(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉａ）の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体、以下の式（９０）で表される化合物、以下の化学式（１０８）で表される化合物またはこれらの薬学的に許容される塩
【化１】
0006026499.tif 000094
【化２】
0006026499.tif 000095
【化３】
0006026499.tif 000096
（式中：
【化４】
0006026499.tif 000097
は、単結合（その場合、Ａ０は存在しない）または＝ＮもしくはＣＲ０基（その場合、Ａ０はＮまたはＣＲ０を表し、Ｒ０＝Ｈまたは（Ｃ１−Ｃ６）アルキル）を表し、
・Ｒ１は、
（５−ジメチルアミノ）ナフタレン−１−スルホニル（ダンシル基）、７−ニトロ−１，２，３−ベンゾオキサジアゾール（ＮＢＤ基）、１−ピレンカルボキシアルデヒド残基、フルオレセイン残基、フルオレセインイソチオシアネート残基、ローダミン残基、フルオレシアニン残基およびガロシアニン残基から選択される蛍光分子の残基、
ジオキセタン誘導体の残基から選択される発光分子の残基、
窒素含有マスタードガスの類似物質残基、イホスファミド残基、クロラムブシル残基、ドキソルビシン残基、シスプラチン残基、アドリアマイシン残基、アクチノマイシン残基、フルオロウラシル残基、メトトレキサート残基、エトポシド残基、ビンクリスチン残基、ポドフィロトキシン残基、ブスルファン残基、ドセタキセル残基、５−フルオロウラシル残基、イリノテカン残基、ＳＮ３８残基、およびこれらの誘導体から選択される抗癌剤の残基、
デキサメタゾン残基、イブプロフェン残基、インドメタシン残基、ベンダザック残基、エトドラク残基、ジクロフェナク残基、ロナゾラク残基、およびこれらの誘導体から選択される抗炎症薬の残基、
スピラマイシン残基である抗生物質残基、
サリチルアルデヒド残基およびダリド残基から選択される抗細菌剤残基、
ベンゾカイン残基である麻酔薬残基、または
エストラジオール残基およびエストロン残基から選択されるステロイド残基
を表し、
・Ｘ２は、イミン官能基（−Ｃ＝Ｎ−または−Ｎ＝Ｃ−）を表し、
・Ｘ３は、単結合または（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル鎖を表し、所望により、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、複素環、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｒ７）＝Ｃ（Ｒ８）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ９−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−、および−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１）−基からなる群から選択される１または複数の部分が割り込んでいてよく且つ／またはこれらが後ろに続いていてよく且つ／またはこれらにより置換されていてよく、前記アリール、ヘテロアリール、および複素環は、所望により、置換されていてよく、
・ｎは、０〜５の整数を表し、
・ｍは、０〜５の整数を表し、
・Ｒ７〜Ｒ８は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
・Ｒ９〜Ｒ１１は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール、もしくはアシル基を表し、
・Ｒ３０は、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール、もしくはアシル基を表し、
・Ｒｘは、水素原子、ハロゲン原子、ＮＯ２、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＲ１２Ｒ１３、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＳＯ３Ｒ１４、−ＣＯＯＲ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＮＲ１６Ｒ１７、−ＯＰＨ（Ｏ）ＯＲ１８、−ＰＨ（Ｏ）ＯＲ１９、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ２０）（ＯＲ２１）、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２２）（ＯＲ２３）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２４、−ＰＲ２５Ｒ２６、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ（式中、Ｒ１２〜Ｒ２４は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基からなる群から選択されるフェニル環の１または複数の置換基を表し、
・Ｒ１２〜Ｒ２４は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し
Ｒ２５およびＲ２６は、互いに独立して、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表す）。
【請求項２】
・ｎは、１〜５の整数を表し、
・ｍは、１〜５の整数を表すことを特徴とする、請求項１に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体。
【請求項３】
【化５】
0006026499.tif 000098
が、単結合（その場合、Ａ０は存在しない）、または＝Ｎ（その場合、Ａ０はＮを表す）、請求項１または２に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体。
【請求項４】
Ｘ３が、−Ａ３−、−Ａ３−Ａ４−Ａ５−、または−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ１２−Ａ１３−基（Ａ３はＡ０に結合している）を表す、請求項１〜３のいずれか一項に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体。
（式中、
・Ａ３は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３３、−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−、−Ｘ５−ＣＨ２−Ｘ７−、または
【化６】
0006026499.tif 000099
を表し、
・Ａ４およびＡ１２は、互いに独立して、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリール、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−アリール、またはアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
・Ａ５は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３４、−Ｘ８−Ｃ（＝Ｘ９）−Ｘ１０−、−Ｘ８−ＣＨ２−Ｘ１０−、または
【化７】
0006026499.tif 000100
を表し、
・Ａ１３は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３９、−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−、−Ｘ５−ＣＨ２−Ｘ７−、または
【化８】
0006026499.tif 000101
を表し、
・Ｘ５〜Ｘ１０は、互いに独立して、単結合またはＯ、Ｓ、ＮＲ３５、もしくは
【化９】
0006026499.tif 000102
を表し、
・Ｒ３３〜Ｒ３５およびＲ３９は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表す）
【請求項５】
Ｘ３が、
・ＮＲ３３および−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−から選択されるＡ３基、
・Ａ３は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３３、−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−、−Ｘ５−ＣＨ２−Ｘ７−を表し、Ａ４は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたはアリール基を表し、
Ａ５は、−Ｘ８−Ｃ（＝Ｘ９）−Ｘ１０−を表す−Ａ３−Ａ４−Ａ５−基、または
・−ＮＲ３３−Ａ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ａ１２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−および−ＮＲ３３−Ａ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ａ１２−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３９−から選択される−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ１２−Ａ１３−基
を表す、請求項４に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体。
【請求項６】
Ｘ３が、
・ＮＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、および−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−から選択されるＡ３基、
・Ａ３は単結合、Ｏ、ＮＲ３３、または−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−を表し、Ａ４は、フェニルまたは（ＣＨ２）ａ基（式中、ａは１〜５、特に１〜３の整数を表す）を表し、Ａ５は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−を表す、−Ａ３−Ａ４−Ａ５−基、または
−ＮＭｅ−Ａ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ａ１２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−および−ＮＭｅ−Ａ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ａ１２−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−から選択される、−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ１２−Ａ１３−基
を表す、請求項５に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体。
【請求項７】
Ｘ３が、−Ａ３−または−Ａ３−Ａ４−Ａ５−基を表し、
・Ａ３は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３３、−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−を表し、
・Ａ４は、請求項４で定義されるものであり、
・Ａ５は、−Ｘ８−Ｃ（＝Ｘ９）−Ｘ１０−基である、請求項４に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体。
【請求項８】
Ｘ３が、−Ａ３−または−Ａ３−Ａ４−Ａ５−基を表し、
・Ａ３は、単結合、ＮＲ３３、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ３５−または−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＲ３５−を表し、
・Ａ４は、−ＣＨ２−または−ＣＨ２−ＣＨ２−であり、
・Ａ５は、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ３５−である、請求項７に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体。
【請求項９】
Ｒ３０が、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体。
【請求項１０】
Ｒｘが、水素原子、ハロゲン原子、ＮＯ２、および（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシからなる群から選択される、１のフェニル環置換基を表す、請求項１〜９のいずれか一項に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体。
【請求項１１】
以下から選択されることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体：
【化１０】
0006026499.tif 000103
【化１１】
0006026499.tif 000104
【化１２】
0006026499.tif 000105
【化１３】
0006026499.tif 000106
【化１４】
0006026499.tif 000107
【化１５】
0006026499.tif 000108
【化１６】
0006026499.tif 000109
【化１７】
0006026499.tif 000110
【化１８】
0006026499.tif 000111
【化１９】
0006026499.tif 000112
【化２０】
0006026499.tif 000113
【化２１】
0006026499.tif 000114
【化２２】
0006026499.tif 000115
【化２３】
0006026499.tif 000116
【化２４】
0006026499.tif 000117
【化２５】
0006026499.tif 000118
【化２６】
0006026499.tif 000119
【化２７】
0006026499.tif 000120
【化２８】
0006026499.tif 000121
【化２９】
0006026499.tif 000122
【化３０】
0006026499.tif 000123
【化３１】
0006026499.tif 000124
【化３２】
0006026499.tif 000125
【化３３】
0006026499.tif 000126
【化３４】
0006026499.tif 000127
【化３５】
0006026499.tif 000128
【請求項１２】
少なくとも１つの請求項１〜１１のいずれか一項に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体と少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含んでなる医薬組成物または診断組成物。
【請求項１３】
骨組織を標的にするための、医薬または診断製品として使用するための、請求項１２に記載の医薬組成物または診断組成物。
【請求項１４】
溶骨性または骨硬化性の骨再形成疾患の処置または骨組織の診断用イメージングのための、請求項１２に記載の医薬組成物または診断組成物。
【請求項１５】
溶骨性または骨硬化性の骨再形成状態を診断するための、請求項１４に記載の医薬組成物または診断組成物。
【請求項１６】
前記溶骨性または骨硬化性の骨再形成疾患は、原発性骨腫瘍、骨転移、多発性骨髄腫、リン酸−カルシウム代謝調節異常、骨粗しょう症、および炎症性疾患から選択されることを特徴とする、請求項１４または１５に記載の医薬組成物または診断組成物。
【請求項１７】
前記原発性骨腫瘍は、骨肉腫、軟骨肉腫、巨細胞腫、またはユーイング肉腫であり、前記リン酸−カルシウム代謝調節異常は、高カルシウム血症であり、炎症性疾患は、関節リウマチまたはプロテーゼ弛緩であることを特徴とする、請求項１６に記載の医薬組成物または診断組成物。
【請求項１８】
以下の連続ステップを含んでなる、請求項１に記載の式（Ｉａ）の化合物の製造方法：
（ａ１）以下の式（ＩＩａ）の化合物：
【化３６】
0006026499.tif 000129
（式中、Ｒｘ、Ｒ３０、ｎ、およびｍは、請求項１で定義した通りであり、Ｘ１１は、−ＣＨＯ、または−ＮＨ２官能基を表す）を、以下の式（ＩＩＩ）の化合物：
【化３７】
0006026499.tif 000130
（式中、
【化３８】
0006026499.tif 000131
Ｒ１、およびＸ３は、請求項１で定義した通りであり、Ｘ１２は、Ｘ１１＝ＣＨＯの時、−ＮＨ２官能基を表し、Ｘ１１＝ＮＨ２の時、−ＣＨＯ官能基を表す）とカップリングさせて式（Ｉａ）の化合物を得るステップ、
（ｂ１）所望により、前記ステップ（ａ１）で得られた式（Ｉａ）の化合物を塩化してその薬学的に許容される塩を得るステップ、
（ｃ１）前記ステップ（ａ１）または（ｂ１）で得られた式（Ｉａ）の化合物またはその薬学的に許容される塩の１つを反応媒体から分離するステップ。
【請求項１９】
以下の式（ＩＩａ）の化合物またはその薬学的に許容される塩
【化３９】
0006026499.tif 000132
（式中、Ｒｘ、Ｒ３０、ｎ、およびｍは、請求項１で定義した通りであり、Ｘ１１は、請求項１８で定義した通りである）。
【請求項２０】
【化４０】
0006026499.tif 000133
から選択される、化合物。
【請求項２１】
治療的または診断的に関心のあるベクター化分子を製造するための、請求項１９または２０に記載の化合物の使用。
【請求項２２】
前記治療的または診断的に関心のあるベクター化分子が、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体である、請求項２１に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体、その合成方法、それらを含む医薬組成物、および医薬としてのその使用に関し、更に、骨組織を標的とするベクターによる治療的または診断的関心のある分子のベクター化に関する。
【背景技術】
【０００２】
骨組織は、ヒドロキシアパタイト結晶（Ｃａ１０（ＰＯ４）６（ＯＨ）２）の形態のリン酸カルシウムからなるミネラル部分および分化細胞の細胞外マトリックスを含む有機部分で構成される結合組織である。
