(57)【要約】  親油性ＩＬ−２産生抑制物質、および該親油性ＩＬ−２産生抑制物質を経口投与により血中曝露量を抑制しリンパ送達し得る基剤を含有してなる医薬組成物を開示する。前記医薬組成物によれば、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の副作用低減のために血中曝露量を抑制し、かつ所望の薬理作用を発現し得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質、および当該物質の血中曝露量を抑制しリンパに送達し得る担体を含有してなる医薬組成物。
【請求項２】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、ＬｏｇＰ値が２以上であり、ＩＣ５０（ヒト混合リンパ球反応５０％阻害薬物濃度）が１μｍｏｌ／Ｌ以下である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、タクロリムス、シクロスポリン、ラパマイシン、ミコフェノール酸、およびミコフェノール酸モフェチルからなる群より選択される１種または２種以上である、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制しリンパに送達し得る担体が、（ｉ）モノ−、ジ−、トリ−グリセリド、またはその混合物、（ｉｉ）炭素数が１２から１８までの脂肪酸、またはそれらの混合物、（ｉｉｉ）ＨＬＢ値が１０から１８であり、重量平均分子量が２００〜５０００のポリエチレングリコールを分子構造中に含有する界面活性剤、および（ｉｖ）炭素数が１２から１８までの高級アルコールからなる群より選択される１種または２種以上である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
（ｉ）が、ナタネ油、ひまし油、ヒマワリ油、カカオ脂、中鎖脂肪酸トリグリセリド、モノオレイン、ジオレイン、トリオレイン、ステアリン酸モノグリセリド、ステアリン酸ジグリセリド、ステアリン酸トリグリセリド、パルミチン酸モノグリセリド、パルミチン酸ジグリセリド、パルミチン酸トリグリセリド、ミリスチン酸モノグリセリド、ミリスチン酸ジグリセリド、ミリスチン酸トリグリセリド、アラキジン酸モノグリセリド、アラキジン酸ジグリセリド、アラキジン酸トリグリセリド、ベヘン酸モノグリセリド、ベヘン酸ジグリセリド、およびベヘン酸トリグリセリドからなる群より選択される１種または２種以上である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
（ｉｉ）が、リノール酸、ステアリン酸、オレイン酸、ラウリン酸、およびパルミチン酸からなる群より選択される１種または２種以上である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
（ｉｉｉ）が、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレン・脂肪酸モノエステル、飽和ポリグリコール化グリセリド、Ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸塩、およびポリオキシエチレン硬化ヒマシ油からなる群より選択される１種または２種以上である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項８】
（ｉｖ）が、ステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、およびセチルアルコールからなる群より選択される１種または２種以上である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項９】
担体の配合量が、当該物質１重量部に対して０．１〜２０，０００重量部である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
医薬組成物が経口投与用である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
医薬組成物がリンパ送達性である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制しリンパに送達し得る担体を投与することにより、親油性ＩＬ−２産生抑制物質をリンパに送達させる方法。
【請求項１３】
リンパへの送達が、Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が１時間以上である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
リンパへの送達が、Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が４時間以下である、請求項１２又は１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量の指標である血中ＡＵＣｂｌｏｏｄまたは血漿中ＡＵＣｐｌａｓｍａを、対照組成物の血中ＡＵＣｂｌｏｏｄまたは血漿中ＡＵＣｐｌａｓｍａに比して、０％以上８０％以下とする、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、ＬｏｇＰ値が２以上であり、ＩＣ５０（ヒト混合リンパ球反応５０％阻害薬物濃度）が１μｍｏｌ／Ｌ以下である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、タクロリムス、シクロスポリン、ラパマイシン、ミコフェノール酸、およびミコフェノール酸モフェチルからなる群より選択される１種または２種以上である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
投与が経口である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１〜請求項１１のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与する、請求項１２に記載の方法。
【請求項２０】
（ｉ）モノ−、ジ−、トリ−グリセリド、またはその混合物、（ｉｉ）炭素数が１２から１８までの脂肪酸、またはそれらの混合物、（ｉｉｉ）ＨＬＢ値が１０から１８であり、重量平均分子量が２００〜５０００のポリエチレングリコールを分子構造中に含有する界面活性剤、および（ｉｖ）炭素数が１２から１８までの高級アルコールからなる群より選択される１種または２種以上の物質の、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制しリンパに送達し得る担体としての使用。
【請求項２１】
（ｉ）が、ナタネ油、ひまし油、ヒマワリ油、カカオ脂、中鎖脂肪酸トリグリセリド、モノオレイン、ジオレイン、トリオレイン、ステアリン酸モノグリセリド、ステアリン酸ジグリセリド、ステアリン酸トリグリセリド、パルミチン酸モノグリセリド、パルミチン酸ジグリセリド、パルミチン酸トリグリセリド、ミリスチン酸モノグリセリド、ミリスチン酸ジグリセリド、ミリスチン酸トリグリセリド、アラキジン酸モノグリセリド、アラキジン酸ジグリセリド、アラキジン酸トリグリセリド、ベヘン酸モノグリセリド、ベヘン酸ジグリセリド、およびベヘン酸トリグリセリドからなる群より選択される１種または２種以上である、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
（ｉｉ）が、リノール酸、ステアリン酸、オレイン酸、ラウリン酸、およびパルミチン酸からなる群より選択される１種または２種以上である、請求項２０に記載の使用。
【請求項２３】
（ｉｉｉ）が、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレン・脂肪酸モノエステル、飽和ポリグリコール化グリセリド、Ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸塩、およびポリオキシエチレン硬化ヒマシ油からなる群より選択される１種または２種以上である、請求項２０に記載の使用。
【請求項２４】
（ｉｖ）が、ステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、およびセチルアルコールからなる群より選択される１種または２種以上である、請求項２０に記載の使用。
【請求項２５】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、ＬｏｇＰ値が２以上であり、ＩＣ５０（ヒト混合リンパ球反応５０％阻害薬物濃度）が１μｍｏｌ／Ｌ以下である、請求項２０に記載の使用。
【請求項２６】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、タクロリムス、シクロスポリン、ラパマイシン、ミコフェノール酸、およびミコフェノール酸モフェチルからなる群より選択される１種または２種以上である、請求項２０に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質、および該親油性ＩＬ−２産生抑制物質を経口投与により血中曝露量を抑制し、かつ、薬効発現に必要な物質量をリンパへ送達し得る担体を含有してなる医薬組成物に関する。詳細には、血中への薬物移行量を抑制し、リンパへの効率的な薬物送達を達成する医薬組成物に関するものである。
また、親油性ＩＬ−２産生抑制物質、および該親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中移行量抑制とリンパ送達を達成する担体を含有してなる医薬組成物を経口投与することにより、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制する方法、あるいは、親油性ＩＬ−２産生抑制物質をリンパに送達させる方法に関するものである。さらに、経口投与することにより親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中移行量を抑制しリンパに送達させるための、特定の油脂または特定の界面活性剤の使用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質としては、リンパ球のインターロイキン−２（以下、ＩＬ−２）産生を抑制する物質としてタクロリムス、シクロスポリン、ラパマイシン等が公知である（特許文献１）。また、ミコフェノール酸およびミコフェノール酸モフェチルもリンパ球細胞の増殖を抑制することから、ＩＬ−２産生が抑制されるため、ＩＬ−２産生抑制物質である（特許文献２、非特許文献１）【０００３】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質は、その物理的化学的特性として、水への溶解性は低く、親油性ＩＬ−２産生抑制物質を固体あるいは水懸濁液として経口投与した場合、生物学的利用率は低い。そのため、例えばタクロリムスにおいては、タクロリムスと例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）などの重合体とからなり、生物学的利用率を向上させた固溶体組成物に関する発明に基づき、現在のタクロリムス製品（製品名：Prograf）は医療の現場に提供されている（特許文献３）。【０００４】
しかしながら、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の経口投与時の吸収は一定しておらず、患者により個人差があるので、血中濃度の高い場合の副作用並びに血中濃度が低い場合の拒絶反応及び移植片対宿主病の発現を防ぐため、患者の状況に応じて血中濃度を測定し、トラフレベル（trough level）の血中濃度を参考にして投与量を調節すること、特に移植直後あるいは投与開始直後は頻回に血中濃度測定を行うことが望ましいことが注意点として報告されている（非特許文献２＜用法・用量＞参照）。【０００５】
一方、経口吸収性並びに吸収性変動幅（ばらつき）の改善を目的として、非晶質の親油性ＩＬ−２産生抑制物質、および界面活性剤を含有してなる経口医薬組成物も報告されている（特許文献４）。また、消化管のＣＹＰ代謝に基づく生物学的利用率の低下を回避する目的として、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の固体分散体を腸溶性高分子物質により被覆した経口徐放製剤も報告されている（特許文献５）。さらに、親油性ＩＬ−２産生抑制物質を油と共に非水溶媒に溶解してなる、筋肉内注射に適した非水溶性製剤なる発明、さらに所望により、乳化剤を添加した非水溶性製剤に関する発明も報告されている（特許文献６）。【０００６】
他方、親油性ＩＬ−２産生抑制物質については、腎機能障害や高血糖、糖尿等の膵機能障害の副作用発現頻度が高まることが報告されている（非特許文献２＜使用上の注意＞参照）。
また、親油性ＩＬ−２産生抑制物質投与後の親油性ＩＬ−２産生抑制物質血中曝露量と薬理効果との間に、関連性は認められるものの、高い血中濃度が持続する場合に腎障害が認められていることも報告されている（非特許文献２＜用法・用量に関連する使用上の注意＞参照）。【０００７】
したがって、顕著な免疫抑制効果が臨床的に確認された親油性ＩＬ−２産生抑制物質について、血中曝露量の抑制により副作用を軽減し、薬理作用の免疫抑制作用を発現し得る親油性ＩＬ−２産生抑制物質含有医薬組成物の開発が今なお要望される。【０００８】
ところで、移植に対する拒絶反応はリンパ球細胞に基づくものであり、このリンパ球細胞に対する作用が免疫抑制剤の薬理作用機序と知られている。リンパ送達化技術とは、免疫抑制剤を経口投与することにより、消化管粘膜透過後、血管内に移行させるのではなく、直接リンパ管内に送達させることにより、リンパ管系に存在するリンパ球細胞に直接作用させることを可能にした技術である。【０００９】
しかし一方で、リンパ液中の免疫抑制剤の濃度を著しく上昇させることは、リンパ腫発生のリスクを高めることになるため、薬効の発現に必要となる薬物量を効率的にリンパへ送達することが望ましい。【００１０】
かかるリンパ送達化技術としては、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル等の界面活性剤を用いて、水に分散したシクロスポリン類のリンパ指向性製剤が報告され、所望によりミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸等の中〜高級脂肪酸を添加してもよいことが報告されている（特許文献７、非特許文献３）。該技術では血中のシクロスポリン濃度は変化させていない。またリンパ液中の濃度を著しく上昇させており、リンパ腫発生のリスクを高めている。【００１１】
なお、安定で高い一貫した吸収性と生物学的利用率の向上を目的として、タクロリムス（ＦＫ５０６）やラパマイシンクラスの化合物と、中鎖脂肪酸トリグリセリド（ＴＧ）、混合モノ−、ジ−、トリ−グリセリド（便宜的に、例えばアーモンド油、落花生油、桃油、パーム油、とうもろこし油、ひまわり油、ベニバナ油等の植物油）、およびエステル交換エトキシル化植物油の親油性相、親水性相、および界面活性剤を含有した、粒径２００ｎｍ以上のエマルジョン製剤が報告されている（特許文献８）。しかし、同公報には、生物学的利用率を向上した、すなわちタクロリムス血中濃度を高めた経口用医薬組成物については例示されているが、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し、かつ薬効発現に必要な薬物量をリンパへ送達する技術については開示されていない。【００１２】
