(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
0005976828.tif 000106
［上式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、及びＣ１-Ｃ３アルキルから独立して選択され；
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＨ３)ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＦ３)ＯＨ、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ３、及び-Ｃ(Ｏ)Ｎ(ＣＨ３)２から選択され；
Ｒ５は、-ＣＨ３、又は-ＣＨ２ＣＨ３であり；
あるいは２つのＲ５基は、３-、４-、５-、又は６員の炭素環又は環原子として１個の酸素を有する複素環を形成し；
ｎは、１、２、３、又は４であり、
Ｒ６は、Ｈ、-ＣＨ３、及び-ＣＨ２ＣＨ３から選択され；
Ｒ７は構造：
0005976828.tif 000107
0005976828.tif 000108
（ここで波線は結合部位を示す）から選択され；
Ｒ８は、-ＣＨ３、シクロプロピル、及びオキセタン-３-イルから選択され；
Ｘ１はＣＲ９又はＮであり、ここで、Ｒ９はＨ、-ＣＨ３、及び-ＣＨ２ＣＨ３から選択され；
Ｘ２はＣＲ１０又はＮであり、ここで、Ｒ１０はＨ、-ＣＨ３、及び-ＣＨ２ＣＨ３から選択され；
Ｙ１及びＹ２はＣＨ及びＮから独立して選択され、Ｙ１及びＹ２はそれぞれＮではない］
から選択される化合物、又はその立体異性体、互変異性体、又は薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
ＸがＣＲ９であり、Ｒ９がＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＸがＮである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ４が-ＣＨ２ＯＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２がＦである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１及びＲ３がＨである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ６がＣＨ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
以下の表：
0005976828.tif 000109
0005976828.tif 000110
0005976828.tif 000111
0005976828.tif 000112
0005976828.tif 000113
から選択される化合物。
【請求項９】
以下の表：
0005976828.tif 000114
から選択される化合物。
【請求項１０】
請求項１から９の何れか一項に記載の化合物と薬学的に許容可能な担体、流動促進剤、希釈剤、又は賦形剤を含んでなる薬学的組成物。
【請求項１１】
治療剤を更に含む、請求項１０に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
請求項１から９の何れか一項に記載の化合物を薬学的に許容可能な担体と組み合わせることを含む、薬学的組成物の作製方法。  
【請求項１３】
請求項１０に記載の薬学的組成物を治療有効量含む、免疫障害、癌、心臓血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、ブルトン型チロシンキナーゼに起因する疾患又は障害を治療するための医薬。
【請求項１４】
疾患又は障害が免疫障害である、請求項１３に記載の医薬。
【請求項１５】
免疫障害が関節リウマチである、請求項１４に記載の医薬。
【請求項１６】
疾患又は障害が、全身的及び局所的炎症、関節炎、免疫抑制に関連した炎症、臓器移植拒絶反応、アレルギー、潰瘍性大腸炎、クローン病、皮膚炎、喘息、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、多発性硬化症、強皮症／全身性硬化症、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）血管炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、乾癬である、請求項１３に記載の医薬。
【請求項１７】
疾患又は障害が、乳癌、卵巣癌、子宮頸部癌、前立腺癌、精巣癌、尿生殖路癌、食道癌、喉頭癌、膠芽細胞腫癌、神経芽細胞腫、胃癌、皮膚癌、ケラトアカントーマ、肺癌、類表皮癌、大細胞癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞癌、肺腺癌、骨癌、結腸癌、腺腫、膵臓癌、腺癌、甲状腺癌、濾胞癌、未分化癌、乳頭癌、セミノーマ、黒色腫、肉腫、膀胱癌、肝癌及び胆道、腎臓癌、膵臓癌、骨髄障害、リンパ腫、毛様細胞、口腔癌、鼻咽頭、咽頭癌、唇癌、舌癌、口癌、小腸癌、結腸−直腸癌、大腸癌、直腸癌、脳及び中枢神経系の癌、ホジキン病、白血病、気管支癌、甲状腺癌、肝臓及び肝内胆管の癌、肝細胞癌、胃癌、神経膠腫／神経膠芽腫、子宮内膜癌、黒色腫、腎臓及び腎盂の癌、膀胱癌、子宮体癌、子宮頸癌、多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、骨髄性白血病、口腔及び咽頭の癌、非ホジキンリンパ腫、黒色腫、及び絨毛結腸腺腫から選択される癌である、請求項１３に記載の医薬。
【請求項１８】
抗炎症剤、免疫調節剤、化学療法剤、向神経性因子、心臓血管疾患治療剤、肝疾患治療剤、抗ウイルス剤、血液疾患治療剤剤、糖尿病治療剤、及び免疫不全疾患治療剤から選択される追加の治療剤が更に投与される、請求項１３に記載の医薬。
【請求項１９】
請求項１０に記載の薬学的組成物を含む、ブルトン型チロシンキナーゼに起因する症状を治療するためのキット。
【請求項２０】
免疫障害、癌、心臓血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、ブルトン型チロシンキナーゼに起因する疾患又は障害の治療において医薬として使用するための請求項１０に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
免疫障害、癌、心臓血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害の治療のための医薬の製造における請求項１０に記載の薬学的組成物の使用であって、該薬剤がブルトン型チロシンキナーゼを介して作用する使用。
【発明の詳細な説明】
【関連出願】
【０００１】
関連出願とのクロスリファレンス
米国特許法施行規則第１．５３（ｂ）条に従って出願されたこの非仮出願は、その内容の全体が出典明示により援用される、２０１１年１１月３日出願の米国仮出願第６１／５５５３９５号の米国特許法第１１９条（ｅ）項に基づく優先権を主張する。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、一般に、炎症、免疫疾患、及び癌を含む、ブルトン型チロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）によって媒介される疾患を治療するための化合物、より具体的には、Ｂｔｋ活性を阻害する化合物に関する。また本発明は、哺乳動物細胞、又は関連する病理学的状態のインビトロ、インサイツ及びインビボ診断又は治療のための化合物の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ヒト酵素の最大のファミリーであるプロテインキナーゼは、５００をはるかに超えるタンパク質を包含する。ブルトン型チロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）はチロシンキナーゼのＴｅｃファミリーの一員であり、初期Ｂ細胞発生並びに成熟Ｂ細胞の活性化、シグナル伝達及び生存の調節因子である。
【０００４】
Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）を介したＢ細胞シグナル伝達は、広範囲の生物学的成果をもたらすことができ、これらの成果はＢ細胞の発達段階に依存する。ＢＣＲシグナルの大きさと持続時間は正確に調節されなければならない。ＢＣＲ媒介性シグナル伝達の異常は、Ｂ細胞活性化の調節不全並びに／又は多数の自己免疫疾患及び／もしくは炎症性疾患を導く病原性自己抗体の形成を引き起こし得る。ヒトにおけるＢｔｋの突然変異はＸ連鎖無ガンマグロブリン血症（ＸＬＡ）を生じさせる。この疾患は、Ｂ細胞の成熟障害、免疫グロブリン産生の減少、Ｔ細胞非依存性免疫応答不全及びＢＣＲ刺激後の持続性カルシウムサインの著しい減衰に関連する。アレルギー性障害及び／又は自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患におけるＢｔｋの役割に関する証拠はＢｔｋ欠損マウスモデルで確認されている。例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の標準マウス前臨床モデルにおいて、Ｂｔｋ欠損は疾患進行の著明な改善をもたらすことが示されている。更に、Ｂｔｋ欠損マウスはまた、コラーゲン誘導性関節炎の発症に対しても抵抗性であり、ブドウ球菌誘導性関節炎にも罹患しにくい。多数の証拠が自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患の病因におけるＢ細胞及び体液性免疫系の役割を裏付けている。Ｂ細胞を枯渇させるために開発されたタンパク質に基づく治療法（例えばリツキサンなど）は、多くの自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患の治療に対する１つのアプローチである。Ｂ細胞活性化におけるＢｔｋの役割のゆえに、Ｂｔｋの阻害剤はＢ細胞媒介性病原性活性（例えば自己抗体産生など）の阻害剤として有用であり得る。Ｂｔｋは、破骨細胞、マスト細胞及び単球においても発現され、これらの細胞の機能にとって重要であることが示されている。例えば、マウスにおけるＢｔｋ欠損はＩｇＥ媒介性マスト細胞活性化の障害（ＴＮＦ-α及び他の炎症性サイトカイン放出の著明な減少）に関連し、ヒトにおけるＢｔｋ欠損は活性化単球によるＴＮＦ-α産生の大幅な減少に関連する。
【０００５】
よって、Ｂｔｋ活性の阻害は、アレルギー性障害及び／又は自己免疫疾患及び／又は炎症性疾患、例えばＳＬＥ、関節リウマチ、多発性血管炎、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、重症筋無力症、アレルギー性鼻炎、及び喘息などの治療のために有用であり得る（Di Paoloら(2011)Nature Chem. Biol. 7(1):41-50；Liuら (2011) Jour. of Pharm. and Exper. Ther. 338(1):154-163）。加えて、Ｂｔｋはアポトーシスにおいても役割を果たすことが報告されている；従って、Ｂｔｋ活性の阻害は、癌、並びにＢ細胞リンパ腫、白血病及び他の血液悪性腫瘍の治療のために有用であり得る。更に、破骨細胞機能におけるＢｔｋの機能を考慮すると、Ｂｔｋ活性の阻害は骨粗しょう症などの骨障害の治療に有用であり得る。特定のＢｔｋ阻害剤が報告されている（Liu (2011) Drug Metab. and Disposition 39(10):1840-1849；米国特許第７８８４１０８号、国際公開第２０１０／０５６８７５号；米国特許第７４０５２９５号；米国特許第７３９３８４８号；国際公開第２００６／０５３１２１号；米国特許第７９４７８３５号；米国特許出願第２００８／０１３９５５７号；米国特許第７８３８５２３号；米国特許出願第２００８／０１２５４１７号；米国特許出願第２０１１／０１１８２３３号；２０１１年８月３１日出願の国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０５００３４号「PYRIDINONES/PYRAZINONES, METHOD OF MAKING, AND METHOD OF USE THEREOF」；２０１１年８月３１日出願の国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０５００１３号「PYRIDAZINONES, METHOD OF MAKING, AND METHOD OF USE THEREOF」；２０１１年５月６日出願の米国特許出願第１３／１０２７２０号「PYRIDONE AND AZA-PYRIDONE COMPOUNDS AND METHODS OF USE」）。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、一般的に、ブルトン型チロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）調節活性を有する式Ｉのアルキル化ピペラジンピリドン化合物に関する。
式Ｉの化合物は、構造：
0005976828.tif 000002
を有し、その立体異性体、互変異性体、又は薬学的に許容可能な塩を含む。様々な置換基は本明細書中以下に定義される。
【０００７】
本発明の一態様は、式Ｉの化合物及び薬学的に許容可能な担体、流動促進剤、希釈剤、又は賦形剤を含んでなる薬学的組成物である。 薬学的組成物は、さらに第二の治療剤を含有していてもよい。
【０００８】
本発明の別の態様は、式Ｉの化合物と薬学的に許容可能な担体を組合せて含有せしめてなる、薬学的組成物の作製方法にある。
【０００９】
本発明は、免疫障害、癌、心臓血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、ブルトン型チロシンキナーゼにより媒介される疾患又は障害に罹患している患者に治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む、疾患又は障害を治療する方法を含む。
【００１０】
本発明は、ａ）式Ｉの化合物を含有する第一の薬学的組成物；及びｂ）使用のための指示書を含む、ブルトン型チロシンキナーゼによって媒介される病状を治療するためのキットを含む。
【００１１】
本発明は、医薬として使用され、また免疫障害、癌、心臓血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害から選択され、ブルトン型チロシンキナーゼにより媒介される疾患又は障害を治療するために使用される、式Ｉの化合物を含む。
【００１２】
本発明は、免疫障害、癌、心臓血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害及び神経障害を治療するための医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を含み、ここで該医薬はブルトン型チロシンキナーゼを媒介する。
【００１３】
本発明は、式Ｉの化合物の作製方法を含む。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、中間体２,６-ジブロモ-４-フルオロベンズアルデヒド１０１ａを用いて出発する、(Ｓ)-２-(５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-フエニル)-３,４,６,７,８,９- ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-１(２Ｈ)-１オン１０１の調製を示す。
【図２】図２は、中間体(Ｓ)-[４-フルオロ-２-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)-ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-６-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２,７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-５-イル}フェニル]酢酸メチル１０２ａを用いて出発する、(Ｓ)-５-[５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)フェニル]-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２,７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-６-オン１０２の調製を示す。
【図３】図３は、中間体３-(２-クロロ-４,４-ジメチルシクロペンタ-１-エニル)アクリル酸(Ｅ)-エチル１０３ａを用いて出発する、(２Ｓ)-１０-[５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-[１-メチル-５-({５-[２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル]-フェニル]-４,４-ジメチル-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６),７-ジエン-９-オン１０３の調製を示す。
【図４ａ】図４ａは、中間体２,５-ジメチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸(２Ｒ,５Ｓ)-tert-ブチル１０４ａを用いて出発する、２-(３-(５-(５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン１０４の調製を示す。
【図４ｂ】図４ｂは、３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン１０４ｊを用いて出発する、４-フルオロ-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロ-ピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート１０４ｏの調製を示す。
【図５】図５は、 中間体(Ｓ)-２-(５-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル) ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート１０５ａを用いて出発する、(Ｓ)-２-(３-(５-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ) -１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン１０５の調製を示す。
【図６】図６は、中間体(Ｓ)-４-フルオロ-２-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート１０６ａを用いて出発する、(Ｓ)-２-(５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン１０６の調製を示す。
【図７】図７は、中間体２-メチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸(Ｓ)-tert-ブチルを用いて出発する、(Ｓ)-２-(３-(５-(５-(３,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン１０７の調製を示す。
【図８】図８は、中間体２-メチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル１０８ａを用いて出発する、(Ｒ)-２-(３-(５-(５-(３,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン１０８の調製を示す。
【図９】図９は、中間体３-メチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル１０９ａを用いて出発する、(Ｒ)-２-(３-(５-(５-(２,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン１０９の調製を示す。
【図１０】図１０は、中間体(Ｓ)-５-ブロモ-３-(５-(２,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン１１０ａを用いて出発する、(Ｓ)-２-(３-(５-(５-(２,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン１１０の調製を示す。
【図１１】図１１は、中間体１-tert-ブチル ２-メチル ４-ベンジルピペラジン-１,２-ジカルボキシレート１１１ａを用いて出発する、２-(５-フルオロ-３-(５-(５-(３-(フルオロメチル)-４-メチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン１１１の調製を示す。
【図１２】図１２は、中間体Ｎ,Ｎ-ジブロモベンゼンスルホンアミド１１２ａを用いて出発する、２-(５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-メチル-５-(５-(９-メチル-７-オキサ-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノナン-３-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン１１２の調製を示す。
【図１３】図１３は、中間体３-メチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸(３Ｓ)-tert-ブチル１１３ａを用いて出発する、(Ｓ)-２-(７,７-ジフルオロ-１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-４-フルオロ-６-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)ベンジル酢酸１１３ｑの調製を示す。
【図１４】図１４は、中間体１Ｈ-ピロール-２-カルボン酸エチルからの１１３ｏの調製を示す。
【図１５】図１５は、中間体３-メチルシクロペンタ-２-エンオンからの、２-ブロモ-６-{４,４-ジメチル-９-オキソ-７-チア-１０,１１-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-１(８),２(６),１１-トリエン-１０-イル}-４-フルオロベンズアルデヒド１３１ｉの調製を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
その例が添付の構造及び式で示される本発明の所定の実施態様が以下に詳細に参照される。本発明は、列挙された実施態様に関連して記載されるが、これら実施態様に限定することを意図するものではないことは理解される。逆に、本発明は、特許請求の範囲に記載の本発明の範囲内に含まれ得るあらゆる代替物、改変物、及び均等物を包含するものである。当業者であれば、本発明の実施に使用され得、ここに記載されたものと類似か均等である多くの方法及び材料を認識できるであろう。本発明は、記載された方法及び材料には決して限定されない。援用される文献、特許、及び類似の資料のうちの一又は複数が、限定しないが、定義された用語、用語の使用法、記載された技術などを含む本願と異なるか又は矛盾する場合は、本願が優先する。特段の定義がなされない限り、ここで使用される技術的及び科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって理解されるものと同じ意味を有する。ここに記載のものと類似するか又は同等である方法や材料を本発明の実施又は試験に使用することができるが、適切な方法及び材料を以下に記載する。ここで言及した刊行物、特許出願、特許、及び他の文献の全てが、その全体が出典明示によりここに援用される。別段の記載がない限り、本出願において使用される命名法は、ＩＵＰＡＣ系統的命名法に基づく。
【００１６】
（定義）
置換基の数を示す場合、「一又は複数」なる用語は、一置換から最も多い可能な置換数までの範囲、つまり、水素１個から全水素の置換基による置換までを指す。「置換基」なる用語は親分子上の水素原子と置き換えられる原子又は原子群を示す。「置換された」なる用語は、特定の基が一又は複数の置換基を有していることを意味する。任意の基が複数の置換基を有している場合があり、様々な可能な置換基が提供される場合、置換基は独立して選択され、同じである必要はない。「非置換の」なる用語は、特定された基が置換基を有していないことを意味する。「置換されていてもよい」なる用語は、特定された基が非置換であるか、又は可能な置換基の群から独立して選択される一又は複数の置換基で置換されていることを意味する。置換基の数を示す場合、「一又は複数」なる用語は、一置換から最も多い可能な置換数までの範囲、つまり、水素１個から全水素の置換基による置換までを指す。
【００１７】
ここで使用される「アルキル」なる用語は、１から１２の炭素原子(Ｃ１-Ｃ１２)の飽和した直鎖状もしくは分枝鎖一価炭化水素基を意味し、ここで、アルキル基は場合によっては以下に記載の一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよい。他の実施態様では、アルキル基は１から８の炭素原子(Ｃ１-Ｃ８)、又は１から６の炭素原子(Ｃ１-Ｃ６)である。アルキル基の例は、限定しないが、メチル(Ｍｅ、-ＣＨ３)、エチル(Ｅｔ、-ＣＨ２ＣＨ３)、１-プロピル(ｎ-Ｐｒ、ｎ-プロピル、-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３)、２-プロピル(ｉ-Ｐｒ、ｉ-プロピル、-ＣＨ(ＣＨ３)２)、１-ブチル(ｎ-Ｂｕ、ｎ-ブチル、-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３)、２-メチル-１-プロピル(ｉ-Ｂｕ、ｉ-ブチル、-ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２)、２-ブチル(ｓ-Ｂｕ、ｓ-ブチル、-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ３)、２-メチル-２-プロピル(ｔ-Ｂｕ、ｔ-ブチル、-Ｃ(ＣＨ３)３)、１-ペンチル(ｎ-ペンチル、-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３)、２-ペンチル(-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３)、３-ペンチル(-ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)２)、２-メチル-２-ブチル(-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＨ２ＣＨ３)、３-メチル-２-ブチル(-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)２)、３-メチル-１-ブチル(-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２)、２-メチル-１-ブチル(-ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ３)、１-ヘキシル(-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３)、２-ヘキシル(-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３)、３-ヘキシル(-ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３))、２-メチル-２-ペンチル(-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３)、３-メチル-２-ペンチル(-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ３)、４-メチル-２-ペンチル(-ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２)、３-メチル-３-ペンチル(-Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)２)、２-メチル-３-ペンチル(-ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)２)、２，３-ジメチル-２-ブチル(-Ｃ(ＣＨ３)２ＣＨ(ＣＨ３)２)、３,３-ジメチル-２-ブチル(-ＣＨ(ＣＨ３)Ｃ(ＣＨ３)３、１-ヘプチル、１-オクチル等を含む。
【００１８】
ここで使用される「アルキレン」なる用語は、１から１２の炭素原子(Ｃ１-Ｃ１２）の飽和した直鎖状又は分岐鎖の二価炭化水素基を意味し、ここで、アルキレン基は場合によっては以下に記載の一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよい。他の実施態様では、アルキレン基は１から８の炭素原子(Ｃ１-Ｃ８）、又は１から６の炭素原子(Ｃ１-Ｃ６)である。アルキレン基の例は、限定しないが、メチレン(-ＣＨ２-)、エチレン(-ＣＨ２-)、プロピレン(-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２-)等を含む。
【００１９】
「アルケニル」なる用語は、少なくとも一の不飽和部位、すなわち、炭素-炭素のｓｐ２二重結合を有する２〜８の炭素原子(Ｃ２-Ｃ８)の直鎖状もしくは分枝鎖の一価炭化水素基を意味し、ここでアルケニル基は、場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよく、「シス」及び「トランス」配向、あるいは「Ｅ」及び「Ｚ」配向を有する基を含む。例は、限定しないが、エチレニル又はビニル(-ＣＨ＝ＣＨ２)、アリル(-ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２)等を含む。
【００２０】
「アルケニレン」なる用語は、少なくとも一の不飽和部位、つまり炭素−炭素ｓｐ２二重結合を有する２から８の炭素原子(Ｃ２-Ｃ８）の直鎖状もしくは分枝鎖状の二価炭化水素基を意味し、ここで、アルケニル基は、場合によっては置換されていてもよく、「シス」及び「トランス」配向、又は別に「Ｅ」及び「Ｚ」配向を有する基を含む。例は、限定されないが、エチレニレン又はビニレン（-ＣＨ=ＣＨ-）、アリル（-ＣＨ２ＣＨ=ＣＨ-）等を含む。
【００２１】
「アルキニル」なる用語とは、少なくとも一の不飽和部位、すなわち、炭素-炭素のｓｐ三重結合を有する２から８の炭素原子(Ｃ２-Ｃ８)の直鎖状もしくは分枝鎖の一価炭化水素基を意味し、ここで、アルキニル基は、場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよい。例は、限定しないが、エチニル(-Ｃ≡ＣＨ)、プロピニル（プロパルギル、-ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）等を含む。
【００２２】
「アルキニレン」なる用語は、少なくとも一の不飽和部位、つまり炭素−炭素ｓｐ三重結合を有する２から８の炭素原子(Ｃ２-Ｃ８）の直鎖状又は分岐状の二価炭化水素基を意味し、ここで、アルキニル基は場合によってはでありうる。例は、限定しないが、エチニレン（-Ｃ≡Ｃ-）、プロピニレン（プロパルギレン、-ＣＨ２Ｃ≡Ｃ-）等を含む。
【００２３】
「炭素環」、「カルボシクリル」、「炭素環式環」及び「シクロアルキル」なる用語は、単環式環としては３から１２の炭素原子(Ｃ３-Ｃ１２)、又は二環式環としては７から１２の炭素原子を有する一価の非芳香族の飽和又は部分不飽和環を意味する。７から１２の原子を有する二環式炭素環は、例えばビシクロ［４，５］、ビシクロ［５，５］、ビシクロ［５，６］又はビシクロ［６，６］系として配置され得、９又は１０の環原子を有する二環式炭素環は、ビシクロ［５，６］又はビシクロ［６，６］系として、あるいは架橋系、例えば、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、ビシクロ［２．２．２］オクタン及びビシクロ［３．２．２］ノナンとして配置されうる。スピロ部分もまたこの定義の範囲に含まれる。単環式炭素環の例は、限定しないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、１-シクロペンタ-１-エニル、１-シクロペンタ-２-エニル、１-シクロペンタ-３-エニル、シクロヘキシル、１-シクロヘキサ-１-エニル、１-シクロヘキサ-２-エニル、１-シクロヘキサ-３-エニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル、シクロウンデシル、シクロドデシル等を含む。カルボシクリル基は場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で置換される。
【００２４】
「アリール」は、親芳香族環系の一つの炭素原子から一つの水素原子を除去することにより誘導される６−２０の炭素原子(Ｃ６-Ｃ２０)の一価の芳香族炭化水素基を意味する。幾つかのアリール基は、例示的な構造では、「Ａｒ」と表される。アリールは、飽和環、部分不飽和環、又は芳香族の炭素環式環に縮合した芳香族環を含む二環式基を含む。典型的なアリール基は、限定しないが、ベンゼン（フェニル）、置換ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニル、インデニル、インダニル、１,２-ジヒドロナフタレン、１,２,３,４-テトラヒドロナフチル等から誘導される基を含む。アリール基は、場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で独立して置換される。
【００２５】
「アリーレン」は、親芳香環系の二つの炭素原子から二つの水素原子を取り除くことによって誘導される６−２０の炭素原子(Ｃ６-Ｃ２０）の二価芳香族炭化水素基を意味する。幾つかのアリール基は、例示的な構造では、「Ａｒ」と表される。アリーレンは、飽和、部分的不飽和環、又は芳香族炭素環に縮合した芳香族環を含む二環式基を含む。典型的なアリーレン基は、限定されないが、ベンゼン（フェニレン）、置換ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニレン、インデニレン、インダニレン、１,２-ジヒドロナフタレン、１,２,３,４-テトラヒドロナフチル等から誘導される基を含む。アリーレン基は場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で置換される。
【００２６】
「複素環」、「ヘテロシクリル」及び「複素環式環」なる用語は、ここでは交換可能に使用され、３から約２０の環原子の飽和又は部分不飽和の（すなわち、環内に一又は複数の二重結合及び／又は三重結合を有する）炭素環式基を意味し、ここで、少なくとも１つの環原子は、窒素、酸素及び硫黄から選択されるヘテロ原子であり、残りの環原子は、Ｃであり、一又は複数の環原子は、場合によっては以下に記載される一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよい。複素環は、３から７の環員（２から６の炭素原子と、Ｎ、Ｏ、Ｐ、及びＳから選択される１から４のヘテロ原子）を有する単環、又は７から１０の環員（４から９の炭素原子と、Ｎ、Ｏ、Ｐ、及びＳから選択される１から６のヘテロ原子）を有する二環、例えば、ビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］、又は［６，６］系でありうる。複素環は、Paquette, Leo A.; “Principles of Modern Heterocyclic Chemistry” (W.A. Benjamin, New York, 1968)、特に、第１章、第３章、第４章、第６章、第７章、及び第９章；“The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs”(John Wiley & Sons, New York, 1950から現在)、特に、第１３巻、第１４巻、第１６巻、第１９巻、及び第２８巻；及びJ. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566に記載されている。「ヘテロシクリル」は、また、複素環基が、飽和環、部分不飽和環、又は芳香族の炭素環式環又は複素環式環に縮合している基を含む。複素環式環の例は、限定しないが、モルホリン-４-イル、ピペリジン-１-イル、ピペラジニル、ピペラジン-４-イル-２-オン、ピペラジン-４-イル-３-オン、ピロリジン-１-イル、チオモルホリン-４-イル、Ｓ-ジオキソチオモルホリン-４-イル、アゾカン-１-イル、アゼチジン-１-イル、オクタヒドロ-ピリド［１,２-ａ］ピラジン-２-イル、［１,４]ジアゼパン-１-イル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペリジノ、モルホリニノ、チオモルホリノ、チオキサニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ホモピペリジニル、オキセパニル、チエパニル、オキサゼピニル、ジアゼピニル、チアゼピニル、２-ピロリニル、３-ピロリニル、インドリニル、２Ｈ-ピラニル、４Ｈ-ピラニル、ジオキサニル、１,３-ジオキソラニル、ピラゾリニル、ジチアニル、ジチオラニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、ピラゾリジニルイミダゾリニル、イミダゾリジニル、３-アザビシクロ［３.１.０］ヘキサニル、３-アザビシクロ［４.１.０］ヘプタニル、アザビシクロ［２.２.２］ヘキサニル、３Ｈ-インドリルキノリジニル及びＮ-ピリジルウレアを含む。スピロ部分もまたこの定義の範囲に含まれる。２個の環原子がオキソ(＝Ｏ)部分で置換されている複素環式基の例は、ピリミジノニル及び１,１-ジオキソ-チオモルホリニルである。ここでの複素環式基は、ここに記載の一又は複数の置換基で独立して置換されていてもよい。
【００２７】
「ヘテロアリール」なる用語は、５員環、６員環又は７員環の一価芳香族基を意味し、窒素、酸素、及び硫黄から独立して選択される一又は複数のヘテロ原子を含む５−２０の原子の縮合環系（その環の少なくとも一つが芳香族である）を含む。ヘテロアリール基の例は、ピリジニル（例えば、２-ヒドロキシピリジニルを含む）、イミダゾリル、イミダゾピリジニル、ピリミジニル（例えば、４-ヒドロキシピリミジニルを含む）、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、キノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、シンノリニル、インダゾリル、インドリジニル、フタラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、イソインドリル、プテリジニル、プリニル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、チアジアゾリル、フラザニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、及びフロピリジニルである。ヘテロアリール基は、場合によってはここに記載の一又は複数の置換基で独立して置換される。
【００２８】
複素環又はヘテロアリール基は、それが可能な場合、炭素（炭素連結）又は窒素（窒素連結）結合でありうる。例を挙げると、限定ではないが、炭素結合複素環又はヘテロアリールはピリジンの２、３、４、５、又は６位、ピリダジンの３、４、５、又は６位、ピリミジンの２、４、５、又は６位、ピラジンの２、３、５、又は６位、フラン、テトラヒドロフラン、チオフラン、チオフェン、ピロール又はテトラヒドロピロールの２、３、４、又は５位、オキサゾール、イミダゾール又はチアゾールの２、４、又は５位、イソオキサゾール、ピラゾール、又はイソチアゾールの３、４、又は５位、アジリジンの２又は３位、アゼチジンの２、３、又は４位、キノリンの２、３、４、５、６、７、又は８位、又はイソキノリンの１、３、４、５、６、７、又は８位で結合する。
【００２９】
例を挙げると、限定ではないが、窒素結合複素環又はヘテロアリールは、アジリジン、アゼチジン、ピロール、ピロリジン、２-ピロリン、３-ピロリン、イミダゾール、イミダゾリジン、２-イミダゾリン、３-イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、２-ピラゾリン、３-ピラゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドール、インドリン、１Ｈ-インダゾールの１位、イソインドール又はイソインドリンの２位、モルホリンの４位、及びカルバゾール又はβ-カルボリンの９位で結合する。
【００３０】
「治療する」及び「治療」という用語は、目的が関節炎又は癌の発症又は広がりなどの望ましくない生理学的変化又は障害を緩徐化する（軽減する）ことである、治療的処置を指す。本発明の目的のために、有益な又は所望の臨床結果は、検出可能であるか否かに関わらず、症状の緩和、疾患の程度の軽減、疾患の状態の安定化（すなわち悪化しないこと）、疾患進行の遅延又は緩徐化、疾患状態の改善又は緩和、及び寛解（部分的又は完全な）を含むが、これらに限定されない。「治療」はまた、治療を受けない場合に予想される生存期間と比較して生存期間を延長することも意味し得る。治療を必要とするものは、状態又は障害を有するものを含む。
【００３１】
「治療有効量」という語句は、（ｉ）特定の疾患、状態もしくは障害を治療する、（ｉｉ）特定の疾患、状態もしくは障害の１つもしくは複数の症状を減弱させる、改善するもしくは取り除く、又は（ｉｉｉ）本明細書で述べる特定の疾患、状態もしくは障害の１つもしくは複数の症状の発症を予防するもしくは遅延させる、本発明の化合物の量を意味する。癌の場合、薬剤の治療有効量は、癌細胞の数を減少させ得る；腫瘍のサイズを低減し得る；周辺器官への癌細胞の浸潤を阻害し得る（すなわちある程度遅延させ、好ましくは停止させ得る）；腫瘍の転移を阻害し得る（すなわちある程度遅延させ、好ましくは停止させ得る）；腫瘍増殖をある程度阻害し得る；及び／又は癌に関連する症状の一又は複数をある程度軽減し得る。薬剤が増殖を防止し得る及び／又は既存の癌細胞を死滅させ得るという点で、治療有効量は細胞増殖抑制性及び／又は細胞傷害性であり得る。癌療法に関して、効果は、例えば無増悪期間（ＴＴＰ）を評価する及び／又は奏効率（ＲＲ）を決定することによって測定できる。
【００３２】
本明細書で使用される「炎症性障害」は、過度の又は調節されない炎症応答が過度の炎症症状、宿主の組織損傷又は組織機能の低下をもたらす任意の疾患、障害又は症候群を意味し得る。「炎症性障害」はまた白血球の流入及び／又は好中球の化学走性によって媒介される病的状態を指す。
【００３３】
本明細書で使用される「炎症」は、損傷を与える物質と損傷された組織の双方を破壊する、希釈する又は壁で囲む（隔離する）ように働く、組織の損傷又は破壊によって誘発される局在化された保護反応を指す。炎症は白血球の流入及び／又は好中球の化学走性と顕著に関連する。炎症は、病原性生物及びウイルスによる感染から、並びに心筋梗塞又は脳卒中後の外傷又は再灌流、外来性抗原に対する免疫応答及び自己免疫応答などの非感染手段から生じ得る。従って、式Ｉの化合物で治療可能な炎症性障害は、特異的防御系の反応並びに非特異的防御系の反応に関連する障害を包含する。
【００３４】
「特異的防御系」は、特異的抗原の存在に対して反応する免疫系の成分を指す。特異的防御系の反応から生じる炎症の例には、外来性抗原に対する古典的応答、自己免疫疾患、及びＴ細胞によって媒介される遅発型過敏症反応が含まれる。慢性炎症性疾患、固形移植組織及び器官、例えば腎臓及び骨髄移植の拒絶反応、並びに移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）は、特異的防御系の炎症反応の更なる例である。
