(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物：
【化１】
0005922587.tif 000020
。
【請求項２】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物を含む治療用組成物。
【請求項３】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物を含む、アレルギー性疾患および他の炎症状態、感染症ならびに癌の治療用組成物。
【請求項４】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物を含む、アレルギー性鼻炎の治療用組成物。
【請求項５】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物を含む、喘息の治療用組成物。
【請求項６】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物を含んでなる、ワクチンアジュバント。
【請求項７】
抗原または抗原組成物と、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物とを含んでなる、免疫原性組成物。
【請求項８】
抗原または抗原組成物と、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物とを含んでなる、ワクチン組成物。
【請求項９】
疾患の治療または予防のための請求項７に記載の免疫原性組成物。
【請求項１０】
疾患の治療または予防のための請求項８に記載のワクチン組成物。
【請求項１１】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物を含む、アレルギー性疾患および他の炎症状態、感染症ならびに癌の治療のための薬剤。
【請求項１２】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物を含む、アレルギー性鼻炎の治療のための薬剤。
【請求項１３】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物を含む、喘息の治療のための薬剤。
【請求項１４】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンである化合物と、１つまたは複数の薬学上許容される希釈剤または担体とを含んでなる、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化合物、それらの調製のための方法、それらを含んでなる組成物に関し、様々な障害、特にアレルギー性疾患および他の炎症状態（例えばアレルギー性鼻炎および喘息）、感染症、癌の治療におけるそれらの使用、ならびにワクチンアジュバントとしてのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
脊椎動物は、微生物の侵入によって絶えず脅かされ、伝染性病原体を除去するために免疫防御の機構を発展させてきた。哺乳類において、この免疫系は２つの支流（先天性免疫および後天性免疫）を含む。宿主側防御の最前線は先天性免疫系であり、マクロファージおよび樹状細胞によって媒介される。後天性免疫は、感染の後期段階での病原体の排除に関与しており、免疫記憶の生成も可能にする。後天性免疫は、遺伝子再構成が行われた抗原特異的受容体を持つリンパ球の莫大なレパートリーに起因して、非常に特異的である。
【０００３】
先天性免疫応答はもともと非特異的であると考えられていたが、自己と様々な病原体を区別することが現在知られている。先天性免疫系は、複数の重要な特徴を有する、生殖細胞系列にコードされた限られた数のパターン認識受容体（ＰＲＲ）を介して微生物を認識する。
【０００４】
トール様受容体（ＴＬＲ）はヒトにおいて記載される１０のパターン認識受容体のファミリーである。ＴＬＲは先天性免疫細胞によって優先的に発現され、そこでのそれらの役割は、感染の兆候について環境を監視し、活性化に際しては侵入病原体の排除を目的とした防御機構を動員することである。ＴＬＲが引き起こした早期の先天性免疫応答は感染の伝播を限定し、その一方でそれらが誘導する炎症誘導性のサイトカインおよびケモカインは、抗原提示細胞、Ｂ細胞およびＴ細胞の動員および活性化をもたらす。ＴＬＲは適応的免疫応答の性質を修飾して、樹状細胞活性化およびサイトカイン放出を介する適切な保護を提供することができる（Ａｋｉｒａ  Ｓ．，ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００１：２，６７５−６８０）。異なるＴＬＲアゴニストから見られる応答のプロファイルは、活性化された細胞タイプに依存する。
【０００５】
ＴＬＲ７は、非自己核酸の検出に特殊化された細胞のエンドソームコンパートメント中に局在するＴＬＲのサブグループ（ＴＬＲ３、７、８および９）のメンバーである。ＴＬＲ７は１本鎖ＲＮＡの認識を介して抗ウイルス防御において重要な役割を果たす（Ｄｉｅｂｏｌｄ  Ｓ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００４：３０３，１５２９−１５３１；Ｌｕｎｄ  Ｊ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ，ＰＮＡＳ，２００４：１０１，５５９８−５６０３）。ＴＬＲ７はヒトにおいて限定された発現プロファイルを有しており、Ｂ細胞および形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）によって優先的に発現され、単球によってより低い程度で発現される。形質細胞様ＤＣは、リンパ系由来の樹状細胞のユニークな集団であり（末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）のうちの０．２〜０．８％）、これはウイルス感染に応答して高レベルインターフェロンα（ＩＦＮα）およびインターフェロンβ（ＩＦＮβ）を分泌する主要なＩ型インターフェロン産生細胞である（Ｌｉｕ  Ｙ−Ｊ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００５：２３，２７５−３０６）。
【０００６】
アレルギー性疾患は、Ｔｈ２に偏ったアレルゲンに対する免疫応答と関連する。Ｔｈ２応答はＩｇＥレベルの上昇と関連し、それは肥満細胞に対する効果を介して、アレルゲンに対する過敏性を促進して、例えばアレルギー性鼻炎において見られる症状をもたらす。健康な個人において、アレルゲンに対する免疫応答は、Ｔｈ２／Ｔｈ１および調節性Ｔ細胞の混合された応答により、よりうまく平衡が保たれる。ＴＬＲ７リガンドは、インビトロでＴｈ２サイトカインを減少させＴｈ１サイトカイン放出を促進すること、およびインビボでアレルギーの肺モデルにおいてＴｈ２タイプ炎症性応答を寛解することが示さている（Ｆｉｌｉ  Ｌ．，ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ａｌｌ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００６：１１８，５１１−５１７；Ｍｏｉｓａｎ  Ｊ．，ｅｔ  ａｌ，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２００６：２９０，Ｌ９８７−９９５；Ｔａｏ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｈｉｎ．  Ｍｅｄ．Ｊ．，２００６：１１９，６４０−６４８）。したがって、ＴＬＲ７リガンドにはアレルギー患者において見られる免疫応答の平衡を再び保ち、疾患緩和をもたらす可能性がある。
【０００７】
哺乳類において効果的な先天性免疫応答の生成の中心となるのは、細胞に作用して複数の効果を誘導するインターフェロンおよび他のサイトカインの誘導を引き起こす機構である。これらの効果は、抗感染性遺伝子発現の活性化、強い抗原特異的免疫を推進するための細胞の抗原提示の活性化、および食細胞におけるファゴサイトーシスの促進を含むことができる。
【０００８】
インターフェロンは、ウイルス感染から細胞を保護できる物質として最初に記載された（Ｉｓａａｃｓ  ＆  Ｌｉｎｄｅｍａｎｎ，Ｊ．Ｖｉｒｕｓ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ．Ｐｒｏｃ．Ｒ．Ｓｏｃ．Ｌｏｎ．Ｓｅｒ．Ｂ．Ｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．１９５７：１４７，２５８−２６７）。ヒトにおいて、Ｉ型インターフェロンは、第９染色体上の遺伝子によってコードされ、少なくとも１３個のアイソフォームのインターフェロンα（ＩＦＮα）、および１個のアイソフォームのインターフェロンβ（ＩＦＮβ）をコードする関連タンパク質のファミリーである。組換えＩＦＮαは最初に承認された生物学的治療剤であり、ウイルス感染および癌における重要な治療法となった。細胞に対する直接的抗ウイルス活性に加えて、インターフェロンは免疫系の細胞に対して作用する強力な免疫応答修飾物質であることが知られている。
【０００９】
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）疾患のための第一選択療法として、インターフェロンの組み合わせは、ウイルス負荷の軽減に、およびある被験体におけるウイルス複製の消去に、非常に効果的であり得る。しかしながら、多くの患者で持続的なウイルス応答を示すことは不成功であり、これらの患者においてウイルス負荷は制御されない。加えて、インターフェロンの注射による治療法は、コンプライアンスに影響を与えることが示される複数の望まれない有害作用と関連する可能性がある（Ｄｕｄｌｅｙ  Ｔ．，ｅｔ  ａｌ，Ｇｕｔ．，２００６：５５（９），１３６２−３）。
【００１０】
Ｉ型インターフェロンおよび他のサイトカインの活性化を含む先天性免疫応答を刺激することができる低分子化合物の投与は、ウイルス感染を含むヒト疾患の治療または予防のための重要な戦略になり得る。このタイプの免疫修飾戦略には、感染症だけでなく、癌（Ｋｒｉｅｇ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｎｃｏｌ．Ｒｅｐ．，２００４：６（２），８８−９５）、アレルギー性疾患（Ｍｏｉｓａｎ  Ｊ．，ｅｔ  ａｌ，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２００６：２９０，Ｌ９８７−９９５）、過敏性大腸疾患等の他の炎症状態（Ｒａｋｏｆｆ−Ｎａｈｏｕｍ  Ｓ．，Ｃｅｌｌ．，２００４，２３，１１８（２）：２２９−４１）において、およびワクチンアジュバント（Ｐｅｒｓｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，２００２：１０（１０  Ｓｕｐｐｌ），Ｓ３２−７）としても有用かもしれない化合物を同定する可能性がある。
【００１１】
動物モデルにおいて、イミキモドの局所的なアジュバント活性（Ａｄａｍｓ  Ｓ．，ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００８，１８１：７７６−８４；Ｊｏｈｎｓｔｏｎ  Ｄ．，ｅｔ  ａｌ，Ｖａｃｃｉｎｅ，２００６，２４：１９５８−６５）、または全身的なアジュバント活性（Ｆｒａｎｓｅｎ  Ｆ．ｅｔ  ａｌ，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．，２００７，７５：５９３９−４６）が実証された。レシキモドおよび他の関連するＴＬＲ７／８アゴニストもアジュバント活性を提示することが示された（Ｍａ  Ｒ．ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２００７，３６１：５３７−４２１；Ｗｉｌｌｅ−Ｒｅｅｃｅ  Ｕ．，ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２００５，１０２：１５１９０−４；Ｗｉｌｌｅ−Ｒｅｅｃｅ  Ｕ．，ｅｔ  ａｌ、ＵＳ２００６０４５８８５  Ａ１）。
【００１２】
Ｉ型インターフェロンの誘導をもたらす機構は部分的にしか理解されていない。多くの細胞タイプにおいてインターフェロンの誘導をもたらすことができる１つの機構は、ＲＮＡヘリカーゼＲＩＧ−ＩおよびＭＤＡ５による二本鎖ウイルスＲＮＡの認識である。この機構は、センダイウイルスの細胞感染によってインターフェロンが誘導される一次機構であると考えられる。
【００１３】
インターフェロンの誘導のためのさらなる機構はＴＬＲ依存性シグナル伝達事象を介するものある。ヒトにおいて、形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）は専門のインターフェロン産生細胞であり、例えばウイルス感染に応答して多量のインターフェロンを生じることができる。これらのｐＤＣはＴＬＲ７およびＴＬＲ９を優先的に発現し、ウイルスのＲＮＡまたはＤＮＡによるこれらの受容体の刺激はそれぞれインターフェロンαの発現を誘導できることが示される。
【００１４】
動物およびヒトにおいて、これらの細胞タイプからのインターフェロンαを誘導することができる、ＴＬＲ７およびＴＬＲ９のオリゴヌクレオチドアゴニスト、ならびにＴＬＲ７の低分子のプリンベースのアゴニストが記載されている（Ｔａｋｅｄａ  Ｋ．ｅｔ  ａｌ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３：２１，３３５−７６）。ＴＬＲ７アゴニストは、イミキモドおよびレシキモド等のイミダゾキノリン化合物、オキソアデニンアナログ、ならびにさらにインターフェロンαを誘導することが長年知られているロキソリビンおよび７−チア−８−オキソグアノシン等のヌクレオシドアナログを含む。国際公開第２００８／１１４００８号（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ  ＡＢ／Ｄａｉｎｉｐｐｏｎ  Ｓｕｍｉｔｏｍｏ  Ｐｈａｒｍａ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．）は、ＴＬＲ７修飾物質として９−置換−８−オキソアデニン化合物を開示する。
【発明の概要】
【００１５】
公知の誘導物質の分子標的が同定されていないので、低分子プリン様化合物がＩ型インターフェロンおよび他のサイトカインをどのように誘導できるのかは不明瞭なままである。しかしながら、化合物による初代ヒトドナー細胞の刺激に基づいてヒトインターフェロンＩＦＮαの低分子誘導物質を（機構に関係なく）特徴づけるアッセイ戦略が開発されており、本明細書において開示される。
【００１６】
本発明の簡単な説明
