(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ボタン抽出物と水の重量比が１：５〜１：１２で、ボタン抽出物と、水、水添レシチン及び油相とを混合し、混合後の水添レシチンの濃度が１ｗｔ％〜５０ｗｔ％で、油相の濃度が１ｗｔ％〜５０ｗｔ％で、５０〜５００ａｔｍ下で１００〜８００ｍ／ｓのずり速度で１０〜６０分混合し、
前記油相は、シリコンオイル、鉱物油或いは水添ポリイソブテンのいずれかである構成において、
前記ボタン抽出物を調製する工程が、
前記ボタンの水分の含有量を＜１０％まで乾燥させ、３０〜５０メッシュまで粉砕する工程（１）と、
石油エーテル、ノルマルヘキサン或いはエタノールを用い、摂氏３０〜９０度で２〜８時間をかけて固液分離で抽出する工程（２）と、
液体部分の溶剤を回収（溶媒残留量＜０．１％）してボタンの油溶性成分を得て、摂氏３０〜９０度で１〜４時間をかけて固液分離で固体残渣用の水を抽出し、液体部分を濃縮して抽出物とし、ボタンの水溶性成分を得る工程（３）と、
ボタンの油溶性成分と水溶性成分を混合して前記ボタン抽出物を得る工程（４）と
を備える
ことを特徴とする、ボタン抽出物を含むマイクロエマルションの調製方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法で調製することを特徴とする、ボタン抽出物を含むマイクロエマルション。
【請求項３】
請求項２に記載のボタン抽出物を含むマイクロエマルションを用いたことを特徴とするスキンケア用品又は化粧品。
【請求項４】
前記スキンケア用品や化粧品における、前記ボタン抽出物を含むマイクロエマルションの使用量を０．１ｗｔ％〜１０ｗｔ％とすることを特徴とする、請求項３に記載のスキンケア用品又は化粧品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物抽出物に関し、特に、遺伝子の調節に用い、また化粧品にも用いることができるボタン抽出物を含むマイクロエマルションに関する。
【背景技術】
【０００２】
ボタンは、伝統的な漢方薬材であり、中国薬学大典の記載によると、ボタンの根、葉、花も漢方薬にすることができる。美容スキンケア面における運用も年代をさかのぼることができ、例えば《外台秘要方》《御院要方》等といった古書内にボタンの皮やボタンの花等のスライスを含有した美容処方が記載されている。
【０００３】
現在もボタンは、シャンプー（特許文献１）や美白クリーム（特許文献２）等の洗浄化粧品に活用されているが、その抽出工程、安定性の保護、効果検証等の面においていずれも欠陥が存在している。
【０００４】
ボタンの油溶性と水溶性の抽出物は、異なる効果を持ち、その溶解性も異なるため、化粧品或いはスキンケア用品の配合内に同時に加えることが困難となっている。若しくは化粧品とスキンケア用品を調製するプロセスにおいてそれぞれ異なるステップ内で加えなければならない。
【０００５】
本発明は、システム的な工程と検証方法を設計することで、ボタンの有効成分を全面的に抽出し、また物理的技術を利用して安定性を保護することで、化粧品への活用の便宜性が図られると共に、ＤＮＡマイクロアレイ技術でボタン抽出物とその他の効能物質の遺伝子調節面における働きを迅速且つ正確的に確認でき、また最適配合範囲を見付け出すことができることにある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】中国出願２００４１００９８８３３．２
【特許文献２】中国出願２００５１００００２７１．８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、ボタン抽出物を含むマイクロエマルション及びその調製方法を提供することを目的とする。
【０００８】
