(57)【要約】本発明は、薬物感受性および疾患脆弱性の個体差（個体ごとの傾向）を、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型等を用いて評価する（予測等する）方法を提供する。本発明に係る薬物感受性の評価方法および疾患脆弱性の評価方法は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプと、個体の薬物感受性および疾患脆弱性とを関連づけることを特徴とする方法である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプと、個体の薬物感受性とを関連づけることを特徴とする、薬物感受性の評価方法。
【請求項２】
前記遺伝子多型または前記ハプロタイプの解析結果に基づいて、個体の薬物感受性の有無の傾向を評価することを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
以下の工程：
（１）健常者における連鎖不平衡解析およびハプロタイプ解析を行い、連鎖不平衡ブロック内の遺伝子多型を選択する工程、
（２）被験者における当該遺伝子多型の遺伝子型と薬物感受性との間の関連を解析する工程、および
（３）被験者において薬物感受性と有意に関連した遺伝子多型を薬物感受性の評価に用いる工程
を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプと、個体の疾患脆弱性とを関連づけることを特徴とする、疾患脆弱性の評価方法。
【請求項５】
前記遺伝子多型または前記ハプロタイプの解析結果に基づいて、個体の疾患脆弱性の有無の傾向を評価することを特徴とする、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
以下の工程：
（１）健常者における連鎖不平衡解析およびハプロタイプ解析を行い、連鎖不平衡ブロック内の遺伝子多型を選択する工程、
（２）被験者における当該遺伝子多型の遺伝子多型頻度を、健常者における当該遺伝子多型の遺伝子多型頻度と比較する工程、および
（３）被験者と健常者とで遺伝子多型頻度に有意差のある遺伝子多型を疾患脆弱性の評価に用いる工程
を含む、請求項４または５に記載の方法。
【請求項７】
疾患脆弱性が、疼痛感受性、または物質依存への脆弱性である、請求項４〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
遺伝子多型が、一塩基多型、挿入型多型、欠失型多型および塩基繰り返し多型からなる群から選択される少なくとも１つである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
遺伝子多型が、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子のｒｓ１６８３９８３７、ｒｓ２３６０９６９、ｒｓ１０９３２２００、ｒｓ２２５３２０６、ｒｓ２５５１６４０、ｒｓ１１９０４８１４、ｒｓ１６８３９８８３、ｒｓ６７４０５８４、ｒｓ３７７０７０４、ｒｓ２２５４１３７、ｒｓ２５５１６４５、ｒｓ２５５１９４６、ｒｓ４２３４０８０、ｒｓ２９５２７６８、ｒｓ２７０９３８６、ｒｓ７５９１７８４およびｒｓ７５９４５６０、ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子のｒｓ１２４３８７２、ｒｓ２１４５９２５、ｒｓ２０２５１２６、ｒｓ１８８５３７３、ｒｓ１８８５３７４、ＧＡ００７４７３、ｒｓ２２９５７９４、ｒｓ４８７９９２６、ＧＡ００７４７７、ｒｓ８６７１９４、ｒｓ１１５４１９０８、ｒｓ７４１９１７、ｒｓ７８６２４８５、ｒｓ２７５６８９４、ｒｓ２２４９２５０、ｒｓ２２９５７９５、ｒｓ８７７３６５、ｒｓ２７３７２７３、ｒｓ２２９５７９７、ｒｓ２２９５７９８、ｒｓ１５３４８４７、ｒｓ７８７３８２２、ｒｓ２７３７２７４、ｒｓ１０９７２５６７、ｒｓ３７６３６３０、ｒｓ１０８１４２７４、ｒｓ３７５０４３４、ｒｓ１５７０２４６、ＧＡ０２５６８４、ｒｓ１５７０２４８、ｒｓ１５７０２４９、ｒｓ３４４７８６１１、ｒｓ１３２２０４５、ｒｓ１９５１４３２、ＧＡ０２５６８７、ｒｓ１０８１４２７５、ｒｓ１０７５８３２０、ｒｓ４８７８６２８、ｒｓ１０７５８３２１およびｒｓ１０７５８３２２、ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子のｒｓ４７２２７７８、ｒｓ１７７４７９、ｒｓ１７７４８０、ｒｓ１１９８１７５４、ｒｓ１７７４８６、ｒｓ１７７４９８、ｒｓ２１７５７３８、ｒｓ１７１５６５７９、ｒｓ１７１５６６０３、ｒｓ１７６４２１４５、ｒｓ１０２２９５００、ｒｓ１０２４３６５９、ｒｓ４７２２７８５、ｒｓ１６８７４５０３、ｒｓ１１７７２８１５、ｒｓ６９５８１３３、ｒｓ１６８７４５２５、ｒｓ１７７１５１７４、ｒｓ６９５３５２４、ｒｓ１０２３９８１０、ｒｓ１７１５６６４９、ｒｓ１８１１２４８、ｒｓ８８７６２３、ｒｓ７４０９８８、ｒｓ７７９４３０４、ｒｓ６９５２２２７、ｒｓ４２６９５、ｒｓ１０２９８９７、ｒｓ４７２２７９３、ｒｓ１０２３３６５３、ｒｓ６９５５１０５、ｒｓ１７１５６６８５、ｒｓ１７１５６６９４、ｒｓ１７１５６６９９、ｒｓ１７７５７２、ｒｓ１７７５７３、ｒｓ１７７５７４、ｒｓ１７７５７６、ｒｓ１３４３７７０６、ｒｓ１７７５８０、ｒｓ１７７５８１、ｒｓ１２６６６６３６、ｒｓ１７７５８４、ｒｓ１７７５８５、ｒｓ２１６７１５、ｒｓ１０９５１１９７、ｒｓ１６０３３５、ｒｓ１００８２６２、ｒｓ３１０３５３、ｒｓ３１０３５９、ｒｓ４１２７３、ｒｓ１６３７４５７、ｒｓ１７１５６９１９、ｒｓ４１２７６、ｒｓ１６０３７５、ｒｓ９１７２７５、ｒｓ４１３４８、ｒｓ８８６８１６、ｒｓ１７１５７０４８、ｒｓ６４６２０９８、ｒｓ１０９５１２０１、ｒｓ１３３１１２４８、ｒｓ１２５４０４８０、ｒｓ１０２６５１６６、ｒｓ７７９８７７４、ｒｓ７７９９２４６、ｒｓ６９７２０８１、ｒｓ１２５３３０７９、ｒｓ７８０６５４７、ｒｓ６４６２１００、ｒｓ６９７９３５２、ｒｓ６９５０５７４、ｒｓ４７２２８３５、ｒｓ２０６６９７９、ｒｓ１０４８６５９１、ｒｓ７２１９９３、ｒｓ２２３７３５１、ｒｓ３７３５５６６、ｒｓ１１９７５５３９、ｒｓ６４６２１０７、ｒｓ２１９０３０６、ｒｓ４７１９９５５、およびｒｓ１０２２８１３７、並びにＡＴＦ２サブタイプ遺伝子のｒｓ１１５３７１１、ｒｓ１１５３７０２、ｒｓ７５８３４３１、ｒｓ１１５３６９９、ｒｓ２３０２６６３、ｒｓ３８４５７４４、ｒｓ２１２３４９、ｒｓ２１２３４７、ｒｓ１２６９３０５７、ｒｓ１１５３６８５、ｒｓ２１２３６０、ｒｓ２１２３６１、ｒｓ２０７２５３８、ｒｓ１２０５３９９、ｒｓ１１５３６７６、ｒｓ７５６６４０１、ｒｓ７５７８５６９、ｒｓ３７５５４９０、ｒｓ１３３８８３０８、ｒｓ１１８８８５０７、ｒｓ１０４９７４３４、ｒｓ２６８２１４、ｒｓ１６６５３１、ｒｓ２６８２２８、ｒｓ２６８２２９、ｒｓ２６８２３０、ｒｓ２６８２３１、ｒｓ１０４９７４３５、ｒｓ１９８２２３５、ｒｓ２６８２３７、ｒｓ１３０３０４７４、およびｒｓ２６８１７４から選ばれる少なくとも１つである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
ハプロタイプが以下の表に示されるものから選ばれる少なくとも１つである、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【表１】
2013047912.tif 000073
【表２】
2013047912.tif 000074
【表３】
2013047912.tif 000075
【表４】
2013047912.tif 000076
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法により評価された結果を指標として、個体に投与する薬物の種類、量および／または投与回数を決定する方法。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法により評価された結果を指標として、個体に投与する薬物の副作用を予測する方法。
【請求項１３】
薬物が、オピオイド受容体機能修飾薬および／またはサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質機能修飾薬である、請求項１〜３、７、１１および１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
オピオイド受容体機能修飾薬が、メタンフェタミン、メチレンジオキシメタンフェタミン、アンフェタミン、デキストロアンフェタミン、ドパミン、モルヒネ、ＤＡＭＧＯ、コデイン、メサドン、カルフェンタニール、フェンタニル、ヘロイン、コカイン、ナロキソン、ナルトレキソン、ナロルフィン、レバロルファン、ペンタゾシン、ペチジン、ブプレノルフィン、オキシコドン、ヒドロコドン、レボルファノール、エトルフィン、ジヒドロエトルフィン、ヒドロモルホン、オキシモルホン、トラマドール、ジクロフェナク、インドメタシン、フルルビプロフェンアキセチル、マーカイン、エタノール、メタノール、ジエチルエーテル、プロパノール、ブタノール、フルピルチン、笑気、Ｆ３（１クロロ１，２，２トリフルオロサイクロブタン）、ハロセン、エストラジオール、ジチオトレイトール、チオリダジン、ピモザイド、フルオキセチン、パロキセチン、デシプラミン、イミプラミン、クロミプラミン、テトラミド、イソフルレン、ギンセノシド、イフェンプロディール、ブピバカイン、テルチアピン、クロザピン、ハロペリドール、ＳＣＨ２３３９０およびコカインからなる群から選択される少なくとも１つであり、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質機能修飾薬が、ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）、カルシニューリン、プロテインキナーゼＡ、プロテインキナーゼＣ、ｐ９０リボソームＳ６キナーゼ１（ＲＳＫ１）、カルモジュリンキナーゼ、グリコーゲン合成酵素キナーゼ３βおよびＣＲＥＢ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｃｏａｃｔｉｖａｔｏｒ  １（ＣＲＴＣ１）からなる群から選択される少なくとも１つである、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型を含むＤＮＡ断片に特異的にハイブリダイズしうる、配列番号１〜１７２のいずれか１つに示される塩基配列のうち第５１番目の塩基を含む少なくとも１０塩基長の塩基配列または当該塩基配列に相補的な配列からなるオリゴヌクレオチドを用いることを特徴とする、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記オリゴヌクレオチドの長さが１０〜１５０塩基長である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記オリゴヌクレオチドが配列番号１〜１７２のいずれか１つに示される塩基配列または当該塩基配列に相補的な塩基配列からなる群から選択されるオリゴヌクレオチドである、請求項１５または１６に記載の方法。
【請求項１８】
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプを含む、個体の薬物感受性の有無の傾向を評価するための遺伝子多型マーカー。
【請求項１９】
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプを含む、個体の疾患脆弱性の有無の傾向を評価するための遺伝子多型マーカー。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質（ｃＡＭＰ  ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｅｌｅｍｅｎｔ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ；ＣＲＥＢ）遺伝子解析により薬物感受性および疾患脆弱性を評価する方法に関する。具体的には、ＣＲＥＢ遺伝子の遺伝子多型または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプと、個体の薬物感受性および疾患脆弱性とを関連づける、薬物感受性および疾患脆弱性の評価方法等、より具体的には、上記遺伝子多型またはハプロタイプの解析結果に基づいて、個体における薬物感受性および疾患脆弱性の有無の傾向を評価する方法等に関する。
【背景技術】
【０００２】
疼痛は、医療現場で最も頻繁に見られる病態であり、疾患そのものよりもむしろ、疾患に伴う疼痛の方が患者にとって深刻である場合が多い。痛覚は、生体の警告システムであるという点で重要な役割を有するが、過度の痛みは適切に制御しないとＱＯＬ（Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ）を著しく低下させることになる。近年、ペインコントロールの重要性が認識され、疼痛治療を含む緩和医療が飛躍的に進歩しつつあり、各種鎮痛薬の使用機会および使用量は増加傾向にある。
これまでに、モルヒネ等に代表される麻薬性鎮痛薬は、オピオイド受容体というタンパク質に作用して鎮痛を引き起こすことが知られている。オピオイド受容体には、ミュー、デルタ、カッパ（μ、δ、κ）の３種類があり、いずれも鎮痛作用と関係する。これら受容体は、Ｇｉ／ｏタンパク質共役型受容体であるため、Ｇｉ／ｏタンパク質を介してＧＩＲＫチャネルの活性化とカルシウムチャネルの抑制をするが、それに加えてアデニル酸シクラーゼの抑制も行う（非特許文献１：Ｐｉｅｒｃｅ  Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｖｅｎ−ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ，（２００２）３：６３９−６５０、非特許文献２：Ｂｏｋｏｃｈ  ＧＭ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｇｕａｎｉｎｅ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ  ｏｆ  ａｄｅｎｙｌａｔｅ  ｃｙｃｌａｓｅ，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，（１９８４）２５９：３５６０−３５６７）。アデニル酸シクラーゼの活性化は、サイクリックＡＭＰ依存性プロテインキナーゼを賦活し、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質（ＣＲＥＢ）の１３３番目のセリン残基に対するリン酸化を通して同タンパク質の活性化を引き起こす（非特許文献３：Ｇｏｎｚａｌｅｚ  ＧＡ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｙｃｌｉｃ  ＡＭＰ  ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ  ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ  ｇｅｎｅ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｂｙ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＣＲＥＢ  ａｔ  ｓｅｒｉｎｅ  １３３，Ｃｅｌｌ，（１９８９）５９：６７５−６８０）。活性化されたＣＲＥＢは活性化補助因子としてのＣＲＥＢ結合タンパク質（ＣＲＥＢ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ）と結合し（非特許文献４：Ｃｈｒｉｖｉａ  ＪＣ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ  ＣＲＥＢ  ｂｉｎｄｓ  ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ＣＢＰ．，Ｎａｔｕｒｅ，（１９９３）３６５：８５５−８５９）、ゲノムＤＮＡのサイクリックＡＭＰ応答配列に結合することにより遺伝子発現を促進する（非特許文献５：Ｍｏｎｔｍｉｎｙ  ＭＲ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｃｙｃｌｉｃ−ＡＭＰ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｅｌｅｍｅｎｔ  ｗｉｔｈｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｔ  ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ  ｇｅｎｅ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ，（１９８６）８３：６６８２−６６８６）。