【００３５】
ここで使用される「非特異的防御系」という用語は、免疫記憶の能力がない白血球（例えば顆粒球及びマクロファージ）によって媒介される炎症性障害を指す。少なくとも部分的には、非特異的防御系の反応から生じる炎症の例には、成人（急性）呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）又は多発性器官傷害症候群；再灌流傷害；急性糸球体腎炎；反応性関節炎；急性炎症成分による皮膚病；急性化膿性髄膜炎又は脳卒中などの他の中枢神経系炎症性障害；熱傷；炎症性腸疾患；顆粒球輸血関連症候群；及びサイトカイン誘発毒性などの状態に関連する炎症が含まれる。
【００３６】
本明細書で使用される「自己免疫疾患」は、組織傷害が、身体自体の構成成分への体液性又は細胞媒介性応答に関連する、任意の群の障害を指す。
【００３７】
ここで使用される「アレルギー疾患」は、アレルギーから生じる任意の症状、組織損傷又は組織機能の低下を指す。ここで使用される「関節炎疾患」は、様々な病因に起因する関節の炎症性病変を特徴とする任意の疾患を指す。ここで使用される「皮膚炎」は、様々な病因に起因する皮膚の炎症を特徴とする皮膚疾患の大きなファミリーのいずれかを指す。ここで使用される「移植片拒絶反応」は、移植された組織及び周囲の組織の機能低下、痛み、腫脹、白血球増加及び血小板減少を特徴とする、器官又は細胞（例えば骨髄）などの移植された組織に対する任意の免疫反応を指す。本発明の治療方法は、炎症細胞活性化に関連する障害の治療のための方法を含む。
【００３８】
「炎症性細胞活性化」は、増殖性細胞応答の刺激（サイトカイン、抗原もしくは自己抗体を含むがこれらに限定されない）による誘導、可溶性メディエイタ（サイトカイン、酸素ラジカル、酵素、プロスタノイドもしくは血管作用性アミンを含むがこれらに限定されない）の産生、又は炎症細胞（単球、マクロファージ、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、顆粒球（すなわち好中球、好塩基球及び好酸球などの多形核白血球）、マスト細胞、樹状細胞、ランゲルハンス細胞及び内皮細胞を含むがこれらに限定されない）における新しい又は増加した数のメディエイタ（主要組織適合抗原又は細胞接着分子を含むがこれらに限定されない）の細胞表面発現を指す。これらの細胞におけるこれらの表現型の１つ又は組合せの活性化が炎症性障害の開始、永続化又は増悪に寄与し得ることは当業者に認識される。
【００３９】
「ＮＳＡＩＤ」という用語は、「非ステロイド性抗炎症薬」の頭字語であり、鎮痛、解熱（上昇した体温を低下させ、意識を障害することなく痛みを軽減する）及び、高用量では、抗炎症作用（炎症を低減する）を有する治療薬である。「非ステロイド性」という用語は、これらの薬剤を、（広範囲の作用の中でも特に）類似のエイコサノイド抑制性抗炎症作用を有するステロイドから区別するために使用される。鎮痛薬として、ＮＳＡＩＤは、それらが非麻薬性であるという点で独特である。ＮＳＡＩＤはアスピリン、イブプロフェン及びナプロキセンを含む。ＮＳＡＩＤは、通常、疼痛及び炎症が存在する急性又は慢性状態の治療に適応される。ＮＳＡＩＤは、一般に以下の状態の対症的軽減に適応される：関節リウマチ、変形性関節症、炎症性関節症（例えば強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、ライター症候群、急性痛風、月経困難症、転移性骨痛、頭痛及び片頭痛、術後疼痛、炎症及び組織損傷による軽度から中等度の疼痛、発熱、腸閉塞及び腎疝痛。大部分のＮＳＡＩＤは酵素シクロオキシゲナーゼの非選択的阻害剤として作用し、シクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）及びシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）イソ酵素の両方を阻害する。シクロオキシゲナーゼは、アラキドン酸（それ自体はホスホリパーゼＡ２によって細胞リン脂質二重層から誘導される）からのプロスタグランジン及びトロンボキサンの形成を触媒する。プロスタグランジンは、（数ある中でも特に）炎症過程におけるメッセンジャー分子として作用する。ＣＯＸ−２阻害剤には、セレコキシブ、エトリコキシブ、ルミラコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、ロフェコキシブ及びバルデコキシブが含まれる。  
【００４０】
「癌」という用語は、典型的には調節されない細胞増殖を特徴とする、哺乳動物における生理学的状態を指す又は表現する。「腫瘍」は、一又は複数の癌性細胞を含む。癌の例には、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病又はリンパ系悪性腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。このような癌のより具体的な例には、扁平上皮癌（例えば、上皮の扁平上皮癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌（「ＮＳＣＬＣ」）、肺の腺癌、及び肺の扁平上皮癌を含めた肺癌、腹膜の癌、肝細胞癌、胃腸癌を含めた胃癌（gastric cancer）又は胃癌（stomach cancer）、膵臓癌、グリア芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌又は腎癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、並びに頭頸部癌が挙げられる。
【００４１】
「血液悪性腫瘍（Hematological malignancies）」（英国の綴りは「Haematological」malignancies）は、血液、骨髄及びリンパ節に影響を及ぼす癌の種類である。これら３つは免疫系を介して密接に関連しているので、３つのうちの１つに影響を及ぼす疾患はしばしばその他にも影響する：リンパ腫はリンパ節の疾患であるが、しばしば骨髄に広がり、血液に影響を及ぼす。血液悪性腫瘍は悪性新生物（「癌」）であり、一般に血液学及び／又は腫瘍学の専門家によって治療される。一部の施設では「血液学／腫瘍学」は内科の１つの下位専門領域であるが、また別の施設ではそれらは別々の部門とみなされる（外科腫瘍医及び放射線腫瘍医も存在する）。必ずしも全ての血液障害が悪性（「癌性」）であるわけではない；これらの他の血液状態も血液専門医によって管理され得る。血液悪性腫瘍は２つの主要な血液細胞系統：骨髄細胞株及びリンパ系細胞株のいずれかに由来し得る。骨髄細胞株は通常、顆粒球、赤血球、血小板、マクロファージ及びマスト細胞を産生し、リンパ系細胞株はＢ、Ｔ、ＮＫ及び形質細胞を産生する。リンパ腫、リンパ性白血病及び骨髄腫はリンパ球系に由来し、一方急性及び慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群並びに骨髄増殖性疾患は骨髄系を起源とする。白血病には、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性単球性白血病（ＡＭＯＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）が含まれる。リンパ腫には、ホジキンリンパ腫（４つ全てのサブタイプ）及び非ホジキンリンパ腫（全てのサブタイプ）が含まれる。
【００４２】
「化学療法剤」は、作用機序に関わらず、癌の治療において有用な化合物である。化学療法剤のクラスには、アルキル化剤、代謝拮抗物質、紡錘体毒植物アルカロイド、細胞毒性／抗腫瘍性抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、抗体、光増感剤、及びキナーゼ阻害剤が含まれるが、これらに限定されない。化学療法剤には、「標的療法」及び従来の化学療法に使用されている化合物が含まれる。化学療法剤の例には、エルロチニブ(TARCEVA(登録商標), Genentech/OSI Pharm.,)、ドセタキセル(TAXOTERE(登録商標), Sanofi-Aventis)、５-ＦＵ(フルオロウラシル、５-フルオロウラシル、CAS No. 51-21-8)、ゲムシタビン(GEMZAR(登録商標), Lilly)、ＰＤ-０３２５９０１(CAS No. 391210-10-9, Pfizer)、シスプラチン(シス-ジアミン、ジクロロ白金(ＩＩ)、CAS No. 15663-27-1)、カルボプラチン(CAS No. 41575-94-4)、パクリタキセル(TAXOL(登録商標), Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.)、トラスツズマブ(HERCEPTIN(登録商標), Genentech)、テモゾロミド(４-メチル-５-オキソ-２,３,４,６,８-ペントアザビシクロ[４.３.０]ノナ-２,７,９-トリエン-９-カルボキシアミド、CAS No. 85622-93-1, TEMODAR(登録商標), TEMODAL(登録商標), Schering Plough)、タモキシフェン((Ｚ)-２-［４-(１,２-ジフェニルブタ-１-エニル)フェノキシ]-Ｎ,Ｎ-ジメチルエタンアミド、NOLVADEX(登録商標), ISTUBAL(登録商標), VALODEX(登録商標))、及びドキソルビシン(ADRIAMYCIN(登録商標))、Ａｋｔｉ-１／２、ＨＰＰＤ、及びラパマイシンが含まれる。
【００４３】
「化学療法剤」の更なる例には、オキサリプラチン(ELOXATIN(登録商標),Sanofi)、ボルテゾミブ(VELCADE(登録商標), Millennium Pharm.)、スーテント(SUNITINIB(登録商標), SU11248, Pfizer)、レトロゾール(FEMARA(登録商標),Novartis)、イマチニブメシル酸塩(GLEEVEC(登録商標)，Novartis)、ＸＬ-５１８(ＭＥＫインヒビター、Exelixis, 国際公開第２００７／０４４５１５号)、ＡＲＲＹ-８８６(Ｍｅｋインヒビター、AZD6244, Array BioPharma, Astra Zeneca)、ＳＦ-１１２６(ＰＩ３Ｋインヒビター、Semafore Pharmaceuticals)、ＢＥＺ-２３５(ＰＩ３Ｋインヒビター、Novartis)、ＸＬ-１４７(ＰＩ３Ｋインヒビター、Exelixis)、ＰＴＫ７８７／ＺＫ ２２２５８４(Novartis)、フルベストラント(FASLODEX(登録商標),AstraZeneca)、ロイコボリン(フォリン酸)、ラパマイシン(sirolimus, RAPAMUNE(登録商標)，Wyeth)、ラパチニブ(TYKERB(登録商標)，GSK572016, Glaxo Smith Kline)、ロナファーニブ(SARASARＴＭ, SCH66336, Schering Plough)、ソラフェニブ(NEXAVAR(登録商標), BAY43-9006, Bayer Labs)、ゲフィチニブ(IRESSA(登録商標)，AstraZeneca)、イリノテカン(CAMPTOSAR(登録商標), CPT-11, Pfizer)、ティピファニブ(ZARNESTRAＴＭ, Johnson & Johnson)、アブラキサンＴＭ(ショウノウフリー)、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子処方物(American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Il)、バンデタニブ(rINN, ZD6474, ZACTIMA(登録商標), AstraZeneca)、クロラムブシル、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１(SU 5271; Sugen)、テムシロリムス(TORISEL(登録商標), Wyeth)、パゾパニブ(GlaxoSmithKline)、カンホスファミド(TELCYTA(登録商標), Telik)、チオテパ及びシクロスルファミド(CYTOXAN(登録商標), NEOSAR(登録商標))；スルホン酸アルキル、例えばブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファン；アジリジン、例えばベンゾドパ、カルボコン、メツレドパ、及びウレドパ；エチレンイミン及びメチラメラミン、例えばアルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド及びトリメチロメラミン；アセトゲニン(特にブラタシン及びブラタシノン)；カンプトテシン(合成アナログトポテカンを含む)；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ-１０６５(そのアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシン合成アナログを含む)；クリプトフィシン(特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８)；ドラスタチン；デュオカルマイシン(合成アナログ、ＫＷ-２１８９及びＣＢ１-ＴＭ１を含む)；エロイテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えばクロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素、例えばカルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムヌスチン(ranimnustine)；抗生物質、例えばエネジン抗生物質(例えば、カリケアマイシン、カリケアマイシンガンマ１Ｉ、カリケアマイシンオメガＩ１(Angew Chem. Intl. Ed. Engl. (1994) 33：183-186)；ダイネマイシン(dynemicin)、ダイネマイシンＡ；ビスホスホナート、例えばクロドロナート；エスペラマイシン；並びにネオカルジノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団)、アクラシ���マイシン、アクチノマイシン、オートラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン(chromomycinis）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６-ジアゾ-５-オキソ-Ｌ-ノルロイシン、モルホリノ-ドキソルビシン、シアノモルホリノ-ドキソルビシン、２-ピロリノ-ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシン)、エピルビシン、エソルビシン、イダラルビシン、ネモルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、例えばマイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗剤、例えばメトトレキサート及び５-フルオロウラシル(５-ＦＵ)；葉酸類似体、例えばデノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えばフルダラビン、６-メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えばアンシタビン、アザシチジン、６-アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジン；アンドロゲン、例えばカルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎薬、例えばアミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸リプレニッシャー、例えばフロリン酸；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキセート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エルホルニチン(elfornithine)；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン；メイタンシノイド、例えばメイタンシン及びアンサミトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラエリン(nitraerine)；ペントスタチン；フェナメト；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２-エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ(登録商標)多糖複合体(JHS Natural Products, Eugene, OR)；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２,２',２”-トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン(Ｔ-２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ及びアングイジン)；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド(「Ａｒａ-Ｃ」)；シクロホスファミド；チオテパ；６-チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキセート；シスプラチン及びカルボプラチンのようなプラチナ類似体；ビンブラスチン；エトポシド(ＶＰ-１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン(NAVELBINE(登録商標))；ノバントロン(novantrone)；テニポシド；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン(XELODA(登録商標), Roche)；イバンドロネート；ＣＰＴ-Ｉ１；トポイソメラーゼインヒビターＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン(Ｄ���ＦＯ)；レチノイド類、例えばレチノイン酸；及び上記の何れかの薬学的に許容可能な塩、酸及び誘導体が含まれる。
【００４４】
「化学療法剤」の定義にまた含まれるものは、(ｉ)腫瘍に対するホルモン作用を調節し又は阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば抗エストロゲン及び選択的エストロゲン受容体調節薬(ＳＥＲＭ)、例えばタモキシフェン(例えばNOLVADEX(登録商標)；タモキシフェンクエン酸塩)、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４-ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びＦＡＲＥＳＴＯＮ(登録商標)(トレミフィン(toremifine)クエン酸塩)；(ｉｉ)副腎においてエストロゲン生産を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４(５)-イミダゾール類、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ(登録商標)(メゲストロール酢酸エステル)、ＡＲＯＭＡＳＩＮ(登録商標)(エキセメスタン；Pfizer)、フォルメスタニ(formestanie)、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ(登録商標)(ボロゾール)、ＦＥＭＡＲＡ(登録商標)(レトロゾール；Novartis)、及びＡＲＩＭＩＤＥＸ(登録商標)(アナストロゾール；AstraZeneca)；(ｉｉｉ)抗アンドロゲン、例えばフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリン；並びにトロキサシタビン(１,３-ジオキソランヌクレオシドシトシンアナログ)；(ｉｖ)プロテインキナーゼ阻害剤、例えばＭＥＫ阻害剤（国際公開第２００７／０４４５１５号）；(ｖ)脂質キナーゼ阻害剤；(ｖｉ)アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に例えばＰＫＣ-α、Ｒａｆ及びＨ-Ｒａｓのような異常な細胞増殖に関与するシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの、例えばオブリメルセン（ゲナセンス(登録商標)，Genta Inc.）；(ｖｉｉ)リボザイム、例えばＶＥＧＦ発現阻害剤(例えば、ANGIOZYME(登録商標))及びＨＥＲ２発現阻害剤；(ｖｉｉｉ)ワクチン、例えば遺伝子療法ワクチン、例えばＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ(登録商標)、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ(登録商標)、及びＶＡＸＩＤ(登録商標)；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ(登録商標)ｒＩＬ-２；トポイソメラーゼ１阻害剤、例えばＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ(登録商標)；ＡＢＡＲＥＬＩＸ(登録商標)ｒｍＲＨ；(ｉｘ)抗血管新生剤、例えばベバシズマブ(AVASTIN(登録商標)，Genentech)；及び(ｘ)上記の何れかの薬学的に許容可能な塩、酸及び誘導体である。
【００４５】
また、治療用抗体、例えばアレムツズマブ（Campath）、ベバシズマブ（アバスチン(登録商標)，Genentech）、セツキシマブ（アービタックス(登録商標)，Imclone）；パニツムマブ（VECTIBIX(登録商標)，Amgen）、リツキシマブ（リツキサン(登録商標)，Genentech／Biogen Idec）、ペルツズマブ（OMNITARGＴＭ，2C4，Genentech）、トラスツズマブ（ハーセプチン(登録商標)，Genentech）、トシツモマブ（ベキサール，Corixia）、及び抗体薬物複合体、ゲムツズマブオゾガマイシン（MYLOTARG(登録商標)，Wyeth）も「化学療法剤」の定義に含まれる。
【００４６】
本発明のＢｔｋ阻害剤と組み合わせて化学療法剤として治療上の可能性を有するヒト化モノクローナル抗体には、アレムツズマブ、アポリズマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、バピネオズマブ、ベバシズマブ、ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ、セルトリズマブペゴール、シドフシツズマブ、シドツズマブ、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ、ヌマビズマブ、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ、ペクフシツズマブ、ペクツズマブ、ペルツズマブ、ペキセリズマブ、ラリビズマブ、ラニビズマブ、レスリビズマブ、レスリズマブ、レシビズマブ、ロベリズマブ、ルプリズマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ、ソンツズマブ、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タリズマブ、テフィバズマブ、トシリズマブ、トラリズマブ、トラスツズマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツクシツズマブ、ウマビズマブ、ウルトキサズマブ、及びビジリズマブが含まれる。
【００４７】
「代謝産物」は、指定される化合物又はその塩の体内での代謝を介して生成される産物である。化合物の代謝産物は、当分野で公知の通常の技術を用いて同定することができ、本明細書で述べるような試験を用いてそれらの活性を測定し得る。そのような産物は、例えば投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミド化、エステル化、脱エステル化、酵素切断等から生じ得る。従って、本発明は、本発明の式Ｉ又はＩＩの化合物を、その代謝産物を生じさせるのに十分な機関哺乳動物と接触させることを含む工程によって生成される化合物を含む、本発明の化合物の代謝産物を包含する。
【００４８】
「パッケージ挿入物」という用語は、治療用製品の市販包装中に慣例的に含まれる指示書であって、そのような治療用製品の使用に関する適応症、用法、用量、投与、禁忌及び／又は警告についての情報を含む指示書を指すために用いられる。
【００４９】
「キラル」という用語は、鏡像パートナーの重ね合わせが不可能な性質を有する分子を指し、一方「アキラル」という用語は、その鏡像パートナーに重ね合わせることができる分子を指す。
【００５０】
「立体異性体」という用語は、同一の化学組成を有するが、空間における原子又は基の配置に関して異なる化合物を指す。
【００５１】
「ジアステレオマー」は、２つ又はそれ以上のキラル中心を有する立体異性体であって、それらの分子が互いに鏡像ではない立体異性体を指す。ジアステレオマーは、異なる物理的性質、例えば融点、沸点、スペクトル特性及び反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動及びクロマトグラフィなどの高分解能分析手法の下で分離し得る。
【００５２】
「エナンチオマー」は、互いに重ね合わせ不可能な鏡像である化合物の２つの立体異性体を指す。
【００５３】
本明細書で使用される立体化学的定義及び慣例は、一般にS. P. Parker編, McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York;及びEliel, E.及びWilen, S., 「Stereochemistry of Organic Compounds」, John Wiley & Sons,Inc., New York, 1994に従う。本発明の化合物は、不斉中心又はキラル中心を含んでいてもよく、従って異なる立体異性体形態で存在してもよい。ジアステレオマー、エナンチオマー及びアトロプ異性体、並びにラセミ混合物などのそれらの混合物を含むがこれらに限定されない、本発明の化合物の全ての立体異性体形態は本発明の一部を形成することが意図されている。多くの有機化合物は光学活性な形態で存在し、すなわち平面偏光面を回転させる能力を有する。光学活性な化合物を説明する際に、接頭語Ｄ及びＬ、又はＲ及びＳは、そのキラル中心の周りにある分子の絶対配置を表すために用いられる。接頭語ｄ及びｌ又は（＋）及び（−）は、化合物による平面偏光面の回転の証拠を示すために用いられ、（−）又は１は、化合物が左旋性であることを意味する。（＋）又はｄの接頭語を有する化合物は右旋性である。所与の化学構造について、これらの立体異性体は、互いに鏡像であることを除いて同一である。また、特定の立体異性体はエナンチオマーと称されることもあり、そのような異性体の混合物はしばしばエナンチオマー混合物と呼ばれる。エナンチオマーの５０：５０混合物は、ラセミ混合物又はラセミ体と称され、化学反応又は化学過程において立体選択又は立体特異性が存在しない場合に生じ得る。「ラセミ混合物」及び「ラセミ体」という用語は、光学活性を有さない、２つのエナンチオマー種の等モル混合物を指す。エナンチオマーは、超臨界流体クロマトグラフィ（ＳＦＣ）などのキラル分離法によってラセミ混合物から分離し得る。分離されたエナンチオマーのキラル中心における立体配置の割り当ては暫定的であり得、例示のために表１の構造に示しているが、Ｘ線結晶学データなどの立体化学的決定が待たれる。
【００５４】
「互変異性体」又は「互変異性体形態」という用語は、低エネルギー障壁を介して相互変換可能な、異なるエネルギーを有する構造異性体を指す。例えば、プロトン互変異性体（プロトトロピック互変異性体としても知られる）は、ケト−エノール異性化及びイミン−エナミン異性化などの、プロトンの移動による相互変換を含む。原子価互変異性体は、いくつかの結合電子の再編成による相互変換を含む。
【００５５】
「薬学的に許容可能な塩」という用語は、生物学的に又はその他の点で望ましくないものではない塩を表す。薬学的に許容可能な塩は、酸付加塩及び塩基付加塩の両方を含む。「薬学的に許容可能な」という語句は、物質又は組成物が、製剤を構成するその他の成分及び／又はその物質又は組成物で治療される哺乳動物と化学的及び／又は毒性学的に適合性でなければならないことを示す。
【００５６】
「薬学的に許容可能な酸付加塩」という用語は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸などの無機酸、並びに脂肪族、脂環式、芳香族、アル脂肪族、複素環式、炭素環式及びスルホン酸クラスの有機酸、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、エンボン酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸「メシレート」、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸及びサリチル酸などから選択される有機酸で形成される薬学的に許容可能な塩を表す。
【００５７】
「薬学的に許容可能な塩基付加塩」という用語は、有機又は無機塩基で形成される薬学的に許容可能な塩を表す。許容される無機塩基の例には、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン及びアルミニウム塩が含まれる。薬学的に許容可能な有機非毒性塩基から誘導される塩には、第一級、第二級及び第三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えばイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２-ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ-エチルピペリジン及びポリアミン樹脂などの塩が含まれる。
【００５８】
「溶媒和物」は、一又は複数の溶媒分子と本発明の化合物との会合物又は複合体を指す。溶媒和物を形成する溶媒の例には、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸及びエタノールアミンが含まれるが、これらに限定されない。
【００５９】
「ＥＣ５０」という用語は半数最大効果濃度であり、インビボで特定の効果の最大値の５０％を得るために必要な特定の化合物の血漿濃度を表す。
【００６０】
「Ｋｉ」という用語は阻害定数であり、特定の阻害剤の受容体に対する絶対結合親和性を表す。これは競合結合アッセイを用いて測定され、競合リガンド（例えば放射性リガンド）が存在しない場合は、特定の阻害剤が受容体の５０％を占有する濃度に等しい。Ｋｉ値は、ｐＫｉ値（−ｌｏｇＫｉ）に対数的に変換することができ、より高い値は指数関数的により大きな効力を示す。
【００６１】
「ＩＣ５０」という用語は半数最大阻害濃度であり、インビトロで生物学的過程の５０％阻害を得るために必要な特定の化合物の濃度を表す。ＩＣ５０値は、ｐＩＣ５０値（−ｌｏｇ  ＩＣ５０）に対数的に変換することができ、より高い値は指数関数的により大きな効力を示す。ＩＣ５０値は絶対値ではなく、実験条件、例えば使用される濃度に依存し、チェン−プルソフ式（Biohem. Pharmacol.(1973)22:3099）を用いて絶対阻害定数（Ｋｉ）に変換することができる。ＩＣ７０、ＩＣ９０等のような他のパーセント阻害パラメータも計算し得る。
【００６２】
「この発明の化合物」及び「本発明の化合物」及び「式Ｉの化合物」という用語は、式Ｉの化合物並びにその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物及び薬学的に許容可能な塩及びプロドラッグを包含する。
【００６３】
式Ｉの化合物を含む、ここに与えられた任意の式又は構造もまた、水和物、溶媒和物、及びこのような化合物の多形体、及びこれらの混合物を表すことを意図している。
【００６４】
式Ｉの化合物を含む、本明細書で与えられる任意の式又は構造は、化合物の非標識形態並びに同位体標識形態を示すことも意図されている。同位体標識化合物は、一又は複数の原子が選択された原子質量又は質量数を有する原子で置き換えられていることを除き、本明細書で与えられる式によって表される構造を有する。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素及び塩素の同位体、例えば、限定されないが、２Ｈ（ジュウテリウム、Ｄ）、３Ｈ（トリチウム）、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ及び１２５Ｉなどが含まれる。本発明の様々な同位体標識化合物、例えば３Ｈ、１３Ｃ及び１４Ｃなどの放射性同位体が組み込まれているもの。そのような同位体標識化合物は、代謝試験、反応動態試験、薬剤もしくは基質組織分布アッセイを含む、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）もしくは単光子放出コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）などの検出もしくは画像技術において、又は患者の放射線治療において有用であり得る。ジュウテリウムで標識又は置換された本発明の治療用化合物は、分布、代謝及び排泄（ＡＤＭＥ）に関して、改善されたＤＭＰＫ（薬物代謝及び薬物動態）特性を有し得る。ジュウテリウムなどのより重い同位体による置換は、より高い代謝安定性から生じるある種の治療上の利点、例えばインビボ半減期の延長又は必要投与量の低減をもたらし得る。１８Ｆ標識化合物は、ＰＥＴ又はＳＰＥＣＴ試験のために有用であり得る。本発明の同位体標識化合物及びそのプロドラッグは、一般に、非同位体標識試薬を容易に入手可能な同位体標識試薬に置き換えて、以下に記載するスキーム又は実施例で開示される手順及び調製法を実施することによって調製できる。更に、より重い同位体、特にジュウテリウム（すなわち２Ｈ又はＤ）による置換は、より高い代謝安定性から生じるある種の治療上の利点、例えばインビボ半減期の延長又は必要投与量の低減又は治療指数の改善をもたらし得る。これに関連してジュウテリウムは式（Ｉ）の化合物における置換基とみなされることが理解される。そのようなより重い同位体、特にジュウテリウムの濃度は、同位体濃縮係数によって定義され得る。本発明の化合物において特定の同位体として明確に指定されていない任意の原子は、その原子の任意の安定な同位体を表すことが意図されている。特に明記されない限り、ある位置が「Ｈ」又は「水素」と明確に指定されている場合、その位置はその天然の存在率の同位体組成で水素を有すると理解される。従って、本発明の化合物においてジュウテリウム（Ｄ）と明確に指定される任意の原子はジュウテリウムを表すことが意図されている。
【００６５】
アルキル化ピペラジン化合物
本発明は、Ｂｔｋのキナーゼによって調節される疾患、状態及び／又は障害の治療に潜在的に有用な、式Ｉのアルキル化ピペラジン化合物Ｉ、及びその薬学的製剤を提供する。
【００６６】
式Ｉの化合物の例示的な実施態様は、
0005976828.tif 000003
又はその立体異性体、互変異性体、又は薬学的に許容可能な塩を含み、ここで、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、及びＣ１-Ｃ３アルキルから独立して選択され；
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＨ３)ＯＨ、-Ｃ(ＣＨ３)２ＯＨ、-ＣＨ(ＣＦ３)ＯＨ、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＨ２ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-Ｃ(Ｏ)ＮＨ２、-Ｃ(Ｏ)ＮＨＣＨ３、-Ｃ(Ｏ)Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ３、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、１-ヒドロキシシクロプロピル、イミダゾリル、ピラゾリル、３-ヒドロキシ-オキセタン-３-イル、オキセタン-３-イル、及びアゼチジン-１-イルから選択され；
Ｒ５は、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＯＨ、-ＣＨ２Ｆ、-ＣＨＦ２、-ＣＦ３、-ＣＮ、及び-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨから選択され；
あるいは２つのＲ５基は、３員、４員、５員、又は６員の炭素環又は複素環を形成し；
あるいはＲ５基及びＲ８基は、３員、４員、５員、又は６員の炭素環又は複素環を形成し；
ｎは、１、２、３、又は４であり、
Ｒ６は、Ｈ、Ｆ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-ＮＨ２、及び-ＯＨから選択され；
Ｒ７は構造：
0005976828.tif 000004
0005976828.tif 000005
（ここで波線は結合部位を示す）
から選択され；
Ｒ８は、-ＣＨ３、-Ｓ(Ｏ)２ＣＨ３、シクロプロピル、アゼチジン-３-イル、オキセタン-３-イル、及びモルホリン-４-イルから選択され；
Ｘ１はＣＲ９又はＮであり、Ｒ９はＨ、Ｆ、Ｃｌ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、-ＮＨ２、-ＮＨＣＨ３、-Ｎ(ＣＨ３)２、-ＯＨ、-ＯＣＨ３、-ＯＣＨ２ＣＨ３、及び-ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨから選択され；
Ｘ２はＣＲ１０又はＮであり、Ｒ１０はＨ、-ＣＨ３、-ＣＨ２ＣＨ３、及び-ＣＨ２ＣＨ２ＯＨから選択され；
Ｙ１及びＹ２はＣＨ及びＮから独立して選択され、ここで、Ｙ１及びＹ２はそれぞれＮではない。
【００６７】
式Ｉの化合物の例示的実施態様には、ＸがＣＲ９であり、Ｒ９はＨであるものが含まれる。
【００６８】
式Ｉの化合物の例示的実施態様には、ＸがＮであるものが含まれる。
【００６９】
式Ｉの化合物の例示的実施態様には、Ｒ４が-ＣＨ２ＯＨであるものが含まれる。
【００７０】
式Ｉの化合物の例示的実施態様には、Ｒ２がＦであるものが含まれる。
【００７１】
式Ｉの化合物の例示的実施態様には、Ｒ１及びＲ３がＨであるものが含まれる。
【００７２】
式Ｉの化合物の例示的実施態様には、Ｒ６がＣＨ３であるものが含まれる。
【００７３】
本発明の式Ｉの化合物は、不斉中心又はキラル中心を含んでいてもよく、従って異なる立体異性体形態で存在してもよい。ジアステレオマー、エナンチオマー及びアトロプ異性体、並びにラセミ混合物などのそれらの混合物を含むがこれらに限定されない、本発明の化合物の全ての立体異性体形態は本発明の一部を形成することが意図されている。
【００７４】
加えて、本発明は、シス−トランス（幾何）異性体及び配座異性体を含む、全てのジアステレオマーを包含する。例えば、式Ｉの化合物が二重結合又は縮合環を組み込んでいる場合、シス形態及びトランス形態並びにそれらの混合物は本発明の範囲に包含される。
【００７５】
ここで示す構造において、何れかの特定のキラル原子の立体化学が指定されていない場合は、全ての立体異性体が企図され、本発明の化合物として含まれる。立体化学が特定の立体配置を表す実線の楔形又は破線によって指定されている場合は、その立体異性体はそのように指定され、定義される。
【００７６】
本発明の化合物は、非溶媒和形態並びに水、エタノール等のような薬学的に許容可能な溶媒との溶媒和形態で存在し得、 本発明は溶媒和形態及び非溶媒和形態の双方を包含することが意図される。
【００７７】
本発明の化合物はまた異なる互変異性型で存在する場合があり、全てのそのような形態が本発明の範囲内に包含される。「互変異性体」又は「互変異性形態」なる用語は、低エネルギー障壁を介して相互転換可能な異なったエネルギーの構造異性体を意味する。例えば、プロトン互変異性体（プロトトロピー互変異性体としても知られる）は、ケト-エノール及びイミン-エナミン異性化のようなプロトンの移動を介する相互変換を含む。原子価互変異性体は結合電子の幾らかの再構築による相互変換を含む。
【００７８】
生物学的評価  
酵素活性（又は他の生物学的活性）の阻害剤としての式Ｉの化合物の相対的効果は、各々の化合物が活性を所定の程度まで阻害する濃度を決定し、その結果を比較することによって確認することができる。典型的には、好ましい決定は、生化学アッセイで活性の５０％を阻害する濃度、すなわち５０％阻害濃度又は「ＩＣ５０」である。ＩＣ５０値の決定は当分野で公知の従来技術を用いて達成できる。一般に、ＩＣ５０は、様々な濃度の被験阻害剤の存在下で所与の酵素の活性を測定することによって決定できる。実験的に得られた酵素活性の値を、次に、使用した阻害剤濃度に対してプロットする。５０％酵素活性（いかなる阻害剤も存在しない場合の活性と比較して）を示す阻害剤の濃度をＩＣ５０値とする。同様に、他の阻害濃度は活性の適切な測定を介して定義することができる。例えば、一部の状況では９０％阻害濃度、すなわちＩＣ９０等を確立することが望ましいと考えられる。  
【００７９】
式Ｉの化合物を標準的な生化学的Ｂｔｋキナーゼアッセイによって試験した（実施例９０１）。
【００８０】
式Ｉの化合物を試験するために使用することができる標準的な細胞性Ｂｔｋキナーゼアッセイのための一般的な方法は、ラモス細胞Ｂｔｋのアッセイ（実施例９０２）である。  
【００８１】
標準的なＢ細胞増殖アッセイは、Ｂａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製したＢ細胞を用いて式Ｉの化合物を試験するために使用できる（実施例９０３）。
【００８２】
標準的なＴ細胞増殖アッセイは、Ｂａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製したＴ細胞を用いて式Ｉの化合物を試験するために使用できる（実施例９０４）。
【００８３】
ＣＤ８６阻害アッセイは、８−１６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製した全マウス脾細胞を使用して、Ｂ細胞活性の阻害に関して式Ｉの化合物で実施することができる（実施例９０５）。
【００８４】
Ｂ−ＡＬＬ細胞生存アッセイは、培養下の生存可能なＢ−ＡＬＬ細胞の数を測定するために式Ｉの化合物で実施することができる（実施例９０６）。
【００８５】
ＣＤ６９全血アッセイは、表面ＩｇＭをヤギＦ（ａｂ’）２抗ヒトＩｇＭと架橋することによって活性化したヒト全血中のＢリンパ球によるＣＤ６９の産生を阻害する化合物の能力を測定するために式Ｉの化合物で実施することができる（実施例９０７）。ＣＤ６９は、リンパ球の移動及びサイトカイン分泌に関与するＩＩ型Ｃ型レクチンである。ＣＤ６９発現は、白血球活性化の最初期に利用可能な指標の１つであり、その迅速な誘導は転写活性化を介して起こる（Vazquezら(2009) Jour. of Immunology, ２００９年１０月１９日に公開。doi：10.4049/jimmunol.0900839）。選択的Ｂｔｋ阻害剤による抗原受容体刺激の濃度依存的阻害は、リンパ球活性化マーカーであるＣＤ６９の細胞表面発現を誘導する（Honigbergら(2010) Proc. Natl. Acad. Sci. 107(29)：13075-13080）。従って、選択的Ｂｔｋ阻害剤によるＣＤ６９阻害は、特定のＢ細胞障害の治療効果と相関し得る。ＣＤ６９  Ｈｕ血液ＦＡＣＳ ＩＣ７０値を、表１及び２において例示的な式Ｉの化合物に関して提示する。
【００８６】
