(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
眼の脈絡膜上腔への投与による眼疾患の治療のための医薬の製造における液体薬物製剤の使用であって、液体薬物製剤が、強膜に挿入した中空極微針であって、突先に開口部があり、且つ、前記極微針の一部が、眼の表面と接触するよう構成された凸状の形状を有する基部の端面から延びるように当該基部と連結した、極微針を使って脈絡膜上腔に送達され、液体薬物製剤が、挿入した極微針を通して、一定期間に渡り、眼の脈絡膜上腔に注入され、その期間、注入した薬物製剤は挿入部位から離れて脈絡膜上腔内に流れ込むことを特徴とする、液体薬物製剤の使用。
【請求項２】
挿入部位が眼の赤道の位置にあたることを特徴とする、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
液体薬物製剤が微小粒子またはナノ粒子の懸濁液を含み、当該微小粒子またはナノ粒子が薬物を含むことを特徴とする、請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
眼疾患がブドウ膜炎、緑内障、糖尿病性黄斑浮腫、加齢による湿性もしくは乾性黄斑変性症、脈絡膜新生血管形成またはサイトメガロウイルス性網膜炎であることを特徴とする、請求項１から３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
薬物がベータアドレナリン受容体拮抗薬、縮瞳薬、交感神経様作用薬、炭酸脱水酵素阻害薬、プロスタグランジン、抗菌剤および抗真菌を含む抗菌性化合物、抗ウイルス性化合物、アルドース還元酵素阻害薬、抗炎症および／または抗アレルギー化合物、人工涙液／ドライアイ治療薬、局所麻酔薬、シクロスポリン、ジクロフェナク、ウロガストロンおよび成長因子、散瞳薬および毛様体筋麻痺薬、マイトマイシンＣおよびコラゲナーゼインヒビターおよび加齢黄斑変性の治療薬であることを特徴とする、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６】
薬物がステロイド化合物であることを特徴とする、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
ステロイド化合物がベタメタゾン、クロベタゾン、デキサメタゾン、フルオロメトロン（ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｏｌｏｎｅ）、ヒドロコルチゾンまたはプレドニゾロンであることを特徴とする、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
脈絡膜上腔に送達されない薬物と比較して、製剤が眼での薬物の持続的、長期的または調節された放出を提供することを特徴とする、請求項１から７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
挿入部位が強膜と脈絡膜との接合部分付近であることを特徴とする、請求項１から８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０】
液体薬物製剤の少なくとも一部が眼の赤道の後部の眼組織に到達することを特徴とする、請求項１から９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１１】
中空極微針が強膜の表面に９０度の角度で挿入されることを特徴とする、前記の１から１０の請求項のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１２】
極微針の長さが５０〜２０００μｍであることを特徴とする、前記のいずれかの請求項に記載の使用。
【請求項１３】
注入圧が少なくとも２５０ｋＰａであることを特徴とする前記のいずれかの請求項に記載の使用。
【請求項１４】
粒子の直径が２０〜１０００ｎｍであることを特徴とする、請求項３に記載の使用。
【請求項１５】
前記ステロイド化合物がベタメタゾン、クロベタゾン、デキサメタゾン、フルオロメトロン、ヒドロコルチゾン、又はプレドニゾロンである、請求項６に記載の使用。
【請求項１６】
前記眼疾患がブドウ膜炎である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１７】
前記薬物が加齢黄斑変性の治療薬である、請求項１に記載の使用。
【請求項１８】
前記薬物がペガプタニブナトリウム、ラニビズマブ又はベバシズマブである、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
液体薬物製剤を眼の脈絡膜上腔に送達するための装置であって、
先端を有する中空極微針であって、当該極微針を通じて液体薬物製剤を移すことのできる開口部を規定している中空極微針；及び
前記極微針と連結した基部であって、前記極微針の一部が、眼の表面と接触するよう構成された凸状の形状を有する当該基部の端面から延びる、基部
を備え、
当該装置が、前記極微針の突先を眼の強膜内の挿入部位に挿入して、前記端面の一部が前記眼の表面と接触するように構成されており、
当該装置が、前記極微針を経由して、前記液体薬物製剤を前記挿入部位から離れて脈絡膜上腔に注入するよう構成されている、装置。
【請求項２０】
前記装置が少なくとも１５０ｋＰａの圧力で液体製剤を注入するように機能できる、請求項１９に記載の装置。
【請求項２１】
前記液体薬物製剤を収容するための液体貯蔵器であって、前記極微針の開口部と作動可能な形で連結している液体貯蔵器をさらに備える、請求項１９に記載の装置。
【請求項２２】
前記基部から延びる前記極微針の有効長が３００ミクロン〜１０００ミクロンである、請求項１９に記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
連邦政府による資金援助による研究または開発に関する声明
本発明は、国立衛生研究所により付与される契約番号第８  ＲＯ１  ＥＢ００２６０−０３号および契約番号第Ｒ２４ＥＹ０１７０４５−０１のもと、米国政府の支援を受けてなされた。米国政府が本発明には一定の権利を有する。
【０００２】
本発明は、一般には、眼の治療分野に関し、より具体的には、標的を定めた局所薬物送達のための極微針の使用による眼組織への液体製剤の注入に関する。
【背景技術】
【０００３】
目への薬物送達は極めて困難であり、特に高分子の送達および目の裏側への送達は困難である。目の後方部における炎症性疾患および増殖性疾患の多くは、長期の薬物治療を必要とする。かかる疾患の例としては、黄斑変性症、糖尿病性網膜症およびブドウ膜炎が挙げられる。局所適用や全身投与などの従来の送達方法を使って、目の裏側に有効量の薬物を送達するのは難しく、局所適用では有効性が不十分であり、全身投与ではしばしば顕著な副作用が生じる（ＧｅｒｏｓｋｉおよびＥｄｅｌｈａｕｓｅｒ、Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．  Ｖｉｓ．  Ｓｃｉ．  ４１：９６１−６４（２０００））。例えば、点眼薬は、目の外面または目の前面にある組織に影響を及ぼす症状の治療には有用であるが、多種多様な網膜疾患の治療に必要とされる可能性のある、目の裏側には、ほとんど浸透することができない。
【０００４】
従来の針および注射器を使用した、目への直接注射はしばしば有効であるが、職業訓練が必要であり、安全性に関する懸念も生じている（Ｍａｕｒｉｃｅ、  Ｊ．  Ｏｃｕｌ．  Ｐｈａｒｍｏｃｏｌ．  Ｔｈｅｒ．  １７：３９３−４０１（２００１））。また、薬物投与を必要とする目組織部位への治療有効量の薬物を送達するために必要な目への注射治療の回数および／または頻度を最小限に抑えることができることも望ましい。
【０００５】
目の脈絡膜上腔が研究され、脈絡膜上腔への挿管が薬物送達の可能な経路として記述されている。例えば、Ｏｌｓｅｎら、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊ．  Ｏｐｔｈａｍｏｌｏｇｙ  １４２（５）：７７７−８７（２００６年１１月）；Ｉｓｃｉｅｎｃｅ  Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎの国際公開第２００７／１００７４５号。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、眼組織への治療薬の直接送達のためのより優れ、より安全でより効果的な手法を提供することができれば望ましい。また、かかる手法で使うのに役立ち、製造および使用にかかる費用を比較的低く抑えることのできる装置を提供することもできれば望ましい。さらに、強膜、脈絡膜、ブドウ膜、黄斑、毛様体、硝子体および網膜組織に薬物をピンポイントで送達するための方法を提供することができれば望ましい。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
患者の目に薬物を投与するための方法および装置が提供される。該方法は、例えば、ブドウ膜炎、緑内障、糖尿病性黄斑浮腫、加齢黄斑変性症またはサイトメガロウイルス性網膜炎の治療に利用することができる。１つの態様では、該方法は中空極微針を挿入部位で目の強膜に挿入することを含み、該極微針は先端に開口部があり、挿入した極微針を通して、目の脈絡膜上腔へと薬物を含む液体製剤を一定の期間をかけて注入し、その期間中、注入した液体製剤は挿入部位から脈絡膜上腔内へと流れ込む。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１Ａ−１Ｄ】ヒトの目の組織構造の断面図である。目の全体図（１Ａ）、角膜の接近図（１Ｂ）、脈絡膜上腔内に流体がない場合（１Ｃ）または脈絡膜上腔に流体がある場合（１Ｄ）の目の強膜および関係する組織の接近図である。
