(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
遊離形態または塩形態の次の化合物
【化１】
0006051210.tif 000031
のいずれかから選択される、化合物。
【請求項２】
遊離形態または塩形態の
【化２】
0006051210.tif 000032
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の化合物を薬学的に許容される希釈剤または担体と組み合わせてまたは混合して含む、医薬組成物。
【請求項４】
パーキンソン病、下肢静止不能、振戦、ジスキネジア、ハンチントン病、アルツハイマー病、薬剤誘発性運動障害、鬱病、注意欠損障害、注意欠損多動性障害、双極性疾病、不安、睡眠障害、ナルコレプシー、認知機能障害、認知症、トゥレット症候群、自閉症、脆弱Ｘ症候群、覚醒剤離脱および／または薬物嗜癖、脳血管疾患、卒中、鬱血性心疾患、高血圧、肺高血圧および／または性機能不全；喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、自己免疫性疾患、炎症性疾患；女性性機能不全、運動性無月経、排卵、閉経期、閉経期症状、甲状腺機能低下症、月経前緊張症、早産、不妊症、不規則な月経周期、異常子宮出血、骨粗鬆症、多発性硬化症、前立腺肥大、前立腺癌、エストロゲン誘発子宮内膜増殖症または癌、緑内障および高眼圧、精神病、外傷性脳傷害および／またはＰＤＥ１発現細胞におけるｃＡＭＰおよび／またはｃＧＭＰ低下(またはｃＡＭＰおよび／またはｃＧＭＰシグナル伝達経路阻害)および／またはドーパミンＤ１受容体シグナル伝達活性低下により特徴付けられるあらゆる疾患または状態；および／またはプロゲステロンシグナル伝達の亢進により軽減され得るあらゆる疾患または状態のいずれかの状態を処置するための、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
状態がパーキンソン病である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
状態が認知機能障害である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
状態が統合失調症の認知機能障害である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項８】
状態がナルコレプシーである、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項９】
中枢神経系刺激剤、モダフィニル、抗鬱剤およびγ−ヒドロキシ酪酸から選択される１種または複数種と併用することを特徴とする、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
該状態が女性性機能不全である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
エストラジオール、エストリオール、エストラジオールエステル類、プロゲステロンおよびプロゲスチン類からなる群から選択される１種または複数種と併用することを特徴とする、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
緑内障または高眼圧の処置のための医薬組成物であって、眼科的に適合性の担体中の遊離形態または薬学的に許容される塩形態の請求項１または２に記載の化合物の治療有効量を局所投与するための、医薬組成物。
【請求項１３】
精神病、統合失調症、統合失調感情障害、統合失調症様障害、精神病性障害、妄想性障害および躁病の処置のための医薬組成物であって、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の請求項１または２に記載の化合物の治療有効量を含む、医薬組成物。
【請求項１４】
外傷性脳傷害の処置のための医薬組成物であって、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の請求項１または２に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項１５】
プロスタグランジン類似体の有効量と、同時に、一緒にまたは逐次的に投与することを特徴とする、遊離形態または塩形態の請求項１または２に記載の化合物の有効量を含む、睫毛の伸長または成長促進のための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は２０１１年６月１０日出願の米国仮出願番号６１／４９５,６８３に対する優先権を主張し、その内容を引用により本明細書にその全体を包含させる。
【０００２】
技術分野
本発明は、下記式ＩのＰＤＥ１阻害化合物、その製造方法、医薬としてのそれらの使用およびそれらを含む医薬組成物に関する。これらの化合物は、例えば、ドーパミンＤ１受容体細胞内経路の障害が関連する疾患、例えばパーキンソン病、鬱病、ナルコレプシー、精神病、例えば、統合失調症における認知機能障害またはプロゲステロンシグナル伝達経路亢進を介して改善され得る障害、例えば、女性性機能不全の処置に有用である。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
ホスホジエステラーゼ類(ＰＤＥ)の１１種のファミリーが同定されているが、ファミリーＩにおけるＰＤＥであるＣａ２＋−カルモジュリン依存性ホスホジエステラーゼ類(ＣａＭ−ＰＤＥ)のみがカルシウムおよび環状ヌクレオチド(例えばｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ)シグナル伝達経路の両方を仲介することが示されている。３種の知られたＣａＭ−ＰＤＥ遺伝子であるＰＤＥ１Ａ、ＰＤＥ１ＢおよびＰＤＥ１Ｃは全てヒト中枢神経系組織で発現される。ＰＤＥ１Ａは脳で、海馬のＣＡ１〜ＣＡ３層および小脳で高レベルに、線条体で低レベルに発現されている。ＰＤＥ１Ｂは主に線条体、歯状回、嗅索および前頭前野皮質にドーパミンＤ１受容体と共局在化して発現される。その発現は一般的にドーパミン作動性神経支配が高レベルである脳領域と相関する。ＰＤＥ１Ｂは主に中枢神経系で発現されるが、好中球に存在する。ＰＤＥ１Ｃは脳においてより偏在性に発現され、心臓および血管平滑筋で発現される。
【０００４】
環状ヌクレオチドホスホジエステラーゼ類は、細胞内ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰシグナル伝達を、これらの環状ヌクレオチド類をそのそれぞれの不活性５’−一リン酸類(５’ＡＭＰおよび５’ＧＭＰ)に加水分解することにより減少させる。ＣａＭ−ＰＤＥは、特に基底核または線条体として知られる脳領域における脳細胞におけるシグナル伝達に、重要な役割を有する。例えば、ＮＭＤＡ型グルタミン酸受容体活性化および／またはドーパミンＤ２受容体活性化は細胞内カルシウム濃度増加をもたらし、カルモジュリン依存性キナーゼII(ＣａＭＫII)およびカルシニューリンのようなエフェクター類の活性化およびＣａＭ−ＰＤＥの活性化をもたらし、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ減少に至る。ドーパミンＤ１受容体活性化は、他方で、アデニレートシクラーゼ類の活性化をもたらし、ｃＡＭＰ増加に至る。この環状ヌクレオチドは、次にタンパク質キナーゼＡ(ＰＫＡ；ｃＡＭＰ依存性タンパク質キナーゼ)を活性化させる。ｃＧＭＰの産生は、高細胞内カルシウムレベルにより誘発される一酸化窒素産生のような種々の刺激を介して認知機能に関与する組織で起こり、その後タンパク質キナーゼＧ(ＰＫＧ；ｃＧＭＰ依存性タンパク質キナーゼ)を活性化させることが知られている。ＰＫＧおよびＰＫＡはＤＡＲＰＰ−３２(ドーパミンおよびｃＡＭＰ調節性ホスホタンパク質)およびｃＡＭＰ応答配列結合タンパク質(ＣＲＥＢ)のような下流シグナル伝達経路要素をリン酸化する。リン酸化ＤＡＲＰＰ−３２は、次に、プロテインホスファターゼ類(protein phosphates)−１(ＰＰ−１)の活性化を阻害し、それによりプロゲステロン受容体(ＰＲ)のような基質タンパク質のリン酸化状態を高め、生理的応答の誘発に至る。Ｄ１受容体シグナル伝達は統合失調症で妨害されており、本疾患の認知機能障害に関与する。認知機能におけるｃＡＭＰおよびｃＧＭＰの役割は、動物試験においてよく確立されている。齧歯類での試験もまたドーパミンＤ１またはプロゲステロン受容体活性化を介するｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ合成誘発は、ある齧歯類において交配に対する受容性と関連するロードシス応答を含む、種々の生理学的応答と関連するプロゲステロンシグナル伝達を亢進することを示唆する。その内容を本明細書に引用して包含させるMani, et al., Science (2000) 287: 1053参照。
【０００５】
ＣａＭ−ＰＤＥは、それ故に、一酸化窒素、ノルアドレナリン、ニューロテンシン、ＣＣＫ、ＶＩＰ、セロトニン、グルタメート(例えば、ＮＭＤＡ受容体、ＡＭＰＡ受容体)、ＧＡＢＡ、アセチルコリン、アデノシン(例えば、Ａ２Ａ受容体)、カンナビノイド受容体、ナトリウム利尿ペプチド(例えば、ＡＮＰ、ＢＮＰ、ＣＮＰ)、ＤＡＲＰＰ−３２およびエンドルフィン細胞内シグナル伝達経路を含むが、これらに限定されない基底核(線条体)におけるドーパミン調節性および他の細胞内シグナル伝達経路に影響し得る。
【０００６】
