(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
純正ごま油を有効成分として含む、血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下の必要なヒト又はヒト以外の哺乳動物に、前記ヒト又はヒト以外の哺乳動物の上昇した血清コレステロール値及び／又は血中脂質値を所望の値にまで下げるのに有効な日常ベースに基づく量として純正ごま油1日用量１７６〜２４８ｍｇ／ｋｇ体重を定時に少なくとも８週間継続して経口摂取させるための血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤。
【請求項２】
請求項１に記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤を含有する血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下のための経口用医薬品又は動物医薬品。
【請求項３】
請求項１に記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤を含有する血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下用飲食物又は飼料。
【請求項４】
請求項１に記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤を含有するコレステロール及び／又は血中脂質低減用ペットフード。
【請求項５】
ヒトを除く動物の血清コレステロール値又は血中脂質値の低下のために請求項１記載の血清コレステロール値又は血中脂質値の改善剤を利用する方法であって、前記動物の血清コレステロール値又は血中脂質値を所望の値にまで下げるのに有効な日常ベース（１７６〜２４８ｍｇ／ｋｇ体重／日（ｄａｙ））に基づく量を前記動物に少なくとも８週間継続して経口投与することを含んで成る方法。
【請求項６】
前記動物の前記方法による処置後の動脈硬化指数（ＬＤＬ/ＨＤＬ比）がその動物の処置前の動脈硬化指数（ＬＤＬ/ＨＤＬ比）より８週以上の投与で改善する、請求項５記載の方法。
【請求項７】
ヒトを除く動物の高コレステロール血症及び／又は高血脂症の治療的処置のために請求項１記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤を利用する方法。
【請求項８】
高コレステロール血症及び／又は高血脂症の治療的処置のための医薬品又は動物医薬品の製造のために請求項１記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤を利用する方法。
【請求項９】
高コレステロール血症の処置を必要とするヒトを除く被検体におけるかかる処置のための方法であって、この被検体の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値を所望の値にまで下げるのに有効な日常ベース（１７６〜２４８ｍｇ／ｋｇ体重／日（ｄａｙ））に基づく量で請求項１記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤をこの被検体に少なくとも８週間継続して投与することを含んで成る方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、上昇した血清コレステロール値及び／又は血中脂質値を減少させる血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤、血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下のための経口用医薬品又は動物医薬品、血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下用飲食物又は飼料に関する。
【背景技術】
【０００２】
ごまは非常に古い時代から愛用され、ごまの食の文化は世界各地に広まっている。生ごま、焙煎ごま、ごまペースト、ごま油まで、さまざまな形で世界各地の多種多様な料理に取り入れられている。特に、ごまには約５０％の油が含まれているため、ごまを搾油してごま油を作り、様々な用途に利用してきた。ごまには、多くの栄養成分を含んでおり、そのなかでも最も注目されているのが、セサミンである。ゴマリグナン類のセサミンは、コレステロール低下作用、抗高血圧作用、抗酸化作用、アルコール代謝促進作用などが報告されている（非特許文献１）。
【０００３】
循環器系疾患発症のリスク要因として従来から血中コレステロール濃度の上昇が挙げられているが、最近ではコレステロールとは独立した要因として、血中中性脂肪（トリグリセライド、トリアシルグリセロール）濃度も問題視されている。脂質異常症とは、血中コレステロール濃度の上昇及び／又は血中中性脂肪の一種である血中トリアシルグリセロール濃度の上昇した病態である。血中のコレステロール値が上昇した場合には、高コレステロール血症（高βリポタンパク質血症）とよばれるが、これは主として低密度リポタンパク質（ＬＤＬ、βリポタンパク質）の上昇であり、動脈硬化の危険率があがることがよく知られている。ＬＤＬコレステロールは静脈内膜細胞に取り込まれて沈着し、動脈粥状（アテローム性）硬化の主因となると考えられている。また、脂質を過剰に摂取すると、血中トリアシルグリセロール濃度が上昇し、高トリアシルグリセロール血症とよばれる病態となり、高血圧症や虚血性心疾患などの動脈硬化性疾患につながる危険性が高いことが指摘されている。
【０００４】
上記のような病態はイヌ、ネコなどのペットにも及んでいる。しかし、約３分の１の飼い主は、愛猫、愛犬の肥満に気づいていない。ペットの飼い主は、ペットが喜んで食するものを与えがちであり、血中コレステロール値が高いペットが増加している。ペットの血中コレステロール値が高くなっても、通常飼い主は気がつかない場合が多く、獣医によって始めて発見される場合が多い。血中コレステロールが高くなることで、動脈硬化等の疾患が多くみられるようになり、血中コレステロール値の上昇を見逃すことにより、これらの疾患が早期に発見されず、病状も悪くなるおそれがある。ペット用のコレステロールを低減する方法としては、米糠油粕、小麦ふすま、コーングルテン等の食物繊維を多く配合すること、脂肪分を少なくすること等が提案されているが、一時的な効果は認められるものの、嗜好性が不良のため、ペットが摂食しなくなり、結果としてコレステロール低減効果が得られない場合が多かった。ペットが継続して摂食することができ、簡便にコレステロールを低減させる技術が望まれている。
【０００５】
血清コレステロールもしくは血清トリグリセライド値が上昇する病気の治療薬が種々開発されてきたが、機能性食品の機能性因子として食品中に使用することができるものはなかったところ、セサミンを内容組成物の1重量％以上添加したセサミン含有飲食物が発明された（特許文献１）。ごま種子、ごま粕及びごま油中より単離したセサミンは血中コレステロール及び血中中性脂質を低下させる作用を有する上に安全性が高く、しかも、精製品は無味無臭で白色を呈しているため、飲食品への配合に適するものであり、機能性食品の機能性因子として食品中に使用することができる。該飲食品は、ごま油からセサミンを単離し、あるいはごま油からセサミン等のリグナン類化合物を主成分とする抽出物を得て、これらを飲食物に添加することで得られる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許第３００１５８９号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】アンチ・エイジング医学−日本抗加齢医学会雑誌  ２（４）４９８−５０３（２００６）
【非特許文献２】並木満夫 ・小林貞作編「ごまの科学」朝倉書店、１９８９年１０月１０日発行、６２頁、１６０頁
【非特許文献３】並木満夫編「ごまその科学と機能性」丸善(株)、丸善出版(株)、１９９８年１１月１日発行、２６頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
予防医学知識の普及にともない病気にかかる前の健康又は半健康の状態で予防的に生理活性を有する天然由来の食品を摂取して、健康を保持しようとする試みが行われており、高脂血症を予防又は改善する方法として、数多くの食事成分におけるコレステロールの低減効果が実験、検証されている。その中でもコレステロール低減作用の高い食品として、大豆タンパク質が注目を集めており、動物性タンパク質と比較した効果が実証されている。また、大豆成分以外では、月見草種子中のγ−リノレン酸や椎茸等の繊維について血中コレステロールの低減効果が検証されている。本来の食品に加えることのできる無害な天然物で、嗜好に影響を与えず、しかも安全な天然物そのものを有する飲食物の開発が強く望まれている。すなわち、降コレステロール作用及び降中性脂質作用効果に優れ、かつ安全な天然物そのものからなる血清コレステロール値又は血中脂質値の改善剤に対する強い社会的要請があると考える。  
