(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
［ｉ］ＣｅｎｄＲエレメントを含むアミノ酸配列からなるペプチドまたはタンパク質を含むＣｅｎｄＲ組成物、ならびに、［ｉｉ］共組成物とを含む組み合わせ物であって、ここで、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組み合わせ物であって、ここで、該ＣｅｎｄＲエレメントがアミノ酸配列Ｒ／Ｋ／ＨＸＸＲ／Ｋ／Ｈを含み、
該ＣｅｎｄＲエレメントは、該ペプチドまたはタンパク質のＣ末端に存在し、かつ、ＲＲＲＲ、ＲＨＲＲ、ＫＷＫＫ、ＲＬＬＲおよびＫＰＲＲを含まないか、または、
該ＣｅｎｄＲエレメントは、プロテアーゼによる該ペプチドまたはタンパク質の切断後に該ペプチドまたはタンパク質のＣ末端に露出され、
該ＣｅｎｄＲエレメントはニューロピリン−１に結合し、そして
該ＣｅｎｄＲエレメントは、該ＣｅｎｄＲエレメントが存在しない場合の該共組成物の細胞内部移行、浸透または両方と比較した場合に、該共組成物の細胞内部移行、浸透または両方を増加させる、組み合わせ物。
【請求項２】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、ＲＸＸＫ／Ｈ、ＫＸＸＲ／Ｈ、ＨＸＸＲ／Ｋ／Ｈ、Ｋ／ＨＸＸＲ、Ｒ／ＨＸＸＫ、および、Ｒ／Ｋ／ＨＸＸＨ、からなる群から選択されるアミノ酸配列のいずれか１つからなる、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項３】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、アミノ酸配列Ｒ／Ｋ／ＨＸ２Ｘ３Ｒ／Ｋ／Ｈからなり、ここで、Ｘ２Ｘ３は、ＲＲ、ＷＫ、およびＲＬを除く、アミノ酸の任意の組み合わせである、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項４】
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、１つ以上のアクセサリー分子と会合し、
ここで、該アクセサリー分子の少なくとも１つが、ＲＧＤペプチド、ｉＲＧＤ、Ｌｙｐ−１ペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、またはこれらの組み合わせを含み、
ここで、該アクセサリー分子の１つ以上が、独立して、ホーミング分子、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性ペプチド、エンドソーム脱出分子、細胞内ターゲティング分子、核ターゲティング分子、またはこれらの組み合わせである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項５】
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、複数のアクセサリー分子と会合している、請求項４に記載の組み合わせ物。
【請求項６】
前記アクセサリー分子の少なくとも１つが、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする、請求項４または５に記載の組み合わせ物。
【請求項７】
前記アクセサリー分子の少なくとも１つが、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしない、請求項４〜６のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項８】
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、脳細胞、脳組織もしくは両方、腎細胞、腎組織もしくは両方、皮膚細胞および腱細胞、皮膚組織および腱組織もしくは両方、肺細胞、肺組織もしくは両方、膵細胞、膵組織もしくは両方、腸細胞、腸組織もしくは両方、副腎細胞、副腎組織もしくは両方、網膜細胞、網膜組織もしくは両方、肝細胞、肝組織もしくは両方、前立腺細胞、前立腺組織もしくは両方、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織もしくは両方、卵巣細胞、卵巣組織もしくは両方、心臓細胞、心臓組織もしくは両方、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管、または組み合わせに選択的にホーミングする、請求項４〜７のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項９】
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、プロテアーゼによる前記ペプチドまたはタンパク質の切断後に該ペプチドまたはタンパク質のＣ末端に露出される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項１０】
前記プロテアーゼが、セリンプロテアーゼ、プラスミン、プラスミノゲンアクチベータ、ウロキナーゼ、プロタンパク質転換酵素、フーリン、カルボキシペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼＡ、グルタミン酸特異的カルボキシペプチダーゼ、プロリン特異的カルボキシペプチダーゼ、ＰＳＭＡ、またはこれらの組み合わせである、請求項９に記載の組み合わせ物。
【請求項１１】
前記共組成物が、治療薬を含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項１２】
前記共組成物が、検出剤を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項１３】
前記共組成物が、キャリア、ビヒクルまたは両方を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項１４】
前記共組成物が、治療用タンパク質、治療用化合物、治療用組成物、癌化学療法薬、毒素、細胞傷害剤、抗炎症薬、抗関節炎薬、成長因子、サイトカイン、ケモカイン、１つ以上のシグナル伝達経路を調節する化合物、抗体、核酸、核酸類似体、細胞、ウイルス、ファージ、ウイルス粒子、ファージ粒子、ウイルスカプシド、ファージカプシド、ウイルス様粒子、リポソーム、ミセル、ビーズ、ナノ粒子、マイクロ粒子、化学療法薬、造影剤、イメージング剤、標識、標識剤、抗脈管形成薬、脈管形成促進薬、および、これらの組み合わせからなる群から選択される１つ以上の因子を含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項１５】
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、タンパク質またはペプチドに含まれる、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項１６】
前記タンパク質またはペプチドが、請求項１〜３のいずれか一項に記載の前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには、細胞内に内部移行することができ、組織に浸透することができ、または両方できるが、請求項１〜３のいずれか一項に記載の該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない、請求項１５に記載の組み合わせ物。
【請求項１７】
前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドの唯一の機能性内部移行エレメントである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項１８】
前記タンパク質またはペプチドが、環状であるか、または、前記ＣｅｎｄＲエレメントが、該タンパク質またはペプチドのＣ末端にある、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項１９】
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の内部移行、浸透または両方が、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強されるが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強されない、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項２０】
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の前記内部移行、浸透または両方が、前記ＣｅｎｄＲエレメントが前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強されるが、前記アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強されない、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項２１】
細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物の前記内部移行および浸透が、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強されるが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強されない、請求項１６〜２０のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項２２】
前記ＣｅｎｄＲ組成物が、さらに１つ以上のホーミング分子を含む、請求項２１に記載の組み合わせ物。
【請求項２３】
さらに、複数のアクセサリー分子、複数のＣｅｎｄＲエレメント、複数の共組成物、および、これらの組み合わせからなる群から選択されるいずれか一つを含む、請求項４〜２１のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【請求項２４】
共組成物の、細胞、組織もしくは両方の中への、または細胞、組織もしくは両方を通っての内部移行、浸透または両方の増強における使用のための、請求項１〜１４、２２および２３のいずれか一項に記載の組み合わせ物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
本願は、２００９年６月２２日に出願された米国仮特許出願第６１／２１９，０８６号、２００９年１０月６日に出願された米国仮特許出願第６１／２４９，１４０号の利益を主張する。２００９年６月２２日に出願された米国仮特許出願第６１／２１９，０８６号、および２００９年１０月６日に出願された米国仮特許出願第６１／２４９，１４０号は、その全体が、本明細書中に参考として援用される。
【０００２】
政府支援の研究に関する陳述
本発明は、国立衛生研究所（ＮＩＨ）の国立癌研究所（ＮＩＣ）からの、助成金ＣＡ１０４８９８、ＣＡ１１９４１４、ＣＡ１１９３３５、ＣＡ１２４４２７、ＣＡ１１５４１０、および３０１９９、ならびに国防総省（ＤｏＤ）からの助成金ＢＣ０７６０５０の下、政府支援により成された。政府は本発明に特定の権利を有する。
【０００３】
発明の分野
本発明は、一般には分子医学の分野に関し、さらに具体的には細胞および組織浸透性ペプチドに関する。
【背景技術】
【０００４】
細胞内に内部移行するペプチドは、一般に、細胞浸透性ペプチドと呼ばれる。そのようなペプチドには２つの主要クラスがある：疎水性ペプチドおよびカチオン性ペプチド（ＺｏｒｋｏおよびＬａｎｇｅｌ、２００５）。前記カチオン性ペプチドは、細胞内に核酸、タンパク質を導入するために一般に使用され、それらとしては、原型細胞浸透性ペプチド（ＣＰＰ）、Ｔａｔおよびペネトラチンが挙げられる。（Ｄｅｒｏｓｓｉら、１９９８；ＭｅａｄｅおよびＤｏｗｄｙ、２００７）。ヘルペスウイルスタンパク質、ＶＰ２２、は、細胞に侵入することも細胞から退出することもでき、およびそれと共にペイロードを運搬することができる（ＥｌｌｉｏｔｔおよびＯ’Ｈａｒｅ、１９９７；Ｂｒｅｗｉｓら、２００３）。送達ビヒクルとしてのこれらのペプチドの大きな制約は、選択的でないことである；これらは、すべての細胞に侵入する。１つの細胞型または組織に対してより特異的である、活性化可能な送達システムを使用することができる。
【０００５】
組織浸透は、細胞への組成物の送達に関する重大な制約である。フルオレセイン標識ペプチドの分布と同ペプチドで被覆された酸化鉄粒子の分布との比較は、それらの粒子が、腫瘍血管の近くに留まるが、フルオレセインペプチドは、腫瘍のすべての領域に到達することを示す。度々言及される腫瘍血管の「漏出性」は、この問題を実質的に軽減するようには見えない。さらに、腫瘍血管系の「正常化」を生じさせる抗脈管形成処置（Ｊａｉｎ、２００５）は、血管系が漏出性でない腫瘍をターゲットにする必要を生じさせる。従って、血管外空間内への様々な組成物の通行を改善する新たな方法を見つけることが重要である。血液脳関門をはじめとする血管の内皮を通り抜けて転位する多数のタンパク質が公知である。主な例は、トランスフェリンであり、これは、トランスフェリン受容体により血液脳関門を横断して輸送される。このシステムは、他のペイロードを脳に運ぶために用いられている（Ｌｉら、２００２；ＦｅｎａｒｔおよびＣｅｃｃｈｅｌｌｉ、２００３）。循環から組織内への組成物の転位を媒介することができる内皮トランスサイトーシスのペプチドシグナルは有用である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
このように、様々なタイプの細胞の選択的ターゲティングのための、ならびにそれらの細胞内へのタンパク質およびペプチドの内部移行ならびにタンパク質およびペプチドによる組織の浸透のための、新たな治療戦略が必要とされている。細胞および組織へのおよび細胞および組織内への化合物および組成物の送達を増加させることも必要とされている。本発明は、様々なタイプの細胞により選択的にターゲティングされ、選択的に内部移行され得る、ならびに／または組織に浸透し得るペプチドを提供することにより、これらの必要を満たす。関連する利点も提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法を開示し、該方法は、細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、この場合、該細胞、組織または両方を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【０００８】
細胞内へ共組成物の内部移行を増強する方法も開示し、該方法は、細胞をＣｅｎｄＲエレメントおよび共組成物に曝露し、それによって該細胞内への該共組成物の内部移行を増強する工程を含み、この場合、該細胞を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【０００９】
組織内へのおよび組織を通っての共組成物の浸透を増強する方法を開示し、該方法は、該組織をＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物に曝露し、それによって該組織内へのおよび該組織を通っての該共組成物の浸透を増強する工程を含み、この場合、該組織を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【００１０】
ＣｅｎｄＲエレメントと共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。タンパク質またはペプチドと共組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドが、ＣｅｎｄＲエレメントおよびアクセサリーペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。タンパク質またはペプチドと共組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドが、アミノ酸配列を含み、該アミノ酸配列が、ＣｅｎｄＲエレメントおよびアクセサリーペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。ＣｅｎｄＲエレメントとアクセサリー分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しておらず、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該アクセサリー分子が、互いに共有結合でカップリングしているかまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。これらの組成物において、前記アクセサリーペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があるか、または前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。
【００１１】
有用なアクセサリー分子の例としては、ホーミング分子、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性分子、エンドソーム脱出分子、非細胞ターゲティング分子、核ターゲティング分子が挙げられる。異なるアクセサリー分子が、互いに類似した機能を有する場合があり、互いに異なる機能を有する場合もある。類似した機能を有するアクセサリー分子、異なる機能を有するアクセサリー分子または両方が、ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質および／またはＣｅｎｄＲペプチドと会合している場合がある。
【００１２】
タンパク質またはペプチドと共組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドが、ＣｅｎｄＲエレメントおよびホーミングペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。タンパク質またはペプチドと共組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドが、アミノ酸配列を含み、該アミノ酸配列が、ＣｅｎｄＲエレメントおよびホーミングペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合もしていない組成物も開示する。ＣｅｎｄＲエレメントとホーミング分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該ホーミング分子が、互いに共有結合でカップリングしているか非共有結合で会合している組成物も開示する。これらの組成物において、前記ホーミングペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があるか、または前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通ってのカーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法も開示し、該方法は、細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲエレメントおよびカーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングしているかまたは共有結合で会合している。
【００１３】
細胞内へのカーゴ組成物の内部移行を増強する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞内への該カーゴ組成物の内部移行を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングしているかまたは共有結合で会合している。
【００１４】
組織内へのおよび組織を通ってのカーゴ組成物の浸透を増強する方法を開示し、該方法は、該組織をＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該組織内へのおよび該組織を通っての該カーゴ組成物の浸透を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
【００１５】
ＣｅｎｄＲエレメントおよびカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングしているかまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。タンパク質またはペプチドとカーゴ組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドが、ＣｅｎｄＲエレメントおよびアクセサリーペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が、互いに共有結合でカップリングしているかまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。タンパク質またはペプチドとカーゴ組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドが、アミノ酸配列を含み、該アミノ酸配列が、ＣｅｎｄＲエレメントおよびアクセサリーペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントと該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングしているかまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲエレメントとアクセサリー分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が、互いに共有結合でカップリングしているかまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該アクセサリー分子が、互いに共有結合でカップリングしているかまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。これらの組成物において、前記アクセサリーペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があるか、または前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。
【００１６】
タンパク質またはペプチドとカーゴ組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドが、ＣｅｎｄＲエレメントおよびホーミングペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が、互いに共有結合でカップリングしているかまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。タンパク質またはペプチドとカーゴ組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドが、アミノ酸配列を含み、該アミノ酸配列が、ＣｅｎｄＲエレメントおよびホーミングペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が、互いに共有結合でカップリングしているかまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲエレメントとホーミング分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が、互いに共有結合でカップリングしているかまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該ホーミング分子が、互いに共有結合でカップリングしているかまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。これらの組成物において、前記ホーミングペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があるか、または前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。
【００１７】
幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントである。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントである。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントでない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントでない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントであり、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントではない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントであり、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントではない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントまたはタイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントである。
【００１８】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記細胞、組織または両方の透過性を上げることができる。前記細胞、組織または両方が、被験体内にあることもある。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物に曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を前記被験体に同時に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を、該ＣｅｎｄＲエレメントと該共組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を別々の経路により前記被験体に投与することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物は、互いに結合していない。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を前記ＣｅｎｄＲエレメントおよびカーゴ組成物に曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に同時に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物を、該ＣｅｎｄＲエレメントと該カーゴ組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。
複数の異なるＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、または組み合わせを一緒に使用することができる。同様に、複数の異なる共組成物、複数の異なるカーゴ組成物、または組み合わせを一緒に使用することができる。そのような複数の異なるＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、または組み合わせを一緒に使用する場合、それらを単一タイプの共組成物、単一タイプのカーゴ組成物、複数の異なる共組成物、複数の異なるカーゴ組成物、または組み合わせと共に使用することができる。同様に、複数の異なる共組成物、複数の異なるカーゴ組成物、または組み合わせを一緒に使用するとき、それらを単一タイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲコンジュゲートもしくはＣｅｎｄＲ組成物と共に、または複数の異なるＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物もしくは組み合わせと共に使用することができる。
【００１９】
例えば、（ＣｅｎｄＲエレメントおよびＲＧＤエレメントを単一ペプチドに併有する）ｉＲＧＤを、１つのもしくは複数の異なるＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、もしくは組み合わせ、１つのもしくは複数の異なる共組成物、複数の異なるカーゴ組成物、もしくは組み合わせ、またはこれらの任意の組み合わせと一緒に使用することができる。そのような組み合わせの場合、前記ｉＲＧＤそれ自体が、同じコンジュゲートまたは組成物内に、１つ以上のカーゴ組成物、１つ以上のアクセサリー分子、１つ以上のホーミング分子などと共に併有される場合がある。
【００２０】
前記細胞、組織または両方を異なるＣｅｎｄＲ成分の組み合わせおよび異なる共組成物の組み合わせに、該ＣｅｎｄＲ成分および該共組成物を前記被験体に投与することにより、曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記共組成物の１つ以上を同時に前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記共組成物の１つ以上を、該ＣｅｎｄＲ成分（単数または複数）と該共組成物（単数または複数）を含む１つ以上の単一組成物で、前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記共組成物の１つ以上を、１つ以上の別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記共組成物の１つ以上を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を、１つ以上の別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記共組成物の１つ以上を、１つ以上の別々の経路により、前記被験体に投与することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物は、互いに結合していない。
【００２１】
前記細胞、組織または両方を異なるＣｅｎｄＲ成分の組み合わせおよび異なるカーゴ組成物の組み合わせに、該ＣｅｎｄＲ成分および該カーゴ組成物を前記被験体に投与することにより、曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記カーゴ組成物の１つ以上を同時に前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記カーゴ組成物の１つ以上を、該ＣｅｎｄＲ成分（単数または複数）と該カーゴ組成物（単数または複数）を含む１つ以上の単一組成物で、前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記カーゴ組成物の１つ以上を、１つ以上の別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記カーゴ組成物の１つ以上を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物を、１つ以上の別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記カーゴ組成物の１つ以上を、１つ以上の別々の経路により、前記被験体に投与することができる。
【００２２】
ｉＲＧＤおよび前記共組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ｉＲＧＤおよび該共組成物に曝露することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を同時に前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を、該ｉＲＧＤと該共組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を別々の経路により前記被験体に投与することができる。幾つかの形態において、前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物は、互いに結合していない。前記ｉＲＧＤおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ｉＲＧＤおよび該カーゴ組成物に曝露することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記カーゴ組成物を同時に前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記カーゴ組成物を、該ｉＲＧＤと該カーゴ組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。
【００２３】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タンパク質またはペプチドのアミノ酸配列に含まれている場合がある。幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには、細胞内に内部移行することができ、組織に浸透することができ、または両方できるが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することができず、組織に浸透することができず、または両方できない。幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには組織に浸透することができるが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには組織に浸透することができない。幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができるが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができない。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することができるか、組織に浸透することできるか、または両方できる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記共組成物と会合していずに、組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記タンパク質またはペプチドの唯一の機能性内部移行エレメントである。
【００２４】
幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の内部移行、浸透または両方は、該細胞、組織もしくは両方が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞、組織もしくは両方が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物の浸透は、該組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物の内部移行および浸透は、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の内部移行、浸透または両方は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。幾つかの形態において、組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物の浸透は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物の内部移行および浸透は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。
【００２５】
幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方は、該細胞、組織もしくは両方が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞、組織もしくは両方が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、組織内へのまたは組織を通っての前記カーゴ組成物の浸透は、該組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記カーゴ組成物の内部移行および浸透は、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。幾つかの形態において、組織内へのまたは組織を通っての前記カーゴ組成物の浸透は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記カーゴ組成物の内部移行および浸透は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。
【００２６】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、環状である場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、線状である場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある場合がある。前記共組成物および／またはカーゴ組成物は、治療薬を含む場合がある。前記共組成物および／またはカーゴ組成物は、検出剤を含むことがある。前記共組成物および／またはカーゴ組成物は、キャリア、ビヒクルまたは両方を含む場合がある。前記共組成物および／またはカーゴ組成物は、治療用タンパク質、治療用化合物、治療用組成物、抗脈管形成薬、脈管形成促進薬、癌化学療法薬、毒素、細胞傷害剤、抗炎症薬、抗関節炎薬、成長因子、サイトカイン、ケモカイン、１つ以上のシグナル伝達経路を調節する化合物、抗体、核酸、核酸類似体、細胞、ウイルス、ファージ、ウイルス粒子、ファージ粒子、ウイルスカプシド、ファージカプシド、ウイルス様粒子、リポソーム、ミセル、ビーズ、ナノ粒子、マイクロ粒子、化学療法薬、造影剤、イメージング剤、標識、標識化剤、または組み合わせを含む場合がある。
【００２７】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。例えば、アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントを含む、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチドの一部である場合がある。もう１つの例として、前記アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントと、または該ＣｅｎｄＲエレメントを含むアミノ酸配列、タンパク質もしくはペプチドと、共有結合でカップリングしているかまたは非共有結合で会合している場合がある。前記アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合があるか、または該ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合がある。例えば、幾つかのアクセサリー分子は、アミノ酸配列である。これは、前記ＣｅｎｄＲエレメントから成るアミノ酸配列を前記アクセサリーアミノ酸配列から成るアミノ酸配列とオーバーラップさせることを可能にする。例えば、ｉＲＧＤ、ＬｙＰ−１、ｉＮＧＲおよびＲＧＲペプチドそれぞれが、互いにオーバーラップするアクセサリー配列とＣｅｎｄＲ配列の両方を該ペプチドに含有する。あるいは、前記アクセサリーペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしない独立した単位である場合がある。例えば、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチドまたはＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）は、ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしないアミノ酸配列から成り得る。幾つかの形態において、前記アクセサリー分子は、例えば、前記ＣｅｎｄＲエレメントの受容体とは異なる特定の受容体に結合するＣｅｎｄＲペプチド内の配列を含む場合がある。
【００２８】
前記アミノ酸配列は、１つ以上のアクセサリーペプチドを含む場合がある。例えば、前記アミノ酸配列は、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上のアクセサリーペプチドを含む場合がある。例えば、前記アミノ酸配列は、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。
【００２９】
幾つかの形態において、前記共組成物は、アクセサリー分子を含まない。前記共組成物は、１つ以上のアクセサリー分子を含むことができる。幾つかの形態において、前記共組成物は、アクセサリーペプチドを含まない。前記共組成物は、１つ以上のアクセサリーペプチドを含むことができる。前記共組成物は、腫瘍に選択的にホーミングする。幾つかの形態において、前記共組成物は、腫瘍血管系に選択的にホーミングしない。前記共組成物は、腫瘍血管系に選択的にホーミングすることができる。幾つかの形態において、前記カーゴ組成物は、アクセサリー分子を含まない。前記カーゴ組成物は、１つ以上のアクセサリー分子を含むことができる。幾つかの形態において、前記カーゴ組成物は、アクセサリーペプチドを含まない。前記カーゴ組成物は、１つ以上のアクセサリーペプチドを含むことができる。前記カーゴ組成物は、腫瘍に選択的にホーミングすることができる。幾つかの形態において、前記カーゴ組成物は、腫瘍血管系に選択的にホーミングしない。前記カーゴ組成物は、腫瘍血管系に選択的にホーミングすることができる。
【００３０】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、１つ以上のホーミング分子と会合している場合がある。例えば、ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントを含むアミノ酸配列、タンパク質またはペプチドの一部である場合がある。もう１つの例として、前記ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントと、または該ＣｅｎｄＲエレメントを含むアミノ酸配列、タンパク質もしくはペプチドと、共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。前記ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合があるか、または前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合がある。例えば、幾つかのホーミング分子は、アミノ酸配列である。これは、前記ＣｅｎｄＲエレメントから成るアミノ酸配列をホーミングアミノ酸配列から成るアミノ酸配列とオーバーラップさせる場合がある。例えば、ｉＲＧＤ、ＬｙＰ−１、ｉＮＧＲおよびＲＧＲペプチドそれぞれが、互いにオーバーラップするホーミング配列とＣｅｎｄＲ配列の両方を該ペプチドに含有する。あるいは、前記ホーミングペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしない独立した単位である場合がある。例えば、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチドまたはＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）は、ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしないアミノ酸配列から成り得る。幾つかの形態において、前記ホーミング分子は、例えば、ＣｅｎｄＲエレメントの受容体とは異なる特定の受容体に結合するＣｅｎｄＲペプチド内の配列を含む場合がある。
【００３１】
多くのホーミング分子およびホーミングペプチドが、標的組織の血管系にホーミングする。しかし、便宜上、ホーミングを、本明細書中の幾つかの箇所では、ホーミング分子またはホーミングペプチドが実際にホーミングすることができる血管系と会合している組織へのホーミングとして言及する。従って、例えば、腫瘍血管系にホーミングするホーミングペプチドを、本明細書では、腫瘍組織または腫瘍細胞へのホーミングとして言及する場合がある。ホーミング分子またはホーミングペプチドを、例えばタンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物またはＣｅｎｄＲエレメントと、共に含むことまたは会合させることにより、該タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物またはＣｅｎｄＲエレメントをターゲティングすることができ、または該タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物またはＣｅｎｄＲエレメントは、該ホーミング分子もしくはホーミングペプチドのターゲットにホーミングすることができる。このように、前記タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物またはＣｅｎｄＲエレメントを、前記ホーミング分子またはホーミングペプチドのターゲットにホーミングすると言う場合がある。便宜上、および別の指示がない限り、タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物またはＣｅｎｄＲエレメントなどのホーミングへの言及は、該タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物またはＣｅｎｄＲエレメントなどが、適切なホーミング分子もしくはホーミングペプチドを含むこと、または適切なホーミング分子もしくはホーミングペプチドと会合していることを示すことを意図したものである。
【００３２】
前記タンパク質またはペプチドは、腫瘍に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、腫瘍血管系に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上の特定のタイプの腫瘍に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上の特定のタイプの腫瘍の血管系に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上の特定の病期の腫瘍または癌に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上の特定の病期の腫瘍または癌の血管系に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上の特定の病期の１つ以上の特定のタイプの腫瘍に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上の異なる病期の１つ以上の特定のタイプの腫瘍の血管系に選択的にホーミングすることができる。
【００３３】
前記タンパク質またはペプチドは、肺組織に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、肺血管系に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、心臓組織に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、心臓血管系に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、脳細胞、脳幹細胞、脳組織および／もしくは脳血管系、腎細胞、腎幹細胞、腎組織および／もしくは腎血管系、皮膚細胞、皮膚幹細胞、皮膚組織および／もしくは皮膚血管系、肺細胞、肺組織および／もしくは肺血管系、膵細胞、膵組織および／もしくは膵血管系、腸細胞、腸組織および／もしくは腸血管系、副腎細胞、副腎組織および／もしくは副腎血管系、網膜細胞、網膜組織および／もしくは網膜血管系、肝細胞、肝組織および／もしくは肝血管系、前立腺細胞、前立腺組織および／もしくは前立腺血管系、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織および／もしくは子宮内膜症血管系、卵巣細胞、卵巣組織および／もしくは卵巣血管系、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管および／もしくは腫瘍血管系、骨細胞、骨組織および／もしくは骨血管系、骨髄細胞、骨髄組織および／もしくは骨髄血管系、軟骨細胞、軟骨組織および／もしくは軟骨血管系、幹細胞、胚性幹細胞、多能性幹細胞、人工多能性幹細胞、成人幹細胞、造血幹細胞、神経幹細胞、間葉幹細胞、乳腺幹細胞、内皮幹細胞、嗅覚成人幹細胞、神経堤幹細胞、癌幹細胞、血液細胞、赤血球、血小板、白血球、顆粒球、好中球、好酸球（ｅｏｓｉｎｐｈｉｌ）、好塩基球、リンパ球様細胞、リンパ球、単球、創傷血管系、損傷組織の血管系、炎症組織の血管系、アテローム硬化性プラーク、または組み合わせに選択的にホーミングすることができる。
【００３４】
前記アミノ酸配列を細胞内への内部移行のために選択することができる。前記アミノ酸配列を組織浸透性のために選択することができる。前記アミノ酸配列を細胞内への内部移行および組織浸透のために選択することができる。前記アミノ酸配列は、１つ以上のホーミングペプチドを含む場合がある。例えば、前記アミノ酸配列は、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。前記アミノ酸配列は、ＣＲＥＫＡペプチドを含む場合がある。
【００３５】
前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上のホーミングペプチドを含む場合がある。例えば、前記アミノ酸配列は、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ｉＲＧＤを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ＬｙＰ−１ペプチドを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ｉＮＧＲを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ＲＧＲペプチドを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ＣＲＥＫＡペプチドを含む場合がある。
【００３６】
幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で互いに会合してもいない。幾つかの形態において、前記共組成物は、機能性内部移行エレメントを含まない。前記共組成物は、機能性内部移行エレメントを含むことができる。幾つかの形態において、前記共組成物は、ホーミング分子を含まない。前記共組成物は、１つ以上のホーミング分子を含むことができる。幾つかの形態において、前記共組成物は、ホーミングペプチドを含まない。前記共組成物は、１つ以上のホーミングペプチドを含むことができる。前記共組成物は、腫瘍に選択的にホーミングすることができる。幾つかの形態において、前記共組成物は、腫瘍血管系に選択的にホーミングしない。前記共組成物は、腫瘍血管系に選択的にホーミングすることができる。
【００３７】
幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で互いに会合してもいない。幾つかの形態において、前記カーゴ組成物は、機能性内部移行エレメントを含まない。前記カーゴ組成物は、機能性内部移行エレメントを含むことができる。幾つかの形態において、前記カーゴ組成物は、ホーミング分子を含まない。前記カーゴ組成物は、１つ以上のホーミング分子を含むことができる。幾つかの形態において、前記カーゴ組成物は、ホーミングペプチドを含まない。前記カーゴ組成物は、１つ以上のホーミングペプチドを含むことができる。前記カーゴ組成物は、腫瘍に選択的にホーミングすることができる。幾つかの形態において、前記カーゴ組成物は、腫瘍血管系に選択的にホーミングしない。前記カーゴ組成物は、腫瘍血管系に選択的にホーミングすることができる。
【００３８】
前記アミノ酸配列は、腫瘍に選択的にホーミングすることができる。前記アミノ酸配列は、腫瘍血管系に選択的にホーミングすることができる。前記アミノ酸配列は、１つ以上の特定のタイプの腫瘍に選択的にホーミングすることができる。前記アミノ酸配列は、１つ以上の特定のタイプの腫瘍の血管系に選択的にホーミングすることができる。前記アミノ酸配列は、１つ以上の特定の病期の腫瘍または癌に選択的にホーミングすることができる。前記アミノ酸配列は、１つ以上の特定の病期の腫瘍または癌の血管系に選択的にホーミングすることができる。前記アミノ酸配列は、１つ以上の特定の病期の１つ以上の特定のタイプの腫瘍に選択的にホーミングすることができる。前記アミノ酸配列は、１つ以上の異なる病期の１つ以上の特定のタイプの腫瘍の血管系に選択的にホーミングすることができる。
【００３９】
前記アミノ酸配列は、肺組織に選択的にホーミングすることができる。前記アミノ酸配列は、肺血管系に選択的にホーミングすることができる。前記アミノ酸配列は、心臓組織に選択的にホーミングすることができる。前記アミノ酸配列は、心臓血管系に選択的にホーミングすることができる。前記アミノ酸配列は、脳細胞、脳幹細胞、脳組織および／もしくは脳血管系、腎細胞、腎幹細胞、腎組織および／もしくは腎血管系、皮膚細胞、皮膚幹細胞、皮膚組織および／もしくは皮膚血管系、肺細胞、肺組織および／もしくは肺血管系、膵細胞、膵組織および／もしくは膵血管系、腸細胞、腸組織および／もしくは腸血管系、副腎細胞、副腎組織および／もしくは副腎血管系、網膜細胞、網膜組織および／もしくは網膜血管系、肝細胞、肝組織および／もしくは肝血管系、前立腺細胞、前立腺組織および／もしくは前立腺血管系、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織および／もしくは子宮内膜症血管系、卵巣細胞、卵巣組織および／もしくは卵巣血管系、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管および／もしくは腫瘍血管系、骨細胞、骨組織および／もしくは骨血管系、骨髄細胞、骨髄組織および／もしくは骨髄血管系、軟骨細胞、軟骨組織および／もしくは軟骨血管系、幹細胞、胚性幹細胞、多能性幹細胞、人工多能性幹細胞、成人幹細胞、造血幹細胞、神経幹細胞、間葉幹細胞、乳腺幹細胞、内皮幹細胞、嗅覚成人幹細胞、神経堤幹細胞、癌幹細胞、血液細胞、赤血球、血小板、白血球、顆粒球、好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球様細胞、リンパ球、単球、創傷血管系、損傷組織の血管系、炎症組織の血管系、アテローム硬化性プラーク、または組み合わせに選択的にホーミングすることができる。
【００４０】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、それがホーミング分子とカップリングまたは会合しているとき、腫瘍に選択的にホーミングすることができる。そのようなＣｅｎｄＲエレメントは、腫瘍血管系に選択的にホーミングすることができる。ホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメントは、１つ以上の特定のタイプの腫瘍に選択的にホーミングすることができる。ホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメントは、１つ以上の特定のタイプの腫瘍の血管系に選択的にホーミングすることができる。ホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメントは、１つ以上の特定の病期の腫瘍または癌に選択的にホーミングすることができる。ホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメントは、１つ以上の特定の病期の腫瘍または癌の血管系に選択的にホーミングすることができる。ホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメントは、１つ以上の特定の病期の１つ以上の特定のタイプの腫瘍に選択的にホーミングすることができる。ホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメントは、１つ以上の異なる病期の１つ以上の特定のタイプの腫瘍の血管系に選択的にホーミングすることができる。
【００４１】
ホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメントは、肺組織に選択的にホーミングすることができる。ホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメントは、肺血管系に選択的にホーミングすることができる。ホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメントは、心臓組織に選択的にホーミングすることができる。ホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメントは、心臓血管系に選択的にホーミングすることができる。ホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメントは、脳細胞、脳幹細胞、脳組織および／もしくは脳血管系、腎細胞、腎幹細胞、腎組織および／もしくは腎血管系、皮膚細胞、皮膚幹細胞、皮膚組織および／もしくは皮膚血管系、肺細胞、肺組織および／もしくは肺血管系、膵細胞、膵組織および／もしくは膵血管系、腸細胞、腸組織および／もしくは腸血管系、副腎細胞、副腎組織および／もしくは副腎血管系、網膜細胞、網膜組織および／もしくは網膜血管系、肝細胞、肝組織および／もしくは肝血管系、前立腺細胞、前立腺組織および／もしくは前立腺血管系、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織および／もしくは子宮内膜症血管系、卵巣細胞、卵巣組織および／もしくは卵巣血管系、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管および／もしくは腫瘍血管系、骨細胞、骨組織および／もしくは骨血管系、骨髄細胞、骨髄組織および／もしくは骨髄血管系、軟骨細胞、軟骨組織および／もしくは軟骨血管系、幹細胞、胚性幹細胞、多能性幹細胞、人工多能性幹細胞、成人幹細胞、造血幹細胞、神経幹細胞、間葉幹細胞、乳腺幹細胞、内皮幹細胞、嗅覚成人幹細胞、神経堤幹細胞、癌幹細胞、血液細胞、赤血球、血小板、白血球、顆粒球、好中球、好酸球（ｅｏｓｉｎｐｈｉｌｓ）、好塩基球、リンパ球様細胞、リンパ球、単球、創傷血管系、損傷組織の血管系、炎症組織の血管系、アテローム硬化性プラーク、または組み合わせに選択的にホーミングすることができる。
【００４２】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記ＣｅｎｄＲ組成物、コンジュゲート、分子、タンパク質、ペプチドなどにおける唯一の機能性内部移行エレメントである場合があるか、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記ＣｅｎｄＲ組成物、コンジュゲート、分子、タンパク質、ペプチドなどにおける唯一の機能性組織浸透エレメントである場合があるか、またはその両方である場合がある。選択されるアミノ酸配列は、前記ＣｅｎｄＲ組成物、コンジュゲート、分子、タンパク質、ペプチドなどにおける唯一の機能性内部移行エレメントである場合があるか、選択されるアミノ酸配列は、前記ＣｅｎｄＲ組成物、コンジュゲート、分子、タンパク質、ペプチドなどにおける唯一の機能性組織浸透エレメントである場合があるか、またはその両方である場合がある。
【００４３】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、環状（環式）である場合があるか、またはループを含有する場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、末端カルボキシル基を含む場合がある。遮断基を前記末端カルボキシル基にカップリングさせることができる。前記遮断基および前記末端カルボキシル基をカップリングする結合は、目的の細胞の近傍に存在するプロテアーゼ、酵素、切断剤および／または切断条件によって切断可能であるように選択することができる。前記遮断基を前記ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸にカップリングさせることができる。前記遮断基を、前記ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸以外の前記ＣｅｎｄＲエレメントのアミノ酸にカップリングさせることができる。
【００４４】
目的の細胞の近傍で活性化され得る活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを生産する方法も開示し、該方法は、遮断基が切断可能な結合によってＣｅｎｄＲエレメントにカップリングされている（この切断可能な結合は、目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件によって切断可能となる）活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する工程を含む。前記細胞は、被験体内にある場合がある。前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件を同定することができる。前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件を、前記切断可能ＣｅｎｄＲエレメントの形成の前に同定することができる。前記切断可能な結合は、前記目的の細胞の近傍に存在する酵素に基づいて選択することができる。前記切断可能な結合は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むまたは蓄積する部位、例えば、目的の細胞、に存在する切断剤に基づいて選択することができる。前記切断可能な結合は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むまたは蓄積する部位、例えば、目的の細胞、に存在する切断条件に基づいて選択することができる。前記切断可能な結合は、前記活性化可能なＣｅｎｄＲエレメントの形成の前に選択することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、末端カルボキシル基を含む場合があり、この場合、前記遮断基は該末端カルボキシル基にカップリングされている。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを生産する方法であって、遮断基が切断可能な結合によってＣｅｎｄＲエレメントにカップリングされている活性化可能なＣｅｎｄＲエレメントを形成する工程を含む方法も開示する。前記切断可能な結合は、任意の適する方法で切断することができる。例えば、前記切断可能な結合を酵素的にまたは非酵素的に切断することができる。酵素的切断については、前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むまたは蓄積する部位に切断酵素を供給することができるかまたは該切断酵素が存在することができる。例えば、前記酵素は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むまたは蓄積する細胞の近傍に存在する場合がある。非酵素的切断については、前記ＣｅｎｄＲエレメントを切断剤と接触させる場合があるか、切断条件に置く場合があるか、または両方の場合がある。切断剤は、切断可能な結合の切断を媒介または刺激することができる任意の物質である。切断条件は、切断可能な結合の切断を媒介または刺激することができる任意の溶液または環境条件であり得る。
【００４５】
活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する方法であって、遮断基をＣｅｎｄＲエレメントに共有結合でカップリングさせる工程を含む方法も開示し、この場合、該遮断基と該ＣｅｎｄＲエレメントをカップリングする結合は、切断可能である。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する方法であって、遮断基をアミノ酸配列に共有結合でカップリングさせる工程を含む方法も開示し、この場合、該アミノ酸配列は、ＣｅｎｄＲエレメントを含み、該遮断基と該ＣｅｎｄＲエレメントをカップリングする結合は、切断可能である。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する方法であって、（ａ）細胞内への内部移行および／または組織の浸透のためのアミノ酸配列を選択する工程（この場合、該アミノ酸配列は、ＣｅｎｄＲエレメントを含む）、ならびに（ｂ）遮断基を該ＣｅｎｄＲエレメントに共有結合でカップリングさせる工程（この場合、該遮断基と該ＣｅｎｄＲエレメントをカップリングする結合は、切断可能である）を含む方法も開示する。前記ＣｅｎｄＲエレメントに共有結合でカップリングされた遮断基は、細胞内への内部移行および／または組織の浸透を低減または防止する。前記ＣｅｎｄＲエレメントに共有結合でカップリングされた遮断基は、遮断基を伴わない同じＣｅｎｄＲエレメントと比較して、細胞内への内部移行および／または組織の浸透を低減または防止することができる。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、その選択したアミノ酸配列および遮断基を含むことができる。前記細胞は、被験体内にある場合がある。前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件を同定することができる。前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件を、活性化可能なＣｅｎｄＲエレメントを形成する前に同定することができる。前記切断可能な結合は、前記目的の細胞の近傍に存在する酵素に基づいて選択することができる。前記切断可能な結合は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むまたは蓄積する部位、例えば前記目的の細胞、に存在する切断剤に基づいて選択することができる。前記切断可能な結合は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むまたは蓄積する部位、例えば前記目的の細胞、に存在する切断条件に基づいて選択することができる。前記切断可能な結合は、前記活性化可能なＣｅｎｄＲエレメントを形成する前に選択することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、末端カルボキシル基を含む場合があり、この場合、該末端カルボキシル基に前記遮断基がカップリングされている。
【００４６】
ホーミングＣｅｎｄＲ組成物を形成する方法を本明細書において開示し、該方法は、細胞内への内部移行のためのアミノ酸配列を選択する工程（この場合、該アミノ酸配列は、Ｃ末端エレメントを含む）、およびホーミング分子をその選択したアミノ酸配列と共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させる工程を含み、該ＣｅｎｄＲ組成物は、その選択したアミノ酸配列およびそのカップリングまたは会合させたホーミング分子を含む。
【００４７】
ホーミングＣｅｎｄＲ組成物を作製する方法を開示し、該方法は、（ａ）細胞内への内部移行のためのアミノ酸配列を選択する工程（この場合、該アミノ酸配列は、Ｃ末端エレメントを含む）、および（ｂ）ホーミング分子をその選択したアミノ酸配列と共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させる工程を含み、該ＣｅｎｄＲ組成物は、その選択したアミノ酸配列およびそのカップリングまたは会合させたホーミング分子を含む。
【００４８】
共組成物を細胞に送達する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物に曝露する工程を含み、このとき該ＣｅｎｄＲ組成物は該細胞に侵入することができ、それによって該共組成物を該細胞に送達することができる。
【００４９】
共組成物を組織に浸透させる方法も開示し、該方法は、ＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物に該組織を曝露する工程を含み、このとき該ＣｅｎｄＲ組成物は、該組織内の細胞に侵入することおよび該細胞から退出することができ、それによって該共組成物を該組織に浸透させることができる。
【００５０】
共組成物を細胞内に送達する方法をさらに開示し、該方法は、該共組成物と活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを含むＣｅｎｄＲ組成物に該細胞を曝露する工程を含み、切断剤が、該ＣｅｎｄＲ組成物の該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを活性化すると、該ＣｅｎｄＲ組成物は該細胞に侵入することができ、それによって該共組成物を該細胞内に送達することができる。
【００５１】
共組成物を組織に浸透させる方法をさらに開示し、該方法は、該共組成物と活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを含むＣｅｎｄＲ組成物に該組織を曝露する工程を含み、切断剤が、該ＣｅｎｄＲ組成物の該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを活性化すると、該ＣｅｎｄＲ組成物は、該組織内の細胞に侵入することおよび該細胞を通過することができ、それによって該共組成物を該組織に浸透させることができる。
【００５２】
カーゴ組成物を細胞に送達する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物に曝露する工程を含み、このとき該ＣｅｎｄＲ組成物は該細胞に侵入することができ、それによって該カーゴ組成物を該細胞に送達することができる。
【００５３】
カーゴ組成物を組織に浸透させる方法も開示し、該方法は、ＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物を該組織に曝露する工程を含み、このとき該ＣｅｎｄＲ組成物は、該組織内の細胞に侵入することおよび該細胞から退出することができ、それによって該カーゴ組成物を該組織に浸透させることができる。
【００５４】
カーゴ組成物を細胞内に送達する方法をさらに開示し、該方法は、該カーゴ組成物と活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを含むＣｅｎｄＲ組成物に該細胞を曝露する工程を含み、切断剤が、該ＣｅｎｄＲ組成物の該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを活性化すると、該ＣｅｎｄＲ組成物は該細胞に侵入することができ、それによって該カーゴ組成物を該細胞内に送達することができる。
【００５５】
カーゴ組成物を組織に浸透させる方法をさらに開示し、該方法は、該カーゴ組成物と活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを含むＣｅｎｄＲ組成物に該組織を曝露する工程を含み、切断剤が、該ＣｅｎｄＲ組成物の該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを活性化すると、該ＣｅｎｄＲ組成物は、該組織内の細胞に侵入することおよび該細胞を通過することができ、それによって該カーゴ組成物を該組織に浸透させることができる。
【００５６】
カーゴ組成物を細胞内に送達する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物（この場合、該ＣｅｎｄＲ組成物が該カーゴ組成物を含む）に曝露する工程を含み、このとき該ＣｅｎｄＲ組成物は該細胞に侵入することができ、それによって該カーゴ組成物を該細胞内に送達することができる。
【００５７】
カーゴ組成物を組織に浸透させる方法も開示し、該方法は、該組織をＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物（この場合、該ＣｅｎｄＲ組成物が該カーゴ組成物を含む）に曝露する工程を含み、このとき該ＣｅｎｄＲ組成物は、該組織内の細胞に侵入することおよび該細胞から退出することができ、それによって該カーゴ組成物を該組織に浸透させることができる。
【００５８】
カーゴ組成物を細胞内に送達する方法をさらに開示し、該方法は、該カーゴ組成物と活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを含むＣｅｎｄＲ組成物に該細胞を曝露する工程を含み、切断剤が、該ＣｅｎｄＲ組成物の該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを活性化すると、該ＣｅｎｄＲ組成物は、該細胞に侵入することができ、それによって該カーゴ組成物を該細胞に送達することができ、この場合、該ＣｅｎｄＲ組成物は該カーゴ組成物を含む。
【００５９】
カーゴ組成物を組織に浸透させる方法をさらに開示し、該方法は、該カーゴ組成物と活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを含むＣｅｎｄＲ組成物に該組織を曝露する工程を含み、切断剤が、該ＣｅｎｄＲ組成物の該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを活性化すると、該ＣｅｎｄＲ組成物は、該組織内の細胞に侵入することおよび該細胞を通過することができ、それによって該カーゴ組成物を該組織に浸透させることができ、この場合、該ＣｅｎｄＲ組成物は該カーゴ組成物を含む。
【００６０】
ＣｅｎｄＲエレメントを内部移行することができる細胞は、（ａ）細胞をＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程；および（ｂ）該ＣｅｎｄＲエレメントが内部移行されたかどうかを決定する工程によって同定することができる。前記細胞は、例えばアッセイ物中にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントをホーミング分子にカップリングさせ、それによってＣｅｎｄＲ組成物を形成することができる。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを内部移行することができる細胞は、（ａ）細胞を活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程；（ｂ）該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントが内部移行されたかどうかを決定する工程によって同定することができる。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを、該細胞への曝露前に遮断解除（ｕｎｂｌｏｃｋ）してもよいが、しなくてもよい。これは、例えば、遮断因子の遮断能力を試験するために用いることができる。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、プロテアーゼ活性化ＣｅｎｄＲエレメントである場合もある。
【００６１】
癌細胞、または癌細胞を持つ被験体は、（ａ）該癌細胞をＣｅｎｄＲエレメントに曝露すること；および（ｂ）該ＣｅｎｄＲエレメントが該癌細胞により内部移行されたかどうかを決定する工程によって、ＣｅｎｄＲに基づく治療法の候補として同定することができ、この場合、内部移行されたＣｅｎｄＲエレメントにより該癌細胞または該被験体がＣｅｎｄＲに基づく治療法の候補であると同定される。前記細胞は、例えば、アッセイ物中にある場合があるか、または被験体内にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントをホーミング分子にカップリングさせ、それによってＣｅｎｄＲ組成物を形成することができる。