【０００３】
骨組織は、骨再形成骨再形成と呼ばれるプロセスにより連続的に再編成される。これは、新たな有機マトリックスを合成してこれを石灰化する骨芽細胞の活性による構築期（ｂｕｉｌｄｉｎｇ  ｐｈａｓｅ）（Owen et al., Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 1998, 7, 363）および有機マトリックスを吸収してミネラルを溶解する破骨細胞により誘導される分解期（Roodman et al., Endocr. Rev. 1996, 17, 308）を特徴とする。この生理的プロセスにより、カルシウムおよびリン酸の恒常性並びに骨質量を維持することができ（Manologas et al., Endocriv. Rev. 2000, 21, 115）、機械的ストレスに適応することができる。この平衡の乱れは、大理石骨病等の骨硬化性疾患、またはより多くの場合、（骨肉腫等の原発性腫瘍または骨転移等の続発性腫瘍において）腫瘍に誘発されるものであり得る骨溶解もしくは（骨粗しょう症等の代謝疾患の場合における）腫瘍に誘発されないものであり得る骨溶解の発生に関連する。
【０００４】
ビスホスホナート（ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体を含む、基本形態のビスホスホン酸誘導体）は、Ｐ−Ｏ−Ｐ鎖がＰ−Ｃ−Ｐ鎖で置換されて代謝安定化合物になっている内因性ピロホスファートの合成類似物質であり、骨溶解に有効なツールである（Heymann et al., Trends Mol. Med., 2004, 10, 337）。
【０００５】
これらの分子は、骨組織を標的とする能力のために主に用いられる。ピロホスファート同様、ビスホスホナートは、骨のミネラル成分に対する強力な親和性（リン酸基と骨のミネラル成分であるカルシウムとの間の親和性）を有し、高量で石灰化プロセスを調節することができる。これらの物質は、種々の骨代謝障害の処置に有用であることが証明されている。ビスホスホナートは特に、一方で高カルシウム血症を引き起こし且つ他方で痛みおよび骨折を生じる骨損傷を引き起こす過剰な骨吸収に関わる病態の処置に用いられる。
【０００６】
したがって、これらの使用は、骨粗しょう症、腫瘍誘発または非腫瘍誘発高カルシウム血症、および溶骨性腫瘍病態、例えば前立腺癌または乳癌に続発する骨転移または多発性骨髄腫の処置に約１０年間必須である。
【０００７】
今日までの構造−活性研究の進展により、ビスホスホナートが骨吸収を阻害する能力は２つの構造的ファクター、すなわち
・化合物と骨のミネラル成分との良好な親和性に必要なホスホナート基（およびヒドロキシ−ビスホスホナートの場合、ヒドロキシル）、
・分子に関連する生物学的活性を決定する分子標的に特異的なＲＥＳ側鎖
に依存することが明確に示されている。
【０００８】
【化１】
0006026499.tif 000002
【０００９】
仏国特許出願２９２６０８１は特に、スペーサーアームによりヒドロキシ−ビスホスホン酸官能基に結合した活性成分を含んでなることにより骨組織の標的化を可能にしている二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体を記載している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】仏国特許出願公開第２９２６０８１号明細書
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Owen et al., Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 1998, 7, 363
【非特許文献２】Roodman et al., Endocr. Rev. 1996, 17, 308
【非特許文献３】Manologas et al., Endocriv. Rev. 2000, 21, 115
【非特許文献４】Heymann et al., Trends Mol. Med., 2004, 10, 337
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
しかし、これらの誘導体は、スペーサーアームの漸進的構築により活性成分自体から製造されている。したがって、この方法は経済的でなく、大量の活性成分が失われ、生成物のコストが常に高くなる。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
そこで、本発明者らは、ヒドロキシ−ビスホスホン酸官能基を含むスペーサーアームを、所望により官能化された活性成分上にグラフトすることよって簡便に合成できる新規な二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体を開発した。本発明では、所望により官能化された活性成分がイミン官能基によってスペーサーアームに結合しており、これにより、二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸を、これらの誘導体の治療または診断活性は保存しつつ、より簡便且つより経済的に製造することが可能となっている。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】試験した化合物３の濃度に対する細胞株ＰＯＳ１およびＬ９２９の生細胞の割合を示す図である。
【図２ａ】担体のみ（陰性対照）、化合物４９、または化合物５０を注射された後のマウスのそれぞれ背または腹の蛍光医療用イメージングにより得られた画像を示す図である。
【図２ｂ】担体のみ（陰性対照）、化合物４９、または化合物５０を注射された後のマウスのそれぞれ背または腹の蛍光医療用イメージングにより得られた画像を示す図である。
【図３】刻んだ腫瘍標本中において本発明に係る化合物１１５からの分子１１４の放出の経時的発生を示す図である。
【図４】刻んだ腫瘍標本において本発明に係る化合物８０からのメトトレキサート（ＭＴＸ）の放出の経時的発生を示す図である。
【図５】化合物３の濃度に対する、細胞株ＰＯＳ１およびＬ９２９への抗癌活性の結果を示す図である。
【図６】化合物２１の濃度に対する、細胞株ＰＯＳ１およびＬ９２９への抗癌活性の結果を示す図である。
【図７】化合物８０（ベクター化ＭＴＸ）またはメトトレキサート（ＭＴＸ）の濃度に対する、細胞株ＰＯＳ１への抗癌活性結果の結果を示す図である。
【図８】化合物８０（ベクター化ＭＴＸ）またはメトトレキサート（ＭＴＸ）の濃度に対する、細胞株ＳａＯＳ２への抗癌活性結果の結果を示す図である。
【図９】国際公開第２００９／０８３６１４号の化合物（ＩＩＩ）の濃度に対する、細胞株ＰＯＳ１およびＬ９２９への抗癌活性の結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明は、以下の一般式で表される二機能性ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体またはその薬学的に許容される塩に関する：
【００１６】
【化２】
0006026499.tif 000003
式中、
【００１７】
【化３】
0006026499.tif 000004
は、単結合を表す（その場合、Ａ０は存在しない）または＝Ｎもしくは＝ＣＲ０基を表す（その場合、Ａ０はＮまたはＣＲ０を表し、Ｒ０＝Ｈまたは（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルである）、
・Ｒ１は、治療または診断的関心のある分子の残基を表し、
・Ｘ１は、−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−Ａ２−（ＣＨ２）ｍ−鎖（Ｘ４はＸ２に結合している）を表し、
・Ｘ２は、イミン官能基（−Ｃ＝Ｎ−または−Ｎ＝Ｃ−）を表し、
・Ｘ３は、単結合または（Ｃ１−Ｃ２０）−アルキル鎖、特に（Ｃ１−Ｃ１５）−アルキル、特に（Ｃ１−Ｃ１０）−アルキル、好ましくは（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルを表し、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、複素環、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｒ７）＝Ｃ（Ｒ８）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ９−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−、および−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１）−基からなる群から選択される１または複数の部分が所望により割り込んでいてよく且つ／またはこれらが後ろに続いていてよく且つ／またはこれらで置換されていてよく、アリール、ヘテロアリール、および複素環は置換されていてよく、
・Ｘ４は、単結合または所望により置換されていてよいアリールもしくはヘテロアリール基を表し、
・Ａ１は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ２７、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ２８）Ｃ（Ｏ）−、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２９）−を表し、
・Ａ２は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３０、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３２）−、−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｋ−、または−Ａ９−（ＣＨ２）ａ−Ａ１０−（ＣＨ２）ｂ−Ａ１１−基を表し、
・Ａ９およびＡ１１は、それぞれ、互いに独立して、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ３８を表し、
・Ａ１０は、アリール、ヘテロアリール、または複素環基を表し、
・ｎは、０〜５、特に１〜５の整数、特に３を表し、
・ｍは、０〜５、特に１〜５の整数、特に２を表し、
・ｋは、１〜１０、特に１〜５の整数を表し、
・ａおよびｂは、それぞれ、互いに独立して、０〜５の整数を表し、
・Ｒ７およびＲ８は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
・Ｒ９〜Ｒ１１は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール、もしくはアシル基、好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルもしくはアリール基、更により好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
・Ｒ２７およびＲ２９は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
・Ｒ３０〜Ｒ３２およびＲ３８は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール、もしくはアシル基、好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルもしくはアリール基、更により好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、例えばメチルを表す。
【００１８】
したがって、本発明の分子は、３つの別個の部分、すなわち
・骨のミネラル成分への強力な親和性により分子を骨組織を標的化することを可能にするヒドロキシ−ビスホスホン酸官能基に対応する部分Ｄ、
・残基Ｒ１をその上にグラフトすることが可能なスペーサーアームである部分Ｃ、
・残基Ｒ１をスペーサーアーム上にグラフトするためのリンカーである部分Ｂ、および
・特に骨組織疾患を標的とした処置または診断すら可能する、特にこの骨組織のイメージングのための、治療または診断活性を有する分子の残基Ｒ１に対応する部分Ａ
で構成される。
【００１９】
本発明において、「治療または診断的関心のある分子の残基」とは、治療または診断目的の分子が分子の残部に、特にスペーサーアームＢに結合した時に得られる残基を意味する。したがって、治療または診断的関心のある分子は、スペーサーアームとの結合を可能にする−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ、−ＮＨ２、Ｃ＝Ｏ、−ＣＨＯ、−ＣＯＯＨ、または−ＣＯＮＨ２基等の官能基を含まなければならないまたはそのように修飾されなければならない。
【００２０】
【化４】
0006026499.tif 000005
が＝Ｎ基を表す場合、残基は、有利には、リンカーのアミン官能基と反応して＝Ｎ基を形成できるＣ＝Ｏまたは−ＣＨＯ官能基を有することに留意されたい。
【００２１】
【化５】
0006026499.tif 000006
が＝ＣＲ０基を表す場合、二重結合は、有利には、Ｒ１上に存在する窒素原子に結合してイミン官能基を形成している。したがって、残基は、有利には、リンカーのＣ＝Ｏまたは−ＣＨＯ官能基と反応してその基、すなわち＝ＣＲ０を形成できるアミン官能基を有する。
【００２２】
本発明において、「アルキル」基とは、飽和、直鎖、または分岐鎖の炭化水素鎖を意味する。
【００２３】
本発明において、「（Ｃ１−Ｃ６）アルキル」とは、１〜６個の炭素原子を含む上記で定義したようなアルキル基、例えばメチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル等を意味する。
【００２４】
本発明において、「（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、特に（Ｃ１−Ｃ１５）−アルキル、特に（Ｃ１−Ｃ１０）−アルキル、好ましくは（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル」とは、それぞれ、１〜２０個の炭素原子、特に１〜１５個、特に１〜１０個、好ましくは１〜４個の炭素原子を含む上記で定義したようなアルキル基、例えば、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、デシル等を意味する。
【００２５】
本発明において、「アリール」とは、特に６〜２０個の炭素原子、好ましくは６〜１０個の炭素原子を含み且つ例えばフェニルまたはナフチル基等の１または複数の縮合環を含んでなる芳香族基を意味し、有利にはフェニル基である。
【００２６】
本発明において、「ヘテロアリール」とは、１または複数の縮合環を含んでなり且つ５〜１０個の環原子を含んでなる芳香族基を意味し、環原子は、１または複数のヘテロ原子、有利には１〜４個、更により有利には１または２個の例えば硫黄、窒素、酸素、リン、またはセレン原子、好ましくは硫黄、窒素、または酸素を含み、他の環原子は炭素原子である。ヘテロアリール基の例としては、フリル、チエニル、ピロリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリルインジル、またはセレノフェニルが挙げられる。
【００２７】
本発明において、「シクロアルキル」とは、３〜１０個の環炭素原子を含む飽和の単環式または多環式炭化水素鎖（特に二環式または三環式の鎖）を意味する。多環基である場合、環は、スピロ環接合部により２つずつ縮合、架橋、または結合していてよい。例としては、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびシクロヘプチル基が含まれる。
【００２８】
本発明において、「複素環」基とは、５〜１０員環を意味し、飽和であっても不飽和であってもよいが、芳香族ではなく、１または複数の、有利には１〜４個、より有利には１または２個のヘテロ原子、例えば硫黄、窒素、または酸素原子を含み、特にピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、またはモルホリニル基であり得る。
【００２９】
アリール、ヘテロアリール、および複素環基は、置換されている場合、ハロゲン原子、ＮＯ２、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＲ１２Ｒ１３、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＳＯ３Ｒ１４、−ＣＯＯＲ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＮＲ１６Ｒ１７、−ＯＰＨ（Ｏ）ＯＲ１８、−ＰＨ（Ｏ）ＯＲ１９、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ２０）（ＯＲ２１）、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２２）（ＯＲ２３）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２４、−ＰＲ２５Ｒ２６、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ（式中、Ｒ１２〜Ｒ２４は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、Ｒ２５およびＲ２６は、互いに独立して、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表す）からなる群から選択される１または複数の基で置換されていてよい。
【００３０】
本発明において、「ハロゲン原子」とはフッ素、塩素、臭素、およびヨウ素原子を意味する。
【００３１】
本発明において、「（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ」とは酸素原子により分子の残部に結合した、上記で定義した（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を意味する。例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、またはｔｅｒｔ−ブトキシ基、特にメトキシ基が含まれる。
【００３２】
本発明において、「アシル」基とは、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、またはヘテロアリール基、好ましくは（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたはアリール基、更により好ましくは（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を意味する。
