(57)【要約】  担体に捕集した菌を効率よく溶液化し、フィルタ上で濃縮する際の菌の回収量のばらつきを防止するディスポーザブルな菌捕集担体カートリッジと担体処理装置を提供する。複数の貫通孔を有する上蓋と、フィルタを底面に持つ液体貯蔵槽部と空気吸引路を併せ持つすり鉢状の容器と、ゼラチン等の熱可塑性担体を設置するための支持台とで構成されたカートリッジと、液体供給用分注ノズルと液体供給機構、液体加熱機構、ろ過用吸引ポンプで構成される担体処理装置を用意する。すり鉢状容器の底面に設置されたフィルタ上に温水を供給し、液体貯蔵槽に蓄えることで担体を温水と接触させる。温水との接触により担体はゾル化し、温水と混合され、希釈されたところで、ろ過装置の吸引ポンプを駆動させ、フィルタを介して混合液体を吸引ろ過する。
2009157510.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
熱可塑性担体と、
前記熱可塑性担体を支持し、かつ貫通する開口部を有する支持台と、
前記開口部を覆って配置され、かつ一部にフィルタを有する容器とを備える担体カートリッジ。
【請求項２】
前記熱可塑性担体は、ゲル−ゾル転移高分子であることを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項３】
前記熱可塑性担体は、３０℃以上でゾル状態となるゲル−ゾル転移高分子であることを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項４】
前記熱可塑性担体は、ゼラチンであることを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項５】
前記熱可塑性担体は、アルコール分を含むゼラチンであることを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項６】
前記熱可塑性担体の前記アルコール分は、グリセロールであることを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項７】
前記熱可塑性担体は、ゲル状態では板状で少なくとも１つの貫通孔を有することを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項８】
前記支持台は、複数の貫通孔を有することを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項９】
前記支持台は、前記熱可塑性担体の貫通孔を通過する位置と同じ中心軸上に貫通孔を有することを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項１０】
前記支持台の貫通孔の少なくとも１つは、前記支持台の平板上に形成された突起の中心にあることを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項１１】
前記支持台の前記突起の中心軸は、前記熱可塑性担体の貫通孔の中心軸を通る位置関係で、前記熱可塑性担体は前記突起物を包みこみ前記支持台に支持されることを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項１２】
前記容器は、すり鉢形状であることを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項１３】
前記容器は、少なくとも１枚の前記フィルタが取り付けられ、取り付けるためのドーナツ状の板状部を有することを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項１４】
前記容器は、外筒の内部にあり、前記容器の液体保持部との間にギャップを有することを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項１５】
前記フィルタは、０．４５ミクロン以上の物質を通過させないＨＥＰＡ(High Efficiency Particulate Air)またはポア状のメンブレンフィルタであることを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項１６】
前記熱可塑性担体を覆い、かつ前記熱可塑性担体を介して前記容器と対向して配置され、かつ複数の貫通孔を有する蓋部材をさらに有することを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項１７】
前記蓋部材の少なくとも１つの貫通孔は、前記支持台の突起の中心軸と前記熱可塑性担体の貫通孔の中心軸を通る位置関係にあることを特徴とする請求項１に記載の担体カートリッジ。
【請求項１８】
熱可塑性担体と、
前記熱可塑性担体を支持し、かつ貫通する開口部を有する支持台と、
前記開口部を覆って配置され、かつ一部にフィルタを有する容器と、
前記開口部を介して前記容器に液体を供給する液体供給部と、
前記液体の温度を制御する温度制御部と、
フィルタを介して前記液体とゾル化した熱可塑性ポリマーを吸引ろ過するろ過制御部とを有する担体処理装置。
【請求項１９】
前記液体供給部は、少なくとも１本のノズルと、少なくとも１つの溶液溜めと、少なくとも1本の配管チューブと、前記配管チューブと繋げられた少なくとも１つの送液ポンプと、前記容器内にノズルを移動させるノズル位置制御部とを有することを特徴とする請求項１８に記載の担体処理装置。
【請求項２０】
前記担体処理装置の液体供給部の前記ノズルの先端は、前記支持台と前記フィルタに挟まれた領域で、前記フィルタ上に液体を供給することを特徴とする請求項１８に記載の担体処理装置。
【請求項２１】
前記担体処理装置の温度制御部は、前記液体供給部の前記配管の少なくとも１部を加熱することを特徴とする請求項１８に記載の担体処理装置。
【請求項２２】
前記担体処理装置の温度制御部は、前記液体供給部の前記溶液溜めを加熱することを特徴とする請求項１８に記載の担体処理装置。
【請求項２３】
前記担体処理装置のろ過制御部は、ノズルと、配管チューブと、前記配管チューブと繋げられた吸引ポンプと、前記容器の前記フィルタ部と接触するようにノズルを移動させるノズル位置制御部とを有することを特徴とする請求項１８に記載の担体処理装置。
