(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
茶飲料の製造方法であって、
１）ペクチナーゼ活性の少ないセルラーゼを用いて茶葉を処理して抽出して茶酵素処理エキスを得る工程、ここで、
前記セルラーゼを用いる茶葉の処理の前に、茶葉を水で抽出し、得られる茶抽出液を分離して、セルラーゼを用いて処理するための茶葉を得る；
前記の茶葉の水による抽出を、得られる茶抽出液への可溶性成分抽出率が２０〜４５％となるように行う；及び
２）抹茶と当該茶酵素処理エキスとを混合する工程
を含み、当該セルラーゼについて以下の試験を行ったときに、試験液が未処理ペクチン溶液に対して８０％以上の粘度率を示す、製造方法：
ｐＨ５．４の酢酸バッファーを用いてペクチンの０．５重量％の試験液を調製し、この試験液にセルラーゼを、液中のペクチンに対し１重量％となるように添加し、３７℃で１６時間反応させた後、９０℃で１０分間処理し、酵素活性を失活させ、２４．５℃で音叉型振動式粘度計にて粘度測定を実施し、未処理ペクチン溶液に対する相対的な粘度率を算出する。
【請求項２】
茶飲料中の抹茶の含有量が０．０１〜１．０重量％である、請求項１記載の製造方法。
【請求項３】
抹茶をそのまま又は水に懸濁してから、茶酵素処理エキスと混合する、請求項１又は２に記載の製造方法。
【請求項４】
セルラーゼを用いる茶葉の処理を３５〜５５℃で行う、請求項１〜３のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項５】
セルラーゼを用いる茶葉の処理を３０分〜２０時間行う、請求項１〜４のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項６】
セルラーゼを用いる茶葉の処理をｐＨ４〜６で行う、請求項１〜５のいずれか１項に記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抹茶の不快なザラツキや雑味を伴わず、沈殿の抑制された、抹茶本来のコク及び味わいを有する茶飲料に関する。より具体的には、夾雑ペクチナーゼ活性が少ないセルラーゼ処理によって得られる茶酵素処理エキスと抹茶とを混合することにより得られる茶飲料、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
抹茶を飲料に使用する場合、抹茶の味わいを強くするために抹茶を多く配合することが望まれる。しかしながら、その場合には、抹茶のザラツキや雑味も高まることとなる。さらに、その場合には抹茶が沈殿を生じ易く、外観上飲料の品質に問題があるかの如き誤解を生ずる可能性がある。
【０００３】
抹茶の沈殿等の抑制のためには、例えば、ジェランガムなどの安定剤を用いる方法が知られている（特許文献１）。また、ザラツキ、雑味が極力少なく緑茶飲料に不可欠なすっきりした後味を保持し、緑茶本来の食感、コク、味わいを有し、かつ長期保管においても沈殿や濁りの発生しない安定な、優れた品質の茶飲料を提供するために、茶葉原料を粉砕し、粉砕物から粉末茶を得て、得られた粉末茶をさらに微粉砕処理した後、粒子径１μｍ以上の粒子の大部分を除去することも知られている（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−２９０５３号公報
【特許文献２】ＷＯ２００４／１１０１６１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、特許文献１に記載の方法では、安定剤が飲料の香味に影響を及ぼす恐れがある。また、特許文献２に記載の方法では、粉末茶を微粉砕するための高価な装置が必要となり得る。
【０００６】
