(57)【要約】  生理活性物質を粒子内部に内包或いは粒子表面に担持したポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成された生体適合性ナノ粒子をｐＨ７〜１０の緩衝液中に分散させる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成されたナノ粒子の内部または表面の少なくとも一方に生理活性物質を担持した生体適合性ナノ粒子と、ｐＨ７以上１０以下の緩衝液と、を含む液状組成物。
【請求項２】
前記緩衝液が、ｐＨ７以上８以下のリン酸−クエン酸緩衝液であることを特徴とする請求項１に記載の液状組成物。
【請求項３】
前記緩衝液が、ｐＨ７以上１０以下のリン酸緩衝液であることを特徴とする請求項１に記載の液状組成物。
【請求項４】
前記緩衝液中に、さらに増粘剤を添加したことを特徴とする請求項１に記載の液状組成物。
【請求項５】
前記増粘剤が、水溶性高分子であることを特徴とする請求項４に記載の液状組成物。
【請求項６】
前記水溶性高分子が、キサンタンガム、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、カルボマー、アルギン酸、ヒドロキシプロピルセルロース、カラギーナン、ローカストビーンガム、グァーガム、疎水性ポリエーテルウレタンからなる群より選ばれた少なくとも一種であることを特徴とする請求項５に記載の液状組成物。
【請求項７】
前記生体適合性ナノ粒子の平均粒子径が１０ｎｍ以上３００ｎｍ以下であることを特徴とする請求項１に記載の液状組成物。
【請求項８】
前記ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体の重量平均分子量が５，０００以上１００，０００以下であることを特徴とする請求項１に記載の液状組成物。
【請求項９】
請求項１乃至請求項８のいずれか１項に記載の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る化粧料。
【請求項１０】
請求項１乃至請求項８のいずれか１項に記載の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る頭髪用化粧料。
【請求項１１】
請求項１乃至請求項８のいずれか１項に記載の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る育毛剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、粒子内部または表面の少なくとも一方に生理活性物質を担持させた生体適合性ナノ粒子を分散液中に分散させた液状組成物及びそれを用いた化粧料並びに育毛剤に関し、特に、分散液中でのナノ粒子の安定化法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、脱毛の防止及び育毛を目的とする育毛成分が配合された育毛剤が多数上市されている。また、皮膚の乾燥を防止するためにヒアルロン酸等の保湿成分を配合した化粧料も多数上市されている。このような育毛剤や化粧料において、育毛成分による発毛効果や保湿成分による保湿効果を十分に発現させるためには、作用部位までの有効成分の確実な到達に加えて、有効成分を到達直後から所定期間に亘って放出させる、いわゆる即効性と徐放性とを有することが望ましい。【０００３】
そこで、薬物が作用部位に到達するまで吸収・分解されないようにして、効果的に薬物を投与する技術、いわゆるDrug  Delivery  System（以下、ＤＤＳという）を用いて育毛成分や保湿成分を目的の部位に供給する方法が考えられる。ＤＤＳにおいて中心となる技術の一つは、微量の薬物を生体適合性の高分子の内部または表面に担持させ、細胞への薬物導入効率の高い数十から数百ナノメートル程度のナノ粒子とする技術である。この薬物担持ナノ粒子は、目標とする患部まで薬物を安定して確実に運搬するとともに、高分子の種類や投与後の経過時間で薬物の放出速度（徐放性）をコントロールすることにより、作用部位に到達した時点で薬物を放出することができ、注射剤や経口剤としての用途の他、従来、皮膚深部まで十分浸透させることが困難であった外用剤にも高い効果を発揮する。【０００４】
例えば特許文献１には、育毛成分として、ステビア抽出物と、セラミド前駆体と、セラミドと、血流促進成分とを封入した生体適合性ナノ粒子を含む頭皮用育毛剤が開示されている。また、特許文献２には、生体適合性ナノ粒子の内部または表面の少なくとも一方にヒアルロン酸を担持したヒアルロン酸担持ナノ粒子を配合して成る化粧料が開示されている。また、特許文献３には、活性物質を封入したミクロスフェアの製造方法が開示されている。さらに、上記特許文献１〜３には、生体適合性ナノ粒子を形成する生体適合性高分子として、薬物を内包可能であり、当該薬物の効力を保持したまま長期間保存できるＰＬＧＡ（乳酸・グリコール酸共重合体）が好ましいことが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００９−１０７９４１号公報
【特許文献２】特開２０１０−１５０１５１号公報
【特許文献３】特表平９−５０４０２６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ところで、ＰＬＧＡは分子内にエステル結合が含まれるため、ＰＬＧＡナノ粒子は水溶液中で加水分解され易いという性質を有している。そのため、特許文献１の育毛剤、或いは特許文献２の化粧料では、使用前まではＰＬＧＡナノ粒子粉末とそれを分散させる液体（以下、分散液という）とを別々の容器に充填して保存しておき、使用直前にＰＬＧＡナノ粒子粉末と分散液とを所定量混合して分散液として使用していた。【０００７】
しかしながら、この方法では使用者がＰＬＧＡナノ粒子粉末と分散液とを混合するため、混合量を間違えたり混合時にＰＬＧＡナノ粒子粉末や分散液をこぼしたりするおそれがあり、使用性の面で十分とは言えなかった。そこで、予めナノ粒子粉末を分散液中に分散させた一剤型の製品の開発が望まれていた。【０００８】
なお、特許文献３には、ＰＬＧＡミクロスフェアを含む製剤のｐＨは、通例約５〜８、好ましくは６．５〜７．５であることが記載されているが、ＰＬＧＡナノ粒子の加水分解とｐＨの関係について具体的に検討されたものではなかった。また、ＰＬＧＡと同じ性質を有するエステル結合を含むポリ乳酸、ポリグリコール酸で形成されたナノ粒子を分散液中に分散させる場合についても同様の問題点があった。【０００９】
本発明は、上記問題点に鑑み、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成されたナノ粒子の分散液中での加水分解を所望の期間抑制することができる液状組成物、及びそれを用いた化粧料並びに育毛剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記目的を達成するために本発明は、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成されたナノ粒子の内部または表面の少なくとも一方に生理活性物質を担持した生体適合性ナノ粒子と、ｐＨ７以上１０以下の緩衝液と、を含む液状組成物である。【００１１】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、前記緩衝液が、ｐＨ７以上８以下のリン酸−クエン酸緩衝液であることを特徴としている。【００１２】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、前記緩衝液が、ｐＨ７以上１０以下のリン酸緩衝液であることを特徴としている。【００１３】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、前記緩衝液中に、さらに増粘剤を添加したことを特徴としている。【００１４】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、前記増粘剤が、水溶性高分子であることを特徴としている。【００１５】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、前記水溶性高分子が、キサンタンガム、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、カルボマー、アルギン酸、ヒドロキシプロピルセルロース、カラギーナン、ローカストビーンガム、グァーガム、疎水性ポリエーテルウレタンからなる群より選ばれた少なくとも一種であることを特徴としている。【００１６】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、前記生体適合性ナノ粒子の平均粒子径が１０ｎｍ以上３００ｎｍ以下であることを特徴としている。【００１７】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、前記ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体の重量平均分子量が５，０００以上１００，０００以下であることを特徴としている。【００１８】
また本発明は、上記構成の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る化粧料である。【００１９】
また本発明は、上記構成の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る頭髪用化粧料である。【００２０】
また本発明は、上記構成の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る育毛剤である。
【発明の効果】
【００２１】
本発明の第１の構成によれば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成された生体適合性ナノ粒子の加水分解に伴う乳酸、グリコール酸の生成に起因する液状組成物のｐＨの低下が、緩衝液の緩衝作用によって抑制される。従って、ナノ粒子の加水分解を所定期間効果的に抑制できる液状組成物となる。【００２２】
