(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者の筋肉若しくは外分泌腺の活動亢進性コリン作動性神経支配を原因とするか又はそれに関連した疾患又は病状を治療するための注射用医薬組成物であって、有効量のボツリヌス菌毒素複合体の血清型Ａの神経毒成分を含み且つ前記ボツリヌス菌毒素複合体の他の非毒性タンパク質成分が全く無く、ここで、
（ａ）患者はヒトであり、そして
（ｂ）組成物の投与間隔、すなわち第１の治療及び第２の治療の間隔、は２時間〜８週間であり、第２の治療で投与される量は、第１の治療で投与される量よりも低量、高量、又は同量であり得る、前記医薬組成物。
【請求項２】
第２の治療が、第１の治療の治療効果を高めるために実施される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
（ａ）患者が重篤な運動障害又は重篤な痙性を有する患者であり；そして
（ｂ）投与される有効量が、成人では５００Ｕの神経毒成分を超え、子供では１５Ｕ／ｋｇ体重を越える、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
成人では５００Ｕを越える量、子供では１５Ｕ／ｋｇ体重を越える量が総量であり、
（ａ）この量の第１画分を第１の治療期間に注射し；そして
（ｂ）残りの画分を、第１の治療期間の少なくとも１日後に予定される１回以上のその後の治療期間に注射する、
請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
患者が、ボツリヌス菌毒素で治療されているが治療効果の減少に不満をもち、そして治療後８週間が終了する前に治療を必要とするヒトである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
活動亢進性の腺が自律外分泌腺であり、組成物が腺又は腺近傍に注射される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
（ａ）腺が、汗腺、涙腺、唾液腺、及び粘液腺から成る群より選択されるか；又は
（ｂ）腺が、フレイ症候群、ワニの涙症候群、脇の多汗症、手のひらの多汗症、足底多汗症、頭頸部の多汗症、身体の多汗症、鼻漏、又は脳卒中、パーキンソン病、若しくは筋萎縮性側索硬化症を有する患者における関連唾液過多症から成る群より選択される疾患又は病状に関連している、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
疾患又は病状が、筋ジストニアであるか又はそれを包含する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
ジストニアが、
（ａ）（１）眼瞼痙攣、開口型若しくは閉口型の口下顎ジストニア、歯ぎしり、メージュ症候群、舌ジストニア、開眼失行を含めた頭蓋ジストニア、（２）前屈、後屈、側屈、斜頸を含めた頸部ジストニア、（３）咽頭ジストニア、（４）内転筋型又は外転筋型の痙攣性発声障害、痙攣性の呼吸困難を含めた喉頭ジストニア、（５）書痙、音楽家痙攣、若しくはゴルファー痙攣を含めた動作特異性ジストニアなどの上肢ジストニア、大腿部の内転、大腿部の外転、膝の屈曲、膝の伸展、足首の屈曲、足首の伸展、若しくは内反尖足変形を含めた下肢ジストニア、母指の過伸展、足指の屈曲、若しくは足指の伸展を含めた足のジストニアを含む四肢ジストニア、ピサ症候群若しくはベリーダンサーのジストニアなどの軸性ジストニア、分節性ジストニア、片側性ジストニア若しくは全身性ジストニア、（６）Ｌｕｂａｇにおけるジストニア、（７）大脳皮質基底核変性症におけるジストニア、（８）遅発性ジストニア、（９）脊髄小脳失調症におけるジストニア、（１０）パーキンソン病におけるジストニア、（１１）ハンチントン病におけるジストニア、（１２）ハレルフォルデン・スパッツ病におけるジストニア、（１３）ドーパ誘発性ジスキネジア／ドーパ誘発性ジストニア、（１４）遅発性ジスキネジア／遅発性ジストニア、（１５）発作性ジスキネジア／ジストニア（運動誘発性、非運動誘発性、動作誘発性）から成る群より選択されるか；又は
（ｂ）斜頸、側屈、後屈、前屈、肘屈曲、前腕回内、手首屈曲、母指内転、若しくは拳固から成る群より選択される臨床パターンを包含する、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
筋肉が、同側板状筋、対側胸鎖乳突筋、同側胸鎖乳突筋、頭板状筋、斜角筋複合体、肩甲挙筋、後椎骨、同側僧帽筋、肩甲挙筋、両側頭板状筋、上部僧帽筋、後椎骨深部、両側胸鎖乳突筋、斜角筋複合体、オトガイ下複合体、腕橈骨筋、上腕二頭筋、方形回内筋、円回内筋、橈側手根屈筋、尺側手根屈筋、長母指屈筋、母指内転筋、短母指屈筋／対立筋、浅指屈筋、深指屈筋から成る群より選択される、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
疾患又は病状が筋肉の痙性であるか又はそれを包含する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
痙性が、（１）（ａ）多発性硬化症、横断性脊髄炎、デビック症候群に関するものを含めた自己免疫過程、（ｂ）ウイルス感染、（ｃ）細菌感染、（ｄ）寄生虫感染、若しくは（ｅ）真菌感染、に関連した脳炎及び脊髄炎における痙攣状態、（２）遺伝性痙性対麻痺、（３）大脳半球梗塞、脳幹梗塞から生ずる脳卒中後症候群、若しくは脊髄梗塞、（４）例えば大脳半球損傷、脳幹損傷、脊髄損傷を含めた中枢神経系外傷、（５）脳内出血、くも膜下出血、硬膜下出血、若しくは髄腔内出血などの中枢神経系の出血、又は（６）新生物、例えば大脳半球腫瘍、脳幹腫瘍、若しくは脊髄腫瘍、又は（７）脳卒中後の痙性、又は（９）脳性麻痺による痙性であるか又はそれに関連する、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
筋肉が平滑筋又は横紋筋である、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
個体の顔のしわの線若しくは皮膚のしわを軽減させ又は顔面非対照を取り除くための医薬組成物であって、有効量のボツリヌス菌毒素複合体の血清型Ａの神経毒成分を含み且つ前記ボツリヌス菌毒素複合体の他の非毒性タンパク質成分が全く無く、ここで、
（ａ）個体はヒトであり；
（ｂ）組成物は、１種以上の顔面筋又は皮膚のしわ若しくは非対称の形成に関与する筋肉へ又はその近傍への皮下又は筋肉内注射に用いられ；そして
（ｃ）組成物の投与間隔、すなわち第１の治療及び第２の治療の間隔、は２時間〜８週間であり、第２の治療で投与される量は、第１の治療で投与される量よりも低量、高量、又は同量であり得る、前記医薬組成物。
【請求項１５】
組成物の注射部位が、眉間のしわ、水平な額の線、目尻のしわ、鼻口周囲のしわ、顎のceases、波だった顎、及び／又は広頸筋のバンドである、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
注射部位が、皺眉筋、眼輪筋、鼻根筋、前頭筋、眼輪筋眼窩部、鼻筋、上唇：口輪筋、下唇：口角下制筋、オトガイ筋、及び広頸筋から成る群より選択される、請求項１４に記載の線の形成に関与する筋肉である、請求項１４又は１５に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、ボツリヌス菌毒素複合体の神経毒成分を含有する組成物を投与することにより疾患及び障害を治療するための方法に関するものであり、前記組成物は、前記ボツリヌス菌毒素複合体の他のタンパク質が全く無く、短い間隔で及び／又は高用量で投与される。
【０００２】
より詳細には、本発明は、患者の筋肉若しくは外分泌腺の活動亢進性コリン作動性神経支配を原因とするか又はそれに関連した疾患又は病状を治療するための方法に関するものであり、前記方法は、有効量のボツリヌス菌毒素複合体の神経毒成分を含み且つ前記ボツリヌス菌毒素複合体の他のタンパク質成分が全く無い組成物を投与することを含み、ここで、（ａ）患者はヒトであり、（ｂ）組成物は注射で投与され、そして（ｃ）組成物は、第１の治療及び第２の治療を構成する３ヶ月未満の間隔で投与され、第２の治療で投与される量は、第１の治療で投与される量よりも低量、高量、又は同量であり得る。また、本発明は、患者の筋肉の病理学的活性を原因とするか又はそれに関連した疾患又は病状を治療するための方法に関するものであり、前記方法は、有効量のボツリヌス菌毒素複合体の神経毒成分を含み且つ前記ボツリヌス菌毒素複合体の他のタンパク質成分が全く無い組成物を投与することを含み、ここで、（ａ）患者は重篤な運動障害又は重篤な痙性を有するヒトであり；（ｂ）組成物は注射で投与され；そして（ｃ）投与される有効量は、成人では５００Ｕの神経毒成分を越え、子供では１５Ｕ／ｋｇ体重を越える。最後に、本発明は、顔のしわの線若しくは皮膚のしわを軽減させ又は顔面非対称を取り除くための方法にも関するものであり、前記方法は、有効量のボツリヌス菌毒素複合体の神経毒成分を含み且つ前記ボツリヌス菌毒素複合体の他のタンパク質成分が全く無い組成物を個体へ投与することを含み、ここで、（ａ）個体はヒトであり；（ｂ）組成物は、皮下又は筋肉内注射によって１種以上の顔面筋又は皮膚のしわ若しくは非対称の形成に関与する筋肉に又はその近傍に投与され；そして（ｃ）組成物は、第１の治療及び第２の治療を構成する３ヶ月未満の間隔で投与され、第２の治療で投与される量は、第１の治療で投与される量よりも低量、高量、又は同量であり得る。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
