(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
第２族元素に属する金属、第１２族元素に属する金属、第１３族元素に属する金属および遷移元素に属する金属のうち少なくとも１種を含有する金属化合物を含み、ｐＨが３〜９の含水媒体中に、平均分子量が２，０００〜１０万のヒアルロン酸および／またはその塩を分散させる工程を含み、
前記金属化合物は、有機酸金属塩または無機酸金属塩であり、
前記第２族元素に属する金属は、マグネシウム、カルシウム、およびバリウムであり、
前記第１２族元素に属する金属は、亜鉛であり、
前記第１３族元素に属する金属は、アルミニウムであり、
前記遷移金属は、スカンジウム、イットリウム、ランタノイド元素、アクチノイド元素、チタン、ジルコニウム、ハフニウム、バナジウム、ニオブ、タンタル、クロム、モリブデン、タングステン、マンガン、テクネチウム、レニウム、鉄、ルテニウム、オスミウム、コバルト、ロジウム、イリジウム、ニッケル、パラジウム、白金、銅、銀、および金である、ヒアルロン酸金属塩の製造方法。
【請求項２】
前記分散させる工程の後、前記含水媒体を除去して得られた残留物を加熱乾燥させる工程をさらに含む、請求項１記載のヒアルロン酸金属塩の製造方法。
【請求項３】
前記含水媒体における水の割合は５〜５５容量％である、請求項１または２に記載のヒアルロン酸金属塩の製造方法。
【請求項４】
前記含水媒体に使用される媒体は、エタノール、メタノール、およびアセトンから選ばれる少なくとも１種である、請求項１ないし３のいずれか１項に記載のヒアルロン酸金属塩の製造方法。
【請求項５】
前記金属化合物が亜鉛化合物、マグネシウム化合物、カルシウム化合物、コバルト化合物、銀化合物、および銅化合物から選択されるいずれか１種である、請求項１ないし４のいずれか１項に記載のヒアルロン酸金属塩の製造方法。
【請求項６】
前記有機酸金属塩を構成する有機酸イオンまたは無機酸金属塩を構成する無機酸イオンが弱酸イオンである、請求項１ないし５のいずれか１項に記載のヒアルロン酸金属塩の製造方法。
【請求項７】
前記含水媒体の体積に対する前記金属化合物の量が、５〜５００ｍｇ／ｍｌである、請求項１ないし６のいずれか１項に記載のヒアルロン酸金属塩の製造方法。
【請求項８】
前記ヒアルロン酸および／またはその塩の使用量１質量部に対する前記金属化合物の使用量が、０．０５〜２０質量部である、請求項１ないし７のいずれか１項に記載のヒアルロン酸金属塩の製造方法。
【請求項９】
１％水溶液の動粘度が０．３〜５ｍｍ２／ｓであり、かつ、１ｇ当たりの亜鉛含有量が５０〜１３０ｍｇである、ヒアルロン酸亜鉛。
【請求項１０】
請求項９に記載のヒアルロン酸亜鉛を含有する化粧料。
【請求項１１】
有機酸亜鉛塩または無機酸亜鉛塩である亜鉛化合物を含み、ｐＨが３〜９の含水媒体中に平均分子量２，０００〜１０万のヒアルロン酸および／またはその塩を分散させて、１％水溶液の動粘度が０．３〜５ｍｍ２／ｓであるヒアルロン酸亜鉛を得る工程を含む、ヒアルロン酸亜鉛の製造方法。
【請求項１２】
前記含水媒体中に分散させるヒアルロン酸および／またはその塩の平均粒子径が、５０〜５００μｍである、請求項１１に記載のヒアルロン酸亜鉛の製造方法。
【請求項１３】
前記含水媒体における水の割合は２０〜５５容量％である、請求項１１または１２に記載のヒアルロン酸亜鉛の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒアルロン酸金属塩の製造方法、ヒアルロン酸金属塩を含む化粧品の製造方法、ならびにヒアルロン酸亜鉛およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒアルロン酸と金属との複合体であるヒアルロン酸金属塩として、例えば、創傷、火傷等の治療への利用が期待されるヒアルロン酸亜鉛や、ヒアルロン酸カルシウム、ヒアルロン酸銅が知られている。【０００３】
例えば、特許第２５７１３１２号明細書には、除プロトン化されたヒアルロン酸と亜鉛またはコバルトイオンとの複合体を調製するための方法が開示されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
特許第２５７１３１２号明細書記載の方法では、等量の亜鉛またはコバルトの塩を含む水溶液をヒアルロン酸ナトリウムの水溶液に添加した後、沈殿させることにより、ヒアルロン酸と亜鉛またはコバルトイオンとの会合物（複合体）を得る。この特許第２５７１３１２号明細書記載の方法では、原料のヒアルロン酸ナトリウムを水溶液に溶解させた状態でヒアルロン酸と亜鉛またはコバルトイオンとの会合物を生成させ、その後沈殿させるため、当該会合物を完全に沈殿させることが困難であり、収率が低いという問題がある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、ヒアルロン酸金属塩を簡便な方法にて高収率で得ることができるヒアルロン酸金属塩の製造方法、ヒアルロン酸金属塩を含む化粧品の製造方法、ならびにヒアルロン酸亜鉛およびその製造方法を提供する。【０００６】
本発明の一態様に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法は、第２族元素に属する金属、第１２族元素に属する金属、第１３族元素に属する金属および遷移元素に属する金属のうち少なくとも１種を含有する金属化合物を含む含水媒体中にヒアルロン酸および／またはその塩を分散させる工程を含む。【０００７】
本発明における「ヒアルロン酸金属塩」とは、ヒアルロン酸を構成するカルボキシル基に由来するカルボキシルイオン（ＣＯＯ−）と金属イオン（Ｍ＋，ここでＭは金属を表す）との相互作用により形成される複合体をいう。【０００８】
また、本発明において「含水媒体中にヒアルロン酸および／またはその塩を分散させる」とは、含水媒体中にヒアルロン酸および／またはその塩の一部が溶解しないで固体として存在している状態をいい、好ましくは、ほとんどが溶解しないで固体として存在している状態である。【０００９】
上記ヒアルロン酸金属塩の製造方法において、前記分散させる工程の後、前記含水媒体を除去して得られた残留物を加熱乾燥させる工程をさらに含むことができる。【００１０】
上記ヒアルロン酸金属塩の製造方法において、前記含水媒体における水の割合は５〜５５容量％であることができる。【００１１】
上記ヒアルロン酸金属塩の製造方法において、前記含水媒体に使用される媒体は、エタノール、メタノール、およびアセトンから選ばれる少なくとも１種であることができる。【００１２】
上記ヒアルロン酸金属塩の製造方法において、前記金属化合物が亜鉛化合物、マグネシウム化合物、カルシウム化合物、コバルト化合物、銀化合物、および銅化合物から選択されるいずれか１種であることができる。【００１３】
上記ヒアルロン酸金属塩の製造方法において、前記金属化合物が有機酸金属塩または無機酸金属塩であり、前記有機酸金属塩を構成する有機酸イオンまたは無機酸金属塩を構成する無機酸イオンが弱酸イオンであることができる。【００１４】
上記ヒアルロン酸金属塩の製造方法において、前記ヒアルロン酸および／またはその塩の平均分子量が２，０００〜２００万であることができる。【００１５】
上記ヒアルロン酸金属塩の製造方法において、前記ヒアルロン酸および／またはその塩の平均分子量が２，０００〜１０万であることができる。【００１６】
本発明の別の一態様に係る化粧料の製造方法は、上記ヒアルロン酸金属塩の製造方法により得られたヒアルロン酸金属塩を添加する工程を含む。【００１７】
本発明の他の一態様に係るヒアルロン酸亜鉛は、１％水溶液の動粘度が０．３〜５ｍｍ２／ｓであり、かつ、１ｇ当たりの亜鉛含有量が５０〜１３０ｍｇである。【００１８】
本発明において「ヒアルロン酸亜鉛」とは、ヒアルロン酸を構成するカルボキシル基に由来するカルボキシルイオン（ＣＯＯ−）と亜鉛イオン（Ｚｎ２＋）との相互作用により形成される複合体をいい、具体的には、前記複合体では、２個のヒアルロン酸（２個のカルボキシルイオン）に対し１個の亜鉛イオンが相互作用した構造を有することができる。【００１９】
上記ヒアルロン酸亜鉛は、１％水溶液の動粘度が０．５〜２ｍｍ２／ｓであることができる。【００２０】
上記ヒアルロン酸亜鉛は、１ｇ当たりの亜鉛含有量が５５〜１００ｍｇであることができる。【００２１】
上記ヒアルロン酸亜鉛は、平均分子量２，０００〜１０万のヒアルロン酸および／またはその塩を亜鉛化合物と反応させることにより得ることができる。【００２２】