また、本発明の第２の構成によれば、上記第１の構成の液状組成物において、緩衝液として、ｐＨ７以上８以下のリン酸−クエン酸緩衝液を用いることにより、緩衝液の緩衝作用によってｐＨの低下、及びそれに伴うナノ粒子の加水分解を抑制することができる。また、緩衝剤であるリン酸水素二ナトリウムとクエン酸の組み合わせは水に対する溶解度が高いため、緩衝剤の濃度を高くして緩衝作用を容易に高めることができる。さらに、液状組成物のｐＨが８以下に抑えられるため、人体に対する安全性もより高くなる。【００２３】
また、本発明の第３の構成によれば、上記第１の構成の液状組成物において、緩衝液として、ｐＨ７以上１０以下のリン酸緩衝液を用いることにより、緩衝液の緩衝作用によってｐＨの低下、及びそれに伴うナノ粒子の加水分解を抑制することができる。また、ｐＨが１０以下に抑えられるため、人体に対する悪影響も少ない液状組成物となる。【００２４】
また、本発明の第４の構成によれば、上記第１の構成の液状組成物において、緩衝液中にさらに増粘剤を添加することにより、緩衝液中でのナノ粒子の凝集や沈降の発生を抑制することができ、ナノ粒子の安定した分散状態を所定期間維持することができる液状組成物となる。【００２５】
また、本発明の第５の構成によれば、上記第４の構成の液状組成物において、増粘剤として水溶性高分子を添加することにより、緩衝液中に容易に溶解する水溶性高分子を用いてナノ粒子の凝集や沈降の発生を簡単に且つ効果的に抑制することができる。【００２６】
また、本発明の第６の構成によれば、上記第５の構成の液状組成物において、水溶性高分子としてキサンタンガム、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、カルボマー、アルギン酸、ヒドロキシプロピルセルロース、カラギーナン、ローカストビーンガム、グァーガム、疎水性ポリエーテルウレタンからなる群より選ばれた少なくとも一種を用いることにより、生体への悪影響がなく、安全性の高い液状組成物となる。【００２７】
また、本発明の第７の構成によれば、上記第１の構成の液状組成物において、生体適合性ナノ粒子の平均粒子径を１０ｎｍ以上３００ｎｍ以下とすることにより、化粧料や育毛剤として使用する際に、毛穴や毛穴以外の皮膚細胞の隙間部分からも皮膚の深部にまでナノ粒子が浸透する液状組成物となる。【００２８】
また、本発明の第８の構成によれば、上記第１の構成の液状組成物において、ナノ粒子を形成するポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体の重量平均分子量を５，０００以上１００，０００以下とすることにより、生理活性物質をナノ粒子に担持した状態で所定期間の保存が可能であり、使用時には数時間〜数十時間単位での生理活性物質の徐放が可能な液状組成物となる。【００２９】
また、本発明の第９の構成によれば、上記第１乃至第８のいずれかの構成の液状組成物を化粧料として用いるか、または前記液状組成物が配合された化粧料とすることにより、予めナノ粒子粉末を液中に分散させることで使用性に優れ、且つ一定期間安定して保存可能な一剤型の化粧料が提供される。【００３０】
また、本発明の第１０の構成によれば、上記第１乃至第８のいずれかの構成の液状組成物を頭髪用化粧料として用いるか、または前記液状組成物が配合された頭髪用化粧料とすることにより、予めナノ粒子粉末を液中に分散させることで使用性に優れ、且つ一定期間安定して保存可能な一剤型の頭髪用化粧料が提供される。【００３１】
また、本発明の第１１の構成によれば、上記第１乃至第８のいずれかの構成の液状組成物を育毛剤として用いるか、または前記液状組成物が配合された育毛剤とすることにより、予めナノ粒子粉末を液中に分散させることで使用性に優れ、且つ一定期間安定して保存可能な一剤型の育毛剤が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】試験例１における、２０℃で１２ヶ月間保管した実施例１〜５及び比較例１、２の各試験液のｐＨの推移を示すグラフ
【図２】試験例１における、２０℃で２ヶ月間保管した実施例１〜５及び比較例１、２の各試験液のＰＬＧＡの分子量保持率の推移を示すグラフ
【図３】試験例１における、２０℃で１８ヶ月間保管した実施例２及び比較例２の各試験液のＰＬＧＡの分子量保持率の推移を示すグラフ
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本発明の液状組成物は、生理活性物質を粒子内部に内包或いは粒子表面に担持した生体適合性ナノ粒子を分散液中に分散させたものである。このナノ粒子が毛穴や皮膚表面から皮膚の深部にまで浸透することにより、生理活性物質を皮膚深部にまで到達させるとともに、皮膚深部においてナノ粒子から徐々に生理活性物質を放出させることができるため、特に皮膚の保湿を目的とする化粧料や、頭皮に作用してフケやかゆみを抑える頭髪用化粧料、発毛、育毛効果を発現する育毛剤等の原料として好適に用いることができる。
【００３４】
（生体適合性高分子）
本発明の液状組成物に用いられる生体適合性ナノ粒子を形成する生体適合性高分子は、生体への刺激・毒性が低く、投与後分解して代謝される生体内分解性のものが望ましい。また、内包する生理活性物質を持続して徐々に放出する粒子であることが好ましい。このような素材としては、特に乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ）を好適に用いることができる。ＰＬＧＡは種々の薬物を内包可能であり、薬効を保持したまま長期間保存できることが知られている。さらに、内包される薬物の種類やＰＬＧＡの分子量等にもよるが、ＰＬＧＡの加水分解・長期半減期の特徴から、数時間から数ヶ月単位の徐放ができると考えられる。
【００３５】
ＰＬＧＡの重量平均分子量は、５，０００〜１００，０００の範囲内であることが好ましく、ナノ粒子の調製の容易さや調製されたナノ粒子の皮膚浸透性、及び皮膚内部での分解性を考慮すれば１５，０００〜２５，０００の範囲内であることがより好ましい。乳酸とグリコール酸との組成比（モル比）は１：９９〜９９：１であればよいが、乳酸１に対しグリコール酸１／３であることが好ましい。
【００３６】
また、水溶性の生理活性物質を内包する場合、ＰＬＧＡの表面をポリエチレングリコール（ＰＥＧ）で修飾しておくと、内包量を増やせるため好ましい。生体適合性高分子としては他に、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）が挙げられる。また、アミノ酸のような荷電基あるいは官能基化し得る基を有していてもよい。
【００３７】
（生理活性物質）
ナノ粒子内部に内包或いはナノ粒子表面に担持される生理活性物質は、本発明の液状組成物の用途に応じて選択することができる。本発明の液状組成物を育毛剤として使用する場合は、毛母細胞活性剤、毛髪成分であるセラミド及びセラミド前駆体、消炎剤、男性ホルモン拮抗剤、血行促進剤、殺菌剤、保湿剤、局所刺激剤、抗脂漏剤等の、育毛効果を有する生理活性物質が挙げられる。
【００３８】
毛母細胞活性剤は、毛母細胞や毛根細胞に直接作用して、或いは細胞分裂のエネルギー源となるＡＴＰを増加させて細胞分裂を活性化するものである。このような毛母細胞活性剤の具体例としては、ステビア抽出物、パンテノール、パントテン酸カルシウム、パントテン酸エチル、パントテニルエチルエーテル等のパンテノール誘導体、ヒノキチオール、アスパラギン酸カリウム、ペンタデカン酸グリセリド、感光素３０１、Ｎ−アセチル−Ｌ−メチオニン、５−モノニトログアヤコール、モノニトログアヤコールナトリウム、グルコン酸クロルヘキシジン、ビオチン、ネタカナール、チクセツニンジン、タイソウエキス、プラセンタエキス、ニンジンエキス、ローヤルゼリーエキス、ニンニク成分等が挙げられる。
【００３９】
毛髪成分であるセラミド２及びセラミド５は、毛髪ダメージや毛髪強度を短期間で効果的に改善し、ハリやコシのある健やかな毛髪を産生することができる。セラミド前駆体としては、セラミド２及びセラミド５の産生能が高いグルコシルセラミドが好ましく、中でも工業的に入手容易なコメヌカスフィンゴ糖脂質が好ましい。
【００４０】
消炎剤は、頭皮の炎症を抑えてフケやかゆみを抑制するものである。このような消炎剤の具体例としては、β−グリチルレチン酸及びその誘導体、脂溶性グリチルレチン酸類、グリチルリチン酸及びグリチルリチン酸ジカリウム、グリチルリチン酸モノアンモニウム等のグリチルリチン酸誘導体、塩酸ジフェンヒドラミン、酢酸ヒドロコルチゾン、ブレドニゾロン、サリチル酸、アズレン、グアイアズレン、甘草エキス、エイジツエキス、オウゴンエキス、シコンエキス、カワラヨモギエキス、キキョウエキス、キョウニンエキス、クチナシエキス、熊笹抽出液、ゲンチアナエキス、コンフリーエキス、サンザシエキス、シラカバエキス、セイヨウノコギリソウエキス、ゼニアオイエキス、トウニンエキス、桃葉エキス、ビワ葉エキス等が挙げられる。
【００４１】
男性ホルモン拮抗剤は、５αリダクターゼ阻害剤のように毛母細胞の分裂を鈍くする男性ホルモンの活動を抑制するものである。このような男性ホルモン拮抗剤の具体例としては、エストラジオール、エチニルエストラジオール、スピロノラクトン、オキセンドロン、ジエチルスチルベストロール、エピテストステロン、エストロン、サイプロテロンアセテート、１１α−ハイドロキシプロゲステロン、フルタマイド、３−デオキシアデノシン、酢酸クロルマジノン、ホップエキス、ペパーミントエキス、チョウジエキス、キナエキス、アロエエキス、サンショウエキス、オタネニンジンエキス等が挙げられる。
【００４２】
血行促進剤は、毛細血管を拡張することにより血流量を増大させ、毛乳頭への栄養補給を促進するものである。このような血行促進剤の具体例としては、ニコチン酸及びニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等のニコチン酸誘導体、セファランチン、塩化カルプロニウム、アセチルコリン、γ−オリザノール、サークレチン、クロマカリム、ニコランジル、ピナシジル、フタリド類、ジアルキルモノアミン誘導体、イチョウエキス、カミツレエキス、トウキエキス、センキュウエキス、ローズマリーエキス、センブリエキス、ベニバナエキス、トウガラシチンキ、チンピエキス、ショウキョウチンキ、ニンジンエキス、ショウブ根エキス、当薬エキス、ユズ抽出液等が挙げられる。
【００４３】
殺菌剤は、発毛に悪影響のある雑菌の繁殖を防止するものである。このような殺菌剤の具体例としては、ヒノキチオール、イソプロピルメチルフェノール、メントール、サリチル酸、塩化ベンザルコニウム、オクトピロックス、クロロヘキシジン、ジンクピリチオン、ソルビン酸カリウム、ビオゾール、クジンエキス、ムクロジエキス、オウバクエキス等が挙げられる。