【００３３】
本発明において、「薬学的に許容される」とは、医薬組成物の製造に用いられるものを意味し、一般的に安全且つ非毒性であり、生物学的またはその他の点で望ましくないものでなく、獣医学用およびヒト用の両方の薬剤における使用が許容される。
【００３４】
化合物の「薬学的に許容される塩」とは、親化合物の望ましい薬理活性を有する、本明細書で定義されるような薬学的に許容される塩を意味する。そのような塩には、
（１）水和物および溶媒和物、
（２）塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の薬学的に許容される無機酸と形成されたまたは酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシナフトエ酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムコン酸、２−ナフタレンスルホン酸、プロピオン酸、サリチル酸、コハク酸、ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリメチル酢酸、トリフルオロ酢酸等の薬学的に許容される無機酸と形成された薬学的に許容される酸付加塩、または
（３）親化合物中に存在する酸プロトンが、金属イオン、例えばアルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、もしくはアルミニウムイオンで置換された場合または薬学的に許容される有機もしくは無機塩基に配位された場合に形成される、薬学的に許容される塩基付加塩が含まれる。許容可能な有機塩基としては、ジエタノールアミン、エタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、トリエタノールアミン、トロメタミン等が含まれる。許容可能な無機塩基としては、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、および水酸化ナトリウムが含まれる。
【００３５】
好ましくは、本発明に係る化合物は、塩基が例えばＮａＯＨまたはＫＯＨ、特にＮａＯＨである薬学的に許容される塩基付加塩の形態である。
【００３６】
特に、本発明に係る化合物は、
【００３７】
【化６】
0006026499.tif 000007
が単結合または＝Ｎ基を表し、
・Ｒ１が、治療または診断的関心のある分子の残基を表し、
・Ｘ１が、−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−Ａ２−（ＣＨ２）ｍ−鎖を表し、
・Ｘ２が、イミン官能基（−Ｃ＝Ｎ−または−Ｎ＝Ｃ−）を表し、
・Ｘ３が、単結合または（Ｃ１−Ｃ２０）−アルキル鎖、特に（Ｃ１−Ｃ１５）−アルキル、特に（Ｃ１−Ｃ１０）−アルキル、好ましくは（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルを表し、所望により、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、複素環、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｒ７）＝Ｃ（Ｒ８）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ９−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）−、および−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１）−基からなる群から選択される１または複数の部分が割り込んでいてもよく且つ／またはこれらが後ろに続いていてもよく、アリール、ヘテロアリール、および複素環は所望により置換されていてもよく、
・Ｘ４が、所望により置換されていてよいアリールまたはヘテロアリール基を表し、
・Ａ１が、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ２７、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ２８）Ｃ（Ｏ）−、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２９）−を表し、
・Ａ２が、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３０、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３１）Ｃ（Ｏ）−、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３２）−を表し、
・ｎが、１〜５の整数、特に３を表し、
・ｍが、０〜５、特に１〜５の整数、特に２を表し、
・Ｒ７およびＲ８が、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
・Ｒ９〜Ｒ１１が、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール、もしくはアシル基、好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルもしくはアリール基、更により好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
・Ｒ２７〜Ｒ２９が、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
・Ｒ３０〜Ｒ３２が、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール、もしくはアシル基、好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルもしくはアリール基、更に好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、例えばメチルを表す、
上記式（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩で表すことができる。
【００３８】
【化７】
0006026499.tif 000008
は、有利には、単結合（その場合、Ａ０は存在しない）または＝Ｎ基（その場合、Ａ０はＮを表す）を表す。
【００３９】
有利には、Ｘ１は単結合を表さない。
【００４０】
Ｘ４は、有利には、所望により置換されていてよいアリールまたはヘテロアリール、特に所望により置換されていてよいアリール基、例えばフェニルを表す。
【００４１】
Ｘ４は、より具体的には、所望により置換されていてよいフェニル、ナフチル、またはインドリル基（好ましくは、インドリル基はその窒素原子でＡ１に結合している）を表し、好ましくは所望により置換されていてもよいフェニル基を表す。
【００４２】
Ｘ４のアリールおよびヘテロアリール基、例えばフェニル、ナフチル、およびインドリルは、前述のように置換されていてよく、すなわちハロゲン原子、ＮＯ２、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＲ１２Ｒ１３、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＳＯ３Ｒ１４、−ＣＯＯＲ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＮＲ１６Ｒ１７、−ＯＰＨ（Ｏ）ＯＲ１８、−ＰＨ（Ｏ）ＯＲ１９、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ２０）（ＯＲ２１）、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２２）（ＯＲ２３）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２４、−ＰＲ２５Ｒ２６、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ
（式中、Ｒ１２〜Ｒ２４は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、Ｒ２５およびＲ２６は、互いに独立して、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表す）
からなる群から選択される１または複数の基で置換されていてよい。有利には、これらは、ハロゲン原子、ＮＯ２、および（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシからなる群から選択される１または複数の基、特にＮＯ２で置換される。
【００４３】
Ａ１は、有利には、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ２７、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ２８）Ｃ（Ｏ）−、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２９）−を表す。
【００４４】
Ａ１は、より具体的には、単結合、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ２７、特に単結合またはＯ、好ましくはＯを表す。
【００４５】
特に、Ａ１は、Ｘ４がインドリル基等の窒素原子を含んでなるヘテロアリール基を表し且つこの窒素原子でＡ１に結合している場合、単結合を表す。Ａ１は好ましくは、Ｘ４が炭素原子でＡ１に結合したフェニルもしくはナフチル等のアリールまたはヘテロアリールを表す場合、単結合ではなく、特にＯ、Ｓ、またはＮＲ２７、特に酸素原子を表す。
【００４６】
Ａ２は、有利には、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３０、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３１）Ｃ（Ｏ）−、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３２）−を表し；あるいは、−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｋ−を表す。
【００４７】
Ａ２は、より具体的には、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ３０、好ましくはＮＲ３０（式中、Ｒ３０は上記で定義した通りであり、特に水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルもしくはアリール基、好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、例えばメチルを表す）を表す。Ａ２はまた、−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｋ−基（式中、ｋは上記で定義した通りであり、特に２を表す）を表すこともある。
【００４８】
Ａ２は特にＮＲ３０基（式中、Ｒ３０は、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、好ましくは（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、例えばメチルを表す）を表すこともある。
【００４９】
本発明の特定の実施形態では、Ｘ１は式−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−Ａ２−（ＣＨ２）ｍ−の鎖を表し、式中、
・Ｘ４は、前述のように所望により置換されていてよい、特にＮＯ２で置換されていてよいフェニル基を表し、
・Ａ１は、酸素原子を表し、
・Ａ２は、ＮＲ３０基（式中、Ｒ３０は（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、例えばメチルを表す）を表し、
・ｎは３を表し、
・ｍは２を表す。
【００５０】
Ｘ２は、より具体的には−Ｎ＝ＣＨ−官能基を表す。
【００５１】
【化８】
0006026499.tif 000009
は、有利には単結合を表す。
【００５２】
Ｘ３は特に、−Ａ３−、−Ａ３−Ａ４−Ａ５−、または−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ１２−Ａ１３−基（Ａ３はＡ０に結合している）、特に−Ａ３−、−Ａ３−Ａ４−Ａ５−を表し、式中、
・Ａ３は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３３、−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−、−Ｘ５−ＣＨ２−Ｘ７−、または
【００５３】
【化９】
0006026499.tif 000010
を表し、
・Ａ４およびＡ１２は、互いに独立して、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリール、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−アリール、またはアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、特に（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを表し、
・Ａ５は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３４、−Ｘ８−Ｃ（＝Ｘ９）−Ｘ１０−、−Ｘ８−ＣＨ２−Ｘ１０−、または
【００５４】
【化１０】
0006026499.tif 000011
を表し、
・Ａ１３は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３９、−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−、−Ｘ５−ＣＨ２−Ｘ７−、または
【００５５】
【化１１】
0006026499.tif 000012
を表し、
Ｘ５〜Ｘ１０は、互いに独立して、単結合またはＯ、Ｓ、ＮＲ３５、もしくは
【００５６】
【化１２】
0006026499.tif 000013
を表し、
・Ｒ３３〜Ｒ３５およびＲ３９は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、特に水素原子を表す。
【００５７】
Ｘ３がＡ３基を表す場合、これは特にＮＲ３３または−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−基、特にＮＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、または−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−であり得る。
【００５８】
Ｘ３が−Ａ３−Ａ４−Ａ５−基を表す場合、Ａ３は単結合、Ｏ、ＮＲ３３、または−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−、特に単結合、Ｏ、ＮＲ３３、Ｃ（＝Ｏ）、または−Ｘ５−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−を表し得；Ａ４は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたはアリール基、特にフェニルまたは（ＣＨ２）ａ基（式中、ａは１〜５、特に１〜３の整数を表す）を表し得；Ａ５は、−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−、特に−Ｘ５−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ３５−、例えば−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−を表す。
【００５９】
Ｘ３が−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ１２−Ａ１３−基を表す場合、これは特に−ＮＲ３３−Ａ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ａ１２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−ＮＲ３３−Ａ４−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ａ１２−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３９−基（式中、特に、Ｒ３３＝ＭｅおよびＲ３９＝Ｈ）であり得る。
【００６０】
Ｘ３は、より具体的には、−Ａ３−または−Ａ３−Ａ４−Ａ５−基
［式中、
・Ａ３は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３３、または−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−、特に単結合またはＮＲ３３または−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−基、例えば−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−ＮＲ３５−、特に例えば−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ３５−、または−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＲ３５−を表し、
・Ａ４は既に定義した通りであり、例えば−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−であり、
・Ａ５は、−Ｘ８−Ｃ（＝Ｘ９）−Ｘ１０−基、例えば−Ｘ８−Ｃ（＝Ｏ）−Ｘ１０−、特に例えば−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ３５−を表す］
を表す。
【００６１】
Ｘ３は特に、
・単結合またはＮＲ３３もしくは−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−ＮＲ３５−基、例えば−Ｃ（＝Ｘ６）−ＮＲ３５−（式中、Ｘ６は好ましくはＯまたはＳを表す）を表す−Ａ３−基、または
