(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
あじなれずし食品由来のラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）、ぶりなれずし食品由来のラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）から選択される少なくとも１種の菌体の乾燥粉末体を含有するＩＦＮ−γ産生増強剤であって、
前記あじなれずし食品由来の前記ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）が、独立行政法人製品評価技術基盤機構  特許微生物寄託センター  受託番号ＮＩＴＥ  Ｐ−１２６０で寄託されたラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）ＳＢ１０９であり、前記ぶりなれずし食品由来のラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）が、独立行政法人製品評価技術基盤機構  特許微生物寄託センター  受託番号ＮＩＴＥ  Ｐ−１２５８で寄託されたラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）ＢＮ１−２であり、
前記ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）ＳＢ１０９および前記ラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）ＢＮ１−２は、サイトカイン選択的にＩＦＮ−γ産生を制御する用途に使用されることを特徴とするＩＦＮ−γ産生増強剤。
【請求項２】
あじなれずし食品由来のラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）から選択される少なくとも１種の菌体の乾燥粉末体を含有するＩＬ−２産生増強剤であって、
前記あじなれずし食品由来のラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）が、独立行政法人製品評価技術基盤機構  特許微生物寄託センター  受託番号ＮＩＴＥ  Ｐ−１１２３で寄託されたラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）ＡＮ１−１であり、
前記ラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）ＡＮ１−１は、サイトカイン選択的にＩＬ−２産生を制御する用途に使用されることを特徴とするＩＬ−２産生増強剤。
【請求項３】
請求項１記載のＩＦＮ−γ産生増強剤、または請求項２記載のＩＬ−２産生増強剤を用いて、食品原料を乳酸発酵させたことを特徴とする乳酸発酵食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、免疫賦活作用を有する新規な免疫活性化乳酸菌組成物及び免疫活性化乳酸発酵食品に関し、特に、各種なれずし食品から単離される特定の乳酸菌の菌体等を含有する免疫活性化乳酸菌組成物及び免疫活性化乳酸発酵食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
消化管や呼吸器粘膜に分布する免疫システムは、免疫系全体の６０％以上を占め、その特徴的な免疫活動により、外来異物の認識・排除を行い、生命活動を維持するのに極めて重要な役割を担っている。
【０００３】
粘膜免疫システムの中でも消化管免疫は，食物からの栄養源の取り込みを監視する他、微生物や食物由来の成分、薬物などの影響を受け、腸内環境の保全や食物アレルギー応答の制御、免疫寛容、造血などの生体応答と密接に関連している。この特徴的な消化管免疫反応は、パイエル板という腸の特殊なリンパ組織によって担われ、このリンパの機能を制御するアジュバント活性様のメカニズムが経口可能なワクチンや抗アレルギー薬開発のための新規な薬理学的作用機序として注目されている（例えば、非特許文献１を参照）。
【０００４】
一方で、石川県下で造られる発酵食品には、あじなれずし、かぶらずし、だいこんずし、いかこうじ漬け等、独自性のある発酵食品が多く、この発酵プロセスには、多くの乳酸菌が関与している。
【０００５】
前記なれずしの遊離アミノ酸には、γ−アミノ酪酸を多く含むものがあり、このγ−アミノ酪酸の人等の哺乳動物に対する代表的な生理作用として、脳機能改善、精神安定化、血圧上昇抑制等が知られている。また、なれずしの有機酸量の主成分である乳酸は、乳酸菌によって生成されるが、乳酸菌は、生菌、死菌であっても、その菌体成分が生体に吸収されるか、あるいは腸内細菌を介して、免疫機能の増強や肝機能の促進等に有利に働くとされている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Mowat et al. Nature Rev.Immunol., Vol.3, 332
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
