(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の成分（Ａ）〜（Ｄ）を含有するペットフード。
（Ａ）構成脂肪酸として二重結合を３つ以上有する不飽和脂肪酸を３質量％以上含む油脂、
（Ｂ）鉄、鉄化合物、銅及び銅化合物から選ばれるミネラル成分、
（Ｃ）クエン酸及び／又はその塩        合計量がモル比で成分（Ｂ）の１０倍以上、
（Ｄ）レシチン
【請求項２】
さらに（Ｅ）カテキン類、クルクミン、クエルセチン及びミリシトリンから選ばれる少なくとも１種のポリフェノールを含有する、請求項１記載のペットフード。
【請求項３】
前記（Ｄ）レシチン含有量がペットフード中に０．０６〜６．０質量％である、請求項１又は２記載のペットフード。
【請求項４】
前記クエン酸の塩がクエン酸アルカリ金属塩である請求項１〜３のいずれか記載のペットフード。
【請求項５】
前記成分（Ｃ）が、クエン酸とクエン酸の塩を共に含むものである請求項１〜４のいずれか記載のペットフード。
【請求項６】
ｐＨが３．５〜７．０である請求項１〜５のいずれか記載のペットフード。
【請求項７】
前記成分（Ｄ）がホスファチジルエタノールアミンを含み、その含有量がペットフード中に０．０３質量％以上である請求項１〜６のいずれか記載のペットフード。
【請求項８】
ドライタイプである請求項１〜７のいずれか記載のペットフード。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、不飽和脂肪酸含有油脂を含むペットフードに関する。
【背景技術】
【０００２】
ペットブームによりペット飼育数は増大しており、それに伴いペットの高齢化、運動不足、栄養過多等によりペットの肥満、糖尿病、肝臓疾患等のヒトの成人病と同様の疾病が増大している。また、避妊手術後のホルモンバランスの狂いによって肥満する犬や猫が多くなっている。このような肥満や体重増加を防止するためのペットフードが数多く開発されている。例えば、不飽和脂肪酸含有量を高くした油脂を配合したペットフードが提案されている。
【０００３】
このようなペットフードは、不飽和脂肪酸を多く含むため、保存環境によっては酸化され易く、臭い、嗜好性などに影響を与えることがある。そこで本出願人は高ミネラル含有のペットフードにおいて、ビタミンＣ誘導体を配合する技術（特許文献１）や、天然由来の抗酸化剤を含有させると共にペットフード中の鉄イオン及び銅イオンの含有量をコントロールする技術（特許文献２）により、長期保存安定性を改善することを提案してきた。
【０００４】
また、食品用途での抗酸化システムとして、中鎖脂肪酸を構成脂肪酸とするグリセライドと酸化防止剤を組み合わせたもの（特許文献３）、ヤマモモ抽出物と水溶性酸化防止剤及び親油性酸化防止剤を組み合わせたもの（特許文献４）、マッシュルーム菌糸体培養濾液等と抗酸化剤とを組合せたもの（特許文献５）などが提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００５−２０４６５９号公報
【特許文献２】特開２００７−１１０９１６号公報
【特許文献３】特開２００４−１１５７５８号公報
【特許文献４】特開２００７−１８５１３８号公報
【特許文献５】特開平７−５９５４８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
近年における、ペットの健康志向の高まりの中では、種々の生理的効果を有することが期待されているω３脂肪酸やω６脂肪酸といった、分子内に不飽和結合を多く持つ脂肪酸を構成脂肪酸とする油脂を多く配合するペットフードが求められている。しかしながら、これら脂肪酸は非常に酸化しやすく、長期に亘って生理的効果を発現させることが困難である。したがって、このような高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸とする油脂を含有するペットフードにおいて、長期の保存安定性を達成することが求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
そこで本発明者らは、二重結合を２つ以上有する不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含有する油脂を含むペットフードの長期保存安定性について検討してきたところ、不飽和脂肪酸含有油脂にペットフードに必要な金属塩、特に銅や鉄を配合すると当該油脂の酸化は促進されてしまい、両者を含有する酸化に対して安定なペットフードは得られないことが判明してきた。そこで、その酸化安定性を改善すべく種々検討したところ、抗酸化作用を有するとされているカテキン、ビタミンＥ、レシチン、ビタミンＣ類、カロチンなどの単独での配合では、不飽和脂肪酸含有油脂と金属塩含有ペットフードの酸化は十分に防止できなかったのに対し、クエン酸又はその塩を所定量以上配合することにより顕著に酸化が防止できることを見出した。
本発明者は、当該クエン酸又はその塩配合によるペットフードの酸化に対する安定化作用をさらに向上させるべく検討した結果、全く意外にも、単独の添加ではほとんど酸化防止作用を有さないレシチンを、一定量以上のクエン酸又はその塩とともに配合すれば、不飽和脂肪酸含有油脂と金属塩を含有するペットフードの安定性を顕著に改善できることを見出し、本発明を完成した。
【０００８】
すなわち、本発明は、次の成分（Ａ）〜（Ｄ）を含有するペットフードを提供するものである。