化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、国際出願ＰＣＴ／ＥＰ２００９／０６０２６５号中で開示され、ＷＯ２０１０／０１８１３３として公開されており、この化合物はヒトインターフェロンの誘導物質であることが示され、ヒトインターフェロンの既知の誘導物質に関して改善されたプロファイル（例えば促進された力価）を保持する可能性があり、およびＴＮＦαに関してＩＦＮαの選択性の促進を示し得る。マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、より容易に製剤化および／または加工および／または操作されることが期待される。例えば、６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの純度は、マレイン酸塩の形成および／もしくは再結晶を介して改善され得、ならびに／またはその安定性は遊離塩基と比べて改善され得る。ヒトインターフェロンを誘導する６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、様々な障害の治療、例えばアレルギー性疾患および他の炎症状態（例えばアレルギー性鼻炎および喘息）の治療、感染症および癌の治療において有用であり得、ワクチンアジュバントとしても有用であり得る。マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンが類似の薬理学的特性を有するであろうことが期待される。
【００１７】
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、強力な免疫修飾物質であるので、その取り扱いにおいて注意しなくてはならない。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
第１の態様において、化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化１】
0005922587.tif 000002
【００１９】
は、マレイン酸塩の形態で提供される。
【００２０】
さらに、６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンがマレイン酸塩の形態で提供され、そこでは６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン：マレイン酸塩アニオンの比は１：１である。
【００２１】
したがって、本発明のさらなる態様として、療法における使用のために、化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンが、マレイン酸塩の形態で提供される。
【００２２】
それゆえ、アレルギー性疾患および他の炎症状態、感染症ならびに癌の治療における使用のためにも、化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンがマレイン酸塩の形態で提供される。
【００２３】
それゆえ、アレルギー性鼻炎の治療における使用のためにも、化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンがマレイン酸塩の形態で提供される。
【００２４】
それゆえ、喘息の治療における使用のためにも、化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンがマレイン酸塩の形態で提供される。
【００２５】
それゆえ、マレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを含んでなるワクチンアジュバントも提供される。
【００２６】
抗原または抗原組成物およびマレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを含んでなる免疫原性組成物も提供される。
【００２７】
抗原または抗原組成物およびマレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを含んでなるワクチン組成物も提供される。
【００２８】
疾患を患っているかまたは疾患に感受性のあるヒト被験体に対する、抗原または抗原組成物およびマレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを含んでなる免疫原性組成物の投与を含んでなる、疾患を治療または予防する方法も提供される。
【００２９】
疾患を患っているかまたは疾患に感受性のあるヒト被験体に対する、抗原または抗原組成物およびマレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを含んでなるワクチン組成物の投与を含んでなる、疾患を治療または予防する方法も提供される。
【００３０】
疾患の治療または予防のための抗原または抗原組成物を含んでなる免疫原性組成物の製造のための、マレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの使用も提供される。
【００３１】
疾患の治療または予防のための抗原または抗原組成物を含んでなるワクチン組成物の製造のための、マレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの使用も提供される。
【００３２】
アレルギー性疾患および他の炎症状態、感染症ならびに癌の治療のための薬剤の製造のための、マレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの使用も提供される。
【００３３】
アレルギー性鼻炎の治療のための薬剤の製造のための、マレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの使用も提供される。
【００３４】
喘息の治療のための薬剤の製造のための、マレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの使用も提供される。
【００３５】
アレルギー性疾患および他の炎症状態、感染症ならびに癌の治療方法であって、それを必要とするヒト被験体に対する、治療有効量のマレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの投与を含んでなる方法も提供される。
【００３６】
アレルギー性鼻炎の治療方法であって、それを必要とするヒト被験体に対する、治療有効量のマレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの投与を含んでなる方法も提供される。
【００３７】
喘息の治療方法であって、それを必要とするヒト被験体に対する、治療有効量のマレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの投与を含んでなる方法も提供される。
【００３８】
本発明は、さらなる態様において、少なくとも１つの他の治療的に活性のある薬剤と共に、マレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを含んでなる組み合わせを提供する。
【００３９】
マレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンと、１つまたは複数の薬学上許容される希釈剤または担体とを含んでなる、医薬組成物も提供される。
【００４０】
１つまたは複数の薬学上許容される希釈剤または担体と共に、マレイン酸塩の形態の化合物６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを混合することを含んでなる、医薬組成物を調製する方法も提供される。
【００４１】
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンおよびその塩は、ＷＯ２０１０／０１８１３３として公開された米国仮出願第６１／０８７７７７号および国際出願第ＰＣＴ／ＥＰ２００９／０６０２６５号中で記載される方法論によって調製することができ、参照として本明細書に援用される。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの代表的なＸＲＰＤディフラクトグラムを示す図である。
【図２】６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの代表的なＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図３】６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンマレイン酸塩の代表的なＸＲＰＤディフラクトグラムを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
多くの有機化合物は溶媒と複合体を形成し、溶媒中で有機化合物が反応するか、または溶媒から有機化合物が沈殿または結晶することが認識されるだろう。これらの複合体は「溶媒和物」として公知である。例えば、水との複合体は「水和物」として公知である。水、エタノール、イソプロピルアルコールおよびＮ−メチルピロリジノン等の、高沸点を持つ溶媒および／または水素結合を形成する高い傾向を持つ溶媒を使用して、溶媒和物を形成することができる。溶媒和物の同定のための方法はＮＭＲおよび微量分析を含むが、これらに限定されない。マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの溶媒和物は本発明の範囲内である。
【００４４】
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは主としてＳ−異性体の形態で存在するが、少量、例えば５％未満、または３％未満、および好ましくは１％未満、または好ましくは０．５％未満のＲ−異性体を含み得ることが認識されるだろう。これらの混合物のマレイン酸塩が本発明の範囲内で検討されることが認識されるだろう。
【００４５】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは互変異性形態で存在することができる。本発明は、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンのすべての互変異性体を、個々の互変異性体またはその混合物としても、包含することが理解されるだろう。
【００４６】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、結晶形態または非晶形態であり得る。さらに、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの結晶形態のいくつかは、多形体として存在することができ、これらは本発明の範囲内に含まれる。熱力学的に最も安定した多形形態（複数可）は特に興味深い。
【００４７】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの多形形態は、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）、赤外分光法（ＩＲ）、ラマン分光法、示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）、熱重量分析（ＴＧＡ）および固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）を含むが、これらに限定されない複数の従来の分析技術を使用して、特徴づけおよび識別が行われる。
【００４８】
本発明の範囲内に含まれるものは、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの溶媒和物、水和物、異性体および多形形態であることが、前述したことから認識されるだろう。
【００４９】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンが、有益な効果を有する可能性のある疾患状態の例は、アレルギー性疾患および他の炎症状態（例えばアレルギー性鼻炎および喘息）、感染症ならびに癌を含む。マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、ワクチンアジュバントとしても役に立つ可能性がある。
【００５０】
免疫応答の修飾物質として、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、独立したものとして、またはアジュバントとして組合わせて、喘息、アレルギー性鼻炎および鼻炎結膜炎、食物アレルギー、過敏性肺疾患、レフレル症候群、遅延型過敏性障害、アテローム性動脈硬化症、膵臓炎、胃炎、大腸炎、骨関節炎、乾癬、サルコイド症、肺線維症、呼吸窮迫症候群、毛細気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、副鼻腔炎、嚢胞性繊維症、紫外線角化症、皮膚異形成症、慢性蕁麻疹、湿疹、ならびにすべてのタイプの皮膚炎等の炎症性疾患またはアレルギー性疾患を含むが、これらに限定されない免疫介在性障害の治療および／または予防にも有用であり得る。
【００５１】
マレイン酸塩の形態６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、気道のウイルス性増悪および扁桃腺炎を含むが、これらに限定されない呼吸器感染に対する反応の治療および／または予防にも有用であり得る。マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、関節リウマチ、乾癬性関節炎、全身性エリテマトーデス、シェーグレン病、強直性脊椎炎、硬皮症、皮膚筋炎、糖尿病を含むが、これらに限定されない自己免疫性疾患、移植片対宿主病を含む移植片拒絶、クローン病および潰瘍性大腸炎を含むが、これらに限定されない炎症性腸疾患の治療および／または予防にも有用であり得る。
【００５２】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、肝炎ウイルス（例えばＢ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス）、ヒト免疫不全ウイルス、パピロマウイルス、ヘルペスウイルス、呼吸系ウイルス（例えばインフルエンザウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、ライノウイルス、メタ肺炎ウイルス、パラインフルエンザウイルス、ＳＡＲＳ）、および西ナイルウイルスによって引き起こされたものを含むが、これらに限定されない感染症の治療にも有用であり得る。マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、例えば細菌、真菌または原虫類によって引き起こされる微生物感染の治療にも有用であり得る。これらは、結核、細菌性肺炎、アスペルギルス症、ヒストプラスマ症、カンジダ症、ニューモシスチス症、レプラ、クラミジア、クリプトコックス疾患、クリプトスポリジウム症、トキソプラズマ症、リーシュマニア、マラリアおよびトリパノソーマ症を含むが、これらに限定されない。
【００５３】
マレイン酸塩の形態６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、様々な癌の治療、特に免疫療法に対して応答性である癌であり、腎細胞癌、肺癌、乳癌、結腸直腸癌、膀胱癌、黒色腫、白血病、リンパ腫および卵巣癌を含むが、これらに限定されない既知の癌の治療にも有用であり得る。
【００５４】
治療または治療法に対する本明細書の参照は、既存の病態の治療に加えて、状態に依存して予防処置にも拡張できることが、当業者によって認識されるだろう。
【００５５】
本明細書において言及されるように、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは治療剤として有用であり得る。
