(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
疎水性ブロックＡおよび親水性ブロックＢを含有する両親媒性ブロックコポリマーを含むミセル組成物であって、ブロックＡの数平均分子量（Ｍｎ）（ＭｎＡ）をブロックＢの数平均分子量（ＭｎＢ）で除した比率Ｒは、０．９５より高く、前記両親媒性ブロックコポリマーは、パラメーターαによって特徴付けられ；
３＜α＜５．５であり；
α＝ＭｎＡ／（ＭｎＡ＋ＭｎＢ）×Ｋｏ／ｗＡ×√Ｍｔｏｔであり、ここで、
ＭｎＡ＝ブロックＡの数平均分子量（Ｍｎ）であり、
ＭｎＢ＝ブロックＢの数平均分子量（Ｍｎ）であり、
Ｋｏ／ｗＡ＝疎水性ブロックＡのモノマー単位のオクタノール／水分配係数であり、
Ｍｔｏｔ＝ＭｎＡ＋ＭｎＢ（ＭｔｏｔはｋＤａで表される）であり、
前記疎水性ブロックＡは、少なくとも１種の疎水性ポリマーＸを含み、前記親水性ブロックＢは、少なくとも１種の親水性ポリマーＹを含み、前記両親媒性ブロックコポリマーは、トリブロックコポリマーである、
ミセル組成物。
【請求項２】
疎水性化合物をさらに含む、請求項１に記載のミセル組成物。
【請求項３】
前記ミセルの平均粒径が、１０〜２００ｎｍの範囲内にある、請求項１または２に記載のミセル組成物。
【請求項４】
前記疎水性化合物が、治療薬、心臓血管作用薬、ビタミン、着香料、食品成分、顔料、触媒、光安定剤もしくはＵＶ安定剤、殺菌剤、殺虫剤、難燃剤または抗癌薬の群から選択される、請求項２または３に記載のミセル組成物。
【請求項５】
前記疎水性化合物が、心臓血管作用薬である、請求項４に記載のミセル組成物。
【請求項６】
前記疎水性ポリマーＸが、ポリ（乳酸）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）、ポリ（ε−カプロラクトン）、ポリ（ヒドロキシブチレート）、ポリ（テトラメチレンカーボネート）またはポリ（エステルアミド）からなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載のミセル組成物。
【請求項７】
前記親水性ポリマーＹが、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エステルアミド）、ポリビニルピロリドンまたはポリビニルアセテートからなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載のミセル組成物。
【請求項８】
前記両親媒性ブロックコポリマーが、Ｘ−Ｙ−Ｘを含むトリブロックコポリマーである、請求項１〜７のいずれか一項に記載のミセル組成物。
【請求項９】
前記トリブロックコポリマーが、ポリ乳酸、疎水性ポリエステルアミドまたはポリカプロラクトンを疎水性ポリマーＸとして含み、かつポリエチレングリコールまたは親水性ポリエステルアミドを親水性ポリマーＹとして含む、請求項８に記載のミセル組成物。
【請求項１０】
前記ミセル組成物が、さらなる疎水性コア賦形剤をさらに含み得る、請求項１〜９のいずれか一項に記載のミセル組成物。
【請求項１１】
前記ミセル組成物が、疎水性ブロックＡおよび親水性ブロックＢを含有する両親媒性ジブロックコポリマーをさらに含み、前記疎水性ブロックＡが、少なくとも１種の疎水性ポリマー単位Ｘを含み、前記親水性ブロックＢが、少なくとも１種の親水性ポリマー単位Ｙを含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のミセル組成物。
【請求項１２】
ジブロックコポリマーの量が、全組成物の最大３０重量％まで可変であり得る、請求項１１に記載のミセル組成物。
【請求項１３】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のミセル組成物の調製方法であって、
ａ．前記疎水性化合物および前記両親媒性ブロックコポリマーを有機溶媒に溶解させて溶液を形成する工程と、
ｂ．前記有機溶液を水性媒体中に添加する工程と、
ｃ．前述の工程を場合により繰り返す工程と
を含む、方法。
【請求項１４】
前記方法が、以下の工程：
ｄ．前記有機溶媒を蒸発させ、それにより水溶液を形成する工程と、
ｅ．前述の工程を請求項１３に記載された工程とともに場合により繰り返す工程、
ｆ．前記水溶液を濾過して前記ミセル組成物を得る工程と、
ｇ．場合により前記ミセルを乾燥させる工程と
をさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記水性媒体が、水、生理食塩水または１〜１４の範囲のｐＨを有する緩衝液からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記有機溶媒が、アセトン、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、アセトニトリルまたはそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項１７】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載のミセル組成物を含む物品。
【請求項１８】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載のミセル組成物を含むデバイス。
【請求項１９】
請求項１７に記載の物品を含むデバイス。
【請求項２０】
食品加工用途、難燃性用途、コーティング、接着剤および化粧品、生地／布帛、工業および美術用途における、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のミセル組成物、請求項１７に記載の物品または請求項１８または１９に記載のデバイスの使用。
【請求項２１】
食品加工用途、難燃性用途、コーティング、接着剤および化粧品、生地／布帛、工業および美術用途における、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のミセル組成物の使用であって、
前記ミセル組成物がその制御放出特性を示すことを可能にする量で使用される、ミセル組成物の使用。
【請求項２２】
医薬としての使用のための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のミセル組成物。
【請求項２３】
心臓血管用途のための医薬の製造のための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のミセル組成物の使用。
【請求項２４】
癌治療のための医薬の製造のための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のミセル組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、両親媒性ブロックコポリマーに基づくミセル組成物に関する。本発明はまた、医学および／または獣医学用途に適したミセル組成物の調製方法に関する。本発明はまた、当該ミセル組成物を含む物品またはデバイスに関する。
【０００２】
本発明の分野は、水系における使用のために疎水性化合物を処方する、特に、比較的不溶性かつ／または毒性の疎水性化合物（例えば、心臓血管作用薬、抗癌剤、着香料、ビタミン、画像化剤、顔料、難燃剤、農芸用化学薬剤、殺菌剤、農薬または殺虫剤）の処方の分野である。