【０００９】
天然物そのものには、例えばえごま、かき、イワシ、しいたけがある。えごまに含まれるα-リノレン酸はコレステロール値を下げてくれる働きがある。カキに含まれるタウリンは血中のコレステロール値を下げる効果がある。タウリンには、コレステロールから胆汁酸を合成し、排泄を促して血中コレステロールを減少させる働きがある。同時に中性脂肪も減少させる働きがある。イワシに含まれているドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸はコレステロ−ルを溶かす作用がある。イワシに含まれるＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）、ＥＰＡ（エイコサペンタエン酸）、この二つの成分が血液の流れを良くし、血中のコレステロ−ルを溶かし、血中の悪玉（ＬＤＬ）コレステロールを減らしながら、逆に善玉（ＨＤＬ）コレステロールを増やす働きがある。しいたけに含まれるナイアシンはコレステロール値を下げるのに有効である。
【００１０】
しかしながら、本発明者らの知る限り、天然物からの抽出物に該当しないごま油そのものが降コレステロール作用及び降中性脂質作用を有することを検証した報告は未だなされていない。今日の健康を意識した社会では、食物中の脂肪含量に注意が向けられ、例えば飽和脂肪酸が少ない肉が好まれている。更に、人の体脂肪、特に皮下脂肪や内臓脂肪等を調節するダイエット、フィットネス等も大きな関心が持たれている。かかる背景の下、作用効果に優れ、かつ安全な血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減剤に対する強い社会的要請は天然物のごま油そのものではなく天然物からの抽出物中に含有される形のセサミンに向けられていたからである（特許文献１参照）。
また、ごま油中には，油脂などリグナン類化合物以外の物質が含まれている上、リグナン類化合物の中でも、セサミンと同じく有用な作用を有する可能性があるエピセサミン、セサミノール、セサミノール配糖体、セサモリン、セサモールが含まれている（非特許文献２の１６０頁参照）。ごま油中にセサミンは０．３４０〜１１．３％含まれている（非特許文献２の６２頁参照）。ごま脱脂粕中にセサミノール配糖体は０．８６８％含まれている（非特許文献３の２６頁の表２．１参照）。セサミノール配糖体はセサミノールに糖の分子がついたものであり、体内に入ると腸内細菌の働きにより、セサミノールに変換するし、また、セサミンとエピセサミンは，生体内で及ぼす影響に差がある。ごま油の摂取により血清コレステロール値の低減効果あるいは血中脂質値の低減効果が発揮されるかもしれないが、未だそれを検証した報告はない。ましてやその用量用法は全く明らかにされていない。ごま油そのものを用いて、いかなる物質が単独であるいは互いに複合して作用して血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減効果をもたらしたのかについては、不明である。試験管内の実験は、生体内での作用効果を確認したものではない。単純化された試験管内と様々な作用が複雑に影響を与えあう生体内とでは、生じる作用が異なるため、物質が生体内で与える効果を調べるには、試験管内での実験のみでは不十分である。効果が実証されるにはヒト及び動物で血漿中のコレステロール及びトリグリセリドを測定しなければならない。
【００１１】
本発明は、天然物そのものからなる安定性が高く、副作用が少ない血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減剤を提供することを目的とする。本発明は純正ごま油の血清コレステロール値あるいは血中脂質値改善効果の発現用量用法を明らかにすることを目的とする。
【００１２】
並びに、本発明は、降コレステロール作用及び降中性脂質作用を有する、天然物で安全な物質である該低減剤を含有する血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減効果を発現する飲食品、飼料、医薬品、動物医薬品を提供することを目的とする。さらに、本発明は、嗜好性が良好で、ペットが継続して摂食することができ、簡便に血清コレステロール値及び／又は血中脂質値を低減できるペット用血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減剤、及び血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減用ペットフードを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者等が属する会社は、純正ごま油を既に販売しており、本発明で用いるごま油は原材料としてアフリカ、中南米、東南アジアより輸入した厳選したごまを用いて、焙煎、圧搾又は抽出、精製、ろ過・静置などといった工程を経て製造したものである。ごまには、多くの栄養成分を含んでおり、そのなかでも最も注目されているのが、セサミンである。ゴマリグナン類のセサミンは、コレステロール低下作用、抗高血圧作用、抗酸化作用、アルコール代謝促進作用などが報告されている（非特許文献１）。ゴマリグナン類には、セサミンの他にも、セサモリン、セサモノールなどがあり、本発明の実施例の試験で使用した純正ごま油中にも、セサミン、セサモリンを含むゴマリグナン類が含有されている。
【００１４】
本発明者等は、上記の目的を達成するため種々研究した結果、純正ごま油がｉｎ ｖｉｔｒｏ及び動物を用いたｉｎ ｖｉｖｏ試験、ヒト試験により血中コレステロール及び血中中性脂質低減効果を有することを確認し、血中コレステロール及び血中中性脂質を低下させる作用を有する上に安全性が高く、しかも、古くから市販されているため十分な食経験があるといえるため、調理や飲食品への配合に適するものであることを見いだし、本発明を完成した。
【００１５】
本発明は以下の（１）の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤を要旨とする。
（１）純正ごま油を有効成分として含む、血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下の必要なヒト又はヒト以外の哺乳動物に、前記ヒト又はヒト以外の哺乳動物の上昇した血清コレステロール値及び／又は血中脂質値を所望の値にまで下げるのに有効な日常ベースに基づく量として純正ごま油1日用量１７６〜２４８ｍｇ／ｋｇ体重を定時に少なくとも８週間継続して経口摂取させるための血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤。
【００１６】
また、本発明は以下の（２）の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下のための経口用医薬品又は動物医薬品を要旨とする。
（２）上記（１）に記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤を含有する血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下のための経口用医薬品又は動物医薬品。
【００１７】
また、本発明は以下の（３）の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下用飲食物又は飼料を要旨とする。
（３）上記（１）に記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤を含有する血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下用飲食物又は飼料。
【００１８】
また、本発明は以下の（４）の血清コレステロール及び／又は血中脂質低減用ペットフードを要旨とする。
（４）上記（１）に記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤を含有する血清コレステロール及び／又は血中脂質低減用ペットフード。
【００１９】
また、本発明は以下の（５）ないし（８）の血清コレステロール値又は血中脂質値の改善剤を利用する方法を要旨とする。
