(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下：
（ａ）第１の密封容器および該密封容器内に含まれる滅菌乾燥微粒子組成物であって、該微粒子組成物は、生分解性ポリマーを含む、活性薬剤を含まない生分解性微粒子を含み、ここで、該生分解性ポリマーは、ポリエステル、ポリオルトエステル、ポリカーボネート、ポリシアノアクリレート、ポリホスファジン、およびこれらの組み合わせからなる群から選択され、ここで該密封容器は、滅菌流体の導入および除去を可能にするように構成されており、該微粒子組成物が、γ線照射により滅菌されている、密封容器および滅菌乾燥微粒子組成物；ならびに、
（ｂ）滅菌流体の導入および除去を可能にするように構成されている第２の密封容器であって、抗原を含む滅菌抗原性組成物を含む、第２の密封容器
を含む、キット。
【請求項２】
前記密封容器は、隔壁を含む、請求項１に記載のキット。
【請求項３】
前記生分解性微粒子は、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）を含む、請求項１または２に記載のキット。
【請求項４】
前記微粒子組成物が２５ｍｇ／ｍｌの濃度を有するような量の水を前記第１の密封容器に添加した際に、前記微粒子が０．５〜５μｍの間のＤ（ｖ，０．５）値を有する懸濁物が、形成される、請求項１〜３のいずれかに記載のキット。
【請求項５】
前記微粒子組成物は、凍結乾燥した微粒子組成物である、請求項１〜４のいずれかに記載のキット。
【請求項６】
前記凍結乾燥した微粒子組成物は、凍結保護因子をさらに含む、請求項５に記載のキット。
【請求項７】
前記第１の密封容器は、４〜５０ｍｇの間の前記微粒子および５〜１５０ｍｇの１種以上の薬学的賦形剤を含む単一用量容器である、請求項１〜６のいずれかに記載のキット。
【請求項８】
前記微粒子組成物は、荷電した微粒子を含む、請求項１〜７のいずれかに記載のキット。
【請求項９】
前記荷電した微粒子は、前記生分解性ポリマーに加えて、荷電した種を含む、請求項８に記載のキット。
【請求項１０】
前記荷電した種は、アニオン性界面活性剤およびカチオン性界面活性剤から選択される、請求項９に記載のキット。
【請求項１１】
前記微粒子組成物が２５ｍｇ／ｍＬの濃度となる量の水を前記第１の密封容器に添加した際に、懸濁物が形成され、ここで前記微粒子が生理学的ｐＨにおいて＋２０ｍＶより高いかもしくは−２０ｍＶ未満であるゼータ電位を有する、請求項１〜１０のいずれかに記載のキット。
【請求項１２】
前記微粒子組成物は、免疫学的アジュバントをさらに含む、請求項１〜１１のいずれかに記載のキット。
【請求項１３】
前記免疫学的アジュバントは、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）、３−Ｏ−脱アセチル化ＭＰＬ（３ｄＭＰＬ）、低分子免疫増強剤、ムラミルトリペプチドホスファチジルエタノールアミンおよびトコフェロールから選択される、請求項１２に記載のキット。
【請求項１４】
前記免疫学的アジュバントは、Ｔｏｌｌ様レセプター（ＴＬＲ）の活性化因子である、請求項１２に記載のキット。
【請求項１５】
前記ＴＬＲは、Ｔｏｌｌ様レセプター２（ＴＬＲ  ２）、Ｔｏｌｌ様レセプター７（ＴＬＲ  ７）、Ｔｏｌｌ様レセプター８（ＴＬＲ８）、もしくはこれらの組み合わせから選択される、請求項１４に記載のキット。
【請求項１６】
前記抗原性組成物は、凍結乾燥した組成物である、請求項１〜１５のいずれかに記載のキット。
【請求項１７】
前記抗原性組成物は、ペプチド含有抗原およびポリヌクレオチド含有抗原から選択される抗原を含む、請求項１〜１６のいずれかに記載のキット。
【請求項１８】
滅菌水性液体、シリンジ、もしくはその両方をさらに含む、請求項１〜１７のいずれかに記載のキット。
【請求項１９】
前記滅菌抗原性組成物が水性液体であり、前記微粒子組成物が該水性液体と組み合わせられ、そして、混合され、該組み合わせ物が混合して３０分以内に脊椎動物被験体に投与されることを特徴とする、請求項１〜１２のいずれかに記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、２０１０年１月２４日に出願された米国仮出願番号６１／２９７，８０５号からの優先権を主張し、上記米国仮出願は、その全容が参考として本明細書に援用される。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
粒状キャリアは、適切な免疫応答を誘発しようとする試みにおいて、吸着もしくは捕捉された抗原とともに使用されてきた。このようなキャリアは、免疫系に選択された抗原の複数のコピーを提示し、局所リンパ節において抗原の捕捉および保持を促進すると考えられる。上記粒子は、マクロファージによってファゴサイトーシスを受け得、サイトカイン放出を介して抗原提示を増強し得る。
【０００３】
例えば、共有に係る特許文献１および同時係属中の特許文献２は、免疫学的応答（細胞媒介性免疫学的応答を含む）を刺激するために、抗原が吸着され、抗原が閉じ込められた微粒子の使用、ならびに上記微粒子を作製するための方法を記載する。上記微粒子を形成するために使用され得るポリマーは、ポリ（ラクチド）およびポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧ）を含む。
【０００４】
共有に係る特許文献３および特許文献４、ならびに特許文献５は、吸着された高分子（ポリヌクレオチドおよびポリペプチド抗原が挙げられる）を有する微粒子を作製するための方法を開示している。上記微粒子は、例えば、ポリマー（例えば、ポリ（α−ヒドロキシ酸）（例えば、ＰＬＧＡ、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、ポリオルトエステル、ポリ酸無水物など））を含み、例えば、カチオン性、アニオン性もしくは非イオン性の界面活性剤を使用して形成される。アニオン性界面活性剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を含むＰＬＧ微粒子）を含む微粒子は、正に荷電した高分子（例えば、ポリペプチド）とともに使用され得る。カチオン性界面活性剤を含む微粒子（例えば、ＣＴＡＢ（セトリミド（ｃｅｔｒｉｍｉｄｅ）もしくはセチルトリメチルアンモニウムブロミドとしても公知）を有するＰＬＧ微粒子）は、負に荷電した高分子（例えば、ＤＮＡ）とともに使用され得る。免疫学的応答（細胞媒介性免疫学的応答が挙げられる）を刺激するためのこのような微粒子の使用もまた、開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第９８／３３４８７号
【特許文献２】米国特許出願公開第２００３／００４９２９８号明細書
【特許文献３】国際公開第００／０６１２３号
【特許文献４】国際公開第０１／３６５９９号
【特許文献５】米国特許第６，８８４，４３５号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の要旨）
本発明は、生分解性微粒子を含む滅菌微粒子組成物を提供し、上記生分解性微粒子は、少なくとも１種の生分解性ポリマーを含む。
【０００７】
特定の実施形態において、上記滅菌微粒子組成物は、乾燥している。
【０００８】
特定の実施形態において、上記微粒子組成物は、ブランクである（すなわち、それらは、活性薬剤（例えば、薬物、免疫学的アジュバント、抗原などを含む医薬）を含まない）。
【０００９】
特定の実施形態において、本発明の滅菌微粒子組成物内の上記生分解性ポリマーは、合成生分解性ポリマーであり、例えば、とりわけ、ポリエステル（例えば、ポリ［ヒドロキシ酸］、ポリ［環式エステル］など）、ポリカーボネート、ポリオルトエステル、ポリ酸無水物、ポリシアノアクリレート、ポリホスファジン、およびこれらの組み合わせから選択される。
【００１０】
特定の実施形態において、上記滅菌微粒子組成物は、γ線照射されている。それらの調製後に密封環境において上記微粒子組成物をγ線照射することによって、上記微粒子組成物が、無菌条件下で製造された場合でも、滅菌生成物を提供することは可能である。
【００１１】
本発明に従う滅菌微粒子組成物は、例えば、滅菌流体の導入および除去を可能にするように構成されている密封容器内で（例えば、ゴム製隔壁などを有するガラス製バイアル内で）提供され得る。
【００１２】
このような密封容器内で滅菌乾燥微粒子組成物を提供することによって、上記微粒子は、水性流体（例えば、注射用水）に曝され得、それによって、上記微粒子の水性懸濁物を形成し、これは、その後、引き抜かれて、患者に投与され得る。
【００１３】
好ましくは、上記微粒子組成物が２５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在するような量の水が添加された際に、上記懸濁した微粒子が１０μｍ未満（例えば、１０μｍから５μｍまで、２．５μｍまで、１μｍまで、５００ｎｍまで、２５０ｎｍまで、１００ｎｍまでもしくはこれ以下の範囲に及ぶ）のＤ（ｖ，０．５）値を有する懸濁物が形成される。
【００１４】
特定の実施形態において、このような密封容器は、以下：（ａ）上記微粒子処方物がγ線照射されたという表明、（ｂ）貯蔵情報、（ｃ）投与情報、および（ｄ）上記微粒子形成物をどのように投与するかに関する指示書からなる群の１つ以上の要素を示すラベルとともに、提供され得る。いくつかの場合において、上記密封容器およびラベルは、適切なパッケージ材料内に含まれ得る。
【００１５】
特定の実施形態において、本発明に従う微粒子組成物は、抗原を含む。抗原の例としては、とりわけ、ペプチド含有抗原、ポリサッカリド含有抗原、ポリヌクレオチド含有抗原、およびこれらのハイブリッド（例えば、ペプチド−ポリサッカリドハイブリッド抗原）が挙げられる。抗原は、例えば、腫瘍細胞および病原性生物（例えば、ウイルス、細菌、真菌および寄生生物）に由来し得る。
【００１６】
上記微粒子組成物がγ線照射によって滅菌され、かつ抗原がこのような照射の効果に対して抵抗性である場合、上記抗原は、例えば、上記微粒子の表面と会合し（例えば、吸着され）得るか、上記微粒子内に捕捉され得るかもしくは封じ込められ得るか、またはその両方であり得る。
【００１７】
しかし、多くの抗原は、このような照射の効果に抵抗性ではない。その場合、上記抗原は、照射滅菌後に、上記微粒子と合わされ得る。例えば、滅菌水性抗原含有流体（例えば、溶液、懸濁物など）は、本発明の微粒子組成物に導入され得（上記微粒子組成物は、例えば、乾燥形態、水性懸濁物などの状態であり得る）、それによって、上記微粒子および抗原を含む滅菌水性懸濁物を形成し、これは、その後、引き抜かれて、患者に投与され得る。これら実施形態のうちのいくつかにおいて、上記抗原の実質的なパーセンテージ（例えば、２５重量％以上）が、短期間（例えば、３０分以下）の内に上記微粒子に吸着され、好ましくは、３０分から、１０分まで、５分まで、１分まで、もしくはこれ以下の範囲の期間内に、例えば、上記抗原のうちの２５重量％から、５０重量％まで、７５重量％まで、９０重量％まで、９５重量％までもしくはこれ以上が、上記微粒子に吸着され得る。
【００１８】
特定の実施形態（例えば、上記投与されるべき抗原がペプチド含有抗原である場合）において、正味の負電荷を有する微粒子は、吸着を増強するために使用され得る。特定の他の実施形態（例えば、上記投与されるべき抗原が、ポリヌクレオチド含有抗原である場合）において、正味の正電荷を有する微粒子は、吸着を増強するために使用され得る。
【００１９】
所定の微粒子集団の正味の電荷は、上記微粒子のゼータ電位の測定を含む公知の技術を使用して測定され得る。特定の実施形態において、上記微粒子組成物が２５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在するような量の水を添加した際に、懸濁物が形成され、ここで上記懸濁した微粒子は、生理学的ｐＨにおいて＋２０ｍＶより大きいか（正に荷電した粒子に関して）、または−２０ｍＶ未満（負に荷電した粒子に関して）であるゼータ電位を有する。
【００２０】
特定の実施形態において、上記微粒子は、荷電した生分解性ポリマーを使用して形成される。特定の実施形態において、微粒子は、荷電した種の存在下で形成されるか、またはその後、荷電した種で処理される。このような荷電した種の例としては、とりわけ、イオン性低分子、イオン性ペプチド、イオン性ポリマーおよびイオン性表面活性剤が挙げられる。
【００２１】
特定の実施形態において、本発明の滅菌微粒子組成物は、凍結保護因子を含む。このような因子は、例えば、滅菌乾燥微粒子組成物が凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙｉｎｇ）プロセス（例えば、凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｉｏｎ））を使用して形成される場合に、特に望ましい。凍結保護因子の例としては、とりわけ、ポリオール、炭水化物およびこれらの組み合わせが挙げられる。
【００２２】
特定の実施形態において、本発明に従う微粒子組成物は、免疫学的アジュバントを含む。免疫学的アジュバントの例としては、とりわけ、ＣｐＧオリゴヌクレオチド、二本鎖ＲＮＡ、Ｅ．ｃｏｌｉ熱不安定性毒素、アルミニウム塩、リポサッカリドホスフェート化合物、リポポリサッカリドホスフェート模倣物、モノホスホリルリピドＡアナログ、低分子免疫増強剤（例えば、ＴＬＲアゴニスト（ベンゾナフチリジン化合物、リポペプチドなどを含む）、ムラミルトリペプチドホスファチジルエタノールアミンおよびトコフェロール）が挙げられる。
【００２３】
上記微粒子がγ線照射によって滅菌され、かつ上記免疫学的アジュバントがこのような照射の効果に対して抵抗性である場合、上記免疫学的アジュバントは、例えば、上記微粒子の表面と会合し得る（例えば、吸着され得るかもしくは別の方法で結合される）か、上記微粒子内に捕捉され得るかもしくは封じ込められ得るか、またはその両方である。
【００２４】
免疫学的アジュバントがこのような照射の効果に対して抵抗性でない場合、上記免疫学的アジュバントは、照射滅菌後に、上記微粒子と合わせられ得る。例えば、滅菌抗原含有溶液もしくは懸濁物は、上記微粒子に導入され（これは、例えば、乾燥形態、水性懸濁物形態などであり得る）、それによって、上記微粒子およびアジュバントを含む滅菌水性懸濁物を形成する。特定の実施形態において、上記免疫学的アジュバントのうちの実質的なパーセンテージ（例えば、２５重量％以上）が、上記微粒子に短期間（例えば、３０分以下）の内に吸着され、例えば、上記免疫学的アジュバントのうちの２５重量％から、５０重量％まで、７５重量％まで、９０重量％まで、９５重量％まで、もしくはこれ以上が、３０分から、１０分まで、５分まで、１分まで、もしくはこれ以下の範囲の期間内で、上記微粒子に吸着され得る。
【００２５】
特定の実施形態において、本発明に従う微粒子組成物は、上記微粒子内で捕捉されるかもしくは封じ込められるγ線照射の効果に抵抗性の低分子免疫増強剤を含む。ガンマ線照射後、抗原は、捕捉された低分子免疫増強剤とともに上記微粒子の表面に吸着される。特定の実施形態において、上記低分子免疫増強剤は、ＴＬＲ７アゴニスト（例えば、ベンゾナフチリジン化合物）である。他の実施形態において、上記低分子免疫増強剤は、ＴＬＲ２アゴニスト（例えば、リポペプチド）である。特定の実施形態において、本発明の微粒子組成物は、上記微粒子内に封じ込められたＴＬＲ７およびＴＬＲ２アゴニストの両方を含む。
【００２６】
特定の実施形態において、本発明に従う微粒子組成物は、治療剤もしくは他の荷電した薬物を含む。上記微粒子がγ線照射によって滅菌され、かつ治療剤もしくは荷電した薬物がこのような照射の効果に対して抵抗性である場合、上記治療剤もしくは荷電した薬物は、場合によって、例えば、上記微粒子の表面と会合し（例えば、吸着されるかもしくは別の方法で結合され）得るか、上記微粒子内で捕捉され得るかもしくは封じ込められ得るか、またはその両方であり得る。治療剤もしくは荷電した薬物が、このような照射の効果に抵抗性でない場合、上記治療剤もしくは荷電した薬物は、照射滅菌後に、上記微粒子と合わせられる。
【００２７】
本発明の他の局面は、本発明に従う微粒子組成物を含むキットに関する。例えば、特定の実施形態において、キットは、以下を含んで提供される：（ａ）本明細書に記載される滅菌乾燥微粒子組成物を含む第１の密封容器、（ｂ）１種以上の滅菌ワクチン抗原（例えば、乾燥形態、滅菌溶液／懸濁物形態などにある）を含むさらなる密封容器、および／または（ｃ）１種以上の滅菌免疫学的アジュバント（例えば、乾燥形態、滅菌溶液／懸濁物形態などにある）を含むさらなる密封容器。特定の実施形態において、キットは、以下を含んで提供される：（ａ）本明細書に記載される滅菌乾燥微粒子組成物を含む第１の密封容器、（ｂ）１種以上の滅菌治療剤（例えば、乾燥形態、滅菌溶液／懸濁物形態などである）を含むさらなる密封容器、および／または（ｃ）１種以上の滅菌の薬学的に受容可能なキャリアを含むさらなる密封容器。
【００２８】
上記第１の密封容器および上記１個以上のさらなる密封容器は、滅菌流体の導入および除去を可能にするように構成される（例えば、ゴム製隔壁などを介して）。このようなキットは、上に記載されるように、表示および／もしくはパッケージングとともに提供され得る。
【００２９】
他の局面において、本発明は、微粒子組成物（例えば、前述のもの）を生成するための方法を提供する。
【００３０】
なお他の局面において、本発明は、上記微粒子組成物を宿主被験体に（例えば、治療目的、予防目的、もしくは診断目的で）送達する方法を提供する。上記宿主動物は、好ましくは、脊椎動物、より好ましくは、哺乳動物、およびさらにより好ましくは、ヒトである。
【００３１】
特定の実施形態において、上記微粒子組成物を宿主被験体に送達する方法が提供され、上記方法は、（ａ）滅菌乾燥生分解性ポリマー微粒子と、１種以上の抗原を含む水性流体とを合わせ、それによって、上記抗原のうちの少なくとも一部を上記微粒子の表面に吸着させる工程、および（ｂ）上記合わせたものを、哺乳動物に、好ましくは、混合して３０分以内に、より好ましくは、混合して１０分以内に、さらにより好ましくは、都合がよければ混合してできるだけ直ぐに、投与する工程を包含する。
【００３２】
本発明のこれらおよび他の局面、実施形態、ならびに利点は、本明細書の開示に鑑みれば、当業者により容易に明らかになる。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
密封容器および該密封容器内に含まれる滅菌乾燥微粒子組成物を含む製造物品であって、該微粒子組成物は、生分解性ポリマーを含むブランク生分解性微粒子を含み、ここで該密封容器は、滅菌流体の導入および除去を可能にするように構成されている、製造物品。
（項目２）
前記密封容器は、隔壁を含む、項目１に記載の製造物品。
（項目３）
前記製造物品は、γ線照射されている、項目１〜２のいずれかに記載の製造物品。
（項目４）
前記生分解性微粒子は、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）を含む、項目１〜３のいずれかに記載の製造物品。
（項目５）
前記微粒子組成物が２５ｍｇ／ｍｌの濃度を有するような量の水を添加した際に、前記微粒子が０．５〜５μｍの間のＤ（ｖ，０．５）値を有する懸濁物が、形成される、項目１〜４のいずれかに記載の製造物品。
（項目６）
前記微粒子組成物は、凍結乾燥した微粒子組成物である、項目１〜５のいずれかに記載の製造物品。
（項目７）
前記微粒子組成物は、凍結保護因子をさらに含む、項目６に記載の製造物品。
（項目８）
前記容器は、４〜５０ｍｇの間の前記微粒子および５〜１５０ｍｇの１種以上の薬学的賦形剤を含む単一用量容器である、項目１〜７のいずれかに記載の製造物品。
（項目９）
前記微粒子組成物は、荷電した微粒子を含む、項目１〜８のいずれかに記載の製造物品。
（項目１０）
前記荷電した微粒子は、前記生分解性ポリマーに加えて、荷電した種を含む、項目９に記載の製造物品。
（項目１１）
前記荷電した種は、アニオン性界面活性剤およびカチオン性界面活性剤から選択される、項目１０に記載の製造物品。
（項目１２）
前記微粒子組成物が２５ｍｇ／ｍＬの濃度となる量の水を添加した際に、懸濁物が形成され、ここで前記微粒子が生理学的ｐＨにおいて＋２０ｍＶより高いかもしくは−２０ｍＶ未満であるゼータ電位を有する、項目１〜１１のいずれかに記載の製造物品。
（項目１３）
前記微粒子組成物は、免疫学的アジュバントをさらに含む、項目１〜１２のいずれかに記載の製造物品。
（項目１４）
前記免疫学的アジュバントは、モノホスホリルリピドＡアナログ、低分子免疫増強剤、ムラミルトリペプチドホスファチジルエタノールアミンおよびトコフェロールから選択される、項目１３に記載の製造物品。
（項目１５）
（ａ）前記微粒子処方物がγ線照射されたという表明、（ｂ）貯蔵情報、（ｃ）投与情報、および（ｄ）該微粒子形成物をどのように投与するかに関する指示書からなる群の１つ以上の要素を示すラベルをさらに含む、項目１〜１４のいずれかに記載の製造物品。
（項目１６）
前記ラベルは、前記微粒子組成物が、水および１種以上の抗原を含む流体組成物と合わせられ得ることを示す、項目１５に記載の製造物品。
（項目１７）
パッケージング材料をさらに含み、前記密封容器およびラベルは、該パッケージング材料内に含まれる、項目１５または１６のいずれかに記載の製造物品。
（項目１８）
前記免疫学的アジュバントは、Ｔｏｌｌ様レセプター（ＴＬＲ）の活性化因子である、項目１３〜１７のいずれかに記載の製造物品。
（項目１９）
前記免疫学的アジュバントは、Ｔｏｌｌ様レセプター２（ＴＬＲ  ２）、Ｔｏｌｌ様レセプター７（ＴＬＲ  ７）、Ｔｏｌｌ様レセプター８（ＴＬＲ８）、もしくはこれらの組み合わせから選択されるＴｏｌｌ様レセプター（ＴＬＲ）の活性化因子である、項目１３〜１７のいずれかに記載の製造物品。
（項目２０）
項目１〜１９のいずれかに記載の製造物品ならびに滅菌流体の導入および除去を可能にするように構成されているさらなる密封容器を含むキットであって、該さらなる密封容器は、抗原を含む滅菌抗原性組成物を含む、キット。
（項目２１）
前記抗原性組成物は、凍結乾燥した組成物である、項目２０に記載のキット。
（項目２２）
前記抗原性組成物は、ペプチド含有抗原およびポリヌクレオチド含有抗原から選択される抗原を含む、項目２０〜２１のいずれかに記載のキット。
（項目２３）
滅菌水性液体、シリンジ、もしくはその両方をさらに含む、項目２０〜２２のいずれかに記載のキット。
（項目２４）
（ａ）ブランク生分解性微粒子を含む滅菌乾燥微粒子組成物と、（ｂ）抗原を含む水性液体とを合わせる工程；および
該合わせたものを、混合して３０分以内に脊椎動物被験体に投与する工程、
を包含する、プロセス。
（項目２５）
前記滅菌乾燥微粒子組成物は、γ線照射されている、項目２４に記載のプロセス。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１は、（ａ）非γ線照射ＰＬＧに対するＭｅｎ一晩吸着および凍結乾燥、（ｂ）非γ線照射ＰＬＧに対するＭｅｎ  ３０分吸着、ならびに（ｃ）γ線照射ＰＬＧに対するＭｅｎ  ３０分吸着についての、３種のＭｅｎ抗原（２８７−９５３、９６１および９３６−７４１）に関して１μｇおよび１０μｇの投与量でのマウスにおけるＥＬＩＳＡ抗体力価を示す棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
（発明の詳細な説明）
１．微粒子
本発明は、少なくとも１種の生分解性ポリマーを含む生分解性微粒子を含む滅菌微粒子組成物を提供する。特定の実施形態において、上記滅菌微粒子組成物は、乾燥しており、そして／もしくはブランクである。
【００３５】
本発明の微粒子を形成するのに有用な生分解性ポリマーとしては、ホモポリマー、コポリマーおよびポリマーブレンド（天然および合成の両方）が挙げられる。このようなポリマーは、例えば、以下に由来し得る：ポリエステル（例えば、ポリヒドロキシ酸、ポリカプロラクトンなど）、ポリカーボネート、ポリオルトエステル、ポリ酸無水物、ポリシアノアクリレート（例えば、ポリアルキルシアノアクリレートもしくは「ＰＡＣＡ」）、ポリホスファジン、およびこれらの組み合わせ。より代表的なのは、とりわけ、ポリエステル（例えば、グリコール酸、Ｌ−酪酸、Ｄ，Ｌ−酪酸、ヒドロキシ酪酸、ヒドロキシ吉草酸、カプロラクトンおよびジオキサノンのホモポリマーおよびコポリマー）である。さらにより代表的なのは、Ｌ−ラクチド、Ｄ，Ｌ−ラクチド、およびグリコリドのホモポリマーおよびコポリマー（例えば、ポリグリコリド、ポリラクチド（例えば、ポリ（Ｌ−ラクチド）もしくはポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）（本明細書でＰＬＡともいわれる））およびポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（例えば、ポリ（Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）およびポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）（本明細書において「ＰＬＧ」もしくは「ＰＬＧＡ」と称される））である。
【００３６】
上記ポリマーは、種々の分子量において利用可能であり、所定の用途に適切な分子量は、当業者によって容易に決定される。従って、例えば、ＰＬＡに適切な分子量は、約２，０００〜５，０００のといったものであり得る。ＰＬＧに適切な分子量は、約５，０００〜約２００，０００の範囲であり得る。
【００３７】
コポリマーが使用される場合、種々のモノマー比を有するコポリマーが、利用可能であり得る。例えば、ＰＬＧが上記微粒子を形成するために使用される場合、種々のラクチド：グリコリドモル比が、本明細書での使用を見いだされ、上記比は、任意の同時に投与される、吸着そして／または捕捉される種、ならびに所望の分解速度に一部依存して、たいてい選択事項である。例えば、５０：５０  ＰＬＧコポリマー（５０％のＤ，Ｌ−ラクチドおよび５０％のグリコリドを含む）は、より早い再吸収性コポリマー（ｒｅｓｏｒｂｉｎｇ  ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ）を提供する一方で、７５：２５  ＰＬＧは、よりゆっくりと分解し、８５：１５および９０：１０は、増大したラクチド成分に起因して、さらによりゆっくりと分解する。種々のラクチド：グリコリド比率を有する微粒子の混合物はまた、所望の放出動力学を達成するために、本明細書での使用を見いだされ得る。本発明の微粒子の分解速度はまた、ポリマー分子量およびポリマー結晶化度のような因子によって、制御され得る。
【００３８】
使用される場合、ＰＬＧコポリマーは、代表的には、例えば、２０：８０から、２５：７５まで、４０：６０まで、４５：５５まで、５５：４５まで、６０：４０まで、７５：２５まで、８０：２０までの範囲に及ぶラクチド／グリコリドモル比を有し、とりわけ、例えば、５，０００ダルトンから、１０，０００ダルトンまで、２０，０００ダルトンまで、４０，０００ダルトンまで、５０，０００ダルトンまで、７０，０００ダルトンまで、１００，０００ダルトンまで、２００，００ダルトンまでの範囲の分子量を有するものである。
【００３９】
種々のラクチド：グリコリド比、分子量および末端基を有するＰＬＧコポリマーは、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ（Ｇｅｒｍａｎｙ）、Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ，Ｉｎｃ．（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬ，ＵＳＡ）、ＤＵＲＥＣＴ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｐｅｌｈａｍ，ＡＬ）およびＬａｋｅｓｈｏｒｅ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬ，ＵＳＡ）を含む多くの供給源から容易に入手可能である。Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍから入手可能ないくつかの例示的なＰＬＧコポリマーとしては、以下が挙げられる：（ａ）ＲＧ５０２（上記鎖の末端のうちの１つに主にアルキルエステル末端基を有し、５０：５０のラクチド／グリコリドモル比を有し、かつ分子量１２，０００Ｄａを有するＰＬＧ）、（ｂ）ＲＧ５０３（上記鎖の末端のうちの１つに主にアルキルエステル末端基を有し、５０：５０のラクチド／グリコリドモル比を有し、かつ分子量３４，０００Ｄａを有するＰＬＧ）、（ｃ）ＲＧ５０４（上記鎖の末端のうちの１つに主にアルキルエステル末端基を有し、５０：５０のラクチド／グリコリドモル比を有し、かつ分子量４８，０００Ｄａを有するＰＬＧ）、（ｄ）ＲＧ７５２（上記鎖の末端のうちの１つに主にアルキルエステル末端基を有し、７５：２５のラクチド／グリコリドモル比を有し、かつ分子量２２，０００Ｄａを有するＰＬＧ）、（ｅ）ＲＧ７５５（上記鎖の末端のうちの１つに主にアルキルエステル末端基を有し、７５：２５のラクチド／グリコリドモル比を有し、かつ分子量６８，０００Ｄａを有するＰＬＧ）、（ｆ）ＲＧ５０２Ｈ（５０：５０のラクチド／グリコリドモル比を有し、上記鎖の末端のうちの１つに主に遊離カルボキシル末端基を有するＰＬＧ）、および（ｇ）ＲＧ５０３Ｈ（５０：５０のラクチド／グリコリドモル比を有し、上記鎖の末端のうちの１つの主に遊離カルボキシル末端基を有するＰＬＧ）。
【００４０】
本発明に従う微粒子は、任意の適切な方法を使用して調製され得る。
【００４１】
例えば、いくつかの実施形態において、微粒子は、例えば、Ｔｈｏｍａｓｉｎら，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，４１：１３１（１９９６）；米国特許第２，８００，４５７号に記載されるようなスプレー乾燥およびコアセルベーション；Ｍａｓｔｅｒｓ，Ｋ．（１９７６）  Ｓｐｒａｙ  Ｄｒｙｉｎｇ  ２ｎｄ  Ｅｄ．Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；Ｈａｌｌら，（１９８０）  Ｔｈｅ  「Ｗｕｒｓｔｅｒ  Ｐｒｏｃｅｓｓ」  ｉｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｔｈｅｏｒｙ，ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ａ．Ｆ．Ｋｙｄｏｎｉｅｕｓ，ｅｄ．），Ｖｏｌ．２，ｐｐ．１３３−１５４  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌｏｒｉｄａ  ａｎｄ  Ｄｅａｓｙ，Ｐ．Ｂ．，Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔ．Ｓ（２）：９９−１３９（１９８８）によって記載されるように、空気懸濁コーティング技術（例えば、パンコーティングおよびＷｕｒｓｔｅｒコーティング）；および例えば、Ｌｉｍら，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２１０：９０８−９１０（１９８０）によって記載されるように、イオン性ゲル化を使用して形成され得る。
【００４２】
より好ましくは、微粒子は、水中油中水型（ｗ／ｏ／ｗ）溶媒エバポレーションプロセスを使用して、もしくはナノ沈殿法を使用して、形成され得る。
【００４３】
上記ｗ／ｏ／ｗ溶媒エバポレーションプロセスは、例えば、Ｏ’Ｈａｇａｎら，Ｖａｃｃｉｎｅ  １１：９６５−９６９（１９９３）、Ｊｅｆｆｅｒｙら，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１０：３６２（１９９３）、およびＷＯ００／０６１２３（Ｏ’Ｈａｇａｎら）に記載されている。一般に、目的のポリマー（例えば、ＰＬＧ）は、有機溶媒（例えば、ジメチルクロリド（塩化メチレンおよびジクロロメタンともいわれる）、酢酸エチル、アセトニトリル、アセトン、クロロホルムなど）中に溶解する。次いで、上記ポリマー溶液は、第１の体積の水溶液と合わせられ、ｏ／ｗエマルジョンを形成するために乳化され得る。上記水溶液は、とりわけ、例えば、脱イオン水、通常の生理食塩水、緩衝化溶液（例えば、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）もしくはクエン酸ナトリウム／エチレンジアミン四酢酸（クエン酸ナトリウム／ＥＴＤＡ）緩衝溶液）であり得る。代表的には、ポリマー溶液  対  水溶液の体積比は、約５：１〜約２０：１の範囲、より代表的には、約１０：１である。乳化は、この課題に適切な任意の装置を使用して行われ、代表的には、高剪断デバイス（例えば、ホモジナイザー）である。次いで、上記ｏ／ｗエマルジョンの体積は、より大きな第２の体積の水溶液と合わせられ、上記第２の体積の水溶液は、代表的には、表面活性剤（例えば、とりわけ、非荷電の表面活性剤（例えば、ＰＶＡ（ポリビニルアルコール）、ポピドン（ポリビニルピロリドンもしくはＰＶＰとしても公知）、ソルビタンエステル、ポリソルベート、ポリオキシエチル化グリコールモノエーテル、ポリオキシエチル化アルキルフェノール、もしくはポロキサマー））、カチオン性表面活性剤（以下で考察される）もしくはアニオン性表面活性剤（以下で考察される）を含む。水溶液  対  ｏ／ｗエマルジョンの体積比は、代表的には、約２：１〜１０：１の範囲、より代表的には、約４：１である。次いで、この混合物は、安定なｗ／ｏ／ｗ二重エマルジョンを生成するためにホモジナイズされる。次いで、有機溶媒は、微粒子を得るためにエバポレートされる。荷電した表面活性剤（例えば、アニオン性もしくはカチオン性表面活性剤）の存在下で製造される微粒子は、正味の負電荷もしくは正味の正電荷を有する表面を有する微粒子を生じ得、これは、広く種々の分子を吸着し得る。例えば、アニオン性表面活性剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ））で製造される微粒子（例えば、ＳＤＳ−ＰＬＧ微粒子）は、正に荷電した種（例えば、ポリペプチド含有種（例えば、タンパク質））を吸着し得る。同様に、カチオン性表面活性剤（例えば、ＣＴＡＢ）で製造される微粒子（例えば、ＰＬＧ／ＣＴＡＢ微粒子）は、負に荷電した種（例えば、ポリヌクレオチド含有種（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ＤＮＡ−ＲＮＡヘテロポリマー、もしくはオリゴヌクレオチド））を吸着し得る。
