(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
親水性連続相中で分散された内相を含む組成物であって、内相のパーセンテージが５０体積％より高く、前記組成物が、前記内相と前記親水性連続相との間の界面に位置する、セルロース以外の多糖のナノ結晶を含有する組成物であって、前記セルロース以外の多糖のナノ結晶が、正に荷電したナノ結晶から選択され、前記正に荷電したナノ結晶が、キチンナノ結晶から選択されることを特徴とする組成物。
【請求項２】
前記多糖のナノ結晶が、
（ｉ）セルロースナノ結晶を除く正に荷電した多糖ナノ結晶のみ、または
（ｉｉ）少なくとも１つの負に荷電した多糖に由来するナノ結晶と混合された、セルロース以外の正に荷電した多糖ナノ結晶
から選択されることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
エマルションまたはフォームであることを特徴とする、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物が、（ｉ）７５体積％より高い内相のパーセンテージを有する高内相もしくはＨＩＰＥタイプ、または（ｉｉ）５０体積％〜７５体積％の間の範囲の内相のパーセンテージを有する中間内相もしくはＭＩＰＥタイプのエマルションであることを特徴とする、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
親水性連続相中で分散された内相を含む組成物を得るプロセスであって、内相のパーセンテージが５０体積％より高く、前記プロセスが、以下の操作
ａ）セルロース以外の多糖のナノ結晶を親水性相中に取り込む操作と、
ｂ）多糖ナノ結晶を含有する前記親水性相および前記内相の構成のための相を提供する操作と、
ｃ）前記親水性相中に前記内相を分散させることによって前記組成物を形成する操作と
を含むことを特徴とするプロセスであって、
操作ａ）において取り込まれる前記多糖ナノ結晶が、正に荷電したナノ結晶から選択され、
前記正に荷電したナノ結晶が、キチンナノ結晶から選択される
ことを特徴とするプロセス。
【請求項６】
操作ａ）において取り込まれる前記多糖ナノ結晶が、
（ｉ）セルロースナノ結晶を除く正に荷電した多糖ナノ結晶のみ、または
（ｉｉ）少なくとも１つの負に荷電した多糖に由来するナノ結晶と混合された、セルロース以外の正に荷電した多糖ナノ結晶
から選択されることを特徴とする、請求項５に記載のプロセス。
【請求項７】
前記得られた組成物が、操作ｃ）の終了時にエマルションまたはフォームであることを特徴とする、請求項５または６に記載のプロセス。
【請求項８】
前記組成物が、疎水性内相および親水性連続相を含むエマルション組成物であり、前記エマルションを形成する操作ｃ）が
ｃ．１）少なくとも５／９５の疎水性内相／親水性連続相の体積比を有する中間体の水中油エマルションを得る工程と、
ｃ．２）５０体積％より高い内相のパーセンテージを有するエマルション組成物を得る工程であって、
ｃ．２．１）ある体積の疎水性相を工程ｃ．１）において得られた中間体エマルションへ添加し、このようにして得られた混合物を撹拌する工程、および／または
ｃ．２．２）少なくとも前記親水性相の一部の除去によって工程ｃ．１）において得られた中間体エマルションを濃縮する工程
を含む工程と、
を含むことを特徴とする、請求項５〜７のいずれかに記載のプロセス。
【請求項９】
前記中間体の水中油エマルションが、工程ｃ．１）において５０体積％以下である内相のパーセンテージを有することを特徴とする、請求項８に記載のプロセス。
【請求項１０】
前記組成物が、疎水性内相および親水性連続相を含むエマルション組成物であり、前記エマルションを形成する操作ｃ）が、多糖ナノ結晶含有親水性相および疎水性内相を混合して、５０体積％より高い内相のパーセンテージを有する前記エマルションを直接得ることを特徴とする、請求項５〜７のいずれかに記載のプロセス。
【請求項１１】
前記形成されたエマルション組成物が、工程ｃ）の終了時に、（ｉ）７５体積％より高い内相のパーセンテージを有する高内相もしくはＨＩＰＥタイプ、または（ｉｉ）５０体積％〜７５体積％の間の範囲の内相のパーセンテージを有する中間内相もしくはＭＩＰＥタイプであることを特徴とする、請求項５〜１０のいずれかに記載のプロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は内相を増加させた組成物、有利には、エマルションまたはフォーム、好ましくはいわゆる「中間内相」エマルションまたは「高内相」エマルションの分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
いくつかの組成物は、連続相中で分散された内相、すなわち特にエマルションおよびフォームを含む。
【０００３】
エマルションとは、肉眼的に均一であるが、微視的に不均一な、２つの不混和性液体物質の混合物である。
【０００４】
２つの関わる液体物質は相と呼ばれる。１つの相は連続であり；他の不連続内相は小滴として第１の相中で分散される。
【０００５】
フォームはエマルションに非常に類似する。気体（多くの場合空気）は、多くの泡沫（「分散相」または「内相」と称される）として分散され、一方、水性液体は完全に連続である（「連続相」と称される）。
【０００６】
これらの組成物のうちのいくつかは、内相（分散相とも呼ばれる）が組成物の全体積の約５０パーセントを超える体積を有する不混和性分散系である。
【０００７】
従来、内相を増加させたエマルションは、いわゆる「中間内相」エマルションまたは「高内相」エマルション（それぞれ、「ＭＩＰＥ」（中間内相エマルション）タイプまたは「ＨＩＰＥ」（高内相エマルション）タイプのエマルションとも称される）である。
【０００８】
高内相エマルションまたはＨＩＰＥは、内相がエマルションの全体積の約７４％〜７５％を超える体積（すなわち単分散球体の緻密な充填のために幾何学的に可能なものを超える体積）を有する液／液不混和性分散系である。
【０００９】
同様に、中間内相エマルションまたはＭＩＰＥは、内相がエマルションの全体積の約５０％と７４％〜７５％との間の範囲の体積を有する液／液不混和性分散系である。
【００１０】
内相を増加させた油中水タイプ（ＭＩＰＥまたはＨＩＰＥタイプ）のエマルションの産生、およびポリマーフォームの製造のためのそれらの使用は、例えば国際公開番号ＷＯ２０１０／０５８１４８に記載されている。
【００１１】
この国際公開番号ＷＯ２０１０／０５８１４８において、高内相エマルションはセルロースまたはキチンに由来する粒子によって安定化され、その粒子はそのために疎水化によって表面官能化される。
【００１２】
しかしながら、かかる転換された粒子の使用は、消費者にそれらの安全性問題に対する保証懸念（特に食品適用のための）を招く可能性がある。
【００１３】
かかる転換された粒子を得るには、表面修飾の追加工程を必要とする。
【００１４】
加えて、これらの転換された粒子は油中水タイプのエマルションのために意図されるので、疎水性構成要素のカプセル化に好適ではない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】国際公開番号ＷＯ２０１０／０５８１４８
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】Ｌ．Ｃａｎｔａｔ他著「Ｌｅｓ  ｍｏｕｓｓｅｓ：ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｅｔ  ｄｙｎａｍｉｑｕｅ」（Ｐａｒｉｓ；Ｅｄ  Ｂｅｌｉｎ，２０１０−２７８ページ−ＩＳＢＮ：９７８−２−７０１１−４２８４−５）
【非特許文献２】Ｓａｍｉｒ他著（２００５，Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，Ｖｏｌ．６：６１２−６２６）
【非特許文献３】Ｅｌａｚｚｏｕｚｉ−Ｈａｆｒａｏｕｉ他著（Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．２００８；９（１）：５７−６５）
【非特許文献４】Ｌｕｃａｓｓｅｎ，Ｊ．（１９８１）Ｌｕｃａｓｓｅｎ−Ｒｅｉｊｎｄｅｒｓ，Ｅ．Ｈ．ｅｄ．  Ａｎｉｏｎｉｃ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ−Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  Ａｃｔｉｏｎ  ＮＹ，ＵＳＡ：Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ
【非特許文献５】Ａｌａｒｇｏｖａ他著“Ｆｏａｍ  ｓｕｐｅｒｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｐｏｌｙｍｅｒ  ｍｉｃｒｏｒｏｄｓ”，Ｌａｎｇｍｕｉｒ，ｖｏｌ．２０（２４），２００４，１０３７１−１０３７４
【非特許文献６】Ｂｉａｎｃｏ  Ｅ．他著“Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｖｉｓｃｏｅｌａｓｔｉｃｉｔｙ  ｏｆ  Ｍａｇｎｅｔｏ−Ｐｉｃｋｅｒｉｎｇ  Ｆｏａｍｓ”，Ｌａｎｇｍｕｉｒ  ２９，（２０１３），１００１９−１００２７
【非特許文献７】Ｔｚｏｕｍａｋｉ他著“Ｏｉｌ−ｉｎ−ｗａｔｅｒ  ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ  ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ  ｂｙ  ｃｈｉｔｉｎ  ｎａｎｏｃｒｙｓｔａｌ  ｐａｒｔｉｃｌｅｓ”，Ｆｏｏｄ  Ｈｙｄｒｏｃｏｌｌｏｉｄｓ  ２５（２０１１）１５２１−１５２９
【非特許文献８】“Ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ：Ｔｈｅｏｒｙ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ“，Ｐａｕｌ  Ｂｅｃｈｅｒ  Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ  ２００１（ＩＳＢＮ  ０−８４１２−３４９６−５）
【非特許文献９】“Ｈｉｇｈ  ｉｎｔｅｒｎａｌ  ｐｈａｓｅ  ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ  （ＨＩＰＥｓ）−Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｕｓｅ  ｉｎ  ｐｏｌｙｍｅｒ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ”f，Ｃａｍｅｒｏｎ  ＮＲ；Ｓｈｅｒｒｉｎｇｔｏｎ  ＤＣ，ＢＩＯＰＯＬＹＭＥＲＳ  ＬＩＱＵＩＤ  ＣＲＹＳＴＡＬＬＩＮＥ  ＰＯＬＹＭＥＲＳ  ＰＨＡＳＥ  ＥＭＵＬＳＩＯＮ，  ＡＤＶＡＮＣＥＳ  ＩＮ  ＰＯＬＹＭＥＲ  ＳＣＩＥＮＣＥ，Ｖｏｌｕｍｅ：１２６，Ｐａｇｅｓ：１６３−２１４，１９９６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
上記のことを考慮して、様々な産業上の適用（特に食品適用）のために、水中油タイプの新規の内相を増加させたエマルション組成物の必要性がある。
【００１８】
より一般的には、大量に入手可能な薬剤によって安定化され、生物分解性で非毒性で再生可能で低価格かつ超低比重であり、任意で表面修飾によって容易に適合させることができる、内相を増加させた組成物（特にエマルション）の必要性がある。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
本発明は、親水性連続相中で分散された内相（特に疎水性または気体状）を含み、内相のパーセンテージが５０％より高い組成物（有利にはエマルションまたはフォーム）に関する。
【００２０】
この組成物は、前記内相と前記連続相との間の界面に位置する、セルロース以外の多糖のナノ結晶を含有することを特徴とする。
【００２１】
したがって、本発明に記載の組成物は、有利には、
（ｉ）セルロースナノ結晶を除く単一の多糖または少なくとも２つの異なる多糖に由来するナノ結晶、または
（ｉｉ）セルロースに由来するナノ結晶と組み合わせた、セルロース以外の単一の多糖または少なくとも２つの異なる多糖に由来するナノ結晶、
を含有する。
【００２２】
セルロースナノ結晶以外の多糖ナノ結晶は、有利には、正に荷電したナノ結晶（すなわち好ましくはキチンナノ結晶）から選択される。
【００２３】
これらの多糖ナノ結晶は、好ましくは、
（ｉ）セルロースナノ結晶を除く正に荷電した多糖ナノ結晶のみ、または、
（ｉｉ）少なくとも負に荷電した多糖に由来するナノ結晶と混合された、セルロース以外の正に荷電した多糖ナノ結晶、
から選択される。
【００２４】
かかる組成物は、有利には、エマルションまたはフォームである。
【００２５】
組成物は、有利には、高内相またはＨＩＰＥタイプで、内相のパーセンテージが７５％より高いエマルション組成物である。
【００２６】
あるいは、エマルション組成物は、中間内相またはＭＩＰＥタイプであり、５０％〜７５％の間の範囲の内相のパーセンテージを有する。
【００２７】
本発明は、ドライエマルション、ソリッドフォーム、多孔質ポリマー材料またはポリマー材料ビーズから選択される、本発明に記載の組成物から得られる産物にさらに関する。
【００２８】
本発明は、親水性連続相中で分散された内相（特に疎水性または気体状）を含み、５０％より高い内相のパーセンテージを有する組成物を得るプロセスにさらに関する。
【００２９】
このプロセスは、以下の操作、
ａ）セルロース以外の多糖のナノ結晶を親水性相中に取り込む工程と、
ｂ）多糖ナノ結晶を含有する前記親水性相および内相（特に疎水性内相）の構成のための相を提供する操作と、
ｃ）前記親水性相中に前記内相を分散させることによって前記組成物を形成する操作と、
を含むことを特徴とする。
【００３０】
工程ａ）中で取り込まれた多糖ナノ結晶は、有利には、正に荷電したナノ結晶（すなわち好ましくはキチンナノ結晶）から選択される。
