(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0005883863.tif 000039
（式中、
Ｒ1が、−Ｃ（Ｏ）Ｒ8であり；ここで、
Ｒ8が、アルキル、アルコキシ、アミン、アミノアルキル、アミドアルキル、ハロ、ヒドロキシ、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたはフェニルから選択される１つ以上の置換基で任意に置換される、ＮおよびＯから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５員または６員の不飽和複素環であり、
ここで、前記フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよく；
Ｒ2が、ＮおよびＯから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む芳香族または脂肪族Ｃ3〜Ｃ8環式基またはＣ3〜Ｃ8複素環基であり、
ここで、前記Ｃ3〜Ｃ8環式基またはＣ3〜Ｃ8複素環基が、アルキル、アミン、ヒドロキシから選択される１つ以上の置換基でさらに置換されてもよく、または前記環式基または複素環基が、任意に置換される芳香族または脂肪族Ｃ3〜Ｃ8環式基またはＣ3〜Ｃ8複素環基と縮合され；
Ｒ3が、水素またはＣ1〜Ｃ6アルキルであり；
Ｒ4が、水素、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；
Ｒ5が、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ4〜Ｃ7複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ9Ｒ10から選択される基で任意に置換されるベンジル基であり；ここで、
Ｒ9が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2であり、
Ｒ10が、Ｃ2〜Ｃ5アミノアルキルであり；
または
組み合わされたＲ4およびＲ5が、それらが結合される窒素と一緒に、フェニル、ベンジル、アミノアリール、アミドアルキルまたは複素環から選択される基で任意に置換されるピペリジンを形成し、またはピペリジンが、芳香族または脂肪族Ｃ3〜Ｃ8複素環基と縮合され；ここで、
前記フェニル、ベンジル、アミノアリール、複素環または縮合された芳香族または脂肪族Ｃ3〜Ｃ8複素環基が、アルキル、アルキルスルホニル、アルコキシ、アミノアルキル、アミノアリール、アミドアルキル、アリールアミン、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、オキソ、任意に置換されるフェニル、任意に置換されるピペリジン、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよく；または
前記縮合された芳香族または脂肪族Ｃ3〜Ｃ8複素環基が、さらなるＣ6〜Ｃ10環式基またはＣ6〜Ｃ10複素環基と縮合され；
Ｒ6が、水素またはＣ1〜Ｃ6アルキルであり；
Ｒ7が、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、アミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、飽和または不飽和シクロアルキル、または複素環である）の化合物；または
その塩。
【請求項２】
式（Ｉａ）：
【化２】
0005883863.tif 000040
（式中、
Ｒ11が、アルキル、アルコキシ、アミン、アミノアルキル、アミドアルキル、ハロ、ヒドロキシ、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたはフェニルから選択される１つ以上の置換基で任意に置換される、ＮおよびＯから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５員または６員の不飽和複素環であり、
ここで、前記フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキルまたはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよく；
Ｒ4が、水素、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；
Ｒ5が、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ4〜Ｃ7複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ9Ｒ10から選択される基で任意に置換されるベンジル基であり；ここで、
Ｒ9が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2であり、
Ｒ10が、Ｃ2〜Ｃ5アミノアルキルであり；
または
組み合わされたＲ4およびＲ5が、それらが結合される窒素と一緒に、フェニル、ベンジル、アミドアルキルまたは複素環から選択される基で任意に置換されるピペリジンを形成し；ここで、
前記フェニル、ベンジルまたは複素環が、アルキル、アルキルオキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよい）によって表される、請求項１に記載の化合物；または
その塩。
【請求項３】
式（Ｉａ）：
【化３】
0005883863.tif 000041
（式中、
Ｒ11が、アルキルまたはフェニルから選択される１つ以上の基で任意に置換される、ＮおよびＯから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５員または６員の不飽和複素環であり、
ここで、前記フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキルまたはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよく；
Ｒ4が、水素、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；
Ｒ5が、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ4〜Ｃ7複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ9Ｒ10から選択される基で任意に置換されるベンジル基であり；ここで、
Ｒ9が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2であり、
Ｒ10が、Ｃ2〜Ｃ5アミノアルキルであり；
または
組み合わされたＲ4およびＲ5が、それらが結合される窒素と一緒に、フェニル、ベンジル、アミドアルキルまたは複素環から選択される基で任意に置換されるピペリジンを形成し；ここで、
前記フェニル、ベンジルまたは複素環が、アルキル、アルキルオキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよい）によって表される、請求項１に記載の化合物；または
その塩。
【請求項４】
式（Ｉｂ）：
【化４】
0005883863.tif 000042
（式中、
Ｒ4が、水素、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；
Ｒ5が、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ4〜Ｃ7複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ9Ｒ10から選択される基で任意に置換されるベンジル基であり；ここで、
Ｒ9が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2であり、
Ｒ10が、Ｃ2〜Ｃ5アミノアルキルであり；
または
組み合わされたＲ4およびＲ5が、それらが結合される窒素と一緒に、フェニル、ベンジル、アミノアリール、アミドアルキルまたは複素環から選択される基で任意に置換されるピペリジンを形成し、またはピペリジンが、芳香族または脂肪族Ｃ3〜Ｃ8複素環基と縮合され；ここで、
前記フェニル、ベンジル、複素環または縮合された芳香族または脂肪族Ｃ3〜Ｃ8複素環基が、アルキル、アルキルアミド、アルキルオキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルキルオキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよい）によって表される、請求項１に記載の化合物；または
その塩。
【請求項５】
式（Ｉｃ）：
【化５】
0005883863.tif 000043
（式中、
Ｒa、ＲbおよびＲcが、個々に、水素、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ4〜Ｃ7複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ9Ｒ10から選択される基を表し；ここで、
Ｒ9が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2であり、
Ｒ10が、Ｃ2〜Ｃ5アミノアルキルであり；
または組み合わされたＲaおよびＲbまたはＲbおよびＲcがジオキサランを形成する）によって表される、請求項１に記載の化合物；または
その塩。
【請求項６】
式（Ｉｄ）：
【化６】
0005883863.tif 000044
（式中、
Ｒd、ＲeおよびＲfが、独立して、水素、フェニル、ベンジル、アミドアルキル、アミノアリールまたは複素環から選択される基を表し、または組み合わされたＲdおよびＲeまたはＲeおよびＲfが、縮合された芳香族または脂肪族Ｃ3〜Ｃ8複素環基を形成し；ここで、
前記フェニル、ベンジル、複素環または縮合された芳香族または脂肪族Ｃ3〜Ｃ8複素環基が、アルキル、アルコキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよい）によって表される、請求項１に記載の化合物；
または
その塩。
【請求項７】
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチルフェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−メトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３−メトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（４−メトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−メチル）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−エトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−プロポキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−イソプロポキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−ブトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−イソブトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−クロロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−ニトロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−トリフルオロメチル）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３−トリフルオロメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−フルオロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３−フルオロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（４−フルオロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（１，３−ジオキサラン）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３，４−ジクロロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２，４−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２，５−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３，４−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２，３−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２，３，４−トリメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２，６−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−メトキシ−５−トリフルオロメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３，５−ビス（トリフルオロメチル））フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（４−フェニル）ピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｐ−メトキシ）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｐ−クロロ）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｏ−トリフルオロメチル）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｏ−フェニル）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｍ−フェニル）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｐ−フェニル）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｐ−フェノキシ）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（２，５−ジメトキシ）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（４−ベンジル）ピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−２Ｓ−（ｔｅｒｔ−ブチルアミド）ピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（４−アセトアミド）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｏ−フルオロ）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｍ−フルオロ）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｐ−フルオロ）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｏ−トリフルオロメチル）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｍ−トリフルオロメチル）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｐ−トリフルオロメチル）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−スピロクロマン−２，４’−ピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノジメチル−（２−メトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（３−［アミノメチル］フェニル）−アミノ−４−アミノブタン−１−カルボキサミド；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（３−［アミノメチル］フェニル）−アミノ−３−アミノプロパン−１−カルボキサミド；または
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｐ−フルオロフェニル）ピペラジン
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−ベンズイミダゾール；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−２−ビフェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−３−ビフェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−４−ビフェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−２−ナフタレン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｔｈｒ（Ｍｅ）−アミノメチル−（２−メトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−｛１−（メチルスルホニル）スピロ［インドリン−３，４’−ピペリジン］｝；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−｛３Ｈ−３−オキソ−スピロ［イソベンゾフラン−１，４’−ピペリジン］｝；または
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（４−オキソ−スピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］）；
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
ＰＡＲ２拮抗薬である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
ＰＡＲ２作動薬である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物を、任意に薬学的に許容できる担体、賦形剤、希釈剤および／または補助剤とともに含む医薬組成物。
【請求項１２】
望ましくないＰＡＲ２活性に関連する疾病または疾患の予防または治療処置に使用するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
前記疾病または疾患が、炎症性の疾病または疾患、あるいは増殖性の疾病または疾患である、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
前記疾病または疾患が、関節炎、結腸炎および炎症性腸疾患、膵炎、肝臓、腎臓および泌尿生殖器系の疾病、心血管疾患、脳卒中、胃潰瘍、喘息、線維症および線維性疾患、てんかん、アルツハイマー病、パーキンソン病、ＩＩ型糖尿病、肥満および代謝障害、消化器疾患、神経変性疾患および呼吸器疾患、皮膚および皮下組織の疾病、筋肉、骨および腱の疾病から選択される炎症性の疾病または疾患である、請求項１２または１３に記載の化合物。
【請求項１５】
前記疾病または疾患が、胃、結腸、大腸、乳房または膵臓の癌を含む癌から選択される増殖性の疾病または疾患である、請求項１２または１３に記載の化合物。
【請求項１６】
望ましくないＰＡＲ２活性に関連する疾病または疾患の予防または治療処置のための薬剤の製造における、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１７】
前記疾病または疾患が、炎症性の疾病または疾患、あるいは増殖性の疾病または疾患である、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記疾病または疾患が、関節炎、結腸炎および炎症性腸疾患、膵炎、肝臓、腎臓および泌尿生殖器系の疾病、心血管疾患、脳卒中、胃潰瘍、喘息、線維症および線維性疾患、てんかん、アルツハイマー病、パーキンソン病、ＩＩ型糖尿病、肥満および代謝障害、消化器疾患、神経変性疾患および呼吸器疾患、皮膚および皮下組織の疾病、筋肉、骨および腱の疾病から選択される炎症性の疾病または疾患である、請求項１６または１７に記載の使用。
【請求項１９】
前記疾病または疾患が、胃、結腸、大腸、乳房または膵臓の癌を含む癌から選択される増殖性の疾病または疾患である、請求項１６または１７に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、プロテアーゼ活性化受容体−２（ＰＡＲ２）を調節することが可能な化合物、およびその使用に関する。より詳細には、本発明は、ＰＡＲ２の調節剤、それらの調製、および生物学的研究のための手段として、あるいはそれらが単独で使用されるかまたは他の治療法と併用されるかにかかわらず、治療用の作用物質または薬剤としてのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
プロテアーゼ活性化受容体−２（Ｐｒｏｔｅａｓｅ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−２：ＰＡＲ２）は、公知の内因性細胞外配位子を有さず、トリプシン、トリプターゼ、およびカテプシンＧなどの多くのセリンプロテアーゼを含むプロテアーゼによって活性化される点で一意のＧタンパク質共役受容体（Ｇ−ｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｕｐｌｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ＧＰＣＲ）である。セリンプロテアーゼは、膜結合受容体の細胞外Ｎ末端の一部を開裂させて、受容体に結合し、活性化を引き起こすことによって連結配位子として働く新たな配列を露出させる。
【０００３】
