(57)【要約】  ヒト、特に肥満者の内臓脂肪特異的低減剤を提供する。本発明は、ヒスチジンまたはその塩を有効成分として含有する、ヒト、特に肥満者に対する内臓脂肪特異的低減剤を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒスチジンまたはその塩を有効成分として含有する、内臓脂肪特異的低減剤。
【請求項２】
内臓脂肪特異的低減剤が肥満者に対するものである、請求項１記載の内臓脂肪特異的低減剤。
【請求項３】
内臓脂肪特異的低減剤を製造するための、ヒスチジンまたはその塩の使用。
【請求項４】
内臓脂肪特異的低減剤が肥満者に対するものである、請求項３記載の使用。
【請求項５】
内臓脂肪を特異的に低減する使用のための、ヒスチジンまたはその塩。
【請求項６】
内臓脂肪が肥満者の内臓脂肪である、請求項５記載のヒスチジンまたはその塩。
【請求項７】
内臓脂肪を特異的に低減することを必要とする対象に、ヒスチジンまたはその塩の有効量を投与することを含む、内臓脂肪を特異的に低減させる方法。
【請求項８】
対象が肥満者である、請求項７記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒスチジンまたはその塩を有効成分として含有する内臓脂肪特異的低減剤、特に、肥満者に対して内臓脂肪の特異的な低減効果を有する内臓脂肪特異的低減剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、生活の都市化に伴う運動不足、過剰な栄養摂取による肥満の急増が社会問題化している。肥満は皮下脂肪型と内臓脂肪型に大別できるが、このうち内臓脂肪の蓄積は、糖尿病、高脂血症、高血圧などの病態基盤となり、動脈硬化性疾患の発症を加速することが明らかとなっている（非特許文献１）。そのため動脈硬化性疾患の予防には、内臓脂肪を低減することが求められている。また、皮下脂肪は、健康への悪影響が少なく、むしろ身体の保温や内臓の保護に必要であるとの理由から皮下脂肪は低減させないことが望ましい。従って、実質的に皮下脂肪は低減させず、内臓脂肪を特異的に低減することが待望される。
内臓脂肪を低減する物質としては、カテキン（非特許文献２参照）、β−コングリシニン（非特許文献３参照）などが報告されており、ヒトでの効果が確認されている。しかしながらこれらの物質は、皮下脂肪も顕著に低減する、もしくは大量の摂取を必要とする等の問題点を有している。【０００３】
肥満者が日常の食生活で恒常的に摂取を行い、内臓脂肪を低減し、ひいては動脈硬化性疾患を予防することを目的とした場合、医薬品、サプリメント等への加工が容易で、また医薬品として容易に投与できる量、一般の食品に容易に添加できる摂取量で、内臓脂肪を優先的に低減する効果を有する内臓脂肪特異的低減剤を提供することが待望される。
ヒスチジンには、抗疲労作用（特許文献１参照）、摂食抑制作用（非特許文献４参照）、交感神経系を介した脂肪分解促進作用（非特許文献５参照）、健常時の内臓脂肪低減作用（非特許文献６参照）が知られている。しかしながらヒスチジンが、ヒト内臓脂肪を特異的に低減すること、特に肥満者に対して皮下肥肪を実質的に低減せず、内臓脂肪を特異的に低減することは知られていない。
【特許文献１】特開２００６−１３７７０６号公報
【非特許文献１】肥満症治療ガイドライン２００６，肥満研究，１２（臨時増刊号），２００６．
【非特許文献２】Tsuchida Tら，Reduction of body fat in humans by long-term ingestion of catechins．Prog Med.，22(9)，2189-2203，2002．
【非特許文献３】Kohno Mら，Decreases in serum triacylglycerol and visceral fat mediated by dietary soybean β-conglycinin. J Atheroscler Thromb.,13(5)，247−255，2006．
【非特許文献４】Yoshimatsu Hら，Histidine suppresses food intake through its conversion into neuronal histamine．Exp Biol Med.，227(1)，63-68，2002．