前述のなれずし等の乳酸発酵食品は、腸内環境を改善し、生体の健康維持や増進に役立つものと考えられるが、免疫に対する機能性等については、未だ十分に解明されていない。
【０００８】
本発明は、このような実情に鑑みて提案されたものであり、石川県下で造られる発酵食品の粘膜応答に及ぼす影響や作用機序を遺伝子レベルで解明し、腸管機能に優れ、ＩＦＮ−γ産生増強作用やＩＬ−２産生増強作用を持った乳酸菌を見出すことにより、健康維持に役立つ乳酸菌組成物や乳酸発酵食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、石川県の特産の発酵食品について、発酵菌の菌叢解析を行うとともに、ＤＮＡマイクロアレイ法によって腸管の機能を評価することで、免疫活性化に優れた菌を見出すに至った。本発明は、ＩＦＮ−γ産生増強作用やＩＬ−２産生増強作用が見出された乳酸菌を用いて、免疫活性化に優れた乳酸菌組成物及び乳酸発酵食品を提供するものである。
【００１０】
すなわち、本発明のＩＦＮ−γ産生増強剤は、あじなれずし食品由来のラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）、ぶりなれずし食品由来のラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）から選択される少なくとも１種の菌体の乾燥粉末体を含有するＩＦＮ−γ産生増強剤であって、
前記あじなれずし食品由来の前記ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）が、独立行政法人製品評価技術基盤機構  特許微生物寄託センター  受託番号ＮＩＴＥ  Ｐ−１２６０で寄託されたラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）ＳＢ１０９であり、前記ぶりなれずし食品由来のラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）が、独立行政法人製品評価技術基盤機構  特許微生物寄託センター  受託番号ＮＩＴＥ  Ｐ−１２５８で寄託されたラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）ＢＮ１−２であって、
前記ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）ＳＢ１０９、前記ラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）ＢＮ１−２は、サイトカイン選択的にＩＦＮ−γ産生を制御する用途に使用されることを特徴とする。
【００１１】
また、本発明のＩＬ−２産生増強剤は、あじなれずし食品由来のラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）から選択される少なくとも１種の菌体の乾燥粉末体を含有するＩＬ−２産生増強剤であって、
前記あじなれずし食品由来のラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）が、独立行政法人製品評価技術基盤機構  特許微生物寄託センター  受託番号ＮＩＴＥ  Ｐ−１１２３で寄託されたラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）ＡＮ１−１であり、
前記ラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）ＡＮ１−１は、サイトカイン選択的にＩＬ−２産生を制御する用途に使用されることを特徴とする。
また、本発明の乳酸発酵食品は、これらのＩＦＮ−γ産生増強剤、ＩＬ−２産生増強剤を用い、食品原料を乳酸発酵させたことを特徴とする。
【００１２】
あじなれずし食品由来のラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）やラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、さらには、ぶりなれずし食品由来のラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）は、腸内での抗体産生や、ＩＦＮ−γ産生増強作用やＩＬ−２産生増強作用等の免疫活性化作用を有する。したがって、これらを含む乳酸菌組成物や、これら乳酸菌を用いて乳酸発酵された乳酸発酵食品は、免疫賦活化作用に優れ、身体の健康維持に役立つ。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、ＩＦＮ−γ産生増強作用やＩＬ−２産生増強作用等の免疫活性化作用に優れ、健康維持に有用な乳酸菌組成物を提供することができ、また、これを用いて乳酸発酵させることで、同じく免疫活性作用に優れ、健康維持に有用な乳酸発酵食品を提供することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】あじなれずしから単離されたラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillusbuchneri）（ＡＮ１−１）のＩＦＮ−γ産生を示す図である。
