱帯果物バイオマス副産物であるココナッツ殻、ヤシ殻及びＯＰＥＦＢなどに存在するキシロースなどの成分を効率的に利用するための方法として、原料の酸加水分解、電気透析、イオン精製及び脱色などにより製造されたキシロースとアラビノースを含む効率的な加水分解糖化液の製造方法を提供して、この糖化液から微生物発酵によりキシリトールを製造する方法を提供することにある。
【００１７】
本発明の他の目的は、前記糖化液を製造する工程で生じる副産物である加水分解残余物を利用して、炭化工程及び活性化工程などを通じて製造された活性炭及び活性炭製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明は、熱帯果物バイオマス副産物であるココナッツ殻、ヤシ殻及びＯＰＥＦＢ(Oil Palm Empty Fruit Bunch)を酸加水分解する段階と、前記酸加水分解によりキシロース及びアラビノースを含む加水分解糖化液を得る段階と、前記加水分解糖化液を、電気透析装置または電気透析工法を利用して分離精製する段階とを含む、キシロースとアラビノースとを含む加水分解糖化液の製造方法を提供する。
【００１９】
また、本発明は、キシリトール発酵微生物を前記キシロースとアラビノースを含む糖化液に適応させる段階と、前記糖化液を炭素源として含む培養培地にキシリトール発酵微生物を接種して発酵させる段階とを含むことを特徴とするキシリトールの製造方法を提供する。
【００２０】
また、本発明は、熱帯果物バイオマス副産物であるココナッツ殻、ヤシ殻などから、酸加水分解方法によりキシロースとアラビノースを含有する糖化液を製造する工程で発生される副産物であるココナッツ殻あるいはヤシ殻などの加水分解残余物を利用して、炭化工程及び活性化工程などを通じての活性炭の製造方法を提供する。
【発明の効果】
【００２１】
本発明では、熱帯果物皮バイオマスから、機能性糖であるキシロースとアラビノスを、電気透析法を導入して効率的に製造することができることを確認した。また、前記キシロースとアラビノースを含む加水分解糖化液を収得して、これを炭素源として利用して培養を済ませた後、減圧微細ろ過生物反応器で菌体を濃縮し、濃縮された菌体を再使用することにより、キシロース溶液から高い収率のキシリトールを反復的に得ることができることを確認した。また、付加的に、キシロースとアラビノースの製造時に発生する副産物である加水分解残余物を炭化させて活性化させることにより、良質の炭化物を製造して、廃棄物処理が容易になり、且つ廃棄物処理による費用を節減することができることを確認した。
【００２２】
したがって、本発明により、安価のバイオマスを活用して、競争力のある高付加価値の機能性糖であるキシロースとアラビノース、キシリトールを効率的に生産することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
本発明は、熱帯果物バイオマス副産物であるココナッツ殻、ヤシ殻及びＯＰＥＦＢ(Oil Palm Empty Fruit Bunch)を酸加水分解する段階と、前記酸加水分解によりキシロース及びアラビノースを含む加水分解糖化液を得る段階と、前記加水分解糖化液を、電気透析装置または電気透析工法を利用して分離精製する段階とを含む、キシロースとアラビノースとを含む加水分解糖化液の製造方法を提供する。
【００２４】
本発明に使用された熱帯果物バイオマス副産物であるココナッツ殻、パーム殻及びＥＦＢ(Empty Fruit Bunch)は、平均面積０．５〜５ｃｍ２または平均長さ０．１〜５ｃｍに粉砕した後、４０〜８０℃で１２〜２４時間乾燥させる。
【００２５】
酸加水分解は、乾燥されたココナッツ殻、パーム殻またはＯＰＥＦＢ(Oil Palm Empty Fruit Bunch)１００ｇに０．２〜５．０％硫酸溶液１００〜１，０００ｇを添加して、酸加水分解溶媒とバイオマスの混合比率が１：１〜１：２０となるようにした後、反応温度１００〜２００℃、反応圧力０〜１０ｋｇｆ/ｃｍ２で１０〜５０ｒｐｍで攪拌しながら、０．５〜１０時間反応させることにより行われる。
【００２６】