【００３１】
これらの多糖ナノ結晶は、特に、
（ｉ）セルロースナノ結晶を除く正に荷電した多糖ナノ結晶のみ、または
（ｉｉ）少なくとも負に荷電した多糖に由来するナノ結晶と混合された、セルロース以外の正に荷電した多糖ナノ結晶、
から選択される。
【００３２】
工程ｃ）の終了時に、得られた組成物は、有利には、エマルションまたはフォームである。
【００３３】
第１の実施形態によれば、エマルションを形成する操作ｃ）は、
ｃ．１）少なくとも５／９５の疎水性内相／親水性連続相の体積比を有する中間体の水中油エマルションを得る工程と、
ｃ．２）５０％より高い内相のパーセンテージを有するエマルション組成物を得る工程であって、
ｃ．２．１）ある体積の疎水性相を工程ｃ．１）において得られた中間体エマルションへ添加し、このようにして得られた混合物を撹拌する工程、および／または
ｃ．２．２）少なくとも前記親水性相の一部の除去によって工程ｃ．１）において得られた中間体エマルションを濃縮する工程
を含む工程と、
を含む「連続的な」操作である。
【００３４】
この場合、工程ｃ．１）において、中間体の水中油エマルションは、有利には、５０％以下である内相のパーセンテージを有する。
【００３５】
第２の実施形態によれば、エマルションを形成する操作ｃ）は、有利には「直接的」操作であり、それは多糖ナノ結晶を含有する親水性相および疎水性相を混合して、５０％より高い内相のパーセンテージを有する前記エマルションを直接得ることである。
【００３６】
一般的に、工程ｃ）の終了時に、形成されたエマルション組成物は、（ｉ）７５％より高い内相のパーセンテージを有する高内相もしくはＨＩＰＥタイプ、または（ｉｉ）５０％〜７５％の間の範囲の内相のパーセンテージを有する中間内相もしくはＭＩＰＥタイプである。
【図面の簡単な説明】
【００３７】
【図１】水相中のキチンナノ結晶濃度（ｇ／Ｌ）の関数としての液滴直径分布（μｍ）を示す。
【図２】ＨＣｌ濃度変化によって調整された媒質ｐＨの関数としての液滴直径分布（μｍ）（３ｇ／Ｌキチンナノ結晶、２０ｍＭ  ＮａＣｌ）を示す。
【図３】様々な温度での保管後の液滴直径分布（μｍ）（３ｇ／Ｌキチンナノ結晶、０．０１ｍＭ  ＨＣｌ、２０ｍＭ  ＮａＣｌ）を示す。
【図４】乾燥前後の液滴直径分布（μｍ）（５ｇ／Ｌキチンナノ結晶、０．０１ｍＭ  ＨＣｌ、５０ｍＭ  ＮａＣｌ）を示す。
【図５】添加された油（ｍＬで）の体積の関数としての、３ｇ／Ｌキチンナノ結晶の対照懸濁物（「３ｇ／ＬキチンＮＣ対照」）と比較した、１．５ｇ／Ｌキチンナノ結晶／１．５ｇ／Ｌセルロースナノ結晶の混合懸濁物（「１．５ｇ／ＬキチンＮＣ＋１．５ｇ／ＬセルロースＮＣ」）についての内相パーセンテージの変化を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３８】
本発明は新規の内相を増加させた組成物（すなわち、有利には中間内相（ＭＩＰＥ）または高内相（ＨＩＰＥ）のエマルション組成物）に加えて、それを得るプロセスを提供する。
【００３９】
一般的に、本出願人は、予想外に、セルロース以外の多糖のナノ結晶によってＭＩＰＥ／ＨＩＰＥタイプのエマルション組成物を安定化できることを示した。
【００４０】
本出願人は、予想外に、セルロース以外の多糖のナノ結晶によってフォーム形態において組成物を安定化できることも示した。
【００４１】
セルロースナノ結晶以外の多糖ナノ結晶は、有利には、以下の利益を有する。
−ＭＩＰＥ／ＨＩＰＥエマルションの高安定性を生じる不可逆的吸着（界面からのナノ結晶の脱離のために必要とされる解離エネルギーは、この脱離が自然に起こらないようなものであると思われる）、
−非毒性、
−生物分解性、
−生物学的源からのもの、
−後処理によって容易に修飾される。
【００４２】
セルロースのナノ結晶以外のこれらの多糖のナノ結晶は、有利には、被覆率および多孔率のパーセンテージの変動を保証する異方性ロッドタイプ構造を有する。
【００４３】
より好ましくは、セルロースのナノ結晶以外の多糖のナノ結晶は、有利には、β１，４結合によって連結されたグルコースまたはグルコース誘導体（例えばグルコサミンまたはグルコサミン誘導体）のモノマーを含む多糖から得られるナノ結晶から選択される。
【００４４】
選択された多糖ナノ結晶は、有利には、適合させることができる正電荷（大部分のバイオポリマーは負に荷電するが）を有し、オリジナルおよび複数の組み合わせを可能にする。
【００４５】
本発明に記載の組成物
したがって、本発明に記載の組成物は、親水性連続相中で分散された内相を含み、内相のパーセンテージは５０％より高い。
【００４６】
この組成物は、セルロース以外の多糖のナノ結晶を含有し；これらのナノ結晶は内相と親水性連続相との間の界面に位置する。
【００４７】
かかる組成物は、有利には、
−中間内相（ＭＩＰＥ）または高内相（ＨＩＰＥ）タイプのエマルション組成物（その中で前記内相は疎水性液相によって構成される）、または
−フォーム形態における組成物（その中で前記内相は気相によって構成される）
である。
【００４８】
一般的定義
本発明に記載の組成物は、有利には、エマルションまたはフォームである。
【００４９】
「エマルション」または「エマルション組成物」によって、肉眼的に均一であるが、微視的に不均一な２つの不混和性液相の混合物が意味される。
【００５０】
本記述中で、「エマルション」または「エマルション組成物」の概念は互換的に使用される。
【００５１】
「水中油」タイプのエマルションにおいて、本発明の意味では、（ｉ）親水性分散連続相は水相であり、および（ｉｉ）分散された内相は疎水性相である。
【００５２】
水中油エマルションは本記述中で「Ｏ／Ｗ」とも称することができる。
【００５３】
「フォーム」によって、気体と完全に混合された固体または液体の材料からなる複合媒質が意味される。
【００５４】
本発明によれば、フォームは、有利には、水性液体フォームであり、その中で（ｉ）親水性分散連続相は水相であり、および（ｉｉ）分散された内相は気相である。
【００５５】
このフォームは、いわゆる「ドライ」フォーム（すなわち低水和性フォーム）であり得る。
【００５６】
より具体的には、液体がフォームの全体積の無視できる部分のみを占める場合、フォームは「ドライ」フォームであり；慣例によって、したがって液体の体積分率がゼロであると推測される。
【００５７】
実験的には、液体の体積分率は１０−２または１０−４へ低下させることができる。
【００５８】
液体の体積分率は、液体体積とフォームの全体積との間の比（Ｖ液体／Ｖフォーム）に対応する。
【００５９】
この値は、下記の式によるフォーム密度ρに関する。
ρ＝ρｌΦｌ＋ρｇ（１−Φｌ）
ρｌおよびρｇは溶液および気体のそれぞれの密度であり、
Φｌは液体の体積分率に対応し、
Φｌ＊は液体の臨界体積分率に対応し、その液滴は変形されない（この概念は、「Ｌｅｓ  ｍｏｕｓｓｅｓ：ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｅｔ  ｄｙｎａｍｉｑｕｅ」（Ｌ．Ｃａｎｔａｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｐａｒｉｓ；Ｅｄ  Ｂｅｌｉｎ，２０１０−２７８ページ−ＩＳＢＮ：９７８−２−７０１１−４２８４−５）中でさらに定義される）。
したがって３つのタイプのフォーム構造は以下のように定義される。
Φｌ＊＜Φｌならば、泡沫は球であり接触はなく、泡立つ液体に対応し、
０．０５＜Φｌ＜Φｌ＊ならば、泡沫は接触し、潰れた球体の形であり、ウェットフォームに対応し、
Φｌｌ＜０．０５ならば、泡沫は接触し多面体の形であり、ドライフォームに対応する。
【００６０】
言いかえれば、内相のパーセンテージはウェットフォームについては約６４％〜９５％の間であり；内相体積分率はドライフォームについては９５％を超える。
【００６１】
これらのフォームの技術的な態様は以下の文書中でさらに記載される。「Ｌｅｓ  ｍｏｕｓｓｅｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｅｔ  ｄｙｎａｍｉｑｕｅ」、Ｌ．Ｃａｎｔａｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｐａｒｉｓ；Ｅｄ  Ｂｅｌｉｎ，２０１０−２７８ページ−ＩＳＢＮ：９７８−２−７０１１−４２８４−５。
【００６２】
本記述中で、「油相」および「疎水性相」という用語を互換的に使用して、水中油タイプのエマルションの調製のために使用される油液体を指すことができる。
【００６３】
本発明に記載の組成物は少なくとも１つの内相を含む。
【００６４】
本記述中で、エマルションに特異的な態様以外は、「内相」、「疎水性内相」、「分散相」、「疎水性分散相」という用語を互換的に使用して、
−水中油タイプのエマルションの分散された油相、または
−水性液体フォーム中で分散された気体
を指すことができる。
【００６５】
本記述中で、「水相」および「親水性相」という用語を互換的に使用して、水中油タイプのエマルションまたはフォームの調製のために使用される水性液体を指すことができる。
【００６６】
本記述中で、「連続相」、「親水性連続相」および「連続水相」という用語を互換的に使用して、水中油エマルションまたはフォームの分散水相を指すことができる。
【００６７】
エマルション組成物またはフォームの「内相のパーセンテージ」によって、本発明によれば、（ｉ）親水性連続相中で分散された内相の体積と（ｉｉ）結果として生じる組成物の全体積との間の比（体積によるパーセンテージとして）が意味される。
【００６８】
フォームについては、「内相のパーセンテージ」の概念は、有利には、「分散相の体積分率」の概念に等しく対応する。
【００６９】
したがって「内相を増加させた」組成物は、内相（分散相とも呼ばれる）が組成物の全体積の約５０％（好ましくは約５５％）よりも高い体積を占める液／液または液／気不混和性分散系である。
【００７０】
したがって「内相を増加させたエマルション」は、内相（分散相とも呼ばれる）がエマルションの全体積の約５０％（好ましくは約５５％）よりも高い体積を占める液／液不混和性分散系である。
【００７１】
高内相エマルション（ＨＩＰＥ）は、内相（分散相とも呼ばれる）がエマルションの全体積の約７４〜７５パーセントよりも高い体積（すなわち単分散球体、すなわち均一のサイズの球体集団の緻密な充填のために幾何学的に可能なものよりも高い体積）を有する液／液不混和性分散系であることが想起される。
【００７２】
中間内相エマルション（ＭＩＰＥ）は、内相がエマルションの全体積の５０と７４〜７５パーセントとの間の体積を有する液／液不混和性分散系であることもなお想起される。
【００７３】
本発明によれば、中間内相エマルション（ＭＩＰＥ）は、有利には、内相がエマルションの全体積の５０（好ましくは５５）と７４〜７５パーセントとの間の体積を有する液／液不混和性分散系である。
【００７４】
いくつかの状況において、ＨＩＰＥタイプエマルションが上で定義されたプロセスに従って調製される場合、親水性連続相中で分散された疎水性相を含むエマルション相は、任意で、（ｉ）分散されない形において組成物中に存在する、ある体積の疎水性相からなる油相（この体積は測定される）および／または（ｉｉ）水相（エマルションの一部でなくて）を備えて、エマルションとして得ることができる。
【００７５】
内相のパーセンテージは、（ｉ）分散されない疎水性相（その相は一般的にはエマルション相の上にある）の体積を測定すること、（ｉｉ）エマルション相の体積を測定すること、および次いで（ｉｉｉ）組成物中に含有される疎水性相の全体積が既知であるという理解に基づいて、エマルション相中の分散された形である疎水性相の体積を計算することによって計算される。
【００７６】
「疎水性内相／親水性連続相の体積比」（特にＭＩＰＥタイプまたはＨＩＰＥタイプのエマルションについて）によって、本発明によれば、（ｉ）エマルション中に組み込まれた疎水性相の体積と（ｉｉ）エマルション中に組み込まれた親水性相の体積との間の比が意味される。
【００７７】
この後者の比は、エマルション中に組み込まれたナノ結晶の量にも依存するという点で、単に表示的なものである。一般的に、試験は、０．３〜０．８ｇ／Ｌの濃度で懸濁されたナノ粒子を含有する親水性相により実行された。この濃度は一切限定されない；最も信頼できる限定は、有利には、ピッカリング・エマルションの製造の間に８０％の被覆率（限定しないが）である。以下で示される「連続的な」製造プロセスの事例において、ピッカリング・エマルションの安定条件が満たされる（工程ｃ．１））ならば、疎水性相の添加によって、または親水性相の少なくとも１つの部分を引き抜くことによって、プロセスを継続して、エマルションＭＩＰＥまたはＨＩＰＥを形成することができる（工程ｃ．２））。
【００７８】
内相のパーセンテージ
本発明によれば、「増加させた内相」を含む組成物は５０％より高い（好ましくは５５％より高い）内相のパーセンテージを有する。
【００７９】
一実施形態によれば、形成されたエマルションは有利には中間内相（ＭＩＰＥ）タイプであり、５０％〜７５％の間、好ましくは５５％〜７５％の間、さらに有利には６０％〜７５％の間、さらに有利には６５％〜７５％の間、およびさらに有利には７０％〜７５％の間の内相のパーセンテージを有する。
【００８０】
別の実施形態によれば、形成されたエマルションはさらに高内相（ＨＩＰＥ）タイプであり得、７５％より高いか、好ましくは８０％より高いか、より好ましくは８５％より高いか、または場合によっては９０％より高い内相のパーセンテージを有する。内相のこのパーセンテージは、さらに有利には、８０％〜９０％の間（好ましくは８５％〜９０％の間）の範囲である。
【００８１】
さらに別の実施形態によれば、組成物はフォーム形であり、その内相パーセンテージ（分散相の体積分率に対応する）は、５０％より高く、好ましくは５５％より高く、さらに好ましくは、６４％〜９５％の間である。
【００８２】
いわゆる「ドライ」フォームの事例において、内相のパーセンテージは有利には９５％より高い。
【００８３】
体積比