ホスホジエステラーゼ(ＰＤＥ)活性、特に、ホスホジエステラーゼ１(ＰＤＥ１)活性は、脳組織において自発運動活性および学習および記憶として機能する。ＰＤＥ１は、ドーパミンＤ１受容体、ドーパミンＤ２受容体、一酸化窒素、ノルアドレナリン、ニューロテンシン、ＣＣＫ、ＶＩＰ、セロトニン、グルタメート(例えば、ＮＭＤＡ受容体、ＡＭＰＡ受容体)、ＧＡＢＡ、アセチルコリン、アデノシン(例えば、Ａ２Ａ受容体)、カンナビノイド受容体、ナトリウム利尿ペプチド(例えば、ＡＮＰ、ＢＮＰ、ＣＮＰ)、エンドルフィン細胞内シグナル伝達経路およびプロゲステロンシグナル伝達経路を含むが、これらに限定されるものでなく、好ましくは神経系における細胞内シグナル伝達経路の制御のための治療標的である。例えば、ＰＤＥ１Ｂの阻害は、ｃＧＭＰおよびｃＡＭＰを分解から保護することによりドーパミンＤ１アゴニストの作用を増強するように作用するはずであり、同様に、細胞内カルシウムのＤ２受容体仲介増加の結果であるＰＤＥ１活性の阻害により、ドーパミンＤ２受容体シグナル伝達経路を阻害するはずである。細胞内カルシウムレベルの慢性的上昇は、多くの障害、特にアルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病のような神経変性疾患および卒中および心筋梗塞に至る循環器の障害における細胞死と関連する。ＰＤＥ１阻害剤は、それ故に、ドーパミンＤ１受容体シグナル伝達活性減少により特徴付けられる疾患、例えばパーキンソン病、下肢静止不能症候群、鬱病、ナルコレプシーおよび統合失調症と関連する認知機能障害のような認知機能障害に有用である可能性がある。ＰＤＥ１阻害剤はまた女性性機能不全のようなプロゲステロンシグナル伝達亢進により軽減され得る疾患にも有用である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
それ故に、ＰＤＥ１活性を選択的に阻害する化合物が必要とされる。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の要約
本発明は、遊離形態または塩形態の式Ｉ
【化１】
0006051210.tif 000002
〔式中、
(ｉ)  Ｒ１はＨまたはＣ１−４アルキル(例えば、メチルまたはエチル)であり；
(ii)  Ｒ４はＨであり、Ｒ２およびＲ３は独立してＨまたはＣ１−６アルキル(例えば、メチル)であるか；または
Ｒ２はＨであり、Ｒ３およびＲ４は一体となってジ−、トリ−またはテトラメチレン架橋を形成し(例えば、ここで、Ｒ３およびＲ４を担持する炭素がそれぞれＲおよびＳ配置であるとき、Ｒ３およびＲ４は一体となってｃｉｓ配置を有する)；
(iii)  Ｒ５は式Ｉのピラゾロ部分の窒素の一つに結合し、かつ式Ａ
【化２】
0006051210.tif 000003
の基であり、ここで、
Ｘ、ＹおよびＺはＣであり；
Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１１およびＲ１２はＨであり；
Ｒ１０は場合により１個以上のハロ(例えば、ＦまたはＣｌ)で置換されていてよいヘテロアリール(例えば、ピリジル(例えばピリド−２−イル))であり、例えばＲ１０は非置換ピリジルまたはハロ(例えば、フルオロ)で置換されているピリジルであり、例えばＲ１０はピリジル(例えばピリド−２−イル)、６−フルオロピリド−２−イル、５−フルオロピリド−２−イル、４−フルオロピリド−２−イルおよび３−フルオロピリド−２−イルから成る群から選択され；
(iv)  Ｒ６はエチルまたはイソプロピルである。〕
の化合物を提供する。
【０００９】
本発明は、さらに、次に示す式Ｉの化合物を遊離形態または塩形態で提供する。
１.１  Ｒ１がＨまたはＣ１−４アルキル(例えば、メチル)である、式Ｉ；
１.２  Ｒ１がＨである、式Ｉまたは１.１；
１.３  Ｒ１がＣ１−４アルキルである、式Ｉまたは１.１；
１.４  Ｒ１がメチルである、式Ｉまたは１.１；
１.５  Ｒ４がＨであり、Ｒ２およびＲ３が独立してＨまたはＣ１−６アルキル(例えば、メチル)である、式Ｉまたは１.１〜１.４のいずれか；
１.６  Ｒ４がＨであり、Ｒ２およびＲ３がいずれもＣ１−６アルキル(例えば、Ｒ２およびＲ３がいずれもメチル)である、式Ｉまたは１.１〜１.４のいずれか；
１.７  Ｒ１０が場合により１個以上のハロ(例えば、ＦまたはＣｌ)で置換されていてよいヘテロアリール(例えば、ピリジル(例えばピリド−２−イル))である、例えばＲ１０が非置換ピリジルまたはハロ(例えば、フルオロ)で置換されているピリジルである、例えばＲ１０がピリジル(例えばピリド−２−イル)、６−フルオロピリド−２−イル、５−フルオロピリド−２−イル、４−フルオロピリド−２−イルおよび３−フルオロピリド−２−イルから成る群から選択される、式Ｉまたは１.１〜１.６のいずれか；
【００１０】
１.８  Ｒ１０がピリジル(例えば、ピリド−２−イル)である、式Ｉまたは１.１〜１.６のいずれか；
１.９  Ｒ１０が６−フルオロピリド−２−イルである、式Ｉまたは１.１〜１.６のいずれか；
１.１０  Ｒ１０が５−フルオロピリド−２−イルである、式Ｉまたは１.１〜１.６のいずれか；
１.１１  Ｒ１０が４−フルオロピリド−２−イルである、式Ｉまたは１.１〜１.６のいずれか；
１.１２  Ｒ１０が３−フルオロピリド−２−イルである、式Ｉまたは１.１〜１.６のいずれか；
１.１３  Ｒ６がエチルである、式Ｉまたは１.１〜１.１２のいずれか；
１.１４  Ｒ６がイソプロピルである、式Ｉまたは１.１〜１.１２のいずれか；
１.１５  Ｒ４がＨであり、Ｒ２およびＲ３がＣ１−６アルキル(例えば、メチル)であるか；または
Ｒ２がＨであり、Ｒ３およびＲ４は一体となってジ−、トリ−またはテトラメチレン架橋を形成し(例えば、ここで、Ｒ３およびＲ４を担持する炭素がそれぞれＲおよびＳ配置であるとき、Ｒ３およびＲ４は一体となってｃｉｓ配置を有する)である、１.１〜１.１４のいずれか；
１.１６  Ｒ４がＨであり、Ｒ２およびＲ３がいずれもメチルである、１.１〜１.１４のいずれか；
１.１７  Ｒ２がＨであり、Ｒ３およびＲ４が一体となってジ−、トリ−またはテトラメチレン架橋を形成し(例えば、ここで、Ｒ３およびＲ４を担持する炭素がそれぞれＲおよびＳ配置であるとき、Ｒ３およびＲ４は一体となってｃｉｓ配置を有する)である、１.１〜１.１４のいずれか；
１.１８  Ｒ２がＨであり、Ｒ３およびＲ４が一体となってトリ−メチレン架橋を形成する(例えば例えば、ここで、Ｒ３およびＲ４を担持する炭素がそれぞれＲおよびＳ配置であるとき、Ｒ３およびＲ４は一体となってｃｉｓ配置を有する)である、１.１〜１.１４のいずれか；
１.１９  Ｒ６がエチルである、式Ｉまたは１.１〜１.１８のいずれか；
１.２０  Ｒ６がイソプロピルである、式Ｉまたは１.１〜１.１８のいずれか；
【００１１】
１.２１  化合物が
【化３】
0006051210.tif 000004
から成る群から選択される、１.１〜１.１６および１.１９〜１.２０のいずれか；
１.２２  化合物が
【化４】
0006051210.tif 000005
から成る群から選択される、１.１〜１.１５および１.１７〜１.２０のいずれか；
１.２３  化合物が、例えばｃＧＭＰのホスホジエステラーゼ仲介(例えば、ＰＤＥ１仲介)加水分解を、例えば実施例４に記載の固定化金属親和性粒子試薬ＰＤＥアッセイにおいて１μM未満、好ましくは１０nM未満、より好ましくは５nM以下のＩＣ５０で阻害する、前記のいずれか。
【００１２】
特定の態様において、本発明は、遊離形態または塩形態の式Ｉ(ｉ)
【化５】
0006051210.tif 000006
(ｉ)  Ｒ１はＣ１−４アルキル(例えば、メチルまたはエチル)であり；
(ii)  Ｒ４はＨであり、Ｒ２およびＲ３は独立してＣ１−６アルキル(例えば、メチル)であり；
(iii)  Ｒ５は式Ｉのピラゾロ部分の窒素の一つに結合し、かつ式Ａ
【化６】
0006051210.tif 000007
の基であり、ここで、
Ｘ、ＹおよびＺはＣであり；
Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１１およびＲ１２はＨであり；
Ｒ１０は１個以上のハロ(例えば、ＦまたはＣｌ)で置換されているピリジル(例えばピリド−２−イル)であり、例えばＲ１０は非置換ピリジルまたはハロ(例えば、フルオロ)で置換されているピリジルであり、例えばＲ１０はピリジル(例えばピリド−２−イル)、６−フルオロピリド−２−イル、５−フルオロピリド−２−イル、４−フルオロピリド−２−イルおよび３−フルオロピリド−２−イルから成る群から選択され；
(iv)  Ｒ６はエチルまたはイソプロピルである。〕
の化合物を提供する。
【００１３】
他に定義されていない限りまたは文脈から明らかでない限り、次の用語は次の意味を有する。
(ａ)  ここで使用する“アルキル”は、好ましくは１〜６個の炭素原子、好ましくは１〜４個の炭素原子を有する、飽和または不飽和の、好ましくは飽和の炭化水素基であって、これは直鎖でも分枝鎖でもよく、場合により、例えば、ハロゲン(例えば、クロロまたはフルオロ)、ヒドロキシまたはカルボキシで一、二または三置換されていてよい。
【００１４】
(ｂ)  ここで使用する“アリール”は、場合により、例えば、アルキル(例えば、メチル)、ハロゲン(例えば、クロロまたはフルオロ)、ハロアルキル(例えば、トリフルオロメチル)、ヒドロキシ、カルボキシまたは別のアリールまたはヘテロアリール(例えば、ビフェニルまたはピリジルフェニル)で置換されていてよい、単環または二環式芳香族炭化水素、好ましくはフェニルである。
【００１５】
(ｃ)  ここで使用する“ヘテロアリール”は、芳香環を構成する１個以上の原子が炭素ではなく、硫黄または窒素である芳香族基、例えば、ピリジルまたはチアジアゾリルであり、これは、場合により、例えば、アルキル、ハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシまたはカルボキシで置換されていてよい。
【００１６】