【図２】１つの実施形態に従う、細長い本体に配置された中空極微針を含む極微針装置の断面図である。
【図３】図２に示した極微針装置の細長い本体の断面図である。
【図４】１つの実施形態に従う、極微針装置の図である。
【図５】１つの実施形態に従う、極微針装置の図である。
【図６Ａ−６Ｂ】中空極微針装置を使って、目の脈絡膜上腔に薬物を送達するためのプロセスの実施形態を示す図であり、この実施形態において、該プロセスは、中空極微針を強膜に挿入することおよび脈絡膜上腔への液体製剤の注入を含む。
【図７Ａ】従来の３０ゲージの皮下注射針の突先と比較した、１つの実施形態に従う中空極微針を示す比較画像である。
【図７Ｂ】目全体に適合するように成形した特注のアクリル型の略図である。
【図８Ａ−８Ｂ】それぞれスルホローダミンの注入の前と後におけるブタの目の矢状断面の明視野顕微鏡画像である。
【図９Ａ−９Ｄ】脈絡膜上腔に何も注入していないブタの目の低温切開片の蛍光透視像（９Ａ）、軸平面で５００ｎｍの蛍光粒子を注入後のウサギの目の低温切開片を示すコラージュして作った全景（９Ｂ）、極微針挿入部位の前部と後部の両方の空間を示すようにコラージュした、矢状方向で５００ｎｍの蛍光粒子を注入後のブタの目の低温切開片の画像（９Ｃ）、ならびに極微針の挿入部位の前部および後部の両方の空間を示すようにコラージュした５００ｎｍの蛍光粒子を矢状方向で注入後のヒトの目の低温切開片の画像（９Ｄ）である。図９Ｂ、図９Ｃおよび図９Ｄの挿入画像は、極微針挿入部位の拡大図である。
【図１０Ａ−１０Ｂ】ブタの目の脈絡膜上腔に注入した１μｍのコントラスト粒子の周辺分布を示すマイクロコンピューター断層画像であり、断面画像（１０Ａ）およびその断面画像をもとに再構成した３次元画像（１０Ｂ）である。
【図１１Ａ−１１Ｄ】注入圧および極微針の長さがブタの目の脈絡膜上腔への粒子の送達の成功率に及ぼす影響を示すグラフであり、送達する粒子が２０ｎｍの場合（１１Ａ）、１００ｎｍの場合（１１Ｂ）、５００ｎｍの場合（１１Ｃ）および１０００ｎｍの場合（１１Ｄ）である。
【図１２Ａ−１２Ｂ】極微針の挿入部位の前部および後部の両方の空間を示すようにコラージュした、２０ｎｍ粒子（１２Ａ）および１０００ｎｍ粒子（１２Ｂ）を矢状方向で注入後のブタの目の低温切開片の蛍光透視像である。図１２Ａおよび図１２Ｂの挿入画像は、極微針の挿入部位の拡大画像である。
【図１３Ａ−１３Ｂ】１８ｍｍＨｇ（１３Ａ）および３６ｍｍＨｇ（１３Ｂ）の眼内圧をかけて刺激した場合の１０００ｎｍ粒子の脈絡膜上腔送達の成功率に対する眼内圧および極微針の長さが及ぼす影響を示すグラフである。
【図１４】脈絡膜上腔にフルオレセインナトリウムを注射後に撮影したウサギの目の１次元視野走査であり、ｘ軸は裏（０）から正面（１６０）までの目の位置を表し、ｙ軸はその位置における蛍光強度を表している。
【図１５】脈絡膜上腔からのフルオレセインナトリウムの経時的な除去率を示すグラフである。
【図１６】脈絡膜上腔からの２０ｎｍ粒子の経時的な除去率を示すグラフである。
【図１７】脈絡膜上腔からの５００ｎｍ粒子の経時的な除去率を示すグラフである。
【図１８】１つの実施形態に従って、目に薬物を投与するための方法のブロック図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
目に薬物を送達するための有効な薬物送達システムは、以下の４つの一般的な特徴を実現することが望ましい：第一に、侵襲性が最小限であり、安全でなければならない；第二に、薬物は目的の組織を十分に標的化し、目の他の領域への暴露が制限される形で投与されなければならない；第三に、薬物の制御送達または持続送達が可能でなければならない；および第四に、できるだけ使用が簡単でなければならない。ここに記述する実施形態は、目への薬物送達を向上するための極微針装置および使用方法を提供することによりこれらの必要に対応する。
【００１０】
本明細書に記載する方法の有益性が高く、典型的な実施形態の１つでは、薬物の送達は、極微針を強膜に注射（挿入）し、挿入した極微針を通して、目の脈絡膜上腔に製剤を注射（注入）することにより達成される。極微針は、脈絡膜上腔に薬物を精密に送達し、それに続いて治療を必要とする近傍組織に薬物が局所送達できるようにすることができる。薬物は注入された容量から（例えば、その中の微小粒子から）、長期間、例えば、極微針が挿入されて、引き抜かれた数時間後、数日後、数週間後、数ヶ月後などに目組織に放出されることが可能である。これは、例えば、眼組織表面への製剤の局所適用による送達と比較して、薬物のバイオアベイラビリティを有益に向上することができる。本発明の極微針を使うことにより、本方法は、有利にも、脈絡膜上腔内に、または強膜内だが、注入した液体製剤が脈絡膜上腔に流れ込むのに十分なだけ脈絡膜上腔の近くに極微針の突先が配置されるように眼組織への挿入深度を精密に制御することを含む。これは脈絡膜および網膜組織などの下層組織に接触することなく、有利に達成され得る。
【００１１】
極微針は従来の針によるアプローチよりも優れた、侵襲性を最小限に抑えた方法でこの送達を行うことを可能にする。例えば、本発明の極微針は、強膜に対して垂直に挿入できるので、短い浸透距離で脈絡膜上腔に到達することができ、有利である。強膜およびその他の眼組織を通過する、より長い浸透経路を取り、脈絡膜上腔に急角度で接近しなければならない長い従来の針またはカニューレの場合、刺入経路のサイズが増加し、結果として感染および／または血管破裂の危険を増大してしまうが、本発明の極微針はそれらと対照的である。従来の長い針では、挿入深度を精密に制御する機能は、本明細書に記載する極微針と比較すると減少する。
【００１２】
脈絡膜上腔への薬物の送達は、これまでに知られている針装置に比べて、より長い組織領域に渡り、単回投与でより標的化するのが難しい組織に液体製剤を送達することを可能にするので、有利である。特定の理論に拘束されることを望まないが、脈絡膜上腔に入ると、液体製剤は挿入部位から後眼部にある網膜脈絡膜組織、黄斑および視神経に向って周辺に、ならびにブドウ膜および毛様体に向って前方に流れると信じられている。さらに、注入した液体製剤の一部は、極微針の挿入部位近傍の強膜に留まり、後に脈絡膜上腔に、そしてその後、他の隣接組織に分布できる製剤の追加の蓄えとしての役割を果たすことができる。
【００１３】
本明細書で使用される「脈絡膜上腔」という用語は、脈絡上板（上脈絡膜層または上脈絡膜層）と同義であり、強膜および脈絡膜の間に存在する目の領域内の潜在的な空間を指す。この領域は主に、２つの隣接する組織の各々から派生する長い有色素プロセスの緻密な層から成る；ただし、脈絡膜上腔および隣接組織に流体またはその他の物質が蓄積した結果として、この領域に空間が生じる可能性がある。当業者は、目の何らかの病状のために、または何らかの外傷もしくは外科的介入の結果として蓄積される流体、脈絡膜上腔はしばしば拡張されることを理解するであろう。しかし、本明細書の記載では、流体の蓄積は、製剤を上脈絡膜層に注入して（製剤で満たされる）脈絡膜上腔を作り出すことにより意図的に作り出される。特定の理論に拘束されることは望まないが、この領域は、ブドウ膜強膜流出（すなわち、液体を目の１つの領域から他の領域へと移動させる目の自然のプロセス）の通路としての役割を果たし、強膜から脈絡膜剥離が起きた場合には、本当の空間になると信じられている。
【００１４】
極微針の使用方法
【００１５】
本明細書に記載する極微針装置は、特に眼疾患の治療、診断または予防を目的として、患者の目に製剤を送達するために使用することができる。好ましい実施形態においては、患者は治療を必要とするヒトの患者である。患者は成人または子供とすることができる。他の実施形態においては、患者はヒト以外の哺乳動物とすることができる。
【００１６】
広範な眼疾患および障害を、本明細書に記載する方法および装置を使って治療することができる。眼疾患の例としては、以下に限定されないが、ブドウ膜炎、緑内障、糖尿病性黄斑浮腫または網膜症、黄斑変性症および遺伝性疾患が挙げられる。本明細書に記載する方法は、目の後方部、例えば、後眼部の網脈絡膜組織、黄斑および視神経に投与の必要がある薬物の局所送達に特に有用である。１つの実施形態においては、本明細書に記述する送達方法および装置は、遺伝子治療の用途に利用してもよい。例えば、該方法は液体製剤を脈絡膜上腔に投与して、標的の眼組織に選択したＤＮＡ、ＲＮＡまたはオリゴヌクレオチドを送達することもあり得る。
【００１７】
極微針は、目または近隣組織の特定の組織もしくは領域を標的として送達を行う目的で使用することができる。様々な実施形態において、本方法は治療を必要とする強膜、脈絡膜、ブルッフ膜、網膜色素上皮、網膜下腔、網膜、黄斑、視神経円板、視神経、毛様体、小柱網、房水,硝子体液およびその他の眼組織または近隣組織への特定的な薬物送達を目的とすることができる。
【００１８】
本明細書に用いられる「眼組織」および「目」１０は、図１Ａに描かれているように、前眼部１２（すなわち、水晶体の前にある目の部分）および後眼部１４（すなわち、水晶体の後ろにある目の部分）の両方を含む。前眼部１２は、角膜１６および水晶体１８により境界を区切られ、後眼部１４は、強膜２０および水晶体１８によって境界を区切られる。前眼部１２はさらに虹彩２４と角膜１６の間にある前眼房２２および水晶体１８と虹彩２４との間にある後眼房２６に細分される。前眼部１２上の強膜２０の露出部分は、結膜（示されていない）と呼ばれる透明な膜で保護されている。強膜２０の下部には、網膜脈絡膜組織と総称される、脈絡膜２８および網膜２７が存在する。脈絡膜２８と強膜２０との間にある緩い結合組織、すなわち潜在的な空間は脈絡膜上腔（示されていない）と呼ばれる。図１Ｂは角膜１６を示すもので、角膜１６は上皮３０、ボーマン膜３２、支質３４、デスメ膜３６および内皮３８から構成される。図１Ｃおよび図１Ｄは、周囲のテノン鞘４０または結膜４１、脈絡膜上腔４２、脈絡膜２８および網膜２７と一緒に強膜２０を、それぞれ脈絡膜上腔に流体がない場合とある場合の両方について示している。