【発明の概要】
【０００３】
本発明が解決しようとする課題は、薬物感受性および疾患脆弱性の個体差（個体ごとの傾向）を、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質（ＣＲＥＢ）遺伝子多型等を用いて評価する（予測等する）方法を提供することにある。
本発明者は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質（ＣＲＥＢ）遺伝子に注目し、従来知見および臨床データに基づいて、鋭意研究を行った。その結果、各種ＣＲＥＢ遺伝子多型と、例えば鎮痛薬等の薬物感受性および疼痛感受性を含めた疾患脆弱性との相関関係を解析することにより、いくつかの有用な遺伝子多型を同定した。そして、同定したこれら遺伝子多型間の連鎖不平衡を見出し、さらに薬物感受性および疾患脆弱性との有意な相関（詳しくは、特定のＣＲＥＢ遺伝子多型が異なることによって鎮痛薬の投与必要量が変化すること及び疼痛感受性の閾値が変化すること）を明らかにし、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は以下の通りである。
１．  サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプと、個体の薬物感受性とを関連づけることを特徴とする、薬物感受性の評価方法。
当該評価方法としては、例えば、前記遺伝子多型または前記ハプロタイプの解析結果に基づいて、個体の薬物感受性の有無の傾向を評価することを特徴とする方法が挙げられる。
２．以下の工程：（１）健常者における連鎖不平衡解析およびハプロタイプ解析を行い、連鎖不平衡ブロック内の遺伝子多型を選択する工程、（２）被験者における当該遺伝子多型の遺伝子型と薬物感受性との間の関連を解析する工程、および（３）被験者において薬物感受性と有意に関連した遺伝子多型を薬物感受性の評価に用いる工程を含む、前項１に記載の方法。
３．サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプと、個体の疾患脆弱性とを関連づけることを特徴とする、疾患脆弱性の評価方法。
当該評価方法としては、例えば、前記遺伝子多型または前記ハプロタイプの解析結果に基づいて、個体の疾患脆弱性の有無の傾向を評価することを特徴とする方法が挙げられる。
４．以下の工程：（１）健常者における連鎖不平衡解析およびハプロタイプ解析を行い、連鎖不平衡ブロック内の遺伝子多型を選択する工程、（２）被験者における当該遺伝子多型の遺伝子型と疼痛感受性との間の関連を解析する工程、および（３）被験者において疼痛感受性と有意に関連した遺伝子多型を疾患脆弱性の評価に用いる工程を含む、前項３に記載の方法。
５．疾患脆弱性が、疼痛感受性、または物質依存への脆弱性（特に、薬物依存への脆弱性）である、前項３または４に記載の方法。
６．遺伝子多型が、一塩基多型、挿入型多型、欠失型多型および塩基繰り返し多型からなる群から選択される少なくとも１つである、前項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
７．遺伝子多型が、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子（ＣＲＥＢ遺伝子のサブタイプであるＣＲＥＢ１遺伝子（以下同様））のｒｓ１６８３９８３７、ｒｓ２３６０９６９、ｒｓ１０９３２２００、ｒｓ２２５３２０６、ｒｓ２５５１６４０、ｒｓ１１９０４８１４、ｒｓ１６８３９８８３、ｒｓ６７４０５８４、ｒｓ３７７０７０４、ｒｓ２２５４１３７、ｒｓ２５５１６４５、ｒｓ２５５１９４６、ｒｓ４２３４０８０、ｒｓ２９５２７６８、ｒｓ２７０９３８６、ｒｓ７５９１７８４およびｒｓ７５９４５６０、ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子（ＣＲＥＢ遺伝子のサブタイプであるＣＲＥＢ３遺伝子（以下同様））のｒｓ１２４３８７２、ｒｓ２１４５９２５、ｒｓ２０２５１２６、ｒｓ１８８５３７３、ｒｓ１８８５３７４、ＧＡ００７４７３、ｒｓ２２９５７９４、ｒｓ４８７９９２６、ＧＡ００７４７７、ｒｓ８６７１９４、ｒｓ１１５４１９０８、ｒｓ７４１９１７、ｒｓ７８６２４８５、ｒｓ２７５６８９４、ｒｓ２２４９２５０、ｒｓ２２９５７９５、ｒｓ８７７３６５、ｒｓ２７３７２７３、ｒｓ２２９５７９７、ｒｓ２２９５７９８、ｒｓ１５３４８４７、ｒｓ７８７３８２２、ｒｓ２７３７２７４、ｒｓ１０９７２５６７、ｒｓ３７６３６３０、ｒｓ１０８１４２７４、ｒｓ３７５０４３４、ｒｓ１５７０２４６、ＧＡ０２５６８４、ｒｓ１５７０２４８、ｒｓ１５７０２４９、ｒｓ３４４７８６１１、ｒｓ１３２２０４５、ｒｓ１９５１４３２、ＧＡ０２５６８７、ｒｓ１０８１４２７５、ｒｓ１０７５８３２０、ｒｓ４８７８６２８、ｒｓ１０７５８３２１およびｒｓ１０７５８３２２、ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子（ＣＲＥＢ遺伝子のサブタイプであるＣＲＥＢ５遺伝子（以下同様））のｒｓ４７２２７７８、ｒｓ１７７４７９、ｒｓ１７７４８０、ｒｓ１１９８１７５４、ｒｓ１７７４８６、ｒｓ１７７４９８、ｒｓ２１７５７３８、ｒｓ１７１５６５７９、ｒｓ１７１５６６０３、ｒｓ１７６４２１４５、ｒｓ１０２２９５００、ｒｓ１０２４３６５９、ｒｓ４７２２７８５、ｒｓ１６８７４５０３、ｒｓ１１７７２８１５、ｒｓ６９５８１３３、ｒｓ１６８７４５２５、ｒｓ１７７１５１７４、ｒｓ６９５３５２４、ｒｓ１０２３９８１０、ｒｓ１７１５６６４９、ｒｓ１８１１２４８、ｒｓ８８７６２３、ｒｓ７４０９８８、ｒｓ７７９４３０４、ｒｓ６９５２２２７、ｒｓ４２６９５、ｒｓ１０２９８９７、ｒｓ４７２２７９３、ｒｓ１０２３３６５３、ｒｓ６９５５１０５、ｒｓ１７１５６６８５、ｒｓ１７１５６６９４、ｒｓ１７１５６６９９、ｒｓ１７７５７２、ｒｓ１７７５７３、ｒｓ１７７５７４、ｒｓ１７７５７６、ｒｓ１３４３７７０６、ｒｓ１７７５８０、ｒｓ１７７５８１、ｒｓ１２６６６６３６、ｒｓ１７７５８４、ｒｓ１７７５８５、ｒｓ２１６７１５、ｒｓ１０９５１１９７、ｒｓ１６０３３５、ｒｓ１００８２６２、ｒｓ３１０３５３、ｒｓ３１０３５９、ｒｓ４１２７３、ｒｓ１６３７４５７、ｒｓ１７１５６９１９、ｒｓ４１２７６、ｒｓ１６０３７５、ｒｓ９１７２７５、ｒｓ４１３４８、ｒｓ８８６８１６、ｒｓ１７１５７０４８、ｒｓ６４６２０９８、ｒｓ１０９５１２０１、ｒｓ１３３１１２４８、ｒｓ１２５４０４８０、ｒｓ１０２６５１６６、ｒｓ７７９８７７４、ｒｓ７７９９２４６、ｒｓ６９７２０８１、ｒｓ１２５３３０７９、ｒｓ７８０６５４７、ｒｓ６４６２１００、ｒｓ６９７９３５２、ｒｓ６９５０５７４、ｒｓ４７２２８３５、ｒｓ２０６６９７９、ｒｓ１０４８６５９１、ｒｓ７２１９９３、ｒｓ２２３７３５１、ｒｓ３７３５５６６、ｒｓ１１９７５５３９、ｒｓ６４６２１０７、ｒｓ２１９０３０６、ｒｓ４７１９９５５、およびｒｓ１０２２８１３７、並びにＡＴＦ２サブタイプ遺伝子（ＣＲＥＢ遺伝子のサブタイプであるＣＲＥＢ２遺伝子の別名であるＡＴＦ２遺伝子（以下同様））のｒｓ１１５３７１１、ｒｓ１１５３７０２、ｒｓ７５８３４３１、ｒｓ１１５３６９９、ｒｓ２３０２６６３、ｒｓ３８４５７４４、ｒｓ２１２３４９、ｒｓ２１２３４７、ｒｓ１２６９３０５７、ｒｓ１１５３６８５、ｒｓ２１２３６０、ｒｓ２１２３６１、ｒｓ２０７２５３８、ｒｓ１２０５３９９、ｒｓ１１５３６７６、ｒｓ７５６６４０１、ｒｓ７５７８５６９、ｒｓ３７５５４９０、ｒｓ１３３８８３０８、ｒｓ１１８８８５０７、ｒｓ１０４９７４３４、ｒｓ２６８２１４、ｒｓ１６６５３１、ｒｓ２６８２２８、ｒｓ２６８２２９、ｒｓ２６８２３０、ｒｓ２６８２３１、ｒｓ１０４９７４３５、ｒｓ１９８２２３５、ｒｓ２６８２３７、ｒｓ１３０３０４７４、およびｒｓ２６８１７４から選ばれる少なくとも１つである、前項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
８．ハプロタイプが以下の表に示されるものから選ばれる少なくとも１つである、前項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
なお、ハプロタイプとしては、前項７に記載の各種遺伝子多型を任意の数及び種類で組み合わせて構成されるものも、本発明の評価方法等に用いるハプロタイプとして選択することができる。
【表１】
2013047912.tif 000002
【表２】
2013047912.tif 000003
【表３】
2013047912.tif 000004
【表４】
2013047912.tif 000005
９．前項１〜８のいずれか１項に記載の方法により評価された結果を指標として、個体に投与する薬物の種類、量および／または投与回数を決定する方法。
１０．前項１〜８のいずれか１項に記載の方法により評価された結果を指標として、個体に投与する薬物の副作用を予測する方法。
１１．薬物が、オピオイド受容体機能修飾薬および／またはサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質機能修飾薬である、前項１、２、５、９および１０のいずれか１項に記載の方法。
１２．オピオイド受容体機能修飾薬が、メタンフェタミン、メチレンジオキシメタンフェタミン、アンフェタミン、デキストロアンフェタミン、ドパミン、モルヒネ、ＤＡＭＧＯ、コデイン、メサドン、カルフェンタニール、フェンタニル、ヘロイン、コカイン、ナロキソン、ナルトレキソン、ナロルフィン、レバロルファン、ペンタゾシン、ペチジン、ブプレノルフィン、オキシコドン、ヒドロコドン、レボルファノール、エトルフィン、ジヒドロエトルフィン、ヒドロモルホン、オキシモルホン、トラマドール、ジクロフェナク、インドメタシン、エタノール、メタノール、ジエチルエーテル、プロパノール、ブタノール、フルピルチン、笑気、Ｆ３（１クロロ１，２，２トリフルオロサイクロブタン）、ハロセン、エストラジオール、ジチオトレイトール、チオリダジン、ピモザイド、フルオキセチン、パロキセチン、デシプラミン、イミプラミン、クロミプラミン、テトラミド、イソフルレン、ギンセノシド、イフェンプロディール、ブピバカイン、テルチアピン、クロザピン、ハロペリドール、ＳＣＨ２３３９０およびコカインからなる群から選択される少なくとも１つであり、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質機能修飾薬が、ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）、カルシニューリン、プロテインキナーゼＡ、プロテインキナーゼＣ、ｐ９０リボソームＳ６キナーゼ１（ＲＳＫ１）、カルモジュリンキナーゼ、グリコーゲン合成酵素キナーゼ３βおよびＣＲＥＢ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｃｏａｃｔｉｖａｔｏｒ  １（ＣＲＴＣ１）からなる群から選択される少なくとも１つである、前項１１記載の方法。
１３．サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型を含むＤＮＡ断片に特異的にハイブリダイズしうる、配列番号１〜１７２のいずれか１つに示される塩基配列のうち第５１番目の塩基を含む少なくとも１０塩基長の塩基配列または当該塩基配列に相補的な配列からなるオリゴヌクレオチドを用いることを特徴とする、前項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
１４．前記オリゴヌクレオチドの長さが１０〜１５０塩基長である、前項１３に記載の方法。
１５．前記オリゴヌクレオチドが配列番号１〜３８のいずれか１つに示される塩基配列または当該塩基配列に相補的な塩基配列からなる群から選択されるオリゴヌクレオチドである、前項１３または１４に記載の方法。
１６．サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプを含む、個体の薬物感受性の有無の傾向を評価するための遺伝子多型マーカー。ここで薬物としては、前項１１および１２に記載したものと同様のものが挙げられる。
１７．サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプを含む、個体の疾患脆弱性の有無の傾向を評価するための遺伝子多型マーカー。
本発明によれば、薬物感受性および疾患脆弱性に関する個体差を評価することができるサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプ、および当該遺伝子多型もしくはハプロタイプを用いた薬物感受性および疾患脆弱性の評価方法等を提供することができる。この評価方法により、モルヒネ等の麻薬性薬物に関する処方適正量および処方適正スケジュールなどを容易に知ることまたは予測することが可能となり、テーラーメイド疼痛治療および薬物依存治療などに極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【０００４】
図１は、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子に関して同定された遺伝子多型およびそれらの間の連鎖不平衡を示す概略図である。図中、濃色の四角形は連鎖の強いＳＮＰどうしを表す。また、図の各ＳＮＰから左下または右下方向に連なる四角形の交わった四角形においては、ＳＮＰとＳＮＰとの連鎖不平衡の指標であるＤ´の計算値のパーセンテージを記している。例えば、ｒｓ１６８３９８３７とｒｓ２５５１６４０との間のＤ´の計算値は０．９１である。
図２は、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子に関して同定された遺伝子多型およびそれらの間の連鎖不平衡を示す概略図である。図中、濃色の四角形は連鎖の強いＳＮＰどうしを表す。また、図の各ＳＮＰから左下または右下方向に連なる四角形の交わった四角形においては、ＳＮＰとＳＮＰとの連鎖不平衡の指標であるｒ２の計算値のパーセンテージを記している。例えば、ｒｓ１６８３９８３７とｒｓ２５５１６４０との間のｒ２の計算値は０．１２である。