（Ａ）二重結合を２つ以上有する不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含む油脂、
（Ｂ）鉄、鉄化合物、銅及び銅化合物から選ばれるミネラル成分、
（Ｃ）クエン酸及び／又はその塩    合計量が成分（Ｂ）に対してモル比で１０倍以上、（Ｄ）レシチン
【０００９】
また、本発明は、（Ａ）二重結合を２つ以上有する不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含む油脂と、（Ｂ）鉄、鉄化合物、銅及び銅化合物から選ばれるミネラル成分とを含有する組成物に、（Ｃ）クエン酸及び／又はその塩及び（Ｄ）レシチンを配合することを特徴とする該組成物の酸化防止方法を提供するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明のペットフードは長期保存安定性に著しく優れている。したがって、ω３、ω６等の高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として多量に含む油脂を配合した場合などにおいては、その期待される生理的機能を長期に亘って発現することが可能となる。また、脂肪酸の酸化に伴う臭いの変化、嗜好性の低下等が効果的に抑制可能である。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】油脂とミネラル成分を含む組成物に対する種々の抗酸化剤の抗酸化力をランシマット試験法で評価した結果を示す図である。
【図２】試料の電気伝導率の経過変化を示す図である。
【図３】レシチンの量と種類のランシマット立ち上がり時間に及ぼす影響を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明のペットフードは、（Ａ）二重結合を２つ以上有する不飽和脂肪酸（以下、単に高度不飽和脂肪酸ともいう）を構成脂肪酸として含む油脂を含有する。当該油脂の構成脂肪酸中の高度不飽和脂肪酸の含量は、ペットの皮膚及び被毛の健康の点から、２０〜９０質量％（以下、単に％で示す）、さらに２３〜８０％、さらに２５〜７０％であることが好ましい。また、構成脂肪酸として高度不飽和脂肪酸を含む油脂のペットフード中の含量は、１〜４５％が好ましく、さらに２〜４５％が好ましく、さらに２．５〜４０％がより好ましく、３〜３５％がさらに好ましい。ここで、高度不飽和脂肪酸としては、炭素数１８〜２４の高度不飽和脂肪酸が好適なものとして挙げられる。二重結合を２つ有する不飽和脂肪酸としてはリノール酸が挙げられる。また、二重結合を３つ以上有する不飽和脂肪酸を多く含むことが種々の生理的効果を期待できる観点から好ましい。当該不飽和脂肪酸としては、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ），ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）が好ましく、成分（Ａ）の油脂の構成脂肪酸中の当該脂肪酸の含量として３．０％以上が好ましく、３．５％以上がより好ましく、４．０％以上がさらに好ましい。
なお、成分（Ａ）の油脂を構成する脂肪酸としては、高度不飽和脂肪酸以外に、二重結合を１つ有する不飽和脂肪酸及び飽和脂肪酸を含んでいても良い。ここで、二重結合を１つ有する不飽和脂肪酸としては炭素数１６〜２４の不飽和脂肪酸が挙げられ、オレイン酸、パルミトオレイン酸等が好ましい。また、飽和脂肪酸としては炭素数１２〜１８の飽和脂肪酸が挙げられ、パルミチン酸、ステアリン酸等が好適である。
【００１３】
本発明においては、成分（Ａ）以外の油脂、すなわち高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含まない油脂を含有していても良い。本発明のペットフード中の全油脂の含有量は、嗜好性とペットフードの不快臭除去の点から６〜５０％が好ましく、６〜４５％がより好ましく、６〜４０％がさらに好ましく、８〜３５％が特に好ましい。またペットフードに含まれる全油脂の構成脂肪酸中に二重結合を２つ以上有する不飽和脂肪酸の含量は５％〜８０％が好ましく、さらに１０〜７５％がより好ましく、さらに１５〜７０％が好ましく、さらに２０〜６５％が好ましい。
【００１４】
本発明のペットフードに用いられる上記の油脂としては、前記高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含むサフラワー油、オリーブ油、綿実油、コーン油、ナタネ油、大豆油、パーム油、ひまわり油、アマニ油、ごま油、ラード、牛脂、魚油、乳脂、ココナツ油、ヤシ油、米ぬか油、紫蘇油、エゴマ油、月見草油、ヘンプシード油等が挙げられる。これらの中でも、二重結合を３つ以上有する不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として多く含むアマニ油、魚油、紫蘇油、エゴマ油、月見草油、ヘンプシード油が好ましい。しかし、油脂として配合したものに限られず、他の植物原料、又は動物原料中に油脂が含有されている場合にはこれも含む。また、油脂中には、ジグリセリドが含まれていてもよい。
【００１５】