ＰＡＲ２は、全身に広まると、関節炎、炎症性腸疾患、膵炎、および心血管疾患を含む急性および慢性炎症性疾患における炎症誘発性メディエータとして関与している。ＰＡＲ２はまた、胃潰瘍、結腸炎、喘息、および肝線維症などの病態において抗炎症性および保護性があると報告されているが、これについてはまだ議論が分かれている。ＰＡＲ２の活性化は、胃、結腸、乳房および膵臓の癌を含む多くの癌の増殖、転移および血管新生に関連付けられてきた。これに関連して、ＰＡＲ２の小分子調節剤は、抗炎症性、炎症誘発性、抗増殖性または増殖性の作用物質の新たな種類として潜在的な関心を集めている。
【０００４】
トリプシンは、膵臓トリプシンが見られる消化管、ならびにトリプシノーゲンの発現が実証されている結腸、気道上皮、神経および血管内皮細胞、皮膚、腸、腎臓および膵臓におけるＰＡＲ２の強力な活性剤である。肥満細胞トリプターゼは、ＰＡＲ２の重要な活性剤でもあり、肥満細胞において高度に発現され、多くの炎症性疾患、内分泌疾患および他の疾病と強く関連している。より低い効力（ｎＭの濃度の代わりにμＭ）ではあるが、連結配位子のヒトおよびマウスの配列にそれぞれ対応するヘキサペプチドＳＬＩＧＫＶ−ＮＨ２およびＳＬＩＧＲＬ−ＮＨ２が、セリンプロテアーゼの代わりにヒトＰＡＲ２を活性化し得る。
【０００５】
より強力なペプチド作動薬が、ＰＡＲ２向けに作製された。ヘキサペプチド類似体、２−フロイル−ＬＩＧＲＬ−ＮＨ２は、ＳＬＩＧＲＬ−ＮＨ２より約２０倍高い作動薬効力を有し、ＰＡＲ１よりＰＡＲ２に対して選択的である。セリンを他の複素環に置き換えると、等しい効力のＰＡＲ２作動薬が得られ、Ｃ末端ロイシンの代わりの大きい芳香族基は、ＰＡＲ２作動薬効力に同様の向上を与える（ＭｃＧｕｉｒｅ，Ｊ．Ｊ．ら，「Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ２００４」，３０９，１１２４−３１；Ｂａｒｒｙ  ＧＤら，「Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ」  ２００７年，２７，５５５２−７；Ｈｏｌｌｅｎｂｅｒｇ，Ｍ．Ｄ．ら，「Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ２００８」，３２６，４５３−６２；Ｂｏｉｔａｎｏ，Ｃ．ら，「Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ」  ２０１１年，５４，１３０８−１３；Ｆｌｙｎｎ，Ａ．Ｎ．ら，「Ｊ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍ」  ２０１１年，２８６，１９０７６−８８）。２５０，０００種の薬剤様の（ｄｒｕｇ−ｌｉｋｅ）化合物のスクリーニングにより、２−フロイル−ＬＩＧＲＬ−ＮＨ２と同様の作動薬効力、ＰＡＲ２に対するいくらかの選択性および生体内での代謝的安定性を有するＰＡＲ２の２つの小分子作動薬が生成された（Ｓｅｉｔｚｂｅｒｇ，Ｊ．Ｇ．ら，「Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ」  ２００８年，５１，５４９０−３）。
【０００６】
ＰＡＲ２の第１の公知の拮抗薬は、わずかミリモル濃度で受容体に対する親和性を有し、選択性が最もなさそうである（Ｋｅｌｓｏ，Ｅ．Ｂ．ら，「Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ＥｘｐＴｈｅｒ」  ２００６年，３１６，１０１７−２４）。ＰＡＲ２について報告される第２の拮抗薬は、μＭの濃度で活性であるが、トリプシンのような内因性のＰＡＲ２活性剤に対して完全に不活性であるか（Ｋａｎｋｅ，Ｔ．ら，「Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ」２００９年，１５８，３６１−３７１）または部分作動薬の作用または可能な作動薬に誘導されるシグナル伝達のいずれかにより、拮抗薬および作動薬としての二重の機能を有する（Ｇｏｈ，Ｆ．Ｇ．ら，「Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ」  ２００９年，１５８，１６９５−１７０４）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】ＭｃＧｕｉｒｅ，Ｊ．Ｊ．ら，「Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ２００４」，３０９，１１２４−３１
【非特許文献２】Ｂａｒｒｙ  ＧＤら，「Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ」  ２００７年，２７，５５５２−７
【非特許文献３】Ｈｏｌｌｅｎｂｅｒｇ，Ｍ．Ｄ．ら，「Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ２００８」，３２６，４５３−６２
【非特許文献４】Ｂｏｉｔａｎｏ，Ｃ．ら，「Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ」  ２０１１年，５４，１３０８−１３
【非特許文献５】Ｆｌｙｎｎ，Ａ．Ｎ．ら，「Ｊ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍ」  ２０１１年，２８６，１９０７６−８８
【非特許文献６】Ｓｅｉｔｚｂｅｒｇ，Ｊ．Ｇ．ら，「Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ」  ２００８年，５１，５４９０−３
【非特許文献７】Ｋｅｌｓｏ，Ｅ．Ｂ．ら，「Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ＥｘｐＴｈｅｒ」  ２００６年，３１６，１０１７−２４
【非特許文献８】Ｋａｎｋｅ，Ｔ．ら，「Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ」２００９年，１５８，３６１−３７１
【非特許文献９】Ｇｏｈ，Ｆ．Ｇ．ら，「Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ」  ２００９年，１５８，１６９５−１７０４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
１つ以上の態様において、本発明は、低いマイクロモルまたはサブマイクロモル濃度で使用される場合、ＰＡＲ２を選択的に調節することができる新規な種類の化合物を提供し得るのが有利である。構造的特性、および調べられる細胞内経路に応じて、これらの新規な化合物は、作動薬または拮抗薬のいずれかとして作用することができ、生物学的研究のための手段としてまたは抗炎症性、炎症誘発性、抗増殖性または増殖性の療法のための作用物質として有用であり得る。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
一態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
0005883863.tif 000002
（式中、
Ｒ１が、水素または−Ｃ（Ｏ）Ｒ８であり；ここで、
Ｒ８が、アルキル、アルコキシ、アミン、アミノアルキル、アミドアルキル、ハロ、ヒドロキシ、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたはフェニルから選択される１つ以上の置換基で任意に置換される、ＮおよびＯから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５員または６員の飽和または不飽和複素環であり、
ここで、フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよく；
Ｒ２が、ＮおよびＯから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基であり、
ここで、Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基が、アルキル、アミン、ヒドロキシから選択される１つ以上の置換基でさらに置換されてもよく、または環式基または複素環基が、任意に置換される芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基と縮合され；
Ｒ３が、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；
Ｒ５が、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ４〜Ｃ７複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン（ｄｉｏｘａｌａｎｅ）、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ９Ｒ１０から選択される基で任意に置換されるベンジル基であり；ここで、
Ｒ９が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、
Ｒ１０が、Ｃ２〜Ｃ５アミノアルキルであり；
または
組み合わされたＲ４およびＲ５が、それらが結合される窒素と一緒に、フェニル、ベンジル、アミノアルキル、アミノアリール、アミドアルキルまたは複素環から選択される基で任意に置換されるピペリジンを形成し、またはピペリジンが、芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基と縮合され；ここで、
フェニル、ベンジル、アミノアリール、複素環または縮合された芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基が、アルキル、アルキルアミン、アルキルスルホニル、アルコキシ、アミノアルキル、アミノアリール、アミドアルキル、アリールアミン、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、オキソ、任意に置換されるフェニル、任意に置換されるピペリジン、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよく；または
縮合された芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基が、さらなるＣ６〜Ｃ１０環式基またはＣ６〜Ｃ１０複素環基と縮合され；
Ｒ６が、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ７が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、飽和または不飽和シクロアルキル、または複素環である）の化合物；または
その塩であって；
ただし、化合物が、５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−スピロ［インデン−１，４’−ピペリジン］、５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−スピロ［インダン−１，４’−ピペリジン］または５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−スピロ［オクタヒドロ−１Ｈ−インデン−１，４’−ピペリジン］でない化合物またはその塩を提供する。
【００１０】
さらなる態様において、本発明は、式（Ｉａ）：
【化２】
0005883863.tif 000003
（式中、
Ｒ１１が、アルキルまたはフェニルから選択される１つ以上の基で任意に置換される、ＮおよびＯから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５員または６員の不飽和複素環であり、
ここで、フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキルまたはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよく；
Ｒ４が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；
Ｒ５が、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ４〜Ｃ７複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ９Ｒ１０から選択される基で任意に置換されるベンジル基であり；ここで、
Ｒ９が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、
Ｒ１０が、Ｃ２〜Ｃ５アミノアルキルであり；
または
組み合わされたＲ４およびＲ５が、それらが結合される窒素と一緒に、フェニル、ベンジル、アミノアルキル、アミドアルキルまたは複素環から選択される基で任意に置換されるピペリジンを形成し；ここで、
フェニル、ベンジルまたは複素環が、アルキル、アルキルオキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよい）によって表される式（Ｉ）の化合物；または
その塩を提供する。
【００１１】
さらなる態様において、本発明は、本発明の化合物、またはその塩に受容体を曝露する工程を含む、ＰＡＲ２の活性を調節する方法を提供する。
【００１２】
さらなる態様において、本発明は、本発明の化合物、またはその塩を、好ましくは、薬学的に許容できる担体、賦形剤、希釈剤および／または補助剤とともに含む医薬組成物を提供する。
【００１３】
さらに他の態様において、本発明は、本発明に係る化合物、またはその塩を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む、望ましくないＰＡＲ２活性に関連する疾病または疾患のリスクがあるかまたはそれに罹患しやすい被験体、またはその疾病または疾患に罹患している被験体を処置する予防または治療方法を提供する。好ましくは、疾病または疾患は、炎症性の疾病または疾患、または増殖性の疾病または疾患である。
【００１４】
さらに他の態様において、本発明は、望ましくないＰＡＲ２活性に関連する疾病または疾患のリスクがあるかまたはそれに罹患しやすい被験体、またはその疾病または疾患に罹患している被験体の予防または治療処置への、本発明の化合物、またはその塩の使用を提供する。好ましくは、疾病または疾患は、炎症性の疾病または疾患、または増殖性の疾病または疾患である。
【００１５】
さらに他の態様において、本発明は、望ましくないＰＡＲ２活性に関連する疾病または疾患のリスクがあるかまたはそれに罹患しやすい被験体、またはその疾病または疾患に罹患している被験体の予防または治療処置のための薬剤の製造における、本発明の化合物、またはその塩の使用を提供する。好ましくは、疾病または疾患は、炎症性の疾病または疾患、または増殖性の疾病または疾患である。
【００１６】
好ましい態様において、本発明の化合物はＰＡＲ２拮抗薬である。
【００１７】
さらなる好ましい態様において、本発明の化合物はＰＡＲ２作動薬である。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】ＨＴ２９細胞におけるＰＡＲ２作動薬６についての３点濃度の棒グラフのグラフ表示。
【図２】ＰＡＲ２拮抗薬１８によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の濃度依存性阻害のグラフ表示。
【図３】ＰＡＲ２拮抗薬２４によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の濃度依存性阻害のグラフ表示。
【図４】ＰＡＲ２拮抗薬２６によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の濃度依存性阻害のグラフ表示。
【図５】ＰＡＲ２拮抗薬２７によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の濃度依存性阻害のグラフ表示。
【図６】ＰＡＲ２拮抗薬３０によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の濃度依存性阻害のグラフ表示。
【図７】ＰＡＲ２拮抗薬３９によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の濃度依存性阻害のグラフ表示。
【図８】ＰＡＲ２拮抗薬４２によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の濃度依存性阻害のグラフ表示。
【図９】ＰＡＲ２拮抗薬１８、３０、４２、４４が実験の足浮腫を緩和する能力のグラフ表示。拮抗薬１８、３０、４２または４４（オリーブ油中１０ｍｇ／ｋｇを経口投与（ｐ．ｏ．）、ｎ＝３）により、２−ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２（足当たり３５０μｇ、拮抗薬の経口投与の２時間後）によって誘発される足浮腫が軽減された。
【図１０】ラット血漿（薬剤を投与していないＷｉｓｔａｒラットに由来する）中の公知のペプチド作動薬ＳＬＩＧＲＬ−ＮＨ２および２−ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２と比較したＰＡＲ２拮抗薬（１８、３０、４０、４２および４４）の安定性のグラフ表示。
【図１１】ラットの肝臓のホモジネート（薬剤を投与していないＷｉｓｔａｒラットに由来する）中の公知のペプチド作動薬ＳＬＩＧＲＬ−ＮＨ２および２−ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２と比較したＰＡＲ２拮抗薬（１８、３０、４０、４２および４４）の安定性のグラフ表示。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
上記の病態生理学におけるその明らかな役割の証拠にもかかわらず、ＰＡＲ２の生物学的機能は、特に生体内レベルにおいて、依然としてよく理解されていない。このように実質的な進展がないことの原因は、主に、さらなる研究のためのＰＡＲ２の強力でかつ選択的な、生物学的に活性な作動薬および拮抗薬がないことにある。
【００２０】
構造活性関係研究は、ヘキサペプチド作動薬ＳＬＩＧＫＶ−ＮＨ２およびＳＬＩＧＲＬ−ＮＨ２から出発して、これらのペプチド配位子がＰＡＲ２に結合しそれを活性化するのに必要な特定の側鎖官能基を本発明者らが決定できるようにした。この情報を用いることによって、本発明者らは、初めて、強力で、選択的でかつ経口で有効な、受容体の非ペプチド性の調節剤を合理的に設計し、開発することができた。この過程において、本発明者らは、新規な化合物における、受容体認識に必要な断片および作動薬または拮抗薬の機能性を与える領域を決定することができた。ある実施形態において、これらの新規な化合物は、異常なＰＡＲ２発現および／または活性に関連する疾病または疾患を治療または予防する手段を提供する。
【００２１】
本明細書において、当業者に周知のいくつかの用語が使用される。それにもかかわらず、明瞭にするために、いくつかの用語が定義される。
【００２２】
本明細書に使用される際の「非置換」という用語は、置換基が存在せず、または唯一の置換基が水素であることを意味する。
【００２３】
本明細書において、特に定義されない限り、「任意に置換される」という用語は、基が、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルケニルオキシ、アルキニル、アルキニルオキシ、アミノ、アミノアシル、チオ、アリールアルキル、アリールアルコキシ、アリール、アリールオキシ、アシルアミノ、シアノ、ハロゲン、ニトロ、スルホ、ホスホノ、ホスホリルアミノ、ホスフィニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロキシ、オキシアシル、オキシム、オキシムエーテル、ヒドラゾン、−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ2、オキシアシルアミノ、オキシスルホニルアミノ、アミノアシルオキシ、トリハロメチル、トリアルキルシリル、ペンタフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメタンチオ、トリフルオロエテニル、モノ−およびジ−アルキルアミノ、モノ−およびジ−（置換アルキル）アミノ、モノ−およびジ−アリールアミノ、モノ−およびジ−ヘテロアリールアミノ、モノ−およびジ−ヘテロシクリル、アミノ、ならびにアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルから選択される異なる置換基を有する非対称二置換アミンから選択される１つ以上の基でさらに置換されても、またはされなくてもよいことを意味するものと解釈される。
【００２４】
特定の実施形態において、好ましい置換基は、アルキル、フェニル、アルコキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキル、トリハロアルキルオキシまたは式−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ５Ｒ６（式中、Ｒ５が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、Ｒ６がＣ２〜Ｃ５アルキルアミンである）の基から独立して選択される１つ以上の基である。
【００２５】
基または基の一部としての「アルキル」は、特に断りのない限り、直鎖状または分枝鎖状の脂肪族炭化水素基、好ましくはＣ１〜Ｃ１０アルキル、より好ましくはＣ１〜Ｃ８アルキル、最も好ましくはＣ１〜Ｃ６を指す。好適な直鎖状または分枝鎖状のＣ１〜Ｃ６アルキル置換基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、２−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ヘキシルなどが挙げられる。
【００２６】
本明細書における「アミノ」という用語は、水素、アルキル、アリールまたはそれらの組合せで置換される窒素ラジカルを指す。
【００２７】
本明細書において、正式名称、一般的な三文字表記（例えばＳｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、ＶａｌまたはＣｈａ）または一文字表記（例えばＳ、Ｌ、Ｉ、Ｇ、Ｒ、ＫまたはＶ）のいずれかによる、セリン、ロイシン、イソロイシン、グリシン、アルギニン、リジンまたはバリンなどの天然アミノ酸、あるいはシクロヘキシルアラニンなどの非天然アミノ酸を含むアミノ酸への言及は、特に規定されない限り、Ｌ−異性体を意味するものと解釈される。
【００２８】
「アルキルアミン」という用語は、本明細書に定義されるアルキル基にさらに結合されるアミンを指し、規定されない限り、モノ−およびジ−アルキルアミンの両方を含む。アルキル基は、好ましくはＣ１〜Ｃ１０アルキル基である。この基は、窒素原子を介して分子の残りの部分に結合される。
