(57)【要約】【課題】アミロイドを標的とした画像診断プローブとして有効な化合物及び該化合物を配合した生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬を提供する。【解決手段】下記式にて表される化合物及び該化合物を配合してなる生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬。2009054497.tif 000018式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、それぞれ独立に水素、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基（ただし、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３のうち、2以上の置換基が水素であるものを除く。）、Ｒ４は、水素、水酸基、アルキル鎖の炭素数が１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基、ｍは、１〜４の整数である。ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの少なくとも一つは、放射性ハロゲン置換基である。【選択図】なし
2009054497.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）：
【化１】
2009054497.tif 000013
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、それぞれ独立に水素、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基。ただし、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３のうち、2以上の置換基が水素であるものを除く。
Ｒ４は、水素、水酸基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基。
ｍは、１〜４の整数。
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの少なくとも一つは、放射性ハロゲン置換基である。）で表される化合物並びにその塩。
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうち少なくとも一つが、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ又は１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲンである、請求項１記載の化合物並びにその塩。
【請求項３】
２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン、２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨード−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン及び２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンからなる群より選択される、請求項２に記載の化合物並びにその塩。
【請求項４】
下記式（２）：
【化２】
2009054497.tif 000014
（式中、Ｒ６、Ｒ７は、それぞれ独立に水素、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基。ただし、Ｒ６及びＲ７が共に水素であるものを除く。
Ｒ８は、水素、水酸基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基。
Ｒ９は、非放射性ハロゲン置換基、ニトロ基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルアンモニウム基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルスタニル置換基又はトリフェニルスタニル基からなる群より選ばれる基、
ｍは、１〜４の整数である。）で、表される化合物並びにその塩。
【請求項５】
下記式（３）：
【化３】
2009054497.tif 000015
（式中、Ｒ５、Ｒ６は、それぞれ独立に水素、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基。ただし、Ｒ５及びＲ６が共に水素であるものを除く。
Ｒ８は、水素、水酸基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基。
Ｒ１１は、非放射性ハロゲン置換基、ニトロ基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルアンモニウム基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルスタニル置換基又はトリフェニルスタニル基からなる群より選ばれる基、
ｍは、１〜４の整数である。）で、表される化合物並びにその塩。
【請求項６】
下記式（４）：
【化４】
2009054497.tif 000016
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７は、それぞれ独立に水素、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基。ただし、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７のうち、2以上の置換基が水素であるものを除く。
Ｒ１２は、非放射性ハロゲン置換基、メタンスルホン酸置換基、トリフルオロメタンスルホン酸置換基及び芳香族スルホン酸置換基からなる群より選ばれる基、
ｍは、１〜４の整数である。）で表される化合物並びにその塩。
【請求項７】
下記式（１）：
【化５】
2009054497.tif 000017
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、それぞれ独立に水素、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基。ただし、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３のうち、2以上の置換基が水素であるものを除く。
Ｒ４は、水素、水酸基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基。
ｍは、１〜４の整数。
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの少なくとも一つは、放射性ハロゲン置換基である。）で表される化合物を配合してなる、生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬。
【請求項８】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうち少なくとも一つが、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ又は１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲンである、請求項７記載の生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬。
【請求項９】
２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン、２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨード−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン及び２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンからなる群より選択される化合物を配合してなる、請求項８に記載の生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は頭部変性疾患の診断に用いる化合物に関する。より詳しくは、アルツハイマー病を初めとするアミロイドが蓄積する疾患の診断において、病巣部位におけるアミロイドの検出に有用な化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
アミロイドと呼ばれる繊維状蛋白質が体内の種々の器官あるいは組織に沈着することにより発症する疾患は、アミロイドーシスと総称されている。アミロイドーシスに共通しているのはアミロイドと呼ばれるβシート構造に富んだ繊維状蛋白質が全身の諸臓器あるいは局所に沈着し、その臓器や組織における機能異常を生じる点である。【０００３】
アミロイドーシスの代表的疾患であるアルツハイマー病（以下、ＡＤという）は、認知症の原因となる疾患として知られている。この病気は、漸次進行性にアミロイドが脳に沈着して死に至る疾患であるため、他のアミロイドーシスと比較しても社会的関心の高い疾患であるといえる。近年、先進各国では社会の高齢化に伴いＡＤ患者数が急激に増加しており、社会的な問題となっている。【０００４】
病理組織学的見地によると、ＡＤは、老人斑（senile plaques）の出現、神経原繊維変化（neurofibrillary tangles）及び広範な神経脱落の３つの脳内病理所見によって特徴付けられる。老人斑はアミロイドを主要構成成分とする構造物であり、ＡＤ発症における最初期、すなわち臨床症状が出現する１０年以上前に出現する脳内の病理所見とされる。【０００５】
ＡＤの診断は、ＣＴ及びＭＲＩ等の画像診断を補助的に組み合わせた上で、種々の認知機能評価（例えば、長谷川式スケール、ADAS-JCog、MMSE等）を行うことにより実施されている。しかし、このような認知機能評価に基づく方法は、発症初期における診断感度が低く、さらに、各個人が生来有する認識機能により診断結果が影響を受けやすいという欠点がある。また、確定診断には疾患部の生検が不可欠であるため、患者の存命中にＡＤの確定診断を行うことは、現状では事実上不可能である（非特許文献１）。【０００６】
一方、老人斑を構成するアミロイドはアミロイドβ蛋白質（以下、Ａβという）の凝集体であることが報告されており、さらにＡβの凝集体がβシート構造をとることで神経細胞毒性を示すことが多くの研究より報告されている。これらの知見に基づき、Ａβの脳内への沈着が引き金となり、その下流の現象として神経原繊維変化の形成及び神経脱落が起こるとする、いわゆる「アミロイドカスケード仮説」が提唱されている（非特許文献２）。【０００７】
このような事実に基づき、近年、アミロイドに高い親和性を有する化合物をマーカーとして用い、ＡＤをインビボ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）で検出する試みがなされている。
このような脳内アミロイド画像診断用プローブの多くは、アミロイドに対する親和性が高く、かつ脳移行性の高い疎水性の低分子化合物を、種々の放射性核種、例えば１１Ｃ、１８Ｆ及び１２３Ｉ等で標識した化合物である。具体例として、６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］ベンゾチアゾール（以下、ＴＺＤＭという）や６−ヒドロキシ−２−［４’−（Ｎ−メチルアミノ）フェニル］ベンゾチアゾール（以下、６−ＯＨ−ＢＴＡ−１という）を始めとする種々のチオフラビン誘導体（特許文献１、非特許文献３）、（Ｅ）−４−メチルアミノ−４’―ヒドロキシスチルベン（以下、ＳＢ−１３という）や（Ｅ）−４−ジメチルアミノ−４’―ヨードスチルベン（以下、ｍ−Ｉ−ＳＢという）を初めとするスチルベン化合物（特許文献２、非特許文献４、非特許文献５）、６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］ベンゾオキサゾール（以下、ＩＢＯＸという）、６−［２−（フルオロ）エトキシ］−２−［２−（２−ジメチルアミノチアゾール−５−イル）エテニル］ベンゾオキサゾールを初めとするベンゾオキサゾール誘導体（非特許文献６，非特許文献７）、２−（１−｛６−［（２−フルオロエチル）（メチル）アミノ］−２−ナフチル｝エチリデン）マロノニトリル（以下、ＦＤＤＮＰという）を初めとするＤＤＮＰ誘導体（特許文献４、非特許文献８）及び６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（以下、ＩＭＰＹという）を初めとするイミダゾピリジン誘導体（特許文献３、非特許文献９）等を１１Ｃや放射性ハロゲンで標識した化合物が報告されている。さらに、これらの画像診断用プローブの一部については、ヒトイメージング研究が実施され、ＡＤ患者において健常例とは明らかに異なる脳への放射能集積を示すことが報告されている（非特許文献１０、非特許文献１１、非特許文献１２、非特許文献１３）。
また、国際公開２００７／００２５４０号パンフレットには、アミロイド親和性基にエチレングリコール又はポリエチレングリコールを介して放射性同位体標識部位結合させた一連の化合物が、開示されている（特許文献５）。
さらに、国際公開２００７／０６３９４６号パンフレットには、脳内での代謝を抑える目的で、５員の芳香族複素環式基を結合させた一連の化合物が、開示されている（特許文献６）。【０００８】
【特許文献１】特表２００４−５０６７２３号公報
【特許文献２】特表２００５−５０４０５５号公報
