(57)【要約】  本発明は、アミド基等の有無に関わらず、顕著な血液成分吸着能、特に炎症性サイトカイン吸着能を有し、かつ、高い耐溶媒性及び耐熱性を備えた吸着用担体を提供すること、並びに、一工程で担体の表面に所望の官能基を導入し、芳香環同士を架橋できる、吸着用担体の製造方法を提供することを目的としている。本発明は、芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する１種類以上の高分子化合物からなり、上記芳香環同士は、下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合されている吸着用担体を提供する。2013022012.tif 000017［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
2013022012.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する１種類以上の高分子化合物からなり、前記芳香環同士は、下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合されている、吸着用担体。
【化１】
2013022012.tif 000014
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
【請求項２】
体積比で１００倍量の良溶媒に２５℃で２０時間浸漬した場合に、浸漬前と比べて質量変化が１０％未満である、請求項１記載の吸着用担体。
【請求項３】
前記有機基は、アミノ基、カルボキシル基及びスルホニル基からなる群から選ばれる置換基を有する、請求項１又は２記載の吸着用担体。
【請求項４】
前記Ｒ１は、水素である、請求項１〜３のいずれか一項記載の吸着用担体。
【請求項５】
前記高分子化合物は、２以上のベンゼン環を有する、請求項１〜４のいずれか一項記載の吸着用担体。
【請求項６】
前記高分子化合物は、ポリスチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン及びポリカーボネートからなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項記載の吸着用担体。
【請求項７】
炎症性サイトカイン吸着用である、請求項１〜６のいずれか一項記載の吸着用担体。
【請求項８】
芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する１種類以上の高分子化合物と、下記一般式（ＩＩ）で示される化合物と、酸触媒とを反応させて、前記芳香環同士が下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合された吸着用担体を得る架橋工程を備える、吸着用担体の製造方法。
【化２】
2013022012.tif 000015
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
【化３】
2013022012.tif 000016
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
【請求項９】
前記有機基は、アミノ基、カルボキシル基及びスルホニル基からなる群から選択され、
前記Ｒ１は、水素であり、
前記芳香環は、ベンゼン環であり、
前記高分子化合物は、ポリスチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン及びポリカーボネートからなる群から選択される、
請求項８記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、吸着用担体及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症性サイトカインは、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、クローン病等の炎症性疾患の病因に深く関与している。このため、これら炎症性疾患の治療方法としては、低分子医薬品や抗体等の生物製剤を生体内に投与して、炎症性サイトカインを不活化することが試みられてきた。一方で、このような薬物療法における費用の高額化や予期せぬ免疫反応の誘起等の問題点を解消すべく、近年では、炎症性サイトカインと親和性を有する材料を充填したカラムを用いた、血液体外循環療法も開発がなされてきている。【０００３】
炎症性サイトカインと親和性を有する材料としては、ポリアミン等由来のアミノ基を含む官能基を、水不溶性の担体の表面に固定化した吸着用担体が知られている（特許文献１及び２）。また、これら担体の形状を一定範囲の繊維径を有する繊維にすることによって、炎症性サイトカインに加えて活性化した白血球を血中から吸着除去することを可能とした、多機能の吸着用担体も知られている（特許文献３）。【０００４】
