(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩を含む医薬組成物：
【化１】
0005923157.tif 000031
［式中：
Ａｒ１が置換フェニルであり；
Ａｒ２が、フェニル、置換フェニル、チオフェン−イル、置換チオフェン−イル、ピリジニル、置換ピリジニル、チアゾリル、置換チアゾリル、二環系アリール、置換二環系アリール、二環系ヘテロアリール、置換二環系ヘテロアリールからなる群より選択され；
Ｘは、Ｃ又はＮからなる群より選択され；
Ｙは、ＸがＮであるときＣであり、そしてＸがＣであるときＮであり；そして
ｎは、０〜３である］。
【請求項２】
Ａｒ１が
【化２】
0005923157.tif 000032
［式中：
Ｒ１は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、カルバモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルバモイル、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、及びＣ３−Ｃ６シクロアルコキシルからなる群より選択され；
Ｒ２は、ハロゲン、ヒドロキシル、カルバモイル、置換カルバモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルバモイル、スルファモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルファモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、シアノ、ニトロ、アミノ、ＣＦ３、カルボキシル、ウレイド、スルファモイルアミノ、Ｃ１−Ｃ６スルホンアミド、２−アミノ−２−オキソエチル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルコキシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群より選択され；
Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、シアノ、ニトロ、カルバモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルバモイル、スルファモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルファモイル、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、及びＣ３−Ｃ６シクロアルコキシルからなる群より選択される］であり、
Ａｒ２は、フェニル、４−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロ−２−メトキシフェニル、４−ブロモフェニル、４−ブロモ−２−メトキシフェニル、３−ブロモフェニル、４−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−ヒドロキシフェニル、４−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、２−メトキシフェニル、４−クロロチオフェン−２−イル、５−クロロチオフェン−２−イル、３−ブロモチオフェン−２−イル、４−ブロモチオフェン−２−イル、５−ブロモチオフェン−２−イル、５−ブロモチオフェン−３−イル、
【化３】
0005923157.tif 000033
［式中、Ｒ４は、水素、メチル、クロロ、フルオロ、ヒドロキシ、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、カルバモイル、ジメチルアミノ、アミノ、ホルムアミド、及びトリフルオロメチルからなる群より選択され；Ｒ５は、水素、メチル、及びエチルからなる群より選択される］
からなる群より選択される、請求項１の医薬組成物。
【請求項３】
Ａｒ２が、フェニル、４−クロロ−２−メトキシフェニル、４−ブロモフェニル、４−ブロモ−２−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、４−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル、４−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル、及び５−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）チオフェン−２−イルからなる群より選択される、請求項１の医薬組成物。
【請求項４】
Ｒ１が、水素及びメチルからなる群より選択され；
Ｒ２は、ヒドロキシル、カルボキシル、カルバモイル、メチルスルホンアミド、及びｔｅｒｔ−ブチル−カルボキシからなる群より選択され；そして
Ｒ３は水素である、請求項２の医薬組成物。
【請求項５】
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピロール−１−イル）ベンズアミド；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピロール−１−イル）安息香酸；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピロール−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（４−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル）−５−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（４−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル）−５−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−ブロモ−２−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−ブロモ−２−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（５−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）チオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（５−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）チオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
Ｎ−（４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（５−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）チオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルフェニル）メタンスルホンアミド；
４−（１−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−３−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）−３−メチルベンズアミド；及び
４−（１−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−３−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）−３−メチルベンズアミド；
からなる群より選択される化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、請求項１の医薬組成物。
【請求項６】
医薬的に許容される担体又は賦形剤を含む、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
肺の障害を治療する方法において用いられる、請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項８】
喘息を治療する方法において用いられる、請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
医薬の製造における、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
【請求項１０】
肺の障害を治療するための医薬の製造における、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
【請求項１１】
喘息を治療するための医薬の製造における、請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
【請求項１２】
請求項１〜５のいずれかに記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩を医薬的に許容される担体又は賦形剤と混合することを含む、請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物の製造方法。 
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
[0001]  本出願は、米国仮特許出願シリアル番号第６１／１１６，９８２号（２００８年１１月２１日出願）及び米国仮特許出願シリアル番号第６１／０８９，３１３号（２００８年８月１５日出願）の利益を請求する。上記出願のそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
技術分野
[0002]  本発明は、Ｓ−ニトロソグルタチオンレダクターゼの新規ピロール阻害剤、そのような阻害剤を含んでなる医薬組成物、及びそれらを作製して使用する方法へ向けられる。
【背景技術】
【０００３】
[0003]  化学化合物の一酸化窒素は、化学式：ＮＯの気体である。ＮＯは、生体系において知られている数少ない気体シグナル伝達分子の１つであり、様々な生体事象を制御するのに重要な役割を担っている。例えば、内皮は、ＮＯを使用して、細動脈壁の周囲にある平滑筋へ弛緩するシグナルを伝達して、血管拡張と低酸素組織への血流増加をもたらす。ＮＯは、平滑筋増殖、血小板機能、神経伝達を調節することにも関与して、宿主防御においてある役割を担っている。一酸化窒素はきわめて反応性で、数秒の存続時間を有するが、膜を通って自由に拡散することも、多くの分子標的へ結合することもできる。これらの特性により、ＮＯは、隣接細胞間と細胞内部の生体事象を制御することが可能な理想のシグナル伝達分子となっている。
【０００４】
[0004]  ＮＯは、フリーラジカルの気体であり、それにより反応性で不安定となるので、ＮＯは、in vivo で短命で、生理学的条件下では３〜５秒の半減期を有する。酸素の存在時に、ＮＯは、チオールと結合して、Ｓ−ニトロソチオール（ＳＮＯ）と呼ばれる安定なＮＯ付加物の生物学的に重要な群を産生することができる。この安定したＮＯのプールは、生理活性ＮＯの供給源として作用すると仮定されて、細胞のホメオスタシスにおけるＮＯの中心性があるとすれば、それ自体として、健康や病気において決定的に重要であるらしい（Stamler et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:7674-7677 (1992)）。タン
パク質−ＳＮＯは、心臓血管、呼吸、代謝、胃腸、免疫、及び中枢神経系の機能において広汎な役割を担う（Foster et al., 2003, Trends in Molecular Medicine 第9巻、第4号、2003年4月、160-168 頁）。生体系において最も研究されているＳＮＯの１つは、Ｓ−
ニトロソグルタチオン（ＧＳＮＯ）であり（Gaston et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:10957-10961 (1993)）、効率的なトランスニトロソ化剤であって、細胞内の他のＳ
−ニトロソ化タンパク質と平衡状態を維持しているらしい（Liu et al., 2001）ので、ＮＯシグナル伝達において新興の主要な調節因子である。ＮＯ−ＳＮＯ連続性におけるこのきわめて重要な位置があるとすれば、ＧＳＮＯは、ＮＯ調節が薬理学的に正当化されるときに考慮すべき療法上有望な標的を提供する。
【０００５】
[0005]  ＮＯホメオスタシスと細胞ＳＮＯレベルの主要な調節因子としてのＧＳＮＯのこの理解の観点から、一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）酵素によるＮＯラジカルの産生より下流で生じる、ＧＳＮＯ及びＳＮＯタンパク質の内因性の産生を検証することに諸研究が集中してきた。より最近になって、利用可能なＧＳＮＯの濃度と、必然的に利用可能なＮＯとＳＮＯを制御するのに重要な役割を有する、ＧＳＮＯの酵素的異化についての理解が増してきた。
【０００６】
[0006]  このＧＳＮＯ異化反応の理解にとって重要なことに、研究者は、最近、高度に保存されたＳ−ニトロソグルタチオンレダクターゼ（ＧＳＮＯＲ）を同定した（Jensen et al., Biochem J., 331:659-668 (1998); Liu et al., Nature, 410:490-494 (2001)）
。ＧＳＮＯＲは、グルタチオン依存型ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼ（ＧＳ−ＦＤＨ）、アルコールデヒドロゲナーゼ３（ＡＤＨ−３）（Uotila and Koivusalo,「補酵素と
補因子（Coenzymes and Cofactors）」D. Dolphin 監修、517-551 頁（ニューヨーク、ジョン・ウィリー・アンド・サンズ、1989)）、及びアルコールデヒドロゲナーゼ５（ＡＤ
Ｈ−５）としても知られている。重要にも、ＧＳＮＯＲは、他の基質よりもＧＳＮＯに対してより大きな活性を示し（Jensen et al., 1998; Liu et al., 2001）、細菌、植物、
及び動物において、重要なタンパク質及びペプチド脱ニトロソ化活性に媒介するようである。ＧＳＮＯＲは、真核生物において主要なＧＳＮＯ代謝酵素であるらしい（Liu et al., 2001）。従って、ＧＳＮＯＲ活性が低いか又は非存在である生体コンパートメント（例、気道被覆液）では、ＧＳＮＯが蓄積する可能性がある（Gaston et al., 1993）。
【０００７】
[0007]  ＧＳＮＯＲが欠乏している酵母では、この酵素の基質ではないＳ−ニトロシル化タンパク質が蓄積するが、このことは、ＧＳＮＯがＳＮＯ−タンパク質と平衡して存在することを強く示唆する（Liu et al., 2001）。ＧＳＮＯと、従ってＳＮＯ−タンパク質の周囲レベルに対する正確な酵素的制御があることは、生理学的要求を超過してＮＯが産生されるニトロソ化ストレスに抗する保護が含まれる、一群の生理学的及び病理学的機能にわたって、ＧＳＮＯ／ＧＳＮＯＲが種々の役割を担い得るとする可能性を提起する。実際、ＧＳＮＯは、呼吸の促進（Lipton et al., Nature, 413:171-174 (2001)）から、嚢
胞性線維症の膜貫通調節因子の調節（Zaman et al., Biochem Biophys Res Commun, 284:65-70 (2001)）、血管緊張、血栓症、及び血小板機能の調節（de Belder et al., Cardiovasc Res. 1994 May; 28(5):691-4. (1994)；Z. Kaposzta, A et al., Circulation; 106(24): 3057 - 3062, 2002）、並びに宿主防御（de Jesus-Berrios et al., Curr. Biol.,
13:1963-1968 (2003)）に及ぶ生理学的プロセスへの関与が特に示唆されている。他の研究は、ＧＳＮＯＲが酵母細胞をニトロソ化ストレスに対して in vitro（Liu et al., 2001）と in vivo（de Jesus-Berrios et al., 2003）の両方で保護することを見出した。
【０００８】
[0008]  まとめると、これまでのデータは、ＧＳＮＯＲが、ＧＳＮＯを異化して、必然的に、生体系において利用可能なＳＮＯ及びＮＯを低下させる、酵素：ニトロソグルタチオンレダクターゼ（ＧＳＮＯＲ）の主要な生理学的リガンドであることを示唆している（Liu et al., 2001）、（Liu et al., Cell, (2004), 116(4), 617-628）、及び（Que et al., Science, 2005, 308, (5728):1618-1621）。それ自体として、この酵素は、局所及
び全身の生理活性ＮＯを調節することに中心的な役割を担っている。ＮＯバイオアベイラビリティの混乱は、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、血栓症、喘息、胃腸障害、炎症、及び癌が含まれる数多くの疾患状態の病理発生に関連付けられてきたので、ＧＳＮＯＲ活性を調節する薬剤は、一酸化窒素の不均衡に関連した疾患を治療するための候補療法剤となる。
【０００９】
[0009]  現在、当該技術分野では、増加したＮＯ合成及び／又は増加したＮＯ生理活性に関連する医学的状態への診断薬、予防法、改善手段、及び治療法への大きなニーズがある。さらに、他のＮＯ関連障害を予防する、改善する、又は逆転させるための新規な化合物、組成物、及び方法への有意なニーズがある。本発明は、上記のニーズを満足させる。
【発明の概要】
【００１０】
[0010]  本発明は、Ｓ−ニトロソグルタチオンレダクターゼ（「ＧＳＮＯＲ」）阻害剤として有用な新規ピロール化合物を提供する。本発明には、記載のＧＳＮＯＲ阻害剤の医薬的に許容される塩、プロドラッグ、及び代謝産物が含まれる。また本発明に含まれるの
は、少なくとも１つのＧＳＮＯＲ阻害剤と少なくとも１つの医薬的に許容される担体を含んでなる医薬組成物である。
【００１１】
[0011]  本発明の組成物は、どの好適な医薬的に許容される剤形でも製造することができる。
【００１２】
[0012]  本発明は、Ｓ−ニトロソグルタチオンレダクターゼを阻害することを必要とする被検者においてそれをするための方法を提供する。そのような方法は、少なくとも１つのＧＳＮＯＲ阻害剤又はその医薬的に許容される塩、そのプロドラッグ又は代謝産物を少なくとも１つの医薬的に許容される担体と組み合わせて含んでなる医薬組成物の治療有効量を投与することを含む。ＧＳＮＯＲ阻害剤は、本発明による新規化合物であっても、ＧＳＮＯＲの阻害剤であることがこれまで知られていなかった既知の化合物であってもよい。
【００１３】
[0013]  本発明はまた、ＮＯドナー療法によって改善される障害を治療することを必要とする被検者においてそれをする方法を提供する。そのような方法は、少なくとも１つのＧＳＮＯＲ阻害剤、又はその医薬的に許容される塩、プロドラッグ、又はその代謝産物を少なくとも１つの医薬的に許容される担体と組み合わせて含んでなる医薬組成物の治療有効量を投与することを含む。ＧＳＮＯＲ阻害剤は、本発明による新規化合物であっても、ＧＳＮＯＲの阻害剤であることがこれまで知られていなかった既知の化合物であってもよい。
【００１４】
[0014]  本発明はまた、細胞増殖性障害を治療することを必要とする被検者においてそれをする方法を提供する。そのような方法は、少なくとも１つのＧＳＮＯＲ阻害剤、又はその医薬的に許容される塩、プロドラッグ、又はその代謝産物を少なくとも１つの医薬的に許容される担体と組み合わせて含んでなる医薬組成物の治療有効量を投与することを含む。ＧＳＮＯＲ阻害剤は、本発明による新規化合物であっても、ＧＳＮＯＲの阻害剤であることがこれまで知られていなかった既知の化合物であってもよい。
【００１５】
[0015]  本発明の方法には、１以上の第二の活性薬剤での投与が含まれる。そのような投与は、連続的であるか又は組合せ組成物中であり得る。
【００１６】
[0016]  本発明の実施又は検証には、本明細書での記載に類似しているか又は同等である方法及び材料を使用することができるが、好適な方法及び材料を以下に記載する。本明細書に言及するすべての公的に利用可能な出版物、特許出願、特許、及び他の参考文献は、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。抵触がある場合は、種々の定義が含まれる本明細書が基準となる。
【００１７】
[0017]  以上の要約と以下の詳細な記載はともに例示的で説明的なものであり、特許請求されるような組成物及び方法のさらなる詳細を提供することを企図している。当業者には、以下の詳細な記載から、他の目的、利点、及び新規の特徴が容易に明らかになろう。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
[0018]  Ａ．発明の概説
[0019]  最近まで、Ｓ−ニトロソグルタチオンレダクターゼ（ＧＳＮＯＲ）は、ホルムアルデヒドグルタチオン付加物、Ｓ−ヒドロキシメチルグルタチオンを酸化することが知られていた。これまでＧＳＮＯＲは、様々な細菌、酵母、植物、及び動物において確認されて、十分に保存されている。大腸菌（E. oli）、パン酵母（S. cerevisiae）、及びマ
ウスマクロファージからのこのタンパク質は、６０％以上のアミノ酸配列同一性を共有する。ＧＳＮＯＲの活性（即ち、ＮＡＤＨが必須補因子として存在するときのＳ−ニトロソ
グルタチオンの分解）は、大腸菌、マウスマクロファージ、マウス内皮細胞、マウス平滑筋細胞、酵母、及びヒトのヒーラ細胞、上皮細胞、及び単球細胞において検出されてきた。ヒトＧＳＮＯＲのヌクレオチド及びアミノ酸配列の情報は、米国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）データベースより、登録番号Ｍ２９８７２，ＮＭ＿０００６７１の項目で入手することができる。マウスＧＳＮＯＲのヌクレオチド及びアミノ酸配列の情報は、ＮＣＢＩデータベースより、登録番号ＮＭ＿００７４１０の項目で入手することができる。ヌクレオチド配列の場合は、開始部位と終結部位に下線が施されている。ＣＤＳは、コーディング配列を意味する。ＳＮＰは、一塩基多型を意味する。他の関連したＧＳＮＯＲのヌクレオチド及びアミノ酸の配列は、他の種のそれを含めて、米国特許出願：２００５／００１４６９７に見出すことができる。
【００１９】
[0020]  本発明により、ＧＳＮＯＲは、in vitro と in vivo で、Ｓ−ニトロソグルタチオン（ＧＳＮＯ）及びタンパク質Ｓ−ニトロソチオール（ＳＮＯ）を代謝して、少量のＮＯドナー化合物の細胞内レベルを制御してタンパク質のニトロシル化が中毒レベルに達することを防ぐことによって、ＮＯ生理活性を調節するように機能することが示された。
【００２０】