いくつかの実施形態において、６０／４０より高い（より好ましくは８０／２０より高い）疎水性内相／親水性連続相の体積比を有するＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルション組成物が形成される。
【００８４】
「６０／４０より高い」または「少なくとも６０／４０」によって、有利には、体積比で６０よりも高い値（すなわち、６５／３５、７０／３０、７５／２５、８０／２０、８５／１５または９０／１０が含まれる）を有する疎水性内相が意味される。
【００８５】
「８０／２０より高い」または「少なくとも８０／２０」によって、有利には、体積比で８０よりも高い値（すなわち、８５／１５または９０／１０が含まれる）を有する疎水性内相が意味される。
【００８６】
セルロース以外の多糖のナノ結晶
したがって組成物（特にエマルション組成物）は、少なくともそれらのうちのいくらかについてはセルロースのナノ結晶以外のナノ結晶である、多糖のナノ結晶によって安定化される。
【００８７】
多糖（時には複雑なグリカン、ポリオシド、ポリホロシドまたは炭水化物と称される）は、ともに結合された複数のオース（糖またはアンヒドログルコース単位もしくはＡＧＵとも呼ばれる）からなるポリマーである。
【００８８】
「多糖」によって、有利には、数百または数千の単位を達成するために、少なくとも１０のオシド単位のオシド連結によるオースの反復縮合によって形成されたポリマーが特に意味される。
【００８９】
多糖ナノ結晶は、しばしば、先行技術において「ウィスカー」または「ナノウィスカー」という名称で公知である。
【００９０】
「ナノ結晶」という用語は、少なくとも１つの次元が繊維の方向に沿って平行または逆平行に配向された巨大分子鎖からなるナノスケールサイズまたはサブミクロンサイズの結晶であることを意味する。
【００９１】
かかる多糖ナノ結晶は、様々な源（例えば植物、細菌、動物、菌類またはアメーバの起源）から得ることができ、それらは源の分解または再結晶によって得ることができる。
【００９２】
本発明に記載の組成物は、特に、
（ｉ）セルロース以外の多糖または多糖の混合物に由来するナノ結晶、または
（ｉｉ）セルロースに由来するナノ結晶とブレンドされた、セルロース以外の多糖または多糖の混合物に由来するナノ結晶
を含有し得る。
【００９３】
「セルロースナノ結晶」によって、しばしば、先行技術においてセルロース「ウィスカー」、セルロース「ナノウィスカー」または「ナノセルロース」という名称で公知のナノ結晶が意味される。
【００９４】
かかるセルロースナノ結晶は、植物（例えば木材パルプ、コットンまたは藻類）、動物（例えば尾索動物）、細菌再生セルロースまたはマーセル加工されたセルロースの様々な源から得ることができる。それらは、例えばＳａｍｉｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００５，Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，Ｖｏｌ．６：６１２−６２６）またはＥｌａｚｚｏｕｚｉ−Ｈａｆｒａｏｕｉ  ｅｔ  ａｌ．（Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．２００８；９（１）：５７−６５）中に記載される。
【００９５】
セルロースのナノ結晶以外の多糖のナノ結晶は、有利には、いわゆる「構造タイプ」多糖（すなわち、分岐しないグルコースまたはグルコース誘導体およびβ−タイプアノマー連結である単位間の連結のポリマー）から得られるナノ結晶から選択される。
【００９６】
この点に関して、セルロースのナノ結晶以外の多糖のナノ結晶は、有利には、以下の多糖
−グルカン（Ｄ−グルコースのポリマー）
−ガラクタン（Ｄ−ガラクトースのポリマー）
−キシラン（Ｄ−キシロースのポリマー）、および
−特にキチンを含む、Ｄ−グルコサミンのポリマー
から得られるナノ結晶から選択される。
【００９７】
「グルカン」によって、α−グルカンファミリーが意味され、以下の多糖
−デンプン（α−１，４−グルカンおよびα−１，６−グルカン）
−アミロペクチン（α−１，４−グルカンおよびα−１，６−グルカン）
−アミロース（α−１，４−グルカン）
が含まれる。
【００９８】
「グルカン」によって、β−グルカンファミリーも意味され、以下の多糖
−カードラン（β−１，３−グルカン）
−ラミナリン（β−１，３−グルカンおよびβ−１，６−グルカン）
−レンチナン（純粋なβ−１，６：β−１，３−グルカン）
−パミロン（ｐａｍｙｌｏｎ）
−プレウラン（ｐｌｅｕｒａｎ）（β−１，３−グルカンおよびβ−１，６−グルカン）
−ザイモサン（β−１，３−グルカン）
が含まれる。
【００９９】
より好ましくは、セルロースのナノ結晶以外のこれらの多糖のナノ結晶は、有利には、β１，４連結によって接続されたグルコースまたはグルコース誘導体（例えばＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンタイプのものが含まれる、グルコサミンまたはグルコサミン誘導体）のモノマーを含む多糖から得られるナノ結晶から選択される。
【０１００】
多糖ナノ結晶の中で、正電荷を含むもの（大部分のバイオポリマーは負に荷電するが）が特に選択され、オリジナルおよび複数の組み合わせを可能にする。
【０１０１】
この正電荷は有利には適合させることができる。
【０１０２】
この正電荷は対象となるナノ結晶（非官能化粒子）に内因性であり得るか、または官能基化によって（有利にはＮ−アセチルアミン官能基のグラフトによって）得ることができる。
【０１０３】
本発明に記載の組成物は、したがって特に、
（ｉ）セルロースナノ結晶を除く正に荷電した多糖ナノ結晶のみ、または
（ｉｉ）有利には少なくとも１つの負に荷電した多糖に由来するナノ結晶と混合された、セルロース以外の正に荷電した多糖ナノ結晶
を含有し得る。
【０１０４】
この点に関して、多糖ナノ結晶は、したがって有利には、一般的には「ＣｈＮ」と称されるキチンナノ結晶から選択される。
【０１０５】
キチン分子の化学名は、ポリ−Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、β−（１，４）−２−アセトアミド−２−デオキシ−Ｄ−グルコース、またはより単純に［Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンβ−（１，４）Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン］ｎである。
【０１０６】
キチンには、有利には、Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミン単位（５０〜１００％）およびＤ−グルコサミン単位（０〜５０％）からなる多糖が含まれる。
【０１０７】
本発明の文脈において、有利には、「キチンナノ結晶」（針状の結晶性物）と命名されたものは、β（１−４）連結によって連結される、グルコサミンコポリマー鎖およびＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの会合から構成される。
【０１０８】
キチンナノ結晶は動物または菌類起源であり得る。動物源の例には、甲殻類（カニ、エビ、ロブスターなど）およびいくつかの昆虫（ヨーロッパコフキコガネ、甲虫など）が含まれる。キチンの菌類源の例には菌類および酵母が含まれる。
【０１０９】
後に示されるように、本出願人は、キチンナノ結晶によって安定化されたＭＩＰＥ／ＨＩＰＥタイプのエマルション組成物の物理化学的性質は、以下のパラメーター
−キチンナノ結晶の構造パラメーター、
−キチンナノ結晶の表面上の電荷密度、
−キチンナノ結晶による被覆率、
−疎水性分散相／親水性連続相の体積比、
−エマルション組成物のイオン強度またはｐＨ、および
−調製方法
によって条件付けられることを示した。
【０１１０】
さらに後に示されるように、本出願人は、キチンナノ結晶によって安定化されたフォームタイプの組成物の物理化学的性質は、以下のパラメーター
−キチンナノ結晶による被覆率、
−エマルション組成物のイオン強度またはｐＨ、
によって条件付けられることを示した。
【０１１１】
特に、キチンナノ結晶は予想外により高い安定化品質を提示する（これらのナノ結晶を界面に、より容易に集める両親媒性特徴を強化する疎水性特徴は、アセチルアミン官能基の存在に関連する）。
【０１１２】
ナノ結晶はβ−１，３−グルカン、β−１，３−キシラン、およびβ−１，４−マンナン（それらはキチンに類似する繊維構造を共有する）から選択される多糖からも得ることができる。したがってこれらの多糖もナノ結晶形を有することができる。
【０１１３】
これらの後者のナノ結晶は植物または菌類起源であり得る。植物性源の例には、特にβ−１，３−キシランについて、いくつかの藻類が含まれる。β−１，４−マンナンについては、陸上植物の種子内乳に加えていくつかの藻類も挙げることができる。多糖の菌類源の例として、β−１，３−グルカンについては、特にいくつかの菌類およびいくつかの酵母を挙げることができる。
【０１１４】
ナノ結晶はデンプン（α−１，４−グルカンおよびα−１，６−グルカン）から選択される多糖からも得ることができる。
【０１１５】
本発明に記載の組成物は、したがって有利には、
（ｉ）キチンナノ結晶のみ、または
（ｉｉ）有利には負に荷電した少なくとも別の多糖（例えばセルロース）からのナノ結晶と混合された、有利には正に荷電したキチンナノ結晶
を含有し得る。
【０１１６】
事例（ｉ）の好ましい実施形態によれば、組成物は、
−他の乳化化合物または安定化化合物、
−または他の固形微粒子（前記固形微粒子は官能化または非官能化のいずれかである）
を添加せずに、キチンナノ結晶のみによって安定化される。
【０１１７】
事例（ｉｉ）によれば、正に荷電したキチンナノ結晶／負に荷電した多糖（複数可）からのナノ結晶の比は、有利には、所望される表面荷電に対応する値に基づいて調整される。
【０１１８】
この比は、例えば１／９９〜９９／１の間で、好ましくは１０／９０〜９０／１０の間で、特に１／９９、１０／９０、２０／８０、３０／７０、４０／６０、５０／５０、６０／４０、７０／３０、８０／２０、９０／１０または９９／１から選択することができる。
【０１１９】
この場合、液滴または泡沫の表面は有利には双性イオンタイプ（正および負）であろう。
【０１２０】
組成物は、その使用、最終的な目的または適用のために好適な他の化合物をさらに含有することができる。
【０１２１】
組成物の適用は、食品、美容、医薬または植物検疫の分野において使用可能な組成物から選択することができる。
【０１２２】
本発明に記載の最終的な組成物の所望される適用に依存して、組成物は、例えば活性成分およびアジュバント（防腐剤、ゲル化剤、溶媒、色素など）を含有し得るが、これらに限定されない。
【０１２３】
多糖ナノ結晶の寸法特徴
多糖のナノ結晶（特にキチン）は、高度に結晶性の固形微粒子である。
【０１２４】
多糖のこれらのナノ結晶は、非晶性部分を含まないか、または少なくとも実質的に含まない。それらは、好ましくは少なくとも６０％、および好ましくは６０％〜９５％の間の結晶性を有する。
【０１２５】
セルロースのナノ結晶以外の多糖のナノ結晶は、有利には、異方性ロッド（Ｒｅｖｏｌ  ＪＦ  ａｎｄ  Ｍａｒｃｈｅｓｓａｕｌｔ  ＲＨ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．（１５）１９９３，３２５）、プレートまたは球体（球顆）（Ｍｕｒｒａｙ  Ｓ．Ｂ．ａｎｄ  Ｎｅｖｉｌｌｅ  Ａ．Ｃ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．２０（１９９７）１２３−１３０）の形態である。
【０１２６】
「異方性ロッド」によって、１を超える長さ／幅の比を備えた調整可能な粒子が意味される。
【０１２７】
この形態は、例えば電子顕微鏡法、特に透過電子顕微鏡法（またはＴＥＭ）によって観察することができる。
【０１２８】
これらのナノ結晶は、有利には、ミクロンのオーダーの最大長で２〜５０ｎｍの範囲の幅を有する。
【０１２９】
有利には、キチンナノ結晶は異方性の細長い形状を有する。
【０１３０】
キチンナノ結晶は、一般的には以下の寸法の特徴（ｉ）１５０〜６００ｎｍの間の平均長さおよび（ｉｉ）５〜５０ｎｍの間の幅を含む。
【０１３１】
例外として、「ｒｉｆｉａ」（深海の動物）のキチンからのナノ結晶の寸法の特徴は、（ｉ）２２００ｎｍのオーダーの平均長、および（ｉｉ）１８ｎｍのオーダーの幅であることも公知である。
【０１３２】
「長さ」によって、それぞれの長手方向の軸の端部での２点を隔てるナノ結晶の大きな方の寸法が意味される。
【０１３３】
「幅」によって、ナノ結晶に沿って、それぞれの長手方向の軸に垂直で、それらの最大の横断面に対応して測定された寸法が意味される。
【０１３４】
好ましい実施形態において、キチンナノ粒子は、ナノ結晶の比較的均一な集団を形成し、その長さの実験値は、前記ナノ結晶集団に帰属する長さの値に集中するガウス分布に従う。これらの好ましい実施形態において、例えば、実施例において例証されるように、「単一の規定されたサイズ」を有するキチンナノ結晶を使用することができる。
【０１３５】
実際面では、ナノ結晶の形態および寸法は、様々なイメージング技法（透過電子顕微鏡法（ＴＥＭ）もしくは原子間力顕微鏡法（ＡＦＭ）、Ｘ線小角散乱もしくは小角中性子散乱（それぞれＳＡＸＳまたはＳＡＮＳ）または動的光散乱（ＤＬＳ）等）を使用して決定することができる。
【０１３６】
有利には、キチンナノ結晶は、１を超えかつ１００未満、好ましくは５〜３０の間の長さ／幅の比を有する。
【０１３７】
１を超えかつ１００未満の長さ／幅の比には、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８および９９の長さ／幅比が含まれる。
【０１３８】
例えば、キチンナノ結晶は、以下のものから得ることができる。
−カニ殻。２４０ｎｍ×１５ｎｍ（Ｎａｉｒ  ａｎｄ  Ｄｕｆｒｅｓｎｅ，Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２００３）もしくは２６０±８０ｎｍ×２３±３ｎｍ（Ｂｅｌａｍｉｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｐｈｙｓ．Ｃｈｅｍ．２００４）、または