【００４４】
上記ナノ沈殿法（溶媒置換法としても言及される）は、本発明における使用のための微粒子を形成するのに適切な方法の別の例である。例えば、欧州特許第０２７４９６１Ｂ１号（発明の名称「Ｐｒｏｃｅｓｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｉｓｐｅｒｓｉｂｌｅ  ｃｏｌｌｏｉｄａｌ  ｓｙｓｔｅｍｓ  ｏｆ  ａ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｆｏｒｍ  ｏｆ  ｎａｎｏｃａｐｓｕｌｅｓ」，Ｄｅｖｉｓｓａｇｕｅｔら）、米国特許第５，０４９，３２２号（発明の名称は同一、Ｆｅｓｓｉら）、米国特許第５，１１８，５２８号（発明の名称「Ｐｒｏｃｅｓｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｉｓｐｅｒｓｉｂｌｅ  ｃｏｌｌｏｉｄａｌ  ｓｙｓｔｅｍｓ  ｏｆ  ａ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｆｏｒｍ  ｏｆ  ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ」およびＷｅｎｄｏｒｆら）、ＷＯ２００８／０５１２４５（発明の名称「Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｆｏｒ  ｕｓｅ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ」）を参照のこと。この技術において、例えば、ポリマーは、有機溶媒（例えば、親水性有機溶媒（例えば、アセトン、エタノールなど））中に溶解し得る。次いで、得られた有機溶液は、有機溶媒と混和性である一方で、上記ポリマーに対しては溶媒でないさらなる溶媒（代表的には、水溶液）と合わせられ得る。上記水溶液は、例えば、脱イオン水、通常の生理食塩水、緩衝化溶液（例えば、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）もしくはクエン酸ナトリウム／エチレンジアミン四酢酸（クエン酸ナトリウム／ＥＤＴＡ）緩衝溶液）であり得る。次いで、上記有機溶液および水溶液は、適切な相対体積（例えば、代表的には、１：２〜２：１、より代表的には、約１：１）で合わせられ得る。例えば、上記有機溶液は、撹拌しながら、上記非溶媒へと注がれ得るかもしくは注入され得、逆もまた同様である。上記ポリマーが上記有機溶媒中に可溶性であると同時に、上記有機溶媒と上記非溶媒との混和性のブレンドで顕著に溶解性が低い系を選択することによって、微粒子の懸濁物は、実質的に即座に形成され得る。その後、上記有機溶媒は、例えば、エバポレーションによって、上記懸濁物から排除され得る。
【００４５】
いくつかの実施形態において、１種以上のさらなる種（生分解性ポリマーに加えて）を提供することは望ましい。これらは、上記微粒子の内部（例えば、捕捉される）および／もしくは表面（例えば、吸着される）と会合してもよいし、上記微粒子と会合しなくてもよい。このようなさらなる種としては、例えば、張度もしくはｐＨを調節する因子、凍結保護因子、微粒子荷電誘導因子（例えば、荷電した表面活性剤、荷電したポリマーなど）、免疫学的アジュバント、抗原などが挙げられ得る。
【００４６】
このようなさらなる種は、特に、上記さらなる種が、いかなるその後の滅菌プロセス（例えば、γ線照射プロセス）によっても機能不能にされない場合に、上記微粒子形成プロセスの間に提供され得る。上記の微粒子形成技術（例えば、ｗ／ｏ／ｗ溶媒エバポレーション、ナノ沈殿など）において、使用される有機溶液および／もしくは水溶液は、従って、望ましい場合、種々のさらなる種をさらに含み得る。例えば、これらさらなる種は、（ａ）油溶性形態であるかもしくは油分散性の形態である場合には有機溶液に、または（ｂ）水溶性形態もしくは水分散性形態である場合には水溶液に、添加され得る。
【００４７】
他の実施形態において、１種以上のさらなる種は、微粒子形成に続いて（代表的には、有機溶媒除去に続いて、ならびにあるとすれば、洗浄工程に続いて）添加され得る。これらさらなる種は、頻繁には、上記微粒子に、水溶液もしくは分散物として添加され得る。これら種は、例えば、溶液中にあり得るか、そして／または上記粒子−溶液界面に蓄積し得る（例えば、上記微粒子表面に吸着される）。
【００４８】
微粒子を含む適切な微粒子組成物がいったん形成されると（例えば、上記もしくは他の技術を使用して）、それは、さらなる使用のために凍結乾燥され得る。
【００４９】
多くの実施形態において、上記微粒子組成物は、例えば、適切な滅菌プロセス（例えば、γ線照射）を使用して滅菌される。このような微粒子組成物は、例えば、密封容器（例えば、隔壁付きのバイアル）の中へ充填された後に滅菌され得る。代表的なγ線照射線量は、例えば、１０〜３０ｋＧｙユニットの範囲である。
【００５０】
２．抗原
上記のように、本発明に従う微粒子組成物およびキットは、１種以上の抗原を含み得る。各抗原は、有効量（例えば、本発明に従う治療法、予防法もしくは診断法における使用に有効な量）で提供される。例えば、本発明の組成物は、以下に列挙した病原体もしくは腫瘍のうちのいずれかによって引き起こされる疾患を処置もしくは予防するために使用され得る。
【００５１】
本発明とともに使用するための抗原としては、以下に示される抗原のうちの１種以上、または以下に示される病原体および腫瘍のうちの１種以上に由来する抗原が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５２】
（Ａ．細菌抗原）
本発明において使用するのに適した細菌抗原としては、細菌から単離され得るか、精製され得るか、もしくは由来し得るタンパク質、ポリサッカリド、リポポリサッカリド、および外膜小胞が挙げられる。さらに、細菌抗原としては、細菌溶解物および不活性化細菌処方物が挙げられる。細菌抗原は、組換え発現によって生成され得る。細菌抗原は、好ましくは、その生活環の少なくとも１段階の間に、上記細菌の表面に露出されるエピトープを含む。細菌抗原は、好ましくは、複数の血清型にわたって保存される。細菌抗原としては、以下に示される細菌のうちの１種以上に由来する抗原および以下に同定される具体的抗原例が挙げられる。
【００５３】
Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ：    髄膜炎抗原としては、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ血清群（例えば、Ａ、Ｃ、Ｗ１３５、Ｙ、および／もしくはＢ）から精製されるか由来するタンパク質（例えば、ＷＯ９９／２４５７８；ＷＯ９９／３６５４４；ＷＯ９９／５７２８０；ＷＯ００／２２４３０；Ｔｅｔｔｅｌｉｎら（２０００）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８７：１８０９−１８１５；ＷＯ９６／２９４１２；およびＰｉｚｚａら（２０００）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８７：１８１６−１８２０において同定されるもの）、サッカリド（ポリサッカリド、オリゴサッカリドもしくはリポポリサッカリドが挙げられる）、もしくは外膜小胞（ＷＯ０１／５２８８５；Ｂｊｕｎｅら（１９９１）Ｌａｎｃｅｔ  ３３８（８７７５）：１０９３−１０９６；Ｆｕｓｋａｓａｗａら（１９９９）Ｖａｃｃｉｎｅ  １７：２９５１−２９５８；およびＲｏｓｅｎｑｉｓｔら（１９９８）Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．Ｓｔｒａｎｄ  ９２：３２３−３３３）が挙げられる。髄膜炎タンパク質抗原は、接着、オートトランスポーター（ａｕｔｏｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）、毒素、Ｆｅ獲得タンパク質（Ｆｅ  ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  ｐｒｏｔｅｉｎ）、および膜会合タンパク質（好ましくは、内在性外膜タンパク質）から選択され得る。
【００５４】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ：  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ抗原としては、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅに由来するサッカリド（ポリサッカリドもしくはオリゴサッカリドが挙げられる）および／もしくはタンパク質が挙げられる。サッカリド抗原は、血清型１、２、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０、２２Ｆ、２３Ｆ、および３３Ｆから選択され得る。タンパク質抗原は、ＷＯ９８／１８９３１；ＷＯ９８／１８９３０；米国特許第６，６９９，７０３号；米国特許第６，８００，７４４号；ＷＯ９７／４３３０３；およびＷＯ９７／３７０２６に同定されるタンパク質から選択され得る。Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅタンパク質は、ポリヒスチジン三つ組ファミリー（Ｐｏｌｙ  Ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ  Ｔｒｉａｄ  ｆａｍｉｌｙ）（ＰｈｔＸ）、コリン結合タンパク質ファミリー（ＣｂｐＸ）、ＣｂｐＸ短縮物、ＬｙｔＸファミリー、ＬｙｔＸ短縮物、ＣｂｐＸ短縮物−ＬｙｔＸ短縮物キメラタンパク質、ニューモリシン（Ｐｌｙ）、ＰｓｐＡ、ＰｓａＡ、Ｓｐ１２８、Ｓｐ１０１、Ｓｐ１３０、Ｓｐ１２５もしくはＳｐ１３３から選択され得る。
【００５５】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ（グループＡ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）：グループＡ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ抗原としては、ＷＯ０２／３４７７１およびＷＯ２００５／０３２５８２において同定されたタンパク質（ＧＡＳ  ４０を含む）、ＧＡＳ  Ｍタンパク質のフラグメントの融合物（ＷＯ０２／０９４８５１；およびＤａｌｅ（１９９９）Ｖａｃｃｉｎｅ  １７：１９３−２００、およびＤａｌｅ（１９９６）Ｖａｃｃｉｎｅ  １４（１０）：９４４−９４８に記載されるものを含む）、フィブロネクチン結合タンパク質（Ｓｆｂ１）、連鎖球菌性のヘム会合タンパク質（Ｓｈｐ）、およびストレプトリジンＳ（ＳａｇＡ）が挙げられる。
【００５６】
Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ：  Ｍｏｒａｘｅｌｌａ抗原としては、ＷＯ０２／１８５９５；およびＷＯ９９／５８５６２において同定される抗原、外膜タンパク質抗原（ＨＭＷ−ＯＭＰ）、Ｃ抗原、および／もしくはＬＰＳが挙げられる。
【００５７】
Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ：  百日咳抗原としては、Ｂ．ｐｅｒｔｕｓｓｉｓに由来する百日咳ホロ毒素（ＰＴ）および線維状血球凝集素（ＦＨＡ）、必要に応じて、同様に、パータクチンおよび／もしくは凝集原２および凝集原３抗原との組み合わせが挙げられる。
【００５８】
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ：  Ｓｔａｐｈ  ａｕｒｅｕｓ抗原としては、非毒性組換えＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａエキソトキシンＡに必要に応じて結合体化されたＳ．ａｕｒｅｕｓ  タイプ５およびタイプ８の莢膜ポリサッカリド（例えば、ＳｔａｐｈＶＡＸＴＭ）および表面タンパク質に由来する抗原、インベージン（ロイコシジン、キナーゼ、ヒアルロニダーゼ）、ファゴサイトーシスによる包み込みを阻害する表面因子（莢膜、プロテインＡ）、カロテノイド、カタラーゼ生成、プロテインＡ、コアグラーゼ、凝固因子、および真核生物細胞膜を溶解する膜損傷毒素（ｍｅｍｂｒａｎｅ−ｄａｍａｇｉｎｇ  ｔｏｘｉｎ）（必要に応じて、無毒化される）（溶血素、ロイコトキシン、ロイコシジン）が挙げられる。
【００５９】
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ：  Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ抗原としては、スライム関連抗原（ｓｌｉｍｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ａｎｔｉｇｅｎ）（ＳＡＡ）が挙げられる。
【００６０】
Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ（破傷風）：  破傷風抗原としては、破傷風トキソイド（ＴＴ）が挙げられ、好ましくは、本発明の組成物とともに／結合体化されてキャリアタンパク質として使用される。
【００６１】
Ｃｏｒｎｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ（ジフテリア）：  ジフテリア抗原としては、ジフテリア毒素（好ましくは、無毒化されたもの（例えば、ＣＲＭ１９７））が挙げられる。さらに、ＡＤＰリボシル化を調節するか、阻害するかもしくは関連し得る抗原は、本発明の組成物との組み合わせ／同時投与／結合について企図される。上記ジフテリアトキソイドは、キャリアタンパク質として使用され得る。
【００６２】
Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  Ｂ（Ｈｉｂ）：  Ｈｉｂ抗原としては、Ｈｉｂサッカリド抗原が挙げられる。
【００６３】
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ：  Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ抗原としては、エンドトキシンＡ、Ｗｚｚタンパク質、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＬＰＳ（より具体的には、ＰＡＯ１（Ｏ５血清型）から単離されたＬＰＳ）、および外膜タンパク質（外膜タンパク質Ｆ（ＯｐｒＦ）が挙げられる）（Ｐｒｉｃｅら（２００１）Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．６９（５）：３５１０−３５１５）が挙げられる。
【００６４】
Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ．    細菌抗原は、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａから得られ得る。
【００６５】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ（グループＢ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）：  グループＢ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ抗原としては、タンパク質およびサッカリド抗原（例えば、ＷＯ０２／３４７７１；ＷＯ０３／０９３３０６；ＷＯ０４／０４１１５７；およびＷＯ２００５／００２６１９に同定されるもの（タンパク質ＧＢＳ  ５９、ＧＢＳ  ６７、ＧＢＳ  ８０、ＧＢＳ  １０４、ＧＢＳ  ２７６、ＧＢＳ  ３２２が挙げられ、そして血清タイプＩａ、Ｉｂ、Ｉａ／ｃ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩおよびＶＩＩＩに由来するサッカリド抗原が挙げられる）が挙げられる。
【００６６】
Ｎｅｉｓｅｒｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ：  淋病抗原としては、Ｐｏｒ（もしくはポリン）タンパク質（例えば、ＰｏｒＢ（例えば、Ｚｈｕら（２００４）Ｖａｃｃｉｎｅ  ２２：６６０−６６９を参照のこと）、トランスフェリン結合タンパク質（ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｇ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ）（例えば、ＴｂｐＡおよびＴｂｐＢ（例えば、Ｐｒｉｃｅら（２００４）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．７１（１）：２７７−２８３を参照のこと））、混濁タンパク質（ｏｐａｃｉｔｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ）（例えば、Ｏｐａ）、還元修飾性タンパク質（ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ−ｍｏｄｉｆｉａｂｌｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ）（Ｒｍｐ）、および外膜小胞（ＯＭＶ）調製物（例えば、Ｐｌａｎｔｅら（２０００）Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１８２：８４８−８５５；ＷＯ９９／２４５７８；ＷＯ９９／３６５４４；ＷＯ９９／５７２８０；およびＷＯ０２／０７９２４３を参照のこと）が挙げられる。
【００６７】
Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ：  Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ抗原としては、血清型Ａ、Ｂ、ＢａおよびＣ（トラコーマ（失明の原因）の因子）、血清型Ｌ１、Ｌ２およびＬ３（鼡径リンパ肉芽腫と関連）、および血清型Ｄ−Ｋに由来する抗原が挙げられる。Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｓ抗原としてはまた、ＷＯ００／３７４９４；ＷＯ０３／０４９７６２；ＷＯ０３／０６８８１１；およびＷＯ０５／００２６１９に同定される抗原（ＰｅｐＡ（ＣＴ０４５）、ＬｃｒＥ（ＣＴ０８９）、ＡｒｔＪ（ＣＴ３８１）、ＤｎａＫ（ＣＴ３９６）、ＣＴ３９８、ＯｍｐＨ様（ＣＴ２４２）、Ｌ７／Ｌ１２（ＣＴ３１６）、ＯｍｃＡ（ＣＴ４４４）、ＡｔｏｓＳ（ＣＴ４６７）、ＣＴ５４７、Ｅｎｏ（ＣＴ５８７）、ＨｒｔＡ（ＣＴ８２３）、ＭｕｒＧ（ＣＴ７６１）、ＣＴ３９６およびＣＴ７６１が挙げられる）、およびこれらの抗原の具体的組み合わせが挙げられる。
【００６８】
Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ（梅毒）：  梅毒抗原としては、ＴｍｐＡ抗原が挙げられる。
【００６９】
Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｄｕｃｒｅｙｉ（軟性下疳を引き起こす）：  Ｄｕｃｒｅｙｉ抗原としては、外膜タンパク質（ＤｓｒＡ）が挙げられる。
【００７０】
Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓもしくはＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ：  抗原は、トリサッカリド反復および米国特許第６，７５６，３６１号に提供される他のＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ由来抗原が挙げられる。
【００７１】
Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ：  Ｈ  ｐｙｌｏｒｉ抗原としては、Ｃａｇ、Ｖａｃ、Ｎａｐ、ＨｏｐＸ、ＨｏｐＹおよびウレアーゼ抗原が挙げられる。
【００７２】
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ：  抗原としては、Ｓ．ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ抗原の１６０ｋＤａ血球凝集素が挙げられる。
【００７３】
Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ抗原としては、ＬＰＳ（Ｘｕら（２００２）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．７０（８）：４４１４−４４２３）が挙げられる。
【００７４】
Ｅ．ｃｏｌｉ：  Ｅ．ｃｏｌｉ抗原は、腸管毒素原性Ｅ．ｃｏｌｉ（ＥＴＥＣ）、腸管凝集性Ｅ．ｃｏｌｉ（ＥＡｇｇＥＣ）、分散接着性（ｄｉｆｆｕｓｅｌｙ  ａｄｈｅｒｉｎｇ）Ｅ．ｃｏｌｉ（ＤＡＥＣ）、腸管病原性Ｅ．ｃｏｌｉ（ＥＰＥＣ）、もしくは腸管出血性Ｅ．ｃｏｌｉ（ＥＨＥＣ）に由来し得る。
【００７５】
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ（炭疽）：  Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ抗原は、必要に応じて、無毒化され、Ａ成分（致死因子（ＬＦ）および浮腫因子（ＥＦ））から選択され得、これらはともに、防御抗原（ＰＡ）として公知の共通するＢ成分を共有し得る。特定の実施形態において、本発明の組成物は、炭疽抗原を含まない。
【００７６】
Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ（ペスト（ｐｌａｇｕｅ））：ペスト抗原としては、Ｆ１莢膜抗原（Ｇｏｓｆｅｌｄら．（２００３）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．７１（１））：３７４−３８３）、ＬＰＳ（Ｆｉｅｌｄｓら（１９９９）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６７（１０）：５３９５−５４０８）、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ  Ｖ抗原（Ｈｉｌｌら（１９９７）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６５（１１）：４４７６−４４８２）が挙げられる。
【００７７】
Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ：  結核抗原としては、リポタンパク質、ＬＰＳ、ＢＣＧ抗原、抗原８５Ｂ（Ａｇ８５Ｂ）とＥＳＡＴ−６（必要に応じて、カチオン性脂質小胞中に処方される）との融合タンパク質（Ｏｌｓｅｎら（２００４）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．７２（１０）：６１４８−６１５０）、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ（Ｍｔｂ）イソクエン酸デヒドロゲナーゼ関連抗原（Ｂａｎｅｒｊｅｅら（２００４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０１（３４）：１２６５２−１２６５７）、およびＭＰＴ５１抗原（Ｓｕｚｕｋｉら（２００４）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．７２（７）：３８２９−３８３７）が挙げられる。
【００７８】
Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ：  抗原としては、外膜タンパク質（外膜タンパク質Ａおよび／もしくはＢ（ＯｍｐＢ）（Ｃｈａｏら（２００４）Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．１７０２（２）：１４５−１５２）、ＬＰＳ、および表面タンパク質抗原（ＳＰＡ）（Ｃａｒｌら（１９８９）Ｊ．Ａｕｔｏｉｍｍｕｎ．２  補遺：８１−９１）が挙げられる）が挙げられる。
【００７９】
Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ．    細菌抗原は、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓに由来し得る。
【００８０】
Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ：  抗原としては、ＷＯ０２／０２６０６およびＷＯ０５／０８４３０６に同定されるもの（ＣＰｎ０３２４、Ｃｐｎ０３０１、Ｃｐｎ０４８２、Ｃｐｎ０５０３、Ｃｐｎ０５２５、Ｃｐｎ０５５８、Ｃｐｎ０５８４、Ｃｐｎ０８００、Ｃｐｎ０９７９、Ｃｐｎ０４９８、Ｃｐｎ０３００、Ｃｐｎ００４２、Ｃｐｎ００１３、Ｃｐｎ４５０、Ｃｐｎ０６６１、Ｃｐｎ０５５７、Ｃｐｎ０９０４、Ｃｌｐｎ０７９５、Ｃｐｎ０１８６およびＣｐｎ０６０４、ならびにこれらの抗原の具体的組み合わせが挙げられる）が挙げられる。
【００８１】
Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ：  抗原としては、プロテイナーゼ抗原、ＬＰＳ、特に、Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ  ＩＩのリポポリサッカリド、Ｏ１  Ｉｎａｂａ  Ｏ特異的ポリサッカリド、Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａ  Ｏ１３９、ＩＥＭ１０８ワクチンの抗原（Ｌｉａｎｇら（２００３）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．７１（１０）：５４９８−５５０４）、およびＺｏｎｕｌａ  ｏｃｃｌｕｄｅｎｓ毒素（Ｚｏｔ）が挙げられる。
【００８２】
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ  （腸チフス）：  抗原としては、莢膜ポリサッカリド、好ましくは、結合体（Ｖｉ、すなわち、ｖａｘ−ＴｙＶｉ）が挙げられる。
【００８３】
Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ（ライム病）：  抗原としては、リポタンパク質（例えば、ＯｓｐＡ、ＯｓｐＢ、ＯｓｐＣおよびＯｓｐＤ）、他の表面タンパク質（例えば、ＯｓｐＥ関連タンパク質（Ｅｒｐｓ））、デコリン結合タンパク質（例えば、ＤｂｐＡ）、および抗原的に可変性のＶＩタンパク質（例えば、Ｐ３９およびＰ１３と関連する抗原（内在性膜タンパク質、Ｎｏｐｐａら（２００１）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６９（５）：３３２３−３３３４））、ＶｌｓＥ抗原性バリエーションタンパク質（Ｌａｗｒｅｎｚら（１９９９）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３７（１２）：３９９７−４００４）が挙げられる。
【００８４】
Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ：  抗原としては、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ外膜タンパク質（ＯＭＰ）が挙げられる。
【００８５】
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ：  抗原としては、ＯＭＰ（ＯＭＰ  Ａが挙げられる）、およびポリサッカリド（必要に応じて、破傷風トキソイドに結合体化される）が挙げられる。
【００８６】
他の細菌抗原としては、莢膜抗原、ポリサッカリド抗原もしくは上記のうちのいずれかのタンパク質抗原が挙げられる。さらなる細菌抗原としてはまた、外膜小胞（ＯＭＶ）調製物が挙げられる。さらに、抗原としては、前述の細菌のうちのいずれかの生の、弱毒化、および／もしくは精製バージョンが挙げられる。抗原は、グラム陰性細菌もしくはグラム陽性細菌に由来し得る。抗原は、好気性細菌もしくは嫌気性細菌に由来し得る。
【００８７】
さらに、上記細菌由来のサッカリド（ポリサッカリド、ＬＰＳ、ＬＯＳもしくはオリゴサッカリド）のうちのいずれかは、別の因子もしくは抗原（例えば、キャリアタンパク質（例えば、ＣＲＭ１９７））に結合体化され得る。このような結合体化は、米国特許第５，３６０，８９７号；およびＲｏｙら（１９８４）Ｃａｎ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．６２（５）：２７０−２７５に提供されるように、上記サッカリドのカルボニル部分の、上記タンパク質のアミノ基への還元的アミノ化によってもたらされる直接結合体化であり得る。別の実施形態において、上記サッカリドは、リンカーを介して（例えば、スクシンイミド、もしくはＨｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，１ｓｔ  ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ（１９９６）およびＷｏｎｇ，Ｓ．Ｓ．，ＣＲＣ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ，１ｓｔ  ｅｄ．，ＣＲＣ−Ｐｒｅｓｓ（１９９１）に提供される他の連結と）結合体化され得る。
【００８８】
（Ｂ．ウイルス抗原）
本発明における使用に適切なウイルス抗原としては、不活性化（もしくは死滅）ウイルス、弱毒化ウイルス、スプリットウイルス処方物、精製サブユニット処方物、ウイルスから単離され得るか、精製され得るか、もしくは由来し得るウイルスタンパク質、およびウイルス様粒子（ＶＬＰ）が挙げられる。ウイルス抗原は、細胞培養もしくは他の基質上で増殖させられたか、または組換え発現されたウイルスに由来し得る。ウイルス抗原は、好ましくは、その生活環の少なくとも１つの段階の間に上記ウイルスの表面に曝されるエピトープを含む。ウイルス抗原は、好ましくは、複数の血清型もしくは単離物にわたって保存されている。ウイルス抗原としては、以下に示されるウイルスのうちの１種以上、および以下に同定される特定の抗原例に由来する抗原が挙げられる。
【００８９】
オルソミクソウイルス：  ウイルス抗原は、オルソミクソウイルス（例えば、インフルエンザＡ、ＢおよびＣ）に由来し得る。オルソミクソウイルス抗原は、血球凝集素（ＨＡ）、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）、核タンパク質（ＮＰ）、マトリクスタンパク質（Ｍ１）、膜タンパク質（Ｍ２）を含むウイルスタンパク質のうちの１つ以上、転写酵素成分（ＰＢ１、ＰＢ２およびＰＡ）のうちの１種以上から選択され得る。好ましい抗原としては、ＨＡおよびＮＡが挙げられる。
【００９０】
インフルエンザ抗原は、大流行期間の（例年の）インフルエンザ株に由来し得る。インフルエンザ抗原は、汎流行性の大発生を引き起こす可能性を有する株（すなわち、現在広まっている株における血球凝集素と比較して、新たな血球凝集素を有するインフルエンザ株、もしくはトリ被験体において病原性でありかつヒト集団において水平感染する可能性を有するインフルエンザ株、もしくはヒトに対して病原性であるインフルエンザ株）に由来し得る。インフルエンザ抗原は、卵もしくは細胞培養において増殖させられるウイルスに由来し得る。