従って、抹茶のザラツキ、雑味、沈殿を抑制するための新たな手段が求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、鋭意検討した結果、ペクチナーゼなどの夾雑活性の少ないセルラーゼで茶葉を酵素処理して得られる茶酵素処理エキスを、抹茶と混合することにより、抹茶のザラツキ、雑味を伴わない、抹茶本来のコク、味わいを有する、沈殿の抑制された茶飲料を得ることができることを見出した。
【０００８】
即ち、本願発明は以下のものに関する。
１．抹茶と、茶酵素処理エキスとを混合して得られる、茶飲料であって、
当該茶酵素処理エキスが、ペクチナーゼ活性の少ないセルラーゼを用いて茶葉を処理して抽出することを含む方法により得られ、Ｂｒｉｘを０．３に調整した時の粘度が１．０ｍＰａ・ｓ以上の茶酵素処理エキスであり、そして、
当該セルラーゼについて以下の試験を行ったときに、試験液が未処理ペクチン溶液に対して８０％以上の粘度率を示す、茶飲料：
ｐＨ５．４の酢酸バッファーを用いてペクチンの０．５重量％の試験液を調製し、この試験液にセルラーゼを、液中のペクチンに対し１重量％となるように添加し、３７℃で１６時間反応させた後、９０℃で１０分間処理し、酵素活性を失活させ、２４．５℃で音叉型振動式粘度計にて粘度測定を実施し、未処理ペクチン溶液に対する相対的な粘度率を算出する。
２．茶飲料中の抹茶の含有量が０．０１〜１．０重量％である、１記載の茶飲料。
３．抹茶をそのまま又は水に懸濁してから、茶酵素処理エキスと混合して得られる、１又は２に記載の茶飲料。
４．茶飲料の製造方法であって、
１）ペクチナーゼ活性の少ないセルラーゼを用いて茶葉を処理して抽出して茶酵素処理エキスを得る工程、及び
２）抹茶と当該茶酵素処理エキスとを混合する工程
を含み、当該セルラーゼについて以下の試験を行ったときに、試験液が未処理ペクチン溶液に対して８０％以上の粘度率を示す、製造方法：
ｐＨ５．４の酢酸バッファーを用いてペクチンの０．５重量％の試験液を調製し、この試験液にセルラーゼを、液中のペクチンに対し１重量％となるように添加し、３７℃で１６時間反応させた後、９０℃で１０分間処理し、酵素活性を失活させ、２４．５℃で音叉型振動式粘度計にて粘度測定を実施し、未処理ペクチン溶液に対する相対的な粘度率を算出する。
５．茶飲料中の抹茶の含有量が０．０１〜１．０重量％である、４記載の製造方法。
６．抹茶をそのまま又は水に懸濁してから、茶酵素処理エキスと混合する、４又は５に記載の製造方法。
７．セルラーゼを用いる茶葉の処理の前に、茶葉を水又は有機溶媒で抽出し、得られる茶抽出液を分離して、セルラーゼを用いて処理するための茶葉を得る、４〜６のいずれか１項に記載の製造方法。
８．前記の茶葉の水又は有機溶媒での抽出を、得られる茶抽出液への可溶性成分抽出率が２０〜４５％となるように行う、７に記載の製造方法。
９．セルラーゼを用いる茶葉の処理を３５〜５５℃で行う、４〜８のいずれか１項に記載の製造方法。
１０．セルラーゼを用いる茶葉の処理を３０分〜２０時間行う、４〜９のいずれか１項に記載の製造方法。
１１．セルラーゼを用いる茶葉の処理をｐＨ４〜６で行う、４〜１０のいずれか１項に記載の製造方法。
【発明の効果】
【０００９】
茶酵素処理エキスを、抹茶と混合することにより、抹茶のザラツキや雑味を伴わない、抹茶本来のコク、味わいを有する、沈殿の抑制された茶飲料を得ることができる。理論に拘束されないが、当該エキスを混合することにより、抹茶の舌への吸着が緩やかになり、不快なザラツキや雑味を抑制するものと考えられる。尚、これらの推測は本発明を限定するものではない。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】各種セルラーゼで処理されたペクチン溶液の粘度を示すグラフである。
【図２】前抽出率と茶エキスの粘度との関係を示すグラフである。
【図３】各種茶抽出液の粘度を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明を詳細に説明する。
