(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）
【化１】
0005890512.tif 000029
［式中、
Ｙは、カルボニル基又はスルホニル基であり；
Ｒ1は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ4アルキル基及びＣ1−Ｃ4アルコキシル基から成る群から選択され；
Ｒ2は、ＯＨ、メトキシル基、−ＯＲ4ＯＨ及び−ＯＲ4ＮＨ2から成る群から選択され、ここで、Ｒ4はＣ1−Ｃ3アルキル基であり；そして
Ｒ3は、Ｈ又はピバロイルオキシベンゼンスルホニル基である］で表されるオキシム系化合物、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項２】
Ｙが、スルホニル基である、請求項１に記載のオキシム系化合物。
【請求項３】
Ｒ1が、Ｈ及びＣ1−Ｃ4アルキル基から成る群から選択される、請求項１〜２の何れか１項に記載のオキシム系化合物。
【請求項４】
Ｒ1が、Ｈ、メチル、エチル及びｎ−プロピルから成る群から選択される、請求項３に記載のオキシム系化合物。
【請求項５】
Ｒ2が、ＯＨ、メトキシル基及び−ＯＲ4ＯＨから成る群から選択される、請求項１〜４の何れか１項に記載のオキシム系化合物。
【請求項６】
Ｒ2の−ＯＲ4ＯＨが、−ＯＣ3Ｈ6ＯＨである、請求項５に記載のオキシム系化合物。
【請求項７】
（Ｅ）−4−（Ｎ−（2−（1−（ヒドロキシイミノ)エチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
(Ｅ)−4−（Ｎ−（2−（1−(ヒドロキシイミノ)プロピル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
（Ｅ）−4−（Ｎ−（2−（1−（ヒドロキシイミノ)ブチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
（Ｅ）−4−（Ｎ−（2−（(ヒドロキシイミノ)メチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
（Ｅ）−4−（Ｎ−（2−（1−(メトキシイミノ)エチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
（Ｚ）−4−（Ｎ−（2−（1−(メトキシイミノ)エチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、及び
（Ｅ）−4−（Ｎ−（2−（1−（3−ヒドロキシプロポキシイミノ)エチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
から成る群から選択される、請求項１に記載のオキシム系化合物。
【請求項８】
請求項１〜７の何れか１項に記載のオキシム系化合物、又は医薬的に許容されるその塩を含む、好中球エラスターゼ阻害活性を有する医薬組成物。
【請求項９】
請求項１〜７の何れか１項に記載のオキシム系化合物、又は医薬的に許容されるその塩を含む、プロテイナーゼ３阻害活性を有する医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１〜７の何れか１項に記載のオキシム系化合物、又は医薬的に許容されるその塩を含む、炎症性疾患の治療のための医薬組成物。
【請求項１１】
前記炎症性疾患が、肺損傷、慢性閉塞性肺疾患、急性呼吸窮迫症候群、肺気腫、嚢胞性線維症、局所脳虚血、虚血−再灌流傷害、糸球体腎炎、リウマチ様関節炎、水疱性類天疱瘡、敗血症、及びヴェーゲナー肉芽腫症から成る群から選択される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記炎症性疾患が、肺損傷である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記炎症性疾患が、急性肺損傷である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
請求項１に記載のオキシム系化合物の製造方法であって、
下記式（Ａ）：
【化２】
0005890512.tif 000030
［式中、
Ｒ1及びＲ3は、式（Ｉ）における定義と同じである］で表される化合物を、
下記式（Ｂ）：
【化３】
0005890512.tif 000031
［式中、
Ｙは、式（Ｉ）における定義と同じである］で表される化合物及びＲ2ＮＨ2の化合物（Ｒ2は、式（Ｉ）における定義と同じである）で表される化合物と反応させることを含む、方法。
【請求項１５】
（ａ）下記式（II）
【化４】
0005890512.tif 000032
[式中、
Ｒ1及びＲ3は、式（Ｉ）におけるＲ1及びＲ3と同じ定義を有する]で表される化合物を得るために、式（Ａ）の化合物を、式（Ｂ）の化合物と反応させ；そして
（ｂ）式（Ｉ）の化合物を得るために、式（II）の化合物と、Ｒ2ＮＨ2の化合物とを反応させることにより行われる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
（ａ）下記式（III ）：
【化５】
0005890512.tif 000033
[式中、
Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は、式（Ｉ）におけるＲ1、Ｒ2及びＲ3と同じ定義を有する]の化合物を形成するために、式（Ａ）の化合物と、Ｒ2ＮＨ2の化合物とを反応させ；そして
（ｂ）式（Ｉ）の化合物を得るために、式（III ）の化合物と、式（Ｂ）の化合物とを反応させることにより行われる、請求項１４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願に対する相互参照
本出願は、２０１４年１月２４日出願の台湾特許出願第１０３１０２６９５号に基づく優先権を主張する。
【０００２】
１．発明の分野
本発明は、オキシム系化合物、より詳細には、抗炎症効果を示す２−アミノベンズアルデヒドオキシム化合物、その製造方法、及びそれを含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
２．関連技術の説明
好中球は、感染に対する人体の防御において重要な役割を果たす。炎症刺激に対する応答において、活性化された好中球は、一連の細胞毒素、例えばスーパーオキシドアニオン（O2・-）、他の反応性酸素種の前駆体、セリンプロテアーゼ及び生理活性脂質を分泌する。
【０００４】
好中球エラスターゼ（ＮＥ、白血球エラクターゼ又はリソソームエラスターゼとしても知られている）（ＥＣ３．４．２１．３７）及びプロテイナーゼ３（白血球プロテイナーゼ３としても知られている）（ＥＣ３．４．２１．７６）の分子量はそれぞれ２９−３３ｋＤａ及び２９−３２ｋＤａである。好中球エラスターゼ及びプロテイナーゼ３の両者は、キモトリプシン様セリンプロテイナーゼに属し、そして通常、好中球のアズール顆粒（azurophil granule）に貯蔵される。
【０００５】
好中球エラスターゼ及びプロテイナーゼ３の活性は、恒常性を維持するために身体における内因性阻害剤のタンパク質（例えば、α１−プロテアーゼ阻害剤及びα２−マクログロブリン）により調節される。過剰のプロテアーゼ放出は、組織損傷を引き起こし、長期の好中球蓄積は、炎症性障害の病因において重要な役割を有する。
【０００６】
好中球エラスターゼ及びプロテイナーゼ３に関連する炎症性障害は、肺（例えば、急性肺障害など）傷害、慢性閉塞性肺疾患、急性呼吸窮迫症候群、肺気腫、嚢胞性線維症、局所脳虚血、虚血 - 再灌流傷害、糸球体腎炎、関節炎（例えば、リウマチ様関節炎）、水疱性類天疱瘡、敗血症及びウェゲナー肉芽腫症を包含する（B. Korkmaz et al. (2008), Biochimie, 90:227-242; A. S. Cowburn et al. (2008), Chest, 134:606-612; Y. Nakano et al. (2009), Journal of Surgical Research, 155:311-317; M. Hayakawa et al. (2010), Shock, 33:14-18; K. J. Kwon et al. (2013), Neurosci. Lett., 548:67-72; B. Korkmaz et al. (2013), Semin. Immunopathol., 35:411-421; B. Korkmaz et al. (2013), Int. Immunopharmacol., doi: 10.1016/j.intimp.2013.07.003を参照のこと）。従って、好中球エラスターゼ及びプロテイナーゼ３の阻害は、炎症性障害の治療のためのドラッグデザインにおいて重要な役割を有する。
【０００７】
