(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）の化合物
【化１】
0005934184.tif 000048
（Ａは，Ｒ又はＣＨ（Ｒ１）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ２であり、
Ｒ及びＲ２は、任意選択で場合によりヒドロキサム酸で置換されたアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキルオキシ、任意選択で場合によりハロゲンで置換されたアリールアルキルオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルアルキルオキシ、シクロアルキルアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルキルアミノ、アリールアルキルアミノ、ヘテロアリールアルキルアミノ、及びヘテロシクロアルキルアルキルアミノから選択され、
Ｒ１は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、任意選択で場合によりハロゲン又はアルコキシで置換されたアリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択され、
Ｒ３は、Ｈ、又はＣ１−Ｃ６アルキル基である。）
又はその互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー、エピマー、又は溶媒和物。
【請求項２】
前記ＡがＲであり、
前記Ｒ３がＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記Ｒが、任意選択で場合によりヒドロキサム酸で置換されたアルキル、アリール、アリールアルキルオキシ、又はアリールアルキルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
前記Ａが、ＣＨ（Ｒ１）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ２であり、
前記Ｒ３が、Ｈである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
前記Ａが、ＣＨ（Ｒ１）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ２であり、
前記Ｒ３が、−ＣＨ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
それぞれ独立して、またはあらゆる組み合わせで、
前記Ｒ１が、アルキル、任意選択で場合によりハロゲン若しくはアルコキシで置換されたアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアリールアルキルであり、
前記Ｒ２が、任意選択で場合によりハロゲンで置換されたアリールアルキルオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、又はアリールアルキルアミノである、請求項４又は５に記載の化合物。
【請求項７】
以下の化合物からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物：
トランス−ベンジル−４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルカルバメート；
トランス−Ｎ−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）ベンズアミド；
トランス−Ｎ−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−１−ナフトアミド；
トランス−Ｎ−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−２−ナフトアミド；
トランス−Ｎ−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）ビフェニル−４−カルボキサミド；
トランス−Ｎ−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−２−フェニルアセトアミド；
トランス−Ｎ−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−２−（ナフタレン−１−イル）アセトアミド；
トランス−Ｎ−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−２−（ナフタレン−２−イル）アセトアミド；
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イルカルバメート；
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート；
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−３−シクロヘキシル−１−オキソプロパン−２−イルカルバメート；
トランス−ベンジル−２−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−２−オキソ−１−フェニルエチルカルバメート；
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イルカルバメート；
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−３−（４−ブロモフェニル）−１−オキソプロパン−２−イルカルバメート；
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−３−（４−メトキシフェニル）−１−オキソプロパン−２−イルカルバメート；
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−１−オキソ−４−フェニルブタン−２−イルカルバメート；
トランスベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−１−オキソ−３，３−ジフェニルプロパン−２−イルカルバメート；
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−３−（ナフタレン−１−イル）−１−オキソプロパン−２−イルカルバメート；
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−３−（ナフタレン−２−イル）−１−オキソプロパン−２−イルカルバメート；
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソブタン−２−イルカルバメート；
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−４−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−１−オキソブタン−２−イルカルバメート；
トランス−４−ブロモベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イルカルバメート；
シス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イルカルバメート；
トランス−Ｎ１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−Ｎ８−ヒドロキシオクタンジアミン；
トランス−ベンジル−１−（（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）（メチル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イルカルバメート；
トランス−Ｎ−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−２−（３−ベンジルウレイド）−３−フェニルプロパンアミド：
又はその互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー、エピマー、又は溶媒和物。
【請求項８】
（ａ）式（ＩＩ）の化合物を、ＲＣＯＣｌ及びＲＣＯＯＨからなる群から選択されるアシル化剤と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物を得るステップと、
【化２】
0005934184.tif 000049
（ここで、Ｒ及びＲ３は、請求項１で定義された通りであり、ＢＯＣはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル保護基である。）
（ｂ）任意選択で場合によっては、ステップ（ａ）で得られた式（ＩＩＩ）の化合物を他の式（ＩＩＩ）の化合物に変換し、ＢＯＣ保護基を式（ＩＩＩ）の化合物から取り除き、式（Ｉ）の化合物を得るステップを含む、
【化３】
0005934184.tif 000050
ＡがＲである、請求項１で定義された一般式（Ｉ）の化合物を調製する方法。
【請求項９】
（ａ）式（ＩＩ）の化合物を、以下の構造
【化４】
0005934184.tif 000051
を有するアシル化剤と反応させて式（ＩＶ）の化合物を得るステップと、
【化５】
0005934184.tif 000052
（ここで、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、請求項１で定義された通りであり、ＢＯＣはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル保護基である。）
（ｂ）任意選択で場合によっては、ステップ（ａ）で得られた式（ＩＶ）の化合物を他の式（ＩＶ）の化合物に変換し、ＢＯＣ保護基を式（ＩＶ）の化合物から取り除き、式（Ｉ）の化合物を得るステップを含む、
【化６】
0005934184.tif 000053
ＡがＣＨ（Ｒ１）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ２である、請求項１で定義された一般式（Ｉ）の化合物を調製する方法。
【請求項１０】
ＬＳＤ１及び／又はＬＳＤ２ヒストンデメチラーゼの阻害剤である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物を含む製薬組成物。
【請求項１１】
治療上使用される、請求項１~７のいずれか１項に記載の化合物を含む製薬組成物。
【請求項１２】
アポトーシス促進剤、抗腫瘍剤、又は抗ウイルス剤として使用するための請求項１~７のいずれか１項に記載の化合物を含む製薬組成物。
【請求項１３】
前記抗腫瘍剤が、神経芽細胞腫、前立腺癌、乳癌、急性骨髄性白血病、Ｔ細胞系急性リンパ性白血病、膀胱癌、肺癌、及び結腸直腸癌からなる群から選択される腫瘍の有効な抗腫瘍剤であり、前記抗ウイルス剤が、単純ヘルペスウイルスに起因するウイルス感染に有効である、請求項１２に記載の製薬組成物。
【請求項１４】
治療を必要とする哺乳動物に投与することによる、ヒストンデメチラーゼＬＳＤ１及び／又はＬＳＤ２の活性に関連する疾患の予防及び／又は治療のための薬剤の製造のための、治療上有効な量の請求項１〜７のいずれかに定義された一般式（Ｉ）の化合物の使用であって、
前記疾患が、神経芽細胞腫、前立腺癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、結腸直腸癌、急性骨髄性白血病、Ｔ細胞系急性リンパ性白血病、及び単純ヘルペスウイルス感染から選択される、使用。
【請求項１５】
１又は２以上の請求項１〜７のいずれかで定義された一般式（Ｉ）の化合物単独、又は他の活性化合物との組み合わせ、及び少なくとも１つの薬学的に許容できる賦形剤を含む、製薬組成物。
【請求項１６】
剤形単位中に配合されている、請求項１５に記載の製薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、トラニルシプロミン誘導体及びそれらの治療薬としての使用に関し、特に、例えば、腫瘍、ウイルス感染等の、遺伝子転写、細胞分化及び増殖の制御障害を特徴とする疾患である、ヒストンデメチラーゼＬＳＤ１及びＬＳＤ２活性に関連する疾患及び状態の予防及び／又は治療のための治療薬としての使用に関する。本発明はまた、これらの化合物の調製に関し、また、それらを含む組成物及びそれらの治療上の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
クロマチンの構造及び機能状態の変化は、様々な疾患の発病に関わっている。ヌクレオソームに対する翻訳後修飾の導入及び除去を触媒する生化学的及び酵素的なプロセスは、いわゆるエピジェネティック療法（ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，非特許文献１）を可能性のある標的とする研究のテーマになっている。増大する数のヒストンデメチラーゼの発見は、真核生物のゲノム及び遺伝子制御に関わる重要なクロマチン修飾である、ヒストンのメチル化制御のダイナミックな本質を明らかにした。ヒストンリシンデメチラーゼは、エピジェネティック薬にとって非常に魅力的な標的を提示し、注目を集めている。リシンはモノ−、ジ−、及びトリ−メチル化され得る。同一のアミノ酸に対するそれぞれの修飾は、明確に異なる生物的効果を発現する。ヒストンリシンデメチラーゼの最近の発見は、２種類の酵素機構を明らかにした（非特許文献２）。鉄依存性酵素は、３つすべてのメチル化状態において、リシン側鎖を脱メチル化でき、このファミリーの多くのデメチラーゼがすでに特性が明らかにされている。反対に、フラビン依存性ヒストンデメチラーゼの機能の根底にある酸化化学反応は、これらの酵素がトリメチル化リシンに作用することを困難にし、これらの酵素のモノ−及びジ−メチル化基質への作用を制限している。
【０００３】
