(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式Ｉ：
【化１】
0006005740.tif 000133
（式中、
Ｒ１は、水素およびメチルから選択され；
Ｒ２は、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピラジン−２−イル、およびキノキサリン−２−イル、ピリミジン−４−イル、１，１−ジオキソテトラヒドロチオフェン−３−イル、およびシクロプロピルから選択され、Ｒ２は、メチルおよびハロゲンから独立して選択される１つ以上の置換基で任意に置換され；あるいは
Ｒ１およびＲ２はそれらが結合する窒素原子と一緒になって、４−ヒドロキシピペリジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、アゼパン−１−イル、４−ベンジルピペラジン−１−イル、４−エチルピペラジン−１−イル、３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル、またはモルホリン−４−イルを形成し；
Ｒ３は、水素およびハロから選択され；
【化２】
0006005740.tif 000134
は、単結合を表し、それに結合する炭素−炭素二重結合は、（Ｅ）−または（Ｚ）−立体配置にある）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
前記化合物が、構造式ＩＩ：
【化３】
0006005740.tif 000135
で表わされる、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項３】
Ｒ１が、水素およびメチルから選択され；
Ｒ２が、ピリジン−２−イル、ピリジン−４−イル、ピラジン−２−イル、およびピリミジン−４−イルから選択され、Ｒ２が、メチルおよびクロロから選択される単一置換基で任意に置換され；または
Ｒ１およびＲ２が一緒になって、４−ヒドロキシピペリジン−１−イルを形成する、
請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３が水素である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
前記化合物が、以下の構造式：
【化４】
0006005740.tif 000136
【化５】
0006005740.tif 000137
のいずれか１つによって表わされる、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項６】
前記化合物が、以下の構造式：
【化６】
0006005740.tif 000138
のいずれか１つによって表わされる、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩と、薬学的に許容できる担体とを含んでなる組成物。
【請求項８】
癌の治療に有用な第２の治療薬をさらに含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
ＣＲＭ１活性関連障害を治療するための請求項７に記載の組成物。
【請求項１０】
前記障害が、増殖性疾患、炎症性疾患、自己免疫障害、ウイルス感染症、眼科疾患、神経変性疾患、異常な組織増殖障害、食物摂取量関連疾患、アレルギー、および呼吸器疾患から選択される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記障害が、癌である、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記組成物が、癌を治療するのに有用な第２の治療薬と共に投与される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
ＣＲＭ１活性関連障害を治療するための医薬の製造における、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１１年７月２９日に出願された米国仮特許出願第６１／５１３，４２８号明細書、２０１１年７月２９日に出願された米国仮特許出願第６１／５１３，４３２号明細書、２０１２年３月１３日に出願された米国仮特許出願第６１／６１０，１７８号明細書、２０１２年６月１日に出願された米国仮特許出願第６１／６５４，６５１号明細書、および２０１２年５月３１日に出願された米国仮特許出願第６１／６５３，５８８号明細書の優先権を主張する。上記出願は、その内容全体を参照によって本明細書に援用する。
【背景技術】
【０００２】
ほとんどの主要なヒト固形および血液悪性腫瘍からの細胞は、多様な発がん性タンパク質、腫瘍サプレッサータンパク質、および細胞周期制御因子の異常な細胞局在を示す（Ｃｒｏｎｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．２００４、Ｆａｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ  ２００６）。例えば特定のｐ５３変異は、核内でなく細胞質中への局在化をもたらす。これは腫瘍サプレッサー機能が無傷であるにもかかわらず、正常な増殖制御の喪失をもたらす。その他の腫瘍では、野生型ｐ５３は細胞質中に隔離され、または迅速に分解されて、この場合もまた、そのサプレッサー機能の喪失につながる。機能性ｐ５３タンパク質の適切な核局在化の復元は、新生物細胞のいくつかの特性を正常化し得て（Ｃａｉ  ｅｔ  ａｌ．２００８；Ｈｏｓｈｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．２００８；Ｌａｉｎ  ｅｔ  ａｌ．１９９９ａ；Ｌａｉｎ  ｅｔ  ａｌ．１９９９ｂ；Ｓｍａｒｔ  ｅｔ  ａｌ．１９９９）、ＤＮＡ損傷剤に対するがん細胞の感受性を復元し得て（Ｃａｉ  ｅｔ  ａｌ．２００８）、確立した腫瘍（Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ  ＆  ＤｅＰｉｎｈｏ  ２００７、Ｘｕｅ  ｅｔ  ａｌ．２００７）の退縮をもたらし得る。フォークヘッド（Ｔｕｒｎｅｒａｎｄ  Ｓｕｌｌｉｖａｎ  ２００８）およびｃ−Ａｂｌ（Ｖｉｇｎａｒｉ  ａｎｄ  Ｗａｎｇ  ２００１）などのその他の腫瘍サプレッサータンパク質についても、同様のデータが得られている。これに加えて、いくつかの腫瘍サプレッサーおよび増殖制御タンパク質の異常な局在化が、自己免疫疾患の発病に関与することもある（Ｄａｖｉｓ  ２００７、Ｎａｋａｈａｒａ  ２００９）。ＣＲＭ１の阻害は、特異的腫瘍サプレッサータンパク質（ＴＳＰ）が欠失し、または機能不全である、家族性がん症候群（例えば１つのｐ５３対立遺伝子の欠損に起因するリー・フラウメニ症候群、ＢＲＣＡ１またはＢＲＣＡ２がん症候群）において特に興味深い効用を提供してもよく、ＣＲＭ１阻害剤の全身性（または局所性）投与によるＴＳＰレベルの増大は、正常な腫瘍サプレッサー機能の復元を助け得る。
【０００３】
特定のタンパク質およびＲＮＡは、それらが分子を核内に搬入する場合はインポーチンに分類され、分子を核外に搬出する場合はエクスポーチンに分類される、特化された輸送分子によって核に搬入され、それから搬出される（Ｔｅｒｒｙ  ｅｔ  ａｌ．２００７；Ｓｏｒｏｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．２００７）。核に搬入されそれから搬出されるタンパク質は、妥当な輸送体との相互作用する可能にする、核内搬入／局在化（ＮＬＳ）または搬出（ＮＥＳ）配列を含有する。エクスポーチン−１またはＸｐｏ１とも称されるＣｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ  Ｒｅｇｉｏｎ  Ｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ  １は、主要なエクスポーチンである。
【０００４】
Ｃｒｍ１の過剰発現は、ヒト卵巣がん（Ｎｏｓｋｅ  ｅｔ  ａｌ．２００８）、子宮頸がん（ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｗａｔｔ  ｅｔ  ａｌ．２００９）、膵臓がん（Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．２００９）、肝細胞がん（Ｐａｓｃａｌｅ  ｅｔ  ａｌ．２００５）、および骨肉腫（Ｙａｏ  ｅｔ  ａｌ．２００９）をはじめとするいくつかの腫瘍において報告されており、独立してこれらの腫瘍型の芳しくない臨床転帰と関連付けられている。
【０００５】
Ｃｒｍ１の阻害は、遺伝子発現、細胞増殖、血管新生、およびエピジェネティックスと関連付けられている、ｐ５３、ｃ−Ａｂｌ、ｐ２１、ｐ２７、ｐＲＢ、ＢＲＣＡ１、ＩｋＢ、ＩＣｐ２７、Ｅ２Ｆ４、ＫＬＦ５、ＹＡＰ１、ＺＡＰ、ＫＬＦ５、ＨＤＡＣ４、ＨＤＡＣ５またはフォークヘッドタンパク質（例えばＦＯＸＯ３ａ）などの腫瘍サプレッサータンパク質および／または増殖制御物質の核からの大量流出をブロックする。Ｃｒｍ１阻害剤は、正常な（非形質転）細胞を残しながら、発がん性活性化または増殖促進シグナル存在下であってさえも、がん細胞にアポトーシスを誘導することが示されている。Ｃｒｍ１の阻害の大多数の研究は、天然Ｃｒｍ１阻害剤レプトマイシンＢ（ＬＭＢ）を利用している。ＬＭＢそれ自体は、新生物細胞に対して高度に毒性であるが、耐容性に劣り、動物（Ｒｏｂｅｒｔｓ  ｅｔ  ａｌ．１９８６）およびヒト（Ｎｅｗｌａｎｄｓ  ｅｔ  ａｌ．１９９６）において著しい胃腸毒性がある。薬剤様特性を改善するためのＬＭＢの誘導体化は、動物腫瘍モデルにおいて、抗腫瘍活性を維持して耐容性がより良い化合物をもたらす（Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．２００７、Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．２００８、Ｍｕｔｋａ  ｅｔ  ａｌ．２００９）。したがって核外搬出阻害剤は、新生物およびその他の増殖性疾患において、有益な効果を有し得る。
【０００６】
腫瘍サプレッサータンパク質に加えて、Ｃｒｍ１はまた、炎症過程に関与するいくつかの重要なタンパク質も搬出する。これらとしては、ＩｋＢ、ＮＦ−ｋＢ、Ｃｏｘ−２、ＲＸＲα、Ｃｏｍｍｄ１、ＨＩＦ１、ＨＭＧＢ１、ＦＯＸＯ、ＦＯＸＰ、その他が挙げられる。それが免疫グロブリンκ遺伝子発現を駆動するという発見に名前が由来する、転写活性化因子の核因子κＢ（ＮＦ−ｋＢ／ｒｅｌ）ファミリーは、炎症、増殖、免疫、および細胞生存に関与する、多様な遺伝子のｍＲＮＡ発現を調節する。基本条件下では、ＩｋＢと称されるＮＦ−ｋＢのタンパク質阻害剤は、核内でＮＦ−ｋＢに結合して、複合体ＩｋＢ−ＮＦ−ｋＢは、ＮＦ−ｋＢ転写機能を不活性化する。炎症性刺激に応えて、ＩｋＢはＩｋＢ−ＮＦ−ｋＢ複合体から解離し、それはＮＦ−ｋＢを遊離させて、その強力な転写活性を曝露させる。ＮＦ−ｋＢを活性化する多数のシグナルは、ＩｋＢをタンパク質分解の標的にすることでＮＦ−ｋＢを活性化する（ＩｋＢのリン酸化は、それをユビキチン化、次にタンパク質分解のために「標識する」）。核ＩｋＢａ−ＮＦ−ｋＢ複合体は、Ｃｒｍ１によって細胞質に搬入され得て、そこで解離してＮＦ−ｋＢが再活性化され得る。ユビキチン化ＩｋＢもまたＮＦ−ｋＢ複合体から解離して、ＮＦ−ｋＢ転写活性が復元されてもよい。ヒト好中球およびマクロファージ様細胞（Ｕ９３７）へのＣｒｍ１誘導性搬入のＬＭＢによる阻害は、転写的に不活性の核ＩｋＢａ−ＮＦ−ｋＢ複合体の蓄積をもたらすだけでなく、細胞刺激時であってもさえもＮＦ−ｋＢの初期活性化もまた妨げる（Ｇｈｏｓｈ  ２００８、Ｈｕａｎｇ  ２０００）。別の研究では、ＬＭＢによる処理は、肺微小血管内皮細胞中で、ＩＬ−１β誘導性ＮＦ−ｋＢＤＮＡ結合（ＮＦ−ｋＢ転写活性化の最初のステップ）、ＩＬ−８発現、および細胞間接着分子発現を阻害した（Ｗａｌｓｈ  ２００８）。ＣＯＭＭＤ１は、ＮＦ−ｋＢおよび低酸素誘導因子１（ＨＩＦ１）転写活性の双方に対する、別の核阻害剤である。Ｃｒｍ１阻害によってＣＯＭＭＤ１の核外搬出をブロックすることは、ＮＦ−ｋＢおよびＨＩＦ１転写活性阻害の増大をもたらす（Ｍｕｌｌｅｒ  ２００９）。
【０００７】
Ｃｒｍ１はまた、レチノイドＸ受容体α（ＲＸＲα）輸送も媒介する。ＲＸＲαは肝臓中で高度に発現されて、胆汁酸、コレステロール、脂肪酸、ステロイド、および異物代謝、および恒常性の調節において、中心的役割を果たす。肝臓炎症中には、主にＣｒｍ１によるＲＸＲαの炎症媒介核外搬出のために、核ＲＸＲαレベルは顕著に低下する。ＬＭＢは、ヒト肝臓由来細胞において、ＩＬ−１β誘導性の細胞質におけるＲＸＲαレベル増大を妨げることができる（Ｚｉｍｍｅｒｍａｎ  ２００６）。
【０００８】
ＮＦ−ｋＢ、ＨＩＦ−１、およびＲＸＲαシグナル伝達におけるＣｒｍ１媒介の核外搬出の役割は、核外搬出をブロックすることが、血管系（血管炎、動脈炎、リウマチ性多発性筋痛、アテローム性動脈硬化）、皮膚科学的（下記参照）、リウマチ学的（リウマチ性および関連関節炎、乾癬性関節炎、脊椎関節症、結晶性関節症、全身性エリテマトーデス、混合性結合組織疾患、筋炎症候群、皮膚筋炎、封入体筋炎、未分化結合組織病、シェーグレン症候群、強皮症、および重複症候群など）をはじめとする、複数の組織および臓器にわたる多数の炎症過程において、潜在的に有益であり得ることを示唆する。
【０００９】
ＣＲＭ１の阻害は、ＩＣｐ２７、Ｅ２Ｆ４、ＫＬＦ５、ＹＡＰ１、およびＺＡＰのような一連の転写因子を阻害／活性化することで、遺伝子発現に影響を及ぼす。
【００１０】
Ｃｒｍ１の阻害は、炎症性皮膚疾患（アトピー、アレルギー性皮膚炎、化学性皮膚炎、乾癬）、日焼けによる損傷（紫外線（ＵＶ）損傷）、および感染症をはじめとする、多数の皮膚科学的症候群に対する潜在的な治療効果を有する。ＬＭＢを用いて最も良く研究されたＣＲＭ１の阻害は、正常なケラチノサイトに対する最小の影響を示し、ＵＶ、ＴＮＦα、またはその他の炎症性刺激に曝露したケラチノサイトに対する抗炎症活性を発揮した（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ  ＆  Ｓｈｉｎｋａｉ  ２００５、Ｋａｎｎａｎ  ＆  Ｊａｉｓｗａｌ  ２００６）。Ｃｒｍ１の阻害はまた、ケラチノサイト（Ｓｃｈａｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．２０１０、Ｋａｎｎａｎ  ＆  Ｊａｉｓｗａｌ  ２００６）およびその他の細胞型（Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．２００９）を酸化損傷から保護する、ＮＲＦ２（核因子赤血球系関連因子２）活性を上方制御する。ＬＭＢは、ＨＰＶ１６などの発がん性ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）株に感染したケラチノサイトにアポトーシスを誘導するが、未感染ケラチノサイトでは誘導しない（Ｊｏｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ．２００９）。
【００１１】
Ｃｒｍ１はまた、パーキンソン病（ＰＤ）、アルツハイマー病、および筋萎縮性側索硬化（ＡＬＳ）をはじめとする、神経変性疾患に有用であってもよい、重要な神経保護タンパク質の輸送も媒介する。例えば、（１）ＮＲＦ２（Ｗａｎｇ  ２００９）、ＦＯＸＡ２（Ｋｉｔｔａｐｐａ  ｅｔ  ａｌ．２００７）などの重要な神経防護作用制御因子の核内保持を強制して神経細胞内に留め、および／または（２）グリア細胞の核内へのＩκＢ隔離によりＮＦκＢ転写活性を阻害することで、Ｃｒｍ１の阻害は、これらの障害で見られる神経細胞死を遅延または予防し得る。異常なグリア細胞増殖を、ＣＲＭ１レベルまたはＣＲＭ１機能の異常と結びつける証拠もある（Ｓｈｅｎ  ２００８）。
【００１２】
主にＣＲＭ１を通じて媒介される、損なわれていない核外搬出はまた、多数のウイルスの損なわれていない成熟にも必要である。それらの生活環に、核外搬出、および／またはＣＲＭ１それ自体が関係があるとされるウイルスとしては、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、アデノウイルス、サルレトロウイルス１型、ボルナ病ウイルス、インフルエンザ（通常株ならびにＨ１Ｎ１および鳥類Ｈ５Ｎ１株）、Ｂ（ＨＢＶ）およびＣ（ＨＣＶ）型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、デング（Ｄｕｎｇｅｅ）、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、黄熱病ウイルス、西ナイルウイルス、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、およびメルケル細胞ポリオーマウイルス（ＭＣＶ）が挙げられる。（Ｂｈｕｖａｎａｋａｎｔｈａｍ  ２０１０、Ｃｏｈｅｎ  ２０１０、Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ  １９９８）。損なわれていない核外搬出に依存する、追加的なウイルス感染症が将来発見されるものと思われる。
【００１３】
核小体を通り抜けて、核と細胞質の間を往復するＨＩＶ−１  Ｒｅｖタンパク質は、Ｒｅｖ応答要素（ＲＲＥ）ＲＮＡを含有する、スプライシングされていない、そして個々にスプライスされている、ＨＩＶ転写物のＣＲＭ１搬出経路による搬出を容易にする。ＬＭＢｏｒ  ＰＫＦ０５０−６３８などのＣＲＭ１阻害剤を使用するＲｅｖ媒介ＲＮＡ輸送の阻害は、ＨＩＶ−１転写過程を停止させ、新しいＨＩＶ−１ビリオン生成を阻害して、それによってＨＩＶ−１レベルを低下させ得る（Ｐｏｌｌａｒｄ  １９９８、Ｄａｅｌｅｍａｎｓ  ２００２）。
【００１４】
デングウイルス（ＤＥＮＶ）は、一般的な節足動物媒介ウイルス疾患であるデング熱（ＤＦ）と、そのより重篤で潜在的に致死性のデング出血熱（ＤＨＦ）の病原体である。ＤＨＦは、ＤＥＮＶに対する過剰な炎症応答の結果のようである。ＮＳ５は、ＤＥＮＶの最大かつ最も良く保存されたタンパク質である。ＣＲＭ１は、核から、ＮＳ５の機能の大部分がそこで媒介される細胞質への、ＮＳ５輸送を調節する。ＣＲＭ１が媒介するＮＳ５の搬出阻害は、ウイルス生成動態の変化をもたらし、炎症性ケモカインインターロイキン−８（ＩＬ−８）の誘導を低下させ、ＤＥＮＶ、そしてＣ型肝炎ウイルスをはじめとする、その他の医学的に重要なフラビウイルスによって引き起こされる疾患の治療に、新しい手段を提示する（Ｒａｗｌｉｎｓｏｎ  ２００９）。
【００１５】
核外に出るためにＣＲＭ１を使用する、ウイルスにコードされたその他のＲＮＡ結合タンパク質としては、ＨＳＶ１型テグメントタンパク質（ＶＰ１３／１４、またはｈＵＬ４７）、ヒトＣＭＶタンパク質ｐｐ６５、ＳＡＲＳコロナウイルスＯＲＦ  ３ｂタンパク質、およびＲＳＶマトリックス（Ｍ）タンパク質が挙げられる（Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ２００８、Ｓａｎｃｈｅｚ  ２００７、Ｆｒｅｕｎｄｔ  ２００９、Ｇｈｉｌｄｙａｌ  ２００９）。
【００１６】
興味深いことに、これらのウイルスの多くは、慢性ＨＢＶまたはＨＣＶ感染症に起因する肝細胞がん（ＨＣＣ）、ＨＰＶに起因する子宮頸がん、およびＭＣＶと関連付けられているメルケル細胞がんをはじめとする、特定タイプのヒトのがんと関連付けられている。したがってＣＲＭ１阻害剤は、ウイルス伝染過程、ならびにこれらのウイルスに起因する悪性形質転換過程の双方に対して、有益な効果を有し得る。
【００１７】
ＣＲＭ１は核局在化を制御し、ひいてはヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）、ヒストンアセチルトランスフェラーゼ（ＨＡＴ）、およびヒストンメチルトランスフェラーゼ（ＨＭＴ）をはじめとする酵素を代謝する、複数のＤＮＡの活性を制御する。不可逆的ＣＲＭ１阻害剤による心筋細胞肥大の抑制が実証されており、肥大性遺伝的プログラムを抑制することが知られている酵素である、ＨＤＡＣ５の核内保持（および活性化）と関連があると考えられる（Ｍｏｎｏｖｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．２００９）。したがってＣＲＭ１阻害は、特定形態のうっ血性心不全および肥大性心筋症をはじめとする肥大性症候群において、有益な効果を有してもよい。
【００１８】
ＣＲＭ１はまた、その他の障害とも関連付けられている。網膜神経節細胞の変性および視力喪失によって特徴付けられる遺伝性疾患であるレーバー病は、ＣＲＭ１スイッチの不活動と関連付けられている（Ｇｕｐｔａ  Ｎ  ２００８）。神経変性障害を核輸送異常と結びつける証拠もある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１９】
しかし今まで、生体外および生体内で使用するための小分子薬剤様Ｃｒｍ１阻害剤は、稀であった。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
本発明は、核輸送調節因子として有用な化合物、または薬学的に許容可能なそれらの塩に関する。本発明はまた、本発明の化合物を含んでなる薬学的に許容可能な組成物と、不適切な核輸送によって引き起こされる異常な細胞応答と関連付けられている、障害または病状などの様々な障害の治療において、前記化合物および組成物を使用する方法も提供する。
【００２１】
本発明の一実施形態では、化合物は、式Ｉ：
【化１】
0006005740.tif 000002
で表わされ、またはその薬学的に許容可能な塩であり、式中、各変数の値および代案の値は、本明細書に定義され記載されるとおりである。
【００２２】
本発明の別の実施形態は、本発明の化合物または薬学的に許容可能なその塩と、薬学的に許容できる担体とを含んでなる、組成物である。
【００２３】
さらに別の本発明の実施形態は、それを必要とする対象に、本発明の化合物の、またはその薬学的に許容可能な塩の、または本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含んでなる組成物の治療有効量を投与するステップを含んでなる、ＣＲＭ１活性関連障害を治療する方法である。
【００２４】
本発明の別の実施形態は、対象において、ＲＭ１活性関連障害を治療するための、本発明の化合物の使用である。
【００２５】
本発明の別の実施形態は、対象において、ＣＲＭ１活性関連障害を治療する薬剤を製造するための、本発明の化合物の使用である。
【００２６】
本発明の核輸送調節因子、およびその薬学的に許容可能な塩および／または組成物は、マウス、ラット、イヌ、およびサルにおけるＡＵＣによる測定で、優れた生体内曝露を提供する一方で低レベルの脳透過性を示す。したがって本発明の化合物、およびその薬学的に許容可能な塩および／または組成物は、本明細書に記載される疾患、障害、または病状などの、不適切な核輸送によって引き起こされる、異常な細胞応答と関連付けられている、多様な疾患、障害または病状を治療するのに有用である。本発明によって提供される化合物はまた、生物学的および病理学的現象における核輸送調節の研究；キナーゼによって媒介される細胞内情報伝達経路の研究；および核輸送調節因子の比較評価にも有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】時間の関数としての腫瘍体積のグラフであり、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）のマウス異種移植モデルにおける腫瘍体積に対する、化合物Ｉ−３の効果を示す。
【図２】ＭＤＡ−ＭＢ−４６８ＴＮＢＣ細胞中における、ＣＲＭ１およびアポトーシスマーカータンパク質に対する化合物Ｉ−３の濃度増大の効果を示す、ウエスタンブロット画像である。図２Ｂ、ＤＵ４４７５管腔ＢＣ細胞中における、ＣＲＭ１およびアポトーシスマーカータンパク質に対する化合物Ｉ−３の濃度増大の効果を示す、ウエスタンブロット画像である。図２Ｃ、ＨＳ５７８ＴＴＮＢＣ細胞中における、ＣＲＭ１およびアポトーシスマーカータンパク質に対する化合物Ｉ−３の濃度増大の効果を示す、ウエスタンブロット画像である。
【図３】ＭＤＡ−ＭＢ−４６８およびＨＳ５７８ＴＴＮＢＣ細胞系における、抗アポトーシスおよび細胞周期タンパク質に対する、化合物Ｉ−３の濃度増大の効果を示す、ウエスタンブロット画像である。
【図４】示される処置を施した、抗体誘導オスＢＡＬＢ／ｃ関節炎マウスにおける、０〜１２日間の時間と対比した、平均体重を示すグラフである。
【図５】示される処置を施した、抗体誘導オスＢＡＬＢ／ｃ関節炎マウスにおける、０〜１２日間の時間と対比した、平均全足臨床関節炎スコアのグラフである。
【図６】示される処置を施した、ＰＭＡ誘導オスＢＡＬＢ／ｃ乾癬マウスにおいて、０〜７日目に判定された、平均耳介厚、鱗屑、および皺を点数化した棒グラフである。
【図７】新奇物体認識モデルにおいて示されるように処置された、ラットの物体選好を示すグラフの組である。
【図８】示されるように処置された、肥満および痩せ型Ｚｕｃｋｅｒラットにおける、時間と対比した、累積および平均食物摂取量を示すグラフの組である。図８Ｂ、示されるように処置された、肥満および痩せ型Ｚｕｃｋｅｒラットにおける、時間と対比した、平均およびパーセント体重を示すグラフの組である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明の新規特性は、以下の発明の詳細な説明を分析すれば、当業者には明白になるであろう。しかし発明の詳細な説明とそれに続く特許請求の範囲から、本発明の精神と範囲内の様々な変更と修正は当業者には明白になるので、報告される発明の詳細な説明および特定の実施例は、本発明の特定の実施形態を示す一方で、例証のみを目的として提供されるものと理解すべきである。
【００２９】
発明の化合物
本発明の一実施形態は、式Ｉ：
【化２】
0006005740.tif 000003
によって表わされる化合物、またはその薬学的に許容可能な塩であり、式中、
Ｒ１は、水素およびメチルから選択され；
Ｒ２は、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピラジン−２−イル、およびキノキサリン−２−イル、ピリミジン−４−イル、１，１−ジオキソテトラヒドロチオフェン−３−イル、およびシクロプロピルから選択され、Ｒ２は、メチルおよびハロゲンから選択される１つまたは複数の独立した置換基で任意選択的に置換され；あるいは
Ｒ１およびＲ２はそれらの介在性原子と一緒になって、４−ヒドロキシピペリジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、アゼパン−１−イル、４−ベンジルピペラジン−１−イル、４−エチルピペラジン−１−イル、３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル、またはモルホリン−４−イルを形成し；
Ｒ３は、水素およびハロから選択され；
【化３】
0006005740.tif 000004
は、単結合を表し、それに結合する炭素−炭素二重結合は、（Ｅ）−または（Ｚ）−立体配置にある。
【００３０】
上で概説されるように、Ｒ１は、水素およびメチルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ１は水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ１はメチルである。
【００３１】
上で概説されるように、Ｒ２は、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピラジン−２−イル、キノキサリン−２−イル、ピリミジン−４−イル、１，１−ジオキソテトラヒドロチオフェン−３−イル、およびシクロプロピルから選択され、Ｒ２は、メチルおよびハロゲンから選択される１つまたは複数の独立した置換基で任意選択的に置換され；あるいは式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２はピリジン−２−イルである。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２はピリジン−３−イルである。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２はピリジン−４−イルである。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２はピラジン−２−イルである。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２はピリミジン−４−イルである。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２はキノキサリン−２−イルである。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２は、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、およびピリジン−４−イルから選択される。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２は、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピラジン−２−イル、およびピリミジン−４−イルから選択される。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２は、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−４−イル、ピラジン−２−イル、およびピリミジン−４−イルから選択される。
【００３２】
いくつかの実施形態では、Ｒ２は
【化４】
0006005740.tif 000005
から選択される。
【００３３】
式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２は、メチルおよびクロロから選択される単一置換基によって、任意選択的に置換される。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２は、メチル基によって任意選択的に置換される。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ２は、クロロ基によって任意選択的に置換される。いくつかの実施形態では、Ｒ２は
【化５】
0006005740.tif 000006
から選択される。
【００３４】
いくつかの実施形態では、Ｒ２は
【化６】
0006005740.tif 000007
から選択される。
【００３５】
いくつかの実施形態では、Ｒ２は
【化７】
0006005740.tif 000008
から選択される。
【００３６】
式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ２はそれらの介在性原子と一緒になって、４−ヒドロキシピペリジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、アゼパン−１−イル、４−ベンジルピペラジン−１−イル、４−エチルピペラジン−１−イル、３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル、またはモルホリン−４−イルを形成する。式Ｉのいくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ２はそれらの介在性原子と一緒になって、４−ヒドロキシピペリジン−１−イルを形成する。
【００３７】
上で概説されるように、Ｒ３は、水素およびハロゲンから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ３は水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、ハロゲン（例えばクロロ、ブロモ、ヨードまたはフルオロ）である。いくつかのこのような実施形態では、Ｒ３はクロロである。
【００３８】
上で概説されるように、トリアゾール部分およびとカルボニル部分の間の炭素−炭素二重結合は、（Ｅ）−立体配置または（Ｚ）−立体配置にある。いくつかの実施形態では、その二重結合は、（Ｅ）−立体配置にある。いくつかの実施形態では、その二重結合は（Ｚ）−立体配置にあり、化合物は、式ＩＩ：
【化８】
0006005740.tif 000009
によって表わされ、またはその薬学的に許容可能な塩であり、式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、上で定義されて本明細書に記載されるとおりである。
【００３９】
本発明のさらなる実施形態は、式ＩＩによって表される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩であり、式中、変数の値および代案の値は、式Ｉの化合物について上で定義されるとおりである。
【００４０】
このさらなる実施形態の第１の態様では、Ｒ１は、上で定義されるとおりであり；Ｒ２は、ピリジン−２−イル、ピリジン−４−イル、ピラジン−２−イル、およびピリミジン−４−イルから選択され、Ｒ２は、メチルおよびクロロから選択される単一置換基で任意選択的に置換され；あるいはＲ１およびＲ２はそれらの介在性原子と一緒になって、４−ヒドロキシピペリジン−１−イルを形成する。
【００４１】
第１の態様の特定の態様では、Ｒ３は水素である。残りの変数の値および代案の値は、式Ｉの化合物について上述し、またはさらなる実施形態、またはその第１の態様のとおりである。
【００４２】
式Ｉの例示的な化合物は、表１に記載される。
【００４３】
【表１】
0006005740.tif 000010
【００４４】
【表２】
0006005740.tif 000011
【００４５】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、化合物Ｉ−３〜Ｉ−２６のいずれか１つから選択される。これらの実施形態の一態様では、化合物は、化合物Ｉ−３、Ｉ−４、Ｉ−５、Ｉ−７、Ｉ−８、Ｉ−１０、Ｉ−１２、Ｉ−１８、Ｉ−１９、およびＩ−２４から選択される。より具体的な態様では、本発明の化合物は、Ｉ−３およびＩ−４から選択される。
【００４６】
薬物動態（ＰＫ）は、創薬研究開発においてますます重要な役割を果たしている。薬物動態は、薬物の吸収、分布、代謝および／または排出の経時変化の定量的研究である。薬物が投与されると、それは投与部位から、全身の血液循環へと急速に分布する。治療薬の分布程度の１つの基準は、最終測定濃度（ＡＵＣｔ）まで計算されて、無限時間（ＡＵＣＩｎｆ）に外挿される、血漿濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）である。したがってＡＵＣは、薬剤曝露を定量化するのに有用な尺度である。
【００４７】
一般に、治療薬曝露が高いほど、作用物質の効果は大きい。しかし高い治療薬曝露は、脳などの特定組織に有害な影響を及ぼすこともある。内皮細胞間の密着結合からなる保護ネットワークである血液脳関門（ＢＢＢ）が、親水性および／または大型分子の拡散を制限する一方で、ＡＵＣの高い薬剤は、なおもＢＢＢおよび／または脳脊髄液に透過できる。このような透過は往々にして望ましくなく、望まれない副作用をもたらし得る。現行の創薬努力は、一つには、薬物曝露（例えばＡＵＣ）の最大化と、脳透過性の最小化を上手く両立させることを目指している。
【００４８】
脳：血漿（Ｂ：Ｐ）比は、脳組織中および循環中の治療薬の相対的分布の１つの定量方法であり、したがって治療薬の脳透過性の１つの指標を提供する。脳および脳脊髄液をはじめとする中枢神経系（ＣＮＳ）に局在する疾患を標的とする場合は、高い脳：血漿比が好ましい。しかし非ＣＮＳ治療薬では、脳透過性を最小化して、脳およびＣＮＳ組織内における治療薬の望まれない蓄積によって引き起こされる可能な副作用を回避するために、より低い脳：血漿比が一般に好ましい。
【００４９】
実施例により詳細に記載されるように、本発明の化合物は、２０１１年３月５日に出願されて、２０１１年１１月１０日に米国特許第２００９／０２７５６０７号明細書として公開された、所有者共通の米国特許出願第１３／０４１，３７７号明細書で開示されるものなどのその他の核輸送阻害剤との比較で、より高いＡＵＣおよび／またはより低いＢ：Ｐを示す。本発明のいくつかの実施形態では、式Ｉの化合物は、マウスに１０ｍｇ／ｋｇで経口投与した際に、約１μＭ未満の核外搬出活性、約３３００を超える（例えば約３５００を超える）ＡＵＣＩｎｆ、および約２．５未満のＢ：Ｐ比を有する。
【００５０】
発明の合成方法
本発明によると、本発明の化合物を調製するのに有用である式Ｚの化合物（例えば本発明の化合物の前駆体）の（Ｚ）−オレフィン誘導体：
【化９】
0006005740.tif 000012
またはその薬学的に許容可能な塩を調製する方法が提供され、
式中、
Ａ環は、フェニル、８〜１０員の二環式アリール環、窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、ならびに窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択される、任意選択的に置換される環であり；
Ｙは、共有結合または−Ｌ−であり；
Ｌは、二価のＣ１〜８飽和または不飽和の直鎖または分枝炭化水素遊離基であり、Ｌの１つまたは２つのメチレン単位は、−ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＯＲ）−または−Ｃ（ＮＲ）−によって任意選択的に置き換えられ；
各Ｒは、独立して、水素、またはＣ１〜６脂肪族、フェニル、４〜７員の飽和または部分不飽和炭素環、窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員の飽和または部分不飽和複素環、窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、８〜１０員の二環式アリール環、ならびに窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択される任意選択的に置換される基であり；あるいは
同一窒素上の２つのＲ基は、それらが付着する窒素原子と一緒になって、窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する４〜７員の飽和または部分不飽和複素環、または窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員のヘテロアリール環を形成し；
Ｖ１、Ｖ２、およびＶ３のそれぞれは、独立して、Ｃ（Ｒｙ）またはＮであり；