【００６２】
腫瘍、または腫瘍を持つ被験体は、（ａ）該腫瘍からの組織をＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程；および（ｂ）該ＣｅｎｄＲエレメントがその組織を通過したかどうか、またはその組織内の細胞により内部移行されたかどうかを決定する工程によって、ＣｅｎｄＲに基づく治療法の候補として同定することができ、この場合、通過したまたは内部移行されたＣｅｎｄＲエレメントにより該腫瘍または該被験体がＣｅｎｄＲに基づく治療法の候補であると同定される。
【００６３】
目的の細胞の近傍で活性化され得る活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、該目的の細胞の近傍に存在する酵素によって切断可能である切断可能な結合によって遮断基がＣｅｎｄＲエレメントにカップリングされている活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する工程により作製することができる。これは、前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する前に、前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件を同定する工程をさらに含む場合がある。これは、前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する前に、前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件に基づき前記切断可能な結合を選択する工程をさらに含む場合がある。
【００６４】
活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、（ａ）細胞への内部移行のためのアミノ酸配列を選択する工程（この場合、該アミノ酸配列は、Ｃ末端エレメントを含み、該Ｃ末端エレメントは、末端カルボキシル基を含む）および（ｂ）その選択したアミノ酸配列の末端カルボキシル基に遮断基を共有結合によりカップリングさせる工程（この場合、該遮断基と該末端カルボキシル基をカップリングする結合は、切断可能である）によって形成することができ、この場合、該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、その選択したアミノ酸および該遮断基を含む。これは、工程（ｂ）の前に、前記目的の細胞の近傍に存在するプロテアーゼ、酵素、切断剤および／または切断条件によって切断可能であるような、該遮断基と該末端カルボキシル基をカップリングする結合を選択する工程をさらに含む場合がある。
【００６５】
活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、（ａ）細胞内への内部移行のためのアミノ酸配列を選択する工程（この場合、該アミノ酸配列は、Ｃ末端エレメントを含み、該Ｃ末端エレメントは、末端カルボキシル基を含む）および（ｂ）その選択したアミノ酸配列の末端カルボキシル基に遮断基を共有結合によりカップリングさせる工程（この場合、該遮断基と該末端カルボキシル基をカップリングする結合は、切断可能である）を含む方法によって作製することができ、この場合、該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、その選択したアミノ酸配列および該遮断基を含む。この方法は、工程（ｂ）の前に、前記目的の細胞の近傍に存在するプロテアーゼ、酵素、切断剤および／または切断条件によって切断可能であるような、該遮断基と該末端カルボキシル基をカップリングする結合を選択する工程をさらに含む場合がある。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法であって、
該細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、ここで、該細胞、組織または両方を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない、方法。
（項目２）
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通ってのカーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法であって、
該細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、ここで、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合しており、ここで、該ＣｅｎｄＲエレメントが、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントである、方法。
（項目３）
前記細胞、組織または両方を前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントを前記カーゴ組成物にカップリングさせる工程をさらに含む、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、前記細胞、組織または両方の透過性を上げる、項目１〜３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５）
前記細胞、組織または両方が、被験体内にある、項目１〜４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６）
前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を前記被験者に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物に曝露する、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物に曝露する、項目５に記載の方法。
（項目８）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが１つ以上のアクセサリー分子と会合している、項目１〜７のいずれか一項に記載の方法。
（項目９）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが複数のアクセサリー分子と会合している、項目８に記載の方法。
（項目１０）
前記アクセサリー分子の少なくとも１つが、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする、項目８または９に記載の方法。
（項目１１）
前記アクセサリー分子の少なくとも１つが、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしない、項目８〜１０のいずれか一項に記載の方法。
（項目１２）
前記アクセサリー分子の少なくとも１つが、ＲＧＤペプチド、ｉＲＧＤ、Ｌｙｐ−１ペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ，ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、または組み合わせを含む、項目８〜１１のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、独立して、ホーミング分子、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性ペプチド、エンドソーム脱出分子、細胞内ターゲティング分子、核ターゲティング分子、または組み合わせである、項目８〜１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、ホーミング分子である、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、アクセサリーペプチドである、項目１３に記載の方法。
（項目１６）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、脳細胞、脳組織もしくは両方、腎細胞、腎組織もしくは両方、皮膚細胞および腱細胞、皮膚組織および腱組織もしくは両方、肺細胞、肺組織もしくは両方、膵細胞、膵組織もしくは両方、腸細胞、腸組織もしくは両方、副腎細胞、副腎組織もしくは両方、網膜細胞、網膜組織もしくは両方、肝細胞、肝組織もしくは両方、前立腺細胞、前立腺組織もしくは両方、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織もしくは両方、卵巣細胞、卵巣組織もしくは両方、心臓細胞、心臓組織もしくは両方、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管、または組み合わせに選択的にホーミングする、項目８〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、ｉＲＧＤを含む、項目８〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１８）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、Ｌｙｐ−１ペプチドを含む、項目８〜１７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１９）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、ｉＮＧＲを含む、項目８〜１８のいずれか一項に記載の方法。
（項目２０）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、ＲＧＲペプチドを含む、項目８〜１９のいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、腫瘍に選択的にホーミングする、項目８〜２０のいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、腫瘍血管系に選択的にホーミングする、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、肺組織に選択的にホーミングする、項目８〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目２４）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、心臓組織に選択的にホーミングする、項目８〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目２５）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである、項目１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
（項目２６）
前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントが、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントが、セリンプロテアーゼ、プラスミン、プラスミノゲンアクチベータ、ウロキナーゼ、プロタンパク質転換酵素、フーリン、カルボキシペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼＡ、グルタミン酸特異的カルボキシペプチダーゼ、プロリン特異的カルボキシペプチダーゼ、ＰＳＭＡ、または組み合わせによって活性化可能である、項目２６に記載の方法。
（項目２８）
前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物が、前記被験体に同時に投与される、項目６または８〜２７のいずれか一項に記載の方法。
（項目２９）
前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物が、該ＣｅｎｄＲエレメントと該共組成物を含む単一組成物で前記被験体に投与される、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物が、別々の組成物で前記被験体に投与される、項目６または８〜２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目３１）
前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物が、異なる時に前記被験体に投与される、項目６または８〜２７のいずれか一項に記載の方法。
（項目３２）
前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物が、別々の組成物で前記被験体に投与される、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物が、別々の経路により前記被験体に投与される、項目３０〜３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３４）
前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物が互いに結合していない、項目１〜３３のいずれか一項に記載の方法。
（項目３５）
前記共組成物またはカーゴ組成物が、治療薬を含む、項目１〜３４のいずれか一項に記載の方法。
（項目３６）
前記共組成物またはカーゴ組成物が、検出剤を含む、項目１〜３５のいずれか一項に記載の方法。
（項目３７）
前記共組成物またはカーゴ組成物が、キャリア、ビヒクルまたは両方を含む、項目１〜３６のいずれか一項に記載の方法。
（項目３８）
前記共組成物またはカーゴ組成物が、治療用タンパク質、治療用化合物、治療用組成物、癌化学療法薬、毒素、細胞傷害剤、抗炎症薬、抗関節炎薬、成長因子、サイトカイン、ケモカイン、１つ以上のシグナル伝達経路を調節する化合物、抗体、核酸、核酸類似体、細胞、ウイルス、ファージ、ウイルス粒子、ファージ粒子、ウイルスカプシド、ファージカプシド、ウイルス様粒子、リポソーム、ミセル、ビーズ、ナノ粒子、マイクロ粒子、化学療法薬、造影剤、イメージング剤、標識、標識剤、抗脈管形成薬、脈管形成促進薬、または組み合わせを含む、項目１〜３７のいずれか一項に記載の方法。
（項目３９）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、アミノ酸配列に含まれる、項目１〜３８のいずれか一項に記載の方法。
（項目４０）
前記アミノ酸配列が、タンパク質またはペプチドに含まれる、項目３９に記載の方法。
（項目４１）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、タンパク質またはペプチドに含まれる、項目１〜３９のいずれか一項に記載の方法。
（項目４２）
前記タンパク質またはペプチドが、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには、細胞内に内部移行することができ、組織に浸透することができ、または両方できるが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない、項目４０に記載の方法。
（項目４３）
前記タンパク質またはペプチドが、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには、組織に浸透することができるが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには組織に浸透することができない、項目４０に記載の方法。
（項目４４）
前記タンパク質またはペプチドが、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができるが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない、項目４０に記載の方法。
（項目４５）
前記アミノ酸配列が、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することができか、組織に浸透することができるか、または両方できる、項目３９〜４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
前記アミノ酸配列が、前記カーゴ組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することができるか、組織に浸透することができるか、または両方できる、項目３９〜４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４７）
前記アミノ酸配列が、前記共組成物と会合していずに、組織に浸透することができる、項目３９〜４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
前記アミノ酸配列が、前記カーゴ組成物と会合していずに、組織に浸透することができる、項目３９〜４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
前記アミノ酸配列が、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる、項目３９〜４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目５０）
前記アミノ酸配列が、前記カーゴ組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる、項目３９〜４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目５１）
前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドの唯一の機能性内部移行エレメントである、項目３９〜５０のいずれか一項に記載の方法。
（項目５２）
前記タンパク質またはペプチドが、環状である、項目４０〜５１のいずれか一項に記載の方法。
（項目５３）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある、項目４０〜５１のいずれか一項に記載の方法。
（項目５４）
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記内部移行、浸透または両方が、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目４０〜５３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５５）
組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記浸透が、前記アミノ酸配列が前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目４０〜５３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５６）
細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記内部移行および浸透が、前記アミノ酸配列が前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目４０〜５３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５７）
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記内部移行、浸透または両方が、前記ＣｅｎｄＲエレメントが前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、前記アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目４０〜５３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５８）
組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記浸透が、前記ＣｅｎｄＲエレメントが前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、前記アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目４０〜５３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５９）
細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記内部移行および浸透が、前記ＣｅｎｄＲエレメントが前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、前記アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目４０〜５３のいずれか一項に記載の方法。
（項目６０）
前記アミノ酸配列が１つ以上のアクセサリー分子と会合している、項目３９〜５９のいずれか一項に記載の方法。
（項目６１）
前記タンパク質またはペプチドが１つ以上のアクセサリー分子と会合している、項目４０〜６０のいずれか一項に記載の方法。
（項目６２）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、独立して、ホーミング分子、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性ペプチド、エンドソーム脱出分子、細胞内ターゲティング分子、核ターゲティング分子、または組み合わせである、項目６０または６１に記載の方法。
（項目６３）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、ホーミング分子である、項目６２に記載の方法。
（項目６４）
前記ホーミング分子の１つ以上が、独立して、ＲＧＤペプチド、ｉＲＧＤ、Ｌｙｐ−１ペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ，ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、または組み合わせである、項目６３に記載の方法。
（項目６５）
前記タンパク質またはペプチドが、１つ以上のアクセサリーペプチドを含む、項目４０〜６４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６６）
前記アミノ酸配列が、１つ以上のアクセサリーペプチドを含む、項目３９〜６４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６７）
前記アクセサリーペプチドの１つ以上が、独立して、ホーミングペプチド、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性ペプチド、エンドソーム脱出ペプチド、細胞内ターゲティングペプチド、核ターゲティングペプチド、または組み合わせである、項目６５または６６に記載の方法。
（項目６８）
前記アクセサリーペプチドの１つ以上が、ホーミングペプチドである、項目６７に記載の方法。
（項目６９）
前記ホーミングペプチドの１つ以上が、独立して、ＲＧＤペプチド、ｉＲＧＤ、Ｌｙｐ−１ペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ，ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、または組み合わせである、項目６８に記載の方法。
（項目７０）
前記タンパク質またはペプチドが、脳細胞、脳組織もしくは両方、腎細胞、腎組織もしくは両方、皮膚細胞および腱細胞、皮膚組織および腱組織もしくは両方、肺細胞、肺組織もしくは両方、膵細胞、膵組織もしくは両方、腸細胞、腸組織もしくは両方、副腎細胞、副腎組織もしくは両方、網膜細胞、網膜組織もしくは両方、肝細胞、肝組織もしくは両方、前立腺細胞、前立腺組織もしくは両方、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織もしくは両方、卵巣細胞、卵巣組織もしくは両方、心臓細胞、心臓組織もしくは両方、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管、または組み合わせに選択的にホーミングする、項目６１〜６９のいずれか一項に記載の方法。
（項目７１）
前記タンパク質またはペプチドが、ｉＲＧＤを含む、項目４０〜７０のいずれか一項に記載の方法。
（項目７２）
前記タンパク質またはペプチドが、Ｌｙｐ−１ペプチドを含む、項目４０〜７１のいずれか一項に記載の方法。
（項目７３）
前記タンパク質またはペプチドが、ｉＮＧＲを含む、項目４０〜７２のいずれか一項に記載の方法。
（項目７４）
前記タンパク質またはペプチドが、ＲＧＲペプチドを含む、項目４０〜７３のいずれか一項に記載の方法。
（項目７５）
前記タンパク質またはペプチドが、腫瘍に選択的にホーミングする、項目６１〜７４のいずれか一項に記載の方法。
（項目７６）
前記タンパク質またはペプチドが、腫瘍血管系に選択的にホーミングする、項目７５に記載の方法。
（項目７７）
前記タンパク質またはペプチドが、肺組織に選択的にホーミングする、項目６１〜７０のいずれか一項に記載の方法。
（項目７８）
前記タンパク質またはペプチドが、心臓組織に選択的にホーミングする、項目６１〜７０のいずれか一項に記載の方法。
（項目７９）
前記アミノ酸配列が、細胞内への内部移行のために選択される、項目３９〜７８のいずれか一項に記載の方法。
（項目８０）
前記アミノ酸配列が、組織浸透のために選択される、項目３９〜７９のいずれか一項に記載の方法。
（項目８１）
前記アミノ酸配列が、細胞内への内部移行および組織浸透のために選択される、項目３９〜８０のいずれか一項に記載の方法。
（項目８２）
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の前記内部移行、浸透または両方が、該細胞、組織または両方が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞、組織または両方が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない、項目１〜８１のいずれか一項に記載の方法。
（項目８３）
組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物の前記浸透が、該組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない、項目１〜８１のいずれか一項に記載の方法。
（項目８４）
細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物の前記内部移行および浸透が、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない、項目１〜８１のいずれか一項に記載の方法。
（項目８５）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、ＣｅｎｄＲ組成物に含まれる、項目１〜８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目８６）
前記ＣｅｎｄＲ組成物が、１つ以上のアクセサリー分子を含む、請求８５に記載の方法。
（項目８７）
前記ＣｅｎｄＲ組成物が、１つ以上のカーゴ組成物を含む、項目８５または８６に記載の方法。
（項目８８）
前記ＣｅｎｄＲ組成物が、１つ以上のホーミング分子を含む、項目８５〜８７のいずれか一項に記載の方法。
（項目８９）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、ＣｅｎｄＲコンジュゲートに含まれる、項目１〜８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目９０）
前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートが、１つ以上のアクセサリー分子を含む、項目８９に記載の方法。
（項目９１）
前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートが、１つ以上のカーゴ組成物を含む、項目８９または９０に記載の方法。
（項目９２）
前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートが、１つ以上のホーミング分子を含む、項目１〜９１のいずれか一項に記載の方法。
（項目９３）
前記細胞、組織または両方が、複数のアクセサリー分子に曝露される、項目１〜９２のいずれか一項に記載の方法。
（項目９４）
前記細胞、組織または両方が、複数のホーミング分子に曝露される、項目１〜９３のいずれか一項に記載の方法。
（項目９５）
前記細胞、組織または両方が、複数のカーゴ組成物に曝露される、項目１〜９４のいずれか一項に記載の方法。
（項目９６）
前記細胞、組織または両方が、複数のＣｅｎｄＲエレメントに曝露される、項目１〜９５のいずれか一項に記載の方法。
（項目９７）
前記細胞、組織または両方が、複数の共組成物に曝露される、項目１〜９６のいずれか一項に記載の方法。
（項目９８）
ＣｅｎｄＲエレメントと共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物。
（項目９９）
ＣｅｎｄＲエレメントとカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、ここで、該ＣｅｎｄＲエレメントが、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントである組成物。
（項目１００）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、１つ以上のアクセサリー分子と会合している、項目９８または９９に記載の組成物。
（項目１０１）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、複数のアクセサリー分子と会合している、項目１００に記載の組成物。
（項目１０２）
前記アクセサリー分子の少なくとも１つが、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする、項目１００または１０１に記載の組成物。
（項目１０３）
前記アクセサリー分子の少なくとも１つが、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしない、項目１００〜１０２のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０４）
前記アクセサリー分子の少なくとも１つが、ＲＧＤペプチド、ｉＲＧＤ、Ｌｙｐ−１ペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ，ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、または組み合わせを含む、項目１００〜１０３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０５）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、独立して、ホーミング分子、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性ペプチド、エンドソーム脱出分子、細胞内ターゲティング分子、核ターゲティング分子、または組み合わせである、項目１００〜１０４のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０６）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、ホーミング分子である、項目１０５に記載の組成物。
（項目１０７）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、アクセサリーペプチドである、項目１０５に記載の組成物。
（項目１０８）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、脳細胞、脳組織もしくは両方、腎細胞、腎組織もしくは両方、皮膚細胞および腱細胞、皮膚組織および腱組織もしくは両方、肺細胞、肺組織もしくは両方、膵細胞、膵組織もしくは両方、腸細胞、腸組織もしくは両方、副腎細胞、副腎組織もしくは両方、網膜細胞、網膜組織もしくは両方、肝細胞、肝組織もしくは両方、前立腺細胞、前立腺組織もしくは両方、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織もしくは両方、卵巣細胞、卵巣組織もしくは両方、心臓細胞、心臓組織もしくは両方、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管、または組み合わせに選択的にホーミングする、項目１００〜１０７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０９）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、ｉＲＧＤを含む、項目１００〜１０７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１０）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、Ｌｙｐ−１ペプチドを含む、項目１００〜１０９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１１）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、ｉＮＧＲを含む、項目１００〜１１０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１２）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、ＲＧＲペプチドを含む、項目１００〜１１１のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１３）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、腫瘍に選択的にホーミングする、項目１００〜１１２のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１４）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、腫瘍血管系に選択的にホーミングする、項目１１３に記載の組成物。
（項目１１５）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、肺組織に選択的にホーミングする、項目１００〜１０７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１６）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、心臓組織に選択的にホーミングする、項目１００〜１０７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１７）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである、項目９８〜１１６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１８）
前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントが、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである、項目１１７に記載の組成物。
（項目１１９）
前記プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントが、セリンプロテアーゼ、プラスミン、プラスミノゲンアクチベータ、ウロキナーゼ、プロタンパク質転換酵素、フーリン、カルボキシペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼＡ、グルタミン酸特異的カルボキシペプチダーゼ、プロリン特異的カルボキシペプチダーゼ、ＰＳＭＡ、または組み合わせによって活性化可能である、項目１１８に記載の組成物。
（項目１２０）
前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物が、互いに結合していない、項目９８〜１１９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２１）
前記共組成物またはカーゴ組成物が、治療薬を含む、項目９８〜１２０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２２）
前記共組成物またはカーゴ組成物が、検出剤を含む、項目９８〜１２１のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２３）
前記共組成物またはカーゴ組成物が、キャリア、ビヒクルまたは両方を含む、項目９８〜１２２のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２４）
前記共組成物またはカーゴ組成物が、治療用タンパク質、治療用化合物、治療用組成物、癌化学療法薬、毒素、細胞傷害剤、抗炎症薬、抗関節炎薬、成長因子、サイトカイン、ケモカイン、１つ以上のシグナル伝達経路を調節する化合物、抗体、核酸、核酸類似体、細胞、ウイルス、ファージ、ウイルス粒子、ファージ粒子、ウイルスカプシド、ファージカプシド、ウイルス様粒子、リポソーム、ミセル、ビーズ、ナノ粒子、マイクロ粒子、化学療法薬、造影剤、イメージング剤、標識、標識剤、抗脈管形成薬、脈管形成促進薬、または組み合わせを含む、項目９８〜１２３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２５）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、アミノ酸配列に含まれる、項目９８〜１２４のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２６）
前記アミノ酸配列が、タンパク質またはペプチドに含まれる、項目１２５に記載の組成物。
（項目１２７）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、タンパク質またはペプチドに含まれる、項目９８〜１２５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２８）
前記タンパク質またはペプチドが、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには、細胞内に内部移行することができ、組織に浸透することができ、または両方できるが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない、項目１２６に記載の組成物。
（項目１２９）
前記タンパク質またはペプチドが、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには、組織に浸透することができるが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには組織に浸透することができない、項目１２６に記載の組成物。
（項目１３０）
前記タンパク質またはペプチドが、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができるが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない、項目１２６に記載の組成物。
（項目１３１）
前記アミノ酸配列が、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することができるか、組織に浸透することができるか、または両方できる、項目１２５〜１３０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３２）
前記アミノ酸配列が、前記カーゴ組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することができるか、組織に浸透することができるか、または両方できる、項目１２５〜１３０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３３）
前記アミノ酸配列が、前記共組成物と会合していずに、組織に浸透することができる、項目１２５〜１３０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３４）
前記アミノ酸配列が、前記カーゴ組成物と会合していずに、組織に浸透することができる、項目１２５〜１３０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３５）
前記アミノ酸配列が、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる、項目１２５〜１３０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３６）
前記アミノ酸配列が、前記カーゴ組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる、項目１２５〜１３０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３７）
前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドの唯一の機能性内部移行エレメントである、項目１２５〜１３６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３８）
前記タンパク質またはペプチドが、環状である、項目１２６〜１３７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３９）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある、項目１２６〜１３７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４０）
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の内部移行、浸透または両方が、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目１２６〜１３９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４１）
組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記浸透が、前記アミノ酸配列が前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目１２６〜１３９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４２）
細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記内部移行および浸透が、前記アミノ酸配列が前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目１２６〜１３９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４３）
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記内部移行、浸透または両方が、前記ＣｅｎｄＲエレメントが前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、前記アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目１２６〜１３９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４４）
組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記浸透が、前記ＣｅｎｄＲエレメントが前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、前記アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目１２６〜１３９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４５）
細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記内部移行および浸透が、前記ＣｅｎｄＲエレメントが前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、前記アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない、項目１２６〜１３９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４６）
前記アミノ酸配列が１つ以上のアクセサリー分子と会合している、項目１２５〜１４５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４７）
前記タンパク質またはペプチドが１つ以上のアクセサリー分子と会合している、項目１２６〜１４６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４８）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、独立して、ホーミング分子、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性ペプチド、エンドソーム脱出分子、細胞内ターゲティング分子、核ターゲティング分子、または組み合わせである、項目１４６または１４７に記載の組成物。
（項目１４９）
前記アクセサリー分子の１つ以上が、ホーミング分子である、項目１４８に記載の組成物。
（項目１５０）
前記ホーミング分子の１つ以上が、独立して、ＲＧＤペプチド、ｉＲＧＤ、Ｌｙｐ−１ペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ，ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、または組み合わせである、項目１４９に記載の組成物。
（項目１５１）
前記タンパク質またはペプチドが、１つ以上のアクセサリーペプチドを含む、項目１２６〜１５０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１５２）
前記アミノ酸配列が、１つ以上のアクセサリーペプチドを含む、請求１２５〜１５０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１５３）
前記アクセサリーペプチドの１つ以上が、独立して、ホーミングペプチド、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性ペプチド、エンドソーム脱出ペプチド、細胞内ターゲティングペプチド、核ターゲティングペプチド、または組み合わせである、項目１５１または１５２に記載の組成物。
（項目１５４）
前記アクセサリーペプチドの１つ以上が、ホーミングペプチドである、項目１５３に記載の組成物。
（項目１５５）
前記ホーミングペプチドの１つ以上が、独立して、ＲＧＤペプチド、ｉＲＧＤ、Ｌｙｐ−１ペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ，ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、または組み合わせである、項目１５４に記載の組成物。
（項目１５６）
前記タンパク質またはペプチドが、脳細胞、脳組織もしくは両方、腎細胞、腎組織もしくは両方、皮膚細胞および腱細胞、皮膚組織および腱組織もしくは両方、肺細胞、肺組織もしくは両方、膵細胞、膵組織もしくは両方、腸細胞、腸組織もしくは両方、副腎細胞、副腎組織もしくは両方、網膜細胞、網膜組織もしくは両方、肝細胞、肝組織もしくは両方、前立腺細胞、前立腺組織もしくは両方、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織もしくは両方、卵巣細胞、卵巣組織もしくは両方、心臓細胞、心臓組織もしくは両方、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管、または組み合わせに選択的にホーミングする、項目１４７〜１５５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１５７）
前記タンパク質またはペプチドが、ｉＲＧＤを含む、項目１２６〜１５６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１５８）
前記タンパク質またはペプチドが、Ｌｙｐ−１ペプチドを含む、項目１２６〜１５７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１５９）
前記タンパク質またはペプチドが、ｉＮＧＲを含む、項目１２６〜１５８のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６０）
前記タンパク質またはペプチドが、ＲＧＲペプチドを含む、項目１２６〜１５９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６１）
前記タンパク質またはペプチドが、腫瘍に選択的にホーミングする、項目１４７〜１６０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６２）
前記タンパク質またはペプチドが、腫瘍血管系に選択的にホーミングする、項目１６１に記載の組成物。
（項目１６３）
前記タンパク質またはペプチドが、肺組織に選択的にホーミングする、項目１４７〜１５６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６４）
前記タンパク質またはペプチドが、心臓組織に選択的にホーミングする、項目１４７〜１５６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６５）
前記アミノ酸配列が、細胞内への内部移行のために選択される、項目１２５〜１６４のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６６）
前記アミノ酸配列が、組織浸透のために選択される、項目１２５〜１６５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６７）
前記アミノ酸配列が、細胞内への内部移行および組織浸透のために選択される、項目１２５〜１６６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６８）
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の内部移行、浸透または両方が、該細胞、組織または両方が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞、組織または両方が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない、項目９８〜１６６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６９）
組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物の前記浸透が、該組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない、項目９８〜１６６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１７０）
細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物の前記内部移行および浸透が、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない、項目９８〜１６６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１７１）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、ＣｅｎｄＲ組成物に含まれる、項目９８〜１７０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１７２）
前記ＣｅｎｄＲ組成物が、１つ以上のアクセサリー分子を含む、請求１７５に記載の組成物。
（項目１７３）
前記ＣｅｎｄＲ組成物が、１つ以上のカーゴ組成物を含む、項目１７５または１７２に記載の組成物。
（項目１７４）
前記ＣｅｎｄＲ組成物が、１つ以上のホーミング分子を含む、項目１７５〜１７３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１７５）
前記ＣｅｎｄＲエレメントが、ＣｅｎｄＲコンジュゲートに含まれる、項目９８〜１７０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１７６）
前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートが、１つ以上のアクセサリー分子を含む、項目１７５に記載の組成物。
（項目１７７）
前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートが、１つ以上のカーゴ組成物を含む、項目１７５または１７６に記載の組成物。
（項目１７８）
前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートが、１つ以上のホーミング分子を含む、項目９８〜１７７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１７９）
前記細胞、組織または両方が、複数のアクセサリー分子に曝露される、項目９８〜１７８のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１８０）
前記細胞、組織または両方が、複数のホーミング分子に曝露される、項目９８〜１７９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１８１）
前記細胞、組織または両方が、複数のカーゴ組成物に曝露される、項目９８〜１８０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１８２）
前記細胞、組織または両方が、複数のＣｅｎｄＲエレメントに曝露される、項目９８〜１８１のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１８３）
前記細胞、組織または両方が、複数の共組成物に曝露される、項目９８〜１８２のいずれか一項に記載の組成物。
【００６６】
本開示の方法および組成物のさらなる利点を以下の説明にある程度記載する。該利点は、該説明からある程度理解されるし、または本開示の方法および組成物の実施によって知ることができる。本開示の方法および組成物の利点は、添付の特許請求の範囲において特に指摘するエレメントおよび組み合わせによって実現および達成される。上記の一般的な説明および以下の詳細な説明の両方が例示的なものであり、説明的なものでしかなく、請求項に記載する本発明を限定するものではないことは理解されるはずである。
【図面の簡単な説明】
【００６７】
本明細書に組み込まれており本明細書の一部を構成する添付の図面は、本開示の方法および組成物の幾つかの実施形態を例証するものであり、この説明と共に、本開示の方法および組成物の原理の説明に役立つものである。
【図１】図１は、組織ターゲティング／組織浸透性ＣｅｎｄＲシステムの略図を示す。
【図２】図２は、ペプチドＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）の注射後の様々な組織におけるファージ力価のグラフを示す。全身性オリゴマーＲＰＡＲＰＡＲは、血管の漏出を増加させて、ターゲティングされていないトレーサーファージを循環させる。マウスに１０１０ｐｆｕの対照ファージと、ニュートラアビジン足場を使用してオリゴマー化した８μＭのＲＰＡＲＰＡＲ（または対照）ペプチドを含有する１５０μＬのＰＢＳをマウスに静脈内注射した。３０分の循環後、マウスを灌流し、組織内に残存するファージの数を決定した。ｙ軸上の値は、ＲＰＡＲＰＡＲ／対照比を表す。統計解析をスチューデントｔ検定、ｎ＝４、によって行った；エラーバーは、ｓ．ｅ．ｍ．を示す；二重アスタリスク、ｐ＜０．０１、三重アスタリスク、ｐ＜０．００１。スケールバー：２０μｍ（Ｂ、Ｃ）および５０μｍ（Ｆ）。
【図３】図３は、ｉＲＧＤの複数段階結合および浸透メカニズムの例のダイアグラムを示す。配列は、配列番号１および配列番号３７である。
【図４】図４Ａ〜４Ｃは、ｉＲＧＤペプチドのインビボ腫瘍ホーミングを示す。ａ、フルオレセイン標識（ＦＡＭ）ｉＲＧＤまたは対照ペプチド（ＰＢＳ中２００μｇ）をデノボ膵管腺癌（ＰＤＡＣ）を有するＬＳＬ−Ｋｒａｓ、ｐ５３−ｆｌ／＋、ｐ４８−Ｃｒｅマウスに静脈内注射した。前記ペプチドを２時間循環させ、器官を回収し、ＵＶ光下で検査した。矢頭は、腫瘍を指摘している。点線は、器官を配置した場所を示す。ｂ、示されているペプチド、ファージおよびミセルを注射したマウスからの同所性２２Ｒｖ−１ヒト前立腺癌異種移植片の共焦点画像。ｉＲＧＤを、インテグリン結合性だが非浸透性の類似ペプチド、ＣＲＤＧＣ（配列番号３６）と比較した。循環時間は、遊離ペプチドについては２時間、ペプチド提示ファージについては１５分、およびペプチドをカップリングさせたミセルについては３時間であった。矢印は、血管壁内のまたは血管壁のすぐ外側のＦＡＭ−ＣＲＧＤＣペプチドまたはＣＲＧＤＣファージを指摘しており、腫瘍血管系へのそのホーミングの例証となる。これら３つの腫瘍それぞれについての複数の切片からの代表視野を示す。スケールバー＝５０μｍ。ｃ、ｉＲＧＤおよびＣＲＧＤＣペプチドの腫瘍ホーミング領域の定量。ＦＡＭ−ｉＲＧＤまたはＦＡＭ−ＣＲＧＤＣペプチドを注射したマウスからの２２Ｒｖ−１同所性腫瘍の凍結切片を抗ＦＩＴＣ抗体で免疫組織化学染色した。サンプルをＦＡＭ陽性領域の定量化のためにＳｃａｎｓｃｏｐｅ  ＣＭ−１スキャナーでの画像解析に付した。統計解析をスチューデントｔ検定、ｎ＝３、で行った；エラーバー、ｓ．ｅ．ｍ．；三重アスタリスク、ｐ＜０．００１。
【図５】図５Ａおよび５Ｂは、ｉＲＧＤ注射マウスにおける血管外腫瘍組織内へのエバンスブルー（アルブミン）の腫瘍特異的侵入を示す。ｉＲＧＤは、配列番号３である。ｉＲＧＤＤは、配列番号４である。同所移植された膵癌異種移植片または乳癌異種移植片を有するマウスに１μｇのエバンスブルーを注射し、５分後に、１００μｇの、ＰＢＳ中のｉＲＧＤペプチド、ＰＢＳのみまたは対照ペプチドを注射した。３０分後に腫瘍および組織を回収し、色素含有量について検査した。図５Ａは、ｉＲＧＤ注射マウスの腫瘍が、対照腫瘍より多くの青色物を含有することを示す。図５Ｂは、膵臓腫瘍を有するマウスからの結果および同じマウスの非腫瘍組織からの結果の定量化を示す。ｉＲＧＤ処置腫瘍には、対照腫瘍より約４倍多い色素が蓄積された。対照ペプチドは、非ＣｅｎｄＲ  ＲＧＤペプチドを含んだ。
【図６】図６Ａおよび６Ｂは、エクスビボでの腫瘍浸透アッセイを示す。ＰＰＣ１ヒト前立腺癌皮下異種移植片を切除し、図６Ａの場合は１０１０ファージ粒子／ｍＬを含む短期培養物で、ｉＲＧＤおよび図６Ｂの場合はＣＧ７Ｃインサートを有する対照ファージを含む短期培養物で維持した。３７℃で９０分後、腫瘍を洗浄し、固定し、切片を作製した。ファージコートタンパク質に対する抗体でファージを検出した。ｉＲＧＤファージが腫瘍に深く浸透したことに注目すること。スケールバー  ２００μｍ。
【図７】図７は、異なる組成物の注射後の（日数での）時間に対する（ｍｍ３での）腫瘍体積のグラフであり、ハーセプチンおよびｉＲＧＤペプチドの併用で処置したマウスにおける向上した抗腫瘍効果を示す。高いＨＥＲ２発現を伴うヒト乳癌（ＢＴ４７４）の同所性異種移植片を有するマウスを、図に示されているように４ｍｇ／ｋｇ  ｉＲＧＤまたはＰＢＳの１日１回の注射と併用で３ｍｇ／ｋｇ（腫瘍細胞接種後２１日の時点、＝グラフにおける第０日、での初回注射）または１．５ｍｇ／ｋｇ（後続の注射）のハーセプチンの週１回の注射により処置した。
【図８】図８は、カップリングしていない共組成物のターゲティング、内部移行および組織浸透のＣｅｎｄＲによる増加のダイアグラムを示す。３例のホーミングペプチドが列挙されているが、ＣｅｎｄＲエレメントをターゲティングもホーミングもなしで使用することができ、および任意の他のターゲティングもしくはホーミング分子、ターゲティングもしくはホーミング剤、ターゲティングもしくはホーミングペプチドまたはターゲティングもしくはホーミング配列と共に使用することができる。
【図９】図９Ａ〜９Ｄは、ｉＲＧＤ注射マウスにおける血管外腫瘍組織へのエバンスブルーの腫瘍特異的侵入を示す。ｉＲＧＤは、配列番号３である。ｉＲＧＤＤは、配列番号４である。同所性ＭＩＡ  ＰａＣａ−２ヒト膵臓癌腫異種移植片を有するマウスに１μｇのアルブミン結合色素エバンスブルーを静脈内注射し、続いて５分後、ＰＢＳ中の１００ｎｍｏｌのｉＲＧＤペプチドもしくは対照ペプチド、またはＰＢＳのみを静脈内注射した。３０分後に組織を回収した。（Ａ）ｉＲＧＤを注射したマウスの組織における（メインパネル）およびＰＢＳ注射対照マウスの腫瘍における（挿入図）エバンスブルー蓄積。ｉＲＧＤ注射マウスの原発性腫瘍および左腎に浸潤した腫瘍（矢頭）における濃青色に注目すること。Ｔ、腫瘍；Ｐ、膵臓；Ｓ、脾臓。（ＢからＤ）膵臓腫瘍および組織におけるエバンスブルーの定量化。（Ｂ）では、異なる量のｉＲＧＤを注射した。（Ｃ）では、ｉＲＧＤの効果を、ＲＸＸＫ／Ｒ  ＣｅｎｄＲ配列を欠く対照ＲＧＤペプチド（配列番号６）のものと比較した。（Ｄ）では、５０μｇの抗ニューロピリン−１遮断抗体または対照ＩｇＧをｉＲＧＤの前に注射した。統計解析を（Ｂ）および（Ｄ）の場合はＡＮＯＶＡで、ならびに（Ｃ）の場合はスチューデントｔ検定で行った。ｎ＝３；エラーバー、ｓ．ｅ．ｍ．；二重アスタリスク、ｐ＜０．０１；三重アスタリスク、ｐ＜０．００１。
【図１０】図１０Ａ〜１０Ｃは、様々な腫瘍モデルにおける血管外腫瘍組織へのエバンスブルーの腫瘍特異的侵入を示す。配列は、配列番号３、配列番号４および配列番号４０である。腫瘍マウスに１μｇのアルブミン結合色素エバンスブルーを注射し、続いて５分後、ＰＢＳ中の１００ｎｍｏｌのｉＲＧＤペプチドまたは対照ペプチドまたはＰＢＳのみを注射した。３０分後に組織を回収した。（Ａ）組織および次の腫瘍の肉眼的外観を示す；ＢＴ４７４ヒト乳癌および２２Ｒｖ１ヒト前立腺癌、ならびに遺伝子操作デノボマウス膵管腺癌（ＰＤＡＣ）の同所異種移植片。（Ｂ）腫瘍細胞および正常組織の心内注射によって発生させたＧＦＰ−ＰＣ−３播種性腫瘍の肉眼的外観を示す。ＧＦＰ−ＰＣ−３播種性腫瘍モデルにおける多数の小結節（左上パネル、矢頭）を含めて、色素とｉＲＧＤの両方を受けたマウスからの腫瘍における青色物に注目すること。ＧＦＰ−ＰＣ−３播種性腫瘍の右パネルにおける緑色蛍光シグナル（白色の着色）は、腫瘍結節の位置を示す。（Ｃ）ＧＦＰ−ＰＣ−３播種性腫瘍モデルの顎腫瘍におけるエバンスブルーの定量化。同時注入がＲＸＸＫ／Ｒ  ＣｅｎｄＲモチーフを欠く対照ＲＧＤペプチド（配列番号６）またはＰＢＳのみとのものであるときではなく、ｉＲＧＤを該色素と同時注入したときの該色素の腫瘍特異的蓄積に注目すること。統計解析をスチューデントｔ検定で行った；エラーバー、ｓ．ｅ．ｍ．；二重アスタリスク、ｐ＜０．０１；ｎ＝３。
【図１１】図１１は、ｉＲＧＤのＣｅｎｄＲエレメント（ＣＲＧＤＫ；配列番号３４）が、皮膚における局所的な血管の透過性増加を誘導することを示す。修正されたマイルス（Ｍｉｌｅｓ）アッセイを行った（ＭｉｌｅｓおよびＭｉｌｅｓ、１９５２、Ｍｕｒｏｈａｒａら、１９９８、Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９）。０．５％エバンスブルーと１３μｇのＱｕａｎｔｉｌｕｍ組み換えルシフェラーゼと１０９ｐｆｕのターゲティングされていないファージ粒子との混合物を含有する１５０μＬのＰＢＳをマウスに静脈内注射した。１０分後、示されている濃度のＶＥＧＦ−１６５、ＲＰＡＲＰＡＲペプチド（配列番号２）、ＲＰＡＲペプチド、ＣＲＧＤＫペプチド（配列番号３４）を含有する３０μＬのＰＢＳまたは３０μＬのＰＢＳのみの皮内注射をマウスに施した。３０分後、皮膚サンプルを４ｍｍパンチャーで回収した。ルシフェラーゼ活性およびファージ力価を測定して、皮膚の血管外組織内での前記薬剤の滞留量を定量した。それらの値を、ＰＢＳを注射した皮膚サンプルに対して正規化した。統計解析をＡＮＯＶＡで行った；ｎ＝３；エラーバー、ｓ．ｅ．ｍ．；単一アスタリスク、ｐ＜０．０５；二重アスタリスク、ｐ＜０．０１；三重アスタリスク、ｐ＜０．００１。ＲＰＡＲは、配列番号５である。
【図１２】図１２は、ｉＲＧＤ−コンボ（ｉＲＧＤ−ｃｏｍｂｏ）送達システムを示す。配列は、配列番号１および配列番号３７である。静脈内注射したｉＲＧＤペプチドは、３段階プロセスで腫瘍組織に浸透する（右パネル、より詳しくはＳｕｇａｈａｒａら、２００９を参照のこと）；（１）ｉＲＧＤは、ＲＧＤモチーフを有する腫瘍血管内皮細胞上のαｖインテグリンを認識する、（２）その後、それがタンパク質分解を受けて、Ｃ末端の潜在ＣｅｎｄＲエレメント、ＲＧＤＫ／Ｒ（配列番号３１）を露出し（右パネルにおける小さな、か細い矢印）、ジスルフィド結合が破壊する（右パネルの細い線）、（３）ＣｅｎｄＲエレメントが、ニューロピリン−１への結合を媒介して、ＣｅｎｄＲ誘導経内皮および組織（ＣｅｎｄＲ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｔｒａｎｓｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ  ＆  Ｔｉｓｓｕｅ：ＣｅｎｄＩＴ）効果を誘導し、その結果、細胞および組織の浸透が生ずる。従来のコンジュゲート型送達方法では、カーゴ（例えば、薬物、診断薬）は、Ｎ末端システインに化学的に結合させる（細い線の下になっている「Ｃ」は、ジスルフィド破壊を表す、右パネル）。コンボ送達法の場合、カーゴは、ペプチドとは別々に同時投与される。ｉＲＧＤが誘導するＣｅｎｄＩＴ効果が、同時投与されたカーゴの血管外腫瘍組織への浸透を可能にする。
【図１３】図１３Ａ〜１３Ｃは、ｉＲＧＤ注射マウスにおける血管外腫瘍組織内の分子およびナノ粒子の蓄積を示す。同所性２２Ｒｖ１ヒト前立腺腫瘍を有するマウスに、２００ｎｍｏｌのフルオレセイン標識ＣＲＧＤＣペプチド（ＦＡＭ−ＣＲＧＤＣ、配列番号３６）、０．２ｍｇのテキサスレッド標識３ｋＤａもしくは１０ｋＤａデキストラン、５ｍｇ鉄／ｋｇのフルオレセイン標識酸化鉄ナノワーム（ｎａｎｏｗｏｒｍ）、または１０９プラーク形成単位（ｐｆｕ）のターゲティングされていないファージを注射し、続いて５分後、ＰＢＳ中の１００ｎｍｏｌのｉＲＧＤペプチドまたはＰＢＳのみを注射した。３０分後、デキストランおよびファージのために、ならびに２時間後、ＦＡＭ−ＣＲＧＤＣおよびナノワームのために組織を回収した。（Ａ）腫瘍の免疫蛍光。ＦＡＭ−ＣＲＧＤＣについては、ＵＶ光下で撮った画像も示す（１番左のパネル）。点線は、組織を置いた場所を示す。ファージをＴ７ファージ抗体で検出した。着色をそれらのパネルに記載する。淡色のスペックは、ＦＡＭ−ＣＲＧＤＣ陽性染色を表し；淡灰色領域は、デキストラン陽性染色を表し；淡色スペックは、酸化鉄ナノワームまたはファージ染色を表す。スケールバー＝１００μｍ。（Ｂ）腫瘍切片におけるＦＡＭ−ＣＲＧＤＣおよびデキストランについての陽性領域の定量化。凍結切片を、抗ＦＩＴＣ抗体（ＦＡＭ−ＣＲＧＤＣ）または抗デキストラン抗体（デキストラン）で免疫組織化学染色し、分析のためにＳｃａｎｓｃｏｐｅでスキャンした。（Ｃ）ファージ力価に基づく組織内に蓄積されたファージの定量化。
【図１４】図１４Ａ〜１４Ｄは、ｉＲＧＤと同時注入したドキソルビシン（ＤＯＸ）−リポソームの強化された抗腫瘍効果を示す。（ＡおよびＢ）同所性２２Ｒｖ１ヒト前立腺腫瘍を有するヌードマウスにＤＯＸ−リポソーム（３ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ）を静脈内注射し、続いて５分後、１００ｎｍｏｌのｉＲＧＤまたはＰＢＳを静脈内注射した。３時間後に腫瘍および組織を回収した。（Ａ）では、腫瘍の切片を作製し、抗ＣＤ３１抗体で染色した。ドキソルビシンは、左パネルにおいて４つのハローのように見える淡色スペックにより表される。スケールバー＝２００μｍ、ｎ＝３。（Ｂ）では、組織内のＤＯＸを定量化した。（Ｃ）２週齢同所性２２Ｒｖ１腫瘍を有するヌードマウスに、２μｍｏｌ／ｋｇのｉＲＧＤ、シクロ（−ＲＧＤｆＫ−）（配列番号４０）またはＰＢＳと併せて、ＤＯＸ−リポソーム（１または３ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ）またはＰＢＳの静脈内注射を毎日施した。処置の１７日後に腫瘍を採取し、計量した。各群のマウスの数は５匹であった。同様の結果をもたらした３回実験のうちの１回を示す。（Ｄ）前記処置研究からの腫瘍サンプルおよび心臓サンプルの組織切片を用いて免疫組織化学的にＴＵＮＥＬ染色を行い、陽性について定量化した。統計解析を（Ｂ）の場合はスチューデントｔ検定で、ならびに（Ｃ）および（Ｄ）の場合はＡＮＯＶＡで行った；エラーバー。ｓ．ｅ．ｍ．；ｎ．ｓ．、有意でない；単一アスタリスク、ｐ＜０．０５；二重アスタリスク、ｐ＜０．０１；三重アスタリスク、ｐ＜０．００１。
【図１５】図１５は、ｉＲＧＤと３ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇのＤＯＸ−リポソームとの併用についての強化された抗腫瘍効果を示す。２週齢同所性２２Ｒｖ１腫瘍を有するヌードマウスに、２μｍｏｌ／ｋｇ  ｉＲＧＤまたはＰＢＳと併せて、ＤＯＸ−リポソーム（３ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ）またはＰＢＳの静脈内注射を毎日施した。処置の１７日後に腫瘍を採取し、計量した。各群の動物の数は１３匹であった。統計解析をスチューデントｔ検定で行った；エラーバー、ｓ．ｅ．ｍ．；単一アスタリスク、ｐ＜０．０５；二重アスタリスク、ｐ＜０．０１。
【図１６】図１６は、ｉＲＧＤとＤＯＸ−リポソームの併用後の心臓の組織切片を用いて行ったＴＵＮＥＬ染色を示す。図１４Ｃに示した処置研究後に回収した心臓サンプルの切片を作製し、ＴＵＮＥＬアッセイキットおよびＤＡＰＩ（青色）で免疫蛍光染色し、共焦点顕微鏡で観察した。ぼやけて見える赤い点（矢印が例を指摘している）は、ＴＵＮＥＬシグナルを表す。スケールバー＝２００μｍ。
【図１７】図１７は、ｉＲＧＤとＤＯＸ−リポソームの併用で処置した腫瘍マウスの体重シフトを示す。図１４Ｃに示した処置研究におけるマウスを、処置研究中、４日おきに計量した。体重シフトパーセントを示す。統計解析をＡＮＯＶＡで行った；エラーバー。ｓ．ｅ．ｍ．；ｎ．ｓ．、有意でない；三重アスタリスク、ｐ＜０．００１。
【図１８】図１８Ａ〜１８Ｃは、ｉＲＧＤと同時注入したハーセプチンについての強化された抗腫瘍効果を示す（ＡおよびＢ）。同所性ＢＴ４７４ヒト乳房腫瘍を有するマウスにハーセプチン（３ｍｇ／ｋｇ）を静脈内注射し、続いて５分後、１００ｎｍｏｌのｉＲＧＤまたはＰＢＳを静脈内注射した。３時間後に組織を回収した。（Ａ）では、腫瘍切片をハーセプチンについて抗ヒトＩｇＧ抗体で免疫組織化学染色し、陽性領域（より暗い陰影）を定量化した。ｎ＝３。（Ｂ）では、組織内のハーセプチンを競合ＥＬＩＳＡで定量した。ｎ＝３。（Ｃ）ハーセプチンおよびｉＲＧＤの共投与での腫瘍処置研究。ＢＴ４７４腫瘍マウスに、最初の処置日（グラフの第０日）には３または９ｍｇ／ｋｇおよび後続の注射では１．５または４．５ｍｇ／ｋｇのハーセプチンを、またはＰＢＳを、４日ごとに２４日間静脈内注射した。この処置を、ハーセプチン注射日には４μｍｏｌ／ｋｇのｉＲＧＤまたはＰＢＳの、および他の日には２μｍｏｌ／ｋｇのｉＲＧＤまたはＰＢＳの毎日の注射と併用した。各群におけるマウスの数は、１０匹であった。同様の結果をもたらした４回の実験のうちの１つを示す。統計解析は、（Ａ）および（Ｂ）の場合はスチューデントｔ検定で、ならびに（Ｃ）の場合はＡＮＯＶＡで行った；エラーバー。ｓ．ｅ．ｍ．；ｎ．ｓ．、有意でない；単一アスタリスク、ｐ＜０．０５；二重アスタリスク、ｐ＜０．０１；三重アスタリスク、ｐ＜０．００１。
【図１９】図１９は、ｉＲＧＤを発現するＴ７ファージのエクスビボ腫瘍浸透を示す。ＰＰＣ１ヒト前立腺癌皮下腫瘍を切除し、次の１０９ｐｆｕ／ｍＬのファージと阻害剤の組み合わせを含有する短期培養物で維持した：（左上）、ｉＲＧＤペプチドを発現するファージ（ｉＲＧＤファージ）、阻害剤なし；（右上）、対照Ｇ７ペプチドを発現するターゲティングされていないファージ（ＣＧ７Ｃファージ）、阻害剤なし；（左中間）、ｉＲＧＤファージと１０ｍＭのアジ化ナトリウム；（右中間）、ｉＲＧＤファージ、阻害剤なしだが４℃インキュベートしたもの；（左下）、ｉＲＧＤファージと機能遮断性抗ニューロピリン−１抗体；（右下）、ｉＲＧＤファージと対照ヤギＩｇＧ。最初に腫瘍を阻害剤と共に２０分間、４℃でインキュベートした。その後、示されているファージをその溶液に添加し、腫瘍をさらに９０分間、３７℃（パネルＤの場合は４℃）でさらにインキュベートした。インキュベーション後、腫瘍を洗浄し、固定し、切片を作製した。それらの切片を抗Ｔ７ファージ抗体（淡色の染色）、抗ＣＤ３１抗体（中等度の陰影の染色−Ａの場合は見えない、Ｂにほんの少し存在）、およびＤＡＰＩ（灰色染色）で染色し、共焦点顕微鏡で観察した。ｉＲＧＤファージが腫瘍内に深く浸透したこと、およびこのプロセスがアジ化ナトリウム、低温または抗ニューロピリン−１抗体によって阻害されたことに注目すること。スケールバー＝２００μｍ。
【図２０】図２０は、ｉＲＧＤ−コンボレジメンでの処置後の腫瘍組織内のＤＯＸ−リポソームの拡散を示す。図１４Ｃにおける処置研究後に回収した腫瘍を固定し、切片を作製した。（Ａ）図１４Ｃからの腫瘍の切片を抗ＣＤ３１抗体で免疫蛍光染色した。左パネルにおいて全体にわたって見られる灰色スペックは、Ｄｏｘ染色を表す。ｉＲＧＤ−コンボレジメンでの２〜３週間の処置の後のＤＯＸの広い拡散に注目すること。５つの腫瘍それぞれからの代表画像を示す。スケールバー＝２００μｍ。
【発明を実施するための形態】
【００６８】
本開示の方法および組成物は、特定の実施形態についての以下の詳細な説明およびその中に含まれる実施例、ならびに図面ならびにそれらの前のおよび下記の説明を参照することにより、より容易に理解することができる。
【００６９】
本化合物、組成物、物品、デバイスおよび／または方法を開示および説明する前に、それらが、特に別の指定がない限り、特定の合成方法または特定の組換えバイオテクノロジー法に限定されず、または特に別の指定がない限り、特定の試薬に限定されず、従って、勿論、様々であり得ることを理解すべきある。本明細書において用いる専門用語が特定の実施形態の説明のみを目的とするものであり、限定的であることを意図したものでないことも理解すべきである。
【００７０】
Ａ．定義
本明細書および添付の特許請求の範囲において用いる場合、その文脈が明確に別様に示していない限り、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は複数形の指示内容を包含する。従って、例えば、「薬学的キャリア」への言及は、２つ以上のそのようなキャリアおよびこれらに類するものの混合物を包含する。
【００７１】