【特許文献３】特表２００５−５１２９４５号公報
【特許文献４】特表２００２−５２３３８３号公報
【特許文献５】国際公開第２００７／００２５４０号パンフレット
【特許文献６】国際公開第２００７／０６３９４６号パンフレット
【非特許文献１】J. A. Hardy & G. A. Higgins, “Alzheimer’s Disease: The Amyloid Cascade Hypohesis.”, Science, 1992, 256, p.184-185
【非特許文献２】G. McKhann et al., “Clinical diagnosis of Alzheimer’s disease: Report of the NINCDS-ADRDA Work Group under the auspices of Department of Health and Human Services Task Force on Alzheimer’s Disease.”, Neurology, 1984, 34, p.939-944
【非特許文献３】Z.-P. Zhuang et al., “Radioiodinated Styrylbenzenes and Thioflavins as Probes for Amyloid Aggregates.”, J. Med. Chem., 2001, 44, p.1905-1914
【非特許文献４】Masahiro Ono et al., “11C-labeled stilbene derivatives as Aβ-aggregate-specific PET imaging agents for Alzheimer’s disease.”, Nuclear Medicine and Biology, 2003, 30, p.565-571
【非特許文献５】H. F. Kung et al., “Novel Stilbenes as Probes for amyloid plaques .”, J. American Chemical Society, 2001, 123, p.12740-12741
【非特許文献６】Zhi-Ping Zhuang et al., “IBOX(2-(4’-dimethylaminophenyl)-6- iodobensoxazole): a ligand for imaging amyloid plaques in the brain.”, Nuclear Medicine and Biology, 2001, 28, p.887-894
【非特許文献７】Furumoto Y et al., “[11C]BF-227: A New 11C-Labeled 2-Ethenylbenzoxazole Derivative for Amyloid-β Plaques Imaging.”, European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging, 2005, 32, Sup.1, P759
【非特許文献８】Eric D. Agdeppa et al., “2-Dialkylamino-6-Acylmalononitrile Substituted Naphthalenes (DDNP Analogs): Novel Diagnostic and Therapeutic Tools in Alzheimer’s Disease.”, Molecular Imaging and Biology, 2003, 5, p.404-417
【非特許文献９】Zhi-Ping Zhuang et al., “Structure-Activity Relationship of Imidazo[1,2-a]pyridines as Ligands for Detectingβ-Amyloid Plaques in the Brain.”, J. Med. Chem, 2003, 46, p.237-243
【非特許文献１０】W. E. Klunk et al., “Imaging brain amyloid in Alzheumer’s disease with Pittsburgh Compound-B.”, Ann. Neurol., 2004, 55, p.306-319
【非特許文献１１】Nicolaas P. L. G. Verhoeff et al., “In-Vivo Imaging of Alzheimer Disease β-Amyloid With [11C]SB-13 PET.”, American Journal of Geriatric Psychiatry, 2004, 12, p.584-595
【非特許文献１２】Hiroyuki Arai et al., "[11C]-BF-227 AND PET to Visualize Amyloid in Alzheimer's Disease Patients", Alzheimer's & Dementia: The Journal of the Alzheimer's Association, 2006, 2, Sup.1, S312
【非特許文献１３】Christopher M. Clark et al., "Imaging Amyloid with I123 IMPY SPECT", Alzheimer's & Dementia: The Journal of the Alzheimer's Association, 2006, 2, Sup.1, S342
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上記の様に、アミロイドを対象とした画像診断プローブとして、種々の化合物が開示され、臨床応用に向けて検討が進められている。
ＴＺＤＭ、ＩＢＯＸ及びｍ−Ｉ−ＳＢのヨードを［１２５Ｉ］で標識した化合物は、正常マウスを用いた実験の結果、投与後２分点において、いずれも脳内への移行が認められている。しかしこれらの化合物は、正常組織からのクリアランスが十分ではなく、投与後の時間経過に伴い、徐々に脳内に集積する傾向を示している（特表２００５−５１２９４５号公報、Zhi-Ping Zhuang et al.,Nuclear Medicine and Biology, 2001, 28, p.887-894、H. F. Kung et al.,J. Am. Chem. Soc., 2001, 123, p.12740-12741）。正常組織からのクリアランスが十分でないと、アミロイド集積部位において十分なコントラストが得られないといった問題がある。ＳＢ−１３を［１１Ｃ］で標識した化合物については、ラットを用いた実験により正常組織からのクリアランスを有することが示されているが、そのクリアランス速度は十分に速いとはいえない（Masahiro Ono et al., Nuclear Medicine and Biology, 2003, 30, p.565-571）。【００１０】
一方、ＩＭＰＹを初めとするイミダゾピリジン骨格を有する化合物は、投与後脳内へ移行してアミロイドに集積するといった性質を有すると共に、上述した化合物とは異なり正常組織からのクリアランスが早いといった優れた性質を有することが、［１２５Ｉ］標識化合物を用いた実験の結果明らかとされている。しかし、ＩＭＰＹは、復帰突然変異試験にて陽性を示す化合物であり、この化合物を画像診断プローブとして用いるには、その投与量や投与形態につき十分な注意が必要となる。（国際公開第０３／１０６４３９号パンフレット）
ＦＤＤＮＰについても、復帰突然変異試験にて陽性を示すことが、報告されている。（国際公開第０３／１０６４３９号パンフレット）【００１１】
本発明は、アミロイドを標的とした画像診断プローブとして種々の化合物が開示されているものの、臨床使用に耐え得る性能を有することが確認された化合物は未だ存在していないという上記事情に鑑みてなされたものであり、アミロイドを標的とした画像診断プローブとして有効な化合物及び該化合物を配合した生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬を得ることを目的とした。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
発明者等は鋭意検討を重ねた結果、イミダゾピリジン−フェニル骨格を有し、フェニル基に酸素原子を介して種々の置換基を結合させた一連の化合物により、アミロイドを標的とした画像診断プローブとして有効な化合物を提供し得ることを見出し、本発明を完成した。【００１３】
本発明の一側面によると、下記式（１）：【００１４】
【化６】
2009054497.tif 000003
【００１５】
で表される化合物並びにその塩、及び前記式（１）で表される化合物又はその塩を配合してなる、生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬が、提供される。【００１６】
ここで、生体組織としては、アミロイドーシスにおいてアミロイドが沈着することが知られている種々の組織とすることができる。このような生体組織の代表例としては、脳、心臓、肺、膵臓、骨、関節等が挙げられ、最も代表的な生体組織としては、脳が挙げられる。脳を対象とした場合における、代表的なアミロイドーシスは、アルツハイマー病及びレビー小体型痴呆である。【００１７】
式（１）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、それぞれ独立に水素、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基である。ただし、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３のうち、2以上の置換基が水素であるものは、本発明からは除外される。【００１８】
Ｒ４は、水素、水酸基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基であり、ｍは、１〜４の整数である。【００１９】
また、本発明に係る化合物は画像診断プローブとして用いられるものであるので、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうちの少なくとも一つは、放射性ハロゲン置換基である必要がある。
放射性ハロゲンとしては、ＳＰＥＣＴやＰＥＴにおいて通常用いられている核種を用いることができる。より具体的には、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲンを用いることができ、より好ましくは１８Ｆ又は１２３Ｉを用いることができる。【００２０】
好ましい態様において、本発明に係る化合物は、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン、２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨード−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン及び２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンからなる群からなる群より選択され、本発明に係る検出試薬は、これらの化合物又はその塩を配合してなるものである。【００２１】
本発明の別の一側面によると、下記式（２）：【００２２】
【化７】
2009054497.tif 000004
【００２３】
下記式（３）：【００２４】
【化８】
2009054497.tif 000005
【００２５】
下記式（４）：【００２６】
【化９】
2009054497.tif 000006
【００２７】
のいずれかで表される化合物又はその塩が提供される。【００２８】
前記式（２）、（３）及び（４）中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７は、それぞれ独立に水素、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基である。ただし、式（２）において、Ｒ６、Ｒ７が共に水素であるもの、式（３）においてＲ５、Ｒ６が共に水素であるもの、及び、式（４）においてＲ５、Ｒ６、Ｒ７のうち、2以上の置換基が水素であるものは、それぞれ本発明からは除外される。
Ｒ８は、水素、水酸基、アルキル鎖の炭素数１〜４のアルコキシ置換基、及びハロゲン置換基からなる群より選ばれる基である。【００２９】
Ｒ９は、非放射性ハロゲン置換基、ニトロ基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルアンモニウム基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルスタニル置換基又はトリフェニルスタニル基からなる群より選ばれる基である。
Ｒ１１は、非放射性ハロゲン置換基、ニトロ基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルアンモニウム基、アルキル鎖が炭素数１〜４の長さであるトリアルキルスタニル置換基又はトリフェニルスタニル基からなる群より選ばれる基である。
Ｒ１２は、非放射性ハロゲン置換基、メタンスルホン酸置換基、トリフルオロメタンスルホン酸置換基及び芳香族スルホン酸置換基からなる群より選ばれる基である。
なお、ｍは、１〜４の整数である。
【発明の効果】
【００３０】
本発明により、生体内における良好なアミロイド描出能を有する、新規なアミロイド親和性化合物及び生体組織に沈着したアミロイドの検出試薬を得ることが可能となった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３１】