各ＲｘおよびＲｙは、−Ｒ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｎ（Ｒ）２、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＳＯＲ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２ＮＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ、−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ２、および−ＮＲＳＯ２Ｒから独立して選択され；
各Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、重水素、トリチウムまたはハロゲンであり；
Ｗは、−ＣＮ、ハロアルキル、−ＮＯ２または−Ｃ（＝Ｚ）Ｒ３であり；
Ｚは、Ｏ、Ｓ、またはＮＲであり；
Ｒ３は、水素、−Ｒ、または、−ＳＲ、および−Ｎ（Ｒ４）２から選択され；
各Ｒ４は、独立して−Ｒであり；あるいは
同一窒素上の２つのＲ４は、それらが付着する窒素原子と一緒になって、窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する４〜７員の飽和または部分不飽和複素環、または窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員のヘテロアリール環を形成し、それによって形成される環は、−（Ｒ５）ｎで任意選択的に置換され；
各Ｒ５は、−Ｒ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｎ（Ｒ）２、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＳＯＲ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２ＮＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２、−ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ、−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ２、および−ＮＲＳＯ２Ｒから独立して選択され；
ｍおよびｎのそれぞれは、独立して、０、１、２、３、および４から選択される整数である。
【００５１】
式Ｚの化合物は、例えば、２０１１年３月５日に出願された米国特許第１３／０４１，３７７号明細書、および２０１１年７月２９日に出願された米国仮特許出願第６１／５１３，４２８号明細書、および２０１２年６月１日に出願された米国仮特許第６１／６５３，５８８号明細書に記載される。式Ｚの化合物は、一般に（Ｅ）−および（Ｚ）−オレフィン異性体の混合物として合成され、それは分離されなくてはならない。（Ｅ）−および（Ｚ）−オレフィン異性体の分離には、大規模なクロマトグラフィーが必要であり、望まれない異性体は、所望の異性体に典型的に変換され得ないため、反応が進行した中間体Ａの５０％の損失をもたらす。５０％の収率は、合成のあらゆる段階において、非効率的であり高価であるが、このような許容できない収率は、多段階合成の終わりには、なおもより大きな問題となる。１，４−求核性付加における立体障害性塩基の使用は、反応に（Ｚ）−選択性もたらし得て、その結果、主要または排他的生成物として、シス−オレフィン異性体を提供することが、驚くことに発見された。したがって本発明は、式Ｚの化合物の（Ｚ）−選択的合成と、式Ｚの化合物を調製するのに有用な合成中間体を調製する方法とを提供する。式Ｚの化合物の合成における重要段階は、スキームＩに描写される。
【００５２】
特定の実施形態では、式Ｚの化合物は、下記のスキームＩ：
【化１０】
0006005740.tif 000013
に準拠して調製され、式中、ＬＧは離脱基であり、Ａ環、Ｙ、Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、Ｒｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｗ、およびｍのそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義され、本明細書の実施形態で記載されるとおりである。
【００５３】
ステップＳ−１．１のいくつかの実施形態では、中間体Ａは、１，４−求核性付加／除去反応によって、中間体Ｂとカップリングされる。ステップＳ−１．１のいくつかの実施形態では、ＬＧは適切な離脱基である。ステップＳ−１．１のいくつかのこのような実施形態では、ＬＧはハロゲンである。いくつかの実施形態では、ＬＧはヨードである。ステップＳ−１．１のいくつかの実施形態では、ＬＧはブロモである。ステップＳ−１．１のいくつかの実施形態では、ＬＧはスルホネートである。いくつかのこのような実施形態では、ＬＧはメタンスルホン酸エステル（メシレート）である。
【００５４】
ステップＳ−１．１のいくつかの実施形態では、中間体Ａは、立体障害求核性塩基の存在下で、中間体Ｂとカップリングされる。当業者は、適切な立体障害塩基を選択できるであろう。本発明で使用するための適切な立体障害求核性塩基としては、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノン−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ（２．２．２）オクタン（ＤＡＢＣＯ）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルメチルアミン、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン、キヌクリジン、１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン（ＰＭＰ）、７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ（４．４．０）デカ−５−エン（ＭＴＢＤ）、トリフェニルホスフィン、トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン、およびトリシクロヘキシルホスフィンが挙げられる。
【００５５】
特定の実施形態では、式Ｙの化合物は、下記のスキームＩＩ：
【化１１】
0006005740.tif 000014
に準拠して調製され、式中、ＬＧは離脱基であり、Ｒｘ、Ｒｙ、Ｒ１、Ｒ２、Ｗ、およびｍのそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義され、本明細書の実施形態で記載されるとおりである。
【００５６】
ステップＳ−２．１のいくつかの実施形態では、中間体Ｃがチオール酸塩と反応されて、中間体Ｄが提供される。ステップＳ−２．１のいくつかの実施形態では、チオール酸塩はチオール酸ナトリウムである。ステップＳ−２．１のいくつかの実施形態では、チオール酸塩はチオール酸カリウムである。
【００５７】
ステップＳ−２．２では、中間体Ｄがヒドラジン同等物と反応されて、中間体Ｅが提供される。
【００５８】
ステップＳ−２．３では、中間体Ｅが中間体Ｂとカップリングされて、式Ｙの化合物が提供される。ステップＳ−２．３のいくつかの実施形態では、ＬＧは適切な離脱基である。ステップＳ−２．３のいくつかのこのような実施形態では、ＬＧはハロゲンである。いくつかの実施形態では、ＬＧはヨードである。ステップＳ−２．３のいくつかの実施形態では、ＬＧはブロモである。ステップＳ−２．３のいくつかの実施形態では、ＬＧはスルホネートである。いくつかのこのような実施形態では、ＬＧはメタンスルホン酸エステル（メシレート）である。
【００５９】
ステップＳ−２．３のいくつかの実施形態では、中間体Ｅは、立体障害求核性塩基の存在下で、中間体Ｂとカップリングされる。当業者は、適切な立体障害塩基を選択できるであろう。本発明で使用するための適切な立体障害求核性塩基としては、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノン−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ（２．２．２）オクタン（ＤＡＢＣＯ）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルメチルアミン、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン、キヌクリジン、１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン（ＰＭＰ）、７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ（４．４．０）デカ−５−エン（ＭＴＢＤ）、トリフェニルホスフィン、トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン、およびトリシクロヘキシルホスフィンが挙げられる。
【００６０】
一態様に従って、本発明は、
（ａ）式Ａ：
【化１２】
0006005740.tif 000015
（式中、Ａ環、Ｒｘ、Ｙ、Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、およびｍのそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ａの化合物と、式Ｂ：
【化１３】
0006005740.tif 000016
（式中、
ＬＧは、ハロゲン、−ＯＳＯ２Ｒまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３であり；
Ｒ、Ｗ、Ｒ１、およびＲ２のそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）のオレフィンを立体障害求核性塩基の存在下で反応させて、式Ｚの化合物を形成するステップと
を含んでなる、
式Ｚ：
【化１４】
0006005740.tif 000017
（式中、Ａ環、Ｙ、Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３、Ｒｘ、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｗ、およびｍのそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する方法を提供する。
【００６１】
上述したように、式Ａの化合物は、１，４−求核性付加／除去反応によって、中間体Ｂとカップリングされる。いくつかの実施形態では、式Ａの化合物は、立体障害求核性塩基の存在下で、中間体Ｂとカップリングされる。適切な立体障害塩基としては、三級アミン塩基が挙げられる。いくつかの実施形態では、適切な立体障害塩基としては、立体障害第二級アミン塩基が挙げられる。いくつかの実施形態では、立体障害求核性塩基は、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノン−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ（２．２．２）オクタン（ＤＡＢＣＯ）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルメチルアミン、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン、キヌクリジン、１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン（ＰＭＰ）、７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ（４．４．０）デカ−５−エン（ＭＴＢＤ）、トリフェニルホスフィン、トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン、およびトリシクロヘキシルホスフィンから選択される。いくつかの実施形態では、立体障害求核性塩基は１，４−ジアザビシクロ（２．２．２）オクタン（ＤＡＢＣＯ）である。いくつかの実施形態では、立体障害求核性塩基は１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）である。
【００６２】
いくつかの実施形態では、立体障害求核性塩基はホスフィンである。いくつかのこのような実施形態では、立体障害求核性塩基はトリフェニルホスフィンである。
【００６３】
いくつかの実施形態では、上のステップ（ｂ）は約０℃〜約１００℃の温度範囲で実施される。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）は約０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）は約２５℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）は約５０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）は約１００℃の温度で実施される。
【００６４】
当業者は、式Ａの化合物と中間体Ｂとの１，４−求核性付加／除去反応が、極性の非プロトン性有機溶媒の使用を要することを認識するであろう。適切な極性の非プロトン性有機溶媒としては、ジオキサン、テトラヒドロフラン、およびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）などのエーテルと、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）などのアミドとが挙げられる。当業者は、所望の反応温度のための適切な溶媒を選択できる。
【００６５】
別の態様に従って、本発明は、
（ａ）式Ｅ：
【化１５】
0006005740.tif 000018
（式中、Ｒｘ、Ｒｙ、およびｍは、式Ｙの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｅの化合物と、式Ｂ：
【化１６】
0006005740.tif 000019
（式中、
ＬＧは、ハロゲン、−ＯＳＯ２Ｒまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３であり；
Ｒ、Ｗ、Ｒ１、およびＲ２のそれぞれは、式Ｙの化合物について上で定義されるとおりである）のオレフィンを立体障害求核性塩基の存在下で反応させて、式Ｙの化合物を形成するステップと
を含んでなる、式Ｙ：
【化１７】
0006005740.tif 000020
（式中、Ｒ、Ｒｘ、Ｒｙ、Ｒ１、Ｒ２、Ｗ、およびｍのそれぞれは、式Ｚの化合物に関して上で定義されるとおりである）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する方法を提供する。
【００６６】
上述したように、式Ｅの化合物は、１，４−求核性付加／除去反応によって、中間体Ｂとカップリングされる。いくつかの実施形態では、式Ｅの化合物は、立体障害求核性塩基の存在下で、中間体Ｂとカップリングされる。適切な立体障害塩基としては、三級アミン塩基が挙げられる。いくつかの実施形態では、適切な立体障害塩基としては、立体障害第二級アミン塩基が挙げられる。いくつかの実施形態では、立体的障害求核性塩基は、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノン−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ（２．２．２）オクタン（ＤＡＢＣＯ）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルメチルアミン、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン、キヌクリジン、１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン（ＰＭＰ）、７−メチル−１，５，７−トリアザビシクロ（４．４．０）デカ−５−エン（ＭＴＢＤ）、トリフェニルホスフィン、トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン、およびトリシクロヘキシルホスフィンから選択される。いくつかの実施形態では、立体障害求核性塩基は１，４−ジアザビシクロ（２．２．２）オクタン（ＤＡＢＣＯ）である。いくつかの実施形態では、立体障害求核性塩基は１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）である。
【００６７】
いくつかの実施形態では、立体障害求核性塩基はホスフィンである。いくつかのこのような実施形態では、立体障害求核性塩基はトリフェニルホスフィンである。
【００６８】
いくつかの実施形態では、上のステップ（ｂ）は約０℃〜約１００℃の温度範囲で実施される。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）は約０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）は約２５℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）は約５０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）は約１００℃の温度で実施される。
【００６９】
当業者は、式Ｅの化合物と中間体Ｂとの１，４−求核性付加／除去反応が、極性の非プロトン性有機溶媒の使用を要することを認識するであろう。適切な極性の非プロトン性有機溶媒としては、ジオキサン、テトラヒドロフラン、およびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）などのエーテルと、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）などのアミドとが挙げられる。当業者は、所望の反応温度のための適切な溶媒を選択できる。
【００７０】
式Ｙの化合物のいくつかの実施形態では、Ｗは−ＣＮである。いくつかの実施形態では、Ｗはハロアルキルである。いくつかのこのような実施形態では、Ｗは−ＣＦ３である。いくつかの実施形態では、Ｗは−ＮＯ２である。
【００７１】
いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（＝Ｚ）Ｒ３である。いくつかのこのような実施形態では、ＺはＯである。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３は−ＯＲ、−ＳＲまたは−Ｎ（Ｒ４）２から選択される。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）ＯＲである。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）ＯＲであり、式中Ｒは、メチル、エチル、イソプロピル、ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、およびｓｅｃ−ブチルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ３である。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３である。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ（ＣＨ３）２である。
【００７２】
いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４）２である。いくつかの実施形態では、Ｗは−（Ｏ）ＮＨ（Ｒ４）である。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ４）２であり、式中、双方のＲ４基は、それらが付着する窒素原子と一緒になって、窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する４〜７員の飽和複素環を形成し、それによって成形される環は、−（Ｒ５）ｎで任意選択的に置換される。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４）２であり、式中、双方のＲ４基は、それらが付着する窒素原子と一緒になって、窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有する４〜７員の飽和複素環を形成し、それによって成形される環は、−（Ｒ５）ｎで任意選択的に置換される。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４）２であり、式中、双方のＲ４基は、それらが付着する窒素原子と一緒になって、窒素、酸素、またはイオウから独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員の飽和複素環を形成し、それによって成形される環は、−（Ｒ５）ｎで任意選択的に置換される。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４）２であり、式中、双方のＲ４基は、それらが付着する窒素原子と一緒になって、１個の窒素原子を有する４〜７員の飽和複素環を形成し、それによって成形される環は、−（Ｒ５）ｎで任意選択的に置換される。
【００７３】
いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４）２であり、式中、双方のＲ４基は、それらが付着する窒素原子と一緒になって、１個の窒素原子を有する４〜６員の飽和複素環を形成し、それによって成形される環は、−（Ｒ５）ｎで任意選択的に置換される。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４）２であり、式中、双方のＲ４基は、それらが付着する窒素原子と一緒になって、１個の窒素原子を有する４〜５員の飽和複素環を形成し、それによって成形される環は、−（Ｒ５）ｎで任意選択的に置換される。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４）２であり、式中、双方のＲ４基は、それらが付着する窒素原子と一緒になって、１個の窒素原子を有する４員の飽和複素環を形成し、それによって成形される環は、−（Ｒ５）ｎで任意選択的に置換される。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４）２であり、式中、双方のＲ４基は、それらが付着する窒素原子と一緒になって、１個の窒素原子を有する４員の飽和複素環を形成し、それによって成形される環は、少なくとも１つのフッ素で置換される。いくつかの実施形態では、Ｗは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ４）２であり、式中、双方のＲ４基は、それらが付着する窒素原子と一緒になって、１個の窒素原子を有する４員の飽和複素環を形成し、それによって成形される環は、少なくとも２つのフッ素で置換される。いくつかの実施形態では、Ｗは
【化１８】
0006005740.tif 000021
である。
【００７４】
いくつかの実施形態では、Ｒ１は水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ１は重水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ２は水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ２は重水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ１およびＲ２は、それぞれ水素である。
【００７５】
いくつかの実施形態では、ｍは１である。いくつかの実施形態では、ｍは２である。いくつかのこのような実施形態では、Ｒｘはハロアルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒｘは−ＣＦ３である。
【００７６】
いくつかの実施形態では、Ｒｙは水素である。
【００７７】
いくつかの実施形態では、本発明は、
（ａ）式Ｄ：
【化１９】
0006005740.tif 000022
（式中、Ｒｘおよびｍは、式Ｅの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｄの化合物を反応させて、式Ｅの化合物を形成するステップと
を含んでなる
式Ｅ：
【化２０】
0006005740.tif 000023
（式中、Ｒｘ、Ｒｙ、およびｍは、式Ｚの化合物について記載されるとおりである）の化合物を提供する方法を提供する。
【００７８】
いくつかの実施形態では、式Ｄの化合物を形成するのに効果的な条件は、ヒドラジン同等物を含む。したがっていくつかの実施形態では、式Ｅの化合物を供する方法のステップ（ｂ）は、前記式Ｄの化合物をヒドラジン同等物と反応させて（ｒｅａｃｔｉｏｎ）、式Ｅの化合物を形成するステップを含む。いくつかの実施形態では、中間体Ｄは、ヒドラジン水和物と反応されて、式Ｅの化合物を提供する。いくつかの実施形態では、中間体Ｄは、ヒドラジンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルなどのヒドラジンの保護形態と反応され、引き続いて脱保護されて、中間体Ｄを提供する。
【００７９】
当業者は、ヒドラジンの中間体Ｄへの付加が、極性の非プロトン性有機溶媒を要することを認識するであろう。適切な極性の非プロトン性有機溶媒としては、ジオキサン、テトラヒドロフラン、およびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）などのエーテルと、イソプロピルアルコールなどのアルコールと、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）などのアミドとが挙げられる。当業者は、所望の反応温度のための適切な溶媒を選択できる。
【００８０】
いくつかの実施形態では、本発明は、
（ａ）式Ｃ：
【化２１】
0006005740.tif 000024
（式中、Ｒｘおよびｍは、式Ｄの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｃの化合物を反応させて、式Ｄの化合物を形成するステップと
を含んでなる、式Ｄ：
【化２２】
0006005740.tif 000025
（式中、Ｒｘおよびｍは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を調製する方法を提供する。
【００８１】
上述したように、いくつかの実施形態では、中間体Ｃはチオール酸塩で処理されて、中間体Ｄを提供する。いくつかの実施形態では、チオール酸塩はチオール酸ナトリウムである。当業者は、中間体Ｃとチオール酸塩の反応が、極性の非プロトン性溶媒の使用を要することを認識するであろう。適切な極性の非プロトン性溶媒としては、ジオキサン、テトラヒドロフラン、およびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）などのエーテルが挙げられる。
【００８２】
いくつかの実施形態では、本発明は、
（ａ）式Ｆ：
【化２３】
0006005740.tif 000026
（式中、Ｒ２およびＷは、式Ｂの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｆの化合物を反応させて、式Ｂの化合物を形成するステップと
を含んでなる、式Ｂ：
【化２４】
0006005740.tif 000027
（式中、
ＬＧは、ハロゲン、−ＯＳＯ２Ｒまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３であり；
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、およびＷのそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を調製する方法を提供する。
【００８３】
上述したように、中間体Ｂのいくつかの実施形態では、ＬＧはハロゲンである。いくつかのこのような実施形態では、式Ｆの化合物は、ハロゲン化物塩で処理される。いくつかの実施形態では、式Ｆの化合物は、ハロゲン化ナトリウムで処理される。いくつかのこのような実施形態では、式Ｆの化合物は、ヨウ化ナトリウムで処理される。いくつかの実施形態では、中間体Ｆは、酸存在下において、ハロゲン化物塩で処理される。適切な酸としては、無機酸および有機酸の双方が挙げられる。いくつかの実施形態では、中間体Ｆは、ハロゲン化物塩および酢酸などの有機酸で処理される。いくつかの実施形態では、中間体Ｆは、酢酸存在下において、ヨウ化ナトリウムで処理されて、式Ｂの化合物を与える。
【００８４】
当業者は、ハロゲン化物塩の中間体Ｆへの付加が、極性の非プロトン性有機溶媒を要することを認識するであろう。適切な極性の非プロトン性有機溶媒としては、ジオキサン、テトラヒドロフラン、およびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）などのエーテルが挙げられる。
【００８５】
別の態様に従って、本発明は、
（ａ）式Ｅ：
【化２５】
0006005740.tif 000028
（式中、Ｒｘ、Ｒｙ、およびｍのそれぞれは、式Ｘの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｅの化合物と、式Ｇ：
【化２６】
0006005740.tif 000029
（式中、
ＬＧは、ハロゲン、−ＯＳＯ２Ｒまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３であり；
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ４のそれぞれは、式Ｘの化合物について上で定義されるとおりである）のオレフィンを立体障害求核性塩基の存在下で反応させて、式Ｘの化合物を形成するステップと
を含んでなる、式Ｘ：
【化２７】
0006005740.tif 000030
（式中、Ｒ、Ｒｘ、Ｒｙ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、およびｍのそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する方法を提供する。
【００８６】
別の態様に従って、本発明は、
（ａ）式Ｅ：
【化２８】
0006005740.tif 000031
（式中、Ｒｘ、Ｒｙ、およびｍのそれぞれは、式Ｗの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｅの化合物と、
式Ｈ：
【化２９】
0006005740.tif 000032
（式中、
ＬＧは、ハロゲン、−ＯＳＯ２Ｒまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３であり；
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、およびｎのそれぞれは、式Ｗの化合物について上で定義されるとおりである）のオレフィンを立体障害求核性塩基の存在下で反応させて、式Ｗの化合物を形成するステップと
を含んでなる、式Ｗ：
【化３０】
0006005740.tif 000033
（式中、Ｒ、Ｒｘ、Ｒｙ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、ｍ、およびｎのそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する方法を提供する。
【００８７】
別の態様に従って、本発明は、
（ａ）式Ｅ：
【化３１】
0006005740.tif 000034
（式中、Ｒｘ、Ｒｙ、およびｍのそれぞれは、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｅの化合物と、式Ｊ：
【化３２】
0006005740.tif 000035
（式中、
ＬＧは、ハロゲン、−ＯＳＯ２Ｒまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３であり；
Ｒ、Ｒ１、およびＲ２のそれぞれは、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）のオレフィンを立体障害求核性塩基の存在下で反応させて、式Ｖの化合物を形成するステップと
を含んでなる、式Ｖ：
【化３３】
0006005740.tif 000036
（式中、Ｒ、Ｒｘ、Ｒｙ、Ｒ１、Ｒ２、およびｍのそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する方法を提供する。
【００８８】
いくつかの実施形態では、本発明は、
（ａ）式Ｋ：
【化３４】
0006005740.tif 000037
（式中、Ｒ２およびＲ４のそれぞれは、式Ｇの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｋの化合物を反応させて、式Ｇの化合物を形成するステップと
を含んでなる、式Ｇ：
【化３５】
0006005740.tif 000038
（式中、
ＬＧは、ハロゲン、−ＯＳＯ２Ｒまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３であり；
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ４のそれぞれは、式Ｚの化合物について本明細書に記載されるとおりである）の化合物を調製する方法を提供する。
【００８９】
上述したように、中間体Ｇのいくつかの実施形態では、ＬＧはハロゲンである。いくつかのこのような実施形態では、式Ｋの化合物はハロゲン化物塩で処理される。いくつかの実施形態では、式Ｋの化合物はハロゲン化ナトリウムで処理される。いくつかのこのような実施形態では、式Ｋの化合物はヨウ化ナトリウムで処理される。いくつかの実施形態では、中間体Ｋは、酸存在下において、ハロゲン化物塩で処理される。適切な酸としては、無機酸および有機酸の双方が挙げられる。いくつかの実施形態では、中間体Ｋは、ハロゲン化物塩および酢酸などの有機酸で処理される。いくつかの実施形態では、中間体Ｋは、酢酸存在下において、ヨウ化ナトリウムで処理されて、式Ｇの化合物を与える。
【００９０】
いくつかの実施形態では、本発明は、
（ａ）式Ｌ：
【化３６】
0006005740.tif 000039
（式中、Ｒ２は、水素、重水素、トリチウムまたはハロゲンである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｌの化合物と、ＨＮ（Ｒ４）２（式中、各Ｒ４は、式Ｋの化合物について上で定義されるとおりである）を反応させて、式Ｋの化合物を形成するステップと
を含んでなる、式Ｋ：
【化３７】
0006005740.tif 000040
（式中、Ｒ２およびＲ４のそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を調製する方法を提供する。
【００９１】
いくつかの実施形態では、式Ｌの化合物は、ＨＮ（Ｒ４）２の存在下で、アミドカップリング剤で処理されて、式Ｋの化合物を形成する。適切なアミドカップリング剤としては、ＨＯＢｔ、ＨＯＡｔ、ＨＡＭＤＵ、ＨＡＭＴＵ、ＰｙＢＯＰ、ＰｙＢｒＯＰ、ＴＢＴＵ、ＨＡＴＵ、およびＴ３Ｐが挙げられる。当業者は、このようなアミドカップリング試薬の使用が、塩基の使用を要することを認識するであろう。適切な塩基としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、４−ジメチルピリジン（ＤＭＡＰ）などの有機塩基が挙げられる。
【００９２】
いくつかの実施形態では、式Ｌの化合物を塩化チオニルなどの塩素化剤と反応させて塩化アシルを形成し、次にそれをＨＮ（Ｒ４）２と反応させて、式Ｋの化合物を形成する。
【００９３】
いくつかの実施形態では、本発明は、
（ａ）式Ｌ：
【化３８】
0006005740.tif 000041
（式中、Ｒ２は、式Ｇの化合物について上で定義されるとおりである）のプロパギル酸を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｌの化合物と、式ＨＯ−Ｒを有するアルコールを反応させて、式Ｍ：
【化３９】
0006005740.tif 000042
（式中、ＲおよびＲ２のそれぞれは、式Ｇの化合物について上で定義されるとおりである）のプロパギルエステルを形成するステップと；
（ｃ）前記式Ｍのプロパギルエステルを反応させて、式Ｎ：
【化４０】
0006005740.tif 000043
（式中、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、およびＬＧのそれぞれは、式Ｇの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を形成するステップと；
（ｄ）前記式Ｎの化合物を加水分解して、式Ｑ：
【化４１】
0006005740.tif 000044
（式中、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、およびＬＧのそれぞれは、式Ｇの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を形成するステップと；
（ｅ）前記式Ｑの化合物と、ＨＮ（Ｒ４）２（式中、各Ｒ４は、式Ｇの化合物について上で定義されるとおりである）を反応させて、式Ｇの化合物を形成するステップと
を含んでなる、式Ｇ：
【化４２】
0006005740.tif 000045
（式中、
ＬＧは、ハロゲン、−ＯＳＯ２Ｒまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３であり；
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ４のそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を調製する方法を提供する。
【００９４】
いくつかの実施形態では、式Ｌのプロパギル酸は、アルコールで処理されて、式Ｍのプロパギルエステルを形成する。適切なアルコールとしては、メタノール、エタノール、およびイソプロパノールが挙げられる。当業者は、式Ｌのプロパギル酸のエステル化が、触媒性酸によってもたらされ得ることを認識するであろう。したがっていくつかの実施形態では、式Ｌのプロパギル酸が、触媒性硫酸の存在下で、メタノールまたはエタノールで処理されて、式Ｍのプロパギルエステルが提供される。