本発明は、上記のボタン抽出物を含むマイクロエマルションを遺伝子制御複合体の調製に用いるものである。
【０００９】
本発明は、上記のボタン抽出物を含むマイクロエマルションを化粧品やスキンケア用品の製造にことをもう一つの目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
ボタン抽出物と水の重量比が１：５〜１：１２で、ボタン抽出物と、水、水添レシチン及び油相とを混合し、混合後の水添レシチンの濃度が１ｗｔ％〜５０ｗｔ％で、油相の濃度が１ｗｔ％〜５０ｗｔ％で、５０〜５００ａｔｍ下で１００〜８００ｍ／ｓのずり速度で１０〜６０分混合する。
【００１１】
油相は、シリコンオイル、鉱物油及び水添ポリイソブテンのいずれかから選ぶことができる。
【００１２】
ボタン抽出物の調製方法は、ボタン（根、茎、葉、花を含む）の水分の含有量を＜１０％まで乾燥させ、３０〜５０メッシュまで粉砕する工程（１）と、石油エーテル、ノルマルヘキサン或いはエタノールを用い、摂氏３０〜９０度で２〜８時間をかけて固液分離で抽出する工程（２）と、液体部分の溶剤を回収（溶媒残留量＜０．１％）してボタンの油溶性成分を得て、摂氏３０〜９０度で１〜４時間をかけて固液分離で固体残渣用の水を抽出し、液体部分を濃縮して抽出物とし、ボタンの水溶性成分を得る工程（３）と、ボタンの油溶性成分と水溶性成分を混合する工程（４）と、を備える。
【００１３】
上記の方法で得られるボタン抽出物を含むマイクロエマルションは、粒径１０００〜２０００ｎｍで、ボタン抽出物の含有量は１％〜２５％となる。
【００１４】
このボタン抽出物を含むマイクロエマルションは、ボタンの水溶性成分と油溶性成分の抽出物を同時に含んでおり、スキンケア用品や化粧品の製造に用いることができ、また、一般のボタン抽出物と比べ、スキンケア用品や化粧品としての安定性が高い。このボタン抽出物を含むマイクロエマルションのスキンケア用品や化粧品での使用量は０．１ｗｔ％〜１０ｗｔ％とする。
【００１５】
このボタン抽出物を含むマイクロエマルションとその他の物質とで調合することで、メラニンを形成している遺伝子、皮膚の保湿能力と関係のある遺伝子、皮膚の老化の改善に関係する遺伝子及び皮膚への刺激の緩和に関係する遺伝子の発現量を調節することができる。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の利点は、ボタンの水溶性成分と油溶性成分をマイクロエマルションに調製し、安定性を高め、使いやすいことにある。このマイクロエマルションを使用し化粧品やスキンケア用品を製造すると、効果的に保湿し、メラニンを減らし、皮膚の老化を改善し、皮膚への刺激を緩和することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明の特徴及び効果を更に明確に分かりやすくするため、実施例を添えて説明する。
【実施例１】
【００１８】
ボタン（根、茎、葉、花を含む）の水分の含有量を＜７％まで乾燥させ、２０メッシュまで粉砕した。
【００１９】
エタノールを溶剤として用い、摂氏６０度で６時間をかけて固液分離で抽出した。液体部分を蒸留し溶剤を取り除き、その溶剤を回収（溶媒残留量＜０．１％）してボタンの油溶性成分を得た。
【００２０】
摂氏７０度で３時間をかけて固液分離で固体残渣用の水を抽出し、液体部分を濃縮して抽出物とし、ボタンの水溶性成分を得た。
【００２１】
ボタンの水溶性成分と油溶性成分を混合した。
【００２２】
エタノールは、石油エーテルやノルマルヘキサンを代替として用いることもでき、同様の結果を得られる。
【実施例２】
【００２３】
実施例１で得たボタンの油溶性成分と水溶性成分の混合物１ｋｇに、１０ｋｇの水を入れた。さらに水添レシチン４ｋｇとシリコンオイル５ｋｇを加え混合液とした。水添レシチンとシリコンオイルの混合液における質量濃度はそれぞれ２０％と２５％とした。