本発明のさらに他の一態様に係る化粧料は、上記ヒアルロン酸亜鉛を含有する。【００２３】
本発明のさらに他の一態様に係るヒアルロン酸亜鉛の製造方法は、亜鉛化合物を含む含水媒体中に平均分子量２，０００〜１０万のヒアルロン酸および／またはその塩を分散させる工程を含む。【００２４】
上記ヒアルロン酸亜鉛の製造方法において、前記含水媒体中に分散させるヒアルロン酸および／またはその塩の平均粒子径が、５０〜５００μｍであることができる。【００２５】
上記ヒアルロン酸亜鉛の製造方法において、前記含水媒体における水の割合は２０〜５５容量％であることができる。【００２６】
本発明のさらに他の一態様に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法は、第２族元素に属する金属、第１１族元素に属する金属、第１２族元素に属する金属および第１３族元素に属する金属のうち少なくとも１種を含有する金属化合物を含む含水媒体中にヒアルロン酸および／またはその塩を分散させる工程を含む。
【発明の効果】
【００２７】
上記ヒアルロン酸金属塩の製造方法によれば、第２族元素に属する金属、第１２族元素に属する金属、第１３族元素に属する金属および遷移元素に属する金属のうち少なくとも１種を含有する金属化合物を含む含水媒体中にヒアルロン酸および／またはその塩を分散させる工程を含むことにより、生成したヒアルロン酸金属塩は含水媒体中に溶解しないで固体として存在しているため、ヒアルロン酸金属塩の精製および回収が容易である。よって、ヒアルロン酸金属塩を簡便な方法にて高収率で得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、実施例１のヒアルロン酸亜鉛が、実施例２の高分子ヒアルロン酸亜鉛、および実施例１で使用した原料ヒアルロン酸に比べて、バリア機能が低下した肌からの水分の蒸散をより効果的に抑制することを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
以下、本発明の一実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法、ヒアルロン酸金属塩を含む化粧品の製造方法、ならびにヒアルロン酸亜鉛およびその製造方法について詳細に説明する。なお、本発明において「％」は「質量％」、「部」は「質量部」を意味する。
【００３０】
１．ヒアルロン酸金属塩の製造方法
本実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法は、第２族元素に属する金属、第１２族元素に属する金属、第１３族元素に属する金属および遷移元素に属する金属のうち少なくとも１種を含有する金属化合物を含む含水媒体中にヒアルロン酸および／またはその塩（以下、「原料ヒアルロン酸および／またはその塩」ともいう。）を分散させる工程を含む。
【００３１】
１．１．分散させる工程
本実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法によれば、前記金属化合物を含む含水媒体中に原料ヒアルロン酸および／またはその塩を分散させる工程を含むことにより、生成したヒアルロン酸金属塩が含水媒体中に溶解しないで固体として存在しているため、ヒアルロン酸金属塩の精製および回収が容易である。よって、ヒアルロン酸金属塩を簡便な方法にて高収率で得ることができる。
【００３２】
１．１．１．原料ヒアルロン酸および／またはその塩
本実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法において使用する原料は、平均分子量が好ましくは２，０００以上（好ましくは２，０００〜２００万、より好ましくは２，０００〜１０万、さらに好ましくは２，０００〜５万、特に好ましくは４，０００〜２万、最も好ましくは４，０００〜１万）であるヒアルロン酸および／またはその塩である。本実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法を適用することができる原料ヒアルロン酸および／またはその塩の平均分子量の上限はないが、概して、原料ヒアルロン酸および／またはその塩の平均分子量が小さいほど、水溶液に溶解したヒアルロン酸金属塩はアルコール等を添加しても沈殿しにくくなるため、例えば特許第２５７１３１２号明細書に記載されているような、沈殿によってヒアルロン酸金属塩を得る方法では収率が低くなる。よって、原料ヒアルロン酸および／またはその塩の平均分子量が小さいほど、本実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法による利点（高収率にてヒアルロン酸金属塩を得ることができる）が大きいといえる。
【００３３】
本発明において、「ヒアルロン酸」とは、グルクロン酸とＮ−アセチルグルコサミンとの２糖からなる構成単位を１以上有する多糖類をいう。また、「原料ヒアルロン酸の塩」としては、特に限定されないが、食品または薬学上許容しうる塩であることが好ましく、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩等が挙げられる。
【００３４】
原料ヒアルロン酸および／またはその塩は、動物等の生体組織（例えば鶏冠、さい帯、皮膚、関節液など）から抽出されたものでもよく、または、微生物、動物細胞もしくは植物細胞を培養して得られたもの（例えばストレプトコッカス属の細菌等を用いた発酵法）、化学的または酵素的に合成されたものなどを使用することができる。
【００３５】
含水媒体の体積に対する原料ヒアルロン酸および／またはその塩の量は通常、５〜５００ｍｇ／ｍｌ（好ましくは２０〜２００ｍｇ／ｍｌ）である。
【００３６】
なお、本発明において、原料ヒアルロン酸および／またはその塩の平均分子量は、以下の方法にて測定された値である。
【００３７】
即ち、約０．０５ｇの（原料）ヒアルロン酸および／またはその塩（本品）を精密に量り、０．２ｍｏｌ／Ｌ濃度の塩化ナトリウム溶液に溶かし、正確に１００ｍＬとした溶液及びこの溶液８ｍＬ、１２ｍＬ並びに１６ｍＬを正確に量り、それぞれに０．２ｍｏｌ／Ｌ濃度の塩化ナトリウム溶液を加えて正確に２０ｍＬとした溶液を試料溶液とする。この試料溶液および０．２ｍｏｌ／Ｌ濃度の塩化ナトリウム溶液につき、日本薬局方（第十五改正）一般試験法の粘度測定法（第１法毛細管粘度計法）により３０．０±０．１℃で比粘度を測定し（式１）、各濃度における還元粘度を算出する（式２）。還元粘度を縦軸に、本品の換算した乾燥物に対する濃度（ｇ／１００ｍＬ）を横軸にとってグラフを描き、各点を結ぶ直線と縦軸との交点から極限粘度を求める。ここで求められた極限粘度をＬａｕｒｅｎｔの式（式３）に代入し、平均分子量を算出する（T.C. Laurent, M. Ryan, A. Pietruszkiewicz,:B.B.A., 42, 476-485(1960)）。
【００３８】
（式１）比粘度 ＝ {試料溶液の所要流下秒数)/(０．２ｍｏｌ／Ｌ塩化ナトリウム溶液の所要流下秒数)}−１
（式２）還元粘度（ｄＬ／ｇ）＝ 比粘度/(本品の換算した乾燥物に対する濃度（ｇ／１００ｍＬ)) 
（式３）極限粘度（ｄＬ／ｇ）＝３．６×１０−４Ｍ０．７８Ｍ：平均分子量
【００３９】
１．１．２．金属化合物
上記分散させる工程において使用する金属化合物としては、例えば、第２族元素に属する金属、第１１族元素に属する金属、第１２族元素に属する金属、および第１３族元素に属する金属から選ばれる少なくとも１種であってもよい。
【００４０】
上記分散させる工程において使用する金属化合物としては、前記第２族元素に属する金属が例えばマグネシウム、カルシウムおよびバリウムであり、前記第１２族元素に属する金属が例えば亜鉛であり、前記第１３族元素に属する金属が例えばアルミニウムであることができる。また、遷移元素に属する金属は、第３〜１１族元素に属する金属であり、前記第３族元素に属する金属が例えばスカンジウム、イットリウム、ランタノイド元素およびアクチノイド元素から構成される希土類元素であり、前記第４族元素に属する金属が例えばチタン、ジルコニウムおよびハフニウムであり、前記第５族元素に属する金属が例えばバナジウム、ニオブおよびタンタルであり、前記第６族元素に属する金属が例えばクロム、モリブデンおよびタングステンであり、前記第７族元素に属する金属が例えばマンガン、テクネチウムおよびレニウムであり、前記第８族元素に属する金属が例えば鉄、ルテニウムおよびオスミウムであり、前記第９族元素に属する金属が例えばコバルト、ロジウムおよびイリジウムであり、前記第１０族元素に属する金属が例えばニッケル、パラジウムおよび白金であり、前記第１１族元素に属する金属が例えば銅、銀および金であることができる。