このような従来の炎症性サイトカイン吸着用担体では、まず、ポリスチレンとＮ−メチロール−α−クロロアセトアミドを反応させて反応性官能基を導入し、次にポリアミンを反応性官能基に共有結合で固定するといったように、多段の工程を経ることで所望の官能基が水不溶性の担体の表面に構築される。ここで水不溶性の担体の表面に固定化された官能基は、尿素結合、チオ尿素結合及びアミド基等の、水素結合可能な官能基を含むことが好適とされている。また、得られる担体に耐溶媒性及び耐熱性を付与することを目的として、パラホルムアルデヒドを用いた、ポリスチレン由来のベンゼン環同士の架橋が施されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許第４５９１９７４号公報
【特許文献２】特開２００６−２７２０７５号公報
【特許文献３】特開２００６−３１２８０４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、尿素結合、チオ尿素結合及びアミド基等は高温条件で加水分解される可能性があることから、これら官能基の寄与による高い吸着能の確保と、担体の耐熱性の確保とを両立させることは、困難であった。また、ベンゼン環同士の架橋によれば耐熱性の問題は緩和されるものの、架橋反応を反応性官能基導入と同時に行えば両反応が競合して、反応性官能基導入の阻害による吸着能の低下が生じかねず、さらに予期せぬ副産物が生じる危険性も指摘されていた。反応競合を回避するために、架橋反応を別工程とすることも考えられるが、さらに工程数が増えて多種多量の試薬が必要となることから、有効な解決策にはならないのが現状であった。【０００７】
そこで本発明は、アミド基等の有無に関わらず、顕著な血液成分吸着能、特に炎症性サイトカイン吸着能を有し、かつ、高い耐溶媒性及び耐熱性を備えた吸着用担体を提供することを目的とする。また本発明は、一工程で、担体の表面に所望の官能基を導入し、芳香環同士を架橋できる、吸着用担体の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、本発明者らは、所望の官能基を有するアルデヒド又はケトンを用いることによって、血液成分、特に炎症性サイトカインを高効率に吸着除去することが可能であり、かつ、高い耐溶媒性及び耐熱性を有する吸着用担体の製造が達成されることを見出し、本発明を完成するに至った。【０００９】
すなわち、本発明は、以下の（１）〜（９）に記載した吸着用担体及びその製造方法を提供する。
（１）  芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する１種類以上の高分子化合物からなり、前記芳香環同士は、下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合されている、吸着用担体。
【化１】
2013022012.tif 000003
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
（２）  体積比で１００倍量の良溶媒に２５℃で２０時間浸漬した場合に、浸漬前と比べて質量変化が１０％未満である、上記（１）に記載の吸着用担体。
（３）  上記有機基は、アミノ基、カルボキシル基及びスルホニル基からなる群から選ばれる置換基を有する、上記（１）又は（２）に記載の吸着用担体。
（４）  上記Ｒ１は、水素である、上記請求項１〜３のいずれか一項記載の吸着用担体。
（５）  上記高分子化合物は、２以上のベンゼン環を有する、上記（１）〜（４）のいずれかに記載の吸着用担体。
（６）  上記高分子化合物は、ポリスチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン及びポリカーボネートからなる群から選択される、上記（１）〜（５）のいずれかに記載の吸着用担体。
（７）  炎症性サイトカイン吸着用である、上記（１）〜（６）のいずれかに記載の吸着用担体。
（８）  芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する１種類以上の高分子化合物と、下記一般式（ＩＩ）で示される化合物と、酸触媒とを反応させて、上記芳香環同士が下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合された吸着用担体を得る架橋工程を備える、吸着用担体の製造方法。
【化２】
2013022012.tif 000004
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
【化３】
2013022012.tif 000005
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
（９）上記有機基は、アミノ基、カルボキシル基及びスルホニル基からなる群から選択され、上記Ｒ１は、水素であり、上記芳香環は、ベンゼン環であり、上記高分子化合物は、ポリスチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン及びポリカーボネートからなる群から選択される、上記（８）に記載の製造方法。【００１０】
また本発明は、以下の（１０）〜（１７）に記載した炎症性サイトカイン吸着用担体及びその製造方法を提供する。
（１０）  ２以上のベンゼン環を有する高分子化合物からなり、上記ベンゼン環同士は、下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合されている、炎症性サイトカイン吸着用担体。