哺乳動物は、ＬＳＤ１及びＬＳＤ２の２種類のフラボ酵素デメチラーゼをもっている。ＬＳＤ１は、最初に発見されたヒストンデメチラーゼであり、通常（常にではないが）、コリプレッサータンパク質ＣｏＲＥＳＴと結びついている。ＬＳＤ１／ＣｏＲＥＳＴは、ヒストンデアセチラーゼ１／２（ＨＤＡＣ１／２）と結びつき、典型的には、遺伝子抑制制御に関与する多くのクロマチン複合体によって用いられる多酵素複合体を形成する（非特許文献３）。ＬＳＤ１は、遺伝子の活性化マークとしてよく特性が明らかにされているヒストンＨ３のＬｙｓ４の、モノ−及びジ−メチル化Ｌｙｓ４からメチル基を取り除く。この酵素は、その固形腫瘍（ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒ）中での過剰発現（非特許文献４）、その様々な分化プロセスでの役割（非特許文献５）、そのヘルペスウイルス感染における関与（非特許文献６）、及びその有効な薬物ターゲットである、ＨＤＡＣ１との結びつきによって示唆されているように、エピジェネティック薬にとって興味深い標的である。ＬＳＤ２は、より最近に発見されたデメチラーゼであり、ＬＳＤ１のように、Ｈ３のモノ−及びジ−メチル化Ｌｙｓ４に対する厳密な特異性を示す。しかしながら、その一部しか特性が明らかになっていないＬＳＤ２の生物学的性質は、ＬＳＤ２がＣｏＲＥＳＴに結合せず、今までのところ、いかなるＬＳＤ１を含むタンパク質複合体中に発見されていないため（非特許文献７）、ＬＳＤ１の生物学的性質とは異なると考えられている。
【０００４】
ＬＳＤ１及びＬＳＤ２は、モノアミンオキシダーゼ（ＭＡＯｓ）Ａ及びＢと構造的に相同である、同様の触媒ドメイン（配列同一性４５％）を共有するマルチドメインタンパク質である。トラニルシプロミン（すなわち、（±）−トランス−２−フェニルシクロプロピル−１−アミン（ｔＰＣＰＡ）であり、抗抑うつ薬として用いられるＭＡＯ阻害剤である。）はまた、ＬＳＤ１を抑制できる（非特許文献８）。
【０００５】
【化１】
0005934184.tif 000002
【０００６】
非特許文献９には、ＬＳＤ１及びＭＡＯｓの阻害剤としての置換されたトランス−２−アリールシクロプロピルアミンの合成経路が記載されている。これらの誘導体は、ＭＡＯＡ及びＢの阻害において、ＬＳＤ１よりも１０倍以上有効である。
【０００７】
非特許文献１０は、低分子のＬＳＤ１阻害剤としてのＭＡＯ阻害剤フェネルジンを含むヒドラジンに関する。
【０００８】
特許文献１には、ＬＳＤ１タンパク質の阻害剤（ＲＮＡｉ分子）及び／又は例えばトラニルシプロミン等のモノアミンオキシダーゼ阻害剤を宿主に投与することによって、宿主のウイルス感染を治療する方法が記載されている。
【０００９】
特許文献２には、ＬＳＤ１の活性を調節し、アンドロゲンレセプター依存性の遺伝子発現を制御するために、少なくとも１つのｓｉＲＮＡ（低分子干渉ＲＮＡ）及び少なくとも１つの抗ＬＳＤ１抗体の使用、並びにこれらのトラニルシプロミン等のモノアミンオキシダーゼ阻害剤との組み合わせの使用に関する
【００１０】
特許文献３〜６（本出願の優先日より後に公開されている）は、フェニルシクロプロピルアミン誘導体が、ＬＳＤ１の機能を選択的に抑制できること開示している。開示された化合物のいずれも本発明の範囲内ではない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】国際公開第２０１００１１８４５号
【特許文献２】欧州特許出願公開第１６９３０６２号
【特許文献３】国際公開第２０１０／０４３７２１号
【特許文献４】国際公開第２０１０／０８４１６０号
【特許文献５】国際公開第２０１０／１４３５８２号
【特許文献６】国際公開第２０１１／０３５９４１号
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ｕｒｄｉｎｇｕｉｏ  ＲＧ，Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｍｕｔ  ＪＶ，Ｅｓｔｅｌｌｅｒ  Ｍ．  Ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  ｄｉｓｅａｓｅｓ：  ｇｅｎｅｓ，ｓｙｎｄｒｏｍｗｓ，ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ．  Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ．８：１０５６−１０７２，２００９
【非特許文献２】Ａｎａｎｄ  Ｒ，Ｍａｒｍｏｓｔｅｉｎ  Ｒ．  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ｌｙｓｉｎｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｄｍｅｔｈｙｌａｓｅ  ｅｎｚｙｍｅｓ．  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８２：３５４２５−３５４２９，２００７
【非特許文献３】Ｂａｌｌａｓ  Ｎ，ｅｔ  ａｌ．  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｔｒａｉｔｓ  ｂｙ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  ｃｏｍｐｌｅｘ．  Ｎｅｕｒｏｎ．３１：３５３−３６５，２００１
【非特許文献４】Ｓｃｈｕｌｔ  ＪＨ，ｅｔ  ａｌ．Ｌｙｓｉｎｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｄｅｍｅｔｈｙｌａｓｅ  １  ｉｓ  ｓｔｒｏｎｇｌｙ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｉｎ  ｐｏｏｒｌｙ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ  ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ：  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅｒａｐｙ．  Ｃａｎｃｅｒ．Ｒｅｓ．６９：２０６５−２０７１，２００９
【非特許文献５】Ｈｕ  Ｘ，ｅｔ  ａｌ．ＬＳＤ１−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ＴＡＬ１  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｓｉｓ．  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０６：１０１４１−１０１４６，２００９
【非特許文献６】Ｇｕ  Ｈ，Ｒｏｉｚｍａｎ  Ｂ．  Ｅｎｇａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｌｙｓｉｎｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｄｅｍｅｔｈｙｌａｓｅ／ＨＤＡＣ１／ＣｏＲＥＳＴ／ＲＥＳＴ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ｂｙ  ｈｅｒｐｅｓ  ｓｉｍｐｌｅｘ  ｖｉｒｕｓ  １．  Ｊ．Ｖｉｒｔｏｌ．８３：４３７６−４３８５，２００９
【非特許文献７】Ｋａｒｙｔｉｎｏｓ  Ａ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｆｌａｖｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｈｉｓｔｏｎｅ  ｄｅｍｅｔｈｙｌａｓｅ．  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８４：１７７７５−１７７８２，２００９
【非特許文献８】Ｓｃｈｍｉｄｔ  ＤＭ，  ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ＤＧ．  ｔｒａｎｓ−２−Ｐｈｅｎｙｌｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｅ  ｉｓ  ａ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ−ｂａｓｅｄ  ｉｎａｃｔｉｖａｔｏｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｈｉｓｔｏｎｅ  ｄｅｍｅｔｈｙｌａｓｅ  ＬＳＤ１．  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４６：４４０８−４４１６，２００７
【非特許文献９】Ｇｏｏｄｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１８，  ３０４７−３０５１，２００８
【非特許文献１０】Ｃｕｌｈａｎｅ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．ＡＭ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ  １３２，３１６４−３１７６，２０１０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
そのため、ヒストンデメチラーゼ活性に関連する疾患及び状態の予防又は治療において有用である、ＬＳＤ１及び／又はＬＳＤ２ヒストンデメチラーゼの強力で選択的な阻害剤としての低分子物を同定する必要がある。
【００１４】
本発明の化合物は、遺伝子転写、細胞分化及び増殖の制御障害がみられる様々な疾患、「例えば、腫瘍、ウイルス感染等の治療に有用である、強力なヒストンデメチラーゼ阻害活性を有する低分子化合物である。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、ＬＳＤ１及び／又はＬＳＤ２のヒストンデメチラーゼ阻害活性を有し、ＬＳＤ１及び／又はＬＳＤ２ヒストンデメチラーゼ活性に関連する疾患及び状態の予防又は治療において有用である化合物に関する。本発明はまた、前述の化合物を調製する方法、それらを含む組成物、及びそれらの治療上の使用に関する。
【００１６】
本発明は、一般式（Ｉ）のトラニルシプロミン誘導体及びそれらの誘導体が、ヒストンデメチラーゼ阻害活性を有することを発見した。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】６ｅの生物学的評価を示す。（Ａ）細胞成長阻害における６ｅのレチノイン酸（ＲＡ）との相乗効果を示す図である。ＮＢ４細胞を６ｅ（２μＭ）の存在又は非存在下で、徐々に濃度が増加するレチノイン酸（１０ｎＭ、１００ｎＭ、及び１μＭ）で処理した。指示した点において、トリパン（ｔｒｙｐａｎ）色素排除法により細胞をカウントした。ＮＴは処理されていない細胞（溶媒のみ）を表す。（Ｂ）ＮＢ４細胞中への分化の導入における６ｅのレチノイン酸（ＲＡ）との相乗効果を示す図である。ＮＢ４細胞を、６ｅ（２μＭ）の存在又は非存在下で、レチノイン酸（１００ｎＭ）又は溶媒（ＮＴ）で処理した。７日後の細胞をガラススライド上でサイトスピン（ｃｙｔｏ−ｓｐｉｎ）し、染色（Ｍａｙ  Ｇｒｕｎｗａｌｄ−Ｇｉｅｍｓａ）した。
【図２】ＮＢ４細胞へのアポトーシス誘導における６ｅのレチノイン酸（ＲＡ）との相乗効果を示す図である。ＮＢ４細胞を６ｅ（２μＭ）の存在又は非存在下で、徐々に濃度が増加するレチノイン酸（１０ｎＭ、１００ｎＭ、及び１μＭ）又は溶媒（ＮＴ）で処理した。アポトーシスを７日後に透過性細胞のプロジウムヨウ化物染色により測定した。代表的な実験は以下に示す。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本明細書で用いられるすべての用語は、他の記載がない限り、当該技術分野で知られている通常の意味であると理解される。本明細書中で使用された特定の用語の他のより具体的な定義は、より広い定義をもたらす定義の明確な説明がない限り、以下で説明するとおりであり、本明細書及び特許請求の範囲を通して一様に適用される。
【００１９】
そのため、本発明の目的とする式（Ｉ）の化合物は、
【００２０】
【化２】
0005934184.tif 000003
【００２１】
式（Ｉ）中、
ＡはＲ又はＣＨ（Ｒ１）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ２であり、
Ｒ及びＲ２は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキルオキシ、アリールアルキルオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルアルキルオキシ、シクロアルキルアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルキルアミノ、アリールアルキルアミノ、ヘテロアリールアルキルアミノ、及びヘテロシクロアルキルアルキルアミノから選択され、
Ｒ１は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、及びヘテロシクロアルキルアルキルから選択され、
Ｒ３は、Ｈ、又は低アルキル基であり、
さらに、その異性体、互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー、エピマー、結晶多形、溶媒和物、それらの混合物、プロドラッグ、及びそれらの薬学的に許容できる塩である。
【００２２】
用語「アルキル」は、１〜１０個の炭素原子を有する完全に飽和した直鎖状又は分岐した飽和炭化水素鎖である。例としては、これらに限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、及びデシル等が含まれる。「低アルキル基」又は「Ｃ１−Ｃ６アルキル」は、それらが１〜６個の炭素原子を含むことを除いて、同様の意味を有する。
【００２３】
用語「アルケニル」は、２〜１０個の炭素原子及び少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する直鎖状又は分岐した炭化水素鎖を示す。例としては、これらに限定されないが、エテニル、２−プロペニル、及びイソブテニル等が含まれる。
【００２４】
用語「アルキニル」は、２〜１０個の炭素原子及び少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する直鎖状又は分岐した炭化水素鎖を示す。例としては、これらに限定されないが、エチニル、２−プロピニル、及びイソブチニル等が含まれる。
【００２５】
用語「シクロアルキル」は、１つ又は２つの環部分からなる、あらゆる非芳香族炭素環系である。シクロアルキル基は、その環が二重結合の存在により芳香環にならない限り、１又は２以上の炭素−炭素二重結合を有し得る。シクロアルキル基の例としては、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びシクロヘプチル等の（Ｃ３−Ｃ７）シクロアルキル基、並びに飽和の環式及び二環式のテルペン類、並びにシクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、及びシクロヘプテニル等の（Ｃ３−Ｃ７）シクロアルケニル基、並びに不飽和の環式及び二環式テルペン類が含まれる。
【００２６】