本明細書では、範囲を、「約」１つの特定の値から、および／または「約」別の特定の値までと表示することがある。このような範囲が表示されているとき、別の実施形態は、その１つの特定の値からおよび／またはその他の特定の値までを含む。同様に、値が、先行する「約」の使用により近似値として表示されているとき、その特定の値が別の実施形態を構成することは理解される。それぞれの範囲の終点が、他の終点と比べて有意でもあり、他の終点と無関係に有意でもあることは、さらに理解される。本明細書には多数の値が開示されており、それぞれの値が、その値自体に加えて、「約」その特定の値として本明細書に開示されているということも理解される。例えば、値「１０」が開示されているときには「約１０」も開示されている。当業者により適切に理解されるように、ある値が開示されているときには、その値「以下」、「その値以上」およびその値間の可能な範囲も開示されていることも理解される。例えば、値「１０」が開示されている場合、「１０以下」および「１０以上」も開示されている。本出願を通して、データを多数の異なる形式で提供すること、およびこのデータが、終点および始点、ならびにデータ点の任意の組み合わせについての範囲を示すことも理解される。例えば、特定のデータ点「１０」および特定のデータ点１５が開示されている場合、１０および１５より大きい、１０および１５以上、１０および１５未満、１０および１５以下、および１０および１５に等しい、ならびに１０と１５との間が開示されていると見なされることは理解される。２つの特定の単位の間のそれぞれの単位も開示されているということも理解される。例えば、１０および１５が開示されている場合には、１１、１２、１３、および１４も開示されている。
【００７２】
本明細書中および後続の特許請求の範囲中で、多数の用語に言及する。これらの用語は、以下の意味を有すると定義するものとする：
「任意選択の」または「必要に応じて」は、その後に記載されている事象または状況が起こることもあり、起こらないこともあること、およびその記載が該事象または状況が起こる事例および起こらない事例を含むことを意味する。
【００７３】
本出願を通して、様々な出版物を参照する。これらの出版物の開示全体が、本出願が属する技術の状態をより完全に説明するために参照により本出願に援用されている。開示する参考文献は、その参考文献に基づく文の中で論じる、それらの参考文献の中に含まれている材料についても、参照により個別に且つ具体的に援用されている。
【００７４】
特に別の指定がない限り、本開示の方法および組成物は、特定の合成方法、特定の分析技術または特定の試薬に制限されず、従って、様々であり得ることを理解すべきである。本明細書中で用いる専門用語は、特定の実施形態を説明するためのものであり、限定的であることを意図したものではないことも理解すべきである。
【００７５】
Ｂ．概要
組成物の細胞内送達、退出および組織浸透を可能にする新しい技術的プラットフォームを本明細書に開示する。この送達は、一般的である場合もあり、腫瘍などの目的の細胞または組織に対してターゲティングしたものである場合もある。標的細胞内への組成物（ナノ粒子、薬物、検出可能マーカー、および他の化合物を含む）およびそれらのペイロードの内部移行および標的組織内への透過は、ターゲティング効率を増加させことができる。ペイロードと細胞または組織特異的浸透性ペプチドとの共有結合的カップリングも非共有結合的会合もなしでの、ペイロードの細胞型特異的内部移行および組織タイプ特異的浸透は、以前に達成され得ていない。
【００７６】
細胞浸透性送達ビヒクルは、多数の方法で重要である。第一に、細胞浸透性ターゲティングエレメントは、ペイロードを細胞質内に運ぶことができ、これは、例えば核酸に基づく治療薬の送達において、重要である。第二に、内部移行は、ターゲティングを向上させることができる。なぜなら、細胞内へのペプチドおよびそのペイロードの内部移行は、ホーミングをより有効にするからである（Ｃｈｒｉｓｔｉａｎら、２００３；Ｊｉａｎｇら、２００４；Ｌａａｋｋｏｎｅｎら、２００４；Ｗｅｉｓｓｌｅｄｅｒら、２００５）。第三に、ここで説明するように、組織浸透特性と併有される細胞浸透特性は、血管外遊出および組織内拡散を増強する。Ｔａｔ、ペネトラチンおよび他の原型細胞浸透性ペプチドは、組織浸透特性に起因するものとはされていない。
【００７７】
本開示のＣｅｎｄＲペプチドは、Ｌ−アミノ酸ＣＰＰも、Ｄ−アミノ酸ＣＰＰも活性である（Ｌａｎｇｅｌ、２００７；ＭｅａｄｅおよびＤｏｗｄｙ、２００７）のに対して、ＣｅｎｄＲペプチドの細胞浸透特性が特定の細胞表面受容体への立体特異的結合に依存する点で原型細胞浸透性ペプチド（ＣＰＰ）とは異なる。さらに、ＣｅｎｄＲペプチドは、特定の病変（例えば腫瘍）または個々の組織に対して特異的であり得る。
【００７８】
血管外空間内に浸透する組成物の能力は、インビボでの組成物のターゲティング効率を制限する大きな要因である。定義的特徴としてＣ末端エレメントを有する単純なペプチドモチーフであって、細胞内へのファージおよび遊離ペプチドの高効率的内部移行のシグナルとなるモチーフが同定された。この内部移行現象は、「Ｃ末端則（Ｃ−ｅｎｄ  ｒｕｌｅ）」すなわち「ＣｅｎｄＲ」と名付けられた。Ｃ末端エレメントを曝露させるタンパク質分解は、内部移行シグナルを誘発するスイッチとしての機能を果たすことができる。様々な組成物を、この機構によって内部移行することができる。例えば、ターゲットに誘発されて内部移行する高特異的ホーミングシステムを可能にするＣ末端エレメントを露出させる一般的または細胞型特異的タンパク質分解により、標的部位でホーミングペプチド媒介蓄積が起こり得る。ＣｅｎｄＲ経路は、目的の組成物の血管系からの退出および組織内へのそれらの拡散のために使用することもできる。Ｃ末端エレメントは、血管系から組成物を拡散させることができる（および従って、例えば静脈内注射から腫瘍組織内に拡散され得る）。ＣｅｎｄＲエレメントは、目的の組成物の、他のＣｅｎｄＲ可能膜（ＣｅｎｄＲ−ｃａｐａｂｌｅ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）（例えば粘膜および脳血液関門）の通過を媒介するために使用することもできる。本明細書において用いる場合、「組織浸透」および「組織の浸透」は、細胞の外層または第一層を超えてもしくは通っての、または組織膜を通っての、組織内へのまたは組織を通っての通行を指す。組織を通ってのこのような通行または浸透（血管外遊出および組織浸透と呼ばれる場合もある）は、例えば、細胞内部移行および組織内の細胞間の通行の機能（ｆｕｎｃｔｉｏｎ）である場合がある。本出願を通して、用語「組織浸透」を用いるとき、このような浸透は、体内の至る所で見出される他のバリアおよびＣｅｎｄＲ可能膜、例えば血液脳関門、にも拡大することができると解される。
【００７９】
公知の細胞浸透性ペプチドとは異なり、本開示の内部移行エレメントは、位置依存性である−ペプチドのＣ末端以外の位置に存在するときには不活性である。もう１つの顕著な特徴は、ＣｅｎｄＲエレメントが立体特異的であること、すなわち、完全にＤ−アミノ酸から成るＣｅｎｄＲエレメントは不活性であることである。潜伏性ＣｅｎｄＲペプチドを、例えば適切なタンパク質分解酵素により切断して、例えばＣ末端アルギニン、リシンまたはリシン−グリシンを露出させることによって、活性化することができる。本出願を通して、用語「ＣｅｎｄＲエレメント」または「Ｃ末端エレメント」を用いるとき、Ｃ末端アルギニン、Ｃ末端リシン、またはグリシンが最も遠いＣ末端位置にあるＣ末端リシン−グリシンペアを記載するためにこれを用いる。言い換えると、リシンがＣ末端にある場合、そのリシンのＣ末端側にグリシンを有するＣｅｎｄＲエレメントは機能性のままで存在し得る。しかしながら、リシン残基がＣ末端エレメントとして機能することになるためには末端にグリシンを有する必要はない。それゆえ、リシンはグリシンなしで存在して依然として機能性であることができる。しかし、グリシンが、グリシンに隣接するリシンの存在なしでＣ末端エレメントとして機能できない点で、逆は真ではない。アルギニンは、最も遠いＣ末端位置に残存する限り、Ｃ末端エレメントとして機能するためにリシンもグリシンも必要としない。そのようなＣｅｎｄＲエレメントをタイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントと呼ぶことができる。
【００８０】
用語「ＣｅｎｄＲエレメント」または「Ｃ末端エレメント」は、Ｃ末端ヒスチジン、および配列Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４（この場合、Ｘ１はＲ、ＫまたはＨであり得、Ｘ４はＲ、Ｋ、ＨまたはＫＧであり得、Ｘ２およびＸ３はそれぞれ独立して任意のアミノ酸であり得る）を有するアミノ酸配列を記載するために用いることもできる。このようなＣｅｎｄＲエレメントを、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントと呼ぶことができる。Ｘ２およびＸ３アミノ酸を特定の目的のために選択することができる。例えば、Ｘ２、Ｘ３、または両方を、プロテアーゼ認識配列の全部または一部を形成するために選ぶことができる。これは、例えば、Ｘ４アミノ酸後の切断によって活性化される潜伏性または潜在ＣｅｎｄＲエレメントとしてＣｅｎｄＲエレメントを有するペプチドの切断を特定するまたは可能にするのに有用である。そのようなアミノ酸の選択例を、表１および表２に示す。Ｘ１、Ｘ２およびＸ３アミノ酸を、例えば、細胞表面のＮＲＰ−１分子にさらなるタンパク質を動員するために選択することもできる。これは、例えば、ＣｅｎｄＲエレメント（ならびにＣｅｎｄＲエレメントを含有する組成物、コンジュゲート、タンパク質およびペプチド）の選択性ならびに内部移行および／または組織浸透力を調節するために利用することができる。Ｘ２およびＸ３アミノ酸を、Ｘ１−Ｘ４モチーフ内でのプロテアーゼ切断を防止するために選択することもできる。例えば、Ｘ２および／またはＸ３は、プロリンである場合があり、これは、該プロリンと隣の下流アミノ酸との間での、例えばカルボキシペプチダーゼによる、プロテアーゼ切断を低減または排除する。もう１つの例として、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３および／またはＸ４間の結合の１つ以上を、それらの結合の位置でのプロテアーゼ切断を低減または排除するように修飾することができる。必要に応じて、特定のアミノ酸を、Ｘ２、Ｘ３、または両方のための使用から除外することができる。例えば、所望される場合、ＧおよびＤをそれぞれＸ２およびＸ３としての同時使用から除外することができる。いくつかのタイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントを、Ｒ／Ｋ／ＨＸＸＲ／Ｋ／Ｈ（配列番号２０）、Ｒ／ＫＸＸＲＫ（配列番号２３）およびＲ／Ｋ／ＨＸＸＫＧ（配列番号２１）と記載する場合もある。
【００８１】
ＣｅｎｄＲエレメントの例としては、
【００８２】
【化１】
0005906184.tif 000002
が挙げられる。
【００８３】
便宜上、ＣｅｎｄＲエレメントを構成するアミノ酸モチーフを、アルギニン、リシン、リシン−グリシンペア、またはヒスチジンがＣ末端にあった場合、および該Ｃ末端の該アルギニン、リシン、リシン−グリシンペア、またはヒスチジンの将来の露出が計画または意図される場合、ＣｅｎｄＲエレメントまたは潜伏性ＣｅｎｄＲエレメントと呼ぶ場合がある。
【００８４】
このプロテアーゼ可制御内部移行システムは、細胞型特異的および／または組織タイプ特異的取り込みなどの機能ならびに組織内にその組成物を分散させる能力を有する組成物を工学的に作製する際に有用であり得る。加えて、この規則は、ウイルス感染および食作用をはじめとする数多くの生物学的プロセスに関連し得る。ウイルスは本来、細胞に感染するためにＣｅｎｄＲ経路を用いることができるので、ＣｅｎｄＲ組成物、コンジュゲート、分子、タンパク質および／またはエレメントは、ウイルス感染プロセスへの干渉に有用であり得る。
【００８５】
本開示の組織／細胞浸透システムは、特異的標的組織にホーミングするばかりでなく、その組織内に浸透もするペプチドを得ることを可能にする。これらのペプチドは、２つの活性配列モチーフ、特定の受容体に対する結合部位と組織浸透受容体に結合する配列モチーフ、を含有する。これら２つの配列モチーフは、互いにオーバーラップし得る。ＣｅｎｄＲペプチドは、ＣｅｎｄＲペプチドと共に提示された材料を取り込む輸送システムを活性化する。様々なホーミングＣｅｎｄＲペプチドを使用して、薬物ならびに他の化合物および組成物を異なる標的細胞および標的組織にターゲティングすることができる。例えば、あるタイプのＣｅｎｄＲペプチドについての受容体は、腫瘍の低酸素領域において優先的に発現されるので、これらのペプチドのパネルを有することにより、単一のペプチドで果たすことができるものよりも腫瘍組織に対する適用範囲を充分にすることが可能になる。様々なサイズの共組成物およびカーゴをＣｅｎｄＲペプチドと共に使用することができる。薬物と共に腫瘍浸透性ＣｅｎｄＲペプチド（または２つの組み合わせ）を含めることで、腫瘍内での該薬物のより高い濃度を、非腫瘍組織にその濃度の影響を及ぼすことなく、生じさせることができる。本開示の方法および組成物は、腫瘍内に薬物をより広く分布させることもできる。結果として、抗腫瘍活性を強化することができる。ＣｅｎｄＲエレメントは、非常に多数の他のエレメント、例えばアクセサリー分子およびホーミング分子、ならびに送達および内部移行する成分、例えば共組成物およびカーゴ組成物、と併用することができる。
【００８６】
腫瘍組織内への浸透は、血管外腫瘍組織への薬物の拡散に不利に働く、腫瘍からの組織液の流出を余儀なくする高い腫瘍内流体圧のため、すべての抗癌剤に伴う問題点である（Ｊａｉｎら、２００７）。考えられる理由は、血管は漏出性になる傾向があり、リンパ管が腫瘍においてあまりよく機能しないということである。薬物が完全に腫瘍特異性であり、正常組織において無害である場合（および費用が問題にならない場合）には、腫瘍のすべての部分への十分な用量の送達に対する一切の妨げを圧倒するような、大量のその薬物を投与することができる。これは、明らかに抗癌剤での場合ではない；薬物毒性が投薬を制限し、腫瘍浸透が大きな障害である。本開示の方法および組成物は、浸透の問題を有する薬物または有効であるが標準的な治療用量でさえ高毒性である薬物に対して最高の影響を及ぼすことができる。本質的に、すべての抗癌剤がこれらの問題の一方または両方を有する。
【００８７】
特定のペプチドモチーフは、腫瘍内へのならびに他の細胞内および組織内への薬物の浸透を特異的に増加させることを発見した。腫瘍内への薬物の浸透を特異的に増加させる腫瘍ホーミングペプチドを開示する。これらのペプチドは、腫瘍特異的ホーミング配列とＣｅｎｄＲという名の組織浸透性および内部移行モチーフの両方を含有する。ＣｅｎｄＲエレメントは、これらのペプチドの中に隠れており、ターゲット腫瘍でのタンパク質分解により活性化される。これらのペプチドに結合した薬物、蛍光体およびナノ粒子ペイロードが腫瘍内に蓄積し、血管外腫瘍組織に深く浸透する。しかし、ペイロードをＣｅｎｄＲペプチドとカップリングまたは会合させる必要がないことも発見した。遊離ＣｅｎｄＲペプチドは、腫瘍内への組織透過性を特異的に誘導し（ＣｅｎｄＩＴ効果−ＣｅｎｄＲ誘導経内皮および組織効果（ＣｅｎｄＲ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｔｒａｎｓｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ  ＆  ｔｉｓｓｕｅ  ｅｆｆｅｃｔ）−と名付けた）、それにより、同時注入薬物またはナノ粒子を血管外遊出させ、腫瘍組織内に浸透させることが可能となる。この同じ効果を、ＣｅｎｄＲ受容体を有する任意の細胞および組織で達成することができる。実証された同時注入化合物の腫瘍内濃度の増加は、約４倍である。
【００８８】
例えば、腫瘍浸透性ＣｅｎｄＲペプチドは、腫瘍イメージングおよび抗癌剤での腫瘍処置を増加させるために使用することができる。ＦＤＡ認可イメージング剤、例えば酸化鉄ナノ粒子ＭＲＩ造影剤を、腫瘍を有するマウスに、腫瘍ホーミングＣｅｎｄＲペプチドと共に、またはペプチドの組み合わせと共に注射し、その後イメージングすることができる。任意の公知のまたは未来の薬物をＣｅｎｄＲペプチド共に使用して、腫瘍成長に作用することおよび腫瘍成長を阻害することができる。例えば、前記共組成物は、任意の臨床使用抗癌剤であり得る。公知の技術を用いて、腫瘍組織内での薬物蓄積および分布ならびに抗腫瘍有効性を決定することができる（そのようなものの例を本明細書に記載する）。
本開示の内部移行および組織浸透増強は、広範な用途を有する。本開示のＣｅｎｄＲエレメントおよびペプチドを使用して、任意の薬物、化合物または組成物の効果的なターゲティング、送達および浸透を増加および増強することができる。ターゲティングしたおよびホーミングするＣｅｎｄＲペプチドの効果には幾つかの有意な意味がある。第一に、薬物ならびに他の化合物および組成物を、目的の細胞および組織に、標準的な療法において可能であるより高い濃度で送達することができる。これは、ＣｅｎｄＲペプチドによって媒介される内部移行および組織浸透の増加の結果である。投与することができる薬物の量は一般に、副作用によって制限されるので、これは特に重要である。従って、投与される薬物の量を増加させることなく標的での薬物濃度を増加させることで、任意の公知のまたは未来の薬物および療法の有効性を拡大および向上させることができる。ターゲティングまたはホーミングＣｅｎｄＲペプチドを使用すると、標的とした細胞および組織においてのみ薬物濃度の増加がおこり、標的とされていない組織ではおこらない。そのような場合、処置の効率は増加するが、副作用は同じままである。第二に、薬物または他の化合物もしくは組成物の用量または量を、処置効率を損なうことなく、減少させることができる。ＣｅｎｄＲペプチドは、投与する薬物量が少なくなったとしても、標的細胞または標的組織で同じ薬物濃度を生じさせる。第三に、アジュバントＣｅｎｄＲペプチドと薬物、イメージング剤または他の化合物もしくは組成物を互いにカップリングさせる必要がないため、検証および認可済みのＣｅｎｄＲペプチドを使用して、任意の薬物、イメージング剤または他の化合物もしくは組成物を増加させることができる。
【００８９】
本開示の方法および組成物は、一般には治療およびインビボ診断における、ならびに詳細には癌治療およびインビボ診断における大きな問題：組織内への薬物ならびに他の化合物および組成物の不良な浸透、に対処する。腫瘍組織内に有効に且つ特異的に浸透する腫瘍ホーミングペプチドであって、結合させたペイロード、例えば蛍光体、薬物またはナノ粒子造影剤を血管外腫瘍組織内深くに運ぶことができるものであるペプチドを発見した。前記ペイロードを前記腫瘍浸透性ペプチドにカップリングまたは結合させる必要がないことを今般発見した；前記ペプチドは、腫瘍における組織透過性を特異的に誘導し、それにより同時注入化合物は血管外遊出することができ、腫瘍組織内に浸透することができる。
【００９０】
この腫瘍浸透性ペプチド概念は、膨大な有用性を有する：（１）標準的なレジメンから腫瘍に到達するより多くの薬物（または診断プローブまたは他の化合物もしくは組成物）を腫瘍に送達する。これは、より良好な有効性および低減した副作用を意味する。（２）この手順が腫瘍浸透性問題を解決するのを助けることができる。薬物は、一般に血管から３〜５細胞径より先に浸透せず、それにより、より遠くに位置する腫瘍細胞は、いずれの薬物もないまま放置されるかまたは、耐性の発現を促進する可能性がある低い薬物濃度に曝露される（ＨａｍｂｌｅｙおよびＨａｉｔ、２００９）。本開示の方法および組成物は、腫瘍内でのより均等な薬物分布を得ることを可能にする。（３）薬物を該ペプチドにカップリングさせる必要がないということは、腫瘍浸透性ペプチドが一旦臨床的に検証されたら、それを使用して任意のイメージング剤または抗癌剤の有効性を増加させることができることを意味する。
【００９１】
もう１つの例では、ＣｅｎｄＲペプチドをナノ医療に使用することができる。ナノ医療の主目的の１つは、疾患の診断、モニタリングおよび処置の際に複数の機能を果たすことにより単純な薬物に勝るデバイスを設計することである。新しい技術を応用して、血管外組織内への不良な浸透性などの、多機能ナノ粒子の医学的使用における大きな問題の幾つかを解決することができる。
【００９２】
ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドおよびＣｅｎｄＲエレメントを開示する。ＣｅｎｄＲエレメントおよびＣｅｎｄＲ化合物は、ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドおよびこれらに類するものの基本的特徴である。ＣｅｎｄＲ組成物は、ＣｅｎｄＲエレメントまたはＣｅｎｄＲ化合物を含む任意の組成物、集塊、コンジュゲート、分子、タンパク質、ペプチドなどである。ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、ＣｅｎｄＲエレメントまたはＣｅｎｄＲ化合物と１つ以上の他のエレメント、ペプチド、タンパク質、化合物、分子、薬剤、化合物などとの、共有結合性であろうと非共有結合性であろうと、会合体である。例えば、ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲ分子などを含むことができる。ＣｅｎｄＲ分子は、ＣｅｎｄＲエレメントまたはＣｅｎｄＲ化合物を含む分子である。例えば、ＣｅｎｄＲ分子は、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドなどを含むことができる。一般に、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲ分子およびＣｅｎｄＲコンジュゲートがＣｅｎｄＲ組成物のすべての形態である。ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲペプチドおよびＣｅｎｄＲタンパク質は、ＣｅｎｄＲ分子の形態であり得る。その文脈が別様に示していない限り、ＣｅｎｄＲ組成物への言及は、ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲエレメントおよびこれらに類するものを指すことを意図したものである。ＣｅｎｄＲ成分は、ＣｅｎｄＲエレメントを含む任意の分子、ペプチド、タンパク質、化合物、コンジュゲート、組成物などである。ＣｅｎｄＲ成分の例としては、例えば、ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドおよびＣｅｎｄＲエレメントが挙げられる。
【００９３】
ＣｅｎｄＲ成分は、１つ以上のＣｅｎｄＲエレメントを含む場合がある。ＣｅｎｄＲエレメントが２つ以上のＣｅｎｄＲエレメントを含む場合、それらのＣｅｎｄＲエレメントの幾つかまたはすべてをタンパク質またはペプチドのＣ末端で露出することまたは露出可能にすることができるようにＣｅｎｄＲ成分を設計することは有用である。これは、例えばコンジュゲートおよび組成物において、非常に多数の方法で果たすことができる。これは、例えば分岐形成ペプチドおよびタンパク質において、果たすこともできる。
【００９４】
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法を開示し、該方法は、細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲエレメントおよび共組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、この場合、該細胞、組織または両方を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【００９５】
細胞内への共組成物の内部移行を増強する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物に曝露し、それによって該細胞内への該共組成物の内部移行を増強する工程を含み、この場合、該細胞を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【００９６】
組織内へのまたは組織を通っての共組成物の浸透を増強する方法を開示し、該方法は、該組織をＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物に曝露し、それによって該組織内へのおよび該組織を通っての該共組成物の浸透を増強する工程を含み、この場合、該組織を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【００９７】
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法を開示し、該方法は、該細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲペプチドおよび該共組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、この場合、該細胞、組織または両方を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【００９８】
細胞内へ共組成物の内部移行を増強する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲペプチドおよび該共組成物に曝露し、それによって該細胞内への該共組成物の内部移行を増強する工程を含み、この場合、該細胞を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。組織内へのおよび組織を通っての共組成物の浸透を増強する方法を開示し、該方法は、該組織をＣｅｎｄＲペプチドおよび該共組成物に曝露し、それによって該組織内へのおよび該組織を通っての該共組成物の浸透を増強する工程を含み、この場合、該組織を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【００９９】
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法を開示し、該方法は、該細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、この場合、該細胞、組織または両方を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【０１００】
細胞内へ共組成物の内部移行を増強する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物に曝露し、それによって該細胞内への該共組成物の内部移行を増強する工程を含み、この場合、該細胞を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【０１０１】
組織内へのまたは組織を通っての共組成物の浸透を増強する方法を開示し、該方法は、該組織をＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物に曝露し、それによって該組織内へのおよび該組織を通っての該共組成物の浸透を増強する工程を含み、この場合、該組織を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【０１０２】
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法を開示し、該方法は、該細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該共組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、この場合、該細胞、組織または両方を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【０１０３】
細胞内へ共組成物の内部移行を増強する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該共組成物に曝露し、それによって該細胞内への該共組成物の内部移行を増強する工程を含み、この場合、該細胞を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【０１０４】
組織内へのまたは組織を通っての共組成物の浸透を増強する方法を開示し、該方法は、該組織をＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該共組成物に曝露し、それによって該組織内へのおよび該組織を通っての該共組成物の浸透を増強する工程を含み、この場合、該組織を曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【０１０５】
例えば共組成物を使用する本開示の方法などの、本開示の方法のいずれにおいても、本方法で使用するＣｅｎｄＲエレメント（単数もしくは複数）または他のＣｅｎｄＲ成分（単数もしくは複数）は、カーゴ組成物を含むＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。同様に、例えばカーゴ組成物を使用する本開示の方法などの、本開示のいずれの方法においても、該ＣｅｎｄＲエレメント（単数または複数）と該共組成物（単数または複数）が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合されてもいない方法で１つ以上の組成物を使用する場合もある。
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通ってのカーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法を開示し、該方法は、該細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
【０１０６】
細胞内へのカーゴ組成物の内部移行を増強する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞内への該カーゴ組成物の内部移行を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
【０１０７】
組織内へのおよび組織を通ってのカーゴ組成物の浸透を増強する方法を開示し、該方法は、該組織をＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該組織内へのおよび該組織を通っての該カーゴ組成物の浸透を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通ってのカーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法を開示し、該方法は、該細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲペプチドおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
【０１０８】
細胞内へのカーゴ組成物の内部移行を増強する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲペプチドおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞内への該カーゴ組成物の内部移行を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。組織内へのおよび組織を通ってのカーゴ組成物の浸透を増強する方法を開示し、該方法は、該組織をＣｅｎｄＲペプチドおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該組織内へのおよび該組織を通っての該カーゴ組成物の浸透を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通ってのカーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法を開示し、該方法は、該細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
【０１０９】
細胞内へのカーゴ組成物の内部移行を増強する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞内への該カーゴ組成物の内部移行を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
【０１１０】
組織内へのおよび組織を通ってのカーゴ組成物の浸透を増強する方法を開示し、該方法は、該組織をＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物に曝露し、それによって該組織内へのおよび該組織を通っての該カーゴ組成物の浸透を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通ってのカーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法を開示し、該方法は、該細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
【０１１１】
細胞内へのカーゴ組成物の内部移行を増強する方法も開示し、該方法は、該細胞をＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞内への該カーゴ組成物の内部移行を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
【０１１２】
組織内へのおよび組織を通ってのカーゴ組成物の浸透を増強する方法を開示し、該方法は、該組織をＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該組織内へのおよび該組織を通っての該カーゴ組成物の浸透を増強する工程を含み、この場合、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは共有結合で会合している。
【０１１３】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記細胞、組織または両方の透過性を上げることができる。前記細胞、組織または両方が、被験体内にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物に曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を前記被験体に同時に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を、該ＣｅｎｄＲエレメントと該共組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を別々の経路により前記被験体に投与することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物は、互いに結合していない。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物に曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に同時に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物を、該ＣｅｎｄＲエレメントと該カーゴ組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。そのような組成物を単独で投与することができ、または任意の他の成分、例えば本明細書に開示するもの、と併用で投与することができる。例えば、ＣｅｎｄＲ／カーゴ組成物を、１つ以上の他のＣｅｎｄＲ成分、１つ以上の他のカーゴ組成物、１つ以上の共組成物、もしくは任意のこれらの組み合わせと一緒に投与または使用することができる。ＣｅｎｄＲエレメントは、ＣｅｎｄＲエレメントと任意の他の成分、例えば本明細書に記載するもの、を含む組成物中に存在し得る。例えば、ＣｅｎｄＲ組成物は、１つ以上の他のＣｅｎｄＲ成分、１つ以上のカーゴ組成物、またはこれらの任意の組み合わせをさらに含む場合がある。
複数の異なるＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、または組み合わせを一緒に使用することができる。同様に、複数の異なる共組成物、複数の異なるカーゴ組成物、または組み合わせを一緒に使用することができる。そのような複数の異なるＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、または組み合わせを一緒に使用する場合、それらを単一タイプの共組成物、単一タイプのカーゴ組成物、複数の異なる共組成物、複数の異なるカーゴ組成物、または組み合わせと共に使用することができる。同様に、複数の異なる共組成物、複数の異なるカーゴ組成物、または組み合わせを一緒に使用し得るとき、それらを単一タイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲコンジュゲートもしくはＣｅｎｄＲ組成物と共に、または複数の異なるＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物もしくは組み合わせと共に使用することができる。一緒に使用するというのは、同時に同じ組成物、同じ処置、同じ処置レジメン、同じ処置コースなどで一緒に使用することを意味する。
例えば、ＣｅｎｄＲエレメントを１つもしくは複数の異なるＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、もしくは組み合わせ、１つもしくは複数の異なる共組成物、複数の異なるカーゴ組成物、または組み合わせ、あるいはこれらの任意の組み合わせと一緒に使用することができる。そのような組み合わせの場合、ＣｅｎｄＲエレメントそれ自体が、同じコンジュゲートまたは組成物内に、１つ以上のカーゴ組成物、１つ以上のアクセサリー分子、１つ以上のホーミング分子などと共に併有される場合がある。
【０１１４】
もう１つの例として、（ＣｅｎｄＲエレメントおよびＲＧＤエレメントを単一ペプチドに併有する）ｉＲＧＤを、１つのもしくは複数の異なるＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、もしくは組み合わせ、１つのもしくは複数の異なる共組成物、複数の異なるカーゴ組成物、もしくは組み合わせ、またはこれらの任意の組み合わせと一緒に使用することができる。そのような組み合わせの場合、ｉＲＧＤそれ自体が、同じコンジュゲートまたは組成物内に、１つ以上のカーゴ組成物、１つ以上のアクセサリー分子、１つ以上のホーミング分子などと共に併有される場合がある。
【０１１５】
前記細胞、組織または両方を異なるＣｅｎｄＲ成分の組み合わせおよび異なる共組成物の組み合わせに、該ＣｅｎｄＲ成分および該共組成物を前記被験体に投与することにより、曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記共組成物の１つ以上を同時に前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記共組成物の１つ以上を、該ＣｅｎｄＲ成分（単数または複数）と該共組成物（単数または複数）を含む１つ以上の単一組成物で、前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記共組成物の１つ以上を、１つ以上の別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記共組成物の１つ以上を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を、１つ以上の別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記共組成物の１つ以上を、１つ以上の別々の経路により、前記被験体に投与することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物は、互いに結合していない。
【０１１６】
前記細胞、組織または両方を異なるＣｅｎｄＲ成分の組み合わせおよび異なるカーゴ組成物の組み合わせに、該ＣｅｎｄＲ成分および該カーゴ組成物を前記被験体に投与することにより、曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記カーゴ組成物の１つ以上を同時に前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記カーゴ組成物の１つ以上を、該ＣｅｎｄＲ成分（単数または複数）の１つ以上と該カーゴ組成物（単数または複数）の１つ以上を含む１つ以上の単一組成物で、前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記カーゴ組成物の１つ以上を、１つ以上の別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記カーゴ組成物の１つ以上を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物を、１つ以上の別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ成分の１つ以上および前記カーゴ組成物の１つ以上を、１つ以上の別々の経路により、前記被験体に投与することができる。本明細書に開示する様々な形態のいずれかでの様々なＣｅｎｄＲ成分および、必要に応じて、様々な共組成物のいずれかを一緒にまたは別々に、様々な時点、方式、形態、レジメン、投薬量などで投与することができる。
【０１１７】
ｉＲＧＤおよび前記共組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ｉＲＧＤおよび該共組成物に曝露することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を同時に前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を、該ｉＲＧＤと該共組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物を別々の経路により前記被験体に投与することができる。幾つかの形態において、前記ｉＲＧＤおよび前記共組成物は、互いに結合していない。前記ｉＲＧＤおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ｉＲＧＤおよび該カーゴ組成物に曝露することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記カーゴ組成物を同時に前記被験体に投与することができる。前記ｉＲＧＤおよび前記カーゴ組成物を、該ｉＲＧＤと該カーゴ組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。そのような組成物を単独で投与することができ、または任意の他の組成物、例えば本明細書に開示するもの、と併用で投与することができる。例えば、ｉＲＧＤ／カーゴ組成物を１つ以上の他のＣｅｎｄＲ成分、１つ以上の他のカーゴ組成物、１つ以上の共組成物、もしくは任意のこれらの組み合わせと一緒に投与または使用することができる。前記ｉＲＧＤは、該ｉＲＧＤと任意の他の成分、例えば本明細書に開示するもの、を含む組成物中に存在し得る。例えば、前記ｉＲＧＤ組成物は、１つ以上の他のＣｅｎｄＲ成分、１つ以上のカーゴ組成物、またはこれらの任意の組み合わせをさらに含む場合がある。
【０１１８】
前記ＣｅｎｄＲペプチドは、前記細胞、組織または両方の透過性を上げることができる。前記細胞、組織または両方が、被験体内にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記共組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該共組成物に曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記共組成物を前記被験体に同時に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記共組成物を、該ＣｅｎｄＲペプチドと該共組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記共組成物を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記共組成物を別々の経路により前記被験体に投与することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記共組成物は、互いに結合していない。前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該カーゴ組成物に曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に同時に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記カーゴ組成物を、該ＣｅｎｄＲペプチドと該カーゴ組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。
【０１１９】
前記ＣｅｎｄＲ組成物は、前記細胞、組織または両方の透過性を上げることができる。前記細胞、組織または両方が、被験体内にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記共組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物に曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記共組成物を前記被験体に同時に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記共組成物を、該ＣｅｎｄＲ組成物と該共組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記共組成物を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記共組成物を別々の経路により前記被験体に投与することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記共組成物は、互いに結合していない。前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記カーゴ組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物に曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記カーゴ組成物を前記被験体に同時に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記カーゴ組成物を、該ＣｅｎｄＲ組成物と該カーゴ組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。より一般的には、ＣｅｎｄＲ成分は、ＣｅｎｄＲエレメントとカーゴ組成物の両方を含む場合がある。例えば、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよびＣｅｎｄＲ組成物は、ＣｅｎｄＲエレメントとカーゴ組成物の両方を含む場合がある。
【０１２０】
前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、細胞、組織または両方の透過性を上げることができる。前記細胞、組織または両方が、被験体内にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記共組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該共組成物に曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記共組成物を前記被験体に同時に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記共組成物を、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートと該共組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記共組成物を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記共組成物を別々の経路により前記被験体に投与することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記共組成物は、互いに結合していない。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該カーゴ組成物に曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に同時に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記カーゴ組成物を、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートと該カーゴ組成物を含む単一組成物で、前記被験体に投与することができる。
【０１２１】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、アミノ酸配列のすべてまたは一部である場合がある。前記アミノ酸配列は、タンパク質またはペプチドのすべてまたは一部である場合がある。前記ＣｅｎｄＲペプチドは、アミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドのすべてまたは一部である場合がある。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、アミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドを含む場合がある。前記ＣｅｎｄＲ組成物は、アミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドを含む場合がある。前記アミノ酸配列は、ＣｅｎｄＲエレメントを含む場合がある。前記アミノ酸配列は、１つ以上のアクセサリー分子をさらに含む場合がある。前記アミノ酸配列は、１つ以上のホーミング分子をさらに含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上のアクセサリー分子をさらに含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上のホーミング分子をさらに含む場合がある。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、１つ以上のカーゴ組成物を含む場合がある。前記ＣｅｎｄＲ組成物は、１つ以上のカーゴ組成物を含む場合がある。
幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには、細胞内に内部移行することができるか、組織に浸透することができるか、または両方できるが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することがも組織に浸透することもできない。幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには組織に浸透することができるが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには組織に浸透することができない。幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができるが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記共組成物と会合していずに、細胞に内部移行することができるか、組織に浸透することできるか、または両方できる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記共組成物と会合していずに、組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記タンパク質またはペプチドの唯一の機能性内部移行エレメントである。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の内部移行、浸透または両方は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。幾つかの形態において、組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物の浸透は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物の内部移行および浸透は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。幾つかの形態において、組織内へのまたは組織を通っての前記カーゴ組成物の浸透は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記カーゴ組成物の内部移行および浸透は、前記アミノ酸配列が、前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強するが、該アミノ酸配列が、該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強しない。
【０１２２】
幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該タンパク質またはペプチドに存在するときには、細胞内に内部移行することができるか、組織に浸透することができるか、または両方できるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該タンパク質またはペプチドに存在するときには、組織に浸透することができるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには組織に浸透することができない。幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該タンパク質またはペプチドに存在するときには、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記共組成物と会合していずに、細胞に内部移行することができるか、組織に浸透することできるか、または両方できる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記共組成物と会合していずに、組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記タンパク質またはペプチドの唯一の機能性内部移行エレメントである。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の内部移行、浸透または両方は、該細胞、組織または両方が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞、組織または両方が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物の浸透は、該組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物の内部移行および浸透は、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方は、該細胞、組織または両方が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞、組織または両方が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において組織内へのまたは組織を通っての前記カーゴ組成物の浸透は、該組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記カーゴ組成物の内部移行および浸透は、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強しない。
【０１２３】
幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲペプチドに存在するときには、細胞内に内部移行することができるか、組織に浸透することができるか、または両方できるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲペプチドに存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲペプチドに存在するときには、組織に浸透することができるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲペプチドに存在しないときには組織に浸透することができない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲペプチドに存在するときには、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲペプチドに存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲペプチドは、前記共組成物と会合していずに、細胞に内部移行することができるか、組織に浸透することできるか、または両方できる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲペプチドは、前記共組成物と会合していずに、組織に浸透することできる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲペプチドは、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記ＣｅｎｄＲペプチドの唯一の機能性内部移行エレメントである。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の内部移行、浸透または両方は、該細胞、組織または両方が前記ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されると増強するが、該細胞、組織または両方が該ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物の浸透は、該組織が前記ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物の内部移行および浸透は、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方は、該細胞、組織または両方が前記ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されると増強するが、該細胞、組織または両方が該ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において組織内へのまたは組織を通っての前記カーゴ組成物の浸透は、該組織が前記ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記カーゴ組成物の内部移行および浸透は、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲペプチドに曝露されないと増強しない。
【０１２４】
幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに存在するときには、細胞内に内部移行することができるか、組織に浸透することができるか、または両方できるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに存在するときには、組織に浸透することができるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに存在しないときには組織に浸透することができない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに存在するときには、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、前記共組成物と会合していずに、細胞に内部移行することができるか、組織に浸透することできるか、または両方できる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、前記共組成物と会合していずに、組織に浸透することできる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートの唯一の機能性内部移行エレメントである。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の内部移行、浸透または両方は、該細胞、組織または両方が前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されると増強するが、該細胞、組織または両方が該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物の浸透は、該組織が前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物の内部移行および浸透は、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方は、該細胞、組織または両方が前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されると増強するが、該細胞、組織または両方が該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において組織内へのまたは組織を通っての前記カーゴ組成物の浸透は、該組織が前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記カーゴ組成物の内部移行および浸透は、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲコンジュゲートに曝露されないと増強しない。
【０１２５】
幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲ組成物に存在するときには、細胞内に内部移行することができるか、組織に浸透することができるか、または両方できるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲ組成物に存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲ組成物に存在するときには、組織に浸透することができるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲ組成物に存在しないときには組織に浸透することができない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲ組成物に存在するときには、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができるが、該ＣｅｎｄＲエレメントが該ＣｅｎｄＲ組成物に存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物は、前記共組成物と会合していずに、細胞に内部移行することができるか、組織に浸透することできるか、または両方できる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物は、前記共組成物と会合していずに、組織に浸透することできる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物は、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記ＣｅｎｄＲ組成物の唯一の機能性内部移行エレメントである。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の内部移行、浸透または両方は、該細胞、組織または両方が前記ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されると増強するが、該細胞、組織または両方が該ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されないと増強しない。幾つかの形態において組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物の浸透は、該組織が前記ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物の内部移行および浸透は、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方は、該細胞、組織または両方が前記ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されると増強するが、該細胞、組織または両方が該ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されないと増強しない。幾つかの形態において組織内へのまたは組織を通っての前記カーゴ組成物の浸透は、該組織が前記ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されると増強するが、該組織が該ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されないと増強しない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記カーゴ組成物の内部移行および浸透は、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されると増強するが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲ組成物に曝露されないと増強しない。
【０１２６】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記ＣｅｎｄＲペプチドは、活性化可能ＣｅｎｄＲペプチドである場合がある。前記活性化可能ＣｅｎｄＲペプチドは、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲペプチドである場合がある。前記ＣｅｎｄＲペプチドは、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、活性化可能ＣｅｎｄＲコンジュゲートである場合がある。前記活性化可能ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲコンジュゲートである場合がある。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲ組成物は、活性化可能ＣｅｎｄＲ組成物である場合がある。前記活性化可能ＣｅｎｄＲ組成物は、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲ組成物である場合がある。前記ＣｅｎｄＲ組成物は、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある場合がある。
【０１２７】
前記タンパク質またはペプチドは、環状である場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、線状である場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある場合がある。前記共組成物は、治療薬を含む場合がある。前記共組成物は、検出剤を含むことがある。前記共組成物は、キャリア、ビヒクルまたは両方を含む場合がある。前記共組成物は、例えば、治療用タンパク質、治療用化合物、治療用組成物、抗脈管形成薬、脈管形成促進薬、癌化学療法薬、毒素、細胞傷害剤、抗炎症薬、抗関節炎薬、成長因子、サイトカイン、ケモカイン、１つ以上のシグナル伝達経路を調節する化合物、抗体、核酸、核酸類似体、細胞、ウイルス、ファージ、ウイルス粒子、ファージ粒子、ウイルスカプシド、ファージカプシド、ウイルス様粒子、リポソーム、ミセル、ビーズ、ナノ粒子、マイクロ粒子、化学療法薬、造影剤、イメージング剤、標識、標識化剤、または組み合わせを含む場合がある。
前記カーゴ組成物は、治療薬を含む場合がある。前記カーゴ組成物は、検出剤を含むことがある。前記カーゴ組成物は、キャリア、ビヒクルまたは両方を含む場合がある。前記カーゴ組成物は、例えば、治療用タンパク質、治療用化合物、治療用組成物、抗脈管形成薬、脈管形成促進薬、癌化学療法薬、毒素、細胞傷害剤、抗炎症薬、抗関節炎薬、成長因子、サイトカイン、ケモカイン、１つ以上のシグナル伝達経路を調節する化合物、抗体、核酸、核酸類似体、細胞、ウイルス、ファージ、ウイルス粒子、ファージ粒子、ウイルスカプシド、ファージカプシド、ウイルス様粒子、リポソーム、ミセル、ビーズ、ナノ粒子、マイクロ粒子、化学療法薬、造影剤、イメージング剤、標識、標識化剤、または組み合わせを含む場合がある。
【０１２８】
幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲペプチドおよび前記カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび前記カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物および前記カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。
【０１２９】
ＣｅｎｄＲエレメントと共組成物を含む組成物を開示する。ＣｅｎｄＲペプチドと共組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートと共組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物と共組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲエレメントと共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物を開示する。ＣｅｎｄＲペプチドと共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートと共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。
【０１３０】
ＣｅｎｄＲエレメントと１つ以上の共組成物を含む組成物を開示する。ＣｅｎｄＲペプチドと１つ以上の共組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートと１つ以上の共組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物と１つ以上の共組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲエレメントと１つ以上の共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントと該共組成物の少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物を開示する。ＣｅｎｄＲペプチドと１つ以上の共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドと該共組成物の少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートと１つ以上の共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートと該共組成物の少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物と１つ以上の共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物と該共組成物の少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。
【０１３１】
ＣｅｎｄＲエレメントとカーゴ組成物を含む組成物を開示する。ＣｅｎｄＲペプチドとカーゴ組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートとカーゴ組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物とカーゴ組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲエレメントとカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物を開示する。ＣｅｎｄＲペプチドとカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートとカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。
【０１３２】
ＣｅｎｄＲエレメントと１つ以上のカーゴ組成物を含む組成物を開示する。ＣｅｎｄＲペプチドと１つ以上のカーゴ組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートと１つ以上のカーゴ組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物と１つ以上のカーゴ組成物を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲエレメントと１つ以上のカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントと該カーゴ組成物の少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物を開示する。ＣｅｎｄＲペプチドと１つ以上のカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドと該カーゴ組成物の少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートと１つ以上のカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートと該カーゴ組成物の少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物と１つ以上のカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物と該カーゴ組成物の少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。
【０１３３】
