(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
トランスケイ皮酸と、下記の（ｉ）および（ｉｉ）に記載の成分から任意に選択される１種以上の成分とを含む脂質異常症判定用マーカーセット。
（ｉ）シチジン、セロトニン、ホスホノ酢酸、ニコチン、コリンリン酸およびエピネフリン
（ｉｉ）インドールピルビン酸、１，３−ジアミノプロパン、ケイ皮アルデヒド、フェニルプロパン酸、４−ヒドロキシ安息香酸、Ｎ２，Ｎ２−ジメチルグアノシン、Ｎ−アセチルアスパラギン、リボチミジン、３−ホスホセリン、５−メチルシチジン、セロテトラオース、Ｄ−リボース５−リン酸、ゲンチシン酸アルデヒド、キサンチン、ピロリン酸およびβ−アラニン  
【請求項２】
被験者から採取された唾液中のトランスケイ皮酸の量を測定して、
該量が健常者から採取された唾液中の当該量と比べて低い場合に、もしくは、脂質異常症患者から採取された唾液中の当該量と比べて同一または低い場合に、脂質異常症にかかりやすいという基準と比較することにより、
被験者の脂質異常症への罹患しやすさを試験する方法。
【請求項３】
被験者から採取された唾液中のトランスケイ皮酸の量と下記の（ｉ）および（ｉｉ）に記載の成分から任意に選択される１種以上の成分の量とを測定して、
被験者から採取された唾液中のトランスケイ皮酸の量が、健常者から採取された唾液中の当該量と比べて低い場合、または脂質異常症患者から採取された唾液中の当該量と比べて同一または低い場合であって、かつ
被験者から採取された唾液中の（ｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量が、健常者から採取された唾液中の当該量と比べて高い場合に、または
被験者から採取された唾液中の（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量が、健常者から採取された唾液中の当該量と比べて低い場合に、
脂質異常症にかかりやすいという基準と比較することにより、
被験者の脂質異常症への罹患しやすさを試験する方法。
（ｉ）シチジン、セロトニン、ホスホノ酢酸、ニコチン、コリンリン酸およびエピネフリン
（ｉｉ）インドールピルビン酸、１，３−ジアミノプロパン、ケイ皮アルデヒド、フェニルプロパン酸、リノール酸、４−ヒドロキシ安息香酸、Ｎ２，Ｎ２−ジメチルグアノシン、Ｎ−アセチルアスパラギン、リボチミジン、３−ホスホセリン、５−メチルシチジン、セロテトラオース、Ｄ−リボース５−リン酸、ゲンチシン酸アルデヒド、キサンチン、ピロリン酸およびβ−アラニン  
【請求項４】
被験者から採取された唾液中のトランスケイ皮酸の量と下記の（ｉ）および（ｉｉ）に記載の成分から任意に選択される１種以上の成分の量とを測定して、
被験者から採取された唾液中のトランスケイ皮酸の量が、健常者から採取された唾液中の当該量と比べて低い場合、または脂質異常症患者から採取された唾液中の当該量と比べて同一または低い場合であって、かつ
被験者から採取された唾液中の（ｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量が、脂質異常症患者から採取された唾液中の当該量と比べて同一または高い場合に、または
被験者から採取された唾液中の（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量が、脂質異常症患者から採取された唾液中の当該量と比べて同一または低い場合に、脂質異常症にかかりやすいという基準と比較することにより、
被験者の脂質異常症への罹患しやすさを試験する方法。  
（ｉ）シチジン、セロトニン、ホスホノ酢酸、ニコチン、コリンリン酸およびエピネフリン
（ｉｉ）インドールピルビン酸、１，３−ジアミノプロパン、ケイ皮アルデヒド、フェニルプロパン酸、リノール酸、４−ヒドロキシ安息香酸、Ｎ２，Ｎ２−ジメチルグアノシン、Ｎ−アセチルアスパラギン、リボチミジン、３−ホスホセリン、５−メチルシチジン、セロテトラオース、Ｄ−リボース５−リン酸、ゲンチシン酸アルデヒド、キサンチン、ピロリン酸およびβ−アラニン  
【請求項５】
トランスケイ皮酸と（ｉ）および（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分との組み合わせを変数とする多変量解析を行う請求項３または４に記載の方法。  
【請求項６】
前記多変量解析が、ロジスティック回帰分析である請求項５に記載の方法。  
【請求項７】
トランスケイ皮酸と（ｉ）および（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分との組み合わせが、下記の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）または（ｅ）である請求項５または６に記載の方法。
（ａ）トランスケイ皮酸、リノール酸およびエピネフリン
（ｂ）トランスケイ皮酸、コリンリン酸、ニコチンおよびβ−アラニン
（ｃ）トランスケイ皮酸、コリンリン酸、リノール酸およびニコチン
（ｄ）トランスケイ皮酸、コリンリン酸、ピロリン酸およびリノール酸
（ｅ）トランスケイ皮酸、Ｎ−アセチルアスパラギン、ニコチンおよび４−ヒドロキシ安息香酸  