【００９５】
当業者は、このようなエステル化が、約２５℃〜約１００℃、またはアルコールの沸点までの温度で実施され得ることを認識するであろう。いくつかの実施形態では、式Ｌのプロパギル酸のエステル化を加熱して還流させる（アルコールの沸点）。
【００９６】
上述したように、式Ｎの化合物のいくつかの実施形態では、ＬＧはハロゲンである。いくつかのこのような実施形態では、式Ｍの化合物は、ハロゲン化物塩で処理される。いくつかの実施形態では、式Ｍの化合物は、ハロゲン化ナトリウムで処理される。いくつかのこのような実施形態では、式Ｍの化合物は、ヨウ化ナトリウムで処理される。いくつかの実施形態では、式Ｍの化合物は、酸存在下において、ハロゲン化物塩で処理される。適切な酸としては、無機酸および有機酸の双方が挙げられる。いくつかの実施形態では、式Ｍの化合物は、ハロゲン化物塩および酢酸などの有機酸で処理される。いくつかの実施形態では、式Ｍの化合物は、酢酸存在下において、ヨウ化ナトリウムで処理されて、式Ｎの化合物を与える。
【００９７】
いくつかの実施形態では、式Ｎの化合物のエステルは、アクリル酸に加水分解される。適切な加水分解条件は、当業者に知られており、水の存在下における、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、および水酸化セシウムなどの水酸化物が挙げられる。当業者は、このような加水分解が、約２５℃〜約１００℃の温度で実施され得ることを認識するであろう。いくつかの実施形態では、式Ｎのアクリレートの加水分解は、加熱して環流される。
【００９８】
いくつかの実施形態では、式Ｑのアクリル酸をＨＮ（Ｒ４）２と反応させて、式Ｇの化合物を形成する。いくつかの実施形態では、式Ｑのアクリル酸は、ＨＮ（Ｒ４）２の存在下で、アミドカップリング剤で処理されて、式Ｇの化合物を形成する。適切なアミドカップリング剤としては、ＨＯＢｔ、ＨＯＡｔ、ＨＡＭＤＵ、ＨＡＭＴＵ、ＰｙＢＯＰ、ＰｙＢｒＯＰ、ＴＢＴＵ、ＨＡＴＵ、およびＴ３Ｐが挙げられる。当業者は、このようなアミドカップリング試薬の使用が、塩基の使用を要することを認識するであろう。適切な塩基としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、４−ジメチルピリジン（ＤＭＡＰ）などの有機塩基が挙げられる。
【００９９】
いくつかの実施形態では、式Ｑの化合物を塩化チオニルなどの塩素化剤と反応させて塩化アシルを形成し、次にそれをＨＮ（Ｒ４）２と反応させて、式Ｇの化合物を形成する。
【０１００】
いくつかの実施形態では、本発明は、
（ａ）式Ｌ：
【化４３】
0006005740.tif 000046
（式中、Ｒ２は、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｌの化合物と、
【化４４】
0006005740.tif 000047
を反応させて、式Ｒ：
【化４５】
0006005740.tif 000048
（式中、Ｒ２は、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を形成するステップと；
（ｃ）前記式Ｒの化合物を反応させて、式Ｊ：
【化４６】
0006005740.tif 000049
（式中、
ＬＧは、ハロゲン、−ＯＳＯ２Ｒまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３であり；
Ｒ、Ｒ１、およびＲ２のそれぞれは、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｄ）前記式Ｊの化合物と、式Ｅ：
【化４７】
0006005740.tif 000050
（Ｒｘ、Ｒｙ、およびｍのそれぞれは、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を立体障害求核性塩基の存在下で反応させるステップと
を含んでなる、式Ｖ：
【化４８】
0006005740.tif 000051
（式中、Ｒ、Ｒｘ、Ｒｙ、Ｒ１、Ｒ２、およびｍのそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する方法を提供する。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、本発明は、
（ａ）式Ｌ：
【化４９】
0006005740.tif 000052
（式中、Ｒ２は、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｂ）前記式Ｌの化合物と、式ＨＯ−Ｒを有するアルコールを反応させて、式Ｍ：
【化５０】
0006005740.tif 000053
（式中、ＲおよびＲ２のそれぞれは、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を形成するステップと；
（ｃ）前記式Ｍの化合物を反応させて、式Ｎ：
【化５１】
0006005740.tif 000054
（式中、ＬＧは、ハロゲン−ＯＳＯ２Ｒまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３の化合物であり；Ｒ、Ｒ１、およびＲ２のそれぞれは、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を提供するステップと；
（ｄ）前記式Ｎの化合物を加水分解して、式Ｑ：
【化５２】
0006005740.tif 000055
（式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＬＧのそれぞれは、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を形成するステップと；
（ｅ）前記式Ｑの化合物と、
【化５３】
0006005740.tif 000056
を反応させて、式Ｊ：
【化５４】
0006005740.tif 000057
（式中、
ＬＧは、ハロゲン、−ＯＳＯ２Ｒまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３であり；
Ｒ、Ｒ１、およびＲ２のそれぞれは、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を形成するステップと；
（ｆ）前記式Ｊの化合物と、式Ｅ：
【化５５】
0006005740.tif 000058
（式中、Ｒｘ、Ｒｙ、およびｍのそれぞれは、式Ｖの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物を立体障害求核性塩基の存在下で反応させて、式Ｖの化合物を提供するステップと
を含んでなる式Ｖ：
【化５６】
0006005740.tif 000059
（式中、Ｒ、Ｒｘ、Ｒｙ、Ｒ１、Ｒ２、およびｍのそれぞれは、式Ｚの化合物について上で定義されるとおりである）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する方法を提供する。
【０１０２】
定義
本発明の化合物は、上で概説され、本明細書で開示されるクラス、サブクラス、およびクラスによってさらに例証されるものを含む。本明細書の用法では、特に断りのない限り、以下の定義が適用されるものとする。本発明の目的では、化学元素はＰｅｒｉｏｄｉｃ  Ｔａｂｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ，ＣＡＳ  ｖｅｒｓｉｏｎ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ，第７５版に従って同定される。さらに有機化学の一般的原理は、その内容全体を参照によって本明細書に援用する、“Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｏｒｒｅｌｌ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｏｏｋｓ，Ｓａｕｓａｌｉｔｏ：１９９９、および“Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，第５版，Ｅｄ．：Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｂ．ａｎｄ  Ｍａｒｃｈ，Ｊ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：２００１に記載される。
【０１０３】
本明細書で特に断りのない限り、本明細書で使用される命名法は、その例示的な化学構造名および化学構造命名法について、参照によって本明細書に援用する、Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｓｅｃｔｉｏｎｓ  Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，ａｎｄ  Ｈ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ，１９７９に述べられる例と規則に一般に従う。任意選択的に、化合物名は、化学物質命名プログラムＡＣＤ／ＣｈｅｍＳｋｅｔｃｈ，バージョン５．０９／Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ２００１，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．，Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｃａｎａｄａを使用して、生成してもよい。
【０１０４】
本発明の化合物は、（例えばＥ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ａｎｄ  Ｓ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ，Ｓｔｅｒｅｏ−ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４，ｐａｇｅｓ  １１１９−１１９０に記載されるように）不斉中心、キラル軸、およびキラル面を有して、ラセミ体、ラセミ混合物として、および個々のジアステレオマーまたは鏡像異性体として存在してもよく、光学異性体をはじめとする全ての可能な異性体およびそれらの混合物は、本発明に包含される。
【０１０５】
「脂肪族」または「脂肪族基」という用語は、本明細書の用法では、直鎖（すなわち非分枝）、分枝、または環式（融合、架橋、およびスピロ融合多環式を含む）一価の炭化水素遊離基を意味する。脂肪族基は、飽和であり得て、または１つまたは複数の不飽和単位を含有し得るが、芳香族ではない。特に断りのない限り、脂肪族基は１〜６個の炭素原子を含有する。しかしいくつかの実施形態では、脂肪族基は１〜１０または２〜８個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態では、脂肪族基は１〜４個の炭素原子を含有し、なおも別の実施形態では、脂肪族基は１〜３個の炭素原子を含有する。適切な脂肪族基としては、直鎖または分枝の、アルキル、アルケニル、およびアルキニル基と、（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルケニル）アルキルまたは（シクロアルキル）アルケニルなどのそれらのハイブリッドとが挙げられるが、これに限定されるものではない。
【０１０６】
「アルキル」という用語は、本明細書の用法では、飽和、直鎖または分枝脂肪族基を意味する。一態様では、アルキル基は、１〜１０または２〜８個の炭素原子を含有する。アルキルとしては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチルなどが挙げられるが、これに限定されるものではない。
【０１０７】
「アルケニル」という用語は、明細書の用法では、１つまたは複数の炭素−炭素二重結合（すなわち−ＣＨ＝ＣＨ−）を有する、直鎖または分枝脂肪族基を意味する。一態様では、アルケニル基は２〜８個の炭素原子を有して、例えば非限定的に、エテニル、１−プロペニル、１−ブテニルなどが挙げられる。「アルケニル」という用語は、「シス」および「トランス」、または代案としては「Ｅ」および「Ｚ」立体配置にある炭素−炭素二重結合を有する、遊離基を包含する。アルケニル基が、２つ以上の炭素−炭素二重結合を含む場合、各炭素−炭素二重結合は、独立して、シスまたはトランス二重結合、またはその混合物である。
【０１０８】
「アルキニル」という用語は、本明細書の用法では、１つまたは複数の（ｏｎｅ  ｏｒｅ  ｍｏｒｅ）炭素−炭素（ｃａｒｂｏｎｄ）三重結合（すなわち−Ｃ≡Ｃ−）を有する、直鎖または分枝脂肪族遊離基を意味する。一態様では、アルキル基は２〜８個の炭素原子を有して、例えば非限定的に、１−プロピニル（プロパルギル）、１−ブチニルなどが挙げられる。
【０１０９】
「脂環式」、「カルボシクリル」、「カルボシクロ」、および「炭素環式」という用語は、単独でまたはより大きな部分の一部として使用されて、本明細書に記載される、３〜１０員の飽和または部分不飽和環式脂肪族単環系または二環系を指し、脂肪族環系は、上で定義されて本明細書に記載されるように、任意選択的に置換される。脂環式基としては、制限なしに、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロヘプテニル、シクロオクチル、シクロオクテニル、およびシクロオクタジエニルが挙げられる。「脂環式」、「カルボシクリル」、「カルボシクロ」、および「炭素環式」という用語はまた、デカヒドロナフチル、テトラヒドロナフチル、デカリン、またはビシクロ［２．２．２］オクタンなどの１つまたは複数の芳香族または非芳香族環に融合した、脂肪族環も含む。
【０１１０】
「シクロアルキル」という用語は、本明細書の用法では、３〜１０員の単環または二環系を有する、飽和環式脂肪族を意味する。シクロアルキルは、本明細書に記載されるように、任意選択的に置換され得る。いくつかの実施形態では、シクロアルキルは３〜６個の炭素を有する。
【０１１１】
「ヘテロシクロアルキル」という用語は、本明細書の用法では、その中で少なくとも１つの炭素原子がＮ、Ｓ、およびＯから選択されるヘテロ原子で置換されている、飽和または不飽和脂肪族環系を意味する。ヘテロシクロアルキルは、共に付着していても、ペンダント様式であっても、または融合していてもよい、１つまたは複数の環を含有し得る。一態様では、ヘテロシクロアルキルは３〜７員環系であり、例えば非限定的に、ピペリジニル、ピペラジニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニルなどが挙げられる。
【０１１２】
「ヘテロ原子」という用語は、酸素、イオウ、窒素、リン、またはケイ素の１つまたは複数を意味して、窒素、イオウ、リン、またはケイ素のあらゆる酸化形態；塩基性窒素のあらゆる四級化形態；および例えば、Ｎ（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリル中など）、ＮＨ（ピロリジニル中など）またはＮＲ＋（Ｎ−置換ピロリジニル中など）などの複素環の置換可能な窒素を含む。
【０１１３】
「不飽和」という用語は、本明細書の用法では、部分が、１つまたは複数の不飽和単位を有することを意味する。
【０１１４】
「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、明細書の用法では、ハロゲンを意味し、例えば非限定的に、放射性および非放射性形態の双方のフルオロ、クロロ、ブロモ、ヨードなどが挙げられる。
【０１１５】
「ハロアルキル」という用語は、本明細書の用法では、１つまたは複数のハロゲン原子で置換されている脂肪族基を意味する。いくつかの実施形態では、ハロアルキルは、過ハロゲン化脂肪族基を指す。いくつかの実施形態では、ハロアルキルは、１つまたは複数のハロゲン原子で置換されているアルキル基を指す。例示的なハロアルキル基としては、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＦ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＦ３、−ＣＨ２（ＣＦ３）２、−ＣＦ２（ＣＦ３）２などが挙げられる。
【０１１６】
「アリール」という用語は、単独でまたは組み合わせで、本明細書の用法では、ペンダント様式で共に付着してもよい、または融合してもよい、１つまたは複数の環を含有する炭素環式芳香族系を意味する。特定の実施形態では、アリールは、１、２または３環である。一態様では、アリールは５〜１２個の環原子を有する。「アリール」という用語は、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、フェナントリル、アントリル、およびアセナフチルなどの芳香族遊離基を包含する。「アリール」基は、低級アルキル、ヒドロキシル、ハロ、ハロアルキル、ニトロ、シアノ、アルコキシ、低級アルキルアミノなどの１〜４個の置換基を有し得る。
【０１１７】
「ヘテロアリール」という用語は、単独でまたは組み合わせで、本明細書の用法では、少なくとも１つの炭素原子が、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択されるヘテロ原子によって置き換えられている、芳香族系を意味する。ヘテロアリールは、共に付着していても、ペンダント様式であっても、または融合していてもよい、１つまたは複数の環を含有し得る。特定の実施形態では、ヘテロアリールは、１、２または３環である。一態様では、ヘテロアリールは、５〜１２個の環原子を有する。「ヘテロアリール」という用語は、トリアゾリル、イミダゾリル、ピロリル、ピラゾリル、テトラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリル、フリル、ベンゾフリル、チエニル、ベンゾチエニル、キノリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、イソオキサゾリルなどの複素環式芳香族基を包含する。「ヘテロアリール」基は、低級アルキル、ヒドロキシル、ハロ、ハロアルキル、ニトロ、シアノ、アルコキシ、低級アルキルアミノなどの１〜４個の置換基を有し得る。
【０１１８】
本発明の化合物上の置換基および置換パターンは、化学的に安定しており、当該技術分野で公知の技術、ならびに下記の方法によって容易に合成され得る化合物を与えるように、当業者によって選択され得るものと理解される。一般に「置換される」という用語は、「任意選択的に」という用語がそれに先行するかどうかに関わりなく、指定された部分の１つまたは複数の水素が、適切な置換基で置換されることを意味する。特に断りのない限り、「任意選択的に置換される基」は、基の置換可能な各位置で適切な置換基を有し得て、あらゆる所与の構造内の２つ以上の位置が、特定の群から選択される２つ以上の置換基で置換されてもよい場合、置換基は各位置で同一であるか、または異なり得る。代案としては、「任意選択的に置換される基」は非置換であり得る。
【０１１９】
本発明によって想定される置換基の組み合わせは、安定したまたは化学的に実現可能な化合物の形成をもたらすものであることが好ましい。置換基それ自体が、２つ以上の基によって置換される場合、安定した構造が得られさえすれば、これらの複数の基は、同一炭素原子または異なる炭素原子上にあり得るものと理解される。「安定した」という用語は、本明細書の用法では、それらの生成、検出、および特定の実施形態では、それらの回収、精製、および本明細書で開示される目的の１つまたは複数のための使用を可能にする条件に置かれた際に、実質的に変性しない化合物を指す。
【０１２０】
「任意選択的に置換される基」の置換可能な炭素原子上の適切な一価の置換基は、独立して、ハロゲン；−（ＣＨ２）０〜４Ｒ°；−（ＣＨ２）０〜４ＯＲ°；−Ｏ（ＣＨ２）０〜４Ｒ°、−Ｏ−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；−（ＣＨ２）０〜４ＣＨ（ＯＲ°）２；−（ＣＨ２）０〜４ＳＲ°；Ｒ°で置換されてもよい−（ＣＨ２）０〜４Ｐｈ；Ｒ°で置換されてもよい−（ＣＨ２）０〜４Ｏ（ＣＨ２）０〜１Ｐｈ；Ｒ°で置換されてもよい−ＣＨ＝ＣＨＰｈ；Ｒ°で置換されてもよい−（ＣＨ２）０〜４Ｏ（ＣＨ２）０〜１−ピリジル；−ＮＯ２；−ＣＮ；−Ｎ３；−（ＣＨ２）０〜４Ｎ（Ｒ°）２；−（ＣＨ２）０〜４Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）Ｒ°；−Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｓ）Ｒ°；−（ＣＨ２）０〜４Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＮＲ°２；−Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｓ）ＮＲ°２；−（ＣＨ２）０〜４Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；−Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）Ｒ°；−Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＮＲ°２；−Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）Ｒ°；−Ｃ（Ｓ）Ｒ°；−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）ＳＲ°；−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）ＯＳｉＲ°３；−（ＣＨ２）０〜４ＯＣ（Ｏ）Ｒ°；−ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）０〜４ＳＲ−，ＳＣ（Ｓ）ＳＲ°；−（ＣＨ２）０〜４ＳＣ（Ｏ）Ｒ°；−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）ＮＲ°２；−Ｃ（Ｓ）ＮＲ°２；−Ｃ（Ｓ）ＳＲ°；−ＳＣ（Ｓ）ＳＲ°、−（ＣＨ２）０〜４ＯＣ（Ｏ）ＮＲ°２；−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ°）Ｒ°；−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ°；−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ°；−Ｃ（ＮＯＲ°）Ｒ°；−（ＣＨ２）０〜４ＳＳＲ°；−（ＣＨ２）０〜４Ｓ（Ｏ）２Ｒ°；−（ＣＨ２）０〜４Ｓ（Ｏ）２ＯＲ°；−（ＣＨ２）０〜４ＯＳ（Ｏ）２Ｒ°；−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ°２；−（ＣＨ２）０〜４Ｓ（Ｏ）Ｒ°；−Ｎ（Ｒ°）Ｓ（Ｏ）２ＮＲ°２；−Ｎ（Ｒ°）Ｓ（Ｏ）２Ｒ°；−Ｎ（ＯＲ°）Ｒ°；−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ°２；−Ｐ（Ｏ）２Ｒ°；−Ｐ（Ｏ）Ｒ°２；−ＯＰ（Ｏ）Ｒ°２；−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ°）２；ＳｉＲ°３；−（Ｃ１〜４直鎖または分枝アルキレン）Ｏ−Ｎ（Ｒ°）２；または−（Ｃ１〜４直鎖または分枝アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｎ（Ｒ°）２であり、式中、各Ｒ°は、以下に定義するように置換されてもよく、独立して、水素、Ｃ１〜６脂肪族、−ＣＨ２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ２）０〜１Ｐｈ、−ＣＨ２−（５〜６員ヘテロアリール環）、または窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和、部分不飽和、またはアリール環であり、または上の定義に妨げられることなく、２つの独立したＲ°の存在は、それらの介在原子と一緒になって、窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する３〜１２員の飽和、部分不飽和、またはアリール単環または二環を形成し、それは以下に定義するように置換されてもよい。
【０１２１】
Ｒ°（またはそれらの介在原子と共に２つの独立したＲ°の存在を一緒することで形成される環）上の適切な一価の置換基は、独立して、ハロゲン、−（ＣＨ２）０〜２Ｒ●、−（ｈａｌｏＲ●）、−（ＣＨ２）０〜２ＯＨ、−（ＣＨ２）０〜２ＯＲ●、−（ＣＨ２）０〜２ＣＨ（ＯＲ●）２；−Ｏ（ハロＲ●）、−ＣＮ、−Ｎ３、−（ＣＨ２）０〜２Ｃ（Ｏ）Ｒ●、−（ＣＨ２）０〜２Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）０〜２Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、−（ＣＨ２）０〜２ＳＲ●、−（ＣＨ２）０〜２ＳＨ、−（ＣＨ２）０〜２ＮＨ２、−（ＣＨ２）０〜２ＮＨＲ●、−（ＣＨ２）０〜２ＮＲ●２、−ＮＯ２、−ＳｉＲ●３、−ＯＳｉＲ●３、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ●、−（Ｃ１〜４直鎖または分枝アルキレン）Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、または−ＳＳＲ●であり、式中、各Ｒ●は非置換であり、または「ハロ」が先行する場合は１つまたは複数のハロゲンのみで置換され、Ｃ１〜４脂肪族、−ＣＨ２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ２）０〜１Ｐｈ、または窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和、部分不飽和、またはアリール環から独立して選択される。Ｒ°の飽和炭素原子上の適切な二価の置換基としては、＝Ｏおよび＝Ｓが挙げられる。
【０１２２】
「任意選択的に置換される基」の飽和炭素原子上の適切な二価の置換基としては、＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮＲ＊２、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）Ｒ＊、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ＊、＝ＮＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ＊、＝ＮＲ＊、＝ＮＯＲ＊、−Ｏ（Ｃ（Ｒ＊２））２〜３Ｏ−、および−Ｓ（Ｃ（Ｒ＊２））２〜３Ｓ−が挙げられ、式中、各独立したＲ＊の存在は、水素、以下に定義するように置換されてもよいＣ１〜６脂肪族、または窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換の５〜６員の飽和、部分不飽和またはアリール環から選択される。「任意選択的に置換される」基の隣接する置換可能な炭素に結合する適切な二価の置換基としては、−Ｏ（ＣＲ＊２）２〜３Ｏ−が挙げられ、式中、各独立したＲ＊の存在は、水素、以下に定義するように置換されてもよいＣ１〜６脂肪族、または窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換の５〜６員の飽和、部分不飽和またはアリール環から選択される。
【０１２３】
Ｒ＊の脂肪族基上の適切な置換基としては、ハロゲン、−Ｒ●、−（ｈａｌｏＲ●）、−ＯＨ、−ＯＲ●、−Ｏ（ｈａｌｏＲ●）、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、−ＮＨ２、−ＮＨＲ●、−ＮＲ●２、および−ＮＯ２が挙げられ、式中、各Ｒ●は、非置換であり、または「ハロ」が先行する場合は、１つまたは複数のハロゲンのみで置換されて、独立して、Ｃ１〜４脂肪族、−ＣＨ２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ２）０〜１Ｐｈ、または窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和、部分不飽和、またはアリール環である。
【０１２４】
「任意選択的に置換される基」の置換可能な窒素上の適切な置換基としては、−Ｒ†、−ＮＲ†２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ†、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ†、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ†、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ†、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ†、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ†２、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ†２、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ†２、および−Ｎ（Ｒ†）Ｓ（Ｏ）２Ｒ†が挙げられ、；式中、各Ｒ＊は、独立して、水素、以下に定義するように置換されてもよいＣ１〜６脂肪族、非置換−ＯＰｈ、または窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換の５〜６員の飽和、部分不飽和またはアリール環から選択され、または上の定義に妨げられることなく、２つの独立したＲ†の存在は、それらの介在原子と一緒になって、窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換の３〜１２員の飽和、部分不飽和、またはアリール単環または二環を形成する。
【０１２５】
Ｒ†の脂肪族基上の適切な置換基は、独立して、ハロゲン、−Ｒ●、−（ｈａｌｏＲ●）、−ＯＨ、−ＯＲ●、−Ｏ（ｈａｌｏＲ●）、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、−ＮＨ２、−ＮＨＲ●、−ＮＲ●２、または−ＮＯ２であり、式中、各Ｒ●は、非置換であり、または「ハロ」が先行する場合は、１つまたは複数のハロゲンのみで置換されて、独立して、Ｃ１〜４脂肪族、−ＣＨ２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ２）０〜１Ｐｈ、または窒素、酸素、およびイオウから独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和、部分不飽和、またはアリール環である。
【０１２６】
本明細書の用法では、「ヒドラジン同等物」は、分子内に−Ｎ−Ｎ−部分を導入のに使用し得る、化学試薬を意味する。ヒドラジン同等物としては、ヒドラジン水和物、ならびにヒドラジンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルなどのヒドラジンの保護形態が挙げられる
【０１２７】
本明細書の用法では、「離脱基」は、化学反応中に分子から置換される官能基を指す。離脱基としては、ハロゲン、ならびに（ａｓ  ｗｅｌｌ）トシレートやメシレートなどのスルホネート基が挙げられる。
【０１２８】
本明細書の用法では、「薬学的に許容可能な塩」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー性応答などなしで、ヒトおよび下等動物組織と接触させる使用に適し、利点／リスクの比率が妥当に釣り合った塩を指す。薬学的に許容可能な塩は、当該技術分野で周知である。例えばＳ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．は、その関係のある教示の内容全体を参照によって本明細書に援用する、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９７７，６６，１−１９で、薬学的に許容可能な塩について詳細に記載する。本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩としては、患者の治療に適合する、適切な無機および有機酸および塩基から誘導される塩が挙げられる。
【０１２９】
薬学的に許容可能な無毒の酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、および過塩素酸などの無機酸によって、または酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸またはマロン酸などの有機酸によって、またはイオン交換などの当該技術分野で使用されるその他の方法を使用して、形成されるアミノ基の塩である。その他の薬学的に許容可能な酸付加塩としては、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、硫酸ラウリル塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが挙げられる。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、適切な塩を形成する例示的な無機酸としては、塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸と、オルトリン酸一水素ナトリウム、および硫酸水素カリウムなどの酸金属塩とが挙げられるがこれに限定されるものではない。適切な塩を形成する例証的な有機酸としては、モノ−、ジ−、およびトリカルボン酸が挙げられる。このような酸の例は、例えば、酢酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、桂皮酸、サリチル酸、２−フェノキシ安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸とメタンスルホン酸や２−ヒドロキシエタンスルホン酸などのその他のスルホン酸である。一酸塩または二酸塩のいずれかが形成され得て、このよう塩は、水和、溶媒和または実質的に無水の形態のいずれかで存在し得る。一般に、これらの化合物の酸付加塩は、それらの遊離塩基形態と比較して、水や種々の親水性有機溶媒中でのより溶解性であり、一般により高い融点を示す。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物の酸付加塩は、最も適切には薬学的に許容可能な酸から生成され、例えば塩酸、硫酸またはリン酸などの無機酸、そして例えば、コハク酸、マレイン酸、酢酸またはフマル酸などの有機酸によって形成されるものが挙げられる。
【０１３２】
実験室での使用のために、または引き続く薬学的に許容可能な酸付加塩への変換のために、例えば式Ｉの化合物の単離において、例えばシュウ酸塩などのその他の薬学的に許容可能でない塩を使用し得る。本発明の化合物の塩基付加塩（ナトリウム、カリウム、およびアンモニウム塩など）、溶媒和化合物、および水和物もまた、本発明の範囲内に含まれる。所与の化合物塩を所望の化合物塩に変換することは、当業者に良く知られている標準的な技術を適用することで、達成される。
【０１３３】
「薬学的に許容可能な塩基性付加塩」は、式Ｉによって表される酸化合物のあらゆる無毒の有機または無機塩基付加塩、またはその中間体のいずれかである。適切な塩を形成する例証的な無機塩基としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムまたはバリウムの水酸化物が挙げられるが、これに限定されるものではない。適切な塩を形成する例証的な有機塩基としては、メチルアミン、トリメチルアミン、およびピコリンなどの脂肪族、脂環式または芳香族有機アミン、またはアンモニアが挙げられる。分子中の他の箇所にエステル官能基がもしあれば、加水分解されないように、適切な塩の選択が重要なこともある。適切な塩の選択基準は、当業者に知られている。
【０１３４】
適切な塩基から誘導される塩としては、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウム、およびＮ＋（Ｃ１〜４アルキル）４塩が挙げられる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが挙げられる。適切な場合、さらなる薬学的に許容可能な塩としては、ハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、低級アルキルスルホネート、およびアリールスルホネートなどの対イオンを使用して形成される、無毒のアンモニウム、四級アンモニウム、およびアミンカチオンが挙げられる。
【０１３５】
特に断りのない限り、本明細書で描写される構造はまた、例えば、各不斉中心のＲおよびＳ立体配置、ＺおよびＥ二重結合異性体、およびＺおよびＥ立体構造異性体など、構造の全ての異性体（例えば鏡像異性、ジアステレオマー、および幾何学的（または立体構造））形態を含むことが意図される。したがって本化合物の単一立体化学異性体、ならびに鏡像異性、ジアステレオマー、および幾何学的（または立体構造）混合物は、本発明の範囲内である。特に断りのない限り、本発明の化合物の全ての互変異性形態は、本発明の範囲内である。
【０１３６】
それに加えて特に断りのない限り、本明細書で描写される構造は、１つまたは複数の同位体濃縮原子の存在のみが異なる、化合物を含むことが意図される。例えば、重水素またはトリチウムによる水素の置換によって、または１３Ｃ−または１４Ｃ濃縮炭素による炭素の置換によって生成される化合物は、本発明の範囲内である。このような化合物は、例えば、分析ツールとして、生物学的アッセイのプローブとして、または本発明に従った治療薬として、有用である。
【０１３７】
「立体異性体」という用語は、空間内のそれらの原子の配向のみが異なる、個々の分子の全ての異性体を指す一般用語である。これとしては、鏡像異性体（鏡像異性体）、幾何学的（シス／トランス）異性体、および互いに鏡像（ジアステレオマー）でない２つ以上のキラル中心がある化合物の異性体が挙げられる。
【０１３８】
「治療する」または「治療」という用語は、一時的または恒久的ベースで、１つまたは複数の症状を緩和すること、１つまたは複数の症状の原因を排除すること、あるいは疾患または病状に付随する１つまたは複数の症状の発生を予防または遅延させることを意味する。
【０１３９】
「治療有効量」という用語は、疾患または病状の１つまたは複数の症状を治療しまたは重症度を低下させるのに効果的な、化合物の量を意味する。
