(57)【要約】  本発明者らは、まず、HBV感染Huh-7細胞に対する、下記式（III）で表される化合物の効果を検討し、前記化合物がin vitroにおいて単独で抗HBV作用を有することを見出した。式（III）：2009154248.tif 000051  さらに、遺伝子C型またはA型のHBVを感染させたヒト肝臓を有するキメラマウスにおいて、PEG-IFNによるHBVの複製の抑制効果が、前記式（III）の化合物と併用することにより増強されること、および、遺伝子C型のHBV（野生株およびエンテカビル耐性株）を感染させたヒト肝臓を有するキメラマウスにおいて、エンテカビルによるHBVの複製の抑制効果が、前記式（III）の化合物と併用することにより増強されること、さらに、前記式（III）の化合物は、野生株のHBVであっても、エンテカビルおよび／またはラミブジン耐性株のHBVであっても、抗HBV作用を示すことを明らかにした。
2009154248.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（I）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、HBV感染症を治療または予防するための医薬組成物。
式（I）：
【化１】
2009154248.tif 000039
〔式中、Ａは、−（ＣＨ2）n−を表し、ここでｎは、０〜１０の整数を表し；
Ｂは、−ＣＨ2−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＮＨ2）−、または−Ｃ（＝ＮＯＲ）−を表し、ここでＲは、水素原子、炭素数１〜８の直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル基（炭素数１〜４の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基でモノまたはジ置換されていてもよいアミノ基で置換されていてもよい）を表し；
Ｄは、−（ＣＨ2）m−Ｒ′を表し、ここでｍは、０〜１０の整数を表し、Ｒ′は、水素原子、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、置換されていてもよい複素環式基、置換されていてもよいアリール基、置換されていてもよいヘテロアリール基、−ＯＸ基（ここで、Ｘは、水素原子または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、シクロアルキル基、または置換されていてもよいアリール基を表す）、またはハロゲン原子を表し；
Ｅは、水素原子または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基を表し；
Ｇは、−（ＣＨ2）p−Ｊを表し、ここでｐは、０〜４の整数を表し、Ｊは、水素、ＯＨ基、ＳＨ基、メチルチオ基、カルボキシル基、カルバモイル基、アミノ基、グアニジノ基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、シクロアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、置換されていてもよいアリール基、置換されていてもよい複素環式基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を表し；
結合Ｑは、単結合または二重結合を表し；そして
Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は、同一又は異なって、水酸基、アミノ基（炭素数１〜４の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基でモノまたはジ置換されていてもよい）、−ＯＬ、直鎖又は分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基を表し、ここでＬは、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基を示す。〕
【請求項２】
前記化合物が、以下の式（II）〜（XII）のいずれかに表される化合物、またはそれらのその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の医薬組成物。
式(II)
【化２】
2009154248.tif 000040
式(III)
【化３】
2009154248.tif 000041
式(IV）
【化４】
2009154248.tif 000042
式(V）
【化５】
2009154248.tif 000043
式(VI）
【化６】
2009154248.tif 000044
式(VII）
【化７】
2009154248.tif 000045
式(VIII）
【化８】
2009154248.tif 000046
式(IX）
【化９】
2009154248.tif 000047
式(X）
【化１０】
2009154248.tif 000048
式(XI）
【化１１】
2009154248.tif 000049
式(XII）
【化１２】
2009154248.tif 000050
【請求項３】
HBV感染症が、B型肝炎、肝硬変、または肝癌である、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
対象に治療上有効量の請求項１の式（I）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する段階を含む、HBV感染症を治療または予防する方法。
【請求項５】
HBV感染症を治療または予防するための医薬組成物を調製するための、請求項１の式（I）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なHBV感染症を治療または予防するための医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｂ型肝炎ウイルス（HBV）は不完全２本鎖DNAウイルスで、ヘパドナウイルスに属し、その感染は主要な世界的健康問題の一つである。また、感染者数は全世界で３億５千万人、わが国での感染率は約１％程度であると考えられており、約１５０万人の感染者が存在すると推定されている。東南アジアを中心として罹患率は非常に高く、依然として大きな問題となっている。B型急性肝炎は、多くの場合自然治癒するが、稀に劇症肝炎を引き起こす。一旦慢性化すると、慢性肝炎から肝硬変、肝細胞癌へと進展していく症例が存在する。日本においてHBV感染は、ほとんどの場合が母児感染によるものであったが、近年では、HBs抗原陽性の妊婦からの出生児には、ワクチン投与が行われており、新たな母児感染例は稀となった。しかし、最近では、若年者の性行為感染症としてのB型急性肝炎が増加し、一部の症例で慢性化し（非特許文献１）、肝機能異常が持続し、慢性肝炎、肝硬変、肝細胞癌へと移行する。【０００３】
臨床病態として、同じHBV持続感染者であっても、トランスアミナーゼの変動が激しく、早期に肝硬変に進行し、さらには肝細胞癌にまで進展する例と、トランスアミナーゼが正常を維持し病態がほとんど進行しない例が見られる。このように宿主の病態に大きく差が生じるのには、いまだ明確な回答は得られていないが、ウイルス側の要因と宿主側の要因が関与していることは充分に考えられる。近年、そのウイルス側の要因として注目されているのがHBV遺伝子型（genotype）である（非特許文献２）。HBV genotypeはこれまでにＡ〜Ｈに分類され、その地域特異性や臨床的差異が報告されている（非特許文献３）。【０００４】
