(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
本体、および、この本体内に形成され、両端が前記本体の外部に開口するマイクロ流路を有するフローセルの前記マイクロ流路に一端が接続された管の他端を、廃液容器内の液面より高い位置に固定する固定ステップと、
前記廃液容器内に負圧を発生させる負圧発生ステップと、
前記フローセルの前記マイクロ流路を通り、前記管により前記廃液容器内部に導入された液体を前記廃液容器内の所定の位置で空気中に露出させ、この空気中に露出させた液体を所定の搬出構造を用いて前記所定の位置から連続的に搬出する搬出ステップと
を有することを特徴とする送液方法。
【請求項２】
本体、および、この本体内に形成され、両端が前記本体の外部に開口するマイクロ流路を有するフローセルと、
このフローセルの前記マイクロ流路に一端が接続された管と、
内部の液面より高い位置に前記管の他端が固定された廃液容器と、
この廃液容器内を負圧にする負圧発生装置と、
前記フローセルの前記マイクロ流路を通り前記管により前記廃液容器内部に導入されて前記廃液容器内の所定の位置で空気中に露出した液体を、前記所定の位置から連続的に搬出する搬出構造と
を備えることを特徴とする送液システム。
【請求項３】
請求項２記載の送液システムにおいて、
前記所定の位置と前記マイクロ流路内の前記液体の液面の高さは、同一である
ことを特徴とする送液システム。
【請求項４】
請求項２または３記載の送液システムにおいて、
前記搬出構造は、前記所定の位置で前記管の他端と当接する前記廃液容器内壁面からなる
ことを特徴とする送液システム。
【請求項５】
請求項２または３記載の送液システムにおいて、
前記搬出構造は、前記管の前記他端に接続された紐部材からなる
ことを特徴とする送液システム。
【請求項６】
請求項２または３記載の送液システムにおいて、
前記搬出構造は、
前記廃液容器内に設けられた容器と、
この容器から前記液体を連続的に搬送する搬送部材と
から構成されることを特徴とする送液システム。
【請求項７】
請求項６記載の送液システムにおいて、
前記搬送部材は、
前記容器を貫通する棒部材と、
この棒部材に接続された紐部材と
から構成されることを特徴とする送液システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、送液方法および送液システムに関するものであり、特に、フローセル内のマイクロ流路を通った液体を廃液容器に送る送液方法および送液システムに関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、毛細管現象が発現する程度に微小な流路（以下、「マイクロ流路」と言う。）を作製して流体を流通させることにより生化学測定や化学合成を行う技術が注目されている。この技術において流体をマイクロ流路に送液する方法は、圧力を用いる方法や電気泳動を用いる方法が提案されている。このうち、圧力を用いる方法は、電気泳動を利用する方法と比較して、液体の性質に関わらず送液でき、流速を制御しやすいので、広く用いられている（例えば、特許文献１，２参照。）。
【０００３】
具体的には、特許文献１では、試料液を供給する液供給ポートと、廃液を溜める廃液ポートと、これらを連通する流路とを同一チップに形成し、液供給ポート内を正圧または廃液ポート内を負圧とすることにより送液することが提案されている。また、特許文献２では、マイクロ流路の流路入口に加圧した液体を供給し、マイクロ流路の流路出口と試験管等の貯留容器とをチューブで接続することにより、そのチューブを介して貯留容器にマイクロ流路を通過した液体を溜めることが提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００３−３０２３３０号公報
【特許文献２】特開２００６−２７２２３０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、上述したような圧力による液体の送液方法では、マイクロ流路内の液体に加わる圧力が安定しないことがあった。このような問題について、図８〜図１０を参照して説明する。
【０００６】
