(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体から採取した脂肪組織にガンマ線を２０−５００ｋＧｙの線量まで照射する工程、及び
ガンマ線が照射された脂肪細胞を遠心分離する工程を含むことを特徴とする免疫を除去した生脂肪材料の製造方法。
【請求項２】
ガンマ線の照射は−６０℃〜―１０℃の低温で行われることを特徴とする請求項１に記載の免疫を除去した生脂肪材料の製造方法。
【請求項３】
ドライアイス、低温のイソプロピルアルコール、氷及び低温の金属塊から選ばれる低温保持材料をガンマ線照射域に置くことにより前記低温が維持されることを特徴とする請求項２に記載の免疫を除去した生脂肪材料の製造方法。
【請求項４】
前記生体から採取した脂肪組織を密封するために、ガンマ線を照射する工程の前に、更に充填工程を含み、
前記脂肪組織は、ガンマ線照射処理が可能な容器に充填され、且つ
前記容器は開閉が可能な蓋を有することを特徴とする請求項１に記載の免疫を除去した生脂肪材料の製造方法。
【請求項５】
前記容器は、ポリカーボネート、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ポリエチレンテレフタレート及びガラスから選ばれるガンマ線照射可能な少なくとも１つの材料から形成されることを特徴とする請求項４に記載の免疫を除去した生脂肪材料の製造方法。
【請求項６】
前記容器は、少なくとも２層のパッキンにより密閉されることを特徴とする請求項４に記載の免疫を除去した生脂肪材料の製造方法。
【請求項７】
前記パッキンの少なくとも１層は昼光の透過を防ぐ材料から成ることを特徴とする請求項６に記載の免疫を除去した生脂肪材料の製造方法。
【請求項８】
ガンマ線を照射する前又は後、あるいはガンマ線を照射する前後に、更に微粉砕する工程を含むことを特徴とする請求項１に記載の免疫を除去した生脂肪材料の製造方法。
【請求項９】
前記生体から採取した脂肪組織は、ガンマ線を照射する前に凍結され、ガンマ線を照射した後に解凍されることを特徴とする請求項１に記載の免疫を除去した生脂肪材料の製造方法。
【請求項１０】
ガンマ線を照射した後に、更に脂質を除去する工程を含むことを特徴とする請求項１に記載の免疫を除去した生脂肪材料の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、免疫を除去した生脂肪材料及びその製造方法に関する。特に、採取したヒトの脂肪組織から免疫を除去した後に、別のヒトに移植する生脂肪材料に関する。
【背景技術】
【０００２】
過去２世紀の間、ボリューム置換のためにヒトの体に注入する多数の材料が様々の方法により試みられてきた。例えば、過去に用いられていたシリコーン及びパラフィンは、肉芽腫など免疫に関連する問題を誘発することが知られているため、現在ではほとんど用いられることはない。
【０００３】
ヒト又は動物から得られた同種真皮又は同種骨は、移植に使われるように処理される。しかしながら、そこから免疫タンパク質及び免疫細胞を用いて抗原性を除去するのに余分に種々の化学処理が必要で、同意を得るのに時間が掛る。更に、処理時に不都合な反応が起こる恐れがあり、免疫タンパク質及び免疫細胞を用いて抗原性の除去が１００％補償される訳ではない。また、処理工程は、極めて大きなコストを要し、移植に必要な原料材料を準備するには屍体の提供が不十分であり、材料のコストは約５００米ドル／ｃｃと高く、移植を必要とする患者には、大きな経済負担となる。
【０００４】
最近の内外の関連技術を眺めると、自身の皮膚の表皮細胞及び皮下組織細胞を培養することにより得られる、非細胞人工皮膚から層状の生皮膚等価物（ＬＳＥ：ｌｉｖｉｎｇ  ｓｋｉｎ  ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ）など、広範な種々の人工皮膚が開発の途上にあり、商業化も近い。これらの生成物は、同種組織を用いて無細胞の処理を行うか又はコラーゲンなどの生体材料中に調整されるので、極めて高価である。細胞ＬＳＥは、迅速に皮膚の傷を治癒し且つ傷痕を縮小するとの優れた皮膚の回復効果があり、自律性細胞又は処理された同種組織は、免疫の拒絶反応が無いと報告されている。
【０００５】