（５）ヒトを除く動物の血清コレステロール値又は血中脂質値の低下のために上記（１）記載の血清コレステロール値又は血中脂質値の改善剤を利用する方法であって、前記動物の血清コレステロール値又は血中脂質値を所望の値にまで下げるのに有効な日常ベース（１７６〜２４８ｍｇ／ｋｇ体重／日（ｄａｙ））に基づく量を前記動物に少なくとも８週間継続して経口投与することを含んで成る方法。
（６）前記動物の前記方法による処置後の動脈硬化指数（ＬＤＬ/ＨＤＬ比）がその動物の処置前の動脈硬化指数（ＬＤＬ/ＨＤＬ比）より８週以上の投与で改善する、上記（５）記載の方法。
（７）ヒトを除く動物の高コレステロール血症及び／又は高血脂症の治療的処置のために上記（１）記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤を利用する方法。
（８）高コレステロール血症及び／又は高血脂症の治療的処置のための医薬品又は動物医薬品の製造のために上記（１）記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤を利用する方法。
【００２０】
また、本発明は以下の（９）の高コレステロール血症の処置を必要とするヒトを除く被検体におけるかかる処置のための方法を要旨とする。
（９）高コレステロール血症の処置を必要とするヒトを除く被検体におけるかかる処置のための方法であって、この被検体の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値を所望の値にまで下げるのに有効な日常ベース（１７６〜２４８ｍｇ／ｋｇ体重／日（ｄａｙ））に基づく量で上記（１）記載の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤をこの被検体に少なくとも８週間継続して投与することを含んで成る方法。
【発明の効果】
【００２１】
本発明により、純正ごま油そのものを有効成分とする、上昇した血清コレステロール値又は血中脂質値を減少させる血清コレステロール値又は血中脂質値の改善剤を提供することができる。
また、本発明により、ヒトを除く動物の血清コレステロール値又は血中脂質値の低下のために純正ごま油そのものを有効成分とする、上昇した血清コレステロール値又は血中脂質値を減少させる血清コレステロール値又は血中脂質値の改善剤を利用する方法を提供することができる。
また、本発明は、降コレステロール作用及び降中性脂質作用を有する、天然物で安全な物質である純正ごま油を有効成分とする該低減剤を含有する血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減効果を発現する飲食品、飼料、医薬品、動物医薬品を提供することができる。さらに、本発明は、嗜好性が良好で、ペットが継続して摂食することができ、簡便に血清コレステロール値及び／又は血中脂質値を低減できるペット用血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減剤、及び血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減用ペットフードを提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】実施例３のリグナン類を８週間反復経口投与した高コレステロール食負荷ラットの体重を示す図面である。データは平均値±標準誤差で表示。
【図２】実施例３のリグナン類を８週間反復経口投与した高コレステロール食負荷ラットの血中総コレステロール（Ｔ−Ｃｈｏ）を示す図面である。データは平均値±標準誤差で表示。＊Ｐ＜０．０５；ｖｓ媒体群（Ｄｕｎｎｅｔｔ  ｔｅｓｔ）．
【図３】実施例３のリグナン類を８週間反復経口投与した高コレステロール食負荷ラットの血中高比重リポ蛋白（ＨＤＬ−Ｃ）を示す図面である。データは平均値±標準誤差で表示。＊＊Ｐ＜０．０１，＊Ｐ＜０．０５；ｖｓ媒体群（Ｄｕｎｎｅｔｔ  ｔｅｓｔ）．
【図４】実施例３のリグナン類を８週間反復経口投与した高コレステロール食負荷ラットの血中低比重リポ蛋白（ＬＤＬ−Ｃ）を示す図面である。データは平均値±標準誤差で表示。＃＃Ｐ＜０．０１，＃Ｐ＜０．０５；ｖｓ媒体群（Ｓｔｅｅｌ  ｔｅｓｔ）．
【図５】実施例３のリグナン類を８週間反復経口投与した高コレステロール食負荷ラットの動脈硬化指数（ＬＤＬ/ＨＤＬ比）を示す図面である。データは平均値±標準誤差で表示。＃＃Ｐ＜０．０１，＃Ｐ＜０．０５；ｖｓ媒体群（Ｓｔｅｅｌ  ｔｅｓｔ）．
【図６】実施例５の試験におけるＬＤＬ−Ｃ（Ｆ式）の摂取前からの変化量の比較を示す図面である。
【図７】実施例５の試験における総コレステロール（ＴＣ）の摂取前からの変化量の比較を示す図面である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
ごま油はごまの種子に圧搾等の加工をして作られる食用油の一種である。ごま油１００％は純正ごま油、大豆油や菜種油などのごま油以外の食用油をブレンドして作った調合ごま油の２種類がある。ごま油は通常、ごまを焙煎してから加工した茶褐色の色調と独特の焙煎風味を持つ焙煎ごま油を指す。焙煎ごま油は焙煎の強弱により種類があり、用途に応じて選択され利用されている。また、ごま油には他の食用油と同様に、精製工程を経て製造する精製ごま油というものもある。精製ごま油は淡黄色の色調で焙煎ごま油のような独特の焙煎風味はないが和食の天ぷら油や焼き油、洋食の炒め油やドレッシング等にも利用されている。焙煎ごま油も精製ごま油もそれぞれの特徴に応じ、食用に利用されている。また、焙煎ごま油と精製ごま油を組み合わせることで多種多様なバリエーションのごま油を作り出すことが出来る。搾油の方法は加圧による圧搾法と化学的な技術で抽出する抽出法がある。
本出願人は、純正ごま油をすでに販売しており、本発明で用いるごま油は原材料としてアフリカ、中南米、東南アジアより輸入した厳選したごまを用いて、焙煎、圧搾、ろ過・静置といった工程を経て製造したものである。すなわち、純正ごま油は、厳選したごまを用いて、焙煎、圧搾又は抽出、ブレンド・ろ過・静置という一連の工程を経て製造されたものである。  
【００２４】
コレステロールは、三大栄養素の一つ「脂質」の主な成分で、生命の維持に欠かせない。副腎皮質ホルモンや性ホルモンなど、重要なホルモンの原料になっている。血清コレステロール値の高い人とは、通常、総コレステロール値が２２０ｍｇ/ｄｌ以上に該当する人を指す。ただし、２００２年にきめた診療指針を変更され、新しい指針ではＬＤＬ値が１４０以上で決めることになり、総コレステロール値は考慮されないことになった。
血清コレステロール値の高い人のための、血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤として、また、健康食品、機能性食品、特定保健用食品、病者用食品等として用いることができる。血清コレステロール値が上記値より低い人（適正域の人）であっても、コレステロール値を適正域に維持するために本発明改善剤等を摂取してもよい。
【００２５】
本発明の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下剤は、医薬品のほか、医薬部外品、薬理効果を備えた健康食品、健康飲料、特定保健用食品、機能性食品、食品添加剤、その他ヒト以外の動物に対する薬剤や餌、餌用添加剤などとして提供することもできる。例えば、医薬品及び医薬部外品として用いる場合、投与形態は、経口投与又は非経口投与が都合よく行われるものであればどのような剤形のものであってもよく、例えば注射液、輪液、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、腸溶剤、トローチ、内用液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、外用液剤、湿布剤、点鼻剤、点耳剤、点眼剤、吸入剤、軟膏剤、ローション剤、坐剤等を挙げることができる。これら各種製剤は、常法に従って目的に応じて主薬に賦形剤、結合剤、防腐剤、安定剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味剤などの医薬の製剤技術分野において通常使用しうる既知の補助剤、例えば乳糖、果糖、ブドウ糖、でん粉、ゼラチン、炭酸マグネシウム、合成ケイ酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース又はその塩、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、シロップ、ワセリン、グリセリン、エタノール、プロピレングリコール、クエン酸、塩化ナトリウム、亜硫酸ソーダ、リン酸ナトリウムなどの無毒性の添加剤を用いて製剤化することができる。また外用剤としては基剤としてワセリン、パラフィン、油脂類、ラノリン、マクロゴール等を用い、通常の方法によって軟膏剤、クリーム剤等を調製することができる。医薬部外品として調製し、これを瓶ドリンク飲料等の飲用形態、或いはタブレット、カプセル、顆粒等の形態とすることにより、より一層摂取し易くすることができる。