ＣｅｎｄＲエレメントとアクセサリー分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該アクセサリー分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲペプチドとアクセサリー分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該アクセサリー分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートとアクセサリー分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該アクセサリー分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物とアクセサリー分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲ組成物および該アクセサリー分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲペプチドとアクセサリー分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲペプチドが該アクセサリー分子を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートとアクセサリー分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートが該アクセサリー分子を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物とアクセサリー分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲ組成物が該アクセサリー分子を含む組成物も開示する。これらの組成物において、前記アクセサリー分子は、アクセサリーペプチドであるかまたはアクセサリーペプチドを含む場合がある。前記アクセサリーペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があるか、または該ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。これらの組成物において、前記組成物は、１つ以上の共組成物および／または１つ以上のアクセサリー分子を含む場合があり、この場合、前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物の少なくとも１つは、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物および該アクセサリー分子の少なくとも１つは、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。
【０１３４】
ＣｅｎｄＲエレメントとホーミング分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該ホーミング分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲペプチドとホーミング分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該ホーミング分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートとホーミング分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該ホーミング分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物とホーミング分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲ組成物および該ホーミング分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲペプチドとホーミング分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲペプチドが該ホーミング分子を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートとホーミング分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートが該ホーミング分子を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物とホーミング分子と共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物および共組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しておらず、該ＣｅｎｄＲ組成物が該ホーミング分子を含む組成物も開示する。これらの組成物において、前記ホーミング分子は、ホーミングペプチドであるかまたはホーミングペプチドを含む場合がある。前記ホーミングペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があるか、または前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。これらの組成物において、前記組成物は、１つ以上の共組成物および／または１つ以上のホーミング分子を含む場合があり、この場合、前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物および該共組成物の少なくとも１つは、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、該ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物および該ホーミング分子の少なくとも１つは、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。
【０１３５】
ＣｅｎｄＲエレメントとアクセサリー分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該アクセサリー分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲペプチドとアクセサリー分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該アクセサリー分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートとアクセサリー分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該アクセサリー分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物とアクセサリー分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲ組成物および該アクセサリー分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲペプチドとアクセサリー分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲペプチドが該アクセサリー分子を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートとアクセサリー分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートが該アクセサリー分子を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物とアクセサリー分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲ組成物が該アクセサリー分子を含む組成物も開示する。これらの組成物において、前記アクセサリー分子は、アクセサリーペプチドであるかまたはアクセサリーペプチドを含む場合がある。前記アクセサリーペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があるか、または前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。これらの組成物において、前記組成物は、１つ以上のカーゴ組成物および／または１つ以上のアクセサリー分子を含む場合があり、この場合、前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物の少なくとも１つは、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物および該アクセサリー分子の少なくとも１つは、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。
【０１３６】
ＣｅｎｄＲエレメントとホーミング分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該ホーミング分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲペプチドとホーミング分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該ホーミング分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートとホーミング分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該ホーミング分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物とホーミング分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲ組成物および該ホーミング分子が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。ＣｅｎｄＲペプチドとホーミング分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲペプチドおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲペプチドが該ホーミング分子を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲコンジュゲートとホーミング分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲコンジュゲートが該ホーミング分子を含む組成物も開示する。ＣｅｎｄＲ組成物とホーミング分子とカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲ組成物が該ホーミング分子を含む組成物も開示する。これらの組成物において、前記ホーミング分子は、ホーミングペプチドであるかまたはホーミングペプチドを含む場合がある。前記ホーミングペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があるか、または前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。これらの組成物において、前記組成物は、１つ以上のカーゴ組成物および／または１つ以上のホーミング分子を含む場合があり、この場合、前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物および該カーゴ組成物の少なくとも１つは、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物および該ホーミング分子の少なくとも１つは、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。
【０１３７】
タンパク質またはペプチドと共組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドがＣｅｎｄＲエレメントおよびアクセサリーペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。タンパク質またはペプチドと共組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドがアミノ酸配列を含み、該アミノ酸配列がＣｅｎｄＲエレメントおよびアクセサリーペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。これらの組成物において、前記アクセサリーペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があるか、または前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。これらの組成物において、前記組成物は、１つ以上の共組成物および／または１つ以上のアクセサリーペプチドを含む場合があり、この場合、前記タンパク質またはペプチドと該共組成物の少なくとも１つとが、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、前記タンパク質またはペプチドと該アクセサリーペプチドの少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。
【０１３８】
タンパク質またはペプチドと共組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドがＣｅｎｄＲエレメントおよびホーミングペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。タンパク質またはペプチドと共組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドがアミノ酸配列を含み、該アミノ酸配列がＣｅｎｄＲエレメントおよびホーミングペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物も開示する。これらの組成物において、前記ホーミングペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があるか、または前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。これらの組成物において、前記組成物は、１つ以上の共組成物および／または１つ以上のホーミングペプチドを含む場合があり、この場合、前記タンパク質またはペプチドと該共組成物の少なくとも１つとが、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、前記タンパク質またはペプチドと該ホーミングペプチドの少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。
【０１３９】
タンパク質またはペプチドとカーゴ組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドがＣｅｎｄＲエレメントおよびアクセサリーペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。タンパク質またはペプチドとカーゴ組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドがアミノ酸配列を含み、該アミノ酸配列がＣｅｎｄＲエレメントおよびアクセサリーペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。これらの組成物において、前記アクセサリーペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があるか、または前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。これらの組成物において、前記組成物は、１つ以上のカーゴ組成物および／または１つ以上のアクセサリーペプチドを含む場合があり、この場合、前記タンパク質またはペプチドと該カーゴ組成物の少なくとも１つとが、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、前記タンパク質またはペプチドと該アクセサリーペプチドの少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。
【０１４０】
タンパク質またはペプチドとカーゴ組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドがＣｅｎｄＲエレメントおよびホーミングペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。タンパク質またはペプチドとカーゴ組成物を含む組成物であって、該タンパク質またはペプチドがアミノ酸配列を含み、該アミノ酸配列がＣｅｎｄＲエレメントおよびホーミングペプチドを含み、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している組成物も開示する。これらの組成物において、前記ホーミングペプチドは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合があり、または前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合がある。これらの組成物において、前記組成物は、１つ以上のカーゴ組成物および／または１つ以上のホーミングペプチドを含む場合があり、この場合、前記タンパク質またはペプチドと該カーゴ組成物の少なくとも１つとが、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもおらず、前記タンパク質またはペプチドと該ホーミングペプチドの少なくとも１つが互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している。
【０１４１】
本明細書において用いる場合、成分（例えば、ＣｅｎｄＲエレメントおよび共組成物）への「共有結合でカップリングしていない」という言及は、該成分が共有結合により接続されていない（例えば、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が、共有結合により接続されていない）ことを意味する。すなわち、例えば前記ＣｅｎｄＲエレメントと前記共組成物の間には共有結合の連続鎖がない。逆に、成分（例えば、ＣｅｎｄＲエレメントおよびカーゴ組成物）への「共有結合でカップリングしている」という言及は、該成分が共有結合により接続されている（例えば、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が、共有結合により接続されている）ことを意味する。すなわち、例えば前記ＣｅｎｄＲエレメントと前記カーゴ組成物の間には共有結合の連続鎖がある。成分は、共有結合で直接的にまたは間接的にカップリングされていることがある。直接共有結合性カップリングは、それぞれの成分の原子間の共有結合の存在を指す。間接共有結合性カップリングは、それぞれの成分の原子間の共有結合の不在を指す。すなわち、カップリングしている成分のいずれにも属さない一部の他の原子（単数または複数）が、それらの成分の原子間に介在する。直接共有結合性カップリングと間接共有結合性カップリングの両方が、共有結合の連続鎖を含む。
【０１４２】
非共有結合性会合は、非共有結合および相互作用による成分の会合を指す。非共有結合性会合は、直接的である場合もあり、または間接的である場合もある。直接非共有結合性会合は、それぞれが個々に共有結合の鎖により成分に接続されている原子を含む非共有結合を指す。従って、直接的非共有結合性会合の場合、会合成分間に介在する他の分子はない。間接非共有結合性会合は、成分を連結する分子および結合の任意の鎖を指し、この場合、該成分は、共有結合でカップリングされていない（すなわち、該成分以外の少なくとも１つの別個の分子が非共有結合により該成分間に介在する）。
【０１４３】
成分（例えば、ＣｅｎｄＲエレメントおよび共組成物）への「非共有結合で会合」していないという言及は、該成分間に直接非共有結合性会合も間接非共有結合性会合もないことを意味する。すなわち、例えば、ＣｅｎｄＲエレメントに共有結合でカップリングしているいずれの原子も、共組成物に共有結合でカップリングしている原子との非共有結合に関与しない。この意味の範囲内で、ＣｅｎｄＲエレメントおよび共組成物は、組成物内に一緒に存在する場合があり、この場合、ＣｅｎｄＲエレメントおよび共組成物は、複数の介在非共有結合により間接的に会合しているが、非共有結合で会合していない（この用語は、本明細書中で定義するとおり）。例えば、ＣｅｎｄＲエレメントおよび共組成物をキャリア内で一緒に混合することができ、そこではそれらが直接非共有結合で会合していない。間接的に非共有結合で会合していないと述べるＣｅｎｄＲエレメントおよび共組成物は、連続組成物（ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）内で一緒に混合することができない。成分（例えば、ＣｅｎｄＲエレメントおよび共組成物）への「直接的に非共有結合で会合」していないという言及は、該成分間に直接非共有結合性会合がない（間接非共有結合性会合は存在することがある）ことを意味する。成分（例えば、ＣｅｎｄＲエレメントおよび共組成物）への「間接的に非共有結合で会合」していないという言及は、該成分間に直接的共有結合性会合も間接的共有結合性会合もないことを意味する。
【０１４４】
成分は複数の鎖および経路（ｐａｔｈ）（直接非共有結合性会合と直接非共有結合性会合の両方を含む）により非共有結合で会合していることがあることは理解される。これらの定義のために、単一の直接非共有結合性会合の存在は、間接非共有結合性会合も存在したとしても、その会合を直接非共有結合性会合にする。同様に、成分間の共有結合性接続の存在は、非共有結合性会合も存在したとしても、該成分が共有結合でカップリングしていることを意味する。たまたま互いの非共有結合性会合がない、共有結合でカップリングしている成分が、非共有結合で会合していない成分の定義に入ると見なされないことも理解される。
【０１４５】
幾つかの形態において、前記共組成物は、機能性内部移行エレメントを含まない。前記共組成物は、機能性内部移行エレメントを含むことができる。幾つかの形態において、前記共組成物は、ホーミング分子を含まない。前記共組成物は、ホーミング分子を含むことができる。幾つかの形態において、前記共組成物は、ホーミングペプチドを含まない。前記共組成物は、ホーミングペプチドを含むことができる。前記共組成物は、腫瘍に選択的にホーミングすることができる。幾つかの形態において、前記共組成物は、腫瘍血管系に選択的にホーミングしない。前記共組成物は、腫瘍血管系に選択的にホーミングすることができる。幾つかの形態において、前記共組成物は、アクセサリー分子を含まない。前記共組成物は、アクセサリー分子を含むことができる。幾つかの形態において、前記共組成物は、アクセサリーペプチドを含まない。前記共組成物は、アクセサリーペプチドを含むことができる。前記共組成物は、腫瘍に選択的にホーミングすることができる。
【０１４６】
ＣｅｎｄＲエレメントは、１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。例えば、アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントを含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記アクセサリー分子は、ＣｅｎｄＲエレメントとまたはＣｅｎｄＲエレメントを含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートもしくは組成物と、共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。アクセサリー分子は、有用な機能を有する、ならびにＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質および／またはＣｅｎｄＲペプチドと併用することができる、任意の分子、化合物、成分などであり得る。有用なアクセサリー分子の例としては、ホーミング分子、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性分子、エンドソーム脱出分子、細胞内ターゲティング分子、核ターゲティング分子が挙げられる。異なるアクセサリー分子が、互いに類似した機能を有する場合があり、互いに異なる機能を有する場合もある。類似した機能を有するアクセサリー分子、異なる機能を有するアクセサリー分子または両方が、ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質および／またはＣｅｎｄＲペプチドと会合している場合がある。
前記アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合があり、またはＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合がある。例えば、幾つかのアクセサリー分子は、アミノ酸配列である。これは、ＣｅｎｄＲエレメントから成るアミノ酸配列をアクセサリーアミノ酸配列から成るアミノ酸配列とオーバーラップさせる場合がある。例えば、ｉＲＧＤ、ＬｙＰ−１、ｉＮＧＲおよびＲＧＲペプチドそれぞれが、互いにオーバーラップするアクセサリー配列とＣｅｎｄＲ配列の両方を該ペプチド内に含有する。あるいは、前記アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしていない独立した単位である場合がある。例えば、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、またはＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）は、ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしないアミノ酸配列から成り得る。幾つかの形態において、前記アクセサリー分子は、例えば、ＣｅｎｄＲエレメントの受容体とは異なる特定の受容体に結合するＣｅｎｄＲペプチド内の配列を含む場合がある。
【０１４７】
前記ＣｅｎｄＲペプチドは、１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。例えば、アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲペプチドを含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲペプチドとまたは前記ＣｅｎｄＲペプチドを含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートもしくは組成物と、共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。例えば、アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートを含むコンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートとまたは前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートを含むコンジュゲートもしくは組成物と、共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。前記ＣｅｎｄＲ組成物は、１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。例えば、アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲ組成物を含む組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記アクセサリー分子は、前記ＣｅｎｄＲ組成物とまたは前記ＣｅｎｄＲ組成物を含む組成物と、共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。
【０１４８】
前記アミノ酸配列は、１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。例えば、アクセサリー分子は、前記アミノ酸配列を含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記アクセサリー分子は、前記アミノ酸配列とまたは前記アミノ酸配列を含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートもしくは組成物と、共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。例えば、前記アミノ酸配列は、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。前記アミノ酸配列は、ＣＲＥＫＡペプチドを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。例えば、アクセサリー分子は、前記ペプチドを含むタンパク質、ペプチド、コンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記アクセサリー分子は、前記ペプチドまたはタンパク質、前記ペプチドを含むペプチド、コンジュゲートまたは組成物と共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。例えば、アクセサリー分子は、前記タンパク質を含むタンパク質、コンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記アクセサリー分子は、前記タンパク質または前記タンパク質を含むタンパク質、コンジュゲートまたは組成物と共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。例えば、前記タンパク質またはペプチドは、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。前記コンジュゲートは、１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。例えば、アクセサリー分子は、前記コンジュゲートを含むコンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記アクセサリー分子は、前記コンジュゲートまたは前記コンジュゲートを含むコンジュゲートもしくは組成物と共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。例えば、前記コンジュゲートは、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。前記組成物は、１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。例えば、アクセサリー分子は、前記組成物を含む組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記アクセサリー分子は、前記組成物または前記組成物を含む組成物と共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。例えば、前記組成物は、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。
【０１４９】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、１つ以上のホーミング分子と会合している場合がある。例えば、ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントを含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントとまたは前記ＣｅｎｄＲエレメントを含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートもしくは組成物と、共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。前記ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントから独立している場合があり、またはＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合がある。例えば、幾つかのホーミング分子は、アミノ酸配列である。これは、前記ＣｅｎｄＲエレメントから成るアミノ酸配列をホーミングアミノ酸配列から成るアミノ酸配列とオーバーラップさせる場合がある。例えば、ｉＲＧＤ、ＬｙＰ−１、ｉＮＧＲおよびＲＧＲペプチドそれぞれが、互いにオーバーラップするホーミング配列とＣｅｎｄＲ配列の両方を該ペプチドに含有する。あるいは、前記ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしない独立した単位である場合がある。例えば、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、またはＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）は、ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしないアミノ酸配列から成り得る。幾つかの形態において、前記ホーミング分子は、例えば、前記ＣｅｎｄＲエレメントの受容体とは異なる特定の受容体に結合するＣｅｎｄＲペプチド内の配列を含む場合がある。
【０１５０】
前記ＣｅｎｄＲペプチドは、１つ以上のホーミング分子と会合している場合がある。例えば、ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲペプチドを含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲペプチドとまたは前記ＣｅｎｄＲペプチドを含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートもしくは組成物と、共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、１つ以上のホーミング分子と会合している場合がある。例えば、ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートを含むコンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートとまたは前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートを含むコンジュゲートもしくは組成物と、共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。前記ＣｅｎｄＲ組成物を１つ以上のホーミング分子と会合させることができる。例えば、ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲ組成物を含む組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記ホーミング分子は、前記ＣｅｎｄＲ組成物とまたは前記ＣｅｎｄＲ組成物を含む組成物と、共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。
【０１５１】
前記アミノ酸配列は、１つ以上のホーミング分子と会合している場合がある。例えば、ホーミング分子は、前記アミノ酸配列を含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記ホーミング分子は、前記アミノ酸配列とまたは前記アミノ酸配列を含むアミノ酸配列、タンパク質、ペプチド、コンジュゲートもしくは組成物と、共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。例えば、前記アミノ酸配列は、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。前記アミノ酸配列は、ＣＲＥＫＡペプチドを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上のホーミング分子と会合している場合がある。例えば、ホーミング分子は、前記ペプチドを含むタンパク質、ペプチド、コンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記ホーミング分子は、前記ペプチド、または前記ペプチドを含むタンパク質、ペプチド、コンジュゲートまたは組成物と共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。例えば、ホーミング分子は、前記タンパク質を含むタンパク質、コンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記ホーミング分子は、前記タンパク質、または前記タンパク質を含むタンパク質、コンジュゲートまたは組成物と共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。例えば、前記タンパク質またはペプチドは、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ｉＲＧＤを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ＬｙＰ−１ペプチドを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ｉＮＧＲを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ＲＧＲペプチドを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ＣＲＥＫＡペプチドを含む場合がある。前記コンジュゲートは、１つ以上のホーミング分子と会合している場合がある。例えば、ホーミング分子は、前記コンジュゲートを含むコンジュゲートまたは組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記ホーミング分子は、前記コンジュゲートまたは前記コンジュゲートを含むコンジュゲートもしくは組成物と共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。例えば、前記コンジュゲートは、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。前記コンジュゲートは、ｉＲＧＤを含む場合がある。前記コンジュゲートは、ＬｙＰ−１を含む場合がある。前記コンジュゲートは、ｉＮＧＲを含む場合がある。前記コンジュゲートは、ＲＧＲペプチドを含む場合がある。前記コンジュゲートは、ＣＲＥＫＡペプチドを含む場合がある。前記組成物は、１つ以上のホーミング分子と会合している場合がある。例えば、ホーミング分子は、前記組成物を含む組成物の一部である場合がある。もう１つの例として、前記ホーミング分子は、前記組成物または前記組成物を含む組成物と共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。例えば、前記組成物は、ｉＲＧＤペプチド、ＬｙＰ−１ペプチド、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、ＣＲＥＫＡペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＤペプチド（これはＣｅｎｄＲエレメントではない）、または組み合わせを含む場合がある。前記組成物は、ｉＲＧＤを含む場合がある。前記組成物は、ＬｙＰ−１を含む場合がある。前記組成物は、ｉＮＧＲを含む場合がある。前記組成物は、ＲＧＲペプチドを含む場合がある。前記組成物は、ＣＲＥＫＡペプチドを含む場合がある。
【０１５２】
前記アミノ酸配列を細胞内への内部移行のために選択することができる。前記アミノ酸配列を組織浸透のために選択することができる。前記アミノ酸配列を細胞内への内部移行および組織浸透のために選択することができる。前記タンパク質またはペプチドを細胞内への内部移行のために選択することができる。前記タンパク質またはペプチドを組織浸透のために選択することができる。前記タンパク質またはペプチドを細胞内への内部移行および組織浸透のために選択することができる。前記コンジュゲートを細胞内への内部移行のために選択することができる。前記コンジュゲートを組織浸透のために選択することができる。前記コンジュゲートを細胞内への内部移行および組織浸透のために選択することができる。前記組成物を細胞内への内部移行のために選択することができる。前記組成物を組織浸透のために選択することができる。前記組成物を細胞内への内部移行および組織浸透のために選択することができる。
【０１５３】
前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを腫瘍に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを腫瘍血管系に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを１つ以上の特定のタイプの腫瘍に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを１つ以上の特定のタイプの腫瘍の血管系に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを１つ以上の特定の病期の腫瘍または癌に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを１つ以上の特定の病期の腫瘍または癌の血管系に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを１つ以上の特定の病期の１つ以上の特定のタイプの腫瘍に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを１つ以上の異なる病期の１つ以上の特定のタイプの腫瘍の血管系に選択的にホーミングすることができる。
【０１５４】
前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを肺組織に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを肺血管系に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを心臓組織に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを心臓血管系に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ組成物、アミノ酸配列、タンパク質またはペプチド、コンジュゲート、組成物、共組成物、カーゴ組成物、または組み合わせを、脳細胞、脳幹細胞、脳組織および／もしくは脳血管系、腎細胞、腎幹細胞、腎組織および／もしくは腎血管系、皮膚細胞、皮膚幹細胞、皮膚組織および／もしくは皮膚血管系、肺細胞、肺組織および／もしくは肺血管系、膵細胞、膵組織および／もしくは膵血管系、腸細胞、腸組織および／もしくは腸血管系、副腎細胞、副腎組織および／もしくは副腎血管系、網膜細胞、網膜組織および／もしくは網膜血管系、肝細胞、肝組織および／もしくは肝血管系、前立腺細胞、前立腺組織および／もしくは前立腺血管系、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織および／もしくは子宮内膜症血管系、卵巣細胞、卵巣組織および／もしくは卵巣血管系、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管および／もしくは腫瘍血管系、骨細胞、骨組織および／もしくは骨血管系、骨髄細胞、骨髄組織および／もしくは骨髄血管系、軟骨細胞、軟骨組織および／もしくは軟骨血管系、幹細胞、胚性幹細胞、多能性幹細胞、人工多能性幹細胞、成人幹細胞、造血幹細胞、神経幹細胞、間葉幹細胞、乳腺幹細胞、内皮幹細胞、嗅覚成人幹細胞、神経堤幹細胞、癌幹細胞、血液細胞、赤血球、血小板、白血球、顆粒球、好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球様細胞、リンパ球、単球、創傷血管系、損傷組織の血管系、炎症組織の血管系、アテローム硬化性プラーク、または組み合わせに選択的にホーミングすることができる。
【０１５５】
ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドおよびＣｅｎｄＲエレメントを、任意の適する手法で設計および生産することができる。例えば、本開示のＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質およびＣｅｎｄＲペプチドにおけるＣｅｎｄＲエレメントは、細胞への内部移行および／または組織の浸透のためのアミノ酸配列を選択することによって設計または生産することができ、この場合、前記アミノ酸配列は、Ｃ末端エレメントを含み、ここで、タンパク質またはペプチドが、その選択したアミノ酸配列を含み、その選択したアミノ酸配列は、そのタンパク質またはペプチドのＣ末端にある。
【０１５６】
ＣｅｎｄＲエレメントと共組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物が互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない組成物を開示する。ＣｅｎｄＲエレメントおよびカーゴ組成物を含む組成物であって、該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物が互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合しており、該ＣｅｎｄＲエレメントがタイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントである組成物も開示する。
【０１５７】
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法も開示し、該方法は、該細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲエレメントおよび該共組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該共組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含む。幾つかの形態では、前記細胞、組織または両方を曝露する前に、前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物は、互いに共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合してもいない。
【０１５８】
細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通ってのカーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する方法も開示し、該方法は、該細胞、組織または両方をＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物に曝露し、それによって該細胞、組織もしくは両方の中へのまたは該細胞、組織もしくは両方を通っての該カーゴ組成物の内部移行、浸透または両方を増強する工程を含む。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物は、互いに共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合している場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記方法は、前記細胞、組織または両方を前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露する前に、該ＣｅｎｄＲエレメントを前記カーゴ組成物にカップリングさせる工程をさらに含む場合がある。
【０１５９】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記細胞、組織または両方の透過性を上げることができる。前記細胞、組織または両方が、被験体内にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物に曝露することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記カーゴ組成物を前記被験体に投与することにより、前記細胞、組織または両方を該ＣｅｎｄＲエレメントおよび該カーゴ組成物に曝露することができる。
【０１６０】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、複数のアクセサリーと会合している場合がある。幾つかの形態において、前記アクセサリー分子の少なくとも１つは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする。幾つかの形態において、前記アクセサリー分子の少なくとも１つは、前記ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしない。幾つかの形態において、前記アクセサリー分子の少なくとも１つは、ＲＧＤペプチド、ｉＲＧＤ、Ｌｙｐ−１ペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ、ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、または組み合わせを含む場合がある。前記アクセサリー分子の１つ以上は、独立して、ホーミング分子、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性ペプチド、エンドソーム脱出分子、細胞内ターゲティング分子、核ターゲティング分子、または組み合わせであり得る。前記アクセサリー分子の１つ以上は、ホーミング分子である場合がある。前記アクセサリー分子の１つ以上がアクセサリーペプチドである場合がある。前記アクセサリー分子の１つ以上がｉＲＧＤを含む場合がある。前記アクセサリー分子の１つ以上は、Ｌｙｐ−１を含む場合がある。前記アクセサリー分子の１つ以上がｉＮＧＲを含む場合がある。前記アクセサリー分子の１つ以上がＲＧＲペプチドを含む場合がある。
【０１６１】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、脳細胞、脳組織もしくは両方、腎細胞、腎組織もしくは両方、皮膚細胞および腱細胞、皮膚組織および腱組織もしくは両方、肺細胞、肺組織もしくは両方、膵細胞、膵組織もしくは両方、腸細胞、腸組織もしくは両方、副腎細胞、副腎組織もしくは両方、網膜細胞、網膜組織もしくは両方、肝細胞、肝組織もしくは両方、前立腺細胞、前立腺組織もしくは両方、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織もしくは両方、卵巣細胞、卵巣組織もしくは両方、心臓細胞、心臓組織もしくは両方、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管、または組み合わせに選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、腫瘍に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、腫瘍血管系に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、肺組織に選択的にホーミングすることができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、心臓組織に選択的にホーミングすることができる。
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、セリンプロテアーゼ、プラスミン、プラスミノゲンアクチベータ、ウロキナーゼ、プロタンパク質転換酵素、フーリン、カルボキシペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼＡ、グルタミン酸特異的カルボキシペプチダーゼ、プロリン特異的カルボキシペプチダーゼ、ＰＳＭＡ、または組み合わせによって活性化可能であり得る。
前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を前記被験体に同時に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を、該ＣｅｎｄＲエレメントと該共組成物を含む単一組成物で前記被験者に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を異なる時点で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を別々の組成物で前記被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を別々の経路により前記被験体に投与することができる。
【０１６２】
幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物は、互いに結合していない。前記共組成物またはカーゴ組成物は、治療薬を含む場合がある。前記共組成物またはカーゴ組成物は、検出剤を含む場合がある。前記共組成物またはカーゴ組成物は、キャリア、ビヒクルまたは両方を含む場合がある。前記共組成物またはカーゴ組成物は、治療用タンパク質、治療用化合物、治療用組成物、癌化学療法薬、毒素、細胞傷害剤、抗炎症薬、抗関節炎薬、成長因子、サイトカイン、ケモカイン、１つ以上のシグナル伝達経路を調節する化合物、抗体、核酸、核酸類似体、細胞、ウイルス、ファージ、ウイルス粒子、ファージ粒子、ウイルスカプシド、ファージカプシド、ウイルス様粒子、リポソーム、ミセル、ビーズ、ナノ粒子、マイクロ粒子、化学療法薬、造影剤、イメージング剤、標識、標識剤、抗脈管形成薬、脈管形成促進薬、または組み合わせを含む場合がある。
【０１６３】
前記ＣｅｎｄＲエレメントはアミノ酸配列に含まれている場合がある。前記アミノ酸配列は、タンパク質またはペプチドに含まれている場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タンパク質またはペプチドに含まれている場合がある。幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには細胞内に内部移行することができるか、組織に浸透することができるか、または両方できるが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには組織に浸透することができるが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには組織に浸透することができない。幾つかの形態において、前記タンパク質またはペプチドは、前記アミノ酸配列が該タンパク質またはペプチドに存在するときには細胞に内部移行することおよび組織に浸透することができるが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには細胞に内部移行することも組織に浸透することもできない。
【０１６４】
幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記共組成物と会合していずに、細胞に内部移行することができるか、組織に浸透することできるか、または両方できる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記カーゴ組成物と会合していずに、細胞に内部移行することができるか、組織に浸透することできるか、または両方できる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記共組成物と会合していずに、組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記カーゴ組成物と会合していずに、組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記共組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記カーゴ組成物と会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる。幾つかの形態において、前記アミノ酸配列は、前記タンパク質またはペプチドの唯一の機能性内部移行エレメントである場合がある。
【０１６５】
前記タンパク質またはペプチドは、環状である場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある場合がある。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記内部移行、浸透または両方は、前記アミノ酸配列が前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強し得るが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強し得ない。幾つかの形態において、組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記浸透は、前記アミノ酸配列が前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強し得るが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強し得ない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記内部移行および浸透は、前記アミノ酸配列が前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強し得るが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強し得ない。幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記内部移行、浸透または両方は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強し得るが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強し得ない。幾つかの形態において、組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記浸透が、前記ＣｅｎｄＲエレメントが前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強し得るが、該アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強し得ない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物またはカーゴ組成物の前記内部移行および浸透は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが前記タンパク質またはペプチドに存在するときには増強し得るが、前記アミノ酸配列が該タンパク質にもペプチドにも存在しないときには増強し得ない。
【０１６６】
前記アミノ酸配列は、１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上のアクセサリー分子と会合している場合がある。前記アクセサリー分子の１つ以上は、独立して、ホーミング分子、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性ペプチド、エンドソーム脱出分子、細胞内ターゲティング分子、核ターゲティング分子、または組み合わせである場合がある。前記アクセサリー分子の１つ以上が、ホーミング分子である場合がある。前記ホーミング分子の１つ以上は、独立して、ＲＧＤペプチド、ｉＲＧＤ、Ｌｙｐ−１ペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ，ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、または組み合わせである場合がある。
【０１６７】
前記タンパク質またはペプチドは、１つ以上のアクセサリーペプチドを含む場合がある。前記アミノ酸配列は、１つ以上のアクセサリーペプチドを含む場合がある。前記アクセサリーペプチドの１つ以上は、独立して、ホーミングペプチド、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性ペプチド、エンドソーム脱出ペプチド、細胞内ターゲティングペプチド、核ターゲティングペプチド、または組み合わせである場合がある。前記ホーミングペプチドの１つ以上は、独立して、ＲＧＤペプチド、ｉＲＧＤ、Ｌｙｐ−１ペプチド、ＮＧＲペプチド、ｉＮＧＲ，ＲＧＲペプチド、ＨＥＲ２結合ペプチド、または組み合わせである場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ｉＲＧＤを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、Ｌｙｐ−１ペプチドを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ｉＮＧＲを含む場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、ＲＧＲを含む場合がある。
【０１６８】
前記タンパク質またはペプチドは、脳細胞、脳組織もしくは両方、腎細胞、腎組織もしくは両方、皮膚細胞および腱細胞、皮膚組織および腱組織もしくは両方、肺細胞、肺組織もしくは両方、膵細胞、膵組織もしくは両方、腸細胞、腸組織もしくは両方、副腎細胞、副腎組織もしくは両方、網膜細胞、網膜組織もしくは両方、肝細胞、肝組織もしくは両方、前立腺細胞、前立腺組織もしくは両方、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織もしくは両方、卵巣細胞、卵巣組織もしくは両方、心臓細胞、心臓組織もしくは両方、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管、または組み合わせに選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、腫瘍に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、腫瘍血管系に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、肺組織に選択的にホーミングすることができる。前記タンパク質またはペプチドは、心臓組織に選択的にホーミングすることができる。
【０１６９】
前記アミノ酸配列を細胞内への内部移行のために選択することができる。前記アミノ酸配列を組織浸透のために選択することができる。前記アミノ酸配列を細胞内への内部移行および組織浸透のために選択することができる。
【０１７０】
幾つかの形態において、細胞、組織もしくは両方の中へのまたは細胞、組織もしくは両方を通っての前記共組成物の内部移行、浸透または両方は、該細胞、組織または両方が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強し得るが、細胞、組織または両方が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強し得ない。幾つかの形態において、組織内へのまたは組織を通っての前記共組成物の前記浸透は、該組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強し得るが、該組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強し得ない。幾つかの形態において、細胞および組織内へのまたは細胞および組織を通っての前記共組成物の前記内部移行および浸透は、該細胞および組織が前記ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されると増強し得るが、該細胞および組織が該ＣｅｎｄＲエレメントに曝露されないと増強し得ない。
【０１７１】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、ＣｅｎｄＲ組成物に含まれる場合がある。前記ＣｅｎｄＲ組成物は、１つ以上のアクセサリー分子を含む場合がある。前記ＣｅｎｄＲ組成物は、１つ以上のカーゴ組成物を含む場合がある。前記ＣｅｎｄＲ組成物は、１つ以上のホーミング分子を含む場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、ＣｅｎｄＲコンジュゲートに含まれる場合がある。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、１つ以上のアクセサリー分子を含む場合がある。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、１つ以上のカーゴ組成物を含む場合がある。前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、１つ以上のホーミング分子を含む場合がある。
【０１７２】
前記細胞、組織または両方を複数のアクセサリー分子に曝露することができる。前記細胞、組織または両方を複数のホーミング分子に曝露することができる。前記細胞、組織または両方を複数のカーゴ組成物に曝露することができる。前記細胞、組織または両方を複数のＣｅｎｄＲエレメントに曝露することができる。前記細胞、組織または両方を複数の共組成物に曝露することができる。
【０１７３】
本明細書中で定義するように、Ｃ末端エレメント（ＣｅｎｄＲエレメント）は、アルギニン、リシンもしくはリシン−グリシン（タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントについて）、またはヒスチジン、もしくは配列Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４（この場合、Ｘ１はＲ、ＫまたはＨであり得、Ｘ４はＲ、Ｋ、ＨまたはＫＧであり得、Ｘ２およびＸ３はそれぞれ独立して任意のアミノ酸であり得る）を有するアミノ酸配列（タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントについて）のいずれかである。
【０１７４】
本明細書において用いる場合、「アミノ酸配列を細胞内への内部移行のために選択すること」は、そのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの細胞内への侵入を達成するという特定の意図をもってアミノ酸配列を選択、同定、設計または別様に類別することを指す。従って、例えば、そのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの細胞内への侵入を達成すること以外の何らかの目的または能力のためにおよびアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの細胞内への侵入を達成する意図がなくアミノ酸配列を選択することは、「アミノ酸配列を細胞内への内部移行のために選択すること」を構成しない。何らかの目的または能力のためにならびにそのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの細胞内への侵入を達成するためのアミノ酸配列を選択することは、「アミノ酸配列を細胞内への内部移行のために選択すること」を構成する。従って、そのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの細胞内への侵入を達成するという特定の意図を少なくとももってアミノ酸配列を選択することが、「アミノ酸配列を細胞内への内部移行のために選択すること」を構成することは、追加の目標または目的の存在によって変更されるものではない。
【０１７５】
本明細書において用いる場合、「アミノ酸配列を組織の浸透のために選択すること」は、そのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの組織内への侵入（すなわち、組織浸透）を達成するという特定の意図をもってアミノ酸配列を選択、同定、設計または別様に類別することを指す。従って、例えば、そのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの組織内への侵入を達成すること以外の何らかの目的または能力のためにおよび該アミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの組織内への侵入を達成する意図がなくアミノ酸配列を選択することは、「アミノ酸配列を組織の浸透のために選択すること」を構成しない。何らかの目的または能力のためにならびにそのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの組織内への侵入を達成するためのアミノ酸配列を選択することは、「アミノ酸配列を組織の浸透のために選択すること」を構成する。従って、そのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの組織内への侵入を達成するという特定の意図を少なくとももってアミノ酸配列を選択することが、「アミノ酸配列を組織の浸透のために選択すること」を構成することは、追加の目標または目的の存在によって変更されるものではない。
【０１７６】
本明細書において用いる場合、「アミノ酸配列を細胞内への内部移行および／または組織の浸透のために選択すること」は、そのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成するという特定の意図をもってアミノ酸配列を選択、同定、設計または別様に類別することを指す。従って、例えば、そのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの細胞、組織または両方の中への侵入を達成すること以外の何らかの目的または能力のためにおよび該アミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの細胞、組織または両方の中への侵入を達成する意図がなくアミノ酸配列を選択することは、「アミノ酸配列を細胞内への内部移行および／または組織の浸透のために選択すること」を構成しない。何らかの目的または能力のためにならびにそのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成するためのアミノ酸配列を選択することは、「アミノ酸配列を細胞内への内部移行および／または組織の浸透のために選択すること」を構成する。従って、そのアミノ酸配列から成るタンパク質またはペプチドの細胞、組織または両方の中への侵入を達成するという特定の意図を少なくとももってアミノ酸配列を選択することが、「アミノ酸配列を細胞内への内部移行および／または組織の浸透のために選択すること」を構成することは、追加の目標または目的の存在によって変更されるものではない。
【０１７７】
本明細書において用いる場合、その文脈が別様に示していない限り、「共組成物を細胞内への内部移行のために選択すること」は、共組成物およびＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントを、該共組成物と該ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の細胞内への侵入を達成するという特定の意図をもって、選択、同定、設計または別様に類別することを指す。従って、例えば、選択したＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの侵入と併せて細胞内への侵入を達成すること以外の何らかの目的または能力のために、およびその共組成物とそのＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の細胞内への侵入を達成する意図がなく、共組成物を選択することは、「共組成物を細胞内への内部移行のために選択すること」を構成しない。何らかの目的または能力のためにならびにその共組成物の細胞内への侵入を達成するために共組成物を選択することは、「共組成物を細胞内への内部移行のために選択すること」を構成する。従って、共組成物の細胞内への侵入を達成するという特定の意図を少なくとももって共組成物を選択することが、「共組成物を細胞内への内部移行のために選択すること」を構成することは、追加の目標または目的の存在によって変更されるものではない。
【０１７８】
本明細書において用いる場合、その文脈が別様に示していない限り、「共組成物を組織の浸透のために選択すること」は、共組成物およびＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントを、該共組成物と該ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の組織内への侵入（すなわち、組織浸透）を達成するという特定の意図をもって、選択、同定、設計または別様に類別することを指す。従って、例えば、選択したＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの侵入と併せて組織内への侵入を達成すること以外の何らかの目的または能力のために、およびその共組成物とそのＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の組織内への侵入を達成する意図がなく、共組成物を選択することは、「共組成物を組織の浸透のために選択すること」を構成しない。何らかの目的または能力のためにならびにその共組成物の組織内への侵入を達成するために共組成物を選択することは、「共組成物を組織の浸透のために選択すること」を構成する。従って、共組成物の組織内への侵入を達成するという特定の意図を少なくとももって共組成物を選択することが、「共組成物を組織の浸透のために選択すること」を構成することは、追加の目標または目的の存在によって変更されるものではない。
【０１７９】
本明細書において用いる場合、その文脈が別様に示していない限り、「共組成物を細胞内への内部移行および／または組織の浸透のために選択すること」は、共組成物およびＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントを、該共組成物と該ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成するという特定の意図をもって、選択、同定、設計または別様に類別することを指す。従って、例えば、選択したＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの侵入と併せて細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成すること以外の何らかの目的または能力のために、およびその共組成物とそのＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成する意図がなく、共組成物を選択することは、「共組成物を細胞内への内部移行および／または組織の浸透のために選択すること」を構成しない。何らかの目的または能力のためにならびにその共組成物の細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成するために共組成物を選択することは、「共組成物を細胞内への内部移行および／または組織の選択のために選択すること」を構成する。従って、共組成物の細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成するという特定の意図を少なくとももって共組成物を選択することが、「共組成物を細胞内への内部移行および／または組織の浸透のために選択すること」を構成することは、追加の目標または目的の存在によって変更されるものではない。
【０１８０】
本明細書において用いる場合、その文脈が別様に示していない限り、「カーゴ組成物を細胞内への内部移行のために選択すること」は、カーゴ組成物およびＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントを、該カーゴ組成物と該ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の細胞内への侵入を達成するという特定の意図をもって、選択、同定、設計または別様に類別することを指す。従って、例えば、選択したＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの侵入と併せて細胞内への侵入を達成すること以外の何らかの目的または能力のために、およびそのカーゴ組成物とそのＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の細胞内への侵入を達成する意図がなく、カーゴ組成物を選択することは、「カーゴ組成物を細胞内への内部移行のために選択すること」を構成しない。何らかの目的または能力のためにならびにそのカーゴ組成物の細胞内への侵入を達成するためにカーゴ組成物を選択することは、「カーゴ組成物を細胞内への内部移行のために選択すること」を構成する。従って、カーゴ組成物の細胞内への侵入を達成するという特定の意図を少なくとももってカーゴ組成物を選択することが、「カーゴ組成物を細胞内への内部移行のために選択すること」を構成することは、追加の目標または目的の存在によって変更されるものではない。
