(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離されたプロバイオティクス菌株であるストレプトコッカス・サーモフィラスであって、Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH(DSMZ)に受入番号DSM 28121で委託された、プロバイオティクス菌株。
【請求項２】
前記ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121は母乳から単離されたものである、請求項１に記載のプロバイオティクス菌株。
【請求項３】
請求項１に記載されたプロバイオティクス菌株の、ヒアルロン酸を生成する組成物の製造のための使用。
【請求項４】
前記ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121は活性または不活性である、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
請求項１に記載されたプロバイオティクス菌株を含有する、ヒアルロン酸を生成する組成物。
【請求項６】
前記ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121は、腸内において生存しコロニー形成することにより、その数を増大させる能力を有する、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
血中ヒアルロン酸含有量が増大する、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
前記ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121は活性または不活性である、請求項５に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物は、食料製品、健康食品サプリメント、医薬品またはスキンケア製品である、請求項５に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121の代謝物をさらに有する、請求項５に記載の組成物。
【請求項１１】
皮膚水和度が向上する、請求項５に記載の組成物。
【請求項１２】
ドライアイの症状が改善する、請求項５に記載の組成物。
【請求項１３】
関節膨張、関節痛および硬直症の症状が改善する、請求項５に記載の組成物。
【請求項１４】
請求項１に記載されたプロバイオティクス菌株又はその代謝物の、ヒアルロン酸を生成する食料製品、健康食品サプリメント、医薬品またはスキンケア製品の製造のための使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なプロバイオティクス菌株に関し、具体的には、そのプロバイオティクス菌株の、ヒアルロン酸の分泌の増強における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒアルロン酸（hyaluronate; HA）は、Ｄ−グルクロン酸およびＮ−アセチルグルコサミンの二糖からなる多数の反復単位から構成された直鎖状グルコサミングリカンであり、結合組織、上皮組織および神経組織の全体に広く分布している。また、細胞外基質の主要成分の一つでもあるヒアルロン酸は、細胞の増殖および転位に多大な貢献を果たしており、またある種の悪性腫瘍の進行に深く関与する可能性もある。
【０００３】
ヒトの身体において、ヒアルロン酸はヒアルロン酸塩の形で生じ、皮膚、臍帯、および硝子体体液内に高濃度で検出される。平均的な体重７０ｋｇ（１５４ポンド）のヒトは、その身体内におよそ１５グラムのヒアルロン酸を有する。しかしながら、ヒアルロン酸がヒトの身体に含まれる量は、加齢により減少する傾向にある。そしてそれはほぼ毎日失われていく。したがって新生児は高レベルのヒアルロン酸含有量をもって産まれてくるが、２５歳になると６５パーセントのヒアルロン酸が残るのみであり、そして６０歳になるとわずか２５パーセントのヒアルロン酸しか残っていない。したがって、若い肌は柔軟で弾力があるが、ヒアルロン酸が失われていくにつれて、肌はその水分保持能力が低下していく。加齢に加えて、現代の人々は、過労、不規則な生活、バランスの悪い食事、紫外線、エアコンの効いたオフィスでの長時間労働などのさまざまな要因により、さらに肌の水分を失いやすくなっており、ヒアルロン酸の補給が必要になってきている。
【０００４】