本発明のペットフードはまた、成分（Ｂ）として鉄、鉄化合物、銅及び銅化合物から選ばれるミネラル成分を含有する。鉄化合物としては、硫酸鉄、塩化第二鉄、フマル酸第一鉄、炭酸第一鉄、酸化鉄等が挙げられる。該鉄化合物のペットフード中の含有量は、ペットフードの配合において許容できる範囲、鉄換算で０．００００１〜１％、さらに０．００００５〜０．３％、さらに０．０００１〜０．１％が好ましい。
【００１６】
銅化合物としては、硫酸銅、塩化銅、酸化銅、炭酸銅、硫化銅、銅クロロフィル等が挙げられる。該銅化合物のペットフード中の含有量は、ペットフードの配合において許容できる範囲、銅換算で０．００００１〜０．１％、さらに０．００００５〜０．０３％、さらに０．０００１〜０．０１％が好ましい。
【００１７】
これらのミネラル成分のうち、鉄又は鉄化合物と銅又は銅化合物とは併用するのが好ましい。本発明では、これらのミネラル成分の合計の含有量は、ミネラル換算（鉄換算及び銅換算）で０．０００５〜１％が好ましく、０．０００５〜０．５％がより好ましく、０．００１〜０．１％がさらに好ましい。
【００１８】
本発明のペットフードには、ミネラル成分として鉄、銅以外に、マンガン、コバルト、カルシウム、リン、ナトリウム、カリウム等を含有してもよい。これらミネラル成分は、例えば、酸化マンガン、炭酸コバルト、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム等として配合される。
【００１９】
本発明のペットフードは、さらに成分（Ｃ）として、クエン酸及び／又はその塩を含み、その合計量が成分（Ｂ）に対してモル比で１０倍以上である。ここでクエン酸塩としてはアルカリ金属塩やアルカリ土類金属塩が挙げられ、特にアルカリ金属塩が好ましい。アルカリ金属塩としては、クエン酸の正塩（三アルカリ金属塩）、一水素二アルカリ金属塩及び二水素アルカリ金属塩を意味する。クエン酸のアルカリ金属塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩が挙げられ、特にナトリウム塩であることが好ましい。なお、本明細書において、特に断らない限りは、クエン酸ナトリウムという場合にはクエン酸三ナトリウム塩（二水和塩）を表わす。
【００２０】
クエン酸及びその塩の合計量が成分（Ｂ）の金属に対してモル比で１０倍以上であると、クエン酸及び／又はその塩とレシチンとの併用による前記酸化防止効果が相乗的に向上する。当該成分（Ｃ）の合計量は、成分（Ｂ）に対してモル比で１１倍以上、さらに１２倍以上、さらに１５倍以上、さらに１８倍以上が好ましい。また、クエン酸又はその塩の合計量は、嗜好性の点から、成分（Ｂ）に対してモル比で６０倍以下が好ましい。
【００２１】
また、成分（Ｃ）はペットフード中にクエン酸換算で０．５％以上含まれていることが好ましい。ここで「クエン酸換算で」とは、成分（Ｃ）としてクエン酸及びクエン酸のアルカリ金属塩（以下、クエン酸類とも言う）が含まれている場合、又は成分（Ｃ）がクエン酸のアルカリ金属塩のみである場合、アルカリ金属分を水素に置き換えてクエン酸分子量とみなして質量を換算することを意味する。
本発明のペットフードは、保存安定性及び嗜好性の点から、クエン酸類をクエン酸換算で０．７％以上、さらに０．７５％以上、さらに０．９％以上、さらに１．０％以上含有していることが好ましい。クエン酸類含有量の上限値としては、嗜好性、保存時の臭いを考慮して５．０％、さらに４．０％が好ましい。
【００２２】
本発明のペットフードでは、成分（Ｃ）とともに、成分（Ｄ）としてレシチンを含有する。レシチンは狭義にはホスファチジルコリンを意味するが、広義にはグリセロリン脂質を意味する。本発明で好適に用いられるホスファチジルエタノールアミンはグリセロリン脂質の一種であり、広義のレシチンに含まれる。レシチンが商業用又は工業用に用いられるときは広義のグリセロリン脂質を意味し、グリセロリン脂質を主成分とした混合物であることが多い。レシチンは本発明のように高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含む油脂とミネラル成分との配合系においては、単独で使用した場合には効果が低く、ミネラル成分を含まない系の抗酸化力にまで及ばない（図１参照）。一方、クエン酸を単独で１．０％以上配合した系においては、抗酸化力がミネラル成分を含まない系のレベルまで回復する。本発明においては、クエン酸とレシチンを共存させることによって、各々単独での効果からは想像できないレベルにまで抗酸化力が向上することを見出したものである。実際、他の一般的に知られている抗酸化剤であるミックストコフェロールや、効果が非常に高いといわれているδ−トコフェロールをクエン酸と共存させた場合には、クエン酸単独よりも抗酸化力が低下する現象が観測された（図１）。つまり、この抗酸化力の向上はクエン酸とレシチンを組み合わせたことによる特有の現象と言える。
【００２３】
本発明に用いられる（Ｄ）レシチンとしては、大豆レシチン、粉末大豆レシチン、卵黄レシチン、水素添加大豆レシチン、水素添加卵黄レシチン、菜種レシチン、コーンレシチン、牛脳レシチン、牛肝臓レシチン等が挙げられる。また、食品や飼料に一般的に用いられる大豆レシチンの成分として、含有量の多い順にホスファチジルコリン（ＰＣ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）、ホスファチジン酸（ＰＡ）が存在するが、これら単独でも本発明ではレシチンとして扱われる。また、ＰＣの構成脂肪酸としてＤＨＡが結合したＰＣ−ＤＨＡなどもレシチンとして挙げられる。これらのうちＰＥは抗酸化活性が高いことが分かった。したがって、混合物としてはＰＥ含有量が高いものが望ましく、また、高度不飽和脂肪酸を多く含んでいるものが望ましい。大豆レシチン、粉末大豆レシチン、水素添加大豆レシチン、卵黄レシチンが風味、臭い、コストの観点からより好ましい。中でも大豆レシチンが効果の発現、コストの観点から好ましい。
