(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物、
【化１】
0005956928.tif 000037
あるいは、その薬学的に許容可能な塩であることを特徴とする化合物。
【請求項２】
以下の化合物であることを特徴とする請求項１記載の化合物。
【化２】
0005956928.tif 000038
【請求項３】
以下の化合物であることを特徴とする請求項１記載の化合物。
【化４】
0005956928.tif 000039
【請求項４】
アンドロゲン受容体媒介性の疾患又は疾病を軽減するための製剤を製造するための以下
の式の化合物、
【化５】
0005956928.tif 000040
あるいはその薬学的に許容可能な塩の使用であって、
前記アンドロゲン受容体媒介性の疾患又は疾病は、前立腺癌、良性前立腺肥大症、多毛
症、脱毛症、神経性食欲不振、乳癌、及び男性性腺機能低下症から成る群から選択される
ことを特徴とする使用。
【請求項５】
前記アンドロゲン受容体媒介性の疾患又は疾病が前立腺癌であることを特徴とする請求
項４記載の使用。
【請求項６】
前記前立腺癌が去勢抵抗性前立腺癌であることを特徴とする請求項５記載の使用。
【請求項７】
前記製剤が治療上有効な量の第２の物質をさらに含むことを特徴とする、請求項４記載
の使用。
【請求項８】
前記化合物が以下の式の化合物であることを特徴とする請求項４に記載の使用。
【化６】
0005956928.tif 000041
【請求項９】
前記化合物が以下の式の化合物であることを特徴とする請求項４記載の使用。
【化７】
0005956928.tif 000042
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
アンドロゲン受容体媒介性の疾患又は疾病を処置するための、化合物、及びそのような化合物を製造する方法、そのような化合物を含む医薬組成物及び薬剤、及びそのような化合物を使用する方法が記載される。
【背景技術】
【０００２】
前立腺癌は、男性において最も一般的な癌であり、２００９年に２７，３６０を超える死亡の原因となる（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，  ２００９）。大多数の前立腺癌死亡は、従来のアンドロゲン遮断療法に反応性のない転移性疾患の進行が原因である。アンドロゲン遮断療法は、１９４０年代以降、前立腺癌を有する患者における標準治療であった。アンドロゲン遮断にもかかわらず、ほとんどの患者は、最終的に疾患の進行を経験する。長年、疾患のこの後の相は、「ホルモン不応性前立腺癌」又は「アンドロゲン非依存性前立腺癌」と呼ばれた。それ以降、アンドロゲン遮断療法を数年間続けた後に出現する前立腺癌は、アンドロゲンに依存したままであることが明らかになった。残存した前立腺癌細胞は、（副腎から発現した）低レベルの循環するアンドロゲンを移入し、これらの低レベルのテストステロンにかなり感応的になり、及び実際に、前立腺癌細胞自体内のテストステロンを合成する能力を得た。前立腺癌のこの段階は、現在、「去勢抵抗性前立腺癌」又はＣＲＰＣと称される。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本明細書には、特定の実施形態において、アンドロゲン受容体媒介性の疾患を処置するための、化合物、及びそのような化合物を製造する方法、そのような化合物を含む医薬組成物及び薬剤、及びそのような化合物を使用する方法が記載される。
【０００４】
幾つかの実施形態において、本発明は、式（１）の構造、
【０００５】
【化１】
0005956928.tif 000002
【０００６】
を有する化合物又は式（１）の構造を有する化合物の薬学的に許容可能な塩又はＮ−オキシドを提供し、
式中、
（ａ）  ＡＢＣＤ環状構造及び／又は、１つ又は両方のメチル基は、独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、ハロゲン化したＣ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルケニル、ハロゲン化したＣ１−Ｃ６−アルケニル、ハロゲン、アミノ、アミノアルキレン、ヒドロキシイミノ、ｎ，ｎ＋１−エポキシ、カルボニル（オキソ）、グルクロニド、グルクロン酸塩、Ｏ結合（Ｏ−ｌｉｎｋｅｄ）硫酸塩、及びヒドロキシから選択された、１以上の置換基によって随意に置換され、
（ｂ）  Ｘは、グルクロニド、グルクロン酸塩、Ｏ結合硫酸塩、ＯＨ又はＯであり、及び、
（ｃ）  点線は、独立して二重結合又は単結合となる各々の出現で引かれ（ｔａｋｅｎ  ａｔ  ｅａｃｈ  ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ）、ここで、化合物は、
【０００７】
【化２】
0005956928.tif 000003
【０００８】
ではなく、及びここで、化合物は、被験体への薬物の投与後にインビボで形成される。
【０００９】
幾つかの実施形態において、本発明は、有効な量の化合物を含む医薬組成物を提供し、ここで、被験体への組成物の投与後に、化合物は、式（１）、
【００１０】
【化３】
0005956928.tif 000004
【００１１】
のその代謝物質又は薬学的に許容可能な塩又は、Ｎ−オキシドを生成し、
式中、
（ａ）  ＡＢＣＤ環状構造及び／又は１つ又は両方のメチル基は、独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、ハロゲン化したＣ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルケニル、ハロゲン化したＣ１−Ｃ６−アルケニル、ハロゲン、アミノ、アミノアルキレン、ヒドロキシイミノ、ｎ，ｎ＋１−エポキシ、カルボニル（オキソ）、グルクロニド、グルクロン酸塩、Ｏ結合硫酸塩、及びヒドロキシから選択された、１以上の置換基によって随意に置換され、
（ｂ）  Ｘは、グルクロニド、グルクロン酸塩、Ｏ結合硫酸塩、ＯＨ又はＯであり、及び、
（ｃ）  点線は、独立して二重結合又は単結合となる各々の出現で引かれ、ここで、化合物もしくは代謝物質も、
【００１２】
【化４】
0005956928.tif 000005
【００１３】
ではなく、ここで、代謝物質は、アンドロゲン受容体媒介性の疾患又は疾病を処置するのに有効である。
【００１４】
幾つかの実施形態において、本発明は、アンドロゲン受容体媒介性の疾患又は疾病を処置する方法を提供し、該方法は、アンドロゲン生合成を阻害し、アンドロゲン受容体シグナル伝達を阻害し、及びアンドロゲン受容体感受性を減少させるために、治療上有効な量の化合物又はその薬学的に許容可能な塩又はＮ−オキシドを、それを必要とする患者に投与する工程を含み、ここで、前記化合物は、被験体への化合物の投与後に、その代謝物質又は薬学的に許容可能な塩又はＮ−オキシドを生成し、ここで、代謝物質は、式（１）の構造、
【００１５】
【化５】
0005956928.tif 000006
【００１６】
を有し、
式中、
（ａ）  ＡＢＣＤ環状構造及び／又は１つ又は両方のメチル基は、独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、ハロゲン化したＣ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルケニル、ハロゲン化したＣ１−Ｃ６−アルケニル、ハロゲン、アミノ、アミノアルキレン、ヒドロキシイミノ、ｎ，ｎ＋１−エポキシ、カルボニル（オキソ）、グルクロニド、グルクロン酸塩、Ｏ結合硫酸塩、及びヒドロキシから選択された、１以上の置換基によって随意に置換され、
（ｂ）  Ｘは、グルクロニド、グルクロン酸塩、Ｏ結合硫酸塩、ＯＨ又はＯであり、及び、
（ｃ）  点線は、独立して二重結合又は単結合となる各々の出現で引かれ、ここで、化合物もしくは代謝物質も、
【００１７】
【化６】
0005956928.tif 000007
【００１８】
ではない。
【００１９】
幾つかの実施形態において、本発明は、式（１）の構造、
【００２０】
【化７】
0005956928.tif 000008
【００２１】
を有する化合物又は式（１）の構造を有する化合物の薬学的に許容可能な塩又はＮ−オキシドを提供し、
式中、
（ａ）  ＡＢＣＤ環状構造及び／又は１つ又は両方のメチル基は、独立して、ｎ，ｎ＋１エポキシ、オキソ、ヒドロキシから選択された２つの置換基によって置換され、
（ｂ）  Ｘは、グルクロニド、グルクロン酸塩、Ｏ結合硫酸塩、ＯＨ又はＯであり、及び、
（ｃ）  点線は、独立して二重結合又は単結合となる各々の出現で引かれ、ここで、化合物は、
【００２２】
【化８】
0005956928.tif 000009
【００２３】
ではなく、及びここで、化合物は、被験体への薬物の投与後にインビボで形成される。
【００２４】
幾つかの実施形態において、本発明は、式（１）の構造、
【００２５】
【化９】
0005956928.tif 000010
【００２６】
を有する化合物又は式（１）の構造を有する化合物の薬学的に許容可能な塩又はＮ−オキシドを提供し、
式中、
（ａ）  ＡＢＣＤ環状構造及び１つのメチル基は、独立して、ｎ，ｎ＋１エポキシ、オキソ、及びヒドロキシから選択された置換基によって置換され、
（ｂ）  Ｘは、グルクロニド、グルクロン酸塩、Ｏ結合硫酸塩、ＯＨ又はＯであり、及び、
（ｃ）  点線は、独立して二重結合又は単結合となる各々の出現で引かれ、ここで、化合物は、
【００２７】
【化１０】
0005956928.tif 000011
【００２８】
ではなく、及びここで、化合物は、被験体への薬物の投与後にインビボで形成される。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
本発明の新しい特徴は、特に、添付の特許請求の範囲内に明記される。本発明の特徴及び利点のより良い理解は、本発明の原理が利用される、具体例を明記する後述する詳細な説明及び以下の添付図面を引用することによって得られる。
【００３０】
【図１】図１は、様々な時点での、ＮＡＤＰＨ生成システムがある状態及びない状態における、０．１Ｍのリン酸緩衝液及びプールされたラット肝臓ミクロソームによる１０μｍの化合物（１）のインキュベーション後の、化合物（１）の濃度、及びそのあり得る（ｐｏｔｅｎｔｉａｌ）代謝物質の表である。
【図２】図２は、様々な時点での、ＮＡＤＰＨ生成システムがある状態及びない状態における、０．１Ｍのリン酸緩衝液、３ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＥＤＴＡ及びプールされたラット肝臓ミクロソームによる１０μｍの化合物（１）のインキュベーション後の、化合物（１）の濃度、及びそのあり得る代謝物質の表である。
【図３】図３は、様々な時点での、ＮＡＤＰＨ生成システムがある状態及びない状態における、０．１Ｍのリン酸緩衝液及びプールされたイヌ肝臓ミクロソームによる１０μｍの化合物（１）のインキュベーション後の化合物（１）の濃度、及びそのあり得る代謝物質の表である。
【図４】図４は、様々な時点での、ＮＡＤＰＨ生成システムがある状態及びない状態における、０．１Ｍのリン酸緩衝液、３ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＥＤＴＡ及びプールされたイヌ肝臓ミクロソームによる１０μｍの化合物（１）のインキュベーション後の、化合物（１）の濃度、及びそのあり得る代謝物質の表である。
【図５】図５は、様々な時点での、ＮＡＤＰＨ生成システムがある状態及びない状態における、０．１Ｍのリン酸緩衝液及びプールされたサル肝臓ミクロソームによる１０μｍの化合物（１）のインキュベーション後の、化合物（１）の濃度、及びそのあり得る代謝物質の表である。
【図６】図６は、様々な時点での、ＮＡＤＰＨ生成システムがある状態及びない状態における、０．１Ｍのリン酸緩衝液、３ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＥＤＴＡ及びプールされたサル肝臓ミクロソームによる１０μｍの化合物（１）のインキュベーション後の、化合物（１）の濃度、及びそのあり得る代謝物質の表である。
【図７】図７は、様々な時点での、ＮＡＤＰＨ生成システムがある状態及びない状態における、０．１Ｍのリン酸緩衝液及びプールされたヒト肝臓ミクロソームによる１０μｍの化合物（１）のインキュベーション後の、化合物（１）の濃度、及びそのあり得る代謝物質の表である。
【図８】図８は、様々な時点での、ＮＡＤＰＨ生成システムがある状態及びない状態における、０．１Ｍのリン酸緩衝液、３ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＥＤＴＡ及びプールされたヒト肝臓ミクロソームによる１０μｍの化合物（１）のインキュベーション後の、化合物（１）の濃度、及びそのあり得る代謝物質の表である。
【図９】図９は、化合物（１）の代表的なクロマトグラムである（ｍ／ｚ  ３８９）。
【図１０】図１０は、１２０分間までのラット肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ｍ／ｚ  ４０５）。
【図１１】図１１は、１２０分間までのラット肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ｍ／ｚ  ４２１）。
【図１２】図１２は、１２０分間までのＥＤＴＡ及びＭｇＣｌ２によるラット肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ｍ／ｚ  ４０５）。
【図１３】図１３は、１２０分間までのＥＤＴＡ及びＭｇＣｌ２によるラット肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ｍ／ｚ  ４２１）。
【図１４】図１４は、１２０分間までのイヌ肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ｍ／ｚ  ４０５）。
【図１５】図１５は、１２０分間までのイヌ肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ｍ／ｚ  ４２１）。
【図１６】図１６は、１２０分間までのＥＤＴＡ及びＭｇＣｌ２によるイヌ肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ＳＩＲ  ｍ／ｚ  ４０５）。
【図１７】図１７は、１２０分間までのＥＤＴＡ及びＭｇＣｌ２によるイヌ肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ＳＩＲ  ｍ／ｚ  ４２１）。
【図１８】図１８は、１２０分間までのサル肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ＳＩＲ  ｍ／ｚ  ４０５）。
【図１９】図１９は、１２０分間までのサル肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ＳＩＲ  ｍ／ｚ  ４２１）。
【図２０】図２０は、１２０分間までのＥＤＴＡ及びＭｇＣｌ２によるサル肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ＳＩＲ  ｍ／ｚ  ４０５）。
【図２１】図２１は、１２０分間までのＥＤＴＡ及びＭｇＣｌ２によるサル肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ＳＩＲ  ｍ／ｚ  ４２１）。
【図２２】図２２は、１２０分間までのヒト肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ＳＩＲ  ｍ／ｚ  ４０５）。
【図２３】図２３は、１２０分間までのヒト肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ＳＩＲ  ｍ／ｚ  ４２１）。
【図２４】図２４は、１２０分間までのＥＤＴＡ及びＭｇＣｌ２によるヒト肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ＳＩＲ  ｍ／ｚ  ４０５）。
【図２５】図２５は、１２０分間までのＥＤＴＡ及びＭｇＣｌ２によるヒト肝臓ミクロソームにおける１０μＭの化合物（１）のインキュベーションの代表的なクロマトグラムである（ＳＩＲ  ｍ／ｚ  ４２１）。
【図２６】図２６は、水中の０．１％のギ酸及びアセトニトリル中の０．１％のギ酸におけるイヌ血漿からの親化合物のクロマトグラムである。
【図２７】図２７は、水中の０．１％のギ酸及びアセトニトリル中の０．１％のギ酸におけるサル血漿からの親化合物のクロマトグラムである。
【図２８】図２８は、水中の０．１％のギ酸及びアセトニトリル中の０．１％のギ酸において最適化されたＨＰＬＣパラメーターを使用する、サル血漿からの親化合物のクロマトグラムである。
【図２９】図２９は、ヒト血漿中の親化合物の較正曲線である。
【図３０】図３０は、直接の注入に関する親化合物のフラグメンテーションパターンである。
【図３１】図３１は、解析方法による希釈剤（ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  ｍｅｔｈｏｄ  ｄｉｌｕｅｎｔ）中の０．４１７ｎｇ／ｍＬの親のフラグメンテーションパターンである。
【図３２】図３２は、ヒト血漿中の５ｎｇ／ｍＬの親のフラグメンテーションパターンである。
【図３３】図３３は、ヒト血漿中の１０ｎｇ／ｍＬの親のフラグメンテーションパターンである。
【図３４】図３４は、抽出されたカニクイザル血漿中のＭＲＭ ３８９〜１９５を示すクロマトグラムである。
【図３５】図３５は、Ｓｔｄ．１のＭＲＭ ３８９〜１９５を示すクロマトグラムである。
【図３６】図３６は、Ｓｔｄ．２のＭＲＭ ３８９〜１９５を示すクロマトグラムである。
【図３７】図３７は、Ｓｔｄ．３のＭＲＭ ３８９〜１９５を示すクロマトグラムである。
【図３８】図３８は、Ｓｔｄ．５のＭＲＭ ３８９〜１９５を示すクロマトグラムである。
【図３９】図３９は、Ｓｔｄ．６のＭＲＭ ３８９〜１９５を示すクロマトグラムである。
【図４０】図４０は、Ｓｔｄ．７のＭＲＭ ３８９〜１９５を示すクロマトグラムである。
【図４１】図４１は、親に関して最適化されたＭＳ／ＭＳ パラメーターを使用する、親の生成物イオンスペクトルである。
【図４２】図４２は、親に関して最適化されたＭＳ／ＭＳ パラメーターを使用する、Ｓｔｄ．１の生成物イオンスペクトルである。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
（特定の化学用語）
特に他に明記のない限り、明細書及び請求項を含む、本出願に使用される以下の用語は、下記の定義を有する。明細書及び添付の請求項において使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈がはっきりと特に指示していない限り、複数の指示対象を含む。標準的な化学用語の定義は、Ｃａｒｅｙ  ａｎｄ  Ｓｕｎｄｂｅｒｇ  ”ＡＤＶＡＮＣＥＤ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ  ４ＴＨ  ＥＤ．”  Ｖｏｌｓ． Ａ  （２０００）  ａｎｄ  Ｂ  （２００１），  Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを含む、参考資料において見られ得、その全体が引用によって本明細書に組み込まれる。特に指示のない限り、当該技術分野の技術内の、質量分析、ＮＭＲ、ＨＰＣＬ、タンパク質化学、生化学、組換え型ＤＮＡ技術及び薬理学の従来の方法が用いられる。