式Ｉの例示的な化合物の細胞傷害性又は細胞増殖抑制活性は、増殖している哺乳動物腫瘍細胞株を細胞培地中で樹立し、式Ｉの化合物を添加して、細胞を約６時間〜約５日間培養し、細胞生存率を測定することによって測定できる（実施例９０８）。細胞に基づくインビトロアッセイは、生存率、すなわち増殖（ＩＣ５０）、細胞傷害性（ＥＣ５０）及びアポトーシスの誘導（カスパーゼ活性化）を測定するために使用され、血液悪性腫瘍及び固形腫瘍に対する臨床効果を予測するうえで有用であり得る。
【００８７】
式Ｉの化合物と化学療法剤との組合せのインビトロ効力は、実施例９０８の細胞増殖アッセイによって測定することができる：Ｐｒｏｍｅｇａ社，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩから市販されている、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存率アッセイ。この均一系アッセイ法は、甲虫類（Coleoptera）ルシフェラーゼの組換え発現に基づき（米国特許第５５８３０２４号；米国特許第５６７４７１３号；米国特許第５７００６７０号）、代謝的に活性な細胞の指標である、存在するＡＴＰの定量化に基づいて培養下の生細胞の数を決定する（Crouchら(1993) J. Immunol. Meth. 160：81-88；米国特許第６６０２６７７号）。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）アッセイを９６又は３８４ウェル形式で実施し、自動ハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）に適用できるようにした（Creeら(1995）AntiCancer Drugs 6：398-404）。均一系アッセイの手順は、単一の試薬（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）試薬）を、血清添加培地で培養した細胞に直接添加することを含む。細胞洗浄、培地の除去及び複数のピペット分注段階は必要ない。このシステムは、試薬を添加し、混合した後１０分で、３８４ウェル形式においてわずか１５細胞／ウェルを検出する。
【００８８】
均一な「添加−混合−測定」形式は、細胞溶解及び存在するＡＴＰの量に比例する発光シグナルの生成をもたらす。ＡＴＰの量は、培養物中に存在する細胞の数に直接比例する。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）アッセイは、ルシフェラーゼ反応によって生じる「グロー型」発光シグナルを生成し、これは、使用される細胞型及び培地に依存して、一般に５時間を超える半減期を有する。生細胞は相対発光量（ＲＬＵ）に反映される。基質である甲虫ルシフェリンは、同時にＡＴＰのＡＭＰへの変換及び光子の生成を伴って、組換えホタルルシフェラーゼにより酸化的に脱カルボキシル化される。半減期の延長は、試薬注入器を使用する必要性を排除し、複数のプレートの連続又はバッチモード処理のための柔軟性を提供する。この細胞増殖アッセイは、様々なマルチウェル形式、例えば９６又は３８４ウェル形式で使用できる。データは、照度計又はＣＣＤカメラ撮影装置によって記録することができる。発光出力は、経時的に測定される、相対発光量（ＲＬＵ）として示される。
【００８９】
式Ｉの例示的な化合物及び化学療法剤との組合せの抗増殖作用は、特定の血液腫瘍細胞株に対するＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）アッセイ（実施例９０８）によって測定される。試験した化合物及び組合せについてＥＣ５０値が確立される。
【００９０】
表１及び２の例示的な式Ｉの化合物を本発明の方法に従って作製し、特性決定して、Ｂｔｋの阻害に関して試験した。それらは以下の構造及び対応する名称を有する（ChemDraw Ultra, Version9.0.1、及びChewBioDraw, Version11.0, CambridgeSoft Corp., CambridgeMA）。複数の名称が式Ｉの化合物又は中間体に関連する場合は、化学構造が化合物を定義するものとする。
【００９１】
表１
0005976828.tif 000006
0005976828.tif 000007
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【００９２】
表２
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0005976828.tif 000013
【００９３】
式Ｉの化合物の投与
本発明の化合物は、治療される状態に適した任意の経路によって投与し得る。適切な経路には、経口、非経口（皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、皮内、髄腔内及び硬膜外を含む）、経皮、直腸、経鼻、局所（口腔及び舌下を含む）、膣、腹腔内、肺内及び鼻腔内が含まれる。局所免疫抑制治療に関しては、化合物を、移植前に阻害剤を灌流すること又は移植片を阻害剤と接触させることを含む、病巣内投与によって投与し得る。好ましい経路は、例えば受容者の状態によって異なり得ることが認識される。化合物を経口投与する場合は、薬学的に許容可能な担体又は賦形剤と共に丸剤、カプセル、錠剤等として製剤化し得る。化合物を非経口投与する場合は、薬学的に許容可能な非経口ビヒクルと共に、及び、以下で詳述するように、注射用単位投薬形態で製剤化し得る。
【００９４】
ヒト患者を治療する用量は、式Ｉ又はＩＩの化合物約１０ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲であり得る。典型的な用量は、化合物約１００ｍｇ〜約３００ｍｇであリ得る。用量は、特定の化合物の吸収、分布、代謝及び排泄を含む薬物動態及び薬力学的性質に依存して、１日１回（ＱＩＤ）、１日２回（ＢＩＤ）、又はそれ以上の頻度で投与され得る。加えて、毒性因子も投与量及び投与レジメンに影響を及ぼし得る。経口投与される場合、丸剤、カプセル又は錠剤を特定の期間１日１回又はより少ない頻度で摂取し得る。レジメンは、多数の治療サイクルにわたって反復し得る。
【００９５】
式Ｉの化合物での治療方法
本発明の式Ｉの化合物は、免疫障害、心臓血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝／内分泌機能障害又は神経障害などのＢｔｋキナーゼに関連する細胞増殖、機能又は挙動の異常から生じる疾患又は障害に罹患しており、従って上記で定義された本発明の化合物の投与を含む方法によって治療され得る、ヒト又は動物患者を治療するために有用である。癌に罹患しているヒト又は動物患者も、上記で定義された本発明の化合物の投与を含む方法によって治療され得る。患者の状態は、それにより改善又は軽減され得る。
【００９６】
式Ｉの化合物は、全身及び局所炎症、免疫炎症性疾患、例えば関節リウマチ、免疫抑制、臓器移植拒絶反応、アレルギー、潰瘍性大腸炎、クローン病、皮膚炎、喘息、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、多発性硬化症、強皮症／全身性硬化症、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）血管炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、乾癬などの、哺乳動物細胞、生物又は関連する病的状態のインビトロ、インサイツ及びインビボ診断又は治療のため、並びに全般的な関節保護作用のために有用であり得る。
【００９７】
本発明の方法は、また、関節炎疾患、例えば関節リウマチ、単関節関節炎、変形性関節症、痛風性関節炎、脊椎炎；ベーチェット病；敗血症、敗血症性ショック、内毒素性ショック、グラム陰性敗血症、グラム陽性敗血症、及び毒素ショック症候群；敗血症、外傷又は出血に続発する多臓器傷害症候群；眼障害、例えばアレルギー性結膜炎、春季結膜炎、ブドウ膜炎及び甲状腺関連眼障害；好酸球性肉芽腫；肺又は呼吸器障害、例えば喘息、慢性気管支炎、アレルギー性鼻炎、ＡＲＤＳ、慢性肺炎症疾患（例えば慢性閉塞性肺疾患）、珪肺症、肺サルコイドーシス、胸膜炎、肺胞炎、血管炎、気腫、肺炎、気管支拡張症及び肺酸素毒性；心筋、脳又は四肢の再灌流傷害；線維症、例えば嚢胞性線維症；ケロイド形成又は瘢痕組織形成；アテローム性動脈硬化症；自己免疫疾患、例えば全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、自己免疫性甲状腺炎、多発性硬化症、一部の形態の糖尿病及びレイノー症候群；移植片拒絶障害、例えばＧＶＨＤ及び同種移植拒絶反応；慢性糸球体腎炎；炎症性腸疾患、例えば慢性炎症性腸疾患（ＣＩＢＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎及び壊死性腸炎；炎症性皮膚疾患、例えば接触皮膚炎、アトピー性皮膚炎、乾癬又はじん麻疹；感染に起因する発熱及び筋痛；中枢神経系又は末梢神経系炎症性障害、例えば髄膜炎、脳炎、及び軽微な外傷に起因する脳又は脊髄損傷；シェーグレン症候群；白血球血管外遊出を含む疾患；アルコール性肝炎；細菌性肺炎；抗原抗体複合体媒介性疾患；循環血液量減少性ショック；Ｉ型糖尿病；急性及び遅延型過敏症；白血球悪液質及び転移に起因する疾患状態；熱傷；顆粒球輸血関連症候群；並びにサイトカイン誘発性毒性などの疾患を治療することを含む。
【００９８】
また、本発明の方法は、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、尿生殖路癌、食道癌、喉頭癌、グリア芽細胞腫、神経芽細胞腫、胃癌、皮膚癌、角化棘細胞腫、肺癌、類表皮癌、大細胞癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞癌、肺腺癌、骨癌、結腸癌、腺腫、膵臓癌、腺癌、甲状腺癌、濾胞状癌、未分化癌、乳頭状癌、精上皮腫、黒色腫、肉腫、膀胱癌、肝臓癌及び胆道癌、腎臓癌、膵臓癌、骨髄障害、リンパ腫、へアリーセルの癌、口腔癌、鼻咽頭癌、咽頭癌、口唇癌、舌癌、口の癌、小腸癌、結腸直腸癌、大腸癌、直腸癌、脳及び中枢神経系の癌、ホジキン病、白血病、気管支癌、甲状腺癌、肝臓及び肝内胆管の癌、肝細胞癌、胃癌、神経膠腫／グリア芽細胞腫、子宮内膜癌、黒色腫、腎臓及び腎盂の癌、膀胱癌、子宮体癌、子宮頸癌、多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、骨髄性白血病、口腔及び咽頭の癌、非ホジキンリンパ腫、黒色腫、並びに絨毛結腸腺腫から選択される癌を治療することを含む。
【００９９】
本発明の方法は、再灌流傷害、すなわち組織もしくは器官が虚血期間を経験し、その後再灌流が起こる状況から生じる傷害を有する又は傷害を受けやすい被験者を治療するうえで有用性を有し得る。「虚血」という用語は、動脈血の流入の障害に起因する局所的な組織貧血を指す。一過性の虚血とそれに続く再灌流は、特徴として患部の血管の内皮を介した好中球の活性化及び遊出を生じさせる。活性化された好中球の蓄積は、次に、反応性酸素代謝産物の生成をもたらし、この反応性酸素代謝産物が関与する組織又は器官の成分を損傷する。この「再灌流傷害」という現象は、一般に血管発作（全虚血及び局所虚血を含む）、出血性ショック、心筋虚血又は心筋梗塞、臓器移植及び脳血管攣縮などの状態に関連する。例を挙げると、再灌流傷害は、一度血液の受け入れを止められた心臓が再灌流し始める、心臓バイパス手術の終了時又は心停止の間に起こる。Ｂｔｋ活性の阻害は、そのような状況における再灌流傷害の量の低減を生じさせ得ると期待される。
【０１００】
薬学的製剤
ヒトを含む哺乳動物の治療処置に本発明の化合物を使用するために、本発明の化合物は通常、標準的な医薬慣例に従って薬学的組成物として製剤化される。本発明のこの態様によれば、本発明の化合物を薬学的に許容可能な希釈剤又は担体と共に含有する薬学的組成物が提供される。
【０１０１】
典型的な製剤は、本発明の化合物と担体、希釈剤又は賦形剤を混合することによって調製される。適切な担体、希釈剤及び賦形剤は当業者に周知であり、炭水化物、ワックス、水溶性及び／又は膨潤性ポリマー、親水性又は疎水性物質、ゼラチン、油、溶媒、水等の材料を含む。使用される特定の担体、希釈剤又は賦形剤は、本発明の化合物が適用される手段及び目的に依存する。溶媒は一般に、哺乳動物に投与するのに安全であると当業者によって認められた（ＧＲＡＳ）溶媒に基づいて選択される。一般に、安全な溶媒は、水及び水中で可溶性又は混和性である他の非毒性溶媒などの非毒性水性溶媒である。適切な水性溶媒には、水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えばＰＥＧ４００、ＰＥＧ３００）等及びそれらの混合物が含まれる。製剤はまた、薬物（すなわち本発明の化合物又はその薬学的組成物）の洗練された体裁を与えるため又は医薬品（すなわち医薬）の製造を助けるために一又は複数の緩衝剤、安定剤、界面活性剤、湿潤剤、潤滑剤、乳化剤、懸濁化剤、防腐剤、抗酸化剤、不透明化剤、流動促進剤、加工助剤、着色剤、甘味料、香料、香味料及び他の公知の添加剤も含有し得る。
【０１０２】
製剤は、従来の溶解及び混合手順を使用して調製され得る。例えば、バルク原薬（すなわち本発明の化合物又は安定化された形態の本発明の化合物（例えばシクロデキストリン誘導体又は他の公知の複合体形成剤との複合体）を、上述した賦形剤の一又は複数の存在下で適切な溶媒に溶解する。本発明の化合物は、典型的には医薬剤形に製剤化され、薬物の容易に制御可能な投与量を提供し、患者が処方されたレジメンを順守することを可能にする。
【０１０３】
適用のための薬学的組成物（又は製剤）は、薬物を投与するために使用される方法に依存して様々な方法で包装され得る。一般に、配給のための製品は、適切な形態の薬学的製剤がその中に収められた容器を含む。適切な容器は当業者に周知であり、ビン（プラスチック及びガラス）、小袋、アンプル、プラスチックバッグ、金属円筒等のような材料を含む。容器はまた、包装の内容物の不注意な開封を防ぐために不正開封防止の仕組みも含み得る。加えて、容器には、容器の内容物を記載するラベルがその表面に貼付される。ラベルはまた、適切な警告も含み得る。
【０１０４】
本発明の化合物の薬学的製剤は、様々な投与経路及び投与のタイプに合わせて調製され得る。例えば、所望の程度の純度を有する式Ｉ又はＩＩの化合物は、場合により、凍結乾燥製剤、破砕粉末又は水溶液の形態で、薬学的に許容可能な希釈剤、担体、賦形剤又は安定剤と混合してもよい（Remington's Pharmaceutical Sciences(1980)16版, Osol, A編）。製剤化は、適切なｐＨで周囲温度にて、及び所望の純度で、生理学的に許容される担体、すなわち使用される投与量及び濃度で受容者に非毒性である担体と混合することによって実施され得る。製剤のｐＨは、主として特定の使用及び化合物の濃度に依存するが、約３〜約８の範囲であり得る。ｐＨ５の酢酸緩衝液中の製剤は適切な実施態様である。
【０１０５】
化合物は通常、固体組成物、凍結乾燥製剤又は水溶液として保存することができる。
【０１０６】
本発明の薬学的組成物は、良質の医療のための原則と一致する方法で、すなわち量、濃度、スケジュール、経過、ビヒクル及び投与経路で製剤化され、用量決定され、投与される。これに関連して考慮する因子には、治療される特定の障害、治療される特定の哺乳動物、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与の日程計画、及び医師に公知の他の因子が含まれる。投与される化合物の「治療有効量」はそのような考慮によって決定され、過増殖性障害を改善する又は治療するのに必要な最小量である。
【０１０７】
一般的な提案として、各用量につき非経口投与される阻害剤の初期医薬的有効量は、約０．０１−１０００ｍｇ／ｋｇの範囲、すなわち１日当たり患者の体重１ｋｇにつき約０．１−２０ｍｇの範囲内であり、使用される化合物の典型的な初期範囲は０．３−１５ｍｇ／ｋｇ／日である。
【０１０８】
許容される希釈剤、担体、賦形剤及び安定剤は、使用される投与量及び濃度で受容者に非毒性であり、緩衝剤、例えばリン酸、クエン酸及び他の有機酸；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルもしくはベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えばメチルもしくはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチンもしくは免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニンもしくはリシン；グルコース、マンノースもしくはデキストリンを含む単糖類、二糖類及び他の炭水化物；キレート剤、例えばＥＤＴＡ；糖類、例えばスクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトール；塩形成対イオン、例えばナトリウム；金属錯体（例えば亜鉛タンパク質錯体）；並びに／又は非イオン性界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）もしくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が含まれる。活性医薬成分はまた、例えばコアセルベーション技術によって又は界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、コロイド状薬物送達システム（例えばリポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）中又はマクロエマルジョン中の、ヒドロキシメチルセルロース又はゼラチンマイクロカプセル及びポリ（メタクリル酸メチル）マイクロカプセルに封入し得る。そのような技術は、Remington's Pharmaceutical Sciences(1980)16版, Osol, A編に開示されている。
【０１０９】
式Ｉの化合物の徐放性調製物が調製され得る。徐放性調製物の適切な例には、式Ｉの化合物を含有する固体疎水性ポリマーの半透過性マトリックスが含まれ、このマトリックスは成形品、例えばフィルム、又はマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリックスの例には、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ(２-ヒドロキシエチル-メタクリレート）、又はポリ(ビニルアルコール))、ポリアクチド類（米国特許第３７７３９１９号）、Ｌグルタミン酸とγ-エチル-Ｌ-グルタメートのコポリマー、非分解性エチレン-酢酸ビニル、分解性乳酸-グリコール酸コポリマー、例えばLUPRON DEPOTＴＭ（乳酸-グリコール酸コポリマー及び酢酸ロイプロリドからなる注入可能なミクロスフィア）、及びポリ-Ｄ-(-)-３-ヒドロキシ酪酸が含まれる。
【０１１０】
製剤は、本明細書で詳述する投与経路に適するものを含む。製剤は、好都合に単位剤形で提供することができ、薬学分野で周知の方法のいずれかによって調製され得る。技術及び製剤は一般に、Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Co., Easton, PA)に見出される。そのような方法は、活性成分を、一又は複数の副成分を構成する担体と混合する段階を含む。一般に製剤は、活性成分を液体担体又は微粉化した固体担体又はその両方と均一かつ密接に混合し、次に、必要な場合は、生成物を成形することによって調製される。
【０１１１】
経口投与に適する式Ｉの化合物の製剤は、各々が所定量の式Ｉの化合物を含有する丸剤、カプセル、カシェ剤又は錠剤などの個別単位として調製され得る。圧縮錠剤は、粉末又は顆粒などの自由流動形態の活性成分を、場合により結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、表面活性剤又は分散剤と混合して、適切な機械で圧縮することによって調製され得る。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末活性成分の混合物を適切な機械で成形することによって作製され得る。錠剤は、場合により被覆するか又は割線を入れてもよく、また場合により活性成分の持続放出又は制御放出を提供するように製剤化される。錠剤、トローチ剤、ロゼンジ、水性もしくは油世懸濁剤、分散性散剤もしくは顆粒剤、乳剤、ハードもしくはソフトカプセル、例えばゼラチンカプセル、シロップ剤又はエリキシル剤が経口使用のために調製され得る。経口使用を意図する式Ｉの化合物の製剤は、薬学的組成物の製造のための当分野で公知の任意の方法に従って調製することができ、そのような組成物は、口当たりの良い製剤を提供するために、甘味料、香味料、着色剤及び防腐剤を含む一又は複数の作用物質を含有し得る。錠剤の製造に適した非毒性の薬学的に許容可能な賦形剤と混合して活性成分を含有する錠剤は許容される。これらの賦形剤は、例えば不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム又は炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウム；造粒剤及び崩壊剤、例えばトウモロコシデンプン又はアルギン酸；結合剤、例えばデンプン、ゼラチン又はアラビアゴム；及び潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクであり得る。錠剤は被覆されていなくてもよく、又は消化管での崩壊及び吸着を遅らせ、それにより長期間にわたって持続的な作用を提供するためのマイクロカプセル化を含む公知の技術によって被覆され得る。例えば、時間遅延物質、例えばモノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルを単独で又はワックスと共に使用し得る。
【０１１２】
眼又は他の外部組織、例えば口及び皮膚の治療のために、製剤は、好ましくは、例えば０．０７５−２０％ｗ／ｗの量で活性成分を含有する局所軟膏又はクリームとして施用される。軟膏として製剤化する場合は、活性成分をパラフィン系又は水混和性の軟膏基剤と共に使用し得る。あるいは、活性成分を水中油型クリーム基剤と共にクリームに製剤化し得る。所望する場合は、クリーム基剤の水相は、多価アルコール、すなわち２個又はそれ以上のヒドロキシル基を有するアルコール、例えばプロピレングリコール、ブタン１,３-ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロール及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００を含む）、並びにそれらの混合物を含み得る。局所製剤は、望ましくは、皮膚又は他の患部を介した活性成分の吸収又は浸透を促進する化合物を含み得る。そのような皮膚浸透促進剤の例には、ジメチルスルホキシド及び関連する類似体が含まれる。本発明の乳剤の油相は、公知の成分から公知の方法で構成され得る。油相は単に乳化剤だけを含んでもよいが、望ましくは、少なくとも１つの乳化剤と、脂肪又は油又は脂肪と油の両方との混合物を含む。好ましくは、親水性乳化剤が、安定剤として働く親油性乳化剤と共に含まれる。油と脂肪の両方を含むことも好ましい。合わせて考慮すると、安定剤を伴う又は伴わない乳化剤は、いわゆる乳化ワックスを構成し、ワックスは油脂と共に、クリーム製剤の油性分散相を形成する、いわゆる乳化軟膏基剤を構成する。本発明の製剤における使用に適した乳化剤及び乳化安定剤には、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０、Ｓｐａｎ（登録商標）８０、セトステアリルアルコール、ベンジルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル及びラウリル硫酸ナトリウムが含まれる。
【０１１３】
式Ｉの化合物の水性懸濁液は水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合せしめられて活性物質を含む。そのような賦形剤には、懸濁剤、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、クロスカルメローゼ、ポビドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム及びアカシアガム、及び分散又は湿潤剤、例えば天然に生じるホスファチド（例えばレシチン）、脂肪酸とアルキレンオキシドとの縮合産物（例えばポリオキシエチレンステアレート）、長鎖脂肪族アルコールとエチレンオキシドとの縮合産物（例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール）、脂肪酸とヘキシトール無水物から誘導された部分エステルとエチレンオキシドとの縮合産物（例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）が含まれる。水性懸濁液はまた一又は複数の保存料、例えばエチル又はｎ-プロピルｐ-ヒドロキシ-ベンゾエート、一又は複数の着色剤、一又は複数の香味剤及び一又は複数の甘味料、例えばスクロース又はサッカリンを含みうる。
【０１１４】
式Ｉの化合物の薬学的組成物は、滅菌された注射用調製物の形態、例えば滅菌注射用水性又は油性懸濁液の形態であってもよい。この懸濁液は上に述べた好適な分散又は湿潤剤及び懸濁剤を用いて公知技術に従って処方することができる。滅菌された注射用調製物はまた１,３-ブタンジオール溶液又は凍結乾燥粉末として調製したもののように、非毒性の非経口的に許容可能な希釈剤又は溶媒中の滅菌注射用溶液又は懸濁液であってもよい。用いることができる許容可能なビヒクル及び溶媒は水、リンガー液及び等張塩化ナトリウム溶液である。また、滅菌固定化油を溶媒又は懸濁媒質として便宜的に用いることができる。この目的に対して、合成のモノ-又はジグリセリドを含む任意のブランドの固定化油を用いることができる。また、オレイン酸のような脂肪酸も同様に注射剤の調製に使用することができる。
【０１１５】
単位投薬形態をつくるために担体物質と混合されうる活性成分の量は、処置される宿主と特定の投与形式に応じて変わる。例えば、ヒトへの経口投与のための時間放出製剤は、全組成物の約５から約９５％（重量：重量）と変わりうる適切で簡便な量の担体物質と共に配合されておよそ１から１０００ｍｇの活性物質を含みうる。薬学的組成物は投与のために容易に測定可能な量をもたらすように調製することができる。例えば、静脈点滴のための水溶液は、約３０ｍＬ／時間の割合で適した体積の点滴が生じうるようにするために、溶液１ミリリットル当たり約３から５００μｇの活性成分を含みうる。
【０１１６】
非経口投与に適した製剤には、抗酸化剤、バッファー、静菌剤及び意図したレシピエントの血液と製剤を等張にする溶質を含みうる水性及び非水性滅菌注射用溶液；及び懸濁剤及び増粘剤を含みうる水性及び非水性滅菌懸濁液が含まれる。
【０１１７】
眼への局所投与に適した製剤には、好適な担体、特に活性成分のための水性溶媒に活性成分が溶解又は懸濁させられた点眼液がまた含まれる。活性成分はそのような製剤中に、好ましくは０．５〜２０％ｗ／ｗ、例えば０．５〜１０％ｗ／ｗ、特に約１．５％ｗ／ｗの濃度で存在する。
【０１１８】
口への局所投与に適した製剤には、香味基剤、通常はスクロース及びアカシア又はトラガカント中に活性成分を含むロゼンジ；ゼラチン及びグリセリン、又はスクロース及びアカシアのような不活性基剤に活性成分を含むパスティユ；及び適切な液体担体に活性成分を含むうがい薬が含まれる。
【０１１９】
直腸投与のための製剤は、例えばココアバター又はサリチレートを含む好適な基剤を用いて座薬として提供することができる。
【０１２０】
肺内又は経鼻投与に適した製剤は、例えば０．１から５００ミクロン（例えば０．５、１、３０ミクロン、３５ミクロン等々のような増分ミクロンで０．１から５００ミクロンの範囲の粒子径を含む）の範囲の粒子径を有し、これが鼻経路を通る迅速な吸入又は肺胞嚢に達するように口からの吸入によって投与される。好適な製剤には、活性成分の水性又は油性溶液が含まれる。エアゾール又は乾燥粉末投与に適した製剤は常法によって調製することができ、以下に記載されるような疾患の治療又は予防にこれまで使用されている化合物のような他の治療剤と共に送達できる。
【０１２１】
膣投与に適した製剤は、活性成分に加えて、当該分野で適切であることが知られているような担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム又はスプレー製剤として提供することができる。
【０１２２】
製剤は、単位投薬又は複数投薬容器、例えば密封されたアンプル及びバイアルに包装することができ、使用直前に注射用の滅菌液体担体、例えば水の添加のみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）条件で保存することができる。即時混合注射溶液及び懸濁液は既に記載された種類の滅菌粉末、顆粒及び錠剤から調製される。好適な単位投薬製剤は、活性成分の、上に記載されたような毎日の投薬又は毎日の部分用量単位、又はその適切な画分を含むものである。
【０１２３】
本発明はさらに獣医学的担体と共に上述の少なくとも一の活性成分を含む獣医学的組成物を提供する。獣医学的担体は組成物を投与する目的に有用な物質であり、不活性な又は獣医学分野で許容され、活性成分と相容性がある固形、液体又は気体物質でありうる。これらの獣医学的組成物は非経口的、経口的又は任意の他の所望の経路によって投与することができる。
【０１２４】
併用療法
式Ｉの化合物は、単独で、又は例えば炎症性又は過剰増殖性疾患（例えば、癌）のようなここに記載の疾患又は障害の治療のための他の治療剤と組み合わせて用いることができる。所定の実施態様では、式Ｉの化合物は、薬学的併用製剤において又は併用療法として投薬レジメンで、抗炎症性又は抗過剰増殖特性を有するか又は炎症性、免疫反応性疾患、又は過剰増殖性疾患（例えば、癌）を治療するのに有用である第二の化合物と組み合わせられる。第二の治療剤はＮＳＡＩＤ抗-炎症剤であり得る。第二の治療剤は化学療法剤であり得る。薬学的併用製剤又は投薬レジメンの第２の化合物は、好ましくは、それらが互いに悪影響を及ぼさないように、式Ｉの化合物に対して相補的な活性を有する。このような化合物は意図する目的に効果的な量で組合せられて存在する。一実施態様では、この発明の化合物は、式Ｉの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物、又は薬学的に許容可能な塩、又はプロドラッグを、ＮＳＡＩＤ等の治療剤と組合せて含有する。
【０１２５】
併用療法は、同時又は逐次レジメンとして投与され得る。逐次的に投与される場合は、組合せを２回又はそれ以上の投与で投与し得る。併用投与には、別々の製剤又は単一薬学的製剤を使用する同時投与、及び何れかの順序での連続投与が含まれ、ここで好ましくは、両方（又は全部）の活性薬剤が同時にそれらの生物学的活性を及ぼす期間が存在する。
【０１２６】
上記同時投与薬剤のいずれかについての適切な投与量は、現在使用されている投与量であり、新たに同定された作用物質及び他の治療薬又は処置の組合せ作用（相乗作用）に起因して低減され得る。
【０１２７】
併用療法は、「相乗作用」をもたらす場合があり、「相乗作用性」であると証明され得る、すなわち活性成分を一緒に使用した場合に達成される作用は、化合物を別々に使用することから生じる作用の合計よりも大きい。相乗作用は、活性成分が、（１）共製剤され、配合単位投与製剤中で同時に投与もしくは送達される；（２）別々の製剤として交互にもしくは並行して送達される；又は（３）何らかの他のレジメンによって送達される場合に達成され得る。交互の療法で送達される場合は、化合物が、例えば別々の注射器での異なる注射、別々の丸剤もしくはカプセル、又は別々の注入によって、逐次的に投与又は送達される場合に達成され得る。一般に、交互の療法の間は、各々の活性成分の有効投与量を逐次的に、すなわち連続的に投与するが、併用療法では、２つ又はそれ以上の活性成分の有効投与量を一緒に投与する。
【０１２８】
治療の特定の実施態様では、式Ｉの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物、又はその薬学的に許容可能な塩もしくはプロドラッグは、本明細書で述べるものなどの他の治療薬、ホルモン剤又は抗体薬剤と組み合わせることができ、並びに外科療法及び放射線療法と組み合わせてもよい。本発明による併用療法は、従って、式Ｉの少なくとも１つの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物、又はその薬学的に許容可能な塩もしくはプロドラッグの投与、及び少なくとも１つの他の癌治療法の使用を含む。式Ｉの化合物及びその他の医薬的に活性な治療薬の量並びに投与の相対的なタイミングは、所望の併用治療効果を達成するように選択される。
【０１２９】
式Ｉの化合物の代謝産物
本明細書で述べる式Ｉの化合物のインビボ代謝産物も本発明の範囲に含まれる。そのような産物は、例えば投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミド化、エステル化、脱エステル化、酵素切断等から生じ得る。従って、本発明は、本発明の化合物を、その代謝産物を生じさせるのに十分な期間哺乳動物と接触させることを含む工程によって生成される化合物を含む、式Ｉの化合物の代謝産物を包含する。
【０１３０】
代謝産物は、典型的には本発明の化合物の放射性標識された（例えば１４Ｃ又は３Ｈ）同位体を調製し、それを検出可能な用量（例えば約０．５ｍｇ／ｋｇを上回る）でラット、マウス、モルモット、サル又はヒトなどの動物に非経口投与して、代謝が起こるのに十分な時間（典型的には約３０秒〜３０時間）放置し、その変換産物を尿、血液又は他の生物学的試料から単離することによって同定される。これらの産物は標識されているので容易に単離される（他は、代謝産物中に残存するエピトープに結合することができる抗体の使用によって単離される）。代謝産物の構造は従来の方法で、例えばＭＳ、ＬＣ／ＭＳ又はＮＭＲ分析によって決定される。一般に、代謝産物の分析は、当業者に周知の従来の薬物代謝試験と同じ方法で行われる。代謝産物は、それらがインビボで他の形で見出されない限り、本発明の化合物の治療投薬のための診断アッセイにおいて有用である。
【０１３１】
製造品
本発明の他の実施態様では、上記で述べた疾患及び障害の治療のために有用な物質を含む製造品又は「キット」が提供される。一実施態様において、キットは、式Ｉの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物、又は薬学的に許容可能な塩又はプロドラッグを収容した容器を含む。キットは、容器上又は容器に付随してラベル又はパッケージ挿入物を有し得る。「パッケージ挿入物」なる用語は、指示、使用法、用量、投与、禁忌、、及び／又はこのような治療用製品の使用に関する注意についての情報を含む、治療用製品の市販パッケージに常套的に含まれる指示を称するために使用される。好適な容器には、例えば、ビン、バイアル、シリンジ、ブリスターパック等が含まれる。容器は、ガラス又はプラスチックなどの様々な材料から形成されてもよい。容器は、症状を治療するのに有効な式Ｉの化合物又はその製剤を収容し、無菌のアクセスポートを有し得る（例えば、容器は皮下注射針で貫通可能なストッパーを有する静脈内溶液バッグ又はバイアルであってもよい）。組成物中の少なくとも一の活性剤は式Ｉの化合物である。ラベル又はパッケージ挿入物は、組成物が癌のような選択した症状の処置のために使用されることを示している。更に、ラベル又はパッケージ挿入物は、治療される患者が、疾患、例えば過剰増殖性疾患、神経変性、心肥大、疼痛、偏頭痛又は神経外傷性疾患もしくは事象などを有していることを示すことができる。一実施態様において、ラベル又はパッケージ挿入物は、式Ｉの化合物を含有する組成物が異常細胞増殖に起因する疾患を治療するのに使用できることを示している。また、ラベル又はパッケージ挿入物は、組成物が他の疾患を治療するのに使用できることを示しうる。代替的に又は付加的に、製造品は、薬学的に許容可能なバッファー、例えば注射用の静菌水(ＢＷＦＩ)、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー液及びデキストロース溶液を含む第２の容器をさらに含んでもよい。更に、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針及びシリンジを含む商業的及び使用者の見地から望ましい他の材料を含んでもよい。
【０１３２】
キットは、式Ｉの化合物を投与するための指示書、及び存在するならば第２の製薬用製剤をさらに含む。例えば、キットが式Ｉの化合物を含有する第１の組成物と第２の製薬用製剤を含むならば、キットは、それを必要とする患者に、第１及び第２の薬学的組成物を同時、逐次又は別々に投与するための指示書をさらに含んでよい。
【０１３３】
他の実施態様において、キットは式Ｉの化合物の固体状経口用形態、例えば錠剤又はカプセルの送達に適している。このようなキットは、好ましくは多くの単位用量を含む。このようなキットには、それらが意図する使用の順序に向いた用量を有するカードが含まれる。このようなキットの例は「ブリスターパック」である。ブリスターパックは包装産業でよく知られており、製薬用単位用量形態で幅広く使用されている。所望するならば、記憶補助が、例えば数、文字、又は他のマークの形態で、もしくは所定投与量で投与可能である処理スケジュールに日にちを指定したカレンダー挿入物を用いて提供可能である。
【０１３４】
一実施態様において、キットは、（ａ）そこに式Ｉの化合物を含む第一の容器と；場合によっては（ｂ）そこに第２の製薬用製剤を含む第２の容器とを含み得、ここで第２の製薬用製剤は抗増殖活性を持つ第２の化合物を含有する。代替的に又は付加的に、キットは、薬学的に許容可能なバッファー、例えば注射用の静菌水(ＢＷＦＩ)、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー液及びデキストロース溶液を含む第３の容器をさらに含んでもよい。更に、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針及びシリンジを含む商業的及び使用者の見地から望ましい他の材料を含んでもよい。
【０１３５】
所定の他の実施態様において、キットが式Ｉの組成物と第二の治療剤を含む場合、キットは別々の組成物を収容する容器、例えば分割ボトル又は分割ホイルパックを含みうるが、別々の組成物は、単一又は未分割容器に収容されてもよい。典型的には、キットは、別々の成分を投与するための指示書を含む。別々の成分が、異なる投与形態(例えば、経口及び非経口)で投与される場合、異なる投与間隔で投与される場合、又は組合せ物の個々の成分の用量設定が処方医師に所望される場合、キット形態は特に有利である。
【０１３６】
式Ｉ化合物の調製
式Ｉの化合物は、特にここに含まれる記述に照らして、化学分野でよく知られているもの、及びComprehensive Heterocyclic Chemistry II, Editors Katritzky and Rees, Elsevier, 1997, 例えば第3巻；Liebigs Annalen der Chemie, (9):1910-16, (1985)；Helvetica Chimica Acta, 41:1052-60, (1958)；Arzneimittel-Forschung, 40(12):1328-31, (1990)に記載の他の複素環のためのものと類似のプロセスを含む合成経路により合成され得、それぞれは出典明示により援用される。出発物質は、例えばAldrich Chemicals (Milwaukee, WI)等から商業的に入手可能であり、又は当業者によく知られている方法 (例えば、Louis F. Fieser 及び Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, 第1-23巻, Wiley, N.Y. (196７-2006 ed.), 又は Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl編. Springer-Verlag, Berlin, 補遺を含む(Beilsteinオンラインデーターベースからも利用可能)を使用して容易に調製される。
【０１３７】
式Ｉの化合物及び必要な試薬及び中間体の合成に有用な合成化学変換及び保護基の方法論（保護及び脱保護）は当技術分野で公知であり、例えば、R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T. W. Greene 及び P. G .M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 第3版., John Wiley and Sons (1999)；及び L. Paquette編, Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995)、及びその後続版に記載されているものが含まれる。
【０１３８】
式Ｉの化合物は、単独で、又は少なくとも２、例えば５〜１００の化合物、又は１０〜１００の化合物を含む化合物ライブラリとして調製されてよい。式Ｉの化合物のライブラリは、当業者に公知の方法により、コンビナトリアル「スプリット＆ミックス」アプローチによって、又は溶液相もしくは固相化学のいずれかを使用する複数の平行合成によって調製され得る。
【０１３９】
図面及び実施例は、式Ｉの化合物を調製するための例示的な方法を提供する。当業者は、他の合成経路を使用して式Ｉ及びＩＩの化合物を合成し得ることを認識する。特定の出発物質及び試薬を図面及び実施例において示し、論じるが、様々な誘導体及び／又は反応条件を提供するために他の出発物質及び試薬を容易に代用することができる。加えて、記載される方法によって調製される化合物の多くは、当業者に周知の従来の化学を用いて、本開示に照らして更に修飾することができる。
【０１４０】
式Ｉの化合物の調製において、中間体の遠隔官能基（例えば、第１級又は第２級アミン）の保護が必要であり得る。そのような保護の必要性は、遠隔官能基の性質及び調製方法の条件に依存して変化する。適切なアミノ保護基には、アセチル、トリフルオロアセチル、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢｚ）及び９-フルオレニルメチレンオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）が含まれる。そのような保護の必要性は、当業者によって容易に決定される。保護基及びそれらの使用の一般的な説明については、T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991参照。
【０１４１】
式Ｉの化合物の調製に有用な実験手順、中間体及び試薬は、２０１１年５月６日に出願され、その全体が出典明示により援用される米国特許出願第１３／１０２７２０号「ピリドン及びアザ-ピリドン化合物とその使用方法」に見出すことができる。
【０１４２】
図１−１２は、実施例１０１−１１２に詳細に記載されている式Ｉの化合物１０１−１２５の例示的実施態様の合成を記載しており、他の式Ｉの化合物の調製についても有用である。
【０１４３】
一般的な調製手順
一般的な手順：鈴木カップリング
0005976828.tif 000014