【０１４０】
「薬学的に許容できる担体」という用語は、医薬組成物、すなわち患者に投与できる剤形を形成できるようにするする、活性成分と混合される無毒の溶媒、分散剤、賦形剤、アジュバントまたはその他の材料を意味する。このような担体の一例は、非経口投与のために典型的に使用される、薬学的に許容可能な油である。薬学的に許容可能な担体は、当該技術分野で周知である。
【０１４１】
本明細書で開示される要素に言及する場合、冠詞「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」、および「前記（ｓａｉｄ）」は、１つまたは複数の要素があることを意味することが意図される。「含んでなる」、「有する」、および「はじめとする」という用語は、制約がないことが意図され、列挙する要素の他に追加的な要素があってもよいことを意味する。
【０１４２】
調合および投与
薬学的に許容可能な組成物
本発明の別の実施形態は、本発明の化合物または薬学的に許容可能なその塩と、薬学的に許容できる担体、アジュバント、またはビヒクルとを含んでなる、組成物である。本発明の組成物中の化合物の量は、生物学的サンプル中または患者において、ＣＲＭ１を測定可能な程度に阻害するのに効果的な量である。特定の実施形態では、本発明の組成物は、同組成物を必要とする患者への投与のために調合される。「患者」という用語は、本明細書の用法では動物を意味する。いくつかの実施形態では、動物は哺乳類である。特定の実施形態では、患者は獣医学の患者（すなわち非ヒト哺乳類患者）である。いくつかの実施形態では、患者はイヌである。別の実施形態では、患者はヒトである。
【０１４３】
「薬学的に許容できる担体、アジュバント、またはビヒクル」という語句は、それが一緒に調合される化合物の薬理学的活性を破壊しない無毒の担体、アジュバント、またはビヒクルを指す。本発明の組成物中で使用されてもよい薬学的に許容可能な担体、アジュバントまたはビヒクルとしては、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩などの緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、硫酸プロタミンやリン酸水素二ナトリウムやリン酸水素カリウムや塩化ナトリウムや亜鉛塩などの塩または電解質、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコール、および羊毛脂が挙げられるが、これに限定されるものではない。
【０１４４】
本発明の組成物は、吸入噴霧、局所、直腸内、鼻腔内、口腔内、膣内、または埋め込み式リザバーを通じて、経口投与、非経口投与（皮下、筋肉内、静脈内、および皮内を含む）されてもよい。いくつかの実施形態では、提供される化合物または組成物は、静脈内および／または腹腔内投与可能である。
【０１４５】
「非経口」という用語は、本明細書の用法では、皮下、静脈内、筋肉内、眼内、硝子体内、関節内、滑液嚢内、胸骨内、クモ膜下腔内、肝臓内、腹腔内病巣内、および頭蓋内注射または輸液技術を含む。好ましくは、組成物は、経口、皮下、腹腔内または静脈内投与される。本発明の組成物の無菌注射用形態は、水性または油性懸濁液であってもよい。これらの懸濁液は、適切な分散または湿潤剤と、懸濁剤とを使用して、当該技術分野で公知の技術によって調合されてもよい。無菌注射用製剤はまた、例えば１，３−ブタンジオール溶液などの無毒の非経口的に許容可能な希釈剤または溶媒中の、無菌注射用溶液または懸濁液であってもよい。用いてもよい許容可能なビヒクルおよび溶剤は、特に、水、リンゲル液、および等張塩化ナトリウム溶液である。これに加えて、無菌の不揮発性油が、溶媒または懸濁媒として従来法で用いられる。
【０１４６】
本発明の薬学的に許容可能な組成物は、カプセル、錠剤、水性懸濁液、および溶液をはじめとするが、これに限定されるものではない、あらゆる経口的に許容可能な剤形で、経口的に投与してもよい。経口使用される錠剤の場合、通常、使用される担体としては、乳糖およびコーンスターチが挙げられる。ステアリン酸マグネシウムなどの平滑剤もまた、典型的に添加される。カプセル形態での経口投与では、有用希釈剤としては、乳糖および乾燥コーンスターチが挙げられる。経口使用のために水性懸濁液が必要な場合、活性成分は、乳化および懸濁剤と組み合わされる。所望ならば、特定の甘味剤、着香料または着色剤もまた、添加してもよい。いくつかの実施形態では、提供される経口製剤は、即時放出または持続／遅延放出のために調合される。いくつかの実施形態では、組成物は、錠剤、ロゼンジ、および香錠をはじめとする、バッカルまたは舌下投与に適する。提供される化合物はまた、マイクロカプセル化形態であり得る。
【０１４７】
代案としては、本発明の薬学的に許容可能な組成物は、直腸投与のための坐薬の形態で投与してもよい。本発明の薬学的に許容可能な組成物はまた、特に治療の標的が、眼、皮膚、または下部腸管の疾患をはじめとする、局所塗布によって容易にアクセスできる領域または器官を含む場合に、局所的に投与してもよい。適切な局所製剤は、これらの各領域または器官のために、容易に調製される。
【０１４８】
下部腸管のための局所施用は、直腸坐薬製剤（上記を参照されたい）で、または適切な浣腸製剤で実施し得る。局所的経皮パッチもまた、使用し得る。
【０１４９】
眼科用途では、薬学的に許容可能な組成物は、微粉化懸濁液として、またはペトロラタムなどの軟膏中で、調合され得る。
【０１５０】
本発明の薬学的に許容可能な組成物はまた、経鼻煙霧剤または吸入によって投与し得る。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、本発明の薬学的に許容可能な組成物は、腹腔内投与のために調合される。
【０１５２】
単回投与形態の組成物を製造するために、担体材料と組み合わせてもよい本発明の化合物の量は、治療される宿主、および特定の投与様式に応じて変動する。一実施形態では、組成物は、組成物を与えられる患者に、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の用量の阻害剤が投与され得るように調合される。別の実施形態では、投与量は、約０．５〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重、または４〜１２０時間毎に１ｍｇ〜１０００ｍｇ／投与、または特定の薬剤の要件に従う。典型的に、本発明の医薬組成物は、１日あたり約１〜約６回投与される。
【０１５３】
任意の特定患者のための特定の用量および治療計画が、用いられる特定化合物の活性、年齢、体重、総体的な健康、性別、食餌、投与時間、排出速度、薬剤併用、治療する医師の判断、および治療される特定疾患の重症度をはじめとする多様な要素に左右されることもまた理解される。組成物中の本発明の化合物の量はまた、組成物中の特定化合物にも左右される。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、組成物は、１つまたは複数の追加的な治療薬または予防薬をさらに含む。本発明の組成物が、本明細書に記載される式の化合物と、１つまたは複数の追加的な治療薬または予防薬との組み合わせを含んでなる場合、化合物と追加的な作用薬の双方は、単剤療法レジメンで普通に投与される用量の約１〜１００％、より好ましくは約５〜９５％の用量レベルで存在すべきである。追加的な作用物質は、複数回投与レジメンの一部として、本発明の化合物とは別に投与し得る。代案としては、追加的な作用物質は、単一組成物中で本発明の化合物と共に混合された、単回投与形態の一部であり得る。
【０１５５】
必要ならば、患者の病状改善に際して、本発明の化合物、組成物または組み合わせの維持用量を投与し得る。引き続いて、症状が所望のレベルまで緩和された際の改善された病状が保持されるレベルまで、投与の用量または頻度、またはその双方を症状に応じて低下させ得る。しかし患者は、あらゆる疾患症状の再発に際して、長期的に断続的治療を必要とすることもある。
【０１５６】
化合物および薬学的に許容可能な組成物の使用
本明細書に記載される化合物および組成物は、一般にＣＲＭ１を阻害するのに有用であり、したがってＣＲＭ１活性と関連付けられている、１つまたは複数の障害を治療にするのに有用である。したがって特定の実施形態では、本発明は、それを必要とする患者に、本発明の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩または組成物を投与するステップを含んでなる、ＣＲＭ１媒介疾患を治療する方法を提供する。本明細書に記載される化合物および組成物はまた、例えば試験管内でまたは生体外で培養中の細胞に、または例えば生体内などで対象に投与して、本明細書で以下に記載されるものをはじめとする、多様な障害を治療、予防、および／または診断し得る。
【０１５７】
本発明でＣＲＭ１阻害剤として利用される化合物の活性は、生体外、生体内または細胞系中でアッセイしてもよい。本発明でＣＲＭ１阻害剤として利用される化合物をアッセイする詳細な条件は、実施例に記載される。
【０１５８】
本明細書の用法では、「ＣＲＭ１媒介疾患または病状」または「ＣＲＭ１活性関連疾患または病状」という用語は、ＣＲＭ１が役割を果たしている、あらゆる疾患またはその他の有害病状を意味する。したがって本発明の別の実施形態は、ＣＲＭ１が役割を果たしている、１つまたは複数の疾患を治療し、または重症度を低下させることに関する。いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載される化合物の治療有効量を患者に投与するステップを含んでなる、対象において、ｐ５３、ｐ７３、ｐ２１、ｐＲＢ、ｐ２７、ＩκＢ、ＮＦκＢ、ｃ−Ａｂｌ、ＦＯＸＯタンパク質、ＣＯＸ−２の発現または活性と関連付けられている疾患を治療する方法を提供する。別の実施形態では、本発明は、増殖性疾患（例えばがん）、炎症性疾患、自己免疫障害、ウイルス感染症、眼科疾患または神経変性疾患から選択される、疾患または病状を治療し、または重症度を低下させる方法に関し、方法は、本発明による化合物または組成物を、それを必要とする患者に投与するステップを含んでなる。より具体的な実施形態では、本発明は、がんを治療しまたは重症度を低下させる方法に関する。上記障害の特定の例は、下で詳細に記載される。
【０１５９】
本発明の化合物によって治療可能ながんとしては、血液悪性腫瘍（白血病、リンパ腫、骨髄腫、骨髄異形成、および骨髄増殖性症候群）、および固形腫瘍（前立腺、乳房、肺、結腸、膵臓、腎臓、卵巣などのがん腫、ならびに軟部組織および骨肉腫、および間質腫瘍）が挙げられるが、これに限定されるものではない。乳がん（ＢＣ）としては、基底細胞様乳がん（ＢＬＢＣ）、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、およびＢＬＢＣとＴＮＢＣの双方である乳がんが挙げられる。これに加えて、乳がんとしては、侵襲性または非侵襲性乳管又は小葉がん、管状腺がん、髄様がん、粘液性がん、乳頭がん、乳房の篩状がん、男性乳がん、再発性または転移性乳がん、乳房の葉状腫瘍、乳首のパジェット病が挙げられる。
【０１６０】
本発明の化合物によって治療可能な炎症性疾患としては、多発性硬化症、関節リウマチ、変性関節疾患、全身性エリテマトーデス、全身性硬化症、血管炎症候群（小、中および大血管）、アテローム性動脈硬化、炎症性腸疾患、過敏性腸症候群、クローン病、粘液性大腸炎、潰瘍性大腸炎、胃炎、敗血症、乾癬およびその他の皮膚科炎症性疾患（湿疹、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、蕁麻疹、強皮症、乾癬、および急性炎症性要素を伴う皮膚病、天疱瘡、類天疱瘡、アレルギー性皮膚炎など）、および蕁麻疹症候群が挙げられるが、これに限定されるものではない。いくつかの実施形態では、ＣＲＭ１活性関連疾患または病状は、多発性硬化症、過敏性腸症候群、関節リウマチ、乾癬またはその他の皮膚科炎症性疾患である。
【０１６１】
本発明の化合物によって治療可能なウイルス性疾患としては、急性熱性咽頭炎、咽頭結膜熱、流行性角結膜炎、乳児胃腸炎、コクサッキー感染症、伝染性単核症、バーキットリンパ腫、急性肝炎、慢性肝炎、肝硬変、肝細胞がん、原発性ＨＳＶ−１感染症（例えば小児における歯肉口内炎、成人における扁桃炎および咽頭炎、角結膜炎）、潜在性ＨＳＶ−１感染症（例えば口唇ヘルペス（ｈｅｒｐｅｓ  ｌａｂｉａｌｉｓ）および口唇ヘルペス（ｃｏｌｄ  ｓｏｒｅｓ）、原発性ＨＳＶ−２感染症、潜在性ＨＳＶ−２感染症、無菌性髄膜炎、伝染性単核症、巨細胞封入体病、カポジ肉腫、多中心性キャッスルマン病、原発性滲出液リンパ腫、ＡＩＤＳ、インフルエンザ、ライ症候群、はしか、後感染性脳脊髄炎、おたふく風邪、過形成上皮病変（例えば尋常性、扁平、足底、および肛門性器疣贅、喉頭乳頭腫、疣贅状表皮発育異常症）、子宮頸がん、扁平上皮がん、クループ、肺炎、細気管支炎、感冒、灰白髄炎、狂犬病、インフルエンザ様症候群、肺炎を伴う重症細気管支炎、風疹、先天性風疹、水痘、および帯状疱疹が挙げられるが、これに限定されるものではない。本発明の化合物によって治療可能なウイルス性疾患としてはまた、Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎をはじめとする、長期ウイルス感染症が挙げられる。
【０１６２】
例示的な眼科疾患としては、黄斑浮腫（糖尿病性および非糖尿病性黄斑浮腫）、加齢性湿潤および乾燥型黄斑変性、加齢性円板状黄斑変性（ａｇｅｄ  ｄｉｓｃｉｆｏｒｍ  ｍａｃｕｌａｒ  ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）、嚢胞状黄斑浮腫、眼瞼浮腫、網膜浮腫、糖尿病性網膜症、脈絡網膜症、血管新生黄斑症、血管新生緑内障、ブドウ膜炎、虹彩炎、網膜血管炎、眼内炎、全眼球炎、転移性眼炎、脈絡膜炎、網膜色素上皮炎（ｅｐｉｔｈｅｌｉｉｔｉｓ）、結膜炎、毛様体炎、強膜炎、上強膜炎、視神経炎、球後視神経炎、角膜炎、眼瞼炎、滲出性網膜離脱、角膜潰瘍、結膜潰瘍、慢性貨幣状角膜炎、眼疾患に関する低酸素症または虚血、未熟児網膜症、増殖性糖尿病性網膜症、ポリープ状脈絡膜血管症、網膜血管腫状増殖、網膜動脈閉塞症、網膜静脈閉塞症、コーツ病、家族性滲出性硝子体網膜症、脈なし病（高安病）、イールズ病、抗リン脂質抗体症候群、白血病性網膜症、血液過粘稠度症候群、マクログロブリン血症、インターフェロン網膜症、高血圧性網膜症、放射線網膜症、角膜上皮幹細胞不全症、または白内障が挙げられるが、これに限定されるものではない。
【０１６３】
本発明の化合物によって治療可能な神経変性疾患としては、パーキンソン病、アルツハイマー病、およびハンチントン病、および筋萎縮性側索硬化（ＡＬＳ／ルー・ゲーリック病）が挙げられるが、これに限定されるものではない。いくつかの実施形態では、ＣＲＭ１活性関連疾患または病状は、ＡＬＳである。
【０１６４】
本明細書に記載される化合物および組成物はまた、拡張型心筋症、肥大性心筋症、拘束性心筋症、肺線維症、肝線維症、糸球体腎炎、およびその他の腎障害をはじめとする、異常な組織増殖および線維症障害を治療するのにも使用してもよい。
【０１６５】
本明細書に記載される化合物および組成物はまた、肥満症および過食症などの、食物摂取量に関連した障害を治療するのに使用してもよい。いくつかの実施形態では、ＣＲＭ１活性関連疾患または病状は、肥満である。
【０１６６】
いくつかの実施形態では、ＣＲＭ１活性関連疾患または病状は、次のとおりである。筋ジストロフィー、例えば骨関節炎および関節リウマチなどの関節炎、強直性脊椎炎（ａｎｋｙｌｏｓｉｎｇ  ｓｐｏｎｄｉｌｉｔｉｓ）、外傷性脳損傷、脊髄損傷、敗血症、リウマチ性疾患、がんアテローム性動脈硬化、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、レプトスピラ症（ｌｅｐｔｏｓｐｉｒｉｏｓｉｓ）腎疾患、緑内障、網膜疾患、加齢、頭痛、疼痛、複合性局所疼痛症候群、心臓肥大、筋消耗、異化作用障害、肥満症、胎児の成長遅延、高コレステロール血症、心疾患、慢性心不全、虚血／再灌流、脳卒中、脳動脈瘤、狭心症、肺疾患、嚢胞性線維症、酸誘導肺傷害、肺高血圧症、喘息、慢性閉塞性肺疾患、シェーグレン症候群、肺硝子膜症、腎臓病、糸球体疾患、アルコール性肝疾患、腸疾患、腹膜子宮内膜症、皮膚病、副鼻腔炎、中皮腫、免疫不全を伴う無汗性外胚葉形成不全症、ベーチェット病、色素失調症、結核、喘息、クローン病、大腸炎、眼アレルギー、虫垂炎、パジェット病、膵臓炎、歯周炎（ｐｅｒｉｏｄｏｎｉｔｉｓ）、子宮内膜症、炎症性腸疾患、炎症性肺疾患、シリカ誘発性疾患、睡眠時無呼吸、ＡＩＤＳ、ＨＩＶ−１、自己免疫疾患、抗リン脂質抗体症候群、狼瘡、狼瘡性腎炎、家族性地中海熱、遺伝性周期熱症候群、心理社会的ストレス病、神経病理学的疾患、家族性アミロイドポリニューロパチー、炎症性神経障害、パーキンソン病、多発性硬化症、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ａｍｙｏｔｒｏｐｉｃ  ｌａｔｅｒａｌ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、ハンチントン病、白内障、または難聴。
【０１６７】
別の実施形態では、ＣＲＭ１活性関連疾患または病状は、次のとおりである。頭部外傷、ブドウ膜炎、炎症性疼痛、アレルゲン誘発性喘息、非アレルゲン誘発性喘息、糸球体腎炎、潰瘍性大腸炎、壊死性腸炎、周期熱を伴う高グロブリンＤ血症（ＨＩＤＳ）、ＴＮＦ受容体関連周期性症候群（ＴＲＡＰＳ）、クリオピリン関連周期性症候群、マックル・ウェルズ症候群（蕁麻疹−難聴−アミロイドーシス）、家族性寒冷蕁麻疹、新生児期発症多臓器性炎症性疾患周期熱（ＮＯＭＩＤ）、周期熱−アフタ性口内炎−咽頭炎−扁桃腺炎（ＰＦＡＰＡ症候群）、ブラウ症候群、化膿性無菌性関節炎、壊疽性膿皮症、座瘡（ＰＡＰＡ）、インターロイキン１受容体拮抗欠乏症（ＤＩＲＡ）、クモ膜下出血、多発性嚢胞腎、移植、臓器移植、組織移植、骨髄異形成症候群、刺激物質誘発性炎症、植物刺激物誘発性炎症、ツタウルシ／ウルシオール油誘発性炎症、化学的刺激物誘発性炎症、蜂刺傷誘発性炎症、咬虫症誘発性炎症、日光皮膚炎、火傷、皮膚炎、内毒血症、肺傷害、急性呼吸窮迫症候群、アルコール性肝炎、または寄生虫感染症によって引き起こされる腎臓損傷。
【０１６８】
別の実施形態では、本明細書に記載される化合物または組成物は、喘息、気管支炎、肺線維症、アレルギー性鼻炎、酸素毒性、肺気腫、慢性気管支炎、急性呼吸困難症候群、およびあらゆる慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）をはじめとする、アレルギーおよび呼吸器疾患を治療または予防するのに使用してもよい。
【０１６９】
本発明の別の実施形態は、ＣＲＭ１活性関連疾患または病状を治療するための薬剤の製造における、式Ｉの化合物の使用である。さらなる態様では、本発明は、対象中において、ｐ５３、ｐ７３、ｐ２１、ｐＲＢ、ｐ２７、ＩκＢ、ＮＦκＢ、ｃ−Ａｂｌ、ＦＯＸＯタンパク質またはＣＯＸ−２の発現または活性と関連付けられている疾患を治療する薬剤を製造するための、式Ｉの化合物の使用を提供する。いくつかの実施形態では、本発明は、がんおよび／または新生物障害、血管新生、自己免疫障害、炎症性障害および／または疾患、エピジェネティックス、ホルモン障害および／または疾患、ウイルス性疾患、神経変性障害および／または疾患、および眼科的障害のいずれかを治療する薬剤の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【０１７０】
いくつかの実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物の薬学的に許容可能な塩、またはその薬学的に許容可能な組成物を生物学的サンプルに接触させ、または患者に投与するステップを含んでなる、生物学的サンプル中または患者においてＣＲＭ１を阻害する方法を提供する。
【０１７１】
新生物障害
本明細書に記載される化合物または組成物は、新生物疾患を治療するのに使用し得る。「新生物障害」は、例えば良性または悪性の増殖性細胞成長によって特徴付けられる異常な状態または病状などの、自律的増殖または複製能力を有する細胞によって特徴付けられる、疾病または障害である。例示的な新生物障害としては、がん腫、肉腫（例えば軟部組織）、骨肉腫、転移性障害（例えば前立腺、脳、骨、胃腸、肺、乳房、卵巣、子宮頸、膵臓、腎臓、頭頸部、および肝臓起源の腫瘍）、造血性新生物障害（例えば白血病、リンパ腫、骨髄腫およびその他の悪性形質細胞障害）、および転移性腫瘍が挙げられる。一実施形態では、治療されるがんは、乳房、卵巣、子宮頸、胃腸、前立腺、結腸、肺、腎臓、脳、肝臓、および膵臓がんから選択される。化合物による治療は、例えば細胞増殖低下、腫瘤量低下など、新生物障害の少なくとも１つの症状を改善するのに効果的な量であり得る。
【０１７２】
一実施形態では、新生物障害は、基底細胞様乳がん（ＢＬＢＣ）である。ＢＬＢＣは、乳がん（ＢＣ）の最高１５％を占め、通常、ＥＲ、プロゲステロン受容体ＰＲ、およびＨＥＲ−２増幅の欠如によって特徴付けられる、トリプルネガティブ乳がんである（ＴＮＢＣ）。特定の実施形態では、乳がんはＴＮＢＣである。これに加えて、ほとんどのＢＲＣＡ１関連ＢＣは、ＢＬＢＣおよびＴＮＢＣであり、基底サイトケラチンおよびＥＧＦＲを発現する。ＢＬＢＣは、高悪性度表現型、高い組織学的等級、および高い再発と転移率を伴う芳しくない臨床転帰によって特徴付けられる。
【０１７３】
併用療法
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される化合物は、追加的な「第２の」治療薬または治療と共に投与される。第２の治療薬は、指示される疾患または病状を治療する単剤療法で典型的に使用される、あらゆる作用物質から選択されてもよい。本明細書の用法では、「共に投与される」という用語および関連用語は、本発明による治療薬の同時または逐次の投与を指す。例えば本発明の化合物は、別個の単一剤形で同時または順次に、または単一剤形中で合わせて、別の治療薬と共に投与してもよい。したがって本発明は、式Ｉの化合物、追加的な治療薬、および薬学的に許容できる担体、アジュバント、またはビヒクルを含んでなる、単一剤形を提供する。
【０１７４】
第２の治療薬が対象に投与される本発明の一実施形態では、本発明の化合物の有効量は、第２の治療薬が投与されない場合のその有効量を下回る。別の実施形態では、第２の治療薬の有効量は、本発明の化合物が投与されない場合のその有効量を下回る。このようにして、作用物質のいずれかの高用量に付随する、望まれない副作用が最小化されることもある。（制限なしに、投薬計画改善および／または薬剤コスト低下をはじめとする）その他の可能な利点は、当業者には明白であろう。
【０１７５】
例示的な追加的ながん治療法としては、例えば、化学療法、抗体療法などの標的療法、キナーゼ阻害剤、免疫療法、およびホルモン療法、エピジェネティック療法、生体沈殿阻害剤、および抗血管新生療法が挙げられる。これらの各治療の例は、下で提供される。
【０１７６】
がん療法で使用される化学療法剤の例としては、例えば、代謝拮抗剤（例えば葉酸、プリン、およびピリミジン誘導体）およびアルキル化剤（例えばナイトロジェンマスタード、ニトロソウレア、白金、アルキルスルホネート、ヒドラジン、トリアゼン、アジリジン、紡錘体阻害剤、細胞毒性薬、トポイソメラーゼ阻害剤など）が挙げられる。例示的な作用薬としては、アクラルビシン、アクチノマイシン、アリトレチノイン、アルトレタミン、アミノプテリン、アミノレブリン酸、アムルビシン、アムサクリン、アナグレリド、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アトラセンタン、ベロテカン、ベキサロテン、ベンダムスチン（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎ）、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カンプトテシン、カペシタビン、カルボプラチン、カルボコン、カルモフール、カルムスチン、セレコキシブ、クロランブシル、クロルメチン、シスプラチン、クラドリビン、クロファラビン、クリサンパスターゼ、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デシタビン、デメコルチン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エファプロキシラル、エレスクロモール、エルサミトルシン、エノシタビン、エピルビシン、エストラムスチン、エトグルシド、エトポシド、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル（５ＦＵ）、フォテムスチン、ゲムシタビン、グリアデルインプラント、ヒドロキシカルバミド、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、イリノテカン、イロフルベン、イクサベピロン、ラロタキセル、ロイコボリン、リポソーム性ドキソルビシン、リポソーム性ダウノルビシン、ロニダミン、ロムスチン、ルカントン、マンノスルファン、マソプロコール、メルファラン、メルカプトプリン、メスナ、メトトレキサート、アミノレブリン酸メチル、ミトブロニトール、ミトグアゾン、ミトタン、マイトマイシン、ミトキサントロン、ネダプラチン、ニムスチン、オブリメルセン、オマセタキシン、オルタタキセル、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペグアスパラガーゼ、ペメトレキセド、ペントスタチン、ピラルビシン、ピクサントロン、プリカマイシン、ポルフィマーナトリウム、プレドニムスチン、プロカルバジン、ラルチトレキセド、ラニムスチン、ルビテカン、サパシタビン、セムスチン、シチマジーンセラデノベック、ストラタプラチン、ストレプトゾシン、タラポルフィン、テガフール−ウラシル、テモポルフィン、テモゾロマイド、テニポシド、テセタキセル、テストラクトン、四硝酸塩、チオテパ、チアゾフリン、チオグアニン、ティピファニブ、トポテカン、トラベクテジン、トリアジコン、トリエチレンメラミン、トリプラチン、トレチノイン、トレオスルファン、トロホスファミド、ウラムスチン、バルルビシン、ベルテポルフィン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンフルニン、ビノレルビン、ボリノスタット、ゾルビシン、および本明細書に記載されるその他の細胞分裂阻害剤または細胞毒性薬が挙げられる。
【０１７７】
いくつかの薬剤は、単独よりも合わせたときにより良く機能するので、２種以上の薬剤が同時に投与されることが多い。頻繁に、２種以上の化学療法剤が、併用化学療法として使用される。いくつかの実施形態では、（併用化学療法をはじめとする）化学療法剤を、本明細書に記載される化合物と組み合わせて使用し得る。
【０１７８】
標的療法は、がん細胞の無秩序なタンパク質に対して特異的な作用薬の使用からなる。小分子標的療法剤は、一般にがん細胞内の変異した、過剰発現した、またはさもなければ重要な、タンパク質の酵素ドメインの阻害剤である。顕著な例は、アキシチニブ、ボスチニブ、セジラニブ、ダサチニブ（ｄｅｓａｔｉｎｉｂ）、エルロチニブ（ｅｒｏｌｏｔｉｎｉｂ）、イマチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ニロチニブ、セマキサニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、およびバンデタニブなどのチロシンキナーゼ阻害剤と、またアルボシジブおよびセリシクリブなどのサイクリン依存性キナーゼである。モノクローナル抗体療法は、治療薬が、がん細胞表面タンパク質に特異的に結合する抗体である、別のストラテジーである。例としては、典型的に乳がんで使用される、抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ抗体トラスツズマブ（ハーセプチン（登録商標））と、典型的に多様なＢ細胞悪性腫瘍で使用される、抗ＣＤ２０抗体リツキシマブおよびトシツモマブとが挙げられる。その他の例示的な抗体としては、セツキシマブ、パニツマブ、トラスツズマブ、アレムツズマブ、ベバシズマブ、エドレコロマブ、およびゲムツズマブが挙げられる。例示的な融合タンパク質としては、アフリベルセプトおよびデニロイキンジフチトクスが挙げられる。いくつかの実施形態では、標的療法は、例えばグリベックなどの本明細書に記載される化合物と組み合わせて、使用し得る（Ｖｉｇｎａｒｉ  ａｎｄ  Ｗａｎｇ  ２００１）。
【０１７９】
標的療法はまた、腫瘍周囲の細胞表面受容体に、または罹患した細胞外基質に結合し得る「自動誘導装置」としての小型ペプチドを含み得る。これらのペプチドに付着する放射性核種（例えばＲＧＤ）は、核種が細胞近傍で崩壊すれば、最終的にがん細胞を殺滅する。このような治療法の一例としては、ＢＥＸＸＡＲ（登録商標）が挙げられる。
【０１８０】
抗血管新生療法としては、スニチニブやソラフェニブなどの血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）を標的とするキナーゼ阻害剤；またはベバシズマブまたはＶＥＧＦ−Ｔｒａｐ、をはじめとする、ＶＥＧＦまたはＶＥＧＦ受容体に対するモノクローナル抗体または受容体「デコイ」；またはサリドマイドまたはその類似体（レナリドミド、ポマリドミド）；または線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、アンギオポエチン、またはアンギオスタチンまたはエンドスタチンなどの非ＶＥＧＦ血管新生標的を標的とする作用薬が挙げられる。
【０１８１】
エピジェネティック治療法としては、エピジェネティックな修飾を制御する酵素の阻害剤、具体的にはいくつかの悪性腫瘍に対して有望な抗腫瘍形成性効果を示したＤＮＡメチルトランスフェラーゼとヒストンデアセチラーゼ、ならびにアンチセンスオリゴヌクレオチドおよびｓｉＲＮＡが挙げられる。
【０１８２】
がん免疫療法は、患者自身の免疫系が腫瘍と闘うよう誘導するようにデザインされた、治療ストラテジーの多様なセットを指す。腫瘍に対する免疫応答を生じさせる現代的な方法としては、表在性膀胱がんのための膀胱内ＢＣＧ免疫療法、前立腺がんワクチンであるプロベンジ、および腎細胞がんおよび黒色腫患者において、免疫応答を誘導するためのインターフェロンおよびその他のサイトカインの使用が挙げられる。
【０１８３】
同種異系造血幹細胞移植は、供与者の免疫細胞が、移植片対腫瘍効果で腫瘍を攻撃することが多いので、免疫療法の一形態と見なし得る。いくつかの実施形態では、免疫療法剤を本明細書に記載される化合物と組み合わせて使用し得る。
【０１８４】
ホルモン療法剤としては、ホルモン作動薬またはホルモン拮抗薬の投与が挙げられ、レチノイド／レチノイン酸、エストロゲンまたはテストステロンを阻害する化合物、ならびにプロゲストーゲン投与が挙げられる。
【０１８５】
上の開示は、本発明について概説する。以下の特定の実施例を参照して、より完全な理解が得られ得る。これらの実施例は、例証のみを目的として記載され、本発明の範囲を制限することは意図されない。状況に応じて、または好都合であれば、形態の変更および同等物の置換が検討される。本明細書では、特定の用語が用いられているが、このような用語は記述的観念であることが意図され、制限目的ではない。
【実施例】
【０１８６】
略号
ａｔｍ  大気
ａｑ．水性
ＢＩＮＡＰ  ２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル
Ｂｏｃ  ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＣＤＩ  Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール
ＣＨ２Ｃｌ２  ジクロロメタン
ＤＣＣ  Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＭ  ジクロロメタン
ＤＢＵ  ジアザ（１，３）ビシクロ［５．４．０］ウンデカン
ＤＩＣ  Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＰＥＡ  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ  Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン
ＤＭＦ  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド
ＤＰＰＦ  ジフェニルホスフィノフェロセン
ＥＡ  酢酸エチル
ＥＤＣＩ  Ｎ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＥＤＣ  １−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ｅｑ．当量
Ｅｔ２Ｏ  ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＥｔＯＨ  エタノール
ＥｔＩ  ヨードエタン
Ｅｔ  エチル
Ｆｍｏｃ  ９−フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＧＣ  ガスクロマトグラフィー
ｈ  時間
ＨｅｔＡｒ  ヘテロアリール
ＨＯＢｔ  Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＢＴＵ  Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート
ＨＰＬＣ  高速液体クロマトグラフィー
ＬＡＨ  水素化アルミニウムリチウム
ＬＣＭＳ  液体クロマトグラフィー質量分析
ＭＣＰＢＡ  ｍ−クロロ過安息香酸
ＭｅＣＮ  アセトニトリル
ＭｅＯＨ  メタノール
ｍｉｎ  分
ＭｅＩ  ヨウ化メチル
ＭｅＭｇＣｌメチル塩化マグネシウム
Ｍｅ  メチル
ＮａＯＡｃ  酢酸ナトリウム
ＮＭＲ  核磁気共鳴
ＮＭＰ  Ｎ−メチルピロリジノン
ｏ．ｎ．一晩
ＲＴ  室温または滞留時間
Ｔ３Ｐ  プロピルホスホン酸無水物
ＴＥＡ  トリエチルアミン
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン
ＴＬＣ  薄層クロマトグラフィー
【０１８７】
方法の以下の説明全体を通じて、適切な場合は、有機合成の当業者に容易に理解される様式で、様々な反応物質および中間体に、適切な保護基が付加され、引き続いてそれから除去されるものと理解される。このような保護基を使用する従来の手順、ならびに適切な保護基の例は、例えば“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，（１９９９）に記載される。化学処理による、基または置換基から別の基または置換基への変換が、最終生成物に向かう合成経路上のあらゆる中間体または最終生成物に対して実施され得ることもまた理解され、その中では、可能なタイプの変換は、変換に用いられる条件または試薬に対する、その段階で分子が有するその他の官能基の固有の不適合性によってのみ制限される。このような固有の不適合性と、それらを適切な変換および合成段階を適切な順番で実施することによって回避する方法は、有機合成の当業者には容易に理解されるであろう。変換の例は下述され、記載される変換は、それについて変換が例示される、一般的な基または置換基のみに限定されないものと理解される。その他の適切な変換に関する参考文献および説明は、“Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ−Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ”Ｒ．Ｃ．Ｌａｒｏｃｋ，ＶＨＣ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．（１９８９）にある。その他の適切な反応に関する参考文献および説明は、例えば、“Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，Ｍａｒｃｈ，第４版ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ（１９９２）、または“Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｓｍｉｔｈ，ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，（１９９４）などの有機化学教科書に記載される。中間体および最終製品を精製する技術としては、例えば、カラムまたは回転板上の順相および逆相クロマトグラフィー、再結晶、蒸留、および液体−液体または固体−液体抽出が挙げられ、これらは当業者には容易に理解されるであろう。置換基および基の定義は、異なって定義される場合を除き、式Ｉについて記載されるとおりである。「室温」および「周囲温度」という用語は、特に断りのない限り、１６〜２５℃の温度を意味するものとする。「還流」という用語は、特に断りのない限り、溶媒に関して、溶媒の沸点以上の温度を意味するものとする。
【０１８８】
実施例１：中間体（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸の合成。
【化５７】
0006005740.tif 000060
３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾチオアミドの合成：
【化５８】
0006005740.tif 000061
２Ｌの３つ口丸底フラスコに、ＤＭＦ（１Ｌ）中の３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（２００ｇ）の溶液を装填した。次に溶液をＮａＳＨ（１２３．７ｇ、２．０ｅｑ．）およびＭｇＣｌ２（１８６．７ｇ、１．０ｅｑ．）で処理して、反応混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を氷水スラリー（１０Ｌ）中に注ぎ入れて、化合物をＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を水性飽和鹹水（３×１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥して、濾過し、減圧下で濃縮して、２０５ｇの所望の粗製３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾチオアミド（収率：９０％）をもたらし、それを精製せずに次のステップで使用した。
【０１８９】
３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールの合成：
【化５９】
0006005740.tif 000062
