(57)【要約】本発明は、ｓＥＨ阻害活性に基づき高血圧に対して治療効果を発揮する医薬を提供することを目的としている。本発明は、下記に代表されるジアザスピロウレア誘導体又はその薬理学的に許容される塩を提供する。2013115294.tif 000024
2013115294.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式（Ｉ）で示される、ジアザスピロウレア誘導体又はその薬学的に許容される塩。
【化１】
2013115294.tif 000023
［式中、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌ又は−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｍ−Ｌであり、
Ｙは、Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１である場合に−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌ又は−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｍ−Ｌであり、Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌ又は−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｍ−Ｌである場合に−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１であり、
Ｌは、水素原子、ハロゲン原子、水酸基、シアノ基、炭素数１〜６のアルキル基若しくはアルキルオキシ基、炭素数３〜６のシクロアルキル基、炭素数４〜１０のシクロアルキルアルキル基、環構成原子数４〜６のヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２、フェニル基又は環構成原子数５〜１０のヘテロアリール基であり（該アルキル基及び該アルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよく、該フェニル基及び該ヘテロアリール基は、水素原子が、それぞれ独立に、１〜３個のハロゲン原子又は炭素数１〜６のアルキル基で置換されていてもよく、ヘテロシクリル基が縮合していてもよい）、
Ｍは、炭素数１〜８のアルキレン基、炭素数３〜６のシクロアルキレン基、環構成原子数３〜６のヘテロシクリレン基、フェニレン基又は環構成原子数５〜１０のヘテロアリレン基であり（該アルキレン基、該シクロアルキレン基及び該ヘテロシクリレン基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよく、該ヘテロシクリレン基は、環を構成する１個のメチレン基が−Ｃ（＝Ｏ）−に置き換わっていてもよく、該フェニレン基及び該ヘテロアリレン基は、へテロシクリル基が縮合していてもよい）、
Ｒ１は、フェニル基又はベンジル基であり（該フェニル基及び該ベンジル基は、ベンゼン環上の水素原子が、それぞれ独立に、ハロゲン原子、シアノ基又は炭素数１〜６のアルキル基若しくはアルキルオキシ基で置換されていてもよく、該アルキル基及び該アルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）、
Ｒ２は、水素原子又は炭素数１〜６のアルキル基であり、
Ａは、メチレン基又は酸素原子である。］
【請求項２】
Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌであり、
Ｙは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１であり、
Ｒ１は、少なくともベンゼン環上の４位の水素原子が、ハロゲン原子、シアノ基又は炭素数１〜６のアルキル基若しくはアルキルオキシ基（該アルキル基及び該アルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）、で置換されているフェニル基又はベンジル基である、
請求項１記載のジアザスピロウレア誘導体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ１は、少なくともベンゼン環上の４位の水素原子が、炭素数１〜６のアルキル基又はアルキルオキシ基（該アルキル基及び該アルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）、で置換されているフェニル基であり、
Ａは、酸素原子である、
請求項２記載のジアザスピロウレア誘導体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｌは、水素原子、ハロゲン原子、シアノ基又は炭素数１〜６のアルキル基であり、
Ｍは、へテロシクリル基が縮合していてもよいフェニレン基又は環構成原子数５〜１０のヘテロアリレン基であり、
Ｒ１は、少なくともベンゼン環上の４位の水素原子が、トリフルオロメチル基又はトリフルオロメトキシ基、で置換されているフェニル基である、
請求項３記載のジアザスピロウレア誘導体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項記載のジアザスピロウレア誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、医薬。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか一項記載のジアザスピロウレア誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、可溶性エポキシドヒドロラーゼ阻害剤。
【請求項７】
請求項１〜４のいずれか一項記載のジアザスピロウレア誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、高血圧の治療剤又は予防剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジアザスピロウレア誘導体及びその医薬用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
エポキシエイコサトリエン酸（Ｅｐｏｘｙｅｉｃｏｓａｔｒｉｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄｓ；以下、ＥＥＴｓ）は、内皮細胞由来の過分極因子の一つであり、アラキドン酸がチトクロームＰ４５０（ＣＹＰ）エポキシゲナーゼによる代謝を受けることにより産生される。ＥＥＴｓは、人体にとって有益な血管内皮保護作用と血圧上昇抑制作用とを併せ持つが、生体内では可溶性エポキシド加水分解酵素（ｓｏｌｕｂｌｅ  ｅｐｏｘｉｄｅ  ｈｙｄｒｏｌａｓｅ；以下、ｓＥＨ）によって、不活性体であるジヒドロキシエイコサトリエン酸（ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｅｉｃｏｓａｔｒｉｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄｓ；以下、ＤＨＥＴｓ）へと速やかに変換される。【０００３】
ｓＥＨは、生体内の多くの臓器でその発現が認められるが、アンジオテンシンＩＩ誘発性高血圧モデルや自然発症型高血圧（Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ  Ｒａｔ；以下、ＳＨＲ）モデルの腎臓で発現が亢進し（非特許文献１及び２）、ｓＥＨノックアウトマウスでは平均血圧が正常動物に比べて低いことが知られている（非特許文献３）。これらの事実から、ｓＥＨの発現亢進は、高血圧の病態に関与していると考えられている。【０００４】
このため、ｓＥＨの作用を抑制する可溶性エポキシドヒドロラーゼ阻害剤（以下、ｓＥＨ阻害剤）は、高血圧の治療薬になり得ると思われたが、近年見出されたｓＥＨ阻害剤の多くは、ＳＨＲモデルで発症する自然発症型高血圧に対してほとんど治療効果を示さないことが報告されている（非特許文献４〜６）。【０００５】
ｓＥＨ阻害活性を有する化合物としては、１２−（３−ａｄａｍａｎｔａｎ−１−ｙｌ−ｕｒｅｉｄｏ）−ｄｏｄｅｃａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ（ＡＵＤＡ）（非特許文献７）、Ｎ−ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ−Ｎ−ｄｏｄｅｃｙｌ  ｕｒｅａ（ＮＣＮＤ）（非特許文献１）、ＡＲ９２８１（非特許文献８）、スピロ構造を有する化合物（非特許文献４）、４位がヘテロアリール基で置換されているピペリジン化合物（非特許文献５）及び３位に２個の置換基を有するピペリジン化合物（非特許文献６）が報告されている。【０００６】
また、ジアザスピロウレア構造を有する化合物としては、スピロ環状化合物（特許文献１）、スピロ複素環化合物（特許文献２）及びスピロ環状アミド化合物（特許文献３）が報告されている。【０００７】
その一方で、高血圧の治療薬又は予防薬としては、利尿薬、カルシウム拮抗薬、アンジオテンシン変換酵素阻害薬（ＡＣＥＩ）、アンジオテンシン受容体拮抗薬（ＡＲＢ）、直接的レニン阻害薬、交感神経遮断薬、α２受容体刺激薬が開発され、患者の症状に合わせて降圧剤として使用されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第２００６／００６４９０号
【特許文献２】国際公開第２００５／０４７２８６号
【特許文献３】国際公開第２００７／１０３７１９号
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｉｍｉｇら、Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ、２００２年、３９巻、ｐ．６９０−６９４
【非特許文献２】Ｙｕら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２０００年、８７巻、ｐ．９９２−９９８
【非特許文献３】Ｓｉｎａｌら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２０００年、２７５巻、５１号、ｐ．４５４０４−４５４１０
【非特許文献４】Ｓｈｅｎら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、２００９年、１９巻、ｐ．３３９８−３４０４
【非特許文献５】Ｓｈｅｎら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００９年、５２巻、ｐ．５００９−５０１２
【非特許文献６】Ｓｈｅｎら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、２００９年、１９巻、ｐ．５３１４−５３２０
【非特許文献７】Ｉｍｉｇら、Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ、２００５年、４６巻、ｐ．９７５−９８１
【非特許文献８】Ａｎａｎｄａｎら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、２０１１年、２１巻、ｐ．９８３−９８８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
しかしながら、既存の降圧剤は、過量投与により過度の低血圧を引き起こし、強いめまい、ふらつき、立ちくらみ等を引き起こすリスクがあるため、血圧をコントロールするには、降圧剤の選択と服用量に慎重になる必要があり、医師や患者に大きな負担が掛かっているのが現状である。このため、病態の進行に伴う高血圧に対して降圧作用を示し、正常な血圧に対しては降圧作用を示さない、安全で使い勝手のよい降圧剤の開発が急務であると考えられた。【００１１】
これまでにｓＥＨ阻害活性を有する化合物は見出されてはいるが、高血圧に対して治療効果を示すとは限らず（非特許文献４〜６）、高血圧に対して治療効果を示す化合物を見出すことは容易でないのが現状であった。ましてや、ｓＥＨ阻害剤が、病態の進行に伴う高血圧に対しては降圧作用を示すが、正常な血圧に対しては降圧作用を示さない病態選択的な降圧剤になり得るとは考えられてこなかった。【００１２】
なお、ｓＥＨ阻害活性を有する化合物として、ジアザスピロウレア構造を有する化合物が報告された例はなく、ジアザスピロウレア構造を有する化合物が、高血圧に対して有効であるとする開示や示唆はこれまでに一切されてこなかった。【００１３】
そこで本発明は、ｓＥＨ阻害活性に基づき高血圧に対して治療効果を発揮する医薬を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは上記課題を解決するため鋭意検討した結果、ｓＥＨ阻害活性を有する新規なジアザスピロウレア誘導体及びその塩が高血圧に対し優れた治療効果及び予防効果を示すことを見出し、本発明を完成させた。【００１５】
すなわち、本発明は、以下の一般式（Ｉ）で示されるジアザスピロウレア誘導体又はその薬理学的に許容される塩を提供する。
【化１】
2013115294.tif 000003
［式中、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌ又は−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｍ−Ｌであり、Ｙは、Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１である場合に−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌ又は−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｍ−Ｌであり、Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌ又は−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｍ−Ｌである場合に−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１であり、Ｌは、水素原子、ハロゲン原子、水酸基、シアノ基、炭素数１〜６のアルキル基若しくはアルキルオキシ基、炭素数３〜６のシクロアルキル基、炭素数４〜１０のシクロアルキルアルキル基、環構成原子数４〜６のヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２、フェニル基又は環構成原子数５〜１０のヘテロアリール基であり（該アルキル基及び該アルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよく、該フェニル基及び該ヘテロアリール基は、水素原子が、それぞれ独立に、１〜３個のハロゲン原子又は炭素数１〜６のアルキル基で置換されていてもよく、ヘテロシクリル基が縮合していてもよい）、Ｍは、炭素数１〜８のアルキレン基、炭素数３〜６のシクロアルキレン基、環構成原子数３〜６のヘテロシクリレン基、フェニレン基又は環構成原子数５〜１０のヘテロアリレン基であり（該アルキレン基、該シクロアルキレン基及び該ヘテロシクリレン基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよく、該ヘテロシクリレン基は、環を構成する１個のメチレン基が−Ｃ（＝Ｏ）−に置き換わっていてもよく、該フェニレン基及び該ヘテロアリレン基は、へテロシクリル基が縮合していてもよい）、Ｒ１は、フェニル基又はベンジル基であり（該フェニル基及び該ベンジル基は、ベンゼン環上の水素原子が、それぞれ独立に、ハロゲン原子、シアノ基又は炭素数１〜６のアルキル基若しくはアルキルオキシ基で置換されていてもよく、該アルキル基及び該アルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）、Ｒ２は、水素原子又は炭素数１〜６のアルキル基であり、Ａは、メチレン基又は酸素原子である。］【００１６】
上記のジアザスピロウレア誘導体は、Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌであり、Ｙが−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１であり、Ｒ１が、少なくともベンゼン環上の４位の水素原子がハロゲン原子、シアノ基又は炭素数１〜６のアルキル基若しくはアルキルオキシ基（該アルキル基及び該アルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）で置換されているフェニル基又はベンジル基であることが好ましい。【００１７】
これらの限定が加わることにより、ｓＥＨに対する阻害活性を高めることができる。【００１８】
また上記のジアザスピロウレア誘導体は、Ｒ１が、少なくともベンゼン環上の４位の水素原子が炭素数１〜６のアルキル基又はアルキルオキシ基（該アルキル基及び該アルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）で置換されているフェニル基であり、Ａが酸素原子であることがより好ましい。【００１９】
これらの限定が加わることにより、生体内における代謝安定性を高めることができる。【００２０】
また上記のジアザスピロウレア誘導体は、Ｌが、水素原子、ハロゲン原子、シアノ基又は炭素数１〜６のアルキル基であり、Ｍが、ヘテロシクリル基が縮合していてもよいフェニレン基又は環構成原子数５〜１０のヘテロアリレン基であり、Ｒ１が、ベンゼン環上の４位の水素原子がトリフルオロメチル基又はトリフルオロメトキシ基で置換されているフェニル基であることがさらに好ましい。【００２１】
この場合には、ｓＥＨ阻害活性及び生体内における代謝安定性を高めることができるだけでなく、高血圧に対する治療効果をも高めることができる。【００２２】
また本発明は、上記のジアザスピロウレア誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬及びｓＥＨ阻害剤を提供する。この医薬は、高血圧の治療剤又は予防剤として好適に使用できる。
【発明の効果】
【００２３】
本発明のジアザスピロウレア誘導体は、高いｓＥＨ阻害活性を有しており、高血圧に対して高い治療効果又は予防効果を発揮する。また本発明の医薬は、メカニズムに基づいて高血圧を治療又は予防する薬効を有し、正常な血圧に対しては急激な降圧作用を示さないため、病態選択的な降圧剤として利用できる。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】高血圧自然発症ラット（ＳＨＲ）における実施例化合物１、２、３及び４並びに比較例化合物２の血圧降下作用を示した図である。
【図２】正常ラット（ＳＤラット）における実施例化合物１及びテルミサルタンの血圧降下作用を示した図である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本発明のジアザスピロウレア誘導体又はその薬理学的に許容される塩は、以下の一般式（Ｉ）で示されることを特徴としている。
