(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の異種クレード又は異種菌株からのウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質に結合することができるポリクローナル抗体を産生する方法であって、
妊娠前又は妊娠中に、一次用量のヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントで雌の非ヒト動物にワクチン接種する工程、
前記妊娠中に、２つの追加免疫用量のＨＩＶ  Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントで前記雌の非ヒト動物にワクチン接種する工程であり、第１の追加免疫用量及び第２の追加免疫用量でのワクチン接種間の時間が、約５週間以上又は前記動物の妊娠期間の約１２％以上である、工程、及び、
前記動物の乳汁又は初乳を得る工程、
を含む方法。
【請求項２】
前記一次用量が妊娠前に投与され、さらに、前記追加免疫用量が妊娠後に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記一次用量及び前記追加免疫用量でのワクチン接種間の時間が、少なくとも約７週間又は前記動物の妊娠期間の少なくとも約１６％である、請求項１又は請求項２記載の方法。
【請求項４】
前記一次用量及び前記追加免疫用量でのワクチン接種間の時間が、少なくとも約１２週間又は前記動物の妊娠期間の少なくとも約２８％である、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
前記一次用量及び前記追加免疫用量でのワクチン接種間の時間が、少なくとも約３５週間又は前記動物の妊娠期間の少なくとも約８１％である、請求項１〜４のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
前記動物は、３回以上の追加免疫用量でワクチン接種される、請求項１〜５のいずれか１項記載の方法。
【請求項７】
第１の追加免疫用量及び最後の追加免疫用量でのワクチン接種間の時間が、少なくとも約２８週間又は前記動物の妊娠期間の少なくとも約６５％である、請求項１〜６のいずれか１項記載の方法。
【請求項８】
前記動物は、妊娠期間中に第２の追加免疫用量でワクチン接種される、請求項１〜７のいずれか１項記載の方法。
【請求項９】
前記動物は、妊娠期間の最後の８週間以内に、又は、妊娠期間のうち最後の約１８％以内に第２の追加免疫用量でワクチン接種される、請求項１〜８のいずれか１項記載の方法。
【請求項１０】
前記追加免疫用量のうち少なくとも１つが妊娠の中期に与えられる、請求項１〜９のいずれか１項記載の方法。
【請求項１１】
前記乳汁又は初乳は分娩後に得られる、請求項１〜１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
前記動物は有蹄動物である、請求項１〜１１のいずれか１項記載の方法。
【請求項１３】
ＨＩＶの伝染を防止する組成物を製造する方法であって、
請求項１〜１２のいずれか１項記載の方法によりポリクローナル抗体を調製する工程、
調製された前記ポリクローナル抗体を抽出する工程、及び、
薬学的に許容される賦形剤と共に、精製された前記抗体を処方する工程、
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医療の分野、特にウイルス感染の治療に有用な方法及び組成物を提供する。より詳細には、本発明は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の伝染を抑制するための方法及び組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
レトロウイルス命名ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）は、免疫系の進行性破壊（後天性免疫不全症候群；ＡＩＤＳ）、並びに中枢及び末梢神経系の変性を含む複雑な疾患の病原体である。1980年代初期に、それが、公衆衛生の問題として現れてから、疾患を制御又は消滅させる努力は、主に、個人が既に感染した後に疾患を治療する選択肢に集中してきた。
【０００３】
コンドームの使用は、性交の際のＨＩＶ感染の伝染に対して相当程度の保護を提供する。しかし、コンドームの使用は、ＨＩＶの伝染に対して100％効果があるわけではない。更に、カップルは多くの場合にコンドームを使用しない。フォーム、ゲル、スポンジ若しくは他の形態で膣若しくは直腸に挿入することができる又は男性生殖器に局所的に塗布することができる局所用組成物が、多くの場合にコンドームより好まれる。更に、コンドームの予防効果は、コンドームの外面に被覆された潤滑剤に適切な殺菌剤を含めることによって改善することができる。しかし、ＨＩＶの伝染に対する効果的な局所組成物を開発することは、現在までほとんど進んでいない。
【０００４】
局所ＨＩＶ予防組成物を開発するための作業の大部分は、市販薬のノノキシノール−9のような界面活性剤及び緩衝剤の使用に集中してきた。界面活性剤及び洗剤は、溶解及び乳化により微生物及び精子の膜を分裂する。界面活性剤含有クリーム及びゲルは、死滅能力が非常に広範囲であるという利点を有し、したがって、ＨＩＶウイルス及び他の性行為感染症に関連するウイルスを死滅することができる。しかし界面活性剤及び緩衝剤の使用は、これらが細胞膜に対して引き起こしうる損傷によって実質的に制限されている。膣において、ノノキシノール−9は膣壁を薄くすることが示されている。直腸では、ノノキシノール−9は直腸壁を剥がす可能性がある。
【０００５】
殺ＨＩＶウイルス剤（HIV viruside）としての使用が調査されている他の殺ウイルス性（virusidal）組成物には、ウイルスエンベロープに粘着し、細胞膜を遮蔽する可能性があるカラギーナン及び他の大型硫酸化多糖類が含まれる。ヒト免疫不全ウイルスリバーストランスクリプターゼの非ヌクレオシドインヒビターが、ＨＩＶに対していくらかの効果を有することも示している。
【０００６】
科学者たちは、近年、性的接触の後にＨＩＶが生体にどのように侵入するかにいついての理解を改善する幾つかの生物学的発見を報告しており、これらはＨＩＶと標的細胞の相互作用を妨げる予防物質をもたらす可能性がある。これの発見は、一般にＴリンパ球、単球／マクロファージ及び樹状細胞を中心に展開し、ＣＤ4細胞レセプターがウイルス伝染のプロセスに関与していることを示唆している。例えば、ＨＩＶが樹状細胞の表面に密接に結合し、樹状細胞がＣＤ４＋  Ｔヘルパー細胞に微生物抗原を提示して、免疫反応を刺激すると、樹状細胞は、ＨＩＶをＣＤ４＋  Ｔヘルパー細胞に不用意に移動し、それによって感染の進行を進めると考えられる。
【０００７】
数人は、これらの発見に基づいて、ウイルスとヒト宿主の相互作用を阻止する予防薬を設計できると仮定した。しかし、ＨＩＶとヒト細胞の特定の相互作用に依存する方法は、感染経路が完全に定義されておらず、多様でありうるので限定的である。（Ｍｉｌｌｅｒ，Ｃ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，“Ｇｅｎｉｔａｌ  Ｍｕｃｏｓａｌ  Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｉｍｉａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ：Ａｎｉｍａｌ  Ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  Ｈｅｔｅｒｏｓｅｘｕａｌ  Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ”，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，６３，４２７７−４２８４（１９８９）；Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，Ｄ．Ｍ．ａｎｄ  Ｂｏｕｒｉｎｂａｉａｒ，Ａ．Ｓ．，“Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ＨＩＶ  Ｓｐｒｅａｄ  ｆｒｏｍ  Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｔｏ  Ｅｐｉｔｈｅｌｉａ”，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，１８６，２６１−２７３（１９９２）；Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，Ｄ．Ｍ．，Ｔａｎ，Ｘ．，Ｐｅａｒｃｅ−Ｐｒａｔｔ，Ｒ．ａｎｄ  Ｚａｃｈａｒｏｐｏｕｌｏｓ，Ｖ．Ｒ．，“Ａｎ  Ａｓｓａｙ  ｆｏｒ  Ｈ  ＩＶ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｕｌｔｕｒｅｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｅｒｖｉｘ−ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｃｅｌｌｓ”，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，５２，１−１３（１９９５）；Ｈｏ，Ｊ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ  ｆｒｏｍ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ（ＨｌＶ）−ＳｅｒｏｎｅｇａｔｉＶｅ  Ｄｏｎｏｒｓ  Ｉｎｄｕｃｅ  ＨＩＶ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｆｒｏｍ  ＨＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  Ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ  Ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ”：Ａｎ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ＨＩＶ  Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ  Ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｄ  ｂｙ  Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  Ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ．，”Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８１，１４９３−１５０５（１９９５）；及びＢｒａａｔｈｅｎ，Ｌ．Ｒ．＆  Ｍｏｒｋ，Ｃ．ｉｎ“ＨＩＶ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｋｉｎ  Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ  Ｃｅｌｌｓ”，Ｉｎ：Ｓｋｉｎ  Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ）ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｖｉｒｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ＡＩＤＳ（編Ｂｅｃｋｅｒ，Ｙ．）１３１−１３９（Ｋｌｕｗｅｒ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｂｏｓｔｏｎ，（１９９１））。
【０００８】
ＨＩＶワクチンを開発する研究者たちの努力もまだ成功していない。例えば、不活化ＳＩＶのワクチン接種は、ＳＩＶに対する強力な免疫反応にもかかわらず、アフリカミドリザルの同種のウイルスによる感染を防止することができない。
【０００９】
従来技術についての前述の検討から明らかなように、ＨＩＶ及びＨＩＶ伝染の防止及び治療における克服されるべき重大な問題が依然として残ったままである。ＨＩＶ伝染を抑制する組成物及び方法を提供することによって、従来技術の問題を克服する又は改善することが本発明の態様である。
【００１０】
文献、作用、物質、器具、物品などの考察は、本明細書の文脈を提供する目的だけのために本明細書に含まれる。これらのいずれか又は全ての事項は、従来技術の基礎を形成すること又は本出願のそれぞれの請求の優先日の前に存在していたかのように、本明細書に関連する分野における一般的な周知の事実であったことを示唆又は表さない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】ＰＣＴ／ＡＵ２００９／００１２１８
【特許文献２】米国特許第５，１８５，１５５号
【特許文献３】米国特許第５，２４８，７００号
【特許文献４】米国特許第４，０１１，３１２号
【特許文献５】米国特許第３，８８７，６９９号
【特許文献６】米国特許第５，１４３，７３１号
【特許文献７】米国特許第３，６４０，７４１号
【特許文献８】米国特許第４，８９５，７２４号
【特許文献９】米国特許第４，７９５，６４２号
【特許文献１０】米国特許第５，２３１，１１２号
【特許文献１１】米国特許第５，９８９，５８１号
【特許文献１２】米国特許第３，８８８，９７５号
【特許文献１３】米国特許第４，２８３，３２５号
【特許文献１４】米国特許第３，９１６，８９８号
【特許文献１５】米国特許第４，３６０，０１３号
【特許文献１６】米国特許第４，９６１，９３１号
【特許文献１７】ＷＯ９６／３００２５
【特許文献１８】ＥＰ０３５８１５４
【特許文献１９】ＥＰ０７３６５３３
【特許文献２０】米国特許第５，８１４，６３９号
【特許文献２１】ＥＰ０６５６７７８
【特許文献２２】ＷＯ９４／０３４４０
【特許文献２３】ＷＯ９６／１００１９
【特許文献２４】米国特許第５，４８９，６９７号
【特許文献２５】ＥＰ−０１４２２６８
【特許文献２６】ＥＰ−０１７６２９９
【特許文献２７】米国特許第ＲＥ３３，６５３号
【特許文献２８】米国特許第４，５３０，７８７号
【特許文献２９】米国特許第４，５６９，７９０号
【特許文献３０】米国特許第４，６０４，３７７号
【特許文献３１】米国特許第４，７４８，２３４号
【特許文献３２】米国特許第４，７５２，５８５号
【特許文献３３】米国特許第４，９４９，３１４号
【特許文献３４】ＷＯ９６／２５１７１
【特許文献３５】米国特許第５，４６４，９３３号
【特許文献３６】米国特許第４，２１１，７７１号
【特許文献３７】ＷＯ／２００４／０７８２０９（ＰＣＴ／ＡＵ２００４／０００２７７）
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ｍｉｌｌｅｒ，Ｃ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，“Ｇｅｎｉｔａｌ  Ｍｕｃｏｓａｌ  Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｉｍｉａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ：Ａｎｉｍａｌ  Ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  Ｈｅｔｅｒｏｓｅｘｕａｌ  Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ”，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，６３，４２７７−４２８４（１９８９）