【化４】
2013022012.tif 000006
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
（１１）  上記有機基は、アミノ基、カルボキシル基及びスルホニル基からなる群から選ばれる置換基を有する、上記（１０）に記載の担体。
（１２）  上記Ｒ１は、水素である、上記（１０）又は（１１）に記載の担体。
（１３）  上記高分子化合物は、ポリスチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン及びポリカーボネートからなる群から選ばれる高分子化合物である、上記（１２）〜（１３）のいずれかに記載の担体。
（１４）  ２以上のベンゼン環を有する高分子化合物と、下記一般式（ＩＩ）で示される化合物と、酸触媒とを反応させて、上記ベンゼン環同士が下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合された炎症性サイトカイン吸着用担体を得る架橋工程を備える、炎症性サイトカイン吸着用担体の製造方法。
【化５】
2013022012.tif 000007
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
【化６】
2013022012.tif 000008
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
（１５）  上記有機基は、アミノ基、カルボキシル基及びスルホニル基からなる群から選ばれる置換基を有する、上記（１４）に記載の製造方法。
（１６）  上記Ｒ１は、水素である、上記（１４）又は（１５）に記載の製造方法。
（１７）  上記高分子化合物は、ポリスチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン及びポリカーボネートからなる群から選ばれる高分子化合物である、上記（１４）〜（１６）のいずれかに記載の製造方法。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の吸着用担体は、アミド基等の有無に関わらず、高い耐熱性を備え、顕著な血液成分吸着能、特に炎症性サイトカイン吸着能を発揮できる。また本発明の製造方法によれば、多工程を経ることによる多種多量の試薬の必要性若しくは担体の劣化又は反応競合による反応制御の困難性といった、多くの問題点の解消が可能となる。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明の吸着用担体は、芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する１種類以上の高分子化合物からなり、上記芳香環同士は、下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合されていることを特徴としている。
【化７】
2013022012.tif 000009
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
【００１３】
「芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する高分子化合物」とは、高分子化合物の繰り返し構造の一部に芳香環が含まれる高分子化合物をいい、その中で芳香環をベンゼン環に限定した「２以上のベンゼン環を有する高分子化合物」とは、高分子化合物の繰り返し構造の一部にベンゼン骨格が含まれる高分子化合物をいい、単独重合体又は共重合体のいずれであっても構わない。「芳香環」は、特に指定はしないが、例えば、ベンゼン系芳香環であるベンゼン、ナフタレン、アントラセン；複素芳香環であるフラン、チオフェン、ピロール；非ベンゼン系芳香環であるアズレン、シクロペンタジエンなどが挙げられる。「芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する高分子化合物」及び「２以上のベンゼン環を有する高分子化合物」としては、例えば、ポリスチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリエーテルケトン、ポリカーボネート、ポリエチレンテレフタレート、あるいはこれら高分子化合物同士若しくはこれら高分子化合物と他の高分子化合物とのブロック共重合体、混合物又はポリマーアロイが挙げられるが、血液体外循環療法で使用実績のあるポリスチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン又はポリカーボネートが好ましい。
【００１４】
「芳香環同士は、下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合されている」とは、高分子化合物が有する一の芳香環と、高分子化合物が有する他の芳香環とが、上記一般式（Ｉ）で示される構造を介して、共有結合によって化学的に連結されている状態、すなわち、高分子化合物が有する一の芳香環と、高分子化合物が有する他の芳香環とが、上記一般式（Ｉ）で示される構造によって架橋されている状態をいう。
【００１５】