【請求項２４】
液体を回収する少なくとも１つの液体回収部と、
回収した前記液体を収める回収容器と、前記回収容器を保持するホルダと、
前記回収ホルダ下部に設置された光検出器と、前記光検出器の位置制御部とを有することを特徴とする請求項１８に記載の担体処理装置。
【請求項２５】
さらに少なくとも２つの第２の溶液溜めを有し、前記容器内と前記溶液溜めにノズルを移動させる第２のノズル位置制御部とを有することを特徴とする請求項２４に記載の担体処理装置。
【請求項２６】
前記第２の溶液溜めは、ＡＴＰ（アデノシン３リン酸）抽出試薬、ＡＴＰ発光試薬、さらにＡＴＰ消去試薬の少なくとも１つを保持していることを特徴とする請求項２５に記載の担体処理装置。
【請求項２７】
前記担体カートリッジの前記熱可塑性担体上に菌を集菌するステップと、
集菌した前記担体カートリッジを前記細菌計測装置に設置するステップと、
前記液体供給部から３０℃以上に加熱した液体を前記容器内に供給し、前記熱可塑性担体を前記液体で溶解してゾル化するステップと、
前記ろ過制御部でゾル化した担体と前記液体を吸引ろ過し、前記フィルタ上に前記菌を集菌するステップと、
前記フィルタ上に、前記液体供給部からＡＴＰ抽出試薬を添加するステップと、
前記ＡＴＰ抽出試薬を前記液体回収部で回収するステップと、
回収した前記ＡＴＰ抽出試薬を液体回収容器に分注し、前記液体回収容器に分注したＡＴＰ発光試薬と混合するステップと、
前記ＡＴＰ抽出液の回収液に含まれるＡＴＰと化学発光させ、前記化学発光の光強度を前記発光検出器で計測するステップと、
ＡＴＰ発光量から前記菌の数を計数するステップと、
を有する菌の計測方法。
【請求項２８】
前記菌は、空中浮遊菌、前記熱可塑性担体が押し付けられて付着した付着菌、静置させた前記熱可塑性担体上に落下した落下菌のいずれかであることを特徴とする請求項２７に記載の菌の計測方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、空中浮遊菌、付着菌、落下菌の捕集容器、ならびにこの容器を用いた装置および菌計数法に関する。
【背景技術】
【０００２】
バイオクリーンルーム、製薬、食品工業の生産ラインでは、環境管理のための微生物モニタリングが必要で、空中浮遊菌、落下菌、付着菌を計数する。測定方法は、クリーンルームの生物汚染管理の国際標準化機構ISO14698-1で定められており、該手法により測定された清浄度は、グレードで分類される。空中浮遊菌の測定方法は、浮遊菌の自然落下や一定量の空気を吸引する空中浮遊細菌サンプラ（特許文献１参照）を利用したものが一般的に用いられている。これらの方法では、寒天平板培地上に一定時間内に菌を補集し、培養後発生したコロニー数をもって表わすものである。上記寒天培地を恒温機中にて２〜７日間培養し、発生したコロニー数を目視で数える。そして、各培地のコロニー数を平均して浮遊菌数とする。なお、クリーンルームにおいて高い清浄度が要求される無菌医薬品の製造施設や細胞を生産する細胞培養施設（CPC）では、上述したグレード分類において、グレードAやグレードBを常時保ち管理する必要がある。これは、空中の微粒子数で、≦３，５３０個／ｍ３、菌数で、≦１０ＣＦＵ（Colony Forming Unit）／ｍ３に値する（グレードＡ（安全キャビネット内）：≦１ＣＦＵ／ｍ３、グレードＢ（安全キャビネット周辺作業場）：≦１０ＣＦＵ／ｍ３）、である。【０００３】
一方、微生物中に含まれるＡＴＰ（アデノシン３リン酸）に、発光試薬であるルシフェラーゼ及びルシフェリンを添加して、その生物発光を測定する方法（ＡＴＰ法）がある。空中浮遊菌サンプラでシャーレ内に保持された寒天培地に菌を含む塵埃を回収し、その後、溶液系に展開し、試薬反応で菌中からＡＴＰを抽出する。抽出したＡＴＰを生物発光法で測定し、得られた発光強度からＡＴＰ量を算出する。ＡＴＰ量と菌数は比例関係にあるので、ＡＴＰ量から空中浮遊菌数を算出できる。【０００４】
ＡＴＰ法を用いた空中浮遊菌の一般的な計測フローは以下のとおりである。
１．空中浮遊細菌サンプラによる菌の集菌
２．採取した菌の回収、溶液系への展開
３．菌液中の死菌消去と菌由来ではない外来のＡＴＰ消去
４．生菌中のＡＴＰ抽出
５．発光試薬添加による生物発光、測定、計数
上記計測フロー1について、
多孔ノズル形態のインパクタ方式サンプラが用いられ、１０〜２０分で空気１ｍｍ３に含まれる塵埃をシャーレ内の平板培地上に回収する（非特許文献１参照）。菌の回収率は９０％以上である。清浄度の高い良好なクリーンルームや安全キャビネット内では、２０分ほどの時間をかけて、数個の菌を集める。【０００５】
上記計測フロー２について、
捕集により平板培地上に採取された菌を、表面から剥離させて、別に用意した容器に液体サンプルとして回収する。菌を全量回収するには、培地上に捕捉された菌の取り出しを確実に行う必要があり、作業者のスキルと溶液の選定が重要である。また、ここで、回収するツール自身が汚染していると正確な計数ができなくなってしまうという課題がある。【０００６】
上記計測フロー３、４について、
試薬の開発が進み（非特許文献３参照）、簡便に死菌と外来ＡＴＰの消去、菌中ＡＴＰの抽出が行なえるようになった。アピラーゼとアデノシンリン酸デアミナーゼを主成分とするＡＴＰ消去試薬を測定対象の液体サンプルに加え、３０分反応させ、その後、界面活性剤を主成分とするＡＴＰ抽出試薬を加え、３０〜６０秒反応させる。これにより、生菌由来のＡＴＰのみを測定する準備が整う。【０００７】
上記計測フロー５について、
発光試薬を生菌由来のＡＴＰを抽出した後の抽出液に添加、もしくは生菌由来のＡＴＰを抽出した後の抽出液を回収して、発光試薬に添加、混合することによる生物化学発光を光検出器で検出する。菌数はＡＴＰ量に比例するので、ＡＴＰ発光量から菌数を算出する。【０００８】
ＡＴＰ発光測定において、ＡＴＰ発光を高い感度でかつ高い精度で測定するためには、高感度な検出器を用いること及び検出器と発光反応場との光学配置による高い集光を実現することが重要である。さらに、装置外や発光物質以外からの光、いわゆる迷光が、装置内へ侵入すると測光精度が低下するので、迷光の侵入を極力抑止させる遮光機構を実現することが重要である。非特許文献１（論文）の図２によると、ＡＴＰの検出下限は１×１０−１７ｍｏｌ（１０ａｍｏｌ）であり、菌数に換算すると、ほぼ１０菌程度の感度に相当する。空中浮遊菌を対象にすると、１個の菌から測定できる検出感度が要求されるため、非特許文献１では、３５℃、６時間の培養を上記計測フローの１と２の工程に挟む場合が多い（非特許文献１（論文）の図９）。【０００９】