（抹茶）
抹茶は、緑茶の一種であるてん茶の茶葉を粉末化したものの呼称である。本発明においては、公知のいずれの抹茶を用いてもよい。本発明の茶飲料中の抹茶の含有量は特に限定されないが、典型的には、０．０１〜５．０重量％、０．０１〜１．０重量％又は０．０５〜０．３重量％であり、より好ましくは０．１〜０．２重量％である。
【００１２】
（茶酵素処理エキス）
本発明の飲料に用いる茶酵素処理エキスは、茶葉を、夾雑ペクチナーゼ活性が少ないセルラーゼで処理して抽出することにより得られる。
【００１３】
茶酵素処理エキスを製造するために使用する茶葉は、特に限定されないが、例えば、煎茶、番茶、ほうじ茶、玉露、かぶせ茶、甜茶等の蒸し製の不発酵茶（緑茶）；嬉野茶、青柳茶、各種中国茶等の釜炒茶等の不発酵茶；包種茶、鉄観音茶、ウーロン茶等の半発酵茶；紅茶、阿波番茶、プアール茶などの発酵茶等を用いることができる。なかでも、特に旨味やコク味が重要視される不発酵茶（緑茶）および半発酵茶が好適に用いられる。なお、茶葉はそのまま使用しても良いが、抽出効率・酵素反応効率を向上させるために粉砕して用いることもできる。
【００１４】
セルラーゼは、セルロースのβ―１、４−グリコシド結合を加水分解してセロビオースを生成する反応を行う酵素であるが、食品で利用可能なセルラーゼの多くは純度が低く、ヘミセルラーゼやペクチナーゼ等の夾雑酵素を含有する。本発明者らは、夾雑ペクチナーゼ活性の少ないセルラーゼを用いると、所望の茶エキスを効率よく製造できることを見出した。セルラーゼは夾雑ペクチナーゼ活性が少ないものを使用することが必要であり、好ましくはペクチナーゼ活性を実質的に含有しないものを使用する。セルラーゼ以外の酵素剤であっても、セルラーゼ活性を有しており、夾雑ペクチナーゼ活性が少ないものであれば使用することが可能である。本発明においては、セルラーゼとしての力価が５０単位／ｇ以上、好ましくは１００単位／ｇ以上であり、更に好ましくは２００単位／ｇ以上であり、かつ、ペクチナーゼ活性ができるだけ少ないセルラーゼを使用する。
【００１５】
セルラーゼ活性は、セルラーゼがカルボキシメチルセルロースナトリウムに３７℃で作用するとき、反応初期の１分間に１マイクロモルのブドウ糖に相当する還元力の増加をもたらす酵素量を１単位とする。
【００１６】
ペクチナーゼ活性に関しては、以下の方法で試験をし、結果として得られる試験液の粘度の、未処理ペクチン溶液の粘度に対する相対的な比率（粘度率）が８０％以上、好ましくは８５％以上、より好ましくは９０％以上、さらに好ましくは９５％以上であるセルラーゼを用いる。当該相対粘度率が高い程、ペクチナーゼ活性は低い。
【００１７】
試験方法：ｐＨ５．４の酢酸バッファーを用いてペクチンの０．５重量％の試験液を調製し、この試験液にセルラーゼを、液中のペクチンに対し１重量％となるように添加し、３７℃で１６時間反応させた後、９０℃で１０分間処理し、酵素活性を失活させ、２４．５℃で音叉型振動式粘度計にて粘度測定を実施し、未処理ペクチン溶液（セルラーゼ処理前の前記試験液である）に対する相対的な粘度率を算出する。
【００１８】
夾雑ペクチナーゼ活性の少ない好ましいセルラーゼは、例えば、セルラーゼアマノＴ４（天野エンザイム）、スミチームＣ（新日本化学）などの、Ｔｒｉｃｏｄｅｒｍａ属を由来とするセルラーゼである。
【００１９】
本発明における茶酵素処理エキスを製造するためには、茶葉を、前記のペクチナーゼ活性が少ないセルラーゼで処理し、抽出を行う。抽出は、セルラーゼ処理と同時に行ってもよいし、セルラーゼ処理後に行ってもよいが、好ましくは、同時に行う。
【００２０】