【非特許文献２】Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，Ｄ．Ｍ．ａｎｄ  Ｂｏｕｒｉｎｂａｉａｒ，Ａ．Ｓ．，“Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ＨＩＶ  Ｓｐｒｅａｄ  ｆｒｏｍ  Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｔｏ  Ｅｐｉｔｈｅｌｉａ”，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，１８６，２６１−２７３（１９９２）
【非特許文献３】Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，Ｄ．Ｍ．，Ｔａｎ，Ｘ．，Ｐｅａｒｃｅ−Ｐｒａｔｔ，Ｒ．ａｎｄ  Ｚａｃｈａｒｏｐｏｕｌｏｓ，Ｖ．Ｒ．，“Ａｎ  Ａｓｓａｙ  ｆｏｒ  Ｈ  ＩＶ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｕｌｔｕｒｅｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｅｒｖｉｘ−ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｃｅｌｌｓ”，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，５２，１−１３（１９９５）
【非特許文献４】Ｈｏ，Ｊ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ  ｆｒｏｍ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ（ＨｌＶ）−ＳｅｒｏｎｅｇａｔｉＶｅ  Ｄｏｎｏｒｓ  Ｉｎｄｕｃｅ  ＨＩＶ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｆｒｏｍ  ＨＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  Ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ  Ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ”：Ａｎ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ＨＩＶ  Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ  Ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｄ  ｂｙ  Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  Ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ．，”Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８１，１４９３−１５０５（１９９５）
【非特許文献５】Ｂｒａａｔｈｅｎ，Ｌ．Ｒ．＆  Ｍｏｒｋ，Ｃ．ｉｎ“ＨＩＶ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｋｉｎ  Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ  Ｃｅｌｌｓ”，Ｉｎ：Ｓｋｉｎ  Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ）ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｖｉｒｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ＡＩＤＳ（編Ｂｅｃｋｅｒ，Ｙ．）１３１−１３９（Ｋｌｕｗｅｒ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｂｏｓｔｏｎ，（１９９１）
【非特許文献６】Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｄ．Ｈ．Ｌｅｗ編，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８１
【非特許文献７】Ｂｏｄｍｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第７８巻（１９８９）
【非特許文献８】Ａｍｉｅｓ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ，第７７巻（１９５９）
【非特許文献９】Ｐｆｉｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，第３巻，２２９〜２３３頁（１９８６）
【非特許文献１０】Ｄｅａｍｅｒ  ａｎｄ  Ｕｓｔｅｒ，“Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ”，ｉｎ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ，２７〜５１頁（１９８３）
【非特許文献１１】Ｓｅｓｓａ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，第２４５巻，３２９５〜３３００頁（１９７０）
【非特許文献１２】；Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，第３４巻，４７３〜４７４頁（１９８２）
【非特許文献１３】；Ｔｏｐｉｃｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｄ．Ｄ．Ｂｒｅｉｍｅｒ  ａｎｄ  Ｐ．Ｓｐｅｉｓｅｒ編，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，３４５〜３５８頁（１９８５）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１３】
第１態様において、本発明は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントに結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む、ＨＩＶの伝染を抑制する組成物を提供する。Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントは、任意のＨＩＶ  Ｅｎｖタンパク質でありうるが、好ましくは、Ｅｎｖタンパク質はｇｐ140である。理論に束縛されることなく、ポリクローナル抗体はＨＩＶビリオンに結合するように作用し、それによって、粘膜表面に障壁層を形成する細胞の中のＨＩＶの動きを抑制することが提案されている。一つの実施態様において、組成物は細胞のＨＩＶ感染を防止することができる。
【００１４】
一つの実施態様において、Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントはｇｐ140オリゴマーである。オリゴマーは、ｇｐ140三量体、二量体又は単量体を含むことができる。オリゴマーを、例えばレンチルレクチンアフィニティークロマトグラフィー及びゲル濾過により形質導入ＨｅＬａ及び293細胞上澄みから精製することができる。Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントは、ＨＩＶクレードＡ、クレードＢ又はクレードＣ菌株のウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントでありうる。
【００１５】
一つの実施態様において、ポリクローナル抗体又はそのフラグメントは、ＨＩＶの異種クレード又はＨＩＶの異種菌株からのＥｎｖタンパク質に結合することができる。
【００１６】
一つの実施態様において、組成物は、異種クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ１４０に結合することができるクレードＢのｇｐ１４０に対して生じたポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００１７】
一つの実施態様において、ポリクローナル抗体又はそのフラグメントは、ｇｐ１４０に結合するモノクローナル抗体Ａｂ  ｂ１２と競合する。
【００１８】
一つの実施態様において、ポリクローナル抗体又はそのフラグメントは中和抗体と競合する。
【００１９】
抗体又はそのフラグメント又はその機能的同等物は、動物をＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントで免疫化することにより産生することができる。動物を、ｇｐ１４０、組み換えｇｐ１４０又はオリゴマーｇｐ１４０で免疫化することができる。組み換えｇｐ140はビリオン培養から誘導することができない。動物を、ＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメント及びアジュバントで免疫化することができる。一つの実施態様において、アジュバントは油中水型乳剤である。
【００２０】
動物を、クレードＢのｇｐ１４０及び異種クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ１４０に結合することができる産生された抗体により免疫化することができる。
【００２１】
動物を、クレードＢのｇｐ１４０及びｇｐ１４０に結合するモノクローナル抗体Ａｂ  ｂ１２と競合する産生された抗体により免疫化することができる。
【００２２】
動物を、クレードＢのｇｐ１４０及び異種クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ１４０に結合することができる産生された抗体により免疫化することができ、ここで産生された抗体は、ｇｐ１４０に結合するモノクローナル抗体Ａｂ  ｂ１２と競合する。
【００２３】
抗体又はそのフラグメント又はその機能的同等物は、鳥類の卵に存在しうる若しくはそれから得ることができるか又は動物の高度免疫初乳若しくは高度免疫乳汁に存在しうる若しくはそれから得ることができる。動物は雌ウシでありうる。
【００２４】
組成物を局所投与用に処方することができ、特定の実施態様において、組成物は膣内又は直腸内投与用に処方される。組成物をゲル剤として処方することができる又は局所クリーム、軟膏、ローション若しくはフォーム製剤として処方することができる。
【００２５】
特定の実施態様において、組成物は、薬学的に許容される賦形剤、潤滑剤又は抗ウイルス剤を更に含むことができる。
【００２６】
本発明は、ＨＩＶ伝染の治療及び／又は予防のための薬剤の製造における本発明の組成物の使用も提供する。
【００２７】
本発明は、動物をＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントで免疫化すること及び免疫化された動物から高度免疫初乳を得ることを含む、ＨＩＶの伝染を抑制する組成物を調製する方法も提供する。
【００２８】
本発明は、動物をＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントで免疫化すること及び免疫化された動物から高度免疫乳汁を得ることを含む方法により調製された、ＨＩＶの伝染を抑制する組成物も提供する。
【００２９】
本発明は、ＨＩＶの伝染を抑制する方法であって、
雌ウシを免疫化して高度免疫初乳又は高度免疫乳汁を形成すること；及び
高度免疫初乳又は高度免疫乳汁を被験者に投与することを含み、ここで雌ウシを免疫化して高度免疫初乳又は高度免疫乳汁を産生する工程が、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントによるワクチン接種を含む方法も提供される。Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントは、任意のＨＩＶ  Ｅｎｖタンパク質でありうるが、好ましくは、Ｅｎｖタンパク質はｇｐ140である。
【００３０】
また提供されるものは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントに結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを被験者に投与することを含む、ＨＩＶの伝染を抑制する方法である。Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントは、任意のＨＩＶ  Ｅｎｖタンパク質でありうるが、好ましくは、Ｅｎｖタンパク質はｇｐ140である。
【００３１】
一つの実施態様において、Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントはｇｐ140オリゴマーである。オリゴマーは、ｇｐ140三量体、二量体又は単量体を含むことができる。オリゴマーを、例えばレンチルレクチンアフィニティークロマトグラフィー及びゲル濾過により形質導入ＨｅＬａ及び293細胞上澄みから精製することができる。Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントは、ＨＩＶクレードＡ、クレードＢ又はクレードＣ菌株のウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントでありうる。
【００３２】
一つの実施態様において、ポリクローナル抗体又はそのフラグメントは、ＨＩＶの異種クレード又はＨＩＶの異種菌株からのＥｎｖタンパク質に結合することができる。
【００３３】
抗体又はそのフラグメント又はその機能的同等物は、動物をＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントで免疫化することにより産生することができる。動物を、ｇｐ１４０、組み換えｇｐ１４０又はオリゴマーｇｐ１４０で免疫化することができる。組み換えｇｐ140はビリオン培養から誘導することができない。動物を、ＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメント及びアジュバントで免疫化することができる。一つの実施態様において、アジュバントは油中水型乳剤である。
【００３４】
抗体又はそのフラグメント又はその機能的同等物は、鳥類の卵に存在しうる若しくはそれから得ることができるか又は動物の高度免疫初乳若しくは高度免疫乳汁に存在しうる若しくはそれから得ることができる。動物は雌ウシでありうる。
【００３５】
組成物を局所投与用に処方することができ、特定の実施態様において、組成物は膣内又は直腸内投与用に処方される。組成物をゲル剤として処方することができる又は局所クリーム、軟膏、ローション若しくはフォーム製剤として処方することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】ｇｐ１４０のワクチン接種スケジュールを示す。
【図２】ｇｐ１４０のワクチン接種スケジュールを示す。