【特許文献１】特開昭６１−１４８１８１号公報（欧州特許公開第０３２３０４２号）
【特許文献２】米国特許公報（ＵＳ４７８６６３７）、特許公報第３８４４４９１号
【特許文献３】特開昭６２−２７７３２１号公報
【特許文献４】国際公開ＷＯ９８／２４４１８パンフレット
【特許文献５】国際公開ＷＯ９９／４９８６３パンフレット
【特許文献６】特開平４−１８２４２９号公報
【特許文献７】特開昭６１−２８０４３５号公報
【特許文献８】特開平７−１３８１６１号公報（米国特許公報（ＵＳ５９３２２４３、ＵＳ６５６５８５９、ＵＳ７０２５９７５）、米国公開特許公報２００３／０１６６５１７Ａ１）
【非特許文献１】Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ６４，１６９５，１９９７
【非特許文献２】プログラフカプセル０．５ｍｇ，１ｍｇ添付文書
【非特許文献３】Ｐｈａｒｍａ．Ｒｅｓ．，３，１，４８−５１，１９８６
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明は、臨床上顕著な免疫抑制効果が確認された親油性ＩＬ−２産生抑制物質について、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量の抑制によって副作用を軽減し、薬理効果の免疫抑制作用を発現し得る、親油性ＩＬ−２産生抑制物質含有医薬組成物を提供するものである。
また、本発明は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中移行量を抑制しリンパに送達させ得る担体を含有した医薬組成物を経口投与することにより、親油性ＩＬ−２産生抑制物質血中曝露量を抑制し、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の薬理作用である免疫抑制作用を発現し得る、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の副作用を軽減させる方法を提供するものである。また、そのための親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し親油性ＩＬ−２産生抑制物質をリンパに送達させるための担体の使用に関する発明をそれぞれ提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の主作用となるＩＬ−２産生抑制効果と、副作用の指標となる親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量に着目し鋭意検討した結果、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し、かつ親油性ＩＬ−２産生抑制物質の薬理作用である免疫抑制作用を発現し得る基剤を見出した。また、これらの知見に基づき、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の副作用を低減させる方法並びにリンパに送達するための担体の使用に関する検討を行い、本発明を完成させるに至った。【００１５】
すなわち、本発明は、
［１］親油性ＩＬ−２産生抑制物質、および当該物質の血中曝露量を抑制しリンパに送達し得る担体を含有してなる医薬組成物；
［２］親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、ＬｏｇＰ値が２以上であり、ＩＣ５０（ヒト混合リンパ球反応５０％阻害薬物濃度）が１μｍｏｌ／Ｌ以下である、［１］の医薬組成物；
［３］親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、タクロリムス、シクロスポリン、ラパマイシン、ミコフェノール酸、およびミコフェノール酸モフェチルからなる群より選択される１種または２種以上である、［１］又は［２］の医薬組成物；
［４］親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制しリンパに送達し得る担体が、（ｉ）モノ−、ジ−、トリ−グリセリド、またはその混合物、（ｉｉ）炭素数が１２から１８までの脂肪酸、またはそれらの混合物、（ｉｉｉ）ＨＬＢ値が１０から１８であり、重量平均分子量が２００〜５０００のポリエチレングリコールを分子構造中に含有する界面活性剤、および（ｉｖ）炭素数が１２から１８までの高級アルコールからなる群より選択される１種または２種以上である、［１］〜［３］の医薬組成物；
［５］（ｉ）が、ナタネ油、ひまし油、ヒマワリ油、カカオ脂、中鎖脂肪酸トリグリセリド、モノオレイン、ジオレイン、トリオレイン、ステアリン酸モノグリセリド、ステアリン酸ジグリセリド、ステアリン酸トリグリセリド、パルミチン酸モノグリセリド、パルミチン酸ジグリセリド、パルミチン酸トリグリセリド、ミリスチン酸モノグリセリド、ミリスチン酸ジグリセリド、ミリスチン酸トリグリセリド、アラキジン酸モノグリセリド、アラキジン酸ジグリセリド、アラキジン酸トリグリセリド、ベヘン酸モノグリセリド、ベヘン酸ジグリセリド、およびベヘン酸トリグリセリドからなる群より選択される１種または２種以上である、［４］の医薬組成物；
［６］（ｉｉ）が、リノール酸、ステアリン酸、オレイン酸、ラウリン酸、およびパルミチン酸からなる群より選択される１種または２種以上である、［４］の医薬組成物；
［７］（ｉｉｉ）が、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレン・脂肪酸モノエステル、飽和ポリグリコール化グリセリド、Ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸塩、およびポリオキシエチレン硬化ヒマシ油からなる群より選択される１種または２種以上である、［４］の医薬組成物；
［８］（ｉｖ）が、ステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、およびセチルアルコールからなる群より選択される１種または２種以上である、［４］の医薬組成物；
［９］担体の配合量が、当該物質１重量部に対して０．１〜２０，０００重量部である、［１］〜［８］の医薬組成物；
［１０］医薬組成物が経口投与用である、［１］の医薬組成物；
［１１］医薬組成物がリンパ送達性である、［１］の医薬組成物；
［１２］親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制しリンパに送達し得る担体を投与することにより、親油性ＩＬ−２産生抑制物質をリンパに送達させる方法；
［１３］リンパへの送達が、Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が１時間以上である、［１２］の方法；
［１４］リンパへの送達が、Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が４時間以下である、［１２］又は［１３］の方法；
［１５］親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量の指標である血中ＡＵＣｂｌｏｏｄまたは血漿中ＡＵＣｐｌａｓｍａを、対照組成物の血中ＡＵＣｂｌｏｏｄまたは血漿中ＡＵＣｐｌａｓｍａに比して、０％以上８０％以下とする、［１２］の方法；
［１６］親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、ＬｏｇＰ値が２以上であり、ＩＣ５０（ヒト混合リンパ球反応５０％阻害薬物濃度）が１μｍｏｌ／Ｌ以下である、［１２］の方法；
［１７］親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、タクロリムス、シクロスポリン、ラパマイシン、ミコフェノール酸およびミコフェノール酸モフェチルからなる群より選択される１種または２種以上である、［１２］の方法；
［１８］投与が経口である、［１２］の方法；
［１９］請求項１〜請求項１１のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与する、［１２］の方法；
［２０］（ｉ）モノ−、ジ−、トリ−グリセリド、またはその混合物、（ｉｉ）炭素数が１２から１８までの脂肪酸、またはそれらの混合物、（ｉｉｉ）ＨＬＢ値が１０から１８であり、重量平均分子量が２００〜５０００のポリエチレングリコールを分子構造中に含有する界面活性剤、および（ｉｖ）炭素数が１２から１８までの高級アルコールからなる群より選択される１種または２種以上の物質の、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制しリンパに送達し得る担体としての使用；
［２１］（ｉ）が、ナタネ油、ひまし油、ヒマワリ油、カカオ脂、中鎖脂肪酸トリグリセリド、モノオレイン、ジオレイン、トリオレイン、ステアリン酸モノグリセリド、ステアリン酸ジグリセリド、ステアリン酸トリグリセリド、パルミチン酸モノグリセリド、パルミチン酸ジグリセリド、パルミチン酸トリグリセリド、ミリスチン酸モノグリセリド、ミリスチン酸ジグリセリド、ミリスチン酸トリグリセリド、アラキジン酸モノグリセリド、アラキジン酸ジグリセリド、アラキジン酸トリグリセリド、ベヘン酸モノグリセリド、ベヘン酸ジグリセリド、およびベヘン酸トリグリセリドからなる群より選択される１種または２種以上である、［２０］の使用；
［２２］（ｉｉ）が、リノール酸、ステアリン酸、オレイン酸、ラウリン酸、およびパルミチン酸からなる群より選択される１種または２種以上である、［２０］の使用；
［２３］（ｉｉｉ）が、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレン・脂肪酸モノエステル、飽和ポリグリコール化グリセリド、Ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸塩、およびポリオキシエチレン硬化ヒマシ油からなる群より選択される１種または２種以上である、［２０］の使用；
［２４］（ｉｖ）が、ステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、およびセチルアルコールからなる群より選択される１種または２種以上である、［２０］の使用；
［２５］親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、ＬｏｇＰ値が２以上であり、ＩＣ５０（ヒト混合リンパ球反応５０％阻害薬物濃度）が１μｍｏｌ／Ｌ以下である、［２０］の使用；
［２６］親油性ＩＬ−２産生抑制物質が、タクロリムス、シクロスポリン、ラパマイシン、ミコフェノール酸およびミコフェノール酸モフェチルからなる群より選択される１種または２種以上である、［２０］の使用
に関するものである。
また、本発明においては、親油性ＩＬ−２産生抑制物質として、タクロリムス及びその塩を除く態様を採用することができる。
【発明の効果】
【００１６】
本発明は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質を経口投与する際、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し、かつ親油性ＩＬ−２産生抑制物質を効率的にリンパに送達し得る担体を選択・使用する点に特徴を有し、生物学的利用率の向上を目的とした経口吸収改善化技術とは相違するものである。本発明医薬組成物は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し、かつ親油性ＩＬ−２産生抑制物質の薬理作用である免疫抑制作用を発現し得ることが確認されていることから、腎機能障害等の副作用を軽減させることが期待できる発明であり、経口投与した薬物の吸収量を増加させる技術とは相違する効果を奏するものである。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】中鎖トリグリセリド、ヒマワリ油、カカオ脂３０ｍｇを添加した各サンプル、およびヒマワリ油３００ｍｇを添加したサンプルについて求めた累積脂肪酸分解率を示すグラフである。
【図２】実施例１、２、３、５の本発明組成物を経口投与した後のタクロリムスの累積吸収率を示すグラフである。
【図３】試験例２で得られた反応１時間の脂肪酸分解率と、試験例１において得られた実施例１、２、３、５の本発明組成物投与後のタクロリムスの血中ＡＵＣ０−１９ｈの相関性を示すグラフである。
【図４】基剤分子構造中に含まれる融点５０℃以上の脂肪酸の重量含率と、実施例１、４、６、並びに比較例１の組成物を投与後のタクロリムスの血中ＡＵＣ０−１９ｈの相関性を示すグラフである。
【図５】各製剤投与後のリンパ移行性（タクロリムスのリンパ移行量を血中ＡＵＣで除した値）を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
本発明における親油性ＩＬ−２産生抑制物質とは、親油性であり、かつＩＬ−２産生を抑制する化合物またはその医薬的に許容される塩を意味し、詳細には、ACD/LogD Suite version 8.0（Advanced
Chemistry Development Inc.）を用いて算出したＬｏｇＰ値が２以上であり、かつ下記の試験法−１により決定したＩＣ５０が１μｍｏｌ／Ｌ以下の化合物またはその医薬的に許容される塩を意味する。ここで、ＬｏｇＰ値は、１−オクタノールと水の２液相の溶媒と薬物を混合し平衡に達したときの１−オクタノール中の薬物濃度を水中の薬物濃度で除した値（以下、１−オクタノール／水分配係数Ｐ）の底１０に対する対数である。ＬｏｇＰ値が高い薬物ほど、水よりも１−オクタノールへの親和性が高く、より親油性であるといえる。本発明における親油性とは、ＬｏｇＰ値が２以上であることを示す。【００１９】
試験法−１は下記の方法である。Transplant
Proceedings, No 5, Suppl 6, 36-39, 1987記載のように、健常人から採取した新鮮な脱線維素血液からFicoll-Paque（Pharmacia Fine Chemicals）を用いた密度勾配法により分離したリンパ球を、Hanks液により３回洗浄する。５×１０５個のリンパ球を０．２ｍＬのＲＰＭＩ １６４０完全培地中で、３７℃、ＣＯ２濃度５％、空気９５％下で９６時間培養する。最後の４時間は０．５μＣｉトリチウム化チミジン（３Ｈ-ＴｄＲ、６．７Ci/nmol、New
England Nuclear）を添加して培養する。培養したサンプルをマイクロハーベスター（Bellco