【００４１】
金属化合物は、１種を単独でまたは２種以上を組み合わせて使用することができる。中でも、得られるヒアルロン酸金属塩の汎用性および有用性の観点から、前記金属化合物は例えば、亜鉛化合物、マグネシウム化合物、カルシウム化合物、コバルト化合物、銀化合物、および銅化合物から選択されるいずれか１種であることが好ましい。
【００４２】
亜鉛化合物としては、例えば、硫酸亜鉛、塩化亜鉛、炭酸亜鉛および酸化亜鉛等の無機亜鉛、酢酸亜鉛、蟻酸亜鉛およびラウリン酸亜鉛等の有機亜鉛が挙げられる。
【００４３】
マグネシウム化合物としては、例えば、酢酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、塩化マグネシウム、硫酸マグネシウム、乳酸マグネシウム、水酸化マグネシウムおよび酸化マグネシウム等が挙げられる。
【００４４】
カルシウム化合物としては、例えば、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、乳酸カルシウム、グルコン酸カルシウムおよび水酸化カルシウム等が挙げられる。
【００４５】
バリウム化合物としては、例えば、水酸化バリウム、塩化バリウムおよび硫化バリウム等が挙げられる。
【００４６】
銅化合物としては、例えば、酢酸銅、グルコン酸銅および硫酸銅等が挙げられる。
【００４７】
銀化合物としては、例えば、酢酸銀、硝酸銀、硫酸銀、炭酸銀および酸化銀等が挙げられる。
【００４８】
金化合物としては、例えば、塩化金酸、シアン化金およびシアン化金カリウム等が挙げられる。
【００４９】
アルミニウム化合物としては、例えば、酢酸アルミニウム、炭酸アルミニウム、硫酸アルミニウム、乳酸アルミニウムおよび塩化アルミニウム等が挙げられる。
【００５０】
コバルト化合物としては、例えば、酢酸コバルトが挙げられる。
【００５１】
前記金属化合物としては、特に限定するものではないが、有機酸金属塩または無機酸金属塩であることが好ましく、有機酸金属塩を構成する有機酸イオンまたは無機酸金属塩を構成する無機酸イオンが弱酸イオン（例えば、酢酸イオン、蟻酸イオン、炭酸イオン）であることがより好ましい。前記有機酸金属塩を構成する有機酸イオンまたは無機酸金属塩を構成する無機酸イオンが弱酸イオンである場合、含水媒体中で解離しないで有機酸または無機酸のまま存在する割合が例えば塩酸や硫酸等の強酸より大きいため、得られたヒアルロン酸金属塩から解離する金属イオンが少なくなり、ヒアルロン酸金属塩の収率を高めることができる。
【００５２】
例えば、前記金属化合物が有機酸亜鉛塩である場合、酢酸亜鉛、蟻酸亜鉛等の弱酸の有機酸亜鉛塩であることが好ましく、無機酸亜鉛塩である場合、炭酸亜鉛等の弱酸の無機酸亜鉛塩であることが好ましい。
【００５３】
原料ヒアルロン酸および／またはその塩との反応性が優れている観点から、金属化合物は、含水媒体に溶解する性質を有するものであることが好ましい。
【００５４】
含水媒体の体積に対する金属化合物の量は通常、５〜５００ｍｇ／ｍｌ（好ましくは２０〜２００ｍｇ／ｍｌ）である。また、原料ヒアルロン酸および／またはその塩の使用量１部に対する金属化合物の使用量は、０．０５〜２０部（好ましくは０．２〜５部）であることが好ましい。
【００５５】
１．１．３．含水媒体
本実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法において、ヒアルロン酸金属塩の収率をより高くできる点で、含水媒体における水の割合は５〜５５容量％であることが好ましく、１０〜５０容量％であることがより好ましく、２０〜５５容量％であることがさらに好ましく、２０〜４０容量％であることが特に好ましい。この場合、含水媒体における水の割合が５容量％未満であると、ヒアルロン酸金属塩の収率が低くなる場合があり、一方、含水媒体における水の割合が５５容量％を超えると、ヒアルロン酸金属塩が沈殿しにくくなり、ヒアルロン酸金属塩の収率が低下する場合がある。例えば、ヒアルロン酸金属塩がヒアルロン酸亜鉛である場合、含水媒体における水の割合は２０〜５５容量％であることが好ましい。
【００５６】
また、前記含水媒体に使用される媒体は、水と混和する液体であり、例えば、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノールなどのアルコール系溶媒、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン系溶媒、テトラヒドロフラン、アセトニトリル等の有機溶媒を挙げることができ、これらを単独でまたは組み合わせて使用することができる。中でも、産業上利用しやすいという観点から、エタノール、メタノール、およびアセトンから選ばれる少なくとも１種であることが好ましい。
【００５７】
前記分散させる工程における反応温度は特に限定されないが、１５〜６０℃が好ましく、２０〜４５℃がより好ましい。反応温度が１５℃未満であると、ヒアルロン酸金属塩中の金属含有量が少なくなることがある。また、前記分散させる工程における反応時間は特に限定されないが、通常１０分〜６時間である。
【００５８】
また、原料ヒアルロン酸および／またはその塩を分散させる、前記金属化合物を含む含水媒体のｐＨは通常３〜９であり、４〜８であることために使用されるが好ましく、５〜７であることがより好ましい。ここで、前記含水媒体のｐＨが３未満であると、ヒアルロン酸金属塩の金属含有量が大きく低下することがあり、また、ヒアルロン酸金属塩の分子量が大きく低下することがある。また、前記含水媒体のｐＨが９を超えると、ヒアルロン酸金属塩の金属含有量が大きく低下することがある。
【００５９】
１．２．加熱乾燥させる工程
本実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法において、前記分散させる工程の後、前記含水媒体を除去して得られた残留物を加熱乾燥させる工程をさらに含むことができる。
【００６０】
前記分散させる工程により得られた反応液を静置して沈殿物を生じさせ、デカンテーションにより前記含水媒体を除去して残留物を得る。次に、この残留物に含水媒体を添加して同様に、静置による沈殿物の生成およびデカンテーションを行い残留物を得る操作を必要に応じて１回以上行ってもよい。
【００６１】
また、前記加熱乾燥させる工程において、加熱温度は限定されないが、通常６０〜９５℃である。なお、前記加熱乾燥は減圧下で行ってもよい。
【００６２】
１．３．目的物（ヒアルロン酸金属塩）
本発明の一実施形態に係るヒアルロン酸金属塩は、本実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法によって得ることができる。
【００６３】
本実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の平均分子量は２，０００〜１０万であることが好ましく、２，０００〜５万であることがより好ましく、４０００〜２万であることがさらに好ましく、４，０００〜１万であることが最も好ましい。
【００６４】
本実施形態に係るヒアルロン酸金属塩は、第２族元素に属する金属、第１２族元素に属する金属、第１３族元素に属する金属および遷移元素に属する金属から選ばれる少なくとも１種であることができ、例えば、第２族元素に属する金属、第９族元素に属する金属、第１２族元素に属する金属、および第１３族元素に属する金属から選ばれる少なくとも１種であることができ、特に、亜鉛、マグネシウム、カルシウム、コバルト、銀、および銅から選択されるいずれか１種の金属を含むことができる。より具体的には、本実施形態に係るヒアルロン酸金属塩は、ヒアルロン酸を構成するカルボキシル基に由来するカルボキシルイオン（ＣＯＯ−）と金属イオン（Ｍａ＋、ここでＭは金属元素であり、ａは１〜３の整数を表される価数である。）との相互作用により形成される複合体である。
【００６５】
２．ヒアルロン酸金属塩を含有する化粧料の製造方法
本発明の一実施形態に係るヒアルロン酸金属塩を含有する化粧料の製造方法は、上記実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法により得られたヒアルロン酸金属塩を添加する工程を含む。