【００２４】
混合液をステンレス容器に入れ、５００ａｔｍの圧力を加え、５００ｍ／ｓのずり速度で４０ｍｉｎ混合して、マイクロエマルションを形成し、ボタン抽出物を含むマイクロエマルションを得た。最終的な製品の粒径は１０００〜２０００ｎｍの範囲で、そのボタン抽出物の含有量は５ｗｔ％とした。シリコンオイルは鉱物油を代替として用いることもでき、同様の結果を得られる。
【００２５】
上記の調製で得たマイクロエマルションを乳液とクリーム基質に加え、添加量１０％の実験群とした。これと同時に、市販のマイクロエマルション化していないボタン抽出物を同様の乳液とクリーム基質に加え、添加量０．５％の対照群とした。何も加えない乳液とクリーム基質をブランクとした。
【００２６】
実験群と対照群の試料を透明のプラスチック瓶に置き、２４時間光を照射し、摂氏４０度で４週間負荷テストを実施した。ブランクは日陰の涼しいところで保存した。４０人のボランティアに色合い・においについて評価をしてもらった。すべてのボランティアが、実験群とブランクを比較し、「色合い・におい共に変化なし」または「色合い・においにごくわずか変化」と回答した。すべてのボランティアが、対照群とブランクを比較し、「色合い・におい共に大きな変化」と回答した。すべてのボランティアが、「実験群の外観とにおいは対照群より優れている」と回答した。
【実施例３】
【００２７】
実施例１で得たボタンの油溶性成分と水溶性成分の混合物１．２ｋｇに、７．８ｋｇの水を入れた。さらに水添レシチン０．５ｋｇとシリコンオイル０．５ｋｇを加え混合液とした。水添レシチンとシリコンオイルの混合液における質量濃度はそれぞれ５％と５％とした。
【００２８】
混合液をステンレス容器に入れ、５ａｔｍの圧力を加え、８００ｍ／ｓのずり速度で６０ｍｉｎ混合して、マイクロエマルションを形成し、ボタン抽出物を含むマイクロエマルションを得た。最終的な製品の粒径は１０００〜２０００ｎｍの範囲で、そのボタン抽出物の含有量は１２ｗｔ％とした。
【実施例４】
【００２９】
実施例１で得たボタンの油溶性成分と水溶性成分の混合物１．２ｋｇに、７．８ｋｇの水を入れた。さらに水添レシチン０．５ｋｇと水添ポリイソブテン０．５ｋｇを加え混合液とした。水添レシチンと水添ポリイソブテンの混合液における質量濃度はそれぞれ５％と５％とした。
【００３０】
残りの手順は実施例３と同じで、ボタン抽出物を含むマイクロエマルションを得た。最終的な製品の粒径は１０００〜２０００ｎｍの範囲で、そのボタン抽出物の含有量は１２ｗｔ％とした。
【実施例５】
【００３１】
ヒト表皮角化細胞（ＨＥＫ）の培養株を６ウェルプレートに接種し、その密度は約２００００細胞／ｃｍ２であって、細胞の融合率が７０％に達したとき、少なくとも２グループに分ける工程（１）。
【００３２】
このうちの１つにボタン抽出物を含む有効成分を加えて２４時間処理する。実施例３または４のボタン抽出物を含むマイクロエマルションとウンデシレノイルフェニルアラニン（ＳＥＰＰＩＣ社の製品）を加え、ＤＭＥＭを使用して希釈し、最終的に細胞系の中のボタン抽出物を含むマイクロエマルションの濃度を３ｗｔ％、ウンデシレノイルフェニルアラニンを１ｗｔ％とし、もう１つを対照とする（ブランク培地を加える）工程（２）。
【００３３】
細胞を集めてからＲＮＡを単離させ、ＲＮＡをｃＤＮＡに形質転換し、これにより得られたｃＤＮＡをＴ７ＲＮＡポリメラーゼにより増幅し、アントシアニン−３或いはアントシアニン−５の蛍光標識を使用してシチジン三リン酸を標識し、標識したｃＤＮＡをＤＮＡマイクロアレイのスライドガラス上にハイブリダイゼーションし、Ａｇｉｌｅｎｔのデュアルチャネルレーザー検出ＤＮＡマイクロアレイスキャナシステムを使用してＤＮＡマイクロアレイのスライドガラスをスキャンし、Ｃｙ３標識のレーザー波長は５３２ｎｍとし、Ｃｙ５標識のレーザー波長は６３３ｎｍとして、蛍光強度を記録し、データ分析を行う工程（３）。