【非特許文献５】Yoshimatsu Hら，Histidine induces lipolysis through sympathetic nerve in white adipose tissue．Eur J Clin Invest.，32(4)，236-241，2002．
【非特許文献６】Kasaoka Sら，Histidine supplementation suppresses food intake and fat accumulation in rats．Nutrition.，20，991-996，2004．
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、ヒトに対する内臓脂肪特異的低減剤、特に肥満者の皮下脂肪を実質的に低減しない、内臓脂肪特異的低減剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者等は前記課題を解決するために鋭意検討した結果、ヒスチジンを長期摂取することにより、肥満モデル動物では皮下脂肪と内臓脂肪の両方を低減する効果が認められるのに対して、予想に全く反して、ヒトにおいては、特にヒトの肥満者においては皮下脂肪を実質的に低減せず、内臓脂肪を特異的に低減することを見出し、本発明を完成するに至った。
前記において「実質的に低減せず」とは、測定誤差やプラセボ効果等のヒスチジン摂取以外の影響を除き、分析値の増減が１０％以内に収まることをいう。
すなわち本発明は、以下に示す通りである。
〔１〕  ヒスチジンまたはその塩を有効成分として含有する、内臓脂肪特異的低減剤。
〔２〕  内臓脂肪特異的低減剤が肥満者に対するものである、〔１〕記載の内臓脂肪特異的低減剤。
〔３〕  内臓脂肪特異的低減剤を製造するための、ヒスチジンまたはその塩の使用。
〔４〕  内臓脂肪特異的低減剤が肥満者に対するものである、〔３〕記載の使用。
〔５〕  内臓脂肪を特異的に低減する使用のための、ヒスチジンまたはその塩。
〔６〕  内臓脂肪が肥満者の内臓脂肪である、〔５〕記載のヒスチジンまたはその塩。
〔７〕  内臓脂肪を特異的に低減することを必要とする対象に、ヒスチジンまたはその塩の有効量を投与することを含む、内臓脂肪を特異的に低減させる方法。
〔８〕  対象が肥満者である、〔７〕記載の方法。
【発明の効果】
【０００６】
本発明により、安全で効果的な内臓脂肪特異的低減剤、特に肥満者に対する内臓脂肪特異的低減剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１は、肥満者に対するヒスチジンの内臓脂肪特異的低減効果を表す図面である。
【図２】図２は、肥満モデル動物に対するヒスチジンの体脂肪低減効果を表す図面である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明で用いられるヒスチジンとしては、Ｌ−ヒスチジン、Ｄ−ヒスチジンおよびＤＬ−ヒスチジンが挙げられるが、Ｌ−ヒスチジンが好ましい。
ヒスチジンは、発酵生産する方法等により取得することができる。また、ヒスチジンは、市販品を購入することにより取得することもできる。
Ｌ−ヒスチジンを発酵生産する方法としては、例えば、特開昭５８−１７９４９７号公報、特開昭６０−２４１９３号公報に記載の方法が挙げられる。
また、Ｌ−ヒスチジンおよびＤ−ヒスチジンは、シグマ−アルドリッチ社等より購入することもできる。【０００９】
ヒスチジンの塩としては、薬理学的に許容されるものであれば特に制限はなく、例えば酸付加塩、金属塩、アンモニウム塩、有機アミン付加塩、アミノ酸付加塩等が挙げられる。
酸付加塩としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、乳酸塩、α−ケトグルタル酸塩、グルコン酸塩、カプリル酸塩等の有機酸塩が挙げられる。
金属塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、亜鉛塩等が挙げられる。
アンモニウム塩としては、アンモニウム塩、テトラメチルアンモニウム塩等が挙げられる。