ボツリヌス毒素はボツリヌス菌によって産生される。７種の抗原的に異なる血清型のボツリヌス毒素、即ちボツリヌス毒素Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、及びＧが存在する。ボツリヌス毒素は、溶解させたクロストリジウム培養物から放出させると、通常他の細菌タンパク質と会合しており、いっしょになって毒素複合体を形成している。この複合体の神経毒サブユニットは、本明細書においてボツリヌス毒素複合体の「神経毒成分」と称する。「ボツリヌス毒素」という用語は、他のクロストリジウムタンパク質が全く無い神経毒成分を表すが、「ボツリヌス毒素複合体」のことも表す：これは、本明細書において、神経毒成分の２つの状態を区別することが必要ないか又は望まれない場合に用いられる。この複合体は、通常、「複合体形成タンパク質」又は「細菌タンパク質」と称する追加のいわゆる「非毒性」タンパク質を含有する。神経毒成分と細菌タンパク質との複合体は、「ボツリヌス菌毒素複合体」又は「ボツリヌス毒素複合体」と称する。この複合体の分子量は、約３００，０００〜約９００，０００Ｄａで多様であり得る。複合体形成タンパク質は、例えば種々のヘマグルチニンである。この毒素複合体のタンパク質は、それ自体毒性ではないが、神経毒成分に安定性を提供し、ボツリヌス中毒において経口毒性に関与する。毒素複合体とは異なり、単離され精製された形態の神経毒成分、即ち、複合体形成クロストリジウムタンパク質が全く無い成分は、酸に不安定であり、胃腸管の侵食環境に耐性ではない。
【０００４】
ボツリヌス毒素複合体の神経毒成分は、血清型Ａの場合、分子量およそ１５０ｋＤａの１本鎖ポリペプチドとして初めに形成される。他の血清型では、神経毒成分は、細菌供給源に応じて約１４５〜約１７０ｋＤａで多様であることが観察されている。血清型Ａの場合、例えばポリペプチドのタンパク質分解プロセシングにより、重鎖及び軽鎖から成る、ジスルフィド結合によって連結された２本鎖ポリペプチドの形態で活性化ポリペプチドを生ずる。ヒトでは、重鎖は、前シナプスコリン作動性神経終末への結合及び毒素の細胞内への内在化を介在する。軽鎖は、毒性効果に関与すると考えられており、亜鉛エンドペプチダーゼとして作用し、膜融合に関与する特定タンパク質を切断する（スネア複合体）（例えばＭｏｎｔｅｃｕｃｃｏ  Ｃ．、Ｓｈｉａｖｏ  Ｇ．、Ｒｏｓｅｔｔｏ  Ｏ．：破傷風及びボツリヌス神経毒素の作用機序。Ａｒｃｈ  Ｔｏｘｉｃｏｌ．１９９６；１８（増刊号）：３４２−３５４を参照されたい）。細胞内で膜融合プロセスを破壊することによって、ボツリヌス毒素は、シナプス間隙へのアセチルコリン放出を妨げる。神経筋接合部におけるボツリヌス毒素の全体的効果は、神経筋伝達を遮断することであり、実際には筋肉を麻痺させることである。ボツリヌス毒素は、他の末梢コリン作動性シナプスにおいても活性を有し、唾液分泌や発汗の低下を引き起こす。
【０００５】
それぞれの血清型のボツリヌス毒素は、前シナプス神経終末上の血清型特異的受容体部位に結合する。コリン作動性ニューロンに対するボツリヌス毒素の特異性は、これら神経終末上の受容体部位に対する重鎖の高親和性に基づいている（参考文献：Ｋａｔｓｅｋａｓ  Ｓ．、Ｇｒｅｍｍｉｎｌｏｈ  Ｇ．、Ｐｉｃｈ  Ｅ．Ｍ．：神経終末タンパク質；学習のための融合。Ｔｒａｎｓｎｅｕｒｏ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９４；１７：３６８−３７９）。
【０００６】
その毒性効果にもかかわらず、ボツリヌス毒素複合体は治療薬として非常に多くの疾患に使用されている。Ａ血清型ボツリヌス毒素は、米国において１９８９年に、斜視、眼瞼痙攣、及び他の障害を治療するためのヒトへの使用が承認された。それは、ボツリヌス毒素Ａタンパク質複合体として、例えばボトックスの商品名で（アラガン社）又はディスポートの商品名で（イプセン社）市販されている。治療適用のため、複合体は治療すべき筋肉に直接注射される。生理的ｐＨでは、毒素はタンパク質複合体から放出されて、所望の薬理効果を生ずる。ボツリヌス毒素の効果はほんの一時的なものであり、これが、治療効果を維持するためにボツリヌス毒素の反復投与が必要とされ得る理由である。多くの症例で、ボツリヌス毒素タンパク質複合体の反復投与後に、ボツリヌス毒素耐性が観察されている。患者は、神経毒成分に対するものであってその活性をブロックする中和抗体の関連レベルに達していた（Ｇｏｓｃｈｅｌ  Ｈ、Ｗｏｈｌｆａｒｔｈ  Ｋ、Ｆｒｅｖｅｒｔ  Ｊ、Ｄｅｎｇｌｅｒ  Ｒ、Ｂｉ−ｇａｌｋｅ  Ｈ．、（１９９７）Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ．１９９７、Ｓｅｐ；１４７（１）：９６−１０２）。その結果、（例えばボトックス又はディスポートを使用する）ボツリヌス毒素複合体を用いる療法は、それらの患者ではもはや有効ではない。ボトックス又はディスポートのようなボツリヌス毒素医薬のその後の適用は効果的ではない。ボツリヌス毒素タンパク質複合体を用いた治療を一時停止すれば抗体力価は低下し得る。しかしながら、治療を停止する必要がある期間は長期にわたり得る（例えばＤｒｅｓｓｌｅｒ  Ｄ、Ｂｉｇａｌｋｅ  Ｈ（２００２）ボツリヌス毒素療法停止後のボツリヌス毒素抗体力価。Ｍｏｖ  Ｄｉｓｏｒｄ  １７：１７０−１７３を参照されたい）。
【０００７】
当初は、ボツリヌス毒素複合体への耐性はまれであると考えられていた。その後の報告で、頸部ジストニアを治療された患者におけるボツリヌス毒素療法の抗体誘導性の療法失敗がおよそ５％の頻度であることが示唆された（参考文献：Ｋｅｓｓｌｅｒ  ＫＲ、Ｓｋｕｔｔａ  Ｍ、Ｂｅｎｅｃｋｅ  Ｒ．、Ａ型ボツリヌス毒素による頸部ジストニアの長期治療：効能、安全性、及び抗体頻度。ドイツジストニア研究グループ。Ｊ  Ｎｅｕｒｏｌ．１９９９、Ａｐｒ；２４６（４）：２６５−７４）。この観察は、単一場所における患者の遡及評価に基づいたものである。しかしながら、近年、より高頻度の発生率が報告されており、治療対象のおよそ２０％が影響を受けたことを示唆している（参考文献：Ｔｈｅ  Ｍｕｓｃｕｌａｒ  Ｎｅｒｖｅ、Ｍａｙ  ２００４、ｐ．６３０）。一般に、抗体誘導性の療法失敗の危険性は、投与されたボツリヌス毒素の単回用量と強く相関すると考えられている。
【０００８】
複合体に含有されるタンパク質は、免疫応答を強化し得ると考えられている。ボツリヌス毒素療法の抗体誘導性の完全な失敗に関する他の危険因子は、注射間隔、即ちその後の注射シリーズ間の間隔である。したがって、ボツリヌス毒素を３ヶ月毎に１回だけ投与し、抗体形成の危険性を低下させることが一般的慣例である。ボツリヌス投与の効果がより早く消滅する患者は、経口医薬で治療することができる。しかしながら、それら経口医薬の有効性は限られたものである。
【０００９】
ボツリヌス毒素タンパク質複合体の他の悪影響は、標的筋肉へ注射後のその局所又は全身への拡散である。単一線維筋電図（ＳＦ−ＥＭＧ）は、注射部位から離れた筋肉において細かい振動の増加を示している。例えば、Ａｌｎｔｙら（Ａｌｎｙ  Ｒ．Ｋ．、Ａｍｉｎｏｆｆ  Ｍ．Ｊ．、Ｇｅｌｂ  Ｄ．Ｊ．、Ｌｏｗｅｎｓｔｅｉｎ  Ｄ．Ｈ．：ボツリヌス神経毒素注射部位から離れたMyomuscular効果。Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  １９８８；３８：１７８０−１７８３）は、頸筋への注射によって治療された患者が、注射部位から離れた筋肉において細かい振動及び線維密度を増加させたことを示している。これらの異常はおよそ３〜６ヶ月後に正常に戻る。局注後のボツリヌス毒素の全身への拡散を示す他の証拠は、心血管系の反射及び血圧における変化の発生である（参考文献：Ａｌｎｙ  Ｒ．Ｋ．、Ａｍｉｎｏｆｆ  Ｍ．Ｊ．、Ｇｅｌｂ  Ｄ．Ｊ．、Ｌｏｗｅｎｓｔｅｉｎ  Ｄ．Ｈ．：ボツリヌス神経毒素注射部位から離れたMyomuscular効果。Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  １９８８；３８：１７８０−１７８３）。
