(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
セイヨウスモモ果肉の酵素分解物とデイジーの花の抽出物を配合した美白剤。
【請求項２】
請求項１の美白剤を配合した美白用皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、美白に優れた効果を有する美白に優れた皮膚外用剤に関する。特にメラニンが表皮細胞(ケラチノサイト)へ移動する過程を抑制する作用の相乗的効果に関する。
【背景技術】
【０００２】
紫外線等の刺激を受けると炎症を伴いながら、α−メラノサイト刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）、エンドセリン−１（ＥＴ−１）、一酸化窒素（ＮＯ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、顆粒球・マクロファージ・コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）等の情報伝達系が活性化し、これによってチロシナーゼの生成が増加し、チロシンからドーパを経てメラニンを生成が活発化され、メラノサイトに蓄積される。メラノサイトはケラチノサイトに向けて樹状突起と呼ばれる枝のような突起を伸ばし、ケラチノサイトは樹状突起とともにメラニンを取り込み、紫外線等の刺激からケラチノサイトを防御する反応を完結します。その後、ターンオーバーによって皮膚表面から脱落し、その役割を終える。
皮膚が黒く見えるのはケラチノサイトにメラニンが多く、長く存在するために起こる。
今までチロシナーゼ活性阻害等メラニンの生成を抑制する美白剤が多く利用されていたが、近年、α−ＭＳＨ、エンドセリン等の情報伝達系を抑制する物質、そして、ケラチノサイトがメラニンを取り込むことを抑制する物質の利用が行われつつある。（特許文献１参照）
このように美白に関して、様々な段階を抑制することによってより優れた美白作用を得ることができる。
しかしながら、ケラチノサイトにメラニンが取り込まれる過程を抑制する物質に関しては、充分に要求に答えられる物質はなかった。
【０００３】
【特許文献１】特開２００６−３４７９２６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、ケラチノサイトにメラニンが取り込まれる過程を抑制（以下ケラチノサイト貪食作用抑制という）する物質を見出し、効果の高い美白剤を得ることである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは鋭意検討した結果、セイヨウスモモ果肉の酵素分解物とデイジーの花の抽出物を組合わせることによって、強いケラチノサイト貪食作用抑制物質を見出した。
以下に詳細を記載する。
セイヨウスモモは学名、Prunus domestica バラ科、サクラ属のの落葉性小高木で原産地はカスピ海沿岸部といわれている植物である。プルーンはその果実を乾燥した食べ物のことである。
本発明品であるプルーンの酵素分解物は、プルーン果肉をそのまま、あるいは圧搾、細砕、粉砕、すりつぶす等を行った後、繊維素分解酵素にて処理して得られる。乾燥果実を用いる場合は、そのまま或いは水等の水性溶媒により膨潤させて酵素分解に使用する。
繊維素分解酵素としては、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペクチナーゼ等を使用することができるが、好適にはセルラーゼを用いる。分解条件は特に限定されるものではないが、各種酵素活性温度を選定することが好ましい。酵素分解後は加熱処理等により酵素を失活させた後、水性溶媒を適量加えるか、または加えないで、濾過を行う。
水性溶媒としては、水、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、ブタノール、イソブタノール等の低級アルコール或いは含水低級アルコール、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール、1,2-ブチレングリコール、1,4-ブチレングリコール、1,5-ペンタンジオール、1,2-ペンタンジオール、1,3-ペンタンジオール、1,4-ペンタンジオール、1,3,5-ペンタントリオール等の多価アルコールあるいは含水多価アルコール、フェノキシエタノール、パラベン、エチルパラベン、メチルパラベン、プロピルパラベン等の中から選ばれる１種もしくは２種以上を用いることができる。