現在のところHBV感染症に対する治療法は、インターフェロン（IFN）療法と核酸アナログ製剤（ラミブジン[LMV]、アデフォビル[ADV]、エンテカビル[ETV]）が主体である。HBe抗原陽性症例に対するIFNの著効率は投与期間によって差はあるものの1/3以下である。核酸アナログ製剤LMVのHBe抗原陰性化率は投与期間を伸ばすことで増加するが、この治療の問題点は投与中止により肝炎の再燃を起す可能性が高いこと、薬剤耐性株の出現にある。LMV耐性ウイルス出現により肝炎が再燃した場合は、IFN、他の核酸アナログ製剤（ADV、ETV）による治療が可能である。この内IFN療法はある程度肝炎のコントロールが可能であるが、副作用の出現と投与期間が限定されている点が問題となっている。LMV耐性ウイルスにはADVやETVなどを用いるが、同じ核酸アナログであることからADVやETVにも耐性を示すウイルスが既に出現している。いずれにせよ耐性ウイルス出現の問題は今後の課題であり、耐性ウイルスの出現しない薬剤の開発が望まれている。【０００５】
後述の式（I）で表される化合物については、そのいくつかが、抗真菌感染症や免疫疾患の治療剤として有用であることが特許文献１（WO98/56755）に、そのいくつかが、抗HCV作用を有することが特許文献２（WO2004/071503）及び特許文献３（WO2005/005372）に、また、そのいくつかをインターフェロンと併用することによる抗HCV効果が特許文献４（WO2007/132882）に、さらに、そのいくつかがスフィンゴミエリンの生合成過程を遮断し、抗HCV効果を有すると共に抗HIV効果や抗インフルエンザウイルス効果が期待できることが特許文献５（WO2006/016657）に、それぞれ記載されているが、抗HBV効果を有することについては、記載も示唆もない。【０００６】
なお、本出願の発明に関連する先行技術文献情報を以下に示す。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】WO98/56755
【特許文献２】WO2004/071503
【特許文献３】WO2005/005372
【特許文献４】WO2007/132882
【特許文献５】WO2006/016657
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ozasa A, Tanaka Y, Orito E and Mizokami M. Influence of Genotypes and Precore Mutations on Fulminant or Chronic Outcome of Acute Hepatitis B Virus Infection. Hepatology. 2006;44:326-334.
【非特許文献２】Miyakawa Y, Mizokami M. Classifying hepatitis B virus genotypes. Intervirology 2003;46:329-338.
【非特許文献３】Orito E, Mizokami M, Sakugawa H, et al. A case-control study for clinical and molecular biological differences between hepatitis B viruses of genotypes B and C. Japan HBV Genotype Research Group. Hepatology 2001;33:218-223.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、その目的は、新規なHBV感染症を治療または予防するための医薬組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記の課題を解決するために、鋭意研究を行った。まず、HBV感染Huh-7細胞に対する、下記式（III）で表される化合物の抗HBV効果を検討した。その結果、前記化合物の添加により、HBV RNAレベルが減少し、前記化合物がin vitroにおいて単独で抗HBV作用を有することを見出した。
式（III）：
【化１】
2009154248.tif 000003
【００１１】
次に、遺伝子C型またはA型のHBVを感染させたヒト肝臓を有するキメラマウスを用いて、前記式（III）の化合物およびPEG化インターフェロン（PEG-IFN）の抗HBV効果を検討した。その結果、遺伝子C型、A型どちらのHBV感染ヒト肝臓を有するキメラマウスにおいても、PEG-IFNによるHBVの複製の抑制効果が、前記式（III）の化合物と併用することにより増強されることが明らかになった。【００１２】
さらに、遺伝子C型のHBV（野生株およびエンテカビル耐性株）を感染させたヒト肝臓を有するキメラマウスを用いて、前記式（III）の化合物およびエンテカビルの抗HBV効果を検討した。その結果、エンテカビルによるHBVの複製の抑制効果が、前記式（III）の化合物と併用することにより増強されることが明らかになった。【００１３】
さらに、前記式（III）の化合物は、エンテカビルおよび／またはラミブジンに対して耐性を有するHBVに対しても、単独で用いた場合でも、PEG-IFNまたはエンテカビルと併用した場合でも、野生株のHBVに対するのと同様に、抗HBV効果を示すことが明らかとなった。【００１４】
即ち、本発明者らは、式（III）の化合物が単独でHBV感染症の新規治療剤となりうること、および、前記式（III）の化合物およびインターフェロン、または、前記式（III）の化合物および核酸アナログを併用することにより、より高いHBV複製阻害効果が得られることを見出し、これにより本発明を完成するに至った。【００１５】
本発明は、より具体的には以下の〔１〕〜〔８〕を提供するものである。
〔１〕  以下の式（I）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、HBV感染症を治療または予防するための医薬組成物。
式（I）：
【化２】
2009154248.tif 000004
〔式中、Ａは、−（ＣＨ2）n−を表し、ここでｎは、０〜１０の整数を表し；
Ｂは、−ＣＨ2−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＮＨ2）−、または−Ｃ（＝ＮＯＲ）−を表し、ここでＲは、水素原子、炭素数１〜８の直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル基（炭素数１〜４の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基でモノまたはジ置換されていてもよいアミノ基で置換されていてもよい）を表し；
Ｄは、−（ＣＨ2）m−Ｒ′を表し、ここでｍは、０〜１０の整数を表し、Ｒ′は、水素原子、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、置換されていてもよい複素環式基、置換されていてもよいアリール基、置換されていてもよいヘテロアリール基、−ＯＸ基（ここで、Ｘは、水素原子または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、シクロアルキル基、または置換されていてもよいアリール基を表す）、またはハロゲン原子を表し；
Ｅは、水素原子または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基を表し；
