(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）又は（II）：
【化１】
0005961259.tif 000014
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物。
【請求項２】
Ｘが、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ又は８２Ｂｒである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘが、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ又は１３１Ｉである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
式（Ｉａ）：
【化２】
0005961259.tif 000015
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
式（Ｉｂ）：
【化３】
0005961259.tif 000016
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
式（IIａ）：
【化４】
0005961259.tif 000017
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
式（IIｂ）：
【化５】
0005961259.tif 000018
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
式（Ｉ）の化合物、式（II）の化合物又はこれらの混合物：
【化６】
0005961259.tif 000019
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
と、生理学的に許容されるビヒクルとを含む医薬組成物。
【請求項９】
化合物が、式（Ｉａ）：
【化７】
0005961259.tif 000020
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物である、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
化合物が、式（Ｉｂ）：
【化８】
0005961259.tif 000021
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物である、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
化合物が、式（IIａ）：
【化９】
0005961259.tif 000022
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物である、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
化合物が、式（IIｂ）：
【化１０】
0005961259.tif 000023
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物である、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
式（Ｉａ）の化合物、式（Ｉｂ）の化合物、式（IIａ）の化合物及び式（IIｂ）の化合物の２又は３以上の混合物：
【化１１】
0005961259.tif 000024
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
を含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
Ｘが、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ又は８２Ｂｒである、請求項８〜１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１５】
Ｘが、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ又は１３１Ｉである、請求項８〜１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１６】
患者の領域を画像化するための医薬組成物の製造における、式（Ｉ）の化合物、式（II）の化合物又はこれらの混合物：
【化１２】
0005961259.tif 000025
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の使用。
【請求項１７】
医薬組成物が、式（Ｉａ）：
【化１３】
0005961259.tif 000026
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物を含む、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
医薬組成物が、式（Ｉｂ）：
【化１４】
0005961259.tif 000027
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物を含む、請求項１６に記載の使用。
【請求項１９】
医薬組成物が、式（IIａ）：
【化１５】
0005961259.tif 000028
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物を含む、請求項１６に記載の使用。
【請求項２０】
医薬組成物が、式（IIｂ）：
【化１６】
0005961259.tif 000029
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物を含む、請求項１６に記載の使用。
【請求項２１】
医薬組成物が、式（Ｉａ）の化合物、式（Ｉｂ）の化合物、式（IIａ）の化合物及び式（IIｂ）の化合物の２又は３以上の混合物：
【化１７】
0005961259.tif 000030
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
を含む、請求項１６に記載の使用。
【請求項２２】
Ｘが、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ又は８２Ｂｒである、請求項１６〜２１のいずれかに記載の使用。
【請求項２３】
Ｘが、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ又は１３１Ｉである、請求項１６〜２１のいずれかに記載の使用。
【請求項２４】
患者の領域が心臓である、請求項１６〜２２のいずれかに記載の使用。
【請求項２５】
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−１−［７６Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−１−［７６Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−１−［７７Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−１−［７７Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−１−［８２Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−１−［８２Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２４Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２４Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２５Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２５Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１３１Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１３１Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［７６Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［７６Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［７７Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［７７Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［８２Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［８２Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２４Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２４Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２５Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２５Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１３１Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン、及び
