(57)【要約】  本発明は乳がん耐性蛋白（ＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２）阻害剤に関する。  一般式（１）［式中、Ａは置換基を有してもよい３−８員の複素環を示す。］で表されるアクリロニトリル誘導体又はその塩。2009072267.tif 000014
2009072267.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
2009072267.tif 000012
［式中、Ａは置換基を有してもよい３−８員の複素環を示す。］
で表されるアクリロニトリル誘導体又はその塩。
【請求項２】
前記Ａが、置換基を有してもよい下記（３）〜（９）から選択される１種である請求項１記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩。
【化２】
2009072267.tif 000013
【請求項３】
下記から選択されるアクリロニトリル誘導体又はその塩。
ピペリジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル
（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル
アゼチジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル
ピロリジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル
（２−メチル−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル
（３−ヒドロキシメチル−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル
アゼパン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル
アゾカン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル
（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル
モルホリン−４−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル
【請求項４】
請求項１〜３の何れか１項記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩を有効成分とする医薬。
【請求項５】
請求項１〜３の何れか１項記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩を有効成分とするＢＣＲＰ阻害剤。
【請求項６】
請求項１〜３の何れか１項記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩を有効成分とする抗がん剤耐性克服剤又は抗がん剤効果増強剤。
【請求項７】
請求項１〜３の何れか１項記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩、及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項８】
請求項１〜３の何れか１項記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩、及びＢＣＲＰの基質となり得る抗がん剤を含有する抗がん剤組成物。
【請求項９】
請求項１〜３の何れか１項記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩の、抗がん剤耐性克服剤又は抗がん剤効果増強剤の製造のための使用。
【請求項１０】
請求項１〜３の何れか１項記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩の、ＢＣＲＰの基質となり得る抗がん剤を含有する抗がん剤組成物の製造のための使用。
【請求項１１】
請求項１〜３の何れか１項記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩を投与する、ＢＣＲＰの関与により薬剤耐性を獲得したがんの処置方法。
【請求項１２】
請求項１〜３の何れか１項記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩を投与する、ＢＣＲＰの阻害方法。
【請求項１３】
請求項１〜３の何れか１項記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩を投与する、抗がん剤の耐性を克服する方法又は抗がん剤の効果を増強する方法。
【請求項１４】
請求項１〜３の何れか１項記載のアクリロニトリル誘導体又はその塩及びＢＣＲＰの基質となり得る抗がん剤を投与する、がんの治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は乳がん耐性蛋白（ＢＣＲＰ／ＡＢＣＧ２）阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
がん化学療法において、治療開始時から抗がん剤に無効である自然耐性や抗がん剤を長期に連用するとその効果が低下する獲得耐性の出現は大きな問題となっている。この抗がん剤に対する耐性の克服は、がん化学療法の治療成績向上につながることが期待され、これまでに様々な耐性機構の存在が明らかにされてきた。その中でも抗がん剤を細胞外へ能動輸送し、その細胞内蓄積量を減少させる薬剤輸送蛋白質の発現は、耐性機構の中心的な役割を果たしていると考えられている。
１９７０年代に発見されたＭＤＲ１遺伝子にコードされる薬剤輸送蛋白質Ｐ−糖蛋白質は、化学構造や作用機序が異なる複数の抗がん剤に対して交叉耐性を生じることから、多剤耐性克服剤の有力な標的分子とされてきた。しかし、Ｐ−糖蛋白質だけでは抗がん剤耐性機構を説明しきれないことも次第に明らかとなり、さらに新しい薬剤輸送蛋白質を標的分子とした耐性克服剤の開発が望まれている。【０００３】
その様な中、１９９８年に、Ｐ−糖蛋白質と同じくＡＴＰ結合カセット（ＡＢＣ）トランスポータースーパーファミリーと呼ばれる一群に属する薬剤輸送蛋白質として、乳がん耐性蛋白質（ＢＣＲＰの他、ＡＢＣＧ２、ＭＸＲ又はＡＢＣＰとも呼ばれる）が発見された（非特許文献１参照）。ＢＣＲＰの構造にはＡＴＰ結合カセットが一つしか存在せず、二つのＡＴＰ結合カセットを有するＰ−糖蛋白質や他のＡＢＣトランスポーターとは構造的に異なっている。ＢＣＲＰは塩酸イリノテカン（ＣＰＴ−１１）やトポテカン等のトポイソメラーゼＩ阻害剤、ミトキサントロン等のトポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ゲフィチニブやイマチニブ等の分子標的治療薬に対する耐性機構に関与する。一方、ＢＣＲＰはＰ−糖蛋白質により排出されるパクリタキセルやビンクリスチン等に対しては作用しないこと、またＰ−糖蛋白質ではほとんど細胞外へ排出されないＣＰＴ−１１や７−エチル−１０−ヒドロキシカンプトテシン（ＳＮ−３８：ＣＰＴ−１１の活性体）等のカンプトテシン誘導体の排出に関わることから（非特許文献２参照）、Ｐ−糖蛋白質とは異なる基質特異性を有することが明らかにされている。さらに、ＢＣＲＰは経口投与された抗がん剤のバイオアベイラリビティの限界にも関与していることが示唆されている（非特許文献３参照）。これらの事実から、ＢＣＲＰを阻害する薬剤は、従来の耐性克服剤では克服され得なかった抗がん剤の耐性に対して克服効果を発揮し、さらには抗がん剤のバイオアベイラビリティをも向上させることが期待され、その開発が望まれる。【０００４】
これまでに、抗がん剤に対する耐性克服を目的として数多くのＰ−糖蛋白質阻害剤が開発されてきた。それに比べ、ＢＣＲＰ阻害剤に関する報告は少なく、またその阻害作用も十分とは言えないことから、より有効なＢＣＲＰ阻害剤を発見するための絶え間ない努力がなされている。なお、これまでに報告されているＢＣＲＰ阻害作用を有する化合物としては、ＦＴＣ（Ｆｕｍｉｔｒｅｍｏｒｇｉｎ  Ｃ）誘導体（非特許文献４参照）、エストロゲンや抗エストロゲン（非特許文献５参照）、ノボビオシン（非特許文献６参照）等がある。また、我々は、フラボノイド（特許文献１参照）、ジフェニルアクリロニトリル誘導体（特許文献２参照）および複素環を有するアクリロニトリル誘導体（特許文献３参照）にＢＣＲＰ阻害作用を見出しているが、これらのいずれについても未だ十分な効果は得られておらず、さらには、溶解性、毒性など、医薬品として有用とされるにはクリアしなければならない課題を抱えている。