−エビ殻。２００〜５６０ｎｍ×１８〜４０ｎｍ（Ｐｈｏｎｇｇｙｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｏｌｙｍｅｒ  ２００７）。
【０１３９】
多糖ナノ結晶の表面上の電荷
組成物安定性を至適化するために、多糖ナノ結晶は、有利には、特に静電的な態様を考慮に入れて、それらの表面特徴に従って選択される。
【０１４０】
特に、キチンナノ結晶は表面アミン官能基（特にＮ−アセチルグルコサミン部分）に起因して正に荷電し、そして表面電荷密度はアセチル化レベルに従って変動する。
【０１４１】
表面の静電特徴に関して、エマルションを安定化するキチンナノ結晶は、有利には、１ｅ．ｎｍ−２のオーダーで最大表面電荷密度を有する。「ｅ」は素電荷であることが指摘される。
【０１４２】
表面電荷密度は、任意で水相のイオン強度に従って選択することができる。
【０１４３】
表面電荷密度の不安定化効果は、水相中のイオン強度を増加させることによって任意で消滅させることができる。
【０１４４】
有利には、この表面電荷密度は伝導性測定によって決定される。
【０１４５】
所望される表面電荷密度はナノ結晶のアセチル化レベルのモニターによって得ることができる。
【０１４６】
「アセチル化度」（または「ＤＡ」）は、グルコサミン単位の総数当たりのＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミン単位のモル分率×１００である。
【０１４７】
ＤＡは、異なる方法（導電率滴定、窒素／炭素比の元素分析測定、ＩＲもしくはＵＶ分光測定、１Ｈ液体ＮＭＲもしくは１３Ｃ固体ＮＭＲ、または酵素反応によるもの）によって決定することができる（Ｍ．Ｒｉｎａｕｄｏ，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００６，３１，６０３−６３２）。
【０１４８】
キチンの脱アセチルは、アルカリ性条件（濃ＮａＯＨ）において、またはキチン脱アセチル化酵素の存在下において酵素的加水分解によって実行することができる。
【０１４９】
アルカリ処理（例えば９０℃で２時間〜４時間３３％ＮａＯＨ溶液で、８５％〜９０％の収率）によって部分的にキチンナノ結晶を脱アセチルすることは可能である（Ｙ．Ｍ．Ｆａｎ，Ｔ．Ｓａｉｔｏ  ａｎｄ  Ａ．Ｉｓｏｇａｉ，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ，２０１０，７９，１０４６−１０５１）。
【０１５０】
アセチル化度（ＤＡ）は、鎖可溶性を定義し、したがってその命名を定義する。
【０１５１】
５０％より高いＤＡについて、キチンは不溶性の固体形であり；５０％より低いＤＡについて、可溶性キトサン鎖が得られる。
【０１５２】
本発明によれば、このアセチル化レベルは、有利には５０％〜１００％の間、好ましくは少なくとも７０％（例えば約７４％）、より好ましくは約９０％である。
【０１５３】
一般的に、本発明に従って使用される多糖ナノ結晶は、いかなる表面官能基修飾も行っていないナノ結晶である。
【０１５４】
これには、そのアミン官能基は脱アセチルによって修飾されないキチンナノ結晶が含まれる。
【０１５５】
特に、それらの後続する架橋を可能にする基（例えばメタクリレートタイプまたはジメタクリレートタイプの基）により官能化またはグラフトされていない多糖ナノ結晶が、優先的に使用される。
【０１５６】
さらに、ポリマー分子（ポリエチレングリコール、ポリ（ヒドロキシエステル）またはポリスチレン等）により官能化またはグラフトされない多糖ナノ結晶が、優先的に使用される。
【０１５７】
一般的に、塩の非存在下において表面電荷密度の効果があるように見えるが、この効果はＮａＣｌ（それは電荷を保護し、静電反発作用を限定する）の添加によって消滅する。
【０１５８】
セルロースナノ結晶以外の多糖ナノ結晶の量および被覆率
組成物は、有利には、前記組成物の全重量に基づいて、重量で０．０３５％〜２％（より好ましくは重量で０．０５％〜１％）の多糖（有利にはキチン）のナノ結晶を含む。
【０１５９】
この多糖ナノ結晶質量割合は、例えば水相を乾燥抽出することまたは加水分解後に糖を定量することによって評価することができる。
【０１６０】
本発明によれば、実施されたナノ結晶タイプに基づいて、少なくとも５０％、好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、有利には約８０％の被覆率を得るのに十分な量の多糖ナノ結晶が、本発明に記載の最終的なＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルション組成物を得るために必要とされることが示された。
【０１６１】
本記述の意味において、多糖ナノ結晶による「被覆率」は、油／水の界面で、多糖ナノ結晶によって被覆される水相中で分散された疎水性相の小滴表面の割合を表わす。
【０１６２】
被覆率「Ｃ」は、（ｉ）疎水性内相／親水性連続相の界面で安定化することができるエマルション組成物中に存在する多糖ナノ結晶の表面と（ｉｉ）前記エマルション組成物中の疎水性相の小滴の表面の合計との比であり、下記の式（Ｉ）によって計算される。
【数１】
0005902870.tif 000002
式中、
Ｓｐは、エマルション組成物中に存在する界面で安定化することができる多糖ナノ結晶表面を表わし、
Ｓｄは、エマルション組成物中で疎水性相小滴の表面の合計を表わす。
【０１６３】
ナノ結晶表面は単一の平面に同化し、そのナノ結晶は平面のリボンへと前記表面で整列されると推定される。
【０１６４】
結果的に、ナノ結晶表面値は下記の式（ＩＩ）によって計算することができる。
【数２】
0005902870.tif 000003
但し、
0005902870.tif 000004
式中
Ｓｐは、エマルション組成物中に存在する界面で安定化することができる多糖ナノ結晶表面を表わし、
Ｎｐは、水相中に存在する多糖ナノ結晶の数を指し、
Ｌは、多糖ナノ結晶の長さを指し、
ｌは、多糖ナノ結晶の幅を指し、
ｈは、多糖ナノ結晶の高さを指し、
ｍｐは、多糖ナノ結晶の質量を指し、
ρは、多糖ナノ結晶の密度を指す。
【０１６５】
小滴の表面は油／水の界面での表面であり、それはＤ（３，２）に沿った各々の小滴平均直径について計算された。
【０１６６】
結果的に、小滴表面値は下記の式（ＩＩＩ）によって計算することができる。
【数３】
0005902870.tif 000005
但し、
【数４】
0005902870.tif 000006
式中
Ｎｇは、エマルション中に存在する小滴の数を指し、
Ｓｄは、疎水性相の小滴表面値を指し、
Ｒは、小滴平均半径を指し、
Ｖoilは、疎水性内相の全体積を指す。
【０１６７】
被覆率「Ｃ」の最終的な値は、既に上記された式（Ｉ）によって計算される。
【数１】
0005902870.tif 000007
式中、
Ｓｐは、エマルション組成物中に存在する界面で安定化することができる多糖ナノ結晶表面を表わし、
Ｓｄは、エマルション組成物中の疎水性相小滴の表面の合計を表わす。
【０１６８】
実施例は、少なくとも６ｇ／Ｌの濃度のキチンを含有する溶液からフォームの形で組成物を得ることができることをさらに示す。
【０１６９】
イオン強度およびｐＨ
本出願人は、エマルション組成物安定性が規定された最小イオン強度の水相の使用によって増加できることも示した。
【０１７０】
キチンナノ結晶による実施例において示されるように、エマルションの至適の安定性は、水相イオン強度値の最小閾値（例えば３ｇ／Ｌのキチンナノ結晶の懸濁物について２ｍＭのＮａＣｌの最終的な濃度および０．０１ｍＭのＨＣｌ濃度）から得られる。
【０１７１】
実施例においても示されるように、エマルション組成物の最大の安定性は、前記エマルションにおいて１０〜５０ｍＭのＮａＣｌの最終的な濃度に対応するイオン強度値について得られる。
【０１７２】
さらに実施例において観察されるように、イオン強度の非存在または１０ｍＭを超えるイオン強度の増加は、フォームタイプ組成物の不安定化させる傾向がある。この事例において、イオン強度は有利には１〜５ｍＭの間のＮａＣｌである。
【０１７３】
任意の理論に束縛されることを意図しないが、本出願人は、エマルションの至適の安定性が得られる水相のイオン強度閾値は、水相中に存在する電荷（カウンターイオン）がナノ結晶上に存在する電荷（イオン）を中和するものであると考える。
【０１７４】
実施例においても示されるように、過剰なカウンターイオンの存在はエマルション安定性特性に有意に影響しない。大過剰のカウンターイオン（それは実施例の操作条件において達成されていない）については、ナノ結晶沈殿があるので状態の変化を予測することができ、必ずしもエマルション安定性を変更しない（凝集現象はエマルション安定化のためにむしろ好ましく思われる）。
【０１７５】
指標として、特定の実施形態によれば、キチンナノ結晶は有利には０．９ｅ．ｎｍ−２の最大表面電荷密度を含んで、５ｍＭのＮａＣｌに同等のイオン強度に少なくとも等しいイオン強度を含む組成物を安定化する。
【０１７６】
１０ｍＭのＮａＣｌに同等のイオン強度よりも高いイオン強度を含む組成物について、キチンナノ結晶上の表面電荷密度は、もはやエマルションの効果的な安定化に関連するパラメーターであるとは思われない。
【０１７７】
１０ｍＭのＮａＣｌに同等のイオン強度よりも高いイオン強度には、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２７５、２８０、２９０、３００、３１０、３１５、３２０、３２５、３３０、３３５、３４０、３４５、３５０、３６０、３７０、３７５、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、または５００ｍＭのＮａＣｌよりも高いイオン強度が含まれる。好ましくは、イオン強度は３ＭのＮａＣｌに同等のイオン強度よりも低い。
【０１７８】
本出願人は、エマルション組成物安定性は、規定されたｐＨを備えた水相の使用によって増加でき、有利にはその値は酸濃度によって調整されることも示した。
【０１７９】
例えば、酸は、鉱酸および有機酸、有利には塩酸、過塩素酸、酢酸、ギ酸、クロロ酢酸、クエン酸、ピクリン酸、アスコルビン酸、および１２までの炭素原子を含む脂肪酸から選択され；塩酸が優先的に使用される。
【０１８０】
実施例において示されるように、エマルション組成物の最大の安定性は３〜６の間のｐＨ値について得られる。同様に、３から５へのｐＨ増加は、フォームの形で組成物の安定化を促進する。
【０１８１】
さらにこの実施例において、フォーム形成がｐＨに応じて可逆的であることが示される。
【０１８２】
エマルション組成物の構造
エマルション組成物の構造を定義するために、親水性相中で分散された疎水性相を構成する脂質小滴のサイズ分布に関する特徴を、特に使用することができる。
【０１８３】
実施例は、μｍで測定されたその脂質小滴集団の体積中で最も有力なもの（「最頻値」とも命名される）を含む。
【０１８４】
脂質小滴のサイズ分布はいわゆる「ザウター」直径（ｄ３．２）およびｄ４．３値を特徴とすることができ、下記の式によってそれぞれ定義される。
ｄ３．２＝Σｎｉｄｉ３／Σｎｉｄｉ２
ｄ４．３＝Σｎｉｄｉ４／Σｎｉｄｉ３
式中、ｎｉはｄｉの直径の脂質小滴の数である。
【０１８５】
これらの２つの値は、親水性連続相中で分散された脂質小滴のサイズ分布を査定することを良好に可能にする。
【０１８６】
この脂質小滴集団は例えばレーザー粒度分布技法によって決定される。
【０１８７】
内相
疎水性相は、植物油、動物油、鉱物油、合成油、疎水性有機溶媒および疎水性液体ポリマーから選択される。
【０１８８】
疎水性相は置換または非置換のアルカンまたはシクロアルカンから選択することができる。実施例は、アルカンおよびシクロアルカンによる本発明に記載のＨＩＰＥエマルションの実施形態をそれぞれ例証する。
【０１８９】
疎水性相について、５つを超える炭素原子を備えたアルカンには、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６を超えるかまたは１７を超える炭素原子を備えたアルカンが含まれる、すなわち特に、従来の呼称に従って、Ｃ６−Ｃ１８アルカンであり、それは式ＣｎＨ２ｎ＋２のものである。前記アルカンは直鎖状または分岐状であり得る。
【０１９０】
前記アルカンには、ヘキサン、ヘプタン、オクタン、ノナン、デカン、ウンデカン、ドデカン、トリデカン、テトラデカン、ペンタデカン、ヘキサデカン、ヘプタデカンおよびオクタデカンのタイプの直鎖状または分岐状のアルカンが含まれる。
【０１９１】
置換されたアルカンには、塩素、臭素、ヨウ素またはフッ素から選択されるハロゲンによって少なくとも１つの水素原子が置換される上記の直鎖状または分岐状のアルカンが含まれる。少なくとも１つの水素原子の置換には、２、３、４または５の水素原子の置換が含まれる。
【０１９２】
いくつかの実施形態において、前記シクロアルカンは置換または非置換のシクロヘキサンである。シクロヘキサンは、塩素、臭素、ヨウ素またはフッ素から選択される１、２、３または４のハロゲン原子によって置換することができる。
【０１９３】
疎水性相は例えばパラフィン油としてかかるアルカンの混合物も含むことができる。
【０１９４】
いくつかの実施形態において、疎水性相は公知のタイプの１つまたは複数の重合可能な疎水性モノマーを含む。
【０１９５】
他の実施形態において、疎水性相は、本質的に疎水性モノマーまたは疎水性モノマーの混合物の組成物である。例示として、疎水性相は、本質的にスチレンモノマー組成物であり得る。
【０１９６】
疎水性相が疎水性モノマーまたは疎水性モノマーの組み合わせを含むかまたはそれらである実施形態は、ポリマー材料ビーズの製造（これらのモノマー（複数可）の重合によって）に特に有用である。
【０１９７】
フォームの事例において、内相は、気体、有利には空気、窒素または二酸化炭素である。
【０１９８】
親水性相
「親水性相」または「水相」によって、疎水性相と不混和性の液体が意味される。好ましくは水と混和性の親水性相が使用される。親水性相は、実施例において示されるように水であり得る。
【０１９９】