【００１９】
目に薬物を投与する方法は、一般に、強膜に中空極微針を挿入し、続いて中空極微針を通して、目の脈絡膜上腔へと液体製剤を注入することから成る。
【００２０】
挿入
【００２１】
１つの実施形態において、挿入部位は目の赤道と縁との間である。もう１つの実施形態において、挿入部位は目の縁の後部約２ｍｍから約１０ｍｍの間である。実施形態において、極微針の挿入部位は目の赤道におよそ位置する。もう１つの実施形態においては、挿入部位は目の赤道と目の縁との間である。もう１つの実施形態において、挿入部位は目の縁の後部２ｍｍから１０ｍｍである。もう１つの実施形態において、製剤は注射部位（すなわち、極微針の突先の位置）において脈絡膜上腔に導入された後、注射が行われている最中に、脈絡膜上腔を通って注射部位から流れ出す。もう１つの実施形態において、注射部位（すなわち、極微針の突先の位置）は目の赤道の前部であり、少なくとも製剤の一部は、注射の最中（すなわち、製剤が極微針から引き続き流れ出している間）に、目の赤道の後部に流れ込む。もう１つの実施形態において、注射部位（すなわち、極微針の突先の位置）は目の赤道の前部であり、少なくとも製剤の一部は、注射の最中（すなわち、製剤が極微針から引き続き流れ出している間）に、黄斑の近くに流れ込む。
【００２２】
重要なことに、眼組織の極微針の挿入深度は精密に制御される。様々な方法を使って、本明細書に記述される極微針の挿入深度を制御することができる。特定の実施形態において、挿入深度は極微針の選択長または有効長によって制限される。「有効長」は、組織挿入に利用可能な部分、すなわち、基部から延び、仮に組織変形がゼロであるとするならば、挿入される長さである；極微針のうち、基部に向って延びるまたは基部を通って延び、したがって組織に挿入することのできない近位部は一切無視する。すなわち、極微針は、所望の浸透深度とほぼ等しい長さを有することもあり得る。１つの実施形態において、極微針は、極微針の突先が実質的に強膜の基部（すなわち、強膜と脈絡膜との接合部分付近）に、強膜を完全に貫通することなく、挿入できるだけ短い。もう１つの実施形態において、極微針の突先は、脈絡膜を貫通することなく、強膜を通って脈絡膜上腔に挿入される。
【００２３】
もう１つの実施形態において、極微針は所望の浸透深度より長い長さを有するように作られるが、極微針は組織に途中までだけが挿入されるように制御される。部分挿入は、極微針の挿入プロセスの間に、曲がったり、窪んだりする組織の機械的性質によって制御することができる。このようにして、極微針が組織に挿入されると、その動きは組織を部分的に弾性的に変形し、組織に部分的に浸透する。組織が変形する程度を制御することにより、組織への極微針の挿入深度を制御することができる。
【００２４】
追加の挿入制御機能については、下記の「使用方法における極微針の動きを指示するための制御機能」の節に記述する。
【００２５】
もう１つの実施形態においては、極微針は回転／ドリリング技法および／または振動動作を使って組織に挿入される。このようにして、例えば組織の所望の深度に相当する所望の回転数だけ極微針をドリリングするなどにより、極微針を所望の深度まで挿入することができる。極微針のドリリングについては、本明細書に参照により組み込むＷａｎｇらの米国特許出願公開第２００５０１３７５２５  Ａ１号を参照されたい。回転／ドリリング技法および／または振動動作は、挿入ステップ、引き抜きステップ、または両方に適用することができる。
【００２６】
注入
【００２７】
好ましい実施形態においては、圧力勾配（例えば、ポンプ機能、注射器）を利用して製剤を貯蔵器から眼組織へと駆動することにより、液体製剤は中空極微針を通じて脈絡膜上腔に注入される。その他の実施形態では、製剤は電界（例えば、イオン泳動など）または別の外部から加えられるエネルギー（例えば、超音波／音響エネルギー）を使って貯蔵器から眼組織へと駆動されることができる。
【００２８】
１つの実施形態において、挿入した極微針から脈絡膜上腔に注入される液体製剤の量は、１０μＬから２００μＬ、例えば、５０から１５０μＬである。もう１つの実施形態において、約１０μＬから約５００μＬ、例えば、５０から２５０μＬが、極微針を通じて脈絡膜上腔に注入される。
【００２９】
１つの実施形態において、極微針を通じて液体製剤を注入する駆動力または駆動圧によって、投与プロセスの間（すなわち注入中）、注入された液体製剤は脈絡膜上腔の内部を流れ、目の裏側に到達する。これは、１秒から１００秒、例えば１０から３０秒のような、１分または２分より短い時間で行われることができる。１つの態様において、液体製剤は、注入プロセスの間、挿入部位から少なくとも２．５ｍｍ離れた部位、挿入部位から少なくとも５ｍｍ離れた部位、または挿入部位から少なくとも１０ｍｍ離れた部位に、脈絡膜上腔内で周囲に向って流れることが望ましい。液体製剤は脈絡膜上腔内で挿入部位から目の裏側（すなわち、後眼部の網脈絡膜組織、黄斑および視神経）へと周囲に向って流れることが望ましい。
【００３０】
眼組織内に送達される薬物の量も、部分的には、使用される極微針の種類およびその使用方法によって制御することができる。１つの典型的な実施形態では、中空極微針は眼組織に挿入され、挿入後、薬物液を送達するために眼組織から徐々に回収され、所定の投与量を達成した後は、圧力（例えば、注射器などの機械的装置からの圧力）または電界などの、流体の駆動力を停止することにより、薬物の漏れ／制御されない送達を回避して、送達を中止することができる。送達される薬物の量は、適切な注入圧で液体製剤を駆動することにより制御されることが望ましい。特定の実施形態では、注入圧は少なくとも１５０ｋＰａ、少なくとも２５０ｋＰａまたは少なくとも３００ｋＰａである。適切な注入圧は、個々の患者または種によって異なる可能性がある。
【００３１】
しかし当業者は、適切な量の液体製剤を送達するための所望の注入圧は、極微針の挿入深度および液体製剤の組成による影響を受け得ることを理解するであろう。例えば、目に送達するための製剤が、活性薬剤または微小気泡を封入するナノ粒子または微小粒子の形態であるか、またはそれらを含む実施形態では、比較的高い注入圧が必要とされる可能性がある。ナノ粒子または微小粒子の封入技法は、当業で周知である。
【００３２】
追加の注入制御機能については、下記の「極微針を通じた輸送の制御」の節で記述する。
【００３３】
１つの実施形態において、目に薬物を投与する方法は、挿入ステップの後、製剤の注入前および／または製剤の注入中に、中空極微針を部分的に回収することをさらに含むこともある。具体的な実施形態において、極微針の部分回収は、液体製剤を眼組織に注入するステップの前に行われる。この挿入／回収ステップは、ポケットを形成し、液体製剤が極微針の突先部の開口部の部分で、眼組織により妨害されることなくまたはあまり妨害されずに、極微針から流れ出ることを可能にし、有益である。このポケットには、製剤を満たすことができるが、液体製剤が極微針から、ポケットを通って脈絡膜上腔へと流れるためのコンジットとしての役割も果たす。図６Ａは、強膜２０に挿入された中空極微針１３０を示しており、製剤１３１は極微針内の中空の開口部に一時的に配置される（液体製剤の容器に通じる液体輸送路は示されていない）。図６Ｂは、極微針１３０を部分的に回収して、液体製剤１３１を脈絡膜上腔に注入した後の極微針１３０を示している。矢印は脈絡膜上腔を通過する製剤の周囲への流れを示している。
【００３４】
ある具体的な実施形態では、極微針は、１つまたは複数の眼組織または近隣組織への制御した（すなわち、一定の時間に渡って持続的、長期的または調節した）薬物放出のために、製剤を強膜を通じて脈絡膜上腔に注入する。この「持続的放出」または「長期的放出」または「調節した放出」は、一般に、眼組織に製剤を局所適用することで得られるよりも長期に及ぶ。ある具体的な実施形態では、少なくとも１本の極微針が眼組織から引き抜かれた後に、製剤の長期的、持続的または調節した放出が起きる。この送達方法は眼組織の場合、特に有益になりえる。経皮的な極微針パッチの塗布の場合、患者が不快を感じずに、長期間に渡って（極微針を挿入した状態で）パッチを塗布したままでいられる可能性があるが、それとは対照的に、眼組織では、患者の不快を最小限に抑えるために、できる限り短期間で挿入および回収プロセスを行うことが望ましいためである。
【００３５】
その他のステップ、実施形態および適用
【００３６】
もう１つの態様において、患者の目に薬物を投与する方法は、極微針の挿入および／または液体製剤の注入をモニタリングし、液体製剤が脈絡膜上腔に精密に送達されることを確実にすることを含む（図１８）。かかるモニタリングは、以上のステップの１つまたは複数のステップの間、画像誘導フィードバック方法を使って達成することができ、その例としては、以下に制限されないが、従来の顕微鏡検査、ＭＲＩ、Ｘ線、共焦点顕微鏡法、眼球コヒーレンス・トモグラフィー（例えば、前眼部光コヒーレンス・トモグラフィー、ハイデルベルグ網膜トモグラフィー、スペクトル領域光コヒーレンス・トモグラフィー）、蛍光眼底血管造影法、インドシアニングリーン蛍光眼底撮影法、高解像度立体眼底撮影法、自己蛍光イメージング、超広角視野イメージング、および様々な超音波技法が挙げられる。したがって、本方法は、液体製剤の初期注入が目の脈絡膜上腔へと、挿入部位から離れる方向に流れたかどうかを判定することがさらに含まれることもあり得る。初期注入が成功だったと判定された場合は、所望の容量の液体製剤を注入し、圧力などの液体の駆動力を除去することにより、注入を中止して、極微針を目から回収することができる。しかし、液体製剤の初期注入が失敗だった（すなわち、目の脈絡膜上腔へと、挿入部位から離れる方向に製剤がほとんど流れていなかった）と判定された場合は、極微針を配置し直して、送達に成功するまでプロセスを繰り返すことができる。
