(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物又はその薬剤利用可能な塩若しくは立体異性体。
【化１】
0005945227.tif 000078
式中、ＸはＯ又はＮＲ’’から選択され、
Ｌは、化学結合、又は置換若しくは非置換Ｃ１−４アルキレンであり、前記置換基はＲａであり、
ＸとＬは、それらの結合位置と共に置換または非置換の５員環ヘテロシクリルを形成でき、ここで該ヘテロシクリルは、
【化２】
0005945227.tif 000079
であり、
Ｙは、化学結合または−Ｃ（Ｏ）−であり、
Ｒ１は、Ｈ又はＣ１−３アルキル基であり、
Ｒ２は、Ｃ２−３アルケニル基であり、
Ｒ３はＨであり、
Ｒａは、Ｈ、ＯＲ’、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、Ｃ（Ｏ）Ｒ’、ＮＨＲ’、ＮＲ’２、ＳＲ’、Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ’、Ｃ（Ｏ）ＮＲ’２、（ＣＨ２）ｎＯＲ’、（ＣＨ２）ｎＳＲ’、置換または非置換Ｃ１−６アルキルから選択され、該置換基は、ＯＭｅ、Ｓ−Ｍｅ、イソプロピル、イソブチル、−（ＣＨ２）ｎ−Ｐｈ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｐｈ−ＯＭｅ、−（ＣＨ２）ｎ−インドール、
【化３】
0005945227.tif 000080
および
【化４】
0005945227.tif 000081
から選択され、
ｎは、０から５の整数であり、
Ｒ’は、Ｈ、Ｃ１−５アルキル、−（ＣＨ２）ｎ−Ｐｈ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｐｈ−ＯＭｅ、−（ＣＨ２）ｎ−インドール、
【化５】
0005945227.tif 000082
および
【化６】
0005945227.tif 000083
から選択され、
Ｒ’’はＨである。
【請求項２】
請求項１記載の式（Ｉ）の化合物を調製する方法であって、化合物（ｉ）を化合物（ｉｉ）と結合させるステップを含む方法。
【化７】
0005945227.tif 000084
ＬｇはＯＨであり；
Ｒ１はメチル基であり；
Ｒ２は−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２であり；
Ｒ３はＨであり；
Ｌは、化学結合、又は置換若しくは非置換Ｃ１−４アルキレンであり、前記置換基は請求項１記載のＲａであり、
Ｘは、ＯＨであり、
Ｙは、−Ｃ（Ｏ）−である。
【請求項３】
下記式で表される化合物である、請求項１記載の化合物。
【化８】
0005945227.tif 000085
Ｒ’はＨ、−ＣＨ３、及び−ＣＨ２ＣＨ３から選択される。
【請求項４】
請求項１記載の式（Ｉ）の化合物を調製する方法であって、化合物（ｉｉｉ）を化合物（ｉｖ）と反応させるステップを含む方法。
【化９】
0005945227.tif 000086
Ｒ１はメチル基であり；
Ｒ２は−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２であり；
Ｒ３はＨであり；
Ｌは、化学結合、又は置換若しくは非置換Ｃ１−４アルキレンであり、前記置換基は請求項１記載のＲａであり、
ＸはＯ又はＮＲ’’であり、
ＹはＣＯＯＨである。
【請求項５】
治療効果量の請求項１記載の式（Ｉ）の化合物又はその薬剤利用可能な塩形態若しくは立体異性体を含む薬剤組成物。
【請求項６】
アルツハイマー病（ＡＤ）、痴呆症、並びに虚血性卒中及びパーキンソン病で成る群から選択される神経変性疾病を治療又は軽減するための薬剤の製造のための請求項１記載の化合物の使用。
【請求項７】
治療効果量の請求項１記載の式（Ｉ）の化合物又はその薬剤利用可能な塩形態若しくは立体異性体と、薬剤利用可能な賦形剤と、を含む、アルツハイマー病（ＡＤ）、痴呆症、虚血性卒中およびパーキンソン病からなる群から選択される神経変性疾病を治療又は軽減するための薬剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、アミロイドベータペプチド（Ａβペプチド）と称される小型疎水性ペプチドの過剰生成を特徴とする。Ａβ４２ペプチドは特に神経毒性であり、この病気の病態形成を発症させる。本明細書ではＡβ４２の生成を減少させ、ＡＤ、痴呆症および他の神経変性疾病の治療に利用できる一連の小型分子化合物を解説する。この神経変性疾病には虚血性卒中やパーキンソン病が含まれる。本明細書ではさらに、このような小型分子並びに小型分子を含んだ薬剤組成物の製造方法も説明されている。
【背景技術】
【０００２】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、特定ニューロン（神経）細胞の大幅な減少が関与する変性中枢神経の疾病であり、臨床学的には、徐々に神経機能を低下させ、究極的には死に至らしめる、記憶力、認識力、論理的思考力、判断力および感情安定性の進行的な喪失を特徴とする病気である。この病気は現在、米国内において約四百万人も罹患させており、毎年十万人を死に至らしめている。
【０００３】
ＳＤを患う患者の脳は、ニューロン変性およびアミロイド斑並び神経原線維変等と様々に称される特徴的な病変を示す。現在のところ、ＡＤの唯一の確定的な診断法は、培検脳におけるこれらプラーク（斑）の存在の判定である。アミロイドカスケードまたはアミロイド仮説と呼称されるＡＤのための有力な科学的仮説によれば、特定のアミロイド変性ペプチドやベータアミロイドペプチドの進行的な脳内蓄積が、ＡＤの病態形成において有害な役割を果たしており、認知症および痴呆症の発症を、数年あるいは、可能性としては数十年も先行する(Hardy J, Selkoe DJ, Science, 2002 297(5580):353−356)。従って、これらペプチドの生成の防止はＡＤの治療に対する製薬産業の取り組みにおける焦点となっている。
【０００４】
Ａβペプチドは、神経細胞および他の細胞内で発見されるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）、母本膜貫通タンパク質の過剰処理の結果として生成される（Selkoe, DJ. Trends Cell Biol. 1998, 8(11):447−453）。主としてアミロイド斑は、アスパルチルプロテアーゼ、ベータセクレターゼ、および続くプレセニリン依存ガンマセクレターゼ裂開により触媒される連続的タンパク質分解によってアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）から誘導される４０および４２のアミノ酸ペプチド（それぞれＡβ４０およびＡβ４２と呼称）から成る。Ａβ４２はＡβ４０よりもさらに疎水性であり、溶解度が低く、アミロイド斑において支配的な種である。Ａβ４２は凝固性および蓄積性がさらに高いため、神経毒並びにシナプス損失を引き起こしやすい。従って、薬剤開発のための全ての努力はＡβ４２の生成に注がれ、他のベータアミロイドペプチド種には注がれていない（Selkoe DJ, Schenk D. Annu Rev Pharamacol Toxicol. 2003; 43:545−584）。
【０００５】
Ａβ４２の過剰生成の引き金を引く多数の原因および危険因子が存在する。特に、加齢、頭部損傷／外傷、ＡｐｏＥ／４キャリアのごとき遺伝性症状、心血管疾病および２型糖尿病は全て、Ａβ４２の増加した生成を促し、よってアルツハイマー病の発症の前兆となるであろう。増強されたＡβ４２の生成および病気の発症、進行並びに病態形成に密接に関わる２つの分子関与事象は、活性酸素種（ＲＯＳ）の発生と、ニューロンによるエネルギー生成の低減である(Moreira PI et al., CNS Neurol. Disord. Drug Targets, 2008; 7:3−10)。ＲＯＳの発生および結果としての細胞損傷／応答は、感受可能なニューロンで見られる特徴的なＡＤ病理に非常に深く関わると考えられる。ニューロンによるエネルギー生成での欠陥は疾病進行過程の非常に早期に観察される。ニューロンにおけるエネルギー不足は、ＡＴＰである細胞内エネルギーの分子形態の合成における減少として定義される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Hardy J, Selkoe DJ, Science, 2002 297(5580):353−356
【非特許文献２】Selkoe, DJ. Trends Cell Biol. 1998, 8(11):447−453
【非特許文献３】Selkoe DJ, Schenk D. Annu Rev Pharamacol Toxicol. 2003; 43:545−584
【非特許文献４】Moreira PI et al., CNS Neurol. Disord. Drug Targets, 2008; 7:3−10
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
これらの事象、すなわちＡβ４２の生成を減少させる方法およびこの疾病の治療法としての神経酸化性ストレスおよびエネルギー欠乏の両方を標的にした既知の薬剤または小型分子化合物は存在しない。本明細書では、これら両方の事象に同時的に対処できる一連の化合物を解説し、それら化合物がＡβ４２の生成を減少させ、罹患動物モデルにおいて認知力を改善させることを解説する。
【０００８】
新規であるピリジンカルボン酸誘導体が、細胞内でのＡβの生成を抑制／減少させることが発見された。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
発明の要旨
本発明は、式（Ｉ）の新規な化合物、または薬学的に利用可能なその塩、プロドラッグもしくは立体異性体に関する。
【化１】
0005945227.tif 000002
【００１０】
式中、ＸはＯ、ＮＲ’’、Ｓまたは置換あるいは非置換アルキレンから選択でき、
Ｌは、化学結合、または置換あるいは非置換アルキレンでよく、好適には置換または非置換Ｃ１−４アルキレンであり、好適には置換基はＲａから選択でき、
ＸとＬは、それらの結合位置と共に置換または非置換シクロアルキルあるいは置換または非置換ヘテロシクリルを形成でき、
Ｙは、化学結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、ＮＲ’’または置換あるいは非置換アルキレンでよく、
Ｒ１は、Ｈ、置換または非置換アルキル、あるいは置換または非置換シクロアルキルでよく、
Ｒ２は、Ｈ、（ＣＨ２）ｎＯＲ’、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルカノイル、置換または非置換アリール、置換または非置換アラルキル、置換または非置換ヘテロシクリル、あるいは置換または非置換シクロアルキルから選択でき、
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＲ’’、Ｃ（Ｏ）２Ｒ’’、Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルコイル、あるいは置換または非置換シクロアルキルでよく、
Ｒａは、Ｈ、ＯＲ’、Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、Ｃ（Ｏ）Ｒ’、ＮＲ’、Ｎ（ＮＲ”）ＮＲ’、ＳＲ’、ＳＯ２Ｒ’、ＳＯ２ＮＲ’、ＮＳＯ２Ｒ’、Ｃ（Ｏ）ＮＲ’、（ＣＨ２）ｎＯＲ’、（ＣＨ２）ｎＳＲ’、置換または非置換アルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換シクロアルキル、あるいは置換または非置換ヘテロシクリルでよく、
ｎは、０から５の整数でよく、
Ｒ’とＲ’’は、独立的に、Ｈ、置換または非置換アルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換シクロアルキル、あるいは置換または非置換ヘテロシクリルから選択できる。
【００１１】
本発明はさらに、式（Ｉ）の化合物を生成する方法も提供する。
【００１２】
本発明はさらに、治療効果量の本発明の化合物または化合物の組み合わせ、あるいは化学式（Ｉ）の薬剤利用可能なその塩形態物、立体異性体あるいはプロドラッグ、並びに薬剤利用可能なキャリア（運搬体）を含んだ薬剤組成物をも提供する。
【００１３】
本発明はさらに、アルツハイマー病（ＡＤ）、痴呆症、および虚血性卒中、パーキンソン病のごとき他の神経変性疾病の治療または症状の緩和に有効である化合物を提供する。
【００１４】
本発明はさらに、アルツハイマー病（ＡＤ）、痴呆症、および虚血性卒中、パーキンソン病のごとき他の神経変性疾病を治療または症状を緩和する方法を提供する。この方法は患者に対して本発明の化合物またはその組成物を投与することを含む。
【００１５】
式（Ｉ）の化合物の薬剤利用可能な塩も本発明の範囲内である。同様に、水和物を含んで、式（Ｉ）の化合物の薬剤利用できる溶媒和物も想定範囲内である。
【００１６】
構造的に、式（Ｉ）は、ここで説明する属群の化学構造から想定可能なエナンチオマーおよびジアステレオマーを含む全ての立体異性体を包含する。
【００１７】
想定される全てのものは式（Ｉ）の化合物のプロドラッグである。
【００１８】
本発明の１実施態様によれば、ＸがＯである式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００１９】
１実施態様によれば、ＸがＮである式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００２０】
１実施態様によれば、Ｌが化学結合である式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００２１】
１実施態様によれば、Ｌが置換または非置換アルキレンである式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００２２】
１実施態様によれば、Ｙが−Ｃ（Ｏ）−である式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００２３】
１実施態様によれば、Ｒ１が置換または非置換アルキルである式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００２４】
１実施態様によれば、Ｒ２がＨ、置換または非置換アルキル、またはＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２である化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００２５】
１実施態様によれば、Ｒ３がＨである式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００２６】
１実施態様によれば、ＸとＬがそれらの結合位置と共に置換または非置換ヘテロシクリルを形成できる式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００２７】
１実施態様によれば、ＲａがＨ、置換または非置換アルキル、Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｃ３Ｈ６ＳＣＨ３、置換または非置換フェニル、置換または非置換ベンジル、並びに置換または非置換ヘテロシクリルである式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００２８】
１実施態様によれば、ｎが３である式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００２９】
１実施態様によれば、Ｒ’とＲ’’が独立的に、Ｈ、ＣＨ３および４−アリル−６−メトキシフェニルから選択される式（Ｉ）の化合物が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】ラットの新規な物体認知試験における認知機能の改善に関する化合物９の効果。新規であって、よく知られている物体の探検に費やされる時間に関して、ビヒクル（賦形薬）（２ｍＬ／ｋｇ、経口）＋ビヒクル（１ｍＬ／ｋｇ、腹腔内）、ビヒクル（２ｍＬ／ｋｇ、経口）＋スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、ドネペジル（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）＋スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、化合物−９（１０ｍｇ／ｋｇ、経口）＋スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、化合物−９（３０ｍｇ／ｋｇ、経口）＋スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、経口）、および化合物−９（９０ｍｇ／ｋｇ、経口）＋スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）の平均（±Ｓ．Ｅ．Ｍ）効果。