５Ｌの３つ口丸底フラスコに、ＤＭＦ（１．０３Ｌ）中の３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾチオアミド（２０５．６５ｇ）の溶液を装填した。ヒドラジン水和物（７３．２ｇ、２．０ｅｑ．）を滴下して添加し、反応混合物を室温で１時間撹拌した。ＨＣＯＯＨ（１．０３Ｌ）を滴下して添加し、反応混合物を９０℃で３時間還流させた。室温に放冷後、反応混合物を飽和水性炭酸水素ナトリウム溶液（７Ｌ）中に注ぎ入れて、ＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を水性飽和鹹水（３×５００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、１８０ｇの粗製化合物をもたらした。この粗製物を石油エーテル（３×５００ｍＬ）と共に撹拌し、濾過して、乾燥し、淡黄色固体として得られる、１６０ｇの３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールを得た（収率：７５％）。
【０１９０】
（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレートの合成：
【化６０】
0006005740.tif 000063
２Ｌの３つ口丸底フラスコに、ＤＭＦ（９６０ｍＬ）中の３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール（１６０ｇ）の溶液を装填した。溶液をＤＡＢＣＯ（１２７．７４ｇ、２ｅｑ．）で処理して、３０分間撹拌した後、（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸イソプロピル（１５０．３２ｇ、１．１ｅｑ．）を滴下して添加した。約１時間後、反応混合物を氷水スラリー（５Ｌ）中に注ぎ入れて、ＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を水性飽和鹹水（３×１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、２５０ｇの粗製化合物をもたらし、それを酢酸エチル／ｎ−ヘキサン勾配を使用するカラムクロマトグラフィー（６０／１２０シリカゲル）によって精製した（カラムはヘキサン中で充填され、所望の化合物は２％ＥｔＯＡＣ／ｎ−ヘキサンから溶出し始めた）。所望の化合物を含有する画分を合わせて、１３８ｇの純粋な所望の化合物を得た（収率：６１％）。
【０１９１】
（Ｚ）−３−（５−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（２）の合成：
【化６１】
0006005740.tif 000064
５Ｌの３つ口丸底フラスコ内で、（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレート（１３０ｇ、１．０ｅｑ．）をＴＨＦ（１．３Ｌ）中に溶解した。溶液に、水（１．３Ｌ）中のＬｉＯＨ（６９．３ｇ、５．０ｅｑ．）の溶液を滴下して添加し、反応混合物を室温で４時間撹拌した後、４００ｍＬの氷水スラリーでクエンチして、希釈水性ＨＣｌで酸性（ｐＨ＝２〜３）にした。混合物をＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で抽出し、合わせた有機層を鹹水で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧下で濃縮して、１１０ｇの所望のカルボン酸（収率：９４％）（ＬＣＭＳによるシス含有量＝９０．０％、トランス含有量＝８．２％）をもたらした。
【０１９２】
実施例２：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピラジン−２−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−３）の合成。
【化６２】
0006005740.tif 000065
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、１：１のＣＨ２Ｃｌ２：ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２００ｇ）の懸濁液を装填した。２−ヒドラジノピラジン（０．０６２ｇ）を−４０℃で添加して、Ｔ３Ｐ（５０％）（０．４３２ｇ）およびＤＩＰＥＡ（０．１４７ｇ）がそれに続いた。反応混合物を−４０℃で３０分間撹拌した後、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮した。（アンモニア雰囲気下で）移動相としてＣＨ２Ｃｌ２中の５％ＭｅＯＨを使用して、分取ＴＬＣにより粗製油を精製し、４０ｍｇ（収率：１６％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピラジン−２−イル）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，１０．５３（ｓ，１Ｈ），９．５９（ｓ，１Ｈ），９．１４（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，２Ｈ），８．２９（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｓ，１Ｈ），８．０６−８．０７（ｍ，１Ｈ），７．９２−７．９３（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５１−７．５３（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），６．０７−６．１０（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ）；Ｃ１７Ｈ１２Ｆ６Ｎ７ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋予測値：４４４．３１、実測値：４４４．４９（室温で２．７０分間、純度９５．７８％）。
【０１９３】
実施例３：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリジン−２−イル）アクリロヒドラジド塩酸塩（Ｉ−４）の合成。
【化６３】
0006005740.tif 000066
５００ｍＬの３つ口丸底フラスコに、１：１のＣＨ２Ｃｌ２：ＡｃＯＥｔ（２００ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（１−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１，２，４−イル）アクリル酸（１０ｇ、１．０ｅｑ．）の懸濁液を装填した。２−ヒドラジノピリジン（３．１１ｇ）を−４０℃で添加した。Ｔ３Ｐ（酢酸エチル中の５０％）（２１．７５ｇ）を滴下して添加し、ＤＩＰＥＡ（７．３６ｇ）がそれに続き、反応混合物を−４０℃で３０分間撹拌した後、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して粗製褐色油をもたらし、それをカラムクロマトグラフィーによって精製した（化合物はＣＨ２Ｃｌ２中の１．３％ＭｅＯＨで溶出した）。所望の化合物を含有する画分を合わせて、６．０ｇ（収率：４８％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリジン−２−イル）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，１０．４１（ｓ，１Ｈ），９．６６（ｓ，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，２Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），８．０６−８．０８（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４８−７．５３（ｍ，１Ｈ），７．４９−７．５２（ｄ，Ｊ＝１０．４，１Ｈ），６．７１−６．７５（ｍ，１Ｈ），６．６６−６．６８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．０７−６．０９（ｄ，Ｊ＝１０．４，１Ｈ）．Ｃ１８Ｈ１２Ｆ６Ｎ６ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋予測値：４４３．３３、実測値：４４３．４４（室温で２．４５分間、純度１００％）。
【０１９４】
（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリジン−２−イル）アクリロヒドラジド塩酸塩の合成：
【化６４】
0006005740.tif 000067
５００ｍＬの３つ口丸底フラスコに、Ｅｔ２Ｏ（２５０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリジン−２−イル）アクリロヒドラジド（５．５ｇ）の溶液を装填した。溶液を５℃に冷却して１，４−ジオキサン中のＨＣｌで処理し、室温になるまで放置して、ＴＬＣ分析によって完了が示されるまで撹拌した（約１時間）。固体をブフナー漏斗上で濾過して、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、真空乾燥して、５．５ｇ（収率：９２％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリジン−２−イル）アクリロヒドラジド塩酸塩をもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，１１．２６（ｓ，１Ｈ），１０．８９（ｓ，１Ｈ），９．５５（ｓ，１Ｈ），８．５２（ｓ，２Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），８．０３−８．０７（ｍ，２Ｈ），７．６２−７．５９（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２１−７．２４（ｍ，１Ｈ），７．０５−７．０９（ｍ，１Ｈ），６．１６−６．１９（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），Ｃ１８Ｈ１３Ｆ６Ｎ６ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４４３．３３；実測値：４４３．４４（室温で３．５４分間、純度９９．０％）。
【０１９５】
実施例４：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−１−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）プロプ−２−エン−１−オン（Ｉ−５）の合成。
【化６５】
0006005740.tif 000068
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２０ｇ）の溶液を装填した。ピペリジン−４−オール（０．０７ｇ、１．２ｅｑ．）を添加して、Ｔ３Ｐ（プロピルホスホン酸無水物）（０．４０ｍＬ、１．２ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．１９ｍＬ、２．０ｅｑ．）を添加するために、溶液を−６０℃に冷却した。反応混合物を３０分間撹拌した後、水（５０ｍＬ）中に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水性飽和鹹水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮した。シリカ６０／１２０および移動相としてＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を使用するカラムクロマトグラフィーによる精製（所望の化合物は、３．０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２を使用して、溶出し始めた）は、０．０２５ｇ（収率：１０％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−１−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）プロプ−２−エン−１−オンをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ，８．７５（ｓ，１Ｈ），８．５８（ｓ，２Ｈ），７．９３（ｓ，１Ｈ），７．０８−７．１１（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），６．０１−６．０４（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），４．０２−４．１４（ｍ，１Ｈ），３．９８−４．０１（ｍ，１Ｈ），３．７８−３．８５（ｍ，１Ｈ），３．４７−３．５２（ｓ，１Ｈ），３．３２−３．３８（ｓ，１Ｈ），１．９６（ｓ，１Ｈ），１．８３（ｓ，１Ｈ），１．２７（ｓ，１Ｈ），０．９０（ｓ，１Ｈ）；化学式：Ｃ１８Ｈ１７Ｆ６Ｎ４Ｏ２のＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４３５．３４；実測値：４３５．２４（室温で２．４０８分間、純度８９．６％）。
【０１９６】
実施例５：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ−（ピロリジン−１−イル）アクリルアミド（Ｉ−６）の合成。
【化６６】
0006005740.tif 000069
１：１のＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．３５ｇ）の冷溶液（−４０℃）を１−アミノピロリジンＨＣｌ（０．１３４ｇ）で処理した。次に混合物をＴ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；０．７７ｍｌ、１．３ｅｑ．）で処理し、ＤＩＰＥＡ（０．５１ｍｌ、３．０ｅｑ．）の緩慢な添加がそれに続いた。反応混合物を−４０℃で３０分間撹拌した後、氷水でクエンチして、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水性飽和鹹水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、０．２７５ｇの粗製固体をもたらした。ＣＨ２Ｃｌ２中のＭｅＯＨを移動相として使用する、シリカゲル（６０−１２０メッシュサイズ）上のカラムクロマトグラフィーによる精製は、純粋な所望の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ−（ピロリジン−１−イル）アクリルアミド（７．０ｍｇ収率：１．７％）をもたらした：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，９．４９（ｓ，１Ｈ），８．９５（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，２Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），７．４−７．３８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．８７−５．８４（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），２．８６−２．８１（ｍ，４Ｈ），１．７４−１．７３（ｍ，４Ｈ）；Ｃ１７Ｈ１６Ｆ６Ｎ５ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４２０．３３；実測値：４２０．１３（室温で７．７６分間、純度９２．４％）。
【０１９７】
実施例６：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−メチル−Ｎ’−（ピリジン−２−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−７）の合成。
【化６７】
0006005740.tif 000070
２−（１−メチルヒドラジニル）ピリジンの合成：
【化６８】
0006005740.tif 000071
２５ｍＬの３つ口丸底フラスコに、２−ブロモピリジン（０．３１ｇ）およびメチルヒドラジン（５．０９ｇ、３４．２ｅｑ．）を窒素雰囲気下で装填し、混合物を撹拌して、８０〜８５℃の還流温度に１時間加熱した。反応混合物を減圧下（４０℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、黄色油をもたらし、１０％ｗ／ｖの水性Ｎａ２ＣＯ３で処理して、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水性飽和鹹水で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して減圧下（４０℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して黄色油（０．４０ｇ）をもたらし、それをそのまま次のステップで使用した。
【０１９８】
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．４３ｇ）、２−（１−メチルヒドラジニル）ピリジン（０．１５ｇ、１．０ｅｑ．）を装填した。Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；１．１ｇ、１．５ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．４０ｇ、２．５ｅｑ．）を窒素雰囲気下において−６０℃で添加し、反応の進捗は、ＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を移動相として使用し、ＵＶ光で可視化される）によってモニターした。反応混合物を減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、０．６５ｇの粗製固体をもたらした。ＣＨ２Ｃｌ２およびＭｅＯＨ中のＣｏｍｂｉ−Ｆｌａｓｈカラムクロマトグラフィー上で、精製を実施した（所望の化合物は、ＣＨ２Ｃｌ２中の３．３％ＭｅＯＨで溶出し始めた）。所望の化合物を含有する画分を合わせて、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、９０．０ｍｇ（収率：１８％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−メチル−Ｎ’−（ピリジン−２−イル）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．８９（ｓ，１Ｈ），９．７９（ｂｒｓ，１Ｈ），８．５７−８．６２（ｄ，２Ｈ），７．９２−７．９４（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５９−７．６４（ｍ，１Ｈ），７．１９−７．２５（ｑ，１Ｈ），６．７５−６．８９（ｍ，２Ｈ），５．８５−５．８８（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４６（ｄ，３Ｈ）；Ｃ１９Ｈ１５Ｆ６Ｎ６ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４５７．３５；実測値：４５６．２６（室温で２．５２分間、純度１００．０％）。
【０１９９】
実施例７：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−メチル−Ｎ’−（ピラジン−２−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−８）の合成。
【化６９】
0006005740.tif 000072
２−（１−メチルヒドラジニル）ピラジンの合成：
【化７０】
0006005740.tif 000073
２５ｍＬの３つ口丸底フラスコ内で、窒素雰囲気下において室温で、２−クロロピラジン（０．５ｇ）をメチルヒドラジン（０．５ｇ、１．５ｅｑ．）に溶解した。固体Ｋ２ＣＯ３（０．９ｇ、１．５ｅｑ．）を添加し、反応混合物を撹拌して８０〜８５℃に加熱して、１．０時間還流させた。次に反応混合物をＲＴに放冷して、減圧下（４０℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、黄色油性残渣をもたらして、それを１０％ｗ／ｖの水性Ｎａ２ＣＯ３で処理して、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を鹹水で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して減圧下（４０℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、黄色０．４３ｇの黄色油をもたらして、それをそのまま次のステップで使用した。
【０２００】
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．３ｇ）、２−（１−メチルヒドラジニル）ピラジン（０．１２ｇ、１．１ｅｑ．）、およびＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）を装填した。Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；０．３８ｇ、１．５ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．５０ｇ、３．５ｅｑ．）を窒素雰囲気下において−６０℃で添加し、反応の進行は、ＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を移動相として使用し、ＵＶ光下で視覚化される）でモニターした。反応混合物を減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、０．２６５ｇの固体粗製物をもたらした。溶出剤としてＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨを使用するＣｏｍｂｉ−Ｆｌａｓｈカラムクロマトグラフィーを使用した精製（所望の化合物は、ＣＨ２Ｃｌ２中の１．５％ＭｅＯＨで溶出し始めた）は、７５．０ｍｇの純粋な化合物（収率２３％）；（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−メチル−Ｎ’−（ピラジン−２−イル）アクリロヒドラジドをもたらした：
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．７７（ｓ，１Ｈ），９．４０−９．３６（ｂｒｓ，１Ｈ），８．５２（ｓ，２Ｈ），８．２９−８．２７（ｄ，２Ｈ），８．１５（ｓ，１Ｈ），７．９２５−７．９２（ｄ，１Ｈ），７．５６−７．５４（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），６．１３−６．１０（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４３（ｄ，３Ｈ）；Ｃ１８Ｈ１４Ｆ６Ｎ７ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４５８．３４；実測値：４５８．２４（室温で２．８３分間、純度９６．３１％）。
【０２０１】
実施例８：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−メチル−Ｎ’−（３−メチルピリジン−２−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−９）の合成。
【化７１】
0006005740.tif 000074
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２５ｇ）の溶液を装填した。溶液を−７０℃に冷却し、３−メチル−２−（１−メチルヒドラジニル）ピリジン（０．１３５ｇ、１．０ｅｑ．）、Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；１．４ｍＬ、４ｅｑ．）、およびＤＩＰＥＡ（０．６ｍＬ、６ｅｑ．）で連続して処理した。透明な反応混合物を−６０℃で４時間撹拌した。反応の進行は、ＣＨ２Ｃｌ２中の２．５％ＭｅＯＨを移動相として、ＵＶによる可視化を使用する、ＴＬＣ分析によって追跡した。反応混合物を減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して粗化合物をもたらし、それをカラムクロマトグラフィー（６０／１２０メッシュＳｉＯ２およびＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２勾配での溶出）によって精製した。所望の化合物は、ジクロロメタン中の０．３〜０．４％ＭｅＯＨで溶出し始めた。所望の物質を含有する画分を合わせて、０．２１ｇ（収率：４０％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−メチル−Ｎ’−（３−メチルピリジン−２−イル）アクリロヒドラジドを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ＝１０．７３（ｓ，１Ｈ），９．３２（ｓ，１Ｈ），８．５２（ｓ，２Ｈ），８．４５−８．４６（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２９（ｓ，１Ｈ），７．９７−７．９９（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．４８−７．５０（ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ），７．０１−７．０５（ｍ，１Ｈ），５．８６−５．８８（ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ），３．２６（ｓ，３Ｈ）；Ｃ２０Ｈ１４Ｆ９Ｎ６ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋５２５．３５；実測値：５２５．１９（室温で３．３１分間、純度９９．４０％）。
【０２０２】
実施例９：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（５−メチルピリジン−２−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−１０）の合成。
【化７２】
0006005740.tif 000075
ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２５ｇ）の溶液を装填した５０ｍＬの３つ口丸底フラスコを、２−ヒドラジニル−５−メチルピリジン（０．９７ｇ、１．１ｅｑ．）で処理した。混合物を−６０℃に冷却して、Ｔ３Ｐ（プロピルホスホン酸無水物；０．８５ｍＬ、２．０ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．５ｍＬ、４．０ｅｑ．）で処理した。混合物を３０分間撹拌し、次に水（５０ｍＬ）中に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を鹹水（５０ｍＬ）で洗浄して、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、粗製化合物をもたらして、それをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、６０／１２０メッシュ、移動相としてＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製した。所望の化合物は、２．５％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２で溶出し始めた。所望の化合物を含有する画分を合わせて、減圧下で濃縮し、０．１３０ｇ（収率：４０％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（５−メチルピリジン−２−イル）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ，１０．３８（ｓ，交換可能，１Ｈ），９．６５（ｓ，１Ｈ），８．５４（ｓ，２Ｈ），８．４０（ｓ，交換可能，１Ｈ），８．２９（ｓ，１Ｈ），７．９０（ｓ，１Ｈ），７．４８−７．５１（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３３−７．３６（ｄｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，Ｊ＝６Ｈｚ，１Ｈ），６．６１−６．６３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．２０−６．２３（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ）；Ｃ１９Ｈ１５Ｆ６Ｎ６ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４５７．３５；実測値：４５７．２４（室温で２．６１分間、純度９９．１３％）。
【０２０３】
実施例１０：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−メチル−Ｎ’−（ピリジン−３−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−１１）の合成。
【化７３】
0006005740.tif 000076
ＣＨ２Ｃｌ２（１２ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２５）の溶液を装填した５０ｍＬの３つ口丸底フラスコを、３−（１−メチルヒドラジニル）ピリジン（０．１０５ｇ、１．２ｅｑ．）で処理した。混合物を−６０℃に冷却して、Ｔ３Ｐ（プロピルホスホン酸無水物；０．５０ｍＬ、１．２ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．２４ｍＬ、２．０ｅｑ．）で処理し、１時間撹拌した。反応の進行は、１０％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を移動相として、ＵＶ光下の可視化を使用する、ＴＬＣ分析によって追跡した。次に反応混合物を水（５０ｍＬ）中に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を鹹水（５０ｍＬ）で洗浄して、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、粗製化合物をもたらして、それをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、６０／１２０メッシュ、移動相としてＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製した。所望の化合物は、３．０％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２中に溶出し始めた。化合物を含有する画分を収集して、減圧下で濃縮し、１４０ｍｇ（収率：４３％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−メチル−Ｎ’−（ピリジン−３−イル）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，１０．５５（ｓ，１Ｈ），９．４１（ｓ，１Ｈ），９．１５（ｓ，２Ｈ），８．５８（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，１Ｈ），８．２９（ｓ，１Ｈ），７．５１−７．５４（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１８−７．２２（ｍ，２Ｈ），６．０５−６．０７（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），３．２０（ｓ，３Ｈ）；Ｃ１９Ｈ１５Ｆ６Ｎ６ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４５７．３５；実測値：４５７．１９（室温で２．４３分間、純度８３．４８％）。
【０２０４】
実施例１１：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（６−クロロピリミジン−４−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−１２）の合成。
【化７４】
0006005740.tif 000077
２５ｍＬの３つ口丸底フラスコに、ＥｔＯＡｃ（５．０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．５ｇ）および４−クロロ−６−ヒドラジノピリミジン（０．２０ｇ、１．０ｅｑ．）の溶液を装填した。混合物を−４０℃に冷却して、Ｔ３Ｐ（２．３ｍＬ、２．５ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．９８ｍＬ、４．０ｅｑ．）で処理した。ＴＬＣ分析（溶出剤として５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を使用する）は、出発原料が３０分後に消費されたことを示した。次に反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水洗して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、粗製物をもたらして、５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を移動相として、それに分取ＴＬＣ精製を実施した。これは、２５０ｍｇ（収率：３６．７４％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（６−クロロピリミジン−４−イル−）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６），δ＝１０．５９（ｂｒｓ，交換可能，１Ｈ），９．８５（ｂｒｓ，交換可能，１Ｈ），９．５２（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｓ，２Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），８．２７（ｓ，１Ｈ），７．５２−７．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ），６．６９（ｓ，１Ｈ），６．０５−６．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ）；Ｃ１７Ｈ１１ＣｌＦ６Ｎ７Ｏについて計算されたＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋４７８．７６；実測値：４７８．０９（室温で２．７９分間、純度９７．５１％）。
【０２０５】
実施例１２：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリジン−３−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−１３）の合成。
【化７５】
0006005740.tif 000078
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２５ｇ）および３−ヒドラジノピリジン（０．０７７ｇ、１．０ｅｑ．）を装填した。Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；０．５２ｇ、１．２ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．２７ｇ、２．０ｅｑ．）を窒素雰囲気下において、−５５〜−６０℃で添加した。反応の進行は、１０％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を移動相として、ＵＶ光下の可視化を使用する、ＴＬＣ分析によって追跡した。反応混合物を減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、０．４７５ｇの粗製固体をもたらした。（ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を使用する）Ｃｏｍｂｉ−Ｆｌａｓｈカラムクロマトグラフィーを使用して、精製を実施した。所望の化合物は、ＣＨ２Ｃｌ２中の２．３％ＭｅＯＨで溶出し始めた。所望の化合物を含有する画分を合わせて、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、２０．０ｍｇ（収率：６％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリジン−３−イル）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．３５（ｓ，１Ｈ），９．６６（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，２Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），８．２４（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｓ，１Ｈ），７．９３−７．９５（ｍ，１Ｈ），７．５２−７．５４（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０９−７．１５（ｍ，２Ｈ），６．０４−６．０７（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），Ｃ１８Ｈ１３Ｆ６Ｎ６ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４４３．３３実測値：４４３．１９（室温で２．１９分間、純度９９．６０％）。
【０２０６】
実施例１３：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（キノキサリン−２−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−１４）の合成。
