(57)【要約】下記式（１）：2009136563.tif 000021［式中、Ａは、単糖が２〜６分子結合したオリゴ糖を含む置換基であり、Ｂは、下記式（２）：2009136563.tif 000022（式中、Ｘは、環員数が５〜１０の飽和もしくは不飽和の単環もしくは二環、もしくは窒素、酸素を含む分子を表し、ここで、該環は、窒素、硫黄、酸素からなる群より選択される１〜３個の原子を含んでもよく、ｎは、０又は１であり、Ｙは、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯＮＨ−、−ＮＨ−、または−ＣＯ−、または炭素数０以上のアルキル基であり、Ｒは、必要により１個もしくは２個のヒドロキシ、メルカプト、アミノ、シアノ、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルオキシ、フェニル、ベンジル、ヘテロアリール、フェノキシ、ベンジルオキシ及びヘテロアリールオキシにより置換されていてもよい、炭素数が１〜２０の直鎖または分岐のアルキル、アルケニルまたはアルキニルである）であり、ｍ：ｎ＝９：１〜１：９であり、Ｚは、水素基、メチル基又はエチル基である］の共重合体を含む保湿剤。
2009136563.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）：
2009136563.tif 000016
［式中、Ａは、単糖が２〜６分子結合したオリゴ糖を含む置換基であり、Ｂは、下記式（２）：
2009136563.tif 000017
（式中、Ｘは、環員数が５〜１０の飽和もしくは不飽和の単環もしくは二環、もしくは窒素、酸素を含む分子を表し、ここで、該環は、窒素、硫黄、酸素からなる群より選択される１〜３個の原子を含んでもよく、ｎは、０又は１であり、Ｙは、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯＮＨ−、−ＮＨ−、または−ＣＯ−、または炭素数０以上のアルキル基であり、Ｒは、必要により１個もしくは２個のヒドロキシ、メルカプト、アミノ、シアノ、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルオキシ、フェニル、ベンジル、ヘテロアリール、フェノキシ、ベンジルオキシ及びヘテロアリールオキシにより置換されていてもよい、炭素数が１〜２０の直鎖または分岐のアルキル、アルケニルまたはアルキニルである）であり、ｍ：ｎ＝９：１〜１：９であり、Ｚは、水素基、メチル基又はエチル基である］の共重合体を含む保湿剤。
【請求項２】
下記式（３）：
2009136563.tif 000018
［式中、ｍ１：ｎ１は、９：１〜１：９であり、ｘは、０〜３の整数であり、Ｙは、単結合、−ＮＨＣＯ−、−ＮＨＣＯＮＨ−、−ＣＯＮＨ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯＯ−、−ＯＣＯ−、−ＣＯＯ−、−ＣＯ−又は−ＮＨ−であり、Ｒ１は、炭素数５〜１０の飽和もしくは不飽和の単環もしくは二環、又はＯ、ＳもしくはＮを含む五もしくは六員複素環（ここで、該単環もしくは二環又は複素環は、非置換であるか、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、チオール、シアノ、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、アセチル、から選択される一つ以上の基で置換されていてもよい）、又は炭素数１〜２０のアルキル（ここで、該アルキルは、Ｏ、Ｓ、ＮＨで中断されてもよく、またハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、チオール、シアノ、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、アセチル、から選択される一つ以上の基で置換されていてもよい）である］、
下記式（４）：
2009136563.tif 000019
（式中、ｍ２：ｎ２＝９：１〜１：９であり、Ｒ１は、式（３）と同様である）、及び
下記式（５）：
2009136563.tif 000020
（式中、ｍ３：ｎ３＝９：１〜１：９である）
からなる群から選択される一種以上の共重合体を含む保湿剤。
【請求項３】
Ｙは、ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−であり、Ｒ１は、炭素数１〜２０のアルキル（ここで、該アルキルはハロゲン、ヒドロキシ又はシクロヘキシルで置換されている）である、請求項２に記載の保湿剤。