【００３７】
該方法が強膜を貫通することなく、少なくとも第２の極微針を強膜に挿入することをさらに含むように、極微針は、選択によっては、複数の極微針の配列の一部とすることもできる。複数の極微針の配列を眼組織に挿入する１つの実施形態では、複数の極微針の各々の製剤は、薬物、製剤形態、製剤の容積／容量またはこれらのパラメタの組合せにおいて互いに同一であっても、異なっていてもよい。１つの事例において、異なる種類の製剤を１つまたは複数の極微針を介して注射することができる。例えば、第２の製剤を含む第２の中空極微針を目組織に挿入することは、第２の製剤を眼組織に送達することになる。
【００３８】
本明細書に記載する極微針装置は、液体、組織、分子試料などの物質を目から除去する目的に適合化することができる。
【００３９】
しかし、当業者は他の種類の極微針（例えば、ソリッドな極微針）および製剤を眼組織に送達するその他の方法を本明細書に記述する注入方法の代用または本明細書に記述する注入方法と併用して利用することができることを理解するであろう。非制限的な例としては、少なくとも部分的に、製剤のコーティングを溶解させて極微針から除去する；少なくとも部分的に、製剤のコーティング（例えば、実質的に無傷のスリーブとしてまたは断片で）極微針から外す；極微針が一体化して形成されている基部または連結されている基部から極微針を折るまたは溶解させて外す；これらの任意の組合せがある。
【００４０】
本明細書に記載する極微針装置は、１つまたは複数の極微針を、分析物、電気的活性および光またはその他の信号を検知するためのセンサーとして使用するように適合化することもできる。センサーは圧力、温度、化学物質および／または電磁場（例えば、光）のセンサーを含むこともできる。バイオセンサーは極微針上もしくは極微針の内部、または極微針を介して身体組織と交信する装置の内部に配置することができる。極微針バイオセンサーは、主要な４つのクラスの変換器、すなわち電位差測定、電流測定、光学および生理化学的のいずれの変換器にすることもできる。１つの実施形態では、中空極微針は、対応づけられた検知機能を備えたゲルなどの物質で満たされる。物質との結合または酵素により媒介される反応に基いた検知の用途では、基質または酵素は針の内部で固定化することができる。もう１つの実施形態においては、光を特定の場所に導く目的、または、例えば、色の評価のためにｐＨ染料などの手段を使った検知の目的のために、導波管を極微針装置に組み込むことができる。同様に、特定の組織を直接刺激、破壊もしくは治療するため、または診断目的のために、熱、電気、光、超音波またはその他のエネルギー形態を精密に発信することもできる。
【００４１】
極微針装置
【００４２】
極微針装置は中空極微針を含む。該装置は極微針の近位端を収容するための細長いハウジングを含むこともできる。該装置は極微針を通して液体製剤を導くための手段をさらに含むこともできる。例えば、該手段は極微針の基部または近位端と流体接続している軟性または硬性のコンジットとすることができる。該手段は、装置を通る流体の流れを誘導するための圧力勾配を作り出すためのポンプまたはその他の装置を含むこともできる。該コンジットは液体製剤の貯蔵器と動作可能な形で連結していてもよい。貯蔵器は任意の適切な容器とすることができる。１つの実施形態において、貯蔵器は従来の注射器の形態であってもよい。貯蔵器は使い捨ての単位容量容器であってもよい。
【００４３】
極微針
【００４４】
本明細書に用いられる「中空」という用語は、極微針の中心を通る単一の直線状の開口部、ならびに複数の開口部、極微針を通る複雑な経路を辿る開口部、開口部（単数または複数）からの複数の入口点および出口点、ならびに開口部の交差およびネットワークを含む。すなわち、中空極微針は極微針の基部から、基部から遠位にある極微針のシャフトおよび／または先端部内の出口点への１つまたは複数の連続した経路を含む構造を有する。
【００４５】
本明細書に用いられる「極微針」という用語は、基部、シャフトならびに強膜およびその他の眼組織への挿入に適した先端を有するコンジット本体を指し、本明細書に記述されるように、侵襲性を最小限に抑えた挿入および液体製剤注入に適した寸法を有する。すなわち、極微針は２０００ミクロンを超えない長さまたは有効長および５００ミクロンを超えない幅（または直径）を有する。
【００４６】
様々な実施形態において、極微針は約５０μｍから２０００μｍの長さを有することができる。別の特定の実施形態において、極微針は約１５０μｍから約１５００μｍ、約３００μｍから約１２５０μｍ、約５００μｍから約１２５０μｍ、約７００μｍから約１０００μｍ、または約８００μｍから約１０００μｍの長さを有することができる。好ましい実施形態において、極微針の長さは約１０００μｍである。様々な実施形態において、極微針の近位部は、最大幅または断面寸法が約５０μｍから５００μｍ、約５０μｍから約４００μｍ、約１００μｍから約４００μｍ、約２００μｍから約４００μｍ、または約１００μｍから約２５０μｍであり、開口直径は約５μｍから約４００μｍである。特定の実施形態において、極微針の近位部の最大幅または断面寸法は約４００μｍである。しかしながら、極微針の突先が斜めになっている実施形態では、開口直径は極微針の近位部の外径より大きくなる可能性があることを、当業者は理解するであろう。極微針は縦横比（幅：縦）が約１：１．５から約１：１０となるように製造することができる。他の長さ、幅および縦横比も想定される。
【００４７】
極微針は直線状または先細のシャフトを有することができる。１つの実施形態において、極微針の直径は極微針の基端で最大になり、基部に対して遠位端の地点まで次第に細くなっていく。極微針は直線（すなわち、先細りしない）部分および先細り（すなわち斜め）部分の両方を含むシャフトを有するように製造することもできる。極微針は、垂直面に円形の断面を有するシャフトを備えるように形成することが可能であり、断面は円形以外にすることもできる。極微針の突先部は多種多様な構成とすることが可能である。極微針の突先は、シャフトの縦軸を中心に対称とすることも、非対称とすることもできる。先端は斜めにする、先細りにする、方形にする、または丸くすることができる。特定の実施形態において、極微針は、極微針の突先部だけが極微針のうち、眼組織に実質的に挿入される部分になるように設計することができる（すなわち、先端部が極微針の全長の７５％を超える、極微針の全長の８５％を超える、または極微針の全長の約９５％を超える）。その他の特定の実施形態において、極微針は、極微針の突先部が極微針のうち、眼組織に挿入されるただの一部分となり、一般に、極微針の全長の約７５％未満、極微針の全長の約５０％未満または極微針の全長の約２５％未満になるように設計することもできる。例えば、１つの実施形態において、極微針の有効全長は５００μｍから１０００μｍであり、先端部の長さは、約４００μｍ未満、約３００μｍ未満、または約２００μｍ未満である。
【００４８】
基部
【００４９】
極微針は基部から延びる。基部は極微針と一体化させることも、極微針から独立させることもできる。基部は硬性または軟性とすることができる。基部はほぼ平面とするか、例えば、注射部位で眼組織表面の形状に曲線化する、または例えば基部と眼組織との接触を最小限に抑えるために、眼表面から遠ざかるように曲線をつける（例えば、凸状）ことができる。基部は挿入地点で眼の表面との接触が最小になるような形状とすることが望ましい。例えば、１つの実施形態において、基部はほぼ垂直な極微針シャフトから最小距離だけ延びてもよい。もう１つの実施形態において、基部は、眼組織の屈曲を相殺し、極微針の眼組織への挿入を容易にするために、極微針に向って眼組織を持ち上げるような形状にすることができる（例えば、基部は眼組織を「つまむ」ために、極微針から極微針の突先部に延びてもよい）。かかる実施形態のいくつかは、参照によりその関係する開示が本明細書に組み込まれる、米国特許第６７４３２１１号に記載された装置の少なくとも一部をもとにすることができる。
【００５０】
特定の実施形態において、極微針装置は１本の極微針を有する。図５に示した１つの実施形態において、極微針装置１３０は、凸状基部１３２およびそこを通して液体製剤（示されていない）を目に送達するか、または眼から体液を抜くことができる開口部１４０を有する中空極微針１３４を含む。中空極微針１３４は近位部１３６および先端部１３８を含む。
【００５１】
極微針は、眼への挿入に適した任意の角度で極微針の基部から延びることができる。特定の実施形態において、極微針は、目の表面への極微針の挿入がほぼ垂直になるように、約９０度の角度で基部から延びる。別の特定の実施形態では、極微針は約６０から約９０度の角度で基部から延びる。
【００５２】
極微針配列
【００５３】
代替実施形態において、該装置は複数の極微針から成る配列を含む。例えば、該装置は、２から１０００本（例えば、２から１００本）の極微針から成る配列を含んでもよい。１つの実施形態において、装置は１本から１０本の極微針を含むことができる。極微針の配列には、異なる極微針が混ざりあって含まれていてもよい。例えば、配列は長さ、基部の直径、先端部の形状、極微針と極微針との間隔、薬物のコーティングなどが種々様々な極微針を含んでいてもよい。極微針装置が複数の極微針の配列を含む実施形態では、１本の極微針が基部から延びる角度は、同じ配列内にある別の極微針が基部から延びる角度とは無関係とすることができる。