鈴木型カップリング反応は、炭素−炭素結合を形成して式Ｉの化合物及び中間体、例えばＡ−３の環に結合するために有用である（Suzuki (1991) Pure Appl. Chem. 63:419-422；Miyaura and Suzuki (1979) Chem. Reviews 95(7):2457-2483；Suzuki (1999) J. Organometal. Chem. 576:147-168)。鈴木カップリングは、Ａ−１又はＡ−２等のボロン酸と、Ｂ−２又はＢ−４等のアリールハロゲン化物との、パラジウム媒介性の架橋カップリング反応である。例えば、Ｂ−２は、約１．５等量の４,４,４',４',５,５,５',５'-オクタメチル-２,２'-ビ（１,３,２-ジオキサボロラン)と組み合わせ、水中に１モル溶液と等量の約３等量の炭酸ナトリウム、及び同量のアセトニトリルに溶解させた。低原子価パラジウム触媒、例えばビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム（ＩＩ)ジクロリドを、触媒量、又はそれ以上添加する。いくつかの場合においては、水層のｐＨを調節するために、酢酸カリウムを炭酸ナトリウムの代わりに使用する。次に、反応物を１０〜３０分、マイクロ波反応器（Biotage AB, Uppsala, Sweden）中の圧力下で約１４０−１５０℃に加熱する。内容物を酢酸エチル又は別の有機溶媒で抽出する。有機層の蒸発後、ボロンエステルＡ−１をシリカで又は逆相ＨＰＬＣによって精製し得る。置換基は定義されるとおりであるか、又はその保護された形態もしくは前駆体である。同様に、臭化物中間体Ｂ−４をボロニル化してＡ−２を得ることができる。
【０１４４】
Ｂ−２とＡ−２、又はＢ−１とＢ−４の鈴木カップリングにより、式Ｉの化合物又は中間体Ａ−３が得られる。ボロン酸エステル（又は酸）（１．５当量）Ａ−１又はＡ−２、及びパラジウム触媒、例えばビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(ＩＩ)クロリド（０．０５当量）を、アセトニトリル中のハロ中間体（１当量）、及び１Ｍの炭酸ナトリウム水溶液（アセトニトリルと同量）の混合物に添加する。反応混合物を約１５分間マイクロ波で約１５０℃に加熱する。反応の完了時は、ＬＣ／ＭＳに示される。水を混合物に添加し、沈殿した生成物を濾過し、ＨＰＬＣによって精製し、生成物Ａ−３を得る。置換基は、定義されたような、又は保護された形態又はその前駆体である。
【０１４５】
種々のパラジウム触媒が鈴木カップリング反応中に使用することができる。種々の低原子価Ｐｄ（ＩＩ）及びＰｄ（０）触媒が、ＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２、Ｐｄ(ｔ-Ｂｕ)３、ＰｄＣｌ２ｄｐｐｆＣＨ２Ｃｌ２、Ｐｄ(ＰＰｈ３)４、Ｐｄ(ＯＡｃ)／ＰＰｈ３、Ｃｌ２ＰＤ[(Ｐｅｔ３)]２、Ｐｄ(ＤＩＰＨＯＳ)２、Ｃｌ２Ｐｄ(ＢｉＰｙ)、[ＰｄＣｌ(Ｐｈ２ＰＣＨ２ＰＰｈ２)]２、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(ｏ-ｔｏｌ)３]２、Ｐｄ２(ｄｂａ)３／Ｐ(ｏ-ｔｏｌ)３、Ｐｄ２(ｄｂａ)／Ｐ(フリル)３、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(フリル)３]２、Ｃｌ２Ｐｄ(ＰＭｅＰｈ２)２、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(４-Ｆ-Ｐｈ)３]２、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(Ｃ６Ｆ６)３]２、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(２-ＣＯＯＨ-Ｐｈ）(Ｐｈ)２]２、Ｃｌ２Ｐｄ[Ｐ(４-ＣＯＯＨ−Ｐｈ)(Ｐｈ)（Ｐｈ)２]２、及びカプセル化触媒のＰｄ  ＥｎＣａｔ?３０、Ｐｄ  ＥｎＣａｔ?ＴＰＰ３０、及びＰｄ（ＩＩ）ＥｎＣａｔ?  ＢＩＮＡＰ３０（米国特許第２００４／０２５４０６６号）を含む、鈴木カップリング反応に使用されてよい。
【０１４６】
一般的な手順：ブッフバルト反応
0005976828.tif 000015
ブッフバルト反応は、６−ブロモ中間体Ｂ−１をアミノ化するのに有用である(Wolf and Buchwald (2004) Org. Synth Coll. Vol. １０:423; Paulら (1994) Jour. Amer. Chem. Soc. １１6:596９-5970)。ＤＭＦ中の３,５-ジハロ−ピリドン中間体Ｂ−１の溶液に、適切な適当な５-(ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-アミン、例えば１０４ｂ、又は５-(ピペラジン-１-イル)ピラジン-２-アミン（２００ｍｏｌ％）、Ｃｓ２ＣＯ３（５０ｍｏｌ％）、Ｐｄ２(ｄｂａ)３（５ｍｏｌ％）、及び４,５-ビス(ジフェニルホスフィノ)-９,９-ジメチルキサンテン（Xantphos、ＣＡＳ登録番号１６１２６５−０３−８、１０ｍｏｌ％）を添加する。反応物を約３０分、マイクロ波反応器（Biotage AB, Uppsala, Sweden）中の圧力下で約１１０℃に加熱する。得られた溶液を真空中で濃縮し、Ｂ−２を得る。他のパラジウム触媒及びホスフィンリガンドも有用である。
【０１４７】
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Ｎ-アリールアミド中間体Ｂ−４も、環状アミド中間体（Ｒ７）、例えば３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)オン)１０１Ｅ及びアリールブロミドＢ−３を用いて、ブッフバルト反応下で調製可能である。。  
【０１４８】
分離方法  
式Ｉの化合物を調製する方法において、反応生成物を互いに及び／又は出発物質から分離することは好都合であり得る。各段階又は一連の段階の所望生成物を、当分野で一般的な技術によって所望の程度の均質性まで分離及び／又は精製する。典型的には、そのような分離は、多相抽出、溶媒もしくは溶媒混合物からの結晶化、蒸留、昇華又はクロマトグラフィを含む。クロマトグラフィには、例えば逆相及び順相クロマトグラフィ；サイズ排除クロマトグラフィ；イオン交換クロマトグラフィ；高、中及び低圧液体クロマトグラフィ法及び装置；小規模分析クロマトグラフィ；疑似移動床（ＳＭＢ）クロマトグラフィ及び分取薄層又は厚層クロマトグラフィを含む多くの方法、並びに小規模薄層及びフラッシュクロマトグラフィの技術が含まれ得る。
【０１４９】
別のクラスの分離方法は、所望生成物、未反応出発物質、反応副産物等に結合する又はさもなければこれらを分離可能にするように選択された試薬で混合物を処理することを含む。そのような試薬には、吸着剤又は吸収剤、例えば活性炭、分子ふるい、イオン交換体等が含まれる。あるいは、試薬は、塩基性材料の場合は酸、酸性材料の場合は塩基、抗体などの結合試薬、結合タンパク質、クラウンエーテルなどの選択的キレート剤、液体／液体イオン抽出試薬（ＬＩＸ）等であり得る。適切な分離方法の選択は、関与する物質の性質、例えば蒸留及び昇華における沸点及び分子量、クロマトグラフィにおける極性官能基の有無、多相抽出における酸性及び塩基性媒質中での物質の安定性等に依存する。
【０１５０】
ジアステレオマー混合物は、当業者に周知の方法、例えばクロマトグラフィ及び／又は分別結晶化によって、それらの物理的化学的相違に基づき個々のジアステレオマーに分離することができる。エナンチオマーは、適切な光学活性化合物（例えばキラルなアルコール又はモッシャーの酸塩化物などのキラル助剤）との反応によってエナンチオマー混合物をジアステレオマー混合物に変換し、ジアステレオマーを分離して、個々のジアステレオマーを対応する純粋なエナンチオマーに変換（例えば加水分解）することによって分離できる。また、本発明の化合物の一部はアトロプ異性体（例えば置換ビアリール）であり得、本発明の一部とみなされる。エナンチオマーはまた、キラルＨＰＬＣカラムの使用によって分離することもできる。
【０１５１】
その立体異性体を実質的に有さない単独の立体異性体、例えばエナンチオマーは、光学活性な分割剤を用いたジアステレオマーの形成などの方法を使用してラセミ混合物の分割により入手し得る（(Eliel, E. 及び Wilen, S. 「Stereochemistry of Organic Compounds」 John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994; Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr., 113(3):283-302）。本発明のキラル化合物のラセミ混合物は、（１）キラル化合物とのイオン性ジアステレオマー塩の形成、及び分別結晶化又は他の方法による分離、（２）キラル誘導体化試薬を用いたジアステレオマー化合物の形成、ジアステレオマーの分離、及び純粋な立体異性体への変換、並びに（３）キラル条件下での実質的に純粋な又は濃縮された立体異性体の直接の分離を含む、任意の適切な方法によって分離し、単離することができる。「Drug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology」 Irving W. Wainer編, Marcel Dekker, Inc., New York (1993)参照。
【０１５２】
方法（１）では、ジアステレオマー塩を、鏡像異性的に純粋なキラル塩基、例えばブルシン、キニーネ、エフェドリン、ストリキニーネ、α-メチル-β-フェニルエチルアミン（アンフェタミン）等と、酸性官能基を担持する不斉化合物、例えばカルボン酸及びスルホン酸との反応によって形成することができる。ジアステレオマー塩を誘導し、分別結晶化又はイオンクロマトグラフィによって分離し得る。アミノ化合物の光学異性体の分離のために、キラルなカルボン酸又はスルホン酸、例えばカンファースルホン酸、酒石酸、マンデル酸又は乳酸の添加により、ジアステレオマー塩の形成をもたらすことができる。
【０１５３】
別法として、方法（２）によって、分割される基質をキラル化合物の一エナンチオマーと反応させてジアステレオマー対を形成する(E. 及び Wilen, S. 「Stereochemistry of Organic Compounds」, John Wiley & Sons, Inc., 1994, p. 322)。ジアステレオマー化合物は、不斉化合物をエナンチオマー的に純粋なキラル誘導体化試薬、例えばメンチル誘導体と反応させた後、ジアステレオマーの分離と加水分解によって、純粋な又は濃縮されたエナンチオマーを生じせしめることによって形成させることができる。光学純度を決定する方法は、ラセミ混合体のキラルエステル、例えばメンチルエステル、例えば塩基の存在下で(-)メンチルクロロホルメート、又はMosherエステル、α-メトキシ-α-(トリフルオロメチル)フェニルアセテート(Jacob III.  J. Org. Chem. (1982) 47:4165)を製造し、二つのアトロプ異性体エナンチオマー又はジアステレオマーの存在性について１Ｈ ＮＭＲスペクトルを分析することを含む。アトロプ異性体化合物の安定なジアステレオマーは、アトロプ異性体ナフチル-イソキノリンの分離方法に従って順相及び逆相クロマトグラフィーによって分離し単離することができる（国際公開第９６／１５１１１号）。方法（３）によって、二つのエナンチオマーのラセミ混合物をキラル定常期を使用するクロマトグラフィーによって分離することができる(「Chiral Liquid Chromatography」 (1989) W. J. Lough編, Chapman and Hall, New York; Okamoto, J. Chromatogr., (1990) 513:375-378)。濃縮又は精製したエナンチオマーは、不斉炭素原子を持つ他のキラル分子を区別するために使用される方法、例えば旋光及び円偏光二色性によって区別することができる。
【実施例】
【０１５４】
実施例１０１ａ  ２,６-ジブロモ-４-フルオロベンズアルデヒド（１０１ａ）
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無水トルエン（３００ｍＬ）中の１,３-ジブロモ-５-フルオロ-２-ヨードベンゼン（５０ｇ、１３２ｍｍｏｌ）の溶液を−３５℃に冷却した。−２５℃以下の内部温度を維持しながら３０分かけてイソプロピルマグネシウムクロリド（８４ｍＬ、１７１ｍｍｏｌ、ジエチルエーテル中に２．０Ｍ）の溶液。図１を参照。透明な褐色の溶液を得た。撹拌を１．５時間続けた。次いで、無水ＤＭＦ（３４ｍＬ、４３６ｍｍｏｌ）を３０分かけて添加した。反応混合物の温度を−１９℃に上げた。反応混合物を１時間かけて１０℃（室温）まで温め、この温度で１．５時間撹拌した。反応物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌ（１００ｍＬ）でクエンチし、濾過し、減圧下で蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５０：１〜２０：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出）により精製し、１０１ａ（２０ｇ、収率５４％）を黄色固形物として得た。
【０１５５】
実施例１０１ｂ  ２,６-ジブロモ-４-フルオロフエニル)メタノール（１０１ｂ）
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エタノール（５００ｍＬ）中の２,６-ジブロモ-４-フルオロベンズアルデヒド１０１ａ（２０ｇ、７１ｍｍｏｌ）の溶液を、ＮａＢＨ４（１０ｇ、２８４ｍｍｏｌ）に加えた。混合物を室温（１０℃）で４時間撹拌した。ＴＬＣは出発材料の消滅を示した。反応物をＨＣｌ溶液（１５０ｍＬ、１Ｍ）でクエンチした。大部分のエタノールを減圧下で蒸発させた。残留物を酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(５０：１〜２０：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出）により精製して、１０１ｂ（１５ｇ、収率７５％）を白色固形物として得た。
【０１５６】
実施例１０１ｃ  ２,６-ジブロモ-４-フルオロベンジルアセテート（１０１ｃ）
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磁気攪拌器及び窒素注入口を備えた５００ｍＬの一口丸底フラスコに、  無水塩化メチレン（１００ｍＬ）中の１０１ｂ（２３．０ｇ、８１．０ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２５．０ｇ、２４７ｍｍｏｌ）を充填した。無水酢酸（１０．０ｇ、９８．０ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温で１６時間撹拌した。この時間後、混合物を塩化メチレン（１００ｍＬ）で希釈し、飽和水性炭酸水素ナトリウム（１００ｍＬ）で洗浄した。層を分離し、水層を塩化メチレン（２×２０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカ、０％〜５０％の酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、１０１ｃを白色固形物として収率８７％（２３．０ｇ）で得た。
【０１５７】
実施例１０１ｄ  ５,６,７,８-テトラヒドロインドリジン-２-カルボン酸メチル（１１２ｄ）
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磁気攪拌器及び窒素導入口を備えた５００ｍＬの丸底フラスコを窒素でパージし、５,６,７,８-テトラヒドロインドリジン-２-カルボン酸（３０．４ｇ、１８４ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（１．００ｇ、  １３．６ｍｍｏｌ）及び塩化メチレン（３００ｍＬ）を充填した。溶液を氷浴を用いて０℃に冷却した。塩化オキサリル（２８．０ｇ、２２１ｍｍｏｌ）を滴下して加え、反応混合物を３０分間かけて室温まで加温し、５時間撹拌した。この時間後、得られた溶液を濃縮し、褐色固形物を得た。この固形物を無水メタノール（４００ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃に冷却した。トリエチルアミン（５７ｇ、５５２ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、それを室温でさらに２時間撹拌した。この時間後、反応混合物を減圧下で濃縮乾固した。残留物を塩化メチレン（３００ｍＬ）で希釈し、水（２００ｍＬ）及び飽和水性炭酸水素ナトリウム（２００ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をヘキサン（２００ｍＬ）で滴定し、１０１ｄを白色固形物として収率５８％（１９．１ｇ）で得た。融点：７２〜７４℃；1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 7.13 (s, 1H), 6.23 (s, 1H), 3.93 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 3.77 (s, 3H), 2.75 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.93 (m, 2H), 1.80 (m, 2H); (APCI+) m/z 180.1 (M+H)
【０１５８】
実施例１０１ｅ  ３-(シアノメチル)-５,６,７,８-テトラヒドロインドリジン-２-カルボン酸メチル（１０１ｅ）
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５００ｍＬの三口丸底フラスコに添加漏斗、温度計を具備せしめ、５,６,７,８-テトラヒドロインドリジントン-２-カルボン酸メチル１０１ｄ（６．７０ｇ、３７．４ｍｍｏｌ）、ヨードアセトニトリル（１２．５ｇ、  ７４．９ｍｍｏｌ）、硫酸鉄（ＩＩ）七水和物（５．２０ｇ、１８．７ｍｍｏｌ）及びジメチルスルホキシド（２５０ｍＬ）を充填した。過酸化水素（３５％、１８．２ｇ、１８７ｍｍｏｌ）を、水浴を用い、室温でシリンジポンプを介して１時間、混合物に滴下して加えた。硫酸鉄（ＩＩ）七水和物（２〜３当量）を、反応混合物の色調が深赤色になるまで、２５℃〜３５℃の間の温度で保持しながら、少しずつ混合物に添加した。ＴＬＣが反応の完了を示すと、さらなる過酸化水素（２−３当量）及びさらなる硫酸鉄（ＩＩ）七水和物（１−２当量）を、同様にして添加した。当該時間後、反応混合物を飽和水性炭酸水素ナトリウム（２００ｍＬ）及び酢酸エチル（４００ｍＬ）の間で分配した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和チオ硫酸ナトリウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーで精製し、収率７８％（６．４０ｇ）で１０１ｅを黄色油状物として得た：1H NMR (500 MHz, CDCl3) d 6.23 (s, 1H), 4.23 (s, 2H),  3.94 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 3.81 (s, 3H), 2.74 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 2.00 (m, 2H), 1.83 (m, 2H); (APCI+) m/z 219.3 (M+H)
【０１５９】
実施例１０１ｆ  ３-(２-アミノエチル)-５,６,７,８-テトラヒドロインドリジン-２-カルボン酸メチル塩酸塩（１０１ｆ）
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３-(シアノメチル)-５,６,７,８-テトラヒドロインドリジン-２-カルボン酸メチル１０１ｅを、室温で一晩、塩酸の存在下にてエタノールと酢酸エチルにおいて、５０ｐｓｉの水素下、酸化白金触媒で水素化し、１０１ｆ（３８０ｍｇ、１．７４ｍｍｏｌ）を得、次の工程で直接に使用した。
【０１６０】
実施例１０１ｇ  ３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロ[３,４-ｂ]インドリジン-１(２Ｈ)-オン（１０１ｇ）
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磁気攪拌器及び窒素導入口を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、３-(２-アミノエチル)-５,６,７,８-テトラヒドロインドリジン-２-カルボン酸メチル塩酸塩１０１ｆは  （上述にて調製、推定１．７４ｍｍｏｌ、仮定定量的収率）、ナトリウムエトキシド（３５４ｍｇ、５．２２ｍｍｏｌ）及びエタノール（２０ｍＬ）を充填した。混合物を５５℃で５時間撹拌した。当該時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル（２００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）の間で分配した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーで精製し、収率６７％（２２０ｍｇ）で１０１ｇを白色固形物として得た：融点１９５−１９７℃； 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) d 6.76 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 3.78 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 3.35 (m, 2H), 2.66 (m, 4H),1.87 (m, 2H), 1.72 (m, 2H); (APCI+) m/z 191.3 (M+H)
【０１６１】
実施例１０１ｈ  ２-ブロモ-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピロロ[３,４-ｂ]インドリジン-２(１Ｈ)-イル）ベンジルアセテート（１０１ｈ）
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磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１，４-ジオキサン（６０ｍＬ）、１０１ｃ（１．９ｇ、６．０ｍｍｏｌ）、  １０１ｇ（４００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、及び炭酸セシウム（１．３ｇ、４．０ｍｍｏｌ）を充填した。３０分、得られた混合物に窒素をバブリングした後、キサントホス（１２０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)（１８０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１００℃で１２時間加熱した。この時間後、反応物を室温まで冷却し、酢酸エチル（４０ｍＬ）と水（４０ｍＬ）の間に分配し、濾過した。水層を分離し、酢酸エチル（７０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥した。乾燥剤を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を、２：１のＰＥ／ＥＡで溶出するフラッシュカラムで精製し、１０１ｈ（４２１ｍｇ、４６％）を黄色の固形物として得た。MS: [M+H]+ 435. 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 7.52-7.50 (m, 1H), 7.20-7.23 (m, 1H), 6.14 (s, 1H), 5.10-5.20 (m, 2H), 4.06-4.12 (m, 1H), 3.92-3.97 (m, 1H), 3.83-3.88 (m, 1H), 3.75-3.79 (m, 1H), 3.03-3.10 (m, 1H), 2.94-2.99 (m, 1H), 2.75-2.83 (m, 2H), 2.00-2.05 (m, 5H), 1.83-1.88 (m, 2H)
【０１６２】
実施例１０１ｉ  (Ｓ)-４-フルオロ-２-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９−ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１０１ｉ）
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１０１ｈ（３００ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）、(Ｓ)-１-メチル-３-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-５-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（３３２ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）、ＣＨ３ＣＯＯＮａ（１１４ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（３６８ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)（５６ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）、ＣＨ３ＣＮ（２５ｍＬ）、及びＨ２Ｏ（１ｍＬ）の混合物を、１００℃で３時間加熱した。ついで蒸発させ、残留物を塩化メチレン／メタノール（３０：１）で溶出するシリカゲルカラムで精製し、１０１ｉ（２９３、収率４１％）を褐色固形物として得た。MS: (M+H)+ 710。
【０１６３】
実施例１０１  (Ｓ)-２-(５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-１(２Ｈ)-オン（１０１）
プロパン-２-オール（８ｍＬ）、テトラヒドロフラン（８ｍＬ）、及び水（１．５ｍＬ）中の１０１ｉ（２７０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＯＨ（９１４ｍｇ、３８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２時間３０℃で撹拌した。それを蒸発させ、残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製し、１０１（１２７ｍｇ、５０％）を白色固形物としてを得た。MS: (M+H)+ 669。1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.58 (t, J=2.5, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.85 (d, J=3.0, 1H), 7.35-7.38 (m, 2H), 7.22-7.25 (m, 2H), 7.13-7.16 (m, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.57-4.54 (m, 2H), 4.47 (t, J=6.0, 1H), 4.42 (t, J=6.5, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.98-4.04 (m, 1H), 3.89-3.94 (m, 1H), 3.78-3.83 (m, 2H), 3.67 (s, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.37-3.42 (m, 1H), 3.00-3.10 (m, 2H), 2.90-2.95 (m, 2H), 2.71 (t, J=6.0, 2H), 2.52-2.55 (m, 1H), 2.28-2.35 (m, 2H), 2.18 (t, J=8.5, 1H), 1.89-1.94 (m, 2H), 1.72-1.78 (m, 2H), 0.93 (t, J=6.5, 3H)
【０１６４】
実施例１０２ａ  (Ｓ)-[４-フルオロ-２-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)-ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-６-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２,７]トリデカ-１(９),２(７),３- トリエン-５-イル}フェニル]メチルアセテート（１０２ａ）
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１０１ｉについて記載された手順に従って、(４-フルオロ-２-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２,７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリン-５-イル}-６-(テトラ-メチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)フェニル)メチルアセテート (２５０ｍｇ)及び５-ブロモ-１-メチル-３-(３-メチル-５-(４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン (２１８ｍｇ)を用いて出発し、１０２ａを黄色固形物（２２５ｍｇ、６２％）として得た。LCMS: [M+H]+ 726。図２参照。
【０１６５】
実施例１０２  (Ｓ)-５-[５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)フェニル]-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２,７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-６-オン（１０２）
１０１について記載した手順に従って、水酸化リチウムを用いて１０２ａ（２１０ｍｇ、０  ２９ｍｍｏｌ）を加水分解し、１０２を白色固形物（１１７ｍｇ、８５％）として得た。LCMS: [M+H]+ 684. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.61 (d, J=2.5, 1H), 8.26 (s 1H), 7.99 (d, J=2.5, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.46 (d, J=2.0, 1H), 7.29-7.32 (m, 2H), 7.11 (dd, J=2.0, 8.0, 1H), 6.82 (d, J=9.0, 1H), 4.62-4.73 (m, 4H), 4.31 (d, J=6.5, 2H), 4.02 (t, J=6.5, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.52-3.55 (m, 1H), 3.45-3.49 (m, 1H), 3.09 (t, J=4.5, 2H), 2.99 (t, J=4.5, 2H), 2.87 (t, J=4.5, 2H), 2.56 (dd, J=3.0, 11.0, 1H), 2.46-2.49 (m, 2H), 2.19-2.25 (m, 1H), 1.96-2.01 (m, 4H), 1.00 (d, J=6.0, 3H)
【０１６６】
実施例１０３ａ  ３-(２-クロロ-４,４-ジメチルシクロペンタ-１-エニル)アクリル酸(Ｅ)-エチル（１０３ａ）
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Organic Preparations and Procedures Int., 29 (4), 47１-498から、次の２つの手順を適合させた。磁気撹拌機及び窒素導入口を備えた５００ｍＬの一口丸底フラスコに、ベンゼン（２４０ｍＬ）中の２-クロロ-４,４-ジメチルシクロ-ペンタ-１-エンカルバルデヒド（３８ｇ、２４０ｍｍｏｌ）を充填した。図３を参照。溶液に、エトキシカルボニルメチレントリフェニルホスホラン（８４ｇ、２４０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１４時間撹拌した。当該時間後、溶媒を蒸発させ、残留物をヘキサン(２Ｌ)と共に粉砕し、ＰＰｈ３副産物から生成物を抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮した。残留物を、１００％ヘキサン−１：１ヘキサン／酢酸エチル勾配を用いたカラムクロマトグラフィーにより精製し、収率３７％（２０ｇ）の１０３ａを得た。
【０１６７】
実施例１０３ｂ  ５,５-ジメチル-１,４,５,６-テトラヒドロシクロペンタ[ｂ]ピロール-２-カルボン酸エチル（１０３ｂ）
0005976828.tif 000028
磁気攪拌器及び窒素導入口を備えた２５０ｍＬの一口丸底フラスコに、ＤＭＳＯ（１００ｍＬ）中の１０３ａ（１７ｇ、７４ｍｍｏｌ）を充填した。溶液にアジ化ナトリウム（９．６ｇ、１５０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、混合物を７５℃に加熱し、８時間攪拌した。室温に冷却後、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）及びＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）を加え、有機層を分離した。水層をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残留物を１００％ヘキサン−１：１ヘキサン／酢酸エチル勾配を用いたカラムクロマトグラフィーにより精製し、収率３７％（５．７ｇ）の１０３ｂを得た。
【０１６８】
実施例１０３ｃ  １-(シアノメチル)-５,５-ジメチル-１,４,５,６-テトラヒドロシクロ-ペンタ[ｂ]ピロール-２-カルボン酸エチル（１０３ｃ）
0005976828.tif 000029
磁気攪拌器及び窒素導入口を備えた２５０ｍＬの一口丸底フラスコに、ＤＭＦ（５７ｍＬ）中の１０３ｂ（６．２ｇ、３０ｍｍｏｌ）を充填した。溶液にＮａＨ（鉱油中に８０％分散、１．２６ｇ、４２．１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で９０分間撹拌した。当該時間後、ブロモアセトニトリル（２．９４ｍＬ、４２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１４時間撹拌した。当該時間後、水（１００ｍＬ）及び酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、有機層を分離した。水層を酢酸エチル（２Ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、収率９５％（７ｇ）の１０３ｃを得た。
【０１６９】
実施例１０３ｄ  １-(２-アミノエチル)-５,５-ジメチル-１,４,５,６-テトラヒドロシクロ-ペンタ[ｂ]ピロール-２-カルボン酸エチル塩酸塩（１０３ｄ）
0005976828.tif 000030
５００ｍＬのＰａｒｒ反応ボトルを窒素でパージし、１０％パラジウム炭素（５０％湿潤、２．０ｇ乾燥重量）、１０３ｃ（４．５ｇ、１８ｍｍｏｌ）、１２％塩酸（９．２ｍＬ、３７ｍｍｏｌ）、酢酸エチル（８０ｍＬ）及びエタノール（５２ｍＬ）を充填した。ボトルにＰａｒｒ水素化装置を取り付け、排気し、５０ｐｓｉの圧力まで水素ガスを充填し、６時間振盪した。この時間後、水素を排気し、窒素をボトルに充填した。セライト５２１（１０．０ｇ）を加え、混合物をセライト５２１のパッドを通して濾過した。フィルターケーキをエタノール（２×５０ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を減圧下で濃縮乾固した。粗残留物１０３ｄをさらに精製することなく次の工程に持ち越した。
【０１７０】
実施例１０３ｅ  ４,４-ジメチル-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６)-６,７-ジエン-９-オン（１０３ｅ）
0005976828.tif 000031
磁気攪拌器及び窒素導入口を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、粗１０３ｄ（〜１８ｍｍｏｌ）、ナトリウムエトキシド（６．２ｇ、９２ｍｍｏｌ）及びエタノール（１２０ｍＬ）を充填した。混合物を５５℃で一晩で撹拌した。当該時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）の間で分配した。溶液を濾過した。固形物を酢酸エチル（１５ｍＬ）で洗浄し、所望の生成物１０３ｅを８５０ｍｇ得た。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ほぼ乾燥するまで減圧下で濃縮した。溶液を濾過し、固形物（１．４４ｇ）を酢酸エチル（１５ｍＬ）で洗浄した。合わせた固形物を真空下で乾燥させ、収率６１％（２．３ｇ）の１０３ｅを得た。
【０１７１】
実施例１０３ｆ  ２-ブロモ-４-フルオロ-６-(９-オキソ-４,４-ジメチル-１,１０ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６)-６,７-ジエン-１０-イル)ベンジルアセテート（１０３ｆ）
0005976828.tif 000032
密封チューブに磁気攪拌機を具備せしめ、１,４-ジオキサン（３６ｍＬ）中の１０３ｅ（７４０ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）、２,６-ジブロモ-４-フルオロベンジルアセテート１０１ｃ（２．４ｇ、７．２ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（２．６ｇ、７．９ｍｍｏｌ）を充填した。３０分間溶液を通して窒素をバブリング後、キサントホス（２５０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)（２６０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１６時間１００℃まで加熱した。この時間後、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）及び酢酸エチル（５０ｍＬ）を加えた。水層を分離し、酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。得られた残留物を１００％ヘキサン−１００％酢酸エチルの勾配を用いて溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製し、収率５６％（９１０ｍｇ）の１０３ｆを得た。
【０１７２】
実施例１０３ｇ  ２-(４,４,５,５-テトラメチル-[１,３,２]ジオキサボロラン-２-イル)-４-フルオロ-６-(９-オキソ-４,４-ジメチル-１，１０ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６)-６,７-ジエン-１０-イル)ベンジルアセテート（１０３ｇ）
化合物１０３ｆ（４５０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、４,４,４',４',５,５,５',５'-オクタメチル-２,２'-ビ(１,３,２-ジオキサボロラン）（６３５ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（３９３ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）、ＣＨ２Ｃｌ２とのビス(ジフェニルホスフィノ)-フェロセン]ジクロロパラジウム(ＩＩ)錯体（ＰｄＣｌ２ｄｐｐｆ：ＣＨ２Ｃｌ２（１：１）、６６ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）及び１,４-ジオキサン（２０ｍＬ）を混合し、５時間１００℃で加熱した。反応混合物を室温に冷却し、セライト５２１のパッドを通して濾過した。フィルターケーキを酢酸エチル（２×２５ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を減圧下で濃縮乾固し、１０３ｇ（定量的収率）を黒色油状物として得、次の工程に直接使用した。MS (ESI+) m/z 497.3 (M+H)。
【０１７３】
実施例１０３ｈ  (２Ｓ)-(２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ-[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-４-フルオロ-６-[１-メチル-５-({５-[２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル]フェニル)-メチルアセテート（１０３ｈ）
0005976828.tif 000033
化合物１０１ｉのために記載された手順に従って、２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)フェニル)メチルアセテート (２２９ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）と(Ｓ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（２２９ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）とを反応させ、１０３ｈを黄色固形物（８０ｍｇ、２４％）として得た。MS: [M+H]+ 724。
【０１７４】
実施例１０３  (２Ｓ)-１０-[５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-[１-メチル-５-({５-[２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル]-フェニル]-４,４-ジメチル-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２,６]ドデカ２(６)-６,７-ジエン-９-オン（１０３）
１０１について記載した手順に従い、中間体１０３ｈ（８０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を水酸化リチウムを用いて加水分解し、１０３を黄色固形物（４０ｍｇ、５３％）として得た。LCMS: [M+H]+ 682。 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.56 (dd, J=2.0, 7.0, 1H), 7.95 (t, J=3.0, 1H), 7.82 (d, J=3.0, 1H), 7.47 (t, J=3.0, 1H), 7.31 (dd, J=3.0, 9.0, 1H), 7.17-7.14 (m, 1H), 6.95 (dd, J=2.5, 9.0, 1H), 6.82-6.80 (m, 2H), 4.71-4.61 (m, 4H), 4.56-4.53 (m, 1H), 4.41-4.37 (m, 1H), 4.33-4.28 (m, 1H), 4.23-4.15 (m, 3H), 3.91-3.86 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.55-3.44 (m, 2H), 3.08-3.06 (m, 2H), 2.56-2.46 (m, 7H), 2.21-2.16 (m, 1H), 1.27 (s, 6H), 0.98-0.97 (m, 3H)
【０１７５】
実施例１０４ａ  ２,５-ジメチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸 (２Ｒ,５Ｓ)-tert-ブチル（１０４ａ）
0005976828.tif 000034
化合物１０８ａについて記載した手順に従い、４-クロロ-２,５-ジメチルピペラジン-１-カルボン酸(２Ｒ,５Ｓ)-tert-ブチル (１．５ｇ、６．０ｍｍｏｌ)と５-ブロモ-２-ニトロピリジン（１２１２ｍｇ、６．０ｍｏｌ）とを反応させて、１０４ａを黄色固形物（１５００ｍｇ、７５％）として得た。LCMS: [M+H]+ 337。図４を参照。