・−Ａ３−Ａ４−Ａ５−基
［式中、
Ａ３は、単結合または−Ｘ５−Ｃ（＝Ｘ６）−Ｘ７−基、例えば−Ｃ（＝Ｏ）−Ｘ７−、特に−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−を表し、
Ａ４は、上記で定義したようなものであり、
Ａ５は、ＮＲ３４または−Ｘ８−Ｃ（＝Ｘ９）−ＮＲ３５−基、例えば−Ｘ８−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ３５−を表す］
を表す。
【００６２】
Ｘ３は特に、ＮＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ２）２−ＯＣ（＝Ｏ）−基を表し得、あるいは−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−さえ表し得る。
【００６３】
本発明のヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体の残基Ｒ１は、溶骨性または骨硬化性の骨再形成疾患、例えば原発性骨腫瘍（例えば骨肉腫、軟骨肉腫、巨細胞腫、またはユーイング肉腫）、骨転移、多発性骨髄腫、リン酸−カルシウム代謝調節異常、例えば高カルシウム血症、骨粗しょう症、および炎症性疾患、例えば関節リウマチまたはプロテーゼ弛緩（ｐｒｏｓｔｈｅｔｉｃ  ｌｏｏｓｅｎｉｎｇ）の処置または診断に有用な活性成分の残基であり得る。
【００６４】
特に、残基Ｒ１は、蛍光分子の残基、例えば、（５−ジメチルアミノ）ナフタレン−１−スルホニル（ダンシル基）、７−ニトロ−１，２，３−ベンゾオキサジアゾール（ＮＢＤ基）、１−ピレンカルボキシアルデヒド残基、フルオレセイン残基およびその誘導体、例えばフルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）およびローダミン、例えばローダミンＢ、シアニン誘導体、例えばフルオレシアニンおよびガロシアニン；発光分子の残基、例えばジオキセタン誘導体の残基およびアルカリまたはアルカリ土類金属硫化物から選択される診断的関心のある分子の残基であり得る。対応するヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体も、特に診断目的で、骨組織のイメージングに用いることができる。
【００６５】
特に、Ｒ１残基は、骨の形成促進活性または吸収抑制活性を有する、抗癌剤、抗炎症薬、抗生物質、抗細菌剤、麻酔薬、ステロイド、およびペプチドから選択される治療的関心のある分子の残基から選択され得る。
【００６６】
Ｒ１残基は特に、抗癌剤、例えばマスタードガスの（特に窒素含有）類似物質のようなアルキル化分子、イホスファミドおよびその誘導体、並びにクロラムブシルおよびその誘導体、抗新生物性分子、例えばドキソルビシン、シスプラチン、アドリアマイシン、アクチノマイシン、フルオロウラシル、メトトレキサート、エトポシド、ビンクリスチン、ポドフィロトキシン、ブスルファン、ドセタキセル、５−フルオロウラシル、およびその誘導体、またはトポイソメラーゼ１阻害剤、例えばイリノテカンまたはその類似物質、例えばＳＮ３８、抗炎症薬、例えばコルチコステロイド、例えばデキサメタゾンおよびその誘導体、または非ステロイド性抗炎症薬、例えばイブプロフェン、インドメタシン、ベンダザック、エトドラク、ジクロフェナク、ロナゾラク、およびその誘導体；抗生物質、例えばスピラマイシン、抗細菌剤、例えばサリチルアルデヒドおよびその誘導体、例えばダリド（ｄａｌｙｄｅ）；麻酔薬、例えばベンゾカイン、およびステロイド、例えばエストラジオールおよびエストロンの誘導体から選択される治療的関心のある分子に由来し得る。
【００６７】
Ｒ１は特に、ポドフィロトキシン残基、窒素含有マスタードガス類似物質、クロラムブシル、メトトレキサート、ドキソルビシン、ＳＮ３８、イブプロフェン、ジクロフェナク、エストロン、スピラマイシン、ダリド、またはベンゾカインであり得る。
【００６８】
Ｒ１は特に、ポドフィロトキシン残基、窒素含有マスタードガス類似物質、メトトレキサート、イブプロフェン、ジクロフェナク、エストロン、スピラマイシン、またはベンゾカイン；特にポドフィロトキシン残基または窒素含有マスタードガス類似物質であり得る。
【００６９】
Ｒ１はまた、ダンシル基、７−ニトロ−１，２，３−ベンゾオキサジアゾール、１−ピレンカルボキサルデヒドの残基、フルオレセインの残基、またはその誘導体の残基、またはローダミン、特にローダミンＢ、特にダンシル基、１−ピレンカルボキサルデヒドまたはフルオレセインまたはその誘導体の残基であり得る。
【００７０】
特に、本発明の化合物は以下の式（Ｉａ）で表され得る：
【００７１】
【化１３】
0006026499.tif 000014
式中、
【００７２】
【化１４】
0006026499.tif 000015
Ｒ１、Ｒ３０、Ｘ２、Ｘ３、ｎ、およびｍは上記で定義した通りであり、Ｒｘは、水素原子、ハロゲン原子、ＮＯ２、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＲ１２Ｒ１３、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＳＯ３Ｒ１４、−ＣＯＯＲ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＮＲ１６Ｒ１７、−ＯＰＨ（Ｏ）ＯＲ１８、−ＰＨ（Ｏ）ＯＲ１９、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ２０）（ＯＲ２１）、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ２２）（ＯＲ２３）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２４、−ＰＲ２５Ｒ２６、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ（式中、Ｒ１２〜Ｒ２４は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、Ｒ２５およびＲ２６は、互いに独立して、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表す）からなる群から選択されるフェニル環の１または複数の置換基を表す。
【００７３】
酸素は特に、Ｘ２基に対してフェニル環上でメタまたはパラ位、好ましくはメタ位である。
【００７４】
Ｒ３０は、より具体的には、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、例えばメチルを表す。ｎは３を表し得、ｍは２を表し得る。
【００７５】
Ｒｘは、より具体的には、１または複数、特に１個の、水素原子、ハロゲン原子、ＮＯ２、および（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシからなる群から選択される、特に水素原子およびＮＯ２からなる群から選択される、フェニル環置換基を表す。
【００７６】
Ｒｘは特に水素原子またはＮＯ２基を表す。これは、有利には、酸素に関してフェニル環上でオルト位であり得る。
【００７７】
本発明に係る式（Ｉ）の例としては特に以下が挙げられる：
【００７８】
【化１５】
0006026499.tif 000016
【００７９】
【化１６】
0006026499.tif 000017
【００８０】
【化１７】
0006026499.tif 000018
【００８１】
【化１８】
0006026499.tif 000019
【００８２】
【化１９】
0006026499.tif 000020
【００８３】
【化２０】
0006026499.tif 000021
【００８４】
【化２１】
0006026499.tif 000022
【００８５】
【化２２】
0006026499.tif 000023
【００８６】
【化２３】
0006026499.tif 000024
【００８７】
【化２４】
0006026499.tif 000025
【００８８】
【化２５】
0006026499.tif 000026
【００８９】
【化２６】
0006026499.tif 000027
【００９０】
【化２７】
0006026499.tif 000028
【００９１】
【化２８】
0006026499.tif 000029
【００９２】
【化２９】
0006026499.tif 000030
【００９３】
【化３０】
0006026499.tif 000031
【００９４】
【化３１】
0006026499.tif 000032
【００９５】
【化３２】
0006026499.tif 000033
【００９６】
【化３３】
0006026499.tif 000034
【００９７】
【化３４】
0006026499.tif 000035
【００９８】
【化３５】
0006026499.tif 000036
【００９９】
【化３６】
0006026499.tif 000037
【０１００】
【化３７】
0006026499.tif 000038
【０１０１】
【化３８】
0006026499.tif 000039
【０１０２】
【化３９】
0006026499.tif 000040
【０１０３】
【化４０】
0006026499.tif 000041
【０１０４】
【化４１】
0006026499.tif 000042
【０１０５】
本発明は更に、特に骨組織への標的化のための、医薬または診断製品として使用するための、前述のヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体またはその薬学的に許容される塩に関する。
【０１０６】
本発明は更に、薬学的または診断組成物を製造するための、より具体的には骨組織への標的化のための、本発明のヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体またはその薬学的に許容される塩に関する。
【０１０７】
特に、本発明のヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体は、溶骨性または骨硬化性の骨再形成状態、例えば原発性骨腫瘍、例えば骨肉腫、軟骨肉腫、巨細胞腫、またはユーイング肉腫；骨転移；多発性骨髄腫；リン酸−カルシウム代謝調節異常、例えば高カルシウム血症；骨粗しょう症；および炎症性疾患、例えば関節リウマチまたはプロテーゼ弛緩を処置するための医薬として、あるいは、溶骨性または骨硬化性の骨再形成状態、例えば原発性骨腫瘍、例えば骨肉腫、軟骨肉腫、巨細胞腫、またはユーイング肉腫；骨転移；多発性骨髄腫；およびリン酸−カルシウム代謝調節異常、例えば高カルシウム血症；骨粗しょう症；および炎症性疾患、例えば関節リウマチまたはプロテーゼ弛緩を特に診断するための、骨組織の診断的イメージングのための製品として用いることができる。
【０１０８】
第１の実施形態では、ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体は骨組織イメージングに用いられる。
【０１０９】
第２の実施形態では、ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体は、腫瘍処置において使用され、特に悪性高カルシウム血症、骨肉腫のような原発性骨腫瘍、および骨転移を処置するために使用される。
【０１１０】
第３の実施形態では、ヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体は、骨粗しょう症の処置においてまたは抗炎症処置において使用され、特に関節リウマチを処置するために使用される。
【０１１１】
本発明は更に、少なくとも１つの前述の本発明のヒドロキシ−ビスホスホン酸誘導体またはその薬学的に許容される塩と少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含んでなる薬学的または診断組成物に関する。
【０１１２】
この組成物は、特に皮下、静脈内、筋肉内、または経皮で投与されるように、すなわち、好ましくは注射可能な形態またはパッチで、ヒトを含む哺乳動物向けに製造することができる。投与量は、処置によっておよび問題となる状態によって異なる。
【０１１３】
活性成分としての本発明の化合物は、１日１回単回投与により与えられるか、１日複数回投与される、例えば等量で１日２回投与される、０．０１〜１０００ｍｇ／日の用量で用いることができる。１日に投与される用量は、有利には、５〜５００ｍｇ、更により有利には１０〜２００ｍｇである。これらの範囲を超える用量を用いることが必要になることもあり、当業者であればこれは理解することができる。
【０１１４】
本発明は更に、医薬または診断製品として用いるための、前述したような医薬組成物または診断組成物に関する。
【０１１５】
特に、本発明の組成物は、骨組織イメージングまたは溶骨性もしくは骨硬化性の骨再形成疾患、例えば原発性骨腫瘍（例えば骨肉腫、軟骨肉腫、巨細胞腫、またはユーイング肉腫）、骨転移、多発性骨髄腫、リン酸−カルシウム代謝調節異常（例えば高カルシウム血症）、骨粗しょう症、および炎症性疾患（例えば関節リウマチまたはプロテーゼ弛緩）の処置もしくは診断に用いることができる。
【０１１６】
第１の実施形態では、診断組成物は骨組織のイメージングに用いられる。
【０１１７】
第２の実施形態では、治療組成物は、腫瘍の処置、特に悪性の高カルシウム血症、原発性骨腫瘍、および骨転移の処置に用いられる。
【０１１８】
第３の実施形態では、治療組成物は、骨粗しょう症の処置においてまたは抗炎症処置において用いられ、特に関節リウマチを処置するために用いられる。
【０１１９】
式（Ｉ）の化合物を以下の連続ステップに従って製造することができる：
（ａ１）以下の式（ＩＩ）の化合物：
【０１２０】
【化４２】
0006026499.tif 000043
（式中、Ｘ１は、上記で定義した通りであり、Ｘ１１は、−ＣＨＯまたは−ＮＨ２官能基を表す）と以下の式（ＩＩＩ）の化合物：
【０１２１】
【化４３】
0006026499.tif 000044
（式中、
【０１２２】
【化４４】
0006026499.tif 000045
Ｒ１、およびＸ３は上記で定義した通りであり、Ｘ１２は、Ｘ１１＝ＣＨＯの時、−ＮＨ２官能基を表し、Ｘ１１＝ＮＨ２の時、−ＣＨＯ官能基を表す）とをカップリングさせて式（Ｉ）の化合物を得るステップ、
（ｂ１）所望により、上記ステップ（ａ１）で得られた式（Ｉ）の化合物を塩化してその薬学的に許容される塩を得るステップ、および
（ｃ１）ステップ（ａ１）または（ｂ１）で得られた式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩の１つを反応媒体から分離するステップ。
【０１２３】
ステップ（ａ１）：
イミン官能基を生じるアルデヒド（ＣＨＯ）とアミン（ＮＨ２）の間のカップリング反応は、水、ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、ｉＰｒＯＨ、ＰｒＯＨ、ＢｕＯＨ、ＢｕＯＨ、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ＭｅＮＯ２、ＭｅＣＮ、ＴＨＦ、ジオキサン、ピリジン、ＨＭＰＴ、ジグリム、エチレングリコール、グリセロール、およびその混合物、特に水、メタノール、およびその混合物等の極性溶媒中で行うことができる。
【０１２４】
所望により、反応媒体に、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＬｉＯＨ、Ｃａ（ＯＨ）２、ＮａＨＣＯ３、Ｎａ２ＣＯ３、ＫＨＣＯ３、Ｋ２ＣＯ３、Ｌｉ２ＣＯ３、ＮＨ３、アミン、ピリジン、ピコリン、キノリン、ＤＭＡＰ、ＤＢＵ等、特にＮａＯＨまたはＫＯＨ等の塩基が添加されてもよい。
【０１２５】
逆に、ＨＣｌ、Ｈ２ＳＯ４、ＡｃＯＨ、ＣＦ３ＣＯＯＨ、またはＨＣＯＯＨ等の酸が添加されてもよい。
【０１２６】
反応は、有利には、室温、すなわち、温度１５〜４０℃、特に２０〜３０℃、特に約２５℃で行う。
【０１２７】
しかし、試薬が熱感受性でない場合、反応媒体を約１００〜１５０℃に加熱してもよい。
【０１２８】
必要であれば、特に活性成分が反応条件下で反応し得る別の官能基を有する場合、追加的な保護および脱保護ステップをこのプロセス中に用いることができる。
【０１２９】
ステップ（ｂ１）：
塩化ステップは、前述したような薬学的に許容される酸または塩基の存在下で行われる。これは特に、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＬｉＯＨ、Ｃａ（ＯＨ）２、ＮａＨＣＯ３、Ｎａ２ＣＯ３、ＫＨＣＯ３、Ｋ２ＣＯ３、Ｌｉ２ＣＯ３、ＮＨ３、アミン、ピリジン、ピコリン、キノリン、ＤＭＡＰ、ＤＢＵ等、特にＮａＯＨまたはＫＯＨ、特にＮａＯＨ等の塩基であり得る。
【０１３０】
ステップ（ｃ１）：
このようにして得られた式（Ｉ）の化合物は、当業者に周知の方法、例えば抽出、溶媒の蒸発、または沈殿および濾過等により、反応媒体から分離することができる。
【０１３１】
更に、必要であれば、この化合物は、当業者に周知の技術により、例えば、化合物が結晶である場合の再結晶化により、シリカゲルカラムもしくは逆相クロマトグラフィーにより、または高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により精製することもできる。
【０１３２】
当業者に公知の技術で式（ＩＩ）の化合物を製造することができる。
【０１３３】
Ａ２＝ＮＲ３０の場合、式（ＩＩ）の化合物は以下の式（ＩＶ）の化合物：
Ｘ１１−Ｘ４−Ａ１−Ｈ    
（ＩＶ）
（式中、Ｘ４、Ｘ１１、およびＡ１は上記で定義した通りである）から以下の連続ステップにより製造することができる：
（ａ２）所望により、Ｘ１１官能基を保護して以下の式（ＩＶｂｉｓ）の化合物：
Ｘｂｉｓ１１−Ｘ４−Ａ１−Ｈ    （ＩＶｂｉｓ）
（式中、Ｘ４およびＡ１は、上記で定義した通りであり、Ｘｂｉｓ１１は、保護されたＣＨＯまたはＮＨ２官能基を表す）を得るステップ、
（ｂ２）式（ＩＶ）または（ＩＶｂｉｓ）の化合物と以下の式（Ｖ）の化合物：
Ａ６−（ＣＨ２）ｎ−Ａ７ 
（Ｖ）
（式中、ｎは、上記で定義した通りであり、Ａ６およびＡ７は、互いに独立して、脱離基、例えばハロゲン原子、特に臭素原子、トシラート、またはメシラート等を表す）を反応させて以下の式（ＶＩ）または（ＶＩｂｉｓ）の化合物：
Ｘ１１−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−Ａ７ 
（ＶＩ）
または
Ｘｂｉｓ１１−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−Ａ７ 
（ＶＩｂｉｓ）