有機アミン付加塩としては、モルホリン塩、ピペリジン塩等が挙げられる。
アミノ酸付加塩としては、グリシン塩、フェニルアラニン塩、リジン塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩等が挙げられる。
前記のヒスチジンの塩のうち、塩酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、α−ケトグルタル酸塩、アスパラギン酸塩が好ましく用いられるが、他の塩、または２以上の塩を適宜組み合わせて用いてもよい。【００１０】
本発明の内臓脂肪特異的低減剤には、ヒスチジンまたはその塩に加え、適宜、各用途、例えば医薬製剤用、飲食品製剤用に適した添加剤を含有させることができる。【００１１】
本発明の内臓脂肪特異的低減剤は、ヒスチジンまたはその塩を含有し、必要に応じて薬理学的に許容される１種または２種以上の他の治療のための有効成分を含有していてもよい。
かかる有効成分としては例えば、バリン、ロイシン、イソロイシン、アルギニン、リジン、グルタミン、アラニン、セリン、グリシン、システイン、スレオニン等のアミノ酸等、カテキン、β−コングリシニン、カプサイシン、カルニチン、ギムネマ酸、α−リポ酸、ガルシニア等が挙げられる。【００１２】
本発明の内臓脂肪特異的低減剤は、ヒスチジンまたはその塩を必要に応じ担体等の添加剤と一緒に混合し、製剤学の技術分野においてよく知られている任意の方法により製造することができる。【００１３】
製剤の投与経路は、内臓脂肪特異的低減に対して最も効果的な経路を選択するのが望ましく、経口投与または、例えば静脈内、腹膜内もしくは皮下投与等の非経口投与を挙げることができるが、経口投与が望ましい。【００１４】
製剤の投与剤形としては、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、浸剤・煎剤、カプセル剤、シロップ剤、液剤、エリキシル剤、エキス剤、チンキ剤、流エキス剤等の経口剤、注射剤、点滴剤、クリーム剤、坐剤等の非経口剤を挙げることができるが、経口剤が望ましい。【００１５】
本発明の内臓脂肪特異的低減剤を製剤化する際には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、分散剤、懸濁化剤、乳化剤、希釈剤、緩衝剤、抗酸化剤、細菌抑制剤等の添加剤を用いることができる。【００１６】
本発明の製剤は、経口投与に適当な添加剤、例えばシロップ剤等の液体調製物である場合は、水、ショ糖、ソルビトール、果糖等の糖類、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール等のグリコール類、ごま油、オリーブ油、大豆油等の油類、p−ヒドロキシ安息香酸エステル類等の防腐剤、ストロベリーフレーバー、ペパーミント等のフレーバー類などの添加剤を添加して、製剤化することができる。【００１７】
また、経口投与に適当な、例えば錠剤、散剤、顆粒剤等は、乳糖、白糖、ブドウ糖、ショ糖、マンニトール、ソルビトール等の糖類、バレイショ、コムギ、トウモロコシ等の澱粉、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム等の無機物、カンゾウ末、ゲンチアナ末等の植物末等の賦形剤、澱粉、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、カルメロースナトリウム、カルメロースカルシウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、アルギン酸ナトリウム等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク、水素添加植物油、マクロゴール、シリコーン油等の滑沢剤、ポリビニールアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、カルメロース、ゼラチン、澱粉のり液等の結合剤、脂肪酸エステル等の界面活性剤、グリセリン等の可塑剤などの添加剤を添加して、製剤化することができる。
また、経口投与に適当な製剤には、一般に飲食品に用いられる添加剤、例えば甘味料、着色料、保存料、増粘安定剤、酸化防止剤、発色料、漂白料、防かび剤、ガムベース、苦味料、酵素、光沢剤、酸味料、調味料、乳化剤、強化剤、製造用剤、香料、香辛料抽出物等が添加されてもよい。