図８に示す送液システムは、マイクロフローセル１００と、一端２０１がマイクロフローセル１００に接続された管２００と、この管２００の他端２０２が接続された廃液容器３００とを備えている。ここで、マイクロフローセル１００は、本体１０１と、この本体１０１内部に形成され両端が本体１０１の外部に開口する流路１０２とを備えている。管２００の一端２０１は、マイクロフローセル１００の流路１０１の出力側の端部に接続され、管２００の他端２０２は、廃液容器３００内に貯留された液体内に配設されている。
【０００７】
このような送液システムにおいて、マイクロフローセル１００の流路１０２の入力側の端部に液体を供給し、負圧発生装置（図示せず）により廃液容器３００内を負圧とすると、流路１０２内の液体が、流路１０２の出力側の端部から管２００を経て、廃液容器３００内に搬送される。
流路１０２を流れる液体を繰り返し測定する場合には、流路１０２の入力側の端部に繰り返し液体が供給されるので、廃液容器３００内の液面が上昇して、廃液容器３００内に貯留された液体にかかる静水圧が変化する。すると、上述したように管２００の他端２０２が廃液容器３００内の液体内に配設されているので、管２００内の液体にかかる圧力も変化してしまう。これにより、流路１０２内の液体に係る圧力が変化するので、流路１０２内を流れる液体の流速も変化してしまい、結果として、測定を正確に行えなくなってしまうことがあった。
【０００８】
そこで、図９に示すように、管２００の他端２０２が廃液容器３００内に貯留された液体内に位置しないようにすると、管２００内の液体が廃液容器３００内に貯留された液体にかかる静水圧の影響を受けないようにすることができる。ところが、管２００の他端２０２から出力される液体が表面張力によって液滴を形成するようになるので、管２００の他端２０２から液体が間欠的に出力されることになり、このような液体の動きによって流路１０２内の液体に加わる圧力も変動してしまう。すると、流路１０２内を流れる液体の流速も変化し、結果として、測定を正確に行えなくなってしまうことがあった。
【０００９】
このため、図１０に示すように、廃液容器３００内に、廃液容器３００内に貯留された液体の液面よりも高い位置に有底筒状の内部容器３０１を設け、管２００の他端２０２を内部容器３０１に貯留された液体内に配設することが提案されている。このようにすると、管２００内の液体が内部容器３０１内に貯留された液体にかかる静水圧の影響を受けないようにできるとともに、管２００の他端２０２に液滴が形成されないので、その液滴の影響を受けないようにすることができる。ところが、管２００の他端２０２から内部容器３０１内に液体が供給され続けると、内部容器３０１の上端に供給された液体は、やがて内部容器３０１内にいっぱいに溜まった状態から、表面張力によって内部容器３０１の開口から盛り上がった後、その開口から廃液容器３００内部に流れ出る。このような液体の動きによって内部容器３０１内に他端２０２が配設された管２００内の液体にかかる液体の圧力が変動するので、流路１０２内の液体に加わる圧力も変動してしまう。このため、流路１０２内を流れる液体の流速も変化し、結果として、測定を正確に行えなくなってしまうことがあった。
【００１０】
以上のように、従来の技術では、マイクロ流路内を通過する液体の流速が変化してしまうので、安定した測定を行うことが困難となってしまう。
【００１１】
そこで、本発明は、マイクロ流路内の液体に加わる圧力を安定させることができる送液方法および送液システムを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
上述したような課題を解決するために、本発明に係る送液方法は、本体、および、この本体内に形成され、両端が本体の外部に開口するマイクロ流路を有するフローセルのマイクロ流路に一端が接続された管の他端を、廃液容器内の液面より高い位置に固定する固定ステップと、廃液容器内に負圧を発生させる負圧発生ステップと、フローセルのマイクロ流路を通り、管により廃液容器内部に導入された液体を廃液容器内の所定の位置で空気中に露出させ、この空気中に露出させた液体を所定の搬出構造を用いて所定の位置から連続的に搬出する搬出ステップとを有することを特徴とするものである。
【００１３】
また、本発明に係る送液システムは、本体、および、この本体内に形成され、両端が本体の外部に開口するマイクロ流路を有するフローセルと、このフローセルのマイクロ流路に一端が接続された管と、内部の液面より高い位置に管の他端が固定された廃液容器と、この廃液容器内を負圧にする負圧発生装置と、フローセルのマイクロ流路を通り管により廃液容器内部に導入されて廃液容器内の所定の位置で空気中に露出した液体を、所定の位置から連続的に搬出する搬出構造とを備えることを特徴とするものである。