（式中、Ｘ４、Ｘ１１、Ｘｂｉｓ１１、Ａ１、Ａ７、およびｎは上記で定義した通りである）を得るステップ、
（ｃ２）上記式（ＶＩ）または（ＶＩｂｉｓ）の化合物を、式Ｒ３０ＮＨ２（Ｒ３０は上記で定義した通りである）のアミンと反応させて以下の式（ＶＩＩ）または（ＶＩＩｂｉｓ）の化合物：
Ｘ１１−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨＲ３０ 
（ＶＩＩ）
または
Ｘｂｉｓ１１−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨＲ３０ 
（ＶＩＩｂｉｓ）
（式中、Ｘ４、Ｘ１１、Ｘｂｉｓ１１、Ａ１、Ｒ３０、およびｎは上記で定義した通りである）を得るステップ、
（ｄ２）上記式（ＶＩＩ）または（ＶＩＩｂｉｓ）の化合物と式Ａ８−（ＣＨ２）ｍＣＯＯＨ（式中、Ａ８は、脱離基、例えばハロゲン原子、トシラート、メシラートを表す）の酸またはｍ＝２の場合はアクリル酸を反応させて、以下の式（ＶＩＩＩ）または（ＶＩＩＩｂｉｓ）の化合物：
Ｘ１１−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ３０−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯＯＨ  
（ＶＩＩＩ）
または
Ｘｂｉｓ１１−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ３０−（ＣＨ２）ｍ−ＣＯＯＨ      （ＶＩＩＩｂｉｓ）
（式中、Ｘ４、Ｘ１１、Ｘｂｉｓ１１、Ａ１、Ｒ３０、ｎ、およびｍは上記で定義した通りである）を得るステップ、
（ｅ２）上記式（ＶＩＩＩ）または（ＶＩＩＩｂｉｓ）の化合物の酸官能基をヒドロキシ−ビスホスホン酸に変換して式（ＩＩ）の化合物または以下の式（ＩＩｂｉｓ）の化合物：
【０１３４】
【化４５】
0006026499.tif 000046
（式中、Ｘ４、Ｘｂｉｓ１１、Ａ１、Ｒ３０、ｎ、およびｍは上記で定義した通りである）を得るステップ、
（ｆ２）所望により、官能基Ｘｂｉｓ１１を脱保護して式（ＩＩ）の化合物を得るステップ、および
（ｇ２）上記ステップ（ｅ２）または（ｆ２）で得られた式（ＩＩ）の化合物を反応媒体から分離するステップ。
【０１３５】
ステップ（ａ２）：
式（ＩＶ）の化合物は、市販されているか、当業者に公知の技術により入手可能である。
【０１３６】
アルデヒド官能基（ＣＨＯ）は、当業者に周知の任意の保護基、特に、式−Ｃ（ＯＲ３６）（ＯＲ３７）（式中、Ｒ３６およびＲ３７は、同一であるか異なり、好ましくは同一であり、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表すか、Ｒ３５およびＲ３７が、一緒になって、式−（ＣＨ２）ｐ−（式中、ｐは２または３、特に３を表す）の鎖を形成する）の環式または非環式アセタールで保護することができる。
【０１３７】
アルデヒド官能基はまた、対応するアルコール、Ｒ３６ＯＨおよびＲ３７ＯＨ（好ましくは同一）との反応により、またはＲ３６およびＲ３７が一緒にＨＯ−（ＣＨ２）ｐ−ＯＨと鎖を形成する場合、アセタール形態で保護することができる。
【０１３８】
アミン官能基（ＮＨ２）は、当業者に周知の任意の保護基で、特にＢｏｃ（ブチルオキシカルボニル）基で保護することができる。
【０１３９】
ステップ（ｂ２）：
本発明において、「脱離基」とは、求核置換反応中に求核試薬で容易に置換できる化学基を意味し、求核試薬は、より具体的にはアミン、特に第二級アミンである。更に、そのような脱離基は、より具体的には、ハロゲン原子、例えば塩素原子、メシラート（ＭｓＯ−）、またはトシラート（ｐ−Ｍｅ−Ｐｈ−Ｏ−）であり得る。
【０１４０】
このステップは、Ｋ２ＣＯ３等の塩基の存在下で行うことができる。Ａ６およびＡ７は、それぞれ臭素原子等のハロゲン原子を表し得る。
【０１４１】
ステップ（ｃ２）：
このステップはＴＨＦ等の溶媒中で特に室温で行うことができる。
【０１４２】
ステップ（ｄ２）：
このステップはＤＩＰＥＡ等の塩基の存在下、特にアルコール等の溶媒中、例えばメタール中で、特に室温にて行うことができる。
【０１４３】
ステップ（ｅ２）：
このステップ中、カルボン酸官能基が、特に酸塩化物（−ＣＯＣｌ）の形態またはカテコールボラン等のボランとの反応によりボラン誘導体の形態で活性化され得る。
【０１４４】
次いで、活性化されたカルボン酸官能基を、トリス（トリメチルシリル）ホスファイトと反応させ、その後、メタノール等の脂肪族アルコールと反応させて、ヒドロキシ−ビスホスホン酸官能基を得る。
【０１４５】
ステップ（ｆ２）：
保護された形態の官能基（アルデヒドまたはアミン）を、当業者に周知の技術、特に酸または塩基処理により脱保護する。特に、酸媒体中、特にＨＣｌの存在下で、アセタール誘導体を脱保護してアルデヒド官能基を放出させることができる。
【０１４６】
ステップ（ｇ２）：上記ステップ（ｃ１）参照。
【０１４７】
本発明は更に、以下の式（ＩＩ）の化合物またはその薬学的に許容される塩に関する：
【０１４８】
【化４６】
0006026499.tif 000047
式中、
・Ｘ１は、−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−Ａ２−（ＣＨ２）ｍ−鎖を表し、
・Ｘ１１は、−ＣＨＯまたは−ＮＨ２基、特に−ＣＨＯを表し、
・Ｘ４は、単結合または任意により置換されたアリールもしくはヘテロアリール基を表し、
・Ａ１は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ２７、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ２８）Ｃ（Ｏ）−、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２９）−を表し、
・Ａ２は、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３０、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３１）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３２）−、−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｋ−、または−Ａ９−（ＣＨ２）ａ−Ａ１０−ＣＨ２）ｂ−Ａ１１−基を表し、
・Ａ９およびＡ１１は、それぞれ、互いに独立して、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ３８を表し、
・Ａ１０は、アリール、ヘテロアリール、または複素環基を表し、
・ｎは、０〜５、特に１〜５の整数、特に３を表し、
・ｍは、０〜５、特に１〜５の整数、特に２を表し、
・ｋは、１〜１０、特に１〜５の整数を表し、
・ａおよびｂは、互いに独立して、０〜５の整数を表し、
・Ｒ２７〜Ｒ２９は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
・Ｒ３０〜Ｒ３２およびＲ３８は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール、もしくはアシル基、好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルもしくはアリール基、更により好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、例えばメチルを表す。
【０１４９】
特に、式（ＩＩ）の化合物またはその薬学的に許容される塩は以下の特徴を有し得る：
・Ｘ１が、−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−Ａ２−（ＣＨ２）ｍ鎖を表し、
・Ｘ１１が、−ＣＨＯまたは−ＮＨ２基、特に−ＣＨＯを表し、
・Ｘ４が、任意により置換されたアリールまたはヘテロアリール基を表し、
・Ａ１が、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ２７、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ２８）Ｃ（Ｏ）−、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２９）−を表し、
・Ａ２が、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３０、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３１）Ｃ（Ｏ）−、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３２）−を表し、
・ｎが、１〜５の整数、特に３を表し、
・ｍが、０〜５、特に１〜５の整数、特に２を表し、
・Ｒ２７〜Ｒ２９が、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表し、
・Ｒ３０〜Ｒ３２が、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリールもしくはアシル基、好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルもしくはアリール基、更により好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、例えばメチルを表す。
【０１５０】
有利には、Ｘ１は単結合を表さない。
【０１５１】
Ｘ４は、有利には、所望により置換されたアリールまたはヘテロアリール基、特に所望により置換されたアリール基、例えばフェニルを表す。
【０１５２】
Ｘ４は、より具体的には、所望により置換されたフェニル、ナフチル、またはインドリル基（インドリル基は好ましくはその窒素原子でＡ１に結合している）、好ましくは所望により置換されたフェニル基を表す。
【０１５３】
アリールおよびヘテロアリール基、例えばフェニル、ナフチル、およびインドリルであるＸ４は、前述のように、特にハロゲン原子、ＮＯ２、および（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシからなる群から選択される１または複数の基、特にＯ２で所望により置換されていてよい。
【０１５４】
Ａ１は、有利には、単結合、Ｏ、Ｓ、ＮＲ２７、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ２８）Ｃ（Ｏ）−、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２９）−を表す。
【０１５５】
Ａ１は、より具体的には、単結合、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ２７、特に単結合またはＯ、好ましくはＯを表す。
【０１５６】
特に、Ｘ４が、窒素原子を含んでなり且つこの窒素原子でＡ１に結合しているヘテロアリール基（例えばインドリル基）を表す場合、Ａ１は単結合を表す。Ａ１は、好ましくは単結合ではなく、特に、Ｘ４が炭素原子によりＡ１に結合したヘテロアリールまたはフェニルもしくはナフチル等のアリールを表す場合、酸素原子を表す。
【０１５７】
Ａ２は、有利には、Ｏ、Ｓ、ＮＲ３０、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｎ（Ｒ３１）Ｃ（Ｏ）−、または−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ３２）−を表す。
【０１５８】
Ａ２は、より具体的には、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ３０、好ましくはＮＲ３０（式中、Ｒ３０は、上記で定義した通りであり、特に水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルもしくはアリール基、好ましくは水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、例えばメチルを表す）を表す。
【０１５９】
Ａ２は特にＮＲ３０基（式中、Ｒ３０は、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、好ましくは（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、例えばメチルを表す）を表す。
【０１６０】
本発明の特定の実施形態では、Ｘ１は式−Ｘ４−Ａ１−（ＣＨ２）ｎ−Ａ２−（ＣＨ２）ｍの鎖を表し、
式中、
・Ｘ４は、前述のように所望により置換された、特にＮＯ２で置換されていてよいフェニル基を表し、
・Ａ１は、酸素原子を表し、
・Ａ２は、ＮＲ３０基（式中、Ｒ３０は（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、例えばメチルを表す）を表し、
・ｎは３を表し、
・ｍは２を表す。
【０１６１】
式（ＩＩ）の化合物は特に以下の式（ＩＩａ）で表され得る：
【０１６２】
【化４７】
0006026499.tif 000048
式中、Ｒ３０、Ｘ１１、Ｒｘ、ｎ、およびｍは上記で定義した通りである。
【０１６３】
この化合物は特に、以下の化合物２０または３５であり得る。
【０１６４】
【化４８】
0006026499.tif 000049
【０１６５】
式（ＩＩ）の化合物は当業者に公知の技術により製造することができる。
【０１６６】
Ａ２＝ＮＲ３０の時、式（ＩＩ）の化合物は、前述の方法と、製造された化合物を反応媒体から分離する最終ステップの前または後に必要に応じて行う塩化ステップにより製造することができる。
【０１６７】
本発明は更に、特に骨組織の標的化を意図した、治療的または診断的関心のあるベクター化された分子を製造するための、前述したような式（ＩＩ）の化合物の使用に関する。
【０１６８】
官能基Ｘ１２＝ＣＨＯまたはＮＨ２を有するように官能化されている可能性のある治療的または診断的関心のある分子を、その後、そのＸ１２官能基と式（ＩＩ）の化合物のＸ１１官能基とのカップリングにより（ＣＨＯとＮＨ２の間のカップリング）式（ＩＩ）の化合物に結合させる。
【０１６９】
治療的または診断的関心のある分子は、溶骨性または骨硬化性の骨再形成疾患、例えば原発性骨腫瘍（例えば、骨肉腫、軟骨肉腫、巨細胞腫、またはユーイング肉腫）、骨転移、多発性骨髄腫、リン酸−カルシウム代謝調節異常、例えば高カルシウム血症、骨粗しょう症、および炎症性疾患、例えば関節リウマチまたはプロテーゼ弛緩の処置または診断に有用な分子であり得る。
【０１７０】
診断的関心のある分子は、より具体的には、特に骨組織の医療用イメージングに有用な分子、例えば、蛍光分子、例えば（５−ジメチルアミノ）ナフタレン−１−スルホニル残基（ダンシル基）、７−ニトロ−１，２，３−ベンゾオキサジアゾール（ＮＢＤ基）、１−ピレンカルボキサルデヒド、フルオレセインおよびその誘導体、例えばフルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）およびローダミン、例えばローダミンＢ、およびシアニン誘導体、例えばフルオレシアニンおよびガロシアニン；または発光分子、例えばジオキセタンの誘導体およびアルカリまたはアルカリ土類硫化物であり得る。
【０１７１】
治療的関心のある分子は、より具体的には、骨中で形成促進（pro-formation）活性または吸収抑制活性を有する抗癌剤、抗炎症薬、抗生物質、麻酔薬、ステロイド、およびペプチドから選択される活性成分であり得る。
【０１７２】
治療的関心のある分子は特に、抗癌剤、例えばアルキル化分子様、例えばマスタードガス（特に窒素を含む）類似物質、イホスファミドおよびその誘導体、または抗新生物性分子、例えばドキソルビシン、シスプラチン、アドリアマイシン、アクチノマイシン、フルオロウラシル、メトトレキサート、エトポシド、ビンクリスチン、ポドフィロトキシン、ブスルファン、ドセタキセル、５−フルオロウラシルおよびその誘導体；抗炎症薬、例えばコルチコステロイド、例えばデキサメタゾンおよびその誘導体、または非ステロイド系抗炎症薬、例えばイブプロフェン、インドメタシン、ベンダザック、エトドラク、ジクロフェナク、ロナゾラク、およびその誘導体；抗生物質、例えばスピラマイシン；麻酔薬、例えばベンゾカイン；並びにステロイド、例えばエストラジオールおよびエストロンの誘導体から選択され得る。
【０１７３】
治療的関心のある分子は特に、ポドフィロトキシンまたはまたはマスタードガスの窒素含有類似物質であり得る。
【０１７４】
診断的関心のある分子はダンシルまたはピレン誘導体であり得る。
【０１７５】
診断的または治療的関心のあるベクター化分子は、より具体的には、前述したような式（Ｉ）の分子であり得る。
【０１７６】
使用される略語：
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＣＤＩ：カルボニルジイミダゾール
ＤＢＵ：ジアザ（１，３）ビシクロ［５．４．０］ウンデカン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ：ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＥＤＣＩ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ｅｑ．：当量（Ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ）
ＥＳ：エレクトロスプレー
ＨＭＤＳ：ヘキサメチルジシラザン
ＨＭＰＴ：ヘキサ−メチルホスホルアミド
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＰＴＳＡ：パラ−トルエンスルホン酸
Ｐｙ：ピリジン
ＮＭＲ：核磁気共鳴
ＲＴ：室温
ＴＥＡ：トリエチルアミン
Ｔｆ：トリフラート
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
【実施例】
【０１７７】
１．本発明に係る化合物の合成
１．１．式（ＩＩ）の分子の合成
以下の反応図に従って化合物２０を製造した。
【０１７８】
【化４９】
0006026499.tif 000050
【０１７９】
【化５０】
0006026499.tif 000051