【０００３】
一般に、潜在的に疎水性の化合物は、それらが「忌避性（ｃｈａｌｌｅｎｇｉｎｇ）」（難水溶性）化合物として分類されることになり得る特性を有する。そのような分子は、有望なインビトロ能力を有するが、難水溶性、毒性、化学的不安定性、および限られた細胞浸透性などの性質のため、これらの化合物は、処方が有効であることを必要とする（Ｄａｖｉｓ，Ｓ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１７９，２）。
【０００４】
両親媒性ブロックコポリマーに基づくミセル系が、そのような忌避性化合物を処方するために使用されてきた（Ｊｏｎｅｓ，Ｍ．Ｃ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．４８，１０１）。疎水性ブロックおよび親水性ブロックからなる両親媒性ブロックコポリマーは、選択溶媒中で集合して、ミクロ相分離したコア／シェル構造になり得る。水性環境において、疎水性化合物が封入されてミセルの疎水性コアになる一方で、ミセルのシェルによって水溶性がもたらされる。ミセルは、それらのナノスコピック寸法およびシェルによって付与された特性のため、長期循環能力を有し得る。
【０００５】
国際公開第Ａ−９７／１０８４９号パンフレットは、生分解性ポリマーミセル型の薬物組成物、および水不溶性薬物を含むミセルの調製方法を開示しており、当該ミセルは、親水性ブロックとしてポリ（エチレンオキシド）を含有しかつ疎水性ブロックとしてポリ（−ξ−カプロラクトン）を含有する両親媒性のジもしくはトリブロックコポリマーからなるものである。ミセルを形成するために使用される両親媒性ブロックコポリマーの分子量は、約１４３０〜６０００ダルトンの範囲内にある。結果として得られるミセル−薬物組成物は、インビボでの水不溶性薬物の徐放に適し得、この効果は、親水性ブロックおよび疎水性ブロックの分子量および相対比を制御することによって最大化され得る。国際公開第Ａ−９７／１０８４９号パンフレットは、様々なＰＬＬＡ−ＰＥＯブロックコポリマーおよびそれらの水への溶解度を開示している。水への溶解度は、０．２ｇ／１００ｍＬから２０ｇ／１００ｍＬ超まで様々である。水溶性であるこれらのミセルの不利な点は、それらには凝集する傾向があり、そのためより長期の条件ではミセルの安定性が保証され得ないことである。
【０００６】
国際公開第Ａ−０５／１１８６７２号パンフレットは、６０００ダルトンを超える分子量を有するポリ（エチレンオキシド）−ｂ−ポリ（ξ−カプロラクトン）（ＰＥＯ−ｂ−ＰＣＬ）ブロックコポリマーの自己集合から形成される、疎水性薬物の投与のためのミセルを開示している。当該ミセルの調製におけるより高い分子量のブロックコポリマーの使用が、ミセル粒子の凝集の減少および体内分布（ｂｉｏｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ）の改変を結果としてもたらすことが見出された。しかしながら、この出願は、ミセルの安定性および水溶性については記述していない。
【０００７】
当該技術分野において、薬学的処方物、食品処方物、化粧品処方物および工業用処方物における使用のための難（水）溶性化合物を封入するための組成物に対する、長らく感じられている必要性がある。望ましくは、封入物質の大きさは、ナノスコピックであり、熱力学的にかつ速度論的に安定であり、疎水性化合物の自己凝集を防ぎ、有利な放出速度を提供するものである。
【０００８】
したがって、本発明の目的は、熱力学的にかつ速度論的に安定であり、疎水性化合物の自己凝集を防ぎかつ有利な放出特性を提供するナノスコピックミセルをもたらす両親媒性ブロックコポリマーを含むミセル組成物を提供することである。
【０００９】
本発明の目的は、モノマー単位からなる疎水性ブロックＡおよび親水性ブロックＢを含有する両親媒性ブロックコポリマーを含むミセル組成物であって、ブロックＡの数平均分子量（Ｍｎ）（ＭｎＡ）をブロックＢの数平均分子量（ＭｎＢ）で除した比率Ｒは、０．９５より高く、両親媒性ブロックコポリマーは、パラメーターαによって特徴づけられ、
３＜α＜５．５であり；
α＝ＭｎＡ／（ＭｎＡ＋ＭｎＢ）×Ｋｏ／ｗＡ×√Ｍｔｏｔであり、ここで、
ＭｎＡ＝ブロックＡの数平均分子量（Ｍｎ）であり、
ＭｎＢ＝ブロックＢの数平均分子量（Ｍｎ）であり、
Ｋｏ／ｗＡ＝疎水性ブロックＡのモノマー単位のオクタノール／水分配係数であり、
Ｍｔｏｔ＝ＭｎＡ＋ＭｎＢである、
ミセル組成物を提供することによって達成される。
【００１０】
意外なことに、ミセルが、親水性および疎水性のブロックＡおよびＢの量および数平均分子量の、最適条件を用いて調製され得ることが見出された。驚くべきことに、ミセルの凝集する傾向が著しく減少した、より長期の条件でも安定なミセルが提供され得ることが見出された。このミセル組成物の安定性のため、ミセルは、制御放出、保存寿命、およびインビボでの長い循環時間を示すことに関して向上した特性を示す。さらに、そして同時に、ミセル組成物中の薬物の濃度は、投与量要求を満たすように適応され得る。本発明のミセル組成物は、薬物放出を制御することが可能である。そのようなミセル組成物は、従来の剤形に比べていくつかの有利な点（例えば、薬物の全身性副作用の減少および有効残留時間の延長、有効性（標的化放出）および患者のコンプライアンスの向上、血漿中薬物濃度のより小幅な変動を伴うより長時間にわたる薬物の治療レベルの維持）を提供し得る。
【００１１】
両親媒性ブロックコポリマーは、好ましくは、少なくとも疎水性ブロックＡおよび親水性ブロックＢを含み、疎水性ブロックＡは、少なくとも１種の疎水性ポリマーＸを含み、親水性ブロックＢは、少なくとも１種の親水性ポリマーＹを含み、Ｘ単位およびＹ単位は、交互に並ぶ。疎水性ポリマーＸおよび親水性ポリマーＹは、モノマーで構成されている。
【００１２】
α＜３であれば、両親媒性ブロックコポリマーは水溶性になり、凝集および不安定なミセルとなる。α＞５．５であれば、ミセルは不安定になる。パラメーターαにおけるオクタノール／水分配係数は、平衡状態にある２つの不混和溶媒の混合物の２つの相中のモノマーの濃度の比率である。したがって、この係数は、これらの２つの溶媒間のモノマーの溶解度差の尺度である。「分配係数（Ｐａｒｔｉｔｉｏｎ  Ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ）」の適切な代わりの表現は、「分配定数（ｐａｒｔｉｔｉｏｎ  ｃｏｎｓｔａｎｔ）」、「分配比率（ｐａｒｔｉｔｉｏｎ  ｒａｔｉｏ）」または「分布比率（ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｒａｔｉｏ）」である。通常、選択される溶媒のうちの１つは水であるが、もう１つの溶媒は、疎水性の例えばオクタノールである。したがって、分配係数は、ある化学物質が、どの程度「水を好む」かまたは「水を恐れる」かの尺度である。オクタノール−水分配係数は、溶質のＬｏｇＰとして表わされ得、フラスコ振盪法を用いて２５℃の温度および１バールの圧力で測定されることになる。この方法は、いくらかのその溶質、本発明においては疎水性ポリマーＸを構成するモノマーＺを、ある体積のオクタノールおよび水に溶解させ、この混合物を振盪し、次いで、各溶媒中のモノマーＺの濃度を測定することからなる。モノマーＺの濃度は、ＵＶ／ＶＩＳ分光法を使用して測定され得る。ＬｏｇＰ＝ｌｏｇ［Ｚ］ｏｃｔａｎｏｌ／［Ｚ］ｗａｔｅｒ