【図３】血清及び初乳のＩｇＧがクレードＡ、Ｂ及びＣのｇｐ１４０  Ｅｎｖに結合することを示す。
【図４】非妊娠雌ウシの精製初乳ＩｇＧがｇｐ１４０  Ｅｎｖへの結合を保持することを示し、異種結合活性を示す。
【図５】ウシのＩｇＧが、ｇｐ１４０のＣＤ４結合部位へのモノクローナル抗体Ａｂ  ｂ１２の結合を阻止することを示す。
【図６】クレードＡ／Ｂ／Ｃのｇｐ１４０でワクチン接種した妊娠雌ウシの初乳及びクレードＢのｇｐ１４０でワクチン接種した非妊娠雌ウシが、広範囲の異種中和活性を有することを示す。下図は、精製初乳ＩｇＧが中和活性を有することを示す。
【発明を実施するための形態】
【００３７】
本発明は、部分的には、ＨＩＶ  Ｅｎｖタンパク質に結合する高度に特異的な初乳抗体を妊娠動物のワクチン接種により生成できるという知見を根拠にしている。したがって、第１態様において、本発明は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントに結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む、ＨＩＶの伝染を抑制する組成物を提供する。Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントは、任意のＨＩＶ  Ｅｎｖタンパク質でありうるが、好ましくは、Ｅｎｖタンパク質はｇｐ140である。理論に束縛されることなく、ポリクローナル抗体はＨＩＶビリオンに結合するように作用し、それによって、粘膜表面に障壁層を形成する細胞の中のＨＩＶの動きを抑制することが提案されている。一つの実施態様において、組成物は、細胞のＨＩＶ感染を抑制又は防止することができる。別の実施態様において、組成物は、粘膜表面の障壁層を形成するような上皮細胞の中のＨＩＶの動きを抑制又は防止することができる。この組成物を処方する手法及びＨＩＶの伝染を抑制する方法は、従来技術の手法と区別され、本発明の前の従来技術の一般的教示に全く反している。
【００３８】
本明細書で使用されるとき、用語「伝染を抑制する」は、一般に、ＨＩＶ伝染の完全な抑制、また部分的な抑制を意味する。完全な抑制とは、ＨＩＶウイルスが感染する及び／又は複製する及び／又は他の細胞を更に感染するのに成功することが完全にできないことを示す。これは、熟練の技能者により細胞及び／又は生体全体のレベルで多数の方法により判定することができる。一つのそのような判定は、宿主細胞から感染性ＨＩＶを得ることができないことによってなされる。別のそのような判定は、ＨＩＶが宿主細胞に侵入したことを決定できないことによってなされる。生体全体のレベルでは、ＨＩＶ感染をアッセイする標準的な方法を使用することができる（例えば、個人においてＨＩＶに対する抗体をアッセイすること）。部分的な抑制とは、本明細書に記載されている治療を受けていない適切な対照と比較して、感染する及び／又は複製する及び／又は他の細胞を更に感染するＨＩＶの能力における測定可能で統計的に有意な低減を意味する。一つの例は、感染を成功させるためにＨＩＶへのより高いレベルの曝露又はより長時間の曝露を必要とすることである。
【００３９】
本明細書で使用されるとき、用語「結合することができる」は、一般に、本明細書に記載されている抗体のような、ＨＩＶのクレードのｇｐ140に結合する抗体を意味する。ＨＩＶのクレードのｇｐ140に結合することは、下記の実施例に記載されているように示される。有用な実施態様において、抗体又はそのフラグメントは、抗体を生じるＨＩＶの菌株又はクレードのｇｐ１４０に結合し、抗体を生じないＨＩＶの菌株又はクレードのｇｐ１４０にも結合する。別の有用な実施態様において、抗体又はそのフラグメントは、抗体を生じるＨＩＶのクレードのｇｐ１４０に結合し、ＨＩＶの異種クレードのｇｐ１４０にも結合する。
【００４０】
本明細書で使用されるとき、用語「クレード」は、一般に、ＨＩＶのサブタイプ又は組み換え形態を包含する。
【００４１】
以前の研究は、ＨＩＶに対する保護及び／又はＨＩＶの伝染の抑制を提供する改善された組成物の提供が必要であることを示している。特に、膣又は直腸の生得的保護表面層の完全性を損なうことなくＨＩＶから保護する組成物を提供する必要性が存在する。この目的を目指した研究は、能動免疫（例えば、ワクチン）に集中してきたが、ＨＩＶに対する抗体がＨＩＶに対する組成物に使用される場合、これらの抗体はＨＩＶ抗原を使用して作製され、このことは、感染の危険性及び大量製造の困難さのために、それの及びその使用の規制認可を得ることが困難となる。従来技術の教示に反して、本発明は受動異種免疫の提供に部分的に根拠を置いており、ここで特定の生体で作製された抗体は、別の生体、一般に異なる種を保護するために使用される。
【００４２】
Ｅｎｖ外部ドメインはｇｐ１４０として知られており、これはｇｐ１２０及び切断型ｇｐ４１（膜貫通ドメイン及び細胞質末端を欠いている）の両方を含有する。一つの実施態様において、Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントはｇｐ140オリゴマーである。オリゴマーは、ｇｐ140三量体、二量体又は単量体を含むことができる。オリゴマーを、例えばレンチルレクチンアフィニティークロマトグラフィー及びゲル濾過により形質導入細胞（例えば、ＨｅＬａ及び293）上澄みから精製することができる。Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントは、ＨＩＶクレードＡ、クレードＢ又はクレードＣ菌株のウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントでありうる。
【００４３】
関連する出願（参照として組み込まれるＰＣＴ／ＡＵ２００９／００１２１８）において、出願者たちは、ＨＩＶ−１の菌株がＥｎｖにおいて差異を有することを示した。
【００４４】
一つの実施態様において、組成物は、クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ140に結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００４５】
別の実施態様において、組成物は、クレードＡ及びクレードＢのｇｐ140に結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００４６】
別の実施態様において、組成物は、クレードＢ及びクレードＣのｇｐ140に結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００４７】
別の実施態様において、組成物は、クレードＡ及びクレードＣのｇｐ140に結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００４８】
別の実施態様において、組成物は、クレードＡ、クレードＢ及びクレードＣのｇｐ140に結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００４９】
一つの実施態様において、組成物は、異種クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ１４０に結合することができるクレードＢのｇｐ１４０に対して生じたポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００５０】
一つの実施態様において、組成物は、ｇｐ１４０に結合するモノクローナル抗体Ａｂ  ｂ１２と競合するポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００５１】
別の実施態様において、組成物は、異種クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ１４０に結合することができるクレードＢのｇｐ１４０に対して生じたポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含み、ここで抗体又はそのフラグメントは、ｇｐ１４０に結合するモノクローナル抗体Ａｂ  ｂ１２と競合する。
【００５２】
驚くべきことに、出願者たちは、一つのクレードのＨＩＶ  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０オリゴマーでワクチン接種した雌ウシの初乳及び初乳から精製したＩｇＧが、ＨＩＶ菌株にわたってＥｎｖの配列及びグリコシル化が多様であるにもかかわらず、別のクレードのＨＩＶ  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０に結合できることを示した。更に、出願者たちは、一つのクレードのＨＩＶ  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０オリゴマーでワクチン接種した雌ウシの初乳及び初乳から精製したＩｇＧが、ＨＩＶ菌株にわたってＥｎｖの配列及びグリコシル化が多様であるにもかかわらず、別のクレードのｇｐ１４０に結合し、ＨＩＶを中和できることを示した。
【００５３】
乳牛を妊娠中期に高品質の可溶性オリゴマーＨＩＶ−１  Ｅｎｖ（ｇｐ１４０）でワクチン接種して、ＨＩＶ伝染抑制組成物として使用される高レベルのＨＩＶ−１  Ｅｎｖ特異的ポリクローナル中和抗体を含有する初乳を産生した。本発明者たちは、抗ＨＩＶ  Ｅｎｖ  ＩｇＧがウシ初乳の固有抗ウイルス成分と相乗作用して、ＨＩＶ−1を攻撃的に中和することを示している。
【００５４】
したがって、本発明はキログラムの量でウシＩｇＧを産生する利点を提供する。理論に束縛されることなく、本発明の組成物は、ＨＩＶを中和する強力な能力を有し、それによってインビトロで感受性細胞を非感染性にすることが提案される。
【００５５】
一つの実施態様において、ポリクローナル抗体又はそのフラグメントは抗体を中和する。
【００５６】
本明細書で使用されるとき、用語「中和」は、一般に、本発明の分子を結合し、その生物学的活性を妨害することができる抗体又はそのフラグメントを意味する。この用語は、例えば細胞のＣＤ４へのｇｐ１４０の結合を阻止することにより、ウイルス、例えばＨＩＶが細胞を感染するのを阻止する抗体又はそのフラグメントを包含する。
【００５７】
抗体又はそのフラグメント又はその機能的同等物は、動物をＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントで免疫化することにより産生することができる。
【００５８】
動物を、ｇｐ１４０、組み換えｇｐ１４０又はオリゴマーｇｐ１４０で免疫化することができる。
【００５９】
動物を、クレードＢのｇｐ１４０及び異種クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ１４０に結合することができる産生された抗体により免疫化することができる。
【００６０】
動物を、クレードＢのｇｐ１４０及び異種クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ１４０に結合することができる産生された抗体により免疫化することができる。
【００６１】
動物を、クレードＢのｇｐ１４０及びｇｐ１４０に結合するモノクローナル抗体Ａｂ  ｂ１２と競合する産生された抗体により免疫化することができる。
【００６２】
動物を、クレードＢのｇｐ１４０及び異種クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ１４０に結合することができる産生された抗体により免疫化することができ、ここで産生された抗体は、ｇｐ１４０に結合するモノクローナル抗体Ａｂ  ｂ１２と競合する。
【００６３】
一つの実施態様において、産生されたポリクローナル抗体又はそのフラグメントは抗体を中和する。
【００６４】
一つの実施態様において、産生されたポリクローナル抗体又はそのフラグメントは、細胞のＣＤ４へのｇｐ１４０の結合を阻止する。
【００６５】
一つの実施態様において、組み換えｇｐ140はビリオン培養から誘導することができない。
【００６６】
免疫反応を生成するのに適したＥｎｖポリペプチドは、ｇｐ１４０に少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％のアミノ酸同一性を有するＥｎｖポリペプチドである。ｇｐ１４０は、所定のＨＩＶ菌株からのｇｐ１２０のフラグメント及び同じＨＩＶ菌株からのｇｐ４１のフラグメントを含有し、ここで可溶性ｇｐ４１フラグメントは、貫膜ドメインを欠いている。オリゴマー構造を形成することができるｇｐ１４０ポリペプチドは、作成物から発現することができる。したがって、ｇｐ１４０ポリペプチドをエンコードするヌクレオチド配列及びｇｐ１４０ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む発現作成物が提供される。発現作成物は、一過性の使用のものでありうる又はエピソーム複製作成物若しくは組込形態のいずれかとして標的細胞への安定した形質移入及び維持においてより適切でありうる。
【００６７】
一つの実施態様において、ｇｐ１４０ポリペプチド及びｇｐ１４０ポリペプチドを発現する発現作成物が提供される。別の実施態様において、製造される又は天然細胞グリコシル化を付加する発現系により発現されるグリコシル化ｇｐ140ポリペプチドが提供される。
【００６８】
組み換えｇｐ１４０は、表１に含まれる発現ベクターを使用し、異なるクレード／菌株からのＥｎｖを担持する偽ウイルスを使用して産生することができる。
【００６９】
ｇｐ140を多数の異なる方法により精製することができる。例えば、ｇｐ１４０含有組織培養上澄みを、炭水化物に対するレンチレクチンの親和性を介して、ｇｐ１４０を含む糖タンパク質の捕捉を仲介するレンチレクチンアフィニティーカラムに通すことができる。洗浄した後、ｇｐ１４０を、０．５Ｍのメチル−Ｄ−マンノピラノシド（Ｓｉｇｍａ）の添加によりカラムから競合的に溶出する。他のｇｐ１４０菌株においてこの系で得られる収率は、組織培養上澄み１００ミリリットルあたり０．４〜１．０ミリグラムに変わる。次に溶出液を濃縮することができ、ｓｕｐｅｒｄｅｘ  200でのゲル透過により更に精製することができる。ｇｐ140は、オリゴマー形態で培養上澄みから精製される。
【００７０】
可溶性Ｅｎｖ  ｇｐ１４０オリゴマーは、ＨｅＬａ及び／又は２９３Ｔ細胞のクレードＡ、Ｂ及びＣのＨＩＶ−１菌株から調製され、レンチレクチンアフィニティー及びゲル濾過クロマトグラフィーにより精製されている。
【００７１】
４頭の雌ウシ（２頭が妊娠後期（pregnant in second semester）であり、２頭が初めは非妊娠であった）をＭｏｎｔａｎｉｄｅアジュバントで処方した１００μｇの精製ＨＩＶ−１  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０オリゴマーでワクチン接種した。２頭の雌ウシ（１頭が妊娠しており、１頭が非妊娠であった）の２つの群を、クレードＢ（ＡＤ８）のみにより又は等量（３３．３３μｇ）のクレードＡ、Ｂ及びＣのＥｎｖ  ｇｐ１４０（ＵＧ８、ＡＤ８及びＭＷ）（「トリミックス」と呼ばれる）によりワクチン接種した。４頭の雌ウシは全て少なくとも３回のワクチン接種を受け、最後のワクチン接種を出産の４週間前に与えた。４頭の雌ウシは全て９週間以内に血清変換した。相互終点血清ＩｇＧ滴定は、新たに確立した抗ウシＩｇＧ  ＨＩＶ−１  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０特異的ＥＬＩＳＡにより決定して、妊娠雌ウシでは１×１０２．５までであり、非妊娠雌ウシでは１×１０５までであった。妊娠雌ウシにおいて予測される低血清ＩｇＧ滴定は、血清ＩｇＧ抗体を出産のおよそ４週間前の初乳にポンプで入れたことにより説明された。