【００９１】
パラミクソウイルス科のウイルス：  ウイルス抗原は、パラミクソウイルス科のウイルス（例えば、肺炎ウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶ）およびモルビリウイルス（麻疹）に由来し得る。
【００９２】
肺炎ウイルス：  ウイルス抗原は、肺炎ウイルス（例えば、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）、ウシＲＳウイルス、マウス肺炎ウイルス、および七面鳥鼻気管炎ウイルス）に由来し得る。好ましくは、上記肺炎ウイルスは、ＲＳＶである。肺炎ウイルス抗原は、以下のタンパク質（表面タンパク質融合物（Ｆ）、糖タンパク質（Ｇ）および低分子疎水性タンパク質（ＳＨ）、マトリクスタンパク質ＭおよびＭ２、ヌクレオキャプシドタンパク質Ｎ、ＰおよびＬ、ならびに非構造タンパク質ＮＳ１およびＮＳ２が挙げられる）のうちの１種以上から選択され得る。好ましい肺炎ウイルス抗原としては、Ｆ、ＧおよびＭが挙げられる。例えば、Ｊｏｈｎｓｔｏｎｅら（２００４）Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．８５（Ｐｔ  １１）：３２２９−３２３８を参照のこと。肺炎ウイルス抗原はまた、キメラウイルス中に処方され得るかもしくはキメラウイルスに由来し得る。例えば、キメラＲＳＶ／ＰＩＶウイルスは、ＲＳＶおよびＰＩＶの両方の成分を含み得る。
【００９３】
パラミクソウイルス：  ウイルス抗原は、パラミクソウイルス（例えば、パラインフルエンザウイルスタイプ１〜４（ＰＩＶ）、ムンプス、センダイウイルス、シミアンウイルス５、ウシパラインフルエンザウイルス、およびニューカッスル病ウイルスに由来し得る。好ましくは、上記パラミクソウイルスは、ＰＩＶもしくはムンプスである。パラミクソウイルス抗原は、以下のタンパク質：血球凝集素ノイラミニダーゼ（ＨＮ）、融合タンパク質Ｆ１およびＦ２、核タンパク質（ＮＰ）、ホスホプロテイン（Ｐ）、巨大タンパク質（Ｌ）、およびマトリクスタンパク質（Ｍ）のうちの１種以上から選択され得る。好ましいパラミクソウイルスタンパク質としては、ＨＮ、Ｆ１およびＦ２が挙げられる。パラミクソウイルス抗原はまた、キメラウイルスに処方され得るかもしくはキメラウイルスに由来し得る。例えば、キメラＲＳＶ／ＰＩＶウイルスは、ＲＳＶおよびＰＩＶの両方の成分を含み得る。市販のムンプスワクチンは、１価形態において、もしくは麻疹および風疹ワクチン（ＭＭＲ）と組み合わせてのいずれかで、生の弱毒化ムンプスウイルスを含む。
【００９４】
モルビリウイルス：  ウイルス抗原は、モルビリウイルス（例えば、麻疹）に由来し得る。モルビリウイルス抗原は、以下のタンパク質：血球凝集素（Ｈ）、糖タンパク質（Ｇ）、融合因子（Ｆ）、巨大タンパク質（Ｌ）、核タンパク質（ＮＰ）、ポリメラーゼホスホプロテイン（Ｐ）、およびマトリクス（Ｍ）のうちの１種以上から選択され得る。市販の麻疹ワクチンは、代表的には、ムンプスおよび風疹と組み合わせて（ＭＭＲ）、生の弱毒化麻疹ウイルスを含む。
【００９５】
ピコルナウイルス：  ウイルス抗原は、ピコルナウイルス（例えば、エンテロウイルス、ライノウイルス、ヘパルナウイルス（Ｈｅｐａｒｎａｖｉｒｕｓ）、カルジオウイルスおよびアフトウイルス）に由来し得る。エンテロウイルス（例えば、ポリオウイルス）に由来する抗原は、好ましい。
【００９６】
エンテロウイルス：  ウイルス抗原は、エンテロウイルス（例えば、ポリオウイルス  タイプ１、２もしくは３、コクサッキーＡウイルス  タイプ１〜２２および２４、コクサッキーＢウイルス  タイプ１〜６、エコーウイルス（ＥＣＨＯ））タイプ１〜９、１１〜２７および２９〜３４、ならびにエンテロウイルス  ６８〜７１）に由来し得る。好ましくは、上記エンテロウイルスは、ポリオウイルスである。エンテロウイルス抗原は、好ましくは、以下のキャプシドタンパク質：ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３およびＶＰ４のうちの１種以上から選択される。市販のポリオ・ワクチンとしては、不活性化ポリオワクチン（ＩＰＶ）および経口ポリオウイルスワクチン（ＯＰＶ）が挙げられる。
【００９７】
ヘパルナウイルス：  ウイルス抗原は、ヘパルナウイルス（例えば、Ａ型肝炎ウイルス（ＨＡＶ））に由来し得る。市販のＨＡＶワクチンとしては、不活性化ＨＡＶワクチンが挙げられる。
【００９８】
トガウイルス：  ウイルス抗原は、トガウイルス（例えば、ルビウイルス、アルファウイルス、もしくはアルテリウイルスに由来し得る。ルビウイルス（例えば、風疹ウイルス）に由来する抗原は、好ましい。トガウイルス抗原は、Ｅ１、Ｅ２、Ｅ３、Ｃ、ＮＳＰ−１、ＮＳＰＯ−２、ＮＳＰ−３およびＮＳＰ−４から選択され得る。トガウイルス抗原は、好ましくは、Ｅ１、Ｅ２およびＥ３から選択される。市販の風疹ウイルスワクチンとしては、生の低温適応ウイルスを、代表的には、ムンプスおよび麻疹ワクチンと組み合わせて（ＭＭＲ）含む。
【００９９】
フラビウイルス：  ウイルス抗原は、フラビウイルス（例えば、ダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）、デング（タイプ１、２、３もしくは４）、黄熱、日本脳炎、西ナイル脳炎、セントルイス脳炎、ロシア春夏脳炎、ポワッサン脳炎）に由来し得る。フラビウイルス抗原は、ＰｒＭ、Ｍ、Ｃ、Ｅ、ＮＳ−１、ＮＳ−２ａ、ＮＳ２ｂ、ＮＳ３、ＮＳ４ａ、ＮＳ４ｂ、およびＮＳ５から選択され得る。フラビウイルス抗原は、好ましくは、ＰｒＭ、ＭおよびＥから選択される。市販のＴＢＥワクチンとしては、不活性化ウイルスワクチンが挙げられる。
【０１００】
ペスチウイルス：  ウイルス抗原は、ペスチウイルス（例えば、牛ウイルス性下痢（ＢＶＤＶ）、豚コレラ（ＣＳＦＶ）もしくはボーダー病（ＢＤＶ））に由来し得る。
【０１０１】
ヘパドナウイルス：  ウイルス抗原は、ヘパドナウイルス（例えば、Ｂ型肝炎ウイルス）に由来し得る。ヘパドナウイルス抗原は、表面抗原（Ｌ、ＭおよびＳ）、コア抗原（ＨＢｃ、ＨＢｅ）から選択され得る。市販のＨＢＶワクチンとしては、表面抗原Ｓタンパク質を含むサブユニットワクチンが挙げられる。
【０１０２】
Ｃ型肝炎ウイルス：  ウイルス抗原は、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に由来し得る。ＨＣＶ抗原は、Ｅ１、Ｅ２、Ｅ１／Ｅ２、ＮＳ３４５ポリプロテイン、ＮＳ  ３４５コアポリプロテイン、コア、および／もしくは非構造領域に由来するペプチド（Ｈｏｕｇｈｔｏｎら（１９９１）Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  １４：３８１−３８８）のうちの１種以上から選択され得る。
【０１０３】
ラブドウイルス：  ウイルス抗原は、ラブドウイルス（例えば、リッサウイルス（狂犬病ウイルス）およびベシクロウイルス（ＶＳＶ））に由来し得る。ラブドウイルス抗原は、糖タンパク質（Ｇ）、核タンパク質（Ｎ）、巨大タンパク質（Ｌ）および非構造タンパク質（ＮＳ）から選択され得る。市販の狂犬病ウイルスワクチンは、ヒト二倍体細胞もしくは胎児アカゲザル肺細胞（ｆｅｔａｌ  ｒｈｅｓｕｓ  ｌｕｎｇ  ｃｅｌｌ）で増殖させた死滅ウイルスを含む。
【０１０４】
カリシウイルス科：  ウイルス抗原は、カリシウイルス科（例えば、ノーウォークウイルス、およびノーウォーク様ウイルス（例えば、ハワイウイルスおよびスノーマウンテンウイルス））に由来し得る。
【０１０５】
コロナウイルス：  ウイルス抗原は、コロナウイルス、ＳＡＲＳ、ヒト呼吸器コロナウイルス、トリ伝染性気管支炎（ＩＢＶ）、マウス肝炎ウイルス（ＭＨＶ）、およびブタ伝染性胃腸炎ウイルス（ＴＧＥＶ）に由来し得る。コロナウイルス抗原は、スパイク（Ｓ）、エンベロープ（Ｅ）、マトリクス（Ｍ）、ヌクレオキャプシド（Ｎ）、および血球凝集素−エステラーゼ糖タンパク質（ＨＥ）から選択され得る。好ましくは、上記コロナウイルス抗原は、ＳＡＲＳウイルスに由来する。ＳＡＲＳウイルス抗原は、ＷＯ０４／９２３６０に記載されている。
【０１０６】
レトロウイルス：  ウイルス抗原は、レトロウイルス（例えば、オンコウイルス、レンチウイルスもしくはスプマウイルスに由来し得る。オンコウイルス抗原は、ＨＴＬＶ−１、ＨＴＬＶ−２もしくはＨＴＬＶ−５に由来し得る。レンチウイルス抗原は、ＨＩＶ−１もしくはＨＩＶ−２に由来し得る。レトロウイルス抗原は、ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖ、ｔａｘ、ｔａｔ、ｒｅｘ、ｒｅｖ、ｎｅｆ、ｖｉｆ、ｖｐｕ、およびｖｐｒから選択され得る。ＨＩＶ抗原は、ｇａｇ（ｐ２４ｇａｇおよびｐ５５ｇａｇ）、ｅｎｖ（ｇｐ１６０およびｇｐ４１）、ｐｏｌ、ｔａｔ、ｎｅｆ、ｒｅｖ  ｖｐｕ、ミニプロテイン、（好ましくは、ｐ５５  ｇａｇおよびｇｐ１４０ｖ欠失）から選択され得る。ＨＩＶ抗原は、以下の株：ＨＩＶＩＩＩｂ、ＨＩＶＳＦ２、ＨＩＶＬＡＶ、ＨＩＶＬＡＩ、ＨＩＶＭＮ、ＨＩＶ−１ＣＭ２３５、ＨＩＶ−１ＵＳ４のうちの１種以上に由来し得る。
【０１０７】
レオウイルス：  ウイルス抗原は、レオウイルス（例えば、オルトレオウイルス、ロタウイルス、オルビウイルス、もしくはコルチウイルス）に由来し得る。レオウイルス抗原は、構造タンパク質λ１、λ２、λ３、μ１、μ２、σ１、σ２、もしくはσ３、または非構造タンパク質σＮＳ、μＮＳ、もしくはσ１ｓから選択され得る。好ましいレオウイルス抗原は、ロタウイルスに由来し得る。ロタウイルス抗原は、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３、ＶＰ４（もしくは切断された生成物ＶＰ５およびＶＰ８）、ＮＳＰ  １、ＶＰ６、ＮＳＰ３、ＮＳＰ２、ＶＰ７、ＮＳＰ４、もしくはＮＳＰ５から選択され得る。好ましいロタウイルス抗原としては、ＶＰ４（もしくは上記切断された精製バットＶＰ５およびＶＰ８）、およびＶＰ７が挙げられる。
【０１０８】
パルボウイルス：  ウイルス抗原は、パルボウイルス（例えば、パルボウイルス  Ｂ１９）に由来し得る。パルボウイルス抗原は、ＶＰ−１、ＶＰ−２、ＶＰ−３、ＮＳ−１およびＮＳ−２から選択され得る。好ましくは、上記パルボウイルス抗原は、キャプシドタンパク質ＶＰ−２である。
【０１０９】
デルタ肝炎ウイルス（ＨＤＶ）：  ウイルス抗原は、ＨＤＶ、特に、ＨＤＶ由来のδ−抗原（例えば、米国特許第５，３７８，８１４号を参照のこと）に由来し得る。
【０１１０】
Ｅ型肝炎ウイルス（ＨＥＶ）：  ウイルス抗原は、ＨＥＶに由来し得る。
【０１１１】
Ｇ型肝炎ウイルス（ＨＧＶ）：  ウイルス抗原は、ＨＧＶに由来し得る。
【０１１２】
ヒトヘルペスウイルス：  ウイルス抗原は、ヒトヘルペスウイルス（例えば、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタイン・バー・ウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ６）、ヒトヘルペスウイルス７（ＨＨＶ７）、およびヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８））に由来し得る。ヒトヘルペスウイルス抗原は、最初期タンパク質（α）、初期タンパク質（β）、および後期タンパク質（γ）から選択され得る。ＨＳＶ抗原は、ＨＳＶ−１株もしくはＨＳＶ−２株に由来し得る。ＨＳＶ抗原は、糖タンパク質ｇＢ、ｇＣ、ｇＤおよびｇＨ、融合タンパク質（ｇＢ）、もしくは免疫エスケープタンパク質（ｉｍｍｕｎｅ  ｅｓｃａｐｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ）（ｇＣ、ｇＥ、もしくはｇＩ）から選択され得る。ＶＺＶ抗原は、コア、ヌクレオキャプシド、テグメント（ｔｅｇｕｍｅｎｔ）、もしくはエンベロープタンパク質から選択され得る。生の弱毒化ＶＺＶワクチンは、市販されている。ＥＢＶ抗原は、初期抗原（ＥＡ）タンパク質、ウイルスキャプシド抗原（ＶＣＡ）、および膜抗原（ＭＡ）の糖タンパク質から選択され得る。ＣＭＶ抗原は、キャプシドタンパク質、エンベロープ糖タンパク質（例えば、ｇＢおよびｇＨ）、ならびにテグメントタンパク質から選択され得る。
【０１１３】
パポバウイルス：  抗原は、パポバウイルス（例えば、パピローマウイルスおよびポリオーマウイルス）に由来し得る。パピローマウイルスとしては、ＨＰＶ  血清型１、２、４、５、６、８、１１、１３、１６、１８、３１、３３、３５、３９、４１、４２、４７、５１、５７、５８、６３および６５が挙げられる。好ましくは、ＨＰＶ抗原は、血清型６、１１、１６もしくは１８に由来する。ＨＰＶ抗原は、キャプシドタンパク質（Ｌ１）および（Ｌ２）、もしくはＥ１〜Ｅ７、またはその融合物から選択され得る。ＨＰＶ抗原は、好ましくは、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）へと処方される。ポリオーマウイルスとしては、ＢＫウイルスおよびＪＫウイルスが挙げられる。ポリオーマウイルス抗原は、ＶＰ１、ＶＰ２もしくはＶＰ３から選択され得る。
【０１１４】
本発明において使用するための他の抗原、組成物、方法および微生物は、Ｐｌｏｔｋｉｎ，Ｓ．Ａ．ら，Ｖａｃｃｉｎｅｓ，４ｔｈ  ｅｄ．，Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ  Ｃｏ．（２００４）；Ｍｕｒｒａｙ，Ｐ．Ｒ．ら，Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ５ｔｈ  ｅｄ．，Ｍｏｓｂｙ  Ｅｌｓｅｖｉｅｒ（２００５）；Ｊｏｋｌｉｋ，Ｗ．Ｋ．（ｅｄ．），Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，３ｒｄ  ｅｄ．，Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ＆  Ｌａｎｇｅ（１９８８）；Ｈｏｗｌｅｙ，Ｐ．Ｍ．ら（ｅｄｓ．），Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，４ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ（１９９１）；およびＦｉｅｌｄｓ，Ｂ．Ｎ．ら（ｅｄｓ．），Ｆｉｅｌｄｓ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，４ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００１）に記載される。
【０１１５】
（Ｃ．真菌抗原）
本発明において使用するための真菌抗原は、以下に示される真菌のうちの１種以上に由来し得る。
【０１１６】
真菌抗原は、皮膚真菌（以下が挙げられる：
【０１１７】
【化１】
0005988435.tif 000002
）に由来し得る。
【０１１８】
真菌病原体は、以下：
【０１１９】
【化２】
0005988435.tif 000003
に由来し得る。
【０１２０】
真菌抗原を生成するためのプロセスは、当該分野で周知である（米国特許第６，３３３，１６４号を参照のこと）。好ましい方法において、細胞壁が実質的に除去されたかもしくは少なくとも部分的に除去された真菌細胞から得られ得る不溶性画分から抽出および分離される、溶解した画分は、上記プロセスが以下の工程を包含する点で特徴付けられる：生きている真菌細胞を得る工程；細胞壁が実質的に除去されたかもしくは少なくとも部分的に除去された真菌細胞を得る工程；細胞壁が実質的に除去されたかもしくは少なくとも部分的に除去された上記真菌細胞を破裂させる工程；不溶性画分を得る工程；ならびに上記不溶性画分から溶解した画分を抽出および分離する工程。
【０１２１】
（Ｄ．ＳＴＤ抗原）
本発明の組成物は、性感染症（ＳＴＤ）に由来する１種以上の抗原を含み得る。このような抗原は、ＳＴＤ（例えば、クラミジア、陰部ヘルペス、肝炎（例えば、ＨＣＶ）、性器疣贅、淋病、梅毒および／もしくは軟性下疳）のための予防もしくは治療を提供し得る（ＷＯ００／１５２５５を参照のこと）。抗原は、１種以上のウイルス性もしくは細菌性のＳＴＤに由来し得る。本発明における使用のためのウイルス性ＳＴＤ抗原は、例えば、ＨＩＶ、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、および肝炎（ＨＣＶ）に由来し得る。本発明における使用のための細菌性ＳＴＤ抗原は、例えば、Ｎｅｉｓｅｒｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｄｕｃｒｅｙｉ、Ｅ．ｃｏｌｉ、およびＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅに由来し得る。これら病原体に由来する具体的抗原の例は、上に記載される。
【０１２２】
（Ｅ．呼吸器抗原（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ａｎｔｉｇｅｎ））
本発明の組成物は、呼吸器疾患を引き起こす病原体に由来する１種以上の抗原を含み得る。例えば、呼吸器抗原は、呼吸器ウイルス（例えば、オルソミクソウイルス（インフルエンザ）、肺炎ウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶ）、モルビリウイルス（麻疹）、トガウイルス（風疹）、ＶＺＶ、およびコロナウイルス（ＳＡＲＳ）に由来し得る。呼吸器抗原は、呼吸器疾患を引き起こす細菌（例えば、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ、およびＭｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）に由来し得る。これら病原体に由来する具体的抗原の例は、上に記載される。
【０１２３】
（Ｆ．小児用ワクチン抗原）
本発明の組成物は、小児被験体における使用に適した１種以上の抗原を含み得る。小児被験体は、代表的には、約３歳齢未満、もしくは約２歳齢未満、もしくは約１歳齢未満である。小児用抗原は、６ヶ月、１年、２年もしくは３年の経過にわたって複数回投与され得る。小児用抗原は、小児集団を標的とし得るウイルスおよび／もしくは小児集団が感染しやすいウイルスに由来し得る。小児用ウイルス抗原としては、以下のうちの１種以上に由来する抗原が挙げられる：オルソミクソウイルス（インフルエンザ）、肺炎ウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶおよびムンプス）、モルビリウイルス（麻疹）、トガウイルス（風疹）、エンテロウイルス（ポリオ）、ＨＢＶ、コロナウイルス（ＳＡＲＳ）、および水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタイン・バー・ウイルス（ＥＢＶ）。小児用細菌抗原としては、以下のうちの１種以上に由来する抗原が挙げられる：Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ（グループＡ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ（破傷風）、Ｃｏｒｎｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ（ジフテリア）、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  Ｂ（Ｈｉｂ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ（グループＢ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、およびＥ．ｃｏｌｉ。これら病原体に由来する具体的抗原の例は、上に記載される。
【０１２４】
（Ｇ．高齢者もしくは免疫が損なわれた個体における使用のための抗原）
本発明の組成物は、高齢者もしくは免疫が損なわれた個体における使用に適した１種以上の抗原を含み得る。このような抗体は、標的とされた抗原に対する彼らの免疫応答を改善するためにより高い用量でもしくはアジュバント付加された処方物で、より頻繁にワクチン接種される必要があり得る。高齢者もしくは免疫が損なわれた個体における使用のために標的とされ得る抗原としては、以下の病原体のうちの１種以上に由来する抗原が挙げられる：Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ（グループＡ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ（破傷風）、Ｃｏｒｎｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ（ジフテリア）、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  Ｂ（Ｈｉｂ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ（グループＢ  Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、Ｃｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、オルソミクソウイルス（インフルエンザ）、肺炎ウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶおよびムンプス）、モルビリウイルス（麻疹）、トガウイルス（風疹）、エンテロウイルス（ポリオ）、ＨＢＶ、コロナウイルス（ＳＡＲＳ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタイン・バー・ウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）。これら病原体に由来する具体的抗原の例は、上に記載される。
【０１２５】
（Ｈ．青年期用ワクチンにおける使用に適した抗原）
本発明の組成物は、青年期被験体における使用に適した１種以上の抗原を含み得る。青年期は、以前に投与された小児用抗原の追加免疫の必要があり得る。青年期における使用に適切であり得る小児用抗原は、上に記載される。さらに、青年期は、性活動を開始する前に防御免疫もしくは治療的免疫を確実にするために、ＳＴＤ病原体に由来する抗原を受容するように標的とされ得る。青年期における使用に適切であり得るＳＴＤ抗原は、上に記載される。
【０１２６】
（Ｉ．腫瘍抗原）
本発明の組成物は、１種以上の腫瘍抗原もしくは癌抗原を含み得る。腫瘍抗原は、例えば、ペプチド含有腫瘍抗原（例えば、ポリペプチド腫瘍抗原もしくは糖タンパク質腫瘍抗原）であり得る。腫瘍抗原はまた、例えば、サッカリド含有腫瘍抗原（例えば、糖脂質腫瘍抗原もしくはガングリオシド腫瘍抗原）であり得る。腫瘍抗原は、さらに、例えば、ポリペプチド含有腫瘍抗原を発現するポリヌクレオチド含有腫瘍抗原（例えば、ＲＮＡベクター構築物もしくはＤＮＡベクター構築物（例えば、プラスミドＤＮＡ））であり得る。
【０１２７】
腫瘍抗原としては、（ａ）ポリペプチド含有腫瘍抗原（以下が挙げられる：ポリペプチド（これは、例えば、８〜２０アミノ酸長の範囲であり得るが、この範囲外の長さもまた、一般的である）、リポポリペプチドおよび糖タンパク質）、（ｂ）サッカリド含有腫瘍抗原（以下が挙げられる：ポリサッカリド、ムチン、ガングリオシド、糖脂質および糖タンパク質）、ならびに（ｃ）抗原性ポリペプチドを発現するポリヌクレオチド）が挙げられる。
【０１２８】
腫瘍抗原は、例えば、（ａ）癌細胞と関連した全長分子、（ｂ）上記のホモログおよび改変形体（欠失部分、付加部分および／もしくは置換部分を有する分子が挙げられる）、ならびに（ｃ）上記のフラグメントであり得る。腫瘍抗原は、組換え形態で提供され得る。腫瘍抗原としては、例えば、ＣＤ８＋リンパ球によって認識されるクラスＩ拘束性抗原もしくはＣＤ４＋リンパ球によって認識されるクラスＩＩ拘束性抗原が挙げられる。
【０１２９】
多くの腫瘍抗原が、当該分野で公知であり、以下が挙げられる：（ａ）癌−精巣抗原（例えば、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＳＳＸ２、ＳＣＰ１、ならびにＲＡＧＥ、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥおよびＭＡＧＥファミリーポリペプチド（例えば、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−２、ＭＡＧＥ−３、ＭＡＧＥ−４、ＭＡＧＥ−５、ＭＡＧＥ−６、およびＭＡＧＥ−１２（これらは、例えば、黒色腫、肺、頭頸部、ＮＳＣＬＣ、乳房、胃腸、および膀胱の腫瘍に対処するために使用され得る）））、（ｂ）変異抗原（例えば、ｐ５３（種々の固形腫瘍、例えば、結腸直腸癌、肺癌、頭頸部癌と関連する）、ｐ２１／Ｒａｓ（例えば、黒色腫、膵臓癌および結腸直腸癌と関連する）、ＣＤＫ４（例えば、黒色腫と関連する）、ＭＵＭ１（例えば、黒色腫と関連する）、カスパーゼ−８（例えば、頭頸部癌と関連する）、ＣＩＡ  ０２０５（例えば、膀胱癌と関連する）、ＨＬＡ−Ａ２−Ｒ１７０１、β−カテニン（例えば、黒色腫と関連する）、ＴＣＲ（例えば、Ｔ細胞非ホジキンリンパ腫と関連する）、ＢＣＲ−ａｂｌ（例えば、慢性骨髄性白血病と関連する）、トリオースホスフェートイソメラーゼ、ＫＩＡ  ０２０５、ＣＤＣ−２７、およびＬＤＬＲ−ＦＵＴ）、（ｃ）過剰発現される抗原（例えば、ガレクチン４（例えば、結腸直腸癌と関連する）、ガレクチン９（例えば、ホジキン病と関連する）、プロテイナーゼ３（例えば、慢性骨髄性白血病と関連する）、ＷＴ  １（例えば、種々の白血病と関連する）、カルボニックアンヒドラーゼ（例えば、腎癌と関連する）、アルドラーゼＡ（例えば、肺癌と関連する）、ＰＲＡＭＥ（例えば、黒色腫と関連する）、ＨＥＲ−２／ｎｅｕ（例えば、乳房、結腸、肺および卵巣の癌と関連する）、α−フェトプロテイン（例えば、肝癌と関連する）、ＫＳＡ（例えば、結腸直腸癌と関連する）、ガストリン（例えば、膵臓癌および胃癌と関連する）、テロメラーゼ触媒タンパク質、ＭＵＣ−１（例えば、乳癌および卵巣癌と関連する）、Ｇ−２５０（例えば、腎細胞癌と関連する）、ｐ５３（例えば、乳癌、結腸癌と関連する）、および癌胎児性抗原（例えば、乳癌、肺癌、および胃腸管の癌（例えば、結腸直腸癌）と関連する））、（ｄ）共通抗原（例えば、黒色腫−メラノサイト分化抗原（例えば、ＭＡＲＴ−１／Ｍｅｌａｎ  Ａ、ｇｐ１００、ＭＣ１Ｒ、メラノサイト刺激ホルモンレセプター、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質−１／ＴＲＰ１およびチロシナーゼ関連タンパク質−２／ＴＲＰ２（例えば、黒色腫と関連する）））、（ｅ）前立腺関連抗原（例えば、ＰＡＰ、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、ＰＳＨ−Ｐ１、ＰＳＭ−Ｐ１、ＰＳＭ−Ｐ２）（例えば、前立腺癌と関連する）、（ｆ）免疫グロブリンイディオタイプ（例えば、骨髄腫およびＢ細胞リンパ腫と関連する）、ならびに（ｇ）他の腫瘍抗原（例えば、ポリペプチド含有抗原およびサッカリド含有抗原）（以下が挙げられる：（ｉ）糖タンパク質（例えば、シアリルＴｎおよびシアリルＬｅｘ（例えば、乳癌および結腸直腸癌と関連）ならびに種々のムチン；糖タンパク質は、キャリアタンパク質に結合され得る（例えば、ＭＵＣ−１は、ＫＬＨに結合され得る））；（ｉｉ）リポポリペプチド（例えば、脂質部分に連結されたＭＵＣ−１）；（ｉｉｉ）ポリサッカリド（例えば、Ｇｌｏｂｏ  Ｈ合成ヘキササッカリド）（これはキャリアタンパク質に（例えば、ＫＬＨに）連結され得る）、（ｉｖ）ガングリオシド（例えば、ＧＭ２、ＧＭ１２、ＧＤ２、ＧＤ３（例えば、脳、肺癌、黒色腫と関連する）（これはまた、キャリアタンパク質（例えば、ＫＬＨ）に結合され得る）））。
【０１３０】
他の腫瘍抗原としては、ｐ１５、Ｈｏｍ／Ｍｅｌ−４０、Ｈ−Ｒａｓ、Ｅ２Ａ−ＰＲＬ、Ｈ４−ＲＥＴ、ＩＧＨ−ＩＧＫ、ＭＹＬ−ＲＡＲ、エプスタイン・バー・ウイルス抗原、ＥＢＮＡ、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）抗原（Ｅ６およびＥ７が挙げられる）、Ｂ型肝炎ウイルス抗原およびＣ型肝炎ウイルス抗原、ヒトＴ細胞リンパ球向性ウイルス抗原、ＴＳＰ−１８０、ｐ１８５ｅｒｂＢ２、ｐ１８０ｅｒｂＢ−３、ｃ−ｍｅｔ、ｍｎ−２３Ｈ１、ＴＡＧ−７２−４、ＣＡ  １９−９、ＣＡ  ７２−４、ＣＡＭ  １７．１、ＮｕＭａ、Ｋ−ｒａｓ、ｐ１６、ＴＡＧＥ、ＰＳＣＡ、ＣＴ７、４３−９Ｆ、５Ｔ４、７９１  Ｔｇｐ７２、ｂｅｔａ−ＨＣＧ、ＢＣＡ２２５、ＢＴＡＡ、ＣＡ  １２５、ＣＡ  １５−３（ＣＡ  ２７．２９＼ＢＣＡＡ）、ＣＡ  １９５、ＣＡ  ２４２、ＣＡ−５０、ＣＡＭ４３、ＣＤ６８＼ＫＰ１、ＣＯ−０２９、ＦＧＦ−５、Ｇａ７３３（ＥｐＣＡＭ）、ＨＴｇｐ−１７５、Ｍ３４４、ＭＡ−５０、ＭＧ７−Ａｇ、ＭＯＶ１８、ＮＢ／７０Ｋ、ＮＹ−ＣＯ−１、ＲＣＡＳ１、ＳＤＣＣＡＧ１６、ＴＡ−９０（Ｍａｃ−２結合タンパク質＼シクロフィリンＣ関連タンパク質）、ＴＡＡＬ６、ＴＡＧ７２、ＴＬＰ、ＴＰＳなどが挙げられる。これらならびに他の細胞成分は、例えば、米国特許公開第２００２／０００７１７３号およびそこで引用される参考文献に記載される。
【０１３１】
腫瘍抗原は、例えば、変異したかもしくは改変された細胞成分に由来し得る。改変後、上記細胞成分は、それらの調節機能をもはや発揮せず、よって、上記細胞は、制御されない増殖を経験し得る。改変された細胞成分の代表例としては、ｒａｓ、ｐ５３、Ｒｂ、ウィルムス腫瘍遺伝子によってコードされる改変されたタンパク質、ユビキチン、ムチン、ＤＣＣによってコードされるタンパク質、ＡＰＣ、およびＭＣＣ遺伝子、ならびにレセプターもしくはレセプター様構造物（例えば、ｎｅｕ、甲状腺ホルモンレセプター、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）レセプター、インスリンレセプター、上皮増殖因子（ＥＧＦ）レセプター、およびコロニー刺激因子（ＣＳＦ）レセプター）が挙げられる。これらならびに他の細胞成分は、例えば、米国特許第５，６９３，５２２号およびそこで引用される参考文献に記載される。
【０１３２】
細菌抗原およびウイルス抗原は、癌の処置のために本発明の組成物とともに使用され得る。特に、キャリアタンパク質（例えば、ＣＲＭ１９７、破傷風トキソイド、もしくはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ抗原）は、癌の処置のために、本発明の化合物とともに／本発明の化合物との結合体化において使用され得る。上記癌抗原組み合わせ治療は、既存の治療と比較して、増大した効力およびバイオアベイラビリティーを示す。
【０１３３】
癌もしくは腫瘍抗原に関するさらなる情報は、例えば、
【０１３４】
【数１】
0005988435.tif 000004
に見いだされ得る。
【０１３５】
さらなる抗原はまた、外膜小胞（ＯＭＶ）調製物を含み得る。
【０１３６】
さらなる処方法および抗原（特に、腫瘍抗原）は、米国特許公開第２００４／０２０２６８０号に提供される。米国特許第６，８８４，４３５もまた参照のこと。
【０１３７】
（Ｊ．抗原参考文献）
本発明の組成物は、以下の参考文献のうちのいずれかにおいて記載される抗原を含み得る：
【０１３８】
【数２】
0005988435.tif 000005
【０１３９】
【数３】
0005988435.tif 000006
【０１４０】
【数４】
0005988435.tif 000007
上記の引用されたすべての特許、特許出願および学術記事の内容は、本明細書に完全に示されるかのように本明細書に参考として援用される。
【０１４１】
３．免疫学的アジュバント
上記のように、本発明に従う微粒子組成物およびキットは、１種以上の免疫学的アジュバントを含み得る。本発明とともに使用するための免疫学的アジュバントとしては、以下に示されるもののうちの１種以上が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４２】
（Ａ．ミネラル含有組成物）
免疫学的アジュバントとして使用するのに適したミネラル含有組成物は、ミネラル塩（例えば、アルミニウム塩およびカルシウム塩）を含む。本発明は、ミネラル塩（例えば、ヒドロキシド（例えば、オキシヒドロキシド）、ホスフェート（例えば、ヒドロキシホスフェート、オルトホスフェート）、スルフェートなどを含む（例えば、Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｄｅｓｉｇｎ：Ｔｈｅ  Ｓｕｂｕｎｉｔ  ａｎｄ  Ａｄｊｕｖａｎｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐｏｗｅｌｌ，Ｍ．Ｆ．  ａｎｄ  Ｎｅｗｍａｎ，Ｍ．Ｊ．  ｅｄｓ．）（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ）  １９９５，第８章および第９章を参照のこと））、または異なるミネラル化合物の混合物（例えば、必要に応じて、過剰のホスフェートとともに、ホスフェートおよびヒドロキシドアジュバントの混合物）を含み、上記化合物は、任意の適切な形態（例えば、ゲル、結晶、不定形など）をとり、上記塩の吸着が、好ましい。上記ミネラル含有組成物はまた、金属塩の粒子として処方され得る（ＷＯ００／２３１０５）。