（標識前駆体化合物の合成）
以下、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成する場合を例にとり、本発明に係る化合物の合成方法について説明する。【００３２】
６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成にあたっては、まず、４’−ヒドロキシ−３’−メトキシアセトフェノンと臭化第二銅とを反応させ、２−ブロモ−４’−ヒドロキシ−３’−メトキシアセトフェノンを得る（図１、工程１）。この反応は、定法、例えば文献（King L. Carroll & Ostrum G. Kenneth, Journal of Organic Chemistry, 1964, 29(12), p.3459-3461）記載の方法に従って行うことができる。【００３３】
次に、上記で合成した２−ブロモ−４’−ヒドロキシ−３’−メトキシアセトフェノンを２−アミノ−５−ヨードピリジンと反応させ、２−（４’−ヒドロキシ−３’−メトキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成する（図１、工程２）。この工程は、例えば、下記の要領にて行うことができる。【００３４】
まず、２−ブロモ−４’−ヒドロキシ−３’−メトキシアセトフェノンと２−アミノ−５−ヨードピリジンとをアセトニトリル等の不活性溶媒に溶解し、還流温度にて２〜６時間反応させると、２−（４’−ヒドロキシ−３’−メトキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの臭化水素酸塩が生成し、白色沈殿を生じる。このときの溶媒としては、アセトニトリルの他、メタノールやアセトンといった、同様の反応にて通常用いられる溶媒を用いることができる。また、反応温度は還流することができる温度であればよく、例えばアセトニトリルを溶媒とした場合は１１０℃とすることができる。なお、用いる溶媒の量は、反応に十分な量であればよいが、多過ぎると反応物の沈殿を得ることができないため、注意が必要である。例えば、２ｍｍｏｌ相当の２−ブロモ−４’−ヒドロキシ−３’−メトキシアセトフェノンを用いて反応させる場合は、約１５〜３０ｍＬの溶媒を用いればよい。【００３５】
次に、反応液をろ過して沈殿物をろ別後、この白色沈殿をメタノール／水混液（１：３）に懸濁し、これに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を沈殿物に対して大過剰となるように加えると、２−（４’−ヒドロキシ−３’−メトキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンが遊離して沈殿が生ずる。この新たに生じた沈殿をろ取することによって、本工程の目的物である２−（４’−ヒドロキシ−３’−メトキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを得ることができる（図１、工程２）。メタノール／水混液の量は、反応させるために十分な量であれば特に限定する必要はないが、多すぎると生成物の析出の妨げとなるため注意が必要である。例えば、２ｍｍｏｌ相当の２−ブロモ−４’−ヒドロキシ−３’−メトキシアセトフェノンを用いた場合であれば、４〜１０ｍＬ程度のメタノール／水混液を用いればよい。また、炭酸水素ナトリウムの量は、反応基質である前記沈殿物に対して大過剰であれば特に限定する必要はなく、例えば、前記条件にて反応させる場合であれば、６ｍＬ程度の飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を反応液に添加すればよい。【００３６】
次いで、合成した２−（４’−ヒドロキシ−３’−メトキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを十分に乾燥させた後、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、炭酸カリウム及び１−フルオロー２−パラトルエンスルホニルオキシエタンを添加する。この混合物を室温で一昼夜程度攪拌して反応させ、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル層を濃縮してクロマトグラム精製を行うことにより２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを得る（図１、工程３）。炭酸カリウムの量は、反応中に発生するパラトルエンスルホン酸を中和できる量であれば良く、典型的には副原料である１−フルオロー２−パラトルエンスルホニルオキシエタンに対してモル比にして２〜３倍程度用いればよい。また、１−フルオロー２−パラトルエンスルホニルオキシエタンの量は、反応基質に対して過剰量であれば良く、典型的には反応基質である２−（４’−ヒドロキシ−３’−メトキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンに対してモル比にして１．５倍程度用いればよい。【００３７】
得られた２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンをジオキサンに溶解し、トリエチルアミンを加えた後、ビストリブチルスズ及び触媒量のテトラキストリフェニルホスフィンパラジウムを添加する。この反応液を約９０℃に加熱して一昼夜程度反応させた後、溶媒を留去し、クロマトグラム精製を行って、目的物である６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを得ることができる（図２、工程１）。このとき、ビストリブチルスズの量は、反応基質に対して過剰量となる条件を満たす量であればよく、具体的には反応基質である２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンに対してモル比にして１．５倍程度であれば良い。【００３８】
なお、フェニル基にトリブチルスタニル置換基以外のトリアルキルスタニル置換基を結合させた化合物を得る場合は、図２の工程１でビストリブチルスズを用いる代わりに、目的に応じた種々のビストリアルキルスズを用いればよい。例えば、フェニル基の３’位にトリメチルスタニル置換基を結合させた化合物を合成する場合は、図２の工程１においてビストリメチルスズを用いて上記と同様の反応を行えばよい。【００３９】
また、イミダゾピリジン環における置換基の結合部位が異なる化合物や、２つの置換基が結合した化合物を得る場合には、工程２において、２−アミノ−５−ヨードピリジンの代わりに、目的化合物に対応した種々の化合物を用いて公知の方法によって反応を行えば良い。
例えば、イミダゾピリジン環の６位にヨード置換基、７位にメチル置換基を結合させた化合物を得る場合には、工程２において２−アミノ−５−ヨードピリジンの代わりに２−アミノ−４−メチル−５−ヨードピリジンを用い、上記工程２と同様に反応を行えば良い。【００４０】
（放射性ハロゲン標識化合物の合成方法）
次に、放射性ヨード標識体化合物を例にとり、本発明の別の一側面に係る、放射性ハロゲン標識化合物の製造方法について説明する。【００４１】
放射性ヨード標識体化合物の合成は、上記の要領にて合成した標識前駆体化合物を不活性有機溶媒に溶解し、これに公知の方法にて得られた［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム溶液等を加え、酸及び酸化剤を加えて反応させることによって行うことができる。標識前駆体化合物を溶解させる不活性有機溶媒としては標識前駆体及び［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム等との間で反応性を有さない種々の溶媒を用いることができ、好ましくはメタノールを用いることができる。【００４２】
酸は種々のものを用いることができ、好ましくは塩酸を用いることができる。
酸化剤は、反応液中のヨウ素を酸化させることができるものであれば特に限定する必要はなく、好ましくは過酸化水素又は過酢酸を用いることができる。酸化剤の添加量は、反応溶液中のヨウ素を酸化させるのに十分な量であれば良い。【００４３】
ヨウ素以外の放射性ハロゲン標識体は、合成目的に応じた標識前駆体を、目的に応じた放射性ハロゲンで標識することによって合成することができる。【００４４】
（本発明に係る診断剤の調製方法及び使用方法）
本発明に係る診断剤は、他の一般に知られている放射性診断剤と同様、本発明に係る放射性ハロゲン標識化合物を所望により適当なｐＨに調整された水又は生理食塩水、あるいはリンゲル液等に配合させた液として調製することができる。この場合における本化合物の濃度は、配合された本化合物の安定性が得られる濃度以下とする必要がある。本化合物の投与量は、投与された薬剤の分布を画像化するために十分な濃度であれば特に限定する必要はない。例えば、ヨウ素−１２３（１２３Ｉ）標識化合物及びフッ素−１８（１８Ｆ）標識化合物の場合は、体重６０ｋｇの成人一人当り５０〜６００ＭＢｑ程度、静脈投与又は局所投与して使用することができる。投与された薬剤の分布は、公知の方法にて画像化することができ、例えばヨウ素−１２３（１２３Ｉ）標識化合物の場合はＳＰＥＣＴ装置、フッ素−１８（１８Ｆ）標識化合物の場合はＰＥＴ装置を用いて画像化することができる。【００４５】
以下、実施例、比較例及び参考例を記載して本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの内容に限定されるものではない。なお、下記実施例において、実験に供する化合物の名称を、表１の様に定義した。【００４６】
【表１】
2009054497.tif 000007
【００４７】
（実施例１）２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成【００４８】
臭化第二銅８．４７ｇ（３７．９ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル５０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−ヒドロキシ−３’−メトキシアセトフェノン３．００ｇ（１８．１ｍｍｏｌ相当）を加え、加熱還流した。２時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）で精製し、２−ブロモ−４’−ヒドロキシ−３’−メトキシアセトフェノン４．１１ｇ（１６．３ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程１）。【００４９】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシ−３’−メトキシアセトフェノン４９０ｍｇ（２．００ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ヨードピリジン４４０ｍｇ（２．００ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル１５ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて２時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶は、水３．０ｍＬ−メタノール１．０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約６．０ｍＬ加え、超音波洗浄器で５分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−（４’−ヒドロキシ−３’−メトキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２３１ｍｇ（０．６２８ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程２）。【００５０】
十分に乾燥させ水分を取り除いた２−（４’−ヒドロキシ−３’−メトキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２３１ｍｇ（０．６２８ｍｍｏｌ相当）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６．０ｍＬに溶解し、これに炭酸カリウム２６０ｍｇ（１．８８ｍｍｏｌ相当）を加えた。これに１−フルオロー２−パラトルエンスルホニルオキシエタン２０６ｍｇ（０．９４２ｍｍｏｌ相当）を加え、室温で１８時間攪拌した。反応終了後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで３回抽出を行った。合わせた酢酸エチル層を、水及び飽和食塩水で洗浄したのち，無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）にて精製を行い、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２３５ｍｇ（０．６４２ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程３）。【００５１】
得られた２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００５２】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ8.37 ( s, 1H ), 7.75 ( s, 1H ), 7.57 ( d, J = 2.3 Hz, 1H ), 7.42-7.40 ( m, 2H ), 7.34 ( dd, J = 1.8, 9.6 Hz, 1H ), 6,97 ( d, J = 8.7 Hz, 1H ), 4.80 ( dt, 2JHF = 47.7 Hz, J = 4.1 Hz, 2H ), 4.31 ( dt, 3JHF = 27.5 Hz, J = 4.1 Hz, 2H ), 3.99 ( s, 3H )。【００５３】
