(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（ＩＩ）：
【化１】
0006051211.tif 000027
（式中、
Ｒ１は、炭素数１〜３のアルキル基を表し、
Ｒ２が炭素数１〜３のアルコキシ基を表し且つＲ７が水素原子を表すか、又は、Ｒ２とＲ７とで−Ｏ−ＣＨ２−又は−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−橋架け基（式中、−Ｏ−はＲ２基を担持する炭素原子に結合し、−ＣＨ２−はＲ７基を担持する炭素原子に結合している。）を形成し、
Ｒ３は、水素原子又はエチル基を表し、
Ｒ４は、−ＮＨ２、又は、−ＮＨ−ＬＣ−ビオチン（式中、ＬＣはリンカーを表す。）を表し、
Ｒ５とＲ６とが異なる場合は、Ｒ５及びＲ６は、水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基及びペンチル基から選択され、
Ｒ５とＲ６とが同一である場合は、Ｒ５及びＲ６は、水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基及びペンチル基から選択されるが、
ただし、Ｒ１は、Ｒ５又はＲ６のうちの少なくとも１つとは異なる。）
で表される合成五糖化合物及びその塩。
【請求項２】
ＬＣは式：−（Ｃ＝Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ−（ｎは１〜１０）のリンカーを表す、請求項１に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項３】
ＬＣは式：−（Ｃ＝０）−（ＣＨ２）４−ＮＨのリンカーを表す、請求項２に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項４】
Ｒ４は、−ＮＨ２を表す、
請求項１に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項５】
Ｒ５及びＲ６は、同一の基を表す、
請求項１〜４のいずれか１項に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項６】
Ｒ５及びＲ６の一方は水素原子を表し、他方は炭素数１〜５のアルキル基を表す、
請求項１〜４のいずれか１項に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項７】
Ｒ２とＲ７とで−Ｏ−ＣＨ２−橋架け基（式中、−Ｏ−はＲ２基を担持する炭素原子に結合し、−ＣＨ２−はＲ７基を担持する炭素原子に結合している。）を形成し、Ｒ３はエチル基を表す、
請求項１〜６のいずれか１項に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項８】
Ｒ２は炭素数１〜３のアルコキシ基を表し、Ｒ３及びＲ７は水素原子を表す、
請求項１〜６のいずれか１項に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項９】
下記化合物群：
化合物１５ａ、
【化２】
0006051211.tif 000028
化合物１５ｂ、
【化３】
0006051211.tif 000029
化合物１５ｃ、
【化４】
0006051211.tif 000030
化合物１５ｅ、
【化５】
0006051211.tif 000031
化合物１５ｆ、
【化６】
0006051211.tif 000032
化合物１５ｈ、
【化７】
0006051211.tif 000033
化合物１５ｉ、
【化８】
0006051211.tif 000034
化合物１５ｋ、
【化９】
0006051211.tif 000035
化合物１８ａ、
【化１０】
0006051211.tif 000036
化合物１８ｂ、
【化１１】
0006051211.tif 000037
化合物１８ｃ、
【化１２】
0006051211.tif 000038
化合物１８ｅ、
【化１３】
0006051211.tif 000039
及び、化合物１８ｆ
【化１４】
0006051211.tif 000040
から選択される、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の合成五糖化合物及びその塩と、
医薬的に許容される希釈剤又は担体と
を含む医薬組成物。
【請求項１１】
薬剤として使用される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項１２】
薬剤として使用される、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記薬剤は、血液凝固異常の治療を目的とした薬剤である、
請求項１１に記載の前記用途のための請求項１〜９のいずれか１項に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項１４】
前記薬剤は、血液凝固異常の治療を目的とした薬剤である、
請求項１２に記載の前記用途のための請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記薬剤は、固形臓器移植に伴う虚血再灌流障害を防ぐことを目的とした薬剤である、
請求項１１に記載の前記用途のための請求項１〜９のいずれか１項に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項１６】
前記薬剤は、固形臓器移植に伴う虚血再灌流障害を防ぐことを目的とした薬剤である、
請求項１２に記載の前記用途のための請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記薬剤は、心臓手術中、体外膜型酸素供給中、又は、循環補助中の体外血液回路における血液凝固を予防する、又は、その危険性を下げることを目的とした薬剤である、
請求項１１に記載の前記用途のための請求項１〜９のいずれか１項に記載の合成五糖化合物及びその塩。
【請求項１８】
前記薬剤は、心臓手術中、体外膜型酸素供給中、又は、循環補助中の体外血液回路における血液凝固を予防する、又は、その危険性を下げることを目的とした薬剤である、
請求項１２に記載の前記用途のための請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の合成五糖化合物及びその塩と、
アビジンと
を含むキット。
【請求項２０】
請求項１０に記載の医薬組成物と、
アビジンと
を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は抗凝固剤（すなわち、血液凝固を防ぐ物質）に関する。より具体的には、本発明は抗血栓性オリゴ糖に関する。
【背景技術】
【０００２】
天然硫酸化多糖であるヘパリンは、グリコサミノグリカンファミリーに属する抗凝固物質の一つである。ヘパリンは、血液凝固カスケードにおけるいくつかのプロテアーゼ（特に第Ｘａ因子及びトロンビン）に対する阻害作用を促進する能力を通して抗凝固活性を示す。
【０００３】
ヘパリン及びヘパリン系薬剤は、アンチトロンビン（ＡＴ）の特定の結合領域に結合することで、第Ｘａ因子の活性を阻害する。ヘパリン又はヘパリン系薬剤は、アンチトロンビンの特定の結合領域に結合すると、アンチトロンビン（ＡＴ）の立体構造（コンフォメーション）を変化させる。このＡＴの立体構造変化が第Ｘａ因子阻害に関与している。これまでの研究結果によれば、有意にＡＴに結合し第Ｘａ因子を阻害できる最小の構成要素は、五糖類である。
【０００４】
このような立体構造の変化を誘発する物質の原型とも言えるのが、フォンダパリヌクスである。フォンダパリヌクスナトリウム（アリクストラ（商標）、グラクソ・スミスクライン）は、新しいタイプの抗血栓剤としては初めてのものである。フォンダパリヌクスナトリウムの半減期は、ラットでは約１時間、ヒトでは１７時間であり、抗凝固剤治療を必要とする患者に対して１日１回投与される。フォンダパリヌクスナトリウムは、ヘパリンのアンチトロンビン結合部位を模倣した、化学的に合成された五糖である。この五糖は、選択的第Ｘａ因子阻害剤であるため、トロンビン生成の阻害剤である。
【０００５】
フォンダパリヌクスの合成は時間がかかり複雑である。よって、同様の活性及び薬物動態プロファイルを維持しつつ、その化学的性質を簡素化する目的で、一連の五糖類が新しく考案されている（特許文献１、２）。
【０００６】
特許文献１には、Ｎ−硫酸基、Ｎ−酢酸基及びヒドロキシ基がアルコキシ基及びＯ−硫酸基で置換された合成五糖類が開示されている。特許文献２にも同様の合成五糖類が開示されており、そのＬ−イズロン酸単位は２Ｓ０立体構造でロックされており、そのＤ−グルクロン酸単位Ｅは最終的に５位にエチル基を有する。
【０００７】
しかしながら、これら五糖類の単位にアルキル基が存在すると、調製方法をかなり簡素化できる一方で、半減期は延長されるため、臨床使用に問題を生じさせる。
【０００８】
特許文献３でも合成五糖の提供を試みており、この特許文献では、腸壁を通過できるという五糖類の能力が抗血栓剤としての用途において重要であるとみなされている。
【０００９】
しかし、特許文献３に記載の多くの化合物についても半減期が長すぎることが分かった。
【００１０】
抗凝固性の五糖類の半減期、すなわち薬剤の血漿中濃度が半減するのに必要な時間は、非常に重要な薬物動態パラメータである。実際、例えば出血時などには、可能な限り早く抗凝固作用を止めて出血を止めることが必要な場合もある。
【００１１】
抗凝固剤の好適な半減期は、ヒトの場合は約５〜約２０時間であり、これはラットの場合の約０．５時間〜約３時間に相当する。
【００１２】
五糖にビオチン部位を導入した場合、ビオチンに強力に結合するタンパク質であるアビジンを注入することにより、抗凝固活性を素早く抑制することができる。
【００１３】
ビオチン基（ＩＵＰＡＣ名：５−［（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル］ペンタン酸、ビタミンＢ７としても知られる）とは以下に示す基である。
【００１４】
【化１】
0006051211.tif 000002
【００１５】
このようなビオチン基含有五糖類は、特許文献４により公知である。アビジンは、これらの化合物が標的に及ぼす作用を防ぐとともに、これらの化合物の排出を促進する。特許文献４に記載のビオチン基含有化合物の抗第Ｘａ因子活性は、ビオチン基を有していない対応物の活性と同等である。
【００１６】
このように、アビジンの投与によりビオチン基含有化合物の抗凝固活性を無効にすることが可能であり、これにより、半減期が長い抗凝固性五糖を使用することができるようになる。
【００１７】
しかしながら、血漿中には、ビオチンのカルボン酸末端におけるアミド結合を切断するビオチニダーゼ酵素が存在し、この酵素がビオチン基含有化合物と反応して化合物からビオチン基を脱離させ得る。その結果、ビオチン基が脱離した化合物は、もはやアビジンによって無効にされることはなく、生理学的に洗い流されるまで抗凝固活性を保続する。これは、抗凝固剤治療は長期に渡る可能性があり、ビオチン基が脱離した化合物が血漿中に蓄積し得ることから、深刻な問題である。したがって、依然として、半減期が短いビオチン基含有化合物を使用して、緊急時には化合物を即座に無効にでき、ビオチニダーゼによって化合物からビオチン基が脱離しても血漿中に蓄積しないようにすることが非常に望ましい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１８】
【特許文献１】米国特許第５５４３４０３号明細書