【００１０】
ある患者では、ボツリヌス毒素タンパク質複合体の高用量投与は、治療を意図しない筋肉に影響を及ぼし得る。例えば、眼瞼痙攣をボツリヌス毒素タンパク質複合体で治療する場合、拡散は開眼筋に影響を及ぼし、眼瞼下垂症を引き起こし得る。
【００１１】
したがって、抗体形成の危険性だけでなく、全身拡散の危険性も、ボツリヌス毒素を比較的低用量で、したがって潜在的にあまり有効でない用量で投与することを必要とする。その結果、医師は、ボトックス又はディスポートを３ヶ月毎に１回以下で投与することを強く助言される。これは、高用量のボツリヌス毒素を必要とする患者に特に適用される。
【発明の概要】
【００１２】
以上を考慮すると、本発明の目的は、本明細書に記載の障害を患った患者の治療を提供することであり、治療用ボツリヌス毒素製剤を短縮した間隔で及び／又は比較的高用量を用いることによって投与することを可能にする。治療用ボツリヌス毒素製剤は、特定の標的組織（例えば特定の筋肉又は腺）に適用すべきであるため、隣接組織への拡散が限定されることが重要な要求である。最後であるが重要な要求は、治療用ボツリヌス毒素製剤の抗原性低下である。また、本発明の目的は、柔軟な及び／又は頻繁な間隔で好適な医薬にて痙攣性又はジストニー筋肉に関連した疾患を治療するための方法を提供することである。本発明の他の目的は、頻繁な間隔で薬物を用い、抗体形成の危険性が低下し及び／又は全身への拡散が軽減された美顔処置を提供することである。
【００１３】
したがって、本発明は、患者の筋肉若しくは外分泌腺の活動亢進性コリン作動性神経支配を原因とするか又はそれに関連した疾患又は病状を治療するための方法に関するものであり、前記方法は、有効量のボツリヌス菌毒素複合体の神経毒成分を含み且つ前記ボツリヌス菌毒素複合体の他のタンパク質成分が全く無い組成物を投与することを含み、ここで、（ａ）患者はヒトであり、（ｂ）組成物は注射で投与され、そして（ｃ）組成物は、第１の治療及び第２の治療を構成する３ヶ月未満の間隔で投与され、第２の治療で投与される量は、第１の治療で投与される量よりも低量、高量、又は同量であり得る。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
ボツリヌス毒素複合体の神経毒成分の投与を包含する本発明の概念は、一般に、筋肉又は外分泌腺の活動亢進性コリン作動性神経支配に関連した病状の治療を可能にすることは注目すべきものであり、ここで、神経毒成分はシナプス間隙へのアセチルコリン分泌をブロックする。したがって、本発明によって提供される治療は、以下の適応症のいずれかに対して行うことができ、その多くはＤｒｅｓｓｌｅｒ  Ｄ（２０００）（ボツリヌス毒素療法。Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ、スタットガート、ニューヨーク）に詳細に記載されている：
ジストニア
頭蓋ジストニア
眼瞼痙攣
口下顎ジストニア
開口型
閉口型
歯ぎしり
メージュ症候群
舌ジストニア
開眼失行
頸部ジストニア
前屈
後屈
側屈
斜頸
咽頭ジストニア
喉頭ジストニア
痙攣性発声障害／内転筋型
痙攣性発声障害／外転筋型
痙攣性の呼吸困難
四肢ジストニア
上肢ジストニア
動作特異性ジストニア
書痙
音楽家痙攣
ゴルファー痙攣
下肢ジストニア
大腿部の内転、大腿部の外転
膝の屈曲、膝の伸展
足首の屈曲、足首の伸展
内反尖足変形
足のジストニア
母指の過伸展（striatal toe）
足指の屈曲
足指の伸展
軸性ジストニア
ピサ症候群
ベリーダンサーのジストニア
分節性ジストニア
片側性ジストニア
全身性ジストニア
ｌｕｂａｇにおけるジストニア
大脳皮質基底核変性症におけるジストニア
ｌｕｂａｇにおけるジストニア
遅発性ジストニア
脊髄小脳失調症におけるジストニア
パーキンソン病におけるジストニア
ハンチントン病におけるジストニア
ハレルフォルデン・スパッツ病におけるジストニア
ドーパ誘発性ジスキネジア／ドーパ誘発性ジストニア
遅発性ジスキネジア／遅発性ジストニア
発作性ジスキネジア／ジストニア
運動誘発性
非運動誘発性
動作誘発性
口蓋ミオクローヌス
ミオクローヌス
ミオキミア
硬直
良性筋痙攣
遺伝性の顎の振戦
奇異性顎筋活動
片側咀嚼筋痙攣
肥大性鰓弓筋疾患
咬筋肥大
前脛骨筋肥大
眼振
動揺視
核上性注視麻痺
持続性部分てんかん
痙性斜頸手術計画
声帯外転筋麻痺
難治性変異性発声障害（recalcitant mutational dysphonia）
上部食道括約筋機能障害
声帯肉芽腫
吃音
ジル・ド・ラ・トゥレット症候群
中耳ミオクローヌス
防御性喉頭閉鎖
咽頭切除後言語障害
防御性（protective）眼瞼下垂症
内反
オディ括約筋機能障害
疑似アカラシア（pseudoachalasia）
非アカラシア食道運動障害
膣痙
術後不動
振戦
膀胱機能障害
排尿筋・括約筋協調不全
膀胱括約筋痙攣
片側顔面痙攣
神経再生によるジスキネジア
美顔用途
目尻のしわ
渋面
顔面非対称
オトガイのくぼみ
全身硬直症候群
強縮
前立腺肥大
肥満治療
脳性小児麻痺
斜視
混合型
麻痺性斜視
共同斜視
網膜剥離手術後の斜視
白内障手術後の斜視
無水晶体眼における斜視
筋炎による（myositic）斜視
筋傷害による（myopathic）斜視
交代性上斜位
斜視手術に伴うものとしての斜視
内斜視
外斜視
アカラシア
裂肛
外分泌腺機能亢進
フレイ症候群
ワニの涙症候群
多汗症
脇
手のひら
足底
鼻漏
関連唾液過多症
脳卒中において
パーキンソン病において
筋萎縮性側索硬化症において
痙攣状態
脳炎及び脊髄炎において
自己免疫過程
多発性硬化症
横断性脊髄炎
デビック症候群
ウイルス感染
細菌感染
寄生虫感染
真菌感染
遺伝性痙性対麻痺において
脳卒中後の症候群
大脳半球梗塞
脳幹梗塞
脊髄梗塞
中枢神経系外傷において
大脳半球損傷
脳幹損傷
脊髄損傷
中枢神経系出血において
脳内出血
くも膜下出血
硬膜下出血
髄腔内出血
新生物において
大脳半球腫瘍
脳幹腫瘍
脊髄腫瘍
ボツリヌス毒素は、例えば、クロストリジウム属の細菌の培養によって入手可能である。本発明の好ましいクロストリジウム種は、ボツリヌス菌である。しかしながら、神経毒成分は、他の細菌種に由来してもよいことに注目することは重要である。但し、ボツリヌス菌由来神経毒成分の機能相同体であることが条件である。本発明の方法に用いる組成物は、他のボツリヌス菌タンパク質が全く無い神経毒成分を常に含有するであろう。しかしながら、神経毒成分を産生する場合、毒素は、神経毒成分、即ちヒトへの毒性効果に関与するタンパク質及び他の細菌タンパク質を含有する複合体として細菌から単離され得る。その後、神経毒成分は毒素複合体から精製することができる。本明細書において、「毒素複合体」又は「ボツリヌス毒素複合体」又は「ボツリヌス神経毒素複合体」という用語は互換性があり、およそ１５０ｋＤａの神経毒成分、更に、ヘマグルチニン及び非ヘマグルチニンタンパク質を含めたボツリヌス菌の非毒性タンパク質を含む高分子量複合体を表す（Ｓａｋａｇｕｃｈｉ  １９８３；Ｓｕｇｉｙａｍａ  １９８０）。
【００１５】
本発明は、筋肉又は外分泌腺の活動亢進性コリン作動性神経支配に関連した疾患を有することを特徴とする患者の治療を想定するものである。本明細書において「患者」という用語は、ボツリヌス毒素に曝されたことのない患者だけでなく、ボツリヌス毒素に曝されている患者も表す。後者の患者は、ボツリヌス毒素複合体又はその成分に対する抗体を発生させているかもしれない。そのような抗体は中和抗体であり得る。患者の抗体力価が７ｍＵを越えないこと、特に中和抗体の力価が７ｍＵを越えないことが好ましい。「〜を越えない抗体力価」という用語は、７ｍＵ未満、例えば１ｍＵ〜６ｍＵ、又は０．０１ｍＵ〜１ｍＵを意味する。
【００１６】
本明細書において「活動亢進性コリン作動性神経支配」という用語は、異常に高量のアセチルコリンをシナプス間隙へ放出することを特徴とするシナプスに関するものである。「異常に高い」とは、例えばその放出を、同種であるが活動亢進性状態にないシナプスにおける放出と比較することによって、得ることができる基準活性に対して２５％以下、５０％以下、又はそれ以上の増加に関係するものであり、ここで、筋ジストニアは活動亢進性状態を示し得る。「２５％以下」は、例えば約１％〜約２５％を意味する。必要な測定を実施するための方法は、当該技術分野において公知である。
【００１７】
本発明との関連において用いる「約」という用語は、「およそ」又は「大体」を意味する。数値との関連において、この用語は、厳密な数値の定義を付することなくその値の±１０％の値又は表示された範囲の値を推定するものと解釈することができる。
【００１８】