Glass Inc.）のガラスフィルター紙上に採取する。乾燥したフィルター紙が含む放射能量を液体シンチレーションカウンターにより測定し、細胞内に取り込まれた３Ｈ-ＴｄＲ量を算出する。培養時に薬物を加えた場合の３Ｈ-ＴｄＲ量を、薬物を加えない場合の３Ｈ-ＴｄＲ量で除し、１００を乗じた値を取り込み率（％）とする。培養時に加える薬物濃度を変化させ、取り込み率が５０％となる薬物濃度をＩＣ５０（ヒト混合リンパ球反応５０％阻害薬物濃度）とする。本発明におけるＩＬ−２産生抑制物質とは、試験法−１により決定したＩＣ５０が１μｍｏｌ／Ｌ以下の化合物またはその医薬的に許容される塩を示す。親油性ＩＬ−２産生抑制物質としては、例えば、タクロリムス、シクロスポリン、ラパマイシン、ミコフェノール酸、ミコフェノール酸モフェチルなどが挙げられ、他の態様としてはタクロリムスである。これらのＩＬ−２産生抑制物質は１種または２種以上を適宜組み合わせて使用することができる。例えば、タクロリムス、ミコフェノール酸、およびミコフェノール酸モフェチルからなる群から選択される１種または２種以上を組み合わせる態様が採用される。他に、シクロスポリン、ラパマイシン、ミコフェノール酸、およびミコフェノール酸モフェチルからなる群から選択される１種または２種以上を組み合わせる態様も採用される。更には、タクロリムスを除くＩＬ−２産生抑制物質を組み合わせる態様も採用され得る。【００２０】
本発明で使用することのできるタクロリムス（ＬｏｇＰ値：３以上）またはその医薬的に許容される塩（タクロリムスとその塩と略記することがある）は、特開昭６１−１４８１８１号公報（欧州特許公開第０３２３０４２号）に記載され、以下の化学名、あるいは一般式で規定される。【００２１】
［３Ｓ−［３Ｒ＊［Ｅ（１Ｓ＊，３Ｓ＊，４Ｓ＊）］，４Ｓ＊，５Ｒ＊，８Ｓ＊，９Ｅ，１２Ｒ＊，１４Ｒ＊，１５Ｓ＊，１６Ｒ＊，１８Ｓ＊，１９Ｓ＊，２６ａＲ＊］］−５，６，８，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７，１８，１９，２４，２５，２６，２６ａ−ヘキサデカヒドロ−５，１９−ジヒドロキシ−３−［２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル）−１−メチルエテニル］−１４，１６−ジメトキシ−４，１０，１２，１８−テトラメチルｌ−８−（２−プロペニル）−１５，１９−エポキシ−３Ｈ−ピリド［２，１−ｃ］［１，４］オキサアザシクロトリコシン−１，７，２０，２１（４Ｈ，２３Ｈ）−テトロン，一水和物
[3S-[3R*[E(1S*,3S*,4S*)],
4S*,5R*,8S*,9E,12R*,14R*,15S*,16R*,18S*,19S*,26aR*]]
-5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-hexadecahydro-5,19-dihydroxy-3-[2-(4-hydroxy-3-methoxycyclohexyl)-1-methylethenyl]-14,16-dimethoxy-4,10,12,18-tetramethyl-8-(2-propenyl)-15,19-epoxy-3H-pyrido[2,1-c][1,4]
oxaazacyclotricosine-1,7,20,21(4H,23H)-tetrone, monohydrate【００２２】
【化１】
2009054463.tif 000002
【００２３】
タクロリムスまたはその塩は、次のような疾患の治療または予防に有用である。
自己免疫疾患の眼疾患（例えば角結膜炎、春季結膜炎、ベーチェット病に伴うブドウ膜炎、角膜炎、ヘルペス性角膜炎、円錐形角膜炎、角膜上皮異栄養症、角膜白斑、眼天疱瘡、モーア潰瘍、強膜炎、グレーブス眼障害、フォークトー小柳−原田症候群、乾性角結膜炎（ドライアイ）、フリクテン、虹彩毛様体炎、類肉腫症、内分泌眼障害等）；
皮膚疾患（例えば皮膚筋炎、尋常性白斑症、尋常性魚鱗癬、光線過敏症および皮膚Ｔ細胞リンパ腫、炎症性および増殖亢進性皮膚病、ならびに免疫学的仲介皮膚疾患（具体的には、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、湿疹状皮膚炎、脂漏性皮膚炎、扁平苔癬、天疱瘡、水疱瘡類天疱瘡、表皮水疱症、じんま疹、血管性水腫、脈管炎、紅斑、皮膚好酸球増加症、紅斑性狼瘡、座瘡および円形脱毛症等）、関節症性乾癬、環状乾癬、広汎性乾癬、円板状乾癬、ツンブッシュ汎発性膿疱性乾癬、地図状乾癬、滴状乾癬、花環状乾癬、陳旧性乾癬、硬貨状乾癬、輪状乾癬、カキ殻状乾癬、点状乾癬、膿疱性乾癬、脊椎炎性乾癬、汎発性乾癬などの乾癬）；
外傷、熱傷、手術等による肥厚性瘢痕やケロイド等；
心臓、腎臓、肝臓、骨髄、皮膚、角膜、肺、膵臓、小腸、肢、筋肉、神経、椎間板、気管、筋原細胞、軟骨等の臓器あるいは組織の移植による拒絶反応；
骨髄移植後の移植片対宿主反応；
リウマチ性関節炎、全身性エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型糖尿病等；
病原細菌（例えばアスペルギルス・フミガーツス、フサリウム・オキシスポルム、トリコフィトン・アステロイデス等）を要因とする感染症；
可逆的閉塞性気道疾患［喘息（例えば気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息および塵埃喘息）、特に慢性または難治性喘息（例えば遅発性喘息および気道機能亢進性気管支炎）等］；
粘膜または血管の炎症（例えば胃潰瘍、虚血性または血栓性血管損傷、虚血性腸疾患、腸炎、壊死性全腸炎、熱傷に伴う腸損傷、ロイコトリエンＢ４媒介疾患）；
腸炎／アレルギー（例えば腹腔疾患、直腸炎、好酸球性胃腸炎、肥満細胞症、クローン病および潰瘍性大腸炎）；
胃腸管から遠くで症候性発現を伴う食物関連アレルギー性疾患（例えば偏頭痛、鼻炎および湿疹）；
腎臓病（例えば間質性腎炎、グッドパスチャー症候群、溶血性尿毒症症候群および糖尿病性腎障害）；
神経疾患（例えば多発性筋炎、ギラン・バレー症候群、メニエール病、多発性神経炎、孤立性神経炎、脳梗塞、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側鎖硬化症（ＡＬＳ）および神経根障害）；
脳虚血性疾患（例えば頭部損傷、脳内出血（例えばクモ膜下出血、脳出血）、脳血栓、脳塞栓、心拍停止、発作、一過性脳虚血発作（ＴＩＡ）、高血圧性脳症、脳梗塞）；
内分泌性疾患（例えば甲状腺亢進症およびパセドウ病）；
血液疾患（例えば純赤血球無形成症、無形成性貧血、形成不全性貧血、特発性血小板減少性紫斑病、自己免疫溶血性貧血、無顆粒球症、悪性貧血、巨大赤芽球性貧血および赤血球形成不全）；
骨疾患（例えば骨粗鬆症）；
呼吸器疾患（例えばサルコイドーシス、肺線維症および特発性間質性肺炎；
皮膚病（例えば皮膚筋炎、尋常性白斑、尋常性魚鱗癬、光過敏症および皮膚Ｔ細胞性リンパ腫）；
循環器疾患（例えば動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症、大動脈炎症症候群および多発性動脈炎）；
コラーゲン病（例えば皮膚硬化症、ヴェグナー肉芽腫およびシェーグレン症候群）；
肥満症；
好酸球性筋膜炎；
歯周疾患（例えば歯肉、歯周組織、歯槽骨または歯骨質の損傷）；
ネフローゼ症候群（例えば腎炎）；
男性型脱毛症、老人性脱毛症；
筋ジストロフィー症；
膿皮症およびセザール症候群；
染色体異常に伴う疾患（例えばダウン症候群）；
アディソン病。【００２４】
本発明で使用することのできるシクロスポリンは、以下のシクロスポリン（ＬｏｇＰ値：２．９２）またはシクロスポリン類である。シクロスポリンまたはその医薬的に許容される塩（シクロスポリンとその塩と略記することがある）は以下の化学名、一般式で規定される。【００２５】
［Ｒ−［［Ｒ＊，Ｒ＊−（Ｅ）］］−サイクリック（Ｌ−アラニル−Ｄ−アラニル−  Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−  Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−３−ヒドロキシ−Ｎ，４−ジメチル−Ｌ−２−アミノ−６−オクテノイル−Ｌ−α−アミノ−ブチリル−Ｎ−メチルグリシル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−バリル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル）
[R-[[R*,R*-(E)]]-cyclic(L-alanyl-D-alanyl-
N-methyl-L-leucyl-N-methyl-L-leucyl- N-methyl-L-valyl-3-hydroxy-N,4-dimethyl-L-2-amino-6-octenoyl-L-α-amino-butyryl-N-methylglycyl-N-methyl-L-leucyl-L-valyl-N-methyl-L-leucyl)
【化２】
2009054463.tif 000003
[式中、−ＭeＢmt−は、式(Ｂ)
【化３】
2009054463.tif 000004
(式中、−x−y−は−ＣＨ＝ＣＨ−(トランス)である)
で示されるＮ−メチル−(４Ｒ)−４−ブタ−２Ｅ−エン−１−イル−４−メチル−(Ｌ)トレオニル残基を表す]【００２６】
シクロスポリン類としては、天然シクロスポリンＡ〜Ｚ［参考、トラバー等、１、「ヘルベティカ・シミカ・アクタ」(Helv．Chim．Acta.)６０、１２４７−１２５５(１９７７)、トラバー等、２、「ヘルベティカ・シミカ・アクタ」(Helv．Chim．Acta.)６５、ナンバー１６２、１６５５−１６６７(１９８２)、コーベル等、「ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・アプライド・マイクロバイオロジー・アンド・バイオテクノロジー」(Europ．J．Applied
Microbiology and Biotechnology)１４、２７３−２４０(１９８２)、およびフォン・バルトバーグ等、「プログレス・イン・アラージー」(Progress
in Allergy)、３８、２８−４５(１９８６)］、並びに様々な非天然シクロスポリン誘導体および人工もしくは合成シクロスポリン類、例えばいわゆるジヒドロ−シクロスポリン類［この場合、−ＭeＢmt−残基の−x−y−部分(上記式Ｂ)を飽和させることにより、−x−y−＝−ＣＨ２−ＣＨ２−が得られる］、誘導体化シクロスポリン類（例、別の置換基をシクロスポリン分子の３位のサルコシル残基のα−炭素原子に導入する場合）、−ＭeＢmt−残基が異性体形態で存在するシクロスポリン類（例、−ＭeＢmt−残基の６’および７’位間の立体配置がトランスではなくシスである場合）、および例えばウェンガーにより開発された全合成的シクロスポリン製造方法の使用により、変異型アミノ酸がペプチド配列の特定位置に組み込まれているシクロスポリン類［例えばトラバー１、トラバー２およびコーベル、前出、アメリカ合衆国特許第４１０８９８５号、同第４２１０５８１号および同第４２２０６４１号、ヨーロッパ特許公開第００３４５６７号、同第００５６７８２号および同第０２９６１２２号、国際特許公開第ＷＯ８６／０２０８０号、ウェンガー１、「トランスプランテーション・プロシーディングス」(Transp．Proc.)１５、補遺１:２２３０(１９８３)、ウェンガー２、「アンゲバンテ・ヘミー・インターナショナル・エディション・イン・イングリッシュ」(Angew．Chem．Int．Ed.)、２４、７７(１９８５)およびウェンガー３、「プログレス・イン・ザ・ケミストリー・オブ・オーガニック・ナチュラル・プロダクツ」(Progress in the Chemistry of Organic Natural Products)、５０、１２３(１９８６)参照］が挙げられる。【００２７】
すなわち、シクロスポリン類に含まれる種類としては、例えば[Ｔhr]２−、[Ｖal]２−、[Ｎva]２−および[Ｎva]２−[Ｎva]５−「シクロスポリン」(各々、シクロスポリンＣ、Ｄ、ＧおよびＭとしても知られている)、[３’−Ｏ−アセチル−ＭeＢmt]１−「シクロスポリン」(シクロスポリンＡ酢酸塩としても知られている)、ジヒドロ−[ＭeＢmt]１−[Ｖal]２−「シクロスポリン」(ジヒドロ−シクロスポリンＤとしても知られている)、３’−デスオキシ−３’−オキソ−[ＭeＢmt]１−[Ｖal]２−および−[Ｎva]２−「シクロスポリン」、[(Ｄ)フルオロメチル−Ｓar]３−「シクロスポリン」、[(Ｄ)Ｓer]８−「シクロスポリン」、[ＭeＩle]１１−「シクロスポリン」、[(Ｄ)ＭeＶal]１１−「シクロスポリン」(シクロスポリンＨとしても知られている)、[ＭeＡla]６−「シクロスポリン」、[(Ｄ)Ｐro]３−「シクロスポリン」などがある。
［シクロスポリン類に関する現行の慣用的命名法に従い、「シクロスポリン」(すなわち、シクロスポリンＡ)の構造を基準にしてこれらを定義する。これは、まず「シクロスポリン」に存在するアミノ酸残基とは異なった(存在する)アミノ酸残基を示し(例、「[(Ｄ)Ｐro]３」は、問題のシクロスポリンが、３位に−Ｓar−残基ではなく−(Ｄ)Ｐro−を有することを示す)、次に「シクロスポリン」なる語を適用して「シクロスポリン」に存在する残基と一致する残りの残基の特徴を示すことにより行なわれる。個々の残基については、１位の残基−ＭeＢmt−、−ジヒドロ−ＭeＢmt−またはその均等残基から出発して番号を付す。］【００２８】
シクロスポリン類の非常に多くは、シクロスポリンに匹敵する医薬的有用性またはさらに特異的有用性、例えば特に細胞増殖抑制療法に対する腫よう耐性を打ち消す活性を呈し、治療剤としてのそれらの適用性に関する提案が文献に多く記載されている。【００２９】
シクロスポリンとその塩は、次のような疾患の治療または予防に有用である。
臓器移植、例えば心臓、肺、心肺同時、肝臓、腎臓、すい臓、骨髄、皮膚および角膜移植並びに特に異型臓器移植による拒絶反応；
自己免疫疾患および炎症状態、特に自己免疫要素を含む病因による炎症状態、例えば関節炎(例えばリューマチ様関節炎、慢性進行性関節炎および変形性関節炎)およびリューマチ疾患；
自己免疫血液疾患(例えば溶血性貧血、再生不能性貧血、先天性形成不良性貧血および特発性血小板減少症を含む)、全身性エリテマトーデス、多発性軟骨炎、硬皮症、ウェゲネル肉芽腫症、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、乾せん、スティーブン-ジョンソン症候群、特発性スプルー、自己免疫炎症性腸疾患(例えば、潰よう性大腸炎およびクローン病を含む)、内分泌性眼病、グレーブス病、サルコイドーシス、多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、若年型糖尿病(真性糖尿病Ｉ型)、ブドウ膜炎(前部および後部)、乾燥性角結膜炎および春季角結膜炎、間質性肺線維症、乾せん性関節炎および糸球体腎炎(例えば、特発性ネフローゼ症候群または微細病変ネフロパシーを含むネフローゼ症候群を伴う場合または伴わない場合)
寄生虫、特に原生動物による疾患、例えばマラリア、コクシジオイデス症および住血吸虫症；
他の抗新生物または細胞増殖抑制療法に対する抵抗を解除または排除する薬剤としての癌治療における用途。【００３０】
本発明で使用することのできるラパマイシンまたはその医薬的に許容される塩（ラパマイシンとその塩と略記することがある）は以下の化学名で規定される。【００３１】