【化７６】
0006005740.tif 000079
２−ヒドラジニルキノキサリンの合成：
【化７７】
0006005740.tif 000080
３０ｍＬの封管内で、２−クロロキノキサリン（１．０ｇ）をエタノール（８ｍＬ）に溶解して、窒素雰囲気下において室温でヒドラジン水和物（８ｍＬ）を添加した。混合物を撹拌して、還流温度（８０℃）で１時間加熱した。反応の進行は、１０％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を移動相として、ＵＶ光下のおよび／またはニンヒドリンによる可視化を使用する、ＴＬＣ分析によって追跡した。反応混合物を減圧下（４０℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、２４０ｍｇの白色固体をもたらし、それをそのまま次のステップで使用した。
【０２０７】
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、ＥｔＯＡｃ中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２５ｇ）および２−ヒドラジニルキノキサリン（０．１４ｇ、１．２ｅｑ．）の溶液を装填した。Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；０．８３ｍＬ、２．０ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．５ｍＬ、４．０ｅｑ．）を窒素雰囲気下において−５５〜−６０℃で添加して、反応混合物を２時間撹拌した後、減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、０．１５０ｇの粗製固体をもたらした。Ｃｏｍｂｉ−Ｆｌａｓｈカラムクロマトグラフィーを使用した精製（ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２による溶出；所望の化合物はＣＨ２Ｃｌ２中の５％ＭｅＯＨで溶出し始めた）は、６０ｍｇの（収率：２０％）（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（キノキサリン−２−イル）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ＝１０．８５１（ｓ，１Ｈ），９．８９−９．８７（ｓ，１Ｈ），９．６７（ｓ，１Ｈ），８．４９−８．５４（ｍ，３Ｈ），８．２６（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），７．８６−７．８８（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．４５−７．６６（ｍ，４Ｈ），６．１７−６．２０（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ）；Ｃ２１Ｈ１４Ｆ６Ｎ７ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４９４．３７；実測値：４９４．１９（室温で２．８８分間、純度１００％）。
【０２０８】
実施例１４：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（１，１−ジオキソテトラヒドロチオフェン−３−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−１５）の合成。
【化７８】
0006005740.tif 000081
ＥｔＯＡｃ（２０．０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．５ｇ）の溶液を装填した５０ｍＬの３つ口丸底フラスコを、２−（１，１−ジオキソテトラヒドロチオフェン−３−イル）ヒドラジン（０．３ｇ、１．２ｅｑ．）で処理した。混合物を−６０℃に冷却して、Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；２．０ｍＬ、２ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（１ｍＬ、４ｅｑ．）で処理した。反応混合物を−６０℃で３０分間撹拌した後、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、０．６０ｇの固体残渣をもたらした。カラムクロマトグラフィーによる精製（ＳｉＯ２；ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２による溶出；所望の化合物はＣＨ２Ｃｌ２中の５％ＭｅＯＨで溶出した）は、１００ｍｇ（収率＝１５％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（テトラヒドロチオフェン−１−１−二酸化−３−イル）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ＝９．５７（ｓ，１Ｈ），８．６４（ｓ，２Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），７．３４−７．３６（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８９−５．９２（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），４．０１（ｍ，１Ｈ），３．０４−３．２６（ｍ，４Ｈ），２．２７−２．３４（ｍ，２Ｈ）．Ｃ１７Ｈ１５Ｆ６Ｎ５Ｏ３ＳのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４８４．４０；実測値：４８３．３９（室温で２．６３分間、純度６６．３９％）。
【０２０９】
実施例１５：（Ｚ）−Ｎ−（アゼパン−１−イル）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリルアミド（Ｉ−１６）の合成。
【化７９】
0006005740.tif 000082
５００ｍＬの３つ口丸底フラスコに、ＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＡｃ（１：１、２００ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．３ｇ）の溶液を装填し、溶液を室温においてアゼパン−１−アミン（０．１３７ｇ）で処理した。混合物を−６０℃に冷却し、最初にＴ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％、０．７８ｍｌ）、次にＤＩＰＥＡ（０．５８ｍＬ）で処理した。反応混合物を−６０℃で３０分間撹拌した後、氷冷水でクエンチして、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を鹹水で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、０．５７のｇ固体をもたらした。カラムクロマトグラフィーによる精製（ＳｉＯ２、移動相としてＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２；化合物はＣＨ２Ｃｌ２中の０．１％ＭｅＯＨで溶出し始めた）は、９０ｍｇ（収率：２４％）の（Ｚ）−Ｎ−（アゼパン−１−イル）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリルアミドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，９．６１（ｓ，１Ｈ），９．４９（ｓ，１Ｈ），９．１４（ｓ，１Ｈ），８．５２（ｓ，２Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），７．３９−７．９７（ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ），６．５２−６．４９（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８６−５．８３（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），３．００−２．９７（ｍ，４Ｈ），１．５８−１．５４（ｍ，８Ｈ）Ｃ１９Ｈ１９Ｆ６Ｎ５ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４４８．３９；室温で３．２２分間の実測値４４８．３０、純度（９６．４８％）。
【０２１０】
実施例１６：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（２，６−ジメチルピリミジン−４−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−１７）の合成。
【化８０】
0006005740.tif 000083
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、酢酸エチル（１５ｍＬ）に溶解した（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２０ｇ）の溶液を装填した。溶液を−４０℃に冷却し、４−ヒドラジニル−２，６−ジメチルピリミジン（０．０７８ｇ、１ｅｑ．）で処理した。次にＴ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；０．７ｇ，３．０ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．３６７ｇ，４．０ｅｑ．）を同時に添加して、反応混合物を−４０℃で３０分間撹拌した。次に反応混合物を室温になるまで放置して、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、０．３４０ｇの油性粗化合物をもたらして、移動相としてＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を使用するｃｏｍｂｉ−ｆｌａｓｈによって精製し（所望の化合物はＣＨ２Ｃｌ２中の７〜８％ＭｅＯＨで溶出した）、５０ｍｇ（収率：１８％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（２，６−ジメチルピリミジン−４−ｙｌ）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，１０．５４（ｓ，１Ｈ），９．１９（ｂ，１Ｈ），８．５４（ｓ，２Ｈ），８．３０（ｓ，１Ｈ），７．５２−７．５５（ｄ，Ｊ＝１０．４，１Ｈ），６．２９（ｓ，１Ｈ），６．０６−６．０８（ｄ，Ｊ＝１０．４，１Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），２．１３（ｓ，３Ｈ），Ｃ１９Ｈ１５Ｆ６Ｎ７ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４７２．３７；実測値：４７２．２４（室温で２．８８分間、純度９９．５９％）。
【０２１１】
実施例１７：（Ｅ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピラジン−２−イル）アクリロヒドラジドの合成
【化８１】
0006005740.tif 000084
３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾチオアミドの合成：
【化８２】
0006005740.tif 000085
２Ｌの３つ口丸底フラスコに、ＤＭＦ（１Ｌ）中の３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（２００ｇ）の溶液を装填して、ＮａＳＨ（１２３．７ｇ、２．０ｅｑ．）およびＭｇＣｌ２（１８６．７ｇ、１ｅｑ．）で処理した。反応混合物を周囲温度で３時間撹拌した後、氷水スラリー（１０Ｌ）中に注ぎ入れて、ＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を鹹水で洗浄して（３×１００ｍＬ）、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、２０５ｇの粗製化合物（収率：９０％）をもたらし、それをさらに精製せずに次のステップで使用した。
【０２１２】
３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールの合成：
【化８３】
0006005740.tif 000086
５Ｌの３つ口丸底フラスコに、ＤＭＦ（１．０３Ｌ）中の３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾチオアミド（２０５．６５ｇ）の溶液を装填し、滴下して添加されるヒドラジン水和物（７３．１６ｍＬ、２．０ｅｑ．）で処理した。反応混合物を周囲温度で１時間撹拌した後、滴下して添加されるＨＣＯＯＨ（１．０２８Ｌ）で処理した。反応混合物を９０℃で３時間還流させ、次に室温に冷却して、飽和水性ＮａＨＣＯ３溶液（７Ｌ）中に注ぎ入れて、ＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を鹹水（３×５００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して１８０ｇの固体をもたらした。固体を石油エーテルに懸濁して、懸濁液を撹拌して、濾過して乾燥し、淡黄色固体として所望のトリアゾール（１６０ｇ、収率：７５％）をもたらした。
【０２１３】
（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレートおよび（Ｅ）−イソプロピル３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレートの合成：
【化８４】
0006005740.tif 000087
２Ｌの３つ口丸底フラスコに、ＤＭＦ（０．９６Ｌ、６Ｖ）中の３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール（１６０ｇ、）の溶液を装填し、ＤＡＢＣＯ（１２７．７４ｇ、２ｅｑ．）で処理して３０分間撹拌した。（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸イソプロピル（１５０．３２ｇ、１．１ｅｑ．）を上記の反応混合物に滴下して添加し、１時間撹拌した後、氷水スラリー（５Ｌ）中に注ぎ入れて、ＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を鹹水（３×１００ｍＬ）で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、２５０ｇの粗製化合物をもたらした。カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、６０／１２０メッシュ、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン誘導体勾配による溶出；所望の化合物はヘキサン誘導体中の２〜２．５％ＥｔＯＡｃで溶出し始めた）による精製は、純粋なシスエステル（１３８ｇ、収率：６１．６％）および純粋なトランスエステル（１１．６ｇ、収率：５．２％）をもたらした。
【０２１４】
（Ｅ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸の合成：
【化８５】
0006005740.tif 000088
５００ｍＬの３つ口丸底フラスコに、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の（Ｅ）−イソプロピル３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレート（５．０ｇ）の溶液を装填した。溶液を水（５０ｍＬ）中のＬｉＯＨ（２．６６ｇ、５．０ｅｑ．）の溶液で処理して、反応混合物を室温で４時間撹拌した後、４０ｍＬの水で希釈して、希釈水性ＨＣｌで酸性化（ｐＨ＝２〜３）し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を鹹水で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して減圧下で濃縮し、２．７５ｇの所望の不飽和カルボン酸（収率：６１．６％、ＬＣＭＳによる純度：９９．０％）をもたらした。
【０２１５】
（Ｅ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピラジン−２−イル）アクリロヒドラジドの合成：
【化８６】
0006005740.tif 000089
ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）およびＴＨＦ（１２．５ｍＬ）中の（Ｅ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．７５ｇ、）の溶液に、１２ｍＬのＴＨＦ中の２−ヒドラジノピラジン（０．２３ｇ）の溶液を室温で添加した。Ｔ３Ｐ（酢酸エチル中の５０％、１．５２ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（１．４６ｍＬ）を滴下して同時に添加して、反応混合物を室温で３０分間撹拌した後、氷冷水でクエンチして、ＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を鹹水で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、０．６９８ｇの粗製固体をもたらした。最初に石油エーテル、次にＥｔ２Ｏと共に磨砕して、２７５ｍｇ（収率：２９％）の（Ｅ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピラジン−２−イル）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，１０．３（ｓ，１Ｈ），９．１５（ｓ，２Ｈ），８．５９（ｓ，２Ｈ），８．３０−８．２６（ｄ，Ｊ＝１４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．１３（ｓ，１Ｈ），８．０６−８．０７（ｍ，１Ｈ），６．９８−６．９５（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ）；Ｃ１７Ｈ１２Ｆ６Ｎ７ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４４３．３１；実測値：４４４．１９（室温で２．６２５分間、純度９９．０６％）。
【０２１６】
実施例１８：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリジン−４−イル）アクリロヒドラジド塩酸塩（Ｉ−１９）の合成。
【化８７】
0006005740.tif 000090
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、ＥｔＯＡｃ（１０．０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２５ｇ）を装填した。４−ヒドラジニルピリジン塩酸塩（０．１６ｇ、１．２ｅｑ．）を−４０℃で添加して、Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％、０．８５ｍＬ、２．０ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．４９ｍＬ、４．０ｅｑ．）の同時添加がそれに続いた。反応混合物を−４０℃で３０分間撹拌した後、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、０．３５ｇの粗製物をもたらした。移動相としてＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を使用する、カラムクロマトグラフィーによる精製（化合物はＣＨ２Ｃｌ２中の４％ＭｅＯＨで溶出した）は、８０ｍｇ（収率：２９．８５％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリジン−４−イル）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，１０．５３（ｂｒｓ，ＮＨ交換可能，１Ｈ），９．５８（ｓ，１Ｈ），８．８８（ｂｒｓ，ＮＨ交換可能，１Ｈ），８．８４（ｓ，２Ｈ），８．２９（ｓ，１Ｈ），８．０９−８．１１（ｄ，２Ｈ），７．５２−７．５４（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），６．６６−６．６９（ｍ，２Ｈ），６．０６−６．１０（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，Ｈ）；Ｃ１８Ｈ１３Ｆ６Ｎ６ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４４３．３３；実測値：４４３．２４（室温で２．２４１分間、純度９０．１７％）。
【０２１７】
２５ｍＬの３つ口丸底フラスコに、ＣＨ２Ｃｌ２（５．０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリジン−４−イル）アクリロヒドラジド（０．０８ｇ）の冷溶液（０℃）を装填して、ジオキサン（０．５ｍＬ）中の４Ｎ  ＨＣｌで処理した。反応混合物が室温になるまで放置して、４時間撹拌した後、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、０．０５ｇ（収率：４０．８１％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリジン−４−イル）アクリロヒドラジドＨＣｌ塩をもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１３．６７（ｂｒｓ，交換可能，１Ｈ），１０．６７（ｓ，交換可能，１Ｈ），９．４３（ｓ，１Ｈ），８．５８（ｓ，２Ｈ），８．３５−８．３８（ｍ，４Ｈ），７．６０−７．６２（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９２−６．９６（ｍ，２Ｈ），６１１−６．１３（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ）；Ｃ１８Ｈ１３Ｆ６Ｎ６ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４４３．３３；実測値：４４３．２４（室温で３．００分間、純度９０．９７％）。
【０２１８】
実施例１９：（Ｚ）−Ｎ−（４−ベンジルピペラジン−１−イル）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリルアミド（Ｉ−２０）の合成。
【化８８】
0006005740.tif 000091
４−ベンジルピペラジン−１−アミンの合成。
【化８９】
0006005740.tif 000092
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、濃塩酸および水を装填して、窒素雰囲気下におけるＮａＮＯ２およびベンジルピペラジン（５．０ｇ）添加のために、溶液を０〜５℃に冷却した。反応混合物を０〜５℃で２．５時間撹拌した後、水で希釈して、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して減圧下（４０℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、４．４０ｇの無色の固体をもらした。ｃｏｍｂｉ−ｆｌａｓｈクロマトグラフィー（２５．５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサンでの溶出）を使用した精製は、２．０ｇの所望の化合物（収率：３４．３％）をもたらした。
【０２１９】
ＴＨＦ中の１−ベンジル−４−ニトロソ−４−ピペリジン（ｐｉｐｅｒｉｚｉｎｅ）（０．８ｇ）の冷溶液（−７０℃）を、窒素雰囲気下において過剰なＬＡＨで処理した。反応混合物が周囲温度になるまで放置して、１．０時間撹拌した後、水でクエンチして、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して減圧下（４０℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、０．７０ｇの４−ベンジルピペラジン−１−アミンを無色の固体としてもたらした。
【０２２０】
（Ｚ）−Ｎ−（４−ベンジルピペラジン−１−イル）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリルアミドの合成。
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２２０ｇ、１．２ｅｑ．）、４−ベンジルピペラジン−１−アミン（０．１０ｇ、１．０ｅｑ．）、およびＥｔＯＡｃ（１５ｍｌ）を装填した。Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；０．９９ｇ、３．０ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．２７ｇ、４．０ｅｑ．）を窒素雰囲気下において、−６０℃で添加した。反応の進行は、ＴＬＣ分析（ＳｉＯ２、１５％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を移動相として、ＵＶ光下での可視化）によって追跡した。反応混合物を水中でクエンチし、酢酸エチル（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、０．３５ｇの粗製固体をもらした。Ｃｏｍｂｉ−ｆｌａｓｈ上の精製（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２での溶出）は、２０ｍｇ（収率：６％）の（Ｚ）−Ｎ−（４−ベンジルピペラジン−１−イル）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリルアミドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．４４−９．４８（ｔ，３Ｈ），９．１０（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｓ，２Ｈ），７．２３−７．４１（ｍ，６Ｈ），６．４６−６．４９（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８３−５．８６（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４７（ｓ，２Ｈ），２．８１（ｓ，４Ｈ），２．２３−２．３３（ｄ，２Ｈ）Ｃ２４Ｈ２３Ｆ６Ｎ６ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋５２５．４７；実測値：５２５．２０（室温で９．８７分間、純度１００％）。
【０２２１】
実施例２０：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ−（４−エチルピペラジン−１−イル）アクリルアミド（Ｉ−２１）の合成。
【化９０】
0006005740.tif 000093
ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２５ｇ）の冷溶液（−４０℃）を４−エチルピペラジン−１−アミン（０．１２ｇ）で処理した。Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％、０．８４ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（０．２４ｍＬ）を同時に添加して、反応混合物を−４０℃で３０分間撹拌した後、氷冷水でクエンチしてＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を鹹水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥して、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、０．２８０ｇの粗化合物をもらした。ｃｏｍｂｉ−ｆｌａｓｈクロマトグラフィーによる精製（ＣＨ２Ｃｌ２中の２％ＭｅＯＨでの溶出）と、それに続く分取ＴＬＣプレート（ＣＨ２Ｃｌ２中の１０％ＭｅＯＨでの溶出）上の精製は、６０ｍｇの（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ−（４−エチルピペラジン−１−イル）アクリルアミドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＦ３ＣＯＯＤ）δ：１０．７５（ｓ，１Ｈ），８．３１−８．２９（ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈ），７．９８（ｓ，１Ｈ），７．２１−７．２３（ｄ，１Ｈ），６．０８−６．１０（ｄ，１Ｈ），３．５２−３．５４（ｍ，３Ｈ），３．３６（ｓ，１Ｈ），３．１１（ｍ，８Ｈ），１．１９−１．２２（ｍ，３Ｈ）；Ｃ１９Ｈ２１Ｆ６Ｎ６ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４６３．４０；実測値：４６３．２３（室温で２．４３分間、純度９８．６３％）。
【０２２２】
実施例２１：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ−モルホリノアクリルアミド（Ｉ−２２）の合成。
【化９１】
0006005740.tif 000094
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．２５０ｇ）、モルホリン−４−アミン（０．０７２ｇ、１．０ｅｑ．）、およびＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）を装填した。溶液を−６０℃に冷却し、Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；０．６３ｍＬ、１．５ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．２４ｍＬ、２．０ｅｑ．）で、窒素雰囲気下において処理した。反応の進行は、１０％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を移動相として使用し、ＵＶ光下で可視化される、ＴＬＣ分析によって追跡した。完了時に、反応混合物を水でクエンチして、ＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、０．３５ｇの粗製固体をもらした。精製（Ｃｏｍｂｉ−ｆｌａｓｈ、３％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２での溶出）は、１００ｍｇ（収率：３３％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ−モルホリノアクリルアミドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ＝９．５２（ｓ，ＮＨｅｘｃｈａｎｇｅ，１Ｈ），８．５１（ｓ，２Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），７．３８−７．４２（ｍ，１Ｈ），６．５０−６．５３（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８４−５．８６（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），３．６３（ｓ，４Ｈ），２．８７（ｓ，４Ｈ）；Ｃ１７Ｈ１６Ｆ６Ｎ５Ｏ２のＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４３６．３３；実測値：４３６．１８（室温で２．６４分間、純度１００％）。
【０２２３】
実施例２２：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリミジン−４−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−２３）の合成。
【化９２】
0006005740.tif 000095
４−ヒドラジニルピリミジンの合成：
【化９３】
0006005740.tif 000096
ＥｔＯＨ（２５ｍＬ）中の２，４−ジクロロピリミジン（２．０ｇ）溶液を０〜２０℃に冷却して、ヒドラジン（２．８ｍＬ）で処理した。反応の進行は、１０％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を移動相として使用し、ＵＶ光下で可視化される、ＴＬＣ分析によって追跡した。混合物を減圧下で濃縮して、３．１ｇの粗製２−クロロ−４−ヒドラジニル−ピリミジン（収率＝９４．８％）をもらした。
【０２２４】
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶解した２−クロロ−４−ヒドラジニル−ピリミジン（２００ｍｇ）の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（２００ｍｇ）を添加して、ＴＬＣ分析（１０％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を移動相として使用し、ＵＶ光下で可視化される）によって完了が示されるまで、懸濁液を水素雰囲気下で撹拌した。混合物をセライト（登録商標）を通して濾過し、減圧下で濃縮して、２５０ｍｇの４−ヒドラジニルピリミジンをもらした。
【０２２５】
（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリミジン−４−イル）アクリロヒドラジドの合成。
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（２５０ｍｇ、１．０ｅｑ．）、およびＥｔＯＡｃ（２０．０ｍＬ）を装填した。４−ヒドラジニルピリミジン（２３１ｍｇ、３ｅｑ．）を−６０℃で添加して、Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％、０．８４ｍＬ、２．０ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．２４ｍＬ、２．０ｅｑ．）の同時添加がそれに続いた。反応混合物を−６０℃で３０分間撹拌した後、減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、０．２０ｇの固体をもたらした。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中の５％ＭｅＯＨで溶出）による精製は、７５ｍｇの材料をもたらし、それを分取ＴＬＣ（移動相としてＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２を使用する）によって精製して、１３ｍｇ（収率＝５％）（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピリミジン−４−イル）アクリロヒドラジドを提供した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ＝１０．５９（ｓ，１Ｈ），９．６８（ｓ，ＮＨ交換，１Ｈ），９．４７（ｓ，ＮＨ交換，１Ｈ），８．５３−８．５９（ｔ，２Ｈ），８．３０（ｓ，１Ｈ），８．１９−８．２０（ｄ，１Ｈ），７．５３−７．５６（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），６．６６−６．６７（ｄ，１Ｈ），６．０６−６．０９（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ）；Ｃ１７Ｈ１２Ｆ６Ｎ７ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４４４．３１；実測値：４４４．１９（室温で２．３９分間、純度９４．９７％）。
【０２２６】
実施例２３：（Ｚ）−３−（３−（４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピラジン−２−イル）アクリロヒドラジド（Ｉ−２４）の合成。
【化９４】
0006005740.tif 000097
４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンズアミドの合成：
【化９５】
0006005740.tif 000098
ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中の４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（１．０ｇ）の溶液を固体Ｋ２ＣＯ３（０．５５ｇ、１．１ｅｑ．）およびＨ２Ｏ２（３０％ｖ／ｖ、１．０ｍＬ）で処理した。反応混合物を室温で３時間撹拌した後、氷水（２０ｍＬ）中に注ぎ入れた。沈殿物を濾過して、石油エーテルで洗浄し、１．０ｇの粗製の所望の一級アミド（収率：９０％）をもらした。
【０２２７】
４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾチオアミドの合成：
【化９６】
0006005740.tif 000099
トルエン（２０ｍＬ）中の４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンズアミド（１．２ｇ）の溶液に、ローソン試薬（３．３２ｇ、２．０ｅｑ．）を添加した。反応混合物を９０℃で８時間撹拌した後、室温に冷却して濾過した。濾液を水中に注ぎ入れて、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を鹹水（３×５０ｍＬ）で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、２ｇの粗製化合物をもたらした。粗化合物をｃｏｍｂｉ−ｆｌａｓｈクロマトグラフィーによって精製し（７％ＥｔＯＡｃ：ヘキサンでの溶出）、１．０ｇの所望の化合物（収率：７９％）をもらした。
【０２２８】
３−（４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールの合成：
【化９７】