【化２】
2013115294.tif 000004
［式中、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌ又は−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｍ−Ｌであり、Ｙは、Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１である場合に−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌ又は−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｍ−Ｌであり、Ｘが−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌ又は−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｍ−Ｌである場合に−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１であり、Ｌは、水素原子、ハロゲン原子、水酸基、シアノ基、炭素数１〜６のアルキル基若しくはアルキルオキシ基、炭素数３〜６のシクロアルキル基、炭素数４〜１０のシクロアルキルアルキル基、環構成原子数４〜６のヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２、フェニル基又は環構成原子数５〜１０のヘテロアリール基であり（該アルキル基及び該アルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよく、該フェニル基及び該ヘテロアリール基は、水素原子が、それぞれ独立に、１〜３個のハロゲン原子又は炭素数１〜６のアルキル基で置換されていてもよく、ヘテロシクリル基が縮合していてもよい）、Ｍは、炭素数１〜８のアルキレン基、炭素数３〜６のシクロアルキレン基、環構成原子数３〜６のヘテロシクリレン基、フェニレン基又は環構成原子数５〜１０のヘテロアリレン基であり（該アルキレン基、該シクロアルキレン基及び該ヘテロシクリレン基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよく、該ヘテロシクリレン基は、環を構成する１個のメチレン基が−Ｃ（＝Ｏ）−に置き換わっていてもよく、該フェニレン基及び該ヘテロアリレン基は、へテロシクリル基が縮合していてもよい）、Ｒ１は、フェニル基又はベンジル基であり（該フェニル基及び該ベンジル基は、ベンゼン環上の水素原子が、それぞれ独立に、ハロゲン原子、シアノ基又は炭素数１〜６のアルキル基若しくはアルキルオキシ基で置換されていてもよく、該アルキル基及び該アルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）、Ｒ２は、水素原子又は炭素数１〜６のアルキル基であり、Ａは、メチレン基又は酸素原子である。］
【００２６】
「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を意味する。
【００２７】
「炭素数１〜６のアルキル基」とは、炭素原子を１〜６個有する直鎖状又は炭素原子を３〜６個有する分岐鎖状の飽和炭化水素基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、１−プロピル基、２−プロピル基、１−ブチル基、２−ブチル基、２−メチル−２−プロピル基（ｔｅｒｔ−ブチル基）又は２−メチル−１−プロピル基が挙げられる。
【００２８】
「炭素数１〜６のアルキルオキシ基」とは、上記の炭素数１〜６のアルキル基が酸素原子に結合した基を意味し、例えば、メトキシ基、エトキシ基、１−プロピルオキシ基、２−プロピルオキシ基、１−ブチルオキシ基又は２−ブチルオキシ基が挙げられる。
【００２９】
上記のアルキル基及びアルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に、１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよく、この場合のアルキル基としては、例えば、トリフルオロメチル基、２−フルオロエチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、トリクロロメチル基又は２，２，２−トリクロロエチル基が挙げられ、この場合のアルキルオキシ基としては、例えば、トリフルオロメトキシ基、２，２，２−トリフルオロエトキシ基又は２−フルオロエトキシ基が挙げられる。
【００３０】
「炭素数３〜６のシクロアルキル基」とは、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基又はシクロヘキシル基を意味する。
【００３１】
「炭素数４〜１０のシクロアルキルアルキル基」とは、メチル基、エチル基、プロピル基又はブチル基の水素原子が、上記の炭素数３〜６のシクロアルキル基で置換された基を意味し、例えば、シクロプロピルメチル基、シクロプロピルエチル基、シクロプロピルプロピル基、シクロプロピルブチル基、シクロブチルメチル基、シクロペンチルメチル基又はシクロヘキシルメチル基が挙げられる。
【００３２】
「環構成原子数４〜６のヘテロシクリル基」とは、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子からなる群から選択される同一又は異なる原子を環構成原子として１又は２個含む、環構成原子数が４〜６の飽和複素環基を意味し、例えば、オキセタニル基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、ジオキサニル基、モルホリニリル基、ピロリジニル基、ピペリジニル基、テトラヒドロチオフェニル基又はテトラヒドロチオピラニル基が挙げられる。
【００３３】
「環構成原子数が５〜１０のヘテロアリール基」とは、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子からなる群から選択される同一又は異なる原子を環構成原子として１〜４個含む、環構成原子数が５〜１０の単環式又は縮環式の複素芳香族基を意味し、単環式のヘテロアリール基としては、例えば、ピリジル基、ピリミジニル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、１，３，５−トリアジニル基、１，２，４−トリアジニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、１，２，４−トリアゾリル基、テトラゾリル基、チエニル基、フラニル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チアゾリル基又はイソチアゾリル基が挙げられ、縮環式のヘテロアリール基としては、例えば、キノリル基、イソキノリル基、ベンゾフラニル基、イソベンゾフラニル基、インドリル基、インダゾリル基、ベンズイミダゾリル基、ベンズトリアゾリル基、ベンゾオキサゾリル基又はベンゾチアゾリル基が挙げられる。
【００３４】
一般式（Ｉ）のＬにおけるフェニル基及び上記のヘテロアリール基は、水素原子が、それぞれ独立に、１〜３個のハロゲン原子又は炭素数１〜６のアルキル基で置換されていてもよく、この場合のフェニル基としては、例えば、２−フルオロフェニル基、４−フルオロフェニル基、２，６−ジフルオロフェニル基、２−クロロフェニル基、３−クロロフェニル基又は４−クロロフェニル基が挙げられ、この場合のヘテロアリール基としては、例えば、２−クロロピリジル基、４−クロロピリジル基、５−メチルピラジニル基、３−メチルイソオキサゾリル基又は１，３−ジメチルピラゾリル基が挙げられる。
【００３５】
また一般式（Ｉ）のＬにおけるフェニル基及び上記のヘテロアリール基は、ヘテロシクリル基が縮合していてもよく、この場合のフェニル基としては、例えば、２，３−ジヒドロベンゾフラニル基、ベンゾ［ｄ］［２，３］ジオキソリル基、２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ベンゾジオキシニル基、インドリニル基、イソインドリニル基又は３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジニル基が挙げられ、この場合のヘテロアリール基としては、例えば、２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジニル基、２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｃ］ピリジニル基、２，３−ジヒドロフロ［３，２−ｂ］ピリジニル基、２，３−ジヒドロフロ［３，２−ｃ］ピリジニル基、［１，３］ジオキソロ［４，５−ｂ］ピリジニル基、［１，３］ジオキソロ［４，５−ｃ］ピリジニル基、１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジニル基、１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジニル基、１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジニル基、１Ｈ−ピロロ［３，２−ｂ］ピリジニル基、１Ｈ−［１，２，３］トリアゾリロ［４，５−ｂ］ピリジニル基又は１Ｈ−［１，２，３］トリアゾリロ［４，５−ｃ］ピリジニル基が挙げられる。
【００３６】
「炭素数１〜８のアルキレン基」とは、炭素原子を１〜８個有する直鎖状又は炭素原子を３〜８個有する分岐鎖状の飽和炭化水素鎖を意味し、例えば、メチレン基、エチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、ブチレン基、イソブチレン基、ペンチレン基、イソペンチレン基又はヘキシレン基が挙げられる。
【００３７】
「炭素数３〜６のシクロアルキレン基」とは、炭素原子を３〜６個有する環状の飽和炭化水素鎖を意味し、例えば、シクロプロピレン基、シクロブチレン基、シクロペンチレン基又はシクロヘキシレン基が挙げられる。
【００３８】
「環構成原子数３〜６のヘテロシクリレン基」とは、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子からなる群から選択される同一又は異なる原子を環構成原子として１又は２個含む、環構成原子数が３〜６の飽和複素環鎖を意味し、例えば、オキセタニレン基、テトラヒドロフラニレン基、テトラヒドロピラニレン基、ジオキサニレン基、モルホリニレン基、ピロリジニレン基、ピペリジニレン基、テトラヒドロチオフェニレン基又はテトラヒドロチオピラニレン基が挙げられる。
【００３９】
上記のアルキレン基、シクロアルキレン基及びヘテロシクリレン基は、水素原子が、それぞれ独立に、１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよく、この場合のアルキレン基としては、例えば、フルオロメチレン基、ジフルオロメチレン基、１−フルオロエチレン基、１，１―ジフルオロエチレン基、１，２−ジフルオロエチレン基、１，１−ジフルオロプロピレン基、２，２−ジフルオロプロピレン基、３，３−ジフルオロプロピレン基、１−フルオロイソプロピレン基、２−フルオロイソプロピレン基、１，２−ジフルオロイソプロピレン基、２，２−ジフルオロイソプロピレン基、１，２，２−トリフルオロイソプロピレン基、２，２，２−トリフルオロイソプロピレン基、１，１−ジフルオロブチレン基、２，２−ジフルオロブチレン基、３，３−ジフルオロブチレン基、４，４−ジフルオロブチレン基、１，１−ジフルオロペンチレン基、２，２−ジフルオロペンチレン基、３，３−ジフルオロペンチレン基、４，４−ジフルオロペンチレン基、５，５−ジフルオロペンチレン基、１，１−ジフルオロヘキシレン基、２，２−ジフルオロヘキシレン基、３，３−ジフルオロヘキシレン基、４，４−ジフルオロヘキシレン基、５，５−ジフルオロヘキシレン基又は６，６−ジフルオロヘキシレン基が挙げられ、この場合のシクロアルキレン基としては、例えば、フルオロシクロプロピレン基、１，１−ジフルオロシクロプロピレン基、１，２―ジフルオロシクロプロピレン基、フルオロシクロブチレン基、１，１−ジフルオロシクロブチレン基、フルオロシクロペンチレン基、１，１−ジフルオロシクロペンチレン基、クロロシクロペンチレン基、フルオロシクロへキシレン基、１，１−ジフルオロシクロヘキシレン基又はクロロシクロヘキシレン基が挙げられ、この場合のヘテロシクリレン基としては、例えば、３，３−ジフルオロテトラヒドロピラニレン基、４，４−ジフルオロテトラヒドロピラニレン基、３，３−ジフルオロピペリジニレン基、４，４−ジフルオロピペリジニレン基、３，３−ジフルオロテトラヒドロチオピラニレン基又は４，４−ジフルオロテトラヒドロチオピラニレン基が挙げられる。
【００４０】
また上記のヘテロシクリレン基は、環を構成する１個のメチレン基が−Ｃ（＝Ｏ）−に置き換わっていてもよく、この場合のヘテロシクリレン基としては、例えば、ピロリジン−２−オニレン基が挙げられる。
「環構成原子数５〜１０のヘテロアリレン基」とは、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子からなる群から選択される同一又は異なる原子を環構成原子として１〜４個含む、環構成原子数５〜１０の単環式又は縮環式の複素芳香族鎖を意味し、単環式のヘテロアリレン鎖としては、例えば、ピリジレン基、ピリミジニレン基、ピラジニレン基、ピリダジニレン基、１，３，５−トリアジニレン基、１，２，４−トリアジニレン基、ピロリレン基、イミダゾリレン基、ピラゾリレン基、１，２，４−トリアゾリレン基、テトラゾリレン基、チエニレン基、フラニレン基、オキサゾリレン基、イソオキサゾリレン基、チアゾリレン基又はイソチアゾリレン基が挙げられ、縮環式のヘテロアリール基としては、例えば、キノリレン基、イソキノリレン基、ベンゾフラニレン基、イソベンゾフラニレン基、ベンズイミダゾリレン基、ベンズトリアゾリレン基、ベンゾオキサゾリレン基又はベンゾチアゾリレン基が挙げられる。
【００４１】
フェニレン基及び上記のヘテロアリレン基は、へテロシクリル基が縮合していてもよく、この場合のフェニレン基としては、例えば、フェニレン基、２，３−ジヒドロベンゾフラニレン基、ベンゾ［ｄ］［２，３］ジオキソリレン基、２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ベンゾジオキシニレン基、インドリニレン基、イソインドリニレン基又は３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジニレン基が挙げられ、この場合のヘテロアリレン基としては、例えば、２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジニレン基、２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｃ］ピリジニレン基、２，３−ジヒドロフロ［３，２−ｂ］ピリジニレン基、２，３−ジヒドロフロ［３，２−ｃ］ピリジレン基、［１，３］ジオキソロ［４，５−ｂ］ピリジニレン基、［１，３］ジオキソロ［４，５−ｃ］ピリジニレン基、１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジニレン基、１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジニレン基、１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジニレン基、１Ｈ−ピロロ［３，２−ｂ］ピリジニレン基、１Ｈ−［１，２，３］トリアゾリロ［４，５−ｂ］ピリジニレン基又は１Ｈ−［１，２，３］トリアゾリロ［４，５−ｃ］ピリジニレン基が挙げられる。
【００４２】
一般式（Ｉ）のＲ１におけるフェニル基及びベンジル基は、ベンゼン環上の水素原子が、それぞれ独立に、ハロゲン原子、シアノ基又は炭素数１〜６のアルキル基若しくはアルキルオキシ基（前記アルキル基及びアルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に、１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）で置換されていてもよく、この場合のフェニル基としては、例えば、４−トリフルオロメチルフェニル基、４−トリフルオロメトキシフェニル基、４−ジフルオロメトキシフェニル基、４−クロロフェニル基、４−メチルフェニル基、４−シアノフェニル基、4−エチルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、４−ｔｅｒｔブチルフェニル基、３，４−ジクロロフェニル基、３−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル基、３−クロロ−４−トリフルオロメトキシフェニル基、３−メチル−４−クロロフェニル基、３−メチル−４−トリフルオロメチルフェニル基又は３−メチル−４−トリフルオロメトキシフェニル基が挙げられ、この場合のベンジル基としては、例えば、２−メチルベンジル基、３−メチルベンジル基、４−メチルベンジル基、２−クロロベンジル基、３−クロロベンジル基、４−クロロベンジル基、２−トリフルオロメチルベンジル基、３−トリフルオロメチルベンジル基、４−トリフルオロメチルベンジル基、２−トリフルオロメトキシベンジル基、３−トリフルオロメトキシベンジル基、４−トリフルオロメトキシベンジル基２，４−ジクロロベンジル基、３，４−ジクロロベンジル基、２−トリフルオロメチル−４−クロロベンジル基、２−トリフルオロメトキシ−４−クロロベンジル基、２−クロロ−４−メチルベンジル基、２−トリフルオロメチル−４−メチルベンジル基、２−トリフルオロメトキシ−４−メチルベンジル基、２−クロロ−４−シアノベンジル基、２−トリフルオロメチル−４−シアノベンジル基、２−トリフルオロメトキシ−４−シアノベンジル基、２−クロロ−４−フルオロベンジル基、２−トリフルオロメチル−４−フルオロベンジル基又は２−トリフルオロメトキシ−４−フルオロベンジル基が挙げられる。
【００４３】
また、「治療剤又は予防剤」には、治療又は予防の一方に用いられるもののみならず、治療及び予防の双方の目的に対して同時に用いられるものも包含される。
【００４４】
上記のジアザスピロウレア誘導体は、一般式（Ｉ）において、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｍ−Ｌであり、Ｙは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ１であることが好ましい。
【００４５】
Ｌは、水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、炭素数１〜６のアルキル基若しくはアルキルオキシ基（前記アルキル基及びアルキルオキシ基は、水素原子が、１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）、炭素数４〜１０のシクロアルキルアルキル基又は炭素数３〜６のシクロアルキル基であることが好ましく、ハロゲン原子、シアノ基又は炭素数１〜６のアルキル基であることがより好ましく、ハロゲン原子、シアノ基又はメチル基であることがさらに好ましい。
