(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
Ｒ１−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４−Ｒ２    （Ｉ）
のペプチドであって、アミノ酸ＡＡ１、ＡＡ２、およびＡＡ４のうちの少なくとも１つが非コードアミノ酸であることを特徴とし、ここで：
ＡＡ１は、−Ａｒｇ−、−Ｐｈｇ−、および−Ｎｌｅ−から成る群より選択されるか、または結合であり；
ＡＡ２は、−Ｐｈｇ−から成る群より選択され；
ＡＡ３は、−Ｔｒｐ−および−Ｖａｌ−から成る群より選択され；
ＡＡ４は、−Ｐｈｇ−および−Ｇｌｙ−から成る群より選択され；
Ｒ１は、ＨおよびＲ５−ＣＯから成る群より選択され；
Ｒ２は、−ＮＲ３Ｒ４および−ＯＲ３から成る群より選択され；
ここで、Ｒ３は、Ｈであり、Ｒ４は、Ｈおよび無置換Ｃ１−Ｃ２４アルキルから成る群より選択され；
ここで、Ｒ５は、Ｈおよび無置換Ｃ１−Ｃ２４アルキルから成る群より選択され；
ただし、ＡＡ１が結合である場合、ＡＡ２は−Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は−Ｔｒｐ−であり、ＡＡ４は−Ｐｈｇ−である、
ペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから成る群より選択され、ＡＡ１は、−Ｌ‐Ａｒｇ−、または−Ｌ‐Ｎｌｅ−、または結合であり、ＡＡ２は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｌ‐Ｔｒｐ−であり、ＡＡ４は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、およびＲ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３は、Ｈであり、Ｒ４は、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、およびヘキサデシルから選択されることを特徴とする、請求項１に記載のペプチド。
【請求項３】
Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから成る群より選択され、ＡＡ１は、−Ｌ‐Ａｒｇ−であり、ＡＡ２は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｌ‐Ｖａｌ−であり、ＡＡ４は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−、または−Ｌ‐Ｇｌｙ−であり、およびＲ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３は、Ｈであり、Ｒ４は、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、およびヘキサデシルから選択されることを特徴とする、請求項１に記載のペプチド。
【請求項４】
Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから成る群より選択され、ＡＡ１は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ２は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｌ‐Ｔｒｐ−であり、ＡＡ４は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、およびＲ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３は、Ｈであり、Ｒ４は、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、およびヘキサデシルから選択されることを特徴とする、請求項１に記載のペプチド。
【請求項５】
皮膚、粘膜、および／または頭皮の治療および／またはケアのための、請求項１から４のいずれか一項に記載の一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩。
【請求項６】
エラスターゼ活性に起因する、皮膚、粘膜、および／または頭皮の状態、障害、および／または疾患の治療、予防、および／またはケアのための、請求項５に記載のペプチド。
【請求項７】
一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩であって、コラーゲン合成の刺激のための、請求項１から４のいずれか一項に記載のペプチド。
【請求項８】
前記治療、予防、および／またはケアは、老化および／または光老化の徴候を低減、遅延、および／もしくは予防し、ならびに／または皮膚弾性を高め、ならびに／または顔のシワを低減または除去するものである、請求項５に記載のペプチド。
【請求項９】
美容的または薬理学的効果量の、請求項１から４のいずれか一項に記載の一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つ、ならびに賦形剤または美容的もしくは薬理学的に許容される補助剤の少なくとも１つを含有する、美容または医薬組成物。
【請求項１０】
前記一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩は、リポソーム、混合リポソーム、オレオソーム、ニオソーム、ミリカプセル、マイクロカプセル、ナノカプセル、スポンジ、シクロデキストリン、小胞、ミセル、界面活性剤の混合ミセル、界面活性剤‐リン脂質混合ミセル、ミリスフェア、マイクロスフェア、ナノスフェア、リポスフェア、マイクロエマルジョン、ナノエマルジョン、小粒子、ミリ粒子、マイクロ粒子、ナノ粒子、および固体脂質ナノ粒子から成る群より選択される、美容的もしくは薬理学的に許容される送達システムまたは徐放システムに組み込まれるか、または、タルク、ベントナイト、シリカ、デンプン、もしくはマルトデキストリンから成る群より選択される美容的もしくは薬理学的に許容される固体有機ポリマーまたは固体無機基材に吸着されることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物は、クリーム、多相エマルジョン、無水組成物、水性分散液、オイル、ミルク、バルサム、フォーム、ローション、ジェル、クリームジェル、水性アルコール溶液、水性グリコール溶液（ｈｙｄｒｏｇｌｙｃｏｌｉｃ  ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）、ヒドロゲル、リニメント、血清（ｓｅｒａ）、石鹸、シャンプー、コンディショナー、血清（ｓｅｒｕｍｓ）、軟膏、ムース、ポマード、粉末、バー型（ｂａｒｓ）、ペンシル型（ｐｅｎｃｉｌｓ）、スプレー、エアロゾル、カプセル、ゼラチンカプセル、錠剤、糖衣錠、顆粒、チューイングガム、溶液、懸濁液、エマルジョン、シロップ、多糖フィルム、ゼリー、およびゼラチンから成る群より選択される製剤であることを特徴とする、請求項９または１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記組成物は、コンシーラー、メークアップファンデーション、メークアップリムーバルローション、メークアップリムーバルミルク、アイシャドー、口紅、リップグロス、リッププロテクター、およびパウダーから成る群より選択される製品であることを特徴とする、請求項９から１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩は、布、不織布、または医療用デバイスに組み込まれることを特徴とする、請求項９から１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物は、エラスターゼ阻害剤、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、メラニン合成の刺激または阻害剤、美白または脱色剤、着色促進剤（ｐｒｏｐｉｇｍｅｎｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）、セルフタンニング剤、老化防止剤、ＮＯ‐シンターゼの阻害剤、５α‐レダクターゼの阻害剤、リジル‐および／またはプロリルヒドロキシラーゼの阻害剤、酸化防止剤、遊離ラジカル捕捉剤および／または抗大気汚染剤、反応性カルボニル種捕捉剤、抗糖化剤、抗ヒスタミン剤、制吐剤、抗ウィルス剤、抗寄生虫剤、乳化剤、皮膚軟化剤、有機溶媒、液体噴霧剤、皮膚調整剤、湿潤剤、水分を保持する物質、アルファヒドロキシ酸、ベータヒドロキシ酸、保湿剤、表皮加水分解酵素、ビタミン、顔料または着色剤、色素、ゲル化ポリマー、増粘剤、界面活性剤、軟化剤、シワ防止剤、目の下のクマを低減または治療できる剤、剥離剤、抗菌剤、抗真菌剤、静真菌剤、殺菌剤、静菌剤、真皮もしくは表皮の高分子合成を刺激する剤および／またはそれらの分解を阻害もしくは予防する能力を持つ剤、コラーゲン合成を刺激する剤、エラスチン合成を刺激する剤、デコリン合成を刺激する剤、ラミニン合成を刺激する剤、デフェンシン合成を刺激する剤、シャペロン合成を刺激する剤、アクアポリン合成を刺激する剤、ヒアルロン酸合成を刺激する剤、脂質および角質層成分の合成を刺激する剤、セラミドの合成を刺激する剤、コラーゲン分解を阻害する剤、エラスチン分解を阻害する剤、線維芽細胞増殖を刺激する剤、ケラチノサイト増殖を刺激する剤、脂肪細胞増殖を刺激する剤、メラノサイト増殖を刺激する剤、ケラチノサイト分化を刺激する剤、脂肪細胞分化を刺激する剤、アセチルコリンエステラーゼを阻害する剤、皮膚弛緩剤、グリコサミノグリカン合成を刺激する剤、抗過角化症剤、面皰分解剤（ｃｏｍｅｄｏｌｙｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ）、抗乾癬剤、ＤＮＡ修復剤、ＤＮＡ保護剤、抗掻痒剤、敏感肌の治療および／またはケアのための剤、固化剤（ｆｉｒｍｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）、抗ストレッチマーク剤、結合剤、皮脂産生を制御する剤、脂肪分解剤または脂肪分解を刺激する剤、抗セルライト剤、抗発汗剤、治癒を刺激する剤、治癒共補助剤（ｃｏａｄｊｕｖａｎｔ  ｈｅａｌｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）、再上皮化を刺激する剤、再上皮化共補助剤（ｃｏａｄｊｕｖａｎｔ  ｒｅｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｉｚａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔｓ）、サイトカイン成長因子、沈静剤、抗炎症剤、麻酔剤、毛細血管循環および／または微小循環に作用する剤、血管新生を刺激する剤、血管透過性を阻害する剤、静脈強壮剤（ｖｅｎｏｔｏｎｉｃ  ａｇｅｎｔｓ）、細胞代謝に作用する剤、真皮‐表皮接合を改善する剤、発毛を誘発する剤、発毛阻害もしくは抑制剤、保存料、芳香物質、キレート剤、植物抽出物、エッセンシャルオイル、海産抽出物、生物発酵プロセスから得られる剤、無機塩、細胞抽出物、ならびに日焼け止め、紫外線Ａおよび／もしくはＢに対して作用する有機または無機の光防護剤、またはこれらの混合物から成る群より選択される、美容的もしくは薬理学的効果量の少なくとも１つの補助剤をさらに含むことを特徴とする、請求項９から１３のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚、粘膜、および／もしくは頭皮におけるエラスターゼ活性の阻害、ならびに／またはコラーゲン合成の刺激を行う能力を有するペプチド、ならびに、これらのペプチドを含有する美容または医薬組成物、ならびに、皮膚、粘膜、および／もしくは頭皮の治療ならびに／またはケアにおけるこれらの使用、好ましくは、エラスターゼ活性に起因する、および／またはコラーゲン合成の刺激が有益である皮膚、粘膜、および／または頭皮の状態、障害、および／または疾患の治療、予防、および／またはケアのためのこれらの使用、に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は、真皮および表皮の２層から成る。表皮は、最外部層であり、ケラチノサイト、メラノサイト、およびランゲルハンス細胞から構成される。表皮における主たる細胞集団は、ケラチノサイトから成り、これは、常に再生される角質化層を形成する。その機能は、物理的、化学的、または病原性であれ、外部の剤からの保護である。真皮は、これよりも内部に位置し、基底膜を介して表皮と接着している。これは、線維芽細胞、脂肪細胞、およびマクロファージから成り、血管によって水分供給がなされ、触覚および温度の感覚を伝達する役割を担う多くの神経終末を有する。毛包は、汗腺、皮脂腺、およびアポクリン腺と同様に真皮内に存在し、その機能は、皮膚の一体性および弾性を維持することである。このような特性は、線維芽細胞によって分泌されるタンパク質から構成されるその細胞外基質によって与えられる。
【０００３】
細胞外基質（ＥＣＭ）のタンパク質は、グリコサミノグリカンおよび線維状タンパク質という２つのグループに分類される。グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）は、アミノ糖二糖類の重合から得られる非分岐鎖である。その化学定特性および負電荷の数が多いことにより、ＧＡＧは、大量の水を引き付ける傾向にある嵩高い構造を形成し、これにより、圧縮に対するＥＣＭの耐性が付与される。線維状タンパク質は、構造的および接着性の機能を有し、主としてエラスチンおよびコラーゲンの二種類であり、これらは、引っ張り、圧縮、伸び、およびねじれに対して抵抗する能力などの組織の機械的特性を担っている。
【０００４】
ＥＣＭの弾性および反発性は、弾性線維のネットワークに起因する。構造的には、弾性線維は、直径がおよそ１０ｎｍであるミクロフィブリルの鞘に覆われたエラスチンのコアから構成される。ミクロフィブリルは、フィブリリンおよびミクロフィブリル関連糖タンパク質（ＭＡＧＰ）から構成される。弾性線維の構築は逐次的であり、まずミクロフィブリルが出現して骨格を形成し、その上にエラスチンが堆積する。エラスチンは、およそ７５０のアミノ酸残基から構成される疎水性の高いタンパク質であり、水溶性前駆体であるトロポエラスチンに由来し、これは、線維芽細胞によって細胞外空間に分泌される。エラスチン線維は、線維芽細胞の細胞膜近辺におけるトロポエラスチンモノマーの集合および架橋によってもたらされる。
【０００５】
トロポエラスチン分子は、分子量が約７０ｋＤａである可溶性の形態で合成され、その配列中に、疎水性ドメインが架橋ドメインと交互に存在する（非特許文献１）。疎水性ドメインは、プロリン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、およびグリシンが多く、中でも特にバリンおよびグリシンが多い、２から９のアミノ酸によるペプチドの繰り返しである（非特許文献２）。疎水性ドメイン間の相互作用は、集合において重要であり、分子の弾性にとって不可欠である（非特許文献３）。トロポエラスチンの架橋ドメインは、プロリンリッチ領域またはポリアラニン領域内にリジン残基を有する。リジルオキシダーゼの作用によるデスモシンの共有結合架橋の形成が、重合した不溶性産物を安定化させ（非特許文献４）、ＬＯＸおよびＬＯＸＬと称される２つのオキシダーゼリジルタンパク質のみが、不溶性エラスチンを架橋させる能力を有する（非特許文献５）。加えて、トロポエラスチンの翻訳された配列は、種の間で高く保存されている負に帯電した親水性Ｃ末端ドメインを有する。この分子に影響を与える主たる翻訳後修飾は、プロリン残基のヒドロキシル化である。
【０００６】
エラストジェネシス（ｅｌａｓｔｏｇｅｎｅｓｉｓ）は、弾性線維中において機能性エラスチンの発生を引き起こすプロセスである。これは、細胞内において、トロポエラスチン分子の合成から開始し、これに６７ｋＤａのガラクトースレクチンが付加し、これがシャペロンとして作用してトロポエラスチン分子の分子内凝集を阻止する。この複合体は、細胞外空間へ分泌され、ここで、ガラクトースレクチンは、ミクロフィブリルのガラクト糖（ｇａｌａｃｔｏｓｕｇａｒ）と相互作用を起こしてそのトロポエラスチンに対する親和性を低下し、局所的に放出される。６７ｋＤａのガラクトースレクチンは、再利用され、その機能を回復することができ、一方、トロポエラスチンは、ミクロフィブリル関連糖タンパク質（ＭＡＧＰ）のＮ末端ドメインとトロポエラスチンのＣ末端ドメインとの相互作用を介して、ミクロフィブリル成分によって形成された骨格内に堆積する。整列されると、トロポエラスチンのリジン残基の大部分は、Ｃｕ２＋依存性リジルオキシダーゼの作用によって脱アミノ化され、酸化されてアルデヒドとなる。前記の形成されたアルデヒドのそれ自体との、または未修飾リジンとの反応全体を通しての架橋が発生し、その結果、トロポエラスチン鎖は不溶性となり、エラスチンネットワークが成長する。トロポエラスチンのミクロフィブリルへの堆積を調節する可能性があると考えられるエミリン（ｅｍｉｌｉｎｅ）およびフィブリンファミリーに属する分子は、細胞膜‐弾性線維およびエラスチン‐ミクロフィブリル界面に見られる。現在のところ、ミクロフィブリルの構築にフィブリリン以外の分子が不可欠であるとする証拠は存在しない（非特許文献６）。成熟エラスチンは、架橋によって共有結合で連結されたトロポエラスチンの不溶性ポリマーであり、これは、二、三、または四官能であり得る。複雑性は時間と共に増加すると考えられている。疎水性断片は、移動性が高く、系のエントロピーに大きく寄与し、インビボでポリマーを水和する水の量もまた、系のエントロピーに寄与する（非特許文献２）。
【０００７】
弾性線維は、皮膚の弾性を維持するために重要であるが、肺または大血管壁などのその他の組織および器官でも重要である（非特許文献７）。弾性線維の形成における、それを構成する種々のタンパク質をコードする遺伝子の突然変異などの欠陥は、種々の病態をもたらす。従って、フィブリリン‐１遺伝子における突然変異は、マルファン症候群（骨格、眼、および心血管の症状を伴う）の原因となり；フィブリリン‐２遺伝子における突然変異は、眼および骨格の症状に加えて先天性拘縮性クモ指症を引き起こし、ならびにエラスチン遺伝子における突然変異は、ウィリアムズ症候群、大動脈弁上狭窄、および皮膚弛緩症の原因となる（非特許文献８）。
【０００８】
弾性線維は、ヒトの一生を通して柔軟性を維持するという目的を有する。しかし、それを分解し得る酵素が存在して、皮膚の弾力性の喪失をもたらし、これは、結合組織の老化に大きく寄与し、日光への露出による皮膚の変性において重要な役割を担う因子である（非特許文献９）。
【０００９】
エラスターゼは、セリンプロテアーゼのファミリーに属する酵素であり、表面に結合した炭水化物を有する。その生物学的機能は、エラスチンを分解して、結合組織を通しての好中球遊走を可能とすることであり、それによって、感染の場合は、病原性微生物を破壊することができる。ヒトの場合、膵エラスターゼ遺伝子および好中球エラスターゼ遺伝子というエラスターゼをコードする２つの遺伝子が存在し、エラスターゼは、好中球、マクロファージ、線維芽細胞、および膵臓細胞などの細胞によって産生、分泌される。微生物中およびいくつかのヘビの毒液中には、他の形態のエラスターゼが見られる。エラスターゼの作用は、皮膚の弾性、健康状態、および質の低下に関与し得る。老化および光老化に起因するシワおよびストレッチマーク、類天疱瘡、皮膚炎、ならびに乾癬などの付随する皮膚の症状の直接または間接的な原因がエラスターゼ活性であるいくつかの障害が報告されている。エラスターゼ活性はまた、ケロイドおよび肥厚性瘢痕などの創傷治癒障害、ならびにセルライトの場合のオレンジピールスキンなどの弾性の欠如に起因する皮膚の変質とも関連する。弾性線維は、その低いリモデリング速度のために、ある程度の時間の後に外傷部位に現れるものであり、すなわち、新しい瘢痕には存在せず、成熟瘢痕では、その配置は異常である。
【００１０】
コラーゲンは、細胞外基質の線維状タンパク質の主たるファミリーであり、哺乳類における全タンパク質質量の２５％を構成する。これは、２０を超えるファミリーに分類されており、それらすべてが種々の組織における特定の機能を満足する個々の特徴を有する。
【００１１】
コラーゲンの主たる特徴は、グリシンおよびプロリンの多い３つのポリペプチド鎖の会合によって形成されたらせん構造である。そのアミノ酸組成を変化させると、その機械的特性の機能不全および喪失が引き起こされる（非特許文献１０）。これらのポリペプチド鎖は、次々に会合して、成熟組織中にて直径が１０〜３００ｎｍ、長さが数百マイクロメートルであるフィブリルを形成する。このようなフィブリルは、多くの場合、ケーブル束（ｃａｂｌｅ  ｂｕｎｃｈｉｎｇ）などの主構造に付加され、これは、電子顕微鏡を通して、直径が数マイクロメートルのコラーゲン線維として観察することができる。このプロセスは、原線維形成として知られる（非特許文献１１）。すべてのコラーゲンがフィブリルを形成する能力を有しているわけではなく；線維状コラーゲンとして知られるＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、Ｖ、およびＸＩ型コラーゲンのみである。
【００１２】
成人の真皮は、基本的に、Ｉ、ＩＩＩ、およびＶ型の線維状コラーゲンによって形成される。Ｉ型コラーゲンは、真皮の全コラーゲンの８０〜９０％を占める。一般的に、Ｉ型コラーゲン線維は、直径が大きいという特徴を有し、このことは、より大きい機械的負荷に耐えるその能力と相関している。ＩＩＩ型コラーゲンは、組織の伸張性に介在し、そして老化と共にＩ型コラーゲン分子に置き換わるものであり、これは、成熟皮膚が若い皮膚よりも伸張性が低いことの一因であるプロセスである。Ｖ型コラーゲンは、ＩおよびＩＩＩ型と会合してフィブリルの直径を制御している（非特許文献１２、非特許文献１０）。
【００１３】
コラーゲン線維は、常に再生プロセスを受けているが、そのような再生は年齢と共に低下し、真皮の薄化を引き起こす。加えて、コラーゲン線維の組織化が耐性の強いコラーゲンネットワークを提供するものの、コラーゲン線維は、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）として知られる特定の酵素に対して感受性を有する。ＭＭＰは、タンパク質分解酵素（エンドプロテアーゼ）のファミリーに属し、その活性中心に３つのシステイン残基と１つのメチオニン残基とに配位した亜鉛原子を持ち、全体として、細胞外基質および基底層からの高分子成分を中性ｐＨへと分解することができる（コラーゲン、エラスチンなど）。
【００１４】
真皮の堅固性は、あらゆる方向へ互いに対して充填されたコラーゲン線維の重なりに主として起因する。コラーゲン線維は、皮膚および／または粘膜の弾性ならびに緊張性に寄与する。しかし、真皮の薄化は、時間的な老化だけでなく、例えばコルチコイドホルモンの過分泌、特定の疾患（マルファン症候群、エーラース‐ダンロス症候群）、またはビタミン欠乏症（壊血病）などの病理学的な原因にも起因する。また、ＵＶ放射線、喫煙、またはレチノイン酸および誘導体、グルココルチコイド、もしくはビタミンＤおよび誘導体などの特定の治療、などの外的因子も、皮膚、粘膜、および／または頭皮、ならびにそのコラーゲンレベルに対して影響を与えることも認められている。コラーゲン線維の分解の結果は、皮膚の緩みおよびシワとして、特に顔、耳、首、頭皮、腕、および手など日光に曝露される皮膚の領域に現れ、これは、滑らかで張りのある外観の皮膚が好まれることから、人々が常に抑制しようと努力してきたところである。
【００１５】
ＵＶＡおよび／またはＵＶＢ放射線に対する長期にわたる曝露（反復的な照射）、または高い曝露（強い照射）に付随する皮膚の損傷は、研究されてきており；特に、より高エネルギー波長のＵＶＢ放射線（２９０〜３００ｎｍ；全ＵＶ放射線の５％）は、特に表皮細胞（ケラチノサイト）にそのＤＮＡに作用することで影響を与えること、ならびにＵＶＡ放射線（３２０〜４００ｎｍ；全ＵＶ放射線の９５％）は、より強い透過性の性質を有し、線維芽細胞などの真皮細胞にも作用し、遊離ラジカルを間接的に発生させる作用を持つことが知られている。
【００１６】
さらに、ＵＶ放射線、特にＵＶＡおよび／またはＵＶＢ放射線への長期間にわたる曝露は、コラーゲンを破壊するＭＭＰ、特にマトリックスメタロエラスターゼＩ型（ＭＭＰ‐１）の発現を刺激する（非特許文献１３、非特許文献１４、非特許文献１５）。これは、光線誘発皮膚老化または光老化の構成成分の１つである（非特許文献１６）。これとは別に、ＭＭＰ‐１、ＭＭＰ‐２、およびＭＭＰ‐９の活性が年齢と共に増加すること、ならびにこの増加は、細胞成長の鈍化と合わせて、時間的な皮膚の老化に寄与することも知られている（特許文献１）。同様に、喫煙者の皮膚もまた、ＭＭＰが過剰発現される早期老化の状態を有している（非特許文献１７）。
【００１７】
弾性線維は、時間と共に架橋を増加させて、全体的な弾性を低下させ、これと平行して、エラスチンの進行的な断片化が、真皮密度の低下を引き起こす。このような変化は、皮膚の弾性の喪失、および老化の特徴の出現を含む。さらに、ＵＶ光によって誘発される細胞外基質の損傷は、シワの出現、皮膚の反発性の喪失、および光線性弾力線維症を引き起こす。弾力線維症は、肉眼的には、曝露された皮膚上の多くの黄味がかった小結節として現れる。組織学的レベルでは、弾力線維症は、乳頭真皮内における、エラスチン、ミクロフィブリルタンパク質、フィブロネクチン、ならびにＩ型およびＩＩＩ型コラーゲンから構成される好塩基性アモルファス物質の蓄積を意味する。
【００１８】
老化の最も明らかな徴候はシワの出現であり、これは、皮膚の弾力性の喪失に一部起因する。分子レベルでは、若い皮膚における弾性線維は直線的な外観であり、弾性を示唆している。屈曲した、または曲がった線維は、弾性の欠如を示唆しており、老化と関連している（非特許文献１８）。トランス‐レチノイン酸などの薬剤またはＣＯ２レーザーによって誘発される皮膚のシワの修復は、弾性線維の直線性の回復を含む（非特許文献１９、非特許文献２０）。弾性線維の直線性の喪失は、周囲の線維芽細胞によるエラスターゼの分泌に起因する場合があり、および内在性のエラスターゼインヒビターの非存在が伴っている場合がある。さらに、紫外線Ｂ（ＵＶＢ）放射線により、線維芽細胞が弾性線維の張力を維持しなくなることが引き起こされる場合があり、これによって、直線性が喪失し、その結果、柔軟性が失われる。皮膚エラスターゼの特異的な阻害は、シワを阻止し、皮膚の弾性の喪失を遅延させ、弾性線維の三次元構造の分解を減速することが示されている（非特許文献２１）。従って、局所投与によるエラスターゼ活性の阻害は、シワ、シミ、および表情ジワなどの老化および光老化の症状を低減、防止、または遅延させることができる。
【００１９】