（３Ｓ，６Ｒ，７Ｅ，９Ｒ，１０Ｒ，１２Ｒ，１４Ｓ，１５Ｅ，１７Ｅ，１９Ｅ，２１Ｓ，２３Ｓ，２６Ｒ，２７Ｒ，３４ａＳ）−９，１０，１２，１３，１４，２１，２２，２３，２４，２５，２６，２７，３２，３３，３４，３４ａ−ヘキサデカヒドロ−９，２７−ジヒドロキシ−３−［（１Ｒ）−２−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル］−１−メチルエチル］−１０，２１−ジメトキシ−６，８，１２，１４，２０，２６−ヘキサメチル−２３，２７−エポキシ−３Ｈ−ピリド［２，１−ｃ］［１，４］−オクサアザシクロヘントリアコンチン−１，５，１１，２８，２９（４Ｈ，６Ｈ，３１Ｈ）−ペントン
(3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-hexadecahydro-9,27-dihydroxy-3-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hydroxy-3-methoxycyclohexyl]-1-methylethyl]-10,21-dimethoxy-6,8,12,14,20,26-hexamethyl-23,27-epoxy-3H-pyrido[2,1-c][1,4]-oxaazacyclohentriacontine-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-pentone【００３２】
ラパマイシンとその塩は、次のような疾患の治療または予防に有用である。
真菌症、特にカンジダ・アルビカンス（Candida albicans）による真菌症；
アレルギー性脳脊髄炎、多発性硬化症、関節炎、慢性関節リウマチ；
心臓、腎臓、肝臓、骨髄、皮膚、角膜、肺、膵臓、小腸、肢、筋肉、神経、椎間板、気管、筋原細胞、軟骨等の臓器あるいは組織の移植による拒絶反応；
全身性紅斑性狼瘡、肺炎、インスリン依存性糖尿病、血管損傷後における平滑筋細胞増殖および血管内膜肥厚化、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、眼の炎症。【００３３】
本発明で使用することのできるミコフェノール酸またはその医薬的に許容される塩（ミコフェノール酸とその塩と略記することがある）は、最初ペニシリウム・ブレビコンパクタムの醗酵液中に見出された弱活性抗生物質であり、以下の化学名、一般式で規定される。【００３４】
６−（１，３−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−６−メトキシ−７−メチル−３−オキソ−５−イソベンゾフラニル）−４−メチル−４−ヘキセン酸
(E)-6-(4-hydroxy-6-methoxy-7-methyl-3-oxo-1,3-dihydroisobenzofuran-5-yl)-4-methylhex-4-enoic
acid【００３５】
【化４】
2009054463.tif 000005
【００３６】
また、本発明で使用することのできるミコフェノール酸モフェチル（ＬｏｇＰ値：２．３８）またはその医薬的に許容される塩（ミコフェノール酸モフェチルとその塩と略記することがある）は、欧州特許第２８１７１３号Ｂ１に記載され、以下の化学名、一般式で規定される。【００３７】
（Ｅ）−６−（１，３−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−６−メトキシ−７−メチル−３−オキソ−５−イソベンゾフラニル）−４−メチル−４−ヘキセン酸モルホリノエチル
2-morpholinoethyl
(E)-6-(1,3-dihydro-4-hydroxy-6-methoxy-7-methyl-3-oxo-5-isobenzofuranyl)-4-methyl-4-hexenoate【００３８】
【化５】
2009054463.tif 000006
【００３９】
ミコフェノール酸とその塩およびミコフェノール酸モフェチルとその塩は、次のような疾患の治療または予防に有用である。【００４０】
免疫抑制剤として、自己免疫関連異常、例えば：Ｉ型真性糖尿病；炎症性腸疾患（例えば、クローン病および潰瘍性大腸炎）；全身性紅斑性狼瘡；慢性活動性肝炎；多発性硬化症；グレーヴズ病；橋本甲状腺炎；ベーチェット症候群；重症筋無力症；シェーグレン症候群；悪性貧血；特発性副腎不全；およびＩ型およびII型多腺自己免疫症候群を処置するのに有用である。【００４１】
喘息、免疫溶血性貧血、糸球体腎炎、および肝炎の処置における治療用免疫抑制剤としてもまた有用である。免疫抑制剤としての予防的使用には、例えば、心臓、肺、膵臓、腎臓、肝臓、皮膚、および角膜同種移植片における同種移植片拒絶の処置、および対宿主性移植片病の予防がある。【００４２】
血管損傷に対する増殖応答、例えば、血管形成術後の再狭窄、および心臓バイパス外科手術後の再狭窄における血管壁に傷を受けた後の狭窄症を阻害するのに有用である。【００４３】
慢性関節リウマチ、若年性関節リウマチ、およびブドウ膜炎を処置する際に抗炎症剤として有用である。【００４４】
抗腫瘍剤として、リンパ性網内皮症起源の固形腫瘍（solidtumors）および悪性腫瘍を処置する際に有用である。例えば、固形腫瘍の処置に対するこの化合物類の有用性には：扁平上皮癌を含む頭部および頸部の癌；小細胞および非小細胞肺癌を含む肺癌；縦隔腫瘍；扁平上皮癌および腺癌を含む、食道癌；膵臓癌；肝細胞癌、胆管癌、胆嚢癌、および胆汁管癌を含む肝胆汁性系の癌；腺癌、肉腫、リンパ腫、およびカルチノイド類を含む小腸癌；結腸癌および直腸癌を含む結腸直腸癌；転移性癌；卵巣癌、子宮肉腫、および腎細胞癌、尿管癌、膀胱癌、前立腺癌、尿道癌、陰茎癌、睾丸癌、外陰癌、腟癌、頸部癌、子宮内膜癌、およびファローピウス管癌を含む尿生殖器系の癌；胸癌；内分泌系癌；柔組織肉腫；悪性中皮腫；扁平上皮癌、基底細胞癌、および黒色腫を含む皮膚癌；中枢神経系の癌；悪性骨腫瘍；および形質細胞新生物がある。【００４５】
リンパ性網内皮症起源の悪性腫瘍の処置に対する抗腫瘍剤として、例えば、Ｂ、Ｔ、および前単球細胞系悪性腫瘍、菌状息肉腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫細胞および他のＥＢＶ−変形化Ｂ−リンパ球の悪性腫瘍、同種移植片受容者におけるエプスタイン  バーウイルス感染から生じるリンパ腫、慢性リンパ性白血病、急性リンパ性白血病、およびヘアリー・セル白血病を含むリンパ腫および白血病を処置するのに有用である。【００４６】
抗ウイルス剤として、この化合物類は、例えば：Ｉ型およびII型ヒトＴ  細胞白血病ウイルス（ＨＴＬＶ  １およびＨＴＬＶ  ２）、Ｉ型およびII型ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ  １、ＨＩＶ  ２）、ヒト鼻咽頭癌腫ウイルス（ＮＰＣＶ）を含むレトロウイルス類を処置するのに、またＥＢＶ感染Ｂ−リンパ球、ＣＭＶ感染、ヘルペスウイルス６型、単純ヘルペス１型および２型（ＨＳＶ−１、ＨＳＶ−２）、および帯状ヘルペスを含むヘルペスウイルスを処置するのに有用である。【００４７】
抗乾癬剤として、例えば、乾癬および乾癬性関節炎を処置するのに有用である。【００４８】
親油性ＩＬ−２産生抑制物質の配合量としては、治療上患者個々の年齢および疾病の種類、疾病の程度、予防上の有効な量、あるいはその他の要因により適宜調整すれば特に制限されないが、通常１日あたりの投与量が約０．０５〜３０００ｍｇ、他の態様としては０．０５〜２０００ｍｇが用いられる。ミコフェノール酸またはミコフェノール酸モフェチルを除くＩＬ−２産生抑制物質の更なる態様としては、０．０５〜５００ｍｇ、更に他の態様としては０．１〜１００ｍｇが用いられる。また１回あたりの投与量としては、通常平均０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、５００ｍｇ、または１０００ｍｇが投与される（但し、水和物として供される場合、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の量として記載）。投与回数は、通常１日２回である。【００４９】
また、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の配合割合としては、本発明医薬組成物全量に対して通常０．００５〜９０ｗ／ｗ％であり、他の態様としては０．０５〜５０ｗ／ｗ％である。【００５０】
本発明に用いられる親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中移行量を抑制しリンパに送達し得る担体（以下、親油性ＩＬ−２産生抑制物質・リンパ送達用担体）としては、医薬的に許容されるものであり、かつ親油性ＩＬ−２産生抑制物質を経口投与後、血中移行量を抑制しリンパに効率的に送達し得るものであれば特に制限されない。例えば、下記（Ｉ）に記載した機能を有する物質、あるいは、例えば、（ｉ）〜（ｉｖ）に記載したような物質等が挙げられる。１種または２種以上適宜混合して使用することが可能である。【００５１】
本発明に用いられる親油性ＩＬ−２産生抑制物質・リンパ送達用担体は、実質的に、例えばエタノール等の低級アルコールを含有しない態様も採用することができる。なお、本明細書において、「低級アルコール」とは炭素数５までのものを意味する。ただし、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中移行量抑制およびリンパ送達を損なわない範囲内の低級アルコール量を含有する態様を排除するものではない。【００５２】
本明細書における「リンパ送達」とは、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し、かつそれぞれの親油性ＩＬ−２産生抑制物質に関して、当該親油性ＩＬ−２産生抑制物質を含有し世界で最初に市販された製剤のカプセル内容物［例えば、タクロリムスを含有するタクロリムス水和物カプセル（例えば、プログラフカプセル、アステラス製薬株式会社）、シクロスポリンＡを含有するシクロスポリンカプセル（例えば、サンディミュンカプセル、ノバルティスファーマ株式会社）、ミコフェノール酸モフェチルを含有するミコフェノール酸モフェチルカプセル（例えば、セルセプトカプセル、ロシュ）］を対照組成物とし、後記試験法−２に示す方法にて得られるリンパ液中ＡＵＣｌｙｍｐｈが、対照に比し、５０％以上２００％以下であることを意味する。【００５３】
本発明における「リンパ送達」とは、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し、かつ後記試験法−３に示す方法にて得られるＩＬ−２産生率が０％以上４０％以下、他の態様としては０％以上３０％以下、更なる態様としては０％以上２０％以下とすることを意味する。【００５４】
本発明における「リンパ送達」とは、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し、かつそれぞれの親油性ＩＬ−２産生抑制物質に関して、当該親油性ＩＬ−２産生抑制物質を含有し世界で最初に市販された製剤のカプセル内容物［例えば、タクロリムスを含有するタクロリムス水和物カプセル（例えば、プログラフカプセル、アステラス製薬株式会社）、シクロスポリンＡを含有するシクロスポリンカプセル（例えば、サンディミュンカプセル、ノバルティスファーマ株式会社）、ミコフェノール酸モフェチルを含有するミコフェノール酸モフェチルカプセル（例えば、セルセプトカプセル、ロシュ）］を対照組成物とし、後記試験法−７に示す方法にて得られるリンパ球１０７個当たりに含まれる親油性ＩＬ−２産生抑制物質の濃度が、対照に比し、５０％以上２００％以下であることを意味する。【００５５】
本発明における「血中曝露量の抑制」とは、後記試験法−４に示す方法にて得られる血中ＡＵＣｂｌｏｏｄが０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以上９０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以下、他の態様としては０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以上７０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以下、更なる態様としては０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以上５０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以下とすることを意味する。あるいは、後記試験法−５に示す方法にて得られる血中ＡＵＣｂｌｏｏｄが０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以上１４０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以下、他の態様としては０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以上１１０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以下、更なる態様としては０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以上８０ｎｇ・ｈ／ｍＬ以下とすることを意味する。【００５６】
本発明における「血中曝露量の抑制」とは、それぞれの親油性ＩＬ−２産生抑制物質に関して、当該親油性ＩＬ−２産生抑制物質を含有し世界で最初に市販された製剤のカプセル内容物［例えば、タクロリムスを含有するタクロリムス水和物カプセル（例えば、プログラフカプセル、アステラス製薬株式会社）、シクロスポリンＡを含有するシクロスポリンカプセル（例えば、サンディミュンカプセル、ノバルティスファーマ株式会社）］を対照組成物とし、後記試験法−４あるいは後記試験法−５に示す方法にて得られる血中ＡＵＣｂｌｏｏｄを対照に比し、０％以上８０％以下、他の態様としては０％以上６０％以下、更なる態様としては０％以上４０％以下とすることを意味する。【００５７】
本発明における「血中曝露量の抑制」とは、それぞれの親油性ＩＬ−２産生抑制物質に関して、当該親油性ＩＬ−２産生抑制物質を含有し世界で最初に市販された製剤のカプセル内容物［例えば、ミコフェノール酸モフェチルを含有するミコフェノール酸モフェチルカプセル（例えば、セルセプトカプセル、ロシュ）］を対照組成物とし、後記試験法−４に示す方法にて得られる血漿中ＡＵＣｐｌａｓｍａを対照に比し、０％以上８０％以下、他の態様としては０％以上６０％以下、更なる態様としては０％以上４０％以下とすることを意味する。【００５８】
本明細書における「試験法−２」は、下記の試験とする。１２時間以上絶食させたラット（male Lewis rat，300-350g）の胸管リンパにカニューレを施し、リンパ液が安定して採取できる状態にあることを確認した後に、投与液をゾンデを用いて強制経口投与する。ラットは投与後リンパ液採取終了時まで絶食とし、水は自由に摂取させる。投与後０−１、１−２、２−３、３−４、４−６、６−２４時間のそれぞれの間に採取されるリンパ液中に含まれる油性ＩＬ−２産生抑制物質の濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ、ＨＰＬＣなどによって定量して、リンパ液採取時間の中点の時間の物質濃度として台形法にてリンパ液中薬物濃度対時間曲線下面積（リンパ液中ＡＵＣｌｙｍｐｈ）を算出する。【００５９】