最近では、分注機と検出器を同一装置内の遮光された空間に配置した生物発光検出システムで、ＡＴＰ量を1ａｍｏｌから計測できるようになった（非特許文献２（論文）の図３）。【００１０】
高感度検出器に関しては、従来から、光電子増倍管が、ＡＴＰ測定用のルミノメータやＡＴＰ発光を利用したルミノメータを具備した微生物計数装置の光検出器として用いられている。さらなる高感度仕様の場合には、光電子増倍管の信号をデジタル処理する単一光子計数法（フォトンカウンティング法）が採用される。次に、光学配置に関しては、光の強度は発光点からの距離の２乗で減衰するため、発光物質を含む試料容器を受光面に近づけるのが良いとされている。また、発光点からの光は球状に発散するため、受光面へ効率よく回収するための光学配置が重要となる。なお、光の回収効率は立体角でしばしば定義されるが、それによれば、受光面を容器に近づけること、発光エリアに対して大きな受光面を用意することが高感度化を実現する上で重要である。また、強制的に光を鏡面で反射させて、受光面に誘導するように容器ホルダを鏡面部材で取り囲むことも有効である。【００１１】
なお、計測フロー２、３、４の順番は順不同で、３、４を先に行い、それから２でＡＴＰ抽出済みの菌液を回収する実施形態もある。【００１２】
また、計測フロー１で落下菌や付着菌を、専用の担体で捕集すれば、計測フロー２以降は同じ工程で、落下菌、付着菌の測定が可能である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】特開２０００−３００２４６号公報
【特許文献２】特開２０００−３１４７３８号公報
【特許文献３】特開平７−８３８３１号公報
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】空気清浄第３８巻第５号  pp.２１-２６,２０００
【非特許文献２】第２６回空気清浄とコンタミネーション研究大会予稿集  pp.２４０-２４２,２００８
【非特許文献３】Nippon Nogeikagaku Kaishi Vol.78,No.7,pp.630-635,2004
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
化学発光検出装置の高感度化により、１ａｍｏｌのＡＴＰ量を計測できるようになったため、数個の菌が存在すれば原理的には検出できる。しかしながら、採取した菌の回収、溶液系への展開では、現状、マニュアル操作であり、菌を全量回収するには作業者のスキル習得が必要であり、また、回収するツール自体が汚染されていると、結果の信頼性・再現性を失う。短時間培養を行なうことで菌数を１０倍程度増殖させてから計測する方法もあるが、菌種の違いや培地の栄養条件下で菌の増殖率は変わるため、正確な計数は困難である。工業的価値の面からは、従来の培養法と異なり、１時間以内で清浄度を確認できる培養不要のＡＴＰ法をバイオクリーンルーム清浄度モニタに適用できれば、商品の出荷効率が著しく向上し、商品ストック用のプラント整備が不要となり、即日出荷できるようになる。【００１６】
本発明はこのような状況に鑑みてなされたものであり、採取した菌を高い回収率をもって全自動で溶液系へ展開することができる菌捕集担体容器の構成および担体処理装置を提供する。特に、培養不要なＡＴＰ法による菌の計数方法で、1菌からの検出を可能とするデバイスおよび装置を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
上記課題を解決するために、複数の貫通孔を有する上蓋と、フィルタを底面に持つ液体貯蔵槽部と空気吸引路を併せ持つ容器と、ゼラチン等の熱可塑性担体を設置するための支持台とを用意する。上蓋、容器、支持台は一体化されたもので、支持台は容器と上蓋の間に挟まれた構成とする。支持台は上蓋と接することなく、また、容器底面のフィルタとも接しない配置で容器内部の液体貯蔵槽部に設置される。これらのハウジングを以下、菌捕集担体カートリッジと記述する。【００１８】
菌捕集担体カートリッジの上蓋の複数の貫通孔は、浮遊菌を空気とともに通過させて捕集する手段であるインパクタノズルと液体貯蔵槽に液体を供給するための液体供給用分注ノズル導入孔として利用する。支持台上に温度依存的にゾルーゲル相転移を起こす熱可塑性担体を設置する。ここで、例えば３７℃を転移温度とする担体を用意する。【００１９】
吸引ファンで気体を吸込む捕集機を別途用意し、捕集担体カートリッジを捕集機のヘッドに設置する。捕集担体カートリッジの容器部の吸引路を介して空気を吸引し、インパクタの原理で空気中の菌を含む塵埃をゲル状の担体表面に集菌する。【００２０】
塵埃捕集が終了した後、カートリッジを捕集機から取外し、担体処理装置に設置する。担体処理装置は液体供給用分注ノズルと液体供給機構、液体加熱機構、ろ過用吸引ポンプで構成される。上蓋の液体供給用分注ノズル導入孔に、液体供給用分注ノズルを挿入し、フィルタ上に温水（≧３７℃）を供給する。液体供給時はろ過用吸引ポンプを停止しておく。フィルタ上に供給される温水は液体貯蔵槽に時間とともに蓄えられる。３７℃でゾルーゲル相転移が起こる担体に温水が接触することで、ゲル状の担体はゾル状態へと変化し、ゾル化した担体は温水と混ざり、液体として扱うことができるようになる。担体がゾル化し、温水と混合され、希釈されたところで、ろ過装置の吸引ポンプを駆動させ、捕集担体カートリッジのフィルタを介して混合液体を吸引ろ過する。細菌が通過しない形状、隙間を有するフィルタを用いることで、吸引ろ過後、菌のみがフィルタ上に捕獲される。発光反応のバックグラウンドとなる高分子やダストはろ過により、フィルタを通過し、吸引ポンプより排除される。【００２１】
次に、フィルタ上にＡＴＰ抽出液を加え、ろ過によりフィルタ上に捕獲された菌の内部からＡＴＰ分子を抽出する。抽出後、専用の化学発光測定装置とルシフェリン・ルシフェラーゼの発光試薬を用意し、ＡＴＰ抽出反応を終えた該ＡＴＰ抽出液を発光試薬と混合する。化学発光計測装置により発光量を計測する。得られた発光強度からＡＴＰ量を、さらにＡＴＰ量をもとに菌数を算出し、計数する。【００２２】