酸加水分解反応後に水層に溶解された可溶性物質を回収するために、沈殿物を除去した後、ｐＨ１．０〜２．０の酸加水分解液を炭酸カルシウムでｐＨ３．０〜７．０に調整した後、温度６０〜９０℃、時間３０〜１２０分の条件で攪拌を行い、酸加水分解液中の硫酸イオンをカルシウムイオンと反応して、硫酸カルシウム形態に沈澱させる。前記酸加水分解液を、熱交換機を通じて温度３０℃以下に冷却させ、反応液内に水和された硫酸カルシウムを、温度による溶解度差により沈澱させる。前記沈澱された硫酸カルシウムを、ろ過布を使用して除去する。ろ過された反応液を、電気透析装置を利用して電気伝導度(Conductivity)を１，０００μＳ/ｃｍ以下に脱塩させる。
【００２７】
前記沈澱法を使用する時、沈澱にならずに残留する少量の塩が、後続の濃縮工程で析出されスケールを形成し、生産性を落とす可能性がある。したがって、本発明者らは、このような問題点を解決するために、電気透析(ED;Electrodialysis)工法を導入した。電気透析工法を利用する場合、沈澱法で問題を起こすスケールが発生しないため、キシロースとアラビノースの生産性が向上し、また、糖化液に残留する総イオン量が減少し、イオン交換樹脂工法において樹脂再生回数が減って、再生過程で使用される酸/アルカリ溶液の使用を著しく減らすことができる。このような電気透析工法を利用してキシロースとアラビノースを生産する場合、廃水発生量及び生産性の向上により、生産費の節減効果も期待できる。
【００２８】
好ましくは、前記電気透析装置は、イオン交換膜、電極板、流量調節ポンプ及び整流器を含む。
【００２９】
前記脱塩された反応液を糖濃度２５〜４５ブリックス(brix)に真空濃縮した後、粒状活性炭で脱色させる。この時の脱色条件は、線速度(Linear velocity; LV)＝１〜３ｍ/ｈｒ、温度７０〜８０℃が好ましい。
【００３０】
前記脱色された反応液を強酸性陽イオン交換樹脂、弱塩基性陰イオン交換樹脂、混合樹脂に順次通過させて、無機塩類及びイオン性物質を除去し、キシロース成分を主に含有して、少量のアラビノース及び５％以下の他の単糖類を含む糖化液を得ることができる。好ましくは、前記イオン交換膜は、陽イオン膜と陰イオン膜で構成される。
【００３１】
また、本発明は、キシリトール発酵微生物を前記キシロースとアラビノースを含む糖化液に適応させる段階と、前記糖化液を炭素源として含む培養培地にキシリトール発酵微生物を接種して発酵させる段階とを含むことを特徴とするキシリトールの製造方法を提供する。
【００３２】
本発明の加水分解糖化液は、上述した方法により得られ、別途の前処理過程(中和及びろ過、イオン交換樹脂による精製)を経て、キシリトール生産のための微生物培養培地に添加して使用する。発酵のための培養培地として、酵母抽出物、麦芽抽出物、大豆粕などの複合窒素源とＫＨ２ＰＯ４，ＭｇＳＯ４／７Ｈ２Ｏなどを含む培地を使用することが好ましい。
【００３３】
本発明のキシリトール発酵微生物は、キシリトールを発酵できる微生物であれば、特に制限はないが、本発明では、カンジダトロピカリスＣＪ−ＦＩＤ(Candida tropicalis CJ-FID)及びその突然変異株を使用することが好ましく、これは、大韓民国特許公開２００５−２５０５９に公開されている。
【００３４】
また、本発明のキシリトール発酵微生物は、前記加水分解糖化液を含む培地に微生物を１０〜３０世代の成長期間の間、長時間培養させることにより、加水分解糖化液に適応させることを特徴とする。好ましくは、２０回の継代培養を通じて、前記加水分解糖化液に適応されたキシリトール発酵微生物を使用し、キシリトールの転換収率を高めることができる。図１に示したように、加水分解糖化液にキシリトール発酵微生物を適応させるための継代培養の回数において、２０回まではキシリトールの収率が増加するが、それ以上を培養しても、キシリトールの収率は大きく増加しない。したがって、継代培養は、２０回ぐらいすることが経済的である。
【００３５】
前記継代培養のための培地は、前記加水分解糖化液を含んだ通常的な培養培地を使用することができる。
【００３６】
本発明で発酵は、単一発酵槽内で一定な濃度のキシロース糖化液を投入した後、投入されたキシロースが枯渇されると発酵を終了させる回分式発酵及び繰り返し回分式発酵工程により行うことができる。
【００３７】
本発明の繰り返し回分式発酵工程では、前記キシリトールを発酵できる微生物を培養培地に接種して、減圧式微細ろ過生物反応器で培養する。その後、培養液は、排出して、培地は、生物反応器に連続的に注入する。前記排出された培養液は、減圧式微細ろ過管(Microfiltration system using vaccum pressure)または遠心分離機を使用して、菌体と培養濾液とに分離する。特に、自動化システムを活用するためには、減圧式微細ろ過管を使用することが好ましく、前記減圧式微細ろ過管は、生物反応器とは別に付着して使用することができ、生物反応器内に設けて使用することもできる。分離された菌体は、３０〜７０ｇ/ｌの濃度に濃縮して再接種し、加水分解糖化液を炭素源として使用し、生物反応器内で再循環させて培養をする。その後、前記培養濾液からキシリトールを回収する。