【００２４】
成分（Ｄ）は抗酸化効果の点から、成分（Ａ）の油脂に対して０．１％以上、さらに０．３％以上、さらに０．５以上含有されることが望ましい。より高い抗酸化効果と風味の観点から、０．６％以上２０．０％以下、さらに１．０％以上１５．０％以下であることが好ましい。
なお、本発明において前記レシチン（Ｄ）の量はアセトン不溶分であるリン脂質換算の量を指し、該リン脂質換算量は日本油脂科学会編「基準油脂分析試験法  ５．３．３．１−８６  リン脂質リン組成」に記載の方法により測定することができる。例えば、食品などで一般的に使用される大豆レシチンにはトリグリセライドなどのアセトン可溶分も含まれるので、このような成分を除く趣旨である。アセトン不溶分であるレシチン量としては、レシチン源（例えば、大豆レシチンとして市販される剤）中に６０％程度であることが多い。また、ペットフード中のリン脂質の含有量は、好ましくは、フードからクロロホルム／メタノールの溶剤で油脂を抽出した後に、油脂中のリン含量を定量することができる。当該油脂中のリン含量の定量は、基準油脂分析試験法（日本油化学協会、２．４．１１−１９９６）の比色法を用いて行う（リン量からの換算係数２５．４）。この定量法によるリン脂質含有量の値は、アセトン不溶分であるリン脂質換算の量とよく一致する。また、成分（Ｄ）は、抗酸化効果と風味の観点から本発明のペットフード全量中に０．０６〜６．０％、さらに０．１〜３％、さらに０．２〜２．０％含有するのが好ましい。また、ペットフード中には、成分（Ｄ）としてＰＥ含量が０．０３％以上、さらに０．０４％以上であることが、高い抗酸化効果の観点から好ましい。さらに、成分（Ｄ）の含有量は、成分（Ａ）の油脂の構成成分である高度不飽和脂肪酸に対して０．５％以上７５％以下、さらに０．５％以上５０％以下であることが高い抗酸化効果の観点から好ましい。
【００２５】
本発明のペットフードには、さらに成分（Ｅ）カテキン、クルクミン、クエルセチン及びミリシトリンから選ばれる少なくとも１種のポリフェノールを含有することによって、前記の抗酸化力がさらに高まる。図１に示すように、クエン酸１％＋レシチン０．６％に対して、カテキンを０．３％加えた場合（図中▲）は抗酸化力を示すランシマットの立ち上がり時間が約３倍にまで上昇する。興味深いことには、クエン酸１％にカテキンを０．３％加えたもの（◆）はクエン酸単独と同等かそれ以下の抗酸化力となる。つまり、成分（Ａ）及び（Ｂ）を含むペットフードにおいて、カテキンによる抗酸化力の向上は、クエン酸及びレシチンの共存系で特有の現象であり、各抗酸化剤単独での効果からは想像もできないものである。
【００２６】
本発明に用いられるポリフェノールとして、カテキン類が抗酸化効果を劇的に高めることが可能であるので好ましい。カテキン類としては、３，３’，４’，５，７−フラバンペントール骨格を有するものであればよく、カテキン、エピカテキン、ガロカテキン、エピガロカテキン、カテキンガレート、エピカテキンガレート、ガロカテキンガレート、エピガロカテキンガレートが含まれる。これらのカテキンは、茶抽出物を用いてもよい。
クルクミン源としてはウコン抽出物、ショウガ抽出物等を用いてもよい。クエルセチン源としてはタマネギ外皮抽出物、リンゴ外皮抽出物等を用いてもよい。ミリシトリン源としてはヤマモモ抽出物を用いてもよい。
【００２７】
（Ｅ）のポリフェノールは、抗酸化効果及び風味の観点から、本発明のペットフード中に０．０１〜３５％、さらに０．０２〜５．０％、さらに０．０３〜２．０％含有するのが好ましい。また、より高い抗酸化効果を得る点から、成分（Ｄ）と成分（Ｅ）の質量比（Ｄ／Ｅ）は、１／１〜１００／１が好ましく、さらに２／１〜８０／１が好ましい。本発明においてポリフェノールの量は、有効であると思われるポリフェノールの量をいう。カテキンとして茶抽出物を用いる場合は当該抽出物の上記カテキン類７種類の総含有量を指す。
【００２８】
本発明のペットフードはそのｐＨが３．５〜７．０であることが好ましい。当該範囲であると、上記成分（Ｂ）による上記成分（Ａ）の酸化がより効果的に抑制され、嗜好性も良好となる。当該ｐＨが４．０〜７．０、さらに好ましくは４．５〜６．８であると、酸化抑制効果が一層高まるとともに、保存時の臭いが良好になるので好ましい。クエン酸類を含み、かつｐＨがこのような範囲とするには、クエン酸のほかにｐＨ調整剤を加える方法がある。そのような方法の中でも、クエン酸とクエン酸塩を併用する方法がｐＨ調整がし易いとともに、嗜好性も良好で、風味も統一感があるので好ましい。特に、クエン酸塩として上述のクエン酸アルカリ金属塩を用いることが好ましい。
【００２９】
なお、「ペットフードのｐＨ」とは、ペットフードを以下の方法によって測定したときのｐＨのことを意味する。
＜ペットフードのｐＨ測定方法＞
ペットフード１０ｇを４５℃のイオン交換水（好ましくは２５℃における電気伝導度が０．０１ｍＳ／ｍ以下のイオン交換水）６０ｍＬ中に加えて十分に攪拌し、１時間静置した後に定性ろ紙（Ｎｏ．１，Ａｄｖａｎｔｅｃ製）を用いてろ過し、濾液を２５℃においてｐＨ測定した。