セルラーゼ処理のためには、茶葉に対して純水を添加し、充分混和したのちに酵素反応を行う。セルラーゼは夾雑ペクチナーゼ活性が少ないものを使用することが必要であり、好ましくはペクチナーゼ活性を実質的に含有しないものを使用する。酵素処理条件は、セルラーゼが機能できる条件であれば特に限定されない。例えば、純水の添加量は特に限定されないが、好ましくは茶葉重量あたり１３〜１８倍、より好ましくは１５倍の容量を使用する。処理温度は、好ましくは３５〜５５℃、より好ましくは４０℃である。処理時間は、３０分間〜２０時間が好ましい。セルラーゼの使用量は、好ましくは、茶葉の重量に対して０．１〜３．０重量％である。セルラーゼは、一度に添加してもよいが、数回に分けて添加してもよい。通常、酵素剤の至適ｐＨは４〜６であり、セルラーゼ処理時には、その範囲にｐＨを調整してもよい。ｐＨ調整のために、酸・アルカリをｐＨ調製剤として適宜使用することができるが、無機酸としては塩酸、リン酸などを、有機酸としてはクエン酸、酢酸、アスコルビン酸などを使用することができる。有機酸、特にアスコルビン酸を好適に使用することができる。セルラーゼ処理を終了させるためには、必要に応じて、反応液を加熱することによりセルラーゼを失活させる。このようにセルラーゼ処理することによって、通常は、茶酵素処理エキスの抽出も同時に行われる。
【００２１】
セルラーゼ処理及び抽出後は、例えばスクリューデカンタ（齋藤遠心機株式会社製）などの分離機を使用して、茶葉と茶抽出液を固液分離し、茶酵素処理エキスを得ることができる。得られた茶酵素処理エキスは必要に応じて濃縮することができる。また、当該エキスは、液体のまま使用しても良いが、凍結乾燥、スプレードライなどの方法により粉末化して使用することもできる。
【００２２】
セルラーゼを用いる茶葉の処理の前には、必要に応じて、茶葉を水又はアルコール等の有機溶媒で抽出し（本明細書においては、「前抽出」とも記載する）、得られる茶抽出液を分離する。本明細書で「茶抽出液」というときは、この抽出液を指す。
【００２３】
抽出の際には、茶葉重量に対して好ましくは１５倍重量以上、より好ましくは１５〜１５０倍重量程度、より好ましくは３０〜４０倍重量程度の抽出溶媒に浸漬して茶葉中の可溶性成分を溶出させることが好ましい。この場合、あらかじめ抽出溶媒を加熱しておいてもよいが、茶葉浸漬後に加熱して抽出しても良い。また、抽出溶媒としては純水を好適に用いることができるが、これにエタノールなどの有機溶媒を適宜含有させることもできる。また、抽出溶媒にミネラル分を添加することにより適宜硬度を調整することもできる。抽出温度は特に限定されないが、典型的には５０〜９５℃、好ましくは６０〜８０℃、最も好ましくは７０℃である。抽出温度などの抽出条件は、得られる抽出液の可溶性成分抽出率が２０〜４５％、好ましくは３０〜４０％以上、特に４０％となるようにすることが望ましい。なお、可溶性成分の抽出率は式「抽出液のＢｒｉｘ×採液量［ｇ］／茶葉量［ｇ］」で算出される。茶の前抽出は、１回だけ行ってもよいし、複数回行ってもよい。このようにして得られた茶抽出液はそのまま茶飲料として用いることができるほか、本発明の茶酵素処理エキスと混合して茶飲料とすることもできる。
【００２４】
上記のセルラーゼ処理・抽出、及び茶葉の前処理の工程においては、本発明の効果を損なわない限り種々の追加的な成分を用いることができる。しかしながら、本発明に悪影響を及ぼすと考えられる程度のペクチナーゼ（ペクチナーゼ自体だけでなく、ペクチナーゼ活性を有する他の酵素を含む）を用いることは、避けるべきである。
【００２５】
このようにして得られる、本願発明において用いられる茶酵素処理エキスは、口当たりの良いコクを有すると共に、高い粘度を有することを特徴とする。典型的には、本発明において用いられる茶酵素処理エキスは、Ｂｒｉｘを０．３に調整した時に１．０ｍＰａ・ｓ以上、好ましくは１．１０ｍＰａ・ｓ以上、より好ましくは１．１５ｍＰａ・ｓ以上の粘度を示す。粘度の上限はないが、典型的には、２．０ｍＰａ・ｓ程度までの粘度を有する。この粘度は、音叉型振動式粘度計、例えばＳＶ−Ａ（エーアンドデイ社製）にて測定することができる。Ｂｒｉｘの調整は、不揮発性成分の組成が変化しないように、水の添加又は留去等により行えばよい。