【００３２】
用語「アルケニル基」は、本明細書に使用されるように、中に１以上の二重結合を有する炭化水素鎖を指す。アルケニル基の二重結合は、別の不飽和基に対して非共役性又は共役性であり得る。適切なアルケニル基は、限定されないが、ビニル、アリル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ブタジエニル、ペンタジエニル、ヘキサジエニル、２−エチルヘキセニル、２−プロピル−２−ブテニル、４−（２−メチル−３−ブテン）−ペンテニルなどの、（Ｃ２−Ｃ８）アルケニル基を含む。アルケニル部分は、分枝鎖、直鎖、又は環状であり得（この場合、「シクロアルケニル」基としても知られる）、置換され得ない又は置換され得る。
【００３３】
本明細書に使用されるような用語「アルコキシ基」は、−Ｏ−（アルキル）を含み、ここで、アルキルは、本明細書に定義される通りである。ほんの一例として、Ｃ１−６アルコキシは、限定されないが、メトキシ、エトキシなどを含む。アルコキシ基は、置換され得ない又は置換され得る。
【００３４】
用語「アルキル」は、本明細書に使用されるように、１〜１０の炭素原子を有する炭化水素基を指し、直線の、分枝した、環式の、飽和した及び／又は不飽和の特徴を含む。それが本明細書に現われる場合は常に、「１〜１０」などの数値域は、所望の範囲内の各整数を指し、例えば、本発明の定義はまた、数値域が指定されていない用語「アルキル」の出現を含むが、「１〜１０の炭素原子」又は「Ｃ１−１０」又は「（Ｃ１−Ｃ１０）」は、アルキル基が、１０の炭素原子を含むそれ以下の、１つの炭素原子、２つの炭素原子、３つの炭素原子などから成り得ることを意味する。アルキル部分は、「飽和したアルキル」基であり得、これは、アルキル部分が、任意のアルケン又はアルキンの部分を包含しないことを意味する。代表的な飽和したアルキル基は、限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、２−メチル−１−プロピル、２−メチル−２−プロピル、２−メチル−１−ブチル、３−メチル−１−ブチル、２−メチル−３−ブチル、２，２−ジメチル−１−プロピル、２−メチル−１−ペンチル、３−メチル−１−ペンチル、４−メチル−１−ペンチル、２−メチル−２−ペンチル、３−メチル−２−ペンチル、４−メチル−２−ペンチル、２，２−ジメチル−１−ブチル、３，３−ジメチル−１−ブチル、２−エチル−１−ブチル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、及びｎ−ヘキシル、及びヘプチル及びオクチルなどのより長いアルキル基を含む。アルキル部分はまた、「不飽和のアルキル」部分であり得、これは、アルキル部分が、少なくとも１つのアルケン又は少なくとも１つのアルキンの部分を包含することを意味する。「アルケン」部分は、少なくとも２つの炭素原子及び少なくとも１つの炭素−炭素二重結合からなる基を指し、「アルキン」部分は、少なくとも２つの炭素原子及び少なくとも１つの炭素−炭素三重結合からなる基を指す。代表的な不飽和のアルキル基は、限定されないが、エテニル、プロペニル、ブテニル、プロパルギルなどを含む。アルキル基は、置換され得ない又は置換され得る。置換されたアルキル基は、限定されないが、ほんの一例として、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルなどの、ハロゲン置換されたアルキル基を含む。
【００３５】
用語「アルキニル」基は、本明細書に使用されるように、中に１以上の三重結合を有する炭化水素鎖を指す。アルキニル基の三重結合は、別の不飽和基に対して非共役性又は共役性であり得る。適切なアルキニル基は、限定されないが、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、メチルプロピニル、４−メチル−１−ブチニル、４−プロピル−２−ペンチニル、及び４−ブチル−２−ヘキシニルなどの、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル基を含む。アルキニル部分は、分枝鎖又は直鎖であり得、置換され得ない又は置換され得る。用語「エステル」は、本明細書に使用されるように、式ＣＯＯＲを有する化学部分を指し、ここで、Ｒは、アルキル、シクロアルキル、アリール、及び（環炭素を介して結合される）ヘテロ脂環式からなる群から選択される。本明細書に記載される化合物上のヒドロキシ又はカルボキシルの側鎖は、エステル化され得る。このようなエステルを作るための手順及び特定の基は、当業者に公知であり、Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  ３ｒｄ  Ｅｄ．，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ，  １９９９などの、参考文献に容易に見られ得、これは、その全体が引用によって本明細書に組み込まれる。エステル基は、置換され得ない又は置換され得る。
【００３６】
用語「ハロゲン」は、本明細書に使用されるように、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードを意味する。好ましいハロゲン基は、フルオロ、クロロ及びブロモである。
【００３７】
本明細書に使用されるような用語「ヘテロ原子」は、炭素又は水素以外の周期表における任意の原子を意味する。そのようなヘテロ原子は、限定されないが、フッ素、塩素又は臭素などのハロゲン、酸素及び硫黄などのカルコゲン、窒素、リン、シリコン、又はホウ素を含む。好ましいヘテロ原子は、フッ素、塩素、酸素、窒素、及び硫黄である。
【００３８】
用語「ハロアルキル」、「ハロアルケニル」、「ハロアルキニル」及び「ハロアルコキシ」は、１以上のハロゲン基又はそれらの組み合わせによって置換される、アルキル、アルケニル、アルキニル及びアルコキシの構造を含む。
【００３９】
本明細書に使用されるような用語「グルクロニド（ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄｅ）」、「グルクロニド（ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄｏ）」などは、以下に例証されるような単結合を介した、又は２、３又は４つのヒドロキシの位置でのグルクロン酸結合を指す：
【００４０】
【化１１】
0005956928.tif 000012
【００４１】
本明細書に使用されるような用語「グルクロン酸塩（ｇｌｕｃｕｒｏｎａｔｅ）」、「グルクロン酸塩（ｇｌｕｃｕｒｏｎａｔｏ）」などは、以下に例証されるような単結合を介したグルクロン酸結合を指す：
【００４２】
【化１２】
0005956928.tif 000013
【００４３】
用語「員環」は、本明細書に使用されるように、任意の環式構造を包含し得る。用語「員」は、環を構築する骨格原子の数を示すように意図される。したがって、例えば、シクロヘキシル、ピリジン、ピラン及びチオピランは、６員環であり、シクロペンチル、ピロール、イミダゾール、フラン、及びチオフェンは、５員環である。
【００４４】
用語「部分（ｍｏｉｅｔｙ）」は、分子の特定のセグメント又は官能基を指す。化学部分は、しばしば、分子に埋め込まれた又は付加された化学成分と認識される。
【００４５】
用語「保護基」は、本明細書に使用されるように、いくつかの又はすべての反応的な部分を遮断し、保護基が取り除かれるまでそのような基が化学反応に関与するのを選択的に防ぐ、化学部分を指す。
【００４６】
用語「反応物」は、本明細書に使用されるように、共有結合を生みだすために使用される求核分子又は求電子を指す。
【００４７】
特に指示のない限り、置換基は、「随意に置換された」と考えられると、例えば、アルケニル、アルキル、アルコキシ、アルキルアミン、アルキルチオ、アルキニル、アミド、一置換及び二置換のアミノ基を含むアミノ、アリール、アリールオキシ、アリールチオ、カルボニル、炭素環、シアノ、シクロアルキル、ハロゲン、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロアリール、複素環、ヒドロキシ、イソシアナート、イソチオシアナト、メルカプト、ニトロ、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｓ−スルホンアミド、Ｎ−スルホンアミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、ペルハロアルキル、ペルフルオロアルキル、シリル、スルホニル、チオカルボニル、チオシアナト、トリハロメタンスルホニル、及びそれらの保護された化合物から個々に及び独立して選択される１以上の基によって置換され得る基であることが意図される。上記の置換基の保護された化合物を形成し得る保護基は、当業者に公知であり、Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  ３ｒｄ  Ｅｄ．，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ，  １９９９，  ａｎｄ  Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ，  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ，  １９９４などの、参考文献に見られ得、それらは、それら全体が引用によって本明細書に組み込まれる。
【００４８】
（特定の薬学用語）
製剤、組成物又は成分に関する用語「許容可能な」は、本明細書に使用されるように、処置されている被験体の一般的な健康に対して持続的な悪影響を有さないことを意味する。
【００４９】
用語「アゴニスト」は、本明細書に使用されるように、別の分子の活性又は受容体部位の活性を増強する、化合物、薬物、酵素活性化剤又はホルモンモジュレーターなどの、分子を指す。
【００５０】
用語「アンタゴニスト」は、本明細書に使用さられるように、別の分子の活性又は受容体部位の活性を減少させる、又は防ぐ、化合物、薬物、酵素インヒビター又はホルモンモジュレーターなどの分子を指す。
【００５１】
用語「担体」は、本明細書に使用されるように、細胞又は組織へ化合物を組み込むのを促進する、相対的に無毒な化学化合物又は薬剤を指す。
【００５２】
用語「同時投与」などは、本明細書に使用されるように、一人の患者に選択された治療薬の投与を包含することを意味し、薬剤が投与の同じ又は異なる経路によって、あるいは同じ又は異なる時間に投与される、処置レジメンを含むことが意図される。
【００５３】
用語「有効な量」又は「治療上有効な量」は、本明細書に使用されるように、処置されている疾患又は疾病の１以上の症状をある程度和らげる、投与されている十分な量の薬剤又は化合物を指す。その結果、疾患の徴候、症状、又は原因を減少及び／又は軽減し、又は生物系の任意の他の所望の変化をもたらし得る。例えば、治療上の使用のための「有効な量」は、疾患の臨床的に有意な減少を提供するために必要とされる、本明細書に開示されるような化合物を含む組成物の量である。任意の個々の場合における、適切な「有効」な量は、用量漸増試験などの技術を使用して決定され得る。
【００５４】
用語「増強する（ｅｎｈａｎｃｅ）」又は「増強すること（ｅｎｈａｎｃｉｎｇ）」は、本明細書に使用されるように、効力又は持続時間のいずれかにおいて、所望の効果を増加又は延長させることを意味する。したがって、治療薬の効果を増強することに関して、用語「増強すること」は、効力又は持続時間のいずれかにおいて、系に対する他の治療薬の効果を増加又は延長させる能力を指す。「増強させる有効な量」は、本明細書に使用されるように、所望の系において別の治療薬の効果を増強するのに十分な量を指す。
【００５５】
用語「キット」及び「製品」は、同義語として使用される。
【００５６】
用語「代謝物質」は、本明細書に使用されるように、化合物が代謝されるときに形成される、化合物の誘導体を指す。前記代謝物質はまた、分光器及び他の分析的な手段を介するそれらの構造の測定の後に、慎重な化学合成によって生成され得る。
【００５７】
用語「活性代謝物」は、本明細書に使用されるように、化合物が代謝される時に形成される、化合物の生物学的に活性な誘導体を指す。
【００５８】
用語「代謝された（ｍｅｔａｂｏｌｉｚｅｄ）」は、本明細書に使用されるように、有機体によって特定の物質が変化する、（限定されないが、加水分解反応及び酵素により触媒された反応を含む）過程（ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ）の全体を指す。したがって、酵素は、化合物への特定の構造的変化をもたらし得る。例えば、チトクロームＰ４５０は、様々な酸化反応及び還元反応を触媒する一方で、ウリジン二リン酸グルクロニルトランスフェラーゼは、芳香族アルコール、脂肪族アルコール、カルボン酸、アミン、及び遊離スルフィヒドリル基への活性化グルクロン酸分子の転移を触媒する。代謝に関するさらなる情報は、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  ９ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  （１９９６）から得られ得る。
【００５９】
用語「調節する」は、本明細書に使用されるように、ほんの一例として、標的の活性を増強する、標的の活性を阻害する、標的の活性を限定する、又は標的の活性を拡張することを含む、標的の活性を変化させるように、標的と直接的又は間接的にのどちらかで相互作用することを意味する。
【００６０】
用語「モジュレーター」は、本明細書に使用されるように、標的と直接的又は間接的のどちらかで相互作用する分子を指す。相互作用は、限定されないが、アゴニストとアンタゴニストの相互作用を含む。
【００６１】
「薬学的に許容可能な」は、本明細書に使用されるように、化合物の生物学的活性又は特性を抑止せず、比較的無毒である、担体又は希釈剤などの物質を指し、即ち、該物質は、所望されない生物学的効果を引き起こさずに、又は該物質が含まれる組成物のいかなる成分とも有害な方法で相互作用せずに、個体に投与され得る。
【００６２】
化合物の用語「薬学的に許容可能な塩」は、本明細書に使用されるように、薬学的に許容可能な塩を指す。
【００６３】
用語「薬学的な組み合わせ（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）」は、本明細書に使用されるように、１より多い活性成分の混合又は組み合わせに由来し、活性成分の固定された及び固定されない組み合わせの両方を含む、生成物を意味する。用語「固定された組み合わせ」は、活性成分、例えば式（１）の化合物及び助剤の両方が、単一の実体又は用量の形態で患者に同時投与されることを意味する。用語「固定されない組み合わせ」は、活性成分、例えば式（１）の化合物及び助剤が、具体的な時間制限の介入なく同時に、平行して、又は連続して別々の実体として患者に投与されることを意味し、このような投与は、患者の身体に有効なレベルの２つの化合物を提供する。後者の用語はまた、カクテル療法、例えば３以上の活性成分の投与にも当てはまる。
【００６４】
用語「医薬組成物」は、本明細書に使用されるように、活性化合物又は化合物の、担体、安定化剤、希釈剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤、及び／又は賦形剤などの、他の化学成分との混合物を指す。
【００６５】
用語「被験体」又は「患者」は、哺乳動物及び非哺乳動物を含む。哺乳動物の例は、限定されないが、哺乳動物のクラスの任意のメンバー：ヒト、チンパンジーのようなヒト以外の霊長類、及び他の類人猿及びサル類、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタなどの家畜、ウサギ、イヌ、及びネコなどの家庭の動物、ラット、マウス及びモルモットなどのような、げっ歯類を含む、実験動物を含む。非哺乳動物の例は、限定されないが、鳥類、魚類などを含む。本明細書に提供される方法及び組成物の１つの実施形態において、哺乳動物はヒトである。
【００６６】
用語「処置する（ｔｒｅａｔ）」、「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、及び「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、本明細書に使用されるように、疾患又は疾病の症状を軽減、緩和、又は改善すること、更なる症状を予防すること、症状の根底にある代謝の原因を改善又は予防すること、疾患又は疾病を阻害すること、例えば疾患又は疾病の進行を阻止すること、疾患又は疾病を和らげること、疾患又は疾病を退行させること、疾患又は疾病により生じる疾病を和らげること、あるいは疾患又は疾病の症状を止めることを含む。
【００６７】
（例示的な生物学的活性）
＜アンドロゲン受容体（ＡＲ）＞
アンドロゲンは、標的組織の細胞内で、特定の受容体、アンドロゲン受容体（ＡＲ）に結合する。ＡＲは、身体の多数の組織において発現され、テストステロン（Ｔ）及びジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）などの、内因性のアンドロゲンリガンドの生理学的効果に加え、病態生理学的効果も現れる受容体である。構造上、ＡＲは、３つの主な機能ドメイン：リガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）、ＤＮＡ結合ドメイン、及びアミノ末端ドメインからなる。ＡＲに結合し、内因性のＡＲリガンドの効果を模倣する化合物は、ＡＲアゴニストと呼ばれ、一方で内因性のＡＲリガンドの効果を阻害する化合物は、ＡＲアンタゴニストと称される。受容体へのアンドロゲンの結合は、受容体を活性化し、標的遺伝子に隣接しているＤＮＡ結合部位へ受容体を結合させる。そこから、受容体は、遺伝子の発現を規制するために、コアクチベータータンパク質及び塩基性の転写因子と相互に作用する。したがって、その受容体を介して、アンドロゲンは、細胞における遺伝子発現の変化を引き起こす。これらの変化は、最終的に、標的組織の生理機能において目に見える、細胞の代謝的産出（ｏｕｔｐｕｔ）、分化又は増殖という結果を引き起こす。前立腺において、アンドロゲンは、アンドロゲン感受性組織の細胞質内に存在するＡＲに結合することによって、前立腺組織及び前立腺癌細胞の成長を刺激する。
【００６８】
選択的にＡＲを調節する化合物は、限定されないが、前立腺癌、良性前立腺肥大症、女性型多毛症、脱毛症、神経性食欲不振、乳癌、ざ瘡、骨疾患などの筋骨格系の疾病、造血状態(ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ)、神経筋疾患、リウマチ疾患、癌、AIDS、悪液質、及び男性避妊法において用いられるホルモン補充療法(HRT)に関する、男性の性能強化に関する、男性の生殖状態に関する、一次又は二次の男性性腺機能低下症を含む、様々な疾患、及び疾病の処置又は予防において臨床的に重要である。
【００６９】
＜去勢抵抗性前立腺癌＞
内因性のホルモン（例えば、テストステロン）の作用を遮断する薬剤（抗アンドロゲン）は、前立腺癌の処置に高度に有効であり、日常的に使用される（アンドロゲン除去療法）。最初は腫瘍成長を抑えるに有効であるが、これらのアンドロゲン除去療法は、結局、ほとんどすべての患者において失敗し、「去勢抵抗性前立腺癌」（「ＣＲＰＣ」）につながる。すべてではないが、ほとんどの前立腺癌細胞は、最初に、アンドロゲン除去療法に反応する。しかしながら、時間とともに、前立腺癌細胞の残存する個体群は、アンドロゲン除去療法によって生じた選択圧に反応したが、今はそれに対して反応がない（ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ）ために出現する。原発性癌が、利用可能な療法に反応がないだけではなく、癌細胞はまた、原発腫瘍から離れ、血流を移動し得、疾患を離れた部位（特に骨）まで拡散させる。他の影響の中で、これは著しい疼痛及び更なる骨の脆弱性を引き起こす。