【特許文献１】国際公開第２００４／０６９２３３号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００４／０６９２４３号パンフレット
【特許文献３】国際公開第２００６／１０６７７８号パンフレット
【非特許文献１】Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1998,95:15665-15670
【非特許文献２】Cancer Res.,1999,59:5938-5946
【非特許文献３】J.Clin.Oncol.,2002,20:2943-2950
【非特許文献４】Mol.Cancer Ther.,2002,1:417-425
【非特許文献５】Mol.Cancer Ther.,2003,2:105-112
【非特許文献６】Int.J.Cancer,2004,108:146-151
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、優れた乳がん耐性蛋白質（ＢＣＲＰ）阻害作用を有し且つ溶解性の改善された新規な薬剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、上記課題を解決すべく、ＢＣＲＰにより耐性を獲得した抗がん剤耐性がん細胞を用いて様々な化合物についてスクリーニングを行った結果、下記式（１）で表される新規なアクリロニトリル誘導体に強力なＢＣＲＰ阻害作用があることを見出した。【０００７】
すなわち、本発明は、一般式（１）【０００８】
【化１】
2009072267.tif 000003
【０００９】
〔式中、Ａは置換基を有してもよい３−８員の複素環を示す。］
で表されるアクリロニトリル誘導体又はその塩を提供するものである。【００１０】
また、本発明は、上記のアクリロニトリル誘導体又はその塩を有効成分とする医薬を提供するものである。
また、本発明は、上記のアクリロニトリル誘導体又はその塩を有効成分とするＢＣＲＰ阻害剤を提供するものである。
また、本発明は、上記のアクリロニトリル誘導体又はその塩を有効成分とする抗がん剤耐性克服剤又は抗がん剤効果増強剤を提供するものである。【００１１】
また、本発明は、上記のアクリロニトリル誘導体又はその塩、及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供するものである。
また、本発明は、上記のアクリロニトリル誘導体又はその塩、及びＢＣＲＰの基質となり得る抗がん剤を含有する抗がん剤組成物を提供するものである。【００１２】
また、本発明は、上記のアクリロニトリル誘導体又はその塩の、抗がん剤耐性克服剤又は抗がん剤効果増強剤の製造のための使用を提供するものである。
また、本発明は、上記のアクリロニトリル誘導体又はその塩の、ＢＣＲＰの基質となり得る抗がん剤を含有する抗がん剤組成物の製造のための使用を提供するものである。【００１３】
また、本発明は、上記のアクリロニトリル誘導体又はその塩を投与する、ＢＣＲＰの関与により薬剤耐性を獲得したがんの処置方法を提供するものである。
また、本発明は、上記のアクリロニトリル誘導体又はその塩を投与する、ＢＣＲＰの阻害方法を提供するものである。
また、本発明は、上記のアクリロニトリル誘導体又はその塩を投与する、抗がん剤の耐性を克服する方法又は抗がん剤の効果を増強する方法を提供するものである。
また、本発明は、上記のアクリロニトリル誘導体又はその塩及びＢＣＲＰの基質となり得る抗がん剤を投与する、がんの治療方法を提供するものである。
【発明の効果】
【００１４】
本発明のアクリロニトリル誘導体又はその塩の優れたＢＣＲＰ阻害作用により、ＢＣＲＰが関与する抗がん剤耐性を克服することが可能である。また、もとからＢＣＲＰを発現するがんに対し、抗がん剤の効果を増強することが可能である。また、抗がん剤のバイオアベイラビリティを向上させることも期待され、がん化学療法における治療成績の向上につながることが期待される。
さらには、本発明のアクリロニトリル誘導体又はその塩は溶解性に優れており、医薬品原薬として極めて有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
一般式（１）中、Ａで示される複素環としては、３〜８員の複素環が挙げられ、このうち、４〜８員の複素環が好ましい。前記Ａで示される複素環としては、具体的にはアジリジン、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、チオモルホリン、モルホリン、アゼパン、アゾカンなどが挙げられる。このうち下記式（２）〜（９）で示される複素環が好ましく、下記式（５）で示されるピペリジンが特に好ましい。【００１６】
【化２】
2009072267.tif 000004
【００１７】
一般式（１）中、前記Ａで示される複素環は、一若しくは複数の置換基を有してもよく、当該置換基としては、水酸基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、低級アシルオキシ基、ニトロ基、アミノ基、ハロゲン原子、低級ヒドロキシアルキル基、低級アルコキシカルボニル基などが挙げられ、置換基が複数の場合それぞれの置換基は同じでも異なっていてもよい。このうち、水酸基を有する複素環が特に好ましい。【００１８】
前記低級アルキル基としては、炭素数１〜６のアルキル基が挙げられ、具体的にはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソブチル基等が挙げられる。
前記低級アルコキシ基としては、炭素数１〜６のアルコキシ基が挙げられ、具体的にはメトキシ基、エトキシ基等が挙げられる。
前記低級アシルオキシ基としては、炭素数１〜６のアシルオキシ基が挙げられ、具体的にはホルミルオキシ基、アセトキシ基、プロピオニルオキシ基等が挙げられる。
前記低級ヒドロキシアルキル基としては、炭素数１〜６のヒドロキシアルキル基が挙げられ、具体的にはヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基等が挙げられる。
前記低級アルコキシカルボニル基としては、炭素数１〜６のアルコキシカルボニル基が挙げられ、具体的にはメトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基等が挙げられる。
ハロゲン原子としては、塩素、臭素、フッ素、ヨウ素等が挙げられる。【００１９】
本発明のアクリロニトリル誘導体は、薬理学的に許容される塩を形成することができ、斯かる塩もまた本発明に含まれる。塩としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの無機酸塩；ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属塩；カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属塩；ｐ−トルエンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、乳酸塩等の有機酸塩等が挙げられる。また、本発明の化合物は、溶媒水和物の形態で存在することもあり、かかる水和物も本発明に含まれる。更に、本発明のアクリロニトリル誘導体には、異性体が存在し得るが、これら異性体及びその混合物もまた、本発明に含まれる。【００２０】
これらの中で特に好ましい化合物は、下記の化合物又はその塩である。
ピペリジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル；
（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル；
アゼチジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル；
ピロリジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル；
（２−メチル−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル；
（３−ヒドロキシメチル−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル；
アゼパン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル；
アゾカン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル；
（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル；
モルホリン−４−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル【００２１】
本発明のアクリロニトリル誘導体又はその塩は、例えば次の反応式（Ａ）に従って製造することができる。
反応式（Ａ）【００２２】
【化３】
2009072267.tif 000005
【００２３】
すなわち、５−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−カルボキシアルデヒド（Ｘ）と３，４−ジメトキシベンジルシアニド（Ｙ）を縮合させることにより（Ｚ）−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−３−［５−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−イル］−アクリロニトリル（Ｚ）が得られる。
さらに（Ｚ）にブロモアセチルブロミド（ＸＸ）を反応させることによりブロモ−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（ＸＹ）が得られる。ブロモ−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（ＸＹ）に所望の第２級アミン類（ＸＺ：式中、Ａは上記定義と同じ。）を反応させることにより、本発明の一般式（１）で表わされるアクリロニトリル誘導体（式中、Ａは上記定義と同じ。）が得られる。【００２４】
前記第２級アミン類（ＸＺ：式中、Ａは上記定義と同じ。）は、特に限定されるものではないが、具体的にはピペリジン、４−ヒドロキシピペリジン、アジリジン−２−カルボキシリック  アシッド  メチル  エステル、アゼチジン、ピロリジン、２−メチル−ピペリジン、３−ヒドロキシメチル−ピペリジン、アゼパン（ヘキサメチレンイミン）、アゾカン（ヘプタメチレンイミン）、４−メチル−ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン等が挙げられ、前記反応式（Ａ）において、これらの第２級アミン類により得られるアクリロニトリル誘導体としては、
ピペリジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル、
（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル、
１−（１−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イルオキシカルボニルメチル）−アジリジン−２−カルボキシリック  アシッド  メチル  エステル、
アゼチジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル、
ピロリジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル、
（２−メチル−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル、
（３−ヒドロキシメチル−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル、
アゼパン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル、
アゾカン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル、
（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル、
モルホリン−４−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル、
チオモルホリン−４−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル等が挙げられる。【００２５】
縮合反応は、ナトリウムアルコキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の塩基の存在下にて行うのが好ましい。ナトリウムアルコキシドの存在下での縮合反応は、例えばメタノール、エタノール等のアルコール溶媒中、氷冷から還流温度で行われる。また、水酸化ナトリウムの存在下での縮合反応は、塩化メチレン、クロロホルム等の不活性溶媒と水との混合溶媒中、第四級アンモニウム等を添加して行われる。【００２６】
本発明の複素環を有するアクリロニトリル誘導体又はその塩は、そのままでも投与することができるが、他の薬学的に許容される分散補助剤、賦形剤等の担体と混合し、粉剤、液剤、カプセル剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤、顆粒剤、丸剤、錠剤、トローチ剤、リモネーデ剤等の経口剤又は注射剤等の剤形で使用することができる。これらの製剤は、公知の方法で製造することができる。【００２７】
担体としては、例えば、マンニトール、乳糖、デキストラン等の水溶性の単糖類ないしオリゴ糖類もしくは多糖類；例えばヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース等のゲル形成性又は水溶性のセルロース類；例えば結晶性セルロース、α−セルロース、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム、及びそれらの誘導体等の水吸収性でかつ水難溶性のセルロース類；例えばヒドロキシプロピル澱粉、カルボキシメチル澱粉、架橋澱粉、アミロース、アミロペクチン、ペクチン及びそれらの誘導体等の水吸収性でかつ水難溶性の多糖類；例えばアラビアガム、トラガントガム、グリコマンナン及びそれらの誘導体等の水吸収性でかつ水難溶性のガム類；例えばポリビニルピロリドン、架橋ポリアクリル酸及びその塩、架橋ポリビニルアルコール、ポリヒドロキシエチルメタクリレート及びそれらの誘導体等の架橋ビニル重合体類；リン脂質、コレステロール等のリポソーム等分子集合体を形成する脂質類等を挙げることができる。【００２８】
本発明の化合物の溶解性が低い場合には、可溶化処理を施すことができる。可溶化処理としては通常医薬に適用できる方法、例えば、ポリオキシエチレンアルコールエーテル類、ポリオキシエチレンアシルエステル類、ソルビタンアシルエステル類やポリオキシエチレンソルビタンアシルエステル類等の界面活性剤を添加する方法、ポリエチレングリコール等の水溶性高分子を使用する方法等が挙げられる。また、必要により、可溶性の塩にする方法、シクロデキストリン等を用いて包接化合物を形成させる方法等も使用できる。可溶化処理の方法は、目的とするアクリロニトリル誘導体又はその塩に応じて適宜変更できる。【００２９】