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１３１Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オンからなる群から選択される化合物。
【請求項２６】
式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（IIａ）及び（IIｂ）：
【化１８】
0005961259.tif 000031
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物の２又は３以上を含む組成物。
【請求項２７】
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン、及び
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オンからなる群から選択される、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２８】
化合物が、
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン、及び
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オンからなる群から選択される１又は２以上の化合物である、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
化合物が、
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン、及び
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オンからなる群から選択される１又は２以上の化合物である、請求項１６に記載の使用。
【請求項３０】
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン、及び
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オンからなる群から選択される２又は３以上の化合物を含む、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３１】
患者の領域の画像化に使用するための、請求項１〜７、２５及び２７のいずれかに記載の化合物。
【請求項３２】
患者の領域の画像化に使用するための、請求項８〜１５及び２８のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項３３】
患者の領域の画像化に使用するための、請求項２６又は３０に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射標識されたロテノン誘導体、並びにこれらの調製方法及び画像診断における使用を提供する。特に、本発明は、放射性ヨウ素化ロテノン誘導体、これらの調製方法及び虚血の領域を検出するための単光子放射型コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ，Single Photon Emission Computed Tomography）心筋灌流画像化におけるこれらの使用を提供する。
【背景技術】
【０００２】
心筋灌流画像化は、心臓の筋肉への血流量を評価する非侵襲的検査であり、心筋虚血、心筋梗塞及び冠状動脈性心疾患の診断に使用される。検査では、ガンマ放射性の放射性核種を含有する核トレーサーが患者の血液の流れの中に注射され、トレーサーが、良好な血流を受け取る心筋細胞により取り込まれる。次に、心臓が、トレーサーの放射性核種により放出されたガンマ線を検出するカメラで画像化され、それによって心臓への血液灌流又は血流の画像マップを提供する。心臓の２つの別個の走査が実施される：心臓が安静時の第１の走査及び心臓が増加した仕事負荷下（すなわち、ストレス状態下）にある第２の走査である。２つの別個の走査は、血流がストレス状態下で不十分であり、冠動脈に妨害物又は狭窄が存在することを示す心臓の区域があるかを評価するために比較される。
【０００３】
Van Brocklin et al.（米国特許出願公開第２００９／０１３６４２４号明細書）は、心臓の心筋組織に局在化する能力に基づいて心筋流トレーサーとして使用される、放射標識されたロテノン誘導体を以前に調製している。しかし、これらの誘導体を合成するのに必要なステップの数のため、心筋灌流画像化におけるこれらの広範囲な臨床使用が除外されることがある。したがって、容易に調製することができ、心筋灌流画像化に効果的に使用されるために十分な安定性を示す、放射標識されたロテノン誘導体の必要性が存在する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００９／０１３６４２４号明細書
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、放射標識されたロテノン誘導体、並びにこれらの調製方法及び画像診断における使用を提供する。特に、本発明は、放射性ヨウ素化ロテノン誘導体、これらの調製方法及び虚血の領域を検出するための単光子放射型コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）心筋灌流画像化におけるこれらの使用を提供する。
【０００６】
１つの態様において、本発明は、式（Ｉ）又は式（II）：
【０００７】
【化１】
0005961259.tif 000002
【０００８】
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の化合物を提供する。
【０００９】
別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物、式（II）の化合物又はこれらの混合物：
【００１０】
【化２】
0005961259.tif 000003
【００１１】
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
と、生理学的に許容されるビヒクルとを含む医薬組成物を提供する。
【００１２】
さらなる態様において、本発明は、
式（Ｉ）の化合物、式（II）の化合物又はこれらの混合物：
【００１３】
【化３】
0005961259.tif 000004
【００１４】
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
と、生理学的に許容されるビヒクルとを含む組成物の診断有効量を患者に投与し、組成物の一部が患者の領域に保持されることと、
患者の領域において放射線を検出することと、
患者の領域の画像を得ることと
を含む、患者の領域を画像化する方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
本発明のこれら及び他の特徴は以下の説明からより明らかとなり、その説明においては添付の図面が参照される。
【図１】本発明のロテノン誘導体を形成する合成スキームの例を説明する図である。
【図２】本発明の非放射性［１２７Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体のクロマトグラムを示す図である。
【図３Ａ】本発明の［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体の混合物のクロマトグラムを示す図である。
【図３Ｂ】図３Ａの［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体の混合物の精製画分のクロマトグラムを示す図である。
【図４】培養した心筋細胞における本発明の［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体及び９９ｍＴｃ−テトロホスミンの内部移行の量を示す図である。初代新生児心筋細胞を、本発明の［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体（ｒｏｔ）又は９９ｍＴｃ−テトロホスミン（ｍｙｏ）と共にインキュベートした。内部移行の量を、総タンパク質１ｕｇ当たりのｃｐｍで示す。それぞれの化合物について２つの別個の試験の結果を示す。
【図５】ラットへの注射の３０分後の１２３Ｉ−ロテノン分布のＳＰＥＣＴ画像（加算画像（summed images））を示す図である。左上から始まり時計回りに、最大値投影、冠状面図、横断図及び矢状面図が示されている。
【図６Ａ−Ｃ】安静状態（Ｒ）及びストレス状態（Ｓ）のブタ対象のインビボ心臓のそれぞれの切片の、ＳＰＥＣＴ画像化により決定された短軸像、水平長軸像及び垂直長軸像を示す図である。図６Ａ〜Ｃの明領域は、本発明の放射性標識されたトレーサーの取り込みが比較的低い代表的な区域であり、血流が低減した（虚血）区域を示す。
