(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下式：
【化１】
0005960695.tif 000012
の、パンテノールとドコサヘキサエン酸のエステル、
またはその薬学上許容可能な塩、エナンチオマーまたはジアステレオ異性体、またはラセミ混合物を含むそれらの混合物。
【請求項２】
下式Ａ：
【化２】
0005960695.tif 000013
の、請求項１に記載のエステル。
【請求項３】
薬物として使用するための、請求項１または請求項２に記載のエステル。
【請求項４】
請求項１または請求項２に記載のエステルおよび薬学上許容可能な賦形剤を含んでなる、医薬組成物。
【請求項５】
心房性および／または心室性不整脈、頻脈および／または細動から選択される心血管疾患の予防および／または治療；心筋細胞の電気伝導異常が現れる疾患の予防および／または治療；高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、高血圧症、高脂血症、脂質異常症から選択される心血管疾患の複数の危険因子の予防および／または治療；あるいは心筋梗塞によって誘発される、心房性および／または心室性不整脈、頻脈、細動および／または電気伝導異常に由来する心血管疾患の一次的または二次的予防および／または治療に使用するための、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
高血圧症が不応性動脈性高血圧症である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
脂質異常症が混合型脂質異常症である、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
心血管疾患の治療が、突然死および梗塞後治療である、請求項５に記載の組成物。
【請求項９】
心房細動の予防および／または治療に使用するための、請求項５に記載の組成物。
【請求項１０】
請求項１または請求項２に記載のエステルを調製するための方法であって、下記工程：
ａ）Ｏ−保護基による、パンテノールまたはＤ−パンテノールの、２つのＯＨ官能基の選択的保護、
ｂ）１−［（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）カルボニル］−１Ｈ−イミダゾールおよびＮ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミンの存在下でのＤＨＡによる、保護されていないＯＨ官能基のエステル化、
ｃ）２つの保護されたＯＨ官能基の脱保護
を含んでなる、方法。
【請求項１１】
Ｏ−保護基がトリメチルクロロシランである、請求項１０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定の特性を有する、パンテノールとドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）のモノエステルであって、とりわけ、心血管疾患の治療および予防における薬物としてのモノエステルに関する。
【背景技術】
【０００２】
ω−３系の多価不飽和脂肪酸、特に、ドコサヘキサエン酸は、ある特定の心血管疾患の治療や対応する危険因子の調整におけるそれらの潜在的使用について知られている。特に、それらは、高脂血症、高コレステロール血症および高血圧症の治療において知られている。心筋梗塞を経験した患者に対して、高濃度のＤＨＡエチルエステルを含有する処方物を用いて行われた臨床試験では、死亡率、特に、突然死の減少によってそれらの有効性が示された。これらの結果は、１つには、心室心筋細胞の細胞膜に対する安定化作用によるものであり、この作用によって、梗塞を経験した患者でまたはそのような状態を再現する実験モデルでは、虚血筋細胞の存在下で悪性不整脈の出現が防止される。
【０００３】
さらに、国際公開２００４／０４７８３５号によれば、ＤＨＡエチルエステルを使用して、心房細動を予防することができることも知られている。
【０００４】
加えて、国際公開２００７／１４７８９９号には、ある特定のＤＨＡエステルの調製および使用、特に、特定ＤＨＡエステル、ピリジン−３−イルメチルドコサヘキサエノアート（ニコチニルアルコールＤＨＡエステル）の薬効が記載されている。
【発明の概要】
【０００５】
しかしながら、本発明者らは、驚くべきことに、パンテノールとＤＨＡの特定モノエステルが心血管疾患の治療に関連して特に有利な特性を有するということを発見した。
【０００６】