本発明の化合物は、ＢＣＲＰを強力に阻害するので、ＢＣＲＰ阻害剤、抗がん剤耐性克服剤又は抗がん剤効果増強剤として使用することが出来、さらにＢＣＲＰの基質となり得る抗がん剤と組み合わせて抗がん剤組成物として使用することが出来る。抗がん剤の投与によってＢＣＲＰ関与の耐性を獲得したがんに対し、抗がん剤耐性克服剤として使用することが出来、また、もとからＢＣＲＰを発現し、抗がん剤に対して低感受性のがんに対しては抗がん剤効果増強剤として使用することが出来る。本発明のＢＣＲＰ阻害剤を有効成分とする抗がん剤耐性克服剤および抗がん剤効果増強剤の対象となる抗がん剤としては、ＢＣＲＰ又はその類縁体の基質となり得る抗がん剤であれば特に制限はないが、例えば塩酸イリノテカン／ＣＰＴ−１１（活性本体：ＳＮ−３８）やトポテカン等のトポイソメラーゼＩ阻害剤、ミトキサントロン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ビスアントレンやエトポシド等のトポイソメラーゼＩＩ阻害剤、メトトレキサート等の葉酸代謝拮抗薬、ゲフィチニブやイマチニブ等の分子標的治療薬等が挙げられる。なお、ここでＢＣＲＰの類縁体は、ＢＣＲＰと同様にがんの耐性や抗がん剤の感受性に関わるものであれば特に制限されない。【００３０】
本発明のＢＣＲＰ阻害剤の投与量は、投与法や患者の症状等に合わせて適宜調整すればよいが、成人１日あたり１ｍｇ〜１０ｇ、更に１００ｍｇ〜１０ｇ、特に５００ｍｇ〜１０ｇ投与するのが好ましい。また、抗がん剤とＢＣＲＰ阻害剤との比率は、特に限定されず、その好適な範囲は用いる抗がん剤、阻害剤の種類等により異なるが、例えば抗がん剤として塩酸イリノテカンを用いる場合には、重量換算で抗がん剤：ＢＣＲＰ阻害剤が１：１〜１：５００、特に１：１〜１：１００、更に１：１〜１：１０の比率とすることが好ましい。
【実施例】
【００３１】
次に本発明を実施例を挙げて更に詳細に説明するが、これは単に例示であって本発明を限定するものではない。【００３２】
実施例１：複素環を有するアクリロニトリル誘導体の製造【００３３】
（製造工程１）  ５−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−カルボキシアルデヒドの製造工程（５−ブロモチオフェン−２−カルボキシアルデヒド  への４−ヒドロキシピペリジンの導入工程）
反応容器に５−ブロモチオフェン−２−カルボキシアルデヒドを入れ、水を加えた。３当量の４−ヒドロキシピペリジンを入れ、還流下で数十分から終夜撹拌した。反応終了直後ろ紙にてろ過し、ろ液を流水で数十分間、次いで氷で数時間冷却した。析出した結晶を吸引ろ取し、冷水で洗浄、水分を除いた後、クロロホルムに溶解した。クロロホルム溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、シリカゲルパッドでろ過し、ろ液の色が薄くなるまでクロロホルムで洗浄した。ろ液を減圧下濃縮し、結晶が析出し始めるところで濃縮をやめ、ｎ−ヘキサンを加えて、室温で終夜撹拌した。結晶をろ取し、ｎ−ヘキサン洗浄、減圧下乾燥し５−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−カルボキシアルデヒドを得た。【００３４】
（製造工程２）  （Ｚ）−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−３−［５−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−イル］−アクリロニトリルの製造工程（５−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−カルボキシアルデヒドと３，４−ジメトキシベンジルシアニドの縮合工程）
反応容器に５−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−カルボキシアルデヒド及び３，４−ジメトキシベンジルシアニドを入れ、エタノールに溶解した。ナトリウムエトキシドを加え、還流下にて撹拌した。反応終了後、反応液を流水で数十分間冷却し、水を加え、数十分間撹拌した。析出した結晶を吸引ろ取し、水、エタノール、ヘキサンで順次洗浄した後、減圧下乾燥し（Ｚ）−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−３−［５−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−イル］−アクリロニトリルを得た。【００３５】
（製造工程３：Ａ法）  ブロモ−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステルの製造工程
アルゴンガス雰囲気下、反応容器に（Ｚ）−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−３−［５−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−イル］−アクリロニトリルを入れ、クロロホルムに溶解し、ピリジンを加え、氷浴中で数十分間撹拌した。反応液にブロモアセチルブロミドを加えた後、氷浴中で数時間、室温で終夜撹拌した。反応終了後クロロホルム、水を加え分液した。有機層を水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフ法で精製しブロモ−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステルを得た。【００３６】
（製造工程３：Ｂ法）  ブロモ−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステルの製造工程
反応容器に（Ｚ）−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−３−［５−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−イル］−アクリロニトリルを入れ、テトラヒドロフランに溶解し氷冷した。水素化ナトリウムを加え氷浴中で数十分間撹拌した。反応液にブロモアセチルクロリドを加えた後、還流下で数時間撹拌した。放冷後、反応液にクロロホルム、水を加えて分液した。有機層を水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフ法で精製しブロモ−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステルを得た。【００３７】
（製造工程４）  ブロモ−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステルへのアミンの導入工程
アルゴンガス雰囲気下、反応容器にブロモ−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステルを入れ、クロロホルムに溶解し、氷浴中で数十分間撹拌した。所望の第二級アミン及びトリエチルアミンなどの第三級アミンを加え、氷浴中で数時間、室温で終夜撹拌した。反応終了後、反応液を水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラムクロマト法で精製し、所望のアクリロニトリル誘導体を得た。【００３８】
以下に誘導体の製造と分析結果の具体例を示す。【００３９】
ピペリジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（化合物１）の製造
５−ブロモチオフェン−２−カルボキシアルデヒド（４２．３０ｇ）および４−ヒドロキシピペリジン（６７．３０ｇ）を用いて、（製造工程１）に従ってアミンを導入し（収量３３．００ｇ：収率７１％）、得られた５−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−カルボキシアルデヒド（１０．５６ｇ）および３，４−ジメトキシベンジルシアニド（８．８６ｇ）を（製造工程２）に従って縮合し、（Ｚ）−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−３−［５−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−イル］−アクリロニトリル（収量１３．５０ｇ：収率７３％）を得た。得られた（Ｚ）−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−３−［５−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−チオフェン−２−イル］−アクリロニトリル（２０．００ｇ）をクロロホルム（６５０ｍｌ）に溶解し、さらにピリジン（６．４１ｇ）およびブロモアセチルブロミド（１４．１３ｇ）を（製造工程３）Ａ法に従って反応させ（収量２３．００ｇ：収率８７％）、得られたブロモ−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（２．３０ｇ）をクロロホルム（１００ｍｌ）に溶解し、さらにピペリジン（５３３ｍｇ）およびトリエチルアミン（６５８ｍｇ）を（製造工程４）に従って反応させ、目的物（収量１．４０ｇ：収率６０％）を得た。【００４０】