シベレスタット（sivelestat）（エラスポール（Elaspol）として市販される）は、好中球エラスターゼのための阻害剤である。しかしながら、シベレスタットの製造方法は、複雑且つ有害であり、またシベレスタットは薬物動態学的効果が低く、器官に対して毒性を有する可能性があり、それにより臨床適用へのその使用が制限されている。シベレスタットは現在、日本及び韓国においては、急性呼吸窮迫症候群に関連した呼吸不全の治療のために使用される（T. Stevens et al. (2011), The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 339:313-320）。
【０００８】
欧州特許第０３４７１６８Ｂ１号は、以下の通り一般式（Ｉ）を有するピバリン酸のフェニルエステル誘導体を開示する：
【０００９】
【化１】
0005890512.tif 000002
【００１０】
式（Ｉ）のフェニルエステル誘導体の各基は、欧州特許第０３４７１６８Ｂ１号の開示の通りに定義される。欧州特許第０３４７１６８Ｂ１号の表１より、２０種の化合物が好中球エラスターゼの活性に対する阻害活性を示すことが証明されている。次の２種の化合物が、２０種の化合物に含まれる：
実施例２（６３）：Ｎ−［０−（ｐ−ピバロイルオキシベンゼン）スルホニルアミノベンゾイル］グリシン、ここでＲ1は、下記式：
【００１１】
【化２】
0005890512.tif 000003
【００１２】
であり、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＨであり、ｍは１であり、そしてＹはＳＯ2である；及び
実施例５（３）：ピバリン酸ｐ−［Ｎ−（Ｏ−カルボキシフェニル）スルファモイル］フェニルエステル、ここでＲ1は、下記式：
【００１３】
【化３】
0005890512.tif 000004
【００１４】
であり、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＨであり、ｍは１であり、そしてＹはＳＯ2である。
Han−Hsiang  Wangは、多くのアントラニレート誘導体（anthranilate）を開示し、ここで下記一般式（II）：
【００１５】
【化４】
0005890512.tif 000005
【００１６】
を有する化合物ＷＨＨ５１、ＷＨＨ５２及びＷＨＨ５３は、好中球エラスターゼの放出を効果的に阻害する能力を有することが証明されている（論文“The Sturcture-activity Relationships Study of Anti-inflammatory Activity Anthranilate Derivatives,” Graduate Institute of Natural Products, Chang Gung University (2010)を参照のこと）。
【００１７】
化合物ＷＨＨ５１においては、環Ａはベンゼン環であり、Ｒ1はＯＣＨ3であり、Ｒ2は４−ＯＣＯＣ（ＣＨ3）3であり、ＷはＣＨであり、ＸはＮＨであり、ＹはＳＯ2であり、且つＺは単結合である。化合物ＷＨＨ５２においては、環Ａはベンゼン環であり、Ｒ1はＯＣＨ2ＣＨ3であり、Ｒ2は４−ＯＣＯＣ（ＣＨ2）3であり、ＷはＣＨであり、ＸはＮＨであり、ＹはＳＯ2であり、且つＺは単結合である。化合物ＷＨＨ５３においては、環Ａはベンゼン環であり、Ｒ2はＮＨＯＨ2ＣＯＯＣＨ3でありＲ2は４−ＯＣＯＣ（ＣＨ3）3であり、ＷはＣＨであり、ＸはＮＨであり、ＹはＳＯ2であり、且つＺは単結合である。
【００１８】
式（Ｉ）及び（II）を有する上述の誘導体の製造は、複雑であり且つ水素ガスの使用のために危険である。さらに、プロテイナーゼ３の阻害及びインビボでの炎症性障害の治療に対するその効果は証明されていない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１９】
従って、炎症性障害の治療において効果的であり、また容易に且つ安全に製造され得る新規化合物を開発することが当該分野において必要である。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
従って、本発明は、プロテイナーゼ３及び好中球エラスターゼの阻害、及び炎症性障害の治療に対して卓越した効果を有する化合物を提供することである。
【００２１】
第１に、本発明は下記式（Ｉ）
【００２２】
【化５】
0005890512.tif 000006
【００２３】
［式中、
Ｙは、カルボニル基又はスルホニル基であり；
Ｒ1は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ4アルキル基及びＣ1−Ｃ4アルコキシル基から成る群から選択され；
Ｒ2は、ＯＨ、メトキシル基、−ＯＲ4ＯＨ及び−ＯＲ4ＮＨ2から成る群から選択され、ここでＲ4はＣ1−Ｃ3アルキル基であり；そして
Ｒ3は、Ｈ又はピバロイルオキシベンゼンスルホニル基である］で表されるオキシム系化合物、又は医薬的に許容されるその塩を提供する。
【００２４】
第２に、本発明はまた、
下記式（Ａ）：
【００２５】
【化６】
0005890512.tif 000007
【００２６】
［式中、
Ｒ1及びＲ3は、式（Ｉ）における定義と同じである］で表される化合物と、
下記式（Ｂ）：
【００２７】
【化７】
0005890512.tif 000008
【００２８】
［式中、
Ｙは、式（Ｉ）における定義と同じである］で表される化合物及びＲ2ＮＨ2の化合物（Ｒ2は、式（Ｉ）における定義と同じである）で表される化合物とを反応させることを含む、式（Ｉ）のオキシム系化合物の製造方法を提供する。
【００２９】
第３に、本発明は、式（Ｉ）のオキシム系化合物、又は医薬的に許容されるその塩を含む、好中球エラスターゼに対する阻害活性を有する医薬組成物を提供する。
【００３０】
第４に、本発明は、式（Ｉ）のオキシム系化合物、又は医薬的に許容されるその塩を含む、プロテイナーゼ３に対する阻害活性を有する医薬組成物を提供する。
【００３１】
第５に、本発明は、式（Ｉ）のオキシム系化合物、又は医薬的に許容されるその塩を含む、炎症性障害の治療のための医薬組成物を提供する。
【００３２】
第６に、本発明は、式（Ｉ）のオキシム系化合物又は医薬的に許容されるその塩の投与を通して好中球エラスターゼ活性を阻害する方法を提供する。
【００３３】
第７に、本発明は、式（Ｉ）のオキシム系化合物又は医薬的に許容されるその塩の投与を通じてプロテアーゼ３活性を阻害する方法を提供する。
【００３４】
第８に、本発明は、式（Ｉ）のオキシム系化合物又は医薬的に許容されるその塩の投与を通じて炎症性障害を治療する方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
本発明の他の特徴及び利点は、本発明の好ましい実施形態の次の詳細な説明を経てのみならず、図面（図１−３）の参照を通じて明らかにされるであろう。
【００３６】
【図１】図１は、病理対照群（ヒト好中球エラスターゼのみ投与）、陽性対照群（ヒト好中球エラスターゼ及びシベレスタット投与）及び実施例群１及び２（ヒト好中球エラスターゼ及び化合物（１）投与）の各群につき、ヒト好中球エラスターゼの注入後１０、２０、３０、４０、５０、６０、９０、１２０及び２４０分においてノギス（vernier caliper）を用いて測定された、マウスの足の厚さの変化における本発明化合物（１）の効果を示す；足の厚さの変化は、ヒト好中球エラスターゼの注入前後の足の厚さの差異として決定され；「＊」は病理対照群との比較でｐ＜０．０５を示し；「＊＊」は病理対照群との比較でｐ＜０．０１を示し；及び「＊＊＊」は病理対照群との比較でｐ＜０．００１を示す。
【００３７】
【図２】図２は、正常対照グループ（生理食塩水投与、ＬＰＳは投与されず）、病理対照群（生理食塩水投与、且つＬＰＳ投与）、陽性対照群（ＬＰＳ投与、且つラベルスタット投与）、及び実施例群（ＬＰＳ投与、且つ化合物（１）投与）の各マウスの肺組織におけるミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）活性に対する化合物（１）の効果を示す：「＊＊」は病理対照群との比較でｐ＜０．０１を示す。
【００３８】
【図３】図３は、４００倍の倍率で光学顕微鏡（ＩＸ81、Olympus）を用いて観察され、且つデジタルカメラ（DP72、Olympus）を用いて撮影された、図２の正常対照群、病理対照群、陽性対照群及び実施例群におけるマウスからの肺組織の写真を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
好ましい実施形態の詳細な説明
本発明のオキシム系化合物は、下記式（Ｉ）：
【００４０】
【化８】
0005890512.tif 000009
【００４１】
［式中、
Ｙは、カルボニル基又はスルホニル基であり；
Ｒ1は、Ｈ、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ4アルキル基及びＣ1−Ｃ4アルコキシル基から成る群から選択され；
Ｒ2は、ＯＨ、メトキシル基、−ＯＲ4ＯＨ及び−ＯＲ4ＮＨ2から成る群から選択され、ここでＲ4はＣ1−Ｃ3アルキル基であり；そして
Ｒ3は、Ｈ又はピバロイルオキシベンゼンスルホニル基である］を有する。
【００４２】