【００７０】
ＣＲＰＣ細胞は、利用可能なままである細胞内のアンドロゲンに対する反応を増強するための、少なくとも３つの異なる経路を増幅させることによる、低レベルの循環するアンドロゲンによって特徴付けられた環境において生存することが予期される。これらは：（１）ＡＲコピー数を増加させ、その結果、内科的去勢療法によって誘発された低レベルの循環するアンドロゲンに対する、細胞の感受性を増加させる、ＡＲの発現のアップレギュレーション、（２）アンドロゲン遮断療法の後に細胞に残るアンドロゲンの移入（ｉｍｐｏｒｔａｔｉｏｎ）に関係する酵素の発現の増加、（３）ＣＲＰＣ細胞がその細胞自体のアンドロゲンを合成することを可能にする、ステロイド産生を規制する遺伝子の発現の増加を含む。ステロイド産生経路における重要な酵素は、チトクロームＣ１７α−ヒドロキシラーゼ／Ｃ１７，２０−リアーゼ（ＣＹＰ１７）であり、該酵素は、副腎、精巣、及び前立腺におけるアンドロゲン産生を制御する。
【００７１】
本明細書には、特定の実施形態において、限定されないが、前立腺癌、良性前立腺肥大症、女性型多毛症、脱毛症、神経性食欲不振、乳癌、ざ瘡、骨疾患などの筋骨格系の疾病、造血状態、神経筋疾患、リウマチ疾患、癌、AIDS、悪液質、及び男性避妊法において用いられるホルモン補充療法(HRT)に関する、男性の性能強化に関する、男性の生殖状態に関する、一次又は二次の男性性腺機能低下症を含む、アンドロゲン受容体媒介性の疾患又は疾病を処置するための、化合物、そのような化合物を作る方法、そのような化合物を含む医薬組成物及び薬剤、およびそのような化合物を使用する方法が記載される。幾つかの実施形態において、アンドロゲン受容体媒介性の疾患又は疾病は、前立腺癌である。特定の実施形態において、前立腺癌は、去勢抵抗性前立腺癌である。
【００７２】
本明細書には、特定の実施形態において、アンドロゲン生合成を減少させる、アンドロゲン受容体シグナル伝達を減少させる、及びアンドロゲン受容体感受性を低下させる、化合物、そのような化合物を含む医薬組成物、及び薬剤、及びそのような化合物を使用する方法が記載される。
【００７３】
１つの態様において、化合物、そのような化合物を含む医薬組成物及び薬剤、及びそのような化合物を使用する方法は、アンドロゲン生合成を減少させる。幾つかの実施形態において、本明細書に開示される化合物は、アンドロゲン産生を制御する酵素の活性を阻害する。特定の実施形態において、本明細書に開示される化合物は、チトクロームＣ１７α−ヒドロキシラーゼ／Ｃ１７，２０−リアーゼ（ＣＹＰ１７）の活性を阻害する。
【００７４】
１つの態様において、化合物、そのような化合物を含む医薬組成物及び薬剤、およびそのような化合物を使用する方法は、アンドロゲン受容体シグナル伝達を減少させる。幾つかの実施形態において、本明細書に開示される化合物は、ＡＲに結合し、テストステロン結合の競合的インヒビターである。
【００７５】
１つの態様において、化合物、そのような化合物を含む医薬組成物及び薬剤、およびそのような化合物を使用する方法は、アンドロゲン受容体感受性を減少させる。幾つかの実施形態において、本明細書に開示される化合物は、細胞内のＡＲタンパク質の含量を減少させ、低レベルのアンドロゲン増殖シグナルによって持続される細胞の能力を低減する。特定の実施形態において、本明細書に開示される化合物は、薬物の被験体への投与の後にインビボで形成される。
【００７６】
（化合物）
式（１）の化合物、その薬学的に許容可能な塩、薬学的に許容可能なＮ−オキシド、薬学的に活性な代謝物質、薬学的に許容可能なプロドラッグ、薬学的に許容可能な多形体及び薬学的に許容可能な溶媒和物は、ステロイドホルモン核内受容体の活性を調節し、それゆえ、アンドロゲン受容体媒介性の疾患又は疾病を処置するのに有用である。
【００７７】
【化１３】
0005956928.tif 000014
【００７８】
式（１）の化合物において、ＡＢＣＤ環状構造は、ステロイドの、「Ａ」、「Ｂ」、「Ｃ」及び「Ｄ」の環状部分又はそのアナログであり、それらは随意に置換され、Ｘは、グルクロニド、グルクロン酸塩、Ｏ結合硫酸塩、ＯＨ又はＯであり、及び、ここで、点線は、原子価を満たし、安定分子を作るように、独立して二重結合又は単結合となる各々の出現で引かれ得る。
【００７９】
ＡＢＣＤ環状構造の随意の置換基は、１以上の：Ｃ１−Ｃ６−アルキル及びハロゲン化されたＣ１−Ｃ６−アルキル；二重結合が環状構造に直接付けられる場合を含む、Ｃ１−Ｃ６−アルケニル及びハロゲン化されたＣ１−Ｃ６−アルケニル；ハロゲン；アミノ；アミノアルキレン；ヒドロキシイミノ；ｎ，ｎ＋１−エポキシ；カルボニル（オキソ）；グルクロニド、グルクロン酸塩、Ｏ結合硫酸塩、及びヒドロキシを含む。ＡＢＣＤ環状構造の隣接した炭素原子上の水素置換基は、炭素原子間のさらなる結合によって随意に取り除かれ得る且つ置換され得、その結果、環状構造内のこれらの炭素間の二重結合をもたらす。幾つかの実施形態において、ＡＢＣＤ環状構造上の随意の置換は、環状構造の１０及び／又は１３の位置でのメチル基である。
【００８０】
式（１）の特定の実施形態は、２つの置換基を含み、各々の置換基は、「Ａ」、「Ｂ」、「Ｃ」及び「Ｄ」の環の任意の位置で、ヒドロキシ、カルボニル（オキソ）、又はｎ，ｎ＋１エポキシから独立して選択される。式（１）の特定の実施形態は、「Ａ」、「Ｂ」、「Ｃ」及び「Ｄ」の環の任意の位置で、ヒドロキシ、カルボニル（オキソ）、又はｎ，ｎ＋１エポキシから独立して選択される１つの置換基を含む。
【００８１】
式（１）の特定の具体的な実施形態は、式（２）、式（３）、式（４）、式（５）、式（６）、式（７）、式（８）、式（９）、式（１０）、式（１１）、式（１２）、式（１３）、式（１４）、式（１５）、式（１６）、式（１７）、式（１８）、式（１９）、式（２０）、式（２１）、式（２２）、式（２３）、式（２４）、式（２５）、式（２６）、式（２７）、式（２８）、式（２９）、式（３０）、及び式（３１）のように以下に示され、式中、Ｘは、グルクロニド、グルクロン酸塩、又はＯ結合硫酸塩である。
【００８２】
【化１４】
0005956928.tif 000015
【００８３】
【化１５】
0005956928.tif 000016
【００８４】
式（１）の特定の具体的な実施形態は、式（３２）、式（３３）、式（３４）、式（３５）、式（３６）、式（３７）、式（３８）、式（３９）、式（４０）、式（４１）、式（４２）、式（４３）、式（４４）、式（４５）、式（４６）、式（４７）、式（４８）、式（４９）、式（５０）、式（５１）、式（５２）、式（５３）、式（５４）、式（５５）、式（５６）、式（５７）、式（５８）、式（５９）、式（６０）、式（６１）、式（６２）、式（６３）、式（６４）、及び式（６５）のように以下に示される。
【００８５】
【化１６】
0005956928.tif 000017
【００８６】
【化１７】
0005956928.tif 000018
【００８７】
【化１８】
0005956928.tif 000019
【００８８】
（化合物の合成）
式（Ｉ）の化合物は、当業者に公知の標準合成技術を使用して、又は本明細書に記載される方法と組み合わせた、当業者に公知の方法を使用して合成され得る。さらに、本明細書に示される溶媒、温度及び他の反応条件は、当業者の経験及び知識によって変えられ得る。
【００８９】
式（１）の化合物の合成に使用される出発物質は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．  （Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  Ｗｉｓ．）、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．  （Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ，  Ｍｏ．）などの、商業的供給源から得られ得るか、又は出発物質は合成され得る。本明細書に記載される化合物及び異なる置換基を有する他の関連する化合物は、例えば、Ｍａｒｃｈ，  ＡＤＶＡＮＣＥＤ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ  ４ｔｈ  Ｅｄ．，  （Ｗｉｌｅｙ  １９９２）； Ｃａｒｅｙ  ａｎｄ  Ｓｕｎｄｂｅｒｇ，  ＡＤＶＡＮＣＥＤ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ  ４ｔｈ  Ｅｄ．，  Ｖｏｌｓ． Ａ  ａｎｄ  Ｂ  （Ｐｌｅｎｕｍ  ２０００，  ２００１），及びＧｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，  ＰＲＯＴＥＣＴＩＶＥ  ＧＲＯＵＰＳ  ＩＮ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ  ３ｒｄ  Ｅｄ．，  （Ｗｉｌｅｙ  １９９９）に記載されるような、当業者に既知の技術及び物質を使用して合成され得る（これら全ては、それら全体が引用によって本明細書に組み込まれる）。本明細書に開示されるような化合物の調製のための一般的な方法は、当該技術分野において公知の反応に由来し、該反応は、本明細書に提供されるような、式において見られる様々な成分を導入するために、当業者によって理解されるように、適切な試薬及び条件を使用することによって変更され得る。参考として、以下の合成方法が利用され得る。
【００９０】
式（１）の化合物は、親化合物中に存在する酸性プロトンが、金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、又はアルミニウムイオンによって置換されるか、または有機塩基と配位する（ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｓ  ｗｉｔｈ）かのいずれかの時に形成される、薬学的に許容可能な塩として調製され得る。さらに、開示される化合物の塩形態は、出発物質又は中間物の塩を使用して調製され得る。
【００９１】
化合物（１）を作成する様々な方法が熟考され、以下の記載は限定しない例として提供される。幾つかの実施形態において、以下の化学反応の１以上は、不活性雰囲気、例えば、窒素、アルゴン中で行われる。幾つかの実施形態において、反応の温度がモニタリングされる。幾つかの実施形態において、反応は、ＨＰＬＣ又はＴＬＣによってモニタリングされる。幾つかの実施形態において、反応のｐＨがモニタリングされる。幾つかの実施形態において、反応の温度が制御される。幾つかの実施形態において、生成物の純度はＨＰＬＣによって測定される。幾つかの実施形態において、実験は、小規模、中規模、大規模、分析的規模、又は製造規模で実行される。幾つかの実施形態において、生成物は、シリカゲル、セライト、又はそれらの組み合わせを含む、パッドを介したろ過によって澄まされる。
【００９２】
幾つかの実施形態において、合成は、大規模で行われる。幾つかの実施形態において、大規模は、約１から約１０ｋｇまでの規模を含む。幾つかの実施形態において、合成は、製造規模で行われる。幾つかの実施形態において、製造規模は、約１０ｋｇより大きい規模を含む。幾つかの実施形態において、製造規模は、約１０から約１，０００ｋｇまでの規模を含む。幾つかの実施形態において、製造規模は、約１０から約１００ｋｇまでの規模を含む。幾つかの実施形態において、製造規模は、約１０から約５０ｋｇまでの規模を含む。幾つかの実施形態において、製造規模は、約３３．４ｋｇの規模を含む。
【００９３】
幾つかの実施形態において、製造規模の合成を計画するか又は行うために使用される情報を集めるために、実験は小規模で行われる。幾つかの実施形態において、より小規模で得られた結果は、製造規模で再生可能であると予期される。幾つかの実施形態において、より小規模で得られた結果は、製造規模で再生可能であると予期されない。幾つかの実施形態において、製造規模で得られた収量は、より小規模で得られた収量より多い。幾つかの実施形態において、製造規模で得られた収量は、より小規模で得られた収量より少ない。
【００９４】
【化１９】
0005956928.tif 000020
【００９５】
１つの実施形態において、溶媒中の式ｉの化合物の溶液は調製される。その後、式ｉｉの化合物は、溶液に接触され、結果として生じる混合物は、式ｉｉｉの化合物を提供するのに十分な期間、塩基の存在下で加熱される。幾つかの実施形態において、その期間は、約１時間、約２時間、約４時間、約８時間、約１２時間、又は約２４時間である。幾つかの実施形態において、時間は、約１時間から約２４時間までである。幾つかの実施形態において、塩基は、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸ナトリウム、又はリン酸カリウムを含む。幾つかの実施形態において、溶媒は、ＤＭＦを含む。幾つかの実施形態において、温度は、約５０℃、約７０℃、約１００℃、約１５０℃、又は還流条件を維持するのに有効な温度である。幾つかの実施形態において、温度は、約５０℃から約２００℃までである。式ｉｉｉの化合物は、反応混合物から分離され、当業者に公知の任意の方法によって精製され得る。このような方法は、限定されないが、水性混合物を反応混合物へ注ぐ工程を含み、それによって、固形物として化合物ｉｉｉを沈殿させる。式ｉｉｉの分離した化合物は、当業者に公知の任意の方法によって随意に精製され得る。このような方法は、限定されないが、水による倍散を含む。
【００９６】
【化２０】
0005956928.tif 000021
【００９７】
１つの実施形態において、溶媒中の式ｉｉｉの化合物の溶液は調製され、溶液は、式ｉｖの化合物を提供するのに十分な期間、触媒と接触される。幾つかの実施形態において、その期間は、約１時間、約２時間、約４時間、約８時間、約１２時間、又は約２４時間である。幾つかの実施形態において、時間は、約１時間から約２４時間までである。幾つかの実施形態において、触媒は、炭素上のパラジウム、炭素上のプラチナ、遷移金属塩又は遷移金属錯体を含む。幾つかの実施形態において、溶媒は、Ｎ−メチルピロリドンである。幾つかの実施形態において、温度は、約５０℃、約７０℃、約１００℃、約１５０℃、約１９０℃、約２００℃、又は還流条件を維持するのに有効な温度である。幾つかの実施形態において、温度は、約５０℃から約２５０℃までである。式ｉｖの化合物は、反応混合物から分離され、当業者に公知の任意の方法によって精製され得る。このような方法は、限定されないが、インラインろ過及び／又は結晶化を含む。式ｉｉｉの分離した化合物は、当業者に公知の任意の方法によって随意に精製され得る。
【００９８】
【化２１】
0005956928.tif 000022
【００９９】
１つの実施形態において、溶媒中の式ｉｖの化合物の溶液は調製され、溶液は、式ｖの化合物（すなわち、化合物（１））を提供するのに十分な期間、塩基と接触される。幾つかの実施形態において、その期間は、約１時間、約２時間、約４時間、約８時間、約１２時間、又は約２４時間である。幾つかの実施形態において、時間は、約１時間から約２４時間までである。幾つかの実施形態において、塩基は、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムメトキシド、カリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムエトキシド、混合したアルカリアルコキシド（例えばリチウム−カリウムアルコキシド）、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸ナトリウム、又はリン酸カリウムを含む。幾つかの実施形態において、溶媒は、水、メタノール、エタノール、２−プロパノール、ｔ−ブタノール、又はそれらの混合物を含む。幾つかの実施形態において、溶媒は、メタノールを含み、塩基はナトリウムメトキシドを含む。幾つかの実施形態において、温度は、約３５℃、約５０℃、約７０℃、約１００℃、又は還流条件を維持するのに有効な温度である。幾つかの実施形態において、温度は、約２５℃から約１００℃までである。式ｖの化合物は、反応混合物から分離され、当業者に公知の任意の方法によって精製され得る。このような方法は、限定されないが、抽出を含む。式ｉｉｉの分離した化合物は、当業者に公知の任意の方法によって随意に精製され得る。このような方法は、限定されないが、倍散を含む。
【０１００】
（化合物のさらなる形態）
便宜上、本明細書のこのセクション及び他の部分において記載される化合物の形態及び他の特徴は、一例として、「式（Ｉ）」などの、単一の式を使用する。しかしながら、本明細書に記載される化合物の形態及び他の特徴は、式（Ｉ）の範囲内にある本明細書に示されるすべての式に等しくうまく当てはまる。例えば、本明細書に記載される化合物の形態及び他の特徴は、式（２）、式（３）、式（４）、式（５）、式（６）、式（７）、式（８）、式（９）、式（１０）、式（１１）、式（１２）、式（１３）、式（１４）、式（１５）、式（１６）、式（１７）、式（１８）、式（１９）、式（２０）、式（２１）、式（２２）、式（２３）、式（２４）、式（２５）、式（２６）、式（２７）、式（２８）、式（２９）、式（３０）、式（３１）、式（３２）、式（３３）、式（３４）、式（３５）、式（３６）、及び式（３７）を有する化合物の他に、これらの一般的な式の範囲内にある特定の化合物のすべてにも適用され得る。
【０１０１】
式（１）の化合物は、遊離塩基の形態の化合物を、塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メタリン酸などの無機酸、および酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、p-トルエンスルホン酸、酒石酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、安息香酸、3-(4-ヒドロキシベンゾイル)安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、アリールスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、1,2-エタンジスルホン酸、2-ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、2-ナフタリンスルホン酸、4-メチルビシクロ-[2.2.2]オクタ-2-エン-1-カルボン酸、グルコヘプトン酸、4,4'-メチレンビス-(3-ヒドロキシ-2-エン-1-カルボン酸)、3-フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、三級ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、及びムコン酸などの有機酸を含む、薬学的に許容可能な無機酸又は有機酸と反応させることにより、(薬学的に許容可能な塩のタイプである)薬学的に許容可能な酸付加塩として調製され得る。前記塩はまた、所望の対イオンを加える沈殿による溶液からの、又はイオン交換樹脂などの適切な媒体を使用することによるかのいずれかの塩交換によって生成され得る。そのような方法は、限定されないが、テトラフェニルボラート、テトラフルオロボラート及びヘキサフルオロホスファートを含む塩を形成するために使用され得る。