【００４６】
Ｍは、炭素数１〜８のアルキレン基（前記アルキレン基は、水素原子が、それぞれ独立に、１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）又はへテロシクリル基が縮合していてもよいフェニレン基若しくは環構成原子数５〜１０のヘテロアリレン基であることが好ましく、へテロシクリル基が縮合していてもよいフェニレン基又は環構成原子数５〜１０のヘテロアリレン基であることがより好ましく、フェニレン基又はイソオキサゾリレン基であることがさらに好ましい。
【００４７】
Ｒ１は、少なくともベンゼン環上の４位の水素原子がハロゲン原子、シアノ基又は炭素数１〜６のアルキル基若しくはアルキルオキシ基（前記アルキル基及びアルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に、１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）で置換されているフェニル基又はベンジル基であることが好ましく、少なくともベンゼン環上の４位の水素原子が炭素数１〜６のアルキル基又はアルキルオキシ基（前記アルキル基及びアルキルオキシ基は、水素原子が、それぞれ独立に、１〜３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）で置換されているフェニル基であることがより好ましく、少なくともベンゼン環上の４位の水素原子がトリフルオロメチル基又はトリフルオロメトキシ基で置換されているフェニル基であることがさらに好ましい。
【００４８】
Ｒ２は、炭素数１〜６のアルキル基であることが好ましく、メチル基であることがより好ましい。
【００４９】
Ａは、酸素原子であることが好ましい。
【００５０】
上記の一般式（Ｉ）で示されるジアザスピロウレア誘導体（以下、ジアザスピロウレア誘導体（Ｉ））の薬理学的に許容される塩としては、例えば、硫酸、塩酸若しくはリン酸等の鉱酸との塩、酢酸、シュウ酸、乳酸、酒石酸、フマル酸、マレイン酸、メタンスルホン酸若しくはベンゼンスルホン酸等の有機酸との塩、トリメチルアミン若しくはメチルアミン等のアミンとの塩又はナトリウムイオン、カリウムイオン若しくはカルシウムイオン等の金属イオンとの塩が挙げられる。
【００５１】
上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）の製造に使用する出発物質と試薬は、市販品をそのまま利用してもよいし、又は、公知の方法（国際公開第２００９／０８５１８５号、米国特許第０５４５１５７８号明細書及び国際公開第２００７／０３００６１号）を参考にして化学合成することもできる。
【００５２】
上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）のうち、一般式（Ｉ−ａ）及び（Ｉ−ｂ）で示される化合物は、例えば、以下のスキーム１及びスキーム２に示すように、ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）に対するアミド化工程又はスルホンアミド化工程を経ることにより製造できる。
【００５３】
アミド化工程は、以下のスキーム１に示すように、ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）に対する塩基存在下、酸クロリドとのアミド化反応、又は、塩基及び縮合剤存在下、カルボン酸との縮合反応により行うことができる。
（スキーム１）
【化３】
2013115294.tif 000005
［式中、Ｌ、Ｍ、Ｒ１及びＡは、上記定義に同じ。］
【００５４】
酸クロリドとのアミド化反応に用いる溶媒としては、例えば、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（以下、ＤＭＦ）、テトラヒドロフラン（以下、ＴＨＦ）、ジオキサン、ジエチルエーテル又は１，２−ジメトキシエタンが挙げられるが、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル又はＴＨＦが好ましく、ジクロロメタン又は１，２−ジクロロエタンがより好ましい。
【００５５】
酸クロリドとのアミド化反応に用いる酸クロリドの当量は、ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）に対して１〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましく、１〜１．５当量がさらに好ましい。
【００５６】
酸クロリドとのアミド化反応に用いる塩基としては、例えば、ジイソプロピルエチルアミン（以下、ＤＩＰＥＡ）、トリエチルアミン、ピリジン又はＮ−メチルモルホリン等の有機塩基が挙げられるが、ＤＩＰＥＡ又はトリエチルアミンが好ましい。該塩基の当量は、ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）に対して１〜１００当量が好ましく、１〜１０当量がより好ましい。
【００５７】
酸クロリドとのアミド化反応の反応温度は、−５０〜１００℃が好ましく、−２０〜６０℃がより好ましく、０〜４０℃がさらに好ましい。また、酸クロリドとのアミド化反応の反応時間は、３０分間〜２４時間が好ましく、３０分間〜１２時間がより好ましく、３０分間〜８時間がさらに好ましい。
【００５８】
酸クロリドとのアミド化反応におけるジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）の反応開始時の濃度は、０．０１〜１００Ｍが好ましく、０．０１〜１０Ｍがより好ましく、０．１〜１０Ｍがさらに好ましい。
【００５９】
カルボン酸との縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、シクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−エチル−Ｎ‘−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリスジメチルアミノホスホニウム塩（ＢＯＰ試薬）、１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−ベンゾトリアゾリウム−３−オキシドヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ）又はＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（以下、ＨＡＴＵ）が挙げられるが、ＨＡＴＵが好ましい。
【００６０】
カルボン酸との縮合反応に用いる溶媒としては、縮合剤としてＨＡＴＵを用いる場合、例えば、ＤＭＦ、ＴＨＦ、１，４−ジオキサン、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン、ジエチルエーテル又は１，２−ジメトキシエタンが挙げられるが、ＤＭＦ又は１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノンが好ましく、ＤＭＦがより好ましい。
【００６１】
カルボン酸との縮合反応に用いる縮合剤の当量は、ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）に対して１〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましい。
【００６２】
カルボン酸との縮合反応に用いるカルボン酸の当量は、ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）に対して１〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましく、１〜１．５当量がさらに好ましい。
【００６３】
カルボン酸との縮合反応に用いる塩基としては、例えば、ＤＩＰＥＡ、トリエチルアミン、ピリジン又はＮ−メチルモルホリン等の有機塩基が挙げられるが、ＤＩＰＥＡ又はトリエチルアミンが好ましい。該塩基の当量は、ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）に対して１〜１００当量が好ましく、１〜１０当量がより好ましい。
【００６４】
カルボン酸との縮合反応の反応温度は、−５０〜１００℃が好ましく、−２０〜６０℃がより好ましく、０〜４０℃がさらに好ましい。また、カルボン酸との縮合反応の反応時間は、３０分間〜２４時間が好ましく、３０分間〜１２時間がより好ましく、３０分間〜８時間がさらに好ましい。
【００６５】
カルボン酸との縮合反応におけるジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）の反応開始時の濃度は、０．０１〜１００Ｍが好ましく、０．０１〜１０Ｍがより好ましく、０．１〜３Ｍがさらに好ましい。
【００６６】
スルホンアミド化工程は、以下のスキーム２に示すように、ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）に対する塩基存在下、スルホニルクロリドとのスルホンアミド化反応により行うことができる。
（スキーム２）
【化４】
2013115294.tif 000006
［式中、Ｌ、Ｍ、Ｒ１及びＡは、上記定義に同じ。］
【００６７】
スルホニルクロリドとのスルホンアミド化反応に用いる溶媒としては、例えば、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル、ＴＨＦ、ジオキサン、ジエチルエーテル又は１，２−ジメトキシエタンが挙げられるが、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル又はＴＨＦが好ましく、ジクロロメタン又は１，２−ジクロロエタンがより好ましい。
【００６８】
スルホニルクロリドとのスルホンアミド化反応に用いるスルホニルクロリドの当量は、ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）に対して１〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましく、１〜１．５当量がさらに好ましい。
【００６９】
スルホニルクロリドとのスルホンアミド化反応に用いる塩基としては、例えば、ＤＩＰＥＡ、トリエチルアミン、ピリジン又はＮ−メチルモルホリン等の有機塩基が挙げられるが、ＤＩＰＥＡ又はトリエチルアミンが好ましい。該塩基の当量は、ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）に対して１〜１００当量が好ましく、１〜１０当量がより好ましい。
【００７０】
スルホニルクロリドとのスルホンアミド化反応の反応温度は、−５０〜１００℃が好ましく、−２０〜６０℃がより好ましく、０〜４０℃がさらに好ましい。また、スルホニルクロリドとのスルホンアミド化反応の反応時間は、３０分間〜２４時間が好ましく、３０分間〜１２時間がより好ましく、３０分間〜８時間がさらに好ましい。
【００７１】
スルホニルクロリドとのスルホンアミド化反応におけるジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）の反応開始時の濃度は、０．０１〜１００Ｍが好ましく、０．０１〜１０Ｍがより好ましく、０．１〜１０Ｍがさらに好ましい。
【００７２】
ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）は、例えば以下のスキーム３に示すように、保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）に対するウレア化工程、続く保護ジアザスピロウレア誘導体（ＩＶ）に対する脱保護工程を経ることにより製造できる。
（スキーム３）
【化５】
2013115294.tif 000007
［式中、Jは、保護基を表す。Ｒ１及びＡは、上記定義に同じ。］
【００７３】
ウレア化工程は、スキーム３に示すように、保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）に対する塩基の存在下、イソシアナートとのウレア化反応、又は、塩基存在下、ウレア化剤及びアミンとのウレア化反応により行うことができる。
【００７４】
イソシアナートとのウレア化反応に用いる溶媒としては、例えば、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル、ＤＭＦ、ＴＨＦ、ジオキサン、ジエチルエーテル又は１，２−ジメトキシエタンが挙げられるが、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル又はＴＨＦが好ましく、ジクロロメタン又は１，２−ジクロロエタンがより好ましい。
【００７５】
イソシアナートとのウレア化反応に用いるイソシアナートの当量は、保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）に対して１〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましく、１〜１．５当量がさらに好ましい。
【００７６】
イソシアナートとのウレア化反応に用いる塩基としては、例えば、ＤＩＰＥＡ、トリエチルアミン、ピリジン又はＮ−メチルモルホリン等の有機塩基が挙げられるが、ＤＩＰＥＡ又はトリエチルアミンが好ましい。該塩基の当量は、保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）に対して１〜１００当量が好ましく、１〜１０当量がより好ましい。
【００７７】
イソシアナートとのウレア化反応における反応温度は、−５０〜１００℃が好ましく、−２０〜６０℃がより好ましく、０〜４０℃がさらに好ましい。また、イソシアナートとのウレア化反応における反応時間は、３０分間〜２４時間が好ましく、３０分間〜１２時間がより好ましく、３０分間〜８時間がさらに好ましい。
【００７８】
イソシアナートとのウレア化反応における保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）の反応開始時の濃度は、０．０１〜１００Ｍが好ましく、０．０１〜１０Ｍがより好ましく、０．１〜１０Ｍがさらに好ましい。
【００７９】
ウレア化剤及びアミンとのウレア化反応に用いる溶媒としては、例えば、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル、ＤＭＦ、ＴＨＦ、ジオキサン、ジエチルエーテル又は１，２−ジメトキシエタンが挙げられるが、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル又はＴＨＦが好ましく、ジクロロメタン又は１，２−ジクロロエタンがより好ましい。
【００８０】
ウレア化剤及びアミンとのウレア化反応に用いるウレア化剤は、例えば、Ｎ，Ｎ−カルボニルジイミダゾール、ホスゲン、ジホスゲン、トリホスゲン、４−クロロ蟻酸フェニル又は４−ニトロ蟻酸フェニルが挙げられるが、４−クロロ蟻酸フェニル又は４−ニトロ蟻酸フェニルが好ましい。該ウレア化剤の当量は、保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）に対して１〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましく、１〜１．５当量がさらに好ましい。
【００８１】
ウレア化剤及びアミンとのウレア化反応に用いるアミンの当量は、保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）に対して１〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましく、１〜１．５当量がさらに好ましい。
【００８２】
ウレア化剤及びアミンとのウレア化反応に用いる塩基としては、例えば、ＤＩＰＥＡ、トリエチルアミン、ピリジン又はＮ−メチルモルホリン等の有機塩基が挙げられるが、ＤＩＰＥＡ又はトリエチルアミンが好ましい。該塩基の当量は、保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）に対して１〜１００当量が好ましく、１〜１０当量がより好ましい。
【００８３】
ウレア化剤及びアミンとのウレア化反応における反応温度は、−５０〜１００℃が好ましく、−２０〜６０℃がより好ましく、０〜４０℃がさらに好ましい。また、ウレア化剤及びアミンとのウレア化反応における反応時間は、３０分間〜２４時間が好ましく、３０分間〜１２時間がより好ましく、３０分間〜８時間がさらに好ましい。
【００８４】
ウレア化剤及びアミンとのウレア化反応における保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）の反応開始時の濃度は、０．０１〜１００Ｍが好ましく、０．０１〜１０Ｍがより好ましく、０．１〜１０Ｍがさらに好ましい。
【００８５】
保護ジアザスピロウレア誘導体（ＩＶ）の脱保護工程は、Ｇｒｅｅｎらの方法（「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、第３版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｉｎｃ．、１９９９年）によって実施できる。例えば、保護ジアザスピロウレア誘導体（ＩＶ）の保護基がベンジル基である場合には、金属触媒存在下、水素添加反応を行なうことで保護基を除去して、ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩ）に導くことができる。
【００８６】
また、ジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）のうち、一般式（Ｉ−ｃ）又は（Ｉ−ｄ）で示される化合物は、スキーム４に示すように、保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）を出発物質にして、上記アミド化工程又はスルホンアミド化工程と同様の方法で置換基Ｙを導入して中間体（Ｖ−ａ）又は（Ｖ−ｂ）を得、引き続き上記脱保護工程と同様の方法でアミン中間体（ＶＩ−ａ）又は（ＶＩ−ｂ）を得て、上記ウレア化工程と同様の方法を行うことによって製造できる。
（スキーム４）
【化６】
2013115294.tif 000008
［式中、Jは、保護基を表す。Ｌ、Ｍ、Ｒ１及びＡは、上記定義に同じ。］
【００８７】
保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）は、市販品をそのまま利用してもよいし、又は、公知の方法により製造してもよい。
【００８８】
例えば、保護ジアザスピロアミン誘導体（ＩＩＩ）のうち、１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン誘導体は、国際公開第２００９／０８５１８５号又は国際公開第２００９／０９８４４８号を参考にして製造できる。
