(57)【要約】    【課題】  食品組成物、動物の寿命を延長するための飼料組成物及び該飼料組成物を用いる動物の飼育方法を提供する。    【解決手段】  下記式(1)のポリアミン、及びその医薬として許容し得る塩からなる群から選ばれる少なくとも１の化合物を含む、食品組成物、又は動物の寿命を延長するための飼料組成物：  NH2-(CH2)m1-(NH)p1-(CH2)m2-(NH)p2-(CH2)m3-            (NH)p3-(CH2)m4-(NH)p4-(CH2)m5-NH2    …(1)    【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式(1)のポリアミン、及びその医薬として許容し得る塩からなる群から選ばれる少なくとも１の化合物を含む、食品組成物：
NH2-(CH2)m1-(NH)p1-(CH2)m2-(NH)p2-(CH2)m3-
(NH)p3-(CH2)m4-(NH)p4-(CH2)m5-NH2    …(1)
（式中、m1〜m5はそれぞれ独立に０〜７の整数であって、そのうち少なくとも１つは０よりも大きく、m1＋m2＋m3＋m4＋m5の和は、２以上かつ１８未満であり、かつp1, p2,
p3及びp4は、それぞれ独立に０又は１である。）。
【請求項２】
式(1)中において、m1〜m5がそれぞれ独立に０〜５の整数であって、m1＋m2＋m3＋m4＋m5の和が２以上かつ１７未満である、請求項１記載の食品組成物。
【請求項３】
式(1)中、m1＋m2＋m3＋m4＋m5の和が、４以上かつ１６未満である、請求項２記載の食品組成物。
【請求項４】
式(1)中において、m1が２〜７の整数、かつm2,m3, m4及びm5が０であり、p1，p2, p3及びp4がそれぞれ０である、請求項１記載の食品組成物。
【請求項５】
式(1)中において、m1が３〜５の整数、かつm2,m3, m4及びm5が０であり、p1，p2, p3及びp4がそれぞれ０である、請求項１記載の食品組成物。
【請求項６】
式(1)中において、m1が２〜７の整数、m2が２〜７の整数、かつm3, m4及びm5が０であり、p1が１で、p2, p3及びp4がそれぞれ０である、請求項１記載の食品組成物。
【請求項７】
式(1)中において、m1が３〜５の整数、m2が２〜５の整数、かつm3, m4及びm5が０であり、p1が１で、p2, p3及びp4がそれぞれ０である、請求項１記載の食品組成物。
【請求項８】
式(1)中において、m1が２〜７の整数、m2及びm3が２〜７の整数、m4及びm5が０であり、p1及びp2が１で、p3及びp4がそれぞれ０である、請求項１記載の食品組成物。
【請求項９】
式(1)中において、m1が３〜５の整数、m2及びm3が２〜５の整数、かつm4及びm5が０であり、p1及びp2が１で、p3及びp4がそれぞれ０である、請求項１記載の食品組成物。
【請求項１０】
式(1)中において、m1、m2、m3及びm4が２〜７の整数で、m5が０であり、p1〜p3が１であり、かつp4が０である、請求項１記載の食品組成物。
【請求項１１】
式(1)中において、m1が３〜５の整数、m2, m3及びm4が２〜５の整数、かつm5が０であり、p1〜p3が１であり、かつp4が０である、請求項１記載の食品組成物。
【請求項１２】
前記ポリアミンが、3,3’−イミノビスプロピルアミン、Ｎ−アミノブチル−1,3−ジアミノプロパン、4,4'−イミノビスブチルアミン、及びＮ−アミノペンチル−1,3−ジアミノプロパンからなる群から選ばれたものである、請求項１記載の食品組成物。
【請求項１３】
前記ポリアミンが、4,8-ジアザウンデカン-1,11-ジアミン、4,9-ジアザドデカン-1,12-ジアミン、4,8-ジアザドデカン-1,12-ジアミン、5,9-ジアザトリデカン-1,13-ジアミン、4,8-ジアザトリデカン-1,13-ジアミン、4,10-ジアザトリデカン-1,13-ジアミン、4,9-ジアザトリデカン-1,13-ジアミン、5,9-ジアザトリデカン-1,13-ジアミン、及び5,9-ジアザテトラデカン-1,14-ジアミンからなる群から選ばれたものである、請求項１記載の食品組成物。
【請求項１４】
前記ポリアミンが、4,8,12-トリアザペンタデカン-1,15-ジアミン、4,8,12-トリアザヘキサデカン-1,16-ジアミン、4,9,13-トリアザヘプタデカン-1,17-ジアミン、4,9,14-トリアザオクタデカン-1,18-ジアミン、5,9,13-トリアザヘプタデカン-1,17-ジアミン、5,9,14-トリアザオクタデカン-1,18-ジアミン、4,9,14-トリアザオクタデカン-1,18-ジアミン、5,10,14-トリアザオクタデカン-1,18-ジアミンからなる群から選ばれたものである、請求項１記載の食品組成物。
【請求項１５】
前記ポリアミンが、4,8,12,16-テトラアザノナデカン-1,19-ジアミン、4,8,12,16-テトラアザアイコサン-1,20-ジアミン、4,8,12,17-テトラアザアイコサン-1,20-ジアミン、及び4,8,13,17-テトラアザアイコサン-1,20-ジアミンからなる群から選ばれたものである、請求項１記載の食品組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか１項記載の食品組成物からなる、動物の寿命を延長するための飼料組成物。
【請求項１７】
前記動物が、哺乳類である、請求項１６記載の飼料組成物。
【請求項１８】
前記動物が、犬、猫、ラット、ハツカネズミ、馬、牛、羊、及び人からなる群から選ばれたものである、請求項１７記載の飼料組成物。
【請求項１９】
１日の供与単位に、前記動物の体重１Kgあたり式(1)のポリアミン0.01〜1000mgが含まれている、請求項１６〜１８のいずれか１項記載の飼料組成物。
【請求項２０】
１日の供与単位に、前記動物の体重１Kgあたり式(1)のポリアミン0.05〜400mgが含まれている、請求項１６〜１８のいずれか１項記載の飼料組成物。
【請求項２１】
１日の供与単位に、前記動物の体重１Kgあたり式(1)のポリアミン0.05〜100mgが含まれている、請求項１６〜１８のいずれか１項記載の飼料組成物。
【請求項２２】
動物に、その体重１Kgあたり下記式(1)のポリアミン及びその医薬として許容し得る塩からなる群から選ばれる少なくとも１の化合物0.01〜1000mgを投与できるよう、請求項１６〜２１のいずれか１項記載の飼料組成物を供与する、動物の寿命を延長する飼育方法：
NH2-(CH2)m1-(NH)p1-(CH2)m2-(NH)p2-(CH2)m3-
(NH)p3-(CH2)m4-(NH)p4-(CH2)m5-NH2    …(1)
（式中、m1〜m5はそれぞれ独立に０〜７の整数であって、そのうち少なくとも１つは０よりも大きく、m1＋m2＋m3＋m4＋m5の和は、２以上かつ１８未満であり、かつp1, p2, p3及びp4は、それぞれ独立に０又は１である。）。
【請求項２３】
動物に、その体重１Kgあたり式(1)のポリアミン及びその医薬として許容し得る塩からなる群から選ばれる少なくとも１の化合物0.05〜400mgを投与する、請求項２２記載の飼育方法。
【請求項２４】
動物に、その体重１Kgあたり式(1)のポリアミン及びその医薬として許容し得る塩からなる群から選ばれる少なくとも１の化合物0.05〜100mgを投与する、請求項２２記載の飼育方法。
【請求項２５】
前記動物が、犬、猫、ラット、ハツカネズミ、馬、牛、羊、及び人からなる群から選ばれたものである、請求項２２〜２５のいずれか１項記載の飼育方法。
【請求項２６】
動物に、その体重１Kgあたり、下記式(1)のポリアミン、及びその医薬として許容し得る塩からなる群から選ばれる少なくとも１の化合物0.01〜1000mgを投与することを含む、動物の寿命を延長する飼育方法：
NH2-(CH2)m1-(NH)p1-(CH2)m2-(NH)p2-(CH2)m3-
(NH)p3-(CH2)m4-(NH)p4-(CH2)m5-NH2    …(1)
（式中、m1〜m5はそれぞれ独立に０〜７の整数であって、そのうち少なくとも１つは０よりも大きく、m1＋m2＋m3＋m4＋m5の和は、２以上かつ１８未満であり、かつp1, p2, p3及びp4は、それぞれ独立に０又は１である。）。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食品組成物、動物の寿命を延長するための飼料組成物及び該飼料組成物を用いる動物の飼育方法に関するものである。さらに詳細に述べると、本発明は、特定のポリアミンを含む食品組成物、特定のポリアミンを含む、動物の寿命を延長するための飼料組成物、及び該飼料組成物を供与して動物の寿命を延長する飼育方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来から、人間や動物の老齢化を遅らせ、かつ寿命を延ばす化合物、薬剤、又は機能性食品などの研究が行われてきた。そして、例えば、ポリフェノールの含有量を増やした機能性食品やワインなどの飲料、EF-キナーゼの特異的な抑制により寿命を延ばす組成物（特許文献１）、及び特定の薬理学的な物質を含む老化を遅らせる組成物（特許文献３）などが開発されてきた。しかし、これらは老化を遅らせ、寿命を延ばす機能が不明瞭であり、さらに優れた老化遅延、寿命延長の機能を有する薬剤、又は食品の開発が望まれている。【０００３】