本発明の化合物、例えば、式ＩまたはＩ(ｉ)の化合物、例えば、１.１〜１.２３のいずれかは、遊離形態または塩形態で、例えば、酸付加塩類として存在し得る。本明細書で特に断らない限り、“本発明の化合物”のような用語は、あらゆる形態、例えば遊離または酸付加塩形態または本化合物が酸性置換基を含むとき、塩基付加塩形態の本化合物を包含すると解釈すべきである。本発明の化合物は医薬としての使用が意図され、それ故に薬学的に許容される塩類が好ましい。医薬用途に不適な塩類は、例えば、遊離の本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩類の単離または精製に有用であることがあり、それ故にまた包含される。
【００１７】
本発明の化合物は、ある場合、プロドラッグ形態でも存在し得る。プロドラッグ形態は、体内で本発明の化合物に変換される化合物である。例えば、本発明の化合物がヒドロキシ置換基またはカルボキシ置換基を含むとき、これらの置換基は生理学的に加水分解可能なおよび許容されるエステル類を形成させ得る。ここで使用する“生理学的に加水分解可能であり、かつ許容されるエステル”は、生理学的条件下で加水分解可能であり、酸類(ヒドロキシ置換基を有する本発明の化合物の場合)またはアルコール類(カルボキシ置換基を有する本発明の化合物の場合)を生じ、これら自体投与される量で生理学的に耐容性である本発明の化合物のエステル類を意味する。それ故に、本発明の化合物がヒドロキシ基を含む、例えば、化合物−ＯＨであるとき、このような化合物のアシルエステルプロドラッグ、すなわち、化合物−Ｏ−Ｃ(Ｏ)−Ｃ１−４アルキルは体内で加水分解されて、一方で生理学的に加水分解可能なアルコール(化合物−ＯＨ)を、そして他方で酸(例えば、ＨＯＣ(Ｏ)−Ｃ１−４アルキル)を形成し得る。あるいは、本発明の化合物がカルボン酸、例えば、化合物−Ｃ(Ｏ)ＯＨであるとき、このような化合物の酸エステルプロドラッグである化合物−Ｃ(Ｏ)Ｏ−Ｃ１−４アルキルは加水分解されて、化合物−Ｃ(Ｏ)ＯＨおよびＨＯ−Ｃ１−４アルキルを形成し得る。すなわち、本用語は、それ故に、慣用の医薬プロドラッグ形態を包含する。
【００１８】
本発明はまた本発明の化合物の製造方法および下に明示する疾患および障害の処置(特にドーパミンＤ１受容体シグナル伝達活性低下により特徴付けられる疾患、例えばパーキンソン病、トゥレット症候群、自閉症、脆弱Ｘ症候群、ＡＤＨＤ、下肢静止不能症候群、鬱病、認知機能障害、例えば、統合失調症の認知機能障害、ナルコレプシーおよびプロゲステロンシグナル伝達亢進により軽減され得る疾患、例えば女性性機能不全または精神病または緑内障のような疾患または障害の処置)のための本発明の化合物の使用方法も提供する。この疾病列挙は網羅的であることを意図せず、下に示す他の疾患および障害を含み得る。
【００１９】
他の態様において、本発明はさらに遊離形態、薬学的に許容される塩形態またはプロドラッグ形態の本発明の化合物を薬学的に許容される担体と共に含む医薬組成物を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
発明の詳細な記載
本発明の化合物の製造方法
本発明の化合物およびその薬学的に許容される塩類は、本明細書に記載し、かつ例示する方法およびそれに準じる方法および化学分野で知られた方法を使用して製造し得る。このような方法は、下記のものを含むが、これらに限定されない。これらの方法のための出発物質は、市販されていないならば、既知化合物の合成に類似するまたはそれに準ずる方法を使用して、化学手法から選択される方法により製造し得る。種々の出発物質、中間体および／または本発明の化合物は、ＷＯ２００６／１３３２６１、ＷＯ２００９／０７５７８４および／またはＷＯ２０１０／０６５１４９に記載する方法または記載する方法に準じる方法を使用して製造し得る。ここで引用する全ての文献は、その全体を引用により本明細書に包含させる。
【００２１】
本発明の化合物はそのエナンチオマー、ジアステレオ異性体およびラセミ体、ならびにそれらの多形、水和物、溶媒和物および複合体を含む。本発明の範囲内の幾つかの化合物は二重結合を含み得る。本発明における二重結合の記載は、該二重結合のＥおよびＺ異性体の両者を含むことを意味する。加えて、本発明の範囲内の幾つかの化合物は１個以上の不斉中心を含み得る。本発明は光学的に純粋な立体異性体のいずれかならびに立体異性体の混合物のいずれかの使用を含む。
【００２２】
本発明の化合物は、その安定または不安定な同位体が包含されることも意図する。安定な同位体は、同種(すなわち、元素)の豊富にある核種と比較して、１個の付加的中性子を含む非放射性同位体である。このような同位体を含む化合物の活性は保持されると予測され、このような化合物は非同位体類似体の薬物動態試験にも有用である。例えば、本発明の化合物上のある位置の水素原子を重水素(非放射性である安定な同位体)で置き換え得る。既知の安定な同位体の例は、重水素、１３Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏを含むが、これらに限定されない。あるいは、同種(すなわち、元素)の豊富にある核種と比較して、複数の付加的中性子を含む放射性同位体である不安定な同位体、例えば、１２３Ｉ、１３１Ｉ、１２５Ｉ、１１Ｃ、１８Ｆを、Ｉ、ＣおよびＦの対応する豊富にある核種と置き換え得る。本発明の化合物の有用な同位体の他の例は１１Ｃ同位体である。これらの放射性同位体は、放射性イメージングおよび／または本発明の化合物の薬物動態学的試験に有用である。ＷＯ２０１１／０４３８１６(その内容を引用によりその全体を本明細書に包含させる)に開示されたＰＤＥ１阻害剤の同位体の製造方法を、本発明の化合物の同位体の製造に使用できる。
【００２３】
融点は未補正であり、(ｄｅｃ)は分解を意味する。温度は摂氏(℃)で記載する。特記しない限り、操作は室温または環境温度、すなわち、１８〜２５℃の範囲の温度で行う。クロマトグラフィーはシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーを意味する。薄層クロマトグラフィー(ＴＬＣ)はシリカゲルプレート上で行う。ＮＭＲデータは、主要構造関連プロトンのデルタ値であり、内部標準としてのテトラメチルシラン(ＴＭＳ)に対する百万分率(ppm)で示す。シグナルの形について慣用の略語を使用する。結合定数(Ｊ)はHzで示す。マススペクトル(ＭＳ)について、最低質量主要イオンを、同位体分節が複数マススペクトルをもたらすときの分子について記載する。溶媒混合物組成は体積パーセントまたは体積比で表す。ＮＭＲスペクトルが複雑である場合、構造関連シグナルのみを記載する。
【００２４】
用語および略語：
ＢｕＬｉ＝ｎ−ブチルリチウム
ＢｕｔＯＨ＝ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、
ＣＡＮ＝硝酸アンモニウムセリウム(IV)、
ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン、
ＤＭＦ＝Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(N,N-dimethylforamide)、
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド、
Ｅｔ２Ｏ＝ジエチルエーテル、
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル、
equiv.＝当量、
ｈ＝時間、
ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー、
ＬＤＡ＝リチウムジイソプロピルアミド
ＭｅＯＨ＝メタノール、
ＮＢＳ＝Ｎ−ブロモスクシンイミド
ＮＣＳ＝Ｎ−クロロスクシンイミド
ＮａＨＣＯ３＝重炭酸ナトリウム、
ＮＨ４ＯＨ＝水酸化アンモニウム、
Ｐｄ２(ｄｂａ)３＝トリス[ジベンジリデンアセトン]ジパラジウム(０)
ＰＭＢ＝ｐ−メトキシベンジル、
ＰＯＣｌ３＝オキシ塩化リン、
ＳＯＣｌ２＝塩化チオニル、
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸、
ＴＦＭＳＡ＝トリフルオロメタンスルホン酸
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン。
【００２５】
本発明における合成方法を下に説明する。Ｒ基についての意味は、特記しない限り上に式ＩまたはＩ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかに明示したとおりである。
【００２６】
本発明の一つの面において、式IIａの化合物をジカルボン酸、酢酸無水物および酢酸を混合し、加熱、例えば、約９０℃で加熱しながら、約３時間反応させ、次いで冷却することにより、式IIｂの中間体化合物を合成できる。
【化７】
0006051210.tif 000008
〔式中、Ｒ１はＣ１−４アルキル、例えば、メチルである。〕
【００２７】
例えばIIｂの化合物と、例えばＰＯＣｌ３のような塩素化化合物を、ある場合には少量の水と共に加熱し、例えば、約８０℃で約４時間加熱して反応させ、次いで冷却することにより、中間体IIｃを製造できる。
【化８】
0006051210.tif 000009
【００２８】
IIｃの化合物と、例えばＰ１−Ｘを、ＤＭＦのような溶媒およびＫ２ＣＯ３のような塩基と、室温でまたは加熱しながら反応させることにより、中間体IIｄを生成させ得る。
【化９】
0006051210.tif 000010
〔式中、Ｐ１は保護基[例えば、ｐ−メトキシベンジル基(ＰＭＢ)]であり；Ｘはハロゲン、メシレートまたはトシレートのような脱離基である。〕。好ましくはＰ１はパラメトキシベンジル(ＰＭＢ)であり、塩基は炭酸カリウムである。
【００２９】