【図２】あじなれずしから単離されたラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillusbuchneri）（ＡＮ１−１）のＩＬ−２産生を示す図である。
【図３】あじなれずしから単離されたラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillusplantarum）（ＡＮＰ７−１）のＩＦＮ−γ産生を示す図である。
【図４】あじなれずしから単離されたラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）（ＡＮＰ７−１）のＩＬ−２産生を示す図である。
【図５】ぶりなれずしから単離されたラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）（ＢＮ１−２）及びあじなれずしから単離されたラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）（ＳＢ１０９）のＩＦＮ−γ産生を示す図である。
【図６】ぶりなれずしから単離されたラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）（ＢＮ１−２）及びあじなれずしから単離されたラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）（ＳＢ１０９）のＩＬ−２産生を示す図である。
【発明の実施の形態】
【００１５】
以下、本発明を適用した乳酸菌組成物及び乳酸発酵食品の実施形態について詳細に説明する。
【００１６】
本発明の免疫活性化乳酸菌組成物は、「あじなれずし食品」由来のラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus
brevis）、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、「ぶりなれずし食品」由来のラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）から選択される少なくとも１種を含むことを特徴事項とするものであり、これにより免疫活性を向上させるという機能を有する。
【００１７】
「なれずし」は、塩蔵した魚を米飯と共に漬け込み熟成させた発酵食品であり、いわゆる「ほんなれ」と「なまなれ」とがある。「ほんなれ」は、熟成期間が長く、米飯が粥状になるまでじっくりと熟成させているため、魚だけが食される。「なまなれ」は、熟成期間が短く、発酵の初期段階を利用するため、米飯は食用可能な形状となっており、魚とともに食する。
【００１８】
能登地方の「なれずし」は、市販品や一般家庭で作られたもの等があるが、原魚に各種魚が利用されており、熟成期間は約２ヶ月間で、「なまなれ」に類する。この能登地方のアジ（鯵）を用いた「なれずし」が、本発明で言うところの「あじなれずし食品」である。同じく、ぶり（鰤）を用いた「なれずし」が「ぶりなれずし食品」である。
【００１９】
前述の「なれずし」の発酵プロセスには、多くの乳酸菌が関与しているが、本発明者らは、乳酸菌の菌叢解析を行うとともに、ＤＮＡマイクロアレイ法によりその機能を評価した。その結果、「あじなれずし食品」の乳酸発酵に関与するラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）やラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus
brevis）、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、「ぶりなれずし食品」の乳酸発酵に関与するラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）が、腸での抗体産生等、免疫活性化に関して、顕著な活性を有することを見出した。
【００２０】
本発明の乳酸菌組成物において使用する前記ラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）やラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus
brevis）、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、ラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）は、菌体そのものであってもよいし、菌体成分や菌体由来成分、菌体処理物等であってもよい。例えば、前記菌体成分は、水やアルコールで抽出することにより得ることができる。
【００２１】
また、前記ラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）やラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus
plantarum）、ラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）は、それぞれ単独で用いてもよいし、これらのうちの２種以上を混合して用いることも可能であり、他の乳酸菌等を添加することも可能である。
【００２２】
さらに、本発明の乳酸菌組成物を薬剤等の形態で供する場合には、薬理上許容し得る担体、賦活剤、各種添加物等を加えることも可能である。
【００２３】
一方、本発明の免疫活性化乳酸発酵食品は、前記免疫活性化機能を有するラクトバチルス・ブチネリ（Lactobacillus buchneri）やラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus
brevis）、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、ラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri）を用い、各種食品原料を発酵させたものである。これら免疫活性化機能を有する乳酸菌を予め仕込んでおくことで、特定の乳酸菌（前記ラクトバチルス・ブチネリやラクトバチルス・ブレビス、ラクトバチルス・プランタラム、ラクトバチルス・パラブチネリ）が増殖し、免疫活性化機能に優れた乳酸発酵食品を提供することが可能となる。
【００２４】
乳酸発酵させる食品原料は任意であり、あらゆる種類の発酵食品に適用することが可能である。例えば、あじなれずしにも適用することができるし、かぶらずし、だいこんずし、いかこうじ漬け等にも適用することができる。勿論、これらに限らず、世の中に知られている乳酸発酵食品の全てに適用することが可能である。発酵に際しては、例えば前記ラクトバチルス・ブチネリやラクトバチルス・ブレビス、ラクトバチルス・プランタラム、ラクトバチルス・パラブチネリを豊富に含む菌叢を利用して発酵食品を造り、製品とすればよい。
【００２５】
以上のように、本発明の免疫活性化乳酸菌組成物や免疫活性化乳酸発酵食品は、免疫活性化機能を有するラクトバチルス・ブチネリやラクトバチルス・ブレビス、ラクトバチルス・プランタラム、ラクトバチルス・パラブチネリを含有しているので、健康を維持する上で極めて有用なものである。
【実施例】
【００２６】
以下、本発明を適用した具体的な実施例について、実験結果を基に説明する。
【００２７】
実験方法
数種の「なれずし」から発酵に関係する菌を採取して菌叢解析を実施し、単離された菌をマウスに経口投与し、小腸のリンパ節（パイエル板）細胞が産生するサイトカインのＩＬ−２とＩＦＮ−γの産生を指標に免疫応答に及ぼす影響を調べると共に，小腸のリンパ節を含む組織を採取してｔｏｔａｌ  ＲＮＡを採取し、これを２万個の発現遺伝子が解析可能なＤＮＡマイクロアレイに付し、有益な遺伝子群の変動を指標に健康に有用な菌を探索した。
【００２８】
（１）サンプルの作製
菌体を濾過後に凍結乾燥に付し、乾燥粉末体を得た。これをサンプルとして以下の実験に用いた。
（２）実験動物
Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ（雄，５ｗ，日本チャールズリバー）を実験時に適宜購入し、金沢大学自然研動物飼育施設で１週間以上飼育、馴化させてから実験に使用した。
【００２９】
（３）サンプルの調製と投与
（１）の方法で得られたサンプルについて、最終投与量が３０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙになるよう、用時、精製水に懸濁して投与サンプルを調製した。この投与サンプルを（２）の条件で飼育したマウスに０．１ｍＬ／１０ｇで１日１回（午前１０時）、連続的に５日間、経口投与した。
【００３０】
（４）パイエル板構成細胞の採取
初回のサンプル投与開始から７日後に、マウスを過剰のエーテルにより致死せしめ、無菌条件下に小腸を摘出して、散布するパイエル板を実体顕微鏡下に摘出した。得られたパイエル板を冷えたリン酸緩衝液に入れて洗浄後、７５０Ｕ／ｍＬのコラゲナーゼ（ｔｙｐｅＩ：シグマ・アルドリッチ社製）完全培地（ＲＰＭＩ−１６４０）に投入し、１時間インキュベートした。インキュベート終了後、分離したパイエル板構成リンパ球を２００μｍのナイロンメッシュを通してシングルセル懸濁液として細胞数を計測した。
【００３１】
パイエル板構成細胞を３×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬの濃度となるように５％ＦＣＳ化ＲＰＭＩ−１６４０培地に再浮遊して調製し、２４ウエル培養プレートに１ｍＬずつ播種した。５％ＣＯ２気流下、３７℃で１時間の安定培養を行った後に、最終濃度が５μｇ／ｍＬのConcanavalin
A（ＣｏｎＡ），あるいは１μｇ／ｍＬのlipopolysaccharide（ＬＰＳ）を各ウエルに添加し、４８〜１４４時間、静置培養した。
【００３２】
（５）培養液上清中のＴｈ１およびＴｈ２関連サイトカインの測定