ところで、動物細胞の表面には、様々な細胞膜分化抗原（Cluster of differentiation：以下、CDと呼ぶ）が発現しており、そのうちCD11aとCD18がLFA-1(leukocyte function associated antigen 1)を構成している。そして、炎症の初期の段階では、該LFA-1を表面に有するリンパ球、単球、マクロファージ、顆粒球等の免疫細胞が、リガンドであるICAM-1を発現している血管内皮細胞等に接着することにより活性化され、組織に炎症を生じさせる。この反応をきっかけに組織の炎症が始まると、様々な炎症を誘発するメディエーターの産生により、他の接着分子や機能的な細胞膜分化抗原分子の活性化が誘発され、炎症が増強される。このため、LFA-1の発現量を減少させるか、この接着分子に抗体や機能的な分子を結合させて接着分子の接着機能を低下させることにより、炎症の発生や進行を抑制することができる（非特許文献２，３及び４）。【０００４】
本発明者らは、このような炎症の発生や進行の抑制について研究を行い、スペルミン等の特定のポリアミンがLFA-1の発現を減少させること、及び抗炎症作用があることを見出し（非特許文献１）、様々な炎症由来の疾患の予防、又は進行を抑制する、該ポリアミンを主成分とするLFA-1抑制剤を開発した（特許文献２）。本発明者らは、さらに研究を行った結果、年齢が高くなるほど免疫細胞表面のLFA-1が増え、炎症が起きやすくなること、加齢に伴いポリアミンの合成能力が低下し、若い個体と比較し好ましい血中のポリアミン濃度が低くなることを見出した。そして加齢に伴うLFA-1の増加により、血管の炎症に起因する動脈硬化、心臓疾患、自己免疫性関節炎、糖尿病性網膜症などが進行し易くなるので、LFA-1の増加を抑制するポリアミンを必要量食餌から摂取させることにより、動物の健康を維持し、かつ寿命を延ばす可能性があると考えた。【０００５】
【特許文献１】特表2003-508347
【特許文献２】国際公開公報WO2004/073701
【特許文献３】特表2007-513201
【非特許文献１】Kuniyasu SODA et.al.,: Spermine, a Natural Polyamine, SuppressesLFA-1 Expression on Human Lymphocyte: The Journal of Immunology; 2005, 175:pp.237〜245
【非特許文献２】Dedrick RL, Walicke P, Garovoy M.：Anti-adhesion antibodies efalizumab, ahumanized anti-CD11a monoclonal antibody.：Transpl Immunol. 2002, 9(2-4):181-6.
【非特許文献３】Guerette B, Moisset PA, Huard C, Tardif F, Gravel C, Tremblay JP.：Inflammatory damagefollowing first-generation replication-defective adenovirus controlled byanti-LFA-1.：JLeukoc Biol. 1997, 61(4):533-8.
【非特許文献４】Li X, Abdi K, Rawn J, Mackay CR, Mentzer SJ.：LFA-1 and L-selectinregulation of recirculating lymphocyte tethering and rolling on lungmicrovascular endothelium.：Am J Respir Cell Mol Biol. 1996, 14(4):398-406.
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、加齢等に伴うLFA-1の増加に起因する炎症、及び関連疾患を予防、及び軽減するのに有効な機能性食品組成物、動物の寿命を延長するための飼料組成物並びに該飼料組成物を用いる動物の飼育方法を提供することを目的とする。さらに詳細に述べると、本発明は、特定のポリアミンを含む、加齢等に伴うLFA-1の増加に起因する炎症、及び関連疾患を予防、及び軽減するのに有効な機能性食品組成物、特定のポリアミンを含む、動物の寿命を延長するための飼料組成物、及び該飼料組成物を供与して動物の寿命を延長する飼育方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本件発明者らは、加齢に伴うLFA-1の増加に起因する炎症、及び関連疾患とポリアミンの関係を研究する過程で、該LFA-1の増加を抑制するポリアミンを食餌から摂取させることにより、動物の健康を維持し、かつ寿命を延ばす可能性があると考え、そのようなポリアミンの効果について研究を行った。その結果、該LFA-1の増加を抑制するポリアミンを食餌から摂取させることにより、動物の寿命を延ばすことができるという知見を得て、本発明を完成した。【０００８】
これを詳細に述べると、図１に示す様に、免疫細胞内のスペルミンおよびスペルミジンの濃度上昇が生じると、スペルミン合成酵素であるSアデノシルメチオニン脱炭酸酵素（S-adenosylmethionine decarboxylase (AdoMet DC)）とオルニチン脱炭酸酵素（Ornithine decarboxylase (ODC)）の活性が低下し、結果としてSアデノシルメチオニン（S-adenosylmethionine）が過剰になる。ところが、図２に示す様に、Sアデノシルメチオニンは生体内にメチル基を供給する物質であり、この濃度上昇は遺伝子のメチル化の進行を促進することになる。LFA-1の発現は遺伝子のプロモーター領域（CpG）のメチル化（Methylation）により蛋白量の発現が低下する事が判っている。それ以外の遺伝子においても、Sアデノシルメチオニン脱炭酸酵素の活性が抑制されてSアデノシルメチオニンが過剰になると、遺伝子の一部でメチル化の進行が見られる。遺伝子のメチル化の変化は老化や老化に伴う様々な生活習慣病と呼ばれる疾患の発症に密接な関係のあることが示唆されている。LFA-1においても、加齢とともにそのプロモーター領域のメチル化異常が生じ，結果としてLFA-1の発現が増強していると考えられる。ポリアミンの持続的な経口摂取によってLFA-1の発現が抑制されることは、老化や老化に伴う疾患と密接に関係している他の遺伝子の発現にも影響を与えている可能性が高い。このような観点からも、ポリアミンの摂取により動物の健康を維持し、老化や老化に伴う疾患の発症及び進行を抑制し、かつ寿命を延ばす可能性があると考えたのである。【０００９】
したがって、本発明は、下記式(1)のポリアミン、及びその医薬として許容し得る塩からなる群から選ばれる少なくとも１の化合物を含む、食品組成物を提供する。
NH2-(CH2)m1-(NH)p1-(CH2)m2-(NH)p2-(CH2)m3-
(NH)p3-(CH2)m4-(NH)p4-(CH2)m5-NH2    …(1)
該式中、m1〜m5はそれぞれ独立に０〜７の整数であって、そのうち少なくとも１つは０よりも大きく、m1＋m2＋m3＋m4＋m5の和は、２以上かつ１８未満であり、かつp1, p2,
p3及びp4は、それぞれ独立に０又は１である。【００１０】
さらに、本発明は、前記食品組成物からなる、動物の寿命を延ばすための飼料組成物を提供する。
さらに本発明は、１日の供与単位に、動物の体重１Kgあたり式(1)のポリアミン及びその医薬として許容し得る塩からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物0.01〜1000mg、好ましくは0.01〜100mg含まれている、前記飼料組成物を提供する。【００１１】
さらに本発明は、動物に、その体重１Kgあたり式(1)のポリアミン及びその医薬として許容し得る塩からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物0.01〜1000mg、好ましくは0.01〜100mgが投与されるよう、前記飼料組成物を供給する、動物の寿命を延長する飼育方法を提供する。