さらに、閉経期の間における真皮に関連する主たる変化は、コラーゲンレベルおよび真皮厚さの減少である。閉経期の女性において、このことは、皮膚および／または粘膜の薄化をもたらす。従って、女性は、「乾燥皮膚」または張ったように感じられる皮膚の感覚を経験し、表面のシワおよび小ジワのレベルの増加が見られる。このような皮膚は、荒れた肌触りに見える。最後に、このような皮膚は、柔軟性が低い。女性は、閉経期の後、コラーゲンのレベルの２．１％を毎年喪失しており、閉経期後の最初の５年間に、３０％が喪失されることが示されている（非特許文献２２）。
【００２０】
プロテアーゼは、コラーゲンおよび／またはエラスチンが分解、破壊される種々の皮膚、粘膜、および／または頭皮の状態、ならびに障害において重要な役割を担っている（非特許文献２３）。結合組織細胞におけるプロテアーゼの活性に起因してコラーゲンが分解される報告されている種々の病態の中で、発明者らが見出したのは、慢性潰瘍（非特許文献２４）、乾癬（非特許文献２５、非特許文献２６）、歯肉炎および歯周炎などの口腔病態（非特許文献２７）、皮膚癌（非特許文献２８、非特許文献２９）、ならびに腫瘍の浸潤および転移（非特許文献３０）である。
【００２１】
プロテアーゼはまた、発達の過程での組織の形態形成、組織の修復、および血管新生を含む細胞外基質のタンパク質分解性リモデリングなど、細胞外基質が分解または再構築される種々の生理学的状態においても重要な役割を担っている（非特許文献２３）。特定の方法で、ＭＭＰは、結合組織リモデリングにおいて極めて重要な役割を有しており（非特許文献３１）、例えば、ＭＭＰによるコラーゲン分解により、皮膚は、シワがあり、たるんだように見えてしまう。
【００２２】
ＭＭＰの過剰発現または結合組織におけるＭＭＰ活性の上昇と関連する皮膚および／もしくは頭皮の別の病態または障害は、挫瘡である（非特許文献３２）。挫瘡の患部皮膚は、高いレベルのＭＭＰ‐１を有することが報告されている。
【００２３】
エラスターゼを分泌する細胞型は線維芽細胞だけではなく、好中球によって産生されるエラスターゼも、皮膚の障害またはさらには病態の発生に寄与している。好中球エラスターゼまたはＨＬＥ（ヒト白血球エラスターゼ）は、エラスチン、ＩＩＩおよびＩＶ型コラーゲン、ならびにプロテオグリカンなどの細胞外基質の種々の構成成分を分解する能力を有することが知られている炎症誘発剤である。好中球エラスターゼの活性は、皮膚の白血球浸潤を特徴とする病態である乾癬、アトピー性皮膚炎、およびアレルギー性接触皮膚炎を有する患者の疾患皮膚表面において高められている（非特許文献３３）。さらに、皮膚の白血球浸潤は、ＵＶ光によって高められる（非特許文献３４）。さらに、エラスターゼによるエラスチン分解は、老化に付随する慢性炎症状態に寄与するサイトカインとして作用するエラスチン断片を作り出す（非特許文献３５）。
【００２４】
乾癬は、原因が分かっていない慢性の皮膚炎症である。その出現は、免疫系の要素によって媒介される炎症反応と関連している。この病態の最も典型的な特徴は、リンパ球浸潤を伴う過形成性の角質化した病変部の出現である。このような病変部は、増殖活動がより大きい端部から拡大する。エラスターゼがケラチノサイトの増殖を誘発することが示されている（非特許文献３６）。これらのデータは、エラスターゼ酵素活性を阻害する化合物を含有する経皮製剤が、エラスターゼレベルの上昇と共に炎症および白血球浸潤を伴って発生する患部皮膚の症状を軽減するという予測が適切であることを示唆しており、例えば、これらに限定されないが、乾癬、アトピー性皮膚炎、およびアレルギー性接触皮膚炎の治療である。接触皮膚炎およびアトピー性皮膚炎を含む皮膚炎を有する患者はまた、いくつかのＭＭＰのレベルも高い（非特許文献３７、非特許文献３８、非特許文献２４）。「皮膚炎」は、炎症を引き起こす皮膚の状態、障害、または病態として定義され、接触皮膚炎、アトピー性皮膚炎、敏感肌、および湿疹を含む。
【００２５】
同様に、酒さもまた、ＭＭＰが関連する皮膚および／もしくは頭皮の病態または障害である。酒さは、血管新生および炎症の増大を特徴とする。血管新生とは、新しい血管が形成されるプロセスを意味し、これは、酒さのような良性の状態および癌のような悪性のプロセスを含む。組織の細胞外基質に存在する基質分解酵素は、新しい血管を基質へ貫通させるため、これによって血管新生が促進される。ＭＭＰは、このようなプロセスに関与する種類の酵素を代表するものである（非特許文献３９）。
【００２６】
別の炎症性皮膚疾患は水疱性類天疱瘡であり、これは水泡を引き起こす。水疱性類天疱瘡の皮膚病変の発症には好中球が関与し、その作用はエラスターゼによって媒介されるということが示されており（非特許文献４０）、従って、エラスターゼ阻害剤の局所投与は、この不具合による皮膚の症状を軽減するための妥当であり得る治療法である。
【００２７】
エラスターゼの阻害は、現行技術で述べられる皮膚へのその他の効果を有する。例えば特許文献２には、脱毛などの用途のために毛髪の成長を抑制する目的で、美容製剤の補助剤としてエラスターゼ阻害剤を用いることが記載されている。
【００２８】
また、ＭＭＰは、毛胞周囲基質の分解に、従って脱毛に関与することも知られている。具体的には、サイトカインよび上皮成長因子が、毛根の下部上皮区画内（ｌｏｗｅｒ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ）にてＭＭＰ‐９の産生を刺激し、このようなメカニズムによって、脱毛症で見られる毛細管毛包の退縮が制御される（非特許文献４１）。従って、脱毛プロセスの過程での過剰発現されたＭＭＰの阻害は、脱毛の遅延、およびさらには防止に効果的であり得る（特許文献３）。
【００２９】
さらに、ＭＭＰ活性は、コラーゲンを含有する組織における瘢痕形成にも関連する。「瘢痕形成」とは、過去の傷害に起因する、または皮膚上のコラーゲンを含有する組織の治癒プロセスに起因する、形態的に異常なコラーゲン構造の形成として定義される。
【００３０】
治癒プロセスは、３つの段階：（１）炎症、（２）組織形成、および（３）組織リモデリング、から成る。治癒プロセスに必要である段階は、細胞外基質の分解であり：創傷領域の細胞を増殖させてそれを再生させるために、細胞外基質が分解されることが必要である。このような分解はＭＭＰを通して行われる。治癒プロセスの段階は、異なるＭＭＰ間のバランスにより制御され、過剰なＭＭＰ活性は慢性潰瘍を引き起こすことが報告されている。例えば、ＭＭＰ‐８の過剰発現は、脚における慢性潰瘍の病変形性を伴う場合がある。同様に、糖尿病性潰瘍は、長期間にわたる炎症、コラーゲン合成の減少、および高いＭＭＰレベルを特徴とする。
【００３１】
瘢痕には様々な原因（事故、外科手術、皮膚疾患、熱傷、挫瘡、感染、および事故全般）があるが、全ての瘢痕が同じであるわけではない。様々な種類の瘢痕は、以下のように分類することができる。
‐  平坦で蒼白色の瘢痕：身体の自然治癒プロセスの結果として形成される。
‐  沈み込んだ瘢痕：筋肉などのより深い構造と結合した皮膚によって形成されるか、または内部組織における脂肪の喪失によって形成される。このような瘢痕は、皮膚内へ陥凹しており、通常は損傷の結果である。
‐  肥厚性瘢痕：治癒プロセスの過程で、身体が過剰のコラーゲンを産生する場合に見られる。このような瘢痕は皮膚表面にわたって盛り上がり、不規則に組織化されたコラーゲンを含有する。
‐  ケロイド瘢痕：治癒プロセスの過程において、不均衡なコラーゲン産生の結果として形成される。このような瘢痕は、皮膚表面にわたって盛り上がるだけではなく、元の創傷の境界を越えて拡大し、いつまでも成長し続ける場合がある。
‐  挫瘡瘢痕：挫瘡患部の皮膚に形成される。この瘢痕は沈み込むかまたはケロイドになる場合がある。水痘に罹患したことのある人が同様の瘢痕を持つ場合がある。
‐  伸展した瘢痕：治癒プロセスの過程において、治癒する創傷の周囲の皮膚が張力下に置かれる場合に発生する。この瘢痕は、最初は正常に見えるが、数週間または数ヶ月間の期間にわたって幅広く細くなり得る。これは創傷が関節に近く、動作の間に伸展されることによって起こり得るか、または一般的な健康不良もしくは栄養不良によって治癒が不十分であることに起因し得る。
‐  ストレッチマーク：例えば妊娠中または青年期の急成長の過程で、皮膚が急速に伸展される際に発生する。
【００３２】
従って、皮膚瘢痕の低減は、線維症プロセスの過程における治癒のような病理学的観点、および、挫傷に起因する瘢痕またはストレッチマークの外観を緩和させる場合のような美容的観点の両方から望ましいものである。瘢痕形成に関して、エラスターゼの阻害による考え得る有益性についても報告されている。従って、尋常性挫傷に起因する瘢痕周囲領域では、エラスチンの分解が起こっている（非特許文献４２）。従って、エラスターゼ阻害剤は、局所投与用製剤の補助剤として、挫傷の患部皮膚における瘢痕の発生を防止するのに効果的であろう。さらに、特許文献４は、エラスターゼ阻害剤の投与による、眼外傷の場合の角膜上の瘢痕形成の防止について記載している。
【００３３】
脂肪細胞の増殖および分化の過程で、ＭＭＰが過剰発現されることも報告されている（非特許文献４３）。従って、セルライトの患部皮膚のコラーゲンネットワークは破壊され、これが、オレンジピールスキンの外観を引き起こす原因の１つとなっている。従って、コラーゲン合成を刺激することができる化合物を皮膚に補給することは、そのようなコラーゲンの破壊の低減を補助するものであり、効果的な抗セルライト治療となる。エラスターゼの阻害はまた、コラーゲン分解の影響を軽減する補助となるものであり、例えば、老化に起因するシミの発生を防止し、およびセルライトの特徴であるオレンジピールスキンなどの皮膚の凹凸を改善する。
【００３４】
ＭＭＰ活性はまた、リンパ管および血管を取り囲む細胞外基質の組織破壊の原因でもある。血管周囲の基質の劣化は受動的血管拡張を起こし、これは、毛細血管の可視性もしくは毛細血管拡張症、またはクーペロシス（ｃｏｕｐｅｒｏｓｉｓ）を引き起こす。これに加えて、この微小毛細血管の受動的拡張は、目の下のクマまたは眼窩周囲領域のクマを引き起こし得る局所的な血管破裂の原因となり得る。さらに、ＭＭＰは静脈壁の機械的特性に影響を及ぼし、それによって静脈が脆弱となり、その結果として静脈瘤の発生が誘発され得る。
【００３５】
ＭＭＰと組織基質の分解との関連とは別に、ＭＭＰは、関節炎（関節リウマチ、変形性関節症など）、骨疾患（骨粗鬆症など）、異所性血管新生、多発性硬化症、腫瘍転移、および組織潰瘍（角膜、胃、表皮など）などの、結合組織または基底膜基質の代謝異常を伴って発生する種々の病態にも関与することが示唆されている（特許文献５）。従ってＭＭＰ阻害剤は、組織基質の代謝異常によって引き起こされるこれらの病態の治療および予防に有効である可能性がある。
【００３６】
皮膚、粘膜、および／または頭皮におけるコラーゲンおよびエラスチン線維の存在の重要性、ならびにその存在を維持し、またはさらには強化することの重要性は、従って、理解することができる。従って、皮膚におけるコラーゲンおよび／またはエラスチンのレベルならびに一体性を維持し、皮膚を平滑で張りのある外観に維持し、老化および／または光老化の徴候を低減、遅延、および／または予防することにその効果が指向される製品が利用可能であることは重要である。皮膚のエラスチンおよび／もしくはコラーゲン含有量を高い状態で維持すること、または皮膚のエラスチンおよび／もしくはコラーゲン含有量を増加させることは、種々の異なる方法で達成することができる。一方では、マトリックスプロテアーゼを阻害する物質を用いることができる。しかし、他方で、そのようなプロテアーゼの誘発によるコラーゲンおよび／またはエラスチン分解の有害な影響を、新たな合成によって打ち消すことを目的として、コラーゲンおよび／またはエラスチンの合成を増加させる物質を使用することも可能である。年齢の上昇に伴う新たなタンパク質合成の低下は、ここで、コラーゲンおよび／またはエラスチンの合成を増加させる活性成分を用いることで、少なくとも部分的に相殺することができる。
【００３７】
本発明の文脈において、「老化」および「老化皮膚」という用語は、皮膚の外観に眼に見える変化が出現すること、ならびに手触りで知覚される変化が出現することを述べるために使われるものであり、例えば限定されない意味で、シワ、小ジワ、肌荒れ、表情ジワ、ストレッチマーク、肌ギレ（ｄｉｓｃｏｎｔｉｎｕｉｔｉｅｓ）、肌溝、弛緩症、頬のたるみなどの皮膚のたるみ、目の下たるみ、二重アゴ、毛穴の拡大、弾性の喪失、反発性の喪失、堅固さの喪失、弾力線維症、分化異常、過剰の角質化、角化症、シミ、赤変、または目の下のクマなどの皮膚の色の変化、年齢によるシミ、肝斑、またはソバカスなどの色素過剰領域の出現、平滑性の喪失、オレンジピールスキン、コラーゲン構造の喪失、ならびに角質層、真皮、表皮、血管系（例えば、クモ状静脈または毛細血管拡張症の出現）、または皮膚に近い組織のその他の組織学的変化である。皮膚の老化は、主として２つの構成成分を有するプロセスであり：時間の経過に起因する経時的な老化、および紫外（ＵＶ）放射線への曝露のレベルに起因し、光老化として知られる光に誘発される老化である。タバコの煙への曝露、汚染への曝露、ならびに寒気および／または風のような気象条件などのいくつかの環境因子を合わせたものも、皮膚老化に寄与している。
【００３８】
現行技術では、エラスターゼ阻害活性を有する植物抽出物について（特許文献６、特許文献７、特許文献８、特許文献９、特許文献１０）、およびこの活性を持つ合成化学化合物について（特許文献１１、特許文献１２、特許文献１３、特許文献１４）報告されている。特に、特許文献１５には、アラニンおよびプロリンの多いリポペプチド、特には、Ｌ‐Ａｌａ−Ｌ‐Ａｌａジペプチドを含有するリポペプチドが、エラスターゼ阻害剤として報告されている。
【００３９】
コラーゲン合成の増加と関連付けて述べられることが多く、従って先行技術である個々の物質としては、例えば、アスコルビン酸、ならびに特に、アスコルビン酸パルミテート、リン酸アスコルビルマグネシウム、リン酸アスコルビルナトリウム、およびアスコルビン酸アルファ‐およびベータ‐グルコシドなどのその誘導体、レチノール、ならびにレチノイン酸、レチナール、レチノール、酢酸レチニル、もしくはパルミチン酸レチニルなどのレチノールの誘導体、または例えばアロエ属（Ａｌｏｅ）およびツボクサ属（Ｃｅｎｔｅｌｌａ）の植物種の抽出物などの植物抽出物、などの活性成分である。また、コラーゲン合成の刺激のためにさらに頻繁に用いられる活性成分としては、例えばカルニチン、カルノシン、クレアチン、マトリカインペプチド（例：リジル−スレオニル−スレオニル−リジル−セリン）、およびパルミトイル化ペンタペプチド（例：セデルマ／クロダ（Ｓｅｄｅｒｍａ／Ｃｒｏｄａ）製のＭａｔｒｉｘｙｌ（登録商標））またはＶｉｎｃｉｐｅｐｔｉｄｅ（ビンシエンス（Ｖｉｎｃｉｅｎｃｅ），フランス）という商品名のオリゴペプチドなどのさらなるペプチド構造、などのペプチド物質およびその誘導体も挙げられる。さらに、アシアチン酸、マデカシン酸、マデカソシド（ｍａｄｅｃａｓｓｏｓｉｄｅ）、アシアチコシド（ａｓｉａｔｉｃｏｓｉｄｅ）、センテラアシアチカ（Ｃｅｎｔｅｌｌａ  ａｓｉａｔｉｃａ）の抽出物、ナイアシンアミド、アスタキサンチン（ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎｅ）、例えば酵母およびカラスムギからのグルカン、ゲニステインおよびダイゼインなどのダイズ抽出物およびダイズイソフラボン、ルチン、クリシン、モリン（ｍｏｒｉｎ）、ビンロウジアルカロイド（ｂｅｔｅｌ  ｎｕｔ  ａｌｋａｌｏｉｄｓ）、フォルスコリン、ベツリン酸、オオバコ属（Ｐｌａｎｔａｇｏ）の抽出物、ＴＧＦ‐ベータ、イチョウ（Ｇｉｎｋｇｏ  ｂｉｌｏｂａ）の抽出物、グルタミン、ならびにグリコール酸などの化合物も、コラーゲン合成刺激剤として用いられる。
【００４０】
本発明は、皮膚、粘膜、および／または頭皮におけるエラスターゼの阻害および／またはコラーゲン合成の刺激に効果的であるコードされないアミノ酸を含む合成ペプチドについて述べる。その配列中にコードされないアミノ酸を有するペプチドで、皮膚、粘膜、および／または頭皮においてエラスターゼ阻害活性を示し、および／またはコラーゲン合成を刺激するものは現行技術には存在しない。コードされないアミノ酸の使用により、プロテアーゼによるその認識を困難とし、それらを含むペプチドの半減期が延長される。このペプチドの半減期の延長により、エラスターゼの阻害および／またはコラーゲン合成の刺激におけるその効力が長続きするようになる。
【００４１】
従って、コラーゲンもしくはエラスチンを分解する酵素に対する活性を持つか、または皮膚、粘膜、および／もしくは頭皮においてコラーゲンもしくはエラスチンの内在的合成を刺激する潜在能を持つ既存の化合物および／または抽出物は様々なものが数多く存在するにも関わらず、現行技術において公知であるものよりも効果的であり、選択的である新規なエラスターゼ阻害薬および／またはコラーゲン合成刺激薬を識別することが依然として求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００４２】
【特許文献１】欧州特許第１００５３３３Ｂ１号
【特許文献２】米国特許第７，２１１，２７８号
【特許文献３】欧州特許第１０７６５４９Ｂ１号
【特許文献４】米国特許第５，９２２，３１９号
【特許文献５】欧州特許第０９２７１６１Ｂ１号
【特許文献６】特開平１１‐２４６３８６
【特許文献７】特開２０００‐０７２６４９
【特許文献８】特開平１１‐２７９０４１
【特許文献９】米国特許第６，３９５，２６１号
【特許文献１０】米国特許第６，２３８，６７４号
【特許文献１１】米国特許第４，６４３，９９１号
【特許文献１２】米国特許第５，００８，２４５号
【特許文献１３】米国特許第５，１６２，３０７号
【特許文献１４】米国特許第５，１８９，１７８号
【特許文献１５】米国特許第４，６６５，０５３号
【非特許文献】
【００４３】
【非特許文献１】Ｂｒｏｗｎ‐Ａｕｇｓｂｕｒｇｅｒ  Ｐ．，Ｔｉｓｄａｌｅ  Ｃ，Ｂｒｏｅｋｅｌｍａｎｎ  Ｔ．，Ｓｌｏａｎ  Ｃ．ａｎｄ  Ｍｅｃｈａｍ  Ｒ．Ｐ．（１９９５）“Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎ  ｅｌａｓｔｉｎ  ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ  ｄｏｍａｉｎ  ｔｈａｔ  ｊｏｉｎｓ  ｔｈｒｅｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｃｈａｉｎｓ”Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：１７７７８‐１７７８３
【非特許文献２】Ｄｅｂｅｌｌｅ  Ｌ．ａｎｄ  Ｔａｍｂｕｒｒｏ  Ａ．Ｍ．（１９９９）“Ｅｌａｓｔｉｎ：ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．３１：２６１‐２７２
【非特許文献３】Ｂｅｌｌｉｎｇｈａｍ  Ｃ．Ｍ．，Ｗｏｏｄｈｏｕｓｅ  Ｋ．Ａ．，Ｒｏｂｓｏｎ  Ｐ．，Ｒｏｔｈｓｔｅｉｎ  Ｓ．Ｊ．ａｎｄ  Ｋｅｅｌｅｙ  Ｆ．Ｗ．（２００１）“Ｓｅｌｆ‐ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｌｙ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｈｕｍａｎ  ｅｌａｓｔｉｎ  ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｓ”Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．１５５０：６‐１９
【非特許文献４】Ｃｓｉｓｚａｒ  Ｋ．（２００１）“Ｌｙｓｙｌ  ｏｘｉｄａｓｅｓ：ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｍｉｎｅ  ｏｘｉｄａｓｅ  ｆａｍｉｌｙ”Ｐｒｏｇ．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．７０：１‐３２
【非特許文献５】Ｂｏｒｅｌ  Ａ．，Ｅｉｃｈｅｎｂｅｒｇｅｒ  Ｄ．，Ｆａｒｊａｎｅｌ  Ｊ．，Ｋｅｓｓｌｅｒ  Ｅ．，Ｇｌｅｙｚａｌ  Ｃ．，Ｈｕｌｍｅｓ  Ｄ．Ｊ．Ｓ．，Ｓｏｍｍｅｒ  Ｐ．ａｎｄ  Ｆｏｎｔ  Ｂ．（２００１）“Ｌｙｓｙｌ  ｏｘｉｄａｓｅ‐ｌｉｋｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｆｒｏｍ  ｂｏｖｉｎｅ  ａｏｒｔａ”Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：４８９４４‐４８９４９
【非特許文献６】Ｋｉｅｌｔｙ  Ｃ．Ｍ．，Ｓｈｅｒｒａｔｔ  Ｍ．Ｊ．ａｎｄ  Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈ  Ｃ．Ａ．（２００２）“Ｅｌａｓｔｉｃ  ｆｉｂｅｒｓ”Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．１１５：２８１７‐２８２８
【非特許文献７】Ｆａｕｒｙ  Ｇ．（２００１）“Ｆｕｎｃｔｉｏｎ‐ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｏｆ  ｅｌａｓｔｉｃ  ａｒｔｅｒｉｅｓ  ｉｎ  ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ：ｆｒｏｍ  ｍｉｃｒｏｆｉｂｒｉｌｓ  ｔｏ  ｅｌａｓｔｉｎ  ａｎｄ  ｅｌａｓｔｉｃ  ｆｉｂｅｒｓ”Ｐａｔｈｏｌ．Ｂｉｏｌ．（Ｐａｒｉｓ）４９：３１０‐３２５
【非特許文献８】Ｔａｓｓａｂｅｈｊｉ  Ｍ．，Ｍｅｔｃａｌｆｅ  Ｋ．，Ｈｕｒｓｔ  Ｊ．，Ａｓｈｃｒｏｆｔ  Ｇ．Ｓ．，Ｋｉｅｌｔｙ  Ｃ．，Ｗｉｌｍｏｔ  Ｃ．，Ｄｏｎｎａｉ  Ｄ．，Ｒｅａｄ  Ａ．Ｐ．ａｎｄ  Ｊｏｎｅｓ  Ｃ．Ｊ．（１９９８）“Ａｎ  ｅｌａｓｔｉｎ  ｇｅｎｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ  ａｂｎｏｒｍａｌ  ｔｒｏｐｏｅｌａｓｔｉｎ  ａｎｄ  ａｂｎｏｒｍａｌ  ｅｌａｓｔｉｃ  ｆｉｂｅｒｓ  ｉｎ  ａ  ｐａｔｉｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ａｕｔｏｓｏｍａｌ  ｄｏｍｉｎａｎｔ  ｃｕｔｉｓ  ｌａｘａ”Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．６：１０２１‐１０２８
【非特許文献９】Ｗａｔｓｏｎ  Ｒ．Ｅ．Ｂ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ  Ｃ．Ｅ．Ｍ．，Ｃｒａｖｅｎ  Ｎ．Ｍ．，Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈ  Ｃ．Ａ．ａｎｄ  Ｋｉｅｌｔｙ  Ｃ．Ｍ．（１９９９）“Ｆｉｂｒｉｌｌｉｎ‐ｒｉｃｈ  ｍｉｃｒｏｆｉｂｒｉｌｓ  ａｒｅ  ｒｅｄｕｃｅｄ  ｉｎ  ｐｈｏｔｏａｇｅｄ  ｓｋｉｎ．Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ａｔ  ｔｈｅ  ｄｅｒｍａｌ‐ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｊｕｎｃｔｉｏｎ”Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１１２：７８２‐７８７
【非特許文献１０】Ｃｕｌａｖ  Ｅ．Ｍ．，Ｃｌａｒｋ  Ｃ．Ｈ．ａｎｄ  Ｍｅｒｒｉｌｅｅｓ  Ｍ．Ｊ．（１９９９）“Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ  ｔｉｓｓｕｅｓ：ｍａｔｒｉｘ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｒｅｌｅｖａｎｃｅ  ｔｏ  ｐｈｙｓｉｃａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ”Ｐｈｙｓ．Ｔｈｅｒ．７９：３０８‐３１９
【非特許文献１１】Ａｕｍａｉｌｌｅｙ  Ｍ．ａｎｄ  Ｇａｙｒａｕｄ  Ｂ．（１９９８）“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｍａｔｒｉｘ”Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．７６：２５３‐２６５
【非特許文献１２】“Ｔｈｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｋｉｎ”，Ｆｒｅｉｎｋｅｌ  Ｒ．Ｋ．ａｎｄ  Ｗｏｏｄｌｅｙ  Ｄ．Ｔ．，ｅｄｓ．Ｔｈｅ  Ｐａｒｔｈｅｎｏｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ，２００１
【非特許文献１３】Ｆｉｓｈｅｒ  Ｇ．Ｊ．，Ｄａｔｔａ  Ｓ．Ｃ．，Ｔａｌｗａｒ  Ｈ．Ｓ．，Ｗａｎｇ  Ｚ．Ｑ．，Ｖａｒａｎｉ  Ｊ．，Ｋａｎｇ  Ｓ．ａｎｄ  Ｖｏｏｒｈｅｅｓ  Ｊ．Ｊ．（１９９６）“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｂａｓｉｓ  ｏｆ  ｓｕｎ‐ｉｎｄｕｃｅｄ  ｐｒｅｍａｔｕｒｅ  ｓｋｉｎ  ａｇｅｉｎｇ  ａｎｄ  ｒｅｔｉｎｏｉｄ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ”Ｎａｔｕｒｅ  ３７９：３３５‐３３９
【非特許文献１４】Ｆｉｓｈｅｒ  Ｇ．Ｊ．，Ｗａｎｇ  Ｚ．Ｑ．，Ｄａｔｔａ  Ｓ．Ｃ．，Ｖａｒａｎｉ  Ｊ．，Ｋａｎｇ  Ｓ．ａｎｄ  Ｖｏｏｒｈｅｅｓ  Ｊ．Ｊ．（１９９７）“Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｐｒｅｍａｔｕｒ  Ｓｋｉｎ  Ａｇｉｎｇ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  Ｌｉｇｈｔ”Ｎｅｗ  Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３７：１４１９１４２９
【非特許文献１５】Ｆｉｓｈｅｒ  Ｇ．Ｊ．，Ｃｈｏｉ  Ｈ．Ｃ．，Ｂａｔａ‐Ｃｓｏｒｇｏ  Ｚ．，Ｓｈａｏ  Ｙ．，Ｄａｔｔａ  Ｓ．，Ｗａｎｇ  Ｚ．Ｑ．，Ｋａｎｇ  Ｓ．ａｎｄ  Ｖｏｏｒｈｅｅｓ  Ｊ．Ｊ．（２００１）“Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｉｎｃｒｅａｓｅｓ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ‐８  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｓｋｉｎ  ｉｎ  ｖｉｖｏ”Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１１７：２１９‐２２６