【００６６】
本実施形態に係る製造方法によって得られた、ヒアルロン酸金属塩を含有する化粧料は、ヒアルロン酸金属塩を通常０．００１〜５％の範囲で含有する。また、化粧料の態様としては、例えば、化粧水（例えば、美白化粧水）、クリーム（例えば、バニシングクリーム、コールドクリーム）、乳液、美容液、パック（例えば、ゼリー状ピールオフタイプ、ペースト状拭き取りタイプ、粉末状洗い流しタイプ）、洗顔料、洗浄料、クレンジング、ファンデーション、口紅、リップクリーム、リップグロス、リップライナー、頬紅、シェービングローション、アフターサンローション、デオドラントローション、ボディローション（ハンドケアローション、フットケアローションを含む）、ボディオイル、石鹸、入浴剤、シャンプー、コンディショナー、ヘアパック、ヘアトニック、養毛剤、パーマネント液、カラーリング液が挙げられる。
【００６７】
本実施形態に係る製造方法によって得られたヒアルロン酸金属塩を含有する化粧料はさらに、以下の成分が配合されていてもよい。前記成分としては、例えば、カチオン化多糖類（例えば、カチオン化ヒアルロン酸、カチオン化ヒドロキシエチルセルロース、カチオン化グアーガム、カチオン化澱粉、カチオン化ローカストビーンガム、カチオン化デキストラン、カチオン化キトサン、カチオン化ハチミツ等）、アニオン界面活性剤（例えば、アルキルベンゼンスルホン酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸エステル塩、アルキル硫酸エステル塩、オレフィンスルホン酸塩、脂肪酸塩、ジアルキルスルホコハク酸塩等）、非イオン界面活性剤（例えば、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油誘導体等）、陽イオン界面活性剤（例えば、アルキルトリメチルアンモニウム塩、ジアルキルジメチルアンモニウム塩、アルキルピリジニウム塩、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム等）、両性界面活性剤（例えば、アルキルベタイン、アルキルアミドプロピルベタイン、イミダゾリニウムベタイン、卵黄レシチン、大豆レシチン等）、油分（例えば、シリコーン、シリコーン誘導体、流動パラフィン、スクワラン、ミツロウ、カルナバロウ、オリーブ油、アボガド油、ツバキ油、ホホバ油、馬油等）、保湿剤（例えば、ヒアルロン酸ナトリウム、加水分解ヒアルロン酸、疎水化ヒアルロン酸、アセチルヒアルロン酸、ヒアルロン酸ジメチルシラノール、セラミド、ラウロイルグルタミン酸ジフィトステリルオクチルドデシル、フィトグリコーゲン、加水分解卵殻膜、トレハロース、グリセリン、アテロコラーゲン、ソルビトール、マルチトール、１，３−ブチレングリコール等）、高級脂肪酸（例えば、ラウリン酸、ベヘニン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸等）、高級アルコール（例えば、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、イソステアリルアルコール、バチルアルコール等）、多価アルコール（例えば、グリセリン、ジグリセリン、１，３−プロパンジオール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ペンチレングリコール等）、増粘剤（例えば、セルロースエーテル、カルボキシビニルポリマー、キサンタンガム、パルミチン酸デキストリン等）、両性高分子樹脂化合物（例えば、ベタイン化ジアルキルアミノアルキルアクリレート共重合体等）、カチオン性高分子樹脂化合物（例えば、ビニルピロリドン／ジメチルアミノエチルメタクリレート共重合体カチオン化物、ポリジメチルジアリルアンモニウムハライド型カチオン性ポリマー等）、防腐剤（例えば、メチルパラベン、エチルパラベン、ブチルパラベン、プロピルパラベン、フェノキシエタノール、イソプロピルメチルフェノール等）、酸化防止剤（例えば、トコフェノール、アスコルビン酸、ＢＨＴ等）、金属封鎖剤（例えば、エデト酸塩、エチドロン酸塩等）、紫外線吸収剤（例えば、ベンゾフェノン誘導体、パラアミノ安息香酸誘導体、メトキシ桂皮酸誘導体等）、紫外線反射剤（例えば、酸化チタン、酸化亜鉛等）、タンパク質加水分解物（例えば、ケラチンペプチド、コラーゲンペプチド、大豆ペプチド、コムギペプチド、ミルクペプチド、シルクペプチド、卵白ペプチド等）、アミノ酸（例えば、アルギニン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、ヒドロキシプロリン、システイン、セリン、Ｌ−テアニン等）、天然物エキス（クジンエキス、カジルエキス、テンチカエキス、海草エキス、ユーカリエキス、ローヤルゼリーエキス、ローズマリーエキス、ブナの木エキス等）、その他の機能性成分（コエンザイムＱ１０、ポリクオタニウム―５１、エラスチン、白金ナノコロイド、パルミチン酸レチノール、パンテノール、アラントイン、ジラウロイルグルタミン酸リシンナトリウム、リン酸アスコルビルマグネシウム、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド、エラグ酸、コウジ酸、リノール酸、トラネキサム酸、ハイドロキノン、ハイドロキノン誘導体等）、リン脂質ポリマー、香料、色素が挙げられる。
【００６８】
３．ヒアルロン酸亜鉛およびその製造方法
３．１．ヒアルロン酸亜鉛
本発明の一実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛は、１％水溶液の動粘度が０．３〜５ｍｍ２／ｓであり、かつ、１ｇ当たりの亜鉛含有量が５０〜１３０ｍｇである。
【００６９】
本発明において、ヒアルロン酸亜鉛の動粘度は、ウベローデ粘度計（柴田科学器械工業株式会社製）を用いて測定することができる。この際、流下秒数が２００〜１０００秒になるような係数のウベローデ粘度計を選択する。また、測定は３０℃の恒温水槽中で行ない、温度変化のないようにする。ヒアルロン酸亜鉛の１％水溶液の動粘度は、分子量の大きさの指標である。通常、ヒアルロン酸亜鉛の分子量が大きいほど、１％水溶液の動粘度が大きい。
【００７０】
ウベローデ粘度計により測定された前記水溶液の流下秒数と、ウベローデ粘度計の係数との積により、動粘度（単位：ｍｍ２／ｓ）を求めることができる。
【００７１】
本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛は、１％水溶液の動粘度が０．５〜２ｍｍ２／ｓであることが好ましく、１〜１．５ｍｍ２／ｓであることがより好ましい。本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛の１％水溶液の動粘度が５ｍｍ２／ｓを超えると、本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛を皮膚に塗布した際に、角質に浸透しにくい場合がある。
【００７２】
また、本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛は、１ｇ当たりの亜鉛含有量が５５〜１００ｍｇであることが好ましく、６０〜８０ｍｇであることがより好ましい。なお、本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量は、後述する実施例記載の方法（キレート滴定法）によって測定された値である。キレート滴定法は例えば、日本薬局方（第十五改正）医薬品各条の硫酸亜鉛水和物（Ｃ−４６７５〜４６７８）に記載されている。
【００７３】
本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛は、２，０００〜１０万であることが好ましく、２，０００〜５万であることがより好ましく、４０００〜２万であることがさらに好ましく、４，０００〜１万であることが最も好ましい。
【００７４】
さらに、本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛は、平均分子量２，０００〜１０万の原料ヒアルロン酸および／またはその塩を亜鉛化合物と反応させることにより得ることができる。当該反応については「３．２．ヒアルロン酸亜鉛の製造方法」の欄で後述する。
【００７５】