（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イルエステル（化合物２）の製造
上記化合物１の製造中に得られたブロモ−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（９１０ｍｇ）をクロロホルム（５０ｍｌ）に溶解し、さらに４−ヒドロキシピペリジン（２３３ｍｇ）およびトリエチルアミン（２３３ｍｇ）を（製造工程４）に従って反応させ、目的物（収量６２２ｍｇ：収率６４％）を得た。【００４１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），５．０８−５．０２（１Ｈ，ｍ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．７７−３．７０（１Ｈ，ｍ），３．５８−３．５２（２Ｈ，ｍ），３．３１−３．２７（２Ｈ，ｍ），３．２５（２Ｈ，ｓ），２．８７−２．８２（２Ｈ，ｍ），２．４２−２．３６（２Ｈ，ｍ），２．４３−２．３５（２Ｈ，ｍ），１．９５−１．８２（４Ｈ，ｍ），１．７０−１．６０（２Ｈ，ｍ）【００４２】
ピペリジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル  塩酸塩（化合物３）の製造
化合物１（９５０ｍｇ）に６ｍｏｌ／ｌ塩酸（３５２μｌ）、２−プロパノール（２５ｍｌ）、エタノール（１０ｍｌ）を加え、約８０℃にて加温溶解した。放冷後、減圧下溶媒を留去し、残留物を２−プロパノール−メタノール系で再結晶することにより、目的物（収量８６９ｍｇ：収率８５％）を得た。【００４３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．０１（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．９４（１Ｈ，ｓ），７．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），７．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．２），７．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８），６．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），５．１３−５．０９（１Ｈ，ｍ），４．２３（２Ｈ，ｂｒ  ｓ），３．８３（３Ｈ，ｓ），３．７８（３Ｈ，ｓ），３．５６−３．４２（４Ｈ，ｍ），３．４０−３．３０（４Ｈ，ｍ），３．０５−２．９５（２Ｈ，ｍ），２．０８−２．０２（２Ｈ，ｍ），１．８５−１．６５（６Ｈ，ｍ）【００４４】
（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イルエステル  塩酸塩（化合物４）の製造
化合物２（９５６ｍｇ）に６ｍｏｌ／ｌ塩酸（３４２μｌ）、２−プロパノール（３０ｍｌ）、メタノール（３０ｍｌ）を加え、約８０℃にて加温溶解した。放冷後、減圧下溶媒を留去し、残留物を２−プロパノールで再結晶することにより、目的物（収量９４７ｍｇ：収率９３％）を得た。【００４５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．１４（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．９４（１Ｈ，ｓ），７．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０），７．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．０），７．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４），６．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），５．１３−５．０７（１Ｈ，ｍ），４．２９−４．２３（２Ｈ，ｍ），３．８３（３Ｈ，ｓ），３．７８（３Ｈ，ｓ），３．５８−３．４６（３Ｈ，ｍ），３．４０−３．２６（６Ｈ，ｍ），２．０７−１．９０（４Ｈ，ｍ），１．８５−１．６５（４Ｈ，ｍ）【００４６】
ピペリジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル  メタンスルホン酸塩（化合物５）の製造
化合物１（９５１ｍｇ）にメタンスルホン酸（１３７μｌ）、２−プロパノール（２０ｍｌ）、メタノール（５ｍｌ）を加え、約８０℃にて加温溶解した。放冷後、減圧下溶媒を留去し、残留物を２−プロパノール−メタノール系にて再結晶することにより、目的物（収量１０７８ｍｇ：収率９５％）を得た。【００４７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：９．７８（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．９３（１Ｈ，ｓ），７．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），７．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．２），７．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８），６．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），５．１３−５．０９（１Ｈ，ｍ），４．２４（２Ｈ，ｂｒ  ｓ），３．８３（３Ｈ，ｓ），３．７８（３Ｈ，ｓ），３．５５−３．４０（４Ｈ，ｍ），３．３８−３．３０（４Ｈ，ｍ），３．０６−２．９４（２Ｈ，ｍ），２．２９（３Ｈ，ｓ），２．０８−２．０２（２Ｈ，ｍ），１．８５−１．６５（６Ｈ，ｍ）【００４８】
（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イルエステル  メタンスルホン酸塩（化合物６）の製造
化合物２（１０２９ｍｇ）にメタンスルホン酸（１４４μｌ）、２−プロパノール（２０ｍｌ）、メタノール（１０ｍｌ）を加え、約８０℃にて加温溶解した。放冷後、減圧下溶媒を留去し、残留物を２−プロパノール−メタノール系にて再結晶することにより、目的物（収量６９６ｍｇ：収率５７％）を得た。【００４９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１１．３２（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），５．１８−５．１２（１Ｈ，ｍ），４．２９（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），３．９５（３Ｈ，ｓ），３．９３（２Ｈ，ｂｒ  ｓ），３．９１（３Ｈ，ｓ），３．６５−３．５２（４Ｈ，ｍ），３．５０−３．３８（２Ｈ，ｍ），３．３３−３．２５（２Ｈ，ｍ），２．７８（３Ｈ，ｓ），２．４８−２．３０（２Ｈ，ｍ），２．１５−２．０５（２Ｈ，ｍ），２．００−１．８７（４Ｈ，ｍ），１．６５−１．５５（２Ｈ，ｍ）【００５０】
アゼチジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（化合物７）の製造
化合物２と同様にして、アゼチジンおよびトリエチルアミンを用いて（製造工程４）に従って反応させ、目的物（収率７４％）を得た。【００５１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３），６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），５．０７−４．９８（１Ｈ，ｍ），３．９５（３Ｈ，ｓ），３．９１（３Ｈ，ｓ），３．５９−３．５０（２Ｈ，ｍ），３．３５（４Ｈ，ｔ−ｌｉｋｅ，Ｊ＝７．１），３．３１−３．２２（２Ｈ，ｍ），３．２６（２Ｈ，ｓ），２．１４（２Ｈ，ｑｕｉｎｔ−ｌｉｋｅ，Ｊ＝７．１），２．０８−１．９７（２Ｈ，ｍ），１．９２−１．７９（２Ｈ，ｍ）【００５２】
アゼチジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル  メタンスルホン酸塩（化合物８）の製造
化合物７（３００ｍｇ）をメタノール（２ｍＬ）に懸濁し、１ｍｏｌ／ｌメタンスルホン酸（メタノール溶液）（６３０μｌ）を加え溶解した。減圧下溶媒を留去し、残留物にエーテルを加え粉末化することにより、目的物（収量３４５ｍｇ：収率９５％）を得た。【００５３】
ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：４６８［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１１．８０（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），５．１７−５．０８（１Ｈ，ｍ），４．６３−４．５２（２Ｈ，ｍ），４．１５−４．０２（４Ｈ，ｍ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．６０−３．５０（２Ｈ，ｍ），３．３４−３．２４（２Ｈ，ｍ），２．８７−２．７５（１Ｈ，ｍ），２．８１（３Ｈ，ｓ），２．５６−２．４１（１Ｈ，ｍ），２．１２−２．０２（２Ｈ，ｍ），１．９７−１．８５（２Ｈ，ｍ）【００５４】
ピロリジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（化合物９）の製造
化合物２と同様にして、ピロリジンおよびトリエチルアミンを用いて（製造工程４）に従って反応させ、目的物（収率７４％）を得た。【００５５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３），６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），５．１０−５．０２（１Ｈ，ｍ），３．９５（３Ｈ，ｓ），３．９１（３Ｈ，ｓ），３．６２−３．５０（２Ｈ，ｍ），３．３７（２Ｈ，ｓ），３．３２−３．２２（２Ｈ，ｍ），２．７２−２．５８（４Ｈ，ｍ），２．１０−１．９９（２Ｈ，ｍ），１．９４−１．７８（６Ｈ，ｍ）【００５６】
ピロリジン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル  メタンスルホン酸塩（化合物１０）の製造
化合物９（３００ｍｇ）をメタノール（３ｍｌ）に懸濁し、１ｍｏｌ／ｌメタンスルホン酸（メタノール溶液）（６２０μｌ）を加え溶解した。この溶解液を氷冷下攪拌しながらエーテル（５０ｍｌ）−２−プロパノ−ル（１０ｍｌ）の混液に加えることにより、目的物（収量３４２ｍｇ：収率９５％）を得た。【００５７】
ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：４８２［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１１．５８（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），７．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），５．１８−５．０８（１Ｈ，ｍ），４．１１（２Ｈ，ｓ），４．０５−３．９１（２Ｈ，ｂｒ  ｍ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．６１−３．４９（２Ｈ，ｍ），３．３５−３．２２（２Ｈ，ｍ），３．１８−３．０１（２Ｈ，ｂｒ），２．７７（３Ｈ，ｓ），２．２７−１．８５（８Ｈ，ｍ）【００５８】
（２−メチル−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（化合物１１）の製造
化合物２と同様にして、２−メチル−ピペリジンおよびトリエチルアミンを用いて（製造工程４）に従って反応させ、目的物（収率７３％）を得た。【００５９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：７．３６（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３），６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），５．０９−５．００（１Ｈ，ｍ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．６０−３．４８（２Ｈ，ｍ），３．４１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），３．３４−３．２２（２Ｈ，ｍ），２．９１−２．８２（１Ｈ，ｍ），２．６２−２．４７（２Ｈ，ｍ），２．０９−１．９８（２Ｈ，ｍ），１．８１−１．８０（２Ｈ，ｍ），１．７７−１．５０（４Ｈ，ｍ），１．３８−１．２１（２Ｈ，ｍ），１．０８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３）【００６０】
（２−メチル−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル  メタンスルホン酸塩（化合物１２）の製造
化合物１１（３１２ｍｇ）をメタノール（２ｍｌ）に懸濁し、１ｍｏｌ／ｌメタンスルホン酸（メタノール溶液）（６１０μｌ）を加え溶解した。減圧下溶媒を留去し、残留物にエーテルを加え粉末化することにより、目的物（収量３２０ｍｇ：収率８６％）を得た。【００６１】
ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：５１０［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１０．８４（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．３８（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），７．１４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．０），７．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０），６．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３），６．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），５．１５−５．０６（１Ｈ，ｍ），４．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８．３），４．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８．３），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．７５−３．６４（１Ｈ，ｍ），３．６３−３．４３（４Ｈ，ｍ），３．３５−３．２４（２Ｈ，ｍ），２．８３（３Ｈ，ｓ），２．１５−２．０３（３Ｈ，ｍ），１．９８−１．７９（６Ｈ，ｍ），１．６２−１．４８（１Ｈ，ｍ），１．４３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３）【００６２】
（３−ヒドロキシメチル−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（化合物１３）の製造