明細書を通して使用される「神経毒成分」という用語は、神経毒活性を有し、血清型Ａでは分子量およそ１５０ｋＤａのボツリヌス毒素複合体のサブユニットに関するものである。「神経毒成分」という用語には、ボツリヌス菌の他の血清型に見られる機能相同体も含まれる。本発明の好ましい態様では、神経毒成分は他のボツリヌス菌タンパク質が全く無く、好ましくは神経毒成分に潜在的に関連するＲＮＡも無い。神経毒成分は、およそ１５０ｋＤａの１本鎖前駆体タンパク質であるか、又はおよそ５０ｋＤａの軽鎖（Ｌｃ）及びおよそ１００ｋＤａの重鎖（Ｈｃ）を含み、１本以上のジスルフィド結合によって連結され得る、タンパク質分解でプロセシングされた神経毒成分であり得る（概説として、例えばＳｉｍｐｓｏｎ  ＬＬ、Ａｎｎ  Ｒｅｖ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｏｘｉｃｏｌ．２００４；４４：１６７−９３を参照されたい）。当該技術分野に熟練した者は、たとえプロセシングされていない前駆体がある種の生物学的機能を発揮できるか又は部分的に活性であり得ると考えられるとしても、完全な生物活性は、タンパク質分解による活性化後にのみ達成されるとことを認識するであろう。「生物活性」とは、（ａ）受容体結合、（ｂ）内在化、（ｃ）エンドソーム膜から細胞質への転位、及び／又は（ｄ）シナプス小胞の膜融合に関与するタンパク質の細胞内タンパク質分解による切断を表す。生物活性を評価するためのｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイには、Ｐｅａｒｃｅ  ＬＢ、Ｂｏｒｏｄｉｃ  ＧＥ、Ｆｉｒｓｔ  ＥＲ、ＭａｃＣａｌｌｕｍ  ＲＤ（１９９４）（ボツリヌス毒素活性の測定：致死率アッセイの評価。Ｔｏｘｉｃｏｌ  Ａｐｐｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １２８：６９−７７）及びＤｒｅｓｓｌｅｒ  Ｄ、Ｌａｎｇｅ  Ｍ、Ｂｉｇａｌｋｅ  Ｈ（２００５）（Ｂ型ボツリヌス毒素に対する抗体を検出するためのマウス横隔膜アッセイ。Ｍｏｖ  Ｄｉｓｏｒｄ  ２０：１６１７−１６１９）に記載のようなマウスＬＤ５０アッセイ及びマウス片側横隔膜アッセイが含まれる。
【００１９】
生物活性は、一般にマウス単位（ＭＵ）で表される。本明細書において、１ＭＵは、特定マウス集団の５０％を腹腔内注射後に死滅させる神経毒成分の量、即ちマウスｉ．ｐ．ＬＤ５０である（Ｓｃｈａｎｔｚ＆Ｋａｕｔｅｒ、１９７８）。「ＭＵ」及び「単位」又は「Ｕ」という用語は互換性がある。あるいは、生物活性は、致死量単位（ＬＤＵ）／ｎｇタンパク質（即ち神経毒成分）で表すことができる。「ＭＵ」という用語は本明細書において「Ｕ」又は「ＬＤＵ」という用語と互換的に用いられている。
【００２０】
「有効量」という用語は、投与後、疾患の症状の部分的又は完全な除去を生ずる神経毒成分の量を意味する。有効量は通常１〜２０００ＭＵの範囲であるが、５０００ＭＵ以下の用量も用いることができる。高用量の神経毒成分を患者に投与すべき場合、治療を１回を越える治療期間に分割することが有益であり得る。「１回を越える治療期間」という用語は、例えば２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回の治療期間を意味する。
【００２１】
本発明の方法に用いる神経毒成分は、ボツリヌス菌培養物から精製することが好ましい。ボツリヌス菌を培養し、そこから毒素複合体を精製する方法は、先行技術に記載されている（Ｓｃｈａｎｔｚ＆Ｋａｕｔｅｒ、１９７８．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｍｅｔｈｏｄｓ．ボツリヌス菌神経毒素の標準アッセイ。Ｊ  Ａｓｓｏｃ  Ｏｆｆ  Ａｎａｌ  Ｃｈｅｍ  １９７８；６１（１）：９６−９９に概説されている）。神経毒成分は、本質的にＤａｓＧｕｐｔａ＆Ｓａｔｈｙａｍｏｏｒｔｈｙの方法（ＤａｓＧｕｐｔａ  ＢＲ、Ｓａｔｈｙａｍｏｏｒｔｈｙ  Ｖ．Ａ型ボツリヌス神経毒素の精製及びアミノ酸組成。Ｔｏｘｉｃｏｎ．１９８４；２２（３）：４１５−２４）に記載のようにしてボツリヌス菌から精製することができる。この目的のために、Ａ型ボツリヌス菌を、例えば、２％プロテオースペプトン、１％酵母エキス、１％グルコース、及び０．０５％チオグリコール酸ナトリウムから成る培地の入った２０Ｌ発酵槽で培養する。７２時間増殖後、３Ｎ硫酸を加えることによって（最終ｐＨ＝３．５）毒素を沈殿させる。沈殿させて遠心分離したバイオマスを、０．２Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０）で抽出する。硫酸プロタミンで沈殿させることによって核酸を除去後、硫酸アンモニウムを加えることによって毒素を沈殿させる。可溶化し、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ６．０）で透析した沈殿物をＤＥＡＥ−セファデックス（登録商標）カラムに同一ｐＨで結合させ、１５０ｍＭ  ＮａＣｌで溶出させる。この後、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．９）で平衡化したＱＡＥ−セファデックス（登録商標）カラムでクロマトグラフィを行う。毒素はＮａＣｌ濃度勾配により溶出される。最終工程では、ＳＰ−セファデックス（登録商標）（ｐＨ７．０）で毒素をクロマトグラフにかける。この場合、結合した毒素はＮａＣｌ濃度勾配（０〜３００ｍＭ）によりカラムから溶出される。精製した毒素をＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）で解析すると、通常、純度９５±５％を示す。
【００２２】
ボツリヌス神経毒素、特に上記毒素複合体は、以前に、７種の血清学的に異なるＡ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型、Ｆ型、及びＧ型に分類された。近年、Ａ血清型（Ａ１及びＡ２）並びにＣ血清型（Ｃ１及びＣ２）の異なる集団が同定されている。ここで、これらの集団を「サブタイプ」と表す。
【００２３】
血清型Ａの神経毒成分は、ボツリヌス菌毒素複合体の他のタンパク質が全く無い組成物で、ゼオミンという商品名でメルツ製薬から市販されている。
あるいは、本発明の方法に用いる神経毒成分は、組換え遺伝子発現によって作製することができる。この目的のために、神経毒成分又はその変異体をコードするオープンリーディングフレームを目的宿主細胞における遺伝子発現に適したベクターへクローニングすることができる。組換え遺伝子発現及びタンパク質精製の方法は当該技術分野に熟練した者に公知である。
【００２４】
神経毒成分をコードする組換え核酸分子は、公知の核酸配列に由来しても、組換え技術又は化学合成によって２以上の公知配列から組換えてもよい。キメラ神経毒成分の例は、例えば、神経毒成分の第１の血清型の軽鎖を第２の血清型の重鎖へ融合させることによって作製される分子である。化学合成の例は、神経毒成分全体の化学合成である。
【００２５】
１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、又は２０以下のアミノ酸変異を含有する遺伝子組換えされた神経毒成分も含まれる。変異は置換、挿入、又は欠損であり得る。変異は、上記生物活性を全く損なわないことが好ましい。しかしながら、変異体を用いて神経毒成分の生物活性を調節することも想定される。
【００２６】
化学修飾したアミノ酸、例えば、グルコシル化、アセチル化又はその他に修飾された、毒素の取り込み又は安定性に有益であり得る１以上のアミノ酸を含有するボツリヌス毒素の神経毒成分も含まれる。特に好ましいのは神経毒成分の脂質化である。修飾残基は、例えば酵素によるｉｎ  ｖｉｔｒｏ反応によって又は適切な化学反応条件を用いることによって神経毒成分へ加えることができる。あるいは、修飾酵素の機能は、宿主細胞内で酵素を発現させることによってトランスに提供することができる。
【００２７】
上記方法を用いることにより、神経毒成分に対する中和抗体を誘導することなく治療頻度を有意に増加させることができる。これに関連して、本発明以前は、より頻繁なボツリヌス毒素投与は治療される患者の免疫応答を誘導する可能性を高めると考えられていたため、公知の治療計画は３ヶ月未満の間隔でボツリヌス毒素を投与することを厳重に回避していたことに注目すべきである。本明細書に開示の実施例は、ボツリヌス毒素複合体の代わりに神経毒成分を使用することでそのような問題を回避できるという発想を支持している。
【００２８】
本発明の好ましい態様では、第２の治療は第１の治療の治療効果を高めるために実施される。これは、適切なボツリヌス毒素用量の投与をより有効に可能にするであろう。例えば、第１の治療期間では、次善の最適用量の神経毒成分を投与することができる。患者の疾患の症状が十分に応答しない場合、第２の又はその後の治療期間に更に神経毒成分を投与することができる。したがって、本発明の方法に伴って軽減された危険性を鑑みると、患者を有効に治療するために必要な最適用量に近づくために、多くの治療期を用いることができる。