同様に、「ベンゼン環同士は、下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合されている」とは、高分子化合物が有する一のベンゼン環と、高分子化合物が有する他のベンゼン環とが、上記一般式（Ｉ）で示される構造を介して、共有結合によって化学的に連結されている状態、すなわち、高分子化合物が有する一のベンゼン環と、高分子化合物が有する他のベンゼン環とが、上記一般式（Ｉ）で示される構造によって架橋されている状態をいう。
【００１６】
なお、高分子化合物が有する全ての芳香環、ベンゼン環が上記のように架橋されている必要はなく、一部の芳香環、ベンゼン環のみが上記のように架橋されている状態であっても構わない。
【００１７】
「有機基」とは、炭素、水素、酸素、窒素、硫黄及びハロゲンからなる群から選ばれる元素から成り立つ、ひとまとまりの原子団をいい、例えば、アルキル基、フェニル基、ヒドロキシル基、メルカプト基、アミノ基、カルボキシル基、アルデヒド基又はスルホニル基を有する原子団が挙げられるが、静電相互作用による血液成分吸着能、特に炎症性サイトカイン吸着能を発揮するためには、アミノ基、カルボキシル基又はスルホニル基からなる群から選ばれる置換基を有することが好ましい。
【００１８】
「吸着用担体」とは、タンパク質や糖鎖、脂質などの生理活性物質を液体中吸着除去可能な材料をいい、「吸着」とは、タンパク質や糖鎖、脂質などの生理活性物質が吸着用担体に付着し、容易に剥離しない状態をいう。
【００１９】
「血液成分吸着用担体」とは、血液中から血液成分を吸着除去可能な材料をいう。
【００２０】
「血液成分」とは、血液を構成する成分のことをいい、例えば、赤血球、白血球若しくは血小板等の血球成分又は炎症性サイトカイン等の液性因子が挙げられるが、炎症性疾患の治療を目的とする場合には、炎症性サイトカインが吸着除去されることが好ましい。
【００２１】
「炎症性サイトカイン吸着用担体」とは、血液中から炎症性サイトカインを吸着除去可能な材料をいう。
【００２２】
炎症性サイトカインとは、特定の細胞に情報を伝達する、細胞から分泌されるタンパク質をいい、例えば、インターロイキン、腫瘍壊死因子−α、トランスフォーミング・グロウス・ファクター・ベータ、インターフェロン−γ、血管新生増殖因子又は免疫抑制酸性蛋白が挙げられる。
【００２３】
インターロイキンとは、白血球が分泌し、免疫系の調節に機能するサイトカインのことをいい、例えば、インターロイキン−１、インターロイキン−６（以下、ＩＬ−６）、インターロイキン−８（以下、ＩＬ−８）、インターロイキン−１０又はインターロイキン−１７が挙げられる。
【００２４】
架橋の有無は、良溶媒への溶解性で確認する。「芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する高分子化合物」に対する良溶媒を用いて、良溶媒の温度が２５℃かつ、上記の吸着用担体と良溶媒の体積比が１：１００の割合で２０時間浸漬した際に、吸着用担体の浸漬前後の重量変化が１０％未満であれば、十分な架橋構造を有しているとする。
すなわち、上記吸着担体は、体積比で１００倍量の良溶媒に２５℃で２０時間浸漬した場合に、浸漬前と比べて質量変化が１０％未満であることが好ましい。
【００２５】
ここで「良溶媒」とは、溶媒の温度を２５℃として、架橋前の「芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する高分子化合物」と溶媒の体積比が１：１００の割合で２０時間浸漬した際に、架橋前の「芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する高分子化合物」の浸漬前後の重量変化が１０％以上となる溶媒のことを指す。この良溶媒は「芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する高分子化合物」の種類によって異なっており、例えば、「芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する高分子化合物」がポリスチレンであれば、「良溶媒」は、クロロホルム、アセトン、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、ベンゼン、トルエン、ニトロベンゼンなどが上げられる。また、「芳香環を含む２つ以上の繰り返し単位を有する高分子化合物」がポリスルホンであれば、クロロホルム、アセトン、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、N-メチルピロリドンなどが上げられる。「芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する高分子化合物」がポリエーテルスルホンであれば、クロロホルム、アセトン、ジメチルホルムアルデヒド、ジメチルスルホキシドなどが上げられる。  
【００２６】
本発明の吸着用担体の製造方法は、芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する１種類以上の高分子化合物と、下記一般式（ＩＩ）で示される化合物と、酸触媒とを反応させて、上記芳香環同士が下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合された吸着用担体を得る、架橋工程を備えることを特徴とする。