本発明における「試験法−３」は、下記の試験とする。１２時間以上絶食させたラット（male Lewis rat, 6 weeks）に投与液をゾンデを用いて強制経口投与する。ラットは投与後採血時間まで絶食とし、水は自由に摂取させる。一方生理食塩水にコンカナバリンＡ（フナコシ株式会社）を１ｍｇ／ｍＬとなるよう添加し５分間スターラー攪拌後、０．４５μｍのフィルター（NALGENE, SFCA Filter Unit）で濾過した濾液を調製する（以下、コンカナバリンＡ液）。ラットに投与液を投与後１６時間に、調製後２時間以内のコンカナバリンＡ液を、コンカナバリンＡとして１５ｍｇ／ｋｇの投与量になるよう急速静脈内投与する。コンカナバリンＡ液投与後３時間に採血を行い、遠心分離により血漿を採取して血漿中ＩＬ−２濃度をＥＬＩＳＡキット（BioSource International, Inc., Rat IL-2 ELISA kit）により測定する。一方、投与液を投与していないラット（以下、無投与群）に上記と同じコンカナバリンＡ液を急速静脈内投与し、その後３時間に採血を行い、遠心分離により血漿を採取して血漿中ＩＬ−２濃度をＥＬＩＳＡキット（BioSource International, Inc., Rat IL-2 ELISA kit）により測定する。投与液を投与したラットの血漿中ＩＬ−２濃度の、無投与群のＩＬ−２濃度に対する百分率（％）をＩＬ−２産生率とする。【００６０】
本発明における「試験法−４」は、下記の試験とする。１２時間以上絶食させたラット（male Lewis rat, 6 weeks）に投与液を強制経口投与する。ラットは投与後採血時間まで絶食とし、水は自由に摂取させる。投与後、１、４、８、１２、１９時間に採血を行い、全血中に含まれる親油性ＩＬ−２産生抑制物質の濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ、ＨＰＬＣなどによって定量して台形法にて血中薬物濃度対時間曲線下面積（血中ＡＵＣｂｌｏｏｄ）を算出する。ただし、腸肝循環が認められる親油性ＩＬ−２産生抑制物質（例えば、ミコフェノール酸、ミコフェノール酸モフェチル）は、投与後０．５、１、２時間に採血を行い、遠心分離により血漿を採取して血漿中に含まれるミコフェノール酸の濃度をHPMCによって定量して台形法にて血漿中薬物濃度対時間曲線下面積（血漿中ＡＵＣｐｌａｓｍａ）を算出する。【００６１】
本発明における「試験法−５」は、下記の試験とする。１６時間以上絶食させたカニクイザル（オス、３−５才、2.8−3.8 kg）に投与用カプセル剤を水１０ｍＬとともに強制経口投与する。サルは投与後２４時間の採血終了まで絶食とし、水は自由に摂取させる。投与前ならびに投与後、０．５、１、２、４、６、８、１２、２４、４８時間に採血を行い、全血中に含まれる親油性ＩＬ−２産生抑制物質の濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ、ＨＰＬＣなどによって定量して台形法にて血中薬物濃度対時間曲線下面積（血中ＡＵＣｂｌｏｏｄ）を算出する。【００６２】
本発明における「試験法−６」は、下記の試験とする。ｐＨ６．８リン酸緩衝液（日本薬局方、第１４局、崩壊試験法・第２液）に５０ｍｍｏｌ／Ｌとなるようタウロコール酸ナトリウムを溶解し、リパーゼ（ＳＩＧＭＡ社, Lipase from porcine pancreas, 329 U/mg）を３７５Ｕ／ｍＬの濃度となるように添加し、２時間攪拌することにより模擬腸液を調製する。模擬腸液６．０ｍＬに対して基剤を３０ｍｇ、あるいは３００ｍｇ添加した反応前のサンプル、および該サンプルを２８℃付近で振とう（YAMATO SCIENTIFIC CO., LTD.、最大速度）し、０．５、１、３時間反応させた後のサンプルをそれぞれ準備する。遊離脂肪酸測定用キット（和光純薬工業、NEFA C−テストワコー）を用いて、反応前のサンプルと反応後のサンプル中の遊離脂肪酸濃度を測定する。一方、油脂化学便覧（改定三版、日本油脂化学協会編、丸善株式会社）に記載の脂肪酸組成を用いて、基剤が完全に分解された時に生成される理論脂肪酸濃度を算出する。理論脂肪酸濃度に対する反応後のサンプル中の遊離脂肪酸濃度と反応前のサンプル中の遊離脂肪酸濃度の差の百分率（％）を、脂肪酸分解率とする。【００６３】
本発明における「試験法−７」は、下記の試験とする。１２時間以上絶食させたラット（male Lewis rat, 6 weeks）に投与液を強制経口投与する。ラットは投与後採血時間まで絶食とし、水は自由に摂取させる。投与後１６時間に採血を行い、全血を得る。
Ficcoll-conray溶液（リンホセパールII  免疫生物研究所）を用いてショ糖密度勾配法により全血からリンパ球層を単離し，リンパ球１０７個当たりに含まれる親油性ＩＬ−２産生抑制物質の濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ、ＨＰＬＣなどによって定量する。【００６４】
本発明における「投与液」は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質を親油性ＩＬ−２産生抑制物質・リンパ送達用担体に溶解または分散した溶液、あるいは親油性ＩＬ−２産生抑制物質を親油性ＩＬ−２産生抑制物質・リンパ送達用担体に溶解し、当該組成物を０．５重量％となるようメチルセルロース（信越化学工業株式会社、ＳＭ−４００）０．５重量％水溶液に懸濁させた懸濁液とする。【００６５】
本発明で用いる親油性ＩＬ−２産生抑制物質・リンパ送達用担体としては、例えば、以下の（Ｉ）あるいは（ｉ）〜（ｉｖ）を挙げることができる。【００６６】
（Ｉ）親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し、かつＩＬ−２産生率が０％以上４０％以下、他の態様としては０％以上３０％以下、更なる態様としては０％以上２０％以下となる基剤。【００６７】
（ｉ）モノ−，ジ−，トリグリセリドまたはその混合物。例えば、ナタネ油、ひまし油、ヒマワリ油、カカオ脂、中鎖脂肪酸トリグリセリド、モノオレイン、ジオレイン、トリオレイン、ステアリン酸モノグリセリド、ステアリン酸ジグリセリド、ステアリン酸トリグリセリド、パルミチン酸モノグリセリド、パルミチン酸ジグリセリド、パルミチン酸トリグリセリド、ミリスチン酸モノグリセリド、ミリスチン酸ジグリセリド、ミリスチン酸トリグリセリド、アラキジン酸モノグリセリド、アラキジン酸ジグリセリド、アラキジン酸トリグリセリド、ベヘン酸モノグリセリド、ベヘン酸ジグリセリド、およびベヘン酸トリグリセリドが挙げられる。他の態様としては、ヒマワリ油、カカオ脂、モノオレイン、中鎖脂肪酸トリグリセリド、ステアリン酸モノグリセリド、ステアリン酸ジグリセリド、ステアリン酸トリグリセリドが挙げられる。各種油脂の代表的な脂肪酸組成は油脂化学便覧（Ｐ．１０４〜１１２、改定三版、日本油脂化学協会編、丸善株式会社）に記載のとおりである（表１：「各種油脂を構成する脂肪酸組成率（％）」参照）。中鎖脂肪酸トリグリセリドの市販製品（製品名）として、ＯＤＯ、ミグリオール（Miglyol）、ココナード、パナセート、キャプテックス（Captex）、マイニトール（Mynitol）、キャプムル（Capmul）、ネオビー（Neobee）、マゾール（Mazol）等がある。ステアリン酸モノグリセリドの市販製品（製品名）として、MGS-F20V、MGS-F50V、MGS-50MV、MGS-F75V、MGS-75MV、インバイター 491（IMWITOR 491）、インバイター 900K（IMWITOR 900K）等がある。１種または２種以上適宜混合して使用することができる。前記試験法−６に示す方法にて得られる反応１時間後の脂肪酸分解率が０％以上６０％以下、他の態様としては０％以上５０％以下、他の態様としては０％以上４０％以下であり、かつ前記試験法−３に示す方法にて得られるＩＬ−２産生率が０％以上４０％以下、他の態様としては０％以上３０％以下、他の態様としては０％以上２０％以下の基剤であることができる。他の態様としては、基剤分子構造中に含まれる脂肪酸のうち融点５０℃以上の脂肪酸の重量含率が１０％以上１００％以下、他の態様としては２０％以上１００％以下、他の態様としては３０％以上１００％以下であり、かつ前記試験法−３に示す方法にて得られるＩＬ−２産生率が０％以上４０％以下、他の態様としては０％以上３０％以下、他の態様としては０％以上２０％以下の基剤である。【００６８】
【表１】
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【００６９】
（ｉｉ）炭素数が１２から１８までの脂肪酸。例えば、リノール酸、ステアリン酸、オレイン酸、ラウリン酸、パルミチン酸等が挙げられる。他の態様としては、オレイン酸、ラウリン酸、パルミチン酸である。１種または２種以上適宜混合して使用することができ、飽和または不飽和のいずれであってもよい。【００７０】
（ｉｉｉ）ＨＬＢ値が１０から１８であり、重量平均分子量が２００〜５０００のポリエチレングリコールを分子構造中に含有する界面活性剤。例えば、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール（重量平均分子量が１０００〜５０００であり、かつポリオキシエチレン基含有比率が１０〜５０％のもの、製品名・Pluronic L44, Pluronic P85）、ポリオキシエチレン・脂肪酸モノエステル（製品名・Lipopeg 4-L）、飽和ポリグリコール化グリセリド（製品名・Gelucire 50/13）、Ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸塩（製品名・TPGS）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（製品名・HCO）が挙げられる。他の態様としては、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール（重量平均分子量が１０００〜５０００であり、かつポリオキシエチレン基含有比率が１０〜５０％のもの、製品名・Pluronic L44, Pluronic P85）または飽和ポリグリコール化グリセリド（製品名・Gelucire
50/13）も挙げられる。１種または２種以上適宜混合して使用することができる。【００７１】
（ｉｖ）炭素数が１２から１８までの高級アルコール。例えば、ステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール等が挙げられる。１種または２種以上適宜混合して使用することができる。【００７２】
本発明に用いられる親油性ＩＬ−２産生抑制物質と親油性ＩＬ−２産生抑制物質・リンパ送達用担体との配合割合としては、親油性ＩＬ−２産生抑制物質をリンパに送達し得る比であれば特に制限されない。例えば、親油性ＩＬ−２産生抑制物質・リンパ送達用担体の配合量は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質１重量部に対して、０．１〜２０，０００重量部であり、他の態様としては１〜１０，０００重量部であり、更なる態様としては１０〜２，０００重量部である。担体の割合が少ない場合、担体の種類によっては親油性ＩＬ−２産生抑制物質の吸収速度を十分に制御することができず、その結果、親油性ＩＬ−２産生抑制物質血中曝露量が抑制されない傾向が認められることから、ある一定割合以上配合されることが望ましい。配合割合は、通常基剤の種類に応じ適宜調整されるが、具体的には親油性ＩＬ−２産生抑制物質１重量部に対して、融点８５℃以下のモノグリセリドは１重量部以上のリンパ送達用担体を配合することができ、他の態様としては融点２５℃以下のトリグリセリドは１０重量部以上のリンパ送達用担体を配合することができ、更なる態様としては融点２５℃以下の脂肪酸は１００重量部以上のリンパ送達用担体を配合することができる。【００７３】
本発明の医薬組成物には、さらに各種医薬賦形剤が適宜使用され、製剤化される。かかる医薬賦形剤としては、製薬的に許容され、かつ薬理的に許容されるものであれば特に制限されない。例えば、乳化剤、結合剤、崩壊剤、酸味料、発泡剤、人工甘味料、香料、滑沢剤、着色剤、安定化剤、緩衝剤、抗酸化剤などが使用される。例えば乳化剤としては、天然又は水素化ひまし油とエチレンオキシドとの反応生成物［商品名：クレモファー（Cremophor）、ニッコール（NIKKOL）、マペッグ（MAPEG）、インクロカス（INCROCAS）、タガト（TAGAT）］、ポリオキシエチレン−ソルビタン−脂肪酸エステル［商品名：ツィーン（TWEEN）］、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル［商品名：マイルジュ（MYRJ）］、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー及びブロックコポリマー［商品名：プルロニック（PLURONIC）、エンカリックス（EMKALYX）ポロキサマー（POLOXAMER）］、リン脂質（大豆レシチン）、プロピレングリコールモノ−及びジ−脂肪酸エステル［商品名：マイグリオール(MIGLYOL)］などが使用される。結合剤としては、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルアルコール、メチルセルロース、アラビアゴムなどが挙げられる。崩壊剤としては、例えばコーンスターチ、デンプン、カルメロースカルシウム、カルメロースナトリウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロースなどが挙げられる。酸味料としては、例えばクエン酸、酒石酸、リンゴ酸などが挙げられる。発泡剤としては、例えば重曹などが挙げられる。人工甘味料としては、例えばサッカリンナトリウム、グリチルリチン二カリウム、アスパルテーム、ステビア、ソーマチンなどが挙げられる。香料としては、例えばレモン、レモンライム、オレンジ、メントールなどが挙げられる。滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ショ糖脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール、タルク、ステアリン酸などが挙げられる。着色剤としては、例えば黄色三二酸化鉄、赤色三二酸化鉄、食用黄色４号、５号、食用赤色３号、１０２号、食用青色３号などが挙げられる。緩衝剤としては、クエン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、アスコルビン酸またはその塩類、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、アスパラギン酸、アラニン、アルギニンまたはその塩類、酸化マグネシウム、酸化亜鉛、水酸化マグネシウム、リン酸、ホウ酸またはその塩類などが挙げられる。抗酸化剤としては、例えばトコフェロール、ブチルヒドロキシアニソール、アスコルビン酸、ジブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、アスコルビン酸ステアリン酸エステル、セサモール、オリザノール、ケルセチン、β−カロチン、フラボンなどが挙げられる。溶解剤としては、中鎖脂肪酸トリグリセリド、レシチン、ショ糖脂肪酸エステル、飽和ポリグリコール化グリセリド（商品名：Gelucire）、ＨＬＢ値が１から７までの界面活性剤などが挙げられる。また親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中移行量を低減しリンパに送達することを損なわない配合量であれば、単独のリンパ送達用担体としては親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中移行量を低減しリンパに効率的に送達し得ない物質を溶解剤として用いることもで��る。吸着剤としては、二酸化ケイ素、結晶セルロース、ケイ酸アルミニウム、炭酸マグネシウムなどが挙げられる。吸収抑制剤としては、高級アルコール、脂肪酸エステル、グルタミン酸などが挙げられる。医薬賦形剤としては、１種または２種以上組合せて適宜適量添加することができる。【００７４】