【請求項８】
多変量解析の変数として、体重、腹囲、収縮期血圧および拡張期血圧からなる群から選択される１種以上の指標をさらに用いる、請求項５〜７のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脂質異常症の判定方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
脂質異常症は生活習慣病の１つであり、メタボリックシンドロームの構成因子でもある。脂質異常症の基準のひとつは血中の中性脂肪（トリグリセリド）濃度が１５０ｍｇ／ｄＬ以上であり、同様の基準はメタボリックシンドロームの診断基準のひとつとして採用されている。
【０００３】
脂質異常症と判定される人口は、境界領域に該当する人数を含めると２，２００万人にものぼることが厚生労働省の調査でわかっている（平成１２年厚生労働省循環器疾患基礎調査）。トリグリセリド異常だけでみても、基準値を上回る人の割合は、５０代男性で約５０％、６０代女性で約３０％と高い値を示す（平成１８年国民健康・栄養調査）。脂質異常症は放置すると動脈硬化を発症し、さらに進展すると心筋梗塞、脳梗塞を発症し、最悪の場合には死に至る。しかしながらその危険性はあまり周知されておらず、糖尿病や高血圧に比べて軽視されているのが現状である。
【０００４】
脂質異常症はその症状を自覚できず、健康診断等から自覚している人の割合はわずか３０％程度である（平成１８年国民栄養調査）。脂質異常レベルを判断するためには、採血を行う必要があるが、採血には痛みを伴うので、日常的な計測方法として適当とはいえなかった。
【０００５】
特許文献１には、生体から低侵襲に得られる唾液試料中のニコチンアミド代謝物量を測定し、その測定値に基づいて生体情報を取得できること、ニコチンアミド代謝物量との関連が示唆されているメタボリックシンドロームの発症に関する情報も得ることができることが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１１−１０７１２４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら特許文献１にはニコチンアミド代謝物と脂質異常レベルとの間の関連については何ら開示されていない。従って、唾液から脂質異常レベルを判断するための指標についてはまだ知られていなかった。
【０００８】
本発明の目的は、唾液中の成分を利用して、家庭でも簡便に、脂質異常症に罹患しているか否かを判定する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは下記の〔１〕〜〔６〕を提供する。
〔１〕下記の（ｉ）および（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分であることを特徴とする脂質異常症判定用マーカー。
（ｉ）シチジン、セロトニン、ホスホノ酢酸、ニコチン、コリンリン酸およびエピネフリン
（ｉｉ）インドールピルビン酸、１，３−ジアミノプロパン、ケイ皮アルデヒド、フェニルプロパン酸、リノール酸、トランスケイ皮酸、４−ヒドロキシ安息香酸、Ｎ２，Ｎ２−ジメチルグアノシン、Ｎ−アセチルアスパラギン、リボチミジン、３−ホスホセリン、５−メチルシチジン、セロテトラオース、Ｄ−リボース５−リン酸、ゲンチシン酸アルデヒド、キサンチン、ピロリン酸およびβ−アラニン
〔２〕被験者から採取された唾液中の下記の（ｉ）および（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量を測定して、該量から被験者が脂質異常症に罹患しているか否かを判定する、脂質異常症の判定方法。
（ｉ）シチジン、セロトニン、ホスホノ酢酸、ニコチン、コリンリン酸およびエピネフリン
（ｉｉ）インドールピルビン酸、１，３−ジアミノプロパン、ケイ皮アルデヒド、フェニルプロパン酸、リノール酸、トランスケイ皮酸、４−ヒドロキシ安息香酸、Ｎ２，Ｎ２−ジメチルグアノシン、Ｎ−アセチルアスパラギン、リボチミジン、３−ホスホセリン、５−メチルシチジン、セロテトラオース、Ｄ−リボース５−リン酸、ゲンチシン酸アルデヒド、キサンチン、ピロリン酸およびβ−アラニン
〔３〕被験者から採取された唾液中の（ｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量が、健常者から採取された唾液中の当該量と比べて高い場合に、または
被験者から採取された唾液中の（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量が、健常者から採取された唾液中の当該量と比べて低い場合に、
被験者が脂質異常症に罹患していると判定する、上記〔２〕に記載の判定方法。
〔４〕被験者から採取された唾液中の（ｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量が、脂質異常症患者から採取された唾液中の当該量と比べて同一または高い場合に、または
被験者から採取された唾液中の（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量が、脂質異常症患者から採取された唾液中の当該量と比べて同一または低い場合に、