【化８】
2013022012.tif 000010
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
【化９】
2013022012.tif 000011
［Ｒ１は水素又は有機基を表し、Ｒ２は有機基を表す。］
【００２７】
「芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する高分子化合物」及び「２以上のベンゼン環を有する高分子化合物」とは、上記定義と同じであり、やはりポリスチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン又はポリカーボネートが好ましい。
【００２８】
上記一般式（ＩＩ）で示される化合物は、Ｒ１が水素であればアルデヒド基を、Ｒ１が有機基であればケトン基を有することとなる。
【００２９】
「酸触媒」とは、ルイス酸をいうが、反応後の処理の容易化のためには液体のルイス酸が好ましく、非プロトン性溶媒に溶解するルイス酸がより好ましく、硫酸がさらに好ましい。ここで非プロトン性溶媒としては、例えば、ジメチルスルホオキシド（以下、ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、アセトン、酢酸エチル、ニトロベンゼン又はＮ−メチル−２−ピロリドンが挙げられる。上記の架橋工程における酸触媒の使用量は、少なすぎれば反応効率が低下する一方で、多すぎても相対的な溶媒量が減り、やはり反応効率が低下するため、溶媒量に対して５〜９０重量％（以下、ｗｔ％）が好ましく、１０〜８０ｗｔ％がより好ましい。下限値の好ましい値は５ｗｔ％であり、より好ましくは１０ｗｔ％である。上限値の好ましい値は９０ｗｔ％であり、より好ましくは８０ｗｔ％である。いずれの好ましい下限値もいずれの好ましい上限値と組み合わせることができる。
【００３０】
「芳香環同士が下記一般式（Ｉ）で示される構造を介して共有結合された担体」とは、高分子化合物が有する一の芳香環と、高分子化合物が有する他の芳香環とが、上記一般式（Ｉ）で示される構造によって架橋されている高分子化合物からなる担体をいう。
【００３１】
「有機基」とは、上記定義と同じであり、やはりアミノ基、カルボキシル基又はスルホニル基からなる群から選ばれる置換基を有することが好ましい。
【００３２】
架橋工程における、芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する高分子化合物又は２以上のベンゼン環を有する高分子化合物と、上記一般式（ＩＩ）で示される化合物及び酸触媒の反応機構については、以下のように推測される。まず、酸触媒により上記一般式（ＩＩ）で示される化合物のカルボニル酸素がプロトン化されてカルボカチオンが生成し、高分子化合物が有する一の芳香環の水素との置換反応によって１つ目の共有結合が生成する。さらに、酸触媒によりヒドロキシル基がプロトン化されて水分子が脱離し、再びカルボカチオンが生成し、高分子化合物が有する他の芳香環の水素と置換の反応によって２つ目の共有結合が生成する。
【００３３】
上記一般式（ＩＩ）で示される化合物に効率よくプロトンを供与するため、架橋工程に用いる溶媒は、非プロトン性極性溶媒が好ましい。一方で、上記一般式（ＩＩ）で示される化合物が非プロトン性極性溶媒に対し溶解しない場合には、プロトン性極性溶媒と非プロトン性極性溶媒との混合溶媒を用いても構わない。ここでプロトン性溶媒としては、例えば、メタノール若しくはエタノール等のアルコール又は酢酸が挙げられるが、安価であることからメタノールが好ましい。
【００３４】
非プロトン性溶媒とプロトン性溶媒との混合溶媒を用いる場合における非プロトン性極性溶媒の体積比は、５０ｖｏＬ％以上が好ましく、６０ｖｏＬ％以上がより好ましい。
【００３５】
架橋工程における反応温度は、用いる溶媒と触媒との混合溶液の凝固点以上の温度であれば特に限定されないが、４０℃以上が好ましく、６０℃以上がより好ましい。
【００３６】
架橋工程に供給される「芳香環を含む繰り返し単位を２以上有する高分子化合物」又は「２以上のベンゼン環を有する高分子化合物」について、その形状は特に限定されないが、例えば、血液中から炎症性サイトカインのみならず、その供給源である活性化した白血球を除去しようとするのであれば、繊維又は粒子形状とすることが考えられる。
【００３７】
本発明の吸着用担体に、さらに活性化した白血球の吸着能を付与しようとする場合には、「繊維の繊維径」及び「粒子の粒子径」は、白血球の貪食能を発揮させるために「０．５〜２０μｍである」必要がある。ここで、貪食能をより安定して発揮させるためには、「繊維の繊維径」及び「粒子の粒子径」は４〜２０μｍであることが好ましく、４〜１０μｍであることがより好ましい。ここで白血球の貪食能とは、顆粒球及び単球がヒトなどの体内に侵入した微生物や細菌等を捕らえ、これを食べようとする性質をいう。
【００３８】