【特許文献２】国際公開第９９／３６４２８号
【特許文献３】欧州特許出願公開第２０７４１３１号明細書
【特許文献４】欧州特許出願公開第１３２２６７３号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１９】
本発明者らは、驚くべきことに、Ｄ単位の置換基を変更することで、アルキル化された或いはＯ−硫酸基で変性された五糖類の半減期を調整できることを見出した。
【００２０】
２位にアミノ官能基を導入すると半減期が短縮する。
【００２１】
この２位のアミノ官能基をビオチン化すると半減期が延長する。
【００２２】
Ｄ単位に遊離ヒドロキシ基を１つ導入すると半減期が短縮する。
【００２３】
本発明者らは、これらの各種知見を組み合わせることで、強力な第Ｘａ因子阻害剤として、半減期が短いビオチン基含有五糖類を特定するに至った。
【００２４】
したがって本発明は、合成が容易で半減期が短い五糖類、特にビオチン基含有五糖類を提供することを目的の一つとする。
【００２５】
本発明はまた、高い抗第Ｘａ因子活性を有する（つまりＩＣ５０値が低い）ビオチン基含有五糖類を提供することも目的の一つとする。
【００２６】
結果として、本発明の化合物、より詳しくはビオチン基含有化合物の使用により、先行技術における問題点が全て解決される。
【課題を解決するための手段】
【００２７】
本発明は、式（Ｉ）：
【００２８】
【化２】
0006051211.tif 000003
【００２９】
（式中、
Ｒ１は、炭素数１〜３のアルキル基を表し、
Ｒ２が炭素数１〜３のアルコキシ基を表し且つＲ７が水素原子を表すか、又は、Ｒ２とＲ７とで−Ｏ−ＣＨ２−又は−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−橋架け基（式中、−Ｏ−はＲ２基を担持する炭素原子に結合し、−ＣＨ２−はＲ７基を担持する炭素原子に結合している。）を形成し、
Ｒ３は、水素原子又はエチル基を表し、
Ｒ４は、−ＯＨ、−ＮＨ２、又は、−ＮＨ−ＬＣ−ビオチン（式中、ＬＣはリンカーを表し、好適には式：−（Ｃ＝Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ−（ｎは１〜１０）で表され、より好適には式：−（Ｃ＝Ｏ）−（ＣＨ２）４−ＮＨで表される。）を表し、
Ｒ５とＲ６とが異なる場合は、Ｒ５及びＲ６は、水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基及びペンチル基から選択され、
Ｒ５とＲ６とが同一である場合は、Ｒ５及びＲ６は、水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基及びペンチル基から選択されるが、
ただし、Ｒ１は、Ｒ５又はＲ６のうちの少なくとも１つとは異なる。）
で表される合成五糖化合物及びその塩に関する。
【００３０】
好適には、本発明の合成五糖化合物は、式（ＩＩ）：
【００３１】
【化３】
0006051211.tif 000004
【００３２】
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は上述の通り。）で表される。
【００３３】
Ｒ４は、−ＮＨ２、又は、−ＮＨ−ＬＣ−ビオチン（ＬＣは上述の通り。）を表してもよい。
【００３４】
ある実施形態においては、Ｒ５及びＲ６は、同一の基を表す。
【００３５】
別のある実施形態では、Ｒ５又はＲ６の一方は水素原子を表し、他方は炭素数１〜５のアルキル基を表す。
【００３６】
上記実施形態の全てのある変形例では、Ｒ２とＲ７とで−Ｏ−ＣＨ２−橋架け基（式中、−Ｏ−はＲ２基を担持する炭素原子に結合し、−ＣＨ２−はＲ７基を担持する炭素原子に結合している。）を形成し、Ｒ３はエチル基を表す。
【００３７】
上記実施形態の全ての別の変形例では、Ｒ２は炭素数１〜３のアルコキシ基を表し、Ｒ３及びＲ７は水素原子を表す。
【００３８】
本発明はまた、上記合成五糖化合物及びその塩と、医薬的に許容される希釈剤又は担体とを含む医薬組成物に関する。
【００３９】
本発明はまた、薬剤として、例えば血液凝固異常の予防及び治療を目的とした薬剤として使用される上記合成五糖化合物及びその塩に関する。
【００４０】
血液凝固異常とは、具体的には、深部静脈血栓症、肺塞栓症、急性冠症候群、心筋梗塞、脳卒中等、静脈血栓症又は動脈血栓症の１つをいう。血液凝固異常は心房細動に起因するものであってもよい。
【００４１】
本発明はまた、固形臓器移植に伴う虚血再灌流障害を防ぐための薬剤として使用される合成五糖化合物及びその塩に関する。
【００４２】
本発明はまた、心臓手術中、体外膜型酸素供給中、又は、人工心臓等による循環補助中の体外血液回路における血液凝固を予防する、又は、その危険性を下げる方法であって、上記合成五糖化合物及びその塩を投与することを含む方法に関する。
【００４３】
本発明はまた、上記合成五糖化合物及びその塩、又は、上記医薬組成物と、アビジンとを含むキットに関する。
【発明を実施するための形態】
【００４４】
定義
本発明の化合物は、医薬的に許容される塩の形態であってもよい。医薬品において使用する場合には、本発明の化合物の塩は、無毒な「医薬的に許容される塩」を指す。米国食品医薬品局（ＦＤＡ）認可の医薬的に許容される塩の形態には、医薬的に許容される酸性／陰イオン性、又は、塩基性／陽イオン性の塩が含まれる（Ｇｏｕｌｄ，Ｐ．Ｌ．，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，１９８４，３３，２０１−２７１；Ｂｅｒｇｅ，Ｓ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９７７，６６（１），１−１９）。
【００４５】
本発明の酸性又は塩基性化合物の医薬的に許容される塩は、言うまでもないが、遊離した塩基又は酸を化学量論量以上の所望の塩形成酸又は塩基と反応させる等、従来の方法で形成できる。
【００４６】
本発明の酸性化合物の医薬的に許容される塩としては、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、アンモニウム等の無機陽イオンとの塩や、有機塩基との塩が挙げられる。好適な有機塩基としては、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、アルギニン、ベンザチン、ジオラミン、オラミン、プロカイン及びトロメタミンが挙げられる。
【００４７】
本発明の塩基性化合物の医薬的に許容される塩としては、有機酸又は無機酸の誘導体である塩が挙げられる。好適な陰イオンとしては、酢酸イオン、アジピン酸イオン、ベシル酸イオン、臭化物イオン、カンシル酸イオン、塩化物イオン、クエン酸イオン、エジシル酸イオン、エストール酸イオン、フマル酸イオン、グルセプト酸イオン、グルコン酸イオン、グルクロン酸イオン、馬尿酸イオン、ヒクラート（ｈｙｃｌａｔｅ（塩酸塩水和物イオン））、臭化水素酸イオン、塩酸イオン、ヨウ化物イオン、イセチオン酸イオン、乳酸イオン、ラクトビオン酸イオン、マレイン酸イオン、メシル酸イオン、メチル臭化物イオン、メチル硫酸イオン、ナプシル酸イオン、硝酸イオン、オレイン酸イオン、パモ酸イオン、リン酸イオン、ポリガラクツロン酸イオン、ステアリン酸イオン、コハク酸イオン、硫酸イオン、スルホサリチル酸イオン、タンニン酸イオン、酒石酸イオン、テレフタル酸イオン、トシル酸イオン、及び、トリエチオジド（ｔｒｉｅｔｈｉｏｄｉｄｅ）が挙げられる。硫酸塩が特に好ましい。
【００４８】
本発明の治療方法における「投与」には、具体的に開示された化合物を用いて上述の種々の疾患を治療することが含まれるものとする。
【００４９】
本発明の化合物は、経口経路で、又は、静脈内投与、筋肉内投与、腹腔内投与、皮下投与、経皮的投与、直腸及び局所投与、並びに、吸入を含む非経口経路で投与できると考えられる。
【００５０】
経口投与の場合、本発明の化合物は、通常はタブレット、カプセル剤、水溶液又は懸濁液の形態で使用されることとなる。
【００５１】
経口使用されるタブレットは、不活性希釈剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、甘味剤、フレーバー剤、着色剤及び保存剤等の医薬的に許容される賦形剤と混合された有効成分を含んでいてもよい。好適な不活性希釈剤としては、炭酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸ナトリウム、リン酸カルシウム及びラクトースが挙げられる。好適な崩壊剤としては、コーンスターチ及びアルギン酸が挙げられる。結合剤としては、デンプン及びゼラチンが挙げられる。滑沢剤を使用する場合は、一般的には、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクが使用される。所望により、タブレットは、胃腸管での吸収を遅らせるためにモノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリル等の物質でコーティングされていてもよい。
【００５２】
経口使用のカプセル剤としては、有効成分が固体希釈剤と混合されたハードゼラチンカプセル剤や、有効成分が水又はオイル（落花生油、流動パラフィン、オリーブオイル等）と混合されたソフトゼラチンカプセル剤が挙げられる。
【００５３】
筋肉内、腹腔内、皮下及び静脈内での使用を含む非経口使用の場合は、本発明の化合物は、一般的に、適切なｐＨ及び等張性になるように緩衝した無菌水溶液又は懸濁液として提供される。好適な水性賦形剤としては、リンゲル液及び等張性塩化ナトリウム溶液が挙げられる。本発明における水性懸濁液は、セルロース誘導体、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン及びトラガカントゴム等の懸濁化剤や、レシチン等の湿潤剤を含んでいてもよい。水性懸濁液に好適な保存剤としては、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル及びｐ−ヒドロキシ安息香酸ｎ−プロピルが挙げられる。
【００５４】
投与の形態
本発明の化合物は、当該技術分野において周知の通り、そのまま直接送達されてもよいし、賦形剤（上記参照）を含む医薬組成物として送達されてもよい。本治療方法は、治療上有効な量の本発明の化合物を患者や患畜に投与することを含む。
【００５５】
本明細書において、「治療上有効な量」又は「治療上有効な用量」とは、標的となる病状の治療、改善若しくは予防、検知可能な治療効果若しくは予防効果の発揮、又は、患者や患畜の延命に必要な本発明の化合物の量を指す。このような分子の毒性及び治療効力は、細胞培養や動物実験による標準的な薬学的方法、例えばＬＤ５０（集団の５０％が死に至る量）やＥＤ５０（集団の５０％に治療の効果が現れる量）を測定するなどして決定できる。治療効果に対する毒性作用の用量比を治療指数といい、ＬＤ５０／ＥＤ５０の比で表される。治療指数が高い薬剤が好ましい。
【００５６】
治療上有効な量又は治療上有効な用量とは、研究者、獣医、医師又はその他の臨床家が求めている、組織、系、動物又はヒトにおける生物学的又は医学的反応を誘発する化合物又は医薬組成物の量である。例えば、抗凝固活性や、血液凝固異常（深部静脈血栓症や肺塞栓症等の深部静脈血栓塞栓症、術後深部静脈血栓症、冠症候群、心筋梗塞、脳卒中等）の治療が挙げられる。
【００５７】
厳密な処方、投与経路、用量及び服用間隔は、患者や患畜の症状の詳細を考慮した上で、当該技術分野において公知の方法に従って選択すべきである。
【００５８】