なお、ペットフードの性状が固形の場合には、乳鉢等を使用して細かく磨り潰した後に上記攪拌操作を行うことが好ましい。
【００３０】
本発明のペットフードには、さらに炭水化物を含むことが好ましい。炭水化物源としては、単糖類、オリゴ糖、多糖類、食物繊維、デンプン類等が含まれる。デンプン類としては、ワキシーコーンデンプン、コーンデンプン、小麦デンプン、米デンプン、糯米デンプン、馬鈴薯デンプン、甘露デンプン、タピオカデンプン、サゴデンプン、又はこれらに化学的処理を施したものや化学修飾した加工デンプン等が挙げられる。また、炭水化物は、穀物類として含有させてもよく、穀物類としては、とうもろこし、大麦、小麦、ライ麦、ソルガム、米、ひえ、あわ、アマラサンサス、キヌア等が挙げられる。炭水化物は、ペットフード中に１０〜７０％、さらに２０〜６０％、さらに３０〜５０％含有するのが、経済的、肥満防止効果、摂取性、便の状態、及び外観を健康的に美しくする点から好ましい。
【００３１】
本発明のペットフードにおいては、さらに動物性又は植物性のタンパク質を含むことが、肥満防止効果、摂取性、栄養バランス、及び外観を健康的に美しくする点から好ましいが、摂取性の点から動物性タンパク質がさらに好ましい。動物性タンパク質としては、カゼイン等の乳タンパク質も挙げられるが、肥満防止効果及び摂取性の点から、動物性肉類タンパク質が好ましい。このような動物性肉類タンパク質としては、牛、豚、羊、うさぎ、カンガルー等の畜肉及び獣肉、並びにその副生成物及び加工品；鶏、七面鳥、うずら等の鳥肉並びにその副生成物及び家屋品；魚、白身魚等の魚肉並びにその副生成物及び加工品；ミートミール、ミートボーン、チキンミール、ポータリーミール、フィッシュミール等の上記原料のレタリング等が挙げられる。このうち、肥満防止効果の点で、鶏肉、魚肉が特に好ましい。複数の肉類タンパク質を混合して用いる場合には、鶏肉及び／又は魚肉を肉類中の３０〜１００％、さらに５０〜１００％含有させるのが好ましい。
植物性タンパク質としては、大豆タンパク質、小麦タンパク質、小麦グルテン、コーングルテン等が好ましい。
【００３２】
本発明のペットフード中に動物性又は植物性タンパク質は、乾燥減量で５〜７０％、さらに１０〜６０％、さらに１５〜４０％含有するのが好ましい。
【００３３】
本発明のペットフードには、さらに植物ステロールを含有してもよい。植物ステロールは、ペットフード中に、コレステロール低下効果の点で、０．１％以上、さらに０．５％以上含有するのが好ましい。また植物ステロール含有量の上限は、０．１〜３０％の範囲であればよい。ここで植物ステロールとしては、例えばα−シトステロール、β−シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール、α−シトスタノール、β−シトスタノール、スチグマスタノール、カンペスタノール、シクロアルテノール等のフリー体、及びこれらの脂肪酸エステル、フェルラ酸エステル、桂皮酸エステル等のエステル体が挙げられる。
【００３４】
本発明のペットフードには、さらに、ぬか類、粕類、野菜、ビタミン類等を配合することができる。ぬか類としては、米ぬか、ふすま等が、粕類としては、大豆粕等が挙げられる。野菜類としては野菜エキス等が挙げられる。ビタミン類としては、Ａ、Ｂ１、Ｂ２、Ｄ、Ｅ、ナイアシン、パントテン酸、カロチン等が挙げられ、０．０５〜１０％含有するのが好ましい。この他、一般的にペットフードに使用されるゲル化剤、保型剤、ｐＨ調整剤、調味料、防腐剤、栄養補強剤等も含有することができる。さらに、ＢＨＡ、ＢＨＴ、エトキシキン、ＴＢＨＱ、プロピルガレートなどの合成の抗酸化剤を併用することも可能である。その場合であっても、本発明の技術によって合成の抗酸化剤を従来よりも減らすことが可能となる。なお、これら合成の抗酸化剤は本発明のペットフードに含まれないことが好ましい。
【００３５】
本発明のペットフードは、前記成分を混合し、所望の形態にすることにより製造できるが、成分（Ａ）の油脂成分は最後に添加するのが好ましい。例えば、穀物、肉ミール並びに鉄及び銅等のミネラル成分とともに、クエン酸及びクエン酸塩を混合し、十分混合したあとに、水や水蒸気で加水しながらエクストルーダーによって押出成型をする。その後に、好ましくは水分を１０％以下になるまで熱風乾燥させる。二重結合が二つ以上の脂肪酸を多く含む油脂は、熱風乾燥させたあとに、コーティングするのが望ましい。また、レシチン及びカテキンは、クエン酸等とともに添加してもよいし、油脂とともに添加してもよい。
【００３６】
また、本発明のペットフードとしては、ドライタイプ、ウェットタイプ、セミモイストタイプ、ジャーキータイプ、ビスケットタイプ、ガムタイプ、粒状、粉状、スープ状等いずれの形態であってもよいが、ドライタイプであることが保存の簡便性から好ましい。通常、ドライタイプの場合には、複数回食餌量のペットフードがラミネート製のパッケージ内に収容されているが、開封後には空気と触れ易い環境となるために酸化が進行し易い。したがって、本発明のペットフードはドライタイプにおいてより効果を発揮し易いといえる。
【００３７】