ヒアルロン酸亜鉛は、創傷の治癒に有効であることが報告されている（例えば特許第２５７１３１２号明細書）。本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛は例えば、創傷の治癒や皮膚の肌質改善に有効である。
【００７６】
３．２．ヒアルロン酸亜鉛の製造方法
本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛の製造方法は、亜鉛化合物を含む含水媒体中に平均分子量２，０００〜１０万（好ましくは２，０００〜５万、より好ましくは４，０００〜２万、さらに好ましくは４，０００〜１万）の原料ヒアルロン酸および／またはその塩を分散させる工程を含む。
【００７７】
本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛の製造方法における条件は、上述の実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法における条件と同様である。すなわち、本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛の製造方法における原料ヒアルロン酸および／またはその塩、含水媒体、および亜鉛化合物の量ならびに反応時間および反応温度は、上述の実施形態に係るヒアルロン酸金属塩の製造方法における原料、含水媒体、および金属化合物の量ならびに反応時間および反応温度と同様である。
【００７８】
なお、本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛の製造方法においては、原料ヒアルロン酸および／またはその塩からなる粉末の平均粒子径は５０〜５００μｍであることが好ましく、１００〜４００μｍであることがより好ましい。ここで、原料ヒアルロン酸および／またはその塩からなる粉末の平均粒子径が５０μｍ未満であると、ヒアルロン酸亜鉛の収率が低くなる場合があり、一方、５００μｍを超えると、原料ヒアルロン酸および／またはその塩からヒアルロン酸亜鉛への置換が進行せず、亜鉛含有量が低い場合がある。
【００７９】
本発明において、原料ヒアルロン酸および／またはその塩からなる粉末の平均粒子径の測定方法は、一般的に知られたレーザー回折式測定法や、動的光散乱式測定法等を挙げることができる。なお、原料ヒアルロン酸および／またはその塩からなる粉末の平均粒子径の調整方法は、特に限定されるものではない。例えば、ヒアルロン酸および／またはその塩を含有する溶液を、噴霧乾燥、凍結乾燥等により乾燥処理を施した後、必要に応じて粉砕を行う方法等が挙げられる。
【００８０】
さらに、本実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛の製造方法においては、亜鉛含有量が高いヒアルロン酸亜鉛を高収率で得られるという観点から、前記含水媒体における水の割合は２０〜５５容量％であることが好ましい。
【００８１】
４．化粧料
本発明の一実施形態に係る化粧料は、上記実施形態に係るヒアルロン酸亜鉛を含有する。
【００８２】
本実施形態に係る化粧料の態様としては、例えば、上述の「２．ヒアルロン酸金属塩を含有する化粧料の製造方法」の欄で例示したものが挙げられる。また、本実施形態に係る化粧料には、ヒアルロン酸亜鉛以外に、上述の「２．ヒアルロン酸金属塩を含有する化粧料の製造方法」の欄で例示した成分が配合されていてもよい。
【００８３】
本実施形態に係る化粧料によれば、ヒアルロン酸亜鉛を含有することにより、皮膚に潤いを与えることができ、かつ、肌質を改善することができる。
【００８４】
５．実施例
以下、実施例によって本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は実施例に限定されない。
【００８５】
５．１．試験方法
５．１．１．平均分子量
本実施例において、原料ヒアルロン酸の平均分子量は、上述の実施形態で説明された方法で測定された。
【００８６】
５．１．２．ヒアルロン酸金属塩の収率
本実施例において、ヒアルロン酸金属塩の収率は以下の式によって得られた値である。
ヒアルロン酸金属塩の収率（％）＝ヒアルロン酸金属塩の質量／原料ヒアルロン酸の質量×１００（％）
【００８７】
５．１．３．ヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量（ｍｇ）
本実施例において、ヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量（ｍｇ）は、キレート滴定法によって測定された値である。以下にその測定方法を示す。
【００８８】
ヒアルロン酸亜鉛０．３ｇを精密に量り（サンプリング量）、純水を加えて正確に１００ｍＬとする。この溶液２５ｍＬを３００ｍＬビーカーに投入し、更に純水１００ｍＬおよびアンモニア性塩化アンモニウム緩衝液２ｍＬを加える。次いで、エリオクロムブラックＴ・塩化ナトリウム指示薬０．０４ｇを加え溶解させ、０．０１ｍｏｌ／ＬのＥＤＴＡ溶液を用いて滴定を行い、赤紫色から淡青色に色調変化を視認した。なお、ヒアルロン酸亜鉛の乾燥減量の測定は、測定対象のヒアルロン酸亜鉛について、医薬部外品原料規格のヒアルロン酸ナトリウム（２）の項目（ｐ．５８９〜５９２）に記載の方法に従って行った（減圧、五酸化リン、６０℃、４時間）。
ヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量（ｍｇ／ｇ）＝（０．６５４×ＥＤＴＡ滴定量（ｍＬ）×１．００４×（１００／２５））／（サンプリング量（ｇ）×（１−ヒアルロン酸亜鉛の乾燥減量／１００））
【００８９】
５．１．４．平均粒子径
本実施例において、原料ヒアルロン酸の平均粒子径は、上述の実施形態で説明されたレーザー回折式測定法で測定された。具体的には、分散媒としてエタノールを用い、ＳＡＬＤ−２０００Ｊ（島津製作所社製）を用いて測定された。
【００９０】
５．１．５．動粘度
ヒアルロン酸亜鉛の１％水溶液の動粘度の測定は、上記実施形態に記載された装置および方法にしたがって行った。
【００９１】
５．２．実施例１
２００ｍＬビーカーに、酢酸亜鉛二水和物（（ＣＨ３ＣＯ２）２Ｚｎ・２Ｈ２Ｏ）を３ｇと清水５０ｍＬを投入し、溶解させた。酢酸亜鉛二水和物が完全に溶解した後、その溶液にエタノールを１００ｍＬ投入し、得られた含水媒体（ｐＨ６．３）を撹拌しながら液温が４０℃となるように加熱した。４０℃達温後、撹拌しながら原料ヒアルロン酸（平均分子量約８，０００、平均粒子径約２３０μｍ、キユーピー株式会社製）５ｇをタンクに投入し、原料ヒアルロン酸粉末が分散状態となるよう反応液を４０℃の温度条件下で６０分間攪拌した。なお、後述する比較例１〜３、参考例、実施例２、ならびに試験例１〜３において、ヒアルロン酸を分散させるために用いる含水媒体のｐＨは、実施例１の含水媒体のｐＨとほぼ同等であった。
【００９２】
反応終了後、１５分間静置し、上澄みの酢酸亜鉛含有含水エタノールをデカンテーションにより除去することにより、沈殿物を得た。得られた沈殿物に、９０％（ｖ/ｖ）エタノールを１１０ｍＬ加え、未反応の亜鉛を除去する目的で１０分間撹拌した後、１５分間静置し、上澄みの９０％含水エタノールをデカンテーションにより除去した。この操作を５回繰り返した。得られた沈殿物（残留物）を６０℃で真空乾燥させて、ヒアルロン酸亜鉛を得た。
【００９３】
実施例１で得られたヒアルロン酸亜鉛の収率は１０８％であり、ヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量は７２．２ｍｇであった。また、得られたヒアルロン酸亜鉛の１％水溶液の動粘度は１．２ｍｍ２／ｓであった。
【００９４】
なお、実施例１で得られたヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量（理論値）は７９．６ｍｇであり、理論値に対する置換率は９１％であった。ヒアルロン酸金属塩１ｇ当たりの金属含有量の理論値は以下の方法で算出された。
【００９５】
すなわち、ヒアルロン酸金属塩１ｇ当たりの金属含有量の理論値は、金属イオンがＭ価（Ｍは１以上の整数）の場合、ヒアルロン酸金属塩において、ヒアルロン酸１構成単位中に金属イオンが１／Ｍ個含まれるものとして算出した値である。例えば、金属イオンが１価の場合、ヒアルロン酸金属塩において、ヒアルロン酸１構成単位中に金属イオンが１個含まれるものとして算出した値である。