【００４４】
保湿剤は、頭皮の乾燥を防止して柔軟にすることで、発毛環境を整えるものである。このような保湿剤の具体例としては、トレハロース、メイグイファ、ソルビトール、可溶性コラーゲン、グリセリン、コンドロイチン硫酸、チューベローズポリサッカライド、冬虫夏草、トリサッカライド、尿素、バイオヒアルロン酸、ヒアルロン酸、ビタミンＣリン酸エステルカルシウム塩、ピロリドンカルボン酸ナトリウム、プロピレングリコール、ボタンピエキス、アロエエキス、プラセンタエキス、エンメイソウエキス、オトギリソウエキス、オーツ麦エキス、オオムギ抽出液、オレンジ抽出液、海草エキス、キューカンバーエキス、ゴボウエキス、シイタケエキス、ジオウエキス、デュークエキス、ビワ抽出液、ブドウ葉エキス、プルーンエキス、ヘチマエキス、マイカイエキス、ミニササニシキ、ユリエキス、リンゴエキスなどが挙げられる。
【００４５】
局所刺激剤は、頭皮の新陳代謝の活性化、頭皮の強化、かゆみ防止等の効果を有するものである。このような局所刺激剤の具体例としては、カンファー、トウガラシチンキ、ノニル酸ワニリルアミド、メントール、ショウキョウチンキ、オランダカラシエキス、カンタリスチンキ、サンショウエキス、ハッカ油、ワサビ大根エキス等が挙げられる。
【００４６】
抗脂漏剤は、脱毛を促進する過剰に分泌された皮脂を除外したり、皮脂腺の活動を抑制したりするものである。このような抗脂漏剤の具体例としては、カシュウエキス、オドリコソウエキス、イオウ、チオキソロン、バンサイド、ポリソルベート類、レシチン等が挙げられる。
【００４７】
本発明の液状組成物を頭髪用化粧料や皮膚用化粧料として使用する場合は、上記の殺菌剤、局所刺激剤、保湿剤の他、ビタミンやビタミン誘導体等が必要に応じて加えられる。
【００４８】
（ナノ粒子の製造方法）
次に、生理活性物質が内包または表面担持されたナノ粒子の製造方法について説明する。ナノ粒子の製造方法としては、生理活性物質および生体適合性高分子を１，０００ｎｍ未満の平均粒径を有する粒子に加工できる方法であれば特に限定されるものではない。例えば、本実施態様においては球形晶析法を好適に用いることができる。球形晶析法は、化合物合成の最終プロセスにおける結晶の生成・成長プロセスを制御することで、球状の結晶粒子を設計し、その物性を直接制御して加工することができる方法である。この球形晶析法の一つに、エマルション溶媒拡散法（ＥＳＤ法）がある。
【００４９】
ＥＳＤ法は、次に示すような原理によって、ナノ粒子（ナノスフェア）を製造する技術である。本法には、基材ポリマーとなる生体適合性高分子を溶解できる良溶媒と、これとは逆に生体適合性高分子を溶解しない貧溶媒の二種類の溶媒が用いられる。この良溶媒には、生体適合性高分子を溶解し、且つ貧溶媒へ混和するアセトン等の有機溶媒を用いる。そして、貧溶媒には、通常、ポリビニルアルコール水溶液等を用いる。以下、生体適合性高分子として乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ）を用いた場合の操作手順を詳述する。
【００５０】
まず、ＰＬＧＡを良溶媒中に溶解後、ＰＬＧＡが析出しないように、生理活性物質の溶解液を良溶媒中へ添加混合する。このＰＬＧＡと生理活性物質を含む混合液を、貧溶媒中に攪拌下、滴下すると、混合液中の良溶媒（有機溶媒）が貧溶媒中へ急速に拡散移行する。その結果、貧溶媒中で良溶媒の自己乳化が起き（マランゴニ効果）、サブミクロンサイズの良溶媒のエマルション滴が形成される。さらに、良溶媒と貧溶媒の相互拡散により、エマルション内から有機溶媒が貧溶媒へと継続的に拡散していくので、エマルション滴内のＰＬＧＡ並びに生理活性物質の溶解度が低下し、最終的に、生理活性物質を内包した結晶粒子のＰＬＧＡナノ粒子が生成する（ナノ粒子形成工程）。
【００５１】
上記球形晶析法では、物理化学的な手法でナノ粒子を形成でき、しかも得られるナノ粒子が略球形であるため、均質なナノ粒子を、触媒や原料化合物の残留といった問題を考慮することなく、容易に形成することができる。その後、良溶媒である有機溶媒を減圧留去し（溶媒留去工程）、乾燥することで、ナノ粒子粉末を得る。
【００５２】
溶媒留去の方法としては、真空法と外気導入法とに大別される。真空法は、密閉晶析容器内の真空度が規定値になるよう、真空ポンプをＯＮ／ＯＦＦ制御するか、若しくは真空ポンプの一次側にリーク弁を設けてリーク量を調整することで、晶析容器内の真空度を制御する。但し、溶媒留去工程においてもＰＬＧＡの加水分解を最小限にすることが品質上重要であり、溶媒が突沸しない程度まで真空度を高めつつ、極力短時間で溶媒を留去することが望ましい。このときの温度は、ＰＬＧＡのガラス転移点である約４５℃以下で行う必要がある。具体的には、３０〜４０℃の温度条件下で使用し、溶媒の沸点が当該温度付近になるよう真空度を制御する。
【００５３】
他方、外気導入法は、リーク弁を晶析容器の上部に設けることで、晶析容器内に外気を取り込ませながら溶媒を留去させるため、真空法よりも比較的低い真空度で同程度の時間で留去することが可能である。この方法は、真空ポンプや冷却機器等の付帯機器が増大するという欠点はあるものの、真空法では真空度が高くなり過ぎることで、粒子の凝集や封入薬物の漏出等の品質上の問題が起こる場合、容器内の真空度を適切な範囲内に調節できる点で有利となる。従って、薬物が封入されたナノ粒子懸濁液からの溶媒留去法として採用できる。
【００５４】
上記ナノ粒子形成工程において使用する良溶媒および貧溶媒の種類は特に限定されるものではないが、人体に対して安全性が高く、且つ環境負荷の少ないものを用いる必要がある。このような貧溶媒としては、例えばポリビニルアルコール水溶液が好適に用いられ、ポリビニルアルコール以外の界面活性剤としては、ポリエチレングリコール、シクロデキストリン、レシチン、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられる。
【００５５】
良溶媒としては、低沸点の有機溶媒であるハロゲン化アルカン類、アセトン、メタノール、エタノール、エチルアセテート、ジエチルエーテル、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン等が挙げられるが、例えば、厚生労働省通知「医薬品の残留溶媒ガイドラインについて（平成１０年３月３０日  医薬審第３０７号）」でクラス３に分類されるアセトンのみ、若しくはアセトンとエタノールの混合液が好適に用いられる。
【００５６】
ポリビニルアルコール水溶液の濃度についても、生体適合性高分子の濃度等に応じて適宜決定すればよいが、ポリビニルアルコール水溶液の濃度が高いほどナノ粒子表面へのポリビニルアルコールの付着が良好となるものの、乾燥後の水への再分散性が低下する。一方、ポリビニルアルコール水溶液の濃度が所定以下になると、貧溶媒中での分散性に悪影響を与える。そのため、ポリビニルアルコールの重合度やけん化度によっても異なるが、０．１重量％以上１０重量％以下が好ましく、２重量％程度がより好ましい。
【００５７】
本発明で製造されるナノ粒子は、１，０００ｎｍ未満の平均粒子径を有するものであれば特に制限はないが、一般に、毛穴の直径は２００μｍ程度であるため、皮膚深部への浸透効果を高めるためには平均粒子径を３００ｎｍ以下とすることが好ましい。また、皮膚細胞の大きさは１５，０００ｎｍ、皮膚細胞間隔は皮膚の浅い所と深い所でバラツキがあるが、７０ｎｍ程度であると考えられ、細胞の脈動により皮膚細胞間隔が広がるため、平均粒子径が３００ｎｍ程度であれば、細胞間隙ルート（皮膚角質細胞間隙）を通してナノ粒子の表皮や真皮への浸透がなされ、生理活性物質を皮膚深部へと効果的に送達させることができる。一方、ナノ粒子の粒子径が小さくなるほど生理活性物質の内包率も低くなるため、平均粒子径は１０ｎｍ以上とすることが好ましい。
【００５８】
ナノ粒子への生理活性物質の内包量は、ナノ粒子形成時に添加する生理活性物質の量の調整、ナノ粒子を形成する生体適合性高分子の種類及び分子量等により調整可能である。ナノ粒子形成時に良溶媒に混合する生理活性物質の量としては、生体適合性高分子に対する重量比を０．００１以上１．０以下とすることが好ましい。生体適合性高分子に対する重量比が０．００１未満の場合、良溶媒中での生理活性物質の濃度が低すぎてナノ粒子への内包率が低くなる。一方、１．０を超えると、ナノ粒子の形成が阻害される。
【００５９】
また、ナノ粒子に内包される生理活性物質が、水溶液中でアニオン分子として存在するアニオン性の生理活性物質である場合、上記ナノ粒子形成工程において貧溶媒にカチオン性高分子を添加することで、ナノ粒子への生理活性物質の内包率を高めることができる。
【００６０】
従来の球形晶析法を用いてアニオン性の生理活性物質を内包したナノ粒子を製造しようとすると、良溶媒中に分散混合した水溶性の生理活性物質が貧溶媒中に漏出、溶解してしまい、ナノ粒子を形成する生体適合性高分子だけが沈積するため、生理活性物質がほとんど内包されなかった。これに対し、上記ナノ粒子形成工程においてカチオン性高分子を貧溶媒中に添加した場合は、ナノ粒子表面を被覆したカチオン性高分子がエマルション滴表面に存在するアニオン性の生理活性物質と相互作用し、貧溶媒中への生理活性物質の漏出を抑制できるものと考えられる。
【００６１】
また、生体内の細胞壁は負に帯電しているが、従来の球形晶析法で製造されたナノ粒子の表面は、一般的に負のゼータ電位を有しているため、電気的反発力によりナノ粒子の細胞接着性が悪くなるという問題点があった。従って、本発明のようにカチオン性高分子を用いてナノ粒子表面が正のゼータ電位を有するように帯電させることは、負帯電の細胞壁に対するナノ粒子の接着性を増大させ、アニオン性の生理活性物質の細胞内移行性を向上させる観点からも好ましい。
【００６２】
なお、ゼータ電位とは、粒子から十分に離れた電気的に中性な領域の電位を基準とした場合の、上記移動が生じる面（滑り面）の電位である。ゼータ電位の絶対値が増加すれば、粒子間の反発力が強くなって粒子の安定性は高くなり、逆にゼータ電位が０に近づくにつれて粒子は凝集を起こしやすくなる。そのため、ゼータ電位は粒子の分散状態の指標として用いられている。
【００６３】