【０１７６】
実施例１０４ｂ  ４-(６-アミノピリジン-３-イル)-２,５-ジメチルピペラジン-１-カルボン酸(２Ｒ,５Ｓ)-tert-ブチル（１０４ｂ）
0005976828.tif 000035
化合物１０８ｂについて記載した手順に従い、１０４ａ（１．５ｇ、４．４６ｍｍｏｌ）の反応により、１０４ｂを黄色固形物（１１３０ｍｇ、８３％）として得た。LCMS: [M+H]+ 307
【０１７７】
実施例１０４ｃ  ４-(６-(５-ブロモ-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イルアミノ)ピリジン-３-イル)-２,５-ジメチルピペラジン-１-カルボン酸(２Ｒ,５Ｓ)-tert-ブチル（１０４ｃ）
0005976828.tif 000036
化合物１０８ｃについて記載した手順に従い、２,５-ジメチルピペラジン-１-カルボン酸(２Ｒ,５Ｓ)-tert-ブチル（３３２ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ） と３,５-ジブロモ-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（２９４ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）との反応により、１０４ｃを黄色固形物（４０２ｍｇ、７５％）として得た。LCMS: [M+H]+ 492
【０１７８】
実施例１０４ｄ  ４-(６-(５-ブロモ-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イルアミノ)ピリジン-３-イル)-２,５-ジメチルピペラジン-１-カルボン酸(２Ｒ,５Ｓ)-tert-ブチル（１０４ｄ）
0005976828.tif 000037
化合１０８ｄ物について記載した手順に従い、１０４ｃ（４０２ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を酸性加水分解し、ｂｏｃ基を除去し、１０４ｄを黄色固形物（３００ｍｇ、９４％）として得た。LCMS: [M+H]+ 392
【０１７９】
実施例１０４ｅ  ５-ブロモ-３-(５-((２Ｓ，５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)-ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（１０４ｅ）
0005976828.tif 000038
化合物１０８ｅについて記載した手順に従い、５-ブロモ-３-(５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-ピリジン２(Ｈ)-オン(３００ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ)を用いて出発し、１０４ｅを黄色固形物(３２０ｍｇ、９３％)として得た。LCMS: [M+H]+ 448
【０１８０】
実施例１０４ｆは  ２,２,２-トリクロロ-１-(４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-イル)エタノン（１０４ｆ）
0005976828.tif 000039
磁気攪拌器、冷却器及び窒素導入口を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール(３．００ｇ、２４．８ｍｍｏｌ)、トリクロロアセチル塩化物(１３．５ｇ、７４．４ｍｍｏｌ)及び１,２-ジクロロエタン(５０ｍＬ)を充填した。溶液を８５℃で２時間で撹拌した。当該時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、収率１００％(６．５０ｇ)の１０４ｆを黒色半固形物として得た：1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) d 11.94 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 2.62 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.47 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.80 (m, 2H), 1.65 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 266.0 (M+H)
【０１８１】
実施例１０４ｇ  ４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１０４ｇ）
0005976828.tif 000040
磁気攪拌器及び窒素導入口を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、２,２,２-トリクロロ-１-(４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-イル)エタノン１０４ｆ(６．５０ｇ、２４．８ｍｍｏｌ)、ナトリウムエトキシド(１７．０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ)及びエタノール(４０ｍＬ)を充填した。溶液を室温で１時間撹拌した。当該時間後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、収率１００％(４．８０ｇ)の４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル１０４ｇを褐色固形物として得た：融点７０−７２℃；1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 9.08 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.25 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.65 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.56 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.85 (m, 4H), 1.28 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS (ESI+) m/z 194.1 (M+H)
【０１８２】
実施例１０４ｈ  １-(シアノメチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１０４ｈ）
0005976828.tif 000041
磁気攪拌器及び窒素導入口を備えた１２５ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル１０４ｇ(５．７６ｇ、２９．８ｍｍｏｌ)及びＤＭＦ(５０ｍＬ)を充填した。溶液を氷浴を用いて０℃に冷却した。水素化ナトリウム、ＮａＨ(鉱油中に６０％分散、１．４３ｇ、３５．８ｍｍｏｌ)を添加した。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。当該時間後、ブロモアセトニトリル(１．４３ｇ、３５．８ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を１４時間室温で撹拌した。当該時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル(１５０ｍＬ)と水(４５０ｍＬ)の間で分配した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル(３×１５０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、収率５５％(３．８０)の１０４ｈを黄色半固形物として得た：1H NMR (300 MHz, CDCl3) d 6.66 (s, 1H), 5.29 (s, 2H), 4.28 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.62 (t, 2H, J = 6.3 Hz), 2.49 (t, 2H, J = 6.3 Hz), 1.92 (m, 2H), 1.75 (m, 2H), 1.33 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS (ESI+) m/z 233.1 (M+H)
【０１８３】
実施例１０４ｉ  １-(２-アミノエチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１０４ｉ）
0005976828.tif 000042
２００ｍＬのＰａｒｒ反応ボトルを窒素でパージし、１０％パラジウム炭素(５０％湿潤、１．２８ｇ乾燥重量)、１０４ｈ(３．００ｇ、１２．９ｍｍｏｌ)、１２％塩酸(６．５ｍＬ、２５ｍｍｏｌ)、酢酸エチル(６０ｍＬ)及びエタノール(４０ｍＬ)を充填した。ボトルにＰａｒｒ水素化装置を取り付け、排気し、５０ｐｓｉの圧力まで水素ガスを充填し、６時間振盪した。この時間後、水素を排気し、窒素をボトルに充填した。セライト５２１（４．０ｇ）を加え、混合物をセライト５２１のパッドを通して濾過した。フィルターケーキをエタノール（２×２０ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を減圧下で濃縮乾固した。残留物を酢酸エチル(１５０ｍＬ)と１０％水性炭酸カリウム(１００ｍＬ)の間で分配した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル(３×７５ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をエタノール(５ｍＬ)と共に粉砕し、収率７１％(１．７１ｇ)の１０４ｉを白色固形物として得た：融点１０２−１０４℃；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) d 6.61 (s, 1H), 6.22 (br, 2H), 4.15 (m, 4H), 2.77 (m, 2H), 2.59 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 2.42 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 1.70 (m, 2H), 1.62 (m, 2H), 1.23 (t, 3H, J = 7.0 Hz); MS (APCI+) m/z 237.2 (M+H)
【０１８４】
実施例１０４ｊ  ３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１０４ｊ）
0005976828.tif 000043
磁気攪拌器及び窒素導入口を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、１０４ｉ(１．８０ｇ、７．６３ｍｍｏｌ)、ナトリウムエトキシド(１．５５ｇ、２２．８ｍｍｏｌ)及びエタノール(５０ｍＬ)を充填した。混合物を５５℃で５時間撹拌した。当該時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル(２００ｍＬ)と水(１００ｍＬ)の間で分配した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル(２×１００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、収率４２％(６０５ｍｇ)の１０４ｊを白色固形物として得た：融点２０７−２０９℃；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) d 7.41 (s, 1H), 6.36 (s, 1H), 3.84 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 3.42 (m, 2H), 2.51 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.42 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.76 (m, 2H), 1.65 (m, 2H); (APCI+) m/z 191.3 (M+H)
【０１８５】
実施例１０４ｋ  ２,６-ジブロモ-４-フルオロベンズアルデヒド１０４ｋ
−３５℃に冷却した、無水トルエン(３００ｍＬ)中の１,３-ジブロモ-５-フルオロ-２-ヨードベンゼン(５０ｇ、１３２ｍｍｏｌ)の溶液に、−２５℃以下の内部温度を維持しながら３０分かけてイソプロピル−塩化マグネシウム（８４ｍＬ、１７１ｍｍｏｌ、Ｅｔ２Ｏ中に２．０Ｍ）の溶液を添加した。無水ＤＭＦ（３４ｍＬ、４３６ｍｍｏｌ）を３０分かけて添加した。反応混合物を１時間かけて１０℃（室温）まで温め、この温度で１．５時間撹拌した。ついで、それを３．０ＭのＨＣｌでクエンチし、続いて酢酸エチルを添加した。有機層を分離し、減圧下で蒸発した。残留物を石油エーテル／酢酸エチル(５０：１〜２０：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１０４ｋを白色固形物(２０ｇ、５４％)として得た。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 10.23 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.5, 2H)。
【０１８６】
実施例１０４ｌ  (２,６-ジブロモ-４-フルオロフエニル)メタノール（１０４ｌ）
ＥｔＯＨ中(５００ｍＬ)の１０４ｋ(２０ｇ、７１ｍｍｏｌ)の溶液に、ＮａＢＨ４(１０ｇ、２８４ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を４時間室温(１０℃)で撹拌し、ＴＬＣは出発物質の消滅を示した。反応物を水性ＨＣｌ溶液(１５０ｍＬ、１Ｍ)でクエンチし、ＥｔＯＨの大部分が蒸留されるまで、真空中で蒸発させた。残留物を酢酸エチルで抽出した(５００ｍＬ×３)で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で蒸発させた。残留物を石油エーテル／酢酸エチル(５０：１〜２０：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１０４ｌを白色固形物(１５ｇ、７５％)として得た。MS: [M-OH]+ 267. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.68 (d, J = 8.5, 2H), 5.23 (s, 1H), 4.71 (s, 2H)。
【０１８７】
実施例１０４ｍ  ２,６-ジブロモ-４-フルオロベンジルアセテート（１０４ｍ）
０℃で、ＣＨ２Ｃｌ２(５００ｍＬ)中の(２,６-ジブロモ-４-フルオロフェニル)メタノール(１０４ｌ)(２０ｇ、７１ｍｍｏｌ)の溶液に、ピリジン(８．４ｇ、１０７ｍｍｏｌ)及び塩化アセチル(８．３ｇ、１０７ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を室温で５時間撹拌した。ＴＬＣは出発材料の消滅を示した。反応物を真空中で蒸発させ、残留物を石油エーテル／酢酸エチル(５０：１〜２０：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、１０４ｍを白色固形物(２０ｇ、８７％)として得た。 MS: [M-Oac]+ 267. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.36 (d, J = 7.5, 2H), 5.38 (s, 2H), 2.10 (s, 3H)
【０１８８】
実施例１０４ｎ  ２-ブロモ-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１０４ｎ）
磁気攪拌器を備えた２５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１０４ｊ(３．８ｇ、２０ｍｍｏｌ)、１０４ｍ(２０ｇ、６０ｍｍｏｌ)、キサントホス(１．２ｇ、２ｍｍｏｌ)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(１．８ｇ、２ｍｍｏｌ)、Ｃｓ２ＣＯ３(１６ｇ、５０ｍｍｏｌ)、及び１,４-ジオキサン(１２０ｍＬ)を充填した。システムを排気し、次いでＮ２を再充填した。還流冷却器をフラスコに取り付け、反応混合物を１６時間１００℃で加熱した。次いで、混合物を室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を５：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、１０４ｎを白色固形物(５．２ｇ、６０％)として得た。MS: [M+H]+ 435. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.70 (dd, J = 3, 1H), 7.48 (dd, J = 3, 1H), 6.52 (s, 1H), 5.01 (m, 2H), 4.18 (m, 2H), 4.02 (m, 1H), 3.73 (m, 1H), 2.60 (m, 2H), 2.45 (m, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.77 (m, 2 H), 1.68 (m, 2H)。
【０１８９】
実施例１０４ｏ  ４-フルオロ-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロ-ピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート（１０４ｏ）
磁気攪拌器を備えた２５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１０４ｎ(３．８ｇ、８．６５ｍｍｏｌ)、(ＰｉｎＢ)２(１１ｇ、４３．２５ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(０．４ｇ、０．５ｍｍｏｌ)、ＫＯＡｃ(２．５ｇ、２６ｍｍｏｌ)及び１,４-ジオキサン(１５０ｍＬ)を充填した。システムを排気し、次いでＮ２を再充填した。還流冷却器をフラスコに取り付け、反応混合物を１５時間１００℃で加熱した。次いで、混合物を室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を５：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、１０４ｏを白色固形物(３．２ｇ、７７％)として得た。MS: [M+H]+ 483。
【０１９０】
実施例１０４ｐ  ２-(５-(５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１０４ｐ）
0005976828.tif 000044
化合物１０８ｆについて記載した手順に従い、１０４ｅ(２６８ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ)と１０４ｏ(２８９ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ)とを反応させ、１０４ｐを黄色固形物(３００ｍｇ、８５％)として得た。LCMS: [M+H]+ 724
【０１９１】
実施例１０４  ２-(３-(５-(５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１０４）
実施例１０１ｉの手順に従い、水酸化リチウムを用いて１０４ｐ（２８８ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の酢酸エステルを加水分解し、１０４を白色固形物（８０ｍｇ、２５％）として得た。LCMS: [M+H]+ 682. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.60 (d, J=2.0, 1H), 8.02 (d, J=2.5, 1H), 7.87 (d, J=1.5, 1H), 7.49-7.48 (m, 1H), 7.37 (d, J=9.0, 1H), 7.16 (d, J=9.0, 1H), 6.96 (d, J=8.5, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.81 (d, J=9.0, 1H), 4.77-4.61 (m, 4H), 4.54 (d, J=11.5, 1H), 4.39-4.31 (m, 2H), 4.19-4.15 (m, 3H), 3.92-3.91 (m, 1H), 3.77-3.74 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.18 (s, 1H), 2.92-2.89 (m, 1H), 2.73-2.70 (m, 2H), 2.61-2.56 (m, 4H), 2.48 (s, 1H), 1.98-1.79 (m, 5H), 0.91-0.89 (m, 6H)
【０１９２】
実施例１０５ａ  (Ｓ)-２-(５-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル))ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１０５ａ）
0005976828.tif 000045
磁気攪拌器を備えた密封チューブに、(Ｓ)-５-ブロモ-３-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン(２０３ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ)、４-フルオロ-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート(２１６ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(１８ｍｇ、０．０２２５ｍｍｏｌ)、ＮａＯＡｃ(７４ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１９１ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ)、及びアセトニトリル(３ｍＬ)を充填した。図５を参照。真空／アルゴンフラッシュの３サイクル後、混合物を１００℃で１時間加熱した。次いで、それを濾過し、濾液を真空中で蒸発させた。残留物をジクロロメタン／メタノール(２５：１、Ｖ／Ｖ)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、１０５ａ(２２０ｍｇ、８７％)を茶色固形物として得た。LCMS: [M+H]+ 724
【０１９３】
実施例１０５  (Ｓ)-２-(３-(５-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１０５）
ｉＰｒＯＨ／ＴＨＦ(１：１、４ｍＬ)及びＨ２Ｏ(１ｍＬ)中の１０５ａ(２２０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ)及びＬｉＯＨ(７２ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ)の混合物を、１時間３０℃で撹拌した。混合物を真空中で蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃ(１０ｍＬＸ２)で抽出した。合わせたＥｔＯＡｃ抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣにより精製し、１０５(５４ｍｇ、２５％)を白色固形物として得た。LCMS: [M+H]+ 682。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.54 (t, J=2.5, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.47 (d, J=1.5, 1H), 7.26-7.24 (m, 1H), 7.18-7.15 (m, 1H), 6.95 (dd, J=2.5, 9.0, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.81 (d, J=7.5, 1H), 4.72-4.61 (m, 4H), 4.54 (d, J=11.5, 1H), 4.33-4.30 (m, 2H), 4.20-4.14 (m, 3H), 3.92-3.90 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.53 (t, J=5.5, 1H), 3.31 (s, 1H), 3.12 (s, 2H), 2.61-2.56 (m, 5H), 2.44 (s, 2H), 2.35 (s,1H), 1.91-1.89 (m, 2H), 1.80-1.79 (m, 2H), 1.67 (s, 1H), 1.43-1.37 (m, 1H), 0.82 (t, J=5.5, 3H)
【０１９４】
実施例１０６ａ  (Ｓ)-４-フルオロ-２-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１０６ａ）
0005976828.tif 000046
密封チューブに、ＣＨ３ＣＮ(２０ｍＬ)中の４-フルオロ-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサ-ヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート (３３７ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ)、 (Ｓ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(３-メチル-５-(４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン(３０３ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(３３ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４.３Ｈ２Ｏ(３７２ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ)、及びＮａＯＡｃ(１１５ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ)の混合物を充填した。図６を参照。システムを排気し、次いでＮ２を再充填した。反応混合物を２時間１１０℃で加熱した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を３０：１のＤＣＭ／ＭｅＯＨで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、１０６ａを黄色固形物(２５８ｍｇ、５２％)として得た。LCMS: [M+H]+ 710
【０１９５】
実施例１０６  (Ｓ)-２-(５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１０６）
室温で、ＴＨＦ／ｉＰＡ／Ｈ２Ｏ（６ｍＬ／６ｍＬ／２ｍＬ）中の１０６ａ(１５３ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ)の溶液に、ＬｉＯＨ(７０ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ)を撹拌しながら添加した。この混合物を０．５時間攪拌した。次いで、Ｈ２Ｏ(２０ｍＬ)を添加し、混合物をＥＡ(３０ｍＬＸ３)で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、黄色固形物を得、逆相分取ＨＰＬＣによりさらに精製し、１０６を白色固形物(６０ｍｇ、収率４２％)として得た。LCMS: [M+H]+ 668. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.57 (dd, J=2.0, 7.0, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.48 (t, J=2.5, 1H), 7.33 (d, J=7.0, 1H), 7.16 (d, J=8.0, 1H), 6.96 (dd, J=2.5, 9.0, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.83 (d, J=9.0, 1H), 4.69-4.72 ( m, 4H), 4.55 (d, J=11.5, 1H), 4.29-4.38 (m, 2H), 4.14-4.20 (m, 3H), 3.90-3.93 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.57 (s, 1H), 3.48 (s, 1H), 3.09-3.14 (m, 2H), 2.52-2.61 (m, 7H), 2.23 (s,1H), 1.88-1.91 (m, 2H), 1.79-1.81 (m, 2H), 0.99 (d, J=5.0, 3H)
【０１９６】
実施例１０７ａ  ２-メチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸(Ｓ)tert-ブチル（１０７ａ）
0005976828.tif 000047
化合物１０８ａについて記載した手順に従い、５-ブロモ-２-ニトロピリジン(１．５ｇ)と２-メチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｓ)-tert-ブチル(２．３ｇ)とを反応させ、１０７ａを黄色固形物(１．５ｇ、４０％)としてを得た。MS: [M+H]+ 323。図７を参照。
【０１９７】
実施例１０７ｂ  ４-(６-アミノピリジン-３-イル)-２-メチル-ピペラジン-１-カルボン酸(Ｓ)tert-ブチル（１０７ｂ）
0005976828.tif 000048
化合物１０８ｂについて記載した手順に従い、１０７ａ(４．０ｇ)の還元により、１０７ｂを黄色固形物(１．２３ｇ、９７％)として得た。MS: [M+H]+ 293
【０１９８】
実施例１０７ｃ  ４-(６-(５-ブロモ-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロ-ピリジン-３-イルアミノ)ピリジン-３-イル)-２-メチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｓ)-tert-ブチル（１０７ｃ）
0005976828.tif 000049
化合物１０８ｃについて記載した手順に従い、３,５-ジブロモ-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン(８３ｍｇ)と１０７ｂ(９０ｍｇ)とを反応させ、１０７ｃを黄色固形物(１２０ｍｇ、８１％)として得た。MS: [M+H]+ 480
【０１９９】
実施例１０７ｄ  (Ｓ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(３-メチルピペラジン-１-イル)-ピリジン-２-イル−アミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１０７ｄ）
0005976828.tif 000050
化合物１０８ｄについて記載した手順に従い、１０７ｃのｂｏｃ基の酸性加水分解  により、１０７ｄを黄色固形物(１００ｍｇ、９０％)として得た。MS: [M+H]+ 380
【０２００】
実施例１０７ｅ  (Ｓ)-５-ブロモ-３-(５-(３,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メートルエチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（１０７ｅ）
0005976828.tif 000051
化合物１０８ｅについて記載した手順に従い、１０７ｄ(１００ｍｇ)のメチル化により、１０７ｅを黄色固形物(６０ｍｇ、５９％)として得た。MS: [M+H]+ 394
【０２０１】
実施例１０７ｆ  (Ｓ)-２-(５-(５-(３,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ-[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１０７ｆ）
0005976828.tif 000052
化合物１０８ｆについて記載した手順に従い、４-フルオロ-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート(７４ｍｇ)と１０７ｅ（６０ｍｇ）とを反応させ、１０７ｆを黄色固形物(６０ｍｇ、５９％)として得た。LCMS: [M+H]+ 668
【０２０２】
実施例１０７  (Ｓ)-２-(３-(５-(５-(３,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１０７）
実施例１０８の手順に従い、水酸化リチウムを用いて１０７ｆ(６０ｍｇ)を加水分解することにより、１０７を白色固形物(２０ｍｇ、３６％)として得た。LCMS: [M+H]+ 626。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 8.55 (s, 1H), 7.90 (d, J=2.5, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.46 (d, J=2.5, 1H), 7.26 (dd, J=3.0, 9.5, 1H), 7.17 (dd, J=3.0, 9.5, 1H), 6.95 (dd, J=3.0, 9.0, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.81 (d, J=9.0, 1H), 4.55 (d, J=10.5, 1H), 4.31-4.36 (m, 2H), 4.14-4.20 (m, 3H), 3.90-3.92 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.38 (d, J=11, 1H), 3.32 (d, J=11.5, 1H), 2.94 (s, 2H), 2.56-2.61 (m, 5H), 2.49 (s, 1H), 2.38 (s, 4H), 1.89-1.91 (m, 2H), 1.79-1.80 (m, 2H), 1.17 (d, J=5.0, 3H)
【０２０３】
実施例１０８ａ  ２-メチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル（１０８ａ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、メチルスルフィニルメタン（５０ｍＬ）、５-ブロモ-２-ニトロピリジン(２．２ｇ、１１ｍｍｏｌ)、２-メチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル(２．２ｇ、１１ｍｍｏｌ)、及び炭酸カリウム(３．０８ｍｇ、２２ｍｍｏｌ)を充填した。図８を参照。システムを３回の真空／窒素フラッシュのサイクルにかけ、６５℃で１５時間加熱した。次いで、それを室温に冷却し、酢酸エチル(１００ｍＬ)と水(２０ｍＬ)の間で分配した。水層を分離し、酢酸エチル(５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブライン(５０ｍＬ)で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を２：１(Ｖ／Ｖ)の石油／酢酸エチルで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、１０８ａを黄色固形物(１．７５ｇ、５０％)として得た。LCMS: [M+H]+ 323
【０２０４】
実施例１０８ｂ  ４-(６-アミノピリジン-３-イル)-２-メチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル（１０８ｂ）
メタノール(１５ｍＬ)中の１０８ａ(１．０ｇ、３．１ｍｍｏｌ)の混合物に、１０％パラジウム炭素(１００ｍｇ)を加えた。混合物を一晩水素雰囲気下、室温で撹拌した。反応の終わりに、それを濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物をＤＣＭ／ＭｅＯＨ(１０：１、Ｖ／Ｖ)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、１０８ｂを褐色固形物(８００ｍｇ、８８％)として得た。LCMS: [M+H]+ 293
【０２０５】
実施例１０８ｃ  ４-(６-(５-ブロモ-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イルアミノ)ピリジン-３-イル)-２-メチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル（１０８ｃ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１,４-ジオキサン(１５ｍＬ)、１０８ｂ(８００ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ)、３,５-ジブロモ-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン(７２０ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ)、及び炭酸セシウム(１．７６ｇ、５．４ｍｍｏｌ)を充填した。３分間、懸濁液に窒素をバブリング後、キサントホス(７８ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(１２８ｍｇ、０．１  １４ｍｍｏｌ)を添加した。システムを３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクルにかけ、３時間加熱還流を行った。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を酢酸エチル(３０ｍＬ)と水(３０ｍＬ)の間で分配した。水層を分離し、酢酸エチル(５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブライン(５０ｍＬ)で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を１０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、１０８ｃを黄色固形物(６２４ｍｇ、４７％)として得た。LCMS: [M+H]+ 480
【０２０６】
実施例１０８ｄ  (Ｒ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(３-メチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１０８ｄ）
ジクロロメタン(８ｍＬ)中の１０８ｃ(６２４ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ)の混合物に、室温でトリフルオロ酢酸(３００ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ)を滴下して加えた。次いで、混合物を一晩撹拌した。２．０ＮのＮａＯＨを添加し、１０以上のｐＨに調整した。ついで、混合物を酢酸エチル(５０ｍＬ×２)で抽出した。合わせた有機層をブライン(５０ｍＬ)で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、１０８ｄを褐色固形物(３００ｍｇ、６１％)として得た。LCMS: [M+H]+ 380
【０２０７】
実施例１０８ｅ  (Ｒ)-５-ブロモ-３-(５-(３,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（１０８ｅ）
メタノール(８ｍＬ)の中の１０８ｄ(３００ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ)の溶液に、室温で、２滴の酢酸、３０％のホルムアルデヒド溶液(０．５ｍＬ)及びナトリウムトリアセトキシ水素化ホウ素(３５４ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ)を添加した。次いで、混合物を室温で１時間撹拌した。反応終了後、水(１０ｍＬ)を加え、混合物を酢酸エチル(２０ｍＬ×２)で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、１０８ｅを褐色固形物(２８０ｍｇ、９０％)として得た。LCMS: [M+H]+ 392
【０２０８】
実施例１０８ｆ  (Ｒ)-２-(５-(５-(３,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１０８ｆ）
磁気攪拌器を備えた密封チューブに、１０８ｅ(２８０ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ)、４-フルオロ-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール- ２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート(３４４ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ)、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)(５８ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ)、１．０ＭのＮａＯＡｃ(２．０当量)、１．０ＭのＫ３ＰＯ４(２．０当量)及び  ジオキサン(５ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュサイクルの後、混合物を１１０℃で２時間加熱した。ついで、それを濾過し、濾液を真空中で蒸発させた。残留物をジクロロメタン／メタノール(１０：１、Ｖ／Ｖ)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し  １０８ｆを白色固形物(２５０ｍｇ、５８％)として得た。LCMS: [M+H]+ 668
【０２０９】
実施例１０８  (Ｒ)-２-(３-(５-(５-(３,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１０８）