【００１４】
上記送液システムにおいて、所定の位置とマイクロ流路内の液体の液面の高さは、同一であるようにしてもよい。
【００１５】
上記送液システムにおいて、搬出構造は、所定の位置で管の他端と当接する廃液容器内壁面からなるようにしてもよい。
【００１６】
また、上記送液システムにおいて、搬出構造は、管の他端に接続された紐部材からなるようにしてもよい。
【００１７】
また、上記送液システムにおいて、搬出構造は、廃液容器内に設けられた容器と、この容器から液体を連続的に搬送する搬送部材とから構成されるようにしてもよい。
ここで、搬送部材は、容器を貫通する棒部材と、この棒部材に接続された紐部材とから構成されるようにしてもよい。
【発明の効果】
【００１８】
本発明によれば、フローセルのマイクロ流路を通り、管により廃液容器内部に導入された液体を廃液容器内の所定の位置で空気中に露出させ、この空気中に露出させた液体を所定の位置から連続的に搬出することにより、マイクロ流路内の液体に加わる圧力を安定させることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１は、本発明の第１の実施の形態に係る送液システムの構成を示す図である。
【図２】図２は、本発明の第１の実施の形態に係る送液システムによる送液方法を示すフローチャートである。
【図３】図３は、本発明の第２の実施の形態に係る送液システムの構成を示す図である。
【図４】図４は、本発明の第３の実施の形態に係る送液システムの構成を示す図である。
【図５】図５は、本発明の第４の実施の形態に係る送液システムの構成を示す図である。
【図６】図６は、本発明の第４の実施の形態に係る送液システムの変形例の構成を示す図である。
【図７】図７は、本発明の第４の実施の形態に係る送液システムの変形例の構成を示す図である。
【図８】図８は、従来の送液システムの構成を示す図である。
【図９】図９は、従来の送液システムの構成を示す図である。
【図１０】図１０は、従来の送液システムの構成を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
［第１の実施の形態］
まず、図１を参照して、本発明に係る第１の実施の形態について詳細に説明する。
【００２１】
＜送液システムの構成＞
図１に示すように、本実施の形態に係る送液システムは、フローセル１と、このフローセル１に一端２１が接続された管２と、この管２の他端２２が接続された廃液容器３と、この廃液容器３内を負圧とする負圧発生装置（図示せず）とを備えている。
【００２２】
フローセル１は、直方体状の本体１１と、両端が本体１１の外部に開口する流路１２とを備えている。
【００２３】
流路１２は、上部が本体１１の上面から開口する凹部からなる供給部１３と、供給部１３の底部に接続された一端から本体１１の上面または底面に沿った方向に延在し、毛細管現象が発現する程度に形成された測定流路１４と、上部が本体１１の上面から開口する凹部からなり、底部に測定流路１４の他端が接続された液だめ１５とから構成される。この液だめ１５の開口には、管２の一端２１が接続されている。
【００２４】
管２は、フローセル１の液だめ１５と廃液容器３とを連通する管である。ここで、管２の他端２２は、廃液容器３内に貯留される液体の液面よりも高く、廃液容器３の側部の内壁面に当接する位置に配設されている。
【００２５】
廃液容器３は、内部に閉鎖空間を有する筐体である。本実施の形態では、天部が平板で閉塞され、底部が円錐状の部材で閉塞された円筒状に形成されている。廃液容器３の上部には、例えば定圧ポンプなどの負圧発生装置（図示せず）と接続される接続口３１が形成されており、この接続口３１から廃液容器３内の空気が吸引されることにより、廃液容器３内が負圧とされる。
【００２６】
＜送液方法＞
次に、図２を参照して、本実施の形態に係る送液システムによる送液方法について説明する。
【００２７】
はじめに、上述した構成の送液システムを用意する（ステップＳ１）。ここで、管２の他端２２は、廃液容器３内に貯留される液体の液面よりも高く、廃液容器３の側部の内壁面に当接する位置に配設されている。
【００２８】