本発明に用いられるカチオン性高分子としては、キトサン及びキトサン誘導体、セルロースに複数のカチオン基を結合させたカチオン化セルロース、ポリエチレンイミン、ポリビニルアミン、ポリアリルアミン等のポリアミノ化合物、ポリオルニチン、ポリリジン等のポリアミノ酸、ポリビニルイミダゾール、ポリビニルピリジニウムクロリド、アルキルアミノメタクリレート４級塩重合物（ＤＡＭ）、アルキルアミノメタクリレート４級塩・アクリルアミド共重合物（ＤＡＡ）、細胞膜（生体膜）の構成成分であるリン脂質極性基（ホスホリルコリン基）と重合性に優れたメタクリロイル基とを併せ持つ２−メタクリロイルオキシエチルホスホルコリン（ＭＰＣ）を構成単位とする高分子に第４級アンモニウム塩等のカチオン基を結合させたカチオン性高分子（例えばＭＰＣと２−ヒドロキシ−３−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアンモニウムクロリドとのコポリマー）等が挙げられるが、特にキトサン或いはその誘導体が好適に用いられる。
【００６４】
キトサンは、エビやカニ、昆虫の外殻に含まれる、アミノ基を有する糖の１種であるグルコサミンが多数結合したカチオン性の天然高分子であり、乳化安定性、保形性、生分解性、生体適合性、抗菌性等の特徴を有するため、化粧品や食品、衣料品、医薬品等の原料として広く用いられている。このキトサンを貧溶媒中に添加することにより、生体への悪影響がなく、安全性の高いナノ粒子を製造することができる。
【００６５】
このようにして得られたナノ粒子をそのまま用いるか、或いは必要に応じて複合化する（複合化工程）。この複合化により、使用前まではナノ粒子が集まった取り扱いの容易な複合粒子となっており、使用時に水分に触れることでナノ粒子に戻って高反応性等の特性が復元可能となる。
【００６６】
ナノ粒子の複合化方法としては、凍結乾燥法（例えば、乾燥棚式の凍結乾燥機（宝製作所社製）やナウタミキサＮＸＶ（ホソカワミクロン社製）を用いて真空凍結乾燥を行うこと）が好適に用いられる。また、流動層乾燥造粒法（例えば、アグロマスタＡＧＭ（ホソカワミクロン社製）を使用して流動造粒を行うこと）または乾式機械的粒子複合化法（例えば、メカノフュージョンシステムＡＭＳ（ホソカワミクロン社製）を使用して圧縮力および剪断力を加えること）により複合化しても良い。特に、粒子化する材料を含む混合物を流動ガス中に噴霧する流動層乾燥造粒法を用いた場合、時間と手間のかかる凍結乾燥工程を省略可能となり、複合粒子を容易に且つ短時間で製造できるため工業化にも有利となる。
【００６７】
次に、ナノ粒子の表面にさらにアニオン性の生理活性物質を担持させる方法について説明する。ここでは、正のゼータ電位を有するナノ粒子表面へアニオン性の生理活性物質を静電気的に担持させる方法を例に挙げて説明する。
【００６８】
アニオン性の生理活性物質をナノ粒子表面へ静電気的に担持させるためには、ナノ粒子表面が正のゼータ電位を有するように帯電させておく必要がある。上記ナノ粒子形成工程においてカチオン性高分子を貧溶媒中に添加すると、形成されたナノ粒子の表面がカチオン性高分子により修飾（被覆）され、ナノ粒子表面のゼータ電位が正となる。そこで、凍結乾燥によりナノ粒子を複合化する際に、凍結乾燥前のナノ粒子懸濁液にアニオン性の生理活性物質を添加することにより、負の電荷を持つアニオン分子となった生理活性物質が静電気的相互効果によりナノ粒子表面に所定量担持（外付け）される。
【００６９】
なお、カチオン性高分子の中でもカチオン性のより強いものを用いることにより、ゼータ電位がより大きな正の値となるため、ナノ粒子表面により多くの生理活性物質を担持可能になるとともに、ナノ粒子間の反発力が強くなってナノ粒子の安定性も高くなる。例えば、元来カチオン性であるキトサンの一部を第四級化することで、さらにカチオン性を高めた塩化Ｎ−［２−ヒドロキシ−３−（トリメチルアンモニオ）プロピル］キトサン等のキトサン誘導体（カチオニックキトサン）を用いることが好ましい。
【００７０】
ナノ粒子表面への生理活性物質の担持量は、カチオン性高分子の種類及び添加量や、凍結乾燥前のナノ粒子懸濁液中に添加する生理活性物質の量の調整により変更可能である。ナノ粒子懸濁液中に添加する生理活性物質の量としては、生体適合性高分子に対する重量比を０．００１以上１．０以下とすることが好ましい。生体適合性高分子に対する重量比が０．００１未満の場合、生理活性物質の濃度が低すぎてナノ粒子表面への担持率が低くなる。一方、１．０を超えると、静電気的に担持可能な量を超えてしまい、ナノ粒子表面へ担持されない余剰の生理活性物質が生じる。
【００７１】
このように、生理活性物質のナノ粒子への内包とナノ粒子表面への静電気的担持とを組み合わせることにより、先ずナノ粒子表面に担持された生理活性物質、次いでナノ粒子に内包された生理活性物質の順に放出される。従って、生理活性物質の放出速度を２段階に制御可能となる。
【００７２】
なお、凍結乾燥前のナノ粒子懸濁液に余剰のポリビニルアルコールやキトサンが残存していると、ポリビニルアルコールやキトサンと、生理活性物質とが吸着してしまい、生理活性物質を効率良くナノ粒子表面に担持できなくなる。そのため、溶媒留去工程の後で生理活性物質の溶液を添加する前に、遠心分離操作によりポリビニルアルコールやキトサンを除去する工程（除去工程）を設けることが好ましい。
【００７３】
特に、ポリビニルアルコールは親水性で吸湿性があるため、凍結乾燥後の複合粒子にポリビニルアルコールが過剰に含まれていると、複合粒子がベタついて品質が損なわれる。また、ポリビニルアルコールの添加量の増大と共に充填性（容器への充填のしやすさ）が悪くなる。さらに、ポリビニルアルコール特有の「糊」の機能のため、皮膚に塗布したときに肌の引張り感（つっぱり感）が強く出る。これらの不具合を解消するためにも除去工程を設けることが好ましい。
【００７４】
具体的には、遠心分離操作で粒子を単離し、余剰のポリビニルアルコールを含む上澄み液を廃棄して精製水に置換し、再度遠心分離することでポリビニルアルコールを除去する方法が考えられる。
【００７５】
なお、ここでは生理活性物質が内包されたナノ粒子の表面にさらに生理活性物質を担持させる場合について説明したが、ナノ粒子形成工程において生理活性物質を良溶媒へ添加せず、生体適合性高分子のみを凝集させて形成したナノ粒子の表面に上記方法を用いて生理活性物質を担持させても良い。
【００７６】
次に、生理活性物質が担持されたナノ粒子を結合剤と共に複合化させた複合粒子について説明する。ナノ粒子を結合剤と共に複合化することで、再分散性に加えて分散性、耐熱性にも優れた複合粒子とすることができる。また、結合剤中に生理活性物質を添加することにより、ナノ粒子を含む複合粒子に他の生理活性物質を担持させることもできる。
【００７７】
結合剤は、複合化の際にナノ粒子同士を隔てる層を形成して複合粒子の分散性、耐熱性を向上させる。また、ナノ粒子に内包される生理活性物質は水溶性であるため、一旦内包された生理活性物質がナノ粒子表面へ漏出すると、周囲に存在する水に再溶解する。この水を凍結乾燥等により除去すると、その分だけ生理活性物質が減少して含有率にばらつきが発生してしまう。そこで、有機または無機の物質を再分散可能に複合化させ、生理活性物質の溶解した水を除去せずにそのままナノ粒子と共に乾燥させることが好ましい。
【００７８】
このような結合剤としては、例えばマンニトール、トレハロース、ソルビトール、エリスリトール、マルトース、キシリトール等の糖アルコールやショ糖、アクリル系ポリマーやエチルセルロース等の高分子化合物粉末等が挙げられる。なお、結合剤として結晶性の弱い糖アルコールを用いると、複合化の際にアモルファス化してしまい良好に粒子化できなくなる場合がある。そのため、結晶性の強いマンニトールを用いることが好ましい。
【００７９】
（液状組成物）
このようにして製造したナノ粒子若しくは複合粒子を、分散液中に分散させて液状組成物とする。この液状組成物を育毛剤または化粧料として使用するか、或いは育毛剤または化粧料の原料として配合することで、ナノ粒子は毛穴や皮膚表面から皮膚深部まで効率よく浸透する。即ち、皮膚表面に塗布されたナノ粒子を含有する液滴は、ナノ粒子により表面張力が低下しているため界面エネルギーが下がる方向（皮膚内部へ浸透する方向）に移動し易くなる。さらに、液滴内のナノ粒子又は水に対し皮膚内部からの吸着も起こるため、ナノ粒子は皮膚深部へと効率よく送達されることとなる。結果、ナノ粒子に担持された生理活性物質が皮膚内部において投与直後から所定期間に亘って徐放される。
【００８０】
従って、取り扱いが簡単で、且つ有効な育毛効果や保湿効果を得ることができる育毛剤または化粧料となる。本発明の育毛剤の剤型としては、液体製剤が挙げられる。本発明の化粧料の剤型としては、ヘアトニック、ヘアリキッド、シャンプー、リンス、ヘアコンディショナー等の頭髪用化粧料や、乳液、化粧水、スキンクリーム等のスキンケア化粧料が挙げられる。液状組成物中へのナノ粒子若しくは複合粒子の配合割合は、要求される効果や剤型等に応じて任意に設定することができる。
【００８１】
（分散液）
分散液としては、ナノ粒子が瞬時に均一分散するとともに、人体に対し安全性の高いものを用いる必要があり、水や水及びエタノールの混合液が好適に用いられる。なお、水に対するエタノールの容量比が１／２以上になるとナノ粒子の凝集が起こるため、１／１０から３／１０の範囲とすることが好ましい。また、分散液として乳液を使用することにより、ナノ粒子の皮膚浸透効果をさらに高めることができる。
【００８２】
ところで、ＰＬＧＡナノ粒子は水分と長時間触れると加水分解されてしまい、ナノ粒子による生理活性物質の運搬性能が失われることが知られている。ＰＬＧＡナノ粒子が加水分解されると、ＰＬＧＡを構成する乳酸、グリコール酸が生成するため、分散液が徐々に酸性となってｐＨ（水素イオン濃度）が低下する。このｐＨの低下によってＰＬＧＡの加水分解はさらに促進される。
【００８３】
そこで、本発明の液状組成物では、分散液としてｐＨ７〜１０の緩衝液を用いることとした。この場合、緩衝作用によって分散液のｐＨが７〜１０に維持されるため、ＰＬＧＡナノ粒子の加水分解によるｐＨの低下が発生しない。従って、分散液を緩衝液とすることにより、分散液中のＰＬＧＡナノ粒子の加水分解を効果的に抑制することができる。
【００８４】
なお、本明細書中における「緩衝液」とは、リン酸緩衝液やリン酸−クエン酸緩衝液等の、強酸と弱塩基からなる塩に過剰の弱塩基を加えた溶液、もしくは弱酸と強塩基からなる塩に過剰の弱酸を加えた通常の緩衝液（バッファー液）の他、緩衝剤を含む溶液または水溶液、及び数種類の特定の物質がある一定の比率で溶解したことでｐＨ緩衝能を有する溶液となったもの（例えば、水酸化マグネシウム水溶液）も含むものとする。
【００８５】