【図７】ブタ対象の心臓の単離した横切開片から放射されるガンマ放射線の測定を使用して得た、安静状態及びストレス状態のブタ対象のインビボ心臓のＳＰＥＣＴにより決定された極性マップを示し、ブタの心臓の安静及びストレス状態の代表的な極性マップを示す図である。安静状態のとき、ブタ対象に、本発明の［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体６〜９の混合物及び金BioPal STERIspheres（商標）の組み合わせを投与した。ストレス状態では、ブタ対象に、本発明の［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体６〜９の混合物及びサマリウムBioPal STERIspheres（商標）の組み合わせを投与した。ブタの心臓における虚血は、ブタの冠動脈左前下行枝（ＬＡＤ，left anterior descending）を収縮させることにより模擬した。図７Ａ及び７Ｂは、安静状態及びストレス状態のそれぞれのブタ対象のインビボ心臓における［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体６〜９の混合物により放射されたガンマ放射線のＳＰＥＣＴ画像化により決定された極性マップを示す。図７Ｃ及び７Ｄは、安静状態及びストレス状態のそれぞれのブタ対象の心臓に導入された、中性子放射化金及びサマリウムBioPal STERIspheres（商標）により放射されたガンマ放射線の測定を使用して決定された極性マップを示す。図７Ｅ及び７Ｆは、安静状態及びストレス状態のそれぞれのブタ対象の心臓における［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体６〜９の混合物により放射されたガンマ放射線の測定を使用して決定された極性マップを示す。図７Ｂ、７Ｄ及び７Ｆの暗領域は、血流が低減した（虚血）区域を示す。
【図８】心筋血流（ＭＢＦ，myocardial blood flow）の関数としての、ブタ対象の心臓における本発明の［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体６〜９の混合物、Myoview（商標）（９９ｍＴｃ−テトロホスミン）及び９９ｍＴｃ−セスタミビの取り込み（１グラム当たりの注射用量のパーセント；％ＩＤ／ｇ）のプロットを示す図である。
【図９】ＬＶの１ｇ当たり１．７ｍｌ／分の流速での静脈収集時間の関数としての、１３１Ｉ−アルブミン、９９ｍＴｃ−セスタミビ２０１タリウム及び本発明の［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体６〜９の混合物の分画静脈出現速度の値ｈ（ｓ−１）を示す図である。
【図１０】９９ｍＴｃ−セスタミビ及び本発明の［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体６〜９の混合物の最大純取り込みの値を示す図である。各ポイントは、別々の動物における１回の実験を表す。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明は、放射標識されたロテノン誘導体、並びにこれらの調製方法及び画像診断における使用を提供する。特に、本発明は、放射性ヨウ素化ロテノン誘導体、これらの調製方法及び虚血の領域を検出するための単光子放射型コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）心筋灌流画像化におけるこれらの使用を提供する。
【００１７】
本発明は、式（Ｉ）及び式（II）：
【００１８】
【化４】
0005961259.tif 000005
【００１９】
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
のロテノン誘導体に関し、これは、ＳＰＥＣＴ画像化に有用なガンマ線放射の放射性核種を含有する。本発明のロテノン誘導体は、ミトコンドリア電子伝達鎖の複合体Ｉに高い親和性を有し、したがって、心臓の心筋などのミトコンドリアの高い含有量を有する組織に局在化しうる。特に、本発明のロテノン誘導体を使用する心臓の血流のＳＰＥＣＴ画像化（心筋灌流画像化）を使用して、心臓への血流の程度を評価し、対象の冠動脈疾患の診断を補助することができる。
【００２０】
式（Ｉ）及び式（II）の化合物を使用する適切な心筋灌流画像化研究は、一般に受け入れられている慣例に従って、心臓画像化の医学専門分野（放射線医学、核医学及び心臓学）の当業者により実施することができる。
【００２１】
本発明の診断用組成物を、注射及び点滴が含まれるが、これらに限定されない非経口投与によって、単独で又は互いに組み合わせて投与することができる。式（Ｉ）の化合物、式（II）の化合物又はこれらの混合物を、生理学的に許容されるビヒクルを含む医薬組成物の形態で投与することができる。
【００２２】
本明細書で使用されるとき、「生理学的に許容されるビヒクル」という用語には、式（Ｉ）の化合物又は式（II）の化合物の結合活性の有効性を干渉せず、化学的に不活性であり、投与される患者に対して毒性がない担体媒質が含まれるが、これに限定されない。
【００２３】
本明細書で使用されるとき、生理学的に許容されるビヒクルの「有効量」という用語は、有意な背景を導入することなく、対象の所望の領域の明確な画像化をもたらす生理学的に許容されるビヒクルの非毒性量を意味する。
【００２４】
生理学的に許容されるビヒクルの非限定例には、ヒト血清アルブミン；水性緩衝溶液；エタノールなどのアルコール；水性エタノールなどの水性アルコール溶液；滅菌水；生理食塩水；塩化ナトリウム注射液；リンゲル注射液；乳酸リンゲル注射液；デキストロース注射液；デキストロース及び塩化ナトリウム注射液；及びプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えば、ポリエチレングリコール３００及びポリエチレングリコール４００）、グリセリン、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ポリソルベート−８０（ツイーン８０）、ポリソルベート−２０（ツイーン２０）、ドデカン酸ナトリウム又は臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウムを含有する水溶液が含まれる。ビヒクルの特定の例には、プロピレングリコール（１０〜６８容量％）、エタノール（１〜２０容量％）、ポリエチレングリコール３００（１０〜５０容量％）、ポリエチレングリコール４００（１〜９容量％）、グリセリン（１〜１５容量％）、ＤＭＡ（０．５〜３容量％）、ＰＶＰ（０．５〜６容量％）又はツイーン８０（０．０８〜０．４容量％）を含有する水溶液が含まれる。
【００２５】
本発明の医薬組成物は、アスコルビン酸、ゲンチシン酸又はパラ−アミノ安息香酸などの安定剤又は酸化防止剤を含むこともできる。
【００２６】
本発明の化合物は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（IIａ）又は（IIｂ）：
【００２７】
【化５】
0005961259.tif 000006
【００２８】
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
の異性体でありうる。
【００２９】
本発明の放射性トレーサーに使用することができるガンマ放射性の放射性核種の例には、限定されるものではないが、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、８２Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉが含まれる。
【００３０】
より詳細には、本発明の化合物は、下記：
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−１−［７６Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−１−［７６Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−１−［７７Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−１−［７７Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−１−［８２Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−１−［８２Ｂｒ］ブロモ−２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２４Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２４Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２５Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２５Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１３１Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１３１Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［７６Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［７６Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［７７Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［７７Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［８２Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［８２Ｂｒ］ブロモ−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２４Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２４Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２５Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２５Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１３１Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン、及び