【００５６】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、任意の都合のよい方法において投与のために製剤化することができる。
【００５７】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、例えば経口投与、局所投与、吸入投与、鼻腔内投与、頬腔投与、非経口投与（例えば、静脈内投与、皮下投与、皮内投与または筋肉内投与）または直腸投与のために製剤化することができる。一態様において、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは経口投与のために製剤化される。さらなる態様において、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、局所投与（例えば鼻腔内投与または吸入投与）のために製剤化される。
【００５８】
経口投与のための錠剤およびカプセルは、結合剤（例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガント、デンプン漿剤、セルロースまたはポリビニルピロリドン）；充填剤（例えばラクトース、微結晶性セルロース、糖、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウムまたはソルビトール）；潤滑剤（例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ポリエチレングリコールまたはシリカ）；崩壊剤（例えばジャガイモデンプン、クロスカルメロースナトリウムまたはデンプングリコール酸ナトリウム）；またはラウリル硫酸ナトリウム等の湿潤剤等の従来の賦形剤を含むことができる。錠剤は当該技術分野において周知の方法に従ってコートすることができる。
【００５９】
経口液体調製物は、例えば水性懸濁もしくは油性懸濁物、溶液、乳化物、シロップまたはエリキシルの形態であってもよいし、または使用前の構成のための乾燥製品として水もしくは他の好適な媒質と共に提供されてもよい。かかる液体調製物は、懸濁化剤（例えばソルビトールシロップ、メチルセルロース、グルコース／糖シロップ、ゼラチン、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルまたは水素添加食用脂）；乳化剤（例えばレシチン、モノオレイン酸ソルビタンまたはアラビアゴム）；非水性媒質（食用油を含み得る）（例えばアーモンドオイル、分留ヤシ油、油状エステル、プロピレングリコールまたはエチルアルコール）；または防腐剤（例えばメチル、ｐ−オキシ安息香酸プロピルまたはソルビン酸）等の従来の添加物を含むことができる。調製物は、緩衝塩、着香剤、着色剤および／または甘味剤（例えばマンニトール）も必要に応じて含むことができる。鼻腔内投与のための組成物は、小滴によってまたは加圧されたポンプによって鼻に投与する水性組成物を含む。好適な組成物はこの目的のための希釈剤または担体として水を含む。
【００６０】
肺または鼻に対する投与のための組成物は１つまたは複数の賦形剤（例えば１つまたは複数の懸濁化剤、１つまたは複数の防腐剤、１つまたは複数の界面活性剤、１つまたは複数の等張性調整剤、１つまたは複数の共溶媒）を含み、組成物（例えば緩衝系）のｐＨを制御する成分を含むことができる。さらに、組成物は、抗酸化剤（例えばメタ重亜硫酸ナトリウム）および矯味剤等の他の賦形剤を含むことができる。組成物は噴霧化によって鼻または呼吸器管の他の領域にも投与することができる。マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、水性鼻腔内溶液製剤としての提供のために十分な可溶性および安定性を供することができる。
【００６１】
鼻腔内組成物は、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンが鼻腔（標的組織）のすべての領域に送達されることを可能にし、さらに活性化合物をより長い期間の間に標的組織に接触させておくことを可能にできる。鼻腔内組成物のための好適な投薬レジームは、鼻腔を清浄にした後に鼻を介して徐々に吸入する患者のためのものである。吸入の間に、組成物は１つの鼻孔に投与されるが、他の鼻孔は手で圧迫される。次いでこの手順を他の鼻孔について反復する。典型的には、１つの鼻孔あたり１または２スプレーを、上記の手順によって、毎日１、２または３回、理想的には毎日１回投与される。特に興味深いのは毎日１回の投与に好適な鼻腔内組成物である。
【００６２】
懸濁化剤（複数可）は、含まれていれば、組成物の全重量に基づいて、０．１〜５％（ｗ／ｗ）（１．５％〜２．４％（ｗ／ｗ）等）の量で典型的には存在する。薬学上許容される懸濁化剤の例は、Ａｖｉｃｅｌ（登録商標）（微結晶性セルロースおよびカルボキシメチルセルロースナトリウム）、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ビーガム、トラガント、ベントナイト、メチルセルロース、キサンタンガム、カーボポールおよびポリエチレングリコールを含むが、これらに限定されない。
【００６３】
肺または鼻に対する投与のための組成物は１つまたは複数の賦形剤を含み、１つまたは複数の防腐剤の含有によって微生物または真菌の汚染および増殖から保護することができる。薬学上許容される抗微生物剤または防腐剤の例は、第四アンモニウム化合物（例えば塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、セトリミド、塩化セチルピリジウム、塩化ラウラルコニウムおよびミリスチル塩化ピコリニウム）、水銀剤（例えば硝酸フェニル水銀、酢酸フェニル水銀およびチメロサール）、アルコール剤（例えばクロロブタノール、フェニルエチルアルコールおよびベンジルアルコール）、抗菌性エステル（例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステル）、エデト酸２ナトリウム（ＥＤＴＡ）等のキレート剤、ならびにクロルヘキシジン、クロロクレゾール、ソルビン酸およびその塩（ソルビン酸カリウム等）およびポリミキシン等の他の抗微生物剤を含むが、これらに限定されない。薬学上許容される抗真菌剤または防腐剤の例は、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、プロピオン酸ナトリウム、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベンおよびブチルパラベンを含むが、これらに限定されない。防腐剤（複数可）は、含まれていれば、組成物の全重量に基づいて、０．００１〜１％（ｗ／ｗ）（０．０１５％〜０．５％（ｗ／ｗ）等）の量で存在することができる。
【００６４】
組成物（例えば少なくとも１つの化合物が懸濁されている場合）は、組成物の水相中で薬剤粒子の溶解を促進するように機能する１つまたは複数の界面活性剤を含むことができる。例えば、使用される界面活性剤の量は混合の間に発泡を引き起こさない量である。薬学上許容される界面活性剤の例は、ポリオキシエチレン（２０）モノオレイン酸ソルビタン（ポリソルベート８０）、マクロゴールエーテルおよびポロキサマー等の脂肪族アルコール、エステルおよびエーテルを含む。界面活性剤は、組成物の全重量に基づいて、約０．０１〜１０％（ｗ／ｗ）（０．０１〜０．７５％（ｗ／ｗ）等）の間で、例えば約０．５％（ｗ／ｗ）の量で存在することができる。
【００６５】
体液（例えば鼻腔液）との等張性を達成して刺激レベルの低下をもたらす、１つまたは複数の等張性調整剤（複数可）が含まれ得る。薬学上許容される等張性調整剤の例は、塩化ナトリウム、デキストロース、キシリトール、塩化カルシウム、グルコース、グリセリンおよびソルビトールを含むが、これらに限定されない。等張性調整剤は、存在するならば、組成物の全重量に基づいて、０．１〜１０％（ｗ／ｗ）（４．５〜５．５％（ｗ／ｗ）等）、例えば約５．０％（ｗ／ｗ）の量で含まれ得る。
【００６６】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、クエン酸ナトリウム、クエン酸、トロメタモール、リン酸水素２ナトリウム（例えば十二水和物、七水和物、二水和物および無水形態）またはリン酸ナトリウム等のリン酸塩およびその混合物等の好適な緩衝剤の添加によって緩衝することができる。
【００６７】
緩衝剤は、存在するならば、組成物の全重量に基づいて、０．１〜５％（ｗ／ｗ）、例えば１〜３％（ｗ／ｗ）の量で含まれ得る。
【００６８】
矯味剤の例は、スクラロース、スクロース、サッカリンまたはその塩、フルクトース、デキストロース、グリセロール、コーンシロップ、アスパルテーム、アセスルファム・ケィ、キシリトール、ソルビトール、エリトリトール、グリチルリチン酸アンモニウム、タウマチン、ネオテーム、マンニトール、メントール、ユーカリ油、ショウノウ、天然着香剤、人工着香剤およびその組合わせを含む。
【００６９】
１つまたは複数の共溶媒（複数可）は、医薬化合物（複数可）および／または他の賦形剤の可溶性を支援するために含まれ得る。薬学上許容される共溶媒の例は、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、エチレングリコール、グリセロール、エタノール、ポリエチレングリコール（例えばＰＥＧ３００またはＰＥＧ４００）およびメタノールを含むが、これらに限定されない。一実施形態において、共溶媒はプロピレングリコールである。
【００７０】
共溶媒（複数可）は、存在するならば、組成物の全重量に基づいて、０．０５〜３０％（ｗ／ｗ）（１〜２５％（ｗ／ｗ）等）、例えば１〜１０％（ｗ／ｗ）の量で含まれ得る。
【００７１】
吸入投与のための組成物は、加圧されたポンプまたは吸入器（例えばリザーバー乾燥粉末吸入器、単位用量乾燥粉末吸入器、前定量された多重用量の乾燥粉末吸入器、鼻吸入器または加圧されたエアロゾル吸入器）、噴霧器または通気器によって、呼吸器管へ投与される、水性混合物、有機混合物または水性／有機混合物、乾燥粉末または結晶性組成物を含む。好適な組成物はこの目的のための希釈剤または担体として水を含み、緩衝剤等の従来の賦形剤、等張性修飾剤および同種のものと共に提供され得る。水性組成物は噴霧化によって鼻および呼吸器管の他の領域へも投与され得る。かかる組成物は、好適な液化された噴射剤の使用により、加圧されたパック（定量された用量の吸入器等）から送達された水性の溶液もしくは懸濁物またはエアロゾルであり得る。
【００７２】
鼻（例えば鼻炎の治療のため）または肺への局所的な投与のための組成物は、加圧されたエアロゾル組成物、および加圧されたポンプによって鼻腔に送達される水性組成物を含む。加圧されていない鼻腔への局所的な投与のために好適な組成物は、特に興味深い。好適な組成物はこの目的のための希釈剤または担体として水を含む。肺または鼻への投与のための水性組成物は、緩衝剤、等張性修飾剤および同種のもの等の従来の賦形剤と共に提供され得る。水性組成物は噴霧化によっても鼻へ投与することができる。
【００７３】
液体分注器は、典型的には鼻腔への液体組成物の送達に使用することができる。液体組成物は水性または非水性であり得るが、典型的には水性であり得る。かかる液体分注器は、液体分注器のポンプ機構に対してユーザー適用力の適用に際して、定量された用量の液体組成物が分注される分注ノズルまたは分注オリフィスを有することができる。かかる液体分注器は、概して液体組成物の定量された多重用量（連続的ポンプ作動に際して分注できる用量）のリザーバーを備えて提供される。分注ノズルまたは分注オリフィスは、鼻腔の中への液体組成物のスプレー分注のために、ユーザーの鼻孔の中への挿入用として構成することができる。前記のタイプの液体分注器は国際公開第ＷＯ２００５／０４４３５４号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄ社）中に記載および図示される。分注器は、液体組成物を含有するための容器上に据え付けられた圧搾ポンプを有する液体発射装置を格納する筺体を有する。筺体は指で操作可能な少なくとも１つのサイドレバーを有し、サイドレバーは、カムによって筺体中で容器を上方へ移動させるように筺体に対して内に向かって移動可能であり、ポンプを圧縮させ、筺体の鼻腔ノズルを介してポンプステムから定量された用量の組成物をポンプで送り込む。一実施形態において、液体分注器はＷＯ２００５／０４４３５４の図３０〜４０中に図示される一般的なタイプである。
【００７４】
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンをマレイン酸塩の形態で含む水性組成物は、国際公開第ＷＯ２００７／１３８０８４号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄ社）中で開示されるような、例えばその図２２〜４６に関して開示されたような、または英国特許出願第ＧＢ０７２３４１８．０号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄ社）中で開示されたような、例えばその図７〜３２に関して開示されたようなポンプによっても送達することができる。ＧＢ０７２３４１８．０の図１〜６中で開示されるような作動器はポンプを作動させることができる。
【００７５】
吸入による肺への局所送達のための乾燥粉末組成物は、吸入器または通気器における使用のために、例えばゼラチンのカプセルおよびカートリッジ、または例えば薄くのばされたアルミホイルのブリスター中で例えば提供することができる。粉末ブレンド組成物は、概して６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンのマレイン酸塩、および単糖、二糖または多糖（例えばラクトースまたはデンプン）等の好適な粉末基剤（担体／希釈剤／賦形剤の物質）の吸入のための粉末混合物を含む。乾燥粉末組成物は、薬物および担体に加えて、さらなる賦形剤（例えば糖エステル（例えばセロビオースオクタアセタート）、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム等の三成分剤）も含むことができる。
【００７６】
一実施形態において、吸入投与のための好適な組成物は、好適な吸入装置の内側に据え付けた薬剤パック（複数可）で提供される複数の密封用量容器の中へ組み込むことができる。容器はひとつずつ破裂、剥離、または他の方法で開口することができ、当該技術分野において公知であるように、乾燥粉末組成物の用量は吸入装置の口金に対する吸入によって投与される。薬剤パックは複数の異なる形態（例えばディスク形状または細長い小片）であり得る。代表的な吸入装置はＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ社によって販売されるＤＩＳＫＨＡＬＥＲ（商標）およびＤＩＳＫＵＳＴＭ装置である。
【００７７】
乾燥粉末の吸入可能な組成物は吸入装置中でバルクリザーバーとしても提供され、そして装置はリザーバーから吸入チャンネルへの組成物の用量の定量のための定量機構を備えて提供され、定量された用量は装置の口金で患者が吸入することによって吸入され得る。このタイプの例示的な販売された装置は、ＴＵＲＢＵＨＡＬＥＲ（商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ社）、ＴＷＩＳＴＨＡＬＥＲ（商標）（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ社）およびＣＬＩＣＫＨＡＬＥＲ（商標）（Ｉｎｎｏｖａｔａ社）である。