経口投与に適当な製剤は、ヒスチジンまたはその塩をそのまま、または例えば粉末食品、シート状食品、瓶詰め食品、缶詰食品、レトルト食品、カプセル食品、タブレット状食品、流動食品、ドリンク剤等の形態として、特に肥満者に対する内臓脂肪特異的低減用の健康食品、機能性食品、栄養補助食品、特定保健用食品等の飲食品として用いてもよい。【００１８】
非経口投与に適当な、例えば注射剤は、好ましくは受容者の血液と等張であるヒスチジンまたはその塩を含む滅菌水製剤からなる。例えば、注射剤の場合は、塩溶液、ブドウ糖溶液または塩溶液とブドウ糖溶液との混合物からなる担体等を用いて注射用の溶液を調製する。
また、これら非経口剤においても、経口剤で例示した希釈剤、防腐剤、フレーバー類、賦形剤、崩壊剤、潤沢剤、結合剤、界面活性剤、可塑剤などから選択される１種またはそれ以上の添加剤を添加してもよい。【００１９】
本発明の内臓脂肪特異的低減剤中のヒスチジンまたはその塩の濃度は、製剤の種類、当該製剤の投与により期待する効果等に応じて適宜選択されるが、ヒスチジンまたはその塩として、通常は０．１〜９０重量％、好ましくは０．５〜８０重量％、特に好ましくは１〜７０重量％である。【００２０】
本発明の製剤の投与量および投与回数は、投与形態、投与される者の年齢、体重等に応じて異なるが、成人に対し１日あたりヒスチジンまたはその塩（但し塩の場合はフリー体に換算して）として、通常は５０ｍｇ〜３０ｇ、好ましくは１００ｍｇ〜１０ｇ、特に好ましくは２００ｍｇ〜３ｇであり、１日に１回ないし数回に分けて投与する。投与期間は、特に限定されないが、通常は１日間〜１年間、好ましくは１週間〜３ケ月間である。【００２１】
本発明の内臓脂肪特異的低減剤は、通常肥満者に対して使用され、ここに肥満者としては、例えば体組成、体脂肪の分布等に応じて異なるが、通常は身長と体重により算出されるｂｏｄｙ  ｍａｓｓ  ｉｎｄｅｘ（ＢＭＩ）が２５以上の者あるいは体脂肪率が男性で２０％以上、女性で３０％以上の者、好ましくはウエスト周囲径が男性で８５ｃｍ以上、女性で９０ｃｍ以上の者が例示され、特に好ましくは臍レベルの腹部ＣＴ断面像で内臓脂肪面積が１００ｃｍ２以上の者が例示される。【００２２】
本発明の内臓脂肪特異的な低減とは、皮下脂肪を実質的に低減することなく、内臓脂肪を特異的に低減することを指す。また、本発明の内臓脂肪特異的低減剤は、内臓脂肪を特異的に増加させることに対する予防剤としても使用しえる。【００２３】
以下に、実施例、ヒスチジンの経口摂取による肥満者の内臓脂肪特異的低減効果を調べた試験例を示す。
【実施例】
【００２４】
試験例
日本肥満学会基準による内臓脂肪型肥満（腹部内臓脂肪面積１００ｃｍ２以上）に該当する４０〜６０歳までの健常男性２３名を、内臓脂肪面積がほぼ同一になるように対照群ｎ＝１１、ヒスチジン摂取群ｎ＝１２の２群に分け、ダブルブラインドで１２週間の摂取試験を行った。被験物質は毎日夕食後にハードカプセル形態で４錠ずつ（Ｌ−ヒスチジンを全１ｇ含有）、水と共に飲用させた。被験物質の配合を表１に示す。腹部内臓脂肪の低減効果は被験物質摂取１２週後の、臍部横断部のＣＴ断層撮影により評価した。得られた臍部ＣＴ像から内臓脂肪計測ＰＣソフトＦａｔ  Ｓｃａｎ  Ｖｅｒ．２（Ｎ２システム（株））によって内臓脂肪面積および皮下脂肪面積を求めて脂肪量とした。【００２５】
【表１】
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【００２６】
結果はそれぞれ対照群の脂肪面積の平均値を１００％として示した（図１）。ヒスチジン群では対照群に比べ、内臓脂肪面積が４．５％低い値を示した。一方で皮下脂肪面積は両群でほとんど差が認められなかった。このことからヒスチジンは、肥満者に対して、皮下脂肪は全く低減せず、内臓脂肪を特異的に低減する効果を有することが明らかとなった。【００２７】
比較試験例
