(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アスタキサンチンとトリ（カプリル・カプリン酸）グリセリンとミックストコフェロールとを含有し、
トリ（カプリル・カプリン酸）グリセリンは、遊離型アスタキサンチンに対して、１０倍量を超えて含有し、
ミックストコフェロールは遊離型アスタキサンチンに対して０．３倍量以上含有し、経表皮水分蒸散量を低減し、角層細胞を成熟させる皮膚バリア機能促進外用剤と、
アスタキサンチンとトリ（カプリル・カプリン酸）グリセリンとミックストコフェロールとを含有し、
トリ（カプリル・カプリン酸）グリセリンは、遊離型アスタキサンチンに対して、１０倍量を超えて含有し、
ミックストコフェロールは遊離型アスタキサンチンに対して０．３倍量以上含有し、経表皮水分蒸散量を低減し、角層細胞を成熟させる皮膚バリア機能促進内服剤（ただし、乳化物の形態を除く。）と、が併用される、皮膚バリア機能促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は皮膚バリア機能の回復による改善及び皮膚バリア機能の向上（以下、皮膚バリア機能促進と総称する）に効果的な外用剤及び内服剤とその組み合せに関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚組織は、外部からの化学的あるいは物理的刺激から生体を守る重要な組織である。
このような皮膚バリア機能は、角層細胞が成熟し、充分に扁平になり、表面積が充分に大きくなった細胞が幾層にも重なった構造が形成されている場合に正常であるといわれる。
【０００３】
皮膚バリア機能の改善、促進等を目的にしたものとしては、例えば特許文献１〜４が公知であるが未だ充分とは言えない。
これに対して本願出願人は、これまでにアスタキサンチンに関する研究及び商品開発を進めており、今回アスタキサンチンを所定の他の成分と配合することで皮膚バリア機能が促進されることが明らかになり、本発明に至った。
なお、特許文献５にはオキアミの溶剤抽出液を精製して得られる化粧料を開示する。
しかし、角質層改善効果の試験結果の内容からすると、試験方法がテープ剥離による角質細胞の剥離量の低下を評価するものであって皮膚バリア機能が改善されたか否かについては必ずしも明らかではない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００７−１４２９４号公報
【特許文献２】特開２００５−１１９９９５号公報
【特許文献３】特開２００７−１９１４号公報
【特許文献４】特開２００４−５１５４３号公報
【特許文献５】特開平５−１５５７３６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、皮膚バリア機能の促進に効果的な外用剤及び内服剤とその組み合せの提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は皮膚に塗る外用剤と経口投与による内服剤に特徴があるとともに、特に外用剤と内服剤を組み合せて併用することで大きな皮膚バリア機能の回復改善あるいは、皮膚バリア機能の向上が認められる。
【０００７】
第１に本発明に係る外用剤としての皮膚バリア機能促進外用剤は、トコフェロールと下記一般式（１）で表記されたグリセリドのうち、一方又は両方とアスタキサンチンとを含有することを特徴とする。
【化１】
0005912215.tif 000002
ただし、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３はそれぞれ同一又は異なってもよい炭素数８〜２２の直鎖又は分岐の飽和又は不飽和のアルキル基である。
【０００８】
第２に本発明に係る内服剤としての皮膚バリア機能促進内服剤は、トコフェロールと下記一般式（１）で表記されたグリセリドのうち、一方又は両方とアスタキサンチンとを含有することを特徴とする。
【化２】