【請求項４】
共重合体の含量が、０．０００１〜５重量％である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の保湿剤。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の保湿剤、及び多糖類及び／又はタンパク質を含む化粧品。
【請求項６】
多糖類がコンドロイチンである、請求項５に記載の化粧品。
【請求項７】
多糖類がヒアルロン酸である、請求項５に記載の化粧品。
【請求項８】
タンパク質がコラーゲン又は低分子コラーゲンである、請求項５に記載の化粧品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、糖鎖含有スチレン誘導体とこの糖鎖含有スチレン誘導体と共重合可能なモノマーとからなる共重合体を含む保湿剤、及びこの保湿剤、多糖類及びタンパク質を含む化粧品に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒアルロン酸に代表される天然多糖やコラーゲンに代表される天然タンパク質は、保湿力に優れ、皮膚にうるおいや弾力性を与えると共に、キメを整え、張りを与える効果があるため、皮膚を美しく維持することが出来ることから、これらの成分を配合する保湿性の高い化粧品が数多く開発されている。【０００３】
しかしながら、ヒアルロン酸は、粘性の高い天然多糖であり、皮膚吸収が悪く、また、水分や汗などで容易に皮膚から剥離するため、長時間の保湿性能には問題があった。【０００４】
また、化粧品に使用されるコラーゲンの多くは、動物や海洋生物から抽出されたものを、酸・アルカリや酵素処理で低分子化したものが用いられているが、ヒアルロン酸と同様に皮膚への浸透性はほとんど無く、皮膚表面での保湿効果は高いものの、皮膚内部での保湿効果はほとんど期待できなかった。【０００５】
しかしながら、コラーゲンは、細胞周囲で細胞の維持活性化を司る主要構成タンパク質である。従って、細胞周囲でコラーゲンが減少したり、硬化したりすることが原因で、細胞の活性が低下し、さらには細胞数が減少し、肌の弾力性が失われ、皺の形成の一因となる。したがって、皺形成を予防するにはコラーゲンを皮膚、特に真皮層の細胞に供給することにより、コラーゲン維持並びにヒアルロン酸維持・産生を促進するとともに、皮膚細胞内部および表面に保湿性を保つことが重要である。【０００６】
上述したように、従来のヒアルロン酸やコラーゲンの成分の配合だけでは、皮膚細胞へのこれら化合物の供給は、困難であり、保湿性付与および皺の形成の抑制は、不十分であった。【０００７】
一方、糖類に何らかの修飾を加えたものとして、糖を側鎖に有しスチレンを主鎖に有するポリ（Ｎ−ｐ−ビニルベンジル−Ｄ−ラクトンアミド）（以下、ＰＶＬＡという）が合成され（非特許文献１）、かかる高分子を基質として細胞培養に用いた例（特許文献１−４）や、培養容器のコーティング剤に用いた例（特許文献５）、抗血栓性材料に用いた例（特許文献６）や、薬剤をＰＶＬＡで包接してＤＤＳとして用いた例（特許文献７）、化粧料に用いた例（特許文献８）などがある。これらはそのいずれもがＰＶＬＡをホモポリマーとして用いたものである。【０００８】
他方、この糖鎖含有スチレン誘導体と他のモノマーとの共重合体として、メタクリロイル基をＮ末端に有するリジンオリゴマーとの共重合体を用いて薬物を特定細胞に取り込ませる方法（特許文献９）や、４−ビニルベンジルヘキサデカンアミドとの共重合体を抗血栓性材料として用いる例（特許文献１０）などがある。【０００９】
これらの糖側鎖含有重合体を用いた発明は、糖側鎖が細胞培養において特異的に効果を有するものであること、また糖側鎖を細胞が認識することなどを利用したものであるが、これらの共重合体の保湿剤としての用途は、未だ知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開昭６３−１１６６９２号
【特許文献２】特開昭６３−２７９７８７号
【特許文献３】特開昭６３−３０１７８６号
【特許文献４】特開平１−３０９６８１号
【特許文献５】特開平４−１６９５３０号
【特許文献６】特開平２−２２４６６４号
【特許文献７】特開平５−１０５６３７号
【特許文献８】特開２０００−２７３０１９号
【特許文献９】特開平１０−４５６３０号
【特許文献１０】特開２００５−１１２９８７号