用語「アルキル基」とは、本明細書において言及される場合、直鎖又は分岐鎖成分を有する単価飽和炭化水素基である。従って、用語「Ｃ1−Ｃ4アルキル基」とは、本明細書において言及される場合、１〜４個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖の単価飽和単価水素基であり、用語「Ｃ1−Ｃ3アルキル基」とは、本明細書において言及される場合、１〜３個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖の単価飽和炭化水素である。Ｃ1−Ｃ4アルキル基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びそれらの分岐鎖の異性体を包含するが、それらに限定されない。Ｃ1−Ｃ3アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル及びイソプロピルを包含するが、それらに限定されない。
【００４３】
用語「Ｃ1−Ｃ4アルコキシル基とは、本明細書において言及される場合、化学式−ＯＲ′（式中、Ｒ′は上記で定義されたような、Ｃ1−Ｃ4アルキル基である）を有する基である。Ｃ1−Ｃ4アルコキシルの例は、メトキシル、エトキシル、ｎ−プロポキシル、イソ−プロポキシル、ｎ−ブトキシル、イソ−ブトキシル、ｓｅｃ−ブトキシル及びｔｅｒｔ−ブトキシルを包含するが、それらに限定されない。
【００４４】
好ましくは、Ｙはスルホニル基である。
【００４５】
好ましくは、Ｒ1は、Ｈ又はＣ1−Ｃ4アルキル基である。
【００４６】
本発明の例においては、Ｒ1は、Ｈ、メチル、エチル又はｎ−プロピルである。
【００４７】
好ましくは、Ｒ2は、ＯＨ、メトキシ基又は−ＯＲ4ＯＨである。
【００４８】
本発明の例においては、Ｒ2は、ＯＨ、メトキシ基又は−ＯＣ3Ｈ6ＯＨである。
【００４９】
本発明のオキシム系化合物は、好ましくは、
（Ｅ）−4−（Ｎ−（2−（1−（ヒドロキシイミノ)エチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
（Ｅ）−4−（Ｎ−（2−（1−(ヒドロキシイミノ)プロピル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
（Ｅ）−4−（Ｎ−（2−（1−（ヒドロキシイミノ)ブチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
（Ｅ）−4−（Ｎ−（2−（(ヒドロキシイミノ)メチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
（Ｅ）−4−（Ｎ−（2−（1−(メトキシイミノ)エチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
（Ｚ）−4−（Ｎ−（2−（1−(メトキシイミノ)エチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、及び
（Ｅ）−4−（Ｎ−（2−（1−（3−ヒドロキシプロポキシイミノ)エチル)フェニル)スルファモイル)フェニルピバレート、
から選択される。
【００５０】
本発明のオキシム系化合物は、遊離形で、又は適切な場合、医薬的に許容される塩、溶媒和物、水和物又はそれらの立体異性体として存在することができる。
【００５１】
オキシム系化合物の医薬的に許容できる塩は、無機酸、例えばＨＣｌ、ＨＢｒ、Ｈ2ＳＯ4及びＨ2ＰＯ4との塩、有機酸との塩、例えば酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、及びメタンスルホン酸塩、又はアミノ酸、例えばアルギニン、アスパラギン酸及びグルタミン酸との塩であってもよいが、それらに限定されない。
【００５２】
式（Ｉ）のオキシム系化合物の製造方法は、下記式（Ａ）：
【００５３】
【化９】
0005890512.tif 000010
【００５４】
［式中、
Ｒ1及びＲ3は、式（Ｉ）における定義と同じである］で表される化合物と、
下記式（Ｂ）：
【００５５】
【化１０】
0005890512.tif 000011
【００５６】
［式中、
Ｙは、式（Ｉ）における定義と同じである］で表される化合物、及びＲ2ＮＨ2の化合物（Ｒ2は、式（Ｉ）における定義と同じである）で表される化合物を反応させることを含む。
【００５７】
好ましくは、前記方法は、
（ａ）下記式（II）
【００５８】
【化１１】
0005890512.tif 000012
【００５９】
[式中、
Ｒ1及びＲ3は、式（Ｉ）におけるＲ1及びＲ3の同じ定義を有する]で表される化合物を得るために、式（Ａ）の化合物と、式（Ｂ）の化合物とを反応させ；そして
（ｂ）式（Ｉ）の化合物を得るために、式（II）の化合物と、Ｒ2ＮＨ2の化合物とを反応させることにより行われる。
【００６０】
好ましくは、前記方法は、
（ａ）下記式（III ）：
【００６１】
【化１２】
0005890512.tif 000013
【００６２】
[式中、
Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は、式（Ｉ）におけるＲ1、Ｒ2及びＲ3と同じ定義を有する]の化合物を形成するために、式（Ａ）の化合物と、Ｒ2ＮＨ2の化合物とを反応させ；そして
（ｂ）式（Ｉ）の化合物を得るために、式（III ）の化合物と、式（Ｂ）の化合物とを反応させることにより行われる。
【００６３】
式（Ｉ）のオキシム系化合物は、ヒト好中球エラスターゼの放出を阻害でき、且つインビトロで、ヒト好中球エラスターゼに対する阻害活性を示すことが可能であると証明されている。さらに、式（Ｉ）のオキシム系化合物は、インビボでヒト好中球エラスターゼにより誘発されるリポ多糖（LPS）−誘発急性肺損傷及び足の浮腫を効果的に治療することができた。従って、式（Ｉ）のオキシム系化合物は、炎症性障害を治療できると予測される。
【００６４】
従って、本発明は、式（Ｉ）のオキシム系化合物又は医薬的に許容できるその塩を含む、好中球エラスターゼに対する阻害活性を有する医薬組成物を提供する。本発明はまた、式（Ｉ）のオキシム系化合物又は医薬的に許容できるその塩を含む、プロテイナーゼ３に対する阻害活性を有する医薬組成物を提供する。本発明はまた、式（Ｉ）のオキシム系化合物又は医薬的に許容できるその塩を含む、炎症性障害の治療のための医薬組成物を提供する。
【００６５】
本明細書において使用される場合、用語「治療する」（ｔｒｅａｔ）、「治療」（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）及び「治療すること」（ｔｒｅａｔｉｎｇ）とは、疾患又は障害の臨床学的徴候の少なくとも１つを予防し、低め、改善し、又は制御し、そして病状又は徴候の重症度又は進行を低め、停止し、そして逆転させることをいう。
【００６６】
本発明の炎症性障害は、次のものを包含するが、それらに限定されない：肺損傷、慢性閉塞性肺疾患、急性呼吸窮迫症候群、肺気腫、嚢胞性線維症、局所脳虚血、虚血−再灌流傷害、糸球体腎炎、リウマチ様関節炎、水疱性類天疱瘡、敗血症、及びヴェーゲナー肉芽腫症（B. Korkmaz et al. (2008), Biochimie, 90:227-242; A. S. Cowburn et al. (2008), Chest, 134:606-612; Y. Nakano et al. (2009), Journal of Surgical Research, 155:311-317; M. Hayakawa et al. (2010), Shock, 33:14-18; K. J. Kwon et al. (2013), Neurosci. Lett., 548:67-72; B. Korkmaz et al. (2013), Semin. Immunopathol., 35:411-421; B. Korkmaz et al. (2013), Int. Immunopharmacol., doi: 10.1016/j.intimp.2013.07.003）。好ましくは、炎症性障害は肺損傷、より好ましくは急性肺損傷である。
【００６７】
本発明の医薬組成物は、非経口、経口又は局所投与されてもよく、投与形、例えば注射（例えば、減菌水溶液、分散液等）、減菌粉末、錠剤、トローチ、ピル、カプセル、外用剤等に製剤化されてもよい。
【００６８】
本発明の医薬組成物は、非経口経路、例えば腹腔内、皮下、筋肉内又は静脈内注射により投与されてもよい。この実施形態によれば、本発明の医薬組成物は、腹腔内注射により投与される。
【００６９】
本発明の医薬組成物は、さらに医薬的に許容できる担体を含む。医薬的に許容できる担体は、次の剤の少なくとも１つを包含する：溶媒、緩衝剤、乳化剤、懸濁化剤、分解剤、崩壊剤、分散剤、結合剤、賦形剤、安定化剤、キレート剤、希釈剤、ゲル化剤、防腐剤、湿潤剤、潤滑剤、吸収遅延剤、リポソーム等。医薬的に許容できる担体の例は、次のものを包含するが、それらに限定されない：水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水（PBS）、糖含有溶液、及びアルコール含有水溶液。