次に、供給部１３に液体を注入した後、負圧発生装置を駆動し、廃液容器３内に大気圧よりも低い圧力をかける（ステップＳ２）。すると、管２を介して液だめ１５内の気体が負圧発生装置に吸引される。これにより、大気に開放された供給部１３と液だめ１５との間に圧力差が発生し、供給部１３に供給された液体が、測定流路１４を通って液だめ１５に流入する。この液だめ１５に流入した液体は、管２の一端に到達すると、廃液容器３内の圧力との圧力差により、管２を通って廃液容器３に流入し、この廃液容器３の底部に貯留される。これにより、測定流路１４、液だめ１５および管２内が液体で満たされた状態となる。
【００２９】
この状態とした後、必要に応じて供給部１３に液体を注入しながら負圧発生装置を駆動させることにより、供給部１３内の液体を測定流路１４内を通過させ、液だめ１５および管２を介して廃液容器３に送液する（ステップＳ３）。このときに測定流路１４を流れる液体に対して例えば生化学測定や化学合成などを行う。  
一例として、測定流路１４を高さ７５μｍ、幅１ｍｍ、長さ８ｍｍ、管２を内径１／３２in、長さ２０ｃｍ、廃液容器３を内径１．５ｃｍ、高さ１０ｃｍに形成し、負圧発生装置により３ｍｂａｒの負圧をかけることにより、上述したような送液を実現できることを確認することができた。
【００３０】
このような送液を行っているとき、管２の他端２２は、廃液容器３内に貯留される液体の液面よりも高い位置（以下、「所定の位置」と言う。）に配設されているので、この所定の位置で管２の他端２２から出力される液体が空気中に露出する。
また、管２の他端２２は、廃液容器３の側部の内壁面に当接し、出力する液体がその内壁面に円滑に移動する状態とされている。これにより、管２の他端２２から出力される液体は、所定の位置で廃液容器３内の空気中に露出して廃液容器３の内壁面へと円滑に移動した後、連続的に内壁面をつたって廃液容器３の底部に搬出され、この底部に貯留される。
【００３１】
このように、管２の他端２２から出力された液体が、廃液容器３の底部に貯留された液体とは異なる場所で空気中に露出するので、管２内の液体は、その廃液容器３の底部に貯留された液体にかかる静水圧の影響を受けない。これにより、測定流路１４内の液体についても、廃液容器３の底部に貯留された液体にかかる静水圧の影響を受けることを防ぐことができる。
【００３２】
また、管２の他端２２から出力された液体が円滑に廃液容器３の内壁面に移動するので、管２の他端２２から出力される液体が液滴を形成しない。したがって、管２内の液体や測定流路１４内の液体が、その液滴の形成による間欠的な圧力変動の影響を受けることを防ぐことができる。
【００３３】
さらに、所定の位置とフローセル１の供給部１３内の液面との高さを一致させれば、管２の他端２２から出力される液体と供給部１３内の液体とにかかる静水圧を同一にすることができるので、負圧発生装置によりかかる負圧をそのまま流路１２内の液体にかけることができ、結果としてより正確な送液制御を行うことができる。
【００３４】
以上説明したように、本実施の形態によれば、管２の他端２２を廃液容器３内に貯留される液体の液面よりも高い位置に配設し、かつ、廃液容器３の内壁面に当接させることにより、測定流路１４内の液体にかかる圧力を安定させることができる。
【００３５】
なお、本実施の形態において、廃液容器３の内側面のうち管２の他端２２と当接した位置よりも鉛直下方の部分は、連続していない、すなわちくぼみや切欠きなどが形成されていてもよいことは言うまでもない。
【００３６】
［第２の実施の形態］
次に、図３を参照して、本発明に係る第２の実施の形態について詳細に説明する。なお、本実施の形態は、上述した第１の実施の形態と廃液容器３の内壁の構成を変更したものである。したがって、本実施の形態において、上述した第１の実施の形態と同等の構成については、同じ名称および符号を付して、適宜説明を省略する。
【００３７】
本実施の形態においては、廃液容器３の内側壁には、廃液容器３内に貯留される液体の液面よりも上方に、凹部からなるくぼみ３２が形成されている。このくぼみ３２の縁部は、廃液容器３の内側壁と連続している。くぼみ３２の内部には、管２の他端２２が配設されている。
【００３８】
本実施の形態によれば、管２の他端２２が廃液容器３内に貯留される液体の液面よりも高いくぼみ３２内に配設され、このくぼみ３２内で管２の他端２２から出力される液体が空気中に露出する。