【図２】ラットの新規な物体認知試験における認知機能の改善に関する化合物９の効果。新規であって、よく知られている物体の探検に費やされる時間に関して、ビヒクル（２ｍＬ／ｋｇ、経口）＋ビヒクル（１ｍＬ／ｋｇ、腹腔内）、ビヒクル（２ｍＬ／ｋｇ、経口）＋スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、ドネペジル（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）＋スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、化合物−９（０．３ｍｇ／ｋｇ、経口）＋スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、化合物−９（０．３ｍｇ／ｋｇ、経口）＋スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、化合物−９（１ｍｇ／ｋｇ、経口）＋スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）、および化合物−９（３ｍｇ／ｋｇ、経口）＋スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）の平均（±Ｓ．Ｅ．Ｍ）効果。
【００３１】
発明の詳細な説明
本発明は式（Ｉ）の新規な化合物、または薬学的に利用可能なその塩、プロドラッグもしくは立体異性体に関する。
【化２】
0005945227.tif 000003
【００３２】
ここで、ＸはＯ、ＮＲ”、Ｓ、または置換あるいは非置換アルキレンから選択でき、
Ｌは、化学結合、または置換あるいは非置換アルキレンでよく、好適には置換または非置換Ｃ１−４アルキレンであり、好適には置換基はＲａから選択でき、
ＸとＬは、それらの結合位置と共に置換または非置換シクロアルキルあるいは置換または非置換ヘテロシクリルを形成でき、
Ｙは、化学結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、ＮＲ”または置換あるいは非置換アルキレンでよく、
Ｒ１は、Ｈ、置換または非置換アルキル、あるいは置換または非置換シクロアルキルでよく、
Ｒ２は、Ｈ、（ＣＨ２）ｎＯＲ’、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルカノイル、置換または非置換アリール、置換または非置換アラルキル、置換または非置換ヘテロシクリル、あるいは置換または非置換シクロアルキルから選択でき、
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＲ”、Ｃ（Ｏ）２Ｒ”、Ｃ（Ｏ）ＮＲ”、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルコイル、あるいは置換または非置換シクロアルキルでよく、
Ｒａは、Ｈ、ＯＲ’、Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、Ｃ（Ｏ）Ｒ’、ＮＲ’、Ｎ（ＮＲ”）ＮＲ’、ＳＲ’、Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’、ＮＳ（Ｏ）２Ｒ’、Ｃ（Ｏ）ＮＲ’、（ＣＨ２）ｎＯＲ’、（ＣＨ２）ｎＳＲ’、置換または非置換アルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換シクロアルキル、あるいは置換または非置換ヘテロシクリルでよく、
ｎは、０から５の整数でよく、
Ｒ’とＲ”は、独立的に、Ｈ、置換または非置換アルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換シクロアルキル、あるいは置換または非置換ヘテロシクリルから選択できる。
【００３３】
本発明はさらに、式（Ｉ）の化合物を生成する方法も提供する。
【００３４】
本発明はまた、治療効果量の本発明の化合物または化合物の組み合わせ、あるいはその薬剤利用可能な塩形態物、立体異性体、並びに薬剤利用可能なキャリアを含んだ薬剤組成物を提供する。
【００３５】
本発明はさらに、アルツハイマー病（ＡＤ）、痴呆症、および虚血性卒中、パーキンソン病のごとき他の神経変性疾病を治療または症状の緩和に有効である化合物を提供する。
【００３６】
本発明はさらに、アルツハイマー病（ＡＤ）、痴呆症、および虚血性卒中、パーキンソン病のごとき他の神経変性疾病を治療または症状の緩和する方法を提供する。この方法は患者に対する本発明の化合物またはその組成物の投与を含む。
【００３７】
化学式（Ｉ）の化合物の薬剤利用可能な塩も想定範囲内である。同様に、水和物を含んで化学式（Ｉ）の化合物の薬剤利用できる溶媒和物も想定範囲内である。
【００３８】
構造的に化学式（Ｉ）は、ここで説明する属群の化学構造から想定できるエナンチオマーおよびジアステレオマーを含む全ての立体異性体を包含するものである。
【００３９】
想定内の全てのものは化学式（Ｉ）の化合物のプロドラッグである。
【００４０】
本発明の１実施例によれば、ＸがＯである化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００４１】
１実施例によれば、ＸがＮである化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００４２】
１実施例によれば、Ｌが化学結合である化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００４３】
１実施例によれば、Ｌが置換または非置換アルキレンである化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００４４】
１実施例によれば、Ｙが−Ｃ（Ｏ）−である化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００４５】
１実施例によれば、Ｒ１が置換または非置換アルキルである化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００４６】
１実施例によれば、Ｒ２がＨ、置換または非置換アルキル、またはＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２である化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００４７】
１実施例によれば、Ｒ３がＨである化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００４８】
１実施例によれば、ＸとＬがそれらの結合位置と共に置換または非置換ヘテロシクリルを形成できる化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００４９】
１実施例によれば、ＲａがＨ、置換または非置換アルキル、Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｃ３Ｈ６ＳＣＨ３、置換または非置換フェニル、置換または非置換ベンジル、並びに置換または非置換ヘテロシクリルである化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００５０】
１実施例によれば、ｎが３である化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００５１】
１実施例によれば、Ｒ’とＲ’’が独立的に、Ｈ、ＣＨ３および４−アリル−６−メトキシフェニルから選択される化学式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００５２】
１実施例によれば、化学式（ＩＩ）の化合物と化学式（ＩＩ）の薬剤組成物の組み合わせが提供される。
【００５３】
【化３】
0005945227.tif 000004
【００５４】
化学式（ＩＩ）は、ピリジンカルボン酸、Ｘ−Ｌ−Ｙおよびメトキシベンゼン誘導体のごときである全部で３種の成分（ａ）、（ｂ）および（ｃ）を含んでいる。ここでＸとＹはＨであり、または化学式（Ｉ）において前記された化合物群であり、アルツハイマー病の治療に使用される。
【００５５】
もう１つの実施例によれば、化学式（ＩＩＩ）の化合物および化学式（ＩＩＩ）の薬剤組成物の組み合わせがさらに提供される。
【００５６】
【化４】
0005945227.tif 000005
【００５７】
この組み合わせは化学式（ＩＩＩ）の２つの成分を含む。これら２つの成分（ａ）と（ｄ）はピリジンカルボン酸およびメトキシベンゼン誘導体のごときものである。ここでＸとＹはＨであり、または化学式（Ｉ）で前記された化合物群であり、アルツハイマー病、痴呆症および虚血性卒中並びパーキンソン病等である他の神経変性疾病の治療に使用される。
【００５８】
さらにもう１つの実施例によれば、化学式（ＩＶ）の化合物および化学式（ＩＶ）の薬剤組成物の組み合わせが提供される。
【００５９】
【化５】
0005945227.tif 000006
【００６０】
この組み合わせはピリジンカルボン酸誘導体およびメトキシベンゼン誘導体のごとき２つの成分を含む。ここでＸとＹはＨであり、または化学式（ＩＶ）の２つの成分を含む化学式（Ｉ）で前記された化合物群であり、アルツハイマー病、痴呆症および他の神経変性疾病の治療に使用される。
【００６１】
本発明の１好適実施例では、本発明の化合物は以下のものである。
【００６２】
【化６】
0005945227.tif 000007
【００６３】
ここで、「アルキル」とは、炭素原子および水素原子だけで成り、不飽和部を含まず、１個から８個の炭素原子を有し、１つの化学結合によって分子の残り部分に結合している直鎖または分岐鎖の炭化水素鎖状基のことであり、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、１−メチルエチル（イソプロピル）、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、並びに１，１−ジメチルエチル（ｔ−ブチル）である。
【００６４】
「アルケニル」とは、炭素−炭素の二重結合を含み、２個から約１０個の炭素原子を有した直鎖または分岐鎖の脂肪族炭化水素基であり、例えば、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル（アリル）、イソ−プロピル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、並びに２−ブテニルである。
【００６５】
「アルカノイル基」とは、２個から１０個の炭素原子を含んだ、直鎖または分岐鎖の脂肪族アシル基（好適にはＣ２−６アルカノイル基）または芳香族アシル基のことである。その例にはアセチル基、プロピオニル基、ピバロイル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基およびベンゾイル基が含まれており、中でもアセチル基が好適である。
【００６６】
「シクロアルキル」とは、３個から約１２個の炭素原子の非芳香族単環式または多環式環系であり、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルである。多環式シクロアルキル基の例には、限定はしないが、ペルヒドロナフチル、アデアマンチル、およびノルボルニル基、架橋環式基、およびスピロ二環式基であり、例えば、スピロ（４，４）ノン−２−イルである。
【００６７】
「アリール」とは、６個から１４個の炭素原子を有した芳香族ラジカル（基）のことであり、例えば、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、およびジフェニルである。
【００６８】
「アリールアルキル」とは、前記のアルキル基に直接的に化学結合した前記のアリール基のことであり、例えば、−ＣＨ２Ｃ６Ｈ５および−Ｃ２Ｈ５Ｃ６Ｈ５である。
【００６９】
「置換」とは、同一基または異なる基での同一位置または異なる位置にある１個から３個の置換分のことである。
【００７０】
「アルキニル」とは、２個から６個の炭素原子を有し、少なくとも１つのアルキニル飽和部を有したアルキニル基のことであり、その例としてはアセチレニルやプロパルギルがある。
【００７１】
「ヘテロシクリル」および「複素環」とは、安定した三員環から十五員環ラジカルで、炭素原子、および、窒素、リン、酸素および硫黄から選択される１個から５個のヘテロ原子で成るものである。本発明の目的においては、この複素環式ラジカルは単環式、二環式または三環式の環系であり、縮合、架橋またはスピロ環式系を含み、オプションで複素環式ラジカル中の窒素、リン、炭素、酸素または硫黄原子を様々な酸化状態に酸化することができる。さらに、窒素原子はオプションで四級化でき、環式ラジカルは部分的または完全に飽和化できる（すなわち、複素環式またはヘテロアリール化できる）。
【００７２】
「ヘテロシクリルアルキル」とは、アルキル基に直接的に化学結合した複素環式ラジカルのことである。ヘテロシクリルアルキルラジカルは、安定した構造を提供するアルキル基の任意の炭素原子にて主構造部に結合できる。
【００７３】
特に言及がない限り、ここで使用する「置換された」とは、次の置換基のいずれか、または任意の組み合わせにおける置換を意味する。これら置換基とは、ヒドロキシ、ハロゲン、カルボキシル、シアノ、ニトロ、オキソ（＝Ｏ）、チオ（＝Ｓ）、置換または非置換アルキル、ハロアルキル、置換または非置換アルコキシ、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル、置換または非置換アリール、置換または非置換アリールアルキル、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換シクロアルケニルアルキル、置換または非置換シクロアルケニル、置換または非置換アミノ、置換または非置換アリール、置換または非置換へテロアリール、置換または非置換ヘテロシクリルアルキル環、置換または非置換ヘテロアリールアルキル、置換または非置換複素環式環、置換または非置換グアニジン、ＣＯＯＲｘ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｘ、−Ｃ（Ｓ）Ｒｘ、−（Ｃ（Ｏ）ＮＲｘＲｙ、−Ｃ（Ｏ）ＯＮＲｘＲｙ、−ＮＲｙＣＯＮＲｙＲｚ、−Ｎ（Ｒｘ）ＳＯＲｙ、−Ｎ（Ｒｘ）ＳＯ２Ｒｙ、−（＝Ｎ−Ｎ（Ｒｘ）Ｒｙ）、−ＮＲｘＣ（Ｏ）ＯＲｙ、−ＮＲｘＲｙ、−ＮＲｘＣ（Ｏ）Ｒｙ、−ＮＲｘＣ（Ｓ）Ｒｙ、−ＮＲｘＣ（Ｓ）ＮＲｙＲｚ、−ＳＯＮＲｘＲｙ、−ＳＯ２ＮＲｘＲｙ、−ＯＲｘ、−ＯＲｘＣ（Ｏ）ＮＲｙＲｚ、−ＯＲｘＣ（Ｏ）ＯＲｙ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｘ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｘＲｙ、−ＲｘＮＲｙＣ（Ｏ）Ｒｚ、−ＲｘＯＲｙ、−ＲｘＣ（Ｏ）ＯＲｙ、−ＲｘＣ（Ｏ）ＮＲｙＲｚ、−ＲｘＣ（Ｏ）Ｒｙ、−ＲｘＯＣ（Ｏ）Ｒｙ、−ＳＲｘ、−ＳＯＲｘ、−ＳＯ２Ｒｘ、および−ＯＮＯ２であり、Ｒｘ、ＲｙおよびＲｚは独立的に、水素、置換または非置換アルキル、ハロアルキル、置換または非置換アルコキシ、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル、置換または非置換アリール、置換または非置換アリールアルキル、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換シクロアルケニル、置換または非置換アミノ、置換または非置換アリール、置換または非置換へテロアリール、置換または非置換ヘテロシクリルアルキル環、置換または非置換ヘテロアリールアルキル、置換または非置換複素環式環から選択される。前記の“置換”基の置換分をさらに置換することはできない。例えば、「置換アルキル」の置換分が「置換アリール」であるとき、「置換アリール」の置換分は「置換アルケニル」ではあり得ない。
【００７４】
“ハロゲン”または“ハロ”とは、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を含むものである。
【００７５】