【００７０】
本発明は、式（Ｉ）のオキシム系化合物又は医薬的に許容されるその塩を対象に投与することを包含する、対象における好中球エラスターゼ活性又はプロテアーゼ３活性を阻害する方法を提供する。本発明はまた、式（Ｉ）のオキシム系化合物又は医薬的に許容されるその塩を対象に適用することを包含する、対象における炎症性障害を治療する方法を提供する。
【実施例】
【００７１】
製造例
一般的方法
１． シリカゲルカラムクロマトグラフィー処理は、シリカゲル６０を用いて行った（Silicycleから入手可能の篩メッシュ２３０−４００）。
【００７２】
２．1Ｈ−ＮＭＲ及び13Ｃ−ＮＭＲはBrucker AVANCe-400 MHz FT-NMR核磁気共鳴分光計を用いて測定結果を得た。のＣＤＣl3δ７．２６５ｐｐｍ及びＣＤＣｌ3δ７７．９ｐｐｍを内部標準として用い、化学シフトを決定した。結合定数はＪと呼ばれ、単位はＨｚである。
【００７３】
３．エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル（ＥＳＩ−ＭＳ）及び高解像度エレクトロスプレーイオン化質量スペクトル（ＨＲＥＳＩ−ＭＳ）を、それぞれ、ＴＳＱ量子トリプル四重極（TSQ  Quantum Triple Quadrupole）質量分析計及びオービトラップ（Orbitrap）質量分析計（両者とも、Thermo Finnigan LLCから入手可能）を用いて測定結果を得た。
【００７４】
４．式（I）のオキシム系化合物の製造
式（I）の化合物は、次のスキーム１〜３のうちの１つを用いて製造することができる。
【００７５】
スキーム１においては、２−アミノベンズアルデヒド又は２−アミノフェニルケトン（化合物（a１））を、ｐ−ピバロイルオキシベンゼンスルホニルクロリドと反応させ、４−（Ｎ−（２−アシルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレート（化合物（b２））を得る。次に、化合物（a２）をヒドロキシルアミン塩酸塩と反応させ、式（Ｉ）の化合物を得る。製造例１〜４における次の化合物（１）、（２）、（３）及び（４）を、スキーム１の方法を用いて合成した。
【００７６】
【化１３】
0005890512.tif 000014
【００７７】
スキーム２においては、化合物（ａ１）と、メトキシルアミン塩酸塩と反応させ、１−（２−アミノフェニル）エタノン０−メチルオキシム（化合物（ａ３））を得た。次に、化合物（ａ３）を、ｐ−ピバロイルオキシベンゼンスルホニルクロリドと反応させ、式（Ｉ）のオキシム系化合物を得る。製造例５における、幾何異性体である以下の化合物（５）及び（６）を、スキーム２の方法を用いて製造した。
【００７８】
【化１４】
0005890512.tif 000015
【００７９】
スキーム３においては、化合物（a１）を、ヒドロキシルアミン塩酸塩と反応させ、（Ｅ）−１−（２−アミノフェニル）エタノンオキシム（化合物（ａ４））を得る。化合物（ａ４）を、３−クロロプロパン−１−オールと反応させ、（Ｅ）−１−（２−アミノフェニル）エタノン０−３−ヒドロキシプロピルオキシム（化合物（ａ５））を得る。次に、化合物（ａ５）を、ｐ−ピバロイルオキシベンゼンスルホニルクロリドと反応させ、式（Ｉ）の化合物を得る。製造例６における次の化合物（７）を、スキーム３を用いて製造した。
【００８０】
【化１５】
0005890512.tif 000016
【００８１】
化合物（１）、（２）、（３）及び（４）が、スキーム２を経て製造可能であることは注目すべきであり、ここで、メトキシアミン塩酸塩に代えてヒドロキシルアミン塩酸塩が使用される。すなわち、化合物（ａ１）を最初に、ヒドロキシルアミン塩酸塩と反応させ、続いてｐ−ピバルロイルオキシベンゼンスルホニル塩酸塩と反応させる。化合物（７）もまた、スキーム２を経て製造されることができ、ここで、メトキシアミン塩酸塩に代えてＯ−３−ヒドロキシプロピルヒドロキシアミン塩酸塩が使用される。
【００８２】
製造例１
下記式を有する化合物（１）（（Ｅ）−４−（Ｎ−（２−（１−（ヒドロキシイミノ）エチル）フェニル）スルファモイル）フェニルピバレート）の製造：
【００８３】
【化１６】
0005890512.tif 000017
【００８４】
Ａ．４−（Ｎ―（２−アセチルフェニル）スルファモイル）フェニル）ピバレートの製造：
２−アミノアセトフェノン（１mmol）及びｐ−ピバロイルオキシベンゼンスルホニルクロリド（１．５当量）を、ピリジン（５ｍｌ）中に加え、混合物を得、続いて室温で４時間反応させ、次いでピリジンを真空下で留去し、反応生成物を得た。反応生成物をシリカゲルカラム（ｎ―ヘキサン／アセトン＝４：１）を用いて精製し、４−（Ｎ―（２−アセチルフェニル）スルファモイル）フェニル）ピバレート（３３１ｍｇ、収率８９％）を得た。
【００８５】
Ｂ．化合物（１）の製造
４−（Ｎ―（２−アセチルフェニル）スルファモイル）フェニル）ピバレート（０．２mmol）及びヒドロキシルアミン塩酸塩（１．５当量）を、エタノール（５ｍｌ）中に加え、混合物を得、続いて前記混合物を還流下で１４時間加熱し、次いで真空濃縮によりエタノールを留去し、反応生成物を得た。前記反応生成物をシリカゲルカラム（ｎ―ヘキサン／アセトン＝４：１）を用いて精製し、化合物（１）を白色粉末（１０５ｍｇ、収率２７％）として得た。
【００８６】
構造同定
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ：10.86 (1H, s, NH), 8.51 (1H, s, OH), 7.73 (2H, d, J= 8,8 Hz), 7.65 (1H, dd, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.33 (1H, dd, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.28 (1H, td, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.11 (1H, td, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.09 (2H, d, J= 8.8 Hz), 2.05 (3H, s, CH3), 1.33 (9H, s, (CH3)3); 13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ：176,9 (s, -OCO-), 157.3 (s, C=N), 154.9 (s, C-4’), 136.5 (s, C-1’), 135.7 (s, C-2), 130.0 (d, C-4), 129.2 (d, C-2’, 6’), 129.0 (d, C-6), 125.9 (s, C-1), 125.1 (d, C-5), 122.9 (d, C-3), 122.5 (d, C-3’, 5’), 39.6 (s, C(CH3)3), 27.4 (q, (CH3)3), 12.8 (q, CH3); ESI-MS: m/z 390.9 ([M+H]+); HRESI-MS: m/z 391.1322 ([M+H]+) (C19H23O5N2Sの計算値, 391.1330)。
【００８７】
製造例２
下記式を有する化合物（２）（（Ｅ）−４−（Ｎ−（２−（１−（ヒドロキシイミノ）プロピル）フェニル）スルファモイル）フェニルピバレート）の製造：
【００８８】
【化１７】
0005890512.tif 000018
【００８９】
Ａ．１−（２−アミノフェニル）プロパン−１−オンの製造：
２−アミノベンゾニトリル（１mmol）を、無水テトラヒドロフラン（５ｍｌ）中で処理、続いて臭化エチルマグネシウム（重量１０当量）を０℃、窒素雰囲気下で添加し、４時間反応させ、反応生成物を得た。反応生成物のｐＨを、１ＮのＨＣｌを用いてｐＨ３〜４の範囲に調節し、続いて酢酸エチル及び飽和炭酸水素ナトリウムを用いて３回分液した。酢酸エチル層を集め、シリカゲルカラム（ｎ―ヘキサン／アセトン＝４：１）を用いて精製し［１−（２−アミノフェニル）プロパン−１−オン］（８３．５ｍｇ、収率５６％）を得た。
【００９０】
Ｂ．４−（Ｎ−（２−プロピオニルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレートの製造：
４−（Ｎ−（２−プロピオニルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレートを製造するための手順は、製造例１における手順Ａと同様である。２−アミノアセトフェノン（１mmol）に代えて、１−（２−アミノフェニル）プロパン−１−オン（０．５mmol）を用いた点が異なる。４−（Ｎ−（２−プロピオニルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレートを、シリカゲルカラム（ｎ−ヘキサン／アセトン＝４：１）を用いて精製した（２６３ｍｇ、収率６８％）。
【００９１】