（実施例２）６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【００５４】
実施例１で得られた、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１６７ｍｇ（０．４２７ｍｍｏｌ相当）をジオキサン７．０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン３．０ｍＬを加えた後、ビストリブチルスズ０．３２ｍＬ（０．６４ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム３２．６ｍｇ（触媒量）を加えた。反応混合物を９０℃で１８時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製を行い、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１４２ｍｇ（０．２４７ｍｍｏｌ相当）を得た（図２、工程１）。【００５５】
得られた６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００５６】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ7.97 ( s, 1H ), 7.77 ( s, 1H ), 7.60-7.58 ( m, 2H ), 7.43 ( dd, J = 1.4, 8.2 Hz, 1H ), 7.15 ( d, J = 8.7 Hz, 1H ), 6.97 ( d, J = 8.2 Hz, 1H ), 4.80 ( dt, 2JHF = 47.2 Hz, J = 4.1 Hz, 2H ), 4.32 ( dt, 3JHF = 27.0 Hz, J = 4.1 Hz, 2H ), 3.99 ( s, 3H ), 1.59-1.52 ( m, 6H ), 1.39-1.32 ( m, 6H ), 1.19-1.05 ( m, 6H ), 0.91 ( t, J = 7.3 Hz, 9H )。【００５７】
（実施例３）２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成【００５８】
２−ブロモ−３−ヒドロキシピリジン１００．０ｇ（０．５７５ｍｏｌ相当）をジメチルスルホキシド３１０ｍＬに溶解し、これに１ｍｏｌ／Ｌナトリウムメトキシド−メタノール溶液５７５ｍＬ（０．５７５ｍｏｌ相当）を加えた後、反応液を９０℃に加温しメタノールを留去した。反応液を１０℃以下まで冷却後、ヨウ化メチル９３．９ｇ（０．６６２ｍｏｌ相当）を加え、室温で２０．５時間攪拌した。反応終了後、反応液を氷水に注ぎクロロホルムで２回抽出した。合わせたクロロホルム層は１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウムで洗浄したのち、飽和食塩水で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去して、２−ブロモ−３−メトキシピリジン６５．４ｇ（０．３４８ｍｏｌ相当）を得た（図３、工程１）。【００５９】
濃硫酸２６２ｍＬを−２℃まで冷却し、これに９０％硝酸２６２ｍＬを注意深く加えた後、２−ブロモ−３−メトキシピリジン６５．３ｇ（０．３４７ｍｍｏｌ相当）を注意深く加えた。反応混合物を氷浴下１０分攪拌後、室温で３０分攪拌し、さらに５５℃まで昇温して１．５時間攪拌した。反応液を室温まで冷却後、少量ずつ氷中に注いで沈殿物を生成させ、この沈殿物をろ取して水で洗浄した。これを五酸化二リンの存在下、減圧下乾燥を行い、２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジン５５．７ｇ（０．２３９ｍｏｌ相当）を得た（図３、工程２）。【００６０】
２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジン５５．６ｇ（０．２３９ｍｏｌ相当）をエタノール１７００ｍＬに溶解し、アルゴン気流下１０％パラジウム炭素（５０％ｗｅｔ）３７．３ｇを添加後、ヒドラジン１水和物２８３ｍＬを滴下した。反応混合物を７０分間加熱還流後、反応液を室温まで冷却してパラジウム炭素をろ過し、さらにろ過物をエタノールで洗浄して洗浄液をろ液と合わせた。この液を減圧濃縮後、水１３００ｍＬと濃アンモニア水１３０ｍLを加え、クロロホルムで８回抽出した。合わせたクロロホルム層は、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し、得られた粗生成物を減圧蒸留して、２−アミノ−５−メトキシピリジン２６．２ｇ（０．２１１ｍｏｌ相当）を得た（図３、工程３）。【００６１】
４’−ヒドロキシアセトフェノン４．０８ｇ（３０．０ｍｍｏｌ相当）を２８％アンモニア水２５０ｍＬに溶解し、これにヨウ素７．６１ｇ（３０．０ｍｍｏｌ相当）とヨウ化カリウム２４．３ｇ（１４６ｍｍｏｌ相当）の水６０ｍＬ溶液を加え、室温で２２．５時間攪拌した。反応終了後、反応液を濃縮し、水で希釈した後、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層は飽和食塩水で１回洗浄したのち、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過、濃縮した。得られた濃縮物に水６０ｍＬと８ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液４０ｍＬを加え、十分に混和したのち不溶物をろ過して取り除いた。次いでろ液に濃塩酸を加えて液性を酸性にし、生じた沈殿をろ取して減圧下乾燥した。得られた沈殿物をクロロホルムと酢酸エチルの混液に溶解したのち水を加え、クロロホルムで５回抽出した。合わせたクロロホルム層を無水硫酸ナトリウムで乾燥したのち、溶媒を減圧下留去し、得られた粗生成物をクロロホルムから再結晶を行い、４’−ヒドロキシ−３’−ヨードアセトフェノン４．００ｇ（１５．３ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程４）。【００６２】
臭化第二銅３．４４ｇ（１５．４ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル１０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−ヒドロキシ−３’−ヨードアセトフェノン２．００ｇ（７．６４ｍｍｏｌ相当）を酢酸エチル１８ｍＬ−クロロホルム１８ｍＬ混液に溶解した液を加え、加熱還流した。３．５時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、活性炭を加えて脱色操作を行った後、溶液をろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝５０／１）で精製して、２−ブロモ−４’−ヒドロキシ−３’−ヨードアセトフェノン２．２０ｇ（６．４５ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程５）。【００６３】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシ−３’−ヨードアセトフェノン６８０ｍｇ（１．９９ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−メトキシピリジン２５２ｍｇ（２．０３ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル１５ｍＬに溶解し、１０５℃の油浴にて４時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却したのち、沈殿物をろ取してアセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥した。得られた粗結晶は、水５ｍＬ−メタノール５ｍＬ混液に懸濁した後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約５ｍＬ加え、超音波洗浄器を用いて５分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ取して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−（４’−ヒドロキシ−３’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４３５ｍｇ（１．１９ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程６）。【００６４】
２−（４’−ヒドロキシ−３’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２７９ｍｇ（０．７６３ｍｍｏｌ相当）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶解し、これに炭酸カリウム３１７ｍｇ（２．２９ｍｍｏｌ相当）を加えた。これに１−ブロモ−３−フルオロプロパン１０５μＬ（１．１５ｍｍｏｌ相当）を加え、室温下２１時間攪拌した。反応終了後、反応液を水に注ぎクロロホルムで３回抽出した。合わせたクロロホルム層は飽和食塩水で洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過、濃縮した。得られた粗生成物をリサイクル分取ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ装置：ＬＣ−９０８（製品名、日本分析工業社製）、カラム：ＪＡＩＧＥＬ  ２Ｈ（製品名、日本分析工業社製）を２本連結、移動相：クロロホルム）を用いて精製し、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２６２ｍｇ（０．６１４ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程７）。【００６５】
得られた２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００６６】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ8.33 ( d, J = 2.1 Hz, 1H ), 7.85 ( dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H ), 7.72-7.71 ( m, 1H ), 7.64-7.62 ( m, 1H ), 7.51-7.47 ( m, 1H ), 6.97 ( dd, J = 9.7, 2.4 Hz, 1H ), 6.87 ( d, J = 8.5 Hz, 1H ), 4.75 ( dt, 2JHF = 47.0 Hz, J = 5.7 Hz, 2H ), 4.19 ( t, J = 5.7 Hz, 2H ), 3.83 ( s, 3H ), 2.24 ( dquint, 3JHF = 25.7 Hz, J = 5.7 Hz, 2H )。【００６７】
１９Ｆ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：４７０MHｚ）：δ-222.53 ( tt, 2JHF = 47.0 Hz, 3JHF = 25.7 Hz )。【００６８】
（実施例４）２−［３’−トリブチルスタニル−４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【００６９】
実施例３で得られた、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１０７ｍｇ（０．２５０ｍｍｏｌ相当）をジオキサン１０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン２ｍＬを加えた後、これにビストリブチルスズ１９０μＬ（０．３７６ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム２０ｍｇ（触媒量）を添加した。反応混合物を９０℃で１４．５時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製した。さらに得られた粗生成物をリサイクル分取ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ装置：ＬＣ−９０８（製品名、日本分析工業社製）、カラム：ＪＡＩＧＥＬ  ２Ｈ（製品名、日本分析工業社製）を２本連結、移動相：クロロホルム）を用いて精製し、２−［３’−トリブチルスタニル−４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３７．８ｍｇ（６４．１μｍｏｌ相当）を得た（図４、工程１）。【００７０】