最近の報告によれば、ヒアルロン酸は皮膚水和度を向上させ、皮膚内のコラーゲン生成を刺激し、抗酸化剤およびフリーラジカル消去剤として作用し、皮膚の弾力性を維持し、関節および神経組織への衝撃を吸収し、抗菌活性および抗炎症活性を有し、かつ眼の組織に流体を維持し、それが可能なさまざまな眼病を予防する助けになりうることが分かってきている。したがって、眼の中でＨＡが失われると、ドライアイや眼精疲労を生むことになる。また滑液の中でＨＡが失われると、関節の保護が少なくなることにもなる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ヒアルロン酸は、最も高い吸湿性、粘弾性、非抗原性、生分解性および生体適合性を有する。したがって、医療、化粧品、および特殊食物の分野においてさまざまな形で応用されている。ヒアルロン酸は、鶏冠から取られたものが商品として流通している。しかしながら、鶏冠から抽出され、食物に応用されたヒアルロン酸は、異種間の動物由来感染症を引き起こす懸念がある。また、消化器官を通した食物の摂取によるものでは、効能が低くなる。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
この課題を解決するために、本発明は、新規なプロバイオティクス菌株を提供する。そのプロバイオティクス菌株は、単離されたプロバイオティクス菌株であるストレプトコッカス・サーモフィラスであって、２０１３年１２月２日に、Inhoffenstr. 7B D-38124 Braunschweig にあるDeutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ) に受入番号DSM 28121で委託された。
【０００７】
ある実施の形態において、前記ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121は母乳から単離されたものである。
【０００８】
さらに本発明は、前記プロバイオティクス菌株の、ヒアルロン酸を生成する組成物の製造のための使用を提供する。
【０００９】
さらに本発明は、前記プロバイオティクス菌株を含有する、ヒアルロン酸を生成する組成物を提供する。
【００１０】
ある実施の形態において、前記ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121は、腸内において生存しコロニー形成することにより、その数を増大させる能力を有する。
【００１１】
ある実施の形態において、血中ヒアルロン酸含有量が増大する。
【００１２】
ある実施の形態において、前記ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121は活性または不活性である。
【００１３】
ある実施の形態において、前記組成物は、食料製品、健康食品サプリメント、医薬品またはスキンケア製品である。
【００１４】
ある実施の形態において、前記組成物は前記ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121の代謝物をさらに有する。
【００１５】
ある実施の形態において、皮膚水和度が向上し、ドライアイ、関節膨張、関節痛および硬直症の症状が改善する。
【００１６】
さらに本発明は、前記プロバイオティクス菌株又はその代謝物の、ヒアルロン酸を生成する食料製品、健康食品サプリメント、医薬品またはスキンケア製品の製造のための使用を提供する。
【発明の効果】
【００１７】
要約すると、本発明は、ヒトの母乳から単離されたプロバイオティクス菌株であるストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121を提供する。このプロバイオティクス菌株であるストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121は、胆汁酸塩耐性や胃酸耐性を有し、腸管内細胞吸着能力を有し、かつ腸管へと輸送されて良好な活性を維持する能力を有する。またこのプロバイオティクス菌株は、腸管内で増殖してその菌株数を増大させる能力も有し、アレルギー反応を阻害する効能、抗炎症効能、そしてリンパ球の活性を調節する効能も有する。なかでも最も重要な点は、本発明によるプロバイオティクス菌株は、腸管内でヒアルロン酸を生成するすぐれた効能を有し、投与後、ヒトの身体内におけるヒアルロン酸含有量を増強する能力を有する。したがって、本発明によるプロバイオティクス菌株あるいはその代謝物は、食料製品、健康食品サプリメント、医薬品またはスキンケア製品に適用可能であり、ヒアルロン酸を増強させ、ヒトの身体における皮膚、眼および関節の健康状態を改善する能力を有する。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】人工腸液内でそれぞれ異なる時間だけ培養したストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121により生成されるヒアルロン酸の含有量を示す図である。
【図２】人工腸液内でそれぞれ異なる時間だけ培養したストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121のコロニー数およびｐＨ値を示す図である。
【図３】ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121のカプセルを投与された複数の被検者（ｎ＝８）の、０日目と２８日目における血中ヒアルロン酸含有量を示す図である。