中間体IIｅを、IIｄの化合物と、ヒドラジンまたはヒドラジン水和物を、メタノールのような溶媒中で、例えば、約４時間、還流して反応させ、次いで冷却することにより製造し得る。
【化１０】
0006051210.tif 000011
【００３０】
例えばIIｅの化合物とＰＯＣｌ３およびＤＭＦを反応させることにより、中間体IVａを生成させ得る。
【化１１】
0006051210.tif 000012
〔式中、Ｒ１は例えばメチル基のような先に式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかにおいて定義した通りである。〕
【００３１】
中間体IVｂは、IVａの化合物と、例えばＲ５−Ｘを、ＤＭＦのような溶媒およびＫ２ＣＯ３のような塩基中、室温でまたは加熱しながら反応させることにより生成させ得る(反応１)。
【化１２】
0006051210.tif 000013
【００３２】
Vｂの化合物から、保護基Ｐ１を適当な方法で除去することにより中間体IVｃを合成し得る。例えば、Ｐ１がＰＭＢ基であるならば、それはＣＡＮまたはＴＦＡ／ＴＦＭＳＡを用いて、室温で除去できる(反応２)。
【化１３】
0006051210.tif 000014
Ｐ１がＢＯＣであるとき、本化合物は塩酸またはＴＦＡのような酸を使用して脱保護し得る。
【００３３】
中間体IVｄは、IVｃの化合物と、例えばＰＯＣｌ３のような塩素化化合物を、約２日間還流させるかまたは密閉バイアル中１５０〜２００℃にて約１０分間マイクロ波装置で加熱して反応させ、次いで冷却することにより製造できる(反応３)。
【化１４】
0006051210.tif 000015
【００３４】
IVｄの化合物を、アミノアルコールと、ＤＭＦのような溶媒中、塩基性条件下、一夜加熱して反応させ、次いで冷却することにより中間体IVｅを生成させ得る(反応４Ａ)。
【化１５】
0006051210.tif 000016
【００３５】
あるいは、中間体IVｅを、IVｃの化合物から、アミノアルコールおよびＢＯＰのようなカップリング剤と、ＤＢＵのような塩基の存在下で反応させることにより直接合成できる(反応４Ｂ)。
【化１６】
0006051210.tif 000017
〔式中、全ての置換基は先に定義したとおりである。〕
【００３６】
化合物IVｆは、IVｅの化合物と例えばＳＯＣｌ２のような脱水／ハロゲン化剤を、ＣＨ２Ｃｌ２のような溶媒中、室温で一夜または３５℃に加熱して数時間反応させ、次いで冷却することにより生成させ得る(反応５)。あるいは、化合物IVｅと４−トルエンスルホニルクロライドおよびピリジンを反応させることにより化合物IVｆを製造し得る。
【化１７】
0006051210.tif 000018
【００３７】
Ｘがハロゲン(例えば、クロロ、ブロモまたはヨード)である化合物IVｇは、IVｆの化合物を、例えばＮＣＳ、ＮＢＳまたはＩ２のようなハロゲン化剤およびＬＤＡまたはｎ−ＢｕＬｉのような塩基(例えば、ＬＤＡ存在下のＮＣＳ)と、ＴＨＦのような溶媒中、低温で数時間反応させることにより生成させ得る(反応６)。
【化１８】
0006051210.tif 000019
【００３８】
あるいは、IVｆの化合物と例えばヘキサクロロエタンのようなハロゲン化剤およびＬｉＨＭＤＳのような塩基を、ＴＨＦのような溶媒中、低温で数時間反応させることにより化合物IVｇを生成させ得る(反応６)。
【化１９】
0006051210.tif 000020
【００３９】
式Ｉの化合物または１.１〜１.２３のいずれかは、IVｇの化合物とＲ６−ＳＨ(式中、Ｒ６は式Ｉにおいて定義したとおりである)を、塩基(例えば、炭酸カリウム)存在下に、加熱、例えば、密閉チューブ中４バールで、例えば、１５０℃で１時間、マイクロ波リアクター中で撹拌しながら加熱して反応させることにより、化合物IVｇを生成させ得る。
【化２０】
0006051210.tif 000021
【００４０】
あるいは、IVｆの化合物とジスルフィドＲ６−Ｓ−Ｓ−Ｒ６を、リチウム剤(例えばＬｉＨＭＤＳ)のような強塩基存在下、例えばＴＨＦのような溶媒中で反応させることにより式Ｉの化合物を生成させ得る。
【００４１】
あるいは、式Ｉの化合物は、例えば、化合物１−Ａと例えばＲ５−Ｘを、ＤＭＦのような溶媒およびＫ２ＣＯ３のような塩基中、室温でまたは加熱しながら反応させることにより製造し得る。
【化２１】
0006051210.tif 000022
〔全ての置換基は先に定義したとおりであり(例えば、Ｒ１〜Ｒ６は先に式ＩまたはＩ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかで定義したとおり)；Ｘはハロゲン、メシレートまたはトシレートのような脱離基である。〕
【００４２】
本発明は、それ故に、化合物１−ＡとＲ５−Ｘを、室温でまたは加熱しながら反応させることを含む、式Ｉの化合物の製造方法を提供する。さらなる態様において、この方法はさらにＫ２ＣＯ３のような塩基を存在させることを含む。
【化２２】
0006051210.tif 000023
【００４３】
他の面において、本発明は、IVｇの化合物とＲ６−ＳＨを、塩基(例えば、炭酸カリウム)存在下、加熱しながら、例えば、密閉管中４バールで撹拌しながら、マイクロ波リアクター中、、例えば、１５０℃で１時間反応させることを含む、式ＩまたはＩ(ｉ)の化合物の製造方法を提供する。
【化２３】
0006051210.tif 000024
【００４４】
本発明の化合物の使用方法
本発明の化合物は、例えば、環状ヌクレオチド合成のインデューサー、例えばドーパミンおよび一酸化窒素(ＮＯ)の阻害またはレベル低下によるＰＤＥ１発現増加またはｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ発現減少が原因の、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ仲介経路の混乱または損傷により特徴付けられる疾患の処置に有用である。ＰＤＥ１によるｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ分解を防止することにより、それによりｃＡＭＰおよびｃＧＭＰの細胞内レベルを上昇させることにより、本発明の化合物は環状ヌクレオチド合成インデューサーの活性を亢進させる。
【００４５】
本発明は、
(ｉ)  パーキンソン病、下肢静止不能、振戦、ジスキネジア、ハンチントン病、アルツハイマー病および薬剤誘発性運動障害を含む神経変性疾患；
(ii)  鬱病、注意欠損障害、注意欠損多動性障害、双極性疾病、不安、睡眠障害、例えば、ナルコレプシー、認知機能障害、例えば、統合失調症の認知機能障害、認知症、トゥレット症候群、自閉症、脆弱Ｘ症候群、覚醒剤離脱および薬物嗜癖を含む精神障害；
(iii)  脳血管疾患、卒中、鬱血性心疾患、高血圧、肺高血圧および性機能不全を含む、循環および心血管障害；
(iv)  喘息、慢性閉塞性肺疾患およびアレルギー性鼻炎、ならびに自己免疫性および炎症性疾患を含む、呼吸器および炎症性障害；
(ｖ)  プロゲステロンシグナル伝達亢進により軽減され得る疾患、例えば女性性機能不全；
(vi)  精神病または緑内障のような疾患または障害；
(vii)  ＰＤＥ１発現細胞における低レベルのｃＡＭＰおよび／またはｃＧＭＰ(またはｃＡＭＰおよび／またはｃＧＭＰシグナル伝達経路阻害)により特徴付けられるあらゆる疾患または状態；および／または
(viii)  ドーパミンＤ１受容体シグナル伝達活性低下により特徴付けられるあらゆる疾患または状態
の状態の一つ以上の処置方法であって、遊離形態、薬学的に許容される塩形態またはプロドラッグ形態の本発明の化合物、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)の化合物または１.１〜１.２３のいずれかの有効量を、それを必要とするヒトまたは動物患者に投与することを含む、方法を提供する。
【００４６】
特に好ましい態様において、本発明は、ナルコレプシーの処置または予防方法を提供する。この態様において、ＰＤＥ１阻害剤を唯一の治療剤として使用してよいが、他の活性剤と組み合わせてもまたは併用のために使用してもよい。故に、本発明は、さらに、ナルコレプシーの処置方法であって、遊離形態、薬学的に許容される塩形態またはプロドラッグ形態である
(ｉ)  ＰＤＥ１阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)の化合物または１.１〜１.２３のいずれかおよび
(ii)  例えば、(ａ)中枢神経系刺激剤−アンフェタミン類およびアンフェタミン様化合物、例えば、メチルフェニデート、右旋性アンフェタミン、メタンフェタミンおよびペモリン；(ｂ)モダフィニル、(ｃ)抗鬱剤、例えば、三環式系(イミプラミン、デシプラミン、クロミプラミンおよびプロトリプチリンを含む)および選択的セロトニン再取り込み阻害剤(フルオキセチンおよびセルトラリンを含む)；および／または(ｄ)γ-ヒドロキシ酪酸(ＧＨＢ)から選択される、覚醒状態を亢進するまたは睡眠を調節する化合物
の治療有効量を、処置を必要とするヒトまたは動物患者に一緒に、逐次的にまたは同時に投与することを含む、方法を含む。
【００４７】