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】K.Kobayashi ら、Polymer Journal、第１７巻、第４号、第５６７〜５７５頁（１９８５）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明の課題は、従来の問題点である保湿性の改善、および皮膚への浸透性が高く、皺形成の抑制に効果のある化粧品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者らは、前記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、糖鎖含有スチレン誘導体とこの糖鎖含有スチレン誘導体と共重合可能なモノマーとからなる共重合体が非常に高い保湿性能を有すること、そして上記共重合体、及び多糖類及び／又はタンパク質を配合した化粧品は、皺の形成を抑制することを見出し、本発明を完成した。【００１４】
すなわち、本発明は、下記のとおりである。
１．下記式（１）：
2009136563.tif 000003
［式中、Ａは、単糖が２〜６分子結合したオリゴ糖を含む置換基であり、Ｂは、下記式（２）：
2009136563.tif 000004
（式中、Ｘは、環員数が５〜１０の飽和もしくは不飽和の単環もしくは二環、もしくは窒素、酸素を含む分子を表し、ここで、該環は、窒素、硫黄、酸素からなる群より選択される１〜３個の原子を含んでもよく、ｎは、０又は１であり、Ｙは、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯＮＨ−、−ＮＨ−、または−ＣＯ−、または炭素数０以上のアルキル基であり、Ｒは、必要により１個もしくは２個のヒドロキシ、メルカプト、アミノ、シアノ、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルオキシ、フェニル、ベンジル、ヘテロアリール、フェノキシ、ベンジルオキシ及びヘテロアリールオキシにより置換されていてもよい、炭素数が１〜２０の直鎖または分岐のアルキル、アルケニルまたはアルキニルである）であり、ｍ：ｎ＝９：１〜１：９であり、Ｚは、水素基、メチル基又はエチル基である］の共重合体を含む保湿剤、
２．下記式（３）：
2009136563.tif 000005
［式中、ｍ１：ｎ１は、９：１〜１：９であり、ｘは、０〜３の整数であり、Ｙは、単結合、−ＮＨＣＯ−、−ＮＨＣＯＮＨ−、−ＣＯＮＨ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯＯ−、−ＯＣＯ−、−ＣＯＯ−、−ＣＯ−又は−ＮＨ−であり、Ｒ１は、炭素数５〜１０の飽和もしくは不飽和の単環もしくは二環、又はＯ、ＳもしくはＮを含む五もしくは六員複素環（ここで、該単環もしくは二環又は複素環は、非置換であるか、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、チオール、シアノ、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、アセチル、から選択される一つ以上の基で置換されていてもよい）、又は炭素数１〜２０のアルキル（ここで、該アルキルは、Ｏ、Ｓ、ＮＨで中断されてもよく、またハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、チオール、シアノ、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、アセチル、から選択される一つ以上の基で置換されていてもよい）である］、
下記式（４）：
2009136563.tif 000006
（式中、ｍ２：ｎ２＝９：１〜１：９であり、Ｒ１は、式（３）と同様である）、及び
下記式（５）：
2009136563.tif 000007
（式中、ｍ３：ｎ３＝９：１〜１：９である）
からなる群から選択される一種以上の共重合体を含む保湿剤、
３．Ｙは、ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−であり、Ｒ１は、炭素数１〜２０のアルキル（ここで、該アルキルはハロゲン、ヒドロキシ又はシクロヘキシルで置換されている）である、上記２に記載の保湿剤、
４．共重合体の含量が、０．０００１〜５重量％である、上記１〜３のいずれか１に記載の保湿剤、
５．上記１〜３のいずれか１に記載の保湿剤、及び多糖類及び／又はタンパク質を含む化粧品、
６．多糖類がコンドロイチンである、上記５に記載の化粧品、
７．多糖類がヒアルロン酸である、上記５に記載の化粧品、
８．タンパク質がコラーゲン又は低分子コラーゲンである、上記５に記載の化粧品。
【発明の効果】