パンテノールは、ビタミンＢ５として一般的に知られている、パントテン酸のアルコール類似体である。体内で、パンテノールはパントテン酸に変換され、その後、パントテン酸は、細胞代謝において特に関心の高い化合物「補酵素Ａ」の大部分を構成する。実際、それは脂質、炭水化物およびタンパク質の代謝に関与する。パンテノールはまた、アセチルコリンおよび副腎のステロイドの形成にも関与する。また、パンテノールは異物の解毒や感染に対する抵抗性にも関与する。
【０００７】
驚くべきことに、本発明者らは、下式：
【化１】
0005960695.tif 000002
のパンテニルドコサヘキサエノアートをブタへ投与することによって、心房不応期の期間を、他のＤＨＡエステルと比べて、特に、パンテノールとＤＨＡのジエステルと比べて、大幅に延長させることが可能になる（本願の実施例２を参照）ということを発見した。
【０００８】
従って、本発明は、下式：
【化２】
0005960695.tif 000003
の、パンテノールとドコサヘキサエン酸のエステル、すなわち、パンテニルドコサヘキサエノアート、またはその薬学上許容可能な塩、エナンチオマーまたはジアステレオ異性体、またはラセミ混合物を含む、それらの混合物に関する。
【０００９】
言い換えれば、本発明は、（２，４−ジヒドロキシ−３，３−ジメチルブタンアミド）プロピル−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサノアート、またはその薬学上許容可能な塩、エナンチオマーまたはジアステレオ異性体、またはラセミ混合物を含む、それらの混合物に関する。
【００１０】
本発明において、「エナンチオマー」とは、同じ分子式を有するが、それらの空間配置によって異なっており、互いに重ね合わせることができない鏡像の関係にある光学異性体化合物を意味する。「ジアステレオ異性体」とは、互いに鏡像の関係にない光学異性体を意味する。本発明の文脈において、「ラセミ混合物」とは、キラル分子の左旋性エナンチオマーと右旋性エナンチオマーが等しい割合にある混合物である。
【００１１】
本発明において、「薬学上許容可能な」とは、一般的に安全で、毒性がなく、生物学上でもそれ以外でも望ましくないものではない医薬組成物の調製において有用であること、さらに、動物用だけでなくヒト医薬用にも許容可能であることを意味する。
【００１２】
化合物の「薬学上許容可能な塩」とは、本明細書に定義するように、薬学上許容され、かつ親化合物の所望の薬理学的活性を有する塩を意味する。そのような塩としては、
（１）無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などとともに形成されるか；または有機酸、例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプタン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシナフトエ酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムコン酸、２−ナフタレンスルホン酸、プロピオン酸、サリチル酸、コハク酸、ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリメチル酢酸、トリフルオロ酢酸などとともに形成される酸付加塩；または
（２）親化合物中に存在する酸プロトンが、金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオンまたはアルミニウムイオンに置き換えられるか；または有機塩基または無機塩基と配位結合する場合に形成される塩が挙げられる。許容可能な有機塩基としては、ジエタノールアミン、エタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、トリエタノールアミン、トロメタミンなどが挙げられる。許容可能な無機塩基としては、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムおよび水酸化ナトリウムが挙げられる。
【００１３】
好ましい薬学上許容可能な塩は、塩酸、トリフルオロ酢酸、ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸およびリン酸から形成される塩である。
【００１４】
薬学上許容可能な塩に関する総ての言及は、本明細書に定義する溶媒付加形態（溶媒和物）または結晶形態（多形）、ならびに酸付加塩を包含することは理解されるべきである。
【００１５】
特定の実施形態では、本発明のエステルは、下式Ａ：
【化３】
0005960695.tif 000004