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１３１Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オンからなる群から選択されうる。
【００３１】
別の例において、本発明の化合物は、下記：
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン、及び
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オンからなる群から選択される。
【００３２】
本発明は、また、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（IIａ）及び（IIｂ）の化合物の２又は３以上の混合物を含む組成物に関する。
【００３３】
特に、本発明は、下記：
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン、及び
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オンからなる群から選択される２又は３以上の化合物の混合物を含む組成物を提供する。
【００３４】
本出願は、下記：
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン、及び
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オンからなる群から選択される１又は２以上の化合物と、
生理学的に許容されるビヒクルと
を含む医薬組成物も提供する。
【００３５】
本発明の放射性ヨウ素化誘導体は、図１に説明されている合成スキームに従って調製することができる。１つの例では、ロテノン（１）を、オキシダントIodogen（商標）（１，３，４，６−テトラクロロ−３α，６α−ジフェニルグリコールウリル；Pierce社（Rockford, IL））の存在下、水溶液中で放射性ハロゲン化物のナトリウム塩と反応させて、放射性異性体アルキルハロゲン化物（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（IIａ）及び（IIｂ）を形成することができる。或いは、ロテノン（１）を、Iodogen（商標）の存在下、水溶液中で非放射性ハロゲン化物のナトリウム塩と反応させて、非放射性異性体アルキルハロゲン化物（IIIａ）、（IIIｂ）、（IVａ）及び（IVｂ）を形成することができ、これらを、同位体交換反応の使用により異性体（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（IIａ）及び（IIｂ）に変換することができる。異性体（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（IIａ）及び（IIｂ）を一緒に又は互いに別々に使用することができ、本発明のＳＰＥＣＴ画像化に放射性トレーサーとして個別に使用することができる。
【００３６】
本発明の医薬組成物に含まれる式（Ｉ）の化合物及び／又は式（II）の化合物の量は、満足のゆく画像化を提供するのに十分であるべきである。例えば、線量は、約１．０〜約５０ミリキューリー又はその間の任意の部分範囲若しくは値、約１．０〜約１０ミリキューリー又はその間の任意の部分範囲若しくは値、約１０〜約２０ミリキューリー又はその間の任意の部分範囲若しくは値、約２０〜約３０ミリキューリー又はその間の任意の部分範囲若しくは値、約３０〜約４０ミリキューリー又はその間の任意の部分範囲若しくは値、或いは約４０〜約５０ミリキューリー又はその間の任意の部分範囲若しくは値でありうる。本発明の放射性トレーサーのそれぞれの量及び活性は、約１〜３時間にわたって患者に留まるように選択されるべきであるが、より長い時間及びより短い時間の両方が許容される。
【００３７】
本発明は、また、
式（Ｉ）の化合物、式（II）の化合物又はこれらの混合物：
【００３８】
【化６】
0005961259.tif 000007
【００３９】
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
と、生理学的に許容されるビヒクルとを含む組成物の診断有効量を患者に投与し、組成物の一部が患者の領域に保持されることと、
患者の領域において放射線を検出することと、
患者の領域の画像を得ることと
を含む、患者の領域を画像化する方法に関する。
【００４０】
上記に定義された方法の１つの例において、患者に投与される化合物は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（IIａ）、（IIｂ）の異性体又はこれらの混合物：
【００４１】
【化７】
0005961259.tif 000008
【００４２】
［式中、Ｘは、ガンマ放射性の放射性核種である］
である。
【００４３】
上記に定義された方法のさらなる例において、患者に投与される化合物は、下記：
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−１−［１２３Ｉ］ヨードプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン；
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｒ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オン、及び
（２Ｒ，６ａＳ，１２ａＳ）−２−（（Ｓ）−２−［１２３Ｉ］ヨード−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−８，９−ジメトキシ−１，２，１２，１２ａ−テトラヒドロクロメノ［３，４−ｂ］フロ［２，３−ｈ］クロメン−６（６ａＨ）−オンからなる群から選択される１又は２以上の化合物である。
【００４４】
上記に定義された方法の別の例において、患者の領域は心臓である。
【００４５】
上記に記載された方法のさらなる例において、画像化される患者の領域は心臓であり、投与するステップの前に、患者を運動させること、又はジピリダモール、ドブタミン、アデノシン若しくはレガデノサン（regadenosan）などのストレス剤を患者に投与することによって、ストレスが、患者に約１〜約８分間にわたって誘発される。
【００４６】
上記に定義された方法の別の例では、式（Ｉ）の化合物及び／又は式（II）の化合物は、ストレスが患者に誘発された期間の３０秒〜１分後に患者に投与される。
【００４７】
以下の実施例は、本発明の特定の実施形態を示すために含まれる。当業者は、本開示を考慮して、本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、開示されている具体的な実施形態に多くの変更を行うことができ、同様又は類似の結果をそれでもなお得ることができることを理解するべきである。
【００４８】
ロテノンの標識化：
【００４９】
【化８】
0005961259.tif 000009
【００５０】
ＴＦＡ（１７ｍＬ）中のロテノン（１、４２．５ｍｇ）を、ＮａＯＨ溶液（０．１Ｍ、５ｍＬ）中のＮａＩ（８１ｍｇ）と混合した。撹拌混合物に、ＴＦＡ（３ｍＬ）中のIodogen（商標）（４５ｍｇ）を室温で加えた。反応混合物を６０℃で４５分間撹拌し、減圧下で濃縮した。水（２０ｍＬ）を注ぎ入れ、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ×３）で抽出し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、緑色の油状物を生じた。この残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）に溶解し、ＨＰＬＣ精製に付した。使用したカラムは、２１．２×２５０ｍｍ及び５μｍの分取Luna 5u C18(2)（Phenomenex社、CA）であった。試料を、水及びＥｔＯＨ（５０／５０）の組み合わせの使用により６ｍＬ分−１の流速で溶出した。検出器を２９０ｎｍに設定した。所望の生成物（保持時間５１〜６３分）を収集し、蒸発乾固して、異性体２〜５の混合物を白色の固体（３ｍｇ、５．６％）として生じた。ジアステレオマー２と３の対及びジアステレオマー４と５の対が、以下の比、１３％の２と３：８７％の４と５で生成された。
【００５１】
図２は、ヨウ素化ロテノンの精製混合物のＵＶクロマトグラムを示し、ここで、ピークＡ及びＢはジアステレオマー２と３の対を表し、ピークＣ及びＤはジアステレオマー４と５の対を表す。ピークＡ〜Ｄに対応するそれぞれの異性体の６’位での絶対配置は、決定されなかった。
【００５２】
ピークＡ〜Ｄに対応する異性体を精製し、１Ｈ−及び１３Ｃ−ＮＭＲ、並びにＨＲＭＳにより分析した。
【００５３】
ピークＡ：