健常ラットに対するヒスチジンの内臓脂肪低減効果が報告されているものの、皮下脂肪についての記載はない（非特許文献６参照）。また肥満モデル動物に対するヒスチジンの体脂肪低減効果を検討した報告はなく、健常と肥満では体内の代謝の状態が大きく異なることから、肥満モデル動物に対するヒスチジンの効果は非特許文献６記載の内容から予測できない。ヒスチジンの経口摂取による、肥満モデルマウスの体脂肪低減効果を調べた比較試験例を以下に示す。
１０週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊ雄性マウス（日本クレア（株））を２群（５匹／群）に分け、高脂肪高ショ糖飼料（対照群）、あるいは高脂肪高ショ糖飼料にヒスチジンを５％重量で添加した飼料（ヒスチジン群）を４週間自由摂取させた。各食餌の組成は表２に示す。４週間後に体重測定した後、１２時間絶食させ、マウスをエーテル麻酔下で開腹し、皮下脂肪および内臓脂肪（副睾丸周囲脂肪、後腹膜脂肪、腸管膜脂肪、腎周囲脂肪）を採取した。皮下脂肪および内臓脂肪の重量をそれぞれ測定し、分散分析による統計解析を行い（有意水準５％未満で有意差ありと判定した）、肥満モデルマウスの体脂肪低減効果を測定した。【００２８】
【表２】
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【００２９】
結果は、それぞれ対照群の脂肪重量の平均値を１００％として示した（図２）。ヒスチジン群では対照群に比べ、体脂肪重量が２８．８％有意に低い値を示した。このうち内臓脂肪重量と皮下脂肪重量はそれぞれ３５．２％、１９．９％有意に低い値を示していた。
このことからヒスチジンには、肥満モデルマウスに対してはヒトの肥満者とは異なり、皮下脂肪と内臓脂肪の両方を低減する効果を有することが明らかとなった。【００３０】
以下に、本発明の実施例を示す。
実施例１  ヒスチジンを含有する錠剤の製造
ヒスチジン１３６．２ｋｇ（製品名:Ｌ−ヒスチジン、協和発酵工業社製）、微結晶セルロース３６．０ｋｇ（製品名:アビセルＦＤ１０１、旭化成ケミカルズ社製）、ショ糖脂肪酸エステル６．６ｋｇ（製品名:ＤＫエステルＦ−２０Ｗ、第一工業製薬社製）、リン酸カルシウム１．２ｋｇ（製品名：リン酸三カルシウム、太平化学産業社製）およびβ−シクロデキストリン２０．０ｋｇ（製品:セルデックスＢ−１００、日本食品化工社製）を、コニカルブレンダー（ＣＢ−１２００ブレンダー、日本乾燥機株式会社製）を用いて混合した。得られた混合物をロータリー圧縮成形機（VIRGO524SS1AY、菊水製作所社製）を用いて、圧締成形圧１０ｋＮで圧縮成形して、直径８ｍｍ、２５０ｍｇの錠剤を製造した。【００３１】
実施例２  ヒスチジンを含有する腸溶カプセルの製造
実施例１と同じ配合で調製した混合物２０ｋｇと二酸化ケイ素０．２ｋｇとを混合撹拌して得られた混合物をカプセル充填機に投入し、ゼラチン製２号ハードカプセル20000錠に充填し、ハードカプセルを得た。得られたハードカプセルの表面を、ハイコーターＨＣＴ−４８型（フロイント産業社製）により、ツェイン溶液を用いてコーティングし、ヒスチジンを含む腸溶カプセル20000錠を製造した。【００３２】
実施例３  ヒスチジンを含有する腸溶錠剤の製造
実施例１で調製した錠剤の表面を、ハイコーターＨＣＴ−４８型（フロイント産業社製）により、シェラック溶液を用いてコーティングし、腸溶錠剤を製造した。【００３３】
実施例４  ヒスチジンを含有する飲料の製造
ヒスチジン１．２８ｋｇ（製品名：Ｌ−ヒスチジン、協和発酵工業社製）、エリスリトール３ｋｇ（日研化学社製）、クエン酸０．０５ｋｇ（協和ハイフーズ社製）、人工甘味料３ｇ、香料０．０６ｋｇを液温７０℃で水５０Ｌに撹拌溶解し、クエン酸でｐＨを３．３に調整後、プレート殺菌を用いて滅菌して瓶に充填後、パストライザー殺菌し、ヒスチジン飲料を製造した。【００３４】
本出願は、日本で出願された特願２００７−２７４１４６（出願日：２００７年１０月２２日）を基礎としており、その内容は、本明細書に全て包含されるものである。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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2009054360.tif 000007
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