【００２９】
「アルキルアミド」という用語は、式−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２（式中、Ｒ置換基の少なくとも１つが、本明細書において定義されるアルキル基を表す）の基を指す。アルキルアミドは、規定されない限り、モノ−およびジ−アルキルアミドの両方を含む。当業者は、モノ−アルキルアミドの場合、残りのＲ置換基が水素を表すことを認識するであろう。アルキル基は、好ましくはＣ１〜Ｃ１０アルキル基である。この基は、窒素原子を介して分子の残りの部分に結合される。
【００３０】
「アミノアルキル」という用語は、少なくとも１つのアミンでさらに置換される、本明細書において定義されるアルキル基を指す。好ましいアミノアルキル基は、Ｃ２〜Ｃ１０アミノアルキル基である。この基は、アルキル炭素原子を介して分子の残りの部分に結合される。
【００３１】
「アミドアルキル」という用語は、少なくとも１つのアミド基でさらに置換される、本明細書において定義されるアルキル基、すなわち式アルキル−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２の基を指す。好ましいアミドアルキル基は、Ｃ２〜Ｃ１０アミドアルキル基である。この基は、アルキル炭素原子を介して分子の残りの部分に結合される。
【００３２】
基または基の一部としての「アリール」は、好ましくは環当たり５〜１２個の原子を有する、任意に置換される単環式、または縮合された多環式の、芳香族炭素環（全て炭素である環原子を有する環構造）を表す。アリール基の例としては、フェニルなどの単環式基、ナフチルなどの縮合された多環式基などが挙げられる。典型的に、アリール基が、Ｃ６〜Ｃ１０アリール基である。
【００３３】
二環式または多環式基に言及して使用される際の「縮合」という用語は、オルト−またはペリ−縮合された二環式または多環式環系などの、環の少なくとも２つが共通のＣ−Ｃ結合を共有する二環式または多環式環系を指す。「縮合」という用語は、二環式または多環式スピロ環系などの、１つのみの共通のＣ原子を共有する二環式または多環式環系も含む。
【００３４】
「アリールアミン」という用語は、本明細書において定義されるアリール基にさらに結合されるアミンを指し、規定されない限り、モノ−およびジ−アリールアミンの両方を含む。アリール基は、好ましくはＣ６〜Ｃ１０アリール基である。この基は、窒素原子を介して分子の残りの部分に結合される。
【００３５】
「アミノアリール」という用語は、少なくとも１つのアミンでさらに置換される、本明細書において定義されるアリール基を指す。好ましいアミノアリール基は、Ｃ６〜Ｃ１０アミノアリール基である。この基は、アリール炭素原子を介して分子の残りの部分に結合される。
【００３６】
基または基の一部としての「アルコキシ」という用語は、アルキルが本明細書において定義されるとおりであるアルキル−Ｏ−基を指す。好ましくは、アルコキシは、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシである。例としては、以下に限定はされないが、メトキシおよびエトキシが挙げられる。
【００３７】
「環」または「環式基」という用語は、好ましくは環当たり３〜１０個の炭素を含有する、飽和、部分不飽和または完全不飽和の単環式または縮合またはスピロ多環式環系を指す。
【００３８】
本明細書において使用される「ハロ」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを指す。
【００３９】
「複素環」または「複素環基」という用語は、環原子として窒素、硫黄および酸素からなる群から選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含有する飽和、部分不飽和または完全不飽和の単環式、二環式または縮合された多環式またはスピロ多環式環系を指す。各環は、好ましくは３〜１０員、より好ましくは４〜７員である。好適な複素環置換基の例としては、以下に限定はされないが、それぞれ１〜３つの置換基でさらに置換され得る、ピロール、フラン、ベンゾフラン、ベンゾチアゾール、イミダゾール、ベンズイミダゾール、イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、トリアゾール、オキサゾール、オキサゾリン、イソオキサゾール、イソオキサゾリン、フラザン、オキサジアゾール、ピペリジン、ピリジン、ピリミジン、ピリダジンおよびピラジンが挙げられる。
【００４０】
本発明のある好ましい実施形態において、一般式（Ｉ）に関して、以下の好ましい実施形態の１つ以上が当てはまる：
ａ）Ｒ１が、それぞれがアルキル、アルコキシ、アミン、アミノアルキル、アミドアルキル、ハロ、ヒドロキシ、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたはフェニルから選択される１つ以上の置換基でさらに任意に置換され得る、ピロール、ピリジン、ピラジン、フラン、ベンゾフラン、ベンゾチアゾール、イミダゾール、イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、トリアゾール、オキサゾール、オキサゾリン、イソオキサゾール、イソオキサゾリン、フラザン、またはオキサジアゾールのアシル誘導体から選択され、ここで、フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよい。
ｂ）Ｒ１が、それぞれがアルキル、アルコキシ、アミン、アミノアルキル、アミドアルキル、ハロ、ヒドロキシ、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたはフェニルから選択される１〜３つの置換基でさらに置換され得る、フラン、イミダゾール、ピラゾール、ピラジン、ピラゾール、トリアゾール、オキサゾールまたはイソオキサゾールのアシル誘導体から選択され、ここで、フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキルまたはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよい。
ｃ）Ｒ１が、アルキル、アルコキシ、アミン、アミノアルキル、アミドアルキル、ハロ、ヒドロキシ、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたはフェニルから選択される基で任意に置換されるイソオキサゾールカルボニルであり、ここで、フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキルまたはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよい。
ｄ）Ｒ２が、ＮおよびＯから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基であり、ここで、Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基が、アルキル、アミン、ヒドロキシから選択される１つ以上の置換基でさらに置換されてもよく、または環式基または複素環基が、任意に置換される芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基と縮合される。
ｅ）Ｒ２が、アルキル、アミン、ヒドロキシから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されるシクロヘキサンまたはフェニルから選択され、または環式基または複素環基が、任意に置換される芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基と縮合される。
ｆ）Ｒ２が、シクロヘキサン、フェニル、（ｐ−メチル）フェニル、（ｐ−アミノ）フェニル、（ｐ−ヒドロキシ）フェニルまたはインドールから選択される。
ｇ）Ｒ３が、水素またはメチルから選択される。
ｈ）Ｒ４が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；Ｒ５が、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ４〜Ｃ７複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ９Ｒ１０から選択される基で任意に置換されるベンジル基であり、ここで、Ｒ９が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、Ｒ１０が、Ｃ２〜Ｃ５アミノアルキルである。
ｉ）Ｒ４が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；Ｒ５が、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、アリールアミン、Ｃ４〜Ｃ７複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキルまたはトリハロアルコキシから選択される基で任意に置換されるベンジル基である。
ｊ）Ｒ４が水素であり；Ｒ５が、アルキルまたはアルコキシで置換されるベンジル基である。
ｋ）Ｒ４が水素であり；Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ９Ｒ１０で置換されるベンジル基であり；ここで、Ｒ９が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、Ｒ１０が、Ｃ２〜Ｃ５アミノアルキルである。
ｌ）Ｒ４が水素であり；Ｒ５が、アルキルまたはアルコキシおよび基−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ９Ｒ１０から選択される基で置換されるベンジル基であり、ここで、Ｒ９が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、Ｒ１０が、Ｃ２〜Ｃ５アミノアルキルである。
ｍ）組み合わされたＲ４およびＲ５が、それらが結合される窒素と一緒に、フェニル、ベンジル、アミノアルキル、アミノアリール、アミドアルキルまたは複素環から選択される基で任意に置換されるピペリジンを形成し、またはピペリジンが、芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基と縮合され；ここで、フェニル、ベンジル、アミノアリール、複素環または縮合された芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基が、アルキル、アルキルアミン、アルキルスルホニル、アルコキシ、アミノアルキル、アミノアリール、アミドアルキル、アリールアミン、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、オキソ、任意に置換されるフェニル、任意に置換されるピペリジン、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよく、または縮合された芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基が、さらなるＣ６〜Ｃ１０環式基またはＣ６〜Ｃ１０複素環基と縮合される。
ｎ）Ｒ６が、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
ｏ）Ｒ７が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、飽和または不飽和シクロアルキル、または複素環である。
【００４１】
一般式（Ｉ）に関するさらなる実施形態において、以下の好ましい実施形態の１つ以上が当てはまる：
ｐ）Ｒ１が、それぞれがアルキルまたはフェニルから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換され得る、ピロール、ピリジン、ピラジン、フラン、ベンゾフラン、ベンゾチアゾール、イミダゾール、イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、トリアゾール、オキサゾール、オキサゾリン、イソオキサゾール、イソオキサゾリン、フラザン、またはオキサジアゾールのアシル誘導体から選択され、ここで、フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよい。
ｑ）Ｒ１が、それぞれがアルキルまたはフェニルから選択される１〜３つの置換基でさらに置換され得る、フラン、イミダゾール、ピラゾール、ピラジン、ピラゾール、トリアゾール、オキサゾールまたはイソオキサゾールのアシル誘導体から選択され、ここで、フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキルまたはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよい。
ｒ）Ｒ１が、アルキルまたはフェニルから選択される基で任意に置換されるイソオキサゾールカルボニルであり、ここで、フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキルまたはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよい。
ｓ）Ｒ２がシクロヘキサンである。
ｔ）Ｒ３が水素である。
ｕ）Ｒ４が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；Ｒ５が、アルキル、アルコキシ、アリールアミン、Ｃ４〜Ｃ７複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ９Ｒ１０から選択される基で任意に置換されるベンジル基であり、ここで、Ｒ９が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、Ｒ１０が、Ｃ２〜Ｃ５アミノアルキルである。
ｖ）Ｒ４が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；Ｒ５が、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ４〜Ｃ７複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキルまたはトリハロアルコキシから選択される基で任意に置換されるベンジル基である。
ｗ）Ｒ４が水素であり；Ｒ５が、アルキルまたはアルコキシで置換されるベンジル基である。
ｘ）Ｒ４が水素であり；Ｒ５が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ９Ｒ１０で置換されるベンジル基であり；ここで、Ｒ９が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、Ｒ１０が、Ｃ２〜Ｃ５アミノアルキルである。
ｙ）Ｒ４が水素であり；Ｒ５が、アルキルまたはアルコキシおよび基−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ５Ｒ６から選択される基で置換されるベンジル基であり、ここで、Ｒ５が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、Ｒ６がＣ２〜Ｃ５アミノアルキルである。
ｚ）組み合わされたＲ４およびＲ５が、それらが結合される窒素と一緒に、フェニル、ベンジル、アミノアルキル、アミドアルキルまたは複素環から選択される基で任意に置換されるピペリジンを形成し；ここで、フェニル、ベンジルまたは複素環が、アルキル、アルコキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキルまたはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよい。
ａａ）Ｒ６がメチルである。
ａｂ）Ｒ７がエチルである。
【００４２】
さらなる態様において、本発明は、式（Ｉａ）：
【化３】
0005883863.tif 000004
（式中、
Ｒ１１が、アルキルまたはフェニルから選択される１つ以上の基で任意に置換される、ＮおよびＯから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５員または６員の不飽和複素環であり、
ここで、フェニル基が、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキルまたはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに任意に置換されてもよく；
Ｒ４が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；
Ｒ５が、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ４〜Ｃ７複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ９Ｒ１０から選択される基で任意に置換されるベンジル基であり；ここで、
Ｒ９が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、
Ｒ１０が、Ｃ２〜Ｃ５アミノアルキルであり；
または
組み合わされたＲ４およびＲ５が、それらが結合される窒素と一緒に、フェニル、ベンジル、アミノアルキル、アミドアルキルまたは複素環から選択される基で任意に置換されるピペリジンを形成し；ここで、
フェニル、ベンジルまたは複素環が、アルキル、アルキルオキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよい）によって表される式（Ｉ）の化合物；または
その塩を提供する。
【００４３】
好ましい実施形態において、Ｒ１１がイソオキサゾールである。
【００４４】
したがって、好ましい態様において、本発明は、式（Ｉｂ）：
【化４】
0005883863.tif 000005
（式中、
Ｒ４が、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アミノアルキルまたはアミドアルキルであり；
Ｒ５が、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ４〜Ｃ７複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ９Ｒ１０から選択される基で任意に置換されるベンジル基であり；ここで、
Ｒ９が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、
Ｒ１０が、Ｃ２〜Ｃ５アミノアルキルであり；
または
組み合わされたＲ４およびＲ３  Ｒ５が、それらが結合される窒素と一緒に、フェニル、ベンジル、アミノアルキル、アミノアリール、アミドアルキルまたは複素環から選択される基で任意に置換されるピペリジンを形成し、またはピペリジンが、芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基と縮合され；ここで、
フェニル、ベンジル、複素環または縮合された芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基が、アルキル、アルキルアミン、アルキルアミド、アルキルオキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルキルオキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよい）によって表される式（Ｉ）の化合物；または
その塩を提供する。
【００４５】
さらに好ましい実施形態において、式（Ｉ）の化合物に関して、Ｒ１１がイソオキサゾールであり、Ｒ４が水素であり、Ｒ５が、任意に置換されるベンジル基である。
【００４６】
したがって、さらなる態様において、本発明は、式（Ｉｃ）：
【化５】
0005883863.tif 000006
（式中、
Ｒａ、ＲｂおよびＲｃが、個々に、水素、アルキル、アミノアルキル、アルコキシ、Ｃ４〜Ｃ７複素環、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、トリハロアルキル、トリハロアルコキシまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ９Ｒ１０から選択される基を表し；ここで、
Ｒ９が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、
Ｒ１０が、Ｃ２〜Ｃ５アミノアルキルであり；
または組み合わされたＲａおよびＲｂまたはＲｂおよびＲｃがジオキサランを形成する）によって表される式（Ｉ）の化合物；または
その塩を提供する。
【００４７】
式（Ｉｃ）に関する好ましい実施形態において、ＲａおよびＲｃが水素であり、Ｒｂが−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨＲ９Ｒ１０であり、ここで、Ｒ９が、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、Ｒ１０が、Ｃ２〜Ｃ５アミノアルキルである。
【００４８】
式（Ｉｃ）に関する別の好ましい実施形態において、ＲａまたはＲｂのうちの一方が、メチル、メトキシまたはエトキシであり、他方が水素であり、Ｒｃが水素である。
【００４９】
式（Ｉｃ）に関するさらなる好ましい実施形態において、組み合わされたＲａおよびＲｂまたはＲｂおよびＲｃがジオキサランを形成し、残りのＲｃまたはＲａが水素である。
【００５０】
別のさらなる好ましい実施形態において、式（Ｉ）の化合物に関して、Ｒ１１がイソオキサゾールであり、組み合わされたＲ４およびＲ５が、それらが結合される窒素と一緒に、フェニル、ベンジル、アミノアルキル、アミドアルキル、アミノアリールまたは複素環から選択される基で任意に置換されるピペリジンを形成し；ここで、
フェニル、ベンジルまたは複素環が、アルキル、アルコキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよい。
【００５１】
したがって、別の態様において、本発明は、式（Ｉｄ）：
【化６】
0005883863.tif 000007
（式中、
Ｒｄ、ＲｅおよびＲｆが、独立して、フェニル、ベンジル、アミノアルキル、アミドアルキル、アミノアリールまたは複素環から選択される基を表し、または組み合わされたＲｄおよびＲｅまたはＲｅおよびＲｆが、縮合された芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基を形成し；ここで、