【０１８１】
本明細書において用いる場合、その文脈が別様に示していない限り、「カーゴ組成物を組織の浸透のために選択すること」は、カーゴ組成物およびＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントを、該カーゴ組成物と該ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の組織内への侵入（すなわち、組織浸透）を達成するという特定の意図をもって、選択、同定、設計または別様に類別することを指す。従って、例えば、選択したＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの侵入と併せて組織内への侵入を達成すること以外の何らかの目的または能力のために、およびそのカーゴ組成物とそのＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の組織内への侵入を達成する意図がなく、カーゴ組成物を選択することは、「カーゴ組成物を組織の浸透のために選択すること」を構成しない。何らかの目的または能力のためにならびにそのカーゴ組成物の組織内への侵入を達成するためにカーゴ組成物を選択することは、「カーゴ組成物を組織の浸透のために選択すること」を構成する。従って、カーゴ組成物の組織内への侵入を達成するという特定の意図を少なくとももってカーゴ組成物を選択することが、「カーゴ組成物を組織の浸透のために選択すること」を構成することは、追加の目標または目的の存在によって変更されるものではない。
【０１８２】
本明細書において用いる場合、その文脈が別様に示していない限り、「カーゴ組成物を細胞内への内部移行および／または組織の浸透のために選択すること」は、カーゴ組成物およびＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントを、該カーゴ組成物と該ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成するという特定の意図をもって、選択、同定、設計または別様に類別することを指す。従って、例えば、選択したＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの侵入と併せて細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成すること以外の何らかの目的または能力のために、およびそのカーゴ組成物とそのＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントの両方の細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成する意図がなく、カーゴ組成物を選択することは、「カーゴ組成物を細胞内への内部移行および／または組織の浸透のために選択すること」を構成しない。何らかの目的または能力のためにならびにそのカーゴ組成物の細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成するためにカーゴ組成物を選択することは、「カーゴ組成物を細胞内への内部移行および／または組織の選択のために選択すること」を構成する。従って、カーゴ組成物の細胞および組織のいずれかまたは両方の中への侵入を達成するという特定の意図を少なくとももってカーゴ組成物を選択することが、「カーゴ組成物を細胞内への内部移行および／または組織の浸透のために選択すること」を構成することは、追加の目標または目的の存在によって変更されるものではない。
【０１８３】
本明細書において用いる場合、他のものと「化合物または組成物を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させること」は、その他のものと共有結合でカップリングしていないし非共有結合で会合もしていない組成物が、その他のものと共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合した状態になるまたは状態にはいるという結果となる任意の作用を指す。一例として、ＣｅｎｄＲエレメントへのホーミング分子の共有結合でのカップリングは、ＣｅｎｄＲエレメントと「ホーミング分子を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させること」を構成する。もう１つの例として、存在しない概念として出発し、その後、そのＣｅｎｄＲペプチドをカップリングまたは会合させることになる物を含む組成物の一部として合成されるＣｅｎｄＲペプチドは、その物と「ＣｅｎｄＲペプチドを共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させること」を構成する。例えば、目的のアミノ酸配列とＣ末端エレメントを含むアミノ酸配列の両方を含むペプチドの合成は、Ｃ末端エレメントを含むアミノ酸配列と、目的のアミノ酸配列を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させることを構成する。しかし、一般に、目的のアミノ酸配列とＣ末端エレメントを含むアミノ酸配列の両方を自然に含むタンパク質またはペプチドの合成は、Ｃ末端エレメントを含むアミノ酸配列と「目的のアミノ酸配列を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させる」過程として除外され得る。
【０１８４】
本明細書において用いる場合、他のものと「共組成物を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させること」は、その他のものとそうなっていない共組成物が、その他のものとその状態になるまたは状態にはいるという結果となる任意の作用を指す。さらに明確には、他のものと「共組成物を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させること」は、共組成物および他のものが共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合した状態になるまたは状態にはいるという結果となる任意の作用を指す。一例として、ある共組成物と別の共組成物の共有結合でのカップリングは、他の共組成物と「共組成物を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させること」を構成する。もう１つの例として、存在しない概念として出発し、その後、その共組成物をカップリングまたは会合させることになる物を含む組成物の一部として合成される共組成物は、その物と「共組成物を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させること」を構成する。
【０１８５】
本明細書において用いる場合、他のものと「カーゴ組成物を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させること」は、その他のものとそうなっていないカーゴ組成物が、その他のものとその状態になるまたは状態にはいるという結果となる任意の作用を指す。さらに明確には、他のものと「カーゴ組成物を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させること」は、カーゴ組成物および他のものが共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合した状態になるまたは状態にはいるという結果となる任意の作用を指す。一例として、あるカーゴ組成物と別のカーゴ組成物の共有結合でのカップリングは、他のカーゴ組成物と「カーゴ組成物を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させること」を構成する。もう１つの例として、存在しない概念として出発し、その後、そのカーゴ組成物をカップリングまたは会合させることになる物を含む組成物の一部として合成されるカーゴ組成物は、その物と「カーゴ組成物を共有結合でカップリングまたは非共有結合で会合させること」を構成する。
【０１８６】
本明細書において用いる場合、「ＣｅｎｄＲエレメント」は、Ｃ末端アルギニン、リシンもしくはリシン−グリシン配列を有するアミノ酸配列（タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントについて）、またはＣ末端ヒスチジンもしくは配列Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４（この場合、Ｘ１はＲ、ＫまたはＨであり得、Ｘ４はＲ、Ｋ、ＨまたはＫＧであり得、Ｘ２およびＸ３はそれぞれ独立して任意のアミノ酸であり得る）を有するＣ末端アミノ酸配列を有するアミノ酸配列（タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントについて）を指す。幾つかのタイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントを、Ｒ／Ｋ／ＨＸＸＲ／Ｋ／Ｈ（配列番号２０）、Ｒ／ＫＸＸＲ／Ｋ（配列番号２３）およびＲ／Ｋ／ＨＸＸＫＧ（配列番号２１）と記載する場合もある。Ｘ１、Ｘ２およびＸ３アミノ酸を、オーバーラッピングするアクセサリーペプチドまたはホーミングペプチドを含めることなどにより、細胞表面のＮＲＰ−１分子に追加のタンパク質を動員するために選択することもできる。これは、例えば、ＣｅｎｄＲエレメント（ならびにＣｅｎｄＲエレメントを含有する組成物、コンジュゲート、タンパク質およびペプチド）の選択性、内部移行および／または組織浸透力を調節するために利用することができる。ＣｅｎｄＲエレメントは、例えば、Ｃ末端エレメントを有するアミノ酸配列を含むタンパク質もしくはペプチドを含む場合があるか、Ｃ末端エレメントを有するアミノ酸配列から成るタンパク質もしくはペプチドを含む場合があるか、またはＣ末端エレメントを有するアミノ酸配列から成る場合がある。必要に応じて、特定のアミノ酸を、Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４の形のＣｅｎｄＲエレメントにおけるＸ２、Ｘ３または両方のための使用から除外することができる。例えば、所望される場合、ＧおよびＤをそれぞれＸ２およびＸ３としての同時使用から除外することができる。
【０１８７】
ＣｅｎｄＲエレメントの例としては、
【０１８８】
【化２】
0005906184.tif 000003
が挙げられる。
【０１８９】
便宜上、ＣｅｎｄＲエレメントを構成するアミノ酸モチーフを、アルギニン、リシン、リシン−グリシンペア、またはヒスチジンがＣ末端にあった場合、および該Ｃ末端のアルギニン、リシン、リシン−グリシンペア、またはヒスチジンの将来の露出が計画または意図される場合、ＣｅｎｄＲエレメントまたは潜伏性ＣｅｎｄＲエレメントと呼ぶ場合がある。
【０１９０】
ＣｅｎｄＲエレメントは、例えば、アミノ酸、アミノ酸類似体、ペプチド類似体、アミノ酸ミメティック、ペプチドミメティックなどから成る場合がある。ＣｅｎｄＲエレメントおよびＣｅｎｄＲペプチドの構造、設計などを、便宜上、アミノ酸およびアミノ酸から成るペプチドに関して本明細書に記載するが、アミノ酸およびペプチドの類似した類似体、ミメティック、修飾形などもＣｅｎｄＲエレメントおよびＣｅｎｄＲペプチドとして使用することができ、同様の原理を用いて設計することもできることは理解される。
【０１９１】
本明細書に開示するように、特定の成分は、ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする場合がある。一般に、ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする成分は、アミノ酸配列を含む成分であり、該成分のアミノ酸配列のすべてまたは一部は、ＣｅｎｄＲエレメントのアミノ酸（単数または複数）とオーバーラップする。一般に、そのようなオーバーラップは、ＣｅｎｄＲエレメントを構成するアミノ酸と共有されるまたは該アミノ酸の範囲内にある成分の一部である、該成分の中にある、または該成分を特定するアミノ酸を特徴とする。タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントについては、成分はＣｅｎｄＲエレメントと、そのＣ末端アルギニン、リシン、またはリシン−グリシン配列がその成分の一部である、その成分の中にある、またはその成分を特定するアミノ酸である場合、オーバーラップする。例えば、ホーミングペプチドＮＧＲＡＨＡ（配列番号２４）をアルギニンを含むＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップさせることができる。この例では、ホーミングペプチド中のアルギニン残基がＣｅｎｄＲエレメントである。
【０１９２】
タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントについては、成分は、ＣｅｎｄＲエレメントと、そのアミノ酸Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３および／もしくはＸ４のうちの１つ以上が、またはそのＣ末端ヒスチジンが、その成分の一部である、その成分の中にある、またはその成分を特定するアミノ酸である場合、オーバーラップする。例えば、ホーミングペプチドＣＲＥＫＡ（配列番号７）をＲＧＣＲを含むＣｅｎｄＲエレメント（配列番号１９）とオーバーラップさせて、
【０１９３】
【化３】
0005906184.tif 000004
（ＣｅｎｄＲエレメントにアンダーラインを付けた）を形成することができる。この例では、ＣｅｎｄＲエレメント（ＣＲ）の少なくとも２つのアミノ酸が、ホーミングペプチドにおける最初の２つのアミノ酸としての役割も果たす。もう１つの例として、アルギニン（またはリシンまたはヒスチジン）を付加させることおよび内部のアルギニンを用いることにより、ホーミングペプチドＮＧＲＡＨＡ（配列番号２４）をタイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップさせ、その結果、オーバーラップしたホーミングペプチドとＣｅｎｄＲエレメント
【０１９４】
【化４】
0005906184.tif 000005
（ＣｅｎｄＲエレメントにアンダーラインを付けた）を得ることができる。もう１つの例として、ホーミングペプチドＣＲＥＫＡ（配列番号７）を、ＲＲＥＫ（配列番号２６）を含むＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップさせて、ＲＲＥＫＡ（配列番号２７）（ＣｅｎｄＲエレメントにアンダーラインを付けた）を形成することができる。前記ＣＲＥＫＡペプチド中のシステインは、そのホーミング機能にとって重要ではない。もう１つの例として、ホーミングペプチドＮＧＲをＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップさせることができ、切断可能モチーフ、ＧＰＤＣ（配列番号２８）を付加させてそれを活性化可能にすることができ、末端システインを使用してそのペプチドを環化して、
【０１９５】
【化５】
0005906184.tif 000006
（ＣｅｎｄＲエレメントにアンダーラインを付けた）を形成することができる。もう１つの例として、（腫瘍―ターゲティングのために）脈管形成血管に対して親和性を有するウロキナーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲペプチドを、ＣｅｎｄＲエレメント（下線）、ウロキナーゼによる切断可能配列（太字）、および脈管形成インテグリンにホーミングする配列（二重アンダーライン）を組み合わせることによって作製することができる：
【０１９６】
【化６】
0005906184.tif 000007
。もう１つの例として、（腫瘍―ターゲティングのために）脈管形成血管に対して親和性を有するフーリンによる活性化可能ＣｅｎｄＲペプチドを、ＣｅｎｄＲエレメント（下線）、フーリンによる切断可能配列、およびＣＤ１３ホーミング配列（二重アンダーライン）を組み合わせることによって作製することができる：
【０１９７】
【化７】
0005906184.tif 000008
。もう１つの例として、（ＣＮＳターゲティングのために）脳血管に対して親和性を有するフーリンによる活性化可能ＣｅｎｄＲペプチドを、ＣｅｎｄＲエレメント（下線）、フーリンによる切断可能配列、および脳微小血管系ホーミング配列（二重アンダーライン）を組み合わせることによって作製することができる：
【０１９８】
【化８】
0005906184.tif 000009
。
【０１９９】
特定の指定アミノ酸配列と例えば指定アミノ酸配列を有さない指定スペーサーを有する成分は、その成分のスペーサーのすべてまたは一部が、そのＣｅｎｄＲエレメントを構成するアミノ酸を共有するかまたは該アミノ酸の範囲内にある場合、ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップすると、尚、言うことができる。例えば、成分がアミノ酸配列ＴＧＬＴＡＸＸＸＸＷ（配列番号４５）によって定義される場合、その成分のＸＸＸＸ領域内にあるＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする。ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップする成分は、一方または両方の末端で該ＣｅｎｄＲエレメントより（すなわち、ＣｅｎｄＲエレメントのＮ末端より、該ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端より、または両方より）伸長することができ、通常は伸長する。
【０２００】
これらの原理を用いて、本明細書に開示するようなＣｅｎｄＲエレメントの構造指定、および該ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップした成分の構造指定を用いて、多数のオーバーラッピングＣｅｎｄＲエレメントを設計および使用することができる。ＣｅｎｄＲエレメントのおよび成分の構造指定が適合性である場合、複数の異なる成分を単一のＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップさせることができる。例えば、ホーミングペプチドとプロテアーゼ切断部位の両方を同じＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップさせることができる。
【０２０１】
成分は、ＣｅｎｄＲエレメントに隣接している場合もある。本明細書において用いる場合、ＣｅｎｄＲエレメントに隣接している成分は、ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしない。ＣｅｎｄＲエレメントに隣接している成分は、該ＣｅｎｄＲエレメントのいずれの末端にも隣接できない。成分は、該成分のアミノ酸（または他の分子）がＣｅｎｄＲエレメントの末端アミノ酸に共有結合でカップリングしている場合、ＣｅｎｄＲエレメントに隣接している。ＣｅｎｄＲエレメントにオーバーラップしておらず、隣接もしていないが、該ＣｅｎｄＲエレメントに共有結合でカップリングもしている成分は、該ＣｅｎｄＲエレメントの上流（のＮ末端）にある場合もあり、該ＣｅｎｄＲエレメントの下流（のＣ末端）にある場合もあり、または（環状分子の場合は）両方である場合もある。
【０２０２】
任意の成分、例えば、本明細書に開示する成分は、ＣｅｎｄＲエレメントとオーバーラップしている場合があり、ＣｅｎｄＲエレメントに隣接している場合があり、および／または上流、下流もしくは両方にある場合がある。そのような成分の例としては、アクセサリー分子、ホーミング分子、プロテアーゼ切断部位などが挙げられる。ＣｅｎｄＲエレメントとカップリングまたは会合している幾つかの成分を、該ＣｅｎｄＲエレメントの下流（Ｃ末端）にあるように有するのが有用である。例えば、そのＣｅｎｄＲエレメントの下流に（および従って活性化のための切断部位から下流に）アクセサリータンパク質またはホーミングペプチドを有する活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、それが活性化されるとそのＣｅｎｄＲエレメントから分離される。もう１つの例として、そのＣｅｎｄＲエレメントの下流に（および従って活性化のための切断部位から下流に）アクセサリー分子またはホーミングペプチドを有する活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、それが活性化されるとそのＣｅｎｄＲエレメントから分離される。これには、ＣｅｎｄＲエレメント機能をより効率的にすることまたは除去される成分の異質な作用の機会を減少させることなどの幾つかの利点がある場合がある。
【０２０３】
任意の文脈、組み合わせまたは使用法で本明細書に開示する任意のＣｅｎｄＲエレメントは、一般にはＣｅｎｄＲエレメント、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメント、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメント、特異的ＣｅｎｄＲエレメント、または組み合わせであり得る。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントである。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントである。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントでない。タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントでないＣｅｎｄＲエレメントの一例は、Ｃ末端ヒスチジンを有するＣｅｎｄＲエレメントである。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントでない。タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントでないＣｅｎｄＲエレメントの一例は、Ｃ末端アルギニン、リシン、またはリシン−グリシンペアを有するＣｅｎｄＲエレメントであって、前記アミノ酸、該アルギニンまたはリシンの上流の３つのアミノ酸が、アルギニンでも、リシンでもヒスチジンでもないＣｅｎｄＲエレメントである。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントであり、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントではない。タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントであり、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントではないＣｅｎｄＲエレメントの一例は、Ｃ末端アルギニン、リシン、またはリシン−グリシンペアを有するＣｅｎｄＲエレメントであって、前記アミノ酸、該アルギニンまたはリシンの上流の３つのアミノ酸が、アルギニンでも、リシンでもヒスチジンでないＣｅｎｄＲエレメントである。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントであり、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントではない。タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントであり、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントではないＣｅｎｄＲエレメントの一例は、Ｃ末端ヒスチジンを有するＣｅｎｄＲエレメントである。タイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントであり、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントではないＣｅｎｄＲエレメントのもう１つの例は、Ｃ末端アルギニン、リシン、ヒスチジン、またはリシン−グリシンペアを有するＣｅｎｄＲエレメントであって、前記アミノ酸、該アルギニン、リシンまたはヒスチジンの上流の３つのアミノ酸が、アルギニン、リシンまたはヒスチジンであるＣｅｎｄＲエレメントである。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タイプ１  ＣｅｎｄＲエレメントまたはタイプ２  ＣｅｎｄＲエレメントである。任意のタイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲエレメントのセット、および／または特異的ＣｅｎｄＲエレメントを、任意の文脈、組み合わせ、または使用に特に含めることができ、またはそれらから除外することができる。例えば、米国特許出願公開第２００９０２２６３７２号に記載されている任意のＣｅｎｄＲエレメントを特に含めることまたは除外することができる。米国特許出願公開第２００９０２２６３７２号は、その全体が、および特にＣｅｎｄＲエレメントについてのその記載ついて、参照により本明細書に援用されている。
【０２０４】
細胞内に内部移行され得るＣｅｎｄＲエレメントを内部移行ＣｅｎｄＲエレメントと呼ぶ場合がある。組織に浸透することができるＣｅｎｄＲエレメントを浸透性ＣｅｎｄＲエレメントと呼ぶ場合がある。細胞内に内部移行され得るおよび組織に浸透することができるＣｅｎｄＲエレメントを内部移行および浸透性ＣｅｎｄＲエレメントと呼ぶ場合がある。その文脈が明らかに別様に示していない限り、「ＣｅｎｄＲエレメント」への言及は、これらのうちの任意のものを個々に、集合的に、または任意の組み合わせで指す。
【０２０５】
本明細書において用いる場合、「ＣｅｎｄＲ組成物」は、ＣｅｎｄＲエレメントを含む組成物を指す。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、例えば、活性である場合があり、活性化可能である場合があり、または遮断されていることがある。例えば、ＣｅｎｄＲ組成物は、ＣｅｎｄＲエレメントを含むアミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチド（この場合、該アミノ酸配列は、該タンパク質またはペプチドのＣ末端にある）を含む場合がある。
【０２０６】
本明細書において用いる場合、「活性化可能ＣｅｎｄＲエレメント」は、そのＣｅｎｄＲエレメントに、例えばＣ末端エレメントの末端カルボキシル基に、共有結合でカップリングされている分子、部分、ナノ粒子、化合物または他の組成物を有するＣｅｎｄＲエレメントであって、該分子、部分、ナノ粒子、化合物または他の組成物がＣｅｎｄＲ組成物、コンジュゲート、分子、タンパク質、ペプチドなどの内部移行および／または組織浸透を遮断できる、ならびに該分子、部分、ナノ粒子、化合物または他の組成物を（例えば、該末端カルボキシル基を露出させるために）除去することができるものであるＣｅｎｄＲエレメントを指す。例えば、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、前記ペプチドのＣ末端にある場合があり、該ＣｅｎｄＲエレメントが内部移行することおよび／または組織に浸透することを防ぐことができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントに共有結合でカップリングしている分子、ナノ粒子、部分、化合物または他の組成物を「遮断基」と呼ぶ場合がある。例えば、遮断基を前記ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アルギニンもしくはリシンまたは他のＣ末端アミノ酸の末端カルボキシル基に、前記ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸に、あるいは前記ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸以外のアミノ酸にカップリングさせることができる。前記遮断基は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが内部移行することおよび／または組織に浸透することを防ぐことができる限り、前記ＣｅｎｄＲエレメント以外のＣｅｎｄＲ組成物、コンジュゲート、分子、タンパク質、ペプチドなどの一部ともカップリングまたは会合させることができる。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを含むＣｅｎｄＲ組成物を活性化可能ＣｅｎｄＲ組成物と呼ぶ場合がある。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを含むＣｅｎｄＲ分子を活性化可能ＣｅｎｄＲ分子と呼ぶ場合がある。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを含むＣｅｎｄＲコンジュゲートを活性化可能ＣｅｎｄＲコンジュゲートと呼ぶ場合がある。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを含むＣｅｎｄＲタンパク質を活性化可能ＣｅｎｄＲタンパク質と呼ぶ場合がある。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを含むＣｅｎｄＲペプチドを活性化可能ＣｅｎｄＲペプチドと呼ぶ場合がある。
【０２０７】
活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントの細胞内への内部移行、組織浸透、または両方を遮断することができる。一般に、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントの細胞内への内部移行と組織の浸透の両方ともが遮断される。そのような活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを活性化可能内部移行および浸透性ＣｅｎｄＲエレメントと呼ぶ場合がある。しかし、一部の活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、組織浸透だけしかまたは細胞内への内部移行だけしか遮断されない。そのような活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを（細胞への内部移行のみが遮断されるＣｅｎｄＲエレメントについて）活性化可能内部移行ＣｅｎｄＲエレメントと、または（組織の浸透のみが遮断されるＣｅｎｄＲエレメントについて）活性化可能内部移行および浸透性ＣｅｎｄＲエレメントと呼ぶ場合がある。一般に、活性化可能である内部移行ＣｅｎｄＲエレメントは、活性化可能内部移行ＣｅｎｄＲエレメントである。同様に、活性化可能である浸透性ＣｅｎｄＲエレメントは、一般に、活性化可能浸透性ＣｅｎｄＲエレメントである。活性化可能である内部移行および浸透性ＣｅｎｄＲエレメントは、活性化可能内部移行および浸透性ＣｅｎｄＲエレメントである。遮断基の除去は、そのＣｅｎｄＲエレメントが細胞内に内部移行すること、組織に浸透すること、または両方を可能にする。
【０２０８】
活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントの切断可能な結合は、任意の適する方法で切断することができる。例えば、前記切断可能な結合を酵素的にまたは非酵素的に切断することができる。酵素的切断については、前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むもしくは蓄積する部位に切断酵素を供給することができまたは切断酵素が存在することができる。例えば、前記酵素は、前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むもしくは蓄積する細胞の近傍に存在することができる。非酵素的切断については、前記ＣｅｎｄＲエレメントを切断剤と接触させることができ、切断条件に置くことができ、または両方できる。切断剤は、切断可能な結合の切断を媒介または刺激することができる任意の物質である。非酵素的切断剤は、酵素を除く任意の切断剤である。切断条件は、切断可能な結合の切断を媒介または刺激することができる任意の溶液または環境条件であり得る。例えば、一部の不安定な結合は、酸性条件、アルカリ性条件、反応性基の存在などで切断することができる。非酵素的切断条件は、酵素の存在を除く任意の切断条件である。作用因子なしの切断条件は、切断剤の存在を除く任意の切断条件である。
【０２０９】
活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、広いまたは狭い状況で活性化可能であり得る。一般に、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、ＣｅｎｄＲエレメントを活性化することができる特異的作用因子または作用因子群に対応して活性化可能である。従って、例えば、特定の活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、特定のプロテアーゼによってのみ活性化可能でである場合がある。そのようなＣｅｎｄＲエレメントを活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントと呼ぶ場合があるが、特定のプロテアーゼによって活性化可能であると言う場合もある。
【０２１０】
「プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメント」（または「プロテアーゼ活性化ＣｅｎｄＲエレメント」）は、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントであって、遮断基がペプチド結合によってＣｅｎｄＲエレメントにカップリングされており、該ペプチド結合をプロテアーゼによって切断することができるものである活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを指す。プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントのこのペプチド結合の切断は、該ＣｅｎｄＲエレメントによる細胞内への内部移行および／または組織浸透性を可能にする。一例では、前記遮断基を切断可能なまたは不安定な結合により前記ＣｅｎｄＲエレメントにカップリングさせることができる。前記切断可能な結合は、例えば酵素または化合物によって、切断することができる。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントの前記結合の切断または「不安定化」は、該ＣｅｎｄＲエレメントを細胞内への内部移行および／または組織浸透を可能にさせる。そのような切断または「不安定化」をＣｅｎｄＲエレメントの活性化と呼ぶ場合がある。プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントの１つの形である。Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４の形のＣｅｎｄＲエレメントのＸ２およびＸ３アミノ酸を特定の目的のために選択することができる。例えば、Ｘ２、Ｘ３または両方を、プロテアーゼ認識配列のすべてまたは一部を形成するために選択することができる。これは、例えば、Ｘ４アミノ酸の後で切断することにより活性化される潜伏性または潜在ＣｅｎｄＲエレメントとしてＣｅｎｄＲエレメント有するペプチドの切断を特定するまたは可能にするのに有用である。そのようなアミノ酸選択の例を表１および表２に示す。プロテアーゼ切断部位は、開発されたおよび当業者に公知の知識に基づいて予測することができる。例えば、切断の予測をウェブサイト、ｃｂｓ．ｄｔｕ．ｄｋ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ＰｒｏＰ／で評価することができる。ＣｅｎｄＲエレメントの１つの有用なクラスは、遮断解除ＣｅｎｄＲエレメントおよび活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントから成り得、このクラスは、活性化可能でない遮断ＣｅｎｄＲエレメントを除外する。
【０２１１】
有用なプロテアーゼは、塩基性残基のＣ末端側で切断する酵素（ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端残基は、塩基性残基である場合がある）およびそれらの切断部位のＣ末端側の配列を認識する（従って、その切断産物のＣ末端配列の自由な選択を可能にする）酵素を含む。有用なプロテアーゼの例としては、例えば、セリンプロテアーゼ（例えば、プラスミンおよびプラスミノゲンアクチベータを含む）、ウロキナーゼ、プロタンパク質転換酵素（例えば、Ｄｕｃｋｅｒｔら、Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｎｖｅｒｔａｓｅ  ｃｌｅａｖａｇｅ  ｓｉｔｅｓ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  １７（１）：１０７−１１２（２００４）参照）、フーリンおよびカルボキシペプチダーゼ、例えばカルボキシペプチダーゼＡ（芳香族または分岐炭化水素側鎖を有するアミノ酸）、グルタミン酸特異的カルボキシペプチダーゼ、プロリン特異的カルボキシペプチダーゼ、ならびにＰＳＭＡが挙げられる。セリンプロテアーゼは、癌細胞および腫瘍にターゲティングさせるＣｅｎｄＲエレメントおよびＣｅｎｄＲ組成物に特に有用である。塩基性残基のＣ末端側で切断する酵素の例としては、Ａｒｇ−Ｃプロテアーゼ（アルギニン残基のＣ末端側で切断する；Ｋｅｉｌ、Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ−Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ−Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９２））、クロストリパイン（アルギニン残基のＣ末端側で切断する；Ｋｅｉｌ、１９９２）、エンテロキナーゼ（配列−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−の後で切断する；配列番号２２）、第Ｘａ因子（配列―Ｇｌｙ−Ａｒｇ−の後で切断する；Ｆｕｊｉｋａｗａら、Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｏｖｉｎｅ  ｆａｃｔｏｒ  Ｘ（Ｓｔｕａｒｔ  ｆａｃｔｏｒ）：ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  ｆａｃｔｏｒ  Ｘａ  ａｌｐｈａ  ｔｏ  ｆａｃｔｏｒ  Ｘａ  ｂｅｔａ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７２：３３５９−３３６３（１９７５））、Ｌｙｓ−Ｃ（リシン残基のＣ末端側で切断する；Ｋｅｉｌ、１９９２）、トロンビン（アルギニン残基のＣ末端側で切断する；Ｋｅｉｌ、１９９２）、トリプシン（アルギニンおよびリシン残基のＣ末端側で切断する；Ｋｅｉｌ、１９９２）、セリンプロテアーゼ、プロタンパク質転換酵素（例えば、ＰＣ１、ＰＣ２、ＰＣ３、ＰＣ４、ＰＣ５、ＰＣ６、ＰＣ７、ＰＣ８、フーリン、Ｐａｃｅ、ＰＡＣＥ４、サイト−１プロテアーゼ、Ｓ１Ｐ、ＳＫＩ、ＮＡＲＣ−１、ＰＣＳＫ１、ＰＣＳＫ２、ＰＣＳＫ３、ＰＣＳＫ４、ＰＣＳＫ５、ＰＣＳＫ６、ＰＣＳＫ７、ＰＣＳＫ８およびＰＣＳＫ９）、プラスミン、ならびにプラスミノゲンアクチベータが挙げられる。それらの切断部位のＣ末端側の配列を認識する酵素の例としては、Ａｓｐ−Ｎエンドペプチダーゼ（アスパラギン酸のＮ末端側で切断する；Ｋｅｉｌ、１９９２）およびカルボキシペプチダーゼ、例えばカルボキシペプチダーゼＡ（プロリン、リシンおよびアルギニンを除くＣ末端残基を切断する）が挙げられる。
【０２１２】
プロテアーゼの例は、Ｈｏｏｋ、Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ  ａｎｄ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｉｎ  ｐｒｏｈｏｒｍｏｎｅ  ａｎｄ  ｐｒｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ、ＲＧ  Ｌａｎｄｅｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ａｕｓｔｉｎ、Ｔｅｘａｓ、ＵＳＡ（１９９８）；Ｈｏｏｐｅｒら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３２１：２６５−２７９（１９９７）；Ｗｅｒｂ、Ｃｅｌｌ  ９１：４３９−４４２（１９９７）；Ｗｏｌｆｓｂｅｒｇら、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１３１：２７５−２７８（１９９５）；ＭｕｒａｋａｍｉおよびＥｔｌｉｎｇｅｒ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１４６：１２４９−１２５９（１９８７）；Ｂｅｒｇら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３０７：３１３−３２６（１９９５）；ＳｍｙｔｈおよびＴｒａｐａｎｉ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  １６：２０２−２０６（１９９５）；Ｔａｌａｎｉａｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：９６７７−９６８２（１９９７）；ならびにＴｈｏｒｎｂｅｒｒｙら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１７９０７−１７９１１（１９９７）にも記載されている。
【０２１３】
表１．インビトロおよびインビボターゲティング研究に用いたプロテアーゼ切断可能ファージおよび対照ファージ。基質ファージ内の切断部位を矢印で示す。タンパク質分解により露出されるＣ末端残基は太字である。
【０２１４】
【表１】
0005906184.tif 000010
表２．切断則
【０２１５】
【表２−１】
0005906184.tif 000011
下記の酵素は、切断部位のそれぞれの組成物が見出されるとき、切断することができる。
【０２１６】
【表２−２】
0005906184.tif 000012
例外則：下記の切断部位を有する組成物の場合、上の切断則があてはまらない、すなわち切断が起きない：
【０２１７】
【表２−３】
0005906184.tif 000013
エキソペプチダーゼ、例えばカルボキシペプチダーゼ、を使用してＣｅｎｄＲエレメントを活性化することができる。例えば、カルボキシペプチダーゼは、ＣｅｎｄＲエレメントを活性化するための有用なプロテアーゼである。カルボキシペプチダーゼは、タンパク質およびペプチドからＣ末端アミノ酸を除去する。カルボキシペプチダーゼは、それらの基質選択性の制約の範囲内で、タンパク質またはペプチドから逐次的にアミノ酸を除去する。従って、例えば、カルボキシペプチドは、タンパク質またはペプチドを完全にまたはほぼ完全に加水分解することができる。様々なカルボキシペプチダーゼが特定の基質選択性または制限を有するため、およびカルボキシペプチダーゼは一般にペプチド結合のみを切断するため、特定のアミノ酸、修飾、および／または非ペプチド結合の存在は、タンパク質またはペプチドのカルボキシペプチダーゼ切断を制御することができる。
【０２１８】
ＣｅｎｄＲエレメントの文脈において、ＣｅｎｄＲエレメントを含むタンパク質、ペプチドまたはアミノ酸配列の構造物および／またはＣｅｎｄＲエレメントを含むタンパク質、ペプチドまたはアミノ酸配列の構造物に対する修飾は、該ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸でのカルボキシペプチダーゼエンディングによる切断を生じさせるように選択することができる。これは、例えば、ＣｅｎｄＲエレメントの末位から二番目のアミノ酸として、該カルボキシペプチダーゼにより嫌われるアミノ酸を含めること、または該カルボキシペプチダーゼがＣ末端アミノ酸とのその結合を切断することを阻止するアミノ酸を含めることにより、果たすことができる。プロリンが（多くのカルボキシペプチドにとっての）そのようなアミノ酸の例である。もう１つの例として、ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸と末位から二番目のアミノ酸との間の結合をプロテアーゼ切断から保護することができる。例えば、前記結合は、非ペプチド結合である場合があり、またはメチル化などの修飾を含む場合がある。もう１つの例として、Ｄ−アミノ酸をＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸、末位から二番目のアミノ酸、または両方として使用することができる。もう１つの例として、Ｄ−アミノ酸をＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸として使用することができる。Ｄ−アミノ酸の制限使用を有するＣｅｎｄＲエレメントは、内部移行および浸透活性を保持する。もう１つの例として、カルボキシペプチダーゼの基質としての役割を果たすアミノ酸をＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸に対してＣ末端に配置することができる。例えば、ＰＳＭＡなどのグルタミン酸特異的カルボキシペプチダーゼについては、グルタミン酸アミノ酸を、ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸に隣接して、およびＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸のＣ末端に、ならびにＣｅｎｄＲエレメントを含有するタンパク質またはペプチドのＣ末端に、配置することができる。他のアミノ酸特異的（または選択性）カルボキシペプチダーゼを同様の方法で使用することができる。これらの場合、前記ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸は、カルボキシペプチダーゼの基質であるべきでない（すなわち、カルボキシペプチダーゼが嫌う基質であるべきである）。
【０２１９】
結合に対するプロテアーゼ切断を低減または排除することができるアミノ酸への結合および修飾は公知であり、本開示のＣｅｎｄＲエレメントにおいて使用することができる。例えば、様々な化学修飾技術および部分が、例えば、米国特許第５，５５４，７２８号、同第６，８６９，９３２号、同第６，８２８，４０１号、同第６，６７３，５８０号、同第６，５５２，１７０号、同第６，４２０，３３９号、米国特許公開第２００６／０２１０５２６号ならびに国際特許出願ＷＯ  ２００６／１３６５８６に記載されている。そのような修飾の幾つかの例としては、ペプチド結合サロゲート、例えばＭｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、第２９４巻、２２３−２４６頁（２００８）のＣｕｄｉｃおよびＳｔａｗｉｋｏｗｓｋｉ、Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ：Ｆｍｏｃ  Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｐｓｅｕｄｏｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓに記載されているもの、ならびにペプチドの構造類似体を生成するための化学修飾、例えばマレイミドキャッピング、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の結合、マレイミド化、アシル化、アルキル化、エステル化およびアミド化が挙げられる。これらおよび他の修飾は、本明細書中の他の箇所でさらに説明する。
【０２２０】
活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントの一部の有用な形態は、環状タンパク質またはペプチドであり得る、または環状タンパク質またはペプチドの中に存在し得る。そのような環状構造物では、前記ＣｅｎｄＲエレメントは、遊離Ｃ末端にないので、潜伏性である。環状タンパク質およびペプチドは、当該技術分野において公知の様々な方法で、例えばシステイン結合により、共有結合により、活性基の反応により、およびリンカーを介して、形成することができる。システイン結合は、タンパク質およびペプチドの有用な環化方法である。環化連結が、ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端である必要がないことは理解しておく必要がある。ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端から離れて環化連結を配置することにより、環化結合の選択および潜伏性ＣｅｎｄＲエレメントの切断可能な結合の選択それぞれが独立していることができる。例えば、環化連結は、システイン結合である場合があり、一方、潜伏性ＣｅｎｄＲエレメントの切断可能な結合は、ペプチド結合である場合がある（この場合、該ペプチド結合は、例えば、プロテアーゼターゲットの切断部位にある場合がある）。
【０２２１】
本開示のタンパク質、ペプチド、アミノ酸配列またはＣｅｎｄＲ組成物のＣｅｎｄＲエレメントは、一般に、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントの切断部位の遊離Ｃ末端にまたはそのＮ末端側にあるはずである。
【０２２２】
幾つかの形態において、ペプチドまたはタンパク質の遊離Ｃ末端にないＣｅｎｄＲエレメントは、細胞内部移行および／または組織浸透を媒介することができる。存在するとき、この作用は、遮断解除ＣｅｎｄＲエレメントを使用する細胞内部移行および組織浸透より概して有効性が低い。ペプチドまたはタンパク質の遊離Ｃ末端にはないが細胞内部移行および／または組織浸透を媒介できるＣｅｎｄＲエレメントを内部ＣｅｎｄＲエレメントと呼ぶ場合がある。内部ＣｅｎｄＲエレメントは、遮断ＣｅｎｄＲエレメントとは区別される。遮断ＣｅｎｄＲエレメントは、（遮断解除されない限り）細胞内部移行および／または組織浸透を媒介しないからである。内部ＣｅｎｄＲエレメントは、線状、環状または分岐ペプチドおよび線状、環状または分岐タンパク質である場合がある。内部ＣｅｎｄＲエレメントは、タンパク質またはペプチドのＣ末端で切断して該ＣｅｎｄＲエレメントを露出させることにより、活性化可能である場合もある。内部ＣｅｎｄＲエレメントのそのような活性化は、内部移行および／または組織浸透活性を増加させるのに役立つ。
【０２２３】
幾つかの形態において、ＣｅｎｄＲ組成物のペプチドまたはタンパク質は、選択されたアミノ酸配列（ＣｅｎｄＲエレメント）が該ペプチドまたはタンパク質に存在するときには細胞内に内部移行することができるが、選択されたアミノ酸が該ペプチドまたはタンパクに存在しないときには細胞内に内部移行することができない。これを用いて、例えばタンパク質またはペプチドがＣｅｎｄＲエレメントを含むかどうかを検出することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、例えばそれ自体の配列以外のものと会合していずに、細胞内に内部移行することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記タンパク質もしくはペプチドまたは前記ＣｅｎｄＲ組成物の唯一の機能性内部移行エレメントである場合があり、または１つ以上の追加の機能性内部移行エレメントが存在する場合がある。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物は、選択されたアミノ酸配列（ＣｅｎｄＲエレメント）が該ＣｅｎｄＲ組成物に存在するときには細胞内に内部移行することができるが、選択されたアミノ酸が該ＣｅｎｄＲ組成物に存在しないときには細胞内に内部移行することができない。
【０２２４】
同様に、幾つかの形態において、ＣｅｎｄＲ組成物のペプチドまたはタンパク質は、選択されたアミノ酸配列（ＣｅｎｄＲエレメント）が該ペプチドまたはタンパク質に存在するときには組織に浸透することができるが、選択されたアミノ酸が該ペプチドまたはタンパク質に存在しないときには組織に浸透することができない。これを用いて、例えばタンパク質またはペプチドがＣｅｎｄＲエレメントを含むかどうかを検出することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、例えばそれ自体の配列以外のものと会合していずに、組織に浸透することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記タンパク質もしくはペプチドまたは前記ＣｅｎｄＲ組成物の唯一の機能性組織浸透エレメントである場合があり、または１つ以上の追加の機能性組織浸透エレメントが存在する場合がある。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物は、選択されたアミノ酸配列（ＣｅｎｄＲエレメント）が該ＣｅｎｄＲ組成物に存在するときには組織に浸透することができるが、選択されたアミノ酸が該ＣｅｎｄＲ組成物に存在しないときには組織に浸透することができない。
【０２２５】
同様に、幾つかの形態において、ＣｅｎｄＲ組成物のペプチドまたはタンパク質は、選択されたアミノ酸配列（ＣｅｎｄＲエレメント）が該ペプチドまたはタンパク質に存在するときには細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができるが、選択されたアミノ酸が該ペプチドにもタンパクにも存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。これを用いて、例えばタンパク質またはペプチドがＣｅｎｄＲエレメントを含むかどうかを検出することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、例えばそれ自体の配列以外のものと会合していずに、細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記タンパク質もしくはペプチドまたは前記ＣｅｎｄＲ組成物の唯一の機能性内部移行および組織浸透エレメントである場合があり、または１つ以上の追加の機能性内部移行および／もしくは組織浸透エレメントが存在する場合がある。幾つかの形態において、前記ＣｅｎｄＲ組成物は、選択されたアミノ酸配列（ＣｅｎｄＲエレメント）が該ＣｅｎｄＲ組成物に存在するときには細胞内に内部移行することおよび組織に浸透することができるが、選択されたアミノ酸が該ＣｅｎｄＲ組成物に存在しないときには細胞内に内部移行することも組織に浸透することもできない。
【０２２６】
「内部移行」は、形質膜または他の生物学的バリアの通過を指す。「浸透」は、細胞、組織または他の生物学的バリア内への進入および細胞、組織または他の生物学的バリアの通過を指す。浸透は、一般に、内部移行を包含し、内部移行を含む。本開示のＣｅｎｄＲエレメントは、一般に、内部移行（例えば、細胞内への内部移行）と浸透（例えば、組織浸透）の両方を促進し、可能にする。内部移行または浸透への言及は、その文脈が別様に示している場合（例えば、別々に細胞内への内部移行および組織浸透の独立したまたは別個の論述および説明−本段落は、そのようなものの一例である）を除き、内部移行と浸透の両方を指すと理解すべきである。
【０２２７】
「細胞内への内部移行」とは、ＣｅｎｄＲエレメントが形質膜に浸透でき、その結果、細胞内に内部移行することを意味する。この内部移行は、例えば、所与のＣｅｎｄＲエレメントおよび所与の細胞について１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０または１００％の効率を伴って起こる場合がある。ＣｅｎｄＲエレメントは、一般に、内部移行、浸透、細胞、組織もしくは両方の中へのおよび／または細胞、組織もしくは両方を通っての内部移行；細胞、組織もしくは両方の中へのおよび／または細胞、組織もしくは両方を通っての浸透；細胞および／または組織の透過性増加；あるいは組み合わせを促進する、媒介する、生じさせる、増強する、などする。「透過性増加」とは、細胞および／または組織の近傍の組成物、コンジュゲート、分子などを該細胞および／または組織に侵入させるならびに細胞および／または組織の近傍の組成物、コンジュゲート、分子などに該細胞および／または組織を通過させる該細胞および／または組織の能力および／または条件を促進すること、媒介すること、生じさせること、増強することなどを意味する。従って、本開示のＣｅｎｄＲエレメント、タンパク質、ペプチド、コンジュゲート、組成物などは、細胞および／または組織の透過性を上げると言われる場合がある。「透過性の」は、細胞および／または組織の近傍の組成物、コンジュゲート、分子などを該細胞および／または組織に侵入させるならびに細胞および／または組織の近傍の組成物、コンジュゲート、分子などに該細胞および／または組織を通過させる、該細胞および／または組成物の能力および／または条件を意味する。
【０２２８】
ＣｅｎｄＲエレメントを内部移行することができる細胞は、例えば、（ａ）細胞をＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程；および（ｂ）該ＣｅｎｄＲエレメントが内部移行されたかどうかを決定する工程によって同定することができる。前記細胞は、例えばアッセイ物中にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントを、例えばホーミング分子にカップリングさせ、それによってＣｅｎｄＲ組成物を形成することができる。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを内部移行することができる細胞は、例えば、（ａ）細胞を活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程；（ｂ）該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントが内部移行されたかどうかを決定する工程によって同定することができる。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを、前記細胞への曝露前に遮断解除（ｕｎｂｌｏｃｋ）してもよいが、しなくてもよい。これは、例えば、遮断因子の遮断能力を試験するために用いることができる。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、プロテアーゼ活性化ＣｅｎｄＲエレメントである場合もある。任意の形態またはタイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物をこれらの方法において用いることができる。
【０２２９】
癌細胞、または癌細胞を持つ被験体、は、例えば、（ａ）該癌細胞をＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程；および（ｂ）該ＣｅｎｄＲエレメントが該癌細胞により内部移行されたかどうかを決定する工程によって、ＣｅｎｄＲに基づく治療法の候補として同定することができ、この場合、内部移行されたＣｅｎｄＲエレメントにより該癌細胞または該被験体がＣｅｎｄＲに基づく治療法の候補であると同定される。前記細胞は、例えば、アッセイ物中にある場合があり、または被験体内にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントを例えばホーミング分子にカップリングさせ、それによってＣｅｎｄＲ組成物を形成することができる。任意の形態またはタイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物をこれらの方法において用いることができる。
【０２３０】
腫瘍、または腫瘍を持つ被験体は、例えば、（ａ）該腫瘍からの組織をＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程；および（ｂ）該ＣｅｎｄＲエレメントがその組織を通過したかどうか、またはその組織の細胞により内部移行されたかどうかを決定する工程によって、ＣｅｎｄＲに基づく治療法の候補として同定することができ、この場合、通過したまたは内部移行されたＣｅｎｄＲエレメントにより該腫瘍または該被験体がＣｅｎｄＲに基づく治療法の候補であると同定される。任意の形態またはタイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物をこれらの方法において用いることができる。
【０２３１】
目的の細胞の近傍で活性化され得る活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、例えば、目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件によって切断可能である切断可能な結合によって遮断基がＣｅｎｄＲエレメントにカップリングされている、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する工程により作製することができる。これは、前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する前に、前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件を同定する工程をさらに含む場合がある。これは、前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する前に、前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件に基づき前記切断可能な結合を選択する工程をさらに含む場合がある。任意の形態またはタイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物をこれらの方法において用いることができる。
【０２３２】
活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、例えば、（ａ）細胞内への内部移行のためのアミノ酸配列を選択する工程（この場合、該アミノ酸配列は、Ｃ末端エレメントを含み、該Ｃ末端エレメントは、末端カルボキシル基を含む）および（ｂ）その選択したアミノ酸配列の末端カルボキシル基に遮断基を共有結合によりカップリングさせる工程（この場合、該遮断基と該末端カルボキシル基をカップリングする結合は、切断可能である）によって形成することができ、この場合、該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、その選択したアミノ酸配列および遮断基を含む。これは、工程（ｂ）の前に、該目的の細胞の近傍に存在するプロテアーゼ、酵素、切断剤および／または切断条件によって切断可能であるような、該遮断基と該末端カルボキシル基をカップリングする結合を選択する工程をさらに含む場合がある。任意の形態またはタイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物をこれらの方法において用いることができる。
【０２３３】
活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、例えば、（ａ）細胞内への内部移行のためのアミノ酸配列を選択する工程（この場合、該アミノ酸配列は、Ｃ末端エレメントを含み、該Ｃ末端エレメントは、末端カルボキシル基を含む）および（ｂ）その選択したアミノ酸配列の末端カルボキシル基に遮断基を共有結合によりカップリングさせる工程（この場合、該遮断基と該末端カルボキシル基をカップリングする結合は、切断可能である）を含む方法によって作製することができ、この場合、該活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、その選択したアミノ酸配列および該遮断基を含む。この方法は、工程（ｂ）の前に、目的の細胞の近傍に存在するプロテアーゼ、酵素、切断剤および／または切断条件によって切断可能であるような、該遮断基と該末端カルボキシル基をカップリングする結合を選択する工程をさらに含む場合がある。任意の形態またはタイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物をこれらの方法において用いることができる。
【０２３４】
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、環状である場合があり、またはループを含有する場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、末端カルボキシル基を含む場合がある。遮断基が前記末端カルボキシル基にカップリングしている場合がある。目的の細胞の近傍に存在するプロテアーゼ、酵素、切断剤および／または切断条件によって切断可能であるような、遮断基と末端カルボキシル基をカップリングする結合を選択することができる。前記遮断基は、前記ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸にカップリングしている場合がある。前記遮断基は、前記ＣｅｎｄＲエレメントのＣ末端アミノ酸以外の前記ＣｅｎｄＲエレメントのアミノ酸にカップリングしている場合がある。
【０２３５】
前記共組成物は、例えば、治療または診断用途を有する、ナノ粒子、または分子、または分子の複合体である場合がある。ＣｅｎｄＲエレメントと共にターゲティングすることができる治療用共組成物としては、ナノ粒子、分子、分子の複合体、抗脈管形成剤、脈管形成促進剤、癌化学療法薬、細胞傷害剤、細胞生存促進剤（ｐｒｏ−ｃｅｌｌ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ａｇｅｎｔ）、細胞分化剤、神経保護薬、免疫修飾物質、抗炎症薬、抗関節炎薬、抗ウイルス薬、またはこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。ＣｅｎｄＲエレメントと共にターゲティングすることができる治療用共組成物としては、治療用タンパク質、治療用化合物、治療用組成物、抗脈管形成剤、脈管形成促進剤、癌化学療法薬、毒素、細胞傷害剤、抗炎症薬、抗関節炎薬、成長因子、サイトカイン、ケモカイン、１つ以上のシグナル伝達経路を調節する化合物、抗体、核酸、核酸類似体、細胞、ウイルス、ファージ、ウイルス粒子、ファージ粒子、ウイルスカプシド、ファージカプシド、ウイルス様粒子、リポソーム、ミセル、ビーズ、ナノ粒子、マイクロ粒子、化学療法薬、造影剤、イメージング剤、標識、標識化剤、または組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。ＣｅｎｄＲエレメントと共にターゲティングすることができる診断用共組成物としては、ナノ粒子、分子、分子の複合体、ＭＲＩイメージング剤、放射性イメージング剤、光学イメージング剤、分子タグ（例えば、ビオチン）、蛍光体、エピトープタグ（例えば、特定の分子アッセイを用いて検出することができるもの）、またはこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。
【０２３６】
前記カーゴ組成物は、例えば、治療用途または診断用途を有する、ナノ粒子、または分子、または分子の複合体である場合がある。ＣｅｎｄＲエレメントと共にターゲティングすることができる治療用カーゴ組成物としては、ナノ粒子、分子、分子の複合体、抗脈管形成剤、脈管形成促進剤、癌化学療法薬、細胞傷害剤、細胞生存促進剤、細胞分化剤、神経保護薬、免疫修飾物質、抗炎症薬、抗関節炎薬、抗ウイルス薬、またはこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。ＣｅｎｄＲエレメントと共にターゲティングすることができる治療用カーゴ組成物としては、治療用タンパク質、治療用化合物、治療用組成物、抗脈管形成剤、脈管形成促進剤、癌化学療法薬、毒素、細胞傷害剤、抗炎症薬、抗関節炎薬、成長因子、サイトカイン、ケモカイン、１つ以上のシグナル伝達経路を調節する化合物、抗体、核酸、核酸類似体、細胞、ウイルス、ファージ、ウイルス粒子、ファージ粒子、ウイルスカプシド、ファージカプシド、ウイルス様粒子、リポソーム、ミセル、ビーズ、ナノ粒子、マイクロ粒子、化学療法薬、造影剤、イメージング剤、標識、標識化剤、または組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。ＣｅｎｄＲエレメントと共にターゲティングすることができる診断用カーゴ組成物としては、ナノ粒子、分子、分子の複合体、ＭＲＩイメージング剤、放射性イメージング剤、光学イメージング剤、分子タグ（例えば、ビオチン）、蛍光体、エピトープタグ（例えば、特定の分子アッセイを使用して検出することができるもの）、またはこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。
【０２３７】
ＣｅｎｄＲエレメントを内部移行することができる細胞は、例えば（ａ）細胞をＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程、および（ｂ）該ＣｅｎｄＲエレメントが内部移行されたかどうかを決定する工程によって同定することができる。ＣｅｎｄＲに基づく療法の候補として癌細胞を同定する方法も開示し、該方法は、（ａ）癌細胞をＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程、および（ｂ）該ＣｅｎｄＲエレメントが該癌細胞によって内部移行されたかどうかを決定する工程を含み、この場合、内部移行されたＣｅｎｄＲエレメントにより、その癌細胞はＣｅｎｄＲに基づく療法の候補であると同定される。前記細胞は、アッセイ物中にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タンパク質またはペプチドにカップリングしている場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを、前記細胞への曝露前に、活性化することができる。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、環状である場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、線状である場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある場合がある。任意の形態またはタイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物をこれらの方法において用いることができる。
【０２３８】
ＣｅｎｄＲエレメントが浸透することができる組織は、例えば、（ａ）組織をＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程、および（ｂ）該ＣｅｎｄＲエレメントが該組織に浸透したかどうかを決定する工程によって同定することができる。ＣｅｎｄＲに基づく療法の候補として組織を同定する方法も開示し、該方法は、（ａ）該腫瘍からの細胞をＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程、および（ｂ）該ＣｅｎｄＲエレメントが該細胞により内部移行されたかどうかを決定する工程を含み、この場合、内部移行されたＣｅｎｄＲエレメントにより、その腫瘍はＣｅｎｄＲに基づく療法の候補であると同定される。腫瘍は、例えば、（ａ）該腫瘍をＣｅｎｄＲエレメントに曝露する工程、および（ｂ）該ＣｅｎｄＲエレメントが該腫瘍に浸透したかどうかを決定する工程により、ＣｅｎｄＲに基づく療法の候補と同定することができ、この場合、浸透したＣｅｎｄＲエレメントにより、その腫瘍はＣｅｎｄＲに基づく療法の候補であると同定される。前記腫瘍は、アッセイ物中にある場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、タンパク質またはペプチドにカップリングしている場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを、前記腫瘍への曝露前に、活性化することができる。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、プロテアーゼによる活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、環状である場合がある。前記タンパク質またはペプチドは、線状である場合がある。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、前記タンパク質またはペプチドのＣ末端にある場合がある。任意の形態またはタイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物をこれらの方法において用いることができる。
目的の細胞の近傍で活性化され得る活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、例えば、目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件によって切断可能である切断可能な結合によって遮断基がＣｅｎｄＲエレメントにカップリングされている、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する工程により生成することができる。前記細胞は、被験体内にある場合がある。前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件を同定することができる。前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件を、前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する前に、同定することができる。前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件に基づいて、前記切断可能な結合を選択することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むまたは蓄積する部位（例えば前記目的の細胞）に存在する切断剤に基づいて、前記切断可能な結合を選択することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むまたは蓄積する部位（例えば前記目的の細胞）に存在する切断条件に基づいて、前記切断可能な結合を選択することができる。前記切断可能な結合を、前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する前に、選択することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、末端カルボキシル基を含む場合があり、ここでは、該末端カルボキシル基に前記遮断基がカップリングされている。任意の形態またはタイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物をこれらの方法において用いることができる。