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．８３（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、６．７４（ｓ，１Ｈ）、６．４９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、６．４３（ｓ，１Ｈ）、５．０２〜４．８９（ｍ，１Ｈ）、４．６２（ｄｄ，Ｊ＝１２．１，３．１Ｈｚ，１Ｈ）、４．２８〜４．１０（ｍ，２Ｈ）、３．９２（ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．８４（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，２Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．７４（ｓ，３Ｈ）、３．３１（ｄｄ，Ｊ＝１４．３，７．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．１３（ｄｄ，Ｊ＝１５．９，８．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．９１（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １８８．９７、１６６．４０、１５７．７９、１４９．４６、１４７．３８、１４３．８５、１３０．１５、１１３．６５、１１２．５４、１１０．１５、１０４．８９、１０４．６６、１００．８９、８８．４４、７２．２４、７１．２９、６６．２８、５９．８０、５６．３２、５５．８９、４４．６１、３２．５６、２６．６１。
Ｃ２３Ｈ２３ＩＯ７  ＥＩのＨＲＭＳ  計算値５３８．０４８８、実測値５３８．０５１４。
【００５４】
ピークＢ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．８２（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）、６．７４（ｓ，１Ｈ）、６．５３（ｓ，１Ｈ）、６．４６（ｄ，１Ｈ）、５．０９（ｔ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、４．９６（ｓ，１Ｈ）、４．７０〜４．５５（ｍ，１Ｈ）、４．１９（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．８８〜３．６７（ｍ，９Ｈ）、３．５３〜３．３４（ｍ，１Ｈ）、３．２９〜３．１０（ｍ，１Ｈ）、１．９３（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１２６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １８８．９１、１６６．８７、１５７．７１、１４９．４９、１４７．３６、１４３．８４、１３０．０４、１１３．６０、１１２．２６、１１０．２０、１０４．７２、１０４．５５、１００．９０、８８．０９、７２．２５、７１．４３、６６．１７、５８．６８、５６．２９、５５．８３、４４．５８、３１．６５、２３．５２。
Ｃ２３Ｈ２３ＩＯ７  ＥＩのＨＲＭＳ  計算値５３８．０４８８、実測値５３８．０４７３。
【００５５】
ピークＣ：Ｃ２３Ｈ２３ＩＯ７  ＥＩのＨＲＭＳ  計算値５３８．０４８８、実測値５３８．０５５０。
【００５６】
ピークＤ：
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．８１（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、６．７３（ｓ，１Ｈ）、６．４６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、６．４３（ｓ，１Ｈ）、４．９４〜４．８８（ｍ，２Ｈ）、４．６０（ｄｄ，Ｊ＝１２．１，３．１Ｈｚ，１Ｈ）、４．１７（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．８３（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．７４（ｓ，３Ｈ）、３．４６（ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．３６（ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．２０（ｄｄ，Ｊ＝１６．２，９．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．１２（ｄｄ，Ｊ＝１６．２，７．９Ｈｚ，１Ｈ）、１．９８（ｂｓ，１Ｈ）、１．３６（ｓ，３Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １８８．９６、１６６．７６、１５７．８９、１４９．４９、１４７．３６、１４３．８５、１２９．９９、１１３．６０、１１３．１０、１１０．２１、１０４．８１、１０４．５９、１００．８９、８７．６９、７２．２５、７１．７１、６６．２２、５６．３０、５５．８５、４４．５８、２７．３５、２２．１９、１７．４６；
Ｃ２３Ｈ２３ＩＯ７  ＥＩのＨＲＭＳ  計算値５３８．０４８８、実測値５３８．０５９０。ピークＤに対応する異性体の構造は、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣ及びＣＯＳＹ  ＮＭＲ実験の使用により確認された。
【００５７】
ロテノンの放射標識化：
【００５８】
【化９】
0005961259.tif 000010
【００５９】
１２．５ｍＣｉの、０．１Ｍ  ＮａＯＨ中のＮａ１２３Ｉ溶液を、１．５ｍＬのBioRadバイアルに加えた。Ｎａ１２３Ｉ溶液の容量を、対応する技術データシートの放射能濃度に基づいて計算した。１７０μＬの、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）中のロテノン（１、２．５ｍｇ／ｍＬ）の溶液及び３０μＬの、ＴＦＡ中のIodogen（商標）溶液（０．７５ｍｇ／ｍＬ）を加えた。ロテノン（１）とIodogen（商標）の比は２０：１であった。混合物を、サーモミキサー（thermomixer）において６００ｒｐｍにより６０℃で４５分間加熱した。室温で５分間冷却した後、反応混合物をＨＰＬＣカラム（Phenomenex Luna C18(2)、５μｍ、１００Å、２５０×４．６ｍｍカラム及び５０％エタノール／５０％水の移動相；流速：１．０ｍＬ／分）に適用して、粗反応混合物を精製した。放射計検出は、０〜２０４８ｋｅＶにわたるオープンウインドウ（open window）の使用により実施した（Ｉ−１２３ピークは１５９ｋｅＶで検出された）。異性体６〜９を含有する精製された溶液を単離し、一定した窒素供給下、６０℃で加熱して、エタノールを部分的に蒸発させた。木炭フィルターをベントとして、また濃縮過程の際のいかなる遊離Ｉ−１２３をも吸収するために使用した。単離された異性体の放射化学的純度は９０％以上であった。ＨＰＬＣ精製の後の異性体６〜９の全体的な収率は３０％であった。ジアステレオマー６と７の対及びジアステレオマー８と９の対が、以下の比、１２％の６と７：８８％の８と９で生成された。
【００６０】
図３Ａは、ジアステレオマー６と７の対を表すピークＡ＊及びＢ＊、並びにジアステレオマー８と９の対を表すピークＣ＊及びＤ＊を有する精製された反応混合物のクロマトグラムを、これらのピークの溶出時間と、図２に示されているピークＡ及びＢ（非放射性ジアステレオマー２と３の対に対応する）とピークＣ及びＤ（非放射性ジアステレオマー４と５の対に対応する）の溶出時間との比較に基づいて示す。ピークＡ＊〜Ｄ＊に対応するそれぞれの異性体の６’位での絶対配置は、決定されなかった。図３Ｂは、異性体６〜９を含有する精製された反応混合物の精製された画分のクロマトグラムを示す。
【００６１】
標識されたロテノン誘導体を用いた細胞取り込みアッセイ
内部移行アッセイを使用して、候補灌流トレーサーのインビトロ機能について検査した。このアッセイでは、ラットの心筋細胞の培養物を３〜５×１０５個の細胞／ｍＬの密度で２４ウエル組織培養プレートに播種した。次に心筋細胞を、細胞培養培地（ＤＭＥＭ）に混合した０．５μＣｉの放射標識されたトレーサーの９９ｍＴｃ−テトロホスミン（Myoview（商標））又は［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン（異性体６〜９を含有する混合物）と共にインキュベートし、５分間までインキュベートした。異なる時点で、全上澄みを収集し、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、次に、１Ｍ  ＮａＯＨに１５分間曝露して溶解した。試料を、ガンマウエルカウンターでカウントし、溶解試料について細胞タンパク質を決定した。データを分析して、総タンパク質当たりのｃｐｍとして表した総「内部移行」画分を示した（図４）。
【００６２】
予備アッセイでは、１２３Ｉ−ロテノンの細胞内部移行は、急速で即時であり、最大取り込みは１５秒までであった。比較すると、９９ｍＴｃ−テトロホスミンの内部移行は１５秒で明白であったが、漸増が５分まで見られた。［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノンの内部移行は、その後の時点では１５秒と比較して同じほど高くなかった。９９ｍＴｃ−テトロホスミンと比べて、［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノンは、全ての時点で高いままであり、［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノンが９９ｍＴｃ−テトロホスミンよりもインビトロにおいて心筋細胞灌流の高い能力を有しうることを示唆している。