「ハロアルキル」とは、ハロゲン原子で置換されたアルキル基を含む基のことであり、アルキル基は前記のものであり、ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素であり、例えば、トリフルオロメチル、ジフロロメチルである。
【００７６】
「アルコキシ基」とは、１個から６個の炭素原子を含んだ直鎖あるいは分枝鎖アルコキシ基のことである。好適なものはＣ１−４アルコキシ基であり、メトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、イソブトキシ基、およびタート−ブトキシ基が含まれる。
【００７７】
「アルコキシカルボニル基」とは、直鎖あるいは分枝鎖のＣ１−５アルコキシ基およびカルボニル基を含む。好適なものはＣ２−５アルコキシカルボニル基であり、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、およびブトキシカルボニル基を含む。それらの中ではメトキシカルボニル基が好適である。
【００７８】
「プロドラッグ」とは、生体内で変性されて化学式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＡ）の化合物、あるいはそれらの薬剤利用可能な塩、水和物または溶媒和物を生成するものである。この変性は様々なメカニズムで発生し、例えば、血液中の加水分解で発生する。プロドラッグの利用の説明は、Ｔ・ヒグチおよびＷ・ステラの「新規な搬送システムとしてのプロドラッグ」（ＡＣＳシンポジウムシリーズの巻１４）並びに「薬剤設計における生物可逆性運搬体」（Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987）において提供されている。
【００７９】
病状、疾病、疾患、病気または症状の“治療”とは以下を含む。
（１）病状、疾病、疾患、病気または症状により苦しんでいる患者、あるいは罹患しやすいがそのような病状、疾病、疾患、病気または症状の臨床的症状あるいは準臨床的症状を経験または発現していない患者に発生する病状、疾病、疾患、病気または症状の予防または遅延化する行為。
（２）病状、疾病、疾患、病気または症状を抑制、すなわち、病状、疾病、疾患、病気または症状、あるいはそれらの少なくとも１つの臨床的または準臨床的症状の進行を停止させ、または抑える行為。
（３）病状、疾病、疾患、病気または症状から患者を解放、すなわち、病状、疾病、疾患、病気または症状、またはそれらの臨床的あるいは準臨床的症状の少なくとも１つを軽減させる行為。
（４）病状、疾病、疾患、病気または症状、あるいはそれらの少なくとも１つの臨床的または準臨床的症状を緩和させる行為。
【００８０】
本発明で解説されている化合物は塩を形成することができる。本発明の非限定的な薬剤利用可能な塩の形成部分の例には、キラル塩基の有機塩基塩の無機塩基塩から誘導された塩、天然アミノ酸の塩、および非天然アミノ酸の塩が含まれる。本発明の一部の化合物は、立体異性体（例えば、ジアステレオマーおよびエナンチオマー）の形態で存在できる。式（Ｉ）で説明される包括的化合物に関して、本願はこれら立体異性体形態、並びにそれらの混合物を包含する。従来技術が特定の立体異性体の合成または分離を教示する限りにおいて、本願の異なる立体異性体形態は、従来技術で知られる方法によって互いに分離できる。あるいは所定の異性体が、立体合成または非対称合成によって得られるであろう。ここで解説する化合物の互換異性形態と混合物も本発明の想定範囲内である。
【００８１】
薬剤利用可能な溶媒和物には、水和物および結晶化した他の溶剤（アルコール等）が含まれる。本発明の化合物は、当該分野で知られた方法によって、低分子量の溶剤による溶媒和物を形成できる。
【００８２】
薬剤組成物
本願で記載される薬剤組成物には、ここで説明する少なくとも一種の化合物と、少なくとも一種の薬剤利用可能な賦形剤（例えば、薬剤利用できるキャリアまたは希釈剤）が含まれる。好適には、想定範囲内の薬剤組成物は、ここで解説する化合物を、ＡＤ、痴呆症、または他の神経変性疾病を治療するのに十分である量で含む。
【００８３】
例えば、想定範囲内の対象物（者）は、生体細胞および人間を含む哺乳動物を含むものである。本発明の化合物は、薬剤利用できる賦形剤（キャリアまたは希釈剤）と関連しており、あるいはキャリアにより希釈され、またはカプセル、錠剤、粉末、シロップ、パッチ等々の形態のキャリア内に内包されるものでよい。
【００８４】
適したキャリアの例には、限定はしないが、水、塩溶液、アルコール、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシエトキシレート化キャスターオイル（ひまし油）、ピーナッツオイル、オリーブオイル、ゼラチン、ラクトース、テラアルバ、スクロース、デキストリン、炭酸マグネシウム、糖、シクロデキストリン、アミロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸、またはセルロースの低級アルキルエーテル、ケイ素酸、脂肪酸、脂肪酸アミン、脂肪酸モノグリセリド、およびジグリセリド、ペンタエリトリトール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン、ヒドロキシメチルセルロース、およびポリビニルピロリドンが含まれる。
【００８５】
キャリアまたは希釈剤には、例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルを単独あるいはワックスと混合させた、徐放性物質が含まれる。
【００８６】
薬剤組成物は、１以上の薬剤利用可能な補助剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤、浸透圧調整塩、緩衝剤、甘味剤、風味剤、着色剤、またはそれらの組み合わせをさらに含むことができる。本発明の薬剤組成物は、従来の手法を採用して、対象物（者）への投与後に活性成分を迅速的、持続的または遅延的に放出させるように形成できる。
【００８７】
ここで説明する薬剤組成物は、例えば、レミントンの「薬剤科学及び実践」（第２０版、２００３年、Lippincott Williams & Wilkins）において解説されている。例えば、活性化合物はキャリアと混合可能であり、あるいはキャリアで希釈できる。キャリアが希釈剤として利用される場合には、ビヒクル（賦形剤）、補助剤、あるいは活性化合物の媒質として作用する固形、半固形、あるいは液体材料でよい。活性化合物は、顆粒状の固形容器、例えば、サシェに吸着させることが可能である。
【００８８】
薬剤組成物は、例えば、カプセル、錠剤、エアゾール、溶液、懸濁液、または注射液の形態でよい。
【００８９】
薬剤投与経路は、活性化合物を適した作用部位または所望の作用部位に効果的に送り届けるものであればどのようなものであってもよい。適した投与経路には、限定はしないが、経口、経鼻、肺投与、舌下、真皮下、皮内、経皮、非経口、経直腸、デポー形態、皮下、経静脈、経尿道、筋肉内、鼻内、眼内（目薬等による）あるいは経局所（局所軟膏等による）が含まれる。この中では経口経路が好適である。
【００９０】
固形の経口投与薬形態には、限定はしないが、錠剤、カプセル（軟質または硬質ゼラチン）、糖衣形態物（粉末またはペレット状の活性成分含有）、トローチおよびロゼンジが含まれる。錠剤、糖衣形態物、またはタルク、及び／又は炭水化物のキャリアあるいは結合剤、等々を有するカプセルが特に経口投与には適している。錠剤、糖衣形態物またはカプセルのための好適なキャリアには、ラクトース、コーンスターチ、及び／又はジャガイモ澱粉が含まれる。糖化ビヒクルが利用されている場合にはシロップまたはエリキサーが利用できる。
【００９１】
従来の錠剤化技術により製造できる典型的な錠剤は次のものを含むことができる。（１）芯剤：活性化合物（純化合物またはその塩）、２５０ｍｇのコロイド状二酸化ケイ素（「Ａｅｒｏｓｉｌ」登録商標）、１．５マウンドの微結晶セルロース（「Ａｖｉｃｅｌ」登録商標）、７０ｍｇの変性セルロースゴム（「Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ」登録商標）、および７．５ｍｇのステアリン酸マグネシウム；（２）コーティング剤：ＨＰＭＣ、約９ｍｇのマイワセット(Ｍｙｗａｃｅｔｔ）９−４０Ｔ、および約０．９ｍｇのアシル化モノグリセリド。
【００９２】
液体処方物には、限定はしないが、シロップ、乳化剤、軟質ゼラチン、および水性または非水性液懸濁物または溶液のごとき殺菌注射液が含まれる。
【００９３】
非経口投与のために特に適しているのは、注射液または懸濁液であり、好適にはポリヒドロキシル化キャスターオイルに溶解された活性化合物を含んだ水溶液である。
【００９４】
治療方法
本発明は、アミロイド−ベータ−４２ペプチド（Ａβ４２ペプチド）と関連する疾病の症状を治療または緩和する方法を提供する。この方法は、対象者に式（Ｉ）の化合物を投与するステップを含む。対象の疾病にはアルツハイマー病、痴呆症、および虚血性卒中やパーキンソン病のごとき他の神経変性疾病が含まれる。
【００９５】
調製方法
ここで説明する化合物は従来方法により調製できる。さらに、ここで説明する化合物はスキーム１からスキーム２で示される反応順序に従って調製できる。さらに、特定の塩基、試薬、溶媒和物、結合剤、等々が言及されている以下のスキームでは、知られている他の塩基、試薬、溶媒和物、結合剤、等々も使用可能であり、本発明の範囲に含まれる。本分野で知られているように利用される、例えば反応温度及び／又は反応時間等の反応条件の改変も本発明の範囲に含まれる。これらスキームで使用される化合物の全ての立体異性体もまた、特に例外が明記されていない限り、本発明の範囲に含まれる。
【００９６】
【化７】
0005945227.tif 000008
【００９７】
Ｌｇが脱離基である式（ｉ）の化合物は、従来方法によって式（ｉｉ）の化合物と反応させることができる。例えば、式（Ｉ）の化合物を得るため、ＬｇがＯＨであれば、例えば、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）、ジメチルホルムアミド、ジイソプロピルエチルアミン、ジクロロメタン、酢酸エチル、等々のごとき溶剤内で、ＤＣＣ、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ｏ−（ベンゾトリアゾール−ｌ−ｙｌ）ウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、等々のごとき結合剤の存在下で、式（ｉ）は式（ｉｉ）と結合できる。
【００９８】
【化８】
0005945227.tif 000009
【００９９】
同様に、上述の方法に従って、式（ｉｉｉ）と式（ｉｖ）の化合物を結合させることで式（Ｉ）の化合物が調製できる。
【０１００】
生体外実験および生体内実験の方法
ヒトの神経細胞モデル
Ａβ４２の生成のためのモデルとして薬剤試験のためにヒト神経芽細胞腫ＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞が利用された。これら細胞は、供給元の指示に従って３７℃で９５％の大気湿度、５％のＣＯ２の条件下、１０％のウシ胎児血清が補完されたダルベッコ変性イーグル培養基(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)またはダルベッコ変性イーグル培養基／ハムＦ−１２培養基(Ham’s F−12 medium)、１００ユニット／ｍｌのペニシリン、および１００μｇ／ｍｌのステプトマイシン内で培養された。典型的に、これら細胞は化合物と共に一晩培養され、続いて培養基は、以下で説明するようにＡβ４２の定量のために回収された。細胞毒性はＭＴＴ測定法でモニターされ、細胞損失を考慮して全ての報告データは補正された。
【０１０１】
Ａβ４２の定量のためのサンドイッチ式酵素結合免疫吸着検査法（ｓＥＬＩＳＡ）
捕捉抗体、検出抗体、および二次抗体、並びにＡβ４２の標準純化調製物がシグマオールドリッチから得られた。細胞は化合物の存在下または不在下で２４時間培養され、調節された培養基はｓＥＬＩＳＡに供された。
【０１０２】
ウィスタラット(Wister Rat)の新規物体認知におけるスコポラミン誘発記憶欠損に対する化合物９の影響試験
認知における改善を試験するのに多用されるラット認知モデルにより、薬剤の効果が試験された。すなわち、新規物体認知におけるスコポラミン誘発記憶欠損に対する効果が試験された（Ennaceur A. Delacour J. A new one−trial test for neurobiological studies of memory in rats. 1:Behavioral data. Behav Brain Res. 1988;31:47−59）。雄ラットに、ビヒクルまたは試験化合物（０、１、３、１０、３０、または１００ｍｇ／ｋｇ体重のドネゼピルまたは化合物）が、習慣化開始前に７日間投与され、新規対象物体認知実験期間中、継続された。
【０１０３】
試験は次のように行われる。１日目にラットは自身の実験場に２０分間順応され（ビヒクルまたは試験化合物の投与１時間後）、自身の住処に戻される。２日目にラットはビヒクルまたは試験化合物を実験の１時間前に投与される。慣れ段階の３０分前にドネペジルが１回投与される。スコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）が実験の２０分前に注射される。スコポラミン投与の２０分後、ラットは慣れ段階に供される。ラットの取り扱いは、実験場にラットを送る前に１０から１５秒間、手の平に動物を別個に置くことで行われる。慣れ段階でラットは、黄色のマスキングテープで覆われた２つの類似した対象物体（見慣れた物体、プラスチックボトル、１２ｃｍ高、５ｃｍ径）を含んだ実験場を３分間探索することを許される。個別の対象物体の探索に費やされた時間が手持ちのストップウォッチで研究者（治療には無関与）によって記録される。全ての実験はビデオ記録される。対象物体の探索とは、匂嗅ぎ行動および舐行動であり、対象物体の１ｃｍの半径範囲内で鼻毛を動かしながら、前足で対象物体に触れたり、鼻を対象物体に向けて突き出したりする行動である。実験終了後、動物は自分の居所に戻される。３分間の実験中断後、ラットは３分間の選択実験を供される。この段階でラットは見慣れた物体のコピーと新規物体（琥珀色ガラス瓶、１１．５ｃｍ高、４．５ｃｍ径）を含む実験場の探索が許される。新規および見慣れた物体の探索に費やされた時間は、手持ちのストップウォッチで同一実験者（慣れ段階を記録し、治療に無関与の実験者）によって記録される。
【０１０４】
それぞれの動物による探索は、実験場の上方に設置されたカメラを介してＤＶＤレコーダにより記録される。慣れ化実験中に１５秒以上探索したラットと、選択実験中に１０秒以上費やしたラットはデータ分析により考察される。これは動物が対象物体の実験を受けたことを確認するためである。選択探索（慣れ段階で他方の対象物体よりも２０秒余分に費やした一方の対象物体の探索）を示すラットはデータ分析のために考察されない。新規対象物体認知実験は４日間行われる。すなわち、最初に６匹の動物が最初の２日間に実験され、次に６匹の動物が次の２日間に実験される（従って、慣れ化前に７日の投与スケジュールが、全動物に７回のビヒクルまたは試験薬が投与されるように実行される。全体で、それぞれの動物はビヒクルまたは試験薬を９回投与される）。
【０１０５】
統計分析：それぞれの処置群で、新規対象物体と見慣れた対象物体に費やされた時間がスチューデントペアｔ検定により比較される。薬剤処置群の識別指標は、クラスカル・ワリス検定を利用してビヒクル群の識別指標と比較される。識別指標とは、選択実験において新規対象物体と見慣れた対象物体の探索に費やされた総合時間に対する、新規対象物体の探索に費やされた時間の割合である。識別指標に基づき部外者（グラッブズ部外者検定、平均値からの２を超える標準偏差以上または以下）は統計分析に考察されない。
【０１０６】
ラットモデルにおける脳Ａβ−４２レベルに対する化合物９の効果試験
薬剤処置
動物が体重に応じて異なる処置群にランダムに振り分けられる。実験動物に試験化合物が２週間、経口投与され、対照動物にはビヒクルのみが投与される。
【０１０７】
脳組織準備
研究の最後に、動物は最終投与の２時間後に処分され、脳サンプルが切除され、ドライアイスによって直ちに凍結される。凍結脳サンプルは、５０ｍＭのＮａＣｌ（ｐＨ１０）とプロテアーゼ抑制剤を含有した３容量（ｗ／ｖ）の冷却された０．２％のジチルアミンにおいて均質化され、続いて、遠心分離機を使用して４℃、１５０００ｒｐｍにて３０分間、遠心分離処理される。得られる上澄み液は可溶性分画として維持され、１０％の０．５Ｍのトリス−ＨＣｌ（ｐＨ６．８）を加えて中和される。
【０１０８】
Ａβ−４２レベルの決定