【００２６】
理論に拘束されないが、茶酵素処理エキスのコクを生じる原因物質は、茶ペクチンであると考えられる。茶ペクチンとは、茶葉中に存在する酸性多糖を意味し、これは主としてガラクツロン酸から構成される。粘度は、ペクチンの濃度と相関関係を有するため、茶酵素処理エキスのコクの指標として利用できる可能性がある。
【００２７】
また、粘度は、ペクチンの濃度と相関関係を有するため、上述した通り、ペクチナーゼ活性の少ない酵素を選択する際の指標としても使用することができる。
茶飲料中の茶酵素処理エキスの含有量は特に限定されないが、典型的には、当該エキスの含有量は、含有される当該エキスのＢｒｉxを０．３に調整した時のエキスの重量に換算して、０．０１〜５．０重量％、０．１〜１．０重量％であり、より好ましくは０．２〜０．３重量％である。
【００２８】
（茶飲料）
本発明の茶飲料は、前記の茶酵素処理エキスと抹茶とを混合することにより得られる。本発明の茶飲料は、これらの成分に加えて、茶抽出液を含有してもよい。茶飲料が茶抽出液を含有する場合には、当該混合を茶抽出液中で行ってもよいし、当該混合後に、得られる混合物と茶抽出液とを混合してもよい。抹茶は、そのまま茶酵素処理エキスと混合してもよいし、水に懸濁してから茶酵素処理エキスと混合してもよい。抹茶を水に懸濁する際には、ホモゲナイザー等により均質化してもよい。これらの成分を混合するための手段は特に限定されず、公知のいずれかの手段を用いればよい。
【００２９】
このようにして得られる茶飲料は、必要に応じて飲料に通常配合されるその他の原料を含有してもよい。例えば、糖類、甘味料、酸味料、食用色素、ビタミン類、フレーバー、酸化防止剤、ｐＨ調整剤などを適宜含有してもよい。
【００３０】
（容器詰飲料）
本発明の茶飲料は、容器詰飲料として提供することができる。容器は、ガラス瓶、ＰＥＴボトル、金属缶などの通常の物が挙げられる。本発明の茶飲料は、抹茶の沈殿が抑制されているため、長期保存されることの多い容器詰飲料として好適である。
【実施例】
【００３１】
以下の実施例により、本発明をより具体的に説明するが、本発明ではこれらに限定されるものではない。
（参考例１）
ペクチン（商品名ペクチン（無糖）、ナカライテスク株式会社製）を０．５重量％となるよう酢酸バッファーｐＨ５．４にて調整して試験液を得た後、市販されている食品添加用セルラーゼ酵素（商品名セルラーゼＡ「アマノ」３（天野エンザイム株式会社製）、商品名セルラーゼＴ「アマノ」４（天野エンザイム株式会社製）、商品名セルロシンＡＣ（エイチビィアイ株式会社製）、商品名セルロシンＴ３（エイチビィアイ株式会社製）、商品名スミチームＣ（新日本化学工業株式会社製））を、試験液中のペクチンに対し１重量％となるように添加した。３７℃で１６時間反応させた後、９０℃で１０分間処理し、酵素活性を失活させた。その後、音叉型振動式粘度計ＳＶ−Ａ（エーアンドデイ社製）にて２４．５℃で粘度測定を実施した。その結果、図１に示す通り、セルラーゼＴ「アマノ」４およびスミチームＣは、ペクチンの消化による粘度変化をほとんど生じず（相対粘度率９７％および１００％）、ほとんどペクチナーゼ活性を有しないことが示された。また、多少の夾雑は認められたものの、セルロシンＴ３（相対粘度率８８％）も本発明に使用できると思われた。本発明の実施例においてはセルラーゼＴ「アマノ」４を使用することにした。
【００３２】
尚、セルラーゼＴ「アマノ」４の力価は２８０単位／ｇである。
（実施例１）