特定の患者や患畜に必要な特定の服用量は、治療対象の症状の重篤度、投与経路、患者や患畜の全般的健康状態（年齢、体重及び食生活）、患者や患畜の性別、投与のタイミング及び頻度、処方する医師の判断、並びに、治療に対する耐性／反応を含む多くの要因に応じて決定される。通常は、（単回用量か分割用量かに関わらず）１日の服用量は、０．０１〜５００ｍｇ／日、より一般的には０．１〜５０ｍｇ／日、最も一般的には１〜１０ｍｇ／日である。また、投与する用量は単位体重当たりであってもよく、この場合の典型的な用量は、０．００１ｍｇ／ｋｇ〜３ｍｇ／ｋｇ、特には０．０１ｍｇ／ｋｇ〜０．２ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ〜０．１ｍｇ／ｋｇであろう。
【００５９】
化学的定義
簡略化のため、本明細書では、通常は１価の基（例えば「アルキル」）を指す用語を、１価の基から１つ以上の水素原子を抜くことにより形成される２価、３価又は４価の橋架け基を指す場合にも使用する。その用語が１価の基を指すか多価の基を指すかは、文脈から明らかになろう。多価の橋架け基が環状部分から形成される場合、結合する結合部は、通常の原子価の法則に応じた好適な環原子上であればどの環原子上にあってもよい。
【００６０】
本明細書中、「アルキル」とは、示された通りの炭素数を有する直鎖又は分枝鎖の１価の飽和炭化水素基を指す。例えば、「炭素数１〜５のアルキル」には、炭素数１、２、３、４及び５のアルキル基が含まれる。特に限定されないが、好適なアルキル基の例としては、メチル基（−Ｍｅ）、エチル基（−Ｅｔ）、プロピル基（−Ｐｒ）、イソプロピル基、ブチル基（−Ｂｕ）、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基（−Ｐｅｎｔ）が挙げられる。
【００６１】
アルコキシとは、「アルキル−Ｏ−」基（式中、アルキルは上述の通り）を指す。特に限定されないが、好適なアルコキシ基の例としては、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基及びイソプロポキシ基が挙げられる。
【００６２】
本発明には、それぞれ単離した各種ジアステレオマーの他、混合物が包含されることは理解されるだろう。
【００６３】
本発明の化合物が電荷を持った形態を補う対イオン（カウンターイオン）は、水素等の医薬的に許容される対イオンであり、ナトリウム、カルシウム、マグネシウム及びカリウム等のアルカリ又はアルカリ土類金属イオンであることがより好ましい。
【００６４】
その他「化合物」基の定義については、当業者であれば上述の定義や通常の命名法の慣習に基づいて容易に理解できるであろう。
【００６５】
本発明のいずれか１つの態様に関して既述された任意の特徴はいずれも本発明の他の態様にも適用することができることは理解されるであろう。
【００６６】
例示された化合物の説明において、「ＩＣ５０」は、抗第Ｘａ因子活性を表す。
【００６７】
用途
本明細書に記載の上記化合物は、薬剤として使用することができる。さらに具体的には、上記化合物は、血液凝固異常の治療を目的とした薬剤として使用することができる。
【００６８】
血液凝固異常とは、具体的には、深部静脈血栓症、肺塞栓症、急性冠症候群、心筋梗塞、脳卒中等の静脈血栓症又は動脈血栓症の１つである。血液凝固異常は、心房細動に起因するものであってもよい。
【００６９】
本発明の化合物は、血液体外循環（ＥＣＣ）中に使用することもできる。したがって、抗凝固効果を阻害又は抑制できることが重要である。
【００７０】
本発明の化合物は、固形臓器移植に伴う虚血（血管の閉塞によって血液供給が不十分な状態）再灌流障害を防ぐための薬剤としても使用することができる。
【実施例】
【００７１】
本発明を下記例により更に説明する。
【００７２】
使用される略語
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＭＴＢＥ：メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴｆＯＨ：トリフルオロメタンスルホン酸
Ａｃ２Ｏ：無水酢酸
Ｂｎ：ベンジル
Ｐｈ：フェニル
Ｂｚ：ベンゾイル
Ｍｅ：メチル
Ｅｔ：エチル
Ｐｒ：プロピル
Ｂｕ：ｎ−ブチル
Ｐｅｎｔ：ペンチル
Ｈｅｘ：ヘキシル
Ａｃ：酢酸塩又は酢酸エステル（アセテート）
【００７３】
セクション１：単糖Ｄ単位の合成
【００７４】
【化４】
0006051211.tif 000005
【００７５】
化合物３の調製
Ｂｒｉｌｌ及びＴｉｒｅｆｏｒｔが記載した方法（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．（１９９８），３９，ｐｐ．７８７−７９０）と同様の方法でＣｅｒｎｙエポキシド１から化合物２（１，６：２，３−ジアンヒドロ−４−ＯＲｂ−［β］−Ｄマンノピラノース）を合成した。化合物２（１７．５ｍｍｏｌ）を１３０ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／水混合物［４／１（ｖ／ｖ）］に溶解し、そこにアジ化ナトリウム（２２．８ｇ、３５０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応媒体を１００℃で６時間加熱した。セライト濾過後、濾液を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル／シクロヘキサン混合物（２０ｍｌ／７ｍｌ）から再結晶して、化合物３を結晶として得た。
【００７６】
化合物４の調製
化合物３（１１ｍｍｏＬ）とＲａ−Ｘ（３３ｍｍｏＬ）を無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８０ｍｌ）に添加した冷却（０℃）混合液に、アルゴン雰囲気下で水素化ナトリウム（１．３ｇ、３３ｍｍｏＬ）を分割して添加した。この混合液を室温で２０時間撹拌した。過剰の水素化ナトリウムはメタノールで潰した。この反応液を真空下で濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃに溶かした。有機相を水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムのクロマトグラフィー（ｎ−ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）により精製して、白色固形の化合物４を得た。
【００７７】
化合物５の調製：アセトリシス（加酢酸分解）の一般法
乾燥させた丸底フラスコ中で、化合物４（１１ｍｍｏＬ）を無水酢酸（７３ｍＬ、７７０ｍｍｏＬ、７０当量）とトリフルオロ酢酸（１２．３ｍＬ、１６５ｍｍｏＬ、１５当量）との混合液に０℃で溶解した。この反応液を室温で一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去した後、トルエンと共に共沸留去した。残渣は、シリカゲルカラムのフラッシュクロマトグラフィーで精製して、所望の化合物５を得た。あるいは、残渣を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄後、さらに精製することなくそのまま次工程で使用した。
【００７８】
化合物６の調製：アノマー性ｐ−クロロチオフェノール基の導入
ＢＦ３・ＯＥｔ２（４．１９ｍＬ、３３ｍｍｏＬ）を、化合物５（１１ｍｍｏＬ）と４−ｐ−クロロチオフェノール（４．８ｇ、３３ｍｍｏＬ）とをトルエン（５５ｍＬ）に添加した撹拌懸濁液に０℃で加え、この混合液を室温で７時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３溶液をｐＨ＝７になるまで添加し、反応液を−２０℃で一晩冷却した。有機層を分離し、ＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を真空下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘプタン／酢酸エチル）によって精製して、化合物６を得た。
【００７９】
以下に、２種の化合物６ｆ（Ｒａ＝ＯＥｔ、Ｒｂ＝ＯＢｎ）及び６ｈ（Ｒａ＝ＯＥｔ、Ｒｂ＝ＯＥｔ）のＮＭＲデータを示す。
【００８０】
化合物６ｆ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ７．７７〜７．４１（ｍ（１０Ｈ  ａｒｏｍ．（＝芳香族性、以下同じ）），５．７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．４６Ｈｚ，Ｈ−１α），５．１４〜５．０２（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２−Ｂｎ），４．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，Ｈ−１β），４．４８〜４．４５（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６ａ／ｂ），４．０８〜３．８２（ｍ，２Ｈ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３），４．０６〜３．９４（ｍ，２Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−３），３．５５〜３．５１（ｍ，２Ｈ，Ｈ−４，Ｈ−５），２．２５（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−Ａｃ），１．４２（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３）
【００８１】
化合物６ｈ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ７．４５〜７．４０（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），７．３０〜７．２７（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），５．４８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，Ｈ−１），４．３０〜４．２６（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６ａ／ｂ），３．８１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，Ｈ−２），３．７２，３．５７（２ｓ，６Ｈ，２×ＯＭｅ），３．５０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，Ｈ−３），２．０８（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３−Ａｃ）
【００８２】
化合物７の調製：６−ＯＡｃ基の鹸化
１Ｎ水酸化ナトリウム（１２０ｍＬ）を、化合物６（１２０．９ｍｍｏＬ）を４５０ｍＬのＴＨＦ／メタノール（２／１）に添加した溶液に０℃で撹拌下にて滴下した。この反応液を室温で３時間撹拌し、真空下で濃縮した。残渣を水に溶解し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させて化合物７を得、さらに精製せずにそのまま次工程で使用した。
【００８３】
化合物８の調製：６−（ｐ−メトキシベンゾイル）基の導入