【００１５】
上述したように本発明は、本発明は、糖鎖含有スチレン誘導体と、この糖鎖含有スチレン誘導体と共重合可能なモノマーとからなる共重合体を含む保湿剤、及びこの保湿剤、多糖類及びタンパク質を含む化粧品である。本発明の化粧品は、皺の形成を抑制するとともに、非常に高い保湿性能を有する。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】ＳＲＡ細胞における各ポリマーコーティングシャーレ上での細胞増殖試験の結果を示す。左から、０．０１％ＰＶＬＡ、０．０１％Ｐ（ＶＬＡ−ｃｏ−ＶＢＣＨ）９：１、０．０１％ＰＶＣＡ、０．０１％Ｐ（ＶＣＡ−ｃｏ−ＶＢＣＨ）９：１、コントロール  水のみである。値は、Ｐｓｔの２４時間後を１００％としたときの増殖率で示した。
【図２】ＮＩＨ３Ｔ３細胞における各ポリマーコーティングシャーレ上での細胞増殖試験の結果を示す。左から、０．０１％ＰＶＬＡ、０．０１％Ｐ（ＶＬＡ−ｃｏ−ＶＢＣＨ）９：１、０．０１％ＰＶＣＡ、０．０１％Ｐ（ＶＣＡ−ｃｏ−ＶＢＣＨ）９：１、コントロール  水のみである。値は、Ｐｓｔの２４時間後を１００％としたときの増殖率で示した。
【図３】豚皮膚水分浸透試験の結果（１５分後）を示した。
【図４】豚皮膚水分浸透試験の結果（３０分後）を示した。
【図５】豚皮膚水分浸透試験の結果（６０分後）を示した。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明を実施するための最良の形態を詳細に説明する。
【００１８】
上記式に記載の化合物では、糖としてラクトースを用いたが、本発明の別の態様においては、他のオリゴ糖としては単糖が２〜６分子結合したものが好適に使用され得る。具体的にはトレハロース、ネオトレハロース、マルトース、セロビオース、ゲンチオビオース、メリビオース、ルチノース、スクロース、ツラノース、ビシアノース、セロトリオース、ゲンチアノース、イソパノース、マルトトリオース、ラフィノース、リコテトラオース、マルトテトラオース、マルトペンタオース、マルトヘキサオース、から選択される一種であることが好ましい。これらのうち、特にラクトースが、ポリマーの水に対する溶解性、原料価格、入手し易さなどの点で好ましい。また、単糖としては、グルコース、ガラクトース、マンノース、フルクトース、キシロース、アラビノースから選択される一種であることが好ましく、これらのうち特にグルコースが前記同様の理由で好ましい。
【００１９】
本発明に係る保湿剤は、上記式１−３に記載の共重合体を含む。また、本発明に係る化粧品は、本発明の保湿剤に加えて、ヒアルロン酸ナトリウムやコンドロイチン等の多糖類、及び／又は、低分子コラーゲン、コラーゲン等のタンパク質およびを含有する。
【００２０】
ヒアルロン酸ナトリウムは、動物組織等から抽出する抽出法あるいは微生物の培養による発酵法で工業的に生産されているが、本発明に用いることのできるヒアルロン酸ナトリウムは、抽出法・発酵法のいずれの方法で生産されたものでも良い。
【００２１】
また、上記ヒアルロン酸ナトリウムは、分子量５万から３００万前後のものが生産されているが、本発明に用いるヒアルロン酸ナトリウムの分子量は、この範囲のものであれば、いずれのものでも使用できる。
【００２２】
本発明に用いられるコラーゲンは、牛、豚、鶏等の動物や魚介類の皮等から抽出・精製されたものに、水に対する溶解性が高めるため酵素を作用させて可溶化したアテロコラーゲンを好ましく用いることが出来る。弱酸性からアルカリ性領域においても溶解性に優れているため、アテロコラーゲンをミリスチル化、フタル化、サクシニル化等の化学修飾したものを好ましく用いることが出来る。さらにヒアルロン酸ナトリウムとの併用において優れた保湿作用を発揮することから特に好ましい。
【００２３】
本発明に用いられる低分子コラーゲンは、牛、豚、鶏等の動物や魚介類の皮等から抽出・精製されたコラーゲン成分またはゼラチン成分を酵素処理によって低分子化して得られた分子量が約２８０〜１０００のコラーゲンペプチドが、皮膚浸透性があり、かつ、真皮層での保持性が高く、コラーゲンおよびヒアルロン酸産生促進効果が高い。分子量が１０００以上のコラーゲンペプチドは、皮膚浸透性が劣るので好ましくない。
【００２４】
本発明の共重合体は、糖鎖を疎水性ポリマーに結合させた基本骨格を有しているため、皮膚表面からの水分蒸発を防ぐとともに、皮膚内部の水分を保持する作用があり、皮膚に対する保湿効果が極めて高い。特に、皮膚浸透性のコラーゲンペプチドあるいはヒアルロン酸との併用においては、両者の複合的作用により、皮膚表面および皮膚内部の保湿効果が優れているとともに、皮膚の皺形成阻止に非常に効果がある。