Ｇは、−（ＣＨ2）p−Ｊを表し、ここでｐは、０〜４の整数を表し、Ｊは、水素、ＯＨ基、ＳＨ基、メチルチオ基、カルボキシル基、カルバモイル基、アミノ基、グアニジノ基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、シクロアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、置換されていてもよいアリール基、置換されていてもよい複素環式基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を表し；
結合Ｑは、単結合または二重結合を表し；そして
Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は、同一又は異なって、水酸基、アミノ基（炭素数１〜４の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基でモノまたはジ置換されていてもよい）、−ＯＬ、直鎖又は分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基を表し、ここでＬは、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基を示す。〕【００１６】
〔２〕  前記化合物が、以下の式（II）〜（XII）のいずれかに表される化合物、またはそれらのその薬学的に許容される塩である、〔１〕に記載の医薬組成物。
式(II)
【化３】
2009154248.tif 000005
式(III)
【化４】
2009154248.tif 000006
式(IV）
【化５】
2009154248.tif 000007
式(V）
【化６】
2009154248.tif 000008
式(VI）
【化７】
2009154248.tif 000009
式(VII）
【化８】
2009154248.tif 000010
式(VIII）
【化９】
2009154248.tif 000011
式(IX）
【化１０】
2009154248.tif 000012
式(X）
【化１１】
2009154248.tif 000013
式(XI）
【化１２】
2009154248.tif 000014
式(XII）
【化１３】
2009154248.tif 000015
【００１７】
〔３〕  HBV感染症が、B型肝炎、肝硬変、または肝癌である、上記〔１〕または〔２〕に記載の医薬組成物。
〔４〕  前記式（I）の化合物と他の１個以上の抗HBV剤を組み合わせてなる、HBV感染症を治療または予防するための医薬組成物。
〔５〕  他の抗HBV剤と併用することを特徴とする、前記式（I）の化合物を有効成分として含有する、HBV感染症を治療または予防するための医薬組成物。
〔６〕  対象に治療上有効量の前記式（I）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する段階を含む、HBV感染症を治療または予防する方法。
〔７〕  HBV感染症を治療または予防するための医薬組成物を調製するための、前記式（I）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩の使用。
〔８〕  HBV感染症を治療または予防するための方法に使用するための、前記式（I）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１Ａ】HBV  遺伝子C_AT型（野生株）感染細胞Huh-7における薬剤の作用を示す図である。
【図１Ｂ】種々の株のHBVを感染させた細胞Huh-7における薬剤の作用を示す図である。A：ラミブジン高度耐性株、50%増殖抑制＝3.4マイクロモル、B：エンテカビル耐性株、50%増殖抑制＝3.7マイクロモル、C：ラミブジン耐性株、50%増殖抑制＝3.6マイクロモル、Wild：野生株、50%増殖抑制＝3.2マイクロモル
【図２】HBV  遺伝子型C_AT型（野生株）に対する薬剤の作用を示す図である。
【図３】HBV  遺伝子型A型（野生株）に対する薬剤の作用を示す図である。
【図４】HBV  遺伝子型C_AT型（野生株）に対する薬剤の作用を示す図である。
【図５】HBV  遺伝子型C型（エンテカビル耐性株）に対する薬剤の作用を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明は、式（I）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、新規なHBV感染症を治療または予防するための医薬組成物に関する。
【００２０】
下記式（I）で表される化合物は、抗HBV作用を有する。従って、下記式（I）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩は、HBV感染症を治療または予防するための薬剤として有用である。
式（I）：
【化１４】
2009154248.tif 000016
式中、Ａは、−（ＣＨ2）n−を表し、ここでｎは、０〜１０の整数を表し；
Ｂは、−ＣＨ2−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＮＨ2）−、または−Ｃ（＝ＮＯＲ）−を表し、ここでＲは、水素原子、炭素数１〜８の直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル基（炭素数１〜４の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基でモノまたはジ置換されていてもよいアミノ基で置換されていてもよい）を表し；
Ｄは、−（ＣＨ2）m−Ｒ′を表し、ここでｍは、０〜１０の整数を表し、Ｒ′は、水素原子、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、シクロアルキル基、置換されていてもよい複素環式基、置換されていてもよいアリール基、置換されていてもよいヘテロアリール基、−ＯＸ基（ここで、Ｘは、水素原子または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、シクロアルキル基、または置換されていてもよいアリール基を表す）、またはハロゲン原子を表し；
Ｅは、水素原子または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基を表し；
Ｇは、−（ＣＨ2）p−Ｊを表し、ここでｐは、０〜４の整数を表し、Ｊは、水素、ＯＨ基、ＳＨ基、メチルチオ基、カルボキシル基、カルバモイル基、アミノ基、グアニジノ基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、シクロアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、置換されていてもよいアリール基、置換されていてもよい複素環式基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を表し；
結合Ｑは、単結合または二重結合を表し；そして
Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3は、同一又は異なって、水酸基、アミノ基（炭素数１〜４の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基でモノまたはジ置換されていてもよい）、−ＯＬ、直鎖又は分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基を表し、ここでＬは、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、または直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基を示す。