【００７２】
ＨＩＶ免疫性ウシ初乳を、妊娠中にワクチン接種した全ての雌ウシから産後に収集及び低温殺菌し、比較的低い反応の相互ＩｇＧ滴定の＜１０２（クレードＢワクチン接種）及び１×１０３．５（トリミックスワクチン接種）をもたらした。妊娠前にワクチン接種した雌ウシの相互初乳ＩｇＧ滴定は、１０５（クレードＢワクチン接種）及び１０４．５（トリミックスワクチン接種）であった。ウエスタンブロット分析は、４頭全ての雌ウシの初乳ＩｇＧがＨＩＶ−１  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０に特異的であることを確認した。未画分初乳を、ＨＩＶ−1  Ｅｎｖ偽型レポーターウイルスアッセイにより中和活性について試験した。
【００７３】
簡潔には、Ｅｎｖ偽型レポーターウイルスアッセイは、ＨＩＶ−1エンベロープタンパク質に対するウイルス中和抗体の存在を検出する。選択された菌株／クレードから誘導された、ＨＩＶ−1  Ｅｎｖを発現するＥＧＦＰレポーター偽ウイルス粒子を使用して、標的細胞をＥｎｖ依存的に感染する。一つのアッセイにおいて、レポーター偽ウイルス粒子を、標的細胞（Ｃｆ２ｔｈ−ＣＤ４／ＣＣＲ５／ＣＸＣＲ４；ＣＦ２細胞）への添加の１時間前に、９６ウエルプレートにおいて２×１０４／ウエルでインキュベートする。室温での１２００×ｇによる２時間のスピノキュレーション（spinoculation）の後、残留偽ウイルス及び抗体を除去し、新たな培地を細胞に加えた。２日後、標的細胞をＦＡＣＳによりＥＧＦＰ発現について分析した。初乳又は可溶性ＨＩＶ−１  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０オリゴマーに対して生じた初乳ＩｇＧの存在下で、感染レベルの低下の程度は、ＥＧＦＰ陽性細胞の率の低下を測定することによって判定された。中和率は、ワクチン接種前（出血前）のマウス血清に観察された感染レベルと、３回のワクチン接種でタンパク質を追加免疫した２週間後との比を表す。
【００７４】
クレードＢ及びＣウイルスのＮＩＨ参照パネルを含むクレードＡ／Ｅ、クレードＢ及びクレードＣ偽型ウイルスを試験し（合計ｎ＝27）、ラクトフェリン及び他の生体活性ペプチドに起因する固有の感染阻止活性を既に有する非免疫ウシ初乳と比較した。妊娠中にトリミックスワクチン接種した雌ウシの未画分初乳は、全てのＢクレード偽ウイルス（ｎ＝１５）、並びに大部分のＣクレード（ｎ＝１１）及びクレードＡ／Ｅ（ｎ＝１）偽ウイルスにおいて１：１６の希釈で５０％までの高い中和を示した。クレードＢでワクチン接種した最初の雌ウシは、低い反応であったが、妊娠前にワクチン接種した雌ウシ及び最近子牛を有したときにワクチン接種した雌ウシは両方とも良好に反応した。このときまで、広範囲の中和がクレードＢでワクチン接種した雌牛において観察され、Ｂクレード（ｎ＝１２）及びクレードＣ偽ウイルス（ｎ＝９）（１：１６希釈）では５０〜８０％の中和を示した（表１）。最初の一対の雌ウシのＩｇＧ  Ａｂｓを初乳から精製し、中和活性は、５００μｇ／ｍｌの非免疫ＩｇＧと比較して、トリミックスＩｇＧでは５０％までの中和を精製ＩｇＧで保持した。異なるクレードの偽ウイルスに対する２つのＨＩＶ  Ｅｎ  ｇｐ１４０高度免疫ウシ初乳試料の中和プロフィールの結果を表１に示す（実施例２を参照すること）。この結果は、異なるクレードのｇｐ１４０の間にエピトープの有意な差異があるので、ｐｇ１４０に対して生じた抗体が、異なるクレードのウイルスに強く結合し、それを中和することが予測されないことから驚くべきものである。
【００７５】
これらの結果は、高レベルの中和抗体を生じ、異種ＨＩＶ菌株に結合することができる抗体を中和するこの方法を強く支持する。しがたって、一つの実施態様において、ポリクローナル抗体又はそのフラグメントは、ＨＩＶの異種クレード又はＨＩＶの異種菌株からのＥｎｖタンパク質に結合することができる。
【００７６】
一つの実施態様において、組成物は、クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ140に結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００７７】
別の実施態様において、組成物は、クレードＡ及びクレードＢのｇｐ140に結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００７８】
別の実施態様において、組成物は、クレードＢ及びクレードＣのｇｐ140に結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００７９】
別の実施態様において、組成物は、クレードＡ及びクレードＣのｇｐ140に結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００８０】
別の実施態様において、組成物は、クレードＡ、クレードＢ及びクレードＣのｇｐ140に結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００８１】
別の実施態様において、組成物は、異種クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ１４０に結合することができるクレードＢのｇｐ１４０に対して生じたポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００８２】
別の実施態様において、組成物は、ｇｐ１４０に結合するモノクローナル抗体Ａｂ  ｂ１２と競合するポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含む。
【００８３】
別の実施態様において、ポリクローナル抗体又はそのフラグメントは抗体を中和する。
【００８４】
別の実施態様において、組成物は、異種クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのｇｐ１４０に結合することができるクレードＢのｇｐ１４０に対して生じたポリクローナル抗体又はそのフラグメントを含み、ここでポリクローナル抗体又はそのフラグメントは、ｇｐ１４０に結合するモノクローナル抗体Ａｂ  ｂ１２と競合する。
【００８５】
抗体又はそのフラグメント又はその機能的同等物は、鳥類の卵に存在しうる若しくはそれから得ることができるか又は動物の高度免疫初乳若しくは高度免疫乳汁に存在しうる若しくはそれから得ることができる。動物は雌ウシでありうる。
【００８６】
高度免疫血清、乳汁、初乳などの生成方法は、当該技術において知られている。
【００８７】
高度免疫物質を生成する方法は、他の潜在的に免疫原性の分子からＥｎｖタンパク質を精製する工程を含むことができる。例えば、Ｅｎｖタンパク質を、場合によりスクロース、パーコール、セシウムなどを使用して形成した勾配を使用する高及び低速遠心分離のような方法によって単離することができる。サイズ排除クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィーなどのようなクロマトグラフ法も有用である。電気泳動法（例えば、キャピラリー電気泳動）、濾過法（例えば、接線流限外濾過）、分割法（例えば、タンパク質沈殿）は、有用な方法の更なる例である。慢性感染細胞株を、ＨＩＶによる細胞、例えば６Ｄ５細胞（ＨＵＴ７８細胞株のサブクローン）の感染によって発生することができる。放射性免疫沈降分析を使用して、細胞株がＥｎｖを培地に分泌することを検査する。次にＥｎｖタンパク質を、Ｅｎｖタンパク質に対するマウスＭＡｂｓを使用するアフィニティークロマトグラフィーにより、血清無含有調整培地から精製することができる。
【００８８】
高度免疫物質の産生のために、Ｅｎｖタンパク質（精製されている又はされていないにかかわらず）は、典型的には注射により（例えば、ＩＭ、皮下、腹腔内又は静脈内経路を介して）動物に投与される。Ｅｎｖタンパク質をアジュバントと組み合わせて、動物により生成される免疫反応を増加することができる。
【００８９】
したがって、動物を、ＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメント及びアジュバントで免疫化することができる。一つの実施態様において、アジュバントは油中水型乳剤である。
【００９０】
当業者は、フロイント完全アジュバント、ミョウバン及びスクアレンのような多くの潜在的に有用なアジュバントを良く知っている。本発明の組成物に使用することができるアジュバントには、水中油型乳剤及び油中水型乳剤を含む本発明のアジュバントとして使用するのに適した油性乳剤組成物が含まれるが、これらに限定されず、完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）及び不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）を使用することもできる。好ましくは、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅブランドのアジュバントを使用することができる（ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ  ＩＳＡ  ５０Ｖ、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ  ＩＳＡ  ２０６及びＭＯＮＴＡＮＩＤＥ  ＩＭＳ  １３１２）。これらのアジュバントは、マンニドオレエート及び鉱油の油性アジュバント組成物又は可溶性免疫賦活剤と組み合わせた水性ナノ粒子である。
【００９１】
本発明の使用に適したアジュバントには、腸内細菌リポ多糖（ＬＰＳ）の誘導体、脂質Ａ誘導体、免疫賦活性オリゴヌクレオチド、並びにＡＤＰリボシル化毒素及びその無毒化誘導体のような細菌又は微生物誘導体が含まれる。
【００９２】
動物には、Ｅｎｖを数日間、数週間又は数か月にわたる間隔で投与することができる。免疫化レジームの終了時に、高度免疫物質（例えば、血液、乳汁又は初乳）を採取する。高度免疫物質における抗体は、上記に記載された方法のいずれかを含む任意の適切な方法により採取することができる。
【００９３】
一つの実施態様において、組成物は、初乳又は初乳抽出物からの抗体を含み、初乳は、ワクチン接種なしで得た初乳と比較して抗Ｅｎｖ抗体が豊富であることを更に特徴とする。
【００９４】
方法の一つの実施態様において、ポリクローナル抗体は、高度免疫物質から得られる。高度免疫物質は、動物が当該の抗原で攻撃を受けていない対応する物質と比較して豊富化されている。
【００９５】
高度免疫物質を生じるのに使用される動物は、ヒトを含む任意の適切な動物でありうる。しかし、ヒトの乳汁は潜在的に伝染性のヒト病原体を含有しうるので、方法の一つの形態は、抗体がヒト由来ではないことを規定する。いずれにしても、大量の乳汁を生じる動物が好ましい。この点において、有蹄類（特に雌ウシ）が高度免疫物質を生成するのに有用な動物である。
【００９６】
方法の一つの実施態様において、「高度免疫物質」は、抗体又はそのフラグメントが豊富であり、動物源から誘導される乳汁、特に初乳の乳汁（初乳）などのような高度免疫乳製品由来物質である。高度免疫乳製品物質は、好ましくは高度免疫初乳である。
【００９７】
別の実施態様において、高度免疫物質はトリの卵から誘導される。ＩｇＹとして知られている免疫グロブリンのサブタイプを、卵黄から容易に抽出することができる。典型的には、卵黄を最初に脱脂し、ＩｇＹを、スキムミルクに使用されるものと同一又は同様の方法により単離する。
【００９８】
本明細書において使用されるとき、用語「初乳」は、初乳の乳汁；加工して脂肪、壊死細胞片、ラクトース及びカゼインの１つ以上を部分的に又は完全に除去した初乳の乳汁のような加工された初乳の乳汁；並びに例えば凍結乾燥、噴霧乾燥又は当該技術において既知の他の乾燥方法により乾燥された初乳の乳汁又は加工された初乳の乳汁が含まれる。初乳の乳汁は、一般に、分娩後５日以内の雌ウシのような哺乳動物から取られる。好ましくは、哺乳類の初乳は、分娩後の最初の４日間で得たウシ初乳であり、より好ましくは分娩後の最初の２日間で得たウシ初乳であり、さらにより好ましくは分娩後の初日に得たウシ初乳であり、最も好ましくは分娩後に最初に採乳して得たウシ初乳である。
【００９９】
好ましくは、雌ウシから収集した初乳は、少なくとも４％の総タンパク質（重量％）、より好ましくは５％、より好ましくは少なくとも８％、より好ましくは少なくとも１０％を含む。
【０１００】
好ましくはＩｇＧと雌ウシから収集した初乳の総タンパク質との比は、少なくとも１０％、より好ましくは２０％である。
【０１０１】
高度免疫乳製品物質は、好ましくは、１キログラムあたり少なくとも３ｇの、Ｅｎｖに向けられたＩｇＧである産物又は等モル濃度の抗Ｅｎｖ抗体を含有する。例えば、高度免疫物質は、成分の乾燥重量に基づいて、高度免疫物質の１ｋｇあたり少なくとも５ｇ、少なくとも１０ｇ又は少なくとも１５ｇの抗Ｅｎｖ抗体を含有することができる。抗体濃度の範囲の上限は、用量、疾患の状態及び患者の健康のような要因に応じて決まる。高度免疫物質は、例えば、成分の乾燥重量に基づいて、高度免疫物質の１ｋｇあたり６０ｇ以下、５０ｇ以下又は４０ｇ以下のような８０ｇ以下の抗Ｅｎｖ抗体を含有することができる。
【０１０２】
方法の一つの実施態様において、ポリクローナル抗体が組成物として被験者に投与される。組成物は、一つの実施態様において、例えば免疫化雌ウシの高度免疫初乳の組成物又はその１つ以上の加工成分を従来の食物及び／又は薬学的に許容される賦形剤と混合することにより、投与前に、リガンドと混合された担体を含むことができる。非ワクチン接種動物の従来の乳製品物質と比べた豊富化された製品の比は、比較ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、例えば少なくとも１０のように少なくとも４でありうる。
【０１０３】
別の実施態様において、Ｅｎｖに特異的な一部又は全ての抗体は、初乳から抽出され、投与用の組成物の調製に使用される。
【０１０４】
一つの実施態様において、高度免疫物質は、クレードＡ、クレードＢ又はクレードＣのＨＩＶ−1菌株から誘導されたＥｎｖに結合する。好ましくは、高度免疫物質は、上記の少なくとも２つ、より好ましくはクレードの少なくとも３つに結合する。Ｅｎｖに結合することができる抗体から選択される物質における豊富化の程度は、標準的なＥＬＩＳＡにより判定すると、それぞれのＥｎｖ分子に関して対応する非ワクチン接種動物において見出されるレベルの少なくとも４倍、例えば少なくとも１０倍でありうる。
【０１０５】
一つの実施態様において、低分子量部分は、初乳又は初乳抽出物から実質的に除去される。実質的に除去されるとは、少なくとも７５％、好ましくは９０％の低分子量部分が除去されることを意味する。
【０１０６】
この実施例の好ましい例において、少なくとも７５％（例えば少なくとも９０％又は実質的に完全な除去）の、３０ｋＤａ未満の分子量の部分が、初乳又は初乳抽出物から除去される。好ましくは、60ｋＤａ未満の分子量部分が、初乳又は初乳抽出物から実質的に除去される。
【０１０７】
一つの実施態様において、高度免疫物質は、Ｅｎｖに結合する抗体及び抗体フラグメントから選択される免疫原性物質を含む。好ましくは、抗体又は抗体フラグメントは、ウシ由来のポリクローナル抗体又はポリクローナル抗体フラグメントである。
【０１０８】