[0021]  このことに基づけば、この酵素の阻害により、ＮＯドナー療法が適用されるすべての疾患において生理活性が増強され、病理学的に増殖している細胞の増殖が阻害され、そしてそのことが有益である疾患においてＮＯ生理活性が高められることになる。
【００２１】
[0022]  本発明は、ＧＳＮＯＲの強力な阻害剤である医薬品を提供する。特に提供されるのは、以下に図示される構造（式Ｉ）を有する、ＧＳＮＯＲの阻害剤である置換ピロール類似体、又はその医薬的に許容される塩、立体異性体、又はプロドラッグである。
【００２２】
【化１】
0005923157.tif 000002
【００２３】
[0023]  三置換ピロール類似体は、ＧＳＮＯＲの強力な阻害剤である。本文脈で使用するように、「類似体」という用語は、ピロール環を保持する式Ｉの化合物と同様の化学構造及び機能を有する化合物を意味する。
【００２４】
[0024]  本発明のいくつかのピロール類似体は、配置異性体、幾何異性体、及び配座異性体が含まれる、様々な異性型でも存在し得て、並びに、様々な互変異性型、特に水素原子の付加点が異なるものでも存在し得る。本明細書に使用するように、「異性体」という用語には、化合物の互変異性型を含めて、化合物のすべての異性型が含まれると企図される。
【００２５】
[0025]  不斉中心を有する例示化合物は、異なるエナンチオマー及びジアステレオマーの形態で存在し得る。化合物は、光学異性体又はジアステレオマーの形態で存在し得る。従って、本発明には、化合物がその光学異性体、ジアステレオマー、及びそれらの混合物（ラセミ混合物が含まれる）の形態で含まれる。
【００２６】
[0026]  図示した構造とその構造へ付与した名称との間に矛盾があるならば、図示した構造が基準となることを銘記されたい。さらに、ある構造又は構造の一部の立体化学が、例えば、実線、楔形線、又は破線で示されていなければ、その構造又は構造の一部には、
記載の化合物のすべての立体異性体が含まれると解釈されるべきである。
【００２７】
[0027]  本発明によれば、Ｓ−ニトロソグルタチオンレダクターゼの生体試料中のレベルは、米国特許出願公開公報番号２００５／００１４６９７に記載の方法によって定量することができる。「生体試料」という用語には、限定されないが、血液（例、血清、血漿、又は全血）、尿、唾液、汗、母乳、膣分泌物、精液、毛包、皮膚、歯、骨、爪、又は他の分泌物、体液、組織、又は細胞の試料が含まれる。
【００２８】
[0028]  Ｂ．定義
[0029]  本明細書に使用するように、「約」は、当業者によって理解されて、それが使用される文脈に依ってある程度変化する可能性がある。それが使用される文脈があっても、当業者に明らかでないこの用語の使用があるならば、「約」は、その特定用語のプラス又はマイナス１０％までを意味する。
【００２９】
[0030]  「アシル」という用語には、直鎖又は分岐鎖の低級アルキル残基が付いたアセチル残基（ＣＨ３ＣＯ−）又はカルボニル基を含有する化合物及び部分が含まれる。
【００３０】
[0031]  本明細書に使用する「アルキル」という用語は、指定数の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素を意味する。例えば、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルには、限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、及びネオヘキシルが含まれることになる。アルキル基は、未置換であっても、本明細書に記載の１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００３１】
[0032]  本明細書に使用する「アルケニル」という用語は、指定数の炭素原子と少なくとも１つの二重結合を有する直鎖又は分岐鎖の不飽和炭化水素を意味する。（Ｃ２−Ｃ８）アルケニル基の例には、限定されないが、エチレン、プロピレン、１−ブチレン、２−ブチレン、イソブチレン、ｓｅｃ−ブチレン、１−ペンテン、２−ペンテン、イソペンテン、１−ヘキセン、２−ヘキセン、３−ヘキセン、イソヘキセン、１−ヘプテン、２−ヘプテン、３−ヘプテン、イソヘプテン、１−オクテン、２−オクテン、３−オクテン、４−オクテン、及びイソオクテンが含まれる。アルケニル基は、未置換であっても、本明細書に記載の１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００３２】
[0033]  本明細書に使用する「アルキニル」という用語は、指定数の炭素原子と少なくとも１つの三重結合を有する直鎖又は分岐鎖の不飽和炭化水素を意味する。（Ｃ２−Ｃ８）アルキニル基の例には、限定されないが、アセチレン、プロピン、１−ブチン、２−ブチン、１−ペンチン、２−ペンチン、１−ヘキシン、２−ヘキシン、３−ヘキシン、１−ヘプチン、２−ヘプチン、３−ヘプチン、１−オクチン、２−オクチン、３−オクチン、及び４−オクチンが含まれる。アルキニル基は、未置換であっても、本明細書に記載の１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００３３】
[0034]  本明細書に使用する「アルコキシ」という用語は、指定数の炭素原子を有する−Ｏ−アルキル基を意味する。例えば、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基には、−Ｏ−メチル、−Ｏ−エチル、−Ｏ−プロピル、−Ｏ−イソプロピル、−Ｏ−ブチル、−Ｏ−ｓｅｃ−ブチル、−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル、−Ｏ−ペンチル、−Ｏ−イソペンチル、−Ｏ−ネオペンチル、−Ｏ−ヘキシル、−Ｏ−イソヘキシル、及び−Ｏ−ネオヘキシルが含まれる。
【００３４】
[0035]  本明細書に使用する「アミノアルキル」という用語は、Ｃ１−Ｃ６アルキル基の水素原子の１以上が式：−Ｎ（Ｒｃ）２のアミンに置き換わっているアルキル基（典型的には、１〜６の炭素原子）を意味し、ここでＲｃのそれぞれの出現は、独立して、−Ｈ
又は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルである。アミノアルキル基の例には、限定されないが、−ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、ｔ−ブチルアミノメチル、イソプロピルアミノメチル、等が含まれる。
【００３５】
[0036]  本明細書に使用する「アリール」という用語は、５〜１４員の単環系、二環系、又は三環系の芳香族環系を意味する。アリール基の例には、フェニル及びナフチルが含まれる。アリール基は、未置換であっても、本明細書に記載の１以上の置換基で置換されていてもよい。アリール基の例には、フェニル、又は、ピロール、フラン、チオフェン、チアゾール、イソチアゾール、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、及びピリミジンのようなアリール複素環、等が含まれる。
【００３６】
[0037]  本明細書に使用するように、「生理活性」という用語は、生理学的又は病態生理学的プロセスに影響を及ぼし得る１以上の細胞又は細胞外プロセス（例えば、結合、シグナル伝達、等による）に対する効果を示す。
【００３７】
[0038]  「カルボニル」又は「カルボキシ」又は「カルボキシル」という用語には、酸素原子へ二重結合で結合した炭素を含有する化合物及び部分が含まれる。カルボニルを含有する部分の例には、限定されないが、アルデヒド、ケトン、カルボン酸、アミド、エステル、無水物、等が含まれる。
【００３８】
[0039]  「Ｃｍ−Ｃｎ」という用語は、「ｍ」個の炭素原子〜「ｎ」個の炭素原子を意味する。例えば、「Ｃ１−Ｃ６」という用語は、１〜６の炭素原子（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５又はＣ６）を意味する。「Ｃ２−Ｃ６」という用語には、２〜６の炭素原子（Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５又はＣ６）が含まれる。「Ｃ３−Ｃ６」という用語には、３〜６の炭素原子（Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５又はＣ６）が含まれる。
【００３９】
[0040]  本明細書に使用する「シクロアルキル」という用語は、３〜１４員の飽和又は不飽和で非芳香族の単環系、二環系、又は三環系の炭化水素環系を意味する。この群に含まれるのは、ベンゼン環へ縮合したシクロアルキル基である。代表的なシクロアルキル基には、限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロブテニル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、１，３−シクロヘキサジエニル、シクロヘプチル、シクロヘプテニル、１，３−シクロヘプタジエニル、１，４−シクロヘプタジエニル、１，３，５−シクロヘプタトリエニル、シクロオクチル、シクロオクテニル、１，３−シクロオクタジエニル、１，４−シクロオクタジエニル、１，３，５−シクロオクタトリエニル、デカヒドロナフタレン、オクタヒドロナフタレン、ヘキサヒドロナフタレン、オクタヒドロインデン、ヘキサヒドロインデン、テトラヒドロインデン、デカヒドロベンゾシクロヘプテン、オクタヒドロベンゾシクロヘプテン、ヘキサヒドロベンゾシクロヘプテン、テトラヒドロベンゾシクロヘプテン、ドデカヒドロヘプタレン、デカヒドロヘプタレン、オクタヒドロヘプタレン、ヘキサヒドロヘプタレン、及びテトラヒドロヘプタレン、（１ｓ，３ｓ）−ビシクロ［１．１．０］ブタン、ビシクロ［１．１．１］ペンタン、ビシクロ［２．１．１］ヘキサン、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、ビシクロ［２．２．２］オクタン、ビシクロ［３．１．１］ヘプタン、ビシクロ［３．２．１］オクタン、ビシクロ［３．３．１］ノナン、ビシクロ［３．３．２］デカン、ビシクロ［３．３．］ウンデカン、ビシクロ［４．２．２］デカン、ビシクロ［４．３．１］デカンが含まれる。シクロアルキル基は、未置換であっても、本明細書で以下に記載の１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００４０】
[0041]  「ハロゲン」という用語には、フッ素、臭素、塩素、ヨウ素、等が含まれる。
【００４１】
[0042]  本明細書に使用する「ハロアルキル」という用語は、Ｃ１−Ｃ６アルキル基の水素原子の１以上が、同じであっても異なっていてもよいハロゲン原子に置き換わっているＣ１−Ｃ６アルキル基を意味する。ハロアルキル基の例には、限定されないが、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、３−ブロモプロピル、ペンタクロロエチル、及び１，１，１−トリフルオロ−２−ブロモ−２−クロロエチルが含まれる。
【００４２】
[0043]  「ヘテロアルキル」という用語は、それ自体で、又は別の用語との組合せにおいて、他に述べなければ、炭素原子と、Ｏ、Ｎ及びＳからなる群より選択される１〜３のヘテロ原子からなる、安定した直鎖又は分岐鎖のアルキル又はその組合せを意味して、そしてここで窒素原子とイオウ原子は、酸化されていてもよく、そして窒素ヘテロ原子は、四級化していてもよい。ヘテロ原子（複数）のＯ、Ｎ及びＳは、ヘテロアルキル基のどの位置にも配置され得る。例には、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−ＣＨ３、及び−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｎ−ＯＣＨ３が含まれる。例えば、−ＣＨ２−ＮＨ−ＯＣＨ３のように、２までのヘテロ原子が連続的であり得る。ヘテロアルキル基に言及するのに（Ｃ２−Ｃ８）のような接頭語が使用される場合、炭素の数（この例では、２〜８）には、ヘテロ原子も同様に含まれることになる。例えば、Ｃ２−ヘテロアルキル基には、例えば、−ＣＨ２ＯＨ（１つの炭素原子と炭素原子に置き換わった１つのヘテロ原子）と−ＣＨ２ＳＨが含まれることになる。
【００４３】
[0044]  ヘテロ原子が酸素であるヘテロアルキル基の定義をさらに例示すれば、ヘテロアルキル基は、オキシアルキル基であり得る。例えば、（Ｃ２−Ｃ５）オキシアルキルには、例えば、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３（２つの炭素原子と、炭素原子に置き換わった１つの酸素があるＣ３−オキシアルキル基）、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＯＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＯＨ、等が含まれることになる。
【００４４】
[0045]  本明細書に使用する「ヘテロアリール」という用語は、窒素、酸素、及びイオウより選択される少なくとも１つのヘテロ原子を有して、少なくとも１つの炭素原子を含有する５〜１４員の芳香族の複素環を意味して、単環系、二環系、及び三環系の環系が含まれる。代表的なヘテロアリールは、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサジアゾリル、ピリジル、フリル、ベンゾフラニル、チエニル、ベンゾチエニル、キノリニル、ピロリル、インドリル、オキサゾリル、ベンゾオキサゾリル、イミダゾリル、ベンゾイミダゾリル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、イソオキサゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、ピリミジル、アゼピニル、オキセピニル、キノキサリニル、及びオキサゾリルである。ヘテロアリール基は、未置換であっても、本明細書で以下に記載の１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００４５】
[0046]  本明細書に使用するように、「ヘテロ原子」という用語には、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、及びイオウ（Ｓ）が含まれることになる。
【００４６】
[0047]  本明細書に使用するように、「複素環」という用語は、飽和、不飽和、又は芳香族のいずれかであり、窒素、酸素、及びイオウより独立して選択される１〜４ヘテロ原子を含有する３〜１４員の環系を意味して、そしてここで窒素及びイオウのヘテロ原子は、酸化されていてもよく、そして窒素ヘテロ原子は、四級化していてもよく、単環系、二
環系、及び三環系の環系が含まれる。二環系及び三環系の環系には、ベンゼン環へ縮合した複素環又はヘテロアリールを含めてよい。複素環は、化学的に許容される場合、どのヘテロ原子又は炭素原子を介しても付くことができる。複素環には、上記に定義したようなヘテロアリールが含まれる。代表的な複素環の例には、限定されないが、アジリジニル、オキシラニル、チイラニル、トリアゾリル、テトラゾリル、アジリニル、ジアジリジニル、ジアジリニル、オキサジリジニル、アゼチジニル、アゼチジノニル、オキセタニル、チエタニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、ピロリル、オキサジニル、チアジニル、ジアジニル、ジオキサニル、トリアジニル、テトラジニル、イミダゾリル、テトラゾリル、ピロリジニル、イソオキサゾリル、フラニル、フラザニル、ピリジニル、オキサゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、チアゾリル、ベンズチアゾリル、チエニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピリミジニル、ベンゾイミダゾリル、イソインドリル、インダゾリル、ベンゾジアゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、プリニル、インドリル、イソキノリニル、キノリニル、及びキナゾリニルが含まれる。複素環基は、未置換であっても、本明細書で以下に記載の１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００４７】
[0048]  「ヘテロシクロアルキル」という用語は、それ自体で、又は他の用語との組合せにおいて、他に述べなければ、「ヘテロアルキル」の環式バージョンを表す。さらに、ヘテロ原子には、その複素環が分子の残り部分へ付く位置を占める可能性がある。ヘテロシクロアルキルの例には、１−（１，２，５，６−テトラヒドロピリジル）、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニル、４−モルホリニル、３−モルホリニル、テトラヒドロフラン−２−イル、テトラヒドロフラン−３−イル、テトラヒドロチエン−２−イル、テトラヒドロチエン−３−イル、１−ピペラジニル、２−ピペラジニル、等が含まれる。
【００４８】
[0049]  本明細書に使用する「ヒドロキシアルキル」という用語は、指定数の炭素原子を有して、該アルキル基中の水素原子の１以上が−ＯＨ基に置き換わっているアルキル基を意味する。ヒドロキシアルキル基の例には、限定されないが、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、及びこれらの分岐鎖バージョンが含まれる。
【００４９】
[0050]  「ヒドロキシ」又は「ヒドロキシル」という用語には、−ＯＨ又は−Ｏ−のある基が含まれる。
【００５０】
[0051]  本明細書に使用するように、そして他に示さなければ、「立体異性体」という用語は、化合物の他の立体異性体を実質的に含まない、該化合物の１つの立体異性体を意味する。例えば、１つのキラル中心を有する立体異性体的に純粋な化合物は、該化合物の対掌エナンチオマーを実質的に含まない。２つのキラル中心を有する立体異性体的に純粋な化合物は、該化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まない。いくつかの態様において、立体異性体的に純粋な化合物は、該化合物の約８０重量％以上の１つの立体異性体と該化合物の約２０重量％未満の他の立体異性体、例えば、該化合物の約９０重量％以上の１つの立体異性体と該化合物の約１０重量％未満の他の立体異性体、又は該化合物の約９５重量％以上の１つの立体異性体と該化合物の約５重量％未満の他の立体異性体、又は該化合物の約９７重量％以上の１つの立体異性体と該化合物の約３重量％未満の他の立体異性体を含む。
【００５１】
[0052]  本明細書に使用するように、「タンパク質」は、「ペプチド」、「ポリペプチド」、又は「ペプチド断片」と同義で使用される。「精製された」ポリペプチド、タンパク質、ペプチド、又はペプチド断片は、細胞材料又は、そのアミノ酸配列が得られる細胞
、組織、又は無細胞供給源からの他の混在タンパク質を実質的に含まないか、又は化学的に合成されるときは、化学前駆体又は他の化学品を実質的に含まない。
【００５２】
[0053]  本明細書に使用するように、「調節する」は、ペプチド又はポリペプチドのレベルを増加又は減少させること、あるいはペプチド又はポリペプチドの安定性又は活性を増加又は減少させることを意味することになる。「阻害する」という用語は、ペプチド又はポリペプチドのレベルの減少、あるいはペプチド又はポリペプチドの安定性又は活性の減少を意味することになる。好ましい態様において、調節されるか又は阻害されるペプチドは、Ｓ−ニトロソグルタチオン（ＧＳＮＯ）又はタンパク質Ｓ−ニトロソチオール（ＳＮＯ）である。
【００５３】
[0054]  本明細書に使用するように、「一酸化窒素」及び「ＮＯ」という用語には、無電荷の一酸化窒素と有電荷の一酸化窒素の種が含まれ、特に、ニトロソニウムイオン（ＮＯ＋）とニトロキシルイオン（ＮＯ−）が含まれる。一酸化窒素の反応型は、気体の一酸化窒素によって提供され得る。構造：Ｘ−ＮＯｙ（ここでＸは、一酸化窒素を放出、送達、又は移送する部分であり、ｙは１又は２である）を有する化合物には、一酸化窒素をその企図される作用部位へその企図される目的のために活性な形態で提供するありとあらゆるそのような化合物が含まれる。
【００５４】
[0055]  本明細書に利用するように、「医薬的に許容される」という用語は、動物、より特別にはヒトでの使用のために、連邦又は州政府の規制当局によって承認されているか又は米国薬局方又は他の一般的に認知されている薬局方に収載されていることを意味する。「担体」という用語は、治療薬剤とともに投与される希釈剤、アジュバント、賦形剤、又は運搬体を意味して、限定されないが、水及び油剤のような無菌の液剤が含まれる。
【００５５】
[0056]  ＧＳＮＯＲ阻害剤の「医薬的に許容される塩」又は「塩」は、イオン結合を含有して、典型的には、酸又は塩基のいずれかと開示化合物を反応させることによって生成される、被検者への投与に適した、開示化合物の生成物である。医薬的に許容される塩には、限定されないが、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、アルキルスルホン酸塩、アリールスルホン酸塩、アリールアルキルスルホン酸塩、酢酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、乳酸塩、及び酒石酸塩が含まれる酸付加塩；Ｌｉ、Ｎａ、Ｋのようなアルカリ金属カチオン、Ｍｇ又はＣａのようなアルカリ土類金属の塩、又は有機アミン塩を含めることができる。
【００５６】
[0057]  「医薬組成物」は、被検者への投与に適した形態で開示化合物を含んでなる製剤である。本発明の医薬組成物は、好ましくは、その企図される投与経路と適合するように製剤化される。投与経路の例には、限定されないが、経口及び非経口、例えば、静脈内、皮内、皮下、吸入、局所、経皮、経粘膜、及び直腸の投与が含まれる。
【００５７】
[0058]  本明細書に使用する「置換（された）」という用語は、指定される原子上の１以上の水素が、示される群からの選択物に置き換わっていることを意味するが、但し、指定される原子の通常の原子価を超えず、そしてその置換は安定した化合物をもたらすものとする。置換基がケト（即ち、＝Ｏ）であるときは、原子上の２つの水素が置き換わる。環の二重結合は、本明細書に使用するように、２つの隣接した環原子の間で形成される二重結合（例、Ｃ＝Ｃ、Ｃ＝Ｎ、又はＮ＝Ｎ）である。
【００５８】
[0059]  アルキル、ヘテロアルキル、アルキレン、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニル、及びヘテロシクロアルケニルと呼ばれる基への置換基は、−ＯＲｄ’、＝Ｏ、＝ＮＲｄ’、＝Ｎ−ＯＲｄ’、−ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＳＲｄ’、−ハロ、−ＳｉＲｄ’Ｒｄ’’Ｒｄ’’’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ’、−