0005912215.tif 000003
ただし、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３はそれぞれ同一又は異なってもよい炭素数８〜２２の直鎖又は分岐の飽和又は不飽和のアルキル基である。
即ち、本発明に係る上記アスタキサンチンに一般式（１）で表記されたグリセリド又はトコフェロールの一方又は両方を組み合せたものは外用剤としても内服剤としても用いることができ、これにより皮膚バリア機能が改善あるいは向上する。
【０００９】
ここでトコフェロールはビタミンＥとも称され、トコールのメチル化誘導体である。
メチル基の位置により、α，β，γ，δの４種類があり、Ｄ−α−トコフェロールは自然界に広く存在する。
本発明においてトコフェロールは、上記のいずれでもよく、混合したミックストコフェロールでもよい。
【００１０】
アスタキサンチンは、キサントフィル類に分類されるカロテノイドの一種である。
ＩＵＰＡＣ名は、３，３’−ジヒドロキシ−β，βカロテン−４、４’ジオンであり、３及び３’位のヒドロキシ基の位置により（３Ｒ，３’Ｒ）体、（３Ｒ，３’Ｓ）体（メソ体）、（３Ｓ，３’Ｓ）体の三種が存在し、共役二重結合のシス−トランスによる異性体を有する。
本発明では、いずれのアスタキサンチンを用いても良い。
また、遊離型、モノエステル型、ジエステル型として存在可能である。
天然物由来のものとしては、例えば、緑藻ヘマトコッカスなどの微細藻類、赤色酵母フ
ァフィアなどの酵母類、エビ、オキアミ、カニ、ミジンコなどの節足動物類の甲殻、イカ
、タコなどの軟体動物類の内臓や生殖巣、種々の魚介類の皮、ナツザキフクジュソウなど
のフクジュソウ属の花弁、Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．  Ｎ８１１０６、Ｂｒｅｖｕｎ
ｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．  ＳＤ２１２、Ｅｒｙｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＰＣ６な
どのα−プロテオバクテリア類、Ｇｏｒｄｏｎｉａ  ｓｐ．  ＫＡＮＭＯＮＫＡＺ−１１
２９などのゴードニア属、Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｙｍ  ｓｐ．  ＫＨ１０５などの
ラビリンチュラ類（特にヤブレツボカビ科）やアスタキサンチン産生遺伝子組み換え生物
体などから得られるものをあげることができる。
天然からの抽出物及び化学合成品は市販されており、入手は容易である。
【００１１】
本発明においてトリ脂肪酸グリセリドは、グリセリンと炭素数８〜２２の直鎖脂肪酸又は分岐鎖脂肪酸とのエステルであってもよく、これらは飽和脂肪酸でも不飽和脂肪酸でもよい。
好ましくは炭素数８〜１２の中鎖脂肪酸とのエステルがよい。
中鎖脂肪酸としては、トリカプリル酸グリセリル、トリ２エチルヘキサン酸グリセリル、トリ（カプリル・カプリン酸）グリセリル、トリウンデシル酸グリセリル、トリイソパルチミン酸グリセリル等が例として挙げられるが、特に好ましくはトリ（カプリル・カプリン酸）グリセリルである。
【００１２】
本発明に係る外用剤にあっては、上記アスタキサンチン、トコフェロール及びグリセリンとの脂肪酸エステル以外にこれらの配合効果を損なわない範囲で公知の任意の成分を加えることが可能である。
外用剤の形態には、医薬品用の皮膚外用剤や化粧品の形態を含み、特に限定されず、例えば、乳液、クリーム、化粧水、パック、分散液、洗浄料、メーキャップ化粧料、頭皮・毛髪用品等の化粧品や、軟膏剤、クリーム剤、外用液剤等の医薬品などとすることができる。
上記成分以外に、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例えば、美白剤、保湿剤、各種皮膚栄養成分、紫外線吸収剤、酸化防止剤、油性成分、界面活性剤、増粘剤、アルコール類、色剤、水、防腐剤、香料等を必要に応じて適宜配合することができる。