【００２９】
本発明にしたがい、第１の治療期間及び第２の治療期間及びその後の治療期間は、先の治療期間の少なくとも１日後に予定することができる。「少なくとも１日後」という用語は、例えば１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、若しくは１０日、又は１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、若しくは１２週間を意味する。しかしながら、第２の治療は、第１の治療のわずか数時間後、例えば２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、又は８時間後に予定されることも本発明の教示によって想定される。
【００３０】
好ましい態様では、第２の（その後の）治療は、第１の（先の）治療の効能が低下し始める時点で実施される。そのような治療計画を用いることにより、患者の安定した生活の質を達成することができる。
【００３１】
患者の「安定した生活の質」というパラメータの決定を、本発明にしたがい治療すべき１つの病状、即ち眼瞼痙攣を参照することにより、いわゆる眼瞼痙攣障害指数（ＢＳＤＩ）に基づき、以下に例示的に記載する。眼瞼痙攣障害指数［ＢＳＤＩ］は、ＢＥＢを原因とした日常生活の特定動作の機能障害を評価するための自己評価尺度である（Ｇｏｅｒｔｅｌｍｅｙｅｒ  Ｒ、Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ  Ｓ、Ｃｏｍｅｓ  Ｇ、Ｄｅｌｃｋｅｒ  Ａ、局所性ジストニアにおける機能的健康を評価するための眼瞼痙攣障害指数（ＢＳＤＩ）、Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．２００２；１１３（１）：Ｓ７７−Ｓ７８）。
【００３２】
尺度は各受診時に患者が回答すべきである。これには、「機能障害なし」、「軽度／中等度／重度の機能障害」及び「病気のためもはや可能ではない」の５点記載（即ち各項目あたり０〜４点）で評価すべき６項目が含まれる。６項目とは、「車に乗る」、「読書」、「ＴＶ鑑賞」、「買い物」、「散歩」、及び「日常行為を行う」である。当てはまらない項目の場合は評価を無視される他の機能的尺度とは異なり、ＢＳＤＩは、「日常行為を行う」を除く５項目に関し、「該当なし」と回答可能である。
【００３３】
欠損項目のないＢＳＤＩ平均スコアは、該当する回答された項目を全て足し、回答項目数で割ることによって計算する。
しかしながら、そのようなパラメータは、本発明内で治療すべき他の多くの疾患及び病状、例えば頸部ジストニアに関する頭頸部ジストニア質問表（ＣＣＤＱ２４）（Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｊ、Ｗｉｓｓｅｌ  Ｊ、Ｋｅｍｍｌｅｒ  Ｇ、Ｂｏｄｎｅｒ  Ｔ、Ｐｏｅｗｅ  Ｗ、頭頸部ジストニア患者の生活の質：ＣＣＤＱ−２４の開発、Ｍｏｖ．Ｄｉｓｏｒｄ．２０００；１５（増刊号３）：７６１）、及び痙性に関するスウェーデン略式３６の健康調査質問表（ＳＦ−３６）によるＨＲＱＬ（Ｗｅｌｍｅｒ  ＡＫ、ｖｏｎ  Ａｒｂｉｎ  Ｍ、Ｗｉｄｅｎ  Ｈｏｌｍｑｖｉｓｔ  Ｌ、Ｓｏｍｍｅｒｆｅｌｄ  ＤＫ、痙性と脳卒中後１８ヶ月の機能及び健康に関連した生活の質との関連性、Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．２００６；２１（４）：２４７−２５３）に利用可能である。
【００３４】
患者の再注射治療又は最後の治療ごとに、実際のＢＳＤＩ観察と基準ＢＳＤＩ値との差ΔＢＳＤＩを計算する：
ΔＢＳＤＩ＝ＢＳＤＩ実際−ＢＳＤＩ基準
ＢＳＤＩ基準は、治療すべき患者の初診時から医薬を最初に注射する前のあいだに測定する。ＢＳＤＩ実際は、医薬のそれぞれの（再）注射後、及びその３週間後にそれぞれ測定する。
【００３５】
第１の治療時に記録したΔＢＳＤＩ値に基づき、各患者は、以下の方法で３階層のうちの１つに割り当てられる：
・階層１（中等度の改善）：  −１．００≦ΔＢＳＤＩ≦−０．６５
・階層２（顕著な改善）：    −１．３５≦ΔＢＳＤＩ＜−１．００
・階層３（兆候及び症状の無効）：        ΔＢＳＤＩ＜−１．３５
患者は応答者として分類される。即ち、ΔＢＳＤＩ計算値がいずれも閾値Δｃを越えない場合、患者は生活の質の安定レベルを実証する。閾値Δｃ値は、患者が属する階層に依存する。閾値の値は以下の通りである：
・階層１：  Δｃ＝−０．４０
・階層２：  Δｃ＝−０．７５
・階層３：  Δｃ＝−１．１０
応答者は基準ＢＳＤＩ値の低下を示し、したがって、生活の質状態の改善を示す。最小規模の改善は閾値Δｃによって与えられる。階層２の患者は、階層１の患者よりも初期注射に対して強い応答を示し（より小さいＢＳＤＩの差を生ずる）、階層３の患者は、階層２の患者よりも更に強く反応するため、Δｃ値は、階層数と供に低下する。
【００３６】
最後に、再注射治療日のＢＳＤＩレベルと基準ＢＳＤＩレベルとのあいだに観察される差を解析し、再注射時（治療効果の減少が予想される日）の生活の質レベルに長期にわたり何らかの改善があるかどうか調査する。
【００３７】
本発明内で用いられるような医薬の、先に特定した（及び請求の範囲に記載した）投与様式は、通常、患者を治療する医師の業務活動に属する。しかしながら、投与様式は、例えば、医薬の包装が、医師及び／又は患者への指示を有する特に適した説明書を含有し、及び／又は包装が、本発明による投与様式を可能にするのに特に適しているという点で医薬の製造の一部でもあり得る。
【００３８】
本発明の明細書を通して使用されるように、「治療ごとに注射される総量」という用語は、総用量を表し、１回の治療で患者に適用される神経毒素の合計を意味する。１回の治療には１回以上の注射を含めることができる。例えば、胸鎖乳突筋、頭板状筋、頭半棘筋、及び僧帽筋の治療には、１回、２回、３回、４回、又は５回の注射を含めることができ、一方、肩甲挙筋又はＭｍ斜角筋の治療には１〜３回の注射のみ含めることができる。本明細書において先に指摘したように、治療に使用する量は、当該技術分野に公知の多くのパラメータに依存する。そのようなパラメータには、例えば、神経毒成分の血清型、注射すべき標的組織、及び患者特異的な多くの要因が含まれる。１回の治療を２回以上の治療期間に分割し、その期間に上記総量の神経毒成分を投与してもよいことが本発明の教示によって想定される。これは、特に、多量の神経毒成分を投与する場合である。
【００３９】
更に、本発明の方法のこの態様に基づいて、神経毒成分の追加投与を必要とする患者をより有効に治療することが今では可能である。これは、例えば、第１の又は先の治療後、更なる筋肉が疾患の症状の一因となることがはっきりしているとき、又は筋肉がなくなっているときの場合であり得る。
【００４０】
本発明の他の好ましい態様では、患者は高用量の神経毒成分を必要とする患者である。本発明の他の好ましい態様では、（ａ）患者は重篤な運動障害又は重篤な痙性を有する患者であり、そして（ｂ）投与される有効量は、成人では５００Ｕの神経毒成分を越え、子供では１５Ｕ／Ｋｇ体重を越える。
【００４１】
本発明の態様に基づき、更に多量の神経毒成分で患者を治療することが今では可能である。成人患者では、そのような量は、例えば５００Ｕの神経毒成分を越えてもよい。
本発明を通して使用されるように、５００Ｕを超える量は、例えば５００Ｕより多い量、及び５５０Ｕ以下、６００Ｕ以下、７００Ｕ以下、８００Ｕ以下、９００Ｕ以下、１０００Ｕ以下、１１００Ｕ以下、１２００Ｕ以下、１３００Ｕ以下、１４００Ｕ以下、１５００Ｕ以下、１６００Ｕ以下、１７００Ｕ以下、１８００Ｕ以下、１９００Ｕ以下、又は２０００Ｕ以下の量である。投与される用量は５００〜９００Ｕの範囲であることが好ましく、より好ましくはおよそ８５０Ｕである。子供では、「高量」とは、１５Ｕ／ｋｇを越える量、及び１６Ｕ／ｋｇ以下、１７Ｕ／ｋｇ以下、１８Ｕ／ｋｇ以下、１９Ｕ／ｋｇ以下、２０Ｕ／ｋｇ以下を意味する。
【００４２】
本発明のより好ましい態様では、成人では５００Ｕを越える量、子供では１５Ｕ／ｋｇ体重を超える量が総量であり、前記量は、（ａ）この量の第１画分を第１の治療期期に注射し、そして（ｂ）残りの画分を、第１の治療期間の少なくとも１日後に予定される１回以上のその後の治療期間に注射することによって投与される。総有効量の神経毒成分は、同日に投与しても異なる日、即ち異なる治療期間に投与してもよい。好ましくは、高量の神経毒成分を投与すべき場合、投与すべき総量を分割し、２回以上の治療期間に投与することができる。このように、１回の治療期間に投与する場合に別の方法では適合しないような多量を顕著な副作用を観察することなく患者へ投与することができる。
【００４３】