【００１３】
これは、本発明における［Ｚ］が、疎水性ポリマーＸを作り上げているモノマーの、オクタノールまたは水中の濃度であることを意味している。Ｘがポリラクチドである場合、モノマーＺは乳酸であり、乳酸のＫｏ／ｗは、２５℃および１バールの圧力で１である。Ｘがポリカプロラクトンである場合は、モノマーＺはカプロラクトンであり、カプロラクトンのＫｏ／ｗは、２５℃および１バールの圧力で３である。Ｘがポリ乳酸−グリコール酸（ｐｏｌｙｌａｃｔｉｃ−ｇｌｙｃｏｌｉｃ  ａｃｉｄ）である場合は、モノマーＺは乳酸＋グリコール酸であり、乳酸＋グリコール酸のＫｏ／ｗは、２５℃および１バールの圧力で１．６である。疎水性ポリマーＸのさらなる例を、以下に示す。
【００１４】
疎水性ポリマーＸおよび親水性ポリマーＹは、結果として得られる両親媒性ブロックコポリマーが、好ましくは０．１ｇ／１００ｍＬ未満、より好ましくは０．０１ｇ／１００ｍＬ未満、最も好ましくは０．００１ｇ／１００ｍＬの水への溶解度Ｓｗを有することになるように選択される。水への両親媒性ブロックコポリマーの溶解度が低いほど、より安定なミセルが調製され得る。さらに最も好ましくは、両親媒性ブロックコポリマーは、水不溶性である。両親媒性ブロックコポリマーの水への溶解度は、例えば参照により援用される国際公開第９７／１０８４９号パンフレットに開示されているように、測定され得る。
【００１５】
疎水性ポリマーＸおよび親水性ポリマーＹの数平均分子量は、ゲル透過クロマトグラフィーＮＭＲによって測定され得る。ＮＭＲによる末端基分析は、多くの分析実験室において一般的に見られる機器を使用しての簡便なポリマー分子量（平均鎖長）測定方法を提供し、これは、ブロックコポリマー分子の分子量を測定するのにも使用され得る。機器の感度ならびにそれに伴う末端基プロトンおよび２つのブロック間のモノマー単位プロトンを検出する能力によって、測定できる上限が決定されることになる。この方法は、僅かな単純な必要（例えば、ＮＭＲによって反復モノマー基プロトンと区別できる識別可能な末端基プロトンおよび「ブロック間」プロトン、これらのプロトンの正確な積分、ならびにモノマー式量が既知であること）に依拠する。末端基上のプロトンとポリマー鎖上のプロトンの比が決定されれば、Ｍｎ値が生成され得る。トリブロックコポリマー中の外側ブロックについては、これは、反復単位の数に反復単位の分子量を乗じた値＋末端基の分子量となるであろう。反復単位の数は、共にプロトン１個当たりの積分値に正規化される、反復単位プロトンの積分値と末端基プロトンの積分値の比から決定される。トリブロックの内側ブロックについては、同様の計算が適用されるが、この場合は、末端基プロトンではなく、２つのブロック間のモノマー単位プロトンが採用される。言うまでもなく、異なる分子量の反復単位も適用される。ペンタブロックポリマーに拡張すると、さらにもう１組の、追加のブロック間のモノマー単位プロトンの積分が必要となる。
【００１６】
両親媒性ブロックコポリマーは、例えばＡＢジブロック、ＡＢＡまたはＢＡＢトリブロックコポリマーであるが、反復するＢＡまたはＡＢブロックを有してＡ（ＢＡ）ｎまたはＢ（ＡＢ）ｎコポリマーを作る多ブロックコポリマーであって、ｎが２〜５の整数であるものもまた、本発明の一部である。ＡＢＡ型トリブロックコポリマーおよびＢＡＢ型トリブロックコポリマーの両方が、参照により本明細書に完全に援用される米国特許第Ａ−５，６８３，７２３号明細書および米国特許第Ａ−５，７０２，７１７号明細書に開示されている反応スキームに従う開環重合または縮合重合によって、合成され得る。例えば、それらは、触媒として第一スズオクトエートの存在下での、環状エステルモノマー（例えば、ラクチド、グリコリド、または１，４−ジオキサン−２−オン）のうちの１つと、モノメトキシポリ（エチレングリコール）（ｍＰＥＧ）またはポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）との、８０〜１３０℃での開環重合によって調製され得る。ブロックコポリマー生成物は、ジクロロメタンまたはアセトンに溶解され、ジエチルエーテル、ヘキサン、ペンタン、またはヘプタン中で沈殿され、続いて乾燥される。
【００１７】
Ａブロックは、ポリラクチド、ポリカプロラクトン、ラクチドおよびグリコリドのコポリマー、ラクチドおよびカプロラクトンのコポリマー、ラクチドおよび１，４−ジオキサン−２−オンのコポリマー、ポリオルトエステル、ポリアンヒドリド、ポリホスファジン、ポリ（ヒドロキシブチレート）、ポリ（テトラメチレンカーボネート）または疎水性のポリ（エステルアミド）、ポリ（アミノ酸）もしくはポリカーボネートからなる群から選択され得る、少なくとも１種の疎水性ポリマーＸからなる。ポリマーＸは、その生分解性、生体適合性、および可溶化特性のために、利用される。疎水性生分解性ポリマーＸのインビトロおよびインビボ分解は十分に理解されており、分解生成物は、患者の身体によって容易に代謝されかつ／または排出される、天然に存在する化合物である。好ましくは、疎水性ポリマーＸは、ポリラクチド、ポリカプロラクトン、ラクチドおよびグリコリドのコポリマー、ラクチドおよびカプロラクトンのコポリマー、ならびにラクチドおよび１，４−ジオキサン−２−オンのコポリマーからなる群から選択される。明らかなように、疎水性ポリマー単位Ｘが例えばポリラクチドである場合は、モノマーは乳酸である。Ａブロックはまた、当然であるが、２種以上の疎水性ポリマーＸを含み得る。
【００１８】
疎水性ポリマーＸの数平均分子量は、好ましくは５００〜２０，０００ダルトンの範囲内、より好ましくは１，０００〜１０，０００ダルトンの範囲内にある。
【００１９】
Ｂブロックは、親水性のポリエステルアミド、ポリビニルアルコールまたはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）から選択され得る、少なくとも１種の親水性ポリマーＹを含む。好ましくは、ＰＥＧが、その独特の生体適合性、無毒性、親水性、可溶化特性のために、親水性水溶性ブロックとして選択される。また、Ｌ−アミノ酸に基づくＰＥＧコポリマーも、使用され得る。例としては、ポリ（エチレングリコール）−ｂ−ポリ（β−ベンジル−Ｌ−グルタメート）、ポリ（エチレングリコール）−ｂ−ポリ（Ｌ−リシン酸）、ポリエチレングリコール）−ｂ−ポリ（アスパラギン酸、ポリ（エチレングリコール）−ｂ−ポリ（β−ベンジル−Ｌ−アスパルテート）、および上述のブロックコポリマーのアシルエステルが挙げられるが、これらに限定されない。ポリアルキレングリコールまたはその誘導体の数平均分子量は、好ましくは、２００〜２０，０００ダルトンの範囲内、より好ましくは１，０００〜１５，０００ダルトンの範囲内にある。親水性成分の含有量は、当該ブロックコポリマーの全重量に基づき、４０〜８０重量パーセント、好ましくは４０〜７０重量パーセントの範囲内にある。
【００２０】