【００９６】
ヒアルロン酸金属塩１ｇ当たりの金属含有量の理論値（ｍｇ／ｇ）＝（付加した金属の分子量／付加した金属イオンの価数）／（ヒアルロン酸ナトリウムの分子量−ナトリウムの分子量＋（付加した金属の分子量／付加した金属イオンの価数））
【００９７】
５．３．比較例１
１Ｌビーカーに、原料ヒアルロン酸（平均分子量約８，０００、平均粒子径約２３０μｍ、キユーピー株式会社製）５ｇ、酢酸亜鉛二水和物を３ｇ、および清水１２０ｍＬ、エタノール３０ｍＬを投入した。ヒアルロン酸および酢酸亜鉛二水和物が完全に溶解した後、撹拌しながら液温が４０℃となるように加熱し、４０℃の温度条件下で６０分間反応させた。
【００９８】
反応終了後、エタノール５００ｍＬを撹拌しながらゆっくり添加し、混合液を懸濁させ、懸濁物をろ過にて回収した。次いで回収物を８０％（ｖ／ｖ）エタノール５００ｍＬで３回洗浄し、得られた沈殿物（残留物）を６０℃で真空乾燥させて、ヒアルロン酸亜鉛を得た。
【００９９】
比較例１で得られたヒアルロン酸亜鉛の収率は７９％であり、ヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量は７８．４ｍｇであった。また、得られたヒアルロン酸亜鉛の１％水溶液の動粘度は１．２ｍｍ２／ｓであった。
【０１００】
５．４．比較例２
比較例２は、特願２００９−２７８２５９号に記載の実施例１記載の方法を参照して行った。
【０１０１】
まず、比較例１と同様の方法でヒアルロン酸と酢酸亜鉛二水和物を反応させた後、塩酸にて溶液のｐＨを１．０に調整した。次いで、エタノール２００ｍＬを撹拌しながらゆっくり添加し、ヒアルロン酸を懸濁相と上澄み相に分離させた。次いで、水酸化ナトリウムでｐＨを５．０に調整し、ヒアルロン酸を沈殿させ、沈殿物をろ過にて回収し、８０％（ｖ/ｖ）エタノール１００ｍＬで３回洗浄した。得られた沈殿物（残留物）を６０℃で真空乾燥させて、ヒアルロン酸亜鉛を得た。
【０１０２】
比較例２で得られたヒアルロン酸亜鉛の収率は８６％であり、ヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量は８．７ｍｇであった。また、得られたヒアルロン酸亜鉛の１％水溶液の動粘度は１．１ｍｍ２／ｓであった。
【０１０３】
５．５．参考例
実施例１において、原料としてヒアルロン酸（平均分子量約１８０万、平均粒子径約４５０μｍ、キユーピー株式会社製）用いた以外は、実施例１と同様の方法にて、ヒアルロン酸亜鉛を得た。
【０１０４】
参考例で得られたヒアルロン酸亜鉛の収率は１０９％であり、ヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量は５０．８ｍｇであった。また、得られたヒアルロン酸亜鉛の１％水溶液の動粘度は１８０ｍｍ２／ｓであった。
【０１０５】
５．６．比較例３
１Ｌビーカーに、原料ヒアルロン酸（平均分子量約１８０万、平均粒子径約５００μｍ、キユーピー株式会社製）５ｇ、酢酸亜鉛二水和物を３ｇ、および清水１２０ｍＬ、エタノール３０ｍＬを投入した。ヒアルロン酸および酢酸亜鉛二水和物が完全に溶解した後、撹拌しながら液温が４０℃となるように加熱し、４０℃の温度条件下で６０分間反応させた。
【０１０６】
反応終了後、エタノール５００ｍＬを撹拌しながらゆっくり添加し、ヒアルロン酸亜鉛を沈殿させ、上澄み液をデカンテーションにより除去することで沈殿物を回収した。次いで、沈殿物を８０％（ｖ／ｖ）エタノール５００ｍＬで３回洗浄し、得られた沈殿物（残留物）を６０℃で真空乾燥させて、ヒアルロン酸亜鉛を得た。
【０１０７】
比較例３で得られたヒアルロン酸亜鉛の収率は８８％であり、ヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量は６２．４ｍｇであった。また、得られたヒアルロン酸亜鉛の１％水溶液の動粘度は１７５ｍｍ２／ｓであった。
【０１０８】
５．７．試験例１
実施例１において、原料としてヒアルロン酸（平均分子量約８，０００、平均粒子径約２００μｍ、キユーピー株式会社製）を用い、ヒアルロン酸投入前の含水媒体（含水エタノール）中の水およびエタノールの量を表１に示すものにした以外は、実施例１と同様の方法でヒアルロン酸亜鉛（Ｎｏ．１〜８）を製した。
【０１０９】
【表１】
0005852560.tif 000002
【０１１０】
５．８．試験例２
実施例１において、酢酸亜鉛およびエタノールの代わりに表２に示す金属化合物および媒体を使用した以外は、実施例１と同様の方法でヒアルロン酸金属塩（Ｎｏ．１２〜１５、実施例１のヒアルロン酸亜鉛はＮｏ．１１）を製した。
【０１１１】
【表２】
0005852560.tif 000003
【０１１２】
５．９．試験例３
実施例１において、酢酸亜鉛の代わりに表３に示す金属化合物を使用した以外は、実施例１と同様の方法でヒアルロン酸金属塩（Ｎｏ．１６〜２０）を製した。なお、本試験例において、亜鉛以外の金属を含むヒアルロン酸金属塩１ｇ当たりの金属含有量は、ＩＣＰ発光分光分析装置を用いて測定された。また、表３のヒアルロン酸金属塩１ｇ当たりの金属含有量（理論値）は、実施例１と同じ方法にて算出された。また、ヒアルロン酸金属塩１ｇ当たりの金属含有量（理論値）の右側の括弧内の数値は、ヒアルロン酸金属塩１ｇ当たりの金属含有量（理論値）に対する、ヒアルロン酸金属１ｇ当たりの金属含有量（測定値）を置換率（％）として示したものである。
【０１１３】
【表３】
0005852560.tif 000004
【０１１４】
５．１０．実施例２
実施例１において、原料としてヒアルロン酸（平均分子量約１２０万、平均粒子径約４５０μｍ、キユーピー株式会社製）用いた以外は、実施例１と同様の方法にて、ヒアルロン酸亜鉛（収率：１１０％、ヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量：６１ｍｇ、ヒアルロン酸亜鉛の１％水溶液の動粘度：９６ｍｍ２／ｓ）を得た。
【０１１５】
５．１１．実施例３
実施例１において、清水の代わりに０．１Ｎ塩酸を使用した以外は、実施例１と同様の方法でヒアルロン酸金属塩を製した。含水媒体のｐＨは１．７であった。
【０１１６】
実施例３で得られたヒアルロン酸亜鉛の収率は１１２％であり、ヒアルロン酸亜鉛１ｇ当たりの亜鉛含有量は６２．３ｍｇであった。また、得られたヒアルロン酸亜鉛の１％水溶液の動粘度は０．９ｍｍ２／ｓであった。
【０１１７】
５．１２．試験例４
実施例１において、原料ヒアルロン酸として表４に示す平均分子量を有するものを使用した以外は、実施例１と同様の方法でヒアルロン酸亜鉛（Ｎｏ．２１、２３〜２６、実施例１のヒアルロン酸亜鉛はＮｏ．２２）を製した。
【０１１８】
【表４】
0005852560.tif 000005
【０１１９】
５．１３．試験例５
実施例１において、原料としてヒアルロン酸（平均分子量約８０００、平均粒子径約２００μｍ、キユーピー株式会社製）を用い、ヒアルロン酸投入前の含水媒体中の水および媒体（エタノール）の量を表５に示すものにした以外は、実施例１と同様の方法でヒアルロン酸亜鉛（Ｎｏ．３１〜３８）を製した。
【０１２０】
【表５】
0005852560.tif 000006
【０１２１】
５．１４．試験例６
実施例１において、亜鉛化合物および含水媒体中の媒体として表６に示す亜鉛化合物および媒体を用いた以外は、実施例１と同様の方法で精製ヒアルロン酸（Ｎｏ．４２〜４５、実施例１のヒアルロン酸亜鉛はＮｏ．４１）を製した。
【０１２２】
【表６】
0005852560.tif 000007
【０１２３】
５．１５．試験例７
実施例１において、酢酸亜鉛の使用量、ならびにヒアルロン酸と酢酸亜鉛の反応温度および反応時間を表７に示すものにした以外は、実施例１と同様の方法でヒアルロン酸亜鉛（Ｎｏ．５１、５２および５４〜５７、実施例１のヒアルロン酸亜鉛はＮｏ．５３）を製した。
【０１２４】
【表７】
0005852560.tif 000008
【０１２５】
５．１６．試験例８（肌荒れ改善効果の評価）
以下の表８の処方に従い、試験番号Ａ、Ｂ及びＣの組成物を調製した。表８中の数値の単位は「重量％」である。
【０１２６】
【表８】
0005852560.tif 000009
【０１２７】