被験者が脂質異常症に罹患していると判定する、上記〔２〕に記載の判定方法。
〔５〕（ｉ）および（ｉｉ）からなる群から選択される２種以上の成分の組み合わせを変数とする多変量解析を行う上記〔２〕〜〔４〕のいずれか一項に記載の判定方法。
〔６〕前記多変量解析が、ロジスティック回帰分析である上記〔５〕に記載の判定方法。
〔７〕（ｉ）および（ｉｉ）からなる群から選択される２種以上の成分の組み合わせが、下記の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）または（ｅ）である上記〔５〕または〔６〕に記載の判定方法。
（ａ）トランスケイ皮酸、リノール酸およびエピネフリン
（ｂ）トランスケイ皮酸、コリンリン酸、ニコチンおよびβ−アラニン
（ｃ）トランスケイ皮酸、コリンリン酸、リノール酸およびニコチン
（ｄ）トランスケイ皮酸、コリンリン酸、ピロリン酸およびリノール酸
（ｅ）トランスケイ皮酸、Ｎ−アセチルアスパラギン、ニコチンおよび４−ヒドロキシ安息香酸
〔８〕多変量解析の変数として、体重、腹囲、収縮期血圧および拡張期血圧からなる群から選択される１種以上の指標をさらに用いる、上記〔５〕〜〔７〕のいずれか一項に記載の判定方法。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、脂質異常症に罹患しているか否かの可能性を判定できる。また、唾液を試料とするので、被験者への負担が軽減されており、また、家庭での簡便な判定も可能となり、脂質異常症の有用な予防策となることも期待される。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１−１】図１−１は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のシチジンのピーク強度を示すグラフである。
【図１−２】図１−２は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のセロトニンのピーク強度を示すグラフである。
【図１−３】図１−３は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のホスホノ酢酸のピーク強度を示すグラフである。
【図１−４】図１−４は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のニコチンのピーク強度を示すグラフである。
【図１−５】図１−５は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のコリンリン酸のピーク強度を示すグラフである。
【図１−６】図１−６は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のエピネフリンのピーク強度を示すグラフである。
【図２−１】図２−１は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のインドールピルビン酸のピーク強度を示すグラフである。
【図２−２】図２−２は健常者と脂質異常症患者の各唾液中の１，３−ジアミノプロパンのピーク強度を示すグラフである。
【図２−３】図２−３は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のケイ皮アルデヒドのピーク強度を示すグラフである。
【図２−４】図２−４は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のフェニルプロパン酸のピーク強度を示すグラフである。
【図２−５】図２−５は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のリノール酸のピーク強度を示すグラフである。
【図２−６】図２−６は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のトランスケイ皮酸のピーク強度を示すグラフである。
【図２−７】図２−７は健常者と脂質異常症患者の各唾液中の４−ヒドロキシ安息香酸のピーク強度を示すグラフである。
【図２−８】図２−８は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のＮ２，Ｎ２−ジメチルグアノシンのピーク強度を示すグラフである。
【図２−９】図２−９は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のＮ−アセチルアスパラギンのピーク強度を示すグラフである。
【図２−１０】図２−１０は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のリボチミジンのピーク強度を示すグラフである。
【図２−１１】図２−１１は健常者と脂質異常症患者の各唾液中の３−ホスホセリンのピーク強度を示すグラフである。
【図２−１２】図２−１２は健常者と脂質異常症患者の各唾液中の５−メチルシチジンのピーク強度を示すグラフである。
【図２−１３】図２−１３は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のセロテトラオースのピーク強度を示すグラフである。