韓国においては、キトサン、コラーゲン及びキチンを用いた基質型（ｍａｔｒｉｘ−ｔｙｐｅ）人工皮膚が商業化されている。基質上に皮膚細胞を培養した培養皮膚は、臨床試験中であるが、大量生成にはまだ問題が残っている。特許文献１には、ＳｕｒｅＤｅｒｍの名で製品化された移植用の無細胞皮膚層が開示され、韓国外から輸入された組織回復用の生体材料との置換えが可能となった。しかしながら、ヒトの皮膚の獲得に関するかなり厳しい規則のため、まだ少量の生体材料が輸入されている。「フィラー」として周知のこれら材料は、動物由来の材料、人工的に合成した材料、ヒト由来の組織などを用いて製造されるが、使用に際しての便利さ、堅牢性及びコストの面で問題がある。
【０００６】
例えば、牛のコラーゲンを用いた注入材としてのＺｙｄｅｒｍ（登録商標）、ポリメチル−メタクリレートのビーズとコラーゲンの混合液であるＡｒｔｅｃｏｌｌ（登録商標）、改変したヒアルロン酸を用いた生成物であるＲｅｓｔｙｌｅｎｅ（登録商標）、ＡｌｌｏＤｅｒｍ（登録商標）を処理した粉体Ｃｙｍｅｔｒａ（登録商標）などこれらの材料にふくまれる。（米国、ＬｉｆｅＣｅｌｌ社の）ＡｌｌｏＤｅｒｍ（登録商標）は、提供されたヒトの屍体の皮膚を処理して同種無細胞真皮であり、移植片又は挿入断片として商品化されている。上記製品では、拒絶反応の可能性を除くために細胞は全て除去されており、ヒトの組織をそのまま用いた周知の全ての人工皮膚よりも生体適合性があることが特徴である。韓国でも、類似の製品が開発されているが、提供される屍体数が不十分であるので、大部分は輸入された材料である。
【０００７】
更に、肥満体の患者から採取された脂肪組織は、放棄されるか又は後に使用するために保存される。脂肪組織に大量に在る脂質滴内のトリアシルグリセロール及びステロールのエステルなどの中性脂質は、酸化、部分酸化及び加水分解により損なわれるので、２ケ月以上保存した脂肪組織は使えない。脂質は、その不飽和率の高い脂肪酸の酸化により、タンパク質などアミノ酸化合物と反応して、変色、減少を引き起こす生成物が生成され、また過酸化物又は不飽和アルデヒドなどの毒性のある材料が生成される。
【０００８】
また、ヒト以外の豚、牛などの動物の脂肪組織は、液状の脂質の含量（５０〜７０％）がヒトよりも低く、部分的に皮下脂肪筋（ｐａｎｉｃｕｌｕｓ  ｍｕｓｃｕｌａｒｉｓ）と結合する。それに対して、ヒトの脂肪組織は、同種真皮又は筋肉層として区別でき、動物よりも液状の脂質含量が著しく高く、ヒトの脂肪組織を用いた移植用の材料の開発は目立つほどには進捗していない。脂肪組織中の液状の脂質の含量は約９８％であるので、脂肪組織の保存又は生体移植の際に問題がある。更に、脂肪組織は、細胞培養におけるあらゆる要因を含んでいるので、脂肪組織から移植用の材料を開発する試みは少ない。しかしながら、脂肪組織から脂質を除いても、ある程度微細構造が維持され、滅菌の際に脂肪組織の容量が部分的に維持され、且つ免疫の除去が可能であれば、脂肪組織は生体移植の材料として用いることができる。
【０００９】
最近、生体内の効果又は細胞培養に関しては、材料の容量が重量よりも重要であるとの推測に基づいて、多数の細胞を育成してスポンジの様な構造に分化させることが報告されている。従って、微細構造及び滅菌状態を維持したまま、脂肪細胞から免疫を除去できれば、脂肪細胞は他の生体材料よりも移植に有用な材料となる。
【００１０】
その結果、長期保存が可能で、長距離輸送ができ、免疫を除去して他人に移植可能とした脂肪組織を用いて、移植用の生きた脂肪材料を開発する要求がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】韓国特許第１０−０４６９６６１号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
上記の問題点を解決するために、本発明は、長期保存及び長距離輸送に耐えるヒトの移植用材料として用いられる生脂肪材料を提供することを目的としている。
【００１３】