用語「アリール」は、１つ又は２つの環部分からなる、あらゆる芳香族炭素環系であり、それらの環は、縮合環でも互いに単結合で結合されていてもよい。好適なアリール基には、これらに限定されないが、フェニル、α−又はβ−ナフチル、ビフェニル、インダニル、及びインデニルが含まれる。
【００２７】
用語「ヘテロアリール」は、炭素原子及び１又は２以上の、ヘテロ原子、好ましくは互いに独立して窒素、酸素、及び硫黄から選択される、１〜３のヘテロ原子を含む、単環式又は多環式芳香族環を示す。当業者によく知られているように、ヘテロアリール環は、すべて炭素原子である相当物よりも、より低い芳香族特性しか有さない。そのため、本発明の目的において、ヘテロアリール基は、いくらかの芳香族特性のみしか有する必要がない。ヘテロアリール基の具体例には、これらに限定されないが、フリル、ベンゾフラニル、ベンゾジオキソリル、チエニル、ベンゾチオフェニル、ピリジニル、ピリジル−Ｎ−オキシド、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、ピラゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イソオキサゾリル、キノリル、（１，２，３）−及び（１，２，４）−トリアゾリル、テトラゾリル、トリアジニル、ピロリル、イミダゾリル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル、インダゾリル、イソチアゾリル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリル、オキサジアゾリル、及びチアジアゾリル等が挙げられる。
【００２８】
用語「ヘテロシクロアルキル」は、炭素及び水素原子並びに少なくとも１つのヘテロ原子、好ましくは、窒素、酸素、及び硫黄から選択される１〜４のヘテロ原子を含む非芳香族単環式又は非芳香族多環式環を示す。ヘテロシクロアルキル基は、その環が二重結合の存在により芳香環にならない限り、１又は２以上の炭素−炭素二重結合を有し得る。ヘテロシクロアルキル基の例には、これらに限定されないが、アジリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル、チアゾリジニル、オキサゾリジニル、テトラヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフラニル、テトラヒドロピラニル、ピラゾリジニル、１，３−ジオキソラニル、ピロリジニル、ピラニル、ジヒドロピラニル、イソオキサゾリジニル、及びイミダゾリジニル等が挙げられる。ヘテロシクロアルキル基は、非置換でもよいし、１若しくは２の置換基により置換されていてもよい。
【００２９】
用語「シクロアルキルアルキルオキシ」は、−Ｏ−（アルキル）−（シクロアルキル）基を示し、ここで、アルキル及びシクロアルキルは上記で定義された通りである。
【００３０】
用語「アリールアルキルオキシ」は、−Ｏ−（アルキル）−（アリール）基を示し、ここで、アリール及びアルキルは上記で定義された通りである。
【００３１】
用語「ヘテロアリールアルキルオキシ」は、−Ｏ−（アルキル）−（ヘテロアリール）基を示し、ここで、ヘテロアリール及びアルキルは上記で定義された通りである。
【００３２】
用語「ヘテロシクロアルキルアルキルオキシ」は、−Ｏ−（アルキル）−（ヘテロシクロアルキル）基を示し、ここで、ヘテロシクロアルキル及びアルキルは上記で定義された通りである。
【００３３】
用語「シクロアルキルアルキル」は、シクロアルキル基で置換されたアルキル基を示し、ここで、アルキル及びシクロアルキルは上記で定義された通りである。
【００３４】
用語「アリールアルキル」は、アリール基で置換されたアルキル基を示し、ここで、アルキル及びアリールは上記で定義された通りである。
【００３５】
用語「ヘテロアリールアルキル」は、ヘテロアリール基で置換されたアルキル基を示し、ここで、ヘテロアリール及びアルキルは上記で定義された通りである。
【００３６】
用語「ヘテロシクロアルキルアルキル」は、ヘテロシクロアルキル基で置換されたアルキル基を示し、ここで、アルキル及びヘテロシクロアルキルは上記で定義された通りである。
【００３７】
用語「シクロアルキルアルキルアミノ」は、本明細書で定義された、少なくとも１つのシクロアルキルアルキル基で置換されたアミノ基を示す。
【００３８】
用語「アリールアルキルアミノ」は、本明細書で定義された、少なくとも１つのアリールアルキル基で置換されたアミノ基を示す。
【００３９】
用語「ヘテロアリールアルキルアミノ」は、本明細書で定義された、少なくとも１つのヘテロアリールアルキル基で置換されたアミノ基を示す。
【００４０】
用語「ヘテロシクロアルキルアルキルアミノ」は、本明細書で定義された、少なくとも１つのヘテロシクロアルキルアルキル基で置換されたアミノ基を示す。
【００４１】
上述したあらゆるアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクロアルキル基は、任意選択で場合によっては、さらにそれらの置換可能な位置のいくらかが、ハロゲン、カルボキシ、シアノ、アルキル、ポリフッ化アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルキル−ヘテロアリール、ヘテロアリール−アルキル、アミノ−アルキル、アミノ基及びそれらの誘導体、例えば、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、ウレイド、アルキルウレイド、及びアリールウレイド等；カルボニルアミノ基及びそれらの誘導体、例えば、ホルミルアミノ、アルキルカルボニルアミノ、アルケニルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアミノ等；ヒドロキシ基及びそれらの誘導体、例えば、アルコキシ、ポリフッ化アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、又はシクロアルキルオキシ等；カルボニル基及びそれらの誘導体、例えば、アルキルカルボニル、アリールアカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、シクロアルキルオキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、及びヒドロキサム酸等；硫化誘導体、例えば、アルキルチオ、アリールチオ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルフィニル、アリールスルホニルオキシ、アミノスルホニル、アルキルアミノスルホニル、及びジアルキルアミノスルホニル等から選択される、１又は２以上の基、例えば１〜６つの基によってさらに置換されていてもよい。
【００４２】
さらに、適切な場合は、上述した置換基のそれぞれが、上記の置換基の１又は２以上によってさらに置換されていてもよい。
【００４３】
用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子を示す。
【００４４】
用語「アルコキシ」は、−Ｏ−（アルキル）基を示し、ここで、アルキルは上記で定義された通りである。
【００４５】
用語「ポリフッ化アルキル」又は「ポリフッ化アルコキシ」は、上記で定義された、あらゆる直鎖状又は分岐したＣ１−Ｃ６アルキル又はアルコキシ基を示し、例えば、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、２，２，２−トリフルオロエチル、２，２，２−トリフルオロエトキシ、１，２−ジフルオロエチル、及び１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロプロピル−２−イル等のように１より多い水素原子がフッ素原子で置換されている。
【００４６】
上記の内容すべてから、当業者にとって、各種要素の名称として同定されているあらゆる基、例えば、アルキルヘテロアリール、アルキルチオ、アリールチオ、アミノアルキル、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アルキルウレイド、アリールウレイド、アルキルカルボニルアミノ、アルケニルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アリールオキシ、アリールアルキルオキシ、アルキルカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルアミノ；ヘテロアリールオキシ、アリールカルボニルオキシ；アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、シクロアルキルオキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、アリールスルホニルオキシ、アミノスルホニル、アルキルアミノスルホニル、又はジアルキルアミノスルホニル等が、それらが導き出す部分から通常解釈されることを意図する。これまでのところ、例として、用語「アルコキシカルボニル」は、上記で定義された、酸素原子を介してカルボニル基に結合されたアルコキシ基を含む基を示す。
【００４７】
上記の式は、シス、トランス、（Ｒ）又は（Ｓ）のすべての立体構造の可能性を表すための１又は２以上の
【００４８】
【化３】
0005934184.tif 000004
【００４９】
を含む。
【００５０】
用語「アシル化剤」は、アミド結合によって酸をアミノ基へ結合する簡単な工程が可能な、反応性のカルボン酸誘導体をいう。アシル化剤の例としては、これらに限定されないが、有機アシルハライド類、有機酸無水物類、カルボン酸類、エステル類、及び混合カルボン酸−スルホン酸無水物類が含まれる。
【００５１】
用語「約」は、測定において通常起こり得る実験の誤差の範囲を含む。
【００５２】
用語「薬学的に許容できる塩」は、比較的無毒なミネラル及び有機酸が付加した本発明の化合物の塩である。これらの塩は、その化合物の最後の単離及び精製時に、その場で調製される。特に、酸付加による塩は、別々に、精製された化合物をその精製された形態で有機又は無機酸と反応させ、こうして形成された塩を単離することによって調製され得る。得られる塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、リン酸二水素塩、メタンスルホン酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、トリフルオロ酢酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、及びパラ−トルエンスルホン酸等が挙げられる。
【００５３】
一般式（Ｉ）の化合物が不斉中心を含みうることは、当業者にとっては明らかであろう。そのため、本発明はまた、光学立体異性体及びそれらの混合物を含む。本発明の化合物が少なくとも１つの不斉中心を有する場合、それによりそれらはエナンチオマーとして存在する。本発明の化合物が２以上の不斉中心を有する場合、それらはさらにジアステレオ異性体として存在する。ラセミ体を含めて、そうしたすべての異性体及びそれらの任意の比率の混合物は、本発明の範囲内に含まれると解される。
【００５４】
本発明はまた、異性体及びそれらの混合物、互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオ異性体、エピマー、それらの結晶体、及びそれらの結晶多形並びにそれらの混合物に関する。その化合物のいくらかは、化学量論又は非化学量論の１又は２以上の溶媒分子（例えば、水、エタノール）との溶媒和物であり、それらもまた、本発明の範囲内に含まれる。
【００５５】
化合物が互変異性体として存在する場合、それぞれの形態が平衡状態で存在していようが、１つの形態が支配的に存在していようが、本発明の範囲内に含まれると解される。
【００５６】
同様に、式（Ｉ）の化合物の代謝物及び薬学的に許容できるバイオプレカーサー（ｂｉｏ−ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ）（又はプロドラッグともいわれる。）は、本発明の範囲内に含まれ、使用において好適である。
【００５７】
式（Ｉ）の化合物のいわゆる「プロドラッグ」はまた、本発明の範囲内である。そのため、式（Ｉ）の化合物の所定の誘導体は、それ自体ではほとんど又は全く薬理活性を有さないが、体内に投与された場合、例えば、加水分解によって所望の活性を有する式（Ｉ）の化合物に変換され得る。本発明のプロドラッグは、例えば、式（Ｉ）の化合物に存在している適当な官能性基を、例えば、Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄによる「Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５）、又はＪａｒｋｋｏ  Ｒａｕｔｉｏ  ｅｔ  ａｌ．による「Ｐｒｏｄｒｕｇｓ：ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」（Ｎａｔｕｒｅ  ｒｅｖｉｅｗｓ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，ｖｏｌｕｍｅ  ７，Ｍａｒｃｈ  ２００８，２５５−２７０）に記載されているプロモイエティー（ｐｒｏ−ｍｏｉｅｔｉｅｓ）として知られている所定の部分と置換して調製され得る。
【００５８】
好適な実施形態において、本発明は、
Ａが、Ｒであり、好ましくはアルキル、アリール、アリールアルキルオキシ、又はアリールアルキルであり、それぞれは任意選択で場合によっては置換され、
Ｒ３が、Ｈである、式（Ｉ）の化合物を提供し、
さらに、その異性体、互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー、エピマー、結晶多形、溶媒和物、それらの混合物、プロドラッグ、及びそれらの薬学的に許容できる塩を提供する。
【００５９】
他の好適な実施形態において、本発明は、
Ｒ３が、Ｈであり；
Ａが、ＣＨ（Ｒ１）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ２であり；
好ましくは、独立して、又は任意の組み合わせで、
Ｒ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアリールアルキルであり、そのそれぞれは任意選択で場合によっては置換され、
Ｒ２が、アリールアルキルオキシ、又はヘテロアリールアルキルオキシであり、そのそれぞれは任意選択で場合によっては置換されている、式（Ｉ）の化合物を提供し、