【００２１】
本発明においては、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基とは、特に本明細書中で定義している場合を除き、炭素数１〜１２の直鎖もしくは分岐鎖状の炭化水素基を意味し、好ましくは炭素数１〜７の直鎖もしくは分岐鎖状の炭化水素基を意味する。例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔ−ブチル基、ペンチル基、ヘプチル基などが挙げられる。またシクロアルキル基とは、炭素数３〜８の環状炭化水素基を意味する。たとえば、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロヘキセニル基などが挙げられる。また、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基は、炭素数２〜８の直鎖もしくは分岐鎖状の炭化水素基であって、少なくとも１の二重結合を含むものを意味する。例えば、ビニル基、１−プロペニル基、アリル基、２−ブテニル基、２−エテニル−２−ブテニル基などが挙げられる。直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基とは、炭素数２〜８の直鎖もしくは分岐鎖状の炭化水素基であって、少なくとも１の三重結合を含むものを意味する。例えば、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、１−ブチニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基、２−ペンチニル基、３−ペンチニル基、４−ペンチニル基、２−ヘキシニル基、４−ヘキシニル基、２−デシニル基、６，６−ジメチル−ヘプタ−２，４−ジイン−１−イル基などが挙げられる。
【００２２】
また、本明細書において記載される複素環式基とは、窒素原子、硫黄原子、および酸素原子から独立して選択されるヘテロ原子１〜４個（好ましくは１または２個）を環員として含む４〜６員の単環または７〜１０員の二環の環式基（好ましくは単環基）であって、少なくとも１の二重結合を有していてもよい基を意味し、具体的にはピラン、モルホリン、テトラヒドロフラン、ジヒドロフラン、テトラヒドロピラン、ジヒドロピラン、１，３−ジオキサン、ピペラジン、ピペリジン、チオモルホリンなどから誘導される基が挙げられる。
【００２３】
本明細書において記載されるアリール基は、芳香族性を有する単環または多環の炭化水素基を意味する。具体的には、ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、フルオレンなどから誘導される基を挙げることができる。
【００２４】
本明細書において記載されるヘテロアリール基は、芳香族性を有し、窒素原子、硫黄原子、および酸素原子から独立して選択されるヘテロ原子１〜４個（好ましくは１または２個）を環員として含む４〜６員の単環または７〜１０員の二環の環状基（好ましくは単環基）を意味する。具体的には、フラン、チオフェン、ピロール、ジアゾール、ピリジン、チアゾール、イミダゾール、ピリミジン、インドール、キノリン、オキサゾール、イソキサゾール、ピラジン、トリアゾール、チアジアゾール、テトラゾール、ピラゾールなどから誘導される基を挙げることができる。
【００２５】
本明細書において記載されるアラルキル基は、上記のアリール基で置換されている上記の直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基を意味し、具体的にはベンジル基、フェネチル基などを挙げることができる。
【００２６】
本明細書において記載されるヘテロアリールアルキル基は、上記のヘテロアリール基で置換されている上記の直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基を意味する。
【００２７】
本明細書において記載されるアシル基は、カルボニル基を介して結合している、上記の直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、または複素環式基を意味する。
【００２８】
本明細書において記載される「置換されていてもよい」は、特に本明細書中で定義されている場合を除き、このように付記されている基が、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルコキシ基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニルオキシ基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニルオキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、シアノ基、ニトロ基、トリフルオロメチル基、トリフルオロメトキシ基、ハロゲン原子、アリール基、アリールオキシ基、ヘテロアリール基、ヘテロアリールオキシ基、アラルキル基、アラルキルオキシ基、アミノ基（直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基でモノまたはジ置換されていてもよい）、アシル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキルスルホニル基、カルバモイル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキルチオ基、カルボキシル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキルカルボニル基、ホルミル基、アミノスルホニル基などの基で置換されていてもよいことを意味する。これらの置換基に含まれるアリールおよびヘテロアリール部分は、更にハロゲン原子、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルコキシ基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニルオキシ基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキニルオキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、シアノ基、ニトロ基、トリフルオロメチル基、トリフルオロメトキシ基、ハロゲン原子、アリール基、アリールオキシ基、ヘテロアリール基、アラルキル基、アラルキルオキシ基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキル基でモノもしくはジ置換されていてもよいアミノ基、アシル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキルスルホニル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルコキシ基、カルバモイル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキルチオ基、カルボキシル基、直鎖もしくは分岐鎖状のアルキルカルボニル基、ホルミル基、アミノスルホニル基などによってモノ、ジもしくはトリ置換されていてもよい。