親水性相は、親水性溶媒、好ましくはヒドロキシル基を持つ溶媒（グリコール等）であり得る。親水性相について、グリコールにはグリセロールおよびポリエチレングリコールが含まれる。
【０２００】
親水性相は、多糖（例えばデキストランまたはキサンタン、後者は食品用途において広く使用されている）等の増粘剤または粘稠化剤が含まれる水溶性テクスチャー付与剤も含むことができる。
【０２０１】
親水性相は、アルコール（エタノール等）またはアセトンから選択された有機液体から部分的または完全になり得る。
【０２０２】
親水性相は単一の液体または複数の液体の混合物を含むことができる。
【０２０３】
当業者は、親水性相の構成を、特に所望される最終的なＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションに従って、容易に適合させることができる。
【０２０４】
いくつかの実施形態において、親水性相は、ＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションの所望される産業上の適用に有用な様々な追加の物質または追加の物質の組み合わせ（医薬活性成分等）を含むことができる。
【０２０５】
いくつかの実施形態において、親水性相は、ＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルション内で続いて重合することができる１つまたは複数の親水性モノマーを含む。
【０２０６】
いくつかの実施形態において、親水性相は、公知のタイプの１つまたは複数の重合可能な親水性モノマーを含む。
【０２０７】
他の実施形態において、親水性相は、本質的に親水性モノマーまたは親水性モノマーの混合物の組成物である。例示として、親水性相は、本質的にアクリレートタイプの親水性モノマーの組成物であり得る。
【０２０８】
親水性相が親水性モノマーまたは親水性モノマーの組み合わせを含むかまたはそれらである実施形態は、多孔質ポリマー材料の製造に特に有用である。
【０２０９】
得るためのプロセス
本発明は、上で説明された組成物を得るためのプロセスも高める。
【０２１０】
親水性相中で気体相を分散させることによるフォームの製造については、例えば、文献：Ｌｕｃａｓｓｅｎ，Ｊ．（１９８１）Ｌｕｃａｓｓｅｎ−Ｒｅｉｊｎｄｅｒｓ，Ｅ．Ｈ．編Ａｎｉｏｎｉｃ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ−Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  Ａｃｔｉｏｎ  ＮＹ，ＵＳＡ：Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、文献：Ａｌａｒｇｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．“Ｆｏａｍ  ｓｕｐｅｒｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｐｏｌｙｍｅｒ  ｍｉｃｒｏｒｏｄｓ”，Ｌａｎｇｍｕｉｒ，ｖｏｌ．２０（２４），２００４，１０３７１−１０３７４、または文献：Ｂｉａｎｃｏ  Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｖｉｓｃｏｅｌａｓｔｉｃｉｔｙ  ｏｆ  Ｍａｇｎｅｔｏ−Ｐｉｃｋｅｒｉｎｇ  Ｆｏａｍｓ”，Ｌａｎｇｍｕｉｒ  ２９，（２０１３），１００１９−１００２７中で記載されるプロトコルを参照することが可能である。
【０２１１】
一般的に、複数の方法で、液体中の気体を分散させることができ、すなわち基本的には、気体を液体中に吹き込んでｉｎ  ｓｉｔｕで製造するか、気体の存在下において液体を撹拌するか、または多孔質材料を介して通過させることによって気体および液体を混合する。
【０２１２】
この場合、微粒子液体親水性フォーム、好ましくは上述のようないわゆる「ドライ」フォームが、有利には得られる。
【０２１３】
本出願によれば、キチンナノ結晶は、溶液に付与する特異的利益（特に興味深いフォーム形成特性）を有する。
【０２１４】
溶液の「フォーム形成性」または「フォーム形成力」とは、それが振盪される場合または泡沫がそこに射出される場合に、フォームを産生する能力の定性的測定である。
【０２１５】
意外にも、本出願人は、エマルションの全体積の５０％より高いまたは７５％より高い高含有量の疎水性分散相を有する水中油タイプのＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥのエマルションを、セルロース以外の多糖のナノ結晶によって安定化されるピッカリングタイプのエマルションから、「連続して」（「２工程」において、とも称される）得ることができることも示した。
【０２１６】
ピッカリングタイプのエマルションは本技術分野において公知であり、油／水の界面に位置するコロイド状懸濁粒子によって安定化されるエマルションである。
【０２１７】
一般的に、ピッカリング・エマルションは従来の界面活性剤を含有していない。いくつかの実施形態において、ピッカリング・エマルションは１つまたは複数の従来の界面活性剤を含有できるが、エマルションの安定化には十分でない。
【０２１８】
セルロース以外の多糖のナノ結晶によって安定化されたピッカリング・エマルション（それは本記述中で開示される水中油タイプのＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションを得るために開始産物として使用される）は、本発明に特異的であり、それらの調製方法は詳細に以下で記述される。
【０２１９】
より具体的には、本出願人は、キチンナノ結晶によって安定化されたピッカリング水中油エマルションが開始組成物として使用される場合、意外にも、上述のタイプのＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションを得ることができることを示した。
【０２２０】
特に、本発明によれば、キチンナノ結晶によって安定化されたピッカリング・エマルション組成物は、次いで疎水性内相の緻密な充填状態（「最密充填」状態とも呼ぶ）を越えること、すなわち７５％より高い内相パーセンテージを得ることを可能にするので、ＨＩＰＥエマルションが得られることが示される。
【０２２１】
他方では、本出願人は、ピッカリングタイプのエマルションを介することを必要とせずに、キチンナノ結晶が、内相を増加させたエマルション組成物を得ることを直接可能にする特異的および予想外の特性（いわゆる「直接的」プロセス）を提示することをさらに示す。
【０２２２】
以下に示されるように、エマルション組成物の事例において、「直接的」経路は、導入されたすべての親水性相を組み込み、一方「連続的な」経路は親水性相を除外する傾向があり、ＭＩＰＥについての内相のパーセンテージを増加させる。内相パーセンテージは７４％の内相を超え、２つのプロセスにおいて同一である。
【０２２３】
本発明に記載のプロセスは、有利には、以下の操作、
ａ）セルロース以外の多糖（有利にはキチン）のナノ結晶を親水性相中に取り込む工程と、
ｂ）（ｉ）多糖ナノ結晶を含有する前記親水性相および（ｉｉ）内相の構成のための相（必要に応じて疎水性液相または気相）を提供する操作と、
ｃ）前記親水性相中に前記内相を分散させることによって前記組成物を形成する操作と
を含む。
【０２２４】
一般的に、本発明に記載のＨＩＰＥエマルションを得るプロセスが、高い含有量の疎水性内相を備えたエマルション組成物（最大９５体積％を超える疎水性内相を有する）の調製を可能にすることが実施例において示された。
【０２２５】
本発明のプロセスに従って調製され、６０％を超える疎水性内相／親水性分散相の体積比を有するＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥのエマルションが、固体ゲルの形であり得ることがさらに示された。
【０２２６】
本発明のプロセスによって調製されたＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルション組成物が、長い期間（この事例において数か月）の間安定的である（約２０℃で保存される場合が含まれる）ことが実施例において示された。
【０２２７】
さらに、本発明のプロセスに従って得られたＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションが、優れた圧縮強度能力を有することが示された。
【０２２８】
さらに、本出願人は、例えば剪断（例えば高度の撹拌）または圧縮（例えば高速の遠心分離）による本発明に記載のＨＩＰＥエマルション破壊が、可逆性であることを示した。したがって、本発明に記載のＨＩＰＥエマルションは破壊後に再びそれ自体を形成する特性を有する。
【０２２９】
共焦点走査顕微鏡検査による本発明のＨＩＰＥエマルションの研究によって、連続的な水相中で分散された油液滴は、疎水性内相／親水性分散相の比が増加することにより、多面体へと順応するまで歪められ、それは連続的な水相によって占められる体積を最小限にすることが観察された。
【０２３０】
例えば、疎水性内相が水よりも揮発性でないか、重合可能か、または凍結乾燥可能でない油からなる場合、ドライエマルションを達成する処理を本発明に記載のＨＩＰＥエマルションに行えること、および結果的に連続水相のみが乾燥または凍結乾燥によって除去されることも示された。
【０２３１】
本発明に記載のＨＩＰＥエマルションを使用して、例えば（ｉ）両方の相が凍結乾燥可能な場合、前記エマルションを凍結乾燥することによって、または（ｉｉ）疎水性分散相が重合可能なモノマーを含む場合、前記モノマーを重合し、次いで連続水相を除去することによってのいずれかで、ドライフォームを作製することができることも示された。
【０２３２】
多糖ナノ結晶の準備
いくつかの多糖（特にキチン）は「非晶性」と呼ばれる１つの部分から成り、一方第２の部分は「結晶性」である。
【０２３３】
多糖ナノ結晶は、有利には、多糖の非晶性部分の除去によって単離結晶性部分から得られる。
【０２３４】
選択された出発物質から、多糖ナノ結晶は、有利には、以下のプロセス、機械的分画、穏やかな化学的加水分解および溶解／再結晶のうちの１つから選択されたプロセスによって調製される。
【０２３５】
「機械的分画」によって、高圧ホモジナイゼーションの従来の操作が意味される。
【０２３６】
「穏やかな化学的加水分解」によって、非晶性部分除去を保証する条件における多糖の酸化学化合物による処理が意味される。
【０２３７】
酸化学化合物は、有利には硫酸または塩酸から選択される。
【０２３８】
実施例において以下に記載されるように、酸タイプ、温度および加水分解時間に依存して、表面電荷を変調することができる。
【０２３９】
「溶解／再結晶」によって、酸性処理もしくは塩基性処理または溶媒処理（例えばリン酸、尿素／ＮａＯＨ、イオン性液体など）に続く再結晶が意味される。かかるプロセスは、例えばＡ．Ｏｓｏｒｉｏ−Ｍａｄｒａｚｏａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  ８３（４），（２０１１），１７３０−１７３９中で記載される。
【０２４０】
組成物中への包含の前に、得られた多糖ナノ結晶を後修飾プロセスへさらすことができ、後修飾が疎水性ナノ結晶のみを生成するのでなければ、その終了時でそれらの表面電荷密度および／またはそれらの親水性は修飾される。
【０２４１】
この後修飾は、特に導入されるエマルションに応じて、ナノ結晶表面特徴を至適化し、その結果その安定化が至適化されることが意図される。
【０２４２】
キチン表面電荷密度を修飾するために、後修飾プロセスは有利には以前に記述される２〜４時間のＮａＯＨ処理である（Ｙ．Ｍ．Ｆａｎ，Ｔ．Ｓａｉｔｏ  ａｎｄ  Ａ．Ｉｓｏｇａｉ，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ，２０１０，７９，１０４６−１０５１）。
【０２４３】
中性多糖類ナノ結晶の疎水性および表面電荷を修飾するために、後修飾プロセスは、有利にはこれらの多糖ナノ結晶中でＮ−アセチルグルコサミン部分を生成することが意図される。
【０２４４】
代わりにおよび好ましくは、得られた多糖ナノ結晶は、表面電荷（以前に生じられたもの等）における変化を示さない。
【０２４５】
指標として、本発明に記載のＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションを得るプロセスの工程ａ）において提供されるキチンナノ結晶は、有利には、製造プロセスによってキチンから得られる。
【０２４６】
水相中に多糖ナノ結晶を取り込む工程は、ピッカリング・エマルション製造の間のコロイド粒子の取り込みのために実施される工程に対応する。
【０２４７】
「連続的な」または「２工程」プロセス
「連続的な」または「２工程における」と呼ばれる実施形態によれば、親水性相中で疎水性相を分散させることによってエマルション組成物を形成するための操作ｃ）は、以下の２つの連続的工程、
ｃ．１）ピッカリングタイプの中間体の水中油エマルションを得るために、少なくとも５／９５の疎水性相／親水性相の体積比で、前記疎水性相中で前記親水性相を分散させる工程、続いて
ｃ．２）必要に応じて、ＭＩＰＥタイプまたはＨＩＰＥタイプの５０％より高い内相のパーセンテージを有する対象となるエマルション組成物を得る工程であって、
ｃ．２．１）ある体積の疎水性相を工程ｃ．１）において得られた中間体エマルション組成物へ添加し、このようにして得られた混合物を撹拌する工程、および／または
ｃ．２．２）少なくとも前記親水性相の一部の除去によって工程ｃ．１）において得られたエマルション組成物を濃縮する工程
を含む工程
から成る。
【０２４８】
多糖ナノ結晶によって安定化されたピッカリングタイプの中間体の水中油エマルションの準備
本発明に記載のＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションを得るために使用されるピッカリング中間体エマルションは、水相中で分散された疎水性相を含み、セルロース以外の多糖のナノ結晶を含む乳化粒子（言いかえれば「エマルション粒子」と呼ばれる）を含有する、エマルション形における組成物である。