フェニル、ベンジル、複素環または縮合された芳香族または脂肪族Ｃ３〜Ｃ８環式基またはＣ３〜Ｃ８複素環基が、アルキル、アルコキシ、アミノアルキル、アミドアルキル、ヒドロキシ、ハロ、ニトロ、ジオキサラン、トリハロアルキル、またはトリハロアルコキシから選択される１〜３つの置換基でさらに置換されてもよい）によって表される式（Ｉ）の化合物；または
その塩を提供する。
【００５２】
さらに他の好ましい実施形態において、式（Ｉ）の化合物は：
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチルフェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−メトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３−メトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（４−メトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−メチル）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−エトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−プロポキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−イソプロポキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−ブトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−イソブトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−クロロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−ニトロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−トリフルオロメチル）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３−トリフルオロメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−トリフルオロメチル）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−フルオロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３−フルオロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（４−フルオロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（１，３−ジオキサラン）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３，４−ジクロロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２，４−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２，５−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３，４−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２，３−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２，３，４−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２，６−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−メトキシ−５−トリフルオロメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２，４−ジメトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３，５−ビス（トリフルオロメチル））フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−フルオロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３−フルオロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（４−フルオロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（１，３−ジオキサラン）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３，４−ジクロロ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（４−フェニル）ピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｐ−メトキシ）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｐ−クロロ）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｏ−トリフルオロメチル）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｏ−フェニル）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｍ−フェニル）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｐ−フェニル）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｐ−フェノキシ）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（２，５−ジメトキシ）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（４−ベンジル）ピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−２Ｓ−（ｔｅｒｔ−ブチルアミド）ピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（４−アセトアミド）フェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｏ−フルオロ）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｍ−フルオロ）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｐ−フルオロ）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｏ−トリフルオロメチル）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｍ−トリフルオロメチル）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−３−（ｐ−トリフルオロメチル）アミノフェニルピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−スピロクロマン−２，４’−ピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−［（Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチル）］ピペリジン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノジメチル−（２−メトキシ）フェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（３−［アミノメチル］フェニル）−アミノ−４−アミノブタン−１−カルボキサミド；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（３−［アミノメチル］フェニル）−アミノ−３−アミノプロパン−１−カルボキサミド；または
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−４−（ｐ−フルオロフェニル）ピペラジン
からなる群から選択される。
【００５３】
さらに他の好ましい実施形態において、式（Ｉ）の化合物は：
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−ベンズイミダゾール；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−２−ビフェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−３−ビフェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−４−ビフェニル；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−２−ナフタレン；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（６，７−ジメトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン）；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｔｈｒ（Ｍｅ）−アミノメチル−（２−メトキシ）フェニル；
Ｃｈａ−Ｉｌｅ−スピロ［インデン−１，４’−ピペリジン］；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｔｈｒ（Ｍｅ）−スピロ［インデン−１，４’−ピペリジン］；
５−（３−アミノ−イソオキサゾリル）−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−スピロ［インデン−１，４’−ピペリジン］；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｔｈｒ（Ｍｅ）−スピロ［インデン−１，４’−ピペリジン］；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−｛１−（メチルスルホニル）スピロ［インドリン−３，４’−ピペリジン］｝；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−｛３Ｈ−３−オキソ−スピロ［イソベンゾフラン−１，４’−ピペリジン］｝；
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（４−オキソ−スピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］）；または
５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−スピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］
からなる群から選択される。
【００５４】
式（Ｉ）の化合物が、少なくとも２つの不斉中心を有し、したがって、２つ以上の立体異性体で存在することが可能であることが理解されよう。本発明の化合物が、単一のジアステレオマーとして存在することが非常に望ましく、ここで、シクロヘキシルアラニンおよびイソロイシン残基の不斉炭素原子は、Ｌ−配置を有する。したがって、本発明は、シクロヘキシルアラニンおよびイソロイシン残基の少なくとも２つの不斉中心に対して実質的に純粋な、例えば、約９５％〜９７％のｄｅまたは９９％超のｄｅなどの約９０％超のｄｅの立体異性体の化合物、ならびにそのラセミ混合物を含む混合物にも関する。このようなジアステレオマーは、例えばキラル中間体を用いた不斉合成によって調製されてもよく、または混合物は、従来の方法、例えば、クロマトグラフィー、または分割剤の使用によって分割され得る。
【００５５】
さらに、式（Ｉ）は、必要に応じて、溶媒和形態ならびに非溶媒和形態の化合物を包含することが意図される。したがって、各式は、水和形態ならびに非水和形態を含む、示される構造を有する化合物を含む。
【００５６】
本発明の化合物が塩として存在し得ることが理解されよう。本発明の新規な生物活性化合物は、薬学的に許容できる塩として被験体に投与され得る。しかしながら、薬学的に許容できない塩も、薬学的に許容できる塩の調製における中間体としてまたは生物学的研究のための手段としてこれらが有用であり得るため、本発明の範囲内に含まれることが理解されよう。
【００５７】
本発明の塩に適用されるおよび／または本発明の方法に使用される際の「薬学的に許容できる」という用語は、妥当な医学的判断の範囲内で、妥当なリスク／治療ベネフィット比を超える過度の毒性、刺激、アレルギー、または同様の負の反応を伴わずに、ヒトおよび下等動物の組織と接触させて使用するのに適した塩を指す。好ましくは、薬学的に許容できる塩は、患者に投与するのに適した塩である。したがって、本発明は、本発明の化合物のいずれか１つの薬学的に許容できる塩にも及ぶ。
【００５８】
薬学的に許容できる塩は、一般に、当該技術分野において公知であり、本発明の場合、本発明の化合物の比較的非毒性の有機塩または無機塩を含む。このような塩の例としては、以下に限定はされないが、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、硝酸塩、酢酸塩、リン酸塩、臭化水素酸塩、ラウリルスルホン酸塩、グルコヘプトン酸塩、シュウ酸塩、オレイン酸塩、ラウリン酸塩、ステアリン酸塩、パルミチン酸塩、吉草酸塩、安息香酸塩、ナフチル酸塩（ｎａｐｈｔｈｙｌａｔｅ  ｓａｌｔ）、メシル酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩などの酸付加塩が挙げられる（例えば、Ｂｅｒｇｅら，「Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１９７７年」，６６，１−１９を参照）。さらに、薬学的に許容できる塩には、アルカリ金属塩、アルカリ土類塩、およびアンモニウム塩などの塩基性塩も含まれる。例えば、薬学的に許容できる塩基性塩としては、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩が挙げられる。さらに、例えば、リジン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、プロカインおよびトリスの塩を含む有機塩も使用され得る。本発明の化合物中の塩基性窒素含有基は、例えば、アルキルハロゲン化物（メチル、エチル、プロピル、およびブチルの塩化物、臭化物およびヨウ化物を含む低級アルキルハロゲン化物など）、長鎖ハロゲン化物（例えば、デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルの塩化物、臭化物およびヨウ化物）、アラルキルハロゲン化物（例えば、ベンジルおよびフェネチルの臭化物）、ジアルキル硫酸塩（例えば、ジメチル、ジエチル、ジブチルおよびジアミルの硫酸塩）を含む様々な有機作用物質で四級化され得る。
【００５９】
本発明の化合物の塩は、例えば、水、メタノール、エタノール、ジメチルホルムアミド、酢酸エチルなど、およびそれらの混合物との溶媒和物の形態で存在することもできる。
【００６０】
プロドラッグ誘導体も、本発明の範囲に含まれ、広義で、生体内で本発明の化合物に転化される化合物を包含する。このような誘導体は、当業者が容易に考え付くものであり、例えば、アルキルまたはアシル基、酸化物、糖類またはオリゴペプチドでさらに変性される化合物を含み、これらは、本体が容易に開裂されて、本発明に係る活性化合物が得られる。すなわち、「プロドラッグ」という用語は、生体内でその治療的に有効な形態または利用可能な形態に転化されるまで完全には有効でないかまたは利用可能でない本発明の前駆体または変性された化合物を指す。
【００６１】
本発明の化合物を調製するための方法が、本発明のさらなる実施形態として提供され、以下の一般的な手順によって示される。
【００６２】
化合物は、保護アミノ酸を用いて合成され得る。アミノ保護基は、一般に、当業者に公知であり、化学反応からアミノ基を保護する（またはブロックする）のに適しているが、所望の化学反応が分子中の他の位置で行われた後に容易に除去可能である基に関する。保護基が、所望の反応（または一連の反応）後に除去されるため、それらの性質およびサイズは特に重要でない。アミノ保護基の例としては、以下に限定はされないが、アセチル、プロピオニル、ブチリル、フェニルアセチル、ベンゾイルまたはトルイル基などのアシル保護基；アリールオキシ−アルカノイル保護基；メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルジカルボニル（Ｂｏｃ）、２−ヨードエトキシカルボニルなどのアルコキシカルボニル保護基；カルボベンジルオキシ（Ｃｂｚ）、４−メトキシ−ベンジルオキシカルボニル、フルオレニルメチルオキシカルボニルクロリド（Ｆｍｏｃ）などのアラルコキシカルボニル（ａｒａｌｋｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）保護基；または４−メトキシ−２，３，６−トリメチルフェニルスルホニル（Ｍｔｒ）、ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル（Ｐｂｆ）または２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）などのアリールスルホニル保護基が挙げられる。好ましいアミノ保護基は、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、Ｆｍｏｃ、およびベンジルである、より好ましいアミノ酸保護基はＢｏｃである。
【００６３】
一般に、化合物は、Ｂｏｃ−保護されたイソロイシン残基、１種以上のカップリング試薬または活性化試薬およびＮ．Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（Ｎ．Ｎ−ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ：ＤＩＰＥＡ）などの塩基が好適な体積の溶媒に溶解された溶液相中で合成される。
【００６４】
アミノ基へのカルボキシル基のカップリングを進行させるためにカルボキシル基を活性化するのに使用されるカップリング試薬は、一般に、当業者に周知であり、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ：ＤＣＣ）およびジイソプロピルカルボジイミド（ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ：ＤＩＣ）などのカルボジイミドカップリング試薬ならびに１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、１−ヒドロキシ−７−アザ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）、２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートメタンアミニウム（ＨＡＴＵ）、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）およびＯ−（１Ｈ−６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル）１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＣＴＵ）などのトリアゾールカップリング試薬を含み得る。
【００６５】
一般に、上記の反応は、以下に限定はされないが、ジメチルホルムアミド（ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ：ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリジン（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌｐｙｒｏｌｉｄｉｎｅ：ＮＭＰ）、トリフルオロエタノール（ｔｒｉｆｌｏｕｒｏｅｔｈａｎｏｌ：ＴＦＥ）、ヘキサフルオロイソプロパノール（ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｉｓｏｐｒｏｐａｎｏｌ：ＨＦＩＰ）、ジクロロメタノール（ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｏｌ：ＤＣＭ）、またはクロロホルムを含む、溶液相ペプチド合成に適した溶媒または溶媒の混合物中で行われ得る。好ましい実施形態において、反応は、ＤＭＦ中で行われる。
【００６６】
次に、溶液は、式（Ｉ）の化合物の置換基Ｒ２およびＲ３によって表されるＣ末端部分を有するアミノに加えられ、反応が完了するまで撹拌される。一般に、反応は、室温で行われる。カップリング反応の完了は、エレクトロスプレーイオン化質量分析（ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ  ｉｏｎｉｓａｔｉｏｎ  ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ：ＥＳＩ  ＭＳ）または他の形態の分光法によって決定される。
【００６７】
次に、中間化合物は、反応混合物から単離され、粗生成物は、ＤＣＭ中のトリフルオロ酢酸（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ：ＴＦＡ）の溶液で処理されて、イソロイシンＮ末端Ｂｏｃ−保護基が除去される。次に、溶液は、Ｎ２下で蒸発され、洗浄され、ろ過され、減圧下で蒸発される。次に、後続のアミノ酸およびＮ末端カルボン酸が、同じ条件下で順次カップリングされる。最終的な粗生成物が、逆相高性能液体クロマトグラフィー（ｒｅｖｅｒｓｅ  ｐｈａｓｅ  ｈｉｇｈ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：ｒｐＨＰＬＣ）によって精製される。本発明の化合物は、高分解能質量分析（ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ：ＨＲＭＳ）およびプロトン核磁気共鳴分光法（ｐｒｏｔｏｎ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｍａｇｎｅｔｉｃ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ：１Ｈ  ＮＭＲ）によって特性決定され、化合物の純度が、分析的逆相ＨＰＬＣによって評価される。