図３は、ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子に関して同定された遺伝子多型およびそれらの間の連鎖不平衡を示す概略図である。図中、濃色の四角形は連鎖の強いＳＮＰどうしを表す。また、図の各ＳＮＰから左下または右下方向に連なる四角形の交わった四角形においては、ＳＮＰとＳＮＰとの連鎖不平衡の指標であるＤ´の計算値のパーセンテージを記している。例えば、ｒｓ１２４３８７２とｒｓ２０２５１２６との間のＤ´の計算値は０．９７である。
図４は、ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子に関して同定された遺伝子多型およびそれらの間の連鎖不平衡を示す概略図である。図中、濃色の四角形は連鎖の強いＳＮＰどうしを表す。また、図の各ＳＮＰから左下または右下方向に連なる四角形の交わった四角形においては、ＳＮＰとＳＮＰとの連鎖不平衡の指標であるｒ２の計算値のパーセンテージを記している。例えば、ｒｓ１２４３８７２とｒｓ２０２５１２６との間のｒ２の計算値は０．６７である。
図５は、ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子に関して同定された遺伝子多型の一部およびそれらの間の連鎖不平衡を示す概略図である。図中、濃色の四角形は連鎖の強いＳＮＰどうしを表す。また、図の各ＳＮＰから左下または右下方向に連なる四角形の交わった四角形においては、ＳＮＰとＳＮＰとの連鎖不平衡の指標であるＤ´の計算値のパーセンテージを記している。例えば、ｒｓ４７２２７７８とｒｓ１７７４７９との間のＤ´の計算値は０．９３である。
図６は、ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子に関して同定された遺伝子多型の一部およびそれらの間の連鎖不平衡を示す概略図である。図中、濃色の四角形は連鎖の強いＳＮＰどうしを表す。また、図の各ＳＮＰから左下または右下方向に連なる四角形の交わった四角形においては、ＳＮＰとＳＮＰとの連鎖不平衡の指標であるｒ２の計算値のパーセンテージを記している。例えば、ｒｓ４７２２７７８とｒｓ１７７４７９との間のｒ２の計算値は０．８５である。
図７は、ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子に関して同定された遺伝子多型の一部およびそれらの間の連鎖不平衡を示す概略図である。図中、濃色の四角形は連鎖の強いＳＮＰどうしを表す。また、図の各ＳＮＰから左下または右下方向に連なる四角形の交わった四角形においては、ＳＮＰとＳＮＰとの連鎖不平衡の指標であるＤ´の計算値のパーセンテージを記している。例えば、ｒｓ１１５３７１１とｒｓ１１５３７００との間のＤ´の計算値は０．８６である。
図８は、ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子に関して同定された遺伝子多型の一部およびそれらの間の連鎖不平衡を示す概略図である。図中、濃色の四角形は連鎖の強いＳＮＰどうしを表す。また、図の各ＳＮＰから左下または右下方向に連なる四角形の交わった四角形においては、ＳＮＰとＳＮＰとの連鎖不平衡の指標であるｒ２の計算値のパーセンテージを記している。例えば、ｒｓ１１５３７１１とｒｓ１１５３７００との間のｒ２の計算値は０．１４である。
図９は、外科手術（下顎形成外科手術）において鎮痛薬を投与された患者全体における、術後２４時間の投与必要量（μｇ／ｋｇ）に対するＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）の効果（全体の平均±標準誤差）を示すグラフである。
図１０は、外科手術（下顎形成外科手術）において鎮痛薬を投与された患者全体における、術前の疼痛感受性の測定結果（秒）に対するＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）の効果（全体の平均±標準誤差）を示すグラフである。
図１１は、外科手術（下顎形成外科手術）において鎮痛薬を投与された男性患者における、術後２４時間後のＶＡＳ（疼痛の強さ）の測定結果（ｍｍ）に対するＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）の効果（全体の平均±標準誤差）を示すグラフである。
図１２は、外科手術（下顎形成外科手術）において鎮痛薬を投与された患者全体における、術前の疼痛感知潜時の閾値差の測定結果（秒）に対するＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ７５８３４３１）の効果（全体の平均±標準誤差）を示すグラフである。
図１３は、外科手術（下顎形成外科手術）において鎮痛薬を投与された患者全体における、術後２４時間の投与必要量（μｇ／ｋｇ）に対するＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）の効果（全体の平均±標準誤差）を示すグラフである。
図１４は、外科手術（腹部外科手術）において鎮痛薬を投与された患者全体における、術後２４時間の投与必要量（μｇ／ｋｇ）に対するＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）の効果（全体の平均±標準誤差）を示すグラフである。
図１５は、健常者全体における、Ｔｅｍｐｅｒａｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒ  Ｉｎｖｅｎｔｏｒｙ（ＴＣＩ）における報酬依存度（Ｒｅｗａｒｄ  ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ：ＲＤ）スコア（平均値）に対するＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）の効果（全体の平均±標準誤差）を示すグラフである。
図１６は、スタンレー財団脳バンクにおける死後脳組織提供対象者における、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子発現量に対するＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）の効果（全体の平均±標準誤差）を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００５】
以下、本発明を詳細に説明する。本発明の範囲はこれらの説明に拘束されることはなく、以下の例示以外についても、本発明の趣旨を損なわない範囲で適宜変更し実施し得る。
なお、本明細書は、本願優先権主張の基礎となる特願２０１１−２１７１０４号明細書（２０１１年９月３０日出願）の全体を包含する。また、本明細書において引用された全ての刊行物、例えば先行技術文献、及び公開公報、特許公報その他の特許文献は、参照として本明細書に組み込まれる。
１．本発明の概要
（１）サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質（ｃＡＭＰ  ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｅｌｅｍｅｎｔ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ；ＣＲＥＢ）とは、ミューオピオイド受容体等のＧタンパク共役型の受容体の下流のシグナル伝達系を含め細胞内サイクリックＡＭＰ濃度に依存して活性化され核内ゲノムＤＮＡのサイクリックＡＭＰ応答配列（ｃＡＭＰ  ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｅｌｅｍｅｎｔ）に結合し遺伝子発現の制御に関与するとされるタンパク質である。心筋、各種平滑筋、脂肪細胞、骨格筋の他、脳等の様々な組織・器官に存在し、各種遺伝子発現を通してニューロン新生、記憶、依存症等にも関与する。
モルヒネ等に代表される麻薬性鎮痛薬は、オピオイド受容体というタンパク質に作用して鎮痛を引き起こす。オピオイド受容体には、ミュー、デルタ、カッパ（μ、δ、κ）の３種類があり、いずれも鎮痛作用と関係する。これら受容体は、Ｇｉ／ｏタンパク質共役型受容体であるため、Ｇｉ／ｏタンパク質を介してＧＩＲＫチャネルの活性化とカルシウムチャネルの抑制をするが、それに加えてアデニル酸シクラーゼの抑制も行う。アデニル酸シクラーゼの活性化は、サイクリックＡＭＰ依存性プロテインキナーゼを賦活し、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質（ＣＲＥＢ）の１３３番目のセリン残基に対するリン酸化を通して同タンパク質の活性化を引き起こす。活性化されたＣＲＥＢは活性化補助因子としてのＣＲＥＢ結合タンパク質（ＣＲＥＢ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ）と結合し、ゲノムＤＮＡのサイクリックＡＭＰ応答配列に結合することにより遺伝子発現を促進する。
ここで、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質について説明する。サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質は、脳および心臓を含め様々な組織・器官にに分布し、各種遺伝子発現を通してニューロン新生、記憶、依存症発現等において重要な働きをするタンパク質である。サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質は、Ｑ−ｒｉｃｈ  ｄｏｍａｉｎ、Ｋｉｎａｓｅ−ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  ｄｏｍａｉｎ（ＫＩＤ）、ｂａｓｉｃ  ｒｅｇｉｏｎ／ｌｅｕｃｉｎｅ  ｚｉｐｐｅｒ（ｂＺＩＰ）、等を含むドメイン構造をとっている。タンパク質はゲノムＤＮＡと結合する。
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質は、２個のサブユニットが合わさって２量体の状態で機能する。受容体サブタイプの種類としては、ＣＲＥＢ１、ＣＲＥＢ３、ＣＲＥＢ５、ＡＴＦ２などに大別され、さらにそれらのホモログも知られている。脳および心臓を含め様々な組織・器官に発現する。
（２）遺伝子多型
本発明者は、健常者について、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質を構成しうるＣＲＥＢ１、ＣＲＥＢ３、ＣＲＥＢ５、ＡＴＦ２（ＣＲＥＢ２）のサブタイプに関して遺伝子多型（ＳＮＰ等）を同定した（図１〜図８）。また必要により連鎖不平衡解析を行い、連鎖不平衡の強いブロック（ハプロタイプブロック）を同定した。
ここで、連鎖平衡とは２つの遺伝子多型間の染色体上の関係が独立な場合をいい、連鎖不平衡とは遺伝子多型と遺伝子多型が連鎖しているためにメンデルの独立の法則による平衡状態から逸脱している場合をいう。また、ハプロタイプとは、一組の対立遺伝子のうちの一方（片方の親に由来する遺伝子）において、相互に近隣する遺伝子や遺伝子多型などの遺伝的構成を意味する。
ゲノム上近接する遺伝子多型等はハプロタイプブロックで遺伝する。言い換えれば、ハプロタイプは、このハプロタイプブロック内の、同一遺伝子の並び方の組み合わせであるとも言える。
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子において、いくつかの遺伝子多型が、ある表現型に関連して出現する場合は、個々の遺伝子多型を全てタイピングしなくても、ハプロタイプを構成するいくつかの遺伝子多型を解析することによって、患者の遺伝子型と表現型との関連を明らかにすることができる。
本発明者は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子について解析した結果、５´および３´フランキング領域には４個および６個の遺伝子多型を、イントロン領域にそれぞれ７つの遺伝子多型を見出した（表５参照）。
また、ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子については、５´および３´フランキング領域には２５個および１４個の遺伝子多型、イントロン領域に１つの遺伝子多型を見出した（表５参照）。
また、ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子については、５´および３´フランキング領域には９個および５個の遺伝子多型、イントロン領域に２４１個の遺伝子多型、エクソンの非翻訳領域に２つの遺伝子多型（ｒｓ２１９０３０５、ｒｓ３７３５５６６）を見出した（表６参照）。
また、ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子については、５´および３´フランキング領域には１１個および６個の遺伝子多型、イントロン領域に１６個の遺伝子多型、エクソンの非翻訳領域に１つの遺伝子多型（ｒｓ１０４９７４３４）を見出した（表５参照）。
本発明によれば、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプを解析することによって、薬物の有効性、薬物の副作用および薬物の有効持続期間等（例えば、鎮痛薬投与必要回数、総鎮痛薬量および覚せい剤精神病遷延化等）の薬物の感受性に関する表現型（すなわち薬物感受性）、ならびに、疼痛感受性および物質依存への脆弱性（特に、薬物依存への脆弱性）等を含めた疾患の発症に関する表現型（すなわち疾患脆弱性）についての個体差を容易に評価することができる。薬物感受性および疾患脆弱性について評価した結果は、個体に投与する薬物の投与回数、投与量および種類などの決定、並びに副作用の予測において重要な情報となる。よって、本発明は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプの解析結果に基づいて、薬物感受性および疾患脆弱性を評価する方法、具体的には、個体（個人）の薬物感受性および疾患脆弱性の有無（詳しくは、それらの遺伝的要因の有無）の傾向を評価する（具体的には、予め知るまたは予測する）方法を提供するものである。また本発明は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプを含む、個体（個人）の薬物感受性および疾患脆弱性の有無（詳しくは、それらの遺伝的要因の有無）の傾向を評価する（具体的には、予め知るまたは予測する）ための、遺伝子多型マーカーを提供するものである。
特に、モルヒネや覚醒剤などは、使用方法によっては社会的に大きな問題を生じるため、各個体に適切な投薬量を投薬前に予め知ることまたは予測できることは重要である。そのため、本発明は、テーラーメイド疼痛治療や薬物依存治療において極めて有用であると言える。
また本発明によれば、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプを解析することによって、依存傾向パーソナリティーについての個体差を容易に評価することもできる。依存傾向パーソナリティーについて評価した結果は、個体のパーソナリティーについて報酬依存度が高いか低いかを予測する情報となる。よって、本発明は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプの解析結果に基づいて、依存傾向パーソナリティーを評価する方法、具体的には、個体（個人）の依存傾向パーソナリティー（高報酬依存性または低報酬依存性）の有無（詳しくは、その遺伝的要因の有無）の傾向を評価する（具体的には、予め知るまたは予測する）方法を提供するものである。また本発明は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプを含む、個体（個人）の依存傾向パーソナリティー（高報酬依存性または低報酬依存性）の有無（詳しくは、その遺伝的要因の有無）の傾向を評価する（具体的には、予め知るまたは予測する）ための、遺伝子多型マーカーを提供するものである。ここで、上記依存傾向パーソナリティーの評価に適用し得る遺伝子多型および当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプの種類については、前述した薬物感受性および疾患脆弱性の評価方法に適用し得るものと同様のものを用いることができる。また、上記依存傾向パーソナリティーの評価に用いるオリゴヌクレオチドについても、前述した薬物感受性および疾患脆弱性の評価方法に用いるものと同様のものを用いることができる。