他の態様において、本発明は、さらに、プロゲステロンシグナル伝達の亢進により軽減され得る状態の処置または予防方法であって、遊離形態、薬学的に許容される塩形態またはプロドラッグ形態の本発明の化合物、例えば、式Ｉの化合物のいずれかまたは１.１〜１.２３のいずれかの有効量を、処置を必要とするヒトまたは動物に投与することを含む、方法を提供する。プロゲステロンシグナル伝達の亢進により軽減され得る疾患または状態は、女性性機能不全、続発性無月経(例えば、運動性無月経、排卵、閉経期、閉経期症状、甲状腺機能低下症)、月経前緊張症、早産、不妊症、例えば反復流産による不妊症、不規則な月経周期、異常子宮出血、骨粗鬆症、自己免疫疾患、多発性硬化症、前立腺肥大、前立腺癌および甲状腺機能低下症を含むが、これらに限定されない。例えば、プロゲステロンシグナル伝達の亢進により、ＰＤＥ１阻害剤は、妊娠に対する免疫応答または低プロゲステロン機能のために流産しやすい女性における子宮の裏層上への作用を介して卵の着床を促すために、そして妊娠の維持を助けるために使用し得る。例えば、ここに記載する、新規ＰＤＥ１阻害剤は、閉経後女性におけるおよびエストロゲン誘発子宮内膜増殖症および癌における、例えば、エストロゲン／エストラジオール／エストリオールおよび／またはプロゲステロン／プロゲスチン類と組み合わせて投与するホルモン補充療法の効果を亢進するためにも有用であり得る。本発明の方法はまた、例えば繁殖する非ヒト雌哺乳動物における性受容性および／または発情を誘発するために、動物繁殖においても有用である。
【００４８】
この態様において、ＰＤＥ１阻害剤は、前記処置または予防方法に、唯一の治療剤として使用してよいが、他の活性剤と組み合わせてまたは併用投与のためにも、例えばホルモン補充療法と組み合わせても使用し得る。故に、本発明は、さらに、プロゲステロンシグナル伝達の亢進により軽減され得る障害の処置方法であって、遊離形態、薬学的に許容される塩形態またはプロドラッグ形態の
(ｉ)  ＰＤＥ１阻害剤、例えば、式Ｉのいずれかの化合物または１.１〜１.２３のいずれかおよび
(ii)  例えば、エストロゲンおよびエストロゲン類似体(例えば、エストラジオール、エストリオール、エストラジオールエステル類)およびプロゲステロンおよびプロゲステロン類似体(例えば、プロゲスチン類)から選択されるホルモン
の治療有効量を、処置を必要とするヒトまたは動物患者に一緒に、逐次的にまたは同時に投与することを含む、方法を含む。
【００４９】
本発明はまた、細胞または組織内のドーパミンＤ１細胞内シグナル伝達活性を亢進または増強するための方法であって、該細胞または組織と、ＰＤＥ１活性を阻害するのに十分な量の本発明の、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)の化合物または１.１〜１.２３のいずれかを接触させることを含む、方法も提供する。
【００５０】
本発明はまた、処置を必要とする患者におけるＰＤＥ１関連障害、ドーパミンＤ１受容体細胞内シグナル伝達経路障害またはプロゲステロンシグナル伝達経路の亢進により軽減され得る障害の処置方法であって、該患者にＰＤＥ１を阻害する有効量の本発明の例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)の化合物または１.１〜１.２３のいずれかを投与し、ここで、ＰＤＥ１活性がＤＡＲＰＰ−３２および／またはＧｌｕＲ１  ＡＭＰＡ受容体のリン酸化を調節する、方法を提供する。
【００５１】
他の面において、本発明はまた緑内障または高眼圧の処置方法であって、眼科的に適合性の担体中の、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本発明のホスホジエステラーゼタイプＩ(ＰＤＥ１)阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)の化合物または１.１〜１.２３のいずれかの治療有効量を、処置を必要とする患者の眼に局所投与することを含む、方法も提供する。しかしながら、処置は、全身治療であってよくまたは全身治療を含む。全身治療は、例えば、直接血流に届き得る処置または経口投与法を含む。
【００５２】
本発明は、さらに、ＰＤＥ１阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかを含む局所的眼使用のための医薬組成物、例えば、遊離形態または眼科的に許容される塩形態の本発明のＰＤＥ１阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかを、眼科的に許容される希釈剤または担体と組み合わせてまたは混合して含む、眼用の溶液、懸濁液、クリームまたは軟膏を提供する。
【００５３】
場合により、ＰＤＥ１阻害剤は緑内障または高眼圧の処置に有用な第二の薬物と逐次的にまたは同時に投与してよい。２種の活性剤を投与するとき、各薬剤の治療有効量は単剤としての活性に必要な量を下回り得る。従って、閾値以下の量(すなわち、単剤療法として必要なレベルより低い量)が治療的に有効であると見なされ、また有効量とも呼ばれ得る。実際、異なる作用機序および異なる副作用プロファイルの異なる薬剤を投与する利点は、一方または両方の薬剤の投与量減少および副作用軽減、ならびに単剤療法としてのそれらの活性の亢進または増強であり得る。
【００５４】
本発明は、故に、緑内障および高眼圧から選択される状態の処置方法であって、処置を必要とする患者に、眼内圧を低下させることが知られている薬剤の有効量、例えば、閾値以下の量を、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本発明のＰＤＥ１阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかの有効量、例えば、閾値以下の量を、併用した眼内圧を低下させることが知られている薬剤の量およびＰＤＥ１阻害剤の量が、該状態を処置するのに有用であるように、同時に、一緒にまたは逐次的に投与することを含む、方法を提供する。
【００５５】
一つの態様において、これらの薬剤の一方または両方を眼に局所投与する。故に、本発明は、眼内圧を低下させることが知られた薬剤の低投与量を、ＰＤＥ１阻害剤の有効量と同時に、一緒にまたは逐次的に投与することによる、緑内障または高眼圧の処置の副作用を軽減する方法を提供する。しかしながら、局所投与以外の方法、例えば全身治療投与もまた利用し得る。
【００５６】
ＰＤＥ１阻害剤と組み合わせて使用する任意の１種または複数種の付加的薬剤は、例えば、典型的にプロスタグランジン、ピロカルピン、エピネフリンの点眼または、例えばチモロールでの局所β−ブロッカー処置、ならびに炭酸脱水酵素の全身投与阻害剤、例えばアセタゾラミドを含む既存の薬剤から選択され得る。コリンエステラーゼ阻害剤、例えばフィゾスチグミンおよびエコチオパートも用いてよく、ピロカルピンに類似する効果を有する。緑内障処置に現在使用されている薬剤は、例えば、次のものを含む。
１. ブドウ膜強膜路の眼房水を増加させるプロスタグランジン類似体、例えばラタノプロスト(キサラタン)、ビマトプロスト(ルミガン)およびトラボプロスト(トラバタンズ)。ビマトプロストも経線維柱帯房水流出を増加させる。
２. 毛様体による眼房水産生を減少させる、チモロール、レボブノロール(Betagan)およびベタキソロールのような局所β−アドレナリン受容体アンタゴニスト。
３. 房水産生減少およびぶどう膜強膜路増加の二機構により作用する、ブリモニジン(アイファガン)のようなα２−アドレナリンアゴニスト。
４. エピネフリンおよびジピベフリン(Propine)のような低選択的交感神経模倣剤は、線維柱帯網およびおそらくブドウ膜強膜路経路を介する眼房水流出を、おそらくβ２−受容体アゴニスト作用により増加させる。
５. ピロカルピンのような縮瞳剤(副交感神経刺激剤)は、毛様体筋肉の収縮、線維柱帯網の締め付けおよび眼房水の流出増加により作用する。
６. ドルゾラミド(トルソプト)、ブリンゾラミド(エイゾプト)、アセタゾラミド(ダイアモックス)のような炭酸脱水酵素阻害剤は、毛様体における炭酸脱水酵素阻害により眼房水分泌を低下させる。
７. フィゾスチグミンも、緑内障処置および胃排出遅延に使用される。
【００５７】
例えば、本発明は、本発明のＰＤＥ１阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかおよび(ｉ)プロスタノイド類であるウノプロストン、ラタノプロスト、トラボプロストまたはビマトプロスト；(ii)ブリモニジン、アプラクロニジンまたはジピベフリンのようなαアドレナリンアゴニストおよび(iii)ピロカルピンのようなムスカリンアゴニストから選択される薬物を含む、医薬組成物を提供する。例えば、本発明は、遊離形態または眼科的に許容される塩形態の本発明のＰＤＥ１阻害剤を、ビマトプロスト、アブリモニジン、ブリモニジン、チモロールまたはこれらの組み合わせと、眼科的に許容される希釈剤または担体を組み合わせてまたは混合して含む、眼用製剤を提供する。組み合わせの選択がどのように行われても、これに加えて、当業者は適当な選択的受容体サブタイプアゴニストまたはアンタゴニストを選択できる。例えば、αアドレナリンアゴニストについて、例えば、α１アドレナリン受容体に選択的なアゴニストまたはブリモニジンのようなα２アドレナリン受容体に選択的なアゴニストを選択できる。β−アドレナリン受容体アンタゴニストについて、適切な治療適用によって、β１またはβ２またはβ３のいずれかに選択的なアンタゴニストを選択できる。また特定の受容体サブタイプ、例えばＭ１−Ｍ５に選択的なムスカリンアゴニストも選択できる。
【００５８】
ＰＤＥ１阻害剤を、眼用の溶液、クリームまたは軟膏を含む眼用組成物の形態で投与できる。眼用組成物は、さらに、眼圧低下剤を含んでよい。
【００５９】
さらに別の例において、開示されたＰＤＥ１阻害剤は、ビマトプロスト点眼液、酒石酸ブリモニジン点眼液または酒石酸ブリモニジン／マレイン酸チモロール点眼液であり得る眼圧低下剤の閾値以下の量と組み合わせ得る。
【００６０】