さらに本発明は、動物に、その体重１Kgあたり式(1)のポリアミン及びその医薬として許容し得る塩からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物0.01〜1000mg、好ましくは0.01〜100mgを投与する、動物の寿命を延長する飼育方法を提供する。【００１２】
（定義）
本明細書中で用いる用語を下記のように定義する。
用語「ポリアミン」とは、同一分子内に２個以上のアミノ基、及び炭素原子数２〜７個を有する直鎖、又は分枝鎖のアルキレン部分２以上を含む化合物をいう。
用語「医薬として許容し得る塩」とは、医薬として用いることができる、無機酸又は有機酸の無毒性酸付加塩をいう。
用語「動物」とは、本発明の飼料組成物を供与する対象となる哺乳類のような温血動物を意味する。例えば、犬、猫、ラット、ハツカネズミ、馬、牛、羊、及び人などである。【００１３】
用語「CD11a」は、別名として、LFA-1 α-chain、gp180/95、αL Integrin等と呼ばれているが、本明細書、及び請求の範囲においては、これらの名称を統一してCD11aと呼ぶ。
用語「CD18」は、別名として、LFA-1 β-chain、Integrin β2等と呼ばれているが、本明細書、及び請求の範囲においては、これらの名称を統一してCD18と呼ぶ。
用語「１日の供与単位」とは、１日分の飼料として与える飼料組成物、又は１日分の飼料に添加する飼料組成物の量をいう。該添加する飼料組成物の場合、粉剤、液剤、錠剤などの形態で提供することができる。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の飼料組成物を供与することにより、犬、猫などの愛玩動物、動物園等で飼育されている猿、鹿、象などの動物、水族館等で飼育されているイルカ、トド、ラッコ、シャチなどの海洋動物及び犬、馬等の使役動物の健康を維持し、その寿命を延ばす効果が得られる。また、人間に機能性食品として供与することにより、その健康維持、及び寿命の延長という効果が期待できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明で用いるポリアミン化合物の多くは、生物体内に普遍的に存在する生体アミンであって、生物体からの抽出により製造することができる。また、その製造方法は、Beilsteins Handbuch Der Organischen Chemieなどの文献に開示されている。また、メルクインデックス第9版やMethod in Molecular Biology (Vol. 79, Polyamine Protocols, Edited by: D. Morgan, Humana Press Inc., Totowa, NJ) などにも、本発明で用いるポリアミン化合物の情報が記載されている。したがって、当業者であれば、これらの情報に基づき本発明のポリアミンを製造、又は入手できる。【００１６】
本発明で用いるポリアミンは、下記式(1)のポリアミンが好ましい。
NH2-(CH2)m1-(NH)p1-(CH2)m2-(NH)p2-(CH2)m3-
(NH)p3-(CH2)m4-(NH)p4-(CH2)m5-NH2  …(1)
該式中、m1〜m5はそれぞれ独立に０〜７の整数であって、そのうち少なくとも１つは０よりも大きく、m1＋m2＋m3＋m4＋m5の和は、２以上かつ１８未満であり、かつp1, p2,
p3及びp4は、それぞれ独立に０又は１である。
また、該式(1)中において、m1〜m5がそれぞれ独立に０〜５の整数であって、m1＋m2＋m3＋m4＋m5の和２以上かつ１７未満とすることができる。【００１７】
さらに該式(1)中、m1＋m2＋m3＋m4＋m5の和が、４以上かつ１６未満とすることができる。
さらに該式(1)中において、m1が２〜７の整数、かつm2,m3, m4及びm5が０であり、p1，p2,p3及びp4がそれぞれ０とすることができる。
さらに該式(1)中において、m1が２〜７の整数、m2が２〜７の整数、かつm3, m4及びm5が０であり、p1が１で、p2, p3及びp4がそれぞれ０とすることができる。
さらに該式(1)中において、m1が３〜５の整数、m2が２〜５の整数、かつm3, m4及びm5が０であり、p1が１で、p2, p3及びp4がそれぞれ０とすることができる。【００１８】
さらに該式(1)中において、m1が２〜７の整数、m2及びm3が２〜７の整数、m4及びm5が０であり、p1及びp2が１で、p3及びp4がそれぞれ０とすることができる。
さらに該式(1)中において、m1が３〜５の整数、m2及びm3が２〜５の整数、かつm4及びm5が０であり、p1及びp2が１で、p3及びp4がそれぞれ０とすることができる。
さらに該式(1)中において、m1、m2、m3及びm4が２〜７の整数で、m5が０であり、p1〜p3が１であり、かつp4が０とすることができる。
さらに該式(1)中において、m1が３〜５の整数、m2, m3及びm4が２〜５の整数、かつm5が０であり、p1〜p3が１であり、かつp4が０とすることができる。【００１９】
前記式(1)のポリアミンは、ジアミン、トリアミン、テトラアミン、ペンタアミン、及びヘキサアミンとすることができ、本発明ではこれらを単独で、又は組み合わせて使用することができる。次に前記ポリアミンの具体的な例を挙げる。【００２０】
本発明で用いるジアミンの例を挙げると、下記のものがある。
プトレスシン（Putrescine）
NH2(CH2)4NH2  1,4-ブタンジアミン  (1,4-butanediamine)
カダベリン（Cadaverine）
NH2(CH2)5NH2  1,5-ペンタンジアミン  (1,5-pentanediamine)
エチレンジアミン（Ethylenediamine）
NH2(CH2)2NH2  1,2-エタンジアミン  (1,2-etanediamine)
トリメチレンジアミン（Trimethylenediamine）
NH2(CH2)3NH2  1,3-プロパンジアミン  (1,3-propanediamine)
ヘキサメチレンジアミン（Hexamethylenediamine）
NH2(CH2)6NH2
1,6-ヘキサンジアミン  (1,6-hexanediamine)
これらジアミンで好ましいのは、プトレッシンである。【００２１】
本発明で用いるトリアミンの例を挙げると、下記のものがある。
カルジン（ノルスペルミジン）(Norspermidine)
NH2(CH2)3NH(CH2)3NH2 
3,3'-イミノビスプロピルアミン  (3,3'-iminobispropylamine)
[Biochem Biophys. Res. Commun. 63. 69(1975)]  
スペルミジン (Spermidine) 
NH2(CH2)3NH(CH2)4NH2
Ｎ-アミノブチル-1,3-ジアミノプロパン
(N-aminobutyl-1,3-diaminopropane)
[Beil. 4 (2) 704]                 
ホモスペルミジン (Homospermidine)              
NH2(CH2)4NH(CH2)4NH2 
4,4'-イミノビスブチルアミン  
(4,4'-iminobisbutylamine)
アミノプロピルカダベリン (Aminopropylcadaverine)
NH2(CH2)3NH(CH2)5NH2
Ｎ-アミノペンチル-1,3-ジアミノプロパン
(N-aminopentyl-1,3-diaminopropane)
これらトリアミンで好ましいのは、スペルミジンである。【００２２】
本発明で用いるテトラアミンの例を挙げると、下記のものがある。
テルミン（ノルスペルミン）    
NH2(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)3NH2
4,8-ジアザウンデカン-1,11-ジアミン
(4,8-diazaundecane-1,11-diamine)
スペルミン (Spermine)  
NH2(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NH2
4,9-ジアザドデカン-1,12-ジアミン
(4,9-diazadodecane-1,12-diamine)
[Beil. 4 (2) 704, メルクインデックス9.8515]
テルモスペルミン
NH2(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)4NH2