プラズマ内のＡβレベル、ＣＳＦおよび脳組織摘出物が、シグマ（抗アミロイドペプチドβ、裂分部位４２、Ａ１９７６）からの抗Ａβ４２抗体を使用してＥＬＩＳＡにより決定される。
【０１０９】
ＥＬＩＳＡプロトコル
脳組織摘出物のＡβ−４２レベルはＥＬＩＳＡによって決定された。モノクローナル抗βアミロイドクローンＢＡＭ−１０モノクローナル抗体（シグマ、Ａ３９８１）が１：１０００にコーティング緩衝剤により希釈され、１．５μｇ／μＬの実験用濃度が得られた。ウェル（凹部）あたり１００μＬのこの溶液は１６から１８時間、４℃にて９６ウェルイミュノプレート（ＮＵＮＣ）内でコーティングされた。プレートは２３０μＬのウォッシュ緩衝液で３回洗浄された。ウェルは１５０μＬのブロック緩衝液で１時間ブロックされた。プレートは２３０μＬのウォッシュ緩衝液で３回洗浄された。サンプルである標準（２５００−１．１ｎｇ／ｍｌ）とブランクが適したウェルに加えられ、２時間穏やかに揺籃されながら培養された。続いてプレートは２３０μＬのウォッシュ緩衝液で３回洗浄された。二次抗体（抗アミロイドペプチド、裂分部位４２、シグマＡ１９７６）が１％のＢＳＡで１：１０００に希釈され、１．２５μｇ／μＬの実験用濃度が得られた。この１００μＬがウェル当たりに追加され、２時間穏やかに揺籃されながら培養された。プレートは２３０μＬの洗浄緩衝液で３回洗浄された。１００μＬの検出抗体である抗−ラビットＩｇＧの全分子ＨＲＰ抱合体（１％のＢＳＡで１：１０００に希釈されたシグマＡ６１５４）がウェルに加えられ、２時間穏やかに揺籃されながら培養された。プレートは２３０μＬのウォッシュ緩衝液により３回洗浄され、１００μＬのストレパビジンＨＲＰ（１％ＢＳＡにより１：２００に希釈）による洗浄が続いた。プレートは２３０μＬのウォッシュ緩衝液で３回洗浄され、１００μＬのＴＭＢ／Ｈ２Ｏ２基剤が加えられ、２０分間培養された。反応物は５０μＬの２Ｎ  Ｈ２ＳＯ４を加えてトップ蒸留処理され、吸光度がマイクロプレートリーダ（バイオテック社）で４５０／５７０ｍｍにて測定された。
【０１１０】
ウィスタラットのモーリス水迷路を利用した記憶欠落に対する化合物９の効果
モーリス水迷路は認知試験に普通に使用される（F’Hooge R, De DeynPP.Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory. Brain Res Brain Res Rev. 2001;36:60−90）。雄のウィスタラットが研究に使用される。水迷路は、水（２４±２℃）で満たされた１．８ｍ径、０．６ｍ高の円形タンクである。１６ｃｍ径のプラットフォームが、４想像象限の１つの中心で水面下１．０ｃｍに置かれる。これは全てのラットで同じ条件である。学習実験に先立って化合物９が５日間投与され、学習実験中に継続された。学習実験中、化合物９が実験の６０分前に投与された。ドネペジルは５０分間の学習実験に投与された。スコポラミンは３０分間の学習実験に投与された。ラットは徐々に降下され、まず足が水中に浸けられた。ラットはプラットフォームを捜して６０秒間泳がされた。この時間中にプラットフォームが見つけられたら実験は停止され、ラットはプラットフォーム上に３０秒間滞在するのを許され、迷路から取り出された。プラットフォームが６０秒の実験中に見つけられなければ、ラットは手により視覚的手掛かりに面してプラットフォーム上に置かれ、プラットフォーム上に３０秒間滞在が許され、迷路から取り出された。ラットはプラットフォームから取り出され（ラットは取り出される前に前方から研究者の手を確実に見せられる）、タオルで優しく拭い乾かす。それぞれのラットは１日に４回、この実験を受けた。迷路は８箇所の開始点を有する。１日目と３日目に、ラットは第１、第３、第５、第７の開始点から開始した。２日目と４日目にはラットは第２、第４、第６、第７の開始点から開始した。記憶の維持は第５日目に評価され、それぞれの動物は１回の１２０秒のプローブ調査を受け、その間、プラットフォームはプールから取り除かれていた。ラットは記憶維持実験に先立っては何も処置されなかった。ラットは加熱ランプの下に５分間置かれ、自身の居所に戻された。プラットフォームに到達する時間（ｍｓ）、泳ぐ速度（ｃｍ／ｓ）および行路長（ｃｍ）が学習実験で測定された。標的象限（学習訓練中にプラットフォームが置かれた象限）で費やされた百分率時間はプローブ実験で計算された。ラットは継続観察され、ビデオモット２ソフトを使用してデータが発生された。
【０１１１】
実験は１０日間に亘って行われた。すなわち、最初の６匹の動物（ラット）が最初の５日間に実験され、次の６匹の動物が次の５日間に実験された（全動物が９回のビヒクルまたは試験薬を受けるように予備処置および試験スケジュールが組まれた）。得られたデータは、反復測定双方向ＡＮＯＶＡで分析され、続いてグラフパッドプリズムソフトウェアパッケージを使用してボンフェローニ後試験によって分析された。
【０１１２】
アルツハイマー病Ｔｇ２５７６マウスのトランスジェニックモデルにおける化合物９の効果
研究は生後６ヶ月のＴｇ（ＨｕＡｐｐ６９５．Ｋ６７０−Ｍ６７１Ｌ）２５７６トランスジェニックおよび同齢のＣ５７Ｂ１６／ＳＪＬ非トランスジェニック対照マウス（Hsiao K, Chapman P, Nilsen S, Eckman C, Harigaya Y, et al. Correlative memory deficits, Abeta elevation, and amyloid plaques in transgenic mice, Science. 1996;274:99−102）。マウスはジャクソン研究所から取得され、コロニーが設立された。Ｔｇ２５７６トランスジェニックマウスは、二重スエーデン突然変異を有する人間のＡＰＰを過剰発現している。Ｔｇ２７５６と対照マウスは４週間、（１）ビヒクルのみ（ｎ＝１０）あるいは（２）化合物９（５０ｍｇ／ｋｇ、経口投与量、ｎ＝１０）で処置された。溶解性の脳Ａβ−４２とＡβ−４０が典型的な前述のＥＬＩＳＡプロトコルを使用して測定された。
【実施例】
【０１１３】
実施例１：３−フェニル−２−［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸−４−アリル２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化９】
0005945227.tif 000010
【０１１４】
ステップ１：３−フェニル−２−［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸メチルエステルの調製
【化１０】
0005945227.tif 000011
【０１１５】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）内のニコチン酸（１．６４ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）の溶液にＥＤＣＩ．ＨＣｌ（４．２ｇ、２．２２ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（３．６ｍＬ、３．３３ｍｍｏｌ）およびフェニルアラニンメチルエステル（２．０ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素内で室温（２５℃）にて一晩攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬで２回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、オフホワイトの固体として生成物が得られた。
【０１１６】
ステップ２：３−フェニル−２−［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸の調製
【化１１】
0005945227.tif 000012
【０１１７】
メタノール（１０ｍＬ）内の３−フェニル−２−［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸メチルエステル（１．２ｇ、４．２ｍｍｏｌ）の溶液に、水（１０ｍＬ）中に溶解したＬｉＯＨ（０．８８５ｇ、２１．１ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。ＴＨＦが反応混合物から蒸発され、１．５Ｎ  ＨＣｌで酸化され、その後に酢酸エチル（２００ｍＬ）で抽出され、濃縮されて黄色固体（１．０ｇ、９６％）として生成物が得られた。
【０１１８】
ステップ３：３−フェニル−２−［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸−４−アリル２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化１２】
0005945227.tif 000013
【０１１９】
ＤＣＭ（３ｍＬ）内の３−フェニル−２−［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸（０．３５０ｇ、１．２ｍｍｏｌ）の溶液にＥＤＣ．ＨＣｌ（０．４５０ｇ、２．４ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（０．４ｍＬ、３．６ｍｍｏｌ）およびユージノール（０．２３ｍＬ、０．００１５ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素雰囲気下で室温（２５℃）にて一晩攪拌された。得られた混合物は酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はさらにシリカゲルカラムクロマトグラフィで純化処理され、オフホワイト固体（０．１７０ｇ、３４％）として生成物が得られた。
【０１２０】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）ｄ（ｐｐｍ）：３．１８−３．４３（ｍ、４Ｈ）、３．７４（ｓ、３Ｈ）、４．９２−５．１３（ｂｓ、１Ｈ）、６．７６−６．７８（ｍ、１Ｈ）、６．９７−７．００（ｍ、２Ｈ）、７．９１−７．５３（ｍ、６Ｈ）、８．１５（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．７１（ｄ、Ｊ＝４．５Ｈｚ、１Ｈ）、８．９５（ｓ、１Ｈ）、９．２４（ｍ、１Ｈ）
【０１２１】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１６．９（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９７．７２％
化合物の性質：オフホワイト固体
【０１２２】
実施例２：４−メチル−スルファニル−２−［（ピリジン−３カルボニル）−アミノ］酪酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化１３】
0005945227.tif 000014
【０１２３】
ステップ１：４−メチル−スルファニル−２−［（ピリジン−３カルボニル）−アミノ］酪酸メチルエステルの調製
【化１４】
0005945227.tif 000015
【０１２４】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）内のニコチン酸（１．８ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気内でＥＤＣＩ．ＨＣｌ（４．７ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（６．７ｍＬ、６１．５ｍｍｏｌ）およびメチオニンエステル（２．０ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素下で室温（２５℃）にて２時間攪拌された。得られた混合物は酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬで２回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、黄色固体（１．４５ｇ、４４％）として生成物が得られた。
【０１２５】
ステップ２：４−メチル−スルファニル−２−［（ピリジン−３カルボニル）−アミノ］酪酸の調製
【化１５】
0005945227.tif 000016
【０１２６】
メタノール（５ｍＬ）内のエステル（０．５ｇ、１．５４ｍｍｏｌ）の溶液に水（３ｍＬ）に溶解されたＬｉＯＨ（０．３２ｇ、７．７３ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。得られた混合物の溶媒が蒸発され、水（１０ｍＬ）で希釈され、１．５Ｎ  ＨＣｌで酸化され、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮されて黄色固体（０．２３ｇ、５８％）が得られた。
【０１２７】
ステップ３：４−メチル−スルファニル−２−［（ピリジン−３カルボニル）−アミノ］酪酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化１６】
0005945227.tif 000017
【０１２８】
ＤＣＭ（３ｍＬ）内の４−メチル−スルファニル−２−［（ピリジン−３カルボニル）−アミノ］酪酸（０．２５ｇ、０．９８ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（０．２１ｇ、１．９６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．５６ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）およびユージノール（０．１５ｍＬ、０．９８ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素下で室温（２５℃）にて一晩攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、白色固体（０．１５ｇ、３８％）として生成物が得られた。
【０１２９】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）ｄ（ｐｐｍ）：２．１７（ｓ、３Ｈ）、２．４６−２．５２（ｍ、２Ｈ）、２．８０−２．８４（ｍ、２Ｈ）、３．３８（ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、２Ｈ）、５．０８−５．２８（ｍ、３Ｈ）、５．８９−６．０２（ｍ、１Ｈ）、６．７６−６．７８（ｍ、２Ｈ）、７．００−７．０５（ｍ、１Ｈ）、７．７１−７．５９（ｍ、１Ｈ）、８．６０−８．８２（ｍ、３Ｈ）、９．６９（ｂｓ、１Ｈ）
【０１３０】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４００．９（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９１．４１％
化合物の性質：白色固体
【０１３１】
実施例３：３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−酪酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化１７】
0005945227.tif 000018
【０１３２】
ステップ１：３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−酪酸メチルエステルの調製
【化１８】
0005945227.tif 000019
【０１３３】
ＤＣＭ（３０ｍＬ）内のＬ−バリンメチルエステル（３．０ｇ、２．２９ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（１１．５ｍＬ、１１．４５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（８．７ｇ、４５．８ｍｍｏｌ）およびニコチン酸（３．３ｇ、２７．４ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素下で室温（２５℃）にて３時間攪拌された。得られた混合物は酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、粘性固体（２．０ｇ、３８％）として生成物が得られた。
【０１３４】
ステップ２：３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−酪酸の調製
【化１９】
0005945227.tif 000020
【０１３５】