【０１４３】
アルミニウム塩は、Ａｌ３＋の用量が０．２〜１．０ｍｇ／用量の間であるように、本発明のワクチン中に含まれ得る。
【０１４４】
一実施形態において、本発明において使用するための上記アルミニウムベースのアジュバントは、明礬（硫酸アルミニウムカリウム（ＡｌＫ（ＳＯ４）２））、もしくは明礬誘導体（例えば、リン酸緩衝液中の抗原と明礬とを混合し、続いて、塩基（例えば、水酸化アンモニウムもしくは水酸化ナトリウム））での滴定および沈殿によって、その場で形成されるもの）である。
【０１４５】
本発明のワクチン処方物における使用のための別のアルミニウムベースのアジュバントは、水酸化アルミニウムアジュバント（Ａｌ（ＯＨ）３）もしくは結晶性水酸化酸化アルミニウム（ＡｌＯＯＨ）であり、これは、約５００ｍ２／ｇの表面積を有する優れた吸着剤である。別の実施形態において、上記アルミニウムベースのアジュバントは、リン酸アルミニウムアジュバント（ＡｌＰＯ４）もしくはヒドロキシリン酸アルミニウムであり、これは、水酸化アルミニウムアジュバントのヒドロキシル基のうちのいくらかもしくはすべての代わりにホスフェート基を含む。本明細書で提供される好ましいリン酸アルミニウムアジュバントは、不定形であり、酸性媒体、塩基性媒体および中性媒体に可溶性である。
【０１４６】
別の実施形態において、上記アジュバントは、リン酸アルミニウムおよび水酸化アルミニウムの両方を含む。そのより好ましい実施形態において、上記アジュバントは、水酸化アルミニウムより多くの量のリン酸アルミニウムを有する（例えば、リン酸アルミニウム  対  水酸化アルミニウムの重量で、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１または９：１より大きい比）。別の実施形態において、上記ワクチン中のアルミニウム塩は、０．４〜１．０ｍｇ／ワクチン用量、もしくは０．４〜０．８ｍｇ／ワクチン用量、もしくは０．５〜０．７ｍｇ／ワクチン用量、もしくは約０．６ｍｇ／ワクチン用量で存在する。
【０１４７】
一般に、上記好ましいアルミニウムベースのアジュバント、もしくは複数のアルミニウムベースのアジュバントの比（例えば、リン酸アルミニウム  対  水酸化アルミニウム）は、上記抗原が、所望のｐＨにおいて上記アジュバントと反対の電荷を有するように、分子間での静電引力の最適化によって選択される。例えば、リン酸アルミニウムアジュバント（ｉｅｐ＝４）は、リゾチームを吸着するが、ｐＨ７．４ではアルブミンを吸着しない。アルブミンが標的であるとすると、水酸化アルミニウムアジュバントが選択される（ｉｅｐ  １１．４）。あるいは、ホスフェートでの水酸化アルミニウムでの前処理は、その等電点を低下させ、このことは、水酸化アルミニウムを、より塩基性の抗原に対して好ましいアジュバントにする。
【０１４８】
（Ｂ．油エマルジョン）
（他の特定の免疫刺激剤（例えば、ムラミルペプチドもしくは細菌細胞壁成分）と共に、またはそれなしで）免疫学的アジュバントとして使用するのに適した油エマルジョン組成物および処方物は、スクアレン−水エマルジョン（例えば、ＭＦ５９（マイクロフルイダイザーを使用してサブミクロン粒子へと処方された５％のスクアレン、０．５％のＴｗｅｅｎ  ８０、および０．５％のＳｐａｎ  ８５））を含む。ＷＯ９０／１４８３７を参照のこと。Ｐｏｄｄａ（２００１）Ｖａｃｃｉｎｅ  １９：２６７３−２６８０；Ｆｒｅｙら（２００３）Ｖａｃｃｉｎｅ  ２１：４２３４−４２３７もまた参照のこと。ＭＦ５９は、ＦＬＵＡＤＴＭインフルエンザウイルス三価サブユニットワクチン中にアジュバントとして使用される。
【０１４９】
上記組成物中での使用のためのアジュバントは、水中油型サブミクロンエマルジョンを含む。本明細書での使用に好ましい水中油型サブミクロンエマルジョンは、必要に応じて種々の量のＭＴＰ−ＰＥを含むスクアレン／水エマルジョン（例えば、４〜５％ｗ／ｖのスクアレン、０．２５〜１．０％ｗ／ｖのＴｗｅｅｎ  ８０ＴＭ（ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）、および／もしくは０．２５〜１．０％のＳｐａｎ  ８５ＴＭ（ソルビタントリオレエート）、および必要に応じて、Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−Ｌ−アラニン−２−（１’−２’−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチルアミン（ＭＴＰ−ＰＥ）を含む水中油型サブミクロンエマルジョン）、例えば、「ＭＦ５９」（ＷＯ９０／１４８３７；米国特許第６，２９９，８８４号；米国特許第６，４５１，３２５号；およびＯｔｔら，「ＭＦ５９−−Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｓａｆｅ  ａｎｄ  Ｐｏｔｅｎｔ  Ａｄｊｕｖａｎｔ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ」  ｉｎ  Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｄｅｓｉｇｎ：Ｔｈｅ  Ｓｕｂｕｎｉｔ  ａｎｄ  Ａｄｊｕｖａｎｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐｏｗｅｌｌ，Ｍ．Ｆ．  ａｎｄ  Ｎｅｗｍａｎ，Ｍ．Ｊ．ｅｄｓ．）（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ）  １９９５，ｐｐ．２７７−２９６）として公知の水中油型サブミクロンエマルジョンである。ＭＦ５９は、４〜５％ｗ／ｖのスクアレン（例えば、４．３％）、０．２５〜０．５％ｗ／ｖのＴｗｅｅｎ  ８０ＴＭ、および０．５％ｗ／ｖのＳｐａｎ  ８５ＴＭを含み、必要に応じて、Ｍｏｄｅｌ  １１０Ｙマイクロフルイダイザー（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ，Ｎｅｗｔｏｎ，ＭＡ）のようなマイクロフルイダイザーを使用して、サブミクロン粒子へと処方された種々の量のＭＴＰ−ＰＥを含む。例えば、ＭＴＰ−ＰＥは、約０〜５００μｇ／用量、より好ましくは、０〜２５０μｇ／用量、そして最も好ましくは、０〜１００μｇ／用量の量で存在し得る。本明細書で使用される場合、用語「ＭＦ５９−０」は、ＭＴＰ−ＰＥを欠いている上記水中油型サブミクロンエマルジョンを意味する一方で、用語ＭＦ５９−ＭＴＰは、ＭＴＰ−ＰＥを含む処方物を示す。例えば、「ＭＦ５９−１００」は、１００μｇのＭＴＰ−ＰＥ／用量を含む、など。本明細書で使用するためのＭＦ６９（別の水中油型サブミクロンエマルジョン）は、４．３％ｗ／ｖのスクアレン、０．２５％ｗ／ｖのＴｗｅｅｎ  ８０ＴＭ、および０．７５％ｗ／ｖのＳｐａｎ  ８５ＴＭ、ならびに必要に応じて、ＭＴＰ−ＰＥを含む。さらに別の水中油型サブミクロンエマルジョンは、１０％のスクアレン、０．４％のＴｗｅｅｎ  ８０ＴＭ、５％のプルロニックブロックポリマー（ｐｌｕｒｏｎｉｃ−ｂｌｏｃｋｅｄ  ｐｏｌｙｍｅｒ）  Ｌ１２１、およびｔｈｒ−ＭＤＰ（サブミクロンエマルジョンへとマイクロフルイダイズされる）を含むＭＦ７５（ＳＡＦとしても公知）である。ＭＦ７５−ＭＴＰは、ＭＴＰを含むＭＦ７５処方物（例えば、１００〜４００μｇのＭＴＰ−ＰＥ／用量）を示す。
【０１５０】
水中油型サブミクロンエマルジョン、上記組成物における使用のために、同じおよび免疫刺激剤（例えば、ムラミルペプチド）を作製する方法は、ＷＯ９０／１４８３７；米国特許第６，２９９，８８４号；および米国特許第６，４５１，３２５号に詳細に記載される。
【０１５１】
完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）および不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）はまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る。
【０１５２】
（Ｃ．サポニン処方物）
サポニン処方物はまた、本発明において免疫学的アジュバントとして使用するのに適切である。サポニンは、広い範囲の植物種の樹皮、葉、茎、根およびさらには花において見いだされるステロールグリコシドおよびトリテルペノイドグリコシドの異種由来の群である。Ｑｕｉｌｌａｉａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａの木の樹皮から単離されたサポニンは、アジュバントとして広く研究されてきた。サポニンはまた、Ｓｍｉｌａｘ  ｏｒｎａｔａ（サルサパリラ（ｓａｒｓａｐｒｉｌｌａ））、Ｇｙｐｓｏｐｈｉｌｌａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ（ブライダルベール）、およびＳａｐｏｎａｒｉａ  ｏｆｆｉｃｉａｎａｌｉｓ（ソープルート）から商業的に得られ得る。サポニンアジュバント処方物は、精製処方物（例えば、ＱＳ２１）、ならびに脂質処方物（例えば、ＩＳＣＯＭ）を含む。サポニンアジュバント処方物としては、ＳＴＩＭＵＬＯＮ（登録商標）アジュバント（Ａｎｔｉｇｅｎｉｃｓ，Ｉｎｃ．，Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）が挙げられる。
【０１５３】
サポニン組成物は、高性能薄層クロマトグラフィー（ＨＰ−ＴＬＣ）および逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を使用して精製された。これら技術を使用する特定の精製画分が同定された。これらとしては、ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、ＱＳ２１、ＱＨ−Ａ、ＱＨ−ＢおよびＱＨ−Ｃが挙げられる。好ましくは、上記サポニンは、ＱＳ２１である。ＱＳ２１の生成法は、米国特許第５，０５７，５４０号で開示される。サポニン処方物はまた、ステロール（例えば、コレステロール）を含み得る（ＷＯ９６／３３７３９を参照のこと）。
【０１５４】
サポニンおよびコレステロールの組み合わせは、免疫刺激複合体（ＩＳＣＯＭ）といわれる特有の粒子を形成するために使用され得る。ＩＳＣＯＭはまた、代表的には、リン脂質（例えば、ホスファチジルエタノールアミンもしくはホスファチジルコリン）を含む。任意の公知のサポニンは、ＩＳＣＯＭ中で使用され得る。好ましくは、上記ＩＳＣＯＭは、Ｑｕｉｌ  Ａ、ＱＨＡおよびＱＨＣのうちの１種以上を含む。ＩＳＣＯＭは、ＥＰ  ０  １０９  ９４２、ＷＯ９６／１１７１１およびＷＯ９６／３３７３９にさらに記載される。必要に応じて、上記ＩＳＣＯＭＳは、さらなる界面活性剤が全くなくてもよい。ＷＯ００／０７６２１を参照のこと。
【０１５５】
サポニンベースのアジュバントの開発の総説は、Ｂａｒｒら（１９９８）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌ．Ｒｅｖ．３２：２４７−２７１において見いだされ得る。Ｓｊｏｌａｎｄｅｒら（１９９８）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌ．Ｒｅｖ．３２：３２１−３３８もまた参照のこと。
【０１５６】
（Ｄ．ビロソームおよびウイルス様粒子（ＶＬＰ））
ビロソームおよびウイルス様粒子（ＶＬＰ）はまた、免疫学的アジュバントとして適切である。これら構造は、一般に、リン脂質と必要に応じて合わされるかもしくは処方されるウイルス由来の１種以上のタンパク質を含む。それらは、一般に、非病原性、非複製性であり、一般に、天然のウイルスゲノムのいずれも含まない。上記ウイルスタンパク質は、組換え生成されてもよいし、完全なウイルスから単離されてもよい。ビロソームもしくはＶＬＰにおける使用に適したこれらウイルスタンパク質としては、インフルエンザウイルス（例えば、ＨＡもしくはＮＡ）、Ｂ型肝炎ウイルス（例えば、コアタンパク質もしくはキャプシドタンパク質）、Ｅ型肝炎ウイルス、麻疹ウイルス、シンドビス・ウイルス、ロタウイルス、口蹄疫ウイルス、レトロウイルス、ノーウォークウイルス、ヒトパピローマウイルス、ＨＩＶ、ＲＮＡファージ、Ｑβファージ（例えば、コートタンパク質）、ＧＡファージ、ｆｒファージ、ＡＰ２０５ファージ、およびＴｙ（例えば、レトロトランスポゾンＴｙタンパク質ｐ１）に由来するタンパク質が挙げられる。ＶＬＰは、ＷＯ０３／０２４４８０；ＷＯ０３／０２４４８１；Ｎｉｉｋｕｒａら（２００２）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ２９３：２７３−２８０；Ｌｅｎｚら（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６（９）：５３４６−５３５５；Ｐｉｎｔｏら（２００３）Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１８８：３２７−３３８；およびＧｅｒｂｅｒら（２００１）Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７５（１０）：４７５２−４７６０でさらに考察されている。ビロソームは、例えば、Ｇｌｕｃｋら（２００２）Ｖａｃｃｉｎｅ  ２０：Ｂ１０−Ｂ１６でさらに考察されている。免疫強化再構成インフルエンザビロソーム（ＩＲＩＶ）は、鼻内三価ＩＮＦＬＥＸＡＬＴＭ生成物（Ｍｉｓｃｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｅｔｃａｌｆｅ（２００２）  Ｖａｃｃｉｎｅ  ２０  補遺５：Ｂ１７−Ｂ２３）およびＩＮＦＬＵＶＡＣ  ＰＬＵＳＴＭ生成物におけるサブユニット抗原送達系として使用される。
【０１５７】
（Ｅ．細菌誘導体もしくは微生物誘導体）
本発明における使用に適した免疫学的アジュバントとしては、例えば、以下の細菌誘導体もしくは微生物誘導体が挙げられる。
【０１５８】
（１）腸内細菌リポポリサッカリド（ＬＰＳ）の非毒性誘導体：このような誘導体としては、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）および３−Ｏ−脱アセチルＭＰＬ（３ｄＭＰＬ）が挙げられる。３ｄＭＰＬは、３脱−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡと、４，５もしくは６  アシル化鎖との混合物である。３脱−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡの好ましい「小粒子」形態は、ＥＰ  ０  ６８９  ４５４で開示される。３ｄＭＰＬのこのような「小粒子」は、０．２２ミクロン膜を通して無菌濾過をするのに十分に小さい（ＥＰ  ０  ６８９  ４５４を参照のこと）。他の非毒性ＬＰＳ誘導体は、モノホスホリルリピドＡ模倣物（例えば、アミノアルキルグルコサミニドホスフェート誘導体（例えば、ＲＣ−５２９））が挙げられる。Ｊｏｈｎｓｏｎら（１９９９）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．９：２２７３−２２７８を参照のこと。
【０１５９】
（２）リピドＡ誘導体：リピドＡ誘導体としては、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉに由来するリピドＡの誘導体（例えば、ＯＭ−１７４）が挙げられる。ＯＭ−１７４は、例えば、Ｍｅｒａｌｄｉら（２００３）Ｖａｃｃｉｎｅ  ２１：２４８５−２４９１；およびＰａｊａｋら（２００３）Ｖａｃｃｉｎｅ  ２１：８３６−８４２に記載される。
【０１６０】
（３）免疫刺激性オリゴヌクレオチド：免疫刺激性オリゴヌクレオチドもしくは本発明においてアジュバントとして使用するのに適したポリマー分子としては、ＣｐＧモチーフを含むヌクレオチド配列（非メチル化シトシン、続いて、グアノシンを含み、ホスフェート結合によって連結される配列）が挙げられる。細菌二重鎖ＲＮＡもしくはパリンドローム配列もしくはポリ（ｄＧ）配列を含むオリゴヌクレオチドはまた、免疫刺激性であることを示した。上記ＣｐＧは、ヌクレオチド改変／アナログ（例えば、ホスホロチオエート改変）を含み得、二本鎖もしくは一本鎖であり得る。必要に応じて、上記グアノシンは、アナログ（例えば、２’−デオキシ−７−デアザグアノシン）で置換され得る。例えば、考えられるアナログ置換についてはＫａｎｄｉｍａｌｌａら（２００３）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３１（９）：２３９３−２４００；ＷＯ０２／２６７５７；およびＷＯ９９／６２９２３を参照のこと。ＣｐＧオリゴヌクレオチドのアジュバント効果は、Ｋｒｉｅｇ（２００３）Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９（７）：８３１−８３５；ＭｃＣｌｕｓｋｉｅら（２００２）ＦＥＭＳ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３２：１７９−１８５；ＷＯ９８／４０１００；米国特許第６，２０７，６４６号；米国特許第６，２３９，１１６号；および米国特許第６，４２９，１９９号においてさらに考察されている。
【０１６１】
上記ＣｐＧ配列は、ＴＬＲ９（例えば、モチーフＧＴＣＧＴＴもしくはＴＴＣＧＴＴ）に向けられ得る。Ｋａｎｄｉｍａｌｌａら（２００３）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．３１（ｐａｒｔ  ３）：６５４−６５８を参照のこと。上記ＣｐＧ配列は、Ｔｈ１免疫応答（例えば、ＣｐＧ−Ａ  ＯＤＮ）を誘導するのに特異的であり得るか、またはＢ細胞応答（例えば、ＣｐＧ−Ｂ  ＯＤＮ）を誘導するのにより特異的であり得る。ＣｐＧ−ＡおよびＣｐＧ−Ｂ  ＯＤＮは、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌら（２００３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７０（８）：４０６１−４０６８；Ｋｒｉｅｇ（２００２）ＴＲＥＮＤＳ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３（２）：６４−６５；およびＷＯ０１／９５９３５において議論されている。好ましくは、上記ＣｐＧは、ＣｐＧ−Ａ  ＯＤＮである。
【０１６２】
好ましくは、上記ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、その５’末端がレセプター認識に対して接近可能であるように構築される。必要に応じて、２個のＣｐＧオリゴヌクレオチド配列は、それらの３’末端において結合し、「イムノマー（ｉｍｍｕｎｏｍｅｒ）」を形成し得る。例えば、Ｋａｎｄｉｍａｌｌａら（２００３）ＢＢＲＣ  ３０６：９４８−９５３；Ｋａｎｄｉｍａｌｌａら（２００３）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．３１（ｐａｒｔ  ３）：６６４−６５８；Ｂｈａｇａｔら（２００３）ＢＢＲＣ  ３００：８５３−８６１；およびＷＯ０３／０３５８３６を参照のこと。
【０１６３】
免疫刺激性オリゴヌクレオチドおよびポリマー分子はまた、代替のポリマー骨格構造（例えば、ポリビニル骨格（Ｐｉｔｈａら（１９７０）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  ２０４（１）：３９−４８；Ｐｉｔｈａら（１９７０）Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ９（８）：９６５−９７７）、およびモルホリノ骨格（米国特許第５，１４２，０４７号；米国特許第５，１８５，４４４号）が挙げられるが、これらに限定されない。種々の他の荷電したポリヌクレオチドアナログおよび非荷電のポリヌクレオチドアナログは、当該分野で公知である。多くの骨格改変は、当該分野で公知であり、これらとしては、非荷電の連結（例えば、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホアミデート、およびカルバメート）および荷電した連結（例えば、ホスホロチオエートおよびホスホロジチオエート）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６４】
（４）ＡＤＰ−リボシル化毒素およびその無毒化誘導体：細菌ＡＤＰ−リボシル化毒素およびその無毒化誘導体は、本発明においてアジュバントとして使用され得る。好ましくは、上記タンパク質は、Ｅ．ｃｏｌｉ（すなわち、Ｅ．ｃｏｌｉ熱不安定性腸毒素「ＬＴ」）、コレラ（「ＣＴ」）、もしくは百日咳（「ＰＴ」）に由来する。粘膜アジュバントとしての無毒化ＡＤＰ−リボシル化毒素の使用は、ＷＯ９５／１７２１１において、およびＷＯ９８／４２３７５において非経口アジュバントとして記載される。好ましくは、上記アジュバントは、無毒化ＬＴ変異体（例えば、ＬＴ−Ｋ６３、ＬＴ−Ｒ７２、およびＬＴＲ１９２Ｇ）である。アジュバントとしてのＡＤＰ−リボシル化毒素およびその無毒化誘導体（特に、ＬＴ−Ｋ６３およびＬＴ−Ｒ７２）の使用は、以下の参考文献：Ｂｅｉｇｎｏｎら（２００２）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．７０（６）：３０１２−３０１９；Ｐｉｚｚａら（２００１）Ｖａｃｃｉｎｅ  １９：２５３４−２５４１；Ｐｉｚｚａら（２０００）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２９０（４−５）：４５５−４６１；Ｓｃｈａｒｔｏｎ−Ｋｅｒｓｔｅｎら（２０００）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６８（９）：５３０６−５３１３；Ｒｙａｎら（１９９９）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６７（１２）：６２７０−６２８０；Ｐａｒｔｉｄｏｓら（１９９９）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．６７（３）：２０９−２１６；Ｐｅｐｐｏｌｏｎｉら（２００３）Ｖａｃｃｉｎｅｓ  ２（２）：２８５−２９３；およびＰｉｎｅら（２００２）Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ８５（１−３）：２６３−２７０において見いだされ得る。アミノ酸置換についての多くの参考文献は、好ましくは、Ｄｏｍｅｎｉｇｈｉｎｉら（１９９５）Ｍｏｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．１５（６）：１１６５−１１６７に示されるＡＤＰ−リボシル化毒素のＡサブユニットおよびＢサブユニットのアラインメントに基づく。
【０１６５】
式Ｉ、式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその塩はまた、「ＥＲ  ８０３０５８」、「ＥＲ  ８０３７３２」、「ＥＲ  ８０４０５３」、「ＥＲ  ８０４０５８」、「ＥＲ  ８０４０５９」、「ＥＲ  ８０４４４２」、「ＥＲ  ８０４６８０」、「ＥＲ  ８０４７６４」、「ＥＲ  ８０３０２２」もしくは「ＥＲ  ８０４０５７」のように、ＷＯ０３／０１１２２３において定義されるように、アジュバントとして使用され得る：
【０１６６】
【化３】
0005988435.tif 000008
例えば：
【０１６７】
【化４】
0005988435.tif 000009
（Ｆ．ヒト免疫調節剤）
免疫学的アジュバントとして使用するのに適したヒト免疫調節剤としては、サイトカイン（例えば、インターロイキン（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１２など）、インターフェロン（例えば、インターフェロン−γ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、および腫瘍壊死因子（ＴＮＦ））が挙げられる。
【０１６８】
（Ｇ．生体接着剤および粘膜接着剤）
生体接着剤および粘膜接着剤はまた、免疫学的アジュバントとして使用され得る。適切な生体接着剤は、エステル化ヒアルロン酸マイクロスフェア（Ｓｉｎｇｈら（２００１）Ｊ．Ｃｏｎｔ．Ｒｅｌｅａｓｅ  ７０：２６７−２７６）もしくは粘膜接着剤（例えば、ポリアクリル酸、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリサッカリドおよびカルボキシメチルセルロースの架橋誘導体）を含む。キトサンおよびその誘導体はまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る（ＷＯ９９／２７９６０を参照のこと）。
【０１６９】
（Ｈ．リポソーム）
免疫学的アジュバントとして使用するのに適したリポソーム処方物の例は、米国特許第６，０９０，４０６号；米国特許第５，９１６，５８８号；およびＥＰ特許公開第ＥＰ  ０  ６２６  １６９号に記載される。
【０１７０】
（Ｉ．ポリオキシエチレンエーテルおよびポリオキシエチレンエステル処方物）
本発明における使用に適した免疫学的アジュバントは、ポリオキシエチレンエーテルおよびポリオキシエチレンエステルを含む（例えば、ＷＯ９９／５２５４９を参照のこと）。このような処方物は、オクトキシノール（ＷＯ０１／２１２０７）ならびにポリオキシエチレンアルキルエーテルと組み合わせて、ポリオキシエチレンソルビタンエステル表面活性剤を、または少なくとも１種のさらなる非イオン性表面活性剤（例えば、オクトキシノール（ＷＯ０１／２１１５２））と組み合わせて、エステル表面活性剤をさらに含む。
【０１７１】
好ましいポリオキシエチレンエーテルは、以下の群から選択される：ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル（ラウレス９）、ポリオキシエチレン−９−ステアリルエーテル、ポリオキシエチレン（ｐｏｌｙｏｘｙｔｈｅｙｌｅｎｅ）−８−ステアリルエーテル、ポリオキシエチレン−４−ラウリルエーテル、ポリオキシエチレン−３５−ラウリルエーテル、およびポリオキシエチレン−２３−ラウリルエーテル。
【０１７２】
（Ｊ．ポリホスファゼン（ＰＣＰＰ））
免疫学的アジュバントとしての使用に適したＰＣＰＰ処方物は、例えば、Ａｎｄｒｉａｎｏｖら（１９９８）Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  １９（１−３）：１０９−１１５；およびＰａｙｎｅら（１９９８）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌ．Ｒｅｖ．３１（３）：１８５−１９６に記載される。
【０１７３】
（Ｋ．ムラミルペプチド）
免疫学的アジュバントとしての使用に適したムラミルペプチドの例としては、Ｎ−アセチル−ムラミル−Ｌ−スレオニル−Ｄ−イソグルタミン（ｔｈｒ−ＭＤＰ）、Ｎ−アセチル−ノルムラミル−ｌ−アラニル−ｄ−イソグルタミン（ｎｏｒ−ＭＤＰ）、およびＮ−アセチルムラミル−ｌ−アラニル−ｄ−イソグルタミニル−ｌ−アラニン−２−（１’−２’−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチルアミンＭＴＰ−ＰＥ）が挙げられる。
【０１７４】
（Ｌ．イミダゾキノリン化合物）
免疫学的アジュバントとしての使用に適したイミダゾキノリン化合物の例としては、イミキモドおよびそのアナログが挙げられ、これらは、Ｓｔａｎｌｅｙ（２００２）Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２７（７）：５７１−５７７；Ｊｏｎｅｓ（２００３）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  ４（２）：２１４−２１８；および米国特許第４，６８９，３３８号；同第５，３８９，６４０号；同第５，２６８，３７６号；同第４，９２９，６２４号；同第５，２６６，５７５号；同第５，３５２，７８４号；同第５，４９４，９１６号；同第５，４８２，９３６号；同第５，３４６，９０５号；同第５，３９５，９３７号；同第５，２３８，９４４号；および同第５，５２５，６１２号にさらに記載される。
【０１７５】
本発明の実施のためのイミダゾキノリンは、イミキモド、レシキモド、および
【０１７６】
【化５】
0005988435.tif 000010
を含む。例えば、国際公開ＷＯ２００６／０３１８７８およびＷＯ２００７／１０９８１０を参照のこと。このような化合物は、ＴＬＲ７アゴニストであることが公知である。
【０１７７】
（Ｍ．チオセミカルバゾン化合物）
免疫学的アジュバントとしての使用に適したチオセミカルバゾン化合物の例、ならびにこのような化合物を処方、製造、およびスクリーニングするための方法としては、ＷＯ０４／６０３０８に記載されるものが挙げられる。上記チオセミカルバゾンは、サイトカイン（例えば、ＴＮＦ−α）の生成のために、ヒト末梢血単核球の刺激において特に有効である。
【０１７８】
（Ｎ．トリプタントリン化合物）
免疫学的アジュバントとしての使用に適したトリプタントリン化合物の例、ならびにこのような化合物を処方、製造、およびスクリーニングするための方法としては、ＷＯ０４／６４７５９に記載されるものが挙げられる。上記トリプタントリン化合物は、サイトカイン（例えば、ＴＮＦ−α）の生成のために、ヒト末梢血単核球の刺激において特に有効である。
【０１７９】
（Ｏ．ヌクレオシドアナログ）
種々のヌクレオシドアナログは、免疫学的アジュバントとして使用され得る。例えば、（ａ）イサトリビン（Ｉｓａｔｏｒａｂｉｎｅ）（ＡＮＡ−２４５；７−チア−８−オキソグアノシン）：
【０１８０】
【化６】
0005988435.tif 000011
およびそのＵ  ｄ  プロドラッグ；（ｂ）ＡＮＡ９７５；（ｃ）ＡＮＡ−０２５−１；（ｄ）ＡＮＡ３８０；（ｅ）米国特許第６，９２４，２７１号；米国公開２００５／００７０５５６号；および米国特許第５，６５８，７３１号に開示される化合物；（ｆ）以下の式を有する化合物：
【０１８１】
【化７】
0005988435.tif 000012
ここで：
Ｒ１およびＲ２は、各々独立して、Ｈ、ハロ、−ＮＲａＲｂ、−ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、置換されたＣ１−６アルコキシ、ヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、Ｃ６−１０アリール、置換されたＣ６−１０アリール、Ｃ１−６アルキル、もしくは置換されたＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、存在しないか、またはＨ、Ｃ１−６アルキル、置換されたＣ１−６アルキル、Ｃ６−１０アリール、置換されたＣ６−１０アリール、ヘテロシクリル、もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
Ｒ４およびＲ５は、各々独立して、Ｈ、ハロ、ヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリル、−Ｃ（Ｏ）−Ｒｄ、Ｃ１−６アルキル、置換されたＣ１−６アルキルであるか、または一緒に結合して、Ｒ４−５にあるように、５員環を形成し：
【０１８２】
【化８】
0005988435.tif 000013
結合は、
【０１８３】
【化９】
0005988435.tif 000014
によって示される結合において達成され；
Ｘ１およびＸ２は、各々独立して、Ｎ、Ｃ、Ｏ、もしくはＳであり；
Ｒ８は、Ｈ、ハロ、−ＯＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−Ｒｃ、−Ｏ−（Ｃ１−６アルキル）、−Ｓ（Ｏ）ｐＲｅ、もしくは−Ｃ（Ｏ）−Ｒｄであり；
Ｒ９は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、置換されたＣ１−６アルキル、ヘテロシクリル、置換されたヘテロシクリルもしくはＲ９ａであり、ここでＲ９ａは、
【０１８４】
【化１０】
0005988435.tif 000015
であり、結合は、
【０１８５】
【化１１】
0005988435.tif 000016
によって示される結合で達成され；
Ｒ１０およびＲ１１は、各々独立して、Ｈ、ハロ、Ｃ１−６アルコキシ、置換されたＣ１−６アルコキシ、−ＮＲａＲｂ、もしくは−ＯＨであり；
各ＲａおよびＲｂは、独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、置換されたＣ１−６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ６−１０アリールであり；