Ｃ．化合物（２）の製造：
化合物（２）の製造のための手順は、製造例１における手順Ｂと同様である。４−（Ｎ−（２−アセチルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレート（０．２mmol）に代えて、４−（Ｎ−（２−プロピルフェニル）スルファモイル）フェニルピパレート（０．５mmol）を用いた点が異なる。シリカゲルカラム（ｎ−ヘキサン／アセトン＝４：１）を用いて、白色粉末（１５３ｍｇ、収率３７．８％）の化合物（２）を得た。
【００９２】
構造同定
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ：11.04 (1H, s, NH), 8.40 (1H, s, OH), 7.76 (2H, d, J= 8,8 Hz), 7.67 (1H, dd, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.37 (1H, dd, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.27 (1H, td, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.10 (1H, td, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.09 (2H, d, J= 8.8 Hz), 2.64 (2H, q, J= 7.6 Hz, CH2), 1.32 (9H, s, (CH3)3), 0.99 (3H, t, J=7.6 Hz, CH3); 13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ：176,4 (s, -OCO-), 161.8 (s, C=N), 154.4 (s, C-4’), 136.3 (s, C-1’), 135.9 (s, C-2), 129.6 (d, C-4), 128.8 (d, C-2’, 6’), 128.3 (d, C-6), 124.4 (s, C-1), 123.6 (d, C-5), 122.0 (d, C-3, 3’, 5’), 39.2 (s, C(CH3)3), 27.0 (q, (CH3)3), 19.5 (t, CH2CH3), 10.8 (q, CH2CH3) ; ESI-MS: m/z 405.2 ([M+H]+), 427.2 ([M+Na]+), 830.8 ([M+M+Na]+); HRESI-MS: m/z 405.1500 ([M+H]+) (C20H25O5N2Sの計算値, 405.1500)。
【００９３】
製造例３
下記式を有する化合物（３）（（Ｅ）−４−（Ｎ−（２−（１−（ヒドロキシイミノ）ブチル）フェニル）スルファモイル）フェニルピバレート）の製造：
【００９４】
【化１８】
0005890512.tif 000019
【００９５】
Ａ．１−（２−アミノフェニル）ブタン−１−オンの製造
１−（２−アミノフェニル）ブタン−１−オンの製造方法は、製造例２における手順Ａと同様である。臭化エチルマグネシウムに代えて、プロピルマグネシウムクロリドを用いた点で異なる。１−（２−アミノフェニル）ブタン−１−オンを、シリカゲルカラム（ｎ−ヘキサン／アセトン＝４：１）を用いて精製した（９１ｍｇ、収率５６％）。
【００９６】
Ｂ．４−（Ｎ−（２−ブチリルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレートの製造
４−（Ｎ−（２−ブチリルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレートの製造方法は、製造例１における手順Ａに類似する。２−アミノアセトフェノン（１mmol）に代えて１−（２−アミノフェニル）ブタン−１−オン（０．５mmol）を用いた点で相違する。４−（Ｎ−（２−ブチリルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレートをシリカゲルカラム（ｎ−ヘキサン／アセトン＝５：１）を用いて精製した（２９３ｍｇ、収率７３％）。
【００９７】
Ｃ．化合物（３）の製造
化合物（３）の製造方法は製造例１における手順Ｂと同様である。４−（Ｎ−（２−アセチルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレート（０．２mmol）に代えて、４−（Ｎ−（２−ブチリルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレート（０．５mmol）を用いた点が異なる。化合物（３）をシリカゲルカラム（ｎ−ヘキサン／アセトン＝５：１）を用いて精製し、白色粉末（２９２ｍｇ、収率７０％）の化合物（３）を得た。
【００９８】
構造同定
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 11.07 (1H, s, NH), 7.77 (2H, d, J= 8,8 Hz), 7.68 (1H, dd, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.36 (1H, dd, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.27 (1H, td, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.10 (1H, td, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.09 (2H, d, J= 8.8 Hz), 2.61 (2H, t, J= 7.6 Hz, CH2), 1.35 (2H, sext., J= 7.6 Hz, CH2), 1.32 (9H, s, (CH3)3), 0.89 (3H, t, J=7.6 Hz, CH3); 13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ：176,3 (s, -OCO-), 160.8 (s, C=N), 154.4 (s, C-4’), 136.4 (s, C-1’), 136.0 (s, C-2), 129.6 (d, C-4), 128.7 (d, C-2’, 6’), 128.4 (d, C-6), 124.3 (s, C-1), 123.7 (d, C-5), 122.0 (d, C-3’, 5’), 121.8 (d, C-3), 39.2 (s, C(CH3)3), 27.9 (t, CH2CH2CH3), 27.0 (q, (CH3)3), 19.9 (t, CH2CH2CH3), 14.2 (q, CH2CH2CH3) ; ESI-MS: m/z 419.2 ([M+H]+), 441.2 ([M+Na]+); HRESI-MS: m/z 419.1635 ([M+H]+) (C21H27O5N2Sの計算値, 419.1643)。
【００９９】
製造例４
下記式を有する化合物（４）（（Ｅ）−４−（Ｎ−（（１−（ヒドロキシイミノ）メチル）フェニル）スルファモイル）フェニルピバレート）の製造：
【０１００】
【化１９】
0005890512.tif 000020
【０１０１】
Ａ．４−（Ｎ−（２−ホルミルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレートの製造方法は、製造例１における手順Ａと同様である。２−アミノアセトフェノンに代えて、２−アミノベンズアルデヒドを用いた点が相違する。４−（Ｎ−（２−ホルミルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレートを、シリカゲルカラム（ｎ−ヘキサン／アセトン＝５：１）を用いて精製した（２３０ｍｇ、収率６４％）。
【０１０２】
Ｂ．化合物（４）の製造
化合物（４）の製造方法は、製造例１における手順Ｂと同様である。４−（Ｎ−（２−アセチルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレート（０．２mmol）に代えて、４−（Ｎ−（２−ホルミルフェニル）スルファモイル）フェニルピバレート（０．５mmol）を用いた点が相違する。化合物（４）を、シリカゲルカラム（ｎ−ヘキサン／アセトン＝５：１）を用いて精製し、白色粉末（２１４ｍｇ、収率５７％）の化合物（４）を得た。
【０１０３】
構造同定