【０００６】
酵素分解物は、必要に応じて、作用の減退を大きく招かない範囲で、活性炭処理や吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等による精製処理を施してもよい。さらには、任意の助剤、例えばデンプンや乳糖などの各種賦形剤を添加することができる。更に、得られた酵素分解物に上記水性溶媒を適宜添加することができる。
セイヨウスモモ果肉の酵素分解物はすでに化粧品原料として利用されており、肌理改善作用、保湿作用のほか、ケラチノサイト貪食作用抑制効果があることも知られていた。
【０００７】
デイジーは学名Bellis  perennis L.といい、和名をヒナギク（雛菊）、エンメイギク（延命菊）及びチョウメイギク（長命菊）などとも称される多年生植物である。西洋諸国では古くから、デイジーの若葉、蕾や花部などをサラダに加えて食用としても用いている。
また、その根部は薬用としてリウマチや傷の治療、去痰薬などとしても用いられていた。
デイジーの花部を、水、低級脂肪族アルコールもしくは低級脂肪族アルコールの含水物により抽出して得られる抽出物を利用する。
デイジーの花の抽出物にはサポニン、ポリフェノール、多糖類が含まれている。
デイジーの花の抽出物はすでに化粧品原料として利用されており、エンドセリン産生抑制、α−ＭＳＨの結合の抑制、チロシナーゼ生成阻害、メラニン生成抑制等の美白に関連する各作用に効果があり、セイヨウスモモ果肉の酵素分解物と同様にケラチノサイト貪食作用抑制効果も知られていた。
【０００８】
以上の２つの物質はともにケラチノサイト貪食作用抑制効果があることは知られていたが、相乗作用についてはまったく知られていなかった。また、美白作用はより強く相乗作用があるので、ケラチノサイト貪食作用抑制効果以外にも相乗的な効果を発揮し、全体として美白作用が強まったと考えられる。
セイヨウスモモ果肉の酵素分解物とデイジーの花の抽出物の配合量としては、固形分として、それぞれ０．００００１〜１０％、好ましくは０．０００１〜１％を配合する。（なお、％は重量％であり、以下すべて％は重量％を示す）
【０００９】
このセイヨウスモモ果肉の酵素分解物とデイジーの花の抽出物以外にも美白作用を有する物質を配合することはより美白作用を高めるためには必要で、α−ＭＳＨ、エンドセリン等のメラニン生成の情報伝達系を抑制する物質、チロシナーゼ活性阻害、チロシナーゼ生成抑制等のケラチノサイト貪食作用抑制以外の作用を抑制する物質を配合する。
本発明者らが鋭意検討した結果、アルブチン、アルコルビン酸類より選択された１種以上を配合すると良好な結果が得られることがわかった。
アルブチンはコケモモや梨、ウワウルシなどの植物に含まれているフェノール性配糖体であり、メラニン合成に関わるチロシナーゼに直接作用し、メラニンの合成を阻害するといわれている。β型とα型があるがいずれも用いることができる。
また、アルブチンを含有したコケモモや梨、ウワウルシ等の植物抽出物を利用することも可能である。
アルコルビン酸類とは、アルコルビン酸、アルコルビン酸の誘導体或いはそれらの塩を指し、アスコルビン酸誘導体としては、例えばＬ‐アスコルビン酸‐２‐リン酸エステルナトリウム、Ｌ‐アスコルビン酸‐２‐リン酸エステルマグネシウム、Ｌ‐アスコルビン酸‐２‐硫酸エステルナトリウム、Ｌ‐アスコルビン酸‐２‐硫酸エステルマグネシウムなどのアスコルビン酸エステル塩類、Ｌ‐アスコルビン酸‐２‐グルコシド（２‐Ｏ‐α‐Ｄ‐グルコピラノシル‐Ｌ‐アスコルビン酸）、Ｌ‐アスコルビン酸‐５‐グルコシド（５‐Ｏ‐α‐Ｄ‐グルコピラノシル‐Ｌ‐アスコルビン酸）などのアスコルビン酸糖誘導体、それらアスコルビン酸糖誘導体の６位アシル化物（アシル基は、ヘキサノイル基、オクタノイル基、デカノイル基など）、Ｌ‐アスコルビン酸テトライソパルミチン酸エステル、Ｌ‐アスコルビン酸テトララウリン酸エステルなどのＬ‐アスコルビン酸テトラ脂肪酸エステル類、３‐Ｏ‐エチルアスコルビン酸、Ｌ‐アスコルビン酸‐２‐リン酸‐６‐Ｏ‐パルミテートナトリウム等が挙げられる。
【００１０】
さらには抗炎症剤を配合することによって美白作用が高まることが本発明者らの検討でわかった。