各Ｒｃは、独立して、Ｈ、ホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、Ｃ１−６アルキル、もしくは置換されたＣ１−６アルキルであり；
各Ｒｄは、独立して、Ｈ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、置換されたＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、置換されたＣ１−６アルコキシ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨ（置換されたＣ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（置換されたＣ１−６アルキル）２、Ｃ６−１０アリール、もしくはヘテロシクリルであり；
各Ｒｅは、独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、置換されたＣ１−６アルキル、Ｃ６−１０アリール、置換されたＣ６−１０アリール、ヘテロシクリル、もしくは置換されたヘテロシクリルであり；
各Ｒｆは、独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、置換されたＣ１−６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、ホスフェート、ジホスフェート、もしくはトリホスフェートであり；
各ｎは、独立して、０、１、２、もしくは３であり；
各ｐは、独立して、０、１、もしくは２であるか、
あるいは（ｇ）（ａ）〜（ｆ）のうちのいずれかの薬学的に受容可能な塩、（ａ）〜（ｆ）のうちのいずれかの互変異性体、もしくは上記互変異性体の薬学的に受容可能な塩である。
【０１８６】
（Ｐ．ホスフェート含有非環式骨格に結合した脂質）
ホスフェート含有非環式骨格に結合した脂質を含む免疫学的アジュバントとしては、ＴＬＲ４アンタゴニストＥ５５６４（Ｗｏｎｇら（２００３）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４３（７）：７３５−７４２；ＵＳ２００５／０２１５５１７）：
【０１８７】
【化１２】
0005988435.tif 000017
が挙げられる。
【０１８８】
（Ｑ．低分子免疫増強剤（ＳＭＩＰ））
ＳＭＩＰとしては、以下が挙げられる：
・Ｎ２−メチル−１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・Ｎ２，Ｎ２−ジメチル−１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・Ｎ２−エチル−Ｎ２−メチル−１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・Ｎ２−メチル−１−（２−メチルプロピル）−Ｎ２−プロピル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・１−（２−メチルプロピル）−Ｎ２−プロピル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・Ｎ２−ブチル−１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・Ｎ２−ブチル−Ｎ２−メチル−１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・Ｎ２−メチル−１−（２−メチルプロピル）−Ｎ２−ペンチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・Ｎ２−メチル−１−（２−メチルプロピル）−Ｎ２−プロパ−２−エニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・１−（２−メチルプロピル）−２−［（フェニルメチル）チオ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン；
・１−（２−メチルプロピル）−２−（プロピルチオ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン；
・２−［［４−アミノ−１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−イル］（メチル）アミノ］エタノール；
・２−［［４−アミノ−１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−イル］（メチル）アミノ］エチルアセテート；
・４−アミノ−１−（２−メチルプロピル）−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
・Ｎ２−ブチル−１−（２−メチルプロピル）−Ｎ４，Ｎ４−ビス（フェニルメチル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・Ｎ２−ブチル−Ｎ２−メチル−１−（２−メチルプロピル）−Ｎ４，Ｎ４−ビス（フェニルメチル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・Ｎ２−メチル−１−（２−メチルプロピル）−Ｎ４，Ｎ４−ビス（フェニルメチル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・Ｎ２，Ｎ２−ジメチル−１−（２−メチルプロピル）−Ｎ４，Ｎ４−ビス（フェニルメチル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン；
・１−｛４−アミノ−２−［メチル（プロピル）アミノ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル｝−２−メチルプロパン−２−オール；
・１−［４−アミノ−２−（プロピルアミノ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−２−メチルプロパン−２−オール；
・Ｎ４，Ｎ４−ジベンジル−１−（２−メトキシ−２−メチルプロピル）−Ｎ２−プロピル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２，４−ジアミン。
【０１８９】
（Ｒ．プロテオソーム）
１つのアジュバントは、第２のグラム陰性細菌に由来するリポポリサッカリド調製物と組み合わせた、第１のグラム陰性細菌から調製された外膜タンパク質プロテオソーム調製物である。ここで上記外膜タンパク質プロテオソーム調製物およびリポポリサッカリド調製物は、安定な非共有結合アジュバント複合体を形成する。このような複合体としては、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ外膜およびリポポリサッカリドから構成される複合体である「ＩＶＸ−９０８」が挙げられる。それらは、インフルエンザワクチンのためのアジュバントとして使用されてきた（ＷＯ０２／０７２０１２）。
【０１９０】
（Ｓ．リポペプチド）
リポペプチド（すなわち、１個以上の脂肪酸残基および２個以上のアミノ酸残基を含む化合物）はまた、免疫刺激特徴を有することが公知である。グリセリルシステインに基づいたリポペプチドは、アジュバントとして使用するのに特に適している。このようなペプチドの具体例としては、以下の式の化合物：
【０１９１】
【化１３】
0005988435.tif 000018
が挙げられ、ここでＲ１およびＲ２の各々は、必要に応じて酸素官能基でも置換される８〜３０個、好ましくは、１１〜２１個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和の、脂肪族もしくは混合脂肪族−シクロ脂肪族炭化水素ラジカルを表し、Ｒ３は、水素もしくはラジカルＲ１−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ２−を表し、ここでＲ１は、上記と同じ意味を有し、Ｘは、ペプチド結合によって結合しかつ遊離の、エステル化されたかもしくはアミド化されたカルボキシ基を有するアミノ酸、または末端カルボキシ基が遊離の、エステル化されたかもしくはアミド化された形態である２〜１０個のアミノ酸のアミノ酸配列である。特定の実施形態において、上記アミノ酸配列は、Ｄ−アミノ酸（例えば、Ｄ−グルタミン酸（Ｄ−Ｇｌｕ）もしくはＤ−γ−カルボキシ−グルタミン酸（Ｄ−Ｇｌａ））を含む。
【０１９２】
細菌リポペプチドは、一般に、ＴＬＲ６が関与する必要なしにＴＬＲ２を認識する（ＴＬＲは、種々のトリガーの特異的認識を提供するように協力して機能し、そしてＴＬＲ２とＴＬＲ６は一緒に、ペプチドグリカンを認識する一方で、ＴＬＲ２は、ＴＬＲ６なしでリポペプチドを認識する）。これらは、天然のリポペプチドおよび合成リポペプチドとして分類されることがある。合成リポペプチドは、同様の挙動をする傾向にあり、ＴＬＲ２によって主に認識される。
【０１９３】
アジュバントとして使用するのに適したリポペプチドとしては、式Ｉの化合物：
【０１９４】
【化１４】
0005988435.tif 000019
が挙げられ、
ここで＊で表示されるキラル中心および＊＊＊で表示されるキラル中心は、Ｒ配置であり；
＊＊で表されるキラル中心は、Ｒ配置もしくはＳ配置のいずれかであり；
各Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、独立して、７〜２１個の炭素原子を有し、脂肪族もしくはシクロ脂肪族−脂肪族炭化水素基（これは必要に応じて、酸素官能基によって置換される）であるか、またはＲ１ａおよびＲ１ｂのうちの一方（しかし両方ではない）は、Ｈであり；
Ｒ２は、１〜２１個の炭素原子を有し、かつ必要に応じて酸素官能基で置換される脂肪族もしくはシクロ脂肪族炭化水素基であり；
ｎは、０もしくは１であり；
Ａｓは、−Ｏ−Ｋｗ−ＣＯ−もしくは−ＮＨ−Ｋｗ−ＣＯ−のいずれかを表し、ここでＫｗは、１〜１２個の炭素原子を有する脂肪族炭化水素基であり；
Ａｓ１は、Ｄ−もしくはＬ−α−アミノ酸であり；
Ｚ１およびＺ２は、各々独立して、−ＯＨ、またはアミノ−（低級アルカン）−スルホン酸の、もしくは上記Ｄ−およびＬ−αアミノカルボン酸およびアミノ−低級アルキル−スルホン酸から選択される最大６個までのアミノ酸を有するペプチドのＤ−もしくはＬ−α−アミノ酸のＮ末端ラジカルを表し；そして
Ｚ３は、Ｈもしくは−ＣＯ−Ｚ４であり、ここでＺ４は、−ＯＨ、またはアミノ−（低級アルカン）−スルホン酸の、もしくは上記ＤおよびＬ−αアミノカルボン酸およびアミノ−低級アルキル−スルホン酸から選択される最大６個までのアミノ酸を有するペプチドのＤ−もしくはＬ−αアミノ酸のＮ末端ラジカルであるか；あるいはこのような化合物のカルボン酸から形成されるエステルもしくはアミドである。適切なアミドとしては、−ＮＨ２およびＮＨ（低級アルキル）が挙げられ、適切なエステルとしては、Ｃ１−Ｃ４アルキルエステルが挙げられる。（低級アルキルもしくは低級アルカンは、本明細書で使用される場合、Ｃ１−Ｃ６直鎖もしくは分枝状アルキルを意味する）。
【０１９５】
このような化合物は、米国特許第４，６６６，８８６号により詳細に記載されている。１つの好ましい実施形態において、上記リポペプチドは、以下の式：
【０１９６】
【化１５】
0005988435.tif 000020
のものである。
【０１９７】
リポペプチド種の別の例は、ＬＰ４０といわれ、ＴＬＲ２のアゴニストである（Ａｋｄｉｓら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，３３：２７１７−２７２６（２００３））。
【０１９８】
これらは、Ｅ．ｃｏｌｉに由来するリポペプチド（ムレインリポタンパク質といわれる）の公知のクラスに関連する。ムレインリポペプチドといわれるそれらタンパク質の特定の部分分解生成物は、Ｈａｎｔｋｅら（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３４：２８４−２９６（１９７３））に記載される。これらは、Ｎ−アセチルムラミン酸に連結されたペプチドを含み、従って、ムラミルペプチドに関連し、これらは、Ｂａｓｃｈａｎｇら（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４５（２０）：６３３１−６３６０（１９８９））に記載される。
【０１９９】
（Ｔ．ベンゾナフチリジン）
アジュバントとしての使用に適したベンゾナフチリジン化合物の例としては、式（Ｉ）の構造：
【０２００】
【化１６】
0005988435.tif 000021
を有する化合物、およびその薬学的に受容可能な塩、溶媒和物、Ｎ−オキシド、プロドラッグおよび異性体が挙げられ、ここで：
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケン、Ｃ２−Ｃ８アルキン、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキルであり、ここでＲ３の上記Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、もしくはＣ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、各々必要に応じて、ハロゲン、−ＣＮ、−Ｒ７、−ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２および−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８から独立して選択される１〜３個の置換基で置換され；
Ｒ４およびＲ５は、Ｈ、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１２）、−Ｎ（Ｒ１１Ｒ１２）、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＨＮ（Ｒ９）２、−ＳＲ７、−（ＣＨ２）ｎＯＲ７、−（ＣＨ２）ｎＲ７、−ＬＲ８、−ＬＲ１０、−ＯＬＲ８、−ＯＬＲ１０、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケン、Ｃ２−Ｃ８アルキン、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキルから各々独立して選択され、ここでＲ４およびＲ５の上記Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケン、Ｃ２−Ｃ８アルキン、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、各々必要に応じて、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｒ７、−ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、および−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されるか；
またはＲ３とＲ４、もしくはＲ４とＲ５は、隣接する環原子上に存在する場合、必要に応じて、一つに連結して、５〜６員環を形成し得、ここで上記５〜６員環は、必要に応じて、Ｒ７で置換され；
各Ｌは、結合、−（Ｏ（ＣＨ２）ｍ）ｔ−、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニレンおよびＣ２−Ｃ６アルキニレンから独立して選択され、ここでＬの上記Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニレンおよびＣ２−Ｃ６アルキニレンは、各々必要に応じて、ハロゲン、−Ｒ８、−ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から独立して選択される１〜４個の置換基で置換され；
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケン、Ｃ２−Ｃ８アルキン、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、およびＣ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここでＲ７の上記Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケン、Ｃ２−Ｃ８アルキン、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、およびＣ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、各々必要に応じて、１〜３個のＲ１３基で置換され；
各Ｒ８は、Ｈ、−ＣＨ（Ｒ１０）２、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケン、Ｃ２−Ｃ８アルキン、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキルおよびＣ１−Ｃ６ハロアルコキシから独立して選択され、ここでＲ８の上記Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルケン、Ｃ２−Ｃ８アルキン、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキルおよびＣ１−Ｃ６ハロアルコキシ基は、各々必要に応じて、−ＣＮ、Ｒ１１、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＲ９、−ＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２から独立して選択される１〜３個の置換基で置換され；
各Ｒ９は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキルおよびＣ３−Ｃ６シクロアルキルから独立して選択されるか、または各Ｒ９は、独立して、これらが結合するＮと一緒になって、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキルを形成するＣ１−Ｃ６アルキルであり、ここで上記Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキル環は、必要に応じて、Ｎ、ＯおよびＳから選択されるさらなるヘテロ原子を含み、そしてＲ９の上記Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、もしくはＣ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、各々必要に応じて、−ＣＮ、Ｒ１１、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２から独立して選択される１〜３個の置換基で置換され；
各Ｒ１０は、アリール、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキルおよびヘテロアリールから独立して選択され、ここで上記アリール、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキルおよびヘテロアリール基は、必要に応じて、ハロゲン、−Ｒ８、−ＯＲ８、−ＬＲ９、−ＬＯＲ９、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−ＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８および−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２から選択される１〜３個の置換基で置換され；
Ｒ１１およびＲ１２は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキルから独立して選択され、ここでＲ１１およびＲ１２の上記Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、各々必要に応じて、ハロゲン、−ＣＮ、Ｒ８、−ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキルおよびＣ１−Ｃ６ハロアルコキシから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されるか；
またはＲ１１とＲ１２は、各々独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキルであり、かつこれらが結合するＮ原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳから選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む、必要に応じて置換されたＣ３−Ｃ８ヘテロシクロアルキル環を形成し；
各Ｒ１３は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＬＲ９、−ＬＯＲ９、−ＯＬＲ９、−ＬＲ１０、−ＬＯＲ１０、−ＯＬＲ１０、−ＬＲ８、−ＬＯＲ８、−ＯＬＲ８、−ＬＳＲ８、−ＬＳＲ１０、−ＬＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＬＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＬＯＣ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１１、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ８、−ＬＮ（Ｒ９）２、−ＬＮＲ９Ｒ８、−ＬＮＲ９Ｒ１０、−Ｌ＝ＮＯＨ、−ＬＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＬＳ（Ｏ）２Ｒ８、−ＬＳ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ８ＯＨ、−ＬＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＬＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＬＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９ＬＮ（Ｒ９）２、−ＬＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＬＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＬＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２および−ＯＬＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から独立して選択され；
環Ａは、アリールもしくはヘテロアリールであり、ここで環Ａの上記アリールおよびヘテロアリール基は、１〜３個のＲＡ基で必要に応じて置換され、ここで各ＲＡは、ハロゲン、−Ｒ８、−Ｒ７、−ＯＲ７、−ＯＲ８、−Ｒ１０、−ＯＲ１０、−ＳＲ８、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９Ｃ（Ｓ）Ｒ８、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−ＮＲ９ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＣＯ２Ｒ８、−（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｓ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ８）Ｒ８、−Ｃ（ＮＯＲ８）Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＳＯ２Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＳＯ２Ｒ８、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−Ｎ（ＯＲ８）Ｒ８、−ＣＨ＝ＣＨＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｒ９）２、および−（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（Ｏ）Ｒ８から独立して選択されるか；または環Ａ上の２個の隣接するＲＡ置換基は、環員として最大２個までのヘテロ原子を含む５〜６員環を形成し；
ｎは、各々において独立して、０、１、２、３、４、５、６、７もしくは８であり；
各ｍは、１、２、３、４、５および６から独立して選択され、そして
ｔは、１、２、３、４、５、６、７もしくは８である。
【０２０１】
式（Ｉ）の化合物の特定の実施形態において、環Ａは、芳香族環（例えば、フェニル、ピリジル、もしくはピリミジニル）であり、これらは、必要に応じて置換されたＣ１−Ｃ４アルキルもしくはＣ１−Ｃ４アルコキシでか同じ置換基で置換され得、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５の各々は、独立して、Ｈ、ハロ、もしくは必要に応じて置換されたＣ１−Ｃ４アルキルもしくは必要に応じて置換されたＣ１−Ｃ４アルコキシ基を表す。特定の実施形態において、Ｒ３およびＲ５は、各々Ｈを表す。
【０２０２】
これら化合物において、Ｒ４は、代表的には、必要に応じて置換されたＣ１−Ｃ４アルキルであり、そしていくつかの実施形態において、Ｒ４は、必要に応じて置換されたフェニル環もしくはヘテロアリール環（例えば、ピリジン、ピリミジン、インドール、チオフェン、フラン、オキサゾール、イソオキサゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾイミダゾールなど）で置換されたＣ１−Ｃ４アルキルである。これら実施形態のうちのいくつかにおいて、Ｒ５は、Ｈである。上記必要に応じて置換されたフェニルもしくはヘテロアリール環は、Ｍｅ、ＣＮ、ＣＦ３、ハロ、ＯＭｅ、ＮＨ２、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ２、および必要に応じて置換されたＣ１−Ｃ４アルキルもしくはＣ１−Ｃ４アルコキシから選択される最大３個までの置換基を有し得、ここで式（Ｉ）における上記必要に応じて置換されたＣ１−Ｃ４アルキルもしくはＣ１−Ｃ４アルコキシ基についての置換基は、ハロ、−ＯＨ、−ＯＭｅ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、ＣＯＯＨ、−ＰＯ３Ｈ２、−ＯＰＯ３Ｈ２、ＮＨ２、ＮＭｅ２、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、アリール（好ましくは、フェニルもしくは置換されたフェニル）、Ｃ５−Ｃ６ヘテロシクリル（例えば、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピロリジン）から選択される；およびこれら化合物の薬学的に受容可能な塩。
【０２０３】
アジュバントとしての使用に適したベンゾナフチリジン化合物の他の例としては、以下の式の化合物：
【０２０４】
【化１７】
0005988435.tif 000022
が挙げられ、
ここで各ＲＡは、独立して、ハロ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ２、または必要に応じて置換されたＣ１−Ｃ４アルキルもしくは必要に応じて置換されたＣ１−Ｃ４アルコキシであり；Ｘ４は、ＣＨもしくはＮであり；
そしてＲ４およびＲ５は、独立して、Ｈまたは必要に応じて置換されたアルキルもしくは必要に応じて置換されたアルコキシ基を表す。
【０２０５】
好ましくは、上記式の化合物は、０〜１個のＲＡ置換基を有する。
【０２０６】
これら化合物において、Ｒ４は、代表的には、必要に応じて置換されたＣ１−Ｃ４アルキルであり、そしていくつかの実施形態において、Ｒ４は、必要に応じて置換されたフェニル環もしくはヘテロアリール環（例えば、ピリジン、ピリミジン、インドール、チオフェン、フラン、オキサゾール、イソオキサゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾイミダゾールなど）で置換されたＣ１−Ｃ４アルキルである。これら実施形態のうちのいくつかにおいて、Ｒ５は、Ｈである。上記必要に応じて置換されたフェニルもしくはヘテロアリール環は、Ｍｅ、ＣＮ、ＣＦ３、ハロ、ＯＭｅ、ＮＨ２、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ２、および必要に応じて置換されたＣ１−Ｃ４アルキルもしくはＣ１−Ｃ４アルコキシから選択される最大３個までの置換基を有し得、ここで式（Ｘ）における上記必要に応じて置換されたＣ１−Ｃ４アルキルもしくはＣ１−Ｃ４アルコキシ基の置換基は、ハロ、−ＯＨ、−ＯＭｅ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、ＣＯＯＨ、−ＰＯ３Ｈ２、−ＯＰＯ３Ｈ２、ＮＨ２、ＮＭｅ２、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、アリール（好ましくは、フェニルもしくは置換されたフェニル）、Ｃ５−Ｃ６ヘテロシクリル（例えば、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピロリジン）から選択される；およびこれら化合物の薬学的に受容可能な塩。
【０２０７】
特定の実施形態において、上記ベンゾナフチリジン化合物は、以下から選択される：
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパン−２−オール；
２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；
２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；
エチル  ４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾエート；
２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、および
２−（４−メトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン。
【０２０８】
アジュバントとしての使用に適したベンゾナフチリジン化合物の他の例、ならびに処方および製造の方法は、国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２００９／３５５６３（ＷＯ２００９／１１１３３７として公開）に記載されるものが挙げられる。
【０２０９】
（Ｕ．他のアジュバント）
免疫学的アジュバントとして作用する他の物質は、Ｂｕｒｄｍａｎ，Ｊ．Ｒ．ら（ｅｄｓ）（１９９５）（Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｄｅｓｉｇｎ：Ｓｕｂｕｎｉｔ  ａｎｄ  Ａｄｊｕｖａｎｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ）（第７章）およびＯ’Ｈａｇａｎ，Ｄ．Ｔ．（２０００）（Ｖａｃｃｉｎｅ  Ａｄｊｕｖａｎｔｓ：Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ）（Ｖｏｌｕｍｅ  ４２  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ｓｅｒｉｅｓ））に開示される。
【０２１０】
さらに有用なアジュバント物質としては、以下が挙げられる：
・メチルイノシン５’−モノホスフェート（「ＭＩＭＰ」）（Ｓｉｇｎｏｒｅｌｌｉ  ＆  Ｈａｄｄｅｎ（２００３）Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．３（８）：１１７７−１１８６）。
・ポリヒドロキシル化ピロリジジン（ｐｙｒｒｏｌｉｚｉｄｉｎｅ）化合物（ＷＯ２００４／０６４７１５）（例えば、以下の式を有するものであって：
【０２１１】
【化１８】
0005988435.tif 000023
ここでＲは、水素、直鎖状もしくは分枝状の、置換されていないかもしくは置換された、飽和もしくは不飽和のアシル、アルキル（例えば、シクロアルキル）、アルケニル、アルキニルおよびアリール基を含む基から選択されるもの）、またはその薬学的に受容可能な塩もしくは誘導体。例としては、カスアリン、カスアリン−６−α−Ｄ−グルコピラノース、３−エピ−カスアリン、７−エピ−カスアリン、３，７−ジエピ−カスアリンなどが挙げられるが、これらに限定されない。