また本発明によれば、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプを解析することによって、ＣＲＥＢ１遺伝子発現量についての個体差を容易に評価することもできる。ＣＲＥＢ１遺伝子発現量について評価した結果は、個体のＣＲＥＢ１遺伝子発現が高いか低いかを予測する情報となる。よって、本発明は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプの解析結果に基づいて、ＣＲＥＢ１遺伝子の高発現性または低発現性を評価する方法、具体的には、個体（個人）のＣＲＥＢ１遺伝子の高発現性または低発現性の有無（詳しくは、その遺伝的要因の有無）の傾向を評価する（具体的には、予め知るまたは予測する）方法を提供するものである。また本発明は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型、または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプを含む、個体（個人）のＣＲＥＢ１遺伝子の高発現性または低発現性の有無（詳しくは、その遺伝的要因の有無）の傾向を評価する（具体的には、予め知るまたは予測する）ための、遺伝子多型マーカーを提供するものである。ここで、上記ＣＲＥＢ１遺伝子の高発現性または低発現性の評価に適用し得る遺伝子多型および当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプの種類については、前述した薬物感受性および疾患脆弱性の評価方法に適用し得るものと同様のものを用いることができる。また、上記ＣＲＥＢ１遺伝子の高発現性または低発現性の評価に用いるオリゴヌクレオチドについても、前述した薬物感受性および疾患脆弱性の評価方法に用いるものと同様のものを用いることができる。
２．サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型
本発明のヒトサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型としては、主に一塩基多型（ｓｉｎｇｌｅ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ、以下ＳＮＰとも呼称する）を含むが、限定はされず、挿入型多型、欠失型多型、および塩基繰り返し多型をも含みうる。
一塩基多型［ＳＮＰ（ＳＮＰｓ）］とは、遺伝子の特定の１塩基が他の塩基に置換することによる遺伝子多型を意味する。挿入／欠失型多型とは、１以上の塩基が欠失／挿入することによる遺伝子多型を意味する。
また、塩基繰り返し多型とは塩基配列の繰り返し数の異なることにより生じる遺伝子多型を意味する。塩基繰り返し多型は繰り返す塩基数の違いにより、マイクロサテライト多型（塩基数：２塩基〜４塩基程度）とＶＮＴＲ（ｖａｒｉａｂｌｅ  ｎｕｍｂｅｒ  ｏｆ  ｔａｎｄｅｍ  ｒｅｐｅａｔ）多型（繰り返し塩基：数塩基〜数十塩基）に分けられ、その繰り返し数が個々人によって異なる。
本発明における解析によって明らかにされたヒトサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型の情報（日本人健常者のゲノム上で見られたＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子、ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子、ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子およびＡＴＦ２サブタイプ遺伝子におけるＳＮＰ）を、表５および表６に示す。表５および表６に示す遺伝子多型は、本発明のサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型を含む。
【表５】
2013047912.tif 000006
【表６】
2013047912.tif 000007
表５および表６において、「ＣＲＥＢ１」（斜体表記）は、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子（サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質（ＣＲＥＢ）遺伝子のサブタイプであるＣＲＥＢ１遺伝子）を表し、「ＣＲＥＢ３」（斜体表記）は、ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子（ＣＲＥＢ遺伝子のサブタイプであるＣＲＥＢ３遺伝子）を表し、「ＣＲＥＢ５」（斜体表記）は、ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子（ＣＲＥＢ遺伝子のサブタイプであるＣＲＥＢ５遺伝子）を表し、「ＡＴＦ２」（斜体表記）は、ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子（ＣＲＥＢ遺伝子のサブタイプであるＣＲＥＢ２遺伝子の別名であるＡＴＦ２遺伝子）を表す。
「位置」は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子のゲノム上の位置を意味し、５´フランキング領域、３´フランキング領域、イントロン、並びにエクソンを表す。
「遺伝子多型名」は、ゲノム上の位置におけるＳＮＰの名称であり、ｄｂＳＮＰデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｐｒｏｊｅｃｔｓ／ＳＮＰ／からアクセス可能）に登録されたものである（本明細書において同様）。基本的に、４桁以上の数字の前に「ｒｓ」のＩＤが付与され、どのＳＮＰであるかが識別されている。
「メジャーアレル」および「マイナーアレル」は、それぞれ日本人健常者のゲノム上での多数派および少数派となるアレルを表す。
本発明において遺伝子多型情報を得る方法は、例えば、以下の通りである。
（１）ヒトから採取した血液検体から、フェノール法等を用いてゲノムＤＮＡを精製する。その際、ＧＦＸ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｂｌｏｏｄ  ＤＮＡ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＧＥヘルスケア  バイオサイエンス株式会社製）等の市販のゲノムＤＮＡ抽出キットや装置を用いてもよい。
（２）次に、得られたゲノムＤＮＡをＴＥ  ｂｕｆｆｅｒ（１０ｍＭ  ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，１ｍＭ  ＥＤＴＡ，ｐＨ８．０）に溶解し、１００ｎｇ／μｌに調整する。
（３）イルミナ社製、ｉＳｃａｎシステム（Ｉｌｌｕｍｉｎａ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を利用したＩｎｆｉｎｉｕｍ  ａｓｓａｙ  ＩＩ法などにより、メーカー側のプロトコルに従い全ゲノムジェノタイピングを行う。
（４）ＢｅａｄＳｔｕｄｉｏ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ  ｍｏｄｕｌｅ  ｖ３．３．７（Ｉｌｌｕｍｉｎａ）などを用いて全ゲノムジェノタイピングデータ解析を行い、各サンプルの遺伝子多型データの品質評価（Ｑｕａｌｉｔｙ  ｃｏｎｔｒｏｌ）を行う。
（５）これらの全ゲノムジェノタイピングデータより、目的の遺伝子名のアノテーション情報を手掛かりにしてその遺伝子領域およびフランキング領域に含まれる遺伝子多型を選定し、ＢｅａｄＳｔｕｄｉｏ  Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ  ｍｏｄｕｌｅ  ｖ３．３．７（Ｉｌｌｕｍｉｎａ）などの出力機能を用いてそれらの遺伝子多型情報を全て抽出する。
本発明は、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型を含むＤＮＡ断片に特異的にハイブリダイズしうる、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１６８３９８３７、ｒｓ２３６０９６９、ｒｓ１０９３２２００、ｒｓ２２５３２０６、ｒｓ２５５１６４０、ｒｓ１１９０４８１４、ｒｓ１６８３９８８３、ｒｓ６７４０５８４、ｒｓ３７７０７０４、ｒｓ２２５４１３７、ｒｓ２５５１６４５、ｒｓ２５５１９４６、ｒｓ４２３４０８０、ｒｓ２９５２７６８、ｒｓ２７０９３８６、ｒｓ７５９１７８４およびｒｓ７５９４５６０）、ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１２４３８７２、ｒｓ２１４５９２５、ｒｓ２０２５１２６、ｒｓ１８８５３７３、ｒｓ１８８５３７４、ＧＡ００７４７３、ｒｓ２２９５７９４、ｒｓ４８７９９２６、ＧＡ００７４７７、ｒｓ８６７１９４、ｒｓ１１５４１９０８、ｒｓ７４１９１７、ｒｓ７８６２４８５、ｒｓ２７５６８９４、ｒｓ２２４９２５０、ｒｓ２２９５７９５、ｒｓ８７７３６５、ｒｓ２７３７２７３、ｒｓ２２９５７９７、ｒｓ２２９５７９８、ｒｓ１５３４８４７、ｒｓ７８７３８２２、ｒｓ２７３７２７４、ｒｓ１０９７２５６７、ｒｓ３７６３６３０、ｒｓ１０８１４２７４、ｒｓ３７５０４３４、ｒｓ１５７０２４６、ＧＡ０２５６８４、ｒｓ１５７０２４８、ｒｓ１５７０２４９、ｒｓ３４４７８６１１、ｒｓ１３２２０４５、ｒｓ１９５１４３２、ＧＡ０２５６８７、ｒｓ１０８１４２７５、ｒｓ１０７５８３２０、ｒｓ４８７８６２８、ｒｓ１０７５８３２１およびｒｓ１０７５８３２２）、ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ４７２２７７８、ｒｓ１７７４７９、ｒｓ１７７４８０、ｒｓ１１９８１７５４、ｒｓ１７７４８６、ｒｓ１７７４９８、ｒｓ２１７５７３８、ｒｓ１７１５６５７９、ｒｓ１７１５６６０３、ｒｓ１７６４２１４５、ｒｓ１０２２９５００、ｒｓ１０２４３６５９、ｒｓ４７２２７８５、ｒｓ１６８７４５０３、ｒｓ１１７７２８１５、ｒｓ６９５８１３３、ｒｓ１６８７４５２５、ｒｓ１７７１５１７４、ｒｓ６９５３５２４、ｒｓ１０２３９８１０、ｒｓ１７１５６６４９、ｒｓ１８１１２４８、ｒｓ８８７６２３、ｒｓ７４０９８８、ｒｓ７７９４３０４、ｒｓ６９５２２２７、ｒｓ４２６９５、ｒｓ１０２９８９７、ｒｓ４７２２７９３、ｒｓ１０２３３６５３、ｒｓ６９５５１０５、ｒｓ１７１５６６８５、ｒｓ１７１５６６９４、ｒｓ１７１５６６９９、ｒｓ１７７５７２、ｒｓ１７７５７３、ｒｓ１７７５７４、ｒｓ１７７５７６、ｒｓ１３４３７７０６、ｒｓ１７７５８０、ｒｓ１７７５８１、ｒｓ１２６６６６３６、ｒｓ１７７５８４、ｒｓ１７７５８５、ｒｓ２１６７１５、ｒｓ１０９５１１９７、ｒｓ１６０３３５、ｒｓ１００８２６２、ｒｓ３１０３５３、ｒｓ３１０３５９、ｒｓ４１２７３、ｒｓ１６３７４５７、ｒｓ１７１５６９１９、ｒｓ４１２７６、ｒｓ１６０３７５、ｒｓ９１７２７５、ｒｓ４１３４８、ｒｓ８８６８１６、ｒｓ１７１５７０４８、ｒｓ６４６２０９８、ｒｓ１０９５１２０１、ｒｓ１３３１１２４８、ｒｓ１２５４０４８０、ｒｓ１０２６５１６６、ｒｓ７７９８７７４、ｒｓ７７９９２４６、ｒｓ６９７２０８１、ｒｓ１２５３３０７９、ｒｓ７８０６５４７、ｒｓ６４６２１００、ｒｓ６９７９３５２、ｒｓ６９５０５７４、ｒｓ４７２２８３５、ｒｓ２０６６９７９、ｒｓ１０４８６５９１、ｒｓ７２１９９３、ｒｓ２２３７３５１、ｒｓ３７３５５６６、ｒｓ１１９７５５３９、ｒｓ６４６２１０７、ｒｓ２１９０３０６、ｒｓ４７１９９５５、およびｒｓ１０２２８１３７）、並びにＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１１５３７１１、ｒｓ１１５３７０２、ｒｓ７５８３４３１、ｒｓ１１５３６９９、ｒｓ２３０２６６３、ｒｓ３８４５７４４、ｒｓ２１２３４９、ｒｓ２１２３４７、ｒｓ１２６９３０５７、ｒｓ１１５３６８５、ｒｓ２１２３６０、ｒｓ２１２３６１、ｒｓ２０７２５３８、ｒｓ１２０５３９９、ｒｓ１１５３６７６、ｒｓ７５６６４０１、ｒｓ７５７８５６９、ｒｓ３７５５４９０、ｒｓ１３３８８３０８、ｒｓ１１８８８５０７、ｒｓ１０４９７４３４、ｒｓ２６８２１４、ｒｓ１６６５３１、ｒｓ２６８２２８、ｒｓ２６８２２９、ｒｓ２６８２３０、ｒｓ２６８２３１、ｒｓ１０４９７４３５、ｒｓ１９８２２３５、ｒｓ２６８２３７、ｒｓ１３０３０４７４、およびｒｓ２６８１７４）のいずれか１つを含むオリゴヌクレオチドを提供する。当該遺伝子多型部位は、配列番号１〜１７２のいずれか１つに示される塩基配列の第５１番目の塩基である。
本発明のオリゴヌクレオチドの塩基は、少なくとも１０塩基、好ましくは１０〜１５０塩基、より好ましくは１０〜４５塩基、さらに好ましくは１４〜２５塩基を有することが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドとしては、例えば上記のサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子の遺伝子多型を含有する、配列番号１〜１７２のいずれか１つに示される塩基配列または当該塩基配列に相補的な塩基配列から選択されるオリゴヌクレオチドが挙げられる（表７〜１０）。
本発明のオリゴヌクレオチドは、６．で後述するサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型の検出において、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子特異的なプローブおよびプライマーとして用いることができる。
【表７】
2013047912.tif 000008
【表８】
2013047912.tif 000009
【表９】
2013047912.tif 000010
【表１０】
2013047912.tif 000011
表７〜１０（配列番号１〜１７２）には１０１塩基が表示されており、その５１番目に遺伝子多型部位を表示してある。例えば、「Ａ／Ｇ」と表示したものは「Ａ」と「Ｇ」の遺伝子多型であることを意味し、「Ｃ／Ｔ」は「Ｃ」と「Ｔ」の遺伝子多型であることを意味する。
３．ハプロタイプ解析
本発明においては、上記遺伝子多型のうちＳＮＰを用いてハプロタイプを構築することができる。ハプロタイプ解析の対象となるＳＮＰは、その遺伝子多型頻度が０．５％以上のものであればよく、好ましくは１％、より好ましくは５％以上のものを選択することができる。また、ハプロタイプ解析の対象となるＳＮＰは、全部であってもその一部であってもよい。