さらなる本発明の特徴は、以下本発明を実施するための最良の形態および添付図面によって明らかになるものである。
【発明の効果】
【００２３】
本発明によるカートリッジは、第１に、ゲル状の担体で空中浮遊菌、落下菌、付着菌を集菌することにより、従来技術における捕集担体と同等の捕集性能を発揮できる効果がある。第２に、捕集担体をゾル状に相転移させ、そのまま希釈し、捕集担体を温水と混合した液体として取り扱うことができるため、この工程において菌懸濁液となり、培地という固体表面からの液体を用いた剥離による取出し工程が不要となる。ゾル化により、液体中に菌を１００％回収でき、液体成分をろ過することで、極めて高い回収効率が達成される、という効果がある。また煩雑な取出し工程を加温液体の添加という単純な工程に置きかえることが可能となり、自動化、システム構成の簡略化、迅速化、再現性向上、汚染リスク低減などの効果がある。【００２４】
本発明による菌懸濁液は液量が少ないため、菌の濃度が高く、菌の利用効率も高い。また菌懸濁液をろ過等して菌懸濁液中の菌をフィルタ上に捕捉することにより、液量を実質的にゼロとし、菌の濃度や利用効率が飛躍的に高くなる効果がある。また水溶性や粒径の小さい夾雑物の影響を排除でき、信頼性が高い効果がある。つまり菌の計測を高感度、高精度かつ自動的に行える利点がある。【００２５】
従って、本発明は空中浮遊菌、落下菌、付着菌検査における測定精度と感度が高く、簡便迅速に結果が得られる、という効果がある。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１Ａ】実施の形態１による菌捕集担体カートリッジの構成を示す図（１）である。
【図１Ｂ】実施の形態１による菌捕集担体カートリッジの構成を示す図（２）である。
【図２Ａ】実施の形態１による上蓋の構造を示す図（１）である。
【図２Ｂ】実施の形態１による上蓋の構造を示す図（２）である。
【図３Ａ】実施の形態１による担体支持台の構造を示す図（１）である。
【図３Ｂ】実施の形態１による担体支持台の構造を示す図（２）である。
【図３Ｃ】実施の形態１による担体支持台の構造を示す図（３）である。
【図４】実施の形態１による担体支持台７をプレフィルタとして利用した模式図である。
【図５Ａ】実施の形態１による熱可塑性担体上の菌を菌捕集フィルタ上に集菌する様子を示す模式図（１）である。
【図５Ｂ】実施の形態１による熱可塑性担体上の菌を菌捕集フィルタ上に集菌する様子を示す模式図（２）である。
【図６】実施の形態２による担体処理装置の外観を示す図である。
【図７Ａ】実施の形態２による担体処理装置の動作原理を示す図（１）である。
【図７Ｂ】実施の形態２による担体処理装置の動作原理を示す図（２）である。
【図７Ｃ】実施の形態２による担体処理装置の動作原理を示す図（３）である。
【図７Ｄ】実施の形態２による担体処理装置の動作原理を示す図（４）である。
【図７Ｅ】実施の形態２による担体処理装置の動作原理を示す図（５）である。
【図７Ｆ】実施の形態２による担体処理装置の動作原理を示す図（６）である。
【図８】実施の形態３による自動菌数計測装置の外観を示す図である。
【図９】実施の形態３による自動菌数計測装置を用いて生菌を測定する手順を説明するためのフローチャートである。
【図１０】実施の形態３による自動菌数計測装置で得られた経過時間に対するATP発光曲線を示す図である。
【図１１】実施の形態３による動菌数計測装置で得られたATP濃度と発光強度の関係を示すグラフである。
【図１２】実施の形態３による自動菌数計測装置で測定した横軸菌数、縦軸発光強度の菌数依存性グラフである。
【図１３Ａ】実施の形態３による自動菌数計測装置に捕集担体カートリッジを設置する様子を示す模式図（１）である。
【図１３Ｂ】実施の形態３による自動菌数計測装置に捕集担体カートリッジを設置する様子を示す模式図（２）である。
【図１４Ａ】実施の形態２による捕集担体カートリッジを捕集機に設置して使用する様子を示し、インパクタの原理を示す模式図（１）である。
【図１４Ｂ】実施の形態２による捕集担体カートリッジを捕集機に設置して使用する様子を示し、インパクタの原理を示す模式図（２）である。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
以下、添付図面を参照して本発明の実施形態について説明する。ただし、本実施形態は本発明を実現するための一例に過ぎず、本発明を限定するものではないことに注意すべきである。また、各図において共通の構成については同一の参照番号が付されている。
【００２８】
（実施の形態１）
図１は、実施の形態１に係る菌捕集担体カートリッジの概略構成を示す図である。図１Ａは本発明の菌捕集担体カートリッジ１の組立完成図とその透過図である。図１Ｂは概略構成の説明を容易にするため、分解図の形態で図示したものである。菌捕集担体カートリッジ１は、上蓋２、分注ノズルガイド５、熱可塑性担体１５、担体支持台７、液体貯蔵容器９、外筒１０で構成される。
【００２９】
上蓋２には、分注ノズルガイド５と同じ中心軸上に位置する第１の貫通孔３とインパクタノズル用の第２の貫通孔４がｚ軸に沿って形成されている。
【００３０】
分注ノズルガイド５は、担体支持台７の第３の貫通孔８に挿入されるもので、上部の傘構造の部分でぶら下がり固定される構造となっている。ここで、分注ノズルガイド５は担体支持台７と一体成型されたものでも良い。
【００３１】
菌を集菌する熱可塑性担体１５は、担体支持台７の上に設置され、分注ノズルガイド５の傘部分を覆うように設置され、第５の貫通孔１４を有している。第２の貫通孔４は、担体支持台７と分注ノズルガイド５を取り付けた状態で、熱を加えてゾル化状態にした熱可塑性ポリマーを担体支持台７上に載せて、室温付近に温度を下げ、ゲル化して固める。担体支持台７上でゲル化して固める際に形成されるものである。もちろん、熱可塑性担体１５をドーナツ状に型抜きにより形成し、それを後から、担体支持台７に嵌めこんでも良い。
【００３２】