さらに、その異性体、互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー、エピマー、結晶多形、溶媒和物、それらの混合物、プロドラッグ、及びそれらの薬学的に許容できる塩を提供する。
【００６０】
他の好適な実施形態において、本発明は、
Ｒ３が、−ＣＨ３であり；
Ａが、ＣＨ（Ｒ１）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ２であり；
好ましくは、独立して、又は任意の組み合わせで、
Ｒ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアリールアルキルであり、そのそれぞれは任意選択で場合によっては置換され、
Ｒ２が、アリールアルキルオキシ、又はヘテロアリールアルキルオキシであり、そのそれぞれは任意選択で場合によっては置換されている、式（Ｉ）の化合物を提供し、
さらに、その異性体、互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー、エピマー、結晶多形、溶媒和物、それらの混合物、プロドラッグ、及びそれらの薬学的に許容できる塩を提供する。
【００６１】
任意選択で場合によっては薬学的に許容できる塩の形態である、本発明のいくつかの特定の式（Ｉ）の化合物の参考のために、下記の実施例を参照されたい。
【００６２】
式（Ｉ）の化合物の、これらに限定されない具体例を以下の表１に示す。
【００６３】
【表１】
0005934184.tif 000005
【表２】
0005934184.tif 000006
【表３】
0005934184.tif 000007
【００６４】
表１に示された化合物の異性体、互変異性体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー、結晶多形、溶媒和物、混合物、プロドラッグ、及びそれらの薬学的に許容できる塩もまた、本発明の範囲内である。
【００６５】
本発明はまた、上記で定義された一般式（Ｉ）の化合物、それらのプロドラッグ、及び薬学的に許容できる塩の、以下の方法（方法Ａ及び方法Ｂ）に従う調製方法に関し、それらは当業者によく知られた方法に従って行うことができる。その使用得る方法のいくつかは、下記に示され、スキームに表されているが、そして、本発明の化合物の調製に利用可能な合成方法の範囲を限定するものとして見なしてはならない。以下の方法は、代表的なものを示す目的のために示してある。得ようとする式（Ｉ）の化合物の性質に応じて、示された方法論は、適当な出発原料を選択することによって、当業者によって適応させることができ、置換基Ｒ，Ｒ１，Ｒ２及びＲ３の性質が変性されてもよい。
【００６６】
したがって、一般式（Ｉ）のＡがＲである、化合物（Ｉａ）の調製方法を本発明の１つの目的とし、その方法は、
（ａ）式（ＩＩ）の化合物をアシル化剤と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物を得るステップ
【００６７】
【化４】
0005934184.tif 000008
【００６８】
（ここで、Ｒ及びＲ３は上記で定義された通りであり、ＢＯＣはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル保護基である。）
（ｂ）任意選択で場合によっては、ステップ（ａ）で得られた式（ＩＩＩ）の化合物を他の式（ＩＩＩ）の化合物に変換し、ＢＯＣ保護基を式（ＩＩＩ）の化合物から取り除き、式（Ｉａ）の化合物を得るステップ、を含む。
【００６９】
【化５】
0005934184.tif 000009
【００７０】
この方法（方法Ａ）のステップ（ａ）によれば、式（ＩＩ）の化合物をアシル化剤と反応させて式（ＩＩＩ）の化合物を得る反応は、当業者によく知られた様々な方法によっても行うことができる。例として、式（ＩＩ）の化合物は、例えば、塩化アシル等の適当なアシル化剤と、塩基の存在下で処理され、式（ＩＩＩ）のＢＯＣ保護化合物を与え得る。この反応は、例えば、極性非プロトン溶媒、例えば、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、又はそれらの組み合わせ等の好適な溶媒中において、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ピペリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、又はピリジン等のプロトン補足剤の存在下で、室温から溶媒の還流温度の範囲内で行われる。好ましくは、ステップ（ａ）は、式（ＩＩ）の化合物を、トリエチルアミン等のアミンの存在下で、ジクロロメタン中、室温でアシル化剤と反応させることにより行われる。任意選択で場合によっては、式（ＩＩＩ）の化合物はＢＯＣ基の脱保護の前に、他の式（ＩＩＩ）の化合物に変換されてもよい。例えば、アニリンＮＨは、当業者によく知られた方法で、塩基性溶媒中、アルキルハライドによる処理により、アルキル化され得る。通常の方法に従う式（ＩＩＩ）の化合物からのＢＯＣの切り離しによって、最終化合物（Ｉａ）が生成する。ＢＯＣ基の脱保護は、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」（第３版、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ及びＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ（１９９９））及び「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ」（Ｐ．Ｊ．Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ，Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ（１９９４））に記載されている。例えば、ステップ（ｂ）はＨＣｌ又はトリフルオロ酢酸等の酸の添加を通して、例えば、極性非プロトン溶媒である、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、又はそれらの組み合わせ等の好適な溶媒中において、約０℃から還流温度の範囲内で行われる。
【００７１】
式（Ｉａ）の化合物は、当業者に知られた任意の合成方法によって、式（Ｉａ）に含まれる他の化合物に修飾されることもできるし、及び／又は薬学的に許容できる塩に変換されることもできるし、及び／又は、その塩は、式（Ｉａ）の塩ではないフリーの化合物に変換されることもできる。
【００７２】
他の実施形態において、本発明は、ＡがＣＨ（Ｒ１）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ２である一般式（Ｉ）の化合物（Ｉｂ）も調製方法を提供し、この方法は、
（ａ）式（ＩＩ）の化合物とアシル化剤を反応させて、式（ＩＶ）の化合物を得るステップ
【００７３】
【化６】
0005934184.tif 000010
【００７４】
（ここで、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，及びＢＯＣは上記で定義された通りである。）
（ｂ）任意選択で場合によっては、ステップ（ａ）で得られた式（ＩＶ）の化合物を他の式（ＩＶ）の化合物に変換し、ＢＯＣ保護基を式（ＩＶ）の化合物から取り除き、式（Ｉｂ）の化合物を得るステップ、を含む。
【００７５】
【化７】
0005934184.tif 000011
【００７６】
この方法（方法Ｂ）のステップ（ａ）によれば、式（ＩＩ）の化合物をアシル化剤と反応させて式（ＩＶ）の化合物を得る反応は、当業者によく知られた別の方法によっても行われ得る。例として、式（ＩＩ）の化合物は、Ｚ保護アミノ酸等の適当なアシル化剤及び塩基とで、任意選択で場合によっては（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ試薬）、Ｎ，Ｎ−カルボニルジイミダゾール、又は１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩等のカップリング剤の存在下で処理することにより、式（ＩＶ）にＢＯＣで保護された化合物をもたらすことができる。この反応は、例えば、極性非プロトン溶媒、例えば、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、又はそれらの組み合わせ等の好適な溶媒中において、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ピペリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、又はピリジン等のプロトン補足剤の存在下で、室温から溶媒の還流温度の範囲内で行われる。好ましくは、ステップ（ａ）は、式（ＩＩ）の化合物を、トリエチルアミン等のアミンの存在下で、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド中、室温でＺ保護化アミノ酸と反応させることにより行われる。任意選択で場合によっては、式（ＩＶ）の化合物はＢＯＣ基の脱保護の前に、他の式（ＩＶ）の化合物に変換されてもよい。例えば、アニリンＮＨは、当業者によく知られた方法で、塩基性溶媒中、アルキルハライドによる処理により、アルキル化され得る。上述した処理による式（ＩＶ）の化合物のＢＯＣ基のさらねる脱保護により、最終化合物（Ｉｂ）が生成する。
【００７７】
式（Ｉｂ）の化合物は、当業者に知られた任意の合成方法によって、式（Ｉａ）に含まれる他の化合物に修飾されることもできるし、及び／又は薬学的に許容できる塩に変換されることもできるし、及び／又は、その塩は、式（Ｉｂ）の塩ではないフリーの化合物に変換されることもできる。
【００７８】
上記のアシル化剤又はＺ保護アミノ酸は、市販され入手可能な化合物であり、又は当業者によく知られた標準の手段で、公知の化合物から容易に得ることができる。アシル化剤又はＺ保護アミノ酸がヒドロキシル基、カルボキシル基、チオール基、又はアミノ基等の反応性基を有する場合、それらはｔ−ブトキシカルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、メチル、トリメチルシリル、及びこれらに類似した保護基により保護され、合成の所定のステップで、脱保護されて再び保護されていない反応性基にされてもよい。脱保護された基は、例えば、アルキル化、アシル化、スルホニル化、又はこれらと同様の反応でさらに反応されてもよい。官能基の保護及び脱保護は、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」（第３版、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ及びＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ（１９９９））及び「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ」（Ｐ．Ｊ．Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ，Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ（１９９４））に記載されている。
【００７９】
当業者にとっては明らかであるが、上述した方法（方法Ａ又は方法Ｂ）によって調製された式（Ｉ）の化合物が、異性体の混合物として得られる場合、それらを通常の技術によって式（Ｉ）の単一の化合物分離することも、本発明の範囲内である。
【００８０】
当業者によって理解される通り、式（Ｉ）の化合物の合成時に特定の官能基が望ましくない副反応を起こした場合、これらの官能基は通常の技術によって適当に保護される必要がある。同様に、後者（すなわち、保護された官能基）の対応する脱保護化合物への変換は、当業者によく知られた手段によって行われ得る。
【００８１】
式（ＩＩ）の出発原料は、当業者によく知られており、且つ文献で入手可能な標準の手段で、市販され入手可能な化合物から得ることができる。式（ＩＩ）の化合物は、以下の報告された部分の手段（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８０：４０１５−４０１８，１９５８；  Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２７：７３３−７３６，１９６２；  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１６；１８４０−１８４５，２００６）で容易に得ることができる。特に、エチル２−（４−ニトロフェニル）シクロプロピル−１−カルボキシレートは、無水ＣＨＣｌ３中、銅（Ｉ）塩化物（ＣｕＣｌ）の存在下で、市販され入手可能な４−ニトロスチレンとジアゾ酢酸エチル（ＥＤＡ）とのカップリングによりシスとトランスの混合物として得られた（スキーム１）。その２つの異性体は、化合物を分離するための公知の手段、例えば、クロマトグラフ分離、再結晶化技術、及び当業者によく知られた他の方法を用いて分離できる。エチルエステルのアルカリ加水分解は、対応するカルボン酸を与え、それは次に、無水ベンゼン中、トリエチルアミン、ジフェニルホスホリルアジド、ｔ−ブタノール、及びジ−ｔ−ブチルジカーボネートとの反応を通して対応するｔ−ブチルカルバメートに変換される。これらの最終化合物のニトロ基の、次亜リン酸ナトリウム、パラジウム炭素、及び炭酸カリウムを用いた還元により、式（ＩＩ）の化合物が生成する。
【００８２】
【化８】
0005934184.tif 000012
【００８３】
本発明の化合物は、効果的なＬＳＤ１及びＬＳＤ２阻害剤であることが発見され、単独で摂取された場合、白血病細胞に対する坑腫瘍活性を示し、坑白血病薬剤とともに組み合わせて投与した場合、相乗的効果を示す。
【００８４】
式（Ｉ）の化合物がＬＳＤ１及び／又はＬＳＤ２ヒストンデメチラーゼの阻害剤であることは、本発明の目的の１つである。
【００８５】
好ましくは、本発明の化合物は、治療における使用又はアポトーシス促進剤（ｐｒｏ−ａｐｏｐｔｏｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）としての使用のためのものであり、さらに好ましくは、その化合物は、遺伝子転写、細胞分化及び増殖の制御障害を特徴とする疾患の予防及び／又は治療のための薬剤としての使用のためのものである。
【００８６】
好適な実施形態において、本発明の化合物は、抗腫瘍剤としての使用のためのものである。さらに好適な実施形態において、その化合物は抗ウイルス剤としての使用のためのものである。
【００８７】