４人の被験者の前腕内側部を、テープストリッピング法を用いて処理することにより、皮膚のバリア機能を破綻し、ヒト肌荒れモデル皮膚を作製した。ヒト肌荒れモデル皮膚に、試験番号Ａ、Ｂ及びＣの組成物、並びにコントロールとして精製水を約０．３ｍＬ、１日３回、６日間連続して塗布した。テープストリッピング前、テープストリッピング直後、及び７日目の経皮水分蒸散量（TEWL）をTewameter TM300を用いて測定した。なお、測定の３０分前に前腕を洗浄した。また、以下の式に従い、経表皮水分蒸散量（TEWL）の回復率（％）を算出した。
【０１２８】
回復率（％）=（テープストリッピング直後のTEWL値−7日目のTEWL値）/（テープストリッピング直後のTEWL値−テープストリッピング前のTEWL値）×100
【０１２９】
結果を図１に示す。図１から明らかなように、実施例１で得られたヒアルロン酸亜鉛は、優れた経表皮水分蒸散量の回復効果が認められた。
【０１３０】
さらに、上記試験において、以下の表９の基準に従い、肌の赤味を評価した。結果を表１０に示す。表１０に示すように、実施例１で得られたヒアルロン酸亜鉛は、肌の赤味の改善効果が認められた。
【０１３１】
【表９】
0005852560.tif 000010
【０１３２】
【表１０】
0005852560.tif 000011
【０１３３】
実施例１〜３ならびに試験例１〜８によれば、本発明のヒアルロン酸金属塩の製造方法において、第２族元素に属する金属、第１２族元素に属する金属、第１３属元素に属する金属および遷移元素に属する金属のうち少なくとも１種を含有する金属化合物を含む含水媒体中にヒアルロン酸および／またはその塩を分散させる工程を含むことにより、高収率にて簡便な方法でヒアルロン酸金属塩を得ることができることが理解できる。
【０１３４】
これに対して、比較例１および２は、実施例１と同じ原料ヒアルロン酸を用いて、原料ヒアルロン酸を完全に溶解させて金属化合物（酢酸亜鉛）との反応を行った例である。上述の結果から、実施例１のヒアルロン酸亜鉛は、比較例１および２のヒアルロン酸亜鉛よりも収率が高いことが理解できる。
【０１３５】
また、比較例３も比較例１および２と同様に、原料ヒアルロン酸を完全に溶解させて金属化合物（酢酸亜鉛）との反応を行った例である。参考例および比較例３では、実施例１で用いた原料ヒアルロン酸よりも大きな平均分子量を有する原料ヒアルロン酸を用いた。参考例と比較例３との対比から、参考例によれば、金属化合物（酢酸亜鉛）を含む含水媒体中に原料ヒアルロン酸を分散させる工程を含むことにより、平均分子量が大きな原料ヒアルロン酸を用いてヒアルロン酸亜鉛を得た場合においても、原料ヒアルロン酸を完全に溶解させて金属化合物（酢酸亜鉛）との反応を行った場合と比較して、ヒアルロン酸亜鉛の収率を高めることができることが理解できる。
【０１３６】
また、参考例と比較して、実施例１では、得られたヒアルロン酸亜鉛の収率が高く、亜鉛含有量が多かった。その理由としては、実施例１で用いた原料ヒアルロン酸は参考例で用いたヒアルロン酸よりも平均分子量が小さいので、亜鉛イオンが原料ヒアルロン酸の分子構造中に入り込み易いため、ヒアルロン酸のカルボキシルイオンと亜鉛イオンとが配位して複合体を形成しやすく、その結果、ヒアルロン酸亜鉛の収率が高くなるうえに、亜鉛含有量が多くなることが考えられる。
【０１３７】
また、ｐＨが３未満の反応液にて反応を行った場合（実施例３）と比較して、ｐＨが３〜１０の範囲にある反応液にて反応を行った場合（実施例１）のほうが、得られるヒアルロン酸亜鉛の動粘度の低下が少なく（すなわち分子量の低下が低く）、かつ、ヒアルロン酸亜鉛の収率が優れていることが明らかになった。
【０１３８】
５．１７．試験例９
本試験例では、以下に記す処方にて、実施例１で得られたヒアルロン酸亜鉛を配合した化粧料を調製した。
【０１３９】
ヒアルロン酸亜鉛（実施例１）                      ０．２％
ヒアルロン酸ナトリウム                            ０．１％
加水分解ヒアルロン酸                              ０．１％
コラーゲンペプチド                                ０．１％
１，３−ブチレングリコール                        ５．０％
グリセリン                                        ３．０％
イソステアリルアルコール                          ０．１％
酢酸トコフェロール                                ０．１％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノラウリル酸エステル    ０．５％
ＰＯＥ（１５）ラウリルアルコールエーテル          ０．５％
ピロリドンカルボン酸亜鉛                          ０．１％
エチルパラベン                                    ０．１％
メチルパラベン                                    ０．１５％
エタノール                                        ５．０％
香料                                                  適量
精製水                                                残量
【０１４０】
５．１８．試験例１０
本試験例では、以下に記す処方にて、参考例で得られたヒアルロン酸亜鉛を配合した乳液を調製した。
【０１４１】
ヒアルロン酸亜鉛（参考例）                    ０．３％
ペンチレングリコール                          ５．０％
グリセリン                                    ３．０％
スクワラン                                    ５．０％
ステアリン酸                                  ０．５％
ステアリルアルコール                          ２．０％
ワセリン                                      ４．０％
ステアリン酸ソルビタン                        １．０％
ＰＯＥ（１０）モノステアリン酸エステル        １．０％
カルボキシビニルポリマー                      ０．５％
ポリクオタニウム−５１                        ０．１％
メチルパラベン                                ０．１５％
プロピルパラベン                              ０．１％
水酸化カリウム                                ０．１％
ＢＨＴ                                        ０．０２％
ＥＤＴＡ−２ナトリウム                        ０．０２％
香料                                              適量
精製水                                            残量
【０１４２】
５．１９．試験例１１
本試験例では、以下に記す処方にて、実施例１で得られたヒアルロン酸亜鉛を配合した美容液パック（ペースト状ピールオフタイプ）を調製した。
【０１４３】
ヒアルロン酸亜鉛（実施例１）                        ０．５％
ポリ酢酸ビニルエマルジョン                        １７．０％
ポリビニルアルコール                              １１．０％
ソルビトール                                        ５．０％
ポリエチレングリコール４００                        ５．０％
スクワラン                                          ２．５％
ＰＯＥソルビタンモノステアリン酸エステル            １．０％
酸化チタン                                          ４．０％
タルク                                              ８．０％