の、パンテニルドコサヘキサエノアート、すなわち、「Ｄ−パンテノールＤＨＡエステル」、またはその薬学上許容可能な塩、エナンチオマーまたはジアステレオ異性体、またはラセミ混合物を含む、それらの混合物である。
【００１６】
この特定化合物を合成するための方法は、本願の実施例１において提示する。
【００１７】
本発明はまた、パンテノールでの、例えばＤ−パンテノールでのドコサヘキサエン酸のエステル化により、本発明のパンテノールエステルを調製するための方法であって、下記工程：
ａ）Ｏ−保護基による、有利にはトリメチルクロロシランによる、パンテノール、特にＤ−パンテノールの、２つのＯＨ官能基の選択的保護、
ｂ）１−［（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）カルボニル］−１Ｈ−イミダゾールおよびＮ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミンの存在下でのＤＨＡによる、保護されていないＯＨ官能基のエステル化、
ｃ）２つの保護されたＯＨ官能基の脱保護
を含んでなる方法にも関する。
【００１８】
工程ｃ）の脱保護は、当業者には周知であり、Ｏ−保護基がトリメチルクロロシランである場合には、例えば、メタノールおよびｐ−トルエンスルホン酸中で行うことができる。
【００１９】
本発明の文脈において、「Ｏ−保護基」とは、モノエステルの調製の間望ましくない反応からヒドロキシル基を保護する任意の置換基、例えば、Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis" (John Wiley & Sons, New York (1981))およびHarrison et al. "Compendium of Synthetic Organic Methods", Vols. 1 to 8 (J. Wiley & Sons, 1971 to 1996)に記載されているＯ−保護基などを意味する。
【００２０】
本発明はまた、本発明のパンテノールとＤＨＡのエステル、例えば本発明の式ＡのＤ−パンテノールＤＨＡエステルおよび少なくとも１つの薬学上許容可能な賦形剤を含んでなる医薬組成物にも関する。
【００２１】
本発明の医薬組成物は、ヒトを含む哺乳類への投与のために処方することができる。投薬は、治療および問題の疾患によって異なる。これらの組成物は、経口、舌下、皮下、筋肉内、静脈内、経皮、局所または直腸経路によって投与されるように調製される。この場合、有効成分は、従来の医薬品賦形剤と混合し、単位用量形態で、動物またはヒトへ投与することができる。好適な単位用量投与形としては、経口経路形態、例えば、錠剤、ゼラチンカプセル剤、散剤、顆粒剤および経口液剤または懸濁剤など、舌下および口内投与形、皮下、局所、筋肉内、静脈内、鼻腔内または眼内投与形および直腸投与形が挙げられる。
【００２２】
固体組成物を錠剤形態で調製する場合、主要な有効成分を、医薬担体、例えば、ゼラチン、デンプン、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、アラビアガム、シリカまたは類似体などと混合する。錠剤は、スクロースまたは他の好適な材料でコーティングすることができるし、あるいは作用が遅延または延長されるように、さらに所定量の有効成分が連続的に放出されるように処理することもできる。
【００２３】
ゼラチンカプセル製剤は、有効成分を希釈剤と混合し、その後、得られた混合物を軟または硬ゼラチンカプセル剤に注入することによって得られる。
【００２４】
シロップ剤またはエリキシル剤形態の製剤には、有効成分を、甘味料、防腐剤、ならびに香味剤および好適な着色剤とともに含めることができる。
【００２５】
水中に分散させることができる散剤または顆粒剤には、有効成分を、分散剤、湿潤剤または懸濁化剤と、ならびに矯味剤または甘味料との混合物として含めることができる。
【００２６】
坐剤は、直腸温度で溶融する結合剤、例えば、カカオ脂またはポリエチレングリコールなどを用いて調製され、直腸投与に用いられる。
【００２７】
薬理学上適合する分散剤および／または湿潤剤を含有する水性懸濁剤、等張生理食塩水または滅菌注射剤は、非経口（静脈内、筋肉内など）、鼻腔内または眼内投与に用いることができる。
【００２８】
有効成分はまた、所望により、１以上の添加剤とともに、マイクロカプセル形態に処方することもできる。
【００２９】
有利には、本発明の医薬組成物は、経口または静脈内経路による投与、梗塞後治療の場合には、有利には、静脈内経路による投与を目的とする。
【００３０】