組成物は、通常乳汁又は初乳に見出される成長因子分子を更に含有することができる。これらの因子は、組成物に含有された抗Ｅｎｖ抗体と相乗作用を生じることができる。例示的な生長因子には、ＴＧＦ−ベータ−１、ＴＧＦ−ベータ−２、ＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２、ＥＧＦ、ＦＧＦ及びＰＤＧＦが含まれる。
【０１０９】
組成物を局所投与用に処方することができ、特定の実施態様において、組成物は膣内又は直腸内投与用に処方される。組成物をゲル剤として処方することができる又は局所クリーム、軟膏、ローション若しくはフォーム製剤として処方することができる。
【０１１０】
本発明の局所用製剤を使用して、ヒトにおけるＨＩＶ感染を防止すること又は感染したヒトから別のヒトへのＨＩＶウイルスの伝染を抑制することができる。本発明の局所用製剤は、レトロウイルス、特にヒト免疫不全ウイルス、とりわけＨＩＶ−１及びＨＩＶ−２のようなウイルスの増殖又は複製を抑制することができる。局所用製剤は、ウイルス感染の危険性があるヒトの予防的処置に有用である。局所用製剤を使用して、避妊器具（例えば、コンドーム又は子宮内避妊器具）、医療装置、医療用品又は血液、血液製剤及び組織などの生物学的流体を含む医療用流体のような物体又は物質を処理して、ヒトのウイルス感染を防止又は抑制することもできる。そのような局所用製剤は、ウイルス感染、例えばＨＩＶの、ＨＩＶが世界的に伝染する主な方法である性行為による伝染のような伝染の防止にも有用である。ウイルス感染、例えばＨＩＶ感染の伝染を防止又は抑制又は遅延する本発明の方法は、本発明の局所用調合剤の抗ウイルス有効量による膣内、直腸内、陰茎又は他の局所治療を単独又は本明細書に記載されている別の抗ウイルス化合物と組み合わせて含む。
【０１１１】
好ましい組成物は幾つかの形態をとることができる。したがって、一つの実施態様において、組成物は、罹患皮膚又は上皮腔に塗布される、好ましくは体液と接触する危険性のある皮膚又は上皮表面の全体にわたって塗布されるクリーム剤、ローション剤、ゲル剤又はフォーム剤の形態である。膣内又は直腸内投与に適したそのような製剤は、活性成分に加えて、当該技術において適切であることが知られているような担体を含有する水性又は油性懸濁剤、液剤又は乳剤（液体製剤）として存在することができる。「単独」の潤滑剤（すなわち、コンドームに予め装着されていない潤滑剤）、ゲル剤及び同様の水性製剤が、当業者に既知の多様な理由（科学的及び経済的の両方）によって一般に好ましい。これらの製剤は、性行為によるＨＩＶの伝染から保護するためだけでなく、産道を通過する際の新生児の感染を防止するためにも有用である。したがって、膣内投与は、性交の前、性交の間及び出産の直前に行うことができる。
【０１１２】
抗ウイルス性潤滑剤を本明細書に開示されている目的で生殖器に塗布する一つの方法は、少量（茶さじ又は数ミリリットル）のゲル剤、クリーム剤、軟膏剤、乳剤又は同様の製剤を、プラスチック若しくは金属の管、ジャー若しくは同様の容器から又はそのような組成物の単回用量を含有する密閉プラスチック、金属若しくは他のパケットから取り出し、性交の直前に陰茎の表面全体に組成物を塗布することを伴う。代替的な配置方法には、（１）性交の少し前に膣又は直腸の内部の接触可能表面に組成物を塗布すること；及び（２）既に被覆されている、そうでなければ抗ウイルス性潤滑剤と接触するコンドーム、ダイアフラム又は同様の器具を陰茎又は膣の内部に配置することを含む。好ましい実施態様において、抗ウイルス性潤滑剤を生殖器の表面の全体に塗布するこれらの方法のいずれかは、潤滑剤を、性交の全体を通して生殖器及び上皮表面に被覆させ、接触させたままにする。
【０１１３】
別の実施態様において、本発明は、肛門への局所用製剤の局所投与を伴う。肛門に投与される組成物は、適切にはフォーム剤又はゲル剤などであり、膣塗布に関して上記に記載されたものである。肛門塗布の場合では、組成物を肛門の全体にわたって実質的に均一に分配するアプリケーターを使用することが好ましいことがある。例えば、適切なアプリケーターは、長さが２．５〜２５ｃｍ、好ましくは５〜１０ｃｍの管であり、その長さに沿って穴が規則的に配列されている。
【０１１４】
組成物が水溶性膣用クリーム剤又はゲル剤である場合、適切には０．１〜４グラム、好ましくは約０．５〜２グラムが塗布される。組成物が膣用噴霧フォーム剤である場合、適切には０．１〜２グラム、好ましくは約０．５〜１グラムの噴霧フォーム剤が塗布される。組成物が肛門用クリーム剤又はゲル剤である場合、適切には０．１〜４グラム、好ましくは約０．５〜２グラムのクリーム剤又はゲル剤が塗布される。組成物が肛門用噴霧フォーム剤である場合、適切には０．１〜２グラム、好ましくは約０．５〜１グラムの噴霧フォーム剤が塗布される。
【０１１５】
膣用製剤としては、活性成分を殺精子剤と共に使用することができ、コンドーム、ダイアフラム、スポンジ又は他の避妊器具によって用いることができる。適切な殺精子剤の例には、ノニルフェノキシポリオキシエチレングリコール（ノノキシノール9）、塩化ベンゼトニウム及びクロリンダノールが含まれる。適切には、組成物のｐＨは４．５〜８．５である。膣用組成物は、好ましくは４．５〜６、最も好ましくは約５のｐＨを有する。
【０１１６】
膣用製剤には、坐剤（例えば、ゲル被覆クリーム剤）、錠剤及びフィルム剤も含まれる。坐剤は、当該技術において周知の方法を使用して、アプリケーターを挿入することにより投与できる。
【０１１７】
典型的な口腔製剤は、口腔を介して投与された場合に安全である成分を含むクリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、錠剤又はフィルム剤である。口腔製剤は、味覚マスキング又は風味剤を含むこともできる。
【０１１８】
本発明の組成物は、また、持効性組成物の形態でありうる。この実施態様において、組成物は、上記に記載された膣内又は直腸内濃度をもたらす速度で活性化合物を放出する組成物に組み込まれる。持効性組成物は、Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｄ．Ｈ．Ｌｅｗ編，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８１；米国特許第５，１８５，１５５号；同第５，２４８，７００号；同第４，０１１，３１２号；同第３，８８７，６９９号；同第５，１４３，７３１号；同第３，６４０，７４１号；同第４，８９５，７２４号；同第４，７９５，６４２号；Ｂｏｄｍｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第７８巻（１９８９）；Ａｍｉｅｓ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ，第７７巻（１９５９）；及びＰｆｉｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，第３巻，２２９〜２３３頁（１９８６）に開示されており、これらは全て参照として本明細書に組み込まれる。
【０１１９】
本発明の組成物は、膣又は肛門性交のような一部の事象に反応して組成物を放出する形態でもありうる。例えば組成物は、性交の機械的作用で破裂する小胞又はリポソームに抗ｅｎｔ（anti_ent）抗体を含有することができる。リポソームを含む組成物は、米国特許第５，２３１，１１２号；Ｄｅａｍｅｒ  ａｎｄ  Ｕｓｔｅｒ，“Ｌｉｐｏｓｏｍｅ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ”，ｉｎ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ，２７〜５１頁（１９８３）；Ｓｅｓｓａ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，第２４５巻，３２９５〜３３００頁（１９７０）；Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，第３４巻，４７３〜４７４頁（１９８２）；及びＴｏｐｉｃｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｄ．Ｄ．Ｂｒｅｉｍｅｒ  ａｎｄ  Ｐ．Ｓｐｅｉｓｅｒ編，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，３４５〜３５８頁（１９８５）に記載されており、これらは参照として本明細書に組み込まれる。
【０１２０】
本発明の組成物は、膣リング器具、子宮内器具（ＩＵＤ）、膣内ダイアフラム、膣内スポンジ、ペッサリー、コンドームなどのような避妊器具又は物品と関連しうることも理解されるべきである。ＩＵＤ又はダイアフラムの場合では、持効性及び／又は機械的放出性の組成物が好ましく、コンドームの場合では、機械的放出性の組成物が好ましい。
【０１２１】
抗Ｅｎｖ抗体の徐放に適した膣リング薬剤送達系は、米国特許第５，９８９，５８１号に開示されており、参照として本明細書に組み込まれる。米国特許第５，９８９，５８１号に開示されているように、膣リングは避妊のために２つの活性物質を送達する。開示されている薬剤送達系は、熱可塑性ポリマーコアに溶解した薬剤及びコアを覆う熱可塑性皮膚を含む少なくとも１つの区画を含む。コアと皮膚の両方に好ましい熱可塑性ポリマーは、エチレン−酢酸ビニルコポリマーである。当業者に理解されるように、本発明によると、開示されている送達系は、ＨＩＶの感染又は伝染を防止、抑制又は遅延するのに有用な抗Ｅｎｖ抗体を含有する。特定の実施態様において、前記膣リング器具は、１つ以上の追加の薬剤、例えばステロイド性プロゲストゲン化合物及び／又はステロイド性エストロゲン化合物のような避妊剤を含有することもできる。なお他の実施態様において、抗Ｅｎｖ抗体を含有する膣リング系は、また、膣上皮を介するＨＩＶの感染又は伝染の防止を強化するために、Ｏｖｅｓｔｉｎ（商標）のような局所用エストリオールを含有することができる又はそれと組み合わせて使用することができる。
【０１２２】
別の実施態様において、本発明は、ＨＩＶ感染の防止又は遅延に有用な新規物品を提供する。特に本発明の物品は、適切な身体部分又は適切な体腔に設置されたとき抗Ｅｎｖ抗体を放出するものである。したがって、本発明の物品は、上記に記載された又は膣リング器具又はＩＬＩＤでありうる。適切なＩＬＩＤは、米国特許第３，８８８，９７５号及び同第４，２８３，３２５号に開示されており、これらは参照として本明細書に組み込まれる。
【０１２３】
本発明の物品は、時間制御的に、抗Ｅｎｖ抗体を含み、放出する膣内スポンジでありうる。膣内スポンジは、米国特許第３，９１６，８９８号及び同第４，３６０，０１３号に開示されており、これらは参照として本明細書に組み込まれる。本発明の物品は、抗Ｅｎｖ抗体を放出する膣内ディスペンサー（vaginal dispenser）でもありうる。膣内ディスペンサーは、米国特許第４，９６１，９３１号に開示されており、これは参照として本明細書に組み込まれる。
【０１２４】
一つの実施態様において、組成物は、コンドームの危険性低減有効性を増強するため及び使用者に最大限の保護を提供するために、コンドームと共に使用される。組成物を、製造の過程でコンドームに被覆し、パッケージ１つあたり１つのコンドームを含有する従来の防水プラスチック又はホイルパッケージに封入することができる又は使用直前に使用者によりコンドームの外側又は内側のいずれかに手作業で塗布することができる。
【０１２５】
本明細書で使用されるとき、「コンドーム」は、性交の際に防水性の物理的な障壁を男性と女性の生殖器の間に提供するために使用され、性交の後に取り外される障壁器具を意味する。この用語は、陰茎を覆う従来のコンドームを含み、性交の前に膣腔に挿入される、いわゆる「女性用コンドーム」も含む。用語「コンドーム」は、膣腔内部の上皮膜の一部しか覆わないダイアフラム、子宮頸キャップ又は他の障壁器具を含まない。好ましくは、コンドームは、ラテックス又はポリウレタンのような合成プラスチック材料から作製されるべきであり、それは、これらがウイルスに対して高度な保護を提供するからである。
【０１２６】
別の実施態様において、組成物は、使用者に最大限の保護を提供するために、媒介のために、手袋のような可能な他の表面と共に使用される。組成物を、製造の過程で手袋に被覆し、パッケージ１つあたり１対の手袋を含有する従来の防水プラスチック又はホイルパッケージに封入することができる又は使用直前に使用者により手袋の外側又は内側のいずれかに手作業で塗布することができる。
【０１２７】
別の実施態様において、組成物は、膣内用丸剤、直腸内用丸剤又は坐剤の形態である。坐剤又は丸剤は、坐剤又は丸剤が溶解又は腐食して膣又は直腸壁を抗ＨＩＶ剤の予防層で被覆することを可能にする方法で膣又は直腸腔に挿入されるべきである。
【０１２８】
なお別の実施態様において、組成物は膣内器具から放出により局所塗布される。膣リング、膣内スポンジ、ダイアフラム、子宮頸キャップ、女性用コンドームなどのような器具を容易に適合して、挿入の後に組成物を膣腔に放出することができる。
【０１２９】
特定の実施態様において、組成物は、薬学的に許容される賦形剤、潤滑剤又は抗ウイルス剤を更に含むことができる。
【０１３０】
本発明の方法に使用される組成物は、ＨＩＶ感染を防止する別の作用物質、並びに妊娠及び他の性行為感染症から個人を保護する作用物質のような他の活性剤を含むこともできる。したがって、別の実施態様において、本発明に使用される組成物は、第２の抗ＨＩＶ剤、ＨＩＶ以外のウイルス感染に対する殺ウイルス効果剤及び／又は殺精子剤を更に含む。
【０１３１】
一つの特定の実施態様において、組成物は、広く使用されている殺精子界面活性剤であるノノキシノールを含有する。得られる組成物は、「二機能性」組成物と考慮することができ、それは、これが比較的不活性な担体液において、２つの異なる所望の機能を提供する２つの活性剤を有するからであり、ノノキシノールは殺精子避妊剤を提供し、ポリクローナル抗体又はそのフラグメントは、抗ウイルス特性を提供する。ノノキシノールは少なくとも一部の使用者にあるレベルの刺激を引き起こす可能性があり、これは残念なことであるが、精子細胞及び他の哺乳類の細胞の周囲の脂質二重層膜を攻撃及び破壊する、ノノキシノール及びオクトキシノールのような殺精子界面活性剤の周知の副作用である。
【０１３２】
本発明に使用される組成物は、皮膚及び上皮組織の所望の領域への組成物の塗布を促進する及び性交の際に摩擦を低減する潤滑剤を含有することもできる。丸剤又は坐剤の場合では、潤滑剤を投薬の外側に塗布して挿入を促進することができる。
【０１３３】
なお別の実施態様において、本発明は、（ａ）膣腔に挿入される障壁構造及び（ｂ）本発明のポリクローナル抗体を含む組成物を含む、性行為によるＨＩＶの伝染を抑制する器具を提供する。上記に記述されたように、障壁構造として作用する及び抗ＨＩＶ剤を適用するように適合できる器具には、膣内スポンジ、ダイアフラム、子宮頸キャップ又はコンドーム（男性用又は女性用）が含まれる。
【０１３４】
本発明のクリーム剤又は軟膏剤の実施態様において、局所用製剤は１つ以上の潤滑剤を含む。本発明のゲル剤及びフォーム剤は、場合により１つ以上の潤滑剤を含むことができる。
【０１３５】
有用な潤滑剤の非限定例には、セチルエステルロウ、硬化植物油、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸メチル、鉱油、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ラウリル硫酸ナトリウム、白ロウ又は上記の２つ以上の混合物が含まれる。
【０１３６】
局所用製剤における潤滑剤の量は、約０〜約９５重量％の範囲でありうる。典型的なクリーム及び軟膏製剤は、０．１〜９５重量％の潤滑剤を含む。
【０１３７】