上記方法に加えて、ＰＤＥ１阻害剤が精神病、例えば、精神病性症状、例えば幻覚、妄想性または奇異な妄想または著しく混乱した会話および思考により特徴付けられるあらゆる状態、例えば、統合失調症、統合失調感情障害、統合失調症様障害、精神病性障害、妄想性障害および急性躁病エピソードおよび双極性障害におけるような躁病の処置に有用であることも、驚くべきことに判明した。いかなる理論にも縛られることを意図しないが、定型および非定型抗精神病剤、例えばクロザピンは、主にドーパミンＤ２受容体においてそのアンタゴニスト活性を有すると考えられる。しかしながら、ＰＤＥ１阻害剤は、主にドーパミンＤ１受容体でのシグナル伝達亢進に作用する。Ｄ１受容体シグナル伝達亢進により、ＰＤＥ１阻害剤は、種々の脳領域、例えば側坐核ニューロンおよび前頭前野におけるＮＭＤＡ受容体機能を増加できる。この機能の亢進は、例えばＮＲ２Ｂサブユニットを含むＮＭＤＡ受容体で見ることができ、例えば、キナーゼ群のＳｒｃおよびタンパク質キナーゼＡファミリーの活性化を介して起こり得る。
【００６１】
それ故に、本発明は、精神病、例えば、統合失調症、統合失調感情障害、統合失調症様障害、精神病性障害、妄想性障害および急性躁病エピソードおよび双極性障害におけるような躁病の新規処置方法であって、処置を必要とする患者に遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本発明のホスホジエステラーゼ−１(ＰＤＥ１)阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかの治療有効量を投与することを含む、方法を提供する。
【００６２】
ＰＤＥ１阻害剤は、前記処置または予防方法に唯一の治療剤として使用してよいが、他の活性剤と組み合わせても併用のために使用してもよい。故に、本発明は、さらに、精神病、例えば、統合失調症、統合失調感情障害、統合失調症様障害、精神病性障害、妄想性障害または躁病の処置方法であって、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の
(ｉ)  遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本発明のＰＤＥ１阻害剤；および
(ii)  抗精神病剤、例えば、
定型抗精神病剤、例えば、
ブチロフェノン類、例えばハロペリドール(Haldol、セレネース)、ドロペリドール(ドロレプタン)；
フェノチアジン類、例えば、クロルプロマジン(Thorazine、Largactil)、フルフェナジン(Prolixin)、ペルフェナジン(トリラホン)、プロクロルペラジン(Compazine)、チオリダジン(Mellaril、メレリル)、トリフロペラジン(Stelazine)、メソリダジン、ペリシアジン、プロマジン、トリフルプロマジン(Vesprin)、レボメプロマジン(Nozinan)、プロメタジン(フェネルガン)、ピモジド(オーラップ)；
チオキサンテン類、例えば、クロルプロチキセン、フルペンチキソール(Depixol、Fluanxol)、チオチキセン(ナーベン)、ズクロペンチキソール(Clopixol、Acuphase)；
非定型抗精神病剤、例えば、
クロザピン(クロザリル)、オランザピン(ジプレキサ)、リスペリドン(リスパダール)、クエチアピン(セロクエル)、ジプラシドン(Geodon)、アミスルプリド(Solian)、パリペリドン(インヴェガ)、アリピプラゾール(エビリファイ)、Bifeprunox；ノルクロザピン
の治療有効量を、処置を必要とする患者に一緒に、逐次的にまたは同時に投与することを含む、方法を含む。
【００６３】
特定の態様において、本発明の化合物は、特に統合失調症の処置または予防に有用である。
【００６４】
遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本発明の化合物は、特にパーキンソン病、統合失調症、ナルコレプシー、緑内障および女性性機能不全の処置に有用である。
【００６５】
さらに別の面において、本発明は、睫毛の伸長または成長促進のための方法であって、プロスタグランジン類似体、例えば、ビマトプロストの有効量を、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本発明のＰＤＥ１阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかの有効量と一緒に、同時にまたは逐次的に処置を必要とする患者の眼に投与することを含む、方法を提供する。
【００６６】
さらに別の面において、本発明は、外傷性脳傷害の処置または予防方法であって、処置を必要とする患者に治療有効量の遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本発明のＰＤＥ１阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかを投与することを含む、方法を提供する。外傷性脳傷害(ＴＢＩ)は、限局性脳傷害および汎発性脳傷害の両者を含む、一次性傷害ならびに二次性傷害を包含する。二次性傷害は、最初の(一次性)傷害後の炎症性応答および進行が原因であるまたはそれにより悪化する、種々の細胞内過程(例えば、活性酸素種による毒性、グルタミン酸受容体の過剰刺激、カルシウム過剰流入および炎症性上方制御)に起因する、複数の、並行した相互作用するおよび相互依存的な生物学的反応のカスケードである。
【００６７】
本発明はまた
(ｉ)  例えば上に記載したあらゆる疾患または状態のあらゆる方法または処置に使用するための、前記の遊離形態、薬学的に許容される塩形態の本発明の化合物、例えば、式Ｉまたは１.１〜１.２３のいずれか、
(ii)  上に記載したあらゆる疾患または状態の処置のための(医薬の製造における)、遊離形態、薬学的に許容される塩形態の前記の本発明の化合物、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかの使用、
(iii)  遊離形態、薬学的に許容される塩形態の前記の本発明の化合物、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかを、薬学的に許容される希釈剤または担体と組み合わせてまたは混合して含む、医薬組成物および
(iv)  上に記載したあらゆる疾患または状態の処置において使用するための、遊離形態、薬学的に許容される塩形態の前記の本発明の化合物、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかを、薬学的に許容される希釈剤または担体と組み合わせてまたは混合して含む、医薬組成物
を提供する。
【００６８】
それ故に、本発明は、次のパーキンソン病、下肢静止不能、振戦、ジスキネジア、ハンチントン病、アルツハイマー病および薬剤誘発性運動障害；鬱病、注意欠損障害、注意欠損多動性障害、双極性疾病、不安、睡眠障害、ナルコレプシー、認知機能障害、例えば、統合失調症の認知機能障害、認知症、トゥレット症候群、自閉症、脆弱Ｘ症候群、覚醒剤離脱、薬物嗜癖、脳血管疾患、卒中、鬱血性心疾患、高血圧、肺高血圧、性機能不全、喘息、慢性閉塞性肺疾患および／またはアレルギー性鼻炎、自己免疫性疾患、炎症性疾患、女性性機能不全、運動性無月経、排卵、閉経期、閉経期症状、甲状腺機能低下症、月経前緊張症、早産、不妊症、不規則な月経周期、異常子宮出血、骨粗鬆症、多発性硬化症、前立腺肥大、前立腺癌、甲状腺機能低下症、エストロゲン誘発子宮内膜増殖症または癌；ＰＤＥ１発現細胞におけるｃＡＭＰおよび／またはｃＧＭＰ低下(またはｃＡＭＰおよび／またはｃＧＭＰシグナル伝達経路阻害)および／またはドーパミンＤ１受容体シグナル伝達活性低下により特徴付けられるあらゆる疾患または状態；および／またはプロゲステロンシグナル伝達の亢進により軽減され得るあらゆる疾患または状態である疾患の処置または予防的処置のための(医薬の製造における)、医薬組成物形態の、遊離形態、薬学的に許容される塩形態の前記の本発明の化合物、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかまたは本発明の化合物の使用を提供する。
【００６９】
本発明はまた、
ａ)  緑内障または高眼圧、
ｂ)  精神病、例えば、精神病性症状、例えば幻覚、妄想性または奇異な妄想または著しく混乱した会話および思考により特徴付けられるあらゆる状態、例えば、統合失調症、統合失調感情障害、統合失調症様障害、精神病性障害、妄想性障害および急性躁病エピソードおよび双極性障害におけるような躁病、
ｃ)  外傷性脳傷害
の処置または予防的処置用医薬の製造のための、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本発明の化合物の使用を提供する。
【００７０】
句“本発明の化合物”または“本発明のＰＤＥ１阻害剤”は、ここに開示するいずれかのおよび全ての、遊離形態または塩形態の化合物、例えば、前記式Ｉ、Ｉ(ｉ)の化合物または１.１〜１.２３のいずれかを包含する。
【００７１】
用語“処置”および“処置する”は、従って、疾患の症状の予防および処置または改善ならびに疾患原因の処置を包含すると解釈すべきである。一つの態様において、本発明は、ここに開示する疾患または障害の処置方法を提供する。他の態様において、本発明は、ここに開示する疾患または障害の予防方法を提供する。
【００７２】
処置方法に関して、用語“有効量”は、特定の疾患または障害を処置するための治療有効量を包含することを意図する。
【００７３】
用語“肺高血圧”は、肺動脈高血圧を包含することを意図する。
【００７４】
用語“患者”は、ヒトまたは非ヒト(すなわち、動物)患者を含む。特定の態様において、本発明はヒトおよび非ヒトのいずれも包含する。他の態様において、本発明は非ヒトを包含する。他の態様において、本用語はヒトを包含する。
【００７５】
本明細書で使用する用語“含む”は、開放末端であることを意図し、付加的な、非列記要素または方法工程を除外しない。
【００７６】
本発明の化合物は、特にパーキンソン病、ナルコレプシーおよび女性性機能不全の処置に有用である。
【００７７】