本発明は、脂肪組織から脂質を除去して、担体として細胞が付着するのに適した表面を有する生脂肪材料を提供することにもある。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明の好適な一実施態様においては、脂肪組織の採取工程、脂肪組織にガンマ線を２０〜５００ｋＧｙの線量まで照射する工程及び照射後の脂肪組織を遠心分離する工程を含むことを特徴とする、免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。
【００１５】
本発明の好適な一実施態様においては、上記ガンマ線が−６０℃〜−１０℃の低温で照射されることを特徴とする、免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。
【００１６】
発明の好適な一実施態様においては、ドライアイス、低温のイソプロピルアルコール、氷及び低温の金属塊から選ばれる低温保持材料をガンマ線照射域に置くことにより低温が維持されることを特徴とする、免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。
【００１７】
発明の好適な一実施態様においては、脂肪細胞の採取はガンマ線照射処理が可能な注射器を用いて行われる免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。
【００１８】
発明の好適な一実施態様においては、採取した脂肪組織を密封するために、充填工程を更に含むことを特徴とする、免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。上記脂肪組織は、ガンマ線照射処理ができて開閉が可能な蓋を有する容器に充填される。
【００１９】
発明の好適な一実施態様においては、上記容器はポリカーボネート（ＰＣ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）及びガラスから選ばれるガンマ線照射可能な少なくとも１つの材料から形成されることを特徴とする、免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。
【００２０】
発明の好適な一実施態様においては、材料を貯蔵する容器は、少なくとも２層のパッキンにより密閉されることを特徴とする、免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。
【００２１】
発明の好適な一実施態様においては、上記パッキンの少なくとも１層は昼光の透過を防ぐ材料から成ることを特徴とする、免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。
【００２２】
発明の好適な一実施態様においては、ガンマ線を照射する前又は後、あるいはガンマ線を照射する前後に更に微粉砕する工程を含むことを特徴とする、免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。
【００２３】
発明の好適な一実施態様においては、脂肪組織は採取した後に凍結され、ガンマ線を照射した後に解凍されることを特徴とする、免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。
【００２４】
発明の好適な一実施態様においては、ガンマ線を照射した後に、更に脂質を除去する工程を含むことを特徴とする、免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。
【００２５】
発明の好適な一実施態様においては、ガンマ線を２０〜５００ｋＧｙの線量まで照射し、遠心分離により得られた、免疫を除去した生脂肪材料を提供する。
【００２６】
発明の好適な一実施態様においては、ガンマ線は−６０℃〜−１０℃の低温で照射して得られた、免疫を除去した生脂肪材料を提供する。
【００２７】
発明の好適な一実施態様においては、ドライアイス、低温のイソプロピルアルコール、氷及び低温の金属塊から選ばれる低温保持材料をガンマ線照射域に置くことにより低温に維持して得られた、免疫を除去した生脂肪材料を提供する。
【００２８】
発明の好適な一実施態様においては、ガンマ線照射処理が可能な注射器を用いて採取した脂肪細胞から得られた、免疫を除去した生脂肪材料を提供する。
【００２９】