担体支持台７は、中心に分注ノズルガイド５を挿入する第３の貫通孔８だけでなく、平板上に複数の第４の貫通孔１３で構成されている。液体貯蔵容器９は、すり鉢形状またはラッパ形状のカップである。底面は開放形となっており、その第５の貫通孔１４には、菌捕集フィルタ１１を設置し、菌捕集フィルタ１１はドーナツ状の止め板１２で液体貯蔵容器９の底部に固定される。外筒１０は、液体貯蔵容器９の直径よりも大きいため、図１Ａのように菌捕集担体カートリッジ１組立て後には、ギャップ６が外筒１０と液体貯蔵容器９の間に形成される。説明上、液体貯蔵容器９と外筒１０を分解して図示しているが（図1Ｂ）、液体貯蔵容器９と外筒１０は、数箇所に這わせたブリッジで連結されるようにするとよい。ギャップ６は、インパクタノズル用の第２の貫通孔４内に空気を流入する吸気口として使用する。
【００３３】
各部の材質は、使用前の滅菌処理の観点からオートクレーブ可能であるものが良く、融点の高い樹脂材料であるポリプロピレン、ポリエーテルケトンケトン（ＰＥＥＫ）、さらに金属では、ステンレス等が好適である。ディスポーザブルの面では、ポリプロピレン、ＰＥＥＫ材が好適である。
【００３４】
上蓋２、分注ノズルガイド５、支持台７、液体貯蔵容器９と外筒１０のそれぞれを別々に製作した後、手作業で各部材を装着する製作方法でも良いが、射出成型を用いて、可能なかぎり一体成型で製作するのが好ましい。
【００３５】
図２は、上蓋２をｘ-ｙ平面から見た模式図である。インパクタノズルの第２の貫通孔４が、図２Ａでは単一であり、図２Ｂは多孔である。持ち運び可能なポータブルタイプの捕集機を用いる場合、捕集機の吸引ファンの容量が小さいため、流路抵抗上、図２Ｂの多孔型を用いた方が各インパクタノズルの流速を早めることができ、浮遊菌の捕集効率を高めることができる。孔の数は、１００から６００個、孔径は０．６ｍｍ以下、孔の間隔は数ｍｍで配列されるのが一般的である。大きさに制限のない設置型の捕集機を用いる場合では、吸引ファンの容量を大きくできるため、図２Ａのインパクタノズルが単一型の上蓋２を用いるのが良い。インパクタノズルの単一型の利点は、狭い領域に菌を集めることができるため、菌捕集担体カートリッジ１を小さく設計および製作できる。例えば、図２Ａの上蓋を用いる場合、菌捕集担体カートリッジ１の外径寸法は１０ｍｍ程度でもかまわないが、図２Ｂの上蓋を用いる場合では、外径寸法は上記の孔数を配列するために、最低でも４０ｍｍ程度は必要となる。
【００３６】
図３は、担体支持台７をｘ-ｙ平面から見た模式図である。図３Ａでは、第３の貫通孔８を中心に複数の第４の貫通孔１３が扇形形状で放射状に形成されている。図３Ｂでは、第３の貫通孔８の中心に円形の複数の第４の貫通孔１３が一定間隔で複数形成されている。図３Ｃは、メッシュ１８を利用した担体支持台７である。
【００３７】
担体支持台７上には、熱可塑性担体１５が設置される。熱可塑性担体１５の硬度によって、図３Ａ、Ｂ、Ｃの形態を使い分けるのが良い。熱可塑性担体１５がゲル状態で硬いほど、担体支持台７の支持部１７の面積は小さくてもよい。その場合、図３Ａの担体支持台７を用いる方が良い。熱可塑性ポリマーのゾル化の際には、液化した担体ポリマーは、第４の貫通孔を通過して、液体貯蔵容器９内に落下するが、支持部１７の領域面積が小さいほど、支持部１７上に残留するであろう液体量が減る。言い換えれば、支持部１７の領域面積が小さいほど熱可塑性担体１５上に捕捉された菌を効率よく液体貯蔵容器９に回収できる。
【００３８】
図３Ｃは、熱可塑性担体１５がゲル状態で比較的柔らかくても担体支持台７で支持できる形態の一つである。支持部の面積が小さいため、担体支持台７の支持部１７上に残留する液体量を減らすことができる。
【００３９】
図３Ｂを用いれば、最も安定に熱可塑性担体１５を支持できるが、担体支持台７の残留液体量は増えてしまう。残留液体量を低減する方法として、担体支持台７の表面を撥水加工しても良い。
【００４０】
熱可塑性担体１５を支持する機能以外に、もう一つの機能追加として、菌１９以外のダストをトラップするプレフィルタとして担体支持台７を利用する形態もある（図４）。熱可塑性担体１５上には菌１９以外にもダスト２０が存在している。菌体の大きさは、例えば1ミクロンより大きい、または、その１０倍程度の大きさの第４の貫通孔１３で形成された担体支持台７を使用する。
【００４１】
熱可塑性担体１５は、３０℃以上に熱せられるとゲルからゾル状態に転移し、３７〜４０℃で完全に液化する高分子であり、例えば、ゼラチンやゼラチンとグリセロールの混合物、さらに、N-アクリロイルグリシンアミドとN-メタクロイル-N'-ビオチニルプロピレンジアミン（MBPDA）の10:1の共重合ポリマーなどを使用する。
【００４２】
熱可塑性担体１５を３０℃以上、例えば３７℃に熱して、ゾル状態にしたポリマー液体を吸引ろ過すると、図５（Ａ）（Ｂ）に示すように、熱可塑性担体１５上から、菌捕集フィルタ１１上に集菌される。熱可塑性担体１５のゾル化法は、図６の担体処理装置を用いて、実施の形態２で説明するが、液体貯蔵容器９のすり鉢形状またはラッパ形状により、菌１９は、菌捕集フィルタ１１上の狭い領域に集められ、さらに濃縮される。ここで、濃縮された菌１９の環境は、理想的には液量がゼロであり、次に加えられる液体の量の制御で、菌の濃度を自由に制御できる。菌捕集フィルタ１１の有効面の直径が数ｍｍから１０ｍｍ程度であると、数マイクロリットル〜１００マイクロリットルのレベルで液体を添加して、菌懸濁液を液体貯蔵容器９内に作製できる。結果的には、１ｍｍ３（１０００リットル）の空気を捕集機で捕集した菌１９の濃度が、菌捕集フィルタ１１上で、1万倍から１０万倍に濃縮されたことになる。
【００４３】
菌捕集フィルタ１１は、溶液を通過させ菌は通過させない材質であればよく、ＨＥＰＡ(High Efficiency Particulate Air)形状、ポア形状の何れでもよい。例えば、菌の大きさを考慮し、０．４５ミクロン以上の物質の通過を許さないものであればよい。
【００４４】
（実施の形態２）
図６は、実施の形態２による担体処理装置の概略構成を示す図である。担体処理装置は、液体供給部と温度制御部とろ過制御部で構成され、菌捕集担体カートリッジ１内の熱可塑性担体１５を溶解し、ろ過吸引して、菌捕集フィルタ１１上に集菌するものである。装置全体の工程は、第１の制御装置３５を用いて連続的に自動制御されるものである。
【００４５】