【図４】ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121のカプセルを投与された複数の被検者（ｎ＝８）の、０日目と２８日目における皮膚水和度を示す図である。
【図５】ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121のカプセルを投与された複数の被検者（ｎ＝８）のうち、２８日目にその両目に効果的な改善が見られた人々の比率を示す図である。
【図６】ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121のカプセルを投与された複数の被検者（ｎ＝８）の、０日目と２８日目におけるドライアイ症状を示す図である。
【図７】ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121のカプセルを投与された複数の被検者（ｎ＝５）のうち、７日目と２８日目において関節膨張、関節痛および硬直症の症状に効果的な改善が見られた人々の比率を示す図である。
【図８】ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121のカプセルを投与された複数の被検者（ｎ＝５）の、０日目と、７日目と２８日目における関節膨張、関節痛および硬直症の症状を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
特許を受けようとする発明の特徴を当業者がよく理解できるように、本発明の技術および上に述べた好ましい実施の形態を、以下に添付の図面を参照しながら詳しく説明する。
【００２０】
プロバイオティクス菌株は微生物であって、その細菌、交雑系統、抽出物または代謝物は宿主に好影響を及ぼし、ヒトの身体に由来するものは、さまざまな健康増進効果を及ぼす腸管内の生菌微生物であり、またヒト自身が、自らの健康増進のためにサプリメントとしてそのプロバイオティクス菌株を摂取することもできる。ここで、「プロバイオティクス菌株の代謝物」とは、その菌株の分泌物を指し、発酵後の培地もこれに含まれる。
【００２１】
本発明は、母乳から単離された細菌株を提供する。それは、浄化、培養、および同定を経た後、Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ) に受入番号DSM 28121で委託された新規なプロバイオティクス菌株である。腸管内にヒアルロン酸を生成する能力を有するこの菌株は、人工腸液の実験により発見された。その結果によれば、このプロバイオティクス菌株は、腸管の上皮細胞に吸着する能力を有しており、肌の弾力性を維持し、関節を潤滑し衝撃吸収する効能を有し、また、ヒトの身体においてヒアルロン酸を効果的に増強することを目的として、食料製品、健康食品サプリメント、医薬品またはスキンケア製品に製造され得る。
【００２２】
＜カルバゾール法を用いたヒアルロン酸の分析＞
分析するべき培地は、体積比４の９５パーセントエタノールで３回洗浄され、非糖成分を沈殿させる。次にその上清を体積比１の水に再び溶解させ、さらに分析する。ヒアルロン酸の含有量は、カルバゾール法により測定される(BitterおよびMuir, 1962, Anαl Biochem. 4:330-334)。まず硫酸を用いてヒアルロン酸を不安定なヘキスロン酸へと加水分解する。ヘキスロン酸は、カルバゾール試薬と反応してピンク色に発色する。Ｄ−グルクロン酸を標準として用いる。その標準の０．２５ｍＬ、試料およびブランクの溶液を氷の上の各管にそれぞれ加える。次に、０．９５％の四ホウ酸ナトリウムを含む１．５ｍＬの硫酸試薬をそれぞれの管にゆっくりと加え、よく混合する。次にそれらの管を移動させ、１０分間沸騰水浴させる。室温まで冷却した後、５０μＬのカルバゾール試薬をそれぞれの管に添加する。次にもう一度すべての管を５分間沸騰水浴させ、室温まで冷却させる。それぞれの反応物の光学濃度が波長５２５ｎｍで測定される。プロバイオティクス菌株１グラム当たりのヒアルロン酸含有量は、以下の式により計算される。
【００２３】
プロバイオティクス１グラム当たりのヒアルロン酸含有量＝（Ａｂｓ．−０．０７３）／０．００６）×１００）×２．０７）／（（２０／１００））
ここで略語および数値は以下のように表される。
【００２４】
Ａｂｓ．＝プロバイオティクスの吸光度
１００＝１００倍希釈
２．０７＝変換係数
２０／１００＝プロバイオティクス粉末の溶液に対する比
[実施例１  プロバイオティクス菌株の母乳からの単離]
ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121は、健康なヒトの母乳から単離される。新鮮な母乳試料の適切な希釈液をＭＲＳ−Ｃｙｓ寒天板上に広げ、lactobacilli spp. およびStreptococcus sppを単離する。これらの板を嫌気性の条件下に３７℃で４８時間インキュベートした。インキュベーションおよび計数の後、寒天板から５〜１０個の単離物が選択された。それらの単離物は、各タイプのコロニー形態について少なくとも一つはそれを表すサンプルを含んでいた。それらの単離物を光学顕微鏡により観察し、それらの形態およびグラム染色を特定した。