【図２−１４】図２−１４は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のＤ−リボース−５−リン酸のピーク強度を示すグラフである。
【図２−１５】図２−１５は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のゲンチシン酸アルデヒドのピーク強度を示すグラフである。
【図２−１６】図２−１６は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のキサンチンのピーク強度を示すグラフである。
【図２−１７】図２−１７は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のピロリン酸のピーク強度を示すグラフである。
【図２−１８】図２−１８は健常者と脂質異常症患者の各唾液中のβ−アラニンのピーク強度を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明は、脂質異常症の判定に関する。本発明において脂質異常症の判定とは、被験者が脂質異常症に罹患しているかどうかの判定（評価、判別、鑑別）を行うこと、または被験者が脂質異常症患者か健常者かの区別（分類）を行うことを意味する。判定の精度は、複数人の被験者のうち、通常は統計学的に有意な割合の被験者において脂質異常症に罹患していることを正しく判定できる程度であり、例えば５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上の被験者において脂質異常症に罹患していることを正しく判定できる程度である。本発明の判定方法は、医師による診断前の予備的な判定方法として有用である。
【００１３】
本発明において脂質異常症とは、血中に含まれる脂質の量が異常（過剰もしくは不足）であることを意味する。脂質としては、コレステロール（ＨＤＬ、ＬＤＬ）、中性脂肪（トリグリセリド、ＴＧ）が挙げられる。例えば、血中の中性脂肪（トリグリセリド）濃度が１５０ｍｇ／ｄＬ以上である場合に異常と判断される。脂質異常症は、その原因から、生活習慣に起因する脂質異常症、家族性脂質異常症、二次性脂質異常症（甲状腺機能低下症、ネフローゼ症候群、神経性食思不振症、糖源病、リポジストロフィーなどによる）が、本発明の判定方法はこれらのいずれにも適用可能である。
【００１４】
本発明における被験者は、通常は動物であり、好ましくは、ヒト、実験動物（マウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウサギなど）であり、より好ましくはヒトである。
【００１５】
本発明の判定方法においては、被験者から採取された生体試料として唾液を用いる。唾液は生体から常時採取可能であり、家庭での判断に用いる検体としても好適である。唾液は、非刺激唾液と刺激唾液とがあるが、刺激唾液が好ましい。刺激唾液は、パラフィンガムを咀嚼することにより容易に採取することができる。
【００１６】
本発明の脂質異常症の判定方法では、被験者から採取された唾液中の下記の（ｉ）および（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分を測定する。
【００１７】
（ｉ）シチジン、セロトニン、ホスホノ酢酸、ニコチン、コリンリン酸およびエピネフリン
【００１８】
（ｉｉ）インドールピルビン酸、１，３−ジアミノプロパン、ケイ皮アルデヒド、フェニルプロパン酸、リノール酸、トランスケイ皮酸、４−ヒドロキシ安息香酸、Ｎ２，Ｎ２−ジメチルグアノシン、Ｎ−アセチルアスパラギン、リボチミジン、３−ホスホセリン、５−メチルシチジン、セロテトラオース、Ｄ−リボース５−リン酸、ゲンチシン酸アルデヒド、キサンチン、ピロリン酸およびβ−アラニン
【００１９】
（ｉ）および（ｉｉ）からなる群を構成する各化合物の構造を以下に示す。
【００２０】
（１）シチジン（Ｃｙｔｉｄｉｎｅ、Ｃ9Ｈ13Ｎ3Ｏ5）
【化１】
0006051257.tif 000002
【００２１】
（２）セロトニン（Ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ、３−（２−Ａｍｉｎｏｅｔｈｙｌ）−１Ｈ−ｉｎｄｏｌ−５−ｏｌ、５−Ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ、Ｅｎｔｅｒａｍｉｎｅ、Ｃ10Ｈ12Ｎ2Ｏ）
【化２】
0006051257.tif 000003
【００２２】
（３）ホスホノ酢酸（Ｐｈｏｓｐｈｏｎｏａｃｅｔａｔｅ、Ｐｈｏｓｐｈｏｎｏａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ、Ｆｏｓｆｏｎｅｔ、Ｃ2Ｈ5Ｏ5Ｐ）
【化３】
0006051257.tif 000004
【００２３】
（４）ニコチン（Ｎｉｃｏｔｉｎｅ、（Ｓ）−３−（１−ｍｅｔｈｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎ−２−ｙｌ）ｐｙｒｉｄｉｎｅ、（Ｓ）−Ｎｉｃｏｔｉｎｅ、Ｃ10Ｈ14Ｎ2）
【化４】
0006051257.tif 000005
【００２４】