「繊維の繊維径」とは、繊維の小片サンプル１０個をランダムに採取して、走査型電子顕微鏡を用いて２０００倍の写真をそれぞれ撮影し、各写真あたり１０箇所（計１００箇所）の繊維の直径を測定した値の平均値をいう。同様に、「粒子の粒子径」とは、粒子の小片サンプル１０個をランダムに採取して、走査型電子顕微鏡を用いて２０００倍の写真をそれぞれ撮影し、各写真あたり１０箇所（計１００箇所）の粒子の直径を測定した値の平均値をいう。
【００３９】
上記繊維の繊維径が１０μｍ未満である場合、炎症性サイトカイン吸着用担体の強度を確保する観点からより太径の繊維を混合してもよいが、このような太径の繊維の繊維径は、１０〜５０μｍが好ましい。
【００４０】
繊維からなる担体の形状としては、例えば、織布、不織布、綿布又は中空糸が挙げられるが、形状が不織布の場合には、その形状保持のためにポリプロピレンなどの骨格材繊維を入れることも好ましい。
【００４１】
上記の吸着用担体を充填するカラムの容器形状としては、血液の入口と出口を有する容器であればよいが、例えば、円柱状、三角柱状、四角柱状、六角柱状、八角柱状等の角柱状容器が挙げられ、吸着用担体を積層状に充填できる容器、吸着用担体を円筒状に巻いたものを充填できる容器又は血液が円筒の外周より入り内側へと流れて容器外に出る容器が好ましい。
【００４２】
なお、上記の吸着用担体は、血液中から血液成分、特に炎症性サイトカインを効果的に吸着除去でき、血液成分吸着用担体又は炎症性サイトカイン吸着用担体として医療分野で利用できる。また、上記の吸着用担体の製造方法は、血液成分吸着用担体の製造方法又は炎症性サイトカイン吸着用担体の製造方法として好適に利用できる。
【実施例】
【００４３】
以下、本発明の吸着用担体及び吸着用担体を充填したカラムについて、実験例により具体的に説明する。【００４４】
（ＰＰ製不織布の作製）
３６島の海島複合繊維であって、島がさらに芯鞘複合によりなるものを次の成分を用いて、紡糸速度８００ｍ／分、延伸倍率３倍の製糸条件で得た。
島の芯成分            ：  ポリプロピレン
島の鞘成分            ：  ポリスチレン９０ｗｔ％、
ポリプロピレン１０ｗｔ％
海成分                ：  エチレンテレフタレート単位を主たる
繰り返し単位とし、共重合成分として
５−ナトリウムスルホイソフタル酸を
３ｗｔ％含む共重合ポリエステル
複合比率（重量比率）    ：  芯：鞘：海  ＝  ４５：４０：１５
【００４５】
この繊維８５ｗｔ％と直径２０μｍのポリプロピレン繊維１５ｗｔ％とからなる不織布を作製した後、この不織布２枚の間にシート状のポリプロピレン製ネット（厚み０．５ｍｍ、単糸径０．３ｍｍ、開口部２ｍｍ角）を挟み、ニードルパンチすることによって３層構造の不織布（以下、ＰＰ製不織布）を得た。【００４６】
（ＰＳｔ＋ＰＰ製不織布の作製）
ＰＰ製不織布を９５℃、３ｗｔ％の水酸化ナトリウム水溶液で処理し、海成分を溶解することによって、芯鞘繊維の直径が５μｍで、嵩密度が０．０２ｇ／ｃｍ３の不織布（ＰＳｔ＋ＰＰ製不織布、以下、不織布Ａ）を作製した。【００４７】
（４−ジメチルアミノベンズアルデヒドを用いた不織布の作製）
ニトロベンゼン４８．３ｗｔ％、硫酸４８．３ｗｔ％、４−ジメチルアミノベンズアルデヒド３．４ｗｔ％を５０℃で混合、撹拌、溶解し、反応液を４０ｍＬ調製した。この反応液に１ｇの不織布Ａを浸漬し、反応液を５０℃に保ったまま１．５時間反応させた。その後、反応液から不織布を取り出し、４０ｍＬのニトロベンゼンに浸漬し洗浄した。続いて不織布を取り出し、メタノールに浸漬し洗浄を行い、さらに水に浸漬して洗浄を行い、４−ジメチルアミノベンズアルデヒドを用いた不織布（以下、不織布Ｂ）を得た。不織布Ｂにおけるベンゼン環同士の共有結合のために用いた４−ジメチルアミノベンズアルデヒドの構造式を、表１に示す。【００４８】
（テレフタルアルデヒド酸を用いた不織布の作製）
ニトロベンゼン４８．３ｗｔ％、硫酸４８．３ｗｔ％、テレフタルアルデヒド酸３．４ｗｔ％を５０℃で混合、撹拌、溶解し、反応液を４０ｍＬ調製した。この反応液に１ｇの不織布Ａを浸漬し、反応液を５０℃に保ったまま１．５時間反応させた。その後、反応液から不織布を取り出し、４０ｍＬのニトロベンゼンに浸漬し洗浄した。続いて不織布を取り出し、メタノールに浸漬し洗浄を行い、さらに水に浸漬して洗浄を行い、テレフタルアルデヒド酸を用いた不織布（以下、不織布Ｃ）を得た。不織布Ｃにおけるベンゼン環同士の共有結合のために用いたテレフタルアルデヒド酸の構造式を、表１に示す。【００４９】
（ヒドロキシベンズアルデヒドを用いた不織布の作製）
ニトロベンゼン４８．３ｗｔ％、硫酸４８．３ｗｔ％、ヒドロキシベンズアルデヒド３．４ｗｔ％を５０℃で混合、撹拌、溶解し、反応液を４０ｍＬ調製した。この反応液に１ｇの不織布Ａを浸漬し、反応液を５０℃に保ったまま１．５時間反応させた。その後、反応液から不織布を取り出し、４０ｍＬのニトロベンゼンに浸漬し洗浄した。続いて不織布を取り出し、メタノールに浸漬し洗浄を行い、さらに水に浸漬して洗浄を行い、ヒドロキシベンズアルデヒドを用いた不織布（以下、不織布Ｄ）を得た。不織布Ｄにおけるベンゼン環同士の共有結合のために用いたヒドロキシベンズアルデヒドの構造式を、表１に示す。【００５０】
（４−（ジメチルアミノ）ベンゾフェノンを用いた不織布の作製）