ハプロタイプ解析は、種々のコンピュータープログラムで解析することが可能であり、例えば、Ｈａｐｌｏｖｉｅｗ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｒｏａｄｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．ｏｒｇ／ｈａｐｌｏｖｉｅｗ／ｈａｐｌｏｖｉｅｗのウェブサイトから入手可能（以下同様）；Ｂａｒｒｅｔｔ  ＪＣ，Ｆｒｙ  Ｂ，Ｍａｌｌｅｒ  Ｊ，Ｄａｌｙ  ＭＪ．Ｈａｐｌｏｖｉｅｗ：ａｎａｌｙｓｉｓ  ａｎｄｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＬＤ  ａｎｄ  ｈａｐｌｏｔｙｐｅ  ｍａｐｓ．Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ．２００５Ｊａｎ  １５［ＰｕｂＭｅｄ  ＩＤ：１５２９７３００］Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ  ０２１４２，ＵＳＡ．）を用いることができる。
ハプロタイプ解析の例として、上記２．において見出した日本人健常者のサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型のうち、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型である１７箇所のＳＮＰ、ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子多型である４０箇所のＳＮＰ、ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子多型である６４箇所のＳＮＰ、およびＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型である３１箇所のＳＮＰに関して、Ｈａｐｌｏｖｉｅｗを用いて各連鎖不平衡ブロック（ハプロタイプブロック）ごとにハプロタイプを推定した。推定したハプロタイプをそれぞれ表１１〜１４に示す。なお、表中の「Ｔａｇ」は、連鎖不平衡ブロック中の代表的な遺伝子多型であるＴａｇ  ＳＮＰを意味する。
【表１１】
2013047912.tif 000012
【表１２】
2013047912.tif 000013
【表１３】
2013047912.tif 000014
【表１４】
2013047912.tif 000015
さらに、集団における各個体のサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質（ＣＲＥＢ）遺伝子についての遺伝子型情報から、当該集団におけるハプロタイプ頻度を算出し、当該ハプロタイプ頻度をもとにして連鎖不平衡解析を行うことができる。連鎖不平衡の尺度を示す値であるＤ´値およびｒ２値は、以下の定義に基づき算出することができる。
定義：
ＳＮＰ  ＡとＳＮＰ  Ｂとがあり、それぞれのアレルをＡ、ａとＢ、ｂとする。ＳＮＰ  ＡとＳＮＰ  Ｂとが作る４つのハプロタイプをＡＢ、Ａｂ、ａＢ、ａｂとし、それぞれのハプロタイプ頻度をＰＡＢ、ＰＡｂ、ＰａＢ、Ｐａｂとすると、
Ｄ＝ＰＡＢ×Ｐａｂ−ＰＡｂ×ＰａＢ（Ｄ＞０のとき）
Ｄ´＝（ＰＡＢ×Ｐａｂ−ＰＡｂ×ＰａＢ）／Ｍｉｎｉｍｕｍ（（（ＰＡＢ＋ＰａＢ）×（ＰａＢ＋Ｐａｂ）），（（ＰＡＢ＋ＰＡｂ）×（ＰＡｂ＋Ｐａｂ）））（Ｄ＜０のとき）
Ｄ´＝（ＰＡＢ×Ｐａｂ−ＰＡｂ×ＰａＢ）／Ｍｉｎｉｍｕｍ（（（ＰＡＢ＋ＰａＢ）×（ＰＡＢ＋ＰＡｂ）），（（ＰａＢ＋Ｐａｂ）×（ＰＡｂ＋Ｐａｂ）））
ｒ２＝（ＰＡＢ×Ｐａｂ−ＰＡｂ×ＰａＢ）２／［（ＰＡＢ＋ＰＡｂ）（ＰＡＢ＋ＰａＢ）（ＰａＢ＋Ｐａｂ）（ＰＡｂ＋Ｐａｂ）］［但し、Ｍｉｎｉｍｕｍ（（（ＰＡＢ＋ＰａＢ）×（ＰａＢ＋Ｐａｂ）），（（ＰＡＢ＋ＰＡｂ）×（ＰＡｂ＋Ｐａｂ）））は、（ＰＡＢ＋ＰａＢ）×（ＰａＢ＋Ｐａｂ）と（ＰＡＢ＋ＰＡｂ）×（ＰＡｂ＋Ｐａｂ）との内、値の小さい方をとることを意味する。］
さらに、連鎖不平衡解析を行った結果からハプロタイプブロックを推定することができる。ハプロタイプブロックは、ハプロタイプ解析の結果から、例えば、Ｈａｐｌｏｖｉｅｗを用いて連鎖ブロックを推定することができる。
推定されたハプロタイプブロック中の特定のＳＮＰを調べると、間接的に同一ブロック内で連鎖しているＳＮＰの情報を知ることができる。つまり、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子（詳しくはＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子、またはＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子、またはＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子またはＡＴＦ２サブタイプ遺伝子）の遺伝子多型を調べる際に、すべてのＳＮＰを解析する必要はなく、代表的なＳＮＰであるＴａｇ  ＳＮＰなどの特定のいくつかのＳＮＰについてのみタイピングを行えばよい。
４．サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と薬物感受性および疾患脆弱性との相関
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子に遺伝子多型が生じると、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質の機能や発現量が変化する場合があると考えられる。従って、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質に関するさまざまな表現型とは相関関係にある場合がある。
ここで、表現型とは、薬物の感受性に関する表現型（薬物感受性）と、疾患の発症に関する表現型（疾患脆弱性）とを挙げることができる。薬物感受性としては、薬物の有効性、薬物の副作用および薬物の有効持続期間等が挙げられる。また、疾患脆弱性としては、疼痛感受性および物質依存脆弱性（特に、薬物依存への脆弱性）等が挙げられる。
本発明において、前記薬物としては、限定はされないが、オピオイド受容体機能修飾薬およびサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質機能修飾薬等が好ましく挙げられ、例えば、オピオイド受容体またはサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質に直接的または間接的に作用する各種薬物が挙げられる。オピオイド受容体に直接的または間接的に作用する各種薬物としては、具体的には、メタンフェタミン等の覚醒剤、ドパミン受容体作動薬、ドパミン受容体拮抗薬、μ、κ、δオピオイド受容体作動薬、μ、κ、δオピオイド受容体拮抗薬等を挙げることができる。サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質に直接的または間接的に作用する各種薬物としては、具体的には、リン酸化酵素、コアクチベーター、ＰＤＥ４阻害薬、脱リン酸化酵素、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質各種サブタイプ作動薬、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質各種サブタイプ拮抗薬等を挙げることができる。
オピオイド受容体機能修飾薬としては、例えば、モルヒネ、ＤＡＭＧＯ、コデイン、メサドン、カルフェンタニール、フェンタニル、ヘロイン、コカイン、ナロキソン、ナルトレキソン、ナロルフィン、レバロルファン、ペンタゾシン、ペチジン、ブプレノルフィン、オキシコドン、ヒドロコドン、レボルファノール、エトルフィン、ジヒドロエトルフィン、ヒドロモルホン、オキシモルホン、トラマドール、ジクロフェナク、インドメタシン、フルルビプロフェンアキセチル、マーカイン、エタノール、メタノール、ジエチルエーテル、プロパノール、ブタノール、フルピルチン、笑気、Ｆ３（１クロロ１，２，２トリフルオロサイクロブタン）、ハロセン、エストラジオール、ジチオトレイトール、チオリダジン、ピモザイド、フルオキセチン、パロキセチン、デシプラミン、イミプラミン、クロミプラミン、テトラミド、イソフルレン、ギンセノシド、イフェンプロディール、ブピバカイン、テルチアピン、クロザピン、ハロペリドール、ＳＣＨ２３３９０およびコカイン等が挙げられ、特にモルヒネ、ペンタゾシン、ペチジン、ブプレノルフィン、ジクロフェナク、インドメタシン、フルルビプロフェンアキセチル、マーカインが好ましく、モルヒネ、フェンタニルおよびペンタゾシンがより好ましい。
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質機能修飾薬としては、例えば、ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）、カルシニューリン、プロテインキナーゼＡ、プロテインキナーゼＣ、ｐ９０リボソームＳ６キナーゼ１（ＲＳＫ１）、カルモジュリンキナーゼ、グリコーゲン合成酵素キナーゼ３βおよびＣＲＥＢ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｃｏａｃｔｉｖａｔｏｒ  １（ＣＲＴＣ１）がより好ましい。
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と表現型との相関は、例えば、以下の（１）〜（４）のように調べることができる。
（１）健常者における連鎖不平衡解析およびハプロタイプ解析の結果、推定された連鎖不平衡ブロック内の遺伝子多型を選択する。例えば、代表的な遺伝子多型であるＴａｇ  ＳＮＰを表現型との相関解析用のサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型として選択する。
（２）次に、被験者（患者）における当該遺伝子多型についての遺伝子多型頻度を解析する。遺伝子多型と疾患脆弱性との相関を調べる場合、被験者と健常者の遺伝子多型頻度との比較を行う。比較においてはχ２乗検定などの統計手法を用いることが有効である。
ここで、さらに、表現型の違いにより被験者を分類し、分類毎に健常者と被験者の遺伝子多型頻度や遺伝子型を比較してもよい。疾患の発症に関する表現型が覚醒剤精神病様症状の場合、例えば、覚醒剤の使用開始から妄想・幻覚を発症するまでの期間、使用停止後に妄想・幻覚が持続する期間、再燃性の有無、多剤乱用の有無で分類できる。
（３）被験者において薬物感受性と有意に関連した遺伝子多型があれば、当該遺伝子多型を薬物感受性の遺伝的素因の評価に用いることができる。また、健常者と被験者との間で遺伝子多型頻度に有意差のある遺伝子多型があれば、当該遺伝子多型を疾患脆弱性の遺伝的素因の評価に用いることができる。
ただし、遺伝子多型の傾向は、人種や出身地等に影響されることが示唆されているため、関連する遺伝子多型（例えばＳＮＰ）を見出すのに用いた母集団と同様な遺伝子多型を示す集団おいて、当該遺伝子多型を用いる上記評価を行うことが望ましい。
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と表現型との相関の具体例を以下の（１）〜（４）に示す。
（１）術後２４時間総鎮痛薬投与必要量の測定結果との相関において、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）でマイナーアレル（Ｃ）を持つ外科手術を受けた患者は、そのアレル保有数に相関して、術後鎮痛薬の投与必要量（対数変換）が統計学的に有意に多かった。したがって、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）を解析することにより、鎮痛薬への感受性をより容易に予測することができる。
（２）術前の手指氷水浸漬による疼痛感知潜時の測定結果との相関において、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）でのマイナーアレル（Ｃ）の保有と、疼痛感知潜時（対数変換）とは、有意な関連を示した。したがって、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）を解析することにより、疼痛に対する感受性をより容易に予測することができる。
（３）術後２４時間後の疼痛の強さの尺度（ＶＡＳ：Ｖｉｓｕａｌ  ａｎａｌｏｇｕｅ  ｓｃａｌｅ）の測定結果との相関において、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）でマイナーアレル（Ｃ）を持つ外科手術を受けた患者は、そのアレル保有数に相関して、ＶＡＳの値（対数変換）が統計学的に有意に大きかった。したがって、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）を解析することにより、術後の疼痛または鎮痛薬に対する感受性をより容易に予測することができる。
（４）術前の手指氷水浸漬による疼痛感知潜時閾値差の測定結果との相関において、ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ７５８３４３１）でマイナーアレル（Ｃ）を持つ外科手術を受けた患者は、そのアレル保有数に相関して、手指氷水浸漬における疼痛感知潜時閾値差（対数変換）が統計学的に有意に短かった。したがって、ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ７５８３４３１）を解析することにより、術前の鎮痛薬に対する感受性をより容易に予測することができる。
５．解析結果の利用
上記４のように解析されたサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と表現型との相関は、オピオイド受容体およびサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質に関する様々な薬物および疼痛の感受性を予測する方法、オピオイド受容体およびサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質に関する疾患の治療または予防法を選択する方法、または治療用の薬物の適正投与量を決定する方法、副作用を予測する方法などの指標として利用することができる。
また、本発明の遺伝子多型または方法を用いて、人種の違いによる薬物感受性および疾患脆弱性を評価することが可能である。対象者は特に限定されるものではなく、日本人、欧米人などが挙げられるが、本発明においては日本人または日本人と同様の遺伝子多型傾向を有する者であることが好ましい。
６．遺伝子多型の検出
被験対象者からのゲノム試料は、血液、唾液、皮膚等から抽出することができるが、ゲノム試料を採取できるものであれば、これに限定されるものではない。ゲノムＤＮＡの抽出および精製法は周知である。例えば、ヒトから採取した血液、唾液、皮膚等の検体から、フェノール法等を用いてゲノムＤＮＡを精製する。その際、ＧＦＸ  Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｂｌｏｏｄ  ＤＮＡ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＧＥヘルスケア  バイオサイエンス株式会社製）等の市販のゲノムＤＮＡ抽出キットや装置を用いてもよい。検出するＳＮＰがエクソン中にある場合は、ゲノムＤＮＡの代わりにｍＲＮＡやｔｏｔａｌ  ＲＮＡを抽出してもよい。
ゲノム試料中のサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型の検出には、上記した本発明のオリゴヌクレオチドをプローブおよびプライマーとして用いることができる。以下、遺伝子多型検出法の一例を示す。
（１）ＰＣＲ法による遺伝子多型の検出