最も好ましくは、両親媒性ブロックコポリマーは、Ｘ−Ｙ−Ｘからなるトリブロックコポリマーである。トリブロックコポリマーは、好ましくはポリ乳酸、疎水性ポリエステルアミドまたはポリカプロラクトンをポリマーＸとして含み、好ましくはポリエチレングリコール、ポリビニルアルコールまたは親水性ポリエステルアミドをポリマーＹとして含む。具体例としては、ＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ、ＰＣＬ−ＰＥＧ−ＰＣＬまたはポリ（Ｌ−アミノ酸）−ＰＥＧ−ポリ（Ｌ−アミノ酸）ポリマーが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２１】
さらに、モノモーダル（ｍｏｎｏｍｏｄａｌ）ミセル組成物を製造することが可能であることを見出した。しかしながら、これは、両親媒性ブロックコポリマーの水への溶解度Ｓｗに依存する。モノモーダルミセル組成物は、両親媒性ブロックコポリマーが、非常に低い水への溶解度Ｓｗ、好ましくは０．１ｇ／１００ｍＬ未満のＳｗ、より好ましくは０．０１ｇ／１００ｍＬ未満のＳｗ、最も好ましくは０．００１ｇ／１００ｍＬ未満のＳｗを有すれば、調製され得るということが見出された。
【００２２】
本発明の文脈において、「モノモーダルミセル組成物」という用語は、濾過されていないミセル組成物についていう。
【００２３】
好ましい実施形態において、本発明は、疎水性化合物および両親媒性ブロックコポリマーを含むミセル組成物であって、両親媒性ブロックコポリマーは、疎水性ブロックＡおよび親水性ブロックＢからなり、ブロックＡは、１種の同じ疎水性ポリマーＸからなり、親水性ブロックＢは、１種の親水性ポリマーＹからなり、ＸブロックおよびＹブロックは、Ｘ−Ｙ−Ｘとして交互に並ぶ、モノモーダルミセル組成物に関する。ブロックＡの数平均分子量（Ｍｎ）（ＭｎＡ）をブロックＢの数平均分子量（ＭｎＢ）で除した比率Ｒは、０．９５より高い。好ましくは、Ｒは、１．３より高く、より好ましくは１．７より高く、さらにより好ましくは２より高く、最も好ましくは３より高い（例えば３．５より高い）。
【００２４】
両親媒性ブロックコポリマーの数平均分子量は、少なくともある程度は、疎水性化合物の大きさおよび柔軟性に応じて、選択される。
【００２５】
本明細書で使用される場合、疎水性化合物とは、本発明に従う両親媒性ブロックコポリマー内に封入される、水に容易に溶けない化合物である。疎水性化合物の例としては、抗癌剤、抗炎症薬、抗真菌薬、制吐薬、血圧降下薬、性ホルモン、およびステロイドなどの、疎水性の薬物が挙げられる。疎水性薬物の典型例には、パクリタキセル、カンプトテシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、シスプラチン、５−フルオロウラシル、マイトマイシン、メトトレキサート、およびエトポシドなどの抗癌剤；インドメタシン、イブプロフェン、ケトプロフェン、フルビプロフェン、ジクロフェナク、ピロキシカム、テノキシカム、ナプロキセン、アスピリン、およびアセトアミノフェンなどの抗炎症薬；イトラコナゾール、ケトコナゾール、およびアンホテリシンなどの抗真菌薬；テストステロン、エストロゲン、プロゲストン、およびエストラジオールなどの性ホルモン；デキサメタゾン、プレドニゾロン、およびトリアムシノロンなどのステロイド；カプトプリル、ラミプリル、テラゾシン、ミノキシジル、およびパラゾシン（ｐａｒａｚｏｓｉｎ）などの血圧降下薬；オンダンセトロンおよびグラニセトロンなどの制吐薬；β−ラクタム（例えば、ペニシリン系）、クロラムフェニコール、メトロニダゾールおよびフシジン酸などの抗生物質；シクロスポリンならびにビフェニルジメチルジカルボン酸がある。疎水性化合物の他の例には、食品成分、ビタミン、顔料、染料、防虫剤、ＵＶ光吸収化合物、触媒、光／ＵＶ安定剤、殺菌剤、殺虫剤または難燃剤がある。特に、疎水性化合物は、栄養素、薬物、製剤、タンパク質およびペプチド、ワクチン、遺伝物質（例えば、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、プラスミド、ＤＮＡおよびＲＮＡ）、診断用薬、および画像化剤の群から選択され得る。
【００２６】
疎水性化合物は、生物学的応答を刺激または抑制することが可能であり得る。疎水性化合物は、例えば、成長因子（ＶＥＧＦ、ＦＧＦ、ＭＣＰ−１、ＰＩＧＦ、抗炎症化合物、抗血栓形成化合物、抗跛行薬、抗不整脈薬、抗アテローム硬化薬、抗ヒスタミン薬、制癌剤、血管作用薬（ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｒｕｇ）、眼病用薬、アミノ酸、ビタミン、ホルモン、神経伝達物質、神経ホルモン、酵素、シグナル伝達分子および向精神薬から選択され得る。
【００２７】
疎水性薬物のその他の例には、神経薬（アンフェタミン、メチルフェニデート）、α１アドレナリン受容体アンタゴニスト（プラゾシン、テラゾシン、ドキサゾシン、ケテンセリン（ｋｅｔｅｎｓｅｒｉｎ）、ウラピジル）、α２遮断薬（アルギニン、ニトログリセリン）、降圧薬（クロニジン、メチルドパ、モキソニジン、ヒドララジンミノキシジル）、ブラジキニン、アンギオテンシン受容体遮断薬（ベナゼプリル、カプトプリル、シラゼプリル（ｃｉｌａｚｅｐｒｉｌ）、エナラプリル、フォシノプリル、リシノプリル、ペリンドプリル、キナプリル、ラミプリル、トランドラプリル、ゾフェノプリル）、アンギオテンシン−１遮断薬（カンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、テルミサルタン、バルサルタン）、エンドペプチダーゼ（オマパトリラート（ｏｍａｐａｔｒｉｌａｔｅ））、β２アゴニスト（アセブトロール、アテノロール、ビソプロロール、セリプロロール、エスモドール（ｅｓｍｏｄｏｌ）、メトプロロール、ネビボロール、ベタキソロール）、β２遮断薬（カルベジロール、ラベタロール、オクスプレノロール、ピンドロール、プロパノロール）、利尿活性薬（ｄｉｕｒｅｔｉｃ  ａｃｔｉｖｅ）（クロルタリドン、クロロチアジド、エピチジド、ヒドロクロロチアジド、インダパミド、アミロライド、トリアムテレン）、カルシウムチャネル遮断薬（アムロジピン、バルニジピン、ジルチアゼム、フェロジピン、イスラジピン、ラシジピン、レルカニジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、ベラパミル）、抗不整脈活性薬（ａｎｔｉ  ａｒｔｈｙｍｉｃ  ａｃｔｉｖｅ）（アミオダロン、ソラトール（ｓｏｌａｔｏｌ）、ジクロフェナク、エナラプリル、フレカイニド）、またはシプロフロキサシン、ラタノプロスト、フルクロキサシリン、ラパマイシンおよび類似体およびリムス（ｌｉｍｕｓ）誘導体、パクリタキセル、タキソール、シクロスポリン、ヘパリン、コルチコステロイド（トリアムシノロンアセトニド、デキサメタゾン、フルオシノロンアセトニド）、抗血管新生薬（ａｎｔｉ−ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ）（ｉＲＮＡ、ＶＥＧＦアンタゴニスト：ベバシズマブ、ラニビズマブ、ペガプタニブ）、成長因子、ジンクフィンガー転写因子、トリクロサン、インスリン、サルブタモール、エストロゲン、ノルカンタリジン、ミクロリジル（ｍｉｃｒｏｌｉｄｉｌ）類似体、プロスタグランジン、スタチン、コンドロイチナーゼ、ジケトピペラジン、大環状化合物（ｍａｃｒｏｃｙｃｌｉ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ）、ニューレグリン、オステオポンチン、アルカロイド、免疫抑制薬、抗体、アビジン、ビオチン、クロナゼパムがある。