メタノール（１５ｍＬ）、ＴＨＦ（９ｍＬ）内の３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−酪酸メチルエステル（１．５ｇ、６．３ｍｍｏｌ）の溶液に、水（３ｍＬ）に溶解されたＬｉＯＨ（１．３ｇ、３１．７ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。溶媒が反応混合物から蒸発され、水（１５ｍＬＯ）内に溶解され、１．５Ｎ  ＨＣｌで酸化され、酢酸エチル（１５０ｍＬ）で抽出され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮されて黄色固体（１．３８ｇ、９９％）として生成物が得られた。
【０１３６】
ステップ３：３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−酪酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化２０】
0005945227.tif 000021
【０１３７】
ＤＣＭ（３ｍＬ）内の３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−酪酸（０．３ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（０．４４ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．５１ｇ、２．７ｍｍｏｌ）およびユージノール（０．２４ｍＬ、１．６２ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素下で室温（２５℃）にて一晩攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、白色固体（０．２０ｇ、４２％）として生成物が得られた。
【０１３８】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）ｄ（ｐｐｍ）：０．７９−０．８７（ｍ、６Ｈ）、２．２０−２．３０（ｍ、１Ｈ）、３．３６（ｍ、２Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）、４．５９−４．６１（ｂｓ、１Ｈ）、５．０４−５．１４（ｍ、２Ｈ）、５．９６−５．９８（ｍ、１Ｈ）、６．７５−６．７８（ｍ、１Ｈ）、６．９５−７．００（ｍ、２Ｈ）、７．５１−７．５６（ｍ、１Ｈ）、８．２３―８．２５（ｍ、１Ｈ）、８．７２−８．７４（ｍ、１Ｈ）、８．９７−９．０５（ｍ、２Ｈ）
【０１３９】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３６９．０（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９２．８６％
化合物の性質：白色固体
【０１４０】
実施例４：３（１Ｈ−インドール−３−ｙｌ）−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−プロピオン酸−５−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化２１】
0005945227.tif 000022
【０１４１】
ステップ１：３（１Ｈ−インドール−３−ｙｌ）−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−プロピオン酸メチルエステルの調製
【化２２】
0005945227.tif 000023
【０１４２】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）内のメチルエステル（２．０ｇ、９．２ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（５ｍＬ、４６．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（３．５ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）およびニコチン酸（２．０ｇ、９．２ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素下で室温（２５℃）にて２時間攪拌された。得られた混合物は酢酸エチル（１５０ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、オフホワイト固体（２．４ｇ、８１％）として生成物が得られた。
【０１４３】
ステップ２：３（１Ｈ−インドール−３−ｙｌ）−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−プロピオン酸の調製
【化２３】
0005945227.tif 000024
【０１４４】
メタノール（５ｍＬ）、ＴＨＦ（９ｍＬ）内の３（１Ｈ−インドール−３−ｙｌ）−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−プロピオン酸メチルエステル（０．５ｇ、１．６ｍｍｏｌ）の溶液に、水（３ｍＬ）に溶解されたＬｉＯＨ（０．３９ｇ、７．７ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。溶媒が除去され、反応塊は１．５Ｎ  ＨＣｌで酸化され、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮されて無色固体（０．４８ｇ、９９％）として生成物が得られた。
【０１４５】
ステップ３：３（１Ｈ−インドール−３−ｙｌ）−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−プロピオン酸−５−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化２４】
0005945227.tif 000025
【０１４６】
ＤＣＭ内の３（１Ｈ−インドール−３−ｙｌ）−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−プロピオン酸（０．２３ｇ、０．７４ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（０．１５ｇ、１．４４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．４２ｇ、２．２ｍｍｏｌ）およびユージノール（０．１２ｇ、０．７４ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素下で室温（２５℃）にて３時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、黄色低溶性固体（０．１５ｇ、４４％）として生成物が得られた。
【０１４７】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）ｄ（ｐｐｍ）：３．３７（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．４０−３．４９（ｍ、１Ｈ）、３．７４（ｓ、３Ｈ）、５．０５−５．１４（ｍ、３Ｈ）、５．９０−６．０１（ｍ、１Ｈ）、６．７５−６．７８（ｍ、１Ｈ）、６．９４−７．０７（ｍ、４Ｈ）、７．３２−７．３６（ｍ、２Ｈ）、７．５６−７．６４（ｍ、２Ｈ）、８．２２−８．３２（ｍ、１Ｈ）、８．７４（ｄ、Ｊ＝４．５Ｈｚ、１Ｈ）、９．０１（ｓ、１Ｈ）、９．２９（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、１０．９１（ｓ、１Ｈ）
【０１４８】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４５５．８（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９９．５８％
化合物の性質：黄色低溶性固体
【０１４９】
実施例５：３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−［（ピリジン−３−カルボニル）アミノ］プロピオン酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化２５】
0005945227.tif 000026
【０１５０】
ステップ１：３−（４−ヒドロキシフェニル）２−［（ピリジン−３−カルボニル）アミノ］プロピオン酸メチルエステルの調製
【化２６】
0005945227.tif 000027
【０１５１】
ＤＣＭ（２０ｍｌＬ）内のナイアシン（１．２６ｇ、１０．２４ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（２．２５ｍＬ、２５．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（５．８７ｇ、３０．７３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（５．８７ｇ、３０．７３ｍｍｏｌ）、およびアミン（２．０ｇ、１０．２４ｍｍｏｌ）が窒素雰囲気内で加えられた。混合物は窒素下で室温（２５℃）にて３時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、白色固体（１．７ｇ、５６．６％）として生成物が得られた。
【０１５２】
ステップ２：３［４−（ｔ−ブチル−ジメチル−シリルオキシ）フェニル］２−［（ピリジン−３−カルボニル）アミノ］プロピオン酸メチルエステルの調製
【化２７】
0005945227.tif 000028
【０１５３】
ＤＭＦ（１ｍｌＬ）内の３−（４−ヒドロキシフェニル）２−［（ピリジン−３−カルボニル）アミノ］プロピオン酸メチルエステル（０．５３ｇ、１．７６ｍｍｏｌ）の溶液にＮ，Ｎ’−ジイソプロピルエチルアミン（０．４７ｍＬ、２．００ｍｍｏｌ）が加えられ、続いて反応塊は０℃に冷却され、ｔ−ブチル−ジメチル−塩化シリル（０．２６ｇ、１．７６ｍｍｏｌ）が反応塊に０℃で加えられた。混合物は室温（２５℃）にて５時間攪拌された。得られた反応混合物は氷で冷却され、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒は減圧下で蒸発され、薄茶液体（０．６ｇ、８２％）として生成物が得られた。
【０１５４】
ステップ３：３−［４−（ｔ−ブチル−ジメチル−シリルオキシ）フェニル］２−［（ピリジン−３−カルボニル）アミノ］プロピオン酸の調製
【化２８】
0005945227.tif 000029
【０１５５】
メタノール（１ｍＬ）、ＴＨＦ（３ｍＬ）内のメチルエステル（０．９１ｇ）の溶液に、水（１ｍＬ）に溶解したＬｉＯＨ（０．４５ｇ、１０．９７ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は室温（２５℃）にて３時間攪拌された。反応混合物から溶媒が除去され、反応塊は１．５Ｎ  ＨＣｌ（ｐＨ＝２〜４）を使用して酸化された。遊離酸は酢酸エチル（２００ｍＬ）で抽出され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮された。得られた黄色固体は次のステップに直接使用された。
【０１５６】
注：この酸処理中、ｔ−ブチルジメチル塩化シリル裂分が観察された。
【０１５７】
ステップ４：３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−［（ピリジン−３−カルボニル）アミノ］プロピオン酸−４−アリル−２−メトキシオフェニルエステルの調製
【化２９】
0005945227.tif 000030
【０１５８】
ＤＣＭ（４０ｍＬ）内の３−［４−（ｔ−ブチル−ジメチル−シリルオキシ）フェニル］２−［（ピリジン−３−カルボニル）アミノ］プロピオン酸（０．４９８ｇ、１７．４ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（０．５２８ｇ、５．２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．６６ｇ、３．４ｍｍｏｌ）およびユージノール（０．２２ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素下で室温（２５℃）にて３時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、薄黄色固体（０．７５ｇ、３１．５％）として生成物が得られた。
【０１５９】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）ｄ（ｐｐｍ）：３．１１−３．４７（ｍ、４Ｈ）、４．５２（ｓ、３Ｈ）、５．０６−５．１４（ｍ、３Ｈ）、５．９４−６．０３（ｍ、１Ｈ）、６．７４−６．８１（ｍ、３Ｈ）、６．９２−６．９８（ｍ、２Ｈ）、７．１８−７．２１（ｍ、２Ｈ）、７．５１−７．５５（ｍ、１Ｈ）、８．１５−８．１９（ｍ、１Ｈ）、８．６８（ｄ、Ｊ＝３．９Ｈｚ、１Ｈ）、８．９０（ｂｓ、１Ｈ）
【０１６０】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４３３．１（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９９．５％
化合物の性質：薄黄色固体
【０１６１】
実施例６：３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−ペンタン酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
ＫＵ−０２０の合成
【化３０】
0005945227.tif 000031
【０１６２】
ステップ１：３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル−アミノ］−ペンタン酸メチルエステルの調製
【化３１】
0005945227.tif 000032
【０１６３】
ＤＣＭ（２０ｍｌＬ）内のニコチン酸（２．０ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（６．９ｍＬ、４９．５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（６．３ｇ、３３．０ｍｍｏｌ）およびイソロイシンメチルエステル（３．０ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素下で室温（２５℃）にて２．５時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、黄色固体（２．９ｇ、７２％）として生成物が得られた。
【０１６４】
ステップ２：３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル−アミノ］−ペンタン酸の調製
【化３２】
0005945227.tif 000033
【０１６５】
メタノール（１０ｍＬ）、ＴＨＦ（９ｍＬ）内の３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル−アミノ］−ペンタン酸メチルエステル（１．５ｇ、５．９ｍｍｏｌ）の溶液に、水（３ｍＬ）に溶解されたＬｉＯＨ（１．２５ｇ、２９．９ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は室温（２５℃）にて３時間攪拌された。メタノールとＴＨＦは反応塊から除去され、１．５Ｎ  ＨＣｌ（ｐＨ＝２〜３）を使用して酸化された。反応塊は酢酸エチル（１００ｍＬ）で３回抽出され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮されて、薄黄色固体（０．７ｇ、５０％）として生成物が得られた。
【０１６６】
ステップ３：３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−ペンタン酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化３３】
0005945227.tif 000034
【０１６７】
ＤＣＭ（４ｍＬ）内の３−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル−アミノ］−ペンタン酸（０．４７ｇ、１．５９ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（９．４９ｇ、４．９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．６２ｇ、３．２８ｍｍｏｌ）およびユージノール（０．２６ｇ、１．５９ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素下で室温（２５℃）にて４時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、白色固体（０．１２ｇ、１９．３％）として生成物が得られた。