また、管２の他端２２が、廃液容器３の内側壁と連続するくぼみ３２内に配設されているので、管２の他端から出力された液体は、そのくぼみ３２の開口で空気中に露出して廃液容器３の内壁面に円滑に移動した後、連続的に内壁面をつたって廃液容器３の底部に搬出され、この底部に貯留される。
【００３９】
このように、管２の他端２２から出力された液体が廃液容器３の底部に貯留された液体とは異なる場所で空気中に露出するので、管２内の液体は、その廃液容器３の底部に貯留された液体にかかる静水圧の影響を受けない。これにより、測定流路１４内の液体についても、廃液容器３の底部に貯留された液体にかかる静水圧の影響を受けることを防ぐことができる。
【００４０】
また、くぼみ３２に出力された液体がそのくぼみ３２内から円滑に廃液容器３の内壁面に移動するので、管２の他端２２から出力される液体が、その他端２２やくぼみ３２の縁部に液滴を形成しない。したがって、管２内の液体や測定流路１４内の液体が、その液滴の形成による間欠的な圧力変動の影響を受けることを防ぐことができる。
【００４１】
また、くぼみ３２内に貯留される液体の液面とフローセル１の供給部１３内の液面との高さを一致させるようにすれば、管２の他端２２から出力される液体と供給部１３内の液体とにかかる静水圧を同一にすることができるので、負圧発生装置によりかかる負圧をそのまま流路１２内の液体にかけることができ、結果としてより正確な送液制御を行うことができる。
【００４２】
さらに、くぼみ３２を設けることにより、管２の他端２２をくぼみ３２内部に差し入れるという簡単な作業だけで、管２の他端２２を廃液容器３内に配設することができる。
【００４３】
なお、本実施の形態において、廃液容器３の内側面のうちくぼみ３２よりも鉛直下方の部分は、連続していない、すなわちくぼみや切欠きなどが形成されていてもよいことは言うまでもない。
【００４４】
［第３の実施の形態］
次に、本発明に係る第３の実施の形態について説明する。なお、本実施の形態は、第１の実施の形態において、管２の他端２２に接続した紐部材４をさらに設けたものである。したがって、本実施の形態において、上述した第１の実施の形態と同等の構成については、同じ名称および符号を付して、適宜説明を省略する。
【００４５】
本実施の形態において、管２の他端２２は、図４に示すように廃液容器３内に貯留される液体の液面よりも高い位置に配設されており、紐部材４の一端が接続されている。この紐部材４は、管２の他端２２から出力される液体が、液滴を形成したり、表面張力によってその他端２２から盛り上がった形状となったりせず、管２の他端２２から円滑に移動できる部材から構成されている。このような紐部材４は、例えば、布、糸、ワイヤなどで形成することができる。これらのうち、布や糸は、毛細管現象により連続的に液体を搬送することができる。
なお、図４においては、紐部材４の他端が廃液容器３の底部に貯留された液体内に配設されているが、その液面よりも上に配設されるようにしてもよいことは言うまでもない。
【００４６】
このように本実施の形態によれば、管２の他端２２が廃液容器３内に貯留される液体の液面よりも高い位置に配設され、ここで管２の他端２２から出力される液体が空気中に露出する。
また、管２の他端２２に紐部材４の一端が接続されているので、管２の他端２２から出力された液体が紐部材４の一端に円滑に移動した後、連続的に紐部材４をつたって廃液容器３の底部に搬出され、この底部に貯留される。
【００４７】
このように、管２の他端２２から出力された液体が、廃液容器３の底部に貯留された液体とは異なる場所で空気中に露出するので、管２内の液体は、その廃液容器３の底部に貯留された液体にかかる静水圧の影響を受けない。これにより、測定流路１４内の液体についても、廃液容器３の底部に貯留された液体にかかる静水圧の影響を受けることを防ぐことができる。
【００４８】
また、管２の他端２２に紐部材４の一端が配設されているので、その他端２２から出力された液体が紐部材４に円滑に移動するので、管２の他端２２から出力される液体が液滴を形成しない。したがって、管２内の液体や測定流路１４内の液体が、その液滴の形成による間欠的な圧力変動の影響を受けることを防ぐことができる。
【００４９】