【０１０２】
あるいは、式（１）の化合物は、化合物の遊離酸形態を、限定されないが、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、Ｎ−メチルグルカミンなどの有機塩基、及び水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウムなどの無機塩基を含む、薬学的に許容可能な無機塩基又は有機塩基と反応させることによって、(薬学的に許容可能な塩のタイプである)薬学的に許容可能な塩基付加塩として調整され得る。
【０１０３】
薬学的に許容可能な塩に対する言及が、その溶媒付加形態又は結晶形態、特に溶媒和物又は多形体を含むことを理解されたい。溶媒和物は、定比又は不定比量の溶媒のいずれかを含み、水、エタノールなどの薬学的に許容可能な溶媒での結晶化の過程の間に形成され得る。水和物は、溶媒が水である時に形成され、又はアルコラートは、溶媒がアルコールの時に形成される。式（１）の化合物の溶媒和物は、本明細書に記載される過程の間に、都合よく調製又は形成され得る。ほんの一例ではあるが、式（１）の化合物の水和物は、限定されないが、ジオキサン、テトラヒドロフラン又はメタノールなどを含む、有機溶媒を用いて、水性／有機溶媒混合物からの再結晶によって都合よく調製され得る。さらに、本明細書に提供される化合物は、溶媒和形態と同様、非溶媒和形態でも存在し得る。一般的に、溶媒和形態は、本明細書に提供される化合物及び方法の目的のために、非溶媒和形態と同等であると考えられる。
【０１０４】
式（１）の化合物は、多形体としても知られる結晶形態を含む。多形体は、化合物の同じ元素組成の異なる結晶充填配置を含む。多形体は、通常、異なるＸ線回折パターン、赤外線スペクトル、融点、密度、硬度、結晶形、光学特性及び電気特性、安定性、及び溶解度を有する。再結晶溶媒、結晶化の速度、及び保管温度などの様々な要因は、支配的な単結晶形態を引き起こし得る。酸化されていない形態における式（１）の化合物は、限定されないが、アセトニトリル、エタノール、水溶性のジオキサンなどの適切な不活性有機溶媒において、限定されないが、硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、トリアルキルホスフィン、水素化硼素リチウム、水素化硼素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム、三塩化リン、三臭化リンなどの還元剤によって、０〜８０℃までで処置することによって、式（Ｉ）の化合物のＮ−オキシドから調製され得る。さらに、前記還元剤は、樹脂又はシリカなどの固体担体上に共有結合され得るか、又は配位的に保持され（ｃｏｏｒｄｉｎａｔｉｖｅｌｙ  ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ）得る。
【０１０５】
本明細書に記載される、式（Ｉ）の化合物は、（例えば、放射性同位体で）同位体的に、または限定されないが、発色団又は蛍光部分、生物発光ラベル、又は化学発光ラベルの使用を含む、別の他の手段によって標識化され得る。式（Ｉ）の化合物は、１以上のキラル中心を備え得、各中心は、Ｒ又はＳ配置において存在し得る。本明細書に示される化合物は、全てのジアステレオマー、エナンチオマー、及びエピマーの形態の他に、それらの適切な混合物も含む。式（１）の化合物は、化合物のエピマー混合物を、光学活性分割剤と反応させ、化学的に異なる化合物の混合物を形成し、成分を分離し、分割剤を取り除き、及び純粋なエピマーを回収することによって、それらの個々のジアステレオマー又はエピマーとして調製され得る。エピマーの分解（ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）が、本明細書に記載される化合物の共有結合のジアステレオマーの誘導体を使用して行われ得るが、分離できる複合体が好ましい（例えば、結晶のジアステレオマー塩）。ジアステレオマーは、異なる物理的特性（例えば、融点、沸点、溶解度、反応性など）を有し、これらの相違点を利用することによって容易に分離され得る。ジアステレオマーは、キラルクロマトグラフィーによって、又は好ましくは、溶解度の違いに基づく分離／分解（ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ／ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）技術によって分離され得る。その後、エピマー化を生じない任意の実用的な手段によって、分割剤と共に、純粋なエピマーが回収される。それらの立体異性混合物からの化合物の立体異性体の分解に適用可能な、当該技術のより詳細な記載は、Ｊｅａｎ  Ｊａｃｑｕｅｓ，  Ａｎｄｒｅ  Ｃｏｌｌｅｔ，  Ｓａｍｕｅｌ  Ｈ．  Ｗｉｌｅｎ，  “Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，  Ｒａｃｅｍａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ”，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  Ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  Ｉｎｃ．，  １９８１において見られ得、その全体が引用によって本明細書に組み込まれる。
【０１０６】
さらに、本明細書に提供される化合物及び方法は、幾何異性体として存在し得る。本明細書に提供される化合物及び方法は、すべてのシス、トランス、シン、アンチ、エントゲーゲン（Ｅ）、及びツザメン（Ｚ）異性体、ならびにそれらの適切な混合物を含む。幾つかの状況において、化合物は、互変異性体として存在し得る。すべての互変異性体は、本明細書に記載される式内に含まれ、化合物及び方法によって本明細書に提供される。本明細書に提供される化合物及び方法の更なる実施形態において、単一の予備段階、組み合わせ、または相互変換から得られるエナンチオマー及び／又はジアステレオ異性体の混合物も、本明細書に記載される適用に有用であり得る。
【０１０７】
（医薬組成物／製剤）
医薬組成物は、本明細書に使用されるように、式（１）の化合物の、担体、結合剤、安定化剤、希釈剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤、及び／又は賦形剤などの他の化学成分との混合物を指す。医薬組成物は、有機体への化合物の投与を促進する。式（１）の化合物を含む医薬組成物は、限定されないが、以下のものを含む、当該技術分野に公知の、任意の従来の形態及び経路によって医薬組成物として治療上有効な量で投与され得る：静脈内、経口、直腸、エアロゾル、非経口、眼、肺、経皮、膣、耳、鼻、及び局所の投与。
【０１０８】
当業者は、全身よりもむしろ局所に、例えば、臓器への直接的な化合物の注入を介して、しばしばデポー製剤又は徐放製剤において化合物を投与し得る。さらに、当業者は、標的薬物送達システムにおいて、例えば、臓器特異性抗体でコーティングされたリポソームにおいて、式（１）の化合物を含む医薬組成物を投与し得る。リポソームは、臓器の標的とされ、臓器によって選択的に取り込まれる。さらに、式（１）の化合物を含む医薬組成物は、急速放出製剤の形態、持続放出製剤の形態、又は中間放出製剤の形態で提供され得る。
【０１０９】
経口投与に関して、式（１）の化合物は、活性化合物を、当該技術分野に周知の薬学的に許容可能な担体又は賦形剤と組み合わせることによって、容易に調剤され得る。このような担体は、本明細書に記載される化合物が、処置される被験体による経口摂取のための、錠剤、粉末剤、丸薬、ドラゼー、カプセル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、エリキシル剤、スラリー、懸濁液などのように調剤されることを可能にする。
【０１１０】
経口使用のための医薬調製物は、所望されれば、錠剤又はドラゼーコアを得るために、適切な助剤を加えた後に、１以上の固体の賦形剤を、本明細書に記載される化合物の１以上と混合させ、結果として生じる混合物を随意に粉砕し、顆粒の混合物を処理することによって得られる。
【０１１１】
ドラゼーコアは、適切なコーティングによって提供される。この目的のために、濃縮された砂糖水が使用され得、それらは随意に、結合剤、崩壊剤、香味剤又は安定化剤；ラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、及び/又は二酸化チタン、ラッカー溶液、及び適切な有機溶媒又は溶媒混合液を随意に含み得る。色素又はピグメントは、識別のために、又は活性化合物の用量の異なる組み合わせを特徴付けるために、錠剤又はドラゼーのコーティングに加えられ得る。
【０１１２】
経口で使用され得る医薬製剤は、ゼラチンで作られた押し込み型カプセル剤の他に、グリセロール又はソルビトールなどの、ゼラチン及び可塑剤で作られた軟らかい、密閉されたカプセル剤も含む。幾つかの実施形態において、カプセル剤は、製薬ゼラチン、ウシゼラチン、及び植物ゼラチンの１以上を含む硬ゼラチンカプセルを含む。幾つかの例において、ゼラチンは、アルカリ処理される。押し込み型カプセル剤は、ラクトースなどの充填剤、スターチなどの結合剤、及び／又はタルク又はステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、及び随意に安定化剤との混合で、活性成分を含み得る。軟カプセル剤において、活性化合物は、脂肪油、液動パラフィン、又は液体ポリエチレングリコールなどの適切な液体中に溶解又は懸濁され得る。さらに、安定化剤が加えられ得る。経口投与のためのすべての製剤は、そのような投与に適した用量であるべきである。
【０１１３】
口腔内又は舌下投与に関して、組成物は、従来の方法で調剤された、錠剤、ロゼンジ、又はゲルの形態をとり得る。非経口注入は、ボーラス注入又は持続注入に関係する。式（１）の化合物の医薬組成物は、油性又は水溶性のビヒクル中の滅菌した懸濁液、溶液又はエマルションとして、非経口注入に適した形態であり得、懸濁化剤、安定化剤及び／又は分散剤などの製剤化剤を含み得る。非経口投与のための医薬製剤は、水溶性の形態で活性化合物の水溶液を含む。さらに、活性化合物の懸濁液は、好適な油性の注射懸濁液として調製され得る。適切な親油性溶媒又はビヒクルは、胡麻油などの脂肪油、オレイン酸エチル又はトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、またはリポソームを含む。水溶性の注射懸濁液は、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトール、又はデキストランなどの、懸濁液の粘性を増加させる物質を含み得る。随意に、懸濁液はまた、化合物の溶解度を増加させる適切な安定化剤または薬剤を含み得、高濃縮溶液の調製を可能にする。あるいは、活性成分は、使用前には、好適なビヒクル、例えば、滅菌した発熱物質を含まない水で構成するための粉末形態であり得る。
【０１１４】
式（１）の化合物は、局所的に投与され得、溶液、懸濁液、ローション剤、ゲル、ペースト剤、薬用スティック、バーム、クリーム、軟膏剤などの様々な局所的に投与可能な組成物に調剤され得る。このような医薬化合物は、可溶化剤、安定化剤、等張化促進剤、緩衝液、及び防腐剤を含み得る。
【０１１５】
式（１）の構造を有する化合物の経皮投与に適した製剤は、経皮送達装置及び経皮送達パッチを用い得、脂溶性のエマルション又は緩衝水溶液であり得、ポリマー又は接着剤中に溶解及び／又は分散され得る。このようなパッチは、連続的、パルス状、又はオンデマンドの医薬品の送達のために構築され得る。またさらに、式（１）の化合物の経皮送達は、イオン泳動的なパッチなどの手段によって達成され得る。さらに、経皮的なパッチは、式（１）の化合物の制御された送達を提供し得る。律速膜を使用することによって、あるいはポリマーマトリックス又はゲル内で化合物を捕捉することによって、吸収の速度は遅らせられ得る。逆に、吸収促進剤は、吸収を増やすために使用され得る。吸収促進剤又は担体は、皮膚を介した通過を補助する吸収性の薬学的に許容可能な溶媒を含み得る。例えば、経皮装置は、裏打ち材（ｂａｃｋｉｎｇ  ｍｅｍｂｅｒ）、随意に担体を備える化合物を含み、随意に、長時間にわたって制御された速度及び予め定められた速度で化合物を宿主の皮膚に送達するための律速バリアを含有するリザーバー、及び装置を皮膚に固定するための手段を含む包帯（ｂａｎｄａｇｅ）の形態である。
【０１１６】
吸入による投与に関して、式（１）の化合物は、エアロゾル、噴霧又は粉末としての形態であり得る。式（１）の医薬組成物は、適切な推進剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の適切なガスを使用して、加圧包装又は噴霧器からエアロゾルスプレーを示す形態で都合よく送達され得る。加圧エアロゾルの場合において、投与ユニットは、測定された量を送達する弁を提供することによって決定され得る。ほんの一例として、吸入器又は注入器において使用するためのゼラチンなどのカプセル剤及び薬包は、化合物の粉末混合及びラクトース又はスターチなどの適切な粉末基材を含んで調剤され得る。
【０１１７】
式（１）の化合物は、ココアバター又は他のグリセリドなどの従来の坐剤基剤を含む、浣腸剤、直腸ゲル、直腸泡（ｒｅｃｔａｌ  ｆｏａｍｓ）、直腸エアロゾル、坐剤、ゼリー状の坐剤、又は停留浣腸剤などの直腸組成物に加え、ポリビニルピロリドン、ＰＥＧなどの合成ポリマーにおいて調剤され得る。組成物の坐剤形態において、限定されないが、脂肪酸グリセリドの混合物などの低融点ワックスは、随意にココアバターと組み合わされて、最初に融解される。
【０１１８】
本明細書に提供される処置又は使用の方法を実行する際に、本明細書に提供される治療上有効な量の式（１）の化合物は、医薬組成物において、処置されるべき疾患又は疾病を有する哺乳動物に投与される。好ましくは、哺乳動物はヒトである。治療上有効な量は、疾患の重症度、被験体の年齢及び相対的な健康状態、使用される化合物の効力及び他の要因に依存して、幅広く異なり得る。化合物は、単独で又は混合物の成分として１以上の治療薬と組み合わせて使用され得る。
【０１１９】
医薬組成物は、活性化合物を医薬的に使用され得る製剤へと処理するのを促進する賦形剤及び助剤を含む、１以上の生理学的に許容可能な担体を使用する従来の方法で調剤され得る。適切な製剤は、選択される投与の経路に依存する。周知の技術、担体、及び賦形剤はどれも、適切なものとして、及び当該技術分野において理解されるものとして使用され得る。式（１）の化合物を含む医薬組成物は、ほんの一例ではあるが、従来の混合、溶解、造粒、ドラゼー製造、湿式粉砕（ｌｅｖｉｇａｔｉｎｇ）、乳化、カプセル化、封入、又は圧迫の過程の手段によるなど、従来の方法で製造され得る。
【０１２０】
医薬組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体、希釈剤又は賦形剤、及び遊離酸又は遊離塩基の形態、又は薬学的に許容可能な塩形態の活性成分として本明細書に記載される式（１）の化合物を含む。さらに、本明細書に記載される方法及び医薬組成物は、Ｎ−オキシド、（多形体としても知られる）結晶形態に加え、同じ種類の活性を有するこれらの化合物の活性代謝物の使用も含む。幾つかの状況において、化合物は、互変異性体として存在し得る。全ての互変異性体は、本明細書に示される化合物の範囲内に含まれる。さらに、本明細書に記載される化合物は、非溶媒和形態と同様に溶媒和形態で、水、エタノールなどの、薬学的に許容可能な溶媒と共に存在し得る。本明細書に示される化合物の溶媒和形態はまた、本明細書に開示されると考えられる。さらに、医薬組成物は、他の医療薬剤又は医薬品、担体、防腐剤、安定化剤、湿潤剤又は乳化剤などのアジュバント、溶解促進剤、浸透圧を調節するための塩、及び／又は緩衝液を含み得る。さらに、医薬組成物はまた、他の治療上有益な物質を含み得る。
【０１２１】
本明細書に記載される化合物を含む組成物の調製のための方法は、固形物、半固形物又は液体を形成するために、１以上の不活性な、薬学的に許容可能な賦形剤又は担体を用いて、化合物を調剤する工程を含む。固形組成物は、限定されないが、粉末、錠剤、分散性顆粒、カプセル剤、カシェ剤、及び坐剤を含む。液体組成物は、本明細書に開示されるような、化合物を溶解する溶液、化合物を含むエマルション、又は化合物を含むリポソーム、ミセル、又はナノ粒子を含む溶液を含む。半固形組成物は、限定されないが、ゲル、懸濁液及びクリームを含む。組成物は、液体溶液又は懸濁液中にあり得るか、使用前に液体中で溶液又は懸濁液に適した固形形態であり得るか、またはエマルションとしてあり得る。これらの組成物はまた、湿潤剤又は乳化剤、ｐＨ緩衝剤などの微量の非毒性補助物質を含み得る。
【０１２２】
本明細書に記載される医薬組成物の要約は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：
Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  Ｎｉｎｅｔｅｅｎｔｈ  Ｅｄ  （Ｅａｓｔｏｎ，  Ｐａ．：  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，  １９９５）；Ｈｏｏｖｅｒ，  Ｊｏｈｎ  Ｅ．，  Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  Ｅａｓｔｏｎ，  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ  １９７５；Ｌｉｂｅｒｍａｎ，  Ｈ．Ａ．  ａｎｄ  Ｌａｃｈｍａｎ，  Ｌ．，  Ｅｄｓ．，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，  Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｃｋｅｒ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  Ｎ．Ｙ．，  １９８０；及びＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｓｅｖｅｎｔｈ  Ｅｄ．（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  １９９９）に見られ得、それら全体が引用によって本明細書に組み込まれる。
【０１２３】
（投与方法および処置方法）
式（１）の化合物は、ステロイドホルモン核内受容体の活性が疾患の病因および／または病状の一因となる疾患または疾病の処置のための薬剤の調製に使用され得る。さらに、処置を必要とする被験体において、本明細書に記載の疾患または疾病のいずれかを処置するための方法は、式（１）の少なくとも１つの化合物、または、その薬学的に許容可能な塩、薬学的に許容可能なＮ−オキシド、薬学的に活性な代謝物質、薬学的に許容可能なプロドラッグ、あるいは、薬学的に許容可能な溶媒和物を含む医薬組成物を、治療上有効な量で前記被験体に投与する工程を含む。
【０１２４】
本明細書に記載される化合物を含有する組成物は、予防的および／または治療的な処置のために投与され得る。治療用途において、組成物は、疾患または疾病の症状を治療するかまたは少なくとも部分的に阻止するのに十分な量で、すでに疾患または疾病に苦しんでいる被検体に投与される。この使用に有効な量は、疾患または疾病の重症度および経過、以前の治療、被検体の健康状態、体重、薬物への反応、および、治療に当たる医師の判断に依存する。日常の実験（用量漸増臨床試験を含むがこれに限定されない）によってこのような治療上有効な量を測定することは、当業者にとって当該技術の範囲内で十分よく考えられる。