上記で定義された一般式（Ｉ）の化合物の治療上有効な量を、そうした治療を必要とする哺乳動物に投与することによって、ヒストンデメチラーゼＬＳＤ１及び／又はＬＳＤ２の活性に関連する疾患又は状態、特に、腫瘍、ウイルス感染を予防及び／又は治療する方法は、本発明の目的の１つである。
【００８８】
好ましくは、腫瘍は、神経芽細胞腫、前立腺癌、乳癌、急性骨髄性白血病、Ｔ細胞系急性リンパ性白血病、膀胱癌、肺癌、及び結腸直腸癌からなる群から選択される。
【００８９】
さらに好ましくは、ウイルス感染は単純ヘルペスウイルス（Ｈｅｒｐｅｓ  Ｓｉｍｐｌｅｘ  Ｖｉｒｕｓ）に起因する。
【００９０】
１又は２以上の上記で定義された一般式（Ｉ）の化合物単独、又は他の活性化合物との組み合わせ、及び少なくとも１つの薬学的に許容できる賦形剤を含む製薬組成物は、本発明の目的の１つである。
【００９１】
好ましくは、その製薬組成物は、剤形単位中に配合された本発明の化合物の効果的な量を含む。
【００９２】
ここで用いる用語「賦形剤」は、タブレット、カプセル、ピル、粉末、粒子、ペレット、錠剤、トローチ剤、エリキシル剤、シロップ、溶液、懸濁液、エマルション、ドロップ、ローション、スプレー、チンキ剤、クリーム、塗布薬、ゲル、軟膏、座薬、及び経口、経腸、非経口、又は局所性投与等の経皮手段等の独立物中にその組成物の投与単位の形成を可能若しくは容易にするために、又は、その取扱い若しくは保存性を向上させるために製薬組成物に添加される、又は、対象へ治療剤をデリバリーするためのキャリヤー若しくは媒介物として用いられる、それ自体は治療剤ではないあらゆる材料を意味する。
【００９３】
用語「剤形単位」は、人体及び他の哺乳類の投与量単位として好適な物理的に独立した単位を示し、それぞれの単位は、好適な製薬賦形剤とともに、目的とする治療効果を奏するために見積もられた所定量の活性物質を含む。
【００９４】
当業者にとって、そうした製薬組成物を処方するための好適な賦形剤の全体の多様性は承知のことである。好適な薬学的に許容できる賦形剤は、当業者によく知られている。賦形剤は、説明のためでありこれらに限定されないが、希釈剤、可溶化剤、フィラー、接着剤、崩壊剤（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｎｔｓ）、分解阻害剤（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ）、吸着促進剤、アジュバント（ａｄｊｕｖａｎｔｓ）、バインダー、キャリヤー、懸濁／分散剤、フィルム形成剤／被覆剤、粘着剤、抗接着剤、湿潤剤、潤滑剤、流動促進剤、防腐剤、吸着剤、緩衝剤、表面活性剤、不愉快な味又は臭気を隠す又は和らげるために添加される材料、香味料、着色剤、芳香剤、着香剤、甘味料、その組成物の見た目を向上させるために添加される材料等が含まれる。賦形剤の選択は、投与の特定の様式、溶解性及び安定性に対する賦形剤の効果、及び剤形の性質等の要素の広い範囲に影響する。
【００９５】
本発明の製薬組成物は、経口、非経口、経静脈、点滴、皮下、筋肉内、腹腔内、経粘膜（口腔、舌下、鼻腔、経尿道、及び直腸を含む）、局所、経皮、吸入、眼球投与（ｏｃｕｌａｒ  ｒｏｕｔｅｓ）（眼球インプラント、リザーバーインプラント（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ  ｉｍｐｌａｎｔｓ）、及び硝子体内投与等の注射治療を含む）、経粘膜、若しくは経皮又は他の投与のあらゆる投与法を含む様々な投与法により投与され得る。
【００９６】
そのため、それらは、極性溶媒中で経皮の使用のために、又は経粘膜の使用のために、固体若しくは液体の形態、注射可能な溶液若しくは懸濁物若しくはマルチドーズ（ｍｕｌｔｉ−ｄｏｓｅ）ボトル、タブレット、被膜されていない若しくは被膜されたタブレット、糖若しくはフィルム被膜タブレット、カプセル、ウエハーカプセル（ｗａｆｅｒ  ｃａｐｓｕｌｅｓ）、ゲルカプセル、ピル、薬包（ｃａｃｈｅｔｓ）、薬袋（ｓａｃｈｅｔｓ）、粉体、粒子、カプレット、錠剤、急速投与剤、糖剤、舐剤、ペースト、座薬、若しくは直腸カプセル、シロップ、エリキシル剤、エマルション、溶液、懸濁液、クリーム、軟膏、塗布薬、ローション、ドロップ、スプレー、又はパッチの形態で存在する。
【００９７】
例えば、固体の経口形態は、活性化合物とともに、アルカリ土類金属炭酸塩、リン酸マグネシウム、ラクトース、デキストロース、サッカロース、スクロース、セルロース、微晶質セルロース誘導体、澱粉、コーンスターチ若しくはポテトスターチ、修飾澱粉等の希釈剤；シリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム若しくはステアリン酸カルシウム、及び／又はポリエチレングリコール等の潤滑剤；澱粉、アラビアガム、ゼラチンメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、又はポリビニルピロリドン等の結合剤；澱粉、アルギン酸、アルギン酸塩、又は澱粉グリコール酸ナトリウム等の崩壊剤；発泡混合物；染料；レシチン、ポリソルベート、又はラウリル硫酸等の湿潤剤；及び、一般的に、製剤処方に用いられる無毒又は薬理学的に非活性な材料を含んでもよい。これらの製薬の調合物は、例えば、混合、整粒、錠剤化、糖被膜、又はフィルム被膜プロセル等の公知の方法により製造され得る。
【００９８】
経口投与のための液状分散物は、例えば、シロップ、エマルション及び懸濁液が挙げられる。例えば、シロップは、キャリヤーとして、サッカロース、又は、グリセリン及び／若しくはマンニトール若しくはソルビトールを含むサッカロースを含んでもよい。
【００９９】
懸濁液及びエマルションは、キャリヤーとして、天然ガム、寒天、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、又はポリビニルアルコキシを含んでもよい。
【０１００】
筋肉内注射のための懸濁液又は溶液は、活性化合物とともに、滅菌水、オリーブオイル、オレイン酸エチル、グリコール（例えば、プロピレングリコール）等の薬学的に許容できるキャリヤー、及び、必要に応じて好適な量の塩酸リドカインを含んでもよい。
【０１０１】
静脈内注射又は点滴のための溶液は、キャリヤーとして、滅菌水を含んでもよく、又は、好ましくは、それらは無菌の、水性、又は等浸透圧性の塩化ナトリウム溶液の形態中であってもよく、又は、それらはキャリヤーとしてプロピレングリコールを含んでいてもよい。
【０１０２】
座薬は、活性化合物とともに、ココアバター、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル界面活性剤、サリチル酸塩、又はレクチン等の薬学的に許容できるキャリヤーを含んでいてもよい。
【０１０３】
吸入エアロゾルは、活性化合物とともに、ヒドロフルオロアルカン類等の推進剤ガスを含んでいてもよい。推進剤をともなった処方はまた、他の成分、例えば、共溶媒、安定剤、及び任意選択で場合によっては他の賦形剤を含んでもよい。推進剤をともなわない、本発明の化合物を含む吸入処方は、水性、アルコール、又は含水アルコール媒体中で溶液又は懸濁液の形態で存在してもよく、公知のジェット又はウルトラソニック噴霧器又はソフトミスト噴霧器によってデリバリーされてもよい。
【０１０４】
上述した投与される製薬組成物の構成は、単なる代表例である。更なる物質及び加工技術は、「Ｐａｒｔ  ５  ｏｆ  Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ‘ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」（第２０版、２０００、Ｍｅｒｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ）に記載されており、この記載は参照により本明細書に組み込まれる。式（Ｉ）の本発明の化合物は、徐放性形態で、又は徐放性ドラッグデリバリーシステムから投与されることもできる。代表的な徐放性物質の説明はまた、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ‘ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」中の混和物質中に見つけることができる。
【０１０５】
本発明の化合物を含む製薬組成物は、通常、以下の標準の方法で調製され、好適な製薬形態で投与される。
【０１０６】
固体経口組成物は、標準の混合、充填、又は圧縮により調製され得る。大量のフィラーを含む組成物中に活性剤を分散させるために、混合操作を繰り返し行うことができる。
【０１０７】
液状経口調合物は、例えば、水性若しくは油性懸濁液、溶液、エマルション、シロップ若しくはエリキシル剤として処方されることができ、又は、凍結乾燥製品として存在し、使用する前に水又は好適な媒体を添加することにより再構築することもできる。いわゆる液状調合物は、ソルビトール、シロップ、メチルセルロース、寒天、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲル又は水素化食用脂、乳化剤（例えば、レクチン若しくはソルビタンモノオレエート）、又はアカシア（ａｃａｃｉａ）等の懸濁化剤；アーモンドオイル、ヤシ油、油性エステル類（例えば、グリセリンエステル類若しくはプロピレングリコール等）、又はエチルアルコール等の非水性媒体；メチル若しくはプロピルｐ−ヒドロキシベンゾエート、若しくはソルビン酸等防腐剤、及び必要に応じて標準の香料及び染料等の標準の添加剤を含むことができる。
【０１０８】
非経口投与として、本発明の化合物及び滅菌媒体を含む流動性用量単位を調製することができる。その化合物は、選択された媒体及び濃度に応じて、懸濁又は溶解され得る。非経口溶液は、一般的に、その化合物を媒体中に溶解し、フィルター処理により滅菌し、好適なバイアルに充填して密封される。有利には、局部麻酔薬、防腐剤及び緩衝剤等の好適なアジュバントとともに、媒体中で溶解されることもできる。安定性を向上させるために、その組成物はバイアルに充填した後凍結させ、水を真空下で除去することもできる。非経口懸濁液は、媒体中で化合物が溶解されたというよりも、懸濁されている点が異なるが、本質的に同じ方法で調製することができ、それらは滅菌媒体に懸濁される前にエチレンオキシドで処理して滅菌され得る。有利には、本発明の化合物の均一な分散物を簡単にするために、その組成物中に界面活性剤又は湿潤剤を含有させることができる。
【０１０９】
本発明の化合物はまた、局所的に投与され得る。局所的処方は、例えば、軟膏、クリーム、ゲル、ローション、溶液、若しくはペースト等を含んでもよく、並びに／又は、リポソーム、ミセル、及び／若しくはミクロスフェアとなるように調製されてもよい。軟膏は、製剤処方の分野において周知の通り、典型的には、ワセリン又は他の石油誘導体に基づいた半固体の調合物である。軟膏の例としては、油性軟膏ベース（例えば、植物油、動物性脂肪、及び石油由来の半固体炭化水素等）、乳化軟膏ベース（例えば、ヒドロキシステアリンサルフェート、脱水ラノリン、及び親水性ワセリン等）、エマルション軟膏ベース（例えば、セチルアルコール、モノステアリン酸グリセリン、ラノリン、及びステアリン酸）、並びに、様々な分子量のポリエチレングリコールから調製される水溶性軟膏ベースが含まれる。クリームは、これもまた当業者にはよく知られている通り、粘性液又は半固体のエマルションであり、油相、乳化剤、及び水相を含む。油相は、通常、ワセリン及びセチル又はステアリルアルコール等の脂肪族アルコールを含む。水相は、一般的に、保湿剤を含む。クリーム処方中の乳化剤は、非イオン性、アニオン性、カチオン性、又は両性界面活性剤から選択される。単一相ゲルは、典型的には水であり、しかしまた、好ましくはアルコールを含み、任意選択で場合によってはオイルを含むキャリヤー液体の、全体に本質的に均一に分散された有機高分子を含む。好適なゲル化剤は、架橋したアクリル酸ポリマー（例えば、「Ｃａｒｂｏｐｏｌ」の登録商標で市販されているカルボキシポリアルキレン類等の「カルボマー」ポリマー）である。また、ポリエチレンオキシド、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー、及びポリビニルアルコール等の親水性ポリマー；ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、及びメチルセルロース等のセルロース系ポリマー；トラガカント及びキサンタンガム等のガム；アルギン酸ナトリウム；並びに寒天も好ましい。均一なゲルの調製において、アルコール又はグリセリン等の分散剤を添加することができ、また、ゲル化剤が粉砕、機械的混合、及び／若しくは撹拌により分散されることもできる。
【０１１０】
本発明の化合物はまた、経皮放出（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ  ｒｅｌｅａｓｅ）によって投与されてもよい。典型的な経皮処方は、標準の水性又は非水性の媒体、例えば、クリーム、オイル、ローション、若しくはペースト等を含み、また、薄膜又は薬用貼付剤として提供されてもよい。具体例として、本発明の化合物は肌への粘着性貼付剤（例えば、絆創膏等）中に分散されている。この処方は、その化合物を貼付剤から皮膚を通して患者へ拡散させることができる。皮膚を通して放出する持続性薬物を得るために、天然ゴム及びシリコーンが、粘着剤として使用され得る。
【０１１１】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、ヒト等の哺乳動物への投与に好適であり、当業者によく知られている通り、単一の活性剤又は他の薬学的な活性成分と組み合わせて、通常の投与法、並びに、採用された特定の化合物の活性；治療を受けている個人の年齢、体重、総体的な健康状態、性別及び食生活；投与の回数及び方法；排泄の割合；すでに投与された他の薬物；並びに治療を受けている特定の疾患の重症度等の様々な要素に応じた用量によって投与され得る。
【０１１２】
例えば、式（Ｉ）の化合物の経口投与に適用される好適な用量は、１回の投与当たり約３０〜５００ｍｇの範囲で、１日当たり１〜５回である。一般的に、非経口投与が採用された場合、より低い用量で投与される。そのため、例えば、静脈内投与として、例えば、体重１ｋｇ当たり０．５〜３０ｍｇの範囲内の用量が通常適用される。
【０１１３】
本発明の化合物は、例えば、経口で、タブレット、糖若しくはフィルム被膜タブレット、カプセル、又は薬包（ｃａｃｈｅｔｓ）の形態、粉体又は粒子としての形態；シロップ、エマルション、溶液、又は水性若しくは非水性液体中での懸濁液としての形態、水中油型若しくは油中水型液状エマルションとしての形態、急速投与剤、舐剤、又はペーストとしての形態；経直腸で、座薬の形態；非経口で、例えば、筋肉内若しくは経静脈内注射若しくは点滴等の様々な剤形で投与され得る。好ましくは、一般式（Ｉ）の化合物単独又は他の活性成分との組み合わせは、ヒストンデメチラーゼＬＳＤ１及びＬＳＤ２阻害剤が必要とされるあらゆる疾患の予防及び／又は治療のために投与され得る。そうした疾患は、腫瘍及びウイルス感染を含む。