・γ−イヌリン（Ｃｏｏｐｅｒ（１９９５）Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６：５５９−５８０）もしくはその誘導体（例えば、アルガムリン（ａｌｇａｍｍｕｌｉｎ））。
・ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０２２７６９に開示される化合物。
・ＷＯ２００４／８７１５３に開示される化合物（以下が挙げられる：アシルピペラジン化合物、インドールジオン化合物、テトラヒドロイソキノリン（ＴＨＩＱ）化合物、ベンゾシクロジオン化合物、アミノアザビニル化合物、アミノベンゾイミダゾールキノリノン（ＡＢＩＱ）化合物（米国特許第６，６０５，６１７号；ＷＯ０２／１８３８３）、ヒドロフタルイミド（Ｈｙｄｒａｐｔｈａｌａｍｉｄｅ）化合物、ベンゾフェノン化合物、イソオキサゾール化合物、ステロール化合物、キナゾリノン（Ｑｕｉｎａｚｉｌｉｎｏｎｅ）化合物、ピロール化合物（ＷＯ２００４／０１８４５５）、アントラキノン化合物、キノキサリン化合物、トリアジン化合物、ピラゾロピリミジン化合物、およびベンゾアゾール化合物（ＷＯ０３／０８２２７２））。
・ロキソリビン（７−アリル−８−オキソグアノシン）（米国特許第５，０１１，８２８号）。
・カチオン性脂質および（通常は中性の）コリピド（ｃｏ−ｌｉｐｉｄ）（例えば、アミノプロピル−ジメチル−ミリストレイルオキシ−プロパンアミニウムブロミド−ジフィタノイルホスファチジル−エタノールアミン（「ＶａｘｆｅｃｔｉｎＴＭ」）もしくはアミノプロピル−ジメチル−ビス−ドデシルオキシ−プロパンアミニウムブロミド−ジオレオイルホスファチジル−エタノールアミン（「ＧＡＰ−ＤＬＲＩＥ：ＤＯＰＥ」））の処方物。（±）−Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２，３−ビス（ｓｙｎ−９−テトラデセニルオキシ（ｔｅｔｒａｄｅｃｅｎｅｙｌｏｘｙ））−１−プロパンアミニウム塩は、好ましい（米国特許第６，５８６，４０９号）を含む処方物。
【０２１２】
本発明はまた、上で同定される上記免疫学的アジュバントのうちの１種以上の局面の組み合わせを含み得る。例えば、以下のアジュバント組成物は、本発明において使用され得る：（１）サポニンおよび水中油型エマルジョン（ＷＯ９９／１１２４１）；（２）サポニン（例えば、ＱＳ２１）＋非毒性ＬＰＳ誘導体（例えば、３ｄＭＰＬ）（ＷＯ９４／００１５３を参照のこと）；（３）サポニン（例えば、ＱＳ２１）＋非毒性ＬＰＳ誘導体（例えば、３ｄＭＰＬ）＋コレステロール；（４）サポニン（例えば、ＱＳ２１）＋３ｄＭＰＬ＋ＩＬ−１２（必要に応じて、＋ステロール）（ＷＯ９８／５７６５９）；（５）３ｄＭＰＬと、例えば、ＱＳ２１および／もしくは水中油型エマルジョンとの組み合わせ（ＥＰ  ０  ８３５  ３１８；ＥＰ  ０  ７３５  ８９８；およびＥＰ  ０  ７６１  ２３１を参照のこと）；（６）１０％のスクアラン、０．４％のＴｗｅｅｎ  ８０、５％のプルロニック−ブロックポリマーＬ１２１、およびｔｈｒ−ＭＤＰを含むＳＡＦ（サブミクロンエマルジョンへとマイクロフルイダイズされるか、もしくはボルテックスされて、より大きなサイズのエマルジョンを生成する）；（７）２％のスクアレン、０．２％のＴｗｅｅｎ  ８０、およびモノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）、トレハロースジミコレート（ＴＤＭ）、および細胞壁骨格（ＣＷＳ）、好ましくは、ＭＰＬ＋ＣＷＳ（ＤｅｔｏｘＴＭ）からなる群より選択される１種以上の細菌細胞壁成分を含むＲｉｂｉＴＭアジュバントシステム（ＲＡＳ）、（Ｒｉｂｉ  Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍ，Ｈａｍｉｌｔｏｎ，ＭＴ）；（８）１種以上のミネラル塩（例えば、アルミニウム塩）＋ＬＰＳの非毒性誘導体（例えば、３ｄＰＭＬ）；（９）１種以上のミネラル塩（例えば、アルミニウム塩）＋免疫刺激性オリゴヌクレオチド（例えば、ＣｐＧモチーフを含むヌクレオチド配列）。
【０２１３】
アルミニウム塩およびＭＦ５９は、注射用のインフルエンザワクチンとともに使用するために好ましいアジュバントである。細菌毒素および生体接着剤は、粘膜送達されるワクチン（例えば、鼻用ワクチン）とともに使用するのに好ましいアジュバントである。
【０２１４】
４．治療剤
本発明における使用に適した治療剤としては、低分子薬物および生物製剤が挙げられる。
【０２１５】
このような治療剤としては、呼吸器疾患および／もしくは障害（以下が挙げられるが、これらに限定されない：喘息、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、運動誘導性喘息、薬物誘導性喘息（アスピリンおよびＮＳＡＩＤ誘導性が挙げられる）および粉塵誘導性喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；気管支炎（感染性気管支炎および好酸球増加性気管支炎が挙げられる）；肺気腫；気管支拡張症；嚢胞性線維症；サルコイドーシス；農夫肺および関連疾患；過敏性肺臓炎；肺線維症（原因不明の特発性間質性肺炎、特発性間質性肺炎、抗癌治療を複雑にする線維症が挙げられる）および慢性感染（結核およびアスペルギルス症が挙げられる）および他の真菌感染；肺移植の合併症；肺血管系の血管炎障害および血栓障害、ならびに肺高血圧症；気道の炎症状態および分泌状態と関連した慢性の咳の処置を含む鎮咳活性、ならびに医原性の咳；急性および慢性の鼻炎（薬物性鼻炎、および血管運動性鼻炎が挙げられる）；通年性アレルギー性鼻炎および季節性アレルギー性鼻炎（神経性鼻炎（花粉症）が挙げられる）；鼻茸；急性ウイルス感染（風邪が挙げられる）、およびＲＳウイルス、インフルエンザ、コロナウイルス（ＳＡＲＳが挙げられる）およびアデノウイルスに起因する感染の処置において使用される治療剤が挙げられる。
【０２１６】
このような治療剤としては、皮膚障害の処置において使用される治療剤が挙げられ、皮膚障害としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：乾癬、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎もしくは他の湿疹性皮膚炎、および遅延型過敏反応；光線過敏症および光線過敏性皮膚炎；脂漏性皮膚炎、ヘルペス状皮膚炎、扁平苔癬、硬化性萎縮性苔癬、壊疽性膿皮症、皮膚サルコイド、基底細胞癌、日光角化症、円板状紅斑性狼瘡、天疱瘡、類天疱瘡、表皮水疱症、蕁麻疹、血管性浮腫、脈管炎、中毒性紅斑、皮膚好酸球増加症（ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｉａｓ）、円形脱毛症、男性型脱毛症、スイート症候群、ウェーバー・クリスチャン症候群、多形性紅斑；蜂巣織炎（感染性および非感染性の両方）；脂肪織炎；皮膚リンパ腫、非黒色腫性皮膚癌および他の異形成病変；薬物誘導性障害（固定薬疹が挙げられる）。
【０２１７】
このような治療剤としては、眼の疾患および／もしくは障害の処置において使用される治療剤が挙げられ、上記眼の疾患および／もしくは障害としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：眼瞼炎；結膜炎（通年性アレルギー性結膜炎および春季アレルギー性結膜炎が挙げられる）；虹彩炎；前部ぶどう膜炎および後部ぶどう膜炎；脈絡膜炎；網膜に影響を及ぼす自己免疫障害、変性障害もしくは炎症性障害；眼炎（交感性眼炎が挙げられる）；サルコイドーシス；感染症（ウイルス性、真菌性および細菌性が挙げられる）。
【０２１８】
このような治療剤としては、尿生殖器の疾患および／もしくは障害の処置において使用される治療剤が挙げられ、上記尿生殖器の疾患および／もしくは障害としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：腎炎（間質性腎炎および糸球体腎炎が挙げられる）；ネフローゼ症候群；膀胱炎（急性膀胱炎および慢性（間質性）膀胱炎ならびにヒューナー潰瘍が挙げられる）；急性および慢性の尿道炎、前立腺炎、精巣上体炎、卵巣炎および卵管炎；外陰膣炎；ペイロニー病；勃起不全（男性および女性の両方）。
【０２１９】
このような治療剤としては、同種異系移植片拒絶の処置において使用される治療剤が挙げられ、上記同種異系移植片拒絶としては、例えば、腎臓、心臓、肝臓、肺、骨髄、皮膚もしくは角膜の移植後の、または輸血後の急性および慢性のもの；あるいは慢性移植片対宿主病が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２０】
このような治療剤としては、他の自己免疫障害およびアレルギー性障害の処置において使用される治療剤が挙げられ、上記他の自己免疫障害およびアレルギー性障害としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：関節リウマチ、過敏性腸症候群、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、橋本甲状腺炎、クローン病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、グレーブス病、アジソン病、糖尿病、特発性血小板減少性紫斑病、好酸球性筋膜炎、高ＩｇＥ症候群、抗リン脂質抗体症候群（ａｎｔｉｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）およびセザリー症候群。
【０２２１】
このような治療剤としては、癌の処置において使用される治療剤が挙げられ、上記癌としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：前立腺、乳房、肺、卵巣、膵臓、腸および結腸、胃、皮膚および脳腫瘍、ならびに骨髄に影響を及ぼす悪性疾患（白血病が挙げられる）およびリンパ球増殖性系（例えば、ホジキンリンパ腫および非ホジキンリンパ腫）；（転移性疾患および腫瘍再発、ならびに腫瘍随伴症候群の予防および処置を含む）。特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物、その薬学的に受容可能な塩、溶媒和物、Ｎ−オキシド、プロドラッグおよび異性体、ならびに本明細書で提供される薬学的組成物は、ｔｏｌｌ様レセプター活性の調節因子として有用であり、新生物の処置において使用され、上記新生物としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：基底細胞癌、扁平上皮癌、日光角化症、黒色腫、癌腫、肉腫、白血病、腎細胞がん、カポジ肉腫、骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病および多発性骨髄腫。
【０２２２】
このような治療剤としては、感染性疾患の処置において使用される治療剤が挙げられ、上記感染性疾患としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ウイルス性疾患（例えば、性器疣贅、尋常性疣贅、足底疣贅、ＲＳウイルス（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｓｙｎｃｙｔｉａｌ  ｖｉｒｕｓ、ＲＳＶ）、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、デングウイルス、単純ヘルペスウイルス（単なる例示であるが、ＨＳＶ−Ｉ、ＨＳＶ−ＩＩ、ＣＭＶ、もしくはＶＺＶ）、伝染性軟疣腫、ワクシニア、痘瘡、レンチウイルス、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、ライノウイルス、エンテロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス（例えば、ＳＡＲＳ）、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ムンプスウイルス、麻疹ウイルス、パポバウイルス、ヘパドナウイルス、フラビウイルス、レトロウイルス、アレナウイルス（単なる例示であるが、ＬＣＭ、フニンウイルス、マクポウイルス、グアナリトウイルスおよびラッサ熱）ならびにフィロウイルス（単なる例示であるが、エボラウイルスもしくはマールブルグウイルス））。
【０２２３】
このような治療剤としては、細菌性、真菌性、および寄生生物性の感染の処置において使用される治療剤が挙げられ、上記感染としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：結核およびトリ型結核菌、らい病；ニューモシスチス肺炎、クリプトスポリジウム症、ヒストプラズマ症、トキソプラズマ症、トリパノソーマ感染症、リーシュマニア症、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ属、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ属、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ属、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ属、Ｐｒｏｔｅｕｓ属、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ属、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属、およびＣｈｌａｍｙｄｉａ属の細菌によって引き起こされる感染症、ならびに真菌感染症（例えば、カンジダ症、アスペルギルス症、ヒストプラズマ症、クリプトコッカス髄膜炎。
【０２２４】
５．凍結保護因子
先に示されるように、凍結保護因子は、本発明の微粒子組成物に添加され得、いくつかの実施形態において、例えば、本発明に従う凍結乾燥組成物が再懸濁させられる場合に微粒子凝集が実質的に起こらないように添加され得る。
【０２２５】
凍結保護因子としては、以下が挙げられる：（ａ）アミノ酸（例えば、とりわけ、グルタミン酸およびアルギニン）；（ｂ）ポリオール（ジオール（例えば、エチレングリコール、プロパンジオール（例えば、１，２−プロピレングリコールおよび１，３−プロピレングリコール）、およびブタンジオール（例えば、とりわけ、２，３−ブチレングリコール））、トリオール（例えば、とりわけ、グリセロール）、ならびに他のより高級なポリオールが挙げられる）；ならびに（ｃ）炭水化物（例えば、（ｉ）モノサッカリド（例えば、とりわけ、グルコース、ガラクトース、およびフルクトース）、（ｉｉ）ポリサッカリド（ジサッカリド（例えば、とりわけ、スクロース、ラクトース、トレハロース、マルトース、ゲンチオビオースおよびセロビオース）、トリサッカリド（例えば、とりわけ、ラフィノース）、テトラサッカリド（例えば、とりわけ、スタキオース）、ペンタサッカリド（例えば、とりわけ、ベルバスコース）、ならびに多くの他のより高級なポリサッカリドが挙げられる）、ならびに（ｉｉｉ）アルジトール（例えば、とりわけ、キシリトール、ソルビトール、およびマンニトール（この点に関して、アルジトールは、より高級なポリオールであり、炭水化物である））。
【０２２６】
本発明に従う組成物は、提供される場合、本発明の凍結乾燥組成物が再懸濁させる場合に実質的な微粒子凝集を妨げるのに有効な量に依存して、種々の量の凍結保護因子を含み得る。
【０２２７】
６．荷電した種
上記に示されるように、本発明に従う微粒子組成物は、上記微粒子に表面電荷を付与するために、荷電した種を含み得る。荷電した種の例としては、例えば、荷電した表面活性剤、荷電したポリマーおよび荷電した低分子が挙げられる。このような種は、例えば、上記微粒子（例えば、抗原、免疫学的アジュバントなど）の表面への種の吸着を促進するのに有効な量で提供され得る。このような種はまた、例えば、受容可能な微粒子懸濁を促進するために（例えば、微粒子形成および／もしくは凍結乾燥後の再懸濁の間に）有効な量で提供され得る。
【０２２８】
荷電した低分子の具体例としては、ビオチンおよび荷電した低分子免疫増強剤が挙げられる。
【０２２９】
荷電した表面活性剤としては、カチオン性表面活性剤およびアニオン性表面活性剤が挙げられる。カチオン性表面活性剤としては、とりわけ、例えば、セチルトリメチルアンモニウムブロミドもしくは「ＣＴＡＢ」（例えば、セトリミド）、塩化ベンザルコニウム、ＤＤＡ（ジメチルジオクトデシルアンモニウムブロミド）、およびＤＯＴＡＰ（ジオレオイル−３−トリメチルアンモニウム−プロパン）が挙げられる。アニオン性表面活性剤としては、とりわけ、例えば、ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム）、ＳＬＳ（ラウリル硫酸ナトリウム）、ＤＳＳ（ジスルホスクシネート）、および硫酸化脂肪アルコールが挙げられる。
【０２３０】
荷電したポリマーは、複数の荷電した基を有するポリマーである（このようなポリマーは、一般に、「高分子電解質」ともいわれる）。いくつかの荷電したポリマーは、生理学的ｐＨにおいてアニオン性基のみを有するので、正味の負電荷を有する（本明細書においてポリアニオンといわれる）。他の荷電したポリマーは、生理学的ｐＨにおいてカチオン性基のみを有するので、生理学的ｐＨにおいて正味の正電荷を有する（ポリカチオンといわれる）。なお他の荷電したポリマーは、アニオン性基およびカチオン性基の両方を有し（例えば、ペプチド、タンパク質など）、正味の負電荷（例えば、上記アニオン性基が上記カチオン性基より多くの電荷を与えるので）もしくは正味の正電荷（例えば、上記カチオン性基が、上記アニオン性基より多くの電荷を与えるので）を有し得る。どの基が生理学的ｐＨにおいて優勢であるかに依存して、カチオン性基およびアニオン性基の両方を含む荷電したポリマーは、ポリカチオン（上記ポリマーが正味の正電荷を有する場合）もしくはポリアニオン（上記ポリマーが正味の負電荷を有する場合）のいずれかとして本明細書で分類され得る。
【０２３１】
ポリカチオンの具体例としては、とりわけ、例えば、ポリアミン（ポリ（アミノメタクリレート）（以下が挙げられる：ポリ（ジアルキルアミノアルキルメタクリレート）（例えば、ポリ（ジメチルアミノエチルメタクリレート）およびポリ（ジエチルアミノエチルメタクリレート））、ポリビニルアミン）、ポリビニルピリジン（以下が挙げられる：四級ポリビニルピリジン（例えば、ポリ（Ｎ−エチル−４−ビニルピリジン）、ポリ（ビニルベンジルトリメチルアミン））、ポリアルキルアミン（例えば、ポリ（アリルアミンヒドロクロリド）（ＰＡＨ）およびポリ（ジアリルジアルキルアミン）（例えば、ポリ（ジアリルジメチルアンモニウムクロリド）、ポリアミドアミン、ポリイミン（以下が挙げられる：ポリアルキレンイミン（例えば、ポリ（エチレンイミン）（ＰＥＩ）、ポリ（プロピレンイミン）およびエトキシル化ポリ（エチレンイミン））、ポリカチオン性ペプチドおよびタンパク質（塩基性アミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、オルニチンおよびこれらの組み合わせを含む）を含むヒストンペプチドおよびホモポリマーおよびコポリマー、ゼラチン、プロタミンおよび硫酸プロタミン、スペルミン、スペルミジン、ヘキサジメチレンブロミド（ｈｅｘａｄｉｍｅｔｈｒｅｎｅ  ｂｒｏｍｉｄｅ）（ポリブレン）、ならびにポリカチオン性ポリサッカリド（例えば、カチオン性デンプンおよびキトサン）、ならびに前述のコポリマー、塩、誘導体および組み合わせが挙げられる。
【０２３２】
ポリアニオンの具体例としては、とりわけ、例えば、ポリスルホネート（例えば、ポリビニルスルホネート、ポリ（スチレンスルホネート）（例えば、ポリ（スチレンスルホン酸ナトリウム）（ＰＳＳ）、スルホン化ポリ（テトラフルオロエチレン））、ポリスルフェート（例えば、ポリビニルスルフェート、硫酸化および非硫酸化グリコサミノグリカン、ならびに特定のプロテオグリカン（例えば、ヘパリン、硫酸ヘパリン、コンドロイチン硫酸、ケラタン硫酸、デルマタン硫酸、ポリカルボキシレート（例えば、アクリル酸ポリマーおよびこれらの塩（例えば、アンモニウム、カリウム、ナトリウムなど）（例えば、Ａｔｏｆｉｎａ  ａｎｄ  Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．から市販されるもの）、メタクリル酸ポリマーおよびこれらの塩（例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ，メタクリル酸とアクリル酸エチルとのコポリマー））、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルアミロースおよび種々の他のポリマーのカルボン酸誘導体、ポリアニオン性ペプチドおよびタンパク質（例えば、酸性アミノ酸（例えば、グルタミン酸、アスパラギン酸もしくはこれらの組み合わせ）のホモポリマーおよびコポリマー）、ウロン酸（例えば、マンヌロン酸、ガラクツロン酸およびグルロン酸）およびこれらの塩のホモポリマーおよびコポリマー、アルギン酸およびその塩、ヒアルロン酸およびその塩、アルブミン、ゼラチン、カラギーナン、ポリホスフェート（例えば、種々のポリマーのリン酸誘導体）、ポリホスホネート（例えば、ポリビニルホスホネート）、ならびに前述のコポリマー、塩、誘導体および組み合わせが挙げられる。
【０２３３】
７．さらなる賦形剤
１種以上のさらなる薬学的に受容可能な賦形剤（例えば、生物学的緩衝化物質、張度調節剤など）はまた、本発明の微粒子組成物中に存在し得る。
【０２３４】
８．投与
いったん処方されると（および必要な場合には、再懸濁させると）、本発明の微粒子組成物は、投与の経路のなかでもとりわけ、例えば、注射（これは、針がなくてもよい）によって、非経口投与され得る。この点に関して、上記微粒子組成物は、代表的には、隔壁もしくは再懸濁媒体（例えば、注射用水）を供給するためおよび得られた懸濁物を引き抜くための他の適切な手段とともに供給される、バイアルもしくは他の容器中に凍結乾燥されて供給される。適切なシリンジはまた、注射のために供給され得る。
【０２３５】
上記に示されるように、特定の実施形態において、上記微粒子組成物は、γ線照射され、この場合、抗原および任意の他の照射に感受性の種（例えば、免疫学的アジュバントなど）を、投与時に添加することは、望ましいことであり得る。
【０２３６】
例えば、１種以上の抗原および／もしくは１種以上の免疫学的アジュバントを含む溶液もしくは懸濁物は、バイアル内の凍結乾燥された微粒子組成物に導入され得、上記バイアルは、上記内容物を完全に混合するために撹拌される（例えば、渦を巻くように混ぜられる（ｓｗｉｒｌｅｄ））。次いで、上記内容物は、脊椎動物被験体への投与のために引き抜かれる。
【０２３７】
いくつかの実施形態において、上記組成物が投与される前に、上記抗原および／もしくは免疫学的アジュバントとの間の接触後に所定の期間が経過させられる。例えば、上記組成物は、このような接触後の３０分から、１０分まで、５分まで、１分まで、直後までの範囲の時間後に投与され得る。
【０２３８】
上記組成物は、例えば、皮下に、皮内に、筋肉内に、静脈内に、動脈内に、もしくは腹腔内に注射され得る。他の投与態様としては、鼻投与、粘膜投与、眼内投与、直腸投与、膣投与、経口投与および肺投与、ならびに経皮適用もしくは皮膚を通しての適用が挙げられる。
【０２３９】
いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、部位特異的な標的化された送達のために使用され得る。例えば、上記組成物の静脈内投与は、肺、肝臓、脾臓、血液循環、もしくは骨髄を標的とするために使用され得る。
【０２４０】
処置は、単一投与スケジュールもしくは複数投与スケジュールに従って行われ得る。複数投与スケジュールは、投与の主な過程が、例えば、１〜１０回の別個の用量で与えられ得、続いて、他の用量が、治療応答を維持および／もしくは強化するために選択されたその後の時間間隔で（例えば、２回目の用量については１〜４ヶ月、および必要である場合、数ヶ月後に引き続く用量で）与えられるものである。上記投与レジメンはまた、少なくとも一部、上記被験体の必要性によって決定され、開業医の判断に依存する。
【０２４１】
さらに、疾患の予防が望まれる場合、上記組成物は、一般に、目的の感染もしくは障害の第１段階の発生に達する前に投与される。他の形態の処置（例えば、症状もしくは再発の軽減もしくは排除）が望ましい場合、上記組成物は、一般に、上記目的の感染もしくは障害の第１段階の発生に達した後に投与される。
【０２４２】
９．キット
本発明は、被験体への免疫学的組成物の適切な量の投与を単純化し得るキットを含む。
【０２４３】
本発明の代表的なキットは、本発明に従う凍結乾燥微粒子組成物の単位投与形態を、好ましくは、密封容器中に含む。
【０２４４】
本発明のキットは、１種以上の抗原および／もしくは１種以上の免疫学的アジュバントを含む密封容器をさらに含む。上記抗原および／もしくはアジュバントは、凍結乾燥形態であってもよいし、水性流体の形態で提供されてもよい。
【０２４５】
本発明のキットは、１種以上の治療剤および／もしくは荷電した薬物を含む密封容器をさらに含み得る。上記治療剤および／もしくは荷電した薬物は、凍結乾燥形態であってもよいし、水性流体の形態で提供されてもよい。
【０２４６】
本発明のキットは、上記凍結乾燥微粒子組成物を懸濁および投与するために、およびいくつかの実施形態において、供給される任意の凍結乾燥抗原および／もしくはアジュバント組成物を懸濁／溶解させるために、ならびに他の実施形態において、任意の凍結乾燥治療剤および／もしくは荷電した薬物組成物を懸濁／溶解するために使用され得る薬学的に受容可能なビヒクルを含む密封容器をさらに含み得る。
【０２４７】
上記キットは、本発明の組成物を脊椎動物被験体に投与するために使用され得る１種以上のデバイスをさらに含み得る。このようなデバイスの例としては、シリンジ、ドリップバッグ、および吸入器が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４８】
例えば、シリンジは、適切な薬学的に受容可能なビヒクル（例えば、注射用水）を、密封容器中に１種以上の抗原（および必要に応じて、１種以上のアジュバント）を含む凍結乾燥組成物に導入するために使用され得る。次いで、得られた抗原含有懸濁物／溶液は、上記容器から引き抜かれ得、さらなる容器中の微粒子組成物に導入され得る。次いで、得られた懸濁物は、上記さらなる容器から引き抜かれ得、被験体へと投与され得る。上に示されるように、特定の実施形態において、適切な期間（例えば、上記微粒子への十分な抗原吸着を可能にするために）が、（ａ）上記抗原含有懸濁物／溶液が上記微粒子組成物に導入される時間と、（ｂ）脊椎動物被験体への導入の時間との間で経過させられる。
【０２４９】
１０．定義
本発明を記載するにあたって、以下の用語が使用され、以下を示すと定義されるものと解釈される。
【０２５０】
用語「微粒子」とは、本明細書で使用される場合、直径が１０，０００ｎｍ未満、例えば、直径が約１０ｎｍ以下から、約１５０μｍまで、より具体的には、１０ｎｍから、２５ｎｍまで、５０ｎｍまで、１００ｎｍまで、２５０ｎｍまで、５００ｎｍまで、１０００ｎｍまで、２５００ｎｍまで、５０００ｎｍまで、１０，０００ｎｍまでの範囲に及ぶ粒子を意味する。いくつかの実施形態において、乾燥微粒子は、直径が１０，０００ｎｍより大きいが、水性流体に添加すると１０，０００ｎｍ未満の大きさの微粒子へと分散する集合体の状態で存在する。本発明の組成物内の上記微粒子は、代表的には、Ｚ平均および／もしくはＤ（ｖ，０．５）値が５，０００ｎｍ未満（例えば、５，０００ｎｍから、２，５００ｎｍまで、１，０００ｎｍまで、５００ｎｍまで、２５０ｎｍまで、もしくはこれ以下の範囲に及ぶ）である、水性流体における粒度分布を有する。
【０２５１】
粒径は、当該分野で利用可能な方法を使用して決定（測定）され得る。例えば、粒径は、光子相関分光法、動的光散乱もしくは準弾性光散乱を使用して決定され得る。これらの方法は、粒径と、ブラウン運動測定から得られた粒子の拡散特性との相関に基づく。ブラウン運動は、上記粒子を取り囲む溶媒分子による衝撃に起因する、上記粒子のランダム運動である。粒子が大きいほど、ブラウン運動はゆっくりになる。速度は、並進拡散係数（Ｄ）によって定義される。測定される値は、粒子が液体内でどのように運動するか（流体力学的直径）を意味する。得られる直径は、粒子と同じ並進拡散係数を有する球の直径である。
【０２５２】
粒径はまた、静的光散乱を使用して決定され得、これは、単一の時間において溶液中の粒子によって散乱された光の強度を測定する。静的光散乱は、散乱角および溶質濃度の関数として光強度を測定する。光源（例えば、レーザー光）を通過する粒子は、それらのサイズに対して反比例する角度で光を散乱させる。大きな粒子は、小さい散乱角で高い強度の回折パターンを生成するのに対して、小さな粒子は、大きな角度で低い強度のシグナルを生じる。粒径分布は、サンプルから散乱された光の強度が、角度の関数として測定される場合に計算され得る。角度情報は、上記粒径分布を計算するために、散乱モデル（例えば、ミー理論）と比較される。
【０２５３】
一般に、粒径は、室温で決定され、上記粒子直径についての平均値を得るために、問題のサンプルの複数回の分析を要する（例えば、同じサンプルに対して少なくとも３回の反復測定）。
【０２５４】
光子相関分光法に関しては、Ｚ平均（キュムラント平均もしくは流体力学的径ともいわれる）は、代表的には、キュムラント（小幅単一様相）分析から計算される。
【０２５５】
静的光散乱測定については（およびいくつかの実施形態においては、光子相関分光法についても）、体積ベースのサイズパラメーターが測定され得る。例えば、上記Ｄ（ｖ，０．５）（ここでｖは体積を意味する）は、上記組成物中の上記粒子のうちの５０％（体積ベース）が、測定される場合に、上記Ｄ（ｖ，０．５）値より小さいサイズを有しかつ上記組成物中の上記粒子のうちの５０％が上記Ｄ（ｖ，０．５）値より大きいサイズを有する点として値が定義されるサイズパラメーターである。
【０２５６】
本明細書で定義される場合、「懸濁物」とは、懸濁した固体粒状物質を含む液相である。懸濁物は、安定であってもよいし、不安定であってもよい。本明細書で定義される場合、「溶液」とは、溶解した物質を含む液相である。本明細書で定義される場合、「水性」懸濁物もしくは溶液は、水（代表的には、５０重量％以上の水、例えば、５０重量％から、７５重量％まで、９０重量％まで、９５重量％まで、もしくはこれ以上の範囲に及ぶ水）を含む懸濁物もしくは溶液である。
【０２５７】
本明細書で定義される場合、「乾燥」微粒子組成物は、液体中に浸漬されていない（例えば、液体懸濁物内にない）微粒子組成物である。代表的には、「乾燥」微粒子組成物は、３％未満の水を含む。
【０２５８】
本明細書で定義される場合、「ブランク」微粒子組成物は、活性薬剤を含まない微粒子組成物である（すなわち、それらは、医薬（薬物、免疫学的アジュバント、抗原などが挙げられる）を含まない）。
【０２５９】
本明細書で使用するための微粒子組成物は、代表的には、滅菌可能な、実質的に非毒性かつ生分解性であるポリマーから形成される。このような物質としては、とりわけ、ポリエステル（例えば、ポリ［ヒドロキシ酸］（例えば、ポリラクチドおよびポリグリコリド、ポリ［環式エステル］（例えば、カプロラクトンなど）、ポリカーボネート、ポリオルトエステル、ポリ酸無水物、ポリシアノアクリレート、ポリホスファジン、およびこれらの組み合わせが挙げられる。より代表的には、本発明とともに使用するための微粒子は、ポリ（α−ヒドロキシ酸）に由来する（例えば、ポリ（ラクチド）（「ＰＬＡ」）（例えば、ポリ（Ｌ−ラクチド）もしくはポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）に由来する）、ラクチドおよびグリコリドのコポリマー（「ＰＬＧＡ」）（例えば、ポリ（Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）もしくはポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）に由来するか、またはラクチドおよびカプロラクトンのコポリマーに由来するポリマー微粒子である。上記ポリマー微粒子は、従って、種々の分子量を有する種々のポリマー出発物質のうちのいずれかを使用して、コポリマー（例えば、ＰＬＧＡ）の場合には、種々のモノマー（例えば、ラクチド：グリコリド）比を使用して、形成され得、これらの選択は、同時投与される種に一部依存して、主に選択の問題である。これらパラメーターは、以下でさらに考察される。
【０２６０】
「ゼータ電位」とは、本明細書で使用される場合、すべての固体および液体の界面にまたがって存在する電位（例えば、荷電したコロイド粒子を取り囲むイオンの拡散層にまたがる電位）を意味する。ゼータ電位は、電気泳動移動度（すなわち、当該分野で周知の技術を使用して、測定されるべき物質と接触した状態で配置された荷電した電極間をコロイド粒子が移動する速度）から計算され得る。
【０２６１】