エチレングリコール（１００ｍｌ）中、１３（５ｇ、４１ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）と、ピリジン（１７６ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ、０．０５ｅｑ．）と、ＰＴＳＡ・Ｈ２Ｏ（４２９ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ、０．０５ｅｑ．）との溶液を８０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣで反応をモニタリングした。１４を含む反応混合物を何も処理せずに以下のステップで用いた。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０１８０】
【化５１】
0006026499.tif 000052
Ｋ２ＣＯ３（６．５ｇ、４７ｍｍｏｌ、１．１５ｅｑ．）、次いで１，３−ジブロモプロパン（１６．６ｍｌ、１．６４ｍｍｏｌ、４ｅｑ．）を、８０℃のままの前のステップの反応媒体に加えた。同じ温度で２時間撹拌した後、反応媒体を冷却した。１００ｍｌの水を加えた。得られた溶液をエーテルで抽出し、有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。減圧下（２５ｍｂａｒ、９０℃）で濃縮した後、粗化合物１５（１２ｇ）を橙色油状物の形態で得、これ以上精製せずに以下のステップで用いた。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０１８１】
【化５２】
0006026499.tif 000053
ＭｅＮＨ２（２Ｍ／ＴＨＦ）中、前のステップの粗１５（約４１ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）の溶液を室温で１６時間静置した。反応媒体を減圧下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーにかけた（ＤＣＭ〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５：１の勾配）。こうして、１３から３ステップで、６．９ｇの１６を収率７１％で得た。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルで特徴解析した。
【０１８２】
【化５３】
0006026499.tif 000054
ＭｅＯＨ（１２０ｍｌ）と、ＤＩＰＥＡ（２３．９ｍｌ、１４５ｍｍｏｌ、５ｅｑ．）と、アクリル酸（７．７ｍｌ、１１６ｍｍｏｌ、４ｅｑ．）との混合物中、１６（６．９ｇ、２９ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）の溶液を室温で３日間静置した。減圧下４０℃で反応媒体を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーにかけた（ＤＣＭ〜ＭｅＯＨの勾配）。こうして、４．４ｇの１７を収率４９％で得た。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルで特徴解析した。
【０１８３】
【化５４】
0006026499.tif 000055
カテコールボラン（５ｍｌ、１Ｍ／ＴＨＦ、５ｍｍｏｌ、２．１ｅｑ．）を、ＴＨＦ（５．５ｍｌ）中の１７（７３０ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）溶液に、アルゴン下、室温で撹拌しながら添加した（水素放出）。３分後、トリス（トリメチルシリル）ホスファイト（２．５ｍｌ、８．２６ｍｍｏｌ、３．５ｅｑ．）を全部一度に加え、室温で撹拌を１６時間続けた。ＭｅＯＨ（３ｍｌ）を加え、白色沈殿を含む混合物を３０分間撹拌した。その後、過剰のエーテルを加え、撹拌後、白色沈殿を分離し、エーテルで洗浄し、減圧下で乾燥し、ＨＣｌ（２Ｍ、４ｍｌ）水溶液に室温で溶解した。１０分後、濃ＮａＯＨで溶液をｐＨ＝８〜９に塩基性化し、得られた溶液をクロマトグラフィーにかけた（Ｃ１８、３％ ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ〜５０％ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの勾配）。こうして、４３５ｍｇの２０を収率４０％で得た。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルおよび質量スペクトル（ＥＳ）で特徴解析した。
【０１８４】
分子１７の一連の類似物質を同様に合成した。この系列には、種々の異なるアリール／ヘテロアリール環、代替的な保護基、およびフリーのアルデヒドが含まれる：
【０１８５】
上記化合物は、化合物１７と同様な合成プロトコールで製造した。化合物９ｅ３および９ｅ４では、アルデヒド官能基を以下のプロトコールに従って保護した。
【０１８６】
【化５５】
0006026499.tif 000056
化合物９ｅ３：２，４−ジニトロフェニルヒドラジン（４４７ｍｇ、１．３５６ｍｍｏｌ、２ｅｑ．）を、ＭｅＯＨ（５ｍｌ）中の９ｅ１（２００ｍｇ、０．６７８ｍｇ、１ｅｑ．）溶液に加え、得られた懸濁液を室温で３時間撹拌した。赤色沈殿を濾過し、ＤＭＳＯ溶液中でシリカゲルカラムに導入した。溶出後（ＭｅＯＨから水の勾配）、１４０ｍｇ（４３％）の最終生成物９ｅ３が暗赤色粉末の形態で得られた。
【０１８７】
【化５６】
0006026499.tif 000057
化合物９ｅ４：ＭｅＯＨ（１ｍｌ）中の９ｅ１（１００ｍｇ、０．３３９ｍｇ、１ｅｑ．）とＮ，Ｎ’−ジメチル−（１，３−ジアミノプロパン）（３５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）の溶液を５０℃で１５分間蒸発乾固して、純粋な最終生成物９ｅ４（１２６ｍｇ、９８％）を得た。
【０１８８】
これらの全生成物を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０１８９】
１．２．式（Ｉ）の分子の合成
以下の全体図に従って上記化合物２０から化合物３および４（ポドフィロトキシン誘導体）を製造した。
【０１９０】
【化５７】
0006026499.tif 000058
【０１９１】
【化５８】
0006026499.tif 000059
ＤＣＭ（６ｍｌ）を、ポドフィロトキシン２１（９０ｍｇ、０．２１７ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）とＣＤＩ（１７６ｍｇ、１．０８５ｍｍｏｌ、５ｅｑ．）との乾燥混合物にアルゴン下、室温で加えた。１時間後、得られた透明溶液にＮＨ２ＮＨ２・Ｈ２Ｏ（１Ｍ／ＭｅＣＮ、２．１７ｍｌ、２．１７ｍｍｏｌ、１０ｅｑ．）を加えた。１０分後、反応混合物をシリカゲルカラムに添加し（６０ｃｍ３）、クロマトグラフィー（ＤＣＭ〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１の勾配）にかけて、化合物２２を白色粉末の形態で得た（９９ｍｇ、収率＝９７％）。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルで特徴解析した。
【０１９２】
【化５９】
0006026499.tif 000060
ＮＨ２ＮＨ２・Ｈ２Ｏ（２ｍｌ）をＭｅＯＨ（８ｍｌ）中のポドフィロトキシン（４００ｍｇ、０．９６６ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この溶液を５０℃で減圧下にて濃縮し、得られた残渣をシリカゲル上にてクロマトグラフィーにかけた（ＤＣＭ〜ＭｅＯＨの勾配）。こうして、化合物２３を白色固体泡状物の形態で得た（４１０ｍｇ、収率＝８９％）。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０１９３】
【化６０】
0006026499.tif 000061
２０（９６ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）の水（１．５ｍｌ）溶液を、ＭｅＯＨ（１．５ｍｌ）中の２２（１１９ｍｇ、０．２５２ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ．）の溶液に加えた。得られた混合物を室温に１６時間静置した。ｉＰｒＯＨで希釈した後、形成した沈殿を濾過し、ｉＰｒＯＨで洗浄し、乾燥した。１５０ｍｇの粗化合物３を収率８０％で得た。クロマトグラフィー精製（Ｃ１８、３％ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ〜ＭｅＯＨの勾配）、蒸発、および結晶化（Ｈ２Ｏ−ｉＰｒＯＨ−Ｅｔ２Ｏ）後、７５ｍｇの化合物３を白色粉末の形態で得た（収率＝４０％）。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルおよび質量スペクトル（ＥＳ）で特徴解析した。
【０１９４】
【化６１】
0006026499.tif 000062
水（１ｍｌ）中、２３（９４ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）の懸濁液にＮａＯＨ（２Ｍ、５滴）を加えた。水（１ｍｌ）中の２０（１３６ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ、１．４ｅｑ．）の溶液を、得られたわずかに濁った溶液に加え、得られた混合物を十分に撹拌した。１時間後、得られたわずかに濁った溶液を数滴の濃リン酸バッファーでｐＨ７に調整した。室温１６時間後、ほぼ透明な溶液をＣ１８カラムに導入した。溶出（３％ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ〜５０％ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの勾配）後、化合物４を得た（１５０ｍｇ、収率＝８１％）。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルおよび質量スペクトル（ＥＳ）で特徴解析した。
【０１９５】
・窒素含有マスタードガス類似物質（抗腫瘍アルキル化剤）である化合物３２を以下の反応図に従って製造した。
【０１９６】
【化６２】
0006026499.tif 000063
【０１９７】
【化６３】
0006026499.tif 000064
アルゴン下で、ＮａＨＣＯ３（３ｇ）に、ＴＨＦ（２０ｍｌ）およびＤＣＭ（１０ｍｌ）、次いでエチレングリコール（８ｍｌ、１４４ｍｍｏｌ、５．８ｅｑ．）、次いでクロロぎ酸フェニル（３．２ｍｌ、２５ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）を室温で加えた。反応混合物を室温で５時間よく撹拌した（ＣＯ２放出が観察された）。次いで、ＤＣＭを加え（１５０ｍｌ）、得られた混合物をよく撹拌した。溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で濾過し、得られた残渣を、無水Ｎａ２ＳＯ４で濾過したＤＣＭで複数回洗浄した。得られた溶液を減圧下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ〜Ｅｔ２Ｏの勾配）にかけ、化合物２７無色油状物の形態で得た（２．５ｇ、収率＝５６％）。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０１９８】
【化６４】
0006026499.tif 000065
アルゴン下、室温でＴＨＦ（４ｍｌ）中の２７（５２０ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）の溶液にＣＤＩ（１．３９ｇ、８．５８ｍｍｏｌ、３ｅｑ．）を加えた。１０分後、形成した沈殿を分離し、残りの溶液をシリカゲルカラムに導入し、クロマトグラフィー（Ｅｔ２Ｏ）にかけて、化合物２８を得た（２７０ｍｇ、収率＝３４％）。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０１９９】
【化６５】
0006026499.tif 000066
アルゴン下、０℃でＤＣＭ（３ｍｌ）中の２８（１３５ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）の溶液にＭｅＯＴｆ（９７ｍｇ、６７μｌ、０．５９ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ．）を加えた。ジ（２−クロロエチル）アミン（１３９ｍｇ、１２４μｌ、０．９８ｍｍｏｌ、２ｅｑ．）（その塩酸塩から調製（ＤＣＭ／２Ｍ  ＮａＨＣＯ３抽出）したばかりの）を１時間攪拌した後、有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下、室温で濃縮し、加え、反応混合物を３時間置いて室温で連続的に昇温させた。次いで、得られた反応混合物をシリカゲルカラムに添加し、クロマトグラフィー（シクロヘキサン〜Ｅｔ２Ｏの勾配）にかけて、化合物３０を得た（１３０ｍｇ、収率＝７６％）。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２００】
【化６６】
0006026499.tif 000067
ＤＣＭ（１ｍｌ）中、３０（６０ｍｇ、０．１７１ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）の溶液にＮＨ２ＮＨ２・Ｈ２Ｏ（１Ｍ／ＭｅＣＮ、３４２μｌ、３４２ｍｍｏｌ、２ｅｑ．）を加えた。４０分後、反応混合物をシリカゲルカラム（２０ｃｍ３）に導入し、クロマトグラフィー（ＤＣＭ〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１の勾配）にかけて、化合物３１を透明な黄色油状物の形態で得た（３２ｍｇ、６５％）。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２０１】
【化６７】
0006026499.tif 000068
水（３００μｌ）中、２０（４６ｍｇ、０．１０１ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）の溶液を、ＭｅＯＨ（３００μｌ）中の３１（２９ｍｇ、０．１０１ｍｍｏｌ、１ｅｑ．）の溶液に室温で加えた。その後、得られた濁った混合物から油状物が分離した。撹拌後、油状物は徐々に結晶に変換した。混合物を室温で１６時間置いた後、結晶を濾過し、洗浄（５０％ＭｅＯＨを含む水、次いでＭｅＯＨ）し、減圧下で乾燥した。こうして、化合物３２を得た（３０ｍｇ、収率＝４１％）。分子を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルおよび質量スペクトル（ＥＳ）で特徴解析した。
【０２０２】
・化合物３の類似物質である化合物３６を以下の反応図に従っておよび前述のプロトコールに従って製造した。
【０２０３】
【化６８】
0006026499.tif 000069
【０２０４】
分子３６を１Ｈおよび３１ＰＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２０５】
・マスタードガス残基を有する分子４１および４２を以下の反応図に従っておよび前述のプロトコールに従って合成した。
【０２０６】
【化６９】
0006026499.tif 000070
【０２０７】
分子４１および４２を１Ｈおよび３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２０８】
・マスタードガス残基を有する化合物４６を以下の反応図に従っておよび前述のプロトコールに従って合成した。
【０２０９】
【化７０】
0006026499.tif 000071
【０２１０】
分子４６を１Ｈおよび３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２１１】
・蛍光による医療用イメージングに有用なダンシル残基を有する分子４８を市販の化合物４７から以下の反応図に従っておよび前述のプロトコールに従って合成した。
【０２１２】
【化７１】
0006026499.tif 000072
【０２１３】
分子４８を１Ｈおよび３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２１４】
・蛍光による医療用イメージングに有用な改変フルオレセイン残基を有する分子５０を市販の化合物４９から以下の反応図に従っておよび前述のプロトコールに従って合成した。
【０２１５】
【化７２】
0006026499.tif 000073
【０２１６】
分子５０を１Ｈおよび３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２１７】
・蛍光による医療用イメージングに有用なピレン残基を有する分子５５および５６を以下の反応図に従って合成した。
【０２１８】
【化７３】
0006026499.tif 000074
【０２１９】
化合物５２：
ＮａＢＨ４（１２４ｍｇ、３．２７ｍｍｏｌ）を市販の化合物５１（２５０ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２ｍｌ）溶液に加えた。５分後、１Ｍ  ＨＣｌ溶液でｐＨを１に調整し、得られた混合物を水で希釈した。沈殿を濾過し、水洗し、乾燥した。２５０ｍｇの化合物５２を収率９９％で得た。
【０２２０】
化合物５４：
ジメチルホルムアミド（３ｍｌ）中の化合物５２（２００ｍｇ、０．８６２ｍｍｏｌ）の溶液にＮａＨ（４１ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２分間撹拌した。ブロモ酢酸エチル（１４４μｌ、１．０３ｍｍｏｌ）を同じ温度で加えて、１時間撹拌を続けた。ＮＨ２ＮＨ２・Ｈ２Ｏ（１ｍｌ）を加え、撹拌を室温で２時間続けた。水（４０ｍｌ）、次いでシクロヘキサン（４０ｍｌ）を加えた。得られた沈殿を濾過し、ＭｅＯＨで洗浄し、乾燥した。１０２ｍｇの化合物５４を収率３９％で得た（２ステップで）。
【０２２１】
化合物５５および５６：
これらの化合物は化合物５４から前述のプロトコールにより得られた。
分子５５および５６を１Ｈおよび３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２２２】
・蛍光による医療用イメージングに有用な改変フルオレセイン残基を有する分子５７を前述のプロトコールに従い市販の化合物４９から以下の反応図に従って合成した。
【０２２３】
【化７４】
0006026499.tif 000075
【０２２４】
分子５７を１Ｈおよび３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２２５】
・蛍光による医療用イメージングに有用な改変ダンシル残基を有する分子５８を前述のプロトコールに従い市販の化合物４７から以下の反応図に従って合成した。