Ｃ（Ｏ）Ｒｄ’、−ＣＯ２Ｒｄ’、−ＣＯＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＮＲｄ’’Ｃ（Ｏ）Ｒｄ’、−ＮＲｄ’’’Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＮＲｄ’’’ＳＯ２ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＮＲｄ’’ＣＯ２Ｒｄ’、−ＮＨＣ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＲｄ’Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＨＣ（ＮＨ２）＝ＮＲｄ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒｄ’、−ＳＯ２Ｒｄ’、−ＳＯ２ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＮＲｄ’’ＳＯ２Ｒｄ’、−ＣＮ、及び−ＮＯ２が含まれる様々な基より、０〜３に及ぶ数で選択することができて、０、１、又は２の置換基を有するこれらの基は、例示である。
【００５９】
[0060]  Ｒｄ’、Ｒｄ’’、及びＲｄ’’’は、それぞれ独立して、水素、未置換（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、未置換ヘテロ（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、未置換アリール、並びに、−ハロ、未置換アルキル、未置換アルコキシ、未置換チオアルコキシ、及び未置換アリール（Ｃ１−Ｃ４）アルキルより選択される１〜３の置換基で置換されたアリールを意味する。Ｒｄ’とＲｄ’’が同じ窒素原子へ付くとき、それらは、該窒素原子と組み合って、５、６又は７員環を形成することができる。例えば、−ＮＲｄ’Ｒｄ’’は、１−ピロリジニル又は４−モルホリニルを表すことができる。
【００６０】
[0061]  典型的には、アルキル又はヘテロアルキル基は、０〜３の置換基を有するものであり、２以下の置換基を有するこれらの基は、本発明の例示である。アルキル又はヘテロアルキル残基は、未置換であってもモノ置換であってもよい。いくつかの態様において、アルキル又はヘテロアルキル残基は、未置換であろう。
【００６１】
[0062]  アルキル及びヘテロアルキル残基の例示の置換基には、限定されないが、−ＯＲｄ’、＝Ｏ、＝ＮＲｄ’、＝Ｎ−ＯＲｄ’、−ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＳＲｄ’、−ハロ、−ＳｉＲｄ’Ｒｄ’’Ｒｄ’’’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ’、−ＣＯ２Ｒｄ’、−ＣＯＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＮＲｄ’’Ｃ（Ｏ）Ｒｄ’、−ＮＲｄ’’’Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＮＲｄ’’’ＳＯ２ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＮＲｄ’’ＣＯ２Ｒｄ’、−ＮＨＣ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＲａ’Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＨＣ（ＮＨ２）＝ＮＲｄ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒｄ’、−ＳＯ２Ｒｄ’、−ＳＯ２ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＮＲｄ’’ＳＯ２Ｒｄ’、−ＣＮ、及び−ＮＯ２（ここでＲｄ’、Ｒｄ’’及びＲｄ’’’は、上記に定義される通りである）が含まれる。典型的な置換基は、−ＯＲｄ’、＝Ｏ、−ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ハロ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ’、−ＣＯ２Ｒｄ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＮＲｄ’’Ｃ（Ｏ）Ｒｄ’、−ＮＲｄ’’ＣＯ２Ｒｄ’、−ＮＲｄ’’’ＳＯ２ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＳＯ２Ｒｄ’、−ＳＯ２ＮＲｄ’Ｒｄ’’、−ＮＲｄ’’ＳＯ２Ｒｄ’−ＣＮ、及び−ＮＯ２より選択され得る。
【００６２】
[0063]  同様に、アリール及びヘテロアリール基の置換基は、多様であり、−ハロ、−ＯＲｅ’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｅ’、−ＮＲｅ’Ｒｅ’’、−ＳＲｅ’、−Ｒｅ’、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｒｅ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｅ’Ｒｅ’’、−Ｃ（Ｏ）Ｒｅ’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｅ’Ｒｅ’’、−ＮＲｅ’’Ｃ（Ｏ）Ｒｅ’、−ＮＲｅ’’ＣＯ２Ｒｅ’、−ＮＲｅ’’’Ｃ（Ｏ）ＮＲｅ’Ｒｅ’’、−ＮＲｅ’’’ＳＯ２ＮＲｅ’Ｒｅ’’、−ＮＨＣ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＲｅ’Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＲｅ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒｅ’、−ＳＯ２Ｒｅ’、−ＳＯ２ＮＲｅ’Ｒｅ’’、−ＮＲｅ’’ＳＯ２Ｒｅ’、−Ｎ３、−ＣＨ（Ｐｈ）２、ペルフルオロアルコキシ、及びペルフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルより、０〜芳香族環系上の自由原子価の総数に及ぶ数において選択される。
【００６３】
[0064]  Ｒｅ’、Ｒｅ’’及びＲｅ’’’は、水素、未置換（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、未置換ヘテロ（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、未置換アリール、未置換ヘテロアリール、未置換アリール（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、及び未置換アリールオキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルよ
り独立して選択される。典型的には、アリール又はヘテロアリール基は、０〜３の置換基を有するものであり、２以下の置換基を有するこれらの基は、本発明の例示である。本発明の１つの態様において、アリール又はヘテロアリール基は、未置換又はモノ置換であろう。別の態様において、アリール又はヘテロアリール基は、未置換であろう。
【００６４】
[0065]  本明細書に記載のアリール又はヘテロアリール基中のアリール又はヘテロアリール環の隣接原子上の置換基の２つは、式：−Ｔ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−Ｕ−（ここでＴとＵは、独立して、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＣＨ２−、又は単結合であり、ｑは０〜２の整数である）の置換基に置き換わってもよい。あるいは、アリール又はヘテロアリール環の隣接原子上の置換基の２つは、式：−Ｊ−（ＣＨ２）ｒ−Ｋ−（ここでＪとＫは、独立して、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｆ’又は単結合であり、ｒは１〜３の整数である）の置換基に置き換わってもよい。このように形成される新しい環の単結合の１つは、二重結合に置き換わってもよい。あるいは、アリール又はヘテロアリール環の隣接原子上の置換基の２つは、式：−（ＣＨ２）ｓ−Ｘ−（ＣＨ２）ｔ−（ここでｓとｔは、独立して、０〜３の整数であり、そしてＸは、−Ｏ−、−ＮＲｆ’−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲａ’−である）の置換基に置き換わってもよい。−ＮＲｆ’−及び−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｆ’−中の置換基：Ｒｆ’は、水素又は未置換（Ｃ１−Ｃ６）アルキルより選択される。
【００６５】
[0066]  「安定な化合物」と「安定な構造」は、反応混合物からの有用な純度の度合いまでの単離と、有効な治療薬剤への製剤化に耐えるほどに十分に頑丈である化合物を示すものである。
【００６６】
[0067]  本明細書に使用するように、「治療有効量」という用語は、一般に、本明細書に記載のように予防、抑制、又は治療されるべき障害の少なくとも１つの症状を改善するのに必要な量を意味する。「治療有効量」という句は、本発明のＧＳＮＯＲ阻害剤に関する場合、そのような治療を必要とする有意数の被検者においてＧＳＮＯＲ阻害剤が投与されるための特定の薬理学的応答をもたらすＧＳＮＯＲ阻害剤の投与量を意味する。特別な例において特別な被検者へ投与されるＧＳＮＯＲ阻害剤の治療有効量は、たとえそのような投与量が当業者によって治療有効量であるとみなされるとしても、本明細書に記載の状態／疾患を治療するのにいつでも有効であるわけではないことが重要である。
【００６７】
[0068]  Ｃ．Ｓ−ニトロソグルタチオンレダクターゼ阻害剤
[0069]  １．本発明の化合物
[0070]  その側面の１つにおいて、本発明は、式Ｉ：
【００６８】
【化２】
0005923157.tif 000003
【００６９】
［式中：
Ａｒ１とＡｒ２は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群より独立して選択され；
Ｘは、Ｃ又はＮからなる群より選択され；
Ｙは、ＸがＮであるときＣであり、そしてＸがＣであるときＮであり；そして
ｎは、０〜３である］に示す構造を有する化合物、又はその医薬的に許容される塩、立体異性体、又はプロドラッグを提供する。
【００７０】
[0071]  本発明のさらなる側面において、Ａｒ１に適した同一物（identity）には、限定されないが、置換フェニルが含まれ；そしてＡｒ２に適した同一物には、限定されないが、フェニル、置換フェニル、チオフェン−イル、置換チオフェン−イル、ピリジニル、置換ピリジニル、チアゾリル、置換チアゾリル、二環系アリール、置換二環系アリール、二環系ヘテロアリール、置換二環系ヘテロアリールからなる群が含まれる。 
【００７１】
[0072]  本発明のさらなる側面において、Ａｒ１に適した同一物には、限定されないが、
【００７２】
【化３】
0005923157.tif 000004
【００７３】
［式中：
Ｒ１は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、カルバモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルバモイル、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、及びＣ３−Ｃ６シクロアルコキシルからなる群より選択され；
Ｒ２は、ハロゲン、ヒドロキシル、カルバモイル、置換カルバモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルバモイル、スルファモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルファモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、シアノ、ニトロ、アミノ、ＣＦ３、カルボキシル、ウレイド、スルファモイルアミノ、Ｃ１−Ｃ６スルホンアミド、２−アミノ−２−オキソエチル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルコキシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群より選択され；
Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、シアノ、ニトロ、カルバモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルバモイル、スルファモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルファモイル、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、及びＣ３−Ｃ６シクロアルコキシルからなる群より選択される］が含まれる。
【００７４】
[0073]  本発明のさらなる側面において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３に適した同一物には、限定されないが、以下が含まれる：
Ｒ１は、水素及びメチルからなる群より選択される；
Ｒ２は、ヒドロキシル、カルボキシル、カルバモイル、メチルスルホンアミド、及びｔｅｒｔ−ブチル−カルボキシからなる群より選択され；そして
Ｒ３は、水素である。
【００７５】
[0074]  本発明のさらなる側面において、Ａｒ２に適した同一物には、限定されないが、フェニル、４−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロ−２−メトキシフェニル、４−ブロモフェニル、４−ブロモ−２−メトキシフェニル、３−ブロモフェニル、４−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−ヒドロキシフェニル、４−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、２−メトキシフェニル、４−クロロチオフェン−２−
イル、５−クロロチオフェン−２−イル、３−ブロモチオフェン−２−イル、４−ブロモチオフェン−２−イル、５−ブロモチオフェン−２−イル、５−ブロモチオフェン−３−イル、
【００７６】
【化４】
0005923157.tif 000005
【００７７】
［式中、Ｒ４は、水素、メチル、クロロ、フルオロ、ヒドロキシ、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、カルバモイル、ジメチルアミノ、アミノ、ホルムアミド、及びトリフルオロメチルからなる群より選択され；
Ｒ５は、水素、メチル、及びエチルからなる群より選択される］が含まれる。
【００７８】
[0075]  本発明のさらなる側面において、Ａｒ２に適した同一物には、限定されないが、フェニル、４−クロロ−２−メトキシフェニル、４−ブロモフェニル、４−ブロモ−２−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、４−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル、４−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル、及び５−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）チオフェン−２−イルが含まれる。
【００７９】
[0076]  ある置換基への結合が環中の２つの原子を連結する結合に交差するように示されるとき、このときそのような置換基は、環中のどの原子へも結合してよい。置換基が、所与の式の化合物の残り部分へそのような置換基が結合する原子を示さずに収載されるとき、このときそのような置換基は、そのような置換基中のどの原子を介しても結合してよい。置換基及び／又は可変基（variables）の組合せは、そのような組合せが安定な化合
物をもたらしさえすれば、許容される。
【００８０】
[0077]  本発明のある態様では、化合物１が除外される場合がある。
【００８１】
[0078]  本明細書に記載の化合物は、不斉中心を有する場合がある。不斉的に置換された原子を含有する本発明の化合物は、光学活性型又はラセミ型で単離することができる。当該技術分野では、ラセミ型の分割によるか又は光学活性の出発材料からの合成によるといった、光学活性型を製造する方法がよく知られている。本明細書に記載の化合物には、オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合、等の多くの幾何異性体も存在し得て、本発明では、そのようなすべての安定な異性体が考慮される。本発明の化合物のシス及びトランス幾何異性体が記載されて、異性体の混合物として、又は分離した異性型として単離され得る。特定の立体化学又は異性型が具体的に示されなければ、ある構造のすべてのキラル、ジアステレオマー、ラセミ、及び幾何異性型が企図される。示されるか又は記載される化合物のすべての互変異性体も、本発明の一部であるとみなされる。
【００８２】
[0079]  他に示さなければ、そのような非対称性より生じる異性体（例、すべてのエナンチオマー及びジアステレオマー）が本発明の範囲内に含まれると理解されたい。そのような異性体は、模範的な分離技術によるか又は立体化学的に制御された合成によって、実質的に純粋な形態で入手することができる。さらに、本出願において考察される構造と他
の化合物及び部分には、それらのすべての互変異性体も含まれる。アルケンには、Ｅ又はＺのいずれかのジオメトリーを適宜含めることができる。
【００８３】
[0080]  代表的なＧＳＮＯＲ阻害剤
[0081]  以下の表１は、本発明のＧＳＮＯＲ阻害剤として有用な式Ｉの代表的な新規ピロール類似体を収載する。表１に特定する、各化合物を製造するために使用し得る合成法（即ち、スキーム１、スキーム２、等）については、以下の実施例１に詳述する。いくつかの事例において、あるスキームの中間体が市販されていなければ、対応する方法（中間体Ａ、中間体Ｂ、等と呼ぶ）によりその出発材料又は中間体の合成について記載する。表１は、スキーム番号を提供し、スキームに示す出発材料を規定して、必要な場合は、中間体の参照を提供する。表１には、各化合物の裏付けとなる質量分析法のデータも含まれる。実施例２に記載のアッセイによってＧＳＮＯＲ阻害剤の活性を定量して、ＩＣ５０値を入手した。表１のＧＳＮＯＲ阻害剤、化合物１〜２４は、約１００μＭ未満のＩＣ５０を有した。表１のＧＳＮＯＲ阻害剤、化合物１、４〜６、及び８〜２３は、約５．０μＭ未満のＩＣ５０を有して、表１のＧＳＮＯＲ阻害剤、化合物１、５、８〜９、１１〜１２、及び１４〜２２は、約１．０μＭ未満のＩＣ５０を有した。
【００８４】
表１
【００８５】
【表１−１】
0005923157.tif 000006
【００８６】
【表１−２】
0005923157.tif 000007
【００８７】
【表１−３】
0005923157.tif 000008
【００８８】
【表１−４】
0005923157.tif 000009
【００８９】
[0082]  Ｄ．ＧＳＮＯＲ阻害剤を含んでなる医薬組成物
[0083]  本発明には、本明細書に記載の少なくとも１つのＧＳＮＯＲ阻害剤と少なくとも１つの医薬的に許容される担体を含んでなる医薬組成物が含まれる。好適な担体については、参照により本明細書に組み込まれる「レミントン：科学と実践（Remington: The Science and Practice）」第２０版（出版元：リッピンコット・ウィリアムズ・アンド・
ウィルキンス）に記載されている。本発明による医薬組成物は、１以上の非ＧＳＮＯＲ阻害活性薬剤も含んでよい。
【００９０】
[0084]  本発明の医薬組成物は、本明細書に記載の新規ＧＳＮＯＲ阻害剤を含むことができて、該医薬組成物は、ＧＳＮＯＲ阻害剤の活性を有することがこれまで知られていなかった既知の化合物、又はその組合せを含むことができる。
【００９１】
[0085]  ＧＳＮＯＲ阻害剤は、限定されないが、注射可能な剤形、分散液剤、ゲル剤、エアゾール剤、軟膏剤、クリーム剤、凍結乾燥製剤、乾燥散剤、錠剤、カプセル剤、制御放出製剤、迅速溶解製剤、遅延放出製剤、延長放出製剤、パルス放出製剤、即時放出及び制御放出混合製剤、等が含まれる、どの医薬的に許容される剤形でも利用することができる。具体的には、本明細書に記載のＧＳＮＯＲ阻害剤は：（ａ）経口、肺、静脈内、動脈内、鞘内、関節内、直腸、眼、結腸、非経口、槽内、膣内、腹腔内、局所、頬内、経鼻、及び局部投与からなる群より選択される投与用に；（ｂ）分散液剤、ゲル剤、エアゾール剤、軟膏剤、クリーム剤、錠剤、サシェ剤、及びカプセル剤からなる群より選択される剤形へ；（ｃ）凍結乾燥製剤、乾燥散剤、迅速溶解製剤、制御放出製剤、遅延放出製剤、延長放出製剤、パルス放出製剤、並びに即時放出及び制御放出混合製剤より選択される剤形へ；又は（ｄ）これらのあらゆる組合せへ製剤化することができる。
【００９２】
[0086]  呼吸器感染症では、吸入製剤を使用して、高い局所濃度を達成することができる。吸入に適した製剤には、上気道及び下気道の細菌感染症を治療するために吸入器又はネブライザーによって被感染患者の気管支内腔又は鼻腔へ分散させることが可能である、乾燥散剤又はエアゾール化又は気化させた溶液剤、分散液剤、又は懸濁液剤が含まれる。
【００９３】
[0087]  非経口、皮内、又は皮下の適用に使用される溶液剤又は懸濁液剤は、以下の成分の１以上を含むことができる：（１）注射用水、生理食塩水溶液、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、又は他の合成溶媒のような無菌希釈剤；（２）ベンジルアルコール又はメチルパラベンのような抗菌剤；（３）アスコルビン酸又は重亜硫酸ナトリウムのような抗酸化剤；（４）エチレンジアミン四酢酸のようなキレート形成剤；（５）酢酸塩、クエン酸塩、又はリン酸塩のような緩衝剤；及び（５）塩化ナトリウム又はデキストロースのような浸透圧の調整用の薬剤。ｐＨは、塩酸又は水酸
化ナトリウムのような酸又は塩基で調整することができる。非経口調製品は、ガラス又はプラスチックで作製される、アンプル、使い捨てシリンジ、又は多用量バイアルに密封することができる。
【００９４】
[0088]  注射可能な使用に適した医薬組成物は、無菌水溶液剤（水溶性である場合）、又は無菌の注射可能な溶液剤又は分散液剤の用時調製用の分散剤及び無菌散剤を含み得る。静脈内投与に好適な担体には、生理食塩水溶液、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（ＢＡＳＦ、ニュージャージー州パルシッパニー）、又はリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）が含まれる。すべての事例において、組成物は、無菌でなければならず、容易な注入可能性（syringability）が存在する程度まで流動的であるべきである。医薬組成物は、製