この場合、その医薬組成物は、有利には、ポリオキシエチレン脂肪酸、例えば、Ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ  １５などと、出願ＦＲ０９５５６１２に記載されているもののような少なくとも１つのリン脂質誘導体とを含有する。
【００３１】
本発明の医薬組成物は、補足的あるいは相乗的効果を生じさせる他の有効成分を含むことができる。
【００３２】
本発明はまた、薬物として使用するための本発明のドコサヘキサエン酸エステル、すなわち、パンテニルドコサヘキサエノアート、特に、式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアート、または本発明の医薬組成物にも関する。
【００３３】
本発明はまた、心血管疾患、有利には心房性および／または心室性不整脈、頻脈および／または細動から選択される疾患の予防および／または治療；心筋細胞の電気伝導異常が現れる疾患の予防および／または治療；心血管疾患、有利には高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、高血圧症、とりわけ動脈性高血圧症、特に不応性動脈性高血圧症、高脂血症、脂質異常症、有利には混合型脂質異常症、および／または第ＶＩＩ因子血液凝固機能亢進から選択される疾患の複数の危険因子の予防および／または治療；心筋梗塞によって誘発される、心房性および／または心室性不整脈、頻脈、細動および／または電気伝導異常に由来する心血管疾患、有利には突然死の治療および／または一次的または二次的予防；ならびに／あるいは梗塞後治療を目的とする薬物として使用するための、本発明のドコサヘキサエン酸エステル、すなわち、パンテニルドコサヘキサエノアート、特に式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアート、または本発明の医薬組成物にも関する。
【００３４】
言い換えれば、本発明は、上記の疾患を予防および／または治療に使用するための、本発明のドコサヘキサエン酸エステル、すなわち、パンテニルドコサヘキサエノアート、特に式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアート、または本発明の医薬組成物に関する。
【００３５】
有利には、本発明は、心房細動の予防および／または治療を目的とする薬物として使用するための、本発明のドコサヘキサエン酸エステル、すなわち、パンテニルドコサヘキサエノアート、特に、式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアート、または本発明の医薬組成物に関する。
【００３６】
本発明は、以下の図面および実施例を参照することによって、よりよく理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３７】
【図１】図１は、下の実施例２に記載するプロトコールに従った、担体またはＤＨＡエチルエステルと、本発明のパンテニルドコサヘキサエノアート、パンテノールとＤＨＡのジエステル、およびイソソルビドとＤＨＡのジエステルに関する投与後のin vivoでの不応期の変化を表す。
【実施例】
【００３８】
次の実施例は例示目的で示し、限定するものではない。
【００３９】
実施例１：式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアートの合成
１．パンテノールから誘導される中間化合物Ｉの合成（パンテノールの左側のアルコール官能基の保護）
【化４】
0005960695.tif 000005
【００４０】
２０００ｍｌ三つ口フラスコをパージし、窒素雰囲気下で維持し、そのフラスコを使用して、この化合物を合成する。
【００４１】
１２０ｍｌのトリメチルクロロシラン（ＴＭＣＳ）を、（２Ｒ）−２，４−ジヒドロキシ−Ｎ−（３−ヒドロキシプロピル）−３，３−ジメチルブタンアミド（Ｄ−パンテノール、１００ｇ、０．４８８ｍｏｌ、１．００当量）のアセトン（１ｌ）中溶液に、１０〜１５℃の温度で撹拌しながら滴下した。
【００４２】
得られた溶液を、次いで、室温で３時間撹拌し、溶液のｐＨをトリエチルアミンで７に調整した。得られた溶液を、次いで、真空濃縮し、残渣を、石油エーテルとアセトン（５．５：１）の混合物を用いてシリカゲルカラムに適用した。
【００４３】
６５ｇ（５４％）の（４Ｒ）−Ｎ−（３−ヒドロキシプロピル）−２，２，５，５−テトラメチル−１，３−ジオキサン−４−カルボキサミド（化合物Ｉ）を白色固体として得た。
化合物ＩのＬＣ−ＭＳ：（ＥＳ，ｍ／ｚ）：２６８［Ｍ＋Ｎａ］＋，５１３［２Ｍ＋Ｎａ］＋
【００４４】
２．中間化合物ＩＩ＝化合物ＩのＤＨＡエステルの合成