【００２８】
疎水性薬物は、局所送達用として、または術前もしくは術後治療として、疼痛、骨髄炎、骨肉腫、関節感染症、黄班変性、糖尿病性眼、真性糖尿病、乾癬、潰瘍、アテローム性動脈硬化症、跛行、血栓症ウイルス感染症、癌の管理のために、またはヘルニアの処置において、送達され得る。
【００２９】
本発明の文脈において、用語「ミセル」は、選択有機溶媒中で集合してミクロ相分離したコア／シェル構造になる、両親媒性ブロックコポリマーのみについていう。ミセル（ｍｉｃｅｌｌｅ）（複数形ｍｉｃｅｌｌｅｓ、ｍｉｃｅｌｌａ、またはｍｉｃｅｌｌａｅ）は、液体中に分散した両親媒性分子の凝集体である。水溶液中の典型的なミセルは、親水性の「頭部」領域が周囲の溶媒と接し、疎水性領域をミセル中心に隔離した、凝集体を形成する。ミセルの形状は、ほぼ球形である。楕円、円筒、およびロッドなどの形状を含め、他の相も可能である。ミセルの形状および大きさは、その分子の分子幾何構造と溶液条件（例えば、濃度、温度、ｐＨ、およびイオン強度）との関数である。
【００３０】
本発明に従うミセル組成物は、さらなる疎水性コア賦形剤、例えば、脂肪酸、ビタミンまたは任意の疎水性ポリマー（例えば、ポリカプロラクトンなど）を含み得る。こうすることで、放出特性が、さらに操作され得る。ミセルの大きさもまた、こうすることで調整され得る。
【００３１】
本発明のミセル組成物は、場合により、分散保護剤（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）を含み得る。分散保護剤は、例えば凍結乾燥の間に、充填されたミセルの安定剤として作用する。こうすることで、水性分散剤が添加された時に乾燥製品が容易に分散しないということになるようなミセル同士の合体がない。分散保護剤は、糖またはポリオール、例えば、トレハロース、スクロースもしくはラフィノース、または別の親水性ポリオール（例えば、マルトデキストリン、フルクトース、グリセロール、ソルビトール、イノシトールおよびマンノース）であり得る。分散保護剤はまた、糖以外の物質（例えば、ＰＥＧ）であり得る。
【００３２】
典型的に、両親媒性ブロックコポリマーと疎水性コア賦形剤または分散保護剤の比は、１：１ｗ／ｗ〜約１：５０ｗ／ｗ、好ましくは１：１ｗ／ｗ〜１：１０ｗ／ｗ、有利には１：５ｗ／ｗまでの範囲である。
【００３３】
分散保護剤は、疎水性化合物および両親媒性ブロックコポリマーと一緒に溶媒に添加され得るか、または分散保護剤は、有機溶媒中に形成された疎水性化合物および両親媒性ブロックコポリマーの溶液を水中に入れる際に水に添加され得る。
【００３４】
本発明に従うミセル組成物は、両親媒性ブロックコポリマーの混合物であり得る。ミセル組成物は、疎水性ブロックＡおよび親水性ブロックＢを含有する両親媒性ジブロックコポリマーであって、疎水性ブロックＡは少なくとも１種の疎水性ポリマーＸを含み、親水性ブロックＢは少なくとも１種の親水性ポリマーＹを含む、両親媒性ジブロックコポリマーをさらに含み得る。ジブロックコポリマーの量は、全組成物の最大３０重量％まで可変である。
【００３５】
本発明に従うミセルは、１０〜８００ｎｍ、好ましくは１５〜６００ｎｍ、より好ましくは２０〜４００ｎｍの範囲内、最も好ましくは２５〜２００ｎｍの範囲内の平均粒径を包含する。望ましい粒径は、用途に強く依存し、それに応じて調整され得る。ミセルの粒径は、動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ  Ｌｉｇｈｔ  Ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ：ＤＬＳ）（Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ  ＺＳ，Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｌｔｄ．，Ｍａｌｖｅｒｎ，ＵＫ）によって、２５℃で、１７３°の散乱角で測定された。
【００３６】
一般的に、ミセルは、様々な技術（例えば、噴霧乾燥、凍結噴霧蒸発（ｆｒｅｅｚｅ  ｓｐｒａｙ  ｅｖａｐｏｒａｔｉｏｎ）または乳化（補助溶媒蒸発））を用いて製造され得る。乳化によって製造されるミセルの物理的および化学的特性は、ミセルを調製するために適用される乳化処理工程に大きく依存することが、当業者に知られている。例えば、国際公開第Ａ−０３／０８２３０３号パンフレットは、ミセルの調製方法であって、当該ミセルは、両親媒性ブロックコポリマーおよび疎水性化合物を含み、かつ場合により分散保護剤またはミセル安定剤を含む、方法を開示している。ミセルを製造するための処理工程は、疎水性化合物および両親媒性ブロックコポリマーを揮発性有機溶媒に溶解させ、次いで攪拌しながらその混和性溶液に水を添加して、ミセルの形成および疎水性化合物のミセルコアへの分配を促進することを含む。水はゆっくりと添加されて、両親媒性ブロックコポリマーの限界含水率（両親媒性ブロックコポリマーの集合に必要とされる水のレベル）を経てミセル化を誘発する。含水率は、限界重量濃度（ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｗｅｉｇｈｔ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ：ＣＷＣ）よりも高い。続いて、減圧下または高温下で、有機溶媒が蒸発によって除去される。充填後、両親媒性ブロックコポリマーに基づくミセルは、後の再構成のために凍結乾燥され得る。
【００３７】
この方法の主要な不利点の１つは、いずれもミセル形成およびミセルの安定性にとって重要であるが、最終平均粒径および粒度分布にとっても重要である、水の量および限界重量濃度（ＣＷＣ）に至るまでの水の添加速度に対して敏感であることである。
【００３８】
したがって、上記の不利点を有さないミセルの調製方法を提供することが、本発明のさらなる目的である。
【００３９】
本発明はさらに、ミセル組成物を調製するための方法であって、
ａ）疎水性化合物および両親媒性ブロックコポリマーを有機溶媒に溶解させて溶液を形成する工程、
ｂ）前記有機溶液を水性媒体中に添加する工程、
ｃ）前述の工程を場合により繰り返す工程
を包含する、方法に関する。
【００４０】
好ましい実施形態において、疎水性化合物は、治療薬である。
【００４１】
当該ミセル組成物は、２種以上の疎水性化合物も含み得る。
【００４２】
有機溶媒中の両親媒性ブロックコポリマーの濃度は、使用した有機溶媒に依存する。例えばアセトンが溶媒として使用される場合、両親媒性ブロックコポリマーの濃度は、最大１３０ｍｇ／ｍＬ（ミリグラム毎リットル）、好ましくは最大１００ｍｇ／Ｌ、より好ましくは最大６５ｍｇ／Ｌである。
【００４３】