【０１２５】
本明細書に記載の化合物を含有する組成物は、以下から選択された病態または病状を処置するために使用することができる：このような処置を必要としている患者における、一時性および二次性高アルドステロン症、ナトリウム貯留の増加、マグネシウムおよびカリウム排泄（利尿）の増加、水貯留の増加、高血圧（収縮期、または、収縮期の／弛緩期の組み合わせ）、炎症、白血病とリンパ腫などの悪性腫瘍、クッシングの先天性副腎過形成、原発性慢性副腎皮質機能低下症、二次性副腎機能低下症、前立腺癌、良性前立腺過形成、脱毛症、乳癌、ＡＩＤＳ、悪液質、男性避妊法で使用されるホルモン補充療法（ＨＲＴ）に関しては精巣癌、卵巣癌、肺癌、骨粗鬆症、骨量減少、骨代謝回転の異常増加、転移性の骨疾患、および、悪性腫瘍に伴う高カルシウム血症。該方法は、本明細書に記載の有効な量の化合物、あるいは、その互変異性体、プロドラッグ、溶媒和物、または、塩を患者に投与する工程を含む。幾つかの実施形態では、本明細書に記載の化合物を含有する組成物は、前立腺癌を処置するために使用され得る。他の実施形態では、本明細書に記載の化合物を含む組成物は、去勢抵抗性前立腺癌を処置するために使用することができる。
【０１２６】
本明細書に記載の化合物を含有する組成物は、以下から選択される病態または病状を処置するために使用することができる：膀胱癌、前立腺疾患、前立腺肥大症、前立腺痛、前立腺炎、前立腺肥大、尿失禁、前立腺新生物および癌、陰茎新生物および癌、精巣腫瘍および癌、セルトリ−ライディッヒ細胞腫、ライディッヒ細胞腫、セルトリ細胞腫、ウィルムス腫瘍、腎細胞癌、腎腫瘍、尿管腫瘍、アンドロゲン性脱毛症、性腺機能低下症、過剰多毛性（ｈｙｐｅｒｐｉｌｏｓｉｔｙ）、および、良性前立腺肥大症（ｂｅｎｉｇｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉａ）、前立腺の腺腫および腫瘍（重度の転移性の前立腺癌など）、乳癌、脳癌、皮膚癌、卵巣癌、膀胱癌、リンパ腺癌、肝癌、および、腎癌の場合などのアンドロゲン受容体を含有する良性または悪性の腫瘍細胞の処置、膵臓癌、骨粗鬆症、精子形成の抑制（ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇ ｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓ）、リビドー、悪液質、子宮内膜症、多嚢胞性卵巣症候群、食欲不振、男性における加齢性のテストステロンレベルの減少、男性の更年期障害、男性ホルモン補充、ならびに、男性および女性の性機能障害のためのアンドロゲン補充といったアンドロゲン依存の加齢性疾患および疾病、ならびに、外来患者における筋萎縮症の阻害。幾つかの実施形態では、本明細書に記載の化合物を含む組成物は、前立腺癌を処置するために使用され得る。他の実施形態では、本明細書に記載の化合物を含有する組成物は、去勢抵抗性前立腺癌を処置するために使用され得る。
【０１２７】
患者の状態が改善しない場合、医師の判断で、化合物の投与は、慢性的に、すなわち、患者の疾患または疾病の症状を改善させるか、または、さもなければ抑制または制限するために、患者の寿命が尽きるまでの間を含む長期間、投与され得る。患者の状態が改善する場合、医師の判断に基づいて、化合物の投与は、継続的に与えられ得るか、または、一定期間一時的に中止され得る（すなわち、「休薬期間」）。
【０１２８】
ひとたび患者の状態が改善すると、必要に応じて維持量が投与される。続いて、投与の量または頻度あるいはその両方は、症状に応じて、改善された疾患または疾病が保持されるレベルまで減らされ得る。しかしながら、症状が再発すると、患者は長期的に間欠処置を必要とする。
【０１２９】
特定の例において、本明細書に記載される治療上有効な量の少なくとも１つの化合物（または、その薬学的に許容可能な塩、薬学的に許容可能なＮ−オキシド、薬学的に活性な代謝物質、薬学的に許容可能なプロドラッグ、および、薬学的に許容可能な溶媒和物）を、別の治療薬と組み合わせて投与することは適切であってもよい。ほんの一例として、本明細書の化合物の１つを受けた後に患者が経験する副作用の１つが炎症である場合、最初の治療薬と組み合わせて、抗炎症剤を投与するのが適切であり得る。または、ほんの一例として、本明細書に記載される化合物の１つの治療効果は、アジュバントの投与によって高められ得る（すなわち、アジュバント自体は最小の治療的有用性を有し得るだけであるが、別の治療薬と併用することで、患者に対する全体的な治療的有用性が高められ得る）。または、ほんの一例として本明細書に記載される化合物の１つを、治療効果を同様に有する別の治療薬（同様に治療レジメンを含む）とともに投与することで、患者が経験する効果は増大され得る。あらゆる場合において、処置される疾患または疾病にかかわらず、患者が受ける全体的な有用性は、２つの治療薬を単に加えたものであり得るか、さもなければ、患者は相乗的な有用性を受け得る。例えば、相乗効果は、式（１）の化合物と、低カリウム血症、高血圧症、うっ血性心不全、腎不全、とりわけ、慢性腎不全、再狭窄、アテローム性動脈硬化、シンドロームＸ、肥満、腎症、心筋梗塞後（ｐｏｓｔ−ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ）、冠状動脈性心疾患、高血圧と内皮機能不全後のコラーゲン生成、繊維症、および、リモデリングの増加の処置に使用される他の物質とで生じ得る。そのような化合物の例は、オルリスタットなどの抗肥満剤、抗高血圧薬、変力薬、および、限定されないがループ利尿薬（エタクリン酸、フロセミド、および、トルセミドなど）を含む脂質低下薬；ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、フォシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、ペリンドプリル、キナプリル、ラミプリル、および、トランドラプリルなどのアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）インヒビター；ジゴキシンなどのＮａ−Ｋ−ＡＴＰアーゼ膜ポンプのインヒビター；中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）インヒビター、オマパトリラト、サンパトリラト（ｓａｍｐａｔｒｉｌａｔ）、および、ファシドトリルなどのＡＣＥ／ＮＥＰインヒビター；特定のバルサルタン中の、カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、テルミサルタン、および、バルサルタンなどのアンジオテンシンＩＩアンタゴニスト；アセブトロール、ベタキソロール、ビソプロロール、メトプロロール、ナドロール、プロパノロール、ソタロール、および、チモロールなどのβ−アドレナリン受容体遮断薬；ジゴキシン、ドブタミンおよびミルリノンなどの変力薬；アムロジピン、ベプリジル、ジルチアゼム、フェロジピン、ニカルジビン、ニモジピン、ニフェジピン、ニソルジピン、および、ベラパミルなどのカルシウムチャネル遮断薬；ならびに、ロバスタチン、ピタバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、セリバスタチン、メバスタチン、ベロスタチン（ｖｅｌｏｓｔａｔｉｎ）、フルバス��チン、ダルバスタチン、アトルバスタチン、ロスバスタチン、および、リバスタチン（ｒｉｖａｓｔａｔｉｎ）などの３−ヒドロキシ−３−メチル−グルタリルコエンザイムＡ還元酵素（ＨＭＧ−ＣｏＡ）インヒビターを含む。本明細書に記載される化合物が他の治療と併用して投与される場合、同時投与された化合物の投与量は、当然のことながら、用いられる同時投与の薬物の種類、用いられる具体的な薬物、処置されている疾患または疾病などに依存して変化する。さらに、１以上の生理学的に活性な薬剤とともに同時投与される時に、本明細書で提供される化合物は、生理学的に活性な薬剤と同時に、または、連続してのいずれかで投与され得る。連続して投与される場合、主治医は、生理活性物質と組み合わせてタンパク質を投与する適切な順序を決定する。
【０１３０】
いかなる場合においても、複数の治療薬（その１つは本明細書に記載される化合物の１つである）は、任意の順番でまたは同時にさえも投与され得る。もし同時であれば、複数の治療薬は、一回の、統一された形態で、または、複数回の形態で（ほんの一例として、一回の丸薬または２つの別々の丸薬のどちらかとして）提供され得る。治療薬の１つが複数回投与で与えられ得るか、または、両方の治療薬が複数回投与として与えられ得る。もし同時でなければ、複数回投与の間の期間は、０週間以上４週間未満で変わり得る。さらに、組み合わせの方法、組成物および製剤は、２つのみの薬剤の使用に限定されない。複数の治療上の組み合わせが想定される。
【０１３１】
加えて、式（１）の化合物は、患者に追加の効果または相乗的な効果を提供し得る手順と組み合わせても使用され得る。ほんの一例として、患者は、本明細書に記載される方法において、治療的および／または予防的な有用性を見出すことが期待され、ここで、式（１）の医薬組成物および／または他の治療法との併用は、その個体が、特定の疾患または障害と相互に関連することが知られている突然変異遺伝子のキャリアであるかどうかを決定するための遺伝子検査と組み合わされる。
【０１３２】
式（１）の化合物と併用療法は、疾患または疾病の発生の前後、または、その間に、投与可能であり、化合物を含有する組成物を投与するタイミングは変えることができる。したがって、例えば、化合物は、疾患または疾病の発生を防止するために予防薬として使用可能であり、かつ、疾病または疾患の傾向のある被験体に連続的に投与可能である。化合物および組成物は、症状の発症の間または発症の後、できるだけ早急に被検体に投与され得る。化合物の投与は、症状の発症後の最初の４８時間以内に、好ましくは症状の発症後の最初の４８時間以内に、より好ましくは症状の発症後の最初の６時間以内に、および、最も好ましくは症状の発症後の３時間以内に開始され得る。最初の投与は、例えば、静脈注射、ボーラス注入、５分間から約５時間にわたる点滴、丸薬、カプセル、経皮パッチ、口腔送達など、または、それらの組み合わせなどの任意の実用的な経路を介してもよい。化合物は、好ましくは、疾患または疾病の発症が検知されるか、または、疑われた後に、実行可能となるやいなや投与され、疾患の処置に必要な期間は、例えば、約１ヶ月から約３ヶ月である。処置の期間は、各被検体ごとに異なってもよく、その期間は既存の基準を用いて決定され得る。例えば、化合物または化合物を含有する製剤は、少なくとも２週間、好ましくは約１ヶ月から約３年間、および、さらに好ましくは約１ヶ月から約１０年間投与され得る。
【０１３３】
本明細書に記載される医薬組成物は、正確な投与量の単回投与に適したユニット剤形であり得る。ユニット剤形において、製剤は、１以上の化合物の適量を含有する単位用量に分割される。単位用量は、製剤の別々の量を含有するパッケージの形態であり得る。制限しない例は、包装された錠剤またはカプセル剤、および、バイアルまたはアンプル中の粉末である。水溶性懸濁液組成物は、単回投与用の再密閉不可能な容器に入れられてもよい。あるいは、複数回投与用の密閉可能な容器が使用されてもよく、その場合、組成物中に防腐剤を含むことが典型的である。ほんの一例として、非経口注入のための製剤は、アンプル（ただしこれに限定されない）を含むユニット剤形で与えられてもよく、または、防腐剤が加えられた複数回投与用の容器で与えられてもよい。
【０１３４】
本明細書中に記載される式（１）の化合物に適した１日の投与量は、体重あたり約０．０３乃至約６０ｍｇ／ｋｇまでである。限定されないが、ヒトを含む大型哺乳動物において示された１日の投与量は、約１ｍｇから約４０００ｍｇの範囲であり、便宜上、限定されないが、一日に４回までを含む分割用量で投与されるか、または、遅延形態（ｒｅｔａｒｄ  ｆｏｒｍ）で投与される。経口投与のための適切な単位剤形は、約１ｍｇから約４０００ｍｇまでの活性成分を含む。幾つかの実施形態において、式（１）の化合物の単一用量は、約５０ｍｇから約２，０００ｍｇまでの範囲内にある。幾つかの実施形態において、式（１）の化合物の単一用量は、約９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３２５ｍｇ、約６５０ｍｇ、約９７５ｍｇ、約１３００ｍｇ、約１６２５ｍｇ、または、約１９５０ｍｇである。幾つかの実施形態において、約９０ｍｇ、約３２５ｍｇ、約６５０ｍｇ、約９７５ｍｇ、約１３００ｍｇ、約１６２５ｍｇ、または、約１９５０ｍｇの式（１）の化合物の投与は、複数回投与として与えられる。
【０１３５】
個々の処置レジメンに関する変数が大きいため、前述の範囲は単に示唆的なものでしかなく、これらの推奨値からの考慮すべき可動域はありがちなものである。このような投与量は、限定されないが、使用される化合物の活性、処置される疾患または疾病、投与の様式、個々の被験体の要件、処置される疾患または疾病の重症度、および、専門家の判断などの、多くの変数によって変化し得る。
【０１３６】
このような治療レジメンの毒性および治療効果は、限定されないが、ＬＤ５０（個体群の５０％が死に至る用量）およびＥＤ５０（個体群の５０％に治療上有効な用量）を測定する手順を含む、細胞培養物または実験動物における標準の薬学的手順によって測定され得る。毒性効果と治療効果の間の用量比が治療指数であり、ＬＤ５０とＥＤ５０間の比率として表され得る。高い治療指数を示す化合物が好ましい。細胞培養アッセイと動物研究から得られたデータは、ヒトで使用するための様々な投与量を調剤するのに使用され得る。このような化合物の投与量は、好ましくは、最小の毒性を備えたＥＤ５０を含む血中濃度の範囲内にある。投与量は、用いられる投与量および利用される投与の経路によって、この範囲内で変わり得る。
【０１３７】
（インキュベーション研究）
インキュベーション培地は、ＭｇＣｌ２／ＥＤＴＡの存在下および不在下で、化合物（１）の溶解度について最適化された。被験物質の溶解は、ＭｇＣｌ２／ＥＤＴＡの存在下よりもその不在下でわずかに優れていたように思われた。しかしながら、ＣＹＰ  ４５０活性の活性化における二価カチオン、ＭｇＣｌ２の役割は十分に定義されていない（Ｓａｉｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｔａｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．，１９８８）。それ故、化合物（１）の代謝の安定はＥＤＴＡとＭｇＣｌ２の存在下と不在下で行なわれた。
【０１３８】
（基準と品質管理）
標準曲線に対する線形回帰の決定係数（ｒ２）値は、≧０．９９８であった。曲線中の逆算された濃度に基づいた相対誤差（％）はすべての標準値の±１５％以内であった。相対誤差（％）はすべてのＱＣに関して±１６％以内であった。
【０１３９】
（陰性対照）
化合物（１）を含むがミクロソームを含まない２つの空試料（０および１２０分）（０．１Ｍのリン酸緩衝液と交換された量）が、陰性対照として各々のアッセイに含まれていた。すべての機会において、化合物（１）は、０分と比較して、１００％近く（７％以内に）までの１２０分後の％回復によって実証されるように、インキュベーション期間にわたって化学的に安定していた。（図１１−１８）
【０１４０】
（０．１Ｍのリン酸緩衝液中の化合物（１）の代謝の安定性）
様々な時間にわたってＮＡＤＰＨ生成システムの存在下または不在下でプールされたラット、イヌ、サル、および、ヒトの肝臓ミクロソームを用いたインキュベーション後の化合物（１）の濃度とその代謝物質が、それぞれ、図１０、図１４、図１８、および、図２２で提示される。
【０１４１】
０．１Ｍのリン酸緩衝液中のプールされたラットの肝臓ミクロソームを用いた、１０μＭの標的濃度の化合物（１）のインキュベーションから得られた結果は、０分のインキュベーションと比較して、８６％までの回復を含むＮＡＤＰＨ生成システムの存在下での１２０分のインキュベーションの間、化合物（１）は比較的安定していたということを実証した（図１０）。化合物（１）の明らかな欠乏は観察されなかったが、５つの新規なピーク（３．３、４．９、および、８．８分で溶出するｍ／ｚ  ４０５、および、１．０および３．７分で溶出するｍ／ｚ  ４２１）が検出された。ｍ／ｚ  ４０５および４２１（例えば、モノおよびジヒドロキシル化）を有するありうる代謝物質は、ＮＡＤＰＨおよび時間に依存した方法でラット肝臓ミクロソーム中の１０μＭの標的濃度の化合物（１）によるインキュベーション後に観察された（図１０および図１１）。
【０１４２】
ＮＡＤＰＨ生成システムと０．１Ｍのリン酸緩衝液の存在下でイヌの肝臓ミクロソーム中の１０μＭの標的濃度の化合物（１）のインキュベーションは、被験物質が６０分にわたって代謝的に安定していたことを実証した。１２０分のインキュベーション後に、化合物（１）の２５％までの欠乏が、０分のインキュベーションと比較して観察された（図１４）。陰性対照（０分および／またはＮＡＤＰＨを含まない）サンプル中に存在しない新しいピークが調べられ、そして、ラット肝臓ミクロソームと同じように、ｍ／ｚ  ４０５および４２１（例えば、モノおよびジヒドロキシル化）を有するありうる代謝物質が検出された。実際に、５つの新規なピーク（３．４、５．１、および、９．２分までに溶出するｍ／ｚ  ４０５、および、１．０および１．９分までに溶出するｍ／ｚ  ４２１）が、時間に依存した手法のイヌの肝臓ミクロソーム中の１０μＭの標的濃度の化合物（１）によるインキュベーション後に観察された（図１４および図１５）。
【０１４３】
ＮＡＤＰＨ生成システムの存在下または不在下でサルの肝臓ミクロソームを含むリン酸緩衝液中の標的濃度１０μＭの化合物（１）のインキュベーションから得られた結果は、被験物質が著しく代謝したことを実証した。１２０分間のインキュベーションにわたって、１５％から５５％までの化合物（１）の時間に依存した欠乏が観察された（図１８）。親化合物の欠乏は新規なピークの形成に相関していた。実際に、４つの新規なピーク（５．１および９．２分までに溶出するｍ／ｚ  ４０５、ならびに、１．０および１．９分までに溶出するｍ／ｚ  ４２１）は、ＮＡＤＰＨおよび時間に依存した方法で、サルの肝臓ミクロソーム中の１０μＭの標的濃度の化合物（１）によるインキュベーション後に観察された（図１８および図１９）。
【０１４４】
０．１Ｍのリン酸緩衝液のみの存在下で、ヒト肝臓ミクロソーム中の化合物（１）のインキュベーションは、被験物質がＮＡＤＰＨと時間に依存した方法で少なくとも５０％まで代謝されることを実証した。化合物（１）の欠乏は新しいピークの形成と同時であった。抽出されたイオンクロマトグラムを用いて、ｍ／ｚ  ４０５および４２１（例えばモノおよびジヒドロキシル化）を含むありうる代謝物質が調査された。試験された条件におけるヒト肝臓ミクロソーム中の化合物（１）の代謝は、７つの新規なピーク（２．１、３．４、４．７、８．４、および、１０．６分までに溶出するｍ／ｚ  ４０５、および、１．０と３．６分までに溶出するｍ／ｚ  ４２１）をもたらした。
【０１４５】
（０．１Ｍのリン酸緩衝液、１ｍＭのＥＤＴＡ、および、３ｍＭのＭｇＣｌ２中の化合物（１）の代謝の安定性）
０．１Ｍのリン酸緩衝液中の、１ｍＭのＥＤＴＡ中の、３ｍＭのＭｇＣｌ２中の、および、様々な時間のＮＡＤＰＨ生成システムの存在下または不在下での、プールされたラット、イヌ、サル、および、ヒトの肝臓ミクロソームを用いたインキュベーション後の化合物（１）の濃度とその代謝物質が、それぞれ、図１２、図１６、図２０、および、図２４に提示される。