ニトロベンゼン４８．３ｗｔ％、硫酸４８．３ｗｔ％、４−（ジメチルアミノ）ベンゾフェノン３．４ｗｔ％を５０℃で混合、撹拌、溶解し、反応液を４０ｍＬ調製した。この反応液に１ｇの不織布Ａを浸漬し、反応液を５０℃に保ったまま１．５時間反応させた。その後、反応液から不織布を取り出し、４０ｍＬのニトロベンゼンに浸漬し洗浄した。続いて不織布を取り出し、メタノールに浸漬し洗浄を行い、さらに水に浸漬して洗浄を行い、４−（ジメチルアミノ）ベンゾフェノンを用いた不織布（以下、不織布Ｅ）を得た。不織布Ｅにおけるベンゼン環同士の共有結合のために用いた４−（ジメチルアミノ）ベンゾフェノンの構造式を、表１に示す。【００５１】
（４−ジメチルアミノアセトフェノンを用いた不織布の作製）
ニトロベンゼン４８．３ｗｔ％、硫酸４８．３ｗｔ％、４−ジメチルアミノアセトフェノン３．４ｗｔ％を５０℃で混合、撹拌、溶解し、反応液を４０ｍＬ調製した。この反応液に１ｇの不織布Ａを浸漬し、反応液を５０℃に保ったまま１．５時間反応させた。その後、反応液から不織布を取り出し、４０ｍＬのニトロベンゼンに浸漬し洗浄した。続いて不織布を取り出し、メタノールに浸漬し洗浄を行い、さらに水に浸漬して洗浄を行い、４−ジメチルアミノアセトフェノンを用いた不織布（以下、不織布Ｆ）を得た。不織布Ｆにおけるベンゼン環同士の共有結合のために用いた４−ジメチルアミノアセトフェノンの構造式を、表１に示す。【００５２】
（４−アセトアミノフェノンを用いた不織布の作製）
ニトロベンゼン４８．３ｗｔ％、硫酸４８．３ｗｔ％、４−アセトアミノフェノン３．４ｗｔ％を５０℃で混合、撹拌、溶解し、反応液を４０ｍＬ調製した。この反応液に１ｇの不織布Ａを浸漬し、反応液を５０℃に保ったまま１．５時間反応させた。その後、反応液から不織布を取り出し、４０ｍＬのニトロベンゼンに浸漬し洗浄した。続いて不織布を取り出し、メタノールに浸漬し洗浄を行い、さらに水に浸漬して洗浄を行い、４−アセトアミノフェノンを用いた不織布（以下、不織布Ｇ）を得た。不織布Ｇにおけるベンゼン環同士の共有結合のために用いた４−アセトアミノフェノンの構造式を、表１に示す。【００５３】
（ホルムアルデヒドを用いた不織布の作製）
ニトロベンゼン４８．３ｗｔ％、硫酸４８．３ｗｔ％、パラホルムアルデヒド３．４ｗｔ％を５０℃で混合、撹拌、溶解し、反応液を４０ｍＬ調製した。この反応液に１ｇの不織布Ａを浸漬し、反応液を５０℃に保ったまま１．５時間反応させた。その後、反応液から不織布を取り出し、４０ｍＬのニトロベンゼンに浸漬し洗浄した。続いて不織布を取り出し、メタノールに浸漬し洗浄を行い、さらに水に浸漬して洗浄を行い、ホルムアルデヒドを用いた不織布（以下、不織布Ｈ）を得た。不織布Ｄにおけるベンゼン環同士の共有結合のために用いたホルムアルデヒドの構造式を、表１に示す。【００５４】
（アルデヒドを用いなかった不織布の作製）
ニトロベンゼン５０ｗｔ％、硫酸５０ｗｔ％を５０℃で混合、撹拌、溶解し、反応液を４０ｍＬ調製した。この反応液に１ｇの不織布Ａを浸漬し、反応液を５０℃に保ったまま１．５時間反応させた。その後、反応液から不織布を取り出し、４０ｍＬのニトロベンゼンに浸漬し洗浄した。続いて不織布を取り出し、メタノールに浸漬し洗浄を行い、さらに水に浸漬して洗浄を行い、不織布（以下、不織布Ｉ）を得た。【００５５】
（４−ジメチルアミノベンズアルデヒドを用いた中空糸の作製）
ニトロベンゼン４８．３ｗｔ％、硫酸４８．３ｗｔ％、４−ジメチルアミノベンズアルデヒド３．４ｗｔ％を５０℃で混合、撹拌、溶解し、反応液を４０ｍＬ調製した。この反応液に０．５ｇの外径４６０μｍ、内径３００μｍのポリスルホン中空糸（トレビーノ（登録商標）；東レ株式会社）を浸漬し、反応液を５０℃に保ったまま１．５時間反応させた。その後、反応液から中空糸を取り出し、４０ｍＬのニトロベンゼンに浸漬し洗浄した。続いて中空糸を取り出し、メタノールに浸漬し洗浄を行い、さらに水に浸漬して洗浄を行い、４−ジメチルアミノベンズアルデヒドを用いた中空糸（以下、中空糸Ａ）を得た。【００５６】
（アルデヒドを用いなかった中空糸の作製）
ニトロベンゼン５０ｗｔ％、硫酸５０ｗｔ％を５０℃で混合、撹拌、溶解し、反応液を４０ｍＬ調製した。この反応液に０．５ｇの外径４６０μｍ、内径３００μｍのポリスルホン中空糸（トレビーノ（登録商標）；東レ株式会社）を浸漬し、反応液を５０℃に保ったまま１．５時間反応させた。その後、反応液から中空糸を取り出し、４０ｍＬのニトロベンゼンに浸漬し洗浄した。続いて中空糸を取り出し、メタノールに浸漬し洗浄を行い、さらに水に浸漬して洗浄を行い、中空糸（以下、中空糸Ｂ）を得た。【００５７】
【表１】
2013022012.tif 000012
【００５８】
（実施例１）
不織布Ｂを直径８ｍｍの円板状に２枚切り抜き、ポリプロピレン製の容器に入れた。この容器に、ＩＬ−６及びＩＬ−８の濃度がいずれも５００ｐｇ／ｍＬになるように調製したウシ胎児血清（以下、ＦＢＳ）を０．８ｍＬ添加し、３７℃のインキュベータ内で１時間転倒混和してからＥＬＩＳＡ法にてＩＬ−６及びＩＬ−８の残濃度をそれぞれ測定し、以下の式１及び２によりＩＬ−６及びＩＬ−８吸着率を算出した。結果を表２に示す。
ＩＬ−６吸着率（％）＝｛（転倒混和前のＩＬ−６濃度）−（転倒混和後のＩＬ−６濃度）｝／（転倒混和前のＩＬ−６濃度）×１００  ・・・・・・式１