【０１６８】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）ｄ（ｐｐｍ）：０．９１−０．９８（ｍ、３Ｈ）、１．０６−１．１４（ｍ、３Ｈ）、１．２０−１．４１（ｍ、１Ｈ）、１．５０−１．７０（ｍ、１Ｈ）、２．０９−２．３０（ｍ、１Ｈ）、３．３６（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、３Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）、４．６３−４．８７（ｍ、１Ｈ）、５．０４−５．１３（ｍ、２Ｈ）、５．９６−５．９８（ｍ、１Ｈ）、６．７６−６．７９（ｍ、１Ｈ）、６．９５−７．００（ｍ、２Ｈ）、７．５０−７．５５（ｍ、１Ｈ）、８．２１−８．２５（ｍ、１Ｈ）、８．７２−８．７４（ｍ、１Ｈ）、８．８９−９．０４（ｍ、３Ｈ）
【０１６９】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８２．９（［Ｍ＋Ｈ］＋）
化合物の性質：白色固体
【０１７０】
実施例７：２−［ピリジン−３−カルボニル−アミノ］−ペンタンダイオイック(dioic)酸−１−（４−アリル−２−メトキシフェニル）エステルの調製
【化３４】
0005945227.tif 000035
【０１７１】
ステップ１：２−ベンゾイルアミノ−ペンタンダイオイック酸ジメチルエステルの調製
【化３５】
0005945227.tif 000036
【０１７２】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）内のナイアシン（１．４ｇ、１１．４２ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（３．７６ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（４．３６ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）およびＬ−グルタミン酸ジメチルエステル（２．０ｇ、１１．４２ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素下で室温（２５℃）にて３時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、薄黄色オイル（３．１ｇ、７３％）として生成物が得られた。
【０１７３】
ステップ２：２−［ピリジン−３−カルボニル−アミノ］−ペンタンダイオイック酸の生成
【化３６】
0005945227.tif 000037
【０１７４】
メタノール（２ｍＬ）、ＴＨＦ（９ｍＬ）内の２−ベンゾイルアミノ−ペンタンダイオイック酸ジメチルエステル（０．２５ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）の溶液に、水（３ｍＬ）に溶解されたＬｉＯＨ（０．０３７ｇ、８．９ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。ＴＨＦ、メタノールが除去され、ｐＨは１．５ＮＨＣｌで１に調節され、反応塊は酢酸エチル（１００ｍＬ）で３度抽出され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮された。分析から、形成されたモノ酸およびジ酸は次のステップ（１．６ｇ）に供された。
【０１７５】
ステップ３：２−［ピリジン−３−カルボニル−アミノ］−ペンタンダイオイック酸−１−（４−アリル−２−メトキシフェニル）エステルの調製
【化３７】
0005945227.tif 000038
【０１７６】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）内のジ酸（１００ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（０．０８５ｇ、０．８４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．０９７ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）およびユージノール（０．０５５ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。反応混合物は水（５ｍＬ）で冷却され、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮された。未精製反応塊は分取ＨＰＬＣで純化処理され、薄黄色固体（０．１６ｇ、０．２９％）が得られた。
【０１７７】
実施例８：ニコチン酸４−アリル−２−メトキシ−フェノキシカルボニルメチルエステル（塩酸塩）の調製
【化３８】
0005945227.tif 000039
【０１７８】
ステップ１：ブロモ−酢酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化３９】
0005945227.tif 000040
【０１７９】
ジクロロメタン（５ｍＬ）内のユージノール（５００ｍｇ、３．０３ｍｍｏｌ）の溶液にＫ２ＣＯ３（１．０ｇ、７．５７ｍｍｏｌ）が加えられ、０℃でブロモアセチルブロミド（９３１ｍｇ、４．５４ｍｍｏｌ）が追加された。混合物は室温（２５℃）にて１時間攪拌された。得られた混合物は酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（２００ｍＬで２回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、粘性オイル（５００ｍｇ、６３％）としてブロモ−酢酸−４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルが得られた。
【０１８０】
ステップ２：ニコチン酸４−アリル−２−メトキシ−フェノキシカルボニルメチルエステルの調製
【化４０】
0005945227.tif 000041
【０１８１】
ＤＭＦ（４．０ｍＬ）内のニコチン酸（１７２ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）の溶液に０℃にてＫ２ＣＯ３（６０５ｍｇ、４．８３ｍｍｏｌ）が加えられた。この混合物にＤＭＦ（１．０ｍＬ）内の化合物（Ｉ−ａ）（５００ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）の溶液が同温で加えられた。混合物は室温（２５℃）にて１時間攪拌された。得られた混合物は酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（２００ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、粘性オイル（５００ｍｇ）として生成物が得られた。
【０１８２】
ジエチルエーテル（５．０ｍＬ）内の上記生成物（５００ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）の溶液にジオキサン（０．３６ｍＬ、０．９５ｍｍｏｌ）内の４Ｍ  ＨＣｌの溶液が０℃にて加えられた。反応混合物は室温（２５℃）にて１．５時間攪拌され、無色の沈下物が得られた。溶媒はデカントされ、減圧下で乾燥され、無色固体（４５０、８５％）が得られた。
【０１８３】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）ｄ（ｐｐｍ）：３．３７（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．７７（ｓ、３Ｈ）、５．０４−５．１４（ｍ、２Ｈ）、５．２８（ｓ、１Ｈ）、５．９０−６．０２（ｍ、１Ｈ）、６．７７−６．８１（ｍ、１Ｈ）、６．９８（ｄ、Ｊ＝１．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．０５−７．０７（ｍ、１Ｈ）、７．７１−７．７５（ｍ、１Ｈ）、８．４７−８．５１（ｍ、１Ｈ）、８．９２−８．９４（ｍ、１Ｈ）、９．２１（ｄ、Ｊ＝１．２Ｈｚ、１Ｈ）
【０１８４】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３２８．２（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９９．４１％
化合物の性質：薄黄色固体
溶解範囲：１０９．３〜１１１．２℃
【０１８５】
実施例９：２−（ピリジン−３−カルボニロキシ）−琥珀酸４−（４−アリル−２−メトキシ−フェニル）エステル１−メチルエステルの調製
【化４１】
0005945227.tif 000042
【０１８６】
ステップ１：（Ｓ）−２，２−ジメチル−５−オキソ−［１，３］ジオキソラン−４−ｙｌ）−酢酸の調製
【化４２】
0005945227.tif 000043
【０１８７】
２，２−ジメトキシプロパン（５．０ｍＬ）内のＬ−（−）−マリン酸（５．０ｇ、３７．３ｍｍｏｌ）の懸濁液に室温（２５℃）にてＰＰＴＳ（０．１３ｇ、０．５ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は同じ温度で４８時間攪拌された。得られた混合物は水（１００ｍＬ）とジクロロメタン（２５０ｍＬ）の間で分離され、水性層がジクロロメタンで２度抽出された（１００ｍＬで２回）。組み合わされた有機層は硫酸ナトリウム上で乾燥され、減圧下で濃縮され、無色固体（２．１ｇ、３２％）が得られた。
【０１８８】
ステップ２：（２，２−ジメチル−５−オキソ−［１，３］ジオキソラン−４−ｙｌ）−酢酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化４３】
0005945227.tif 000044
【０１８９】
ジクロロメタン内の（（Ｓ）−２，２−ジメチル−５−オキソ−［１，３］ジオキソラン−４−ｙｌ）−酢酸（２．１ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）の溶液に氷点（０℃）にてＮ−エチルジイソプロピルアミン（１０．３ｍＬ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（６．９ｇ、３６．０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．８ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（０．１４ｇ、１．２ｍｍｏｌ）が加えられ、反応混合物は同一の温度で１５分間攪拌された。続いて、ユージノール（２．１８ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）が反応混合物に同一温度で加えられ、混合物は室温（２５℃）にて１２時間攪拌された。得られた混合物はジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬ、４回）、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮された。未精製生成物はカラムクロマトグラフィによってさらに純化処理され、無色固体（２．３ｇ、６０％）が得られた。
【０１９０】
ステップ３：２−ヒドロキシ−琥珀酸−４−（４−アリル−２−メトキシ−フェニル）エステルの調製
【化４４】
0005945227.tif 000045
【０１９１】
ＴＨＦ（１０．０ｍＬ）内の（２，２−ジメチル−５−オキソ−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−酢酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステル（１．０ｇ、３．１２ｍｍｏｌ）の溶液に室温（２５℃）にて１Ｎ塩酸（１０ｍＬ）が加えられ、反応混合物は同一温度で６時間攪拌された。溶媒は半分量に蒸発され、塩化ナトリウムで飽和処理され、生成物は酢酸エチルで抽出された（１００ｍＬで２回）。有機層は硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮されてオフホワイト固体（０．８１ｇ、９３％）が得られた。
【０１９２】
ステップ４：２−ヒドロキシ−琥珀酸４−（４−アリル−２−メトキシ−フェニル）エステル１−メチルエステルの調製
【化４５】
0005945227.tif 000046
【０１９３】
乾燥ＤＭＦ（２．０ｍＬ）内の２−ヒドロキシ−琥珀酸４−（４−アリル−２−メトキシ−フェニル）エステル（０．１ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の溶液に乾燥Ｋ２ＣＯ３が加えられ、０℃にてヨウ化メチルが追加され、反応混合物は室温（２５℃）にて１時間攪拌された。得られた混合物は酢酸エチル（５０．０ｍＬ）で希釈され、濾過された。濾過液は水で洗浄され（２００ｍＬ、４回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。揮発物の揮発で得られた未精製生成物はカラムクロマトグラフィで純化処理され、オレンジ色粘液（０．０５ｇ、４７％）が得られた。
【０１９４】
ステップ５：２−（ピリジン−３−カルボニルオキシ）−琥珀酸４−（４−アリル−２−メトキシ−フェニル）エステル１−メチルエステルの調製
【化４６】
0005945227.tif 000047
【０１９５】
ジクロロメタン（１０．０ｍＬ）内のナイアシン（９０ｍ１ｇ、０．７ｍｍｏｌ）の懸濁液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．５８ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（３８０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５０ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）が０℃にて加えられ、１５分間攪拌された。続いて、２−ヒドロキシ−琥珀酸４−（４−アリル−２−メトキシ−フェニル）エステル（２００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）が同一温度で加えられ、反応混合物は室温（２５℃）にて５時間攪拌された。反応混合物はＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬ、４回））、硫酸ナトリウム上で乾燥された。揮発物の揮発で得られた未精製生成物はカラムクロマトグラフィで純化処理され、薄黄色粘性オイル（１４０ｇ、５１％）が得られた。
【０１９６】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）ｄ（ｐｐｍ）：３．３２（ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．３７（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．７３（ｓ、３Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、５．０７（ｓ、１Ｈ）、５．１０−５．１３（ｍ、１Ｈ）、５．８５−５．９８（ｍ、２Ｈ）、６．７４−６．７６（ｍ、２Ｈ）、６．９２−６．９５（ｍ、１Ｈ）、７．４０−７．４５（ｍ、１Ｈ）、８．３５−８．３９（ｍ、１Ｈ）、８．８２（ｄ、Ｊ＝３．６Ｈｚ、１Ｈ）、９．３１（ｓ、１Ｈ）
【０１９７】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４００．０（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９９．２３％
化合物の性質：薄黄色粘性オイルは冷蔵庫内で保管されると低溶解性固体（４８℃）となる。
【０１９８】
実施例１０：１−（ピリジン−３−カルボニル）−ピロリジン−２−カルボン酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化４７】
0005945227.tif 000048
【０１９９】
ステップ１：１−（ピリジン−３−カルボニル）−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステルの調整
【化４８】
0005945227.tif 000049