発明の好適な一実施態様においては、採取した脂肪細胞を密封するために、更に充填工程を経て得られた、免疫を除去した生脂肪材料を提供する。上記脂肪組織は、ガンマ線照射処理ができて開閉が可能な蓋を有する容器に充填される。
【００３０】
発明の好適な一実施態様においては、ＰＣ、ＰＰ、ＰＶＣ、ＰＥＴ及びガラスから選ばれるガンマ線照射可能な少なくとも１つの材料から形成された上記容器に収納されたことを特徴とする、免疫を除去した生脂肪材料を提供する。
【００３１】
発明の好適な一実施態様においては、少なくとも２層のパッキンにより密閉された容器に貯蔵された、免疫を除去した生脂肪材料の製造方法を提供する。
【００３２】
発明の好適な一実施態様においては、上記パッキンの少なくとも１層は昼光の透過を防ぐ材料から成るパッキンを備えた容器に貯蔵された、免疫を除去した生脂肪材料を提供する。
【００３３】
発明の好適な一実施態様においては、ガンマ線を照射する工程の前又は後、あるいはガンマ線を照射する工程の前後に更に微粉砕された、免疫を除去した生脂肪材料を提供する。
【００３４】
発明の好適な一実施態様においては、採取した後に凍結され、ガンマ線を照射した後に解凍された脂肪組織から得られた、免疫を除去した生脂肪材料を提供する。
【００３５】
発明の好適な一実施態様においては、ガンマ線を照射した後に、更に脂質を除去して得られた、免疫を除去した生脂肪材料を提供する。
【発明の効果】
【００３６】
本発明は、哺乳動物から採取した不必要な脂肪組織をヒトの移植に使用可能とする生脂肪材料及びその製造方法に関する。
【００３７】
更に、本発明の好適な一実施態様によれば、本発明の製造方法により得られた生脂肪材料は、ガンマ線の照射により免疫を除去してヒトの移植の材料として使用可能となる。
【００３８】
また、本発明の好適な一実施態様によれば、本発明の製造方法により得られた生脂肪材料は、ガンマ線の照射が可能な容器に脂肪細胞を採取することにより、ガンマ線により簡単に処理でき、容器に採取した脂肪細胞は、長期保存及び長距離輸送に耐えられる。
【００３９】
更に、本発明の好適な一実施態様によれば、本発明の製造方法により得られた生脂肪材料は、脂肪組織内の細胞膜などの微細構造はそのまま保持されるので、移植の材料として用いることができる。
【００４０】
また、本発明の好適な一実施態様によれば、本発明の製造方法により得られた生脂肪材料は、微粉砕、遠心分離などにより脂質を除去することにより細胞が十分な表面を有するようになるので、細胞を培養する担体として用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】本発明の好適な一実施態様による生脂肪組織の製造方法のフローチャート
【図２】実施例１において調整された生脂肪材料を移植されたラットの経時変化を示す写真
【図３】実施例２において調整された生脂肪材料を移植されたラットの経時変化を示す写真
【図４】実施例１及び実施例２において調整された生脂肪材料を移植されたラットの４週間後の移植部を示す写真
【図５】比較例１において調整された生脂肪材料を移植されたラットの経時変化を示す写真
【図６】比較例２において調整された生脂肪材料を移植されたラットの経時変化を示す写真
【図７】比較例１及び比較例２において調整された生脂肪材料を移植されたラットの４週間後の移植部を示す写真
【発明を実施するための形態】
【００４２】
以下本発明の実施態様を図面に基づいて説明するが、類似の部材には同じ参照符号を用いる。本発明の説明では、本発明の主要な特徴に関して間違って解釈されるのを防ぐため、周知の技術又は構成の詳細な説明は省略した。
【００４３】
特に説明しないか、文脈から明らかな場合には、独特の製品又は材料の製造に関しての用語「約（ａｂｏｕｔ）」は、その分野における許容される範囲での意味であり、以下に述べる正確な値を不実な侵害者が不当に使用することを防ぐためである。
【００４４】
本発明は、ヒトから採取した脂肪組織を滅菌して他人に移植可能とした、免疫を除去した生脂肪材料に関するものである。
【００４５】
本発明の好適な一実施態様において、採取した脂肪細胞にガンマ線を照射することにより脂肪細胞に内在する免疫を除去し、同種細胞に対する抗原性及び生物学的な反応性を破壊して得られた、免疫を除去した生脂肪材料は、他人への移植用の材料として使用できる。
【００４６】