造及び保存の条件下で安定であるべきで、細菌及び真菌のような微生物の汚染作用に抗して保存されるべきである。
【００９５】
[0089]  担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコール、等）、及びこれらの好適な混合物を含んでなる、溶媒又は分散溶媒であり得る。適正な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティング剤の使用によって、（分散液の場合は）必要とされる粒径の維持によって、及び界面活性剤の使用によって維持することができる。微生物の作用の予防は、様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサール、等によって達成することができる。多くの場合において、等張剤、例えば、糖、マンニトール又はソルビトールのようなポリアルコール、及び塩化ナトリウムのような無機塩類を組成物に含めることが好ましいであろう。注射可能な組成物の長期化吸収は、吸収を遅らせる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを組成物に含めることによってもたらすことができる。
【００９６】
[0090]  無菌の注射可能な溶液剤は、必要とされる量の活性試薬（例、ＧＳＮＯＲ阻害剤）を、必要に応じて、上記に列挙した成分の１つ又は組合せとともに適正な溶媒に取り込むこと、それに続く濾過滅菌によって調製することができる。一般に、分散液剤は、基本の分散媒体と他の必要とされるあらゆる成分を含有する無菌担体へ少なくとも１つのＧＳＮＯＲ阻害剤を取り込むことによって調製する。無菌の注射可能な溶液剤の調製用の無菌散剤の場合、例示の調製法には、真空乾燥と凍結乾燥が含まれ、そのいずれも、先に無菌濾過したその溶液より、ＧＳＮＯＲ阻害剤＋所望される追加成分の散剤を産生する。
【００９７】
[0091]  一般に、経口組成物には、不活性希釈剤又は食用担体が含まれる。それらは、例えば、ゼラチンカプセルに被包するか又は錠剤へ圧縮することができる。経口療法上の投与の目的では、ＧＳＮＯＲ阻害剤を賦形剤とともに取り込んで、錠剤、トローチ剤、又はカプセル剤の形態で使用することができる。経口組成物はまた、洗口液としての使用のための液状担体を使用して調製し得て、ここでは液状担体中の化合物が経口的に適用されて口中で転がされて喀痰されるか、又は嚥下される。この組成物の一部として、医薬的に適合した結合剤、及び／又はアジュバント材料を含めることができる。
【００９８】
[0092]  吸入による投与では、化合物は、好適なデバイス由来の好適な推進剤（例、二酸化炭素のような気体、噴霧化液剤、気化溶液剤、又は乾燥散剤）を含有する加圧容器又はディスペンサーからのエアゾールスプレー剤の形態で送達される。経粘膜又は経皮投与では、浸透すべきバリアに適正な浸透剤を製剤中に使用する。当該技術分野では、そのような浸透剤が一般的に知られていて、例えば、経粘膜投与用の、洗浄剤、胆汁酸塩、及びフシジン酸誘導体が含まれる。経粘膜投与は、鼻腔スプレー剤又は坐剤の使用により達成することができる。経皮投与では、活性試薬を、当該技術分野で一般的に知られているような軟膏剤、軟膏、ゲル剤、又はクリーム剤へ製剤化する。この試薬はまた、坐剤（例えば、ココア脂や他のグリセリドのような慣用の坐剤基剤とともに）又は直腸送達用の停留
浣腸剤の形態で調製することができる。
【００９９】
[0093]  １つの態様において、ＧＳＮＯＲ阻害剤は、身体からの速やかな消失に抗して保護する担体とともに調製される。例えば、インプラントやマイクロカプセル化送達システムが含まれる、制御放出製剤を使用することができる。エチレンビニルアセテート、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、及びポリ乳酸のような生分解性、生体適合性のポリマーを使用することができる。このような製剤の製造の方法は、当業者に明らかであろう。この材料は、Alza Corporation 及び Nova Pharmaceutical 社より市販品を入手することができる。
【０１００】
[0094]  リポソーム懸濁液剤（ウイルス抗原に対するモノクローナル抗体が付いた、被感染細胞へ標的指向されるリポソーム剤が含まれる）も医薬的に許容される担体として使用することができる。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号に記載されるように、当業者に知られた方法に従って製造することができる。
【０１０１】
[0095]  さらに、ＧＳＮＯＲ阻害剤の懸濁液剤は、適正な油性の注射懸濁液剤として調製してよい。好適な脂溶性の溶媒又は担体には、ゴマ油のような脂肪オイル、又はオレイン酸エチル、トリグリセリドのような合成脂肪酸エステル、又はリポソームが含まれる。非脂質ポリカチオン性アミノポリマーも送達用に使用してよい。この懸濁液剤には、化合物の溶解性を高めて高濃度溶液剤の調製を可能にするのに適した安定化剤又は薬剤を含めてもよい。
【０１０２】
[0096]  経口又は非経口の組成物を単位剤形で製剤化することは、投与の容易さと投与量の均一性のために特に有利である。本明細書に使用する単位剤形は、治療される被検者への単位投与量として適した、物理的に別個の単位を意味して、各単位は、所望の治療効果をもたらすように計算された所定量のＧＳＮＯＲ阻害剤を必要とされる医薬担体とともに含有する。本発明の単位剤形への仕様は、ＧＳＮＯＲ阻害剤の独自の特徴と達成すべき特別な治療効果、並びに、そのような活性薬剤を個体の治療のために調合することの当該技術分野に固有の限界によって支配されて、直接的に依存する。
【０１０３】
[0097]  少なくとも１つのＧＳＮＯＲ阻害剤を含んでなる、本発明による医薬組成物は、１以上の医薬賦形剤を含むことができる。そのような賦形剤の例には、限定されないが、結合剤、充填剤、滑沢剤、懸濁剤、甘味剤、香味剤、保存剤、緩衝剤、湿潤剤、崩壊剤、発泡剤、及び他の賦形剤が含まれる。そのような賦形剤は、当該技術分野で知られている。例示の賦形剤には：（１）様々なセルロース及び架橋ポリビニルピロリドン、Ａｖｉｃｅｌ（登録商標）ＰＨ１０１及びＡｖｉｃｅｌ（登録商標）ＰＨ１０２のような微結晶性セルロース、珪化微結晶性セルロース（ＰｒｏＳｏｌｖ  ＳＭＣＣＴＭ）、トラガカントゴム、及びゼラチンが含まれる、結合剤；（２）様々なデンプン、乳糖、乳糖一水和物、及び無水乳糖のような充填剤；（３）アルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、コーンスターチ、軽度架橋ポリビニルピロリドン、ジャガイモデンプン、とうもろこしデンプン、及び加工デンプン、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、デンプングリコール酸ナトリウム、及びこれらの混合物のような崩壊剤；（４）圧縮される散剤の流動可能性に作用する薬剤が含まれる滑沢剤。ステアリン酸マグネシウム、Ａｅｒｏｓｉｌ（登録商標）２００のようなコロイド状二酸化シリコン、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、及びシリカゲルが含まれる；（５）コロイド状二酸化シリコンのような滑り剤；（６）ソルビン酸カリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸とその塩、ブチルパラベンのような他のパラヒドロキシ安息香酸エステル、エチル又はベンジルアルコールのようなアルコール類、フェノールのようなフェノール性化合物、又は塩化ベンザルコニウムのような四級化合物といった、保存剤；（７）微結晶性セルロース、乳糖、二塩基性リン酸カルシウム、サッカライド、及び／又は上記のいずれもの混合物といった医薬的
に許容される不活性充填剤のような希釈剤；希釈剤の例には、Ａｖｉｃｅｌ（登録商標）ＰＨ１０１及びＡｖｉｃｅｌ（登録商標）ＰＨ１０２のような微結晶性セルロース；乳糖一水和物、無水乳糖、及びＰｈａｒｍａｔｏｓｅ（登録商標）ＤＣＬ２１のような乳糖；Ｅｍｃｏｍｐｒｅｓｓ（登録商標）のような二塩基性リン酸カルシウム；マンニトール；デンプン；ソルビトール；ショ糖；及びブドウ糖が含まれる；（８）ショ糖、サッカリンショ糖、キシリトール、サッカリンナトリウム、シクラメート、アスパルテーム、及びアセスルフェームのような、あらゆる天然又は人工甘味料が含まれる、甘味剤；（９）ペパーミント、サリチル酸メチル、オレンジフレーバリング、Ｍａｇｎａｓｗｅｅｔ（登録商標）（ＭＡＦＣＯの商標）、バブルガムフレーバー、フルーツフレーバー、等のような香味剤；並びに（１０）有機酸と炭酸塩又は重炭酸塩のような発泡性のカップルが含まれる、発泡剤。好適な有機酸には、例えば、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、フマル酸、アジピン酸、コハク酸、及びアルギン酸と無水物、及び酸塩が含まれる。好適な炭酸塩及び重炭酸塩には、例えば、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、重炭酸カリウム、炭酸マグネシウム、グリシン炭酸ナトリウム、炭酸Ｌ−リジン、及び炭酸アルギニンが含まれる。あるいは、発泡性カップルの重炭酸ナトリウム成分だけが存在してよい。
【０１０４】
[0098]  Ｅ．本発明の組成物を含んでなるキット
[0099]  本発明には、本発明の組成物を含んでなるキットも含まれる。そのようなキットは、例えば、（１）少なくとも１つのＧＳＮＯＲ阻害剤；及び（２）溶媒又は溶液のような、少なくとも１つの医薬的に許容される担体を含むことができる。追加のキット成分には、例えば：（１）安定化剤、緩衝剤、等のような、本明細書において明確化した医薬的に許容される賦形剤のあらゆるもの、（２）キット成分を保持及び／又は混合するための少なくとも１つの容器、バイアル、又は同様の器具；及び（３）吸入器、ネブライザー、シリンジ、等のような送達器具が含まれてもよい。
【０１０５】
[00100]  Ｆ．      ＧＳＮＯＲ阻害剤を製造する方法
[00101]  本発明のＧＳＮＯＲ阻害剤は、既知の合成の方法論を使用して、又は既知の
合成の方法論の変更により、容易に合成することができる。当業者に容易に認められるように、以下に記載の方法論は、多様な置換基を有するピロールの合成を可能にする。以下の実施例において、例示の合成法を記載する。
【０１０６】
[00102]  １つの合成プロトコールに従って、適正に置換されたアセトフェノンと２−
フルアルデヒドの反応に続く強酸での処理によって、適正に置換された１，４，７−トリオンを得る。このトリオンの対応する１，２，５−三置換ピロールへの環化は、ｐ−トルエンスルホン酸の存在下に該トリオンを一級アミンと反応させることによって容易に達成される。本発明の１つの態様では、このピロールのＣ５でのフェニル環のさらなる誘導化が、例えば、様々なクロスカップリング反応によって容易に達成される。例えば、１−（４−クロロフェニル）エタノンと２−フルアルデヒドを反応させることによる三置換ピロールの合成によって、４−クロロフェニル基がＣ５にある標的ピロールを得る。この塩化アリールは、Suzuki カップリング条件下でのボロン酸との反応によって誘導化すること
ができる。このような定型的な誘導化の方法論によって、in vitro でのＧＳＮＯＲ阻害
試験用の化合物ライブラリーの速やかな産生が可能になる。本文書の実施例１では、様々な追加の方法について記載する。
【０１０７】
[00103]  必要とされるならば、当該技術分野で知られた定型的な手段によって、エナ
ンチオマー及びジアステレオマーのさらなる精製及び分離を達成することができる。このように、例えば、化合物のエナンチオマーの分離は、キラルＨＰＬＣと関連のクロマトグラフィー技術の使用によって達成することができる。ジアステレオマーも同様に分離することができる。しかしながら、いくつかの事例では、例えば、制御された沈殿化又は結晶化によるように、ジアステレオマーを物理的に簡便に分離させることができる。
【０１０８】
[00104]  本発明の方法は、本明細書に記載のように行なわれるとき、簡便にも、当該
技術分野で定型的に利用できる温度で実施することができる。１つの態様において、この方法は、約２５℃〜約１１０℃の範囲の温度で実施する。別の態様において、温度は、約４０℃〜約１００℃の範囲にある。なお別の態様において、温度は、約５０℃〜約９５℃の範囲にある。
【０１０９】
[00105]  塩基を必要とする合成工程は、簡便な有機又は無機塩基を使用して行う。典
型的には、この塩基は、求核性ではない。このように、１つの態様において、塩基は、炭酸塩、リン酸塩、水酸化物、アルコキシド、ジシラザンの塩、及び三級アミンより選択される。
【０１１０】
[00106]  本発明の方法は、本明細書に記載のように実施されるとき、反応体の性質及
び量と反応温度に依存して、数分後〜数時間後に実質的には完了している可能性がある。反応が実質的に完了しているときの決定は、簡便には、例えば、ＨＰＬＣ、ＬＣＭＳ、ＴＬＣ、及び１Ｈ  ＮＭＲのような、当該技術分野で知られた通常の技術によって評価することができる。
【０１１１】
[00107]  Ｇ．      治療の方法
[00108]  本発明には、開示される化合物の１以上の使用を通して医学的状態を予防す
るか又は治療する（例えば、その１以上の症状を軽減する）方法が含まれる。この方法は、治療有効量のＧＳＮＯＲ阻害剤を必要とする患者へそれを投与することを含む。本発明の組成物は、予防療法へも使用することができる。
【０１１２】
[00109]  本発明による治療の方法に使用されるＧＳＮＯＲ阻害剤は、（１）本明細書
に記載の新規ＧＳＮＯＲ阻害剤、又はその医薬的に許容される塩、そのプロドラッグ、又はその代謝産物；（２）本発明に先立って知られていたが、ＧＳＮＯＲ阻害剤であることは知られていなかった化合物、又はその医薬的に許容される塩、そのプロドラッグ、又はその代謝産物；又は（３）本発明に先立って知られていて、ＧＳＮＯＲ阻害剤であることが知られていたが、その化合物が本明細書に記載の治療の方法に有用であることは知られていなかった化合物、又はその医薬的に許容される塩、そのプロドラッグ、又はその代謝産物であり得る。
【０１１３】
[00110]  患者は、どの動物、家畜動物、酪農動物、野生動物でもよく、限定されない
が、ネコ、イヌ、ウマ、ブタ、及びウシと、好ましくはヒト患者が含まれる。本明細書に使用されるように、「患者」及び「被検者」という用語は、交換可能的に使用してよい。
【０１１４】
[00111]  有害なほどに高いレベルのＧＳＮＯＲ又はＧＳＮＯＲ活性がある被検者にお
いて、調節は、例えば、ＧＳＮＯＲ機能を壊すか又はダウンレギュレートする、又はＧＳＮＯＲレベルを減少させる開示化合物の１以上を投与することによって達成され得る。これらの化合物は、抗ＧＳＮＯＲ抗体又は抗体断片、ＧＳＮＯＲアンチセンス、ｉＲＮＡ、又は低分子のような他のＧＳＮＯＲ阻害剤、又は他の阻害剤とともに、単独で、又は本明細書に詳しく記載されるような他の薬剤と組み合わせて投与してよい。
【０１１５】
[00112]  本発明は、ＮＯドナー療法によって改善される障害に罹患した被検者を治療
する方法を提供する。このような方法は、治療有効量のＧＳＮＯＲ阻害剤を被検者へ投与することを含む。
【０１１６】
[00113]  本明細書に使用されるように、「治療すること」は、疾患、状態、又は障害
を克服する目的のための患者の管理及び看護について記載して、症状又は合併症の発現を
防ぐための本発明の化合物の投与、症状又は合併症を軽減すること、又は疾患、状態、又は障害を消失させることが含まれる。より具体的には、「治療すること」には、疾患（障害）状態の少なくとも１つの有害な症状又は影響、疾患の進行、疾患の原因体（例、細菌又はウイルス）、又は他の異常な状態を逆転させること、弱めること、軽減すること、最小化すること、抑制すること、又は休止させることが含まれる。治療は、症状及び／又は病態が改善する間は続けられる。
【０１１７】
[00114]  障害には、肺中の低酸素血症及び／又は平滑筋狭窄及び／又は肺感染及び／
又は肺損傷に関連した肺の障害（例、肺性高血圧、ＡＲＤＳ、喘息、肺炎、肺線維症／間質性肺疾患、嚢胞性線維症、ＣＯＰＤ）、高血圧、虚血性冠症候群、アテローム性動脈硬化症、心不全、緑内障といった状態が含まれる心臓血管系疾患及び心疾患、血管新生を特徴とする疾患（例、冠動脈疾患）、血栓症発生のリスクがある障害、再狭窄発生のリスクがある障害、慢性炎症性疾患（例、ＡＩＤ認知症及び乾癬）、アポトーシス発生のリスクがある疾患（例、心不全、アテローム性動脈硬化症、神経変性障害、関節炎、及び肝損傷（虚血性又はアルコール性））、インポテンツ、食物への渇望に応じた摂食に起因する肥満、卒中、再灌流損傷（例、心臓又は肺における外傷性筋肉損傷、又は圧挫損傷）、並びに後続の虚血性イベントに抗するＮＯ保護への心臓又は脳のプレコンディショニングが有益である障害を含めることができる。
【０１１８】
[00115]  １つの態様において、本発明の化合物、又はその医薬的に許容される塩、又
はそのプロドラッグ又は代謝産物は、ＮＯドナーと組み合わせて投与することができる。ＮＯドナーは、一酸化窒素又は関連レドックス種を供与して、より一般的には、一酸化窒素の生理活性、即ち、一酸化窒素を用いて確認される活性、例えば、血管弛緩、又は受容体タンパク質（例、ｒａｓタンパク質、アドレナリン作用性受容体、ＮＦκＢ）の刺激又は阻害を提供する。Ｓ−ニトロソ、Ｏ−ニトロソ、Ｃ−ニトロソ、及びＮ−ニトロソ化合物とそのニトロ誘導体、及び金属ＮＯ錯体が含まれるが、他のＮＯ生理活性産生化合物も除外されない、本発明に有用なＮＯドナーについては、参照により本明細書に組み込まれる「一酸化窒素研究の方法（Methods in Nitric Oxide Research）」Feelisch et al．監修、71〜115 頁（Ｊ．Ｓ．，ジョン・ウィリー・アンド・サンズ、ニューヨーク、1996）に記載されている。ニトロソが三級炭素へ付いているＣ−ニトロソ化合物である、本発明に有用であるＮＯドナーには、米国特許第６，３５９，１８２号とＷＯ０２／３４７０５に記載されるものが含まれる。Ｓ−ニトロソ化合物の例には、本発明に有用なＳ−ニトロソチオールを含めて、例えば、Ｓ−ニトロソグルタチオン、Ｓ−ニトロソ−Ｎ−アセチルペニシラミン、Ｓ−ニトロソ−システインとそのエチルエステル、Ｓ−ニトロソシステイニルグリシン、Ｓ−ニトロソ−γ−メチル−Ｌ−ホモシステイン、Ｓ−ニトロソ−Ｌ−ホモシステイン、Ｓ−ニトロソ−γ−チオ−Ｌ−ロイシン、Ｓ−ニトロソ−δ−チオ−Ｌ−ロイシン、及びＳ−ニトロソアルブミンが含まれる。本発明に有用な他のＮＯドナーの例は、ナトリウムニトロプルシド（ニプリド）、亜硝酸エチル、イソソルビド、ニトログリセリン、モルシドミンであるＳＩＮ  １、フロキサミン、Ｎ−ヒドロキシ（Ｎ−ニトロサミン）、及びＮＯ又は疎水性ＮＯドナーで飽和されたペルフルオロカーボンである。
【０１１９】
[00116]  既知のＮＯ放出剤、アムロジピンのＲ（＋）エナンチオマー（Zhang X. P et
al. 2002 J. Cardiovascular Pharmacology 39, 208-214）とＧＳＮＯＲ阻害剤の組合せも、本発明の態様である。
【０１２０】
[00117]  本発明はまた、病理学的に増殖する細胞に罹患した被検者を治療する方法を
提供し、ここで該方法は、ＧＳＮＯＲの阻害剤の治療有効量を前記被検者へ投与することを含む。ＧＳＮＯＲの阻害剤は、医薬的に許容される担体との組合せにおける、上記に定義されるような化合物、又はその医薬的に許容される塩、又はそのプロドラッグ又は代謝産物である。治療は、症状及び／又は病態が改善する間は続けられる。
【０１２１】
[00118]  別の態様において、病理学的に増殖する細胞は、病理学的に増殖する微生物
であり得る。関与する微生物は、該微生物がニトロソ化ストレスから保護されるようにＧＳＮＯＲが発現されるもの、又は該微生物に感染された宿主細胞がこの酵素を発現することによってニトロソ化ストレスから保護されるものであり得る。「病理学的に増殖する微生物」という用語は、本明細書において、病理学的微生物を意味するために使用されて、限定されないが、病理学的細菌、病理学的ウイルス、病理学的クラミジア、病理学的原生動物、病理学的リケッチア、病理学的真菌、及び病理学的マイコプラズマが含まれる。適用可能な微生物に関するさらなる詳細は、米国特許第６，０５７，３６７号のカラム１１及び１２に説明されている。「病理学的微生物に感染された宿主細胞」という用語には、病理学的ウイルスに感染された哺乳動物細胞だけでなく、細胞内の細菌又は原生動物を含有する哺乳動物細胞（例、結核菌、ライ菌（ライ病）、又は腸チフス菌（腸チフス）を含有するマクロファージ）も含まれる。
【０１２２】
[00119]  別の態様において、病理学的に増殖する細胞は、病理学的蠕虫であり得る。
「病理学的蠕虫」という用語は、本明細書において、病理学的線虫、病理学的吸虫、及び病理学的条虫を意味するために使用される。適用可能な蠕虫に関するさらなる詳細は、米国特許第６，０５７，３６７号のカラム１２に説明されている。
【０１２３】
[00120]  別の態様において、病理学的に増殖する細胞は、病理学的に増殖する哺乳動
物細胞であり得る。本明細書に使用される「病理学的に増殖する哺乳動物細胞」という用語は、前記哺乳動物において、その哺乳動物又はその臓器に有害な効果を引き起こすほどに大きさ又は数が増大する、哺乳動物の細胞を意味する。この用語には、例えば、病理学的に増殖するか又は拡大して再狭窄を引き起こす細胞、病理学的に増殖するか又は拡大して良性前立腺肥大を引き起こす細胞、病理学的に増殖して心筋肥大を引き起こす細胞、関節炎の滑膜細胞のように炎症部位で増殖する細胞、又は細胞増殖性障害に関連した細胞が含まれる。
【０１２４】
[00121]  本明細書に使用されるように、「細胞増殖性障害」という用語は、細胞の非
調節及び／又は異常な増殖が癌性又は非癌性であり得る望まれない状態又は疾患（例えば、乾癬状態）の発症をもたらし得る状態を意味する。本明細書に使用されるように、「乾癬状態」という用語は、角化細胞の過剰増殖、炎症性の細胞浸潤、及びサイトカインの変化が関与する障害を意味する。細胞増殖性障害は、前癌状態又は癌であり得る。癌は、原発性癌又は転移性癌、又はその両方であり得る。
【０１２５】
[00122]  本明細書に使用されるように、「癌」という用語には、肺癌、乳癌、結腸癌
、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腺癌、扁平上皮癌、肉腫、悪性膠腫、横紋筋肉腫、肝細胞癌、頭頚部癌、悪性メラノーマ、非メラノーマ皮膚癌のような固形腫瘍、並びに、白血病、小児白血病及びリンパ腫、多発性骨髄腫、ホジキン病、リンパ球及び皮膚起源のリンパ腫、急性及び慢性白血病（急性リンパ芽球性、急性骨髄芽球性、又は慢性骨髄芽球性白血病のような）、形質細胞性新生物、リンパ性新生物、及びＡＩＤＳに関連した癌のような、造血系腫瘍及び／又は悪性腫瘍が含まれる。
【０１２６】