抗炎症剤としては、例えば、アラントイン、塩化リゾチーム、グアイアズレン、γオリザノール、グリチルレチン酸、グリチルレチン酸ステアリル、グリチルリチン酸及びその塩、トラネキサム酸及びその誘導体、イプシロンアミノカプロン酸等が挙げられる。
また、抗炎症作用を有する植物抽出物、例えば、カミツレ、シャクヤク、タイソウ、チャ、トウキ、モモ、アマチャ、アスナロ、アルニカ、イチョウ、インチンコウ、ウコン、オウレン、オトギリソウ、オランダカラシ、クマザサ、ゲンチアナ、コジソウ、コンフリー、サルビア、サンザシ、サンショウ、シソ、ジュウヤク、セイヨウノコギリソウ、セイヨウハッカ、ソウハクヒ、タイム、チョウジ、トウキンセンカ、パセリ、ハマメリス、ビワ、ブッチャーブルーム、ボダイジュ、マンネンロウ、ボタンピ、ヤグルマギク、ラベンダー、ローマカミツレ、ドクダミ等の抽出物を用いることもできる。これらの植物抽出物は、常法により各植物から抽出した抽出液又は市販品の１種以上を用いることができる。
これらの抗炎症剤の中で、グリチルレチン酸、グリチルレチン酸ステアリル、グリチルリチン酸及びその塩、ビザボロールから選択される１種以上を配合することが好ましい。
さらにはグリチルレチン酸、グリチルレチン酸ステアリル、グリチルリチン酸及びその塩より選択される１種以上と、ビザボロールを配合すると美白効果が最も高くなることがわかった。
【００１１】
これらの成分に加えて、製剤化するために、或いは他の有効性を付与するために上記以外の原料を加えて製剤化する。
製剤の種類に特に限定はなく、液剤、乳剤、クリーム、軟膏、貼付剤等任意の剤形を選択できる。
【実施例】
【００１２】
以下に実施例を記すがこれに限定されるものではない。数値は重量部を表す。
【００１３】
美白液１
セイヨウスモモ果肉の酵素分解物（凍結乾燥品）７．８ｇ、とデイジーの花の抽出物（凍結乾燥品）５．０ｇを混合し、精製水で１００mlにした。
本美白剤に用いたセイヨウスモモ果肉の酵素分解物とデイジーの花の抽出物は以下のように作成した。
セイヨウスモモ果肉の酵素分解物（凍結乾燥品）
セイヨウスモモ(Prunus domestica)の果肉１．０kgをミキサーにて粉砕し、粉砕液を約60℃に調整し、セルラーゼ及びヘミセルラーゼを加える。酵素反応後加熱により酵素を失活させた後、凍結乾燥した。
デイジーの花の抽出物（凍結乾燥品）
デイジー(Bellis  perennis L.)の花（乾燥品）１００gを粉砕し、精製水８００ｇを加えて４０℃で３０時間抽出した。これを濾過し、濾液を凍結乾燥した。
なお、後述する、セイヨウスモモ果肉の酵素分解溶液は、セイヨウスモモ果肉の酵素分解物（凍結乾燥品）７．８ｇを精製水で１００mlにしたもの、デイジーの花の抽出溶液は、デイジーの花の抽出物（凍結乾燥品）５．０ｇを精製水で１００mlにしたもの
【００１４】
美白剤の効果の確認
ケラチノサイトをラブテック２チェンバースライドシステムに４．８×１０3cell/well播種し３日間培養した。培養後、蛍光ビーズ（Tetra speck microspheres, 0.5μm, fluorescent）を２．０×１０4paticles/wellになるように添加し同時に指定濃度に希釈した試験品を添加し、３日間培養した。
その後、１０％中性緩衝ホルマリンにて固定し、蛍光顕微鏡にて観察した。
蛍光顕微鏡にて取り込んだ画像をＩｍａｇｅＪにて解析を行い、細胞１個における輝度値を算出した。算出した輝度値をケラチノサイトが取り込んだ蛍光ビーズ量としそれぞれの取り込み量を比較した。
結果を表１に示す。
【００１５】
【表１】
0005886534.tif 000002
【００１６】
上記美白剤を配合した皮膚外用剤と比較例を表２と表３に示す。
【表２】
0005886534.tif 000003
【００１７】
【表３】
0005886534.tif 000004
【００１８】
女性２０名に対して実際に使用してもらった。方法は顔面を左右に分け、一方に実施例１を他の一方に、比較例１〜３を１ヶ月間使用してもらい、美白効果を確認した。
また、評価基準は実施例１基準として、以下のように数値化し、その平均を示した。
３：実施例１よりかなり効果があった。
２：実施例１より効果があった。
１：実施例１よりやや効果があった。
０：実施例１と同様であった。
−１：実施例１より効果がやや劣った。
−２：実施例１より効果が劣った。
−３：実施例１より効果がかなり劣った。
【００１９】
その結果、比較例１は−１．６、比較例２−１．８は、比較例３は−２．３であった。