塩化ｐ−アニソイル（０．６３５ｇ、３．７２ｍｍｏＬ）を、化合物７（３．１ｍｍｏＬ）をピリジン（１０ｍＬ）に添加した撹拌溶液に０℃で滴下した。この反応液を室温で３時間撹拌した。この反応液をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、真空下で濃縮することで、粗生成物８を得た。これをカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘプタン／酢酸エチル）によって精製して、白色固形の純粋な化合物８を良好な収率で得た。
【００８４】
【化５】
0006051211.tif 000006
【００８５】
【表１】
0006051211.tif 000007
【００８６】
【表２】
0006051211.tif 000008
【００８７】
１２種の化合物（８ａ〜８ｌ）を調製した。いくつかの化合物例のＮＭＲデータを以下に示す。
【００８８】
化合物８ａ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ７．８３〜７．７７（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），７．３６〜７．１６（ｍ，１２Ｈ  ａｒｏｍ．），７．０９〜７．０３（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），６．８６〜６．８０（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），５．５１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，Ｈ−１α），４．９２〜４．７４（ｍ，４Ｈ，２×ＣＨ２−Ｂｎ），４．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，Ｈ−１β），３．９３〜３．８５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２），３．８４〜３．７０（ｍ，３Ｈ，Ｈ−３，Ｈ−４，Ｈ−５），３．７９（ｓ，３Ｈ，ＯＭｅ）
【００８９】
化合物８ｆ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ８．１３〜８．０８（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），７．６９〜７．５１（ｍ，７Ｈ  ａｒｏｍ．），７．３８〜７．３３（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），７．１５〜７．０９（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），５．７９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．４６Ｈｚ，０．７９  Ｈ−１α），５．１５〜５．０５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２−Ｂｎ），４．７９〜４．６５（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６ａ／ｂ），４．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，０．２１  Ｈ−１β），４．１２〜３．８７（ｍ，２Ｈ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３），４．１１〜４．０１（ｍ，３Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−３，Ｈ−４），４．０８（ｓ，３Ｈ，ＯＭｅ），３．６４〜３．５８（ｍ，１Ｈ，Ｈ−５），１．４５（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．１，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３）
【００９０】
化合物８ｇ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ８．１５〜８．０６（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），７．７０〜７．５０（ｍ，７Ｈ  ａｒｏｍ．），７．３８〜７．３２（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），７．１５〜７．０９（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），５．１５〜５．０５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２−Ｂｎ），５．８０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．４６Ｈｚ，Ｈ−１α），４．５６（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１β），４．１３〜３．９９（ｍ，２Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−３），３．７４〜３．７０（ｍ，３Ｈ，Ｈ−５，Ｈ−４），４．７８〜４．５７（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６ａ／ｂ），４．０３〜３．７１（ｍ，２Ｈ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３），１．９２〜１．７６（ｍ，２Ｈ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３），１．１２（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３）
【００９１】
化合物８ｈ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ７．９４〜７．９０（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），７．４１〜７．３８（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），７．１７〜７．１４（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），６．９６〜６．９１（ｍ，２Ｈ  ａｒｏｍ．），５．５４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，Ｈ−１），４．５６（ｍ，２Ｈ，Ｈ−６ａ／ｂ），４．４４（ｍ，２Ｈ，Ｈ−４，Ｈ−５），３．８４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，Ｈ−２），３．７９，３．７５，３．６１（３ｓ，９Ｈ，３×ＯＭｅ），３．５０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，Ｈ−３）
【００９２】
セクション２：五糖１３及び１５の合成
【００９３】
【化６】
0006051211.tif 000009
【００９４】
化合物１０の調製：グリコシド化工程
国際公開第２００８／０４１１３１号に既に記載の四糖９（９．５９ｍｍｏｌ）と、上述通り調製した単糖８（１９．２ｍｍｏｌ、２当量）を１／３（ｖ／ｖ）ジクロロメタン／メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル混合液（２６７ｍＬ）に溶解した。４Ａモレキュラーシーブ粉末（１当量／四糖９）を添加し、得られた懸濁液を室温で２時間撹拌した。この混合物を−５０℃で冷却し、ブロモダン（２８．７７ｍｍｏｌ、３当量）、次にトリフルオロメタンスルホン酸（１３．４３ｍｍｏｌ、１．４当量）を添加し、得られた反応液を−５０℃で２時間撹拌した。単糖８（１等量）を更に追加し、その反応液を−５０℃で１時間撹拌し、−２０℃で一晩保存した。その後、ｐＨ７〜８になるまでトリエチルアミンを添加して反応液を中和し、真空下で濃縮し、残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィー（トルエン／アセトン：９０／１０〜８０／２０）によって精製することで、五糖１０を収率６０〜８４％で得た。
【００９５】
化合物１１の調製：脱アセチル化及び鹸化
２Ｍ水酸化カリウム水溶液（６．２ｍＬ）を、化合物１０（０．１４ｍｍｏｌ）を２／１（ｖ／ｖ）テトラヒドロフラン／メタノール（１５ｍＬ）に添加した溶液に添加し、この混合液を室温で一晩撹拌した。得られた反応液をｐＨ４になるまで酸性樹脂Ｄｏｗｅｘ  ５０ｘ８−１００で中和した。樹脂を濾過によって除去し、濾液を乾燥するまで真空下で濃縮して、化合物１１を定量的収率で得た。
【００９６】
化合物１２の調製：硫酸化
三酸化硫黄−ピリジン錯体（４．２ｍｍｏｌ、３０当量）を、化合物１１（０．１４ｍｍｏｌ）を無水ピリジン（３ｍＬ）に添加した溶液に添加した。得られた混合液を暗所にて８０℃で１６時間加熱した。０℃まで冷却した後、メタノール（２ｍＬ）を添加し、得られた溶液を１時間撹拌した。その後、ｐＨ７〜８になるまで５％ＮａＨＣＯ３水溶液を添加し、この混合液を室温で一晩撹拌し、乾燥するまで濃縮した。残渣を水に溶解し、水を溶離液としてセファデックスＧ−２５カラム上で脱塩することにより、７０〜８０％の収率で化合物１２を得た。
【００９７】
化合物１３の調製：水素化分解
化合物１２（０．１６ｍｍｏｌ）をｔｅｒｔ−ブタノール（８ｍＬ）／水（８ｍＬ）混合液に添加した溶液を大気圧の水素雰囲気下にて１０％パラジウム担持炭（１当量）の存在下、１６時間処理した。濾過後（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（Ｒ）ＬＳＷＰ  ５μｍフィルター使用）、得られた溶液を乾燥するまで濃縮して、化合物１３を定量的収率で得た。
【００９８】
化合物１３ａ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＨ）：［α］Ｄ＝＋５２．４（ｃ＝０．８２，Ｈ２Ｏ）；質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ４８０．６［Ｍ−３Ｈ］３−。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）δ５．６４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＩＩ），５．４３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１  ＩｄｏＵＡＩＩ），５．２１〜５．１９（ｍ，２Ｈ，Ｈ−１  ＧｌｃＩ，Ｈ−１  ＧｌｃＶ），５．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＵＡＩＶ），３．７５〜３．５７（５ｓ，１５Ｈ，５×ＯＭｅ），２．２６／１．８７（ｍ，２Ｈ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３），１．０６（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３）
【００９９】