[00123]  乾癬状態に加えて、本発明の組成物を使用して治療され得る増殖性疾患の種
類は、表皮及び類皮嚢胞、脂肪腫、腺腫、毛細及び皮膚血管腫、リンパ管腫、母斑病変、奇形腫、腎腫、筋線維腫症、骨形成性腫瘍、及び他の形成異常塊、等である。１つの態様において、増殖性疾患には、形成異常と類似の障害が含まれる。
【０１２７】
[00124]  １つの態様において、癌を治療することは、腫瘍サイズの低下、腫瘍数の減
少、腫瘍増殖の遅延、原発腫瘍部位から離れた他の組織又は臓器における転移性病巣の減
少、患者生存率の改善、又は患者の生命の質の改善、又は上記の少なくとも２つを含む。
【０１２８】
[00125]  別の態様において、細胞増殖性障害を治療することは、細胞増殖の速度の低
下、増殖性細胞の比率の低下、細胞増殖の領域又は範囲の大きさの減少、又は異常な外観又は形態を有する細胞の数又は比率の減少、又は上記の少なくとも２つを含む。
【０１２９】
[00126]  なお別の態様において、本発明の化合物又はその医薬的に許容される塩、又
はそのプロドラッグ、又はその代謝産物は、第二の化学療法剤と組み合わせて投与することができる。さらなる態様において、第二の化学療法剤は、タモキシフェン、ラロキシフェン、アナストロゾール、エクセメスタン、レトロゾール、シスプラチン、カルボプラチン、パクリタキセル、シクロホスファミド、ロバスタチン、ミノシン、ゲンシタビン、ａｒａＣ、５−フルオロウラシル、メトトレキセート、ドセタキセル、ゴセレリン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ノコダゾール、テニポシド、エトポシド、エポチロン、ナベルビン、カンプトテシン、ダウノニビシン、ダクチノマイシン、ミトザントロン、アムサクリン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ソラフェニブ、マレイン酸スニチニブ、トラスツズマブ、リツキシマブ、セツキシマブ、及びベバシズマブからなる群より選択される。
【０１３０】
[00127]  １つの態様において、本発明の化合物又はその医薬的に許容される塩、その
プロドラッグ、又はその代謝産物は、ニトロソ化又は酸化ストレスをかける薬剤と組み合わせて投与することができる。本発明のＧＳＮＯＲ阻害剤との組合せ療法においてニトロソ化ストレスを選択的にかけて病理学的に増殖する細胞の増殖を阻害する薬剤とその投与量及び投与経路には、本明細書に組み込まれる米国特許第６，０５７，３６７号に開示されるものが含まれる。本明細書のＧＳ−ＦＤＨ阻害剤との組合せ療法において酸化ストレスをかける補助薬剤（即ち、ＧＳＨ（グルタチオン）に対するＧＳＳＧ（酸化グルタチオン）の比、又はＮＡＤ（Ｐ）Ｈに対するＮＡＤ（Ｐ）の比を高める薬剤、又はチオバルビツール酸誘導体を増加させる薬剤）には、例えば，Ｌ−ブチオニン−Ｓ−スルホキシミン（ＢＳＯ）、グルタチオンレダクターゼ阻害剤（例、ＢＣＮＵ）、ミトコンドリア呼吸の阻害剤又は脱共役剤、及び反応性酸素種（ＲＯＳ）を高める薬物（例、アドリアマイシン）が標準の投与経路での標準投与量で含まれる。
【０１３１】
[00128]  ＧＳＮＯＲ阻害剤は、ホスホジエステラーゼ阻害剤（例、ロリプラム、シロ
ミラスト、ロフルミラスト、Ｖｉａｇｒａ（登録商標）（クエン酸シルデニフィル）、Ｃｉａｌｉｓ（登録商標）（タダラフィル）、Ｌｅｖｉｔｒａ（登録商標）（バルデニフィル）、等）、β−アゴニスト、ステロイド、又はロイコトリエンアンタゴニスト（ＬＴＤ４）とも同時投与してよい。当業者は、改善すべき障害に依って、適正な治療有効量を容易に決定することができる。
【０１３２】
[00129]  ＧＳＮＯＲ阻害剤は、β−アドレナリン作用性のシグナル伝達を改善するた
めの手段として使用してよい。特に、ＧＳＮＯＲの阻害剤は、単独で、又はβ−アゴニストとの組合せにおいて、心不全、又は高血圧症及び喘息のような他の血管系障害を治療するか又はそれらに対して保護するために使用し得る。ＧＳＮＯＲ阻害剤はまた、平滑筋（例、気道及び血管）弛緩をもたらすＧｓ  Ｇ−タンパク質を増強することによって、並びに、Ｇｑ  Ｇ−タンパク質を減弱させることによって、それにより平滑筋収縮を（例えば、気道及び血管において）妨げる、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）を調節するために使用することができる。
【０１３３】
[00130]  ＮＯドナー療法によって改善される障害に罹患した被検者の治療のための治
療有効量とは、治療される障害の改善を引き起こすか又はその障害に関連したリスクに対して保護する、in vivo でのＧＳＮＯＲ阻害量である。例えば、喘息では、治療有効量は
、気管支拡張に有効な量であり；嚢胞性線維症では、治療有効量は、気道閉塞改善に有効な量であり；ＡＲＤＳでは、治療有効量は、低酸素血症改善に有効な量であり；心疾患では、治療有効量は、アンギナ緩和又は血管新生誘導に有効な量であり；高血圧症では、治療有効量は、血圧低下に有効な量であり；虚血性冠動脈障害では、治療有効量は、血流増加に有効な量であり；アテローム性動脈硬化症では、治療有効量は、内皮機能不全の逆転に有効な量であり；緑内障では、治療有効量は、眼内圧低下に有効な量であり；血管新生を特徴とする疾患では、治療有効量は、血管新生阻害に有効な量であり；血栓発生のリスクがある障害では、治療有効量は、血栓予防に有効な量であり；再狭窄発生のリスクがある障害では、治療有効量は、再狭窄阻害に有効な量であり；慢性炎症性疾患では、治療有効量は、炎症抑制に有効な量であり；アポトーシス発生のリスクがある障害では、治療有効量は、アポトーシス予防に有効な量であり；インポテンスでは、治療有効量は、勃起の達成又は持続に有効な量であり；肥満では、治療有効量は、満腹感を引き起こすのに有効な量であり；卒中では、治療有効量は、血流増加又はＴＩＡ保護に有効な量であり；再灌流損傷では、治療有効量は、機能向上に有効な量であり；心臓及び脳のプレコンディショニングでは、治療有効量は、細胞保護に有効な量（例えば、トリポニン又はＣＰＫによって測定されるような）である。
【０１３４】
[00131]  病理学的に増殖する細胞に罹患した被検者の治療のための治療有効量は、抗
増殖に有効な量である、in vivo でのＧＳＮＯＲ阻害量を意味する。本明細書に使用される、このような抗増殖に有効な量は、少なくとも約２０％、少なくとも約１０％、少なくとも約５％、又は少なくとも約１％の増殖速度の抑制を引き起こす量を意味する。
【０１３５】
[00132]  一般に、投与量、即ち治療有効量は、治療される被検者の体重１ｋｇにつき
、１日あたり、１μｇ〜１０ｇの範囲に及び、そしてしばしば、１０μｇ〜１ｇ又は１０μｇ〜１００ｍｇの範囲に及ぶ。
【０１３６】
[00133]  Ｈ．他の使用
[00134]  本発明の化合物又はその医薬的に許容される塩、又はそのプロドラッグ又は
代謝産物は、そのような化合物の存在が有益であり得る状況において、様々な器具へ適用することができる。そのような器具は、どのデバイス又は容器であってもよい（例えば、患者への埋め込みに先立って外科用メッシュ又は心臓血管ステントをコートするのにＧＳＮＯＲ阻害剤を使用し得る埋め込みデバイス）。本発明のＧＳＮＯＲ阻害剤はまた、in vitro アッセイ目的又は細胞を培養するための様々な器具へ適用することができる。
【０１３７】
[00135]  本発明の化合物又はその医薬的に許容される塩、又はそのプロドラッグ又は
代謝産物はまた、抗体、天然リガンド、等のような、ＧＳＮＯＲ阻害化合物への結合パートナーの開発、単離、又は精製のための薬剤として使用することができる。当業者は、本発明の化合物に関連した使用を容易に決定することができる。
【実施例】
【０１３８】
[00136]  以下の実施例は、本発明を例解するために示す。しかしながら、本発明は、
これらの実施例に記載される特定の条件又は詳細に限定されないことを理解されたい。本出願を通して、米国特許が含まれる公的に利用可能な文書へのありとあらゆる参考文献が参照により具体的に組み込まれる。
【０１３９】
[00137]  実施例１：新規ＧＳＮＯＲピロール阻害剤を製造する一般的な方法と具体的
な方法
[00138]  本実施例は、表１に図示するＧＳＮＯＲ阻害剤を製造するためのスキームに
ついて記載する。６つの共通中間体、中間体Ａ〜Ｆについて初めに記載した後で、合成スキームについて記載する。特別な化合物に特定であるスキームもあれば、代表的な化合物
を製造するための例示の方法が含まれる一般的なスキームもある。
【０１４０】
中間体の合成
[00139]  中間体Ａ：６−（４−ブロモフェニル）−３，６−ジオキソヘキサン酸エチ
ルの合成。
【０１４１】
【化５】
0005923157.tif 000010
【０１４２】
[00140]  工程１：４−（４−ブロモフェニル）−４−オキソブタン酸（Ａ−１）の合
成。無水三塩化アルミニウム（２９．１ｇ，２１８ミリモル）をジクロロメタン（１２０ｍＬ）に懸濁させて、０℃へ冷やした。ブロモベンゼン（３５．１ｇ，２２４ミリモル）を慎重に加えた。添加が完了したとき、無水コハク酸（１０．０ｇ，１００ミリモル）を１０分量で慎重に加えた。次いで、この混合物を室温へ温めて、４時間撹拌した。ＴＬＣは、この反応が完了していることを示し、６Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）を滴下した。固形物を濾過し、蒸留水（１０ｍＬｘ２）で洗浄し、真空で乾燥させて、（Ａ−１）（２２ｇ，収率８２％）を白色の固形物として得た．
[00141]  工程２及び工程３：６−（４−ブロモフェニル）−３，６−ジオキソヘキサ
ン酸エチル（中間体Ａ）の合成。（Ａ−１）（５．００ｇ，１８．６ミリモル）の無水ＭｅＣＮ（５０ｍＬ）溶液へＣＤＩ（３．９１ｇ，２４．２ミリモル）を加えた。この溶液を室温で２時間撹拌すると赤くなって（Ａ−２）を得て、これを次の工程に精製せずに使用した。３−エトキシ−３−オキソプロパン酸カリウム（６．３２ｇ，３７．２ミリモル）の無水ＭｅＣＮ（２００ｍＬ）懸濁液へＴＥＡ（５．６３ｇ，５５．８ミリモル）と無水塩化マグネシウム（５．３ｇ，５５．８ミリモル）を０℃で徐々に加えた。この混合物を室温で２時間撹拌し、これへ（Ａ−２）の溶液を分量で加えた。この混合物を室温で一晩撹拌した。揮発物質を減圧下に除去して、残渣をＥＡ（２５０ｍＬ）に溶かし、水（５０ｍＬｘ２）と塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝３：１）によって精製して、中間体Ａ（５．３ｇ，収率８８％）を茶褐色の固形物として得た。
【０１４３】
[00142]  中間体Ｂ：６−（４−メトキシフェニル）−３，６−ジオキソヘキサン酸エ
チルの合成
【０１４４】
【化６】
0005923157.tif 000011
【０１４５】
[00143]  ６−（４−メトキシフェニル）−３，６−ジオキソヘキサン酸エチルの合成
。中間体Ａの合成の工程２及び３の記載と同じ手順に従って、４−（４−メトキシフェニ
ル）−４−オキソブタン酸（９．５ｇ，４５．６７３ミリモル）を６−（４−メトキシフェニル）−３，６−ジオキソヘキサン酸エチルへ変換して、中間体Ｂ（１０．１５ｇ，８０％）を茶褐色の固形物として得た。
【０１４６】
[00144]  下記に記載の中間体Ｃ、Ｄ、Ｅ、及びＦを製造するための一般的な方法
【０１４７】
【化７】
0005923157.tif 000012
【０１４８】
[00145]  代表的な手順：中間体Ｃ、７−（４−メトキシフェニル）−４，７−ジオキ
ソヘプタン酸エチル（Ｒ２＝４−メトキシフェニル）の合成。
【０１４９】
【化８】
0005923157.tif 000013
【０１５０】
[00146]  工程１：（Ｅ）−３−フラン−２−イル−１−（４−メトキシ−フェニル）
−プロペノンの合成。２−フルアルデヒド（５．８５ｇ，６０．９２ミリモル）の溶液を４−メトキシアセトフェノン（８．５ｇ，５６．６ミリモル）のメタノール溶液（１２０ｍＬ）へ加えて、ナトリウムメトキシド（３．１ｇ，５６．６ミリモル）の添加を続けた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、溶媒の真空での除去を続けた。得られる混合物を水（１３０ｍＬ）で希釈して、酢酸エチル（３５０ｍＬ）で抽出した。水層を酢酸エチル（１００ｍＬ）で再抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を真空で除去して、生成物：（Ｅ）−３−フラン−２−イル−１−（４−メトキシ−フェニル）−プロペノン（１２．６ｇ，９７％）を橙色の固形物として得た。
【０１５１】
[00147]  工程２：７−（４−メトキシフェニル）−４，７−ジオキソヘプタン酸エチ
ルの合成。（Ｅ）−３−フラン−２−イル−１−（４−メトキシ−フェニル）−プロペノン（１２．６ｇ，５５．２ミリモル）のエタノール（２３７ｍＬ）溶液へ濃ＨＣｌ（５９ｍＬ）を加えた。この反応混合物を還流下に１６時間加熱し、濃縮し、ジクロロメタン（２５０ｍＬ）で希釈して、得られる有機層を水（２５ｍＬ）で洗浄した。相分離の後で、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を真空で除去して粗製の混合物を得て、これをシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、７−（４−メトキシフェニル）−４，７−ジオキソヘプタン酸エチル（６．８９ｇ，４３％）を得た。
【０１５２】
[00148]  中間体Ｄ：７−（４−ブロモフェニル）−４，７−ジオキソヘプタン酸エチ
ル（Ｒ２＝４−ブロモフェニル）。
【０１５３】
【化９】
0005923157.tif 000014
【０１５４】
中間体Ｃの記載と同じ手順に従った。
【０１５５】
[00149]  中間体Ｅ：７−（４−ブロモフェニル）−４，７−ジオキソヘプタン酸エチ
ル（Ｒ２＝４−ブロモ−２−メトキシフェニル）。
【０１５６】
【化１０】
0005923157.tif 000015
【０１５７】
下記に記載のケトン出発材料の合成（工程１）をして、中間体Ｃの記載と同じ手順に従った。
【０１５８】
[00150]  １−（４−ブロモ−２−メトキシフェニル）エタノン（中間体Ｅの合成の出
発材料）の合成
【０１５９】
【化１１】
0005923157.tif 000016
【０１６０】
[00151]  酢酸３−ブロモフェニル（Ｅ−１）の合成。３−ブロモフェノール（５０ｇ
，０．２９モル）のピリジン（２００ｍＬ）及びジクロロメタン（１００ｍＬ）撹拌懸濁液へ塩化アセチル（２５ｍＬ，０．３５モル）を０℃で滴下して、この混合物を室温で１８時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳは、この反応が完了していることを示した。ピリジンとジクロロメタンを真空で蒸発させた。水（６００ｍＬ）を加えて、塩酸でｐＨ２に酸性化した。この反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬｘ３）で抽出して、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝６０：１）によって精製して、化合物（Ｅ−１）（４６ｇ，７４％）を無色の液体として得た。
【０１６１】
[00152]  １−（４−ブロモ−２−ヒドロキシフェニル）エタノン（Ｅ−２）の合成。
化合物（Ｅ−１）（４６ｇ，０．０．２１モル）及び無水塩化アルミニウム粉末（５７ｇ，０．４２モル）の撹拌懸濁液を１６０℃まで３時間加熱した。この反応混合物を室温へ冷やして、氷（２００ｇ）と水（８００ｍＬ）を注いで、塩酸でｐＨ７に調整した。この反応物を酢酸エチル（５００ｍＬｘ３）で抽出し、有機相を飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝６０：１）によって精製して、化合物（Ｅ−２）（３５．１ｇ，７６％）を淡緑色の固形物として得た。
【０１６２】
[00153]  １−（４−ブロモ−２−メトキシフェニル）エタノン（Ｅ−３）の合成。化
合物（Ｅ−２）（２５ｇ，０．１２モル）及び炭酸カリウム（２４ｇ，０．１８モル）の無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）懸濁液へＭｅＩ（２２．６ｍＬ，０．２３モル）を加えて、この反応混合物を室温で一晩撹拌した。ＬＣＭＳは、この反応が完了していることを示した。次いで、水（３００ｍＬ）を注ぎ、この混合物を酢酸エチル（２００ｍＬｘ３）で抽出し、有機相を飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、化合物（Ｅ−３）（２６．１ｇ，９８％）を無色の固形物として得た。
【０１６３】
[00154]  中間体Ｆ：７−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−４，７−ジオキソ
ヘプタン酸エチル（Ｒ２＝４−クロロ−２−メトキシフェニル）。
【０１６４】
【化１２】
0005923157.tif 000017
【０１６５】
下記に記載のケトン出発材料の合成（工程１）をして、中間体Ｃの記載と同じ手順に従った。
【０１６６】
[00155]  １−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）エタノン（Ｆ−３）（中間体Ｆ
の合成の出発材料）の合成
【０１６７】
【化１３】
0005923157.tif 000018
【０１６８】
[00156]  １−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）エタノン（Ｆ−３）の合成。１
−（４−ブロモ−２−メトキシフェニル）エタノン（Ｅ−３）の３工程合成において、すぐ上に記載した手順に従った。
【０１６９】
[00157]  スキーム１：１Ｆ、１Ｇ、及び１Ｈの一般構造があるＧＳＮＯＲ阻害剤を製
造するための一般的なスキーム。
【０１７０】
【化１４】
0005923157.tif 000019
【０１７１】
[00158]  スキーム１の代表的な手順：Ｒ２＝フェニルである実施例。４，７−ジオキ
ソ−７−フェニル−ヘプタン酸（１Ａの例）と（１Ｂ）は、ともに市販されている。
【０１７２】
[00159]  工程１：４−［２−（２−カルボキシ−エチル）−５−フェニル−ピロール
−１−イル］−安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１Ｃ，Ｒ２＝フェニル）の製造。４，７−ジオキソ−７−フェニル−ヘプタン酸（３．５７ミリモル、１．０当量）の酢酸（１０ｍｌ）撹拌溶液へ４−アミノ安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０５当量、３．７５ミリモル）を加えた。この混合物を８０℃まで３６時間加熱した。溶媒を真空で蒸発させて、粗製の残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。酢酸エチル／ヘキサン（ヘキサン中０％〜５０％酢酸エチル、２０分にわたる）での勾配溶出によって、適正な画分の合体と溶媒の真空での蒸発の後で、半純粋な生成物を得た。得られた黄褐色の固形物（収率５９％）をさらに精製せずに使用した。
【０１７３】
[00160]  工程２：４−［２−（２−カルバモイル−エチル）−５−フェニルピロール
−１−イル］−安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１Ｄ，Ｒ２＝フェニル）の製造。４−［２−（２−カルボキシ−エチル）−５−フェニル−ピロール−１−イル］−安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．３３ミリモル，１．０当量）のＴＨＦ（１０ｍｌ）撹拌溶液へＣＤＩ（１，１’カルボニルジイミダゾール、１．６０ミリモル、１．２当量）を加えた。この混合物を４５℃で２時間撹拌した。次いで、この反応混合物へ酢酸アンモニウム（１．７２ミリモル、１．３当量）を加えた。この混合物を４５℃で１６時間撹拌した。
【０１７４】
[00161]  この反応混合物を水（１００ｍＬ）で希釈して、酢酸エチル（３ｘ７５ｍＬ
）で抽出した。有機相を１Ｎクエン酸（１ｘ１００ｍＬ）、水（１ｘ１００ｍＬ）で洗浄して、乾燥（ＭｇＳＯ４）させた。溶媒を蒸発させて、残渣をフラッシュシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィーによって精製した。酢酸エチル／ヘキサン（ヘキサン中０％〜７０％酢酸エチル、３０分にわたる）での勾配溶出によって、適正な画分の合体と溶媒の真空での蒸発の後で、生成物（収率７３％）を黄褐色の固形物として得た。
【０１７５】
[00162]  工程３：４−［２−（２−シアノ−エチル）−５−フェニル−ピロール−１
−イル］−安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１Ｅ，Ｒ２＝フェニル）の製造。４−［２−（２−カルバモイル−エチル）−５−フェニルピロール−１−イル］−安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．９２ミリモル、１．０当量）のジオキサン及びピリジン撹拌溶液を氷浴で冷やした。この混合物へ無水トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ，７．８４ミリモル、２．０当量）を加えた。１０分後、氷浴を外して、この反応物をそのまま室温へ一晩温めた。溶媒を真空で蒸発させて、残渣をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ３（１５０ｍＬ）で処理した。有機層を分離させ、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させて、溶媒を真空で蒸発させた。残渣を４０ｇの精製用ＲｅｄｉＳｅｐシリカゲルカラム上へロードした。酢酸エチル／ヘキサン（ヘキサン中０％〜１０％酢酸エチル、２５分にわたる）での勾配溶出によって、適正な画分の合体と溶媒の真空での蒸発の後で、生成物（収率６２％）を黄色の固形物として得た。
【０１７６】
[00163]  工程４：４−｛２−フェニル−５−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル
）エチル］−ピロール−１−イル｝−安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（表１中の化合物３，１Ｆ，ここでＲ２＝フェニル）の製造。４−［２−（２−シアノ−エチル）−５−フェニル−ピロール−１−イル］−安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．３１ミリモル、１．０当量）のトルエン（１２ｍｌ）撹拌溶液へアジドトリメチルシラン（ＴＭＳＮ３）（４．６２ミリモル、２．０当量）とＳｎ（Ｂｕ）２Ｏ（酸化ジブチルスズ（ＩＶ））（０．２３ミリモル、０．１当量）を加えた。得られる混合物を１１０℃まで一晩加熱した。溶媒を真空で蒸発させて、残渣を４０ｇの精製用ＲｅｄｉＳｅｐシリカゲルカラム上へロードした。メタノール／ＤＣＭ（ＤＣＭ中０％〜７％メタノール、２５分にわたる）での勾配溶出によって、適正な画分の合体と溶媒の真空での蒸発の後で、生成物：４−｛２−フェニル−５−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］−ピロール−１−イル｝−安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（収率６２％）を得た。