【非特許文献１６】Ｒｉｔｔｉｅ  Ｌ  ａｎｄ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｇ．Ｊ．（２００２）“ＵＶ‐ｌｉｇｈｔ‐ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓｉｇｎａｌ  ｃａｓｃａｄｅｓ  ａｎｄ  ｓｋｉｎ  ａｇｉｎｇ”Ａｇｅｉｎｇ  Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．１：７０５‐７２０
【非特許文献１７】Ｌａｈｍａｎｎ  Ｃ．，Ｂｅｒｇｅｍａｎｎ  Ｊ．，Ｈａｒｒｉｓｏｎ  Ｇ．ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ  Ａ．Ｒ．（２００１）“Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ‐１  ａｎｄ  ｓｋｉｎ  ａｇｉｎｇ  ｉｎ  ｓｍｏｋｅｒｓ”Ｌａｎｃｅｔ  ３５７：９３５−９３６
【非特許文献１８】Ｉｍｏｋａｗａ  Ｇ．，Ｔａｋｅｍａ  Ｙ．，Ｙｏｒｉｍｏｔｏ  Ｙ．，Ｔｓｕｋａｈａｒａ  Ｋ．，Ｋａｗａｉ  Ｍ．ａｎｄ  Ｉｍａｙａｍａ  Ｓ．（１９９５）“Ｄｅｇｒｅｅ  ｏｆ  ＵＶ‐ｉｎｄｕｃｅｄ  ｔｏｒｔｕｏｓｉｔｙ  ｏｆ  ｅｌａｓｔｉｃ  ｆｉｂｅｒｓ  ｉｎ  ｒａｔ  ｓｋｉｎ  ｉｓ  ａｇｅ  ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ”Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１０５：２５４‐２５８
【非特許文献１９】Ｔｓｕｋａｈａｒａ  Ｋ．，Ｔａｋｅｍａ  Ｙ．，Ｍｏｒｉｗａｋｉ  Ｓ．，Ｆｕｊｉｍｕｒａ  Ｔ．，Ｉｍａｙａｍａ  Ｓ．ａｎｄ  Ｉｍｏｋａｗａ  Ｇ．（２００１）“Ｃａｒｂｏｎ  ｄｉｏｘｉｄｅ  ｌａｓｅｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｒｅｐａｉｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｔｈｒｅｅ‐ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ  ｎｅｔｗｏｒｋ  ｏｆ  ｅｌａｓｔｉｃ  ｆｉｂｅｒｓ  ｉｎ  ｒａｔ  ｓｋｉｎ”Ｂｒ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１４４：４５２‐４５８
【非特許文献２０】Ｔｓｕｋａｈａｒａ  Ｋ．，Ｔａｋｅｍａ  Ｙ．，Ｆｕｊｉｍｕｒａ  Ｔ．，Ｍｏｒｉｗａｋｉ  Ｓ．，Ｋｉｔａｈａｒａ  Ｔ．，Ｉｍａｙａｍａ  Ｓ．ａｎｄ  Ｉｍｏｋａｗａ  Ｇ．（１９９９）“Ａｌｌ‐ｔｒａｎｓ  ｒｅｔｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｔｈｅ  ｒｅｐａｉｒ  ｏｆ  ｔｏｒｔｕｏｓｉｔｙ  ｏｆ  ｅｌａｓｔｉｃ  ｆｉｂｅｒｓ  ｉｎ  ｒａｔ  ｓｋｉｎ”Ｂｒ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１４０：１０４８‐１０５３
【非特許文献２１】Ｔｓｕｋａｈａｒａ  Ｋ．，Ｔａｋｅｍａ  Ｙ．，Ｍｏｒｉｗａｋｉ  Ｓ．，Ｔｓｕｊｉ  Ｎ．，Ｓｕｚｕｋｉ  Ｙ．，Ｆｕｊｉｍｕｒａ  Ｔ．ａｎｄ  Ｉｍｏｋａｗａ  Ｇ．（２００１）“Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｋｉｎ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｅｌａｓｔａｓｅ  ｅｌｉｃｉｔｓ  ａ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ‐ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  Ｂ‐ｉｎｄｕｃｅｄ  ｗｒｉｎｋｌｅ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ”Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１１７：６７１‐６７７
【非特許文献２２】Ｂｒｉｎｃａｔ  Ｍ．，Ｋａｂａｌａｎ  Ｓ．，Ｓｔｕｄｄ  Ｊ．Ｗ．，Ｍｏｎｉｚ  Ｃ．Ｆ．，ｄｅ  Ｔｒａｆｆｏｒｄ  Ｊ．ａｎｄ  Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ  Ｊ．（１９８７）“Ａ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｄｅｃｒｅａｓｅ  ｏｆ  ｓｋｉｎ  ｃｏｌｌａｇｅｎ  ｃｏｎｔｅｎｔ，  ｓｋｉｎ  ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ，ａｎｄ  ｂｏｎｅ  ｍａｓｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ  ｗｏｍａｎ”Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．７０：８４０‐８４５
【非特許文献２３】Ｋａｈａｒｉ  Ｖ．Ｍ．ａｎｄ  Ｓａａｒｉａｌｈｏ‐Ｋｅｒｅ  Ｕ．（１９９７）“Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ  ｉｎ  ｓｋｉｎ”Ｅｘｐ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．６：１９９‐２１３
【非特許文献２４】Ｍｉｙｏｓｈｉ  Ｈ．，Ｋａｎｅｋｕｒａ  Ｔ．，Ａｏｋｉ  Ｔ．ａｎｄ  Ｋａｎｚａｋｉ  Ｔ．（２００５）“Ｂｅｎｅｆｉｃｉａｌ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｔｉｓｓｕｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ‐２（ＴＩＭＰ‐２）ｏｎ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ”Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．３２：３４６‐３５３
【非特許文献２５】Ｆｌｉｓｉａｋ  Ｉ．，Ｍｙｓｌｉｗｉｅｃ  Ｈ．ａｎｄ  Ｃｈｏｄｙｎｉｃｋａ  Ｂ．（２００５）“Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｐｓｏｒｉａｓｉｓ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｎ  ｐｌａｓｍａ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ‐１  ａｎｄ  ｔｉｓｓｕｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ‐１”Ｊ．Ｅｕｒ．Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｖｅｎｅｒｅｏｌ．９：４１８‐４２１
【非特許文献２６】Ｓｕｏｍｅｌａ  Ｓ．，Ｋａｒｉｎｉｅｍｉ  Ａ．Ｌ．，Ｉｍｐｏｌａ  Ｕ．，Ｋａｒｖｏｎｅｎ  Ｓ．Ｌ，Ｓｎｅｌｌｍａｎ  Ｅ．，Ｕｕｒａｓｍａａ  Ｔ．，Ｐｅｌｔｏｎｅｎ  Ｊ．，Ｓａａｒｉａｌｈｏ‐Ｋｅｒｅ  Ｕ．（２００３）“Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ‐１９  ｉｓ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｂｙ  ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓ  ｉｎ  ｐｓｏｒｉａｓｉｓ”Ａｃｔａ  Ｄｅｒｍ．Ｖｅｎｅｒｅｏｌ．８３：１０８‐１１４
【非特許文献２７】Ｒｅｙｎｏｌｄｓ  Ｊ．Ｊ．ａｎｄ  Ｍｅｉｋｌｅ  Ｍ．Ｃ．（１９９７）“Ｔｈｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｂａｌａｎｃｅ  ｏｆ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ  ａｎｄ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  ｔｉｓｓｕｅ  ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ：ｒｅｌｅｖａｎｃｅ  ｔｏ  ｏｒａｌ  ｐａｔｈｏｌｏｇｉｅｓ”Ｊ．Ｒ．Ｃｏｌｌ．Ｓｕｒｇ．Ｅｄｉｎｂ．４２：１５４‐１６０
【非特許文献２８】Ｎｔａｙｉ  Ｃ．，Ｈｏｒｎｅｂｅｃｋ  Ｗ．ａｎｄ  Ｂｅｒｎａｒｄ  Ｐ．（２００４）“Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ（ＭＭＰｓ）ｉｎ  ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ”Ｐａｔｈｏｌ．Ｂｉｏｌ．（Ｐａｒｉｓ）５２：１５４‐１５９
【非特許文献２９】Ｋｅｒｋｅｌａ  Ｅ．ａｎｄ  Ｓａａｒｉａｌｈｏ‐Ｋｅｒｅ  Ｕ．（２００３）“Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ：ｆｏｃｕｓ  ｏｎ  ｂａｓａｌ  ａｎｄ  ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｓｋｉｎ  ｃａｎｃｅｒ”Ｅｘｐ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１２：１０９‐１２５
【非特許文献３０】Ｓａｔｏ  Ｈ．，Ｔａｋｉｎｏ  Ｔ．ａｎｄ  Ｍｉｙａｍｏｒｉ  Ｈ．（２００５）“Ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  ｍｅｍｂｒａｎｅ‐ｔｙｐｅ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ‐１  ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ”Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．９６：２１２‐２１７
【非特許文献３１】Ａｂｒａｈａｍ  Ｄ．，Ｐｏｎｔｉｃｏｓ  Ｍ．ａｎｄ  Ｎａｇａｓｅ  Ｈ．（２００５）“Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ  ｔｉｓｓｕｅ  ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ：ｃｒｏｓｓ‐ｔａｌｋ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎｓ  ａｎｄ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ”Ｃｕｒｒ．Ｖａｓｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３：３６９‐３７９］
【非特許文献３２】Ｐａｐａｋｏｎｓｔａｎｔｉｎｏｕ  Ｅ．，Ａｌｅｔｒａｓ  Ａ．Ｊ．，Ｇｌａｓｓ  Ｅ．，Ｔｓｏｇａｓ  Ｐ．，Ｄｉｏｎｙｓｓｏｐｏｕｌｏｓ  Ａ．，Ａｄｊａｙｅ  Ｊ．，Ｆｉｍｍｅｌ  Ｓ．，Ｇｏｕｖｏｕｓｉｓ  Ｐ．，Ｈｅｒｗｉｇ  Ｒ．，Ｌｅｈｒａｃｈ  Ｈ．，Ｚｏｕｂｏｕｌｉｓ  Ｃ．Ｃ．ａｎｄ  Ｋａｒａｋｉｕｌａｋｉｓ  Ｇ．（２００５）“Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ  ｏｆ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｏｒｉｇｉｎ  ｉｎ  ｆａｃｉａｌ  ｓｅｂｕｍ  ｏｆ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｃｎｅ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｉｓｏｔｒｅｔｉｎｏｉｎ”Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１２５：６７３‐６８４
【非特許文献３３】Ｗｉｅｄｏｗ  Ｏ．，Ｗｉｅｓｅ  Ｆ．，Ｓｔｒｅｉｔ  Ｖ．，  Ｋａｌｍ  Ｃ．  ａｎｄ  Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒｓ  Ｅ．（１９９２）“Ｌｅｓｉｏｎａｌ  ｅｌａｓｔａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｐｓｏｒｉａｓｉｓ，ｃｏｎｔａｃｔ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ，  ａｎｄ  ａｔｏｐｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ，”Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．９９：３０６‐３０９
【非特許文献３４】Ｗｏｏｄｂｕｒｙ  Ｒ．Ａ．，Ｋｌｉｇｍａｎ  Ｌ．Ｈ．，Ｗｏｏｄｂｕｒｙ  Ｍ．Ｊ．ａｎｄ  Ｋｌｉｇｍａｎ  Ａ．Ｍ．（１９９４）“Ｒａｐｉｄ  ａｓｓａｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｎｔｉ‐ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｏｐｉｃａｌ  ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｉｄｓ  ｂｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ＵＶＡ‐ｉｎｄｕｃｅｄ  ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｈａｉｒｌｅｓｓ  ｍｏｕｓｅ  ｓｋｉｎ．Ｉ．Ｔｈｅ  ａｓｓａｙ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ”Ａｃｔａ  Ｄｅｒｍ．Ｖｅｎｅｒｅｏｌ．７４：１５‐１７
【非特許文献３５】Ａｎｔｏｎｉｃｅｌｌｉ  Ｆ．，Ｂｅｌｌｏｎ  Ｇ．，Ｄｅｂｅｌｌｅ  Ｌ  ａｎｄ  Ｈｏｒｎｅｂｅｃｋ  Ｗ．（２００７）“Ｅｌａｓｔｉｎ‐ｅｌａｓｔａｓｅ  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍ‐ａｇｉｎｇ”Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．７９：９９‐１５５
【非特許文献３６】Ｒｏｇａｌｓｋｉ  Ｃ，Ｍｅｙｅｒ‐Ｈｏｆｆｅｒｔ  Ｕ．，Ｐｒｏｋｓｃｈ  Ｅ．ａｎｄ  Ｗｉｅｄｏｗ  Ｏ．（２００２）“Ｈｕｍａｎ  ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  ｅｌａｓｔａｓｅ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｖｏ”Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１１８：４９‐５４
【非特許文献３７】Ｈｅｒｏｕｙ  Ｙ．，Ｍｅｌｌｉｏｓ  Ｐ．，Ｂａｎｄｅｍｉｒ  Ｅ．，Ｄｉｃｈｍａｎｎ  Ｓ．，Ｎｏｃｋｏｗｓｋｉ  Ｐ．，Ｓｃｈｏｐｆ  Ｅ．ａｎｄ  Ｎｏｒｇａｕｅｒ  Ｊ．（２００１）“Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｓｔａｓｉｓ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ  ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ＭＭＰ‐１，ＭＭＰ‐２  ａｎｄ  ＭＭＰ‐１３  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ”Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｓｃｉ．２５：１９８‐２０５
【非特許文献３８】Ｄｅｖｉｌｌｅｒｓ  Ａ．Ｃ．，ｖａｎ  Ｔｏｏｒｅｎｅｎｂｅｒｇｅｎ  Ａ．Ｗ．，Ｋｌｅｉｎ  Ｈｅｅｒｅｎｂｒｉｎｋ  Ｇ．Ｊ．，Ｍｕｌｄｅｒｔ  Ｐ．Ｇ．ａｎｄ  Ｏｒａｎｊｅ  Ａ．Ｐ．（２００７）“Ｅｌｅｖａｔｅｄ  ｌｅｖｅｌｓ  ｏｆ  ｐｌａｓｍａ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ‐９  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｔｏｐｉｃ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ：  ａ  ｐｉｌｏｔ  ｓｔｕｄｙ”Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．３２：３１１‐３１３
【非特許文献３９】Ｓａｐａｄｉｎ  Ａ．Ｎ．，Ｆｌｅｉｓｃｈｍａｊｅｒ  Ｒ．（２００６）“Ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｓ：  Ｎｏｎａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”Ｊ．Ａｍ．Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍ．５４：２５８‐２６５
【非特許文献４０】Ｌｉｕ  Ｚ．，Ｓｈａｐｉｒｏ  Ｓ．Ｄ．，Ｚｈｏｕ  Ｘ．，Ｔｗｉｎｉｎｇ  Ｓ．Ｓ．，Ｓｅｎｉｏｒ  Ｒ．Ｍ．，Ｇｉｕｄｉｃｅ  Ｇ．Ｊ．，Ｆａｉｒｌｅｙ  Ｊ．Ａ．ａｎｄ  Ｄｉａｚ  Ｌ．Ａ．（２０００）“Ａ  ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｒｏｌｅ  ｆｏｒ  ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ  ｅｌａｓｔａｓｅ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｂｕｌｌｏｕｓ  ｐｅｍｐｈｉｇｏｉｄ”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０５：１１３‐１２３
【非特許文献４１】Ｊａｒｒｏｕｓｓｅ  Ｆ．，Ｂｏｉｓｎｉｃ  Ｓ．，Ｂｒａｎｃｈｅｔ  Ｍ．Ｃ，Ｂｅｒａｎｇｅｒ  Ｊ．Ｙ．，Ｇｏｄｅａｕ  Ｇ．，Ｂｒｅｔｏｎ  Ｌ．，Ｂｅｒｎａｒｄ  Ｂ．Ａ．ａｎｄ  Ｍａｈｅ  Ｙ．Ｆ．（２００１）“Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｈａｉｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ  ｆｏｒ  ＭＭＰ‐９  ｇｅｌａｔｉｎｏｌｙｔｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｙ：  ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈａｉｒ  ｇｒｏｗｔｈ”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．４０：３８５‐３９２
【非特許文献４２】Ｄｉｃｋ  Ｇ．Ｆ．，Ａｓｈｅ  Ｂ．Ｍ．，Ｒｏｄｇｅｒｓ  Ｅ．Ｇ．，Ｄｉｅｒｃｋｓ  Ｒ．Ｃ．ａｎｄ  Ｇｏｌｔｚ  Ｒ．Ｗ．（１９７６）“Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｅｌａｓｔｏｌｙｔｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ  ａｎｄ  Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ  ｉｎ  ａｃｎｅ  ｖｕｌｇａｒｉｓ  ａｎｄ  ｉｎ  ｎｏｒｍａｌ  ｓｋｉｎ”Ａｃｔａ  Ｄｅｒｍ．Ｖｅｎｅｒｅｏｌ．５６：２７９‐２８２
【非特許文献４３】Ｔｒａｕｒｉｇ  Ｍ．Ｔ．，Ｐｅｒｍａｎａ  Ｐ．Ａ．，Ｎａｉｒ  Ｓ．，Ｋｏｂｅｓ  Ｓ．，Ｂｏｇａｒｄｕｓ  Ｃ．ａｎｄ  Ｂａｉｅｒ  Ｌ．Ｊ．（２００６）“Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ３（ＭＭＰ３）ｉｎ  ｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ／ｓｔｒｏｍａｌ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｎｏｎｏｂｅｓｅ  ｎｏｎｄｉａｂｅｔｉｃ  ｖｅｒｓｕｓ  ｏｂｅｓｅ  ｎｏｎｄｉａｂｅｔｉｃ  Ｐｉｍａ  Ｉｎｄｉａｎｓ”Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ５５：３１６０‐３１６５
【発明を実施するための形態】
【００４４】
本発明は、上記で述べた問題点に対する解決策を提供するものである。驚くべきことに、本発明の出願者は、コードされないアミノ酸を持つ特定の合成ペプチドが、皮膚、粘膜、および／もしくは頭皮でのエラスターゼの阻害および／またはコラーゲン合成の刺激において著しい効力を有し、従って、エラスターゼ活性に起因するおよび／またはコラーゲン合成の刺激が有益である、皮膚、粘膜、および／または頭皮の任意の状態、障害、および／または疾患の、治療、予防、および／またはケアに有用であることを見出した。
【００４５】
定義
本発明を理解しやすくするために、本発明に関して用いられるいくつかの用語および表現の意味を示す。
【００４６】
本明細書にて、アミノ酸に用いられる略語は、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．（１９８４）１３８：９‐３７およびＪ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９８９）２６４：６３３‐６７３において指定される、ＩＵＰＡＣ‐ＩＵＢの生化学命名委員会（Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ  ｏｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ）の規則に従う。
【００４７】
従って、例えば、ＧｌｙはＮＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨを表し、Ｇｌｙ−はＮＨ２−ＣＨ２−ＣＯ−を表し、−Ｇｌｙは−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＯＯＨを表し、および−Ｇｌｙ−は−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＯ−を表す。従って、ペプチド結合を表すハイフンは、記号の右に置かれる場合、アミノ酸の１‐カルボキシル基（ここで、従来の非イオン化型で表される）からＯＨを除いた形であり、記号の左に置かれるとき、アミノ酸の２‐アミノ基からＨを除いた形であり；両方の修飾を同じ符号に適用してよい（表１を参照）。
【００４８】
0005878761.tif 000002
【００４９】
本明細書中で用いられる「Ａｃ−」の略語は、アセチル基（ＣＨ３−ＣＯ−）を示し、「Ｐａｌｍ−」の略語は、パルミトイル基（ＣＨ３−（ＣＨ２）１４−ＣＯ−）を示すために用いられる。
【００５０】
本発明で用いられる「非環式脂肪族基」という用語は、例えば、これらに限定されないが、直鎖状または分岐鎖状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル基を包含する。
【００５１】
「アルキル基」という用語は、１から２４、好ましくは１から１６、より好ましくは１から１４、より好ましくは１から１２、さらにより好ましくは１、２、３、４、５、もしくは６個の炭素原子を有し、単結合を介して分子の残りの部分と結合する、直鎖状または分岐鎖状の飽和基を意味し、例えば、これらに限定されないが、メチル、エチル、イソプロピル、イソブチル、ｔｅｒｔ‐ブチル、ヘプチル、オクチル、デシル、ドデシル、ラウリル、ヘキサデシル、オクタデシル、アミル、２‐エチルヘキシル、２‐メチルブチル、および５‐メチルヘキシルなどが挙げられる。
【００５２】
「アルケニル基」という用語は、２から２４、好ましくは２から１６、より好ましくは２から１４、より好ましくは２から１２、さらにより好ましくは２、３、４、５、もしくは６個の炭素原子を、共役または非共役である１もしくは２個以上の炭素‐炭素二重結合、好ましくは１、２、もしくは３個の炭素−炭素二重結合と共に有し、単結合を介して分子の残りの部分と結合する、直鎖状または分岐鎖状の基を意味し、例えば、これらに限定されないが、ビニル、オレイル、およびリノレイル基などが挙げられる。
【００５３】
「アルキニル基」という用語は、２から２４、好ましくは２から１６、より好ましくは２から１４、より好ましくは２から１２、さらにより好ましくは２、３、４、５、もしくは６個の炭素原子を、共役または非共役である１もしくは２個以上の炭素‐炭素三重結合、好ましくは１、２、もしくは３個の炭素−炭素三重結合と共に有し、単結合を介して分子の残りの部分と結合する、直鎖状または分岐鎖状の基を意味し、例えば、これらに限定されないが、エチニル、１‐プロピニル、２‐プロピニル、１‐ブチニル、２‐ブチニル、３‐ブチニル、および１‐ペンチニルなどのペンチニル基、などが挙げられる。
【００５４】
本発明で用いられる「アリシクリル（ａｌｉｃｙｃｌｙｌ）基」という用語は、例えば、これらに限定されないが、シクロアルキル、シクロアルケニル、およびシクロアルキニル基を包含する。
【００５５】
「シクロアルキル」という用語は、３から２４、好ましくは３から１６、より好ましくは３から１４、より好ましくは３から１２、さらにより好ましくは３、４、５、もしくは６個の炭素原子を有し、単結合を介して分子の残りの部分と結合する飽和単環式または多環式の脂肪族基を意味し、例えば、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、メチルシクロヘキシル、ジメチルシクロヘキシル、オクタヒドロインデン、デカヒドロナフタレン、およびドデカヒドロフェナレンなどが挙げられる。