ドライタイプのペットフードとしては、キブル形状、平板形状、骨形状などが挙げられる。ペットの噛み易さや扱いやすい形状を得るなどの観点からは、嵩密度が１００〜９００ｋｇ／ｍ3、特に３００〜７００ｋｇ／ｍ3であることが好ましい。しかしながら、このような嵩密度であると、表面積が高くなるとともに表面に多数の空隙が存在しやすくなるので、ペットフード中の油脂の酸化が進みやすいと言える。しかし、このような場合であっても、本願発明のペットフードは高い抗酸化力を有しているので、上述した長所を活かすことが可能である。このためにペットの嗜好性に優れ、長期に亘って風味等が劣化せず、しかも高度不飽和脂肪酸に起因する所望の生理的効果の恩恵を受けることができる。
【実施例】
【００３８】
＜試料の調製＞
表１に示す（Ａ）油脂、（Ｂ）ミネラル成分、（Ｃ）クエン酸+クエン酸ナトリウム（質量比１：２；以下、クエン酸混合物という）、（Ｄ）レシチン、（Ｅ）ポリフェノール、（Ｘ）その他の抗酸化剤について、種々の組み合わせの試験を行った。試験は（Ａ）油脂３ｇ、又はこれに（Ｄ）レシチン、(Ｘ)その他の抗酸化剤を配合し、（Ｂ）ミネラル成分、（Ｃ）クエン酸混合物、(Ｅ)ポリフェノールを少量の水に溶解したものを添加して行った。なお、表１中の％で表される数値は、油脂に対する質量％である。
【００３９】
【表１】
0005886540.tif 000002
【００４０】
試験に用いた材料の詳細は以下の通りである。
（Ａ）油脂：  脂肪酸組成は表２に示した通り。
（Ｂ）ミネラル成分
塩化第二鉄        ：試薬、和光純薬製
塩化第二銅    ：試薬、和光純薬製
（Ｃ）クエン酸混合物
クエン酸ナトリウム（二水和物）：試薬、和光純薬製
クエン酸（無水）  ：試薬、和光純薬製
（Ｄ）レシチン
レシチン（大豆由来）：  ＹＥＬＫＩＮ  ＴＳ（製品名、ＡＧＭ社製、リン脂質換算量（有効分）６３．３％）
大豆由来ＰＥ：  ホスファチジルエタノールアミン（製品名）
大豆由来ＰＣ：  L-α-ホスファチジルコリン（製品名、大豆由来；シグマアルドリッチジャパン社製）
水添大豆レシチン：  L-α-ホスファチジルコリン（製品名、和光純薬社製）
ＤＰＰＣ：  L-α-ホスファチジルコリン・ジパルミトイル（製品名、和光純薬社製）
（Ｅ）ポリフェノール
カテキン製剤：  ポリフェノン（製品名、三井農林株式会社製、茶抽出物。カテキン含有量３０％、カテキン類の組成は表３の通り）
クルクミン：  ウコン根茎抽出物（製品名、横浜油脂工業株式会社製、含有量１５％以上）
クエルセチン：  タマネギ外皮・薄皮抽出物（製品名、横浜油脂工業株式会社  含有量５．０％以上）
ミリシトリン：  サンメリンＹＯ−１８４４（製品名、三栄源エフ・エフ・アイ株式会社製）
（Ｘ）その他の抗酸化剤
δ−トコフェロール：  タマ生化学株式会社製
Ｍｉｘ−トコフェロール：  Archer  Daniels  Midland  Company製
【００４１】
【表２】
0005886540.tif 000003
【００４２】
【表３】
0005886540.tif 000004
【００４３】
＜抗酸化剤の評価方法＞
調製した試料を、自動油脂安定性試験装置（「ランシマット７４３」、メトローム社製）に取り付け、２０ｍＬ／ｍｉｎの条件で空気をバブリングしながら１２０℃に保ち、電気伝導率を測定する。経時時間に対する電気伝導率をプロットし、図1のようにして立ち上がりの時間（単位：時間）を求め、安定性の評価とする。これは、酸化により電気伝導率が増加するという原理に基づく評価であり、立ち上がり時間が長いことは酸化に対する耐性が高いことを意味する。
【００４４】
試験例
抗酸化剤として（Ｃ）クエン酸混合物、（Ｄ）レシチン及び（Ｘ）他の酸化剤を用いた場合の試験結果を表４に、さらに（Ｅ）ポリフェノールを加えた場合の試験結果を表５に示す。
【００４５】
【表４】
0005886540.tif 000005
【００４６】
【表５】
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【００４７】
＜ランシマット立ち上がり時間の見方＞
抗酸化剤の効果は、それを添加する前の組成に比べて、立ち上がり時間が延びているかどうかを判断基準とした。また、これまでの経験から、ペットフードに用いる油脂はランシマットの立ち上がり時間（以下立ち上がり時間とする）が３時間以上であることが好ましいと考えられるので、これを好ましい組成と評価した。
【００４８】
＜油脂の脂肪酸組成の違いによる比較＞
試験番号１−３２及び３７−４０では、油脂ａ１（二重結合を３つ以上有する不飽和脂肪酸を１３．０%含有）を用いているが、脂肪酸組成による抗酸化効果評価の比較のためａ２（同不飽和脂肪酸を２．８%含有）を用いた試験を試験番号３３−３６で行った。油脂単独の立ち上がり時間ではａ１が２．２時間、ａ２が１１．９時間と大きな違いを生じているが、ミネラルが入ることでａ１が０．５時間、ａ２が０．７時間とほぼ同じ抗酸化力まで大幅に減少する。これにクエン酸混合物を添加することによりａ２では６．７時間と十分なレベルまで回復するが、ａ１では油脂単独時のレベルである２．２時間までしか回復しない。つまり、高度不飽和脂肪酸含有量が高い油脂の場合には、より高い抗酸化力を得るために、より技術的な工夫が必要であると考えられる。
【００４９】
＜クエン酸＋クエン酸塩の効果をさらに高める素材＞
試験番号１０−１２及び１６で検討を行った。油脂、ミネラル、クエン酸の系で各抗酸化剤を、表４に示す有効分換算量（有姿で１．０％）で添加した結果を示す。レシチン（大豆由来）のみにクエン酸混合物の効果をさらに高める効果が認められた。
【００５０】
＜クエン酸混合物の量について＞