【００６３】
化合物６〜９の安定性
ロテノンを、上記に記載された方法に従って１２３Ｉで放射標識して、化合物６〜９の混合物を生成した。０．５６ｍＬの、２３％エタノール中の化合物６〜９の１５．５ｍＣｉ／ｍＬ混合物を、３．８４ｍＬの１０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．５及び０．１０ｍＬの９５％エタノールで希釈して、約５のｐＨの値を有する４．５ｍＬの１．９ｍＣｉ／ｍＬ溶液を生成した。溶液を撹乱することなく室温で２２時間放置した。２２時間後、化合物の混合物の分析は、これらの生成物には加水分解による分解が実質的にないことを明らかにした。
【００６４】
異性体６〜９（１２％のジアステレオマー６及び７；８８％のジアステレオマー８及び９）を含有する混合物のSprague-Dawleyラットにおけるエキソビボ体内分布
０．５ｍＬの量の、７％エタノール中の化合物６〜９（混合物Ａ：１２％のジアステレオマー６及び７；８８％のジアステレオマー８及び９の異性体混合物を含む組成物）の２．４ｍＣｉ／ｍＬ混合物を、０．５８ｍＬの１０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ６．５及び０．０２３ｍＬの９５％エタノールで希釈して、約５のｐＨの値を有する１．１ｍＬの１．１ｍＣｉ／ｍＬ溶液を生成した。この溶液（０．９ｍＣｉ）の０．８ｍＬの量を、１４匹のSprague-Dawleyラットの尾静脈を介して注射した。ラットのうち６匹を使用して、２時間後の化合物６〜９の混合物の体内分布を評価し、残りの８匹のラットを使用して、２４時間後の化合物の体内分布を決定した。選択した臓器を収集及び計量し、放射能を、検出範囲の１３８〜２０７ｋｅＶを使用するガンマウエルカウンターによりそれぞれの臓器で測定し、放射能の測定値を注射の時点に減衰補正した。組織１グラム当たりの注射された用量の百分率の値（％ＩＤ／ｇ）を、組織１グラム当たりの注射された総放射能に対する臓器における放射能の比を取って計算した。ラットの心臓による取り込みは、心臓が良好に画定されている図５に示されたＳＰＥＣＴ／ＣＴ画像により確認された。
【００６５】
表１に示されているように、注射の２時間後、心筋組織に有意な取り込み（２．０１±０．４８％）があったが、他の全ての臓器におけるトレーサー蓄積は、胃（３．２６±１．７７％）を除いて心臓より低かった。心臓と血液の比は、注射の２時間後で高く（８．３７±３．９７）、トレーサーが血液から心筋に急速に抽出されたことを示している。心臓取り込みと周囲の臓器との比も高く（心臓／肝臓：２．９８±０．９３；心臓／肺：４．１１±１．０４）、これはＳＰＥＣＴ／ＣＴ画像（図５）において背景から最小限の干渉しかないことと一致している。
【００６６】
２４時間後、化合物６〜９の混合物の大部分（８２〜９８％）がほとんどの臓器から除かれ、胃（３５％）及び尿／膀胱（１６％）からの洗い出し率はより低い。小型分子に基づいた放射性医薬品の一般的な腎臓排泄経路に起因して、注射の２４時間後で高い尿取り込みが予測される。胃における蓄積及び遅い除去は、ナトリウムヨウ素共輸送体（ＮＩＳ，sodium iodide symporter）の活性に関連する可能性がある。ＮＩＳは、ナトリウム及びヨウ化物イオンを交換する膜貫通糖タンパク質であり、哺乳動物の腸管腔に高いレベルで発現する。心臓からの除去は、肝臓、血液及び肺よりも速く、注射の２時間〜２４時間後に心臓と血液、心臓と肝臓及び心臓と肺の比が有意に低減したことから示されている。
【００６７】
甲状腺の取り込み量は、インビボ脱ヨウ素化の程度を示す。化合物６〜９の混合物の甲状腺取り込みは注射の２時間後で低く（臓器当たり０．３３±０．１２％ＩＤ）、トレーサーが２時間以内では比較的安定していることを示す。甲状腺取り込みは、注射の２４時間後で有意に増加し、計算された線形甲状腺蓄積率は、２時間〜２４時間で１時間当たり約０．１３％であり、これは注射の２４時間後のトレーサーの脱ヨウ素化と一致する。この研究では、化合物６〜９の混合物の正常な「影響を受けない」分布を理解することが必要であったので、甲状腺遮断試薬は用いられなかった。
【００６８】
【表１】
0005961259.tif 000011
【００６９】
異性体６〜９の混合物の精製された画分のSprague-Dawleyラットにおけるエキソビボ体内分布
体内分布研究は、異性体６〜９の混合物（混合物Ａ）の精製された画分を使用して上記に記載された方法に従って実施した。
【００７０】
図３Ｂは、体内分布研究に使用された４つの別個の画分のＨＰＬＣクロマトグラムを示す：画分１：１００％の成分Ａ＊を含む画分；画分２：１５．２％の成分Ａ＊及び８４．８％の成分Ｂ＊を含む異性体混合物を含む画分；画分３：４．４％の成分Ａ＊、４．４％の成分Ｂ＊及び９１．２％の成分Ｃ＊を含む異性体混合物を含む画分；画分４：１．５％の成分Ａ＊、０．８％の成分Ｂ＊及び９７．７％の成分Ｄ＊を含む異性体混合物を含む画分。
【００７１】
表２は、画分１〜４のそれぞれの体内分布データ（注射の２時間後の組織１ｇ当たりの％ＩＤ）を示す。データは、僅かに低い心臓取り込み及びかなり低い肝臓取り込みを示し、結果として比較的高い心臓対肝臓の比をもたらすピークＢ＊により表される異性体を除いて、異性体６〜９のそれぞれの体内分布がほとんどの臓器において類似していることを示唆している。Ｂ＊の腸取り込みも、他より有意に高い。
【００７２】
４つの異性体６〜９の体内分布の類似性の結果、これらの４つの異性体を多様な比で含有する混合物を、さらに精製することなくＳＰＥＣＴ画像化に使用できると考えられる。
【００７３】
【表２】
0005961259.tif 000012
【００７４】
以下の例では、化合物６〜９（１２％の６及び７；８８％の８及び９；図３Ａ参照）の混合物の分布、並びに金及びサマリウムの非放射性安定同位体（BioPal STERIspheres（商標））でマークした微小球の分布を、ブタ心臓モデルの安静及びストレス状態の両方で評価した。
【００７５】
注射した後、マークした微小球は、循環血液によりブタの心筋の血管内に留まる。心筋組織の血管内に滞留するこれらの安定同位体マーク微小球の相対量は、分析される組織を最初に中性子放射化に付し、次に微小球内に含有されている得られた放射性同位体から放射されるガンマ放射線の量を測定することによって、その場で測定することができる。微小球から放射されたガンマ放射線の測定量は、微小球が配される組織への、微小球を含有する血液の以前の流量を示す。灌流を測定する際の安定標識微小球の使用は、Reinhardt et al. Am J. Physiol Heart Circ Physiol 280: H108-H116, 2001に記載されており、その開示は参照により本明細書に組み込まれる。
【００７６】
外科的情報
ブタにはTelazolの筋肉内注射により麻酔をかけた。グリコピロレートも、挿管法を促進するために投与した。ブタに挿管し、イソフルオラン（isofluorane）マスクの使用により麻酔下に維持した。次にブタを右側臥位に置き、左側のほぼ第３肋間隙で開胸術に付した。左胸腔を開放した後、心膜を心臓の縦軸に沿って切開し、カテーテル（カテーテル１）を左心房に挿入した。
【００７７】
血管ループを、Ｄ２分枝の３ｍｍ下方の冠動脈左前下行枝（ＬＡＤ）の周囲に置いた。大腿動脈を切開により左脚から露出させ、カテーテル（カテーテル２）をその動脈に挿入した。カテーテル２を吸引ポンプ（withdrawal pump）（モデル PHD 2000, Harvard Apparatus社）に取り付けた。全ての連結線及び両方のカテーテルを、ヘパリン化食塩水で初回刺激し、血液を４分間かけて４ｍＬ／分の速度で収集して、１６ｍＬの基準血液採取をもたらした。２つの標準ＩＶ耳カテーテルをブタのそれぞれの耳に設置した（一方は本発明の放射性トレーサーを注射するためであり、他方はストレス剤を注射するためであった）。
【００７８】
安静研究：
５ｍＬの十分に混合した金BioPAL STERIspheres（商標）を、１０〜３０秒間かけてカテーテル１によりブタの左心房に注射した。次に血液をカテーテル２により４ｍＬ／分の吸引速度で４分間採取し、１６ｍＬの基準血液採取をもたらした。非経口投与のための化合物６〜９の混合物の溶液は、０．２０ｍＬの、化合物６〜９の混合物の１３．６ｍＣｉ／ｍＬ水溶液を、０．１６ｍＬの９５％エタノール及び２．８４ｍＬの１０ｍＭ酢酸ナトリウム緩衝液で希釈して、３．２ｍＬの、５％エタノール中０．８５ｍＣｉ／ｍＬ溶液を生成することによって調製した。３ｍＬの、化合物６〜９の混合物の非経口溶液を、血液が採取され、画像化セッションが開始された後、標準ＩＶ耳カテーテルに注入し、ブタの左耳の中に注入した。Ｉ−１２３の分布の心電図ゲート画像を、カメラの視野の中心に動物の心臓を置いて、専用の心臓ＳＰＥＣＴカメラ（Discovery NM 530c, GE Healthcare社）で得た。専用システムは、ピンホール視準及び１９．８ｃｍ×８ｃｍのテルル化カドミウム亜鉛固体検出器を使用した。カメラの感度は、伝統的なガンマカメラの約４×であり、エネルギー分解能に２×改善を有した。データをリストモードにより、エネルギーウインドウ（energy window）の１５９±１６ｋｅＶを使用して、同時に得た。それぞれ１５分間の２つの取得を、安静状態の動物から次々に得て、最初のものはトレーサーの注射の直後から始まった。第３の１５分安静時画像は、動物にストレスを与える直前に得た。全ての画像を、最尤推定期待値最大化（ＭＬＥＭ，maximum-likelihood expectation-maximization）再構成アルゴリズムに基づいて業者供給反復アルゴリズムの使用により標準的臨床プロトコールに従って再構成した。データは、減弱の効果については補正しなかった。