【０２４９】
既に規定されているように、ピッカリング・エマルションは「水中油」タイプである。
【０２５０】
使用される疎水性相および親水性相に加えて実施されたナノ結晶は上で生じられた通りである。
【０２５１】
ピッカリング・エマルションは、したがって少なくともセルロース以外の多糖のナノ結晶（有利にはキチンナノ結晶）によって安定化される。
【０２５２】
好ましい実施形態によれば、中間体のピッカリング・エマルション組成物は、別の乳化化合物または安定化化合物を添加せずに、セルロース以外の多糖のナノ結晶（有利にはキチンナノ結晶）のみによって安定化される。
【０２５３】
組成物は、有利には、前記ピッカリング・エマルションの全重量上に基づいて、重量で０．５％のセルロース以外の多糖のナノ結晶（有利にはキチンナノ結晶）を含む。
【０２５４】
上で発展されるように、本発明によれば、実施されたナノ結晶のタイプに依存して、少なくとも５０％の被覆率を得るために十分な量のセルロース以外の多糖のナノ結晶が、本発明に記載の最終的なＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルション組成物を得るために好適なピッカリング・エマルション組成物の調製のために必要とされることが示された。
【０２５５】
工程ｃ．１）において、ピッカリングタイプ水中油エマルションは、有利には少なくとも５／９５、および好ましくは多くとも５０／５０、または多くとも６０／４０の疎水性相／親水性相の体積比を有利には有する。
【０２５６】
「少なくとも５／９５」によって、体積比で５の最小値の疎水性相が意味される。
【０２５７】
「多くとも５０／５０」または「多くとも６０／４０」によって、それぞれ体積比で５０または６０の最大値の疎水性相が意味される。
【０２５８】
この文脈において、疎水性相／親水性相の体積比は、有利には、５／９５、１０／９０、１５／８５、２０／８０、２５／７５、３０／７０、３５／６５、４０／６０、４５／５５、５０／５０、５５／４５または６０／４０から選択される。
【０２５９】
本発明に記載のこのピッカリングタイプ水中油エマルションは、有利には、５０％以下の内相のパーセンテージを有する。
【０２６０】
この文脈において、ピッカリングタイプ水中油エマルションは、有利には、５〜３０％の間の範囲の内相のパーセンテージを含む。
【０２６１】
ピッカリング・エマルション組成物を得るプロセス
ピッカリング中間体エマルション組成物を製造するプロセスは、有利には、以下の工程
（ａ）上で定義されるようなセルロース以外の多糖のナノ結晶（有利にはキチンのナノ結晶）を提供すること、および次いで
（ｂ）前記ピッカリング中間体エマルション中で少なくとも５０％（好ましくは少なくとも８０％）の被覆率を生成することができる質量の量で前記組成物の水相中に前記ナノ結晶を取り込むことおよび前記中間体エマルションを安定化すること
を含む。
【０２６２】
中間体エマルションの製造のために一般的な工程は、ピッカリング・エマルションの製造のために特に使用される従来の手順に従って実行することができる。
【０２６３】
文献：Ｔｚｏｕｍａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｏｉｌ−ｉｎ−ｗａｔｅｒ  ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ  ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ  ｂｙ  ｃｈｉｔｉｎ  ｎａｎｏｃｒｙｓｔａｌ  ｐａｒｔｉｃｌｅｓ”，Ｆｏｏｄ  Ｈｙｄｒｏｃｏｌｌｏｉｄｓ  ２５（２０１１）１５２１−１５２９を、特に参照することができる。
【０２６４】
特に、水相中に多糖ナノ結晶を取り込む工程は、ピッカリング・エマルションの製造の間のコロイド粒子の取り込みのために実施される工程に対応する。
【０２６５】
親水性相（安定化するナノ結晶を含有する）中での疎水性相の分散は、当業者によって公知の任意のエマルション産生技法によって達成することができる。
【０２６６】
したがって、例えば慣習的に実行されるように、超音波によってエマルションを得るための技法を使用することができる。当業者に周知のローター−ステータータイプ（例えばＵｌｔｒａｔｕｒｒａｘ（商標）として公知のローター−ステーター装置）のホモジナイザー分散装置で撹拌することによるエマルションを得るための技法も使用することができる。
【０２６７】
例示として、キチンナノ結晶により安定化されたピッカリング・エマルションは、装置の能力およびエマルションの体積に依存して、数秒〜数分間超音波によるホモジナイゼーション工程を、（ｉ）親水性相／（ｉｉ）疎水性相の混合物（適切な量のキチンナノ結晶を含む前記混合物）に行うことによって得ることができる。
【０２６８】
さらに例示として、キチンナノ結晶により安定化されたピッカリング・エマルションは、１〜３分の期間で少なくとも５０００ｒｐｍ（毎分回転数）の率でＨｅｉｄｏｌｐｈタイプ（Ｒｏｔｈ（登録商標））のローター／ステーター装置によるホモジナイゼーション工程を、（ｉ）親水性相／（ｉｉ）疎水性相の混合物（適切な量のキチンナノ結晶を含む前記混合物）に行うことによって得ることができる。
【０２６９】
ピッカリング中間体エマルションからの中間内相（ＭＩＰＥ）タイプまたは高内相（ＨＩＰＥ）タイプのエマルション組成物の産生
ピッカリング中間体エマルションの安定条件が満たされる（工程ｃ．１））ならば、工程（複数可）を介してプロセスを継続して、ＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションを形成することができる（工程ｃ．２））。
【０２７０】
本発明によれば、ＭＩＰＥ／ＨＩＰＥエマルションは、
ｃ．２．１）ある体積の疎水性相を工程ｃ．１）において得られた中間体エマルション組成物へ添加することによって、および／または
ｃ．２．２）少なくとも前記親水性相の一部の除去によって工程ｃ．１）において得られた中間体エマルション組成物を濃縮することによって
得ることができる。
【０２７１】
ＨＩＰＥエマルションは、７４〜７５％より高い内相のパーセンテージに対応する、「最密充填」（または同じサイズの球体の理論的に最大の密集）の閾値を越える疎水性液滴濃度の達成によって得られる。
【０２７２】
この点に関して、限定されずに、２つの経路
内相小滴が可変的なサイズであること、および
内相小滴が膨潤し、次いでそれらが歪むこと
が可能である。
【０２７３】
以下の実施例は、本発明に記載のピッカリング・エマルションが対象となるＨＩＰＥエマルション（７４〜７５％より高い内相パーセンテージ）を提供することを示す。
【０２７４】
体積の疎水性相の添加
第１の実施形態によれば、疎水性相の添加によってプロセスを継続して、ＭＩＰＥまたはＨＩＰＥエマルションを形成することができる（工程ｃ．２．１））。
【０２７５】
上述のように調製されたピッカリング中間体エマルションから本発明に記載のＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションを得るために、有利には、所望される量の疎水性相を前記エマルションへ添加し、その後ピッカリング・エマルション／添加された疎水性相の混合物を撹拌する。
【０２７６】
この添加された疎水性相は、ピッカリング・エマルションを形成するために含まれる疎水性相と同じ、またはそれとは異なり得る。
【０２７７】
意外にも、本出願人は、ホモジナイザー装置（例えばＵｌｔｒａｔｕｒｒａｘ（商標））によりピッカリング中間体エマルション／添加された疎水性相の混合物を単純に撹拌することによって、ＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションを直接得ることができることを示した。
【０２７８】
実施例において示されるように、本発明に記載のＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションにおいて、疎水性分散相体積／エマルション体積の比の値は（したがって疎水性分散相体積／親水性連続相体積の比の値も）、出発ピッカリング・エマルションへ添加された疎水性相体積に直接依存する。
【０２７９】
実施例においても示されるように、このようにして得られたＨＩＰＥエマルションにおける疎水性分散相／連続水相の体積比の値についての特異的限定は存在しないように思われる。
【０２８０】
本発明に記載のＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションにおいて、疎水性分散相／エマルションの体積比の値は、至適の撹拌条件のために、出発ピッカリング・エマルションへ添加された疎水性相体積に関連して、あらかじめ決定することができる。
【０２８１】
ピッカリング・エマルション／添加された疎水性相の混合物を撹拌する工程は、従来のホモジナイザー／分散装置（例えばＵｌｔｒａｔｕｒｒａｘ（商標）タイプの撹拌装置）により容易に実行することができる。
【０２８２】
例示として、Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘ（商標）タイプの撹拌装置が使用される場合、ＨＩＰＥエマルションは、４ｍＬ容器については少なくとも５０００ｒｐｍ（好ましくは少なくとも５５００ｒｐｍ）の回転速度で少なくとも１５秒間撹拌することによって得ることができる。
【０２８３】
当業者は、本記述中の指示およびエマルション組成物を製造する分野におけるその一般知識に基づいて混合物を撹拌する工程の条件を適合させる。
【０２８４】
混合物を撹拌する工程について、少なくとも１５秒の期間には、少なくとも２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、９０、９５、１００、１１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０秒の期間が含まれる。
【０２８５】
必要に応じて、これは最終的なＨＩＰＥエマルションを得るために有用ではないが、撹拌する工程は２００秒以上続いてもよい。
【０２８６】
撹拌する工程について、少なくとも１０００ｒｐｍの撹拌力には、少なくとも１０５０、１１００、１１５０、１２００、１２５０、１３００、１３５０、１４００、１４５０、１５００、１５５０、１６００、１６５０、１７００、１７５０、１８００、１８５０、１９００、２０００、２１００、２２００、２３００、２４００、２５００、２６００、２７００、２８００、２９００、３０００、３１００、３２００、３３００、３４００、３５００、４０００、４１００、４２００、４３００、４４００、４５００、４６００、４７００、４８００、４９００、５０００、５１００、５２００、５３００、５４００、５５００、５６００、５７００、５８００、５９００、６０００、６１００、６２００、６３００、６４００、６５００、６６００、６７００、６８００、６９００、７０００、７１００、７２００、７３００、７４００、７５００、７６００、７７００、７８００、７９００、８００００、８１００、８２００、８３００、８４００、８５００、８６００、８７００、８８００、８９００、９０００、または少なくとも１００００ｒｐｍの撹拌力が含まれる。
【０２８７】
必要に応じて、これは最終的なＨＩＰＥエマルションを得るために有用ではないが、１５０００ｒｐｍより高い撹拌力を適用することができる。
【０２８８】
好ましくは、上で定義された一般的な撹拌条件において、撹拌力はエマルション構造が変更されることを防止するために２００００ｒｐｍ未満である。撹拌力は、当業者によって、本記述の内容および必要に応じてその一般知識に照らして、容易に適合させることができる。特に、撹拌力は、出発ピッカリング・エマルション粘度、および特に添加される疎水性相の粘度に依存するＨＩＰＥエマルションの調製の間の粘度上昇に基づいて、当業者によって適合させることができる。
【０２８９】
いくつかの実施形態において、Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘ（商標）タイプ装置により撹拌する工程は、２つの相（それぞれ、第１の撹拌力が適用される第１の相および第２の撹拌力が適用される第２の相）において実行することができる。
【０２９０】
例示として、撹拌工程は、例えば第１の撹拌相および第２の撹拌相についておよそ同じ継続時間で、（ｉ）１１０００ｒｐｍの第１の撹拌相および（ｉｉ）１５０００ｒｐｍの第２の撹拌相により実行することができる。
【０２９１】
有利には、ピッカリング・エマルション／添加された疎水性相の混合物の撹拌工程は、室温（すなわち一般的には１５℃〜２５℃および通常１８℃〜２３℃の温度）で実行される。
【０２９２】
エマルション組成物の濃度
第２の実施形態によれば、プロセスはＭＩＰＥまたはＨＩＰＥエマルションを形成するために濃縮工程により継続することができる（工程ｃ２．２））。
【０２９３】
この濃縮工程は、
−クリーム分離／重力沈降、
−遠心分離（例えば２０００ｇ１０分間）、
−濾過（有利には従来の多孔質膜システムまたは連続的な限外濾過）、
−浸透法、
−凍結濃縮法または乾燥（連続相のみが蒸発する条件において）
から例えば選択される適切な技法による親水性連続相の除去をもたらす。
【０２９４】
実施例において示されるように、本発明に記載のＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションにおいて、疎水性分散相体積／エマルション体積の比の値は、特に
−各々の構成要素（親水性相、疎水性相、ナノ結晶）の濃度、
−エマルションを得るプロセス（超音波、ローター−ステーターなど）および、
−使用した条件（速度、時間周期、温度、エネルギー、体積など）、
に依存する。
【０２９５】
これらの技法のパラメーターはサンプルに応じて適合させる。
【０２９６】