【００７８】
乾燥粉末の吸入可能な組成物のためのさらなる送達方法は、典型的には患者によって吸入装置の中へ需要に応じて充填されるカプセル（１個のカプセルあたり１用量）において提供される、組成物の定量された用量のためのものである。装置はカプセルを破裂、貫通または他の方法で開口する手段を有し、その結果、用量が装置の口金で吸入されるときに、患者の肺の中へ流入することができる。かかる装置の販売例としては、ＲＯＴＡＨＡＬＥＲ（商標）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）およびＨＡＮＤＩＨＡＬＥＲ（商標）（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ社）がある。
【００７９】
吸入のために好適な加圧されたエアロゾル組成物は懸濁物または溶液のいずれかであり得、６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンのマレイン酸塩、およびフルオロカーボンもしくは水素含有クロロフルオロカーボンまたはその混合物、特にヒドロフルオロアルカン、さらに特に１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパンまたはその混合物等の好適な噴射剤を含み得る。エアロゾル組成物は、例えばＷＯ９４／２１２２９およびＷＯ９８／３４５９６（Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ  Ｍｉｎｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ社）中で記載されているような、界面活性剤（例えばオレイン酸、レシチン、オリゴ乳酸またはその誘導体）等の当該技術分野において周知のさらなる組成物賦形剤および共溶媒（例えばエタノール）を任意で含むことができる。加圧された組成物は、概してキャニスター（例えばアルミニウムキャニスター）中に保持され、弁（例えば定量弁）により閉鎖され、口金を備えて提供される作動器の中へ取り付けられる。
【００８０】
軟膏、クリームおよびゲルは、例えば好適な増粘剤および／またはゲル化剤および／または溶媒の添加により水性基剤または油性基剤を用いて製剤化することができる。したがってかかる基剤は、例えば水および／または油（液体パラフィン、または落花生油もしくはヒマシ油等の植物油等）または溶媒（ポリエチレングリコール等）を含み得る。基剤の性質に応じて使用できる増粘剤およびゲル化剤は、軟パラフィン、ステアリン酸アルミニウム、セトステアリルアルコール、ポリエチレングリコール、羊毛脂、ミツロウ、カルボキシポリメチレンおよびセルロース誘導体、および／またはモノステアリン酸グリセリンおよび／または非イオン性乳化剤を含む。
【００８１】
ローションは水性基剤または油性基剤により製剤化され、１つまたは複数の乳化剤、安定化剤、分散剤、懸濁化剤または増粘剤も含む。
【００８２】
外部適用のための粉末は、任意の好適な粉末基剤（例えばタルク、ラクトースまたはデンプン）の補助により形成することができる。小滴は、１つまたは複数の分散剤、可溶化剤、懸濁化剤または防腐剤も含む、水性基剤または非水性基剤により製剤化することができる。
【００８３】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、例えば、皮膚の中へ活性成分を送達する貼付剤または他の装置（例えば加圧気体装置）用の組成物による経皮送達のために製剤化することができる。
【００８４】
頬腔投与のために、組成物は、従来の様式で製剤化された錠剤またはロゼンジの形態をとることができる。
【００８５】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、例えばカカオバターまたは他のグリセリド等の従来の坐剤基剤を含む坐剤としても製剤化することができる。
【００８６】
例えば、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンはボーラス注入または持続点滴による非経口投与のためにも製剤化され、例えばアンプル、バイアル、小体積の点滴または充填済みシリンジとして単位用量形態で、または防腐剤を添加して複数用量容器で提供され得る。組成物は、水性媒質または非水性媒質中の溶液、懸濁物または乳化物としてかかる形態をとり、抗酸化剤、緩衝液、抗菌剤および／または等張性調整剤等の製剤化剤を含むことができる。あるいは、活性成分は、使用前に好適な媒質（例えば滅菌されたパイロジェン不含有水）による構成のための粉末形態であり得る。乾燥固体状態は、個々の滅菌容器の中へ滅菌粉末を無菌的に充填することによって、または各々の容器の中へ滅菌溶液を無菌的に充填し凍結乾燥することによって調製できる。
【００８７】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、ワクチンの活性を修飾するアジュバントとしてもワクチンと共に製剤化できる。かかる組成物は、アルミニウム塩、油と水の乳化物、熱ショックタンパク質、リピドＡ調製物および誘導体、糖脂質、ＣｐＧ  ＤＮＡもしくは類似薬剤等の他のＴＬＲアゴニスト、ＧＭ−ＣＳＦもしくはＩＬ−１２等のサイトカインまたは類似薬剤を含むが、これらに限定されないアジュバント活性を持つ１つまたは複数の成分と共に、タンパク質、ＤＮＡ、生細菌もしくは死細菌および／またはウイルスもしくはウイルス様粒子を含むが、これらに限定されない抗体（複数可）もしくは抗体断片（複数可）または抗原成分を含むことができる。
【００８８】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、単独でまたは他の治療剤と組み合わせて用いることができる。マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンおよび他の薬学的に活性のある薬剤（複数可）は、ともにまたは個別に投与することができ、個別に投与した場合、投与は任意の順序で同時にまたは連続して起こり得る。マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンおよび他の薬学的に活性のある薬剤（複数可）の量および投与の相対的なタイミングは、所望される組合せ療法効果を達成するために選択される。マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの他の治療剤との組合わせ投与は、両方の化合物を含む一体型の医薬組成物での投与、または化合物の１つを各々に含む分離した医薬組成物での投与を併用することによってもよい。あるいは、組合わせは、１つの治療剤を第一におよび他のものを第二に投与するか、またはその逆に投与する連続型様式で個別に投与することができる。かかる連続投与は時間が接近または時間が隔たっていてもよい。
【００８９】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、ウイルス感染の予防または治療において有用な１つまたは複数の薬剤と組み合わせて使用することができる。かかる薬剤の例は以下を含むが、これらに限定されない。ポリメラーゼ阻害剤（ＷＯ２００４／０３７８１８−Ａ１中で開示されたものに加えて、ＷＯ２００４／０３７８１８およびＷＯ２００６／０４５６１３中で開示されたもの等）；ＪＴＫ−００３、ＪＴＫ−０１９、ＮＭ−２８３、ＨＣＶ−７９６、Ｒ−８０３、Ｒ１７２８、Ｒ１６２６に加えて、ＷＯ２００６／０１８７２５、ＷＯ２００４／０７４２７０、ＷＯ２００３／０９５４４１、ＵＳ２００５／０１７６７０１、ＷＯ２００６／０２００８２、ＷＯ２００５／０８０３８８、ＷＯ２００４／０６４９２５、ＷＯ２００４／０６５３６７、ＷＯ２００３／００７９４５、ＷＯ０２／０４４２５、ＷＯ２００５／０１４５４３、ＷＯ２００３／０００２５４、ＥＰ１０６５２１３、ＷＯ０１／４７８８３、ＷＯ２００２／０５７２８７、ＷＯ２００２／０５７２４５中で開示されたものおよび類似薬剤；複製阻害剤（アシクロビル、ファムシクロビル、ガンシクロビル、シドフォビル、ラミブジンおよび類似薬剤等）；プロテアーゼ阻害剤（ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤サキナビル、リトナビル、インジナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、ホスアンプレナビル、ブレカナビル、アタザナビル、チプラナビル、パリナビル、ラシナビル、およびＨＣＶプロテアーゼ阻害剤ＢＩＬＮ２０６１、ＶＸ−９５０、ＳＣＨ５０３０３４等）；および類似薬剤；ヌクレオシドおよびヌクレオチド系逆転写酵素阻害剤（ジドブジン、ジダノシン、ザルシタビン、アバカビル、スタビジン（ｓｔａｖｉｄｉｎｅ）、アデフォビル、アデフォビル・ジピボキシル、フォジブジン、トドキシル（ｔｏｄｏｘｉｌ）、エムトリシタビン、アロブジン、アムドキソビル、エルブシタビンおよび類似薬剤等）；非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤（ネビラピン、デラビルジン、エファビレンツ、ロビリド、イムノカル、オルチプラズ、カプラビリン、ＴＭＣ−２７８、ＴＭＣ−１２５、エトラビリンおよび類似薬剤等）（イムノカル、オルチプラズなどの耐酸化活性を有する薬剤を含む）；侵入阻害剤（エンフビルチド（Ｔ−２０）、Ｔ−１２４９、ＰＲＯ−５４２、ＰＲＯ−１４０、ＴＮＸ−３５５、ＢＭＳ−８０６、５−ヘリックスおよび類似薬剤等）；インテグラーゼ阻害剤（Ｌ−８７０、１８０および類似薬剤等）；出芽阻害剤（ＰＡ−３４４およびＰＡ−４５７、および類似薬剤等）；ケモカイン受容体阻害剤（ビクリビロク（ＳｃｈＣ）、Ｓｃｈ−Ｄ、ＴＡＫ７７９、マラビロク（ＵＫ−４２７，８５７）、ＴＡＫ４４９に加えて、ＷＯ０２／７４７６９、ＷＯ２００４／０５４９７４、ＷＯ２００４／０５５０１２、ＷＯ２００４／０５５０１０、ＷＯ２００４／０５５０１６、ＷＯ２００４／０５５０１１およびＷＯ２００４／０５４５８１中で開示されたもの、ならびに類似薬剤等）；ノイラミニダーゼ阻害剤（ＣＳ−８９５８、ザナミビル、オセルタミビル、ペラミビルおよび類似薬剤等）；イオンチャネルブロッカー（アマンタジンまたはリマンタジンおよび類似薬剤等）；および干渉ＲＮＡおよびアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ−１４８０３および類似薬剤等）；決定されてない作用機序の抗ウイルス剤（例えばＷＯ２００５／１０５７６１、ＷＯ２００３／０８５３７５、ＷＯ２００６／１２２０１１中で開示されたもの、リバビリンおよび類似薬剤）。
【００９０】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、ウイルス感染の予防または治療、例えば免疫療法において有用であり得る１つまたは複数の他の薬剤（例えばインターフェロンまたは他のサイトカイン／ケモカイン、サイトカイン／ケモカイン受容体修飾物質、サイトカインアゴニストまたはアンタゴニストおよび類似薬剤）；ならびに治療用ワクチン、抗線維化剤、コルチコステロイドまたはＮＳＡＩＤ（非ステロイド性抗炎症剤）等の抗炎症剤および類似薬剤と組み合わせても使用することができる。
【００９１】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、アレルギー性疾患、炎症性疾患、自己免疫性疾患の予防または治療、例えば；抗原免疫療法（抗ヒスタミン、ステロイド、ＮＳＡＩＤ、気管支拡張剤（例えばβ２アゴニスト、アドレナリン作動性アゴニスト、抗コリン作動剤、テオフィリン）、メトトレキサート、ロイコトリエン修飾物質および類似薬剤）；モノクローナル抗体療法（抗ＩｇＥ、抗ＴＮＦ、抗ＩＬ−５、抗ＩＬ−６、抗ＩＬ−１２、抗ＩＬ−１および類似薬剤等）；受容体療法（例えばエンタネルセプトおよび類似薬剤）；抗原非特異的免疫療法（例えばインターフェロン、他のサイトカイン／ケモカイン、サイトカイン／ケモカイン受容体修飾物質、サイトカインアゴニストまたはアンタゴニスト、ＴＬＲアゴニストおよび類似薬剤）において有用であり得る１つまたは複数の他の薬剤と組み合わせて使用することができる。
【００９２】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、癌の予防または治療、例えば化学療法（アルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、抗代謝剤、抗分裂剤、キナーゼ阻害剤および類似薬剤等）；モノクローナル抗体療法（トラスツズマブ、ゲムツズマブおよび他の類似薬剤等）；およびホルモン療法（タモキシフェン、ゴセレリンおよび類似薬剤等）において有用であり得る１つまたは複数の他の薬剤と組み合わせて使用することができる。
【００９３】
本発明に記載の医薬組成物は、単独でも、または他の治療法上の分野（例えば胃腸疾患）における少なくとも１つの他の治療剤と組み合わせて使用することもできる。本発明に記載の組成物は遺伝子組み換え療法と組み合わせて使用することもできる。
【００９４】
本発明は、さらなる態様において、少なくとも１つの他の薬学上活性のある薬剤と共に、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを含む組合わせを含む。
【００９５】
上で参照された組合わせは医薬組成物の形態での使用に便利なように提供することができ、したがって、少なくとも１つの薬学上許容されるその希釈剤または担体と共に上で定義されるような組合わせを含む医薬組成物は本発明のさらなる態様を示す。
【００９６】
マレイン酸塩の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの治療有効量は複数の因子に依存するだろう。例えば、レシピエントの種、年齢および体重、治療を必要とする正確な状態およびその重症度、組成物の性質、ならびに投与経路は、すべて検討すべき因子である。治療有効量は、最終的に付き添いの医師の裁量によるべきである。それとは関係なく、衰弱しているヒトの治療のための、６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンのマレイン酸塩の効果的な量は、一般的には１日あたり０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇレシピエントの体重の範囲であるべきだ。通常は、効果的な量は、１日あたり０．００１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であるべきだ。したがって、７０ｋｇの成人にとって、１日あたりの実際の量の１つの例は通常は７〜７００ｍｇであろう。鼻腔内投与経路および吸入投与経路については、７０ｋｇの成人のための典型的な用量は１日あたり１マイクログラムから１ｍｇの範囲であるべきだ。この量は、１日あたり単一用量、または１日あたり幾つかのサブ用量（２、３、４、５、またはそれ以上等）で全体の用量が同じであるように与えることができる。類似の投薬量は本明細書において参照される他の状態の治療に適切であるべきだ。
【００９７】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは任意の適切な頻度（例えば１週間あたり１〜７回）でも投与することができる。正確な投薬レジメンは、治療指標、患者の年齢および状態、ならびに選ばれた特定の投与経路等の因子にもちろん依存するだろう。