さらに、管２の他端２２とフローセル１の供給部１３内の液面との高さを一致させるようにしてもよい。これにより、管２の他端２２から出力される液体と供給部１３内の液体とにかかる静水圧を同一にすることができるので、負圧発生装置によりかかる負圧をそのまま流路１２内の液体にかけることができ、結果としてより正確な送液制御を行うことができる。
【００５０】
［第４の実施の形態］
次に、本発明に係る第４の実施の形態について説明する。なお、本実施の形態は、第１の実施の形態において、内部容器５と紐部材６をさらに設けたものである。したがって、本実施の形態において、上述した第１の実施の形態と同等の構成については、同じ名称および符号を付して、適宜説明を省略する。
【００５１】
図５に示すように、本実施の形態において、廃液容器３内には、この廃液容器３内に貯留された液体の液面よりも高い位置に有底筒状の内部容器５が配設されている。この内部容器５の内部には、管２の他端２２が配設されている。また、内部容器５の上部には、紐部材６の一端が接続されている。
【００５２】
紐部材６は、例えば、布、糸、ワイヤなど管２から出力される液体が表面や内部を円滑に移動できる部材から構成されている。なお、図５においては、紐部材６の他端が廃液容器３の底部に貯留された液体内に配設されているが、その液面よりも上に配設されるようにしてもよいことは言うまでもない。
【００５３】
このように本実施の形態によれば、管２の他端が廃液容器３内に貯留される液体の液面よりも高い位置に配設された内部容器５内に配設され、この内部容器５の開口で管２の他端２２から出力される液体が空気中に露出する。
そして、内部容器５の上部に紐部材６の一端が接続されているので、管２の他端２２から出力され内部容器５の上部まで移動した液体が紐部材６の一端に円滑に移動した後、連続的に紐部材６をつたって廃液容器３の底部に搬出され、この底部に貯留される。
【００５４】
このように、管２の他端２２から出力された液体が、廃液容器３の底部に貯留された液体とは異なる場所で空気中に露出するので、管２内の液体は、その廃液容器３の底部に貯留された液体にかかる静水圧の影響を受けない。これにより、測定流路１４内の液体についても、廃液容器３の底部に貯留された液体にかかる静水圧の影響を受けることを防ぐことができる。
【００５５】
また、管２の他端２２から出力された液体が紐部材６に円滑に移動するので、管２の他端２２から出力される液体が液滴を形成しない。したがって、管２内の液体や測定流路１４内の液体が、その液滴の形成による間欠的な圧力変動の影響を受けることを防ぐことができる。
【００５６】
なお、本実施の形態において、紐部材６の一端は、図５に示すように、内部容器５の上部の一部のみに設けるのみならず、例えば、図６に示すように、内部容器５の上部開口を覆うようにしてもよい。これにより、内部容器５内に貯留された液体の変動を抑えて、管２内の液体にかかる圧力をより安定させることができる。
【００５７】
また、図７に示すように、内部容器５を略水平方向に貫通するワイヤなどの棒部材７を設け、このワイヤに紐部材６の一端を接続するようにしてもよい。この場合、管２の他端２２から出力された液体は、棒部材７が挿通される内部容器５の孔５１から棒部材７をたどって紐部材６に到達し、この紐部材６を介して廃液容器３の底部に移動する。このようにしても、流路１２内の液体にかかる圧力を安定させることができる。
【００５８】
さらに、内部容器５内に貯留される液体の液面とフローセル１の供給部１３内の液面との高さを一致させるようにすることで、管２の他端から出力される液体と供給部１３内の液体とにかかる静水圧を同一にすることができるので、負圧発生装置によりかかる負圧をそのまま流路１２内の液体にかけることができ、結果としてより正確な送液制御を行うことができる。
【産業上の利用可能性】
【００５９】
本発明は、管から出力される液体を容器内に貯留する各種システムや方法に適用することができる。
【符号の説明】
【００６０】
１…フローセル、２…管、３…廃液容器、４…紐部材、５…内部容器、６…紐部材、７…棒部材、１１…本体、１２…流路、１３…供給部、１４…測定流路、１５…液だめ、２１…一端、２２…他端、３１…接続口、３２…くぼみ、５１…孔。
【図１】
0005873126.tif 000002
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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