【００５６】
「シクロアルケニル基」という用語は、５から２４、好ましくは５から１６、より好ましくは５から１４、より好ましくは５から１２、さらにより好ましくは５もしくは６個の炭素原子を、共役または非共役である１もしくは２個以上の炭素‐炭素二重結合、好ましくは１、２、もしくは３個の炭素−炭素二重結合と共に有し、単結合を介して分子の残りの部分と結合する、非芳香族単環式または多環式の脂肪族基を意味し、例えば、これらに限定されないが、シクロペンタ‐１‐エン‐１‐イル基などが挙げられる。
【００５７】
「シクロアルキニル基」という用語は、５から２４、好ましくは５から１６、より好ましくは５から１４、より好ましくは５から１２、さらにより好ましくは５もしくは６個の炭素原子を、共役または非共役である１もしくは２個以上の炭素‐炭素二重結合、好ましくは１、２、もしくは３個の炭素−炭素三重結合と共に有し、単結合を介して分子の残りの部分と結合する、非芳香族単環式または多環式の脂肪族基を意味し、例えば、これらに限定されないが、シクロへキシ‐１‐イン‐１‐イル基などが挙げられる。
【００５８】
「アリール基」という用語は、炭素‐炭素を介して結合した、もしくは縮合した１、２、３、もしくは４個の芳香族環を含み、６から３０、好ましくは６から１８、より好ましくは６から１０、より好ましくは６もしくは１０個の炭素原子を有する芳香族基を意味し、例えば、これらに限定されないが、中でもフェニル、ナフチル、ジフェニル、インデニル、フェナントリル、もしくはアントラニリック（ａｎｔｈｒａｎｉｌｉｃ）が挙げられ；または、アラルキル基を意味する。
【００５９】
「アラルキル基」という用語は、７から２４個の炭素原子を有する、芳香族基により置換されたアルキル基を意味し、例えば、これらに限定されないが、−（ＣＨ２）１‐６−フェニル、−（ＣＨ２）１‐６−（１‐ナフチル）、−（ＣＨ２）１‐６−（２‐ナフチル）、および−（ＣＨ２）１‐６−ＣＨ（フェニル）２などが挙げられる。
【００６０】
「ヘテロシクリル基」という用語は、３から１０の員数を有する炭化水素環を意味し、ここで、環の１もしくは２個以上の原子、好ましくは環の１、２、もしくは３個の原子は、窒素、酸素、または硫黄を例とする炭素以外の元素であり、飽和または不飽和であってよい。本発明の目的のために、ヘテロ環は、単環式、二環式、または三環式の環系であってよく、これらは縮合環系を含んでよく；ヘテロシクリルラジカル中の窒素、炭素、または硫黄の原子は、所望される場合は酸化されていてよく；窒素原子は、所望される場合は、四級化されていてよく；ならびに、ヘテロシクリルラジカルは、部分的もしくは完全に飽和されているか、または芳香族であってよい。より好ましくは、ヘテロシクリルの用語は、５または６員環を意味する。
【００６１】
「ヘテロアリールアルキル基」という用語は、置換または無置換の芳香族へテロシクリル基により置換されたアルキル基を意味し、このアルキル基は、１から６個の炭素原子を有し、ならびに芳香族へテロシクリル基は、２から２４個の炭素原子および１から３個の炭素以外の原子を有し、例えば、これらに限定されないが、−（ＣＨ２）１‐６−イミダゾリル、−（ＣＨ２）１‐６−トリアゾリル、−（ＣＨ２）１‐６−チエニル、−（ＣＨ２）１‐６−フリル、および−（ＣＨ２）１‐６−ピロリジニルなどが挙げられる。
【００６２】
本技術分野において用いられるように、上記で定める基には、ある度合いの置換が存在してよい。従って、本発明のいずれの基にも置換が存在してよい。本発明の基における置換された基について本明細書で言及する場合、それは、指定されるラジカルが、１もしくは２つ以上の置換基により、１もしくは２つ以上の置換可能な位置、好ましくは１、２、もしくは３つの位置、より好ましくは１もしくは２つ以内の位置、さらにより好ましくは１つの位置において置換されてよいことを示す。このような置換基としては、例えば、これらに限定されないが、Ｃ１‐Ｃ４アルキル；ヒドロキシル；Ｃ１‐Ｃ４アルコキシル；アミノ；Ｃ１‐Ｃ４アミノアルキル；Ｃ１‐Ｃ４カルボニルオキシル；Ｃ１‐Ｃ４オキシカルボニル；フッ素、塩素、臭素、およびヨウ素などのハロゲン；シアノ；ニトロ；アジド；Ｃ１‐Ｃ４アルキルスルホニル；チオール；Ｃ１‐Ｃ４アルキルチオ；フェノキシルなどのアリールオキシル；−ＮＲｂ（Ｃ＝ＮＲｂ）ＮＲｂＲｃが挙げられ、ここでＲｂおよびＲｃは、独立して、Ｈ、Ｃ１‐Ｃ４アルキル、Ｃ２‐Ｃ４アルケニル、Ｃ２‐Ｃ４アルキニル、Ｃ３‐Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ６‐Ｃ１８アリール、Ｃ７‐Ｃ１７アラルキル、３〜１０員環へテロシクリル、またはアミノ基の保護基から成る群より選択される。
【００６３】
本発明の化合物
本発明の化合物は、一般式（Ｉ）
Ｒ１−Ｗｐ−Ｘｎ−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４−Ｙｍ−Ｒ２    （Ｉ）
これらの立体異性体、その混合物、および／またはこれらの美容的もしくは薬理学的に許容される塩、で定められ、アミノ酸ＡＡ１、ＡＡ２、またはＡＡ４のうちの少なくとも１つがコードされないものであることを特徴とし、および：
ＡＡ１は、−Ａｒｇ−、−Ｐｈｇ−、および−Ｎｌｅ−から成る群より選択されるか、または結合であり；
ＡＡ２は、−Ａｌａ−、−Ｐｈｇ−、−Ｃｉｔ−、および−Ｎｌｅ−から成る群より選択され；
ＡＡ３は、−Ｔｒｐ−、−Ｖａｌ−、および−Ｔｙｒ−から成る群より選択され；
ＡＡ４は、−Ｐｈｇ−および−Ｇｌｙ−から成る群より選択され；
Ｗ、Ｘ、およびＹは、独立して、コードされる、またはコードされないアミノ酸から成る群より選択され；
ｐ、ｎ、およびｍは、０から１までの範囲であり；
Ｒ１は、Ｈ、置換もしくは無置換の非環式脂肪族基、置換もしくは無置換のアリシクリル、置換もしくは無置換のヘテロシクリル、置換もしくは無置換のヘテロアリールアルキル、置換もしくは無置換のアリール、置換もしくは無置換のアラルキル、およびＲ５−ＣＯ−から成る群より選択され；
Ｒ２は、−ＮＲ３Ｒ４、−ＯＲ３、および−ＳＲ３から成る群より選択され；
ここで、Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈ、置換もしくは無置換の非環式脂肪族基、置換もしくは無置換のアリシクリル、置換もしくは無置換のヘテロシクリル、置換もしくは無置換のヘテロアリールアルキル、置換もしくは無置換のアリール、および置換もしくは無置換のアラルキルから成る群より選択され；
ここで、Ｒ５は、Ｈ、置換もしくは無置換の非環式脂肪族基、置換もしくは無置換のアリシクリル、、置換もしくは無置換のアリール、置換もしくは無置換のアラルキル、置換もしくは無置換のヘテロシクリル、および置換もしくは無置換のヘテロアリールアルキルから成る群より選択され；
ただし、ＡＡ１が結合である場合、ＡＡ２は−Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｔｒｐ−である。
【００６４】
Ｒ１およびＲ２の基は、それぞれ、ペプチド配列のアミノ末端（Ｎ末端）およびカルボキシ末端（Ｃ末端）と結合する。
【００６５】
本発明の好ましい態様によれば、Ｒ１は、ＨおよびＲ５−ＣＯ−から成る群より選択され、ここで、Ｒ５は、置換または無置換のＣ１‐Ｃ２４アルキル、置換または無置換のＣ２‐Ｃ２４アルケニル、置換または無置換のＣ２‐Ｃ２４アルキニル、置換または無置換のＣ３‐Ｃ２４シクロアルキル、置換または無置換のＣ５‐Ｃ２４シクロアルケニル、置換または無置換のＣ５‐Ｃ２４シクロアルキニル、置換または無置換のＣ６‐Ｃ３０アリール、置換または無置換のＣ７‐Ｃ２４アラルキル、３〜１０の環員数である置換または無置換のヘテロシクリル、ならびに２から２４個の炭素原子と１から３個の炭素以外の原子、および１から６個の炭素原子のアルキル鎖を持つ置換または無置換のヘテロアリールアルキルから成る群より選択される。より好ましくは、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ｔｅｒｔ‐ブタノイル、ヘキサノイル、２‐メチルヘキサノイル、シクロヘキサンカルボキシル、オクタノイル、デカノイル、ラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、ステアロイル、オレオイル、およびリノレオイルから選択される。さらにより好ましくは、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、パルミトイル、またはミリストイルである。さらにより好ましい態様では、ラジカルＲ１は、アセチルである。
【００６６】
本発明の別の好ましい態様によれば、Ｒ２は、−ＮＲ３Ｒ４、−ＯＲ３、または−ＳＲ３であり、ここで、Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈ、置換または無置換のＣ１‐Ｃ２４アルキル、置換または無置換のＣ２‐Ｃ２４アルケニル、置換または無置換のＣ２‐Ｃ２４アルキニル、置換または無置換のＣ３‐Ｃ２４シクロアルキル、置換または無置換のＣ５‐Ｃ２４シクロアルケニル、置換または無置換のＣ５‐Ｃ２４シクロアルキニル、置換または無置換のＣ６‐Ｃ３０アリール、置換または無置換のＣ７‐Ｃ２４アラルキル、３〜１０の環員数である置換または無置換のヘテロシクリル、ならびに２から２４個の炭素原子と１から３個の炭素以外の原子、および１から６個の炭素原子のアルキル鎖を持つ置換または無置換のヘテロアリールアルキルから成る群より選択される。所望される場合は、Ｒ３  ｙ  Ｒ４は、飽和または不飽和の炭素‐炭素結合を介して結合し、窒素原子と共に環を形成してもよい。より好ましくは、Ｒ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈ、置換または無置換のＣ１‐Ｃ２４アルキル、置換または無置換のＣ２‐Ｃ２４アルケニル、置換または無置換のＣ２‐Ｃ２４アルキニル、置換または無置換のＣ３‐Ｃ１０シクロアルキル、置換または無置換のＣ６‐Ｃ１５アリール、ならびに３〜１０の環員数である置換または無置換のヘテロシクリル、ならびに３から１０の環員数および１から６個の炭素原子のアルキル鎖を持つ置換または無置換のヘテロアリールアルキルから成る群より選択される。より好ましくは、Ｒ３およびＲ４は、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、またはヘキサデシルから成る群より選択される。さらにより好ましくは、Ｒ３はＨであり、Ｒ４は、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、またはヘキサデシルから成る群より選択される。より好ましい態様によると、Ｒ２は、−ＯＨおよび−ＮＨ２から選択される。
【００６７】
本発明の別の態様によると、ＡＡ２は、−Ｐｈｇ−であり、ＡＡ４は、−Ｐｈｇ−である。
【００６８】
本発明の別の態様によると、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから成る群より選択され、ＡＡ１は、−Ｌ‐Ａｒｇ−であり、ＡＡ２は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｌ‐Ｔｙｒ−であり、ＡＡ４は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、およびＲ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、およびヘキサデシルから選択され、好ましくは、Ｒ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２である。より好ましくは、Ｒ１は、アセチルであり、Ｒ２は、−ＯＨである。さらにより好ましくは、ｐ、ｎ、およびｍは、０である。
【００６９】
本発明の別の態様によると、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから成る群より選択され、ＡＡ１は、−Ｌ‐Ｎｌｅ−であり、ＡＡ２は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｌ‐Ｔｙｒ−であり、ＡＡ４は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、およびＲ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、およびヘキサデシルから選択され、好ましくは、Ｒ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２である。より好ましくは、Ｒ１は、アセチルであり、Ｒ２は、−ＯＨである。さらにより好ましくは、ｐ、ｎ、およびｍは、０である。
【００７０】
本発明の別の態様によると、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから成る群より選択され、ＡＡ１は、−Ｌ‐Ａｒｇ−であり、ＡＡ２は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｌ‐Ｔｒｐ−であり、ＡＡ４は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、およびＲ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、およびヘキサデシルから選択され、好ましくは、Ｒ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２である。より好ましくは、Ｒ１は、アセチルであり、Ｒ２は、−ＯＨである。さらにより好ましくは、ｐ、ｎ、およびｍは、０である。
【００７１】
本発明の別の態様によると、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから成る群より選択され、ＡＡ１は、−Ｌ‐Ｎｌｅ−であり、ＡＡ２は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｌ‐Ｔｒｐ−であり、ＡＡ４は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、およびＲ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、およびヘキサデシルから選択され、好ましくは、Ｒ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２である。より好ましくは、Ｒ１は、アセチルであり、Ｒ２は、−ＯＨである。さらにより好ましくは、ｐ、ｎ、およびｍは、０である。
【００７２】
本発明の別の態様によると、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから成る群より選択され、ＡＡ１は、−Ｌ‐Ａｒｇ−であり、ＡＡ２は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｌ‐Ｖａｌ−であり、ＡＡ４は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、およびＲ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、およびヘキサデシルから選択され、好ましくは、Ｒ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２である。より好ましくは、Ｒ１は、アセチルであり、Ｒ２は、−ＯＨである。さらにより好ましくは、ｐ、ｎ、およびｍは、０である。
【００７３】
本発明の別の態様によると、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから成る群より選択され、ＡＡ１は、−Ｌ‐Ａｒｇ−であり、ＡＡ２は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｌ‐Ｖａｌ−であり、ＡＡ４は、−Ｇｌｙ−であり、およびＲ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、およびヘキサデシルから選択され、好ましくは、Ｒ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２である。より好ましくは、Ｒ１は、アセチルであり、Ｒ２は、−ＯＨである。さらにより好ましくは、ｐ、ｎ、およびｍは、０である。
【００７４】
本発明の別の態様によると、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから成る群より選択され、ＡＡ１は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ２は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｌ‐Ｔｒｐ−であり、ＡＡ４は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、およびＲ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、およびヘキサデシルから選択され、好ましくは、Ｒ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２である。より好ましくは、Ｒ１は、アセチルであり、Ｒ２は、−ＯＨである。さらにより好ましくは、ｐ、ｎ、およびｍは、０である。
【００７５】
本発明の別の態様によると、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、またはパルミトイルから成る群より選択され、ＡＡ１は、結合であり、ＡＡ２は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、ＡＡ３は、−Ｌ‐Ｔｒｐ−であり、ＡＡ４は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−または−Ｄ‐Ｐｈｇ−であり、およびＲ２は、−ＮＲ３Ｒ４または−ＯＲ３であり、ここで、Ｒ３およびＲ４は、独立して、Ｈ、メチル、エチル、ヘキシル、ドデシル、およびヘキサデシルから選択され、好ましくは、Ｒ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２である。より好ましくは、Ｒ１は、アセチルであり、Ｒ２は、−ＯＨである。さらにより好ましくは、ｐ、ｎ、およびｍは、０である。
【００７６】
本発明の別の態様によると、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、ラウロイル、ミリストイル、およびパルミトイルから成る群より選択され、好ましくは、Ｒ１は、Ｈ、アセチル、およびパルミトイルから成る群より選択され、ならびに、好ましくは、Ｒ２は、−ＯＨおよび−ＮＨ２から成る群より選択される。
【００７７】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物は：
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ；
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｔｙｒ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｔｙｒ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｔｙｒ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｔｙｒ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｔｙｒ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｔｙｒ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−ＮＨ２、
Ｐａｌｍ−Ｐｈｇ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ｐａｌｍ−Ｐｈｇ−Ｎｌｅ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ｈ−Ａｒｇ−Ｃｉｔ−Ｖａｌ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ｈ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ｖａｌ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ｐａｌｍ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ｐａｌｍ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＮＨ−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３、
Ｈ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ２
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｇｌｙ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
Ａｃ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｔｙｒ−Ｐｈｇ−Ｉｌｅ−ＯＨ、
Ａｃ−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｔｙｒ−Ｐｈｇ−Ｇｌｙ−ＮＨ２、
Ａｃ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−ＯＨ、および、
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｐｈｇ−ＯＨ；
これらの立体異性体、その混合物、ならびに／またはこれらの美容的もしくは薬理学的に許容される塩、
から成る群より選択される。
【００７８】
本発明のペプチドは、立体異性体または立体異性体の混合物として存在してよく、例えば、それらを形成するアミノ酸は、Ｌ‐、Ｄ‐立体配置を有してよく、または互いに独立したラセミ体であってもよい。従って、不斉炭素の数、および異性体または異性体混合物が存在するかどうかに応じて、異性体混合物、ならびにラセミ体もしくはジアステレオマーの混合物、または純粋なジアステレオマーもしくはエナンチオマーを得ることが可能である。本発明のペプチドの好ましい構造は、純粋な異性体、すなわちエナンチオマーまたはジアステレオマーである。
【００７９】
例えば、ＡＡ１が−Ｐｈｇ−であってよいと示される場合、ＡＡ１は、−Ｌ‐Ｐｈｇ−、−Ｄ‐Ｐｈｇ−、またはこれら両方のラセミもしくは非ラセミ混合物から選択されることが理解される。同様に、ＡＡ２が−Ａｒｇ−であってよいと記載される場合、それは、−Ｌ‐Ａｒｇ−、−Ｄ‐Ａｒｇ−、またはこれら両方のラセミもしくは非ラセミ混合物であってよいことが理解される。本明細書に記載される作製プロセスにより、当業者は、適切な立体配置のアミノ酸を選択することで、本発明のペプチドの各立体異性体を得ることが可能となる。
【００８０】
本発明に関して、「コードされないアミノ酸」という用語は、天然のものであってもそうでないものであっても、遺伝子コードによってコードされないアミノ酸を意味し、例えば、これらに限定されないが、中でもシトルリン、オルニチン、サルコシン、デスモシン、ノルバリン、４‐アミノ酪酸、２‐アミノ酪酸、２‐アミノイソ酪酸、６‐アミノヘキサン酸、１‐ナフチルアラニン、２‐ナフチルアラニン、２‐アミノ安息香酸、４‐アミノ安息香酸、４‐クロロフェニルアラニン、２，３‐ジアミノプロピオン酸、２，４‐ジアミノ酪酸、サイクロセリン、カルニチン、シスチン、ペニシラミン、ピログルタミン酸、チエニルアラニン、ヒドロキシプロリン、アロイソロイシン、アロスレオニン、イソニペコ酸、イソセリン、フェニルグリシン、スタチン、β‐アラニン、ノルロイシン、Ｎ‐メチルアミノ酸、β‐アミノ酸、またはγ‐アミノ酸、およびこれらの誘導体である。非天然アミノ酸のリストは、“Ｕｎｕｓｕａｌ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ  ｉｎ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”ｂｙ  Ｄ．Ｃ．Ｒｏｂｅｒｔｓ  ａｎｄ  Ｆ．Ｖｅｌｌａｃｃｉｏ，ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｖｏｌ  ５（１９８３），Ｃｈａｐｔｅｒ  ＶＩ，Ｇｒｏｓｓ  Ｅ．ａｎｄ  Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ  Ｊ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＵＳＡの論文中に、または、ネオＭＰＳ（ＮｅｏＭＰＳ）、バッケム（Ｂａｃｈｅｍ）、ノババイオケム（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）、シグマ‐アルドリッチ、ペプチドインターナショナル（Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）、アドバンストケムテック（Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ）、ケム‐インペックス（Ｃｈｅｍ‐Ｉｍｐｅｘ）、メイブリッジケミカルテクノロジーシロテック（Ｍａｙｂｒｉｄｇｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｈｉｒｏｔｅｃｈ）、ペニンシュララボラトリーズ（Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、またはＲＳＰアミノアシッドアナログズ（ＲＳＰ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ）、などの専門企業の商品カタログに記載されている。
【００８１】
本発明に関して、ｐ、ｎ、およびｍが０以外である場合、Ｗ、Ｘ、およびＹの性質が本発明のペプチドの活性を妨げることはなく、むしろ、エラスターゼの阻害への寄与および／またはコラーゲン合成の刺激をもたらすか、またはこれらに影響を及ぼさないものであることは明らかに理解される。
【００８２】