【００２６】
飲食物として用いる場合、その形態は、上記医薬製剤の形態でもよく、また固形、あるいは液状の食品ないしは嗜好品であってもよい。血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下効果を備えた健康食品、健康飲料、特定保健用食品、機能性食品としては、例えば、純正ごま油、或いはその混合物を、炭酸、賦形剤（造粒剤含む）、希釈剤、或いは更に甘味剤、フレーバー、小麦粉、でんぷん、糖、油脂類等の各種タンパク質、糖質原料やビタミン、ミネラルなどの飲食品材料群から選ばれた一種或いは二種以上と混合したり、或いは、現在公知の飲食品、例えばスポーツ飲料、果実飲料、乳飲料、茶飲料、野菜ジュース、乳性飲料、アルコール飲料、ゼリー、ゼリー飲料、炭酸飲料、チューインガム、チョコレート、キャンディ、ビスケット、スナック、パン、乳製品、魚肉練り製品、畜肉製品、冷菓、乾燥食品、サプリメントなどに添加して製造することができる。中でも、脂肪を多く含んだ飲食物に純正ごま油を加えて飲食物を調製すれば、含有脂肪の割にコレステロールの上昇を抑制することができるから、低コレステロール飲食物或いはダイエット飲食物などとして提供することができる。
【００２７】
また、本発明の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下剤を所定量食品に含有させることで、血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低減作用を示す食品を製造することが可能である。このように、「血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低減作用を示す食品」を容易に調製できるのは、純正ごま油そのものが良好な風味と血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低減効果をあわせ持つことにより始めて導き出されるものであり、本発明により初めて達成されるものである。また、本発明の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低減剤を用いることで、血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減作用を示す特定保健用食品や、特別用途食品（病者用食品、えん下困難者用食品）を調製することもできる。
この当該血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減作用を示す食品を製造する方法は、本発明の純正ごま油そのものを有効成分とする血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減剤を含有させることに技術的特長を有するものである。
【００２８】
健康食品、機能性食品として用いる場合は、その形態は、上記医薬製剤や飲食物の形態でもよいが、例えば蛋白質（蛋白質源としてはアミノ酸バランスのとれた栄養価の高い乳蛋白質、大豆蛋白質、卵アルブミン等の蛋白質が最も広く使用されるが、これらの分解物、卵白のオリゴペプチド、大豆加水分解物等の他、アミノ酸単体の混合物も使用される）、糖類、脂肪、微量元素、ビタミン類、乳化剤、香料等が配合された自然流動食、半消化態栄養食及び成分栄養食や、ドリンク剤等の加工形態であってもよい。
健康飲食品として用いられる場合、例えば、乾燥食品、サプリメント等に配合することができるが、これに限定されるものではない。
本発明の飲食物は、本発明の純正ごま油を実質的に含有しない食品原料に、本発明の純正ごま油を所要量、加えて、一般の製造法により加工製造することができる。本発明の純正ごま油を実質的に含有しない飲食物とは、例えば胡麻等を原料としていない飲食物が挙げられるが、胡麻等を原料とする飲食物であっても、最終形態の飲食品における本発明の純正ごま油の含有量が極微量であって、その飲食物の１日摂取量あたり、本発明の純正ごま油の総含有量が０．８ｇ未満、好ましくは０．１ｇ以下のもの、あるいはその飲食物の１日摂取量あたり、本発明の純正ごま油が０．８ｇ未満、好ましくは０．１ｇ以下のものは、本発明の純正ごま油を実質的に含有しない飲食物に含まれる。
本発明の純正ごま油の配合量は剤形、食品の形態性状により異なるが、一般には０．００１〜５０％が好ましいが特に限定されるものではない。また健康食品、機能性食品としての摂取は、上昇した血清コレステロール値及び／又は血中脂質値を減少させる血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善に用いられ、医師の食事箋に基づく栄養士の管理の下に、病院給食の調理の際に本発明のごま油を実質的に含有しない任意の食品に、本発明の純正ごま油を加え、その場で調整した機能性食品の形態で患者に与えることもできる。本発明の飲食物は、上昇した血清コレステロール値及び／又は血中脂質値を減少させる血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善を目的として、目安として本発明の純正ごま油を1日用量を１５０ｍｇ以上／ｋｇ・ｄａｙとして、好ましくは２１０ｍｇ以上／ｋｇ・ｄａｙ継続して摂取させることが望ましい。１５０ｍｇ以上／ｋｇ・ｄａｙは、体重６８ｋｇで1日用量が１０ｇ以上／日に相当し、２１０ｍｇ以上／ｋｇ・ｄａｙは、体重６８ｋｇで1日用量が１４ｇ以上／日に相当する。
１回あるいは複数回に分けて摂取させることが望ましい。
【００２９】
また、本発明の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下剤を所定量ペットフードに含有させることで、血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低減作用を示すペットフードを製造することが可能である。
ペットとしては特に限定されないが、イヌやネコに用いることが好ましい。本発明におけるペットフードとは、ヒトが愛玩の目的で飼育する動物のための飼料を指し、具体的にはドッグフード、キャットフード等をいう。ペットフードの形態は特に限定されず、ドライタイプ、ウェットタイプ、セミモイストタイプ、ビスケットタイプ、ジャーキータイプ、ソーセージタイプ、粉末、顆粒、カプセル等のサプリメントタイプが挙げられる。
ペットフード全量に対する純正ごま油の含有量は、上記摂取好適範囲に基づき、ペットの種類、摂取方法により適宜選定され、０．０００１質量％〜３０質量％が好ましく、より好ましくは０．００１質量％〜２５質量％である。
血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下の必要な人の体重は平均で６５Ｋｇであるから、ペットの重さを勘案して1日用量を決め、１回あるいは複数回に分けて摂取させるよいにするとよい。含有量が少なすぎると、血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減効果が不十分になる場合があり、多すぎるとペットの嗜好性を損なうおそれがある。
本発明のペットフードには、本発明の効果を損なわない範囲で、ペットフードに含まれる通常の成分を１種単独で又は２種以上を適宜組み合わせて配合することができる。
任意成分としては、例えば、小麦、ライ麦、マイカ、大麦、グレインソルガム、玄米、コーン、米、ひえ、あわ、アマランサス等の炭水化物、牛肉、豚肉、鶏肉、羊肉等の肉類、魚粉、肉粉、大豆蛋白、脱脂粉乳等のタンパク源、小麦胚芽、米糠油粕、米糠、大豆油粕、牛脂、ラード、大豆等の動植物性油脂、ふすま等の食物繊維、野菜由来成分、乳糖、オリゴ糖等の糖類、ビタミン、ミネラル等の微量栄養成分、多価アルコール、水等が挙げられる。この中でも、コレステロール低減剤効果の点から、Ｌ−カルニチン、環状オリゴ糖、グルコマンナン、イソフラボン、乳酸菌、植物ステロール、リンゴポリフェノール、ＥＰＡ、ＤＨＡ、海藻、魚油、オリーブ油、ごま、ごま油等を併用すると好適である。
本発明のペットフードの製造方法は特に限定されず、純正ごま油と任意成分とを混合して、公知の方法により得ることができる。