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ：10.52 (1H, s, NH), 8.05 (1H, s, H), 7.87 (2H, d, J= 8.8 Hz), 7.64 (1H, br. dd, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.26 (1H, td, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.14 (2H, d, J= 8.8 Hz), 7.13 (1H, dd, J= 1.2, 8.0 Hz), 7.05 (1H, td, J= 1.2, 8.0 Hz), 1.33 (9H, s, (CH3)3); 13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ：176,4 (s, -OCO-), 154.6 (s, C=N), 152.1 (s, C-4’), 136.3 (s, C-1’, 2), 132.1 (d, C-4), 130.5 (d, C-6), 128.9 (d, C-2’, 6’), 123.7 (d, C-5), 122.2 (d, C-3’, 5’), 119.5 (s, C-1), 119.1 (d, C-3), 39.2 (s, C(CH3)3), 27.0 (q, (CH3)3); ESI-MS: 399.1 ([M+Na]+); HRESI-MS: m/z 399.0985 ([M+Na]+) (C18H20N2O5SNaの計算値, 399.0983)。
【０１０４】
製造例５
下記式を有する化合物（５）（（Ｅ）−４−（Ｎ−（２−（１−（メトキシイミノ）エチル）フェニル）スルファモイル）フェニルピバレート）及び化合物（６）（（Ｚ）−４−（Ｎ−（２−（１−（メトキシイミノ）エチル）フェニル）スルファモイル）フェニルピバレート）の製造：
【０１０５】
【化２０】
0005890512.tif 000021
【０１０６】
Ａ．１−（２−アミノフェニル）エタノンＯ−メチルオキシムの製造：
２−アミノアセトフェノン（１mmol）を、エタノール（１０ｍｌ）中に加え、続いてメトキシルアミン塩酸塩（２．５当量）を添加し、混合物を得た。その混合物を８０℃で１２時間、還流下で加熱し、続いて真空濃縮によりエタノールを除去した。次に、反応生成物を水及びジクロロメタン（ＤＣＭ）を用いて３回分液した。有機層を集め、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、続いて濾過し、次いで真空濃縮により溶媒を除去し、１−（２−アミノフェニル）エタノンＯ−メチルオキシム（１５４ｍｇ、収率９４％）を得た。
【０１０７】
Ｂ．化合物（５）及び（６）の製造
化合物（５）及び（６）の製造方法は、製造例１における手順Ａに類似する。２−アミノアセトフェノン（１mmol）に代えて、１−（アミノフェニル）エタノンＯ−メチルオキシム（０．５mmol）を用いた点が相違する。化合物（５）及び（６）を、シリカゲルカラム（ｎ−ヘキサン／アセトン＝４：１）を用いて精製し、白色粉末（２４２ｍｇ、収率６０％）の化合物（５）及び白色粉末（１０ｍｇ、収率２．５％）の化合物（６）を得た。
【０１０８】
構造同定
化合物（５）：
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ：10.77 (1H, s, NH), 7.69 (2H, d, J= 8,8 Hz), 7.65 (1H, br. dd, J= 1.2, 8.4 Hz), 7.30 (1H, br. td, J= 1.2, 8.4 Hz), 7.27 (1H, d, J= 8.4 Hz), 7.11 (1H, td, J= 1.2, 8.4 Hz), 7.08 (2H, d, J= 8.8 Hz), 4.06 (3H, s, OCH3), 2.02 (3H, s, CH3), 1.33 (9H, s, (CH3)3); 13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ：176.2 (s, -OCO-), 156.1 (s, C=N), 154.4 (s, C-4’), 136.4 (s, C-1’), 135.4 (s, C-2), 129.7 (d, C-6), 128.7 (d, C-2’, 6’), 128.5 (d, C-4), 125.0 (s, C-1), 124.5 (d, C-5), 122.3 (d, C-3’, 5’), 121.9 (d, C-3), 62.6 (q, OCH3), 39.2 (s, C(CH3)3), 27.0 (q, (CH3)3), 13.2 (q, CH3); ESI-MS: 403.4 ([M-H]-); HRESI-MS: m/z 403.1322 ([M-H]-) (C20H23O5N2Sの計算値, 403.1331)。
【０１０９】
化合物（６）：
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ：7.66 (2H, d, J= 8.8 Hz), 7.64 (1H, br. dd, J= 1.2, 7.6 Hz), 7.40 (1H, td, J= 1.2, 7.6 Hz), 7.23 (1H, td, J= 1.2, 7.6 Hz), 7.10 (2H, d, J= 8.8 Hz), 7.05 (1H, d, J= 1.2, 7.6 Hz), 3.91 (3H, s, OCH3), 1.57 (3H, s, CH3), 1.36 (9H, s, (CH3)3); 13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ：176.3 (s, -OCO-), 154.6 (s, C=N), 153.6 (s, C-4’), 136.7 (s, C-1’), 132.7 (s, C-2), 130.3 (d, C-1), 130.1 (s, C-6), 128.8 (d, C-2’, 6’), 127.3 (d, C-4), 126.5 (d, C-3), 126.3 (d, C-3), 122.3 (d, C-3’, 5’), 62.1 (q, OCH3), 39.2 (s, C(CH3)3), 27.0 (q, (CH3)3), 21.3 (q, CH3); ESI-MS: 427.1 ([M+Na]+); HRESI-MS: m/z 427.1298 ([M+Na]+) (C18H20N2O5SNaの計算値, 427.1294)。
【０１１０】
製造例６
下記式を有する化合物（７）（（Ｅ）−４−（Ｎ−（２−（１−（３−ヒドロキシプロポキシイミノ）エチル）フェニル）スルファモイル）フェニルピバレート）の製造：
【０１１１】
【化２１】
0005890512.tif 000022
【０１１２】
Ａ．（Ｅ）−１−（２−アミノフェニル）エタノンオキシムの製造
２−アミノアセトフェノン（１．５mmol）及びヒドロキシルアミン塩酸塩（３．７５当量）を、エタノール（５ｍｌ）中に加え、混合物を得た。その混合物を、７０℃で１６時間、還流下で加熱し、続いて真空濃縮によりエタノールを除き、水及び酢酸エチルを用いて３回分液した。有機層を集め、無水硫酸マグネシウムにより乾燥し、続いて濾過し、次いで真空濃縮により溶媒を除去し、（Ｅ）−１−（２−アミノフェニル）エタノンオキシム（２１５ｍｇ、収率９５％）を得た。
【０１１３】
Ｂ．（Ｅ）−１−（２−アミノフェニル）エタノン０−３−ヒドロキシプロピルオキシムの製造
（Ｅ）−１−（２−アミノフェニル）エタノンオキシム（０．２mmol）を、無水アセトニトリル（ＭｅＣＮ）（１０ｍｌ）中に添加し、続いてＫ2ＣＯ3（１．１当量）及び３−クロロプロパン−１−オール（５当量）を添加し、混合物を得た。その混合物を、還流下で３６時間、加熱し、そしてシリカゲルカラム（ｎ−ヘキサン／アセトン＝２：１）を用いて精製し、（Ｅ）−１−（２−アミノフェニル）エタノン０−３−ヒドロキシプロピルオキシム（１６８ｍｇ、収率８１％）を得た。
【０１１４】
Ｃ．化合物（７）の製造
（Ｅ）−１−（２−アミノフェニル）エタノン０−３−ヒドロキシプロピルオキシム（０．２mmol）を、ジクロロメタン（ＤＣＭ）（５ｍｌ）中に添加し、続いてピリジン（１０当量）及び４−（クロロスルフォニルフェニルピバレート（２当量）を添加し、混合物を得た。その混合物を、還流下で１６時間加熱し、そしてシリカゲルカラム（ｎ―ヘキサン／アセトン＝６：１）を用いて精製し、白色粉末（４３ｍｇ、収率４９％）の化合物（７）を得た。
【０１１５】
構造同定
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ：10.82 (1H, s, NH), 7.71 (2H, br. dd, J=8.8 Hz, H-3’, 5’), 7.63 (1H, dd, J=1.2, 8.0 Hz, H-3), 7.33 (1H, dd, J=1.2, 8.0 Hz, H-6), 7.28 (1H, td, J=1.2, 8.0 Hz, H-5), 7.09 (2H, d, J=8.8 Hz, H-2’, 6’), 7.10 (1H, td, J=1.2, 8.0 Hz, H-4), 4.39 (2H, t, J=6.4 Hz, =NOCH2-), 3.82 (2H, t, J=6.0 Hz, -CH2OH), 3.82 (2H, t, J=6.0 Hz, -CH2OH), 2.06 (2H, m, CH2), 2.06 (3H, s, CH3), 1.33 (9H, s, (CH3)3); 13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ：176,3 (s, -OCO-), 156.2 (s, C=N), 154.4 (s, C-4’), 136.4 (s, C-2), 135.4 (s, C-1’), 129.7 (d, C-4), 128.6 (d, C-6), 128.6 (d, C-2’, 6’), 124.8 (d, C-5), 124.4 (s, C-1), 122.0 (d, C-3’, 5’), 121.7 (d, C-3), 72.1 (t, =NOCH2-), 59.8 (-CH2OH), 39.2 (s, C(CH3)3), 32.2 (t, CH2), 27.0 (q, (CH3)3), 13.3 (q, CH3) ; ESI-MS: 449.2 ([M+H]+), 471.2 ([M+Na]+); HRESI-MS: m/z 449.1761 ([M+H]+) (C22H29N2O6Sの計算値, 449.1741)。