【００９８】
医薬組成物は、単位用量あたりの所定の量の活性成分を含む単位用量形態で提供することができる。かかる単位は、非限定的例として、治療されている状態、投与経路ならびに患者の年齢、体重および状態に依存して、０．５ｍｇ〜１ｇの６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンのマレイン酸塩を含むことができる。好ましい単位投与量組成物は、活性成分の、用量またはサブ用量（本明細書において上で列挙されたように）、またはその適切な一部を含むものである。かかる医薬組成物は、製薬技術における任意の周知の方法によって調製することができる。
【００９９】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン、および１つまたは複数の薬学上許容される希釈剤または担体を含む医薬組成物がしたがってさらに提供される。任意で、医薬組成物は少なくとも１つの他の薬学上活性のある薬剤をさらに含むことができる。
【０１００】
１つまたは複数の薬学上許容される希釈剤または担体と共に、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを混合することを含む、かかる医薬組成物を調製する方法がさらに提供される。
【０１０１】
マレイン酸アニオン（例えば好適な溶媒中の例えばマレイン酸）のソースと６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを反応させて、マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを産生することを含む、６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンのマレイン酸塩を調製する方法がさらに提供される。一態様において、上記方法は、１：１の比のマレイン酸アニオン：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを産生する。
【０１０２】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、以下に記述される方法論によって調製することができる。
【０１０３】
略称
以下のリストは、本明細書において使用される特定の略称の定義を提供する。リストが網羅的ではないことは認識されるが、以下に本明細書で定義されないこれらの略称の意味は当業者に容易に明らかになるだろう。
【０１０４】
ＤＭＦ    Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ    ジメチルスルホキシド
ＨＰＬＣ    高速液体クロマトグラフィー
ＭＤＡＰ  ＨＰＬＣ    ２つの溶媒勾配を使用するＣ１８カラムでの逆相ＨＰＬＣおよびエレクトロスプレー質量分析法による画分の分析。
【０１０５】
ＳＰＥ    固相抽出
ｍｉｎ    分
ストリップする    減圧下で溶媒を除去する
ＴＦＡ    トリフルオロ酢酸
ｒｔ    室温
ｖｏｌ    体積
ＢＳＡ    Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド
ＣＰＭＥ    シクロペンチルメチルエーテル
ＴＢＭＥ    ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル
ＭｅＴＨＦ    ２−メチルテトラヒドロフラン
ＮＭＰ    Ｎ−メチルピロリジノン
ＤＣＭ    ジクロロメタン
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンおよびそのマレイン酸塩を作製する合成プロセスはスキーム１中に要約される。
【０１０６】
スキーム１
【化２】
0005922587.tif 000003
【０１０７】
ここで、ＲＡＺ＝
【化３】
0005922587.tif 000004
【０１０８】
ｎ＝２、ｍ＝５およびＸ＝Ｃｌ。
【０１０９】
スキーム１の各合成ステップのための典型的な反応条件は、以下に提供される。
【０１１０】
Ａ：  ジヒドロピラン／パラトルエンスルホン酸、例えば５０℃で３〜６時間。
【０１１１】
Ａ１：  ジヒドロピラン／パラトルエンスルホン酸、例えば５０℃で１時間、次いでアンモニア／イソプロパノール、例えば６０℃で４時間、次いで水を添加し周囲温度まで１２〜１８時間にわたり冷却する。
【０１１２】
Ａ２：  アセトニトリル中のＢＳＡ、還流、０℃に冷却、次いでアセトニトリル中のテトラヒドロピランアセテート、１０℃に暖め、次いで水性炭酸水素ナトリウム。
【０１１３】
Ｂ：  アンモニア／イソプロパノール、例えば５０℃で５時間、次いで周囲温度で１２〜１８時間、次いで５０℃で９時間。
【０１１４】
Ｃ：  Ｚ＝Ｏ、ＲＡ＝Ｃ１−６アルキル：ＲＡＯＮａ／ブタノール／ジメトキシエタン、例えば９３〜１１０℃で１２〜１８時間。
【０１１５】
Ｃ１：  ジクロロメタン中のＮ−ブロモスクシンイミド、例えば０〜５℃で３０分間、次いで周囲温度で０．５〜１時間、次いで例えばナトリウムメトキシド／メタノール、窒素下／６０−７０℃／１２〜１８時間、次いでＴＦＡ／メタノール例えば周囲温度で１８〜６５時間。
【０１１６】
Ｄ：  ジクロロメタン中のＮ−ブロモスクシンイミド、例えば０〜５℃で３０分間、次いで周囲温度で３６〜４８時間、またはクロロホルム中のＮ−ブロモスクシンイミド、５℃未満で４〜６時間。
【０１１７】
Ｅ：  ナトリウムメトキシド／メタノール、例えば４〜６時間の還流。
【０１１８】
Ｆ：  ＴＦＡ／メタノール、例えば周囲温度で１８〜６５時間、またはＴＦＡ／メタノール、例えば周囲温度で７０〜７４時間。
【０１１９】
Ｇ：  炭酸カリウム／ＤＭＦ、次いで５０℃で１〜１．５時間、次いで（ＶＩ）を添加、４０分間撹拌、次いで（ＩＶ）／トリエチルアミンを添加、次いで周囲温度で１８時間。
【０１２０】
Ｇ１：  炭酸カリウム／ＤＭＦ、次いで窒素下５０℃で３０分間、次いで周囲温度、（ＶＩ）を添加、２０時間撹拌。
【０１２１】
Ｇ２：  Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルエチルアミン含有ＤＭＦの溶液、次いで５０℃で４８時間、次いでより多くの（ＩＶ）を添加、次いでさらに５０℃で４８時間。
【０１２２】
Ｈ：  塩化水素／メタノール、次いで周囲温度で１８時間。
【０１２３】
式（ＩＶ）、（ＶＩ）、（ＸＩＡ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）および（ＸＶ）の化合物は、文献で公知あるかもしくは例えばＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社（ＵＫ）から商業的に入手可能であるか、または公知の手順（例えばＪ．  Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第６版（２００７）、ＷｉｌｅｙＢｌａｃｋｗｅｌｌ社、またはＣｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｔｒｏｓｔ  Ｂ．Ｍ．およびＦｌｅｍｉｎｇ  Ｉ．（編）、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ社、１９９１年）等の合成方法論の標準参考テキストで開示されたものであり、各々はかかる手順に関連して参照として本明細書に援用される）との類似性によって調製することができる。
【０１２４】
マレイン酸塩の形態の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンは、好適な溶媒（例えばイソプロピルアルコール）中のマレイン酸アニオンのソースと、６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンを反応させることによっても、より一般的に調製することができる。マレイン酸アニオンの好適なソースはマレイン酸またはマレイン酸塩である。
【０１２５】
本明細書において記述された合成経路で用いることができる他の保護基およびそれらの除去のための手段の例は、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（第４版）、Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ社、２００６年（かかる手順に関連して参照として本明細書に援用される）中で見出すことができる。
【０１２６】
上文に記述された反応またはプロセスのいずれかのための、加熱および冷却の従来の方法、例えば、温度調節オイルバスまたは温度調節ホットブロック、および氷／塩バスまたはドライアイス／アセトンバスをそれぞれ、用いることができる。単離の従来の方法、例えば水性溶媒または非水性溶媒からの、またはそれらの中への抽出を使用することができる。無水硫酸マグネシウムもしくは無水硫酸ナトリウムと共に振盪すること、または疎水性フリットを通過させること等の、有機溶媒、溶液または抽出物を乾燥する従来の方法を用いることができる。精製の従来の方法、例えば結晶およびクロマトグラフィー（例えばシリカクロマトグラフィーまたは逆相クロマトグラフィー）を、必要に応じて使用することができる。結晶は、酢酸エチル、メタノール、エタノールまたはブタノール等の従来の溶媒、またはその水性混合物を使用して行うことができる。反応モニタリング技法、例えば薄層クロマトグラフィーおよびＬＣ−ＭＳによって具体的な反応時間、温度が典型的には決定できることが認識される。
【０１２７】
必要に応じて、６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの個々の異性体は、偏左右異性誘導体の分別結晶またはキラル高速液体クロマトグラフィー（キラルＨＰＬＣ）等の従来の手順を使用して、個々の異性体として調製することができる。
【０１２８】
化合物の絶対立体化学はＸ線結晶解析等の従来の方法を使用して決定することができる。
【０１２９】
全般的な実験の詳細
化合物は、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ社（Ｔｏｒｏｎｔｏ，  Ｏｎｔａｒｉｏ，  Ｍ５Ｈ２Ｌ３，  Ｃａｎａｄａ）からのＡＣＤ／Ｎａｍｅ  ＰＲＯ  ６．０２化学命名ソフトウェアを使用して命名した。
【０１３０】
本明細書において参照されるＬＣＭＳシステムＢ〜Ｄの実験の詳細は、以下の通りである。
【０１３１】
システムＢ
カラム：  ３０ｍｍ×４．６ｍｍ、ＩＤ、３．５μｍ  Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８カラム
流速：  ３ｍＬ／分
温度：  ３０℃
ＵＶ検出範囲：  ２１０〜３５０ｎｍ
質量スペクトル：代替スキャンの正および負のモードのエレクトロスプレーイオン化を使用して、質量分析計で記録した
溶媒：  Ａ：水中の０．１％ｖ／ｖのギ酸溶液
Ｂ：アセトニトリル中の０．１％ｖ／ｖのギ酸溶液
勾配：時間（分） Ａ％ Ｂ％
０      ９７  ３
０．１  ９７  ３
４．２  ０    １００
４．８  ０    １００
４．９  ９７  ３
５．０  ９７  ３
システムＣ
カラム：  ５０ｍｍ×２．１ｍｍ、ＩＤ、１．７μｍ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８
流速：  １ｍＬ／分
温度：  ４０℃
ＵＶ検出範囲：  ２１０〜３５０ｎｍ
質量スペクトル：  代替スキャンの正および負のモードのエレクトロスプレーイオン化を使用して、質量分析計で記録した
溶媒：  Ａ：アンモニア溶液によりｐＨ１０に調節した水中の１０ｍＭ重炭酸アンモニウム
Ｂ：アセトニトリル
勾配：時間（分） Ａ％ Ｂ％
０      ９９  １
１．５  ３    ９７
１．９  ３    ９７
２．０  ０    １００
システムＤ
カラム：  ５０ｍｍ×４．６ｍｍ、ＩＤ、３．５μｍ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム
流速：  ３ｍＬ／分
温度：  ３０℃
ＵＶ検出範囲：  ２１０〜３５０ｎｍ
質量スペクトル：  代替スキャンの正および負のモードのエレクトロスプレーイオン化を使用して、質量分析計で記録した。
【０１３２】
溶媒：  Ａ：アンモニア溶液によりｐＨ１０に調節した水中の１０ｍＭ重炭酸アンモニウム
Ｂ：アセトニトリル
勾配：時間（分） Ａ％ Ｂ％
０      ９９  １
０．１  ９９  １
４．０  ３    ９７
５．０  ３    ９７
クロマトグラフィー精製は、典型的にはプレパックシリカゲルカートリッジを使用して行った。Ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ  ＩＩは、Ａｒｇｏｎａｕｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社から入手可能な自動化マルチユーザーフラッシュクロマトグラフィーシステムであり、使い捨ての順相固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジ（２ｇ〜１００ｇ）を利用する。これには、勾配法の実行を可能にする四元オンライン溶媒混合が提供されている。サンプルを、多機能オープンアクセスソフトウェア（溶媒、流速、勾配プロファイルおよび採取条件を管理する）を使用して待機させる。システムは、Ｋｎａｕｅｒ社波長変更可能ＵＶ検出器、ならびに自動化ピークカッティング、採取およびトラッキングを可能にする２個のＧｉｌｓｏｎ社ＦＣ２０４フラクションコレクターを装備する。
【０１３３】
窒素気流を使用する溶媒除去を、Ｒａｄｌｅｙｓ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社（Ｓａｆｆｒｏｎ  Ｗａｌｄｅｎ、Ｅｓｓｅｘ、ＣＢ１１  ３ＡＺ、ＵＫ）から入手可能なＧｒｅｅｎＨｏｕｓｅ  Ｂｌｏｗｄｏｗｎシステムで３０〜４０℃で行った。
【０１３４】
１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、すべて４００ＭＨｚで作動する、Ｂｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ  ４００またはＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＤＲＸまたはＶａｒｉａｎ  Ｕｎｉｔｙ  ４００分光計のいずれかで、ＣＤＣｌ３またはＤＭＳＯ−ｄ６のいずれかにおいて記録した。使用される内部標準は、ＣＤＣｌ３について７．２５ｐｐｍまたはＤＭＳＯ−ｄ６について２．５０ｐｐｍで、テトラメチルシランまたは残存するプロトン化された溶媒のいずれかであった。
【０１３５】
質量分析による自動分取ＨＰＬＣは、以下で与えられた条件下で行った。ＵＶ検出は２１０ｎｍ〜３５０ｎｍの波長からの平均化されたシグナルであり、質量スペクトルは代替スキャンの正および負のモードのエレクトロスプレーイオン化を使用して質量分析計で記録した。
【０１３６】
方法Ａ
方法Ａは、ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム（典型的には、１５０ｍｍ×１９ｍｍ、内径５μｍのパッキングした直径）で周囲温度で行った。用いられた溶媒は以下の通りであった。
【０１３７】