【０２２６】
【化７５】
0006026499.tif 000076
【０２２７】
分子５８を１Ｈおよび３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２２８】
・蛍光による医療用イメージングに有用なローダミンＢ残基を有する分子５９を以下の反応図に従って合成した。
【０２２９】
【化７６】
0006026499.tif 000077
【０２３０】
化合物６０：
フェノール（１０ｇ、１０６ｍｍｏｌ）とブロモ酢酸ブロモ無水物（９．１６ｍｌ、１０６ｍｍｏｌ）との混合物を９０℃で１０分間加熱した後、全揮発性成分を減圧下９０℃で蒸発させて乾燥した。２３ｇの化合物６０をほぼ定量的な収率で得た。
【０２３１】
化合物６１：
ＭｅＮＯ２（５ｍｌ）中の６０（０．２４３ｍｌ、２．２ｍｍｏｌ）と市販のローダミンＢ（８８４ｍｇ、２ｍｍｏｌ）との溶液を８０℃で５分間撹拌した後、同じ温度で減圧下にて蒸発乾固した。こうして化合物６１をアモルファス状黒色固体の形態で得た（１．２２ｇ、収率＝約１００％）．
【０２３２】
化合物６２：
ＮａＯＨ（２Ｍ、２ｍｌ）中のチオカルボヒドラジド（２３３ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）の溶液を水（２ｍｌ）中の２０（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この透明溶液を６０℃で蒸発させて乾燥した。水（２ｍｌ）を加え、溶液を再度６０℃で蒸発させて乾燥した。Ｃ１８カラム上にて、残渣をクロマトグラフィーにかけて化合物６２を得た（７１ｍｇ、アモルファス状固体、収率＝６０％）。
【０２３３】
化合物５９：
水（１ｍｌ）とＴＨＦ（１ｍｌ）との混合物中、６２（１０ｍｇ、０．０１８４ｍｍｏｌ）と６１（４８ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）の溶液を４０℃で２時間撹拌した。その後、ＭｅＯＨ、次いでＥｔ２Ｏを加えた。形成した沈殿を濾過し（１４ｍｇ）、Ｃ１８カラム上においてクロマトグラフィーにかけた。こうして２ｍｇの化合物５９を得た（収率＝１０％）。
分子５９を１Ｈおよび３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２３４】
・マスタードガス残基を有する分子６３を以下の反応図に従って合成した。
【０２３５】
【化７７】
0006026499.tif 000078
【０２３６】
化合物６５：
ベンゼン中の６４（１０ｇ、７４．６ｍｍｏｌ）と、グリセロール（４．６ｇ、７４．６ｍｍｏｌ）と、パラ−トルエンスルホン酸（７１０ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）との混合物を５時間還流加熱（ディーン・スターク）した後、室温で冷却した。過剰の無水Ｋ２ＣＯ３を加え、混合物をよく撹拌した後、無水Ｋ２ＣＯ３で濾過し、減圧下で蒸発させ、シリカゲルを用いたクロマトグラフィーにかけた。こうして化合物６５（６．３ｇ、収率＝４７％）を薄黄色油状物の形態で得た。
【０２３７】
化合物６６：
冷水で冷却したＭｅＯＨ（５ｍｌ）中の６５（１ｇ、５．６ｍｍｏｌ）の溶液にＮａＢＨ４（４２７ｍｇ、１１．２ｍｍｏｌ）を徐々に加え、得られた混合物を室温で５分間撹拌した。混合物をリン酸バッファーでｐＨ７に調整した。ＭｅＯＨ：ＤＣＭ＝１：１混合物、次いで無水Ｎａ２ＳＯ４を加え、最終混合物をよく撹拌した後、無水Ｎａ２ＳＯ４無水物で濾過し、減圧下で濃縮した。化合物６６を得た（９８０ｍｇ、収率＝９６％）。
【０２３８】
化合物６７：
アルゴン下、−１２０℃で、ＨＭＤＳ−Ｎａ（ＴＨＦ中２Ｍ、１．６７ｍｌ、３．３４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２３ｍｌ）中の６６（５００ｍｇ、２．７８ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。−１２０℃で１０分後、ＴＨＦ（４ｍｌ）中のビス（２−クロロエチル）ホスホルアミド酸ジクロリド（７２０ｍｇ、２．７８ｍｍｏｌ）を全部一度に加えた。反応混合物を１．５時間かけて徐々に室温に加熱し、次いで−９０℃で冷却した。アンモニアのＤＣＭ（１．５Ｍ、５．７ｍｌ、８．６２ｍｍｏｌ）溶液をこの温度で加えた。冷浴を除去し、反応媒体を室温で１時間撹拌し、シリカとＭｅＯＨを加え、溶媒を減圧下４０℃で蒸発させた。シリカ上におけるクロマトグラフィー（ＤＣＭ〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５：１の勾配）および溶媒の蒸発後、化合物６７を得た（１．０３ｍｇ、９６％）。
【０２３９】
化合物６８：
化合物６７（１ｇ、２．６ｍｍｏｌ）を１５ｍｌのＤＣＭに溶解し、５０ｍｌのＥｔ２Ｏを加えた。得られた溶液を２Ｍ  ＨＣｌとよく撹拌し、水、次いでＮａＨＣＯ３飽和溶液で洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下４０℃で濃縮した。化合物６８を得た（６１０ｍｇ、６９％）。
【０２４０】
化合物６９：
１Ｍ  ＮａＯＨ（６ｍｌ）中のチオカルボヒドラジド（４００ｍｇ、３．７８ｍｍｏｌ）の溶液を、ＭｅＯＨ（１１ｍｌ）中の６８（１２８ｍｇ、０．３７８ｍｍｏｌ）の溶液に室温で加えた。４０分後、混合物をＮａＣｌの飽和溶液で希釈し、ＤＣＭで抽出した（５回）。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下４０℃で濃縮した。化合物６９を得た（５０ｍｇ、３１％）。
【０２４１】
化合物６３：
水（１ｍｌ）中の２０（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液をＴＨＦ（３ｍｌ）中の６９（５０ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）の溶液に室温で加えた。得られた溶液を減圧下６０℃で蒸発させた。得られた残渣にＴＨＦ（３ｍｌ）、次いで水（０．５ｍｌ）を加え、混合物を６０℃で５分間加熱した。得られた溶液に３滴の２Ｍ  ＮａＯＨを加え、反応混合物（ｐＨ＝９〜１０）を室温で１６時間静置した。Ｃ１８カラム上においてクロマトグラフィーによる精製後、化合物６３（２０ｍｇ、収率＝２１％）を得た。
分子６３を１Ｈおよび３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２４２】
・イブプロフェン残基を有する分子７０を以下の反応図に従って合成した。
【０２４３】
【化７８】
0006026499.tif 000079
【０２４４】
化合物７２：
室温で、化合物６０（３１２ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）をイブプロフェン（２５０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）とＮａ２ＣＯ３（１２８ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）とを含むＤＭＦ（３ｍｌ）混合物に加え、得られた混合物を室温で３０分間撹拌した。粗化合物７１を含むこの混合物に室温でＤＣＭ（２０ｍｌ）を加え、次いでヒドラジン水和物（ＭｅＣＮ中１Ｍ、３．７ｍｌ、３．７ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を３０分間撹拌した後、エーテル（６０ｍｌ）で希釈し、０．１Ｍ  ＮａＯＨで５回抽出し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下４０℃で濃縮した。化合物７２（１７０ｍｇ、収率＝５１％、２ステップ）を得た。
【０２４５】
化合物７０：
２０（２５ｍｇ、０．０５６８ｍｍｏｌ）と７２（１９ｍｇ、０．０６８１ｍｍｏｌ）とを含むＨ２Ｏ：ＴＨＦ＝１：１（３ｍｌ）混合物の溶液を減圧下６０℃で蒸発させた。同じ溶解／蒸発サイクル２回繰り返した。Ｃ１８カラムを用いたクロマトグラフィー精製後、化合物７０（２４ｍｇ、収率＝４９％）を得た。
分子７０を１Ｈおよび３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２４６】
・抗癌剤メトトレキサートの残基を有する分子７３を以下の反応図に従って合成した。
【０２４７】
【化７９】
0006026499.tif 000080
【０２４８】
化合物７４：
室温で、化合物６０（５７ｍｇ、２６４ｍｍｏｌ）をメトトレキサート（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）とＮａ２ＣＯ３（２３ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）とを含むＤＭＦ（１ｍｌ）混合物に加え、得られた混合物を室温で２４時間撹拌した。この混合物をシリカ上においてクロマトグラフィーにかけた（ＤＣＭ→ＭｅＯＨ）。化合物７４（４５ｍｇ、収率＝３５％）を得た。
【０２４９】
化合物７５：
７４（４０ｍｇ、０．０６７９ｍｍｏｌ）と、ＭｅＯＨ（１６ｍｌ）と、ＤＣＭ（１０ｍｌ）と、ＴＨＦ（２ｍｌ）と、ヒドラジン水和物（ＭｅＣＮ中１Ｍ、０．１ｍｌ、０．１ｍｍｏｌ）との混合物を減圧下４０℃で蒸発させた。残渣を１ｍｌの水およびＭｅＯＨに、次いで過剰のＥｔ２Ｏに溶解した。得られた沈殿を濾過し、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、乾燥した。化合物７５（３０ｍｇ、収率＝８４％）を得た。
【０２５０】
化合物７３：
２０（３２ｍｇ、０．０７１２ｍｍｏｌ）と７５（２５ｍｇ、０．０４７４ｍｍｏｌ）とを含むＨ２Ｏ：ＴＨＦ＝１：１（３ｍｌ）混合物の溶液を減圧下６０℃で蒸発させた。同じ溶解／蒸発サイクルを２回繰り返した。Ｃ１８カラム上におけるクロマトグラフィー精製後、化合物７３（２３ｍｇ、収率＝５０％）を得た。
分子７３を１Ｈおよび３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２５１】
・抗癌剤メトトレキサート残基を有する分子８０を以下の反応図に従って合成した。
【０２５２】
【化８０】
0006026499.tif 000081
【０２５３】
化合物７６：
化合物６０と同じ方法で製造した。最終結晶生成物はほぼ定量的な収率で得られた。
【０２５４】
化合物７８：
化合物７６および７７から出発して化合物７４と同じ方法で製造し、収率は３８％であった。分子７８を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２５５】
化合物７９：
化合物７８から出発して化合物７５と同じ方法で製造し、収率は７７％であった。分子 ７９を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２５６】
化合物８０：
化合物７９および２０から出発して化合物７３と同じ方法で製造し、収率は６５％であった。分子８０を質量、１Ｈ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０２５７】
・抗癌剤メトトレキサート残基を有する分子９０を以下の反応図に従って合成した。
【０２５８】
【化８１】
0006026499.tif 000082
【０２５９】
化合物８３：
トシルクロリドＴｓＣｌ（１．０１ｇ、５．３ｍｍｏｌ）を、８０℃で３分間撹拌した化合物８１（４．７ｍｌ、６ｅｑ．）とＫ２ＣＯ３（８１４ｍｇ、５．９ｍｍｏｌ）との混合物に加え、得られた混合物を更に５分間撹拌した。次いで、Ｋ２ＣＯ３（８１４ｍｇ、５．９ｍｍｏｌ）と、３−ヒドロキシベンズアルデヒド（５００ｍｇ、４．１ｍｍｏｌ）と、ＮａＩ（７３ｍｇ）との乾燥混合物を加え、得られた混合物を８０℃で１６時間撹拌した。ＮａＯＨ（１ｍｌ）の２Ｍ溶液を加え、混合物を室温で１０分間撹拌した。ＤＣＭ−Ｈ２Ｏ−ＮａＣｌ−ＮａＯＨで抽出後、有機溶液をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で乾燥した。純粋な化合物８３（８００ｍｇ）を収率７７％で得た。分子８３を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２６０】
化合物８４：
ベンゼン（１０ｍｌ）中の化合物８３（８００ｍｇ、３．１５ｍｍｏｌ）の溶液に無水Ｎａ２ＳＯ４（２．５ｇ）を加えた。この溶液にピリジン（１２μｌ、０．１５８ｍｍｏｌ）、ＰＴＳＡ・Ｈ２Ｏ（３０ｍｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）、およびエチレングリコール（５７８μｌ、１０．４ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を７７℃で３時間撹拌した。Ｋ２ＣＯ３（１ｇ）を加え、１５分撹拌し、冷却した後、混合物を、Ｅｔ２Ｏで洗浄したＫ２ＣＯ３で濾過した。減圧下で濃縮した後、純粋な化合物８４（７５０ｍｇ）を収率８０％で得た。分子８４を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２６１】
化合物８５：
ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の化合物８４の溶液にＮａＨ（ミネラルオイル中６０％、４０３ｍｇ、１０．０８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で５分間撹拌した。ブロモ酢酸エチル（１．１２ｍｌ、１０．０８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で４時間撹拌した。メタノール（２ｍｌ）を加えた。得られた溶液をシリカゲルカラム（１６０ｇ）に導入し、シクロヘキサン−ＤＣＭグラジエントで溶出した。有機溶液を減圧下で乾燥した（８０℃、４０ｍｂａｒ、３０分）。化合物８５（１．１ｇ）を収率７１％で得た。分子８５を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２６２】
化合物８６：
ＭｅＯＨ（２ｍｌ）中の化合物８５（５４０ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）とＮａＯＨ（２Ｍ、０．６ｍｌ）との溶液を室温で４０分間撹拌した後、シリカゲル上においてクロマトグラフィーにかけた（４０ｇ、溶出液：ＤＣＭ〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＴＥＡ＝２：１：０．２の勾配）。有機溶液を減圧下４０℃で濃縮した後、同じ温度でＴＨＦを用いて３回共蒸発させ、化合物８６を（３４８ｍｇ）収率６６％で得た。分子８６を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２６３】
化合物８９：
ＴＨＦ（３６０μｌ）中の化合物８６（６０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（５．８μｌ、０．０８６ｍｍｏｌ）との溶液に、アルゴン下、室温で、撹拌しながらカテコールボラン（０．３ｍｌ、１Ｍ／ＴＨＦ、０．３ｍｍｏｌ）を加えた（水素放出）。３分後、トリス（トリメチルシリル）ホスファイト（１５０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を一度に加え、撹拌を室温で３時間続けた。ＭｅＯＨ（０．４ｍｌ）を加え、混合物を１５分間撹拌した。次に、過剰のエーテルを加え、撹拌した後、無色油状物を分離し、エーテルで洗浄し、減圧下で乾燥し、１ｍｌの水およびＨＣｌｃｏｎｃ（０．２５ｍｌ）に室温で溶解した。３０分後、溶液を濃ＮａＯＨでｐＨ＝１４に塩基性化した後、リン酸バッファーでｐＨを７に調整し、得られた溶液をクロマトグラフィーにかけた（Ｃ１８、３％ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ）。１５ｍｇの純粋な化合物８６を収率２１％で得た。分子を質量、１Ｈ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０２６４】
化合物９０：
化合物７９および８９から出発して化合物７３と同じように製造し、特徴解析した。
【０２６５】
・抗癌剤ドキソルビシン残基を有する分子９４を以下の反応図に従って合成した。
【０２６６】
【化８２】
0006026499.tif 000083
【０２６７】
化合物９２：
無水コハク酸（８．６ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）を、ドキソルビシン（５０ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（０．１ｍｌ）とのＤＭＦ（２ｍｌ）混合物に加え、得られた混合物を室温で１０分間撹拌した後、シリカゲル上においてクロマトグラフィーにかけた（溶出液：ＤＣＭ〜ＭｅＯＨの勾配）。純粋な化合物９２（５３ｍｇ）を収率９６％で得た。分子９２を質量および１Ｈ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０２６８】
化合物９３：
化合物９２（５０ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）とチオカルボヒドラジド（５５ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）とを含むＭｅＯＨ：ＴＦＡ＝１０００：１混合物の溶液を室温で１６時間撹拌した後、シリカゲル上においてクロマトグラフィーにかけた（溶出液：ＤＣＭ〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１：１の勾配）。化合物９３（５３ｍｇ）を収率９５％で得た。
【０２６９】
化合物９４：
化合物９３（１０ｍｇ、０．０１３７ｍｍｏｌ）と、化合物２０（８ｍｇ、０．０１７６ｍｍｏｌ）と、４滴のＡｃＯＨとを含む水：ＴＨＦ＝１：１混合物（４ｍｌ）の溶液を室温で１６時間撹拌した後、ＴＨＦを減圧下室温で除去し、形成した沈殿を濾過し、水、ＭｅＯＨ、およびＥｔ２Ｏで洗浄し、乾燥した。化合物９４（８ｍｇ）を収率５２％で得た。分子９４を質量、１Ｈ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０２７０】
・抗癌剤ＳＮ３８の残基を有する分子９９を以下の反応図に従って合成した。
【０２７１】
【化８３】
0006026499.tif 000084
【０２７２】
化合物９５：
Bioconjugate Chem. 19, 4, 2008, 849-859に記載の作業手順に従って化合物９５を合成した。