【０１１６】
製造例１〜６により製造される化合物（１）〜（７）を、表１に列挙する。
【０１１７】
【表１】
0005890512.tif 000023
【０１１８】
薬理学的実施例
次の分析を行い、化合物（１）〜（７）の生物学的活性を決定した。
【０１１９】
実験材料
１．Ｃａ2+フリーのハンクス平衡塩溶液（ハンクス液）（Ｃａ2+-free Hank's balanced salt solution）：
ｐＨ７．１を有するＣａ2+フリーハンクス液は、表２に示される成分を含む。成分は脱イオン水に溶解された。
【０１２０】
【表２】
0005890512.tif 000024
【０１２１】
２．ハンクス平衡塩溶液（ＨＢＳＳ）
ｐＨ７．４を有するＨＢＳＳは、表３に示される成分を含む。成分は脱イオン水に溶解された。
【０１２２】
【表３】
0005890512.tif 000025
【０１２３】
３．ヒト好中球の調製：
長庚（Chang Gung）医療財団治験審査委員会により承認された認定手続きを経て、健常ヒトボランティア（２０〜３４歳）を募集した。
【０１２４】
静脈穿刺により健常ヒトボランティアから得られた血液を、６５０ｇで１０分間遠心分離し、血小板を含む上層を除くことにより白血球に富む下層を得た。３％デキストランＴ５００溶液を、白血球に富む下層と共に１：１の体積比で混合し、室温で静置した。２５分間の静置後、好中球を含む透明な上清液を、Ficoll-Pague（登録商標）Plus (14-1440-03, GE Healthcare, Sweden)の遠心分離管にゆっくり移し、４００ｇ及び４℃で４０分間、密度勾配遠心分離にかけた。このようにして得られた沈殿物を、低張液すなわち０．２％ＮａＣｌにより処理し、赤血球を溶解し、続いて２００ｇ及び４℃で８分間、遠心分離を用いて溶解された赤血球を除き、好中球を得た。トリパンブル−排除法を用いて決定された９８％以上の生存細胞を有する精製好中球を、Ｃａ2+フリーハンクス液（ｐＨ７．４）に懸濁し、１×１０7個の細胞／ｍｌの濃度を有する好中球懸濁液を得た。その好中球懸濁液を使用前４℃で貯蔵した。
【０１２５】
４．実験動物：
雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス（生後６〜８週、体重２０〜２５ｇ）をBioLasco Taiwan Co., Ltdから購入した。すべてのマウスは以下の条件の空調付室内：１２時間の照明及び１２時間の暗闇の明暗サイクル、２１−２４℃、４０−７０％の相対湿度、及び７５〜１００％での換気率で飼育された。さらに食物及び水は実験動物のすべてに自由裁量で(ad libitum)与えられた。実験動物を含むすべての実験手順は、長庚大学の実験動物センターにより承認され、実験動物の管理と使用のためのＮＩＨ（国立衛生研究所）ガイドに従って実験された。
【０１２６】
一般的な実験操作
統計学的分析：
次の各薬理学的実験を３回反復した。実験データは「平均±平均標準誤差（ＳＥＭ）」により示される。すべてのデータは、スチューデントのｔ−検定又は分散の一方向分析（一方向ＡＮＯＶＡ）、続くテューキー検定（turkey's test）により分析され、各薬理学的実験におけるグループ間の差異が評価された。分析結果がｐ＜０．０５を示す場合、統計的に有意である。
【０１２７】
薬理試験１：抗炎症活性に対する化合物（１）〜（７）の効果
Ａ．エラスターゼ活性阻害に対する化合物（１）〜（７）の効果：
各化合物（１）〜（７）を、５０μｌの緩衝液Ａ（２０ ｍＭ のトリス−ＨＣｌ (ｐＨ ７．４)、０．１％ ＮａＮ3 及び ５ ｍＭの ＣａＣｌ2を含む）中に添加し、各化合物（１）〜（７）について０．０２、０．２、２又は２０μＭの濃度を有する化合物溶液を得、続いてそれらの化合物溶液５０μｌを９６ウェルプレートに添加した。同じ体積の緩衝液Ａ及びシベレスタット（化合物（１）〜（７）と同じ溶媒条件及び濃度下で）をそれぞれ対照群及び陽性対照群として使用した。９６ウェルプレートの各ウェルに、さらに２５μｌのヒト好中球エラスターゼ（Enzo、２００ｎＭ、２０ ｍＭ のトリス−ＨＣｌ （ｐＨ ７．４）及び ０．１％ ＮａＮ3を含む緩衝液Ｂ）及び２５μｌのMeO-Suc-Ala-Ala-Pro-Val-p-ニトロアニリド(５００ μＭ、緩衝液Ｂ中で調製)を添加し、続いてインキュベーター（３０℃）において３０分間反応させた。ＥＬＩＳＡリーダー（ThermoLabsystem, USA）を用いて４０５ｎｍでの光吸収の変化を検出した（ＯＤ405）。
【０１２８】
ＩＣ50値、即ち対照群に対してＯＤ405での吸光度の５０％を低めるオキシム系化合物の濃度を示す値を記録した。結果は表４に示される。
【０１２９】
【表４】
0005890512.tif 000026
【０１３０】
表4は、化合物（１）〜（７）がヒト好中球エラスターゼの活性を効果的に阻害することができたことを示す。特に化合物（１）はシベレスタットよりも良好な阻害効果を有する。
【０１３１】
Ｂ．ヒト好中球エラスターゼ（ＮＥ）放出に対する化合物１〜６の効果：
各化合物（１）〜（６）を１００％ＤＭＳＯに溶解し、各化合物（１）〜（６）について、０．０１、０．０３、０．１、０．３、１、３又は１０ｍＭの濃度を有するストック化合物溶液を得た。「実験材料」セクション下「３．ヒト好中球の調製」において得られた７５０μｌの好中球懸濁液を、２００μＭのMeO-Suc-Ala-Ala-Pro-Val-p-nitroanilide (454454, Calbiochem Limited,７５０μｌの ＨＢＳＳに溶解され、ヒト好中球のための基質として機能する)と共に、１：１の体積比で添加し（最終的に体積１．５ｍｌとする）、３７℃で２分間撹拌し、続いて前述の化合物溶液１．５μｌを添加し、３７℃で２分間反応させた。対照群においては、化合物溶液に代えて１００％ＤＭＳＯを用いた。さらに、陽性対照群として、化合物溶液に代えてシベレスタット（ＤＭＳＯにおいて０．０１、０．０３、０．１、０．３、１、３又は１０ｍＭの濃度を有する）を用いた。反応混合物をサイトカラシンＢ（ＣＢ、０．５ｍｇ／ｍｌ）１．５μｌと共に添加し、３分間インキュベートし、続いてホルミル−Ｌ−メチオニル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニン(ＦＭＬＰ、１００μＭ) １．５μｌを添加し、１０分間反応させ好中球を活性化した。４０５ｎｍでの最終混合物についての吸光度の変化を、分光光度計（U-3010, Hitachi）を用いて測定した。ＩＣ50値、即ち対照群と比較して最終混合物の吸光度を５０％低める化合物の濃度を示す値を記録した。結果は表５に示される。
【０１３２】
【表５】
0005890512.tif 000027
【０１３３】
表５の結果から、化合物（１）〜（６）がヒト好中球エラスターゼの放出を効果的に阻害できたことが見出される。特に、化合物（１）は、シベレスタットよりも良好な効果を有する。
【０１３４】
前述の結果によれば、化合物（１）〜（７）は、ヒト好中球エラスターゼの活性を阻害することができ、且つその放出を制御することができたため、式（Ｉ）のオキシム系化合物は抗炎症活性を示すことが予測される。
【０１３５】
薬理試験２：プロテイナーゼ３活性の阻害に対する化合物（１）の効果
化合物（１）を、５０μｌの緩衝液Ｃ［１００ ｍＭ の４−（２−ヒドロキシエチル)−１−ピペラジンエタンスルホン酸(ＨＥＰＥＳ、 ｐＨ ７．５)、５００ ｍＭ のＮａＣｌ、 １０％ ＤＭＳＯ及び１７０ ｍＭの ５，５’− ジチオビス−（２−ニトロ安息香酸) (ＤＴＮＢ)を含む］と共に混合し、０．０２、０．２、２又は２０μＭの濃度を有する化合物溶液を得た。次に、５０μｌの化合物溶液を９６ウェルプレートの各ウェルに添加した。同じ体積を有するジベレスタット（化合物（１）の溶媒条件及び濃度と同じ条件及び濃度下での）を、それぞれ対照群及び陽性対照群として使用した。２５μｌのプロテイナーゼ３（Ｍｅｒｃｋ，２００ｎＭ、緩衝液Ｃ中で調製）を、９６ウェルプレートの各ウェルに添加し、続いて２５μｌのBoc-Ala-Ala-Nve-SBzl（４００μＭ、緩衝液Ｃ中で調製）を添加した。９６ウェルプレートを３０℃で１８０分間、インキュベーターに配置した。４０５ｎｍでの吸光度（ＯＤ405）の変化を、ＥＬＩＳＡリーダーにより測定した。