得られた２−［３’−トリブチルスタニル−４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００７１】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ7.88 ( dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H ), 7.89-7.78 ( m, 1H ), 7.73 ( s, 1H ), 7.66 ( d, J = 2.3 Hz, 1H ), 7.50 ( d, J = 9.7 Hz, 1H ), 6.94 ( dd, J = 9.7, 2.3 Hz, 1H ), 6.91-6.85 ( m, 1H ), 4.65 ( dt, 2JHF = 47.0 Hz, J = 6.0 Hz, 2H ), 4.12 ( t, J = 6.0 Hz, 2H ), 3.82 ( s, 3H ), 2.20 ( dquint, 3JHF = 25.7 Hz, J = 6.0, 2H ), 1.64-1.45 ( m, 6H ), 1.33 ( sextet, J = 7.3 Hz, 6H ), 1.16-1.01 ( m, 6H ), 0.89 ( t, J = 7.3 Hz, 9H )。【００７２】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ162.88, 149.20, 145.96, 142.68, 134.64, 130.31, 127.70, 126.84, 119.35, 117.37, 109.64, 108.28, 107.55, 80.81 ( d, 1JCF = 165.1 Hz ), 63.53 ( d, 3JCF = 5.8 Hz ), 56.20, 30.63 ( d, 2JCF = 20.2 Hz ), 29.16, 27.35, 13.67, 9.90。【００７３】
１９Ｆ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：４７０MHｚ）：δ-221.43 ( tt, 2JHF = 47.0 Hz, 3JHF = 25.7 Hz )。【００７４】
（実施例５）２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成【００７５】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシ−３’−ヨードアセトフェノン１．４６ｇ（４．２８ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−メトキシピリジン５８４ｍｇ（４．７１ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル３０ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて２．５時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶は、水３．０ｍＬ−メタノール１．０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約１０ｍＬ加え、超音波洗浄器で５分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−（４’−ヒドロキシ−３’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン８１２ｍｇ（２．２２ｍｍｏｌ相当）を得た（図５、工程１）。【００７６】
十分に乾燥させ水分を取り除いた２−（４’−ヒドロキシ−３’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３６６ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ相当）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１０．０ｍＬに溶解し、これに炭酸カリウム４１５ｍｇ（３．００ｍｍｏｌ相当）を加えた。これに１−フルオロー２−パラトルエンスルホニルオキシエタン３２７ｍｇ（１．５０ｍｍｏｌ相当）を加え、９０℃で２時間攪拌した。反応終了後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで３回抽出を行った。合わせた酢酸エチル層を、水及び飽和食塩水で洗浄したのち，無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）にて精製を行い、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３８１ｍｇ（０．９２４ｍｍｏｌ相当）を得た（図５、工程２）。【００７７】
得られた２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００７８】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ8.34 ( d, J = 1.8 Hz, 1H ), 7.87 ( dd, J = 1.8, 8.7 Hz, 1H ), 7.73 ( s, 1H ), 7.64 ( d, J = 2.3 Hz, 1H ), 7.50 ( d, J = 9.6 Hz, 1H ), 6.98 ( dd, J = 1.8, 9.6 Hz, 1H ), 6.89 ( d, J = 8.7 Hz, 1H ), 4.82 ( dt, 2JHF = 47.2 Hz, J = 4.1 Hz, 2H ), 4.31 ( dt, 3JHF = 27.0 Hz, J = 4.1 Hz, 2H ), 3.83 ( s, 3H )。【００７９】
（実施例６）２−［３’−トリブチルスタニル−４’−（２”−フルオロエトキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【００８０】
実施例５で得られた、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２９７ｍｇ（０．７２１ｍｍｏｌ相当）をジオキサン７．０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン３．０ｍＬを加えた後、ビストリブチルスズ０．５５ｍＬ（１．１ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム５５．０ｍｇ（触媒量）を加えた。反応混合物を９０℃で１８時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製を行い、２−［３’−トリブチルスタニル−４’−（２”−フルオロエトキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１８８ｍｇ（０．３２７ｍｍｏｌ相当）を得た（図６、工程１）。【００８１】
得られた２−［３’−トリブチルスタニル−４’−（２”−フルオロエトキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００８２】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ7.89 ( dd, J = 2.3, 8.7Hz, 1H ), 7.84 ( d, J = 2.3 Hz, 1H ), 7.73 ( s, 1H ), 7.66 ( s, 1H ), 7.51 ( d, J = 9.6 Hz, 1H ), 6.95 ( d, J = 9.6 Hz, 1H ), 6.84 ( d, J = 8.7 Hz, 1H ), 4.73 ( dt, 2JHF = 46.7 Hz, J = 3.7 Hz, 2H ), 4.22 ( dt, 3JHF = 23.8 Hz, J = 3.7 Hz, 2H ), 3.82 ( s, 3H ), 1.58-1.51 ( m, 6H ), 1.37-1.30 ( m, 6H ), 1.13-1.06 ( m, 6H ), 0.89 ( t, J = 7.3 Hz, 9H )。【００８３】
（実施例７）２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成【００８４】
２−ブロモエタノール２．５０ｇ（２０．０ｍｍｏｌ相当）とイミダゾール（Ｉｍｉｄａｚｏｌｅ）２．７２ｇ（４０．０ｍｍｏｌ相当）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）１０ｍＬに溶解し、０℃に冷却した後、ｔ−ブチルジフェニルクロロシラン（ＴＢＤＰＳＣｌ）５．５０ｇ（２０．０ｍｍｏｌ相当）を加えた。反応混合物を室温で１８時間攪拌した後、飽和塩化ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで３回抽出を行った。合わせた酢酸エチル層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）にて精製を行い、１−ブロモ−２−（ｔ−ブチルジフェニルシロキシ）エタン７．０４ｇ（１９．４ｍｍｏｌ相当）を得た（図７、工程１）。【００８５】
２’,４’−ジヒドロキシアセトフェノン１．００ｇ（６．５７ｍｍｏｌ相当）をジメチルホルムアミド３０．０ｍLに溶解し、炭酸カリウム９０８ｍｇ（７．８８ｍｍｏｌ相当）を加えた後、１−ブロモ−２−（ｔ−ブチルジフェニルシロキシ）エタン２．３９ｇ（６．５７ｍｍｏｌ相当）を加えた。反応混合物を９０℃で２時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで３回抽出を行った。合わせた酢酸エチル層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）にて精製を行い、４’−（２”−ｔ−ブチルジフェニルシロキシエトキシ）−２’−ヒドロキシアセトフェノン２．１１ｇ（４．８６ｍｍｏｌ相当）を得た（図７、工程２）。【００８６】
水素化ナトリウム１７５ｍｇ（７．２９ｍｍｏｌ相当）をテトラヒドロフラン３０ｍＬに懸濁し、４’−（２”−ｔ−ブチルジフェニルシロキシエトキシ）−２’−ヒドロキシアセトフェノン２．１１ｇ（４．８６ｍｍｏｌ相当）を加えた。室温で１０分間攪拌した後、ヨードメタン０．４５４ｍＬ（４．８６ｍｍｏｌ相当）を加え、９０℃でさらに４時間攪拌した。反応終了後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで３回抽出を行った。合わせた酢酸エチル層を、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）にて精製を行い、４’−（２”−ｔ−ブチルジフェニルシロキシエトキシ）−２’−メトキシアセトフェノン１．２５ｇ（４．８６ｍｍｏｌ相当）を得た（図７、工程３）。【００８７】
臭化第二銅１．３１ｇ（５．８６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル１３ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−（２”−ｔ−ブチルジフェニルシロキシエトキシ）−２’−メトキシアセトフェノン１．２５ｇ（４．８６ｍｍｏｌ相当）を加え、加熱還流した。３時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、活性炭を加えて脱色操作を行った後、溶液をろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）で精製し、２−ブロモ−４’−（２”−ｔ−ブチルジフェニルシロキシエトキシ）−２’−メトキシアセトフェノン６６６ｍｇ（１．２６ｍｍｏｌ相当）を得た（図７、工程４）。【００８８】
２−ブロモ−４’−（２”−ｔ−ブチルジフェニルシロキシエトキシ）−２’−メトキシアセトフェノン６６６ｍｇ（１．２６ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ヨードピリジン３６０ｍｇ（１．６４ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル５．０ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて２時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させ、２−[４’−（２”−ｔ−ブチルジフェニルシロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン・臭化水素酸塩５２５ｍｇ（０．７２０ｍｍｏｌ相当）を得た（図７、工程５）。【００８９】
２−[４’−（２”−ｔ−ブチルジフェニルシロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン・臭化水素酸塩２００ｍｇ（０．２７４ｍｍｏｌ相当）をテトラヒドロフラン２．０ｍLに溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリドの１．０ｍｏｌ／Ｌテトラヒドロフラン溶液０．３３ｍLを加えた。室温で４時間攪拌した後、炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、続いて水５．０ｍLとアセトニトリル１．０ｍLを加えて析出した沈殿物をろ別した。ろ別した沈殿物を水、アセトニトリルの順で洗浄し、２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１０３ｍｇ（０．２５１ｍｍｏｌ相当）を得た（図７、工程６）。【００９０】
得られた２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００９１】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重ジメチルホルムアミド、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ8.92 ( s, 1H ), 8.24 ( s, 1H ), 8.16 ( d, J = 8.7 Hz, 1H ), 7.38 (s, 2H ), 6.69 ( d, J = 1.8 Hz, 1H ), 6.65 ( dd, J = 8.7, 1.8 Hz, 1H ), 4.89 ( brs, 1H ), 4.06-4.04 ( m, 2H ), 4.13 ( s, 3H ), 3.73-3.75 ( m, 2H )。【００９２】