活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、例えば、遮断基をＣｅｎｄＲエレメントに共有結合でカップリングさせる工程により形成することができ、この場合、該遮断基と該ＣｅｎｄＲエレメントをカップリングする結合は、切断可能である。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、例えば、遮断基をアミノ酸配列に共有結合でカップリングさせる工程により形成することができ、この場合、該アミノ酸配列はＣｅｎｄＲエレメントを含み、該遮断基と該ＣｅｎｄＲエレメントをカップリングする結合は切断可能である。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、例えば、（ａ）細胞内への内部移行および／または組織浸透のためのアミノ酸配列を選択する工程（この場合、該アミノ酸配列は、ＣｅｎｄＲエレメントを含む）、および（ｂ）遮断基を該ＣｅｎｄＲエレメントに共有結合でカップリングさせる工程（この場合、該遮断基と該ＣｅｎｄＲエレメントをカップリングする結合は、切断可能である）によって形成することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントに共有結合でカップリングしている前記遮断基は、細胞内への内部移行および／または組織浸透を低減または防止する。前記ＣｅｎｄＲエレメントに共有結合でカップリングしている前記遮断基は、遮断基を伴わない同じＣｅｎｄＲエレメントと比較して、細胞内への内部移行および／または組織の浸透を低減または防止することができる。前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントは、その選択したアミノ酸配列および前記遮断基を含むことができる。前記細胞は、被験体内にある場合がある。前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件を同定することができる。前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件を、前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する前に同定することができる。前記目的の細胞の近傍に存在する酵素、切断剤および／または切断条件に基づいて、前記切断可能な結合を選択することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むまたは蓄積する部位（例えば前記目的の細胞）に存在する切断剤に基づいて、前記切断可能な結合を選択することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントが送達される、ホーミングする、進むまたは蓄積する部位（例えば前記目的の細胞）に存在する切断条件に基づいて、前記切断可能な結合を選択することができる。前記切断可能な結合を、前記活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを形成する前に、選択することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントは、末端カルボキシル基を含む場合があり、ここで、該末端カルボキシル基に前記遮断基がカップリングされている。任意の形態またはタイプのＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲペプチド、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲコンジュゲートまたはＣｅｎｄＲ組成物をこれらの方法において用いることができる。
前記ＣｅｎｄＲエレメントは、１０、２０、３０、４０、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、１０００または２０００残基までの長さを有する場合がある。特定の実施形態において、ＣｅｎｄＲエレメントは、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００または２００残基の長さを有する場合がある。さらなる実施形態において、ＣｅｎｄＲエレメントは、２から２００残基、２から１００残基、２から９０残基、２から８０残基、２から７０残基、２から６０残基、２から５０残基、２から４０残基、２から３０残基、２から２０残基、２から１５残基、２から１０残基、３から２００残基、３から１００残基、３から９０残基、３から８０残基、３から７０残基、３から６０残基、３から５０残基、３から４０残基、３から３０残基、３から２０残基、３から１５残基、３から１０残基、４から２００残基、４から１００残基、４から９０残基、４から８０残基、４から７０残基、４から６０残基、４から５０残基、４から４０残基、４から３０残基、４から２０残基、４から１５残基、４から１０残基、５から２００残基、５から１００残基、５から９０残基、５から８０残基、５から７０残基、５から６０残基、５から５０残基、５から４０残基、５から３０残基、５から２０残基、５から１５残基、５から１０残基、１０から２００残基、１０から１００残基、１０から９０残基、１０から８０残基、１０から７０残基、１０から６０残基、１０から５０残基、１０から４０残基、１０から３０残基、１０から２０残基、２０から２００残基、２０から１００残基、２０から９０残基、２０から８０残基、２０から７０残基、２０から６０残基、２０から５０残基、２０から４０残基または２０から３０残基の長さを有する場合がある。本明細書において用いる場合、用語「残基」は、アミノ酸またはアミノ酸類似体を指す。
ＣｅｎｄＲエレメントを含有するタンパク質またはペプチドは、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、１０００または２０００残基までの長さを有する場合がある。特定の実施形態において、ＣｅｎｄＲ組成物のタンパク質またはペプチド部分は、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００または２００残基の長さを有する場合がある。さらなる実施形態において、ＣｅｎｄＲエレメントを含有する前記タンパク質またはペプチドは、２から２００残基、２から１００残基、２から９０残基、２から８０残基、２から７０残基、２から６０残基、２から５０残基、２から４０残基、２から３０残基、２から２０残基、２から１５残基、２から１０残基、３から２００残基、３から１００残基、３から９０残基、３から８０残基、３から７０残基、３から６０残基、３から５０残基、３から４０残基、３から３０残基、３から２０残基、３から１５残基、３から１０残基、４から２００残基、４から１００残基、４から９０残基、４から８０残基、４から７０残基、４から６０残基、４から５０残基、４から４０残基、４から３０残基、４から２０残基、４から１５残基、４から１０残基、５から２００残基、５から１００残基、５から９０残基、５から８０残基、５から７０残基、５から６０残基、５から５０残基、５から４０残基、５から３０残基、５から２０残基、５から１５残基、５から１０残基、１０から２００残基、１０から１００残基、１０から９０残基、１０から８０残基、１０から７０残基、１０から６０残基、１０から５０残基、１０から４０残基、１０から３０残基、１０から２０残基、２０から２００残基、２０から１００残基、２０から９０残基、２０から８０残基、２０から７０残基、２０から６０残基、２０から５０残基、２０から４０残基または２０から３０残基の長さを有する場合がある。
前記ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、１０００または２０００残基までの長さを有する場合がある。特定の実施形態において、ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００または２００残基の長さを有する場合がある。さらなる実施形態において、ＣｅｎｄＲコンジュゲートは、５から２００残基、５から１００残基、５から９０残基、５から８０残基、５から７０残基、５から６０残基、５から５０残基、５から４０残基、５から３０残基、５から２０残基、５から１５残基、５から１０残基、１０から２００残基、１０から１００残基、１０から９０残基、１０から８０残基、１０から７０残基、１０から６０残基、１０から５０残基、１０から４０残基、１０から３０残基、１０から２０残基、２０から２００残基、２０から１００残基、２０から９０残基、２０から８０残基、２０から７０残基、２０から６０残基、２０から５０残基、２０から４０残基または２０から３０残基の長さを有する場合がある。
【０２３９】
ＣｅｎｄＲ組成物の前記タンパク質またはペプチド部分は、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、１０００または２０００残基までの長さを有する場合がある。特定の実施形態において、ＣｅｎｄＲ組成物の前記タンパク質またはペプチド部分は、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００または２００残基の長さを有する場合がある。さらなる実施形態において、ＣｅｎｄＲ組成物の前記タンパク質またはペプチド部分は、２から２００残基、２から１００残基、２から９０残基、２から８０残基、２から７０残基、２から６０残基、２から５０残基、２から４０残基、２から３０残基、２から２０残基、２から１５残基、２から１０残基、３から２００残基、３から１００残基、３から９０残基、３から８０残基、３から７０残基、３から６０残基、３から５０残基、３から４０残基、３から３０残基、３から２０残基、３から１５残基、３から１０残基、４から２００残基、４から１００残基、４から９０残基、４から８０残基、４から７０残基、４から６０残基、４から５０残基、４から４０残基、４から３０残基、４から２０残基、４から１５残基、４から１０残基、５から２００残基、５から１００残基、５から９０残基、５から８０残基、５から７０残基、５から６０残基、５から５０残基、５から４０残基、５から３０残基、５から２０残基、５から１５残基、５から１０残基、１０から２００残基、１０から１００残基、１０から９０残基、１０から８０残基、１０から７０残基、１０から６０残基、１０から５０残基、１０から４０残基、１０から３０残基、１０から２０残基、２０から２００残基、２０から１００残基、２０から９０残基、２０から８０残基、２０から７０残基、２０から６０残基、２０から５０残基、２０から４０残基または２０から３０残基の長さを有する場合がある。
【０２４０】
前記ＣｅｎｄＲ組成物は、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、１０００または２０００残基までの長さを有する場合がある。特定の実施形態において、ＣｅｎｄＲ組成物は、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００または２００残基の長さを有する場合がある。さらなる実施形態において、ＣｅｎｄＲ組成物は、５から２００残基、５から１００残基、５から９０残基、５から８０残基、５から７０残基、５から６０残基、５から５０残基、５から４０残基、５から３０残基、５から２０残基、５から１５残基、５から１０残基、１０から２００残基、１０から１００残基、１０から９０残基、１０から８０残基、１０から７０残基、１０から６０残基、１０から５０残基、１０から４０残基、１０から３０残基、１０から２０残基、２０から２００残基、２０から１００残基、２０から９０残基、２０から８０残基、２０から７０残基、２０から６０残基、２０から５０残基、２０から４０残基または２０から３０残基の長さを有する場合がある。
【０２４１】
ＣｅｎｄＲ（および他の）ペプチドをタンパク質分解に対して安定化することができる。例えば、ペプチド結合の一部をＮ−メチル化またはＣ−メチル化で保護することによる、腫瘍ホーミングペプチドＣＲＥＫＡなどの、ペプチドの安定性および活性（Ｓｉｍｂｅｒｇら、２００７）。活性を向上させるために保護する最も重要な結合は、Ｒ−Ｇ結合である。これは、インテグリン結合とＣｅｎｄＲ活性の両方を不活性化する切断を妨げるからである。例えば、ペプチドＣ（ＣＭｅ）ＲＧＤＫＧＰＤＣ（配列番号９２）およびＣＲ（ＮＭｅ）ＧＤＫＧＰＤＣ（配列番号９３）化合物は、望ましくないタンパク質分解に対して安定している。アクセサリーペプチドおよびホーミングペプチドもまたまたは同様にタンパク質分解に対して安定化することができる。
【０２４２】
ｉＲＧＤについて用いた同じエバンスブルーアッセイを用いて、ＬｙＰ−１ペプチドおよび任意の他のＣｅｎｄＲペプチドの活性を試験することができる（図５）。ＭＤＡ−ＭＢ−４３５ヒト癌腫をＬｙＰ−１ペプチドの活性の試験に用いることができる。この腫瘍は、細胞表面ｐ３２、ＬｙＰ−１の一次受容体、の最高発現を示す（Ｆｏｇａｌら、２００８）からである。ＲＧＲは、ＲＩＰ−Ｔａｇ膵島細胞癌腫でのファージ・ライブラリー・スクリーンで同定されており（Ｊｏｙｃｅら、２００３）、これを用いて、ＲＧＲペプチドの活性を試験することができる。ＬｙＰ−１の主たる標的は、血管ではなく、低酸素／低栄養領域の腫瘍リンパ管、腫瘍マクロファージおよび腫瘍細胞である（Ｌａａｋｋｏｎｅｎら、２００４；Ｆｏｇａｌら、２００８）。このため、ＬｙＰ−１と同時注入した化合物は、該ペプチドにより優先選択される領域に優先的に蓄積すると予想することができる。
【０２４３】
ｉＲＧＤは、様々なサイズの共組成物の蓄積を増加させることができる：１．３ｋＤａ  ＦＡＭ−ＣＲＧＤＣペプチド（これは、ＣｅｎｄＲモチーフを欠き、独力では極めてわずかしか腫瘍組織に浸透しない）、アルブミン結合色素（エバンスブルー）、抗体、および２つのタイプのナノ粒子：Ｔ７ファージ（直径６５ｎｍ）および酸化鉄ナノワーム（長さ８０ｎｍおよび厚み３０ｎｍ）。例えばｉＲＧＤおよび非ＣｅｎｄＲ  ＲＧＤペプチド（これは、ＣｅｎｄＲメカニズムではなく、腫瘍関連インテグリンへのホーミングが関係する腫瘍蓄積についての対照として役立つ）を用いて、任意の共組成物を試験することができる。このＲＧＤペプチドの不活性Ｄ変異体からＥ変異体を、インテグリンに結合していない対照ペプチドとして使用することができる。ＣｅｎｄＲペプチドの用量を滴定して、最大に有効である範囲を見つけることができる。ＣｅｎｄＲペプチドによって媒介される共組成物の内部移行および組織浸透も、例えば標識された形態の共組成物での灌流、ｉＲＧＤ処置腫瘍の染色によって試験することができる。
【０２４４】
本開示のＣｅｎｄＲペプチド（および他のＣｅｎｄＲ形態）および共組成物を、同じ形態および手法でまたは異なる形態および／もしくは手法で；同時にまたは異なる時点で；ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）を最初にまたは二番目に投与して、一緒にまたは別々に投与することができる。投与は、例えば、同時投与（同時におよび同じまたは異なる経路／手段／形態による）、別投与（同じまたは異なる経路／手段／形態による平行投与）、逐次投与（異なる時点で同じまたは異なる経路／手段／形態による）などである場合がある。共組成物およびＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）を異なる時点で投与するとき、投与間の様々な異なる遅延時間を用いることができる。例えば、前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与する１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１５、２０、３０、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０または１２０分以上前に、投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与する１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、５４、６０、６６または７２時間以上前に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与する１、２、３、４、５、６または７日以上前に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与した１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１５、２０、３０、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０または１２０分以上後に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与した１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、５４、６０、６６または７２時間以上後に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与した１、２、３、４、５、６または７日以上後に投与することができる。
前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与する前１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１５、２０、３０、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０または１２０分以内に、投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与する前１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、５４、６０、６６または７２時間以内に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与する前１、２、３、４、５、６または７日以内に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与した後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１５、２０、３０、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０または１２０分以内に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与した後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、５４、６０、６６または７２時間以内に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲペプチド（または他のＣｅｎｄＲ形態）は、共組成物を投与した後１、２、３、４、５、６または７日以内に投与することができる。同じ日または同じ時間以内に投与することは特に有用である。
【０２４５】
前記ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を被験体に同時に投与することができる。同時にとは、オーバーラップしているまたは連続した期間中を意味する。前記ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を、被験体に、該ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントと該共組成物を含む単一組成物で投与することができる。前記ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチドまたはＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を別々の組成物で被験体に投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を被験体に異なる時点で投与することができる。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を被験体に別々の組成物で投与することができる。別々の組成物とは、互いに混合されていないかまたは接触していない（投与後に起こり得る場合を除く）組成物を意味する。前記ＣｅｎｄＲエレメントおよび前記共組成物を被験体に別々の経路によって投与することができる。別々の経路とは、別々の場所で、異なる手段または手法によるものを意味する。
【０２４６】
ＣｅｎｄＲペプチドを安定化ペプチドの形態で作製することができ、および／または長期循環形態として処方することができる。例えば、ポリエチレングリコールコンジュゲートを使用することができる。ＣｅｎｄＲペプチドおよび／または共組成物を長期間にわたって投与することもできる。例えば、ＣｅｎｄＲペプチドおよび／または共組成物を浸透圧ポンプで送達することができる。これは、標的細胞および標的組織の透過性を拡大することができる。ＣｅｎｄＲペプチドの修飾形態を使用することができる。例えば、ＣｅｎｄＲペプチドをメチル化することができる（これは、タンパク質分解に対して該ペプチドを安定することができる）。切断されてＣｅｎｄＲエレメントを活性化する結合を除き、切断に対して安定であることは望ましい。ＣｅｎｄＲエレメントへの修飾は、一般に、活性化後のそれらを機能性または機能できる状態にしておくものでなければならない。
【０２４７】
本開示のＣｅｎｄＲ組成物、コンジュゲート、分子、タンパク質、ペプチドおよびエレメントに組み込むことができる非常に多数のアミノ酸およびペプチド類似体があることは理解される。例えば、使用することができる非常に多数のＤ−アミノ酸または他の非天然アミノ酸がある。自然に存在するペプチドの逆の立体異性体を開示し、ペプチド類似体の立体異性体も開示する。これらのアミノ酸は、化学合成により、または選ばれたアミノ酸をｔＲＮＡ分子へ負荷しそして例えばアンバーコドンを利用する遺伝子構築物を工学的に作製して部位特異的方法でペプチド鎖に類似体アミノ酸を挿入することにより、ポリペプチド鎖に容易に組み込むことができる（Ｔｈｏｒｓｏｎら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．７７：４３−７３（１９９１）、Ｚｏｌｌｅｒ、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、３：３４８−３５４（１９９２）；Ｉｂｂａ、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＆  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  １３：１９７−２１６（１９９５）、Ｃａｈｉｌｌら、ＴＩＢＳ、１４（１０）：４００−４０３（１９８９）；Ｂｅｎｎｅｒ、ＴＩＢ  Ｔｅｃｈ、１２：１５８−１６３（１９９４）；ＩｂｂａおよびＨｅｎｎｅｃｋｅ、Ｂｉｏ／ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１２：６７８−６８２（１９９４）、これらのすべてが、少なくともアミノ酸類似体に関する材料について、参照により本明細書に援用されている）。
【０２４８】
ペプチドに似ているが、天然ペプチド結合によって連結されていない分子を生成することができる。例えば、アミノ酸またはアミノ酸類似体についての結合としては、ＣＨ２ＮＨ−−、−−ＣＨ２Ｓ−−、−−ＣＨ２−−ＣＨ２−−、−−ＣＨ＝ＣＨ−−（シスおよびトランス）、−−ＣＯＣＨ２−−、−−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−−、および−−ＣＨＨ２ＳＯ――を挙げることができる（これらおよび他のものは、Ｓｐａｔｏｌａ，Ａ．Ｆ．ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ、Ｂ．Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ編、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、２６７頁（１９８３）；Ｓｐａｔｏｌａ，Ａ．Ｆ．、Ｖｅｇａ  Ｄａｔａ（Ｍａｒｃｈ  １９８３）、第１巻、第３号、Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｂａｃｋｂｏｎｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ（ｇｅｎｅｒａｌ  ｒｅｖｉｅｗ）；Ｍｏｒｌｅｙ、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ（１９８０）４６３−４６８頁；Ｈｕｄｓｏｎ，Ｄ．ら、Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｅｐｔ  Ｐｒｏｔ  Ｒｅｓ  １４：１７７−１８５（１９７９）（−−ＣＨ２ＮＨ−−、ＣＨ２ＣＨ２−−）；Ｓｐａｔｏｌａら、Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ  ３８：１２４３−１２４９（１９８６）（−−ＣＨＨ２−−Ｓ）；Ｈａｎｎ  Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．Ｉ  ３０７−３１４（１９８２）（−−ＣＨ−−ＣＨ−−、シスおよびトランス）；Ａｌｍｑｕｉｓｔら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２３：１３９２−１３９８（１９８０）（−−ＣＯＣＨ２−−）；Ｊｅｎｎｉｎｇｓ−Ｗｈｉｔｅら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ  ２３：２５３３（１９８２）（−−ＣＯＣＨ２−−）；Ｓｚｅｌｋｅら、欧州特許出願ＥＰ  ４５６６５  ＣＡ（１９８２）：９７：３９４０５（１９８２）（−−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−−）；Ｈｏｌｌａｄａｙら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ．Ｌｅｔｔ  ２４：４４０１−４４０４（１９８３）（−−Ｃ（ＯＨ）ＣＨ２−−）；およびＨｒｕｂｙ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ  ３１：１８９−１９９（１９８２）（−−ＣＨ２−−Ｓ−−）において見つけることができる；これらのそれぞれが参照により本明細書に援用されている）。特に好ましい非ペプチド結合は、−−ＣＨ２ＮＨ−−である。ペプチド類似体、例えばｂ−アラニン、ｇ−アミノ酪酸およびこれらに類するものが、結合原子間に１つ超の原子を有する場合があることは理解される。
【０２４９】
アミノ酸類似体およびペプチド類似体は、多くの場合、向上したまたは望ましい特性、例えば、より大きな経済的生産、より大きな化学安定性、向上した薬理学的特性（半減期、吸収、有効性、効力など）、改変された特異性（例えば、生物学的活性の広域スペクトル）、低減された抗原性、およびその他、を有する。
【０２５０】
Ｄアミノ酸は、ペプチダーゼなどによって認識されないので、Ｄ−アミノ酸を使用して、より安定なペプチドを生じさせることができる。活性が持続する限り、同じタイプのＤ−アミノ酸（Ｌ−リシンの代わりに例えば、Ｄ−リシン）でのコンセンサス配列の１つ以上のアミノ酸の系統的置換を用いてより安定したペプチドを生じさせることができる。システイン残基を使用して、２つ以上のペプチドを環化するまたは互いに連結させることができる。これは、ペプチドを強いて特定の配座にするのに有利である場合がある（ＲｉｚｏおよびＧｉｅｒａｓｃｈ、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６１：３８７（１９９２）、参照により本明細書に援用されている）。
【０２５１】
前記ＣｅｎｄＲエレメントに加えて、例えばアクセサリーペプチド、前記ＣｅｎｄＲエレメントに融合しているアクセサリーペプチド、前記ＣｅｎｄＲエレメントもしくはＣｅｎｄＲペプチドと共有結合でカップリングもしくは非共有結合で会合しているアクセサリー分子、前記ＣｅｎｄＲエレメントに融合しているホーミング分子、前記ＣｅｎｄＲエレメントもしくはＣｅｎｄＲペプチドと共有結合でカップリングもしくは非共有結合で会合しているホーミング分子、前記ＣｅｎｄＲエレメントに融合しているカーゴ組成物、および／または前記ＣｅｎｄＲエレメントもしくはＣｅｎｄＲペプチドと共有結合でカップリングもしくは非共有結合で会合しているカーゴ組成物を含有する、多機能性ＣｅｎｄＲ組成物を開示する。別の機能を有する追加の化合物を前記組成物に加えることができる。そのような多機能性コンジュゲートは、その組成物の異なる部分により付与される少なくとも２つの機能を有し、例えば、選択的ホーミング活性に加えて抗脈管形成活性または脈管形成促進活性を表す。
【０２５２】
本明細書において用いる場合、用語「ペプチド」は、ペプチド、タンパク質、タンパク質のフラグメントおよびこれらに類するものを意味するように広く用いる。用語「ペプチドミメティック」は、本明細書において用いる場合、構造に基づくペプチドの活性を有するペプチド様分子を意味する。そのようなペプチドミメティックとしては、化学修飾されたペプチド、自然に存在しないアミノ酸を含有するペプチド様分子、およびペプトイドが挙げられ、ならびにそのペプチドミメティックが由来する活性などの活性を有する（例えば、「Ｂｕｒｇｅｒ’ｓ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ」第１巻（Ｍ．Ｅ．Ｗｏｌｆｆ編；Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  １９９５）、８０３−８６１頁におけるＧｏｏｄｍａｎおよびＲｏ、Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎを参照のこと）。
【０２５３】
ＣｅｎｄＲエレメントは、細胞表面に存在するニューロピリン−１（ＮＲＰ−１）に結合する。ＮＲＰ−１へのＣｅｎｄＲエレメントの結合は、ＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲエレメントに結合しているもの、および共組成物の内部移行を媒介する。非ペプチド化合物を使用して、ＮＲＰ−１を結合し、内部移行および組織浸透を媒介することもできる。そのような非ペプチド化合物を本明細書ではＣｅｎｄＲ化合物と呼ぶ。ＣｅｎｄＲ化合物は、ＣｅｎｄＲエレメントを使用する本明細書に記載するすべての方法およびすべての組成物において使用することができる（唯一の例外は、特定の使用または組成物が、ＣｅｎｄＲ成分がペプチドであることを必要とする場合である）。
【０２５４】
３つの機能：組織特異的ホーミング、標的組織内での拡散およびその組織内の細胞内への内部移行、を併有するホーミングペプチドの設計原理を開発した。これらのペプチドは、ＣｅｎｄＲエレメントにおいて具現される組織特異的ホーミング配列と組織浸透性および内部移行モチーフの両方を含有する。活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントを、例えば標的組織でのタンパク質分解性切断により、活性化することができる。本実施例が、選択した組織をターゲティングすることによるこのプラットフォーム技術の原理の証拠となる。
【０２５５】
１．本開示の原理および実施例を用いて、正常または罹病組織への特異的ホーミング、組織浸透、および細胞内部移行を併有するペプチドをスクリーニングおよび合成することができる。組織特異的ホーミング、組織浸透および細胞内部移行を併有するペプチドもまた開示する。前記ペプチドは、ホーミングエレメントと組織浸透エレメントの様々な組み合わせを用いることができ、および心臓、肺または前立腺をターゲットにする。
【０２５６】
２．本開示のペプチドは、組織特異的ホーミング、標的組織内での拡散およびその組織内の細胞内への内部移行に使用することができ、この使用は、インビトロ細胞結合および内部移行ならびにインビボホーミングアッセイを行うことにより確立し、検証することができる。
【０２５７】
本開示の化合物は、標的組織への材料の導入のための有用なツールである。それらは、診断および治療用化合物の疾患特異的または細胞型および組織特異的ターゲティングを可能にして、有効性を増加させることおよび副作用を減少させることができる。本明細書に開示する原理は、特異的ホーミングペプチドを得ることができるおよびＣｅｎｄＲ受容体を発現する（これは殆どの細胞がする）任意の細胞または組織に適用可能である。
【０２５８】
最近の研究により、種々の正常組織の血管系における広範な分子不均一性が明らかなった。加えて、腫瘍などの病変は、それら自体の変化を該血管系に負わせる。分子マーカーのこのシステムは、「血管ジップコード」と呼ばれることがある（Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ、２００４）。前記ジップコードは、特定の組織内に診断薬および治療薬を選択的に送達するドッキングベースの（「シナフィック（ｓｙｎａｐｈｉｃ）」）ターゲティングを可能にする。このアプローチは、より高い効力を生じさせ、副作用を減少させる。ターゲティング型送達原理は、特に癌において確立されている：抗体を用いる白血病細胞への放射性同位体のターゲティングは、確立された療法であり、充実性腫瘍の診断および処置を目的とした幾つかの製品が臨床試験中であり；それらの多くが、初期世代腫瘍ホーミングペプチドまたはそれらの誘導体を使用する。しかし、シナフィック送達をより一般に有用にする上での１つの論点は、効力が低くなる傾向があるという点である。血管への送達をターゲットにすることは、それらの内側の内皮層が循環プローブに容易に利用可能であるので、より有効であり得ることは認識されているが、腫瘍実質内への浸透が、従来、問題であった（Ｊａｉｎ、１９９０）。従って、ターゲティングした材料のターゲット血管への結合を実証することは容易であったが、該標的組織内の該材料の実質的により高い濃度が必ずしも達成されたわけではなかった（例えば、Ｌｉｕら、２００７）。
標的にペイロードを送達する際に現在利用可能なペプチドより有効であり、特異的である新たなクラスのホーミングペプチドを発見した。本明細書に記載するように、これらのペプチドの重要な特徴（およびその優れた性能についての基礎）は、標的組織に到着して、それらが能動的に血管外遊出し、組織およびその中の細胞内に浸透することである。この活性の原理および分子メカニズムは、腫瘍ホーミングペプチドで確立されている。しかし、任意の細胞および組織においてならびに任意の細胞または組織ターゲティングまたはホーミング化合物を使用して、これらの原理を用いることおよび適用することができる。
現在可能であるものを超えて、より高い濃度または量の材料を体内の特定の標的におよび該標的内に送達するこの能力は、医学における素晴らしい意味を有する。本開示の技術は、すべてのインビボ診断用化合物、非経口投与薬、ナノ医療用化合物、遺伝子および細胞療法などに恩恵をもたらすことができる。それは、送達された材料の標的での濃縮により有効性を増加させることができ、および相対的により少ない該材料を受ける他の組織での副作用を低減する。標的組織への選択的浸透は、効力をさらに増加させる。最後に、本開示の組織浸透性ペプチドを修飾および処方して薬物様化学的性質にすることができ、これがこの技術を経口投与療法にも適用可能にする。
特定の標的組織にホーミングするばかりでなくその組織内に浸透もするペプチドの獲得を可能にさせる組織／細胞浸透システムが最近発見された。この組織浸透モチーフは、活性になるためにペプチド（またはタンパク質）のＣ末端で露出されなければならない。この故、Ｃ末端則にちなんでそれはＣｅｎｄＲと名付けられた。図１は、ＣｅｎｄＲシステムの原理を示すものである。ＣｅｎｄＲホーミングペプチドは、組織特異的ホーミング配列とＣｅｎｄＲ配列（これは、図１に示すように、潜在または活性化可能ＣｅｎｄＲ配列であり得る）の両方を含有する。ホーミング配列は、標的組織内の血管内皮にペプチドを連れていき、それが潜在ＣｅｎｄＲ配列を有する場合、そこでそのペプチドは、ＣｅｎｄＲモチーフがＣ末端になり活性になるように、内因性プロテアーゼによってタンパク質分解的にプロセッシングされる。その後、その活性化されたＣｅｎｄＲモチーフは、ＣｅｎｄＲペプチドおよびそれに付いている任意のペイロードの血管外遊出、組織浸透および細胞侵入を媒介する受容体（ニューロピリン−１）に結合する（Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９；米国特許出願公開第２００９０２２６３７２号）。
【０２５９】
この複数段階ホーミング、プロセッシングおよび組織浸透プロセスは、ＣｅｎｄＲを、受容体結合のみに依拠するペプチドおよび他のプローブよりも特異的にする。この組織および細胞浸透は、標的組織内のすべての部分および細胞型への送達を促進する。
細胞結合ペプチドおよび組織ホーミングペプチドについての不相応な数のペプチドＴ７ファージライブラリスクリーンが、アルギニン（またはときにはリシンまたはヒスチジン）をＣ末端残基として有したことに先ず注目した。（このペプチドインサートは、Ｔ７システムにおけるファージコートタンパク質のＣ末端で提示される）。前記Ｃ末端アルギニンは、通常、ＲＸＸＲ配列（Ｒ、アルギニン；Ｘ、任意のアミノ酸）の文脈中に存在した。この配列モチーフは、ファージ粒子の細胞内部移行を細胞に誘発することができ、その結果、その富化に至ることを認めた。大量のデータを生成して、このシステムおよびそのメカニズムを実証した。先ず、３７℃でインキュベートして酸性（ｐＨ２．５）緩衝液で洗浄した細胞（ＰＰＣ１前立腺癌細胞）から、Ｒ（Ｋ）ＸＸＲモチーフを提示するファージを回収した。Ｔ７ファージはｐＨ２．５で安定でないので、この結果は、このファージの内部移行を示した。選択したプールからの個々のファージを使用する結合研究により、ＰＰＣ１細胞への弱いファージ結合には（Ｇ６Ｒの場合のように）Ｃ末端アルギニンの存在のみで十分であるが、頑強な結合および内部移行には、例えばＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）、この選択したファージプールにおいて表される頻度が最も高い配列、におけるような、Ｃ末端ＲＸＸＲモチーフの存在が必要であることが明らかになった。
【０２６０】
ＲＰＡＲＰＡＲペプチドのアラニンスキャンにより、Ｃ末端アルギニン（またはリシン）はファージ結合にとって重要であること、ならびに他の２つの塩基性アミノ酸は用量および位置依存的な様式でその相互作用を増大させることが明らかになった。細胞との相互作用は、他のファージエレメントが関与していなかった。なぜなら、ＲＰＡＲＰＡＲ官能化量子ドット（ｑｄｏｔ）が結合し、ファージ粒子とは区別できない様式で内部移行されたからである。このｑｄｏｔ内部移行は、生きている、未固定細胞（細胞内蓄積がプロセッシングアーチファクトに起因するものを除外する）でみられた。興味深いことに、Ｄ−アミノ酸から成るペプチド（Ｄ−ｒｐａｒｐａｒ；配列番号２）は、大きく低減された量子ドット取り込み誘発能力を有した。これは、キラル結合部位の関与を示すものである。（ＲＰＡＲＰＡＲＡ；配列番号９４におけるような）追加のＣ末端アミノ酸でのＣ末端ＲＸＸＲエレメントのマスキング、またはＣ末端カルボキシル基のアミド化は、細胞結合および内部移行を無効にした。（塩基性残基の後で切断し、おそらくＣ末端アルギニンを露出させる）トリプシンでのＲＰＡＲＰＡＲＡファージの処理は、ＰＰＣ−１細胞結合を回復させた。これらの発見は、細胞結合および内部移行が、遊離カルボキシル基を有する末端塩基性アミノ酸の存在を必要とすることを示している。腫瘍および正常細胞系ならびに正常マウス器官から採取した一次細胞のパネルにおけるそれぞれの細胞系もＲＰＡＲＰＡＲファージを結合した。
【０２６１】
静脈内注射したＲＰＡＲＰＡＲファージは、最初に触れた血管床（肺および、より少ない程度に、心臓）に強く蓄積した。このＲＰＡＲＰＡＲファージは、肺組織全体にわたって拡散したが、これらの肺において対照ファージは検出されなかった。この結果は、ＣｅｎｄＲファージが、組織実質内に浸透できたことを示している。従って、ＲＰＡＲＰＡＲペプチドは、様々なタイプの細胞に侵入することができ組織浸透を促進することもできる、細胞浸透性ペプチドである。様々な細胞内部移行経路の利用可能ないずれの阻害剤も、ＲＰＡＲＰＡＲ  ＣｅｎｄＲペプチドによって媒介される内部移行を阻害しなかった。これは新たな経路を示す。
【０２６２】
ニューロピリン−１は、ＣｅｎｄＲペプチドの細胞受容体である。ＲＰＡＲＰＡＲ結合タンパク質を同定するために、アガロースビーズに固定化した該ＲＰＡＲＰＡＲペプチドを用いるアフィニティークロマトグラフィーによりＰＰＣ−１腫瘍抽出物を分画した。遊離ＲＰＡＲＰＡＲペプチドを含有する緩衝液での溶離により１３０ｋＤａタンパク質が放出され、これをＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分光分析によりＮＲＰ−１と同定した。この同定を免疫ブロッティングにより確認した。
【０２６３】
複数の系統の証拠がＣｅｎｄＲ受容体としてのＮＲＰ−１の役割を支持した：ＲＰＡＲＰＡＲペプチドを結合も内部移行もしないＭ２１黒色腫細胞は、ＮＲＰ−１も発現しない。ＮＲＰ−１の強制発現は、これらの細胞をＲＰＡＲＰＡＲファージが結合および内部移行できるようにしたが、ＮＲＰ−１結合ポケット突然変異体でトランスフェクトした細胞は、ＲＰＡＲＰＡＲ結合を付与しなかった。最後に、免疫蛍光共染色により、ＲＰＡＲＰＡＲファージとｑｄｏｔが前記細胞表面および前記細胞内部にＮＲＰ−１とともに共局在することが明らかになった。
【０２６４】
血管内皮成長因子の代替形態の１つ、ＶＥＧＦ−１６５、は、エキソン８によりコードされたそのＣ末端ＣｅｎｄＲ様配列（ＣＲＣＤＫＰＲＲ；配列番号９５；Ｊｉａら、２００６）を用いてＮＲＰ−１に結合する。幾つかのペプチド、例えば、Ａ７Ｒ（ＡＴＷＬＰＰＲ；配列番号９６；Ｓｔａｒｚｅｃら、２００６）、免疫調節性ペプチドタフトシン（ＴＫＰＲ；配列番号９７）およびその変異体強化タフトシン（ＴＫＰＰＲ；配列番号９８；ｖｏｎ  Ｗｒｏｎｓｋｉら、２００６）もＮＲＰ−１上の同じ部位に結合する（Ｇｅｒｅｔｔｉら、２００８）。同じくこの部位に結合するセマホリン３Ａは、血管透過性を向上させる（Ａｃｅｖｅｄｏら、２００８）。ＶＥＧＦ−１６５、強化タフトシンまたはＡ７Ｒの７つのＣ末端アミノ酸を提示するＴ７ファージは、ＰＰＣ−１細胞に結合し、ＰＰＣ−１細胞により取り込まれ、両方の活性が、未標識ＲＰＡＲＰＡＲペプチドをその結合緩衝液に含めたときまたはアラニン残基をＶＥＧＦ−Ｃ７のＣ末端に付加させたとき、低減された。これらの実験により、ＣｅｎｄＲペプチドは、ＮＲＰ−１を重要な成分として含む経路によって内部移行することが示される。
【０２６５】
ホメオドメイン転写因子、例えばアンテナペディア、単純疱疹ウイルス−１タンパク質ＶＰ２２、およびヒト免疫不全ウイルス−１トランスアクチベータＴＡＴタンパク質が細胞内に内部移行することは公知である。これらのタンパク質に由来する短鎖カチオン性細胞浸透性ペプチド（ＣＰＰ）は、それらの内部移行能力を保持する。しかし、これらのペプチドは、そのペプチド内のアミノ酸のキラリティーとは無関係である点、活性に細胞表面ヘパラン硫酸塩を必要とする点および組織浸透活性を割当てられていない点（Ｌａｎｇｅｌ、２００７）で、ＣｅｎｄＲペプチドとは異なる。
【０２６６】
ファージスクリーンからの腫瘍ホーミングペプチド内の潜在ＣｅｎｄＲ配列。トリプシンによるＣ末端遮断ＲＰＡＲＰＡＲＡペプチドの活性化は、内部ＣｅｎｄＲモチーフがプロテアーゼによって活性化されて、内部移行および組織浸透を誘発できることを示した。実際、腫瘍ホーミングスクリーンからの細胞浸透性ペプチドの調査により、幾つかの潜在的ＣｅｎｄＲペプチドが判明した。これらのペプチドとしては、ＫＲＴＲ配列（配列番号１００；Ｌａａｋｋｏｎｅｎら、２００２、２００４；ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００７／０９０１９４、米国特許出願公開第２００８／００１４１４３）を含有するＬｙｐ−１（ＣＧＮＫＲＴＲＧＣ；配列番号９９）、ＣＲＧＲＲＳＴ（配列番号１０１；ＲＧＲＲ（配列番号１０２；Ｊｏｙｃｅら、２００３）、ならびにひときわすぐれた細胞および組織浸透活性を有する新たに発見されたＲＧＤペプチド、ｉＲＧＤ（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９；２００９年１月１９日出願の米国特許出願第１２／３５５，６７２号）が挙げられる。
【０２６７】
上に列挙した腫瘍ホーミングペプチドのそれぞれがＣｅｎｄＲモチーフ、Ｒ／ＫＸＸＫ／Ｒ、を含有するが、このモチーフは、Ｃ末端ではない。タンパク質分解プロセッシングがこれらのペプチド内のＣｅｎｄＲモチーフを活性化できると仮定した。実際、トリプシンでのｉＲＧＤファージまたはＬｙｐ−１ファージの処理は、ＰＰＣ１細胞への該ファージの結合を増強させた。トリプシンは、非内部移行ペプチドＣＲＧＤＣ（配列番号３６）またはＲＧＤ−４Ｃに対して影響を及ぼさなかった。インタクトｉＲＧＤファージの４℃での結合ではなく、トリプシン処理ｉＲＧＤファージの４℃での結合は、原型ＣｅｎｄＲペプチド、ＲＰＡＲＰＡＲ、を発現する非感染性ファージによって遮断されたが、ＣｅｎｄＲモチーフがＣ末端へのアラニン残基の付加によってマスクされたペプチド（ＲＰＡＲＰＡＲＡ；配列番号２）を提示するファージによっては遮断されなかった。細胞内産物が、ｉＲＧＤペプチドで処理した細胞から単離され、質量分光分析により、予想ＣｅｎｄＲ活性フラグメント、ＣＲＧＤＫ（配列番号３４）がそれらの細胞から回収できることも証明されている（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９；２００９年１月１９日出願の米国特許出願第１２／３５５，６７２号）。
【０２６８】
ｉＲＧＤペプチドは、血管外遊出および組織浸透を促進する点で比類なく有効であり；ｉＲＧＤペプチドおよびｉＲＧＤファージは、腫瘍組織内に拡散するが、潜在ＣｅｎｄＲモチーフを欠く従来のＲＧＤペプチドは、腫瘍血管に到達できるだけである（図４参照）。ｉＲＧＤペプチドは、いずれの正常組織にも検出可能な程度にはホーミングしない。ｉＲＧＤペプチドで被覆されたナノ粒子は目覚ましく組織内に拡散し、それにより光学イメージング、ＭＲＩが可能となり、およびパクリタキセルとアルブミンとから成るナノ粒子薬であるアブラキサンの活性が強化される。ｉＲＧＤによるホーミングの増加は、ターゲティングされていない対照より平均で１２倍大きかった（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９；２００９年１月１９日出願の米国特許出願第１２／３５５，６７２号）。ＬｙＰ−１ペプチドもナノ粒子および他の共組成物を血管外腫瘍組織内に深く運ぶ（Ｌａａｋｋｏｎｅｎら、２００４；Ｋａｒｍａｌｉら、２００９；ＰＣＴ公開番号ＷＯ  ２００７／０９０１９４；米国特許出願公開第２００８／００１４１４３号）。これらの結果は、ＣｅｎｄＲエレメントが組織浸透および細胞内部移行を媒介すること、ならびに潜在ＣｅｎｄＲエレメントを含有する組織ホーミングペプチドが腫瘍内へのペイロードの特異的送達に比類なく有効であり得ることを実証している。本明細書に開示するように、ＣｅｎｄＲエレメントおよびＣｅｎｄＲホーミングペプチドの使用を腫瘍以外の組織に拡大することができる。
【０２６９】
器官特異的ＣｅｎｄＲホーミングペプチド。殆どの、おそらくすべての正常組織は、それらの血管系に特異的分子マーカーにより定義される組織特異的分子識別特性をつける（Ｒｏｕｓｌａｈｔｉ、２００４において総説されている）。腫瘍と同様に、これらの相違をファージ・ディスプレイ・スクリーンからのペプチドでプローブすることができ、ならびにＣｅｎｄＲエレメントおよびＣｅｎｄＲペプチドなどの化合物および組成物の送達の標的として活用することができる。
【０２７０】
これまでのところインビボ・ファージ・ディスプレイにより分析されたすべての正常組織は、組織特異的内皮マーカーを発現することが分かっている。これらの組織としては、大器官、例えば脳、肺、心臓および腎臓、ならびに小器官、例えば前立腺の両方が挙げられる（ＲｕｏｓｌａｈｔｉおよびＲａｊｏｔｔｅ、２０００；Ａｒａｐら、２００２；Ｚｈａｎｇら、２００５）。初期の研究は、線維状ファージライブラリで行われた。これは、ファージ表面タンパク質上でのＮ末端伸長部分としてインサートを発現させる。これらのライブラリは、ＣｅｎｄＲペプチドを優先選択せず、その結果、これらのスクリーンから回収された組織特異的ホーミングペプチドは、ＣｅｎｄＲモチーフを含有しなかった。
【０２７１】
Ｔ７での最近の研究からの器官特異的ホーミングペプチドの調査により、潜在ＣｅｎｄＲ配列を有する多数のペプチドが判明した。心臓ホーミングペプチドのコレクション（Ｚｈａｎｇら、２００５；米国特許出願公開第２００６／０１６０７４３号および同第２００９／００９２５４８号）は、３つのそのようなペプチドを含有し；それらの中で２つの最も強力なペプチドがＣＧＲＫＳＫＴＶＣ（配列番号１０３）（提案された受容体、高システインタンパク質２）およびＣＰＫＴＲＲＶＰＣ（配列番号１０４）（受容体、膀胱癌関連タンパク質ｂｃ１０）であった。つい最近、正常前立腺組織を用いるＴ７ベースのスクリーニングが行われ、以前の線維状ファージスクリーン（Ａｒａｐら、２００２）とは異なり、これらのＴ７スクリーンもＣｅｎｄＲペプチドの優位性を示した。マウス前立腺から単離された細胞に対する３回のエクスビボ・スクリーニング・ラウンドと前立腺ホーミングについての１回のインビボラウンドから成るスクリーンからの２１のペプチドのうちの９つが、潜在ＣｅｎｄＲモチーフを含有した。興味深いことに、この９つのうちの８つは、それらすべてがＣＲＸＴＲＸＸＲＣコンセンサス（配列番号１０５）に一致する点で、互いにほぼ同様であった。顕性ＣｅｎｄＲモチーフを有する狂犬病ウイルス由来ペプチドを使用して、血液脳関門を通って脳にｓｉＲＮＡが送達された（Ｋｕｍａｒら、２００７）。これらの結果は、ＣｅｎｄＲ特性を有する器官特異的ペプチドを生産および使用できることを示唆している。
【０２７２】
本明細書に開示するように、組織特異的ホーミング、組織浸透および細胞内部移行を併有するペプチドについてスクリーニングすることおよび該ペプチドを合成することができる。これらのペプチドは、血管ホーミングエレメントと組織浸透エレメントの様々な組み合わせを使用することができ、ならびに例えば心臓、肺または前立腺をターゲットにすることができる。
【０２７３】
血管系および実質の組織特異的性質は、特に疾病過程の早期における罹病組織においてでさえ保持されることが期待できるので、介入が最も有益である可能性があるとき、正常器官をターゲットとして使用することができる。例えば、心臓、肺および前立腺をターゲットにすることができる。これらの組織の血管系に対する従来のＣｅｎｄＲペプチドと候補ＣｅｎｄＲペプチドの両方は手持ちである。心臓および肺は、特異的ターゲティングおよび組織浸透を用いることができる治療の標的として、特に関心が高い（嚢胞性線維症がそのような疾患の一例である）。さらに、心臓および肺の右側は、静脈内注射されたペプチドが最初に遭遇する組織である。実際、予め活性化されたＣｅｎｄＲペプチド（露出Ｒ／ＫＸＸＲ／Ｋ配列を有するペプチド；配列番号２３）は、これらの組織により選択的に保持される。従って、それらをＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）およびＣＲＰＰＲ（配列番号１０６；Ｚｈａｎｇら、２００５）のようなペプチドで多少選択的にターゲティングすることができる。以前にトランスジェニック前立腺癌マウスを使用して、腫瘍が顕著に発達する前の、ターゲットとなる前立腺組織破壊が、これらのマウスにおいて腫瘍の発達を遅らせることが示された（Ａｒａｐら、２００２）。本開示のペプチドは、その手順を改善するためにさらに有効である。加えて、前記前立腺は、小器官の代表でありしかも初回通過効果が要因でない器官の代表である。ニューロピリン−１は、内皮細胞および様々な実質細胞に遍在的に発現され、多数の顕性ＣｅｎｄＲペプチドが前立腺スクリーンで得られているため、ＣｅｎｄＲアプローチを前立腺に関しても用いることができる。
【０２７４】
例えば、選択した器官に対する組織浸透性ペプチドについて３つのアプローチを用いることができる：（１）心臓および前立腺に対する既に手元にあるＣｅｎｄＲモチーフペプチドの試験；（２）以前に同定されたホーミング配列と遺伝子ＣｅｎｄＲモチーフを組み込むキメラペプチドの構築；および（３）新たなペプチドについてのファージスクリーニング。
【０２７５】
既存ＣｅｎｄＲモチーフホーミングペプチド。肺にホーミングするペプチド（ＲａｊｏｔｔｅおよびＲｕｏｓｌａｈｔｉ、１９９９；ＢｒｏｗｎおよびＲｕｏｓｌａｈｔｉ、２００４）、心臓にホーミングするペプチド（Ｚｈａｎｇら、２００５、および未発表の結果）および前立腺にホーミングするペプチド（Ａｒａｐら、２００２；未発表）を所有している。これらのペプチドの一部は、ＣｅｎｄＲモチーフを有する。ペプチドのホーミングは、幾つかの方法で確立することができる。一例は、「プレイ・オフ・スクリーニング」と呼ばれるスクリーニング法の使用によるものである。候補ファージを等しい比率で併せ、そのプールをマウスに注射し、標的器官または標的組織を幾つかの他の器官または組織と一緒に回収し、定量的ＰＣＲにより、ファージ・ディスプレイ・ペプチドのいずれかがその標的に優先的にホーミングしたかどうかを決定する。肺（および心臓）を、活性化ＣｅｎｄＲペプチド（例えば、ＲＰＡＲＰＡＲ；配列番号２）である程度ターゲティングすることができる。このホーミングは、初回通過効果に基づくものであり、心臓（特に右側）を含む。他の器官におけるこれらのペプチドの実質的な蓄積もある；結果として、それらは、ストリンジェントなターゲティングが望まれる場合、最良である。
【０２７６】
キメラペプチド。以前に同定された（および将来の）非ＣｅｎｄＲホーミングペプチドを活性化または活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントと組み合わせることができる。例えば、肺についてのホーミングペプチド（ＲａｊｏｔｔｅおよびＲｕｏｓｌａｈｔｉ、１９９９；ＢｒｏｗｎおよびＲｕｏｓｌａｈｔｉ、２００４）および前立腺についてのホーミングペプチド（Ａｒａｐら、２００２）とＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）（またはＲＰＡＲ；配列番号５）を、該ホーミングペプチドがＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）のＣ末端である（ＣｅｎｄＲ活性を遮断するため）ようにおよびＣｅｎｄＲ活性化のためにプロテアーゼ切断部位を提供する配列により隔てられているように、組み合わせることができる。そのようなペプチド内の潜在ＣｅｎｄＲエレメントをフーリンにより活性化することができる。これらの酵素は、特にＸのうちの１つが塩基性アミノ酸である場合、ＲＸＸＲコンテキスト内のＣ末端アルギニンの後で切断することを優先選択するからである。しかし、トリプシンによるＲＰＡＲＰＡＲＡ（配列番号２）およびｉＲＧＤの活性化によって実証されるように、塩基性アミノ酸の後で切断するいずれの酵素も潜在ＣｅｎｄＲ配列を潜在的に活性化できる。ＣｅｎｄＲホーミングペプチドの一次受容体に対する酵素の位置が活性化に影響を及ぼすことがある。既存の活性化可能ＣｅｎｄＲペプチドから配列を複製することにより、既知切断部位を作製することができる。これらの構築物を、リードアウトとしてファージ滴定を用いてファージ提示ペプチドとして試験することができる。所望される場合には、構造物ＲＰＡＲＰＸＲＸＸＸＸホーミングペプチド（配列番号１０７）を有するファージライブラリを調製し、標的組織から単離した細胞への結合および該細胞内への内部移行についてそのライブラリをスクリーニングすることにより、前記プロテアーゼ切断部位を最適化することができる。
【０２７７】
肺ホーミングのために、例えばＣＧＦＥＬＥＴＣ（配列番号１０８；ＲａｊｏｔｔｅおよびＲｕｏｓｌａｈｔｉ、１９９９；標的分子：膜ジペプチジルペプチダーゼ）を使用して、キメラペプチドライブラリを構築することができる。
【０２７８】
心臓ホーミングのためのもう１つの戦略として、非ＣｅｎｄＲペプチド心臓ホーミングペプチドコレクション（Ｚｈａｎｇら、２００５）を使用して、キメラペプチドおよびライブラリを構築することができる。もう１つの戦略として、心臓への優先選択性を示す（Ｚｈａｎｇら、２００５）活性化ＣｅｎｄＲペプチドＣＲＰＰＲ（配列番号１０６）を使用することができる。例えば、ＣＲＰＰＲＡ配列（配列番号１０９）を活性化および／もしくは内部移行について試験することにより（Ｃ末端アミノ酸は、ＣｅｎｄＲエレメントを活性化するために切断される必要がある−他のアミノ酸も同様に使用することができる）、またはファージライブラリを例えば構造物ＣＲＰＰＲＸＸＸＸ（配列番号１１０）に関してスクリーニングすることにより、追加の心臓ホーミングＣｅｎｄＲモチーフペプチドを生産することができる。
【０２７９】
前立腺については、例えば前立腺ホーミングペプチド（ＳＭＳＩＡＲＬ；標的分子は未知；Ａｒａｐら、２００２）を、キメラペプチドライブラリの構築の出発点として使用することができる。前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）は、前立腺において活性化されるＣｅｎｄＲペプチドのもう１つの興味深い供給源となる。ＰＳＭＡは、グルタミル優先選択性カルボキシペプチダーゼである（例えば、Ｌｉｕら、２００２）。Ｃ末端グルタミン酸を有するＲＰＡＲＰＡＲペプチド（ＲＰＡＲＰＡＲＥ；配列番号１１１）の遮断により、前立腺において選択的に活性化されるＣｅｎｄＲペプチドが得られる。このカルボキシペプチダーゼの発現は、癌細胞においてアップレギュレートされ、これは、その発現を癌処置の状況下での活性化に特に有用なものにする。前立腺での前記ペプチドの濃度を増加させるために、例えば前立腺ホーミングＳＭＳＩＡＲＬ配列（配列番号１１２）を、例えばＲＰＡＲＥ配列（配列番号１１１のアミノ酸４−８）のこの場合はＮ末端側に、付加させた構築物（ＳＭＳＩＡＲＬＡＲＰＡＲＥ；配列番号１１３）。前記２つのペプチド間への１つのアミノ酸（例えば、アラニン）の挿入は、ＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）におけるモチーフに類似した二重ＣｅｎｄＲモチーフを生じさせる。
【０２８０】
本開示のペプチドを、例えばインビトロ細胞結合および内部移行およびインビボホーミングを試験することにより、検証することができる。合成ペプチドを使用して、選択したファージに関係づけられる活性が、ファージディスプレイによるペプチドによって再生産されることを示すことができる。このための技術は周知である（例えば、Ｚｈａｎｇら、２００５；Ｓｉｍｂｅｒｇら、２００７；Ｋａｒｍａｌｉら、２００８）。前記ペプチドを一般には蛍光体で標識して、組織内での検出を可能にすることができ、ならびに遊離ペプチドとナノ粒子上の多量体コンジュゲート（これのほうがファージ上への多価提示によく似ている）の両方を試験することができる。
【０２８１】
ＣｅｎｄＲエレメントを所与の細胞に選択的に送達するために該ＣｅｎｄＲエレメントにカップリングさせたホーミング分子であって、それにより、ホーミングＣｅｎｄＲ組成物を形成するものであるホーミング分子を開示する。様々なホーミング分子を本開示の組成物、コンジュゲートおよび方法において使用することができる。そのようなホーミング分子としては、限定ではないが、本明細書に開示するペプチドが挙げられる。本開示の化合物、組成物、コンジュゲートおよび方法は、開示するようなペプチドおよびペプチドミメティックを含めて、様々な形態での本開示のホーミング分子を含むまたは使用することができる。表現の便宜上、本明細書中の多くの場所でペプチドの使用または包含について述べる。そのような場合、ペプチドに関して説明しているのと同じまたは同様の方法で、様々な形態のホーミング分子も使用または含むことができる、ならびにそれによりそのような使用および包含が具体的に意図され、開示されると考えられるということが理解される。ホーミングＣｅｎｄＲペプチド、分子などは、１つ以上のホーミングペプチドまたは分子と組み合わせられているＣｅｎｄＲエレメントを指す。
【０２８２】
本明細書において用いる場合の用語「ホーミング分子」は、正常組織に優先して特定の細胞または特定の組織にインビボで選択的にホーミングする任意の分子を意味する。同様に、用語「ホーミングペプチド」または「ホーミングペプチドミメティック」は、正常組織に優先して特定の細胞または特定の組織にインビボで選択的にホーミングするペプチドを意味する。ホーミング分子は、特定の細胞もしくは特定の組織にインビボで選択的にホーミングする、または特定の細胞もしくは特定の組織への優先選択的ホーミングを示すことができると解される。
【０２８３】
「選択的にホーミングする」とは、インビボで、ホーミング分子が、非標的と比較して標的に優先選択的に結合することを意味する。例えば、ホーミング分子は、非腫瘍と比較して、腫瘍に優先選択的に結合することができる。例えば、腫瘍細胞への選択的ホーミングは一般に、非腫瘍細胞の幾つかの組織タイプと比較して、腫瘍細胞内への少なくとも２倍より多い局在化を特徴とする。ホーミング分子は、殆どのまたはすべての非標的細胞と比較して、標的細胞への５倍、１０倍、２０倍またはそれより大きな優先選択的局在化を特徴とし得る。従って、場合によっては、ホーミング分子は、標的細胞および標的組織へのホーミングに加えて、幾分かは１つ以上の正常細胞、組織および器官にホーミングする。選択的ホーミングをターゲティングと呼ぶ場合もある。
【０２８４】
ホーミング分子がその標的を認識するおよび／またはその標的に結合するという文脈での結合は、共有結合と非共有結合の両方を指す場合があり、この場合、例えば、ホーミング分子が、共有結合および／または非共有結合によりその標的に結合する（ｂｉｎｄ）、結合する（ａｔｔａｃｈ）または別様にカップリングすることができる。結合（ｂｉｎｄｉｎｇ）は、高親和性である場合もあり、低親和性である場合もあり、好ましくは高親和性であり得る。有用であり得る結合力の例としては、共有結合、双極子相互作用、静電力、水素結合、疎水性相互作用、イオン結合、および／またはファンデルワールス力が挙げられるが、これらに限定されない。この結合は、ＣｅｎｄＲエレメントとで発生する結合に加えて発生することがある。
【０２８５】
多くのホーミング分子およびホーミングペプチドは、標的組織の血管系にホーミングする。しかし、便宜上、ホーミングは、本明細書中の幾つかの箇所では、ホーミング分子またはホーミングペプチドが実際にホーミングすることがある血管系に関連した組織へのホーミングのことを言う。従って、例えば、腫瘍血管系にホーミングするホーミングペプチドを、本明細書では腫瘍組織にまたは腫瘍細胞にホーミングすると言う場合がある。ホーミング分子またはホーミングペプチドと、例えばタンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物またはＣｅｎｄＲエレメントを含めるまたは会合させることにより、該タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物もしくはＣｅｎｄＲエレメントを該ホーミング分子もしくは該ホーミングペプチドの標的にターゲティングすることができ、または該タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物もしくはＣｅｎｄＲエレメントは、該ホーミング分子またはホーミングペプチドの標的にホーミングすることができる。このように、前記タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物またはＣｅｎｄＲエレメントを、ホーミング分子またはホーミングペプチドの標的にホーミングすると言う場合がある。便宜上、および別様に示されていない限り、タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物またはＣｅｎｄＲエレメントなどのホーミングへの言及は、該タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物またはＣｅｎｄＲエレメントなどが、適切なホーミング分子またはホーミングペプチドを含む、または適切なホーミング分子またはホーミングペプチドと会合していることを示すことを意図したものである。
【０２８６】
本開示のアミノ酸配列、共組成物、カーゴ組成物、タンパク質またはペプチド（およびホーミング分子とカップリングまたは会合しているＣｅｎｄＲエレメント）は、例えば、脳細胞、脳幹細胞、脳組織および／もしくは脳血管系、腎細胞、腎幹細胞、腎組織および／もしくは腎血管系、皮膚細胞、皮膚幹細胞、皮膚組織および／もしくは皮膚血管系、肺細胞、肺組織および／もしくは肺血管系、膵細胞、膵組織および／もしくは膵血管系、腸細胞、腸組織および／もしくは腸血管系、副腎細胞、副腎組織および／もしくは副腎血管系、網膜細胞、網膜組織および／もしくは網膜血管系、肝細胞、肝組織および／もしくは肝血管系、前立腺細胞、前立腺組織および／もしくは前立腺血管系、子宮内膜症細胞、子宮内膜症組織および／もしくは子宮内膜症血管系、卵巣細胞、卵巣組織および／もしくは卵巣血管系、腫瘍細胞、腫瘍、腫瘍血管および／もしくは腫瘍血管系、骨細胞、骨組織および／もしくは骨血管系、骨髄細胞、骨髄組織および／もしくは骨髄血管系、軟骨細胞、軟骨組織および／もしくは軟骨髄血管系、幹細胞、胚性幹細胞、多能性幹細胞、人工多能性幹細胞、成人幹細胞、造血幹細胞、神経幹細胞、間葉幹細胞、乳腺幹細胞、内皮幹細胞、嗅覚成人幹細胞、神経堤幹細胞、癌幹細胞、血液細胞、赤血球、血小板、白血球、顆粒球、好中球、好酸球（ｅｏｓｉｎｐｈｉｌｓ）、好塩基球、リンパ球様細胞、リンパ球、単球、創傷血管系、損傷組織の血管系、炎症組織の血管系、アテローム硬化性プラーク、または組み合わせにホーミングすることができる。
【０２８７】
ホーミング分子およびホーミングペプチドの例は公知である。例としては、脳ホーミングペプチド、例えば：ＣＮＳＲＬＨＬＲＣ（配列番号１１４）、ＣＥＮＷＷＧＤＶＣ（配列番号１１５）、ＷＲＣＶＬＲＥＧＰＡＧＧＣＡＷＦＮＲＨＲＬ（配列番号１１６）、ＣＬＳＳＲＬＤＡＣ（配列番号１１７）、ＣＶＬＲＧＧＲＣ（配列番号１１８）、ＣＮＳＲＬＱＬＲＣ（配列番号１１９）、ＣＧＶＲＬＧＣ（配列番号１２０）、ＣＫＤＷＧＲＩＣ（配列番号１２１）、ＣＬＤＷＧＲＩＣ（配列番号１２２）、ＣＴＲＩＴＥＳＣ（配列番号１２３）、ＣＥＴＬＰＡＣ（配列番号１２４）、ＣＲＴＧＴＬＦＣ（配列番号１２５）、ＣＧＲＳＬＤＡＣ（配列番号１２６）、ＣＲＨＷＦＤＶＶＣ（配列番号１２７）、ＣＡＮＡＱＳＨＣ（配列番号１２８）、ＣＧＮＰＳＹＲＣ（配列番号１２９）、ＹＰＣＧＧＥＡＶＡＧＶＳＳＶＲＴＭＣＳＥ（配列番号１３０）、ＬＮＣＤＹＱＧＴＮＰＡＴＳＶＳＶＰＣＴＶ（配列番号１３１）；腎臓ホーミングペプチド、例えば：ＣＬＰＶＡＳＣ（配列番号１３２）、ＣＧＡＲＥＭＣ（配列番号１３３）、ＣＫＧＲＳＳＡＣ（配列番号１３４）、ＣＷＡＲＡＱＧＣ（配列番号１３５）、ＣＬＧＲＳＳＶＣ（配列番号１３６）、ＣＴＳＰＧＧＳＣ（配列番号１３７）、ＣＭＧＲＷＲＬＣ（配列番号１３８）、ＣＶＧＥＣＧＧＣ（配列番号１３９）、ＣＶＡＷＬＮＣ（配列番号１４０）、ＣＲＲＦＱＤＣ（配列番号１４１）、ＣＬＭＧＶＨＣ（配列番号１４２）、ＣＫＬＬＳＧＶＣ（配列番号１４３）、ＣＦＶＧＨＤＬＣ（配列番号１４４）、ＣＲＣＬＮＶＣ（配列番号１４５）、ＣＫＬＭＧＥＣ（配列番号１４６）；皮膚ホーミングペプチド、例えば：ＣＡＲＳＫＮＫＤＣ（配列番号１４７）、ＣＲＫＤＫＣ（配列番号１４８）、ＣＶＡＬＣＲＥＡＣＧＥＧＣ（配列番号１４９）、ＣＳＳＧＣＳＫＮＣＬＥＭＣ（配列番号１５０）、ＣＩＧＥＶＥＶＣ（配列番号１５１）、ＣＫＷＳＲＬＨＳＣ（配列番号１５２）、ＣＷＲＧＤＲＫＩＣ（配列番号１５３）、ＣＥＲＶＶＧＳＳＣ（配列番号１５４）、ＣＬＡＫＥＮＶＶＣ（配列番号１５５）；肺ホーミングペプチド、例えば：ＣＧＦＥＣＶＲＱＣＰＥＲＣ（配列番号１５６）、ＣＧＦＥＬＥＴＣ（配列番号１５７）、ＣＴＬＲＤＲＮＣ（配列番号１５８）、ＣＩＧＥＶＥＶＣ（配列番号１５９）、ＣＴＬＲＤＲＮＣ（配列番号１６０）、ＣＧＫＲＹＲＮＣ（配列番号１６１）、ＣＬＲＰＹＬＮＣ（配列番号１６２）、ＣＴＶＮＥＡＹＫＴＲＭＣ（配列番号１６３）、ＣＲＬＲＳＹＧＴＬＳＬＣ（配列番号１６４）、ＣＲＰＷＨＮＱＡＨＴＥＣ（配列番号１６５）；膵臓ホーミングペプチド、例えば：ＳＷＣＥＰＧＷＣＲ（配列番号１６６）、ＣＫＡＡＫＮＫ（配列番号１６７）、ＣＫＧＡＫＡＲ（配列番号１６８）、ＶＧＶＧＥＷＳＶ（配列番号１６９）；腸ホーミングペプチド、例えば：ＹＳＧＫＷＧＷ（配列番号１７０）；子宮ホーミングペプチド、例えば：ＧＬＳＧＧＲＳ（配列番号１７１）；副腎ホーミングペプチド、例えば：ＬＭＬＰＲＡＤ（配列番号１７２）、ＬＰＲＹＬＬＳ（配列番号１７３）；網膜ホーミングペプチド、例えば：ＣＳＣＦＲＤＶＣＣ（配列番号１７４）、ＣＲＤＶＶＳＶＩＣ（配列番号１７５）；消化管ホーミングペプチド、例えば：ＹＳＧＫＷＧＫ（配列番号１７６）、ＧＩＳＡＬＶＬＳ（配列番号１７７）、ＳＲＲＱＰＬＳ（配列番号１７８）、ＭＳＰＱＬＡＴ（配列番号１７９）、ＭＲＲＤＥＱＲ（配列番号１８０）、ＱＶＲＲＶＰＥ（配列番号１８１）、ＶＲＲＧＳＰＱ（配列番号１８２）、ＧＧＲＧＳＷＥ（配列番号１８３）、ＦＲＶＲＧＳＰ（配列番号１８４）、ＲＶＲＧＰＥＲ（配列番号１８５）；肝臓ホーミングペプチド、例えば：ＶＫＳＶＣＲＴ（配列番号１８６）、ＷＲＱＮＭＰＬ（配列番号１８７）、ＳＲＲＦＶＧＧ（配列番号１８８）、ＡＬＥＲＲＳＬ（配列番号１８９）、ＡＲＲＧＷＴＬ（配列番号１９０）；前立腺ホーミングペプチド、例えば：ＳＭＳＩＡＲＬ（配列番号１９１）、ＶＳＦＬＥＹＲ（配列番号１９２）、ＲＧＲＷＬＡＬ（配列番号１９３）；卵巣ホーミングペプチド、例えば：ＥＶＲＳＲＬＳ（配列番号１９４）、ＶＲＡＲＬＭＳ（配列番号１９５）、ＲＶＧＬＶＡＲ（配列番号１９６）、ＲＶＲＬＶＮＬ（配列番号１９７）；クロット結合ホーミングペプチド、例えば：ＣＲＥＫＡ（配列番号７）、ＣＬＯＴｌ、およびＣＬＯＴ２；心臓ホーミングペプチド、例えば：ＣＲＰＰＲ（配列番号１９８）、ＣＧＲＫＳＫＴＶＣ（配列番号１９９）、ＣＡＲＰＡＲ（配列番号２００）、ＣＰＫＲＰＲ（配列番号２０１）、ＣＫＲＡＶＲ（配列番号２０２）、ＣＲＮＳＷＫＰＮＣ（配列番号２０３）、ＲＧＳＳＳ（配列番号２０４）、ＣＲＳＴＲＡＮＰＣ（配列番号２０５）、ＣＰＫＴＲＲＶＰＣ（配列番号２０６）、ＣＳＧＭＡＲＴＫＣ（配列番号２０７）、ＧＧＧＶＦＷＱ（配列番号２０８）、ＨＧＲＶＲＰＨ（配列番号２０９）、ＶＶＬＶＴＳＳ（配列番号２１０）、ＣＬＨＲＧＮＳＣ（配列番号２１１）、ＣＲＳＷＮＫＡＤＮＲＳＣ（配列番号２１２）、ＣＧＲＫＳＫＴＶＣ（配列番号２１３）、ＣＫＲＡＶＲ（配列番号２１４）、ＣＲＮＳＷＫＰＮＣ（配列番号２１５）、ＣＰＫＴＲＲＶＰＣ（配列番号２１６）、ＣＳＧＭＡＲＴＫＣ（配列番号２１７）、ＣＡＲＰＡＲ（配列番号２１８）、ＣＰＫＲＰＲ（配列番号２１９）；腫瘍血管ホーミングペプチド、例えば：ＣＮＧＲＣ（配列番号２２０）およびＮＧＲモチーフを有する他のペプチド（米国特許第６，１７７，５４２号および同第６，５７６，２３９号；米国特許出願公開第２００９０２５７９５１号）；ＲＧＤペプチド、ならびにＲＧＲペプチドが挙げられる。他のホーミングペプチドとしては、ＣＳＲＰＲＲＳＥＣ（配列番号２２１）、ＣＳＲＰＲＲＳＶＣ（配列番号２２２）およびＣＳＲＰＲＲＳＷＣ（配列番号２２３）（Ｈｏｆｆｍａｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ、第４巻（２００３））、Ｆ３（ＫＤＥＰＱＲＲＳＡＲＬＳＡＫＰＡＰＰＫＰＥＰＫＰＫＫＡＰＡＫＫ；（配列番号２２４））、ＰＱＲＲＳＡＲＬＳＡ（配列番号２２５）、ＰＫＲＲＳＡＲＬＳＡ（配列番号２２６）（米国特許第７，５４４，７６７号）、およびＣＧＲＥＣＰＲＬＣＱＳＳＣ（配列番号６２）が挙げられ、これらは腫瘍にホーミングする。
【０２８８】
一端または両端にシステイン残基を有する多くのホーミングモチーフおよびターゲティングモチーフおよびホーミング配列およびターゲティング配列を示すが、そのようなシステイン残基が一般にホーミング機能に必要ないことは理解される。一般に、そのようなシステインは、ホーミング配列およびターゲティング配列を同定する方法のために存在する。そのような末端システインを、例えば、本明細書に開示するものなどのペプチドを環化するために、使用することができる。これらの理由で、システイン残基を任意の本開示ペプチドの末端に付加させることができることも理解される。
【０２８９】
有用なＮＧＲペプチドとしては、例えば、Ｘ２ＣＮＧＲＣＸ２（配列番号８９）、ＣＸ２（Ｃ／Ｘ）ＮＧＲ（Ｃ／Ｘ）Ｘ２Ｃ（配列番号９０）およびＣＮＧＲＣＸ６（配列番号９１）（この場合の「Ｘ」は、任意のアミノ酸である）が挙げられ、これらは線状である場合もあり、または環状である場合もある。ＮＧＲペプチドの例としては、ＣＮＧＲＣＶＳＧＣＡＧＲＣ（配列番号６３）、ＮＧＲＡＨＡ（配列番号２４）、ＣＶＬＮＧＲＭＥＣ（配列番号６７）、ＣＮＧＲＣ（配列番号６８）、ＡＬＮＧＲＥＥＳＰ（配列番号６６）、ＣＶＬＮＧＲＭＥ（配列番号８７）、ＣＫＶＣＮＧＲＣＣＧ（配列番号８８）、ＣＥＭＣＮＧＲＣＭＧ（配列番号６９）、ＣＰＬＣＮＧＲＣＡＬ（配列番号７０）、ＣＰＴＣＮＧＲＣＶＲ（配列番号７１）、ＣＧＶＣＮＧＲＣＧＬ（配列番号７２）、ＣＥＱＣＮＧＲＣＧＱ（配列番号７３）、ＣＲＮＣＮＧＲＣＥＧ（配列番号７４）、ＣＶＬＣＮＧＲＣＷＳ（配列番号７５）、ＣＶＴＣＮＧＲＣＲＶ（配列番号７６）、ＣＴＥＣＮＧＲＣＱＬ（配列番号７７）、ＣＲＴＣＮＧＲＣＬＥ（配列番号７８）、ＣＥＴＣＮＧＲＣＶＧ（配列番号７９）、ＣＡＶＣＮＧＲＣＧＦ（配列番号８０）、ＣＲＤＬＮＧＲＫＶＭ（配列番号８１）、ＣＳＣＣＮＧＲＣＧＤ（配列番号８２）、ＣＷＧＣＮＧＲＣＲＭ（配列番号８３）、ＣＰＬＣＮＧＲＣＡＲ（配列番号８４）、ＣＫＳＣＮＧＲＣＬＡ（配列番号８５）、ＣＶＰＣＮＧＲＣＨＥ（配列番号８６）、ＣＱＳＣＮＧＲＣＶＲ（配列番号４７）、ＣＲＴＣＮＧＲＣＱＶ（配列番号４８）、ＣＶＱＣＮＧＲＣＡＬ（配列番号４９）、ＣＲＣＣＮＧＲＣＳＰ（配列番号５０）、ＣＡＳＮＮＧＲＶＶＬ（配列番号５１）、ＣＧＲＣＮＧＲＣＬＬ（配列番号５２）、ＣＷＬＣＮＧＲＣＧＲ（配列番号５３）、ＣＳＫＣＮＧＲＣＧＨ（配列番号５４）、ＣＶＷＣＮＧＲＣＧＬ（配列番号５５）、ＣＩＲＣＮＧＲＣＳＶ（配列番号５６）、ＣＧＥＣＮＧＲＣＶＥ（配列番号５７）、ＣＥＧＶＮＧＲＲＬＲ（配列番号５８）、ＣＬＳＣＮＧＲＣＰＳ（配列番号５９）、ＣＥＶＣＮＧＲＣＡＬ（配列番号６０）が挙げられる。
【０２９０】
腫瘍ターゲティングに有用なペプチドとしては、例えば、ｉＲＧＤ、ＬｙＰ−１、ｉＮＧＲおよびＲＧＲペプチドが挙げられる。原型腫瘍ホーミングＣｅｎｄＲペプチド、ｉＲＧＤは、本明細書に記載する結果を生じさせることにおいて使用した。推定ＣｅｎｄＲエレメントを含有するペプチドであるＬｙＰ−１は腫瘍浸透特性を有する。このペプチドは、腫瘍内に固有の標的を有し、それは腫瘍の低酸素／低栄養領域に優先的に蓄積する（Ｌａａｋｋｏｎｅｎら、２００２；２００４；Ｋａｒｍａｌｉら、２００９）。ＣＲＧＲＲＳＴ（ＲＧＲ；Ｊｏｙｃｅら、２００３）は、サイトカインと抗体の組み合わせを腫瘍内にターゲティングする際の使用に成功しているペプチドである（Ｈａｍｚａｈら、２００８）。このペプチドは、線状であり、合成を容易にする。ＮＧＲペプチドは、腫瘍に関連した脈管形成血管系をはじめとする脈管形成血管系、ならびにαｖインテグリンおよびα５β１インテグリンにホーミングする（米国特許第６，５７６，２３９号および同第６，１７７，５４２号ならびに米国特許出願公開第２００９０２５７９５１号）。ＬｙＰ−１と同様に、ＲＧＲは、少なくともある程度は腫瘍タイプ特異的である（Ｊｏｙｃｅら、２００３）が、これら２つのペプチドによって認識される腫瘍タイプは、部分的に異なるようであり、これは、汎腫瘍（ｐａｎ−ｔｕｍｏｒ）ｉＲＧＤとの組み合わせ試験する際に有利であり得る。表３は、腫瘍ホーミングＣｅｎｄＲペプチドの例を示すものである。
【０２９１】
表３．ＣｅｎｄＲエレメントを有する腫瘍ホーミングペプチドの使用
【０２９２】
【表３−１】
0005906184.tif 000014
【０２９３】
【表３−２】
0005906184.tif 000015
ＲＧＤペプチドは、ＲＧＤ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）モチーフを含有するならびに脈管形成部および腫瘍血管系にホーミングするペプチドである。ＮＧＲペプチドは、ＮＧＲ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）モチーフを含有するならびに脈管形成部および腫瘍血管系にホーミングするペプチドである。ＮＧＲペプチドの例としては、ＣＮＧＲＣＶＳＧＣＡＧＲＣ（配列番号６３）、ＮＧＲＡＨＡ（配列番号２４）、ＣＶＬＮＧＲＭＥＣ（配列番号６７）、およびＣＮＧＲＣ（配列番号６８）が挙げられる。ＧＳＬペプチドは、ＧＳＬ（Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ）モチーフを含有するおよび腫瘍血管系にホーミングするペプチドである。ＧＳＬペプチドの例としては、ＣＧＳＬＶＲＣ（配列番号６５）およびＣＬＳＧＳＬＳＣ（配列番号６４）が挙げられる。
【０２９４】