【０１７７】
[00164]  工程５：４−｛２−フェニル−５−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル
）−エチル］−ピロール−１−イル｝−安息香酸（表１の化合物２、１Ｇ，ここでＲ２＝フェニル）の製造。４−｛２−フェニル−５−［２−（１ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］−ピロール−１−イル｝−安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．３４ミリモル、１．０当量）のギ酸（４．２ｍｌ）溶液を室温で４２時間撹拌した。溶媒を真空で蒸発させて、残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製した。溶媒の真空での除去によって、１５６ｍｇの所望生成物：４−｛２−フェニル−５−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］−ピロール−１−イル｝−安息香酸（３２％）と、ｔ−ブチル基がテトラゾール環へ移動した副生成物（１８０ｍｇ，３７％）を得た。
【０１７８】
[00165]  工程６：４−｛２−フェニル−５−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル
）−エチル］−ピロール−１−イル｝−ベンズアミド（表１の化合物、１Ｆ，ここでＲ２＝フェニル）の製造。４−｛２−フェニル−５−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−エチル］−ピロール−１−イル｝−安息香酸（０．３７ミリモル、１．０当量）のＤＭＦ（１０ｍｌ）撹拌溶液へＥＤＣＩ（１．４８ミリモル、４．０当量）、ＨＯＢｔ水和物（１．４８ミリモル、４．０当量）、及びＤＩＥＡ（ジイソプロピルエチルアミン、２．９６ミリモル、８．０当量）を加えた。得られる混合物を室温で一晩撹拌した。この反応混合物をＤＣＭ（７５ｍＬ）と１０％クエン酸（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（７５ｍＬ）で洗浄した。飽和ＮａＨＣＯ３を１Ｍ  ＨＣｌで酸性化して、ＤＣＭ（２ｘ１００ｍＬ）で抽出した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ４）させて、溶媒を真空
で除去した。粗製の材料を分取用ＨＰＬＣによって精製して、生成物（収率３０％）を白色の固形物として得た。
【０１７９】
[00166]  スキーム２：構造２ＨがあるＧＳＮＯＲ阻害剤を製造するための一般的なス
キーム
【０１８０】
【化１５】
0005923157.tif 000020
【０１８１】
[00167]  スキーム２の代表的な手順：４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−
イル）エチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド（２Ｈ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）の合成。
【０１８２】
[00168]  工程１：３−（１−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル
フェニル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）プロパン酸（２Ｃ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）の製造。（２Ａ）（５５０ｍｇ，２．０８３ミリモル）と４−アミノ−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（４３１ｍｇ，２．０８３ミリモル）を無水ジオキサン（５ｍＬ）に溶かした。ＴｓＯＨ（３５ｍｇ，０．２０８ミリモル）を加えて、この反応混合物を１００℃まで８時間加熱した。ＴＬＣとＬＣ−ＭＳは、出発材料を示さなかった。この混合物を水（１０ｍＬ）とＥＡ（１０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離させて、水相をＥＡ（１０ｍＬｘ３）で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物（２Ｃ）（Ｒ２＝４−メトキシフェニル）（５５６ｍｇ，６１％）を茶褐色のオイルとして得た。
【０１８３】
[00169]  工程２：４−（２−（３−アミノ−３−オキソプロピル）−５−（４−メト
キシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｄ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）の製造。３−（１−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチルフェニル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）プロパン酸（５００ｍｇ，１．１５ミリモル）を無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶
かした。ＣＤＩ（２３０ｍｇ，１．３８ミリモル）を５分量で加えて、室温で２時間撹拌した。ＴＬＣは、出発材料を示さなかった。この黄色の溶液を２５％アンモニウム水和物（１０ｍＬ）へ０℃で滴下した。添加が完了した後で、この混合物をそのまま室温まで温めて、２時間撹拌した。この溶液を酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出して、合わせた有機層を５％塩酸、飽和重炭酸ナトリウム、及び塩水で別々に洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮して、表題化合物（２Ｄ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）（３２０ｍｇ，６５％）を黄色の固形物として得た。
【０１８４】
[00170]  工程３：４−（２−（２−シアノエチル）−５−（４−メトキシフェニル）
−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｅ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）の製造。４−（２−（３−アミノ−３−オキソプロピル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（３５５ｍｇ，０．８１８ミリモル）を無水ＴＨＦ（２ｍＬ）に溶かした。トリエチルアミン（２０６ｍｇ，２．０５ミリモル）を加えて、この混合物を０℃へ冷やした。ＴＦＡＡを滴下して、この温度で３０分間撹拌した。ＴＬＣは、この反応が完了していることを示した。酢酸エチル（１０ｍＬ）で希釈して塩水で洗浄し、有機相を分離させて硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物（２Ｅ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）（２８０ｍｇ，８２％）を茶褐色のオイルとして得た。
【０１８５】
[00171]  工程４：４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５
−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｆ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）の製造。４−（２−（２−シアノエチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（２８０ｍｇ，０．６７３ミリモル）をトルエン（３ｍＬ）に溶かした。Ｂｕ２ＳｎＯ（３０ｍｇ，０．１３５ミリモル）とＴＭＳＮ３（１．３２ｇ，１２．１ミリモル）を加えて、この混合物を加熱して一晩還流させた。トルエンを真空で蒸発させ、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、（２Ｆ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）（２６５ｍｇ，８６％）を黄色のオイルとして得た。
【０１８６】
[00172]  工程５：４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５
−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸（２Ｇ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）の製造。４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（２６５ｍｇ）をギ酸（３ｍＬ）に溶かして、室温で一晩撹拌した。ＬＣ−ＭＳは、この反応が完了していることを示した。ギ酸を蒸発させ、残渣を分取用ＴＬＣによって精製して、（２Ｇ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）（１３０ｍｇ，５６％）を黄色の固形物として得た。
【０１８７】
[00173]  工程６：４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５
−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド（２Ｈ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）の製造。４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸（１３０ｍｇ，０．３３２ミリモル）を無水ＴＨＦ（３ｍＬ）に溶かした。ＣＤＩ（６８ｍｇ，０．４１９ミリモル）を室温で、３分量で加えて、この温度で１時間撹拌した。得られる黄色の溶液を２５％アンモニウム水和物（３ｍＬ）へ０℃で滴下した。添加が完了した後で、この混合物をそのまま室温まで温めて、２時間撹拌した。この混合物を真空で蒸発させて、残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、（２Ｈ，Ｒ２＝４−メトキシフェニル）（７ｍｇ，５．４％）を黄色の固形物として得た。
【０１８８】
[00174]  スキーム３：構造３ＦのあるＧＳＮＯＲ阻害剤を製造するための一般的なス
キーム
【０１８９】
【化１６】
0005923157.tif 000021
【０１９０】
[00175]  スキーム３の代表的な手順：４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−
イル）エチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール（３Ｆ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の合成。
【０１９１】
[00176]  工程１：３−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニ
ル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）プロパン酸エチル（３Ｂ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。７−（４−ブロモフェニル）−４，７−ジオキソヘプタン酸エチル（３Ａ，ここでＲ２＝４−ブロモフェニル）（４．０ｇ，１１．７６ミリモル）を無水ジオキサンに溶かした。４−アミノフェノール（１．３０ｇ，１１．７６ミリモル）とＴｓＯＨ（２０３ｍｇ，１．１８ミリモル）を加えて、この混合物を１１０℃まで一晩加熱した。ＴＬＣとＬＣ−ＭＳは、この反応が完了していることを示した。ジオキサンを真空で蒸発させて、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、（３Ｂ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（２．９０ｇ，６０％）を茶褐色の固形物として得た。
【０１９２】
[00177]  工程２：３−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニ
ル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）プロパン酸（３Ｃ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。３−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）プロパン酸エチル（１．０ｇ，２．４２ミリモル）をＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ，ｖ／ｖ＝１：１）に溶かし、水酸化リチウム一水和物（２５４ｍｇ，６．０５ミリモル）を加えて、この混合物を室温で一晩撹拌した。ＴＬＣは、出発材料が消費されていることを示した。ＴＨＦを真空で蒸発させて、残渣を５％塩酸でｐＨ＝４へ酸性化した。白色の沈殿を濾過して真空で乾燥させて、（３Ｃ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（９００ｍｇ，９７％）を黄色の固形物として得た。
【０１９３】
[00178]  工程３：３−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニ
ル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）プロパンアミド（３Ｄ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。スキーム２、工程２の記載と同じ手順に従って、３−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）プロパン酸を（３Ｄ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）へ変換して、生成物（収率９６％）を黄色の固形物として得た。
【０１９４】
[00179]  工程４：３−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニ
ル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）プロパンニトリル（３Ｅ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。スキーム２、工程３の記載と同じ手順に従って、３−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）プロパンアミドを（３Ｅ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）へ変換して、生成物（１６０ｍｇ，３８％）を茶褐色のオイルとして得た。
【０１９５】
[00180]  工程５：４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５
−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール（３Ｆ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。スキーム２、工程４の記載と同じ手順に従って、３−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）プロパンニトリルを（３Ｆ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）へ変換して、ここで精製を分取用ＨＰＬＣによって達成して、所望生成物（７５ｍｇ，４８％）を黄色の固形物として得た。
【０１９６】
[00181]  スキーム４：構造４ＦのあるＧＳＮＯＲ阻害剤を製造するための一般的なス
キーム
【０１９７】
【化１７】
0005923157.tif 000022
【０１９８】
[00182]  スキーム４の代表的な手順：４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル
）メチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール（４Ｆ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の合成。
【０１９９】
[00183]  工程１：２−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニ
ル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）酢酸エチル（４Ｂ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。スキーム３、工程１の記載と同じ手順に従って、６−（４−ブロモフェニル）−３，６−ジオキソヘキサン酸エチル（中間体Ｂ）（５ｇ，１５．０ミリモル）を（４Ｂ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）へ変換して、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）により精製して、（４Ｂ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（３．２ｇ，収率５２％）を黄色の固形物として得た。
【０２００】
[00184]  工程２：２−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニ
ル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）酢酸（４Ｃ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。２−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）酢酸エチル（２．０ｇ，５．０１３ミリモル）のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（ｖ／ｖ＝１／１，２０ｍＬ）溶液へＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（６３２ｍｇ，１５．０３８ミリモル）を加え
た。この溶液を室温で３時間撹拌した。ＴＨＦを真空で蒸発させて、得られる水溶液を１０％  ＨＣｌでｐＨ＝３．０へ酸性化した。得られる沈殿を濾過によって単離し、水（５０ｍＬ）で濯ぎ、真空で乾燥させて、（４Ｃ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（１．３８０ｇ，収率７４％）を茶褐色の粉末として得た。
【０２０１】
[00185]  工程３：２−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニ
ル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）アセトアミド（４Ｄ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。２−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）酢酸（１．３ｇ，３．５０４ミリモル）の無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液へＣＤＩ（０．８５１ｇ，５．２５６ミリモル）を分量で加えた。室温で２時間撹拌した。次いで、これを濃ＮＨ３（８０ｍＬ）へ加えて、室温で２時間撹拌した。揮発物質を真空で蒸発させて、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（３０ｍＬｘ２）と塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮して、（４Ｄ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（１．４５ｇ，収率１００％）を茶褐色のオイルとして得た。
【０２０２】
[00186]  工程４：２−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニ
ル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）アセトニトリル（４Ｅ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。２−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）アセトアミド（１．４５ｇ，３．９１９ミリモル）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液へＥｔ３Ｎ（３．９５８ｇ，３９．１８９ミリモル）を滴下してから、ＴＦＡＡ（３ｍＬ）を０〜１０℃で滴下した。この混合物を室温で０．５時間撹拌した。揮発物質を減圧下に除去して残渣を酢酸エチル（５０ｍＬｘ２）で抽出し、水（３０ｍＬ）と塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝４：１）によって精製して、（４Ｅ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（１．２ｇ，収率８７％）を黄色の固形物として得た。
【０２０３】
[00187]  工程５：４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（
４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール（４Ｆ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。スキーム２、工程４の記載と同じ手順に従って、２−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）アセトニトリル（４Ｅ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（４３０ｍｇ，１．１４１ミリモル）を（４Ｆ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）へ変換して、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１：２）により精製して、（４Ｆ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（３９３ｍｇ，収率８２％）を黄色の粉末として得た。