【００７９】
ストレス研究：
ストレス研究の時間線は下記に記載したとおりであった。
【００８０】
0005961259.tif 000013
【００８１】
動物には、右耳の耳カテーテルに注入された血管拡張剤のPersantine（ジピリダモール）の使用によりストレスを与えた。Persantine（０．５６ｍｇ／ｋｇ／分）を４分間かけてＩＶ注入により送達した。ブタの冠動脈ＬＡＤを８分間で収縮させて、ブタにおいて虚血状態を模倣した。サマリウムBioPAL STERIspheres（商標）を、Persantineの注入開始後の８：３０分の時点に注射して、血圧を安定させた。５ｍＬの十分に混合したサマリウムBiopal STERIspheres（商標）を、１０〜３０秒間かけてカテーテル１により左心房に注射した。血液をカテーテル２により４ｍＬ／分の吸引速度で４分間採取し、１６ｍＬの基準血液採取をもたらした。同時に、４ｍＬの、化合物６〜９の混合物の非経口溶液を、左耳の標準ＩＶ耳カテーテルに注入し、２つの１５分間の画像化セッションを実施した。非経口溶液は、０．５５ｍＬの、化合物６〜９の混合物の１３．７ｍＣｉ／ｍＬ水溶液を、０．２１ｍＬの９５％エタノール及び３．４４ｍＬの１０ｍＭ酢酸ナトリウム緩衝液で希釈して、４．２ｍＬの、水中の化合物６〜９の混合物の１．８ｍＣｉ／ｍＬ溶液を生成することによって調製した。
【００８２】
図６Ａ〜Ｃは、安静（Ｒ）及びストレス（Ｓ）状態のブタ対象のインビボ心臓のそれぞれの切片の、ＳＰＥＣＴ画像化により決定された短軸像、水平長軸像及び垂直長軸像を示す。図７Ａ〜Ｂは、ＳＰＥＣＴ画像化セッションの際に得られた画像から調製された、安静状態及びストレス状態のそれぞれのブタ対象のインビボ心臓の極性マップを示す。ＳＰＥＣＴ画像化実験の結果は、ブタ対象の単離心臓の横切開片における、本発明の放射性ヨウ素化ロテノン誘導体により、並びに中性子放射化後の金及びサマリウム微小球により放射されたガンマ放射線の直接測定を伴う２つの追加の実験によって確認した。
【００８３】
図７Ａ〜Ｂに示された画像を得た後、ブタをペントバルビタールナトリウム（２４０ｍｇ／ｍｌ）の２ｍＬ／４．５ｋｇの大量注射によって安楽死させた。ブタの心臓を、安楽死させた後に採取し、流水で十分にすすいだ。左心室を単離し、５つの横断薄片に切断し、これを、それぞれがほぼ等しい濃度の心内膜及び心外膜を含有する約１グラムの貫壁セグメントにさらに細分化した。
【００８４】
組織及び血液試料を計量し、ガンマウエルカウンターの使用により測定して、本発明の放射性ヨウ素化トレーサーのＩ−１２３放射標識により放射されたガンマ放射線の量を決定した。それぞれのセグメントにおいて測定されたガンマ放射線は、心臓の安静及びストレス状態のそのセグメントにおけるトレーサーにより放射されたガンマ放射線の組み合わせた量を表す。試料のカウント及び計量を使用して、組織１グラム当たりの注射用量の百分率（％ＩＤ／ｇ）も計算した。血液及び組織試料中のＩ−１２３が完全に減衰した後、組織と血液の両方をオーブンにより７０℃で４８〜７２時間乾燥し、試料を中性子放射化のために送って、試料に埋め込まれている、得られた放射性［１９８Ａｕ］金含有微小球及び［１５３Ｓｍ］サマリウム含有微小球のそれぞれにより放射されるガンマ放射線を測定した。ブタの単離心臓の安静及びストレス状態の極性マップをＭＡＴＬＡＢ（商標）の使用により生成し、ブタ心臓の底部（心尖部）から頂部（ＡＶ溝）までの全ての横切開セグメントにおいてガンマ測定結果を組み立てた。
【００８５】
本発明の放射性ヨウ素化トレーサーにより放射されたガンマ放射線の測定値から生成された初期極性マップ（示されず）は、安静とストレスの両方の状態のブタの単離心臓におけるガンマ放射線の分布の組み合わせ極性マップを表した。組み合わせ極性マップから安静状態のブタ心臓のガンマ放射線の分布の寄与を取り除くため、この寄与の値を、最初にインビボブタ心臓のＳＰＥＣＴ画像から決定した。
【００８６】
ＳＰＥＣＴ画像（図６Ａ〜Ｃ）の取得の際、安静時の極性マップ及びストレスを誘発した後の極性マップの両方を得た。ストレスを誘発した後に得た画像に基づいて生成された初期極性マップは、安静状態の残留放射能を含有し、したがって、インビボブタ心臓の安静とストレスの両方の状態の初期組み合わせ極性マップを近似的に表した。安静状態極性マップの寄与を、組み合わせ極性マップから、これらの２つの極性マップを整列させ、次に安静状態極性マップの各画素値の寄与を初期組み合わせ極性マップのそれぞれ対応する画素値から差し引くことにより取り除いて、インビボブタ心臓のストレス状態の極性マップを近似的に表す補正極性マップをもたらした。この手順は、ブタ心臓の安静状態極性マップ及びストレス状態極性マップの画素値に対応する初期組み合わせ極性マップの画素値の分率を表す画素値の２つの別個のマトリックスをもたらした。
【００８７】
ＳＰＥＣＴ極性マップの分析から得られたマトリックスを使用して、放射性ヨウ素化ロテノン誘導体から放射されるガンマ放射線の直接測定から得た組み合わせた安静状態とストレス状態の極性マップを、個別の安静状態とストレス状態の極性マップに分けた。
【００８８】
図７Ｃ及び７Ｄは、中性子放射化後の、安静及びストレス状態のそれぞれのブタ対象の心臓における金及びサマリウムBioPal STERIspheres（商標）により放射されたガンマ放射線を使用した測定により決定された極性マップを示す。図７Ｅ及び７Ｆは、安静状態及び（安静状態の寄与を取り除いた後の）ストレス状態のそれぞれのブタ対象の心臓における［１２３Ｉ］ヨウ素化ロテノン誘導体により放射されたガンマ放射線を使用する測定により決定された極性マップを示す。
【００８９】
図７Ｂ、７Ｄ及び７Ｆに示されている暗領域は、冠動脈ＬＡＤの収縮により引き起こされた誘発性閉塞の結果として、ストレス状態のブタ心臓において低減された血流を示す。血流低減の位置は、心臓における収縮の位置と合う。対照的に、安静状態のブタ心臓の血流は、図７Ａ、７Ｃ及び７Ｅに示されているように心臓の全体にわたって実質的に均一である。微小球により観察されたコントラストは、本発明の放射性トレーサーにより観察されたものより大きく、おそらく、心臓の心筋細胞に取り込まれた放射性トレーサーの量より多い量の微小球が心臓の毛細管を閉塞したことに起因する。これらの結果は、本発明の放射性トレーサーを、虚血を有する対象の心筋画像化に使用できることを示す。
【００９０】
心筋血流（ＭＢＦ）の関数としての本発明の放射性トレーサーの取り込みの決定
安静及びストレス状態の組織試料に存在する心筋血流（ＭＢＦ）を、ブタの心臓の単離横切片及び乾燥血液試料における、各放射性金及びサマリウム微小球のそれぞれにより放射されたガンマ放射線の総量から、以下の方程式に従って決定した。
ＭＢＦ＝［（基準血液試料吸引速度（４ｍＬ／分）／（心筋試料の重量（ｇ）］×［同位体カウント（心筋試料）／同位体カウント（基準血液試料）］
【００９１】
図８は、マークされた微小球の使用により決定されたストレス及び誘発性虚血状態にあるブタ心臓の心筋血流の関数として、本発明の放射性トレーサー化合物の取り込み（組織１グラム当たりの注射用量のパーセント；％ＩＤ／ｇ）のプロットを示す。このデータは、本発明の化合物６〜９の混合物の取り込みが、注射の２時間後に３ｍｌ／分／ｇの心筋流速でレベルオフ（ロールオフ）し始めるにすぎず、一方、Myoview製品（テクネチウム（９９ｍＴｃ）テトロホスミン）及びＴｃ−９９ｍ−セスタミビが、注射の２時間後にそれぞれ２ｍｌ／分／ｇ及び１．５ｍＬ／分／ｇの速度でロールオフし始めることを示す。
【００９２】
図８に示されている混合物Ａの異性体及び９９ｍＴｃ−セスタミビのデータに当てはめた非直線の勾配は、それぞれ−３．６０及び−１．２１である。
【００９３】
Broisat et al.（その開示が参照により本明細書に組み込まれる、A. Broisat, M. Ruiz, N. C. Goodman, S. M. Hanrahan, B. W. Reutter, K. M. Brennan, M. Janabi, S. Schaefer, D. D. Watson, G. A. Beller, H. F. VanBrocklin, and D. K. Glover Circ Cardiovasc Imaging 2011; 4:685-692）の図３は、静脈内アデノシンを受けた重症の冠動脈ＬＡＤ狭窄症を有する典型的なイヌから微小球流（ｍｌ／分／ｇ）の関数としてプロットされた、７−（Ｚ）−［１２３Ｉ］ヨードロテノン（１２３Ｉ−ＺＩＲＯＴ）の取り込みデータを示す。Broisat et al.の図３に示された１２３Ｉ−ＺＩＲＯＴのデータに当てはめた非直線の勾配は、−３．５９である。
【００９４】
Glover et al.（その開示が参照により本明細書に組み込まれる、D.K. Glover, M. Ruiz, N. C. Edwards, M. Cunningham, J. P. Simanis, W. H. Smith, D. D. Watson, G. A. Beller Circulation 1995; 91: 813-820）の図４は、静脈内アデノシンを受けた重症の冠動脈ＬＡＤ狭窄症を有する典型的なイヌから微小球流（ｍｌ／分／ｇ）の関数としてプロットされた、９９ｍＴｃ−セスタミビの取り込みデータ（活性（正常％））を示す。Glover et al.の図４に示される９９ｍＴｃ−セスタミビのデータに当てはめた非直線の−１４３の勾配値は、その値を１００で割って−１．４３の比較できる勾配値を生成することにより、Broisat et al.の図３に示される１２３Ｉ−ＺＩＲＯＴのデータに当てはめた線の勾配の大きさに適合するように標準化した。