本発明の好適な一実施態様において、ヒト又は哺乳動物から採取した脂肪組織は、バクテリア及び免疫を除去されることにより、移植用の材料として使用できる。脂肪組織を採取する方法は、特に限定されるものではなく、注射器などを用いて直接に採取してもよい。
【００４７】
採取した脂肪組織は、ガンマ線を照射される。ガンマ線は、放射性材料及び電磁波から放出された放射である。
【００４８】
脂肪組織は、ガンマ線を照射されると、内部の免疫原が不活性化される。
【００４９】
同種細胞以外が移植されると、免疫応答が誘発される。
【００５０】
身体は、移植された物を破壊するように、抗原性及び生物学的な反応性を誘発する。従って、ある人の組織が他人に移植される際には、免疫応答を防ぐために抗原性及び生物学的な反応性を除去することが不可欠となる。免疫応答の原因としては、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）に免疫応答を誘発する領域があり、免疫応答は、細胞及びＤＮＡ内にも生じる。ＥＣＭの主要な成分は、コラーゲンであり、コラーゲンの両端に免疫応答を誘発する領域がある。更に、細胞の表面及び内蔵には、多数の免疫応答物質が含まれている。
【００５１】
本発明では、免疫応答を抑制するため、即ち免疫を除去するために、脂肪細胞にガンマ線を照射した。ガンマ線を照射された細胞は、ＤＮＡが分解されて死ぬことにより破壊される。特に、脂肪細胞のＥＣＭ中の物質であるｈ脂肪ＥＣＭ（ｈ  ｆａｔ  ＥＣＭ）は、ガンマ線の照射により、免疫応答を誘発する領域において不活性化される。
【００５２】
本発明の好適な一実施態様において、採取した脂肪組織に含まれる核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）は、ガンマ線の２０〜５００ｋＧｙの線量までの照射により不活性化され、ＥＣＭ内の免疫が除去され、脂肪組織はそこに含まれるバクテリアなどが効率的に破壊されて滅菌される。
【００５３】
本発明の好適な一実施態様において、ガンマ線は２０〜５００ｋＧｙ、好ましくは４０〜１５０ｋＧｙの線量まで照射する。ガンマ線の照射線量が２０〜５００ｋＧｙ内ならば、脂肪組織は、変性されることなく、その核酸を不活性化することにより免疫が除去され、そこに含まれるバクテリアも除去できる。本発明の好適な一実施態様において、ガンマ線の照射時間は、線量により変わるが、例えば、９０〜１００時間では、８０ｋＧｙの線量となり、１１０〜１２０時間では、１２０ｋＧｙの線量となる。
【００５４】
ガンマ線は、低温、−６０℃〜−１０℃で照射することが好ましい。
【００５５】
低温でガンマ線を照射する場合には、低温保持材を用いてもよい。ドライアイス、冷却したイソプロピルアルコール、氷及び冷却した金属塊から選択される低温保持材をガンマ線の照射域に設置して低温に保つ。定温保持材としてドライアイスを用いる場合には、温度は降下して約−６０℃の低温でガンマ線の照射が行われる。ガンマ線の照射を低温で行う場合には、脂肪細胞は直接に定温保持材料に接しないように容器中に密封することが好ましい。
【００５６】
本発明の好適な一実施態様において、脂肪組織は、ガンマ線での処理が可能な注射器を用いて採取される。脂肪組織をガンマ線での処理が可能な注射器を用いて採取すると、採取した脂肪組織を他の容器に移す必要がなく便利であり、且つ採取した脂肪組織を密封した状態に維持できる。
【００５７】
本発明の好適な一実施態様において、採取した脂肪細胞は、密封した容器に充填してもよい。脂肪細胞の充填は、採取に脂肪細胞が入った容器を用いてもよい。更に、容器はガンマ線での処理が可能である。特に、容器は、外側からしっかりと密封できる容器を開閉する蓋を備えてもよい。この蓋は別の容器にも適用可能となっている。蓋は少なくとも１つ、２つが好ましい。
【００５８】
本発明の好適な一実施態様において、充填可能な容器に用いられる材料は、ガンマ線での処理が可能であることが好ましく、例えば、少なくともＰＣ、ＰＰ、ＰＶＣ、ＰＥＴ及びガラスから選ばれるものである。ガンマ線での処理が可能な材料の厚さは約０．３〜３ｍｍで、ガラスの場合には約１〜１５ｍｍである。厚さが上記の範囲であれば、ガンマ線での処理が簡単であり、移動及び貯蔵にも便利である。
【００５９】