局所用製剤は、１つ以上のアジュバントを含むことができ、ここでアジュバントは抗菌剤、酸化防止剤、湿潤剤若しくは乳化剤又はこれらの２つ以上の混合物である。本発明のゲル剤及びフォーム剤は、１つ以上の抗菌剤を含むことができ、場合により１つ以上の酸化防止剤、湿潤剤及び乳化剤を含むことができる。
【０１３８】
有用な抗菌剤の非限定例は、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、プロピルパラベン、メチルパラベン又はこれらの２つ以上の混合物である。
【０１３９】
局所用製剤における抗菌剤の量は、局所用製剤の総重量に基づいて、約０．０１〜約１０重量％、幾つかの実施態様では約０．２〜約１０重量％の範囲でありうる。
【０１４０】
有用な酸化防止剤の非限定例には、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、エデト酸二ナトリウム又はこれらの２つ以上の混合物が含まれる。
【０１４１】
局所用製剤における酸化防止剤の量は、局所用製剤の総重量に基づいて、約０．０１〜約1重量％、幾つかの実施態様では約０．０１〜約０．１重量％の範囲でありうる。
【０１４２】
有用な湿潤剤の非限定例には、エチレングリコール、グリセリン、ソルビトール又はこれらの２つ以上の混合物が含まれる。
【０１４３】
局所用製剤における湿潤剤の量は、局所用製剤の総重量に基づいて、約１〜約３０重量％、幾つかの実施態様では約２〜約２０重量％の範囲でありうる。
【０１４４】
有用な乳化剤の非限定例には、アクリル酸ポリマー（例えば、カルボマーブランド増粘剤、例はＶｏｖｅｏｎ，ｉｎｃ．により製造されたＣａｒｂｏｍｅｒ  ９３４Ｐ）、ポリオキシエチレン−１０−ステアリルエーテル、ポリオキシエチレン−２０−ステアリルエーテル、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、コレステロール、ステアリン酸ジグリコール、グリセリルモノステアレート、グリセリルステアレート、ポリグリセリル−３−オレエート、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ラノリン、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、メチルセルロース、ポリオキシエチレンステアレート、ポリソルベート、プロピレングリコールモノステアレート、ソルビタンエステル、ステアリン酸又はこれらの２つ以上の混合物が含まれる。
【０１４５】
局所用製剤における乳化剤の量は、局所用製剤の総重量に基づいて、約１〜約４０重量％、幾つかの実施態様では約５〜約３０重量％の範囲でありうる。
【０１４６】
本発明のゲル製剤は、１つ以上のゲル化剤を含む。有用なゲル化剤の非限定例には、スクロースのアリルエーテル（例えば、カルボマーブランド増粘剤）のような架橋で架橋されたアクリル酸ポリマーを含むカルボン酸ポリマー、セトステアリルアルコール、ヒドロキシメチルセルロース、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン又はこれらの２つ以上の混合物が含まれる。
【０１４７】
局所用ゲル製剤におけるゲル化剤の量は、局所用製剤の総重量に基づいて、約０．１〜約１０重量％、幾つかの実施態様では約０．１〜約１重量％の範囲でありうる。
【０１４８】
本発明のゲル製剤は、１つの以上のアルカリ化剤、例えば水酸化ナトリウムを、ゲル化の活性剤として約２重量％未満の量で更に含むことができる。
【０１４９】
製剤は、１つ以上の当該技術に周知の追加の賦形剤、例えば水及びコロイド状二酸化ケイ素のような増粘剤を含有することができる。
【０１５０】
本発明の製剤を、ＨＩＶの感染を治療若しくは防止する又はＨＩＶの伝染を抑制するのに有用な１つ以上の他の抗ウイルス剤又は他の作用物質と組み合わせ、薬学的に許容される担体と組み合わせて投与することができる。方法の一つの形態において、被験者は抗レトロウイルス剤で治療されている。
【０１５１】
幾つかの実施態様において、方法は、抗レトロウイルス剤と、特に、ジドブジン（ＡＺＴ）、アバカビル、エムトリシタビン（ＦＴＣ）、ラミブジン（３ＴＣ）、ジダノシン（ｄｄｌ）、スタブジン（ｄ４Ｔ）、ザルシタビン（ｄｄＣ）、ネビラピン、エファビレンツ、デラビルジン、テノホビル、エンフビルチド（Ｔ２０）、マラビロク（ＣＣＲ５）、ロピナビル、アタザナビル、ホスアンプレナビル（Fosamprenvir）、アンプレナビル、サキナビル、インジナビル、ネルフィナビル、ラルテグラビル及びエルビテグラビル（Elvitegravir）のようなＨＩＶ感染の治療に使用される作用物質との同時投与を含む。
【０１５２】
抗ＨＩＶ−１療法に有用である１つ以上、好ましくは１〜４つの抗ウイルス剤を、少なくとも１つ（すなわち、１〜４つ、好ましくは１つ）の抗Ｅｎｖ抗体と組み合わせて本発明の製剤に使用することができる。単数若しくは複数の抗ウイルス剤を、抗Ｅｎｖ抗体と単回投与形態に組み合わせることができる又は抗Ｅｎｖ抗体及び単数若しくは複数の抗ウイルス剤を、別々の投与形態で同時に若しくは連続的に投与することができる。例えば、ＨＩＶ感染性的パートナーが全身的な抗ウイルス療法による治療を受けている間に、抗Ｅｎｖ抗体製剤を膣リング器具に使用して又はコンドームの外側に被覆して、非感染性的パートナーへのＨＩＶの伝染を防止することができる。本発明の抗Ｅｎｖ抗体製剤と組み合わせた使用が考慮される抗ウイルス剤は、ヌクレオシド及びヌクレオチドリバーストランスクリプターゼインヒビター、非ヌクレオシドリバーストランスクリプターゼインヒビター、プロテアーゼインヒビター、並びにこれらの分類に入らない下記に提示されている他の抗ウイルス薬を含む。特に、ＨＡＡＲＴとして知られている組み合わせは、本発明の抗Ｅｎｖ抗体製剤と組み合わせた使用が考慮される。
【０１５３】
本明細書で使用されるとき、用語「ヌクレオシド及びヌクレオシドリバーストランスクリプターゼ」（「ＮＲＴＩ」）は、ウイルスゲノムＨＩＶ−１  ＲＮＡの、プロウイルスＨＩＶ−１  ＤＮＡへの変換を触媒する酵素である、ＨＩＶ−１リバーストランスクリプターゼの活性を阻害する、ヌクレオシド及びヌクレオチド及びそれらの類似体を意味する。
【０１５４】
典型的に適したＮＲＴＩには、Ｇｌａｘｏ−Ｗｅｌｌｃｏｍｅ  Ｉｎｃ．，Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ，ＮＣ２７７０９から商標名ＲＥＴＲＯＶＩＲで入手能なジドブジン（ＡＺＴ）；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏ．，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ０８５４３から商標名ＶＩＤＥＸで入手可能なジダノシン（ｄｄｌ）；Ｒｏｃｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ０７１１０から商標名ＨＭＤで入手可能なザルシタビン（ｄｄＣ）；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏ．，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ０８５４３から商標名ＺＥＲＩＴで入手可能なスタブジン（ｄ４Ｔ）；Ｇｌａｘｏ−Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ，ＮＣ２７７０９から商標名ＥＰＩＶＩＲで入手可能なラミブジン（３ＴＣ）；ＷＯ９６／３００２５に開示され、Ｇｌａｘｏ−Ｗｅｌｌｃｏｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ，ＮＣ２７７０９から商標名ＺＩＡＧＥＮで入手可能なアバカビル（１５９２Ｕ８９）；Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ９４４０４から商標名ＰＲＥＶＯＮで入手可能なアデフォビルジピボキシル〔ビス（ＰＯＭ）−ＰＭＥＡ〕；ＥＰ−０３５８１５４及びＥＰ−０７３６５３３に開示され、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ０８５４３により開発中のヌクレオシドリバーストランスクリプターゼインヒビターであるロブカビル（lobucavir）（ＢＭＳ−１８０１９４）；Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａ，Ｌａｖａｌ，Ｑｕｅｂｅｃ  Ｈ７Ｖ，４Ａ７，Ｃａｎａｄａにより開発中のリバーストランスクリプターゼインヒビターであるＢＣＨ−１０６５２（ＢＣＨ１０６１８とＢＣＨ−１０６１９のラセミ混合物の形態）；Ｅｍｏｒｙ大学の米国特許第５，８１４，６３９号によりＥｍｏｒｙ大学からライセンス供与され、Ｇｉｌｅａｄから商標名Ｅｍｔｒｉｖｉａ（商標）で入手可能なエミトリシタビン（emitricitabine）〔（−）−ＦＴＣ〕；Ｙａｌｅ大学からＶｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｎｅｗ  Ｈａｖｅｎ  ＣＴ０６５１１にライセンス供与されたベータ−Ｌ−ＦＤ４（ベータ−Ｌ−Ｄ４Ｃとも呼ばれ、ベータ−Ｌ−２’，３’−ジクレオキシ−５−フルオロ−シチデンと命名されている）；ＥＰ０６５６７７８に開示され、Ｅｍｏｒｙ大学及びＧｅｏｒｇｉａ大学からＴｒｉａｎｇｌｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｄｕｒｈａｍ，ＮＣ２７７０７にライセンス供与された（−）−ベータ−Ｄ−２，６，−ジアミノ−プリンジオキソランである、プリンヌクレオシドのＤＡＰＤ；並びにＮＩＨにより発見され、Ｕ．Ｓ．Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｉｎｃ．，Ｗｅｓｔ  Ｃｏｎｓｈｏｈｏｋｅｎ，ＰＡ１９４２８により開発中の酸性安定プリン系リバーストランスクリプターゼインヒビターである、９−（２，３−ジデオキシ−２−フルオロ−ｂ−Ｄ−テロ−ペントフラノシル）アデニンのロデノシン（lodenosine）（ＦｄｄＡ）が含まれる。本明細書で使用されるとき、用語「非ヌクレオシドリバーストランスクリプターゼインヒビター」（「ＮＮＲＴＩ  １１Ｓ」）は、ＨＩＶ−１リバーストランスクリプターゼの活性を阻害する非ヌクレオシドを意味する。
【０１５５】
本明細書で使用されるとき、用語「非ヌクレオシドリバーストランスクリプターゼインヒビター」（「ＮＮＲＴＩ  １１Ｓ」）は、ＨＩＶ−１リバーストランスクリプターゼの活性を阻害する非ヌクレオシドを意味する。
【０１５６】
典型的に適したＮＮＲＴＩには、Ｒｏｘａｎｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，ＯＨ４３２１６の製造会社であるＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍから商標名ＶＩＲＡＭＵＮＥで入手可能なネビラピン（ＢＩ−ＲＧ−５８７）；Ｐｈａｒｍａｃｉａ  ＆  Ｕｐｊｏｈｎ  Ｃｏ．，Ｂｒｉｄｇｅｗａｔｅｒ  ＮＪ０８８０７から商標名ＲＥＳＣＲＩＰＴＯＲで入手可能なデラビルジン（ＢＨＡＰ，Ｕ−９０１５２）；ＷＯ９４／０３４４０に開示され、米国ではＢｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ及びヨーロッパではＭｅｒｃｋから商標名ＳＵＳＴＩＶＡで入手可能なベンゾオキサジン−２−オンであるエファビレンツ（ＤＭＰ−２６６）；Ｐｈａｒｍａｃｉａ  ａｎｄ  Ｕｐｊｏｈｎ，Ｂｒｉｄｇｅｗａｔｅｒ  ＮＪ０８８０７により開発中のフロピリジン−チオ−ピリミドであるＰＮＵ−１４２７２１；ＡＧ−１５４９（旧Ｓｈｉｏｎｏｇｉ  ＃Ｓ−１１５３）；ＷＯ９６／１００１９に開示され、Ａｇｏｕｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＬａＪｏｌｌａ  ＣＡ９２０３７−１０２０により臨床開発中の５−（３，５−ジクロロフェニル）−チオ−４−イソプロピル−１−（４−ピリジル）メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルカーボネート；Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．により発見され、Ｔｒｉａｎｇｌｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｄｕｒｈａｍ，ＮＣ２７７０７により開発中のＭＫＣ−４４２（１−（エトキシ−メチル）−５−（１−メチルエチル）−６−（フェニルメチル）−（２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン）；ＮＩＨの米国特許第５，４８９，６９７号に開示され、（＋）−カラノイド（calanolide）Ａを経口投与製品としてＶｉｔａ−Ｉｎｖｅｓｔと共同開発しているＭｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｒｅｓｅａｒｃｈにライセンス供与されたクマリン誘導体である（＋）−カラノイドＡ（ＮＳＣ−６７５４５１）及びＢ；並びにＴｉｂｏｔｅｃにより市販されているエトラビリン（ＴＭＣ−１２５，Ｉｎｔｅｌｅｎｃｅ）が含まれる。本明細書で使用されるとき、用語「プロテアーゼインヒビター」（「ＰＩ」）は、ウイルスポリタンパク質前駆物質（例えば、ウイルスＧＡＧ及びＧＡＧ  Ｐｏｌポリタンパク質）を、感染性ＨＩＶ−１で見出される個別の機能性タンパク質にタンパク質分解的切断することに必要な酵素である、ＨＩＶ−１プロテアーゼのインヒビターを意味する。ＨＩＶプロテアーゼインヒビターには、ペプチド模倣構造、高分子量（7600ダルトン）及び実質的なペプチド特性を有する化合物、例えば、ＣＲＩＸＩＶＡＮ（Ｍｅｒｃｋから入手可能）、並びに非ペプチドプロテアーゼインヒビター、例えば、ＶＩＲＡＣＥＰＴ（Ａｇｏｕｒｏｎから入手可能）が含まれる。
【０１５７】
典型的に適したＰＩには、Ｒｏｃｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ０７１１０−１１９９から硬質ゲルカプセル剤として商標名ＩＮＶＩＲＡＳＥ及び軟質ゲルカプセル剤として商標名ＦＯＲＴＯＶＡＳＥで入手可能なサキナビル（Ｒｏ３１−８９５９）；Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ａｂｂｏｔｔ  Ｐａｒｋ，ＩＬ６００６４から商標名ＮＯＲＶＩＲで入手可能なリトナビル（ＡＢＴ−５３８）；Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｗｅｓｔ  Ｐｏｉｎｔ，ＰＡ１９４８６−０００４から商標名ＣＲＩＸＩＶＡＮで入手可能なインジナビル（ＭＫ−６３９）；Ａｇｏｕｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＬａＪｏｌｌａ  ＣＡ９２０３７−１０２０から商標名ＶＩＲＡＣＥＰＴで入手可能なネルフナビル（nelfnavir）（ＡＧ−１３４３）；Ｖｅｒｔｅｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ０２１３９−４２１１により開発中であり、Ｇｌａｘｏ−Ｗｅｌｌｃｏｍｅ，Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ，ＮＣから利用拡大プログラムにより入手可能な非ペプチドプロテアーゼインヒビターである商標名ＡＧＥＮＥＲＡＳＥのアンプレナビル（１４１Ｗ９４）；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ０８５４３により入手可能な（Ｎｏｖａｒｔｉｓ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ（ＣＧＰ−６１７５５）により最初に発見された）ラシナビル（lasinavir）（ＢＭＳ−２３４４７５）；Ｄｕｐｏｎｔのより発見され、Ｔｒｉａｎｇｌｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓにより開発中の環状尿素であるＤＭＰ−４５０；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ０８５４３により第二世代ＨＩＶ−１  ＰＩとして開発中のアザペプチドであるＢＭＳ−２３２２６２３；Ａｂｂｏｔｔ，Ａｂｂｏｔｔ  Ｐａｒｋ，ＩＬ６００６４により開発中のＡＢＴ−３７８；Ｓｈｉｏｎｏｇｉ（Ｓｈｉｏｎｏｇｉ  ＃Ｓ−１１５３）により発見され、Ａｇｏｕｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＬａＪｏｌｌａ  ＣＡ９２０３７−１０２０により開発中の経口活性イミダゾールカルバメートであるＡＧ−１５４９；アタザナビル；チプラナビル；並びにダルナビルが含まれる。