【００２５】
成分（ａ）ヒアルロン酸ナトリウムと、成分（ｂ）低分子量コラーゲンとコラーゲンの合計配合量比は、（ａ）／｛（ｂ）＋（ｃ）｝＝１０〜２２０（重量比）（（ｃ）は他の添加成分）が好ましく、さらには３０から２００（重量比）が好ましい。この範囲を越えると、均質性、保湿性、使用時の伸びが低下してしまう。
【００２６】
本発明の共重合体（ｄ）のコラーゲンの配合比は、（ｂ）／（ｄ）＝０．０７〜１．２（重量比）が好ましく、さらには０．１から０．８（重量比）がさらに好ましい。この範囲を越えると、保湿性、皮膚の皺形成抑制効果が低下してしまう。
【００２７】
本発明の化粧品は、本発明の作用効果を損なわない質的および量的範囲内であれば、本発明成分以外の任意の成分を配合することができる。例えば、アミノ酸、糖、ビタミンＣ誘導体、増粘剤、香料、防腐剤などを配合することができる。
【００２８】
以下に、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれにより何ら限定されるものではない。
【００２９】
本発明の共重合体を、下記のように製造した。
ＶＬＡ（Ｎ−ｐ−ビニルベンジル−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１−４）−Ｄ−グルコンアミド）を初めとする糖鎖を持つポリスチレン誘導体は、特許文献１０に従って合成した。
モノマーであるビニルベンジルヘキサデカンアミド（ＶＡＬ、上記（３）において、Ｘ＝１、Ｙ＝ＮＨＣＯ、Ｒ１＝−（ＣＨ２）１４ＣＨ３である化合物）の合成を示す。ビニルベンジルアミン１０gを無水クロロフォルム１５０mlに溶解し、ピリジン７gを加えて、冷却した後、パルミトイルクロリド２４gを溶解した無水クロロフォルム５０mlを滴下漏斗より３０分間かけて滴下した。反応終了後、クロロフォルム溶液を水で洗浄した後、乾燥させ、溶媒を減圧留去した。残さをエタノールから再結晶して、ＶＡＬ２０gを得た。
【００３０】
ポリマーの合成のために、ＶＬＡとＶＡＬをモル比９：１、８：２、７：３等の割合で秤量し、真空反応管に分注した。ＤＭＳＯあるいはＤＭＳＯ−トルエンの混合溶媒を加えて完全に溶解した後、凍結−脱気−融解を繰り返して、酸素を溶液中から取り除いた。これに１００分の１モルのアゾイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）を添加して、溶解したのち、減圧密閉した。６０℃で５時間反応させてポリマーを合成した。
【００３１】
得られた溶液を大過剰のメタノールに滴下して、ポリマーを沈澱させた。これを適当な溶媒に溶解し、再びメタノールに滴下してポリマーを沈澱させる操作を３回繰り返した。
最終的に得られたポリマーを蒸留水に溶解し、大過剰の水に対して透析した。その後、凍結乾燥により目的のポリマーを得た。
【００３２】
次にＶＬＡの共重合の相手モノマーの一つであるビニルベンジルシクロへキシルプロパンアミド（ＶＢＣＨ、上記式（３）において、Ｘ＝１、Ｙ＝ＮＨＣＯ、Ｒ１＝
2009136563.tif 000008
である化合物）の合成について示す。ビニルベンジルアミン１３ｇを無水THF１５０ｍｌに溶解し、WSC２３ｇ、３−シクロへキシルプロピオン酸１３ｇを溶解した無水THF５０ｍｌを加えた。反応終了後、沈殿をろ別し、THFを留去し、クロロホルムに溶解した後、溶液を水で洗浄した後、乾燥させ、溶媒を減圧留去した。残さをエタノールから再結晶して、モノマー１０ｇを得た。ポリマーの作製は、上記と同様に行った。
【００３３】
他のモノマーに関しては、市販品を購入した。
【００３４】
細胞培養試験
０．０１w/v%のＰ（ＶＬＡ−ｃｏ−ＶＡＬ）９：１あるいは、Ｐ（ＶＣＡ−ｃｏ−ＶＡＬ）９：１水溶液を作成し、未処理の６穴シャーレに２ｍｌずつ添加し、一昼夜コーティングした。その後、ＰＢＳで３回洗浄し、実験に用いた。
【００３５】
実験方法
継代しておいたＳＲＡ（水晶体上皮細胞）および３Ｔ３細胞（繊維芽細胞）を上記シャーレに播種した（１×１０４／シャーレ）。培地はそれぞれの細胞に最適な培地を用いた。２４時間、４８時間培養後の形態観察と細胞数を計数した。結果を図１及び２に示した。
【００３６】
ＰＶＬＡはガラクトース残基を有し、ＰＶＣＡはセロビオース残基を有している。糖鎖としてはセロビオース残基が細胞に良好に認識され増殖を促進していることが判った。これらに疎水性アンカーを導入した誘導体では、それぞれより効率的に細胞の増殖を促進している結果が得られた。従って、本発明で作製した糖鎖を有する共重合体を用いると細胞を活性化させ増殖を促進できる効果があると考えられた。