【００３８】
一般に、微生物による方法は、その生産性が２．０〜３．０ｇ/ｌ−ｈで、菌体を１回しか使用できない短所がある。そのため、菌体の損失無しに再使用できる減圧微細ろ過器を使用することにより、個別的に回分式発酵工程を数回行うことに比べ、再培養のための洗浄及び培養前段階の準備による費用の上昇がなく、高濃度培養による収率と生産性の向上により、キシリトールを経済的に生産することができる。
【００３９】
また、本発明は、熱帯果物バイオマス副産物であるココナッツ殻、ヤシ殻などから、酸加水分解方法によりキシロースとアラビノースを含有する糖化液を製造する工程で発生される副産物であるココナッツ殻あるいはヤシ殻などの加水分解残余物を利用して、炭化工程及び活性化工程などを通じての活性炭の製造方法を提供する。
【００４０】
より具体的に、本発明の活性炭を製造する方法は、酸加水分解によりキシロース及びアラビノース成分が加水分解糖化液として抽出除去された、熱帯果物バイオマス副産物であるココナッツ殻及びパーム殻の加水分解残余物を原料として、５００〜１，０００℃で７２〜１６８時間炭化及び活性化を通じて、高純度ガス吸着用活性炭を始めとした活性炭を製造する方法を含む。
【００４１】
前記加水分解残余物は、抽出過程中に炭素の純度が増加し、灰分含有量が減少して、また微孔の発達により、高純度ガス吸着用のような高品質の活性炭への製造が可能である。
【００４２】
本発明の高純度ガス級着用活性炭は、前記酸加水分解残余物を収去し、４０〜１００℃で２４〜４８時間乾燥する乾燥工程と、５００〜１，０００℃で７２〜１６８時間炭化及び活性化する工程により製造される。
【００４３】
本発明の活性炭は、酸加水分解を施さなかったココナッツ殻またはパーム殻を使用して製造した活性炭に比べ、著しく優れたガス吸着力を示すことが分かった(表６参照)。
【００４４】
以下、実施例を通じて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲がこれら実施例に限定されるものではない。
【００４５】
実施例１：キシロース及びアラビノースの製造
熱帯果物バイオマス副産物であるココナッツ殻、パーム殻及びＯＰＥＦＢを、平均面積０．５〜５ｃｍ２または平均長さ０．１〜５ｃｍに粉砕した後、４０〜８０℃で１２〜２４時間乾燥した。
【００４６】
酸加水分解は、乾燥されたココナッツ殻、パーム殻またはＯＰＥＦＢ  １００ｇに０．２〜５．０％硫酸溶液１００〜１，０００ｇを添加して、酸加水分解溶媒とバイオマスの混合比率が１：１〜１：２０となるようにした後、反応温度１００〜２００℃、反応圧力０〜１０ｋｇｆ/ｃｍ２で１０〜５０ｒｐｍで攪拌しながら、０．５〜１０時間反応して行った。抽出時間による糖組成比率を表１に示した。
【００４７】
【表１】
2009520504.tif 000003
【００４８】
その後、水層に溶解された可溶性物質を回収するために、酸加水分解物を除去した後、ｐＨ１．０〜２．０の反応液を、炭酸カルシウムを使用してｐＨ３．０〜７．０に調整した後、温度６０〜９０℃で３０〜１２０分間攪拌を行い、反応液中の硫酸イオンをカルシウムイオンと反応させて、硫酸カルシウム形態に沈澱させた。前記反応液を、熱交換機を通じて温度３０℃以下に冷却させ、反応液内に水和された硫酸カルシウムを温度による溶解度差により沈澱させた。前記反応液を、０．５μｍ孔隙を有するフィルタプレスでろ過し、沈澱された硫酸カルシウムを除去した後、ろ過された反応液を、電気透析(ED；Electrodialysis)装置を利用して、電気伝導度(Conductivity)を１，０００μＳ/ｃｍ以下に脱塩させた。電気透析前・後のキシロース、アラビノースの濃度及び電気伝導度の測定結果を表２に示した。
【００４９】
【表２】
2009520504.tif 000004
【００５０】
脱塩された反応液をブリックス(brix)２５〜４５に真空濃縮した後、粒状活性炭で脱色させた。この時の脱色条件は、線速度(Linear velocity; LV)＝１〜３ｍ/ｈｒ、温度７０〜８０℃が好ましい。