【００８９】
また、２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン誘導体（ＩＩＩ−ａ）は、例えば以下のスキーム５に示すように、アルデヒド誘導体（ＶＩＩ）に対するアクリロニトリルとの付加工程、続くニトリル誘導体（ＶＩＩＩ）に対するニトリル基の還元及び還元的アミノ化工程を経ることにより製造できる。
（スキーム５）
【化７】
2013115294.tif 000009
［式中、Jは保護基を表す。］
【００９０】
付加工程は、スキーム５に示すように、アルデヒド誘導体（ＶＩＩ）に対する塩基存在下、アクリロニトリルとの反応により行うことができる。アルデヒド誘導体（ＶＩＩ）は、市販品をそのまま利用してもよいし、又は、国際公開第２００９／１０８８２７号を参考にして化学合成することもできる。
【００９１】
アクリロニトリルとの付加反応に用いる溶媒としては、例えば、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル、ＤＭＦ、ＴＨＦ、１，４−ジオキサン、ジエチルエーテル又は１，２−ジメトキシエタンが挙げられるが、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル、ＴＨＦ又は１，４−ジオキサンが好ましく、ＴＨＦ又は１，４−ジオキサンがより好ましい。
【００９２】
アクリロニトリルとの付加反応に用いるアクリロニトリルの当量は、アルデヒド誘導体（ＶＩＩ）に対して１〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましく、１〜１．５当量がさらに好ましい。
【００９３】
アクリロニトリルとの付加反応に用いる塩基としては、例えば、炭酸ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の有機酸塩、水酸化ナトリウム若しくは水酸化カリウム等の無機塩基又はトリメチルベンジルアンモニウムヒドロキシド若しくはテトラエチルアンモニウムヒドロキシド等のアンモニウム塩が挙げられるが、トリメチルベンジルアンモニウムヒドロキシド又はテトラエチルアンモニウムヒドロキシドが好ましく、トリメチルベンジルアンモニウムヒドロキシドがより好ましい。該塩基の当量は、アルデヒド誘導体（ＶＩＩ）に対して０．０１〜１００当量が好ましく、０．０１〜１当量がより好ましい。
【００９４】
アクリロニトリルとの付加反応における反応温度は、−５０〜１００℃が好ましく、−２０〜６０℃がより好ましく、０〜４０℃がさらに好ましい。また、アクリロニトリルとの付加反応における反応時間は、３０分間〜７２時間が好ましく、３時間〜７２時間がより好ましく、１２時間〜７２時間がさらに好ましい。
【００９５】
アクリロニトリルとの付加反応におけるアルデヒド誘導体（ＶＩＩ）の反応開始時の濃度は、０．０１〜１００Ｍが好ましく、０．０１〜１０Ｍがより好ましく、０．１〜１０Ｍがさらに好ましい。
【００９６】
ニトリル基の還元及び還元的アミノ化工程は、ニトリル誘導体（ＶＩＩＩ）に対する金属触媒及び酸存在下、水素添加反応により行うことができる。
【００９７】
ニトリル基の還元及び還元的アミノ化反応に用いる溶媒としては、例えば、酢酸エチル、エタノール又はメタノールが挙げられるが、メタノール又はエタノールが好ましい。
【００９８】
ニトリル基の還元及び還元的アミノ化反応に用いる金属触媒としては、例えば、酸化白金、水酸化パラジウム／炭素又はパラジウム／炭素が挙げられるが、水酸化パラジウム／炭素又はパラジウム／炭素が好ましい。
【００９９】
ニトリル基の還元及び還元的アミノ化反応に用いる該金属触媒の当量は、ニトリル誘導体（ＶＩＩＩ）に対して０．０１〜１０当量が好ましく、０．０５〜３当量がより好ましく、０．１〜１当量がさらに好ましい。
【０１００】
ニトリル基の還元及び還元的アミノ化反応に用いる酸としては、例えば、塩酸、硫酸又は硝酸が挙げられるが、塩酸が好ましい。該酸の当量は、ニトリル誘導体（ＶＩＩＩ）に対して０．１〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましく、１〜１．５当量がさらに好ましい。
【０１０１】
ニトリル基の還元及び還元的アミノ化反応における水素の圧力は、１〜１０気圧が好ましく、１〜５気圧がより好ましく、３〜５気圧がさらに好ましい。
【０１０２】
ニトリル基の還元及び還元的アミノ化反応におけるニトリル誘導体（ＶＩＩＩ）の反応開始時の濃度は、０．０１〜１００Ｍが好ましく、０．０１〜１０Ｍがより好ましく、０．０５〜１Ｍがさらに好ましい。
【０１０３】
以上のようにして得られる上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）、その薬理学的に許容される塩、又は、上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）の製造に用いる中間体、原料化合物若しくは試薬は、必要に応じて、抽出、蒸留、クロマトグラフィー又は再結晶等の方法で単離精製してもよい。
【０１０４】
また、本発明の医薬は、上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴としており、ｓＥＨ阻害剤として高血圧をはじめとする循環器疾患の治療剤及び予防剤として好適に使用できる。
【０１０５】
「ｓＥＨ阻害剤」とは、ＥＥＴｓの加水分解を触媒するｓＥＨの作用を阻害する化合物、すなわち、ｓＥＨ阻害活性を示す化合物又は該化合物を有効成分として含有する組成物を意味する。
【０１０６】
ｓＥＨ阻害剤が示すｓＥＨ阻害活性は、例えば、ヒト由来のｓＥＨと、その基質であるＥＥＴｓとをｓＥＨ阻害剤の存在下で反応させ、産生されるＤＨＥＴの量を対照と比較することで測定できる。また、市販の測定キット（Ｓｏｌｕｂｌｅ  Ｅｐｏｘｉｄｅ  Ｈｙｄｒｏｌａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ；Ｃａｙｍａｎ社）を用いるか、公知文献（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００５年、第３４３巻、ｐ．６６−７５等）に記載の方法によっても、ｓＥＨ阻害剤の活性を測定できる。
【０１０７】
さらに、ラセミ性４−ニトロフェニル−トランス−２，３−エポキシ−３−フェニルプロピルカーボネートを基質として用いて、酵素（０．２４μＭのヒトｓＥＨ）を、基質（４０μＭ）の導入前に、リン酸ナトリウム緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ７．４）中にてｓＥＨ阻害剤とともに３０℃で５分間インキュベートし、４０５ｎｍの４−ニトロフェノラート陰イオンの出現を３０℃で１分間測定（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ  ２００；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ社）するか、又は、シアノ（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）メチルトランス−［（３−フェニルオキシラン−２−イル）メチル］カーボネートを基質として用いて、酵素（０．９６ｎＭのヒトｓＥＨ）を、基質（５μＭ）の導入前に、ｓＥＨ阻害剤とともにＢｉｓＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（２５ｍＭ、ｐＨ７．０、０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡを含む）中にて３０℃で５分間インキュベートし、６−メトキシ−２−ナフトアルデヒドの出現をモニターすることによっても、ｓＥＨ阻害剤のｓＥＨ阻害活性を測定できる。
【０１０８】
上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩は、ｓＥＨ阻害活性を示すので、ｓＥＨの活性化に伴うＥＥＴｓの減少に起因する疾患である高血圧をはじめとする循環器疾患の治療又は予防に有効である。
【０１０９】
上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩の高血圧に対する治療効果は、動物モデルを用いて評価できる。そのような動物モデルとしては、例えば、アンジオテンシンＩＩ誘発性高血圧モデル、ＳＨＲモデル又は食塩感受性高血圧発症モデルが挙げられる。
【０１１０】
上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩は、生体内のｓＥＨに対して強い抑制作用を示し、加えて、動物試験において高血圧に対し治療効果を示す生理活性物質であるため、医薬品の有効成分として用いることができる。
【０１１１】
上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬は、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、イヌ、サル、ウシ、ヒツジ又はヒト）、特にヒトに対して投与した場合に、ｓＥＨに対して強い抑制作用を示し、高血圧に対し優れた治療効果を発揮できる。
【０１１２】
上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する治療剤又は予防剤は、そのまま粉末剤として、又は、適当な剤形の医薬組成物として、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、イヌ、サル、ウシ、ヒツジ又はヒト）に対して経口的又は非経口的（例えば、経皮投与、静脈投与、直腸内投与、吸入投与、点鼻投与又は点眼投与）に投与できる。
【０１１３】
哺乳動物への投与のための剤形としては、例えば、錠剤、散剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、シロップ剤、液剤、注射剤、乳剤、懸濁剤若しくは坐剤又は公知の持続型製剤が挙げられる。これら剤形は、公知の方法によって製造することができ、製剤分野において一般的に用いられる担体を含有するものである。そのような担体としては、例えば、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤（液状製剤における溶剤）、溶解補助剤、懸濁化剤又は無痛化剤が挙げられる。また必要に応じて、等張化剤、緩衝剤、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、吸着剤又は湿潤剤等の添加物を用いても構わない。
【０１１４】
賦形剤としては、例えば、乳糖、Ｄ−マンニトール、澱粉、ショ糖、コーンスターチ、結晶セルロース又は軽質無水ケイ酸が挙げられる。
【０１１５】
滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク又はコロイドシリカが挙げられる。
【０１１６】
結合剤としては、例えば、結晶セルロース、Ｄ−マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、澱粉、ショ糖、ゼラチン、メチルセルロース又はカルボキシメチルセルロースナトリウムが挙げられる。
【０１１７】
崩壊剤としては、例えば、澱粉、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム又はＬ−ヒドロキシプロピルセルロースが挙げられる。
【０１１８】
溶剤としては、例えば、注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油又はトウモロコシ油が挙げられる。
溶解補助剤としては、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム又はクエン酸ナトリウムが挙げられる。
【０１１９】
懸濁化剤としては、例えば、ステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム若しくはモノステアリン酸グリセリン等の界面活性剤又はポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース若しくはヒドロキシプロピルセルロース等の親水性高分子が挙げられる。
【０１２０】
無痛化剤としては、例えば、ベンジルアルコールが挙げられる。
【０１２１】
等張化剤としては、例えば、ブドウ糖、塩化ナトリウム、Ｄ−ソルビトール又はＤ−マンニトールが挙げられる。
【０１２２】
緩衝剤としては、例えば、リン酸塩、酢酸塩、炭酸塩又はクエン酸塩等の緩衝液が挙げられる。
【０１２３】
防腐剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸又はソルビン酸が挙げられる。
【０１２４】
抗酸化剤としては、例えば、亜硫酸塩又はアスコルビン酸が挙げられる。
【０１２５】
上記の医薬は、ジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩を０．００１〜９９重量％含有することが好ましく、０．０１〜９９重量％含有することがより好ましい。ジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩の有効投与量及び投与回数は、投与形態、患者の年齢、体重、治療すべき症状の性質又は重篤度によっても異なるが、通常成人１日当り１〜１０００ｍｇを、好ましくは１〜３００ｍｇを、１回又は数回に分けて投与できる。
【０１２６】
なお上記の医薬は、単独で投与してもよいが、疾患の治療効果、予防効果の補完若しくは増強又は投与量の低減のために、他の薬剤と配合するか、他の薬剤と併用して使用することもできる。
【０１２７】
配合又は併用し得る他の薬剤としては、例えば、糖尿病治療剤、糖尿病性合併症治療剤、高脂血症治療剤、降圧剤、抗肥満剤、利尿剤、化学療法剤、免疫療法剤、抗血栓剤又は悪液質改善剤（以下、併用薬剤）が挙げられる。
【０１２８】
上記の医薬を併用薬剤と併用して使用する場合には、上記の医薬及び併用薬剤の投与時期は特に限定されず、これらを投与対象に対して同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与しても構わない。また、併用薬剤は低分子化合物であってもよいし、高分子の蛋白、ポリペプチド、抗体又はワクチン等であっても構わない。併用薬剤の投与量は、臨床上用いられている用量を基準として、適宜選択できる。
【０１２９】
上記の医薬を併用薬剤と配合して使用する場合には、上記の医薬と併用薬剤との配合比は、投与対象、投与ルート、対象疾患、症状又は組み合わせ等により適宜選択できる。例えば、投与対象がヒトである場合には、ジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩に対し、併用薬剤を０．０１〜９９．９９の配合比で用いればよい。
【０１３０】
糖尿病治療剤としては、例えば、ウシ若しくはブタの膵臓から抽出された動物インスリン製剤、大腸菌若しくは酵母を用いて遺伝子工学的に合成したヒトインスリン製剤、インスリン亜鉛、プロタミンインスリン亜鉛、インスリンのフラグメント若しくは誘導体等のインスリン製剤、塩酸ピオグリタゾン、トログリタゾン、ロシグリタゾン若しくはそのマレイン酸塩等のインスリン抵抗性改善剤、ボグリボース、アカルボース、ミグリトール若しくはエミグリテート等のα−グルコシダーゼ阻害剤、フェンホルミン、メトホルミン若しくはブホルミン等のビグアナイド剤、トルブタミド、グリベンクラミド、グリクラジド、クロルプロパミド、トラザミド、アセトヘキサミド、グリクロピラミド、グリメピリド、グリピザイド、グリブゾール、レパグリニド、ナテグリニド、ミチグリニド若しくはそのカルシウム塩水和物等のインスリン分泌促進剤、プラムリンチド等のアミリンアゴニスト、バナジン酸等のホスホチロシンホスファターゼ阻害剤、シタグリプチン、ビルダグリプチン、アログリプチン等のＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、エクセナチド、リラグルチド等のＧＬＰ−１様作用物質、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、グルコース−６−ホスファターゼ阻害剤、グルカゴン拮抗剤又はＳＧＬＵＴ阻害剤が挙げられる。
【０１３１】
糖尿病性合併症治療剤としては、例えば、トルレスタット、エパルレスタット、ゼナレスタット、ゾポルレスタット、ミナルレスタット若しくはフィダレスタット等のアルドース還元酵素阻害剤、ＮＧＦ、ＮＴ−３若しくはＢＤＮＦ等の神経栄養因子、神経栄養因子産生・分泌促進剤、ＰＫＣ阻害剤、ＡＧＥ阻害剤、チオクト酸等の活性酸素消去剤又はチアプリド若しくはメキシレチン等の脳血管拡張剤が挙げられる。
【０１３２】
高脂血症治療剤としては、例えば、プラバスタチン、シンバスタチン、ロバスタチン、アトルバスタチン、フルバスタチン、リパンチル、セリバスタチン若しくはイタバスタチン等のＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、ベザフィブラート、ベクロブラート、ビニフィブラート、シプロフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブラート、クロフィブリン酸、エトフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、ニコフィブラート、ピリフィブラート、ロニフィブラート、シムフィブラート若しくはテオフィブラート等のフィブラート系化合物、スクアレン合成酵素阻害剤、アバシマイブ若しくはエフルシマイブ等のＡＣＡＴ阻害剤、コレスチラミン等の陰イオン交換樹脂、プロブコール、ニコモール若しくはニセリトロール等のニコチン酸系薬剤又はイコサペント酸エチル、ソイステロール若しくはガンマオリザノール等の植物ステロールが挙げられる。
【０１３３】
降圧剤としては、例えば、カプトプリル、エナラプリル若しくはデラプリル等のアンジオテンシン変換酵素阻害剤、カンデサルタンシレキセチル、ロサルタン、エプロサルタン、バルサンタン、テルミサルタン、イルベサルタン若しくはタソサルタン等のアンジオテンシンＩＩ拮抗剤、マニジピン、ニフェジピン、ニカルジピン、アムロジピン若しくはエホニジピン等のカルシウム拮抗剤、レブクロマカリム等のカリウムチャンネル開口剤、クロニジン又はアリスキレンが挙げられる。
【０１３４】
抗肥満剤としては、例えば、デキスフェンフルラミン、フェンフルラミン、フェンテルミン、シブトラミン、アンフェプラモン、デキサンフェタミン、マジンドール、フェニルプロパノールアミン若しくはクロベンゾレックス等の中枢性抗肥満剤、オルリスタット等の膵リパーゼ阻害剤、β３アゴニスト、レプチン若しくはＣＮＴＦ（毛様体神経栄養因子）等のペプチド性食欲抑制剤又はリンチトリプト等のコレシストキニンアゴニストが挙げられる。
【０１３５】