化合物１３ｂ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＭｅ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；９２２．８０５５［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，８５７．７２０６［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，７９３．１４４９［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，５２８．４２５８［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−，４８５．３７０１［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１００】
化合物１３ｃ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＥｔ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ９２９．８［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，８６４．７［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，７６０．２［Ｍ−２Ｈ］２−，４９０．０［Ｍ−３Ｈ］３−。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）δ５．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＩＩ），５．２８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，Ｈ−１  ＭａｎＵＡＩＩ），５．２１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＶ），５．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩ），４．８４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＶ），３．９３〜３．７４（ｍ，２Ｈ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３），３．６０，３．５３，３．４５，３．４４，３．４２（５ｓ，１５Ｈ，５×ＯＭｅ），２．０７／１．７１（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ３），１．１９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３），０．９０（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，−ＣＨ２−ＣＨ３）
【０１０１】
化合物１３ｄ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＰｒ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ８７２．１９８４［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，８０７．６２２６［Ｍ＋１ＤＢＡ−３Ｈ］２−，７６７．６４２４［Ｍ−２Ｈ］２−
【０１０２】
化合物１３ｅ（ＯＲ５＝ＯＭｅ、ＯＲ６＝ＯＨ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ８５７．６６［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，７９３．０９［Ｍ＋１ＤＢＡ−３Ｈ］２−，４８６．１０［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１０３】
化合物１３ｆ（ＯＲ５＝ＯＥｔｍ、ＯＲ６＝ＯＨ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ９２９．３［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，８６４．７［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，８００．１［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，７６０．２［Ｍ−２Ｈ］２−，４９０．０［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１０４】
化合物１３ｇ（ＯＲ５＝ＯＰｒ、ＯＲ６＝ＯＨ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ８７１．６９１９［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，８０７．１１７９［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，７６７．１３９７［Ｍ−２Ｈ］２−
【０１０５】
化合物１３ｈ（ＯＲ５＝ＯＭｅ、ＯＲ６＝ＯＭｅ）：［α］Ｄ＝＋７１．６（ｃ＝１，Ｈ２Ｏ）；質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ８６４．６［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，８００．０［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，５３３．０［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−，５９０．０［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１０６】
化合物１３ｉ（ＯＲ５＝ＯＥｔ、ＯＲ６＝ＯＥｔ）：［α］Ｄ＝＋７９．３（ｃ＝１，Ｈ２Ｏ）；質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ９４３．３［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，８７８．７［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，８１４．２［Ｍ＋ＤＢＡ＋３Ｈ］２−
【０１０７】
化合物１３ｊ（ＯＲ５＝ＯＰｒ、ＯＲ６＝ＯＰｒ）：［α］Ｄ＝＋６４．５（ｃ＝１，Ｈ２Ｏ）；質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ５０８．７［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１０８】
化合物１３ｋ（ＯＲ５＝ＯＢｕ、ＯＲ６＝ＯＢｕ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ９０６．６９９１［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，５６１．０７５６［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−，５１８．０２６７［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１０９】
化合物１３ｌ（ＯＲ５＝ＯＰｅｎｔ、ＯＲ６＝ＯＰｅｎｔ）：［α］Ｄ＝＋６６．９（ｃ＝１，Ｈ２Ｏ）；質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ９８５．３［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，９２０．８［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，５７０．４［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−，５２７．４［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１１０】
化合物１５の調製：ＬＣ−ビオチン化
化合物１３（０．０８６ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（８ｍＬ）溶液に、６−（ビオチンアミド）ヘキサン酸スクシンイミジル１４（５８．６ｍｇ、０．１２９ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（２２．５μＬ、０．１２９ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で２０時間撹拌した。その後、５％ＮａＨＣＯ３水溶液を加えた（３．６ｍＬ）。この混合液を室温で一晩撹拌し、乾燥するまで濃縮した。残渣を水に溶解し、水を溶離液としてセファデックスＧ−２５カラム上で脱塩して、収率６８〜８７％で化合物１５を得た。
【０１１１】
化合物１５ａ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＨ）：［α］Ｄ＝＋６４．８（ｃ＝１，Ｈ２Ｏ）；質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １１４９．９［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−，１０８４．８［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，１０２０．３［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，６７９．８［Ｍ＋２ＤＢＡ−５Ｈ］３−，６３６．８［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）δ５．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＩＩ），５．４２（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１  ＭａｎＵＡＩＩ），５．３２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＶ），５．２２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩ），５．１７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＶ），４．５４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６ビオチン），４．４２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２ビオチン），３．７５〜３．５４（５ｓ，１５Ｈ，５×ＯＭｅ），３．３３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１ビオチン），２．９９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，Ｈ−７ａビオチン），２．７６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，Ｈ−７ｂビオチン），２．２８／１．９３（ｍ，２Ｈ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３），１．１９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３）