試験番号１３−１８及び２９−３２において、クエン酸混合物の量をミネラルの量に対して変えることによって抗酸化力の変化を確認した。ミネラルに対するクエン酸混合物のモル比（後者／前者）が６．７倍では、レシチン無添加と比較して抗酸化力向上効果が見られず、むしろ低下する傾向にあった。同モル比１０倍ではレシチンの添加効果が見られ、対油脂３．０％ではランシマット時間が３時間を超え十分な安定性となった。モル比が２０倍のときにレシチンの添加量が対油脂０．６%で十分な効果が得られた。ミネラル含有量を３倍に高めた場合（試験番号２９−３２）においてもモル比が６．７倍ではレシチンの添加効果が見られず、モル比が２０倍のときにレシチンの添加効果が見られ、レシチン対油０．６%で十分な結果となった。
【００５１】
＜レシチンの種類と量に関して＞
商業的あるいは工業的にペットフードに使用可能なレシチンとして、大豆レシチンのアセトン不溶分を基準として量の規定を行った。また、大豆レシチンのグリセロリン脂質の大豆ＰＣ及び大豆ＰＥ各単独成分を用いた実験も行った（試験番号１５−２５）。その結果、成分として一番多いＰＣよりもＰＥに強い活性が認められた。また、試験番号１９−２３の結果からはＰＥの含有量に抗酸化効果が依存していることがわかった（図３）。
【００５２】
＜ポリフェノールの評価について＞
試験番号３７−４０では、上記クエン酸混合物及びレシチンに加え、各種ポリフェノールを添加した場合の抗酸化力評価を行った。カテキン類は立ち上がり時間が長くなり、抗酸化力が劇的に上がることが示された。クルクミン、クエルセチン、ミリシトリンを加えた場合にも抗酸化力の向上が見られた。カテキン類を代表として調べると（試験番号７及び１０）、単独で添加した場合及びクエン酸混合物共存状態（レシチンなし）においても抗酸化力が向上していないことから、抗酸化力を向上させる効果はクエン酸、レシチン、カテキン類すべて共存する系において初めて発現される効果である。
【００５３】
＜ペットフードにおける抗酸化力の評価＞
実施例１〜２、参考例及び比較例１〜２
表６に示す組成の原料を用い、エクストルーダーで混合押出成型をすることにより、直径１０ｍｍ、長さ約１０ｍｍの円柱状のペットフード（キブル）を製造した。嵩密度は４７２ｋｇ／ｍ3であった。
【００５４】
実施例１のペットフードから抽出した油脂のグリセリド又は脂肪酸組成、二重結合を２つ、及び３つ以上有する不飽和脂肪酸含有量を表７〜９に示す。
【００５５】
ペットフードに含まれる全油脂は１５％、ペットフード中の二重結合を２つ以上有する不飽和脂肪酸の含有量は２７．２％、また３つ以上有する不飽和脂肪酸の含有量は６．７％であった。
【００５６】
【表６】
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【００５７】
【表７】
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【００５８】
【表８】
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【００５９】
【表９】
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【００６０】
＜油脂の臭いの評価方法＞
室温（約２０℃）で１６週間保存し、油脂の臭いの変化を５名のヒトによる官能で評価した。気にならない範囲の順から、「変性臭がほとんど感じない」と答えた人数が「４名以上」を○、「２〜３名」を△、「１名以下」を×と表わした。
【００６１】
＜安定性試験方法＞
室温（約２０℃）で保存を行い、１６週目に、含有する油脂のＰＯＶ（過酸化物価）の測定及び評価を以下の手順で行った。
【００６２】
＜ＰＯＶ（過酸化物価）の測定方法＞
過酸化物価（ＰＯＶ）については、日本油脂化学会制定の「規準油脂分析試験法」の２．４．１２．２−９４「過酸化物価」に従って分析した。
（１）ペットフードからの油脂の抽出
５０ｇのキブルを粉砕し、１ｍｍ目開きのふるいに通し、そのサンプルを円筒ろ紙に充填し、コック付きのオープンカラムにセットした。コックを閉じたまま、上方から滴下ロートで１５０ｍＬのジエチルエーテルを滴下し、滴下終了後カラムのコックを開けてジエチルエーテルを回収した。次に、５０ｍＬジエチルエーテルにて同様の操作を行った。回収したジエチルエーテルをエバポレーターにより除去し、ペットフードからの抽出油脂を得た。
【００６３】
（２）油脂のＰＯＶ測定
ペットフードから抽出した油脂０．５ｇを２５０ｍＬのトールビーカーに量り取り、酢酸／イソオクタン＝３／２（容積比）の溶液２０ｍＬ溶かした。０．１ｍＬの飽和ヨウ化カリウム溶液をそのトールビーカーに加え、１分間よく振とうした。その後、３０ｍＬの蒸留水を加え滴定サンプルとした。この滴定サンプルを０．０１Ｎチオ硫酸ナトリウムで滴定した。このとき、メトロームシバタ（株）のＰＯＶ自動滴定装置、ＤＭＰティトリーノ７８５型を使用した。
【００６４】
（３）抗酸化効果の評価
油脂のＰＯＶの上昇値（１６週間）が５以下の場合を◎、５を超え７の場合を○、７を超え９の場合を△、９を超える場合を×として、表６に示した。なお、無添加及びカテキン単独配合の場合のＰＯＶの上昇値は１３程度であった。
＜酸素消費量の測定＞
ペットフードの酸化反応の指標として、本試験では酸素消費量を測定した。
【００６５】
＜クエン酸換算値の測定方法＞