【０１４６】
プールされたラットの肝臓ミクロソームを含む１０μＭの標的濃度の化合物（１）のインキュベーションから得られた結果は、０分のインキュベーションと比較して、８５％までの回復を含むＮＡＤＰＨ生成システムの存在下での６０分間のインキュベーションにわたって、化合物（１）が比較的安定していたことを実証した。しかしながら、１２０分では、化合物（１）の回復は、０分と比較して７９％までわずかに減少した（図１２）。イオン電流クロマトグラムの合計に基づいて、陰性対照（０分および／またはＮＡＤＰＨを含まない）サンプル中に存在しない任意の新規なピークは、ｍ／ｚ  ４０５および４２１（例えば、モノおよびジヒドロキシル化）が検出されたありうる代謝物質の抽出されたイオンクロマトグラムを用いて調べられた。実際に、親化合物のわずかな欠乏は、時間とＮＡＤＰＨに依存した５つの新規なピーク（３．３、４．９、および、８．７分までに溶出するｍ／ｚ  ４０５、および、１．０および３．７分までに溶出するｍ／ｚ  ４２１）の形成に関連した（図１２および図１３）。それらのピークもＭｇＣｌ２とＥＤＴＡのインキュベーションがない場合に検出された。
【０１４７】
ＮＡＤＰＨ生成システムの存在下でのイヌの肝臓ミクロソーム中の１０μＭの標的濃度の化合物（１）のインキュベーションは、被験物質がラットの際に似た手法で代謝的に安定していたことを実証した。０分と比較して、化合物（１）は、８５％までの回復を伴って６０分にわたって安定していた。１２０分間のインキュベーション後に、化合物（１）はＮＡＤＰＨに依存した手法で少なくとも２４％まで代謝された（図１４）。陰性対照（０分のおよび／またはＮＡＤＰＨを含まない）サンプル中に存在しない新規なピークが調べられた。ラットの肝臓ミクロソームと同様に、ｍ／ｚ  ４０５および４２１（例えば、モノとジヒドロキシル化）を含むありうる代謝物質が検出された。実際に、４つの新規なピーク（５．１と９．１分までに溶出するｍ／ｚ  ４０５、および、１．０と１．９分までに溶出するｍ／ｚ  ４２１）が、時間に依存した手法のイヌの肝臓ミクロソーム中の１０μＭの標的濃度の化合物（１）によるインキュベーション後に観察された（図１６および図１７）。それらのピークもＭｇＣｌ２とＥＤＴＡのインキュベーションがない場合に検出された。
【０１４８】
ＮＡＤＰＨ生成システムの存在下および不在下でサルの肝臓ミクロソームを含む１０μＭの標的濃度の化合物（１）のインキュベーションから得られた結果は、被験物質がＮＡＤＰＨと時間に依存した手法の１２０分間のインキュベーションにわたって代謝的に不安定であることを実証した。親化合物の欠乏（１２０分で３７％まで減少する）は、新規なピークの形成に相関した。実際に、４つの新規なピーク（５．１と９．３分までに溶出する４０５、および、１．０と１．９分までに溶出するｍ／ｚ  ４２１）は、ＮＡＤＰＨと時間に依存した手法でのサルの肝臓ミクロソーム中の１０μＭの標的濃度の化合物（１）によるインキュベーション後に観察された（図２０および図２１）。それらのピークもＭｇＣｌ２とＥＤＴＡのインキュベーションのない場合に検出された。
【０１４９】
ヒトの肝臓ミクロソーム中のインキュベーション後に、化合物（１）は、ＮＡＤＰＨ生成システムの存在下では１２０分間比較的安定していた（８９％までの回復）。しかしながら、ヒト肝臓ミクロソームを含む１０μＭの化合物（１）のインキュベーションは、時間に依存した手法で６つの新規なピーク（４．７、８．３、および、１０．６分までに溶出するｍ／ｚ  ４０５、および、１．０、１．７、および、３．６分までに溶出するｍ／ｚ  ４２１）の形成をもたらした（図２４および図２５）。それらのピークもＭｇＣｌ２とＥＤＴＡのインキュベーションのない場合に検出された。
【０１５０】
（インキュベーション研究から得られる結論）
１２０分間のインキュベーション後の、プールされた雄雌混合のラット、イヌ、サル、および、ヒトの肝臓ミクロソーム中の１０μＭの標的濃度の化合物（１）の代謝の安定は、ＥＤＴＡとＭｇＣｌ２の存在下と不在下で行われた。親化合物の欠乏と、時間に依存した手法での代謝物質の形成が、ＮＡＤＰＨ生成システムの存在下または不在下で調べられた。
【０１５１】
ＥＤＴＡとＭｇＣｌ２の存在下で１０μＭの標的濃度の化合物（１）のインキュベーションから得られた結果は、化合物（１）が６０分にわたってラットとイヌの肝臓ミクロソーム中で代謝的に安定していたことを実証した。ＮＡＤＰＨ−ＧＳを含まない陰性対照の（ラットミクロソーム中の）わずかな増加と（イヌミクロソーム中で２１％までの）著しい減少と比較して、１２０分間のインキュベーション後、親化合物の２１％までと２４％までの欠乏は、ラットとイヌの肝臓ミクロソームでそれぞれ観察され、アッセイ中の変化を示している。化合物（１）は、３０〜１２０分間のインキュベーション後に、１６％までの欠乏から３７％までの欠乏までで示されるように、サルミクロソームではそれほど安定していなかった。しかしながら、このシステムは、ＮＡＤＰＨ−ＧＳの不在下で化合物（１）の濃度の上昇を示した（３０分および１２０分のインキュベーションの間、−１４％まで、および、−１２％まで）。サルの肝臓ミクロソームとは対照的に、化合物（１）は、ＮＡＤＰＨ生成システムの存在下で１２０分のインキュベーションにわたって１１％までのわずかな欠乏によって実証されるように、ヒト肝臓ミクロソームでは代謝的に安定していたが、ＮＡＤＰＨ−ＧＳの不在下では、ヒト肝臓ミクロソームは化合物（１）をわずかに（７％まで）欠乏させた。陰性対照が標準的なアッセイ変化を示している間は、代謝物の安定傾向にあるとの解釈が依然としてなされてもよい。
【０１５２】
すべての種において、親化合物の欠乏は、新しいピーク、推定代謝物（モノ酸化）（ｍｏｎｏｏｘｉｄａｔｉｏｎ）の形成に関連していた。それらの推定代謝物の形成は時間とＮＡＤＰＨとに依存しており、したがって、化合物（１）の生体内変化における、シトクロムＰ４５０および／またはフラビン含有モノオキシゲナーゼ（ＦＭＯ）酵素のいずれかの関与を示唆しているということは注目に値する。
【０１５３】
結論として、化合物（１）は、ラット、イヌ、および、ヒトの肝臓ミクロソームで代謝的に安定しており、ＥＤＴＡとＭｇＣｌ２の存在下での１２０分間のインキュベーション後に、サルの肝臓ミクロソームではそれほど安定していなかった。
【０１５４】
（キット／製品）
本明細書に記載の治療用途で使用するために、キットおよび製品も本明細書中で記載される。このようなキットは、運搬装置、パッケージ、あるいは、例えば、バイアル、チューブなどの１以上の容器を収容するために仕切られた容器を含み、容器の各々は、本明細書に記載の方法で使用される個別の要素の１つを含む。適切な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、注射器、および、試験管を含む。容器はガラスやプラスチックなどの様々な材料から形成可能である。
【０１５５】
例えば、容器は、本明細書中に開示されるように、随意に組成物中に、または、別の薬剤と組み合わせて、本明細書中に記載の１以上の化合物を含むことができる。容器は随意に無菌の点検ポートを有する（例えば、容器は静脈注射用の溶液バッグまたは皮下注射針で貫通可能なストッパを備えたバイアルであってもよい）。このようなキットは、識別についての記載、ラベル、または本明細書中に記載の方法での使用に関する取扱説明書を備えた化合物を随意に含む。
【０１５６】
キットは典型的には１以上の追加の容器を含み、その各々は、本明細書中に記載される化合物の使用のための商業的な観点とユーザの観点から望ましい１以上の様々な材料（例えば、試薬、随意に濃縮形式で、および／または、デバイスで）を含む。このような材料の制限しない例としては、緩衝液、希釈剤、フィルタ、針、注射器、運搬装置、パッケージ、容器、バイアル、および／または、使用の内容ならびに／あるいは使用説明書を表示したチューブのラベル、および、使用説明書を備えた添付文書が含まれるが、これらに限定されない。取扱説明書のセットも典型的には含まれる。
【０１５７】
ラベルは容器上にあるか、または、容器に付随し得る。ラベルを形成している文字、数字、または他の字体が容器本体に取り付けられたり、成形されたり、または、エッチングされたりする場合、ラベルは容器上にある。ラベルが例えば、添付文書として、容器を保持する入れ物または運搬装置の内部にある場合、ラベルは容器に付随してもよい。ラベルは内容物が具体的な治療用途に使用されることを示すために用いられ得る。ラベルは、例えば、本明細書に記載の方法で、内容物を用いる使用するための指示を示すように用いられてもよい。
【実施例】
【０１５８】
以下の実施例は、式（１）の化合物を生成するための方法、及び式（１）の有効性及び安全性を試験するための例示的方法を提供する。これらの実施例は、例示目的のみに提供され、本明細書に提供される特許請求の範囲を制限しない。本明細書に開示され請求される方法のすべては、本開示に照らして、不当な実験なしでなされ、実行され得る。特許請求の範囲の概念、精神及び範囲から逸脱することなく、本明細書に記載される方法へ、及び該方法の工程に、又は一連の工程に変更が適用され得ることは当業者に明らかである。当業者に明らかなすべてのこのような同様の代替及び改変は、添付された特許請求の範囲の精神、範囲及び概念内にあると考えられる。
【０１５９】
（実施例１：式（１）の化合物の合成）
（実施例１ａ：３α−アセトキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル−１−イル）−１６−ホルミルアンドロスタ−５，１６−ジエンの合成）
【０１６０】
【化２２】
0005956928.tif 000023
【０１６１】
３３．４ｋｇの３α−アセトキシ−１７−クロロ−１６−ホルミルアンドロスタ−５，１６ジエンを、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中でベンズイミダゾール及び炭酸カリウムと混合させ、出発物質の残りの量によって決定されるように、反応が終了するまで加熱する。反応が終了した後、反応混合物を冷却し、冷却した水と混合し、反応物をクエンチする。固形物をクエンチした反応混合物から分離し、順にＤＭＦと水の混合物、水、希釈した水性の塩化水素酸、水、希釈した水性の炭酸水素ナトリウム、及び水で洗浄する。その後、中間生成物、３α−アセトキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）−１６−ホルミルアンドロスタ−５，１６−ジエンをその後乾燥する。
【０１６２】
（実施例１ｂ：３α−アセトキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）−アンドロスタ−５，１６−ジエンの合成及び精製）
【０１６３】
【化２３】
0005956928.tif 000024
【０１６４】
３α−アセトキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）−１６−ホルミルアンドロスタ−５，１６−ジエンを、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）中の約１０％のパラジウム炭素（Ｐｄ／Ｃ）と混合し、反応混合物中の３α−アセトキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）−１６−ホルミルアンドロスタ−５，１６−ジエン／３α−アセトキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）アンドロスタ−５，１６−ジエンの比率によって決定されるように、反応が終了するまで加熱する。反応が終了した後、反応混合物を冷却する。硫酸マグネシウムを加え、結果として生じる混合物を濾過する。水を濾液に加え、結果として生じる混合物を撹拌する。固形で粗製の３α−アセトキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）−アンドロスタ−５，１６−ジエンを、水／ＮＭＰ混合物から分離し、水とメタノールの混合物で洗浄し、乾燥し、包装する。
【０１６５】
粗製の３α−アセトキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）アンドロスタ−５，１６−ジエンを、酢酸エチル中に溶解し、澄ませる（ｃｌａｒｉｆｉｅｄ）。この混合物の容量を、減圧蒸留によって減少させる。結果として生じる混合物を冷却し、固形物を分離し、冷たい酢酸エチルで洗浄し、真空下で乾燥する。幾つかの実施形態において、不純物のレベルを測定するためにサンプルにインプロセスの試験（ｉｎ−ｐｒｏｃｅｓｓ  ｔｅｓｔ）を行う。不純物のレベルが許容可能でなければ、再結晶プロセスを繰り返す。
【０１６６】
（実施例１ｃ：３α−ヒドロキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）−アンドロスタ−５，１６−ジエンの合成及び精製）
【０１６７】
【化２４】
0005956928.tif 000025
【０１６８】
３α−アセトキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）アンドロスタ−５，１６−ジエンを、メタノール中でナトリウムメトキシドと混合させ、３α−アセトキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）アンドロスタ−５，１６−ジエンの残りの量によって決定されるように、反応が終了するまで加熱する。反応が終了した後、反応混合物を冷却し、水と混合することで反応物をクエンチする。結果として生じるスラリーを撹拌し、更に冷却する。固形で粗製の３α−ヒドロキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）アンドロスタ−５，１６−ジエンを、クエンチした反応混合物から分離し、メタノールと水の混合物で洗浄し、その後、洗浄液が中性になるまで水で洗浄し、続いて乾燥して、包装する。
【０１６９】
粗製の３α−ヒドロキシ−１７−（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）アンドロスタ−５，１６−ジエンを、メタノールと酢酸エチルの混合物中に溶解し、澄ませる。生成物を、溶媒交換によって、メタノール／酢酸エチル溶液から酢酸エチル単独へと移す。結果として生じる混合物を冷却し、固形物を分離し、冷たい酢酸エチルで洗浄し、真空下で乾燥する。幾つかの実施形態において、不純物のレベルを測定するためにサンプルにインプロセスの試験を行う。不純物のレベルが許容可能でなければ、再結晶プロセスを繰り返す。
【０１７０】
（実施例２：（５Ｓ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル１−イル）−１０，１３−ジメチル−４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−ドデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３（２Ｈ）−オン（６）の合成）
【０１７１】
【化２５】
0005956928.tif 000026
【０１７２】
（工程１：（３Ｓ，５Ｓ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１７−クロロ−１６−ホルミル−１０，１３−ジメチル−２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルアセテート（２）の調製）
無水のクロロホルム（６０ｍＬ）中のアセテート１（３．０ｇ、９．０２ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下で、オキシ塩化リン（１５．０ｍＬ）およびジメチルホルムアミド（１５．０ｍＬ）の冷たい（０℃）攪拌した溶液に液滴で加えた。２５℃までその混合物を温め、次に還流まで５時間加熱し、その後５０℃で一晩撹拌した。結果として生じる混合物を減圧下で濃縮し、氷上に注ぎ、酢酸エチルにより抽出した。混合した抽出物を、水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、そして溶媒を減圧下で取り除くことで、白色固形物を得た。１〜１０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーによる精製によって化合物２（２．５９ｇ、８１％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．８５（ｓ，３Ｈ）、０．９５（ｓ，３Ｈ）、０．９６−１．５５（ｍ，１１Ｈ）、１．６０−１７３（ｍ，５Ｈ）、１．８０−１．８４（ｍ，２Ｈ）、１．９７−２．０６（ｍ，１Ｈ）、２．０（ｓ，３Ｈ）、２．５２（ｍ，１Ｈ）、４．６７（ｍ，１Ｈ）、９．９６（ｓ，１Ｈ）。
【０１７３】
（工程２：（３Ｓ，５Ｓ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル１−イル）−１６−ホルミル−１０，１３−ジメチル−２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルアセテート（３）の調製）
乾燥ＤＭＦ（２２ｍＬ）中の化合物２（２．５８ｇ、６．８０ｍｍｏｌ）、ベンズイミダゾール（２．４１ｇ、２０．４ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（３．４ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ２下で２５℃で１時間加熱した。その混合物を２５℃まで冷却し、水に加え、得られた固形物をＥｔＯＡｃにより抽出した。混合した抽出物を、水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で溶媒を取り除くことで、茶色の固形物を得た。１〜３％のＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２を使用するフラッシュクロマトグラフィーによる精製によって淡黄色固形物（３．０ｇ、定量（ｑｕａｎｔ））として化合物３を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．８６（ｓ，６Ｈ）、０．８９−１．６（ｍ，１０Ｈ）、１．６１−１．８０（ｍ，８Ｈ）、２．０１（ｓ，３Ｈ）、２．２４−２．３３（ｍ，１Ｈ）、２．７５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，６．０６Ｈｚ、１Ｈ）、４．６８（ｍ，１Ｈ）、７．３３（ｍ，３Ｈ）、７．８４（ｍ，１Ｈ）、７．８６（ｓ，１Ｈ）、９．５６（ｓ，１Ｈ）。ＡＰＣＩ＋＝４６１。
【０１７４】
（工程３：（３Ｓ，５Ｓ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル１−イル）−１０，１３−ジメチル−２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルアセテート（４）の調製）