ＣｏｎＡによる刺激培養終了後に、培養液上清を回収し、ここに含まれるＴヘルパー細胞による免疫調節因子であるＩＬ−２とＩＦＮ−γ（Ｔｈ１）、ＩＬ−４とＩＬ−５（Ｔｈ２）を市販のＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ（Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社製）を用いて測定した。測定方法は、ｋｉｔの添付文書に従い、形成する発色色素の吸光度を測定し、標準物質による検量線からそれぞれのサイトカイン産生量を算定した。
【００３３】
発酵食品から単離できた乳酸菌
（数種のあじなれずし食品由来）
AN1-1: Lactobacillus buchneri
AN1-3: L. alimentarius
AN1-5: L. brevis
AN1-7: L. casei
AN2-2: L. brevis = AN1-5
AN2-3: L. plantarum
AN2-5: L. alimentarius = AN1-3
AN3-2: L. plantarum = AN2-3
AN3-5: L. brevis = AN1-5, AN2-2
AN4-1: L. plantarum = AN2-3, AN3-2
AN5-1: L. paraplantarum
AN5-3: L. plantarum =
AN2-3, AN3-2,
AN4-1
ANP1-4: L. brevis
ANP7-1: L. plantarum
ANP7-4: L. casei
ANP7-6: L. brevis
SB108: Pediococcus ethanolidurans
SB109: L. brevis
【００３４】
（ぶりなれずし食品由来）
BN1-2: L. parabuchneri 
【００３５】
（さばなれずし食品由来）
SN1-7: L. alimentarius
SN1-8: L. parabuchneri
（いかこうじ漬け食品由来）
SB103: Enterococcus faecalis
（いか黒造り食品由来）
SB105: Weissella hellenica
【００３６】
上記に示される乳酸菌のうち、ラクトバチラス・ブチネリ（Lactobacillus
buchneri） AN1-1、ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis） AN1-5、AN3-5およびSB109、ラクトバチルス・プランタラム  (Lactobacillus
plantarum) AN3-2およびANP7-1、ラクトバチルス・パラブチネリ（Lactobacillus parabuchneri） BN1-2、エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis） SB103、ワイセラ・ヘレニカ（Weissella hellenica）SB105及びぺディオコッカス・エタノリデュランス(Pediococcus ethanolidurans) SB108は、独立行政法人製品評価技術基盤機構  特許微生物寄託センターに寄託申請し、以下の受託番号で受託された。
【００３７】
Lactobacillus buchneri AN1-1（受託番号：NITE P-1123）
Lactobacillus brevis AN1-5（受託番号：NITE P-1124）
Lactobacillus plantarum AN3-2（受託番号：NITE P-1255）
Lactobacillus brevis AN3-5（受託番号：NITE P-1256）
Lactobacillus parabuchneri BN1-2（受託番号：NITE P-1258）
Lactobacillus plantarum ANP7-1（受託番号：NITE P-1224）
Enterococcus faecalis SB103（受託番号：NITE P-1127）
Weissella hellenica SB105（受託番号：NITE P-1128）
Pediococcus ethanolidurans SB108（受託番号：NITE P-1228）
Lactobacillus brevis SB109（受託番号：NITE P-1260）
【００３８】
単離乳酸菌の生物活性の要約
あじなれずしから単離された乳酸菌のうちＡＮ１−１（Lactobacillus
buchneri）、ＳＢ１０９（Lactobacillus
brevis）およびＡＮＰ７−１（L. plantarum）、ぶりなれずしから単離されたＢＮ１−２（Lactobacillus parabuchneri）については、抗体産生など免疫活性化の活性があった。さらに、「あじなれずし由来」のＡＮ１−１およびＡＮＰ７−１については、腸管の免疫賦活化活性の他に、ＤＮＡマイクロアレイの結果において、interferon-induced protein with tetratricopeptide repeats 1、interferon activated gene set、guanylate nucleotide binding proteins、2'-5' oligoadenylate synthetases、およびchemokine (C-C motif) ligand等のウイルス感染の防御に役立つ遺伝子が強く上昇していた。