【化５】
0005960695.tif 000006
【００４５】
この化合物を合成するために、パージし、不活性アルゴン雰囲気下で維持した１ｌ三つ口フラスコを使用し、そのフラスコに、（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエン酸（ＣＡＳ  ６２１７−５４−５）（７０ｇ、０．２１３ｍｏｌ、１．００当量）、１’，１−［（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）カルボニル］−１Ｈ−イミダゾール（５１．９ｇ、０．３２０ｍｏｌ、１．５０当量）、Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（３１．２ｇ、０．２５６ｍｏｌ、１．２当量）および（４Ｒ）−Ｎ−３−ヒドロキシプロピル−２，２，５，５−テトラメチル−１，３−ジオキサン−４−カルボキサミド（化合物Ｉ）（６２．７ｇ、０．２５６ｍｏｌ、１．２０当量）のジクロロメタン（６００ｍｌ）中溶液を入れた。
【００４６】
得られた溶液を室温で一晩撹拌し、次いで、２００ｍｌのジクロロメタンで希釈した。得られた溶液を、次いで、２×１００ｍｌの水で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空濃縮した。残渣をシリカゲルカラムに適用し、石油エーテルとアセトン（４０：１〜２０：１）の混合物を用いて溶出し、７１．０ｇ（６０％）の３−｛［（４Ｒ）−２，２，５，５−テトラメチル−１，３−ジオキサン−４−イル］ホルムアミド｝プロピル（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエノアート（化合物ＩＩ）を無色の固体として得た。
【００４７】
３．本発明のパンテニルドコサヘキサエノアートの合成（アルコール官能基の脱保護）
【化６】
0005960695.tif 000007
【００４８】
本発明の化合物を合成するために、パージし、不活性アルゴン雰囲気下で維持した１ｌ三つ口フラスコを使用し、そのフラスコに、３−｛［（４Ｒ）−２，２，５，５−テトラメチル−１，３−ジオキサン−４−イル］ホルムアミド｝プロピル（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエノアート（化合物ＩＩ）（７１ｇ、０．１２８ｍｏｌ、１．００当量）のメタノール（７１０ｍｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸（０．９７２ｇ、５．１２ｍｍｏｌ、０．０４当量）中溶液を入れた。
【００４９】
得られた溶液を、次いで、室温で一晩撹拌した。得られた混合物を真空濃縮した。残渣を、ヘキサン：アセトン（８：１〜３：１）を用いてシリカゲルカラムに適用した。
【００５０】
５１．９ｇ（７９％）の３−［（２Ｒ）−２，４−ジヒドロキシ−３，３−ジメチルブタンアミド］プロピル（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエノアート（式Ａの化合物）を黄色油状物として得た。
【００５１】
式Ａの化合物のＬＣ−ＭＳ：（ＥＳ，ｍ／ｚ）：５１６［Ｍ＋Ｈ］＋，５３８［Ｍ＋Ｎａ］＋
式Ａの化合物のＵＰＬＣ：
・カラム：Waters社製Ｘ−ｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８、３．５μｍ、２．１＊５０ｍｍ
・移動相Ｂ：メタノール
・移動相Ａ：水／０．０５％ＴＦＡ
・勾配：２．３分以内（Ｂ：１５％から１００％まで）、１．２分間（Ｂ：１００％）、０．１分以内（Ｂ：１００％から１５％まで）、その後停止。
・流速：１．０ｍｌ／分
【００５２】
式Ａの化合物のキラルＨＰＬＣ：ｅｅ％＝９８．１％
・カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＡ、０．４６＊２５ｃｍ、５μｍ
・移動相：ヘキサン：エタノール（９６：４）
・流速：１．５ｍｌ／分
【００５３】
式Ａの化合物のＨＮＭＲ： (300 MHz, CDCI3, ppm):δ 0.92-0.,99 (m, 9H), 1.83-1.90 (m, 2H), 2.07-2.09 (m, 2H), 2.39-2.4 (m, 4H), 2.82-2.85 (m, 10H), 3.31 -3.41 (m, 2H), 3.49-3.56 (m, 2H), 4.04 (s, 1H), 4.14-4.17 (t, J=6.0 Hz, 2H), 5.29-5.42 (m, 12H), 7.02 (s, 1H).