緩衝液のｐＨが７よりも小さい場合は、緩衝作用によってｐＨの更なる低下は抑制されるものの、緩衝液が元々酸性であるためＰＬＧＡの酸加水分解が進行する。また、ｐＨが１０を超える場合は、ＰＬＧＡのアルカリ加水分解が進行するとともに、人体への悪影響も懸念される。従って、緩衝液のｐＨは７〜１０とする必要があり、安全性を考慮するとｐＨ７〜８がより好ましい。
【００８６】
本発明の液状組成物に用いられる緩衝液としては、緩衝剤としてリン酸水素二ナトリウムとクエン酸の組み合わせを用いたリン酸−クエン酸緩衝液、リン酸水素二ナトリウムとリン酸二水素ナトリウムの組み合わせを用いたリン酸緩衝液が挙げられる。リン酸−クエン酸緩衝液はｐＨ７〜８に調整する際に好適に用いられ、リン酸緩衝液はｐＨ７〜１０に調整する際に好適に用いられる。
【００８７】
また、緩衝液中の緩衝剤の濃度が高くなるほど緩衝液の緩衝作用が増大するが、リン酸水素二ナトリウムとクエン酸の組み合わせは、リン酸水素二ナトリウムとリン酸二水素ナトリウムの組み合わせに比べて水に対する溶解度が高いため、高濃度の緩衝液を調製することができる。従って、リン酸−クエン酸緩衝液を用いることにより、緩衝作用を大きくして加水分解抑制効果をより高めることができる。
【００８８】
なお、ＰＬＧＡ以外のＰＬＡ、ＰＧＡについても、加水分解により乳酸、またはグリコール酸が生成してｐＨが徐々に低下する点はＰＬＧＡと同様であるため、分散液としてｐＨ７〜１０の緩衝液を用いることで、分散液中のＰＬＡ、ＰＧＡナノ粒子の加水分解を効果的に抑制することができる。
【００８９】
（増粘剤）
緩衝液の緩衝作用は緩衝剤の濃度に比例して高くなるため、ナノ粒子の加水分解を長期間に亘って抑制するためには分散液中の緩衝剤の濃度を高くすることが好ましい。しかし、緩衝剤の濃度が高くなると、ナノ粒子表面の水和水が脱水され、ナノ粒子が凝集し易くなる。その結果、ナノ粒子の沈降・凝集が発生し、安定した分散状態を長期間維持することが困難となる。
【００９０】
そこで、分散液中に増粘剤を添加することにより、ナノ粒子の分散状態を所定期間維持することができる液状組成物となる。本発明の液状組成物に添加する増粘剤としては、キサンタンガム、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、カルボマー、アルギン酸、ヒドロキシプロピルセルロース、カラギーナン、ローカストビーンガム、グァーガム、疎水性ポリエーテルウレタンから選ばれた一種または二種以上の水溶性高分子が挙げられる。疎水性ポリエーテルウレタンの代表例としては、（ＰＥＧ−２４０／デシルテトラデセス−２０／ＨＤＩ）コポリマーが挙げられる。また、水溶性高分子以外の増粘剤としては、水膨潤性粘土鉱物の一種であるヘクトライトが挙げられる。ヘクトライトは膨潤性に富むスメクタイト構造を有しており、水に溶解することで増粘作用を有する。
【００９１】
上記の増粘剤の添加量の下限値（最小有効添加量）は、ナノ粒子の分散状態を維持する期間、緩衝剤の濃度及び組み合わせ、ナノ粒子の配合量、増粘剤の種類によって異なる。従って、液状組成物の処方に応じて適宜調整すれば良い。また、増粘剤の添加量の上限値（最大有効添加量）については特に制限はないが、増粘剤の添加量が多くなると液状組成物の粘度が高くなり、化粧料や育毛剤として使用する際の使用感が悪くなる。従って、化粧料や育毛剤としての使用感を損なわない範囲の添加量とすることが好ましい。
【００９２】
また、分散液中に他の生理活性物質を配合しておくことで、ナノ粒子の皮膚深部への浸透に伴い、ナノ粒子表面に吸着された分散液中の生理活性物質も同時に皮膚深部まで送達されるため、より多くの生理活性物質を皮膚深部へ供給することができる。分散液中に配合される生理活性物質としては、褐藻エキス、ゴボウエキス、アルテア根エキス、セリン、ベタイン、ソルビトール、トレハロース、グリシン、アラニン、プロリン、トレオニン、アルギニン、リシン、グルタミン酸、マルトデキストリン、スクワラン、イノシトール、ビオチン、酵母エキス等の保湿成分、ビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＦ、ビタミンＫ、ビタミンＰ、ビタミンＵ、カルニチン、フェルラ酸、γ−オリザノール、α−リポ酸、オロット酸及びこれらの成分又は誘導体である酢酸レチノール、酢酸リボフラビン、ピリドキシンジオクタノエート、Ｌ−アスコルビン酸ジパルミチン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸ナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸リン酸エステル、ＤＬ−トコフェロール−Ｌ−アスコルビン酸リン酸ジエステルジカリウム、パントテニルエチルエーテル、Ｄ−パントテニルアルコール、アセチルパントテニルエチルエーテル、エルゴカルシフェロール、コレカルシフェロール、酢酸トコフェロール、ニコチン酸トコフェロール、コハク酸トコフェロール等のビタミンまたはビタミン誘導体、或いはＶＣ−ＰＭＧ（水溶性リン酸アスコルビルＭｇ）、ＡＡ２Ｇ（アスコルビン酸グルコシド）、パンテノール（水溶性ビタミンＢ５）、Ｌ−システイン等の水溶性のプロビタミン類が挙げられる。
【００９３】
その他、本発明の液状組成物には、タルク、マイカ、セリサイト、酸化チタン、無水珪酸、カオリン、酸化亜鉛、雲母チタン、酸化鉄等の無機粉末、ポリエステル、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリウレタン、アクリル酸樹脂、フェノール樹脂、フッ素樹脂、ジビニルベンゼン、スチレン共重合体等の各種樹脂粉末或いはそれらの２種以上から成る共重合樹脂粉末、アセチルセルロース、多糖類、タンパク質等の有機粉末、赤色２０２号、赤色２２６号、黄色２０５号、黄色４０１号、青色１号、青色２０４号、青色４０４号等の顔料粉末、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸マグネシウム、パルミチン酸亜鉛等の金属石鹸、ジメチコン、メチコン、シクロメチコン、ポリエーテル変性シリコン、フッ素変性シリコン等のシリコン化合物、トリオクタノイン、ジカプリル酸ネオペンチルグリコール、トリ（カプリル／カプリン酸）グリセリル、（ヒドロキシステアリン酸／ステアリン酸／ロジン酸）ジペンタエリスリチル、イソステアリン酸水添ヒマシ油等のエステル油、ミネラルオイル、ワセリン、ポリブテン等の鉱物油、カルナウバロウ、キャンデリラロウ、ミツロウ等のロウ、ホホバ油、オリーブ油、アロエ、ベニバナ等の天然系原料等の、任意の無機又は有機原料、或いは通常化粧料に配合される任意の成分、例えばエタノールや多価アルコール等のアルコール類、界面活性剤、油脂、紫外線吸収剤、着色料、香料、防腐剤等を、本発明の効果を妨げない範囲で配合することができる。
【００９４】
なお、本発明は上述した各実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。以下、本発明の液状組成物に用いるナノ粒子の製造方法及び液状組成物中におけるナノ粒子の加水分解抑制効果について、実施例、比較例、及び試験例により更に具体的に説明する。なお、以下の試験例では、ＰＬＧＡナノ粒子の分子量保持効果（加水分解抑制効果）、及び分散安定化効果を調査するため、試験液中に分散させるナノ粒子の調製方法を示した参考例ではナノ粒子への生理活性物質の担持は行っていない。
［ＰＬＧＡナノ粒子の調製］
【参考例】
【００９５】
生体適合性高分子である乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ：和光純薬工業社製ＰＬＧＡ７５２０、平均分子量２０，０００、乳酸・グリコール酸重合モル比＝７５：２５）１０ｇを良溶媒であるアセトン２００ｍＬに溶解し、エタノール１００ｍＬを加えて混合し、溶液を調製した。また、ＰＬＧＡに対して貧溶媒である０．２５重量％のポリビニルアルコール（ＰＶＡ  ＥＧ０５、日本合成化学工業社製）水溶液４００ｍＬを調製した。このポリビニルアルコール水溶液を４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、先のＰＬＧＡ溶液を一定速度で滴下してＰＬＧＡナノ粒子の懸濁液を得た。
【００９６】
滴下終了後、減圧下でアセトン、エタノールを留去した。次に、得られたナノ粒子懸濁液にトレハロース（林原社製）１１．７ｇ、リン酸アスコルビルマグネシウム（和光純薬工業社製）２．１ｇを添加し、凍結乾燥にてＰＬＧＡナノ粒子の複合粒子粉末を得た。
【００９７】
得られた複合粒子を水中へ再分散させた際のＰＬＧＡナノ粒子の粒度分布を動的光散乱法（測定装置：ＭＩＣＲＯＴＲＡＣ  ＵＰＡ−１５０、日機装社製）により測定したところ、平均粒子径は１６０ｎｍであった。
［液状組成物の調製］
【実施例１】
【００９８】
緩衝剤としてクエン酸、リン酸水素二ナトリウムを２００ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．０に調整した水７９．６重量％、エタノール２０重量％の混合液に、参考例で調製したＰＬＧＡナノ粒子０．４重量％を分散して液状組成物を調製した。
【実施例２】
【００９９】
緩衝剤としてクエン酸、リン酸水素二ナトリウムを２００ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．６に調整した水７９．６重量％を用いて、実施例１と同様の手順により液状組成物を調製した。
【実施例３】
【０１００】
緩衝剤としてリン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウムを２００ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．７に調整した水７９．６重量％を用いて、実施例１と同様の手順により液状組成物を調製した。
【実施例４】
【０１０１】
緩衝剤としてリン酸二水素ナトリウム、水酸化ナトリウムを２００ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ９．０に調整した水７９．６重量％を用いて、実施例１と同様の手順により液状組成物を調製した。
【実施例５】
【０１０２】
緩衝剤としてリン酸二水素ナトリウム、水酸化ナトリウムを２００ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ１０．０に調整した水７９．６重量％を用いて、実施例１と同様の手順により液状組成物を調製した。