4,8-ジアザドデカン-1,12-ジアミン
(4,8-diazadodecane-1,12-diamine)
カナバルミン  
NH2(CH2)4NH(CH2)3NH(CH2)4NH2
5,9-ジアザトリデカン-1,13-ジアミン
(5,9-diazatridecane-1,13-diamine)
アミノペンチルノルスペルミジン
NH2(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)5NH2
4,8-ジアザトリデカン-1,13-ジアミン
(4,8-diazatridecane-1,13-diamine)【００２３】
N,N’-ビス（アミノプロピル）カダベリン
NH2(CH2)3NH(CH2)5NH(CH2)3NH2
4,10-ジアザトリデカン-1,13-ジアミン 
(4,10-diazatridecane-1,13-diamine)
アミノプロピルホモスペルミン (Aminopropylhomospermine)
NH2(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)4NH2 
4,9-ジアザトリデカン-1,13-ジアミン
(4,9-diazatridecane-1,13-diamine)
カナバルミン (Canavalmine) 
NH2(CH2)4NH(CH2)3NH(CH2)4NH2 
5,9-ジアザトリデカン-1,13-ジアミン
(5,9-diazatridecane-1,13-diamine)
ホモスペルミン (Homospermine)
NH2(CH2)4NH(CH2)4NH(CH2)4NH2
5,10-ジアザテトラデカン-1,14-ジアミン
(5,10-diazatetradecane-1,14-diamine)
これらテトラアミンで好ましいのは、テルミン、スペルミン、ホモスペルミン、テルモスペルミン、アミノペンチルノルスペルミジン、及びN,N’-ビス（アミノプロピル）カダベリンであり、特に好ましいのはスペルミンである。【００２４】
本発明で用いるペンタアミンの例を挙げると、下記のものがある。
カルドペンタミン  (Caldopentamine)      
NH2(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)3NH2
4,8,12-トリアザペンタデカン-1,15-ジアミン
(4,8,12-triazapentadecane-1,15-diamine)
ホモカルドペンタミン  (Homocaldopentamine)
NH2(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)4NH2
4,8,12-トリアザヘキサデカン-1,16-ジアミン
(4,8,12-triazahexadecane-1,16-diamine)
アミノプロピルカナバルミン  (Aminopropylcanavalmine) 
NH2(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NH(CH2)4NH2
4,9,13-トリアザヘプタデカン-1,17-ジアミン
(4,9,13-triazaheptadecane-1,17-diamine)
ビス（アミノプロピル）ホモスペルミン
(Bis(aminopropyl)homospermidine)
NH2(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)4NH(CH2)4NH2
4,9,14-トリアザオクタデカン-1,18-ジアミン
(4,9,14-triazaoctadecane-1,18-diamine)
ビス（アミノプロピル）ノルスペルミン
(Bis(aminobutyl)norspermidine)
NH2(CH2)4NH(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)4NH2
5,9,13-トリアザヘプタデカン-1,17-ジアミン
(5,9,13-triazaheptadecane-1,17-diamine)【００２５】
アミノブチルカナバルミン (Aminobutylcanavalmine)
NH2(CH2)4NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)4NH2
5,9,14-トリアザオクタデカン-1,18-ジアミン
(5,9,14-triazaoctadecane-1,18-diamine)
アミノプロピルホモスペルミン (Aminopropylhomospermine)
NH2(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)4NH(CH2)4NH2
4,9,14-トリアザオクタデカン-1,18-ジアミン
(4,9,14-triazaoctadecane-1,18-diamine)
ホモペンタミン (Homopentamine)
NH2(CH2)4NH(CH2)4NH(CH2)3NH(CH2)4NH2
5,10,14-トリアザオクタデカン-1,18-ジアミン
(5,10,14-triazaoctadecane-1,18-diamine)
これらペンタアミンで好ましいのは、カルドペンタミン及びホモカルドペンタミンである。【００２６】
本発明で用いるヘキサアミンの例を挙げると、下記のものがある。
カルドヘキサミン  (Caldohexamine)
NH2(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)3NH2
4,8,12,16-テトラアザノナデカン-1,19-ジアミン
(4,8,12,16-tetraazanonadecane-1,19-diamine)
ホモカルドヘキサミン (Homocaldohexamine)
NH2(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)4NH2
4,8,12,16-テトラアザアイコサン-1,20-ジアミン
(4,8,12,16-tetraazaicosane-1,20-diamine)
セルモヘキサミン (Thermohexamine)
NH2(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NH2
4,8,12,17-テトラアザアイコサン-1,20-ジアミン
(4,8,12,17-tetraazaicosane-1,20-diamine)
ホモセルモヘキサミン (Homethermohexamine)
NH2(CH2)3NH(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NH(CH2)3NH2
4,8,13,17-テトラアザアイコサン-1,20-ジアミン
(4,8,13,17-tetraazaicosane-1,20-diamine)
これらヘキサアミンで好ましいのは、カルドヘキサミン及びホモカルドヘキサミンである。【００２７】
本発明では、前記ポリアミンを、医薬として許容し得る塩の形態で用いることができる。該塩は、有機酸又は無機酸の付加塩類であって、例えば、塩酸、フッ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸付加塩、及び例えば、スルホン酸、メタンスルホン酸、スルファミン酸、酒石酸、フマル酸、臭化水素酸、グリコール酸、クエン酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、アスコルビン酸、p-トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタリンスルホン酸、プロピオン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、ステアリン酸、ケイ皮酸、アスパラギン酸、サリチル酸、グルコン酸などの有機酸付加塩である。該塩は、遊離の塩基のにおいがないので特に塩酸付加塩類が好ましい。該酸付加塩類は、本発明の技術分野における常法で、遊離の塩基形態のポリアミンと、適当な酸との接触により調製することができる。【００２８】
（供与量）
本発明の飼料組成物の投与量は、対象動物の種類、性別、年齢、体重に合わせて適宜変えることになるが、通常、哺乳動物では一日当り、ポリアミンとして、0.01〜1000mg/Kg体重、0.01〜400mg/Kg体重、0.01〜100mg/Kg体重、0.05〜100mg/Kg体重、0.05〜40mg/kg体重、さらに0.05〜4mg/kg体重とすることができる。【００２９】