【００３７】
接触角試験
ポリスチレンシャーレ（Ｆａｌｃｏｎ１００８シャーレ：表面処理なし）に各試験溶液をそれぞれ１ｍｌ添加し、１時間放置することによってシャーレ表面をコーティングした。所定時間後、各シャーレを蒸留水３ｍｌで３回洗浄し、シャーレを一旦乾燥させた。乾燥させたシャーレを用いて接触角測定装置でシャーレに滴下した水滴の接触角を測定した。
【００３８】
2009136563.tif 000009
【００３９】
上記表に記載のとおり、コントロール（水のみ）では８３．６度と高い撥水性を示した。ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸のみを添加した溶液では、接触角は、それぞれ８７．４、８９．６とより撥水性に傾いており、ポリスチレン表面の親水化には向いていないことが判った。
【００４０】
一方、各合成糖鎖ポリマーを含有した溶液は、水の系よりも親水的な表面を提供できることが判った。さらに、今回の特徴であるＰＶＬＡに疎水性残基を共重合させた化合物をヒアルロン酸と組み合わせた系では、Ｐ（ＶＬＡ−ｃｏ−ＶＢＣＨ）９：１とヒアルロン酸の系で３６度、ヒアルロン酸および０．１％  Ｐ（ＶＬＡ−ｃｏ−ＶＡＬ）９：１混合溶液の系で５８．８度と非常に大きな親水化度を示すことが判った。コンドロイチン硫酸との組み合わせは、ヒアルロン酸よりも効果が落ちるものの、同様に良好な親水化が見られた。
【００４１】
従って、この結果から、ＰＶＬＡ誘導体の疎水性残基によるアンカリング効果とヒアルロン酸等の多糖成分の固定効果により、非常に親水化した表面を提供できることが明らかとなった。
【００４２】
ヒアルロン酸保水性試験
ヒアルロン酸およびＰＶＬＡ誘導体による保水力保持試験を行った。
各サンプルをサンプル瓶（５ｍｌマルエムスクリュー瓶）に１ｍｌずつ分注した。これをサンプル瓶蓋ごと重量測定した。密閉容器中で、１０ｇの塩化カルシウムを入れたサンプル瓶を中心に各サンプルを配置して蓋を取り、放置した。その後、定時に各重量を測定した。
【００４３】
結果を下記に示す。
【００４４】
2009136563.tif 000010
【００４５】
この結果、コントロールである水が２０日で保持する水分量よりも各サンプルは水分を保持していることがわかった。この効果は、糖鎖高分子のみでも顕著であるが、糖鎖高分子と多糖類を組み合わせることで、さらに顕著になっていることが判った。
【００４６】
さらに、糖鎖高分子に疎水性共重合体を導入した場合、その効果はさらに増大していた。このことは、糖鎖高分子と多糖類の相互作用に疎水性共重合体が重要な役割を果たしていることを示している。特に、シクロヘキサン環を導入した糖鎖高分子は、その効果がさらに顕著であり、糖鎖高分子−多糖類−水の間に強固なクラスター構造を取ることで、水の蒸発を防ぎ、効果的に保水していると考えられた。
【００４７】
肌水分保持試験
ボランティアの腕の水分量を市販の肌水分量測定器を用いて測定した。各水溶液を１００μlずつ各測定した肌表面にアプライし、コットンで所定時間カバーした。所定時間後、コットンを取り去り、各試験部の肌水分量を測定した。３０分後の水分量測定結果を下記に示す。数値は、処理前後の肌水分量の差を、水を塗布したときの水分量の差を０として表した。
【００４８】
2009136563.tif 000011
【００４９】
全体を比較した結果、糖鎖含有ポリマーのみでも水分を保持する効果が見られた。さらに、糖鎖高分子にヒアルロン酸やコンドロイチン硫酸などの多糖類を組み合わせた系では、飛躍的な水分保湿効果が得られた。この効果は、糖鎖高分子に疎水性残基を導入した系ほど、効果的であった。従って、糖鎖高分子に疎水性共重合体を導入することは、肌との相互作用を高め、肌にアンカリングすることにより、多糖類を安定に肌上に留めることが出来るためだと考えられる。この効果は、１時間後でも認められた。
【００５０】
豚皮膚水分浸透試験
各水溶液に、トリパンブルー溶液をごく少量加えて試験液とした。豚皮を準備し、３ｃｍ角にカットしておいた。上記水溶液を３０μlずつ豚皮表面にアプライし、所定時間放置した。所定時間後、各試験部をデジタルカメラにて撮影比較した。各時間後の測定結果を図３−５に示す。
【００５１】
水を塗布したときの図と比較しても、各溶液は、皮膚となじみやすい傾向が見られた。特に、糖鎖含有ポリマーのみでも皮膚に浸透しやすい傾向が見られたが、疎水性部を導入したポリマーは、その効果が顕著であった。
【００５２】