本発明の文脈において使用される場合、有機溶媒とは、少なくとも１種の両親媒性ブロックコポリマーおよび少なくとも１種の疎水性化合物との溶液を生成するために使用される水混和性液体である。本発明の方法における使用には、溶媒は、望ましくは水の沸騰温度よりも低い（１ａｔｍで摂氏１００度未満の）沸騰温度を有する溶媒である。好ましくは、有機溶媒は、水と共沸混合物を、有利には、負共沸混合物（ｎｅｇａｔｉｖｅ  ａｚｅｏｔｒｏｐｅ）を形成する。溶媒および水が共沸混合物を形成する場合、共沸混合物（ａｚｅｏｐｔｒｏｐｉｃ  ｍｉｘｔｕｒｅ）は、減圧および／または高温の条件下で共沸混合物を除去することによって乾燥され得る。例としては、アセトン、メタノール、エタノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、プロパノール、イソプロパノール、酢酸エチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４４】
好ましい実施形態において、有機溶媒は、アセトン、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、アセトニトリルまたはそれらの混合物からなる群から選択される。
【００４５】
水性媒体は、水、生理食塩水または１〜１４の範囲のｐＨを有する緩衝液からなる群から選択される。
【００４６】
本発明の方法は、ミセルの平均粒径および粒度分布に対する向上した制御を提供し、労力を要するかつ／または費用のかかる処理工程（例えば、溶媒蒸発、乾燥、滅菌など）を省く可能性を提供する。さらに、当該方法は、水の量および／または添加速度に敏感ではなく、当該方法は、ミセル安定剤（例えば、界面活性剤）を含まず、当該方法は、小規模でも大規模でも連続的に実施され得、したがって、堅牢で、拡大縮小可能で、かつ経済的に魅力的な、ミセル組成物調製方法を提供し得る。
【００４７】
本発明の方法はまた、１つ以上の向上した特性（例えば、向上した制御放出、向上した保存寿命、直接注入可能であること）も示し得るミセル組成物を提供し得、同時に、ミセル組成物中の薬物の濃度は、投与量要求を満たすように適応され得る。当然であるが、当該方法は、親水性化合物を封入するために逆にされ得る。
【００４８】
少なくとも表面に、官能基、特にシグナル伝達分子、酵素または受容体分子（例えば、抗体）を付与することによって、ミセルの少なくとも表面を、官能基化することも可能である。受容体分子は、例えば、本発明の粒子を利用して（例えば、診断試験の一部として）精製または検出されることになる関心のある成分のための受容体分子であり得る。適切な官能基化方法は、当該技術分野において知られている方法に基づき得る。
【００４９】
本発明の文脈において、用語「調製方法」および「方法」は、相互交換可能に使用される。
【００５０】
文脈が明らかに別のことを示さない限り、本明細書における用語の複数形は、本明細書において使用される場合、単数形を含むと解釈されるべきであり、逆に単数形は、複数形を含むと解釈されるべきである。
【００５１】
本明細書において示されるあらゆるパラメーターの全ての上方および下方の境界について、境界値は、それぞれのパラメーターについてのそれぞれの範囲に含まれる。本明細書に記載されるパラメーターの最小値および最大値の全ての組み合わせは、本発明の種々の実施形態および選好についてパラメーター範囲を規定するために使用され得る。
【００５２】
本明細書において百分率として表わされるあらゆる量の総和は、（四捨五入による誤差を考慮して）１００％を超え得ないことが理解されるであろう。例えば、本発明の組成物（またはその一部）を構成する全ての成分の合計は、組成物（またはその同じ一部）の重量（または他の）百分率として表わされる場合、四捨五入により誤差を考慮して、合計１００％になり得る。しかしながら、列挙された成分が非網羅的である場合は、そのような成分のそれぞれについての百分率の合計は、本明細書において明示的に記載されないことがあり得る任意のさらなる化合物のさらなる量に、ある百分率を割り当てるために、１００％未満であり得る。
【００５３】
本発明のミセル組成物は、例えば経口投与、非経口投与、口腔粘膜投与、舌下投与、経鼻投与、経直腸投与、パッチ投与、ポンプ投与または経皮投与され得、それに応じて処方された薬学的組成物中で投与され得る。非経口投与には、静脈内、腹膜内（ｉｎｆｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、皮下、筋内、経上皮、経鼻、肺内、鞘内、経直腸および局所といった投与方法が含まれる。非経口投与は、選択された時間にわたる連続注入によってもよい。本発明のミセルは、例えば不活性希釈剤と共にもしくは同化可能な食用キャリアと共に、経口投与され得るか、本発明のミセルは、硬質殻もしくは軟質殻ゼラチンカプセル中に封入され得るか、本発明のミセルは、圧縮されて錠剤にされ得るか、本発明のミセルは、食餌の食品と直接に混ぜられ得る。経口治療投与のためには、本発明のミセルは、賦形剤内に組み込まれ得、摂取可能錠剤、バッカル錠、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、カシェ剤などの形態で使用され得る。本発明のミセル組成物はまた、非経口投与され得る。本発明に従うミセル組成物の溶液は、カシェ剤中で調製され得る。通常の保存および使用の条件下において、これらの調製物は、微生物の増殖を防止するための保存剤を含有する。当業者であれば、どのようにして好適な処方物を調製するかを知っているであろう。
【００５４】
本発明に従うミセルが使用され得る分野としては、皮膚科学、脈管、整形外科、眼科、脊髄、腸、肺、鼻、または耳の分野が挙げられる。薬学的用途における他にも、本発明に従うミセルは、とりわけ、農業または食品用途において使用され得る。特に、そのようなミセルは、食品添加物、農薬、殺虫剤または植物栄養素を含み得る。
【００５５】
本発明はさらに、本発明のミセル組成物を含む物品に関する。別の態様において、本発明は、本発明のミセル組成物を含むデバイスを提供する。本発明の文脈において、物品は、ある目的を果たすようにまたは特殊機能を遂行するように設計された、個々の物もしくは品物またはある種の構成要素であり、単独で機ｆ得る。
【００５６】
さらに別の好ましい実施形態において、本発明は、本発明の物品を含むデバイスを提供する。デバイスは、特殊目的を果たすようにまたは特殊機能を遂行するように設計された装置または機械であり、２つ以上の物品からなり得る（多物品集成体）。
【００５７】
デバイスの例としては、カテーテル、ステント、ロッド、埋入物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
別の態様において、本発明は、医学用途（例えば、治療的心臓血管用途）、獣医学用途、食品加工用途、難燃剤用途、コーティング、接着剤および化粧品、生地／布帛、工業および美術用途における、本発明のミセル組成物、本発明の物品、本発明のデバイスの使用を提供する。
【００５９】
別の好ましい実施形態において、本発明は、医薬としての使用のための本発明のミセル組成物を提供する。
【００６０】
さらに別の好ましい実施形態において、本発明は、心臓血管治療用途のための医薬の製造のための、本発明のミセル組成物の使用を提供する。
【００６１】
別の好ましい実施形態において、本発明は、本発明のミセル組成物が使用されることを特徴とする、心臓血管治療用途向けの医薬を製造するための方法を提供する。
【００６２】
次に、以下の非限定的な、説明することのみを目的とする実施例に関して、本発明を詳細に説明する。
【００６３】
［実施例］
［材料および方法］