【００９５】
Broisat et al.の１２３Ｉ−ＺＩＲＯＴのデータに当てはめた非直線の勾配と、Glover et al.の９９ｍＴｃ−セスタミビのデータに当てはめた非直線の勾配から誘導される勾配との比の値は２．５であり、一方、本出願の図８に示される混合物Ａと９９ｍＴｃ−セスタミビのデータに当てはめた非直線の勾配の比の値は、３．０である。これらの値は、混合物Ａの異性体が、１２３Ｉ−ＺＩＲＯＴと類似した取り込み速度を増加した流量で有することを示唆している。
【００９６】
図７に示される極性マップ及び図８に例示されるデータは、本発明の化合物６〜９が心筋灌流画像化検査のストレス成分からもたらされる比較的高い心筋流速で検査対象の心筋に保持され、したがって対象の虚血状態の診断に有効でありうることを示唆している。
【００９７】
化合物６〜９の心筋分布
逆行性灌流（ランゲンドルフ）の調製は、１．５〜２．５ｋｇの雄のニュージーランド白色ウサギ（Charles River社、Wilmington MA）の心臓を使用して以前に記載されたように実施した（参照により本明細書に組み込まれる、R. C. Marshall, P. Powers-Risius, B. W. Reutter, S. E. Taylor, H. F. VanBrocklin, R. H. Huesman, T. F. Budinger J Nucl Med. 2001; 42:272-281）。ヘパリン（５ｍｇ／ｋｇ）の注射及び正中胸骨切開術の後、上行大動脈及び大動脈分枝、肺、並びに胸腺をそのまま保持しながら心臓を切除した。心臓を、改質タイロード溶液（１０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｇＣｌ２、２８ｍＭのＮａＨＣＯ３、０．４４ｍＭのＮａＨ２ＰＯ４、２．５ｍＭのＣａＣｌ２、６ｍＭのＫＣｌ、５ｍＭのグルコース、１００ｍＭのピルビン酸ナトリウムと２２ｇ／ＬのＢＳＡ及び９５％Ｏ２／５％ＣＯ２で通気）を含有する氷冷浴に直ぐに入れ、胸腺及び脂肪組織を素早く取り除いた。次に心臓を大動脈カニューレで吊るし、水ジャケット付き温度調節ランゲンドルフ灌流システム（Radnotti社、CA, USA）により予熱改質タイロード緩衝液を一定流速で灌流した。ランゲンドルフ装置に吊るした合計時間は、典型的には６０秒以下であった。大動脈カニューレで吊るした後、残った肺、気管及び外来組織を取り除いた。
【００９８】
テベジウス循環からの流体を、ポリエチレンカテーテル処置した心尖部排出管（apical drain）から排出した。圧力変換器（Radnotti社）に連結した流体充填ラテックスバルーンを、左心房及び僧帽弁を介して左心室に挿入した。右心房を切除した後、ペーシング電極（Radnotti社）を心房の高さに置いて、心臓の制御ペーシングを可能にした。
【００９９】
最終調製の後、左心室バルーンを膨張させて、収縮期圧を６０〜８０ｍｍＨｇに一定に保持しながらおよそ８〜１０ｍｍＨｇの拡張終期圧を達成した。心臓を、３８℃に温めた改質タイロード溶液により連続的に灌流し、密閉チャンバーに保持して、湿度及び温度を維持した。心臓を、Grass SD9刺激装置（Harvard Apparatus社、Montreal QC）により、４Ｖの刺激を４分間にわたって送達して、１分間当たり１８０の拍動で鼓動させた。灌流及び心室圧を、BioPacデータ取得システム（BioPac社、Montreal QC）の使用により実験の全体にわたってモニターした。実験の際に不規則な圧力及び電気的活動を示した心臓は、分析に含めなかった。
【０１００】
安定化した後（およそ１５〜３０分間）、ベースライン放射能を表す５つの第２試料を１５〜２０秒間収集し、その後、２００μＬの大量注射の放射性トレーサー（２μＣｉの１３１Ｉ−アルブミン、９９ｍＴｃ−セスタミビ、２０１Ｔｌ又は化合物６〜９の混合物（混合物Ａ：１２％のジアステレオマー６及び７；８８％のジアステレオマー８及び９の異性体混合物を含む組成物）を、大動脈カニューレの真上に位置する注入ポートを介して注入した。５つの第２静脈流出試料を、最初の５分間は連続的、次の１０分間は３０秒間隔、その後の２０分間は６０秒毎に予め計量したバイアルに収集した。全ての試料の放射能をガンマカウンターでカウントし、データをMatlabソフトウエアの使用により分析した。それぞれのトレーサーの平均静脈出現速度を、ＬＶの湿重量の１ｇ当たり１．７ｍｌ／分の流速で収集した１３１Ｉ−アルブミン（Ｎ＝３）、９９ｍＴｃ−セスタミビ（Ｎ＝５）、混合物Ａ（Ｎ＝６）及び２０１Ｔｌ（Ｎ＝６）について決定した。最大取り込み値を、変動流速（ＬＶの湿重量の１ｇ当たり０．３５〜３．１ｍｌ／分）で９９ｍＴｃ−セスタミビ及び混合物Ａについて決定した。
【０１０１】
結果：
図９から、灌流トレーサー（９９ｍＴｃ−セスタミビ及び混合物Ａの異性体）に対する基準トレーサー（１３１Ｉ−アルブミン）の初期ピーク分画静脈出現速度を定性的に評価することができる。アルブミン（非拡散性トレーサー）により観察される、より高い静脈流出速度は、これが血管内空間に留まり、心筋、すなわち血管外空間に灌流しないことを示唆している。逆に、拡散性トレーサーの９９ｍＴｃ−セスタミビ、２０１Ｔｌ及び混合物Ａの異性体は、より低い分画静脈出現速度を有し、これらのトレーサーが血管系から漏れ出て血管外空間に入り、心筋を灌流することを示唆している。後の時点で、９９ｍＴｃ−セスタミビ、２０１Ｔｌ及び混合物Ａの異性体は、より高い分画出現速度を有し、これらが血管系に再進入し、静脈流出により心筋から出ることを示している。混合物Ａの異性体により観察される、より低いピーク静脈流出速度は、９９ｍＴｃ−セスタミビ、２０１Ｔｌ及び１３１Ｉ−アルブミンと比べて長い心筋保持を示唆している。
【０１０２】
Marshall et al.と比較して、９９ｍＴｃ−セスタミビ及び１３１Ｉ−アルブミンの曲線は非常に類似している。混合物Ａの異性体は、曲線の前半部分において７’−Ｚ−［１２５Ｉ］ヨードロテノン（１２５Ｉ−ロテノン）に匹敵する静脈出現速度を有する（Marshall et al. 2001の図１と本出願の図９を比較すること）。曲線の後半部分では、１２５Ｉ−ロテノンは、混合物Ａの異性体と比べて高い静脈流出速度を有すると思われる。このことは、血管外空間への心筋灌流の後、混合物Ａの異性体が１２５Ｉ−ロテノンよりも遅く心筋から出ることを意味している。心筋からより遅く出ることは、このことがより長い期間にわたって医師が画像を集めることを可能にし、それによって画像解像度、感度及び品質が増加するので、臨床画像診断にとって有益である。
【０１０３】
最大トレーサー取り込みＵ（ｔ）は、注入された総量と比較した、心筋に残留しているトレーサーの最大含有量の測度である。それぞれのトレーサーで６匹の動物を変動流速（左心室の湿重量の１ｇ当たりのｍＬ／分で表した）で灌流した。混合物Ａの異性体の全体的な最大取り込みは、９９ｍＴｃ−セスタミビよりも有意に大きかった（Ｐ＝０．０３）。加えて、増加流量での取り込みの増加速度は、セスタミビより混合物Ａの異性体の方が有意に大きかった（Ｐ＝０．００７）。混合物Ａの異性体の線形回帰の結果は、ｙ＝０．８６ｘ＋０．２６、Ｒ２＝０．９２であり、セスタミビでは、ｙ＝０．３３ｘ＋０．１４、Ｒ２＝０．８８である。
【０１０４】
定性的には、図１０に示されている９９ｍＴｃ−セスタミビ及び混合物Ａの異性体の最大純取り込みは、Marshall et al. (2001)に１２５Ｉ−ロテノン及び９９ｍＴｃ−セスタミビについて報告されたものと類似している（Marshall et al.の図６Ａと本出願の図１０を比較すること）。混合物Ａ（ｒ＝０．９６）及び９９ｍＴｃ−セスタミビ（ｒ＝０．９４）の相関係数は、これらの実験において、トレーサー取り込みが流速と高く相関していることを示唆している。
【０１０５】
Marshall et al.は、９９ｍＴｃ−セスタミビ及び１２５Ｉ−ロテノンの最大取り込みデータに当てはめたそれぞれの直線の０．２９及び０．７８の勾配を報告している。本出願の図１０に示されている９９ｍＴｃ−セスタミビ及び混合物Ａの異性体のデータに当てはめた線の勾配は、それぞれ０．３３及び０．８６である。Marshall et al.の１２５Ｉ−ロテノン及び９９ｍＴｃ−セスタミビの当てはめた線の勾配の比の値は、２．６９であり、一方、図１０に示されている混合物Ａ及び９９ｍＴｃ−セスタミビの当てはめた線の勾配の比の値は、２．６１である。これらの値は、混合物Ａの異性体が、１２５Ｉ−ロテノンと類似した取り込み速度を増加した流量で有することを示唆している。増加流量でのトレーサーの線形取り込みは、患者において、心筋灌流の欠乏がほぼ例外なくより高い血流速度で検出される、すなわち、ストレス検査の際に低流（虚血）と高流（正常）区域の比較により検出されるので、臨床設定において特に望ましい。
【０１０６】
１つ又は２つ以上の現在の好ましい実施形態が例として記載されてきた。多数の変更及び修正を、特許請求の範囲に定義された本発明の範囲から逸脱することなく行えることは、当業者にとって明白である。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
0005961259.tif 000043
【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
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【図７Ｆ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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