ｉＰｒＯＨ／ＴＨＦ(１：１、３ｍＬ)及びＨ２Ｏ(１ｍＬ)中の、１０８ｆ(２５０ｍｇ、０．３７５ｍｍｏｌ)及びＬｉＯＨ(９８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ)の混合物を、３０℃で２時間で撹拌した。混合物を真空中で蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃ(１０ｍＬＸ２)で抽出した。合わせたＥｔＯＡｃ抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣを用いて精製し、１０８(６２ｍｇ、２６％)を白色固形物として得た。LCMS: [M+H]+ 626。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H), 7.89 (d, J=2.5, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.45 (d, J=2, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.14-7.16 (m, 1H), 6.92-6.94 (m, 1H), 6.86 (s,1H), 6.79 (d, J=9, 1H), 4.52-4.54 (m, 1H), 4.30-4.32 (m, 2H), 4.14-1.16 (m, 3H), 3.90-3.91 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.34-3.35 (m, 2H), 2.91-2.92 (m, 2H), 2.60-2.38 (m, 10H), 1.83-1.85 (m, 2H), 1.78-1.79 (m, 2H), 1.17 (s, 3H)
【０２１０】
実施例１０９ａ  ３-メチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)tert-ブチル（１０９ａ）
0005976828.tif 000053
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１,４-ジオキサン(６０ｍＬ)、５-ブロモ-２-ニトロピリジン(２．０ｇ、１０．０ｍｍｏｌ)、３-メチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル(２．０ｇ、１０．０ｍｍｏｌ)、及び炭酸セシウム(６．５ｇ、２０ｍｍｏｌ)を充填した。図９参照。３０分、得られた混合物に窒素をバブリングした後、キサントホス(５７９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(９１５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)を添加し、反応混合物を１００℃で１５時間撹拌した。この時間後、反応物を室温に冷却し、濾過した。濾液を酢酸エチル(１００ｍＬ)と水(１００ｍＬ)の間で分配した。水層を分離し、酢酸エチル(１５０ｍＬ×３)で抽出した。合わせた有機層をブライン(５０ｍＬ)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を、３０：１のＤＣＭ／ＭｅＯＨで溶出するフラッシュカラムで精製し、１０９ａを黄色固形物として(１．６ｇ、４４％)として得た。MS: [M+H]+ 323. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.21 (d, J=3.5, 1H), 8.18 (d, J=9.0, 1H), 7.43-7.45 (m, 1H), 4.33 (s, 1H), 3.92-3.99 (m, 1H), 3.80 (d, J=12.5, 2H), 3.06-3.23 (m, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.09 (d, J=6.5, 3H)。
【０２１１】
実施例１０９ｂ  ４-(６-アミノピリジン-３-イル)-３-メチルピペラジン-１-カルボン酸  (Ｒ)-tert-ブチル（１０９ｂ）
0005976828.tif 000054
５００ｍＬのフラスコを窒素でパージし、１０９ａ(１．５ｇ、４．６ｍｍｏｌ)、１０％パラジウム炭素(５０％湿潤、２００ｍｇ)、及びメタノール(７０ｍＬ)を充填した。排気し、水素ガスを充填し、１０時間室温で撹拌した。ついで、水素を排気し、窒素をフラスコに充填した。触媒をセライトのパッドを通して濾過することにより除去し、濾液を減圧下で濃縮し、１０９ｂを褐色固形物(１．１ｇ、８１％)として得た。MS: [M+H]+ 293
【０２１２】
実施例１０９ｃ  ４-(６-(５-ブロモ-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロ-ピリジン-３-イルアミノ)ピリジン-３-イル)-３-メチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル（１０９ｃ）
0005976828.tif 000055
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１,４-ジオキサン(５０ｍＬ)、１０９ｂ(１．０ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ)、３,５-ジブロモ-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン(２．７ｇ、１０．２ｍｍｏｌ)、及び炭酸セシウム(２．２ｇ、６．８ｍｍｏｌ)を充填した。３０分、得られた混合物に窒素をバブリングした後、キサントホス(１９８ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)-ジパラジウム(０)(３１３ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ)を添加し、反応混合物を１００℃で５時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却し、濾過した。濾液を酢酸エチル(１００ｍＬ)と水(１００ｍＬ)の間で分配した。水層を分離し、酢酸エチル(１００ｍＬ×３）抽出した。合わせた有機層をブライン(５０ｍＬ)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を３０：１のＤＣＭ／ＭｅＯＨで溶出するフラッシュカラムで精製し、１０９ｃを黄色固形物(１．１ｇ、６３％)として得た。MS: [M+H]+ 478。
【０２１３】
実施例１０９ｄ  (Ｒ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(２-メチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１０９ｄ）
0005976828.tif 000056
メタノール(２０ｍＬ)中の１０９ｃ(６００ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ)の混合物を、ＨＣｌ／ジオキサン(４．０Ｍ、４ｍＬ)に加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。次いで、これを減圧下で濃縮した。残留物を水性１．０ＭのＮａＯＨで塩基性化し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層をＨ２Ｏで洗浄し、減圧下で濃縮し、１０９ｄ(４５０ｍｇ、９５％)を黄色固形物として得た。MS: [M+H]+ 378。
【０２１４】
実施例１０９ｅ  (Ｒ)-５-ブロモ-３-(５-(２,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（１０９ｅ）
0005976828.tif 000057
メタノール／ＨＯＡｃ中(３０ｍＬの／３ｍＬ)中の１０９ｄ(５００ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ)及び３０％ホルムアルデヒド(６．５ｍｍｏｌ)の混合物を室温で５分間撹拌し、続いてＮａＢＨ３ＣＮ(１２０ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を室温で４時間撹拌した。それを室温まで冷却し、Ｈ２Ｏ(２００ｍＬ)を加えた。混合物をＤＣＭ(５０ｍＬ)で３回で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を３０：１のＤＣＭ／メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製し、１０９ｅを黄色固形物(４７３ｍｇ、８３％)として得た。MS: [M+H]+ 392。
【０２１５】
実施例１０９ｆ  (Ｒ)-２-(５-(５-(２,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１０９ｆ）
0005976828.tif 000058
ＤＭＦ(４ｍＬ)中の１０９ｅ(４００ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)、４-フルオロ-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート(４９０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)(８０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ)、２．０ＭのＮａ２ＣＯ３(２．０当量)の混合物を、１００℃で２時間加熱した。ブラインを加え、混合物をＥＡ(５０ｍＬ)で３回抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。残留物を３０：１のＤＣＭ／メタノールで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、１０９ｆを褐色固形物(３５４ｍｇ、５２％)として得た。LCMS: [M+H]+ 668
【０２１６】
実施例１０９  (Ｒ)-２-(３-(５-(５-(２,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１０９）
化合物１０８について記載した手順に従い、水酸化リチウムを用いて１０９ｆ(３３７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ)を加水分解することにより、１０９を黄色固形物(１５２ｍｇ、４８％)として得た。LCMS: (M+H)+ 626. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.57 (t, J=2.5, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.83 (d, J=3.0, 1H), 7.31-7.36 (m, 3H), 7.23 (d, J=9.0, 1H), 7.17-7.20 (m, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.86-4.88 (m, 1H), 4.32 (d, J=4.5, 2H), 4.09-4.20 (m, 3H), 3.87-3.91 (m, 1H), 3.66 (s, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.04-3.08 (m, 1H), 2.90-2.94 (m, 1H), 2.57-2.65 (m, 3H), 2.47 (t, J=5.5, 2H), 2.35-2.42 (m, 2H), 2.19-2.21 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.79 (t, J=6.0, 2H), 1.66-1.69 (m, 2H), 0.91 (d, J=6.0, 3H)
【０２１７】
実施例１１０ａ  (Ｓ)-５-ブロモ-３-(５-(２,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１０ａ）
化合物１０９ｅについて記載した手順に従い、(Ｓ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(２-メチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン(３７７ｍｇ、１ｍｍｏｌ)を還元ホルミル化によりメチル化し、１１０ａを白色固形物(２９４ｍｇ、７５％)として得た。LCMS: [M+H]+ 393。図１０を参照。
【０２１８】
実施例１１０ｂ  (Ｓ)-２-(５-(５-(２,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１１０ｂ）
化合物１０９ｆについて記載した手順に従い、１１０ａ(３９１ｍｇ、１ｍｍｏｌ)及び４-フルオロ-２-(１-オキソ-３-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート(４８２ｍｇ、１ｍｍｏｌ)を鈴木反応によってカップリングさせ、１１０ｂを白色固形物(３４３ｍｇ、５０％)を得た。LCMS: [M+H]+ 668
【０２１９】
実施例１１０  (Ｓ)-２-(３-(５-(５-(２,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１１０）
実施例１０９の手順に従い、１１０ｂ(６６７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)の酢酸エステルを加水分解し、１１０を白色固形物(７５ｍｇ、１２％)として得た。LCMS: [M+H]+ 626。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.57 (d, J=8, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.47 (d, J=1.5, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.15-7.16 (m, 1H), 6.94-6.96 (m, 1H), 6.86 (s,1H), 6.80 (d, J=8.5, 1H), 4.52-4.54 (m, 1H), 4.31-4.33 (m, 2H), 4.18-4.19 (m, 3H), 3.90-3.91 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.49-3.50 (m, 1H), 3.06-3.07 (m, 2H), 2.58-2.60 (m, 7H), 2.34 (s, 3H), 1.88-1.89 (m, 2H), 1.78-1.79 (m, 2H), 0.96 (s, 3H)
【０２２０】
実施例１１１ａ  ２-メチル４-ベンジルピペラジン-１,２-ジカルボン酸１-tert-ブチル（１１１ａ）
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攪拌棒を備えた乾燥した１００ｍＬの一口丸底フラスコに、Ｎ２下で、２-メチルピペラジン-１,２-ジカルボン酸１-tert-ブチル(５ｇ、２０．５ｍｍｏｌ)を添加した(図１)。無水アセトニトリル(６０ｍＬ)を添加し、続いてＢｎＢｒ(２．７ｍＬ、２２．５ｍｍｏｌ)及びトリエチルアミン(８．５ｍｌ、６１．５ｍｍｏｌ)を添加した。冷却器をフラスコに装着し、反応混合物を７１℃で４５分間加熱した。反応混合物を室温になるまで放置し、減圧下で濃縮した。次いで、それをジクロロメタンで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗化合物をフラッシュカラム(ＰＥ：ＥＡ＝８：１)を用いて精製し、４．５ｇ(６６％)の１１１ａを得た。MS: [M+H]+: 335
【０２２１】
実施例１１１ｂ  (４-ベンジル-１-メチルピペラジン-２-イル)メタノール（１１１ｂ）
0005976828.tif 000060
化合物１１１ａ(１ｇ、２．９９ｍｍｏｌ)を、１００ｍＬの無水テトラヒドロフランに溶解し、水素化リチウムアルミニウム(３４２ｍｇ、８．９８ｍｍｏｌ)を０℃にて注意深く添加し、混合物を３０分間撹拌した。次に、それを３時間還流させ、反応混合物を氷の上に少しずつ注いだ。次いで、それを濾過し、濾液を真空中で蒸発させた。１００ｍＬのブラインを加えた後、それをジクロロメタン(１００ｍＬ×３)で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、１１１ｂを黄色油状物(０．６ｇ、収率９１％)として得た。
【０２２２】
実施例１１１ｃ  ４-ベンジル-２-(フルオロメチル)-１-メチルピペラジン（１１１ｃ）
0005976828.tif 000061
Ｎ２下、塩化メチレン中のＮ,Ｎ'-ジメチルアミノ硫黄トリフルオリド(１０．８ｍｌ、８１．８ｍｍｏｌ)の氷冷溶液に、塩化メチレン中の１１１ｂ(９ｇ、４０．９ｍｍｏｌ)を加えた。黄色溶液を０℃で１時間で攪拌し、室温に加温し、１５時間撹拌した。反応物をＮａＨＣＯ３で希釈し、有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。粗生成物をシリカゲル(ＤＣＭ：メタノール＝５０：１)で精製し、１１１ｃを黄色油状物(３ｇ、収率３３％)として得た。MS: [M+H]+: 223
【０２２３】
実施例１１１ｄ  ２-(フルオロメチル)-１-メチルピペラジン（１１１ｄ）
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磁気攪拌器を備えた２５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１１１ｃ(３ｇ、１３．５ｍｍｏｌ)及びＭｅＯＨ(８０ｍＬ)を充填し、得られた混合物をＰｄ／Ｃ(１０％)(３００ｍｇ)に添加した。反応混合物を水素ガス(Ｈ２）下で１５時間撹拌した。反応終了後、それを濾過し、濃縮し、１１１ｄを黄色油状物(１．６ｇ、収率９０％)として得た。
【０２２４】
実施例１１１ｅ  ２-(フルオロメチル)-１-メチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン（１１１ｅ）
0005976828.tif 000063
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１１１ｄ(１．６ｇ、１２．１ｍｍｏｌ)、５-ブロモ-２-ニトロピリジン(３．７ｇ、１８．２ｍｍｏｌ)及び炭酸セシウム(９．９ｇ、３０．２ｍｍｏｌ)を充填した。３０分、得られた溶液に窒素をバブリングした後、キサントホス(７００ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(５５０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ)を加え、反応混合物を１５時間加熱還流した。この後、反応物を室温に冷却し、濾過し、濃縮し、粗生成物として黒色固形物を得た。次いで、それをシリカゲル(ＤＣＭ：メタノール＝１００：１)上で精製して、１１１ｅを黄色固形物(２．６ｇ、収率７６％)として得た。1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.20 (dd, J = 12.5 Hz, 2H), 7.51 (dd, J = 9.0 Hz, 1H), 4.74-4.54 (m, 2H), 4.03-3.92 (m, 2H ), 3.20 (m, 1H), 3.09-2.99 (m, 2H), 2.50 (m, 2H), 2.46 (s, 3H)
【０２２５】
実施例１１１ｆ  ５-(３-(フルオロメチル)-４-メチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-アミン（１１１ｆ）
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磁気攪拌器を備えた２５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１１１ｅ(２．６ｇ、１０．２ｍｍｏｌ)及びＭｅＯＨ(５０ｍＬ)を充填し、得られた混合物をＰｄ／Ｃ(１０％)(２６０ｍｇ）に添加した。反応混合物をＨ２下で１５時間撹拌した。反応終了後、それを濾過し、濃縮し、１１１ｆを得、精製せずに次の工程で使用した。
【０２２６】
実施例１１１ｇ  ５-ブロモ-３-(５-(３-(フルオロメチル)-４-メチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１１ｇ）
0005976828.tif 000065
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１,４-ジオキサン(６０ｍＬ)、１１１ｅ(粗製、１４．１ｍｍｏｌ)、３,５-ジブロモ-１-メチルピリジン２(１Ｈ)-オン(４．５ｇ、１６．９ｍｍｏｌ)及び炭酸セシウム(１１．５ｇ、３５．２ｍｍｏｌ)を充填した。３０分、得られた溶液に窒素をバブリングした後、キサントホス(８２０ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(６４５ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ)を加え、反応混合物を１５時間加熱還流した。この後、反応物を室温に冷却し、濾過し、濃縮し、粗生成物を黒色固形物として得た。ついで、シリカゲル(ＤＣＭ：ＭｅＯＨ１＝１００：１〜５０：１)において精製し、１１１ｇの黄色固形物(３．１ｇ、５０％収率)として得た。
【０２２７】
実施例１１１ｈ  ４-フルオロ-２-(５-(５-(３-(フルオロメチル)-４-メチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサ-ヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１１１ｈ）
0005976828.tif 000066
ＭｅＣＮ（１５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１．５ｍＬ）中の１１１ｇ(１ｇ、２．４ｍｍｏｌ)、４-フルオロ-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート(１．３ｇ、２．６８ｍｍｏｌ)、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)(１９０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１ｇ、４．８ｍｍｏｌ)、及びＮａＯＡｃ(３９０ｍｇ、４．８ｍｍｏｌ)の混合物を、１１０℃で３時間加熱した。溶媒を真空中で蒸発させた。残留物をシリカゲルカラム(ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１)で精製して、１１１ｈ(０．８ｇ、収率４５％)を得た。
【０２２８】
実施例１１１  ２-(５-フルオロ-３-(５-(５-(３-(フルオロメチル)-４-メチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１１１）
ｉＰｒＯＨ(１０ｍＬ)、ＴＨＦ(１０ｍＬ)及びＨ２Ｏ(１０ｍＬ)中の１１１ｈ(７５０ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ)及びＬｉＯＨ水和物(２．３ｇ、５５ｍｍｏｌ)の混合物を３０℃で１時間撹拌した。混合物を真空中で蒸発させ、残留物をＤＣＭ(３×３０ｍＬ)で抽出した。合わせた抽出物を減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラム(ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１)で精製して、１１１を黄色固形物(７００ｍｇ、９３％)として得た。MS: [M+H]+644. 1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.41 (m, 1H), 7.33 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.02 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 4.67-4.46 (m, 4H), 4.19(s, 3H), 4.02 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.51 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.42 (d, J = 11. Hz, 1H), 3.36 (s, 1H), 2.96 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.85 (m, 1H), 2.73-2.50 (m, 7H), 2.48(s, 3H), 1.88 (m, 2H), 1.78 (m, 2H)
【０２２９】
実施例１１２ａ  Ｎ,Ｎ-ジブロモベンゼンスルホンアミド（１１２ａ）
0005976828.tif 000067
ベンゼンスルホンアミド(１１５ｇ、７３１．４ｍｍｏｌ)、ＫＯＨ(８２．８ｇ、１．４８ｍｏｌ)及び水(５００ｍｌ)を、１０００ｍＬの三口フラスコに入れた(図１２)。次いで、臭素(２３０ｇ、１．４８ｍｏｌ)を、激しく撹拌しながら滴下して加えた。得られた沈殿物を濾過し、水で洗浄し、濾過して、１１２ａを黄色粉末(２０７ｇ、９０％)として得た。
【０２３０】
実施例１１２ｂ  ２-ブロモ-３-(Ｎ-((Ｒ)-２-ブロモ-３-エトキシ-３-オキソプロピル)フェニルスルホンアミド)プロパン酸(Ｓ)-エチル（１１２ｂ）
0005976828.tif 000068
ＤＣＭ(５００ｍｌ)中の１１２ａ(２０７ｇ、６５８．２６ｍｍｏｌ)の溶液に、アクリル酸エチル(３３１．２ｇ、３．２９ｍｏｌ)を加えた。混合物を還流まで攪拌し、水銀アークランプにより、４時間、水銀の光で起こる反応を確実に開放した。次いで、反応混合物をＰＥ：ＥＡ＝１５：１〜１０：１で溶出するシリカゲルカラムで精製して、１１２ｂを白色固形物(２０ｇ、６％)として得た。MS: [M+H]+: 538
【０２３１】
実施例１１２ｃ  １-ベンジル-４-(フェニルスルホニル)ピペラジン-２,６-ジカルボン酸(２Ｒ,６Ｓ)-ジエチル（１１２ｃ）
0005976828.tif 000069
トルエン(１００ｍｌ)中の１１２ｂ(２０ｇ、３８．８ｍｍｏｌ)の溶液にＢｎＮＨ２を(１２．４８ｇ、１１６．５ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を９０℃で３時間で撹拌した。ついで、混合物をＰＥ：ＥＡ＝５０：１〜１０：１で溶出するシリカゲルカラムで精製して、１１２ｃを白色結晶(１０．７ｇ、６０％)として得た。 MS: [M+H]+: 461
【０２３２】
実施例１１２ｄ  (１-ベンジル-４-(フェニルスルホニル)ピペラジン-２,６-ジイル)ジメタノール（１１２ｄ）
0005976828.tif 000070
ＴＨＦ(７０ｍｌ、７０ｍｍｏｌ)中のＬｉＡｌＨ４の１Ｍ溶液を、ＴＨＦ(２７５ｍｌ)中の１１２ｃ(１０．７ｇ、２３．２ｍｍｏｌ)に、冷却しながら滴下して加え、撹拌した。反応混合物を２０分間還流し、Ｎａ２ＣＯ３の飽和溶液に注ぎ、ＴＢＭＥで３回抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、蒸発乾固させ、無色の固形物を得、ＴＢＭＥで洗浄し、１１２ｄを白色結晶(７ｇ、８０％)として得た。MS:[M + H] +:377
【０２３３】
実施例１１２ｅ  ９-ベンジル-３-(フェニルスルホニル)-７-オキサ-３,９-ジ??アザ-ビシクロ[３.３.１]ノナン（１１２ｅ）
0005976828.tif 000071
トルエン(１４ｍＬ)中のＳＯＣｌ２(１．３４ｍｌ、１８．５ｍｍｏｌ)を室温で攪拌しながら、ＤＭＦ(２７６ｍｇ)中の１１２ｅ（７．０ｇ、１８．５７ｍｍｏｌ）の溶液に、急速に滴下して加えた。反応混合物を、還流下で５時間、油浴(１７０℃)において加熱した。反応混合物を蒸発させ、Ｎａ２ＣＯ３の飽和溶液に溶解させ、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固し、ＰＥ：ＥＡ＝１０：１〜５：１で溶出させるシリカゲルカラムで精製し、１１２ｅを無色結晶(３．０ｇ、４５％)として得た。MS:[M + H] +:413
【０２３４】
実施例１１２ｆ  ３-(フェニルスルホニル)-７-オキサ-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノナン（１１２ｆ）
0005976828.tif 000072
ＥｔＯＨ(１００ｍｌ)中の１１２ｅ(３．０ｇ、８．３７ｍｍｏｌ)の溶液に、ＭｅＯＨ(３０ｍｌ)中のＰｄ／Ｃ(０．５ｇ)を添加した。反応混合物を一晩５０℃で水素雰囲気にて水素化した。次いで、触媒を濾過し、エタノールで洗浄し、溶媒を蒸発させ、１１２ｆを無色固形物(２．０ｇ、９０％)として得た。MS:[M + H] +:268
【０２３５】
実施例１１２ｇ  ９-メチル-３-(フェニルスルホニル)-７-オキサ-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノナン（１１２ｇ）
0005976828.tif 000073
ＭｅＣＮ(６０ｍｌ)中の１１２ｆ(２．０ｇ、７．５ｍｍｏｌ)の溶液に、室温でＨＣＨＯ(１．４ｍｌ、１６ｍｍｏｌ)及び５滴のＡｃＯＨを加えた。ついで、ＮａＣＮＢＨ３(１ｇ、１６ｍｍｏｌ)を添加し、混合物を２時間撹拌した。これを水に注ぎ、ＥＡ(１００  ＊３)で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させ、ＰＥ：ＥＡ＝５：１〜１：１で溶出させるシリカゲルカラムで精製し、１１２ｇを無色油状物(１．５ｇ、７２％として)得た。MS:[M + H] +:283
【０２３６】
実施例１１２ｈ  ９-メチル-７-オキサ-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノナン塩酸塩（１１２ｈ）
0005976828.tif 000074
トルエン(１５ｍｌ)及びＴＨＦ(１５ｍｌ)の混合物中の１１２ｇ(１．５ｇ、５．３ｍｍｏｌ)の溶液にＬｉＡｌＨ４(０．４２ｇ、１０．８ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を一晩１１０℃で加熱した。次いで、それをＨＣｌ(２ｍｏｌ／ｌ)に注いだ。有機層を分配し、水層を蒸発乾固し、メタノールに溶解した。得られた懸濁液を濾過し、濾液を蒸発させて１１２ｈ(８００ｍｇ、４３％)を無色油状物として得た。MS:[M + H] +:143
【０２３７】
実施例１１２ｉ  ９-メチル-３-(６-ニトロピリジン-３-イル)-７-オキサ-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノナン（１１２ｉ）
0005976828.tif 000075
ＤＭＳＯ(５０ｍｌ)中の１１２ｈ(８００ｍｇ、５．６ｍｍｏｌ)及び５-ブロモ-２-ニトロピリジン(１．３７ｇ、６．８６ｍｍｏｌ)の溶液にＣ２ＣＯ３(５ｇ)を及びｔ-ＢｕＮＨ４Ｉ(触媒)。反応混合物を１２０℃で一晩撹拌した。次いで、それを室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ(３００ｍｌ)で抽出した。有機層を水(３×１００ｍｌ)及びブライン（１５０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮し、粗生成物を得、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：１〜５０：１で溶出するシリカゲルカラムで精製し、１１２ｉを黄色固形物(８５０ｍｇ、７２％)として得た。MS:[M + H] +:265
【０２３８】
実施例１１２ｊ  ５-(９-メチル-７-オキサ-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノナン-３-イル)ピリジン-２-アミン（１１２ｊ）
0005976828.tif 000076
ＴＨＦ(８０ｍｌ)中の１１２ｉ(８００ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ)の溶液に、ＭｅＯＨ(２０ｍｌ)中のＰｄ／Ｃ(５０ｍｇ)を、室温で添加した。反応混合物を水素大気圧で水素化し、室温で一晩撹拌した。混合物を濾過し、濾液を蒸発させて、１１２ｊを無色油状物(６８０ｍｇ、９０％)として得た。MS:[M + H] +:235
【０２３９】
実施例１１２ｋ  ５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(９-メチル-７-オキサ-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]-ノナン-３-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１２ｋ）
0005976828.tif 000077
ジオキサン(１００ｍｌ)中の１１２ｊ(５００ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ)及び３,５-ジブロモ-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン(８５２ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ)の溶液に、キサントホス(５８ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ)、ＣＳ２ＣＯ３(２．１ｇ、６．４ｍｍｏｌ)及びＰｄ２(ｄｂａ)３(１１０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を１０５℃で一晩撹拌した。混合物を室温に冷却し、濾過し、濃縮し、粗生成物をＭｅＯＨ：ＤＣＭ＝０〜１：５で溶出するシリカゲルカラムで精製し、１１２ｋ(５００ｍｇ、４６．４％)を得た。MS:[M + H] +:421
【０２４０】
実施例１１２ｌ  ４-フルオロ-２-(１-メチル-５-(５-(９-メチル-７-オキサ-３,９-ジアザ-ビシクロ-[３.３.１]ノナン-３-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１１２ｌ）
0005976828.tif 000078
ＭｅＣＮ（８ｍＬ）及びＨ２Ｏ（０．８ｍＬ）中の１１２ｌ(５００ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ)、４-フルオロ-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート(６３６ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ)、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)(９５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(５００ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ)、及びＮａＯＡｃ(１９５ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ)の混合物を、１１０℃で３時間加熱した。溶媒を真空中で蒸発させた。残留物をＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１で溶出するシリカゲルカラムで精製して、１１２ｌ(３４０ｍｇ、収率４１％)を得た。MS:[M + H] +:696
【０２４１】
実施例１１２  ２-(５フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-メチル-５-(５-(９-メチル-７-オキサ-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノナン-３-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１１２）
ｉＰｒＯＨ(４ｍＬ)、ＴＨＦ(４ｍＬ)及びＨ２Ｏ(４ｍＬ)中の１１２ｌ(３４０ｍｇ、０．４８９ｍｍｏｌ)及びＬｉＯＨ水和物(４４５ｍｇ、２４．４５ｍｍｏｌ)の混合物を３０℃で１時間撹拌した。混合物を真空中で蒸発させ、残留物を分取ＨＰＬＣで精製して、１１２を低黄色固形物(１０５ｍｇ、３２．８５％)として得た。MS: [M+H]+654。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.42 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.23-7.14 (m, 2H), 6.94 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.84 (m, 2H), 4.52 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.31 (m, 2H), 4.12 (m, 5H), 3.89 (m, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.43 (m, 4H), 2.84 (s, 2H), 5.62-2.54 (m, 7H), 1.88 (m, 2H), 1.78 (m, 2H)
【０２４２】
実施例１１３ａ  ３-メチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸(３Ｓ)-tert-ブチル（１１３ａ）
手順は実施例１０４に記載のものであり、３-メチルピペラジン-１-カルボン酸(３Ｓ)-tert-ブチル)(１０．０ｇ、５０ｍｍｏｌ)及び５-ブロモ-２-ニトロピリジン(１０．５ｇ、５０ｍｍｏｌ)を用いて出発し、１１３ａを黄色固形物(８．０５ｇ、５０％)として得た。図１３を参照。MS-ESI: [M+H]+ 323
【０２４３】
実施例１１３ｂ  ４-(６-アミノピリジン-３-イル)-３-メチルピペラジン-１-カルボン酸(３Ｓ)-tert-ブチル（１１３ｂ）
手順は実施例１０４に記載のものであり、１１３ａ(５．８ｇ、１８ｍｍｏｌ)を用いて出発し、１１３ｂを褐色固形物(４．９ｇ、９３％)として得た。図１３を参照。MS-ESI: [M+H]+ 293
【０２４４】
実施例１１３ｃ  ４-(６-(５-ブロモ-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イルアミノ) ピリジン-３-イル)-３-メチルピペラジン-１-カルボン酸(３Ｓ)-tert-ブチル（１１３ｃ）
手順は実施例１０４に記載のものであり、１１３ｂ(４．０ｇ、１３．７ｍｍｏｌ)及び３,５-ジブロモ-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン(５．５ｇ、２０．６ｍｍｏｌ)を用いて出発し、１１３ｃを黄色固形物(５．４ｇ、８３％)として得た。図１３を参照。MS-ESI: [M+H]+ 478
【０２４５】
実施例１１３ｄ  (３Ｓ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(２-メチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１３ｄ）
手順は実施例１０４に記載のものであり、１１３ｃ(３．１ｇ、６．５ｍｍｏｌ)を用いて出発し、１１３ｄを黄色固形物(２．３ｇ、９４％)として得た。図１３を参照。MS-ESI: [M+H]+ 378
【０２４６】
実施例１１３ｅ  (Ｓ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１３ｅ）
メタノール(７００ｍＬｍＬ)中の１１３ｄ(４０．０ｇ、１０６ｍｍｏｌ)、オキセタン-３-オン(１１．４ｇ、１５９ｍｍｏｌ)、ＮａＢＨ３ＣＮ(１０．０ｇ、１５９ｍｍｏｌ)及び塩化亜鉛(２１．３ｇ、１５９ｍｍｏｌ)の混合物を５時間５０℃で撹拌した。混合物を水(１００ｍＬ)に添加し、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(３Ｘ２００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を４０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１１３ｅ(３５ｇ、７３％)を得た。図１３を参照。MS: [M+H]+ 434
【０２４７】
実施例１１３ｆ  (３Ｓ)-１-メチル-３-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)-ピリジン-２-イルアミノ)-５-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１３ｆ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１１３ｅ(１．０ｇ、１．０当量、２．３ｍｍｏｌ)を、Ｐｉｎ２Ｂ２(１．４６ｇ、２．５０当量、５．７５ｍｍｏｌ)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(１０５ｍｇ、０．０５当量、０．１２５ｍｍｏｌ)、Ｘ−Ｐｈｏｓ(９３ｍｇ、０．１当量、０．２３ｍｍｏｌ)、酢酸カリウム(６７６ｍｇ、３．０当量、６．９ｍｍｏｌ)、及びジオキサン(５０ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を４時間９０℃で加熱した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を３：１の石油エーテル／酢酸エチル(８０ｍＬ)で洗浄し、１１３ｆを黄色固形物(１．０ｇ、９０％)として得た。図１３を参照。MS: [M+H]+ 482。
【０２４８】
実施例１１３ｇ  ４-[５-(エトキシカルボニル)-１Ｈ−ピロール-３-イル]-４-オキソブタン酸（１１３ｇ）
３０００ｍＬの四口丸底フラスコに、１,２-ジクロロエタン(６９０ｍＬ)とＡｌＣｌ３（４００．５ｇ、３．００ｍｏｌ、６．００等量）中のオキソラン-２,５-ジオン(１００ｇ、９９９．２７ｍｍｏｌ、２．００当量)の溶液を入れ、ついで、１,２-ジクロロエタン(６６０ｍＬ)中の１Ｈ-ピロール-２-カルボン酸エチル(６９ｇ、４９５．８６ｍｍｏｌ、１．００当量)の溶液を、室温で２０分かけて、撹拌しながら添加した(図１４)。得られた溶液を室温で３時間撹拌し、水／氷３ｋｇを加えてクエンチした。固形物を濾過により収集し、水１ｘ１０００で洗浄し、真空オーブン中で乾燥させ、１０５ｇ(８９％)の１１３ｇを白色固形物として得た。
【０２４９】
実施例１１３ｈ  ４-[５-(エトキシカルボニル)-１Ｈ-ピロール-３-イル]ブタン酸（１１３ｈ）
２０００ｍＬの四口丸底フラスコに、ＣＦ３ＣＯＯＨ(１０００ｍＬ)中の１１３ｈ(１０５ｇ、４３８．９２ｍｍｏｌ、１．００当量)の溶液を入れ、続いてトリエチルシラン(２０４ｇ、１．７５ｍｏｌ、４．００等量）の溶液を、室温で３０分かけて、撹拌しながら滴下して加えた(図１４)。得られた溶液を室温で８時間撹拌し、真空下で濃縮し、５００ｍＬの水及び５００ｍＬの酢酸エチルで希釈した。溶液のｐＨ値を飽和水性炭酸水素ナトリウムで７に調整した。得られた溶液を酢酸エチル３ｘ５００ｍＬで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮し、３０ｇ(３０％)の１１３ｈを淡褐色固形物として得た。
【０２５０】
実施例１１３ｉ  ７-オキソ-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１１３ｉ）
１０００ｍＬの丸底フラスコに、ＣＦ３ＣＯＯＨ(５００ｍＬ)中の１１３ｈ(３０ｇ、１３３．１９ｍｍｏｌ、１．００当量)の溶液を入れ、続いてトリフルオロアセチル２,２,２-トリフルオロアセテート(４２ｇ、１９９．９７ｍｍｏｌ、１．５０等量）を添加した。図１４を参照。得られた溶液を室温で６０分撹拌し、真空下で濃縮し、５００ｍＬの水と５００ｍＬのＥＡで希釈し、３ｘ５００ｍＬの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を１ｘ５００ｍＬの飽和水性炭酸カリウム及び１ｘ５００ｍＬのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空下で濃縮し、２４ｇ(８７％)の１１３ｉを淡褐色固形物として得た。