本発明の他の好ましい態様では、患者は、ボツリヌス毒素で治療されているが治療効果の減少に不満をもち、そして治療後３ヶ月が終了する前に治療を必要とするヒトである。
治療効果のそのような減少は、患者が自分の障害の重篤度を毎日記録する治療日程表でモニターすることができる（そのような治療日程表は例えばメルツ製薬より配布されている）。
【００４４】
本発明の更に他の好ましい態様では、活動亢進性の腺は自律外分泌腺であり、組成物は、腺又はその近傍に注射される。
好ましい態様では、自律外分泌腺は、（ａ）汗腺、涙腺、唾液腺、及び粘液腺から成る群より選択されるか；又は（ｂ）フレイ症候群、ワニの涙症候群、脇の多汗症、手のひらの多汗症、足底多汗症、頭頸部の多汗症、身体の多汗症、鼻漏、又は脳卒中、パーキンソン病、若しくは筋萎縮性側索硬化症を有する患者における関連唾液過多から成る群より選択される疾患又は病状に関連する活動亢進性の腺である。しかしながら、神経毒成分療法の標的組織は、あらゆる活動亢進性外分泌腺をカバーすることに注目すべきである。したがって、本発明は、本明細書に援用されるＳｏｂｏｔｔａ，Ｊｏｈａｎｎｅｓ（Ａｔｌａｓ  ｄｅｒ  Ａｎａｔｏｍｉｅ  ｄｅｓ  Ｍｅｎｓｃｈｅｎ．２２．Ａｕｆｌａｇｅ．Ｂａｎｄ  １  ｕｎｄ  ２．Ｕｒｂａｎ＆Ｆｉｓｃｈｅｒ、２００５）に記載のあらゆる腺に関与する治療に適用できることが想定される。
【００４５】
また、本発明は、患者の筋肉の病理学的活性を原因とするか又はそれに関連した疾患又は病状を治療するための方法に関するものであり、前記方法は、有効量のボツリヌス菌毒素複合体の神経毒成分を含み且つ前記ボツリヌス菌毒素複合体の他のタンパク質成分が全く無い組成物を投与することを含み、ここで、（ａ）患者は重篤な運動障害又は重篤な痙性を有するヒトであり；（ｂ）組成物は注射で投与され；そして（ｃ）投与される有効量は、成人では５００Ｕの神経毒成分を越え、子供では１５Ｕ／ｋｇ体重を越える。
【００４６】
本発明の好ましい態様では、成人では５００Ｕを越える量、子供では１５Ｕ／ｋｇ体重を超える量が総量であり、前記量は、（ａ）この量の第１画分を第１の治療期間に注射し、そして（ｂ）残りの画分を、第１の治療期間の少なくとも１日後に予定される１回以上のその後の治療期間に注射する、ことによって投与される。
【００４７】
本発明の他の好ましい態様では、組成物は、第１の治療及び第２の治療を構成する３ヶ月未満の間隔で投与され、第２の治療で投与される量は、第１の治療で投与される量よりも低量、高量、又は同量であり得る。
【００４８】
本発明の更に他の好ましい態様では、前記疾患又は病状は筋ジストニアであるか又はそれを包含する。「ジストニア若しくは筋ジストニアであるか又はそれを包含する疾患又は病状」という用語は、ジストニア筋肉を含めた病状を表す。病状は、全身性ジストニア、分節性ジストニア、局所性ジストニア、多巣性ジストニア、及び片側性ジストニアから成る群より選択されることが好ましい。局所性ジストニアは、頭蓋ジストニア、頸部ジストニア、四肢ジストニア、体幹のジストニア、及び痙攣性発声障害から成る群より選択されることが好ましい。頸部ジストニアは、痙性斜頸とも称するが、頸部及び肩の筋肉における不随意で不適切な筋肉の活動亢進を特徴とし、異常な頭の動きや位置、攣縮又は震えをもたらす（Ｆａｈｎ  Ｓ．一次性ジストニアの評価。：Ｍｕｎｓａｔ  ＴＬ編『神経学的欠損の定量』ボストン：Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈｓ；１９８９．ｐ．２４１−２７０（ＩＤ  １７６０１３７））。頸部及び肩の罹患筋肉への神経毒成分の注射は多くの患者において症状の有意な緩和をもたらす。
【００４９】
本発明のより好ましい態様では、ジストニアは、（ａ）（１）眼瞼痙攣、開口型又は閉口型の口下顎ジストニア、歯ぎしり、メージュ症候群、舌ジストニア、開眼失行を含めた頭蓋ジストニア、（２）前屈、後屈、側屈、斜頸を含めた頸部ジストニア、（３）咽頭ジストニア、（４）内転筋型又は外転筋型の痙攣性発声障害、痙攣性の呼吸困難を含めた喉頭ジストニア、（５）書痙、音楽家痙攣、若しくはゴルファー痙攣を含めた動作特異的ジストニアなどの上肢ジストニア、大腿部の内転、大腿部の外転、膝の屈曲、膝の伸展、足首の屈曲、足首の伸展、若しくは内反尖足変形を含めた下肢ジストニア、母指の過伸展、足指の屈曲、若しくは足指の伸展を含めた足のジストニアを含めた四肢ジストニア、ピサ症候群若しくはベリーダンサーのジストニアなどの軸性ジストニア、分節性ジストニア、片側性ジストニア、又は全身性ジストニア、（６）Ｌｕｂａｇにおけるジストニア、（７）大脳皮質基底核変性症におけるジストニア、（８）遅発性ジストニア、（９）脊髄小脳失調症におけるジストニア、（１０）パーキンソン病におけるジストニア、（１１）ハンチントン病におけるジストニア、（１２）ハレルフォルデン・スパッツ病におけるジストニア、（１３）ドーパ誘発性ジスキネジア／ドーパ誘発性ジストニア、（１４）遅発性ジスキネジア／遅発性ジストニア、（１５）発作性ジスキネジア／ジストニア（運動誘発性、非運動誘発性、動作誘発性）から成る群より選択されるか；又は（ｂ）斜頸、側屈、後屈、前屈、肘屈曲、前腕回内、手首屈曲、母指内転、若しくは拳固から成る群より選択される臨床パターンを包含するものである。
【００５０】
以下の表は、臨床パターン及び潜在的に関与する筋肉の非限定的リストを提供するものであり、それらの筋肉は本発明の教示によれば好ましい標的筋肉である。
【００５１】
【表１】
0005897784.tif 000002
【００５２】
「痙攣性発声障害」は、喉頭の１種以上の筋肉の不随意運動を原因とする発声障害である。痙攣性発声障害を患う患者は、話すことが困難である。痙攣性発声障害は、変声を引き起こし、又は堅い、張りつめた、のどの詰まったような、若しくは努力を要する質の声を引き起こす。本明細書に開示するように、神経毒成分を喉頭の患部筋肉に注射することにより、通常声が改善する。
【００５３】
眼瞼痙攣は、眼輪筋の自発的な両側性の間欠性又は持続性の不随意収縮を特徴とする進行性の疾患である（Ｇｒａｎｄａｓ  Ｆ、Ｅｌｓｔｏｎ  Ｊ、Ｑｕｉｎｎ  Ｎ、Ｍａｒｓｄｅｎ  ＣＤ、眼瞼痙攣：２６４人の患者の概説。Ｊ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  １９８８；５１（６）：７６７−７７２（ＩＤ  １７５９１２０）；Ｊａｎｋｏｖｉｃ  Ｊ、Ｏｒｍａｎ  Ｊ、眼瞼痙攣：２５０人の患者の人口統計学的な臨床調査。Ａｎｎ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  １９８４；１６（４）：３７１−３７６（ＩＤ  １７６１７８６）；Ｍａｕｒｉｅｌｌｏ  ＪＡ、Ｌｅｏｎｅ  Ｔ、Ｄｈｉｌｌｏｎ  Ｓ、Ｐａｋｅｍａｎ  Ｂ、Ｍｏｓｔａｆａｖｉ  Ｒ、Ｙｅｐｅｚ  ＭＣ、片側顔面痙攣を有する１１９人の患者の１１年にわたる治療選択。Ｃｌｉｎ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ  １９９６；９８（３）：２１３−２１６（ＩＤ  １７７７０６８））。本発明の方法に基づいて眼輪筋に局注すると、ボツリヌス毒素は非常に有効であり、眼瞼痙攣の対処療法に良好な耐容性を示す。
【００５４】
他の好ましい態様では、Ａ型ボツリヌス毒素による前処置を受け、短期間の効能を示す良性特発性眼瞼痙攣を有する患者を、複合体形成タンパク質の無いボツリヌス神経毒素を用いて、短縮された注射間隔で、即ち３ヶ月未満の間隔でボツリヌス神経毒素を投与することにより治療する。複合体形成タンパク質の無いボツリヌス神経毒素は、高純度Ａ型ボツリヌス神経毒素であることが好ましい。ボツリヌス神経毒素の新たな注射は、患者が治療効果の減少を報告するときに指示する。この治療計画によれは、患者は、先に考察したように安定な生活の質を達成することができ、これは、先に考察したようにして決定することが好ましい。
【００５５】
本発明のより好ましい態様では、筋肉は、同側板状筋、対側胸鎖乳突筋、同側胸鎖乳突筋、頭板状筋、斜角筋複合体、肩甲挙筋、後椎骨（postvertebralis）、同側僧帽筋、肩甲挙筋、両側頭板状筋、上部僧帽筋、後椎骨深部（deep postvertebralis）、両側胸鎖乳突筋、斜角筋複合体、オトガイ下複合体、腕橈骨筋、上腕二頭筋、方形回内筋、円回内筋、橈側手根屈筋、尺側手根屈筋、長母指屈筋、母指内転筋、短母指屈筋/対立筋、浅指屈筋、深指屈筋から成る群より選択される。
【００５６】
本発明の好ましい態様では、疾患又は病状は、筋肉の痙性であるか又はそれを包含する。