【実施例６】
【０１０３】
緩衝剤としてクエン酸、リン酸水素二ナトリウムを７５０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．５に調整した水７９．２重量％、エタノール２０重量％の混合液に、参考例で調製したＰＬＧＡナノ粒子０．４重量％、増粘剤としてヒアルロン酸０．４重量％を分散して液状組成物を調製した。
【実施例７】
【０１０４】
緩衝剤としてクエン酸、リン酸水素二ナトリウムを７５０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．５に調整した水７９．３重量％、エタノール２０重量％の混合液に、参考例で調製したＰＬＧＡナノ粒子０．４重量％、増粘剤としてヒアルロン酸０．３重量％を分散して液状組成物を調製した。
【実施例８】
【０１０５】
緩衝剤としてクエン酸、リン酸水素二ナトリウムを７５０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．５に調整した水７９．５重量％、エタノール２０重量％の混合液に、参考例で調製したＰＬＧＡナノ粒子０．４重量％、増粘剤としてヒアルロン酸０．１重量％を分散して液状組成物を調製した。
【実施例９】
【０１０６】
緩衝剤としてクエン酸、リン酸水素二ナトリウムを７５０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．５に調整した水７９．２重量％、エタノール２０重量％の混合液に、参考例で調製したＰＬＧＡナノ粒子０．４重量％、増粘剤としてキサンタンガム０．４重量％を分散して液状組成物を調製した。
【実施例１０】
【０１０７】
緩衝剤としてクエン酸、リン酸水素二ナトリウムを７５０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．５に調整した水７９．５重量％、エタノール２０重量％の混合液に、参考例で調製したＰＬＧＡナノ粒子０．４重量％、増粘剤としてキサンタンガム０．１重量％を分散して液状組成物を調製した。
【実施例１１】
【０１０８】
緩衝剤としてクエン酸、リン酸水素二ナトリウムを７５０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．５に調整した水７９．５５重量％、エタノール２０重量％の混合液に、参考例で調製したＰＬＧＡナノ粒子０．４重量％、増粘剤としてキサンタンガム０．０５重量％を分散して液状組成物を調製した。
【実施例１２】
【０１０９】
緩衝剤としてクエン酸、リン酸水素二ナトリウムを７５０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．５に調整した水７９．４９重量％、エタノール２０重量％の混合液に、参考例で調製したＰＬＧＡナノ粒子０．４重量％、増粘剤としてヒアルロン酸０．０１重量％、キサンタンガム０．１重量％を分散して液状組成物を調製した。
【実施例１３】
【０１１０】
緩衝剤としてクエン酸、リン酸水素二ナトリウムを７５０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．５に調整した水７９．５重量％、エタノール２０重量％の混合液に、参考例で調製したＰＬＧＡナノ粒子０．４重量％、増粘剤としてヒアルロン酸０．０５重量％、キサンタンガム０．０５重量％を分散して液状組成物を調製した。
【比較例１】
【０１１１】
緩衝剤としてクエン酸、クエン酸ナトリウムを２００ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ６．３に調整した水７９．６重量％を用いて、実施例１と同様の手順により液状組成物を調製した。
【比較例２】
【０１１２】
緩衝剤を溶解しないｐＨ６．８の水７９．６重量％を用いて、実施例１と同様の手順により液状組成物を調製した。
【比較例３】
【０１１３】
緩衝剤としてクエン酸、リン酸水素二ナトリウムを７５０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で溶解してｐＨ７．５に調整した水７９．６重量％にＰＬＧＡナノ粒子０．４重量％を分散して液状組成物を調製した。
［ＰＬＧＡナノ粒子の加水分解抑制効果］
【試験例１】
【０１１４】
実施例１〜５、及び比較例１、２において調製した液状組成物を試験液として２０℃で所定期間静置保存した後、各試験液のｐＨ及び各試験液中のＰＬＧＡの分子量を測定した。各試験液の組成、保管温度、及びｐＨの初期設定値をまとめて表１に示す。
【０１１５】
【表１】
2012169518.tif 000002
【０１１６】
試験液のｐＨは、ｐＨメーター（堀場製作所社製、Ｄ−５１）を用いて測定した。ＰＬＧＡの分子量は、試験液中のエタノールを減圧留去した後、凍結乾燥することにより得られた粉末にクロロホルム２．０ｍＬを加えてＰＬＧＡのみを溶解した。この溶液を０．２μｍのフィルターでろ過し、ろ液をＧＰＣ（ゲル浸透クロマトグラフィー、検出器：島津製作所社製、示差屈折率計）を用いて測定した。ＰＬＧＡの分子量保持率を下記式により算出した。
ＰＬＧＡ分子量保持率（％）＝（一定期間保存後のＰＬＧＡ分子量）／（試験開始前のＰＬＧＡ分子量）×１００
結果を図１〜図３に示す。
【０１１７】
図１及び図２に示すように、緩衝剤を用いてｐＨの初期設定値が７．０〜１０．０になるように調整した実施例１〜５の試験液（それぞれ●、○、△、▲、□のデータ系列）では、いずれも２０℃で１２ヶ月保管した後も初期設定値とほぼ同等のｐＨが保持されており、２０℃で２ヶ月保管した後のＰＬＧＡの分子量保持率も９０％以上であった。さらに、図３に示すように、実施例２の試験液（○のデータ系列）では８ヶ月保管した後も分子量保持率はほぼ１００％であり、試験液中のＰＬＧＡナノ粒子がほとんど加水分解されなかった。また、１２ヶ月保管した後の分子量保持率は９６％、１８ヶ月保管した後の分子量保持率は８８％であり、１８ヶ月後においても高い分子量保持率を維持していた。なお、ｐＨの初期設定値が１０．０である実施例５の試験液（□のデータ系列）では、２０℃で２ヶ月保管後のｐＨは１０に保持されており、分子量保持率は９０％程度であることから、ＰＬＧＡの実用的な加水分解抑制効果を発現する緩衝液のｐＨの上限値は１０と推認される。
【０１１８】
これに対し、緩衝剤を用いてｐＨの初期設定値が６．３になるように調整した比較例１の試験液（×のデータ系列）では、緩衝効果によって２０℃で８ヶ月保管した後のｐＨは初期設定値とほぼ同等の６．１に保持されていたが、試験液が酸性であるため時間の経過とともにＰＬＧＡの加水分解が進行し、２０℃で２ヶ月保管した後のＰＬＧＡの分子量保持率は７０％以下であった。また、１２ヶ月保管した後のｐＨは５．５まで低下した。これは、加水分解によって生成する乳酸、グリコール酸が増加したことで緩衝効果が弱まったためであると考えられる。
【０１１９】
また、緩衝剤を添加しなかった比較例２の試験液（＊のデータ系列）では、ＰＬＧＡの加水分解によって生成する乳酸、グリコール酸により２０℃で８ヶ月保管した後のｐＨが３．３に低下しており、２０℃で２ヶ月保管した後のＰＬＧＡの分子量保持率も７０％以下であった。さらに、図３に示すように、２０℃で８ヶ月保管した後の分子量保持率は０％となり、試験液中のＰＬＧＡナノ粒子が完全に加水分解された。
【０１２０】
以上の結果より、ｐＨ７．０〜１０．０の緩衝液中ではＰＬＧＡナノ粒子の加水分解が長期間に亘って顕著に抑制されることが確認された。
［ＰＬＧＡナノ粒子の分散安定化効果］
【試験例２】
【０１２１】
実施例６〜１３、及び比較例３において調製した液状組成物を試験液として２０℃で３ヶ月間保存した後、試験例１と同様の装置及び操作手順により、各試験液のｐＨ及び各試験液中のＰＬＧＡの分子量を測定した。また、各試験液中のＰＬＧＡナノ粒子の分散状態を目視により観察した。各試験液の組成、保管温度、及びｐＨの初期設定値をまとめて表２に示す。
【０１２２】
【表２】
2012169518.tif 000003
【０１２３】
ＰＬＧＡナノ粒子の分散状態は、粒子の凝集、沈降が認められない場合を◎、粒子の凝集は認められないが、微量の粒子が沈降している場合を○、粒子の凝集は認められないが、小量の粒子が沈降している場合を△、粒子の凝集及び沈降の両方が認められる場合を×とした。観察結果をｐＨ及び分子量保持率と併せて表３に示す。
【０１２４】
【表３】
2012169518.tif 000004
【０１２５】
表３に示すように、実施例６〜１３、及び比較例３の試験液では、いずれも２０℃で３ヶ月保管した後のｐＨが初期設定値と同じ７．５に保持されており、ＰＬＧＡの分子量保持率も１００％であった。
【０１２６】
また、増粘剤としてヒアルロン酸ナトリウムを単独で使用した実施例６〜８では、添加量が０．４重量％である実施例６で粒子の凝集、沈降が認められず、最も分散性が良好であった。また、ヒアルロン酸ナトリウムの添加量が０．３重量％以下である実施例７、８では粒子の凝集は認められないが、徐々にＰＬＧＡナノ粒子の沈降が観察された。一方、増粘剤としてキサンタンガムを単独で使用した実施例９〜１１では、添加量が０．４重量％である実施例９で最も分散性が良好であり、キサンタンガムの添加量が０．１重量％以下である実施例１０、１１では徐々にＰＬＧＡナノ粒子の沈降が観察された。
【０１２７】
さらに、増粘剤としてヒアルロン酸ナトリウムとキサンタンガムを併用した実施例１２、１３では、ヒアルロン酸ナトリウムまたはキサンタンガムを単独で使用した場合に比べて低い添加量で良好な分散性を示し、特にヒアルロン酸ナトリウムを０．０１重量％、キサンタンガムを０．１重量％添加した実施例１２ではＰＬＧＡナノ粒子の凝集及び沈降は全く認められなかった。
【０１２８】
これに対し、増粘剤を添加しなかった比較例３では、ＰＬＧＡナノ粒子の凝集及び沈降の両方が認められた。以上のことから、増粘剤として０．４重量％以上のヒアルロン酸ナトリウム、０．４重量％以上のキサンタンガムを添加することにより、緩衝液中でのＰＬＧＡナノ粒子の分散状態を効果的に維持することができ、ヒアルロン酸ナトリウムとキサンタンガムを併用することで添加量を低減できることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【０１２９】