【００５１】
前記脱色された反応液を強酸性陽イオン交換樹脂、弱塩基性陰イオン交換樹脂、混合樹脂に順次通過させて、無機塩類、イオン性物質の除去及び精製を行って、１〜５％以下の単糖類成分と、有用なキシロース及びアラビノースの二つの成分を共に含む加水分解糖化液を得ることができた。
【００５２】
このような方法により得られた有用糖類を大量に含む前記糖化液は、ジビニルベンゼンが架橋された硫酸化ポリスチレン形態のＮａ＋イオン型クロマトグラフィ分離用樹脂を充填した分離塔に通液させて、キシロース高含有液分画とアラビノース分画との二つの分画に分離することができる。分画されたキシロースとアラビノースをブリックス(Brix)６０〜８０に濃縮した後、結晶化して、キシロース結晶とアラビノース結晶を得た。得られたキシロースとアラビノースの回収率及び純度を表３に示した。
【００５３】
実施例２：キシロース及びアラビノースの製造(加水分解剤の変更)
０．２〜５．０％硫酸水溶液で酸処理する代わりに、０．２〜５．０％の塩酸水溶液を利用して酸処理したことを除いては、実施例１と同様に行った。得られたキシロースとアラビノースの回収率及び純度を表３に示した。
【００５４】
実施例３：キシロース及びアラビノースの製造(加水分解剤の変更)
０．２〜５．０％硫酸水溶液で酸処理する代わりに、０．２〜５．０％のシュウ酸水溶液を利用して酸処理したことを除いては、実施例１と同様に行った。得られたキシロースとアラビノースの回収率及び純度を表３に示した。
【００５５】
比較例１：キシロース及びアラビノースの製造(加水分解剤の変更)
０．２〜５．０％硫酸水溶液で酸処理する代わりに、０．２〜５．０％の苛性ソーダ水溶液を利用したアルカリ処理後、塩酸でｐＨ５．０〜７．０に中和させることを除いては、実施例１と同様に行った。得られたキシロースとアラビノースの回収率及び純度を表３に示した。
【００５６】
【表３】
2009520504.tif 000005
【００５７】
実施例４：得られた単糖類とキシロース及びアラビノース糖化液の糖組成
実施例１〜３及び比較例１により得られた単糖類とキシロース及びアラビノースを含む、イオン精製された糖液の糖組成を調べた。その結果を表４に示した。
【００５８】
【表４】
2009520504.tif 000006
【００５９】
各実施例による結果をまとめてみた結果、実施例１の方法によるキシロース及びアラビノースの製造で、イオン交換樹脂脱塩処理と分離結晶化を通じて、回収率８５％以上、純度９８％以上のキシロース結晶と、回収率８０％以上、純度９８％以上のアラビノース結晶を生産することができた。
【００６０】
実施例５：得られた加水分解残余物の炭化後、成分含量の比較
実施例１〜３及び比較例１のキシロース及びアラビノースの製造過程で発生した副産物である加水分解残余物を収去し、４０〜１００℃で２４〜４８時間乾燥した後、１０ｋｇ重量部を基準とし、５００〜７００℃で７２〜１６８時間炭化させた後、成分含量を調べた。対照群として、酸加水分解を施さなかったココナッツ殻とパーム殻を、上記と同様な方法により製造した後、成分含量を比較し、その結果を表５に示した。表５から分かるように、対照群に比べ、炭化収率及び固定炭素が増加して、灰分量が減少したことが分かる。
【００６１】
【表５】
2009520504.tif 000007
【００６２】
実施例６：加水分解残余物の炭化及び活性化後、成分含量の比較
実施例５のキシロース及びアラビノースの製造過程で発生した副産物である加水分解残余物の炭化後、８００〜１，０００℃の温度範囲で炭素を酸化反応させることにより、炭化物の表面浸食及び炭化物の微孔構造を生成させた。その後、ガス(水蒸気、二酸化炭素、空気などの酸化性ガス)活性化を通じて製造された活性炭を対照群として使用して、酸加水分解を施さなかったココナッツ殻とパーム殻を、上記と同様な方法を使用して活性炭を製造した後、成分含量を比較し、その結果を表６に示した。表６から分かるように、熱帯果物バイオマス副産物であるココナッツ殻、パーム殻の加水分解残余物を使用した場合、対照群に比べ、ガス吸着力に優れていることが分かる。
【００６３】
【表６】
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【００６４】
実施例７：キシロース含量が２００ｇ/Ｌである加水分解糖化液を利用した回分式発酵