【０１１２】
化合物１５ｂ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＭｅ）：［α］Ｄ＝＋５９．２（ｃ＝１，Ｈ２Ｏ）；質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １１５６．９７６８［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−，１０９２．９１６４［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，１０２７．３１０３［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−
【０１１３】
化合物１５ｃ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＥｔ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １１６３．９［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−，１０９８．９［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，１０３４．３［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，９６９．７［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，６８９．２［Ｍ＋２ＤＢＡ−５Ｈ］３−，６４６．１［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）δ５．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＩＩ），５．２６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１  ＭａｎＵＡＩＩ），５．１６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＶ），５．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩ），５．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＶ），４．５４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６ビオチン），４．４２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２ビオチン），３．９８〜３．７３（ｍ，２Ｈ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３），３．５９，３．４７，３．４４，３．４３，３．３８（５ｓ，１５Ｈ，５×ＯＭｅ），３．３３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１ビオチン），２．９９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，Ｈ−７ａビオチン），２．７６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，Ｈ−７ｂビオチン），１．１９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３）
【０１１４】
化合物１５ｅ（ＯＲ５＝ＯＭｅ、ＯＲ６＝ＯＨ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １１５６．９［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−，１０９１．９［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，１０２７．３［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，９６２．７［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）δ７．９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，ＮＨ  ＧｌｃＶ），５．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＩＩ），５．２７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１  ＭａｎＵＡＩＩ），５．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＶ），５．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩ），５．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＶ），４．５９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６ビオチン），４．４１（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２ビオチン），３．５９，３．５５，３．４７，３．４４，３．４３，３．３７（６ｓ，１８Ｈ，６×ＯＭｅ），３．３３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１ビオチン），２．９９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，Ｈ−７ａビオチン），２．７６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，Ｈ−７ｂビオチン）
【０１１５】
化合物１５ｆ（ＯＲ５＝ＯＥｔ、ＯＲ６＝ＯＨ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １１６３．９［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−，１０９８．９［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，１０３４．３［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，９６９．７［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，７４５．２［Ｍ＋３ＤＢＡ−６Ｈ］３−，６４６．１［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−
【０１１６】
化合物１５ｈ（ＯＲ５＝ＯＭｅ、ＯＲ６＝ＯＭｅ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １１６４．５［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−
【０１１７】
化合物１５ｉ（ＯＲ５＝ＯＥｔ、ＯＲ６＝ＯＥｔ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １１７８．５［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−，１０４８．８［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，９８４．２［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，６９８．９［Ｍ＋２ＤＢＡ−５Ｈ］３−，６５５．８［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−
【０１１８】
化合物１５ｊ（ＯＲ５＝ＯＰｒ、ＯＲ６＝ＯＰｒ）：［α］Ｄ＝＋４７．４（ｃ＝１．６，Ｈ２Ｏ）；質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ７０７．８［Ｍ＋２ＤＢＡ−５Ｈ］３−，６６４．８［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−，６２１．７［Ｍ−３Ｈ］３−，４６６．０［Ｍ−４Ｈ］４−
【０１１９】
化合物１５ｋ（ＯＲ５＝ＯＢｕ，ＯＲ６＝ＯＢｕ）：［α］Ｄ＝＋５６．１（ｃ＝０．９５，Ｈ２Ｏ）；質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １２０６．４３１９［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−，１１４１．９２９８［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，７１７．５７１６［Ｍ＋２ＤＢＡ−５Ｈ］３−，６７４．５１０５［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−，６３１．４７２２［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１２０】
化合物１５ｌ（ＯＲ５＝ＯＰｅｎｔ、ＯＲ６＝ＯＰｅｎｔ）：［α］Ｄ＝＋６４．０（ｃ＝１，Ｈ２Ｏ）；質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １２２０．０２６７［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−，１１５５．４４８６［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，１０９０．３６９０［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，７２６．５６８６［Ｍ＋２ＤＢＡ−５Ｈ］３−，６８３．５１７３［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−，６４０．４６６５［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１２１】
セクション３：五糖１７及び１８の合成
下記スキーム３に示すように、国際公開第２００６／０６７１７３号に既に記載の四糖１６と単糖８を出発物質として、化合物１３及び１５と同様の方法（スキーム２）で化合物１７及び１８を調製した。
【０１２２】
【化７】
0006051211.tif 000010
【０１２３】
化合物１７は、化合物１３と同様の方法で調製した。
【０１２４】