より具体的には、本出願人が先に出願した特開２００３−５５１８８号に記載の成分等が例として挙げられる。
【００１３】
本発明に係る内服剤にあっては、サプリメント、健康食品、栄養機能食品や特定保健用食品などの保健機能食、特別用途食品、一般食品、医薬部外品さらにはスポーツ用のサプリメントとして用いることができ、摂取のしやすさや摂取量が決めやすいことから、サプリメント、スポーツ用のサプリメント、保健機能食、特別用途食品が好ましく、前述医薬品と同様の形態、錠剤、口腔内速崩壊錠、カプセル、顆粒、細粒などの固形投与形態、液剤、ドリンク、シロップ及び懸濁液のような液体投与形態で摂取することができる。
【００１４】
本発明においては、上記外用剤のみ又は内服剤のみの使用でも皮膚バリア機能の改善効果が認められるものの、外用剤と内服剤とを併用するとさらに皮膚バリア機能の向上が認められる。
【発明の効果】
【００１５】
本発明に係る外用剤及び内服剤は、トコフェロールと下記一般式（１）で表記されたグリセリドのうち、一方又は両方とアスタキサンチンを配合することで優れた皮膚バリア機能の改善効果が認められる。
【化３】
0005912215.tif 000004
ただし、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３はそれぞれ同一又は異なってもよい炭素数８〜２２の直鎖又は分岐の飽和又は不飽和のアルキル基である。
さらには、これら外用剤と内服剤とを組み合せて併用すると、より皮膚バリア機能向上効果が認められる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】８週間、内外用剤併用による経表皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ）の変化を示す。
【図２】８週間、内外用剤併用による角層細胞面積（μｍ２）の変化を示す。
【図３】外用剤の塗布における群分けを示す。
【図４】試験例２において実施例２（Ｓ群）と比較例２（Ｃ群）に示した外用剤使用による６週間後のＴＥＷＬの変化比率を示す。
【図５】試験例２において実施例１（Ａ群）と比較例１（Ｐ群）に示した内服剤使用による６週間後のＴＥＷＬの変化比率を示す。
【図６】試験例２において内服剤として実施例１（Ａ群）、比較例１（Ｐ群）と外用剤として実施例２（Ｓ群）、比較例２（Ｃ群）とを組み合せた４つの群における使用開始３週間後のＴＥＷＬの変化比率を示す。
【図７】試験例２において内服剤として実施例１（Ａ群）、比較例１（Ｐ群）と外用剤として実施例２（Ｓ群）、比較例２（Ｃ群）とを組み合せた４つの群における使用開始６週間後のＴＥＷＬの変化比率を示す。
【図８】試験例２において実施例２（Ｓ群）と比較例２（Ｃ群）に示した外用剤使用による６週間後の角層細胞面積の変化比率を示す。
【図９】試験例２において実施例１（Ａ群）と比較例１（Ｐ群）に示した内服剤使用による６週間後の角層細胞面積の変化比率を示す。
【図１０】試験例２において内服剤として実施例１（Ａ群）、比較例１（Ｐ群）と外用剤として実施例２（Ｓ群）、比較例２（Ｃ群）とを組み合せた４つの群における使用開始６週間後の角層細胞面積の変化比率を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明に係る外用剤及び内服剤の併用効果を試験例１としてモニター試験で検証し、さらには試験例２として本発明に係る外用剤、内服剤の効果を群分けして比較例と比較評価したので具体的に説明するが本発明はこれに限定されない。
【００１８】
＜試験例１＞
女性３０名に対して、内服剤として表１の実施例１に示した成分割合の２００ｍｇカプセルを朝晩１カプセル（１日当たり２カプセル）ずつ服用させ、その際に表２の実施例２に示した配合割合の外用剤を０．５ｍｌ（１日当たり１ｍｌ）顔面に塗布させた。