【０２５１】
実施例１１３ｊ  ６,６-ジフルオロ-７-オキソ-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１１３ｊ）
窒素の不活性雰囲気でパージし、維持された２０００ｍＬの４口丸底フラスコに、テトラヒドロフラン(２００ｍＬ)中の１１３ｉ(２４ｇ、１１５．８２ｍｍｏｌ、１．００当量)の溶液を入れ、続いてＬｉＨＭＤＳ(４０６ｍＬ、３．５０当量)を−７８℃で３０分撹拌しながら滴下して添加した(図１４)。これに、−７８℃で３０分撹拌しながら、テトラヒドロフラン(５００ｍＬ)中のＮ-(ベンゼンスルホニル)-Ｓ-フェニルフルオランスルホンアミド(１０９．５ｇ、３４７．２４ｍｍｏｌ、３．００当量)の溶液を添加した。得られた溶液を室温で一晩撹拌し、２００ｍＬの飽和水性ＮＨ４Ｃｌの添加によりクエンチし、３×２００ｍＬの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物を石油エーテル／酢酸エチル(３０：１)で溶出するシリカゲルカラム上で精製し、９．５ｇ(３４％)の１１３ｊを黄色固形物として得た。
【０２５２】
実施例１１３ｋ  ６,６-ジフルオロ-７-ヒドロキシ-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１１３ｋ）
２５０ｍＬの三口丸底フラスコに、エタノール(１００ｍＬ)中の１１３ｊ(１８ｇ、７４．０１ｍｍｏｌ、１．００当量)を入れ、続いて０℃で、ＮａＢＨ４(２．８ｇ、７４．０２ｍｍｏｌ、１．００等量）を数回に分けて添加した(図１４)。得られた溶液を５℃で１０分間で撹拌し、５０ｍＬの飽和水性ＮＨ４Ｃｌの添加によりクエンチし、真空下で濃縮し、３×５０ｍＬの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を１ｘ１００ｍＬの水及び１ｘ１００ｍＬのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空下で濃縮し、１８ｇ(９９％)の１１３ｋを白色固形物として得た。
【０２５３】
実施例１１３ｌ  ６,６-ジフルオロ-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１１３ｌ）
５００ｍＬの三口丸底フラスコに、ジクロロメタン(２００ｍＬ)及びＣＦ３ＣＯＯＨ(４１．９ｇ、３６７．４８ｍｍｏｌ、５．００当量)中の１１３ｋ(１８ｇ、７３．４０ｍｍｏｌ、１．００当量)の溶液を入れ、続いて０℃で、トリエチルシラン(２５．６ｇ、２２０．１６ｍｍｏｌ、３．００当量)を、２０分かけて撹拌しながら滴下して添加した(図１４)。得られた溶液を室温で４時間撹拌し、飽和水性炭酸水素ナトリウムでｐＨを７に調整し、１ｘ２００ｍＬのジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層を１ｘ１００ｍＬの水及び１ｘ１００ｍＬのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空下で濃縮した。粗生成物をフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製し、１０ｇ(５９％)の１１３ｌを白色固形物として得た。
【０２５４】
実施例１１３ｍ  １-(シアノメチル)-６,６-ジフルオロ-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１１３ｍ）
２５０ｍＬの三口丸底フラスコに、Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド(５０ｍＬ)中の１１３ｌ(５．０ｇ、２１．８１ｍｍｏｌ、１．００当量)の溶液を入れ、０℃で、水素化ナトリウム(１．３ｇ、５４．１７ｍｍｏｌ、１．４０当量、６０％)を１０分かけて数回に分けて添加した(図１４)。これに、２-ブロモアセトニトリル(３．７ｇ、３０．８５ｍｍｏｌ、１．４０当量)を２０℃で１０分かけて、撹拌しながら滴下して添加した。得られた溶液を７時間室温で撹拌し、１００ｍＬの水で希釈し、３×５０ｍＬの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を１ｘ１００ｍの水及び１ｘ１００ｍＬのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物を酢酸エチル／石油エーテル(１：２０)で溶出するシリカゲルカラムで精製して、３．３ｇ(５６％)の１１３ｍをライトイエロー色油状物として得た。
【０２５５】
実施例１１３ｎ  １-(２-アミノエチル)-６,６-ジフルオロ-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１１３ｎ）
１００ｍＬの丸底フラスコに、エタノール(３０ｍＬ)及びＮｉＣｌ２.６Ｈ２Ｏ(３．２ｇ、１３．４５ｍｍｏｌ、１．１０当量)中の１１３ｍ(３．３ｇ、１２．３０ｍｍｏｌ、１．００当量)の溶液を入れ、続いて０℃でＮａＢＨ４(１．４ｇ、３７．０１ｍｍｏｌ、３．００当量)を数回に分けて添加した(図１４)。得られた溶液を室温で２４時間撹拌した。固形物を濾別し、濾液を真空下で濃縮した。得られた溶液を３０ｍＬの酢酸エチルで希釈し、１Ｘ３０ｍＬの塩化水素(２Ｎ)で洗浄した。溶液を飽和水性炭酸水素ナトリウムでｐＨ＝９に調整し、２×３０ｍＬの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空下で濃縮し、０．７ｇ(２１％)の１１３ｎをライトイエロー  色油状物として得た。
【０２５６】
実施例１１３ｏ  ７,７-ジフルオロ-１Ｈ,２Ｈ,３Ｈ,４Ｈ,６Ｈ,７Ｈ,８Ｈ,９Ｈ-ピラジノ[１,２-ａ]インドール-１-オン（１１３ｏ）
２５０ｍＬの丸底フラスコに、トルエン(１００ｍＬ)及び酢酸(１．１ｇ、１８．３２ｍｍｏｌ、０．５０当量)中の１１３ｎ(１０ｇ、３６．７３ｍｍｏｌ、１．００当量)の溶液に入れた。図１４を参照。得られた溶液を２時間加熱還流し、冷却し、真空下で濃縮した。残留物を１００ｍｌの無水エーテルにおいて粉砕した。粗生成物をエタノールからの再結晶により精製し、４．４３ｇ(５３％)の１１３ｏを白色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+227. 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 2.10-2.24 (2H, m), 2.59-2.64 (2H, m), 3.17-3.27 (2H, m), 3.43-3.48 (2H, m), 3.88-3.92 (2H, m), 6.44 (1H, s), 7.56 (1H, s)。
【０２５７】
実施例１１３ｐ  ２-ブロモ-６-(７,７-ジフルオロ-１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-４-フルオロベンジルアセテート（１１３ｐ）
還流冷却器を備えた１００ｍＬの丸底フラスコに、１,４-ジオキサン(４０ｍＬ)、１１３ｏ(８９０ｍｇ、３．９４ｍｍｏｌ)、２,６-ジブロモ-４-フルオロベンジルアセテート１０１ｃ(３８４７ｍｇ、１１．８ｍｍｏｌ)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(１８０ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌ)、キサントホス(２２７ｍｇ、０．３９４ｍｍｏｌ)、及び炭酸セシウム(２．５７ｇ、７．８８ｍｍｏｌ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を１００℃で１６時間加熱した。次いで、それを濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物を３：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１１３ｐ(１１００ｍｇ、６２％)を白色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 471.1。
【０２５８】
実施例１１３ｑ  (Ｓ)-２-(７,７-ジフルオロ-１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-４-フルオロ-６-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)ベンジルアセテート（１１３ｑ）
密封チューブに１１３ｐ(４７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ)、１１３ｆ(４７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(４ｍｇ、０．００５ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム(１６ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(４３ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(２ｍＬ)、及び水(０．２ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を１００℃で１時間加熱した。次いで、それを濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物を２５：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、１１３ｑ(３７ｍｇ、５０％)を褐色固形物として得た。MS: [M+H]+ 746.3
【０２５９】
実施例１１３  (Ｓ)-７,７-ジフルオロ-２-(５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１１３）
ｉ-プロパノール／ＴＨＦ  (１：１、４ｍＬ)及び水(１ｍＬ)中の１１３ｑ(３７ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ)及び水酸化リチウム(１２ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ)の混合物を、３０℃で１時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させた。水(１０ｍＬ)を残留物に加え、得られた混合物を酢酸エチル(２Ｘ１０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１１３(２０ｍｇ、５７％)を白色固形物として得た。MS: [M+H]+ 704.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.57-8.54 (m, 1H), 7.95 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.45-7.41 (m, 1H), 7.32 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.19-7.16 (m, 1H), 6.99-6.95 (m,1H), 6.88 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.97 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.71-4.64 (m, 4H), 4.54 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.35-4.18 (m, 5H), 3.99-3.95 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.53 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.47-3.45 (m, 1H), 3.17 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 3.08 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.90 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 2.79 (t, J = 6.0 Hz,1H), 2.66-2.63 (m,1H), 2.56 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.49-2.47 (m, 2H), 2.30-2.20 (m, 2H), 0.99 (d, J = 6.0 Hz, 3H)。
【０２６０】
実施例１１４ａ  ３-エチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸(Ｓ)-tert-ブチル（１１４ａ）
0005976828.tif 000079
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた２５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１,４-ジオキサン(５０ｍＬ)、５-ブロモ-２-ニトロピリジン(２．０２ｇ、１０ｍｍｏｌ)、３-エチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｓ)tert-ブチル(２．１４ｇ、１０．０ｍｍｏｌ)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(４５８ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ)、キサントホス(５７６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)、及び炭酸セシウム(６．５２ｇ、２０ｍｍｏｌ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を１００℃で一晩加熱した。この後、反応物を室温まで冷却した。次いで、それを濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物を３：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１１４ａ(７００ｍｇ、２２％)を黄色固形物としてを得た。MS: [M+H]+ 336
【０２６１】
実施例１１４ｂ  ４-(６-アミノピリジン-３-イル)-３-エチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｓ)-tert-ブチル（１１４ｂ）
１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、１１４ａ(０．７ｇ、２．０８ｍｍｏｌ)、１０％パラジウム炭素(５０％湿潤、２０８ｍｇ)、及びメタノール(４０ｍＬ)を充填した。混合物を排気し、水素ガスを充填し、そして室温で６時間撹拌した。ついで水素を排気し、窒素をフラスコに充填した。触媒をセライトのパッドを通して濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮し、１１４ｂ(５６８ｍｇ、８９％)を得た。 MS: [M+H]+ 306
【０２６２】
実施例１１４ｃ  ４-(６-(５-ブロモ-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イルアミノ) ピリジン-３-イル)-３-エチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｓ)-tert-ブチル（１１４ｃ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１,４-ジオキサン(５０ｍＬ)、１１４ｂ(５６８ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ)、３,５-ジブロモ-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン(４９８ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(８５ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ)、キサントホス(１０７ｍｇ、０．１８６ｍｍｏｌ)、及び炭酸セシウム(１．１９８ｇ、３．７２ｍｍｏｌ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を１００℃で６時間加熱した。次いで、それを濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物を１００：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、１１４ｃ(５０２ｍｇ、５５％)を黄色固形物として得た。MS: [M+H]+ 492。
【０２６３】
実施例１１４ｄ  (Ｓ)-５-ブロモ-３-(５-(２-エチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１４ｄ）
１１４ｃ(５０２ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ)、ジクロロメタン(２ｍＬ)、及び４．０Ｍ  のＨＣｌ／ジオキサン(４ｍＬ)の混合物を室温で５時間撹拌した。次いで、それを減圧下で濃縮し、粗１１４ｄを黄色固形物(２６３ｍｇ、６６％)として得、さらに精製することなく次の工程で使用した。MS: [M+H]+ 392。
【０２６４】
実施例１１４ｅ  (Ｓ)-５-ブロモ-３-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１４ｅ）
0005976828.tif 000080
メタノール(１０ｍＬ)中の１１４ｄ(２６３ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ)、オキセタン-３-オン(９６ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ)、ＮａＢＨ３ＣＮ（１０４ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ)、及び塩化亜鉛(２２７ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ)の混合物を５時間５０℃で撹拌した。ついで、水(１０ｍＬ)を反応物に添加した。得られた混合物を減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を真空下で濃縮し、残留物を５０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１１４ｅ(２０３ｍｇ、６８％)を得た。MS: [M+H]+ 448。
【０２６５】
実施例１１４ｆ  (Ｓ)-３-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-５-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１４ｆ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１１４ｅ(３２１９ｍｇ、７．２０ｍｍｏｌ)、Ｐｉｎ２Ｂ２(９０７２ｍｇ、３６．０ｍｍｏｌ)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(３２９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ)、Ｘ−Ｐｈｏｓ(３０２ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ)、酢酸カリウム(２１１７ｍｇ、２１．６ｍｍｏｌ)、及びジオキサン(５０ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を１６時間６０℃で加熱した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を８：１の石油エーテル／酢酸エチル(８０ｍＬ)で洗浄し、１１４ｆを黄色固形物(３．０ｇ、８４％)として得た。MS: [M+H]+ 496.4。
【０２６６】
実施例１１４ｇ  (２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０2,6]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-６-[５-({５-[(２Ｓ)-２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル]-４-フルオロフェニル)メチルアセテート（１１４ｇ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた２５ｍＬの一口丸底フラスコに、１１４ｆ(１８０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ)、(２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０2,6]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-４-フルオロ-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)フェニル)メチルアセテート１０３ｇ(１９８ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(２９ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１７０ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム(６６ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(５ｍＬ)及び水(１．０ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を還流して２時間加熱した。次いで、それを室温まで冷却し、濾過した。濾液を減圧下で蒸発させ、得られた残留物を３０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、１１４ｇを黄色固形物(１１５ｍｇ、３９％)として得た。MS: [M+H]+ 738.4
【０２６７】
実施例１１４  ２-(３-{５-[５-((Ｓ)-２-エチル-４-オキセタン-３-イル-ピペラジン-１-イル)-ピリジン-２-イルアミノ]-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロ-ピリジン-３-イル}-５-フルオロ-２-ヒドロキシメチル-フェニル)-７,７-ジメチル-３,４,７,８-テトラヒドロ-２Ｈ，６Ｈ-シクロペンタ[４,５]ピロロ[１,２-ａ]ピラジン-１-オン（１１４）
ｉ-プロパノール／ＴＨＦ  (１：１、４ｍＬ)及び水(１ｍＬ)中の１１４ｇ(１１５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ)及び水酸化リチウム(３８ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ)の混合物を、３０℃で１時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を酢酸エチル(２Ｘ１０ｍＬ)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１１４(４５ｍｇ、４０％)を白色固形物として得た。MS: [M+H]+ 696.4。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.55-8.54 (m, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.80 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.26 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 2.5, 8.5 Hz, 1H), 6.83-6.81 (m, 2H), 4.71 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.67 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.62 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.57-4.55 (m, 1H), 4.41-4.38 (m, 1H), 4.32-4.30 (m, 1H), 4.24-4.14 (m, 3H), 3.92-3.87 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.56-3.50 (m, 1H), 3.33-3.29 (m, 1H), 3.13-3.11 (m, 2H), 2.58-2.56 (m, 3H), 2.52 (s, 2H), 2.44-2.43 (m, 2H), 2.38-2.32 (m, 1H), 1.66-1.64 (m, 1H), 1.42-1.37 (m, 1H), 1.28 (s, 6H), 0.82 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。
【０２６８】
実施例１１５ａ  ３-メチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル（１１５ａ）
0005976828.tif 000081
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた２５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１,４-ジオキサン(６０ｍＬ)、５-ブロモ-２-ニトロピリジン(２．０ｇ、１０．０ｍｍｏｌ)、３-メチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル(２．０ｇ、１０．０ｍｍｏｌ)、及び炭酸セシウム(６．５ｇ、２０ｍｍｏｌ)を充填した。１０分、得られた混合物に窒素をバブリングした後、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(９１５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)及びキサントホス(５７９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)を添加した。システムを３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクルにかけ、１００℃で１５時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却し、濾過した。濾液を酢酸エチル(１００ｍＬ)と水(１００ｍＬ)の間で分配した。水層を分離し、酢酸エチル(３Ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン(１００ｍＬ)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を３０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１１５ａ(１．６ｇ、４４％)を黄色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 323。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.21 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.45-7.43 (m, 1H), 4.34-4.33 (m, 1H), 3.92-3.99 (m, 1H), 3.80 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 3.06-3.23 (m, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.09 (d, J = 6.5 Hz, 3H)。
【０２６９】
実施例１１５ｂ  ４-(６-アミノピリジン-３-イル)-３-メチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル（１１５ｂ）
２５０ｍＬのフラスコを窒素でパージし、１１５ａ(１．５ｇ、４．６ｍｍｏｌ)、１０％パラジウム炭素(５０％湿潤、２００ｍｇ)、及びメタノール(７０ｍＬ)を充填した。排気し、水素ガスを充填し、１０時間室温で撹拌した。ついで水素を排気し、窒素をフラスコに充填した。触媒をセライトのパッドを通して濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮し、１１５ｂ(１．１ｇ、８１％)を褐色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 293
【０２７０】
実施例１１５ｃ  ４-(６-(５-ブロモ-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イルアミノ)ピリジン-３-イル)-３-メチルピペラジン-１-カルボン酸(Ｒ)-tert-ブチル（１１５ｃ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１,４-ジオキサン(４０ｍＬ)、１１５ｂ(１．０ｇ、３．４ｍｍｏｌ)、３,５-ジブロモ-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン(２．７ｇ、１０．２ｍｍｏｌ)、及び炭酸セシウム(２．２ｇ、６．８ｍｍｏｌ)を充填。１０分、得られた混合物に窒素をバブリングした後、キサントホス(１９８ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(３１３ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を３回真空／アルゴンフラッシュのサイクルにかけ、１００℃で５時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却し、濾過した。濾液を酢酸エチル(５０ｍＬ)と水(５０ｍＬ)の間で分配した。水層を分離し、酢酸エチル(３Ｘ３０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をブライン(５０ｍＬ)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を３０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１１５ｃを黄色固形物(１．１ｇ、６３％)として得た。MS-ESI: [M+H]+ 478。
【０２７１】
実施例１１５ｄ  (Ｒ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(２-メチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１５ｄ）
メタノール(２０ｍＬ)中の１１５ｃ(６００ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ)の混合物に、ＨＣｌ／ジオキサン(４Ｍ、４ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。次いで、減圧下で濃縮した。残留物を１Ｍの水性ＮａＯＨで塩基性化し、ジクロロメタン(３Ｘ３０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、減圧下で濃縮し、１１５ｄ(４５０ｍｇ、９５％)を黄色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 378。
【０２７２】
実施例１１５ｅ  (Ｒ)-５-ブロモ-３-(５-(２,４-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１５ｅ）
メタノール／酢酸(３０ｍＬ／３ｍＬ)中の１１５ｄ(５００ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ)及び３０％ホルムアルデヒド(６５０ｍｇ、６．５ｍｍｏｌ)の混合物を５分間室温で撹拌し、続いてＮａＢＨ３ＣＮ(１２０ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を室温で４時間撹拌した。水(２０ｍＬ)を加え、得られた混合物を減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(３Ｘ３０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を３０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１１５ｅを黄色固形物(４７３ｍｇ、９２％)として得た。MS-ESI: [M+H]+ 392。
【０２７３】
実施例１１５ｆ  (Ｒ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１１５ｆ）
メタノール(７００ｍＬ)中の１１５ｅ(４０．０ｇ、１０６ｍｍｏｌ)、オキセタン-３-オン(１１．４ｇ、１５９ｍｍｏｌ)、ＮａＢＨ３ＣＮ(１０．０ｇ、１５９ｍｍｏｌ)及び塩化亜鉛(２１．３ｇ、１５９ｍｍｏｌ)の混合物を、５０℃で５時間撹拌した。水(５０ｍＬ)を混合物に添加し、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(３Ｘ２００ｍＬ)で抽出し、合わせた有機層を減圧下で濃縮した。残留物を４０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１１５ｆ(３５ｇ、７３％)を得た。MS: [M+H]+ 434。
【０２７４】
実施例１１５ｇ  ２,２,２-トリクロロ-１-(４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-イル)エタノン（１１５ｇ）
磁気攪拌器、冷却器及び窒素導入口を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール(３．００ｇ、２４．８ｍｍｏｌ)、トリクロロアセチル塩化物(１３．５ｇ、７４．４ｍｍｏｌ)及び１,２-ジクロロエタン(５０ｍＬ)を充填した。溶液を８５℃で２時間撹拌した。当該時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、収率１００％(６．５０ｇ)の１１５ｇを黒色半固形物として得た：1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.94 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 2.62 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.47 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.80 (m, 2H), 1.65 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 266.0 (M+H)。
【０２７５】
実施例１１５ｈ  ４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１１５ｈ）
磁気攪拌器及び窒素導入口を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、１１５ｇ(６．５０ｇ、２４．８ｍｍｏｌ)、ナトリウムエトキシド(１７．０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ)及びエタノール(４０ｍＬ)を充填した。溶液を室温で１時間撹拌した。当該時間後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、収率１００％(４．８０ｇ)の１１５ｈを褐色固形物として得た：融点７０−７２℃；1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.08 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.25 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.65 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.56 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.85 (m, 4H), 1.28 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS (ESI+) m/z 194.1 (M+H)
【０２７６】
実施例１１５ｉ  １-(シアノメチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１１５ｉ）
磁気攪拌器及び窒素導入口を備えた１２５ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、１１５ｈ(５．７６ｇ、２９．８ｍｍｏｌ)及びＤＭＦ(５０ｍＬ)を充填した。溶液を氷浴を用いて０℃に冷却した。ＮａＨ(鉱油中に６０％分散、１．４３ｇ、３５．８ｍｍｏｌ)を添加した。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。当該時間後、ブロモアセトニトリル(１．４３ｇ、３５．８ｍｍｏｌ)を添加した。混合物を１４時間室温で撹拌した。当該時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル(１５０ｍＬ)と水(４５０ｍＬ)の間で分配した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル(３×１５０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、収率５５％(３．８０ｇ)の１１５ｉを黄色半固形物として得た：1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.66 (s, 1H), 5.29 (s, 2H), 4.28 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.62 (t, 2H, J = 6.3 Hz), 2.49 (t, 2H, J = 6.3 Hz), 1.92 (m, 2H), 1.75 (m, 2H), 1.33 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS (ESI+) m/z 233.1 (M+H)
【０２７７】
実施例１１５ｊ  １-(２-アミノエチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１１５ｊ）
２００ｍＬのＰａｒｒ反応ボトルを窒素でパージし、１０％パラジウム炭素(５０％湿潤、１．２８ｇ乾燥重量)、１１５ｉ(３．００ｇ、１２．９ｍｍｏｌ)、１２％塩酸(６．５ｍＬ、２５ｍｍｏｌ)、酢酸エチル(６０ｍＬ)及びエタノール(４０ｍＬ)を充填した。ボトルにＰａｒｒ水素化装置を取り付け、排気し、５０ｐｓｉの圧力まで水素ガスを充填し、６時間振盪した。この時間後、水素を排気し、窒素をボトルに充填した。セライト５２１（４．０ｇ）を加え、混合物をセライト５２１のパッドを通して濾過した。フィルターケーキをエタノール（２×２０ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を減圧下で濃縮乾固した。残留物を酢酸エチル(１５０ｍＬ)と１０％水性炭酸カリウム(１００ｍＬ)の間で分配した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル(３×７５ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をエタノール(５ｍＬ)と共に粉砕し、収率７１％(１．７１ｇ)の１１５ｊを白色固形物として得た：融点１０２−１０４℃；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 6.61 (s, 1H), 6.22 (br, 2H), 4.15 (m, 4H), 2.77 (m, 2H), 2.59 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 2.42 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 1.70 (m, 2H), 1.62 (m, 2H), 1.23 (t, 3H, J = 7.0 Hz); MS (APCI+) m/z 237.2 (M+H)
【０２７８】
実施例１１５ｋ  ３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１１５ｋ）
磁気攪拌器及び窒素導入口を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコを窒素でパージし、１-(２-アミノエチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール２-カルボン酸エチル１１５ｊ(１．８０ｇ、７．６３ｍｍｏｌ)、ナトリウムエトキシド(１．５５ｇ、２２．８ｍｍｏｌ)及びエタノール(５０ｍＬ)を充填した。混合物を５５℃で５時間撹拌した。当該時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル(２００ｍＬ)と水(１００ｍＬ)の間で分配した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル(２×１００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、収率４２％(６０５ｍｇ)の１１５ｋを白色固形物として得た：融点２０７−２０９℃；1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.41 (s, 1H), 6.36 (s, 1H), 3.84 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 3.42 (m, 2H), 2.51 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 2.42 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.76 (m, 2H), 1.65 (m, 2H); (APCI+) m/z 191.3 (M+H)
【０２７９】
実施例１１５ｌ  ２-ブロモ-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１１５ｌ）