【０２００】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）内のナイアシン（０．４ｇ、３．５０ｍｍｏｌ）の溶液にＬ−プロリンメチルエステル（０．５ｇ、３．２１ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（１．１ｍＬ、１０．５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（１．２ｇ、６．４ｍｍｏｌ）、および触媒量のＤＭＡＰが０℃にて加えられた。混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬ、２回））、硫酸ナトリウム上で乾燥された。減圧下で溶媒は蒸発され、黄色ガム状オイル（１．３ｇ）として生成物が得られた。
【０２０１】
ステップ２：１−（ピリジン−３−カルボニル）−ピロリジン−２−カルボン酸の調製
【化４９】
0005945227.tif 000050
【０２０２】
ＴＨＦ（１３ｍＬ）内の１−（ピリジン−３−カルボニル）−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル（１．３ｇ、５．４ｍｍｏｌ）の溶液に室温（２５℃）にて水（１．３ｍＬ）中の水酸化リチウム（０．３４ｇ、８．１ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。ＴＨＦは反応混合物から蒸発され、残留物はメタノールに溶解され、ｐＨ＝４に酸化され、濾過され、蒸発され、蒸発で得られた粘液はジエチルエーテルで滴定され、オフホワイト固体（１．０ｇ、８３％）として化合物が得られた。
【０２０３】
ステップ４：１−（ピリジン−３−カルボニル）−ピロリジン−２−カルボン酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化５０】
0005945227.tif 000051
【０２０４】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）内のユージノール（０．７ｇ、４．２ｍｍｏｌ）の溶液に１−（ピリジン−３−カルボニル）−ピロリジン−２−カルボン酸（１ｇ、４．６ｍｍｏｌ）が加えられ、続いて、Ｎ−メチルモルホリン（２．７ｍＬ、２５．２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（１．６ｇ、８.４ｍｍｏｌ）、および触媒量のＤＭＡＰが室温にて加えられた。混合物は室温（２５℃）にて１２時間攪拌された。混合物はＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬで２回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物得はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、薄黄色ガム状化合物（２６０ｍＬ、１６％）として生成物が得られた。
【０２０５】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３６７．０（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９９．２６％
化合物の性質：薄黄色ガム状固体
【０２０６】
実施例１１：［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−酢酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化５１】
0005945227.tif 000052
【０２０７】
ステップ１：アミノ−酢酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化５２】
0005945227.tif 000053
【０２０８】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）内のユージノール（０．３ｇ、１．８２ｍｍｏｌ）の溶液にＢｏｃ−グリシン（０．３５ｇ、２．０１ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（０．６５ｍＬ、６．００ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（０．７６ｇ、４．０ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰが氷点にて加えられた。混合物は室温（２５℃）にて１２時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで２回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、薄黄色オイル（３００ｍｇ、４６．９％）として生成物が得られた。
【０２０９】
ステップ２：アミノ−酢酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルトリフルオロ酢酸の調製
【化５３】
0005945227.tif 000054
【０２１０】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）内のアミノ−酢酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステル（０．３ｇ）の溶液にトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）が氷点にて滴下された。混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。溶媒は完全に除去され、反応混合物は次のステップに持ち越された。
【０２１１】
ステップ３：［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−酢酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化５４】
0005945227.tif 000055
【０２１２】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）内のアミノ−酢酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステル（５１０ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）の溶液にナイアシン（０．２３ｇ、１．９ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモリホリン（０．９６ｍＬ、８．８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（０．６８ｇ、３．５ｍｍｏｌ）が氷点にて加えられた。混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍｌで２回）、硫酸ナトリム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィで純化処理され、オフホワイト固体（２１０ｍｇ、４３％）として生成物が得られた。
【０２１３】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）ｄ（ｐｐｍ）：３．４０（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、４．５５（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、２Ｈ）、５．０９−５．１５（ｍ、２Ｈ）、５．９２−６．０１（ｍ、１Ｈ）、６．７８−６．８３（ｍ、２Ｈ）、６．９６−７．０２（ｍ、１Ｈ）、７．３９−７．４３（ｍ、１Ｈ）、８．１５−８．１９（ｍ、１Ｈ）、８．７４−８．９６（ｍ、１Ｈ）、９．０７（Ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ、１Ｈ）
【０２１４】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７２．０（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９８．２５％
化合物の性質：オフホワイト固体
【０２１５】
実施例１２：（Ｓ）−２−ヒドロキシ−琥珀酸ビス−（４−アリル−２−メトキシ−フェニル）エステルの調製
【０２１６】
ステップ１：（Ｓ）−２，２−ジメチル−５−オキソ−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−酢酸の調製
【化５５】
0005945227.tif 000056
【０２１７】
２，２−ジメトキシプロパン（２００ｍＬ）内のＬ−（−）−マリン酸（１００．０ｇ、０．７４ｍｏｌ）の溶液にＰＰＴＳ（２．６０ｇ、１５．１１ｍｍｏｌ）が室温（２５℃）にて加えられた。混合物は同温で４８時間攪拌された。得られた混合物は水（１．０Ｌ）とジクロロメタン（２．５Ｌ）の間で分離され、水性層がジクロロメタンで２度（５００ｍＬで２回）抽出された。組み合わされた有機層は硫酸ナトリウム上で乾燥され、減圧下で濃縮され、無色固体（７５．０ｇ、５８％）が得られた。
【０２１８】
ステップ２：（２，２−ジメチル−５−オキソ−［１，３］ジオキソラン−４−ｙｌ）−酢酸４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化５６】
0005945227.tif 000057
【０２１９】
ジクロロメタン（３００ｍＬ）内の（（Ｓ）−２，２−ジメチル−５−オキソ−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−酢酸（３０．０ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（１４７ｍＬ、０．８６ｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（９８．０ｇ、０．５１ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１３．１ｇ、０．０８ｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（０．２ｇ、０．０１ｍｏｌ）が氷点にて加えられ、混合物は同温で１５分間攪拌された。続いてユージノール（２６．１ｍＬ、０．１７ｍｏｌ）が反応混合物に同温で加えられ、混合物は室温（２５℃）にて５時間攪拌された。得られた混合物はジクロロメタン（２．０Ｌ）で希釈され、水で洗浄され（５００ｍＬで４回）、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮された。溶媒の蒸発で得られた残留物はペテロリウムエーテルで洗浄され、オフホワイト固体（３５．０ｇ、６３％）として生成物が得られた。
【０２２０】
ステップ３：２−ヒドロキシ−琥珀酸４−（４−アリル−２−メトキシ−フェニル）エステルの調製
【化５７】
0005945227.tif 000058
【０２２１】
ＴＨＦ（３５０ｍＬ）内の（２，２−ジメチル−５−オキソ−［１，３］ジオキソラン−４−イル）−酢酸４−アリル−２メトキシフェニルエステル（３５．０ｇ、０．１０ｍｏｌ）の溶液に１Ｎ塩酸（３５０ｍＬ）が室温（２５℃）にて加えられ、混合物は同温で８時間間攪拌された。溶媒は半分量に蒸発され、塩化ナトリウムで飽和処理され、生成物は酢酸エチルで抽出された（７４０ｍＬで２回）。有機層は硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮されて、オフホワイト固体（３０．０ｇ、９８％）として生成物が得られた。
【０２２２】
ステップ４：（Ｓ）−２−ヒドロキシ−琥珀酸ビス−（４−アリル−２−メトキシ−フェニル）エステルの調製
【化５８】
0005945227.tif 000059
【０２２３】
ジクロロメタン（４５０ｍＬ）内の２−ヒドロキシ−琥珀酸４−（４−アリル−メトキシ−フェニル）エステル（２０．０ｇ、０．０７ｍｏｌ）の溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（６１．０ｍＬ、０．３５ｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（４０．８ｇ、０．２１ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５．４ｇ、０．０３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（８７ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）が氷点にて加えられ、反応混合物は同温で１５分間攪拌された。続いてユージノール（１１．７ｇ、０．０７ｍｏｌ）が反応混合物に同温で加えられ、混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。
【０２２４】
得られた混合物にＮ−エチルジイソプロピルアミン（２４．０ｍＬ、０．１４ｍｏｌ）が加えられ、続いて塩化ニコチノイル塩酸（２５．４ｇ、０．１４ｍｏｌ）が氷点（０℃）にて加えられ、混合物は室温（２５℃）にて２時間攪拌された。得られた混合物は酢酸エチル（２．０Ｌ）で希釈され、水で洗浄され（１．０Ｌで４回）、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮された。得られた非精製生成物はカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、黄色粘液（１０．０２ｇ、３７％）が得られた。
【０２２５】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）ｄ（ｐｐｍ）：３．３４−３．３８（ｍ、４Ｈ）、３．５３−３．５５（ｍ、２Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）、５．０４−５．０８（ｍ、２Ｈ）、５．１３（ｓ、１Ｈ）、５．１４（ｓ、１Ｈ）、５．９２−６．０２（ｍ、３Ｈ）、６．７７−６．８０（ｍ、２Ｈ）、６．９５−７．０６（ｍ、４Ｈ）、７．６３−７．６７（ｍ、１Ｈ）、８．３６−８．４０（ｍ、１Ｈ）、８．８８−８．９０（ｍ、１Ｈ）、９．１８（ｓ、１Ｈ）
【０２２６】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５３２．１（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９８．４２％
化合物の性質：薄黄色粘性オイル
【０２２７】
実施例１３：４−［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−ブチル酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化５９】
0005945227.tif 000060
【０２２８】
ステップ１：４［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−ブチル酸メチルエステルの調製
【化６０】
0005945227.tif 000061
【０２２９】
ニコチン酸（１．６ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（４．２９ｍＬ、３９．０４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（４．０ｇ、２６．０ｍｍｏｌ）、およびアミン（２．０ｇ、１３．００ｍｍｏｌ）加えられた。混合物は窒素雰囲気中、室温（２５℃）にて３時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬで２回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた非精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、白色固体（１．５９ｇ、５５７％）として生成物が得られた。
【０２３０】
ステップ２：４［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−ブチル酸の生成
【化６１】
0005945227.tif 000062
【０２３１】