本発明の医薬組成物は、常法により製薬的に許容される各種剤形に製剤化される。例えば、親油性ＩＬ−２産生抑制物質を担体に溶解または分散し、当該分散物に各種医薬賦形剤を適宜・適量配合した液剤または半固形剤とするか、あるいは前記分散物または液剤または半固形剤を軟カプセル剤あるいは硬カプセル剤とするか、あるいは上記分散物に、例えば界面活性剤等の医薬賦形剤と例えば水等の溶媒を配合し、混合・撹拌してエマルジョンとした液剤としたり、あるいは前記分散物またはエマルジョンを乾燥させたり、適当な医薬賦形剤に吸着させて固化したものを粉末、錠剤、カプセル剤とすることもできる。
以下、本発明方法について説明する。【００７５】
本発明は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質および親油性ＩＬ−２産生抑制物質・リンパ送達用担体を投与することにより、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し、薬効発現に必要な親油性ＩＬ−２産生抑制物質を効率的にリンパに送達させる方法に関する。
親油性ＩＬ−２産生抑制物質をリンパ送達することにより薬効を発現するためには、親油性ＩＬ−２産生抑制物質が医薬学的に治療上または予防上十分量リンパに送達される必要がある。本発明者は、後記のＣｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が１時間以上となる場合に、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制した場合においても、ＩＬ−２産生率を抑制しうることを見出した。【００７６】
本明細書における「Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０」は以下の「試験法−８」によって測定・算出される。詳細には、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の投与量を変化させて、移植手術を施したラットに投与液をゾンデにより強制経口投与する。親油性ＩＬ−２産生抑制物質を投与しない場合に比し、移植片の生着期間が有意に延長する最少の薬物投与量（以下、Ｘｍｉｎ）を見出す。親油性ＩＬ−２産生抑制物質を含む投与液をＸｍｉｎの投与量でラットにゾンデ強制経口投与した後の、リンパ液中親油性ＩＬ−２産生抑制物質濃度（以下、Ｃｌｙｍｐｈ）を測定する。もしＸｍｉｎとは異なる投与量にてリンパ液中の親油性ＩＬ−２産生抑制物質濃度を測定した場合、Ｃｌｙｍｐｈは投与量に比例するとして算出しても構わない。一方、前述の試験法−１によりＩＣ５０（ヒト混合リンパ球反応５０％阻害薬物濃度）を決定する。ＣｌｙｍｐｈをＩＣ５０で除した値をＣｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０とする。【００７７】
Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０は、シャーレ中でのリンパ球混合培養反応における親油性ＩＬ−２産生抑制物質の薬効発揮濃度に対する、生体のリンパ液中での薬効発揮濃度の比である。つまり、シャーレ中での反応に対し、生体のリンパ中では親油性ＩＬ−２産生抑制物質の薬効がどれだけ効率的に発揮されるかを示す指標である。もしシャーレ中と生体のリンパ中と同じ効率で薬効が発揮されるのであれば、Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が１となるはずである。しかし、シャーレ中のリンパ球は純度・濃度が高いのに対し生体のリンパ中には親油性ＩＬ−２産生抑制物質と吸着しうる競合成分が共存していること、さらにリンパ液が循環していることを考慮すると、Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０は１より大きいと考えられる。すなわちＩＣ５０に比し、生体のリンパ中では高い親油性ＩＬ−２産生抑制物質濃度が薬効発揮に必要である。Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０がどの程度の値をどの程度の時間維持すれば体内で薬効発揮できるかについては、従来全く不明であった。本発明者はこの課題に関して鋭意検討することにより、Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が１時間以上となるように、親油性ＩＬ−２産生抑制物質および親油性ＩＬ−２産生抑制物質・リンパ送達用担体を投与することで、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制しても、ＩＬ−２産生率を抑制できることを見出した。【００７８】
一方、リンパ中に親油性ＩＬ−２産生抑制物質が蓄積される場合には、リンパ腫が発生する可能性がある。本発明者はこの課題に関して鋭意検討した結果、タクロリムスを含有するプログラフカプセルの可溶化粉末（国際公開ＷＯ  ９１／１９４９５の実施例１の記載に基づき調製した、タクロリムス１重量部、ヒドロキシプロピルメチルセルロース１重量部、クロスカルメロースナトリウム１重量部、乳糖２重量部からなる組成物）を投与した場合には、Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が４時間より短いことを見出した（後記実験例３−ｃ）。プログラフカプセルは発売以来、既に多くの使用前例があり、リンパ腫の発生リスクが小さいことが明らかとなっている。そのためＣｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が４時間より短い場合、リンパ液中に移行した親油性ＩＬ−２産生抑制物質がリンパ節に蓄積されることによるリンパ腫の発生リスクが小さいことが分かった。【００７９】
特許文献７、非特許文献３では、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル等の界面活性剤を用いて、水に分散したシクロスポリン類のリンパ送達化を実現している。特許文献７、非特許文献３のＣｌｙｍｐｈを概算した結果、Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が５時間以上であるため、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制してもＩＬ−２産生率を抑制できると期待されるが、プログラフカプセルと比べてリンパ腫の発生リスクが大きい（後記実験例３−ｃ）。リンパ腫の発生リスクが大きくなることは、本発明の主目的である副作用の軽減とは相反する結果である。一方、本発明ではＣｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が１時間以上４時間より短いため、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制してもＩＬ−２産生率を抑制でき、かつリンパ腫の発生リスクが小さいことが期待される（後記実験例３−ｃ）。【００８０】
本発明方法としては、本発明が実施されることにより、本発明の所望の効果が達成されるものであれば、実施態様は特に制限されない。
例えば、本発明医薬組成物を投与することにより、本発明方法は実施することができる。【００８１】
本発明は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質をリンパに送達し得る担体を選択・使用・含有してなる医薬組成物を経口投与する点に特徴を有し、生物学的利用率の向上を目的とした経口吸収を増加する方法とは相違するものである。本発明方法は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制したうえで、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の薬理作用である免疫抑制作用を発現させ得ることが確認されていることから、腎機能障害等の副作用を軽減させることが期待できるという、経口吸収を増加する方法とは相違する効果を奏するものである。
以下、本発明担体の使用について説明する。【００８２】
本発明は、経口投与することにより、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し、薬効発現に必要な親油性ＩＬ−２産生抑制物質量をリンパに送達するための、特定の油脂または特定の界面活性剤の使用に関するものである。【００８３】
本発明は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制したうえで、薬効発現に必要な親油性ＩＬ−２産生抑制物質量をリンパに送達するための、特定の油脂または界面活性剤を使用する点に特徴を有し、生物学的利用率の向上を目的とした使用とは相違するものである。本発明使用は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制したうえで、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の薬理作用である免疫抑制作用を発現することが実験的に確認されていることから、腎機能障害等の副作用を軽減させることが期待できるという、経口吸収を増加させるための使用とは異質の効果を奏するものである。
【実施例】
【００８４】
以下、実施例及び実験例によって本発明を具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。【００８５】
実施例１〜実施例７
表２の処方に基づき、以下の方法により本発明組成物を製造した。【００８６】
【表２】
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【００８７】
（実施例１および実施例２）
タクロリムス２０ｍｇをヒマワリ油（ＳＩＧＭＡ社, Sunflower seed oil from Helianthus annuus、以下同じ）２００００ｍｇあるいは３０００ｍｇに加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させ、本発明組成物を得た。【００８８】
（実施例３および実施例４）
約４０℃に加温して融解させたカカオ脂（不二製油株式会社、カカオバター100）３０００ｍｇあるいは３００００ｍｇにタクロリムス２０ｍｇを加え、超音波を３時間照射した後に９０℃で２０分間加温して完全に溶解させ、本発明組成物を得た。【００８９】
（実施例５および実施例６）
タクロリムス２０ｍｇを中鎖脂肪酸トリグリセリド（日清オイリオグループ株式会社、O.D.O-H、以下同じ）３０００ｍｇあるいは３００００ｍｇに加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させ、本発明組成物を得た。【００９０】
（実施例７）
約４０℃に加温して融解させたモノオレイン（ＣＲＯＤＡ社, Crossential GMO）３００００ｍｇにタクロリムス２０ｍｇを加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させ、本発明組成物を得た。【００９１】
実施例８〜実施例１１
表３の処方に基づき、以下の方法により本発明組成物を製造した。【００９２】
【表３】
2009054463.tif 000009
【００９３】
（実施例８、８ｂおよび実施例９）
タクロリムス２０ｍｇをPluronic
L44（ＢＡＳＦ社、以下同じ）２００００ｍｇあるいはPluronic L81（ＢＡＳＦ社）２００００ｍｇあるいはオレイン酸（ＣＲＯＤＡ社, CRODACID O-P、以下同じ）３００００ｍｇに加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させ、本発明組成物を得た。【００９４】
（実施例１０）
約９０℃に加温して融解させたパルミチン酸（花王株式会社、ルナックP-95）３００００ｍｇにタクロリムス２０ｍｇを加え、完全に溶解させた。室温まで冷却後、乳鉢および乳棒を用いて粉砕し、本発明組成物を得た。【００９５】
（実施例１１）
約９０℃に加温して融解させたラウリン酸（花王株式会社、ルナックL-98）３００００ｍｇにタクロリムス２０ｍｇを加え、完全に溶解させた。室温まで冷却後、乳鉢および乳棒を用いて粉砕し、本発明組成物を得た。【００９６】
実施例１２〜実施例１５
表４の処方に基づき、以下の方法により本発明組成物を製造した。【００９７】
【表４】
2009054463.tif 000010
【００９８】
（実施例１２および実施例１３および実施例１４）
中鎖脂肪酸トリグリセリド３０００ｍｇとヒマワリ油３０００ｍｇとの混合物、中鎖脂肪酸トリグリセリド３０００ｍｇとポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール３０００ｍｇとの混合物、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール３０００ｍｇとヒマワリ油３０００ｍｇとの混合物それぞれに対し、タクロリムス２０ｍｇを加え超音波を３時間照射し完全に溶解させ、本発明組成物を得た。【００９９】
（実施例１５）
タクロリムス３０ｍｇをオレイン酸２５００ｍｇに加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させタクロリムスのオレイン酸溶液を調製した。オレイン酸ポリグリセリン及びカプリル酸／カプリン酸マクロゴールグリセリドを水に溶解させ、界面活性剤の水溶液を調製した。タクロリムスのオレイン酸溶液に界面活性剤の水溶液をスターラー攪拌下徐々に添加し、８時間室温下でスターラー攪拌することで本発明組成物を得た。【０１００】
実施例１６〜１８
表５の処方に基づき、以下の方法により本発明組成物を製造した。【０１０１】
【表５】
2009054463.tif 000011
【０１０２】
（実施例１６）