前記の、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の本発明の化合物、例えば、式Ｉ、Ｉ(ｉ)または１.１〜１.２３のいずれかは唯一の治療剤として使用してよいが、他の活性剤と組み合わせてもまたは併用のために使用してもよい。例えば、本発明の化合物がＤ１アゴニスト、例えばドーパミンの活性を亢進するため、例えば、パーキンソン病を有する患者の処置において、慣用のドーパミン作動薬、例えばレボドパおよびレボドパ補助剤(カルビドパ、ＣＯＭＴ阻害剤、ＭＡＯ−Ｂ阻害剤)、ドーパミンアゴニストおよび抗コリン剤と一緒に、逐次的にまたは同時に投与し得る。加えて、例えば、ここに記載する新規ＰＤＥ１阻害剤は、ホルモン補充療法またはエストロゲン誘発子宮内膜増殖症または癌の処置の有効性を高めるために、エストロゲン／エストラジオール／エストリオールおよび／またはプロゲステロン／プロゲスチン類と組み合わせても投与し得る。
【００７８】
本発明の実施に際して用いられる投与量は、例えば処置すべき特定の疾患または状態、使用する特定の本発明の化合物、投与方法および所望の治療により当然変わる。本発明の化合物は、経口、非経腸、経皮または吸入を含む任意の適当な経路で投与し得るが、好ましくは経口的に投与する。一般に、例えば、上記疾患の処置についての満足いく結果が、約０.０１〜２.０mg／kgの程度の投与量の経口投与で示される。大型哺乳動物、例えばヒトにおいて、指示される経口投与のための１日投与量は、従って約０.７５〜１５０mgの範囲であり、簡便には１日１回または２〜４分割して、または毎日持続放出形態で投与する。経口投与のための単位投与量形態は、故に、例えば約０.２〜７５mgまたは１５０mg、例えば約０.２または２.０〜５０mg、７５mgまたは１００mgの本発明の化合物を、薬学的に許容される希釈剤または担体と共に含み得る。
【００７９】
本発明の化合物を含む医薬組成物は、製剤分野で知られる希釈剤または添加物および技術を使用して製造し得る。故に、経口投与形態は錠剤、カプセル、溶液、懸濁液などを含み得る。
【実施例】
【００８０】
種々の本発明の化合物の製造方法を下に示す。本発明の化合物の中間体ならびに本発明の他の化合物(例えば、式１.２３の化合物)およびそれらの塩類は、下記方法に準じておよび／または一般的に詳細な説明に記載した方法に準じておよび化学分野で知られた方法、特にＷＯ２００６／１３３２６１、ＷＯ２００９／０７５７８４およびＷＯ２０１０／０６５１４９(これらの内容を引用によりその全体を本明細書に包含させる)に記載された方法により、製造し得る。
【００８１】
実施例１：
３−(エチルチオ)−２−(４−(５−フルオロピリジン−２−イル)ベンジル)−５,７,７−トリメチル−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
【化２４】
0006051210.tif 000025
２mL  マイクロ波反応バイアルに３−クロロ−２−(４−(５−フルオロピリジン−２−イル)ベンジル)−５,７,７−トリメチル−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン(１６０mg、０.３６mmol)、Ｋ２ＣＯ３(１５０mg、１.１mmol)、過剰のエタンチオール(０.６mL)およびシクロペンタノール(０.５mL)を仕込む。バイアルを密閉し、マイクロ波リアクター中、４バール、１５０℃で１時間、撹拌しながら加熱する。ＬＣＭＳは出発物質が生成物へ変換されたことを示す。反応混合物を冷却し、水(１００mL)で希釈し、ジクロロメタン(３×３０mL)で抽出する。合わせた有機層を蒸発乾固し、残渣をジメチルホルムアミド(１mL)に溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、１２６mgの生成物をギ酸塩(７４％収率)として、９５％の純度で得る。MS (ESI) m/z 465.2 [M+H]+
【００８２】
実施例２：
３−(エチルチオ)−２−(４−(６−フルオロピリジン−２−イル)ベンジル)−５,７,７−トリメチル−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
【化２５】
0006051210.tif 000026
２mL  マイクロ波反応バイアルに３−クロロ−２−(４−(６−フルオロピリジン−２−イル)ベンジル)−５,７,７−トリメチル−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン(９０mg、０.２mmol)、Ｋ２ＣＯ３(１００mg、０.７３mmol)、過剰のエタンチオール(０.６mL)およびシクロペンタノール(０.５mL)を仕込む。バイアルを密閉し、マイクロ波リアクター中、４バール、１５０℃で１時間、撹拌しながら加熱する。ＬＣＭＳは出発物質が生成物の変換されたことを示す。反応混合物を冷却し、水(１００mL)で希釈し、ジクロロメタン(３×３０mL)で抽出する。合わせた有機層を蒸発乾固し、残渣をジメチルホルムアミド(１mL)に溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、１４mgの生成物をギ酸塩(１３％収率)として＞９８％の純度で得る。MS (ESI) m/z 465.2 [M+H]+
【００８３】
実施例３：
２−(４−(６−フルオロピリジン−２−イル)ベンジル)−３−(イソプロピルチオ)−５,７,７−トリメチル−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オン
【化２６】
0006051210.tif 000027
２mL  マイクロ波反応バイアルに３−クロロ−２−(４−(６−フルオロピリジン−２−イル)ベンジル)−５,７,７−トリメチル−７,８−ジヒドロ−２Ｈ−イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(５Ｈ)−オンｓ(８８mg、０.２mmol)、Ｋ２ＣＯ３(１６０mg、１.２mmol)、過剰のプロパン−２−チオール(０.５mL)およびシクロペンタノール(０.５mL)を仕込んだ。バイアルを密閉し、マイクロ波リアクター中、４バール、１５０℃で１時間、撹拌しながら加熱した。ＬＣＭＳは出発物質が生成物へ変換されたことを示す。反応混合物を冷却し、水(１００mL)で希釈し、ジクロロメタン(３×３０mL)で抽出する。合わせた有機層を蒸発乾固し、残渣をジメチルホルムアミド(１mL)に溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、５８mgの生成物をギ酸塩(５５％収率)として９６.４％の純度で得る。MS (ESI) m/z 479.3 [M+H]+
【００８４】
実施例３−Ａ：
(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(エチルチオ)−２−(４−(６−フルオロピリジン−２−イル)ベンジル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン
【化２７】
0006051210.tif 000028
２mL  マイクロ波反応バイアルに(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−３−クロロ−５−メチル−２−(４−(６−フルオロピリジン−２−イル)ベンジル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン(４５mg、０.１mmol)、Ｋ２ＣＯ３(４８mg、０.３５mmol)、過剰のエタンチオール(０.６mL)およびシクロペンタノール(０.５mL)を仕込む。バイアルを密閉し、マイクロ波リアクター中、１５０℃で１時間、撹拌しながら加熱する。ＬＣＭＳは出発物質が生成物の変換されたことを示す。反応混合物を冷却し、水(１００mL)で希釈し、ジクロロメタン(３×３０mL)で抽出する。合わせた有機層を蒸発乾固し、残渣をジメチルホルムアミド(１mL)に溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、３２mgの生成物をギ酸塩(６１％収率)として＞９９％の純度で得る。MS (ESI) m/z 477.1 [M+H]＋
【００８５】
実施例３−Ｂ：
(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−５−メチル−３−(イソプロピルチオ)−２−(４−(６−フルオロピリジン−２−イル)ベンジル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン
【化２８】
0006051210.tif 000029
２mL  マイクロ波反応バイアルに(６ａＲ,９ａＳ)−５,６ａ,７,８,９,９ａ−ヘキサヒドロ−３−クロロ−５−メチル−２−(４−(６−フルオロピリジン−２−イル)ベンジル)−シクロペント[４,５]イミダゾ[１,２−ａ]ピラゾロ[４,３−ｅ]ピリミジン−４(２Ｈ)−オン(１５０mg、０.３３mmol)、Ｋ２ＣＯ３(２７０mg、１.９５mmol)、過剰のプロパン−２−チオール(０.５mL)およびシクロペンタノール(０.５mL)を仕込む。バイアルを密閉し、マイクロ波リアクター中、１５０℃で１時間、撹拌しながら加熱する。ＬＣＭＳは出発物質が生成物へ変換されたことを示す。反応混合物を冷却し、水(１００mL)で希釈し、ジクロロメタン(３×３０mL)で抽出する。合わせた有機層を蒸発乾固し、残渣をジメチルホルムアミド(１mL)に溶解し、濾過し、ＨＰＬＣで精製して、１２２mgの生成物をギ酸塩(６９％収率)として９８％の純度で得る。MS (ESI) m/z 491.2 [M+H]+
【００８６】
実施例４
ＩＭＡＰホスホジエステラーゼアッセイキットを使用するインビトロでのＰＤＥ１Ｂ阻害測定