乾燥ベンゾニトリル（８ｍＬ）中の化合物３（１．５ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｐｄ／Ｃ（１０ｗｔ％、７５０ｍｇ）の存在下で１６時間還流した。２５℃まで冷却した後、触媒をセライトのパッドを介した濾過によって取り除いた。濾液を蒸発し、その残留物を１％のＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２を使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、淡黄色固形物（０．７ｇ、５０％）として化合物４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．８６（ｓ，３Ｈ）、０．９６（ｓ，３Ｈ）、０．７８−０．９（ｍ，１Ｈ）、１．０−１．５１（ｍ，２Ｈ）、１．２７−１．８３（ｍ，１５Ｈ）、２．０３（ｓ，３Ｈ）、２．１０−２．１８（ｍ，１Ｈ）、２．３４−２．４２（ｍ，１Ｈ）、４．６８（ｍ，１Ｈ）、５．９６（ｓ，１Ｈ）、７．２７（ｍ，２Ｈ）、７．４５（ｍ，１Ｈ）、７．８０（ｍ、１Ｈ）、７．９５（ｓ、１Ｈ）。ＡＰＣＩ＋＝４３３。
【０１７５】
（工程４：（３Ｓ、５Ｓ、１０Ｓ、１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル１−イル）−１０，１３−ジメチル−２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オール（５）の調製）
０℃でメタノール（１１．０ｍＬ）中のアセテート４（４５０ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）の溶液に、メタノール中のＫＯＨ溶液（１０％、４．３ｍＬ）を液滴で加えた。混合物を２５℃まで温め、一晩撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発し、残留物に水を加え、混合物を酢酸エチルにより抽出した。その有機相を、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。溶媒を減圧下で取り除くことで粗製の物質を得、それを１００％のＣＨ２Ｃｌ２および１〜２％のＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２でのフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、淡黄色固形物（４００ｍｇ、６３％）として５を分離した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．８５（ｓ，３Ｈ）、０．９７（ｓ，３Ｈ）、０．７８−０．８１（ｍ，１Ｈ）、０．９９−１．５０（ｍ，１０Ｈ）、１．６０−１．９０（ｍ，８Ｈ）、２．１１−２．２０（ｍ，１Ｈ）、２．３４−２．４１（ｍ，１Ｈ）、３．６２（ｍ，１Ｈ）、５．９５（ｄｄ，Ｊ＝１．６，３．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．２８（ｍ，２Ｈ）７．４７（ｍ，１Ｈ）、７．８０（ｍ，１Ｈ）、７．９４（ｓ，１Ｈ）。ＨＰＬＣ＝９８％。ＡＰＣＩ＋＝３９１。
【０１７６】
（工程５：（５Ｓ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル１−イル）−１０，１３−ジメチル−４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−ドデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３（２Ｈ）−オン（６）の調製）
ジクロロメタン（４．０ｍＬ）とアセトニトリル（０．４ｍＬ）の混合物中の５の溶液（１５０ｍｇ、０．３８ｍｏｌ）に、Ｎ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド（ＮＭＯ、１０８ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）、モレキュラーシーブ（４Å、３００ｍｇ）および過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（ＴＰＡＰ、１４ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を２５℃で４時間撹拌した。反応混合物をセライトのパッドを介して濾過し、その濾液を黒色の残留物へと濃縮し、その残留物を、遊離液として１００％のＣＨ２Ｃｌ２を、その後１〜２％のＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２を使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、オフホワイト固形物（７７ｍｇ、５２％）として６を分離した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．９９（ｓ，３Ｈ）、１．０５（ｓ，３Ｈ）、１．０７−１．１５（ｍ，２Ｈ）、１．３０−１．５２（ｍ，４Ｈ）、１．６２−１．８５（ｍ，６Ｈ）、１．９６−２．４３（ｍ，８Ｈ）、５．９６（ｄｄ，Ｊ＝１．６，３．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．２８（ｍ，２Ｈ）、７．４７（ｍ，１Ｈ）、７．８０（ｍ，１Ｈ）、７．９３（ｓ，１Ｈ）。ＨＰＬＣ＝９６％。ＡＰＣＩ＋＝３８９。
【０１７７】
（実施例３：（５Ｒ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル１−イル）−１０，１３−ジメチル−４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−ドデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３（２Ｈ）−オン（７）の合成）
【０１７８】
【化２６】
0005956928.tif 000027
【０１７９】
（工程１：（３Ｒ，５Ｒ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１０，１３−ジメチル−１７−オキソヘキサデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルアセテート（２）の調製）
ピリジン（３０ｍＬ）中のアルコール１（３．０ｇ、１０．３３ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＮ２下で無水酢酸（４．２２ｇ、４１．３２ｍｍｏｌ）を液滴で加え、その後２５℃まで混合物を温め、２５℃で一晩撹拌した。水を反応混合物に加え、結果として生じる混合物をＥｔＯＡｃで希釈した。有機相を分離し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。混合した有機相を、順番に１ＮのＨＣｌ、飽和した炭酸水素ナトリウム、水およびブラインで洗浄した。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させることで白色固形物（３．４５ｇ、定量）として所望のアセテート２を分離した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．８４（ｓ，３Ｈ）、０．９５（ｓ、３Ｈ）、１．０−１．５８（ｍ，１３Ｈ）、１．６０−１.７４（ｍ，２Ｈ）、１．７８−１.９８（ｍ，５Ｈ）、２．０（ｓ、３Ｈ）、２．１０（ｍ，１Ｈ）、２．４５（ｍ，１Ｈ）、４．７１（ｍ，１Ｈ）。
【０１８０】
（工程２：（３Ｒ，５Ｒ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１７−クロロ−１６−ホルミル−１０，１３−ジメチル−２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルアセテート（３）の調製）
無水クロロホルム（３０ｍＬ）中のアセテート２（１．５ｇ、４．５１ｍｍｏｌ）の溶液を、オキシ塩化リン（７．５ｍＬ）およびジメチルホルムアミド（７．５ｍＬ）の冷たい（０℃）攪拌した溶液に窒素下で液滴で加えた。その混合物を２５℃まで温め、還流まで５時間加熱し、その後５０℃で一晩撹拌した。結果として生じる混合物を減圧下で濃縮し、氷上に注ぎ、その後酢酸エチルで抽出した。混合した抽出物を、水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を減圧下で取り除くことで白色固形物を得た。１〜１０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーによる精製によって化合物３（１．１７ｇ、６８％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣl３）δ０．９４（ｓ，３Ｈ）、０．９６（ｓ，３Ｈ）、１．０−１.５８（ｍ，１３Ｈ）、１．６０−２.０（ｍ，５Ｈ）、１．９８−２.１（ｍ，１Ｈ）、２．０（ｓ，３Ｈ）、２．５１（ｍ，１Ｈ）、４．７１（ｍ，１Ｈ）、９．９７（ｓ，１Ｈ）。
【０１８１】
（工程３：（３Ｒ，５Ｒ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル１−イル）−１６−ホルミル−１０，１３−ジメチル−２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルアセテート（４）の調製）
乾燥ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中の化合物３（１．１７ｇ、３．０８ｍｍｏｌ）、ベンズイミダゾール（１．０９ｇ、９．２２ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１．５４ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２下で８０℃で１時間加熱した。混合物を２５℃まで冷却し、水に加え、得られた固形物をＥｔＯＡｃで抽出した。混合した抽出物を、水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を取り除くことで茶色の固形物を得た。１〜３％のＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２を使用するフラッシュクロマトグラフィーによる精製によって、淡黄色固形物（１．４０ｇ、定量）として化合物４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．９４（ｓ，６Ｈ）、０．９２−１．５（ｍ，６Ｈ）、１．５０−１．５９（ｍ，２Ｈ）、１．６０−１．９０（ｍ，１０Ｈ）、２．０３（ｓ，３Ｈ）、２．２４−２．３３（ｍ，１Ｈ）、２．７５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，６．０６Ｈｚ，１Ｈ）、４．７４（ｍ，１Ｈ）、７．３３（ｍ，３Ｈ）、７．８４（ｍ，１Ｈ）、７．８６（ｓ，１Ｈ）、９．５９（ｓ，１Ｈ）。ＡＰＣＩ＋＝４６１。
【０１８２】
（工程４：（３Ｒ，５Ｒ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル１−イル）−１０，１３−ジメチル−２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルアセテート（５）の調製）
乾燥ベンゾニトリル（３．４ｍＬ）中の化合物４（７００ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｐｄ／Ｃ（１０ｗｔ％、３５０ｍｇ）の存在下で８時間還流した。ＲＴ（室温）まで冷却した後、触媒をセライトのパッドによる濾過によって取り除いた。濾液を蒸発させ、その残留物を１％のＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２を使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、淡黄色固形物（０．４６ｇ、７１％）として化合物５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．９４（ｓ，３Ｈ）、０．９７（ｓ，３Ｈ）、０．９２−１．５（ｍ，６Ｈ）、１．５０−１．５９（ｍ，２Ｈ）、１．６０−１．９０（ｍ，１０Ｈ）、２．０３（ｓ，３Ｈ）、２．２４−２．３３（ｍ，１Ｈ）、２．７５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，６．０６Ｈｚ，１Ｈ）、４．７４（ｍ，１Ｈ）、５．９６（ｓ，１Ｈ）、７．２７（ｍ，２Ｈ）、７．３３（ｍ，１Ｈ）、７．８１（ｍ，１Ｈ）、７．９３（ｓ，１Ｈ）。ＡＰＣＩ＋＝４３３。
【０１８３】
（工程５：（３Ｒ，５Ｒ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル１−イル）−１０，１３−ジメチル−２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オール（６）の調製）
メタノール（７．０ｍＬ）中のアセテート５（４５０ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でメタノール中のＫＯＨの溶液（１０％、２．８ｍＬ）を液滴で加え、その混合物を２５℃まで温め、２時間撹拌した。溶媒を残留物にまで減圧下で蒸発させ、残留物に水を加えた。結果として生じる混合物を、酢酸エチルにより抽出した。有機相を、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。溶媒を減圧下で取り除くことで粗製の物質を得、それを１００％のＣＨ２Ｃｌ２での、その後１〜２％のＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２でのフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、淡黄色固形物（２５０ｍｇ、６３％）として６まで分離した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．９４（ｓ，３Ｈ）、０．９７（ｓ，３Ｈ）、１．００−１．３５（ｍ，１Ｈ）、１．２２−１．５６（ｍ，８Ｈ）、１．６０−２．０（ｍ，１０Ｈ）、２．１０−２．２０（ｍ，１Ｈ）、２．３４−２．４５（ｍ，１Ｈ）、３．６５（ｍ，１Ｈ）、５．９６（ｄｄ，Ｊ＝１．６，３．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．２８（ｍ，２Ｈ）、７．４７（ｍ，１Ｈ）、７．７９（ｍ，１Ｈ）、７．９３（ｓ，１Ｈ）。ＨＰＬＣ＝１００％。ＡＰＣＩ＋＝３９１。
【０１８４】
（工程６：（５Ｒ，１０Ｓ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−１０，１３−ジメチル−４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−ドデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３（２Ｈ）−オン（７）の調製）
ジクロロメタン（３．０ｍＬ）とアセトニトリル（０．３３ｍＬ）の混合物中の６（１３０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド（ＮＭＯ、９４ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、モレキュラーシーブ（４Å、２６０ｍｇ）および過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（ＴＰＡＰ、１２ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を２５℃で４時間撹拌した。反応混合物をセライトのパッドを介して濾過し、その濾液を黒色の残留物にまで濃縮し、それを遊離液として１００％のＣＨ２Ｃｌ２を、次に１〜２％のＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２を使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、オフホワイト固形物（９１ｍｇ、７０％）として７を分離した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．９９（ｓ，３Ｈ）、１．０７（ｓ，３Ｈ）、１．２０−１．５４（ｍ，４Ｈ）、１．６２−１．７８（ｍ，４Ｈ）、１．８０−１．９２（ｍ，４Ｈ）、１．９６−２．２０（ｍ，３Ｈ）、２．１５−２．２５（ｍ，２Ｈ）、２．２８−２．５（ｍ，２Ｈ）、２．７３（ｍ、１Ｈ）、５．９６（ｄｄ，Ｊ＝１．６，３．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．２８（ｍ，２Ｈ）、７．４７（ｍ，１Ｈ）、７．７９（ｍ，１Ｈ）、７．９３（ｓ，１Ｈ）。ＨＰＬＣ＝９９％。ＡＰＣＩ＋＝３８９。
【０１８５】
（実施例４：（３Ｓ，１０Ｒ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−１０，１３−ジメチル−２，３，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５ドデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オール（３））
【０１８６】
【化２７】
0005956928.tif 000028
【０１８７】
（工程１：（１０Ｒ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル−１−イル）−１０，１３−ジメチル−６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５−デカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３（２Ｈ）−オン（２）の調製）
ケトン２をＷＯ２００６／０９３９９３に記載されていた手順に従って調製した。
【０１８８】
（工程２：（３Ｓ，１０Ｒ，１３Ｓ）−１７−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾル１−イル）−１０，１３−ジメチル−２，３，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５ドデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−オール（３）の調製）
メタノール（４ｍＬ）中のケトン２の溶液（１５０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）に、Ｎ２下で塩化セリウム七水和物（１４５ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を加え、その溶液を−２０℃まで冷却した。その後、水素化ホウ素ナトリウム（７．４ｍｇ、０．１９５ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を、−２０℃で０．５時間、その後−１５℃で０．５時間撹拌した。水をＥｔＯＡｃに続けて、反応混合物に加えた。有機相を分離し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。混合した有機相をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させることで白色固形物（１５０ｍｇ、定量）として所望の生成物３を分離した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．９０−１．０６（ｍ，２Ｈ）、０．９９（ｓ，３Ｈ）、１．０８（ｓ，３Ｈ）、１．２７−１．５０（ｍ，３Ｈ）、１．５７−１．８７（ｍ，７Ｈ）、１．９０−１．９８（ｍ，１Ｈ）、２．０５−２．４２（ｍ，４Ｈ）、４．１４（ｍ，１Ｈ）、５．３２（ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．９６（ｄｄ，Ｊ＝３．０３，１．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．２９（ｍ，２Ｈ）、７．４７（ｍ，１Ｈ）、７．８０（ｍ，１Ｈ）、７．９６（ｓ，１Ｈ）、ＨＰＬＣ＝９７％、ＡＰＣＩ＋＝３８９。