（５）コリンリン酸（Ｃｈｏｌｉｎｅ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅ、Ｐｈｏｓｐｈｏｃｈｏｌｉｎｅ、Ｏ−Ｐｈｏｓｐｈｏｃｈｏｌｉｎｅ、Ｃ5Ｈ15ＮＯ4Ｐ）
【化５】
0006051257.tif 000006
【００２５】
（６）エピネフリン（Ｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ、Ｌ−Ａｄｒｅｎａｌｉｎｅ、（Ｒ）−（−）−Ａｄｒｅｎａｌｉｎｅ、（Ｒ）−（−）−Ｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ、（Ｒ）−（−）−Ｅｐｉｒｅｎａｍｉｎｅ、（Ｒ）−（−）−Ａｄｎｅｐｈｒｉｎｅ；４−［（１Ｒ）−１−Ｈｙｄｒｏｘｙ−２−（ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌ］−１，２−ｂｅｎｚｅｎｅｄｉｏｌ、Ｃ9Ｈ13ＮＯ3）
【化６】
0006051257.tif 000007
【００２６】
（７）インドールピルビン酸（Ｉｎｄｏｌｅｐｙｒｕｖａｔｅ、Ｉｎｄｏｌｅｐｙｒｕｖｉｃ  ａｃｉｄ、（Ｉｎｄｏｌ−３−ｙｌ）ｐｙｒｕｖａｔｅ、Ｉｎｄｏｌｅ−３−ｐｙｒｕｖａｔｅ、３−（Ｉｎｄｏｌ−３−ｙｌ）ｐｙｒｕｖａｔｅ、Ｃ11Ｈ9ＮＯ3）
【化７】
0006051257.tif 000008
【００２７】
（８）１，３−ジアミノプロパン（１，３−Ｄｉａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｅ、Ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅ、１，３−Ｐｒｏｐａｎｅｄｉａｍｉｎｅ、Ｐｒｏｐａｎｅ−１，３−ｄｉａｍｉｎｅ、Ｃ3Ｈ10Ｎ2）
【化８】
0006051257.tif 000009
【００２８】
（９）ケイ皮アルデヒド（Ｃｉｎｎａｍｉｃ  ａｌｄｅｈｙｄｅ、Ｃｉｎｎａｍａｌｄｅｈｙｄｅ、Ｃ9Ｈ8Ｏ）
【化９】
0006051257.tif 000010
【００２９】
（１０）フェニルプロパン酸（Ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏａｔｅ、３−Ｐｈｅｎｙｌ−ｐｒｏｐｉｏｎｉｃ  ａｃｉｄ、３−Ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ、３−ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐｉｏｎｉｃ  ａｃｉｄ、Ｃ9Ｈ10Ｏ2）
【化１０】
0006051257.tif 000011
【００３０】
（１１）リノール酸（ｌｉｎｏｌｅａｔｅ、Ｌｉｎｏｌｅｉｃ  ａｃｉｄ、（９Ｚ，１２Ｚ）−Ｏｃｔａｄｅｃａｄｉｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ、９−ｃｉｓ，１２−ｃｉｓ−Ｏｃｔａｄｅｃａｄｉｅｎｏａｔｅ、９−ｃｉｓ，１２−ｃｉｓ−Ｏｃｔａｄｅｃａｄｉｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ、Ｃ18Ｈ32Ｏ2）
【化１１】
0006051257.tif 000012
【００３１】
（１２）トランスケイ皮酸（ｔｒａｎｓ−Ｃｉｎｎａｍａｔｅ、ｔｒａｎｓ−Ｃｉｎｎａｍｉｃ  ａｃｉｄ、（Ｅ）−Ｃｉｎｎａｍａｔｅ、Ｃ9Ｈ8Ｏ2）
【化１２】
0006051257.tif 000013
【００３２】
（１３）４−ヒドロキシ安息香酸（４−Ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏａｔｅ、Ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｉｃ  ａｃｉｄ；４−Ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｉｃ  ａｃｉｄ；Ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｅｎｅｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ａｃｉｄ、Ｃ7Ｈ6Ｏ3
【化１３】
0006051257.tif 000014
【００３３】
（１４）Ｎ２，Ｎ２−ジメチルグアノシン（Ｎ２，Ｎ２−Ｄｉｍｅｔｈｙｌｇｕａｎｏｓｉｎ、Ｇｕａｎｏｓｉｎｅ，Ｎ，Ｎ−ｄｉｍｅｔｈｙｌ−ｇｕａｎｏｓｉｎ、Ｃ12Ｈ17Ｎ5Ｏ5）
【化１４】
0006051257.tif 000015
【００３４】
（１５）Ｎ−アセチルアスパラギン（Ｎ−Ａｃｅｔｙｌａｓｐａｒａｇｉｎｅ、Ｃ6Ｈ10Ｎ2Ｏ4）
【化１５】
0006051257.tif 000016
【００３５】
（１６）リボチミジン（Ｒｉｂｏｔｈｙｍｉｄｉｎｅ、５−Ｍｅｔｈｙｌｕｒｉｄｉｎｅ、Ｃ10Ｈ14Ｎ2Ｏ6）
【化１６】
0006051257.tif 000017
【００３６】
（１７）３−ホスホセリン（３−Ｐｈｏｓｐｈｏｓｅｒｉｎｅ、Ｏ−Ｐｈｏｓｐｈｏ−Ｌ−ｓｅｒｉｎｅ、Ｌ−Ｏ−Ｐｈｏｓｐｈｏｓｅｒｉｎｅ；Ｄｅｘｆｏｓｆｏｓｅｒｉｎｅ、Ｃ3Ｈ8ＮＯ6Ｐ）
【化１７】
0006051257.tif 000018