【００３９】
また、ぶり，あるいはあじのなれずしから単離された乳酸菌のうち、ＢＮ１−２（Lactobacillus
parabuchneri）とＳＢ１０９（Lactobacillus brevis）の２種は、消化管免疫関連サイトカインのうち、ＩＬ−２産生には影響せず、ＩＦＮ−γの産生を選択的に増加させた。このことから、これらの乳酸菌は、腸における単球系の免疫を活性化する作用があり、これらの菌および菌叢を豊富に含む食品や、これらの菌を用いて発酵させた食材は、食中毒の防御や消化管における感染症を緩和するのに役立つ機能性食品となるものと考えられる。
【００４０】
小腸におけるサイトカイン産生の結果（免疫賦活作用）
（あじなれずし食品由来の乳酸菌について）
「あじなれずし製品」から単離された乳酸菌でＡＮおよびＡＮＰシリーズの１６種について、培養菌体をマウスに経口投与してパイエル板構成細胞によるＴｈサイトカイン産生に及ぼす影響を調べた。その結果、Ｔｈ１サイトカイン産生のうちＩＬ−２あるいはＩＦＮ−γのいずれかの産生を変化させたのは、ＡＮ１−１およびＡＮＰ７−１の２種の菌であった。
【００４１】
先ず、ＡＮ１−１（L. buchneri）であるが、図２に示す通り、３０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量のＡＮ１−１をマウスに経口投与することにより、ＩＬ−２で１．５倍の有意な産生上昇が見られた。なお、ＡＮ１−１の経口投与はパイエル板のＩＦＮ−γ産生に影響しない（図１）。また、データには示さないが、Ｔｈ２のサイトカイン、ＩＬ−４とＩＬ−５産生には、ＡＮ１−１は影響しないことがわかった。他のＡＮ１−３（L. alimentarius）、ＡＮ１−５（L. brevis）の乳酸菌は、Ｔｈ１のサイトカイン産生には影響を及ぼさなかった。
【００４２】
次に、ＡＮＰ７−１（L. plantarum ）であるが、３０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量のＡＮＰ７−１をマウスに５日間経口投与すると、ＩＦＮ−γで１．８倍の有意な産生上昇が見られ（図３参照）、ＩＬ−２においても有意差はないが、１．３倍の産生増強作用が認められた（図４参照）。
【００４３】
以上のことから、あじなれずし由来の２種の乳酸菌［ＡＮ１−１（L. buchneri）とＡＮＰ７−１（L. plantarum ）］について、消化管免疫の中でも腸内環境の改善や感染予防、及びアレルギーの緩和等の作用を示すものと考えられる。
【００４４】
（ぶりなれずし食品由来及びさばなれずし食品由来の乳酸菌について）
「ぶりなれずし食品」及び「さばなれずし食品」の製品から単離された乳酸菌のＢＮ，ＳＮの２シリーズ３種について、マウスパイエル板構成細胞によるサイトカイン産生によるスクリーニングを行った。
【００４５】
ＢＮ１−２（L.parabuchneri）は、先のＡＮＰ７−１等とは分離された食品が異なり、「ぶりなれずし」由来である。ＢＮ１−２菌は、図５に示す通り、ＡＮＰ７−１と同様にＩＦＮ−γ産生を増強させるが、その活性はＡＮＰ７−１よりもはるかに強く、１５倍のＩＦＮ−γ産生増強活性を認めた。しかしながら、図６に示す通り、ＩＬ−２産生には影響を与えなかった。
【００４６】
ＳＮ１−７（L.alimentarius）については、ＳＮ１−７の３０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙをマウスに経口投与することにより、ＩＦＮ−γ産生は２倍に増加した。なお、ＩＬ−２産生に対してＳＮ１−７は影響しなかった。
【００４７】
（あじなれずし食品由来の他の乳酸菌について）
ＳＢ１０８（Pediococcus ethanolidurans）とＳＢ１０９（L.brevis）の２種は、いずれもあじなれずしより分離された乳酸菌で、ＳＢ１０９はＡＮシリーズのＡＮＰ７−６と同種であり、先の検討ではＴｈサイトカインに影響を与えなかった。しかしながら、同じあじなれずし由来のＳＢ１０９は、図５に示したように、何も処理しないマウスに比較して１６倍以上の強いＩＦＮ−γ産生を示した。一方、ＳＢ１０８は、転じてＩＦＮγ産生を約４０％有意に抑制する活性が認められた。なお、図６に示す通り、ＳＢ１０８も１０９もパイエル板細胞によるＩＬ−２産生には影響を及ぼさなかった。
【００４８】
「ぶり」あるいは「あじ」をベースとする「なれずし」から単離した乳酸菌（ＢＮ１−２及びＳＢ１０９）は、強弱の差こそあれ、強いＩＦＮ−γ産生の誘導活性が認められた。あじなれずし由来のＡＮシリーズに認められたのと同様にＩＬ−２の産生には影響しないことから、サイトカイン選択的な制御活性があることが判明した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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