図６において、菌捕集担体カートリッジ１は、第１の板状部材２１にセットされる。菌捕集担体カートリッジ１のセット場所の第１の板状部材２１の板は、貫通しており、菌液吸引ノズル３１が、第１の板状部材２１を介して菌捕集担体カートリッジ１の底面と接触できるようになっている。
【００４６】
まず、液体供給部と温度制御部について説明する。
【００４７】
第１の貫通孔３の中心のＺ軸上に沿って、菌捕集担体カートリッジ１の上部に第１の分注ノズル２２が位置しており、第１の分注ノズル２２は、第１のノズルホルダ２３に固定され、さらに、第１のノズルホルダ２３は、第１のアクチュエータ２６に固定されている。第１のアクチュエータ２６の移動により、第１の分注ノズル２２は、菌捕集担体カートリッジ１の第１の貫通孔３内に導入でき、分注ノズルガイド５内を通り抜けて、菌捕集フィルタ１１の直上まで接近できる。第１の分注ノズル２２は、第１の配管２４、第２の配管２６、第３の配管２８と繋がっており、配管加熱ヒータ２５、第１の送液ポンプ２７を介して、第３の液体配管２８は、第１の溶液溜め２９に収められている。第１の溶液溜め２９は、溶液溜めヒータ３０の上に設置されている。第１の分注ノズル２２と第１の溶液溜め２９の間に３本の配管を介していると説明したが、配管は１本でもかまわない。この場合、第１の送液ポンプ２７にペリスタティック型やダイヤフラム型のポンプを使用すると良い。なお、第１の送液ポンプ２７は、それら以外にシリンジを使用するシリンジポンプでも良い。配管加熱ヒータ２５は、遠赤外線セラミックヒータ、シーズヒータや、シリコンラバーヒータ等を用いる。遠赤外線セラミックヒータを用いるのであれば、コイル状にした配管をヒータ内部に挿入し、長い配管距離を加熱するのが良い。配管長が短い場合、送液工程で液体が移動する間に、溶液が設定温度まで温まらずに第１の配管２４に移動してしまうからである。シーズヒータを用いるのであれば、ヒータ面に螺旋状に配管を複数回巻き付けて、長い配管距離を加熱する。シリコンラバーヒータを用いるのであれば、ヒータを配管に長い距離巻き付けて、長い配管距離を加熱するのが良い。何れのヒータを選択した場合でも、配管加熱ヒータ２５を断熱材で覆い、外部への熱量の発散を抑制するのが良い。溶液溜めヒータ３０には、板状の抵抗加熱型やペルチェ素子型、等を用いる。配管加熱ヒータ２５、溶液溜めヒータ３０の温度は、熱電対素子等の温度測定器でモニタし、一定に保つようにする。
【００４８】
次に、ろ過制御部について説明する。
【００４９】
菌捕集担体カートリッジ１の菌捕集フィルタ１１の中心のｚ軸に沿った下方に、菌液吸引ノズル３１はあり、第２のアクチュエータ３２に固定されている。第２のアクチュエータ３２の移動により、菌液吸引ノズル３１は、菌捕集担体カートリッジ１の菌捕集フィルタ１１を固定するドーナツ状の止め板１２と接触する。菌液吸引ノズル３１の先端には、Oリングゴムが装着されており、ドーナツ状の止め板１２と接触した際に密着し、リークのない接続が菌捕集フィルタ１１との間で得られる。菌液吸引ノズル３１は、第４の配管３３を介してアスピレータ等の吸引ポンプ３４と繋がっている。吸引ポンプ３４のＯＮ/ＯＦＦ制御、第２のアクチュエータ３２の上下移動は、第１の制御装置３５により制御される。
【００５０】
図７は、実施の形態２による担体処理装置（図６）の動作原理を説明する図である。既に、捕集機を用いた菌捕集工程は済んでおり、菌１９は熱可塑性担体１５上に捕捉されている。その菌捕集担体カートリッジ１を、図６の処理装置に設置し、菌捕集担体フィルタ１１上に集菌する工程を説明する。なお、図では簡単のため、上蓋２を省いて図示している。ここで用いた熱可塑性担体１５は、ゼラチンであり、３７℃を境にゾル化、即ち固体から液体へと変化する。
【００５１】
図７Ａは、第１の制御装置３５から与えられた処理開始の指示に応答して、第１のアクチュエータ２６が駆動し、第１の分注ノズル２２が菌捕集担体カートリッジ１の分注ノズルガイド５を通って、液体貯蔵容器９内の菌捕集フィルタ１１に近づいた状態を示している。さらに、第１の溶液溜め２９から供給される加熱溶液３７が、第１の分注ノズル２２から分注されて間もない状況を示している。加熱溶液３７は、リン酸バッファや滅菌水を用いるのが好適で、ここでは、４０℃のリン酸バッファを使用した。ただし、この４０℃という温度は、液体貯蔵容器９内で予備的に測定した結果である。前段の配管加熱ヒータ２５の設定温度は８０℃とし、第１の分注ノズル２２からは４５〜５０℃の範囲で変動しながら液体貯蔵容器９内に、流速1ｍＬ/ｍｉｎで供給した際の貯蔵容器９内で計測した平均的な温度である。また、ここでは、配管加熱ヒータ２５のみを溶液の加熱に使用しているが、配管加熱ヒータ２５と溶液溜めヒータ３０の併用、溶液溜めヒータ３０の単独での使用でもかまわない。
【００５２】
図７Ｂは、分注を開始し、５分が経過した状況を示している。液体貯蔵容器９の菌捕集フィルタ１１と担体支持台７で挟まれる内部容量は５ｍＬであり、図７Ｂの状態は、熱可塑性担体１５が加熱溶液３７にまさに接し始めたところである。
【００５３】
図７Ｃは、さらに分注を続け、液体貯蔵容器９内に約７ｍＬの加熱溶液３７が供給され、さらに供給を停止した状況を示している。さらに、図７Ｃでは熱可塑性担体のポリマーがゾル転移し、液体化初期の状況を示している。図７Ｄは、数分後、熱可塑性担体のポリマーが完全に液体化し、加熱液体とポリマーの混合液体３８が形成されたところである。菌１９は懸濁し、菌懸濁液が形成されている。
【００５４】
図７Ａ〜Ｄでは、分注ノズルからの加熱溶液により、熱可塑性担体がゾル転移させているが、担体支持体等を加熱することにより、ゾル転移させてもよい。また、加熱溶液の分注と担体支持体等の加熱とを併用させてもよい。
【００５５】
図７Ｅは、菌液吸引ノズル３１が上昇し、ドーナツ状の止め板１２と菌液吸引ノズル３１上のＯリング３６が密着し、吸引を開始する直前を示している。このように密着させるのは、図７Ａ〜Ｄのいずれの工程であってもよい。図７Ｆは、吸引ポンプ３４が稼動し、加熱液体とポリマーの混合液体３８を、菌捕集フィルタ１１を介して、排液し、排液が終了した状況を示している。
【００５６】
図７Ａ〜Ｅの工程により、熱可塑性担体１５上に捕捉した菌１９を菌捕集担体フィルタ１１上に集菌できる。
【００５７】