さらに、糖鎖高分子にヒアルロン酸やコンドロイチン硫酸などの多糖類を組み合わせた系では、飛躍的な皮膚浸透性が得られた。この効果は、糖鎖高分子に疎水性残基を導入した系ほど、効果的であった。従って、糖鎖高分子に疎水性共重合体を導入することは、肌との相互作用を高め、肌にアンカリングすることにより、多糖類を安定に肌上に留めることが出来るためだと考えられる。
【００５３】
この効果は、１時間後でも認められた。また、水のみの系は１時間でも皮膚浸透が遅く、水分が浮き上がっており、これら糖鎖ポリマーの水分皮膚浸透作用は非常に効果的であった。
【００５４】
他の糖鎖を用いた場合においても、水溶性を保持し、ポリスチレンシャーレを容易にコーティングすることが出来、コーティング表面を親水化し、ＰＶＬＡ誘導体の場合と同様の接触角を与えた。従って、ＰＶＣＡ、ＰＶＭＡに対しても同様の効果が得られた。
【００５５】
乳液
下記の組成及び下記製法で乳液を調製し、その美肌効果及び皮膚老化防止効果を調べた。
【００５６】
2009136563.tif 000012
【００５７】
Ａ．成分７、９及び１４を加熱混合し、７０℃に維持した。
Ｂ．成分１〜６、８、１０及び１３を加熱混合し、７０℃に維持した。
Ｃ．上記Ｂを先のＡに加えて混合し、成分１２を加えて均一に乳化し、３０℃まで冷却して、成分１１を加え、均一に混合して乳液を得た。
【００５８】
試験乳液を３０〜５５才の女性のべ２０名に対し、毎日朝と夜の２回、２０週に渡って洗顔後に塗布した。塗布による美肌および皮膚老化防止効果を下記の基準で判断した。
【００５９】
美肌効果
「評価」                      「内容」
有効                        肌のくすみが目立たなくなった。
やや有効                    肌のくすみがあまり目立たなくなった。
無効                        使用前と変化なし。
【００６０】
皮膚老化防止効果
「評価」                      「内容」
有効                        肌の張りつやが改善された。
やや有効                    肌のやや張りつやが改善された。
無効                        使用前と変化なし。
【００６１】
2009136563.tif 000013
【００６２】
クリーム：
下記の組成及び下記製法でクリームを調製し、その美肌効果を調べた。
【００６３】
2009136563.tif 000014
【００６４】
Ａ．成分１〜８、１０及び１１を混合し、加熱して７０℃に維持した。
Ｂ．成分１３を加熱して７０℃に維持した。
Ｃ．ＡにＢを加え、混合した後、冷却して９、１２を加えて、均一に混合して、クリームを得た。
【００６５】
試験クリームを３０〜５５才の女性のべ２０名に対し、毎日朝と夜の２回、２０週に渡って洗顔後に塗布した。塗布による美肌および皮膚老化防止効果を下記の基準で判断した。
【００６６】
美肌効果
「評価」                      「内容」
有効                        肌のくすみが目立たなくなった。
やや有効                    肌のくすみがあまり目立たなくなった。
無効                        使用前と変化なし。
【００６７】
皮膚老化防止効果
「評価」                      「内容」
有効                        肌の張りつやが改善された。
やや有効                    肌のやや張りつやが改善された。
無効                        使用前と変化なし。
【００６８】
2009136563.tif 000015
【００６９】
化粧水：
（処方）                                          配合量（％）
（１）グリセリン                                  ５．０
（２）１，３−ブチレングリコール                  ６．５
（３）ポリオキシエチレンソルビタン                １．２
モノラウリン酸エステル（２０Ｅ．Ｏ．）
（４）エチルアルコール                            ８．０
（５）アスタキサンチン類                          ０．０００５
（６）ＳＯＤ＊１                                  ０．５
（７）ＰＶＬＡ誘導体                              ０．０５