利尿剤としては、例えば、サリチル酸ナトリウムテオブロミン若しくはサリチル酸カルシウムテオブロミン等のキサンチン誘導体、エチアジド、シクロペンチアジド、トリクロルメチアジド、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、ベンチルヒドロクロロチアジド、ペンフルチジド、ポリチアジド若しくはメチクロチアジド等のチアジド系製剤、スピロノラクトン若しくはトリアムテレン等の抗アルドステロン製剤、アセタゾラミド等の炭酸脱水酵素阻害剤、クロルタリドン、メフルシド若しくはインダパミド等のクロルベンゼンスルホンアミド系製剤、アゾセミド、イソソルビド、エタクリン酸、ピレタニド、ブメタニド又はフロセミドが挙げられる。
【０１３６】
化学療法剤としては、例えば、サイクロフォスファミド若しくはイフォスファミド等のアルキル化剤、メソトレキセート若しくは５−フルオロウラシル等の代謝拮抗剤、マイトマイシン若しくはアドリアマイシン等の抗癌性抗生物質、ビンクリスチン、ビンデシン若しくはタキソール等の植物由来抗癌剤、シスプラチン、オキサロプラチン、カルボプラチン又はエトポキシドが挙げられる。
【０１３７】
免疫療法剤としては、例えば、ムラミルジペプチド誘導体、ピシバニール、レンチナン、シゾフィラン、クレスチン、インターフェロン、インターロイキン（ＩＬ）、顆粒球コロニー刺激因子又はエリスロポエチンが挙げられる。
【０１３８】
抗血栓剤としては、例えば、ヘパリンナトリウム、ヘパリンカルシウム若しくはダルテパリンナトリウム等のヘパリン、ワルファリンカリウム等のワルファリン、アルガトロバン等の抗トロンビン薬、ウロキナーゼ、チソキナーゼ、アルテプラーゼ、ナテプラーゼ、モンテプラーゼ若しくはパミテプラーゼ等の血栓溶解薬又は塩酸チクロピジン、シロスタゾール、イコサペント酸エチル、ベラプロストナトリウム若しくは塩酸サルポグレラート等の血小板凝集抑制剤が挙げられる。
【０１３９】
悪液質改善剤としては、例えば、インドメタシン若しくはジクロフェナック等のシクロオキシゲナーゼ阻害剤、メゲステロールアセテート等のプロゲステロン誘導体、デキサメサゾン等の糖質ステロイド、メトクロプラミド系薬剤、テトラヒドロカンナビノール系薬剤若しくはエイコサペンタエン酸等の脂肪代謝改善剤、成長ホルモン、ＩＧＦ−１又は悪液質を誘導する因子であるＴＮＦ−α、ＬＩＦ、ＩＬ−６若しくはオンコスタチンＭに対する抗体が挙げられる。
【実施例】
【０１４０】
以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。【０１４１】
（実施例１）
９−（２−フルオロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物１）の合成：
〔ステップ１〕
４−（アミノメチル）−１−ベンジルピペリジン−４−オール（参考例化合物１）の合成：
アルゴン雰囲気下、室温下で１−ベンジルピペリジン−４−オン（２０ｇ、０．１１ｍｏｌ）、トリエチルアミン（３．７ｍＬ、０．０２６ｍｏｌ）の混合物に、トリメチルシリルシアニド（１６ｇ、０．１２ｍｏｌ）を滴下した。室温下で１０分間撹拌した後、氷冷下で水素化アルミニウムリチウム（５．２ｇ、０．１４ｍｏｌ）のＴＨＦ（０．１０Ｌ）溶液に、反応溶液を滴下した。３時間還流した後、氷冷下で反応溶液に、水（５．２ｍＬ）、１規定水酸化ナトリウム水溶液（５．２ｍＬ）、水（１０ｍＬ）を加えた。氷冷下で１０分間撹拌した後、反応溶液をセライト濾過し、得られた濾液を減圧濃縮し、参考例化合物１を２０ｇ（８７％）得た。【０１４２】
〔ステップ２〕       
Ｎ−（（１−ベンジル−４−ヒドロキシピペリジン−４−イル）メチル）−２−クロロアセトアミド（参考例化合物２）の合成：
氷冷下、４−（アミノメチル）−１−ベンジルピペリジン−４−オール（参考例化合物１）（０．５０ｇ、２．３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．４７ｍＬ、３．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液に、２−クロロアセチルクロリド（０．２２ｍＬ、２．７ｍｍｏｌ）を滴下した。室温下で１０分間撹拌した後、反応溶液に、１規定塩酸（９．０ｍＬ）を加えた。室温下で１０分間撹拌した後、反応溶液に、１規定水酸化ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（富士シリシア化学アミンシリカゲルＤＭ１０２０、溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝７：３→４：６）で精製し、参考例化合物２を０．４３ｇ（６４％）得た。【０１４３】
〔ステップ３〕
９−ベンジル−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−３−オン（参考例化合物３）の合成：
−７８℃下、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．４４ｇ、３．９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５．０ｍＬ）溶液に、Ｎ−（（１−ベンジル−４−ヒドロキシピペリジン−４−イル）メチル）−２−クロロアセトアミド（参考例化合物２）（０．５０ｇ、１．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５．０ｍＬ）溶液を滴下した。室温下で３５分間撹拌した後、反応溶液を減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（富士シリシア化学アミンシリカゲルＤＭ１０２０、溶離液；クロロホルム：メタノール＝９９：１→９１：９）で精製し、参考例化合物３を０．３２ｇ（７２％）得た。【０１４４】
〔ステップ４〕
９−ベンジル−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン（参考例化合物４）の合成：
氷冷下、水素化アルミニウムリチウム（０．１７ｇ、４．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、９−ベンジル−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−３−オン（参考例化合物３）（０．６０ｇ、２．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を滴下した。氷冷下で３０分間撹拌した後、室温下で３０分間撹拌した。１０分間還流した後、氷冷下で反応溶液に、水（０．１７ｍＬ）、１規定水酸化ナトリウム水溶液（０．１７ｍＬ）、水（０．３５ｍＬ）を加えた。氷冷下で１０分間撹拌した後、反応溶液をセライト濾過し、得られた濾液を減圧濃縮し、参考例化合物４を０．４６ｇ（８２％）得た。【０１４５】
〔ステップ５〕
９−ベンジル−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物５）の合成：
氷冷下、９−ベンジル−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン（参考例化合物４）（２．３ｇ、９．３ｍｍｏｌ）のクロロホルム（２０ｍＬ）溶液に、４−（トリフルオロメトキシ）フェニルイソシアナート（１．９ｇ、９．３ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で３０分間撹拌した後、反応溶液を減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝７：３→酢酸エチルのみ）で精製し、参考例化合物５を３．８ｇ（９０％）得た。【０１４６】
〔ステップ６〕
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）の合成：
９−ベンジル−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物５）（３．８ｇ、８．４ｍｍｏｌ）のメタノール（５０ｍＬ）溶液に、２０重量％水酸化パラジウム／炭素（１．８ｇ）を加えた。水素雰囲気下、室温下で１６時間撹拌した後、反応溶液をセライト濾過し、得られた濾液を減圧濃縮し、参考例化合物６を２．６ｇ（８８％）得た。【０１４７】
〔ステップ７〕
９−（２−フルオロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（実施例化合物１）の合成：
氷冷下、Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（１．６ｇ、４．６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．９ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍＬ）溶液に、２−フルオロベンゾイルクロリド（０．８７ｇ、５．５ｍｍｏｌ）を加えた。氷冷下で５分間撹拌した後、反応溶液に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝７：３→２：８）で精製し、実施例化合物１を１．９ｇ（８４％）得た。【０１４８】
（実施例２）
９−（５−メチルイソオキサゾール−３−カルボニル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物２）の合成：
氷冷下、Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．４０ｇ、１．１ｍｍｏｌ）、５−メチルイソオキサゾール−３−カルボン酸（０．１４ｇ、１．１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．４９ｍＬ、２．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．２ｍＬ）溶液に、ＨＡＴＵ（０．６６ｇ、１．７ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で６３時間撹拌した後、反応溶液に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（富士シリシア化学アミンシリカゲルＤＭ１０２０、溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝７：３→１：９）で精製し、実施例化合物２を０．４７ｇ（９２％）得た。【０１４９】
（実施例３）
９−（４−シアノベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物３）の合成：
〔ステップ１〕
９−ベンジル−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物７）の合成：
氷冷下、９−ベンジル−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン（参考例化合物４）（２．０ｇ、８．１ｍｍｏｌ）のクロロホルム（２０ｍＬ）溶液に、４−（トリフルオロメチル）フェニルイソシアナート（１．７ｇ、８．９ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で１０分間撹拌した後、反応溶液を減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝７：３→酢酸エチルのみ）で精製し、参考例化合物７を２．５ｇ（７２％）得た。【０１５０】
〔ステップ２〕
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）の合成：
９−ベンジル−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物７）（２．０ｇ、４．６ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍＬ）溶液に、２０重量％水酸化パラジウム／炭素（３．１ｇ）を加えた。水素雰囲気下、室温下で７２時間撹拌した後、反応溶液をセライト濾過し、得られた濾液を減圧濃縮し、参考例化合物８を１．４ｇ（８８％）得た。【０１５１】
〔ステップ３〕
９−（４−シアノベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（実施例化合物３）の合成：
氷冷下、Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（２．５ｇ、７．２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．０ｍＬ、７．２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、４−シアノベンゾイルクロリド（１．４ｇ、８．６ｍｍｏｌ）を加えた。氷冷下で５分間撹拌した後、反応溶液に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝７：３→２：８）で精製し、実施例化合物３を２．７ｇ（７８％）得た。【０１５２】
（実施例４）
９−（４−クロロピコリノイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物４）の合成：
氷冷下、Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．１５ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、４−クロロピコリン酸（０．０７９ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．１８ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．０ｍＬ）溶液に、ＨＡＴＵ（０．２４ｇ、０．６３ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で１５時間撹拌した後、反応溶液に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（富士シリシア化学アミンシリカゲルＤＭ１０２０、溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝７：３→１：９）で精製し、実施例化合物４を０．１４ｇ（６８％）得た。【０１５３】
（実施例５）
９−（２、６−ジフルオロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物５）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０２０ｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）、２，６−ジフルオロベンゾイルクロリド（０．０１２ｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物５を０．０２７ｇ（９６％）得た。【０１５４】
（実施例６）
９−ピバロイル−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物６）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、ピバロイルクロリド（０．００８４ｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物６を０．０２１ｇ（８６％）得た。【０１５５】
（実施例７）
９−（２−アセトアミドベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物７）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０１８ｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）、Ｎ−アセチルアントラニル酸（０．０１１ｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物７を０．００３８ｇ（１４％）得た。【０１５６】
（実施例８）
９−（２−アセトアミド−４−メチルペンタノイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物８）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０１８ｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）、２−アセトアミド−４−メチルペンタン酸（０．０１１ｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物８を０．０１２ｇ（５０％）得た。【０１５７】
（実施例９）
９−ベンゾイル−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物９）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２４ｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）、ベンゾイルクロリド（０．０２２ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物９を０．０２２ｇ（７１％）得た。【０１５８】
（実施例１０）
９−（フラン−２−カルボニル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物１０）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、２−フロイルクロリド（０．００９１ｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物１０を０．００４０ｇ（１６％）得た。【０１５９】
（実施例１１）
９−（５−メチルピラジン−２−カルボニル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物１１）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０３０ｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）、５−メチルピラジン−２−カルボン酸（０．０１３ｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物１１を０．０１６ｇ（４０％）得た。【０１６０】
（実施例１２）
９−ピコリノイル−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物１２）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、ピコリン酸クロリド塩酸塩（０．０３０ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物１２を０．０１１ｇ（４１％）得た。【０１６１】
（実施例１３）