【００５４】
典型的な装置
【００５５】
図２から５は、極微針装置の典型的な実施形態を示している。図２から３に示す１つの実施形態において、極微針装置１１０は、そこを通して液体製剤（示されていない）を目に送達するか、または眼から体液を抜くことができる開口部１４０を有する中空極微針１１４を含む。極微針は近位部１１６および先端部１１８を含む。極微針１１４は、基部から延びることができ、基部は極微針の近位部１１６および先端部１１８が延びる起点となる遠位端を有する、例えば細長い本体１１２を含む。細長い本体は、基部１１２の遠位端を越えて延びる極微針の基部部分を固定するための手段１１１、例えば、ネジまたはピンなどをさらに含むこともできる。図３に、極微針を固定するための細長い本体１１２の典型的な実施形態を示すが、キャップ部１１３および中空開口部１１７を有する基部１１５が含まれている。細長い本体１１２のキャップ部１１３および基部１１５は、望ましくは、細長い本体のキャップ部から突き出す針の長さ（すなわち、基部１１２から延びる極微針の近位部および先端部）を手動で調節するための手段を含む。このような手段は、例えば、キャップ部１１３を細長い本体の基部１１５にネジで取り付けたり、取り外したりできるようにするネジ山１１９を含むこともできる。図４に示す典型的な実施形態では、細長い本体の基部１１５は、極微針を通じた脈絡膜上腔への液体製剤の制御された注入のために、作動装置１２０に操作可能な形で連結していてもよい。
【００５６】
極微針装置は液体製剤を収容するための液体貯蔵器をさらに含むことができ、液体製剤貯蔵器は極微針の突先の端部に対して遠位の位置にある極微針の開口部と操作可能な形で連絡している。液体貯蔵器は極微針と一体化していても、細長い本体と一体化していても、または極微針および細長い本体のどちらからも独立していてもよい。
【００５７】
極微針の製造
【００５８】
極微針は、金属、ガラス、半導体物質、セラミックまたはポリマーを含め、異なる生体適合性材料から形成／構成することができる。適切な金属の例としては、医薬品グレードのステンレス鋼、金、チタン、ニッケル、鉄、金、スズ、クロム、銅およびこれらの合金が挙げられる。ポリマーは生分解性または非生分解性とすることができる。適切な生体適合性がある生分解性ポリマーの例としては、ポリラクチド、ポリグリコライド、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）共重合体（ＰＬＧＡ）、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリエーテルエステル、ポリカプロラクトン、ポリエステルアミド、ポリ酪酸、ポリ吉草酸、ポリウレタンならびにこれらの共重合体および混合物が挙げられる。代表的な非生分解性ポリマーには、医療機器の製造で知られている様々な熱可塑性物質またはその他の重合構造物質が含まれる。例としては、ナイロン、ポリエステル、ポリカーボネート、ポリアクリレート、エチレン酢酸ビニルのポリマーおよびその他のアクリル置換酢酸セルロース、非生分解性ポリウレタン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニル、ポリビニルイミダゾール、クロロスルホネートポリオレフィン、ポリエチレンオキシド、これらの混合物および共重合体がある。生分解性の極微針は、たとえ誤って折れて眼組織に入った場合でも、基本的に無害になるように、非生分解性の極微針と比較してより高いレベルの安全性を提供することができる。
【００５９】
極微針は、当業で公知または以下の実施例に記述する多種多様な方法によって製造することができる。１つの実施形態において、中空極微針はレーザーまたは同様の光エネルギー源を使って製造される。１つの例において、レーザーを使って、目的の極微針長を表すようにマイクロカニューレを切断することができる。レーザーは単一または複数の開口部を先端に形作るために使用してもよい。単一または複数のカットを単一のマイクロカニューレに実施して、所望の極微針構造を形作ってもよい。１つの例では、マイクロカニューレはステンレス鋼などの金属から製造し、光スペクトルの赤外線領域の波長（０．７〜３００μｍ）でレーザーを使って切断することができる。当業者にはよく知られている金属電解研磨法を使ってさらなる改良を加えることもできる。もう１つの実施形態においては、極微針の長さおよび任意のベベルを物理的な研削プロセスによって形成され、該プロセスは例えば、金属カニューレを移動する研磨面にあてて、研削することが含まれる場合もある。製造プロセスは、極微針の所望の精密な先端の形状を形成するために、精密研削、ミクロビーズのジェット噴射法および超音波洗浄をさらに含むこともできる。
【００６０】
可能な製造技法のさらなる詳細は、例えば、Ｒａｊｕらの米国特許出願公開第２００６／００８６６８９  Ａ１号、Ｋｉｍら米国特許出願公開第２００６／００８４９４２号、Ｙｕｚｈａｋｏｖら米国特許出願公開第２００５／０２０９５６５号、Ｐａｒｋらの米国特許出願公開第２００２／００８２５４３  Ａ１号、Ａｌｌｅｎらの米国特許第６，３３４，８５６号、Ｐｒａｕｓｎｉｔｚらの米国特許第６，６１１，７０７号、Ｐｒａｕｓｎｉｔｚらの米国特許第６，７４３，２１１号に記述されており、それらのすべては、それぞれの極微針製造技法の開示について、本明細書に参照により組み込まれる。
【００６１】
液体製剤
【００６２】
液体製剤は、液体薬、適切な溶媒に薬物を含む溶液または液体懸濁液の形態にすることができる。液体懸濁液は、注入のための適切な液体ビヒクルに分布した微小粒子またはナノ粒子を含むことができる。様々な実施形態において、薬物は液体ビヒクル、微小粒子もしくはナノ粒子、またはビヒクルと粒子の両方で含まれてもよい。液体製剤は、脈絡膜上腔に向っておよび脈絡膜上腔内で流れるのに十分なだけ流体である。好ましい実施形態においては、液体製剤の粘度は３７℃にて約１ｃＰである。
【００６３】
本発明の極微針装置および方法を使って、眼組織に送達するように、広い範囲の薬物を調製することができる。本明細書に用いられる「薬物」という用語は、基本的に任意の予防薬、治療薬または診断薬、すなわち、医療用、獣医学用または化粧用途に有用な成分を指す。薬物は適切なタンパク質、ペプチドおよびそれらの断片から選択され、それらは天然に発生すること、合成されること、または遺伝子組み換えによって生成されることができる。薬物は適切なオリゴヌクレオチド（例えば、アンチセンス・オリゴヌクレオチド剤）、ポリヌクレオチド（例えば、治療用ＤＮＡ）、リボザイム、ｄｓＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ＲＮＡｉ、遺伝子治療ベクター、および／または治療用途向けのワクチンから選択することができる。薬物はアプタマー（例えば、特定の標的分子に結合するオリゴヌクレオチドまたはペプチド）であってもよい。
【００６４】
眼組織に送達する薬物の種類の代表的な例としては、抗生物質、抗ウイルス剤、鎮痛剤、麻酔薬、抗ヒスタミン剤、抗炎症薬および抗腫瘍薬が挙げられる。具体的な薬物および薬物のクラスの例としては、以下に限定されないが、β−アドレナリン受容体拮抗薬（例えば、カルテオロール、セタモロール、ベタキソロール、レバブノロール、メチプラノロール、チモロール）、縮瞳薬（例えば、ピロカルピン、カルバコール、フィゾスチグミン）、交感神経様作用薬（例えば、アドレナリン、ジピベフリン）、炭酸脱水酵素阻害薬（例えば、アセタゾラミド、ドルゾラミド）、プロスタグランジン、抗菌剤および抗真菌を含む抗菌性化合物（例えば、クロラムフェニコール、クロルテトラサイクリン、シプロフロキサシン、フラマイセチン、フシジン酸、ゲンタマイシン、ネオマイシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、ポリミキシン、プロパミジン、テトラサイクリン、トブラマイシン、キノリン）、抗ウイルス性化合物（例えば、アシクロビア、シドフォビル、イドクスウリジン、インターフェロン）、アルドース還元酵素阻害薬、抗炎症および／または抗アレルギー化合物（例えば、ベタメタゾン、クロベタゾン、デキサメタゾン、フルオロメトロン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾロンなどのステロイド化合物およびアンタゾリン、ブロムフェナク、ジクロフェナク、インドメタシン、ロドキサミド、スプロフェン、カロモグリク酸ナトリウムなどの非ステロイド化合物）、人工涙液／ドライアイ治療薬、局所麻酔薬（例えば、アメソカイン、リグノカイン、オキシブプロカイン、プロキシメタカイン）、シクロスポリン、ジクロフェナク、ウロガストロンおよび上皮成長因子などの成長因子、散瞳薬および毛様体筋麻痺薬、マイトマイシンＣおよびコラゲナーゼインヒビターおよびペガプタニブナトリウム、ラニビズマブおよびベバシズマブなどの加齢黄斑変性の治療薬が挙げられる。
【００６５】
特定の実施形態において、薬物は、Ａｄａｍｉｓの米国特許第６，５２４，５８１号に記載されている、インテグリンアンタゴニスト、セレクチンアンタゴニスト、接着分子アンタゴニスト（例えば、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）−１、ＩＣＡＭ−２、ＩＣＡＭ−３、血小板内皮細胞接着分子（ＰＣＡＭ）、血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）または白血球接着を誘導するサイトカインまたは増殖因子アンタゴニスト（例えば、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１６（ＩＬ−１６）、単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）および血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ））であってよい。他の特定の実施形態において、薬物は、Ｔｈｉｅｌらの米国特許第６，７７３，９１６号に記述されている、Ｆｖ免疫グロブリンフラグメント、ミニボディ（minibodies）などのサブ−免疫グロブリン抗原結合分子とすることができる。もう１つの実施形態において、薬物は、造影剤などの、当業で公知の診断薬とすることができる。