【００３７】
（１８）５−メチルシチジン（５−Ｍｅｔｈｙｌｃｙｔｉｄｉｎｅ、Ｃ10Ｈ15Ｎ3Ｏ5）
【化１８】
0006051257.tif 000019
【００３８】
（１９）セロテトラオース（Ｃｅｌｌｏｔｅｔｒａｏｓｅ、Ｃ24Ｈ42Ｏ21）
【化１９】
0006051257.tif 000020
【００３９】
（２０）Ｄ−リボース５リン酸（Ｄ−Ｒｉｂｏｓｅ−５−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｒｉｂｏｓｅ  ５−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｃ5Ｈ11Ｏ8Ｐ）
【化２０】
0006051257.tif 000021
【００４０】
（２１）ゲンチシン酸アルデヒド（Ｇｅｎｔｉｓａｔｅ  ａｌｄｅｈｙｄｅ、２，５−Ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚａｌｄｅｈｙｄｅ、Ｃ7Ｈ6Ｏ3）
【化２１】
0006051257.tif 000022
【００４１】
（２２）キサンチン（Ｘａｎｔｈｉｎｅ、Ｃ5Ｈ4Ｎ4Ｏ2）
【化２２】
0006051257.tif 000023
【００４２】
（２３）ピロリン酸（Ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｄｉｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ  ａｃｉｄ、Ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ  ａｃｉｄ、ＰＰｉ、Ｈ4Ｐ2Ｏ7）
【化２３】
0006051257.tif 000024
【００４３】
（２４）β−アラニン（ｂｅｔａ−Ａｌａｎｉｎｅ、３−Ａｍｉｎｏｐｒｏｐｉｏｎｉｃ  ａｃｉｄ；３−Ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｏａｔｅ、Ｃ3Ｈ7ＮＯ2）
【化２４】
0006051257.tif 000025
【００４４】
本発明の判定方法においては、上記成分から選ばれる１種以上の量または有無を測定するが、２種以上であることが好ましく、３種または４種かそれ以上であることがより好ましく、３種または４種であることが更に好ましい。
【００４５】
本発明の判定方法において、各成分の測定は、例えば、質量分析法によって測定できる。質量分析法による測定の際には各種の質量分析装置を利用することができる。質量分析装置としては、例えば、ＧＣ−ＭＳ、ＬＣ−ＭＳ、ＦＡＢ−ＭＳ、ＥＩ−ＭＳ、ＣＩ−ＭＳ、ＦＤ−ＭＳ、ＭＡＬＤＩ−ＭＳ、ＥＳＩ−ＭＳ、ＨＰＬＣ−ＭＳ、ＦＴ−ＩＣＲ−ＭＳ、ＣＥ−ＭＳ、ＩＣＰ−ＭＳ、Ｐｙ−ＭＳ、ＴＯＦ−ＭＳなどが挙げられ、これらのいずれも利用可能である。
【００４６】
また、各成分の測定は、各成分に特異的に結合する物質（例えば、抗体、アプタマー、受容体、酵素、ペプチドなど）を利用して、ＲＩＡ（ラジオイムノアッセイ）、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着法）、ＥＣＬＩＡ（電気化学発光免疫測定法）などにより測定することもできる。各成分に特異的に結合する物質を必要に応じて担体に固相化してマイクロアレイとし、マイクロアレイを用いて各成分を測定することもできる。
【００４７】
唾液中の成分の測定値から脂質異常症に罹患しているか否かを判定するに当たっては、通常は、参照値との比較を行う。参照値としては、例えば、健常者（本発明の判定方法以外の手段で健常者であることが予め確認されていることが好ましい）から採取された唾液中の成分の測定値、脂質異常症患者（本発明の判定方法以外の手段で脂質異常症患者であることが予め確認されていることが好ましい）から採取された唾液中の成分の測定値が挙げられるが、このうち、前者が好ましい。
【００４８】
参照値が健常者の値である場合を例に取ると、以下の通りである。（ｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量を測定する場合には、被験者から採取された唾液中の当該量が、健常者から採取された唾液中の当該量と比べて高い場合に脂質異常症に罹患していると判定される。（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量を測定する場合には、被験者から採取された唾液中の当該量が、健常者から採取された唾液中の当該量と比べて低い場合に脂質異常症に罹患していると判定される。
【００４９】
参照値が脂質異常症患者の値である場合を例に取ると以下の通りである。（ｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量を測定する場合には、被験者から採取された唾液中の当該量が、脂質異常症患者から採取された唾液中の当該量と比べて同一または高い場合に脂質異常症に罹患していると判定される。（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分の量を測定する場合には、被験者から採取された唾液中の当該量が、脂質異常症患者から採取された唾液中の当該量と比べて同一または低い場合に脂質異常症に罹患していると判定される。