９−（２−シクロプロピルアセチル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物１３）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０３０ｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）、シクロプロピル酢酸（０．０１３ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物１３を０．０１４ｇ（３９％）得た。【０１６２】
（実施例１４）
９−（５−メチルピラジン−２−カルボニル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物１４）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０４９ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、５−メチルピラジン−２−カルボン酸（０．０２５ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物１４を０．０４９ｇ（７５％）得た。【０１６３】
（実施例１５）
９−（２−クロロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物１５）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、２−クロロベンゾイルクロリド（０．０１１ｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物１５を０．０２８ｇ（定量的）得た。【０１６４】
（実施例１６）
９−（４−クロロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物１６）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、４−クロロベンゾイルクロリド（０．０１１ｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物１６を０．０２６ｇ（９２％）得た。【０１６５】
（実施例１７）
９−（３−シアノベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物１７）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、３−シアノ安息香酸（０．００９４ｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物１７を０．０１７ｇ（６３％）得た。【０１６６】
（実施例１８）
９−（２−シアノベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物１８）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、２−シアノ安息香酸（０．００９４ｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物１８を０．０１５ｇ（５３％）得た。【０１６７】
（実施例１９）
９−（３−クロロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物１９）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、３−クロロベンゾイルクロリド（０．０１１ｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物１９を０．０１９ｇ（６６％）得た。【０１６８】
（実施例２０）
９−（３−ヒドロキシベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物２０）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、３−ヒドロキシ安息香酸（０．０１８ｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物２０を０．０１６ｇ（５７％）得た。【０１６９】
（実施例２１）
９−（３−アセトアミドベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物２１）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、３−アセトアミド安息香酸（０．０１１ｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物２１を０．０２８ｇ（９６％）得た。【０１７０】
（実施例２２）
９−（２−アセトアミドベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物２２）の合成：
室温下、Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０２４ｇ，０．０６８ｍｍｏｌ）、フタルイミド（０．０１０ｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１．０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．０２５ｍＬ、０．１４ｍｍｏｌ）を加えた。８０℃下で２１時間撹拌した後、反応溶液に、フタルイミド（０．００８０ｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（０．１０ｍＬ）を加えた。１００℃下で４時間撹拌した後、反応溶液に、酢酸エチルを加え、有機層を１規定塩酸と１規定水酸化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；クロロホルム：メタノール＝９９：１→９０：１０）で精製し、実施例化合物２２を０．００４３ｇ（１５％）得た。【０１７１】
（実施例２３）
９−（５−シクロプロピルイソオキサゾール−４−カルボニル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物２３）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０２０ｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）、５−シクロプロピルイソオキサゾール−４−カルボン酸（０．００９４ｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物２３を０．００８９ｇ（３２％）得た。【０１７２】
（実施例２４）
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−９−（１−（トリフルオロメチル）シクロプロパンカルボニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物２４）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０２１ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、１−（トリフルオロメチル）シクロプロパンカルボン酸（０．００９０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物２４を０．０１０ｇ（３４％）得た。【０１７３】
（実施例２５）
９−（１−フェニルシクロプロパンカルボニル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物２５）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０２２ｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）、１−フェニルシクロプロパンカルボン酸（０．０１５ｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物２５を０．０２０ｇ（６５％）得た。【０１７４】
（実施例２６）
９−（２−（２−メトキシフェニル）アセチル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物２６）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０１２ｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）、２−（２−メトキシフェニル）酢酸（０．００８３ｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物２６を０．００９８ｇ（５８％）得た。【０１７５】
（実施例２７）
９−（２−（２−ピリジン−２−イル）アセチル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物２７）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０２０ｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）、２−（２−ピリジン−２−イル）酢酸塩酸塩（０．０１４ｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物２７を０．０２１ｇ（８０％）得た。【０１７６】
（実施例２８）
９−（４−アセトアミドベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物２８）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０２５ｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）、４−アセトアミド安息香酸（０．０１５ｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物２８を０．０２９ｇ（８０％）得た。【０１７７】
（実施例２９）
９−（４−アセトアミドベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物２９）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０２０ｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、４−アセトアミド安息香酸（０．０１６ｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物２９を０．０２０ｇ（６９％）得た。【０１７８】
（実施例３０）
９−（２−オキシインドリン−５−カルボニル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物３０）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０１３ｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）、２−オキシインドリン−５−カルボン酸（０．０１２ｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物３０を０．０１０ｇ（５４％）得た。【０１７９】
（実施例３１）
９−（２−（４−メトキシフェニル）アセチル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物３１）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０５０ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、２−（４−メトキシフェニル）酢酸（０．０２３ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物３１を０．０６０ｇ（８５％）得た。【０１８０】
（実施例３２）
９−（２−（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）アセチル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物３２）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０３２ｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）、２−（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）酢酸（０．０１９ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物３２を０．０２６ｇ（７９％）得た。【０１８１】
（実施例３３）
９−（３−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物３３）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０２０ｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）、３−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（０．０１１ｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物３３を０．００４０ｇ（１５％）得た。【０１８２】
（実施例３４）
９−（４−シアノベンゾイル）−Ｎ−（４−トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物３４）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０３０ｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）、４−シアノベンゾイルクロリド（０．０１７ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物３４を０．０３３ｇ（８０％）得た。【０１８３】
（実施例３５）
９−（４−フルオロベンゾイル）−Ｎ−（４−トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物３５）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０３０ｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）、４−フルオロベンゾイルクロリド（０．０１６ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物３５を０．０３２ｇ（８０％）得た。【０１８４】
（実施例３６）
９−（１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニル）−Ｎ−（４−トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物３６）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０３０ｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）、１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボニルクロリド（０．０１６ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物３６を０．０３３ｇ（８０％）得た。【０１８５】
（実施例３７）
９−（６−クロロピコリノイル）−Ｎ−（４−トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物３７）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．１５ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、６−クロロピコリン酸（０．０７９ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物３７を０．１４ｇ（６８％）得た。【０１８６】
（実施例３８〜４９）
ＭｉｎｉＢｌｏｃｋ（登録商標）−ＸＴ（４８−ｐｏｓｉｔｉｏｎ；Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  Ｂｏｈｄａｎ社）反応管に、カルボン酸（参考例化合物６に対して１当量）、ＨＡＴＵ（０．０２４ｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．０１８ｍＬ、０．１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．１０ｍＬ）溶液を加えた。室温下で５分間撹拌した後、反応溶液に、Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物６）（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．１０ｍＬ）溶液を加えた。室温下で一晩撹拌した後、反応溶液に水を加え、窒素を吹き付けて濃縮した。得られた粗生成物をＬＣ−ＭＳ逆相分取精製（ＬＣ−ＭＳ装置：Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍ  １１００、カラム：Ｚｏｒｂａｘ（登録商標）Ｅｘｔｅｎｄ−Ｃ１８  ９．４ｍｍ×５０ｍｍ  ５．０μｍ、移動相：１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム水溶液−アセトニトリル）することで実施例化合物３８〜４９を得た。【０１８７】
実施例化合物３８〜４９について、以下に記載の分析方法を用いてＬＣ保持時間及び［Ｍ＋Ｈ］＋又は［Ｍ−Ｈ］−を計測した。分析方法とは、ＬＣ−ＭＳ装置：Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍ  １１００、カラム：Ｚｏｒｂａｘ（登録商標）Ｅｘｔｅｎｄ−Ｃ１８  ９．４ｍｍ×５０ｍｍ  ５．０μｍ、移動相：Ａ＝アセトニトリル  Ｂ＝１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム水溶液、グラジェント：Ａ／Ｂ＝２０／９０→９５／５（６分間）、流速：４ｍＬ／分、で示される分析方法である。【０１８８】
（実施例５０）
Ｎ−（２，４−ジクロロベンジル）−９−（５−メチルイソオキサゾール−３−カルボニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物５０）の合成：
〔ステップ１〕