【００６８】
本発明の化合物は、受容体を活性化するかまたは天然連結配位子の活性を阻害することによるＰＡＲ２活性を調節するそれらの能力によって特定されており、このため、本明細書において「作動薬」、「拮抗薬」、「阻害剤」、「ＰＡＲ２阻害剤」、「ＰＡＲ２の阻害剤」などと呼ばれる場合がある。特定の細胞型のまたは特定の方法で評価されたＰＡＲ２拮抗薬は、異なる細胞型のまたは異なる方法で評価されたＰＡＲ２作動薬または部分作動薬であってもよく、その逆も同様であることに留意することが重要である。例えば、１つの細胞型からの細胞内のカルシウムの放出を活性化する化合物が作動薬または部分作動薬である一方、このような放出を阻害する化合物が拮抗薬であり得る。しかしながら、これらの「作動薬」および「拮抗薬」の効果は、異なる細胞において所与の化合物またはＰＡＲ２配位子で逆になることがあり、または逆の反応が、異なる報告アッセイ（例えばＥＲＫリン酸化またはｃＡＭＰ刺激）を用いて観察され得る。
【００６９】
「配位子」という用語は、受容体の特異的結合パートナーを指し、これには、以下に限定はされないが、受容体作動薬、部分作動薬、混合された作動薬、拮抗薬および薬剤などの、天然連結ＰＡＲ２配位子ならびに結合されていない内因性の細胞外配位子が含まれる。「受容体」という用語は、配位子の特異的結合パートナーを指し、これには、限定はされないが膜結合受容体が含まれる。
【００７０】
本発明の化合物がＰＡＲ２を調節する能力は、当業者に利用可能な何種類もの手段、例えば、実施例に記載される方法などの、細胞内カルシウム動員を含むいくつかの下流マーカーに対するＰＡＲ２調節の効果を測定するインビトロアッセイ、細胞内環状アデノシン一リン酸（ｃｙｃｌｉｃ  ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ：ｃＡＭＰ）刺激またはＥＲＫ１／２リン酸化によって評価され得る。
【００７１】
好ましくは、理論に制約されるものではないが、本発明の化合物は、受容体に結合することによって、また、天然連結配位子が受容体結合領域に接触し、または連結配位子と競合し、または受容体の他の箇所に結合して拮抗薬活性の作動薬を誘発するのを防ぐことによって、ＰＡＲ２の活性化を阻害または増幅する。ＰＡＲ２の拮抗薬は、以下に限定はされないが、本明細書に記載される結合されていない内因性配位子および合成作動薬を含む、ＰＡＲ２に対する他の配位子の活性を阻害することによって作用することもできる。
【００７２】
セリンプロテアーゼの非存在下でＰＡＲ２に結合し、それを活性化する本発明の化合物も好ましい。
【００７３】
本発明の一態様において、細胞を、化合物、またはその塩に曝露する工程を含む、ＰＡＲ２の活性を調節する方法が提供される。細胞を、化合物、またはその塩に曝露する工程は、インビトロ、生体外または生体内で行われ得る。
【００７４】
例えば、細胞を化合物に曝露する工程がインビトロまたは生体外で行われる場合、本発明の方法は、生物学的研究のための手段としてまたは被験体におけるＰＡＲ２活性を調節するための特定の化合物（単独でまたは組み合わせて）の効力を測定するための診断手段として使用され得る。例えば、ＰＡＲ２を発現する細胞は、被験体から除去され、本発明の１種以上の化合物、またはその塩に曝露され得る。化合物（または複数の化合物）がＰＡＲ２の活性を調節する能力は、当業者に公知の方法によっていくつかの下流マーカーのいずれか１つを測定することによって評価され得る。したがって、特定の化合物が別の化合物より有効であるかどうかを確認し、具体的な治療計画を該当する被験体に合わせて調整することができる。
【００７５】
好ましい実施形態において、細胞を、化合物、またはその塩に曝露する工程は生体内で行われる。
【００７６】
本発明の一実施形態において、異常なＰＡＲ２発現および／または活性に関連する疾病または疾患のリスクがあるかまたはそれに罹患しやすい被験体、またはその疾病または疾患に罹患している被験体を処置する予防または治療方法が提供される。具体的な疾病および疾患としては、以下に限定はされないが、関節炎疾患、炎症性腸疾患、膵炎、心血管疾患、胃潰瘍、結腸炎、喘息、線維症および線維性疾患などの急性および慢性炎症性疾患、ならびにてんかん、アルツハイマー病、パーキンソン病、肥満およびＩＩ型糖尿病などの炎症性疾患に関連する他の病態、ならびに胃、結腸、大腸、乳房または膵臓の癌などの増殖性疾患が挙げられる。
【００７７】
好ましい実施形態において、予防または治療方法は、本明細書に記載される望ましくないまたは不十分なＰＡＲ２活性に関連する疾病または疾患、その疾病または疾患の症状、またはその疾病または疾患になりやすい傾向を有する被験体に、その疾病または疾患、その疾病または疾患の症状、またはその疾病または疾患になりやすい傾向を治療し、治癒し、緩和し、軽減し、変化させ、修正し、改善し、好転させ、またはそれに作用するために、本発明に係る化合物、またはその薬学的に許容できる塩を投与する工程を含む。予防的治療は、望ましくないまたは不十分なＰＡＲ２活性に関連する疾病または疾患の発症率を低下させ得る。
【００７８】
本発明の予防または治療方法は、本明細書に記載される望ましくないＰＡＲ２活性に関連する疾病または疾患、その疾病または疾患の症状、またはその疾病または疾患になりやすい傾向を有する被験体に、その疾病または疾患、その疾病または疾患の症状、またはその疾病または疾患になりやすい傾向を治療し、治癒し、緩和し、軽減し、変化させ、修正し、改善し、好転させ、またはそれに作用するために、本発明に係る化合物、またはその薬学的に許容できる塩の組合せを投与する工程も含み得る。予防的治療は、望ましくないＰＡＲ２活性に関連する疾病または疾患の発症率を低下させ得る。ある実施形態において、本発明の化合物またはその薬学的に許容できる塩の組合せは、本発明の化合物またはその薬学的に許容できる塩の１つのみを用いる予防または治療方法と比較して、ＰＡＲ２活性の阻害の強化を提供し得る。
【００７９】
本明細書に記載される予防または治療方法が、当該技術分野において現在用いられている他の治療法との何種類もの組合せで使用され得ることも、当業者によって理解されよう。
【００８０】
ＰＡＲ２発現および／または活性が増大または減少される条件、および前記活性を減少または増大させることが望ましい条件が、当該技術分野において公知の診断または予測アッセイのいずれかまたはその組合せによって、当業者によって特定され得る。例えば、被験体から得られる生物試料（例えば血液、血清、血漿、尿、唾液、脳脊髄液、脂肪組織、脳組織および／またはそれに由来する細胞）が、ＰＡＲ２発現および／または活性について分析され得る。このような病態としては、以下に限定はされないが、関節炎、結腸炎および炎症性腸疾患、膵炎、肝臓、腎臓および泌尿生殖器系の疾病、心血管疾患、脳卒中、胃潰瘍、喘息、線維症および線維性疾患などの自己免疫または炎症性疾患、てんかん、アルツハイマー病、パーキンソン病、肥満およびＩＩ型糖尿病、代謝障害、消化器疾患、神経変性疾患および呼吸器疾患、皮膚および皮下組織の疾病、筋肉、骨および腱の疾病などの炎症性疾患に関連する他の病態、ならびに胃、結腸、大腸、乳房または膵臓の癌を含む癌などの増殖性疾患が挙げられる。
【００８１】
上記の方法は、以下に限定はされないが、ヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ラットおよびマウスを含む全ての哺乳動物、ならびにニワトリ、鳥類、は虫類および細菌などの下等生物を含む任意の種の予防および治療処置に適していると考えられる。
【００８２】
本発明の別の態様において、本発明の化合物、またはその塩（本明細書において「活性化合物」とも呼ばれる）を含む医薬組成物が提供される。好ましい実施形態において、医薬組成物は、薬学的に許容できる担体、賦形剤、希釈剤および／または補助剤を含み得る。
【００８３】
本発明の医薬組成物は、単独でまたは治療用化合物などの他の化合物とともに用いられ得る。
【００８４】
本明細書において使用される際の「薬学的に許容できる担体」という用語は、好ましくは、医薬品投与に適合する、溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含む。補助的な活性化合物を組成物に組み込むこともできる。
【００８５】
医薬組成物は、一般に、その意図される投与経路と適合するように配合される。投与経路の例としては、非経口、例えば、静脈内、皮内、皮下、経口（例えば、吸入）、経皮（局所）、経粘膜、および直腸投与が挙げられる。非経口、皮内、または皮下適用に使用される溶液または懸濁液は、以下の成分：注射用の水、食塩水、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒などの滅菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウムなどの酸化防止剤；エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩などの緩衝剤および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの張度を調整するための作用物質を含み得る。ｐＨは、塩酸または水酸化ナトリウムなどの、酸または塩基を用いて調整され得る。非経口製剤は、ガラスまたはプラスチックで作製された、アンプル、使い捨て注射器または複数回投与バイアルに封入され得る。
【００８６】
注射用途に適した医薬組成物としては、滅菌注射溶液または分散体の即時調製のための滅菌水溶液（水溶性である場合）または分散体および滅菌粉末が挙げられる。静脈内投与では、好適な担体としては、生理食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ．（商標）（ＢＡＳＦ，Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，Ｎ．Ｊ．）またはリン酸緩衝生理食塩水（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｂｕｆｆｅｒｅｄ  ｓａｌｉｎｅ：ＰＢＳ）が挙げられる。いずれの場合も、組成物は、無菌でなくてはならず、容易な注入性（ｓｙｒｉｎｇａｂｉｌｉｔｙ）が存在する程度の流体であるべきである。それは、製造および貯蔵の条件下で安定性であるべきであり、細菌および真菌などの微生物の汚染作用から保護されなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、または液体ポリエチレングリコールなど）、およびそれらの好適な混合物を含有する溶媒または分散媒であり得る。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散体の場合には必要とされる粒度の維持によってまたは界面活性剤の使用によって維持され得る。微生物の作用の防止は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどの組み込みによって達成され得る。多くの場合、組成物中に、等張剤、例えば、糖類、マンニトール、またはソルビトールなどの多価アルコール、または塩化ナトリウムを含むのが好ましいであろう。注射用組成物の持続的吸収は、吸収を遅延させる作用物質、例えば、モノステアリン酸アルミニウムまたはゼラチンを組成物中に含むことによってもたらすことができる。
【００８７】
滅菌注射溶液は、必要に応じて、上に挙げた成分の１つまたはその組合せとともに適切な溶媒に所要量の活性化合物を組み込んだ後、ろ過滅菌することによって調製され得る。一般に、分散体は、塩基性分散媒および上に挙げたものに由来する必要な他の成分を含有する滅菌媒体に活性化合物を組み込むことによって調製される。滅菌注射溶液の調製のための滅菌粉末の場合、好ましい調製方法は、真空乾燥および凍結乾燥であり、これにより、その予め滅菌ろ過された溶液から、活性成分の粉末に加えて任意のさらなる所望の成分が得られる。
【００８８】
経口組成物は、一般に、不活性希釈剤または食用担体を含む。経口の治療的投与のため、活性化合物は、賦形剤とともに組み込まれ、シロップ、錠剤、トローチ、またはカプセル剤、例えば、ゼラチンカプセル剤の形態で使用され得る。経口組成物は、オリーブ油または他の油、または洗口剤として使用するための流体などの流体担体を用いて調製することもできる。薬学的に適合される結合剤、および／または補助剤材料が、組成物の一部として含まれ得る。錠剤、丸薬、カプセル剤、トローチなどが、以下の成分、または同様の性質を有する化合物：微結晶性セルロース、トラガカントゴムまたはゼラチンなどの結合剤；でんぷんまたはラクトースなどの賦形剤、アルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、またはコーンスターチなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムまたはステロート（ｓｔｅｒｏｔｅ）などの潤滑剤；コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤；スクロースまたはサッカリンなどの甘味料；またはペパーミント、メチルサリチル酸塩、またはオレンジ香料などの着香料のいずれかを含有し得る。
【００８９】
吸入による投与の場合、化合物は、好適な噴射剤、例えば、二酸化炭素などのガスを含有する加圧された容器またはディスペンサー、または噴霧器からエアゾールスプレーの形態で送達される。
【００９０】
全身投与も、経粘膜または経皮手段によって行うことができる。経粘膜または経皮投与の場合、透過されるバリアに適切な浸透剤が、製剤に使用される。このような浸透剤は、一般に、当該技術分野において公知であり、これには、例えば、経粘膜投与のため、洗浄剤、胆汁塩、およびフシジン酸誘導体が含まれる。経粘膜投与が、鼻腔用スプレーまたは坐薬を用いて行われ得る。化合物は、坐薬（例えば、カカオ脂および他のグリセリドなどの従来の坐薬基剤を含む）または直腸投与用の停留かん腸の形態で調製され得る。
【００９１】
経皮投与の場合、活性化合物は、当該技術分野において一般に公知の軟膏剤、軟膏、ゲル、またはクリームへと製剤化される。
【００９２】
一実施形態において、活性化合物は、インプラントおよびマイクロカプセル化送達系を含む、徐放性製剤などの、化合物が身体から急速に排除されるのを防ぐ担体を用いて調製される。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの生分解性の生体適合性ポリマーが使用され得る。このような製剤を調製するための方法は、当業者に明らかである。材料は、Ａｌｚａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社およびＮｏｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．から市販品として得ることもできる。リポソーム懸濁液（ウイルス抗原に対するモノクローナル抗体を用いて感染細胞を標的としたリポソームを含む）を、薬学的に許容できる担体として使用することもできる。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号明細書に記載されるように、当業者に公知の方法にしたがって調製され得る。
【００９３】
投与の容易さおよび投薬量の均一性のために投薬単位形態の経口または非経口組成物を製剤化することが有利である。本明細書において使用される際の「投薬単位形態」は、好ましくは、治療される被験体の単回の投薬として適した物理的に個別の単位を指し；各単位は、必要な医薬担体と合わせて、所望の治療効果を生じるように計算される所定の量の活性化合物を含有する。
【００９４】
本発明に係る医薬組成物は、投与のための説明書とともに、容器、パック、またはディスペンサー中に含まれ得る。
【００９５】
このような化合物の毒性および治療効果は、例えば、ＬＤ５０（個体群の５０％致死量）およびＥＤ５０（個体群の５０％に治療効果のある用量）を決定するために、細胞培養または実験動物において標準的な医薬的手順によって決定され得る。毒性作用と治療効果との用量比は、治療指数であり、それは、比率ＬＤ５０／ＥＤ５０として表され得る。高い治療指数を示す化合物が好ましい。毒性の副作用を示す化合物が使用され得る一方、非感染細胞への考えられる損傷を最小限に抑えるために、このような化合物を罹患組織の部位に標的化し、それによって副作用を軽減する送達系を設計することに注意を払うべきである。
【００９６】
細胞培養アッセイおよび動物試験から得られるデータは、ヒトに使用するためのある範囲の投薬量を配合するのに使用され得る。投薬量は、好ましくは、ほとんどまたは全く毒性を伴わずにＥＤ５０を含む血中濃度の範囲内にある。投薬量は、用いられる剤形および用いられる投与経路に応じてこの範囲内で変動し得る。本発明の方法に使用される任意の化合物では、治療効果のある用量を、細胞培養アッセイから最初に推測することができる。用量は、細胞培養中で決定される際にＩＣ５０（すなわち、症状の半値阻害を達成する試験化合物の濃度）を含む血中血漿濃度範囲を達成するように、動物モデル中で配合され得る。このような情報は、ヒトにおける有用な用量をより正確に決定するのに使用することができる。血漿中濃度が、例えば、高性能液体クロマトグラフィーによって測定され得る。
【００９７】
当業者は、用いられる特定の化合物の活性、被験体の年齢、体重、全体的な健康、性別、および食事、投与の時期、投与経路、排せつ速度、任意の複合薬、調節される発現または活性の程度、疾病または疾患の重症度、前処置および存在する他の疾病を含む特定の要因が、被験体を有効に治療するのに必要な投薬量およびタイミングに影響し得ることを理解するであろう。
【００９８】
上記の適応症では、適切な投薬量は、例えば、用いられる化合物、被験体の年齢、性別、体重および全身的な身体状態、投与形態、病態の性質および／または重症度または所望の効果に応じて変わることになる。これらの特徴のバランスを取ることによって、適切な投薬量を決定することは十分に医師の一般技能の範囲内である。ただし、例として、好適な１日投薬量は、約０．１〜約２０００ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは約０．２〜約１００ｍｇ／体重ｋｇ、より好ましくは約０．５〜約２００ｍｇ／体重ｋｇ、さらにより好ましくは約１〜約５０ｍｇ／体重ｋｇの範囲内である。
【００９９】
本発明に使用される手順の実施例が、これ以降により詳細に説明される。しかしながら、以下の説明があくまで例示的なものであり、上述した本発明の一般性に対する限定として決して解釈されるべきではないことを理解されたい。
【実施例】
【０１００】
一般式（Ｉ）の化合物を調製するための方法
以下の実施例は、本発明の代表例であり、本発明の例示的な化合物を調製するための詳細な方法を提供する。
【０１０１】
一般的なアミノ酸カップリング手順（Ａ）：
化合物を、例えば、ＦｍｏｃまたはＢｏｃ−保護されたアミノ酸を用いて溶液相中で合成することができる。一実施例において、Ｂｏｃ−保護されたイソロイシン（１．２〜１．５当量）を、ＤＭＦ（０．２〜０．５Ｍ）中のＨＢＴＵまたはＢＯＰ（１．５当量）およびＤＩＰＥＡ（１．５当量）を用いて１０分間活性化した。次に、溶液を遊離アミンに加え、反応が完了するまで混合物を撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３で（２回）洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空中で乾燥させた。次に、粗生成物をＤＣＭ中２０％のＴＦＡで処理し、１〜２時間撹拌して、Ｂｏｃ−保護基を除去した。反応混合物をＮ２下で蒸発させることによってＴＦＡを除去した。残渣をＤＣＭに溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３で（２回）洗浄し、ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、ろ過し、真空中で蒸発させた。次に、Ｂｏｃ−保護されたシクロヘキシルアラニンアミノ酸（Ｂｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ）および任意に置換される複素環カルボン酸を、同じ条件下で順次カップリングした。各カップリング反応をＥＳＩ  ＭＳによって監視したところ、大抵の反応は一晩で完了した。
【０１０２】
一般的なＨＰＬＣ精製および分析方法：
全ての粗生成物を、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｃ１８カラム（３００Å、２１．２×２５０ｍｍ）を用いて、調整可能な吸光度検出器（λ  ２１４ｎＭ）を備えた半分取ｒｐＨＰＬＣによって精製した。精製された化合物を、ＨＲＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚまたは６００ＭＨｚ）によって特性決定し、純度を、分析ｒｐＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｃ１８カラム、３００、４．６×２５０ｍｍ、λ  ２１４、２３０および２５４ｎｍ）によって評価した。全ての化合物は、９５％以上の純度であった。
【０１０３】
分析ｒｐＨＰＬＣ方法：５０〜１００％のＢで１０分間、１００％のＢでさらに１０分間
溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ中０．１％のＴＦＡ、溶媒Ｂ：１０％のＨ２Ｏ中０．１％のＴＦＡ、９０％のアセトニトリル（半分取および分析ｒｐＨＰＬＣの場合）。
【０１０４】
高分解能エレクトロスプレーイオン化質量分析（Ｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ  ｉｏｎｉｓａｔｉｏｎ  ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ：ＨＲＭＳ）測定値を、内部標準物質としてギ酸ナトリウムクラスターを用いて、１００μＬ／時におけるＭｅＣＮへの直接注入によって陽イオンモードでＤｉｏｎｅｘ  ＬＣシステム（Ｃｈｒｏｍｅｌｅｏｎ）を備えたＢｒｕｋｅｒ  ｍｉｃｒＯＴＯＦ質量分析計において得た。Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄａｌｔｏｎｉｃｓ  Ｄａｔａ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ３．４ソフトウェアを用いてデータを処理した。質量精度は、１ｐｐｍの誤差より良好であった。
【０１０５】
実施例１．  ５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−フルオロ）フェニル（６）の調製。
【化７】