【００５０】
判定においては、各成分の量を変数とする多変量解析を行ってもよい。多変量解析としては例えば、ロジスティック回帰分析、重回帰分析、主成分分析、独立成分分析、因子分析、判別分析、数量化理論、クラスター分析、コンジョイント分析および多次元尺度構成法（ＭＤＳ）が挙げられるが、中でもロジスティック回帰分析が好ましい。
【００５１】
多変量解析においては、（ｉ）および（ｉｉ）からなる群から選択される１種以上の成分を変数とすることが好ましく、２種以上の成分を変数とすることがより好ましく、３種または４種の成分の組み合わせを変数とすることが好ましい。具体的には、トランスケイ皮酸を含む組み合わせを変数とすることが好ましく、更に、下記の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）または（ｅ）の組み合わせを変数とすることがより好ましい。
（ａ）トランスケイ皮酸、リノール酸およびエピネフリン
（ｂ）トランスケイ皮酸、コリンリン酸、ニコチンおよびβ−アラニン
（ｃ）トランスケイ皮酸、コリンリン酸、リノール酸およびニコチン
（ｄ）トランスケイ皮酸、コリンリン酸、ピロリン酸およびリノール酸
（ｅ）トランスケイ皮酸、Ｎ−アセチルアスパラギン、ニコチンおよび４−ヒドロキシ安息香酸
【００５２】
多変量解析においては、更に、被験者に関する指標を変数とすることが好ましく、体重、腹囲、収縮期血圧および拡張期血圧から選ばれる１種以上の指標を変数とすることが好ましく、体重と腹囲の組み合わせ、または、体重、腹囲、収縮期血圧および拡張期血圧の組み合わせを変数とすることがより好ましい。これにより、判定の精度を向上させることができる。
【００５３】
本発明の判定方法は、被験者が脂質異常症に罹患しているか否かを、唾液から簡便に判定できるので、医師の診断前の予備的な検査として、家庭でも実施可能である。さらに、脂質異常症患者である被験者に治療を行い、治療が効果を奏した場合、唾液中の各成分の量も低下ないしは増加する。よって、治療と共に唾液中の成分を測定することにより、治療効果の評価判定を行うこともできる。従って、本発明の判定方法は、脂質異常症の薬剤の投与効果などの治療効果を判定する方法としても有用である。
【実施例】
【００５４】
実施例１  唾液中の各成分の発現量比較
＜評価方法＞
（１）唾液検体採取
被験者より、刺激唾液（パラフィンガムを噛むことにより唾液分泌促進を行った結果分泌された唾液）を採取した。被験者（すべて男性）は、その特徴により以下の各群に分類した。
・健常者群：血液検査において、中性脂肪（トリグリセリド）が１５０ｍｇ／ｄＬ未満である人（ｎ＝２７）
・脂質異常群：血液検査において、中性脂肪（トリグリセリド）が１５０ｍｇ／ｄＬ以上である人（ｎ＝１３）
【００５５】
（２）メタボローム解析による唾液成分の網羅的解析
外部機関に委託し、質量分析法を用いて、唾液メタボローム解析を実施した。採取した唾液を遠心分離にかけて夾雑物を除き、上清をＬＣ−ＭＳ（Ｐｏｓｉｔｉｖｅ／Ｎｅｇａｔｉｖｅ）、ＣＥ−ＭＳ（Ｐｏｓｉｔｉｖｅ／Ｎｅｇａｔｉｖｅ）に供した。得られたＲｔ値、Ｍｓ値から唾液中成分を同定した。
【００５６】
＜評価結果＞
質量分析法による唾液メタボローム解析から、表１に示す各唾液成分の分子量とピーク強度が得られた。このピーク強度を、唾液中に含まれる各唾液成分の量とした。
【００５７】
その結果、シチジン、セロトニン、ホスホノ酢酸、ニコチン、コリンリン酸、およびエピネフリンのピークが、脂質異常群において顕著に高いことが認められた（図１−１〜図１−６、表１）。一方、インドールピルビン酸、１，３−ジアミノプロパン、ケイ皮アルデヒド、フェニルプロパン酸、リノール酸、トランスケイ皮酸、４−ヒドロキシ安息香酸、Ｎ２，Ｎ２−ジメチルグアノシン、Ｎ−アセチルアスパラギン、リボチミジン、３−ホスホセリン、５−メチルシチジン、セロテトラオース、Ｄ−リボース５リン酸、ゲンチシン酸アルデヒド、キサンチン、ピロリン酸、β−アラニンのピークが、脂質異常群において顕著に低いことが認められた（図２−１〜図２−１８、表２）。
【００５８】
これらの結果は、被験者の図１−１〜図１−６および表１に示される唾液成分の量が、健常者群の唾液成分の量を上回る場合に、脂質異常症に罹患していると判定され得ることを示している。すなわち、シチジンを指標とする場合は健常者群のピーク強度である３．００を上回った場合に、セロトニンを指標とする場合は健常者群のピーク強度である６６．１１を上回った場合に、ホスホノ酢酸を指標とする場合は健常者のピーク強度である１２５．００を上回った場合に、ニコチンを指標とする場合は健常者のピーク強度である１０．９６を上回った場合に、コリンリン酸を指標とする場合は健常者群のピーク強度である５５．４１を上回った場合に、エピネフリンを指標とする場合は健常者群のピーク強度である９９８．２６を上回った場合に、その被験者は脂質異常症に罹患していると判定されうることを示している。
【００５９】