（実施例８）６−トリブチルスタニル−２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【００９３】
実施例７で得られた、２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３０ｍｇ（０．０７３ｍｍｏｌ相当）をジオキサン２．０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン１．０ｍＬを加えた後、ビストリブチルスズ０．０６０ｍＬ（０．１１ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム５．１ｍｇ（触媒量）を加えた。反応混合物を９０℃で２３時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）にて精製を行い、６−トリブチルスタニル−２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２４．０ｍｇ（０．０４１９ｍｍｏｌ相当）を得た（図８、工程１）。【００９４】
得られた６−トリブチルスタニル−２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００９５】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ8.23 ( d, J = 8.7 Hz, 1H ), 8.06 ( s, 1H ), 7.98 ( s, 1H ),7.58 ( d, J = 8.2 Hz, 1H ), 7.13 ( d, J = 8.7 Hz, 1H ), 6.64-6.60 ( m, 2H ), 4.15 ( t, J = 4.6 Hz, 2H ), 4.00-3.98 ( m, 5H ), 1.64-1.48 ( m, 6H ), 1.38-1.31 ( m, 6H ), 1.18-1.04 ( m, 6H ), 0.90 ( t, J = 7.3 Hz, 9H )。【００９６】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ159.4, 157.8, 144.3, 140.5, 131.0, 130.1, 129.7, 121.3, 116.6, 116.1, 110.5, 105.6, 99.3, 69.4, 61.5, 55.5, 29.0, 27.3, 13.7, 9.8。【００９７】
（実施例９）２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【００９８】
６−トリブチルスタニル−２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）６０μＬに、２ｍｏｌ／Ｌ塩酸４０μＬ、１３５．７ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム４０μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素２０μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、下記の条件のＨＰＬＣに付して２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。【００９９】
ＨＰＬＣ条件：
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（商品名、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製、サイズ：４．６×１５０ｍｍ）
移動相：０．１％トリフルオロ酢酸を含む水／０．１％トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル＝８０／２０→０／１００（１７分）
流速：１．０  ｍＬ／分
検出器：紫外可視吸光光度計（検出波長：２８２ｎｍ）及び放射線検出器（ｒａｙｔｅｓｔ社 ＳＴＥＦＦＩ型）【０１００】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量１４５ｍｇ）に通液し、２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において５５．７ＭＢｑであった。また、下記の条件によるＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９９％であった。【０１０１】
ＴＬＣ分析条件：
ＴＬＣプレート：Ｓｉｌｉｃａ  Ｇｅｌ  ６０  Ｆ２５４（製品名、メルク社製）
展開相：クロロホルム／メタノール／トリエチルアミン＝１００／１／２
検出器：Ｒｉｔａ  Ｓｔａｒ（製品名、ｒａｙｔｅｓｔ社製）【０１０２】
（実施例１０）６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１０３】
臭化第二銅２８．１７ｇ（１２６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル５０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−ヒドロキシアセトフェノン８．１８ｇ（６０．０ｍｍｏｌ相当）を酢酸エチル５０ｍＬ−クロロホルム５０ｍＬ混液に溶解した液を加え、加熱還流した。５時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、活性炭を加えて脱色操作を行った後、溶液をろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝２０／１）で精製し、さらに酢酸エチル−石油エーテルから再結晶を行い、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン７．２５ｇ（３３．７ｍｍｏｌ相当）を得た（図９、工程１）。【０１０４】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン２．００ｇ（９．２８ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ブロモ−４−メチルピリジン１．９１ｇ（１０．２ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル４０ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて３時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶は、水１０ｍＬ−メタノール１０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約５０ｍＬ加え、超音波洗浄器で１０分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、６−ブロモ−２−［４’−ヒドロキシフェニル］−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２．６７ｇ（８．８１ｍｍｏｌ相当）を得た（図９、工程２）。【０１０５】
２−ブロモエタノール10.0ｇ（８０．０ｍｍｏｌ相当）とイミダゾール（Ｉｍｉｄａｚｏｌｅ）１０．９ｇ（１６０ｍｍｏｌ相当）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）１００ｍＬに溶解し、０℃に冷却した後、ｔ−ブチルジメチルクロロシラン（ＴＢＤＭＳＣｌ）１２．１ｇ（８０．０ｍｍｏｌ相当）を加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで３回抽出を行った。合わせた酢酸エチル層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、得られた粗生成物を減圧蒸留（１２０℃，１００ｍｍＨｇ）にて精製を行い、１−ブロモ−２−（ｔ−ブチルジメチルシロキシ）エタン１４．５ｇ（６０．６ｍｍｏｌ相当）を得た（図９、工程３）。【０１０６】
６−ブロモ−２−（４’−ヒドロキシフェニル）−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４６２ｍｇ（１．５２ｍｍｏｌ相当）をジメチルホルムアミド１０ｍLに溶解し，炭酸カリウム６３０ｍｇ（４．５６ｍｍｏｌ相当）を加えた後、１−ブロモ−２−（t−ブチルジメチルシロキシ）エタン４００ｍｇ（１．６７ｍｍｏｌ相当）を加えた。反応混合物を室温で４日間攪拌した後、飽和塩化ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで３回抽出を行った。合わせた酢酸エチル層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製を行い、６−ブロモ−２−［４’−（２”−t−ブチルジメチルシロキシエトキシ）フェニル］−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン５７１ｍｇ（１．２４ｍｍｏｌ相当）を得た（図９、工程４）。【０１０７】
６−ブロモ−２−［４’−（２”−t−ブチルジメチルシロキシエトキシ）フェニル］−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン５７１ｍｇ（１．２４ｍｍｏｌ相当）をテトラヒドロフラン３．０ｍLに溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリドの１．０ｍｏｌ／Ｌテトラヒドロフラン溶液１．２４ｍLを加えた。室温で２０分間攪拌した後、塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで３回抽出を行った。合わせた酢酸エチル層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、得られた粗生成物を水，酢酸エチルで洗浄し，６−ブロモ−２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３２０ｍｇ（０．９２２ｍｍｏｌ相当）を得た（図９、工程５）。【０１０８】
６−ブロモ−２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１００ｍｇ（０．２８８ｍｍｏｌ相当）をジオキサン４．０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン２．０ｍＬを加えた後、ビストリブチルスズ０．２２ｍＬ（０．４３ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム２２．０ｍｇ（触媒量）を加えた。反応混合物を９０℃で１７時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）にて精製を行い、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン６３．８ｍｇ（０．１１４ｍｍｏｌ相当）を得た（図９、工程６）。【０１０９】
得られた６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【０１１０】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ7.87 ( d, J = 8.7 Hz, 2H ), 7.67 ( s, 1H ), 7.38 ( s, 1H ), 6.98 ( d, J = 8.7 Hz, 2H ), 4.13 ( t, J = 4.5 Hz, 2H ), 3.98 ( t, J = 4.5 Hz, 2H ), 2.39 ( s, 3H ), 1.60-1.46 ( m, 6H ), 1.39-1.32 ( m, 6H ), 1.20-1.06 ( m, 6H ), 0.91 ( t, J = 7.3 Hz, 9H )。【０１１１】
（実施例１１）２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨード−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１１２】
６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）６０μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  ６０μＬ、１ｍｍｏｌ／ｍLヨウ化ナトリウム２０μL、５６０ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム５０μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素２０μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、実施例９と同様の条件のＨＰＬＣに付して２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨード−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。【０１１３】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量１４５ｍｇ）に通液し、２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨード−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨード−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において２２ＭＢｑであった。また、実施例９と同様の条件によるＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９８％であった。【０１１４】