中鎖脂肪酸トリグリセリド５００ｍｇにタクロリムス１０ｍｇを加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させた。室温になるまで自然冷却した後、ヒマワリ油５００ｍｇを加え、十分に混合し、本発明組成物を得た。【０１０３】
（実施例１７および実施例１８）
中鎖脂肪酸トリグリセリド９００ｍｇにタクロリムス１０ｍｇを加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させた。ステアリン酸モノグリセリド（日光ケミカルズ株式会社、MGS-F75MV、以下同じ）１００ｍｇあるいはステアリン酸モノグリセリド（日光ケミカルズ株式会社、MGS-F50MV）１００ｍｇを加え、約８０℃に加温し完全に溶解させた。室温になるまで自然冷却して半固形物状の本発明組成物を得た。【０１０４】
実施例１９および実施例２０
表６の処方に基づき、以下の方法により本発明組成物を製造した。【０１０５】
【表６】
2009054463.tif 000012
【０１０６】
（実施例１９および実施例２０）
中鎖脂肪酸トリグリセリドにタクロリムス１０ｍｇを加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させた。ステアリン酸モノグリセリド（MGS-F75MV）を加え、約８０℃に加温し完全に溶解させた。室温になるまで自然冷却して半固形物状の本発明組成物を得た。【０１０７】
実施例２１
表７の処方に基づき、以下の方法により本発明組成物を製造した。【０１０８】
【表７】
2009054463.tif 000013
【０１０９】
（実施例２１）
リノール酸（和光純薬工業株式会社）にタクロリムス１０ｍｇを加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させた。ステアリン酸モノグリセリド（MGS-F75MV）を加え、約８０℃に加温し完全に溶解させた。室温になるまで自然冷却して半固形物状の本発明組成物を得た。【０１１０】
実施例２２および実施例２３
表８の処方に基づき、以下の方法により本発明組成物を製造した。【０１１１】
【表８】
2009054463.tif 000014
【０１１２】
（実施例２２）
ミコフェノール酸モフェチル２１６ｍｇをヒマワリ油３２４００ｍｇに加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させ、本発明組成物を得た。【０１１３】
（実施例２３）
ミコフェノール酸モフェチル２１６ｍｇをオレイン酸３２４００ｍｇに加え、スターラー攪拌で完全に溶解させ、本発明組成物を得た。【０１１４】
国際公開WO 91/19495の実施例１の記載に基づき、以下の対照組成物を調製した。
対照組成物
タクロリムス                            １
ヒドロキシプロピルメチルセルロース      １
クロスカルメロースナトリウム            １
乳糖                                    ２  
計                                    ５【０１１５】
比較例１〜５
表９の処方に基づき、以下の方法により比較例組成物を製造した。【０１１６】
【表９】
2009054463.tif 000015
【０１１７】
（比較例１）
タクロリムス２０ｍｇをヤシ油（日光ケミカルズ株式会社、TRIFAT C-24）３００００ｍｇに加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させて比較例組成物を調製した。【０１１８】
（比較例２）
タクロリムス２０ｍｇをカプリル酸（花王株式会社、LUNAC 8-98(E)）３００００ｍｇに加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させて比較例組成物を調製した。【０１１９】
（比較例３）
タクロリムス２０ｍｇをリノレン酸（関東化学株式会社）３００００ｍｇに加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させて比較例組成物を調製した。【０１２０】
（比較例４）
タクロリムス２０ｍｇをオリーブ油（ＣＲＯＤＡ社、CLOPURE OL-P）３００００ｍｇに加え、超音波を３時間照射し完全に溶解させて比較例組成物を調製した。【０１２１】
（比較例５）
約９０℃に加温して融解させたミリスチン酸（花王株式会社、ルナックMY-98）３００００ｍｇにタクロリムス２０ｍｇを加え、完全に溶解させた。室温まで冷却後、乳鉢および乳棒を用いて粉砕し比較組成物を調製した。【０１２２】
実験例１（ラットを用いたタクロリムスの薬物動態／薬力学評価）
実施例１〜３、５〜１５、１７〜２１、対照組成物並びに比較例１〜５の製剤をラット（male Lewis rat, 6 weeks）に経口投与した後のタクロリムスの血中曝露量（血中ＡＵＣｂｌｏｏｄ）および薬理効果（ＩＬ−２産生率）を評価した。【０１２３】
タクロリムスの投与量は１、２または３ｍｇ／ｋｇとし、１２時間以上絶食させたラットにゾンデを用いて強制経口投与した。実施例１、２、５、６、８、９、１２〜１５および比較例１〜４は溶解液をそのままの状態で、実施例１７〜２１は半固形物をそのままの状態で、実施例３および７は約４０℃に加温した状態で、実施例１０、１１および比較例５は０．５重量％となるようメチルセルロース（信越化学工業株式会社、SM-400）０．５重量％水溶液に懸濁させた状態で、対照組成物は５ｍｇ／ｍＬとなるよう水に懸濁させた状態で投与した。【０１２４】
血中ＡＵＣｂｌｏｏｄは「試験法−４」により測定・算出した。ラットは投与液投与後採血時間まで絶食とし、水は自由に摂取させた。投与後、１、４、８、１２、１９時間に採血を行い、全血中に含まれるタクロリムスの濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（ＴＳＱ、ThermoQuest、以下同じ）によって定量して台形法にて血中薬物濃度対時間曲線下面積（血中ＡＵＣｂｌｏｏｄ）を算出した。【０１２５】
ＩＬ−２産生率は「試験法−３」により測定・算出した。ラットは投与液投与後採血時間まで絶食とし、水は自由に摂取させた。一方生理食塩水にコンカナバリンＡ（フナコシ株式会社、Lot:S0619）を１ｍｇ／ｍＬとなるよう添加し５分間スターラー攪拌後、０．４５μｍのフィルター（NALGENE, SFCA Filter Unit）で濾過した濾液を調製した（以下、コンカナバリンＡ液）。ラットに投与液を投与後１６時間に、調製後２時間以内のコンカナバリンＡ液を、コンカナバリンＡとして１５ｍｇ／ｋｇの投与量になるよう急速静脈内投与した。コンカナバリンＡ液投与後３時間に採血を行い、遠心分離により血漿を採取して血漿中ＩＬ−２濃度をＥＬＩＳＡキット（BioSource International, Inc., Rat IL-2 ELISA kit）により測定した。一方、投与液を投与していないラット（以下、無投与群）に上記と同じコンカナバリンＡ液を急速静脈内投与し、その後３時間に採血を行い、遠心分離により血漿を採取して血漿中ＩＬ−２濃度をＥＬＩＳＡキット（BioSource International, Inc., Rat IL-2 ELISA kit）により測定した。投与液を投与したラットの血漿中ＩＬ−２濃度の、無投与群のＩＬ−２濃度に対する百分率（％）をＩＬ−２産生率とした。
各製剤投与後の血中ＡＵＣｂｌｏｏｄおよびＩＬ−２産生率を表１０に示す。【０１２６】
【表１０】
2009054463.tif 000016
【０１２７】
実施例２１投与後の対照組成物に対する相対血中ＡＵＣｂｌｏｏｄおよびＩＬ−２産生率を表１１に示す。【０１２８】
【表１１】
2009054463.tif 000017
【０１２９】
実施例１〜３、５〜１５、１７〜２１の製剤はいずれも対照組成物と同様にＩＬ−２産生を抑制し、薬理効果を示す一方で、対照組成物に対して６７％以下の低い血中ＡＵＣｂｌｏｏｄを示したことからタクロリムス血中曝露量が低下していることが判明した。これに対し、比較例１〜５では対照製剤と同様にＩＬ−２産生を抑制するものの、血中ＡＵＣｂｌｏｏｄの低下が認められなかったり、あるいは対照組成物に対して低い血中ＡＵＣｂｌｏｏｄを示すものの、ＩＬ−２産生の抑制が不十分であることが判明した。これらの結果から、本発明医薬組成物はタクロリムス血中曝露量を抑制させることから、高い血中曝露量の持続に伴う副作用を低減したうえで、タクロリムスの所望の薬理効果を有することが示された。【０１３０】
実験例２
脂肪酸分解率を「試験法−６」により測定・算出した。ｐＨ６．８リン酸緩衝液（日本薬局方、第１３局、崩壊試験法・第２液）に５０ｍｍｏｌ／Ｌとなるようタウロコール酸ナトリウムを溶解し、リパーゼ（ＳＩＧＭＡ社、Lipase from porcine pancreas, 329U/mg）を３７５Ｕ／ｍＬの濃度となるように添加し、２時間攪拌することにより模擬腸液を調製した。模擬腸液６．０ｍＬに対して基剤を３０ｍｇ、あるいは３００ｍｇ添加した反応前のサンプル、および該サンプルを２８℃付近で振とう（YAMATO SCIENTIFIC CO., LTD.、最大速度）し、０．５、１、３時間反応させた後のサンプルをそれぞれ準備した。遊離脂肪酸測定用キット（和光純薬工業、NEFA C−テストワコー）を用いて、反応前のサンプルと反応後のサンプル中の遊離脂肪酸濃度を測定した。一方、油脂化学便覧（改定三版、日本油脂化学協会編、丸善株式会社）に記載の脂肪酸組成を用いて、基剤が完全に分解された時に生成される理論脂肪酸濃度を算出した。理論脂肪酸濃度に対する反応後のサンプル中の遊離脂肪酸濃度と反応前のサンプル中の遊離脂肪酸濃度の差の百分率（％）を脂肪酸分解率とした。中鎖トリグリセリド、ヒマワリ油、カカオ脂３０ｍｇを添加したサンプル、およびヒマワリ油３００ｍｇを添加したサンプルについて求めた累積脂肪酸分解率を図１に示す。【０１３１】
図１から明らかなように、脂肪酸の分解速度は基剤の種類によって異なり、分解速度はカカオ脂＜ヒマワリ油＜中鎖トリグリセリドの順であった。また脂肪酸の分解速度は基剤の量によっても異なり、基剤量が多い方が分解速度が遅いことが判明した。【０１３２】
次に、試験例１において得られた実施例１、２、３、５の各組成物投与後のタクロリムスの血中薬物濃度と、タクロリムスを０．１ｍｇ／ｍＬとなるようＰＥＧ４００（関東化学株式会社）に溶解しタクロリムスとして０．１ｍｇ／ｋｇをラット（male Lewis rat, 6 weeks）に静脈注射した後の血中薬物濃度を用いて、デコンボリューション解析を行った。得られた実施例１、２、３、５の本発明組成物を経口投与した後のタクロリムスの累積吸収率を図２に示す。【０１３３】
図２から明らかなように、吸収速度は基剤の種類によって異なり、実施例３（カカオ脂）＜実施例２（ヒマワリ油）＜実施例５（中鎖トリグリセリド）の順であった。また実施例２（ヒマワリ油）と実施例１（ヒマワリ油）を比較すると、投与した基剤の量が多い実施例１の方が吸収速度が遅いことが判明した。図１と図２とを比較すると、基剤の分解速度とタクロリムスの吸収速度が関連していると考えられた。そこで、試験例２で得られた反応１時間の脂肪酸分解率と、試験例１において得られた実施例１、２、３、５投与後のタクロリムスの血中ＡＵＣ０−１９ｈの相関性を調べた結果を図３に示す。【０１３４】
図３から明らかなように、試験例２で得られた反応１時間の脂肪酸分解率と、タクロリムスの血中ＡＵＣ０−１９ｈの間には良好な相関性が得られた。
本結果より、試験例２に従って反応１時間の脂肪酸分解率を測定した際に、分解率が低い処方ほどタクロリムスの血中曝露量を抑制し、タクロリムスの副作用を低減するために適していることが示唆された。【０１３５】
また基剤の化学構造と、タクロリムスの血中ＡＵＣｂｌｏｏｄの間の相関性について検討した結果、基剤分子構造中に含まれる融点５０℃以上の脂肪酸の重量含率と、実施例１、４、６、並びに比較例１を投与後のタクロリムスの血中ＡＵＣｂｌｏｏｄとの間に良好な相関性が得られることが判明した（図４）。本結果より、基剤分子構造中に含まれる融点５０℃以上の脂肪酸の重量含率が高い基剤ほど、タクロリムスの血中曝露量を抑制し、タクロリムスの副作用を低減するために適していることが示された。【０１３６】
実験例３−ａ（ラットを用いたタクロリムスのリンパ移行性評価）
実施例１、３、対照組成物並びに比較例１の製剤をラット（male Lewis rat,
300-350g）に経口投与した後のタクロリムスのリンパ移行性を評価した。【０１３７】
タクロリムスの投与量は２ｍｇ／ｋｇとし、実施例１および比較例１は溶解液をそのままの状態で、実施例３は約４０℃に加温した状態で、対照組成物は５ｍｇ／ｍＬとなるよう水に懸濁させた状態で投与した。【０１３８】
タクロリムスのリンパ移行量を測定・算出した。ラットの胸管リンパにカニューレを施し、リンパ液が安定して採取できる状態にあることを確認した後に、投与液をゾンデを用いて強制経口投与した。ラットは投与後リンパ液採取終了時まで絶食とし、水は自由に摂取させた。投与後０−１、１−２、２−３、３−４、４−６、６−２４時間のそれぞれの間に採取されたリンパ液中に含まれるタクロリムスの濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって定量した。リンパ液中タクロリムス濃度に、各時間帯に採取されたリンパ液の液量を乗じ、その総和をとることでリンパ移行量を算出した。【０１３９】
血中ＡＵＣｂｌｏｏｄを「試験法−４」により測定・算出した。ラットは投与液投与後採血時間まで絶食とし、水は自由に摂取させた。投与後１、４、８、１２、１９時間に採血を行い、全血中に含まれるタクロリムス濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳにて定量して台形法により血中薬物濃度対時間曲線下面積（血中ＡＵＣｂｌｏｏｄ）を算出した。【０１４０】
各組成物を用いた場合のリンパ移行性はタクロリムスのリンパ移行量を血中ＡＵＣｂｌｏｏｄで除した値として算出した。各組成物を用いた場合のリンパ移行性を図５に示す。
図５から明らかなように、実施例１および３はいずれも対照組成物よりも単位血中ＡＵＣｂｌｏｏｄあたりのリンパ移行量が大きくなり、高いリンパ移行性を示すことが判明した。これに対して比較例１は対照組成物と同程度のリンパ移行性であった。これらの結果から、本発明医薬組成物はタクロリムスを効率的にリンパへ送達することから、高い血中曝露量の持続に伴う副作用を低減したうえで、タクロリムスの所望の薬理効果を有することが示された。【０１４１】
実験例３−ｂ（ラットを用いたタクロリムスの血中曝露量とリンパ移行量の比較）
実施例１、３、対照組成物並びに比較例１の製剤をラット（male Lewis rat, 300-350 g）に経口投与した後のタクロリムスの血中曝露量とリンパ移行量を比較した。【０１４２】
タクロリムスの投与量は２ｍｇ／ｋｇとし、実施例１および比較例１は溶解液をそのままの状態で、実施例３は約４０℃に加温した状態で、対照組成物は５ｍｇ／ｍＬとなるよう水に懸濁させた状態で投与した。【０１４３】
血中ＡＵＣｂｌｏｏｄを「試験法−４」により測定・算出した。ラットは投与液投与後採血時間まで絶食とし、水は自由に摂取させた。投与後１、４、８、１２、１９時間に採血を行い、全血中に含まれるタクロリムス濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳにて定量して台形法により血中薬物濃度対時間曲線下面積（血中ＡＵＣｂｌｏｏｄ）を算出した。【０１４４】