【００５４】
実施例２：ブタにおける不応期に対する本発明の式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアートの効果
心血管疾患に対する式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアートの有益な効果は、心房不応期を測定することにより示したが、それは、このパラメーターの期間延長が不整脈、特に、心房細動の発生および永続化を低減させる重要な事象であることが知られているためである(Attuel et al., 1982; Wijffels et al., 1995)。
【００５５】
その研究は、雄ランドレースブタ（２０〜２５ｋｇ）において実施した。イソフランを用いて麻酔を維持した（肺一回換気量の０．５〜３％）。呼吸数および一回換気量を調整して、血液ガスを生理学的範囲内に維持した。
【００５６】
第四肋間で左側開胸術を行い、心膜を開いた。ポリエチレン充填カテーテルを、実験中の動脈圧を測定するために最も近い胸動脈に導入し、活性生成物または対照担体を投与するために左伏在静脈に導入した。
【００５７】
心房心電図（ＥＣＧ）を連続して記録した。この際、３つの電極を心外膜に取り付け、縫合し、４つめの電極を主要部とし、胸筋に取り付けた。このようにして、ＥＣＧにより、心房活動に関する情報が提供される。また、２つの双極電極も左心房に０．３ｃｍ間隔で取り付け、フィッシングホック(fishing hooks)により維持した。電気刺激を刺激装置（ＤＳ  ８０００、ＷＰＩ）によって行った。
【００５８】
動物が手術から回復する（血行動態パラメーターおよび血液ガス、安定かつ正常）のに十分な期間の後に、活性剤または対照担体で処置した動物の不応期の決定を始めた。
【００５９】
一連の連続刺激（Ｓ１）を、心臓を刺激するには不十分なやや低い電圧（０．１Ｖ）で開始し、その後、電圧を０．１Ｖずつ徐々に高めて、負荷による頻度の追跡が可能な刺激の閾値を見つけた。この閾値の探索は各刺激頻度で実施した。
【００６０】
４００ｍｓおよび５００ｍｓの２つの基本周期（ＢＣＬ）を用いた。閾値に達した時点で、刺激Ｓ１（一連の１０回刺激）は電圧閾値の２倍に等しく、期外刺激Ｓ２はその閾値の４倍に等しかった。１０回のＳ１ごとに、不応期中に（すなわち、最後のＳ１から８０ｍｓ後、不応期は理論上少なくとも１００ｍｓ継続するはずである）期外刺激Ｓ２を開始し、その後、１０回の刺激Ｓ１ごとに、最後のＳ１から期外刺激を開始し（５ｍｓで５の増分）、拍動がもたらされるまで行った。
【００６１】
心房不応期は、Ｓ２に対してはっきりとした応答のない最長間隔によって決定される(Wirth et al., 2003)。
【００６２】
グルコース（５％）で１／４希釈した、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）およびＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬＰ（３０／７０）に、式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアートを溶かした。所望により、超音波処理後に５％グルコース溶液を加えた。
【００６３】
式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアート（量：１０＋１０ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝４）をボーラス形態で１分かけて投与し、その後、４０分間拡散させた。
【００６４】
担体は、グルコース（５％）で１／４希釈した、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）およびＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬＰ（３０／７０）で構成する。
【００６５】
担体は、活性剤と同じように投与した。
【００６６】
パンテノールジエステル、イソソルビドジエステルおよびエチルエステルは、式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアートと同じように処方し、投与した。
【００６７】
エチルエステルは下式：
【化７】
0005960695.tif 000008
のＤＨＡエチルエステルである。
【００６８】
パンテノールジエステルは下式：
【化８】
0005960695.tif 000009
を有する。
【００６９】
イソソルビドジエステルは下式：
【化９】
0005960695.tif 000010
を有する。
【００７０】
これらの結果を図１に示す。この図は、上記プロトコールに従った、担体と、式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアートに関する投与後のin vivoでの不応期の変化を表す。
【００７１】
図１に示した結果は、式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアートによって、処置動物における心房不応期（ＡＲＰ）が大幅に延長されることを示している。実際、１０ｍｇ／ｋｇ＋１０ｍｇ／ｋｇの式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアートの静脈内投与によって、ＡＲＰは１９±２ｍｓ延長される（ｎ＝４、ｐ＜０．００１）のに対し、プラセボでは全く効果がない（−４±３ｍｓ、ｎ＝１０、ＮＳ）。
【００７２】
加えて、驚くべきことに、式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアートはパンテノールジエステル（１ジエステル分子につき２つのＤＨＡ分子が存在するにもかかわらず）よりも著しく有効であることも分かった。このことにより、本発明の化合物の重要性が強調される。
【００７３】
従って、式Ａのパンテニルドコサヘキサエノアートを投与することによって、モデル動物における心房不応期は延長され、そのように利用して、不整脈、例えば、心房細動の期間および／または発生を低減させることができる(Attuel et al., 1982; Wijffels et al., 1995)。
【００７４】
参照文献
0005960695.tif 000011
【図１】
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