（参考例１）［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹの合成【０１１５】
ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌの測定等における比較例に用いるため、下記の工程に従い、［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを合成した。【０１１６】
文献（Zhi-Ping Zhuang et al., J. Med. Chem, 2003, 46, p.237-243）記載の方法に従い、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成し、メタノールに溶解した（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）。当該溶液５３μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  ７５μＬ、２２４〜２５３ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム６０〜７０μＬ、１ｍｍｏｌ／Ｌ ヨウ化ナトリウム溶液 １０μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素１５μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、実施例３と同様の条件によるＨＰＬＣに付して［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹ画分を分取した。【０１１７】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量：１４５ｍｇ）に通液し、［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において４１〜５７ＭＢｑであった。また、実施例９と同様の条件にてＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９３％であった。【０１１８】
（実施例１２）２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１１９】
２−［３’−トリブチルスタニル−４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール／ジメチルスルホキシド＝９／１混合溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）５０μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  ５０μＬ、１ｍｍｏｌ／ｍLヨウ化ナトリウム１０μL、３５６ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム５０μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素１０μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、実施例９と同様の条件によるＨＰＬＣに付して２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。【０１２０】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ１８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量１３０ｍｇ）に通液し、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において２６１．６ＭＢｑであった。また、下記の条件によるＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９８％であった。【０１２１】
ＴＬＣ分析条件：
ＴＬＣプレート：ＴＬＣプレート：Ｓｉｌｉｃａ  Ｇｅｌ  ６０  Ｆ２５４（製品名、メルク社製）
展開相：クロロホルム／メタノール／トリエチルアミン＝１００／１／２
検出器：バイオイメージングアナライザー（形式：ＢＡＳ−２５００、富士写真フィルム株式会社製）【０１２２】
（実施例１３）２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１２３】
６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール／ジメチルスルホキシド＝９／１混合溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）７０μＬに、２ｍｏｌ／Ｌ塩酸  ５０μＬ、１ｍｍｏｌ／ｍLヨウ化ナトリウム１５μL、３０９ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム８０μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素１５μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、実施例９と同様の条件によるＨＰＬＣに付して２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。【０１２４】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量１４５ｍｇ）に通液し、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において９８．４ＭＢｑであった。また、実施例１２と同様の条件によるＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９２％であった。【０１２５】
（実施例１４）２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１２６】
２−［３’−トリブチルスタニル−４’−（２”−フルオロエトキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール／ジメチルスルホキシド＝９／１混合溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）７５μＬに、２ｍｏｌ／Ｌ塩酸  １５０μＬ、１ｍｍｏｌ／ｍLヨウ化ナトリウム１５μL、２０４ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム２００μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素１５μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、実施例９と同様の条件によるＨＰＬＣに付して２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。【０１２７】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量１４５ｍｇ）に通液し、２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において８９．０ＭＢｑであった。また、実施例１２と同様の条件によるＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９９％であった。【０１２８】
（実施例１５〜１７、比較例１）オクタノール抽出法を用いた分配係数の測定【０１２９】
化合物の血液脳関門（以下、ＢＢＢという）透過性の指標として一般に知られている、オクタノール抽出法を用いた分配係数（以下、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌという）を測定した。【０１３０】
（方法）
化合物１（実施例１５）、化合物２（実施例１６）、化合物３（実施例１７）、化合物４（実施例１８）及び［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹ（比較例１）のジエチルエーテル溶液をそれぞれ調製し、各溶液を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液にて希釈して、放射能濃度２０〜３０ＭＢｑ／ｍＬに調整した。これらの液各１０μＬを、それぞれオクタノール２ｍＬに添加し、さらに１０ｍｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）２ｍＬを加えて３０秒間攪拌した。それぞれの混合液を低速遠心機（形式：ＣＴＤ４，日立工機株式会社製）で遠心分離（２０００ 回転／分×６０分間）した後、オクタノール層及び水層を各１ｍＬ分取し、それぞれの放射能カウントをオートウェル・ガンマシステム（形式：ＡＲＣ−３０１Ｂ、Ａｌｏｋａ社製）にて計測した。得られた放射能カウントを用い、式（１）よりｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値を算出した。【０１３１】
【数１】
2009054497.tif 000008
【０１３２】
（結果）
結果を表２に示す。この表に示すように、各化合物のｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌの値は、１〜３の間の値を示していた。ＢＢＢを透過可能な化合物においては、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値は１〜３の間の値の値であることが知られている（Douglas D. Dischino et al., J.Nucl.Med., (1983), 24, p.1030-1038）。以上の結果より、化合物１、化合物２及び化合物３は、ＩＭＰＹ同様にＢＢＢ透過性を有することが示唆された。【０１３３】
【表２】
2009054497.tif 000009
【０１３４】
（実施例１９〜実施例２２、比較例２）脳内移行性及びクリアランスの測定【０１３５】
化合物１、化合物２及び化合物３を用い、雄性のＷｉｓｔaｒ系ラット（７週齢）における脳への放射能集積の経時的変化を測定した。【０１３６】
（方法）
化合物１を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度２４ＭＢｑ／ｍＬ）、化合物２を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度３０ＭＢｑ／ｍＬ）、化合物４を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度３２ＭＢｑ／ｍＬ）、及び、化合物３を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度３０ＭＢｑ／ｍＬ）をそれぞれ調製し、試料溶液とした。各試料溶液を、チオペンタール麻酔下で尾静脈より雄性のＷｉｓｔaｒ系ラット（７週齢）に投与した（投与量：０．０５ｍＬ、投与した放射能：１．２〜１．５ＭＢｑ相当）。投与後２分、５分、３０分、６０分に腹部大動脈より脱血した上で脳を採取し、脳の質量を測定し、さらに脳の放射能をシングルチャネルアナライザー（検出器型番：ＳＰ−２０、応用光研工業株式会社製）を用いて計測した（以下、本実施例にてＡとする）。また、残り全身の放射能量を同様に測定した（以下、本実施例にてＢとする）。これらの測定結果を用い、下記式（２）より、各解剖時間点における、脳への単位重量当たりの放射能集積量（％ＩＤ／ｇ）を算出した（実施例１９〜実施例２２）。【０１３７】
別に、［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度２０〜３０ＭＢｑ／ｍＬ）を調製し、上記と同様の操作を行って、各解剖時間点における、脳への単位重量当たりの放射能集積量（％ＩＤ／ｇ）を算出した（比較例２）。
なお、実施例１９〜実施例２２及び比較例２においては、各時間点につきそれぞれ３匹の動物を用いて実験を行った。【０１３８】
【数２】
2009054497.tif 000010
【０１３９】
（結果）
結果を表３に示す。表３に示すように、化合物１、化合物２、化合物３及び化合物４は、投与後２分点において、１２３Ｉ−ＩＭＰＹ同様、高い放射能集積が認められ、その後６０分にかけて速やかに消失する傾向を示していた。この結果より、化合物１、化合物２及び化合物３は、１２３Ｉ−ＩＭＰＹと同様、高い脳移行性及び速やかな脳からのクリアランスを有することが示された。【０１４０】
【表３】
2009054497.tif 000011
【０１４１】
（実施例２３〜実施例２５）化合物１、化合物２及び化合物４による脳内アミロイドの描出の確認【０１４２】