ＰＣＲにより被験サンプルを増幅するには、忠実度の高いＤＮＡポリメラーゼ、例えば、ＫＯＤ  Ｄａｓｈポリメラーゼ（ＴＯＹＯＢＯ社製）を用いることが好ましい。用いるプライマーは、被験サンプル中の対象ＳＮＰを増幅できるように設計し合成する。上流および下流側のプライマーの間の任意の位置に遺伝子多型またはその相補鎖が含まれるのが好ましい。増幅反応終了後は、増幅産物の検出を行い、シークエンス法などにより遺伝子多型の有無を判定する。
（２）塩基配列決定法による遺伝子多型の検出
ジデオキシ法に基づく塩基配列決定法により本発明の遺伝子多型を検出することもできる。塩基配列決定に用いるシークエンサーには、市販のＡＢＩシリーズ（アプライドバイオシステムズ（ライフテクノロジーズ））を用いることができる。
（３）ＤＮＡマイクロアレイによる遺伝子多型の検出
ＤＮＡマイクロアレイは、支持体上にオリゴヌクレオチドプローブが固定されたものであり、ＤＮＡチップ、Ｇｅｎｅチップ、マイクロチップ、ビーズアレイなどを含む。まず、被験サンプルのポリヌクレオチドを単離し、ＰＣＲにより増幅し、蛍光レポーター基により標識する。続いて、標識化ＤＮＡ／ｍＲＮＡ、ｔｏｔａｌ  ＲＮＡをアレイと共にインキュベートする。
次に前記アレイをスキャナーに差し込み、ハイブリダイゼーションパターンを検出する。ハイブリダイゼーションのデータは、プローブアレイに結合した（すなわち標的配列に取り込まれた）蛍光レポーター基からの発光として採集する。標的配列と完全に一致したプローブは、標的配列と一致していない部分を有するものよりも強いシグナルを生じる。アレイ上の各プローブの配列および位置は分かっているため、相補性によって、プローブアレイと反応させた標的ポリヌクレオチドの配列を決定することができる。
（４）ＴａｑＭａｎ  ＰＣＲ法による遺伝子多型の検出
ＴａｑＭａｎ  ＰＣＲ法は、蛍光標識したアレル特異的オリゴヌクレオチド（ＴａｑＭａｎプローブとも言う）とＴａｑ  ＤＮＡポリメラーゼによるＰＣＲとを利用する方法である。アレル特異的オリゴヌクレオチドとは、遺伝子多型部位を含むオリゴヌクレオチドである。ＴａｑＭａｎ  ＰＣＲ法で用いるアレル特異的オリゴヌクレオチドは、前記遺伝子多型情報に基づいて設計することができる。
（５）インベーダー法による遺伝子多型の検出
インベーダー法は、アレル特異的オリゴヌクレオチドと鋳型とをハイブリダイゼーションすることにより遺伝子多型を検出する方法である。インベーダー法を行うためのキットは市販されており（例えばＮａｎｏ  Ｉｎｖａｄｅｒ（Ｒ）Ａｒｒａｙ（ビー・エム・エル社製））、この方法により容易に遺伝子多型を検出することが可能である。
７．キット
本発明は、薬物感受性および疾患脆弱性を評価するためのキットを提供する。本発明の遺伝子多型検出用キットは、本発明を実施するために必要な１種以上の成分を含む。
例えば、本発明のキットは、酵素を保存若しくは供給するためのもの、および／または遺伝子多型検出を実施するために必要な反応成分を含むことが好ましい。当該成分としては、限定されるものではないが、例えば、本発明のオリゴヌクレオチド、酵素緩衝液、ｄＮＴＰ、コントロール用試薬（例えば、組織サンプル、ポジティブおよびネガティブコントロール用標的オリゴヌクレオチドなど）、標識用および／または検出用試薬、固相支持体、説明書などが挙げられる。また本発明のキットは、必要な成分のうちの一部のみを含む部分的キットであってもよく、その場合には、ユーザーが他の成分を用意することができる。
本発明のキットは、上記オリゴヌクレオチドを支持体に固定したマイクロアレイとして提供することもできる。マイクロアレイは、支持体上に本発明のオリゴヌクレオチドが固定されたものであり、ＤＮＡチップ、Ｇｅｎｅチップ、マイクロチップ、ビーズアレイなどを含む。
本発明のキットは、本発明において見出されたサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型を含み、当該遺伝子多型を含むＤＮＡ断片に特異的にハイブリダイズしうるオリゴヌクレオチドを含むことが好ましい。
本発明のキットにより遺伝子多型を判定する場合、例えば、薬物を患者等に使用する前（例えば術前、癌性疼痛時等）に採血してサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子を含むＤＮＡを単離し、当該遺伝子をキット中のオリゴヌクレオチドと反応させて遺伝子型を判定する。
判定した遺伝子型および遺伝子多型から薬物の種類または用量などの投与計画を作成することができる。その結果、個体に合った薬物効果を得ることができ、オーダーメイド医療に有用となる。例えばモルヒネを使用する場合は、個体に合った鎮痛効果を得、また副作用を最低限に抑えることができる。
以下に、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例１】
【０００６】
＜ＳＮＰ解析およびハプロタイプ構築＞
（ＳＮＰ解析）
ヒト（日本人健常者：１２７名）の血液から常法によりゲノムＤＮＡを抽出し、ヒトサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質の４つののサブタイプ（ＣＲＥＢ１、ＣＲＥＢ３、ＣＲＥＢ５、ＡＴＦ２）について遺伝子多型を同定した。
ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子に関しては、全エクソン領域、５´および３´フランキング領域およびイントロン領域を解析範囲とした。ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子は、イントロン領域に７つの遺伝子多型を日本人サンプルにおいて同定した。また、５´および３´フランキング領域には４個および６個の遺伝子多型を見出した（表１５参照）。連鎖不平衡解析の結果、５´フランキングから３´フランキング領域にかけて１つの連鎖不平衡ブロックを見出した（図１、図２参照）。この連鎖不平衡ブロックを代表するＴａｇ  ＳＮＰとして、ｒｓ１６８３９８３７、ｒｓ２３６０９６９、ｒｓ１０９３２２００、ｒｓ２５５１９４６、ｒｓ４２３４０８０およびｒｓ７５９４５６０が適切であることが見出された。
また、同様に、ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子に関しても、全エクソン領域、５´および３´フランキング領域およびイントロン領域を解析範囲とした。ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子は、イントロン領域に１つ、５´および３´フランキング領域に２５個および１４個の遺伝子多型を日本人サンプルにおいて同定した（表１５参照）。連鎖不平衡解析の結果、５´フランキング領域に１つの連鎖不平衡ブロックを、５´フランキング領域から３´フランキング領域にかけて１つの連鎖不平衡ブロックを見出した（図３、図４参照）。この連鎖不平衡ブロックを代表するＴａｇ  ＳＮＰとして、ｒｓ１２４３８７２、ｒｓ２１４５９２５、ｒｓ２０２５１２６、ＧＡ００７４７７、ｒｓ１１５４１９０８、ｒｓ３７６３６３０、ｒｓ１０８１４２７４、ｒｓＧＡ０２５６８４、ｒｓ１０８１４２７５、ｒｓ４８７８６２８およびｒｓ１０７５８３２１が適切であることが見出された。
また、同様に、ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子に関しても、全エクソン領域、５´および３´フランキング領域およびイントロン領域を解析範囲とした。ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子は、エクソンの非翻訳領域に２つ、イントロン領域に２４１個、５´および３´フランキング領域に９個および５個の遺伝子多型を日本人サンプルにおいて同定した（表１６参照）。そのうちの一部の遺伝子多型による連鎖不平衡解析の結果、５´フランキング領域に１つの連鎖不平衡ブロックを、イントロン領域に１５個の連鎖不平衡ブロックを、エクソンの非翻訳領域から３´フランキング領域にかけて１つの連鎖不平衡ブロックを見出した（図５、図６参照）。この連鎖不平衡ブロックを代表するＴａｇ  ＳＮＰとして、ｒｓ４７２２７７８、ｒｓ１７７４７９、ｒｓ１７７４８６、ｒｓ１７７４９８、ｒｓ１０２２９５００、ｒｓ１０２４３６５９、ｒｓ４７２２７８５、ｒｓ１１７７２８１５、ｒｓ１６８７４５２５、ｒｓ１７７１５１７４、ｒｓ６９５３５２４、ｒｓ１０２３９８１０、ｒｓ１７１５６６４９、ｒｓ１８１１２４８、ｒｓ８８７６２３、ｒｓ７４０９８８、ｒｓ６９５２２２７、ｒｓ４２６９５、ｒｓ１０２９８９７、ｒｓ１０２３３６５３、ｒｓ６９５５１０５、ｒｓ１７１５６６９９、ｒｓ１７７５７２、ｒｓ１７７５７３、ｒｓ１７７５８０、ｒｓ１７７５８１、ｒｓ１２６６６６３６、ｒｓ１００８２６２、ｒｓ３１０３５３、ｒｓ４１２７３、ｒｓ１６３７４５７、ｒｓ１７１５６９１９、ｒｓ４１２７６、ｒｓ１６０３７５、ｒｓ１７１５７０４８、ｒｓ６４６２０９８、ｒｓ１０９５１２０１、ｒｓ１３３１１２４８、ｒｓ１０２６５１６６、ｒｓ６９７２０８１、ｒｓ１２５３３０７９、ｒｓ７８０６５４７、ｒｓ６４６２１００、ｒｓ６９７９３５２、ｒｓ７２１９９３、ｒｓ２２３７３５１およびｒｓ３７３５５６６が適切であることが見出された。
また、同様に、ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子に関しても、全エクソン領域、５´および３´フランキング領域およびイントロン領域を解析範囲とした。ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子は、エクソン１の非翻訳領域に１つ、イントロン領域に１６個、５´および３´フランキング領域に１１個および６個の遺伝子多型を日本人サンプルにおいて同定した（表１５参照）。連鎖不平衡解析の結果、５´フランキング領域からイントロン領域にかけて１つの連鎖不平衡ブロックを、３´フランキング領域に１つの連鎖不平衡ブロックを見出した（図７、図８参照）。この連鎖不平衡ブロックを代表するＴａｇ  ＳＮＰとして、ｒｓ１１５３７１１、ｒｓ１１５３７０２、ｒｓ７５８３４３１、ｒｓ２３０２６６３、ｒｓ３８４５７４４、ｒｓ２６８２１４およびｒｓ１９８２２３５が適切であることが見出された。
【表１５】
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【表１６】
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表１５および表１６において、アミノ酸置換を引き起こす多型、すなわち遺伝子多型のアレルに依存して翻訳後のアミノ酸の種類が変化する多型は、存在しなかった。
また、表１５および表１６において、「マイナーアレル頻度」は、マイナーアレルの割合を意味する。なお、被験者となった健常者の人数は、合計１２７人であった。
（ハプロタイプ構築）
ハプロタイプ解析の例として、日本人健常者のサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型のうち、表１５および表１６に示すＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型である１７箇所のＳＮＰ、ＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子多型である４０箇所のＳＮＰ、ＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子多型である８３箇所のＳＮＰ、およびＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型である２３箇所のＳＮＰに関して、Ｈａｐｌｏｖｉｅｗを用いて各連鎖不平衡ブロック（ハプロタイプブロック）ごとにハプロタイプを推定した。推定したハプロタイプを表１７、表１８、表１９、および表２０に示す。なお、表中の「Ｔａｇ」は、連鎖不平衡ブロック中の代表的な遺伝子多型であるＴａｇ  ＳＮＰを意味する。
【表１７】
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【表１８】
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【表１９】
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【表２０】
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表１７に示すように、日本人健常者におけるＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型のハプロタイプは、少なくとも７ハプロタイプが推定され、そのうち３％以上の高頻度でみられるものは６ハプロタイプあった（ハプロタイプ番号Ｈ１〜Ｈ６）。なお、１％未満の頻度で起こることが推定されるハプロタイプについては、表１７中では具体的な表記を割愛した。
また、表１８に示すように、日本人健常者におけるＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子多型のハプロタイプは、少なくとも１４ハプロタイプが推定され、そのうち３％以上の高頻度でみられるものは１１ハプロタイプあった（ハプロタイプ番号Ｈ１〜Ｈ５、Ｈ８〜Ｈ１０およびＨ１２〜Ｈ１４）。なお、１％未満の頻度で起こることが推定されるハプロタイプについては、表１８中では具体的な表記を割愛した。
また、表１９に示すように、日本人健常者におけるＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子多型のハプロタイプは、少なくとも６５ハプロタイプが推定され、そのうち３％以上の高頻度でみられるものは５７ハプロタイプあった（ハプロタイプ番号Ｈ１〜Ｈ３、Ｈ６〜Ｈ９、Ｈ１１〜Ｈ２２、Ｈ２４〜Ｈ３６、Ｈ３８〜Ｈ５４、Ｈ５６、Ｈ５８およびＨ６０〜Ｈ６５）。なお、１％未満の頻度で起こることが推定されるハプロタイプについては、表１９中では具体的な表記を割愛した。
また、表２０に示すように、日本人健常者におけるＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型のハプロタイプは、少なくとも９ハプロタイプが推定され、そのうち３％以上の高頻度でみられるものは９ハプロタイプあった（ハプロタイプ番号Ｈ１〜Ｈ９）。なお、１％未満の頻度で起こることが推定されるハプロタイプについては、表２０中では具体的な表記を割愛した。
表１７、表１８、表１９、および表２０に示すハプロタイプ解析のハプロタイプ頻度の解析とともに、連鎖不平衡解析を行った。その結果を図１〜図８に示す。図１および図２に、日本人健常者におけるＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型間の連鎖不平衡を示す。また、図３および図４に、日本人健常者におけるＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子多型間の連鎖不平衡を示す。また、図５および図６に、日本人健常者におけるＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子多型間の連鎖不平衡を示す。また、図７および図８に、日本人健常者におけるＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型間の連鎖不平衡を示す。
連鎖不平衡解析を行った結果（図１〜図８）からＨａｐｌｏｖｉｅｗを用いて連鎖不平衡ブロックを推定した。
図１において、ＳＮＰとＳＮＰとの連鎖不平衡の指標であるＤ´値を計算し、その値の小数点以下２桁の値を図の各ＳＮＰから左下または右下方向に連なる四角形の交わった四角形に記している。また、連鎖不平衡のより厳しい指標であるｒ２値についても同様に計算し、その値を図２の同様の四角形に記している。なお、値の無い四角形はＤ´またはｒ２の値が１であることを示す。また、図３および図４、図５および図６、図７および図８に関しても同様に表している。