内部移行するＲＧＤ（ｉＲＧＤ）は、ＲＧＤモチーフとＣｅｎｄＲエレメントを併有するペプチドを指す。例えば、配列ＣＲＧＤＫ／ＲＧＰＤ／ＥＣ（配列番号７１）を有する環式ＲＧＤペプチドは、腫瘍組織内での連結されたペイロードの血管外遊出および拡散の編成ならびにその後の腫瘍細胞内への内部移行に格別に有効である。このｉＲＧＤペプチドには２つの機能性エレメントが組み込まれている：腫瘍特異性をもたらすＲＧＤモチーフ（ＰｉｅｒｓｃｈｂａｃｈｅｒおよびＲｕｏｓｌａｈｔｉ、「Ｅ．Ｃｅｌｌ  ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ  ｃａｎ  ｂｅ  ｄｕｐｌｉｃａｔｅｄ  ｂｙ  ｓｍａｌｌ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｆｒａｇｍｅｎｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ」、Ｎａｔｕｒｅ  ３０９、３０−３３（１９８４）；Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ（２００３）；ＥｌｉｃｅｉｒｉおよびＣｈｅｒｅｓｈ（２００１）；Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ（２００２）；Ａｒａｐら（１９９８）；Ｃｕｒｎｉｓら（２００４）；Ｓｉｐｋｉｎｓら（１９９８）；Ｍｕｒｐｈｙら（２００８））および浸透を媒介するＣｅｎｄＲモチーフ。ｉＲＧＤは、αｖインテグリンを発現する培養細胞に容易に接着し、他のＲＧＤペプチドよりはるかに有効に内部移行する。内部移行は、ニューロピリン−１、ＣｅｎｄＲモチーフの受容体の発現に依存性であった。フルオレセイン、ファージまたは人工ナノ粒子のペイロードにカップリングさせたｉＲＧＤは、様々な腫瘍モデルにおいて、インビボで腫瘍血管の周囲に蓄積し、腫瘍間質中に拡散し、腫瘍細胞内に内部移行された状態になった。近赤外色素で標識したｉＲＧＤミセルの全身投与は、マウスの全身イメージングにおいて、強い、特異的な腫瘍シグナルを生じさせた。ｉＲＧＤ内のＣｅｎｄＲエレメントは、おそらくＬｙｓ／Ａｒｇの後での切断により活性化され、そのペプチドによる内部移行の媒介を可能にする、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである。
【０２９５】
内部移行ＮＧＲ（ｉＮＧＲ）は、ＮＧＲモチーフとＣｅｎｄＲエレメントを併有するペプチドを指す。例えば、配列Ｋ／ＲＮＧＲ（配列番号４６）を有するＮＲＧペプチドは、腫瘍組織内での連結されたペイロードの血管外遊出および拡散の編成ならびにその後の腫瘍細胞内への内部移行に格別に有効であり得る。このｉＮＧＲペプチドには２つの機能性エレメントが組み込まれている：腫瘍特異性をもたらすＮＧＲモチーフ、および浸透を媒介するＣｅｎｄＲモチーフ。ｉＮＧＲペプチドのもう１つの例は、ＮＧＲＡＨＡ（配列番号２４）である。ｉＮＧＲペプチドＮＧＲＡＨＡ（配列番号２４）内のＣｅｎｄＲエレメントは、おそらくＡｒｇの後での切断により活性化され、そのペプチドによる内部移行の媒介を可能にする、活性化可能ＣｅｎｄＲエレメントである。
【０２９６】
アクセサリー分子は、有用な機能を有する、ならびにＣｅｎｄＲエレメント、ＣｅｎｄＲ組成物、ＣｅｎｄＲコンジュゲート、ＣｅｎｄＲ分子、ＣｅｎｄＲ化合物、ＣｅｎｄＲタンパク質、ＣｅｎｄＲペプチド、組成物、共組成物および／またはカーゴ組成物と併用して使用できる、任意の分子、化合物、成分などであり得る。有用なアクセサリー分子の例としては、ホーミング分子、ターゲティング分子、アフィニティーリガンド、細胞浸透性分子、エンドソーム脱出分子、細胞内ターゲティング分子、核ターゲティング分子が挙げられる。異なるアクセサリー分子が互いに類似したまたは異なる機能を有する場合がある。
【０２９７】
特定の分子、構造、細胞、組織などをターゲットにする、特定の分子、構造、細胞、組織などにホーミングする、または特定の分子、構造物、細胞、組織などに対して親和性を有する分子は、アクセサリー分子として特に有用である。本明細書中の他の箇所で説明するするホーミングペプチドに加えて、特定の標的分子、構造、細胞、組織などに親和性を有することならびに本開示の成分および組成物を所望の標的に蓄積させるおよび／または指向させることを促進することが知られている非常に多数の分子および化合物がある。便宜上、そのような親和性（アフィニティー）効果をホーミングと呼ぶ場合がある。本明細書中の他の箇所におけるホーミングおよびホーミング効果の説明をこれらの分子に適用することができる。
【０２９８】
アフィニティーリガンドは、特定の分子、部分、細胞組織などと特異的に相互作用する分子である。アフィニティーリガンドと特異的に相互作用する分子、部分、細胞組織などを本明細書では標的または標的分子、標的部分、標的細胞組織などと呼ぶ。用語標的分子は、アフィニティーリガンドと特異的に相互作用する、独立した分子とそのような分子の部分、例えばタンパク質のエピトープ、の両方を指すと解すべきである。特異的結合親和性を有する抗体、受容体／リガンドペアのいずれかのメンバー、合成ポリアミド（ＤｅｒｖａｎおよびＢｕｒｌｉ、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ＤＮＡ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｂｙ  ｐｏｌｙａｍｉｄｅｓ」、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ、３（６）：６８８−９３（１９９９）；ＷｅｍｍｅｒおよびＤｅｒｖａｎ、「Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ｍｉｎｏｒ  ｇｒｏｏｖｅ  ｏｆ  ＤＮＡ」、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｓｔｒｕｃｔ  Ｂｉｏｌ、７（３）：３５５−６１（１９９７））および他の分子がアフィニティーリガンドの例である。
【０２９９】
特定の標的分子と特に相互作用するアフィニティーリガンドをその標的分子に対して特異的であると言う。例えば、アフィニティーリガンドが、特定の抗原に結合する抗体である場合、該アフィニティーリガンドをその抗原に対して特異的であると言う。その抗原は標的分子である。アフィニティーリガンドを特定の標的分子に対して特異的であるという場合もある。有用なアフィニティーリガンドの例は、抗体、リガンド、結合タンパク質、受容体タンパク質、ハプテン、アプタマー、炭水化物、レクチン、葉酸、合成ポリアミド、およびオリゴヌクレオチドである。有用な結合タンパク質としては、ＤＮＡ結合タンパク質が挙げられる。有用なＤＮＡ結合タンパク質としては、ジンクフィンガーモチーフ、ロイシンジッパーモチーフ、およびヘリックス−ターン−ヘリックスモチーフが挙げられる。これらのモチーフは、同じアフィニティーリガンド内に併有されている場合がある。
【０３００】
抗体は、アフィニティーリガンドとして有用である。抗体は、商業的に入手することができるか、または十分に確立した方法を用いて生産することができる。例えば、ＪｏｈｎｓｔｏｎｅおよびＴｈｏｒｐｅ、Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｉｎ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ（Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｏｘｆｏｒｄ、Ｅｎｇｌａｎｄ、１９８７）の３０〜８５頁には、ポリクローナル抗体とモノクローナル抗体の両方を生産するために有用な一般法が記載されている。アッセイ系における抗体の使用についての多くの一般技術および原理がこの本全体に記載されている。特定のタンパク質、炭水化物、糖タンパク質、分子、細胞、組織などに結合する非常に多くの抗体および他のアフィニティーリガンドが公知である。そのような抗体を本開示の成分および組成物において使用することができる。
【０３０１】
細胞浸透ペプチドの例は、例えば、米国特許出願公開第２０１０００６１９４２号、同第２０１０００６１９３２号、同第２０１０００４８４８７号、同第２０１０００２２４６６号、同第２０１０００１６２１５号、同第２００９０２８００５８号、同第２００９０１８６８０２号、同第２００８０２３４１８３号、同第２００６００１４７１２号、同第２００５０２６０７５６号および同第２００３００７７２８９号に記載されており、これらは、それら全体が、特に細胞浸透ペプチドおよびモチーフに関するそれらの記載について、参照により本明細書に援用されている。エンドソーム脱出分子の例は、例えば、米国特許出願公開第２００９０３２５８６６号、同第２００９０３１７８０２号、同第２００８０３０５１１９号、同第２００７０２９２９２０号、同第２００６０１４７９９７号、同第２００５００３８２３９号、同第２００４０２１９１６９号、同第２００３０１４８２６３号、同第２００３００８２１４３号、同第２００２０１３２９９０号および同第２００２００６８２７２号に記載されており、これらは、それら全体が、特にエンドソーム脱出分子およびモチーフに関するそれらの記載について、参照により本明細書に援用されている。細胞内ターゲティング分子の例は、例えば、米国特許出願公開第２００９０３１７３３号、同第２００９０２５８９２６号、同第２００９０１７６６６０号、同第２００８０３１１１３６号、同第２００７０２８７６８０号、同第２００７０１５７３２８号、同第２００７０１１１２７０号、同第２００７０１１１２５１号、同第２００６０２５７９４２号、同第２００６０１５４３４０号、同第２００６００１４７１２号、同第２００５０２８１８０５号、同第２００５０２３３３５６号、同第２００４０００５３０９号、同第２００３００８２１７６号および同第２００１００２１５００号に記載されており、これらは、それら全体が、特に細胞内ターゲティング分子およびモチーフに関するそれらの記載について、参照により本明細書に援用されている。核ターゲティング分子の例は、例えば、米国特許出願公開第１０１００１４３４５４号、同第２０１０００９９６２７号、同第２００９０３０５３２９号、同第２００９０１７６７１０号、同第２００９００８７８９９号、同第２００７０２３１８６２号、同第２００７０２１２３３２号、同第２００６０２４２７２５号、同第２００６０２３３８０７号、同第２００６０１４７９２２号、同第２００６００７０１３３号、同第２００６００５１３１５号、同第２００５０１４７９９３号、同第２００５００７１０８８号、同第２００３０１６６６０１号、同第２００３０１２５２８３号、同第２００３００８３２６１号、同第２００３０００３１００号、同第２００２００６８２７２号および同第２００２００５５１７４号に記載されており、これらは、それら全体が、特に核ターゲティング分子およびモチーフに関するそれらの記載について、参照により本明細書に援用されている。
【０３０２】
本明細書に開示する場合、用語「共組成物」は、ＣｅｎｄＲエレメントと共に使用することができる任意の組成物（ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｔｔｅｒ）を指す。同様に、用語「カーゴ組成物」は、ＣｅｎｄＲエレメントと共に使用することができる任意の組成物を指す。一般に、例えば、共組成物およびカーゴ組成物は、細胞および／または組織内に内部移行するおよび／または浸透する任意の組成物である場合がある。例えば、共組成物またはカーゴ組成物は、分子、コンジュゲート、分子会合体、組成物、混合物である場合がある。共組成物およびカーゴ組成物の例としては、癌化学療法薬、細胞傷害剤、抗炎症薬、抗関節炎薬、ポリペプチド、核酸分子、小分子、ナノ粒子、マイクロ粒子、蛍光体、フルオレセイン、ローダミン、放射性核種、ルテチウム−１７７（１７７Ｌｕ）、レニウム−１８８（１８８Ｒｅ）、ガリウム−６８（６８Ｇａ）、イットリウム−９０（９０Ｙ）、テクネチウム−９９ｍ（９９ｍＴｃ）、ホルミウム−１６６（１６６Ｈｏ）、ヨウ素−１３１（１３１Ｉ）、インジウム−１１１（１１１Ｉｎ）、フッ素−１８（１８Ｆ）、炭素−１１（１１Ｃ）、窒素−１３（１３Ｎ）、酸素−１５（１５Ｏ）、臭素−７５（７５Ｂｒ）、臭素−７６（７６Ｂｒ）、ヨウ素−１２４（１２４Ｉ）、タリウム−２０１（２０１Ｔｌ）、テクネチウム−９９（９９Ｔｃ）、ヨウ素−１２３（１２３Ｉ）、抗脈管形成剤、脈管形成促進剤、またはこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。
【０３０３】
本開示のＣｅｎｄＲ成分は、細胞および組織への治療薬の送達を助けるための一般様式およびプラットフォームを代表するので、それは、任意の治療薬と共に使用することができる。従って、任意の治療薬を本開示の組成物においてまたは本開示の組成物と共に使用することができる。治療薬および治療薬物の総合リストは、多くの場所、例えば、米国食品医薬品局により維持されているＯｒａｎｇｅ  Ｂｏｏｋおよび他のリスト（ウェブサイトｆｄａ．ｇｏｖ／Ｄｒｕｇｓ／ＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＯｎＤｒｕｇｓ／ｕｃｍｌ２９６６２．ｈｔｍおよびｆｄａ．ｇｏｖ／Ｄｒｕｇｓ／ＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＯｎＤｒｕｇｓ／ＡｐｐｒｏｖｅｄＤｒｕｇｓ／ｄｅｆａｕｌｔ．ｈｔｍで入手可能な情報）ならびに他の国により維持されている同様のリストにおいて、ならびにｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ．／（臨床試験を受けている薬物および治療薬について）で見つけることができる。
【０３０４】
共組成物およびカーゴ組成物は、部分であり得る。本明細書において用いる場合、用語「部分」は、連結された共組成物または連結されたカーゴ組成物に生物学的に有用な機能を一般に付与する物理的、化学的または生物学的物質を意味するように広く用いている。部分は、限定ではないが生物学的物質、例えば細胞、ファージもしくは他のウイルス；有機化学物質、例えば小分子；ナノ粒子、放射性核種；核酸分子もしくはオリゴヌクレオチド；ポリペプチド；またはペプチドをはじめとする、任意の天然または非天然物質であり得る。例えば、標的に影響を及ぼす部分、例えば治療効果を有する部分、または標的の検出、可視化もしくはイメージングを促進する部分、例えば蛍光分子もしくは放射性核種。
【０３０５】
本開示の共組成物およびカーゴ組成物の成分を、任意の適する手法で組み合わせる、連結させるおよび／またはカップリングさせることができる。例えば、部分および他の分子を共有結合でまたは非共有結合で、直接または間接的に、リンカー部分を用いてまたは用いずに会合させることができる。
【０３０６】
いくつかの実施形態において、共組成物またはカーゴ組成物は、癌化学療法薬を含む場合がある。本明細書において用いる場合、「癌化学療法薬」は、癌細胞の増殖、成長、寿命または転移活性を阻害する化学薬品である。そのような癌化学療法薬は、限定ではないが、タキサン、例えばドセタキセル；アントラサイクリン、例えばドキソルビシン；アルキル化剤；ビンカアルカロイド；代謝拮抗物質；白金剤、例えばシスプラチンもしくはカルボプラチン；ステロイド、例えばメトトレキサート；抗生物質、例えばアドリアマイシン；イソファミド；または選択的エストロゲン受容体モジュレーター；抗体、例えばトラスツズマブ；パクリタキセル、例えばアブラキサン；ドキシルであり得る。
【０３０７】
共組成物またはカーゴ組成物は、治療薬を含む場合がある。有用な治療薬は、例えば、細胞傷害剤であり得、これは、本明細書において用いる場合、細胞死を直接的または間接的に促進する任意の分子であり得る。有用な細胞傷害剤としては、限定ではないが、小分子、ポリペプチド、ペプチド、ペプチドミメティック、核酸−分子、細胞およびウイルスが挙げられる。非限定的な例として、有用な細胞傷害剤としては、細胞傷害性小分子、例えばドキソルビシン、ドセタキセル、トラスツズマブ；抗菌性ペプチド、例えば下でさらに説明するもの；アポトーシス促進ポリペプチド、例えばカスパーゼおよび毒素、例えばカスパーゼ−８；ジフテリア毒素Ａ鎖、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素Ａ、コレラ毒素、リガンド融合毒素、例えばＤＡＢ３８９ＥＧＦ、トウゴマ（ｒｉｃｉｎｕｓ  ｃｏｍｍｕｎｉｓ）毒（リシン）；および細胞傷害性細胞、例えば細胞傷害性Ｔ細胞が挙げられる。例えば、Ｍａｒｔｉｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６０：３２１８−３２２４（２０００）；ＫｒｅｉｔｍａｎおよびＰａｓｔａｎ、Ｂｌｏｏｄ  ９０：２５２−２５９（１９９７）；Ａｌｌａｍら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７：２６１５−２６１８（１９９７）；ならびにＯｓｂｏｒｎｅおよびＣｏｒｏｎａｄｏ−Ｈｅｉｎｓｏｈｎ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ．Ｓｃｉ．Ａｍ．２：１７５  （１９９６）参照。本明細書に記載するまたは当該技術分野において公知のこれらのおよび追加の細胞傷害剤が本開示の組成物および方法において有用であり得ることは、当業者には理解される。
【０３０８】
幾つかの形態において、治療薬は、治療用ポリペプチドであり得る。本明細書において用いる場合、治療用ポリペプチドは、生物学的に有用な機能を有する任意のポリペプチドであり得る。有用な治療用ポリペプチドは、限定ではないが、サイトカイン、抗体、細胞傷害性ポリペプチド；アポトーシス促進ポリペプチド；および抗脈管形成ポリペプチドを包含する。非限定的な例として、有用な治療用ポリペプチドは、サイトカイン、例えば腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、腫瘍壊死因子−β（ＴＮＦ−β）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、インターフェロン−α（ＩＮＦ−α）、インターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−３（ＩＬ−３）、インターロイキン−４（ＩＬ−４）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−７（ＩＬ−７）、インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、リンホタクチン（ＬＴＮ）もしくは樹状細胞ケモカイン１（ＤＣ−ＣＫ１）；抗ＨＥＲ２抗体もしくはそのフラグメント；毒素もしくはカスパーゼを含む細胞傷害性ポリペプチド、例えばジフテリア毒素Ａ鎖、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素Ａ、コレラ毒素、リガンド融合毒素、例えばＤＡＢ３８９ＥＧＦもしくはリシン；または抗脈管形成ポリペプチド、例えばアンギオスタチン、エンドスタチン、トロンボスポンジン、血小板第４因子；アナステリン；または本明細書中でさらに記載するもしくは当該技術分野において公知のもののうちの１つであり得る。生物学的活性を有するこれらのまたは他のポリペプチドが「治療用ポリペプチド」であり得ることは理解される。
【０３０９】
本開示の共組成物およびカーゴ組成物において有用な治療薬は、抗脈管形成薬である場合がある。本明細書において用いる場合、用語「抗脈管形成薬」は、血管の成長および発達である脈管形成を低減または予防する分子を意味する。前記共組成物およびカーゴ組成物は、脈管形成に関連する任意の疾患、状態および障害を処置または診断するために使用することができる。例えば、黄斑変性および糖尿病性血管合併症を診断および／または処置することができる。様々な抗脈管形成薬を常習的方法により調製することができる。そのような抗脈管形成薬としては、限定ではないが、小分子；タンパク質、例えばドミナントネガティブ形態の脈管形成因子、転写因子および抗体；ペプチド；ならびに核酸分子（リボザイム、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ならびに例えばドミナントネガティブ形態の脈管形成因子および受容体、転写因子ならびに抗体およびそれらの抗原結合フラグメントをコードする核酸分子を含む）が挙げられる。例えば、ＨａｇｅｄｏｒｎおよびＢｉｋｆａｌｖｉ、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．３４：８９−１１０（２０００）、ならびにＫｉｒｓｃｈら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｏｎｃｏｌ．５０：１４９−１６３（２０００）参照。
【０３１０】
有用な治療薬の幾つかの他の例としては、ナイトロジェンマスタード、ニトロソウレア、エチレンイミン、アルカンスルホナート、テトラジン、白金化合物、ピリミジン類似体、プリン類似体、代謝拮抗物質、葉酸類似体、アントラサイクリン、タキサン、ビンカアルカロイド、トポイソメラーゼ阻害剤およびホルモン剤が挙げられる。例示的化学療法薬物は、アクチノマイシン−Ｄ、アルケラン、Ａｒａ−Ｃ、アナストロゾール、アスパラギナーゼ、ＢｉＣＮＵ、ビカルタミド、ブレオマイシン、ブスルファン、カペシタビン、カルボプラチン、カルボプラチナム、カルムスチン、ＣＣＮＵ、クロラムブシル、クロマファジン、クロロホスファミド、シスプラチン、クラドリビン、ＣＰＴ−１１、シクロホスファミド、シタラビン、シトシンアラビノシド、シトキサン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デクスラゾキサン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ＤＴＩＣ、エピルビシン、エストラムスチン、エチレンイミン、エトポシド、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フルタミド、ホテムスチン、ゲムシタビン、ハーセプチン、ヘキサメチルアミン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イホスファミド、イリノテカン、ロムスチン、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキサート、マイトマイシン、ミトーテン、ミトザントロン、ノベンビシン（Ｎｏｖｅｍｂｉｅｈｉｎ）、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロナート、ペントスタチン、フェネステリン、プリカマイシン、プレドニムスチン、プロカルバジン、リツキシマブ、ステロイド、ストレプトゾシン、ＳＴＩ−５７１、ストレプトゾシン、タモキシフェン、テモゾロミド、テニポシド、テトラジン、チオグアニン、チオテパ、トムデックス、トポテカン、トレオスルファン、トリメトレキサート、トロホスファミド、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ＶＰ−１６およびゼローダである。アルキル化剤、例えば、チオテパならびに；アルキルスルホナート、例えばブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファン；アジリジン、例えばベンゾドパ、カルボコン、メツレドパおよびウレドパ；エチレンイミンおよびメチラメラミン（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド（ｔｒｉｅｔyｌｅｎｅｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｅ）、トリエチレンチオホスホルアミドおよびトリメチロールメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）；ニトロソウレア、例えばカルムスチン（Ｃａｎｎｕｓｔｉｎｅ）、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチンおよびラニムスチン；抗生物質、例えば、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリケアマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン（Ｃｈｒｏｍｏｉｎｙｃｉｎｓ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン（Ｉｄａｍｂｉｃｉｎ）、マルセロマイシン、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノ��ラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン（Ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチンおよびゾルビシン（Ｚｏｒｕｂｉｃｉｎ）；代謝拮抗物質、例えばメトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えばデノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリンおよびトリメトレキサート；プリン類似体、例えばフルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリンおよびチオグアニン；ピリミジン類似体、例えばアンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンおよび５−ＦＵ；アンドロゲン、例えばカルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、ルネピチオスタン（Ｒｎｅｐｉｔｉｏｓｔａｎｅ）およびテストラクトンなど；抗副腎薬、例えばアミノグルテチミド、ミトーテンおよびトリロスタン；葉酸補充薬、例えばフロリン酸など；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エフロルニチン（Ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）；エリプチニウムアセタート；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダミン；ミトグアゾン；ミトザントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；シゾフィラン（Ｓｉｚｏｆｒｒａｎ）；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えばパクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）；Ｂｒｉｓｔｏｌ−ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，  Ｎ．Ｊ．）およびドキセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ、Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ））；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えばシスプラチンおよびカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトザントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロナート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；エスペラミシン；カペシタビン；および上記のもののいずれかの薬学的に許容され得る塩、酸または誘導体。腫瘍に対するホルモン作用を制御または阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば、抗エストロゲン類（例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性４（５）−イ���ダゾール、４ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、オナプリストン、およびトレミフェン（フェアストン）を含む）ならびに抗アンドロゲン類、例えばフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリドおよびゴセレリン；ならびに上記のもののいずれかの薬学的に許容され得る塩、酸または誘導体も挙げられる。有用な共組成物およびカーゴ組成物としては、例えば、ドキソルビシン、ハーセプチンおよびリポソームドキソルビシンが挙げられる。
【０３１１】
前記共組成物またはカーゴ組成物は、ホウ素含有化合物を含む場合もある。ホウ素含有化合物は、この原子を含めるための有機合成に関する技術が発展した（「Ｂｏｒｏｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｈｏｒｉｚｏｎ」、Ｇｒｏｚｉａｋ，Ｍ．Ｐ．；Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（２００１）８、３２１−３２８）ので、過去数年にわたって治療薬として益々注目されてきている。最も注目に値するホウ素含有治療薬は、多発性骨髄腫の処置用に最近市場に出されたボロン酸ボルテゾミブである。この飛躍的発展は、ホウ素含有化合物の医薬品としての使用実現可能性を実証した。ホウ素含有化合物は、除草剤（「Ｏｒｇａｎｉｃ  ｂｏｒｏｎ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｓ  ｈｅｒｂｉｃｉｄｅｓ」、Ｂａｒｎｓｌｅｙ，Ｇ．Ｅ．；Ｅａｔｏｎ，Ｊ．Ｋ．；Ａｉｒｓ，Ｒ．Ｓ．；（１９５７）、ＤＥ  １０１６９７８  １９５７１００３）、ホウ素中性子捕捉療法（「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｂ−１０  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｎｅｕｔｒｏｎ  Ｃａｐｔｕｒｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ」、Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｙ．；Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．、（１９９１）６３、４２３−４２６）、セリンプロテアーゼ阻害（Ｂｏｒｉｎｉｃ  ａｃｉｄ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｓ  ｐｒｏｂｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｆａｃｔｏｒｓ  ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｔ  ｔｈｅ  ａｃｔｉｖｅ  ｓｉｔｅｓ  ｏｆ  ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ  Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ  ａｎｄ  α−ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ．  Ｓｉｍｐｅｌｋａｍｐ，Ｊ．；Ｊｏｎｅｓ，  Ｊ．Ｂ．；Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，（１９９２）、２（１１）、１３９１−４；Ｄｅｓｉｇｎ，  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｂｏｒｏｎ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｔｈｒｏｍｂｉｎ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．Ｗｅｉｎａｎｄ，Ａ．；Ｅｈｒｈａｒｄｔ，Ｃ．；Ｍｅｔｔｅｒｎｉｃｈ，Ｒ．；Ｔａｐｐａｒｅｌｌｉ，Ｃ．；Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（１９９９），７、１２９５−１３０７）、アセチルコリンエステラーゼ阻害（「Ｎｅｗ，ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｄ  ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｌｋｙｌｂｏｒｉｎｉｃ  ａｃｉｄ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ」、Ｋｏｅｈｌｅｒ，Ｋ．Ａ．；Ｈｅｓｓ，Ｇ．Ｐ．；Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９７４）、１３、５３４５−５０）および抗菌剤として（「Ｂｏｒｏｎ−Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ：Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｎ  Ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｂａｃｔｅｒｉａ  Ｕｎｄｅｒ  Ｖａｒｉｏｕｓ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ」、Ｂａｉｌｅｙ，Ｐ．Ｊ．；Ｃｏｕｓｉｎｓ，Ｇ．；Ｓｎｏｗ，Ｇ．Ａ．；およびＷｈｉｔｅ，Ａ．Ｊ．；Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、（１９８０）、１７、５４９−５５３）のものを含めて、様々な生物学的活性を有することが証明���れている。抗菌活性を有するホウ素含有化合物は、２つの主要クラス、ジアザボリニン（これは１９６０年代から公知である）とジチエニルボリン酸複合体、に細分することができる。この後者のクラスは、強力な抗菌活性を有する多くの異なるジアリールボロン酸の複合体を含めるように発展された（「Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｉａｒｙｌｂｏｒｉｎｉｃ  ａｃｉｄ  ｅｓｔｅｒｓ  ａｓ  ＤＮＡ  ｍｅｔｈｙｌ  ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ」、Ｂｅｎｋｏｖｉｃ，Ｓ．Ｊ．；Ｓｈａｐｉｒｏ，Ｌ．；Ｂａｋｅｒ，Ｓ．Ｊ．；Ｗａｈｎｏｎ，Ｄ．Ｃ；Ｗａｌｌ，Ｍ．；Ｓｈｉｅｒ，Ｖ．Ｋ．；Ｓｃｏｔｔ，Ｃ．Ｐ．；Ｂａｂｏｖａｌ，Ｊ．；ＰＣＴ国際出願（２００２）、ＷＯ  ２００２０４４１８４）。
【０３１２】
前記共組成物またはカーゴ組成物は、１つ以上の同位体を有する場合もある。そのような同位体は、例えば治療薬として、検出可能物質として、または両方として有用であり得る。有用な同位体の例としては、ルテチウム−１７７（１７７Ｌｕ）、レニウム−１８８（１８８Ｒｅ）、ガリウム−６８（６８Ｇａ）、イットリウム−９０（９０Ｙ）、テクネチウム−９９ｍ（９９ｍＴｃ）、ホルミウム−１６６（１６６Ｈｏ）、ヨウ素−１３１（１３１Ｉ）、インジウム−１１１（１１１Ｉｎ）、フッ素−１８（１８Ｆ）、炭素−１１（１１Ｃ）、窒素−１３（１３Ｎ）、酸素−１５（１５Ｏ）、臭素−７５（７５Ｂｒ）、臭素−７６（７６Ｂｒ）、ヨウ素−１２４（１２４Ｉ）、タリウム−２０１（２０１Ｔｌ）、テクネチウム−９９（９９Ｔｃ）およびヨウ素−１２３（１２３Ｉ）が挙げられる。
【０３１３】
前記共組成物またはカーゴ組成物は、検出可能物質を含む場合もある。様々な検出可能物質が本開示の方法において有用である。本明細書において用いる場合、用語「検出可能物質」は、検出することができる任意の分子を指す。有用な検出可能物質としては、インビボで投与し、その後、検出することができる部分が挙げられる。本開示の組成物およびイメージング法において有用な検出可能物質としては、さらに放射性標識および蛍光分子が挙げられるが、これらに限定されない。検出可能物質は、例えば、検出（好ましくは、非侵襲的技術および／またはインビボ可視化技術によるもの）を直接または間接的に促進する任意の部分であり得る。例えば、検出可能物質は、例えば放射線技術を含む、任意の公知イメージング技術によって検出可能であり得る。検出可能物質としては、例えば造影剤を挙げることができる。前記造影剤は、例えば、フェリデックスである場合がある。いくつかの実施形態において、例えば、前記検出可能物質は、タンタル化合物を含む。いくつかの実施形態において、前記検出可能物質は、ヨウ素、例えば放射性ヨウ素を含む。いくつかの実施形態において、例えば、前記検出可能物質は、有機ヨード酸、例えば、ヨードカルボン酸、トリヨードフェノール、ヨードホルムおよび／またはテトラヨードエチレンを含む。いくつかの実施形態において、前記検出可能物質は、非放射性検出可能物質、例えば、非放射性同位体を含む。例えば、特定の実施形態では酸化鉄およびＧｄを非放射性検出可能物質として使用することができる。検出可能物質としては、放射性同位体、酵素、蛍光体および量子ドット（Ｑｄｏｔ（登録商標））も挙げることもできる。例えば、その検出部分は、酵素、ビオチン、金属またはエピトープタグである場合がある。他の公知のまたは新たに発見される検出可能マーカーは、提供する組成物と共に使用することが意図される。いくつかの実施形態において、例えば、検出可能物質は、バリウム化合物、例えば、硫酸バリウムを含む。
【０３１４】
前記検出可能物質は、１つ以上のイメージング剤である場合がある（または前記共組成物もしくはカーゴ組成物は、１つ以上のイメージング剤を含む場合がある）。イメージング剤の例としては、放射線造影剤、例えばジアトリゾ酸ナトリウム塩・二水和物、ヨウ素および硫酸バリウム、蛍光イメージング剤、例えばリサミンローダミンＰＥ、蛍光または非蛍光染色剤または色素、例えば、可視色を付与することができるものまたは、可視または他の波長、例えば赤外もしくは紫外での電磁放射線の特性スペクトルを反映するもの、例えばローダミン、放射性同位体、陽電子放出同位体、例えば１８Ｆまたは１２４Ｉ（しかし陽電子放出同位体の短い半減期が、いくらかの制限を課すことがある）、金属、強磁性化合物、常磁性化合物、例えばガドリニウム、超常磁性化合物、例えば酸化鉄、および反磁性化合物、例えば硫酸バリウムが挙げられる。イメージング剤は、選ばれたイメージング技術によって生成されるイメージの有用性を最適化するために選択される場合がある。例えば、目的の特徴、例えば胃腸ポリープ、と正常胃腸組織の間の対比を強化するためにイメージング剤を選択することができる。イメージングは、任意の適するイメージング技術、例えばＸ線、コンピュータ断層撮影法（ＣＴ）、ＭＲＩ、陽電子放出型断層撮影法（ＰＥＴ）、またはＳＰＥＣＴを用いて達成することができる。幾つかの形態において、前記共組成物またはカーゴ組成物を核医学イメージング剤、例えばインジウム−ＩＩＩもしくはテクネチウム−９９、に、またはＰＥＴイメージング剤に、またはＭＲＩイメージング剤、例えばナノ粒子、にカップリングさせることができる。
【０３１５】
イメージング技術の例としては、核磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）、コンピュータ断層撮影法（ＣＴ）、単一光子放出型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）および陽電子放出型断層撮影法（ＰＥＴ）が挙げられる。イメージング剤は、一般に、それらの用途の点で診断的であるかまたは治療的であるかのいずれかとして分類することができる。組織に対する放射線の損傷作用のため、放射性医薬品の生体内分布をできるだけ精密にターゲティングすることは有用である。ＰＥＴは、例えば陽電子放出体、例えば１８Ｆ、１１Ｃ、１３Ｎおよび１５０、７５Ｂｒ、７６Ｂｒおよび１２４Ｉ、で標識したイメージング剤を使用することができる。ＳＰＥＣＴは、例えば、単一光子放出体、例えば、２０１Ｔｌ、９９Ｔｃ、１２３Ｉおよび１３１Ｉで標識したイメージング剤を使用することができる。
【０３１６】
グルコース系およびアミノ酸系化合物がイメージング剤として使用される場合がある。アミノ酸系化合物は、それらのより速いタンパク質合成への取り込みおよび組み込みのため、腫瘍細胞を分析する際により有用である。アミノ酸系化合物のうち、１１Ｃ含有化合物および１８Ｆ含有化合物が使用に成功している。イメージングに適する１１Ｃ含有放射性同位元素標識アミノ酸としては、例えば、Ｌ−［ｌ−１１Ｃ］ロイシン（Ｋｅｅｎら、Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ．１９８９（９）：４２９−４５）、Ｌ−［ｌ−１１Ｃ］チロシン（Ｗｉｅｓｅｌら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．１９９１（３２）：２０４１−４９）、Ｌ−［メチル−１１Ｃ］メチオニン（Ｃｏｍａｒら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．１９７６（１）：１１−１４）およびＬ−［Ｉ−１１Ｃ]メチオニン（Ｂｏｌｓｔｅｒら、Ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔ．１９８６（３７）：１０６９−７０）が挙げられる。
【０３１７】
ＰＥＴは、同時計数法を用いておおよそ１１０分の半減期を有する１８Ｆ、おおよそ２０分の半減期を有する１１Ｃ、おおよそ１０分の半減期を有する１３Ｎおよびおおよそ２分の半減期を有する１５Ｏをはじめとする（しかし、これらに限定されない）、短寿命陽電子放出放射性同位体からの消滅光子の形態のガンマ線の検出を含む。ＰＥＴイメージング研究には、［１１Ｃ］メタ−ヒドロキシエフェドリン（ＨＥＤ）および２−［１８Ｆ］フルオロ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（ＦＤＧ）などの化合物を使用することができる。ＳＰＥＣＴは、おおよそ６時間の半減期を有する９９ｍＴｃおよびおおよそ７４時間の半減期を有する２０１Ｔｌをはじめとする（しかし、これらに限定されない）、より長い寿命の同位体を使用することができる。放射性ヨウ素標識メタ−ヨードベンジルグアニジン（ＭＩＢＧ）は、核医学イメージング研究において使用することができる放射性トレーサー（ｒａｄｉｏｔｒａｃｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）である。
【０３１８】
薬学的に許容され得るキャリア中の本開示ＣｅｎｄＲ組成物および共組成物およびカーゴ組成物をインビボで投与することができる。「薬学的に許容され得る」とは、生物学的にまたは別様に望ましくないものでない材料、すなわち、その材料が、一切の望ましくない生物学的作用を生じさせることなくおよびその材料が含まれる薬学的組成物の他のいずれの成分とも有害な様式で相互作用することなく、核酸およびベクターと一緒に被験体に投与することができる材料を意味する。当業者に周知であるように、前記キャリアは、当然、その活性成分の一切の分解を最小にするようにおよび被験体における一切の有害な副作用を最小にするように選択される。それらの材料は、溶液中、懸濁液中にある（例えば、マイクロ粒子、リポソームまたは細胞に組み込まれている）場合がある。
【０３１９】
前記ＣｅｎｄＲ組成物および共組成物およびカーゴ組成物は、薬学的に許容され得るキャリアと併用で治療に使用することができる。適するキャリアおよびそれらの処方物は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（第１９版）Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ  １９９５に記載されている。典型的に、適切な量の薬学的に許容され得る塩を処方の際に使用して処方物を等張性にする。薬学的に許容され得るキャリアの例としては、食塩水、リンゲル液およびデキストロース溶液が挙げられるが、これらに限定されない。溶液のｐＨは、好ましくは約５から約８、およびさらに好ましくは約７から約７．５である。さらに、キャリアは、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスであって、成形品、例えばフィルム、リポソームまたはマイクロ粒子、の形態であるマトリックスなどの、徐放性調製物を含む。特定のキャリアが、例えば投与経路および投与される組成物の濃度に依存して、より好適である場合があることは、当業者には明らかである。
【０３２０】
前記調製物をそれ自体で、または適するキャリアもしくは賦形剤との混合物である薬学的組成物で、被験体または生物に投与することができる。
【０３２１】
本明細書において用いる場合、「薬学的組成物」は、本明細書に記載する活性成分のうちの１つ以上と他の化学成分、例えば生理学的に適するキャリアおよび賦形剤との調製物を指す。薬学的組成物の目的は、被験体または生物への化合物の投与を容易にすることである。
【０３２２】
本明細書における用語「活性成分」は、生物学的効果の責任を負う調製物を指す。
【０３２３】
本明細書において用いる場合、交換可能に用いることができる句「生理学的に許容され得るキャリア」および「薬学的に許容され得るキャリア」は、被験体または生物に対して著しい刺激を生じさせないならびに投与される化合物の生物学的活性および特性を妨げないキャリアまたは希釈剤を指す。アジュバントは、これらの句に含まれる。
【０３２４】
本明細書における用語「賦形剤」は、活性成分の投与をさらに容易にするために薬学的組成物に添加される不活性物質を指す。賦形剤の、限定ではない、例としては、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖および様々なタイプのデンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油ならびにポリエチレングリコールが挙げられる。
【０３２５】
薬物の処方および投与のための技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．、最新版（これは、参照により本明細書に援用されている）において見つけることができる。
【０３２６】
任意の適する投与経路を本開示の組成物に用いることができる。適する投与経路としては、例えば、局所、経腸、局部、全身または非経口的経路を挙げることができる。例えば、投与は、皮膚上、吸入、注腸、結膜、点眼剤、点耳剤、肺胞的、鼻、鼻腔内、膣、膣内、経膣、経腸、経口、口腔内、経口腔、腸管、直腸、直腸内、経直腸、注射、注入、静脈内、動脈内、筋内、脳内、心室内、脳室内、心内、皮下、骨内、皮内、くも膜下、腹腔内、嚢内、海綿体内（ｉｎｔｒａｃａｖｅｒｎｏｓａｌ）、髄内（ｉｎｔｒａｍｅｄｕｌｌａｒ）、眼内、頭蓋内、経皮、経粘膜、経鼻、吸入、槽内、硬膜外、硬膜上、硝子体内などであり得る。本開示の組成物は、任意の他の手順において、および任意の他の手順と共に使用することができる。例えば、本開示の組成物をＨＩＰＥＣ療法の一部として投与することができる。ＨＩＰＥＣの場合、目的の組成物を含有する加熱滅菌溶液を腹腔全体にわたって継続的に循環させる。
【０３２７】
薬学的組成物は、当該技術分野で周知のプロセスによって、例えば従来の混合、溶解、顆粒化、糖衣丸作製、粉末化、乳化、カプセル化、封入または凍結乾燥プロセスによって、製造することができる。
【０３２８】
従って、本開示の方法において使用するための薬学的組成物は、製薬学的に使用することができる、前記活性成分の調製物への加工を容易にする、賦形剤と助剤を含む１つ以上の生理学的に許容され得るキャリアを使用して、従来の手法で処方することができる。妥当な処方は、選ばれる投与経路に依存する。
【０３２９】
注射のために、前記活性成分を水溶液、好ましくは生理学的に適合性の緩衝液中で、例えばハンクス溶液、リンゲル液または生理的塩緩衝液中で処方することができる。経粘膜投与のために、透過させるべきバリアに適する浸透剤をその処方において使用する。そのような浸透剤は、当該技術分野において一般に公知である。
【０３３０】
経口投与のための化合物は、その活性化合物を当該技術分野において周知の薬学的に許容され得るキャリアと組み合わせることにより、容易に処方することができる。そのようなキャリアにより、前記化合物を患者による経口摂取のための錠剤、ピル、糖衣丸、カプセル、液剤、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液およびこれらに類するものとして処方することができる。経口使用のための薬理学的調製物は、固体賦形剤を使用し、必要に応じてその得られた混合物を粉砕し、所望される場合には適する助剤の添加後にその顆粒混合物を加工して錠剤または糖衣丸コアを得ることにより、作製することができる。適する賦形剤は、特に、増量剤、例えば糖（ラクトース、スクロース、マンニトールもしくはソルビトールを含む）；セルロース調製物、例えばトウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、馬鈴薯デンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムなど；および／または生理学的に許容され得るポリマー、例えばポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）である。所望される場合には、崩壊剤、例えば架橋ポリビニルピロリドン、寒天またはアルギン酸もしくはその塩、例えばアルギン酸ナトリウムを添加することができる。
【０３３１】
糖衣丸コアに適するコーティングを施す。このために、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、二酸化チタン、ラッカー溶液および適する有機溶媒または溶媒混合物を必要に応じて含有し得る濃縮糖溶液を使用することができる。活性化合物用量の識別または活性化合物用量の異なる組み合わせの特徴づけのために、染料または色素を錠剤または糖衣丸コーティングに添加することができる。
【０３３２】
経口使用することができる薬学的組成物としては、ゼラチンで作られたプッシュ−フィットカプセル、ならびにゼラチンおよび可塑剤、例えばグリセロールまたはソルビトール、で作られた軟質密閉カプセルが挙げられる。プッシュ−フィットカプセルは、ラクトースなどの増量剤、デンプンなどの結合剤、タルクまたはステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、および必要に応じて安定剤との混合物の状態で、前記活性成分を含有することがある。軟カプセルの場合、前記活性成分を適する液体、例えば脂肪油、流動パラフィンまたは液体ポリエチレングリコールに溶解または懸濁させることがある。加えて、安定剤を添加する場合がある。経口投与のためのすべての処方物は、選ばれた投与経路に適する投薬量でなければならない。
【０３３３】
口腔投与のために、前記組成物は、従来の手法で処方された錠剤またはロゼンジの形態をとる場合がある。
【０３３４】
鼻吸入による投与のために、本開示の方法において使用するための活性成分は、適する噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロ−テトラフルオロエタンまたは二酸化炭素、の使用で、加圧パックまたはネブライザーからのエーロゾルスプレー提示の形態で従来どおり送達することができる。加圧エーロゾルの場合、計量された量を送達するための弁を設けることにより投薬単位を決定することができる。前記化合物と適する粉末基剤、例えばラクトースまたはデンプン、との粉末混合物を含有する、ディスペンサーにおいて使用するための、例えばゼラチンの、カプセルおよびカートリッジを処方することができる。
【０３３５】
本明細書に記載する調製物を、例えばボーラス注射または持続注入による、非経口投与用に処方することができる。注射用の処方物を、例えば必要に応じて保存剤を添加したアンプルまたは複数回投与用容器内の、単位剤形で提供することができる。前記組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液またはエマルジョンである場合があり、ならびに処方剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔ）、例えば懸濁剤、安定剤および／または分散剤を含有する場合がある。
【０３３６】
非経口投与のための薬学的組成物は、水溶性形態の活性調製物の水溶液を含む。加えて、前記活性成分の懸濁液を、適切な油性または水性注射用懸濁液として調製することができる。適する親油性溶媒またはビヒクルとしては、脂肪油、例えばゴマ油、または合成脂肪酸エステル、例えばオレイン酸エチル、トリグリセリドまたはリポソームが挙げられる。水性注射用懸濁液は、懸濁液の粘度を増加させる物質、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトールまたはデキストランを含有する場合がある。必要に応じて、前記懸濁液は、適する安定剤、または高濃度溶液の調製を可能にするために前記活性成分の溶解度を増加させる薬剤を含有することもある。
【０３３７】
あるいは、前記活性成分は、使用前に適するビヒクル、例えば滅菌、発熱物質不含水性溶液、で構成するための粉末形態である場合がある。
【０３３８】
前記調製物は、例えばカカオ脂または他のグリセリドなどの従来の坐剤基剤を使用して、坐剤または停留浣腸などの直腸用組成物で処方することもできる。
【０３３９】
本開示の組成物は、任意の適する処方物で提供することができる。例えば、固体、液体、溶液、ゲル、パッチ、緩徐放出、持効性（ｔｉｍｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）のものなど。
【０３４０】
本開示の方法において使用するための薬学的組成物は、意図した目的を達成するために有効な量の活性成分を含有する組成物を含む。より具体的には、治療有効量は、疾患の症状を予防する、緩和するもしくは改善するためにまたは処置を受ける被験体の生存を延長するために有効な活性成分の量を意味する。
【０３４１】
治療有効量の決定は、とりわけ本明細書に提供する詳細な開示にかんがみて、十分に当業者の能力の範囲内である。
【０３４２】
本開示の方法において使用されるいずれの調製物についても、その治療有効量または用量は、最初にインビトロおよび細胞培養アッセイから推定することができる。例えば、動物モデルにおいて用量を処方して、所望の循環抗体濃度または力価を達成することができる。そのような情報を用いて、ヒトにおいて有用な用量をより正確に決定することができる。
【０３４３】
本明細書に記載する活性成分の毒性および治療有効性は、インビトロでの標準的な製薬学的手順によって、細胞培養物または実験動物において、決定することができる。これらのインビトロおよび細胞培養アッセイならびに動物研究から得たデータを、人間において使用するための範囲の投薬量を処方することにおいて使用することができる。この投薬量は、利用する剤形および利用する投与経路に依存して変わり得る。正確な処方、投与経路および投薬量は、患者の状態を考慮して個々の医師が選択できる。（例えば、ＦｉｎｇｌらのＴｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第１章、１頁（１９７５）を参照のこと）。
【０３４４】
投薬量および投薬間隔を個々に調整して、ウイルス侵入を予防または低減するために十分（最小有効濃度、ＭＥＣ）である抗体を有する血漿を得ることができる。ＭＥＣは、それぞれの調製物について異なるが、インビトロデータから推定することができる。ＭＥＣを達成するために必要な投薬量は、個体の特徴および投与経路に依存する。結合アッセイを用いて、血漿濃度を決定することができる。
【０３４５】
ＭＥＣ値を用いて投薬間隔も決定することができる。１０〜９０％、好ましくは３０〜９０％の間、および最も好ましくは５０〜９０％の時間にわたってＭＥＣを上回る血漿レベルを維持するレジメンを用いて、調製物を投与すべきである。
【０３４６】
処置すべき状態の重症度および応答性に依存して、数日から数週間または治癒が果たされるもしくは疾病状態の減弱が達成されるまで続く処置コースで、投薬は、単回投与または複数回投与のものである場合がある。
【０３４７】
投与すべき組成物の量は、勿論、処置する被験体、その苦痛の重度、投与の仕方、処方する医師の判断などに依存する。
【０３４８】
本開示のＣｅｎｄＲ組成物および共組成物およびカーゴ組成物にコンジュゲートさせることができる脂肪酸（すなわち脂質）としては、リポソームへのペプチドの効率的な取り込みを可能にする脂肪酸が挙げられる。一般に、前記脂肪酸は、極性脂質である。従って、前記脂肪酸は、リン脂質である場合がある。提供する組成物は、天然リン脂質または合成リン脂質のいずれかを含む場合がある。前記リン脂質は、飽和一置換脂肪酸または飽和二置換脂肪酸または不飽和一置換脂肪酸または不飽和二置換脂肪酸およびこれらの組み合わせを含有するリン脂質から選択することができる。これらのリン脂質は、例えば、
ジオレオイルホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルセリン、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、ジオレオイルホスファチジルグリセロール、ジオレオイルホスファチジン酸、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン、パルミトイルオレオイルホスファチジルセリン、パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン、パルミトイルオレオイルホスファチジルグリセロール、パルミトイルオレオイルホスファチジン酸、パルミトエライドイルオレオイルホスファチジルコリン（ｐａｌｍｉｔｅｌａｉｄｏｙｌｏｌｅｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）、パルミトエライドイルオレオイルホスファチジルセリン、パルミトエライドイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン、パルミトエライドイルオレオイルホスファチジルグリセロール、パルミトエライドイルオレオイルホスファチジン酸、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルコリン、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルセリン、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ｍｙｒｉｓｔｏｌｅｏｙｌｏｌｅｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏａｍｉｎｅ）、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルグリセロール、ミリストレオイルオレオイルホスファチジン酸、ジリノレオイルホスファチジルコリン、ジリノレオイルホスファチジルセリン、ジリノレオイルホスファチジルエタノールアミン、ジリノレオイルホスファチジルグリセロール、ジリノレオイルホスファチジン酸、パルミチクリノレオイルホスファチジルコリン（ｐａｌｍｉｔｉｃｌｉｎｏｌｅｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）、パルミチクリノレオイルホスファチジルセリン、パルミチクリノレオイルホスファチジルエタノールアミン、パルミチクリノレオイルホスファチジルグリセロール、パルミチクリノレオイルホスファチジン酸であり得る。これらのリン脂質は、ホスファチジルコリンのモノアシル化誘導体（リゾホスファチジルコリン（ｌｙｓｏｐｈｏｐｈａｔｉｄｙｌｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ））、ホスファチジルセリンのモノアシル化誘導体（リゾホスファチジルセリン）、ホスファチジルエタノールアミンのモノアシル化誘導体（リゾホスファチジルエタノールアミン）、ホスファチジルグリセロールのモノアシル化誘導体（リゾホスファチジルグリセロール）およびホスファチジン酸のモノアシル化誘導体（リゾホスファチジン酸）であることもある。これらのリゾホスファチジル誘導体中のモノアシル鎖は、パルミトイル、オレオイル、パルミトレオイル、リノレオイルミリストイルまたはミリストレオイルであり得る。前記リン脂質は、合成のものである場合もある。合成リン脂質は、ＡＶＡＮＴＩ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ（Ａｌｂａｓｔｅｒ，Ａｌａ．）；Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．）などの様々な供給業者から容易に商業的に入手することができる。これらの合成化合物は、様々であり得、および自然に存在するリン脂質では見られない変異をそれらの脂肪酸側鎖に有し得る。前記脂肪酸は、ＰＳまたはＰＣのいずれかまたは両方においてＣ１４、Ｃ１６、Ｃ１８またはＣ２０鎖長を有する不飽和脂肪酸側���を有する場合がある。合成リン脂質は、ジオレオイル（１８：１）−ＰＳ；パルミトイル（１６：０）−オレオイル（１８：１）−ＰＳ、ジミリストイル（１４：０）−ＰＳ；ジパルミトレオイル（１６：１）−ＰＣ、ジパルミトイル（１６：０）−ＰＣ、ジオレオイル（１８：１）−ＰＣ、パルミトイル（１６：０）−オレオイル（１８：１）−ＰＣ、およびミリストイル（１４：０）−オレオイル（１８：１）−ＰＣを構成要素として有する場合がある。従って、一例として、提供する組成物は、パルミトイル１６：０を含む場合がある。
【０３４９】
前記共組成物またはカーゴ組成物は、マイクロ粒子またはナノ粒子、例えばナノスフェア、ナノシェル、ナノワーム、発熱性ナノシェルおよびこれらに類するものである場合がある。本明細書において用いる場合、「ナノシェル」は、１つ以上の導電性シェル層により囲まれた個別の誘電コア部分または半導体コア部分を有するナノ粒子である。米国特許第６，５３０，９４４号は、金属ナノシェルの作製方法および使用方法のその教示についてその全体が参照により本明細書に援用されている。ナノシェルは、例えば、近赤外光（おおよそ８００から１３００ｎｍ）などの放射線を使用して励起させることができる高導電性金属などの材料で被覆された、ケイ素などの誘電材料または不活性材料のコアを用いて形成することができる。励起すると、ナノシェルは発熱する。結果として生ずる高熱は、周囲の細胞（複数可）または組織を死滅させることができる。ナノシェルのシェルおよびコアの合わせた直径は、数十ナノメートルから数百ナノメートルにわたる。近赤外光は、組織に浸透することができるという点で有利である。ナノ粒子被覆剤および標的となる細胞の選択に依存して他のタイプの照射も用いることができる。例としては、Ｘ線、磁場、電場および超音波が挙げられる。前記粒子を使用して、特に赤外拡散光子イメージング法を用いて、イメージングを向上させることもできる。ターゲティング分子は、抗体またはそれらのフラグメント、特定の受容体のリガンド、または標的となる細胞の表面に特異的に結合する他のタンパク質である場合がある。
【０３５０】
他の分子、エレメント、部分などを、例えば本開示の共組成物、カーゴ組成物、ＣｅｎｄＲ組成物、タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列またはＣｅｎｄＲエレメントと、共有結合で連結または非共有結合で会合させることができる。そのような分子、エレメント、部分などを、例えば、本開示のタンパク質、ペプチド、アミノ酸配列もしくはＣｅｎｄＲエレメントのアミノ末端に；本開示のタンパク質、ペプチド、アミノ酸配列もしくはＣｅｎｄＲエレメントの内部アミノ酸に；本開示のタンパク質、ペプチド、アミノ酸配列もしくはＣｅｎｄＲエレメントのカルボキシ末端に；前記ＣｅｎｄＲエレメントのＮ末端側のタンパク質、ペプチド、アミノ酸配列に；リンカーにより本開示のタンパク質、ペプチド、アミノ酸配列もしくはＣｅｎｄＲエレメントに；または組み合わせに連結させることができる。本開示のＣｅｎｄＲ組成物は、そのような分子、エレメント、部分などと開示するＣｅｎｄＲ組成物、タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列またはＣｅｎｄＲエレメントを接続するリンカーをさらに含む場合がある。本開示のＣｅｎｄＲ組成物、タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列またはＣｅｎｄＲエレメントは、該タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列またはＣｅｎｄＲエレメントでナノ粒子、ナノワームナノシェルおよびこれらに類するものを被覆するために使用することができるコーティング分子、例えばウシ血清アルブミン（ＢＳＡ；Ｔｋａｃｈｅｎｋｏら、（２００３）Ｊ  Ａｍ  Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ、１２５、４７００−４７０１参照）にコンジュゲートさせることもできる。
【０３５１】
本開示の共組成物、カーゴ組成物、ＣｅｎｄＲ組成物、タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列などに他の分子、エレメント、部分などを架橋させるために用いることができるタンパク質架橋剤は、当該技術分野において公知であり、有用性および構造に基づいて定義されており、それらとしては、ＤＳＳ（ジスクシンイミジルスベラート）、ＤＳＰ（ジチオビス（スクシンイミジルプロピオナート））、ＤＴＳＳＰ（３，３’−ジチオビス（スルホスクシンイミジルプロピオナート））、ＳＵＬＦＯ  ＢＳＯＣＯＥＳ（ビス［２−（スルホスクシンイミドオキシカルボニルオキシ）（ｓｕｌｆｏｓｕｃｃｉｎｉｍｄｏｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌｏｘｙ）エチル］スルホン）、ＢＳＯＣＯＥＳ（Ｂｉｓ［２−（スクシンイミドオキシカルボニルオキシ）（ｓｕｃｃｉｎｉｍｄｏｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌｏｘｙ）エチル］スルホン）、ＳＵＬＦＯ  ＤＳＴ（ジスルホスクシンイミジルタータラート）（Ｄｉｓｕｌｆｏｓｕｃｃｉｎｉｍｄｙｌｔａｒｔｒａｔｅ）、ＤＳＴ（ジスクシンイミジルタータラート）（Ｄｉｓｕｃｃｉｎｉｍｄｙｌｔａｒｔｒａｔｅ）、ＳＵＬＦＯ  ＥＧＳ（エチレングリコールビス（スクシンイミジルスクシナート））、ＥＧＳ（エチレングリコールビス（スルホスクシンイミジルスクシナート））、ＤＰＤＰＢ（ｌ，２−ジ［３’−（２’−ピリジルジチオ）プロピオンアミド]ブタン）、ＢＳＳＳ（ビス（スルホスクシンイミジル（ｓｕｌｆｏｓｕｃｃｉｎｉｍｄｙｌ））スベラート）、ＳＭＰＢ（スクシンイミジル（Ｓｕｃｃｉｎｉｍｄｙｌ）−４−（ｐ−マレイミドフェニル）ブチラート）、ＳＵＬＦＯ  ＳＭＰＢ（スルホスクシンイミジル（Ｓｕｌｆｏｓｕｃｃｉｎｉｍｄｙｌ）−４−（ｐ−マレイミドフェニル）ブチラート）、ＭＢＳ（３−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）、ＳＵＬＦＯ  ＭＢＳ（３−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル）、ＳＩＡＢ（Ｎ−スクシンイミジル（４−ヨードアセチル）アミノベンゾアート）、ＳＵＬＦＯ  ＳＩＡＢ（Ｎ−スルホスクシンイミジル（４−ヨードアセチル）アミノベンゾアート）、ＳＭＣＣ（スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシラート）、ＳＵＬＦＯ  ＳＭＣＣ（スルホスクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシラート）、ＮＨＳ  ＬＣ  ＳＰＤＰ（スクシンイミジル−６−［３−（２−ピリジルジチオ）プロピオンアミド）ヘキサノアート）、ＳＵＬＦＯ  ＮＨＳ  ＬＣ  ＳＰＤＰ（スルホスクシンイミジル−６−［３−（２−ピリジルジチオ）プロピオンアミド）ヘキサノアート）、ＳＰＤＰ（Ｎ−スクシンイミジル（Ｓｕｃｃｉｎｉｍｄｙｌ）−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオナート）、ＮＨＳ  ＢＲＯＭＯＡＣＥＴＡＴＥ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルブロモアセタート）、ＮＨＳ  ＩＯＤＯＡＣＥＴＡＴＥ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルヨードアセタート）、ＭＰＢＨ（４−（Ｎ−マレイミドフェニル）酪酸ヒドラジド塩酸塩）、ＭＣＣＨ（４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸ヒドラジド塩酸塩）、ＭＢＨ（ｍ−マレイミド安息香酸ヒドラジド塩酸塩���、ＳＵＬＦＯ  ＥＭＣＳ（Ｎ−（イプシロン−マレイミドカプロイルオキシ）スルホスクシンイミド）、ＥＭＣＳ（Ｎ−（イプシロン−マレイミドカプロイルオキシ）スクシンイミド）、ＰＭＰＩ（Ｎ−（ｐ−マレイミドフェニル）イソシアナート）、ＫＭＵＨ（Ｎ−（カッパ−マレイミドウンデカン酸）ヒドラジド）、ＬＣ  ＳＭＣＣ（スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシ（６−アミドカプロアート））、ＳＵＬＦＯ  ＧＭＢＳ（Ｎ−（ガンマ−マレイミドブチルオキシ）（ｇａｍｍａ−Ｍａｌｅｉｍｉｄｏｂｕｔｒｙｌｏｘｙ）−スルホスクシンイミドエステル）、ＳＭＰＨ（スクシンイミジル−６−（ベータ−マレイミドプロピオンアミドヘキサノアート））、ＳＵＬＦＯ  ＫＭＵＳ（Ｎ−（カッパ−マレイミドウンデカノイルオキシ）スルホスクシンイミドエステル）、ＧＭＢＳ（Ｎ−（ガンマ−マレイミドブチルオキシ（ｇａｍｍａ−Ｍａｌｅｉｍｉｄｏｂｕｔｙｒｌｏｘｙ）スクシンイミド）、ＤＭＰ（ピメルイミド酸ジメチル塩酸塩）、ＤＭＳ（スベルイミド酸ジメチル塩酸塩）、ＭＨＢＨ（ウッド試薬；ｐ−ヒドロキシベンズイミド酸メチル塩酸塩、９８％）、ＤＭＡ（アジプイミド酸ジメチル塩酸塩）が挙げられる。
【０３５２】
共組成物またはカーゴ組成物の成分を、例えばマレイミドカップリングを用いて、カップリングさせることもできる。実例として、成分を、該成分上の遊離システインスルフヒドリル基を使用することにより例えば１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［マレイミド（ポリエチレングリコール）２０００；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２０００−マレイミド］（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄ）に、カップリングさせることによって、脂質にカップリングさせることができる。この反応は、例えば、水溶液中、室温で４時間行うことができる。このカップリング化学反応を用いて、共組成物およびカーゴ組成物の成分をカップリングさせることができる。
【０３５３】
本開示の化合物、成分および組成物を、例えばアミノ基官能化デキストラン化学反応を用いて、カップリングさせることもできる。例えばナノ粒子、ナノワームおよびミセルなどの粒子をアミノ基官能化デキストランで被覆することができる。アミノ化粒子へのＰＥＧの結合は、循環時間を増加させるが、これは、おそらくオプソニン作用に関与する血漿タンパク質の結合が低減することによる（Ｍｏｇｈｉｍｉら、２００１）。前記粒子、例えば、細網内皮系回避（ＰＥＧ）およびホーミング（ホーミング分子）、エンドソーム脱出（ｐＨ感受性ペプチド；例えば、Ｐｉｒｅｌｌｏら、２００７）、検出可能物質、治療用化合物、または組み合わせのためのものは、表面修飾を有する場合がある。１つの粒子にこれらすべての機能を持たせるために、最適化研究を行って、該粒子の表面の利用可能な連結部位のいかなる割合が、ターゲティングおよびペイロード送達の最良の組み合わせをもたらすかを決定することができる。そのような共組成物およびカーゴ組成物の細胞内部移行および／または組織浸透を本開示のＣｅｎｄＲエレメント、アミノ酸配列、ペプチド、タンパク質、分子、コンジュゲートおよび組成物が媒介できる。
【０３５４】
任意の公知技術または本明細書に記載する技術を用いて、本明細書に開示されているように、前記ＣｅｎｄＲエレメント、アミノ酸配列、ペプチド、タンパク質、分子、コンジュゲートおよび組成物それら自体を他の成分にカップリングさせることができる（しかし、一般に、本明細書中の他の箇所で説明するように、本開示の共組成物にはできない）。本開示のＣｅｎｄＲエレメントを環式ペプチドにおいて使用することができる。そのような環式ペプチドの他の成分へのカップリングを可能にするために、選択的側鎖基（ｓｉｄｅ  ｇｒｏｕｐ）保護を用いて、遊離スルフヒドリル基を提供する余分のシステインを有する環式ペプチドを合成することができる。これらのペプチドは、ジスルフィド結合のスクランブリングが検出できないほど安定している。マレイミド官能基もカップリング基として使用することができる。これらの化学的性質を用いて、ＣｅｎｄＲエレメント、アミノ酸配列、ペプチド、タンパク質、分子、コンジュゲートおよび組成物を互いにおよび他の成分にカップリングさせることができる。
【０３５５】
例えばマレイミドカップリングを用いて、ＣｅｎｄＲエレメント、アミノ酸配列、ペプチドおよびタンパク質を他の成分にカップリングさせることができる。実例として、ＣｅｎｄＲエレメント、アミノ酸配列、ペプチドおよびタンパク質を、該ＣｅｎｄＲエレメント、アミノ酸配列、ペプチドまたはタンパク質の遊離システインスルフヒドリル基を用いることにより例えば１，２−ジステアオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［マレイミド（ポリエチレングリコール）２０００；ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２０００−マレイミド］（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｓ）に、カップリングさせることによって、脂質にカップリングさせることができる。この反応は、例えば、水溶液中、室温で４時間行うことができる。このカップリング化学反応を用いて、本開示のＣｅｎｄＲエレメント、アミノ酸配列、ペプチドおよびタンパク質を多くの他の成分、分子および組成物にカップリングさせることができる。
【０３５６】
「処置」は、疾患、病態または障害を治癒する、改善する、安定させるまたは予防する意図での患者の医学的管理を意味する。この用語は、積極的治療、すなわち、具体的に疾患、病態または障害の改善に向けられた処置を含み、原因治療、すなわち、関連疾患、病態または障害の原因の除去に向けられた処置も含む。加えて、この用語は、待機療法、すなわち、疾患、病態または障害の治癒ではなく症状の軽減のために計画された処置；予防的処置、すなわち、関連疾患、病態または障害の発生を最小にするまたは部分的にもしくは完全に抑制することに向けられた処置；および支持的処置、すなわち、関連疾患、病態または障害の改善に向けられた別の特定の療法を補うために用いられる処置を含む。
【０３５７】
本明細書において用いる場合、「被験体」は、動物、植物、細菌、ウイルス、寄生虫および任意の他の生物または核酸を有する実体を含むが、これらに限定されない。被験体は、脊椎動物、より具体的には、哺乳類（例えば、ヒト、ウマ、ブタ、ウサギ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、非ヒト霊長類、ウシ、ネコ、モルモットもしくは齧歯動物）、魚類、鳥類または爬虫類または両生類であり得る。特に、ペットおよび家畜は被験体となる場合がある。被験体は、非脊椎動物、例えば、蠕虫または節足動物（例えば昆虫および甲殻類）である場合がある。この用語は、特定の年齢または性を示さない。従って、雄性であろうと雌性であろうと、成体および新生の被験体、ならびに胎仔を包含することを意図したものである。患者は、疾患または障害に罹患している被験体を指す。用語「患者」は、ヒトおよび獣医学的被験体を含む。子宮内膜症および子宮内膜症細胞の文脈において、被験体は、子宮内膜症および／または子宮内膜症細胞を有するまたは有することができる被験体であると解される。
【０３５８】
腫瘍浸透性ＣｅｎｄＲペプチドは、腫瘍イメージングおよび抗癌薬での腫瘍処置を増やすために使用することができる。イメージングに対するＣｅｎｄＲペプチドの効果を試験することができる。例えば、光学イメージング、例えばＫｏｄａｋ  ＩＮ  ＶＩＶＯ  Ｆｘ  ｉｍａｇｅｒおよびＬｉ−Ｃｏｒ  Ｏｄｙｓｓｅｙ  ｉｍａｇｅｒを使用する近赤外蛍光体での光学イメージング（例えば、Ｓｉｍｂｅｒｇら、２００７；Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９）、およびＭＲＩイメージングを用いることができる。ＭＲＩイメージングのために、前記共組成物またはカーゴ組成物は、Ｆｅｒｉｄｅｘ酸化鉄ナノ粒子およびガドリニウム化合物などのＭＲＩ造影剤である場合がある。これらの化合物を、腫瘍を有するマウスに、腫瘍ホーミングＣｅｎｄＲペプチドまたはペプチドの組み合わせと共にまたは無しで注射し、その後、画像化する。それらの結果を用いて、処置の有効性を決定すること、および共組成物またはカーゴ組成物として治療薬を伴うＣｅｎｄＲペプチドの使用について種々の処置プロトコルを評価することができる。