【０２０４】
[00188]  スキーム５：構造５ＨのあるＧＳＮＯＲ阻害剤を製造するための一般的なス
キーム
【０２０５】
【化１８】
0005923157.tif 000023
【０２０６】
[00189]  スキーム５の代表的な手順：４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル
）メチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド（５Ｈ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の合成。
【０２０７】
[00190]  工程１：４−（２−（４−ブロモフェニル）−５−（２−エトキシ−２−オ
キソエチル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（５Ｂ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。無水ジオキサン中の６−（４−ブロモフェニル）−３，６−ジオキソヘキサン酸エチル（５．０ｇ，１５．０ミリモル）、４−アミノ−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．１０５ｇ，１５．０ミリモル）、及び４−トルエンスルホン酸（２５８ｍｇ，１．５００ミリモル）を１２時間還流させた。溶媒を真空で蒸発させて、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬｘ２）で抽出し、水（１００ｍＬ）と塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝４：１）によって精製して、（５Ｂ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（４．１ｇ，収率５５％）を茶褐色のオイルとして得た。
【０２０８】
[00191]  工程２：２−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−（ｔｅｒｔ−ブト
キシカルボニル）−２−メチルフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）酢酸（５Ｃ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。スキーム３、工程２の記載と同じ手順に従って、４−（２−（４−ブロモフェニル）−５−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．０ｇ，４．０２４ミリモル）を（５Ｃ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）へ変換して、（５Ｃ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（１．３０ｍｇ，収率６９％）を茶褐色の粉末として得た。
【０２０９】
[00192]  工程３：４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）−５−（４−ブロモ
フェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（５Ｄ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。２−（５−（４−ブロモフェニル）−１−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチルフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル
）酢酸（１．３０ｇ，２．７７２ミリモル）の無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液へＣＤＩ（０．５２５ｇ，３．６０３ミリモル）を分量で加えた。この混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、これを濃ＮＨ３・Ｈ２Ｏ（６０ｍＬ）へ加えて、室温で２時間撹拌した。揮発物質を減圧下に除去して残渣を酢酸エチル（５０ｍＬｘ２）で抽出し、水（３０ｍＬ）と塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、（５Ｄ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（１．３０ｇ，収率１００％）を茶褐色のオイルとして得た。
【０２１０】
[00193]  工程４：４−（２−（４−ブロモフェニル）−５−（シアノメチル）−１Ｈ
−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（５Ｅ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．３０ｇ，２．７７６ミリモル）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液へＥｔ３Ｎ（２．８０５ｇ，２７．７７８ミリモル）を滴下してから、ＴＦＡＡ（２．５ｍＬ）を０〜１０℃で滴下した。この混合物を室温で０．５時間撹拌した。揮発物質を減圧下に除去して残渣を酢酸エチル（５０ｍＬｘ２）で抽出し、水（３０ｍＬ）と塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）によって精製して、（５Ｅ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（７３０ｍｇ，収率５８％）を黄色の固形物として得た。
【０２１１】
[00194]  工程５：４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（
４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（５Ｆ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。４−（２−（４−ブロモフェニル）−５−（シアノメチル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（７３０ｍｇ，１．６６２ミリモル）のトルエン（２０ｍＬ）溶液へＴＭＳＮ３（３．７３１ｇ，３２．４４４ミリモル）を分量で加えた。この混合物を１１０℃で一晩撹拌した。溶媒を減圧下に除去して残渣を酢酸エチル（５０ｍＬｘ２）で抽出し、水と塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１：２）によって精製して、（５Ｆ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（５２０ｍｇ，収率８０％）を黄色の粉末として得た。
【０２１２】
[00195]  工程６：４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（
４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸（５Ｇ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（７３０ｍｇ，１．６６２ミリモル）のギ酸（１０ｍＬ）溶液を室温で２４時間撹拌した。溶媒をトルエンとともに減圧下で除去して、（５Ｇ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル（５００ｍｇ，収率１００％）を黄色の粉末として得た。
【０２１３】
[00196]  工程７：４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（
４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド（５Ｈ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）の製造。４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル安息香酸（２００ｍｇ，０．４５８ミリモル）の無水ＤＭＦ（３ｍＬ）溶液へＨＯＢｔ（７４ｍｇ，０．５４９ミリモル）とＥＤＣＩ（１３２ｍｇ，０．６８６ミリモル）を加えた。この混合物を２０℃で撹拌して、出発材料が消失するまで、ＴＬＣによって確認した。次いで、ＤＩＰＥＡ（１５８ｍｇ，１．１４３ミリモル）とＮＨ４Ｃｌ（１２２ｍｇ，２．２８６ミリモル）を加えて、一晩撹拌した。粗生成物を分取用ＨＰＬＣによって精製して、（５Ｈ，Ｒ２＝４−ブロモフェニル）（６８ｍｇ，収率３４％）を白色の粉末として得た。
【０２１４】
[00197]  スキーム６：構造６ＢがあるＧＳＮＯＲ阻害剤を製造するための一般的なス
キーム
【０２１５】
【化１９】
0005923157.tif 000024
【０２１６】
[00198]  スキーム６の代表的な手順：４−（２−（４−（１Ｈ−イミダゾール−１−
イル）フェニル）−５−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール（６Ｂ，Ｒ１＝４−ヒドロキシフェニル）の合成。４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール（４０ｍｇ，０．０９７８ミリモル）とイミダゾール（１０ｍｇ，０．１４６７ミリモル）を無水ＤＭＳＯ（０．４ｍＬ）に溶かし、ＣｕＩ（６ｍｇ，０．０２９３ミリモル）、Ｌ−プロリン（６ｍｇ，０．０４７９ミリモル）、及び炭酸カリウム（２７ｍｇ，０．１９５６ミリモル）を加えて、窒素で５分間パージした。次いで、この混合物をマイクロ波照射によって１１０℃まで１時間加熱した。この反応混合物をＴＨＦ（１５ｍＬ）で希釈して、濾過した。濾液を濃縮し、分取用ＨＰＬＣによって精製して、（６Ｂ，Ｒ１＝４−ヒドロキシフェニル）（５ｍｇ，収率１２％）を得た。
【０２１７】
[00199]  スキーム７：構造７ＢがあるＧＳＮＯＲ阻害剤を製造するための一般的なス
キーム
【０２１８】
【化２０】
0005923157.tif 000025
【０２１９】
[00200]  スキーム７の代表的な手順：４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル
）メチル）−５−（４−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノールの合成。ＤＭＳＯ（１０．０ｍＬ）中の４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール（１．０ｇ，２．５２ミリモル）及び２−メチル−１Ｈ−イミダゾール（２．０７ｇ，２５．２ミリモル）の混合物へ８−ＨＱ（５４ｍｇ，０．３８ミリモル）、Ｃｕ２Ｏ（０．２９ｇ，２．５２ミリモル）、Ｃｓ２ＣＯ３（０．９８６ｇ，３．０３ミリモル）、及びＰＥＧ−２０００（０．２９ｇ）を加えた。得られる混合物をマイクロ波照射下に１５０℃で３時間加熱した。この混合物をＥＡ（６０ｍＬ）で処理し、得られる沈殿を濾過し、Ｂｉｏｔａｇｅ−フラッシュ（固相：Ｃ１８；移動相：Ａ：ＣＨ３ＣＮ，Ｂ：Ｈ２Ｏ（０．０５％  ＣＦ３ＣＯＯＨ）；勾配：Ａ中１２％→２４％のＢ；流速：４０ｍＬ／分）によって精製して、灰白色の固形物（１４３ｍｇ，収率１４％）を得た。
【０２２０】
[00201]  スキーム８：構造８ＥがあるＧＳＮＯＲ阻害剤を製造するための一般的なス
キーム
【０２２１】
【化２１】
0005923157.tif 000026
【０２２２】
[00202]  スキーム８の代表的な手順：４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル
）メチル）−５−（５−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）チオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド（８Ｅ，Ｒ１＝４−カルバモイル−２−メチルフェニル）の合成。
【０２２３】
[00203]  工程１：６−（５−ブロモチオフェン−２−イル）−３，６−ジオキソヘキ
サンニトリル（８Ｂ）の合成。２−シアノ酢酸（１３ｇ，５０ミリモル）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液へｉ−ＰｒＭｇＣｌ（１６ｇ，２５０ミリモル）を−７８℃で１時間滴下した。４−（５−ブロモチオフェン−２−イル）−４−オキソブタン酸（８Ａ）及びＣＤＩ（１２ｇ，７４ミリモル）のＴＨＦ溶液を−７８℃で滴下して、得られる混合物を−７８℃で１時間、そして室温で１時間撹拌した。この反応混合物を飽和塩化アンモニウム（２００ｍＬ）で冷ました。有機相を分離させ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）によって精製して、（８Ｂ）（９．７ｇ，６９％）を黒色のオイルとして得た。
【０２２４】
[00204]  工程２：４−（２−（５−ブロモチオフェン−２−イル）−５−（シアノメ
チル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド（８Ｃ，Ｒ１＝４−カルバモイル−２−メチルフェニル）の合成。（８Ｂ）（２．８５ｇ，１０ミリモル）のＥｔＯＨ溶液へ４−アミノ−３−メチルベンズアミド（１．８０ｇ，１２ミリモル）とＴｓＯＨ（１９０ｍｇ，１．０ミリモル）を加えた。この反応混合物を９０℃で一晩撹拌した。ＴＬＣとＬＣ−ＭＳは、この反応が完了していることを示した。ＥｔＯＨを真空で蒸発させて残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝２：１）によって精製して、（８Ｃ，Ｒ１＝４−カルバモイル−２−メチルフェニル）（２．６０ｇ，６５％）を赤色の固形物として得た。
【０２２５】
[00205]  工程３：４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（
５−ブロモチオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド（８Ｄ，Ｒ１＝４−カルバモイル−２−メチルフェニル）の合成。スキーム５、工程５の記載と同じ手順に従って、４−（２−（５−ブロモチオフェン−２−イル）−５−（シアノメチル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド（８−３，Ｒ１＝４−カルバモイル−２−メチルフェニル）を表題化合物（８Ｄ，Ｒ１＝４−カルバモイル−２−メチルフェニル）へ変換した。
【０２２６】
[00206]  工程４：４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（
５−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）チオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド（８Ｅ，Ｒ１＝４−カルバモイル−２−メチルフェニル）の合成。スキーム７に記載のカップリング手順に従って、４−（２−（（
１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（５−ブロモチオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミドを表題化合物（８Ｅ，Ｒ１＝４−カルバモイル−２−メチルフェニル）へ変換した。
【０２２７】
[00207]  スキーム９：構造９ＫがあるＧＳＮＯＲ阻害剤を製造するための一般的なス
キーム
【０２２８】
【化２２】
0005923157.tif 000027
【０２２９】
[00208]  スキーム９の代表的な手順：４−（１−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−
イル）エチル）−３−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）−３−メチルベンズアミド（９Ｋ，Ｒ＝２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）の合成
[00209]  （９Ｂ）（４−ブロモ−２−メチル安息香酸メチル）の合成。化合物（９Ａ
）（７９．４５ｇ，３６９．５ミリモル）のメタノール（４５０ｍＬ）溶液へ塩化チオニル（５３．６ｍＬ，７３９ミリモル）を加えて、この混合物を７０℃で６時間撹拌した。この反応混合物を濃縮して、（９Ｂ）（８６．３７ｇ，収率１００％）を得た。
【０２３０】
[00210]  （９Ｃ）（４−シアノ−２−メチル安息香酸メチル）の合成。ジメチルホル
ムアミド（６０ｍＬ）中の（９Ｂ）（４−ブロモ−２−メチル安息香酸メチル）（８４．６５ｇ，３６９．５ミリモル）及びシアン化銅（４５ｇ，５０２．５ミリモル）の混合物を８時間還流させた。室温へ冷却後、この反応混合物を水（４００ｍＬ）で希釈して、得られる混合物を濾過した。濾過ケークを酢酸エチル（２００ｍＬｘ３）で洗浄した。濾液を水（４００ｍＬ）で洗浄して、水層を酢酸エチル（２００ｍＬｘ２）で抽出した。合わせた有機層を塩水（４００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム（４０ｇ）で乾燥させて、蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１５：１）によって精製して、（９Ｃ）（４−シアノ−２−メチル安息香酸メチル）（３８ｇ，収率５８．７％）を黄色の固形物として得た。
【０２３１】
[00211]  （９Ｄ）（４−シアノ−２−メチル安息香酸）の合成。（９Ｃ）（４−シア
ノ−２−メチル安息香酸メチル）（３８ｇ，０．２１７モル）のエタノール（４５０ｍＬ）溶液へ水酸化ナトリウム水溶液（１５０ｍＬ，２．９Ｍ／Ｌ）を加えて、この混合物を室温で１２時間撹拌した。ほとんどのエタノールを減圧下に除去して、残渣を水（３００ｍＬ）で希釈した。水層をエチルエーテル（２００ｍＬｘ２）で洗浄して、水層を０℃下に塩酸（４５０ｍＬ，１Ｍ／Ｌ）でｐＨ＜６へ酸性化した。この混合物を酢酸エチル（４００ｍＬｘ３）で抽出して、有機層を塩水で洗浄し、乾燥させ、蒸発させて、（９Ｄ）（４−シアノ−２−メチル安息香酸）（４０ｇ，収率１００％）を黄色の固形物として得た。
【０２３２】
[00212]  （９Ｅ）（塩化４−シアノ−２−メチルベンゾイル）の合成。（９Ｄ）（４
−シアノ−２−メチル安息香酸）（２０ｇ，０．１２４モル）のトルエン（２００ｍＬ）溶液へ塩化チオニル（１８ｍＬ，０．２４８モル）と触媒量のジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）を加えた。得られる混合物を７０℃で１４時間撹拌して、減圧下に濃縮して（９Ｅ）（塩化４−シアノ−２−メチルベンゾイル）（２４ｇ，収率１００％）を得て、これをさらに精製せずに次の工程に使用した。
【０２３３】
[00213]  （９Ｆ）（３−（４−シアノ−２−メチルフェニル）−２−（４−メトキシ
フェニル）−３−オキソプロパン酸エチル）の合成。（４−メトキシ−フェニル）−酢酸エチルエステル（２５．９６ｇ，１３３．７ミリモル）の無水テトラヒドロフラン（２００ｍＬ）溶液へリチウムヘキサメチルジシラジド（２００ｍＬ，１モル／Ｌ）を窒素下に−７８℃で加えた。１５分間撹拌した後で、（９Ｅ）（塩化４−シアノ−２−メチルベンゾイル）（２４ｇ，１３３．６ミリモル）の無水テトラヒドロフラン（１５０ｍＬ）溶液を滴下して、得られる混合物を室温で一晩、１６時間撹拌した。この反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（２００ｍＬ）の添加によって冷まして、得られる混合物を酢酸エチル（１００ｍＬｘ３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム（２０ｇ）で乾燥させ、濾過して、蒸発させた。残渣をシリカゲルカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝２５：１）で精製して、（９Ｆ）（３−（４−シアノ−２−メチルフェニル）−２−（４−メトキシフェニル）−３−オキソプロパン酸エチル）（４０ｇ，収率８８．７％）を得た。
【０２３４】
[00214]  （９Ｇ）（４−（２−（４−メトキシフェニル）アセチル）−３−メチルベ
ンゾニトリル）の合成。ジメチルスルホキシド（７５ｍＬ）中の３−（４−シアノ−２−メチルフェニル）−２−（４−メトキシフェニル）−３−オキソプロパン酸エチル（９Ｆ）（４０ｇ，０．１１８６モル）の混合物へ触媒量の塩水（２．５ｍＬ）を加えて、この反応混合物を１５０℃で２．５時間加熱した。出発材料が消費されていることをＴＬＣが示したとき、この反応混合物を室温へ冷却して、水（１５０ｍＬ）と酢酸エチル（１５０ｍＬ）の間で分配した。水層を酢酸エチル（１００ｍＬｘ２）で抽出した。合わせた有機層を塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム（１５ｇ）で乾燥させ、蒸発させ、シリカゲルでのクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝２５：１）によって精製して、４−（２−（４−メトキシフェニル）アセチル）−３−メチルベンゾニトリル（９Ｇ）（１９ｇ，収率６０．４％）を得た。
【０２３５】
[00215]  （９Ｈ）（４−（２−（４−メトキシフェニル）ペント−４−エノイル）−
３−メチルベンゾニトリル）の合成。（９Ｇ）（４−（２−（４−メトキシフェニル）アセチル）−３−メチルベンゾニトリル）（１９ｇ，７１．６ミリモル）の無水テトラヒドロフラン（２００ｍＬ）溶液へリチウムヘキサメチルジシラジド（ＬｉＨＭＤＳ）（８６ｍＬ，ＴＨＦ中１モル／Ｌ）を窒素下に−７８℃で滴下して、この反応混合物を−７８℃で３０分間撹拌した。この混合物へ３−ブロモ−プロペン（１０．４ｇ，８６ミリモル）
の無水テトラヒドロフラン（７０ｍＬ）溶液を滴下して、得られる混合物を室温へ温めて、一晩撹拌した。この反応物を飽和塩化アンモニウム水溶液（２００ｍＬ）の添加によって冷まして、酢酸エチル（１００ｍＬｘ３）で抽出した。合わせた有機層を塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム（１０ｇ）で乾燥させ、蒸発させ、シリカゲルカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝２５：１）で精製して、（９Ｈ）（４−（２−（４−メトキシフェニル）ペント−４−エノイル）−３−メチルベンゾニトリル）（７．７ｇ，収率３５．２％）をオイルとして得た。