【００２９】
また、式（I）で表される化合物の薬学的に許容される塩は、当該化合物と、医薬品の製造に使用可能である酸または塩基とを接触させることにより製造される。上記塩としては薬理学的に許容されるものであれば特に限定されず、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸などの鉱酸との塩；酢酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ショウノウスルホン酸などの有機酸との塩；ナトリウム、カリウム、カルシウムなどのアルカリ金属又はアルカリ土類金属などとの塩などを挙げることができる。
【００３０】
また、当該塩には当該化合物が形成していてもよい水和物もしくは溶媒和物を含む。式（I）で表される化合物がフリー体として得られる場合、当該化合物が形成していてもよい塩またはそれらの水和物もしくは溶媒和物の状態に、常法に従って変換することができる。
【００３１】
本発明の式（I）で表される化合物は、国際公開公報WO2004/071503、WO2005/005372、またはWO2006/016657に記載された方法で合成することができる。
【００３２】
本発明の式（I）で表される化合物の好ましい例としては、以下の化合物を挙げることができる。
【化１５】
2009154248.tif 000017
【化１６】
2009154248.tif 000018
【化１７】
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【化１８】
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【化１９】
2009154248.tif 000021
【化２０】
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【化２１】
2009154248.tif 000023
【化２２】
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【化２３】
2009154248.tif 000025
【化２４】
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【００３３】
本発明の式（I）で表される化合物のより好ましい例としては、式（II）〜（XII）のいずれかに表される化合物を挙げることができる。
式(II)
【化２５】
2009154248.tif 000027
式(III)
【化２６】
2009154248.tif 000028
式(IV）
【化２７】
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式(V）
【化２８】
2009154248.tif 000030
式(VI）
【化２９】
2009154248.tif 000031
式(VII）
【化３０】
2009154248.tif 000032
式(VIII）
【化３１】
2009154248.tif 000033
式(IX）
【化３２】
2009154248.tif 000034
式(X）
【化３３】
2009154248.tif 000035
式(XI）
【化３４】
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式(XII）
【化３５】
2009154248.tif 000037
【００３４】
本明細書において「治療」という記載は、本発明の薬物を被験者に投与することによって、HBVを消滅あるいは軽減させること、さらなるHBVの広がりを抑制すること、HBVの感染による症状を軽減することを意味し、具体例としては、HBVの排除、肝炎の沈静化、ならびに肝炎から肝硬変、肝繊維化および肝癌への進展の阻止および軽減が挙げられる。また「予防」という記載は、HBVが感染する前に、被験者に投与され、HBVの感染を防いだり、増殖を抑制させることを意味する。
【００３５】
本明細書において「HBV」という記載は、B型肝炎を発症させる能力を持つウイルスの全てを意味する。HBVは現在A〜Hまでの遺伝子型が知られているが、本発明の薬剤の治療および予防対象としては、特に限定されずこれら全ての遺伝子型が含まれる。
【００３６】
本明細書において、「HBV感染症」という記載は、前記HBVのヒトを含む生体への感染によって引き起こされる症状の全てを意味し、具体例としては、B型肝炎、肝硬変、肝繊維化、肝癌などが挙げられる。B型肝炎はさらに、慢性肝炎、急性肝炎、劇症肝炎に分類される。肝癌の具体例としては、肝細胞癌が挙げられる。生体がHBV感染症であるか否かは、例えば、血液中のHBs抗原の検出、血液中のHBe抗原の検出、血液中のHBV-DNA量の測定および血液中のHBVのDNAポリメラーゼ量の測定、ならびにこれらの組み合わせにより判断することができる。
【００３７】
本発明の化合物は、そのまま、又は、その薬理学的に許容される塩として医薬に使用することができる。上記塩としては薬理学的に許容されるものであれば特に限定されず、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸などの鉱酸との塩；酢酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ショウノウスルホン酸などの有機酸との塩；ナトリウム、カリウム、カルシウムなどのアルカリ金属又はアルカリ土類金属などとの塩などを挙げることができる。
【００３８】
上記医薬製剤に含まれる有効成分化合物の量は、特に限定されず広範囲に適宜選択されるが、例えば、０．１〜９９．５重量％、好ましくは０．５〜９０重量％である。
【００３９】
本発明の化合物を、常法に従って主薬として、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤などの医薬の製剤技術分野において通常使用し得る既知の補助剤を用いて製剤化することができる。錠剤の形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で従来公知のものを広く使用でき、例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、グルコース、尿素、澱粉、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸などの賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロップ、グルコース液、澱粉液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドンなどの結合剤；乾燥澱粉、アルギン酸ナトリウム、寒天末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、澱粉、乳糖などの崩壊剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油などの崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩類、ラウリル硫酸ナトリウムなどの吸収促進剤；グリセリン、澱粉などの保湿剤；澱粉、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸などの吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、硼酸末、ポリエチレングリコールなどの潤沢剤などが例示できる。