【０１５８】
他の抗ウイルス剤には、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト、エンフビルチド、ヒドロキシ尿素、リバビリン、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ペンタフシド及びＹｉｓｓｕｍ  Ｐｒｏｊｅｃｔ  Ｎｏ．１１６０７が含まれる。Ｔ細胞の活性化に関与する酵素であるリボヌクレオシド三リン酸レダクターゼインヒビターのヒドロキシ尿素（Ｄｒｏｘｉａ）は、ＮＣＩにより発見され、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂにより開発中であり、前臨床試験では、ジダノシンの活性に相乗効果を有することが示され、スタブジンと共に研究されてきた。ＩＬ−２は、ＡｊｉｎｏｍｏｔｏのＥＰ−０１４２２６８、ＴａｋｅｄａのＥＰ−０１７６２９９、Ｃｈｉｒｏｎの米国特許第ＲＥ３３，６５３号、同第４，５３０，７８７号、同第４，５６９，７９０号、同第４，６０４，３７７号、同第４，７４８，２３４号、同第４，７５２，５８５号及び同第４，９４９，３１４号に開示されており、再構成され、水で希釈される、静脈注入又は皮下投与用の凍結乾燥粉末として、Ｃｈｉｒｏｎ  Ｃｏｒｐ．，Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ，ＣＡ９４６０８−２９９７から商標名ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（アルデスロイキン）で入手可能であり、約１〜約２千万ＩＬＪ／日の用量では皮下が好ましく、約１．５千万ＩＵ／日の用量では、皮下がより好ましい。ＩＬ−１２は、ＷＯ９６／２５１７１に開示され、Ｒｏｃｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ０７１１０−１１９９及びＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｈｏｍｅ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＮＪ０７９４０から入手可能であり、約０．５マイクログラム／ｋｇ／日から約１０マイクログラム／ｋｇ／日の用量では皮下が好ましい。３６アミノ酸合成ペプチドであるエンフビルチド（ＤＰ−１７８，Ｔ−２０）は、米国特許第５，４６４，９３３号に開示され、Ｄｕｋｅ大学から、Ｄｕｋｅ大学及びＲｏｃｈｅと協同でエンフビルチドを開発したＴｒｉｍｅｒｉｓにライセンス供与され、エンフビルチドは、標的膜へのＨＩＶ−１の融合を阻害するように作用する。エンフビルチド（３〜１００ｍｇ／日）は、連続的皮下注入として又はエファビレンツ及び２つのＰＩと一緒にした注射として、三種併用療法に治療抵抗性があるＨＩＶ−１陽性の患者に与えられ、１００ｍｇ／日の使用が好ましい。ＨＩＶ−１  Ｖｉｆタンパク質に基づいた合成タンパク質であるＹｉｓｓｕｍ  Ｐｒｏｊｅｃｔ  Ｎｏ．１１６０７は、Ｙｉｓｓｕｍ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｃｏ．，Ｊｅｒｕｓａｌｅｍ  ９１０４２，Ｉｓｒａｅｌにより前臨床開発中である。１−β−Ｄ−リボフラノシル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−カルボキサミドであるリバビリンは、ＩＣＮ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｃｏｓｔａ  Ｍｅｓａ，ＣＡから入手可能であり、その製造及び処方は、米国特許第４，２１１，７７１号に記載されており、インテグラーゼインヒビターのラルテグラビルは、商標名Ｉｓｅｎｔｒｅｓｓ（商標）でＭｅｒｃｋから入手可能であり、インテグラーゼインヒビターであるエルビテグラビル（elvitegravir）は、Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓにより開発中であり、ＨＩＶ−１Ｇａｇ成熟インヒビターのベリビマト（berivimat）は、Ｐａｎａｃｏｓ  Ｐｈａ���ｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓにより開発中（第Ｉｉｂ相）である。
【０１５９】
本明細書で使用されるとき、用語「抗ＨＩＶ−１治療」は、ヒトにおける、単独療法又は多剤併用療法、特にＨＡＡＲＴ三種及び四種併用療法の一部として、ＨＩＶ−１感染を治療するのに有用であることが見出されているあらゆる抗ＨＩＶ−１薬剤を意味する。典型的に適した既知の抗ＨＩＶ−１療法には、（ｉ）二種のＮＲＴＩ、一種のＰＩ、二番目のＰＩ及び一種のＮＮＲＴＩから選択される少なくとも三種の抗ＨＩＶ−１薬剤；並びに（ｉｉ）ＮＮＲＴＩ及びＰＩから選択される少なくとも二種の抗ＨＩＶ−１薬剤のような多剤併用療法が含まれるが、これらに限定されない。典型的に適したＨＡＡＲＴ多剤併用療法には、（ａ）二種のＮＲＴＩ及び一種のＰＩ又は（ｂ）二種のＮＲＴＩ及び一種のＮＮＲＴＩのような三種併用療法；並びに（ｃ）二種のＮＲＴＩ、一種のＰＩ及び二番目のＰＩ又は一種のＮＮＲＴＩのような四種併用療法が含まれる。未処置の患者の治療では、抗ＨＩＶ−1治療を三種併用療法で始めることが好ましく、二種のＮＲＴＩと一種のＮＮＲＴＩの使用又はＮＮＲＴＩに対して不耐性である場合、二種のＮＲＴＩと一種のＰＩの使用が好ましい。服薬遵守が必須である。ＣＤ４+及びＨＩＶ−１−ＲＮＡ血漿レベルを３〜６か月毎にモニターするべきである。ウイルス量が横ばい状態になったら、四番目の薬剤、例えば一種のＰＩ、一種のＮＮＲＴＩ又はインテグラーゼインヒビターを加えることができる。
【０１６０】
本発明は、ＨＩＶ伝染の治療及び／又は予防のための薬剤の製造における本発明の組成物の使用も提供する。
【０１６１】
本発明は、動物をＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントで免疫化すること及び免疫化された動物から高度免疫初乳を得ることを含む、ＨＩＶの伝染を抑制する組成物を調製する方法も提供する。
【０１６２】
本発明は、動物をＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントで免疫化すること及び免疫化された動物から高度免疫乳汁を得ることを含む方法により調製された、ＨＩＶの伝染を抑制する組成物も提供する。
【０１６３】
本発明は、ＨＩＶの伝染を抑制する方法であって、
雌ウシを免疫化して高度免疫初乳又は高度免疫乳汁を形成すること；及び
高度免疫初乳又は高度免疫乳汁を被験者に投与することを含み、ここで雌ウシを免疫化して高度免疫初乳又は高度免疫乳汁を産生する工程が、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントによるワクチン接種を含む方法も提供される。Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントは、任意のＨＩＶ  Ｅｎｖタンパク質でありうるが、好ましくは、Ｅｎｖタンパク質はｇｐ140である。
【０１６４】
また提供されるものは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントに結合することができるポリクローナル抗体又はそのフラグメントを被験者に投与することを含む、ＨＩＶの伝染を抑制する方法である。Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントは、任意のＨＩＶ  Ｅｎｖタンパク質でありうるが、好ましくは、Ｅｎｖタンパク質はｇｐ140である。
【０１６５】
一つの実施態様において、Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントはｇｐ140オリゴマーである。オリゴマーは、ｇｐ140三量体、二量体又は単量体を含むことができる。オリゴマーを、例えばレンチルレクチンアフィニティークロマトグラフィー及びゲル濾過により形質導入ＨｅＬａ及び293細胞上澄みから精製することができる。Ｅｎｖタンパク質又はそのフラグメントは、ＨＩＶクレードＡ、クレードＢ又はクレードＣ菌株のウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントでありうる。
【０１６６】
一つの実施態様において、ポリクローナル抗体又はそのフラグメントは、ＨＩＶの異種クレード又はＨＩＶの異種菌株からのＥｎｖタンパク質に結合することができる。
【０１６７】
抗体又はそのフラグメント又はその機能的同等物は、動物をＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメントで免疫化することにより産生することができる。動物を、ｇｐ１４０、組み換えｇｐ１４０又はオリゴマーｇｐ１４０で免疫化することができる。組み換えｇｐ140はビリオン培養から誘導することができない。動物を、ＨＩＶウイルスエンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質又はそのフラグメント及びアジュバントで免疫化することができる。一つの実施態様において、アジュバントは油中水型乳剤である。
【０１６８】
抗体又はそのフラグメント又はその機能的同等物は、鳥類の卵に存在しうる若しくはそれから得ることができるか又は動物の高度免疫初乳若しくは高度免疫乳汁に存在しうる若しくはそれから得ることができる。動物は雌ウシでありうる。
【０１６９】
組成物を局所投与用に処方することができ、特定の実施態様において、組成物は膣内又は直腸内投与用に処方される。組成物をゲル剤として処方することができる又は局所クリーム、軟膏、ローション若しくはフォーム製剤として処方することができる。
【０１７０】
方法の一つの実施態様において、リガンドは、抗体又はそのフラグメント若しくは誘導体である。抗体又はそのフラグメント若しくは誘導体は、ポリクローナル免疫グロブリン又はキメラ抗体又は免疫活性フラグメントを提示するデンドリマー又はＦ（ａｂ）及びＦ（ａｂ）2フラグメントのような免疫活性フラグメント又は組み換え免疫活性フラグメント又はアフィニティー精製免疫グロブリン若しくはそれらの免疫活性フラグメントでありうる。
【０１７１】
組成物の一つの形態において、抗体又はそのフラグメント又はその誘導体は、動物を微生物又は微生物産物で免疫化することにより産生される。微生物又は微生物産物に結合することができるポリクローナル抗体は、動物の免疫化により得ることができ、血液、腺若しくは細胞の分泌物、卵、乳汁又は初乳のような体液を介して抗体を得る。
【０１７２】
本発明の方法、組成物及び器具を一般的に適合して、性的活動の時期に最適に対応するように、きっちりタイミングを合わせて、活性剤を放出することができる。ローション剤又はゲル剤として局所塗布される場合、組成物は、好ましくは、性的活動の直前に塗布される。器具及び坐剤のような他の塗布様式を、消費者の必要性に応じて予め決定された速度で長時間にわたって活性剤を放出するように設計することができる。
【０１７３】
本発明の特定の実施態様において、本発明の製剤の目標は、感染又は感染の伝染が遅延、防止又は抑制されるように、ＨＩＶ−1−ＲＮＡウイルス量を検出可能な限界より少なく低減することである。本発明の文脈において、「ＨＩＶ−１−ＲＮＡの検出可能な限界」は、定量的多重サイクルリバーストランスクリプターゼＰＣＲ方法論により測定して、患者の血漿の１ｍｌあたり約２００未満から約５０未満のＨＩＶ−１−ＲＮＡのコピーが存在することを意味する。ＨＩＶ−１−ＲＮＡは、好ましくは、Ａｍｐｌｉｃｏｒ−１  Ｍｏｎｉｔｏｒ  １．５（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓから入手可能）又はＮｕｃｌｉｓｅｎｓ  ＨＩＶ−１  ＱＴ−１の方法論により、本発明において測定される。
【０１７４】
特定の実施態様において、本発明の製剤は、性行為によるＨＩＶの伝染から保護するためだけでなく、産道を通過する際の新生児の感染を防止するためにも有用である。したがって、膣内投与は、性交の前、性交の間、出産の直前又は出産の間に行うことができる。そのような局所投与形態は、ＨＩＶに感染した母親からの新生児に適用する場合に特に有用でありうる。
【０１７５】
ここで本発明は、以下の非限定的実施例を参照することにより更に詳細に説明される。
【０１７６】
実施例
実施例1：ポリクローナル抗Ｅｎｖ抗体を含有する高度免疫初乳の産生
工程1−乳牛用のワクチンの産生
公報ＷＯ／２００４／０７８２０９国際出願ＰＣＴ／ＡＵ２００４／０００２７７（その内容は参照として本明細書に組み込まれる）に報告された抗原の調製手順を使用した。
【０１７７】
工程２−公報ＷＯ／２００４／０７８２０９国際出願ＰＣＴ／ＡＵ２００４／０００２７７（その内容は参照として本明細書に組み込まれる）に報告されたワクチン接種したウシからの抗体の調製手順を使用した。
【０１７８】
実施例2：ＨＩＶ  Ｅｎｖに結合するポリクローナル抗体の産生及び中和の実証
可溶性Ｅｎｖ  ｇｐ１４０オリゴマーは、ＨｅＬａ及び／又は２９３Ｔ細胞のクレードＡ、Ｂ及びＣのＨＩＶ−１菌株から調製され、レンチレクチンアフィニティー及びゲル濾過クロマトグラフィーにより精製されている。
【０１７９】
４頭の雌ウシ（２頭が妊娠後期（pregnant in second semester）であり、２頭が初めは非妊娠であった）をＭｏｎｔａｎｉｄｅアジュバントで処方した１００μｇの精製ＨＩＶ−１  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０オリゴマーでワクチン接種した。２頭の雌ウシ（１頭が妊娠しており、１頭が非妊娠であった）の２つの群を、クレードＢ（ＡＤ８）のみにより又は等量（３３．３３μｇ）のクレードＡ、Ｂ及びＣのＥｎｖ  ｇｐ１４０（ＵＧ８、ＡＤ８及びＭＷ）（「トリミックス」と呼ばれる）によりワクチン接種した。４頭の雌ウシは全て少なくとも３回のワクチン接種を受け、最後のワクチン接種を出産の４週間前に与えた。４頭の雌ウシは全て９週間以内に血清変換した。相互終点血清ＩｇＧ滴定は、新たに確立した抗ウシＩｇＧ  ＨＩＶ−１  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０特異的ＥＬＩＳＡにより決定して、妊娠雌ウシでは１×１０２．５までであり、非妊娠雌ウシでは１×１０５までであった。妊娠雌ウシにおいて予測される低血清ＩｇＧ滴定は、血清ＩｇＧ抗体を出産のおよそ４週間前の初乳にポンプで入れたことにより説明された。