本発明の純正ごま油そのものを有効成分とする血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減剤の摂取量は、ペットの種類、摂取方法によって適宜選定されるが、１５０ｍｇ以上／ｋｇ・ｄａｙ、好ましくは２１０ｍｇ以上／ｋｇ・ｄａｙである。これらの好適範囲により、本発明の純正ごま油そのものを有効成分とする血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減効果を特に得ることができる。
次に、実施例により、本発明をさらに具体的に説明する。
【実施例１】
【００３０】
ヒト肝癌由来細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）を用いたセサミン及びリグナン類による脂質産生抑制作用試験
１  試験目的
ヒト肝癌由来細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）を用いて、上清に分泌されるリポタンパク質をＬｉｐｏＳＥＡＲＣＨ測定システム（ゲルろ過ＨＰＬＣ法及び解析アルゴリズム）により、コレステロール（ＴＣ）及び中性脂肪（ＴＧ）中の主要脂質（ＬＤＬ及びＨＤＬなど）について分別定量し、被験物質による脂質産生抑制作用について検討した。
２  被験物質及び試薬
２−１  被験物質
２−１−１  被験物質Ｉ  セサミン  
２−１−２  被験物質II  セサモリン
２−１−３  被験物質III  リグナン類
２−２  試薬
Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ   Ｍｅｄｉｕｍ（ライフテクノロジーズジャパン株式会社製造）
ＤＭＥＭ, ｈｉｇｈ ｇｌｕｃｏｓｅ, ｎｏ ｇｌｕｔａｍｉｎｅ, ｎｏ ｐｈｅｎｏｌ ｒｅｄ（ライフテクノロジーズジャパン株式会社製造）
２００ｍＭ Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ（シグマアルドリッチジャパン合同会社製造）Ｆｅｔａｌ Ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｍ (ＦＢＳ) （株式会社エムピーバイオジャパン製造）
Ａｌｂｕｍｉｎ，ｆｒｏｍＢｏｖｉｎｅ ｓｅｒｍ（ＢＳＡ） Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄ Ｆｒｅｅ（和光純薬工業株式会社製造）
０．０２％−ＥＤＴＡ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ナカライテスク株式会社製造）
２．５％−Ｔｒｙｐｓｉｎ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ライフテクノロジーズジャパン株式会社製造）
Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−Ｂｕｆｆｅｒｅｄ Ｓａｌｉｎｅ (Ｄ−ＰＢＳ) （ライフテクノロジーズジャパン株式会社製造）
３  材料及び方法
３−１  細胞  ヒト肝癌由来細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）, Ｃｅｌｌ Ｎｏ. : ＪＣＲＢ１０５４  
３−２  機器
ＣＯ２インキュベーター（ＭＣＯ−３４５，パナソニックヘルスケア株式会社）クリーンベンチ（ＭＣＶ−１６，パナソニックヘルスケア株式会社）
培養倒立顕微鏡（ＴＭＳ，株式会社ニコン）
冷却遠心機（ＫＵＢＯＴＡ１７１０，株式会社久保田製作所）
３−３  群構成、被験物質調製、細胞培養、処理及び細胞回収
３−３−１  実験群、被験物質添加量及び最終濃度    
表１に示す。
【００３１】
【表１】
0005870181.tif 000002
【００３２】
３−３−２  被験物質の調製及び使用条件
（１）セサミン溶液は、セサミンの原末をＤＭＳＯに溶解した後、ＤＭＥＭ（０．１％ＢＳＡ含有）で希釈した。５ｍＬの細胞培養液に対して５０μＬ添加し、セサミンの最終濃度が０．０００２，０．０００７，０．００２％になるように調製した。
（２）セサモリン溶液は、セサモリンの原末をＤＭＳＯに溶解した後、ＤＭＥＭ（０．１％ＢＳＡ含有）で希釈した。５ｍＬの細胞培養液に対して５０μＬ添加し、セサモリンの最終濃度が０．０００２，０．０００７，０．００２％になるように調製した。
（３）セサミン＋セサモリン溶液は、セサミン及びセサモリンの原末を２．７６：１の割合でＤＭＳＯに溶解した後、ＤＭＥＭ（０．１％ＢＳＡ含有）で希釈した。５ｍＬの細胞培養液に対して５０μＬ添加し、セサミン＋セサモリンの最終濃度が０．０００２，０．０００７，０．００２％になるように調製した。
（４）リグナン類溶液は、リグナン類を１：１の割合でＤＭＳＯに溶解した後、ＤＭＥＭ（０．１％ＢＳＡ含有）で希釈した。５ｍＬの細胞培養液に対して５０μＬ添加し、リグナン類の最終濃度が０．０００２，０．０００７，０．００２％になるように調製した。
３−３−３  Ｈｅｐ Ｇ２の細胞培養、被験物質の添加及び細胞回収条件
（１）Ｈｅｐ Ｇ２細胞を６ｃｍディッシュで５ｍＬのＤＭＥＭ培養液で３７℃／５％ＣＯ２条件下で維持培養した。
（２）培養した細胞を１×１０６ｃｅｌｌになるようＤＭＥＭ（１０％ＢＳＡ含有）を用いて調製し、ディッシュに播種した。
（３）細胞密度が過剰になる前に、培養容器からＤＭＥＭ（１０％ＢＳＡ含有）を除き、ＤＭＥＭ（０．１％ＢＳＡ含有）で細胞表面を洗浄後、培養容器にＤＭＥＭ（０．１％ＢＳＡ含有）を入れ換え、被験物質を添加した。
（４）Ａ１〜Ａ６群について被験物質と２日間培養後、培養上清を１ｍＬ程回収し、冷凍保存した。
３−４  脂質量測定解析（Ｌｉｐｏ ｃｕｌｔｕｒｅ）
上記で得られたＨｅｐ Ｇ２細胞の培養上清を送付先〔（株）スカイライトバイオテック  解析センター〕に送付した。培養上清に産生されるリポタンパク質をＬｉｐｏＳＥＡＲＣＨ測定システム（Ｌｉｐｏ ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｈｅｐ Ｇ２細胞の培養上清用オプションメニュー）で定量測定した。
【００３３】
４  試験結果
ヒト肝癌由来細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）をセサミン、セサモリン及びリグナン類添加培地で４８時間培養した際の培養上清中コレステロール及び中性脂肪中の主要脂質 （ＣＭ，ＶＬＤＬ，ＬＤＬ及びＨＤＬ）濃度及びＣｏｎｔｒｏｌ−２ (０．１％ｄＤＭＳＯ)と比較した百分比を表２に示した。なおＬｉｐｏＳＥＡＲＣＨ測定システムにおいて、カラム溶出物のピーク強度が０．５ｍＶ未満の場合は検出限界以下（Ｎ.Ｄ.）とした。
セサミンは、Ｃｏｎｔｒｏｌ−２ (０．１％ｄＤＭＳＯ)と比較して最終濃度０．０００２％ではＨｅｐ Ｇ２細胞上清中のコレステロール濃度及び中性脂肪濃度を共に５６％に低下させ、０．０００７％ではコレステロール濃度を４４％に、中性脂肪濃度を４６％に低下する作用を示した。さらに、０．００２％ではコレステロール濃度は検出限界以下に中性脂肪濃度は２８％と顕著な低下作用を示した。
セサモリンは、Ｃｏｎｔｒｏｌ−２ (０．１％ｄＤＭＳＯ)と比較して最終濃度０．０００２％ではＨｅｐ Ｇ２細胞上清中のコレステロール濃度を７５％に、中性脂肪濃度を７０％に低下させ、０．０００７％ではコレステロール濃度を６３％に、中性脂肪濃度を４１％に低下する作用を示した。また、０．００２％ではコレステロール濃度及び中性脂肪濃度は検出限界以下であった。
セサミン＋セサモリンは、Ｃｏｎｔｒｏｌ−２ (０．１％ｄＤＭＳＯ)と比較して最終濃度０．０００２％ではＨｅｐ Ｇ２細胞上清中のコレステロール濃度を８１％に、中性脂肪濃度を８３％とわずかに低下させ、０．０００７％ではコレステロール濃度６９％に、中性脂肪濃度６１％に低下する作用を示した。また、０．００２％ではコレステロール濃度及び中性脂肪濃度は検出限界以下であった。
リグナン類は、Ｃｏｎｔｒｏｌ−２ (０．１％ｄＤＭＳＯ)と比較して最終濃度０．０００２％でＨｅｐ Ｇ２細胞上清中のコレステロール濃度を１１９％に中性脂肪濃度を１３０％にわずかに増加させた。０．０００７％ではコレステロール濃度を１０６％に中性脂肪濃度を１０９％に、０．００２％ではコレステロール濃度を８８％に中性脂肪濃度を９１％とＣｏｎｔｒｏｌ−２ (０．１％ｄＤＭＳＯ)とほぼ同等の作用を示した。
【００３４】
［考察］
セサミン、セサモリン及びセサミン＋セサモリンは、ヒト肝癌由来細胞(Ｈｅｐ Ｇ２)における脂質産生に対して、培地添加濃度が増すにつれて、脂質合成又は分泌の阻害作用を示すことが確認された。