なお本発明は、動物に、その体重１Kgあたり、前記式(1)のポリアミン及びその医薬として許容し得る塩からなる群から選ばれる少なくとも１の化合物を一日当り、ポリアミンとして、0.01〜1000mg/Kg体重、0.01〜400mg/Kg体重、0.01〜100mg/Kg体重、0.05〜100mg/Kg体重、0.05〜40mg/kg体重、さらに0.05〜4mg/kg体重を投与することを含む、動物の寿命を延長する飼育方法を提供する。この場合、通常の飼料に含まれるポリアミン等と、本発明の飼料組成物により供与されるポリアミン等との合計量が前記供与量となればよい。【００３０】
（供与形態と使用方法）
本発明の食料組成物、及び飼料組成物の形態は、対象動物の特性に合わせて適宜選択することができる。例えば、液体、半流動体、又は固形とすることができる。液体飼料組成物は、動物の飼料に混入、又は振りかけて使用することができる。半流動体の飼料組成物は、そのまま単体で、又は他の流動性、半練り製品飼料に加えて使用することができる。また、固形飼料組成物は、粉末状又は一定の大きさに切ったペレットなどペットフードの形態として利用することができる。
また、本発明の食料組成物、及び飼料組成物のポリアミン含有量は、一回の投与単位当たり、ポリアミンとして、0.0025〜100mg/kg体重、好ましくは0.005〜40mg/kg体重、さらに好ましくは0.01〜4mg/kg体重である。【００３１】
なお、本発明の飼料組成物を単体で供与する場合、様々な粒状の固形形態で製造することができる。例えば、本発明の飼料組成物がドッグフードである場合、肉と野菜を含むベース飼料に、所定量のポリアミンを添加し、寒天を加えて凝固させることができる。該ベース飼料の肉は、牛肉、馬肉、鶏肉、魚肉等で、これらの肉を単独で、又は複数種を混合して使用する。該ベース飼料の野菜は、人参、キャベツ、コーン、トマト等であって、これらの野菜を単独で、又は複数種を混合して使用する。さらに、該ベース飼料には、肉と野菜に加えて、チーズ、パスタ、鳥がらスープ、ビーフコンソメ等を添加することもできる。通常、ベース飼料をミンチの状態に粉砕し、次いでポリアミンと水と寒天を加え、加熱、成型後冷却、固化する。【００３２】
なお、本発明の飼料組成物には有効成分として前記ポリアミン又はその医薬として許容し得る塩、又はそれら組み合わせを単独で、又はその他の所望の栄養補助剤、薬剤と組み合わせて使用することができる。該栄養補助剤の例を挙げると、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ニンニク、複合ビタミンＢ等の各種ビタミン剤、ビール酵母、亜麻仁油、魚油、醸造酢、タンパク質濃縮物、乳製品、ミネラル剤などがある。また、該薬剤には、食欲増進剤、抗細菌剤、消化酵素、抗感染薬、抗真菌剤、抗炎症薬、鎮痛剤、代謝作用薬、殺寄生虫薬、その他の医薬品がある。【００３３】
（供与時期）
本発明の飼料組成物は、動物個体が加齢によりポリアミンを合成、及び維持する能力が衰え、血管等に炎症が生じ易くなる前に供与し始めるのが好ましい。例えば、ネズミ等の齧歯類では生後４〜１０週以降、猫や犬等の動物では生後４〜８ヶ月以降、馬、牛、象などの大型草食動物では生後６ヶ月〜２年以降、ヒトでは生後８〜１８年以降が好ましい。
また、本発明の飼料組成物の供与期間は、供与開始から少なくとも３ヶ月、好ましくは６ヶ月、さらに好ましくは１２ヶ月であり、また必要ならば生存中継続的に供与してもよい。【００３４】
また、ポリアミンの延命効果を発揮する有効量は動物の種類、年齢などに応じて異なるが、１日当たりの必要量に対応する本発明の飼料組成物は、１日１回まとめて与えてもよいし、各飼料供給時に分けて与えてもよい。【００３５】
次に実施例に基づき、本発明をさらに詳細に説明する。
【実施例】
【００３６】
本実施例では特に断らない限り、割合％とは重量％（w/w%）を意味する。
（実施例１）飼料組成物の製造  
まず、基本となる飼料組成物を調製した。以下、低ポリアミン飼料組成物という。該飼料組成物の組成は次のとおりである。
水分              ７．６％
タンパク質      ２６．４％
脂質            １０．２％
繊維              ２．５％
灰分              ６．０％
無窒素抽出物    ４７．３％
熱量            ３９７ Kcal/100g
該飼料組成物の調製に用いた原料は、ミルクカゼイン、白身魚肉、酵母、小麦胚芽、豚脂、小麦フスマ、脱脂米糠、アルファルファ粗挽き粉、小麦粗挽き粉、トウモロコシ、ミロ、ビタミン混合物、及びミネラル混合物である。これらの原料を上記組成となるよう配合し、適量の水分とともに混合し、ペレット状に成型した。【００３７】
次に、合成スペルミン（商品名：スペルミン、和光純薬工業株式会社）、スペルミジン（商品名：スペルミジン、シグマアルドリッチ）及びプトレスシン（商品名：プトレスシン、和光純薬工業株式会社）を用いて、高ポリアミン飼料組成物を調製した。該ポリアミンの添加量は、各飼料組成物毎にスペルミン０．０１５％、スペルミジン０．０６％、及びプトレスシン０．０１５％とした。該ポリアミンを添加した以外は、前記低ポリアミン飼料組成物と同様に調製した。【００３８】
（実施例２）実施例１の飼料組成物使用時の血中ポリアミン濃度測定
２４週齢のマウス（Jc1:ICRマウス、オス）を８匹ずつ２群に分け、一群に実施例１の低ポリアミン飼料組成物を与え、他の群に実施例１で調製した、スペルミジン含有ポリアミン飼料組成物を投与し、２６週後のスペルミジン血中濃度を比較した。この場合、マウスの体重は３０〜７０gであり、一日当たり約３〜１０gの飼料を消費するので、前記スペルミジンの摂取量はマウス１匹当たり約２０〜２００mg/kg/日である。図３に示すように、低ポリアミン飼料組成物を摂取した群の血中スペルミジン濃度は約３２nmol/mlであるが、高ポリアミン飼料組成物を摂取した群の血中スペルミジン濃度は約５０nmol/mlである。したがって、本発明の飼料組成物を摂取することにより、血中ポリアミン濃度が高くなることが判る。【００３９】
（実施例３）実施例１の飼料組成物使用時の血中ポリアミン濃度測定
２４週齢のマウス（Jc1:ICRマウス、オス）を９匹ずつ２群に分け、一群に実施例１の低ポリアミン飼料組成物を与え、他の群に実施例１で調製した、スペルミン含有ポリアミン飼料組成物を投与し、２６週後のスペルミン血中濃度を比較した。この場合、マウスの体重は３０〜７０gであり、一日当たり約３〜１０gの飼料を消費するので、前記スペルミンの摂取量はマウス１匹当たり約５〜５０mg/kgである。図４に示すように、低ポリアミン飼料組成物を摂取した群の血中スペルミジン濃度は約５nmol/mlであるが、高ポリアミン飼料組成物を摂取した群の血中スペルミン濃度は約１０nmol/mlである。したがって、本発明の飼料組成物を摂取することにより、血中ポリアミン濃度が高くなることが判る。【００４０】
（実施例４）本発明の高ポリアミン含有飼料組成物の効果の検討（生存率）
２４週齢のマウス（Jc1:ICRマウス、オス）を９匹ずつ２群に分け、一群に実施例１の低ポリアミン飼料組成物を与え、他の群に実施例１で調製した、スペルミン含有ポリアミン飼料組成物を投与し、８０週齢まで累積生存率を比較した。マウスは各ゲージに４〜６匹を入れ、温度および湿度調整が可能で、フィルターを通した空気を送付する装置のついた密閉した飼育器で飼育した。全ての実験に供した動物は１つの飼育器で飼育し、水はすべての動物に同一の物を投与した。また、飼育器の空気は全体に拡散する構造であり、実験に供した動物は同じ空気で呼吸を行っていたことになる。【００４１】
この場合、マウスの体重は３０〜７０gであり、一日当たり約３〜１０gの飼料を消費するので、前記スペルミンの摂取量はマウス１匹当たり約５〜５０mg/kgである。また、前記スペルミジンの摂取量はマウス１匹当たり約２０〜２００mg/kgである。【００４２】
マウスの生存は２日に１度確認した。対表観察および解剖によって死因を特定した。生存率はKaplan-Meier法によって解析し、各群間の生存率の有意差の検定はLogrank(Mantel-Cox)法で行った。図５に示すように、４０週齢を過ぎるころから、高ポリアミン飼料組成物摂取群の累積生存率は、低ポリアミン飼料組成物摂取群の累積生存率より明らかに高くなる。８０週齢になると、低ポリアミン飼料組成物摂取群の累積生存率約０．６に対して、高ポリアミン飼料組成物摂取群の累積生存率は０．８を越えており、高ポリアミン飼料組成物を摂取した群のマウスは明らかに寿命が延びている（Logrank(Mantel-Cox)検定にてp=0.003）。【００４３】
（実施例５）本発明の高ポリアミン含有飼料組成物の効果の検討（状態）