Ａ＝アンモニア溶液によりｐＨ１０に調整した１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液。
【０１３８】
Ｂ＝アセトニトリル。
【０１３９】
中間体
中間体１：２，６−ジクロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン
【化４】
0005922587.tif 000005
【０１４０】
２，６−ジクロロプリン（例えばＡｌｄｒｉｃｈ社から商業的に入手可能）（２５．０ｇ）に、酢酸エチル（２６０ｍＬ）、続いてｐ−トルエンスルホン酸（０．２５３ｇ）を添加した。混合物を５０℃に加熱し、次いで３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（例えばＡｌｄｒｉｃｈ社から商業的に入手可能）（１６．８ｇ）を添加した。次いで反応混合物を５０℃で４時間加熱した。反応混合物を真空下で蒸発させて黄色固体として表題化合物を得た（３６．９ｇ）。
【０１４１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：８．３５（１Ｈ，ｓ），５．７７（１Ｈ，ｄｄ），４．２０（１Ｈ，ｍ），３．７９（１Ｈ，ｍ），２．２０−１．６５（６Ｈ，ｍ）．
中間体１Ａ
【化５】
0005922587.tif 000006
【０１４２】
酢酸（１．２Ｌ、１当量）およびピリジニウムｐ−トルエンスルホネート（５３０ｇ、０．１当量）を、ジクロロメタン（６Ｌ）中に溶解した。溶液を０℃に冷却した。ジクロロメタン（２．５Ｌ）中のジヒドロピラン（２．５２Ｌ、１．３５当量）の溶液を、５℃未満の温度の維持しながら少なくとも１５分間かけて慎重にチャージした。一旦添加が完了したならば、溶液を２０℃まで暖め、一晩撹拌した。水（５．０Ｌ）をチャージし、生じた両相を強く撹拌してから、水層を除去した。次いで有機相を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（５．０Ｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムの上で乾燥した。５０℃で２０ｍｂａｒまで圧力を低下させてＤＣＭおよび過剰なジヒドロピランの除去を確実にしながら、乾燥した有機相を回転蒸発装置で濃縮した。無色〜わずかに黄色の液体として産物を得た（２．６１ｋｇ、９５％理論収率）。
【０１４３】
中間体２：２−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化６】
0005922587.tif 000007
【０１４４】
２，６−ジクロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン（３６．９ｇ）（例えば、中間体１のために調製された）を、イソプロパノール（２５０ｍＬ）中の２Ｍアンモニアと共に５０℃で５時間加熱した。周囲温度で一晩に放置した後、イソプロパノール（１００ｍＬ）中の２Ｍアンモニアをさらに添加して、生じたケーキを破壊し、反応が完了するまで反応混合物をさらに９時間加熱した。反応混合物に水（７０ｍＬ）を添加し、濾過して黄色固体が残った。固体をイソプロピルアルコール：水（５：１（ｖ／ｖ）、６０ｍＬ）で洗浄し、次いで吸引下で空気乾燥して第１の産物を得た。濾液を一晩放置して沈殿を単離した後に再濾過し、両固体を真空下で乾燥した。第１の産物は純粋であり、第２の産物物質は非常にマイナーな不純物（第１の産物において見られない分離した広範囲のシグナル３．５ｐｐｍ）を示したが、他の点では同一であった。固体第１の産物（２８．４ｇ）、固体第２の産物（３．４２ｇ）。
【０１４５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：８．０１（１Ｈ，ｓ），５．９８（２Ｈ，ｂｒｏａｄｓ），５．７０（１Ｈ，ｄｄ），４．１６（１Ｈ，ｍ），３．７８（１Ｈ，ｍ），２．１５−１．６０（６Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ  ｍ）．
中間体２（代替方法）：２−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化７】
0005922587.tif 000008
【０１４６】
無水酢酸エチル（２００ｍＬ）中の２，６−ジクロロプリン（例えばＡｌｄｒｉｃｈ社から商業的に入手可能）（２５ｇ）の溶液に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（例えばＡｌｄｒｉｃｈ社から商業的に入手可能）（２３５ｍｇ）を添加した。反応を５０℃に加熱し、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（例えばＡｌｄｒｉｃｈ社から商業的に入手可能）（１８．１ｍｌ）を一気に添加した。反応を５０℃で１時間撹拌したままにし、溶媒を減圧下で除去した。これにより黄色固体を得た。イソプロパノール（４６０ｍＬ）中の２．０Ｍアンモニア中のこの固体（〜３６ｇ）の懸濁物を窒素下で付属のコンデンサーにより６０℃で４時間加熱した。反応物を水（５０ｍＬ）の中に注ぎ、一晩放置して冷却した。沈殿を濾過し、回転蒸発装置（６０℃）で３０分間乾燥して、灰白色固体として表題化合物を３１ｇを得た（９３％、２ステップ）。
【０１４７】
（Ｃ１０Ｈ１２ＣｌＮ５Ｏ）＋についてのＭＳ計算値＝２５４，２５６
ＭＳ実測値（エレクトロスプレー）：（Ｍ）＋＝２５４，２５６（３：１）
１Ｈ  ＮＭＲ（（ＣＤ３）２ＳＯ）：δ８．４３（１Ｈ，ｓ），７．８２（２Ｈ，ｓ），５．５５（１Ｈ，ｄｄ），４．００（１Ｈ，ｍ），３．６９（１Ｈ，ｍ），２．２１（１Ｈ，ｍ），１．９５（２Ｈ，ｍ），１．７４（１Ｈ，ｍ），１．５６（２Ｈ，ｍ）．
中間体３：２−フルオロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化８】
0005922587.tif 000009
【０１４８】
１０Ｌの制御可能ラボリアクター中で、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド（９７５ｍＬ、３．９８８ｍｏｌ）を、無水アセトニトリル（４Ｌ）中の２−フルオロ−１Ｈ−プリン−６−アミン（例えばＡｌｌｉｅｄＳｉｇｎａｌ社から商業的に入手可能）（２００ｇ、１．３０６ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁物に添加し、もたらされた混合物を加熱還流し、２時間その温度で維持した。次いでサーキュレーターを０℃に再プログラムし、反応混合物を冷却した。次いで、無水アセトニトリル（５００ｍＬ）中のテトラヒドロピラニルアセタート（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２００６，４７（２７），４７４１中に記載されており、中間体１Ａ中にも記載される調製）（２８２ｇ、１．９５９ｍｏｌ）の溶液を、滴下漏斗を介して徐々に添加し、続いてトリメチルシリルトリフルオロメタンスルフォナートを滴下漏斗を介して１滴ずつ添加した。有意な発熱は観察されなかった。サーキュレーター温度を再び１０℃に調節し、撹拌をさらに１時間維持した。次いで混合物に１Ｍ炭酸ナトリウム（４Ｌ）を添加してクエンチした。固体沈殿が観察され、ｐＨが塩基性であることをチェックした。追加の水を懸濁物（１Ｌ）に添加し、放置し、層を有意な固体無機物を含む水層と分離した。大部分の水溶性固体および無機固体が分離された。有機層はまだ有意に固体を含み、撹拌しながら０℃まで冷却して沈殿を促進した。固体を濾過によって回収し、パッドを水で非常によく洗浄し、次いで真空下で４０℃で一晩乾燥して、クリーム色固体として表題化合物を得た（１５２．８ｇ）。
【０１４９】
ＬＣＭＳ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｄ）：ｔＲＥＴ＝１．７１ｍｉｎ；ＭＨ＋＝２３８
中間体４：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化９】
0005922587.tif 000010
【０１５０】
方法Ａ
ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（４８．５ｇ、５０５ｍｍｏｌ）を、（Ｓ）−２−ペンタノール（例えばＪｕｌｉｃｈ  Ｃｈｉｒａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ社から商業的に入手可能）（１８５ｍｌ）に室温で少量ずつ添加し、均質になるまで撹拌した（注：反応は発熱性である）。２−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（３２ｇ、１２６ｍｍｏｌ）（例えば、中間体２のために調製された）を添加し、反応混合物を７０℃で７２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、酢酸エチル（５００ｍＬ）と水（５００ｍＬ）との間で分配した。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残留物をエーテルで粉砕し、固体物質を濾過した。沈殿をエーテルで再び洗浄し、濾液を合わせて蒸発させた。粗製物質（約３０ｇ）をＤＭＳＯ：メタノール（１：１）中で溶解し、８カラム体積にわたるアセトニトリル（＋０．１％ＴＦＡ）−水（＋０．１％ＴＦＡ）の２５〜６５％の勾配を使用する逆相（Ｃ１８）カラム（３３０ｇ）でのクロマトグラフィーによって精製し、画分を飽和炭酸ナトリウム水溶液で直ちに中和した。適切な画分を合わせ、ジクロロメタンと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液との間で分配した。有機相を疎水性フリットを介する通過によって乾燥し、濾過し、蒸発させて、薄いクリーム色泡として表題化合物を得た（１４．９７ｇ）。
【０１５１】
ＬＣＭＳ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｂ）：ｔＲＥＴ＝２．２１ｍｉｎ；ＭＨ＋  ３０６
方法Ｂ
ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２０６ｇ、２．１４４ｍｏｌ）を、２Ｌの丸底フラスコ中の（Ｓ）−２−ペンタノール（例えばＪｕｌｉｃｈ  Ｃｈｉｒａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ社から商業的に入手可能）（７２０ｍＬ、６．５８ｍｏｌ）に添加した。ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドがすべて溶解するまで、混合物を５０℃で撹拌した。次いで２−フルオロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを５分間にわたり小分けにして添加した。３時間後に、ＬＣＭＳ分析により出発物質の消費が完了したことが示され、混合物を氷／水（３Ｌ）の中に注ぎ、次いでメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで抽出した。これは乳化物形成をもたらし、混合物をセライトを通して濾過し、有機相を分離した。次いで水層を固体ＮａＣｌで処理し、次いでメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで再抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムの上で乾燥し、濾過し、次いで蒸発させて、薄茶色ゴムとして表題化合物を得た（１５８．５９ｇ）。
【０１５２】
ＬＣＭＳ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．６５ｍｉｎ；ＭＨ＋  ３０６
中間体５：８−ブロモ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化１０】
0005922587.tif 000011
【０１５３】
Ｎ−ブロモスクシンイミド（１２．１６ｇ、６８．３ｍｍｏｌ）を、クロロホルム（８０ｍＬ）中の２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（１４．９ｇ、４８．８ｍｍｏｌ）（例えば、中間体４のために調製された）の撹拌溶液に、窒素雰囲気下で５℃未満で５分間にわたり少量ずつ添加した。反応混合物を５℃未満で５時間撹拌し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム溶液（８０ｍＬ）次いで水（８０ｍＬ）で洗浄した。泡をジクロロメタン（５０ｍＬ）中に溶解し、水（５０ｍＬ）次いでブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた水相をジクロロメタン（５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を疎水性フリットを通して乾燥し、溶媒を真空下で除去してオレンジ色泡として表題化合物を得た（１８．５ｇ）。
【０１５４】
ＬＣＭＳ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｄ）：ｔＲＥＴ＝３．０６ｍｉｎ；ＭＨ＋  ３８４／３８６
中間体５（代替方法）：８−ブロモ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化１１】
0005922587.tif 000012
【０１５５】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（１０５０ｇ）をＤＣＭ（１０．５Ｌ）中に溶解し、黄色／オレンジ色の溶液を得て、それを０℃に冷却した。Ｎ−ブロモスクシンイミド（９２２ｇ、１．５当量）を３等分して２０分間隔でチャージし、生じた反応混合物を０〜５℃で４時間撹拌した。次いで反応を、５．０Ｌの水中の５００ｇのチオ硫酸ナトリウム五水和物の溶液の添加によってクエンチした。生じた両相を２０℃で完全に混合し、次いで相を分離した。有機相を５．０Ｌの水中の５００ｇのチオ硫酸ナトリウム五水和物の溶液、次いで５．０Ｌの水中の５００ｇのリン酸２カリウム、および最後に５．０Ｌの水で再び洗浄した。有機相を硫酸マグネシウム（８２２ｇ）の上で乾燥し、発泡して続行できなくなるまで回転蒸発装置で蒸発させた。次いで、十分なＤＣＭが除去されるまで（ＮＭＲによって確認されるように）、メタノールを繰り返し添加および除去することによって、混合物の溶媒をメタノールへと交換した。産物は同伴溶媒を含む赤色／茶色のゴムとして得られた（溶媒について補正して１．２８ｋｇ、９６％理論収率）。
【０１５６】
中間体６：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化１２】
0005922587.tif 000013
【０１５７】
８−ブロモ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを無水メタノール（７０ｍＬ）中に溶解し、メタノール（８ｍＬ）中のナトリウムメトキシド（２５％）の溶液を窒素雰囲気下で１滴ずつ添加した。溶液を窒素の雰囲気下で９０℃で４時間加熱還流した。メタノール中のナトリウムメトキシド（２５％の溶液、３ｍＬ）を追加で添加し、反応物を６０℃でさらに１６時間撹拌した。メタノール中のナトリウムメトキシドの追加の小分け（２５％の溶液、５ｍＬ）を添加し、反応を９０℃でさらに７時間撹拌した。溶媒を回転蒸発装置で除去し、粗製産物を酢酸エチル（７５ｍＬ）と飽和塩化アンモニウム溶液（７５ｍＬ）との間で分配した。有機層をブライン（７５ｍＬ）で洗浄した。溶媒を回転蒸発装置で除去して、薄いオレンジ色の泡として表題化合物を産出した（６ｇ）。