ホスホジエステラーゼ１Ｂ(ＰＤＥ１Ｂ)は、環状グアノシンモノホスフェート(ｃＧＭＰ)を５’−グアノシンモノホスフェート(５’−ＧＭＰ)に変換する、カルシウム／カルモジュリン依存性ホスホジエステラーゼ酵素である。ＰＤＥ１Ｂはまた修飾ｃＧＭＰ基質、例えば蛍光分子ｃＧＭＰ−フルオレセインを、対応するＧＭＰ−フルオレセインに変換できる。ｃＧＭＰ−フルオレセインからのＧＭＰ−フルオレセイン産生は、例えば、IMAP(Molecular Devices, Sunnyvale, CA)固定化金属親和性粒子試薬を使用して定量できる。
【００８７】
簡単に言うと、ＩＭＡＰ試薬は、ＧＭＰ−フルオレセインに見られ、ｃＧＭＰ−フルオレセインにない遊離５’−ホスフェートと高親和性で結合する。得られたＧＭＰ−フルオレセイン−ＩＭＡＰ複合体はｃＧＭＰ−フルオレセインと比較して大きい。大きく、ゆっくり転回する複合体と密接に関係する小フルオロフォアを、それらが蛍光を発するときに放出する光子が、蛍光の励起に使用した光子と同じ極性を維持しているために、未結合フルオロフォアと区別できる。
【００８８】
ホスホジエステラーゼアッセイにおいて、ＩＭＡＰと結合できず、それ故にほとんど蛍光偏光を維持できないｃＧＭＰ−フルオレセインを、ＩＭＡＰに結合したとき、蛍光偏光(Δmp)を大きく増加させるＧＭＰ−フルオレセインに変換する。ホスホジエステラーゼ阻害は、それ故に、Δmp減少として測定される。
【００８９】
酵素アッセイ
材料：Molecular Devices (Sunnyvale, CA)から入手可能であるＩＭＡＰ試薬(反応緩衝液、結合緩衝液、ＦＬ−ＧＭＰおよびＩＭＡＰビーズ)以外の全ての化学物質はSigma-Aldrich(St. Louis, MO)から入手可能である。
アッセイ：次のホスホジエステラーゼ酵素類を使用し得る：３’,５’−環状−ヌクレオチド−特異的ウシ脳ホスホジエステラーゼ(Sigma, St. Louis, MO)(主にＰＤＥ１Ｂ)および当業者により、例えばＨＥＫまたはＳＦ９細胞において産生され得る組み換え完全長ヒトＰＤＥ１ＡおよびＰＤＥ１Ｂ(それぞれｒ−ｈＰＤＥ１Ａおよびｒ−ｈＰＤＥ１Ｂ)。ＰＤＥ１酵素を、５０％グリセロールで２.５Ｕ／mlに再構成する。１単位の酵素は、ｐＨ７.５で３０℃で１分間あたり１.０μmoleの３’,５’−ｃＡＭＰを５’−ＡＭＰに加水分解する。酵素(１部)を反応緩衝液(１９９９部)(３０μM  ＣａＣｌ２、１０Ｕ／mlのカルモジュリン(Sigma P2277)、１０mM  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ７.２、１０mM  ＭｇＣｌ２、０.１％ＢＳＡ、０.０５％ＮａＮ３)に添加して、最終濃度１.２５mU／mlとする。９９μlの希釈酵素溶液を、平底９６ウェルポリスチレンプレートの各ウェルに添加し、そこに１００％ＤＭＳＯに溶解した１μlの試験化合物を添加する。化合物を混合し、酵素と１０分間、室温でプレインキュベートする。
【００９０】
３８４ウェルマイクロタイタープレート中で、酵素(４部)および基質溶液(１部)と混合した阻害剤(０.２２５μM)を合わせることにより、ＦＬ−ＧＭＰ変換反応を開始させる。反応物を暗所で、室温で１５分間インキュベートする。３８４ウェルプレートの各ウェルに、結合試薬(６０μl)(１：１８００希釈の消泡剤を添加した結合緩衝液中のＩＭＡＰビーズの１：４００希釈)を添加することにより、反応を停止させる。プレートを、室温で１時間インキュベートして、ＩＭＡＰ結合を完了するまで進行させ、次いで、Envisionマルチモードマイクロプレートリーダー(PerkinElmer, Shelton, CT)に入れて、蛍光偏光(Δmp)を測定する。
【００９１】
Δmpの減少により測定したＧＭＰ濃度低下は、ＰＤＥ活性阻害の指標である。ＩＣ５０値を、０.００３７nM〜８０,０００nMの範囲の８〜１６濃度の化合物存在下に酵素活性を測定し、非線形回帰ソフトウェア(XLFit; IDBS, Cambridge, MA)を使用してＩＣ５０値を推定することを可能とする薬物濃度対ΔmPをプロットする。
【００９２】
本発明の化合物を、ＰＤＥ１阻害活性について、記載したまたは本記載に準じるアッセイを使用して試験する。例示した本発明の化合物(例えば実施例１−３、３−Ａ、３−Ｂまたは式１.２２および１.２３の化合物)は、一般的に、下記のとおり、１μM未満、例えば、約１０nM未満、約５nM以下のＩＣ５０値を有する。
【表１】
0006051210.tif 000030
＊ｎｄ＝測定せず
【００９４】
実施例５
雌ラットにおける性応答に対するＰＤＥ１阻害剤効果
雌ラットにおけるロードシス応答に対するＰＤＥ１阻害剤の効果を、Mani, et al., Science (2000) 287: 1053に記載のとおり測定し得る。卵巣切除し、カニューレ処置した野生型ラットを、エストロゲン(２μg)で薬物刺激し、２４時間後プロゲステロン(２μg)、本発明のＰＤＥ１阻害剤(０.１mg、１.０mgまたは２.５mg)またはゴマ油媒体(対照)を脳室内(icv)注射する。ラットを、雄ラットの存在下、ロードシス応答について試験し得る。ロードシス応答は、ロードシス指数(ＬＱ＝ロードシスの数／１０マウント×１００)により定量する。
【００９５】
実施例６  −  新規物体認識アッセイ
本発明の化合物の認知効果増強を測定するために、候補化合物を、新規物体認識(ＮＯＲ)アッセイにおいて評価し得る。このアッセイプロトコールは、Ennaceur et al., Behav. Brain Res. (1988) 31:47-59およびPrickaerts et al., Eur. J. Pharmacol. (1997) 337:125-136(これらの各々の内容を、引用することにより全体を本明細書に包含させる)に詳細に記載されている。このプロトコールにおいて、ラットを時間Ｔ１にチャンバーに入れ、２匹の同じ“見慣れた物体”を６分間調べさせる。２４時間後、これらをこのチャンバーに再び入れ、見慣れた物体の一方を新規物体と置き換える。見慣れた物体を超える新規物体への接近に費やした時間で測定した“弁別指数”を次いで測定し得る。齧歯類はＴ１時の最初の経験を４時間以内に忘れるため、２４時間間隔のこの試験は、強い効果増強の指標である。
【００９６】
このアッセイプロトコールを、記憶の種々の相を評価するために修飾できる。記憶の３つの一般的相、すなわち、獲得、固定および想起がある。この修飾プロトコールにおいて、ラットに候補化合物をＴ１の２時間前に投与し、追加投与することなく２４時間後に試験し得る。これは、獲得過程の試験である。加えて、Ｔ１試験後の他の種々の時点での投与を、記憶固定および想起における化合物の効果を理解するために行い得る。具体的に、これらの投与時間は獲得(Ｔ１−２時間)、初期固定(Ｔ１＋０.１時間)、後記固定(Ｔ１＋３時間)および想起(Ｔ２−２時間)を表す。
【００９７】
上記のまたは上記に準ずるプロトコールを使用して、実施例１の化合物は、Ｔ１の２時間に投与したとき、０.３mg／Kg  ＰＯの投与量で媒体に対してｐ＜０.０１で活性を示す。
【００９８】
実施例７  −  ハロペリドール誘発誘発カタレプシーモデル
定型および非定型抗精神病剤で処置している統合失調症およびパーキンソン病患者に存在する運動異常に対する有利な効果の可能性を評価するために、本発明の化合物を、動きのこわばりまたはカタレプシーをハロペリドールまたはリスペリドンのような強力なドーパミンＤ２受容体アンタゴニストにより誘発するカタレプシーモデルの回復において試験し得る。本方法は、マウスの前脚を３mm直径のつり下げた木の棒を握らせるために置く、“棒握り試験”を使用する。“下りるまでの時間”を、マウスが脚を棒から、床に動かすまでの時間として記録することにより測定する。カタレプシーは、マウスが棒から離れるのを妨げる筋肉のこわばりである。本モデルで誘発されるカタレプシーの軽減は、本化合物が錐体外路副作用が頻繁である統合失調症およびパーキンソン病の両者において有利な効果を有することを示す。
【００９９】
合計１７匹の８週齢、雄、Ｃ５７ＢＬ／６マウス(Jackson Laboratories)を、実施例１または２の化合物の効果を試験する典型的実験に使用する。マウスを、次の媒体のみ、ハロペリドール単独(３mg／kg  ＰＯ)、実施例１または２の化合物単独(中投与量、ＰＯ)、ハロペリドール＋実施例１または２の化合物(低投与量、ＰＯ)、ハロペリドール＋実施例１または２の化合物(中投与量、ＰＯ)またはハロペリドール＋実施例１または２の化合物(高投与量、ＰＯ)の処置を受ける６群(媒体群についてＮ＝２；Ｎ＝３マウス／薬物書値群)に分ける。カタレプシースコアを各マウスについて、薬物投与後２時間、３時間、４時間および６時間に記録する。カタレプシー測定に使用するチャンバーは、ケージの床から４cm上に水平に固定された３mm直径の木の棒を備えたPlexiglasケージである。各試験セッションについて、マウスの両方の前脚を棒に置き、一方で後脚はPlexiglas床上にある。マウスが両脚を棒から床表面に下げるまでの時間(すなわち、下りるまでの時間)を最大１２０秒間まで記録する。マウスが直ぐに下りたら(置いた後１０秒間未満)、最大１０回まで再試験を行う。１０回のいずれも１０秒間を超えないならば、最長の時間をカタレプシースコアとして記録する。そうでなければ、最初のカタレプシー時間(＞１０秒間)を、１２０秒間の試験時間中記録する。下りるまでの平均時間を各処置群について計算する。実施例１または２の化合物の、ハロペリドール処置後の下りるまでの時間に対する効果を、全ての試験した投与量の各時点での分散分析(ＡＮＯＶＡ、Ｆ５,１６)、続くニューマン・クールズｐｏｓｔ−ｈｏｃ多重比較用例検定により群間差異を統計学的に比較することにより評価する。
【０１００】
本実施例に記載するまたは記載に準じるプロトコールを使用して、本実験は、実施例１および実施例２の化合物は、＜０.１mg／Kgの最小投与量で、カタレプシーモデルに活性であることを示す。