【００２５】
[実施例２  細菌株のスクリーニング]
（２．１  生化学的同定）
細菌を分類するためにグラム染色法を用いた。グラム染色法では、まず細菌検体をクリスタルバイオレットに染色し、次にヨウ素溶液で処理した後、アルコールで脱色し、そしてサフラニンで対比染色される。
【００２６】
（２．２  分子的同定）
同一の細菌種では、１６Ｓ  ｒＤＮＡ配列にはほとんど違いが無い。なぜなら、個別の微生物種はそれぞれ独自のＤＮＡ配列を有しているからである。したがって、本発明では、１６Ｓ  ｒＤＮＡを細菌種の同定に用いる。
【００２７】
本発明では、単離した細菌種を、広範囲１６Ｓ  ｒＤＮＡポリメラーゼ連鎖反応 (Simo Nikkari, Fred A. Lopezら, Emerging Infectious Disease Journal 2002, 8, 188-194)により同定する。単離した細菌コロニーを採取し、ＴＡＣＯＴＭ全ＤＮＡ抽出キット (GeneReach, Taiwan)を用いてＤＮＡを抽出した。細菌の１６Ｓ  ｒＤＮＡ配列は、ＰＣＲ法により汎用のプライマーを以下のように用いて分析した。すなわち、fD1mod (5´-AGAGTTTGATCYTGGYTYAG-3´, SEQ ID NO:1)および16S1RR-B (5´-CTTTACGCCCARTRAWTCCG-3´, SEQ ID NO:2)、63F (5´-CAGGCCTAACACATGCAAGTC-3´, SEQ ID NO:3)および16S1RR-B (5´-CTTTACGCCCARTRAWTCCG-3´, SEQ ID NO:2)、8F2 (5´-TGGAGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3´, SEQ ID NO:4)および806R (5´-GGACTACCAGGGTATCTAAT-3´, SEQ ID NO:5)、ならびに 515F (5´-GTGCCAGCAGCCGCGGTAA-3´, SEQ ID NO:6)および13R (5´-AGGCCCGGGAACGTATTCAC-3´, SEQ ID NO:7)。これらのプライマーに基づく反応は、各プライマーを２０ｐｍｏｌずつ合計５０μＬ中に有していたのみならず、１０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ  ８．３、５０ｍＭのＫＣｌ、１．５ｍＭのＭｇＣｌ２、それぞれ２００μＭのデオキシヌクレオシド三リン酸、２．５Ｕ  ＡｍｐｌｉＴａｑ  ＬＤ  ＤＮＡポリメラーゼ(PE Biosystems, Foster City, CA)および５−μＬのテンプレートを有していた。ＧｅｎｅＡｍｐ  ＰＣＲシステム２４００サーマルサイクラ―(PE Biosystems)を用いて、９４℃で３分間変性工程を行った後、ＰＣＲ工程を９４℃で３０秒間、５６℃で３０秒間、７２℃で３０秒間、３０〜３６回繰り返し行い、その後、伸長工程を７２℃で７分間行った。生成物は、アガロースゲル電気泳動と、臭化エチジウムを用いたＤＮＡ染色法と、により検出された。次に、ＰＣＲの生成物は、ＴＡまたはＴＯＰＯクローニングシステム(INVITROGEN, USA)を用いて、クローニングの後のみならず、直接にも配列決定された。自動化ＡＢＩ  ＰＲＩＳＭ  ３７３または３７７ＤＮＡ配列決定装置(INVITROGEN, USA)およびＡＢＩ  ＰＲＩＳＭＴＭ  ＢｉｇＤｙｅＴＭターミネーターサイクル配列決定準備反応キット(INVITROGEN,USA)を用いてＤＮＡ配列を決定した。ＡｕｔｏＡｓｓｅｍｂｌｅｒ(INVITROGEN, USA)を用いて、両方のＤＮＡ鎖を分析し、かつ電気泳動図の手動による見直しを含む塩基編集を行った。１６Ｓ  ｒＤＮＡ配列は、ＢＬＡＳＴサーチツールを用いることにより、ＧｅｎＢａｎｋのデータベースの配列と比較された。これにより、この菌株は、２０１３年１２月２日に、Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ) に受入番号DSM 28121で委託されたストレプトコッカス・サーモフィラス（SEQ ID NO:8）であると確認された。
【００２８】
ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121のグリセロール保存物は、ＭＲＳブロスへと（１％、ｖ／ｖ）で播種され、１６〜２４時間培養した後、５％（ｖ／ｖ）の播種率で下記培地へと転移された。培地は、２０〜６０ｇ／Ｌのグルコース、５〜３０ｇ／Ｌのショ糖、１０〜２０ｇ／Ｌの酵母抽出物、５〜１０ｇ／Ｌのペプトン、２．５〜８ｇ／ＬのＫ２ＨＰＯ４、１〜２ｇ／ＬのＮａＣｌおよび０．５〜１．２ｇ／ＬのＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏに含んでいた。培養液は、さらなる分析の前に、３７℃で４８時間インキュベートされた。
【００２９】
[実施例３  人工腸液（Artificial intestinal solution(AIS)）調節（in vitro）]