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（（２，４−ジクロロベンジル）カルバモイル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物９）の合成：
室温下、ｔｅｒｔ−ブチル  １−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（０．３０ｇ、１．２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２０ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）のクロロホルム（５．０ｍＬ）溶液に、２，４−ジクロロ−１−（イソシアナートメチル）ベンゼン（０．２６ｇ、１．３ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で１０分間撹拌した後、反応溶液を減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝９：１→５：５）で精製し、参考例化合物９を０．５４ｇ（定量的）得た。【０１８９】
〔ステップ２〕
Ｎ−（２，４−ジクロロベンジル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物１０）の合成：
氷冷下、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（（２，４−ジクロロベンジル）カルバモイル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物９）（０．５４ｇ、１．２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３．０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（以下、ＴＦＡ）（１．５ｍＬ、１９ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で３時間撹拌した後、反応溶液を減圧濃縮した。得られた粗生成物をジクロロメタンに溶解させ、１規定水酸化ナトリウム水溶液で中和し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し、参考例化合物１０を０．４２ｇ（定量的）得た。【０１９０】
〔ステップ３〕
Ｎ−（２，４−ジクロロベンジル）−９−（５−メチルイソオキサゾール−３−カルボニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（実施例化合物５０）の合成：
Ｎ−（２，４−ジクロロベンジル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物１０）（０．０３０ｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物５０を０．０２４ｇ（６０％）得た。【０１９１】
（実施例５１）
Ｎ−（２，４−ジクロロベンジル）−９−（２−フルオロベンゾイル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物５１）の合成：
Ｎ−（２，４−ジクロロベンジル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物１０）（０．０３０ｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物５１を０．０３４ｇ（８５％）得た。【０１９２】
（実施例５２）
９−（２−シクロプロピルアセチル）−Ｎ−（２，４−ジクロロベンジル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物５２）の合成：
Ｎ−（２，４−ジクロロベンジル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物１０）（０．０３０ｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）、シクロプロピル酢酸（０．０１０ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物５２を０．０２４ｇ（６０％）得た。【０１９３】
（実施例５３）
Ｎ−（２，４−ジクロロベンジル）−９−（５−メチルピラジン−２−カルボニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物５３）の合成：
Ｎ−（２，４−ジクロロベンジル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物１０）（０．０３０ｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）、５−メチルピラジン−２−カルボン酸（０．０１４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を用いて実施例２と同様の反応を行うことにより、実施例化合物５３を０．０４０ｇ（定量的）得た。【０１９４】
（実施例５４）
９−（（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）スルホニル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（以下、実施例化合物５４）の合成：
室温下、Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−４−カルボキシアミド（参考例化合物８）（０．０４５ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．０６９ｍＬ、０．４０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２．０ｍＬ）溶液に、１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−スルホニルクロリド（０．０２４ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で５分間撹拌した後、反応溶液に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；クロロホルム：メタノール＝９９：１→９０：１０）で精製し、実施例化合物５４を０．０２２ｇ（３４％）得た。【０１９５】
（実施例５５）
４−（２，６−ジフルオロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシアミド（以下、実施例化合物５５）の合成：
室温下、９−ベンジル−１−オキサ−４，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン（参考例化合物４）（０．０１８ｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．０１５ｍL、０．１１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１．０ｍＬ）溶液に、２，６−ジフルオロベンゾイルクロリド（０．０１４ｇ、０．０７９ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で５分間撹拌した後、反応溶液に、１規定水酸化ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝７：３→２：８）で精製し、粗生成物を得た。室温下、得られた粗成生物のメタノール（１．０ｍＬ）に溶液に、２０重量％水酸化パラジウム／炭素（０．０１０ｇ）を加えた。水素雰囲気下、室温下で１２時間撹拌した後、反応溶液をセライト濾過し、得られた濾液を減圧濃縮した。室温下、得られた粗生成物、トリエチルアミン（０．００８０ｍＬ、０．０５８ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１．０ｍＬ）溶液に、４−（トリフルオロメトキシ）フェニルイソシアナート（０．００８５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で５分間撹拌した後、反応溶液を減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；クロロホルム：メタノール＝９９：１→９０：１０）で精製し、実施例化合物５５を０．００５８ｇ（３工程、３７％）得た。【０１９６】
（実施例５６）
９−（２，６−ジフルオロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−２−カルボキシアミド（以下、実施例化合物５６）の合成：
〔ステップ１〕
ｔｅｒｔ−ブチル  ４ホルミルピペリジン−１−カルボキシラート（参考例化合物１１）の合成：
氷冷下、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−１−カルボキシラート（０．５０ｇ、２．３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液に、デスマーチン試薬（１．１ｇ、２．６ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で２時間撹拌した後、反応溶液に、チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。室温下で５分間撹拌した後、反応溶液をジクロロメタンで抽出した。有機層を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝９：１→６：４）で精製し、参考例化合物１１を０．２６ｇ（５３％）得た。【０１９７】
〔ステップ２〕
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（２−シアノエチル）−４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシラート（参考例化合物１２）の合成：
氷冷下、ｔｅｒｔ−ブチル  ４ホルミルピペリジン−１−カルボキシラート（参考例化合物１１）（０．２６ｇ、１．２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（０．５０ｍＬ）溶液にアクリロニトリル（０．０８８ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）、１０％ベンジルトリエチルアンモニウムヒドロキシド水溶液（０．０２０ｍＬ）を加えた。室温下で１０時間撹拌した後、反応溶液に、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝９：１→６：４）で精製し、参考例化合物１２を０．１９ｇ（６０％）得た。【０１９８】
〔ステップ３〕
ｔｅｒｔ−ブチル  ２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物１３）の合成：
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（２−シアノエチル）−４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシラート（参考例化合物１２）（０．１３ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のエタノール（６．５ｍＬ）溶液に、１０重量％パラジウム／炭素（０．１１ｇ）、１０％塩化水素／メタノール溶液（０．１５ｍＬ）を加えた。水素雰囲気下、室温で２５時間撹拌した。反応溶液をセライト濾過し、得られた濾液を減圧濃縮した。得られた粗生成物を１規定塩酸に溶解させ、酢酸エチルで洗浄した。水層を１規定水酸化ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し、参考例化合物１３を０．０４１ｇ（２９％）得た。【０１９９】
〔ステップ４〕
ｔｅｒｔ−ブチル  ２−（（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）カルバモイル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物１４）の合成：
ｔｅｒｔ−ブチル  ２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物１３）（０．１９ｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、４−（トリフルオロメトキシ）フェニルイソシアナート（０．１３ｍＬ、０．８０ｍｍｏｌ）を用いて実施例５０〔ステップ１〕と同様の反応を行うことにより、参考例化合物１４を０．１７ｇ（５０％）得た。【０２００】
〔ステップ５〕
９−（２，６−ジフルオロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−２−カルボキシアミド（実施例化合物５６）の合成：
氷冷下、ｔｅｒｔ−ブチル２−（（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）カルバモイル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物１４）（０．０３０ｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２．０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（０．５０ｍＬ）を加えた。室温下で３０分間撹拌した後、反応溶液を減圧濃縮し、得られた粗生成物をジクロロメタンに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し、氷冷下、得られた粗生成物のジクロロメタン（２．０ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（０．０７０ｍＬ、０．５０ｍｍｏｌ）、２，６−ジフルオロベンゾイルクロリド（０．０２１ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で１０分間撹拌した後、反応溶液に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝９：１→３：７）で精製し、実施例化合物５６を０．０２４ｇ（７１％）得た。【０２０１】
（実施例５７）
９−（２，６−ジフルオロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−２−カルボキシアミド（以下、実施例化合物５７）の合成：
〔ステップ１〕
ｔｅｒｔ−ブチル  ２−（（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）カルバモイル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物１５）の合成：
ｔｅｒｔ−ブチル  ２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物１３）（０．０５３ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、４−（トリフルオロメチル）フェニルイソシアナート（０．０７２ｍＬ、０．７９ｍｍｏｌ）を用いて実施例５０〔ステップ１〕と同様の反応を行うことにより、参考例化合物１５を０．０６８ｇ（５０％）得た。【０２０２】
〔ステップ２〕
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−２−カルボキシアミド（参考例化合物１６）の合成：
ｔｅｒｔ−ブチル２−（（４−（トリフルオロメチル）フェニル）カルバモイル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物１５）（０．０６８ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を用いて実施例５０〔ステップ２〕と同様の反応を行うことにより、参考例化合物１６を０．０３７ｇ（７０％）得た。【０２０３】
〔ステップ３〕
９−（２，６−ジフルオロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−２−カルボキシアミド（実施例化合物５７）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−２−カルボキシアミド（参考例化合物１６）（０．００４４ｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）、２，６−ジフルオロベンゾイルクロリド（０．００２５ｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物５７を０．００５８ｇ（９３％）得た。【０２０４】
（実施例５８）
９−ピバロイル−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−２−カルボキシアミド（以下、実施例化合物５８）の合成：
Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−２−カルボキシアミド（参考例化合物１６）（０．００６４ｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）、ピバロイルクロリド（０．００２７ｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、実施例化合物５８を０．００６０ｇ（７５％）得た。【０２０５】
（実施例５９）
２−（２，６−ジフルオロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシアミド（以下、実施例化合物５９）の合成：
〔ステップ１〕
ｔｅｒｔ−ブチル  ２−（２，６−ジフルオロベンゾイル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物１７）の合成：
ｔｅｒｔ−ブチル  ２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物１３）（０．０３７ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、２，６−ジフルオロベンゾイルクロリド（０．０２６ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を用いて実施例１〔ステップ７〕と同様の反応を行うことにより、参考例化合物１７を０．０１７ｇ（８８％）得た。【０２０６】
〔ステップ２〕
２−（２，６−ジフルオロベンゾイル）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシアミド（実施例化合物５９）の合成：