表１に示したヘマトコッカス藻抽出物にはジエステル型アスタキサンチンを遊離型換算で１０〜１２％含有している。
本実施例では内服剤としてトリ（カプリル・カプリン酸）グリセリルがアスタキサンチンに対して１０倍量以上含有する。
【表１】
0005912215.tif 000005
【００１９】
【表２】
0005912215.tif 000006
表２中ビオセラＧは大日本化成株式会社の商品であり、グリセリン、スフィンゴモナスエキス及びトコフェロールの配合物である。
なお、ビオセラＧ中にトコフェロールは０．０２％含まれ、比較例２においては０．０００２％の値となる。
本発明における外用剤は、アスタキサンチン、トコフェロール及びトリ（カプリル・カプリン酸）グリセリルを配合した点にある。
外用剤として製剤化した場合に他の添加成分によりアスタキサンチンの酸化に影響を与える場合があり、トコフェロールは、アスタキサンチンの抗酸化剤として作用するとともに外用剤として製剤化するには他の添加成分の抗酸化剤としても機能する。
トコフェロールの配合量は、以下質量においてアスタキサンチン（遊離型換算）の少なくとも０．１倍量以上必要であり、好ましくは０．３倍量以上であるが、他の添加成分によっては、１．５倍量以上、好ましくは２倍量以上、さらに望ましくは５倍量以上がよい場合がある。
また、本発明に係る外用剤においてトリ（カプリル・カプリン酸）グリセリルはオイル状成分であり、アスタキサンチンを希釈安定化させる作用を有する。
外用剤の製剤化においては、このトリ（カプリル・カプリン酸）グリセリルは必須成分とならない場合もあるが、本実施例ではトリ（カプリル・カプリン酸）グリセリルはアスタキサンチンに対して１０．４倍量含まれる。
また、アスタキサンチンの配合量が本実施例の０．００４２％より少なくなると相対的に１０倍量を超え、１００倍量レベル以上になってもよい。
皮膚バリア機能の評価として、経表皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ）と角層細胞面積（μｍ２）を測定評価した。
その測定方法を下記にそれぞれ示す。
【００２０】
［経表皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ）の測定方法］
＜測定環境＞
室温：２０±２℃、湿度：４０±１０％に設定した部屋
＜測定方法＞
（１）被験者は、上記環境の部屋に入室後、洗顔を行なった。
（２）洗顔後、室内で２０分間待機して測定環境へ馴化させた。
（３）２０分間の馴化後、被験者顔面上の規定の部位における経表皮蒸散量を、経表皮水分蒸散量測定器（サイクロン水分蒸散モニターＡＳ−ＣＴ１：有限会社アサヒバイオメッド社製）を用いて測定した。
【００２１】
［角層細胞面積（μｍ２）の測定方法］
＜測定環境＞
室温：２０±２℃、湿度：４０±１０％に設定した部屋
＜測定方法＞
（１）被験者は、上記環境の部屋に入室後、洗顔を行なった。
（２）洗顔後、室内で２０分間待機して角層採取環境へ馴化させた。
（３）被験者顔面上の、経表皮水分蒸散量測定箇所とは別の、規定の部位から角層細胞を、テープストリッピング法にて採取した。
（４）採取した角層細胞をヘマトキシリン・エオシン染色法（Mayers Hematoxylin Solution、1%EosinY Solution：和光純薬社製）にて染色した。
（５）染色した角層細胞の顕微鏡画像を画像処理ソフト（ImageJ：National Institutes of Health開発）により解析し、角層細胞の面積を計測した。その際、被験者あたり約３０個の角層細胞をランダムに選んで面積を平均し、各被験者における角層細胞面積とした。
【００２２】
試験開始時（０週間目）と実施例１の内服剤（２カプセル／１日）と実施例２の外用剤（０．５ｍｌ×２／１日）とを８週間使用した後（８週目）のＴＥＷＬ値のグラフを図１に示す。
また、角層細胞面積の値のグラフを図２に示す。
なお、値は女性３０名の平均値を示す。