0006005740.tif 000100
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾチオアミド（１ｇ）の溶液を、ヒドラジン水和物（０．３２ｇ、２．０ｅｑ．）で処理して、反応混合物を室温で１時間撹拌した後、ギ酸（３ｍＬ）を添加した。反応混合物を９０℃で３時間還流させて、次に室温に冷却し、（温度を２５〜３０℃に保って緩慢に）水性飽和ＮａＨＣＯ３中に注ぎ入れて、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を鹹水（３×５０ｍＬ）で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、１．５ｇの粗製化合物をもたらした。カラムクロマトグラフィー（ヘキサン中の４０％ＥｔＯＡｃによる溶出）による精製は、０．５０ｇの所望の化合物（収率：３６％）をもたらした。
【０２２９】
（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレートの合成：
【化９８】
0006005740.tif 000101
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の３−（４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール（２．１ｇ）の溶液をＤＡＢＣＯ（１．５ｇ、２ｅｑ．）で処理して、混合物を３０分間撹拌した後、（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸イソプロピル（１．７６ｇ、１．１ｅｑ．）を添加した。反応混合物を室温で５時間撹拌し、次に氷水（５０ｍＬ）に中に注ぎ入れて、ＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を鹹水（３×１０ｍＬ）で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮し、３．０ｇの粗製化合物をもたらした。（６０／１２０メッシュＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２中の１〜１．２％ＭｅＯＨによる溶出）を使用するカラムクロマトグラフィーによる精製は、所望の不飽和エステル（１．３３ｇ、収率：５２％）をもたらした。
【０２３０】
（Ｚ）−３−（３−（４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸の合成：
【化９９】
0006005740.tif 000102
２５ｍＬの３つ口丸底フラスコに、１：１のＴＨＦ：水（２６ｍＬ）中の（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレート（１．３３ｇ）の溶液を装填した。溶液を固体ＬｉＯＨ（０．５３ｇ、４ｅｑ．）で処理して、室温で４時間撹拌した後、４００ｍｌの水で希釈し、希釈水性ＨＣｌでｐＨ＝２〜３に酸性化して、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を鹹水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過して減圧下で濃縮し、０．８ｇの粗化合物（収率：６６％）をもらした。
【０２３１】
（Ｚ）−３−（３−（４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピラジン−２−イル）アクリロヒドラジドの合成：
【化１００】
0006005740.tif 000103
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、１：１のＥｔＯＡｃ：ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の（Ｚ）−３−（３−（４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．８ｇ）の溶液を装填した。溶液を−７０℃に冷却し、滴下して添加される２−ヒドラジノピラジン（０．２７５ｇ、１．２ｅｑ．）、Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；２．５ｍＬ、２．０ｅｑ．）、およびＤＩＰＥＡ（１．４４ｍＬ、４．０ｅｑ．）で順次処理した。透明な反応混合物を−６０℃で１時間撹拌した後、減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して粗化合物をもたらした。（６０／１２０メッシュＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２中の３〜４％ＭｅＯＨによる溶出）を使用するカラムクロマトグラフィーによる精製は、０．３０ｇ（収率：３０％）（Ｚ）−３−（３−（４−クロロ−３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−（ピラジン−２−イル）アクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ＝１０．５３（ｓ，１Ｈ），９．５８（ｓ，１Ｈ），９．１１（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．３２（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｓ，１Ｈ），７．５２−７．５５（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），６．０８−６．１１（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ）；Ｃ１７Ｈ１１ＣｌＦ６Ｎ７ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４７８．７６実測値：４７８．１（室温で２．６４分間、純度１００％）。
【０２３２】
実施例２４：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−シクロプロピルアクリロヒドラジド（Ｉ−２５）の合成。
【化１０１】
0006005740.tif 000104
１００ｍＬの３つ口丸底フラスコに、（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（０．５０ｇ）およびＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）を装填した。ＤＣＣ（０．２９ｇ、１．０ｅｑ．）を添加して、シクロプロピルヒドラジン塩酸塩（０．１５ｇ、１．０ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．２４ｍＬ、１．０ｅｑ．）の逐次添加のために、混合物を０℃に冷却した。反応混合物を１時間撹拌した後、水（５０ｍＬ）中に注ぎ入れて、ＣＨ２Ｃｌ２（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を鹹水（５０ｍＬ）で洗浄して、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過して、減圧下（２５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、粗製化合物をもたらした。ｃｏｍｂｉ−フラッシュクロマトグラフィーによる精製（ＣＨ２Ｃｌ２中の１．５〜２．５％ＭｅＯＨでの溶出）と、それに続く分取ＴＬＣプレート（ヘキサン中の７０％ＥｔＯＡｃでの溶出）上のさらなる精製は、１５ｍｇ（収率：２．６％）の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ’−シクロプロピルアクリロヒドラジドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ，９．１６（ｓ，１Ｈ），８．５２（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），７．２３−７．２６（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），６．４０−６．４３（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），４．９７（ｓ，１Ｈ），４．６３（ｓ，１Ｈ），３．１８−３．２０（ｍ，１Ｈ），０．８３−０．８７（ｍ，２Ｈ），０．６５−０．６９（ｍ，２Ｈ）；化学式：Ｃ１６Ｈ１４Ｆ６Ｎ５ＯのＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４０６．３１実測値：４０６．１９（室温で２．７４分間、純度９８．８５％）。
【０２３３】
実施例２５：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）アクリルアミド（Ｉ−２６）の合成。
【化１０２】
0006005740.tif 000105
１−アミノアゼチジン−３−オールの合成：
【化１０３】
0006005740.tif 000106
水（２０ｍｌ）中のアゼチジン−３−オール塩酸塩（２．０ｇ）の冷却（１５〜２０℃）溶液をＮａＯＨ（１０ｍＬの水中の０．８ｇ）で処理し、混合物を１５〜２０℃で１時間撹拌した。次に３つの反応混合物を０℃に冷却し、ＮａＮＯ２溶液（１０ｍＬの水中の１．８９ｇ）および酢酸（１．３ｍＬ）で順次処理した。０〜５℃で２時間撹拌した後、反応混合物を水（２０ｍＬ）中に注ぎ入れて、希釈水性ＨＣｌでｐＨ＝２〜３に酸性化して、ＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を鹹水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥して、減圧下で濃縮して、０．２６ｇ所望の化合物をもたらし、それをそのまま次のステップで使用した（ＬＣＭＳ純度：５９．８４％）。
【０２３４】
ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中の１−ニトロソアゼチジン−３−オール（０．２５ｇ）の溶液を−７５℃に冷却して、希釈水性ＨＣｌ（１．５ｍＬ）で処理した。次に亜鉛粉末（１．３５ｇ）を小分けして添加し、反応混合物を約−７０℃で３時間撹拌した後、セライト（登録商標）を通して濾過し、減圧下で濃縮して、９０ｍｇの１−アミノアゼチジン−３−オールをもたらし、そのまま次のステップで使用した。
【０２３５】
（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）アクリルアミドの合成。
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（２００ｍｇ）およびＴＨＦ（２０．０ｍＬ）を装填した。溶液を−６０℃に冷却し、ＴＨＦ中の１−アミノアゼチジン−３−オール（６５ｍｇ、１．３ｅｑ．）溶液で処理した。Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の５０％；０．６７ｍＬ、２．０ｅｑ．）およびＤＩＰＥＡ（０．５１ｍＬ、２．０ｅｑ．）を同時添加して、反応混合物を−６０℃で３０分間撹拌した後、室温になるまで放置した。次に反応混合物を減圧下（３５℃、２０ｍｍＨｇ）で濃縮して、１００ｍｇの固体をもたらした。カラムクロマトグラフィーによる精製（ＣＨ２Ｃｌ２中の３％ＭｅＯＨによる溶出）は、２０ｍｇの（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−Ｎ−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）アクリルアミドをもたらした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．６０（ｓ，１Ｈ），６．３８（ｓ，１Ｈ），８．５２（ｓ，２Ｈ），８．２６（ｓ，１Ｈ），７．３２−７．３５（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），６．４０（ｄ，交換可能，１Ｈ），５．７８−５．８１（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１４−４．１５（ｄ，１Ｈ），３．８２（ｍ，２Ｈ），３．７１（ｍ，２Ｈ）；化学式Ｃ１６Ｈ１４Ｆ６Ｎ５Ｏ２のＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４２２．３１実測値：４２２．１９（室温で２．４６分間、純度９１．４９％）。
【０２３６】
実施例２６〜３１：実施例２６〜３１は、発明の化合物の調製に有用な新しい合成方法を記載する（例えば発明の化合物の前駆体として、このような化合物は上の式Ｚによって記載される）。
【０２３７】
実施例２６：
【化１０４】
0006005740.tif 000107
プロピオル酸イソプロピルの合成：
【化１０５】
0006005740.tif 000108
添加漏斗、温度計ソケット、および機械的撹拌機を備えた２０Ｌの４つ口丸底フラスコに、プロピオル酸（１０００ｇ、１当量）およびＩＰＡ（８Ｌ、８Ｖｏｌ．）を装填した。ＢＦ３−エーテラート（４．５４ｋｇ、２．０等量）を２５℃で３０分間かけて、添加漏斗から緩慢に添加した。反応混合物の温度を最高９０℃まで徐々に増大させて、反応塊をその温度に３時間保った。３時間後のＧＣモニタリングは、反応完了を示した。反応混合物を室温に冷却し、２０Ｌの氷冷ＤＭ水でクエンチして、３０分間撹拌した。１０Ｌのジクロロメタンを反応混合物に添加して、反応塊をさらに３０分間撹拌した。有機層を分離して、水層を５Ｌのジクロロメタンで再度抽出した。合わせた有機層を１０Ｌの飽和鹹水で洗浄して、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空下において３５℃〜４０℃で濃縮して（生成物は揮発性である）、生成物を褐色液体（１．３２ｋｇ、８１．２５％）として得た。純度８９．６７％（ＧＣ）；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２２（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），２．８５（ｓ，１Ｈ），４．９８−５．０５（ｍ，１Ｈ）．
【０２３８】
（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸イソプロピルの合成：
【化１０６】
0006005740.tif 000109
添加漏斗、温度計ソケット、および機械的撹拌機を備えた２０Ｌの４つ口丸底フラスコに、イソプロピルプロピオル酸エステル（１０００ｇ、１当量）および酢酸（３．７Ｌ、３．７Ｖｏｌ．）を２５℃で装填し、反応塊を１０分間撹拌した。ヨウ化ナトリウム（２．１３８Ｋｇ、１．６Ｖｏｌ．）を添加して、反応混合物を撹拌した（濃褐色が観察された）。温度を１１０℃に上昇させて、反応をその温度に１．５時間保った。ＧＣモニタリングは、１．５時間後の反応完了を示した。反応混合物を室温に冷却し、氷冷ＤＭ水（１８．７５Ｌ、１８．７５Ｖ）でクエンチして、３０分間撹拌した。ＭＴＢＥ（５Ｌ）を反応塊に添加して、さらに３０分間撹拌した。有機層を分離して、水層をＭＴＢＥ（５Ｌ）で再度抽出した。合わせた有機層をＮａＨＣＯ３（２×１０Ｌ）、ＮａＨＳＯ３（２×５Ｌ）、飽和鹹水（５．２Ｌ、５．２Ｖ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥して、真空下において３５℃で濃縮して、（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸イソプロピルを褐色液体（１．４９ｋｇ、７０％）として得た。純度８７．３４％（ＧＣ）；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２８（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），５．０８−５．１３１（ｍ，１Ｈ），６．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），７．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）．
【０２３９】
３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンゾチオアミドの合成：
【化１０７】
0006005740.tif 000110
オーバーヘッド撹拌機と温度計ソケットを備えた２０Ｌの多口丸底フラスコに、ビス（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（１．２５ｋｇ、１．０当量）およびＤＭＦ（６．２５Ｌ、５Ｖ）を装填して、生じた混合物を窒素下において室温（２８℃）で撹拌した。反応混合物を１０℃に冷却して、０．７７５ｇのＮａＳＨ．Ｈ２Ｏ（２等量）を１０分間かけて添加した。１５分間の撹拌後、ＭｇＣｌ２．６Ｈ２Ｏ（１．１６９ｋｇ、１．１等量．）を１５分間かけて小分けして添加し、反応をさらに３５分間撹拌した。反応（緑色の溶液）の進行はＨＰＬＣによってモニターし、それは９９．６％の生成物と０．０３％のベンゾニトリルを示した。反応混合物を０〜５℃に冷却し、３０％の希ＨＣｌ（３．７５Ｌ）を滴下して添加して、ｐＨを２〜３に調節した。生じた塊をＭＴＢＥ（５Ｌ×１）で抽出した。層を分離して、水層に１ＬのＤＭ水を添加して、それをＭＴＢＥ（２．５Ｌ×１）で再度抽出した。合わせた有機層を鹹水（４．５Ｌ×３）で洗浄し、真空下で乾燥して濃縮した。得られた固体にヘキサンを添加して、蒸発させ、生成物を黄色固体（１．４００Ｋｇ、９８．０％）として単離した。純度：９９．２８％（ＨＰＬＣ）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．２７（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，２Ｈ），１０．０（ｓ，１Ｈ），１０．３８（ｓ，１Ｈ）．
【０２４０】
３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールの合成：
【化１０８】
0006005740.tif 000111
オーバーヘッド撹拌機と温度計ソケットを備えた２０Ｌの多口丸底フラスコに、チオアミド（１３７８ｇ、１当量）およびＤＭＦ（６．８９Ｌ、５Ｖ）を装填して、得られた混合物を窒素下において室温（２８℃）で撹拌した。反応塊を１０℃に冷却し、撹拌しながら２時間かけて、ヒドラジン水和物（５０５．４ｇ、２．０等量）を滴下して添加した。反応塊を０℃〜５℃に冷却し、１時間かけてギ酸（６．８９Ｌ、５Ｖ）を添加した（発熱が観察され、温度は２０℃に増大した）。次に反応混合物を９５〜１００℃でさらに１２時間加熱した。反応の進行をＨＰＬＣによってモニターし、それは９９．５％の生成物の形成を示した。反応塊を３５〜４０℃に冷却し、２０．６Ｌの予冷した（１０〜１５℃）ＤＭ水を添加して、３０分間撹拌した。反応塊をＭＴＢＥ（８．２６Ｌ）で抽出した。水層をＭＴＢＥ（５．５１２Ｌ）で再度抽出し、合わせた有機層を１０％炭酸水素ナトリウム（６．８９Ｌ、２Ｖ）、鹹水（６．８９Ｌ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥して、真空下で濃縮した。得られた黄色固体にジクロロメタン（２Ｖ）を添加して、０〜５℃で１時間撹拌し、それは濾過時に、黄色固体（１１５６ｇ、８２．２％）として生成物を与えた。純度：９９．７％（ＨＰＬＣ）；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：８．１５（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｓ，２Ｈ），８．７９（ｓ，１Ｈ），１４．５（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．
【０２４１】
（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレートの合成：
【化１０９】
0006005740.tif 000112
添加漏斗、温度計ソケット、機械的撹拌機、および栓を備えた１０Ｌの４つ口丸底フラスコに、３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール（６００ｇ、１．０ｅｑ．）、ＤＡＢＣＯ（４８０ｇ、２．０ｅｑ）、およびＤＭＦ（３．０Ｌ）を装填した。反応混合物を３０分間撹拌した。３０分後、ＤＭＦ（１２００ｍＬ）中のヨードエステル（１０２４．８ｇ、２．０ｅｑ）の溶液を１時間かけて滴下して添加した。反応の進行はＨＰＬＣによってモニターし、（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレート：６２．３６％、および３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール：１５．１％が示された。さらに１時間後、１当量のＤＡＢＣＯ（２５８ｇ）を添加して、反応をさらに１時間維持した。ＨＰＬＣ分析は、７５．６３％の（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレート、および２％の３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールとしての転換を示した。反応混合物を冷ＤＭ水（１２Ｌ）でクエンチし、１５分間撹拌して酢酸エチル（２×６Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和鹹水（３０％、２×３Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム（１００ｇ）上で乾燥して濃縮した。粗製塊（８４０ｇ）を１０Ｌ丸底フラスコに入れて、メタノール（１２００ｍＬ）を添加した。溶液を０〜５℃に保って、３０分間撹拌した。得られた固体を濾過して、メタノール（２００ｍＬ）で洗浄し、白色固体（５５０ｇ、６５．０％）として生成物をもたらした。純度：８７．３４％（ＨＰＬＣ）；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．３０（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），５．１２（ｍ，１Ｈ），５．７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ），７．２４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ），７．９１（ｓ，１Ｈ），８．５８（ｓ，２Ｈ），９．７０（ｓ，１Ｈ）．シス異性体：トランス異性体の比率は８３：８である。
【０２４２】
（Ｚ）−３−（５−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（２）の合成：
【化１１０】
0006005740.tif 000113
添加漏斗、温度計ソケット、機械的撹拌機、および栓を備えた５Ｌの４つ口丸底フラスコに、ＴＨＦ（１．２５Ｌ）および（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレート（１２５ｇ、１ｅｑ．）を室温で装填した。反応混合物を０℃に冷却した。撹拌溶液に、氷冷水酸化リチウム溶液（１．２５Ｌの水中の６６．５８ｇ）を添加漏斗を通して３０分間かけて添加した。反応温度を緩慢に２５℃に上昇させて、反応塊をこの温度に２時間保った。ＨＰＬＣモニタリングは、以下の状態を示した：（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸：８７．６６％：（Ｅ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸：９．９１％、（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレート２％。反応をさらに３０分間継続して、ＨＰＬＣモニタリングを実施した（（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸：８８．２０％；（Ｅ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル：１１．０３％。反応完了後、反応混合物を氷冷水（３８５ｍＬ）でクエンチして、３０分間撹拌した。希塩酸（３０％、４００ｍＬ）でｐＨを１〜２に調節し、反応塊を酢酸エチル（３×６２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和鹹水（３０％、６５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム（１２．５ｇ）上で乾燥し、減圧下において３０〜３５℃で濃縮した。粗製物にヘキサンを添加して、３０分間撹拌した。得られた固体をブフナー漏斗を通して濾過し、洗浄しヘキサン（２５０ｍＬ）．で洗浄した。得られた固体を真空下で３０分間、室温で３〜４時間乾燥した。生成物を白色粉末（９２．８ｇ、８４．３６％）として単離した。純度：９３％（ＨＰＬＣ）；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：５．９８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ），７．４８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ），８．２（ｓ，１Ｈ），８．５０−８．５４（ｍ，２Ｈ），９．３９（ｓ，１Ｈ）．
【０２４３】
（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−１−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）プロプ−２−エン−１−オンの合成：
【化１１１】
0006005740.tif 000114
窒素入口、添加漏斗、温度計ソケット、機械的撹拌機を備えた３Ｌの４つ口丸底フラスコに、ＤＣＭ（１．８Ｌ、１８Ｖ）中の（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリル酸（１００ｇ、１．０ｅｑ．）を添加した。反応混合物を−１０℃に冷却した。冷却溶液に、ＨＯＢＴ（４．４ｇ、０．１ｅｑ．）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（８０．６ｇ、１．５ｅｑ．）および３，３−ジフルオロアゼチジン塩酸塩（４４ｇ、１．２ｅｑ．）を添加した。得られた混合物に、−１０℃でＤＩＰＥＡ（７２ｍＬ、１．５ｅｑ）を滴下して１．５時間かけて添加した。反応の進行はＨＰＬＣ分析によってモニターし、それはＤＩＰＥＡ添加終了時の反応の完了を示した。反応温度を１５℃〜２０℃に、緩慢に（約２時間）上昇させた。反応混合物を１Ｌの氷水スラリーでクエンチした。有機層を分離して、水層をＤＣＭ（４００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を飽和鹹水（２×５００ｍｌ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４（１０ｇ）上で乾燥して、減圧下（約３５℃）で濃縮し、粗化合物をもらした。このようにして得られた粗化合物を５体積のＤＩＰＥに溶解し、室温で３０分間撹拌して、次に濾過した。粗製物重量は、１００ｇ（収率＝８２．３９％）［ＨＰＬＣによるシス−８５．０７％、ＨＰＬＣによるトランス−１４．３６％］であった。
【０２４４】
このようにして得られた粗化合物は、以下の手順に従って、酢酸エチルを用いる再結晶によってさらに精製した。機械的撹拌機、温度計ソケット、および栓を備えた５００ｍＬの４つ口丸底フラスコに、１００ｇの（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−１−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）プロプ−２−エン−１−オンを添加した。この化合物に、酢酸エチル（７体積）を室温で撹拌しながら添加した。しかし化合物は、完全に可溶性でなかった。したがって生じた溶液を６０℃に加熱して透明な溶液を得て、次に緩慢に−３０℃に冷却した。溶液を−３０℃で２０分館撹拌し、吸引濾過した。得られた化合物を４０〜４５℃で３時間〜４時間真空乾燥し、白色固体として生成物を得た。（ＨＰＬＣによるシス−９８．９％）；（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−１−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）プロプ−２−エン−１−オン。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ９．５７（ｓ，１Ｈ），８．５６（ｓ，２Ｈ），７．９０（ｓ，１Ｈ），７．１８−７．２１（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），５．６１−５．６５（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），４．３９−４．４５（ｍ，４Ｈ）．
【０２４５】
実施例２７：
（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸の合成：
【化１１２】
0006005740.tif 000115
窒素入口を備えた２５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、酢酸（７０ｍＬ、１０Ｖ）に溶解したプロピオル酸（７．０ｇ、１．０ｅｑ）と、ヨウ化ナトリウム（２９．９６ｇ、２．０ｅｑ）を添加した。反応混合物を１０００℃で２〜３時間撹拌した。反応の進行は、１０％ＭｅＯＨ：ＤＣＭを移動相とする、シリカゲル上のＴＬＣ分析によって追跡した。ＳＭ  Ｒｆ＝０．３および生成物Ｒｆ＝０．５。反応混合物を氷水（７００ｍＬ）中に注ぎ入れて、飽和炭酸水素ナトリウム（ｓｏｌｉｄｕｍ  ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ）溶液で中和した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を鹹水溶液（３×１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過して、回転蒸発（２５℃、２０ｍｍＨｇ）によって濃縮し、１２．０ｇの粗製化合物をもたらして、シリカ６０／１２０を使用して移動相としてＭｅＯＨ：ＤＣＭを使用して、カラムクロマトグラフィーによってそれを精製した。カラム（５×１０ｃｍ）をＤＣＭ中で充填し、ＤＣＭ中の２％〜５％のＭｅＯＨ画分収集（５０ｍＬ画分）から開始する勾配様式で、ＭｅＯＨ中に溶出を開始した。化合物は、ＤＣＭ中の２％ＭｅＯＨで溶出し始めた。このようなＴＬＣプロファイルを含有する画分を合わせて、８．０ｇｍの所望の化合物（収率４０．４４％）を得た。
【０２４６】
（Ｚ）−１−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−３−ヨードプロプ−２−エン−１−オンの合成：
【化１１３】
0006005740.tif 000116
窒素入口およびゴム隔膜を備えた２５ｍＬの３つ口丸底フラスコ内で、（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸（０．２５０ｇ、１．０ｅｑ．）をＤＣＭ（１０ｍＬ，４０Ｖ）に溶解した。反応混合物を０℃に冷却し、ＤＩＰＥＡ（０．１６８ｇ、１．１ｅｑ）、ＨＡＴＵ（０．４９４ｇ、１．１ｅｑ）および３，３−ジフルオロアゼチジン塩酸塩（０．１７９ｇ、１．１）を添加した。反応混合物を０℃で２〜３時間撹拌した。反応の進行は、ヘキサン中の４０％酢酸エチルを用いる、シリカゲル上のＴＬＣ分析によって追跡した。反応混合物を濾過して、回転蒸発（２５℃、２０ｍｍＨｇ）によって濃縮し、０．３ｇの粗化合物をもらして、それをシリカ６０／１２０を使用して、移動相としてヘキサン中の４０％酢酸エチルを使用して、カラムクロマトグラフィーによって精製した。カラム（５×１０ｃｍ）をヘキサン中の５％酢酸エチル中で充填し、ヘキサン中の２０％〜３０％酢酸エチルの画分収集（５０ｍＬ画分）から開始する勾配様式で、酢酸エチルで溶出を開始した。化合物は、ヘキサン中の２０％酢酸エチルで溶出し始めた。このようなＴＬＣプロファイルを含有する画分を合わせて、０．１８ｇの所望の化合物（収率５２．３３％）を得た。質量：［Ｍ＋Ｈ］＋：２７３．８。
【０２４７】
（Ｚ）−３−（３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−１−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）プロプ−２−エン−１−オンの合成：
【化１１４】
0006005740.tif 000117
窒素入口を備えた２５ｍＬの３つ口丸底フラスコ内で、３−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール（０．１８ｇ、１．０ｅｑ．）をＤＭＦ（５．０ｍＬ、２７．０Ｖ）に溶解して、ＤＡＢＣＯ（０．１４３ｇ、２．０ｅｑ）および（Ｚ）−１−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）−３−ヨードプロプ−２−エン−１−オン（０．１９２ｇ、１．１ｅｑ）を添加した。反応混合物を室温で２〜３時間撹拌した。反応の進行は、８０％酢酸エチル−ヘキサンを移動相とする、シリカゲル上のＴＬＣ分析によって追跡した、ＳＭ  Ｒｆ＝０．６０および生成物Ｒｆ＝０．４。反応混合物を氷水（５０ｍＬ）中に注ぎ入れて、ＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を鹹水溶液（３×２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過して、回転蒸発（２５℃、２０ｍｍＨｇ）によって濃縮し、０．３ｇの粗製化合物をもたらして、シリカ６０／１２０を使用して移動相として酢酸エチル：ヘキサンを使用して、カラムクロマトグラフィーによってそれを精製した。カラム（５×１０ｃｍ）をヘキサン中で充填し、ヘキサン中の４０％〜４５％酢酸エチルの画分収集（５０ｍＬ画分）から開始する勾配様式で、酢酸エチルで溶出を開始した。化合物は、ヘキサン中の４０％酢酸エチルで溶出し始めた。このようなＴＬＣプロファイルを含有する画分を合わせて（ｃｏｍｂｉｅｎｄ）、７０ｇｍの所望の化合物（収率２５．６４％）を得た。
【０２４８】
実施例２８：（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３−イソプロポキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレートの合成：
【化１１５】
0006005740.tif 000118
プロピオル酸イソプロピルの合成。イソプロパノール（４０００ｍＬ）中のプロピオル酸（５００ｇ、７．１モル）混合物に、ＢＦ３エーテラート（２０１５ｇ、１４．２モル）を１０℃で添加した。１０分間にわたる撹拌後、反応混合物を９０℃に加熱して、２時間撹拌した。反応の完了は、ＴＬＣによってモニターした。反応混合物を２５〜３０℃に冷却し、破砕氷片でクエンチして、ジクロロメタンでの抽出がそれに続いた。有機層を水、次に鹹水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥して、真空下で濃縮し、プロピオル酸イソプロピル（４４０ｇ；５５％）を得た。生成物は、１Ｈ  ＮＭＲによって確認された。
【０２４９】
（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸イソプロピルの合成。
ＡｃＯＨ（１３００ｍＬ）中のプロピオル酸イソプロピル（３５０ｇ、３．１モル）混合物に、ＮａＩ（９３０ｇ、６．２モル）を２５℃で添加した。反応混合物を１１５℃に加熱して、１．５時間撹拌した。反応混合物を２５〜３０℃に冷却し、水でクエンチして、ＭＴＢＥでの抽出がそれに続いた。有機層を飽和炭酸水素塩、亜硫酸水素塩、および鹹水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空下で濃縮して、生成物（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸イソプロピル（６２６ｇ；８３．５％）を得た。生成物は、１Ｈ  ＮＭＲによって確認された。
【０２５０】
３−イソプロポキシ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリルの合成：
【化１１６】
0006005740.tif 000119
ＤＭＦ（３２００ｍＬ、８Ｖ）中のプロパン−２−オール（１０２．９６ｇ１．７６モル）混合物に、ＮａＨ（１２２ｇ、５．０８モル）を５℃で添加した。混合物を２時間撹拌した。この混合物に、３−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（ｂｅｎｚｏｎｉｔｉｉｌｅ）（４００、２．１モル）を滴下して添加した。塊の温度を２５〜３０℃に増大させて、同じ温度に１時間保った。反応は、ＴＬＣによってモニターした。完了後、反応混合物を氷冷水でクエンチして、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を鹹水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥して、次に真空下で濃縮して、５３０ｇ（２．３１モル；１１０％）の３−イソプロポキシ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリルを得て、それをさらに精製せずに次の段階に進めた。面積（ａ／ａ）によるＨＰＬＣ純度−９６．５％。
【０２５１】
３−イソプロポキシ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾチオアミドの合成：
【化１１７】
0006005740.tif 000120