本発明によれば、ナノ粒子を形成する材料としてＰＧＡ、ＰＬＡ、またはＰＬＧＡのいずれかを用い、生理活性物質が粒子内部または表面の少なくとも一方に担持された生体適合性ナノ粒子の分散液中での加水分解を長期間に亘って抑制することができる液状組成物となる。また、液状組成物に増粘剤を添加することにより、ナノ粒子の沈降を抑制して分散安定性を向上させることができる。従って、予めナノ粒子粉末を分散液中に分散させた一剤型の化粧料や育毛剤として好適に利用可能な液状組成物が提供される。
【図１】
2012169518.tif 000005
【図２】
2012169518.tif 000006
【図３】
2012169518.tif 000007
【手続補正書】
【提出日】平成25年5月9日(2013.5.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成されたナノ粒子の内部または表面の少なくとも一方に生理活性物質を担持した生体適合性ナノ粒子と、ｐＨ７以上１０以下のリン酸を含む緩衝液と、増粘剤としてキサンタンガム、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、カルボマー、アルギン酸、ヒドロキシプロピルセルロース、カラギーナン、ローカストビーンガム、グァーガム、疎水性ポリエーテルウレタンからなる群より選ばれた少なくとも一種と、を含む液状組成物。
【請求項２】
前記緩衝液が、ｐＨ７以上８以下のリン酸−クエン酸緩衝液であることを特徴とする請求項１に記載の液状組成物。
【請求項３】
前記増粘剤として、０．０１重量％以上のヒアルロン酸ナトリウムを添加したことを特徴とする請求項１または請求項２に記載の液状組成物。
【請求項４】
前記増粘剤として、０．０５重量％以上のキサンタンガムを添加したことを特徴とする請求項１または請求項２に記載の液状組成物。
【請求項５】
前記増粘剤として、ヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの両方を添加したことを特徴とする請求項１に記載の液状組成物。
【請求項６】
ヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの添加量の合計が０．１重量％以上であることを特徴とする請求項５に記載の液状組成物。
【請求項７】
前記生体適合性ナノ粒子の平均粒子径が１０ｎｍ以上３００ｎｍ以下であることを特徴とする請求項１乃至請求項６のいずれか１項に記載の液状組成物。
【請求項８】
前記ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体の重量平均分子量が５，０００以上１００，０００以下であることを特徴とする請求項１乃至請求項７のいずれか１項に記載の液状組成物。
【請求項９】
請求項１乃至請求項８のいずれか１項に記載の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る化粧料。
【請求項１０】
請求項１乃至請求項８のいずれか１項に記載の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る頭髪用化粧料。
【請求項１１】
請求項１乃至請求項８のいずれか１項に記載の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る育毛剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
上記目的を達成するために本発明は、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成されたナノ粒子の内部または表面の少なくとも一方に生理活性物質を担持した生体適合性ナノ粒子と、ｐＨ７以上１０以下のリン酸を含む緩衝液と、増粘剤としてキサンタンガム、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、カルボマー、アルギン酸、ヒドロキシプロピルセルロース、カラギーナン、ローカストビーンガム、グァーガム、疎水性ポリエーテルウレタンからなる群より選ばれた少なくとも一種と、を含む液状組成物である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、前記増粘剤として、０．０１重量％以上のヒアルロン酸ナトリウムを添加したことを特徴としている。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、前記増粘剤として、０．０５重量％以上のキサンタンガムを添加したことを特徴としている。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、前記増粘剤として、ヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの両方を添加したことを特徴としている。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、ヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの添加量の合計が０．１重量％以上であることを特徴としている。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
本発明の第１の構成によれば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成された生体適合性ナノ粒子の加水分解に伴う乳酸、グリコール酸の生成に起因する液状組成物のｐＨの低下が、緩衝液の緩衝作用によって抑制される。従って、ナノ粒子の加水分解を所定期間効果的に抑制できる液状組成物となる。また、緩衝液として、ｐＨ７以上１０以下のリン酸を含む緩衝液を用いることにより、緩衝液の緩衝作用によってｐＨの低下、及びそれに伴うナノ粒子の加水分解を抑制することができる。また、ｐＨが１０以下に抑えられるため、人体に対する悪影響も少ない液状組成物となる。また、増粘剤としてキサンタンガム、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、カルボマー、アルギン酸、ヒドロキシプロピルセルロース、カラギーナン、ローカストビーンガム、グァーガム、疎水性ポリエーテルウレタンからなる群より選ばれた少なくとも一種を用いることにより、ナノ粒子の安定した分散状態を所定期間維持してナノ粒子の凝集や沈降の発生を簡単に且つ効果的に抑制することができ、且つ、生体への悪影響がなく、安全性の高い液状組成物となる。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
また、本発明の第３の構成によれば、上記第１または第２の構成の液状組成物において、増粘剤として、０．０１重量％以上のヒアルロン酸ナトリウムを添加することにより、緩衝液中でのナノ粒子の凝集や沈降の発生をより効果的に抑制することができる。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
また、本発明の第４の構成によれば、上記第１または第２の構成の液状組成物において、増粘剤として、０．０５重量％以上のキサンタンガムを添加することにより、緩衝液中でのナノ粒子の凝集や沈降の発生をより効果的に抑制することができる。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
また、本発明の第５の構成によれば、上記第１の構成の液状組成物において、増粘剤として、ヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの両方を添加することにより、緩衝液中でのナノ粒子の凝集や沈降の発生を極めて効果的に抑制することができる。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
また、本発明の第６の構成によれば、上記第５の構成の液状組成物において、ヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの添加量の合計を０．１重量％以上とすることにより、増粘剤として用いるヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムをナノ粒子の凝集や沈降を効果的に抑制するために必要な量だけ添加することができる。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
また、本発明の第７の構成によれば、上記第１乃至第６のいずれかの構成の液状組成物において、生体適合性ナノ粒子の平均粒子径を１０ｎｍ以上３００ｎｍ以下とすることにより、化粧料や育毛剤として使用する際に、毛穴や毛穴以外の皮膚細胞の隙間部分からも皮膚の深部にまでナノ粒子が浸透する液状組成物となる。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
また、本発明の第８の構成によれば、上記第１乃至第７のいずれかの構成の液状組成物において、ナノ粒子を形成するポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体の重量平均分子量を５，０００以上１００，０００以下とすることにより、生理活性物質をナノ粒子に担持した状態で所定期間の保存が可能であり、使用時には数時間〜数十時間単位での生理活性物質の徐放が可能な液状組成物となる。
【手続補正書】
【提出日】平成25年10月4日(2013.10.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成されたナノ粒子の内部または表面の少なくとも一方に生理活性物質を担持した生体適合性ナノ粒子と、ｐＨ７以上１０以下のリン酸を含む緩衝液と、増粘剤としてキサンタンガムまたはヒアルロン酸ナトリウムのいずれか一方を含み、キサンタンガムの添加量が０．０５重量％以上、ヒアルロン酸ナトリウムの添加量が０．１重量％以上であることを特徴とする液状組成物。
【請求項２】
キサンタンガムまたはヒアルロン酸ナトリウムの添加量が０．４重量％以上であることを特徴とする請求項１に記載の液状組成物。
【請求項３】
ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成されたナノ粒子の内部または表面の少なくとも一方に生理活性物質を担持した生体適合性ナノ粒子と、ｐＨ７以上１０以下のリン酸を含む緩衝液と、増粘剤としてヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの両方を含み、ヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの添加量の合計が０．１重量％以上であることを特徴とする液状組成物。