化合物１７ａ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＨ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ８３７．６３５３［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，７７３．０６０２［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，７０８．４９２９［Ｍ−２Ｈ］２−。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）δ５．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＶ），５．５１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＩＩ），５．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩ），４．９９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１  ＩｄｏＵＡＩＩ），４．８１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＵＡＩＶ），３．７６〜３．５７（６ｓ，１８Ｈ，６×ＯＭｅ）
【０１２５】
化合物１７ｂ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＭｅ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ９０９．２［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，８４４．７［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，７８０．１［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，７１５．５［Ｍ−２Ｈ］２−。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）δ５．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＩＩ），５．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＶ），５．０４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩ），４．９８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１  ＩｄｏＵＡＩＩ），４．６４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＵＡＩＶ），３．６１（ｓ，３Ｈ，ＯＭｅ），３．５５（２ｓ，６Ｈ，ＯＭｅ），３．５０（２ｓ，６Ｈ，ＯＭｅ），３．４８（ｓ，３Ｈ，ＯＭｅ），３．４２（ｓ，３Ｈ，ＯＭｅ）
【０１２６】
化合物１７ｃ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＥｔ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ８５１．６８７０［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，７８７．１１０６［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，７２２．５３３８［Ｍ−２Ｈ］２−，４８１．３４８７［Ｍ−３Ｈ］３−。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）δ５．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＩＩ），５．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＶ），５．１９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩ），５．１３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１  ＩｄｏＵＡＩＩ），４．７９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＵＡＩＶ），３．９８〜３．９１（ｍ，２Ｈ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３），３．７５〜３．５７（６ｓ，１８Ｈ，６×ＯＭｅ），１．３２（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，Ｒ−ＣＨ２−ＣＨ３）
【０１２７】
化合物１７ｅ（ＯＲ５＝ＯＭｅ、ＯＲ６＝ＯＨ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ８４４．６５５０［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，７８０．０８０１［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，７１５．５０９２［Ｍ−２Ｈ］２−，４７６．６６４１［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１２８】
化合物１７ｆ（ＯＲ５＝ＯＥｔ、ＯＲ６＝ＯＨ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ８５１．７［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，７８７．１［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，７２２．５［Ｍ−２Ｈ］２−，４８１．３［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１２９】
化合物１７ｈ（ＯＲ５＝ＯＭｅ、ＯＲ６＝ＯＭｅ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ９１６．２８１７［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，８５１．７０５７［Ｍ＋２ＤＢＡ＋２Ｎａ−４Ｈ］２−，７８７．１２９８［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，７２２．５５４１［Ｍ−２Ｈ］２−，４８１．３６５４［Ｍ−３Ｈ］３−。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ），δ５．４８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＶ），５．３６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＩＩ），５．０４（ｍ，２Ｈ，Ｈ−１  ＩｄｏＵＡＩＩ，Ｈ−１  ＧｌｃＩ），４．６７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＵＡＩＶ），３．６４〜３．４２（８ｓ，２４Ｈ，８×ＯＭｅ）
【０１３０】
化合物１８は、化合物１５と同様の方法で調製した。
【０１３１】
化合物１８ａ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＨ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード））；ｍ／ｚ  ７１８．２１５［Ｍ＋３ＤＢＡ−６Ｈ］３−，６７１．５２８［Ｍ＋２ＤＢＡ−５Ｈ］３−，６２８．１４２［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−，５８５．０９０［Ｍ−３Ｈ］３−。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）δ５．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＩＩ），５．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．９Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＶ），５．０４（ｄ，１Ｈ，＝３．７Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩ），４．９９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−１  ＩｄｏＵＡＩＩ），４．６７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＵＡＩＶ），３．６０〜３．４２（６ｓ，１８Ｈ，６×ＯＭｅ），４．６１（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６ビオチン），４．４２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２ビオチン），３．３３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１ビオチン），３．０１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，Ｈ−７ａビオチン），２．７７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，Ｈ−７ｂビオチン）
【０１３２】
化合物１８ｃ（ＯＲ５＝ＯＨ、ＯＲ６＝ＯＥｔ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １１５０．８８２８［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−，１０８６．３１８７［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，１０２１．２５６５［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，９５６．６７２３［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，８９２．１０９８［Ｍ−２Ｈ］２−，５９４．３９４２［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１３３】
化合物１８ｅ（ＯＲ５＝ＯＭｅ、ＯＲ６＝ＯＨ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １１４３．８５９４［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−，１０７８．７８８６［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，１０１４．２１４１［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，９４９．６４４４［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，６３２．７５０２［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−，５８９．７０２０［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１３４】