用語「表面活性剤（ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ）」とは、語句「表面活性剤（ｓｕｒｆａｃｅ  ａｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔ）」から来ている。表面活性剤は、界面において（例えば、液体−液体、液体−固体および／もしくは液体−気体界面において）蓄積し、その界面の特性を変化させる。本明細書で使用される場合、表面活性剤としては、界面活性剤、洗浄剤、分散剤、懸濁剤、乳化安定化剤などが挙げられる。
【０２６２】
本明細書で定義される場合、「炭水化物」とは、モノサッカリド、オリゴサッカリドおよびポリサッカリド、ならびにモノサッカリドから誘導される（例えば、還元によって（例えば、アルジトール）、カルボン酸（例えば、グルクロン酸）に対する１個以上の末端基の酸化によって、または１個以上のヒドロキシル基の、水素原子もしくはアミノ基での置換によって（例えば、β−Ｄ−グルコサミンおよびβ−Ｄ−ガラクトサミン））物質が挙げられる。
【０２６３】
本明細書で定義される場合、「モノサッカリド」とは、多価アルコール（すなわち、アルデヒド基（この場合、上記サッカリドはアルドースである）もしくはケト基（この場合、上記サッカリドはケトースである）のいずれかをさらに含むアルコール）である。モノサッカリドは、代表的には、３〜１０個の炭素を含む。さらに、モノサッカリドは、一般に、実験式（ＣＨ２Ｏ）ｎ（ここでｎは３以上（代表的には、３〜１０）の整数である）を有する。３〜６個の炭素のアルドースの例としては、グリセルアルデヒド、エリスロース、トレオース、リボース、２−デオキシリボース、アラビノース、キシロース、リキソース、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、およびタロースが挙げられる。３〜６個の炭素のケトースの例としては、ジヒドロキシアセトン、エリトルロース、リブロース、キシルロース、プシコース、フルクトース、ソルボース、およびタガトースが挙げられる。天然に存在するモノサッカリドは、Ｌ−形態とは対照的に、通常、Ｄ−異性体形態で見いだされる。
【０２６４】
「オリゴサッカリド」とは、比較的短いモノサッカリドポリマー（すなわち、２〜３０個のモノサッカリドユニットを含むもの）を意味する。「ポリサッカリド」は、オリゴサッカリドの長さを超えるモノサッカリドポリマー（すなわち、３０個より多くのモノサッカリドユニットを含むもの）である。さらに、本明細書で使用される場合、用語「ポリサッカリド」はまた、２個以上の連結したモノサッカリドを含むモノサッカリドポリマーを意味する。多義性を回避するために、第２の定義は、そうでないと明確に示されなければ、いつでも適用されるべきである。用語「ポリサッカリド」はまた、ポリサッカリド誘導体（例えば、とりわけ、アミノ官能化およびカルボキシル官能化されたポリサッカリド誘導体）を含む。モノサッカリドは、代表的には、グリコシド結合によって連結される。具体例としては、ジサッカリド（例えば、スクロース、ラクトース、トレハロース、マルトース、ゲンチオビオースおよびセロビオース）、トリサッカリド（例えば、ラフィノース）、テトラサッカリド（例えば、スタキオース）、およびペンタサッカリド（例えば、ベルバスコース）が挙げられる。
【０２６５】
本明細書で使用される場合、用語「サッカリド」とは、モノサッカリド、オリゴサッカリドおよびポリサッカリドを含む。「サッカリド含有種」とは、少なくともその一部分が、サッカリドである分子である。例としては、サッカリド凍結保護因子、サッカリド抗原、キャリアペプチドに結合体化されたサッカリドを含む抗原など）が挙げられる。「ポリサッカリド含有種」は、少なくともその一部分がポリサッカリドである分子である。
【０２６６】
本明細書で使用される場合、「凍結保護因子」は、凍結および融解の際に、有害な影響を経験しないように組成物を保護する薬剤である。例えば、本発明において、凍結保護因子は、本発明の凍結乾燥組成物が再懸濁させられる場合に起こる、実質的な微粒子凝集を妨げるために添加され得る。
【０２６７】
本明細書で使用される場合、用語「ポリヌクレオチド」とは、少なくとも２個のヌクレオチドユニット（本明細書では「ヌクレオチド」ともいわれる）のホモポリマーもしくはヘテロポリマーを意味する。ポリヌクレオチドを形成するヌクレオチドは、本明細書で定義される場合、天然に存在するヌクレオチド（例えば、リボヌクレオチドおよびデオキシリボヌクレオチド）、ならびに天然に存在するヌクレオチドの等価物、誘導体、改変体およびアナログを含む。
【０２６８】
ポリヌクレオチドは、一本鎖形態もしくは複数鎖形態（例えば、二本鎖、三本鎖など）のいずれかであり得る。ポリヌクレオチドは、直線状の形態であってもよいし、非直線状の形態（例えば、環式、分枝状などのエレメントを含む）であってもよい。ポリヌクレオチドは、天然であっても、合成であっても、もしくはこれら両方の組み合わせであってもよい。
【０２６９】
ポリヌクレオチドは、宿主細胞へと導入された場合に自己複製する能力があり得る。このようなポリヌクレオチドの例としては、自己複製ＲＮＡおよびＤＮＡが挙げられ、例えば、レプリコン、プラスミド、コスミド、ファージミド、トランスポゾン、ウイルスベクター、人工染色体（例えば、細菌、酵母など）、ならびに他の自己複製種から選択される。ポリヌクレオチドは、宿主細胞において抗原性ポリペプチドを発現するもの（例えば、ポリヌクレオチド含有抗原）を含む。ポリヌクレオチドは、真核生物もしくは原核生物に由来する天然もしくは合成の配列（例えば、ゲノムＤＮＡ配列、ゲノムＲＮＡ配列、ｃＤＮＡ配列など）が挿入された自己複製ポリヌクレオチドを含む。自己複製ポリヌクレオチドの具体例としては、とりわけ、ＲＮＡベクター構築物およびＤＮＡベクター構築物が挙げられる。発現され得る配列は、とりわけ、天然の配列および天然のものに対する改変（例えば、欠失、付加および置換（一般に、本質的に保存的））を含む。これら改変は、部位指向性変異誘発を通じてのような故意であってもよいし、偶発的（例えば、抗原を生成する宿主の変異を介して）であってもよい。
【０２７０】
本明細書で定義される場合、「オリゴヌクレオチド」は、５〜１００個、そしてより好ましくは、５〜３０個のヌクレオチドの範囲のサイズを有するポリヌクレオチドである。
【０２７１】
本明細書で使用される場合、語句「核酸」は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、およびこれらから形成されるキメラを含む。
【０２７２】
「ポリヌクレオチド含有種」とは、この少なくとも一部部分がポリヌクレオチドである分子である。
【０２７３】
用語「ポリペプチド」および「タンパク質」は、アミノ酸残基のポリマーをいい、そして上記生成物の最小限の長さに限定されない。従って、ペプチド、オリゴペプチド、ダイマー、マルチマーなどは、上記定義内に含まれる。全長タンパク質およびそのフラグメントの両方が、上記定義内に含まれる。上記用語はまた、例えば、上記タンパク質が、免疫学的応答を誘発するかもしくは上記タンパク質が投与される被験体に対して治療的効果を有する能力を維持するように、天然の配列に対する改変（例えば、欠失、付加および置換（一般には、本質的に保存的）を含む。
【０２７４】
「ポリペプチド含有種」とは、少なくともこの一部分がポリペプチドである分子である。例としては、ポリペプチド、糖タンパク質を含むタンパク質、キャリアタンパク質に結合体化されたサッカリド抗原などが挙げられる。
【０２７５】
用語「医薬」とは、生物的に活性な化合物（例えば、薬物、抗生物質、抗ウイルス剤、増殖因子、ホルモン、抗原、アジュバントなど）を意味する。
【０２７６】
用語「アジュバント」とは、医薬の作用を補助もしくは改変する任意の物質（免疫学的アジュバントが挙げられるが、これらに限定されない）に言及し、これらは、抗原に対する免疫応答を増大もしくは多様化させる。従って、免疫学的アジュバントは、抗原に対する免疫応答を強化し得る化合物である。免疫学的アジュバントは、液性免疫および／もしくは細胞性免疫を強化し得る。
【０２７７】
「抗原」は、宿主免疫系を刺激して、上記抗原が提示される場合に細胞の抗原特異的免疫応答もしくは液性抗体応答を作り得る１種以上のエピトープを含む分子を意味する。抗原は、単独で、もしくは別の分子と組み合わせて提示される場合に、細胞性応答および／もしくは液性応答を誘発し得る。
【０２７８】
「エピトープ」は、抗原性分子もしくはその免疫学的特異性を決定する抗原性複合体の一部である。エピトープは、抗原の本定義の範囲内である。一般に、エピトープは、天然に存在する抗原では、ポリペプチドもしくはポリサッカリドである。人工抗原では、それは、低分子量物質（例えば、アルサニル酸誘導体）であり得る。エピトープは、インビボもしくはインビトロで、例えば、同一源の（ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ）抗体もしくはＴリンパ球と特異的に反応する。代替の記述子は、抗原性決定基、抗原性構造グループ分けおよびハプテングループ分けである。
【０２７９】
頻繁には、エピトープは、約５〜１５個の間のアミノ酸を含む。所定のタンパク質のエピトープは、当該分野で周知の、任意の回数のエピトープマッピング技術を使用して、同定され得る。例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６６（Ｇｌｅｎｎ  Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ，Ｅｄ．，１９９６）  Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙを参照のこと。例えば、直線状エピトープは、例えば、固相上で多数のペプチドを同時に合成する工程、ペプチドを上記タンパク質分子の一部に対応させる工程、および上記ペプチドと抗体とを反応させると同時に上記ペプチドが上記支持体とさらに結合する工程によって、決定され得る。このような技術は、当該分野で公知であり、例えば、米国特許第４，７０８，８７１号；Ｇｅｙｓｅｎら（１９８４）（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：３９９８−４００２）；Ｇｅｙｓｅｎら（１９８６）（Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３：７０９−７１５）に記載される。同様に、立体エピトープは、例えば、Ｘ線結晶解析および二次元核磁気共鳴法によって、アミノ酸の空間構造を決定することによって容易に同定される。例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（前出）を参照のこと。
【０２８０】
用語「抗原」とは、本明細書で使用される場合、サブユニット抗原（すなわち、抗原が本来関係している完全な生物とは別個でありかつ分離した抗原）、ならびに死滅した、弱毒化された、もしくは不活性化された細菌、ウイルス、寄生生物もしくは他の病原体または腫瘍の両方を示す。抗体（例えば、抗イディオタイプ抗体）、もしくはそのフラグメント、および合成ペプチドミモトープ（これは。抗原もしくは抗原決定基を模倣し得る）はまた、本明細書で使用される場合、抗原の定義の下に表現される。
【０２８１】
同様に、免疫原性タンパク質もしくは抗原決定基をインビボで発現する（例えば、核酸免疫適用において）オリゴヌクレオチドもしくはポリヌクレオチドはまた、本明細書で抗原の定義に含まれる。
【０２８２】
さらに、本発明の目的のため、「抗原」とは、タンパク質が免疫学的応答を誘発する能力を維持する限りにおいて、天然配列に対する改変（例えば、欠失、付加および置換（一般に、本質的に保存的））を有するタンパク質をいう。これら改変は、部位指向性変異誘発を介する場合のように故意であってもよいし、偶発的（例えば、上記抗原を生成する宿主の変異を介する）であってもよい。
【０２８３】
抗原もしくは組成物に対する「免疫学的応答」もしくは「免疫応答」とは、上記目的の組成物中に存在する分子に対する液性および／もしくは細胞性の免疫応答の、被験体における発生である。
【０２８４】
免疫応答は、先天的および適応免疫応答を含む。先天的免疫応答は、上記免疫系の防御の第１線を提供する迅速に活動する応答である。対照的に、適応免疫は、所定の病原体もしくは障害（例えば、腫瘍）に由来する抗原を認識し、それによって特異性および免疫記憶を提供する、体細胞が再配置したレセプター遺伝子（例えば、Ｔ細胞レセプターおよびＢ細胞レセプター）を有する免疫細胞の選択およびクローン性発現を利用する。先天的免疫応答は、それらの多くの効果の中で、炎症性サイトカインの爆発的発生および抗原提示細胞（ＡＰＣ）（例えば、マクロファージおよび樹状細胞）の活性化をもたらす。病原体と自己成分を区別するために、上記先天的免疫系は、病原体関連分子パターン（すなわち、ＰＡＭＰ）として公知の病原体からのサインを検出する種々の比較的不変性のレセプターを利用する。実験ワクチンに微生物成分を追加することが、強くかつ持続性の適応免疫応答の発生をもたらすことは公知である。上記免疫応答のこの強化の背後にある機構は、パターン認識レセプター（ＰＲＲ）を伴うことが報告された。これは、種々の免疫細胞（好中球、マクロファージ、樹状細胞、ナチュラル・キラー細胞、Ｂ細胞およびいくつかの非免疫細胞（例えば、上皮細胞および内皮細胞）が挙げられる）上に差次的に発現される。ＰＲＲの関与は、これら細胞のうちのいくつかの活性化、ならびにそれらのサイトカインおよびケモカインの分泌、ならびに他の細胞の成熟および移動をもたらす。連携して、このことは、上記適応免疫応答の樹立をもたらす炎症性環境を作り出す。ＰＲＲは、非ファゴサイトレセプター（例えば、Ｔｏｌｌ様レセプター（ＴＬＲ）およびヌクレオチド結合オリゴマー化ドメイン（ＮＯＤ）タンパク質）、およびファゴサイトーシスを誘導するレセプター（例えば、スカベンジャーレセプター、マンノースレセプターおよびβ−グルカンレセプター）を含む。
【０２８５】
報告されたＴＬＲ（いくつかの報告されたＴＬＲアゴニストの例とともに、それは、本発明の種々の実施形態において免疫学的アジュバントとして使用され得る）としては、とりわけ、以下が挙げられる：ＴＬＲ１（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａに由来する細菌リポタンパク質）、ＴＬＲ２（ザイモサン酵母粒子、ペプチドグリカン、リポタンパク質、糖脂質、リポポリサッカリド、リポペプチド）、ＴＬＲ３（ウイルス二本鎖ＲＮＡ、ポリ：ＩＣ）、ＴＬＲ４（細菌リポポリサッカリドおよびアナログ、植物生成物タキソール）、ＴＬＲ５（細菌フラジェリン）、ＴＬＲ６（酵母ザイモサン粒子、リポテイコ酸、マイコプラズマ由来のリポペプチド）、ＴＬＲ７（一本鎖ＲＮＡ、イミキモド、レシキモド（ｒｅｓｉｍｉｑｕｉｍｏｄ）、および他の合成化合物（例えば、ロキソリビンおよびブロピリミン））、ＴＬＲ８（一本鎖ＲＮＡ、レシキモド（ｒｅｓｉｍｉｑｕｉｍｏｄ））およびＴＬＲ９（ＣｐＧオリゴヌクレオチド）。樹状細胞は、ナイーブＣＤ４＋ヘルパーＴ（ＴＨ）細胞の刺激を開始し、キラー細胞へのＣＤ８＋Ｔ細胞分化を誘導するために最も重要な細胞タイプのうちのいくつかとして認識される。ＴＬＲシグナル伝達は、例えば、観察されるＴＨ応答の特定のタイプを決定するＴＬＲシグナルの性質（例えば、ＴＨ１  対  ＴＨ２応答）とともに、これらヘルパーＴ細胞応答の質を決定するにあたって重要な役割を果たすと報告された。抗体（液性）免疫および細胞性免疫の組み合わせは、ＴＨ１タイプ応答の一部として生成されるのに対して、ＴＨ２タイプ応答は、主に抗体応答である。種々のＴＬＲリガンド（例えば、ＣｐＧ  ＤＮＡ（ＴＬＲ９）およびイミダゾキノリン（ＴＬＲ７、ＴＬＲ８））は、インビトロで免疫細胞からのサイトカイン生成を刺激すると証明された。上記イミダゾキノリンは、ＴＬＲアゴニストであると示された最初の低分子薬物様化合物である。さらなる情報については、例えば、Ａ．Ｐａｓｈｉｎｅ，Ｎ．Ｍ．Ｖａｌｉａｎｔｅ  ａｎｄ  Ｊ．Ｂ．Ｕｌｍｅｒ（Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １１，Ｓ６３−Ｓ６８（２００５））、Ｋ．Ｓ．Ｒｏｓｅｎｔｈａｌ  ａｎｄ  Ｄ．Ｈ．Ｚｉｍｍｅｒｍａｎ（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１３（８），８２１−８２９（２００６））、およびそこで引用される参考文献を参照のこと。
【０２８６】
本発明の目的のために、「液性免疫応答」とは、抗体分子によって媒介される免疫応答をいう一方で、「細胞性免疫応答」は、Ｔリンパ球および／もしくは他の白血球によって媒介されるものである。細胞性免疫の１つの重要な局面は、細胞溶解性Ｔ細胞（「ＣＴＬ」）による抗原特異的応答を要する。ＣＴＬは、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）によってコードされるタンパク質と関連して提示され、細胞の表面に発現されるペプチド抗原に対して特異性を有する。ＣＴＬは、細胞内微生物の細胞内での破壊、またはこのような微生物に感染した細胞の溶解を誘導および促進するのを助ける。細胞性免疫の別の局面は、ヘルパーＴ細胞による抗原特異的応答を要する。ヘルパーＴ細胞は、それらの表面にＭＨＣ分子と関連してペプチド抗原を提示する細胞に対して非特異的エフェクター細胞の機能を刺激し、その活性に焦点を当てるのを助けるように作用する。「細胞性免疫応答」はまた、サイトカイン、ケモカイン、ならびに活性化Ｔ細胞および／もしくは他の白血球によって生成される他のこのような分子（ＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞から得られるもの）の生成を意味する。
【０２８７】
細胞性免疫応答を誘発する免疫原性組成物もしくはワクチンのような組成物は、細胞表面においてＭＨＣ分子と関連した抗原の提示によって脊椎動物被験体を感作するように働き得る。上記細胞媒介性免疫応答は、表面で抗原を提示する細胞に向けられる、もしくはその付近に向けられる。さらに、抗原特異的Ｔリンパ球は、免疫された宿主のさらなる防御を可能にするように生成され得る。
【０２８８】
特定の抗原もしくは組成物が細胞媒介性免疫学的応答を刺激する能力は、当該分野で公知の多くのアッセイによって（例えば、リンパ球増殖（リンパ球活性化）アッセイ、ＣＴＬ細胞傷害性細胞アッセイによって、感作した被験体における上記抗原に対して特異的なＴリンパ球をアッセイすることによって、または抗原での再刺激に応じたＴ細胞によるサイトカイン生成の測定によって）決定され得る。このようなアッセイは、当該分野で周知である。例えば、Ｅｒｉｃｋｓｏｎら（１９９３）（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：４１８９−４１９９）；Ｄｏｅら（１９９４）（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２３６９−２３７６）；および以下の実施例を参照のこと。
【０２８９】
よって、免疫学的応答は、例えば、以下の効果のうちの１つ以上：Ｂ細胞による抗体の生成；および／またはサプレッサーＴ細胞の活性化および／または上記目的の組成物もしくはワクチン中に存在する抗原に対して特異的に指向されるγδＴ細胞を含み得る。これら応答は、感染性を中和し、そして／または抗体−補体もしくは抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を媒介して、免疫した宿主に防御を提供するように働き得る。このような応答は、当該分野で周知の標準的免疫アッセイおよび中和アッセイ（例えば、ラジオイムノアッセイおよびＥＬＩＳＡ）を使用して決定され得る。
【０２９０】
本発明の免疫原性組成物は、異なる組成物中の等量の抗原によって誘発される免疫応答より大きな免疫応答を誘発する能力を本発明の免疫原性が有する場合に、「増強した免疫原性」を示す。従って、組成物は、例えば、上記組成物がより強い免疫応答を生成するか、またはより低い用量の抗原が、それが投与される被験体において免疫応答を達成する必要があるので、「増強された免疫原性」を提示し得る。このような増強された免疫原性は、例えば、本発明の組成物、および抗原コントロールを、動物に投与し、そしてその２つのアッセイ結果を比較することによって、決定され得る。
【０２９１】
本明細書で使用される場合、「処置」（そのバリエーション、例えば、「処置する」もしくは「処置された」を含む）は、（ｉ）問題の病原体もしくは障害の予防（例えば、伝統的なワクチンにおけるように、癌もしくは病原性感染）、（ｉｉ）症状の軽減もしくは排除、および（ｉｉｉ）上記問題の病原体もしくは障害の実質的もしくは完全な排除のうちのいずれかを意味する。処置は、予防的に（上記問題の病原体もしくは障害の出現の前に）もしくは治療的に（上記の出現の後に）もたらされ得る。
【０２９２】
用語、本発明の免疫原性組成物の「有効量」もしくは「薬学的有効量」とは、本明細書では、目的の状態を処置もしくは診断するのに十分な上記免疫原性組成物の量を意味する。必要とされる正確な量は、とりわけ、例えば、上記被験体の種、年齢、および全身的な状態；処置されている上記状態の重篤度；目的の特定の抗原；免疫学的応答の場合には、上記被験体の免疫系が抗体を合成する能力（例えば、望ましい防御の程度）；ならびに投与態様に依存して、被験体間で変動する。任意の個々の場合における適切な「有効」量は、当業者によって決定され得る。従って、「治療上有効な量」は、代表的には、慣用的な治験を介して決定され得る比較的広い範囲に入る。
【０２９３】
「脊椎動物被験体」もしくは「脊椎動物」は、脊椎動物亜門（ｓｕｂｐｈｙｌｕｍ  ｃｏｒｄａｔａ）（哺乳動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウマ、およびヒト）；家庭の動物（例えば、イヌおよびネコ）；およびトリ（家禽、野鳥および競技用のトリ（例えば、雄鳥および雌鳥（ニワトリ、七面鳥および他のキジ類のトリが挙げられる））が挙げられる）が挙げられるが、これらに限定されない）の任意のメンバーを意味する。上記用語は、特定の年齢を示さない。従って、成体および新たに生まれた動物はともに、網羅される。
【０２９４】
「薬学的に受容可能な」もしくは「薬理学的に受容可能な」は、生物学的にもしくは他の点で望ましくないわけではない物質を意味し、すなわち、上記物質は、上記個体における明らかに望ましくない生物学的効果を引き起こさず、上記物質が含まれる上記組成物の成分のうちのいずれとも明らかに有害な様式で相互作用することもなく、個体に投与され得る。
【０２９５】
用語「賦形剤」とは、仕上げられた投与形態で存在し得る任意の本質的に補助的な物質を意味する。例えば、用語「賦形剤」は、ビヒクル、結合剤、崩壊剤、充填剤（希釈剤）、滑沢剤、滑剤、（流動性増強剤（ｆｌｏｗ  ｅｎｈａｎｃｅｒｓ））、圧縮補助物質、着色剤、甘味剤、保存剤、懸濁剤／分散剤、フィルム系製剤／コーティング、香味料および印刷インクを含む。
【０２９６】
「生理学的ｐＨ」もしくは「生理学的範囲のｐＨ」とは、約７．２〜８．０（両端含む）の範囲、より代表的には、約７．２〜７．６（両端含む）の範囲におけるｐＨを意味する。
【０２９７】
本明細書で使用される場合、語句「ベクター構築物」は、一般に、目的の核酸配列もしくは遺伝子の発現を指向し得る任意のアセンブリをいう。ベクター構築物は、代表的には、転写プロモーター／エンハンサーもしくは遺伝子座規定エレメント、または他の手段によって遺伝子発現を制御する他のエレメント（例えば、選択的スプライシング（ａｌｔｅｒｎａｔｅ  ｓｐｌｉｃｉｎｇ）、核ＲＮＡエクスポート、メッセンジャーの転写後修飾（ｐｏｓｔ−ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）、もしくはタンパク質の翻訳後修飾（ｐｏｓｔ−ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ））を含む。さらに、上記ベクター構築物は、代表的には、転写される場合、上記目的の配列もしくは遺伝子に作動可能に連結され、転写開始配列として作用する配列を含む。上記ベクター構築物はまた、必要に応じて、ポリアデニル化を指向するシグナル、選択マーカー、ならびに１個以上の制限部位および翻訳終結配列を含み得る。さらに、上記ベクター構築物がレトロウイルスに配置される場合、上記ベクター構築物は、パッケージングシグナル、長末端反復（ＬＴＲ）、ならびに上記使用されるレトロウイルスに適切なプラス鎖およびマイナス鎖プライマー結合部位（これらがもう存在しない場合）を含み得る。
【０２９８】
「ＤＮＡベクター構築物」は、目的の核酸配列もしくは遺伝子の発現を指向し得るＤＮＡ分子を意味する。
【０２９９】
ＤＮＡベクター構築物の１つの具体的タイプは、プラスミドである。これは、宿主細胞内で自律複製し得る環式のエピソームＤＮＡ分子である。代表的には、プラスミドは、環式の二本鎖ＤＮＡループであり、その中にさらなるＤＮＡセグメントが連結され得る。ｐＣＭＶは、当該分野で周知の１つの具体的なプラスミドである。好ましいｐＣＭＶベクターは、ＣＭＶの最初期エンハンサー／プロモーターおよびウシ成長ホルモンターミネーターを含む。具体例は、Ｃｈａｐｍａｎ，Ｂ．Ｓ．ら（１９９１）（Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１９：３９７９−３９８６）に詳細に記載される。
【０３００】
他のＤＮＡベクター構築物が公知であり、これは、ＲＮＡウイルスに基づく。これらＤＮＡベクター構築物は、代表的には、転写生成物がＲＮＡベクター構築物（例えば、アルファウイルスＲＮＡベクターレプリコン）であるｃＤＮＡ配列の５’側にある真核生物細胞において機能するプロモーター、および３’末端領域を含む。上記ＲＮＡベクター構築物は、好ましくは、ピコルナウイルス、トガウイルス、フラビウイルス、コロナウイルス、パラミクソウイルス、黄熱ウイルス、もしくはアルファウイルス（例えば、シンドビス・ウイルス、セムリキ森林ウイルス、ベネズエラ馬脳炎ウイルス、もしくはロスリバー・ウイルス）に由来するＲＮＡゲノムを含み、これらは、１種以上の構造タンパク質遺伝子を目的の生成物をコードする選択された異種核酸配列で置換することによって改変された。上記ＲＮＡベクター構築物は、ＤＮＡテンプレートからインビトロで転写によって得られ得る。具体例としては、例えば、米国特許第５，８１４，４８２号および同第６，０１５，６８６号ならびに国際公開ＷＯ９７／３８０８７、ＷＯ９９／１８２２６およびＷＯ０２／２６２０９に記載されるに記載されるシンドビス・ウイルスベースのプラスミド（ｐＳＩＮ）（例えば、ｐＳＩＮＣＰ）を含む。このようなベクターの構築は、一般に、米国特許第５，８１４，４８２号および同第６，０１５，６８６号に記載される。
【０３０１】
ベクター構築物の他の例としては、ＲＮＡベクター構築物（例えば、アルファウイルスベクター構築物）などが挙げられる。本明細書で使用される場合、「ＲＮＡベクター構築物」、「ＲＮＡベクターレプリコン」および「レプリコン」とは、それ自体の増幅もしくはインビボで（代表的には、標的細胞内で）自己複製を指向し得るＲＮＡ分子を意味する。上記ＲＮＡベクター構築物は、細胞へのＤＮＡの導入および転写が起こるところである核へのトランスポートのための要件なく、直接使用される。上記宿主細胞の細胞質への直接送達のために上記ＲＮＡベクターを使用することによって、異種核酸配列の自律複製および翻訳が、効率的に起こる。
【０３０２】
（一般）
本発明の実施は、別段示されなければ、当業者の技術範囲内である、化学、生物化学、分子生物学、免疫学および薬理学の従来法を使用する。このような技術は、文献中に十分に説明される。例えば、
【０３０３】
【数５】
0005988435.tif 000024
を参照のこと。
【０３０４】
別段示されなければ、もしくは状況が別のことを明らかに規定しなければ、本明細書中のすべてのパーセンテージおよび比は、重量ベースで示される。
【０３０５】
（実験）
以下は、本発明を実施するための具体的実施形態の例である。実施例は、例示目的で提供されるに過ぎず、本発明の範囲を限定するとは如何様にも解釈されない。
【０３０６】
ＲＧ５０３およびＲＧ５０５  ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）  ５０：５０コポリマー組成物を、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ（Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）から得た。ジオクチルナトリウムスルホスクシネート（ＤＳＳ）を、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）製であった。Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ（ＩＲＩＳ，Ｓｉｅｎａ，Ｉｔａｌｙ）から得たＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ（Ｅ．ｃｏｌｉ）由来組換え髄膜炎菌Ｂタンパク質（Ｍｅｎ  Ｂ）抗原、２８７−９５３、９３６−７４１および９６１ｃ（それぞれ、ＧＮＡ２１３２−１０３０、ＧＮＡ２０９１−１８７０、およびＮａｄＡとしても公知）を、ＷＯ２００４／０３２９５８およびＭ．Ｐｉｚｚａら，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８７：１８１６−１８２０（２０００）に以前に記載されるように単離および精製した。酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）マイクロタイタープレートを、Ｎｕｎｃ（Ｒｏｓｋｉｌｄｅ，Ｄｅｎｍａｒｋ）から得た。すべての他の試薬を、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙから入手した。行ったすべての動物研究は、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ａｎｉｍａｌ  Ｕｓｅ  ａｎｄ  Ｃａｒｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによって承認された。
【０３０７】
さらなる詳細および選択肢的なバリエーションを含むさらなる裏付け実験は、Ｓ．Ｊａｉｎ．ら，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１００：６４６−６５４（２０１０）に見いだされ得る。
【実施例】
【０３０８】
（実施例１：微粒子の調製）
微粒子を、先に記載されるように（Ｍ．Ｓｉｎｇｈら，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．９３：２７３−２８２（２００４）およびＪ．Ｋａｚｚａｚら，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ６７：３４７−３５６（２０００））溶媒エバポレーション法によって調製した。微粒子を、Ｗ／Ｏ／Ｗエマルジョン技術を使用して合成した。６ｍＬのリン酸緩衝化生理食塩水を、ジクロロメタン中の３０ｍＬの６％ｗ／ｖのＲＧ５０３もしくはＲＧ５０５  ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）ポリマー溶液に添加し、２分間にわたって２４，０００ｒｐｍにおいて、１０ｍｍプローブ（Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ  Ｔ２５  ＩＫＡ−Ｌａｂｏｒｔｅｃｈｎｉｋ，Ｗａｓｓｅｒｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用してホモジナイズして、Ｗ／Ｏ一時エマルジョンを形成した。このエマルジョンを、０．０５％ｗ／ｗのＤＳＳを含む１５０ｍＬの水に添加し、アイスバス中で２０分間にわたって２０ｍｍプローブ（ＥＳ−１５  Ｏｍｎｉ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｊａｒｒｅｎｔｏｎ，ＶＡ）を使用して、１６８００ｒｐｍにおいて１５〜２０分間にわたってホモジナイズした。得られたエマルジョンを、１０００ｒｐｍにおいて一晩撹拌して、ジクロロメタンをエバポレートした。微粒子を、５３μｍフィルタに通す濾過によって集められ、２〜８ｏＣにおいて撹拌しながら、貯蔵した。
【０３０９】