【０３５９】
種々のＣｅｎｄＲペプチドと種々の共組成物および／またはカーゴ組成物の組み合わせを、例えば、薬物の用量を変えることおよび最大効果をもたらすペプチドの用量を使用することにより、該共組成物またはカーゴ組成物の標的細胞および標的組織への最適な蓄積よび分布について試験することができる。開示する結果は、ＣｅｎｄＲ−薬物の組み合わせが、同じ抗腫瘍効果を生じさせながら、必要とされる薬物の量を減量することができ、これによって副作用を低減できることを示している。ＣｅｎｄＲペプチドは、共組成物またはカーゴ組成物を単独で使用することにより達成できなかった効果を生じさせることもできる。例えば、ＣｅｎｄＲペプチドの使用は、別様に可能である細胞および組織における共組成物またはカーゴ組成物のより高い濃度を可能にすることができる。そのような場合、共組成物またはカーゴ組成物の有効性は、従来の療法で得ることができる有効性を超え得る。
【０３６０】
２００９年１月１９日出願の米国特許出願第１２／３５５，６７２号および２００９年２月２０日出願の同第１２／３９０，０６１号は、それら全体が、特にｉＲＧＤペプチドならびにＣｅｎｄＲエレメント、ペプチドおよびコンジュゲートのそれらの開示について、参照により本明細書に援用されている。
【実施例】
【０３６１】
本明細書において請求する化合物、組成物、物品、デバイスおよび／または方法をどのようにして作製および評価するかの完全な開示および記載を当業者に提供するために以下の実施例を示す。本実施例は、純粋に例示を意図したものであり、本開示を限定することを意図したものではない。数字（例えば、量、温度など）に関しては確実に正確であるように努めたが、幾分かの誤差および偏差が考慮されるべきである。別様に示していない限り、部は重量部であり、温度は℃でのものであるかまたは周囲温度であり、圧力は大気圧またはほぼ大気圧である。
【０３６２】
Ａ．実施例１：ＣｅｎｄＲペプチドによって媒介される共組成物の細胞内部移行および組織浸透
血管漏出を生じさせる（ならびに従って、共組成物の細胞内部移行および組織浸透を増強する）全身投与されたＣｅｎｄＲペプチドの能力を実証するために、オリゴマーＲＰＡＲＰＡＲ−ニュートラアビジン複合体（配列番号２）を静脈内注射し、同時注入トレーサーファージの組織分布を決定した。このアッセイでは、血液が灌流によって除去され、トレーサーファージをはじめとする血管外遊出血液成分が組織内に残る。オリゴマー対照ペプチドではなく、オリゴマーＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）は、ファージ粒子の血管外遊出増加に即して、肺および他の器官内での前記ファージの滞留増加を生じさせた（図２）。これらのデータは、ＲＰＡＲＰＡＲペプチドが、結合させた両方のペイロードの組織浸透を促進することができ、および投与されたかまたは存在する共組成物などの高分子の侵入を可能にするように組織を透過性を上げることができることを示している。
【０３６３】
Ｂ．実施例２：ホーミングＣｅｎｄＲペプチドを使用する腫瘍浸透および透過性増加
図３は、ｉＲＧＤと呼ばれる腫瘍ホーミングＲＧＤペプチド（配列：ＣＲＧＤＫ／ＲＧＰＤ／ＥＣ；配列番号６１）に当てはめた場合の、ＣｅｎｄＲシステムの原理を図示するものである。ｉＲＧＤ内の２つのモチーフは、腫瘍内皮上のαｖインテグリンへのペプチドの結合を媒介するＲＧＤモチーフ（Ｒｏｕｓｌａｈｔｉ、２００２）と、潜在ＣｅｎｄＲ配列ＲＧＤＫ（またはＲＧＤＲ；配列番号２２９）である。ＲＧＤホーミング配列は、ペプチドを腫瘍内皮（脈管形成性血管系はαｖインテグリンを発現する）に向かわせ、そこでペプチドは、ＣｅｎｄＲモチーフがＣ末端になり活性になるように、内因性プロテアーゼによるタンパク質分解プロセッシングを受ける。その後、その活性化されたＣｅｎｄＲモチーフは、そのＣ末端トランケート型ペプチド（およびそれに結合させた任意のペイロード）の血管外遊出、腫瘍浸透および細胞侵入を媒介する異なる受容体（ニューロピリン−１；Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９；２００９年１月１９日出願の米国特許第１２／３５５，６７２号）に結合する。細胞内からのｉＲＧＤの予測Ｎ末端フラグメントの単離を含む、これらの段階のそれぞれが、生化学実験において実証されている（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９：２００９年２月２０日出願の米国特許出願第１２／３９０，０６１号）。この複数段階ホーミングおよび組織浸透プロセスは、受容体結合のみに頼るペプチドおよび他のプローブよりＣｅｎｄＲをさらに特異的にする。ニューロピリン−１は、様々な種類の細胞において広く発現されるが、多くの場合、腫瘍のほうが正常組織より高いレベルでこのタンパク質を発現する。
【０３６４】
ｉＲＧＤの顕著な腫瘍浸透特性は、図４において例証されており、ここではｉＲＧＤとｉＲＧＤの親和性に類似した親和性でαｖインテグリンに結合する（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９）がＣｅｎｄＲモチーフを欠く２つのＲＧＤペプチドを比較している。
【０３６５】
ＣｅｎｄＲモチーフは、幾つかのタンパク質のＣ末端に存在する。血管内皮成長因子の代替形態の１つ、ＶＥＧＦ−１６５、は、エキソン８によりコードされたそのＣ末端のＣｅｎｄＲ様配列（ＣＲＣＤＫＰＲＲ；配列番号９５）を用いてＮＲＰ−１に結合する。幾つかのペプチド、例えばＡ７Ｒ（ＡＴＷＬＰＰＲ；配列番号９６）、免疫調節性ペプチドタフトシン（ＴＫＰＲ；配列番号９７）およびその変異体強化タフトシン（ＴＫＰＰＲ；配列番号９８）もＮＲＰ−１の同じ部位に結合する（Ｇｅｒｅｔｔｉら、２００８）。Ｃ末端ＣｅｎｄＲモチーフも含有しこの部位に結合するセマホリン３Ａは、血管透過性を向上させる（Ａｃｅｖｅｄｏら、２００８）。幾つかの腫瘍浸透性ペプチドは、これらの化合物の血管透過性効果を再現する。この効果は、標的細胞表面での蓄積およびタンパク質分解性活性化を必要とするので、腫瘍特異的である場合がある。
【０３６６】
ホメオドメイン転写因子、例えば、アンテナペディア、単純疱疹ウイルス−１タンパク質ＶＰ２２、およびヒト免疫不全ウイルス−１トランスアクチベータＴＡＴタンパク質、が細胞内に内部移行することは公知である。これらのタンパク質に由来する短鎖カチオン性細胞浸透性ペプチドは、内部移行するそれらの能力を保持する。しかし、これらのペプチドは、そのペプチド内のアミノ酸のキラリティーに依存する点、活性に細胞表面ヘパラン硫酸塩を必要とする点（本発明者らのペプチドは必要としない）、および組織浸透活性が割り当てられていない点（Ｌａｎｇｅｌ、２００７）で、本開示のＣｅｎｄＲペプチドとは異なる。
【０３６７】
ファージスクリーンからの腫瘍ホーミングペプチド内の潜在ＣｅｎｄＲ配列。ｉＲＧＤに加えて、多数の他のホーミングペプチドがＣｅｎｄＲエレメントを含有する。これらのペプチドとしては、ＫＲＴＲ配列（配列番号１００；Ｌａａｋｋｏｎｅｎら、２００２、２００４）を含有するＬｙＰ−１（ＣＧＮＫＲＴＲＧＣ；配列番号９９）、およびＲＧＲＲを伴うＣＲＧＲＲＳＴ（配列番号１０１および１０２；Ｊｏｙｃｅら、２００３）が挙げられる。ｉＲＧＤと同様に、これらのペプチドのＣｅｎｄＲモチーフは、Ｃ末端ではない。タンパク質分解プロセッシングがＣｅｎｄＲモチーフを活性化するために必要とされることを発見された。実際、トリプシンでのｉＲＧＤファージまたはＬｙＰ−１ファージの処理は、ＰＰＣ１細胞上のニューロピリン−１への該ファージの結合を増強させた。トリプシンは、非ＣｅｎｄＲペプチドＣＲＧＤＣ（配列番号３６）およびＲＧＤ−４Ｃに対しては効果がなかった。Ｌｙｐ−１は、血管から遠い腫瘍内の低酸素／低栄養領域にホーミングし、ナノ粒子サイズのペイロードをこれらの位置に送達する（Ｌａａｋｋｏｎｅｎら、２００２、２００４；Ｋａｒｍａｌｉら、２００９）。従って、ＬｙＰ−１は、腫瘍浸透性ＣｅｎｄＲペプチドである。
【０３６８】
ｉＲＧＤは腫瘍における血管透過性を向上させる。ｉＲＧＤの腫瘍浸透特性が、腫瘍における血管透過性を増加させる能力を含むことを発見した。腫瘍を有するマウスにエバンスブルー、血管透過性研究に一般に用いられるアルブミン結合色素を注射し、その後、ｉＲＧＤペプチドを注射した。図５に示すように、ｉＲＧＤは、腫瘍への色素の漏出を対照ペプチドより多く生じさせ、この漏出は、腫瘍組織に対して特異的であり、ＣｅｎｄＲモチーフを含有しないＲＧＤペプチドによって惹起されなかった。腫瘍転移を含む４つの腫瘍タイプを、ばらつきのない結果を伴う複数の実験で、試験した。ＮＲＰ−１に対する阻害抗体を使用することにより血管透過性に対するＲＧＤの効果を遮断する実験によって、血管漏出へのＣｅｎｄＲシステムの関与を実証した。
【０３６９】
ｉＲＧＤは腫瘍への酸化鉄ナノ粒子侵入を増強する。臨床使用されているＭＲＩ造影剤、おおよそ１５０ｎｍの直径を有する常磁性、デキストラン被覆酸化鉄ナノ粒子であるＦｅｒｉｄｅｘ、を腫瘍マウスに注射することにより、腫瘍へのナノ粒子侵入を試験した。ＦｅｒｉｄｅｘとｉＲＧＤの併用は、結果として、腫瘍においてＦｅｒｉｄｅｘ単独より強いＭＲＩコントラストを生じさせた。
【０３７０】
ｉＲＧＤは組織浸透を誘導する。血管から遠隔の腫瘍組織へのｉＲＧＤおよびＬｙＰ−１の迅速な浸透（Ｌａａｋｋｏｎｅｎら、２００４；Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９）は、ｉＲＧＤが、血管外遊出の促進に加えて、実質腫瘍組織を通っての輸送を増加させることができることを示した。これを実証するために、ファージを含有する培養基中で切除したての腫瘍をインキュベートすることにより、循環の作用を排除した。このｉＲＧＤファージは、腫瘍組織に迅速に浸透して、９０分で約４ｍｍ進んだが、対照ファージは、腫瘍表面において微量に見つけられただけであった（図６）。従って、ＣｅｎｄＲペプチドは、組織浸透を誘導し、この浸透は、能動輸送プロセスに依存する。このプロセスをＣｅｎｄＲ誘導経内皮および組織（ＣｅｎｄＩＴ）効果と呼ぶことができる。
【０３７１】
ｉＲＧＤはハーセプチンの腫瘍蓄積および抗癌活性を増加させる。ｉＲＧＤが腫瘍における薬物送達を増強することも実証した。ハーセプチンを共組成物薬として使用した。ハーセプチンは、抗癌剤として広く臨床使用されているＨＥＲ２受容体に対する抗体である。ｉＲＧＤとハーセプチンの両方の投与は、等用量のハーゼプチンのみのより腫瘍成長の抑制に有意により有効であった（図７）。
【０３７２】
これらの結果は、腫瘍処置への概念的に新しいアプローチ：腫瘍組織内への薬物浸透の腫瘍特異的増強、を実証している。腫瘍血管は漏出しやすい傾向があり、これが腫瘍血管周囲の組織への物質の血管外遊出を可能にする（いわゆる、透過性亢進および滞留性亢進−ＥＰＲ−効果）。ＣｅｎｄＩＴと呼ぶことができるＣｅｎｄＲペプチドの効果は、ＥＰＲ効果より明らかにはるかに有効である（例えば、図４参照）。また、ＣｅｎｄＩＴは、能動プロセスであり、漏出でないため、および受容体（ＮＲＰ−１）依存性であるため、循環不在下では受動的拡散および対流が果たすことができない深い腫瘍浸透を生じさせる結果となる（図６）。
【０３７３】
１．考察
この研究は、ＣｅｎｄＲと称する以前に認知されていない細胞内部移行経路を明らかにするものである。ＣｅｎｄＲの顕著な特徴は、（ｉ）Ｒ／ＫＸＸＲ／Ｋ（配列番号２３）認識モチーフ、（ｉｉ）結合および内部移行活性のための前記モチーフのＣ末端露出、（ｉｉｉ）前記結合および内部移行へのＮＲＰ−１関与、および（ｉｖ）タンパク質分解プロセッシングによる潜在ＣｅｎｄＲモチーフの活性なものへの転化である。
【０３７４】
ある群の心臓ホーミングペプチドは、露出したＣｅｎｄＲモチーフを含有する（Ｚｈａｎｇ，Ｌら、２００５）が、ＣｅｎｄＲモチーフは潜在である場合もある。細胞浸透特性を有する幾つかの腫瘍ホーミングペプチドは、潜在ＣｅｎｄＲモチーフを含有する（Ｌａａｋｋｏｎｅｎ，Ｐ．ら、２００２ｂ；Ｐｏｒｋｋａ，Ｋ．ら、２００２；Ｊａｒｖｉｎｅｎ，Ｔ．Ａ．ら、２００７；Ｚｈａｎｇ，Ｌ．ら、２００６）。前記ＣｅｎｄＲモチーフに加えて、これらのペプチドは、特定の受容体に結合する配列を有する。Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９および２００９年２月２０日出願の米国特許出願第１２／３９０，０６１号に記載されているインテグリン結合ｉＲＧＤペプチドは、そのようなペプチドがどのように作用するかを説明する；特定のホーミングエレメントがペプチドを標的（腫瘍）に集中させ、プロテアーゼが前記ＣｅｎｄＲモチーフを露出させ、その後のＮＲＰ−１結合が前記ペプチド（および、もしあればそのペイロード）の細胞取り込みを生じさせる。
【０３７５】
カチオン性ＣＰＰの多くが活性または潜在ＣｅｎｄＲエレメントを含有する（Ｌａｎｇｅｌ、２００７）。ＣｅｎｄＲモチーフを有するＨＩＶ−１  ＴＡＴタンパク質の塩基性ドメインは、ＮＲＰ−１へのＶＥＧＦＡ−１６５の結合を阻害する（Ｊｉａ，Ｈ．ら、２００１）が、カチオン性ＣＰＰの結合および取り込みのメカニズムは未だ解明されていない。カチオン性ＣＰＰとＣｅｎｄＲペプチドの間の最も重要な相違は、Ｄ−アミノ酸から成るＣＣＰが活性である（Ｐｏｌｙａｋｏｖ，Ｖ．ら、２０００、Ｇａｍｍｏｎ，Ｓ．Ｔ．ら、２００３）のに対して、本明細書における結果は、ＣｅｎｄＲ取り込みがＬ−ペプチドの特異的認識にもっぱら依存することを示すということである。また、核となるＣｅｎｄＲ概念に明らかに矛盾して、ＣＰＰの多くが、Ｃ末端に係留されたカーゴを内部移行することができる。ＣｅｎｄＲは、カチオン性ＣＰＰの取込みに関与し得る幾つかの平行経路の１つである可能性がある。
【０３７６】
ＣｅｎｄＲ媒介内部移行システムの生理学的重要性は十分には理解されていないが、ＣｅｎｄＲエレメントは、プロテオーム全体にわたって存在し、多くのセリンプロテアーゼおよびシステインプロテアーゼがそれらを活性化できる（Ｂａｒｒｅｔｔ，Ａｌａｎら、１９９８）。プロタンパク質転換酵素および膜プロテアーゼ、例えばマトリプターゼは、これらの酵素による切断により様々な内因性タンパク質（ペプチドホルモン、成長因子、接着分子、プロテアーゼ；Ｔｈｏｍａｓ，Ｇ．、２００２、Ｕｈｌａｎｄ，Ｋ．２００６）のＣ末端におけるＲＸＸＲ配列を露出させるので、特に関連している可能性がある。ＮＲＰ−１補助受容体機能、受容体活性化、および活性タンパク質の細胞取り込みを可能にすることが、これらの生理学的ＣｅｎｄＲ配列の可能な機能である。
【０３７７】
ウイルスおよび他の微生物は、感染の促進因子としてＣｅｎｄＲメカニズムを乗っ取ったようである。ＣｅｎｄＲエレメントの露出を相伴うウイルスコートタンパク質のタンパク質分解性切断は、多くのウイルス病原体の感染性の繰り返されるテーマであるようである（表４）。
表４．表面ＣｅｎｄＲエレメントを有するヒト病原体ウイルスの例
【０３７８】
【表４−１】
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【０３７９】
【表４−２】
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遍在的に発現されるプロテアーゼ、フーリンによるウイルス表面タンパク質の切断は、幾つかのウイルスの全身拡散への重要な寄与因子であるが、限られた発現パターンを有するプロテアーゼに対して感受性であるウイルスの感染性は、適切なプロテアーゼを発現する組織に感染を限定することができる。この概念は、インフルエンザウイルスによって例示される（Ｓｔｅｉｎｈａｕｅｒ，Ｄ．Ａ．ら、１９９９）。局所感染性哺乳動物インフルエンザウイルスおよび非病原性鳥インフルエンザウイルスのヘマグルチニンは、単一アルギニン残基で切断される；そのような切断は、気道および消化管の細胞型などの限定された細胞型に限られる。対照的に、全身感染を生じさせる病原性鳥インフルエンザウイルスは、フーリンにより活性化されて多塩基性ＣｅｎｄＲエレメントを露出させる。病原体およびそれらの産物のＣｅｎｄＲ媒介内部移行および組織浸透を阻害することにより感染症と戦うための新たな方法が提供され得るということが本明細書に示されている。
【０３８０】
ＣｅｎｄＲ技術は、多くの他のバイオテクノロジー用途、例えば細胞型特異的ナノ粒子の送達の改善を有し得る。予め露出させたＣｅｎｄＲペプチドで被覆したナノ粒子は、それらの粒子が遭遇する最初の血管床（ＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）ファージの静脈内注射後、心臓および肺）に取り込まれる。Ｓｕｇａｈａｒａら、２００８により証明されているように、潜在ＣｅｎｄＲ配列は、末梢組織へのカーゴの送達に有用であり得る。血漿は、高濃度の一般的プロテアーゼ阻害剤（例えば、アルファ−２−マクログロブリン）および酵素特異的プロテアーゼ阻害剤（例えば、アルファ−２−アンチプラスミン、アンチトロンビン）を含有する。これは、血液中での時期尚早のＣｅｎｄＲ活性化を防ぐ可能性がある。活性プロテアーゼは通常、細胞周囲に隣接した領域に概して極限される。これらのプロテアーゼは、受動的蓄積によりまたはホーミングペプチド媒介送達により標的組織に到達したナノ粒子上の潜在ＣｅｎｄＲペプチドを活性化することができる。潜在ＣｅｎｄＲ配列を曝露する（ｕｎｍａｓｋｉｎｇ）ことができる組織特異的プロテアーゼは、インビボターゲット選択性をさらに向上させることができる。活性化されたＣｅｎｄＲエレメントによって媒介される細胞取り込みは、プロセッシングされたペプチドおよびそのカーゴが標的組織または標的細胞に蓄積する１つのメカニズムを提供する。この研究からのもう１つの重要な結論は、ＣｅｎｄＲエレメントが組織内でのナノ粒子の拡散を促進させ得ること、およびドッキングベースのＣｅｎｄＲターゲティングエレメントとプロテアーゼ感受性ＣｅｎｄＲターゲティングエレメントの併用により選択的ＣｅｎｄＲ媒介内部移行および組織浸透を達成できることである。ｉＲＧＤペプチド（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９）、および場合によっては、上記で考察した潜在ＣｅｎｄＲエレメントを有する他の内部移行血管ホーミングペプチドが、このパラダイムの例証となる。研究したファージおよび他のナノ粒子と同様に、様々な感染因子は、該因子が組織中への拡散を容易にするためにＣｅｎｄＲシステムを使用し得ることも示されている。
【０３８１】
２．方法
動物手順。すべての動物実験は、Ａｎｉｍａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ａｔ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａにより承認された手順に従ってＢＡＬＢ／ｃヌードマウス（Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ，Ｉｎｃ．、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）を使用して行った。
【０３８２】
ファージディスプレイ。インビボ・ファージディスプレイのために、マウスに１０１０プラーク形成単位（ｐｆｕ）のＴ７ファージを静脈内注射し、その後、循環系を灌流し、滴定によりターゲット器官における結合ファージを測定した。培養細胞（インビトロ・ディスプレイ）および器官由来細胞懸濁液（エクスビボ・ディスプレイ）での細胞結合研究のために、細胞を１０９ｐｆｕのファージと共に４℃でインキュベートし、洗浄し、溶解し、滴定により定量化した。３７℃でのインキュベーションの後、低ｐＨでの洗浄（グリシン−ＨＣｌ、ｐＨ２．５）を用いて、内部移行ファージ量を評価した。
ｑｄｏｔの標識。ビオチン化ペプチドを使用して、製造業者の説示に従って６０５ＩＴＫストレプトアビジンｑｄｏｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）を官能化した。
免疫蛍光。培養細胞および組織切片を、４％緩衝化パラホルムアルデヒドまたは冷（−２０℃）メタノールによって固定し、その後、適切な一次抗体およびＡｌｅｘａ標識二次抗体と共にインキュベートし、ＤＡＰＩまたはＨｏｅｃｈｓｔ  ３４２  ＤＮＡ色素で核染色した。
アフィニティクロマトグラフィー。ＰＰＣ−１腫瘍を、２００ｍＭのｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを含有するＰＢＳ中に溶解し、その後、ＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）を被覆したＳｕｌｆｏｌｉｎｋ−ビーズ（Ｐｉｅｒｃｅ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）と共にインキュベートし、２ｍＭの遊離ＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）ペプチドを含有する溶解緩衝液で溶離した。溶離画分の銀染色ゲルから切除したゲルフラグメントを、Ｂｕｒｎｈａｍ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  ＲｅｓｏｕｒｃｅにてＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析に付した。
マウスおよび組織。すべての動物実験は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａのｔｈｅ  Ａｎｉｍａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによって承認された手順に従って行った。腫瘍注射のためにおよび犠牲にする前に、キシラジン（１０ｍｇ／ｋｇ）およびケタミン（５０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内注射でマウスを麻酔した。ＢＡＬＢ／ｃ無胸腺ヌードマウス（Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ，Ｉｎｃ．、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）を、腫瘍異種移植片実験ならびにインビボおよびエクスビボ・ファージディスプレイ実験のために使用した。同所性前立腺腫瘍異種移植片を、前立腺の腹葉（ｖｅｎｔｒａｌ  ｌｏｂｅ）への１０６のＰＰＣ−１細胞（Ｚｈａｎｇ，Ｌ．ら、２００６）の注射によって生成した。組織学的分析のために、組織を４％パラホルムアルデヒド中で固定し、３０％スクロースを含有するリン酸緩衝生理食塩水中で凍結保護し、１０μｍの切片にした。
【０３８３】
細胞系。ＰＰＣ−１、ＰＣ−３、Ｄｕ−１４５、４Ｔ１、ＭＩＡ  ＰａＣａ−２、ＰＤＡＣ１．３、Ｂ１６Ｆ１０、Ｍ２１、およびＭＤＡ−ＭＢ−４３５細胞系を、１０％ウシ胎仔血清およびペニシリン／ストレプトマイシンを補充したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で維持した。ヒト臍帯静脈内皮細胞を、製造業者の説示に従って培養した。
【０３８４】
ファージディスプレイ。Ｔ７選択ファージ・ディスプレイ・システムを、製造業者の説示（ＥＭＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｇｉｂｂｓｔｏｗｎ，ＮＪ）に従ってファージライブラリー構築（ライブラリー多様性−１０８）および個々のファージクローニングのために使用した。ファージを、ＰＥＧ−８０００（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）での沈殿およびその後のＣｓＣｌ２勾配超遠心分離および透析によって精製した。提示されたペプチドの配列を、Ｔ７主要コートタンパク質ｇｐ１０のＣ末端のインサート含有領域をコードするＤＮＡから決定した。
【０３８５】
バイオパニングおよびファージ結合研究（Ｈｏｆｆｍａｎ，Ｊ．Ａ．ら、２００４）のために、培養細胞を集密になるまで成長させ、トリプシンを用いて回収し、Ｍｅｄｉｍａｃｈｉｎｅ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）を使用してマウス器官を分離した。ファージ結合を測定するために、結合緩衝液（１％ＢＳＡを含有するＤＭＥＭ）中の１０６の細胞を、１０９ｐｆｕ／ｍＬのＴ７ファージと共に４℃で１時間インキュベートした。細胞を、結合緩衝液で４回洗浄し、１％ＮＰ−４０を含有するＬＢ細菌成長培地中で溶解し、滴定した。ファージ内部移行アッセイは、細胞をファージと共に３７℃でインキュベートしたことおよび酸性緩衝液（５００ｍＭ塩化ナトリウム、０．１Ｍグリシン、１％ＢＳＡ、ｐＨ２．５）を２回目の洗浄の際に結合緩衝液の代わりに使用したことを除き、同じ手順を用いた。
【０３８６】
シリコーン油クッション（１．０３ｇ／ｍＬ）上での遠心分離を用いて、時間経過実験中の細胞から非結合ファージを分離した。ファージの結合および内部移行の阻害剤（ヘパリン、コンドロイチン、糖衣除去酵素、エンドサイトーシス阻害剤、遊離ペプチド、量子ドットおよびＵＶ不活化ファージ）を、ファージとのインキュベーションの２０分前に細胞に添加した。本研究において使用したエンドサイトーシス阻害剤は、次のものであった：ナイスタチン（５０μｇ／ｍＬ）、ゲニステイン（１００μｇ／ｍＬ）、クロルプロマジン（５μｇ／ｍＬ）、５−（Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピル）アミロライド（１００μＭ）、ウォルトマンニン（１０μＭ）。
【０３８７】
マウスにおけるインビボ・ファージ・ホーミング研究を、尾静脈への１０１０ｐｆｕのＴ７ファージの注射によって行い、１０分から１時間後、マウスの左心室を介してＤＭＥＭで灌流した。目的の器官を回収し、１％ＮＰ４０中でホモジナイズし、滴定によってファージを定量した。
【０３８８】
ペプチド合成およびｑｄｏｔ標識。マイクロ波支援自動化ペプチド合成装置（Ｌｉｂｅｒｔｙ，ＣＥＭ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）でＦｍｏｃ／ｔ−Ｂｕ化学反応を用いてペプチドを合成した。０．１％ＴＦＡを含有するアセトニトリル−水混合物を使用するＨＰＬＣにより、ＨＰＬＣによる純度９０％〜９５％までペプチドを精製して、そのペプチドをＱ−ＴＯＦ質量スペクトル分析により検証した。
【０３８９】
ストレプトアビジンＩＴＫ−６０５量子ドット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）を、１００倍モル過剰のペプチドとのインキュベーションによりビオチン化ペプチドで官能化し、その後に透析により遊離ペプチドを除去した。
【０３９０】
アフィニティクロマトグラフィー。４００ｍＭ  ｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシドと１ｍＭ  ＭｇＳＯ４と１ｍＭ  ＭｎＣｌ２と１ｍＭ  ＣａＣｌ２と１錠／５ｍＬのＥＤＴＡ不含プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を含有するＰＢＳ中で同所性ＰＰＣ−１腫瘍をホモジナイズした。４℃の回転プラットフォームでの６時間の抽出の後、溶解産物を遠心分離（冷却微量遠心分離機において１４，０００ｒｐｍで２０分）によって清澄化し、アフィニティカラムにローディングした。このカラムは、システインタグ付きＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）ペプチドを製造業者の説示（Ｐｉｅｒｃｅ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）に従ってＳｕｌｆｏｌｉｎｋカップリングゲルにカップリングさせることによって調製した。一晩結合させた後、カラム洗浄緩衝液（２００ｍＭ  ｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシドを含有するがその他は前記溶解緩衝液と同一）でカラムを洗浄し、その後、２ｍＭの遊離ＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）ペプチドを含む同じ緩衝液で溶出した。
【０３９１】
洗浄画分および溶出画分のサンプルを、Ｎｏｖｅｘ  ４〜２０％Ｔｒｉｓ−グリシンポリアクリルアミドゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）を使用して分離し、Ｓｉｌｖｅｒ  Ｓｎａｐキット（Ｐｉｅｒｃｅ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）を使用して銀染色し、Ｂｕｒｎｈａｍ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  ＦａｃｉｌｉｔｙにてＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析に付した。アフィニティクロマトグラフィサンプルを免疫ブロッティングし、抗体でプローブし、その後、結合について化学発光検出を行った。
【０３９２】
免疫蛍光染色。培養細胞（２×１０５細胞）を、コラーゲン−Ｉ被覆カバーガラス（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）上の６ウェル組織培養プレート中、３７℃、５％ＣＯ２中で一晩成長させ、１０８ｐｆｕのＴ７ファージと共にインキュベートした。細胞を４％パラホルムアルデヒドまたは冷（−２０℃）メタノール中で固定し、抗体で染色した。核をＤＡＰＩまたはＨｏｅｃｈｓｔ  ５４２で染色した。ＣｓＣｌ２遠心分離を使用する追加のファージ精製工程を含むことを除いて、以前に記載されているように（Ｌａａｋｋｏｎｅｎ，Ｐ．ら、２００２ｂ）ポリクローナルウサギ抗Ｔ７抗体をインハウスで産生させた。使用した他の一次抗体は、ラット抗マウスＣＤ３１モノクローナル抗体（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ウサギ抗ＮＲＰ−１、マウス抗ヒトＬａｍｐ−１、マウス抗ヒトカベオリン（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｔｅｍｅｃｕｌａ，ＣＡ）、マウス抗ＮＲＰ−１（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ  Ｉｎｃ．、Ａｕｂｕｒｎ，ＣＡ）、マウス抗ヒトＥＥＡ−１（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）であった。二次抗体である、マウス、ラットおよびウサギ免疫グロブリンに対するＡｌｅｘａ５９４ヤギ抗体、ならびにＡｌｅｘａ４８８ロバ抗ウサギ抗体は、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）からのものであった。細胞および組織切片を共焦点顕微鏡検査により試験した（Ｆｌｕｏｖｉｅｗ  ５００、Ｏｌｙｍｐｕｓ  ＡｍｅｒｉｃａＩｎｃ．、Ｃｅｎｔｅｒ  Ｖａｌｌｅｙ，ＰＡ）。
【０３９３】
ＤＮＡ構築物およびトランスフェクション。ｐｃＤＮＡ３．１（＋）中の野生型ＮＲＰ−１  ｃＤＮＡの発現構築物は、Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｋｌａｇｓｂｒｕｎ博士からの好意的寄贈品であった。部位特異的変異誘発を用いて、ＴＣＡＡＡＡＧＡＡＡＣＣ（配列番号２９；アミノ酸ＳＫＥＴをコードする）をＧＣＴＡＡＡＧＣＴＧＣＴ（配列番号３０；ＡＫＡＡをコードする）で置換することにより、ＮＲＰ−１のｂ１ドメイン内のＶＥＧＦ−１６５結合部位に三重の変異を生じさせた（Ｓ３４６Ａ−Ｅ３４８Ａ−３４９Ａ）。
製造業者の説示（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）に従ってリポフェクタミンを使用してＭ２１黒色腫細胞をこれらの構築物で一過的にトランスフェクトした。
【０３９４】
ファージおよびｑｄｏｔのプロテアーゼ処理。１０９のファージ粒子または５０μＬのペプチド被覆ｑｄｏｔファージを、５０ｉｕのｕＰＡ、２５μｇの結晶トリプシン、５０ｉｕのトロンビン、または２５μｇのコラゲナーゼＩ型（全てＳｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）で処理した。
【０３９５】
Ｃ．実施例３：腫瘍選択的血管透過性増加の誘導による腫瘍のターゲティング
癌療法の主要な問題は、抗癌剤が腫瘍組織内に十分に浸透しないということである。ここに、この制限を克服する、概念的に新しいアプローチを導入する。様々なサイズの同時投与化合物の血管脱出および腫瘍浸透を選択的に増加させる腫瘍浸透性ペプチド、ｉＲＧＤ（ＣＲＧＤＫ／ＲＧＰＤ／ＥＣ；配列番号６１）を開示する。この活性は、ｉＲＧＤ内の２つの配列モチーフ、腫瘍血管（および、多くの場合、腫瘍細胞において）で発現される、αｖインテグリンに対するＲＧＤ結合モチーフと、組織浸透受容体、ニューロピリン−１に結合するＲＸＸＲ／Ｋ  Ｃ末端則モチーフに依存する。ｉＲＧＤとの同時投与は、２つの薬物（ドキソルビシンリポソームおよびハーセプチン）の抗腫瘍活性を増加させた。ｉＲＧＤは、癌診断薬および治療薬の遺伝子ブースターとして利用することができる。
【０３９６】
現行の抗癌剤は、腫瘍組織への不良な浸透と正常組織への高い毒性という２つの大きな問題を欠点として持つ。充実性腫瘍の場合、抗癌剤は、血管から３〜５細胞径しか透過せず、腫瘍の一部の領域は薬物がないままの状態であるかまたは低濃度の薬物が存在するだけである（Ｈａｍｂｌｅｙら、２００９；Ｍｉｎｃｈｉｎｔｏｎら、２００６）。腫瘍は高い間質圧を有するが、これはおそらく、血管が漏出しやすい傾向があり、リンパ管が腫瘍内ではあまり機能しないためであり、このことが腫瘍組織への薬物の浸透に対して不利に働く（Ｊａｉｎ、１９９０；Ｈｅｌｄｉｎら、２００４）。これらの環境が治療の有効性を低減し、薬剤耐性の発生を促進する。
【０３９７】
腫瘍浸透性ペプチド、ｉＲＧＤ（ＣＲＧＤＫ／ＲＧＰＤ／ＥＣ；配列番号６１；システイン間のジスルフィド結合によって環化されている）は、腫瘍血管に特異的に結合すること、腫瘍組織内に浸透すること、および結合させたペイロード、例えば蛍光体、薬物またはナノ粒子造影剤を血管外腫瘍組織内に深く運搬できることが、最近、確認された（Ｓｕｇａｈａｒａ、２００９）。腫瘍浸透性ペプチドにペイロードをカップリングさせる必要はない；該ペプチドは、腫瘍における血管透過性を特異的に増加させ、それにより、同時注入化合物（単数または複数）の血管外遊出および腫瘍組織内への浸透が可能になる（Ｓｕｇａｈａｒａら、２０１０）。この手順は、腫瘍内で作用する薬物の有効性を、ターゲティングのために該薬物を修飾する必要なくおよび該薬物の副作用を増加させることなく、増加させることを可能にする。
【０３９８】
前記ｉＲＧＤペプチドは、腫瘍血管系内でおよび多くの場合腫瘍細胞上で特異的に発現されるαｖインテグリンに結合するため、腫瘍に選択的にホーミングする（Ｒｕｏｓｌａｈｔｉら、２００２；Ｅｌｉｃｅｉｒｉら、２００１；Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９）。ＲＧＤペプチドおよびそれらの模倣物は、様々な医療用途、例えば腫瘍診断および処置に使用されており、臨床試験において評価されている（Ｔｕｃｋｅｒら、２００３）。前記ｉＲＧＤペプチドは、最初に脈管形成性腫瘍内皮上のαｖインテグリンに結合するが、その後、タンパク質分解性切断がＣ末端ＲＧＤＫ／Ｒ配列（配列番号３１；ＣｅｎｄＲ配列；Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９；Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９）を露出させる点で、そのような現在使用されているＲＧＤペプチドとは異なる。トランケートされたペプチドは、もはやインテグリンに結合しないが、血管外遊出および組織浸透活性を媒介するニューロピリン−１に対する親和性を獲得した（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９；Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９）。そのような特性により、該ペプチドの血流中への注射後数分以内におこる、ｉＲＧＤに高効率で腫瘍選択的な組織浸透がもたらさられる（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９）。
【０３９９】
Ｃ末端Ｒ／ＫＸＸＲ／Ｋ（配列番号２３）配列を有するペプチドおよびタンパク質は、ニューロピリン−１への結合により血管透過性を増加させる（Ａｃｅｖｅｄｏら、２００８；Ｊｉａら、２００６；Ｓｏｋｅｒら、１９９８；Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９）。腫瘍におけるｉＲＧＤの迅速な血管外遊出および組織浸透は、ｉＲＧＤのＣｅｎｄＲ配列によって誘導される血管透過性の腫瘍特異的増加に起因し得る。腫瘍を有するマウスに、エバンスブルー、血管透過性を研究するために一般に使用されるアルブミン結合色素（Ｍｉｌｅｓら、１９５２；Ｍｕｒｏｈａｒａら、１９９８）を注射した。化学合成ｉＲＧＤペプチドは、前記色素と同時注入すると、同所性ＭＩＡ  ＰａＣａ−２ヒト膵臓癌腫異種移植片（図９Ａ）およびこの腫瘍により浸潤される二次的部位（図９Ａ、矢頭）における該色素の特異的蓄積を生じさせた。誘導された透過性増加が他の腫瘍タイプにおいても観察され、これによりｉＲＧＤが、ＢＴ４７４ヒト乳房腫瘍および２２Ｒｖ１ヒト前立腺腫瘍の同所性異種移植片、転移を模倣する播種性ヒトＧＦＰ−ＰＣ−３前立腺腫瘍の同所性異種移植片、およびデノボ膵管腺癌の遺伝子操作モデルの同所性異種移植片（Ｈｅｚｅｌら、２００６；図９Ａならびに図１０、ＡおよびＢ）に効率的にホーミングすること（Ｓｕｇａｈａｒａら、２０１０）が証明された。これらの組織における前記色素の定量化により、前記透過性増加が前記腫瘍に対して特異的であることおよび投与したｉＲＧＤの用量に依存することを確認した。腫瘍蓄積の増加は、約４倍であった（図９Ｂ）。
【０４００】
ｉＲＧＤ誘導血管透過性増加へのＣｅｎｄＲエレメントの関連性を試験するために、ＣｅｎｄＲモチーフを有さない２つの一般に使用されているＲＧＤペプチド、ＲＧＤ−４Ｃ（ＣＤＣＲＧＤＣＦＣ；配列番号３２；Ｋｏｉｖｕｎｅｎら、１９９５）およびシクロ（−ＲＧＤｆＫ−）（配列番号４０；Ｍｕｒｐｈｙら、２００８）を透過性増加効果について調査し、不活性であることが判明した（図９Ｃおよび図１０Ｃ）。加えて、ＲＧＤを有するがＣｅｎｄＲモチーフを有さない、スクランブルされたｉＲＧＤ変異体（ＣＲＧＤＤＧＰＫＣ；配列番号３３）も腫瘍における透過性を向上させることができなかった（図９Ｃおよび図１０Ｃ）。ＣｅｎｄＲペプチドの受容体であるニューロピリン−１を機能的に遮断する抗体の腫瘍マウスへの事前の注射は、ｉＲＧＤにより誘発される透過性増加を阻害した（図９Ｄ）。ｉＲＧＤが腫瘍をターゲットにするとき、それはタンパク質分解的に切断されてＣＲＧＤＫ（配列番号３４）になり、これがニューロピリン−１結合性ＣｅｎｄＲペプチドとして作用する（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９）。化学合成ＣＲＧＤＫ（配列番号３４）ペプチドは、ＶＥＧＦ−１６５ならびに基本形ＣｅｎｄＲペプチド、ＲＰＡＲＰＡＲ（配列番号２）およびＲＰＡＲ（配列番号５；Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９；図１１）と同様の用量依存様式で皮膚における局所的血管透過性を向上させた。まとめると、これらの結果は、腫瘍におけるｉＲＧＤによる透過性向上がＣｅｎｄＲ依存性であることを示している。
【０４０１】
ｉＲＧＤによって媒介される組織アクセスの腫瘍特異的増加は、腫瘍実質への薬物およびイメージング剤の送達を改善する新規アプローチをもたらした（図１２に図式化する）。多数の化合物をｉＲＧＤと併用で注射した。ＣｅｎｄＲモチーフを含有せず、単独では腫瘍組織内に極めてわずかしか浸透しない１．３ｋＤａペプチドのフルオレセイン標識ＣＲＧＤＣ（ＦＡＭ−ＣＲＧＤＣ、配列番号３６）（Ｋｏｉｖｕｎｅｎら、１９９３；Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９）は、ｉＲＧＤと同時注入したとき、広範な血管外分布を示した（図１３Ａ）。同様の結果を、３−ｋＤａおよび１０ｋＤａデキストラン、超常磁性酸化鉄ナノワーム（長さ約８０ｎｍおよび厚み約３０ｎｍ（Ｐａｒｋら、２００９））、およびＴ７ファージ（直径約６５ｎｍ（Ｓｏｋｏｌｏｆｆら、２０００））で得た。組織切片内の拡散領域の定量化により、ＦＡＭ−ＣＲＧＤＣ（配列番号３６）およびデキストランが、ｉＲＧＤの存在下で、それを伴わないものより３から５倍、腫瘍内に拡散したことが明らかになった（図１３Ｂ）。Ｔ７ファージは、ｉＲＧＤと同時注入したとき、ファージ力価によって証明されるように、対照より３倍多く腫瘍内に蓄積した（図１３Ｃ）。これらの結果は、前記ｉＲＧＤコンボシステムが、１ｋＤａのペプチドから約７０ｎｍのナノ粒子のサイズにわたる非常に異なるサイズおよび非常に異なる化学特性を有する化合物の腫瘍内蓄積を増加させることができることを示している。同時投与したＣｅｎｄＲペプチド、例えばｉＲＧＤにより誘導された分子のこの組織特異的浸透をＣｅｎｄＲ誘導経内皮および組織効果（ＣｅｎｄＩＴ−「センド・イット（ｓｅｎｄ  ｉｔ）」のように発音する−効果）と名付けた。
【０４０２】
腫瘍処置へのｉＲＧＤ−コンボレジメンの適用可能性を調査するために、同所性２２Ｒｖ１腫瘍をｉＲＧＤとドキソルビシン（ＤＯＸ）−リポソーム（直径約１２０ｎｍ）の組み合わせで処置した。これらのリポソームは、ｉＲＧＤを伴うとｉＲＧＤを伴わない場合より腫瘍組織内にはるかに広く拡散し、より多く蓄積した（図１４、ＡおよびＢ）。腫瘍処置研究は、ｉＲＧＤ−コンボレジメン（１ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ＋ｉＲＧＤ）が、３倍高い用量で単独で与えたＤＯＸ−リポソームと同じほど強力であることを示した（図１４Ｃ）。ＣｅｎｄＲモチーフを含有しない環式ＲＧＤペプチドは、薬物の効果を強化できなかった。特定のＲＧＤペプチドは、腫瘍成長を阻害することが証明されている（Ｂｒｏｏｋｓら、１９９４；Ｔｕｃｋｅｒら、２００３）。このコンボレジメンに使用した用量でのｉＲＧＤ単独対照は、腫瘍成長に対して効果を示さなかった。これは、このコンボレジメンが該薬物単独より有効であるという考えを裏付ける。なぜなら、ｉＲＧＤが腫瘍細胞への薬物のアクセスを改善するからである。１７日間、３ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇで前記リポソームを毎日投与すると、マウスにおけるこの薬物の累積最大耐用量に達する（Ｐａｒｒら、１９９７）。ｉＲＧＤとこの用量の併用（３ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ＋ｉＲＧＤ）は、薬物の有効性をさらに改善した（図１５）。
【０４０３】
前記コンボレジメンは、薬物の有効性を有意に増加させたが、副作用を増加させなかった。ＤＯＸの主たる副作用である心臓毒性は、分子レベルで心筋細胞アポトーシスにより証明される（Ａｒｏｌａら、２０００）。ＴＵＮＥＬ染色によって検出すると豊富な心筋細胞アポトーシスが３ｍｇＤＯＸ／ｋｇ群では観察されたが、コンボ群（１ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ＋ｉＲＧＤ）には１ｍｇＤＯＸ／ｋｇ群と同様のレベルで極めてわずかしか存在しなかった（図１４Ｄおよび図１６）。対照的に、コンボ群（１ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ＋ｉＲＧＤ）からの腫瘍は、３ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ群に匹敵するレベルで強いＴＵＮＥＬ染色を示した。これは、その処置データを裏付ける（図１４Ｄ）。加えて、３ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ群は、急速に体重を減少させたが、コンボ群（１ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ＋ｉＲＧＤ）は、１ｍｇＤＯＸ／ｋｇ群に匹敵する軽度の体重減少を示した（図１７）。これらの結果は、コンボレジメンが、より高い用量の薬物単独での処置と等価の抗腫瘍効果を、副作用の増加を伴うことなくもたらすことを示している。
【０４０４】
次に、前記ｉＲＧＤ−コンボレジメンを、ＢＴ４７４細胞で作製した別の同所性腫瘍モデルにおいて試験した。ＢＴ４７４細胞は、ＨＥＲ２（１４８ｋＤａの抗ＨＥＲ２抗体、ハーセプチンのターゲット）を高度に発現する（Ｓｐｉｒｉｄｏｎら、２００２）。ハーセプチンは、ｉＲＧＤと一緒に注射したとき、対照注射より腫瘍組織内にはるかに効率的に拡散した（図１８Ａ）。ＥＬＩＳＡによる定量化は、ｉＲＧＤが腫瘍内のハーセプチンの蓄積を４０倍、劇的に増強することを示した。これは、おそらく、ＨＥＲ２発現性腫瘍細胞に対するその親和性のためである（図１８Ｂ）。従って、ｉＲＧＤをハーセプチンと併用しての同所性ＢＴ４７４腫瘍の処置は、その薬物の有効性を大いに増加させた（図１８Ｃ）。このコンボレジメンで使用した用量での単独のｉＲＧＤペプチドは、腫瘍成長に影響を及ぼさなかった。このコンボレジメンは、同じまたは３倍高い用量のハーゼプチン単独の処置より有意に有効であった。３倍高い用量のハーセプチンとｉＲＧＤの併用は、よりいっそうその薬物の有効性を改善した。この併用での処置は、すべての腫瘍の根絶をもたらした（図１８Ｃ）。腫瘍は、それが消失した後２週間の観察期間の間、一切の処置なしで再発しなかった。
【０４０５】
新たな腫瘍ターゲティング方法論の基礎を成すＣｅｎｄＩＴ効果は、いわゆる透過性および滞留性亢進（ＥＰＲ）効果とは異なる。ＥＰＲは、腫瘍血管周囲の組織内への物質の血管外遊出を可能にする、腫瘍血管の漏出性に起因する（Ｍａｅｄａら、２００３）。ＣｅｎｄＩＴ効果は、ＥＰＲより明らかにはるかに有効である（例えば、図１３を参照）。ＣｅｎｄＩＴ効果は、恐らくは能動プロセスであって受動的血管漏出現象でない可能性がある。なぜなら、（ｉ）ＣｅｎｄＩＴは、受容体（ニューロピリン−１）により媒介され、ＥＰＲはそうではない、（ｉｉ）ＣｅｎｄＩＴは、数分以内に血管外遊出を生じさせるが、ＥＰＲは、遅い発生を示し、６〜８時間以内に徐々にピークに達する（Ｍａｅｄａら、２００３）、（ｉｉｉ）ＣｅｎｄＩＴは、小分子に関して有効であるが、ＥＰＲは、４５ｋＤａより大きい分子の腫瘍内での滞留を長引かせる（Ｍａｅｄａら、２００３）、および（ｉｖ）ｉＲＧＤを発現するファージは、循環が不在である場合でさえ腫瘍組織内に浸透する、ならびにこのプロセスは、ニューロピリン−１およびエネルギー依存性であるからである（図１９）。しかし、ＥＰＲ（および一般に血管透過性）の中にＣｅｎｄＩＴ成分が存在し得る。なぜなら、これらのプロセスに関与するＶＥＧＦ−１６５は、そのＣ末端に活性ＣｅｎｄＲモチーフを有するからである（Ｍａｅｄａら、２００３；Ｊｉａら、２００６；Ｓｏｋｅｒら、１９９８；Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９）。
【０４０６】
ＣｅｎｄＩＴに基づくｉＲＧＤ−コンボシステムは、腫瘍処置への概念的に新しいアプローチである；ペプチドと遊離薬物の同時投与が腫瘍への薬物のアクセスを増強する。従来の薬物送達システムは、多くの場合、ターゲティングエレメント（例えば、ペプチドおよび抗体）を薬物に結合するために広範な化学反応を必要とする。本開示のシステムは、一切修飾せずに薬物の活性を強化することができる、そのようなシステムを超える顕著な利点を提供する（図１２参照）。加えて、従来のシステムは、ターゲットでの抗原−受容体ドッキング（シナフィック（ｓｙｎａｐｈｉｃ）ターゲティング）に依るものであり、従って、腫瘍血管系上の利用可能な受容体の限られた量のため飽和されるという難点がある。対照的に、前記コンボシステムは、飽和性でない。浸透シグナル（ＣｅｎｄＩＴ効果）が誘発されると、この研究の種々の用量の薬物で証明されるように、いずれの所与の濃度の分子も血管外遊出して腫瘍組織内に残留する可能性がある。
【０４０７】
ｉＲＧＤ−コンボシステムは、高度に腫瘍選択的である。この腫瘍特異性は、ｉＲＧＤの３段階腫瘍ターゲティングメカニズム（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９および２０１０；図１２）から起こる；ｉＲＧＤペプチドは、（ｉ）そのＲＧＤで腫瘍血管系をターゲティングし、（ｉｉ）その後、切断されてＣｅｎｄＲ（ＣＲＧＤＫ／Ｒフラグメント、配列番号３７）になり、（ｉｉｉ）ニューロピリン−１に結合してＣｅｎｄＩＴ効果を誘発する。ｉＲＧＤは、それが切断されない限り、ＣｅｎｄＲ特性を提示せず、または組織浸透受容体であるニューロピリン−１に対する測定可能な程の親和性を有さず、従って、正常組織では極わずかなバックグラウンドしか与えない（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９）。同様の試みがＶＥＧＦで行われ、それは血管透過性を増加させて腫瘍組織内への分子およびナノ粒子のより深い浸透を達成した（Ｍｏｎｓｋｙら、１９９９）。ＶＥＧＦは、腫瘍上面を局所灌流した（ｓｕｐｅｒｆｕｓｅｄ）とき、腫瘍内のアルブミンおよびナノ粒子の血管外遊出を４倍まで増すことに成功した。しかし、同様の効果が、ＶＥＧＦの局所注射で皮膚において（Ｍｏｎｓｋｙら、１９９９；Ｍｕｒｏｈａｒａら、１９９８；Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９）およびターゲティングされていないＣｅｎｄＲペプチドの全身注射で肺において（Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９）観察された。これは、好結果の腫瘍選択的ＣｅｎｄＩＴ効果をもたらすにはターゲティングエレメントが必要であることを明示している。
【０４０８】
最適化作業を殆どせずに他の場所ではなく腫瘍内で分子の蓄積の４倍の増加を達成した；この比率は、例えば、ナノ粒子上の多量体ｉＲＧＤ、構造安定化ｉＲＧＤ、他の腫瘍ホーミングＣｅｎｄＲペプチド（Ｈｏｆｆｍａｎら、２００３；Ｊｏｙｃｅら、２００３；Ｌａａｋｋｏｎｅｎら、２００２；Ｐｏｒｋｋａら、２００２）、もしくはペプチドの組み合わせを用いることにより、または用量および投与スケジュールを最適化することにより、改善することができる。興味深いことに、コンボレジメンでの処置後に回収した腫瘍（図１４Ｂ）は、同じまたはより高い用量の薬物単独で処置したものと比較して腫瘍内の薬物の著しく広い分布を示した（図２０）。ハーセプチンコンボレジメンから回収した腫瘍（図１８Ｃ）は、同じまたはより高い用量のその薬物単独で処置したものと比較して腫瘍内のハーセプチンの広い分布を示した。従って、コンボレジメンの複数回注射または長い循環時間は、腫瘍内での化合物の蓄積の増加を助けることができる。加えて、ハーセプチンで実証されたように、腫瘍組織に対して親和性を有する抗癌剤の使用は、このシステムの改善を助けることができる。
【０４０９】
腫瘍内の分子の蓄積は、より大きい抗腫瘍活性の達成を可能にする。この点は、組織浸透の問題を有する種々の薬物を使用して２つの腫瘍モデルにおいて実証されている（Ｙｕａｎら、１９９４；Ｔｈｕｒｂｅｒら、２００８）。本発明者らが試験した８つの非常に異なる化合物（１ｋＤａの分子から直径約１２０ｎｍのナノ粒子まで）のすべてのものの腫瘍送達が増強し得たので、いずれの薬物の活性もこのシステムにより改善できる可能性がある。あるいは、用量を低下させることで、副作用を低減し、その上、従来の処置と同じレベルの抗腫瘍活性を果たすことを可能にする。従って、毒性のために以前は拒絶されていた薬物を再検討することさえ可能であり得る。癌処置（および診断）の実質的な進歩が結果として起こり得る。
【０４１０】
１．方法
細胞および腫瘍モデル。ＭＩＡ  ＰａＣａ−２ヒト膵管癌、および２２Ｒｖ１、ＧＦＰ−ＰＣ−３、およびＰＰＣ１ヒト前立腺癌細胞系を、１０％ウシ胎仔血清とペニシリン／ストレプトマイシンを補充したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）で培養した。ＢＴ４７４ヒト乳癌細胞系を、１０％ウシ胎仔血清とペニシリン／ストレプトマイシンを補充したＳＦＭ４ＭＡＢ培地で培養した。ＢＡＬＢ／ｃ無胸腺ヌードマウス（Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ，Ｉｎｃ．、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）に１０６ヒト癌細胞を同所性注射することにより異種移植片を生じさせた。ＢＴ４７４異種移植片については、マトリゲル（ＢＤ  Ｂｉｏｓｉｃｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）に縣濁させた５×１０６の腫瘍細胞の同所性接種の１日前にそのマウスの背中に１７β−エストラジオールペレット（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ、Ｓａｒａｓｏｔａ，ＦＬ）を皮下内植した。左心室に２×１０６のＧＦＰ−ＰＣ−３細胞を注射することにより、播種性前立腺腫瘍を生成させた。Ｉｌｌｕｍａｔｏｏｌ  Ｂｒｉｇｈｔ  Ｌｉｇｈｔ  Ｓｙｓｔｅｍ  ＬＴ−９９００（Ｌｉｇｈｔｏｏｌｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｅｎｃｉｎｉｔａｓ，ＣＡ）を用いてＵＶ光で播種性腫瘍結節を検出した。デノボ膵管腺癌のためのトランスジェニックマウスは、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡのＤｏｕｇｌａｓ  Ｈａｎａｈａｎ博士により好意的に提供された。すべての動物実験は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａのｔｈｅ  Ａｎｉｍａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによって承認された手順に従って行った。
【０４１１】
化合物の調製。合成ペプチド（Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９）、Ｇ７（配列番号３８）またはＣＧ７Ｃ（配列番号３９）ペプチドを発現するターゲティングされていないＴ７ファージおよびｉＲＧＤファージ（Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９）、ならびにフルオレセインで標識されたターゲティングされていない酸化鉄ナノワーム（Ｐａｒｋら、２００９）を記載されているとおりに調製した。ＤＯＸ−リポソームは、２：１．５：１．２５：０．２５のモル比での１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、コレステロール、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンおよび１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−[メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］から成った。脂質（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ、Ａｌａｂａｓｔｅｒ，ＡＬからのもの）をクロロホルムに溶解し、水分のない窒素ガスの薄膜を用いて溶媒を蒸発させた。乾燥させた脂質膜を３００ｍＭのリン酸アンモニウム（ｐＨ７．４）で１時間、６０℃で水和した。その後、そのバイアルを短時間、ボルテックスにかけ、時々、バスソニケーターで音波処理した。このようにして形成した多層小胞を、小さな単層小胞の半透明溶液が得られるまで、Ｔｉプローブソニケーターを使用して２〜３分間さらに音波処理した。その後、Ａｖａｎｔｉ  ｍｉｎｉ押出機（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ）を使用して２００ｎｍおよび１００ｎｍの細孔径を有するポリカーボネート膜フィルターを通して１１回、逐次的にそれらの小さな単層小胞を押し出した。その後、ＮＡＰ−１０またはＮＡＰ−２５カラム（ＣＥ  Ｈｅａｌｈｃａｒｅ、Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）を使用するゲル濾過によりその緩衝液をＨｅｐｅｓ緩衝食塩水（２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）と交換した。以前に記載された（Ｍｕｒｐｈｙら、２００８）とおりに膜貫通ホスフェート勾配によって、ＤＯＸ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）をこれらのリポソームに封入した。それらのＤＯＸ−リポソームは、Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ（Ｍａｌｖｅｒｎ，ＵＫ）での動的レーザー光散乱（屈折率、１．５９；粘度、０．８９）によって測定して直径１１９．８±７．６ｎｍ（±は標準偏差を示す）であった。
【０４１２】
インビボ全身透過性アッセイ（ｉＲＧＤ−コンボシステム）。１μｇのエバンスブルー、２００ｎｍｏｌのフルオレセイン標識ＣＲＧＤＣペプチド（ＦＡＭ−ＣＲＧＤＣ、配列番号３６）、２００μｇの固定可能デキストラン（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ、Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）、１０９プラーク形成単位（ｐｆｕ）のＧ７発現性ファージ、５ｍｇ鉄／ｋｇのフルオレセインで標識されたターゲティングされていない酸化鉄ナノワーム、１ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇのＤＯＸ−リポソーム、または３ｍｇ／ｋｇのハーゼプチン（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）のいずれかを含有するＰＢＳ  １００μＬを腫瘍マウスに静脈内注射した。５分後、マウスに、様々な濃度のｉＲＧＤまたは対照ペプチドを伴うまたは伴わないＰＢＳ  １００μＬの静脈内注射を施した。示されている時間、循環させた後、１％ＢＳＡを含有するＰＢＳ  ２０ｍＬでマウスを灌流し、組織を回収した。エバンスブルー定量化のために、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを使用して２４時間、３７℃で組織から色素を抽出し、分光光度計を用いて６００ｎｍの吸光度を測定することにより、色素含有量を定量化した。ＦＡＭ−ＣＲＧＤＣ（配列番号３６）を受けたマウスからの組織は、免疫蛍光および免疫組織化学のために処理する前にＩｌｌｕｍａｔｏｏｌ  Ｂｒｉｇｈｔ  Ｌｉｇｈｔ  Ｓｙｓｔｅｍ  ＬＴ−９９００を用いてＵＶ光下で画像化した。デキストラン、ナノワーム、ＤＯＸ−リポソームまたはハーセプチンを有する組織を、免疫蛍光および免疫組織化学のいずれかまたは免疫蛍光および免疫組織化学の両方に関して処理した。免疫組織化学染色されたセクション内の陽性領域の定量、および該組織内の抗体の総量の定量化は、本文書の他の箇所に記載する。
【０４１３】
インビボ皮膚透過性アッセイ（変形マイルスアッセイ）。麻酔したヌードマウスに、１５０μＬのＰＢＳ中の０．５％エバンスブルー（ＭＰ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ、Ｉｒｖｉｎｅ，ＣＡ）、１３μｇのＱｕａｎｔｉｌｕｍ組み換えルシフェラーゼ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉ）および１０９ｐｆｕのＧ７（配列番号３８）発現ファージ粒子から成る３トレーサー混合物を静脈内注射した。１０分後、１５ｎｇのＶＥＧＦ−１６５（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）または様々な濃度のペプチドのいずれかを含有するＰＢＳ  ３０μＬをマウスの腹側に２列に皮内注射した。３０分後、心臓を介してマウスを灌流し、エバンスブルーで検出された注射部位を含む皮膚を除去し、入念に清浄した。皮膚のサンプル（直径４ｍｍ）を注射部位から打ち抜き、１％ＮＰ４０を含む溶原培地中でホモジナイズし、ルシフェラーゼ活性およびファージ力価についてアッセイした。
【０４１４】
免疫蛍光。凍結切片の組織調製および染色は、記載されている（Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９）とおりに行った。一次抗体は、ラット抗マウスＣＤ３１モノクローナル抗体（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびウサギ抗Ｔ７ファージポリクローナル抗体（Ｔｅｅｓａｌｕら、２００９）であった。二次抗体、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５９４ヤギ抗ラット、６４７ヤギ抗ラット、および４８８ロバ抗ウサギ抗体は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓからのものであった。幾つかの実験において、組織切片をＴＵＮＥＬアッセイキット（Ｉｎ  Ｓｉｔｕ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔ、ＴＭＲ  ｒｅｄ；Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）で染色した。それらの組織切片をＦｌｕｏｖｉｅｗ  ５００共焦点顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ  Ａｍｅｒｉｃａ、Ｃｅｎｔｅｒ  Ｖａｌｌｅｙ，ＰＡ）で調査した。
【０４１５】
免疫組織化学。凍結切片を免疫組織化学染色し、Ｓｃａｎｓｃｏｐｅ  ＣＭ−１スキャナーでスキャンし、陽性染色領域をＩｍａｇｅＳｃｏｐｅソフトウェア（Ａｐｅｒｉｏ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｖｉｓｔａ，ＣＡ；Ｓｕｇａｈａｒａら、２００９）で定量化した。使用した一次抗体は、ビオチン化ウサギ抗ＦＩＴＣ／オレゴングリーンポリクローナル抗体（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）、マウス抗デキストランモノクローナル抗体（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，ＢＣ，Ｃａｎａｄａ）、およびビオチン化ラット抗マウスＣＤ３１モノクローナル抗体（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）であった。二次抗体は、ビオチン化ヤギ抗ウサギポリクローナル抗体（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）、ヤギ抗マウスポリクローナル抗体（Ｖｅｃｔｏｒ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ）、およびウサギ抗ヒトポリクローナル抗体（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）であった。幾つかの実験において、組織切片をＴＵＮＥＬアッセイキット（Ｉｎ  Ｓｉｔｕ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔ、ＰＯＤ；Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）で染色した。
【０４１６】
腫瘍および正常組織内のＤＯＸの定量化。他の場所に記載されている（Ｍａｙｅｒら、１９９７）ように定量化を行った。簡単に言うと、２２Ｒｖ１同所性腫瘍を有するマウスに、ｉＲＧＤ（４μｍｏｌ／ｋｇ）を伴うもしくは伴わないＤＯＸ−リポソーム（５ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ）、または空のリポソームを注射した。３時間後、心臓を介してマウスを灌流し、腫瘍および目的の器官を回収した。水中の１％ドデシル硫酸ナトリウムおよび１ｍＭ  Ｈ２ＳＯ４の混合物中で組織を機械的にホモジナイズした。その後、２ｍＬのクロロホルム／イソプロピルアルコール（１：１、ｖ／ｖ）の添加、その後のボルテックス処理および凍結／解凍サイクルにより、ＤＯＸを抽出した。サンプルを１４，０００×ｇで１５分間、遠心分離し、有機相（最下相）を、分光光度計を用いてＯＤ４９０ｎｍでＤＯＸについて測定した。
【０４１７】
ＤＯＸ−リポソームでの２２Ｒｖ１異種移植片の処置。２週齢の２２Ｒｖ１同所性移植片（典型的には、腫瘍体積約２５０ｍｍ３）を有するヌードマウスに、２μｍｏｌ／ｋｇ  ｉＲＧＤ、シクロ（−ＲＧＤｆＫ−、配列番号４０）、またはＰＢＳの毎日の静脈内注射を組み合わせて、ＤＯＸ−リポソーム（１もしくは３ｍｇ  ＤＯＸ／ｋｇ）またはＰＢＳの静脈内注射を毎日施した。処置の間、４日ごとにマウスを計量した。処置の１７日後、心臓を介してマウスを灌流し、組織を回収した。腫瘍を計量し、この研究の他の場所で記載したように組織学的検査のために心臓サンプルを処理した。
【０４１８】
ハーセプチンの定量化のための競合ＥＬＩＳＡ。このＥＬＩＳＡは、ハーセプチンとビオチン化ヒトＩｇＧとの間の競合結合原理に基づく。測定を行うたびに標準曲線を作成した。この標準曲線のために、５μｇ／ｍＬのウサギ抗ヒトＩｇＧを被覆したマイクロタイターウエル（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ）を、様々な濃度の（０．０１から１０μｇ／ｍＬにわたる）ハーセプチンと１μｇ／ｍＬの最終濃度のビオチン化ヒトＩｇＧ（Ｒｏｃｋｌａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｇｉｌｂｅｒｔｓｖｉｌｌｅ，ＰＡ）の混合物と共にインキュベートした。室温で２時間のインキュベーションの後、０．０１％Ｔｗｅｅｎ  ２０を含有するＰＢＳでウエルを洗浄し、ストレプトアビジンコンジュゲート型ホースラディッシュペルオキシダーゼを添加し、室温で３０分間インキュベートした。マイクロタイターウエル上に捕捉されたビオチン化ヒトＩｇＧの量を、基質として２，２−アジノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン（ｅｔｙｌｂｅｎｚｔｈｉａｚｏｌｉｎｅ）−６−スルホン酸）を用いて定量化し、４０５ｎｍでの吸光度を測定した。ハーセプチンの濃度に対して吸光度をプロットすることにより、標準曲線を描き、それを使用して組織抽出物中のハーセプチンの濃度を計算した。ＢＴ４７４異種移植片および組織に侵入したハーセプチンの量を、標準ハーセプチンサンプルの代わりに組織抽出物を用いて同じ競合ＥＬＩＳＡシステムで測定した。組織抽出物は、次のように調製した。ハーセプチン注射を施したＢＴ４７４腫瘍マウスからの組織を、１％Ｔｗｅｅｎ−２０およびプロテアーゼ阻害剤を伴う１ｍＬの０．１ＭグリシンｐＨ２（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｍｉｎｉ  ＥＤＴＡ−ｆｒｅｅ；Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）中でホモジナイズし、その後、遠心分離（４℃、１０分、１４，０００ｒｐｍ）した。６００マイクロリットルの上清を回収し、１５０μＬの１Ｍ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ８および５０μＬの５Ｍ  ＮａＣｌを添加した。
【０４１９】
ハーセプチンでのＢＴ４７４異種移植片の処置。ＢＴ４７４同所性異種移植片（腫瘍体積で約１００ｍｍ３）を有するヌードマウスに、腫瘍細胞接種（＝第０日）後、第２１日の時点での初回注射については３ｍｇ／ｋｇおよび後続の注射については１．５ｍｇ／ｋｇのハーセプチンで、４日ごとに静脈内処置を行った。このハーセプチン処置を、ハーセプチン注射日の４μｍｏｌ／ｋｇのｉＲＧＤまたはＰＢＳおよび他の日の２μｍｏｌ／ｋｇのｉＲＧＤまたはＰＢＳの毎日の注射と組み合わせた。幾つかの群では、前記ｉＲＧＤ−コンボレジメンより３倍高い用量のハーセプチンを使用した。処置の２４日後、心臓を介してマウスを灌流し、組織を回収した。次の式を用いて腫瘍体積を計算した：体積（ｍｍ３）＝（ｄ２×Ｄ）／２（式中、ｄは、最小腫瘍径であり、Ｄは、最大腫瘍径である）（Ｋａｒｍａｌｉら、２００９）。
【０４２０】
エクスビボ腫瘍浸透アッセイ（腫瘍浸漬アッセイ）。ＰＰＣ１ヒト前立腺皮下腫瘍（直径約１ｃｍ）を切除し、ｉＲＧＤペプチドまたはＧ７（配列番号３８）ペプチドを発現する１０９ｐｆｕ／ｍＬのＴ７ファージと様々な阻害剤を含有するＤＭＥＭ中で維持した。それらの腫瘍を、先ず、阻害剤と共に２０分間４℃でインキュベートした。示したファージをその溶液に添加し、それらの腫瘍を９０分間、３７℃または４℃でさらにインキュベートした。インキュベーション後、１％ＢＳＡを含有する冷ＤＭＥＭで腫瘍を洗浄し、固定し、切片を作製し、免疫蛍光染色し、共焦点顕微鏡で検査した。
【０４２１】
統計解析。両側スチューデントｔ検定または一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）、その後の適する事後検定により、データを分析した。結果を表５にまとめる。
【０４２２】
本出願を通して、様々な出版物を参照する。これらの出版物の開示全体が、本発明が属する技術の状態をより完全に説明するために参照により本明細書に援用されている。
【０４２３】
（参考文献）
【０４２４】
【数１−１】
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【０４２５】
【数１−２】
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【０４２６】
【数１−３】
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【０４２７】
【数１−４】
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【０４２８】
【数１−５】
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【０４２９】
【数１−６】
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【０４３０】
【数１−７】
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【０４３１】
【数１−８】
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【０４３２】
【数１−９】
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【０４３３】
【数１−１０】
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【０４３４】
【数１−１１】
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【０４３５】
【数１−１２】
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【０４３６】
【数１−１３】
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本明細書においておよび添付の特許請求の範囲において用いる場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、その文脈が明確に別様に示していない限り、複数の指示内容を包含することに留意すべきである。従って、「ペプチド（ａ  ｐｅｐｔｉｄｅ）」への言及は、複数のそのようなペプチドを包含し、「そのペプチド（ｔｈｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ）」への言及は、１つ以上のペプチドおよび当業者に公知のそれらの等価物への言及、云々、である。
【０４３７】
「任意選択の」または「必要に応じて」は、その後に記載されている事象、状況または材料が発生するまたは存在することもあり、発生しないし存在もしないこともあること、およびその記載が該事象、状況または材料が発生するまたは存在する事例および発生しないまたは存在しない事例を含むことを意味する。
【０４３８】
本明細書では、範囲を、「約」１つの特定の値から、および／または「約」別の特定の値までと表示することがある。このような範囲が、表示されている、また具体的に意図され、考慮されているとき、その文脈が特に別様に示していない限り、その１つの特定の値からおよび／またはその他の特定の値までが開示されている。同様に、値が、先行する「約」の使用により近似値として表示されているとき、その文脈が特に別様に示していない限り、その特定の値は、別の具体的に意図される実施形態を構成し、その実施形態が開示されているとみなすべきであることは理解される。その文脈が特に別様に示していない限り、それぞれの範囲の終点が、他の終点と関連して有意でもあり、他の終点と無関係に有意でもあることは、さらに理解される。最後に、その文脈が特に別様に示していない限り、明確に開示されている範囲内の個々の値および値の部分範囲のすべても具体的に意図され、開示されているとみなすべきであることは理解されるはずである。上述のことは、特定の場合にこれらの実施形態の幾つかまたはすべてを明らかに開示しているかどうかにかかわらず適用される。
【０４３９】
別様に定義されていない限り、本明細書において用いるすべての技術用語および科学用語は、本開示の方法および組成物が属する当業者が一般的に理解しているものと同じ意味を有する。本明細書中に記載する方法および材料に類似したまた等価の任意の方法および材料を本方法および組成物の実施または試験に使用することができるが、特に有用な方法、デバイスおよび材料は、記載するとおりである。本明細書に引用されている出版物およびこれらの出版物に特記されている材料は、参照により本明細書に具体的に援用されている。本発明が先行発明によるそのような開示に先行する権利を持たないことを認めることとみなすべきものは、本明細書には何もない。いずれの参照も先行技術を構成することを認めない。参考文献の論考は、それらの著者が何を主張しているのかを述べるものであり、出願人は、引用した文献の精度および適切さを吟味する権利を保有する。本明細書中で多数の出版物に言及しているが、そのような参照が、これらの文献のいずれかが当該分野における共通の一般的知識の一部を構成するということを認めることにはならないことは、明確に理解される。
【０４４０】
本明細書の説明および特許請求の範囲を通して、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」およびこの語の変化形、例えば「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「含む（三人称単数現在形）（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」は、「を含む／が挙げられるが、これらに限定されないこと（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ）」を意味し、例えば、他の添加物、成分、整数または工程を排除することを意図したものではない。
【０４４１】
本開示の方法および組成物は様々であり得るで、記載する特定の方法論、プロトコルおよび試薬に制限されないことは理解される。本明細書中で用いる専門用語が、特定の実施形態を説明することのみを目的とし、本発明の範囲を制限することを意図したものではないこと、本発明の範囲が、添付の特許請求の範囲によってのみ制限されることも理解されるはずである。
【０４４２】
当業者には、本明細書中に記載する方法および組成物の具体的な実施形態の多数の等価物がわかるし、常例的な実験以下のものを用いて突きとめることができる。そのような等価物は、以下の特許請求の範囲に包含されると解釈される。
【図６Ａａｎｄ６Ｂ】
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【図２０】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【配列表】
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