ＩＬ−８吸着率（％）＝｛（転倒混和前のＩＬ−８濃度）−（転倒混和後のＩＬ−８濃度）｝／（転倒混和前のＩＬ−８濃度）×１００  ・・・・・・式２
【００５９】
また、不織布Ｂの耐溶媒性を確認するため、不織布Ｂを乾燥させた後、反応溶媒であるニトロベンゼン５０ｗｔ％と硫酸５０ｗｔ％との混合溶液に２０時間浸漬させ、ニトロベンゼン洗浄、メタノール洗浄、水洗浄を行った後に再度乾燥させ、再乾燥前後の不織布Ｂの重量をそれぞれ測定した。再乾燥前後の重量変化（％）を算出し、その値が１０％を超えた場合は耐溶媒性なしと判断した。結果を表２に示す。【００６０】
（実施例２）
不織布Ｃを直径８ｍｍの円板状に２枚切り抜き、ポリプロピレン製の容器に入れた。この容器に、ＩＬ−６及びＩＬ−８の濃度がいずれも５００ｐｇ／ｍＬになるように調製したＦＢＳを０．８ｍＬ添加し、３７℃のインキュベータ内で１時間転倒混和してから、実施例１と同様にＩＬ−６及びＩＬ−８吸着率を算出した。また、不織布Ｃの耐溶媒性を実施例１と同様の方法で判断した。結果を表２に示す。【００６１】
（実施例３）
不織布Ｄを直径８ｍｍの円板状に２枚切り抜き、ポリプロピレン製の容器に入れた。この容器に、ＩＬ−６及びＩＬ−８の濃度がいずれも５００ｐｇ／ｍＬになるように調製したＦＢＳを０．８ｍＬ添加し、３７℃のインキュベータ内で１時間転倒混和してから、実施例１と同様にＩＬ−６及びＩＬ−８吸着率を算出した。また、不織布Ｄの耐溶媒性を実施例１と同様の方法で判断した。結果を表２に示す。【００６２】
（実施例４）
不織布Ｅを直径８ｍｍの円板状に２枚切り抜き、ポリプロピレン製の容器に入れた。この容器に、ＩＬ−６及びＩＬ−８の濃度がいずれも５００ｐｇ／ｍＬになるように調製したＦＢＳを０．８ｍＬ添加し、３７℃のインキュベータ内で１時間転倒混和してから、実施例１と同様にＩＬ−６及びＩＬ−８吸着率を算出した。また、不織布Ｅの耐溶媒性を実施例１と同様の方法で判断した。結果を表２に示す。【００６３】
（実施例５）
不織布Ｆを直径８ｍｍの円板状に２枚切り抜き、ポリプロピレン製の容器に入れた。この容器に、ＩＬ−６及びＩＬ−８の濃度がいずれも５００ｐｇ／ｍＬになるように調製したＦＢＳを０．８ｍＬ添加し、３７℃のインキュベータ内で１時間転倒混和してから、実施例１と同様にＩＬ−６及びＩＬ−８吸着率を算出した。また、不織布Ｆの耐溶媒性を実施例１と同様の方法で判断した。結果を表２に示す。【００６４】
（実施例６）
不織布Ｇを直径８ｍｍの円板状に２枚切り抜き、ポリプロピレン製の容器に入れた。この容器に、ＩＬ−６及びＩＬ−８の濃度がいずれも５００ｐｇ／ｍＬになるように調製したＦＢＳを０．８ｍＬ添加し、３７℃のインキュベータ内で１時間転倒混和してから、実施例１と同様にＩＬ−６及びＩＬ−８吸着率を算出した。また、不織布Ｇの耐溶媒性を実施例１と同様の方法で確認した。結果を表２に示す。【００６５】
（実施例７）
中空糸Ａを１ｃｍ×２００本（計２００ｃｍ）に切断し、ポリプロピレン製の容器に入れた。この容器に、ＩＬ−６及びＩＬ−８の濃度がいずれも５００ｐｇ／ｍＬになるように調製したＦＢＳを１ｍＬ添加し、３７℃のインキュベータ内で１時間転倒混和してから、実施例１と同様にＩＬ−６及びＩＬ−８吸着率を算出した。また、中空糸Ａの耐溶媒性を実施例１と同様の方法で確認した。結果を表２に示す。【００６６】
（比較例１）
不織布Ｈを直径８ｍｍの円板状に２枚切り抜き、ポリプロピレン製の容器に入れた。この容器に、ＩＬ−６及びＩＬ−８の濃度がいずれも５００ｐｇ／ｍＬになるように調製したＦＢＳを０．８ｍＬ添加し、３７℃のインキュベータ内で１時間転倒混和してから、実施例１と同様にＩＬ−６及びＩＬ−８吸着率を算出した。また、不織布Ｈの耐溶媒性を実施例１と同様の方法で判断した。結果を表２に示す。【００６７】
（比較例２）
不織布Ｉを直径８ｍｍの円板状に２枚切り抜き、ポリプロピレン製の容器に入れた。この容器に、ＩＬ−６及びＩＬ−８の濃度がいずれも５００ｐｇ／ｍＬになるように調製したＦＢＳを０．８ｍＬ添加し、３７℃のインキュベータ内で１時間転倒混和してから、実施例１と同様にＩＬ−６及びＩＬ−８吸着率を算出した。また、不織布Ｉの耐溶媒性を実施例１と同様の方法で判断した。結果を表２に示す。【００６８】
（比較例３）
中空糸Ｂを１ｃｍ×２００本（計２００ｃｍ）に切断し、ポリプロピレン製の容器に入れた。この容器に、ＩＬ−６及びＩＬ−８の濃度がいずれも５００ｐｇ／ｍＬになるように調製したＦＢＳを１ｍＬ添加し、３７℃のインキュベータ内で１時間転倒混和してから、実施例１と同様にＩＬ−６及びＩＬ−８吸着率を算出した。また、ポリスルホン中空糸の耐溶媒性を実施例１と同様の方法で確認した。結果を表２に示す。【００６９】
【表２】
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【００７０】
表２の結果から、本発明の吸着用担体が、顕著な炎症性サイトカイン吸着能及び耐溶媒性を示すことが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００７１】
本発明は、医療分野における吸着用担体、特に炎症性サイトカイン吸着用担体として利用できる。
【国際調査報告】
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