0005883863.tif 000008
スキーム１．  ａ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｂ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｃ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｄ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｅ）ＤＭＦ中のイソオキサゾール５−カルボン酸、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ
化合物６を、一般的なアミノ酸カップリング手順Ａにしたがって合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ０．７９〜０．８６（ｍ，８Ｈ）、０．８８〜０．９８（ｍ，１Ｈ）、１．０１〜１．２３（ｍ，５Ｈ）、１．２７〜１．３７（ｍ，１Ｈ）、１．３９〜１．４９（ｍ，１Ｈ）、１．６３〜１．７７（Ｈ２ＯピークとのＨの重なり）、１．８１〜１．８８（ｍ，１Ｈ）、４．４０〜４．４５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．６，１４．８Ｈｚ）、４．５１〜４．５７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．０，１４．８Ｈｚ）、４．７０〜４．７６（ｍ，１Ｈ）、６．６３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、６．８７〜６．８９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、６．９１〜６．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ）、７．００〜７．１０（ｍ，２Ｈ）、７．２２〜７．３６（ｍ，３Ｈ）、８．３０〜８．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）。
ＨＲＭＳ：［ＭＨ］＋４８７．２７１５（Ｃ２６Ｈ３６ＦＮ４Ｏ４＋についての計算値）４８７．２７１８（実測値）。
【０１０６】
実施例２．  ５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−メトキシ）フェニル（１８）の調製。
【化８】
0005883863.tif 000009
スキーム２．  ａ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｂ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｃ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｄ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｅ）ＤＭＦ中のイソオキサゾール５−カルボン酸、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ。
化合物１８を、一般的なアミノ酸カップリング手順Ａにしたがって合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ０．８２〜０．８６（ｍ，７Ｈ）、０．８８〜１．００（ｍ，２Ｈ）、１．０４〜１．２２（ｍ，１Ｈ）、１．２５〜１．３７（ｍ，２Ｈ）、１．４０〜１．４６（ｍ，１Ｈ）、１．５９〜１．７３（ｍ，７Ｈ）、１．７７〜１．８４（ｍ，２Ｈ）、３．８６（ｓ，３Ｈ）、４．１９〜４．２３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．８，８．８Ｈｚ）、４．３７〜４．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６、１４．４Ｈｚ）、４．４６〜４．５１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６，１４．４Ｈｚ）、４．６０〜４．６５（ｍ，１Ｈ）、６．１９〜６．２１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、６．５０〜６．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、６．８７〜６．９３（ｍ，３Ｈ）、６．９９〜７．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．２３〜７．２９（ｍ，２Ｈ）、８．３３１〜８．３３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）。
ＨＲＭＳ：［ＭＨ］＋４９９．２９１５（Ｃ２７Ｈ３９Ｎ４Ｏ５＋についての計算値）４９９．２９１５（実測値）
【０１０７】
実施例３．  ５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（２−イソプロポキシ）フェニル（２４）の調製。
【化９】
0005883863.tif 000010
スキーム３．  ａ）２−ヨードプロパン、ＤＢＵ、１４０℃；ｂ）ＮＨ２ＯＨ；ｃ）Ｚｎ、ＨＣＯＯＮＨ４
工程ａ：マイクロ波反応バイアル中に、サリチルアルデヒド（１当量）、ＤＭＦ、ＤＢＵ（１当量）および対応する２−ヨードプロパンを入れた。容器を密閉し、混合物にＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒマイクロ波反応器（１４０℃、１０分間）において照射した。反応の進行を、ＴＬＣ（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ  ４：１、生成物Ｒｆ約０．５）によって監視した。完了したら、反応混合物を冷まし、ＥｔＯＡｃで希釈し、飽和Ｎａ２ＣＯ３で（３回）洗浄して、出発材料サリチルアルデヒドを除去した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、蒸発乾固させたところ、黄色の液体としての生成物（７０％の収率）が得られ、それをさらに精製せずに使用した。
【０１０８】
工程ｂ：得られたアルデヒドを、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１）中のヒドロキシルアミン塩酸塩（２当量）およびＮａＯＨ（４当量）で処理し、室温で１時間撹拌した。完了した後、反応溶液を蒸発乾固させ、次に、ＥｔＯＡｃに再度溶解させ、１ＭのＨＣｌで（２回）、飽和ＮａＨＣＯ３で（２回）および塩水で（１回）洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、蒸発乾固させたところ、ワックス質の固体（９０％の収率）が得られた。
【０１０９】
工程ｃ：出発材料のＭｅＯＨ中のオキシムに、ギ酸アンモニウム（２当量）および亜鉛末（２当量）を加え、反応混合物を１時間還流させた。反応混合物を、セライトパッドを通してろ過し、ＭｅＯＨで洗浄し、ろ液を蒸発させた。不純粗生成物を分取ＨＰＬＣで精製した。一般的なアミノ酸カップリング手順Ａに記載されるように、精製されたアミンを、Ｂｏｃ−保護されたイソロイシンにカップリングして、２４を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）、δ  ０．８１〜０．８７（ｍ，６Ｈ）、０．８７〜１．０１（ｍ，２Ｈ）、１．０６〜１．３４（ｍ，６Ｈ）、１．３６〜１．３８（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ）、１．４０〜１．４９（ｍ，１Ｈ）、１．６３〜１．７３（ｍ，６Ｈ）、１．７６〜１．８４（ｍ，１Ｈ）、４．１９〜４．２２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６，９．０Ｈｚ）、４．３８〜４．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．０，１４．４Ｈｚ）、４．４４〜４．４８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．０，１４．４Ｈｚ）、４．５９〜４．６５（ｍ，２Ｈ）、６．２１〜６．２３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ）、６．５８〜６．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．６Ｈｚ）、６．８６〜６．８９（ｍ，２Ｈ）、６．９１〜６．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．０１〜７．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ）、７．２２〜７．２４（ｍ，１Ｈ）、８．３３〜８．３４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）。
ＨＲＭＳ：［ＭＨ］＋５２７．３２２８（Ｃ２９Ｈ４３Ｎ４Ｏ５＋についての計算値）５２７．３２３１（実測値）；
【０１１０】
実施例４．  ５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（１，３−ジオキサラン）フェニル（２６）の調製。
【化１０】
0005883863.tif 000011
スキーム４．  ａ）ＣＨ２Ｂｒ２、ＣｕＯ、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、１６０℃；ｂ）Ｈ２ＮＯＨ、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ；ｃ）ＮＨ４ＣＨＯ、Ｐｄ／Ｃ。
工程ａ：ＤＭＦ（１６ｍＬ）を含む丸底フラスコ中に、２，３−ジヒドロキシベンズアルデヒド（２．０ｇ、１４．５ｍｍｏｌ）、ジブロモメタン（１．４ｍＬ、１７．４ｍｍｏｌ）、酸化第二銅（０．１１ｇ、１．４５ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２．４ｇ、１７．４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、１６０℃で一晩還流させた。反応混合物を、セライトパッドを通してろ過し、ろ過ケーキをＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。ろ液をＨ２Ｏで（３回）洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、蒸発乾固させたところ、暗褐色の油が得られた。Ｋｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留装置（沸点１２０℃／０．１ｍｍ）を用いて油を蒸留したところ、黄色の油としての生成物（１．５ｇ、６９％の収率）が得られた。
【０１１１】
工程ｂ：得られたアルデヒドを、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１）中のヒドロキシルアミン塩酸塩（２当量）およびＮａＯＨ（４当量）で処理し、室温で１時間撹拌した。完了した後、反応溶液を蒸発乾固させ、次に、ＥｔＯＡｃに再度溶解させ、１ＭのＨＣｌで（２回）、飽和ＮａＨＣＯ３で（２回）および塩水で（１回）洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、蒸発乾固させたところ、白色の固体（７０％の収率）が得られた。
【０１１２】
工程ｃ：出発材料のＭｅＯＨ中のオキシム（２．５ｍｍｏｌ）に、ギ酸アンモニウム（２当量）およびＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ）を加え、反応混合物を、室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、セライトパッドを通してろ過し、ＭｅＯＨで洗浄し、ろ液を蒸発させた。不純粗生成物を分取ＨＰＬＣで精製した。一般的なアミノ酸カップリング手順Ａに記載されるように、精製されたアミンを、Ｂｏｃ−保護されたイソロイシンにカップリングして、２６を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）、δ  ０．８４〜０．９０（ｍ，６Ｈ）、０．９０〜１．０１（ｍ，２Ｈ）、１．０５〜１．２３（ｍ，４Ｈ）、１．２９〜１．３７（ｍ，１Ｈ）、１．４３〜１．５０（ｍ，１Ｈ）、１．６０〜１．７５（ｍ，６Ｈ）、１．７６〜１．８１（ｍ，１Ｈ）、１．８４〜１．９２（ｍ，１Ｈ）、４．２５〜４．２７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．２，９．０Ｈｚ）、４．３９〜４．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６，１５Ｈｚ）、４．４７〜４．５１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６，１５Ｈｚ）、４．６２〜４．６６（ｍ，１Ｈ）、５．９６〜５．９７（ｍ，２Ｈ）、６．１９〜６．２４（ｍ，１Ｈ）、６．５２〜６．５８（ｍ，１Ｈ）、６．７４〜６．８０（ｍ，３Ｈ）、６．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．０３〜７．０８（ｍ，１Ｈ）、８．３３〜８．３４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）。
ＨＲＭＳ：［ＭＮａ］＋５３５．２５２７（Ｃ２７Ｈ３６Ｎ４Ｎａ１Ｏ６＋についての計算値）５３５．２５２８（実測値）。
【０１１３】
実施例５．  式（２７）によって表される５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノメチル−（３，４−ジクロロ）フェニルの調製。
【化１１】
0005883863.tif 000012
スキーム５．  ａ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｂ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｃ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｄ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｅ）ＤＭＦ中のイソオキサゾール５−カルボン酸、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ
化合物２７を、一般的なアミノ酸カップリング手順Ａにしたがって合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ０．７９〜０．８２（ｍ，６Ｈ）、０．８５〜０．９１（ｍ，２Ｈ）、１．０３〜１．１６（ｍ，４Ｈ）、１．２３〜１．２９（ｍ，１Ｈ）、１．４０〜１．４７（ｍ，１Ｈ）、１．４８〜１．５３（ｍ，１Ｈ）、１．５６〜１．７６（ｍ，７Ｈ）、４．１５〜４．１７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、４．２２〜４．３０（ｍ，２Ｈ）、４．５４〜４．５８（ｍ，１Ｈ）、７．１５〜７．１６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．２１〜７．２３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８，７．８Ｈｚ）、７．４７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、８．０４〜８．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、８．５８〜８．６０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ）、８．７５〜８．７６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、８．９３〜８．９４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４）。
ＨＲＭＳ：［ＭＨ］＋５３７．２０３０（Ｃ２６Ｈ３５Ｃｌ２Ｎ４Ｏ４＋についての計算値）５３７．２０２８（実測値）。
【０１１４】
実施例６．  ５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−（４−フェニル）ピペリジン（３０）の調製。
【化１２】
0005883863.tif 000013
スキーム６．  ａ）Ｍｇ、ＴＨＦ、６５℃；ｂ）Ｐｄ／Ｃ、触媒ＨＣｌ、５０ｐｓｉ；ｃ）ＴＨＦ中４ＭのＨＣｌ
工程ａ：グリニャール反応：乾燥した、窒素充填した二つ口丸底フラスコに、削り屑状マグネシウム（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ  ｔｕｒｎｉｎｇ）（５００ｍｇ、２０ｍｍｏｌ）、少量のヨウ素結晶および乾燥ＴＨＦ（３．８ｍＬ）を入れた。温水浴（５５〜６５℃）中で撹拌しながら、無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中のブロモベンゼン（２０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、乾燥したシリンジに入れ、溶液の１／３を、フラスコ中にゆっくりと移して、反応を開始させた（注：色がゆっくりと暗褐色から淡褐色へと変化した）。混合物が沸騰し始めたら、水浴を除去し、混合物を、乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）で希釈した。次に、残っているブロモベンゼン溶液をフラスコにゆっくりと加えた。混合物を２０分間還流させた（６５℃）後、混合物を冷水浴中で冷却し、乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）中の１−Ｂｏｃ−４−ピペリドン（２ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下添加した（その間、白色の固体が形成された）。添加したら、混合物を室温でさらに３０分間撹拌させた。１０％のクエン酸の冷却された溶液を加え、混合物を１分間撹拌した（結果として、粘着性の固体が形成された）。ジエチルエーテルおよび水を加えて、固体を溶解させ、層を分離させた。水層をエーテルで（２回）洗浄した。組み合わされた有機層を、水で（１回）洗浄し、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空中で蒸発させた。粗生成物を、石油スピリット／酢酸エチル（４：１）で溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製したところ、白色の結晶の生成物（０．９６ｇ、３４．５％の収率）が得られた。
【０１１５】
工程ｂ：水素化分解：ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中の、上記の粗生成物（２００ｍｇ）と、１０％のＰｄ／Ｃと、触媒量の濃ＨＣｌ（１．２ｍＬ）との混合物を、５０ｐｓｉで１時間水素化した。Ｐｄ／Ｃを、セライトパッドを通してろ過し、溶媒を真空中で蒸発させた。
【０１１６】
工程ｃ：Ｂｏｃ脱保護：上記の粗生成物を、ＴＨＦ（４ｍＬ）中４ＭのＨＣｌ（４ｍＬ）で１時間処理した。ＴＨＦ溶媒およびＨＣｌを蒸発させ、残渣をＤＣＭに溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３で（２回）洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空中で蒸発させた。一般的なアミノ酸カップリング手順Ａに記載されるように、残渣アミン（１１０．４ｍｇ、９５％の収率）を、Ｂｏｃ−保護されたイソロイシンにカップリングして、３０を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ０．８４〜１．０２（ｍ，７Ｈ）、１．０８〜１．２６（ｍ，４Ｈ）、１．３２〜１．５４（ｍ，２Ｈ）、１．５７〜１．８３（ｍ，１０Ｈ）、１．９４〜２．０５（ｍ，３Ｈ）、２．６８〜２．８３（ｍ，２Ｈ）、３．１６〜３．２６（ｍ，１Ｈ）、４．１１〜４．２０（ｍ，１Ｈ）、４．６４〜４．７２（ｍ，１Ｈ）、４．７３〜４．８０（ｍ，１Ｈ）、４．８７〜４．９３（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、６．７６〜６．８４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ）、６．９３〜６．９５（ｂｒ  ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ）、７．０５〜７．１１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）、７．１７〜７．２５（ｍ，３Ｈ）、７．２９〜７．３４（ｍ，２Ｈ）、８．３３〜８．３４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）。
ＨＲＭＳ：［ＭＨ］＋５２３．３２７９（Ｃ３０Ｈ４３Ｎ４Ｏ４＋についての計算値）５２３．３２８０（実測値）。
【０１１７】
実施例７．  ５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−スピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］（３７）の調製。
【化１３】
0005883863.tif 000014
スキーム７．  ａ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｂ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｃ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｄ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｅ）ＤＭＦ中のイソオキサゾール５−カルボン酸、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ
化合物を、一般的なアミノ酸カップリング手順Ａにしたがって合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）、δ  ０．８５〜１．００（ｍ，８Ｈ）、１．１１〜１．２４（ｍ，６Ｈ）、１．４９〜１．５９（ｍ，３Ｈ）、１．６０〜１．７２（ｍ，６Ｈ）、１．７４〜１．８５（ｍ，４Ｈ）、１．８６〜２．００（ｍ，１Ｈ）、２．０１〜２．２２（ｍ，１Ｈ）、２．７７〜２．８２（ｍ，１Ｈ）、３．１５〜３．２８（ｍ，１Ｈ）、３．５７〜３．６９（ｍ，１Ｈ）、３．９２〜４．００（ｍ，１Ｈ）、４．４０〜４．４７（ｍ，１Ｈ）、４．６８〜４．７６（ｍ，１Ｈ）、４．８８〜４．９２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．６８（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、６．８２〜７．１４（ｍ，４Ｈ）、７．３１〜７．５７（ｍ，１Ｈ）、８．３４〜８．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）。
ＨＲＭＳ：［ＭＨ］＋５６５．３３８４（Ｃ３２Ｈ４５Ｎ４Ｏ５＋についての計算値）５６５．３３８５（実測値）。
【０１１８】
実施例８．  ５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−アミノジメチル−（２−メトキシ）フェニル（３９）の調製。
【化１４】
0005883863.tif 000015
スキーム８．  ａ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｂ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｃ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｄ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｅ）ＤＭＦ中のイソオキサゾール５−カルボン酸、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ
化合物３９を、一般的なアミノ酸カップリング手順Ａにしたがって合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ０．７５〜０．７６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、０．７８〜０．８１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、０．８６〜０．８８（ｍ，４Ｈ）、０．９０〜０．９６（ｍ，２Ｈ）、１．００〜１．１５（ｍ，３Ｈ）、１．１８〜１．２２（ｍ，１Ｈ）、１．３２〜１．３８（ｍ，１Ｈ）、１．４５〜１．５９（ｍ，２Ｈ）、１．６０〜１．７８（ｍ，６Ｈ）、１．８３〜１．８８（ｍ，１Ｈ）、２．８０（ｓ，１Ｈ）、３．０９（ｓ，２Ｈ）、３．８２（ｓ，３Ｈ）、４．３〜４．６５（ｍ，４Ｈ）、６．８６〜６．８８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、６．９４〜６．９６（ｍ，１Ｈ）、７．０１〜７．１１（ｍ，１Ｈ）、７．１９〜７．２０（ｍ，１Ｈ）、７．２６〜７．３３（ｍ，１Ｈ）、８．３３〜８．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ）、８．７８〜８．７９（ｍ，１Ｈ）、８．９６〜８．９９（ｍ，１Ｈ）。
ＨＲＭＳ：［ＭＨ］＋５１３．３０７１（Ｃ２８Ｈ４１Ｎ４Ｏ５＋についての計算値）５１３．３０７１（実測値）。
【０１１９】
実施例９．  ５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｔｈｒ（Ｍｅ）−アミノメチル−（２−メトキシ）フェニル（４０）の調製。
【化１５】
0005883863.tif 000016
スキーム９．  ａ）ＤＭＦ中のＭｅＩ、ＬｉＯｔＢｕ；ｂ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｃ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｄ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｅ）ＤＭＦ中のイソオキサゾール−５−カルボン酸、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ
工程ａ：Ｂｏｃ−Ｔｈｒ−アミノメチル−（２−メトキシ）フェニル（０．５４１ｍｍｏｌ、一般的なアミノ酸カップリング手順Ａにしたがって２−メトキシベンジルアミンおよびＢｏｃ−Ｔｈｒ−ＯＨから調製された）の粗生成物を、ＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解させた。リチウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２８．４ｍｇ、０．５６８ｍｍｏｌ、１．０５当量）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。ヨウ化メチル（３７μＬ、０．５９５ｍｍｏｌ、１．１当量）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、ロタベーパ（ｒｏｔａｖａｐｏｒ）で蒸発乾固させた。
【０１２０】
工程ｂ〜ｅ：一般的なアミノ酸カップリング手順Ａにしたがって、上記の粗生成物を脱保護し、Ｂｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨおよびイソオキサゾール−５−カルボン酸と順次カップリングして、化合物４０を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）、δ  ０．８５〜１．４０（ｍ，９Ｈ）、１．６０〜１．８１（ｍ，７Ｈ）、３．３７（ｓ，３Ｈ）、３．７７〜３．８４（ｍ，１Ｈ，Ｔｈｒのβ−ＣＨ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、４．３８〜４．４６（ｍ，２Ｈ、ＰｈＣＨ２）、４．５０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．４，３．２Ｈｚ，Ｔｈｒのα−ＣＨ）、４．６３〜４．６９（ｍ，１Ｈ，Ｃｈａのα−ＣＨ）、６．８４〜６．９１（ｍ，３Ｈ）、７．０２〜７．１２（ｍ，３Ｈ）、７．２１〜７．２７（ｍ，２Ｈ）、８．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）、δ  １７１．４、１６８．７、１６２．２、１５７．４、１５５．６、１５１．０、１２９．５、１２９．０、１２５．７、１２０．６、１１０．２、１０６．９、７５．６、５６．９、５５．６、５５．２、５１．４、４０．２、３９．７、３４．１、３３．６、３２．５、２６．２、２６．０、２５．９、１４．０。
ＨＲＭＳ：［ＭＨ］＋５０１．２７０８（Ｃ２６Ｈ３７Ｎ４Ｏ６＋についての計算値）５０１．２７０８（実測値）。
【０１２１】
実施例１０．  ５−（３−アミノ−イソオキサゾリル）−Ｃｈａ−Ｉｌｅ−スピロ［インデン−１，４’−ピペリジン］（４２）の調製。
【化１６】
0005883863.tif 000017
スキーム１０．  ａ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｂ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｃ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｄ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｅ）ＤＭＦ中の３−アミノイソオキサゾール−５−カルボン酸、ＢＯＰ／ＤＩＰＥＡ。
化合物を、一般的なアミノ酸カップリング手順Ａにしたがって合成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）、δ  ０．８６〜２．２３（ｍ，２６Ｈ）、３．０５〜３．１６（ｍ，１Ｈ）、３．４４〜３．５９（ｍ，１Ｈ）、４．１９〜４．２６（ｍ，１Ｈ）、４．３７（塊（ｌｕｍｐ）、Ｄ２Ｏと部分的に交換可能な、ＤＯＨと重なったＮＨ２）、４．６０〜４．７７（ｍ，２Ｈ）、４．９３〜５．０１（ｍ，１Ｈ）、６．４７（ｓ，１Ｈ）、６．８２〜６．８７（ｍ，２Ｈ）、７．１８〜７．４９（ｍ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３、アミド結合回転による２つの回転異性体）、δ  １７１．９（０）／１７１．８（４）、１７０．６（８）／１７０．６（４）、１６３．６、１６２．０、１５５．８、１５０．７（５）／１５０．７（０）、１４２．８／１４２．５、１３９．７／１３９．３、１３１．１／１３１．０、１２７．４／１２７．３、１２５．７、１２５．５、１２１．８、１２１．６／１２１．４、９９．９、５３．１、５１．９／５１．８、５１．５／５１．４、４５．６／４５．１、４１．５／４１．４、４０．２／４０．１、３７．９（４）／３７．８（８）、３４．１、３４．０、３３．６（２）／３３．５（９）、３３．４／３３．２、３２．４（２）／３２．４（０）、２６．２、２６．１（３）／２６．１（０）、２６．０、２４．２、１６．０／１５．６、１１．４／１１．２。
ＨＲＭＳ：［ＭＨ］＋５６２．３３８８（Ｃ３２Ｈ４４Ｎ５Ｏ４＋についての計算値）５６２．３３８８（実測値）；
【０１２２】
実施例１１．  ５−イソオキサゾリル−Ｃｈａ−Ｔｈｒ（Ｍｅ）−スピロ［インデン−１，４’−ピペリジン］（４４）の調製。
【化１７】
0005883863.tif 000018
スキーム１１．  ａ）ＭｅＩ、ＬｉＯｔＢｕ、ＤＭＦ；ｂ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｃ）ＤＭＦ中のＢｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ；ｄ）ＤＣＭ中２０％のＴＦＡ；ｅ）ＤＭＦ中のイソオキサゾール−５−カルボン酸、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ
工程ａ：Ｂｏｃ−Ｔｈｒ−スピロ［インデン−１，４’−ピペリジン］（０．２７０ｍｍｏｌ、一般的なアミノ酸カップリング手順Ａにしたがってスピロ［インデン−１，４’−ピペリジン］およびＢｏｃ−Ｔｈｒ−ＯＨから調製された）の粗生成物を、ＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解させた。リチウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２３ｍｇ、０．２８４ｍｍｏｌ、１．０５当量）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。ヨウ化メチル（１８．５μＬ、０．２９７ｍｍｏｌ、１．１当量）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、ロタベーパで蒸発乾固させた。
【０１２３】
工程ｂ〜ｅ：一般的なアミノ酸カップリング手順Ａにしたがって、上記の粗生成物を脱保護し、Ｂｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨおよびイソオキサゾール−５−カルボン酸と順次カップリングして、化合物４４を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）、δ  ０．８８〜１．３２（Ｍ，８Ｈ）、１．３６〜１．５０（ｍ，３Ｈ）、１．６３〜２．１６（ｍ，９Ｈ）、３．０７〜３．１７（ｍ，１Ｈ）、３．４４〜３．５３（ｍ，１Ｈ）、３．３５（ｓ）／３．４０（ｓ，３Ｈ、２つの回転異性体のＯＭｅ）、３．６６（ｍ，１Ｈ，Ｔｈｒのβ−ＣＨ）、４．１７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、４．６５〜４．７２（ｍ，１Ｈ）、４．７２〜４．７９（ｍ，１Ｈ，Ｃｈａのα−ＣＨ）、５．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，４．０Ｈｚ，Ｔｈｒのα−ＣＨ）、６．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）、６．８５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）、６．９６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）、７．１９〜７．４０（ｍ，６Ｈ）、８．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３、アミド結合回転による２つの回転異性体）、δ１７１．９（０）／１７１．８（４）、１７０．６（８）／１７０．６（５）、１６３．６、１６２．１、１５５．８、１５０．８／１５０．７、１４２．８／１４２．５、１３９．７／１３９．３、１３１．１／１３１．０、１２７．４／１２７．３、１２５．７／１２５．５、１２１．８、１２１．６／１２１．４、９９．９、５３．１、５１．９／５１．８、５１．５／５１．４、４５．６／４５．１、４１．５／４１．１、４０．２／４０．１、３７．９（４）／３７．８（８）、３４．１、３４．０、３３．６（２）／３３．５（９）、３３．４／３３．２、３２．４（２）／３２．４（０）、２６．２、２６．１（３）／２６．１（０）、２６．０、２４．２、１６．０／１５．６、１１．４／１１．２。
ＨＲＭＳ：［ＭＨ］＋５４９．３０７１（Ｃ３１Ｈ４１Ｎ４Ｏ５＋についての計算値）５４９．３０７６（実測値）。
【０１２４】
式（Ｉ）のさらなる例示的な化合物が、以下の表１〜４に提供される。
【０１２５】
【表１Ａ】
0005883863.tif 000019
【表１Ｂ】
0005883863.tif 000020
【表１Ｃ】
0005883863.tif 000021
【表１Ｄ】
0005883863.tif 000022
【０１２６】
【表２】
0005883863.tif 000023
【０１２７】
【表３Ａ】
0005883863.tif 000024
【表３Ｂ】
0005883863.tif 000025
【表３Ｃ】
0005883863.tif 000026
【０１２８】
【表４Ａ】
0005883863.tif 000027
【表４Ｂ】
0005883863.tif 000028
【表４Ｃ】
0005883863.tif 000029
【０１２９】
実施例１２．  ＰＡＲ２活性化の測定。
本発明の化合物がＰＡＲ２を活性化する能力を、カルシウム動員アッセイによって評価し得る。１つの細胞型からの細胞内カルシウムの放出を活性化する化合物が作動薬または部分作動薬である一方、このような放出を阻害する化合物が拮抗薬であり得ることが理解される。しかしながら、これらの「作動薬」および「拮抗薬」の効果は、異なる細胞において所与の化合物またはＰＡＲ２配位子で逆になることがあり、または逆の反応が、異なる報告アッセイ（例えばＥＲＫリン酸化またはｃＡＭＰ刺激）を用いて観察され得る。これらのアッセイに使用される全ての細胞培養試薬を、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）およびＳｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ社（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から購入する。細胞株を、ＡＴＣＣ社（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）によって提供される情報に基づいて、３７℃および５％のＣＯ２における培地中で培養する。これらの実験に使用され得る細胞株としては、以下に限定はされないが、ヒト細胞株ＨＴ２９、ＨＥＫ２９３、ＭＭ９６Ｌ、Ｓａｏｓ−２、ＭＧ−６３、ＨｅＬａ、ＪＡＭ、Ａ５４９およびＨＯＰ６２が挙げられる。一般的なアッセイプロトコルは、選択される細胞株に応じてわずかに変わり得る。一般に、細胞培養継代の際、細胞解離溶液（ｃｅｌｌ  ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ：ＣＤＳ，Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ社）をトリプシンの代わりに用いて、表面から細胞を解離させる。リポ多糖（Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ：ＬＰＳ）およびトリプシンを、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ社から購入する。トリコスタチン（Ｔｒｉｃｈｏｓｔａｔｉｎ：ＴＳＡ）およびＰＡＲ２活性化ペプチド、２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２を、社内で合成する。ＥＬＩＳＡセットをＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ社（Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）から購入し、サイトカインアレイキットをＲａｙＢｉｏｔｅｃｈｏ社（Ｎｏｒｃｒｏｓｓ，ＧＡ）から購入する。抗ＰＡＲ抗体をＳａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ，ＣＡ）から購入し、Ａｌｅｘａ−Ｆｌｕｏｒ  ４８８とコンジュゲートした抗ヤギ抗体をＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社から購入する。
【０１３０】
ウェル当たり約２×１０４〜４×１０５個の細胞で、９６ウェルの黒壁透明底プレート中で細胞を一晩播種する。実験の当日に、上清を除去し、細胞を、４μＭ〜２ｍＭのＦｌｕｏ−３ＡＭ、２５μＬのプルロニック酸（ｐｌｕｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、１％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、２．５ｍＭのプロベネシド（ｐｒｏｂｅｎｅｃｉｄ）および２０ｍＭのＨＥＰＥＳ）とともに色素ローディング緩衝液（ｄｙｅ  ｌｏａｄｉｎｇ  ｂｕｆｆｅｒ）（Ｈａｎｋ’ｓ  Ｂａｌａｎｃｅｄ  Ｓａｌｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＨＢＳＳ）中で３７℃で１時間インキュベートする。次に、細胞をＨＢＳＳで２回洗浄し、Ｐｏｌａｒｓｔａｒ蛍光分光計（ＢＭＧ，Ｄｕｒｈａｍ  ＮＣ）に移す。
【０１３１】
作動薬活性を測定するために、様々な濃度における読み取りが開始した１０秒後に、本発明の化合物を個々のウェルに加え、４８０ｎｍまたは４９５ｎｍの励起波長および５２０ｎｍの発光波長におけるプレートの底部からの蛍光をリアルタイムで測定する。ＨＢＳＳを社内で調製し、全ての他の試薬をＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社（Ｃａｒｌｓｂａｄ）から購入する。プレートは、ＤＫＳＨ社（Ｚｕｒｉｃｈ）によって供給される。カルシマイシン（Ａ２３１８７，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて、最大蛍光を測定し、個々の結果をそれに応じて正規化する。一般式（Ｉ）の例示される化合物の結果を、以下の表５および６に示す。さらに、ＰＡＲ２作動薬６についての上述した作動薬アッセイのグラフ表示を、図１に示し、後述する。
【０１３２】
３つの異なる濃度の６を、ＨＴ２９細胞に室温で加える。したがって、各データ点で反復測定を行った。各データ点は、平均±ＳＥＭを表す。蛍光の純変化を、１００μＭのＰＡＲ２作動薬２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２によって得られる最大反応に対するパーセンテージとして計算した。３０μＭにおいて、６は最大５０％の反応率を示しており、これは、６のＥＣ５０が約３０μＭであることを示す。
【０１３３】
【表５Ａ】
0005883863.tif 000030
【表５Ｂ】
0005883863.tif 000031
【０１３４】
【表６】
0005883863.tif 000032
【０１３５】
実施例１３．  ＰＡＲ２作動薬阻害（拮抗作用）の測定。
本発明の化合物がトリプシンまたは合成ＰＡＲ２作動薬によるＰＡＲ２の活性化を阻害する能力を、実施例１２に上述される細胞内カルシウム放出アッセイによって測定する。
【０１３６】
細胞を上で概説したように調製し、次に、トリプシンまたは合成作動薬のいずれかを作動薬ＥＣ８０に等しい濃度で加える前に、推定上の拮抗薬で３０分間処理する。本発明の化合物がＰＡＲ２の活性化を阻害する能力を、以下の表７、８および９に例示する。さらに、合成実施例（１８、２４、２６、２７、３０、３９および４２）によって表されるＰＡＲ２拮抗薬についての上述した拮抗薬アッセイのグラフ表示を図２〜８に示し、以下に詳細に説明する。
【０１３７】
ＰＡＲ２配位子１８。ＰＡＲ２拮抗薬１８によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の阻害のグラフ表示を図２に示す。化合物１８を、実験の前に室温で３０分間ＨＴ２９細胞で予めインキュベートした。次に、細胞を、１μＭのＰＡＲ２作動薬２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２（図２Ａ、ｎ＝５）または１００ｎＭのトリプシン（図２Ｂ、ｎ＝１）で処理した。各データ点は平均±ＳＥＭを表す。蛍光の純変化を、１μＭの２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２または１００ｎＭのトリプシンによって得られる最大反応に対するパーセンテージとして計算した。蛍光の変化（反応率％）を、対数化合物濃度に対してプロットした。半値阻害濃度（ＩＣ５０）値を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖ５における非線形回帰曲線を用いて用量反応から導き出した。
【０１３８】
ＰＡＲ２配位子２４。ＰＡＲ２拮抗薬２４によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の阻害のグラフ表示を図３に示す（ｎ＝１）。化合物２４を、実験の前に室温で３０分間ＨＴ２９細胞で予めインキュベートした。次に、細胞を、１μＭのＰＡＲ２作動薬２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２で処理した。各データ点は平均±ＳＥＭを表す。蛍光の純変化を、１μＭの２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２によって得られる最大反応に対するパーセンテージとして計算した。蛍光の変化（反応率％）を、対数化合物濃度に対してプロットした。半値阻害濃度（ＩＣ５０）値を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖ５における非線形回帰曲線を用いて用量反応から導き出した。