本実施例では、加熱溶液３７の供給と、吸引による加熱液体とポリマーの混合液体３８の排液は各１回であるが、複数回繰り返して菌捕集フィルタ１１上に菌１９を集菌しても良い。複数回繰り返す方が、菌捕集フィルタ１１上の不純物や熱可塑性担体１５であるゼラチンの固形残留物をフィルタ上で暖めながら、さらに液化して取除くことができる。
【００５８】
本発明の担体処理装置の特徴は、菌捕集フィルタ１１上に加熱液体３７を供給し、熱可塑性担体１５をフィルタに近い位置から液化してろ過できる点である。これにより、菌捕集フィルタ１１上の温度を高く保つことができ、さらに、菌捕集フィルタ１１上の熱可塑性ポリマーの濃度を加熱溶液３７による希釈で、低濃度制御が可能であることから、菌捕集フィルタ１１の目詰まりを防ぐ手段として好都合である。
【００５９】
図１４に示す捕集機７４の吸引により発生した気流７５は、第２の貫通孔４を通って、ギャップ６を通過し、捕集機７４の排気口を通じて排気される。気流７５から外れた菌１９は、熱可塑性担体１５の表面に捕捉される。この際、上蓋２と熱可塑性担体１５との間隔は第２の貫通孔４の径に対して、１：１もしくは１：２とする。前記比率の間隔では、より捕集率が増加する。
【００６０】
熱可塑性担体の下部から加熱溶液を添加する方法以外に、ゾル転移させる方法として、菌捕集担体カートリッジ１の熱可塑性担体１５の上から加熱液体３７を添加する方法を用いてもよい。その場合には、上蓋２を取り外す必要がある。
【００６１】
（実施の形態３）
図８は、実施の形態２による担体処理装置の機構部と化学発光計測機構部をシステム化した自動菌数計測装置６０の概略構成図である。図６の担体処理装置の全機構に、さらに、菌１９のＡＴＰ抽出から発光計測までを自動で処理できる機構部を追加し、菌捕集担体カートリッジ１に捕集された菌１９の数に比例したＡＴＰ量は発光計測し、さらに菌１９の数を算出する装置である。担体処理機構部については、第２の実施例で説明したとおりなので、ここでは説明を省く。
【００６２】
化学発光計測機構部について説明する。
【００６３】
ＡＴＰ計測容器７０は、第１の容器ホルダ３９にセットされる。第１の容器ホルダ３９は、第２の板状部材４０に設置される。光検出器４１は、第３のアクチュエータ４２によりｚ軸方向に移動可能である。ＡＴＰ計測容器７０、第１の容器ホルダ３９、光検出器４１の中心は、ｚ軸方向の同一軸上にあるようにアライメントされている。光検出器４１は、一般的には光電子増倍管（Photomultiplier Tube: PMT）を使用するのが感度の面で好適である。しかし、PMTほどの感度は必要ではなく、装置コストの低下を重視する場合には、ホトダイオード等の半導体素子でも良い。ただし、本明細書では、PMTを使用した系のみについて記載する。
【００６４】
第３のアクチュエータ４２によるｚ軸位置の移動は、検出感度を制御するために使用する。光の強度は発光点からの距離の２乗で減衰するため、発光物質を含む試料容器を受光面に近づけるのが好適である。しかし、ＡＴＰ濃度が高い測定対象を計測する場合、検出器を遠ざけた形で、検出上限を広くすることもまた有効であり、本自動菌数計測装置はそれを可能とする。
【００６５】
発光計測に使用する液体操作部は、ＡＴＰ計測容器７０内へＡＴＰを含む液体を分注する際の液体出口となる第２の分注ノズル４３、第２の送液ポンプ４４、第２の分注ノズル４３を結ぶ第５の配管４５、第２の分注ノズル４３を固定し、かつ第２の分注ノズル４３と第５の配管４５との第２のノズルホルダ４６で構成されている。第２の分注ノズル４３は、第４のアクチュエータ４７によりｚ軸方向で位置を制御できる。さらに、第４のアクチュエータ４７と担体処理を行なう手段としての第３のアクチュエータは第５のアクチュエータに取り付けられており、ｙ軸方向にも位置を制御できる。
【００６６】
第２の板状部材４０上には、溶液溜めチューブを複数セット（ここでは３セット）設置できるチューブ設置ホルダ４９が設置されており、第１の試薬チューブ５０、第２の試薬チューブ５１、第３の試薬チューブ５２には、ＡＴＰ消去試薬、ＡＴＰ抽出試薬、ＡＴＰ発光試薬などが導入される。これらの試薬は、第２の分注ノズル４３を利用して分取され、菌捕集担体カートリッジ１やＡＴＰ計測容器７０内へ分注される。
【００６７】
自動菌数計測装置６０の全工程は、第２の制御装置５３を用いて連続的に自動制御されるものである。
【００６８】
図９を参照して、図８を用いた自動菌数計数法の手順を説明する。まず、ＡＴＰ計測容器７０、ＡＴＰ消去試薬を入れた第１の試薬チューブ５０、ＡＴＰ抽出試薬を入れた第２の試薬チューブ５１、ＡＴＰ発光試薬を入れた第３の試薬チューブ５２を、チューブ設置ホルダ４９に設置する（Ｓ９０１）。次に、浮遊菌捕集用の捕集機に菌捕集担体カートリッジ１を取り付け、菌１９を捕集した菌捕集担体カートリッジ１、または落下菌を集菌した菌捕集担体カートリッジ１、または付着菌を採取した菌捕集担体カートリッジ１を、第２の板状部材４０に設置する（Ｓ９０２）。自動菌数計測装置６０の内部は発光計測のため、遮光された筐体である。上記Ｓ９０１、Ｓ９０２の工程は装置に取付けられた窓７１を介して、その遮光扉７２を外して設置される。または、第２の板状部材４０を引出せる引き出し７３を利用して設置される（図１３）。
【００６９】
装置内は密閉状態で遮光される。
【００７０】
第２の制御装置３５から与えられた処理開始の指示に応答して、まず、第１の分注ノズル２２が菌捕集担体カートリッジ１の液体貯蔵容器９内の菌捕集フィルタ１１の直上まで移動し、第１の溶液溜め２９から供給される加熱溶液３７を分注する（Ｓ９０３）。分注量は任意に設定できる。分注終了後、熱可塑性担体１５の液体化反応のための待機時間を経て（Ｓ９０４）、菌液吸引ノズル３１により、加熱液体とポリマーの混合液体３８を菌捕集フィルタ１１を介して吸引ろ過する（Ｓ９０５）。Ｓ９０３〜９０５の工程が終了すると、菌１９は菌捕集担体フィルタ１１上に集菌されている。
【００７１】