粉砕した煎茶茶葉５ｇを熱水５００ｇで３分間１回（可溶性成分抽出率２０％）又は２回（可溶性成分抽出率４０％）抽出して固液分離を行った後、茶葉重量に対し１重量％となるようにセルラーゼＴ「アマノ」４（天野エンザイム株式会社）及び茶葉重量の１５倍の純水を添加した。さらにＬ−アスコルビン酸を茶葉重量のおよそ０．５重量％添加してｐＨを４．６に調整した。その後、３７℃にて１６時間反応させ、９０℃１０分間処理することによって酵素活性を失活させて反応を終結した。固液分離により茶酵素処理エキスを回収し、音叉型振動式粘度計ＳＶ−Ａ（エーアンドデイ社製）にて粘度測定を実施した。対照として酵素を添加せずに同様の操作を行ったものの粘度も測定した。その結果、図２に示すように、茶葉抽出液の可溶性成分抽出率が２０％以上の条件にて、有意に茶エキスの粘度上昇が認められることを見出した。これは、ペクチナーゼ活性の殆どないセルラーゼを用いることにより、加水分解と茶ペクチンの抽出を行えることを示していると考えられる。特に、酵素処理前に茶葉を熱水抽出して酵素活性阻害物質（カテキン類など）を一定程度除去することにより、セルラーゼによる加水分解と茶ペクチンの抽出の効率が向上するものと考えられる。
【００３３】
（実施例２）
煎茶茶葉５ｇを可溶性成分の抽出率が４０％となるように熱水抽出した後固液分離し、実施例１と同様にして酵素反応を行った。対照として、玉露、てん茶、煎茶から得られた茶抽出液を調製した。茶酵素処理エキスと茶抽出液のＢｒｉｘを０．３に調整した後、音叉型振動式粘度計ＳＶ−Ａ（エーアンドデイ社製）にて粘度測定を実施した。結果を図３に示すが、茶酵素処理エキスは粘度が高く（１．１９ｍＰａ・ｓ）、通常の茶抽出液よりも粘性があることが示された。よって、茶ペクチンの抽出が効率よく行われたものと考えられる。
【００３４】
（実施例３）  茶飲料
本発明により得られた茶酵素処理エキスを抹茶と混合して茶飲料を製造した。
具体的には、先ず、煎茶葉７ｇを２００ｍｌの熱水（９０℃）で５分間抽出し、固液分離をして、飲料のベースとなる茶抽出液を得た（以下、「ベース抽出液」と記載する）。次に、抹茶を約８０倍（重量）の水に懸濁させ、この懸濁液をホモジナイザーにより１５ＭＰａの圧力で処理し（遠心処理はしない）、抹茶懸濁液を得た。次いで、ベース抽出液に、抹茶懸濁液を、茶飲料中の抹茶の含有量が最終的に０．０１、０．２、０．５、１．０重量％となるように、そして実施例１と同様にして得た茶酵素処理エキス（Ｂｒｉｘを０．３に調整した後、音叉型振動式粘度計ＳＶ−Ａ（エーアンドデイ社製）にて粘度測定を実施したところ、粘度は１．１９であった）を、Ｂｒｉｘを０．３に調整した時のエキスの重量の茶飲料の重量に対する百分率として最終的に０．０１、０．２、０．５重量％になるように混合し、水で１０００ｍｌにメスアップし、レトルト殺菌した。このようにして得られた茶飲料に対し、コク、ザラツキ、雑味に関して、５名のパネラーによる６段階の官能評価を行った。その平均点を表３及び表４に示す。尚、評価の配点基準は以下の通り。
【００３５】
【表１】
0005922359.tif 000002
【００３６】
【表２】
0005922359.tif 000003
【００３７】
【表３】
0005922359.tif 000004
【００３８】
【表４】
0005922359.tif 000005
【００３９】
このように、茶酵素処理エキスの添加により、コクが増強され、ザラツキ・雑味が減少した。この変化は、茶酵素処理エキスの量が増えるにつれて顕著となった。
また、当該飲料を５分間静置した後、目視で抹茶の沈降レベルを４段階で評価した。その結果も表６に示す。尚、評価の配点基準は以下の通り。
【００４０】
【表５】
0005922359.tif 000006
【００４１】
【表６】
0005922359.tif 000007
【００４２】
このように、茶酵素処理エキスの添加により、沈降量が減少した。この変化は、茶酵素処理エキスの量が増えるにつれて顕著となった。
【図１】
0005922359.tif 000008
【図２】
0005922359.tif 000009
【図３】
0005922359.tif 000010