【０２３６】
[00216]  （９Ｉ）（４−（２−（４−メトキシフェニル）−４−オキソブタノイル）
−３−メチルベンゾニトリル）の合成。（９Ｈ）（４−（２−（４−メトキシフェニル）ペント−４−エノイル）−３−メチルベンゾニトリル）（９．１ｇ，２９．８ミリモル）のジクロロメタン（４００ｍＬ）溶液へ−７８℃でオゾンを４０分泡立てた。この溶液へジメチルスルフィド（２０ｍＬ）を−７８℃でゆっくり加えた。添加後、得られる混合物を室温で一晩撹拌し、水（１５０ｍＬ）へ注いで、ジクロロメタン（１５０ｍＬｘ２）で抽出した。有機層を塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム（１５ｇ）で乾燥させ、蒸発させ、シリカゲル（石油エーテル／酢酸エチル＝５：１）によって精製して、（９Ｉ）、４−（２−（４−メトキシフェニル）−４−オキソブタノイル）−３−メチルベンゾニトリル（３．０ｇ，収率３２．８％）を黄色の固形物として得た。
【０２３７】
[00217]  ４−（１−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−３−（４−
メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）−３−メチルベンゾニトリル（９Ｊ，Ｒ＝２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）の合成。ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中のＨＯＡｃ（７８ｍｇ，１．３ミリモル）の混合物中の４−（２−（４−メトキシフェニル）−４−オキソブタノイル）−３−メチルベンゾニトリル（９Ｉ）（２００ｍｇ，０．６５ミリモル）、２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エタンアミン塩酸塩（１４６ｍｇ，０．９８ミリモル）の混合物をマイクロ波において１２０℃で０．５時間撹拌した。所望の生成物が生成されたことをＬＣＭＳが示したとき、この混合物を真空で濃縮して、粗製の化合物（９Ｊ，Ｒ＝２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）（２５０ｍｇ）を得て、これを次の工程に直接使用した。
【０２３８】
[00218]  ４−（１−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−３−（４−
メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）−３−メチルベンズアミド（９Ｋ，Ｒ＝２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）の合成。４−（１−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−３−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）−３−メチルベンゾニトリル（９Ｊ，Ｒ＝２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）（２５０ｍｇ，０．６５ミリモル）のＤＭＳＯ（５ｍＬ）溶液へ水（０．５ｍＬ）及びＨ２Ｏ２（７４ｍｇ，０．６５ミリモル）の混合物中のＮａＯＨ（５２ｍｇ，１．３ミリモル）の溶液を加えた。室温で４時間撹拌した後で、この混合物を分取用ＨＰＬＣによって精製して、２４ｍｇの４−（１−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−３−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）−３−メチルベンズアミド（９Ｋ，Ｒ＝２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）（２工程で収率９％）を灰色の固形物として得た。
【０２３９】
[00219]  実施例２．ＧＳＮＯＲアッセイ
[00220]  様々な化合物について、ＧＳＮＯＲ活性を阻害するその能力を in vitro で
試験した。代表的な化合物とその対応するＧＳＮＯＲ活性について、上記の表１の前のパラグラフに記載する。ＧＳＮＯＲの発現及び精製については、Biochemistry 2000, 39, 10720-10729 に記載されている。
【０２４０】
[00221]  ＧＳＮＯＲの発酵処理：１００μｇ／ｍｌのアンピシリンを含有する２ＸＹ
Ｔ培地中のＧＳＮＯＲグリセロールストックの穿刺物より、３７℃で一晩のインキュベーション後にプレ培養物を増殖させた。次いで、アンピシリンを含有する新鮮な２ＸＹＴ（４Ｌ）へ細胞を加えて、３７℃で０．６〜０．９のＯＤ（Ａ６００）にまで増殖させた後で誘導した。２０℃で一晩のインキュベーションにおいて、ＧＳＮＯＲ発現を０．１％アラビノースで誘導した。
【０２４１】
[00222]  ＧＳＮＯＲの精製：大腸菌細胞ペーストを窒素キャビテーションによって溶
解させて、澄明化した溶解物をＡＫＴＡ  ＦＰＬＣ（アマーシャム・ファルマシア）でのＮｉアフィニティークロマトグラフィーによって精製した。このカラムを、２０ｍＭトリス（ｐＨ８．０）／２５０ｍＭ  ＮａＣｌにおいて０〜５００ｍＭのイミダゾール勾配で溶出させた。Ｓｍｔ−ＧＳＮＯＲ融合物を含有する溶出ＧＳＮＯＲ画分をＵｌｐ−１で、４℃で一晩消化させて、アフィニティータグを外してから、同じ条件下にＮｉカラムで再処理した。ＧＳＮＯＲをフロースルー画分に回収して、結晶解析のためには、２０ｍＭトリス（ｐＨ８．０）、１ｍＭ  ＤＴＴ、１０μＭ  ＺｎＳＯ４中のＱ−セファロース及びヘパリンフロースルークロマトグラフィーによってさらに精製する。
【０２４２】
[00223]  ＧＳＮＯＲアッセイ：ＧＳＮＯ溶液と酵素／ＮＡＤＨ溶液は、それぞれの日
に用時作製する。これらの溶液は、濾過して、そのまま室温へ温める。ＧＳＮＯ溶液：１００ｍＭ  ＮａＰＯ４（ｐＨ７．４）、０．４８０ｍＭ  ＧＳＮＯ。３９６μＬのＧＳＮＯ溶液に続いて、ＤＭＳＯ中の試験化合物（又は、完全な反応対照ではＤＭＳＯのみ）の８μＬをキュベットへ加えて、ピペット先端で混合する。試験すべき化合物は、１００％
ＤＭＳＯ中１０ｍＭのストック濃度で作製する。２倍の系列希釈を１００％  ＤＭＳＯで行う。アッセイ液中のＤＭＳＯの最終濃度が１％となるように、各希釈液の８μＬをアッセイ液へ加える。試験する化合物の濃度は、１００〜０．００３μＭの範囲に及ぶ。酵素／ＮＡＤＨ溶液：１００ｍＭ  ＮａＰＯ４（ｐＨ７．４）、０．６００ｍＭ  ＮＡＤＨ、１．０μｇ／ｍＬ  ＧＳＮＯレダクターゼ。３９６μＬの酵素／ＮＡＤＨ溶液を先のキュベットへ加えて、この反応を開始させる。キュベットを Cary 3E UV/可視分光光度計に入れて、３４０ｎｍ吸光度／分の変化を２５℃で３分間記録する。アッセイは、各化合物濃度について同一３検体で行う。SigmaPlot の酵素反応速度分析モジュールでの標準曲線解析を使用して、各化合物のＩＣ５０を計算する。
【０２４３】
[00224]  最終アッセイ条件：１００ｍＭ  ＮａＰＯ４（ｐＨ７．４）、０．２４０ｍ
Ｍ  ＧＳＮＯ、０．３００ｍＭ  ＮＡＤＨ、０．５μｇ／ｍＬ  ＧＳＮＯレダクターゼ、及び１％  ＤＭＳＯ。最終容量：８００μＬ／キュベット。
【０２４４】
[00225]  実施例３．実験喘息におけるＧＳＮＯＲｉの効力
実験喘息モデル
[00226]  卵白アルブミン（ＯＶＡ）誘発喘息のマウスモデルを使用して、ＧＳＮＯＲ
阻害剤について、メタコリン（ＭＣｈ）誘発性気管支収縮／気道過敏反応に対する効力をスクリーニングする。これは、ヒトの喘息に類似した急性アレルギー喘息の表現型を提示する、広く使用されていて、十分に特徴づけられたモデルである。ＭＣｈでのチャレンジに先立ってＧＳＮＯＲ阻害剤を投与する予防プロトコールを使用して、ＧＳＮＯＲ阻害剤の効力について評価する。全身プレチスモグラフィー（Ｐｅｎｈ；Buxco）を使用して、
増加用量のＭＣｈでのチャレンジに応じた気管支収縮応答を評価する。肺炎症の尺度として気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）への好酸球浸潤物の量も定量した。ＧＳＮＯＲ阻害剤の効果を担体と陽性対照としてのコンビベント（吸入；ＩＨ）と比較する。
【０２４５】
材料と方法
[00227]  アレルゲン感作及びチャレンジのプロトコール
[00228]  ＰＢＳ中のＯＶＡ（５００μｇ／ｍｌ）を等量の蒸留水中１０％（ｗ／ｖ）
硫酸アルミニウムカリウムと混合して、１０Ｎ  ＮａＯＨを使用してｐＨ６．５へ調整後、室温で６０分間インキュベートする。７５０ｘｇで５分間の遠心分離後、ＯＶＡ／ミョウバンペレットを蒸留水中の元の容量へ再懸濁させる。０日目に、ミョウバンと複合させた１００μｇ  ＯＶＡ（生理食塩水中５００μｇ／ｍＬの０．２ｍＬ）の腹腔内（ＩＰ）注射液をマウスに与える。生理食塩水中のケタミン及びキシラジン（それぞれ、０．４４及び６．３ｍｇ／ｍＬ）の０．２ｍＬ混合物のＩＰ注射によってマウスを麻酔して、ボード上に背臥位で置く。各動物の舌の裏側に２５０マイクログラム（２．５ｍｇ／ｍｌの１００μｌ）のＯＶＡ（８日目）と１２５μｇ（２．５ｍｇ／ｍｌの５０μｌ）のＯＶＡ（１５、１８、及び２１日目）を入れる。
【０２４６】
[00229]  肺機能検査（Ｐｅｎｈ）
[00230]  有意識で自由に動き、自発的に呼吸するマウスにおける最後のＯＶＡチャレ
ンジから２４時間後に、Buxco チャンバ（ノースカロライナ州ウィルミントン）を使用する全身プレチスモグラフィーで、メタコリンへの in vivo 気道反応性を測定する。２分
間の超音波ネブライザーによって産生する、エアゾール化した生理食塩水又は増加用量のメタコリン（５、２０、及び５０ｍｇ／ｍＬ）でマウスをチャレンジする。気管支収縮の度合いは、同一マウスの気道抵抗性、インピーダンス、及び胸腔内圧の測定と相関する、無次元の計算値である向上休止（Ｐｅｎｈ）として表す。それぞれの噴霧化チャレンジ後４分間のＰｅｎｈ読取り値を取って、平均化する。Ｐｅｎｈは、以下のように計算する：Ｐｅｎｈ＝［（Ｔｅ／Ｔｒ−１）ｘ（ＰＥＦ／ＰＩＦ）］（ここでＴｅは無効化時間であり、Ｔｒは弛緩時間であり、ＰＥＦはピーク呼気流量であり、ＰＩＦはピーク吸気流量ｘ０．６７係数である）。最大値からユーザー定義の最大値百分率へ変化させるボックス圧力の時間が弛緩時間を表す。Ｔｒ測定は、最大ボックス圧力で始めて、４０％で終える。
【０２４７】
[00231]  ＢＡＬＦ中の好酸球浸潤
[00232]  気道過敏反応性の測定の後で、マウスを心臓穿刺によって失血させてから、
両肺より、又は左肺を主気管支で結紮後に右肺より、ＢＡＬＦを採取する。０．０５ｍＬアリコートより全ＢＡＬＦ細胞を計数し、残る体液を４℃、２００ｘｇで１０分間遠心分離する。細胞ペレットを１０％  ＢＳＡ含有生理食塩水に再懸濁させて、スライドガラス上に塗抹標本を作製する。好酸球を０．０５％エオジン水溶液と蒸留水中５％アセトンで５分間染色し、蒸留水で濯いで、０．０７％メチレンブルーで対比染色する。
【０２４８】
[00233]  ＧＳＮＯＲ阻害剤と対照
[00234]  ＧＳＮＯＲ阻害剤をリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）（ｐＨ７．４）にお
いて０．００００５〜３ｍｇ／ｍＬに及ぶ濃度で再構成する。ＧＳＮＯＲ阻害剤をマウスへ単回用量（１０ｍＬ／ｋｇ）として、静脈内（ＩＶ）又は経口ガバージュのいずれかにより投与する。投薬は、ＭＣｈチャレンジの３０分〜２４時間前に実施する。ＧＳＮＯＲ阻害剤の効果を、同じやり方で投薬したＰＢＳ担体と比較する。
【０２４９】
[00235]  すべての試験において、陽性対照としてコンビベントを使用する。コンビベ
ント（ベーリンガー・インゲルハイム）は、その生成物が供給される吸入器デバイスを使用して肺へ投与されるが、マウスへの投与には、ピペット先端を使用して適用する。コンビベントは、ＭＣｈチャレンジの４８時間、２４時間、及び１時間前に投与する。コンビベントのそれぞれのパフ（又は用量）は、１８μｇの臭化イパトロピウム（ＩｐＢｒ）と１０３μｇの硫酸アルブテロール、又はほぼ０．９ｍｇ／ｋｇのＩｐＢｒと５ｍｇ／ｋｇのアルブテロールの用量を提供する。
【０２５０】
[00236]  統計分析
[00537]  ベースライン、生理食塩水、及び増加用量のＭＣｈチャレンジに対するＰｅ
ｎｈの曲線下面積値を、GraphPad Prism 5.0（カリフォルニア州サンディエゴ）を使用し
て計算して、それぞれの（ＩＶ又は経口投与）担体対照のパーセントとして表す。片側ＡＮＯＶＡ，Dunnetts（ＪＭＰ  ８．０，ＳＡＳ研究所、ノースカロライナ州キャリー）を使用して、各試験内の処置群とそれぞれの担体対照群の間の統計学的な差を計算する。処置群とそれぞれの担体対照群の間のｐ値が０．０５未満であれば、有意差があるとみなす。
【０２５１】
[00238]  当業者には、本発明の精神及び範囲より逸脱することなく、本発明の方法及び組成物において様々な変更態様（modifications）及び変形態様（variations）を作製することができることが明らかであろう。
本明細書は以下の発明の開示を包含する：
［１］式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩を含む医薬組成物：
【化２３】
0005923157.tif 000028
［式中：
Ａｒ１とＡｒ２は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群より独立して選択され；
Ｘは、Ｃ又はＮからなる群より選択され；
Ｙは、ＸがＮであるときＣであり、そしてＸがＣであるときＮであり；そして
ｎは、０〜３である］。
［２］Ａｒ１が置換フェニルであり；Ａｒ２が、フェニル、置換フェニル、チオフェン−イル、置換チオフェン−イル、ピリジニル、置換ピリジニル、チアゾリル、置換チアゾリル、二環系アリール、置換二環系アリール、二環系ヘテロアリール、置換二環系ヘテロアリールからなる群より選択される、［１］の医薬組成物。
［３］Ａｒ１が
【化２４】
0005923157.tif 000029
［式中：
Ｒ１は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、カルバモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルバモイル、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、及びＣ３−Ｃ６シクロアルコキシルからなる群より選択され；
Ｒ２は、ハロゲン、ヒドロキシル、カルバモイル、置換カルバモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルバモイル、スルファモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルファモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、シアノ、ニトロ、アミノ、ＣＦ３、カルボキシル、ウレイド、スルファモイルアミノ、Ｃ１−Ｃ６スルホンアミド、２−アミノ−２−オキソエチル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルコキシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群より選択され；
Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、シアノ、ニトロ、カルバモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルバモイル、スルファモイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルファモイル、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシル、及びＣ３−Ｃ６シクロアルコキシルからなる群より選択される］であり、
Ａｒ２は、フェニル、４−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロ−２−メトキシフェニル、４−ブロモフェニル、４−ブロモ−２−メトキシフェニル、３−ブロモフェニル、４−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−ヒドロキシフェニル、４−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、２−メトキシフェニル、４−クロロチオフェン−２−イル、５−クロロチオフェン−２−イル、３−ブロモチオフェン−２−イル、４−ブロモチオフェン−２−イル、５−ブロモチオフェン−２−イル、５−ブロモチオフェン−３−イル、
【化２５】
0005923157.tif 000030
［式中、Ｒ４は、水素、メチル、クロロ、フルオロ、ヒドロキシ、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、カルバモイル、ジメチルアミノ、アミノ、ホルムアミド、及びトリフルオロメチルからなる群より選択され；Ｒ５は、水素、メチル、及びエチルからなる群より選択される］
からなる群より選択される、［１］の医薬組成物。
［４］Ａｒ２が、フェニル、４−クロロ−２−メトキシフェニル、４−ブロモフェニル、４−ブロモ−２−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、４−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル、４−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル、及び５−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）チオフェン−２−イルからなる群より選択される、［１］の医薬組成物。
［５］Ｒ１が、水素及びメチルからなる群より選択され；
Ｒ２は、ヒドロキシル、カルボキシル、カルバモイル、メチルスルホンアミド、及びｔｅｒｔ−ブチル−カルボキシからなる群より選択され；そして
Ｒ３は水素である、［３］の医薬組成物。
［６］４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピロール−１−イル）ベンズアミド；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピロール−１−イル）安息香酸；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピロール−１−イル）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（４−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル）−５−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（４−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル）−５−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−ブロモ−２−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−５−（４−ブロモ−２−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（５−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）チオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（５−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）チオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェノール；
４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（４−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）フェニル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルベンズアミド；
Ｎ−（４−（２−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−５−（５−（２−メチル−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）チオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチルフェニル）メタンスルホンアミド；
４−（１−（２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル）−３−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）−３−メチルベンズアミド；及び
４−（１−（（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−３−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル）−３−メチルベンズアミド；
からなる群より選択される化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、［１］の医薬組成物。
［７］医薬的に許容される担体又は賦形剤を含む、［１］〜［６］のいずれかに記載の医薬組成物。
［８］肺の障害を治療する方法において用いられる、［１］〜［７］のいずれかに記載の医薬組成物。
［９］喘息を治療する方法において用いられる、［１］〜［７］のいずれかに記載の医薬組成物。
［１０］医薬の製造における、［１］〜［６］のいずれかに記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
［１１］肺の障害を治療するための医薬の製造における、［１］〜［６］のいずれかに記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
［１２］喘息を治療するための医薬の製造における、［１］〜［６］のいずれかに記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。
［１３］［１］〜［６］のいずれかに記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩を医薬的に許容される担体又は賦形剤と混合することを含む、［１］〜［７］のいずれかに記載の医薬組成物の製造方法。