一方、被験者の図２−１〜図２−１８および表２に示される唾液成分のピーク強度が、健常者群のピーク強度を下回る場合に、脂質異常に罹患していると判定され得ることを示している。すなわち、インドールピルビン酸を指標とする場合は健常者群のピーク強度である８．６７を下回った場合に、１，３−ジアミノプロパンを指標とする場合は健常者のピーク強度である２４．１５を下回った場合に、ケイ皮アルデヒドを指標とする場合は健常者群のピーク強度である５．２７を下回った場合に、フェニルプロパン酸を指標とする場合は健常者のピーク強度である３４８１０．４４を下回った場合に、リノール酸を指標とする場合は健常者群のピーク強度である５８５．０４を下回った場合に、トランスケイ皮酸を指標とする場合は健常者のピーク強度である４６．５２を下回った場合に、４−ヒドロキシ安息香酸を指標とする場合は健常者群のピーク強度である１２７．１１を下回った場合に、Ｎ２，Ｎ２−ジメチルグアノシンを指標とする場合は健常者のピーク強度である４７．４８を下回った場合に、Ｎ−アセチルアスパラギンを指標とする場合は健常者のピーク強度である５５．８９を下回った場合に、リボチミジンを指標とする場合は健常者群のピーク強度である３８．７０を下回った場合に、３−ホスホセリンを指標とする場合は健常者のピーク強度である１２．２２を下回った場合に、５−メチルシチジンを指標とする場合は健常者群のピーク強度である５．３３を下回った場合に、セロテトラオースを指標とする場合は健常者のピーク強度である１１．４１を下回った場合に、Ｄ−リボース５−リン酸を指標とする場合は健常者群のピーク強度である５．２６を下回った場合に、ゲンチシン酸アルデヒドを指標とする場合は健常者のピーク強度である２．２２を下回った場合に、キサンチンを指標とする場合は健常者群のピーク強度である３．９３を下回った場合に、ピロリン酸を指標とする場合は健常者群のピーク強度である８７３．２６を下回った場合に、β−アラニンを指標とする場合は健常者のピーク強度である５６．８５を下回った場合に、その被験者は脂質異常症に罹患していると判定され得ることを示している。
【００６０】
【表１】
0006051257.tif 000026
【００６１】
【表２】
0006051257.tif 000027
【００６２】
実施例２  唾液成分の多変量解析（ロジスティック回帰分析）による診断精度の向上
実施例１で挙げた各唾液成分を利用して、脂質異常症をより精度良く判定することを目的に、多変量解析手法のひとつであるロジスティック回帰分析を行った。ロジスティック回帰分析は、複数の目的変数（本実施例では唾液成分）を用いて、質的変数（本実施例では、脂質が異常か否か）を予測する場合に、一般的に用いられる解析手法である。
【００６３】
その結果、表３に示される唾液成分の組み合わせを用いることで、表５に示す単一唾液成分による場合と比較して、診断精度が向上することが示唆された（正診率９０％以上）。さらに、表４に示すように、唾液成分と既存の健康指標（体重・腹囲）とを組み合わせて用いると、診断精度がより向上した（表４）。
【００６４】
唾液成分の組み合わせを用いる場合と、実施例１で挙げた単一唾液成分による場合の診断能を比較するべく、ＲＯＣ曲線の曲線下面積を算出した（表６）。ＲＯＣ曲線とは、診断方法の感度と特異度から算出される曲線であり、この曲線下面積が大きいほど、診断能が高いと判断される（森實敏夫著、「わかりやすい医学統計学」、株式会社メディカルトリビューン、ｐ２５４）。その結果、単一唾液成分による場合と比較して、唾液成分の組み合わせによる場合で診断能が著しく高まることが示唆された。
【００６５】
【表３】
0006051257.tif 000028
【００６６】
【表４】
0006051257.tif 000029
【表５】
0006051257.tif 000030
【００６７】
【表６】
0006051257.tif 000031
【図１−１】
0006051257.tif 000032
【図１−２】
0006051257.tif 000033
【図１−３】
0006051257.tif 000034
【図１−４】
0006051257.tif 000035
【図１−５】
0006051257.tif 000036
【図１−６】
0006051257.tif 000037
【図２−１】
0006051257.tif 000038
【図２−２】
0006051257.tif 000039
【図２−３】
0006051257.tif 000040
【図２−４】
0006051257.tif 000041
【図２−５】
0006051257.tif 000042
【図２−６】
0006051257.tif 000043
【図２−７】
0006051257.tif 000044
【図２−８】
0006051257.tif 000045
【図２−９】
0006051257.tif 000046
【図２−１０】
0006051257.tif 000047
【図２−１１】
0006051257.tif 000048
【図２−１２】
0006051257.tif 000049
【図２−１３】
0006051257.tif 000050
【図２−１４】
0006051257.tif 000051
【図２−１５】
0006051257.tif 000052
【図２−１６】
0006051257.tif 000053
【図２−１７】
0006051257.tif 000054
【図２−１８】
0006051257.tif 000055