かかるプロセスは、例えば以下の文献“Ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ：Ｔｈｅｏｒｙ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ”，Ｐａｕｌ  Ｂｅｃｈｅｒ  Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ  ２００１（ＩＳＢＮ  ０−８４１２−３４９６−５）または“Ｈｉｇｈ  ｉｎｔｅｒｎａｌ  ｐｈａｓｅ  ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ  （ＨＩＰＥｓ）−Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｕｓｅ  ｉｎ  ｐｏｌｙｍｅｒ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ”，Ｃａｍｅｒｏｎ  ＮＲ；Ｓｈｅｒｒｉｎｇｔｏｎ  ＤＣ，ＢＩＯＰＯＬＹＭＥＲＳ  ＬＩＱＵＩＤ  ＣＲＹＳＴＡＬＬＩＮＥ  ＰＯＬＹＭＥＲＳ  ＰＨＡＳＥ  ＥＭＵＬＳＩＯＮ，  ＡＤＶＡＮＣＥＳ  ＩＮ  ＰＯＬＹＭＥＲ  ＳＣＩＥＮＣＥ，Ｖｏｌｕｍｅ：１２６，Ｐａｇｅｓ：１６３−２１４，１９９６中で記載される。
【０２９７】
直接的プロセス
予想外に、本発明者は、適切な割合において疎水性相を親水性相（ナノ結晶を含有する）と直接混合することによって、キチンナノ結晶が高内相エマルションを提供することを観察した。
【０２９８】
親水性相中での疎水性相の分散は当業者に公知の任意のエマルション形成技法によって実行することができる。
【０２９９】
超音波によってエマルションを得るための技法は、したがって例えば慣習的に実行されるように使用することができる。当業者に周知のローター−ステータータイプ（例えばＵｌｔｒａｔｕｒｒａｘ（商標）として公知のローター−ステーター装置）のホモジナイザー分散装置で撹拌することによるエマルションを得るための技法も使用することができる。
【０３００】
例示として、キチンナノ結晶により安定化された本発明に記載のエマルションは、均一なエマルションが得られるまで、８０００ｒｐｍのスピードでＨｅｉｄｏｌｐｈタイプ（Ｒｏｔｈ（登録商標））のローター／ステーター装置によるホモジナイゼーション工程を、（ｉ）親水性相／（ｉｉ）疎水性相の混合物（適切な量のキチンナノ結晶を含む前記混合物）に行うことによって得ることができる。
【０３０１】
本発明に記載の組成物の産業上の適用
本記述中で既に以前に言及され、実施例において例証されるように、本発明に記載のＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションは、例えばＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションを単純に凍結乾燥することによってソリッドフォームまたはソリッドエマルションを調製して、得ることができる。
【０３０２】
ソリッドフォームの調製のために、凍結乾燥によって蒸発させることができる疎水性相が優先的に使用される。したがって、凍結乾燥工程を本発明のＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションに行うことによって、親水性相および疎水性相は両方とも多糖ネットワークから形成されたフォームを得るように蒸発され、多糖ナノ結晶から生じる前記多糖ネットワークは疎水性相／親水性相の界面中で位置する。
【０３０３】
具体的には、実施例は、本発明に記載のＨＩＰＥエマルションを単純に凍結乾燥することによるキチンフォーム材料の製造を例証する。
【０３０４】
特にそして限定されずに、ＭＩＰＥタイプエマルションは球状のセル構造を提供し、ＨＩＰＥタイプエマルションは非球状のセル構造を提供する。
【０３０５】
ソリッドフォームは、断熱材もしくは防音材またはバイオマテリアル支持体としてのものも含まれる様々な産業上の適用における固体支持体として使用することができる。
【０３０６】
生じた産物（すなわち多糖フォーム）は、多糖材料の大きな表面積を有しており、特に活性成分（複数可）のための支持体（例えばヒトまたは動物用の薬学的活性成分（複数可）のための支持体として）として使用することができる。
【０３０７】
例示として、活性成分（複数可）が、ＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションの疎水性相または親水性相中のいずれかに事前に添加される場合、関連する活性成分（複数可）の親水性特徴に依存して、薬学的に対象となるかかる支持体を得ることができる。
【０３０８】
いくつかの実施形態において、前記多糖支持体は、（ｉ）１つまたは複数の疎水性活性成分（複数可）、（ｉｉ）１つまたは複数の親水性活性成分（複数可）の両方、および必要に応じて（ｉｉｉ）１つまたは複数の両親媒性の活性成分（複数可）を含むことができる。
【０３０９】
これらの実施形態において、各々の活性成分は、（ｉ）エマルション組成物の調製のために使用される親水性相または疎水性相のうちのいずれか１つ中に、または（ｉｉ）「連続的」プロセスの事例において、最終的なＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションを得るために使用されるピッカリング・エマルション中に、またはさらに（ｉｉｉ）最終的なＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションを得る「連続的な」プロセスの工程ｃ）中で添加される疎水性相中に添加することができる。
【０３１０】
したがって、本発明の目的は、以下の工程
ａ）本記述中で定義されるようなＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルション、好ましくは本記述中で規定されたプロセスに従って得られるＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションを提供する工程、
ｂ）微粒子ソリッドフォームを得るために蒸発（好ましくは凍結乾燥）によって親水性相および前記ＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションの疎水性相を除去する工程
を含む多糖のソリッドフォームを調製するプロセスを提供することである。
【０３１１】
本発明に記載のＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションは、親水性相の蒸発（例えば凍結乾燥）および疎水性相の維持によってドライエマルションを製造するためにも使用することができる。これらの実施形態において、疎水性相は、１つまたは複数の対象となる物質（複数可）（例えば薬学的に対象となる１つまたは複数の活性成分（複数可））を含有することができる。
【０３１２】
本発明に記載のＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションは、主に、重合可能な親水性モノマーを水相中に添加し、次いで前記親水性モノマーをｉｎ  ｓｉｔｕで重合することによって、多孔質ポリマー材料を製造するためにも使用することができる。
【０３１３】
他の態様において、本発明に記載のＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションは、主に、疎水性モノマーを分散された疎水性相中に添加し、次いで前記モノマーを重合することによって、ポリマー材料ビーズを製造するために使用することができる。
【０３１４】
ポリマー材料は、生理的に活性のある活性成分のための支持体材料または医療用人工器官のための支持体材料が含まれる、医療デバイスの製造のための材料として使用することができる。
【０３１５】
ポリマー材料（多孔質ポリマー材料ブロックまたはポリマー材料ビーズのいずれか）を異なるタイプのエマルションから得る技法は、それ自体は本技術分野において公知である。
【０３１６】
いくつかの実施形態において、対象となる前記モノマーは、本発明に従ってエマルション組成物を得るために使用される親水性連続相または疎水性分散相中に既に存在する。
【０３１７】
「連続的な」プロセスの他の実施形態において、対象となる前記モノマーは、ＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションそれ自体を形成する工程において、出発ピッカリング・エマルションへ添加される疎水性相中に存在する。
【０３１８】
さらに他の実施形態において、対象となる前記モノマーは、続いて既に得られているＭＩＰＥエマルションまたはＨＩＰＥエマルションへ添加される。
【０３１９】
さらに他の実施形態において、対象となるモノマーは、本発明に記載のＭＩＰＥエマルションもしくはＨＩＰＥエマルションを得るプロセス中で、および／または本発明に記載のＭＩＰＥエマルションもしくはＨＩＰＥエマルション組成物を得た後に、異なる工程において連続的に添加することができる。
【０３２０】
いくつかの実施形態において、ポリマー（複数可）は１つまたは複数の架橋薬剤と組み合わせて使用される。
【０３２１】
対象となるポリマー（複数可）を重合するために、１つまたは複数の適切な重合開始化合物が慣習的に添加される。
【０３２２】
例示として、ポリマー材料の製造のためのエマルション（水中油ＨＩＰＥエマルションが含まれる）の使用は、例えばＰＣＴ出願番号ＷＯ２００９／０１３５００または特許ＵＳ６，２１８，４４０およびＵＳ４，４７２，０８６中で記載される。
【０３２３】
本発明はさらに説明されるが、以下の実施例に限定されない。
【実施例１】
【０３２４】
キチンナノ結晶によって安定化された水中油エマルションの調製
Ａ．プロトコル
プロトコル１：キチンナノ結晶の調製
キチンナノ結晶を得るプロセスは、文書“Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｃｈｉｒａｌ  ｎｅｍａｔｉｃ  ｏｒｄｅｒｉｎｇ  ｏｆ  ｃｈｉｔｉｎ  ｃｒｙｓｔａｌｌｉｔｅｓ”，Ｒｅｖｏｌ，Ｊ．−Ｆ．；Ｍａｒｃｈｅｓｓａｕｌｔ，Ｒ．Ｈ．；Ｉｎｔ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，１９９３，１５，３２９−３３５、および“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｃｈｉｒａｌｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｅｍａｔｉｃ  ｐｈａｓｅ  ｉｎ  ｃｈｉｔｉｎ  ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ”Ｂｅｌａｍｉｅ，Ｅ；Ｄａｖｉｄｓｏｎ，Ｐ；Ｇｉｒａｕｄ−Ｇｕｉｌｌｅ，Ｍ．Ｍ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｂ，２００４，１０８（３９），１４９９１−１５０００中で記載される。
【０３２５】
より具体的には、８０ｍＬの３Ｎ  ＨＣｌ中の４ｇのキチンを撹拌下で９０分間煮沸する。
【０３２６】
次いで懸濁物を希釈し、１００００ｒｐｍで２０分間の連続した遠心分離によって超純水により洗浄し、０．０１ｍＭ  ＨＣｌに対して５日間透析する。
【０３２７】
最終的な分散物（キチンナノ結晶からなる）に超音波処理を行い、５μｍ次いで１．２μｍで濾過し、次いで４℃で保存する。
【０３２８】
プロトコル２：透過電子顕微鏡法（ＴＥＭ）
２０μＬのキチンナノ結晶の水性懸濁物（０．００２５％重量／体積）を、電子顕微鏡法のためにカーボングリッド上に沈着させる。
【０３２９】
２分後に、過剰量の溶媒を吸収し、２０μＬの酢酸ウラニル（水中で２％）の添加によってサンプルを標識し、過剰量を２分後に吸収する。
【０３３０】
次いで電子顕微鏡のためにこのグリッドを４０℃でオーブン乾燥する。
【０３３１】
次いでＪＥＯＬブランド（８０ｋＶ）の透過型電子顕微鏡によりグリッドを観察した。
【０３３２】
プロトコル３：キチンナノ結晶によって安定化されたＨ／Ｅエマルションの調製
このＨ／Ｅエマルションは２つの異なるプロトコル（すなわち２工程または単工程）に従って調製することができる。
【０３３３】
ａ）２工程のプロトコル
第１の水中油のピッカリング・エマルションは、０．０１ｍＭ  ＨＣｌおよび２０ｍＭ  ＮａＣｌ中の既知の濃度のキチンナノ結晶を含有する水相の使用によって調製される。
【０３３４】
エマルションは、水相の体積と比較して０．３重量％の濃度でナノ粒子を含有する水相から２０／８０油／水の比を使用することによって調製された（さらなる希釈なしに）。
【０３３５】
チューブ中で、０．２ｍＬのヘキサデカンを０．８ｍＬの水性懸濁物へ添加する。５秒の間に、混合物に１秒の超音波処理および２秒の休止の交互の処理を行う。
【０３３６】
次いで、ＨＩＰＥタイプエマルションは、それぞれ１〜２０ｍＬについて３０秒〜２分の間で、５５００ｒｐｍのローター−ステーターへ選択された体積のヘキサデカンを添加することによって得られる。
【０３３７】
（ｂ）１工程のプロトコル
水相および油相をチューブ中に直接置く。
【０３３８】
次いで、ＨＩＰＥタイプエマルションは、５０００ｒｐｍのローター−ステーターにより３０秒〜２分間混合することによって得られる。
【０３３９】
プロトコル４：光学顕微鏡法および粒子サイズ
約２０μＬのエマルションサンプルを１ｍＬの蒸留水の中へ取り込む。
【０３４０】
産物をボルテックスによって混合し、次いで１つの液滴を顕微鏡により観察されるカバースリップ上に沈着させる。
【０３４１】
直径および液滴サイズの分布は、レーザーＨｅ−Ｎｅ（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、英国）を装備した粒度計Ｍａｌｖｅｒｎ  ２０００による光回折で、Ｍａｌｖｅｒｎ  ＭａｓｔｅｒＳｉｚｅｒ装置を用いて、Ｆｒａｕｎｈｏｆｅｒ等式分析により決定される。
【０３４２】
この事例において、凝集のリスクは、測定の直前に０．１％ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム）および０．０１ｍＭ  ＨＣｌを添加することによって限定される。
【０３４３】
プロトコル５：走査電子顕微鏡法（ＳＥＭ）