本発明の範囲には、本発明によって提供されるペプチドの美容的または薬理学的に許容される塩も含まれる。「美容的または薬理学的に許容される塩」という用語は、動物およびより詳細にはヒトへの使用が認められた塩を意味し、これらに限定されないが、中でもリチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、銅、亜鉛、もしくはアルミニウムなどの無機塩、またはこれらに限定されないが、中でもエチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、アルギニン、リジン、ヒスチジン、もしくはピペラジンなどの有機塩である塩基付加塩、または、これらに限定されないが、中でも酢酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、マロン酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、安息香酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、コハク酸塩、オレイン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、もしくはグルコン酸塩を例とする有機塩、またはこれらに限定されないが、中でも塩化物、硫酸塩、ホウ酸塩、もしくは炭酸塩を例とする無機塩である酸付加塩、を形成するために用いられる塩を含む。塩の性質は、それが美容的または薬理学的に許容される限りにおいて決定的なものではない。本発明のペプチドの美容的または薬理学的に許容される塩は、現行技術において公知の従来の方法により得ることができる（Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ，Ｌ．Ｄ．Ｂｉｇｈｌｅｙ  ａｎｄ  Ｍｏｎｋｈｏｕｓｅ  Ｄ．Ｃ．（１９７７）“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ  ６６：１‐１９）。
【００８３】
本発明の別の局面は、皮膚、粘膜、および／または頭皮の治療および／またはケアのための、本発明で述べる一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩に関する。
【００８４】
１つの特定の局面では、本発明は、エラスターゼ活性に起因する、皮膚、粘膜、および／または頭皮の状態、障害、および／または疾患の、治療、予防、および／またはケアのための、本発明で述べる一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩に関する。
【００８５】
別の特定の局面では、本発明は、コラーゲン合成の刺激が有益である、皮膚、粘膜、および／または頭皮の状態、障害、および／または疾患の、治療、予防、および／またはケアのための、本発明で述べる一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩に関する。
【００８６】
別の特定の局面では、本発明は、エラスターゼの阻害、好ましくは、皮膚、粘膜、および／または頭皮におけるエラスターゼの阻害のための、本発明で述べる一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩に関する。
【００８７】
別の特定の局面では、本発明は、コラーゲン合成の刺激、好ましくは、皮膚、粘膜、および／または頭皮におけるコラーゲン合成の刺激のための、本発明で述べる一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩に関する。
【００８８】
別の特定の局面では、本発明は、皮膚、粘膜、および／または頭皮の弾性を高める、本発明で述べる一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩に関する。
【００８９】
別の特定の局面では、本発明は、顔のシワを減少または除去する、本発明で述べる一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩に関する。
【００９０】
別の特定の局面では、本発明は、老化および／または光老化の徴候を低減、遅延、および／または予防する、皮膚および／または頭皮の治療および／またはケアのための、本発明で述べる一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩に関する。
【００９１】
別の特定の局面では、本発明は、シワ、表情ジワ、ストレッチマーク、皮膚の老化、皮膚の光老化、創傷治癒障害、潰瘍、糖尿病性潰瘍、ケロイド、肥厚性瘢痕、挫瘡、セルライト、オレンジピールスキン、弾力線維症、光線性弾力線維症、角化症、炎症、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、敏感肌、湿疹、水疱性類天疱瘡、歯肉炎、歯周炎、皮膚癌、腫瘍浸潤、腫瘍転移、毛細血管拡張症、クーペロシス、静脈瘤、眼の周りのクマ、眼の下のクマ、脱毛症および脱毛、酒さ、ならびに／または乾癬の患部である皮膚、粘膜、および／または頭皮の治療および／またはケアのための、本発明で述べる一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩に関する。
【００９２】
別の特定の局面では、本発明は、毛髪の治療または毛髪の衛生のための、本発明で述べる一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩に関する。
【００９３】
別の特定の局面では、本発明は、顔および／もしくは身体の皮膚の治療および／またはケア、または、顔および／もしくは身体の衛生のための、本発明で述べる一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩に関する。
【００９４】
別の特定の局面では、本発明の治療、予防、および／またはケアは、局所投与または経皮投与によって実施され；好ましくは、局所投与または経皮投与は、イオン泳動、ソノフォレーシス、電気穿孔法、機械的圧力、浸透圧勾配、密封治癒（ｏｃｃｌｕｓｉｖｅ  ｃｕｒｅ）、マイクロインジェクション、圧力による無針注射、微小電気パッチ（ｍｉｃｒｏｅｌｅｃｔｒｉｃ  ｐａｔｃｈｅｓ）による、またはこれらのいずれかの組み合わせによって実施される。
【００９５】
別の特定の局面では、治療、予防、および／またはケアは、経口投与によって行われる。
【００９６】
作製手順
本発明のペプチド、それらの立体異性体、その混合物、および／またはそれらの美容的もしくは薬理学的に許容される塩の合成は、例えば、固相ペプチド合成の方法（Ｓｔｅｗａｒｔ  Ｊ．Ｍ．ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ  Ｊ．Ｄ．（１９８４）“Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ”Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ；Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ  Ｍ．ａｎｄ  Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ  Ａ．（１９８４）“Ｔｈｅ  ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｌｌｏｙｄ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  Ｐ．，Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ  Ｆ．ａｎｄ  Ｇｉｒａｌｔ  Ｅ．（１９９７）“Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ”ＣＲＣ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，ＵＳＡ）、溶液中での合成の方法、固相合成および溶液合成の方法の組み合わせ、または酵素合成の方法（Ｋｕｌｌｍａｎｎ  Ｗ．（１９８０）“Ｐｒｏｔｅａｓｅｓ  ａｓ  ｃａｔａｌｙｓｔｓ  ｆｏｒ  ｅｎｚｙｍｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ  ｏｆ  ｏｐｉｏｉｄ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ”Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５５：８２３４‐８２３８）など、先行技術において公知の従来の方法に従って実施することができる。ペプチドは、所望される配列を産生させる目的で遺伝子操作されたものであっても、されていないものであっても、細菌株の発酵によって得ることもでき、または、動物もしくは植物由来、好ましくは植物由来のタンパク質の制御された加水分解により少なくとも所望される配列を含有するペプチド断片を遊離させることによって得ることもできる。
【００９７】
例えば、式（Ｉ）の本発明のペプチドを得るための方法は：
‐  Ｎ末端が遊離であり、Ｃ末端が保護されているかまたは固相支持体に結合しているアミノ酸上へ、Ｎ末端が保護され、Ｃ末端が遊離であるアミノ酸をカップリングする工程；
‐  Ｎ末端の保護基を除去する工程；
‐  カップリングおよびＮ末端保護基の除去の一連の操作を繰り返して、所望されるペプチド配列を得る工程；
‐  Ｃ末端の保護基の除去、または固相支持体からの開裂を行う工程、
を含む。
【００９８】
好ましくは、Ｃ末端は固相支持体に結合しており、プロセスは固相上で行われ、従って、このプロセスは、Ｎ末端が遊離であり、Ｃ末端がポリマー支持体に結合しているアミノ酸上への、Ｎ末端が保護され、Ｃ末端が遊離であるアミノ酸のカップリング、Ｎ末端の保護基の除去；および、テトラペプチドを得るのに必要である回数の、この一連の操作の反復、ならびに、これに続いて、最後に、合成されたペプチドの元のポリマー支持体からの開裂、を含む。
【００９９】
合成全体を通して、アミノ酸の側鎖の官能基は、一時的または永久的な保護基によって適切に保護された状態が維持され、ポリマー支持体からペプチドを開裂するプロセスと同時に、またはこれに対してオルトゴナルな形で（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｌｙ）脱保護してよい。
【０１００】
別の選択肢として、固相合成は、ジペプチドまたはトリペプチドを、ポリマー支持体上に、またはポリマー支持体へ予め結合させたジペプチドもしくはアミノ酸上にカップリングさせるという、収束的な方法によって実施してもよい。収束的合成法は、当業者に公知であり、Ｌｌｏｙｄ‐Ｗｉｌｌｉａｍｓ  Ｐ．，Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ  Ｆ．ａｎｄ  Ｇｉｒａｌｔ  Ｅ．ｏｎ“Ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ  ｓｏｌｉｄ  ｐｈａｓｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”（１９９３）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ４９：１１０６５‐１１１３３に記載されている。
【０１０１】
このプロセスは、Ｎ末端およびＣ末端の脱保護、ならびに／または本技術分野で公知の標準的な条件およびプロセスを用いての、ポリマー支持体からの区別されない順番によるペプチドの開裂、の追加工程を含んでよく、その後、前記末端の官能基を修飾してよい。所望される場合は行ってよいＮ末端およびＣ末端の修飾は、ポリマー支持体に結合した状態の式（Ｉ）のペプチドで実施してよく、またはペプチドをポリマー支持体から開裂させた後に実施してもよい。
【０１０２】
別の選択肢として、Ｒ１は、本発明のペプチドのＮ末端と化合物Ｒ１−Ｚとの反応によって導入してよく、ここで、Ｒ１は、上述の意味を有し、Ｚは、これらに限定されないが、中でも、トシル基、メシル基、およびハロゲン基などの脱離基であり；Ｒ１は、適切な溶媒中にて、塩基の存在下、求核置換反応で導入され、ここで、Ｎ−Ｃ結合の形成に関与しない官能基を持つ断片は、一時的または永久的な保護基によって適切に保護される。
【０１０３】
所望される場合は、および／または追加的に、Ｒ２ラジカルの導入は、適切な溶媒、およびＮ，Ｎ‐ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）もしくはトリエチルアミンなどを例とする塩基、または１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）もしくは１‐ヒドロキシアザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）などの添加剤、および例えば、中でもカルボジイミド、ウロニウム塩、ホスホニウム塩、もしくはアミジニウム塩などの脱水剤の存在下にて、Ｒ２が−ＯＲ３、−ＮＲ３Ｒ４、または−ＳＲ３である化合物ＨＲ２と、Ｒ２が−ＯＨである式（Ｉ）のペプチドに対応する相補的断片との反応により、または例えば塩化チオニルを用いてアシルハロゲン化物を予め形成させ、それによって、本発明に従う一般式（Ｉ）のペプチドを得ることにより行ってよく、ここで、Ｎ−Ｃ結合の形成に関与しない官能基を有する断片は、一時的または永久的な保護基によって適切に保護されるか、または、別の選択肢として、他のＲ２ラジカルは、ペプチドをポリマー支持体から開裂させるプロセスと同時に行うカップリングによって導入してもよい。
【０１０４】
当業者であれば、Ｃ末端およびＮ末端の脱保護／開裂工程、およびその後の誘導体化工程が、本技術分野で公知の手順に従い、いかなる順序で行われてもよいことを容易に理解するであろう（Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｂ．ａｎｄ  Ｍａｒｃｈ，Ｊ．（１９９９）“Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ”，５ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，２００１）。
【０１０５】
「保護基」という用語は、有機官能基を封止し、制御された条件下で除去することができる基を意味する。保護基、それらの相対的な反応性、およびそれらが不活性状態を維持する条件については当業者に公知である。
【０１０６】
アミノ基のための保護基の代表例は、中でも、酢酸アミド、安息香酸アミド、ピバル酸アミドなどのアミド；ベンジルオキシカルボニル（ＣｂｚもしくはＺ）、２‐クロロベンジル（ＣｌＺ）、パラ‐ニトロベンジルオキシカルボニル（ｐＮＺ）、ｔｅｒｔ‐ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、２，２，２‐トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）、２‐（トリメチルシリル）エチルオキシカルボニル（Ｔｅｏｃ）、９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、もしくはアリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）などのカルバメート、トリチル（Ｔｒｔ）、メトキシトリチル（Ｍｔｔ）、２，４‐ジニトロフェニル（Ｄｎｐ）、Ｎ‐［１‐（４，４‐ジメチル‐２，６‐ジオキソシクロヘキサ‐１‐イリデン）エチル（Ｄｄｅ）、１‐（４，４‐ジメチル‐２，６‐ジオキソ‐シクロヘキシリデン）‐３‐メチルブチル（ｉｖＤｄｅ）、１‐（１‐アダマンチル）‐１‐メチルエトキシカルボニル（Ａｄｐｏｃ）であり、好ましくは、ＢｏｃまたはＦｍｏｃである。
【０１０７】
カルボキシルのための保護基の代表例は、中でも、ｔｅｒｔ‐ブチルエステル（ｔＢｕ）、アリルエステル（Ａｌｌ）、トリフェニルメチルエステル（トリチルエステル、Ｔｒｔ）、シクロヘキシルエステル（ｃＨｅｘ）、ベンジルエステル（Ｂｚｌ）、オルソ‐ニトロベンジルエステル、パラ‐ニトロベンジルエステル、パラ‐メトキシベンジルエステル、トリメチルシリルエチルエステル、２‐フェニルイソプロピルエステル、フルオレニルメチルエステル（Ｆｍ）、４‐（Ｎ‐［１‐（４，４‐ジメチル‐２，６‐ジオキソシクロヘキシリデン）‐３‐メチルブチル］アミノ）ベンジルエステル（Ｄｍａｂ）などのエステルであり；本発明の好ましい保護基は、Ａｌｌ、ｔＢｕ、ｃＨｅｘ、Ｂｚｌ、およびＴｒｔのエステルである。
【０１０８】
三官能アミノ酸は、Ｎ末端およびＣ末端の保護基に対してオルトゴナル（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ）である一時的または永久的な保護基により、合成プロセスの過程で保護することができる。
【０１０９】
アルギニン側鎖のグアニジン基は、中でもアリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）、パラ‐トルエンスルホニル（Ｔｏｓｙｌ、Ｔｏｓ）、２，２，５，７，８‐ペンタメチルクロマン‐６‐スルホニル（Ｐｍｃ）、２，２，４，６，７‐ペンタメチルジヒドロベンゾフラン‐５‐スルホニル（Ｐｂｆ）、ニトロもしくは４‐メトキシ‐２，３，６‐トリメチルベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）基を用いて保護することができる。トリプトファン側鎖のインドール基は、ホルミル（Ｆｏｒ）、ｔｅｒｔ‐ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、メシチレン‐２‐スルホニル（Ｍｔｓ）基を用いて保護することができ、または保護せずに用いることもできる。チロシン側鎖のヒドロキシル基は、中でも２‐ブロモベンジルオキシカルボニル（２‐ＢｒＺ）、ｔｅｒｔ‐ブチル（ｔＢｕ）、アリル（Ａｌｌ）、ベンジル（Ｂｚｌ）、または２，６‐ジクロロベンジル（２，６‐ｄｉＣｌＺ）基を用いて保護することができる。
【０１１０】
好ましい態様では、用いられる保護基の方法は、アミノ基がＢｏｃで保護され、カルボキシル基がＢｚｌ、ｃＨｅｘ、またはＡｌｌで保護され、アルギニン側鎖がＴｏｓで保護され、トリプトファン側鎖がＦｏｒまたはＭｔｓで保護され、およびチロシン側鎖が２‐ＢｒＺまたはＢｚｌで保護される方法である。
【０１１１】
別の好ましい態様では、用いられる保護基の方法は、アミノ基がＦｍｏｃで保護され、カルボキシル基がｔＢｕ、Ａｌｌ、またはＴｒｔで保護され、アルギニン側鎖がＰｂｆまたはＰｍｃで保護され、トリプトファン側鎖がＢｏｃで保護されるかまたは保護されずに用いられ、およびチロシン側鎖がｔＢｕで保護される方法である。
【０１１２】
これらのおよびその他の追加的な保護基の例、それらの導入、ならびにそれらの除去については、文献に記載されている（Ｇｒｅｅｎｅ  Ｔ．Ｗ．ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，（１９９９）“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ａｔｈｅｒｔｏｎ  Ｂ．ａｎｄ  Ｓｈｅｐｐａｒｄ  Ｒ．Ｃ．（１９８９）”Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ”ＩＲＬ  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ）。「保護基」という用語はまた、固相合成に用いられるポリマー支持体も含む。
【０１１３】
合成が、完全にまたは部分的に固相で行われる場合、本発明の方法で用いられることが考えられる固体支持体としては、ポリスチレン支持体、ポリスチレンにグラフトしたポリエチレングリコールなどが挙げられ、例えば、これらに限定されないが、ｐ‐メチルベンズヒドリルアミン樹脂（ＭＢＨＡ）（Ｍａｔｓｕｅｄａ  Ｇ．Ｒ．ａｎｄ  Ｓｔｅｗａｒｔ  Ｊ．Ｍ．（１９８１）“Ａ  ｐ‐ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｅ  ｒｅｓｉｎ  ｆｏｒ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｓｏｌｉｄ‐ｐｈａｓｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｍｉｄｅｓ”Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ２：４５‐５０）、２‐クロロトリチル樹脂（Ｂａｒｌｏｓ  Ｋ．，Ｇａｔｏｓ  Ｄ．，Ｋａｌｌｉｔｓｉｓ  Ｊ．，Ｐａｐａｐｈｏｔｉｕ  Ｇ．，Ｓｏｔｉｒｉｕ  Ｐ．，Ｗｅｎｑｉｎｇ  Ｙ．ａｎｄ  Ｗ．Ｓｃｈａｆｅｒ（１９８９）“Ｄａｒｓｔｅｌｌｕｎｇ  ｇｅｓｃｈｕｔｚｔｅｒ  Ｐｅｐｔｉｄ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｉｅｒｔｅｒ  Ｆｒａｇｍｅｎｔｅ  ｕｎｔｅｒ  Ｅｉｎｓａｔｚ  Ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌ  Ｈａｒｚｅ”Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３０：３９４３‐３９４６；Ｂａｒｌｏｓ  Ｋ．，Ｇａｔｏｓ  Ｄ．，Ｋａｐｏｌｏｓ  Ｓ．，Ｐａｐａｐｈｏｔｉｕ  Ｇ．，Ｓｃｈａｆｅｒ  Ｗ．ａｎｄ  Ｗｅｎｑｉｎｇ  Ｙ．（１９８９）“Ｖｅｒｅｓｔｅｒｕｎｇ  ｖｏｎ  ｐａｒｔｉｅｌｌ  ｇｅｓｃｈｕｔｚｔｅｎ  Ｐｅｐｔｉｄ  ｆｒａｇｍｅｎｔ  ｍｉｔ  Ｈａｒｚ．Ｅｉｎｓａｔｚ  ｖｏｎ  ２‐Ｃｈｌｏｒｏｔｒｉｔｙｌｃｈｌｏｒｉｄ  ｚｕｒ  Ｓｙｎｔｈｅｓｅ  ｖｏｎ  Ｌｅｕ１‐Ｇａｓｔｒｉｎ  Ｉ”Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３０：３９４７‐３９５１）、ＴｅｎｔａＧｅｌ（登録商標）樹脂（ラップポリメーレ社（Ｒａｐｐ  Ｐｏｌｙｍｅｒｅ  ＧｍｂＨ））、ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ（登録商標）樹脂（マトリックスイノベーション社（Ｍａｔｒｉｘ  Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ，Ｉｎｃ））などであり、これらは、５‐（４‐アミノメチル‐３，５‐ジメトキシ‐フェノキシ）−吉草酸（ＰＡＬ）（Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ  Ｆ．，Ｋｎｅｉｂ  Ｃｏｒｄｏｎｉｅｒ  Ｎ．，Ｂｉａｎｃａｌａｎａ  Ｓ．，Ｇｅｒａ  Ｌ．，Ｍａｓａｄａ  Ｒ．Ｉ．，Ｈｕｄｓｏｎ  Ｄ．ａｎｄ  Ｂａｒａｎｙ  Ｇ．（１９９０）“Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ５‐（４‐（９‐ｆｌｕｏｒｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）ａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ‐３，５‐ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ‐ｐｈｅｎｏｘｙ）‐ｖａｌｅｒｉｃ  ａｃｉｄ（ＰＡＬ）ｈａｎｄｌｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｓｏｌｉｄ  ｐｈａｓｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｃ‐ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｍｉｄｅｓ  ｕｎｄｅｒ  ｍｉｌｄ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ”Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５５：３７３０‐３７４３）、２‐［４‐アミノメチル（２，４ジメトキシフェニル）］フェノキシ酢酸（ＡＭ）（Ｒｉｎｋ  Ｈ．（１９８７）“Ｓｏｌｉｄ‐ｐｈａｓｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｆｒａｇｍｅｎｔｓ  ｕｓｉｎｇ  ａ  ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｒｉａｌｋｏｘｙｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ  ｒｅｓｉｎ”Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２８：３７８７‐３７９０）、ワン��（Ｗａｎｇ  Ｓ．Ｓ．（１９７３）“ｐ‐Ａｌｋｏｘｙｂｅｎｚｙｌ  Ａｌｃｏｈｏｌ  Ｒｅｓｉｎ  ａｎｄ  ｐ‐Ａｌｋｏｘｙｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌｈｙｄｒａｚｉｄｅ  Ｒｅｓｉｎ  ｆｏｒ  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ”Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．９５：１３２８‐１３３３)などの、脱保護およびポリマー支持体からのペプチドの開裂を同時に行うことを可能とする不安定性リンカーを含んでも含んでいなくてもよい。
【０１１４】
美容または医薬組成物
本発明のペプチドは、皮膚、粘膜、および／または頭皮におけるエラスターゼ活性の阻害および／またはコラーゲン合成の刺激のために、哺乳類、好ましくはヒトの身体の作用部位とこのペプチドとを接触させる任意の手段により、それを含有する組成物の形態で、投与することができる。
【０１１５】
この点において、本発明の別の局面は、少なくとも１つの一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩を、少なくとも１つの美容的もしくは薬理学的に許容される補助剤と共に含む美容または医薬組成物である。このような組成物は、当業者に公知である従来の方法によって作製することができる（“Ｈａｒｒｙ’ｓ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃｏｌｏｇｙ”，Ｅｉｇｈｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２０００）Ｒｉｅｇｅｒ  Ｍ．Ｍ．，ｅｄ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｕｂ，ＮＹ，Ｕ．Ｓ．；“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｔｗｅｎｔｉｅｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００３）Ｇｅｎｎａｒｏ  Ａ．Ｒ．，ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｕ．Ｓ．）。