【請求項４】
ヒアルロン酸ナトリウムの添加量が０．０１重量％以上、キサンタンガムの添加量が０．１重量％以上であることを特徴とする請求項３に記載の液状組成物。
【請求項５】
前記緩衝液が、ｐＨ７以上８以下のリン酸−クエン酸緩衝液であることを特徴とする請求項１乃至請求項４のいずれか１項に記載の液状組成物。
【請求項６】
前記生体適合性ナノ粒子の平均粒子径が１０ｎｍ以上３００ｎｍ以下であることを特徴とする請求項１乃至請求項５のいずれか１項に記載の液状組成物。
【請求項７】
前記ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体の重量平均分子量が５，０００以上１００，０００以下であることを特徴とする請求項１乃至請求項６のいずれか１項に記載の液状組成物。
【請求項８】
請求項１乃至請求項７のいずれか１項に記載の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る化粧料。
【請求項９】
請求項１乃至請求項７のいずれか１項に記載の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る頭髪用化粧料。
【請求項１０】
請求項１乃至請求項７のいずれか１項に記載の液状組成物から成る、または前記液状組成物を配合して成る育毛剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
上記目的を達成するために本発明は、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成されたナノ粒子の内部または表面の少なくとも一方に生理活性物質を担持した生体適合性ナノ粒子と、ｐＨ７以上１０以下のリン酸を含む緩衝液と、増粘剤としてキサンタンガムまたはヒアルロン酸ナトリウムのいずれか一方を含み、キサンタンガムの添加量が０．０５重量％以上、ヒアルロン酸ナトリウムの添加量が０．１重量％以上の液状組成物である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、キサンタンガムまたはヒアルロン酸ナトリウムの添加量が０．４重量％以上であることを特徴としている。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
また本発明は、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成されたナノ粒子の内部または表面の少なくとも一方に生理活性物質を担持した生体適合性ナノ粒子と、ｐＨ７以上１０以下のリン酸を含む緩衝液と、増粘剤としてヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの両方を含み、ヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの添加量の合計が０．１重量％以上の液状組成物である。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、ヒアルロン酸ナトリウムの添加量が０．０１重量％以上、キサンタンガムの添加量が０．１重量％以上であることを特徴としている。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
また本発明は、上記構成の液状組成物において、前記緩衝液が、ｐＨ７以上８以下のリン酸−クエン酸緩衝液であることを特徴としている。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】削除
【補正の内容】
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
本発明の第１の構成によれば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成された生体適合性ナノ粒子の加水分解に伴う乳酸、グリコール酸の生成に起因する液状組成物のｐＨの低下が、緩衝液の緩衝作用によって抑制される。従って、ナノ粒子の加水分解を所定期間効果的に抑制できる液状組成物となる。また、緩衝液として、ｐＨ７以上１０以下のリン酸を含む緩衝液を用いることにより、緩衝液の緩衝作用によってｐＨの低下、及びそれに伴うナノ粒子の加水分解を抑制することができる。また、ｐＨが１０以下に抑えられるため、人体に対する悪影響も少ない液状組成物となる。また、増粘剤としてキサンタンガムを０．０５重量％以上、またはヒアルロン酸ナトリウムを０．１重量％以上含むことにより、ナノ粒子の安定した分散状態を所定期間維持してナノ粒子の凝集や沈降の発生を簡単に且つ効果的に抑制することができ、且つ、生体への悪影響がなく、安全性の高い液状組成物となる。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
また、本発明の第２の構成によれば、上記第１の構成の液状組成物において、キサンタンガムまたはヒアルロン酸ナトリウムの添加量を０．４重量％以上とすることにより、ナノ粒子の凝集や沈降の発生をより一層効果的に抑制することができる。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
また、本発明の第３の構成によれば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成された生体適合性ナノ粒子の加水分解に伴う乳酸、グリコール酸の生成に起因する液状組成物のｐＨの低下が、緩衝液の緩衝作用によって抑制される。従って、ナノ粒子の加水分解を所定期間効果的に抑制できる液状組成物となる。また、緩衝液として、ｐＨ７以上１０以下のリン酸を含む緩衝液を用いることにより、緩衝液の緩衝作用によってｐＨの低下、及びそれに伴うナノ粒子の加水分解を抑制することができる。また、ｐＨが１０以下に抑えられるため、人体に対する悪影響も少ない液状組成物となる。また、増粘剤としてヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの両方を含み、ヒアルロン酸ナトリウム及びキサンタンガムの添加量の合計を０．１重量％以上とすることにより、ナノ粒子の安定した分散状態を所定期間維持してナノ粒子の凝集や沈降の発生を簡単に且つ効果的に抑制することができ、且つ、生体への悪影響がなく、安全性の高い液状組成物となる。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
また、本発明の第４の構成によれば、上記第３の構成の液状組成物において、ヒアルロン酸ナトリウムの添加量を０．０１重量％以上、キサンタンガムの添加量を０．１重量％以上とすることにより、ナノ粒子の安定した分散状態を所定期間維持してナノ粒子の凝集や沈降の発生をより一層効果的に抑制することができる。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
また、本発明の第５の構成によれば、上記第１乃至第４のいずれかの構成の液状組成物において、緩衝液として、ｐＨ７以上８以下のリン酸−クエン酸緩衝液を用いることにより、緩衝液の緩衝作用によってｐＨの低下、及びそれに伴うナノ粒子の加水分解を抑制することができる。また、緩衝剤であるリン酸水素二ナトリウムとクエン酸の組み合わせは水に対する溶解度が高いため、緩衝剤の濃度を高くして緩衝作用を容易に高めることができる。さらに、液状組成物のｐＨが８以下に抑えられるため、人体に対する安全性もより高くなる。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】削除
【補正の内容】
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
また、本発明の第６の構成によれば、上記第１乃至第５のいずれかの構成の液状組成物において、生体適合性ナノ粒子の平均粒子径を１０ｎｍ以上３００ｎｍ以下とすることにより、化粧料や育毛剤として使用する際に、毛穴や毛穴以外の皮膚細胞の隙間部分からも皮膚の深部にまでナノ粒子が浸透する液状組成物となる。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
また、本発明の第７の構成によれば、上記第１乃至第６のいずれかの構成の液状組成物において、ナノ粒子を形成するポリ乳酸、ポリグリコール酸、または乳酸・グリコール酸共重合体の重量平均分子量を５，０００以上１００，０００以下とすることにより、生理活性物質をナノ粒子に担持した状態で所定期間の保存が可能であり、使用時には数時間〜数十時間単位での生理活性物質の徐放が可能な液状組成物となる。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
また、本発明の第８の構成によれば、上記第１乃至第７のいずれかの構成の液状組成物を化粧料として用いるか、または前記液状組成物が配合された化粧料とすることにより、予めナノ粒子粉末を液中に分散させることで使用性に優れ、且つ一定期間安定して保存可能な一剤型の化粧料が提供される。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３０】
また、本発明の第９の構成によれば、上記第１乃至第７のいずれかの構成の液状組成物を頭髪用化粧料として用いるか、または前記液状組成物が配合された頭髪用化粧料とすることにより、予めナノ粒子粉末を液中に分散させることで使用性に優れ、且つ一定期間安定して保存可能な一剤型の頭髪用化粧料が提供される。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
また、本発明の第１０の構成によれば、上記第１乃至第７のいずれかの構成の液状組成物を育毛剤として用いるか、または前記液状組成物が配合された育毛剤とすることにより、予めナノ粒子粉末を液中に分散させることで使用性に優れ、且つ一定期間安定して保存可能な一剤型の育毛剤が提供される。
【国際調査報告】
2012169518.tif 000008
2012169518.tif 000009
2012169518.tif 000010
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