２４週齢から本発明の飼料組成物の供与をマウス（Jc1:ICRマウス、オス）開始し、生後８０週齢で観察を行った。実験動物１１０匹中、低ポリアミン食を供与したマウスは６６匹であったが、生後８０週齢で生存していたのは３７匹であった。一方、高ポリアミン食を供与したマウスは４４匹であったが、生後８０週齢で生存していたのは３７匹であった。生後８０週齢の時点で生存していた高ポリアミン食を供与したマウスでは、生存した３７匹中２１匹が、毛並みが良好で肉付きがよく運動も活発であった。しかし、低ポリアミン供与群のマウス３７匹中では、毛並みが良好で肉付きがよく運動も活発なマウスは１２匹しか存在せず、毛並みが悪いものが多かった。【００４４】
（実施例６）ポリアミンの毒性
追加実験により、スペルミン０.０４５％（餌１０kg内に４.５g混入）、スペルミジン０.１１５％（餌１０kg内に１１.５g混入）及びプトレスシン０.０４５％（餌１０kg内に４.５g混入）を含有する飼料組成物を継続的に供与してマウスを飼育した。ここで使用した飼料組成物は、ポリアミンの量を除き実施例１で製造したものと同じである。該実験開始から８ヶ月（３３週間経過）経過後も飼育中のマウスに特に変化はなく毒性は見られなかった。【００４５】
（参考例１）ポリアミン高含有食品の摂取による血中ポリアミン濃度の上昇
霊長類であるヒトを対象に、ポリアミン高含有食品の摂取による血中ポリアミン濃度の上昇を確認した。通常、納豆にはスペルミンとスペルミジンなどのポリアミンが１００gあたりおおよそ１０〜１００mg含まれておりポリアミン高含有食品である。該納豆４５〜５０g入り１パック以上を毎日摂取する群（成人１０人）と、納豆を摂取しない群（成人7人）に分け、実験開始２ヶ月後にスペルミンの血中濃度を測定した。その結果、図６のＡに示すように納豆を毎日摂取した群はスペルミンの血中濃度が明らかに上昇したのに対し、納豆を摂取しない群ではスペルミンの血中濃度に変動はなかった。したがって、ヒトを含む霊長類でも、本発明の高ポリアミン飼料組成物を摂取することにより、血中のポリアミン濃度が上昇することが判る。【００４６】
（考察）
（加齢によるポリアミンの合成の低下とLFA-1の増加）
図７に示すように、哺乳動物、例えばヒトでは加齢とともにポリアミンの合成が低下する(Das Rらの論文: Das R. & Kanungo MS. Exp Gerontol 17:95-103(1982))。
そして、図８に示すように、高齢者ほど末梢血単核球のLFA-1が増える。図８のデータはボランティアで参加した人の血液を採取して、末梢血単核球と呼ばれるリンパ球や単核球などの免疫細胞の表面に存在するLFA-1（＝CD11a及びCD１８）の発現を調べたものであって、年齢が高くなるほど発現が強くなることが示されている。このLFA-1は炎症を誘発するために重要な細胞膜タンパク質であり、この発現の増強が炎症を誘発する。したがって、動物では加齢とともにポリアミンの合成が低下するので、リンパ球や単核球などの免疫細胞の発現が増強され、これらの細胞が司る慢性炎症が起きやすくなる。そして、その事が生活習慣病の原因であると考えられている。すなわち、動脈硬化などの多くの生活習慣病が炎症で誘発されることが判ってきたからである。【００４７】
（ポリアミンの摂取量増加とその効果）
図９に示すように、スペルミンは末梢血単核球のLFA-1を減少させる。上記と同じ血液で、血液中のポリアミン濃度を測定して、LFA-1の発現との関係から、ポリアミン（スペルミン）濃度依存的にLFA-1の発現が抑制（LFA-1が減る）される事を発見した。生活習慣病の進行の原因が炎症である事を考慮すると、血液中（血液細胞を含めた全血中）のポリアミン濃度を上昇させることができれば、生活習慣病の予防効果が期待できるという知見を得た。
さらに人の免疫細胞を取りだし、実際にポリアミン（スペルミンとスペルミジン）と培養するとLFA-1(=CD11aおよびCD18)の発現だけが低下することが判った（図10参照）。図10のデータを得るため、ポリアミンとともに培養した細胞における接着分子の平均蛍光強度(MIF)の変化を測定した。
また、従来の研究ではポリアミン（スペルミンとスペルミジン）は炎症性サイトカインの産生を抑制することが判っている。ポリアミン（スペルミンとスペルミジン）は年齢とともに、体内での合成が低下し、刺激によっても合成が亢進しにくい（図７参照）。しかし、同時にポリアミンは分解される事なく消化管から吸収され、体内に広く分布する事が知られている。また、ポリアミンは微生物、植物、動物に共通の物質であり、我々人はこれらの生物からポリアミンを摂取することが出来る。【００４８】
（ポリアミンの摂取量と血中濃度の増加）
図11に、実施例２で得られたマウス血中スペルミジン濃度上昇のデータを示す。また、図12に実施例３で得られたマウス血中スペルミン濃度上昇のデータを示す。実施例１で調製した餌を投与した結果、投与２６週目になり、ポリアミンを多量に含んだ高ポリアミン餌を食べたマウスの血中ポリアミン（スペルミジンおよびスペルミン）濃度が上昇した。しかし、ポリアミン濃度が普通の餌や低いポリアミン濃度の餌を食べたマウスでは、血中ポリアミン濃度は上昇しなかった。
また図６に示すように、人でも、高ポリアミン食（高ポリアミン食である納豆を１日１‐２パックを食べた場合）、２ヶ月ほどして血中のスペルミン濃度が上昇した。
ポリアミン濃度の上昇のパターンはマウスと人とでは異なっているが、いずれにしてもポリアミン（プトレスシン、スペルミジン、スペルミンの３種類のポリアミン）の濃度の高い食品を一定期間摂取すると血中ポリアミン濃度が上昇することがわかった。したがって、本発明の食品組成物又は飼料組成物を一定期間摂取することで血中ポリアミン濃度が上昇することが判る。【００４９】
実施例５で説明したように、ポリアミン濃度の高い食餌を続けたマウスと、低もしくは普通のポリアミン濃度の餌を食べたマウスでは、８０週齢の様子が明らかに異なった。すなわち、高ポリアミン濃度を食べたマウスでは毛並みがよく、元気で活動的であったが、低もしくは普通ポリアミン濃度の餌を食べたマウスの毛並みは不良で、活動性も低下していた。図12は８０週齢マウスの外観的相違を示す写真である。明らかに高ポリアミン濃度を食べたマウスでは毛並みがよいことが判る。【００５０】
さらに、実施例５と同じ方法で追試を行いマウスの生存期間を比較すると、図13に示すように、高ポリアミン餌を食べたマウスの集団は、低もしくは普通ポリアミン濃度の餌を食べたマウスの集団より、明らかに生存率が高く、生存期間が延長することがわかった（３群間の比較でも、高ポリアミン群と普通ポリアミン群および高ポリアミン群と低ポリアミン群の２群間の比較でもp値が0.05以下であり有意の差を認めた）。また、低ポリアミン群と普通ポリアミン群の間には有意差がなかった。図13のデータはKaplan-Meierによる検定で、３群間ではp=0.011, 高と普通ではp=0.003, 高と低ではp=0.032であり、有意の差をもって高ポリアミン餌(c)が長生きであることが判った。
実施例５を継続し、８８週でマウスの腎臓を取り出し、各臓器の組織を検討した。ところ、図14のBに示すように、低および普通ポリアミン餌のマウスでは、腎臓の糸球体（尿を濾過する器官）の硬化（糸球体硬化）が著明であった。該糸球体硬化は老化に伴う変化としてはもっとも特徴的な変化の一つであり、動脈硬化などの生活習慣病の進行が原因である。すなわち、低および普通ポリアミン餌群のマウスでは糸球体硬化が進行しており、動脈硬化や老化がより進行していることが判る。これに対し、高ポリアミン餌を食べたマウスでは、図14のAで示すように該糸球体が若年マウスのように保たれて、硬化が極軽度であり、老化や動脈硬化の進行があまりない事を示している。（若年マウス（２０週齢）の腎臓の組織像と比較すると明らかである。）。【００５１】
さらに腎臓をsenescence marker protein 30（SMP30）の抗体を用いて免疫染色した。該SMP30は加齢とともに組織中から減少するタンパク質であり、他のホルモンの影響等をうけず、酸化ストレスに対する組織の防御機能を有する。このタンパク質の減少は、生体の酸化ストレスからの防御機能を低下させ、老化の進行をさらに早める。図15に示すように、実施例５で得た、高ポリアミン餌群のマウスの腎臓のSMP30の発現量（写真で黒乃至濃灰色に染色されている）は高く、高ポリアミン餌を食べたマウスでは多くのSMP30が存在する事が判った。一方、低又は普通ポリアミン餌群マウスの腎臓のSMP30の量は低下（色が薄い）していた。比較で示した若年マウスでは、当然SMP30の発現は高度である。【００５２】