【０１１６】
本発明のペプチドは、その配列の性質、またはＮ末端および／もしくはＣ末端において考え得る任意の修飾に応じて、様々な水溶性を有する。従って、本発明のペプチドは、水溶液によって組成物中に組み込むことができ、水溶性でないものは、例えば、これらに限定されないが、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、プロピレングリコール、グリセリン、ブチレングリコール、もしくはポリエチレングリコール、またはこれらのいずれかの組み合わせなど、美容的もしくは薬理学的に許容される従来の溶媒中で可溶化することができる。
【０１１７】
投与される本発明のペプチドの美容的もしくは薬理学的効果量、ならびにそれらの用量は、年齢、患者の状態、障害もしくは疾患の重症度、投与の経路および頻度、ならびに用いられるペプチドの特定の性質を含む多くの因子に依存する。
【０１１８】
「美容的もしくは薬理学的効果量」とは、無毒性であるが、所望される効果を提供するのに十分である１もしくは複数の本発明のペプチドの量を意味する。本発明のペプチドは、本発明の美容または医薬組成物中にて、所望される効果を達成するために美容的または薬理学的に効果的である濃度にて用いられ；組成物の全重量に対する好ましい形態では、０．０００００００１％（重量による）から２０％（重量による）、好ましくは、０．０００００１％（重量による）から２０％（重量による）、より好ましくは、０．０００１％（重量による）から１０％（重量による）、さらにより好ましくは０．０００１％（重量による）から５％（重量による）である。
【０１１９】
本発明のペプチドはまた、美容もしくは医薬送達システム、および／または徐放システムに組み込むことができる。
【０１２０】
「送達システム」という用語は、本発明のペプチドと共に投与される希釈剤、補助剤、賦形剤、またはキャリアを意味する。このような美容用または医薬用キャリアは、水、油類、または界面活性剤などの液体であってよく、例えば、これらに限定されないが、ピーナッツ油、大豆油、鉱油、ゴマ油、ヒマシ油、ポリソルベート、ソルビタンエステル、エーテルサルフェート、サルフェート、ベタイン、グルコシド、マルトシド、脂肪アルコール、ノノキシノール、ポロキサマー、ポリオキシエチレン、ポリエチレングリコール、デキシトロース、グリセロール、ジギトニンなど、石油、動物、植物、または合成由来のものを含む。Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”は、適切な媒体としての希釈剤、補助剤、または賦形剤について記載している。
【０１２１】
「徐放」という用語は、ある期間にわたる化合物の少しずつの放出を、必須ではないが好ましくは、ある期間を通しての一定の化合物放出レベルと伴なって提供する化合物の送達システムを表す従来の意味で用いられる。
【０１２２】
送達システムまたは徐放システムの例は、リポソーム、混合リポソーム、オレオソーム、ニオソーム、小粒子、ミリ粒子、マイクロ粒子、ナノ粒子、および固体脂質ナノ粒子、スポンジ、シクロデキストリン、小胞、ミセル、界面活性剤の混合ミセル、界面活性剤‐リン脂質混合ミセル、ミリスフェア、マイクロスフェア、およびナノスフェア、リポスフェア、ミリカプセル、マイクロカプセル、およびナノカプセルであり、さらには、活性成分のより高い浸透の達成、および／またはその薬物動態学的および薬力学的性質の改善の目的で、マイクロエマルジョンおよびナノエマルジョンである。好ましい送達システムまたは徐放システムは、リポソーム、界面活性剤‐リン脂質混合ミセル、およびマイクロエマルジョンであり、より好ましくは、逆ミセルの内部構造を有する油中水型マイクロエマルジョンである。
【０１２３】
徐放システムは、先行技術で公知の方法によって作製することができ、それらを含有する組成物は、例えば、粘着性パッチ、非粘着性パッチ、および微小電気パッチを含む局所投与によって、または例えば、これらに限定されないが、経口、または、経鼻、直腸、もしくは皮下の埋め込みまたは注射、または特定の身体部分への直接の埋め込みもしくは注射を含む非経口による全身投与によって投与することができ、好ましくは、本発明のペプチドを比較的一定の量で放出する必要がある。徐放システムに含有されるペプチドの量は、例えば、投与部位、本発明のペプチドの放出の動態および持続期間、ならびに治療および／または予防されるべき状態、障害、および／または疾患の性質に応じて異なる。
【０１２４】
本発明のペプチドはまた、例えば、これらに限定されないが、中でもタルク、ベントナイト、シリカ、デンプン、もしくはマルトデキストリンなどの、固体有機ポリマーまたは固体ミネラル基材に吸着させてもよい。
【０１２５】
本発明のペプチドを含有する組成物はまた、皮膚、粘膜、および／または頭皮に直接接触する布、不織布、または医療用デバイス内へ組み込むこともでき、それによって、これらは、布もしくは不織布もしくは医療用デバイスとの固定システムの生分解により、または身体との摩擦により、身体の水分により、皮膚のｐＨにより、もしくは体温により、本発明のペプチドを放出する。さらに、布および不織布は、身体と直接接触する衣服の作製に用いることができる。好ましくは、本発明のペプチドを含有する布、不織布、および医療用デバイスは、エラスターゼ活性に起因する、および／またはコラーゲン合成の刺激が有益である、皮膚、粘膜、および／または頭皮の状態、障害、および／または疾患の、治療および／またはケアのために用いられる。
【０１２６】
上述の送達システムおよび／または徐放システムを含む、布、不織布、衣服、医療用デバイス、およびそれらにペプチドを固定化するための手段の例は、文献に記載されており、現行技術において公知である（Ｓｃｈａａｂ  Ｃ．Ｋ．（１９８６）“Ｉｍｐｒｅｇｎａｔｉｎｇ  Ｆａｂｒｉｃｓ  Ｗｉｔｈ  Ｍｉｃｒｏｃａｐｓｕｌｅｓ”，ＨＡＰＰＩ  Ｍａｙ  １９８６；Ｎｅｌｓｏｎ  Ｇ．（２００２）“Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｅｘｔｉｌｅｓ”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２４２：５５‐６２；“Ｂｉｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｔｅｘｔｉｌｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｓｋｉｎ”（２００６）Ｃｕｒｒ．Ｐｒｏｂｌ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ，ｖ．３３，Ｈｉｐｌｅｒ  Ｕ．Ｃ．ａｎｄ  Ｅｌｓｎｅｒ  Ｐ．，ｅｄｓ．Ｓ．Ｋａｒｇｅｒ  Ａ．Ｇ．，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ；Ｍａｌｃｏｍ  Ｒ．Ｋ．，ＭｃＣｕｌｌａｇｈ  Ｓ．Ｄ．，Ｗｏｏｌｆｓｏｎ  Ａ．Ｄ．，Ｇｏｒｍａｎ  Ｓ．Ｐ．，Ｊｏｎｅｓ  Ｄ．Ｓ．ａｎｄ  Ｃｕｄｄｙ  Ｊ．（２００４）“Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  ａ  ｍｏｄｅｌ  ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｄｒｕｇ  ｆｒｏｍ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｓｅｌｆ‐ｌｕｂｒｉｃａｔｉｎｇ  ｓｉｌｉｃｏｎｅ  ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌ”Ｊ．Ｃｏｎｔ．Ｒｅｌｅａｓｅ  ９７：３１３‐３２０）。好ましい布、不織布、衣服、および医療用デバイスは、絆創膏、ガーゼ、シャツ、靴下、ストッキング、下着、腰帯、手袋、オムツ、生理用ナプキン、包帯、ベッドカバー、拭き取り布、ヒドロゲル、粘着性パッチ、非粘着性パッチ、微小電気パッチ、および／またはフェイスマスクである。
【０１２７】
本発明のペプチド、それらの立体異性体、その混合物、および／またはそれらの美容的もしくは薬理学的に許容される塩を含有する美容または医薬組成物は、所望の形態を製剤するために必要である美容的もしくは薬理学的に許容される賦形剤を所望される場合は含んでいてよい、様々な種類の局所または経皮投与用組成物に用いることができる（Ｆａｕｌｉ  ｉ  Ｔｒｉｌｌｏ  Ｃ．（１９９３）Ｔｒｅａｔｉｓｅ  ｏｆ  Ｇａｌｅｎｉｃ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌｕｚａｎ  ５，Ｓ．Ａ．Ｅｄｉｃｉｏｎｅｓ，Ｍａｄｒｉｄ）。
【０１２８】
局所投与または経皮用製剤のための組成物は、いかなる固体、液体、または半固体の製剤として提供されてもよく、例えば、これらに限定されないが、クリーム、例えば、これらに限定されないが、水中の油および／もしくはシリコーンのエマルジョン、油および／もしくはシリコーン中の水のエマルジョン、水／油／水型もしくは水／シリコーン／水型のエマルジョン、ならびに油／水／油型もしくはシリコーン／水／シリカ型のエマルジョンなどの多相エマルジョン、無水組成物、水性分散液、オイル、ミルク、バルサム、フォーム、ローション、ジェル、クリームジェル、水性アルコール溶液、水性グリコール溶液（ｈｙｄｒｏｇｌｙｃｏｌｉｃ  ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）、ヒドロゲル、リニメント、血清（ｓｅｒａ）、石鹸、シャンプー、コンディショナー、血清（ｓｅｒｕｍｓ）、多糖フィルム、軟膏、ムース、ポマード、粉末、バー型（ｂａｒｓ）、ペンシル型（ｐｅｎｃｉｌｓ）、スプレーもしくはエアロゾル（スプレー）などであり、「つけたままのタイプ（ｌｅａｖｅ  ｏｎ）」の製剤および「洗い流しタイプ（ｒｉｎｓｅ  ｏｆｆ）」の製剤を含む。これらの局所または経皮投与用の製剤は、当業者に公知の技術を用いて、例えば、これらに限定されないが、拭き取り布、ヒドロゲル、粘着性パッチ、非粘着性パッチ、微小電気パッチ、もしくはフェイスマスクなどの様々なタイプの固体付帯品に組み込んでよく、または、中でも、液体ファンデーションおよびコンパクトファンデーションを例とするメークアップファンデーション、メークアップリムーバルローション、メークアップリムーバルミルク、コンシーラー、アイシャドー；口紅、リッププロテクター、リップグロス、ならびにパウダーなどの種々のメークアップ製品に組み込んでもよい。
【０１２９】
本発明の美容または医薬組成物は、本発明のペプチドの経皮吸収を高める剤を含んでよく、例えば、これらに限定されないが、中でもジメチルスルホキシド、ジメチルアセタミド、ジメチルホルムアミド、界面活性剤、アゾン（１‐ドデシルアザシクロヘプタン‐２‐オン）、アルコール、尿素、エトキシジグリコール、アセトン、プロピレングリコール、またはポリエチレングリコールなどである。さらに、本発明の美容または医薬組成物は、本発明のペプチドの浸透を高める目的で、イオン泳動、ソノフォレーシス、電気穿孔法、微小電気パッチ、機械的圧力、浸透圧勾配、密封治癒、マイクロインジェクション、もしくは例えば酸素圧による注射などの圧力による無針注射、またはこれらのいずれかの組み合わせによって、治療される局所領域に適用することができる。適用領域は、予防、ケア、および／または治療を行う状態、障害、および／または疾患の性質によって決定される。
【０１３０】
さらに、本発明のペプチド、その立体異性体、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩を含有する美容組成物は、種々のタイプの経口投与用製剤として用いることができ、好ましくは、これらに限定されないが、ゼラチンカプセルを含むカプセル、糖衣錠を含む錠剤、粉末、顆粒、チューイングガム、溶液、懸濁液、エマルジョン、シロップ、多糖フィルム、ゼリー、もしくはゼラチン、および当業者に公知のその他のいずれかの形を例とする経口美容品（ｏｒａｌ  ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ）の形態である。特に、本発明のペプチドは、これらに限定されないが、食事バー、または圧縮もしくは非圧縮粉末など、機能性食品または栄養強化食品のいずれの形態にも組み込むことができる。これらの粉末は、水、ソーダ、乳製品、ダイズ由来品に可溶化可能であるか、または食事バーに組み込み可能である。本発明のペプチドは、これらに限定されないが、脂肪成分、水性成分、湿潤剤、保存料、食感付与剤（ｔｅｘｔｕｒｉｚｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）、香味料、香料、酸化防止剤、および食品産業における一般的な食用色素などの一般的な賦形剤および補助剤と共に、経口組成物または食品サプリメント用に製剤することができる。
【０１３１】
本発明のペプチド、それらの立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩を含有する美容または医薬組成物は、局所もしくは経皮経路、その他の適切ないずれの経路でも投与することができ、例えば経口または非経口経路であり、その目的のために、それらには所望される投与形態の製剤に必要な薬理学的に許容される賦形剤が含まれる。本発明に関して、「非経口」という用語は、経鼻、耳介、点眼、直腸経路、皮下注射、静脈内、筋肉内、硝子体内、脊髄内、頭蓋内、関節内、くも膜下腔内、および腹腔内注射などの皮内、血管内注射、ならびにいずれかの別の同様の注射または注入技術を含む。活性成分の様々な医薬投与形態、およびそれらを得るために必要である賦形剤についてのレビューは、“Ｔｒａｔａｄｏ  ｄｅ  Ｆａｒｍａｃｉａ  Ｇａｌｅｎｉｃａ，”Ｃ．Ｆａｕｌｉ  ｉ  Ｔｒｉｌｌｏ，１９９３，Ｌｕｚａｎ  ５，Ｓ．Ａ．Ｅｄｉｃｉｏｎｅｓ，Ｍａｄｒｉｄに記載されている。
【０１３２】
本発明に記載される美容または医薬組成物に含有される美容的または薬理学的に許容される補助剤の中でも、皮膚、粘膜、および／または頭皮の治療および／またはケアのための組成物に一般的に用いられる追加成分が挙げられ、例えば、これらに限定されないが、その他のエラスターゼ阻害剤、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、メラニン合成の刺激または阻害剤、美白または脱色剤、着色促進剤（ｐｒｏｐｉｇｍｅｎｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）、セルフタンニング剤、老化防止剤、ＮＯ‐シンターゼの阻害剤、５α‐レダクターゼの阻害剤、リジル‐および／またはプロリルヒドロキシラーゼの阻害剤、酸化防止剤、遊離ラジカル捕捉剤および／または抗大気汚染剤、反応性カルボニル種捕捉剤、抗糖化剤、抗ヒスタミン剤、制吐剤、抗ウィルス剤、抗寄生虫剤、乳化剤、皮膚軟化剤、有機溶媒、液体噴霧剤、湿潤剤などの皮膚調整剤、水分を保持する物質、アルファヒドロキシ酸、ベータヒドロキシ酸、保湿剤、表皮加水分解酵素、ビタミン、顔料または着色剤、色素、ゲル化ポリマー、増粘剤、界面活性剤、軟化剤、シワ防止剤、目の下のクマを低減または治療できる剤、剥離剤、抗菌剤、抗真菌剤、静真菌剤、殺菌剤、静菌剤、真皮もしくは表皮の高分子合成を刺激する剤および／またはそれらの分解を阻害もしくは予防する能力を持つ剤、例えばコラーゲン合成を刺激する剤、エラスチン合成を刺激する剤、デコリン合成を刺激する剤、ラミニン合成を刺激する剤、デフェンシン合成を刺激する剤、シャペロン合成を刺激する剤、アクアポリン合成を刺激する剤、ヒアルロン酸合成を刺激する剤、フィブロネクチン合成を刺激する剤、サーチュイン合成を刺激する剤、脂質および角質層成分（セラミド、脂肪酸など）の合成を刺激する剤、コラーゲン分解を阻害する剤、エラスチン分解を阻害するその他の剤など、カテプシンＧなどのセリンプロテアーゼを阻害する剤、線維芽細胞増殖を刺激する剤、ケラチノサイト増殖を刺激する剤、脂肪細胞増殖を刺激する剤、メラノサイト増殖を刺激する剤、ケラチノサイト分化を刺激する剤、脂肪細胞分化を刺激する剤、アセチルコリンエステラーゼを阻害する剤、皮膚弛緩剤、グリコサミノグリカン合成を刺激する剤、抗過角化症剤、面皰分解剤（ｃｏｍｅｄｏｌｙｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ）、抗乾癬剤、ＤＮＡ修復剤、ＤＮＡ保護剤、安定化剤、抗掻痒剤、敏感肌の治療および／またはケアのための剤、固化剤（ｆｉｒｍｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）、抗ストレッチマーク剤、結合剤、皮脂産生を制御する剤、脂肪分解剤または脂肪分解を刺激する剤、抗セルライト剤、抗発汗剤、治癒を刺激する剤、治癒共補助剤（ｃｏａｄｊｕｖａｎｔ  ｈｅａｌｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）、再上皮化を刺激する剤、再上皮化共補助剤（ｃｏａｄｊｕｖａｎｔ  ｒｅｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｉｚａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔｓ）、サイトカイン成長因子、沈静剤、抗炎症剤、麻酔剤、毛細血管循環および／または微小循環に作用する剤、血管新生を刺激する剤、血管透過性を阻害する剤、静脈強壮剤（ｖｅｎｏｔｏｎｉｃ  ａｇｅｎｔｓ）、細胞代謝に作用する剤、真皮‐表皮接合を改善する剤、発毛を誘発する剤、発毛阻害もしくは抑制剤、保存料、芳香物質、キレート剤、植物抽出物、エッセンシャルオイル、海産抽出物、生物発酵プロセスから得られる剤、無機塩、細胞抽出物、ならびに日焼け止め（紫外線Ａおよび／またはＢに対して作用する、有機または無機の光防護剤）などが、組成物のその他の成分と、特に本発明の組成物に含有される一般式（Ｉ）のペプチドと物理的におよび化学的に適合性を有する限りにおいて、挙げられる。さらに、これらの追加成分の性質は、本発明のペプチドの利点を許容されない程度まで変化させてはならない。これらの追加成分の本質は、合成であっても、もしくは植物抽出物などの天然であってもよく、または生物発酵プロセスによって得られる。さらなる例は、“ＣＴＦＡ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ＆  Ｈａｎｄｂｏｏｋ，１２ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００８）”に記載されている。
【０１３３】
本発明のさらなる局面は、本発明のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つを、美容的または薬理学的効果量で含有し、ならびに、これらに限定されないが、中でも、ペンタファーム／ＤＳＭ（Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍ／ＤＳＭ）から市販されているＥｌｈｉｂｉｎ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ツルマメ（Ｇｌｙｃｉｎｅ  Ｓｏｊａ）（ダイズ）タンパク質］、Ｐｒｅｒｅｇｅｎ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ツルマメ（ダイズ）タンパク質、オキシドレダクターゼ］、もしくはＲｅｇｕ（登録商標）‐Ａｇｅ［ＩＮＣＩ：加水分解コメヌカタンパク質、ツルマメ（ダイズ）タンパク質、オキシドレダクターゼ］、コレチカ／エンゲルハード／ＢＡＳＦ（Ｃｏｌｅｔｉｃａ／Ｅｎｇｅｌｈａｒｄ／ＢＡＳＦ）から市販されているＪｕｖｅｎｅｓｃｅ［ＩＮＣＩ：エトキシジグリコールおよびカプリルトリグリセリド、レチノール、ウルソール酸、フィトナジオン、イロマスタット］、Ｍｉｃｒｏｍｅｒｏｌ(商標)［ＩＮＣＩ：ピルスマルス（Ｐｙｒｕｓ  Ｍａｌｕｓ）抽出物］、ヒース抽出物［ＩＮＣＩ：カルナブルガリス（Ｃａｌｌｕｎａ  Ｖｕｌｇａｒｉｓ）抽出物］、Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｉｕｍ（登録商標）［ＩＮＣＩ：加水分解ジャガイモタンパク質］、もしくはＦｌａｖａｇｒｕｍ（商標）ＰＥＧ［ＩＮＣＩ：ＰＥＧ‐６イソステアレート、ヘスペレチンラウレート］、ラボラトリーズセロビオロジーク／コグニス（Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ  Ｓｅｒｏｂｉｏｌｏｇｉｑｕｅｓ／Ｃｏｇｎｉｓ）から市販されているＰｒｏｔｅａｓｙｌ（登録商標）ＴＰ  ＬＳ８６５７［ＩＮＣＩ：エンドウマメ（Ｐｉｓｕｍ  Ｓａｔｉｖｕｍ）抽出物］、ＳＥＰＰＩＣから市販されているＳｅｐｉｌｉｆｔ  ＤＰＨＰ［ＩＮＣＩ：ジパルミトイルヒドロキシプロリン］、ラーン（Ｒａｈｎ）から市販されているＶｉｔａｄｅｒｍ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アルコール、水、グリセリン、加水分解コメタンパク質、イレクスアクイフォリウム（Ｉｌｅｘ  Ａｑｕｉｆｏｌｉｕｍ）抽出物、ウルソール酸ナトリウム、オレアノール酸ナトリウム］、ガッテフォッセ（Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅ）から市販されているＧａｔｕｌｉｎｅ（登録商標）Ａｇｅ  Ｄｅｆｅｎｓｅ  ２［ＩＮＣＩ：ジュグランスレジア（Ｊｕｇｌａｎｓ  Ｒｅｇｉａ）（クルミ）種子抽出物］、ＩＥＢおよびアトリウム（Ａｔｒｉｕｍ）から市販されているＩＰ  ２０００［ＩＮＣＩ：デキストラン、トリフルオロアセチルトリペプチド‐２］、ソラビア（Ｓｏｌａｂｉａ）から市販されているＲａｄｉｃａｐｔｏｌ［ＩＮＣＩ：プロピレングリコール、水、パシフローラインカルナータ（Ｐａｓｓｉｆｌｏｒａ  Ｉｎｃａｒｎａｔａ）花抽出物、リベスニグルム（Ｒｉｂｅｓ  Ｎｉｇｒｕｍ）（ブラックカラント）葉抽出物、ビチスビニフェラ（Ｖｉｔｉｓ  Ｖｉｎｉｆｅｒａ）（ブドウ）葉抽出物］、またはソリアンス（Ｓｏｌｉａｎｃｅ）から市販されているＶｉａＰｕｒｅ（商標）Ｂｏｓｗｅｌｌｉａ［ＩＮＣＩ：オリバナム（ボスウェリアセラタ（Ｂｏｓｗｅｌｌｉａ  Ｓｅｒｒａｔａ））抽出物］を例とする、エラスターゼ阻害剤である合成化合物、天然抽出物、または生物発酵プロセスによって得��れる産物の少なくとも１つも美容的または薬理学的効果量で含有する、美容または医薬組成物に関する。
【０１３４】
本発明のさらなる局面は、本発明のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つを、美容的または薬理学的効果量で含有し、ならびに、これらに限定されないが、パルミチン酸アスコルビル、リン酸アスコルビルマグネシウム、リン酸アスコルビルナトリウム、ならびにアルファ‐およびベータ‐アスコルビルグルコシドなどのアスコルビン酸とその誘導体、レチノイン酸、レチナール、酢酸レチニル、もしくはパルミチン酸レチニルなどのレチノールおよびレチノールの誘導体、アロエ属およびツボクサ属の抽出物などを例とする植物抽出物、カルニチン、カルノシン、クレアチン、アシアチン酸、マデカシン酸、マデカソシド、アシアチコシド、センテラアシアチカの抽出物、ナイアシンアミド、アスタキサンチン、グルカン、ゲニステインおよびダイゼインなどのダイズ抽出物およびダイズイソフラボン、ルチン、クリシン、モリン、ビンロウジアルカロイド、フォルスコリン、ベツリン酸、オオバコ属の抽出物、ＴＧＦ‐ベータ、イチョウの抽出物、グルタミン、グリコール酸、セデルマ／クロダから市販されているＭａｔｒｉｘｙｌ（登録商標）[ＩＮＣＩ：パルミトイルペンタペプチド‐４]、Ｍａｔｒｉｘｙｌ  ３０００（登録商標）[ＩＮＣＩ：パルミトイルテトラペプチド‐７、パルミトイルオリゴペプチド]、もしくはＤｅｒｍａｘｙｌ（登録商標）[ＩＮＣＩ：Ｃ１２‐１５アルキルベンゾエート、トリベヘニン、セラミド２、ＰＥＧ１０ナタネステロール、パルミトイルオリゴペプチド]、ペンタファーム／ＤＳＭから市販されているＳｙｎ（登録商標）‐Ｃｏｌｌ［ＩＮＣＩ：パルミトイルトリペプチド‐５］、Ｐｈｙｔａｌｕｒｏｎａｔｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：イナゴマメ（セラトニアシリクア（Ｃｅｒａｔｏｎｉａ  Ｓｉｌｉｑｕａ）ガム］、もしくはＢｅａｕＡｃｔｉｖｅ（商標）ＭＴＰ［ＩＮＣＩ：加水分解乳タンパク質］、バイオテックマリン（Ｂｉｏｔｅｃｈｍａｒｉｎｅ）から市販されているＴｈａｌａｓｓｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：藻抽出物］、コレチカ／エンゲルハード／ＢＡＳＦから市販されているＥｑｕｉＳｔａｔ（商標）［ＩＮＣＩ：ピルスマルス果実抽出物、ツルマメ種子抽出物］もしくはＪｕｖｅｎｅｓｃｅ［ＩＮＣＩ：エトキシジグリコールおよびカプリルトリグリセリド、レチノール、ウルソール酸、フィトナジオン、イロマスタット］、シラブ（Ｓｉｌａｂ）から市販されているＳＭＳ  Ａｎｔｉ‐ｗｒｉｎｋｌｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アンノナスクアモサ（Ａｎｎｏｎａ  Ｓｑｕａｍｏｓａ）から精製されたオリゴペプチド］もしくはＰａｐｉｌａｃｔｙｌ  Ｄ（登録商標）［ＩＮＣＩ：水、シペルスエスクレンツス（Ｃｙｐｅｒｕｓ  Ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ）塊茎抽出物］、アトリウムイノベーションズ／ユニペックスグループ（Ａｔｒｉｕｍ  Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ／Ｕｎｉｐｅｘ  Ｇｒｏｕｐ）から市販されているＣｈｒｏＮＯｌｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：グリセリン、水（アクア（Ａｑｕａ））、デキストラン、カプロオイルテトラペプチド‐３（Ｃａｐｒｏｏｙｌ  Ｔｅｔｒａｐｅｐｔｉｄｅ‐３）］、Ｋｏｌｌａｒｅｎ（登録商標）［ＩＮＣＩ：トリペプチド‐１］、もしくはＴｈｙｍｕｌｅｎ（登録商標）４［ＩＮＣＩ：水、デキストラン、アセチルテトラペプチド‐２］、ソラビアから市販されているＢｉｏＬｙｓｅ  Ｔ．Ａ．［ＩＮＣＩ：Ｌ‐リジンおよびＬ‐アルギニンから成るオリジナルオリゴペプチド］もしくはＰｅｐｔｉｓｋｉｎ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アルギニン／リジンポリペプチド］、ガッテフォッセ（Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅ）から市販されているＧａｔｕｌｉｎｅ（登録商標）Ｉｎ‐Ｔｅｎｓｅ［ＩＮＣＩ：カプリル／カプリントリグリセリド、スピランテスアクメラ（Ｓｐｉｌａｎｔｈｅｓ  Ａｃｍｅｌｌａ）花抽出物］、ミベレバイオケミストリー（Ｍｉｂｅｌｌｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）から市販されているＰｈｙｔｏＣｅｌｌＴｅｃ（商標）Ｍａｌｕｓ  Ｄｏｍｅｓｔｉｃａ［ＩＮＣＩ：リンゴ（Ｍａｌｕｓ  Ｄｏｍｅｓｔｉｃａ）果実細胞培養物、キサンタンガム、グリセリン、レシチン、フェノキシエタノール、水］、エボニクゴールドシュミット（Ｅｖｏｎｉｋ  Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔ）から市販されているＰｈｙｔｏｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ  ＳＬＣ［ＩＮＣＩ：サリチロイルフィトスフィンゴシン］、ソリアンス（Ｓｏｌｉａｎｃｅ）から市販されているＤａｋａｌｉｎｅ［ＩＮＣＩ：スィートアーモンド（Ｐｒｕｎｕｓ  Ａｍｙｇｄａｌｕｓ  Ｄｕｌｃｉｓ）、アノゲイサスレイオカルプス（Ａｎｏｇｅｉｓｓｕｓ  Ｌｅｉｏｃａｒｐｕｓ）樹皮抽出物］、ビンシエンスから市販されているＣｏｌｌａｘｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ヘキサペプチド‐９］、ＧＰ４Ｇ［ＩＮＣＩ：アルテミア属（Ａｒｔｅｍｉａ）抽出物］、Ｄ’Ｏｒｉｅｎｔｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：フェニックスダクチリフェラ（Ｐｈｏｅｎｉｘ  Ｄａｃｔｙｌｉｆｅｒａ）（ナツメヤシ）種子抽出物］、もしくはＥｄｅｒｌｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：ピルスマルス  リンゴ果実抽出物］、またはプロビタル（Ｐｒｏｖｉｔａｌ）から市販されているＨｏｍｅｏｓｔａｔｉｎｅ［ＩＮＣＩ：エンテロモルファコンプレッサ（Ｅｎｔｅｒｏｍｏｒｐｈａ  Ｃｏｍｐｒｅｓｓａ）、カエサルピニアスピノーサ（Ｃａｅｓａｌｐｉｎｉａ  Ｓｐｉｎｏｓａ）］を例とする、コラーゲン合成剤を刺激する剤である合成化合物、天然抽出物、または生物発酵プロセスによって得られる産物の少なくとも１つも美容的または薬理学的効果量で含有する、美容または医薬組成物に関する。