本発明に係る化合物が脳内アミロイドを描出し得るかを評価するため、下記の実験を行った。【０１４３】
（方法）
（１）Ａβ１−４２（和光純薬工業）をリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で溶解して３７℃で７２時間振盪させ、１ｍｇ／ｍＬの凝集Ａβ懸濁液（以下、本実施例にてアミロイド懸濁液という）を得た。【０１４４】
（２）チオペンタール麻酔下、雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（７週齢）の片側扁桃核へ上記アミロイド懸濁液を２．５μＬ（２５μｇ相当）注入し、対照として、反対側の扁桃核にリン酸緩衝生理食塩液（ｐＨ７．４）を２．５μＬ注入した。アミロイド懸濁液及びリン酸緩衝生理食塩液（ｐＨ７．４）注入１日後のラットを、検体とした。【０１４５】
（３）化合物１を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度２４ＭＢｑ／ｍＬ）、化合物２を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度３０ＭＢｑ／ｍＬ）及び、化合物４を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度３２ＭＢｑ／ｍＬ）をそれぞれ調製し、試料溶液とした。この試料溶液を、チオペンタール麻酔下、上記ラットに尾静脈より投与した（投与量：０．５ｍＬ、投与した放射能：１２〜１５ＭＢｑ相当）。【０１４６】
（４）投与６０分後に脳を摘出して、ミクロトーム（形式：ＣＭ３０５０Ｓ、ＬＥＩＣＡ社製）を用いて厚さ１０μｍの脳切片を作製した。当該脳切片をイメージングプレート上で２０時間露光させた後、バイオイメージングアナライザー（形式：ＢＡＳ−２５００、富士写真フィルム株式会社製）を用いて画像解析を行った。【０１４７】
（５）バイオイメージングアナライザーを用いた上記画像解析の終了後、チオフラビンＴによる病理染色を行って蛍光顕微鏡（株式会社ニコン製、形式：ＴＥ２０００−Ｕ型、励起波長：４００〜４４０ｎｍ、検出波長：４７０ｎｍ）を用いたイメージングを行い、当該切片上にアミロイドが沈着していることを確認した（図１０ｂ、図１１ｂ及び図１２ｂ）。【０１４８】
（結果）
得られたオートラジオグラム及びチオフラビンＴ染色のイメージを図１０〜図１２に示す。この図に示すように、アミロイド懸濁液を注入した側の扁桃核において、明らかな放射能集積が認められた。また、放射能集積部位におけるチオフラビンＴ染色の結果より、当該部位においてアミロイドが存在していることが確認された。一方、生理食塩液を注入した側の扁桃核においては、他の部位と比較した有意な放射能集積は確認されなかった。
この結果より、化合物１、化合物２及び化合物４は、脳内アミロイドに集積する性能を有し、脳内アミロイドの描出能を有することが示唆された。【０１４９】
（実施例２６）化合物３による脳内アミロイドの描出の確認【０１５０】
試料溶液として化合物３を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度３２ＭＢｑ／ｍＬ）を用い、試料溶液投与１２０分後に脳を摘出した他は実施例２３と同様の操作を行った。【０１５１】
得られたオートラジオグラム及びチオフラビンＴ染色のイメージを図１３に示す。この図に示すように、アミロイド懸濁液を注入した側の扁桃核において、明らかな放射能集積が認められた。また、放射能集積部位におけるチオフラビンＴ染色の結果より、当該部位においてアミロイドが存在していることが確認された。一方、生理食塩液を注入した側の扁桃核においては、他の部位と比較した有意な放射能集積は確認されなかった。
この結果より、化合物３は、脳内アミロイドに集積する性能を有し、脳内アミロイドの描出能を有することが示唆された。【０１５２】
（実施例２７）復帰突然変異試験【０１５３】
化合物５の遺伝子突然変異誘発性を調べるため、ネズミチフス菌（Salmonella typhimurium）のＴＡ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１５３５、ＴＡ１５３７及び大腸菌（Escherichia coli）のWP2uvrAを用いる復帰突然変異試験（以下、Ａｍｅｓ試験という）を行った。【０１５４】
試験はＳ９ｍｉｘ無添加とＳ９ｍｉｘ添加の場合について実施した。陰性対象はジメチルスルホオキサイド（以下、ＤＭＳＯという）を用いた。【０１５５】
試験用プレートへ添加する被験液として、化合物５をＤＭＳＯで溶解して濃度５０ｍｇ／ｍＬ液及びこの液をＤＭＳＯで種々の濃度となるように希釈した液を調製し、被験液とした。Ｓ９ｍｉｘ無添加とする場合の陽性対象については、試験菌株にＴＡ９８を用いる場合はＡＦ−２をＤＭＳＯで溶解した液（化合物濃度：１μｇ／ｍＬ）、試験菌株にＴＡ１００或いはWP2uvrAを用いる場合はＡＦ−２をＤＭＳＯで溶解した液（化合物濃度：０．１μｇ／ｍＬ）、試験菌株にＴＡ１５３５を用いる場合はＮａＮ３を注射用水で溶解した液（化合物濃度：５μｇ／ｍＬ）、試験菌株にＴＡ１５３７を用いる場合は９ＡＡをＤＭＳＯで溶解した液（化合物濃度：８００μｇ／ｍＬ）をそれぞれ調製し、被験液として用いた。Ｓ９ｍｉｘを添加する場合の陽性対象については、試験菌株にＴＡ９８を用いる場合は２−ＡＡをＤＭＳＯで溶解して濃度５μｇ／ｍＬとした液、試験菌株にＴＡ１００を用いる場合は２−ＡＡをＤＭＳＯで溶解して濃度１０μｇ／ｍＬとした液、試験菌株にWP2uvrAを用いる場合は２−ＡＡをＤＭＳＯで溶解して濃度１００μｇ／ｍＬとした液、試験菌株にＴＡ１５３５或いはＴＡ１５３７を用いる場合は２−ＡＡをＤＭＳＯで溶解して濃度２０μｇ／ｍＬとした液をそれぞれ調製し、被験液とした。【０１５６】
各被験液の添加液量は０．１ｍＬ／プレートとし、陰性対象についてはＤＭＳＯのみを０．１ｍＬ／プレートとなるように添加した。各被験液と各試験菌株とを混合後、軟寒天を用いて試験用プレート上の培地へ重層し、３７℃で４８時間培養した。別に、各被験液とＳ９ｍｉｘと試験菌株を混合後、軟寒天を用いて試験用プレート上の培地へ重層し、３７℃で４８時間培養した。判定は、培養後のプレートにおける復帰突然変異コロニー数をカウントすることにより行い、復帰突然変異コロニー数が陰性対照の２倍以上の値を示し、更に濃度に依存して増加した場合を陽性とした。【０１５７】
結果を表４に示す。化合物５処理群における復帰変異コロニー数は、いずれの菌株ともＳ９ｍｉｘ添加の有無および被験物質添加量にかかわらず、陰性対照物質処理群の２倍未満であった。一方、陽性対照物質処理群は、明らかな復帰変異コロニー数の増加を示していた。以上の結果より、化合物５はＡｍｅｓ陰性と判定され、遺伝子突然変異誘発性は無いものと判断された。【０１５８】
【表４】
2009054497.tif 000012
【０１５９】
（実施例２８）２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンによる脳内アミロイドへの結合の確認【０１６０】
本発明に係る化合物が脳内アミロイドに結合するかを評価するため、下記の実験を行った。【０１６１】
（方法）
（１）Ａβ１−４２（和光純薬工業）をリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で溶解して３７℃で７２時間振盪させ、１ｍｇ／ｍＬの凝集Ａβ懸濁液（以下、本実施例にてアミロイド懸濁液という）を得た。【０１６２】
（２）チオペンタール麻酔下、雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（７週齢）の片側扁桃核へ上記アミロイド懸濁液を２．５μＬ（２５μｇ相当）注入し、対照として、反対側の扁桃核にリン酸緩衝生理食塩液（ｐＨ７．４）を２．５μＬ注入した。アミロイド懸濁液及びリン酸緩衝生理食塩液（ｐＨ７．４）注入１日後のラットより脳を摘出し、ミクロトーム（形式：ＣＭ３０５０Ｓ、ＬＥＩＣＡ社製）を用いて厚さ１０μｍの脳切片を作製した。【０１６３】
（３）化合物６のジエチルエーテル溶液を１％牛血清アルブミン/リン酸緩衝液（以下、本実施例にて１％ＰＢ／ＢＳＡという）にて希釈したものを試料溶液とした（放射能濃度０．１ＭＢｑ／ｍＬ）。【０１６４】
（４）上記の脳切片をリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）に３０分間浸し、次いで１％牛血清アルブミン/リン酸緩衝液（以下、本実施例にて１％ＰＢ／ＢＳＡという）に３０分間浸した。次いで、試料溶液に脳切片を３０分間浸した。【０１６５】
（５）上記（４）で得た脳切片を１％ＰＢ／ＢＳＡにて５分間、次いでリン酸緩衝液に１０分間（５分間×２回）浸した上で風乾した。その後、当該脳切片をイメージングプレート上で１６時間露光させた後、バイオイメージングアナライザー（形式：ＢＡＳ−２５００、富士写真フィルム株式会社製）を用いて画像解析を行った。【０１６６】
（５）バイオイメージングアナライザーを用いた上記画像解析の終了後、チオフラビンＴによる病理染色を行って蛍光顕微鏡（株式会社ニコン製、形式：ＴＥ２０００−Ｕ型、励起波長：４００〜４４０ｎｍ、検出波長：４７０ｎｍ）を用いたイメージングを行い、当該切片上にアミロイドが沈着していることを確認した（図１４ｂ）。【０１６７】
（結果）
アミロイド脳内注入ラットの脳切片におけるｉｎ ｖｉｔｒｏオートラジオグラム及びチオフラビンＴ染色のイメージを図１４に示す。この図に示すように、アミロイド懸濁液を注入した側の扁桃核において、明らかな放射能集積が認められた。また、放射能集積部位におけるチオフラビンＴ染色の結果より、当該部位においてアミロイドが存在していることが確認された。一方、生理食塩液を注入した側の扁桃核においては、他の部位と比較した有意な放射能集積は確認されなかった。
この結果より、２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンは、脳内アミロイドに結合する性能を有することが示唆された。
【産業上の利用可能性】
【０１６８】
本発明に係る化合物は、診断薬分野において利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１６９】
【図１】２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成スキーム。
【図２】６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム
【図３】２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成スキーム。
【図４】２−［３’−トリブチルスタニル−４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム
【図５】２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成スキーム。
【図６】２−［３’−トリブチルスタニル−４’−（２”−フルオロエトキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム
【図７】２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成スキーム。
【図８】６−トリブチルスタニル−２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム
【図９】６−トリブチルスタニル−２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム
【図１０】（ａ）２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン投与後の脳切片におけるオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示）。
【図１１】（ａ）２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−メトキシフェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン投与後の脳切片におけるオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示）。
【図１２】（ａ）２−［４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）フェニル］−６−［１２３Ｉ］ヨード−７−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン投与後の脳切片におけるオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示）。
【図１３】（ａ）２−［４’−（２”−フルオロエトキシ）−３’−［１２３Ｉ］ヨードフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン投与後の脳切片におけるオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示）。
【図１４】（ａ）２−[４’−（２”−ヒドロキシエトキシ）−２’−メトキシフェニル]−６−[１２３Ｉ]ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの脳切片におけるｉｎ ｖｉｔｒｏオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【国際調査報告】
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