なお、本試験で使用したリグナン類は、１００ｇ当たり、セサミンは２．３５ｇ、セサモリンは１．３８ｇ含まれている。リグナン類の最終濃度が０．００２％の場合は、セサミンは０．００００４７％、セサモリンは０．００００２８％がそれぞれ含まれていることになる。よって、セサミン＋セサモリンの０．０００２％（セサミン０．０００１５％及びセサモリン０．００００５３％）よりも添加量が少なかったため、リグナン類を添加した条件では、脂質合成又は分泌の阻害作用が弱かったと考えられる。
セサミン及びリグナン類による脂質産生抑制作用を評価する目的で、ヒト肝癌由来細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）を用いて被験物質（セサミン、セサモリン及びセサミン+セサモリン、リグナン類）添加条件下における、上清に分泌されるリポタンパク質を定量した。定量には、ＬｉｐｏＳＥＡＲＣＨ測定システム（ゲルろ過HPLC法及び解析アルゴリズム）を用い、コレステロール及び中性脂肪中の主要脂質（ＬＤＬ及びＨＤＬなど）について分別した。
セサミンは、最終濃度０．０００２％から０．００２％の場合、コントロールと比較してＨｅｐ Ｇ２細胞上清中のコレステロール濃度は５６％から検出限界以下に、中性脂肪濃度は５６％から２８％に低下させた。
セサモリンは、最終濃度０．０００２％から０．００２％の場合、コントロールと比較してＨｅｐ Ｇ２細胞上清中のコレステロール濃度は７５％から検出限界以下に、中性脂肪濃度は７０％から検出限界以下に低下させた。
セサミン+セサモリンは、最終濃度０．０００２％から０．００２％の場合、コントロールと比較してＨｅｐ Ｇ２細胞上清中のコレステロール濃度は８１％から検出限界以下に、中性脂肪濃度は８３％から検出限界以下に低下させた。
リグナン類は、最終濃度０．０００２％から０．００２％の場合、コントロールと比較してＨｅｐ Ｇ２細胞上清中のコレステロール濃度は１１９％から８８％に、中性脂肪濃度は１３０％から９１％となった。
以上の結果から、セサミン、セサモリン及びセサミン＋セサモリンは、ヒト肝癌由来細胞(Ｈｅｐ Ｇ２)における脂質産生に対して、合成又は分泌の阻害作用を示すことが確認された。なお、リグナン類に関しては、被験物質中のセサミン及びセサモリン含有量が少なかったため、脂質産生又は分泌の抑制効果が弱かったと考えられる。
【００３５】
【表２】
0005870181.tif 000003
【実施例２】
【００３６】
コレステロール低減の関与成分であるセサミンとセサモリンにスポットを当てて再試験を行った。実施例２の実験は実施例１よりも被験物質の濃度を広く採用した。
１  試験目的
実施例１に記載のとおりである。
２  被験物質及び試薬
２−１  被験物質
２−１−１  被験物質Ｉ  セサミン  
２−１−２  被験物質II  セサモリン
２−２  試薬  実施例１に記載のとおりである。
３  材料及び方法
３−１  細胞  実施例１に記載のとおりである。
３−２  機器  実施例１に記載のとおりである。
３−３  群構成、被験物質調製、細胞培養、処理及び細胞回収
３−３−１  実験群、被験物質添加量及び最終濃度    
表３に示す。
【００３７】
【表３】
0005870181.tif 000004
【００３８】
３−３−２  被験物質の調製及び使用条件
（１）セサミン溶液は、セサミンの原末をＤＭＳＯに溶解した後、ＤＭＥＭ（０．１％ＢＳＡ含有）で希釈した。細胞培養液中のセサミン最終濃度が０．０００２，０．０００５，０．００１％になるように調製した。
（２）セサモリン溶液は、セサモリンの原末をＤＭＳＯに溶解した後、ＤＭＥＭ（０．１％ＢＳＡ含有）で希釈した。細胞培養液中のセサモリン最終濃度が０．００００７３，０．０００１８，０．０００３６％になるように調製した。
（３）５ｍＬＤＭＥＭ（０．１％ＢＳＡ含有）に対して５０μＬ添加して脂質産生抑制作用確認試験をした。
３−３−３  Ｈｅｐ Ｇ２の細胞培養、被験物質の添加及び細胞回収条件  実施例１に記載のとおりである。
３−４  脂質量測定解析（Ｌｉｐｏ ｃｕｌｔｕｒｅ）  実施例１に記載のとおりである。
【００３９】
４  試験結果
ヒト肝癌由来細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）をセサミン及びセサモリン添加培地で４８時間培養した際の培養上清中コレステロール及び中性脂肪中の主要脂質 （ＣＭ，ＶＬＤＬ，ＬＤＬ及びＨＤＬ）濃度を表４に、Ｃｏｎｔｒｏｌ(０．１％ｄＤＭＳＯ)と比較した百分比を表５に示した。
セサミンは、Ｃｏｎｔｒｏｌ(０．１％ｄＤＭＳＯ)と比較して最終濃度０．０００２％ではＨｅｐ Ｇ２細胞上清中のコレステロール濃度７９％及び中性脂肪濃度８８％に低下させ、０．０００５％ではコレステロール濃度を７１％に、中性脂肪濃度を８０％に低下する作用を示した。さらに、０．００１％ではコレステロール濃度５７％、中性脂肪濃度５６％と顕著な低下作用を示した。
セサモリンは、Ｃｏｎｔｒｏｌ(０．１％ｄＤＭＳＯ)と比較して最終濃度０．００００７３％ではＨｅｐ Ｇ２細胞上清中のコレステロール濃度を９３％に低下させ、中性脂肪濃度は１００％とＣｏｎｔｒｏｌ(０．１％ｄＤＭＳＯ)と同等の作用を示した。０．０００１８％ではコレステロール濃度を８６％に低下させ、中性脂肪濃度は１０４％とＣｏｎｔｒｏｌ(０．１％ｄＤＭＳＯ)とほぼ同等の作用を示した。また、０．０００３６％ではコレステロール濃度を７１に、中性脂肪濃度８０％に低下させた。
【００４０】
【表４】
0005870181.tif 000005
【００４１】
【表５】
0005870181.tif 000006
【実施例３】
【００４２】
高コレステロール食負荷ラットを用いるリグナン類の有効性確認試験をした。１  試験目的
「純正ごま油」の有効性に関する非臨床試験の一環として、純正ごまから抽出した「リグナン類」を高コレステロール食負荷ラットに８週間連続投与した。投与期間中の血中Ｔ−Ｃｈｏ、ＨＤＬ−Ｃ及びＬＤＬ−Ｃの測定結果等からその効果を検討することを目的に本試験を実施した。
【００４３】
２  試験方法
本試験で用いた被験物質は、被験物質Ｉ（リグナン類、１ｇ中にリグナン６４．３７９ｍｇ含有、かどや製油株式会社提供）、被験物質II（リグナン類、１ｇ中にリグナン４０．６８３ｍｇ含有、かどや製油株式会社提供）、媒体は、媒体Ｉ（大豆油、和光純薬工業株式会社製）、媒体II（ナタネ油、和光純薬工業株式会社製）である。
試験動物は、ラット（ＳＰＦ）、Ｃｒｌ:(ＣＤ)ＳＤ、雄（日本チャールス・リバー株式会社供給）２８匹をＡ１，Ａ２，Ａ３の各群８匹に分けて高コレステロール食を８週間負荷させ、リグナン類を８週間反復経口投与した（被験物質投与開始時の週齢は６〜１３週齢）。投与期間中の体重、摂餌量、摂水量、血液生化学的検査及び投与後の組織（肝臓）重量を指標にして高コレステロール食負荷ラットに対する有効性の評価を行った。なお、今回の試験では、被験物質として使用したリグナン類の含有量が、当初予定していた量よりも少なかったため、追加入手した被験物質については、投与液量を増加させ７週目から投与を行った。
本試験で用いた飼料は、順化期間中は、標準飼料（ＭＦ、オリエンタル酵母工業株式会社製）を自由に摂取させた。群分け後は、高コレステロール飼料（ＭＦ９７．５％、コレステロール２％、コール酸０．５％）を自由に摂取させた。飲料水は上水道水（岐阜県海津市海津町）を給水瓶により自由に摂取させた。群構成及び投与量は表６に示す。被験物質投与経路は臨床使用経路に従い、強制経口投与した。投与方法はディスポーザブルシリンジ及び経口ゾンデを用いて投与した。投与液量の算出は最新の体重に基づいて、個体別に算出した。
【００４４】
【表６】
0005870181.tif 000007
【００４５】
血液生化学的検査は表７に示す方法に従って測定した。剖検は採血終了後、イソフルラン麻酔下で放血致死させ、肝臓を摘出し重量を測定した。
【表７】
0005870181.tif 000008
【００４６】
測定値は平均値±標準誤差で表した。有意差検定については、Ａ１群を対照としたＢａｒｔｌｅｔｔ検定により分散に一様性が認められる場合にはＤｕｎｎｅｔｔ検定を、分散に一様性が認められない場合にはSteel検定を行った。統計解析には、Ｓｔａｔｌｉｇｈｔ（登録商標、ユックムス株式会社）を使用し、有意水準は５％未満とした。
【００４７】
３  結果
１）体重推移
リグナン類を８週間反復経口投与下高コレステロール食負荷ラットの平均体重を表８及び図１に示した。
【表８】
0005870181.tif 000009
【００４８】
各測定日における平均体重については、全ての実験群で経日的な増加を示し、いずれの被験物質投与群においても媒体投与群に比べて有意な変化は認められなかった。
【００４９】
２）摂餌量測定