【０１３６】
ＩＣ50値、即ち、対照群と比較して最終混合物の吸光度を５０％低める化合物の濃度を示す値を記録した。結果は表６に示される。
【０１３７】
【表６】
0005890512.tif 000028
【０１３８】
表６の結果から、化合物１がプロテイナーゼ３の活性を効果的に阻害することができ、且つシベレスタットよりも良好な活性を有することが示される。
【０１３９】
上記結果によれば、式（Ｉ）のオキシム系化合物が好中球エラスターゼ及びプロテイナーゼ３の活性を阻害することができ、それにより抗炎症効果を示し、炎症性障害を治療するために使用可能であることが示される。
【０１４０】
薬理試験３：ヒト好中球エラスターゼにより誘発される足の浮腫の治療に対する化合物（１）の効果
炎症性障害の治療に対する化合物（１）のさらなる効果を証明するために、化合物（１）についてさらに動物実験を行った。特にヒト好中球エラスターゼにより誘発されるマウスの足の浮腫の治療に対する化合物（１）の効果を測定した。
【０１４１】
雄Ｃ５７／ＢＬ／６マウスを、病理対照群、陽性対照群及び実験群１及び２を含む４種の群（各群ｎ＝６）に無作為に分けた。マウスを、腹腔内注射によりペントバルビタール（５０ｍｇ／ｋｇ）で麻酔した。病理対照群及び陽性対照群におけるマウスを、それぞれ２５μｌの生理食塩水及びシベレスタット（ＤＭＳＯ／生理食塩水（ｖ／ｖ＝７：３）中で調製、用量１００ｍｇ／ｋｇ）により腹腔内注射した。実施例群１及び２におけるマウスを、それぞれ２５μｌの５０ｍｇ／ｋｇ及び１００ｍｇ／ｋｇの化合物（１）（ＤＭＳＯ／生理食塩水（ｖ／ｖ＝７：３）中で調製）により腹腔内注射した。投与後６０分、２５μｌのヒト好中球エラスターゼ（０．００７５Ｕ、５μｇ／ｍｌ、生理食塩水中で調製）を各マウスの後足中に注射し、足に浮腫を誘発した。
【０１４２】
ヒト好中球エラスターゼの注射前、及びヒト好中球エラスターゼの注射後１０、２０、３０、４０、５０、６０、９０、１２０及び２４０分における各グループからの各マウスの右後足の厚さを、ノギス（ＳＬ−Ａ、Ｉｎｓｉｚｅ）を用いて測定した。足の厚さの変化（以降、浮腫度という）を、注射後の足の厚さから注射前の足の厚さを差し引くことにより決定した。
【０１４３】
結果：
図１は、ヒト好中球エラスターゼの注射後１０、２０、３０、４０、５０、６０、９０、１２０及び２４０分で測定される浮腫度を示す。図１に示されるように、実施例群１及び２におけるマウスは、病理対照群における浮腫度に比較して、比較的低い浮腫度を有する。より詳細には、１００ｍｇ／ｋｇでの化合物（１）は、シベレスタットよりも浮腫度の低減において優れた効果を示す。実験データは、化合物（１）がヒト好中球エラスターゼにより誘発された足の浮腫を効果的に改善することを示す。従って、本発明の式（Ｉ）のオキシム系化合物は、ヒト好中球エラスターゼの活性を阻害することにより、インビボで炎症活性を有し、それにより炎症性障害に対する治療効果を達成することができる。
【０１４４】
薬理試験４：リポ多糖類（ＬＰＳ）により誘発された急性肺損傷の治療に対する化合物（１）の効果
Ａ．急性肺損傷の誘発
雄Ｃ５７／ＢＬ／６マウスを、病理対照群、陽性対照群、正常対照群及び実施例群を包含する４種の群（各群当たりｎ＝６）にランダムに分けた。マウスを、ペントバルビタール（５０ｍｇ／ｋｇ）腹腔内注射により麻酔した。病理対照群及び正常対照群からのマウスに、５０μｌの生理食塩水により腹腔内注射した。陽性対照群からのマウスに、シべレスタット［ＤＭＳＯ／生理食塩水（ｖ／ｖ＝７：３）中で調製、用量１００ｍｇ／ｋｇ］を腹腔内注射した。実施例群におけるマウスに、化合物（１）［ＤＭＳＯ／生理食塩水（ｖ／ｖ＝７：３）中で調製、用量１００ｍｇ／ｋｇ］を腹腔内注射した。
【０１４５】
注射の６０分後、各群からの各マウスを、気管開口し気管に開口部を形成し、ＰＥ１０カテーテルをその開口部中に挿入した。正常な対照群における各マウスに、ＰＥ１０カテーテルを通して５０μｌの生理食塩水を注入した。５０μｌのＬＰＳ（生理食塩水中で調製；８００μｌ／マウス）を、病理対照群、陽性対照群及び実施例群における各マウスにＰＥ１０カテーテルを通して投与することにより急性肺損傷を引起した。
【０１４６】
ＰＥ１０カテーテルを通してのＬＰＳ又は生理食塩水投与の６時間後、マウスをと殺した。各マウスの胸を開口し、左肺門をクランプすることにより肺の左側を得た。０．５ｇの取得された左肺組織を、次のＭＰＯ活性分析を用いて分析した。左肺組織の残りについて、次の組織病理学検査を行った。
【０１４７】
Ｂ．ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）活性の分析
こうして得られた０．５ｇの左肺組織を、２．５ｍｌの均質化緩衝液（０．５％の臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、０．２５％のプロテアーゼ阻害剤（Ｐ２７１４、Ｓｉｇｍａ）及び５０ｍＭのリン酸緩衝液（ｐＨ６．０）を含む）に懸濁し、続いて４℃で３回、各時間は３０秒間、超音波装置を用いて振盪し、氷で冷却した。次に、懸濁液を１２，０００ｒｐｍ、４℃で１０分間遠心分離した。上清液を集め、上清液中の総タンパク質濃度（ｍｇ／ｍｌ）をＢｉｏ−Ｒａｄアッセイキットを用いて測定した。
【０１４８】
リン酸緩衝液（５０ｍＭ）２９０μｌ、０−ジアニシジン塩酸塩溶液（２０ｇ／ｌ、ＭＰＯの基質として）３μｌ、及びＨ2Ｏ2（２０ｍＭ）３μｌを、９６ウェルプレートの各ウェルに添加した。１０μｌの上清液を各ウェルに添加し、５分間反応を開始した。３０％アジ化ナトリウム３μｌを用いて反応を停止した。反応混合物についての吸光度（ＯＤ460）を、ＥＬＩＳＡリーダーを用いて４６０ｎｍで測定した。吸光度（ＯＤ460）を標準曲線に基づいてＭＰＯ濃度に転換した。標準曲線はそれぞれＯＤ460を有する５ Ｕ/ｍＬ、２．５ Ｕ/ｍＬ、１．２５ Ｕ/ｍＬ、０．６２５ Ｕ/ｍＬ、０．３１２５ Ｕ/ｍＬ、0.15625  Ｕ/ｍＬ及び ０．０７８１２５ Ｕ/ｍＬの濃度で、Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯから市販されるＭＰＯ標準溶液をプロットすることにより得た。活性は以下の等式に基づいて決定された：
ＭＰＯ活性（Ｕ／ｍｇ）＝ＭＰＯ濃度（Ｕ／ｍｌ）／総タンパク質濃度（ｍｇ／ｍｌ）
【０１４９】
Ｃ．組織病理学的試験
各グループからのマウスの左肺組織をＰＢＳですすぎ、固定溶液（ＰＢＳ下で調製された１０％パラホルムアルデヒド）を用いて固定し、続いてエタノール脱水処理に付した。次に、脱水された組織をパラフィンに包埋し、スライスすることにより４〜６μｍの厚さを有するサンプルを得た。次に、パラフィンを、サンプルから除いた。次に、組織をヘマトキシリン及びエオシンにより染色し、４００×倍率で光学顕微鏡（ＩＸ８１、Ｏｌｙｍｐａｓ）を用いて観察し、その像ををデジタルカメラ（ＤＰ７２、Ｏｌｙｍｐｕｓ）を用いて撮影した。
【０１５０】
結果：
Ａ．ＭＰＯ活性の分析
図２の結果より、正常対照群と比較して、病理対照群におけるＭＰＯ活性が高められることが示され、このことはＬＰＳがマウスにおける急性肺損傷の誘発を引き起こしたことを示す。またデータは病理対照群と比較して、実施例群におけるマウスへの化合物（１）の投与がＭＰＯ活性を有意に低め、化合物（１）がシベレスタットと同等の効果を有することも示す。
【０１５１】
Ｂ．組織病理学的試験
図３は、病理対照群、陽性対照群、正常対照群及び実施例群における肺組織の写真を示す。病理学的対象グループにおいて、肺胞の浮腫、間質性肺浮腫及び白血球浸潤が観察されることが示され、このことはＬＰＳがマウスにおける急性肺損傷の誘発が起こったことを示す。病理学的対照グループと比較して、実験グループの肺組織は、より弱いな肺胞浮腫、間質性肺浮腫及び赤血球浸潤を示す。
【０１５２】
前述の実験結果より、化合物（Ｉ）がＬＰＳ誘発性急性肺損傷を効果的に改善できたことが明らかである。
【０１５３】
結論として、式（Ｉ）のオキシム系化合物は、好中球エラスターゼ及びプロテイナーゼ３に対して優れた阻害活性を有し、且つＬＰＳにより誘発された急性肺損傷及びヒト好中球エラスターゼにより誘発された足の浮腫をインビボで改善する能力を示し、このことは式（Ｉ）のオキシム系化合物が好中球エラスターゼ及びプロテイナーゼ３の活性の調節により炎症性障害の治療のための有能な薬物であり得ることを示唆する。
【０１５４】
本発明は、最も実用的で好ましい実施形態と考えられるものに関連して記載されたが、本発明は開示される実施形態に制限されることなく、最も広い解釈と同等の構成の思想と範囲内に包含される種々の構成を包含することを意図するものと解する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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