３−イソプロポキシ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（１０００ｇ、４．３モル）をＤＭＦ（４０００ｍＬ）に溶解して、硫化水素ナトリウム水和物（６３６ｇ；８．６モル）を添加し、塩化マグネシウム六水和物（９６０．２ｇ、４．７モル）がそれに続いた。反応混合物を２５〜３０℃で、１時間撹拌した。酢酸エチル：ヘキサン（２：８）を移動相として使用して、ＴＬＣ上で反応完了をモニターした。反応混合物を氷水スラリー（２５０ｍＬ）中でクエンチし、１０％水性ＨＣｌの添加によってｐＨを５に調節した。反応混合物をＭＴＢＥで抽出して、２０％鹹水で洗浄した。有機層を真空下で濃縮して、１１３６ｇ（４．３モル；１００％）の表題化合物を得て、それをそのまま次の段階に進めた。ＨＰＬＣ純度−９７．３７％ａ／ａ。
【０２５２】
３−（３−イソプロポキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールの合成：
【化１１８】
0006005740.tif 000121
３−イソプロポキシ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾチオアミド（６４６ｇ；２．７４モル）を、ヒドラジン水和物（１４０ｇ；４．４モル）およびＤＭＦ（３２００ｍＬ；５Ｖ）と合わせた。混合物を３０分間撹拌して、１０℃に冷却した。この反応混合物に、ギ酸（３２００ｍＬ）を滴下して添加した。反応混合物を９０〜１００℃に加熱して、１２時間保った。ＨＰＬＣによる反応完了後、反応塊を２５〜３０℃に冷却して、氷冷水でクエンチした。混合物をＭＴＢＥ中に抽出した。有機層を鹹水で洗浄し、水性炭酸水素ナトリウムがそれに続き、真空下で濃縮した。ヘキサンを使用して残渣を蒸発させ、生じた残渣を１０℃で１時間スラリーにした。得られた固体を濾過して、２５〜３０℃で１２時間乾燥し、５５０ｇ（２．２６モル：８２％）の生成物３−（３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾールを得た。ＨＰＬＣ純度−９５．２４％ａ／ａ。
【０２５３】
（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３−イソプロポキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレートの合成：
【化１１９】
0006005740.tif 000122
ＤＭＦ（１２００ｍＬ）中の３−（３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール（５００ｇ，１．８モル）およびＤＡＢＣＯ（４１７．６ｇ；３．６モル）混合物を３０分間撹拌した。この混合物に、ＤＭＦ（１２００ｍＬ）中の（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸イソプロピル（８６４ｇ；３．６モル）を２５〜３０℃で緩慢に添加して、反応混合物を１時間撹拌した。１時間後、ＤＡＢＣＯ（２０８ｇ；１ｅｑ）を添加して、反応混合物を１時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析は、３−（３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール９．５９％、（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３−イソプロポキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレート：７３．７６％、（Ｅ）−イソプロピル３−（３−（３−イソプロポキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレート：６．６６％を示した。反応塊を水でクエンチし、ジクロロメタンで抽出して、真空下で濃縮し、粗生成物を得た。６０−１２０シリカゲル中の酢酸エチル−ヘキサン系を使用して、粗生成物をクロマトグラフにかけて、３１０ｇ（０．８モル；４４％）を得た。ＨＰＬＣ純度−９９％ａ／ａ。
【０２５４】
実施例２９：（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレートの合成：
【化１２０】
0006005740.tif 000123
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の３−（３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール（０．５０ｇ）（実施例３によって調製された）の溶液に、ＤＡＢＣＯ（２等量）を添加した。生じた反応混合物を室温で３０分間撹拌し、次に（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸イソプロピル（２．０等量；実施例３に従って調製された）を添加した。生じた混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物を氷冷水でクエンチし、酢酸エチル（３回）で抽出した。有機層を分離して、合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。ＬＣ−ＭＳおよびＨＰＬＣ分析は、６２％のシス異性体およｂひ３６％のトランス異性体を明らかにした。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：９．７２（ｓ，１Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），７．３０（ｓ，１Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．７１−５．７３（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），５．１２−５．１８（ｍ，１Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），１．３４（ｄ，６Ｈ）：Ｃ１６Ｈ１６Ｆ３Ｎ３Ｏ３のＬＣＭＳ［Ｍ＋１］＋３５５．３１  ４．３１７分間での実測値３５５．９２（ＬＣＭＳ  ９９．８２％）。
【０２５５】
実施例３０：（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（２−クロロ−６−イソプロポキシピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレートの合成：
【化１２１】
0006005740.tif 000124
３ｍＬのＤＭＦ中の２−クロロ−６−イソプロポキシ−４−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン（０．５ｇ）（実施例３のようにして調製された）に、ＤＡＢＣＯ（０．４６７ｇ、２等量）を添加して、生じた混合物を３０分間撹拌した。（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸イソプロピル（０．９９０ｇ、２当量）（実施例３のようにして調製された）の溶液を反応混合物に添加して、生じた混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物を実施例３のように精製して、５３％のシス異性体および３４％のトランス異性体３４％を得た。
【０２５６】
実施例３１：（Ｚ）−イソプロピル３−（３−（３−（シクロブチルアミノ）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）アクリレートの合成：
【化１２２】
0006005740.tif 000125
１．５ｍＬのＤＭＦ中のＮ−シクロブチル−３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−５−（トリフルオロメチル）アニリン（０．５ｇ）（実施例３のようにして調製された）に、ＤＡＢＣＯ（０．１８８ｇ）を添加して、生じた混合物を３０分間撹拌した。（Ｚ）−３−ヨードアクリル酸イソプロピル（０．４０４ｇ）（実施例３のようにして調製された）の溶液を反応混合物に添加して、生じた混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物を実施例３のように精製して、４４％のシス異性体および２０％のトランス異性体を得た。
【０２５７】
実施例３２：アッセイ。様々なアッセイにおいて、化合物Ｘ−１、Ｘ２、およびＸ−３（表２に描写される）と並行して、例示的な本発明の化合物を試験した。結果は、下の表２に記載される。
【０２５８】
核輸送の阻害
例示的な本発明の化合物が、ＣＲＭ１媒介核輸送を抑制する能力をＲｅｖＧＦＰアッセイで評価した。Ｒｅｖは、ヒト免疫不全ウイルス型１（ＨＩＶ−１）からのタンパク質であり、そのＣ末端ドメインに核外搬出シグナル（ＮＥＳ）、そのＮ末端領域に核局在化シグナル（ＮＬＳ）を含有する。Ｒｅｖタンパク質の核輸送は、古典的ＮＥＳ／ＣＲＭ１経路に依存する（Ｎｅｖｉｌｌｅ  ｅｔ  ａｌ．１９９７）。Ｒｅｖの核蓄積は、ＬＭＢなどのＣＲＭ１の特異的阻害剤で処理した細胞中で観察され得る（Ｋａｕ  ｅｔ  ａｌ．２００３）。
【０２５９】
このアッセイでは、実験の前日に、Ｕ２ＯＳ−ＲｅｖＧＦＰ細胞を３８４ウェル黒クリアボトムプレート上に接種した。化合物は別個３８４ウェルプレート中の４０μＭから開始して、ＤＭＥＭで１：２に連続希釈し、次いで細胞上に移した。細胞を化合物と共に約１時間インキュベートした後、３．７％ホルムアルデヒドで固定して、Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３２５８で核染色した。細胞核中のＧＦＰの量を測定して、各化合物のＩＣ５０を判定した（Ｋａｕ  ｅｔ  ａｌ．２００３）。本発明の化合物は、約１０μＭ未満のＩＣ５０を有すれば、上で概説されるＲｅｖ−ＧＦＰアッセイ中で活性と見なされ、最も望ましい化合物は、約１μＭ未満のＩＣ５０を有する。ＲｅｖＧＦＰアッセイの結果を表２に示す。
【０２６０】
細胞増殖アッセイ
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ細胞増殖アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）をＭＭ．１Ｓ多発性骨髄腫細胞系で使用して、化合物の細胞毒性および細胞分裂阻害特性を試験した。アッセイは、電子結合試薬ＰＥＳ（フェナジンエトスルファート）の存在下における、テトラゾリウム塩、ＭＴＳの切断に基づく。ＭＴＳテトラゾリウム化合物は、細胞によって生体還元されて着色ホルマザン生成物になり、それは組織培養液に可溶性である。この変換は、恐らくは、代謝的に活性な細胞中のデヒドロゲナーゼ酵素によって生成されるＮＡＤＰＨまたはＮＡＤＨによって、達成される。アッセイは、少量のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ溶液試薬を直接培養ウェルに添加して、１〜４時間インキュベートし、次に９６ウェルプレートリーダーを用いて４９０ｎｍで吸光度を読み取って実施される。吸光度は、細胞数とそれらの代謝活性が、直接相関することを明らかにした。
【０２６１】
細胞は、９６ウェルプレートの各ウェル内に、１００μＬの新鮮な培養液中で、５×１０３〜１．５×１０４個の細胞で接種して、付着細胞を一晩付着させた。化合物の原液を細胞培養液中で希釈して、１ｎＭ〜３０μＭの範囲にわたる、各薬剤の８つの濃度を得て、１％ｖ／ｖ未満のＤＭＳＯを陰性対照として使用した。得られた薬剤溶液を細胞上に移した。７２時間の処理後、９６ウェルアッセイプレートの各ウェルに、２０μｌのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ試薬を添加して、プレートを加湿、５％ＣＯ２雰囲気内において、３７℃で１〜４時間培養した。次に９６ウェルプレートリーダーを使用して、各ウェルの吸光度を４９０ｎｍで記録した。ほとんどの場合、アッセイは三連で実施して、結果を最大半量阻害濃度（ＩＣ５０）として提示した。化合物濃度と対比して光学濃度をプロットし、非直線回帰方程式（ＩＤＢＳ  ＸＬｆｉｔ）を使用して分析し、各化合物のＩＣ５０を計算した。
【０２６２】
薬物動態（ＰＫ）アッセイおよび脳：血漿比の判定
ＡＵＣ。合計１０時点（投与前、投与後５分間、１５分間、３０分間、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間、および２４時間）において、マウス（Ｎ＝３）から血液採取した。マウスは交代制で採血され、各マウスは３つの時点における血液採取に寄与した。指定された時点で、動物をイソフルラン下で麻酔し、眼窩後方穿刺によって、１時点あたり約１１０μＬの血液を採取して、予冷したＫ２ＥＤＴＡ（抗凝固剤）管内に入れた。血液サンプルを湿潤氷上にのせて、試料採取の３０分以内に、遠心分離（２０００ｇ、４℃で５分間）して血漿を得た。全てのサンプルは、分析まで約−８０℃で冷凍保存した。分析に先だって、サンプルをアセトニトリル中の内標準（デキサメタゾン）と混合してボルテックスし、遠心分離して上清を分析のために注入した。血漿中の化合物濃度は、ＬＣ−ＭＳ−ＭＳ計測手段を使用して測定した（ＡＰＩ４０００、エレクトロスプレーイオン化によるトリプル四重極；Ａｃｕｉｔｙ  Ｕｌｔｒａ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙカラムＣ１８、有機溶媒としてＭｅＯＨおよびギ酸）。ＡＵＣ値は、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ  ６．２ソフトウェアパッケージ、ノンコンパートメント薬物動態モデルＮＣＡ２００を使用して計算した。
【０２６３】
脳：血漿（Ｂ：Ｐ）比。別個のマウス群（Ｎ＝３）に投薬し（１０ｍｇ／ｋｇのＰＯ）、次に最大血漿濃度の時点（投与後２時間における推定Ｔｍａｘ）で殺処分し、その時点で最終血漿および脳組織を採取した。採取に続いて、脳組織を冷生理食塩水で洗浄して、濾紙上で乾燥させて秤量し、ドライアイスにのせて、急速凍結した。全てのサンプルは、分析まで約−８０℃で冷凍保存した。分析時には、脳組織を均質化して（均質化溶液ＰＢＳ、ｐＨ７．４）、アセトニトリル中の内標準（デキサメタゾン）と混合してボルテックスし、遠心分離して、ＬＣ−ＭＳ−ＭＳ手順を使用する化合物濃度の分析のために上清を注入した（ＡＰＩ４０００、エレクトロスプレーイオン化によるトリプル四重極；Ａｃｕｉｔｙ  Ｕｌｔｒａ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙカラムＣ１８、有機溶媒としてＭｅＯＨおよびギ酸）。血漿サンプルを（均質化段階を除いて）同一方法で処理し、作成された標準曲線に基づいて、各マトリックス中の化合物濃度を計算した。ＰＫアッセイおよびＢ：Ｐ比判定の結果は、表２に報告される。
【０２６４】
【表３】
0006005740.tif 000126
【０２６５】
【表４】
0006005740.tif 000127
【０２６６】
【表５】
0006005740.tif 000128
【０２６７】
【表６】
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【０２６８】
【表７】
0006005740.tif 000130
【０２６９】
化合物Ｘ−１のＡＵＣＩｎｆは、マウスに１０ｍｇ／ｋｇ経口で投与した場合、検出限界未満であった。５ｍｇ／ｋｇ静注で投与した場合、化合物Ｘ−１は、２０９ｈｒ・ｎｇ／ｍＬの低いＡＵＣＩｎｆによって示されるように、最小の曝露を示した。化合物Ｘ−１の脳：血漿比は、経口投与された場合、その無視できる曝露レベルのために判定されなかった。
【０２７０】
化合物Ｘ−２のＡＵＣＩｎｆは、ラットに１０ｍｇ／ｋｇ経口投与した場合、６８．３ｈｒ・ｎｇ／ｍＬと計算された。このような曝露レベルは、化合物Ｘ−３および本発明の式Ｉの化合物と比較して、極めて低い。しかし化合物Ｘ−２は、中程度の脳：血漿比を呈示する。低いＡＵＣＩｎｆは、無視できない脳：血漿比と相まって、化合物Ｘ−２が、低曝露レベルにもかかわらず、ＢＢＢを通過し得ることを示唆する。化合物Ｘ−２は、そのＡＵＣＩｎｆが増大すれば、顕著により高い脳：血漿比を有したであろうと考えられる。
【０２７１】
化合物Ｘ−３のＡＵＣＩｎｆは、ラットに１０ｍｇ／ｋｇ経口投与した場合、１２３００ｈｒ・ｎｇ／ｍＬと計算され、良好な曝露を示す。しかし化合物Ｘ−３は、５．０という高いＢ：Ｐ比を実証した。
【０２７２】
式Ｉの化合物は、約３３００ｈｒ・ｎｇ／ｍＬを超えて、ほとんどの場合約３５００ｈｒ・ｎｇ／ｍＬを超えるＡＵＣＩｎｆと、比較的低いＢ：Ｐ比（＜２．５）によって特徴付けられる。一般に、治療薬のより大きな曝露レベルは、脳透過の可能性を増大させる。したがって式Ｉの化合物が、高いＡＵＣＩｎｆレベルと、比較的低い脳：血漿比を示すことは、驚くべきであり意外である。
【０２７３】
乳がんに対する発明の化合物の生体内および生体外活性
基底細胞様乳がん（ＢＬＢＣ）は、乳がん（ＢＣ）の最高１５％を構成して、通常、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）であり、ＥＲ、プロゲステロン受容体ＰＲ、およびＨＥＲ−２増幅の欠如によって特徴付けられる。これに加えて、ほとんどのＢＲＣＡ１関連ＢＣは、ＢＬＢＣおよびＴＮＢＣであり、基底サイトケラチンおよびＥＧＦＲを発現する。ＢＬＢＣは、高悪性度表現型、高い組織学的等級、そして高い再発および転移率を伴う芳しくない臨床転帰によって、特徴付けられる。追加的な治療法が、必要とされる。生体外および生体内の双方で、様々な乳がん細胞系において、本発明の化合物、例えば化合物Ｉ−３の活性を評価した。
【０２７４】
生体内ＴＮＢＣ（トリプルネガティブ乳がん）異種移植抑制
ＭＤＡ−ＭＢ−４６８（ＡＴＣＣ＃ＨＴＢ−１３２）トリプルネガティブ乳がん細胞は、ＡＴＣＣから得た。これらの細胞は、１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）、１％ペニシリンおよびストレプトマイシン、および２ｍＭＬ−グルタミンを添加した、リーボビッツＬ−１５培地中で培養した。細胞を１：３の比率で希釈して、二次培養した。平均処置前体重１９．２グラムの５〜６週年齢の５０匹のメスＳＣＩＤマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｓ）を使用した。ＳＣＩＤマウスの左側腹部に、５×１０６個のＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞を皮下接種した。腫瘍が１００〜２００ｍｍ３の平均サイズに達したら、マウスを無作為かつ前向きに、１０匹のマウスのビヒクル対照群と、群あたり８匹のマウスの５つの処置群に分けた。処置群は、次のとおりであった：
ビヒクル（蒸留水中の１％プルロニック、１％ＰＶＰ）
５ＦＵ  ５０ｍｇ／ｋｇ
化合物Ｉ−３  ５ｍｇ／ｋｇ  月曜日（Ｍ）、水曜日（Ｗ）、金曜日（Ｆ）
化合物Ｉ−３  １５ｍｇ／ｋｇ、Ｍ、Ｗ、Ｆ
化合物Ｉ−３  ２５ｍｇ／ｋｇ  Ｍ、Ｗ、Ｆ
化合物１−３  ２５ｍｇ／ｋｇ  Ｍ、木曜日（Ｔｈ）。
【０２７５】
全ての投与は、経口経路を介した。動物には無菌Ｌａｂｄｉｅｔ（登録商標）５０５３（滅菌済み）齧歯類固形飼料を給餌して、滅菌水を自由摂取させた。腫瘍は、マイクロキャリパーで、２日毎に１回測定し、腫瘍体積は（長さ×幅×幅）／２として計算した。処置群間の体重の差を評価して、動物の健康をモニターするために、全ての動物を毎日秤量した。研究経過中に、開始体重の２０％を超える低下を示したあらゆる動物は、安楽死させた。腫瘍体積が１５００ｍｍ３を超える、あらゆる動物もまた、安楽死させた。生存を毎日記録した。投薬溶液は、毎日、新鮮に調製した。化合物Ｉ−３は、６７．８％の医薬品を含有して、残りはＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８およびＰＶＰ  Ｋ２９／３２で構成される、凍結乾燥粉末として提供された。これは、６．６４ｍｇ／９０μＬ滅菌水の比率で凍結乾燥粉末を溶解して、滅菌水中のビヒクル（１％Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８および１％ＰＶＰ  Ｋ２９／３２）で必要に応じて希釈して、調製された。化合物Ｉ−３の全ての投与液は、０．１ｍＬ／１０ｇで投与された。処理群間の統計学的差は、棄却限界値０．０５で、マン−ホイットニー順位和またはＡＮＯＶＡ検定を使用して判定した。
【０２７６】
接種後３３日目に、腫瘍を切除した。図１は、時間の関数としての腫瘍体積のグラフであり、化合物Ｉ−３が用量依存的に効力を示し、ビヒクル処置動物と比較して、腫瘍成長を約６０％（５ｍｇ／ｋｇの月水金）からほぼ１００％（２５ｍｇ／ｋｇの月木レジメン）抑制することを示す。これに加えて、化合物Ｉ−３は良好に耐えられた。
【０２７７】
切除時に、腫瘍はまた、腫瘍サプレッサータンパク質（ＴＳＰ）ＦＯＸＯ３ａ、ＩκＢ、およびｐ２７について染色し、ＴＳＰの核局在化を免疫組織化学的検査によって確認した。
【０２７８】
ＴＮＢＣおよび管腔ＢＣ細胞系における増殖抑制および細胞毒性
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ細胞増殖アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、様々なＴＮＢＣおよび管腔ＢＣ細胞系における、化合物Ｉ−３の細胞毒性および細胞分裂阻害特性を試験した。
【０２７９】
細胞は、９６ウェルプレートの各ウェル内の１００μＬの新鮮な培養液中に、（細胞型に応じて）５×１０３〜１．５×１０４個の細胞で接種して、付着細胞を一晩付着させた。化合物の原液を細胞培養液で希釈して、１ｎＭ〜３０μＭの範囲にわたる８つの濃度の各薬剤を得て、１％ｖ／ｖ未満のＤＭＳＯを陰性対照として使用した。得られた薬剤溶液を細胞上に移した。７２時間の処理後、９６ウェルアッセイプレートの各ウェルに、２０μｌのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ試薬を添加して、プレートを加湿５％ＣＯ２雰囲気内において、３７℃で１〜４時間培養した。次に９６ウェルプレートリーダーを使用して、各ウェルの吸光度を４９０ｎｍで記録した。ほとんどの場合、アッセイは三連で実施され、結果は最大半量阻害濃度（ＩＣ５０）として提示された。化合物濃度に対する光学濃度をプロットし、非直線回帰方程式（Ｅｘｃｅｌ  Ｆｉｔ）を使用して分析し、各細胞系に対する化合物（Ｃｏｍｏｐｕｎｄ）Ｉ−３のＩＣ５０を計算した。
【０２８０】
細胞増殖アッセイの結果は、表３に示される。結果は、試験した１５のＢＣ細胞系の９つに対する、化合物Ｉ−３の強力な細胞毒性を実証する。化合物は、ＩＣ５０値が約１．０μＭ未満であれば、細胞系中で効力があると見なされた。その中で化合物Ｉ−３が、１．０μＭ未満のＩＣ５０値を有した細胞系は、感受性細胞系と見なされた一方で、その中で化合物Ｉ−３が、１．０μＭを超えるＩＣ５０値を有した細胞系は、耐性細胞系と見なされた。９つの感受性細胞系の内７つが、ＴＮＢＣであった。全てのＢＣ系統に対するゲノム分析は、ｐ５３、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ、およびＢＲＣＡ１または２の状態が、細胞毒性（ｃｙｏｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ）に影響を及ぼさなかったことを示唆した。
【０２８１】
【表８】
0006005740.tif 000131
【０２８２】
化合物Ｉ−３はアポトーシスを誘導して長期ＢＣ増殖を抑制する
化合物Ｉ−３が、アポトーシスを誘導して、選択されたＢＣ細胞系の長期増殖を抑制する能力を評価した。
【０２８３】
ＭＤＡ−ＭＢ−４６８  ＴＮＢＣ、ＤＵ４４７５、およびＨＳ５７８Ｔ  ＴＮＢＣ細胞を、０〜１０μＭに範囲にわたる濃度の化合物Ｉ−３に２４時間曝露した。２４時間後、全タンパク質細胞抽出物に免疫ブロットを実施して、図２Ａ〜２Ｃに示されるタンパク質に対する抗体に曝露させた。
【０２８４】
図２Ａ〜２Ｃは、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８  ＴＮＢＣ、ＤＵ４４７５、およびＨＳ５７８Ｔ  ＴＮＢＣをはじめとする、上述の最も高耐性および最も高感受性の乳がん細胞系のいくつかから得られた、免疫ブロットの画像である。試験は、２つのアポトーシスマーカーである、ＰＡＲＰおよびカスパーゼ３の低下と、切断ＰＡＲＰおよび切断カスパーゼ３の増大とによって示されるように、化合物Ｉ−３が、２４時間後に、感受性ＴＮＢＣおよび管腔ＢＣ細胞系（それぞれＭＤＡ−ＭＢ−４６８およびＤＵ４４７５）において、アポトーシスを誘導することを示す。対照的に、耐性細胞系ＨＳ５７８Ｔを化合物Ｉ−３で処置した場合は、切断ＰＡＲＰおよび切断カスパーゼ３の無視できる増大のみが観察された。
【０２８５】
長期増殖アッセイもまた実施され、その中ではＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、およびＨＳ５７８Ｔ細胞を１μＭの化合物Ｉ−３で処理して、７日間（ＨＳ５７８Ｔ）または１０日間（ＭＤＡ−ＭＢ−４６８およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１）にわたって培養した。アッセイ終了時、細胞から培地を除去して、残った細胞をクリスタルバイオレットで染色した。試験は、化合物Ｉ−３が、感受性（ＭＤＡ−ＭＢ−４６８およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１）および耐性（ＨＳ５７８Ｔ）ＢＣ細胞系の双方を含む、全ての３つの細胞系の長期増殖を抑制したことを示した。
【０２８６】
化合物Ｉ−３は、ＴＮＢＣ細胞系中で核ＦＯＸＯ３ａおよびＩκＢを増大させる。
ＭＤＡ−ＭＢ−４６８  ＴＮＢＣ基底ＡおよびＢＴ−２０  ＴＮＢＣ基底Ｂ細胞をＤＭＳＯまたは１μＭの化合物Ｉ−３に２４時間曝露して、次にＤＡＰＩ核染色ありまたはなしで、ＦＯＸＯ３ａまたはＩκＢについて染色した。染色された細胞を核局在化について調べた。化合物Ｉ−３での処理に続いて、ＦＯＸＯ３ａおよびＩκＢがどちらも細胞核内に局在化した一方で、ＤＭＳＯ処理された細胞は、ＦＯＸＯ３ａおよびＩκＢがどちらも細胞質内に局在化した。
【０２８７】
２つのＴＮＢＣ系統中の抗アポトーシスおよび細胞周期タンパク質に対する化合物Ｉ−３の効果
ＭＤＡ−ＭＢ−４６８およびＨＳ５７８Ｔ細胞に対する、化合物Ｉ−３の濃度増大効果を調べた。ＭＤＡ−ＭＢ−４６８およびＨＳ５７８Ｔ細胞を化合物Ｉ−３の増大する濃度に２４時間曝露して、図３に示されるタンパク質に対する抗体を用いて、様々なタンパク質の全細胞タンパク質レベルを精査した。
【０２８８】
図３は、７２時間後の２つの細胞系内の化合物Ｉ−３のＩＣ５０にほぼ１００倍の差（１０ｎＭに対して１．５μＭ）があるにもかかわらず、化合物Ｉ−３の濃度増大に応えて、双方の細胞系でＭＣＬ−１の低下が観察されたことを示す。
【０２８９】
実施例３２に記載される実験は、化合物Ｉ−３をはじめとする本発明の化合物によるＣＲＭ１媒介核外搬出の阻害が、腫瘍抑制遺伝子タンパク質の核局在化と活性化を誘導して、選択的アポトーシス、がん細胞毒性、および腫瘍増殖抑制をもたらすことを示す。
【０２９０】
実施例３３：モノクローナル抗体誘導関節炎（ＣＡＩＡ）
ＢａｌｂＣマウスを到着日（−１）にケージに無作為に割り当て、下に示す、以下のレジメンの処理群に、各群（ｎ＝８）を割り当てた。
ビヒクル：経口４、６、８、１０日目
デキサメタゾン：１ｍｇ／ｋｇ腹腔内４、６、８、１０日目
化合物Ｉ−４：４ｍｇ／ｋｇ経口、４、６、８、１０日目
化合物Ｉ−４：７．５ｍｇ／ｋｇ経口、４、６、８、１０日目
化合物Ｉ−４：１５ｍｇ／ｋｇ経口、４、６、８、１０日目
【０２９１】
動物の健康状態を到着時に検査した。健康良好な動物のみを実験室条件に順化させて、研究で使用した。動物には、市販の齧歯類飼料を自由摂取させ、ステンレス鋼給水管付きポリエチレンボトルによって各ケージに供給される飲料水を自由摂取させた。自動制御される環境条は、研究室内において、相対湿度（ＲＨ）３０〜７０％で２０〜２４℃の温度、１２：１２時間の明暗サイクルで、１時間あたり１０〜３０回の換気を保つように設定した。温度、ＲＨ、および光サイクルは、制御コンピュータで毎日モニターした。動物に固有の動物識別番号を与えて、研究０日目に、各動物に抗体カクテル（２００μＬの１０ｍｇ／ｍＬ）の尾静脈注射を投与した。抗体カクテルは、ＭＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（カタログ番号：ＣＩＡ−ＭＡＢ−５０）によって供給された。単回ｍＡｂ投与後の３日目に、全ての動物に、単回腹腔内（ＩＰ）注射による、ＬＰＳ（２００ｕＬｏｆ０．５ｍｇ／ｍＬ）投与を行った。ＬＰＳは、ＭＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（カタログ番号：ＭＤＬＰＳ．５）によって供給された。０日目に、末梢関節における関節炎誘発応答の徴候について、マウスを検査した。疾患発症から、試験の３〜８、１０、および１２日目に、関節炎誘発応答を検査した。関節炎反応は、重症度の昇順で０〜４の尺度によって、各足について報告される。
【０２９２】
【表９】
0006005740.tif 000132
【０２９３】
瀕死状態が見られた動物、関節炎の足に皮膚損傷がある動物、または２０％を超える体重低下がある動物、および重度の疼痛および重度の苦痛の永続的徴候を示す動物は、人道的に安楽死させた。重度の疼痛または苦痛は、熟練した動物技術者によって症例毎に評価された。簡単に述べると、アセスメントでは、異常な啼鳴、他の動物からの孤立、四肢使用の回避、取り扱いに対する異常な応答、振戦および姿勢を探す。動物は、ＣＯ２吸入と、それに続く頸椎脱臼によって安楽死させた。評価は、主に、関節炎点数化および足の厚さ測定値の平均値に基づいた。統計学的分析はまた、体重に関しても実施した。適切な場合は、チューキー事後検定を伴うＡＮＯＶＡによるデータ分析を適用して、治療効果の有意性を判定した。
【０２９４】
このモデルの一部として、動物は、最初の５〜８日間に体重が迅速に低下し、疾患の進行次第で、体重が緩慢に増加／低下し始めた。Ｉ−４は、ビヒクルまたはデキサメタゾン処理群と比較して、体重増加速度を増大させた。図４は、モデルとした、抗体誘導オスＢＡＬＢ／ｃ関節炎マウスにおける、０〜１２日間の時間と対比した、平均体重を示すグラフである。
【０２９５】
これに加えて、ＣＡＩＡモデルとした動物は、典型的に４日目頃に関節炎の徴候を示し始め、疾患が進行するにつれて、時間の関数として総合関節炎スコアが増大する。化合物Ｉ−４による処置は、ビヒクルと比較して、総合スコアを顕著に低下させ、用量依存効果を示す。図５は、示される処置を施した、抗体誘導オスＢＡＬＢ／ｃ関節炎マウスにおける、０〜１２日間の時間と対比した、平均全足臨床関節炎スコアのグラフである。
【０２９６】
実施例３４：ＰＭＡ誘導乾癬モデル
動物施設内において、ＢＡＬＢ／ｃマウスを制御環境（温度２２±１℃、湿度７０±５％、および１２時間の明／１２時間の暗サイクル）内の個別に換気されるケージ内に収容した。マウスは、市販の飼料ペレットおよびＵＶ処理飲料水に、自由にアクセスできた。個別に換気されるケージ毎に、４匹のマウスを収容した。ケージ内の各動物は、尾によって識別した。体重によって、マウス群あたり８匹のマウスを異なる処理群に無作為化した。無作為化に続いて、全群の平均体重は同等であった。研究デザインは、グループ１であった：未感作、１％ＤＭＳＯビヒクル（１０〜３０μｌ、局所的に毎日１回）、グループ２：ＰＭＡ、１％ＤＭＳＯビヒクル（１０〜３０μｌ、局所的に毎日１回）、グループ３：ＰＭＡ、ＰＶＰ／プルロニック（Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ）中の１０ｍｇ／ｋｇのＩ−４（経口、Ｍ−Ｗ−Ｆ；１，３，５，７日目）、グループ４：ＰＭＡ、０．１％ベタメタゾン２５ｍｇ（参照標準）（局所的に毎日１回）
【０２９７】
２０μＬのアセトン中の４μｇのホルボール１２−ミリステート１３−アセテート（ＰＭＡ）をマウスの耳介に毎日塗布した。２日目に始まって、皮膚炎症／乾癬のＰＭＡ誘導は、耳介厚、耳介皮膚の鱗屑、および耳介皮膚の皺の増大に付随する、臨床疾患活動性指数の増大によって顕在化する。以下のパラメータを評価した：（ｉ）耳介厚さ、（ｉｉ）耳介皮膚の鱗屑。これは以下の点数化指標に基づく。０、鱗屑なし；１、軽度の鱗屑；２、中程度の鱗屑；３、重度の鱗屑。（ｉｉｉ）耳介皮膚の皺。これは以下の点数化指標に基づく。０、皺なし；１、軽度の皺；２、中程度の皺；３、重度の皺、（ｉｖ）耳介重量（殺処分日における）。
【０２９８】
図６は、耳介厚、耳介皮膚の鱗屑、および耳介皮膚の皺の点数化を提供する棒グラフである。結果は、１０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｉ−４の経口投与が、ビヒクルとの比較で、統計的に有意な様式で、平均耳介厚を低下させることを示す。Ｉ−４で得られた効力は、陽性対照ベタメタゾンと同等であった。これに加えて、化合物Ｉ−４は良好に耐えられた。
【０２９９】
実施例３５：新奇物体認識
新奇物体認識試験のために、Ｚｕｃｋｅｒラットを試験チャンバー（寸法２６”×１８”×１８”；Ｌ×Ｗ×Ｈ）に入れた。試験中には、食物および水を与えなかった。試験は、３段階を有した：ａ）慣化段階：ラットを単独で試験チャンバーに入れて、６０分間自由に探索させた。追跡ソフトウェア（ＡｎｙＭａｚｅシステム）を使用して、この段階で動物が移動した距離を記録した。この段階の目的は、動物を試験装置に慣れさせることであった。この試験段階は、１日目に実施した。ｂ）サンプル段階：２日目に、ラットを単独で試験チャンバーに３分間入れて、試験チャンバーの２つの隅に置かれた、２個の同一の新奇物体（例えば金属管、プラスチックシリンダー）を含有する試験アリーナを自由に探索させた。追跡ソフトウェアシステムおよび目視観測を使用して、このサンプル段階において動物が移動した距離、ならびに動物が新奇物体との相互作用に費やした時間を自動的に記録した。物体との相互作用は、動物が物体に、または物体のすぐそばに、鼻部を接触させる積極的相互作用と定義された。ｃ）試験段階：サンプル段階の１時間後に、ラットを単独で試験チャンバーに３分間戻し、その１つはサンプル段階において提示された物体であり、２つ目は試験段階に特有の新奇物体である、２個の物体を含有する試験アリーナを自由に探索させた。２個の物体は、サンプル段階で使用したのと同じ、試験チャンバーの２つの隅に置かれた。追跡ソフトウェアシステムおよび目視観測を使用して、この試験段階において動物が移動した距離、ならびに動物が新奇物体および慣れた物体との相互作用に費やした時間を自動的に記録した。サンプル段階および試験段階の双方における、物体相互作用スコアは、２人の観察者によって独立して記録された。最終スコアは、各読み取り間の差異スコアに相当する。物体選好スコアは、Ｄ１（すなわち新奇物体探索に費やした時間ー慣れた物体探索に費やした時間；したがって正のスコアは新奇物体選好に相当する）、およびＤ２（すなわちＤ１／ａ＋ｂ；Ｄ１スコアで除した全体的な物体探索時間）として提示される。
【０３００】
図７は、未処置およびＩ−４処置Ｚｕｃｋｅｒラットの物体選好を示す、グラフの組を提供する。図７から、０．６２５、１．２５、および２．５ｍｇ／ｋｇの用量で経口的に投与された化合物Ｉ−４が、Ｚｕｃｋｅｒラットにおける新奇物体認識の改善傾向を誘導し、Ｉ−４は良好に耐えられたことを認め得る。
【０３０１】
実施例３６：肥満ＺＵＣＫＥＲラット給餌試験
それらの「痩せ型」対応物と比較して、Ｚｕｃｋｅｒ  ｆａ／ｆａラットが、食物摂取量増大、体重増大、および血漿脂質プロフィール上昇を示すべき時点である、１０週齢のオスＺｕｃｋｅｒ（ｆａ／ｆａ）ラットおよびオスＺｕｃｋｅｒ痩せ型ラット（どちらもＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒから）を単独でプラスチック底ケージ内に収容して、１４日間慣れさせた。この期間中、動物体重、食物、および水摂取量を毎日記録した。研究全体にわたり、全ての動物に、標準実験室固形飼料および水に自由にアクセスさせた。１４日目に基線摂取量データを収集し、同等の基線データに基づいて、Ｚｕｃｋｅｒ肥満ラットを処置群に割り当て、すなわち全てのＺｕｃｋｅｒ肥満ラットは、同等の毎日の食物／水摂取量および体重を有した。この段階において、投薬処置への慣化として、ラットに２種類のビヒクルを投与した。基線段階の直後に、処置段階を開始した。暗サイクルの開始のおよそ１時間前に、被験物質およびビヒクルを投与した。投与日程計画は、グループによって変動した。毎週５回の投薬は、月曜日から金曜日であった。研究デザインは以下のとおりであった：Ａ群＝Ｚｕｃｋｅｒ痩せ型オスラット、ビヒクル処置週５回、経口、ｎ＝６；Ｂ群＝Ｚｕｃｋｅｒ肥満オスラット、ビヒクル処置週５回、経口、ｎ＝６；Ｃ群＝Ｚｕｃｋｅｒ肥満オスラット、Ｉ−４  ２．５ｍｇ／ｋｇ週５回、経口、ｎ＝６。
【０３０２】
１日のほぼ同じ次間に、毎日の体重、食物および水摂取量を測定した。処置段階の１〜７日目。
【０３０３】
図８Ａは、肥満および痩せ型Ｚｕｃｋｅｒラットにおける、累積および平均食物摂取量を提供する（Ｗ／Ｏは休薬期間を示す）。毎週５回の２．５ｍｇ／ｋｇ化合物Ｉ−４の経口投与は、肥満（ｆａ／ｆａ）Ｚｕｃｋｅｒラットにおいて、平均および累積食物摂取量を低下させた。化合物Ｉ−４は、良好に耐えられた。
【０３０４】
図８Ｂは、肥満および痩せ型Ｚｕｃｋｅｒラットにおける、平均およびパーセント体重を提供する（Ｗ／Ｏは休薬期間を示す）。毎週５回の２．５ｍｇ／ｋｇのＩ−４の経口投与は、Ｚｕｃｋｅｒ  ｆａ／ｆａ対照と比較して、体重増加を顕著に低下させた。２日間の洗い出し段階で、体重増加は、Ｚｕｃｋｅｒ  ｆａ／ｆａ対照と比較して、なおも低下した。Ｉ−４は、良好に耐えられた。
【０３０５】
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【０３０６】
本明細書に引用された、全ての特許、公開出願、および参考文献の関係のある教示は、その内容全体を参照によって援用する。
【０３０７】
その実施形態例に言及して、本発明を具体的に示して説明した一方で、添付の特許請求の範囲に包含される本発明の範囲を逸脱することなく、形態および詳細に様々な変更を加えてもよいことが、当業者には理解されるであろう。
【図１】
0006005740.tif 000139
【図２】
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【図３】
0006005740.tif 000141
【図４】
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【図５】
0006005740.tif 000143
【図６】
0006005740.tif 000144
【図７】
0006005740.tif 000145
【図８】
0006005740.tif 000146