リグナン類を８週間反復経口投与下高コレステロール食負荷ラットの平均摂餌量を表９に示した。
【表９】
0005870181.tif 000010
【００５０】
摂餌量については、全ての実験群で２週間以降に緩やかな減少傾向を示した。媒体投与群に比べて、リグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群では投与２, ５, ６, ７及び８週間目に有意な増加が認められたが、リグナン類３００ｍｇ／ｋｇ投与群では増加傾向はあるものの有意な変化は認められなかった。
【００５１】
３）摂水量測定  
摂水量については、全ての実験群で被験物質投与期間中に緩やかな増加傾向を示した。媒体投与群に比べてリグナン類３００ｍｇ／ｋｇ投与群では投与１週間目に有意な増加が認められた。また、リグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群は、媒体投与群に比べて投与４及び７週間目に有意な増加を示した。
【００５２】
４）血液生化学的検査
リグナン類を８週間反復経口投与した高コレステロール食負荷ラットの血液生化学的検査〔血中総コレステロール（Ｔ−Ｃｈｏ）、血中高比重リポ蛋白（ＨＤＬ−Ｃ）、血中低比重リポ蛋白（ＬＤＬ−Ｃ）、動脈硬化指数（ＬＤＬ/ＨＤＬ比）〕結果を表１０及び図２〜５に示した。
【表１０】
0005870181.tif 000011
【００５３】
血中総コレステロール (Ｔ−Ｃｈｏ) 値については、投与前値において媒体投与群に比べて、リグナン類３００ｍｇ／ｋｇ及び５００ｍｇ／ｋｇ投与群がわずかながら高かった。全ての実験群のＴ−Ｃｈｏ値は、投与２週間目に上昇し、投与８週間目まで緩やかな低下を示したが、その間のＴ−Ｃｈｏ値については、媒体投与群と被験物質投与との間に有意な変化は認められなかった（図２参照）。
血中高比重リポ蛋白 (ＨＤＬ−Ｃ) 値については、投与前値において媒体投与群に比べて、リグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群に有意な高値が認められた。媒体投与群のＨＤＬ−Ｃ値は、投与２週間から８週間目まで減少を示したが、リグナン類３００ｍｇ／ｋｇ及び５００ｍｇ／ｋｇ投与群は、媒体投与群に比べて投与２, ４, ６及び８週間目に有意な上昇を示し、被験物質の投与用量に依存したＨＤＬ−Ｃ値減少の抑制が認められた（図３参照）。
血中低比重リポ蛋白 (ＬＤＬ−Ｃ) 値については、媒体投与群で投与２週間目に上昇し、その後８週間目まで緩やかな減少が認められた。投与期間中の被験物質投与群のＬＤＬ−Ｃ値は、媒体投与群と同様の推移を示したが、投与２〜６週間目では媒体群との間に有意な変化は見られなかった。また、リグナン類３００ｍｇ／ｋｇ投与群では投与前値において、リグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群では投与８週間目において媒体投与群に比べてＬＤＬ−Ｃ値の若干の増加が認められた（図４参照）。
動脈硬化指数 (ＬＤＬ/ＨＤＬ比) については、媒体投与群で投与２週間目に上昇し、その後８週間目まで緩やかな減少が認められ、リグナン類３００ｍｇ／ｋｇ投与群も同様の推移を示した。一方、リグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群の投与２週間後のＬＤＬ/ＨＤＬ比は、媒体投与群ほど上昇を示さず、投与４, ６及び８週間目では媒体投与群に比べて有意な低下が認められた（図５参照）。
【００５４】
５）組織重量
リグナン類を８週間反復経口投与下高コレステロール食負荷ラットの肝臓重量を表１１に示した。
【表１１】
0005870181.tif 000012
【００５５】
肝臓重量については、媒体投与群と被験物質投与群との間で有意な変化は認められなかったが、体重１００ｇ当たりの肝臓比重量では、媒体投与群に比べてリグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群で有意な増加が認められた。
【００５６】
４  考察
コレステロールに対するリグナン類の有効性を評価する目的として、高コレステロール負荷ラットに及ぼす影響について検討した。
ラットに高コレステロール食を８週間負荷させ、リグナン類を８週間反復経口投与し、投与期間中の体重、摂餌量、摂水量、血液生化学的検査及び投与後の組織（肝臓）重量を指標にして高コレステロール食負荷ラットに対する有効性の評価を行った。なお、今回の試験では、被験物質として使用したリグナン類の含有量が、当初予定していた量よりも少なかったため、追加入手した被験物質については、投与液量を増加させ７週目から投与を行った。
投与期間中の被験物質投与群のラットの体重は、経日的な増加を示し、媒体投与群と比較して、平均体重に有意な変化が見られなかったことから、各被験物質の投与による体重への影響はないものと思われた。
摂餌量については、媒体投与群と比較して、リグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群では投与２, ５,６, ７及び８週間目に増加が認められ、リグナン類３００ｍｇ／ｋｇ投与群でも有意ではないものの増加傾向が認められた。
また、摂水量についても、媒体投与群と比較して、リグナン類３００ｍｇ／ｋｇ投与群では投与1週間目に増加が認められ、リグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群でも投与４及び７週間目に増加作用が認められたことから、被験物質はラットの摂食量を増加させる可能性が示唆された。
血中Ｔ−Ｃｈｏ値については、投与前値において媒体投与群に比べて、リグナン類３００ｍｇ／ｋｇ及び５００ｍｇ／ｋｇ投与群に若干の高値が認められたが、いずれの実験群も投与２週間目に上昇し、投与８週間目まで緩やかな低下を示したが、媒体投与群と比較して被験物質投与群に有意な変化は認められなかった。
一方、血中ＨＤＬ−Ｃ値については、媒体投与群で２週間目以降に５０％程度の低下が見られたが、リグナン類３００ｍｇ／ｋｇ及び５００ｍｇ／ｋｇ投与群では投与２, ４, ６及び８週間目において媒体群に比べて有意かつ投与用量に依存した増加を示した。
血中ＬＤＬ−Ｃ値については、リグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群で媒体投与群に比べて投与８週間目に有意な増加が認められたが、また、投与２から６週間目までのＬＤＬ−Ｃ値については、いずれの投与用量も媒体投与群と同様の推移であった。
そこで、動脈硬化指数であるＬＤＬ/ＨＤＬ比を算出して媒体投与群と比較したところ、リグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群では投与４, ６及び８週間目に有意な減少が認められた。なお、今回実施した血液生化学的検査において、被験物質投与前の測定値の数カ所に有意差が認められたが、これらの数値は被験物質投与前の結果であり、実験動物の群分けにより発生した誤差であることから、被験物質の評価に関して意味のある変化ではないと判断した。
肝臓の重量については媒体投与群と比較して有意な変化は認められなかったが、体重１００ｇ当たりの肝臓比重量では、リグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群で増加が認められた。リグナン類５００ｍｇ／ｋｇの投与による肝臓比重量増加の原因については、現時点では明らかではないので、病理組織学的検査の実施が望まれる。
以上の結果から、被験物質であるリグナン類は、８週間の投与期間中に測定した摂餌量及び摂水量を用量依存的に増加させたことから、摂食量を増加させる可能性が示唆された。また、血中Ｔ−ＣＨＯ値及び血中ＬＤＬ−Ｃ値に大きな影響を及ぼさなかったが、コレステロール負荷による血中ＨＤＬ−Ｃ値の低下を用量依存的に上昇させたことにより、リグナン類５００ｍｇ／ｋｇ投与群では、動脈硬化指数の上昇に対する有意な抑制作用が認められた。
したがって、今回の結果からリグナン類５００ｍｇ／ｋｇは、コレステロール負荷ラットのＨＤＬ−Ｃ値の低下を抑制し、動脈硬化指数を改善したことから、脂質代謝異常や動脈硬化に対する有効性が明らかとなった。
【実施例４】
【００５７】
関与成分の摂取量を設定するための予備試験をした。
高コレステロール血症患者にセサミン３２．４ｍｇ／日を３回に分けて４週間、その後６４．８ｍｇ／日を３回に分けて４週間、合計８週間摂取させた場合、８週後の総コレステロール値及びＬＤＬコレステロール値が対照群に比べて有意に低下したという報告がある（独立行政法人  国立健康・栄養研究所ホームページ．「健康食品」の安全性・有効性情報．）。