本発明の好適な一実施態様において、容器は少なくも２層のパッキン、好ましくは３層のパッキンにより密閉される。パッキンを少なくとも２層とするのは、長距離輸送又は長期間の保存により損傷した外側のパッキンを消毒するためである。
【００６０】
更に、少なくとも２層のパッキンでは、１層を昼光の透過を防ぐ材料から形成することができる。昼光の透過させない層を備えたパッキンを製造することにより、長距離輸送中又は長期間の保存中の損傷、あるいは容器内の脂肪組織が昼光により損傷される恐れを防止する。
【００６１】
本発明の好適な一実施態様において、昼光の透過を防ぐ材料の例としては、アルミニウムなどの金属があるが、これに限定される訳はない。
【００６２】
本発明の好適な一実施態様において、ガンマ線の照射前又は照射後、あるいは照射の前後において、生脂肪組織を微粉砕してもよい。
【００６３】
微粉砕は、脂肪組織に含まれる脂質、油など不必要な物質を脂肪組織から分離するために行われる。
また、ガンマ線の照射後に、脂肪組織の遠心分離を行ってもよい。遠心分離は、脂肪組織の移植に不必要な物質を分離するために行われる。すなわち、脂肪組織の遠心分離は、移植に必要なＥＣＭから脂質、油、水などを分離するために行われる。脂肪組織を遠心分離することにより、脂肪組織内に在るトリアシルグリセロール、ステロールエステルなどの脂質、油、水などを分離して、脂肪組織内に在るＥＣＭが抽出されることになる。
【００６４】
多細胞構造の細胞外の一部であるＥＣＭは、人工的には合成できない、細胞から分泌された種々の３次元構造の機能性分子から成っている。ＥＣＭは、構造を保持すると同時に、圧縮強度、弾性、浸透圧及びイオンの浸透の調整を決める重大な役割を果たしている。
【００６５】
更に、ＥＣＭは、細胞接着及び細胞増殖を助ける。従って、ＥＣＭを別の人間に移植すると、細胞がＥＣＭに接着してそこから増殖することができるので、移植の材料として有用である。
【００６６】
また、採取した脂肪組織はガンマ線照射前に凍結させてもよい。凍結することにより、採取した脂肪組織を分解させずに保存でき且つ長距離輸送することが可能となる。
【００６７】
凍結された脂肪細胞は、滅菌前に解凍して、ガンマ線が照射されて免疫が除去される。
【００６８】
本発明の好適な一実施態様において、生脂肪材料の処理には、更に脂質の除去工程を含んでもよい。遠心分離のみによって、脂質を除去するのではなく、遠心分離の前に脂質の除去工程を加えてもよい。
【００６９】
脂質は、種々の方法により除去できる。
【００７０】
第一に、内部に微細構造が形成された固体材料を用いて、脂質の表面張力により浸透させて脂質を吸着させて除去することもできる。固体材料の例としては、パルプ、フィルター、スポンジなどがあり、脂質に接触させて脂質を吸着させて脂質を除去できる。
【００７１】
別の方法としては、固体材料の表面との結合において、脂質と競合する親水性材料を用いて脂質を除去してもよい。親水性材料の例には、水、アルコールなどが含まれる。脂質を固定材料から分離するために、水又はアルコールを脂肪細胞と混合しもよい。
【００７２】
更に別の方法として、脂質組織間の相対的な動きを促進させて、相互の接触の機会を増大させることによって脂質を分離、除去してもよい。この方法の例には、振動、回転、傾斜面における回転、所定の範囲の循環、振とうなどが含まれる。
【００７３】
更に、脂質を有機溶媒に溶解させて除去してもよい。
【００７４】
このようにして得られた生脂肪材料は、再度の充填、貯蔵又は輸送でき、患者への移植に用いることもできる。
【００７５】
このようにして得られた生脂肪材料は、免疫が除去されて壊死が起こらないので、ヒトに移植する材料として用いられる。更に、この脂肪細胞は、長期保存が可能で、その微細構造が保たれているので、移植用の材料として用いることができる。また、微粉砕及び遠心分離により脂質を除去すると、細胞が付着する表面が生成されて、細胞培養の担体として供することができる。
【００７６】
以下図面を用いて実施例を説明する。実施例中の変形は、当然ながら当業者にとっては明白であり、本発明の範囲内にある。
【００７７】
図１には、本発明による生脂肪材料の製造方法のフローチャートを示す。
【実施例１】
【００７８】