得られた微粒子の粒度分布を、粒径分析器（ＬＡ−９２０，Ｈｏｒｉｂａ）で決定した。予め秤量したガラスバイアルに、１ｍＬの粒子懸濁物を添加し、凍結乾燥した（ＦｒｅｅＺｏｎｅ  ４．５  Ｌ  Ｂｅｎｃｈ  ｔｏｐ  ｆｒｅｅｚｅ  ｄｒｙ  ｓｙｓｔｅｍ  Ｌａｂｃｏｎｃｏ）。ポリマー回収率を、重量差から決定した。ＰＬＧ粒子懸濁物（４８ｍｇのＰＬＧ）を、５４ｍｇのマンニトールおよび１８ｍｇのスクロースとともに各ガラスバイアル（Ｍｅｔｒｏｈｍ）に添加した。これら賦形剤を添加して、上記最終的な再構成体積、それぞれ４．５％および１．５％ｗ／ｖにおける凍結乾燥の間に処方物を安定させた。上記粒子懸濁物を、制御サイクルシェルフ凍結乾燥器（ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｃｙｃｌｅ  ｓｈｅｌｆ  ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｒ）（Ｖｉｒｔｉｓ）を使用して、２日間にわたって凍結乾燥した。凍結乾燥後、上記バイアルの上部空間を、窒素ガスでパージして、酸素を除去した（γ線照射の間の上記バイアル中の酸素含有量は、ポリマー分解に影響を及ぼし得る（Ｔ．Ｎ．Ｂｏｗｍｅｒら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４：４２５−４３９（１９７９））。上記バイアルをシールして、若干数の上記バイアルを、１５ｋＧｙもしくは２５ｋＧｙでγ線照射した（Ｈ．Ｎｇｕｙｅｎら，Ｃｅｌｌ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｂａｎｋ  ８：９３−１０５（２００７）、Ｈ．Ｎｇｕｙｅｎら，Ｃｅｌｌ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｂａｎｋ  ８：８１−９１（２００７）、Ｈ．Ｎｇｕｙｅｎら，Ｃｅｌｌ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｂａｎｋ  ９：１３９−１４７（２００８））。バイアルを、使用するまで２〜８℃で貯蔵した。
【０３１０】
上記凍結乾燥した生成物を、製造業者の指示書に従って、Ｋａｒｌ−Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｖｏｌｕｍｅｔｒｉｃ  Ｔｉｔｒａｔｉｏｎ  ｓｙｓｔｅｍを使用して、残留水分含有量を分析した。残留酸素を、ガスクロマトグラフィーによって決定した。上記微粒子を、滅菌水中で再構成し、製造業者の指示書に従って、ＥｎｄｏＳａｆｅ  ＰＴＳ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＵＳＡ）を使用してエンドトキシン含有量を試験した。
【０３１１】
上記手順（照射前）の結果を、表１に提示する。ＲＧ５０３もしくはＲＧ５０５で合成したＰＬＧ微粒子は、粒径約１μｍを有する均一な集団を生じた。上記粒子合成プロセスの効率の尺度は、ＰＬＧ回収率である。ＲＧ５０３およびＲＧ５０５両方のポリマーについて、ＰＬＧ回収率は、＞７０％であると決定した。上記処方物の残留水分含有量は、＜３％であった。上記エンドトキシン含有量は、１００μＬ用量において１ＥＵ／用量の推奨される限界より顕著に少なかった。
【０３１２】
【表１】
0005988435.tif 000025
上記非照射およびγ線照射した（２５ｋＧｙ）ＲＧ５０３微粒子を、粒径および分子量について特徴付けて、上記微粒子に対する照射プロセスの効果を同定した。数平均分子量（Ｍｎ）および重量平均分子量（Ｍｗ）を、ゲル濾過クロマトグラフィーによって、非照射（非ＧＩ）およびγ線照射（ＧＩ）ＰＬＧ粒子について測定した。
【０３１３】
以下の表２に示されるように、上記ＲＧ５０３微粒子の平均粒径は、ガンマ線照射後に４．３μｍに増大した。平均粒径の類似の増大は、照射後の上記ＲＧ５０５微粒子について観察された（データは示さず）。γ線照射による粒径のこの増大は、文献中に報告された（Ｒ．Ｄｏｒａｔｉら．Ｊ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １０７：７８−９０（２００５）；Ｒ．Ｄｏｒａｔｉら，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌ．２３：１２３−１３３（２００６）；Ｃ．Ｅ．Ｈｏｌｙら，Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２２：２５−３１（２００１））。ＲＧ５０３ポリマーは、２５ｋＧｙにおいてγ線照射した場合に分子量の２３％損失と関連した分解を受けた。
【０３１４】
【表２】
0005988435.tif 000026
（実施例２：吸着効力分析およびインビボでの投与のための照射されたおよび照射されていない凍結乾燥した微粒子組成物の調製）
以下で試験される各ＭｅｎＢ抗原に関して、凍結乾燥微粒子の３つの群を準備した。
【０３１５】
群Ｉ（一晩吸着／凍結乾燥）。    微粒子（ＲＧ５０３もしくはＲＧ５０５）を、実施例１に記載されるように調製した。３種の細菌ＭｅｎＢ抗原（２８７−９５３、９６１ｃ、９３６−７４１）を、独立して、２〜８℃において一晩、上記微粒子に吸着させた。上記タンパク質吸着微粒子を、４．８ｍｇおよび４８ｍｇに対応する量でバイアルに添加した。上記量は、それぞれ、１μｇ／抗原および１０μｇ／抗原の総抗原用量を得るに十分であった。５４ｍｇのＤ−マンニトールおよび１８ｍｇのスクロースを、各バイアルに添加し、Ｖｉｒｔｉｓシェルフ凍結乾燥器を使用して凍結乾燥した。上記バイアルを、免疫の前に注射用水で再構成して、それぞれ、４ｍｇ／ｍＬおよび４０ｍｇ／ｍＬの微粒子濃度および総抗原用量１μｇ／抗原および１０μｇ／抗原を得た。
【０３１６】
群ＩＩ（凍結乾燥／照射ブランク微粒子）。    実施例１に記載されるように調製した微粒子（ＲＧ５０３もしくはＲＧ５０５）を、５４ｍｇのＤ−マンニトールおよび１８ｍｇのスクロースとともに、４８ｍｇ／バイアルにおいて５ｍＬバイアルに添加し、上記のように、Ｖｉｒｔｉｓシェルフ凍結乾燥器中で凍結乾燥した。凍結乾燥した後、上記バイアルを、窒素雰囲気下での１５ｋＧｙもしくは２５ｋＧｙのγ線照射で処理し、２〜８℃において貯蔵した。
【０３１７】
群ＩＩＩ（凍結乾燥／非照射ブランク微粒子）。    実施例１に記載されるように調製した微粒子（ＲＧ５０３もしくはＲＧ５０５）を、５４ｍｇのＤ−マンニトールおよび１８ｍｇのスクロースとともに、４８ｍｇ／バイアルにおいて５ｍＬバイアルへと添加し、上記のように、Ｖｉｒｔｉｓシェルフ凍結乾燥器中で凍結乾燥した。凍結乾燥した後、上記バイアルを、２〜８℃において貯蔵した。
【０３１８】
（実施例３．３種のＭｅｎ  Ｂ株の吸着効力）
三価ＭｅｎＢワクチンの３種の細菌抗原（２８７−９５３、９６１ｃおよび９３６−７４１）を、独立して、実施例２に記載されるように調製したバイアル中で、γ線照射（群ＩＩ）微粒子組成物および非照射（群ＩＩＩ）微粒子組成物に注射用水とともに添加して、それぞれ、４ｍｇ／ｍＬおよび４０ｍｇ／ｍＬの微粒子濃度、ならびに１００μｌあたりの総抗原用量１μｇ／抗原および１０μｇ／抗原を得た。１μｇ抗原用量については、１０μｇ用量吸着抗原を、水中で１０倍希釈した。上記バイアルを室温で３０分間および２時間にわたってインキュベートした。群Ｉのバイアルを、注射用水で再構成した。
【０３１９】
１０μｇの抗原用量を有するこれら微粒子懸濁物を、その後、Ｍａｌｙａｌａら（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，９７：１１５５−１１６４（２００８））に記載されるようにＲＰ−ＨＰＬＣベースの手順に供して、上記照射微粒子および非照射微粒子上への各ＭｅｎＢ抗原の吸着％を決定した。具体的には、１００μＬの上清を、Ｗａｔｅｒｓ  ２６９０／４３２機器（Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）付きのＣ４  ４．６ｍｍ×１５０ｍｍカラム（Ｗａｔｅｒｓ）に注入した。直線状の較正曲線を、Ｍｅｎ  Ｂタンパク質で１０〜２００μｇ／ｍＬの範囲において確立し、上記上清中に存在するタンパク質の量を計算した。次いで、結合していないタンパク質の総量を、最初に添加されたタンパク質の総量から差し引きし、差を、実際のローディング効率を計算するために使用した。
【０３２０】
粒子再構成後のタンパク質吸着の効率をまた、半定量的ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって測定した。タンパク質を吸着した微粒子を、遠心分離によって上記吸着媒体から分離し、上記上清中に残っている結合していないタンパク質の量を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって測定した。本質的には、総上清の１０％に対応する１０μＬの上記上清を、添加した。直線状較正曲線を、ＭｅｎＢタンパク質で０．５〜１０μｇ／ｍＬの範囲で確立し、上記上清中に存在するタンパク質の量を、計算した。次いで、結合されていないタンパク質の総量を、最初に添加されたタンパク質の総量から差し引きし、差を、実際のローディング効率を計算するために使用した（すべての標準回帰曲線のＲ２は、０．９８より優れていた）。γ線照射粒子に対するタンパク質吸着の効率を、上記非照射粒子に対するタンパク質吸着と比較した。
【０３２１】
上記２８７−９５３タンパク質および９３６−７４１タンパク質は、＞９０％効率において３０分以内に上記微粒子上に吸着することが観察された。これは、上記非照射微粒子での３０分後のタンパク質吸着に匹敵した（表３）。９６１ｃタンパク質は、上記照射微粒子上に３０分以内で、＞３５％において吸着した。比較すると、一晩インキュベートしたコントロールＰＬＧ粒子は、＞８０％の９６１ｃ吸着を生じた。
【０３２２】
【表３】
0005988435.tif 000027
吸着したタンパク質を、微粒子から抽出後のＳＤＳ−ＰＡＧＥによって、完全性について評価した。この場合、タンパク質を、１００μＬのＳＤＳサンプル緩衝液で１ｍｇの微粒子から抽出し、上記処方物のうちの１０％に対応する１０μＬを、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析のために、４〜１２％の勾配のＴｒｉｓ／グリシンポリアクリルアミドゲル（Ｎｏｖｅｘ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）に対して載せた。上記ゲルを、コロイド製ブルー染色（Ｎｏｖｅｘ）で染色し、脱色し、スキャンした。上記照射微粒子および非照射微粒子から脱着した抗原は、分子量に基づいて、上記抗原構造と比較できかつ維持していた。このことは、上記ＰＬＧ微粒子のγ線照射が、上記抗原吸着効率に対して、もしくは上記抗原が照射後に吸着される場合の抗原完全性に対して最小限の影響を有することを示唆する。また、結果は、ＰＬＧ分子量の損失が、抗原吸着を与えないことを示す。
【０３２３】
（実施例４．マウスにおけるＥＬＩＳＡ抗体力価）
免疫の前に、三価ＭｅｎＢワクチンの３種の細菌抗原（２８７−９５３、９６１ｃおよび９３６−７４１）を、独立して、実施例２に記載されるように調製したγ線照射（群ＩＩ）（１５ｋＧｙもしくは２５ｋＧｙ）微粒子組成物および非照射（グループＩＩＩ）微粒子組成物（ＲＧ５０３もしくはＲＧ５０５）のバイアルに、注射用水とともに添加して、４ｍｇ／ｍＬもしくは４０ｍｇ／ｍＬの微粒子濃度、ならびに所望の抗原濃度（それぞれ、抗原あたり、１μｇ投与量／１００μｌおよび１０μｇ投与量／１００μｌ）を得た。上記バイアルを室温で３０分間にわたってインキュベートし、その内容物を、その後、動物（ＣＤ−１マウス）免疫のために使用した。マウスを、１０群で、３回、０日目、２１日目、および３５日目において、各バイアルから１００μｌの注射体積（１μｇ／抗原投与量もしくは１０μｇ／抗原投与量の抗原投与量に対応する）を筋肉内免疫した。上記２８７−９５３、９６１ｃおよび９３６−７４１抗原の各々に関して、実施例２の群Ｉからのバイアルの内容物が、注射用水を注射して、それぞれ、１μｇ／抗原および１０μｇ／抗原の１００μｌあたりの総抗原用量で、４ｍｇ／ｍＬおよび４０ｍｇ／ｍＬの微粒子濃度を得た後に、この様式でも注射された。ＥＬＩＳＡ抗体力価を、Ｍａｌｙａｌａら（Ｊ．Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ．，９７，１１５５−１１６４（２００８））に先に公開された方法を使用して、２週間後にマウスで測定した。
【０３２４】
上記結果を図１に示す（３本の棒の第１の群および第４の群は、群Ｉの微粒子で得られた結果に対応する）。上記ＩｇＧ力価は、γ線照射微粒子および非照射微粒子について統計的に類似である。これら結果は、γ線照射は、ＰＬＧ微粒子の効力に対する顕著な影響を有さず、γ線照射、続いて抗原吸着は、実現性のあるワクチン接種ストラテジーとして使用され得ることを実証する。
【０３２５】
（実施例５．マウスにおける補体媒介性血清細菌死滅活性−第１の研究）
第１の研究において、ＲＧ５０３  ＰＬＧポリマーの免疫原性に対する処置の効果を評価し、タンパク質吸着のためのインキュベーション期間（３０分  対  ２時間）を最適化した。
【０３２６】
免疫する前に、３種の細菌性ＭｅｎＢ抗原（すなわち、２８７−９５３、９６１ｃおよび９３６−７４１）を、独立して、実施例２に記載されるように調製したγ線照射（グループＩＩ）（２５ｋＧｙ）および非照射（群ＩＩＩ）微粒子組成物（ＲＧ５０３）のバイアルに注射用水とともに添加して、４ｍｇ／ｍＬもしくは４０ｍｇ／ｍＬの微粒子濃度および望ましい抗原濃度（それぞれ、１００μｌあたり、１μｇ／抗原投与量および１０μｇ／抗原投与量）を得た。上記バイアルを、室温において３０分および２時間にわたってインキュベートし、その後、動物（ＣＤ−１マウス）免疫のために使用した。
【０３２７】
マウスを、１０の群において、３回、０日目、２１日目、および３５日目に筋肉内免疫した。血液サンプルを、３回目の免疫後の２週間において集め（４９日目）、血清を集め、血清細菌死滅活性（ＳＢＡ）力価を、Ｍａｌｙａｌａら（Ｊ．Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ．，９７：１１５５−１１６４（２００８））によって先に刊行された方法を使用して、５株（Ｈ４４／７６、５／９９、Ｍ４４０７、ＮＺ  ９８／２５４およびＧＢ３６４）について２週間後にマウスで測定した。上記ＳＢＡアッセイは、抗体が細菌の表面に複合体を固定し、細菌溶解を誘発する能力を測定する（Ｍ．Ｐｉｚｚａら，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８７：１８１６−１８２０（２０００）；Ｒ．Ａ．Ｗａｌｌ，Ａｎｎ  Ｍｅｄ  ３４：６２４−６３４（２００２）、およびＳ．Ｓ．Ｗｉｌｄｅｓら，ＢｉｏＤｒｕｇｓ  １６：３２１−３２９（２００２））。ＳＢＡの程度を、先に記載されるように（Ｍ．Ｐｉｚｚａら，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８７：１８１６−１８２０（２０００））アッセイした。血清を、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ株のパネルに対するＳＢＡ力価について分析した。上記アッセイは、２倍希釈において、プールしたマウス血清の評価を伴う。このアッセイの設計に基づくと、上記ＳＢＡ力価の間の２倍の差異は、有意でないとみなされる（例えば、ＳＢＡ力価５１２および１０２４は、力価１０２４および２０４８のように、等価とみなされる）。
【０３２８】
これら研究の結果は、以下の表４に示され、ＰＬＧ／ＤＳＳ（非ＧＩ）＋ＭｅｎＢ−３０分、ＰＬＧ／ＤＳＳ（非ＧＩ）＋ＭｅｎＢ−２時間、ＰＬＧ／ＤＳＳ（ＧＩ）＋ＭｅｎＢ−３０分、ＰＬＧ／ＤＳＳ（ＧＩ）＋ＭｅｎＢ−２時間と称される。
【０３２９】
また、この様式で注射および試験されたのは、注射用水を注入して、それぞれ、１μｇ／抗原および１０μｇ／抗原の１００  μｌの注射体積あたりの総抗原用量において４ｍｇ／ｍＬおよび４０ｍｇ／ｍＬの微粒子濃度を得た後に、上記２８７−９５３、９６１および９３６−７４１抗原の各々について、実施例２の群Ｉからのバイアルの内容物であった。これら研究の結果はまた、以下の表４に示され、ＰＬＧ／ＤＳＳ／ＭｅｎＢ  ＳＴＤと称される。
【０３３０】
また、この様式で注射および試験されたのは、水酸化アルミニウムに吸着させた３種の抗原組み合わせ（Ａｌｕｍ／ＭｅｎＢ）であった。３ｍｇ／ｍＬの水酸化アルミニウムを、上記３種の抗原の各々の１００μｇ／ｍＬ、１０ｍＭ  ヒスチジン緩衝液および１５０ｍＭ  塩化ナトリウムと混合した。抗原を、２〜８℃において一晩水酸化アルミニウム上に吸着させた。上記Ａｌｕｍ／ＭｅｎＢ処方物は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥを使用して特徴付けし、マウスを、用量あたり各抗原の１μｇおよび１０μｇに対応する１００μＬ／用量において免疫した。これら研究の結果はまた、以下の表４に示され、Ａｌｕｍ／ＭｅｎＢと称される。
【０３３１】
表４から認められ得るように、非照射ＰＬＧ微粒子上に吸着したＭｅｎ  Ｂタンパク質についての機能的細菌力価は、上記高い方の抗原用量について、γ線照射ＰＬＧ微粒子上に吸着されたものに類似であるが、低い方の用量では、特定の株に関してＢＣＡ力価のいくらかの低下が、γ線照射で観察される。上記２つのインキュベーション期間３０分および２時間は、匹敵する免疫原性応答を生じた。これら処方物についての上記ＳＢＡ力価をまた、明礬に吸着した抗原に匹敵した。これら結果に基づいて、３０分を、上記ＰＬＧ粒子に対するＭｅｎＢタンパク質抗原の吸着のための最適なインキュベーション期間として同定した。
【０３３２】
【表４】
0005988435.tif 000028
（実施例６．マウスにおける補体媒介性細菌死滅活性−第２の研究）
第２の研究において、ＲＧ５０３を、第１の研究において同定した条件を使用して、より高い分子量のＰＬＧポリマーであるＲＧ５０５と比較した。上記ＰＬＧ処方物に対するＰＬＧ分子量の効果を理解するために、上記ＰＬＧポリマーＲＧ５０３（Ｍｗ  ３５ｋＤａ）およびＲＧ５０５（Ｍｗ  ６９ｋＤａ）（Ｒ．Ｚａｎｇｅら，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｉｏｐｈａｒｍ  ４４：１４９−１５７（１９９７））を、ＰＬＧ／ＭｅｎＢ処方物の免疫原性に対するγ線照射の効果について比較した。
【０３３３】
免疫する前に、３種の細菌性ＭｅｎＢ抗原（すなわち、２８７−９５３、９６１ｃおよび９３６−７４１）を、独立して、実施例２に記載されるように調製したγ線照射（群ＩＩ）微粒子組成物のバイアルに注射用水とともに添加して、４ｍｇ／ｍＬもしくは４０ｍｇ／ｍＬの微粒子濃度および所望の抗原濃度（それぞれ、１００μｌあたりの１μｇ／抗原投与量および１０μｇ／抗原投与量）を得た。上記バイアルを、室温において３０分間にわたってインキュベートし、その後、動物（ＣＤ−１マウス）免疫のために使用した。各動物を、各バイアルから１００μｌの体積（１μｇ／抗原投与量もしくは１０μｇ／抗原投与量の抗原投与量に対応する）で、４週間間隔で２回筋肉内に免疫した。
【０３３４】
血清細菌死滅活性（ＳＢＡ）力価を、Ｍａｌｙａｌａら（Ｊ．Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ．，９７：１１５５−１１６４（２００８））に先に刊行された方法を使用して、５株（Ｈ４４／７６、５／９９、Ｍ４４０７、ＮＺ  ９８／２５４およびＧＢ３６４）について２週間後にマウスで測定した。これら研究の結果は、以下の表５に示され、ＰＬＧ  １５ｋＧｙ  ＧＩ  ３０分およびＰＬＧ  ２５ｋＧｙ  ＧＩ  ３０分と称される。
【０３３５】
また、この様式で注射および試験したのは、注射用水を注射して、それぞれ、１μｇ／抗原および１０μｇ／抗原の１００μｌの注射体積あたりの総抗原用量で４ｍｇ／ｍＬおよび４０ｍｇ／ｍＬの微粒子濃度を得た後に、上記２８７−９５３、９６１ｃおよび９３６−７４１抗原の各々について実施例２の群Ｉからのバイアルの内容物であった。これら研究の結果はまた、以下の表３に示され、ＰＬＧ非ＧＩ一晩と称される。
【０３３６】
表５から認められ得るように、上記ＳＢＡ力価は、上記２種のＰＬＧポリマーについて同等である。上記照射粒子に対する９６１ｃタンパク質の吸着は、上記コントロール粒子より劣っていた一方で、上記対応するＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ株（５／９９およびＧＢ３６４）に対するＳＢＡ力価は、上記処理された粒子と処理されていない粒子との間で等価であった。上記第１の研究に類似して、γ線照射は、処理ＰＬＧ微粒子  対  コントロールＰＬＧ微粒子で送達した上記ＭｅｎＢ抗原の免疫原性に対して影響を有さなかった。
【０３３７】
【表５】
0005988435.tif 000029
従って、本発明者らは、２工程アプローチを開発した。ここでｈＰＬＧ微粒子を、第１の工程において、合成し、凍結乾燥し、γ線照射した。免疫の前に起こる第２の工程において、上記粒子を再構成し、滅菌抗原とインキュベートして、上記微粒子上のタンパク質の表面吸着を可能にする。
【０３３８】
先の研究は、ワクチンとして使用するために上記ＰＬＧベースの処方物の最終滅菌のための評価可能なストラテジーを示す。上記ＰＬＧ粒子を、バルク凍結乾燥し得、商業的ワクチンにおける使用のためにバルク滅菌し得る。ワクチン処方物の滅菌のためのこのストラテジーは、無菌製造の必要性を克服し得、それによって、開発コストを低減し得、製造の容易さを増大させ得る。さらに、免疫前に抗原を吸着させることは、上記滅菌ＰＬＧ粒子が複数のワクチン抗原のために使用されることを可能にする。このストラテジーは、特に、発展途上国のために、およびＰＬＧ微粒子のような送達系がバルクで備蓄かつ維持され得る大流行に対して広範囲な価値がある。さらに、照射粒子は、種々の抗原とともに使用され得、それによって、上記ＰＬＧ処方物の融通性を増大させ得る。
【０３３９】
（実施例７．微粒子（化合物４７ありおよびなしの）の調製）
化合物４７を、ＷＯ２０１０／１４４７３４の実施例４４に記載されるように調製する。
【０３４０】
微粒子を、水中油型（ｏ／ｗ）単一エマルジョン技術を使用して調製する。簡潔には、ジクロロメタン中、ＰＬＧに対して１％のローディングのために、４ｍＬの１５％ｗ／ｖのＲＧ５０３  ＰＬＧ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍから市販）溶液と、６ｍｇの化合物４７を、６ｍｇのジオクチルスルホスクシネートを含む３３ｍＬの水（ｐＨ７．２に調節）に添加する。上記混合物を、ＩＫＡ  Ｕｌｔｒａ  Ｔｕｒｒｅｘ  Ｔ−２５ホモジナイザーを使用する２４，０００ｒｐｍにおいて１分間にわたるホモジナイズ、続いて、Ｏｍｎｉ  Ｍａｃｒｏホモジナイザーを使用して１２，９００ｒｐｍにおいて６分間にわたるホモジナイズによって、ホモジナイズした。上記エマルジョンを、通風式化学ドラフトチャンバの中で３〜４時間にわたって、１５０ｒｐｍにおいて振盪して、ジクロロメタンをエバポレートする。化合物４７なしの微粒子を、化合物４７が上記微粒子合成の間に添加されないことを除いて、上記のように合成する。すべての微粒子懸濁物を、５３ミクロンフィルタを使用して濾過する。
【０３４１】
各得られた懸濁物内の上記微粒子の粒径を、Ｈｏｒｉｂａ  ＬＡ−９３０粒径分析計を使用して測定する。この段階（凍結乾燥前）において、０．５〜５μｍの標的平均サイズを有する微粒子処方物は望ましい。
【０３４２】
ＰＬＧ含有量を決定するために、１ｍＬの上記微粒子懸濁物を、予め秤量したシンチレーションバイアルに添加し、上記バイアルを、Ｌａｂｃｏｎｃｏベンチ型凍結乾燥器を使用して凍結乾燥した。ＰＬＧ含有量を、上記凍結乾燥したバイアルと空のバイアルとの間の差異として計算する。すべてのＰＬＧ処方物のＰＬＧ回収率を、＞７０％を目標とする。
【０３４３】
化合物４７を、Ｃ１８  ＸＴｅｒｒａカラム（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）および６分間で勾配９０％の水＋０．１％のＴＦＡ／１０％のアセトニトリル＋０．１％ＴＦＡ〜１００％のアセトニトリル＋０．１％ＴＦＡを使用するＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｓｙｓｔｅｍを使用して、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）によって分析する。
【０３４４】
化合物４７の濃度を決定するために、１００μＬの上記粒子懸濁物を、９００μＬのＤＭＳＯと混合し、ＲＰ−ＨＰＬＣによって分析する。化合物４７回収率を、＞７５％の目標で粒子懸濁物中、化合物４７の濃度に基づいて決定する。
【０３４５】
封じ込め効率を決定するために、１００μＬの上記微粒子懸濁物を、１０ｍＭ  ＨＣｌで１ｍＬに希釈し、３０分間にわたって室温で振動させる。得られた粒子懸濁物を、遠心分離にかける。次いで、上記ペレットを、１ｍＬのＤＭＳＯ中に溶解し、上記ＲＰ−ＵＰＬＣシステムで分析して、封じ込められた化合物４７の量を決定する。上記上清もまた、上記ＲＰ−ＵＰＬＣシステムで分析して、封じ込められていない化合物４７の量を決定する。微粒子に封じ込められた化合物４７の量は、＞９０％を目標とする。
【０３４６】
（実施例８．抗原が吸着した（化合物４７ありおよびなしの）コントロール微粒子組成物の調製）
ＭｅｎＢ抗原２８７−９５３を、１０ｍＭ  ヒスチジン緩衝液（ｐＨ５．５）とともに、１００μｇ／ｍＬの抗原最終濃度（最終的に、用量あたり１０μｇの抗原に対応する）において、一晩２〜８℃において上記粒子に吸着させる。ＭｅｎＢ抗原吸着を、以下の微粒子組成物に対して行う：
吸着１：    ＰＬＧに対して１％の化合物４７のローディングを有する化合物４７封じ込め微粒子を、上記粒子に２５０μｇ／ｍＬの化合物４７を供給する量で提供する。
吸着２：    封じ込められた化合物４７なしの微粒子を、吸着１において供給されたものに等しいＰＬＧ含有量を生じる量で提供する。
【０３４７】
上記微粒子に対するＭｅｎＢ抗原吸着を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、続いて、クーマシーブルー染色、およびＥｘｐｅｒｉｏｎシステム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）によって特徴付ける。Ｍａｌｙａｌａら，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．９７：１１５５−１１６４（２００８）を参照のこと。
【０３４８】
次いで、凍結乾燥処方物を、６ｍＬのホウケイ酸ガラスバイアル中に、以下のように形成する：
バイアル１：    吸着１において形成される上記微粒子懸濁物を、６３ｍｇのマンニトール、２１ｍｇのスクロースおよびＰＬＧに対して５％ｗ／ｗのＰＶＡとともに、３５０μｇの化合物４７（２５μｇの化合物４７の１４用量）に対応する量でバイアルに添加し、凍結乾燥する（Ｖｉｒｔｉｓシェルフ凍結乾燥器を使用する）。
バイアル２：    同時凍結乾燥処方物について、吸着２において形成される上記微粒子懸濁物（封じ込められる化合物４７なしのＰＬＧ）を、３５０μｇの化合物４７、６３ｍｇのマンニトール、２１ｍｇのスクロースおよびＰＬＧに対して５％ｗ／ｗのＰＶＡに対応する量で、上記化合物４７懸濁物とともに、バイアル１中と同じＰＬＧ含有量に等価な量でバイアルに添加し、上記内容物を凍結乾燥する。化合物４７懸濁物を、国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０６０６２１（２０１０年１２月１５日出願）に記載されるように調製する。
バイアル３：    コントロール処方物について、吸着２において形成される上記微粒子懸濁物（封じ込めされた化合物４７なしのＰＬＧ）を、６３ｍｇのマンニトールおよび２１ｍｇのスクロースおよびＰＬＧに対して５％ｗ／ｗのＰＶＡとともに、バイアル１中と同じＰＬＧ含有量に等しい量でバイアルに添加し、上記内容物を凍結乾燥する。
【０３４９】
水分含有量を、Ｋａｒｌ−Ｆｉｓｃｈｅｒ滴定法を使用して決定し、すべての凍結乾燥処方物について＜５％の目標で測定する。
【０３５０】
Ｅｎｄｏｓａｆｅ  ＰＴＳシステム（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｓ）を、＜１ＥＵ／用量の目標で、上記凍結乾燥処方物におけるエンドトキシン含有量を決定するために使用する。
【０３５１】
（実施例９．抗原が吸着した（化合物４７ありおよびなし）照射された微粒子組成物の調製物）
微粒子を、実施例７に記載されるように調製する。処方物を、以下のように、６ｍＬのホウケイ酸ガラスバイアル中に形成する：
バイアル４：    ＰＬＧに対して１％の化合物４７が入っている化合物４７封じ込め微粒子を、６３ｍｇのマンニトール、２１ｍｇのスクロースおよびＰＬＧに対して５％ｗ／ｗのＰＶＡとともに、３５０μｇの化合物４７（２５μｇの化合物４７の１４用量）に対応する量でバイアルに添加し、凍結乾燥する（Ｖｉｒｔｉｓシェルフ凍結乾燥器を使用する）。
バイアル５：    封じ込められた化合物４７なしの微粒子を、３５０μｇの化合物４７、６３ｍｇのマンニトール、２１ｍｇのスクロースおよびＰＬＧに対して５％ｗ／ｗのＰＶＡに対応する量で化合物４７懸濁物とともに、バイアル４中と同じＰＬＧ含有量に等しい量でバイアルに添加し、凍結乾燥する（Ｖｉｒｔｉｓシェルフ凍結乾燥器を使用する）。化合物４７懸濁物を、国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０６０６２１（２０１０年１２月１５日出願）に記載されるように調製する。
バイアル６：    封じ込められた化合物４７なしの微粒子を、６３ｍｇのマンニトール、２１ｍｇのスクロースおよびＰＬＧに対して５％ｗ／ｗのＰＶＡとともに、バイアル４中と同じＰＬＧ含有量に等しい量でバイアルに添加し、凍結乾燥する（Ｖｉｒｔｉｓシェルフ凍結乾燥器を使用する）。
【０３５２】
凍結乾燥後、バイアル４〜６を、窒素でパージし、２５ｋＧｙ  γ線照射で処理し、２〜８℃において貯蔵する。ＭｅｎＢ抗原２８７−９５３を、１００μｇ／ｍＬの抗原最終濃度（最終的に、１０μｇの抗原／用量に対応する）において注射用水とともに、γ線照射微粒子組成物のバイアルの各々に添加する。上記バイアルを室温で３０分間にわたってインキュベートして、タンパク質吸着を可能にする。
【０３５３】
１０μｇ抗原用量を有する上記微粒子懸濁物を、その後、Ｍａｌｙａｌａら（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，９７：１１５５−１１６４（２００８））に記載されるように、上記ＲＰ−ＨＰＬＣベースの手順に供して、上記照射微粒子組成物に対するＭｅｎＢ抗原の吸着％を決定する。具体的には、１００μＬの上記上清を、Ｗａｔｅｒｓ  ２６９０／４３２機器（Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）付きのＣ４  ４．６ｍｍ×１５０ｍｍカラム（Ｗａｔｅｒｓ）に注入する。直線状較正曲線を、Ｍｅｎ  Ｂタンパク質での１０〜２００μｇ／ｍＬの範囲において確立し、上記懸濁物中に存在するタンパク質の量を計算する。次いで、結合していないタンパク質の総量を、最初に添加したタンパク質の総量から差し引きし、差を実際のローディング効率（ｌｏａｄｉｎｇ  ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ）を計算するために使用する。
【０３５４】
粒子再構成後のタンパク質吸着の効率もまた、半定量的ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって測定する。タンパク質が吸着された微粒子を、遠心分離にとって吸着媒体から分離し、上記上清中に残っている結合していないタンパク質の量を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって測定する。本質的には、総上清の１０％に対応する１０μＬの上記上清を入れる。直線的較正曲線を、ＭｅｎＢタンパク質で０．５〜１０μｇ／ｍＬの範囲において確立し、上記上清中に存在するタンパク質の量を計算する。次いで、結合していないタンパク質の総量を、最初に添加したタンパク質の総量から差し引きし、差を実際のローディング効率を計算するために使用する（すべての標準回帰曲線Ｒ２は、０．９８より優れていた）。γ線照射粒子に対するタンパク質吸着の効率を、上記非照射粒子に対するタンパク質吸着と比較する。
【０３５５】
（実施例１０．インビボマウス研究−細菌死滅アッセイ）
実施例８および実施例９に記載される上記微粒子処方物を、免疫する前に、穏やかに混合しながら、１．４ｍＬの注射用水中で再構成する。バイアル１〜３は、直ぐ使用できる状態であるのに対して、バイアル４〜６は、実施例９に記載されるように、使用前に３０分間にわたってタンパク質抗原とともにインキュベートされる（再構成）。１００μＬの各処方物を、マウス１匹あたりに注射し、これは、１０μｇのＭｅｎＢ抗原および化合物４７を含む処方物の場合には、２５μｇのアジュバントに対応する。各マウスを、０日目および２１日目に筋肉内に免疫する（２部位で５０μＬ）。いくつかの場合において、上記マウスをまた、３５日目に免疫し得る。各マウスを、最終免疫の２週間後に採血する。
【０３５６】
ＭｅｎＢ抗原を注射したマウスについては、プールした血清を、最後の免疫の２週間後に、上記ＭｅｎＢ株ＮＺ９８に対して細菌死滅アッセイについて分析する。
【０３５７】
本発明は、例示によって記載されるに過ぎず、改変が行われ得る一方で、本発明の範囲および趣旨内にあることが、理解される。
【図１】
0005988435.tif 000030