図１のＤ´に着目すると、多くの遺伝子多型の組み合わせにおいて、完全連鎖不平衡（Ｄ´＝１）が確認された。また、図２のｒ２値に着目しても、いくつかの遺伝子多型が強い連鎖不平衡（ｒ２＝１）であることが分かった。これらの連鎖不平衡ブロックを代表するＴａｇ  ＳＮＰとして、ｒｓ１６８３９８３７、ｒｓ２３６０９６９、ｒｓ１０９３２２００、ｒｓ２５５１９４６、ｒｓ４２３４０８０およびｒｓ７５９４５６０が適切であることが分かった。
また、図３のＤ´に着目すると、多くの遺伝子多型の組み合わせにおいて、完全連鎖不平衡（Ｄ´＝１）が確認された。また、図４のｒ２値に着目すると、いくつかの遺伝子多型が強い連鎖不平衡（ｒ２＝１）であることが分かった。これらの連鎖不平衡ブロックを代表するＴａｇ  ＳＮＰとして、ｒｓ１２４３８７２、ｒｓ２１４５９２５、ｒｓ２０２５１２６、ＧＡ００７４７７、ｒｓ１１５４１９０８、ｒｓ３７６３６３０、ｒｓ１０８１４２７４、ｒｓＧＡ０２５６８４、ｒｓ１０８１４２７５、ｒｓ４８７８６２８およびｒｓ１０７５８３２１が適切であることが分かった。
図５のＤ´に着目すると、多くの遺伝子多型の組み合わせにおいて、完全連鎖不平衡（Ｄ´＝１）が確認された。また、図６のｒ２値に着目しても、いくつかの遺伝子多型が強い連鎖不平衡（ｒ２＝１）であることが分かった。これらの連鎖不平衡ブロックを代表するＴａｇ  ＳＮＰとして、ｒｓ４７２２７７８、ｒｓ１７７４７９、ｒｓ１７７４８６、ｒｓ１７７４９８、ｒｓ１０２２９５００、ｒｓ１０２４３６５９、ｒｓ４７２２７８５、ｒｓ１１７７２８１５、ｒｓ１６８７４５２５、ｒｓ１７７１５１７４、ｒｓ６９５３５２４、ｒｓ１０２３９８１０、ｒｓ１７１５６６４９、ｒｓ１８１１２４８、ｒｓ８８７６２３、ｒｓ７４０９８８、ｒｓ６９５２２２７、ｒｓ４２６９５、ｒｓ１０２９８９７、ｒｓ１０２３３６５３、ｒｓ６９５５１０５、ｒｓ１７１５６６９９、ｒｓ１７７５７２、ｒｓ１７７５７３、ｒｓ１７７５８０、ｒｓ１７７５８１、ｒｓ１２６６６６３６、ｒｓ１００８２６２、ｒｓ３１０３５３、ｒｓ４１２７３、ｒｓ１６３７４５７、ｒｓ１７１５６９１９、ｒｓ４１２７６、ｒｓ１６０３７５、ｒｓ１７１５７０４８、ｒｓ６４６２０９８、ｒｓ１０９５１２０１、ｒｓ１３３１１２４８、ｒｓ１０２６５１６６、ｒｓ６９７２０８１、ｒｓ１２５３３０７９、ｒｓ７８０６５４７、ｒｓ６４６２１００、ｒｓ６９７９３５２、ｒｓ７２１９９３、ｒｓ２２３７３５１およびｒｓ３７３５５６６が適切であることが分かった。
また、図７のＤ´に着目すると、多くの遺伝子多型の組み合わせにおいて、完全連鎖不平衡（Ｄ´＝１）が確認された。また、図８のｒ２値に着目すると、いくつかの遺伝子多型が強い連鎖不平衡（ｒ２＝１）であることが分かった。これらの連鎖不平衡ブロックを代表するＴａｇ  ＳＮＰとして、ｒｓ１１５３７１１、ｒｓ１１５３７０２、ｒｓ７５８３４３１、ｒｓ２３０２６６３、ｒｓ３８４５７４４、ｒｓ２６８２１４およびｒｓ１９８２２３５が適切であることが分かった。
また、連鎖不平衡解析を行った結果（図１〜図８）からＨａｐｌｏｖｉｅｗを用いて連鎖不平衡ブロックを推定した。その結果、図１および図２に示すＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子のＳＮＰについては、５´フランキング領域から３´フランキング領域にかけて１つの連鎖不平衡ブロックを確認した。同様に、図３および図４に示すＣＲＥＢ３サブタイプ遺伝子のＳＮＰについては、５´フランキング領域に１つの連鎖不平衡ブロックを、５´フランキング領域から３´フランキング領域にかけて１つの連鎖不平衡ブロックを確認した。同様に、図５および図６に示すＣＲＥＢ５サブタイプ遺伝子のＳＮＰについては、５´フランキング領域に１つの連鎖不平衡ブロックを、イントロン領域に１５個の連鎖不平衡ブロックを、エクソンの非翻訳領域から３´フランキング領域にかけて１つの連鎖不平衡ブロックを確認した。同様に、図７および図８に示すＡＴＦ２サブタイプ遺伝子のＳＮＰについては、５´フランキング領域からイントロン領域にかけて１つの連鎖不平衡ブロックを、３´フランキング領域に１つの連鎖不平衡ブロックを確認した。
【実施例２】
【０００７】
＜ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）と、鎮痛薬投与必要量との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、鎮痛薬投与必要量との相関を調べた。外科手術（下顎形成外科手術）を受けた２４７名の患者の血液よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）を判定した。そして、これら遺伝子多型の判定結果と、術後の鎮痛薬投与必要量との相関を解析した。
なお、鎮痛薬としては、主にＰＣＡ（Ｐａｔｉｅｎｔ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ａｎａｌｇｅｓｉａ）ポンプにより静脈内投与されるフェンタニルを用いた。
その結果、下記表２１および図９に示すように、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）でマイナーアレル（Ｃ）を持つ外科手術を受けた患者は、そのアレル保有数に相関して、術後鎮痛薬の投与必要量（対数変換）が統計学的に有意に多かった。したがって、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）を解析することにより、鎮痛薬への感受性を予測することができる。
なお、術後２４時間のフェンタニル投与必要量の中央値２．２２２（μｇ／ｋｇ）の値を基準としてそれより小さい値および大きい値の患者群をそれぞれ鎮痛薬高感受性群および鎮痛薬低感受性群と定義し、ＣＲＥＢ１遺伝子のｒｓ１０９３２２００多型により層別化したところ、この多型においてＡ／Ａの患者群では、５４％および４６％の患者がそれぞれ鎮痛薬高感受性群および鎮痛薬低感受性群と判定されたのに対し、Ｃ／Ｃの患者群では、２３％および７７％の患者がそれぞれ鎮痛薬高感受性群および鎮痛薬低感受性群と判定された。
【表２１】
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【実施例３】
【０００８】
＜ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）と、疼痛感受性との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、疼痛感受性との相関を調べた。外科手術（下顎形成外科手術）を受けた２４７名の患者の血液よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）を判定した。そして、これら遺伝子多型の判定結果と、術前の手指氷水浸漬による疼痛感知潜時の測定との相関を解析した。
その結果、下記表２２および図１０に示すように、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）でマイナーアレル（Ｃ）を持つ外科手術を受けた患者は、そのアレル保有数に相関して、疼痛感知潜時の測定結果（対数変換）が統計学的に有意に小さかった。したがって、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）を解析することにより、疼痛への感受性を予測することができる。
なお、術前の手指氷水浸漬による疼痛感知潜時の測定結果の中央値１５（秒）の値を基準としてそれより小さい値および大きい値の患者群をそれぞれ疼痛高感受性群および疼痛低感受性群と定義し、ＣＲＥＢ１遺伝子のｒｓ１０９３２２００多型により層別化したところ、この多型においてＡ／Ａの患者群では、４５％および５５％の患者がそれぞれ疼痛高感受性群および疼痛低感受性群と判定されたのに対し、Ａ／ＣまたはＣ／Ｃの患者群では、５５％および４５％の患者がそれぞれ疼痛高感受性群および疼痛低感受性群と判定された。
【表２２】
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【実施例４】
【０００９】
＜ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）と、疼痛感受性との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、疼痛感受性との相関を調べた。外科手術（下顎形成外科手術）を受けた２４７名の患者の血液よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）を判定した。そして、これら遺伝子多型の判定結果と、術後２４時間後の疼痛の強さの尺度（ＶＡＳ：Ｖｉｓｕａｌ  ａｎａｌｏｇｕｅ  ｓｃａｌｅ）の測定との相関を解析した。
その結果、下記表２３および図１１に示すように、術後２４時間後の疼痛の強さの尺度（ＶＡＳ）の測定結果（対数変換）との相関において、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）でマイナーアレル（Ｔ）を持つ外科手術を受けた患者は、そのアレル保有数に相関して、ＶＡＳの値（対数変換）が統計学的に有意に大きかった。したがって、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ１０９３２２００）を解析することにより、術後の疼痛または鎮痛薬に対する感受性をより容易に予測することができる。
なお、術後２４時間後のＶＡＳの中央値２４（ｍｍ）の値を基準としてそれより小さい値および大きい値の患者群をそれぞれ疼痛低感受性群および疼痛高感受性群と定義し、ＣＲＥＢ１遺伝子のｒｓ１０９３２２００多型により層別化したところ、この多型においてＡ／Ａの患者群では、５４％および４６％の患者がそれぞれ疼痛低感受性群および疼痛高感受性群と判定されたのに対し、Ａ／ＣまたはＣ／Ｃの患者群では、４７％および５３％の患者がそれぞれ疼痛低感受性群および疼痛高感受性群と判定された。
【表２３】
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【実施例５】
【００１０】
＜ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ７５８３４３１）と、フェンタニルの鎮痛効果との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、疼痛感受性との相関を調べた。外科手術（下顎形成外科手術）を受けた２４７名の患者の血液よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ７５８３４３１）を判定した。そして、これら遺伝子多型の判定結果と、術前の鎮痛薬投与後の手指氷水浸漬における疼痛感知潜時の閾値差の測定により評価されるフェンタニルの鎮痛効果との相関を解析した。
その結果、下記表２４および図１２に示すように、術前の手指氷水浸漬による疼痛感知潜時の閾値差の測定結果（対数変換）との相関において、ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ７５８３４３１）でマイナーアレル（Ｃ）を持つ外科手術を受けた患者は、そのアレル保有数に相関して、手指氷水浸漬における疼痛感知潜時閾値差（対数変換）が統計学的に有意に小さかった。したがって、ＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ７５８３４３１）を解析することにより、術前の鎮痛薬への感受性をより容易に予測することができる。
なお、術前の手指氷水浸漬による疼痛感知潜時閾値差の測定結果の中央値１３（秒）の値を基準として、それより小さい値および大きい値の患者群をそれぞれ鎮痛薬低感受性群および鎮痛薬高感受性群と定義し、ＡＴＦ２遺伝子のｒｓ７５８３４３１多型により層別化したところ、この多型においてＡ／Ａの患者群では、４０％および６０％の患者がそれぞれ鎮痛薬低感受性群および鎮痛薬高感受性群と判定されたのに対し、Ｃ／Ｃの患者群では、７１％および２９％の患者がそれぞれ鎮痛薬低感受性群および鎮痛薬高感受性群と判定された。
【表２４】
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【実施例６】
【００１１】
＜ＣＲＥＢ１、ＣＲＥＢ３、ＣＲＥＢ５およびＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型と、鎮痛薬投与必要量、疼痛感受性、およびフェンタニルの鎮痛効果との相関＞
実施例２〜５と同様にして、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、鎮痛薬投与必要量、疼痛感受性、およびフェンタニルの鎮痛効果との相関を調べた。外科手術（下顎形成外科手術）を受けた合計３５５名の患者の血液よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１、ＣＲＥＢ３、ＣＲＥＢ５およびＡＴＦ２サブタイプ遺伝子の遺伝子多型（連鎖不平衡ブロック内のＴａｇ  ＳＮＰおよび連鎖不平衡ブロック外の個別ＳＮＰ）を判定した。そして、これら遺伝子多型の判定結果と、術後２４時間鎮痛薬投与必要量、術前疼痛感受性、術後２４時間後術前疼痛感受性（ＶＡＳ）、およびフェンタニルの鎮痛効果との相関を解析した。
なお、鎮痛薬としては、主にＰＣＡ（Ｐａｔｉｅｎｔ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ａｎａｌｇｅｓｉａ）ポンプにより静脈内投与されるフェンタニルを用いた。
その結果、ＣＲＥＢ１、ＣＲＥＢ３、ＣＲＥＢ５およびＡＴＦ２サブタイプ遺伝子多型に関して、術後２４時間鎮痛薬投与必要量、術前疼痛感受性、術後２４時間後術前疼痛感受性（ＶＡＳ）、およびフェンタニルの鎮痛効果のいずれかの表現型と統計学的に有意な関連を示した。したがって、これらの遺伝子多型を解析することにより、鎮痛薬への感受性、疼痛感受性、およびフェンタニルの鎮痛効果を予測することができる。実施例２〜５の結果も含めて、本実施例の結果を下記表２５にまとめて示す。
【表２５】
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【実施例７】
【００１２】
＜ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）と、鎮痛薬投与必要量との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、鎮痛薬投与必要量との相関を調べた。外科手術（下顎形成外科手術）を受けた３５４名の患者の血液よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を判定した。そして、これら遺伝子多型の判定結果と、術後の鎮痛薬投与必要量との相関を解析した。
なお、鎮痛薬としては、主にＰＣＡ（Ｐａｔｉｅｎｔ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ａｎａｌｇｅｓｉａ）ポンプにより静脈内投与されるフェンタニルを用いた。
その結果、下記表２６および図１３に示すように、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）でマイナーアレル（Ｃ）を持つ外科手術を受けた患者は、そのアレル保有数に相関して、術後鎮痛薬の投与必要量（対数変換）が統計学的に有意に多かった。したがって、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を解析することにより、鎮痛薬への感受性を予測することができる。