本発明のより好ましい態様では、痙性は、（ａ）脳卒中後の痙性、脳性麻痺による痙性であるか若しくはそれに関連するものであり；又は（ｂ）（１）（ａ）多発性硬化症、横断性脊髄炎、デビック症候群に関するものを含めた自己免疫過程、（ｂ）ウイルス感染、（ｃ）細菌感染、（ｄ）寄生虫感染、若しくは（ｅ）真菌感染、に関連した脳炎及び脊髄炎における痙攣状態、（２）遺伝性痙性対麻痺、（３）大脳半球梗塞、脳幹梗塞から生ずる脳卒中後症候群、若しくは脊髄梗塞、（４）例えば大脳半球損傷、脳幹損傷、脊髄損傷を含めた中枢神経系外傷、（５）大脳内出血、くも膜下出血、硬膜下出血、若しくは髄腔内出血などの中枢神経系の出血、若しくは（６）新生物、例えば大脳半球腫瘍、脳幹腫瘍、若しくは脊髄腫瘍であるか若しくはそれに関連したものである。他の治療は、膀胱、膀胱痙攣、失禁、括約筋の痙攣、脳性麻痺又は前立腺肥大を原因とする痙性の治療であり得る。
【００５７】
「脳卒中後の痙性」という用語は、脳卒中事象後に発生する痙性に関する。脳卒中は長期身体障害の主要原因であり、１９％（２）〜３８％の患者に痙性を生ずる（Ｗａｔｋｉｎｓ  ＣＬ、Ｌｅａｔｈｌｅｙ  ＭＪ、Ｇｒｅｇｓｏｎ  ＪＭ、Ｍｏｏｒｅ  ＡＰ、Ｓｍｉｔｈ  ＴＬ、Ｓｈａｒｍａ  ＡＫ、脳卒中後痙性の罹患率。Ｃｌｉｎ  Ｒｅｈａｂｉｌ  ２００２；１６（５）：５１５−５２２（ＩＤ  １９１５００１））。痙性は、腱反射亢進を伴った緊張性伸張反射（筋緊張）の速度依存性の増大を特徴とする運動障害として定義され、上位運動ニューロン症候群の１つの構成要素として、伸張反射の過度の興奮から生ずる（４）。体重負荷を可能にし得る腰や膝の伸筋痙性の場合のように、ある患者では痙性は有益であり得、患部四肢が添え木のように作用する（５）。しかしながら、大多数の患者では、痙性は、着衣や握りしめた拳の手のひらの洗浄のような日常生活の活動困難を引き起こす（６）。本発明の教示に従い、対応する筋肉群の痙性に関連した変形の一般的臨床パターンを神経毒成分で治療する。
【００５８】
「膀胱（urinary bladder）」という用語は、必ずではないが多くは、失禁や排尿悪化をもたらす脊髄損傷又は多発性硬化症又は外傷から生ずる膀胱障害に関するものである。神経毒素投与の標的筋肉は、他に記載されているように横紋筋性尿道括約筋であることが好ましい（Ｓｃｈｕｒｃｈ  Ｂ、神経泌尿器学におけるボツリヌス毒素の役割。Ｄｒｕｇｓ  Ｔｏｄａｙ  ２００４；４０（３）：２０５−２１２（ＩＤ  ３０９７１４５）；Ｓｃｈｕｒｃｈ  Ｂ、Ｄｅ  Ｓｅｚｅ  Ｍ、Ｄｅｎｙｓ  Ｐ、Ｃｈａｒｔｉｅｒ−Ｋａｓｔｌｅｒ  Ｅ、Ｈａａｂ  Ｆ、Ｅｖｅｒａｅｒｔ  Ｋら、Ａ型ボツリヌス毒素は神経性尿失禁の安全で有効な治療である：６ヶ月間の単回治療の無作為化プラセボ対照試験の結果。Ｊ  Ｕｒｏｌ  ２００５；１７４（１）：１９６−２００（ＩＤ  ３５２８４６２））。
【００５９】
「失禁」という用語は尿失禁を意味し、膀胱からの尿の流れを制御できない。失禁には様々な種類及び程度があり、それらは本発明の教示の範囲内である：溢流性尿失禁は、排尿後の膀胱に残尿がある病状である；その結果、膀胱はほとんど常に一杯のままであり、膀胱から不随意の尿漏を生ずる；ストレス性尿失禁は、咳き込んだときや重い物を持つために力んだときのように膀胱への圧力が増加したときの不随意排尿である；完全失禁は、膀胱頸部及び尿道の括約筋に対する自発運動の制御不能であり、保持能を完全に失う。尿失禁治療では、本明細書に記載の組成物を、例えば三角部を除いた排尿筋へ膀胱鏡的に注射することができる（Ｓｃｈｕｒｃｈ  Ｂ、神経泌尿器学におけるボツリヌス毒素の役割。Ｄｒｕｇｓ  Ｔｏｄａｙ  ２００４；４０（３）：２０５−２１２（ＩＤ  ３０９７１４５）；Ｓｃｈｕｒｃｈ  Ｂ、Ｄｅ  Ｓｅｚｅ  Ｍ、Ｄｅｎｙｓ  Ｐ、Ｃｈａｒｔｉｅｒ−Ｋａｓｔｌｅｒ  Ｅ、Ｈａａｂ  Ｆ、Ｅｖｅｒａｅｒｔ  Ｋら、Ａ型ボツリヌス毒素は神経性尿失禁の安全で有効な治療である：６ヶ月間の単回治療の無作為化プラセボ対照試験の結果。Ｊ  Ｕｒｏｌ  ２００５；１７４（１）：１９６−２００（ＩＤ  ３５２８４６２））。
【００６０】
「前立腺肥大」という用語は、前立腺の正常成分の大きさや数が増大する前立腺の拡大を表す。それらの単なるかさが前立腺の中央を通る尿道を圧迫し、膀胱から尿道を通って外部へという尿の流れを妨げ得る。これは、尿の貯留及び頻尿の生理的欲求をもたらし得る。前立腺肥大が重篤である場合、完全閉塞が起こり得る。本明細書に記載の組成物を前立腺に注射後、症状、前立腺の血清マーカー、前立腺体積、排尿後の残尿量、及びピーク尿流速の有意な減少が観察される。同様の結果が他に記載されている（Ｍａｒｉａ  Ｇ、Ｂｒｉｓｉｎｄａ  Ｇ、Ｃｉｖｅｌｌｏ  ＩＭ、Ｂｅｎｔｉｖｏｇｌｉｏ  ＡＲ、Ｓｇａｎｇａ  Ｇ、Ａｌｂａｎｅｓｅ  Ａ、良性前立腺肥大による排尿障害のボツリヌス毒素による緩和:無作為化プラセボ対照試験の結果。Ｕｒｏｌｏｇｙ  ２００３；６２（２）：２５９−２６５（ＩＤ  ２５６２８２０））。
【００６１】
「脳性麻痺」は、不全麻痺を引き起こす広範な錐体路機能障害、ジストニア、硬直、痙性、及び痙攣を引き起こす錐体外路機能障害、失行症の構成要素及び協調不全について記載する。脳性麻痺（Ｋｏｍａｎ  ＬＡ、Ｍｏｏｎｅｙ  ＪＦ、Ｓｍｉｔｈ  ＢＰ、Ｇｏｏｄｍａｎ  Ａ、Ｍｕｌｖａｎｅｙ  Ｔ、ボツリヌスＡ毒素による脳性麻痺の痙性管理：予備的無作為化二重盲検試験の報告。Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ  Ｏｒｔｈｏｐ  １９９４；１４（３）：２９９−３０３（ＩＤ  １７６７４５８）；Ｐｉｄｃｏｃｋ  ＦＳ、脳性麻痺治療における治療用ボツリヌス毒素の新たな役割。Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ  ２００４；１４５（２  増刊号）：Ｓ３３−Ｓ３５（ＩＤ  ２９９４７８１））は、脳出血、窒息、未熟児出産、及び他の周産期合併症後に発症し得る。それは、非協調運動、不全麻痺、及び様々な形態の筋肉活動亢進を引き起こす生涯にわたる病状である。脳性麻痺患者は、本明細書に開示の方法にしたがって治療する場合、活動亢進性筋肉の機能改善を体験する。
【００６２】
本発明のより好ましい態様では、痙攣筋肉は平滑筋又は横紋筋である。筋活動亢進性の障害の治療における神経毒成分の標的組織は、原則として、Ｓｏｂｏｔｔａ，Ｊｏｈａｎｎｅｓ：Ａｔｌａｓ  ｄｅｒ  Ａｎａｔｏｍｉｅ  ｄｅｓ  Ｍｅｎｓｃｈｅｎ．２２．Ａｕｆｌａｇｅ．Ｂａｎｄ  １  ｕｎｄ  ２．Ｕｒｂａｎ＆Ｆｉｓｃｈｅｒ、２００５に記載のようなヒトの身体の全ての横紋筋及び平滑筋であり得る。この参考文献に記載の筋肉は、本明細書に援用される。本発明の方法は、これらの筋肉のいずれかを標的とすることができる。
【００６３】
また、本発明は、顔のしわの線若しくは皮膚のしわを軽減させる方法、又は顔面非対称を取り除く方法に関するものであり、前記方法は、有効量のボツリヌス菌毒素複合体の神経毒成分を含み且つ前記ボツリヌス菌毒素複合体の他のタンパク質成分が全く無い組成物を個体へ投与することを含み、ここで、（ａ）個体はヒトであり；（ｂ）組成物は、皮下又は筋肉内注射によって１種以上の顔面筋又は皮膚のしわ若しくは非対称の形成に関与する筋肉に又はその近傍に投与され；そして（ｃ）組成物は、第１の治療及び第２の治療を構成する３ヶ月未満の間隔で投与され、第２の治療で投与される量は、第１の治療で投与される量よりも低量、高量、又は同量であり得る。
【００６４】
本発明のこの方法は、顔面筋又は患者の皮膚のしわ又は顔面非対称の処置を可能にする。典型的には、より少量の神経毒成分をそのような美顔法に用いる。そのような量は、１〜５、５〜１０、１０〜２０、又は２０〜５０単位の範囲であることが好ましい。そのような総量は処置と同日に投与しても後日に投与してもよい。例えば、第１の治療期間に用量の第１画分を投与することができる。この第１画分は、次善の画分、即ちしわや皮膚の線を完全に除去しない画分であることが好ましい。１回以上の治療期間に、総用量の残りの画分を投与することができる。
【００６５】
本発明の好ましい態様では、組成物は、眉間のしわ、水平な額の線、目尻のしわ、口周囲のしわ、顎のceases、波だった顎、及び／又は広頸筋のバンドへ注射される。
本発明の他の好ましい態様では、筋肉は、以下の筋肉：頭板状筋、胸鎖乳突筋、斜角筋複合体、肩甲挙筋、半棘筋、頭最長筋、頸最長筋、多裂筋、下頭斜筋、上頭斜筋、大後頭直筋、小後頭直筋、僧帽筋／水平部、僧帽筋／頸部、舌骨上筋、舌骨下筋、二腹筋、内側翼突筋、外側翼突筋、咬筋、側頭筋、眼輪筋、鼻筋、鼻根筋、皺眉筋、口角下制筋、下唇下制筋、前頭筋、上唇挙筋、上唇鼻翼挙筋、口輪筋、笑筋、小頬骨筋、大頬骨筋、三角筋、上腕三頭筋、腕橈骨筋、上腕二頭筋、方形回内筋、円回内筋、橈側手根屈筋、尺側手根屈筋、長母指屈筋、対立筋、骨間筋、虫様筋、母指内転筋、短母指屈筋、浅指屈筋、深指屈筋、内転筋群、大腿四頭筋、ハムストリング筋、下腿三頭筋、後脛骨筋、長母趾屈筋、前脛骨筋、長母趾伸筋、長趾伸筋、短母趾屈筋、短趾屈筋、傍脊椎筋から成る群より選択される。
【００６６】