ＬＤＬコレステロールが高めの者を対象に純正ごま油１０ｇ／日を８週間摂取した（オープン試験）時の血清脂質低減効果及び血管内皮機能改善効果について検討した。主要評価項目のＬＤＬコレステロールは、摂取８週目で有意に低下し改善したが、ＣＡＶＩでは、有意な変動は認められなかった。副次評価項目の総コレステロールは、摂取４、８週目で有意に低下した。安全性には、問題は認められなかった（社内資料  試験実施報告書  株式会社ＴＴＣ作成（2010））。
血清総コレステロール値、血清ＬＤＬコレステロール値及び空腹時血糖値が高めの男女６６名を、純正ごま油１２ ｇ／日、セサミン含有プラセボ油１２ｇ／日、プラセボ油１２ｇ／日いずれかの群に無作為に割付け、１２週間摂取した時の血清コレステロール値低減効果を検討した。主要評価項目のＬＤＬコレステロール、ＬＤＬコレステロール計算値はプラセボ摂取群と比較して純正ごま油摂取群の摂取１２週目に低下傾向がみられ、副次評価項目の総コレステロールはプラセボ摂取群と比較して純正ごま油摂取群の１２週目に低下傾向がみられた。安全性には、問題は認められなかった（社内資料  試験実施報告書  株式会社ＴＴＣ作成（2014））。
これらの結果から、セサミン６４．８ｍｇ／日以上の摂取でＬＤＬコレステロール値低下が期待され、オープン試験の結果から１０ｇ／日を低用量に、先に実施した用量設定試験の結果、また料理に加えて摂取する事を考慮し１４ｇ／日を高用量とした。
【実施例５】
【００５８】
ヒト試験により、純正ごま油摂取により血清コレステロール値の低減効果の臨床試験を実施した。
ごまには、セサミンが含まれており、これまでの研究により、コレステロール低下作用、抗高血圧作用、抗酸化作用、アルコール代謝促進作用などが報告されている。本発明の実施例２における試験の被験食品である純正ごま油についても、セサミン等のゴマリグナン類が含有されている。純正ごま油の血清コレステロール値改善効果の発現用量を検討するために、血清コレステロール値が高めの男女を対象にごま油を含まない食品（プラセボ食品）と、純正ごま油を１４ｇ（高用量）及び１０ｇ（低用量）含有する食品を１２週間摂取させる無作為化二重盲検並行群間比較試験を実施した。主要評価項目はＬＤＬコレステロール（Ｆ式）、副次評価項目は、総コレステロールである。
（１）被験者として２０歳以上６４歳以下の男女で血清コレステロール値が高めの者（総コレステロール値２００〜２４０ｍｇ／ｄＬ、ＬＤＬコレステロール値１２０〜１６０ｍｇ／ｄＬ）１０８名を、高用量群、低用量群、プラセボ群の各群３６名に分けて試験食品の摂取を開始した。１０ｇ／日を低用量、１４ｇ／日を高用量とした。期間中脱落例があり所定の検査内容を完遂した被験者は１０３名であった（表８参照）。高用量群は、体重６８．０１±１１．５０ｋｇに対して１４ｇを投与したのであるから、経口投与が1日用量を１４ｇ／日は１７６−２４８ｍｇ／ｋｇ・ｄａｙとして継続して摂取さたことに相当し、低用量群は、体重６５．４２±１１．１６ｋｇに対して１０ｇを投与したのであるから、経口投与が1日用量を１０ｇ／日は１３１−１８４ｍｇ／ｋｇ・ｄａｙとして継続して摂取させたことに相当する。
【００５９】
【表１２】
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【００６０】
（２）試験方法
本試験で用いた試験食品の組成を表９に、1日摂取量あたりの栄養成分を表１０に示す。試験食品は、朝昼晩のいずれかの食事の際に１日１４ g（７ g×２ポーション）を食事とともに１２週間（８４日間）摂取させ、空腹時臨床検査（血液学的検査、血液生化学検査、尿検査）は、定法に従って測定を行った。
計算法によるＬＤＬコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）の算出法はＦｒｉｅｄｅｗａｌｄらの方法（Ｆ式）にて、下記のように算出した。
ＬＤＬ−Ｃ（Ｆ式）= 総コレステロール（ＴＣ）−ＨＤＬコレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）−中性脂肪（ＴＧ）÷５
【００６１】
【表１３】
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【００６２】
【表１４】
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【００６３】
（３）結果  
１）ＬＤＬ−Ｃ（Ｆ式）
摂取前からの変化量の比較では、１２週目においてプラセボ群に比べて高用量群及び低用量群で有意に低値（プラセボ群：１．９±１５．９ｍｇ／ｄＬ、高用量群：−１１．０±２１０ｍｇ／ｄＬ（ｐ＝０．００２）、低用量群：−５．９±１５．７ｍｇ／ｄＬ（ｐ＝０．０４３）であった。また、８週目においては、プラセボ群に比べて高用量群及び低用量群で有意に低値（プラセボ群：０．７± １７．４ｍｇ／ｄＬ、高用量群：−７．５±１３．８ｍｇ／ｄＬ（ｐ＝ ０．０３５）、低用量群：−８．４±１５．９ｍｇ／ｄＬ（ｐ＝０．０２６）であった（図６参照）。
実測値の群内比較では、１２週目、８週目において高用量群及び低用量群でいずれも有意に低下（高用量群：摂取前：１３８．０± １１．９ｍｇ／ｄＬ、８週目：１３０．５ ± １１．７ｍｇ／ｄＬ、１２週目：１２７．１± １６．１ｍｇ／ｄＬ、 低用量群：摂取前：１４０．４± ９．８ｍｇ／ｄＬ、８週目：１３２．０±１８．８ｍｇ／ｄＬ、１２週目：１３４．５± １９．９ｍｇ／ｄＬ）した。プラセボ群では有意な差は認められなかった。
２）総コレステロール（ＴＣ）
摂取前からの変化量では、１２週目においてプラセボ群に比べて高用量群で有意に低値（プラセボ群 −０．６±１７．８ｍｇ／ｄＬ、高用量群−１２．６± ２２．３ｍｇ／ｄＬ（ｐ＝ ０．０１７））であった。また、低用量群では、プラセボ群に比べて低値（プラセボ群：−０．６±１７．８ｍｇ／ｄＬ、低用量群−８．０±１８．２ｍｇ／ｄＬ（ｐ＝０．０９５））で、有意傾向であった。８週目においては、プラセボ群と比べて高用量群及び低用量群で低値（プラセボ群：−０．５±２０．０ｍｇ／ｄＬ、高用量群：−９．３±１８．５ｍｇ／ｄＬ（ｐ＝０．０６５）、低用量群：−８．７±１７．４ｍｇ／ｄＬ（ｐ＝０．０７５））であり、いずれも有意傾向であった（図７参照）。
実測値の群内比較では、１２週目、８週目において高用量群及び低用量群でいずれも有意に低下（高用量群：摂取前：２１９．６±１８．６ｍｇ／ｄＬ、８週目：２１０．３±１７．９ｍｇ／ｄＬ、１２週目：２０７．０±１９．０ｍｇ／ｄＬ、低用量群：摂取前：２２２．１±１４．３ｍｇ／ｄＬ、８週目：２１３．４±２３．０ｍｇ／ｄＬ、１２週目：２１４．１±２３．５ｍｇ／ｄＬ）した。
以上のとおり、評価項目であるＬＤＬ−Ｃ（Ｆ式）では、純正ごま油を１４ｇ（高用量）及び１０ｇ（低用量）を含む食品はいずれもプラセボ食品と比較して１２週目及び８週目で有意に低値であった。また、評価項目の総コレステロール（ＴＣ）では高用量でプラセボ食品と比較して１２週目で有意に低値であり、８週目で低下傾向を示した。低用量ではプラセボ食品と比較して１２週目及び８週目で低下傾向を示した。
また、本試験条件下では純正ごま油の安全性に問題はなかった。
【産業上の利用可能性】
【００６４】
病気にかかる前の健康又は半健康の状態で予防的に生理活性を有する天然由来純正ごま油摂取して、健康を保持することができる。降コレステロール作用及び降中性脂質作用効果に優れ、かつ安全な天然物そのものからなる血清コレステロール値又は血中脂質値の改善剤に対する強い社会的要請に応えることができると期待される。
【要約】
【課題】天然物そのものからなる安定性が高く、副作用が少ない血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減剤を提供する。
【解決手段】純正ごま油を有効成分とする、上昇した血清コレステロール値及び／又は血中脂質値を減少させる血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の改善剤。好ましくは、血清コレステロール値及び／又は血中脂質値の低下の必要な人に前記人の血清コレステロール値及び／又は血中脂質値を所望の値にまで下げるのに有効な日常ベースに基づく量を経口投与する。
【効果】天然物で安全な物質である純正ごま油を含有し、血清コレステロール値及び／又は血中脂質値低減効果を発現する飲食品、飼料、医薬品、動物医薬品が提供できる。
【選択図】図３【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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