【０１３５】
本発明のさらなる局面は、本発明のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つを、美容的または薬理学的効果量で含有し、ならびに、これらに限定されないが、中でもリポテック（Ｌｉｐｏｔｅｃ）から市販されているカルノシンおよびその誘導体、ＧＨＫ［ＩＮＣＩ：トリペプチド‐１］ならびにその塩および／もしくは誘導体、またはＡｌｄｅｎｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：加水分解コムギタンパク質、加水分解ダイズタンパク質、トリペプチド‐１］、またはＰｒｅｖｅｎｔｈｅｌｉａ（商標）［ＩＮＣＩ：ジアミノプロピオニルトリペプチド‐３３］を例とする、反応性カルボニル種の捕捉剤、遊離ラジカル捕捉剤、および／または抗糖化剤である合成化合物、天然抽出物、または生物発酵プロセスによって得られる産物の少なくとも１つも美容的または薬理学的効果量で含有する、美容または医薬組成物に関する。
【０１３６】
本発明のさらなる局面は、本発明のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つを、美容的または薬理学的効果量で含有し、ならびに、これらに限定されないが、中でもビチスビニフェラ、ロサカニナ（Ｒｏｓａ  ｃａｎｉｎａ）、ウコン（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ）、アイリスパリダ（Ｉｒｉｓ  ｐａｌｌｉｄａ）、カカオ（Ｔｈｅｏｂｒｏｍａ  ｃａｃａｏ）、イチョウ、レオントポジウムアルピヌム（Ｌｅｏｎｔｏｐｏｄｉｕｍ  Ａｌｐｉｎｕｍ）、もしくはドゥナリエラサリナ（Ｄｕｎａｌｉｅｌｌａ  ｓａｌｉｎａ）の抽出物を例とするシワ防止剤および／もしくは老化防止剤である抽出物の少なくとも１つ、またはこれらに限定されないが、中でもセデルマ／クロダから市販されているＭａｔｒｉｘｙｌ（登録商標）[ＩＮＣＩ：パルミトイルペンタペプチド‐３]、Ｍａｔｒｉｘｙｌ  ３０００（登録商標）[ＩＮＣＩ：パルミトイルテトラペプチド‐７、パルミトイルオリゴペプチド]、Ｅｓｓｅｎｓｋｉｎ（商標）［ＩＮＣＩ：ヒドロキシメチオニンカルシウム］、Ｒｅｎｏｖａｇｅ［ＩＮＣＩ：テプレノン］、もしくはＤｅｒｍａｘｙｌ（登録商標）[ＩＮＣＩ：パルミトイルオリゴペプチド]、ペンタファーム／ＤＳＭから市販されているＶｉａｌｏｘ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ペンタペプチド‐３］、Ｓｙｎ  Ａｋｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ジペプチドジアミノブチロイルベンジルアミドジアセテート］、Ｓｙｎ（登録商標）‐Ｃｏｌｌ［ＩＮＣＩ：パルミトイルトリペプチド‐５］、Ｐｈｙｔａｌｕｒｏｎａｔｅ［ＩＮＣＩ：イナゴマメ（セラトニアシリクア）ガム］、もしくはＰｒｅｒｅｇｅｎ（登録商標）［ＩＮＣＩ：ツルマメ（ダイズ）タンパク質、オキシドレダクターゼ］、ラボラトリーズセロビオロジーク／コグニスから市販されているＭｙｏｘｉｎｏｌ（商標）［ＩＮＣＩ：加水分解ハイビスカスエスクレンタス（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ  Ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ）抽出物］、Ｓｙｎｉｏｒａｇｅ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド‐１１］、Ｄｅｒｍｉｃａｎ（商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド‐９］、もしくはＤＮ‐ＡＧＥ（商標）ＬＳ［ＩＮＣＩ：カシアアラタ（Ｃａｓｓｉａ  Ａｌａｔａ）葉抽出物］、エクスシモール（Ｅｘｓｙｍｏｌ）から市販されているＡｌｇｉｓｕｍ  Ｃ（登録商標）［ＩＮＣＩ：メチルシラノールマンヌロネート］もしくはＨｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｓｉｌａｎｅ  ＣＮ（登録商標）［ＩＮＣＩ：メチルシラノールヒドロキシプロリンアスパルテート］、リポテックから市販されているＡｒｇｉｒｅｌｉｎｅ（登録商標）[ＩＮＣＩ：アセチルヘキサペプチド‐８]、ＳＮＡＰ‐７［ＩＮＣＩ：アセチルへプタペプチド‐４］、ＳＮＡＰ‐８［ＩＮＣＩ：アセチルオクタペプチド‐３］、Ｌｅｕｐｈａｓｙｌ（登録商標）[ＩＮＣＩ：ペンタペプチド  １８］、Ｉｎｙｌｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：（提案）アセチルヘキサペプチド‐３０］、Ａｌｄｅｎｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：加水分解コムギタンパク質、加水分解ダイズタンパク質、トリペプチド‐１］、Ｐｒｅｖｅｎｔｈｅｌｉａ（商標）［ＩＮＣＩ：ジアミノプロピオニルトリペプチド‐３３］、Ｄｅｃｏｒｉｎｙ���（商標）［ＩＮＣＩ：トリペプチド‐１０  シトルリン］、Ｔｒｙｌａｇｅｎ（商標）［ＩＮＣＩ：シュードアルテロモナスフェルメント（Ｐｓｅｕｄｏａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓ  Ｆｅｒｍｅｎｔ）抽出物、加水分解コムギタンパク質、加水分解ダイズタンパク質、トリペプチド‐１０  シトルリン、トリペプチド‐１］；Ｅｙｅｓｅｒｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド‐５］、Ｐｅｐｔｉｄｅ  ＡＣ２９［ＩＮＣＩ：アセチルトリペプチド‐３０  シトルリン］、Ｌｉｐｏｃｈｒｏｍａｎ‐６［ＩＮＣＩ：ジメチルメトキシクロマノール］、Ｃｈｒｏｍａｂｒｉｇｈｔ（商標）［ＩＮＣＩ：ジメチルメトキシクロマニルパルミテート］、Ｖｉｌａｓｔｅｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：リジンＨＣｌ、レシチン、トリペプチド‐１０  シトルリン］、ｄＧｌｙＡＧＥ（商標）［ＩＮＣＩ：リジンＨＣｌ、レシチン、トリペプチド‐９  シトルリン］、もしくはＡｎｔａｒｃｔｉｃｉｎｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：シュードアルテロモナスフェルメント抽出物］、インスティテュートユーロピーンデビオロギーセルレア（Ｉｎｓｔｉｔｕｔ  Ｅｕｒｏｐｅｅｎ  ｄｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｅ  Ｃｅｌｌｕｌａｉｒｅ）から市販されているＫｏｌｌａｒｅｎ（登録商標）［ＩＮＣＩ：トリペプチド‐１、デキストラン］、ビンシエンスから市販されているＣｏｌｌａｘｙｌ（登録商標）ＩＳ［ＩＮＣＩ：ヘキサペプチド‐９］、Ｏｒｓｉｒｔｉｎｅ（商標）ＧＬ［ＩＮＣＩ：イネ（Ｏｒｙｚａ  Ｓａｔｉｖａ）（コメ）抽出物］、Ｄ’Ｏｒｉｅｎｔｉｎｅ（商標）ＩＳ［ＩＮＣＩ：フェニックスダクチリフェラ（ナツメヤシ）種子抽出物］、Ｐｈｙｔｏｑｕｉｎｔｅｓｃｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：ヒトツブコムギ（トリチカムモノコッカム（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ  ｍｏｎｏｃｏｃｃｕｍ））抽出物］、もしくはＱｕｉｎｔｅｓｃｉｎｅ（商標）ＩＳ［ＩＮＣＩ：ジペプチド‐４］、インフィニテックアクティボス（Ｉｎｆｉｎｉｔｅｃ  Ａｃｔｉｖｏｓ）から市販されているＢＯＮＴ‐Ｌ  Ｐｅｐｔｉｄｅ［ＩＮＣＩ：パルミトイルヘキサペプチド‐１９］、セピック（Ｓｅｐｐｉｃ）から市販されているＤｅｅｐａｌｉｎｅ（商標）ＰＶＢ［ＩＮＣＩ：パルミトイル加水分解コムギタンパク質］もしくはＳｅｐｉｌｉｆｔ（登録商標）ＤＰＨＰ［ＩＮＣＩ：ジパルミトイルヒドロキシプロリン］、ガッテフォッセから市販されているＧａｔｕｌｉｎｅ（登録商標）Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［ＩＮＣＩ：アクメラオレラセア（Ａｃｍｅｌｌａ  ｏｌｅｒａｃｅａ）抽出物］、Ｇａｔｕｌｉｎｅ（登録商標）Ｉｎ‐Ｔｅｎｓｅ［ＩＮＣＩ：スピランテスアクメラ花抽出物］、もしくはＧａｔｕｌｉｎｅ（登録商標）Ａｇｅ  Ｄｅｆｅｎｓｅ  ２［ＩＮＣＩ：ジュグランスレジア（クルミ）種子抽出物］、バイオテックマリンから市販されているＴｈａｌａｓｓｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：藻抽出物］、アトリウムイノベーションズ／ユニペックスグループから市販されているＣｈｒｏＮＯｌｉｎｅ（商標）［ＩＮＣＩ：カプロオイルテトラペプチド‐３（Ｃａｐｒｏｏｙｌ  Ｔｅｔｒａｐｅｐｔｉｄｅ‐３）］もしくはＴｈｙｍｕｌｅｎ‐４［ＩＮＣＩ：アセチルテトラペプチド‐２］、コレチカ／エンゲルハード／ＢＡＳＦから市販されて��るＥｑｕｉＳｔａｔ［ＩＮＣＩ：ピルスマルス果実抽出物、ツルマメ種子抽出物］もしくはＪｕｖｅｎｅｓｃｅ［ＩＮＣＩ：エトキシジグリコールおよびカプリルトリグリセリド、レチノール、ウルソール酸、フィトナジオン、イロマスタット］、ミベレバイオケミストリーから市販されているＡｍｅｌｉｏｘ［ＩＮＣＩ：カルノシン、トコフェロール、マリアアザミ（Ｓｉｌｙｂｕｍ  Ｍａｒｉａｎｕｍ）果実抽出物］もしくはＰｈｙｔｏＣｅｌｌＴｅｃ  Ｍａｌｕｓ  Ｄｏｍｅｓｔｉｃａ［ＩＮＣＩ：リンゴ果実細胞培養物］、シラブから市販されているＢｉｏｘｉｌｉｆｔ［ＩＮＣＩ：ピンピネラアニスム（Ｐｉｍｐｉｎｅｌｌａ  Ａｎｉｓｕｍ）抽出物］もしくはＳＭＳ  Ａｎｔｉ‐Ｗｒｉｎｋｌｅ（登録商標）［ＩＮＣＩ：アンノナスクアモサ種子抽出物、例えばこれらに限定されないが、アルベリン、マンガンもしくはマグネシウム塩、特定の二級もしくは三級アミン、レチノールおよびその誘導体、ならびにイデベノンおよびその誘導体などのＣａ２＋チャネルアンタゴニスト、コエンザイムＱ１０およびその誘導体、ボスウェリア酸（ｂｏｓｗｅｌｌｉｃ  ａｃｉｄ）およびその誘導体、ＧＨＫおよびその誘導体、および／もしくはその塩、カルノシンおよびその誘導体、例えばこれらに限定されないが、フォトリアーゼもしくはＴ４エンドヌクレアーゼＶなどのＤＮＡ修復酵素、または塩素チャネルアゴニスト、を例とする、シワ防止剤および／または老化防止剤である合成化合物または産物の少なくとも１つも美容的または薬理学的効果量で含有する、美容または医薬組成物に関する。
【０１３７】
本発明のさらなる局面は、本発明のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つを、美容的または薬理学的効果量で含有し、ならびに、これらに限定されないが、中でもブプレウルムチネンシス（Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ  Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、セクロピアオブツシフォリア（Ｃｅｃｒｏｐｉａ  Ｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａ）、ケイトウ（Ｃｅｌｏｓｉａ  Ｃｒｉｓｔａｔａ）、センテラアシアチカ、キノア（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ  Ｑｕｉｎｏａ）、クリサンテルムインジクム(Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｌｌｕｍ  Ｉｎｄｉｃｕｍ)、シトラスアウランチウムアマラ(Ｃｉｔｒｕｓ  Ａｕｒａｎｔｉｕｍ  Ａｍａｒａ)、コーヒーノキ（Ｃｏｆｆｅａ  Ａｒａｂｉｃａ）、コリウスフォースコーリー(Ｃｏｌｅｕｓ  Ｆｏｒｓｋｏｈｌｉｉ)、コンミフォラミルハ(Ｃｏｍｍｉｐｈｏｒａ  Ｍｙｒｒｈａ)、クリスムムマリチムム(Ｃｒｉｔｈｍｕｍ  Ｍａｒｉｔｉｍｕｍ)、ユーゲニアカリオフィルス(Ｅｕｇｅｎｉａ  Ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌｕｓ)、イチョウ、ヘデラヘリクス（Ｈｅｄｅｒａ  Ｈｅｌｉｘ）（アイビー抽出物）、ハイビスカスサブダリファ(Ｈｉｂｉｓｃｕｓ  Ｓａｂｄａｒｉｆｆａ)、マテチャ(Ｉｌｅｘ  Ｐａｒａｇｕａｒｉｅｎｓｉｓ)、ラミナリアディジタータ(Ｌａｍｉｎａｒｉａ  Ｄｉｇｉｔａｔａ)、ネルムビウムスペシオスム(Ｎｅｌｕｍｂｉｕｍ  Ｓｐｅｃｉｏｓｕｍ)、パウリニアクパナ(Ｐａｕｌｌｉｎｉａ  Ｃｕｐａｎａ)、ペウムスボルズス(Ｐｅｕｍｕｓ  Ｂｏｌｄｕｓ)、フィラカンサフィブローサ(Ｐｈｙｌｌａｃａｎｔｈａ  Ｆｉｂｒｏｓａ)、プルネラブルガリス(Ｐｒｕｎｅｌｌａ  Ｖｕｌｇａｒｉｓ)、スィートアーモンド、ルスクスアクレアツス(Ｒｕｓｃｕｓ  Ａｃｕｌｅａｔｕｓ）（ナギイカダ抽出物）、セイヨウニワトコ（Ｓａｍｂｕｃｕｓ  Ｎｉｇｒａ）、スピルリナプラテンシスアルガエ(Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  Ｐｌａｔｅｎｓｉｓ  Ａｌｇａｅ)、キャッツクロー（Ｕｎｃａｒｉａ  Ｔｏｍｅｎｔｏｓａ）、もしくはベルベナオフィシナリス（Ｖｅｒｂｅｎａ  Ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）の抽出物または抽出物の加水分解物などを例とする抗セルライト剤、脂肪分解剤、および／もしくは静脈強壮剤である合成もしくは天然抽出物の少なくとも１つを、または、加えて、これらに限定されないが、中でもジヒドロミリセチン、コエンザイムＡ、リパーゼ、グラウシン（ｇｌａｕｃｉｎ）、エスクリン、ビスナジン、ペンタファーム／ＤＳＭから市販されているＲｅｇｕ（登録商標）‐Ｓｈａｐｅ［ＩＮＣＩ：異性化リノール酸、レシチン、グリセリン、ポリソルベート８０］、ビンシエンス／ＩＳＰから市販されているＵＣＰｅｐｔｉｄｅ（商標）Ｖ［ＩＮＣＩ：ペンタペプチド］もしくはＡＴ  Ｐｅｐｔｉｄｅ（商標）ＩＳ［ＩＮＣＩ：トリペプチド‐３］、ＳＥＰＰＩＣから市販されているＡｄｉｐｏｓｌｉｍ［ＩＮＣＩ：ソルビタンラウレート、ラウロイルプロリン］、リポテックから市販されているＬｉｐｏｒｅｄｕｃｔｙｌ（登録商標）［ＩＮＣＩ：レシチン、カフェイン、ナギイカダ（ルスクスアクレアツス）根抽出物、Ｔｅａハイドロヨージド、アイビー（ヘデラへリクス）抽出物、カルニチン、エスチン、トリペプチド‐１］、カフェイン、カルニチン、エスチン、および／またはトリエタノールアミンヨージドを例とする、抗セルライト剤、脂肪分解剤、および／もしくは静脈強壮剤である合成化合物、抽出物、または生物発酵プロセスで得られる産物の少なくとも１つも、美容的または薬理学的効果量で含有する、美容または医薬組成物に関する。
【０１３８】
適用
本発明の別の局面は、皮膚、粘膜、および／または頭皮の治療および／またはケアのための美容または医薬組成物の作製における、一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つの使用に関する。
【０１３９】
加えて、本発明は、好ましくは皮膚、粘膜、および／または頭皮におけるエラスターゼの阻害および／またはコラーゲン合成の刺激のための美容または医薬組成物の作製における、一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つの使用に関する。
【０１４０】
さらに、本発明の別の局面は、好ましくは皮膚、粘膜、および／または頭皮における、エラスターゼ活性に起因する、および／またはコラーゲン合成の刺激が有益である、皮膚、粘膜、および／または頭皮の状態、障害、および／または疾患の、治療、予防、および／またはケアのための美容または医薬組成物の作製における、一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つの使用に関する。
【０１４１】
好ましくは、エラスターゼ活性に起因する、および／またはコラーゲン合成の刺激が有益である、治療、予防、および／またはケアを行うべき皮膚、粘膜、および／または頭皮の状態、障害、および／または疾患としては、中でも、シワ、表情ジワ、ストレッチマーク、皮膚老化、皮膚光老化、創傷治癒障害、潰瘍、糖尿病性潰瘍、ケロイド、肥厚性瘢痕、挫瘡、セルライト、オレンジピールスキン、弾力線維症、光線性弾力線維症、角化症、炎症、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、敏感肌、湿疹、水疱性類天疱瘡、歯肉炎、歯周炎、皮膚癌、腫瘍浸潤、腫瘍転移、毛細血管拡張症、クーペロシス、静脈瘤、眼の周りのクマ、眼の下のクマ、脱毛症および脱毛、酒さ、および／または乾癬である。
【０１４２】
好ましい態様によると、本発明は、老化および／または光老化の徴候を低減、遅延、および／または予防する、皮膚、粘膜、および／または頭皮の治療のための美容または医薬組成物の作製における、式（Ｉ）のペプチドの使用に関する。
【０１４３】
別の好ましい態様によると、本発明は、皮膚、粘膜、および／または頭皮の弾性を高める美容または医薬組成物の作製における、一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つの使用に関する。
【０１４４】
別の特定の局面では、本発明は、顔のシワを減少または除去する美容または医薬組成物の作製における、一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つの使用に関する。
【０１４５】
別の好ましい態様によると、本発明は、毛髪の治療または毛髪の衛生のための美容または医薬組成物の作製における、一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つの使用に関する。毛髪の治療または毛髪の衛生のための美容または医薬組成物の例としては、中でもシャンプー、コンディショナー、ヘアローション、ヘアトニック、または頭皮用マスクが挙げられる。
【０１４６】
別の好ましい態様によると、本発明は、身体の衛生、または顔および／もしくは身体の皮膚の治療ならびに／またはケアのための美容または医薬組成物の作製における、一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つの使用に関する。身体の衛生、または顔および／もしくは身体の皮膚の治療ならびに／またはケアのための美容または医薬組成物の例としては、中でも、クリーム、例えばこれらに限定されないが、水中の油および／もしくはシリコーンのエマルジョン、油および／もしくはシリコーン中の水のエマルジョン、水／油／水型もしくは水／シリコーン／水型のエマルジョン、ならびに油／水／油型もしくはシリコーン／水／シリカ型のエマルジョンなどの多相エマルジョン、無水組成物、水性分散液、オイル、ミルク、バルサム、フォーム、ローション、ジェル、クリームジェル、水性アルコール溶液、水性グリコール溶液、ヒドロゲル、リニメント、血清（ｓｅｒａ）、石鹸、シャンプー、コンディショナー、血清（ｓｅｒｕｍｓ）、多糖フィルム、軟膏、ムース、ポマード、粉末、バー型、ペンシル型、「つけたままのタイプ」の製剤および「洗い流しタイプ」の製剤を含むスプレーもしくはエアロゾル（スプレー）、拭き取り布、ヒドロゲル、粘着性パッチ、非粘着性パッチ、微小電気パッチ、もしくはフェイスマスク、液体ファンデーションおよびコンパクトファンデーションを例とするメークアップファンデーション、メークアップリムーバルローション、メークアップリムーバルミルク、コンシーラー、アイシャドー、口紅、リッププロテクター、リップグロス、ならびにパウダーなどのメークアップ製品、が挙げられる。
【０１４７】
本発明のペプチド、それらの立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩を含有する組成物は、状態、障害、および／または疾患の治療、予防、および／またはケアを行う必要に応じて、皮膚、粘膜、および／または頭皮に適用してよく、または、経口もしくは非経口投与してもよい。
【０１４８】
本発明に関する美容または医薬組成物の皮膚および／または頭皮への適用は、本発明のペプチドの浸透を高めるために、イオン泳動、ソノフォレーシス、電気穿孔法、微小電気パッチ、機械的圧力、浸透圧勾配、密封治癒、マイクロインジェクション、もしくは例えば酸素圧による注射などの圧力による無針注射、またはこれらのいずれかの組み合わせ、によって実施してよい。
【０１４９】
本発明のさらなる局面は、エラスターゼの阻害および／またはコラーゲン合成の刺激が有益である、哺乳類、好ましくはヒトの状態、障害、および／または疾患の、治療、予防、および／またはケアのための美容的または医薬的方法に関し、この方法は、一般式（Ｉ）のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つの効果量を、好ましくはそれを含有する美容もしくは医薬組成物の形態で、投与することを含む。本発明はまた、好ましくは皮膚、粘膜、および／または頭皮において、エラスターゼを阻害する、および／またはコラーゲン合成を刺激するための美容的または医薬的方法も提供する。さらに、本発明は、皮膚、粘膜、および／または頭皮の弾性を高めるための美容的または医薬的方法を提供する。本発明のさらなる局面は、顔のシワを減少または除去するための美容的または医薬的方法に関する。
【０１５０】
さらに、本発明は、エラスターゼ活性に起因する、および／またはコラーゲン合成の刺激が有益である、皮膚、粘膜、および／または頭皮の状態、障害、および／または疾患の、美容的もしくは医薬的治療、予防、および／またはケアのための方法を提供し、本発明のペプチド、その立体異性体、その混合物、および／またはその美容的もしくは薬理学的に許容される塩の少なくとも１つを含有する美容もしくは医薬組成物の皮膚、粘膜、および／もしくは頭皮上の局所または経皮投与、または、経口もしくは非経口投与を含む。
【０１５１】
適用または投与の頻度は、対象ごとの必要性に応じて広く異なり得るものであり、適用または投与の推奨される範囲は、月１回から１日に１０回、好ましくは、週１回から１日に４回、より好ましくは、週３回から１日に３回、さらにより好ましくは、１日に１回または２回である。
【０１５２】
本明細書で提供される以下の具体的な実施例は、本発明の本質を説明するものである。これらの実施例は、説明のためだけに含まれるものであり、本明細書にて請求される本発明を制限するものとして解釈されてはならない。
【実施例】
【０１５３】
全般的な方法
試薬および溶媒はすべて合成グレードであり、追加の処理を行うことなく使用される。
【０１５４】
略語
アミノ酸に用いられる略語は、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．（１９８４）１３８：９‐３７およびＪ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９８９）２６４：６３３‐６７３において指定される、ＩＵＰＡＣ‐ＩＵＢの生化学命名委員会（Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ  ｏｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ）の規則に従う。
【０１５５】