【００３４】
その結果、ＧＭ−ＣＳＦ（発現を２０倍引き下げる）、グルタレドキシン（発現を３８倍引き上げる）、チオレドキシン還元酵素１（発現を２４倍引き上げる）など、メラニン形成と関係のある遺伝子の発現量を効果的に調節することができた。
【実施例６】
【００３５】
細胞の培養と検出方法は実施例５と同じで、工程（２）において実施例３或いは実施例４のボタン抽出物を含むマイクロエマルションとビタミンＣを加え、最終的に細胞系の中のボタン抽出物を含むマイクロエマルションの濃度を３ｗｔ％、ビタミンＣを０．５ｗｔ％とする。
【００３６】
その結果、ＧＭ−ＣＳＦ（発現を３０倍引き下げる）、グルタレドキシン（発現を１６倍引き上げる）、チオレドキシン還元酵素１（発現を１０倍引き上げる）など、メラニン形成と関係のある遺伝子の発現量を効果的に調節することができた。
【実施例７】
【００３７】
細胞の培養と検出方法は実施例５と同じで、工程（２）において実施例３或いは実施例４のボタン抽出物を含むマイクロエマルションとパンジー抽出物（フランスＳｉｌａｂ社の製品）を加え、最終的に細胞系の中のボタン抽出物を含むマイクロエマルションの濃度を１ｗｔ％、パンジー抽出物を１ｗｔ％とする。
【００３８】
その結果、Ｄｅｓｍｏｃｏｌｌｉｎ３（発現を１８倍引き上げる）、Ｆｉｌａｇｇｒｉｎ（発現を４倍引き上げる）、ＡＱＰ３（発現を２倍引き上げる）など、皮膚の保湿能力と関係のある遺伝子の発現量を効果的に調節することができた。
【実施例８】
【００３９】
細胞の培養と検出方法は実施例５と同じで、工程（２）において実施例２のボタン抽出物を含むマイクロエマルションとイノンド抽出物（ＢＡＳＦ製品）を加え、最終的に細胞系の中のボタン抽出物を含むマイクロエマルションの濃度を３ｗｔ％、イノンド抽出物を１ｗｔ％とする。
【００４０】
その結果、ＭＭＰ１（発現を３０％引き下げる）、ＭＭＰ２（発現を９０％引き下げる）、ＬＯＸＬ−８（発現を２倍引き上げる）、ＣＯＬ１Ａ２（発現を６０％引き上げる）など、皮膚の老化の改善と関係のある遺伝子の発現量を効果的に調節することができた。
【実施例９】
【００４１】
細胞の培養と検出方法は実施例５と同じで、工程（２）において実施例２のボタン抽出物を含むマイクロエマルションとグリチルリチン酸ジカリウムとビサボロールを加え、最終的に細胞系の中のボタン抽出物を含むマイクロエマルションの濃度を１．５ｗｔ％、グリチルリチン酸ジカリウムを０．５ｗｔ％、ビサボロールを０．５ｗｔ％とする。
【００４２】
その結果、ＩＬ−１８（発現を９０％引き下げる）、Ｃａｓｐａｓｅ１（発現を４倍引き下げる）など、皮膚への刺激の緩和と関係のある遺伝子の発現量を効果的に調節することができた。
【００４３】
実施例１０から１５はそれぞれ実施例２から４で得たボタン抽出物を含むマイクロエマルションを使用して、クレンジング製品、美容製品、クリーム製品及び化粧水の製造に用いる。
【実施例１０】
【００４４】
クレンジング製品の調製
【００４５】
【表１】
0005963868.tif 000002
【実施例１１】
【００４６】
美容製品の調製
【００４７】
【表２】
0005963868.tif 000003
【実施例１２】
【００４８】
クリーム製品の調製
【００４９】
【表３】
0005963868.tif 000004
【実施例１３】
【００５０】
クリーム製品の調製２
【００５１】
【表４】
0005963868.tif 000005
【実施例１４】
【００５２】
化粧水の調製
【００５３】
【表５】
0005963868.tif 000006
【実施例１５】
【００５４】
乳液の調製
【００５５】
【表６】
0005963868.tif 000007