【０１８０】
ＨＩＶ免疫性ウシ初乳を、妊娠中にワクチン接種した全ての雌ウシから産後に収集及び低温殺菌し、比較的低い反応の相互ＩｇＧ滴定の＜１０２（クレードＢワクチン接種）及び１×１０３．５（トリミックスワクチン接種）をもたらした。妊娠前にワクチン接種した雌ウシの相互初乳ＩｇＧ滴定は、１０５（クレードＢワクチン接種）及び１０４．５（トリミックスワクチン接種）であった。ウエスタンブロット分析は、４頭全ての雌ウシの初乳ＩｇＧがＨＩＶ−１  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０に特異的であることを確認した。未画分初乳を、ＨＩＶ−1  Ｅｎｖ偽型レポーターウイルスアッセイにより中和活性について試験した。クレードＢ及びＣウイルスのＮＩＨ参照パネルを含むクレードＡ／Ｅ、クレードＢ及びクレードＣ偽型ウイルスを試験し（合計ｎ＝27）、ラクトフェリン及び他の生体活性ペプチドに起因する固有の感染阻止活性を既に有する非免疫ウシ初乳と比較した。妊娠中にトリメックスワクチン接種した雌ウシの未画分初乳は、全てのＢクレード偽ウイルス（ｎ＝１５）、並びに大部分のＣクレード（ｎ＝１１）及びクレードＡ／Ｅ（ｎ＝１）偽ウイルスにおいて１：１６の希釈で５０％までの高い中和を示した。クレードＢでワクチン接種した最初の雌ウシは、低い反応であったが、妊娠前にワクチン接種した雌ウシ及び最近子牛を有したときにワクチン接種した雌ウシは両方とも良好に反応した。このときまで、広範囲の中和がクレードＢでワクチン接種した雌牛において観察され、Ｂクレード（ｎ＝１２）及びクレードＣ偽ウイルス（ｎ＝９）（１：１６希釈）では５０〜８０％の中和を示した（表１）。最初の一対の雌ウシのＩｇＧ  Ａｂｓを初乳から精製し、中和活性は、５００μｇ／ｍｌの非免疫ＩｇＧと比較して、トリミックスＩｇＧでは５０％までの中和を精製ＩｇＧで保持した。
【０１８１】
異なるクレードの偽ウイルスに対する２つのＨＩＶ  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０高度免疫ウシ初乳試料の中和プロフィールの結果を表１に示す。
【０１８２】
これらの結果は、高レベルの中和抗体を生じるこの方法を強く支持している。
【０１８３】
【表１】
0006026402.tif 000002
中和プロフィール：緑色０％〜２５％、黄色２５％〜５０％、橙色５０％〜７５％、赤色７５％〜１００％
＊未決定
【０１８４】
実施例3：ウシ初乳からのＨＩＶ−1  Ｅｎｖに対するポリクローナル中和抗体
ビクトリア州の認可された検疫農場に収容した１２頭の無ＢＳＥの妊娠雌ウシを、４つのＨＩＶ−１  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０オリゴマー：
１）ＳＣ３５クレードＢの予め血清転換した菌株Ｅｎｖ  ｇｐ１４０（これらは開方立体構造に適合し、重要な中和エピトープを顕著に提示する）；
２）ＡＤＡ一次Ｒ５向性クレードＢのＥｎｖ  ｇｐ１４０；
３）９６６クレードＡ／ＥのＥｎｖ  ｇｐ１４０；及び
４）ＭＷクレードＣのＥｎｖ  ｇｐ１４０の等モル混合の１００μｇでワクチン接種する。
これらのＥｎｖを、アジュバント（Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ）で処方し、登録獣医により、妊娠前に２回及び妊娠の中期に３週間間隔で少なくとも２回投与する。
【０１８５】
Ｅｎｖ  ＥＬＩＳＡアッセイ及びウエスタンブロッティングを使用して、ワクチン接種及び妊娠の間に取られた通常の血液試料におけるＥｎｖ特異的ＩｇＧのレベルをモニターし、ワクチン接種をＩｇＧの高滴定量が検出されるまで続ける。出産の直後、最初の初乳を登録獣医が収集し、子牛に必要な初乳を与え、雌ウシ１頭あたりおよそ１リットルの初乳を残す。
【０１８６】
全初乳の２００ｍｌを保存した後、残りを分画し、１ｋｇの純粋な凍結乾燥抗体を得る方法を使用して精製する。全初乳及び精製抗体を、Ｅｎｖ偽型レポーターウイルスアッセイを使用して、中和抗体活性の幅及び滴定量について評価する。典型的な標的細胞、並びに初代細胞をこれらのアッセイで試験する。ＨＩＶ中和もＰＢＭＣ塗布感染系によって確認する。
【０１８７】
霊長類研究を評価するＳＩＶ（この強力な攻撃モデルが使用できる場合）の中和アッセイも検査する。重要なことに、抗体は、ＩＶＦ臨床手順の副産物であるプールされた精漿及び月経周期の多様な段階で収集された膣洗浄液の中に滴定され、中和活性について試験される。通常、膣内のｐＨは酸性（ｐＨ４〜５）であるが、精液の存在下では、ｐＨは中性（ｐＨ７）レベルに増加する。ウシ初乳抗体の活性をこのｐＨ範囲で試験する。
【０１８８】
実施例4：インビトロでのウイルス経細胞輸送及び中和アッセイにおける、並びに子宮頸部移植片感染モデルにおけるウシ初乳ＩｇＧによるＨＩＶ抑制の機構
ＨＩＶが宿主の防御機構を回避する一つの主な経路は、膣の内部に面している上皮細胞の内側を、これらの細胞を感染することなく横切る保護小胞の中でのウイルスの輸送である（経細胞輸送として知られている）。ウシポリクローナル抗体の抗経細胞輸送活性は、経細胞輸送活アッセイによりＥＶＯＭ２上皮細胞電圧抵抗計を使用してＨｅｃ  １−Ｂ細胞において評価する。精製ＩｇＡ及びＩｇＧに加えて、全初乳を、抗経細胞輸送活性について検査する。子宮頸部組織を得て、子宮頸部外膜、子宮頸部内幕の上皮層及び膣の円柱上皮への蛍光標識ウシＩｇＧの浸透を検査する。蛍光Ｖｐｒで標識したＨＩＶビリオンを加えて、移植片培養モデルにおけるこれらの組織上及び中のＨＩＶの動きを追跡して、ウイルス溶解（virolysis）又は捕捉を観察する。
【０１８９】
実施例5：初乳中和抗体の殺菌ゲル剤への処方及びウサギにおけるゲル剤の安定性及び効力についての試験
最も強力なＨＩＶ−1ポリクローナルウシ抗Ｅｎｖ抗体を試験し、プールし、多様な水性緩衝ゲル剤に処方する。強力な中和活性も有するので、タンパク質受容体としてラクトフェリンを加減した製剤及びカゼインと炭酸カルシウムの製剤を含む、抗Ｅｎｖ  Ａｂの幾つかの製剤を調製して、経口送達直腸殺菌剤が胃及び消化器系の通過後にＩｇＧ結合活性を保持する可能性について試験する。
【０１９０】
グリコール系Ｋ−Ｙ潤滑ゲル剤又はＳｔａｒｐｈａｒｍａにより開発されたＶｉｖａｇｅｌであるデンドリマー殺菌ゲル剤のような異なる現存のゲル剤に同時処方したときの抗体の活性。ＨＩＶ中和の幅及び潜在力を保持又は増強する製剤を、インビトロで中性のみならず酸性のｐＨ条件下での活性及びこれらの安定性について試験する。ウシ抗体により誘導される安定性、体内分布及び反応源生（reactogenicity）／炎症性をウサギ毒性学研究により試験する。ウシＩｇＧの体内分布は、組織病理学、免疫組織化学、局所炎症反応の表皮観察、ウシＩｇＧへの抗体及び細胞反応による免疫原生によって、並びにＢｉｏｐｌｅｘビーズアレイ又はサイトカインＥＬＩＳＡ及びＥｌｉＳｐｏｔアッセイによって検査する。体重、眼科学、ＥＣＧ、臨床化学、血液学、検尿、臓器重量及び骨髄、並びに血液塗抹標本をあらゆる異常について試験する。対照動物にはプラセボゲル剤を与える。細胞毒性研究に続いて、初乳及び精製Ａｂｓを、膣において一般的な細菌、例えば好酸性乳酸桿菌と同時培養して、有益な正常細菌叢に対する初乳Ａｂの影響を評価する。霊長類検証研究の前に、膣環境における製剤の安定性及び活性を、ウサギへの適用後の異なる時点で食塩水洗浄により抗体を回収することによって試験する。
【０１９１】
実施例6：処方
以下は、以下の成分リストに基づいて標準的な方法によって処方される。「高度免疫初乳」は、Ｅｎｖに対する抗体を含有する高度免疫初乳である。
【０１９２】
処方1
膣クリーム製剤は、下記の表2に提示された成分を混合することにより調製される。それぞれの適用において、１〜４グラムのクリーム剤がシリンジのような適切なアプリケーターにより経膣投与される。
【０１９３】
【表２】
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【０１９４】
処方2
膣クリーム製剤は、下記の表3に提示された成分を混合することにより調製される。それぞれの適用において、１〜４グラムのクリーム剤がシリンジのような適切なアプリケーターにより経膣投与される。
【０１９５】
【表３】
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【０１９６】
処方3
膣ゲル製剤は、下記の表4に提示された成分を混合することにより調製される。それぞれの適用において、4グラムのゲル剤がシリンジのような適切なアプリケーターにより経膣投与される。
【０１９７】
【表４】
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処方4
直腸フォーム製剤は、下記の表5に提示された成分と不活性噴射剤のイソブテン及びプロパンを混合することにより調製される。フォーム剤は、直腸アプリケーターを備えたエアロゾル容器から供給される。それぞれの適用において、900ミリグラムのフォーム剤がアプリケーターを使用して経直腸投与される。
【０１９８】
【表５】
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【０１９９】
実施例7：抗原産生、精製及び雌ウシのワクチン接種
可溶性三量体クレードＡ（９２ＵＧ８０３７．８；ＵＧ８）、クレードＢ（ＡＤ８）及びクレードＣ（９３ＭＷ９６５．２６；ＭＷ）のＨＩＶ−１  Ｅｎｖ  ｇｐ１４０を、レンチルレクチンアフィニティークロマトグラフィー及びゲル濾過により精製し、所有アジュバント中のｇｐ１４０の１００ｕｇを、図１及び２に示したワクチン接種スケジュールに従って、４頭の雌ウシ（２頭の雌ウシは妊娠後（ｐ）、２頭の雌ウシは妊娠前（ＮＰ））への３回の筋肉内ワクチン接種に使用した。
【０２００】
実施例8：血清及び初乳のＩｇＧはクレードＡ、Ｂ及びＣのｇｐ140  Ｅｎｖに結合する
図３は、クレードＡ（ＵＧ８）、クレードＢ（ＡＤ８）及びクレードＣ（ＭＷ）のｇｐ１４０  Ｅｎｖに対する直接ＥＬＩＳＡにより決定される、一次ワクチン接種の９週間後の血漿及び初乳におけるＥｎｖ  ｇｐ１４０特異的ＩｇＧ滴定量を示す。相互終点滴定量は、出血前試料又は非免疫初乳それぞれに基づいた2倍ＯＤカットオフを使用して決定した。これらの結果は、血清及び初乳のＩｇＧがクレードＡ、Ｂ及びＣのｇｐ140  Ｅｎｖに結合することを示す。結果は、非妊娠雌ウシのＩｇＧがクレードＡ、Ｂ及びＣのｇｐ140に対して広範囲の結合活性を有することも示す。
【０２０１】
実施例9：非妊娠雌ウシの精製初乳ＩｇＧはｇｐ140  Ｅｎｖへの結合を保持する
図４は、クレードＡ（ＵＧ８）、クレードＢ（ＡＤ８）及びクレードＣ（ＭＷ）に対する直接ＥＬＩＳＡにより決定される精製初乳ＩｇＧの特異的結合活性、並びに４５０ｎｍでの吸光度（ａｂｓ）測定を示す。これらの結果は、非妊娠雌ウシの精製ＩｇＧがｇｐ140の結合を保持することを示す。結果は、非妊娠雌ウシの精製ＩｇＧがクレードＡ、Ｂ及びＣのｇｐ140に対して広範囲の結合活性を保持することも示す。結果は、クレードＡ、Ｂ及びＣのｇｐ１４０に結合するクレードＢの可溶性Ｅｎｖ  ｇｐ１４０オリゴマーでワクチン接種した非妊娠雌ウシの初乳とのクレード横断（異種）結合も示す。
【０２０２】
実施例10：ウシのＩｇＧはｇｐ１４０のＣＤ４結合部位へのモノクローナル抗体Ａｂ  ｂ１２の結合を阻止する
免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）ｂ１２及び２Ｇ１２を含む、幾つかの広範囲に中和したヒトモノクローナル抗体（ＭＡｂ）を、感染した個人から誘導している。最も強力なもののうち、周知のｂ１２モノクローナル抗体（Ａｂ  ｂ１２）は、ｇｐ１２０（ｇｐ１４０の一部を形成する）のＣＤ４結合の部位を閉鎖し、標的細胞のＣＤ４へのウイルス付着を防止し、一次ＨＩＶ−１分離物を中和することができる。２Ｇ１２は、ウイルスエンベロープ糖タンパク質ｇｐ１２０における多量のマンノースグルカンの集団を認識する。ｂ12結合の特異性、中和及び保護についての理解は、同様の特異性の中和抗体を誘導する免疫原の開発を助けるはずである。
【０２０３】
図５は、ウシ初乳ＩｇＧがｇｐ１４０  ＣＤ４結合部位への結合をヒト中和ｍＡｂ  ｂ１２と競合することを示す。競合ＥＬＩＳＡを、１００ｕｇのＩｇＧ又は１：１００希釈の全初乳の一定のバックグラウンドにおけるｂ１２及び２Ｇ１２の滴定により実施した。初乳ＩｇＧの存在下又は不在下でＡＤ８（クレードＢのｇｐ１４０）に結合するｂ１２及び２Ｇ１２の能力を、非ヒトＩｇＧ  ＨＲＰ複合抗体により検出した。結果は、ウシＩｇＧが、ｇｐ１４０  ＥｎｖのＣＤ４結合部位への強力なｂ１２抗体の結合を阻止することを示す。結果は、非妊娠雌ウシのウシＩｇＧが、ｇｐ１４０  ＥｎｖのＣＤ４結合部位への強力なｂ１２抗体の結合を阻止することも示す。
【０２０４】
実施例11：クレードＡ／Ｂ／Ｃのｇｐ１４０でワクチン接種した妊娠雌ウシ及びクレードＢのｇｐ１４０でワクチン接種した非妊娠雌ウシの初乳は広範囲の中和活性を有する
表6は、全初乳の中和プロフィールを示す。数字は、一般的な実験室菌株及びＣＦ２細胞のＮＩＨクレードＢ及びＣ参照パネル（ＡＲＲＰ  ＃１１２２７、＃１１３２６）を含む、示されたＥＧＦＰ  Ｅｎｖ偽型ウイルスに対する１：１６希釈での中和率を表す。示されているデータは、２つの独立した実験の代表的な実験のものである。結果は、クレードＡ／Ｂ／Ｃのｇｐ１４０でワクチン接種した妊娠雌ウシ及びクレードＢのｇｐ１４０でワクチン接種した非妊娠雌ウシの初乳が、広範囲の中和活性を有することを示す。特に、この中和は、クレードＡ、Ｂ及びＣのＨＩＶを中和するクレードＢの可溶性Ｅｎｖ  ｇｐ140オリゴマーでワクチン接種した非妊娠雌ウシの初乳とのクレード横断（異種）中和である。更に、クレードＡ、Ｂ及びＣのＨＩＶを中和するトリミックス可溶性ｇｐ140オリゴマーでワクチン接種した妊娠雌ウシの初乳。結果は、非免疫初乳が中和活性を有することも示す。
【０２０５】
【表６】
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中和プロフィール：緑色０％〜２５％、黄色２５％〜５０％、橙色５０％〜７５％、赤色７５％〜１００％
【０２０６】
実施例12：精製初乳ＩｇＧは中和活性を有する
図６は、二種のＥＧＦＰ  Ｅｎｖ偽型レポーターウイルス（クレードＢ）でワクチン接種された４頭の雌ウシの全てからの初乳精製ＩｇＧの中和活性を示す。Ｅｎｖ偽型ウイルスの中和特性；ＡＤ＊  耐性、ＭＮ  感受性。
【０２０７】
最後に、多様な他の変更及び／又は改変を、本明細書に概説された本発明の精神から逸脱することなく実施できることが理解される。
【０２０８】
将来の特許出願者たちは、本出願に基づいて又は本出願の優先権を主張して出願することができる。以下の仮請求項が例としてのみ提供され、そのような将来の出願者たちにより主張されうる範囲を制限することを意図していないことが理解されるべきである。単数又は複数の発明を更に定義又は再定義するために、特徴を、後日に仮請求項に追加する又はそれから削除することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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