氷冷下、ｔｅｒｔ−ブチル  ２−（２，６−ジフルオロベンゾイル）−２，９−ジアザスピロ［５．５］ウンデカン−９−カルボキシラート（参考例化合物１７）（０．０１７ｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１．０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（０．５０ｍＬ）を加えた。室温下で１時間撹拌した後、反応溶液を減圧濃縮し、得られた粗生成物をジクロロメタンに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。氷冷下、得られた粗生成物のクロロホルム（１．０ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（０．００７８ｍＬ、０．０５６ｍｍｏｌ）、２，４−（トリフルオロメトキシ）フェニルイソシアナート（０．００６０ｍＬ、０．０４１ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で５分間撹拌した後、反応溶液を減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝９：１→３：７）で精製し、実施例化合物５９を０．０１４ｇ（７６％）得た。【０２０７】
（比較例１）
Ｎ−（アダマンタン−１−イル）−８−（２，６−ジフルオロベンゾイル）−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−２−カルボキサミド（以下、比較例化合物１）の合成：
〔ステップ１〕
１−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−エチル  ４−（２−メトキシ−２−オキソエチル）ピペリジン−１，４−ジカルボキシラート（参考例化合物１８）の合成：
アルゴン雰囲気下、−７８℃下でＤＩＰＥＡ（２．４ｍＬ、１７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（３０ｍＬ）に、１．５７規定ｎ−ブチルリチウム／ｎ−ヘキサン溶液（１１ｍＬ、１７ｍｍｏｌ）を滴下した。−７８℃下で３０分撹拌した後、反応溶液に、１−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−エチルピペリジン−１，４−ジカルボキシラート（４．０ｇ、１６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を滴下した。−７８℃下で１時間撹拌した後、反応溶液に、ブロモ酢酸メチル（２．２ｍＬ、２４ｍｍｏｌ）を加えた。−７８℃下で１時間撹拌した後、室温下で１８時間撹拌した。反応溶液に、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝９：１→３：７）で精製し、参考例化合物１８を０．８２ｇ（１６％）得た。【０２０８】
〔ステップ２〕
ｔｅｒｔ−ブチル  ２−ベンジル−１，３−ジオキソ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシラート（参考例化合物１９）の合成：
１−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−エチル  ４−（２−メトキシ−２−オキソエチル）ピペリジン−１，４−ジカルボキシラート（参考例化合物１８）（０．８２ｇ、２．５ｍｍｏｌ）に、ベンジルアミン（２．７ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）を加えた。１６０℃下で１８時間撹拌した後、反応溶液に、３規定塩酸を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝９：１→３：７）で精製し、参考例化合物１９を０．５１ｇ（５８％）得た。【０２０９】
〔ステップ３〕
２−ベンジル−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−１，３−ジオン（参考例化合物２０）の合成：
ｔｅｒｔ−ブチル  ２−ベンジル−１，３−ジオキソ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−カルボキシラート（参考例化合物１９）（０．５１ｇ、１．４ｍｍｏｌ）のメタノール（４．０ｍＬ）溶液に、１０％塩化水素／メタノール溶液（６．０ｍＬ）を加えた。室温下で４時間撹拌した後、反応溶液を１規定水酸化ナトリウム水溶液で中和し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し、参考例化合物２０を０．３３ｇ（８８％）得た。【０２１０】
〔ステップ４〕
２−ベンジル−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン（参考例化合物２１）の合成：
２−ベンジル−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−１，３−ジオン（参考例化合物２０）（０．２８ｇ、１．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５．０ｍＬ）溶液に、水素化リチウムアルミニウム（０．２１ｇ、５．４ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で４時間撹拌した後、反応溶液に、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し、参考例化合物２１を０．２２ｇ（８７％）得た。【０２１１】
〔ステップ５〕
（２−ベンジル−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル）（２，６−ジフルオロフェニル）メタノン（参考例化合物２２）の合成：
２−ベンジル−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン（０．１２ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）、２，６−ジフルオロベンゾイルクロリド（参考例化合物２１）（０．１１ｇ、０．６２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３．０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．１５ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で２時間撹拌した後、反応溶液に、水を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝９：１→１：９）で精製し、参考例化合物２２を０．１５ｇ（７６％）得た。【０２１２】
〔ステップ６〕
（２，６−ジフルオロフェニル）（２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル）メタノン（参考例化合物２３）の合成：
（２−ベンジル−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル）（２，６−ジフルオロフェニル）メタノン（参考例化合物２２）（０．１５ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）のメタノール（３．０ｍＬ）溶液に、１０重量％水酸化パラジウム／炭素（０．０４５ｇ）を加えた。水素雰囲気下、室温下で１８時間撹拌した後、反応溶液をセライト濾過し、得られた濾液を減圧濃縮し、参考例化合物２３を０．１１ｇ（定量的）得た。【０２１３】
〔ステップ７〕
Ｎ−（アダマンタン−１−イル）−８−（２，６−ジフルオロベンゾイル）−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−２−カルボキサミド（比較例化合物１）の合成：
（２−ベンジル−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル）（２，６−ジフルオロフェニル）メタノン（参考例化合物２３）（０．０２５ｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）、１−イソシアナートアダマンタン（０．０１９ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１．０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．０２３ｍＬ、０．１３ｍｍｏｌ）を加えた。室温下で３０分間撹拌した後、反応溶液に、水を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液；ヘキサン：酢酸エチル＝９：１→３：７）で精製し、比較例化合物１を０．０３３ｇ（８１％）得た。【０２１４】
（比較例２）
７−ベンジル−Ｎ−（４−フェノキシフェニル）−２，７−ジアザスピロ［４．４］ノナン−２−カルボキサミド（以下、比較例化合物２）の合成：
２−ベンジル−２，７−ジアザスピロ［４．４］ノナン二塩酸塩（０．０１０ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、４−フェノキシフェニルイソシアナート（０．０１５ｇ、０．６９ｍｍｏｌ）を用いて実施例５０〔ステップ１〕と同様の反応を行うことにより、比較例化合物２を０．０１２ｇ（４７％）得た。【０２１５】
以上の実施例で挙げた本発明の化合物、比較例で挙げた化合物の物性データを表１−１〜表１−９、参考例で挙げた化合物の物性データを表２−１〜表２−３に示す。なお、表中のＮ．Ｄ．は「データなし」を表す。【０２１６】
【表１−１】
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【０２１７】
【表１−２】
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【０２１８】
【表１−３】
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【０２１９】
【表１−４】
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【０２２０】
【表１−５】
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【０２２１】
【表１−６】
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【０２２２】
【表１−７】
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【０２２３】
【表１−８】
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【０２２４】
【表１−９】
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【０２２５】
【表２−１】
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【０２２６】
【表２−２】
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【０２２７】
【表２−３】
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【０２２８】
（実施例６０）Ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるヒトｓＥＨ阻害活性の評価試験：
以下のｓＥＨ阻害活性試験は、公知文献（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００５年、第３４３巻、ｐ．６６−７５）記載の方法に基づき、ヒトｓＥＨを用いて行ったものであり、ジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）のｓＥＨ阻害活性を測定し、その有用性を評価するために行なったものである。【０２２９】
ヒト・リコンビナントｓＥＨ（Ｃａｙｍａｎ社）を、被験化合物とともにＢｉｓ−Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（２５ｍＭ、ｐＨ７．０、０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡを含む）中にて室温で３０分間インキュベートした。その後、蛍光基質としてシアノ（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）メチルトランス−［（３−フェニルオキシラン−２−イル）メチル］カーボネート（Ｃａｙｍａｎ社）を加えて、さらに室温で２０〜４５分間インキュベートし、ＺｎＳＯ４を加えて、反応を停止させ、蛍光強度（Ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ：３３０ｎｍ、Ｅｍｉｓｓｉｏｎ：４８５ｎｍ）を測定した。ｓＥＨ非添加かつ被験化合物非添加の蛍光強度を０％ｓＥＨ酵素反応率とし、ｓＥＨ添加かつ被験化合物非添加の蛍光強度を１００％ｓＥＨ酵素反応率として、得られた蛍光強度から、各被験化合物の各ｓＥＨ酵素反応率を算出し、ＩＣ５０を求めた。その結果を表３に示す。【０２３０】
【表３】
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【０２３１】
この結果から、ジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）が、ヒトｓＥＨの酵素反応に対して高い阻害活性を有することが明らかとなった。【０２３２】
（実施例６１）高血圧自然発症モデルラット（ＳＨＲ）の血圧に対する薬効評価試験：
本実施例は、上記の高血圧症の治療薬の有効成分として好ましい一態様である実施例化合物１、２、３及び４並びに公知文献（国際公開第２００７／００７０６９号）記載の比較例化合物２について大腿動脈内カニューレ挿入による直接法を用いて、上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）の投与による高血圧症の治療効果を検討するために行ったものである。【０２３３】
ＳＨＲ（ＳＨＲ系、雄性、２３〜２９週齢；日本チャールス・リバー株式会社）に麻酔をかけた後、股部及び背頸部を除毛し、イソジン液を用いて術野を消毒した。股部及び背頸部皮膚を切開後、ピンセットを用いて鈍性に股部の筋層を切開し、大腿動脈を剥離露出した後、小切開しポリエチレンチューブを挿入留置した。大腿動脈に挿入したチューブに血圧トランスデューサー（日本光電工業株式会社）を接続し、血圧はＢｌｏｏｄ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ  Ａｍｐｌｉｆｉｅｒ（日本光電工業株式会社）にて増幅させ、Ｐｏｗｅｒ  Ｌａｂシステム（日本光電工業株式会社）にて波形を得た。【０２３４】
血圧が安定した後、実施例化合物１、２、３若しくは４又は比較例化合物２を０．５％Ｔｗｅｅｎ８０含有０．５％メチルセルロース溶液に懸濁して、体重１ｋｇあたり３０ｍｇの投与量で経口投与し、溶媒投与群には０．５％Ｔｗｅｅｎ８０含有０．５％メチルセルロース溶液を同様に投与した。投与６時間後まで平均血圧（以下、ＭＢＰ）を測定した。グラフの値は、投与３−４時間後のＭＢＰの平均値を投与４時間後のＭＢＰ値、投与４−５時間後のＭＢＰの平均値を投与５時間後のＭＢＰ値、投与５−６時間後のＭＢＰの平均値を投与６時間後のＭＢＰ値とし、投与前９０分間のＭＢＰの平均値との差として算出した値である。結果を図１に示す。【０２３５】
実施例化合物１投与群、実施例化合物２投与群、実施例化合物３投与群及び実施例化合物４投与群において、溶媒投与群と比較して血圧が低下していることが示された。一方、比較例化合物２投与群では血圧の低下は見られなかった。図中の＊印は、溶媒投与群との比較で統計学的に有意であることを示す（ｔ検定、ｐ＜０．０５）。【０２３６】
（実施例６２）正常ラット（ＳＤラット）の血圧に対する影響評価試験：
本実施例は、上記の高血圧症の治療薬の有効成分として好ましい一態様である実施例化合物１及びテルミサルタンについて、大腿動脈内カニューレ挿入による直接法を用いて、上記のジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）の投与による正常血圧に対する影響を検討するために行ったものである。【０２３７】
ラット（Ｓｐｒａｇｕｅ‐Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）系、雄性、８〜１１週齢、日本チャールス・リバー株式会社）に麻酔をかけた後、股部及び背頸部を除毛し、イソジン液を用いて術野を消毒した。股部及び背頸部皮膚を切開後、ピンセットを用いて鈍性に股部の筋層を切開し、大腿動脈を剥離露出した後、小切開しポリエチレンチューブを挿入留置した。大腿動脈に挿入したチューブに血圧トランスデューサー（日本光電工業株式会社）を接続し、血圧はＢｌｏｏｄ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ  Ａｍｐｌｉｆｉｅｒ（日本光電工業株式会社）にて増幅させ、Ｐｏｗｅｒ  Ｌａｂシステム（日本光電工業株式会社）にて波形を得た。【０２３８】
血圧が安定した後、実施例化合物１又はテルミサルタンを０．５％Ｔｗｅｅｎ８０含有０．５％メチルセルロース溶液に懸濁して、実施例化合物１は体重１ｋｇあたり３０ｍｇの投与量で経口投与し、テルミサルタンは体重１ｋｇあたり３ｍｇ又は１０ｍｇの投与量で経口投与した。溶媒投与群には０．５％Ｔｗｅｅｎ８０含有０．５％メチルセルロース溶液を同様に投与した。投与６時間後までＭＢＰを測定した。グラフの値は、投与３−４時間後のＭＢＰの平均値を投与４時間後のＭＢＰ値、投与４−５時間後のＭＢＰの平均値を投与５時間後のＭＢＰ値、投与５〜６時間後のＭＢＰの平均値を投与６時間後のＭＢＰ値とし、投与前９０分間のＭＢＰの平均値との差である。結果を図２に示す。【０２３９】
実施例化合物１投与群及び溶媒投与群において血圧に変化は見られなかった。一方、テルミサルタン投与群では顕著に血圧が低下していることが示された。図中の＊印は、溶媒投与群との比較で統計学的に有意であることを示す（ｔ検定、ｐ＜０．０５）。【０２４０】
以上の結果から、ジアザスピロウレア誘導体（Ｉ）及びその薬理学的に許容される塩が、高血圧の治療に対して有効であることが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【０２４１】
本発明のジアザスピロウレア誘導体は、ｓＥＨの活性を阻害し、体内のＥＥＴｓを増加させることにより血圧上昇抑制作用及び血管内皮保護作用を示すことから、高血圧をはじめとする循環器疾患の治療薬又は予防薬として用いることができる。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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