走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）による観察のためのエマルションサンプルを調製するために、スチレン／開始剤（ｓｔ：ＡＩＢＮ（アゾビスイソブチロニトリル）１００：１重量／重量の比）の１５０μＬの混合物を事前に１〜２分間超音波へさらし、１．０〜１．５ｍＬの０．３％溶液の２０ｍＭ  ＮａＣｌ中の０．０１ｍＭ  ＨＣｌサンプル溶液と混合する。混合物を１０分間窒素により脱気する。
【０３４４】
エマルションは３０秒間（５秒間隔で２秒の衝撃）の超音波処理によって得た。
【０３４５】
このシステムを窒素により１０分間脱気し、撹拌なしに６時間〜２４時間の間で５０℃で重合を実行する。
【０３４６】
生じた調製物を遠心分離の反復によって０．０１ｍＭ  ＨＣｌでリンスし、次いで観察前に従来の走査電子顕微鏡法技法による金属被覆工程を行う。
【０３４７】
プロトコル６：内相パーセンテージ計算
内相パーセンテージは、エマルションの全体積によって割ったエマルションの油体積に等しい。
【０３４８】
この体積は、例えばサンプリング、計量または公知の直径のチューブ中のエマルション高さを測定することによって得ることができる。
【０３４９】
プロトコル７：脱アセチル／脱アセチル
キチンナノ結晶の脱アセチルプロセスはＦａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  ｐｏｌｙｍｅｒｓ，２０１２，７９，１０４６−１０５１中に記載される。
【０３５０】
より具体的には、２４０ｍＬの４０％ＮａＯＨを０．３ｇのＮａＢＨ４を含有する５０ｍＬの１．２％キチンナノ結晶懸濁物へ添加する。混合物を９０℃で３時間撹拌する。
【０３５１】
遠心分離の反復による３時間の洗浄後に、０．０１ｍＭ  ＨＣｌに対して透析し、５μｍで濾過し、次いで１μｍで実施する。
【０３５２】
プロトコル８：ソリッドフォームの調製
１０ｍＬチューブ中のエマルションを２０００ｇで２〜５分間遠心分離する。
【０３５３】
この工程により、エマルションを濃縮し脱気することが可能になる。
【０３５４】
遠心分離が完了した時に、すべての水相の排出および濃縮されたエマルションのみの回収のために、チューブの底部をチューブカッターを使用して切断する。
【０３５５】
次いでエマルションを−１８℃のフリーザー中に置き凍結乾燥する。
【０３５６】
プロトコル９：ドライフォームの調製
フォーム形成アッセイは、文書Ａｌａｒｇｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．“Ｆｏａｍ  ｓｕｐｅｒｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｐｏｌｙｍｅｒ  ｍｉｃｒｏｒｏｄｓ”，Ｌａｎｇｍｕｉｒ，ｖｏｌ．２０（２４），２００４，１０３７１−１０３７４中に記載されるプロトコルに基づいて実行された。
【０３５７】
このプロセスは、１０ｍＬのメスシリンダー中の２ｍＬの懸濁物の３０秒〜１分間の強い手動式の側面撹拌による通気である。
【０３５８】
形成されたフォームの体積は電子キャリパーによりフォーム厚を測定することによってメスシリンダー中で測定される。全ての測定は同じ実験者によって行なわれた。
【０３５９】
Ｂ．結果
Ｂ．１．ピッカリング・エマルションについての異なるパラメーターの関数としての平均直径の変遷
エマルションの安定性を査定する方法は、小滴直径を測定して合体についてチェックすることである。
【０３６０】
したがって平均直径は粒度分布（プロトコル４）によって測定された。
【０３６１】
（ａ）キチンナノ結晶濃度
得られた結果を以下の表１および図１中で示す。
［表１］
２０ｍＭ  ＮａＣｌおよび０．０１ｍＭ  ＨＣｌ溶液中のキチンナノ結晶の濃度の関数としての平均直径の変遷
0005902870.tif 000008
【０３６２】
これらの結果に基づいて、導入されたキチンナノ結晶数の増加につれて直径の連続的な減少、次いで安定化が起こる。
【０３６３】
キチンナノ結晶濃度についての好ましい値は３ｇ／Ｌであるだろう。
【０３６４】
（ｂ）ｐＨにおける変化
得られた結果を以下の表２および図２中で示す。
［表２］
ＨＣｌ濃度によって調整されたｐＨの関数としての平均直径（μｍ）の変遷（２０ｍＭ  ＮａＣｌ溶液中の３ｇ／Ｌのキチンナノ結晶のエマルションについて）
0005902870.tif 000009
【０３６５】
これらの結果は、キチンナノ結晶からのピッカリング・エマルションの調製に対してｐＨは影響がないことを示す。
【０３６６】
ｐＨの好ましい値は０．０１〜０．１ｍＭのＨＣｌであるだろう。
【０３６７】
（ｃ）塩度における変化
結果を表３中で以下に示す。
［表３］
ＮａＣｌ濃度の変動による塩度（ｍＭ）の関数としての平均直径（μｍ）の変遷（３ｇ／Ｌのキチンナノ結晶のエマルションおよび０．０１ｍＭのＨＣｌ濃度について）
0005902870.tif 000010
【０３６８】
イオン強度の非存在下において、エマルション産生は可能であるが、あまり制御されず、小滴サイズ分布がより多分散性であることが分かる。
【０３６９】
本条件における２ｍＭのＮａＣｌ濃度から、イオン強度の影響はない。
【０３７０】
好ましい値は、表面電荷密度および濃度によれば、２０または５０ｍＭのＮａＣｌであるだろう。
【０３７１】
（ｄ）異なる温度での保存安定性
本標準条件（２０ｍＭ  ＮａＣｌおよび０．０１ｍＭ  ＨＣｌ中の３ｇ／Ｌのキチンナノ結晶）におけるサンプルを異なる温度で１週間保存した。
【０３７２】
得られた結果を以下の表４および図３中で示す。
［表４］
保存温度（℃）の関数としての平均直径（μｍ）の変遷
0005902870.tif 000011
【０３７３】
これらの熱処理後に、エマルションに明らかな変化がなかった。
【０３７４】
２５℃での値は参照値として使用され、合体の非存在はこれらの条件におけるエマルションの安定性を示す。
【０３７５】
Ｂ．２．ドライエマルションとしての適用のための乾燥に対する安定性
５０ｍＭ  ＮａＣｌおよび０．０１ｍＭ  ＨＣｌ中の５ｇ／Ｌのキチンナノ結晶のエマルションサンプルを、５０℃で８時間、次いで２５℃で５日間（均一に乾燥するのに必要とされる時間）プラグを抜いたチューブ中で維持した。
【０３７６】
次いでそれを０．０１ｍＭ  ＨＣｌ中で再び分散し、粒度計上で通過させた。
【０３７７】
得られた結果を以下の表５および添付図４中で示す。
［表５］
乾燥前後の平均直径（μｍ）の変遷
0005902870.tif 000012
【０３７８】
液滴直径は同一であり、ドライエマルションを形成する能力を示す。
【０３７９】
Ｂ．３．２つのプロトコル（「直接的」および「２工程」）によって生産されたＨＩＰＥについての異なるパラメーターの関数としての内相のパーセンテージの変遷
エマルションは上述のプロトコルに従って調製され、２４時間の待ち時間後に体積を測定して内相のパーセンテージを計算する（プロトコル６）。
【０３８０】
最終的に、チューブを傾けるかまたは倒立させて、以下のテクスチャーの指標を得る。Ｓ：固体、Ｐ：注ぐことが可能、Ｌ：液体。
【０３８１】
得られた結果を以下の表６〜９中に示す。
［表６］
本参照条件における変遷：２０ｍＭ  ＮａＣｌおよび０．０１ｍＭ  ＨＣｌ水相中の３ｇ／Ｌのキチンナノ結晶
0005902870.tif 000013
［表７］
より高い酸性度でのｐＨの関数としての変遷：２０ｍＭ  ＮａＣｌおよび０．０１ｍＭ  ＨＣｌ水相中の３ｇ／Ｌのキチンナノ結晶
0005902870.tif 000014
［表８］
塩度の関数（ＮａＣｌの非存在下における）としての変遷：０．０１ｍＭ  ＨＣｌ水相中の３ｇ／Ｌのキチンナノ結晶
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［表９］
塩度の関数（ＮａＣｌの高濃度）としての変遷：１００ｍＭ  ＮａＣｌおよび０．０１ｍＭ  ＨＣｌを含む水相中の３ｇ／Ｌのキチンナノ結晶
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【０３８２】
塩の非存在下において第１の安定的でなく構造化されないエマルション点（流動ゲル／固体ゲル）について、差異が観察される場合、約７４％の内相を超える、すべてのエマルションは、試験された方法およびパラメーターにかかわらず、等しいパーセンテージの内相を有する。
【０３８３】
ほとんどの場合、固体ゲルが得られる。
【０３８４】
塩の非存在のみが構造化されないエマルションを生じるが、ＨＩＰＥを形成することは常に可能である。高塩度で、ゲルは高度に構造化されており、実施はより困難である。
【０３８５】
「直接的」経路は、導入された水をすべて取り込み、一方「２工程の」経路は水を除外し、したがってＭＩＰＥについての内相のパーセンテージを増加させる傾向がある。
【０３８６】
内相の約７４％を超えて、内相のパーセンテージは２つのプロセスについて同じである。
【０３８７】
しかしながら、テクスチャーにおける注目に値する差異は２つの方法の間で言及される。したがってゲル構造化は調製様式に従って異なるように思われる。
【０３８８】
より構造化されたゲル（固体ゲル）およびより高パーセンテージの内相が所望されれば、２工程経路の使用が好ましい。
【０３８９】
さらに、結果（図示されない）から、プロトコル７に従う１および２時間の脱アセチル後に、キチンナノ結晶からＭＩＰＥおよびＨＩＰＥを調製することが可能であることが強調される。
【０３９０】
Ｂ．４．ピッカリング・エマルションまたはＭＩＰＥからのソリッドフォームの調製
キチンナノ結晶およびシクロヘキサンに基づいて調製されたエマルションは凍結され、次いで凍結乾燥された（プロトコル８）。
【０３９１】
このプロトコルはセルフォームを提供し、そのセルサイズはピッカリング・エマルションへ添加される内相体積（シクロヘキサン）に基づいて制御可能である。
【０３９２】
ＳＥＭイメージはこれらのセル構造を示す。これは界面でのキチンナノ結晶の高い安定性を例証し、それは非常に高い多孔率および非常に薄い壁（すなわち１０〜５０ナノメートルの範囲で）の構造を維持することを可能にする。
【０３９３】
界面での不可逆的吸着およびエマルションの高い安定性によって凍結に際して構造を維持することができるので、これらの結果はピッカリング・エマルションの特性に関する。
【０３９４】
２工程経路（図示されない結果）について、フォームの構造は類似する。
【０３９５】
Ｂ．５．多糖ナノ結晶の組み合わせ
ナノ結晶キチン／セルロースの混合エマルションは「２工程」における上述のプロトコル３（ａ）に従って調製され、その結果、２０ｍＭ  ＮａＣｌおよび０．０１ｍＭ  ＨＣｌを含有する水相中の１．５ｇ／Ｌのキチンナノ結晶および１．５ｇ／Ｌのセルロースナノ結晶の組み合わせを得た。
【０３９６】
待ち時間後に、体積を測定して内相のパーセンテージを計算する（プロトコル６）。
【０３９７】
最終的に、チューブを傾けるかまたは倒立させて、以下のテクスチャーの指標を得る。Ｓ：固体、Ｐ：注ぐことが可能、Ｌ：液体。
【０３９８】
得られた結果を以下の表１０および添付図５中で示す。
［表１０］
キチン／セルロースの混合した懸濁物についての内相のパーセンテージの変遷
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【０３９９】
特性は変わらないままであり、界面の性質のみが修飾される。
【０４００】
５０％キチンナノ結晶および５０％セルロースナノ結晶を含む懸濁物は、テクスチャーおよび内相のパーセンテージにおいて、１００％のキチンナノ結晶を含む懸濁物に等しいＭＩＰＥおよびＨＩＰＥにもたらすが、その表面電荷は正および負の両方であり、それはいくつかの適用について興味を持たれる。
【０４０１】
Ｂ．６．安定的ドライフォームの形成
ドライフォーム形成アッセイは上述のプロトコル９に従って実施された。
【０４０２】
以下の異なるパラメーター
−２ｇ／Ｌ〜１３ｇ／Ｌのキチンナノ結晶濃度、
−０〜５  ｍＭのＮａＣｌの間のイオン強度、
−０．０１ｍＭ  ＨＣＬ（ｐＨ５）、０．１ｍＭ  ＨＣｌ（ｐＨ４）および１ｍＭ  ＨＣｌ（ｐＨ３）のｐＨ
が調べられた。
【０４０３】
キチン濃度
得られた結果を、全エマルション体積と比較したフォーム体積分率として、表１１中で以下に示す。
［表１１］
キチンナノ結晶濃度に従うフォーム分率および経時的な安定性の比較（０．０１ｍＭ  ＨＣｌ、２ｍＭ  ＮａＣｌ）
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【０４０４】
フォーム形成は６ｇ／Ｌのキチンナノ結晶濃度から実際に観察される。６ｇ／Ｌ未満の濃度について、フォームは非常に弱く不安定である。
【０４０５】
イオン強度およびｐＨ
結果を表１２中で以下に示す。
［表１２］
１３ｇ／Ｌのキチンナノ結晶およびＴ＝２０分で、イオン強度およびｐＨ条件に従う、パーセンテージでのフォーム体積分率の変遷の比較
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【０４０６】
測定されたフォーム体積の変遷によって示されるように、イオン強度の非存在（０ｍＭ  ＮａＣｌ）は、４より低いｐＨについてはフォーム形成を可能にしない。同様に、１０ｍＭを超えるイオン強度の増加はｐＨにかかわらずフォーム不安定化の傾向がある。
【０４０７】
さらに、３〜５へのｐＨの増加はフォーム安定化を促進する。
【０４０８】
ｐＨ５のもとのフォームは、ｐＨ２（２０μＬの１Ｍ  ＨＣｌの添加による）で消滅し、冠のみが残存することも観察された。ｐＨ５（２０μＬの１Ｍ  ＮａＯＨの添加による）へ戻る場合、フォームは改善される。
【０４０９】
これらの結果はｐＨに応じてフォームが可逆的である性質を示す。
【０４１０】
経時的なフォーム安定性の調査
２ｇ／Ｌ〜１３ｇ／Ｌのキチン溶液（０．０１ｍＭ  ＨＣｌおよび５ｍＭ  ＮａＣｌ）は、前述のプロトコル９に従って水平撹拌へさらされる。
【０４１１】
得られた結果を上述の表１１中で示す。
【０４１２】
経時的に非常に良好な安定性が観察される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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