【００４０】
さらに錠剤は、必要に応じ、通常の剤皮を施した錠剤、例えば、糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。丸剤の形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で従来公知のものを広く使用でき、例えばグルコース、乳糖、カカオバター、澱粉、硬化植物油、カオリン、タルクなどの賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノールなどの結合剤；ラミナラン寒天などの崩壊剤などが例示できる。坐剤の形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で従来公知のものを広く使用でき、例えばポリエチレングリコール、カカオバター、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセリドなどを挙げることができる。注射剤として調製される場合には、液剤および懸濁剤は殺菌され、かつ血液と等張であるのが好ましく、これら液剤、乳剤および懸濁剤の形態に成形するに際しては、希釈剤としてこの分野で慣用されているものをすべて使用でき、例えば、水、エタノール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類などを挙げることができる。なお、この場合、等張性の溶液を調製するのに充分な量の食塩、グルコース、あるいはグリセリンを医薬製剤中に含有せしめてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤などを添加してもよい。さらに必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤などや他の医薬品を含有することもできる。
【００４１】
上記医薬組成物は、投与単位形態で投与することが好ましく、経口投与、組織内投与（皮下投与、筋肉内投与、静脈内投与など）、局所投与（経皮投与など）又は経直腸的に投与することができる。上記医薬組成物は、これらの投与方法に適した剤型で投与されることは当然である。
【００４２】
本発明の化合物など又はそれの製薬上許容され得る塩を医薬として投与する場合、抗ウイルス剤としての用量は、年齢、体重などの患者の状態、投与経路、病気の性質と程度などを考慮した上で調整することが望ましいが、通常は、ヒトについては、成人に対して本発明の有効成分量として、一日当たり、0.1〜2000mgの範囲である。上記範囲未満の用量で足りる場合もあるが、逆に上記範囲を超える用量を必要とする場合もある。多量に投与するときは、一日数回に分割して投与することが望ましい。
【００４３】
上記経口投与は、固形、粉末又は液状の用量単位で行うことができ、例えば、末剤、散剤、錠剤、糖衣剤、カプセル剤、ドロップ剤、舌下剤、その他の剤型などにより行うことができる。
【００４４】
上記組織内投与は、例えば、溶液や懸濁剤などの皮下、筋肉内又は静脈内注射用の液状用量単位形態を用いることによって行うことができる。これらのものは、本発明の化合物又はその製薬上許容される塩の一定量を、例えば、水性や油性の媒体などの注射目的に適合する非毒性の液状担体に懸濁又は溶解し、ついで上記懸濁液又は溶液を滅菌することにより製造される。
【００４５】
上記局所投与（経皮投与など）は、例えば、液剤、クリーム剤、粉末剤、ペースト剤、ゲル剤、軟膏剤などの外用製剤の形態を用いることによって行うことができる。これらのものは、本発明の化合物又はその製薬上許容される塩の一定量を、外用製剤の目的に適合する香料、着色料、充填剤、界面活性剤、保湿剤、皮膚軟化剤、ゲル化剤、担体、保存剤、安定剤などのうちの一種以上と組み合わせることにより製造される。
【００４６】
上記経直腸的投与は、本発明の化合物又はその製薬上許容される塩の一定量を、例えば、パルミチン酸ミリスチルエステルなどの高級エステル類、ポリエチレングリコール、カカオ脂、これらの混合物などからなる低融点固体に混入した座剤などを用いて行うことができる。
【００４７】
上記投与は、例えば、溶液や懸濁剤などの皮下、筋肉内又は静脈内注射用の液状用量単位形態を用いることによって行うことができる。これらのものは、本発明の化合物又はその製薬上許容される塩の一定量を、例えば、水性や油性の媒体などの注射の目的に適合する非毒性の液状担体に懸濁又は溶解し、ついで上記懸濁液又は溶液を滅菌することにより製造される。
【００４８】
本発明の抗HBV剤は、単独で用いても他の抗HBV剤と併用してもよい。
したがって、本発明は、上記式（I）の化合物と他の１個以上の抗HBV剤を組み合わせてなる、HBV感染症を治療または予防するための医薬組成物もまた提供する。該医薬組成物は、式（I）の化合物と他の抗HBV剤をHBV感染症の治療または予防において同時に、別々に、又は順次に投与するために組み合わせた医薬組成物であればよい。本発明の医薬組成物は、式（I）の化合物と他の抗HBV剤を同一医薬組成物中に含有する配合剤であってもよいし、また式（I）の化合物と他の抗HBV剤を別々の医薬組成物に含有するものであってもよい。なお、配合剤中の式（I）で表される化合物とインターフェロンとの配合割合は、予め一定の割合とすることも、症状の軽重や医師の判断などにより、投与時に任意の割合に変更することもできる。また、式（I）の化合物を含有する医薬組成物と他の抗HBV剤を含有する医薬組成物をキットとしたものであってもよい。
【００４９】
ここで、上記の「組み合わせてなる、HBV感染症を治療または予防するための医薬組成物」において、式（I）の化合物と他の抗HBV剤が別々の医薬組成物に含有される場合には、２個以上の別個の製剤の剤型は同じであってもよいし、別々であってもよい。例えば、いずれか一つ又は複数が、非経口製剤、注射剤、点滴剤、静脈内点滴剤であってもよい。
【００５０】
また、本発明は、他の抗HBV剤と併用することを特徴とする、式（I）の化合物を有効成分として含有する、HBV感染症を治療または予防するための医薬組成物に関する。本医薬組成物を他の抗HBV剤と併用する際には、他の抗HBV剤と同時に投与してもよいし、他の抗HBV剤の投与前または投与後に本医薬組成物を投与してもよい。
【００５１】
ここで、「他の抗HBV剤」としては、インターフェロン（IFN）や、核酸アナログ（ラミブジン[LMV]、アデフォビル[ADV]、エンテカビル[ETV]）などを挙げることができるが、好ましくはインターフェロンおよびエンテカビルであり、更に好ましくは、PEG化されたインターフェロンおよびエンテカビルである。
【００５２】
本発明において、「核酸アナログ」という記載は、分子内に核酸（アデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル）の部分構造を有し、HBVのDNA合成を阻害する作用を有する化合物の総称を意味する。
【００５３】
ラミブジンは、例えば、EP382526に記載の方法に従い合成して使用することができる。アデフォビルは、例えば、EP206459に記載の方法に従い合成して使用することができる。アデフォビルは、ジ（ピバロイルメチル）エステル、すなわちアデフォビルジピボキシル（dipivoxil）などのプロドラッグとして用いてもよい。これらのプロドラッグは、例えば、EP481214に記載の方法に従い合成して使用することができる。エンテカビルは、例えば、EP481754に記載の方法に従い合成して使用することができる。また、試薬等として市販されている核酸アナログは、それを購入して、医薬品として承認されている核酸アナログは、その製剤を入手して使用することもできる。例えば、ラミブジンおよびアデフォビルピボキシルは、グラクソ・スミスクライン株式会社が、エンテカビルは、水和物としてブリストル・マイヤーズ株式会社が、それぞれ製造販売している。