【０１８９】
（実施例５：医薬組成物）
（実施例２ａ：経口組成物）
経口送達用の医薬組成物を調製するために、式（１）の化合物を、約０．２０ｇ／ｍＬのかさ密度および約０．３１ｇ／ｍＬのタップ密度を有するように微粉化する。９０ｍｇの微粉化した化合物を、経口投与に適したサイズ「３」のカプセルにパック充填する。
【０１９０】
（実施例２ｂ：経口組成物）
経口送達用の医薬組成物を調製するために、式（１）の化合物を、約０．２０ｇ／ｍＬのかさ密度および約０．３１ｎｇ／ｍＬのタップ密度を有するように微粉化する。３２５ｍｇの微粉化した化合物を、経口投与に適したサイズ「００」のカプセルにパック充填する。
【０１９１】
（実施例２ｃ：経口組成物）
経口送達用の医薬組成物を調製するために、９０ｍｇの式（１）の化合物を、２００ｍｇのラクトースおよび１％のステアリン酸マグネシウムと混合する。混合物を混ぜ合わせ、経口投与に適する錠剤に直接圧縮する。
【０１９２】
（実施例６：インビトロの薬理学的研究）
（実施例３ａ：アンドロゲン受容体結合アッセイ）
アンドロゲン受容体（ＡＲ）競合結合を、変異したＡＲ（３８４ｎＭのＩＣ５０）を発現するアンドロゲン感受性のあるヒト前立腺癌細胞株（ＬＮＣａＰ）細胞における、および野生型ＡＲ（８４５ｎＭのＩＣ５０）を発現する細胞における、放射標識したＲ１８８１（アンドロゲンアゴニスト）を使用して測定した。濃度を増加させる際に、式（１）の化合物を細胞に加える。放射標識したＲ１８８１の量をＡＲへの競合結合の測定として測定する。
【０１９３】
（実施例３ｂ：リアーゼ活性の阻害）
トランスフェクトしたＥ．ｃｏｌｉによって発現されるインタクトな（Ｉｎｔａｃｔ）ＣＹＰ１７を分離し、酵素源として精製する。基質として１７−α−ヒドロキシプレグネノロンを放射標識した。ＣＹＰ１７活性を、基質のＣ−２１側鎖の開裂中に形成された、トリチウム標識した酢酸の量によって測定した。基質のＣＹＰ１７開裂に対する阻害効果を評価するために、式（１）の化合物を濃度を増加させる際に反応に加える。
【０１９４】
（実施例３ｃ：前立腺癌細胞株のテストステロン誘発性増殖の阻害）
ヒト前立腺癌細胞株（ＬＮＣａＰ及びＬＡＰＣ−４）を培養液中で成長させ、１ｎＭのジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）によって刺激する。ＤＨＴのこの濃度は、前立腺癌細胞の増殖を刺激する。増殖に対する効果を評価するために、濃度を増加させる際に式（１）の化合物を細胞に加える。
【０１９５】
（実施例３ｄ：前立腺癌細胞株におけるアンドロゲン受容体（ＡＲ）タンパク質の分解）
培養細胞におけるすべてのタンパク質合成を阻害するために、シクロヘキシミドを、ヒト前立腺癌細胞株（ＬＮＣａＰ）に加える。抽出タンパク質を、ＡＲタンパク質に向けられたモノクローナル抗体により調べると、シクロヘキシミド処置は、単独で、時間依存性の方法によってＡＲレベルを低下させた。濃度を増加させる際に式（１）の化合物を細胞に加えることで、その付加が培養下で経時的にＡＲタンパク質の著しくより大きな減少率をもたらすか否かを測定する。
【０１９６】
（実施例７：インビボの薬理学的研究）
（実施例４ａ：重度の易感染性免疫不全（Ｓｅｖｅｒｅｌｙ  Ｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｔ）（ＳＣＩＤ）マウスにおけるヒト前立腺癌の異種移植片の増殖の阻害）
ＬＡＰＣ４前立腺癌細胞腫瘍の異種移植片を、ＳＣＩＤマウスに移植する。癌を有するマウスに、体重（ＢＷ）１ｋｇ当たり５０ｍｇの式（１）の化合物の皮下（ＳＣ）投与を毎日２回受けさせる。腫瘍サイズを毎週測定し、ビヒクル、Ｃａｓｏｄｅｘ（登録商標）又は去勢のみを受ける対照マウスと比較する。
【０１９７】
（実施例８：β−ヒドロキシ−１７（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）アンドロスタ−５，１６−ジエンの代謝物質の検出）
（試験システム）
３β−ヒドロキシ−１７（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）アンドロスタ−５，１６−ジエンを、プールされたラットの、イヌの、サルの、およびヒトの肝臓ミクロソームと共に０．６ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度でインキュベートする。インキュベーションの混合物は０．１Ｍのリン酸カリウム緩衝液ｐＨ７．４またはインキュベーション緩衝液のいずれかを含んでいる。インキュベーションの混合物の〜３７℃での事前の２分間のインキュベーションに続いて、その反応を、ＮＡＤＰＨ生成システム（ＮＡＤＰＨ−ＧＳ）（１ｍＭのＮＡＤＰ＋、５ｍＭのグルコース−６−リン酸、１．０単位／ｍＬのグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ）、または０．１Ｍのリン酸緩衝液を加えることによって開始させる。適切な時点（０、１５、３０、６０および１２０分）で、反応を適切な停止液（アセトニトリル中の０．１％の蟻酸）を加えることよって停止させる。サンプルを２０℃で１０分間およそ１００００ｘｇで遠心分離にかける。各々のサンプルからの上清の量を分析用の予め標識化されたＨＰＬＣバイアルに移す。残りの親化合物またはあり得る代謝物質の形成をモニタリングするために、サンプルをＬＣ／ＭＳによって分析する。各々の場合において、ＴＯＫ−００１を含んでいるがミクロソームを含まない空サンプルが含まれている。
【０１９８】
（結果）
３β−ヒドロキシ−１７（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）アンドロスタ−５，１６−ジエンのＬＣ／ＭＳは３８９のｍ／ｚを示す。すべての種類において、肝臓ミクロソームによる３β−ヒドロキシ−１７（１Ｈ−ベンズイミダゾル１−イル）アンドロスタ−５，１６−ジエンの枯渇は、陰性対照と比較して、ｍ／ｚ４０５と４２１の新しいピークの形成に相互に関連し、このことは推定上の代謝物質（例えば、モノおよびジヒドロキシル化）を示す。
【０１９９】
（実施例９：ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳによる代謝物質の化学構造の確認）
血漿中の親化合物：
【０２００】
【化２８】
0005956928.tif 000029
【０２０１】
の定量化のためのＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳの方法を導入し、非ヒトの霊長類の血漿サンプル中のあり得る代謝物質ピークのベースライン分離を提供するために最適化した。勾配の変化と共に、移動相と安定相のいくつかの組み合わせを評価した。改善された分離は、変化した勾配でＡＣＥ  ５  Ｃ１８安定相を用いて得られた。
【０２０２】
最適化された方法は、その方法のためになされた変更が、親の定量化のためのその性能に悪影響を与えないということを確かめるために与えられた（ｑｕａｌｉｆｙ）。最適化された方法は、０．５−５００ｎｇ／ｍＬの親の範囲にわたって線形であると結論付けられた。直線領域にわたって１８の基準のうちの合計１８が、それらの名目上の濃度の±１５％以内までは逆算の許容可能な基準に合致し、各２回の抽出に関してその１５％未満のＣＶを有した。
【０２０３】
イヌとサルにおける研究からの保持されたインビボの血漿サンプルを、確認した方法に従って抽出し、フルスキャン様式で分析した。いくつかの種は、親に関して質量変化を伴うと同定され、このことは、前に観察されたインビボの変化に対応した。
【０２０４】
質量分析計への直接の注入によって、親化合物に関して、明らかな切断パターンを得た。分析希釈剤およびヒト血漿の両方中に調製された、漸減する濃度のサンプルを分析し、どの濃度で、観察された切断パターンを背景雑音と識別することができるかを決定した。
【０２０５】
希釈剤中に０．４１７ｎｇ／ｍＬの親、および血漿中に５−１０ｎｇ／ｍＬの親を含むサンプルに関して、明らかなパターンを得た。
【０２０６】
親のあり得る代謝物質の９つの真正の基準の分析によって、真正の基準のうちの２つ（Ｓｔｄ．５およびＳｔｄ．７）は、インビボの研究からのサンプルにおいて観察された、２つの代謝物質のピークのうちの１つと共に共溶出したことが測定された。９つの真正の基準のいずれも、別の観察された代謝物質ピークと一致しなかった。
【０２０７】
インビボの研究の間、さらなるピークが、親化合物を伴って溶出し、または親化合物と共にほとんど共溶出したことが観察された。これらのさらなるピークは、同じ質量推移（３８９ｍ／ｚ〜１９５ｍ／ｚ）を用いて複数の反応モニタリング（ＭＲＭ）によって得られ、このことは、分析物のピーク以外のピークは、１以上の二重結合移動及び／又は第２の水酸基のエピマー化または移動によって生成された親の異性体である可能性が高いということを示す。親のあり得る異性体の代謝物質を確認し、分析実験においてコンパレーターの基準として使用するために合成した。そのような実験においては、正確で再現可能な定量化のために、親とさらなるピークとの間の十分な分離が必要であった。
【０２０８】
（ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳの生物分析方法の最適化）
親の定量化のための最初のＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳの方法は、ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳのプラットフォームに導入された。従来の研究からのイヌとサルの血漿サンプルを、確認された方法に従って抽出し、もとのクロマトグラフィーを再現するために分析した。サンプルのクロマトグラムを図２６および２７に示す。
【０２０９】
様々な分析カラムをスクリーングし、抽出したイヌおよびサルの血漿サンプルを分析し、移動相：水中の０．１％のギ酸およびアセトニトリル中の０．１％のギ酸、で試験した。ピークの形状、ピーク面積およびピーク対称性のパラメーターを、カラムの選択の際に評価した。以下の表に、試験したカラムと観察されたクロマトグラフィーの短いコメントを示す。
【０２１０】
【表１】
0005956928.tif 000030
【０２１１】
最も有望な結果が、ＡＣＥ  ５  Ｃ１８（ｐ／ｎ  ＡＣＥ−１２１−０５０２）カラムを用いて得られた。さらなる移動相を、観察されたピーク間の分離を改善する際のそれらの有効性に関して評価した。さらなる移動相は：
・水中の０．１％のギ酸およびメタノール（ＭｅＯＨ）中の０．１％のギ酸；および
・２ｍＭの酢酸アンモニウム、０．１％のギ酸、９５：５のＨ２Ｏ：ＭｅＯＨおよび２ｍＭの酢酸アンモニウム、０．１％のギ酸、５：９５のＨ２Ｏ：ＭｅＯＨを含んだ。
【０２１２】
３組の移動相すべてから同様の結果を得た。確認された方法から変更されたパラメーターの数を最小限にするために、もとの移動相（水中の０．１％のギ酸およびアセトニトリル中の０．１％のギ酸）を、最適化された方法のために選択した。その方法に対する最終的な変更は、観察されたピーク間の分離を改善するために勾配の最適化を含んだ。抽出されたサル血漿サンプルに関して、最適化された方法論を用いて得られたサンプルのクロマトグラムを、図２８に示す。
【０２１３】
以下に、要約されたヒト血漿中の親の定量化のための最適化されたＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳの生物分析方法を示した。
【０２１４】
【表２】
0005956928.tif 000031
【０２１５】
０．５−１，０００ｎｇ／ｍＬの範囲にわたって較正基準を準備し、下記に述べるように２通り（ｉｎ  ｄｕｐｌｉｃａｔｅ）抽出した。
【０２１６】
【表３】
0005956928.tif 000032
【０２１７】
較正基準の抽出の結果を以下に示す。較正曲線を図２９に示す。
【０２１８】
【表４】
0005956928.tif 000033
【０２１９】
最適化された方法は、親の０．５−５００ｎｇ／ｍＬの範囲にわたり線形であることが測定された。直線領域にわたって１８の基準のうちの合計１８が、それらの名目上の濃度の±１５％以内までは逆算の許容可能な基準に合致し、各２回の抽出に関してその１５％未満のＣＶを有した。定量化の下限（ＬＬＯＱ）および定量化の上限（ＵＬＯＱ）で準備された基準の両方の組は、その指定された許容基準を満たした。
【０２２０】
ブランク血漿（ｂｌａｎｋ  ｐｌａｓｍａ）の抽出は一貫した親シグナルを示した。抽出されたブランク血漿のおよそ２０のインジェクションの平均シグナルは、およそ０．０５ｎｇ／ｍＬの計算された濃度に対応し、それは、定量の下限の１０％を表わした（０．５ｎｇ／ｍＬ）。このブランクシグナル（ｂｌａｎｋ  ｓｉｇｎａｌ）は、ヒト血漿中の親の定量化に影響を与えなかった。
【０２２１】
最適化されたＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳの生物分析の方法は、フルスキャン様式におけるデータを集めるために変更され、従来の研究からの血漿サンプルを抽出し、分析した。有望な代謝物質の予想されたｍ／ｚは、親からの質量変化に関するフルスキャンデータから抽出した。それらのそれぞれの持続時間に加えて、同定されたあり得る代謝物質を、イヌとサルの血漿サンプルに関して以下に列挙する。アスタリスクの印のあるエントリーは、あり得る代謝物質が恐らく同様のｍ／ｚを有する異なる種類からの同位体の分布による場合を表わす。これらの場合は、２単位のみしか異ならないｍ／ｚ値を有する種の共溶出および各々のピークに相当するピーク強度に基づいて確認された。
【０２２２】
【表５】
0005956928.tif 000034
【０２２３】
【表６】
0005956928.tif 000035
【０２２４】
分析方法の希釈剤中に準備された親の溶液を、直接質量分析計に注入することによって、親薬物の明らかな切断パターンを得、そのパターンを図３０に示す。
【０２２５】
一連の親の基準を分析方法の希釈剤中で準備し、切断パターンを得るために生成物イオン走査方式で分析した。背景雑音とそのパターンを識別することができる最も低い濃度は、分析方法の希釈剤中で調製した親のおよそ０．４２ｎｇ／ｍＬであることが測定された。この切断パターンを図３１に示す。
【０２２６】
次に、親を血漿へスパイクし（ｓｐｉｋｅ）、確認された方法に従って抽出を行った。漸減された濃度の結果として生ずるサンプルを、指定された切断パターンの存在に関して保持されたインビボの研究サンプルを分析することが実現可能か否かを測定した。背景雑音と切断パターンを識別することができるかもしれない最も低い濃度の血漿サンプルは、血漿中の親の５−１０ｎｇ／ｍＬの範囲であることが測定された。２つの濃度に対する切断パターンを図３２および３３に示す。確認されたパターンは、５ｎｇ／ｍＬのサンプルに関して観察された（図３２）が；しかしながら、インビボのサンプルに適用された時、低いシグナル強度は制限因子になり得る。
【０２２７】
あり得る代謝物質の真正の９つの基準を方法の希釈剤において準備し、最適化されたＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳの方法によって分析した。抽出されたカニクイザル血漿に対する可能な代謝物質および比較の要約は、以下に提供される。抽出された血漿サンプルのクロマトグラム、および観察されたピークを備えた９つの真正の基準の６つのクロマトグラムを、図３４−４０に示す。９つの真正の基準のうちの３つ、Ｓｔｄ．４、Ｓｔｄ．８およびＳｔｄ．９は、３９１→１９５のＭＲＭにおいて方法クロマトグラフィーにおいて観察されず、一方、２つの他の基準、Ｓｔｄ．１およびＳｔｄ．６は、３９１→１９５のＭＲＭで小さなピークのみを有した。これらの５つの基準は注入され、Ｓｔｄ．４、Ｓｔｄ．６、Ｓｔｄ．８およびＳｔｄ．９は、親化合物の質量より２原子質量単位大きな分子イオン質量を有することが測定された。最適化されたＭＳ／ＭＳのパラメーターの下では、ｍ／ｚ  １９５フラグメントは有意量で生成されなかったが、化合物Ｓｔｄ．１は、親化合物の分子量と同じ３８８原子質量単位の分子量を有することが測定された。親のために最適化されたＭＳ／ＭＳのパラメーターを用いて得られた親化合物およびＳｔｄ．１の生成物イオンスペクトルの比較を、図４１および４２に提供する。
【０２２８】
【表７】
0005956928.tif 000036
【０２２９】
真正の基準のどれも、１．７分でサルプルにおいて観察された、初期に溶出する代謝物質のクロマトグラフィーと一致しなかった。
【０２３０】
真正の代謝物質のうちの２つ、Ｓｔｄ．５およびＳｔｄ．７は、２．７分で後に溶出する代謝物質のクロマトグラフィーと一致した。
【０２３１】
Ｓｔｄ．２の真正の標準が親化合物と共に共溶出する（最も顕著なピーク）ことが観察された。このあり得る代謝物質が血漿サンプルの中にあると、それは現在の方法において親から区別可能ではない。
【０２３２】
真正の基準、Ｓｔｄ．１およびＳｔｄ．３は、血漿サンプルのクロマトグラフィーでは観察されなかった独特のピークを有していた。親に関して最適化されたＭＳ／ＭＳのパラメーターによって、ｍ／ｚ  １９５フラグメントは有意量で生成されず（図４１および４２）、むしろ最も顕著なフラグメントは、ｍ／ｚ  １１９であったが、Ｓｔｄ．１の真正の標準は、３８８原子質量単位である親の質量と一致する親の質量を有することが観察された。
【０２３３】
真正の基準Ｓｔｄ．４、Ｓｔｄ．６、Ｓｔｄ．８およびＳｔｄ．９は、３９０原子質量単位の親質量、これは親の質量より２原子質量単位大きい、を有することが観察された。Ｓｔｄ．６の真正の基準は、著しくより低い反応によってであるが、クロマトグラフ上で、２．７分で、親と共に、および後で溶出する代謝物質と共に共溶出する小さなピークを有することが観察され、このことは、親より２原子質量単位大きな観察された親質量と組み合わせると、これらの２つのピークがＳｔｄ．６サンプル中の不純物に由来すること示唆する。
【図９】
0005956928.tif 000043
【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
0005956928.tif 000049
【図１６】
0005956928.tif 000050
【図１７】
0005956928.tif 000051
【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
0005956928.tif 000055
【図２２】
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【図２３】
0005956928.tif 000057
【図２４】
0005956928.tif 000058
【図２５】
0005956928.tif 000059
【図２６】
0005956928.tif 000060
【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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