また、該SMP30は主に腎臓と肝臓に多く存在するので、さらに肝臓をSMP30の抗体を用いて免疫染色した。図16に示すように、腎臓と同様に、高ポリアミン餌群のマウスの肝臓のSMP30の発現量は高く（写真で濃い色に染色されている）、高ポリアミン餌を食べたマウスでは多くのSMP30が存在する事が判った。一方、低又は普通ポリアミン餌群マウスの肝臓のSMP30の量は低下していた（色が薄い）。比較で示した若年マウスでは、当然SMP30の発現は高度である。【００５３】
これらのことから、高ポリアミン食はマウスの老化に伴う重要臓器の組織学的な変化を抑制し、毛並みを若々しく、活動性を保った。すなわち老化や、その典型的な変化である糸球体硬化を防いで、寿命を延長させることが判る。該マウスの病理学的な差で明らかにした様に、高ポリアミン食、すなわち本発明の食品組成物及び飼料組成物は動脈硬化などの生活習慣病や老化を抑制し、生活習慣病の原因である酸化ストレスに対する防御機能（SMP30）を保つことが出来ることは明かである。【００５４】
（公開データに基づく、人におけるポリアミンの摂取量増加とその効果の考察）
次に、人でも高ポリアミン食が、加齢等に伴うLFA-1の増加に起因する炎症、及び関連疾患、すなわち老化を防ぐ、及び軽減するのに有効か否かを、統計資料を用いて検討した。人の老化の典型的な発病の形態は動脈硬化による疾患である、そこで心臓血管疾患（cardiovascular disease = CVD）の発症頻度を指標にした。該動脈硬化はコレステロールの血管壁への沈着で生じるが、その発病には炎症が重要な働きをする。すなわち、沈着したコレステロールに免疫細胞（末梢血単核球など）が作用し、炎症を起こす事によって動脈硬化が進行するのである。この心臓血管疾患は、心筋梗塞や脳梗塞といった心臓血管疾患を引き起こすが、先進工業国とくに西欧諸国における死因の第一位であり、この疾患の克服は寿命を延長させることにつながると考えられている。したがって、強力な抗炎症作用（炎症性サイトカイン産生抑制、LFA-1発現抑制）を有するポリアミン、特にスペルミンが動脈硬化を抑制していることを示す証拠があるかどうかに焦点をあてて検討した。【００５５】
まず、WHO（World Health Organization）ホームページの統計情報システム(Statistical Information System (WHOSIS) (http://www.who.int/whosis/en/))  から心臓血管疾患の訂正死亡率（２００２年）及び男女の寿命（life expectancy、２０００年）のデータを、国連食糧農業機構の統計部(FAOSTAT)のデータベース（http://www.fao.org/economic/en/）から２００２年の食料消費量データのなかのCrops  primary equvalentおよびLivestock and Fish primary equivalentに関するデータを用いた。また、各食品中のポリアミン濃度は、下記３つの論文に記載されている濃度の平均値を用いた。
1)  Polyamine contents in current
foods: a basis for polyamine reduced diet and a study of its long term observance and tolerance in prostate carcinoma patients. Cipolla BG, Havouis R, Moulinoux JP. Amino Acids. 33: 203-212, 2007.  
2) Polyamines in food-implications for growth and health. Bardocz S, Duguid TJ, Brown DS, Grant G, Pusztai A, White A, Ralph A. J.Nutr.Biochem. 4: 66-71, 1993.
3) Nishibori N, Fujihara S, Akatuki T. Amounts of polyamines in foods in Japan and intake by Japanese. Food Chemistry 100: 491-497, 2007.【００５６】
対象とした国は、ロシアを含むヨーロッパ諸国およびアメリカ合衆国、カナダ、オーストラリアとニュージーランド（アルバニア、アルメニア、オーストラリア、オーストリア、アゼルバイジャン、ベラルーシ、ベルギー、ボスニア及びヘルツェゴビナ、ブルガリア、カナダ、クロアチア、シプラス、チェコ共和国、デンマーク、エストニア、フィンランド、フランス、ジョージア、ドイツ、ギリシア、ハンガリー、アイスランド、アイルランド、イスラエル、イタリア、カザフスタン、ラトビア、リトアニア、マルタ、ニュージーランド、ノルウェイ、ポーランド、ポトルトガル、ルーマニア、ロシア連邦、スロバキア、スロベニア、スペイン、スウェーデン、タジキスタン、マケドニアの前ユーゴスラビア共和国、トルコ、トルクメニスタン、ウクライナ、英国、アメリカ合衆国、ウズベキスタン）の４９カ国であり、文化、人種構成、食文化、宗教的な背景の比較的類似した国家を対象にした。
調査した食品は動物性脂肪、水産動物、水産物、牛肉、バター、ギー、頭足動物、チーズ、クリーム、甲殻類、深海魚、卵、 動物性脂肪（未加工）、淡水魚、蜂蜜、海魚（他）、肉（他）、全乳、ミルク調製バター(ミルクを転換した乳製品を伴う全乳)、軟体動物 (他)、マトン及びヤギ肉、食用内臓肉、豚肉、鶏肉、 乳清、リンゴ、バナナ、レモン及びライム、柑橘類 (他)、パイナップル、グレープ、オレンジ及びマンダリン、フルーツ類（他）、pulses (other), 樹木性ナッツ、地上性ナッツ、シリアル（シリアル（他）、大麦、オーツ麦、ライ麦、小麦、ライス (ミルドeq))、ジャガイモ、トウモロコシ、オニオン、トマト、野菜（他）、刺激物、油料穀物、砂糖、コーヒー、ビール、ワイン、アルコール性飲料の全食品である。【００５７】
これらの国々では、心臓血管疾患（CVD）訂正死亡率と男女の寿命が極めて強い負の相関（男性は相関係数＝-0.950, p<0.0001：女性は相関係数＝-0.942, p<0.0001）を示しており、CVDは死因としてきわめて重要であり、CVDの発症抑制は寿命延長をもたらすことが容易に推測できる（図なし）（CVD event＝訂正心臓血管疾患の年間発症数）。【００５８】
これまでの疫学調査でも報告されているとおり、ミルク消費量(全乳)とCVDの発症数の関連は弱いが、消費量の多い国のほうがCVDの発症数も多い傾向がみとめられた（相関係数＝+3.80, p=0.0066）（図17参照）。
一方、心臓血管疾患とチーズ消費量との関係をみると、乳製品のなかでもポリアミンを比較的多く含むチーズとCVDの発症数は強い負の相関（相関係数＝-0.797, p<0.0001）を示した（図18参照）。
この統計を用いると、これまで指摘されてきたことと同じ傾向があることが判った。しかし、FAOSTATの数値は、各国家間で消費できる状態にある数値であり、実際にすべての食品が摂食されているわけではない。しかし、この各食品の量やその中に含まれる各種成分の比は国家内で必要とされている食品の比率を確実に反映していると考える事ができる。そこで、次に食品や成分などの比を用いて検討することとした。
まず、CVD発症数とミルク全製品消費量（バターを除くミルク製品）に占めるチーズ消費量の比を比較すると、両者は強い負の相関（相関係数＝-0.774,
p<0.0001）を示した（図19参照）。この事は、同じミルクを原料とするチーズにはCVDを抑制する物質が含まれている可能性を示唆する。
一方、既に動脈硬化などの生活習慣病に予防的に作用していることが科学的に明らかにされている、不飽和脂肪酸を多く含む魚食の影響を見るために、魚食の量と動脈硬化を進行させる飽和脂肪酸を多く含む動物の肉食量の比率とCVDの関係を検討した。この結果、心臓血管疾患と魚食／肉食比の間には、弱い負の相関（相関係数＝-0.365, p=0.0095）があることが示された。これは、これまで指摘されてきたように、魚類に多く含まれる多価不飽和脂肪酸(PUFA)がCVDを抑制する可能性をサポートするデータである。【００５９】
さらに、近年になって動脈硬化などの生活習慣病に予防的に作用していることの証明が困難になってきたポリフェノールとの関係を見るために、全アルコール飲料にしめるワインの消費量の比とCVDの関係を検討した。しかし、ワイン消費量／全アルコール飲料消費量とCVD発症数には関係がなかった（相関係数＝-0.086, p=0.5588）。【００６０】
次に、食品中に含まれるポリアミン量とCVDの関係を検討する。