【０２７３】
化合物９６：
ＤＣＭ（２０ｍｌ）中の化合物９５（４００ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）の溶液に４−ベンジルオキシ酪酸（４６０ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）と、ＤＭＡＰ（１００ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）と、ＥＤＣＩ（４６０ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）とを加えた。得られた混合物を室温で２時間撹拌した。水を加え、有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲル上においてクロマトグラフィーにかけた（溶出剤：ＤＣＭ→ＭｅＯＨ）。化合物９６（３７５ｍｇ、収率＝７０％）を得た。分子９６を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２７４】
化合物９７：
化合物９６（３７５ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）のジオキサン／ＥｔＯＨ（２０ｍｌ）混合物溶液にシクロヘキセン（４ｍｌ）および１０％パラジウム炭素（１００ｍｇ）を加えた。得られた混合物を８０℃で２４時間撹拌した後、セライトで濾過し、減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲル上においてクロマトグラフィーにかけた（溶出液：ＤＣＭ→ＭｅＯＨ）。化合物９７（１００ｍｇ、収率＝３０％）を得た。分子９７を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２７５】
化合物９８：
ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の化合物９７（１５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液にＣＤＩ（２１０ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で２０分間撹拌した後、ヒドラジン水和物（ＭｅＣＮ中１Ｍ、２．６ｍｌ、２．６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。この混合物をシリカゲル上においてクロマトグラフィーにかけた（溶出液：ＤＣＭ→ＭｅＯＨ）。化合物９８（８０ｍｇ、収率＝５７％）を得た。分子９８を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２７６】
化合物９９：
化合物２０（１８ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）と９８（２４ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）とを含むＨ２Ｏ：ＴＨＦ＝１：１（２ｍｌ）混合物の溶液を減圧下６０℃で蒸発させた。同じ溶解／蒸発サイクルを２回繰り返した。Ｃ１８カラム上におけるクロマトグラフィーによる精製後、化合物９９（１０ｍｇ、収率＝２５％）を得た。分子９９を質量、１Ｈ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０２７７】
・抗癌剤クロラムブシルの残基を有する分子１０２を以下の反応図に従って合成した。
【０２７８】
【化８４】
0006026499.tif 000085
【０２７９】
化合物１００：
２−メチルアミノエタノール（１９５ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（０．５４ｍｌ、３．９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３５０ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（５００ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２０ｍｌ）中のクロラムブシル（４００ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。得られた混合物を室温で２４時間撹拌した。水を加え、有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲル上においてクロマトグラフィーにかけた（溶出液：ＤＣＭ→ＭｅＯＨ）。化合物１００（３７５ｍｇ、収率＝８０％）を得た。分子１００を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２８０】
化合物１０１：
ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の化合物１００（２００ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）の溶液にＣＤＩ（４４８ｍｇ、２．７７ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で２０分間撹拌した後、ヒドラジン水和物（ＭｅＣＮ中１Ｍ、３．８ｍｌ、３．８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。この混合物をシリカゲルにおいてクロマトグラフィーにかけた（溶出液：ＤＣＭ→ＭｅＯＨ）。化合物１０１（１００ｍｇ、収率＝４３％）を得た。分子１０１を１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにより特徴解析した。
【０２８１】
化合物１０２：
化合物２０（２７ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ）と化合物１０１（３０ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）とを含むＨ２Ｏ：ＴＨＦ＝１：１（２ｍｌ）混合物の溶液を減圧下６０℃で蒸発させた。同じ溶解／蒸発サイクルを２回繰り返した。Ｃ１８カラム上におけるクロマトグラフィーによる精製後、化合物１０２（１３ｍｇ、収率＝２５％）を得た。分子１０２を質量、１Ｈ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０２８２】
・ホルモン生成物エストロン残基を有する分子１０４を以下の反応図に従って合成した。
【０２８３】
【化８５】
0006026499.tif 000086
【０２８４】
化合物１０３：
エストロン（５０ｍｇ、０．１８３ｍｍｏｌ）とチオカルボヒドラジド（９７ｍｇ、０．９１６ｍｍｏｌ）との混合物を２Ｍ  ＮａＯＨ（１ｍｌ）とＭｅＯＨ（１ｍｌ）との混合物に９０℃で溶解し、この温度で５分間撹拌した後、冷却し、シリカゲル上においてクロマトグラフィーにかけた（溶出液：ＤＣＭ〜ＭｅＯＨの勾配）。純粋な化合物１０３を得た（６０ｍｇ、収率＝９２％）。分子１０３を質量および１Ｈ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０２８５】
化合物１０４：
化合物１０３（５５ｍｇ、０．１５３ｍｍｏｌ）と化合物２０（８０ｍｇ、０．１５３ｍｍｏｌ）との混合物を水（１ｍｌ）とＴＨＦ（２ｍｌ）との混合物に室温で溶解し、この温度で１６時間撹拌した後、８０℃でＴＨＦ−水混合物を用いて４回共蒸発させて乾燥させ、Ｃ１８上においてクロマトグラフィーにかけた。純粋な化合物１０４を得た（２８ｍｇ、収率＝９２％）。分子１０４を質量、１Ｈ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０２８６】
【化８６】
0006026499.tif 000087
【０２８７】
化合物１０７：
１０５（１６６μｌ、１．３４ｍｍｏｌ）とトリス（トリメチルシリル）ホスファイト（８００ｍｇ、２．６８ｍｍｏｌ）との混合物をＡｒ下で３０分間撹拌した後、ＭｅＯＨ（２ｍｌ）を加え、混合物を１５分間撹拌し、その後、６０℃で濃縮乾固した。得られた粗生成物をＮＨ２ＮＨ２・Ｈ２Ｏに溶解し、室温で３時間撹拌した。２ｅｑ．のＮａＯＨ、次いでＭｅＯＨを加え、形成した沈殿を濾過し、２ｍｌの水および結晶化ＭｅＯＨに溶解した後、濾過した。得られた生成物を水（３ｍｌ）に溶解し、３ｅｑ．のＮａＯＨを加えた後、溶液を凍結乾燥した。こうして、純粋な化合物１０７を得た（２３０ｍｇ、収率＝９３％）。分子１０７を質量、１Ｈ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０２８８】
化合物１０８：
化合物１０７およびダリドから出発して化合物７３と同様に製造し、特徴解析した。
【０２８９】
・局所麻酔薬ベンゾカインの残基を有する分子１１１を以下の反応図に従って合成した。
【０２９０】
【化８７】
0006026499.tif 000088
【０２９１】
化合物１０９：
化合物２８およびベンゾカインから出発して化合物３０と同様に製造し、特徴解析した。
【０２９２】
化合物１１０：
化合物１０９から出発して化合物３１と同様に製造し、特徴解析した。
【０２９３】
化合物１１１：
化合物１１０および２０から出発して化合物３２と同様に製造し、質量、１Ｈ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０２９４】
・ダンシル残基を有する３の蛍光類似物質（分子１１５）を以下の反応図に従って合成した。
【０２９５】
【化８８】
0006026499.tif 000089
【０２９６】
化合物１１４：
化合物１１３から出発して化合物２２と同様に製造し、特徴解析した。
【０２９７】
化合物１１５：
化合物１１４および２０から出発して化合物３と同様に製造し、質量、１Ｈ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０２９８】
・ダンシル残基を有する蛍光誘導体である分子１２４、１２５、１２６、および１２７を以下の反応図に従って合成した。
【０２９９】
【化８９】
0006026499.tif 000090
【０３００】
化合物１２０、１２１、１２２、および１２３：
これらはそれぞれ化合物１１８、１１９、６０、および７６から出発して化合物７５と同様に製造し、特徴解析した。
【０３０１】
化合物１２４、１２５、１２６、および１２７：
これらはそれぞれ化合物１２０、１２１、１２２、および１２３と２０から出発して化合物７３、８０、および９０と同様に製造し、質量、１Ｈ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭＲのスペクトルにより特徴解析した。
【０３０２】
・ダンシル残基を有する蛍光誘導体である分子１３１を以下の反応図に従って合成した。
【０３０３】
【化９０】
0006026499.tif 000091
【０３０４】
化合物１２９：
市販の化合物２８および１２８から出発して化合物３０と同様に製造し、特徴解析した。
【０３０５】
化合物１３０：
化合物１２９から出発して化合物３１と同様に製造し、特徴解析した。
【０３０６】
化合物１３１：
化合物１３０および２０から出発して化合物３２と同様に製造し、質量、１Ｈ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭのＲスペクトルにより特徴解析した。
【０３０７】
２．生物学的培地中における本発明に係る化合物の解離試験
イミンＸ２結合が解離して生物学的関心のある化合物が放出されることを実証した。この目的のために、刻んだ腫瘍標本、生理食塩水等の生物学的培地中で解離産物を検出し易いように蛍光誘導体を用いた。
【０３０８】
この解離試験は特に、ポドフィロトキシンモチーフがダンシル基で置換された分子３の類似物質を特に表すダンシル残基を有する分子１１５を用いて行った。
【０３０９】
この試験では、３７℃の刻んだ腫瘍培地中に化合物１１５を置き、ＨＰＬＣを用いて化合物１１４および化合物１１３の放出動態を測定した（下図参照）。
【０３１０】
【化９１】
0006026499.tif 000092
【０３１１】
得られた結果を図３に示す。
【０３１２】
この解離試験を、分子８０を用いても行った。この試験では、３７℃の刻んだ腫瘍培地中に化合物８０を置き、ＨＰＬＣを用いてメトトレキサート（ＭＴＸ）の放出動態を測定した。
【０３１３】
得られた結果を図４に示す。
【０３１４】
３．生物学的試験
イミン結合が解離して生物学的関心のある化合物が放出されることを実証した、生物学的培地中における本発明に係る化合物の解離試験の結果は、本発明に係るこれらの化合物の生物学的活性と一致する。
【０３１５】
・インビトロ実験
３つの細胞株、すなわち２つの腫瘍株（ＰＯＳ１、マウス骨肉腫細胞；ＳａＯＳ２、ヒト骨肉腫細胞）および非腫瘍線維芽細胞株（Ｌ９２９、マウス起源の線維芽細胞）において、本発明に係る化合物のインビボ（in vivo）での細胞毒性または抗増殖性の可能性を評価するための実験を行った。
【０３１６】
マウス骨肉腫細胞（ＰＯＳ１）は、５％ＣＯ２を含む３７℃の湿った雰囲気中、ＲＰＭＩ培地（ロズウェルパーク記念研究所（Ｒｏｓｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ））、ＦＣＳ（ウシ胎児血清）（５％）中で培養した。
【０３１７】
ヒト骨肉腫細胞（ＳａＯＳ２）は、５％ＣＯ２を含む３７℃の湿った雰囲気中、ＤＭＥＭ（ダルベッコ変法イーグル培地）、ＦＣＳ（ウシ胎児血清）（１０％）中で培養した。
【０３１８】
マウス起源の線維芽細胞（Ｌ９２９）は、５％ＣＯ２を含む３７℃の湿った雰囲気中、ＲＰＭＩ培地、ＦＣＳ（５％）中で培養した。
【０３１９】
細胞毒性試験を行うために、９６ウェルプレートにＴ０で種々の細胞株を接種した（１０００細胞／ウェル）。
【０３２０】
周辺ウェルには培養培地のみを１００μｌ入れた。種々の濃度の被験化合物をＴ２４（接種２４時間後）で接触させた。
【０３２１】
細胞を種々の濃度の種々の抽出物と７２時間接触させた後にＸＴＴ試験（ＸＴＴキット、供給業者ロッシュ社）を行った。読取りは４時間目にＶＩＣＴＯＲ  ２、１４２０マルチラベルカウンタープレートリーダー（パーキンエルマー社）を用いて行った。
【０３２２】
この試験は、生細胞中にのみ存在する酵素であるミトコンドリアのデヒドロゲナーゼ活性を測定することができる。この酵素はＸＴＴを切断し、培養培地に可溶性の橙色のホルマザンの結晶を放出させる。染色強度を分光測定により測定した。
【０３２３】
被験化合物（０．００５〜１００μＭの複数の濃度）の存在下で７２時間培養した後、０．５％ｔｗｅｅｎ  ２０に溶解した、化合物３、４１、４２、４６、および８０の細胞毒性試験を行った。
【０３２４】
各濃度を細胞生存率試験で３連（ｔｒｉｐｌｉｃａｔｅ）にて評価した。試験した各濃度範囲は化合物から即席で用意された。
【０３２５】
化合物３について得られた結果を図１に示す。
【０３２６】
種々の細胞株と化合物３とを７２時間接触させた後に行った細胞生存率試験により、腫瘍株ＰＯＳ１および非腫瘍株Ｌ９２９の両方の細胞株に対して、０．５〜１００μＭの濃度で抗増殖性または細胞毒性効果が示された。
【０３２７】
ＰＯＳ１およびＬ９２９で得られた結果を、本発明に係る化合物３（ベクター化ポドフィロトキシン）については図５に、化合物２１（ポドフィロトキシン）については図６に示す。本発明に係る化合物８０（ベクター化メトトレキサート）およびメトトレキサート（ＭＴＸ）で得られた結果をＰＯＳ１については図７に、ＳａＯＳ２については図８に示す。
【０３２８】
ＰＯＳ１株では、濃度０．５〜１００μＭで対照と比べて７５〜９０％の細胞生存率の低下が記録された。
【０３２９】
Ｌ９２９株では、濃度０．５〜１００μＭで対照と比べて８７〜９９％の細胞生存率の低下が記録された。
【０３３０】
更に、化合物４１、４２、および４６が、試験した唯一の系である腫瘍株ＰＯＳ１において、５μＭ、１０μＭ、５０μＭ、および１００μＭの濃度で用量効果に関連した細胞生存率の低下を誘導することが観察された。
【０３３１】
ＣＩ５０は、試験した全化合物で１〜５μＭであった。
【０３３２】
以上より、イミン結合と抗癌性化合物残基を表すＲ１基とを有する本発明に係る化合物が、図９に示される国際公開第２００９／０８３６１４号の分子（ＩＩＩ）の場合またはイミン結合以外の種類の結合が用いられた場合とは異なり、生物学的抗癌活性を有することが実証された。
【０３３３】
【化９２】
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国際公開第２００９／０８３６１４号の分子（ＩＩＩ）
【０３３４】
・インビボ実験
化合物３の抗腫瘍効果
Ory B. et al. Cancer 2005, 104(11), 2522-2529に記載のプロトコールに従い、マウス腫瘍細胞（ＰＯＳ−１）をマウス脛骨の近くに移植した骨肉腫モデルにおいて分子３をインビボで試験した。移植の約１４日後に腫瘍が発生し、急速に進行した。これは動物の死亡率を上昇させる肺転移の原因であるかも知れない。濃度０．５μｍｏｌ／ｋｇの分子３は、インビボで腫瘍が確立された後に化合物が投与された時、腫瘍の進行を低減した。
【０３３５】
蛍光による医療用イメージングへの化合物５０の使用
６週齢の雄のスイスマウスを用いて、インビボでの蛍光による医療用イメージングに蛍光分子５０が使えるかどうか調べた。非ベクター化成分４９を同じ条件下で、すなわち５０μｍｏｌ／ｋｇで腹腔内注射（０．９％ＮａＣｌ水溶液中の溶液の形態）し、分子注射後１２０分間拡散させて、試験した。
【０３３６】
更に、マウスに担体（０．９％ＮａＣｌ水溶液）のみを注射して陰性対照とした。
【０３３７】
試験結果を図２ａおよび２ｂに示す。明らかに、分子４９および５０の蛍光分布は異なり、ベクター化分子５０は蛍光部位がさほど広くなく、骨中に位置している。
【図３】
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【図４】
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【図１】
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【図２ａ】
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【図２ｂ】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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