加水分解糖化液には、微生物生育を抑制するフルフラール(furfural)、５−ヒドロキシメチル(5-hydroxymethly；HMF)、アセテート(acetate)、ヒドロキシベンズアルデヒド(hydroxybenzaldehyde；HBA)、バニリン(vanillin)などが存在し、今までのキシロースの転換収率は、５８％に過ぎなかった。したがって、微生物の生長とキシリトールの収率の改善のために、本発明では、キシロース含量が２０％である加水分解糖化液が炭素源として構成された固体培地で、２０回の継代を通じて、キシリトール発酵微生物を、菌を阻害する成分に適応させた。
【００６５】
これにより、キシリトールの収率が８０％まで増加することが分かった(図１)。図１に、微生物成長を阻害する成分を含んでいる糖化液を炭素源とする固体培地で、菌株を阻害物質に適応させることにより、キシリトールの収率を増加させた結果を示した。
【００６６】
まず、２０ｇ/Ｌのブドウ糖、５ｇ/Ｌ酵母抽出物から構成された前培養培地を製造し、５０ｍｌ培地が入っている２５０ｍｌフラスコにカンジダトロピカリス(candida  tropicalis)ＣＪ  ＦＩＤを接種して、２４０ｒｐｍ、３０℃にして１０時間前培養を行った。
【００６７】
その後、キシロース含量が２００ｇ/Ｌの加水分解糖化液、５ｇ/Ｌ酵母抽出物、５ｇ/Ｌ  ウレア(Urea)、５ｇ/Ｌ  ＫＨ２ＰＯ４，ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏから構成された本培養培地を製造して、５Ｌの発酵槽に本培養培地２Ｌを注入した後、前記微生物を接種した。攪拌速度を５００〜３００ｒｐｍにして、ｐＨは、発酵の全過程の間５．０に調節し、培養温度は３０℃で、通気量は、１．０ｖｖｍに供給しながら、５４時間培養した(図２)。図２に発酵時間による細胞濃度(●)、キシロース(■)、キシリトール(▲)の濃度変化を示した。
【００６８】
上記方法により生産されたキシリトールの収率と、精製されたキシリトール粉末を使用して生産したキシリトールの収率とを比較した結果を表７に示した。表７から分かるように、収得されたキシリトール濃度は、１６１ｇ/Ｌであり、細胞濃度１６．５ｇ/Ｌ、キシリトール収率は、８０％であることが分かる。前記結果を、精製されたキシロース粉末を使用して生産したキシリトール収率と比較してみると、生産に所要される時間は増加し、キシリトールの製造収率は若干低下したことが分かる。しかし、同一な菌株を使用してキシリトールを生産する場合、精製されたキシロースの代わりに加水分解糖化液を使用することにより、キシロースを精製する過程が省かれるため、従来の方法に比べ、著しく経済的にキシリトールを製造できることが分かる。
【００６９】
【表７】
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【００７０】
実施例８：繰り返し回分式発酵工程によるキシリトールの生産
実施例７の培地と同様な培地を使用して、生物培養器で培養をした。その後、キシロースが枯渇される直前に、反応の完了された培養液を、生物反応器に取り付けられた減圧式微細ろ過管に移した。使用した菌体と培養濾液を分離した後、分離された菌体を濃縮した。新しい培地２Ｌを注入した生物反応器に、前記濃縮された菌体を搬送し、再培養した。培養条件は、前記実施例８と同様にした。
【００７１】
微細ろ過をしなかった最初の培養は、培養液２Ｌにキシリトール３２２ｇ、生産性２．９８ｇ/ｌ−ｈ、キシロースに対するキシリトール収率８０％を示し、微細ろ過をした後の４回の培養では、蓄積した総培養液８Ｌにおいて、キシリトールは、１，４１５ｇ、生産性７．８６ｇ/ｌ−ｈ、キシリトール収率８８．４％であって、非常に高いことを確認した。図３に、発酵時間による細胞濃度(●)、キシロース(■)、キシリトール(▲)の濃度変化を示した。
【図面の簡単な説明】
【００７２】
【図１】培地継代回数による転換収率(●)の変化を示したグラフである。
【図２】回分式発酵において、発酵時間による細胞濃度(●)、キシロース(■)、キシリトール(▲)の濃度変化を示したグラフである。
【図３】繰り返し回分式発酵において、発酵時間による細胞濃度(●)、キシロース(■)、キシリトール(▲)の濃度変化を示したグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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