【００６６】
薬物は、通常、保管および本明細書に記載の極微針装置を通じた送達に合わせて製造する必要がある。「製剤」は薬物の処方であり、通常、当業で公知の薬学的に許容可能な１つまたは複数の賦形剤が含まれる。「賦形剤」という用語は薬物の取扱い、安定性、分布性、湿潤性、放出動態および／または注射を容易にすることを目的とした製剤中の任意の非活性成分を指す。１つの実施形態において、賦形剤は水もしくは塩水を含有または水または塩水から構成されてもよい。
【００６７】
１つの実施形態において、液体製剤は微小粒子またはナノ粒子を含み、そのいずれも少なくとも１つの薬物を含む。微小粒子またはナノ粒子は、眼組織への薬物の制御した放出を提供することが望ましい。本明細書に用いられる用語「微小粒子」は、数平均径が１から１００μｍ、最も好ましくは１から２５μｍのミクロスフェア、マイクロカプセル、微小粒子およびビーズを包含する。「ナノ粒子」という用語は、数平均径が１から１０００ｎｍの粒子を指す。微小粒子は形状が球体であってもなくてもよい。「マイクロカプセル」は別の物質の中心部を囲む外殻を有する微小粒子と定義されている。中心部は液体、ゲル、固体、気体またはこれらの組合せとすることができる。１つの場合において、マイクロカプセルは気体でできた中心部を囲む外殻を有する「微小気泡」とすることができ、薬物は外殻の表面上、外殻自体の中、または中心部に配置される。（微小気泡は、当業で公知のように、診断用途のために、または微小気泡を破裂させて、選択した眼組織部位にて、もしくは選択した眼組織部位に向って微小気泡の積載物を放出させるために、当業で公知のように、音響振動に反応することができる）。「ミクロスフェア」は固体の球体とすること、多孔質となって、気質物質もしくは殻にある孔もしくは空隙により形成されるスポンジ様構造もしくはハチの巣構造を含むこと、または気質物質もしくは殻に複数の個別の空隙を含むことができる。微小粒子またはナノ粒子は、気質物質をさらに含むこともできる。殻または気質物質は、ポリマー、アミノ酸、サッカリドまたはマイクロカプセル化の技術で公知のその他の物質とすることができる。
【００６８】
薬物を含有する微小粒子またはナノ粒子は、水性または非水性の液体ビヒクルに懸濁していてもよい。液体ビヒクルは、薬学的に許容可能な水性溶液とすることができ、任意で界面活性剤をさらに含むことができる。薬物の微小粒子またはナノ粒子自体が、ポリマー、ポリサッカリド、界面活性剤などの賦形剤を含むこともでき、それらは粒子からの薬物放出の動態を制御するために当業で公知である。
【００６９】
１つの実施形態において、液体製剤は、強膜内のコラーゲンまたはＧＡＧ繊維を分解する効果のある薬剤をさらに含み、眼組織への薬物の浸透／放出を促進することができる。この薬剤は、例えば、ヒアルロニダーゼ、コラゲナーゼまたはこれらの組合せなどの酵素とすることができる。本方法の１つのバリエーションでは、薬物の注入とは別のステップで、注入の前または後に、酵素が眼組織に投与される。酵素および薬物は同一部位に投与される。
【００７０】
もう１つの実施形態においては、製剤は投与と同時に、相が変化する。例えば、液体製剤は、中空極微針を通して、脈絡膜上腔に注射することができ、その後、脈絡膜上腔にてゲル状となり、制御された放出のために薬物がゲルから出て分布する。
【００７１】
使用方法において極微針の動き指示するための制御機能
【００７２】
極微針装置は、極微針を眼組織に制御しながら挿入し、場合によっては回収するための手段を含むことができる。さらに、極微針装置は少なくとも１本の極微針が眼組織に挿入される角度を制御するための手段（例えば、少なくとも１本の極微針を眼組織の表面に、約９０度の角度で挿入することによる）を含むことができる。
【００７３】
眼組織への極微針挿入の深度は、極微針の長さ、ならびに極微針のその他の形状の特徴によって制御することができる。例えば、フランジまたはその他による極微針の幅の突然の変化は、極微針の挿入深さを制限するのに利用することができる。極微針の挿入は、極微針を眼組織内に制御された距離だけ移動し、同様に、例えば、極微針を制御された距離だけ引き戻すように、逆に操作することができる歯車または機械的要素を伴う機械的なマイクロ配置システムを使って制御することも可能である。挿入深度は、極微針を眼組織に挿入する速度によっても制御することができる。回収距離は、極微針を挿入した眼組織の弾性収縮力により、または挿入の力が解除された後、所定の距離だけ極微針を押し戻す要素を極微針装置内に入れておくことにより、制御することができる。
【００７４】
挿入の角度は、極微針の基部に対して第１の角度で極微針を配置し、眼の表面に対して第２の角度で基部を配置することにより、指示することができる。１つの実施形態において、第１の角度は約９０°にすることができ、第２の角度は約０°にすることができる。挿入の角度は、所定の角度に向けられた装置ハウジング内のチャンネルを通じて、極微針を装置ハウジングから突出させることで、指示することもできる。
【００７５】
当業者は、本明細書および下記の実施例に記述する開示と組み合わせて当業で公知の機械的システムを適合化させることで、極微針の挿入を制御しながら、駆動するための適切な構造を工夫することができ、その構造は、手動、電機機械的手段またはこの組合せによって操作可能なものであってよい。
【００７６】
極微針を通じた輸送の制御
【００７７】
中空極微針装置を通じた製剤または生体液の輸送は、例えば、１つまたは複数の弁、ポンプ、センサー、作動装置およびマイクロプロセッサーを使って制御または監視することができる。例えば、１つの実施形態において、極微針装置は、極微針を通じた眼組織への製剤の送達速度を制御するために、ポンプまたは弁を制御するようにプログラミングされたマイクロプロセッサーと共に、マイクロポンプ、マイクロ弁およびポジショナーを含むことができる。極微針を通る流れは、拡散、毛細管現象、機械的ポンプ、電気浸透、電気泳動、対流またはその他の駆動力により推進することができる。装置および極微針の設計は、これらの推進力を活用するために、公知のポンプおよびその他の装置を使って、調整することができる。１つの実施形態において、極微針装置は、眼組織への製剤の送達を向上するために、Ｂｅｃｋの米国特許第６，３１９，２４０号に記述されたものと類似のイオン導入装置をさらに含むことができる。もう１つの実施形態において、極微針装置は極微針を通る流れを監視し、ポンプおよび弁の使用の連係を取るために、流量計またはその他の手段をさらに含むことができる。
【００７８】
製剤または生体液の流れは、当業で公知の多種多様な弁またはゲートを使って規制することができる。弁は、選択的かつ反復的に開閉することが可能なものとすることができ、またはフラクチャブルバリア（fracturable barrier）などの単回使用型とすることができる。極微針装置で使用されるその他の弁およびゲートは、極微針を通る物質の流れを選択的に開始、調節または停止するために、熱により、電気化学的に、機械的に、または磁気によって作動させることができる。１つの実施形態において、流れは弁として働く律速膜を使って制御される。
【００７９】
本発明は、以下の非制限的な実施例を参照することで、さらに理解を深めることができる。
【実施例】
【００８０】
極微針が強膜の基部まで貫通し、脈絡膜上腔を標的とするために使用することができるかどうかを評価するために実験を実施した。より具体的には、中空極微針が死んだブタ、ウサギおよびヒトの目の脈絡膜上腔に小分子および粒子を送達できるかどうかを評価するために実験を実施した。追加実験は、極微針の長さ、注入圧および眼内圧が、ブタの目において直径２０〜１０００ｎｍの粒子の送達に対して及ぼす影響を測定するために実施した。最後に、脈絡膜上腔への送達に対して粒子の大きさが果たす役割および眼の解剖学的障壁の影響を調べるための実験を実施した。
【００８１】
すべて視神経が接続した状態のウサギの目（Ｐｅｌ−Ｆｒｅｅｚ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ、アーカンソー州Ｒｏｇｅｒｓ）、ブタの目（Ｓｉｏｕｘ−Ｐｒｅｍｅ  Ｐａｃｋｉｎｇ、アイオワ州Ｓｉｏｕｘ  Ｃｅｎｔｅｒ）およびヒトの目（Ｇｅｏｒｇｉａ  Ｅｙｅ  Ｂａｎｋ、ジョージア州Ａｔｌａｎｔａ）全体が冷蔵庫に入れて出荷され、最高３日間、４°で湿った状態で保管された。使用の前に、目を室温になるまで放置し、脂肪および結膜をすべて除去して、強膜を露出させた。
【００８２】