次に、生菌中のＡＴＰ量を測定するステップに以降する。第１の試薬チューブ５０より、第２の分注ノズル４３でＡＴＰ消去試薬を分取し、分取したＡＴＰ消去試薬を菌捕集フィルタ１１上に分注する（Ｓ９０６）。ＡＴＰ消去反応の待機時間３０分後（Ｓ９０７）、第２の試薬チューブ５１より、第２の分注ノズル４３でＡＴＰ抽出試薬を分取し、分取したＡＴＰ抽出試薬を菌捕集フィルタ１１上に分注し（Ｓ９１０）、菌中からＡＴＰを抽出する。なお、Ｓ９０９の工程に入る前に、第３の試薬チューブ５２より、第２の分注ノズル４３でＡＴＰ発光試薬を分取し、分取したＡＴＰ発光試薬をＡＴＰ計測容器７０に分注し（Ｓ９０８）、発光試薬のバックグラウンド測定を開始する（Ｓ９０９）。ＡＴＰ抽出反応の待機時間である３０秒〜１分後（Ｓ９１１）、第２の分注ノズル４３で菌捕集担体カートリッジ１の液体貯蔵容器９内に導入し、菌１９と反応させたＡＴＰ抽出試薬を分取し、その分取したＡＴＰ抽出試薬をＡＴＰ計測容器７０に分注し（Ｓ９１２）、ＡＴＰの生物化学発光を計測する（Ｓ９１３）。計測されたＡＴＰ発光強度から、菌数を算出する（Ｓ９１４）。
【００７２】
図１０は、横軸が測定時間、縦軸が単位秒あたりのフォトン数（Ｃｏｕｎｔ  Ｐｅｒ  Ｓｅｃｏｎｄ：  ＣＰＳ）で表されるＡＴＰ発光経時曲線グラフ５４の典型例である。発光試薬を分注する以前のバックグラウンド信号５５を１００秒間取得した後、１００秒後に２５０秒間のATP発光信号５６を取得した例である。ここでは、発光試薬を分注した後、直ちに、数秒で信号強度にピーク値５７を示すフラッシュ型（高感度型）発光試薬を使用している。
【００７３】
菌数を算出するためには、光検出器４１の発光強度とＡＴＰ分子数との関係を、事前に検量線を作成してデータ管理しておく必要がある。図１１は、図１０のピーク値５７からバックグラウンド信号５５の値の差分を数値化し、各濃度に対してプロットした検量線グラフ５８である。検量線は１ａｍｏｌの極低濃度から１０００００ａｍｏｌまで直線状、即ち定量的な強度変化が得られている。
【００７４】
この検量線グラフ５８から、菌数を算出し、データを自動的に出力することができる（Ｓ９１１）。それは、菌によって含まれるATP量が決まっているので算出できる。例えば、枯草菌は１７ａｍｏｌ／菌、黄色ブドウ球菌は１．５２ａｍｏｌ／菌、大腸菌は１−２ａｍｏｌ／菌である。
【００７５】
図１２は、モデル試料として、標準菌株（日水製薬社のＥａｓｙ  ＱＡ  Ｂａｌｌ大腸菌１０，０００ｃｆｕ）を純水で希釈した懸濁液を用いて、大腸菌における検出感度と検出精度を確認した結果である。菌捕集担体カートリッジ１の熱可塑性担体１５上に、懸濁液を点着して点着量を変えることで菌数をコントールし、横軸に菌数、縦軸に発光強度をプロットした発光強度の菌数依存性グラフ５９である。
【００７６】
1〜５ＣＦＵの１ＣＦＵ毎のＡＴＰ量は、０．６、２．７、２．９、５．７、８．３であった（ＡＴＰ：１２ＣＰＳ／ａｍｏｌ）。つまり、平均で１ＣＦＵあたり１．２ａｍｏｌであった。標準菌株のカタログ値は、１．５ａｍｏｌ／ＣＦＵであり、図１２の破線がカタログ値をもとに作成した場合の理想的な検量線である。実験結果は、理想的な検量線の値と一致しており、信頼度、精度の高い計測が可能であることを示している。また、１ＣＦＵから計測可能な高感度装置であることも示している。
【符号の説明】
【００７７】
１…菌捕集担体カートリッジ、２…上蓋、３…第１の貫通孔、４…第２の貫通孔、５…分注ノズルガイド、６…ギャップ、７…担体支持台、８…第３の貫通孔、９…液体貯蔵容器、１０…外筒、１１…菌捕集フィルタ、１２…ドーナツ状の止め板、１３…第４の貫通孔、１４…第５の貫通孔、１５…熱可塑性担体、１７…支持部、１８…メッシュ、１９…菌、２０…ダスト、２１…第１の板状部材、２２…第１の分注ノズル、２３…第１のノズルホルダ、２４…第１の配管、２５…配管加熱ヒータ、２６…第２の配管、２７…第１の送液ポンプ、２８…第３の配管、２９…第１の溶液溜め、３０…溶液溜めヒータ、３１…菌液吸引ノズル、３２・・・第２のアクチュエータ、３３・・・第４の配管、３４・・・吸引ポンプ、３５・・・第１の制御装置、３６・・・Ｏリング、３７・・・加熱溶液、３８・・・加熱液体とポリマーの混合液体、３９・・・第１の容器ホルダ、４０・・・第２の板状部材、４１・・・光検出器、４２・・・第３のアクチュエータ、４３・・・第２の分注ノズル、４４・・・第２の送液ポンプ、４５・・・第５の配管、４６・・・第２のノズルホルダ、４７・・・第４のアクチュエータ、４９・・・チューブ設置ホルダ、５０・・・第１の試薬チューブ、５１・・・第２の試薬チューブ、５２・・・第３の試薬チューブ、５３・・・第２の制御装置、５４・・・ＡＴＰ発光経時曲線グラフ、５５・・・バックグラウンド信号、５６・・・ＡＴＰ発光信号、５７・・・ピーク値、５８・・・検量線グラフ、５９・・・発光強度の菌数依存性グラフ、６０・・・自動菌数計測装置、７０・・・ＡＴＰ計測容器、７１・・・窓、７２・・・遮光扉、７３・・・引き出し、７４・・・捕集機、７５・・・気流
【図１Ａ】
2009157510.tif 000003
【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
2009157510.tif 000009
【図４】
2009157510.tif 000010
【図５Ａ】
2009157510.tif 000011
【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７Ａ】
2009157510.tif 000014
【図７Ｂ】
2009157510.tif 000015
【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
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【図７Ｆ】
2009157510.tif 000019
【図８】
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【図９】
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【図１０】
2009157510.tif 000022
【図１１】
2009157510.tif 000023
【図１２】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【国際調査報告】
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2009157510.tif 000031
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