リンパ液中ＡＵＣｌｙｍｐｈを「試験法−２」により測定・算出した。ラットの胸管リンパにカニューレを施し、リンパ液が安定して採取できる状態にあることを確認した後に、投与液をゾンデを用いて強制経口投与した。ラットは投与後リンパ液採取終了時まで絶食とし、水は自由に摂取させた。投与後０−１、１−２、２−３、３−４、４−６、６−２４時間のそれぞれの間に採取されたリンパ液中に含まれるタクロリムスの濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって定量して、リンパ液採取時間の中点の時間の薬物濃度として台形法にてリンパ液中薬物濃度対時間曲線下面積（リンパ液中ＡＵＣｌｙｍｐｈ）を算出した。
各組成物を投与した後の血中ＡＵＣｂｌｏｏｄおよびリンパ液中ＡＵＣｌｙｍｐｈ（３例の平均値）を表１２に示す。【０１４５】
【表１２】
2009054463.tif 000018
【０１４６】
表１２から明らかなように、比較例１、実施例１および３はいずれも対照組成物よりも低い血中ＡＵＣｂｌｏｏｄを示した。また、実施例１および３はいずれも対照組成物と同程度のリンパ液中ＡＵＣｌｙｍｐｈを示し、対照組成物と同等の薬効を発現することが期待されるが、比較例１は低いリンパ液中ＡＵＣｌｙｍｐｈを示し、薬効の減少が懸念された。これらの結果から、本発明医薬組成物は高い血中曝露量の持続に伴う副作用を低減したうえで、タクロリムスの所望の薬理効果を有することが示唆された。【０１４７】
実験例３−ｃ  ラットを用いたタクロリムスの薬力学評価とリンパ球内濃度
「試験法−３」および「試験法−７」により、実施例１６、１７および対照組成物をラット（male Lewis rat, 6 weeks）に経口投与した後のタクロリムスの１０７個あたりのリンパ球中濃度および薬理効果（ＩＬ−２産生率）を評価した。
各製剤投与後のリンパ球内濃度およびＩＬ−２産生率を表１３に示す。【０１４８】
【表１３】
2009054463.tif 000019
【０１４９】
実施例１６および１７の製剤はいずれも対照組成物と同様にＩＬ−２産生を抑制し，その時点でのリンパ球内濃度も対照組成物と同等であった。このことから，リンパ球内濃度はＩＬ−２産生抑制の指標になることが示された。【０１５０】
実験例３−ｄ（ラットを用いたミコフェノール酸モフェチル投与後のミコフェノール酸の血中曝露量とリンパ球中濃度の比較）
ミコフェノール酸モフェチルは経口投与後、速やかに活性体であるミコフェノール酸に代謝される。そこで、実施例２２および２３、対照組成物の製剤をラット（male Lewis rat, 6 weeks）に経口投与した後のミコフェノール酸の血中曝露量（血漿中ＡＵＣｐｌａｓｍａ）および薬理効果（リンパ球中濃度）を評価した。【０１５１】
ミコフェノール酸モフェチルの投与量は２０ｍｇ／ｋｇとし、１２時間以上絶食させたラットにゾンデを用いて強制経口投与した。実施例２２および２３は溶解液をそのままの状態で、対照組成物としてミコフェノール酸モフェチルを４ｍｇ／ｍＬとなるようメチルセルロース（信越化学工業株式会社、SM-400）０．５重量％水溶液に懸濁させた状態で投与した。【０１５２】
血漿中ＡＵＣｐｌａｓｍａは「試験法−４」により測定・算出した。ラットは投与液投与後採血時間まで絶食とし、水は自由に摂取させた。投与後、０．５、１、２時間に採血を行い、遠心分離により血漿を採取して血漿中に含まれるミコフェノール酸の濃度をＨＰＬＣ（島津）によって定量して台形法にて血漿中薬物濃度対時間曲線下面積（血漿中ＡＵＣｐｌａｓｍａ）を算出した。【０１５３】
リンパ球中濃度は「試験法−７」により測定・算出した。ラットは投与液投与後採血時間まで絶食とし、水は自由に摂取させた。投与後、２時間に採血を行い、Ficcoll-conray溶液（免疫生物研究所、リンホセパールII）を用いてショ糖密度勾配法にて全血からリンパ球層を単離し，リンパ球１０７個当たりに含まれるミコフェノール酸の濃度をＨＰＬＣ（島津）によって定量した。
各製剤投与後の血漿中ＡＵＣｐｌａｓｍａおよびリンパ球中濃度を表１４に示す。【０１５４】
【表１４】
2009054463.tif 000020
【０１５５】
実施例２２および２３の製剤はいずれも対照組成物と同程度のリンパ球中濃度を示し、薬理効果を示す一方で、対照組成物に対して３９％以下の低い血漿中ＡＵＣｐｌａｓｍａを示したことからミコフェノール酸の血中曝露量が低下していることが判明した。対照であるミコフェノール酸モフェチルの懸濁液を２０ｍｇ／ｋｇでラットに経口投与した場合、ラット心臓移植片モデルにおいて生着期間が有意に延長されることが示されている（Transplant ６４，１６９５，１９９７、セルセプト（登録商標）医薬品インタビューフォーム２００８年２月（改訂第１２版））ことから、本発明医薬組成物は高い血中曝露量の持続に伴う副作用を低減したうえで、ミコフェノール酸モフェチルの所望の薬理効果を有することが示唆された。【０１５６】
実験例３−ｅ（ラットを用いたタクロリムスおよびシクロスポリンのＣｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０の比較）
実施例１、３、対照組成物並びに比較例１の製剤をラット（male Lewis rat, 300-350 g）に経口投与した後のＣｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０を比較した。【０１５７】
タクロリムスの投与量は２ｍｇ／ｋｇとし、実施例１および比較例１は溶解液をそのままの状態で、実施例３は約４０℃に加温した状態で、対照組成物は５ｍｇ／ｍＬとなるよう水に懸濁させた状態で投与した。【０１５８】
Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０を「試験法−８」により測定・算出した。タクロリムスの投与量を変化させて、移植手術を施したラットにタクロリムスを含有するプログラフカプセル内可溶化粉末懸濁液をゾンデにより強制経口投与した場合、タクロリムスを投与しない場合に比し、移植片の生着期間が有意に延長する最少のタクロリムス投与量（Ｘｍｉｎ）は１ｍｇ／ｋｇであった（Transplantation、44、734-738、1987）。後記実験例４の結果より、タクロリムスを含有するプログラフカプセル内可溶化粉末懸濁液と、実施例１においての移植片の生着期間が有意に延長する最少のタクロリムス投与量は同じであることが示された。そのためタクロリムスを２ｍｇ／ｋｇで投与した場合のリンパ液中タクロリムス濃度を２で除することで、タクロリムスＸｍｉｎ投与後のリンパ液中タクロリムス濃度（以下、Ｃｌｙｍｐｈ）を算出した。一方、タクロリムスのＩＣ５０（ヒト混合リンパ球反応５０％阻害薬物濃度）は０．１８ｎｇ／ｍＬであった（Transplant Proceedings、No 5、 Suppl 6、36-39、1987）。ＣｌｙｍｐｈをＩＣ５０で除した値をＣｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０とし、結果（３例の平均値）を表１５に示す。【０１５９】
【表１５】
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【０１６０】
特許文献７、非特許文献３に記載されているシクロスポリンＡのリンパ送達化データを用いて「試験法−８」によりＣｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０を算出した。特許文献７の参考例、非特許文献３のリンパ試料採取用実験では、いずれもシクロスポリンＡとして３．５ｍｇを３５０〜４５０ｇのラットに投与しており、シクロスポリンＡの投与量は約８．７５ｍｇ／ｋｇであった。一方、シクロスポリンＡの投与量を変化させて、移植手術を施したラットにシクロスポリンＡを含有するサンディミュンカプセル内容液をゾンデにより強制経口投与した場合、シクロスポリンＡを投与しない場合に比し、移植片の生着期間が有意に延長する最少のシクロスポリンＡ投与量は１０ｍｇ／ｋｇであった（Transplantation、44、734-738、1987）。一方、非特許文献３のラット皮膚移植の結果では特許文献７に記載された発明（HCO-60製剤）では１ｍｇ／ｋｇ投与で、特許文献７の比較例（ゴマ油製剤）の７〜１５ｍｇ／ｋｇと同等の薬効が示されていることから、特許文献７、非特許文献３に記載された組成物のＸｍｉｎは１ｍｇ／ｋｇと推測される。シクロスポリンＡを８．７５ｍｇ／ｋｇで投与した場合のリンパ液中シクロスポリンＡ濃度を８．７５で除することで、シクロスポリンＡをＸｍｉｎ投与後のリンパ液中シクロスポリンＡ濃度（以下、Ｃｌｙｍｐｈ）を算出した。一方、シクロスポリンのＩＣ５０（ヒト混合リンパ球反応５０％阻害薬物濃度）は１６．８μｇ／ｍＬであった（Transplant Proceedings、No 5、 Suppl 6、36-39、1987）。ＣｌｙｍｐｈをＩＣ５０で除した値をＣｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０とした（表１６、表１７）。【０１６１】
【表１６】
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【０１６２】
【表１７】
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【０１６３】
表１５、表１６、表１７から明らかなように、本発明方法、ならびに特許文献７、非特許文献３に記載の方法を用いることにより、Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が１時間以上であるため、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制してもＩＬ−２産生率の抑制を期待できることが判明した。しかし、特許文献７、非特許文献３記載の方法では、Ｃｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が５時間以上であるため、プログラフカプセルと比べてリンパ腫の発生リスクが大きいと考えられる。リンパ腫の発生リスクが大きくなることは、本発明の主目的である副作用の軽減とは相反する結果である。それに対して、本発明記載の方法ではＣｌｙｍｐｈ／ＩＣ５０が３０より大きい時間が１時間以上４時間より短いため、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制してもＩＬ−２産生率を抑制でき、かつリンパ腫の発生リスクが小さいことが期待された。【０１６４】
実験例４（ラット腹部異所性心移植における作用）
移植モデル動物を用いて対照組成物並びに実施例１、実施例１６、および実施例１７の製剤を投与した後の移植臓器生着日数より薬理効果を評価した。ラット（male Lewis rat, 6 weeks）より心臓を摘出し、別個体の腹部に移植した。タクロリムスの投与量を３ｍｇ／ｋｇとし、実施例１は溶解液をそのままの状態で、対照組成物は５ｍｇ／ｍＬとなるよう水に懸濁させた状態でゾンデを用いて強制経口投与した。また、プラセボ群には水のみを経口投与した。食餌条件は非絶食とし、水は自由に摂取させた。各製剤を移植当日より１日１回、１４日間反復経口投与した。【０１６５】
プラセボ群に対して実施例１、実施例１６、および実施例１７の製剤ならびに対照組成物は臓器生着延長効果を示した。また、実施例１、実施例１６、および実施例１７の製剤は対照組成物と同等の臓器生着延長効果を示した。【０１６６】
実験例５（非絶食薬物動態試験）
実験例４における移植モデル動物への投与と同一条件にて対照組成物および実施例１の製剤を１日１回、１４日間反復経口投与したときの血中濃度推移を評価した。食餌条件は非絶食とし、水は自由に摂取させた。１４日目投与後２、４、８、１２、１８、２４時間に採血し、全血中に含まれるタクロリムス濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳにて定量した。その値から最高血中濃度（Ｃｍａｘ）および血中薬物濃度対時間曲線下面積（血中ＡＵＣ０−２４ｈ）を算出した。
各製剤投与後のＣｍａｘおよび血中ＡＵＣ０−２４ｈ（ｎ＝３）を表１８に示す。【０１６７】
【表１８】
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【０１６８】
実施例１のＣｍａｘおよび血中ＡＵＣ０−２４ｈは対照組成物に対してそれぞれ１６％および３３％と低い値を示した。【０１６９】
実験例６（カニクイザルを用いたタクロリムスの薬物動態試験）
実施例１６、および実施例１７の製剤ならびに対照組成物の製剤をカニクイザル（オス、３−５才、2.8−3.8 kg）に経口投与した後のタクロリムスの血中曝露量（血中ＡＵＣｂｌｏｏｄ）を評価した。【０１７０】
タクロリムスの投与量は１ｍｇ／Ｂｏｄｙとし、１６時間以上絶食させたカニクイザルに投与用カプセル剤を水１０ｍＬとともに強制経口投与した。実施例１６および実施例１７は溶解液または半固形物を４号ゼラチンカプセル（カプスゲルジャパン）に、対照組成物については対照組成物５重量部と乳糖５９．３５重量部およびステアリン酸０．６５重量部の混合物を５号ゼラチンカプセルに充填して投与用カプセル剤を調製した。【０１７１】
血中ＡＵＣｂｌｏｏｄは「試験法−５」により測定・算出した。サルは投与用カプセル剤投与後２４時間の採血終了まで絶食とし、水は自由に摂取させた。投与前ならびに投与後、０．５、１、２、４、６、８、１２、２４、４８時間に採血を行い、全血中に含まれるタクロリムスの濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって定量して台形法にて血中薬物濃度対時間曲線下面積（血中ＡＵＣｂｌｏｏｄ）を算出した。
各製剤投与後のＣｍａｘおよび血中ＡＵＣ０−４８ｈ（ｎ＝５）を表１９に示す。【０１７２】
【表１９】
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【０１７３】
実施例１６および実施例１７の平均のＣｍａｘは対照組成物に対してそれぞれ３８％および３５％、平均の血中ＡＵＣ０−４８ｈはそれぞれ４５％および２７％と低い値を示した。
これらの結果から、本発明医薬組成物はタクロリムス血中曝露量を抑制し、高い血中曝露量の持続に伴う副作用を低減したうえで、タクロリムスの所望の薬理効果を有することが示された。
【産業上の利用可能性】
【０１７４】
本発明医薬組成物は、親油性ＩＬ−２産生抑制物質の血中曝露量を抑制し、かつ親油性ＩＬ−２産生抑制物質の薬理作用である免疫抑制作用を発現することが確認されていることから、腎機能障害等の副作用を軽減させることが期待できるという、経口吸収改善化技術とは相違する効果を奏するものである。
以上、本発明を特定の態様に沿って説明したが、当業者に自明の変形や改良は本発明の範囲に含まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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