注射器を用いて、ある人から脂肪組織を採取し、ガンマ線に曝露した。使用した注射器は、ガンマ線での処理が可能であり、注射器自体をガンマ線に曝露した。約１２０時間で、線量１２０ｋＧｙのガンマ線を照射した。ガンマ線の照射中は、注射器を低温に保つため氷に接触させた。ガンマ線照射分後に、脂肪組織を３５００ｒｐｍにて５分間遠心分離して、脂肪組織から水、油及び脂質を分離して、生脂肪材料を得た。このようにして得られた生脂肪材料を９匹の実験用ラットに注入し、結果を観察した。
【実施例２】
【００７９】
注射器を用いて、ある人から脂肪組織を採取して微粉砕した。微粉砕した脂肪組織を、ガンマ線処理可能な充填容器に入れガンマ線を照射した。約９０時間で、線量８０ｋＧｙのガンマ線を照射した。ガンマ線の照射中は、注射器を低温に保つため氷に接触させた。ガンマ線照射分後に、脂肪組織を３５００ｒｐｍにて５分間遠心分離して、脂肪組織から水、油及び脂質を分離して、生脂肪材料を得た。このようにして得られた生脂肪材料を９匹の実験用ラットに注入し、結果を観察した。
【００８０】
［比較例１］
注射器を用いて、ある人から脂肪組織を採取して、ガンマ線を照射せずに３５００ｒｐｍにて５分間遠心分離して、脂肪組織から水、油及び脂質を分離して、生脂肪材料を得た。このようにして得られた生脂肪材料を９匹の実験用ラットに注入し、結果を観察した。
【００８１】
［比較例２］
注射器を用いて、ある人から脂肪組織を採取して微粉砕した。微粉砕後、ガンマ線を照射せずに３５００ｒｐｍにて５分間遠心分離して、脂肪組織から水、油及び脂質を分離して、生脂肪材料を得た。このようにして得られた生脂肪材料を９匹の実験用ラットに注入し、結果を観察した。
【００８２】
図２及び図３には、実施例１及び実施例２に記載の生脂肪材料を実験用ラットに注入してから所定の経過日数後のラットの写真を示している。図４には、実施例１及び実施例２の４週間後の注入した部分のラットから切出しの写真を示している。図５及び図６には、比較例１及び比較例２に記載の生脂肪材料を実験用ラットに注入してから所定の経過日数後のラットの写真を示している。図７には、比較例１及び比較例２の４週間後の注入した部分のラットから切出しの写真を示している。
【００８３】
比較例１及び比較例２において、注入した生脂肪材料から免疫を除去していないので、図５及び図６には注入８日後の実験用ラットに壊死及び創傷が観察され、１２日後には壊死が悪化している。この結果から、ラットの体内にある免疫を除去していない生脂肪材料は、非自源性細胞として損傷されたと思われる。損傷された細胞の一部は、後に回復が認められる（図６の３３日後の写真参照）。
【００８４】
図示してはいないが、生脂肪材料を注入した９匹の実験用ラット全てにも壊死が認められた。
【００８５】
更に図７に示すように、生脂肪材料を注入して４週間後の切出しには、生脂肪材料の初期の形状は消失していることが観察された。特に、生脂肪材料が移植され部分に近い皮膚には、壊死が観察され、皮膚の内部においては移植された脂肪が分解されて初期の形状が消失していた。
【００８６】
図２及び図３において、免疫を除去した生脂肪材料を実験用ラットに注入しているので、生脂肪材料は抗原としては反応せず壊死も起こさないが、移植されたラットの一部を占めて定着することが認められる。
【００８７】
すなわち、移植されたラットには壊死又は創傷がなく、生脂肪材料を注入されたままの外形を保っていることが確認された。
【００８８】
図４は、生脂肪材料を注入したラットの４週間後の切出しの写真であり、生脂肪材料を注入されたままの外形の少なくとも９０％は保っていることが観察された。
【００８９】
上述のことから、本発明の生脂肪材料は免疫を除去されており、目立つ程の変化もなく生脂肪材料を注入されたままの外形を保っているので、移植の材料に適していることが確認された。
【００９０】
以上、本発明の好適な実施態様を詳細に説明したが、本発明の保護範囲は上記に限定されるものではなく、特許請求の範囲に記載の発明の種々の置換、改造及び変更も、当業者には明白であり、本発明の保護範囲に含まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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