【実施例】
【０１１４】
本発明を、以下の図面を参照して以下の非限定的な実施例により詳しく説明する。
【０１１５】
［化学合成］
＜方法＞
他に示唆がない限り、すべての出発試薬は市販され入手可能又は以下に示された手段によって容易に入手可能であり、追加の精製をせずに使用される。すべての溶媒は試薬等級であり、必要な場合は、標準の方法で精製及び乾燥される。反応及び抽出後の溶液の濃度は、約２０Ｔｏｒｒの減圧下でのロータリエバポレータ操作の使用を含む。有機溶液は、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。分析結果は理論値の±０．４０％の範囲内である。
【０１１６】
ＴＬＣをアルミニウムで支持されたシリカゲルプレート（Ｍｅｒｃｋ  ＤＣ，Ａｌｕｆｏｌｉｅｎ  Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ  ６０  Ｆ２５４）を用いて、ＵＶライトでスポットを可視化しながら行った。
【０１１７】
１ＨＮＭＲ及び１３ＣＮＭＲスペクトルをＢｒｕｋｅｒ  ４００ＭＨｚを用いて行った。化学シフトは、１００万分の１（ｐｐｍ、δ単位）で表す。結合定数はヘルツ（Ｈｚ）で表し、分裂パターンはｓ（一重項）、ｂｓ（ブロードな一重項）、ｄ（二重項）、ｔ（三重項）、ｑ（四重項）、ｑｕｉｎｔ（五重項）、又はｍ（多重項）として表す。
【０１１８】
ＥＩＭＳスペクトルは、Ｆｉｓｏｎｓ  Ｔｒｉｏ  １０００スペクトロメータを用いて記録され、分子イオン（Ｍ＋）及びベースピークのみを与えた。
【０１１９】
融点は、Ｂｕｃｈｉ５３０融点装置で測定され、訂正されていない。
【０１２０】
＜実施例１＞
トランス及びシス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−ニトロフェニル）シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ａｎｄ  ｃｉｓ  ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｙｌ  ２−（４−Ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ）ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  Ｃａｒｂａｍａｔｅｓ）：トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−ニトロフェニル）シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｙｌ  ２−（４−Ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ）ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  Ｃａｒｂａｍａｔｅ）の調製
【０１２１】
【化９】
0005934184.tif 000013
【０１２２】
トランス−２−（４−ニトロフェニル）シクロプロピル−１−カルボン酸（５．３ｍｍｏｌ、１．１ｇ）の、無水ベンゼン（２０ｍＬ）、トリエチルアミン（６．４ｍｍｏｌ、０．９ｍＬ）、ジフェニルホスホリルアジド（５．８ｍｍｏｌ；１．２ｍＬ）、及びｔｅｒｔ−ブタノール（５３ｍｍｏｌ、５ｍＬ）溶液を窒素雰囲気化、８０℃で１６時間撹拌した。その後、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（８ｍｍｏｌ、１．７ｇ）を加え、その反応物を８０℃でさらに２時間撹拌した。その溶媒を真空下で除去し、残留物を、酢酸エチル／ｎ−ヘキサン  １／３で溶離するシリカゲルによってクロマトグラフし、純粋なトランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−ニトロフェニル）シクロプロピルカルバメートを淡黄色固体として単離した。
【０１２３】
【数１】
0005934184.tif 000014
【０１２４】
＜実施例２＞
トランス及びシス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−アミノフェニル）シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ａｎｄ  ｃｉｓ  ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｙｌ  ２−（４−Ａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌ）ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  Ｃａｒｂａｍａｔｅｓ）：トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−アミノフェニル）シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｙｌ  ２−（４−Ａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌ）ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  Ｃａｒｂａｍａｔｅ）の調製
【０１２５】
【化１０】
0005934184.tif 000015
【０１２６】
テトラヒドロフラン（３．８８ｍＬ）及び水（３．８ｍＬ）中に、トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−ニトロフェニル）シクロプロピルカルバメート（２．８８ｍｍｏｌ；０．８ｇ）、炭酸カリウム（２．０４ｍｍｏｌ；０．２８ｇ）、及び１０％パラジウム炭素（０．０１６ｇ）の混合物を５分間脱気し、その後、ジ亜リン酸ナトリウム（１０．９６ｍｍｏｌ、１．１６ｇ）の水溶液（２．３２ｍＬ）を、その混合物を勢いよく撹拌しながら滴下して加えた。得られた混合物を６０℃で５分間撹拌した。その溶媒を除去し、残留物に水（１００ｍＬ）を注ぎ、ジエチルエーテルで抽出した（３×５０ｍＬ）。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し（３×５０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。その残留物を酢酸エチル／ｎ−ヘキサン  １／２で溶離するシリカゲルによってクロマトグラフし、最初の溶出液としてｔｅｒｔ−ブチル−１−（４−アミノフェニル）プロパン−２−イルカルバメートを、続いてトランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−アミノフェニル）シクロプロピルカルバメートを、両方とも淡黄色オイルとして単離した。
【０１２７】
【数２】
0005934184.tif 000016
【０１２８】
＜実施例３＞
トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−アロイル（又はアリールアセチル、又はベンジルオキシカルボニル）アミノフェニル）シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ２−（４−ａｒｏｙｌ  （ｏｒ  ａｒｙｌａｃｅｔｙｌ  ｏｒ  ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）ａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌ）ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  ｃａｒｂａｍａｔｅｓ）（１ａ−ｈ）：
【０１２９】
【化１１】
0005934184.tif 000017
【０１３０】
トランス−ｔｅｒｔ−２−（４−ベンゾイルアミノフェニル）シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ２−（４−ｂｅｎｚｏｙｌａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌ）ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  ｃａｒｂａｍａｔｅ）（１ｂ）の調製
【０１３１】
【化１２】
0005934184.tif 000018
【０１３２】
トリエチルアミン（０．７２ｍｍｏｌ、０．１ｍＬ）及び塩化ベンゾイル（０．６ｍｍｏｌ、０．０９ｍＬ）を、氷槽で外部を冷却させながら、無水ジクロロメタン（５ｍＬ）中のトランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−アミノフェニル）シクロプロピルカルバメート（０．６ｍｍｏｌ、０．１５０ｇ）に滴下して加えた。得られた混合物を１時間撹拌し、その後、水（５０ｍＬ）を加え、有機相を分離し、水相をジクロロメタンで抽出した（２×３０ｍＬ）。その有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し（３×５０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。その残留物を酢酸エチル／ｎ−ヘキサン  １／３で溶離するシリカゲルによってクロマトグラフし、純粋な化合物１ｂを白色固体として得た。
【０１３３】
【数３】
0005934184.tif 000019
【０１３４】
以下の化合物（表２）を上述した手順により、適当な試薬を用いて調製した。
【０１３５】
【表４】
0005934184.tif 000020
【０１３６】
＜実施例４＞
トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２［４−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニルアミノアシル）アミノフェニル］シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ２−［４−（Ｎ−ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏａｃｙｌ）ａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌ］ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  ｃａｒｂａｍａｔｅｓ）（２ａ−ｍ）；トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［４−（Ｎ−４−ブロモベンジルオキシカルボニルフェニルアラニル）フェニル］シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ２−［４−（Ｎ−４−ｂｒｏｍｏｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ−ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  ｃａｒｂａｍａｔｅ）（３）；シス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［４−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニルフェニルアラニル）フェニル］シクロプロピルカルバメート（ｃｉｓ  ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ２−［４−（Ｎ−ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ−ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  ｃａｒｂａｍａｔｅ）（４）：
【０１３７】
【化１３】
0005934184.tif 000021
【０１３８】
トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２［４−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニルフェニルアラニル）フェニル］シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ２−［４−（Ｎ−ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌｐｈｅｎｙｌａｌａｎｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ］ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  ｃａｒｂａｍａｔｅ）（２ｅ）の調製
【０１３９】
【化１４】
0005934184.tif 000022
【０１４０】
トリエチルアミン（２．９６ｍｍｏｌ、０．４１ｍＬ）及びＢＯＰ試薬（０．８９ｍｍｏｌ、０．３９ｇ）を窒素雰囲気下で、Ｎ−ベンジルオキシカルボニルフェニルアラニン（０．７４ｍｍｏｌ、０．２２ｇ）の無水ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）溶液に加え、その混合物を０．５時間撹拌した。トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−アミノフェニル）シクロプロピルカルバメート（０．８１ｍｍｏｌ、０．２ｇ）を窒素雰囲気下で加え、その混合物を一晩撹拌した。その反応物に水（５０ｍＬ）を注ぎ、酢酸エチルで抽出した（３×３０ｍＬ）。その有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し（３×５０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。その残留物を酢酸エチル／クロロホルム  １／５で溶離するシリカゲル上のクロマトグラフィーのカラムによって精製し、純粋な化合物２ｅを白色固体として得た。
【０１４１】
【数４】
0005934184.tif 000023
【０１４２】
以下の化合物（表３）を、上述した手順により、適当な試薬を用いて調製した。
【０１４３】
【表５】
0005934184.tif 000024
【表６】
0005934184.tif 000025