本明細書において先に言及した神経毒成分は、組成物又は医薬組成物の一部であり得る。この医薬組成物は、医薬的に活性な追加成分を含有することができる。「医薬組成物」は、医薬又は診断薬として用いるための活性成分を含有するか又はそれで構成される剤形である。そのような医薬組成物は、ヒト患者への診断用又は治療用投与（即ち筋肉内注射又は皮下注射による）に好適であり得る。医薬組成物は凍結乾燥若しくは真空乾燥され、再構成され、又は溶液であることができる。再構成時、再構成溶液は、滅菌生理食塩水（０．９％ＮａＣｌ）を添加することによって調製されることが好ましい。
【００６７】
そのような組成物は、ｐＨ緩衝液、賦形剤、希釈剤、抗凍結剤、及び／又は安定剤などの追加成分を含むことができる。
「ｐＨ緩衝液」は、組成物や溶液などのｐＨ値を一定値又は一定ｐＨ範囲に調整可能な化学物質を表す。
【００６８】
「安定化すること」、「安定化する」、又は「安定化」とは、再構成されたか又は水溶液の医薬組成物中の活性成分、即ち神経毒成分が、生物学的に活性な神経毒成分が医薬組成物中に導入される前に有していた毒性の約２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、及び約１００％以下を有することを意味する。製剤の活性は、本明細書のいずれかに記載のようにして測定することができる。
【００６９】
「抗凍結剤」は、生物学的に活性な神経毒成分が医薬組成物中で凍結乾燥される前に有していた毒性の約２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、及び約１００％以下を有する再構成されたか又は水溶液の医薬組成物中の活性成分、即ち神経毒成分をもたらす賦形剤を表す。製剤の活性は、本明細書のいずれかに記載のようにして測定することができる。
【００７０】
そのような安定剤の例はゼラチン又はアルブミンであり、ヒト由来又は組換え供給源から得たものであることが好ましい。安定剤は、化学的手段によって又は組換え遺伝学によって修飾することができる。本発明の好ましい態様では、アルコール、例えばイノシトール、マンニトールを抗凍結剤として使用し、凍結乾燥中にタンパク質を安定化することが想定される。
【００７１】
本発明のより好ましい態様では、安定剤は、ヒアルロン酸又はポリビニルピロリドン又はポリエチレングリコール又はそれら２種以上の混合物を含む非タンパク質性安定剤であり得る。そのような組成物は、顕著な安定性を有するより安全な組成物であると考えられる。
【００７２】
本発明のより好ましい態様では、医薬組成物は、神経毒成分と、ヒアルロン酸又はポリビニルピロリドン又はポリエチレングリコールとを含むことができ、そのような組成物は場合により好適なｐＨ緩衝液よって、特に酢酸ナトリウム緩衝液及び／又は抗凍結剤ポリアルコールによってｐＨが安定化される。
【００７３】
医薬組成物が神経毒成分の他に、アルブミン、ヒアルロン酸、ポリビニルピロリドン、及び／又はポリエチレングリコール安定剤などの追加成分を含むか否かを問わず、医薬組成物は、約＋８℃〜約−２０℃の温度で保存する場合、その効力を６ヶ月間、１年間、２年間、３年間、及び/又は４年間実質的に変化させないまま保持する。更に、表示した医薬組成物の再構成時の効力又は回収率は約２０％〜約１００％であり得る。
【００７４】
本発明の範囲内の医薬組成物は、神経毒成分と１種以上の追加成分とを含めることができる。好ましくは、本明細書に開示の医薬組成物の再構成時又は注射時のｐＨは約４〜７．５であり、より好ましくは約ｐＨ６．８〜ｐＨ７．６であり、最も好ましくはｐＨ７．４〜ｐＨ７．６である。一般に、本発明の医薬組成物は、神経毒成分を約６ｐｇ〜３０ｎｇの量で含む。好ましくは、神経毒成分の生物活性は、マウスＬＤ５０アッセイで測定して５０〜２５０ＬＤ５０単位／ｎｇ神経毒成分である。より好ましくは、神経毒成分の生物活性は約１５０ＬＤ５０である。
【００７５】
本発明の医薬組成物は、神経毒素及びヒアルロン酸を含むことができる。ヒアルロン酸は神経毒素を安定化する。本明細書に開示の医薬組成物の再構成時又は注射時のｐＨは約４〜７．５であることができる。本発明の医薬組成物中のヒアルロン酸は、２００Ｕ／ｍｌボツリヌス毒素溶液中で、本発明の神経毒成分と、０．１〜１０ｍｇ、特に１ｍｇヒアルロン酸／ｍｌの量で組み合わせることが好ましい。対象溶液は、１〜１００ｍＭ、特に１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液も含有することがより好ましい。
【００７６】
他の好ましい態様では、組成物はポリアルコールを抗凍結剤として含有することができる。使用し得るポリアルコールの例には、例えばイノシトール、マンニトール、及び他の非還元アルコールが含まれる。
【００７７】
特に、タンパク質性安定剤を含まない本発明の医薬組成物のそれらの態様は、時に抗凍結剤として使用されるトレハロース又はマルトトリオース又は関連する糖質又はポリヒドロキシ化合物を含有しないことが好ましい。
【００７８】
本発明の医薬組成物中のポリビニルピロリドンは、２００Ｕ／ｍｌボツリヌス毒素溶液中で、本発明の神経毒成分と、１０〜５００ｍｇ、特に１００ｍｇポリビニルピロリドン／ｍｌの量で組み合わせることが好ましい。対象溶液は、１〜１００ｍＭ、特に１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液も含有することがより好ましい。
【００７９】
本発明の医薬組成物中のポリエチレングリコールは、２００Ｕ／ｍｌボツリヌス毒素溶液中で、本発明の神経毒成分と、１０〜５００ｍｇ、特に１００ｍｇポリエチレングリコール／ｍｌの量で組み合わせることが好ましい。対象溶液は、１〜１００ｍＭ、特に１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液も含有することがより好ましい。
【００８０】
このように、本発明は、より好ましい態様において、ヒアルロン酸安定剤又はポリビニルピロリドン安定剤又はポリエチレングリコール安定剤を含有する医薬組成物に処方された神経毒成分を包含する。更に、医薬組成物は、酢酸ナトリウム緩衝液系及び／又はアルコール性抗凍結剤を含有してもよい。
【００８１】
以下の実施例は、説明のためのみに提供するものであり、限定することを意図するものではない。
【実施例１】
【００８２】
頸部ジストニア治療のためのボツリヌス毒素療法。
４５歳男性の頸部ジストニア患者をボツリヌス毒素療法について評価する。全ての適切な試験後、注射計画を構築し、それに応じて複合体形成タンパク質の無いボツリヌス毒素を総用量３００ＭＵにて適用する。２週間後の再評価において、総体的な症状は改善されているが、標的筋肉を追加し、最初に注射した標的筋肉におけるボツリヌス毒素用量を増やす必要性がある。２週間後、更に患者を再評価したところ、治療結果は最適である。
【００８３】
副作用は生じていない。今までのところ、その後７回の注射シリーズにおいて、治療結果は抗体誘導性の療法の失敗を示すことなく維持されている。
【実施例２】
【００８４】
眼瞼痙攣治療のためのボツリヌス毒素療法。短期間の作用。
６１歳女性の眼瞼痙攣患者を、本発明の神経毒成分を含有し、複合体形成タンパク質の無い医薬で総用量４８ＭＵにて治療し、優れた結果を得る。神経毒成分を注射して４週間後、効果が減弱し始める。更に２週間後、治療効果はほとんど完全に終了した。初期注射シリーズから７週間後に再注射を実施する。神経毒成分を用いた療法を初期用量で繰り返し、同一の効果を得る。神経毒成分を用いた療法をその後６回の注射シリーズで継続し、優れた療法結果を得、抗体誘導性の療法の失敗は示していない。
【実施例３】
【００８５】
全身痙性治療のためのボツリヌス毒素療法。高用量適用。
３５歳男性の全身痙性を有する低酸素性脳障害患者。複合体形成タンパク質の無い本発明の神経毒成分の総用量７５０ＭＵを、２５０ＭＵの３つのアリコートにて１日間隔で投与する。適用後２週間で病状は実質的に改善している。部分的にも領域的にも全身にも副作用を検出することはできない。その後７回の注射シリーズにおいて、療法効果は副作用を発生させることなく安定である。抗体誘導性の療法の失敗は示していない。
【実施例４】
【００８６】
ボツリヌス毒素の美顔用途。注射計画を構築する上での困難性及び短期間の作用。
筋肉のしわや前頭の水平な線を示す４０歳の女性客を、複合体形成タンパク質の無い２０ＭＵのボツリヌス毒素（即ち本発明の神経毒成分）で処置した。２週間後、総体的な症状の改善が見られるが、２０ＭＵのボツリヌス毒素を更に注射することが必要である。２週間後、結果は患者にとって十分に満足のいくものである。４週間後、好ましい効果が減弱し始めるため、ボツリヌス毒素を総用量４０ＭＵにて再注射することが必要になる。今までのところ、この客はその後４回の注射シリーズをそれぞれ総用量４０ＭＵにて受けている。抗体誘導性の療法の失敗は示していない。