以前に記述されている（Ｊ．Ｊｉａｎｇら、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２６：３９５−４０３（２００９））ように、中空極微針はホウケイ酸製マイクロピペット管から製造された（Ｓｕｉｔｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ、カリフォルニア州Ｎｏｖａｔｏ）。図７Ａは、３０ゲージの皮下注射針の突先と比較して中空極微針を示している（スケールバー = ５００μｍ）。ネジ開口部のあるキャップの付いたカスタムのペンのような機器は、極微針を配置し、その長さを精密に調節できるようにするために製造された。この機器は、注入圧を加えるために二酸化炭素ガスシリンダーに接続された管でマイクロピペットホルダー（ＭＭＰ−ＫＩＴ、Ｗｏｒｌｄ  Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、フロリダ州Ｓａｒａｓｏｔａ）に接続された。ホルダーは極微針の強膜への挿入を制御するために使われた極微操作装置（ＫＩＴＥ、Ｗｏｒｌｄ  Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓの）に接続された。
【００８３】
カルボキシル化修飾したＦｌｕｏＳｐｈｅｒｅｓ（登録商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州Ｃａｒｌｓｂａｄ）を、直径２０ｎｍ、１００ｎｍ、５００ｎｍおよび１０００ｎｍの粒子を含む、固形分含有量が２重量％の懸濁液として注射した。最終濃度０．５重量％でＴｗｅｅｎ  ８０（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ）を懸濁液に添加し、使用の前に超音波で分解した。スルホローダミンＢ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）をハンクス平衡塩類溶液（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ、バージニア州Ｍａｎａｓｓａｓ）に溶解し、１０−４Ｍのスルホローダミン溶液を作った。直径１μｍの硫酸バリウム粒子（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、マサチューセッツ州Ｗａｌｔｈａｍ）を平衡塩類溶液（Ｂａｓｓ  Ｐｌｕｓ、Ａｌｃｏｎテキサス州Ｆｏｒｔ  Ｗｏｒｔｈ）に懸濁し、１．５重量％の懸濁液を形成した。
【００８４】
目全体にぴったりと合うように形作られた特注のアクリル型は、目をしっかりと支える目的で作成され、すべての実験に使われた（図７Ｂ）。カテーテルを視神経を通して硝子体に挿入し、眼内圧（１８または３６ｍｍＨｇ）を発生させる高さに上昇させたＢＳＳ  Ｐｌｕｓのボトルに接続した。極微針の挿入および操作中に目の外面をしっかりと支えるために型の内部のチャンネルに吸引を行った。各極微針には、注射する物質を所望の量だけ予め詰めておいた。極微針は設定した極微針長で装置ホルダーに配置され、極微操作装置に接続され、定圧の供給源に接続された。続いて極微針を、縁から５〜７ｍｍ後部にある強膜組織に垂直に挿入した。注入を誘導するために、設定した圧力を加えた。液体の注入が開始されたかを確認するために３０秒の余裕を取った。注入が起きた場合は、所定の容量が注入されると直ちに圧力を停止した。注射した物質を目視で観察した結果、脈絡膜上腔に局所化していた場合は、注射は成功したと見なした。注入が指定の時間枠内に開始されなかった場合は、加えた圧力を止めて、針を回収した。この場合は送達の失敗と見なした。
【００８５】
顕微鏡法を使って撮影される目は、送達完了の数分以内にセットアップから外した。目をドライアイスまたは液体窒素で保存したアセトンまたはイソペンタンの中に配置し、配置後、数分以内に目が完全に凍結するようにした。凍結した目を液体から取り出し、目の一部を、注射物質の画像を撮影するために、かみそりの刃を使って手で切断した。撮影は明視野および蛍光光学系（モデルＳＺＸ１２、Ｏｌｙｍｐｕｓ  Ａｍｅｒｉｃａ、ペンシルバニア州Ｃｅｎｔｅｒ  Ｖａｌｌｅｙ）を使って、立体顕微鏡を使って実施した。強膜、脈絡膜および網膜を含んでいる部分は、最適切断温度培地（Ｓａｋｕｒａ  Ｆｉｎｅｔｅｋ、カリフォルニア州Ｔｏｒｒａｎｃｅ）中に入れ、ドライアイスまたは液体窒素下で凍結させた。これらの試料は、厚さ１０〜３０μｍの凍結切片とし（Ｍｉｃｒｏｍ  Ｃｒｙｏ−Ｓｔａｒ  ＨＭ  ５６０ＭＶ、ドイツ国Ｗａｌｌｄｏｒｆ）、明視野および蛍光光学系により画像を撮影し（Ｎｉｋｏｎ  Ｅ６００、ニューヨーク州Ｍｅｌｖｉｌｌｅ）、注射した物質の目の中での位置を突き止めた。Ａｄｏｂｅ  Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐソフトウェア（Ａｄｏｂｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、カリフォルニア州Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ）を使って、必要に応じて画像をコラージュした。
【００８６】
マイクロコンピューター断層撮影法に使ったブタの目は、注射後、凍結させなかった。代わりに、ブタの目には、硫酸バリウム懸濁液を注射し、直径３０ｍｍの試料チューブに安定化させ、Ｓｃａｎｃｏ  μＣＴ４０デスクトップ円錐ビームシステム（Ｓｃａｎｃｏ  Ｍｅｄｉｃａｌ  ＡＧ、スイス国Ｂｒｕｔｔｉｓｅｌｌｅｎ）を使って、３０μｍの等方性ボクセルサイズ、Ｅ＝５５ｋＶｐ、Ｉ＝１４５μＡおよび積分時間＝２００ｍｓにて、大気中で走査した。Ｆｅｌｄｋａｍｐら（Ｊ．  Ｏｐｔ．  Ｓｏｃ．  Ａｍ．  Ａ−Ｏｐｔ．  Ｉｍａｇｅ  Ｓｃｉ．  Ｖｉｓ．１：６１２−６１９（１９８４））による技法に基く畳み込み逆投影アルゴリズムを通じて、生データが自動的に再構成され、２Ｄグレースケール断層撮影像が生成された。グローバル・セグメンテーション値（ガウスシグマ、ガウスサポートおよび閾値）を造影領域ならびに目組織全体に対して選んだ。グレースケール断層撮影像を積み重ね、最適なセグメンテーション値を適用することにより、３次元の２値化画像を生成した（目全体に対して１つの画像、造影剤を注射した領域に対してもう１つの画像）。これらの画像をＳｃａｎｃｏ画像処理言語を使って重ね合わせ、目全体の中で造影領域の相対的な３次元位置を示した。
【００８７】
実施例１：中空極微針を使った、脈絡膜上腔へのモデル化合物の送達
【００８８】
赤色蛍光スルホローダミンＢをモデル化合物として使用し、脈絡膜上腔を標的化するために、強膜のちょうど基部に挿入した中空極微針１本を使って、ブタの目にｅｘ  ｖｉｖｏで注射した。図８Ａおよび図８Ｂ（スケールバー：５００μｍ）に示す、処置していないブタの目の矢状断面の明視野顕微鏡画像を３５μＬのスルホローダミンＢの注射の前および後の両方に撮影した。正常な眼組織（図８Ａ）で、強膜、脈絡膜、網膜および硝子体液を同定することができる。モデル化合物の注入後（図８Ｂ）、スルホローダミン溶液は強膜の真下および脈絡膜上腔の脈絡膜の上に見ることができ、溶液が注射され、初期の注射部位から脈絡膜上腔内に分布したことを確認できる。最高３５μＬまでの容量を漏れることなく注射することができたが、それを超える容量は、生体であれば、渦静脈が接続している目の表面の開口部から漏れた。ただし、以降のブタおよびウサギのｉｎ  ｖｉｖｏでの実験はこれらの開口部から漏れることなく、最大１００μＬまで脈絡膜上腔に送達できることを示した（データは示されていない）。
【００８９】
実施例２：中空極微針を使った、脈絡膜上腔への粒子の送達
【００９０】
直径５００ｎｍまたは１０００ｎｍの粒子を、ウサギ、ブタおよびヒトの目の脈絡膜上腔にｅｘ  ｖｉｖｏで注射し、画像を撮影し、強膜の真下での粒子の分布および局所化を評価した。脈絡膜上腔に注入しないブタの目の低温切開片の蛍光透視像で、強膜（１）、脈絡膜（２）および網膜（３）を同定した（図９Ａ、スケールバー：５００μｍ）。５００ｎｍ粒子の注射の後、ウサギの目の低温切開片の蛍光透視像を軸平面で撮影し、撮影した画像をコラージュして、全景を形成した（図９Ｂ、スケールバー：５００μｍ）。蛍光粒子の分布（画像では、明るい白い領域として現れる）が、強膜の真下にある薄い鞘にある目の赤道に沿って観察された。１５μＬの容量が注射され、挿入部位の平面で撮影したこの特定の断面では、注射液はおよそ２０ｍｍに分布し、これは目の円周全体の約３６％に相当する。
【００９１】
画像が右側に目の前部および左側に目の後部（それぞれ図９Ｃおよび９Ｄ）を示すように、ブタおよびヒトの目の低温切開片の蛍光透視像を矢状方向で撮影した。これらの画像は、微量注入した粒子（明るい白色として現れる）が注射部位から目の前部方向および後部方向の両方で脈絡膜上腔に分布できることを示している。これらの実験では、極微針１本は、両方の種の脈絡膜上腔に２重量％の粒子懸濁液を３０μＬ送達した。スルホローダミンを注射した場合に観察されたのと同様に、注射部位から離れた渦静脈の開口部で漏れが観察された。
【００９２】
これらの画像中の挿入画像は、極微針の挿入部位の拡大画像である。各々の場合、強膜内の挿入部位は、粒子で満たされていた。ブタ（図９Ｃ）およびヒト（図９Ｄ）の場合、網膜は依然として付いていて、視認可能であり、極微針が網膜を貫通しなかったことは明白だった。ウサギ（図９Ｂ）の場合、低温切開プロシージャの間に分離された網膜は視認できなかった。これらの結果は、極微針がウサギ、ブタおよびヒトの目の脈絡膜上腔を標的として、直径最大１０００ｎｍまでの粒子を送達できることを裏付けた。さらに、これらの結果は、これらの粒子が注射部位から、脈絡膜上腔内であらゆる方向に周囲へと分布することを裏付けた。
【００９３】
マイクロコンピューター断層撮影法（μＴ）を活用して、非侵襲性の方法を使って、３次元で脈絡膜上腔における注射物質の周囲への分布および局所化を撮影した。直径１μｍの硫酸バリウム造影剤粒子３５μＬをブタの目の脈絡膜上腔に注射した後、断面画像は、目の外側の縁の真下、すなわち強膜の真下で周辺を回る薄い白い細長い断片として分布している粒子を示した（図１０Ａ）。このプロファイルは、脈絡膜上腔送達に特徴的であり、蛍光画像からの結果と類似している。これらの断面画像を３次元で再構成した結果は、後眼部での分子の分布を示した（図１０Ｂ。スケールバー：５ｍｍ）。粒子は注射部位を中心に非対称に分布していたが、粒子の分布は半径約５ｍｍであり、およそ７０ｍｍ２の面積に及んだ（これは目の裏面の表面積の７％にあたる）。これは極微針が脈絡膜上腔を標的とすることにより、後眼部のかなりの部分に分子を分布できることをさらに裏付けた。