【００５４】
核酸アナログまたはインターフェロンと式（I）の化合物を併用することで、核酸アナログに耐性を示すHBVに対しても有効な治療方法または予防方法が提供できる。すなわち、上記式（I）の化合物と核酸アナログまたはインターフェロンを組み合わせてなる、HBV感染症を治療または予防するための医薬組成物は、核酸アナログに耐性を示すHBVに対しても有効な医薬組成物である。
【００５５】
さらに、式（I）の化合物を、それ自体で、核酸アナログに耐性を示すHBVによるHBV感染症を治療または予防するための医薬組成物とすることもできる。
【００５６】
ここで、HBVが耐性を示す核酸アナログは、１であっても２以上でもよい。たとえば、HBVは、ラミブジンおよびエンテカビルのいずれか１方に耐性を示してもよく、ラミブジンおよびエンテカビルの両方に耐性を示してもよい。
【００５７】
なお、「核酸アナログに耐性を示すHBV」という記載は、そのHBVのDNAから産生されるアミノ酸配列が、同じ遺伝子型の野生株のHBVのDNAから産生されるアミノ酸配列と比較して、１以上の変異（置換、付加、および／または欠失）があるHBVを意味する。HBVは、この変異を引き起こすことで、核酸アナログに暴露されることによるプレッシャーを回避し、核酸アナログに対する耐性を獲得できる。置換、付加、および／または欠失を起こすアミノ酸配列中の位置または数の違いなど、変異の起こし方の違いにより、HBVが耐性を示す核酸アナログに違いが生じ得るが、本発明の「核酸アナログに耐性を示すHBV」には、この違いによらず、１以上変異を有するHBVの全てが含まれる。
【００５８】
本発明において、「インターフェロン」という記載は、ウイルス、二本鎖RNA、レクチンなどによって動物細胞から誘発される抗ウイルス作用をもったタンパク質または糖タンパク質の総称を意味する。抗ウイルス作用の他、細胞増殖抑制作用、免疫調節作用を有する。産生細胞、特異的受容体との結合能、生物・物理化学的性質から数種のタイプに分類され、主要なものとしてはα、β、γがあるが、このほか、IFNω、IFNτの存在が知られている。さらにインターフェロンαには、20種以上のサブタイプの存在が知られている。現在、天然型のみならず、PEG化、コンセンサスインターフェロン等の各種遺伝子組み換え型の製剤が開発・上市されている。
【００５９】
本発明におけるインターフェロンは、上記タイプのいずれでもよいが、好ましくはαまたはγである。また、本発明におけるインターフェロンは、式（I）の化合物との併用でHBV増殖抑制能を増強する限り、天然型、人工的に変異された遺伝子組み換え型、天然に存在する変異体、融合タンパク質、又はこれらの断片などのいずれであってもよい。また、本発明のインターフェロンはPEG（ポリエチレングリコール）化されていてもよい。インターフェロンのPEG化は当業者に公知の方法（特許２９８０５６９号)により行うことができる。PEG化されたインターフェロンとしては、例えば、ペグインターフェロン−α−２ａ（ペガシス（登録商標））、ペグインターフェロンα−２ｂ（ペグイントロン（登録商標））が挙げられる。本願実施例２〜５で用いているPEG-IFNは、ペグインターフェロン−α−２ａを指す。さらに、本発明のインターフェロンは、アルブミンと結合したインターフェロンであってもよい。アルブミンと結合したインターフェロンとしては、例えば、アルブインターフェロン  α−２ｂ（アルブフェロン（登録商標））が挙げられる。
【００６０】
本発明におけるインターフェロンの由来に特に制限はなく、例えば、ヒト、チンパンジー、オランウータン、イヌ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ロバ、ブタ、ネコ、マウス、モルモット、ラット、ウサギなどを由来とすることができるが、これらに限らずその他の哺乳動物を由来とすることができる。好ましくはヒト由来のインターフェロンである。
【００６１】
ヒトインターフェロンα又はγのアミノ酸配列は公知であり、例えば、インターフェロンαであればGenBank:NM_0240013に記載のアミノ酸配列を用いることができ、インターフェロンγであればGenBank:NM_000619に記載のアミノ酸配列を用いることができる。
【００６２】
また、上記式（I）の化合物と核酸アナログを組み合わせてなる、HBV感染症を治療または予防するための医薬組成物に、更にインターフェロンを組み合わせてもよい。
【００６３】
なお、本明細書において引用された全ての先行技術文献は、参照として本明細書に組み入れられる。
【実施例】
【００６４】
以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明する。
〔実施例１〕  式(III)の化合物の抗HBV作用
本発明者らは、HBV（遺伝子C_AT型；野生株）感染細胞Huh-7における式(III)の化合物の抗HBV作用を調べた。【００６５】
HBV感染前日に、12穴プレート（FALCON, 353043）に培養液DMEM（SIGMA, D6429）を用いてHuh-7を約100,000細胞播いた。【００６６】
感染当日、Huh-7細胞に対して、HBV-DNA (Sugiyama M, et al. HEPATOLOGY, Vol. 44：915-924, 2006に記載) 0.5μg、FUGENE6（ロシュ・ディアグ, 11 814 443 001） 1.5μL、SEAP 5μL、OPTIMEM （invitrogen, 31985）43μLを均一に混ぜたものを各wellに50μL添加した。さらに式(III)の化合物を終濃度0,3,10,および30μMになるように添加した。【００６７】
3日間、37℃、5％CO2存在下で培養後、各wellから培養上清を回収した。上清中の遊離したDNAを除去するため、DNA分解酵素(DNase)処理を行った。具体的には、培養上清50μL、10倍濃度DNase緩衝液（Promega, M6101）10μL、DNase（Promega, M6101）20μL、滅菌水20μLにて37℃、30分間保温後、反応停止液20μL、滅菌水80μLを添加し、65℃、10分間保温した。【００６８】
HBVの定量はHBV-DNAをリアルタイム-PCR法で測定することにより行った（使用機器：Applied Biosystems, 4318157）。まず、溶出した上記DNase処理後の上清200μLからQIAGEN QIAamp DNA Blood Mini Kit（キアゲン, 51106）を用いてDNAを抽出した（50μL）。このDNA溶液5μLに、滅菌水5μL、Master Mixture 12.5μL、TaqMnProbe HBVSP2溶液0.5μL、PrimerF(HBVS190F)溶液 0.5μL、PrimerR(HBVS703R)溶液 0.5μLを添加した（ここで、HBVS190F (190-207)はGCTCGTGTTACAGGCGGG（配列番号：１）の配列を、HBVS703R (684-709)は、GAACCACTGAACAAATGGCACTAGTA（配列番号：２）の配列を、またHBVSP2はFAM-atgttgcccgtttgtcctctaattccag-TAMRA（配列番号：３）の配列をそれぞれ示す）。また、PCRの条件（95℃、10分の後、（95℃、30秒：60℃、30秒：72℃、45秒）括弧内を35サイクル反応）で処理後、4℃保存し、得られた蛍光シグナルからHBV-DNAのコピー数を算出した。