ＴＨＦ（１４ｍＬ）中の４［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−ブチル酸メチルエステル（０．８ｇ、３．４ｍｍｏｌ）の溶液に、水（６ｍＬ）に溶解したＬｉＯＨ（０．７５ｇ、１７．９ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は室温（２５℃）にて一晩攪拌された。５０％の開始物質がその状態で放置された。続いて反応混合物は４５℃にて加熱された。反応は進行しなかった。反応混合物はクロロホルムで処理され、開始物質が回復された。水性層は水で希釈され、１．５Ｎ  ＨＣｌで酸化（ｐＨ＝３）され、酢酸エチル（１５０ｍＬ）で抽出され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮されて、黄色固体（０．６ｇ、８０％）が得られた。
【０２３２】
ステップ３：４［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−ブチル酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化６２】
0005945227.tif 000063
【０２３３】
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の４［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−ブチル酸（０．６ｇ、２．８ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（０．９ｍＬ、４．８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（１．１ｇ、５．７ｍｍｏｌ）、およびユージノール（０．４ｍＬ、４．８ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素雰囲気内で室温（２５℃）にて一晩攪拌された。得られた混合物は酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬで４回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物は分取ＨＰＬＣでさらに純化処理され、無色固体として生成物が得られた。
【０２３４】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５５．１（［Ｍ＋Ｈ］＋）
化合物の性質：無色固体
【０２３５】
実施例１４：４−アリル−２−メトキシフェニル２−（ニコチンアミド）プロパノエートの調製
【化６３】
0005945227.tif 000064
【０２３６】
ステップ１：２−タート−ブトキシコルボニルアミノ−プロピオン酸−４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化６４】
0005945227.tif 000065
【０２３７】
ＤＣＭ（３０ｍＬ）中のＮ−ボック−アラニン（３ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）の溶液にＥＤＣ．ＨＣｌ（３．７３ｇ、２９．５ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（２．８６ｍＬ、４４．２ｍｍｏｌ）、およびユージノール（１．５ｍＬ、１４．７ｍｍｏｌ）が氷点（０℃）にて加えられた。混合物は窒素雰囲気内で室温（２５℃）にて２時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（３００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、オフホワイト固体（３ｇ、６１％）として生成物が得られた。
【０２３８】
ステップ２：２［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸−４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステルの調製
【化６５】
0005945227.tif 000066
【０２３９】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の２−タート−ブトキシコルボニルアミノ−プロピオン酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステル（１．０ｇ、２．９ｍｍｏｌ）の溶液にトリフルオロ酢酸（１．０ｇ、８．９ｍｍｏｌ）が氷点（０℃）にて滴下された。混合物は窒素雰囲気内で室温（２５℃）にて２時間攪拌され、真空下でＦＴＡが除去された。未精製塊のｐＨは重炭酸溶液で６から７に調節された。遊離アミンが酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮されてオフホワイト固体（０．４５ｇ、６４％）が得られた。
【０２４０】
ステップ３：
【化６６】
0005945227.tif 000067
【０２４１】
ＤＣＭ（６ｍＬ）中のニコチン酸（０．２８０ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）の溶液にＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．８７６ｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（０．７４ｍＬ、１．２７ｍｍｏｌ）、および２［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸−４−アリル−２−メトキシ−フェニルエステル（０．５４３ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）が窒素雰囲気内で加えられた。混合物は窒素雰囲気内で室温（２５℃）にて２時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、白色固体（０．３０ｇ、３８．４％）の生成物が得られた。
【０２４２】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）ｄ（ｐｐｍ）：１．７９（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）、３．３８−３．４４（ｍ、２Ｈ）、３．８３（ｓ、３Ｈ）、４．３８（ｂｓ、１Ｈ）、５．０２−５．１４（ｍ、３Ｈ）、５．８９−６．０２（ｍ、１Ｈ）、６．７６−６．７８（ｍ、２Ｈ）、６．８５−７．０２（ｍ、１Ｈ）、７．６０（ｂｓ、１Ｈ）、８．１０（ｂｓ、１Ｈ）、８．５７（ｂｓ、１Ｈ）、８．７７（ｂｓ、１Ｈ）、９．５６（ｓ、１Ｈ）
【０２４３】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３４１．０（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９２．０７％
化合物の性質：白色固体
【０２４４】
実施例１５：４−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−ペンタン酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化６７】
0005945227.tif 000068
【０２４５】
ステップ１：４−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−ペンタン酸メチルエステルの調製
【化６８】
0005945227.tif 000069
【０２４６】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のナイアシン（１．３５ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（３．３４ｇ、３３．００ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（４．２ｇ、２２．０２ｍｍｏｌ）、およびＬ−ロイシンメチルエステル塩酸（２．０ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素雰囲気内で室温（２５℃）にて２．５時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（１００ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、白色固体（２．０ｇ、７２％）として生成物が得られた。
【０２４７】
ステップ２：４−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−ペンタン酸の調製
【化６９】
0005945227.tif 000070
【０２４８】
メタノール（８ｍＬ）、ＴＨＦ（３ｍｌ）中の４−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−ペンタン酸メチルエステル（０．８０ｇ、３．３ｍｍｏｌ）の溶液に、水（９ｍｌ）に溶解されたＬｉＯＨ（０．７ｇ、１６．９ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は室温（２５℃）にて２．５時間攪拌された。メタノールとＴＨＦが反応塊から除去され、１．５Ｎ  ＨＣｌで酸化（ｐＨ＝１）された。反応塊は酢酸エチル（１００ｍＬ）で３回抽出され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濃縮されて薄黄色固体（０．４５ｇ、６０％）として生成物が得られた。
【０２４９】
ステップ３：４−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−ペンタン酸−４−アリル−２−メトキシフェニルエステルの調製
【化７０】
0005945227.tif 000071
【０２５０】
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の４−メチル−２−［ピリジン−３−カルボニル］−アミノ−ペンタン酸（０．４７ｇ、１．９９ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−メチルモルホリン（０．６ｍＬ、５．９９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（０．７６ｇ、３．９９ｍｍｏｌ）、およびユージノール（０．３２ｍＬ、１．９９ｍｍｏｌ）が加えられた。混合物は窒素雰囲気内で室温（２５℃）にて２．５時間攪拌された。得られた混合物はＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈され、水で洗浄され（５０ｍＬで３回）、硫酸ナトリウム上で乾燥された。溶媒の蒸発で得られた未精製生成物はシリカゲルカラムクロマトグラフィでさらに純化処理され、白色固体（０．０９ｇ、１２％）として生成物が得られた。
【０２５１】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）ｄ（ｐｐｍ）：０．９４−０．９９（ｍ、６Ｈ）、１．７９−１．９３（ｍ、３Ｈ）、３．３６（ｄ、Ｊ＝９．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．７３（ｓ、３Ｈ）、４．７５（ｂｓ、１Ｈ）、５．０４−５．１４（ｍ、２Ｈ）、５．９２−５．９８（ｍ、１Ｈ）、６．７５−６．７８（ｍ、１Ｈ）、６．９５−７．００（ｍ、２Ｈ）、７．５１−７．５６（ｍ、１Ｈ）、８．２３−８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．７２−８．７４（ｍ、１Ｈ）、８．０５−９．１２５（ｍ、２Ｈ）
【０２５２】
ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８３．０（［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＨＰＬＣ純度：９８．５９％
化合物の性質：白色固体
【０２５３】
ヒトの神経ＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞における化合物によるＡβ４２の生成の減少
化合物の濃度を増加させつつ細胞が一晩培養された。続いて細胞培地は回収され、培地のＡβ４２はサンドイッチＥＬＩＳＡにより定量された。結果を表１に示す。
【０２５４】
【表１】
0005945227.tif 000072
0005945227.tif 000073
0005945227.tif 000074
表１：化合物のＡβ４２分泌阻害効果
【０２５５】
化合物９はラットの新規物体認知試験（ＮＯＲＴ）で認知機能を増強する
化合物９は上記の方法に従ってＮＯＲＴ試験によって試験された。特に、化合物は、試験された全ての投与量（０から９０ｍｇ／ｋｇ／一日）にて、見慣れた対象物体と新規な対象物体とを区別する能力において、説明されているように認知機能が改善することが示され、その改善は対照ドネペジル以上であった（図１および図２）。
【０２５６】
Ａβ４２の脳レベルに対する化合物９の効果
２週間のラットの処置（治療）後、脳内の溶解性Ａβ４２レベル（表２）が予測され、表２に示されている。治療効果の低下を暗示している、このペプチドのレベルの化合物による投与量が関与した減少が存在した。
【０２５７】
【表２】
0005945227.tif 000075
表２：化合物９によるラット治療後の脳内Ａβ４２レベル
Ｐ＜０．５５，＊＊Ｐ＜０．００１，対照と比較したダンネット検定による一元配置分散分析法
注：シンバスタチン群は１２日目に停止
【０２５８】
モリス水迷路試験での認知に対する化合物９の効果
モリス水迷路研究の結果（この方法で提供）は表３で示されている。改善認知の程度は動物による標的象限への到達時間により計られる。ビヒクルで治療された群の標的への到達時間は、１日目、２日目、３日目および４日目のスコポラミン治療群よりも大幅に短かった。ビヒクル治療群の行程距離および水泳速度は４日目でスコポラミン治療群と比較して大幅に減少した。同様に、ドネペジル治療群においてもスコポラミン治療群と比べて標的に対する到達時間と行程距離の大幅な短縮が２日目、３日目および４日目に観察された。
【０２５９】
化合物９（３ｍｇ／ｋｇ、経口）治療群において、スコポラミン治療群と比較して標的に対する到達時間の大幅な減少が、１日目、２日目、３日目および４日目に観察され、標的への行程距離の大幅な減少が３日目と４日目に観察された。化合物９（１ｍｇ／ｋｇ、経口）治療群において、スコポラミン治療群と比較して標的に対する行程距離の大幅な減少が３日目に観察された。観察された効果は認知特性によるものであると推察された（なぜなら水泳速度に変化がなかったから）。化合物９（１ｍｇ／ｋｇ、経口）治療群において、スコポラミン治療群と比較して標的に対する行程距離の大幅な減少が４日目に観察された。化合物９（３および１０ｍｇ／ｋｇ、経口）治療群の水泳速度において、スコポラミン治療群と比較して大幅な減少が３日目に観察された。ドネペジル治療群とスコポラミン治療群との間の水泳速度に大きな違いは観察されなかった。化合物９（１０ｍｇ／ｋｇ、経口）治療群において、スコポラミン治療群と比較して標的に対する行程距離の大幅な減少が４日目に観察された。
【０２６０】
プローブ実験中に、スコポラミン治療群と較べてビヒクル治療動物は標的象限において長時間を費やした。しかし、スコポラミン治療群と較べたとき、化合物９とドネペジルとの間には大きな観察されなかった。ビヒクル、スコポラミン、ドネペジル、および化合物９の治療群間で水泳速度に大きな相違は観察されなかった。
【０２６１】
結論すれば、改善、特に標的に対する到達時間の改善において、化合物９は肯定的な認知特性を示し、認知疾病の治療に有効であると考えられる。
【０２６２】
【表３】
0005945227.tif 000076
0005945227.tif 000077
表３：学習実験での水迷路における標的到達時間、水泳速度、および行程距離、並びにプローブ実験での標的象限における滞在時間率および水泳速度に対する化合物９の平均（±Ｓ．Ｅ．Ｍ．）効果
【０２６３】
化合物９による治療はＴｇ２５７６マウスモデルのＡβペプチド低減を引き起こす
４週間に亘った化合物９（５０ｍｇ／ｋｇ／日、経口）によるＴｇ２５７６マウスの治療で、溶解性Ａβ−４２とＡβ−４０の脳レベルはそれぞれ２２％と２３％減少した。この減少は、アルツハイマー病に関連する２つの発病性ペプチドを低減させるこの化合物の性能を証明しており、この化合物の治療効果を暗示する。
【図１】
0005945227.tif 000087
【図２】
0005945227.tif 000088