人工腸液（ＡＩＳ）は、Hasjimら(Jovin Hasjim, Gautier Cesbron Lacau ら, Biomacromolecules 2010, 11, 3600-3608)により提案された処方に基づき、一部修正を加えながら作成される。この実施の形態では、人工腸液は消化酵素を含んでおり、その消化酵素は、８ｍｇ／ｍＬのパンクレアチン、１３Ｕ／ｍＬのａ−アミラーゼ、および１．１２Ｕ／ｍＬのアミログルコシダーゼを含み、それらが０．２Ｍの酢酸緩衝液（０．４９ｍＭ  ＭｇＣｌ２，２００ｍＭ  ＣａＣｌ２，ｐＨ６．０）に添加されることにより人工腸液を構成する。次に滅菌化されたＭＲＳブロスがＡＩＳに添加される。これにより、腸内の細菌成長用の栄養分としての一般的な食品摂取を模倣する。ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121の播種は、人工腸管の環境を生むためにヒトの体温である３７℃で行われる。細菌の成長とＨＡの生成を監視するために、培地はさまざまな時点で採取される。細胞培養液の成長は、従来の平板菌数測定法を用いて測定される。培養液は、さまざまな時点で採取され、希釈され、そしてコロニー計数のため、ＭＲＳ寒天板へと移される。図１に示すように、ＡＩＳにおけるストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121によるＨＡ生成は、播種後、２４時間で最高値に達し、コロニーの個数も同時に最大となる。図２に示すように、ｐＨの減少は、酸を生成するプロバイオティクスの成長を示しており、そしてその成長は、ＡＩＳにおける培養液から得られた平板菌数に基づき表される。
【００３０】
本発明においては、母乳から単離されたプロバイオティクス菌株であるストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121は、ヒアルロン酸を生成する能力を有する。前記カバゾール法により同定された、ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121の１グラムあたりのヒアルロン酸収量は、７２．７４ｍｇである。
【００３１】
[実施例４  臨床治験（ｉｎ  ｖｉｖｏ）]
母乳から取られたストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121の皮膚、眼、および関節の健康状態、ならびに血中のＨＡ含有量に及ぼす効能を評価する。
【００３２】
（４．１  血液および皮膚におけるヒアルロン酸含有量への影響）
臨床治験が２５歳〜４０歳の８人の被検者（ｎ＝８）に対して行われた。これらの被検者には、２８日間のあいだ、１日に二回（朝と夕方）、１カプセルあたり１０３ＣＦＵから１０１２ＣＦＵの投与量でストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121のカプセルが数個投与された。一方、コントロール群の３人の被検者たち（ｎ＝３）は、ストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121を含有しないカプセルを一日に数個経口摂取した。
【００３３】
血中ＨＡレベルは、０日目と２８日目にヒトヒアルロン酸（ＨＡ）ＥＬＩＳＡキット(CUSABIO CSB-E04805h, China)を用いて測定した。予めコーティングした板に対して、各ウェルにつき、１００μＬの標準および試料が加えられ、接着性ストリップで蓋をした。次に板は３７℃で２時間インキュベートされ、各ウェルの液体が除去された。それぞれのウェルに対して、１００μＬのビオチン抗体（１ｘ）が添加され、新しい接着性ストリップで蓋をした後、３７℃で１時間インキュベートした。その後、各ウェルは吸引され、洗浄緩衝液で３回洗浄された後、２分間静置された。各ウェルに対して、１００μＬのＨＲＰアビジン（１ｘ）が添加され、新しい接着性ストリップで蓋をした後、３７℃で１時間インキュベートした。この吸引／洗浄プロセスを５回繰り返す。９０ｍＬのＴＭＢ基質が各ウェルに添加された後、３７℃で１５〜３０分間、光源無しでインキュベートした。この反応を終了させるために、５０μＬの停止液が各ウェルに追加され、分光光度計を４５０ｎｍで用いて、光学濃度が５分以内に測定された。
【００３４】
ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121のカプセルを２８日間経口摂取した後では、図３に示すように、平均ＨＡ濃度は、０日目の濃度に比べて１０．２％増加し、２８日目のコントロール群の濃度と比べても７．３％高かった。被検者たちのうち、ＨＡの含有量が効果的に向上した人々の比率は、５/８であった。ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121のカプセルが投与された被検者たちの血中ヒアルロン酸濃度は、大幅に増加した。
【００３５】
ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121のカプセルを２８日間経口摂取した後、皮膚水和度をスキンアナライザー(DERMALAB COMBO, CORTEX TECHNOLOGIES, Denmark)を用いて測定した。図４に示すように、皮膚水和度は、２８日目のコントロール群の水和度と比べて８．０％増加した。被検者たちのうち、皮膚水和度が効果的に向上した人々の比率は、６/８であった。ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121のカプセルが投与された被検者たちの皮膚水和度も、大幅に増加した。
【００３６】
（４．２  眼への影響）
臨床治験が２５歳〜４０歳の８人の被検者（ｎ＝８）に対して行われた。これらの被検者には、２８日間のあいだ、１日に二回（朝と夕方）、１カプセルあたり１０３ＣＦＵから１０１２ＣＦＵの投与量でストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121のカプセルが数個投与された。
【００３７】
ドライアイへの影響が、この治験の０日目と２８日目においてアンケートの形で調査された。図５に示すように、ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121のカプセルを２８日間経口摂取した後、効果的な症状改善を感じた被検者は、６３％であった。図６に示すように、ドライアイを感じる頻度は、２８日間の摂取の後には明らかに減少した。ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121のカプセルを投与された被検者たちのドライアイおよび眼精疲労の症状は改善した。
【００３８】
（４．３  関節への影響）
臨床治験が２５歳〜４０歳の５人の被検者（ｎ＝５）に対して行われた。これらの被検者には、７日間と２８日間のあいだ、１日に二回（朝と夕方）、１カプセルあたり１０３ＣＦＵから１０１２ＣＦＵの投与量でストレプトコッカス・サーモフィラスDSM 28121のカプセルが数個投与された。
【００３９】
図７に示すように、アンケートによれば、ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121のカプセルを７日間と２８日間経口摂取した後、関節膨張、関節痛および硬直症の症状は明らかに軽減された。図８に示すように、治験の７日目において、関節膨張、関節痛および硬直症の症状改善率は、それぞれ８０％、１００％および８０％であった。この効果は、治験の２８日目まで持続し、その日には症状改善率はすべて１００％に達していた。経口摂取の時間が長くなるにつれて、関節膨張、関節痛および硬直症の発生頻度は明らかに減少した。
【００４０】
また、ある実施の形態では、組成物は、本発明のヒアルロン酸を生成するストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121を有する。このストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121は活性であっても、不活性であっても良い。また、ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121あるいはその代謝物を有する組成物は、各種食料製品、健康食品サプリメント、医薬品またはスキンケア製品内に製造され得る。ある実施の形態では、ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121は、スキンケア製品の材料として用いられ得る。ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121の発酵により生成された代謝物は、水相添加物を用いて均質化され得る。そして乳化剤を添加することにより、よく混合され、ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121を十分に活用した均一な成形製剤が形成され、その安定性が保護され、増強されることになる。ストレプトコッカス・サーモフィラス DSM 28121は、ローションやクリームなどのその用途に応じて多種多様な処方で製造され得るが、特定の処方に限定されるわけではない。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
要約すると、本発明のプロバイオティクス菌株は、胆汁酸塩耐性や胃酸耐性を有し、腸管内細胞吸着能力を有し、かつ腸管へと輸送されて良好な活性を維持するばかりか、腸管内で増殖してその菌株数を増大させる能力や、腸管内でヒアルロン酸を生成するすぐれた効能をも有し、ヒアルロン酸を効果的に増強させ、ヒトの身体における皮膚、眼および関節の健康状態を改善することを目的として、食料製品、健康食品サプリメント、医薬品またはスキンケア製品に製造され得る。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【配列表】
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