化合物１８ｆ（ＯＲ５＝ＯＥｔ、ＯＲ６＝ＯＨ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  １１５１．４［Ｍ＋４ＤＢＡ−６Ｈ］２−，１０８５．８［Ｍ＋３ＤＢＡ−５Ｈ］２−，１０２１．２［Ｍ＋２ＤＢＡ−４Ｈ］２−，９５７．２［Ｍ＋ＤＢＡ−３Ｈ］２−，６３７．４［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−，５９４．４［Ｍ−３Ｈ］３−
【０１３５】
化合物１８ｈ（ＯＲ５＝ＯＭｅ、ＯＲ６＝ＯＭｅ）：質量（ＥＳＩ法，ネガティブモード）；ｍ／ｚ  ６３７．４２６１［Ｍ＋ＤＢＡ−４Ｈ］３−，５９４．３７９２［Ｍ−３Ｈ］３−，４４５．０６６２［Ｍ−４Ｈ］４−。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ），δ５．３６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＩＩＩ），５．２４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．９Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＶ），５．０４（ｍ，２Ｈ，Ｈ−１  ＧｌｃＩ，Ｈ−１  ＩｄｏＵＡＩＩ），４．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｈ−１  ＧｌｃＵＡＩＶ），３．５９〜３．４３（８ｓ，２４Ｈ，８×ＯＭｅ），４．５９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６ビオチン），４．４２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２ビオチン），３．３３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−１ビオチン），２．９９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，Ｈ−７ａビオチン），２．７６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，Ｈ−７ｂビオチン）
【０１３６】
生物学的試験
本発明の化合物の生物活性の試験に好適な分析方法が種々存在することは理解されるであろうが、本発明の化合物の生物活性の試験に好適な方法を以下に挙げる。
【０１３７】
化合物の抗第Ｘａ因子活性（ＩＣ５０）の測定
本発明の化合物は、アンチトロンビン（ＡＴ）を活性化することで血液凝固第Ｘａ因子を阻害する。これらの化合物の第Ｘａ因子阻害能をＡＴ存在下にて標準条件で比較した。各化合物について、阻害％対濃度を表す曲線をプロットした。第Ｘａ因子活性を５０％阻害する濃度（ＩＣ５０）を測定した。測定のため市販のシステムを使用した（Ｓｔａｃｈｒｏｍ  ＨＰキット（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ  Ｓｔａｇｏ））。本分析は、ＳＴＡ  Ｃｏｍｐａｃｔ（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ  Ｓｔａｇｏ）で行った。
【０１３８】
血漿中の化合物の定量
ラットの血漿中の化合物の濃度（化合物（μｇ）／血漿（ｍＬ））をそれらの抗第Ｘａ因子活性に基づいて生物学的定量法で測定した（上記Ｓｔａｃｈｒｏｍ  ＨＰキット（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ  Ｓｔａｇｏ））。本分析は、ＳＴＡ  Ｃｏｍｐａｃｔ（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ  Ｓｔａｇｏ）で行った。定量されるラット血漿中の各化合物についてそれぞれ検量線を作成した。
【０１３９】
静脈内投与（排出半減期、Ｔ１／２）後の薬物動態研究
雌のＷｉｓｔａｒ  Ｈａｎラットにおいて、静脈内投与後に本発明の化合物の薬物動態を調べた。
【０１４０】
様々な時点で血液サンプルを採取し、血液（９体積部）をクエン酸ナトリウム（１体積部）と混合し、直ちに氷上で冷却した。サンプルを低温（血漿は通常は８℃未満の温度で２４時間安定）にて３０００×ｇ（遠心力）で１０分間遠心分離し、−２０℃で冷凍保存した。化合物の濃度（血漿のｍＬ当たり）は、上述のように第Ｘａ因子活性を用いてそれぞれの抗第Ｘａ因子活性から求めた。
【０１４１】
このようにして得られた濃度対時間曲線から各化合物の排出半減期を算出した。
【０１４２】
結果
ファミリー１（Ｒ２とＲ７とで橋架け基を形成、Ｒ４＝−ＮＨ２、Ｒ５＝Ｒ６）
【０１４３】
【化８】
0006051211.tif 000011
【０１４４】
【表３】
0006051211.tif 000012
【０１４５】
比較１
Ｐｅｔｉｔｏｕの国際公開第９９／３６４２８号に記載の方法と同様の方法で化合物ＰＡ０１を合成した。
【０１４６】
【化９】
0006051211.tif 000013
【０１４７】
化合物ＰＡ０１のラットでの半減期Ｔ１／２は３．５±０．３時間、ＩＣ５０活性は３４ｎＭである。
【０１４８】
化合物ＰＡ０１及び化合物１３ｈは、Ｒ４基について異なり、化合物（ＰＡ０１）が−ＯＭｅ基を有する一方、化合物１３ｈは−ＮＨ２基を有する。これらを比較した場合、化合物１３ｈの半減期は、化合物ＰＡ０１の半減期に比べて約６６％短縮していることがわかる。
【０１４９】
更に、化合物１３ｉ〜１３ｌと比較することもできる。これらの化合物は、第Ｘａ因子阻害活性を維持しつつ、いずれも化合物ＰＡ０１より短い半減期を示すことが分かるはずである。
【０１５０】
比較２
欧州特許出願公開第２０７４１３１号明細書と同様の方法で化合物ＰＡ０２を合成した。
【０１５１】
【化１０】
0006051211.tif 000014
【０１５２】
化合物ＰＡ０２のラットでの半減期Ｔ１／２は４．８±０．５、ＩＣ５０活性は１０８ｎＭである。
【０１５３】
化合物１３ｈ〜１３ｌは、化合物ＰＡ０２と異なり、Ｒ５及びＲ６に炭素数がより少ないアルキルオキシ基を有する。化合物１３ｈ〜１３ｋのラットでの半減期は化合物ＰＡ０２より短く、１．２時間（−ＯＭｅ）〜３．２時間（−ＯＰｅｎｔ）である。
【０１５４】
更に、化合物１３ｈ〜１３ｌは、化合物ＰＡ０２に比べて高い抗第Ｘａ因子活性を示す。すなわち、化合物１３ｈ〜１３ｋは、より低いＩＣ５０を示す。化合物１３ｈ〜１３ｌのＩＣ５０値は、９９ｎＭ（−ＯＭｅ）〜３４ｎＭ（−ＯＢｕ及び−ＯＰｅｎｔ）である。
【０１５５】
このように限られた構造を選択することにより、先行技術の化合物と比較して半減期が短い化合物が得られることに注目すべきである。
【０１５６】
ファミリー２（Ｒ２とＲ７とで橋架け基を形成、Ｒ４＝−ＮＨ２、Ｒ５≠Ｒ６）
【０１５７】
【化１１】
0006051211.tif 000015
【０１５８】
【表４】
0006051211.tif 000016
【０１５９】
やはり、このように限られた構造を選択することにより、先行技術の化合物と比較して半減期が短い化合物が得られることが分かるはずである。
【０１６０】
ファミリー３（Ｒ２とＲ７とで橋架け基を形成、Ｒ４＝−ＮＨ−ＬＣ−ビオチン、Ｒ５＝Ｒ６）
【０１６１】
【化１２】
0006051211.tif 000017
【０１６２】
【表５】
0006051211.tif 000018
【０１６３】
ＬＣは下記式を表す。
【０１６４】
【化１３】
0006051211.tif 000019
【０１６５】
ビオチン（ＩＵＰＡＣ名：５−［（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル］ペンタン酸、ビタミンＢ７としても知られる）は下記基である。
【０１６６】
【化１４】
0006051211.tif 000020
【０１６７】
比較３
化合物ＰＡ０１及び化合物１５ｈは、Ｒ４基について異なり、化合物ＰＡ０１が−ＯＭｅ基を有する一方、化合物１５ｈは−ＮＨ−ＬＣ−ビオチン基を有する。これらを比較した場合、化合物１５ｈの半減期は、化合物ＰＡ０１の半減期に比べて約５４％短縮していることがわかる。
【０１６８】
更に、化合物１５ａ及び１５ｉと比較することもできる。これらの化合物は、化合物ＰＡ０１より短い半減期を示すことが分かるはずである。
【０１６９】
また、化合物１５ｈ、１５ｉ及び１５ｋは、化合物ＰＡ０１よりＩＣ５０活性が低いことから、より良好な第Ｘａ因子阻害剤である。
【０１７０】
比較４
化合物ＰＡ０２及び化合物１５ａは、Ｒ５及びＲ６基について異なり、化合物ＰＡ０２が−ＯＨｅｘ（ヘキソキシ）基を有する一方、化合物１５ａは−ＯＨ基を有する。また、Ｒ４基についても異なり、化合物ＰＡ０２が−ＮＨ２基を有する一方、化合物１５ａは−ＮＨ−ＬＣ−ビオチン基を有する。両者を比較した場合、化合物１５ａの半減期は、化合物ＰＡ０２に比べて約７３％短縮していることがわかる。
【０１７１】
化合物１５ｈ〜１５ｋは、化合物ＰＡ０２と異なり、Ｒ５及びＲ６として炭素数がより少ないアルキルオキシ基を有する。化合物１５ｈ〜１５ｋの半減期は、化合物ＰＡ０２の半減期より短い。
【０１７２】
更に、化合物１５ｈ〜１５ｋの活性は、化合物ＰＡ０２に比べて高い。化合物１５ａのＩＣ５０値が５６ｎＭであるのに対し、化合物１５ｈ〜１５ｉのＩＣ５０値は３３ｎＭ未満にとどまっている。
【０１７３】
比較５
ファミリー１及びファミリー３の各化合物は、Ｒ４基について異なり、ファミリー１の化合物が−ＮＨ２基を有する一方、ファミリー３の化合物は−ＮＨ−ＬＣ−ビオチン基を有する。ファミリー３の化合物は、ファミリー１の化合物より高い抗第Ｘａ因子活性（より低いＩＣ５０）を示すとともに、依然として許容範囲内の半減期を有する。
【０１７４】
結果として、ファミリー１の化合物に対してビオチン基をグラフト化することで、抗第Ｘａ因子活性が驚くほど向上する。
【０１７５】
ファミリー４（Ｒ２とＲ７とで橋架け基を形成、Ｒ４＝−ＮＨ−ＬＣ−ビオチン、Ｒ５≠Ｒ６）
【０１７６】
【化１５】
0006051211.tif 000021
【０１７７】
【表６】
0006051211.tif 000022
【０１７８】
比較６
ファミリー２及びファミリー４の各化合物は、Ｒ４基について異なり、ファミリー２の化合物が−ＮＨ２基を有する一方、ファミリー４の化合物は−ＮＨ−ＬＣ−ビオチン基を有する。ファミリー４の化合物は、ファミリー２の化合物より高い抗第Ｘａ因子活性（より低いＩＣ５０）を示すとともに、依然として許容範囲内の半減期を有する。
【０１７９】
結果として、ファミリー２の化合物に対してビオチン基をグラフト化することで、抗第Ｘａ因子活性が驚くほど向上する。
【０１８０】
ファミリー５（Ｒ２＝アルコキシ、Ｒ７＝Ｈ、Ｒ４＝−ＮＨ２）
【０１８１】
【化１６】
0006051211.tif 000023
【０１８２】
【表７】
0006051211.tif 000024
【０１８３】
ファミリー６（Ｒ２＝アルコキシ、Ｒ７＝Ｈ、Ｒ４＝−ＮＨ−ＬＣ−ビオチン）
【０１８４】
【化１７】
0006051211.tif 000025
【０１８５】
【表８】
0006051211.tif 000026
【０１８６】
比較７
ファミリー５及びファミリー６の対応する化合物を比較すると、Ｒ４基について異なり、ファミリー５が−ＮＨ２基を有する一方、ファミリー６は−ＮＨ−ＬＣ−ビオチン基を有するが、ファミリー６の化合物は、ファミリー５の化合物より高い抗第Ｘａ因子活性を示すとともに、依然として許容範囲内の半減期を有する。
【０１８７】
結果として、ファミリー５の化合物に対してビオチン基をグラフト化することで、抗第Ｘａ因子活性が驚くほど向上する。