【０１５８】
ＬＣＭＳ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｃ）：ｔＲＥＴ＝１．１４ｍｉｎ；ＭＨ＋  ３３６，３３７
中間体７：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン、トリフルオロ酢酸塩
【化１３】
0005922587.tif 000014
【０１５９】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（６ｇ、１７．８９ｍｍｏｌ）（例えば、中間体６のために調製された）をメタノール（５０ｍＬ）中に溶解した。トリフルオロ酢酸（２０．６７ｍＬ、２６８ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加し、混合物を窒素雰囲気下で２０℃で７２時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、もたらされた固体を酢酸エチルで洗浄し、濾過した。濾液をストリップし、残留物を酢酸エチルで洗浄した。合わせた固形残留物を真空オーブン中で２時間乾燥して、灰白色固体として表題化合物を得た（５．３ｇ）。
【０１６０】
ＬＣＭＳ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．７６ｍｉｎ；ＭＨ＋  ２５２，２５３
中間体７（代替方法）：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン、トリフルオロ酢酸塩
８−ブロモ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（１．２６ｋｇ、残留溶媒について補正した）を無水メチルテトラヒドロフラン（ＭｅＴＨＦ）（１１．４Ｌ）中で溶解し、メタノール（２．６５Ｌ、３．５当量）中の２５％ナトリウムメトキシドを添加した。生じた反応混合物を６５±５℃まで３時間加熱した。完了した反応を室温まで冷却し、２０％ｗ／ｖ塩化アンモニウム水溶液（２×６．３Ｌ）およびブライン（６．３Ｌ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４（１．８ｋｇ）で乾燥し、濾過し、ＭｅＴＨＦ（６．３Ｌ）で洗浄した。合わせた有機相を真空蒸留によって６．３Ｌまで蒸発させた。ＭｅＯＨ（２．５Ｌ）およびＴＦＡ（１．２６Ｌ、５当量）を添加し、混合物を６０℃まで１．５時間加熱した。シクロペンチルメチルエーテル（ＣＰＭＥ）（６．３Ｌ）を添加し、混合物を真空蒸留によって６．３Ｌまで減少させた。固体が沈殿した場合、ＣＰＭＥ（６．３Ｌ）を再び添加し、反応物をさらに６．３Ｌまで濃縮した。スラリーを１０℃まで冷却し、次いで３０分間エージングさせた。産物を濾過し、ＢＭＥ（２×３．８Ｌ）で洗浄し、真空下で４０℃で乾燥して、白色固体を得た（８８６ｇ、７４％理論収率）。
【０１６１】
中間体８：９−（５−クロロペンチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化１４】
0005922587.tif 000015
【０１６２】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン、トリフルオロ酢酸塩（６００ｍｇ、１．６４２ｍｍｏｌ）（例えば中間体７のために調製された）および炭酸カリウム（５６７ｍｇ、４．１１ｍｍｏｌ）を、窒素下で６０℃でＤＭＦ（１０ｍＬ）中で１時間撹拌した。１−ブロモ−５−クロロペンタン（例えばＡｌｄｒｉｃｈ社から商業的に入手可能）（０．２１６ｍＬ、１．６４２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．３４３ｍＬ、２．４６４ｍｍｏｌ）を添加したときに、反応物を室温まで冷却し、混合物を窒素下で２０℃で１６時間撹拌した。次いで混合物を水（１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（２×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を蒸発させ、残留物をジクロロメタン中で溶解し、４０分にわたる０〜１００％のシクロヘキサン中の酢酸エチルの勾配でＦｌａｓｈｍａｓｔｅｒ  ＩＩ（７０ｇアミノプロピルカートリッジ）を使用するカラムクロマトグラフイーによって精製した。適切な画分を合わせ、真空下で蒸発させて、黄色ゴムとして表題化合物を得た（４３０ｍｇ）。
【０１６３】
ＬＣＭＳ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｄ）：ｔＲＥＴ＝４．１５ｍｉｎ；ＭＨ＋＝３５６，３５８
中間体８（硫酸塩としての代替方法）：９−（５−クロロペンチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン、硫酸塩
水酸化ナトリウム（２Ｍ、２．５２Ｌ、２．３当量）を、ＮＭＰ（３．０８Ｌ）中の２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン、トリフルオロ酢酸塩（８００ｇ、１．０当量）の溶液に添加した。１−ブロモ−５−クロロペンタン（４３２ｍＬ、１．５当量）を添加した。反応混合物を５０℃まで６時間加熱した。反応混合物を２０〜２５℃まで冷却した。酢酸エチル（８．０Ｌ）、続いて水（１．６Ｌ）を添加した。１０分間の撹拌後に、相を分離し、次いで有機相を水（１．６Ｌ）で洗浄した。酢酸エチル相を酢酸エチル（４．０Ｌ）でさらに希釈し、５０℃に加熱した。硫酸（１１７ｍＬ、１当量）を１滴ずつ添加した。反応混合物を１．５時間にわたって１０℃まで冷却し、３０分間エージングさせた。産物を濾過によって白色固体として単離し、フィルター上で酢酸エチル（２．４Ｌ）で洗浄し、減圧下で４０℃で乾燥した（５７０ｇ、５７％理論収率）。
【０１６４】
中間体９：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化１５】
0005922587.tif 000016
【０１６５】
９−（５−クロロペンチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン（例えば中間体８のために調製された）（８０ｍｇ、０．２２５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．０３１ｍＬ、０．２２５ｍｍｏｌ）およびピペリジン（０．０４５ｍＬ、０．４５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（３ｍＬ）中に懸濁し、混合物を７０℃まで１８時間加熱した。溶媒を除去し、残留物をジクロロメタン（４ｍＬ）と飽和炭酸水素ナトリウム（４ｍＬ）との間で分配した。水相をさらにジクロロメタンで再抽出し、合わせた有機抽出物を濃縮し、残留物を１：１メタノール：ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中に溶解し、ＭＤＡＰによって精製した（方法Ａ）。産物含有画分を合わせ、窒素気流下で蒸発させて、表題化合物を得た（４７．２ｍｇ）。
【０１６６】
ＬＣＭＳ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｄ）：ｔＲＥＴ＝３．１１ｍｉｎ；ＭＨ＋＝４０５
【実施例】
【０１６７】
参考実施例１：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化１６】
0005922587.tif 000017
【０１６８】
ジオキサン（４Ｍ、０．７１ｍＬ）中の塩化水素の溶液を、メタノール（３ｍＬ）中の２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−９Ｈ−プリン−６−アミン（例えば中間体９のために調製された）（０．０４６ｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。生じた混合物を室温で一晩放置し、次いで窒素下で送風した。残留物をメタノール中に溶解し、２ｇのアミノプロピルＳＰＥカートリッジ（メタノールで前調整した）上にロードし、メタノールで溶出し、生じた溶液を窒素下で送風して、黄色固体として表題化合物を得た（４０．９７ｍｇ）。
【０１６９】
ＬＣＭＳ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．７０ｍｉｎ；ＭＨ＋＝３９１
同様に調製したサンプル（１．７ｇ）を酢酸エチル（約５０ｍＬ）から再結晶した。結晶を回収し、氷冷酢酸エチル（１５ｍＬ）で洗浄し、真空下で５０℃で３時間乾燥し、クリーム色結晶性固体として表題化合物を得た（１．３３ｇ）。
【０１７０】
融点開始（ＤＳＣ）：２０７．４℃（図２を参照されたい）。
【０１７１】
ＸＲＰＤ：（図１および表１を参照されたい）。
【０１７２】
参考実施例１：（代替方法）：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
９−（５−クロロペンチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン、硫酸塩（２５４ｇ、１．０当量）を、ＤＭＳＯ（１．２７Ｌ）およびピペリジン（２８０ｍＬ、５当量）中に溶解した。反応混合物を７０±３℃まで１５．５時間加熱した。反応混合物を２０±３℃まで冷却した。トルエン（２．５Ｌ）、続いて水（１．２５Ｌ）を添加した。１０分間の撹拌後に、相を分離し、上部トルエン相を水（０．５Ｌ）で洗浄した。水（１．５Ｌ）中の塩酸溶液（２．２４ｍｏｌ）を添加した。混合物を１０分間撹拌し、次いで分離させて、下の（水溶性）相を保存した。水溶液を５０±３℃まで１７時間加熱し、次いで２０±３℃まで冷却した。溶液がｐＨ１０〜１１になるまで、水酸化ナトリウム水溶液（２Ｍ、約８４０ｍＬ）を１滴ずつ添加した。もたらされた懸濁物を１０±３℃まで冷却し、さらに３０分間エージングさせ、次いで濾過した。ケーキを水（７．６Ｌ）で洗浄し、産物を一定の重量まで窒素ブリードにより６０℃で減圧下で乾燥した（２０７ｇ、９５％理論収率）。
【０１７３】
多形
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）および示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）を、以下の方法に従って、６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンに対して行った。
【０１７４】
ＸＲＰＤ
ＸＲＰＤデータは、Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ検出器を装備したＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  Ｐｒｏ粉末回折計で取得した。取得状態は以下のとおりであった。放射線：Ｃｕ  Ｋα、発生装置電圧：４０ｋＶ、発生装置電流：４５ｍＡ、開始角度：２．０°２θ、終了角度：４０．０°２θ、ステップサイズ：０．０１６７°２θ。１ステップあたりの時間は３１．７５０秒であった。数ミリグラムのサンプルをＳｉウェーハ（ゼロバックグラウンド）プレート上にマウントし、粉末の薄い層にすることによって、サンプルを調製した。
【０１７５】
特徴的なピーク位置および計算されたｄ−間隔を表１中に要約する。これらはＨｉｇｈｓｃｏｒｅソフトウェアを使用して、生データから計算された。ピーク位置における実験誤差は約±０．１°２θである。相対的なピーク強度は好ましい配向に起因して変動するだろう。
【０１７６】
表１
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの固体状態１型について特徴的なＸＲＰＤピーク位置
【表１】
0005922587.tif 000018
【０１７７】
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの代表的なＸＲＰＤディフラクトグラムを図１中に示す。
【０１７８】
ＤＳＣ
ＤＳＣサーモグラムをＴＡ装置熱量計を使用して得た。サンプルをアルミニウムパンの中に計量し、パンの蓋を上部に置き、パンを密封しないように軽く圧着した。実験は１０℃／分の加熱速度を使用して行った。
【０１７９】
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンの代表的なＤＳＣサーモグラムを図２中に示す。
【０１８０】
実施例２：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン、マレイン酸塩
【化１７】
0005922587.tif 000019
【０１８１】
調製例１
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン（例えば参考実施例１のために調製された）（０．３８４ｇ、０．９８ｍｍｏｌ）をイソプロピルアルコール（４．６ｍＬ、１２容積）中に溶解し、４０℃まで加熱した。マレイン酸（０．１１４ｇ、０．９８ｍｍｏｌ）を添加した。清澄な溶液を得た。室温まで冷却する間に沈殿が生じた。スラリーを濾過し、イソプロピルアルコール（５ｍＬ）で洗浄し、一定の重量まで減圧下で４０℃で乾燥した。６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン、マレイン酸塩（０．３０５ｇ、６１％理論収率）を白色固体として得た。
【０１８２】
１Ｈ  ＮＭＲにより、マレイン酸：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オンが１：１比であることを確認する。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ，９．８５（１Ｈ，ｓ，（ＣＨ２）３ＮＨＣＯ），８．８５（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ＋），６．３９（２Ｈ，ｓ，ＮＨ２），６．０２（２Ｈ，ｓ，ＨＯ２Ｃ（ＣＨ）２），５．００（１Ｈ，ｍ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，ＣＨ３ＣＨ），３．６８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８，ＨｚＮＣＨ２），３．４０（２Ｈ，ｍ，ＮＣＨ２），２．９８（２Ｈ，ｍ，Ｊ＝８．１ＨｚＮＣＨ２），２．８２（２Ｈ，ｂｒｓ，ＮＣＨ２），１．８５−１．２４（１６Ｈ，ｍ，８×ＣＨ２），１．２１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，ＣＨＣＨ３），０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，ＣＨ２ＣＨ３），２．５（溶媒（ＤＭＳＯ））．
調製例２