【０１４４】
＜実施例５＞
トランス−２−（４−アロイル（又はアリールアセチル、又はベンジルオキシカルボニル））アミノフェニルシクロプロピルアミン塩酸塩（ｔｒａｎｓ  ２−（４−ａｒｏｙｌ  （ｏｒ  ａｒｙｌａｃｅｔｙｌ  ｏｒ  ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ））ａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｓ）（５ａ−ｈ）；
トランス−４−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニルアミノアシル）アミノフェニルシクロプロピルアミン塩酸塩（ｔｒａｎｓ  ４−（Ｎ−ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏａｃｙｌ）ａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｅｓ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｓ）（６ａ−ｍ）
トランス−４−ブロモベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イルカルバメート塩酸塩（ｔｒａｎｓ  ４−ｂｒｏｍｏｂｅｎｚｙｌ  １−（４−（２−ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ）ｐｈｅｎｙｌａｍｉｎｏ）−１−ｏｘｏ−３−ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎ−２−ｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（７）；
シス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イルカルバメート塩酸塩（ｃｉｓ  ｂｅｎｚｙｌ  １−（４−（２−ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ）ｐｈｅｎｙｌａｍｉｎｏ）−１−ｏｘｏ−３−ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎ−２−ｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（８）；
【０１４５】
【化１５】
0005934184.tif 000026
【０１４６】
トランス−ベンジル−１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−オキソブタン−２−イルカルバメート塩酸塩（ｔｒａｎｓ  ｂｅｎｚｙｌ  １−（４−（２−ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ）ｐｈｅｎｙｌａｍｉｎｏ）−４−（１Ｈ−ｉｎｄｏｌ−３−ｙｌ）−１−ｏｘｏｂｕｔａｎ−２−ｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（６ｌ）
【０１４７】
【化１６】
0005934184.tif 000027
【０１４８】
６ＮのＨＣｌ水溶液（２ｍＬ）を化合物２ｌ（０．２６ｍｍｏｌ、０．１ｇ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液に加え、その混合物を室温で１２時間撹拌した。沈殿した固体を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し（３×１０ｍＬ）、乾燥させて純粋な６ｌを無色の固体として得た。
【０１４９】
【数５】
0005934184.tif 000028
【０１５０】
以下の化合物（表４及び５）を、上述した手順により、適当な試薬を用いて調製した。
【０１５１】
【表７】
0005934184.tif 000029
【表８】
0005934184.tif 000030
【表９】
0005934184.tif 000031
【０１５２】
＜実施例６＞
Ｎ１−（４−トランス（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−Ｎ８−ヒドロキシオクタンジアミド塩酸塩（Ｎ１−（４−ｔｒａｎｓ（２−ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ）−Ｎ８−ｈｙｄｒｏｘｙｏｃｔａｎｅｄｉａｍｉｄｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（９）の調製
【０１５３】
【化１７】
0005934184.tif 000032
【０１５４】
（ステップａ）
メチル−８−（４−トランス（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−８−オキソオクタン酸塩（ｍｅｔｈｙｌ  ８−（４−ｔｒａｎｓ（２−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ）ｐｈｅｎｙｌａｍｉｎｏ）−８−ｏｘｏｏｃｔａｎｏａｔｅ）の合成
【０１５５】
トリエチルアミン（０．６８ｍｍｏｌ、０．０９ｍＬ）及びメチル−８−クロロ−８−オキソオクタン酸塩（０．５６４ｍｍｏｌ、０．０８ｍＬ）を、氷槽で外部を冷却させながら、トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−アミノフェニル）シクロプロピルカルバメート（０．５６ｍｍｏｌ、１４０ｍｇ）の無水ジクロロメタン（５ｍＬ）溶液中に滴下して加えた。得られた混合物を１時間撹拌し、その後、水（５０ｍＬ）を加え、有機相を分離し、水相をジクロロメタンで抽出した（２×３０ｍＬ）。その最終有機溶液を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し（３×５０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。その残留物を酢酸エチル／クロロホルム  １／２で溶離するシリカゲル上のクロマトグラフィーによって精製し、純粋な化合物メチル−８−（４−トランス（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−８−オキソオクタン酸塩を白色固体として得た。
【０１５６】
【数６】
0005934184.tif 000033
【０１５７】
（ステップｂ）
８−（４−トランス（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−８−オクタン酸（８−（４−ｔｒａｎｓ（２−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ）ｐｈｅｎｙｌａｍｉｎｏ）−８−ｏｘｏｏｃｔａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ）の合成
【０１５８】
上述したメチル−８−（４−トランス（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−８−オキソオクタン酸塩（０．５３ｍｍｏｌ、２２０ｍｇ）及びＬｉＯＨ（１．０５ｍｍｏｌ、４４ｍｇ）のテトラヒドロフラン／水（５ｍＬ／５ｍＬ）溶液を、室温で一晩撹拌した。その反応物をｐＨが４になるまで２ＮのＨＣｌを加えてクエンチし、その後、沈殿物を濾過し、水で洗浄し（３×３０ｍＬ）、乾燥して純粋な８−（４−トランス（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−８−オキソオクタン酸を白色固体として得た。
【０１５９】
【数７】
0005934184.tif 000034
【０１６０】
（ステップｃ）
Ｎ１−（４−トランス−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−Ｎ８−ヒドロキシオクタンジアミド塩酸塩（９）の合成
【０１６１】
クロロギ酸エチル（０．３８４ｍｍｏｌ，０．０４ｍＬ）及びトリエチルアミン（０．４２ｍｍｏｌ、０．０６ｍＬ）を０℃に冷却された８−（４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロプロピル）フェニルアミノ）−８−オキソオクタン酸（０．３２ｍｍｏｌ、１３０ｍｇ）の無水テトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液に加え、その混合物を１０分間撹拌した。その固形物を濾過し、ｏ−（２−メトキシ−２−プロピル）ヒドロキシルアミン（０．９６ｍｍｏｌ、０．７ｍＬ）をその濾液に加えた。その溶液を０℃で１５分間撹拌し、その後、６ＮのＨＣｌ溶液（１０ｍＬ）を加え、さらに１２時間撹拌を続けた。その後、沈殿物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し（３×１０ｍＬ）、純粋なＮ１−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−Ｎ８−ヒドロキシオクタンジアミド塩酸塩（９）を得た。
【０１６２】
【数８】
0005934184.tif 000035
【０１６３】
＜実施例７＞
トランス−ベンジル−１−（（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）（メチル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イルカルバメート塩酸塩（ｔｒａｎｓ  ｂｅｎｚｙｌ  １−（（４−（２−ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ）（ｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ）−１−ｏｘｏ−３−ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎ−２−ｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（１２）の合成
【０１６４】
【化１８】
0005934184.tif 000036
【０１６５】
（ステップａ）
トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−メチルアミノフェニル）シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ２−（４−ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌ）ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  ｃａｒｂａｍａｔｅ）（１０）の合成
【０１６６】
ホルムアルデヒド（１．８８ｍｍｏｌ、０．０５２ｍＬ）、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（５．６４ｍｍｏｌ、０．３５６ｇ）、及び酢酸（０．２ｍＬ）を０℃でトランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−アミノフェニル）シクロプロピルカルバメート（１．８８ｍｍｏｌ、４６７ｍｇ）のアセトニトリル（５ｍＬ）溶液中に添加した。その混合物を室温で１時間撹拌した。水（５０ｍＬ）を加え、その混合物を酢酸エチルで抽出した（３×５０ｍＬ）。その有機相を一緒にして混ぜ合わせ、硫酸ナトリウムで脱水し、その後、溶媒を減圧下で除去した。残渣オイルを酢酸エチル／ｎ−ヘキサン  １／２で溶離するシリカゲルによってクロマトグラフし、黄色オイルとして化合物を得た（収率３４％）。
【０１６７】
【数９】
0005934184.tif 000037
【０１６８】
（ステップｂ）
トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［４−（Ｎ−メチル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルフェニルアラニル）フェニル］シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ２−［４−（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｎ−ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌｐｈｅｎｙｌａｌａｎｙｌ）  ｐｈｅｎｙｌ］ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  ｃａｒｂａｍａｔｅ）（１１）の合成
【０１６９】
トリエチルアミン（０．６１ｍｍｏｌ、０．０８ｍＬ）及びＰｙＢＯＰ（０．１８ｍｍｏｌ、０．０９５ｇ）を窒素雰囲気下でＮ−ベンジルオキシカルボニルフェニルアラニン（０．１５ｍｍｏｌ、０．０４５ｇ）の無水ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）溶液に加え、その混合物を０．５時間にわたって撹拌した。トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−メチルアミノフェニル）シクロプロピルカルバメート１０（０．１５ｍｍｏｌ、０．０４１ｇ）を加え、窒素雰囲気下でその混合物を一晩撹拌した。その反応物に水（３０ｍＬ）を注ぎ、酢酸エチルで抽出した（３×３０ｍＬ）、その有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し（３×３０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。その残留物を酢酸エチル／クロロホルム  １／５で溶離するシリカゲル上のクロマトグラフィーのカラムによって精製し、純粋な化合物を無色のオイルとして得た。収率は７２％であった。
【０１７０】
【数１０】
0005934184.tif 000038
【０１７１】
（ステップｃ）
トランス−ベンジル−１−（（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）（メチル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イルカルバメート塩酸塩（１２）の合成
【０１７２】