【０１３９】
ＰＡＲ２配位子２６。ＰＡＲ２拮抗薬２６によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の阻害のグラフ表示を図４に示す（ｎ＝１）。化合物２６を、実験の前に室温で３０分間ＨＴ２９細胞で予めインキュベートした。次に、細胞を、１μＭのＰＡＲ２作動薬２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２で処理した。各データ点は平均±ＳＥＭを表す。蛍光の純変化を、１μＭの２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２によって得られる最大反応に対するパーセンテージとして計算した。蛍光の変化（反応率％）を、対数化合物濃度に対してプロットした。半値阻害濃度（ＩＣ５０）値を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖ５における非線形回帰曲線を用いて用量反応から導き出した。
【０１４０】
ＰＡＲ２配位子２７。ＰＡＲ２拮抗薬２７によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の阻害のグラフ表示を図５に示す（ｎ＝２）。化合物２７を、実験の前に室温で３０分間ＨＴ２９細胞で予めインキュベートした。次に、細胞を、１μＭのＰＡＲ２作動薬２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２で処理した。各データ点は平均±ＳＥＭを表す。蛍光の純変化を、１μＭの２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２によって得られる最大反応に対するパーセンテージとして計算した。蛍光の変化（反応率％）を、対数化合物濃度に対してプロットした。半値阻害濃度（ＩＣ５０）値を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖ５における非線形回帰曲線を用いて用量反応から導き出した。
【０１４１】
ＰＡＲ２配位子３０。ＰＡＲ２拮抗薬３０によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の阻害のグラフ表示を図６に示す（ｎ＝８）。化合物３０を、実験の前に室温で３０分間ＨＴ２９細胞で予めインキュベートした。次に、細胞を、１μＭのＰＡＲ２作動薬２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２で処理した。各データ点は平均±ＳＥＭを表す。蛍光の純変化を、１μＭの２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２によって得られる最大反応に対するパーセンテージとして計算した。蛍光の変化（反応率％）を、対数化合物濃度に対してプロットした。半値阻害濃度（ＩＣ５０）値を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖ５における非線形回帰曲線を用いて用量反応から導き出した。
【０１４２】
ＰＡＲ２配位子３９。ＰＡＲ２拮抗薬３９によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の阻害のグラフ表示を図７に示す（ｎ＝１）。化合物３９を、実験の前に室温で３０分間ＨＴ２９細胞で予めインキュベートした。次に、細胞を、１μＭのＰＡＲ２作動薬２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２で処理した。各データ点は平均±ＳＥＭを表す。蛍光の純変化を、１μＭの２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２によって得られる最大反応に対するパーセンテージとして計算した。蛍光の変化（反応率％）を、対数化合物濃度に対してプロットした。半値阻害濃度（ＩＣ５０）値を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖ５における非線形回帰曲線を用いて用量反応から導き出した。
【０１４３】
ＰＡＲ２拮抗薬４２。ＰＡＲ２拮抗薬４２によるＨＴ２９細胞における細胞内Ｃａ２＋放出の阻害のグラフ表示を図８に示す（ｎ＝１）。化合物４２を、実験の前に室温で３０分間ＨＴ２９細胞で予めインキュベートした。次に、細胞を、１μＭのＰＡＲ２作動薬２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２で処理した。各データ点は平均±ＳＥＭを表す。蛍光の純変化を、１μＭの２ｆ−ＬＩＧＲＬＯ−ＮＨ２によって得られる最大反応に対するパーセンテージとして計算した。蛍光の変化（反応率％）を、対数化合物濃度に対してプロットした。半値阻害濃度（ＩＣ５０）値を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖ５における非線形回帰曲線を用いて用量反応から導き出した。
【０１４４】
【表７Ａ】
0005883863.tif 000033
【表７Ｂ】
0005883863.tif 000034
【０１４５】
【表８Ａ】
0005883863.tif 000035
【表８Ｂ】
0005883863.tif 000036
【０１４６】
【表９Ａ】
0005883863.tif 000037
【表９Ｂ】
0005883863.tif 000038
【０１４７】
実施例１４．  本発明の化合物の抗炎症活性の評価。
本発明の化合物が急性および慢性炎症性疾患の両方に関連する症状を改善する能力を、当業者に周知のいくつかの動物モデルによって決定することができ、その一般的な実施例を以下に示す。
【０１４８】
薬物動態
動物
雄および雌のＷｉｓｔａｒラット（８〜９週齢、それぞれ２００〜２５０ｇおよび２５０〜３００ｇ）を、一般に、食物および水を備える保有設備の規格にしたがって１２時間の明暗周期に維持する。
【０１４９】
短期間の薬物動態
雄のＷｉｓｔａｒラットに頸静脈カテーテルを外科的に埋め込む。自由行動動物の留置カテーテルから大量の血液を採取する。（ヘパリン化された）血液試料を、本発明の化合物（１０ｍｇ／ｋｇで経口投与（ｐ．ｏ．））を投与する５分前、ならびに投与の３０分後、１〜６時間後、８時間後および２４時間後に採取する。血液を８Ｋｒｐｍで５分間遠心分離し、血漿をアセトニトリルで３回（ｖ／ｖ）希釈し、後に使用するために−８０℃で貯蔵する。
【０１５０】
長期間の薬物動態
カテーテルを埋め込んでいない動物の一部に、本発明の化合物の経口投与を４日間連続で行う（ｎ＝６）。５日目に、ラットを安楽死させ（ＣＯ２吸入）、心穿刺によって血漿を採取する。脳脊髄液（ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄ：ＣＳＦ）を大槽から採取し、腹腔内脂肪を採取する。清潔な、血液を含まないＣＳＦ試料を、アセトニトリルで２回希釈し、ボルテックスし、８Ｋｒｐｍで５分間遠心分離する。脂肪を、等体積（ｍＬ／ｇ）のＭｉｌｌｉｐｏｒｅ水中で均一化する。試料の一部をアセトニトリル（３×ｗ／ｖ）で希釈し、後に使用するために−８０℃で貯蔵する。
【０１５１】
流体試料の調製
検量線：本発明の化合物を含む各ストック溶液を、アセトニトリル中で９．１５、４．５７、０．９２、０．４６、０．０９、０．０４６、０．００９および０．００５μＭで調製する。薬剤で処置していないラットに由来する新鮮血漿の２００μＬの試料を２００μＬのストック溶液に移した後、４００μＬのアセトニトリルを加える。混合物を１分間ボルテックスし、１０分間超音波で分解し、１３Ｋｒｐｍで５分間遠心分離し、後に使用するために−８０℃で貯蔵する。
【０１５２】
上清をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ水（３×体積）およびｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ｍｅｔｈｙｌ  ｅｔｈｅｒ：ＴＢＭＥ、ＣＨＲＯＭＡＳＯＬＶ（登録商標）Ｐｌｕｓ、ＨＰＬＣ用、９９．９％、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ製、３×体積）で希釈する。試料をボルテックスし、水／アセトニトリル相が凍結されるまでドライアイス上に置いておく。有機相をマイクロチューブ中にデカントし、回転真空濃縮器（Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社によって供給されるＣｈｒｉｓｔ  Ｂｅｔａ−ＲＶＣ）を用いて濃縮する。１００μＬのアセトニトリルを残渣に加え、ボルテックスし、ＬＣＭＳ／ＭＳによって直ぐに分析する。
【０１５３】
急性炎症モデル：ＰＡＲ２誘発性足浮腫
使用される方法は、既述の方法（Ｋｅｌｓｏ，Ｅ．Ｂ．ら，「Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ  ２００７年」，５６，７６５−７１；Ｋｅｌｓｏ，Ｅ．Ｂ．ら，「Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ２００６年」，３１６，１０１７−２４；およびＶｅｒｇｎｏｌｌｅ，「Ｎ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９９９年」，１６３，５０６４−９）に基づくものである。雄のＷｉｓｔａｒラット（群当たりｎ＝３）を使用する。簡潔に述べると、５または１０ｍｇ／ｋｇの本発明の化合物（オリーブ油に溶解させた状態での強制経口投与（ｐ．ｏ．）、約５００μＬ、体重により調整）をラットに与える。対照の動物は、オリーブ油（５００μＬの経口投与（ｐ．ｏ．））のみを受ける。２時間後、ＰＡＲ２作動薬２−フロイル−ＬＩＧＲＬＯ（足当たり、生理食塩水中３５０μｇ、１００μＬ）を、３０Ｇの針を用いて、右足の肉球の足底面に（足蹠皮下投与（ｉ．ｐｌ．）で）注射する。生理食塩水のみを受ける左足が対照としての役割を果たす。足の厚さおよび幅を、デジタルキャリパー（Ｗｏｒｌｄ  Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社，ＵＳＡ）を用いて３０分後および１時間ごとに測定し、膨張の面積（ｍｍ２；厚さに幅を乗算した値）を計算し、各個々の足の基準値からの変化のパーセンテージとして表す。例示的なＰＡＲ２配位子１８、３０、４２および４４についての結果を図９に示す。
【０１５４】
急性炎症モデル：λ−カラギーナン誘発性足浮腫
使用される方法は、既述の方法（Ｋｅｌｓｏ，Ｅ．Ｂ．ら，「Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ」  ３１６：１０１７−１０２４；およびＦｌｉｃｋ，Ｍ．Ｊ．ら，「Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ」  １１７：３２２４−３２３５）に基づくものである。雄のＷｉｓｔａｒラット（群当たりｎ＝４）を使用する。簡潔に述べると、１０ｍｇ／ｋｇの本発明の化合物（オリーブ油に溶解させた状態での強制経口投与（ｐ．ｏ．）、５００μＬ）をラットに与える。対照の動物は、オリーブ油（５００μＬの経口投与（ｐ．ｏ．））のみを受ける。３０分後、λ−カラギーナン（生理食塩水中１％  ｗ／ｖ、１００μＬ）を、３０Ｇの針を用いて、右足の肉球の足底面に（足蹠皮下投与（ｉ．ｐｌ．）で）注射する。上記と同様に、生理食塩水のみを受ける左足が対照としての役割を果たす。足の幅および厚さを、１〜６時間、８時間および２４時間の時点で測定する。データを、基準値からの正規化された面積（ｍｍ２）の変化として表す。
【０１５５】
慢性炎症モデル：コラーゲン誘発性関節炎
プロトコルは、既述のプロトコル（Ｅａｒｐ，Ｊ．Ｃ．ら，「Ｂｉｏｐｈａｒｍ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｐｏｓ」  ２００８年；Ｌｉｎ，Ｈ．Ｓ．ら，「Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ」  ２００７年，１５０，８６２−７２；Ｎｉｓｈｉｋａｗａ，Ｍ．ら，「Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ」  ２００３年，４８，２６７０−８１；およびＯｌｏｆｓｓｏｎ，Ｐ．ら，「Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ」  ２００３年，４８，２３３２−４２）に基づくものである。雌のＷｉｓｔａｒラットを使用する（２００〜２５０ｇ、合計ｎ＝１４）。コラーゲンによる免疫付与を０日目に開始し、その際、２００μｇのコラーゲンを、２００μＬ（５０：５０の０．０５Ｍの酢酸およびフロイント不完全アジュバント）中で、３０Ｇの針を用いて尾の付け根に皮下投与する。シャム手術動物（ｓｈａｍ  ａｎｉｍａｌ）は、コラーゲン抜きの媒体（５０：５０の０．０５Ｍ酢酸およびフロイント不完全アジュバント）を受ける。７日後（７日目）、同じ処置を追加免疫として与える。本発明の化合物（オリーブ油中１０ｍｇ／ｋｇ、５００μＬ、経口投与（ｐ．ｏ．）、体重により調整）を試験被験体に７日目以降毎日投与し、関節炎の対照およびシャム手術動物は、強制投与によるオリーブ油媒体のみを受ける。足の測定（上記のような）、体重、臨床スコアおよび機械的侵害受容閾値を、１０日目〜２８日目に１日おきに測定する。後足のみを測定する。膨張の面積（ｍｍ２）を計算し、基準値からの変化のパーセンテージとして表す。個々の足の膨張が２０％を超えたときに足に関節炎の作用があるとみなし、これは、シャム手術動物群で観察される最大足面積変化（すなわち実験の時間経過のみにより予測される成長）である。
【０１５６】
臨床的測定．
以下の条件を組み込んだ臨床スコアを、専門の研究者によって観測的に測定する：移動度：０：跛行（ｌｉｍｐ）なし、完全な後肢体重支持。１：軽度の跛行、移動度の低下。２：片方の後肢での体重支持の減少／体重支持なし。移動度の低下。３：両方の（２本の）後肢での体重支持なし、移動度ほとんどなし。炎症；０：発赤なし、膨張なし、および関節炎症状なし。１：軽度の発赤および膨張。２：関節炎症状の発現（足指の縮め）、中程度の膨張および発赤。３：重度の膨張および発赤、重度の関節炎症状（足底反射の喪失、足指の縮め、ハンドリング時の後足の回外および内転）。不快感／疼痛；０：発声なし、通常の挙動。１：軽い発声のみ。２：発生の増加およびハンドリング時の軽い後退。３：運動時の自発的な発声（教唆に必要なハンドリングなし）。臨床スコアを、含まれる足の数を３つのスコアに乗算した値の和（最大合計スコアは１８、上記を参照）として表す。
【０１５７】
組織病理学および関節の健康の評価
終点（２８日目）で、ＣＯ２を用いてラットを安楽死させる。後足の皮を剥ぎ、切断し、４％のパラホルムアルデヒド（ｐＨ７．４）に４℃で７日間入れる。足を７２時間脱灰し（１０％のＨＣｌ；０．１８％（ｗ／ｖ）のＥＤＴＡ：Ｈ２Ｏ中０．０９％（ｗ／ｖ）の酒石酸塩）、組織学的分析のためにパラフィンろうに埋め込む。標準的なプロトコルを用いて、切片を１０μｍで切断し、ヘマトキシリンおよびエオシン（ｈａｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ  ａｎｄ  ｅｏｓｉｎ：Ｈ＆Ｅ）、マッソントリクローム染色（Ｍａｓｓｏｎ’ｓ  Ｔｒｉｃｈｒｏｍｅ  ｓｔａｉｎ：ＭＴＣ）またはアルシアンブルー／サフラニン−Ｏで染色する。少なくとも６つの切片の脛骨／距骨／踵骨の関節を、動物ごとに撮像（ｉｍａｇｅ）し、評価し／染色法、処置について盲検下に置かれた専門家によって採点する。
【０１５８】
Ｈ＆Ｅ切片を、以下のとおりに、以下の改変された指針（Ｗｏｏｄｒｕｆｆ，Ｔ．Ｍ．ら，「Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ」  ２００２年，４６，２４７６−８５）を用いて採点する。浮腫；０：健常な組織、血漿細胞浸潤なし。１：滑膜外腔（ｅｘｔｒａ−ｓｙｎｏｖｉａｌ  ｓｐａｃｅ）中への軽度の血漿細胞浸潤。２：滑膜外腔中への中程度の血漿細胞浸滑、膜への浸潤が開始する。３：重度の血漿細胞浸潤、滑膜中の米粒体および炎症細胞の発生。滑膜の過形成；０：正常な組織。１：軽度の滑膜腫脹。２：中程度の滑膜腫脹。３：重度の膨張および滑膜腔の成長。軟骨／骨の侵食；０：正常な軟骨。１：関節軟骨への炎症細胞の軽度の付着。２：炎症細胞の中程度の付着が、関節軟骨の第１の層を侵食し始める。３：重度の炎症細胞の付着ならびに軟骨層、軟骨膜および下層の骨の浸食。パンヌス形成；０：パンヌスなし。１：パンヌスが形成され始める。２：パンヌスが滑膜に入る。３：パンヌスが軟骨／骨を浸食し始める。合計病理組織学的スコアを、全てのスコアの和（合計スコアは１２）として表す。コラーゲン損失を、マッソントリクローム染色した切片において、既述したのと同様の脛骨の関節面の赤色染色（アニリンブルーの損失）の相対的比率にしたがって定性的に採点する。０：関節面における赤色染色なし、１：０〜２５％の表面に現れる赤色、２：２５〜５０％の表面に現れる赤色、３：５０％超の関節面において染色された赤色（最大スコアは３）。アルシアンブルー／サフラニン−Ｏ分染により、既述したのと同様に、肥満細胞の活性化状態を決定した。各切片を、脛骨／距骨の関節の上側および下側の領域で、１００倍で撮像する。動物当たり少なくとも６つの切片を撮像する（ラット当たり１２個を超える分析切片）。細胞をＩｍａｇｅＪ  １．４２ｑソフトウェアを用いて画像から計数する。青色が存在しない赤色の細胞を不活性であるとみなす。青色染色が見えるが、ある程度の赤色染色がまだある細胞を活性であるとみなす。目に見える赤色染色がない（青色のみがある）細胞を脱顆粒されているものとみなす。
【０１５９】
実施例１５．  本発明の化合物の抗増殖活性の評価。
本発明の化合物が異常な細胞増殖を緩和する能力を、限定はされないが、以下に示される一般的な実施例を含む、当業者に周知のいくつかのアッセイによって測定することができる。
【０１６０】
細胞ＤＮＡ中へのトリチウム化したチミジンの組み込み。
初代ヒト腎尿細管細胞を、４８ウェルプレート中で、ホルモン規定無血清（ｈｏｒｍｏｎａｌｌｙ  ｄｅｆｉｎｅｄ  ｓｅｒｕｍ  ｆｒｅｅ）ＤＭＥＭ／Ｆ１２中で９０％コンフルエントになるまで成長させる。次に、それらを追加の成長因子を含まないＤＭＥＭで２回洗浄し、この塩基性媒体中でさらに２４時間培養する。この時点で、無血清ＤＭＥＭ中の本発明の化合物を細胞に加え、次に、それらをさらに２４時間培養する。［メチル−３Ｈ］−チミジン（ＴＲＡ１２０，ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）、媒体のｍＬ当たり４μＣｉ（０．１５ＭＢｑ）を、培養の最後の６時間加える。試験期間の終了時に、媒体を除去し（そして、サイトカイン放出の測定のために−８０℃で貯蔵し）、細胞を氷冷ＰＢＳで２回、次に、氷冷１０％トリクロロ酢酸で３回、１０分間にわたって洗浄する。細胞をもう１回メタノールで洗浄する。次に、細胞層を空気乾燥させ、１％のドデシル硫酸ナトリウムを含有する２００μＬの０．３ＭのＮａＯＨを３７℃で１時間加えることによって可溶化する。混合した後、５０μＬを取り出し、ベータ−計数器で計数するために１ｍＬのシンチレーション流体に入れる。そのままの毎分壊変数（ｒａｗ  ｄｐｍ）に４を乗算し、１０００で除算すると、細胞増殖のプロット値が得られる。
【０１６１】
実施例１６．  ラットの血漿および肝臓のホモジネート中の本発明の化合物の安定性
組織液
血液および肝臓を、薬剤を投与していない雄および雌のＷｉｓｔａｒラット（８〜９週齢、それぞれ２００〜２５０ｇおよび２５０〜３００ｇ）から採取する。血液を８Ｋｒｐｍで５分間遠心分離する。血漿をプールし、後に使用するために−８０℃で貯蔵する。ラットの肝臓を均一化し、３つの体積のＰＢＳで希釈し、ろ布でろ過する。ろ液を安定性試験に直接使用する。
【０１６２】
流体試料の調製
各化合物をＤＭＳＯ中に溶解させて、５ｍＭのストック溶液を作製する。１０μＬのストックをラット血漿または肝臓のホモジネート（４９０μＬ）のいずれかで希釈して、１０μＭ（三重反復）の出発濃度を構成する。混合物をボルテックスし、３７℃でインキュベートする。０分、３０分、６０分および１８０分の各時点で、１００μＬの混合物を取り、３００μＬのアセトニトリルで希釈する。混合物をボルテックスし、遠心分離する。３５０μＬの液体をマイクロチューブに移し、回転真空濃縮器（Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社によって供給されるＣｈｒｉｓｔ  Ｂｅｔａ−ＲＶＣ）を用いて濃縮する。１００μＬのアセトニトリル−水（９：１、ｖ／ｖ）を残渣に加え、ボルテックスし、ＬＣＭＳ／ＭＳによって直ぐに分析する。これらの実験からのデータを、ゼロの時点（ｔ０）でのＬＣＭＳ／ＭＳトレースから記録されるピーク面積のパーセントとして表す。
【０１６３】
一般に、化合物（１８、３０、４２および４４）は、ラット血漿中で安定であり（３時間後に８０％超が存在する）、ラットの肝臓のホモジネート中で様々な程度に分解される（図１０および１１）。結果は、化合物が肝臓中で主に代謝されるという仮説を裏付けるものである。
【０１６４】
文献、作業、材料、デバイス、物品などの説明は、あくまでも本発明の内容を提供するために本明細書に含まれる。これらの事項のいずれかまたは全てが従来技術の基礎の一部を成し、優先日以前に存在していたために本発明に関連する分野に共通の一般的な知識であったことは示唆も提示もされていない。
【０１６５】
本明細書における、任意の従来の刊行物（またはそれから得られる情報）への言及、または公知の任意の事項は、該当する従来の刊行物（またはそれから得られる情報）または公知の事項が、本明細書が関する技術分野に共通の一般的な知識の一部を成すという認識または承認または何らかの形態の示唆として解釈されず、また、解釈されるべきではない。
【０１６６】
本明細書および後続の特許請求の範囲の全体を通して、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という用語、ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの活用形は、記載される整数または工程あるいは整数または工程の群の包含を意味するが、任意の他の整数または工程あるいは整数または工程の群の除外を意味するものと理解されない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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