（８）防腐剤                                      適量
（９）香料                                        適量
（10）精製水                                    残量
＊１シグマ社製；人赤血球より得たもの（5.230units/mg)
【００７０】
Ａ．成分（３）、（４）、（５）、（７）（８）及び（９）を混合溶解した。
Ｂ．成分（１）、（２）、（６）及び（１０）を混合溶解した。
Ｃ．ＡとＢを混合して均一にし、化粧水を得た。
【００７１】
パック：
（処方）                                          配合量（％）
（１）ポリビニルアルコール                        ２０．０
（２）エチルアルコール                            ２０．０
（３）グリセリン                                    ５．０
（４）カオリン                                      ６．０
（５）アスタキサンチン類                            ０．０５
（６）ＰＶＬＡ誘導体                                ０．１
（７）防腐剤                                        ０．２
（８）香料                                          ０．１
（９）精製水                                        残量
【００７２】
Ａ．成分（１）、（３）、（４）及び（９）を混合し、７０℃に加熱し、攪拌した。
Ｂ．成分（２）、（５）、（７）及び（８）を混合した。
Ｃ．上記Ｂを先のＡに加え、混合した後、冷却して（６）を均一に分散してパックを得た。
【００７３】
洗浄料：
（処方）                                          配合量（％）
（１）ステアリン酸                                １０．０
（２）パルミチン酸                                  ８．０
（３）ミリスチン酸                                １２．０
（４）ラウリン酸                                    ４．０
（５）オレイルアルコール                            １．５
（６）精製ラノリン                                  １．０
（７）香料                                          ０．１
（８）防腐剤                                        ０．２
（９）グリセリン                                  １８．０
（10）水酸化カリウム                                ６．０
（11）アスタキサンチン類                            ０．５
（12）酢酸−ｄｌ−α−                              ０．０５
トコフェロール＊１
（13）ＰＶＬＡ誘導体                                ０．１
（14）精製水                                        残量
＊１  シグマ社製
【００７４】
Ａ．成分（９）、（１０）及び（１４）を混合し、７０℃に加熱した。
Ｂ．成分（１）〜（６）、（８）、（１１）及び（１２）を混合し、７０℃に加熱した。
Ｃ．上記Ｂを先のＡに加え、しばらく７０℃に保ち、けん化反応が終了後、５０℃まで冷却し、成分（７）および（１３）を加え、冷却して洗浄料を得た。
【図１】
2009136563.tif 000023
【図２】
2009136563.tif 000024
【図３】
2009136563.tif 000025
【図４】
2009136563.tif 000026
【図５】
2009136563.tif 000027
【国際調査報告】
2009136563.tif 000028
2009136563.tif 000029
2009136563.tif 000030
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