−ＰＬＧＡ  ２０ｋＤａは、Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ  Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒから購入した。
−ＰＣＬ  ８０ｋＤａは、Ｓｏｌｖａｙから購入した。
−ＰＥＧ（３．０ｋＤａおよび６．０ｋＤａ）、デキサメタゾンおよびＳｎ２Ｏｃｔは、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから購入した。
−アセトンは、ＢＡＳＦから購入した。
−ラパマイシンおよびパクリタキソール（ｐａｃｌｉｔａｘｏｌ）は、Ｏｓｃａｒ  Ｔｒｏｐｉｔｚから購入した。
−生理食塩水は、ＢＢｒａｕｎから購入した。
−粒径値として、ＤＬＳによって測定される強度に基づくＺ−平均。
−多分散性（ＰｄＩ）は、Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  ＮａｎｏＺＳによって測定される粒度分布の幅の尺度である。
−全ての他の溶媒は、分析グレードのものであり、Ｍｅｒｃｋから購入される。
【００６４】
−Ｍｎは、次のように測定され得る。一例をＰＬＧＡについて示す。
ＮａＯＨを用いたＰＬＧＡの加水分解（ｈｙｄｒｏｌｉｓａｔｉｏｎ）；ＰＥＧは影響されない。加水分解は、２ｍＬのＰＬＧＡまたは２０ｍｇの固体試料および２００μＬの１０Ｍ  ＮａＯＨ溶液を用い、数日（３〜７日）間９０℃で密閉瓶（または７２時間１４０℃および５バールでオートクレーブ（Ｒｏｔｈ，Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ））中で行った。
【００６５】
グリコール酸および乳酸の濃度を、バイナリポンプ、脱気装置、自動サンプラー、カラム槽、ダイオードアレイ検出器および飛行時間型ＭＳからなるＡｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＬＣ−ＭＳシステムで測定した。ＥＳＩ−ＭＳを、以下の条件を用いてネガティブモードで実施した：ｍ／ｚ  ５０〜３２００、フラグメンター（ｆｒａｇｍｅｎｔｏｒ）  ２１５Ｖ、０．９４サイクル／秒、乾燥気体温度  ３５０℃、乾燥気体  １２Ｌ／分のＮ２、ネブライザー圧力  ４５ｐｓｉｇおよびキャピラリー電圧  ４ｋＶ。ＵＶ検出は、１９５ｎｍで行った。室温で２５０×４．６ｍｍ  Ｐｒｅｖａｉｌ−Ｃ１８カラム（Ａｌｌｔｅｃｈ，ＵＳＡ）を用い、超純水中５０ｍＭ  スルホン酸（移動相Ａ）およびアセトニトリル（移動相Ｂ）の勾配を用いて分離を行った。勾配は、ｔ＝０分において９９％（ｖ／ｖ）Ａで開始し、５分間静止し、次いで、１０分間かけて直線的に９０％（ｖ／ｖ）Ｂ（ｔ＝１５分）まで変化させた。流量は０．５ｍＬ／分であり、注入体積は５μＬであった。
【００６６】
−ＰＥＧの重量平均分子量（Ｍｎ）および濃度は、１〜１００ｋＤａの分離範囲を有する、非常に極性の高いヒドロキシル化メタクリレートの８×３００ｍｍ  Ｓｕｐｒｅｍａ  １０００Åカラム（１０μｍ粒径）（ＰＳＳ，Ｍａｉｎｚ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、ＳＥＣによって測定した。移動相（０．１Ｍ  ＮＨ４Ａｃ）を、１．０ｍＬ／分の流量でポンプ輸送した。ＳＥＣ分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＬＣ−ＤＡＤシステムを使用して行った。濃度およびＭｎは、ＰＥＧ較正標準を使用して分析され得る。
【００６７】
［実施例１：開環重合によるＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡトリブロックコポリマーの調製］
ＰＥＧを、２４時間にわたる真空オーブン中での９０℃での乾燥後に、二つ口丸底フラスコに量り入れ、続いて１５０℃の油浴に入れた。合成を続ける前に、少なくとも６０分間、真空を使用した。ラクチドおよびグリコリドの添加（ラクチル：グリコリルのモル比＝５０：５０）は、窒素ガスで真空を解除すると同時にフラッシングすることによって行った。攪拌下において、均一な溶融物が得られた後に、第一スズオクトエート（Ｓｎ２Ｏｃｔ）を、それらのモノマーと同様に添加した。反応条件を２０時間維持し、その後、真空を窒素ガスに置換した。このようにして得られたコポリマーを、下記に列挙する。
【化１】
0005842270.tif 000002
【００６８】
【表１】
0005842270.tif 000003
【００６９】
【表２】
0005842270.tif 000004
【００７０】
バッチ１および２において、両親媒性ブロックコポリマーは、ＭｎＡ＝７．５ｋＤａであり、ＭｎＢ＝６ｋＤａである、ＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡトリブロックコポリマーである。
【００７１】
ブロックＡの数平均分子量（Ｍｎ）（ＭｎＡ）をブロックＢの数平均分子量（ＭｎＢ）で除した比率Ｒは２．５であり、この両親媒性ブロックコポリマーは、次のように計算された、５．２４であるパラメーターαによって特徴付けられる。
α＝ＭｎＡ／（ＭｎＡ＋ＭｎＢ）×Ｋｏ／ｗＡ×√Ｍｔｏｔであり、ここで、
ＭｎＡ＝７．５ｋＤａ
ＭｎＢ＝６ｋＤａ
Ｋｏ／ｗ  ｍｏｎｏｍｅｒｉｃ  ｕｎｉｔｓ  ｏｆ  Ａ＝乳酸／グリコール酸のオクタノール／水分配係数は、１．６である。
【００７２】
【表３】
0005842270.tif 000005
【００７３】
【表４】
0005842270.tif 000006
【００７４】
バッチ３および４において、ＭｎＡ＝３．７５ｋＤａであり、ＭｎＢ＝３ｋＤａである。
【００７５】
比率Ｒ＝２．５であり、そしてα＝３．７であり、これを次のように計算した。
α＝ＭｎＡ／（ＭｎＡ＋ＭｎＢ）×Ｋｏ／ｗＡ×√Ｍｔｏｔであり、ここで、
ＭｎＡ＝３．７５ｋＤａであり、ＭｎＢ＝３ｋＤａであり、Ｋｏ／ｗ＝乳酸／グリコール酸のオクタノール／水分配係数は、１．６である。
【００７６】
［実施例２：開環重合によるＰＣＬ−ＰＥＧ−ＰＣＬトリブロックコポリマーの調製］
ＰＥＧに、１００ｍＬ丸底フラスコ中、ε−アプロラクトン（ａｐｒｏｌａｃｔｏｎｅ）を加えた。反応混合物を１００℃まで加熱し、均一な混合物が形成されるまで攪拌した。スズ（ＩＩ）オクトエート（５８．１ｍｇ、０．１４３ｍｍｏｌ）の触媒原液を、ヘキサン（５ｍＬ）中で調製した。１ｍＬの触媒原液を、１００℃で反応混合物に添加した。反応混合物をさらに、さらなる１８時間（一晩）の間１５０℃まで加熱して、反応を進行させた。翌朝、反応混合物を室温まで冷却し、オフホワイトの蝋質固形物を得た。
【００７７】
【表５】
0005842270.tif 000007
【００７８】
バッチ１において、両親媒性ブロックコポリマーは、ＭｎＡ＝１．５ｋＤａであり、ＭｎＢ＝３ｋＤａである、ＰＣＬ−ＰＥＧ−ＰＣＬトリブロックコポリマーである。
【００７９】
比率Ｒ＝１であり、そしてα＝３．６７であり、これを次のように計算した。
α＝ＭｎＡ／（ＭｎＡ＋ＭｎＢ）×Ｋｏ／ｗＡ×√Ｍｔｏｔであり、ここで、
ＭｎＡ＝１．５ｋＤａ
ＭｎＢ＝３ｋＤａ
Ｋｏ／ｗ  ｍｏｎｏｍｅｒｉｃ  ｕｎｉｔｓ  ｏｆ  Ａ＝カプロラクトンのオクタノール／水分配係数は、３である。
【００８０】
【表６】
0005842270.tif 000008