Ｒ、樹脂；Ａｃ、アセチル；Ａｄｐｏｃ、１‐（１‐アダマンチル）‐１‐メチルエトキシ‐カルボニル；Ａｌａ、アラニン；Ａｌｌ、アリル；Ａｌｌｏｃ、アリルオキシカルボニル；ＡＭ、２‐［４‐アミノメチル‐（２，４‐ジメトキシフェニル）］フェノキシ酢酸；Ａｒｇ、アルギニン；Ｂｏｃ、ｔｅｒｔ‐ブチルオキシカルボニル；２‐ＢｒＺ、２‐ブロモベンジルオキシカルボニル；ＢＳＡ、ウシ血清アルブミン；Ｂｚｌ、ベンジル；Ｃｂｚ、ベンジルオキシカルボニル；ｃＨｘ、シクロヘキシル；Ｃｉｔ、シトルリン；ＣｌＴｒｔ−Ｒ、２‐クロロトリチル樹脂；ＣｌＺ、２‐クロロベンジル；ｃｐｓ、センチポイズ；Ｃ末端、カルボキシ末端；ＤＣＭ、ジクロロメタン；Ｄｄｅ、Ｎ‐［１‐（４，４‐ジメチル‐２，６‐ジオキソシクロヘキサ‐１‐イリデン）エチル；２，６‐ｄｉＣｌＺ、２，６‐ジクロロベンジルオキシカルボニル；ＤＩＥＡ、Ｎ，Ｎ‐ジイソプロピルエチルアミン；ＤＩＰＣＤＩ、Ｎ，Ｎ’‐ジイソプロピルカルボジイミド；Ｄｍａｂ、４‐（Ｎ‐［１‐（４，４‐ジメチル‐２，６‐ジオキソシクロヘキシリデン）‐３‐メチルブチル］アミノ）ベンジル；ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ‐ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ、ジメチルスルホキシド；ＤＮＰ、２，４‐ジニトロフェニル；ＤＰＰＣ、ジパルミトイルホスファチジルコリン；ＥＣＭ、細胞外基質；ＥＤＴＡ、エチレンジアミン四酢酸；ＥＬＩＳＡ、酵素結合免疫吸着検定法；ｅｑｕｉｖ、当量；ＥＳ‐ＭＳ、エレクトロスプレーイオン化質量分析；Ｆｍ、フルオレニルメチル；Ｆｍｏｃ、９‐フルオレニルメチルオキシカルボニル；ＧＡＧ、グリコサミノグリカン；Ｇｌｙ、グリシン；ＨＬＥ、ヒト白血球エラスターゼ；ＨＯＢｔ、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール；ＨＰＬＣ、高速液体クロマトグラフィー；ＩＮＣＩ：化粧品原料の国際命名法（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  ｏｆ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ）；ｉｖＤｄｅ、１‐（４，４‐ジメチル‐２，６‐ジオキソ‐シクロヘキシリデン）‐３‐メチル‐ブチル；ＭＡＧＰ、ミクロフィブリル関連糖タンパク質；ＭＢＨＡ、ｐ‐メチルベンズヒドリルアミン；ＭｅＣＮ、アセトニトリル；ＭｅＯＨ、メタノール；ＭＬＶ、多層小胞；ＭＭＰ、マトリックスメタロプロテアーゼ、Ｍｔｒ、４‐メトキシ‐２，３，６‐トリメチルベンゼンスルホニル；Ｍｔｔ、メチルトリチルまたはメトキシトリチル；Ｎｌｅ、ノルロイシン；Ｎ末端、アミノ末端；ＰＡＬ、５‐（４‐（アミノメチル）‐３，５‐ビス（メトキシ）フェノキシ）吉草酸；Ｐａｌｍ、パルミトイル；Ｐｂｆ、２，２，４，６，７‐ペンタメチル‐ジヒドロベンゾフラン‐５‐スルホニル；ＰＢＳ、リン酸緩衝生理食塩水；Ｐｈｇ、フェニルグリシン；Ｐｍｃ、２，２，５，７，８‐ペンタメチルクロマン‐６‐スルホニル；ｐＮＺ、パラ‐ニトロベンジルオキシカルボニル；ｑ．ｓ．、十分量；ｑ．ｓ．ｐ．、に対する十分量（ｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔ  ｑｕａｎｔｉｔｙ  ｆｏｒ）、ｔＢｕ、ｔｅｒｔ‐ブチル；Ｔｅｏｃ、２‐（トリメチルシリル）エチルオキシカルボニル；ＴＦＡ、トリフルオロ酢酸；ＴＨＦ、テトラヒドロフラン；ＴＩＳ、トリイソプロピルシラン；Ｔｏｓ、パラ‐トルエンスルホニルもしくはトシル；Ｔｒｏｃ、２，２，２‐トリクロロエトキシカルボニル；Ｔｒｐ、トリプトファン；Ｔｒｔ、トリフェニルメチルもしくはトリチル；Ｔｙｒ、チロシン；ＵＬＶ、単層小胞；ＵＶ、紫外；Ｖａｌ、バリン；Ｚ、ベンジルオキシカルボニル。
【０１５６】
化学合成
合成プロセスはすべて多孔性ポリエチレンのディスクを取り付けたポリプロピレンシリンジまたは多孔性プレートを取り付けたＰｙｒｅｘ（登録商標）反応器で行う。溶媒および可溶性試薬は、吸引によって取り出す。Ｆｍｏｃ基の除去は、ピペリジン‐ＤＭＦで行う（２：８、ｖ／ｖ）（１×１分、１×５分、５ｍＬ／ｇ  樹脂）（Ｌｌｏｙｄ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  Ｐ．，Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ  Ｆ．ａｎｄ  Ｇｉｒａｌｔ  Ｅ．（１９９７）“Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ”ＣＲＣ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，ＵＳＡ）。脱保護、カップリング、および再度の脱保護の工程間の洗浄は、各回に１０ｍＬ  溶媒／ｇ  樹脂のＤＭＦ（３×１分間）を用いて行った。カップリング反応は、３ｍＬ  溶媒／ｇ  樹脂で行った。カップリングの制御は、ニンヒドリン試験で行う（Ｋａｉｓｅｒ  Ｅ．，Ｃｏｌｅｓｃｏｔｔ  Ｒ．Ｌ．，Ｂｏｓｓｉｎｇ  Ｃ．Ｄ．ａｎｄ  Ｃｏｏｋ  Ｐ．Ｉ．（１９７０）Ｃｏｌｏｒ  ｔｅｓｔ  ｆｏｒ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｆｒｅｅ  ｔｅｒｍｉｎａｌ  ａｍｉｎｏ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｓｏｌｉｄ  ｐｈａｓｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ，”Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３４：５９５  ５９８）。合成反応および洗浄はすべて室温で行った。
【０１５７】
ＨＰＬＣクロマトグラフィー分析は、３０℃に自動温度調節した逆相カラム（２５０×４．０ｍｍ、Ｋｒｏｍａｓｉｌ  Ｃ８、５μｍ、アクゾノーベル（Ａｋｚｏ  Ｎｏｂｅｌ）、スウェーデン）を用いて、島津の機器（京都、日本）で行った。溶出は、水（＋０．１％  ＴＦＡ）中のアセトニトリル（＋０．０７％  ＴＦＡ）の勾配を用いて、１ｍＬ／分の流速で行い、検出は、２２０ｎｍで行った。
【０１５８】
実施例１
Ｆｍｏｃ−Ｘｎ−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４−Ｙｍ−Ｏ−２‐ＣｌＴｒｔ−Ｒの合成、ここで、ＡＡ４は−Ｌ‐Ｐｈｇ−、−Ｄ‐Ｐｈｇ−、または−Ｇｌｙ−、ＡＡ３は−Ｌ‐Ｔｒｐ−、−Ｌ‐Ｔｙｒ−、または−Ｌ‐Ｖａｌ−；ＡＡ２は−Ｌ‐Ａｌａ−、−Ｌ‐Ｃｉｔ−、−Ｌ‐Ｎｌｅ−、−Ｌ‐Ｐｈｇ−、または−Ｄ‐Ｐｈｇ−；ＡＡ１は−Ｌ‐Ａｒｇ−、−Ｌ‐Ｐｈｇ−、−Ｄ‐Ｐｈｇ−、または−Ｌ‐Ｎｌｅ−；ならびに、ｎおよびｍは０である。
３．２９ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｐｈｇ−ＯＨ、３．２９ｇのＦｍｏｃ−Ｄ‐Ｐｈｇ−ＯＨ、または２．６１ｇのＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（８．８ｍｍｏｌ；１当量）を５５ｍｌのＤＣＭに溶解し、これに１．３ｍｌのＤＩＥＡ（７．６ｍｍｏｌ；０．８６当量）を添加したものを、乾燥２‐クロロトリチル樹脂（５．５ｇ；８．８ｍｍｏｌ）にカップリングさせた。この懸濁液を５分間攪拌し、その後、２．５ｍＬのＤＩＥＡを添加した（１４．６ｍｍｏｌ；１．６６当量）。この混合物を４０分間反応させた。４．４ｍＬのＭｅＯＨで処理することで、残留塩素基を封止した。
【０１５９】
Ｎ末端のＦｍｏｃ基を、全般的な方法で述べたようにして脱保護し、９．３８ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｔｒｐ−ＯＨ、１０．１１ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、または７．４７ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｖａｌ−ＯＨ（２２ｍｍｏｌ、２．５当量）を、ＤＩＰＣＤＩ（３．３９ｍＬ、２２ｍｍｏｌ、２．５当量）およびＨＯＢｔ（３．３７ｇ、２２ｍｍｏｌ、２．５当量）の存在下、ＤＭＦを溶媒として用いて、ペプチジル樹脂上へ１時間カップリングさせた。次に、樹脂を全般的な方法で述べたようにして洗浄し、Ｆｍｏｃ基の脱保護処理を繰り返して、次のアミノ酸をカップリングさせた。記載したプロトコルに従い、出願者らは、順に、６．８５ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ａｌａ−ＯＨ、８．７４ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｃｉｔ−ＯＨ、７．７７ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｎｌｅ−ＯＨ、８．２１ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｐｈｇ−ＯＨ、または８．２１ｇのＦｍｏｃ−Ｄ‐Ｐｈｇ−ＯＨ（２２ｍｍｏｌ、２．５当量）、続いて、１４．２７ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ａｒｇ−（Ｐｂｆ）−ＯＨ、８．２１ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｐｈｇ−ＯＨ、８．２１ｇのＦｍｏｃ−Ｄ‐Ｐｈｇ−ＯＨ、または７．７７ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｎｌｅ−ＯＨ（２２ｍｍｏｌ、２．５当量）のカップリングを、各カップリングにおいて３．３７ｇのＨＯＢｔ（２２ｍｍｏｌ、２．５当量）および３．３９ｍＬのＤＩＰＣＤＩ（２２ｍｍｏｌ、２．５当量）の存在下で行った。
【０１６０】
合成後、ペプチジル樹脂はＤＣＭで洗浄し（５×３分間）、窒素気流下で乾燥させた。
【０１６１】
実施例２
Ｆｍｏｃ−Ｘｎ−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４−Ｙｍ−ＡＭ−ＭＢＨＡ−Ｒの合成、ここで、ＡＡ４は−Ｌ‐Ｐｈｇ−、−Ｄ‐Ｐｈｇ−、または−Ｇｌｙ−；ＡＡ３は−Ｌ‐Ｔｒｐ−、−Ｌ‐Ｔｙｒ−、または−Ｌ‐Ｖａｌ−；ＡＡ２は−Ｌ‐Ａｌａ−、−Ｌ‐Ｃｉｔ−、−Ｌ‐Ｎｌｅ−、−Ｌ‐Ｐｈｇ−、または−Ｄ‐Ｐｈｇ−；ＡＡ１は−Ｌ‐Ａｒｇ−、−Ｌ‐Ｐｈｇ−、−Ｄ‐Ｐｈｇ−、または−Ｌ‐Ｎｌｅ−；ならびに、ｎおよびｍは０である。
０．７３ｍｍｏｌ／ｇ（５ｍｍｏｌ）のローディングである６．８５ｇのＦｍｏｃ−ＡＭ−ＭＢＨＡ樹脂を、Ｆｍｏｃ基を除去する目的で、記載した一般的なプロトコルに従ってピペリジン‐ＤＭＦで処理した。この脱保護した樹脂上への９．３３ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｐｈｇ−ＯＨ、９．３３ｇのＦｍｏｃ−Ｄ‐Ｐｈｇ−ＯＨ、または７．４３ｇのＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（２５ｍｍｏｌ；５当量）の組み込みを、ＤＩＰＣＤＩ（３．８５ｍＬ、２５ｍｍｏｌ；５当量）およびＨＯＢｔ（３．８５ｇ、２５ｍｍｏｌ；５当量）、ならびに溶媒としてＤＭＦを用いて１時間行った。
【０１６２】
次に、この樹脂を全般的な方法で述べたようにして洗浄し、Ｆｍｏｃ基の脱保護処理を繰り返して、次のアミノ酸をカップリングさせた。前述のプロトコルに従い、１０．６７ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｔｒｐ−ＯＨ、１１．４９ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｔｙｒ−（ｔＢｕ）−ＯＨ、または８．４９ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｖａｌ−ＯＨ（２５ｍｍｏｌ；５当量）；９．３３ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｐｈｇ−ＯＨ、９．３３ｇのＦｍｏｃ−Ｄ‐Ｐｈｇ−ＯＨ、７．７８ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ａｌａ−ＯＨ、９．９４ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｃｉｔ−ＯＨ、または８．８４ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｎｌｅ−ＯＨ（２５ｍｍｏｌ；５当量）、および続いて、１６．２２ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ａｒｇ−（Ｐｂｆ）−ＯＨ、９．３３ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｐｈｇ−ＯＨ、９．３３ｇのＦｍｏｃ−Ｄ‐Ｐｈｇ−ＯＨ、または８．８４ｇのＦｍｏｃ−Ｌ‐Ｎｌｅ−ＯＨ（２５ｍｍｏｌ；５当量）のカップリングを、各カップリングにおいて３．８５ｇのＨＯＢｔ（２５ｍｍｏｌ、５当量）および３．８５ｍＬのＤＩＰＣＤＩ（２５ｍｍｏｌ、５当量）の存在下で順に行った。
【０１６３】
合成後、ペプチジル樹脂はＤＣＭで洗浄し（５×３分間）、窒素気流下で乾燥させた。
【０１６４】
実施例３
Ｆｍｏｃ  Ｎ末端保護基除去のための一般手順
実施例１および２で得られたペプチジル樹脂のＦｍｏｃ  Ｎ末端基を、全般的な方法で述べたようにして脱保護した（２０％ピペリジン、１×５分間＋１×２０分間）。ペプチジル樹脂をＤＭＦ（５×１分間）、ＤＣＭ（４×１分間）、ジエチルエーテル（４×１分間）で洗浄し、真空乾燥させた。
【０１６５】
実施例４
実施例３で得られたペプチジル樹脂上へＲ１パルミトイル基を導入するための手順
ＤＭＦ（１ｍＬ）中に予め溶解させた２．５６ｇのパルミチン酸（１０ｍｍｏｌ；１０当量）を、１．５３ｇのＨＯＢｔ（１０ｍｍｏｌ；１０当量）および１．５４ｍＬのＤＩＰＣＤＩ（１０ｍｍｏｌ；１０当量）の存在下にて、実施例３で得られたペプチジル樹脂の１ｍｍｏｌへ添加した。これを１５時間反応させ、その後、樹脂をＴＨＦ（５×１分間）、ＤＣＭ（５×１分間）、ＤＭＦ（５×１分間）、ＭｅＯＨ（５×１分間）、ＤＭＦ（５×１分間）、ＴＨＦ（５×１分間）、ＤＭＦ（５×１分間）、ＤＣＭ（４×１分間）、エーテル（３×１分間）で洗浄し、真空乾燥させた。
【０１６６】
実施例５
実施例３で得られたペプチジル樹脂上へアセチル基Ｒ１を導入するための手順
実施例３で得られたペプチジル樹脂の１ｍｍｏｌを、２５当量のＤＩＥＡの存在下、溶媒として５ｍＬのＤＭＦを用い、２５当量の無水酢酸で処理した。これを３０分間反応させ、その後、ペプチジル樹脂をＤＭＦ（５×１分間）、ＤＣＭ（４×１分間）、ジエチルエーテル（４×１分間）で洗浄し、真空乾燥させた。
【０１６７】
実施例６
実施例３、４、および５で得られたペプチジル樹脂の開裂手順
実施例３、４、および５で得られた乾燥ペプチジル樹脂２００ｍｇを、室温にて攪拌しながら２時間、５ｍＬのＴＦＡ‐ＴＩＳ‐Ｈ２Ｏ（９０：５：５）で処理した。ろ液を５０ｍＬの冷ジエチルエーテルへ取り、多孔性ポリエチレンディスクを取り付けたポリプロピレンシリンジを通してろ過し、５０ｍＬのジエチルエーテルで５回洗浄した。最終的な析出物を真空乾燥させた。
【０１６８】
得られたペプチドを、Ｈ２Ｏ中（＋０．１％  ＴＦＡ）のＭｅＣＮ（＋０．０７％  ＴＦＡ）の勾配でＨＰＬＣ分析したところ、すべての場合で８０％を超える純度が示された。得られたペプチドの同定は、ＥＳ‐ＭＳで確認した。
【０１６９】
実施例７
ポリマー支持体の開裂手順およびＲ２置換アミンによる誘導体化：Ａｃ−Ｘｎ−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４−Ｙｍ−ＮＨ−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３の合成、ここで、ＡＡ４は−Ｌ‐Ｐｈｇ−、−Ｄ‐Ｐｈｇ−、または−Ｇｌｙ−；ＡＡ３は−Ｌ‐Ｔｒｐ−、−Ｌ‐Ｔｙｒ−、または−Ｌ‐Ｖａｌ−；ＡＡ２は−Ｌ‐Ａｌａ−、−Ｌ‐Ｃｉｔ−、−Ｌ‐Ｎｌｅ−、−Ｌ‐Ｐｈｇ−、または−Ｄ‐Ｐｈｇ−；ＡＡ１は−Ｌ‐Ａｒｇ−、−Ｌ‐Ｐｈｇ−、−Ｄ‐Ｐｈｇ−、または−Ｌ‐Ｎｌｅ−；ならびに、ｎおよびｍは０である。
予めＫＯＨの存在下にて真空乾燥しておいた実施例５のペプチジル樹脂、Ａｃ−Ｘｎ−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４−Ｙｍ−Ｏ−２‐ＣｌＴｒｔ−Ｒの１５０ｍｇを、ＤＣＭ中の３％ＴＦＡ溶液の３ｍＬで５分間処理することにより、側鎖が完全に保護されたペプチド、Ａｃ−Ｘｎ−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４−Ｙｍ−ＯＨが得られた。ろ液を５０ｍＬの冷ジエチルエーテルへ取り、この処理を３回繰り返した。エーテル性溶液を室温にて真空蒸発乾固させ、析出物をＨ２Ｏ中の５０％ＭｅＣＮへ溶解し、凍結乾燥した。得られた粗生成物の１０ｍｇをフラスコ中に秤量し、３当量のヘキサデシルアミンおよび２５ｍＬの無水ＤＭＦを添加した。２当量のＤＩＰＣＤＩを添加し、マグネティックスターラーで攪拌しながら４７℃で反応させた。反応は、出発物質の消滅をＨＰＬＣでモニタリングし、２４〜４８時間後に完了した。溶媒を蒸発乾固させ、ＤＣＭで２回共蒸発させた。得られた残渣（側鎖が完全に保護されたＡｃ−Ｘｎ−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４−Ｙｍ−ＮＨ−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３）を２５ｍＬのＤＣＭ‐ＴＦＡ‐アニソール混合物（４９：４９：２）中に再懸濁させ、室温にて３０分間反応させた。これを２５０ｍＬの冷ジエチルエーテルへ添加し、溶媒を減圧下で蒸発させ、さらにエーテルによる共蒸発を追加で２回行った。残渣をＨ２Ｏ中の５０％ＭｅＣＮの混合物へ溶解し、凍結乾燥させた。
【０１７０】
得られたペプチドを、Ｈ２Ｏ中（＋０．１％  ＴＦＡ）のＭｅＣＮ（＋０．０７％  ＴＦＡ）の勾配でＨＰＬＣ分析したところ、すべての場合で７０％を超える純度が示された。得られたペプチドの同定は、ＥＳ‐ＭＳで確認した。
【０１７１】
実施例８
エラスターゼ阻害アッセイ
ペプチドを、０．５％ＤＭＳＯの存在下にて水に再懸濁させた。このアッセイは、ＥｎｚＣｈｅｋ（登録商標）Ｅｌａｓｔａｓｅ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ（モレキュラープローブズ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ））を用い、９６ウェルブラックマイクロプレート上で実施した。この目的のために、ペプチドを０．１ｍＭにて１時間、０．４ユニット／ｍＬのエラスターゼと共に室温で穏やかに攪拌しながら予めインキュベートし、その後、結合基質を、最終濃度２５μｇ／ｍＬでフルオレセイン（ＤＱ（商標）Ｅｌａｓｔｉｎ）へ添加し、反応物を、遮光下にて攪拌しながら、室温で２時間インキュベートした。蛍光が阻害された基質は、エラスターゼによって消化されて蛍光断片を放出し、これを、励起に対しては４８５ｎｍフィルターを、発光に対しては５３０ｎｍフィルターを用いたＦＬＵＯｓｔａｒ  ｇａｌａｘｙ  ｒｅａｄｅｒ（ＢＭＧラボテクノロジーズ（ＢＭＧ  ＬａｂＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ））で、蛍光によりモニタリングする。
【０１７２】
表２に、４５％を超える阻害値を示したペプチドを挙げる。阻害値は、平均阻害のベースライン値に対して標準化したものである。
【０１７３】
0005878761.tif 000003
【０１７４】
実施例９
ヒトエラスターゼ阻害アッセイ
ヒト好中球エラスターゼを、５０ｍＭ  酢酸ナトリウム、２００ｍｍ  ＮａＣｌ、ｐＨ５．５のバッファー中にて５μｇ／ｍＬで再構成した。０．２μｇ／ｍｌのプロテアーゼを、ペプチドと共に最終濃度０．０５〜２ｍＭにて、９６ウェルブラックマイクロプレート中、室温で１時間、予めインキュベートした。予備インキュベーションの後、２５μｇ／ｍＬの基質（ＭｅＯＳｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌアミノメチルクマリン）をウェルへ添加し、このサンプルを遮光下、室温にて２時間インキュベートした。基質の消化によって放出された蛍光を、自動マルチプレート蛍光リーダーを用い、励起３７０ｎｍ、読み取り４６０ｎｍで測定した。
【０１７５】
結果は、エラスターゼおよび生成物が存在しない場合のベースライン蛍光値で補正し、コントロールの蛍光に対して標準化したものであり、ペプチドの各々についての最小阻害濃度を決定した。表３に、これらのペプチドについて得られた最良の阻害値を挙げる。
【０１７６】
0005878761.tif 000004
【０１７７】
実施例１０
Ｐａｌｍ−Ｌ‐Ｎｌｅ−Ｐｈｇ−Ｌ‐Ｔｙｒ−Ｐｈｇ−ＮＨ２を含有する美容組成物の作製
【０１７８】
0005878761.tif 000005
【０１７９】
実施例１１
Ａｃ−Ｌ‐Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｌ‐Ｖａｌ−Ｐｈｇ−ＯＨを含有するリポソームの作製
ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）を秤量し、クロロホルムに溶解した。溶媒を、リン脂質の薄層が得られるまで減圧留去し、この層を、ペプチドの水溶液での処理を５５℃で行うことによって所望の濃度まで水和し（Ｐｈｅｎｏｎｉｐ（登録商標）含有）、ＭＬＶリポソームを得た。ＵＬＶリポソームは、ＭＬＶリポソームの超音波浴への浸漬を、５５℃にて、５分間隔で２分間のサイクルを８回行うことで得た。ＵＬＶリポソームのサイズは、高圧で押出しシステムを通過させることで低下させた。
【０１８０】
0005878761.tif 000006
【０１８１】
実施例１２
Ａｃ−Ｐｈｇ−Ｐｈｇ−Ｌ‐Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨを含有するフェイシャルクリームの組成
【０１８２】
0005878761.tif 000007
【０１８３】
実施例１３
Ａｃ−Ｌ‐Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｌ‐Ｖａｌ−Ｐｈｇ−ＯＨを含有するリポソームゲルの形態の組成物の作製
実施例１１のリポソームを保存料（ＥＤＴＡ、イミダゾリジニル尿素、およびＰｈｅｎｏｎｉｐ(登録商標)）と共にゆるやかに攪拌しながら水に分散させた。Ｈｉｓｐａｇｅｌ（登録商標）２００を添加し［ＩＮＣＩ：水、グリセリン、グリセリルポリアクリレート］、均質混合物が得られるまでゆるやかに攪拌した。
【０１８４】
0005878761.tif 000008
【０１８５】
実施例１４
Ａｃ−Ｌ‐Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｌ‐Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨを含有するマイクロエマルジョンの組成
【０１８６】
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【０１８７】
実施例１５
Ａｃ−Ｌ‐Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｌ‐Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨを含有するボディジェルの組成
【０１８８】
0005878761.tif 000010
【０１８９】
実施例１６
Ａｃ−Ｌ‐Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｌ‐Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＮＨ−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３を含有するヘアローションの組成
【０１９０】
0005878761.tif 000011
【０１９１】
実施例１７
Ａｃ−Ｌ‐Ａｒｇ−Ｐｈｇ−Ｌ‐Ｔｒｐ−Ｐｈｇ−ＯＨを含有する混合ミセルの組成物の作製
サンプル全体に適する容器中にフェーズＡの成分を秤量し、約３０℃まで僅かに加温して保存料のいくつかの溶解を補助した。次に、フェーズＢの成分を添加し、穏やかに攪拌しながら均質化した。
【０１９２】
次に、攪拌を続けながらフェーズＣを添加し、その後、発泡を避けるためにゆっくり攪拌しながらフェーズＤを添加した。
【０１９３】
ｐＨは５．５〜６．５に調節した。
【０１９４】
0005878761.tif 000012
【０１９５】
実施例１８
実施例１５の組成物による皮膚弾性の上昇への効果
本発明の実施例１５の組成物の効果を評価するために、ボランティアの被験者２０人の大腿部に、１日２回のローションの適用を２ヶ月間行った。
【０１９６】
皮膚弾性はキュートメーターを用いて測定し、得られた結果を表４に示す。
【０１９７】
0005878761.tif 000013
【０１９８】
平均して１４％の弾性の上昇が得られた。
【０１９９】
実施例１９
実施例１５の組成物に対応するプラセボ組成物による皮膚弾性の上昇への効果
本発明の実施例１５の組成物に対応するプラセボ組成物の効果を評価するために、ボランティアの被験者２０人の一群に対して、大腿部への１日２回のローションの適用を２ヶ月間行った。
【０２００】
皮膚弾性はキュートメーターを用いて測定し、得られた結果を表５に示す。
【０２０１】
0005878761.tif 000014
【０２０２】
２ヶ月間の処理の後、皮膚弾性の上昇は見られなかった。
【０２０３】
実施例２０
コラーゲン合成刺激アッセイ
ヒト皮膚線維芽細胞を、線維芽細胞のための特定の成長因子を添加したＭ１０６培地中にてコンフルーエントまで成長させた。次に、これをストリプシン処理し（ｓｔｒｙｐｓｉｎｉｚｅｄ）、２４ウェルプレートに、５×１０４細胞／ウェルで播種した。３７℃、５％ＣＯ２雰囲気中での２４時間のインキュベーションの後、１５μｇ／ｍｌのペプチドの段階希釈と共に、またはネガティブコントロールとしての媒体と共に、新しい培地を添加した。細胞をさらに４８時間インキュベートし、その後、培地を回収した。
【０２０４】
分泌されたＩ型コラーゲンの量の分析を、ＥＬＩＳＡアッセイによって行った。簡潔に述べると、９６ウェルプレートを、ウェルあたり５０μＬの回収しておいた培地でコーティングし、加湿雰囲気下、４℃にて一晩吸着させた。次に、プレートをＰＢＳ（＋０．０５％  Ｔｗｅｅｎ‐２０）で３回洗浄し、３％  ＢＳＡで１時間ブロッキングした。ブロッキング後、プレートを抗Ｉ型コラーゲン抗体（１：１０００、ＰＢＳ、０．０５％  Ｔｗｅｅｎ‐２０、１％  ＢＳＡ中）で２時間処理した。このインキュベーションの後、二次抗体（ヤギ抗マウスＩｇＧ‐ＨＲＰ抗体、モレキュラープローブズ、１：１０００、ＰＢＳ、０．０５％  Ｔｗｅｅｎ‐２０、１％  ＢＳＡ中）を添加した。プレートをホスファターゼ基質と共に３０分間インキュベートし、３Ｍ  Ｈ２ＳＯ４を添加することで反応を停止した。４９０ｎｍでの吸収をマイクロプレートリーダーを用いて読み取り、Ｉ型コラーゲンについて、直線回帰標準曲線を用いてコラーゲン濃度を決定した。値は、ネガティブコントロール実験のコラーゲン値に対して標準化したものであり、Ｉ型コラーゲンの増加を、すべての処理について算出した。表６に、Ｉ型コラーゲン含有量の増加についての算出値を挙げる。
【０２０５】
0005878761.tif 000015