まず、摂取カロリーあたりの総ポリアミン摂取量とCVD発症数の関係を検討した。総ポリアミン摂取量とは、食品および飲料中に含まれるプトレスシン、スペルミジン、及びスペルミンの量（全て分子量＝molで計算）である。図20に示されているように、両者の間には負の相関を認めた（相関係数＝-0.560, p<0.0001）。すなわち、摂取カロリーあたりに含まれるポリアミン量の多い国家ほど心臓血管疾患による死亡率が低いということである。
次に、これまでの検討で抗炎症作用（炎症性サイトカイン産生抑制、LFA-1発現抑制作用）がもっとも強力であったスペルミンの摂取量と総カロリーの関係を検討した。その結果、摂取総カロリーにおけるスペルミン摂取量の比とCVDの発症数は強い負の相関（相関係数＝ -0.717, p<0.0001）を認めた(図21参照)。すなわち、総カロリーあたりのポリアミン、特にスペルミンの割合が多い食品を食べている対象国の国民ほど、心臓血管疾患が少ないことが判る。
ポリアミンは大半が細胞内に存在し、とくにタンパク質などと一緒に存在する。そこで、タンパク質摂取量あたりのポリアミン量とCVD発症数を比較すると、やはり両者の間には負の相関を認めた（相関係数＝-0.670, p<0.0001）(図22参照)。すなわち、同じタンパク質でもスペルミンが多く含まれている食品を食べている国民の方がCVDの発症率が低いことが判る。
これらの検討結果は、本発明者が行った試験管レベルでの研究によるポリアミンの抗炎症抑制作用、及びマウスへの高ポリアミン食投与実験による動脈硬化などの老化の進行抑制の実験結果とよく一致する。すなわち、LFA-1の増加に起因する炎症、及び関連疾患、すなわちCVDの発症は炎症により進行する。そして食品中のポリアミンは体内にそのまま吸収されるが、先の統計的なデータでも実際に人で高ポリアミン食の継続で血中のポリアミン濃度が上昇した。すなわち、CVDなどの生活習慣病の発症の機序として重要な炎症を抑制するポリアミン、特にスペルミンを摂取することで、体内に入ったポリアミンが炎症を抑制しCVDの発症を抑制すると考えられるが、そのことが疫学調査上でも証明されたことになる。【００６１】
そして、実際にポリアミンの摂取量と人の寿命の関係を検討すると、男性寿命では、摂取総カロリーあたりのポリアミン摂取量の多い国民ほど寿命が長く（相関係数＝0.658, p<0.0001）(図23参照)、また、女性寿命でも、摂取総カロリーあたりのポリアミン摂取量の多い国民ほど寿命が長い（相関係数＝0.553, p<0.0001）ことがわかった(図24参照)。
したがって、ポリアミンは微生物、植物、動物や人の共通の物質であり、人でも、マウスと同様に動脈硬化などの生活習慣病を抑制し、老化の進行を抑制し、寿命を延長していることがわかった。
【図面の簡単な説明】
【００６２】
【図１】図１は、ポリアミンの代謝経路である。高ポリアミン食によって細胞内スペルミンとスペルミジン濃度が増加すると、Sアデノシルメチオニン脱炭酸酵素（S-adenosylmethioninedecarboxylase(AdoMet DC)）とオルニチン脱炭酸酵素（Ornithinedecarboxylase(ODC)）の活性が低下する。
【図２】図２は、Sアデノシルメチオニン（S-adenosylmethionine）と遺伝子のプロモーター領域（CpG）のメチル化（Methylation）との関係を示す。遺伝子のプロモーター領域のメチル化は遺伝子発現を制御している。Sアデノシルメチオニンはメチル基を供給する唯一の物質であり、この濃度上昇は遺伝子等のメチル化の進行を促進することになる。LFA-1のプロモーター領域はメチル化によって発現が低下する事が判っている。
【図３】図３は、低ポリアミン飼料組成物を摂取した群の血中スペルミジン濃度と、高ポリアミン飼料組成物を摂取した群の血中スペルミジン濃度とを比較したグラフである。
【図４】図４は、実施例３で得られたマウス血中スペルミン濃度上昇のデータを示す。図４では、低ポリアミン飼料組成物を摂取した群の血中スペルミン濃度と、高ポリアミン飼料組成物を摂取した群の血中スペルミン濃度とを比較している。
【図５】図５は、高ポリアミン飼料組成物摂取マウス群の累積生存率と、低ポリアミン飼料組成物摂取マウス群の累積生存率を示すグラフである。
【図６】図６のＡは納豆を毎日摂取したヒトの群のスペルミン血中濃度を示し、Ｂは納豆を摂取しないヒトの群のスペルミンの血中濃度を示すグラフである。Ａの納豆を毎日摂取した群では実験開始前（Before）と比較すると納豆食を継続した後（After）では明らかに血中スペルミン濃度が上昇している。しかし、Bの納豆を食べなかった群では、実験前（Before）と実験後（After）の間に変化を認めなかった。
【図７】図７は、哺乳動物、例えばヒトでは加齢とともにポリアミンの合成が低下することを示すグラフである。
【図８】図８は、高齢者ほど末梢血単核球のLFA-1が増えることを示すデータである。
【図９】図９は、スペルミンの増加が末梢血単核球のLFA-1を減少させることを示すデータである。
【図１０】図10は、人の免疫細胞を取りだし、実際にポリアミン（スペルミンとスペルミジン）と培養するとLFA-1(=CD11aおよびCD18)の発現だけが低下することを示すデータのデータである。図10のデータを得るため、ポリアミンとともに培養した細胞における接着分子のMFIの変化を平均蛍光強度を測定した。
【図１１】図11は、実施例２で得られたマウス血中スペルミジン濃度上昇のデータを示す。
【図１２】図12は、ポリアミン濃度の高い食餌を続けたマウスと、低もしくは普通のポリアミン濃度の餌を食べたマウスにおける外観的相違を示す写真である。明らかに高ポリアミン濃度を食べたマウスでは毛並みがよいことが判る。
【図１３】図13は、実施例５と同じ方法で追試を行いマウスの生存期間を比較した場合における、高ポリアミン餌を食べたマウスの集団、低もしくは普通ポリアミン濃度の餌を食べたマウスの集団毎の、生存率と、生存期間の延長を示すデータである。
【図１４】図14のBは、低および普通ポリアミン餌のマウスでは、腎臓の糸球体（尿を濾過する器官）の硬化（糸球体硬化）が著明であり、一方、高ポリアミン餌のマウスでは図14のAで示すように該糸球体が若年マウスのように保たれて、硬化が極軽度であり、老化や動脈硬化の進行があまりない事を示す、写真である。
【図１５】図15は、低、普通及び高ポリアミン餌群のマウスの腎臓のSMP30の発現量を示す写真である（写真で黒乃至濃灰色に染色されている）。
【図１６】図16は、低、普通及び高ポリアミン餌群のマウスの肝臓のSMP30の発現量を示す写真である（写真で黒乃至濃灰色に染色されている）。
【図１７】図17は、ミルク消費量(全乳)とCVDの発症数の関連を示すデータである。その関連は弱いが、消費量の多い国のほうがCVDの発症数も多い傾向がみとめられる（相関係数＝+3.80, p=0.0066）。
【図１８】図18は、心臓血管疾患とチーズ消費量との関係を示すデータである。乳製品のなかでもポリアミンを比較的多く含むチーズとCVDの発症数は強い負の相関（相関係数＝-0.797, p<0.0001）を示している。
【図１９】図19は、まず、CVD発症数とミルク全製品消費量（バターを除くミルク製品）に占めるチーズ消費量の比を比較するデータを示す。両者は強い負の相関（相関係数＝-0.774, p<0.0001）を示し、この事は、同じミルクを原料とするチーズにはCVDを抑制する物質が含まれている可能性を示唆する。
【図２０】図20は、摂取総カロリーにおけるポリアミン摂取量の比とCVDの発症数の関係を示すデータである。両者には強い負の相関（相関係数＝ -0.560, p<0.0001）が認められる。
【図２１】図21は摂取総カロリーにおけるスペルミン摂取量の比とCVDの発症数の関係を示すデータである。両者には強い負の相関（相関係数＝-717, p<0.0001）が認められる。
【図２２】図22は、タンパク質摂取量あたりのポリアミン量とCVD発症数を比較したデータである。やはり両者の間には負の相関を認めた（相関係数＝-0.670, p<0.0001）。すなわち、同じ蛋白質でもスペルミンが多く含まれている食品を食べている国民の方がCVDの発症数が少ないことが判る。
【図２３】図23は、実際にポリアミンの摂取量と人（男）の寿命の関係を示すデータである。
【図２４】図24は、実際にポリアミンの摂取量と人（女）の寿命の関係を示すデータである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１３】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図１２】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【国際調査報告】
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