【００８１】
バッチ２において、ＭｎＡ＝１．７ｋＤａであり、ＭｎＢ＝３ｋＤａである。
【００８２】
比率Ｒ＝１．１３であり、そしてα＝４．０３であり、これを次のように計算した。
α＝ＭｎＡ／（ＭｎＡ＋ＭｎＢ）×Ｋｏ／ｗＡ×√Ｍｔｏｔであり、ここで、
Ｋｏ／ｗ  ｍｏｎｏｍｅｒｉｃ  ｕｎｉｔｓ  ｏｆ  Ａ＝カプロラクトンのオクタノール／水分配係数は、３である。
【００８３】
［実施例３：合成したトリブロックコポリマーの精製］
実施例１および２のトリブロックコポリマーを、１０〜２０％の重量パーセントでアセトンに溶解させ、Ａｃｒｏｄｉｓｃ  ｐｒｅｍｉｕｍ  ２５ｍｍシリンジフィルター、ＧｘＦ／０．４５μｍ  ＰＶＤＦ膜に通して濾過して、ナノ析出プロセスを妨げ得る粒状不純物および塵粒を除去した。この後、濾過した溶液を５００ｍＬのＰＴＦＥのビーカー中に回収し、一晩（１０〜１２時間）最高４０℃かつ最低３００ｍバールで蒸発させて、溶媒を除去した。
【００８４】
ブロックコポリマーを、１Ｈ−ＮＭＲおよびＧＰＣによって特徴付けた。表１を参照されたい。
【００８５】
【表７】
0005842270.tif 000009
【００８６】
［実施例４：ＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡに基づく薬物充填ミセル組成物の調製］
８５５ｍｇの（ＰＬＧＡ  ３．７５ｋ）２−ＰＥＧ  ３ｋを、１４．２５ｍＬのＡｃｅｔｏｎｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｐｕｒに溶解させた。この溶液を０．４５μｍフィルターに通して濾過して、塵粒を除去した。
【００８７】
１８３．８５ｍｇのラパマイシンおよび１８３．８５ｍｇのＰＬＧＡ−ＰＴＥ  ２０ｋを、その（ＰＬＧＡ  ３．７５ｋ）２−ＰＥＧ  ３ｋ／アセトン溶液に溶解させた。（［Ｒａｐａ］＝１２．９ｍｇ／ｍＬ）。
【００８８】
この処方物を、０．４５μｍフィルターに通して濾過して、塵粒を除去した。
【００８９】
１ｍＬのその濾過処方物を、２５ｍＬのＭｉｌｌｉＱ水にピペットで分注し、動的光散乱法（ＤＬＳ）によって測定した。
【００９０】
このミセル組成物の結果および特性を、表２に示す。
【００９１】
［実施例５：ＰＣＬ−ＰＥＧ−ＰＣＬに基づく薬物充填ミセル組成物の調製］
１４３９．１４ｍｇの（ＰＣＬ  ２ｋ）２−ＰＥＧ  ３ｋを、Ａｃｅｔｏｎｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｐｕｒ（６０ｍｇ／ｍＬ）に溶解させた。このポリマーを、０．４５μｍフィルターに通して濾過した。
【００９２】
ラパマイシンおよびＰＣＬ  ８０ｋを、その（ＰＣＬ  ２ｋ）２−ＰＥＧ  ３ｋ／アセトン溶液に溶解させた。この処方物を、０．４５μｍフィルターに通して濾過した。１ｍＬのその濾過処方物を、２５ｍＬのＭｉｌｌｉＱ水にピペットで分注し、ＤＬＳによって測定した。
【００９３】
このミセル組成物の結果および特性を、表２に示す。
【００９４】
【表８】
0005842270.tif 000010
【００９５】
［実施例６：ＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡに基づくミセル組成物の調製］
［Ａ．異なる濃度のトリブロックコポリマーから作製したミセル］
ａ．３２．１ｍｇのＰＥＧ（６ｋ）−（ＰＬＧＡ（７．５ｋ））２を、１ｍＬのアセトンに溶解させ、０．４００ｍＬのその溶液を、１０ｍＬのＭｉｌｌｉ  Ｑに添加した。
ｂ．６４．５ｍｇのＰＥＧ（６ｋ）−（ＰＬＧＡ（７．５ｋ））２を、１ｍＬのアセトンに溶解させ、０．４００ｍＬのその溶液を、１０ｍＬのＭｉｌｌｉ  Ｑに添加した。
【００９６】
このミセル組成物の結果および特性を、表３に示す。
【００９７】
［Ｂ．異なるｐＨ値におけるミセル］
ａ．６４．５ｍｇのＰＥＧ（６ｋ）−（ＰＬＧＡ（７．５ｋ））２を、１ｍＬのアセトンに溶解させ、０．４００ｍＬのその溶液を、１０ｍＬのｐＨ緩衝液（ＣｅｒｔｉＰＵＲ緩衝液：クエン酸／水酸化ナトリウム／塩化水素）、ｐＨ＝４に添加した。
ｂ．６４．５ｍｇのＰＥＧ（６ｋ）−（ＰＬＧＡ（７．５ｋ））２を、１ｍＬのアセトンに溶解させ、０．４００ｍＬのその溶液を、１０ｍＬのｐＨ緩衝液（ＣｅｒｔｉＰＵＲ緩衝液：ホウ酸／塩化カリウム／水酸化ナトリウム）、ｐＨ＝９に添加した。
【００９８】
このミセル組成物の結果および特性を、表３に示す。
【００９９】
［Ｃ．異なる塩溶液中のミセル］
ａ．６４．５ｍｇのＰＥＧ（６ｋ）−（ＰＬＧＡ（７．５ｋ））２を、１ｍＬのアセトンに溶解させ、０．４００ｍＬのその溶液を、１０ｍＬの０．９％ＮａＣｌに添加した。
【０１００】
このミセル組成物の結果および特性を、表３に示す。
【０１０１】
［Ｄ．塩およびｐＨ制御した溶液中のミセル］
ａ．６４．５ｍｇのＰＥＧ（６ｋ）−（ＰＬＧＡ（７．５ｋ））２を、１ｍＬのアセトンに溶解させ、０．４００ｍＬのその溶液を、１０ｍＬのＰＢＳ、ｐＨ７．４（＝塩化ナトリウム／塩化カリウム／リン酸ナトリウム）に添加した。
【０１０２】
このミセル組成物の結果および特性を、表３に示す。
【０１０３】
【表９】
0005842270.tif 000011
【０１０４】
［実施例７：時間に関するミセル組成物の粒径安定性］
１６４．１ｍｇの（ＰＬＧＡ  ７．５ｋ）２−ＰＥＧ  ６ｋを、２．４００ｍＬのＡｃｅｔｏｎｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｐｕｒに溶解させた。この溶液を０．４５μｍフィルターに通して濾過して、塵粒を除去した。
【０１０５】
０．８ｍｇのラパマイシンを、０．８００ｍＬのアセトン溶液に溶解させた。
【０１０６】
この処方物を０．４５μｍフィルターに通して濾過して、塵粒を除去した。
【０１０７】
０．３０００ｍＬの（ＰＬＧＡ  ７．５ｋ）２−ＰＥＧ  ６ｋ−アセトン溶液を、０．１００ｍＬのラパマイシン−アセトン溶液と混合して、０．４００ｍＬの（ＰＬＧＡ  ７．５ｋ）２−ＰＥＧ  ６ｋ／ラパマイシン−アセトン溶液を得た。
【０１０８】
０．４００ｍＬのその（ＰＬＧＡ  ７．５ｋ）２−ＰＥＧ  ６ｋ／ラパマイシン−アセトン溶液を、１０ｍＬのＭｉｌｌｉＱ水にピペットで分注し、動的光散乱法（ＤＬＳ）によって測定した。
【０１０９】
【表１０】
0005842270.tif 000012
【０１１０】
［実施例８：時間に関するミセル組成物の粒径安定性］
１６４．１ｍｇの（ＰＬＧＡ  ７．５ｋ）２−ＰＥＧ  ６ｋを、２．４００ｍＬのＡｃｅｔｏｎｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｐｕｒに溶解させた。この溶液を０．４５μｍフィルターに通して濾過して、塵粒を除去した。
【０１１１】
０．３０００ｍＬのその（ＰＬＧＡ  ７．５ｋ）２−ＰＥＧ  ６ｋ−アセトン溶液を、０．１００ｍＬのアセトン溶液と混合して、０．４００ｍＬの（ＰＬＧＡ  ７．５ｋ）２−ＰＥＧ  ６ｋ−アセトン溶液を得た。
【０１１２】
０．４００ｍＬのその（ＰＬＧＡ  ７．５ｋ）２−ＰＥＧ  ６ｋ−アセトン溶液を、１０ｍＬのＭｉｌｌｉＱ水にピペットで分注し、動的光散乱法（ＤＬＳ）によって測定した。
【０１１３】
【表１１】
0005842270.tif 000013