その結果、式(III)の化合物の50％阻害濃度（IC50）は約３μMであった（図１Ａ）。【００６９】
さらに、HBVの野生株（Wild）と並べて、ラミブジンおよびエンテカビル耐性株（A: L180M+M204V、B: L180M+M204V+T184L、C: M204V(YVDD)）についてHBV増殖抑制効果を同様の方法で評価した。その結果、式（III）の化合物は、HBVがこれらの薬剤に耐性である無しに関係なく、同程度のHBV増殖抑制効果を示した（図１Ｂ）。【００７０】
〔実施例２〕  HBVに感染したキメラマウスにおける式(III)の化合物およびPEG-IFNとの併用による抗HBV効果（その１）
HBV（遺伝子型C_AT型；野生株）に感染させたヒト肝臓を有するキメラマウス（株式会社フェニックスバイオから購入）を用いて、式(III)の化合物の阻害能を調べた。【００７１】
具体的には、表１に従って式(III)の化合物および／またはPEG-IFN（中外製薬株式会社製）を、HBV遺伝子型C型（C_JPNAT、文献Sugiyama）感染マウスに静脈内または皮下注射によって投与し、血液を採取した。【００７２】
【表１】
2009154248.tif 000038
表１において、○は採血ポイント、30はPEG-IFN 30μg/kg、10+30は式(III)の化合物10mg/kg＋PEG-IFN 30μg/kgを投与したことを示している。【００７３】
次に、血清中のHBVを、実施例１の方法で精製し、HBVの定量はHBV-DNAをリアルタイム-PCR法で測定することにより行った。ただし、プライマーHBSF2： 5’-CTT CAT CCT GCT GCT ATG CCT-3’[nt 406-426]（配列番号：４）およびHBSR2： 5’-AAA GCC CAG GAT GAT GGG AT-3’[nt 646-627]（配列番号：５）とTaqMan probe HBSP2 (nt 461-488)の配列（5’-ATG TTG CCC GTT TGT CCT CTA ATT CCA-3’（配列番号：６））は文献（Abe A, Inoue K, Tanaka T, Kato J, Kajiyama N, Kawaguchi R, Tanaka S, et al. Quantitation of hepatitis B virus genomic DNA by real-time detection PCR. J Clin Microbiol 1999;37:2899-2903.）に従った。【００７４】
その結果、PEG-IFN処置群においてHBV DNAレベルは14日間で血清中において約1.4 Log減少したことが明らかとなった。一方、PEG-IFNおよび式(III)の化合物の併用群では約2 LogのHBVの減少であった（図２）。以上より、PEG-IFNの抗HBV活性が前記式（III）の化合物と併用することにより増強されることが明らかとなった。【００７５】
〔実施例３〕  HBVに感染したキメラマウスにおける式(III)の化合物およびPEG-IFNとの併用による抗HBV効果（その２）
実施例２と同様に、HBV遺伝子型A型（野生株）に感染させたヒト肝臓を有するキメラマウス（株式会社フェニックスバイオから購入）について試験を行った。【００７６】
その結果、PEG-IFN処置群においてHBV DNAレベルは14日間で血清中において約1 Log減少したことが明らかとなった。一方、PEG-IFNおよび式(III)の化合物の併用群では約1.8 LogのHBVの減少であった（図３）。以上のことから、遺伝子型A型に対しても、PEG-IFNの抗HBV活性が前記式（III）の化合物と併用することにより増強されることが明らかとなった。【００７７】
〔実施例４〕  HBVに感染したキメラマウスにおける、式(III)の化合物およびエンテカビルとの併用による抗HBV効果（その１）、ならびに、式(III)の化合物およびPEG-IFNとの併用による抗HBV効果（その３）
実施例３と同様に、HBV（遺伝子型C_AT型；野生株）に感染させたヒト肝臓を有するキメラマウス（株式会社フェニックスバイオから購入）について試験を行った。式（III）の化合物は5 mg/kg（連日静注）、PEG-IFNは30μg/kg（皮下注）、エンテカビル（ETV）は0.02 mg/kg（連日経口）を投与した。【００７８】
その結果、2週間目でETV投与群 (n=4)は平均で1.4 Logの低下に対して、ETVおよび式（III）の化合物併用群(n=3) ならびにPEG-IFNおよび式（III）の化合物併用群 (n=3)は、それぞれ2.0 Logのウイルスタイターの低下がみられた（図４）。このことから、エンテカビルの抗HBV活性が前記式（III）の化合物と併用することにより増強されること、その活性は式(III)の化合物およびPEG-IFNとの併用による抗HBV活性とほぼ同等であることが明らかとなった。【００７９】
〔実施例５〕  HBVに感染したキメラマウスにおける、式(III)の化合物およびエンテカビルとの併用による抗HBV効果（その２）、ならびに、式(III)の化合物およびPEG-IFNとの併用による抗HBV効果（その４）
実施例３と同様に、HBV遺伝子型C型(L180M+S202G＋M204V；ETV耐性株)に感染させたヒト肝臓を有するキメラマウス（株式会社フェニックスバイオから購入）について試験を行った。式（III）の化合物は5 mg/kg（連日静注）、PEG-IFNは30μg/kg（皮下注）、エンテカビル（ETV）は0.02 mg/kg（連日経口）を投与した。【００８０】
その結果、ETV耐性株(n=1)では0.3 Logのウイルス低下であった。ETVおよび式（III）の化合物併用群(n=2をn=1×2として図示)は、最大1.6 Logの低下、PEG-IFNおよび式（III）の化合物併用群(n=2をn=1×2として図示)は2.2 Logの低下がみられた（図５）。以上のことから、エンテカビルの抗HBV活性が、前記式（III）の化合物と併用することにより増強されることが、ETVに耐性を示すHBVにおいても明らかとなった。また、その増強効果は、式(III)の化合物とPEG-IFNとの併用によるものの方が高かった。【００８１】
なお、ここで用いたHBVのエンテカビル耐性株は、ラミブジンなどの他の核酸アナログに対しても耐性を示すことが知られている。
【産業上の利用可能性】
【００８２】
本発明により、HBV感染症を治療または予防するための新規な医薬組成物が提供された。本発明の医薬組成物は単独で抗HBV作用を有することから、HBV感染症の治療剤として有用である。また、核酸アナログ等の薬剤耐性ウイルスに対して効果を有する新規なHBV治療剤として使用しうる点でも有用である。【００８３】
さらに、インターフェロンまたは核酸アナログと併用することにより、より高くHBV複製が抑制されることが明らかとなったことから、これら二つの成分からなる医薬組成物は、より安全性が高く、より有効性が高いHBVを治療するための新規薬剤となりうることが示された。【００８４】
また、本発明により、式（I）の化合物が、インターフェロンおよび／または核酸アナログと併用した場合でも、核酸アナログ等の薬剤耐性ウイルスに対しても有効な、HBV感染症を治療または予防するための新規な医薬組成物となりうることが示された。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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