６ＮのＨＣｌ溶液（２ｍＬ）をトランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［４−（Ｎ−メチル−Ｎ−ベンジルオキシカルボニルフェニルアラニル）フェニル］シクロプロピルカルバメート１１（０．２６ｍｍｏｌ、０．１ｇ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液に加え、その混合物を室温で１２時間撹拌した。その固形沈殿物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し（３×１０ｍＬ）、乾燥させて純粋な化合物を白色固体として得た。収率は８２％、融点は１５６〜１５８℃であり、ベンゼン溶媒で再結晶した。
【０１７３】
【数１１】
0005934184.tif 000039
【０１７４】
＜実施例８＞
トランス−Ｎ−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−２−（３−ベンジルウレイド）−３−フェニルプロパンアミド塩酸塩（ｔｒａｎｓ  Ｎ−（４−（２−ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ）−２−（３−ｂｅｎｚｙｌｕｒｅｉｄｏ）−３−ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎａｍｉｄｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）（１６）の合成
【０１７５】
【化１９】
0005934184.tif 000040
【０１７６】
（ステップａ）
メチル−２−（３−ベンジルウレイド）−３−フェニルプロパノエート（ｍｅｔｈｙｌ  ２−（３−ｂｅｎｚｙｌｕｒｅｉｄｏ）−３−ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏａｔｅ）（１３）の合成
【０１７７】
トリエチルアミン（１，８６ｍｍｏｌ、０．２６ｍＬ）及びベンジルイソシアネート（１．８６ｍｍｏｌ、０．２３ｍＬ）を、０℃でフェニルアラニンメチルエステル塩酸塩（０．９３ｍｍｏｌ、０．２ｇ）のテトラヒドロフラン溶液に加え、その混合物を１２時間にわたって攪拌した。その反応物に水（３０ｍＬ）を注ぎ、酢酸エチルで抽出した（５×３０ｍＬ）。その有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し（３×３０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。その残留物を酢酸エチル／ｎ−ヘキサン  １／２で溶離するシリカゲルでクロマトグラフすることによって精製し、純粋な化合物を無色のオイルとして得た。収率は９５％であった。
【０１７８】
【数１２】
0005934184.tif 000041
【０１７９】
（ステップｂ）
２−（３−ベンジルウレイド）−３−フェニルプロパン酸（２−（３−ｂｅｎｚｙｌｕｒｅｉｄｏ）−３−ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ）（１４）の合成
【０１８０】
メチル−２−（３−ベンジルウレイド）−３−フェニルプロパノエート（１３）（２．６６ｍｍｏｌ、０．８３ｇ）及び２Ｎの水酸化リチウム（５．３２ｍｍｏｌ、０．２２ｇ）のエタノール（２０ｍＬ）溶液を室温で一晩攪拌し続けた。その反応物を２ＮのＨＣｌをｐＨ＝２になるまで加えることによりクエンチし、その後、その沈殿物を濾過し、水で洗浄して（３×３０ｍＬ）、乾燥させて純粋な２−（３−ベンジルウレイド）−３−フェニルプロパン酸を淡白色固形物として得た。収率は９５％、融点は１１５〜１１７℃であり、再結晶の溶媒はシクロヘキサン／ベンゼンであった。
【０１８１】
【数１３】
0005934184.tif 000042
【０１８２】
（ステップｃ）
トランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［４−［２−（３−ベンジルウレイド）−３−フェニルプロパノイル］アミノフェニル］シクロプロピルカルバメート（ｔｒａｎｓ  ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ２−［４−［２−（３−ｂｅｎｚｙｌｕｒｅｉｄｏ）−３−ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌ］  ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ  ｃａｒｂａｍａｔｅ）（１５）の合成
【０１８３】
トリエチルアミン（１．９２ｍｍｏｌ、０．２７ｍＬ）及びＰｙＢＯＰ（０．５７ｍｍｏｌ、０．３０ｇ）を、窒素雰囲気下で２−（３−ベンジルウレイド）−３−フェニルプロパン酸（０．４８ｍｍｏｌ、０．１４ｇ）の無水ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）溶液に加え、その混合物を０．５時間攪拌した。ｔｅｒｔ−ブチル−２−（４−アミノフェニル）シクロプロピル）カルバメート（０．５２ｍｍｏｌ、０．１３ｇ）を加え、窒素雰囲気下で一晩攪拌し続けた。その反応物に水（３０ｍＬ）を注ぎ、酢酸エチルで抽出した（３×３０ｍＬ）。その有機相を飽和食塩水で洗浄し（３×３０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。その残留物を酢酸エチル／ｎ−ヘキサン  １／１で溶離するシリカゲルでクロマトグラフすることによって精製し、純粋な化合物１５を白色固形物として得た。収率は７０％、融点は１００〜１０２℃であり、再結晶溶媒はシクロヘキサンであった。
【０１８４】
【数１４】
0005934184.tif 000043
【０１８５】
（ステップｄ）
トランス−Ｎ−（４−（２−アミノシクロプロピル）フェニル）−２−（３−ベンジルウレイド）−３−フェニルプロパンアミド塩酸塩（１６）の合成
【０１８６】
６ＮのＨＣｌ水溶液（２ｍＬ）をトランス−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［４−［２−（３−ベンジルウレイド）−３−フェニルプロパノイル］アミノフェニル］シクロプロピルカルバメート（０．３０ｍｍｏｌ、０．１ｇ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液に加え、その混合物を室温で１２時間攪拌した。沈殿固形物を濾過し、酢酸エチルで洗浄し（３×１０ｍＬ）、乾燥させて純粋な化合物１６を白色固形物として得た。収率は８２％、融点は１５３〜１５５℃であり、再結晶溶媒はベンゼンであった。
【０１８７】
【数１５】
0005934184.tif 000044
【０１８８】
［生物試験］
【０１８９】
ヒト組み換えＭＡＯ  Ａ及びＭＡＯ  Ｂをピキア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓ）中で発現させ、公知の方法（Ｂｉｎｄａ  Ｃ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １００：９７５０−９７５５，２００３）で精製した。阻害アッセイ及びＫｉ値をキヌラミン（ＭＡＯ  Ａ）及びベンジルアミン（ＭＡＯ  Ｂ）を基質として用いて、ｐＨ７．５で、公知の手順（Ｂｉｎｄａ  Ｃ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １００：９７５０−９７５５，２００３）測定した。マウス組み換えＬＳＤ２を大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）中で発現させ、公知の方法（Ｋａｒｙｔｉｎｏｓ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８４：１７７７５−１７７８２，２００９）で精製した。ヒト組み換えＬＳＤ１／ＣｏＲＥＳＴを単離タンパク質として大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）中で発現させ、既に報告された手順（Ｆｏｒｎｅｒｉｓ  Ｆ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｓｃｉ  ３３：１８１−１８９  ２００８）に従って共に精製した。両方のデメチラーゼを用いた酵素活性及び阻害アッセイを、ｐＨ７．５〜８．０で、メチル化Ｈ３ペプチドを使用して行った（Ｆｏｒｎｅｒｉｓ  Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８２：２００７０−２００７４  ２００７，Ｋａｒｙｔｉｏｎｓ  Ａ，  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８４：１７７７５−１７７８２，２００９）。
【０１９０】
非飽和基質濃度を用いた２５℃でのペルオキシダーゼを組み合わせたアッセイ（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ  ｃｏｕｐｌｅｄ  ａｓｓａｙ）により、化合物の酵素活性に対して可能性のある効果に対して、化合物をスクリーニングした。見かけのｋｃａｔ値を化合物の存在下で（溶解性に応じて、最終濃度は２５μＭ〜１５０μＭの範囲）測定し、試験化合物の非存在下で行った参照アッセイと比較した（表６）。
【０１９１】
ＬＳＤ１活性を、５０ｍＭのＨｅｐｅｓ／ＮａＯＨ  ｐＨ７．５中で、Ｌｙｓ４モノメチル化ヒストンＨ３ペプチドを基質として用いてアッセイした。ＬＳＤ２活性を、５０ｍＭのＨｅｐｅｓ／ＮａＯＨ  ｐＨ８．０中で、Ｌｙｓ４ジメチル化ヒストンＨ３ペプチドを基質として用いて測定した（表６）。ＭＡＯ  Ａ及びＭＡＯ  Ｂのアッセイを、５０ｍＭのＨｅｐｅｓ／ＮａＯＨ  ｐＨ７．５  ０．５％（ｖ／ｖ）還元型Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００中で、基質としてキヌラミン及びベンジルアミンをそれぞれ用いて行った（表６）。
【０１９２】
ＮＢ４細胞を様々な濃度の６ｅで処理した（図１）。６ｅ及びレチノイン酸（ＲＡ、Ｓｉｇｍａ社製）をＤＭＳＯ中で１０００倍希釈した。ＮＢ４細胞を、１０％ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、及び１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを供したＲＰＭＩ培地で培養し、加湿インキュベーター中で３７℃、１０％Ｏ２及び５％ＣＯ２で保持した。細胞を１５０，０００／ｍＬの密度でプレーティングし、２μＭの６ｅの存在下、ＲＡ（１０ｎＭ、１００ｎＭ、及び１μＭ）で処理した。媒体処理細胞中に、ＤＭＳＯを０．２％の最終濃度で加えた。それぞれの時間（２、４、及び７日）で、細胞を採取し、トリパンブルー溶液で染色し、血球計算器を用いてカウントした。生存細胞のみを記録した。同時に、細胞をガラススライド上にサイトスピンし、風乾して、Ｍａｙ  Ｇｒｕｎｗａｌｄ−Ｇｉｅｍｓａ法を用いて染色した。
【０１９３】
［結果］
トラニルシプロミンは、ＭＡＯ及びＬＳＤの共有結合的阻害剤であり、その結合は、容易に測定できるタンパク質結合フラビンの吸光度のブリーチング（ｂｌｅａｃｈｉｎｇ）を引き起こす（Ｌｉ  Ｍ，Ｈｕｂａｌｅｋ  Ｆ，Ｒｅｓｔｅｌｌｉ  Ｎ，Ｅｄｍｏｎｄｓｏｎ  ＤＥ，Ｍａｔｔｅｖｉ  Ａ．Ｉｎｓｉｇｈｔｓ  ｉｎｔｏ  ｔｈｅ  ｍｏｄｅ  ｏｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｍｏｎｏａｍｉｎｅ  ｏｘｉｄａｓｅ  Ｂ  ｆｒｏｍ  ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｃｒｙｓｔａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １００：９７５０−９７５５，２００３；Ｓｃｈｍｉｄｔ  ＤＭ，ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ＤＧ．，ｔｒａｎｓ−２−Ｐｈｅｎｙｌｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｅ  ｉｓ  ａ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ−ｂａｓｅｄ  ｉｎａｃｔｉｖａｔｏｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｈｉｓｔｏｎｅ  ｄｅｍｅｔｈｙｌａｓｅ  ＬＳＤ１．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４６：４４０８−４４１６，２００７；Ｋａｒｙｔｉｎｏｓ  Ａ，Ｆｏｒｎｅｒｉｓ  Ｆ，Ｐｒｏｆｕｍｏ  Ａ，Ｃｉｏｓｓａｎｉ  Ｇ，Ｂａｔｔａｇｌｉｏｌｉ  Ｅ，Ｂｉｎｄａ  Ｃ，Ｍａｔｔｅｖｉ  Ａ．，Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｆｌａｖｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｈｉｓｔｏｎｅ  ｄｅｍｅｔｈｙｌａｓｅ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８４：１７７７５−１７７８２，  ２００９）。この特性は、本発明のトラニルシプロミン誘導体の早く有効なスクリーニングの方法をもたらす。表６に示した通り、酵素活性に対する効果の測定により、それぞれの化合物をさらに評価した。Ｋｉ値は表７に示した選択された化合物において計算した。
【０１９４】
【表１０】
0005934184.tif 000045
【表１１】
0005934184.tif 000046
【０１９５】
【表１２】
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【０１９６】
化合物６ｅを、ＮＢ４細胞中での生物学的活性のためにさらに評価した（図１）。ＮＢ２細胞を様々な濃度の６ｅで処理した。興味深いことに、それ自体では効果を奏しないのに対し、６ｅはＲＡの分化効果を強く促進できた。これは、６ｅの非存在下ではほとんど全く効果を奏さない、１０ｎＭもの低いＲＡ濃度において確認された。ＲＡ及び６ｅの組み合わせは、試験されたすべての投与において、図１の代表的なサイトスピンに示す通り、協調的に細胞の成長を阻害し、改善された分化をもたらした。ＮＢ４細胞に細胞アポトーシスを誘導する作用が測定された場合、同様の効果が示された（図２）。６ｅＨＡ，レチノイン酸がアポトーシスを誘導する作用を向上させる効果を示した。
【図１】
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【図２】
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