イソプロピルアルコール（１４．６ｍＬ、１０容積）中の６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン（例えば参考実施例１のために調製された）（１．４６ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）の溶液を清澄化し（ＢｏｎｄＥｌｕｔカートリッジを介して室温で濾過した）、次いで約５０℃まで加熱した。イソプロピルアルコール（２．９ｍＬ、２容積）中のマレイン酸（０．４３４ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。次いでもたらされた溶液を種形成させ、４５℃まで冷却した。さらなる種を添加した。もたらされたスラリーを室温まで冷却し、一晩（約１６時間）維持し、次いで氷／ウォーターバス中で３０分間冷却した。スラリーを濾過し、イソプロピルアルコール（４．５ｍＬ、３容積および次いで３ｍＬ、２容積）で洗浄した。産物を一定の重量まで減圧下で４０℃で乾燥して、６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン、マレイン酸塩（１．３０５ｇ、６９％理論収率）を得た。
【０１８３】
ＸＲＰＤによる分析（図３）から、このサンプルは結晶質であることが示された。
【０１８４】
生物学的データ
参考実施例１の化合物を、以下のアッセイまたは類似のアッセイに従って、インビトロ生物学的活性について試験した。
【０１８５】
凍結保存されたヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を使用する、インターフェロン−αの誘導のためのアッセイ
化合物調製
参考実施例１の化合物をＤＭＳＯ中に溶解した。ＤＭＳＯにより連続的な２倍希釈を調製し、０．２５μｌを３８４ウェルの透明なＧｒｅｉｎｅｒ社ポリプロピレンプレートの中へ分注した。
【０１８６】
ＰＢＭＣの調製
最大２００ｍＬの血液サンプルを健康なヒトドナーから得た。２５ｍＬ体積の全血をＬｅｕｃｏｓｅｐチューブ中の１５ｍＬフィコール勾配上に重層し、１０００ｇで２０分間遠心分離した。血漿／ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ界面のバンドの細胞を慎重に取り出し、ＰＢＳで２回洗浄した（４００ｇで５分間遠心分離して採取した）。最終的なペレットを、凍結培地（９０％非動化血清、１０％ＤＭＳＯ）中で４×１０７細胞／ｍＬの細胞濃度に再懸濁した。次いで再懸濁した細胞を速度制御フリーザーを使用して凍結保存（凍結）し、最大４か月間−１４０℃で保存した。
【０１８７】
インキュベーションおよびインターフェロン−αについてのアッセイ
アッセイの直前に、凍結保存（凍結）したＰＢＭＣのバイアルを３７℃のウォーターバス中で迅速に解凍した。１：１０で希釈したトリパンブルー中の細胞を調製しカウントした。次いでＰＢＭＣを、増殖培地［１０％ウシ胎仔血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）、ペニシリン＋ストレプトアビジン（Ｇｉｂｃｏ社カタログ番号２５０３０−０２４、１：５０）、Ｌ−グルタミン２ｍＭ、および１０００単位／ｍＬ組換えヒトＩＦＮ−γ（Ｐｒｅｐｒｏｔｅｃｈ社カタログ番号３００−０２）を含むＲＰＭＩ  １６４０］中で、１×１０６細胞／ｍＬの密度に希釈し、０．２５μＬのＤＭＳＯ、または０．２５μＬのＤＭＳＯ中の試験化合物を含む３８４ウェルの透明なＧｒｅｉｎｅｒ社ポリプロピレンプレートに５０μＬ／ウェルで分注した。化合物の最終的な最高濃度は、典型的には５０μＭまたは５μＭであった（高活性化合物に適する曲線を得るために）。プレートを５％  ＣＯ２中で３７℃で２４時間インキュベーションした。
【０１８８】
マルチアイソフォームイムノアッセイを使用して、ＰＢＭＣ上清中のＩＦＮ−αを定量した。ヒトＩＦＮ−αに対するウサギポリクローナル抗体（カタログ番号３１１０１、Ｓｔｒａｔｅｃｈ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）を、アッセイ緩衝液（１０％のウシ胎仔血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）を含むＲＰＭＩ  １６４０）中で１：１００００で希釈し、２０μＬを、ＭＳＤ社（Ｍｅｓｏ−Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ社）ｓｉｎｇｌｅ  ｓｍａｌｌ−ｓｐｏｔ  ３８４ウェルＧＡＲ（ヤギ抗ウサギ抗体がコートされた）プレートの各ウェルに添加した。プレートを激しく振盪しながら室温で１時間インキュベーションした。ＰＢＳによる３回の洗浄に続いて、２０μＬの細胞上清をプレートの各ウェルに添加した。次いでプレートを激しく振盪しながら室温で１時間インキュベーションした。ＩＦＮ−αに対する１対のモノクローナル抗体（カタログ番号２１１００および２１１１２、Ｓｔｒａｔｅｃｈ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）をｓｕｌｆｏ−ＴＡＧ（ＭＳＤ社）で標識し、アッセイ緩衝液中で１：１０００に希釈し、２０μＬをプレートの各ウェルに添加した。プレートを激しく振盪しながら室温で１時間さらにインキュベーションした。ＰＢＳによる３回の洗浄に続いて、３０μｌの２倍Ｔ緩衝液（ＭＳＤ社）を各ウェルに添加し、プレートをＭＳＤ  Ｓｅｃｔｏｒ  ６０００プレートリーダーで読み取った。
【０１８９】
データを、１μＭレシキモド（ｎ＝１６）およびＤＭＳＯ（ｎ＝１６）の内部プレート対照に対して正規化した。ｐＥＣ５０値は、ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅにおけるＩＲＬＳによる４−パラメータの曲線フィットによって、１１点の試験化合物の２倍連続希釈から導き出した。
【０１９０】
結果
参考実施例１は、＞８．３の平均ｐＥＣ５０であった。
【０１９１】
新鮮ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を使用するインターフェロン−αおよびＴＮＦ−αの誘導についてのアッセイ
化合物調製
参考実施例１の化合物をＤＭＳＯ中で溶解し連続希釈し、Ｂｉｏｍｅｋ  ２０００を使用して必要とされる１００倍の濃度範囲を提供した。１μＬの試験化合物をＢｉｏｍｅｋ  ＦＸを使用して９６ウェル組織培養プレートの中へ移した。各化合物は、各ドナーについて二重でアッセイした。各プレートはスタンダードとしてＴＬＲ７／８アゴニストレシキモドの希釈系列を含み、１１カラムは１μＬの２００μＭレシキモド（２μＭの最終濃度を提供し、レシキモドに対するおよその最大反応を定義するのに使用した）を含んでいた。
【０１９２】
ＰＢＭＣの調製
２名のヒトドナーからの血液サンプルをヘパリンナトリウム（１０Ｕ／ｍＬ）の中へ回収した。２５ｍＬ体積の全血をＬｅｕｃｏｓｅｐチューブ中の１５ｍＬ  Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ上に重層し、８００ｇで２０分間遠心分離し、血漿／ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ界面のバンドを慎重に取り出した。回収した細胞を２５００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、ペレットを１０ｍＬの培地（１０％ｖ／ｖウシ胎仔血清（ＦＣＳ、低エンドトキシン）、１００Ｕ／ｍＬペニシリンＧ、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、１０ｍＭ  Ｌ−グルタミンおよび１×非必須アミノ酸を補足したＲＰＭＩ  １６４０（低エンドトキシン））中で再懸濁した。１：２０希釈の細胞をトリパンブルーを使用して調製し、細胞を血球計数器を使用してカウントした。ＰＢＭＣを希釈して１ｍＬあたり２×１０６の最終濃度にし、１００μＬのこの細胞懸濁物を１μＬの希釈した試験化合物を含むウェルへ添加した。
【０１９３】
インキュベーションならびにインターフェロン−αおよびＴＮＦ−αについてのアッセイ
細胞調製物を２４時間インキュベーションし（３７℃、９５％空気、５％  ＣＯ２）、その後上清のサンプルをＢｉｏｍｅｋ  ＦＸを使用して取り出し、ＭＳＤ社（Ｍｅｓｏｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ社）電気化学ルミネセンスアッセイプラットフォームを使用してＦＮ−αおよびＴＮＦ−αの両方についてアッセイした。ＩＦＮ−αアッセイは上記のものと同様に行った。ＴＮＦ−αアッセイはキット説明書（カタログ番号Ｋ１１１ＢＨＢ）の通り行った。
【０１９４】
放出されたサイトカインを、２μＭレシキモドの対照（１１カラム）のパーセンテージとして表現した。このパーセンテージを化合物濃度に対してプロットし、応答に対するｐＥＣ５０を非線形最小二乗曲線のフィッティングによって決定した。ＩＦＮ−α応答について、一般的には４−パラメータロジスティックモデルを選択した。明らかに最大の応答が得られた（すなわち、応答において明確なプラトーが観察された）ＴＮＦ応答については、一般的には４−パラメータモデルを使用した。曲線の上部漸近線が明確でなかったならば、曲線のフィッティングは、一般的には１００％の最大反応に対して（すなわち２μＭレシキモドへの応答に対して）または試験した最高濃度の応答がレシキモド応答を超えたならばこの濃度の応答に対して制約された。いくつかの曲線は１つのまたは両方のサイトカインについてベル型であり、ベル型応答の下に向かう斜面（すなわち最大反応を与える濃度より上の濃度）でのサイトカインデータは、一般的にはフィットから除外したが、通常ピーク応答のすぐ上の濃度は例外とした。したがって曲線のフィッティングは用量応答曲線の上に向かう斜面に集中した。
【０１９５】
結果
参考実施例１は、ＩＦＮ−αおよびＴＮＦ−αの誘導についての平均ｐＥＣ５０が、それぞれ≧９および≦６．５であることを示した。
【０１９６】
アトピーのボランティアからの新鮮なヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を使用する、アレルゲン誘導性サイトカインアッセイ
アトピーのヒトドナーに由来する末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）のアレルゲンおよび試験化合物との共培養に基づくアッセイが開発された。５〜６日の培養後に、細胞上清をサイトカインの範囲についてアッセイした。
【０１９７】
化合物調製
参考実施例１の化合物をＤＭＳＯ中に溶解し、次いで増殖培地（１００Ｕ／ｍＬペニシリンＧ、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、１０ｍＭ  Ｌ−グルタミンを補足したＲＰＭＩ  １６４０培地）中で連続的に希釈して、０．０４％のＤＭＳＯの存在下で必要とされる４倍の濃度範囲にした。各化合物はすべての濃度で三重でアッセイした。
【０１９８】
ＰＢＭＣの調製
オオアワガエリに対するアレルギーがあることが知られているボランティアからの脱線維素ヒト血液を、２５００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。血清の上部層を回収し、５６℃で３０分間非動化した（ＨＩ−自己血清）。細胞の下部層を５０ｍＬのＰＢＳ（＋Ｃａ、＋Ｍｇ）中に再懸濁し、２５ｍＬの希釈血液を５０ｍｌのチューブ中の２０ｍＬのＬｙｍｐｈｏｐｒｅｐ上に重層し、次いで２５００ｒｐｍで室温で２０分間遠心分離した。血清／Ｌｙｍｐｈｏｐｒｅｐ界面のバンドを慎重に取り出した。回収した細胞をＰＢＳで洗浄し、ＨＩ自己血清含有増殖培地中で１ｍＬあたり４×１０６で再懸濁した。ＰＢＭＣを、１０ｕｇ／ｍＬのオオアワガエリ抗原（Ａｌｋ  Ａｂｅｌｌｏ社）および適切な濃度の試験化合物の存在下で、１ウェルあたり０．４×１０６細胞で、平底の９６ウェルプレート中に全体積２００μＬで播種した。
【０１９９】
インキュベーションおよびサイトカインのアッセイ
プレートを最大６日間５％のＣＯ２で３７℃でインキュベーションした。各ウェルから細胞培地を採取し、分析前に−２０℃で保存した。上清中のサイトカインおよびケモカインを、ヒトＴＨ１／Ｔｈ２サイトカインのためのＭｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ社１０スポットプレートを使用して検出した。
【０２００】
上記のアッセイにおいて、３名のアレルギーのドナーからのＰＢＭＣを用いた個別の研究からのデータにより、参考実施例１は、用量応答性の様式でＴｈ２サイトカインＩＬ−５およびＩＬ−１３の生産を減少させ、アレルゲン対照と比較して、０．０４μＭで≧５０％減少が観察されることが示された。
【０２０１】
参考実施例１は以下のモデルにおけるインビボの生物学的活性についても試験された。
【０２０２】
マウスにおける鼻腔内投薬後のインターフェロン−αの誘導についてのアッセイ
参考実施例１の化合物を食塩水中の０．２％のツイーン８０中に溶解し、全身麻酔下でメスＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝６）に鼻腔内に（両鼻孔で合計で５μＬ）投与した。動物を投薬の２時間後に安楽死させ、端末血液サンプルを採取し、インターフェロン−αの血清レベルをＥＬＩＳＡアッセイを使用して測定した。
【０２０３】
このモデルにおいて、参考実施例１は２１０２９ｐｇ／ｍＬのインターフェロン−αの平均血清レベルを示した。媒質処理の対照において、インターフェロン−αは検出されなかった。
【０２０４】
安定性試験
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（１−ピペリジニル）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン、マレイン酸塩は、日米ＥＵ医薬品規制調和国際会議（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｆｏｒ  Ｈａｒｍｏｎｉｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｕｓｅ）（ＩＣＨ）によって規定された、品質に関するガイドライン（Ｑｕａｌｉｔｙ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ）Ｑ１Ａ（Ｒ２）（安定性試験ガイドライン（Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ｏｆ  Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇ  Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ））およびＱ１Ｂ（新原薬および新製剤の光安定性試験ガイドライン（Ｐｈｏｔｏｓｔａｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ｏｆ  Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇ  Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ））において指定された状態下で有意な分解を示さなかった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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