【００９４】
実施例３：脈絡膜上腔への粒子送達に対する動作パラメタの影響
【００９５】
直径２０、１００、５００および１０００ｎｍの粒子を、極微針の長さおよび注入圧を様々に変化させて使い、ブタの目にｅｘ  ｖｉｖｏで注射し、脈絡膜上腔送達の成功率を求めた。試みた注射は完全に成功（脈絡膜上腔に２５μＬの粒子懸濁液が完全に注射された）または完全に失敗（まったく注射できなかった）のいずれかと見なした。部分注射は観察されなかった。注入圧および極微針の長さが、ブタの目の脈絡膜上腔への粒子の送達の成功率に及ぼす影響を、粒子の直径が２０ｎｍ（図１１Ａ）、１００ｎｍ（図１１Ｂ）、５００ｎｍ（図１１Ｃ）および１０００ｎｍ（図１１Ｄ）について示す。
【００９６】
成功率は、注入圧が高くなり、極微針の長さが増加するほど高くなった（ＡＮＯＶＡ、ｐ＜０．０５）。２０ｎｍ粒子（図１１Ａ）の場合、成功率１００％の注射は、あらゆる長さの極微針で、２５０ｋＰａの圧力を使ったときに達成された。１００ｎｍ粒子（図１１Ｂ）の場合、圧力の影響は、同様に２５０ｋＰａで頭打ちになり、１００％の成功率は、極微針の長さが最も短い場合（７００μｍ）を除くすべてのときに達成された。比較的大きな粒子の場合（５００および１０００ｎｍ）（それぞれ図１１Ｃおよび図１１Ｄ）、圧力の影響は、一般に３００ｋＰａで頭打ちになり、それより短い極微針では、成功率は大幅に低下した。いかなる理論にも拘束されることは望まないが、極微針の長さが短いと、強膜内に注射されるため、脈絡膜上腔に到達するには、粒子は強膜の一部を強行突破しなければならないと信じられている。強膜内のコラーゲン繊維の束の間隔が約３００ｎｍであるため、比較的小さな粒子（２０および１００ｎｍ）は、強膜の一部を突破して脈絡膜上腔に到達することが比較的容易である。しかし、より大きな粒子（５００および１０００ｎｍ）は、この解剖学的障壁を越えるのはより難しく、注入圧がより重要なパラメタとなり、注射成功率は大幅に減少する。
【００９７】
ＡＮＯＶＡを使って、様々な極微針長での大きさの異なる粒子の注射率を統計的に比較し、次の表にその要約を示す。
【００９８】
有意性はｐ＜０．０５と見なされ、アステリスク（＊）によって表されている。
【表１】
0005996526.tif 000002
【００９９】
統計分析は、極微針の長さが７００μｍでは、脈絡膜上腔に到達するためには、ほとんどの強膜組織を横断しなければならず、成功率は粒子の大きさに強く依存することを示した。８００および９００μｍの極微針を使ったとき、コラーゲン繊維の間隔より小さい粒子は（２０および１００ｎｍ）は類似した動作を示し、コラーゲン繊維の間隔より大きい粒子（５００および１０００ｎｍ）も類似した動作を示したが、１００ｎｍの粒子と５００ｎｍの粒子の間では著しい差があった。最も長い極微針（１０００μｍ）は、恐らく強膜の基部に到達しており、粒子の大きさに顕著な依存性は見られず、強膜内のコラーゲン障壁を通過することが必要でなくなったことを示唆している。
【０１００】
いかなる特定の理論にも拘束されることを望まないが、前記の結果は、２０および１００ｎｍの粒子は、強膜内ならびに脈絡膜上腔内に分布できるが、５００および１０００ｎｍの粒子は脈絡膜上腔内のみに局所化すべきであることをさらに示唆している。同一の条件下で、２０ｎｍ粒子の分布（図１２Ａ）を１０００ｎｍ粒子の分布（図１２Ｂ）と比較した。予期されていたとおり、比較的小さい粒子は強膜内ならびに脈絡膜上腔内に顕著な分布を示した。対照的に、比較的大きな粒子は主に脈絡膜上腔に留まり、強膜からはほとんど排除されていた。大きな粒子のこの局在は、図１１に示した結果と一致していた。
【０１０１】
したがって、２０および１００ｎｍの粒子は、最小で８００μｍの極微針長および最小で２５０ｋＰａの圧力を使って、確実に注射された。５００および１０００ｎｍの粒子を送達するには、最小で１０００μｍの極微針長および最小で２５０〜３００ｋＰａの圧力が必要とされた。
【０１０２】
実施例４：脈絡膜上腔への粒子の送達に対する眼内圧の影響
【０１０３】
眼内圧（ＩＯＰ）は、目を膨張させた状態に保つ眼内の内圧である。それは注入圧に対抗できる背圧を提供する。眼内圧が脈絡膜上腔への粒子送達に及ぼす影響を評価するために、１０００ｎｍの粒子を２つの異なるレベルのＩＯＰ、１８および３６ｍｍＨＧにて注射した。シミュレートした１８および３６ｍｍＨＧのＩＯＰレベルでの１０００ｎｍ粒子の脈絡膜上腔送達の成功率に対する注入圧および極微針長の影響を、それぞれ図１３Ａおよび図１３Ｂに示す。送達成功率は、一般に、ＩＯＰの増加とともに増加した。正常なＩＯＰでは、最小注入圧（１５０ｋＰａ）でも、最小極微針（７００μｍ）を使った場合にも、粒子は送達されず、最大長の極微針（１０００μｍ）を使って、最大注入圧（３００ｋＰａ）をかけたときにのみ１００％の成功率が達成された（図１３Ａ）。対照的に、ＩＯＰを上昇させると、粒子は、最低の注入圧で、最も短い極微針を使った場合でも、粒子は時々送達され、最大注入圧では、９００と１０００μｍのどちらの極微針を使っても、１００％の成功率が達成された（図１３Ｂ）。
【０１０４】
いかなる理論にも拘束されることを望まないが、ＩＯＰの上昇の主要作用は、強膜の表面をより堅くし、極微針の挿入中の組織表面のたわみを減らし、それにより所定の長さの極微針に対して強膜への浸透深度を増加させることにあると信じられている。我々は極微針の挿入深度を直接測定することはしなかったが、以上の結果は極微針の挿入は、ＩＯＰを上昇させた状態の方が、強膜により深く挿入でき、それによって、注入成功率が増加するため、より効果的になり得ることを示唆している。
【０１０５】
実施例５：生きた動物モデルにおける脈絡膜上腔へのモデル化合物の送達
【０１０６】
脈絡膜上腔への蛍光分子（フルオレセインナトリウム）の送達を、承認された生きた動物実験プロトコルに従って、ウサギを使って評価した。（視線を通した）目の１次元走査を、注入後、最初の５分以内に撮影し、目の中での蛍光分子の分布を測定した（図１４）。ｙ軸は蛍光強度（すなわち、濃度）を表し、ｘ軸は目の中の位置を前面（１６０）から裏面（０）で表している。したがって、結果は、注射後、最初の５分以内で、フルオレセインが既に脈絡膜上腔を通って目の裏側に流れ、一部は内部の挿入部位に留まり続けていることを示している。
【０１０７】
経時的な脈絡膜上腔からのフルオレセインの除去速度を評価するために、同様の走査を実施した（図１５）。蛍光強度は目の２つの領域（脈絡膜上腔および硝子体中央領域）で経時的に測定した。結果は、注射した物質の大部分は、硝子体中央領域には進まずに、脈絡膜上腔に留まったことおよび物質は２４時間以内に脈絡膜上腔からほぼ除去されたことを示している。
【０１０８】
実施例６：生きた動物モデルにおける脈絡膜上腔への粒子の送達
【０１０９】
脈絡膜上腔への粒子の送達を評価するために、生きた動物実験も実施した。直径２０ｎｍおよび５００ｎｍの蛍光粒子をウサギの目に注入し、蛍光強度を評価し、目の２つの領域（脈絡膜上腔および硝子体中央領域）に粒子が留まる時間の長さを測定した。
【０１１０】
比較的小さな粒子（図１６）は、脈絡膜上腔への送達に成功し、少なくとも３５日間、脈絡膜上腔内に留まった。比較的大きな粒子（図１７）も脈絡膜上腔への送達に成功し、少なくとも２４日間、脈絡膜上腔内に留まった。比較的小さな粒子も比較的大きな粒子もともに、低レベルの蛍光発光により示されるように、硝子体中央の領域に十分に局所化されたことは注目すべきである。
【０１１１】
本明細書に引用した刊行物およびそれらの引用元の資料は、参照により明確に組み込まれる。本明細書に記述した方法および装置の変更および変型は、前記の詳細な記述から、当業者には明白になるであろう。かかる変更および変型は、付属の請求項の範囲内に入るものとする。
【図１Ｂ】
0005996526.tif 000003
【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
0005996526.tif 000005
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
0005996526.tif 000009
【図６Ａ】
0005996526.tif 000010
【図６Ｂ】
0005996526.tif 000011
【図９Ａ】
0005996526.tif 000012
【図９Ｂ】
0005996526.tif 000013
【図９Ｃ】
0005996526.tif 000014
【図９Ｄ】
0005996526.tif 000015
【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１Ａ】
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【図７】
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【図８】
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【図１１】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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