エタノール                                          ８．０％
メチルパラベン                                      ０．１５％
香料                                                    適量
精製水                                                  残量
【０１４４】
５．２０．試験例１２
本試験例では、以下に記す処方にて、実施例１で得られたヒアルロン酸亜鉛を配合した洗顔料（クレンジングフォーム）を調製した。
【０１４５】
ヒアルロン酸亜鉛（実施例１）                        ０．２％
カチオン化ヒアルロン酸                              ０．１％
（キユーピー株式会社製、ヒアロベール）
グリセリン                                        １０．０％
ポリエチレングリコール４００                      １５．０％
ジプロピレングリコール                            １０．０％
ラウロイルグルタミン酸ナトリウム                  ２０．０％
ＰＯＥ（２）モノステアリン酸エステル                ５．０％
パーム脂肪酸グルタミン酸ナトリウム                  ８．０％
アルキルベタイン                                    ２．０％
ＥＤＴＡ−２ナトリウム                              ０．０２％
プロピルパラベン                                    ０．１％
メチルパラベン                                      ０．１５％
香料                                                    適量
精製水                                                  残量
【０１４６】
５．２１．試験例１３
本試験例では、以下に記す処方にて、実施例１で得られたヒアルロン酸亜鉛を配合したサンスクリーン（乳液）を調製した。
【０１４７】
ヒアルロン酸亜鉛（実施例１）                        ０．２％
１，３−ブチレングリコール                          ３．０％
ジプロピレングリコール                              ３．０％
シクロメチコン                                      ５．０％
ジメチコン                                          ５．０％
セタノール                                          １．０％
ワセリン                                            １．０％
メトキシケイヒ酸オクチル                            ５．０％
酸化チタン                                          ２．０％
酸化亜鉛                                            ２．０％
ステアリン酸ソルビタン                              １．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアリン酸エステル    １．０％
フェノキシエタノール                                ０．８％
メチルパラベン                                      ０．１％
香料                                                    適量
精製水                                                  残量
【０１４８】
５．２２．試験例１４
本試験例では、以下に記す処方にて、実施例１で得られたヒアルロン酸亜鉛を配合したリップクリームを調製した。
【０１４９】
ヒアルロン酸亜鉛（実施例１）                        ０．１％
マイクロクリスタリンワックス                        １．５％
セレシン                                          １２．０％
スクワラン                                        １０．０％
デカメチルテトラシロキサン                        １０．０％
リンゴ酸ジイソステアリル                            ５．０％
キャンデリラロウ                                    ２．０％
ワセリン                                            ８．０％
ヒドロキシステアリン酸グリセリル                    ２．０％
メントール                                          ０．０５％
流動パラフィン                                      １．０％
酢酸トコフェロール                                  ０．１％
トコフェロール                                      ０．０５％
プロピルパラベン                                    ０．１％
香料                                                    適量
精製水                                                  残量
【０１５０】
５．２３．試験例１５
本試験例では、以下に記す処方にて、実施例１で得られたヒアルロン酸亜鉛を配合したシャンプーを調製した。
【０１５１】
ヒアルロン酸亜鉛（実施例１）                          ０．２％
カチオン化ヒアルロン酸                                ０．１％
（キユーピー株式会社製、ヒアロベール）
ＰＯＥ（２０）ラウリルエーテル硫酸ナトリウム        １１．０％
ラウロイルアスパラギン酸ナトリウム                  １０．０％
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン                    ４．０％
ヤシ油脂肪酸モノエタノールアミド                      ２．０％
ＥＤＴＡ−２ナトリウム                                ０．１％
安息香酸ナトリウム                                    ０．２％
フェノキシエタノール                                  ０．８％
メチルパラベン                                        ０．１％
香料                                                      適量
精製水                                                    残量
【０１５２】
本発明に係る実施の形態の説明は以上である。本発明は、実施の形態で説明した構成と実質的に同一の構成（例えば、機能、方法及び結果が同一の構成、あるいは目的及び結果が同一の構成）を含む。また、本発明は、実施の形態で説明した構成の本質的でない部分を置き換えた構成を含む。また、本発明は、実施の形態で説明した構成と同一の作用効果を奏する構成又は同一の目的を達成することができる構成を含む。また、本発明は、実施の形態で説明した構成に公知技術を付加した構成を含む。
【図１】
0005852560.tif 000012