ＴＥＷＬ値は大きく減少し、平均値の差をｔ検定すると危険率１％で高度に有意となり、角層細胞面積は大きくなりｔ検定で危険率５％で有意となった。
これにより、本発明に係る内服剤と外用剤とを併用することで皮膚バリア機能が向上することが明らかになった。
【００２３】
＜試験例２＞
男性３７名をまずＡｃｔｉｖｅ群（Ａ群）１８名とＰｌａｃｅｂｏ群（Ｐ群）１９名に分け、Ａ群には先の表１の実施例１に示した２００ｍｇカプセル内服剤を朝晩１カプセル（１日当たり２カプセル）ずつ内服させ、Ｐ群には比較例１に示した２００ｍｇカプセルを同様に朝晩１カプセル（１日当たり２カプセル）ずつ内服させた。
上記、Ａ群及びＰ群に対して、それぞれ図３に示すように顔半分にＳｕｂｊｅｃｔ群（Ｓ群）として先の表２に示した実施例２の外用剤０．３ｍｌ／１回を朝晩２回塗布し、残りの顔半分にＣｏｍｐａｒｅｄ群（Ｃ群）として比較例２の外用剤を０．３ｍｌ／１回を朝晩２回塗布させた。
【００２４】
試験例１と同様にＴＥＷＬ値と角層細胞面積値を測定評価したのでその結果を以下に説明する。
図４に示したグラフは外用剤の影響を調査すべく、Ｃ群［Ａ／Ｃ＋Ｐ／Ｃ（３７名）］、Ｓ群［Ａ／Ｓ＋Ｐ／Ｓ（３７名）］のうち、１名除いたＮ＝３６名のＴＥＷＬ値の試験開始時に対する６週間使用後の変化比率（平均値）を示す。
図５に示したグラフは内服剤の影響を調査すべく、Ｐ群［Ｐ／Ｓ＋Ｐ／Ｃ（３８名）］とＡ群［Ａ／Ｓ＋Ａ／Ｃ（３６名）］のうち、Ｎ＝３６名のＴＥＷＬ値の使用開始６週間後の変化比率（平均値）を示す。
この結果、本発明に係る内服剤実施例１とアスタキサンチン等が含まれていない比較例１とにてｔ検定１％有意と判定された。
図６に示したグラフは、内服剤と外用剤との組み合せによるＰ／Ｃ（Ｎ＝１８），Ｐ／Ｓ（Ｎ＝１８），Ａ／Ｃ（Ｎ＝１８），Ａ／Ｓ（Ｎ＝１８）の４つの群分けした場合のそれぞれの試験開始時に対する使用３週間後のＴＥＷＬ値の変化比率を示し、図７に示したグラフは、試験開始時に対する使用６週間後のＴＥＷＬ値の変化比率を示す。
この結果、本発明に係る外用剤の使用有無（Ｓ群とＣ群との比較）及び内服剤の使用有無（Ａ群とＰ群との比較）のいずれにおいても本発明に係る外用剤、内服剤の使用によりＴＥＷＬ値が減少しているが、図６及び図７に示すように本発明に係る外用剤と内服剤とを併用したＡ／Ｓ群のＴＥＷＬ値が最も大きく減少している。
従って、本発明に係る外用剤及び内服剤はそれぞれ単独で使用しても皮膚バリア機能促進効果が認められ、その両方を併用するとさらに大きな効果があることが明らかになった。
【００２５】
次に角層細胞面積の評価結果について説明する。
図８に示したグラフは外用剤の差、Ｃ群［Ａ／Ｃ＋Ｐ／Ｃ（３７名）］とＳ群［Ａ／Ｓ＋Ｐ／Ｓ（３７名）］との試験開始時に対する使用６週間目の角層細胞面積の変化比率を示し、図９に示したグラフは内服剤の差、Ｐ群［Ｐ／Ｓ＋Ｐ／Ｃ（３８名）］とＡ群［Ａ／Ｓ＋Ａ／Ｃ（３６名）］との試験開始時に対する使用６週間目の角層細胞面積の変化比率を示す。
図１０に示したグラフは、外用剤と内服剤とを組み合せた４つの群、Ｐ／Ｃ，Ｐ／Ｓ，Ａ／Ｃ，Ａ／Ｓのそれぞれの試験開始時に対する使用６週間目の角層細胞面積変化比率を示す。
この結果、角層細胞面積に対しては、図８に示すように本発明に係る外用剤の使用効果が大きく発現し、図１０に示すように本発明に係る内服剤と外用剤とを併用したＡ／Ｓ群が最も大きい面積向上の変化を示した。
【図１】
0005912215.tif 000007
【図２】
0005912215.tif 000008
【図３】
0005912215.tif 000009
【図４】
0005912215.tif 000010
【図５】
0005912215.tif 000011
【図６】
0005912215.tif 000012
【図７】
0005912215.tif 000013
【図８】
0005912215.tif 000014
【図９】
0005912215.tif 000015
【図１０】
0005912215.tif 000016