化合物２と同様にして、３−ヒドロキシメチル−ピペリジンおよびトリエチルアミンを用いて（製造工程４）に従って反応させ、目的物（収率９０％）を得た。【００６３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：７．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．５），７．２２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．４，０．５），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），５．０９−５．００（１Ｈ，ｍ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．６７−３．４９（４Ｈ，ｍ），３．３３−３．２２（２Ｈ，ｍ），３．２３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１），２．９０−２．８０（１Ｈ，ｍ），２．７８−２．６７（１Ｈ，ｍ），２．３９−２．１７（２Ｈ，ｍ），２．１０−１．９７（２Ｈ，ｍ），１．９３−１．５５（７Ｈ，ｍ），１．２２−１．０８（１Ｈ，ｍ）【００６４】
（３−ヒドロキシメチル−ピペリジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル  メタンスルホン酸塩（化合物１４）の製造
化合物１３（３３０ｍｇ）をメタノール（３ｍｌ）に懸濁し、１ｍｏｌ／ｌメタンスルホン酸（メタノール溶液）（６３０μｌ）を加え溶解した。減圧下溶媒を留去し、残留物にエーテルを加え粉末化することにより、目的物（収量３４９ｍｇ：収率８９％）を得た。【００６５】
ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：５２６［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１０．４２（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），７．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．０），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），５．１９−５．１０（１Ｈ，ｍ），４．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．８），４．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．８），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．８１−３．６５（２Ｈ，ｍ），３．６１−３．５０（２Ｈ，ｍ），３．４７−３．３８（１Ｈ，ｍ），３．３５−３．２５（２Ｈ，ｍ），３．２０−３．０５（４Ｈ，ｍ），３．０２−２．８９（２Ｈ，ｍ），２．８０（３Ｈ，ｓ），２．１４−１．７８（７Ｈ，ｍ）【００６６】
アゼパン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（化合物１５）の製造
化合物２と同様にして、ヘキサメチレンイミンおよびトリエチルアミンを用いて（製造工程４）に従って反応させ、目的物（収率７５％）を得た。【００６７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：７．３６（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４），５．０８−５．００（１Ｈ，ｍ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．６０−３．５０（２Ｈ，ｍ），３．４１（２Ｈ，ｓ），３．２３−３．２２（２Ｈ，ｍ），２．８２−２．７１（４Ｈ，ｍ），２．０９−１．９８（２Ｈ，ｍ），１．９２−１．８０（２Ｈ，ｍ），１．７２−１．５５（８Ｈ，ｍ）【００６８】
アゼパン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル  メタンスルホン酸塩（化合物１６）の製造
化合物１５（３００ｍｇ）をメタノール（２ｍｌ）に懸濁し、１ｍｏｌ／ｌメタンスルホン酸（メタノール溶液）（５９０μｌ）を加え溶解した。減圧下溶媒を留去し、残留物にエーテルを加え粉末化することにより、目的物（収量３２７ｍｇ：収率９２％）を得た。【００６９】
ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：５１０［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１１．１０（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），５．１７−５．０９（１Ｈ，ｍ），４．１１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．６７−３．５０（４Ｈ，ｍ），３．４２−３．２４（４Ｈ，ｍ），２．８２（３Ｈ，ｓ），２．２０−２．０３（４Ｈ，ｍ），１．９８−１．８２（６Ｈ，ｍ），１．７４−１．６１（２Ｈ，ｍ）【００７０】
アゾカン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（化合物１７）の製造
化合物２と同様にして、ヘプタメチレンイミンおよびトリエチルアミンを用いて（製造工程４）に従って反応させ、目的物（収率７１％）を得た。【００７１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），５．０８−５．００（１Ｈ，ｍ），３．９５（３Ｈ，ｓ），３．９１（３Ｈ，ｓ），３．６０−３．５０（２Ｈ，ｍ），３．３９（２Ｈ，ｓ），３．３４−３．２４（２Ｈ，ｍ），２．７７−２．６５（４Ｈ，ｂｒ），２．０９−１．９９（２Ｈ，ｍ），１．９２−１．８０（２Ｈ，ｍ），１．６８−１．５０（１０Ｈ，ｍ）【００７２】
アゾカン−１−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル  メタンスルホン酸塩（化合物１８）の製造
化合物１７（３００ｍｇ）をメタノール（２ｍｌ）に懸濁し、１ｍｏｌ／ｌメタンスルホン酸（メタノール溶液）（５７０μｌ）を加え溶解した。減圧下溶媒を留去し、残留物にエーテルを加え粉末化することにより、目的物（収量３２７ｍｇ：収率９２％）を得た。【００７３】
ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：５２４［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１０．６０（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），５．１８−５．０９（１Ｈ，ｍ），４．１２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．６９−３．５０（４Ｈ，ｍ），３．４４−３．２２（４Ｈ，ｍ），２．８０（３Ｈ，ｓ），２．１８−１．８２（１０Ｈ，ｍ），１．７８−１．５３（４Ｈ，ｍ）【００７４】
（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（化合物１９）の製造
化合物２と同様にして、４−メチル−ピペラジンおよびトリエチルアミンを用いて（製造工程４）に従って反応させ、目的物（収率６９％）を得た。【００７５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），５．０８−５．００（１Ｈ，ｍ），３．９５（３Ｈ，ｓ），３．９１（３Ｈ，ｓ），３．６０−３．５０（２Ｈ，ｍ），３．３３−３．２１（２Ｈ，ｍ），３．２４（２Ｈ，ｓ），２．７５−２．３６（８Ｈ，ｂｒ  ｍ），２．３０（３Ｈ，ｓ），２．０９−１．９９（２Ｈ，ｍ），１．９２−１．８１（２Ｈ，ｍ）【００７６】
（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル  メタンスルホン酸塩（化合物２０）の製造
化合物１９（２７０ｍｇ）をメタノール（２ｍｌ）に懸濁し、１ｍｏｌ／ｌメタンスルホン酸（メタノール溶液）（５３０μｌ）を加え溶解した。減圧下溶媒を留去し、残留物にエーテルを加え粉末化することにより、目的物（収量２８５ｍｇ：収率８９％）を得た。【００７７】
ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：５１１［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１１．６０−１０．８０（１Ｈ，ｂｒ），７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），５．１０−５．００（１Ｈ，ｍ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．６２−３．４９（４Ｈ，ｍ），３．４１（２Ｈ，ｓ），３．３４−３．２１（２Ｈ，ｍ），３．１８−３．００（６Ｈ，ｍ），２．９０（３Ｈ，ｓ），２．８２（３Ｈ，ｓ），２．１０−１．９９（２Ｈ，ｍ），１．９３−１．８１（２Ｈ，ｍ）【００７８】
モルホリン−４−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル（化合物２１）の製造
化合物２と同様にして、モルホリンおよびトリエチルアミンを用いて（製造工程４）に従って反応させ、目的物（収率７３％）を得た。【００７９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），７．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），５．１０−５．００（１Ｈ，ｍ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．８０−３．７０（４Ｈ，ｍ），３．６０−３．５０（２Ｈ，ｍ），３．３４−３．２０（２Ｈ，ｍ），３．２４（２Ｈ，ｓ），２．６５−２．５４（４Ｈ，ｍ），２．１０−１．９８（２Ｈ，ｍ），１．９３−１．８０（２Ｈ，ｍ）【００８０】
モルホリン−４−イル−アセティック  アシッド  １−［５−［（Ｚ）−２−シアノ−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−ビニル］−チオフェン−２−イル］−ピペリジン−４−イル  エステル  メタンスルホン酸塩（化合物２２）の製造
化合物２１（３００ｍｇ）をメタノール（２ｍｌ）に懸濁し、１ｍｏｌ／ｌメタンスルホン酸（メタノール溶液）（６００μｌ）を加え溶解した。この溶解液を氷冷下攪拌しながらエーテル（５０ｍｌ）に加えることにより、目的物（収量３４０ｍｇ：収率９５％）を得た。【００８１】
ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：４９８［Ｍ＋Ｈ］＋
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１３．００−１１．００（１Ｈ，ｂｒ），７．３７（１Ｈ，ｓ），７．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），７．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２），６．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５），６．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１），５．１９−５．１０（１Ｈ，ｍ），４．１９−３．９７（４Ｈ，ｍ），４．０４（２Ｈ，ｓ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．８０−３．６２（２Ｈ，ｂｒ），３．５８−３．４９（２Ｈ，ｍ），３．３８−３．１７（４Ｈ，ｍ），２．７８（３Ｈ，ｓ），２．１３−２．０３（２Ｈ，ｍ），１．９８−１．８６（２Ｈ，ｍ）【００８２】
実施例２：Ｉｎ  ｖｉｖｏにおける抗がん剤耐性克服効果（経口投与）
６週齢のＢＡＬＢ／ｃ系、雄ヌードマウス（５匹／群）の鼠径部皮下に、ＢＣＲＰ遺伝子導入ヒト大腸がんＨＣＴ１１６細胞（ＨＣＴ１１６／ＢＣＲＰ細胞）（財団法人癌研究会癌化学療法センター  杉本芳一氏より入手）を移植し（２ｘ１０６ｃｅｌｌｓ／０．１ｍｌ／ｍｏｕｓｅ）、１／２ａｂ２（ａは腫瘍の長径、ｂは短径）より求めた推定腫瘍体積が約１００〜１５０ｍｍ３に達した時点より表１乃至表４に示す本発明化合物及び陽性対照化合物として特許文献３（国際公開第２００６／１０６７７８号公報）に開示されている化合物１４（（Ｚ）−２−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−３−｛５−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−チオフェン−２−イル｝−アクリロニトリル塩酸塩：以下、先願化合物１４という）を１日１回、９日間（計９回）にわたり経口投与し、ＣＰＴ−１１（４５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）を１、５、９日目にそれぞれ１日１回（計３回）静脈内投与した。本発明化合物の投与量は０．２０または０．４０ｍｍｏｌ／ｋｇ／ｄａｙ、陽性対照化合物の投与量は０．２３または０．４６ｍｍｏｌ／ｋｇ／ｄａｙとした。なお、本発明の化合物３および化合物５は５％グルコース溶液に溶解し、化合物４および化合物６はブリトンロビンソン緩衝液に溶解し、先願化合物１４は０．１％Ｔｗｅｅｎ  ８０溶液に溶解し、ＣＰＴ−１１は生理食塩水に溶解して投与した。対照群には溶媒のみを投与した。投与開始より２１日目に腫瘍を摘出し重量を測定した後、次式により腫瘍増殖阻止率ＩＲ（％）を求めた。
腫瘍増殖阻止率ＩＲ（％）＝
（１−投与群の平均腫瘍重量／対照群の平均腫瘍重量）×１００
その結果を表１乃至表４に示した。
表１乃至３に示すとおり、本発明のアクリロニトリル誘導体はｉｎ  ｖｉｖｏにおいてもＢＣＲＰを強力に阻害し、極めて優れた抗がん剤耐性克服効果を発揮することが確認された。
また、表４に示した先願化合物１４（Ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて優れた抗がん剤耐性克服効果が確認されている）の結果と比較しても、本発明化合物はさらに顕著な抗がん剤耐性克服効果を奏することが確認された。【００８３】
【表１】
2009072267.tif 000006
【００８４】
【表２】
2009072267.tif 000007
【００８５】
【表３】
2009072267.tif 000008
【００８６】
【表４】
2009072267.tif 000009
【００８７】
実施例３：溶解性
表５に示す本発明化合物又は先願化合物１４（１０ｍｇ）を密封容器に秤量し、水又は５％グルコース液を、終濃度１００ｍｇ／ｍＬになるように添加した。室温で約３０分間撹拌した後、遠心分離にて得た上清中の化合物濃度を高速液体クロマトグラフィーにて定量した。その結果を表５に示した。また、本発明化合物（化合物５、１２、１４、２０）及び先願化合物１４については、生理食塩水に対する溶解性も確認した（溶媒として生理食塩水を添加した以外は、上記と同様にして上清中の化合物濃度を定量した）。
本発明化合物（化合物５、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２）は、先願化合物１４と比較し、水又は５％グルコース液を溶媒として用いた場合において極めて高い溶解性を示した。また、先願化合物１４は生理食塩水に対して低溶解性（１ｍｇ／ｍＬ未満）を示した一方で、本発明化合物（化合物５、１２、１４、２０）は溶媒組成に依存することなく高い溶解性（１００ｍｇ／ｍＬ以上）を示した。
従って、本発明化合物は、極めて高い溶解性を持ち、特に患者に投与する際に輸液組成の制限を受けないという有用な特性を持つことが示唆された。【００８８】
【表５】
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【００８９】
実施例４：
以下に示す成分を混和して、その混和物を打錠した。【００９０】
【表６】
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【国際調査報告】
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