ミキサーで砕いたキブル（３．０ｇ）に５％過塩素酸５ｍＬを加え、１０分間震とうする。震とう後、５０ｍＬのメスフラスコで定容する。１０分間超音波処理を行い、ろ過した溶液を用い高速液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）法で測定する。なお、ＨＰＬＣ測定条件は以下の通りである。
カラム：Shodex Rspak KC-811  ２本、直径８ｍｍ×長さ３００ｍｍ（昭和電工株式会社製）
カラム温度：４０℃
移動相：３ｍｍｏｌ／Ｌ過塩素酸水溶液
反応液：０．２ｍｍｏｌ／Ｌブロムチモールブルー含有１５ｍｍｏｌ／Ｌリン酸水素二ナトリウム水溶液
流量：移動相１．０ｍＬ／分、反応液１．４ｍＬ／分
測定波長：４４５ｎｍ
【００６６】
＜ＰＥ量（リン脂質換算値）の測定方法＞
ペットフードから油脂をクロロホルム：メタノール＝２：１の溶剤で抽出した。抽出した油脂中のリン含量を定量した。油脂中のリン含量の定量は、基準油脂分析試験法（日本油化学協会）の２．４．１１−１９９６リン脂質比色法を用いて行った（リン量からの換算係数２５．４）ペットフード中の含有量としては油脂中の含有量にペットフード中の油脂含有量を乗じて求めた。
リン脂質組成（薄層クロマトグラフ法）基準油脂分析試験法  ４．３．３．１−１９９６法に従ってＰＥのリン脂質中の百分率を求め、上記リン脂質換算値を乗じＰＥの濃度とした。
【００６７】
表６の結果から、クエン酸とレシチンの２成分系及びそれにカテキンを添加した３成分では、安定性が著しく向上した。なお、実施例１及び２のペットフード中ＰＥ含量は０．０４％であった。
【００６８】
＜ペットフードにおける抗酸化力の評価その２＞
実施例３、４及び比較例３
表１０に示す組成の原料を用い、エクストルーダーで混合押出成型をすることにより、直径８．５ｍｍ、長さ約５．５ｍｍの円柱状のペットフード（キブル）を製造した。嵩密度は４２８ｋｇ／ｍ3であった。
【００６９】
実施例３のペットフードから抽出した油脂のグリセリド又は脂肪酸組成、二重結合を２つ、及び３つ以上有する不飽和脂肪酸含有量を表１１〜１２に示す。
【００７０】
ペットフードに含まれる全油脂は１５％、ペットフード中の二重結合を２つ以上有する不飽和脂肪酸の含有量は２７．２％、また３つ以上有する不飽和脂肪酸の含有量は６．７％であった。
【００７１】
【表１０】
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【００７２】
【表１１】
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【００７３】
【表１２】
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【００７４】
＜油脂の臭いの評価方法＞
４０℃で８週間保存し、油脂の臭いの変化を５名のヒトによる官能で評価した。気にならない範囲の順から、「変性臭がほとんど感じない」と答えた人数が「４名以上」を○、「２〜３名」を△、「１名以下」を×と表わした。
（３）抗酸化効果の評価
油脂のＰＯＶの上昇値（４０℃８週間）が  ５以下の場合を◎、５を超え７未満を○７を超え10未満の場合を△、１０を超える場合を×として、表１０に示した。
【００７５】
＜酸化安定性の定量法＞
ペットフードの酸化安定性の指標として保存後のＰＯＶの値を用いてきた。これは油脂の二重結合部に酸素が反応し過酸化物が精製しそれを定量するものである。油脂の劣化を計るにはとても良い指標であり最も一般的な方法である。しかしながら、ＰＯＶの上昇を測定するためには、加速試験である４０℃保存で少なくとも２ヶ月、常温においては４ヶ月もの時間が必要であり時間がかかることが問題点として指摘されてきている。また、この過酸化物は酸化の最終生成物ではなく、反応性にとみ、次いでカルボニル基さらにはカルボキシル基に自動酸化によって変化していくものである。特に高温においては明らかに酸化反応が進んでいるにも関わらずＰＯＶが変化しないあるいは減少するといった現象が起こるという問題点も見出されている。したがって、本発明では酸化反応の指標として減少する酸素の量を測定することによりトータルの酸化反応を評価することを試みた。
【００７６】
＜酸素消費量の測定方法＞
ペットフードを５０ｇはかりとりアルミニウムで積層された包材で密封し４０℃の恒温槽に保存し中の空気の酸素濃度Ｘt（％）を１週間毎に測定し酸素の減少速度を計算した。最初に包材中に存在する空気の容量Ｖ（ｍＬ）を測定し、ペットフードグラムあたりの酸素の消費量を下記計算で求めた。
酸素消費量（ｍＬ）＝Ｖ・（２０．８−Ｘt）／１００
保存期間と酸素消費量の関係を測定したが、とても良い直線関係にあることがわかり、直線の傾きをペットフードの安定性の指標とした。
【００７７】
多価不飽和脂肪酸含有量が高いペットフードにおいてもクエン酸及びレシチンを配合することで安定性が著しく向上した。またこの試験でレシチンだけを配合してクエン酸を配合しない場合は安定性が十分でないこともわかった。
【００７８】
安定性の指標として酸素消費量が有効である。ＰＯＶ及び官能評価の結果から酸素消費量の評価として１．２未満が◎  １．２以上１．６未満が○  １．６以上２．０未満が△  ２．０以上が×とした。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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