なお、術後２４時間のフェンタニル投与必要量の中央値２．２６８（μｇ／ｋｇ）の値を基準としてそれより小さい値および大きい値の患者群をそれぞれ鎮痛薬高感受性群および鎮痛薬低感受性群と定義し、ＣＲＥＢ１遺伝子のｒｓ２９５２７６８多型により層別化したところ、この多型においてＴ／ＴまたはＴ／Ｃの患者群では、５３％および４７％の患者がそれぞれ鎮痛薬高感受性群および鎮痛薬低感受性群と判定されたのに対し、Ｃ／Ｃの患者群では、２２％および７８％の患者がそれぞれ鎮痛薬高感受性群および鎮痛薬低感受性群と判定された。
【表２６】
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【実施例８】
【００１３】
＜ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）と、鎮痛薬投与必要量との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、鎮痛薬投与必要量との相関を調べた。外科手術（腹部外科手術）を受けた１１２名の患者の血液または口腔粘膜よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を判定した。そして、これら遺伝子多型の判定結果と、術後の鎮痛薬投与必要量との相関を解析した。
なお、鎮痛薬としては、主に静脈内投与されるペンタゾシンおよびペチジン、主に座薬として投与されるブプレノルフィン、ジクロフェナクおよびインドメタシン、また点滴静脈内注射されるフルルビプロフェンアキセチル、並びに硬膜外モルヒネといった鎮痛薬を用いた。
なお、フェンタニル換算総鎮痛薬量とは、投与した各鎮痛薬をフェンタニルに換算した場合の総鎮痛薬量（ｍｇ）を意味する。各鎮痛薬のフェンタニルへの換算は、０．３ｍｇフェンタニルと等力価が、９０ｍｇペンタゾシン、３６０ｍｇペチジン（オピスタン）、１ｍｇブプレノルフィン（レペタン）、３００ｍｇジクロフェナク（ボルタレン）、３００ｍｇフルルビプロフェンアキセチル（ロピオン）、６ｍｇ硬膜外モルヒネとして換算した。
その結果、下記表２７および図１４に示すように、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）でメジャーアレル（Ｔ）を持たない外科手術を受けた患者は、当該アレルＴを持つ患者群と比較して、術後鎮痛薬の投与必要量（対数変換）が統計学的に有意に多かった。したがって、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を解析することにより、鎮痛薬への感受性を予測することができる。
なお、術後２４時間のフェンタニル換算総鎮痛薬投与必要量の中央値２．４５３（μｇ／ｋｇ）の値を基準としてそれより小さい値および大きい値の患者群をそれぞれ鎮痛薬高感受性群および鎮痛薬低感受性群と定義し、ＣＲＥＢ１遺伝子のｒｓ２９５２７６８多型により層別化したところ、この多型においてＴ／ＴまたはＴ／Ｃの患者群では、５２％および４８％の患者がそれぞれ鎮痛薬高感受性群および鎮痛薬低感受性群と判定されたのに対し、Ｃ／Ｃの患者群では、３３％および６７％の患者がそれぞれ鎮痛薬高感受性群および鎮痛薬低感受性群と判定された。
【表２７】
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【実施例９】
【００１４】
＜ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）と、メタンフェタミン依存患者における薬物依存重症度との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、薬物依存重症度に関する薬物依存脆弱性との相関を調べた。メタンフェタミン依存患者１９４名の血液よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を判定した。そして、患者群を多剤乱用の有無により分類して比較した。その結果を下記表２８に示す。ここで、メタンフェタミン依存患者を、覚醒剤以外の薬物を乱用（２種類以上）した患者群と、単剤乱用（１種類のみ）の患者群の２群に分類した。
その結果、下記表２８から分かるように、遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）に関して、遺伝子型頻度において顕著な頻度差が認められ、メジャーアレル（Ｔ）を持つメタンフェタミン依存患者は、当該アレルＴを持たない患者群と比較して、多剤乱用者が統計学的に有意に多かった。
以上の結果から、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型における遺伝子型頻度を判定することにより、覚醒剤依存重症度に関する薬物感受性を容易に予測し得ることが示された。
【表２８】
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【実施例１０】
【００１５】
＜ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）と、アルコール依存患者における薬物依存重症度との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、薬物依存重症度に関する薬物依存脆弱性との相関を調べた。アルコール依存患者４３６名の血液よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を判定した。そして、患者群を薬物乱用の有無により分類して比較した。その結果を下記表２９に示す。ここで、アルコール依存患者を、薬物を乱用（１種類以上）した患者群と、薬物乱用無し（アルコール飲酒のみ）の患者群の２群に分類した。
その結果、下記表２９から分かるように、遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）に関して、遺伝子型頻度および対立遺伝子（アレル）頻度において顕著な頻度差が認められ、薬物乱用無しの患者群に比べて薬物乱用患者ではメジャーアレル（Ｔ）頻度が統計学的に有意に高いことが示された。
以上の結果から、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型における遺伝子型頻度およびアレル頻度を判定することにより、薬物依存重症度に関する薬物依存脆弱性を容易に予測し得ることが示された。
【表２９】
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【実施例１１】
【００１６】
＜ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）と、摂食障害患者における薬物依存重症度との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、薬物依存重症度に関する薬物依存脆弱性との相関を調べた。摂食障害患者２２１名の血液よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を判定した。そして、患者群を薬物依存の有無により分類して比較した。その結果を下記表３０に示す。ここで、摂食障害患者を、薬物依存を合併した患者群と、薬物依存合併無しの患者群の２群に分類した。
その結果、下記表３０から分かるように、遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）に関して、遺伝子型頻度および対立遺伝子（アレル）頻度において顕著な頻度差が認められ、薬物依存合併無しの患者群に比べて薬物依存合併患者ではメジャーアレル（Ｔ）頻度が統計学的に有意に高いことが示された。
以上の結果から、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型における遺伝子型頻度およびアレル頻度を判定することにより、薬物依存重症度に関する薬物依存脆弱性を容易に予測し得ることが示された。
【表３０】
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【実施例１２】
【００１７】
＜ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）と、摂食障害患者における物質依存重症度との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、物質（アルコール）依存重症度に関する物質（アルコール）依存脆弱性との相関を調べた。摂食障害患者２２１名の血液よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を判定した。そして、患者群をアルコール依存の有無により分類して比較した。その結果を下記表３１に示す。ここで、摂食障害患者を、アルコール依存を合併した患者群と、アルコール依存合併無しの患者群の２群に分類した。
その結果、下記表３１から分かるように、遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）に関して、遺伝子型頻度および対立遺伝子（アレル）頻度において顕著な頻度差が認められ、アルコール依存合併無しの患者群に比べてアルコール依存合併患者ではメジャーアレル（Ｔ）頻度が統計学的に有意に高い傾向であることが示された。
以上の結果から、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型における遺伝子型頻度およびアレル頻度を判定することにより、物質（アルコール）依存重症度に関する物質（アルコール）依存脆弱性を容易に予測し得ることが示された。
【表３１】
2013047912.tif 000032
【実施例１３】
【００１８】
＜ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）と、報酬依存度との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、報酬依存度に関する依存傾向パーソナリティーとの相関を調べた。健常者４９５名の口腔粘膜よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を判定した。そして、これら遺伝子多型の判定結果と、依存傾向パーソナリティーとの相関を解析した。
なお、依存傾向パーソナリティーのテストとしては、Ｔｅｍｐｅｒａｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒ  Ｉｎｖｅｎｔｏｒｙ（ＴＣＩ）における報酬依存度（Ｒｅｗａｒｄ  ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ：ＲＤ）スコア（平均値）を用いた。
その結果、下記表３２および図１５に示すように、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）でマイナーアレル（Ｃ）を持つ健常者は、そのアレル保有数に相関して、ＲＤスコア（対数変換）が統計学的に有意に少なかった。したがって、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を解析することにより、依存傾向パーソナリティーを予測することができる。
ＲＤスコアの中央値０．６６７の値を基準としてそれより小さい値および大きい値の患者群をそれぞれ低報酬依存度群および高報酬依存度群と定義し、ＣＲＥＢ１遺伝子のｒｓ２９５２７６８多型により層別化したところ、この多型においてＴ／Ｔの健常者群では、４３％および５７％の健常者がそれぞれ低報酬依存度群および高報酬依存度群と判定されたのに対し、Ｃ／Ｃの健常者群では、５８％および４２％の健常者がそれぞれ低報酬依存度群および高報酬依存度群と判定された。
以上の結果から、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型における遺伝子型頻度およびアレル頻度を判定することにより、報酬依存度に関する依存傾向パーソナリティーを容易に予測し得ることが示された。
【表３２】
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【実施例１４】
【００１９】
＜ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）と、ＣＲＥＢ１遺伝子発現量との相関＞
サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型と、遺伝子発現量との相関を調べた。スタンレー財団脳バンクにおける死後脳組織提供対象者１００名の血液よりゲノムＤＮＡを抽出し、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子の１つの遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を判定した。そして、これら遺伝子多型の判定結果と、遺伝子発現量との相関を解析した。
なお、遺伝子発現量としては、βアクチン遺伝子（ＡＣＴＢ）のｍＲＮＡ発現量値で標準化したＣＲＥＢ１の相対ｍＲＮＡ発現量値を用いた。
その結果、下記表３３および図１６に示すように、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）でメジャーアレル（Ｔ）を持たない対象者は、当該アレルＴを持つ対象者群と比較して、ＣＲＥＢ１のｍＲＮＡ発現量（対数変換）が統計学的に有意に多かった。したがって、ＣＲＥＢ１サブタイプ遺伝子多型（ｒｓ２９５２７６８）を解析することにより、遺伝子発現量を予測することができる。
相対ｍＲＮＡ発現量の中央値０．０１４５の値を基準としてそれより小さい値および大きい値の対象者群をそれぞれ低遺伝子発現量群および高遺伝子発現量群と定義し、ＣＲＥＢ１遺伝子のｒｓ２９５２７６８多型により層別化したところ、この多型においてＴ／ＴまたはＴ／Ｃの対象者群では、５２％および４８％の対象者がそれぞれ低遺伝子発現量群および高遺伝子発現量群と判定されたのに対し、Ｃ／Ｃの対象者群では、３０％および７０％の対象者がそれぞれ低遺伝子発現量群および高遺伝子発現量群と判定された。
以上の結果から、サイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型における遺伝子型頻度およびアレル頻度を判定することにより、ＣＲＥＢ１遺伝子発現量の傾向（高遺伝子発現傾向であるか低遺伝子発現傾向であるか）を容易に予測し得ることが示された。
【表３３】
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【産業上の利用可能性】
【００２０】
本発明により、薬物感受性および疾患脆弱性に関する個体差を評価することができるサイクリックＡＭＰ応答配列結合タンパク質遺伝子多型または当該遺伝子多型により構成されるハプロタイプ、および当該遺伝子多型もしくはハプロタイプを用いた薬物感受性および疾患脆弱性の評価方法等を提供することができる。この評価方法により、モルヒネ等の麻薬性薬物に関する処方適正量および処方適正スケジュールなどを容易に知ることまたは予測することが可能となり、テーラーメイド疼痛治療および薬物依存治療などに極めて有用である。
［配列表］
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【国際調査報告】
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