磁気攪拌器を備えた２５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１１５ｋ(３．８ｇ、２０ｍｍｏｌ)、２,６-ジブロモ-４-フルオロベンジルアセテート１０１ｃ(２０．０ｇ、６１ｍｍｏｌ)、キサントフォス(１．１６ｇ、２．０ｍｍｏｌ)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(１．８３ｇ、２．０ｍｍｏｌ)、Ｃｓ２ＣＯ３(１６．３ｇ、５０ｍｍｏｌ)、及び１,４-ジオキサン(１２０ｍＬ)を充填した。システムを排気し、次いでＮ２を再充填した。還流冷却器をフラスコに取り付け、反応混合物を１６時間１００℃で加熱した。混合物を室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を５：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１１５ｌを白色固形物(５．２ｇ、６０％)として得た。MS: [M+H]+ 435. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.71-7.69 (m, 1H), 7.49-7.47 (m, 1H), 6.52 (s, 1H), 5.01 (m, 2H), 4.18 (m, 2H), 4.02 (m, 1H), 3.73 (m, 1H), 2.60 (m, 2H), 2.45 (m, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.77 (m, 2 H), 1.68 (m, 2H)。
【０２８０】
実施例１１５ｍ  ４-フルオロ-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート（１１５ｍ）
磁気攪拌器を備えた２５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１１５ｌ(３．８ｇ、８．８ｍｍｏｌ)、(ＰｉｎＢ)２(１０．９ｇ、４３ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(０．３７ｇ、０．５０ｍｍｏｌ)、酢酸カリウム(２．５５ｇ、２６ｍｍｏｌ)及び１,４-ジオキサン(１５０ｍＬ)を充填した。システムを排気し、次いでＮ２を再充填した。還流冷却器をフラスコに取り付け、反応混合物を１５時間１００℃で加熱した。混合物を室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を５：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１１５ｍを黄色固形物(３．２ｇ、７５％)として得た。MS: [M+H]+ 483。
【０２８１】
実施例１１５ｎ  (Ｒ)-４-フルオロ-２-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１１５ｎ）
0005976828.tif 000082
実施例１０２の手順に従い、１１５ｅ(２２０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ、１．０当量)、１１５ｍ(４８２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ、２．０当量)を用いて出発し、１１５ｎを黄色固形物(１９５ｍｇ、５５％)として得た。MS: [M+H]+ 710.4
【０２８２】
実施例１１５  (Ｒ)-２-(５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１１５）
実施例１０２の手順に従い、１１５ｎ(１９０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ)を用いて出発し、１１５を白色固形物(４７ｍｇ、２６％)として得た。MS: [M+H]+ 668.4。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.84 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.36-7.32 (m, 3H), 7.25-7.18 (m, 2H), 6.52 (s, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.56-4.42 (m, 4H), 4.31-4.30 (m, 2H), 4.18-4.13 (m, 3H), 3.89-3.88 (m, 1H), 3.68-3.67 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.39-3.38 (m, 1H), 3.08-3.07 (m, 1H), 2.94-2.93 (m, 1H), 2.51-2.45 (m, 5H), 2.33-2.32 (m, 2H), 2.19-2.18 (m, 1H), 1.79-1.69 (m, 4H), 0.93-0.92 (m, 3H)。
【０２８３】
実施例１１６ａ  {２-[５-({５-[(２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル]-６-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０2,6]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-４-フルオロフェニル}メチルアセテート（１１６ａ）
0005976828.tif 000083
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた２５-ｍＬの一口丸底フラスコに、５-ブロモ-３-(５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン１０４ｅ (１３４ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ)、１-メチル-３-(５-(４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-５-(４,４,５,５-テトラ-メチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ピリジン-２(１Ｈ)-オン１０３ｇ(２９８ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(２２ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１２７ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム(４９ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(５ｍＬ)、及び水(１．０ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を２時間加熱還流した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物を３０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１１６ａを黄色固形物(１５０ｍｇ、６８％)として得た。MS: [M+H]+ 738.3
【０２８４】
実施例１１６  ２-(３−{５-[５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-オキセタン-３-イル-ピペラジン-１-イル)-ピリジン-２-イルアミノ]-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロ-ピリジン-３-イル}-５-フルオロ-２-ヒドロキシメチル-フェニル)-７,７-ジメチル-３,４,７,８-テトラヒドロ-２Ｈ,６Ｈ-シクロペンタ[４,５]ピロロ[１,２-ａ]ピラジン-１-オン（１１６）
ｉ-プロパノール／ＴＨＦ  (１：１、４ｍＬ)及び水(１ｍＬ)中の１１６ａ(１５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ)及び水酸化リチウム(４８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ)の混合物を、３０℃で１時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させた。得られた混合物を酢酸エチル(２Ｘ１０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１１６(５７ｍｇ、４１％)を白色固形物として得た。MS: [M+H]+ 696.3.  1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.60 (dd, J =2.0, 6.5 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.50-7.49 (m, 1H), 7.37 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 2.5, 9.0 Hz, 1H), 6.83-6.81 (m, 2H), 4.77-4.74 (m, 2H), 4.66-4.62 (m, 2H), 4.57-4.55 (m, 1H), 4.33-4.31 (m, 1H), 4.23-4.14 (m, 3H), 3.92-3.89 (m, 1H), 3.78-3.76 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.22-3.20 (m, 1H), 2.93-2.91 (m, 1H), 2.75-2.73 (m, 2H), 2 .58 (s, 2H), 2.52 (s, 3H), 1.97-1.90 (m, 2H), 1.28 (s, 6H), 0.91 (d, J = 5.5 Hz, 6H)。
【０２８５】
実施例１１７ａ  Ｎ-tert-ブチル-４,５,６,７-テトラヒドロベンゾ[ｂ]チオフェン-２-カルボキサミド（１１７ａ）
0005976828.tif 000084
４,５,６,７-テトラヒドロベンゾ[ｂ]チオフェン-２-カルボン酸(５００ｇ、２．７５ｍｏｌ、１．０当量)及び塩化チオニル(６５５ｇ、５．５ｍｏｌ、２．０当量)の混合物を３時間還流下で沸騰させた。過剰の塩化チオニルを減圧下で蒸留により除去した。残留物をジクロロメタン(１．０Ｌ)に溶解し、ジクロロメタン(５００ｍＬ)中のtert-ブチルアミン(４０２ｇ、５．５モル、２．０当量)の溶液を、混合物の温度を１０℃以下に維持しながら撹拌しつつ添加した。得られた溶液を２５℃で１６時間撹拌した。大部分の溶媒を減圧下で除去した。残留物を氷浴で冷却し、２ＭのＫＯＨ溶液を徐々に導入し、撹拌しながらｐＨを１１に調整した。懸濁液を濾過し、固形物を回収し、水で３回洗浄し、真空中で乾燥させ、１１７ａを白色固形物(５８０ｇ、８０％、２工程にわたる)として得た。MS: [M+H]+ 238. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.02 (s, 1H), 5.77 (s, 1H), 2.65 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 2.47 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 1.74-1.70 (m, 4H), 1.35 (s, 9H)。
【０２８６】
実施例１１７ｂ  Ｎ-tert-ブチル-３-(ジアゼニルメチル)-４,５,６,７-テトラヒドロベンゾ[ｂ]チオフェン-２-カルボキサミド（１１７ｂ）
ＴＨＦ(５００ｍＬ)中の１１７ａ(１００ｇ、０．４２ｍｏｌ、１．０当量)の溶液に、アルゴン下、−７８℃で、ｎ-ＢｕＬｉ(６７２ｍＬ、ＴＨＦ中に２．５Ｍ、１．６８ｍｏｌ、４．０当量)をゆっくりと加えた。混合物を２時間撹拌した。温度を−７８℃に保ちながら、ＤＭＦ(３０６ｇ、４．２ｍｏｌ、１０．０当量)を混合物に添加した。さらに２．０時間後、反応物を−７８℃でメタノール(５００ｍＬ)でクエンチした。室温で０．５０時間撹拌した。８０％水性ヒドラジン水和物(１３１ｇ、２．１ｍｏｌ)を加え、混合物を６５℃で一晩還流させた。有機溶媒を減圧下で除去した。残留物を濾過し、回収した黄色固形物を水で洗浄した。固形物を真空中で乾燥させ、粗１１７ｂを得、さらに精製することなく次の工程で使用した。MS: [M+H]+ 280。
【０２８７】
実施例１１７ｃ  ８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２，７]トリデカ(９),２(７),１,３-トリエン-６-オン（１１７ｃ）
Ｈ２ＳＯ４(３０％水溶液、３Ｌ)中の１１７ｂ(４０ｇ、１４４ｍｍｏｌ)の混合物を、１０５℃で２４時間還流した。次いで、それを濾過し、濾液をジクロロメタン(３×１Ｌ)により抽出した。合わせた抽出物をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で蒸発させた。残留物を１００：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１１７ｃを白色固形物(９．０ｇ、３１％)として得た。MS: [M+H]+ 207。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.15 (s, 1H), 2.96-2.94 (m, 2H), 2.86-2.84 (m, 2H),1.96-1.94 (m, 4H)。
【０２８８】
実施例１１７ｄ  (２-ブロモ-４-フルオロ-６-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２，７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-５-イル}フェニル)メチルアセテート（１１７ｄ）
磁気攪拌器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１１７ｃ(１．０ｇ、４．８５ｍｍｏｌ)、２,６-ジブロモ-４-フルオロベンジルアセテート１０１ｃ(４．８ｇ、１４．６ｍｍｏｌ)、ヨウ化銅(Ｉ)(５５３ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ)、Ｎ１,Ｎ２-ジメチルエタン-１,２-ジアミン(５１２ｍｇ、５．８２ｍｍｏｌ)、Ｃｓ２ＣＯ３(３．２ｇ、９．７ｍｍｏｌ)、及び１,４-ジオキサン(５０ｍＬ)を充填した。システムを排気し、次いでＮ２を再充填した。還流冷却器をフラスコに取り付け、反応混合物を１６時間１００℃で加熱した。それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を５：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１１７ｄを黄色固形物(４３７ｍｇ、２０％)として得た。MS: [M+H]+ 451。
【０２８９】
実施例１１７ｅ  (４-フルオロ-２-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２，７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-５-イル}-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)フェニル)メチルアセテート（１１７ｅ）
実施例１０４の手順に従い、１１７ｄ(４００ｍｇ  ０．８８ｍｍｏｌ)を用いて出発し、１１７ｅを黄色固形物(３５３ｍｇ、８０％)として得た。MS: [M+H]+ 499
【０２９０】
実施例１１７ｆ  {４-フルオロ-２-[１-メチル-５-({５-[(２Ｒ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-６-オキソピリジン-３-イル]-６-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２，７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-５-イル}フェニル}メチルアセテート（１１７ｆ）
0005976828.tif 000085
実施例１０２の手順に従い、(Ｒ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン１１５ｆ（２１７ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ)及び１１７ｅ(２４９ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ)を用いて出発し、１１７ｆを黄色固形物(１７４ｍｇ、４８％)として得た。 MS: [M+H]+ 726。
【０２９１】
実施例１１７  ３-(５-フルオロ-２-ヒドロキシメチル-３-{１-メチル-５-[５-((Ｒ)-２-メチル-４-オキセタン-３-イル-ピペラジン-１-イル)-ピリジン-２-イルアミノ]-６-オキソ-１,６-ジヒドロ-ピリジン-３-イル}-フェニル)-６,７,８,９-テトラヒドロ-３Ｈ-ベンゾ[４,５]チエノ[２,３-ｄ]ピリダジン-４-オン（１１７）
実施例１０２の手順に従い、１１７ｆ(７２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ)を用いて出発し、１１７を黄色固形物(３５ｍｇ、５１％)として得た。LCMS: [M+H]+ 684。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.85 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.37-7.32 (m, 4H), 7.24 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.60 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.57-4.53 (m, 2H), 4.47-4.41 (m, 2H), 4.28-4.27 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 3.68-3.66 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.40-3.38 (m, 1H), 3.10-3.07 (m, 1H), 2.93-2.91 (m, 3H), 2.84-2.82 (m, 2H), 2.54-2.52 (m, 1H), 2.32-2.30 (m, 2H), 2.19-2.18 (m, 1H), 1.89-1.84 (m, 4H), 0.93 (t, J=6.5 Hz, 2H)。
【０２９２】
実施例１１８ａ  {２-[５-({５-[(２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル]-４-フルオロ-６-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２，７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-５-イル}フェニル}メチルアセテート（１１８ａ）
0005976828.tif 000086
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた２５ｍＬの一口丸底フラスコに、５-ブロモ-３-(５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン１０４ｅ(１７９ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ)、(４-フルオロ-２-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２，７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-５-イル}-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)フェニル)メチルアセテート１１７ｄ(２００ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(２９ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１７０ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム(６６ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(５ｍＬ)、及び水(１．０ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を２時間加熱還流した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を３０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１１８ａを黄色固形物(１００ｍｇ、３４％)として得た。MS: [M+H]+ 740.3
【０２９３】
実施例１１８  ３-(３-{５-[５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-オキセタン-３-イル-ピペラジン-１-イル)-ピリジン-２-イルアミノ]-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロ-ピリジン-３-イル}-５-フルオロ-２-ヒドロキシメチル-フェニル)-６,７,８,９-テトラヒドロ-３Ｈ-ベンゾ[４,５]チエノ[２,３-ｄ]ピリダジン-４-オン（１１８）
ｉ-プロパノール／ＴＨＦ(１：１、４ｍＬ)及び水(１ｍＬ)中の１１８ａ(１００ｍｇ、０．１３５ｍｍｏｌ)及び水酸化リチウム(３３ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ)の混合物を、３０℃で１時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させた。得られた混合物を酢酸エチル(２Ｘ１０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１１８(３６ｍｇ、３８％)を白色固形物として得た。MS: [M+H]+ 698.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.64 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.05 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.48 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 2.5, 9.0 Hz, 1H), 7.11 (dd, J = 2.5, 8.5 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.79-4.73 (m, 2H), 4.67-4.61 (m, 2H), 4.31 (s, 2H), 3.77 (t, J=7.0 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.21-3.19 (m, 1H), 2.99-2.98 (m, 2H), 2.94-2.91 (m, 1H), 2.88-2.86 (m, 2H), 2.78-2.71 (m, 2H), 2.51-2.49 (m, 1H), 1.99-1.96 (m, 6H), 0.92-0.90 (m, 6H)。
【０２９４】
実施例１１９ａ  ２-ブロモ-４-フルオロ-６-(１０-フルオロ-１-オキソ-３,４,６,７,８,９−ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１１９ａ）
0005976828.tif 000087
【０２９５】
実施例１１９ａ  １０-ブロモ-１Ｈ,２Ｈ,３Ｈ,４Ｈ,６Ｈ,７Ｈ,８Ｈ,９Ｈ-ピラジノ[１,２-ａ]インドール-１-オン（１１９ａ）
２５０ｍＬの三口丸底フラスコに、Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド(１００ｍＬ)中の１Ｈ,２Ｈ,３Ｈ,４Ｈ,６Ｈ,７Ｈ,８Ｈ,９Ｈ-ピラジノ[１,２-ａ]インドール-１-オン１０４ｊ(９．５ｇ、４９．９４ｍｍｏｌ、１．００当量)の溶液を入れ、続いて０℃で、Ｎ-ブロモスクシンイミド(９．８ｇ、５５．０６ｍｍｏｌ、１．１０当量)を数回に分けて添加した。得られた溶液を室温で２時間撹拌し、５００ｍＬの水で希釈した。沈殿物を濾過し、真空オーブンで乾燥させ、９．５ｇ(７１％)の１１９ａを淡褐色固形物として得た。
【０２９６】
実施例１１９ｂ  １０-フルオロ-１Ｈ,２Ｈ,３Ｈ,４Ｈ,６Ｈ,７Ｈ,８Ｈ,９Ｈ-ピラジノ[１,２-ａ]インドール-１-オン（１１９ｂ）
窒素の不活性雰囲気でパージし、維持された２Ｌの四口丸底フラスコに、テトラヒドロフラン(２００ｍＬ)中の１１９ａ(４０ｇ、１４８．６２ｍｍｏｌ、１．００当量)の溶液を入れ、続いてｎ-ＢｕＬｉＬｉ(２．４Ｍ)(２１８ｍＬ、３．５０当量)を−７８℃で撹拌しながら滴下して添加した。得られた溶液を−４０℃で３０時間撹拌した。これに、テトラヒドロフラン(２００ｍＬ)中のＮ-フルオロベンゼンスルホンイミド(９８．７ｇ、３１３．３３ｍｍｏｌ、２．１０当量)の溶液を、−７８℃で撹拌しながら滴下して添加した。得られた溶液を室温で３時間撹拌し、２００ｍＬの水の添加によりクエンチし、３×５００ｍＬの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空下で濃縮した。祖生成物(３０ｇ)を以下の条件で分取ＨＰＬＣにより精製し(移動相Ａ：０．０５％のトリフルオロ酢酸／水；Ｂ：ＣＨ３ＣＮ；勾配：１０％Ｂ−２５％Ｂ)、５．０５ｇ(１６％)の１１９ｂを白色固形物として得た。MS: [M+H]+ 209。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.16 (br, 1H), 3.90-3.86 (m, 2H), 3.65-3.62 (m, 2H), 2.53-2.47 (m, 4H), 1.88-1.80 (m, 2H), 1.77-1.72 (m, 2H)。
【０２９７】
実施例１１９ｃ  ２-ブロモ-４-フルオロ-６-(１０-フルオロ-１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１１９Ｃ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１,４-ジオキサン(６０ｍＬ)、２,６-ジブロモ-４-フルオロベンジルアセテート１０１ｃ(２．３４ｇ、７．２ｍｍｏｌ)、１１９ｂ(５００ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ)、及び炭酸セシウム(１．６ｇ、４．８ｍｍｏｌ)を充填した。３０分、得られた混合物に窒素をバブリング後、キサントホス(１４０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(２２０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ)を加え、反応混合物を１００℃で１２時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却し、濾過した。濾液を酢酸エチル(４０ｍＬ)と水(４０ｍＬ)の間で分配した。水層を分離し、酢酸エチル(３Ｘ７０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をブライン(３０ｍＬ)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を３：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムで精製し、１１９ｃ(６３２ｍｇ、５８％)を黄色固形物として得た。MS: [M+H]+ 453.2
【０２９８】
実施例１１９ｄ  (Ｓ)-４-フルオロ-２-(１０-フルオロ-１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)ベンジルアセテート（１１９ｄ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１１９ｃ(１５０ｍｇ、１．０当量、０．３３ｍｍｏｌ)、(Ｓ)-１-メチル-３-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-５-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ピリジン-２(１Ｈ)-オン１１３ｆ(１６０ｍｇ、１．０当量、０．３３ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(２１０ｍｇ、３．０当量、０．９９ｍｍｏｌ)、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)(２７．０ｇ、０．１０当量、０．０３３ｍｍｏｌ)、ＴＨＦ(２０ｍＬ)、及び水(０．１ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を２時間加熱還流した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を４０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１１９ｄを黄色固形物(９０ｍｇ、３７％)として得た。MS: [M+H]+ 728.3。
【０２９９】
実施例１１９  (Ｓ)-１０-フルオロ-２-(５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１１９）
磁気攪拌器を備えた５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１１９ｄ(９０ｍｇ、１．０当量、０．１２ｍｍｏｌ)、水酸化リチウム(９．０ｍｇ、３．０当量、０．３７ｍｍｏｌ)、ｉ-プロパノール(３ｍＬ)、ＴＨＦ(３ｍＬ)、及び水(２ｍＬ)を充填した。混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、それを濾過し、濃縮した。残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１１９(４２ｍｇ、４９％)を得た。MS: [M+H]+ 686.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.54 (dd, J = 2.0 Hz, 9.0, 1H), 7.94-7.93 (m, 1H), 7.81 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.45-7.44 (m, 1H), 7.31 (dd, J = 3.0, 9.0 Hz, 1H), 7.15-7.14 (m, 1H), 6.94 (dd, J = 2.0, 9.0 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.71-4.61 (m, 4H), 4.53 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.32-4.31 (m, 2H), 4.15-4.08 (m, 3H), 3.89-3.86 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.55-3.43 (m, 2H), 3.07 (m, 2H), 2.57-2.46 (m, 7H), 2.20-2.16 (m, 1H), 1.88-1.76 (m, 4H), 0.98-096 (m, 3H)。
【０３００】
実施例１２０ａ  {２-[５-({５-[(２Ｓ)-２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル]-４-フルオロ-６-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２，７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-５-イル}フェニル}メチルアセテート（１２０ａ）
0005976828.tif 000088
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた２５ｍＬの一口丸底フラスコに、(Ｓ)-５-ブロモ-３-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン１１４ｅ (１７９ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、 (４-フルオロ-２-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２，７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-５-イル}-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)フェニル)メチルアセテート１１７ｅ (２００ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(２９ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１７０ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム(６６ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(５ｍＬ)、及び水(１．０ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を２時間加熱還流した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を３０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２０ａを黄色固形物(１２０ｍｇ、４１％)として得た。MS: [M+H]+ 740.3
【０３０１】
実施例１２０  ３-(３-{５-[５-((Ｓ)-２-エチル-４-オキセタン-３-イル-ピペラジン-１-イル)-ピリジン-２-イルアミノ]-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロ-ピリジン-３-イル}-５-フルオロ-２-ヒドロキシメチル-フェニル)-６,７,８,９-テトラヒドロ-３Ｈ-ベンゾ[４,５]チエノ[２,３-ｄ]ピリダジン-４-オン（１２０）
ｉ-プロパノール／ＴＨＦ(１：１、４ｍＬ)及び水(１ｍＬ)中の１２０ａ(１２０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ)及び水酸化リチウム(３８ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ)の混合物を、３０℃で１時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させた。得られた残留物を酢酸エチル(２Ｘ１０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１２０(７３ｍｇ、６５％)を白色固形物として得た。MS: [M+H]+ 698.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.58 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.94 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.45 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.11 (dd, J =2.5, 8.0 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.72-4.62 (m, 4H), 4.31 (s, 2H), 4.01 (bs, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.53 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.34-3.32 (m, 1H), 3.13 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.99 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.87 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.60-2.56 (m, 1H), 2.46-2.44 (m, 2H), 2.36-2.34 (m, 1H), 2.01-1.96 (m, 4H), 1.71-1.68 (m, 1H), 1.44-1.36 (m, 1H), 0.83 (t, J = 7.5 Hz, 3H)。
【０３０２】
実施例１２１ａ  ４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１２１ａ）
0005976828.tif 000089
ＤＭＳＯ(１００ｍＬ)中の３-(２-クロロシクロヘキサ-１-エニル)アクリル酸エチル(２１．４ｇ、１００ｍｍｏｌ)の溶液に、アジ化ナトリウム(９．７５ｇ、１５０ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を１０５℃で４時間加熱した。室温に冷却後、混合物を氷水に注いだ。得られた沈殿物を濾過により回収し、１２１ａ(１８．０ｇ、９３．３％)を得た。MS-ESI: [M+H]+ 194。
【０３０３】
実施例１２１ｂ  １-(２,２-ジエトキシエチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸エチル（１２１ｂ）
Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)(３０ｍＬ)中のＮａＨ(１．４４ｇ、６０．２ｍｍｏｌ)の懸濁液に、０℃で、１２１ａ(５．８０ｇ、３０．１ｍｍｏｌ)をゆっくりと添加した。得られた混合物を０．５時間室温で撹拌し、続いて２-ブロモ-１,１-ジエトキシエタン(１１．９ｇ、６０．２ｍｍｏｌ)を加えた。反応物を７０℃で３０時間加熱し、水(１００ｍＬ)でクエンチした。次いで、混合物を酢酸エチル(３×１００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機相を減圧下で濃縮し、残留物を４０：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１２１ｂ(４．７ｇ、５１％)を得た。MS-ESI: [M-エタノール+H]+ 264。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 6.65 (s, 1H), 4.59 (t, J =5.0 Hz, 1H), 4.17-4.16 (m, 4H), 3.59-3.57 (m, 2H), 3.27-3.26 (m, 2H), 2.61 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.51 (t, J = 6.0 Hz , 2H), 1.73-1.71 (m, 2H), 1.63-1.61 (m, 2H), 1.25 (t, J = 7.0 Hz, 3 H), 1.02 (t, J = 7.0 Hz, 6H)。
【０３０４】
実施例１２１ｃ  １-(２,２-ジエトキシエチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボン酸（１２１ｃ）
エタノール(２０ｍＬ)、テトラヒドロフラン(２０ｍＬ)、及び水(３０ｍＬ)の混合溶媒中の１２１ｂ(４．７ｇ、１５．２ｍｍｏｌ)の混合物に、水酸化ナトリウム(３．０ｇ、７５．０ｍｍｏｌ)を添加した。反応物を７５℃で２日間加熱し、減圧下で濃縮した。残留物を水に懸濁し、希釈したクエン酸水溶液で中和した。混合物を酢酸エチル(３Ｘ１００ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を減圧下で濃縮し、１２１ｃ(３．３２ｇ、７８％)を得た。MS-ESI: [M-エタノール+H]+ 236。
【０３０５】
実施例１２１ｄ  １-(２,２-ジエトキシエチル)-４,５,６,７-テトラヒドロ-１Ｈ-インドール-２-カルボキサミド（１２１ｄ）
Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド(３０ｍＬ)中の１２１ｃ(２．８ｇ、１０．０ｍｍｏｌ)の混合物に、Ｏ-(７-アザベンゾトリアゾール-１-イル)-Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(ＨＡＴＵ)(５．７ｇ、１５．０ｍｍｏｌ)、トリエチルアミンた(１．５ｇ、１５．０ｍｍｏｌ)及びＤＭＡＰ(１２８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和水酸化アンモニウム(３０ｍＬ)を添加し、得られた混合物をさらに２時間撹拌した。次いで、それを水(１００ｍＬ)で希釈し、酢酸エチル(３Ｘ１００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機相を減圧下で濃縮し、残留物を石油エーテル／酢酸エチル(６：１〜３：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２１ｄ(２．７ｇ、９６％)を得た。MS-ESI: [M-エタノール+H]+ 235。1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 7.35 (bs, 1H), 6.70 (bs, 1H), 6.60 (s, 1H), 4.60 (t, J =5.5 Hz, 1H), 4.18 (d, J =4.0 Hz, 2H), 3.57-3.56 (m, 2H), 3.25 (m, 2H), 2.57 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.40 (t, J = 6.0 Hz , 2H), 1.71 (t, J =5.0 Hz, 2H), 1.64 (t, J =5.0 Hz, 2H), 1.01 (t, J = 7.0 Hz, 6H)。
【０３０６】
実施例１２１ｅ  ６,７,８,９-テトラヒドロイミダゾ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１２１ｅ）
１２１ｄ(２．７ｇ、９．６ｍｍｏｌ)及び酢酸(１０ｍＬ)の混合物を１１０℃で２時間加熱した。混合物を室温に冷却し、炭酸ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチル(３Ｘ３０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機相を減圧下で濃縮し、１２１ｅを黄色固形物(１．６ｇ、８８％)として得た。MS-ESI: [M+H]+ 189.3。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.28 (s, 1H), 7.02 (d, J =5.5 Hz, 1H), 6.63 (s, 1H), , 6.52 (pt, J =5.5 Hz,1H), 2.66 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.57 (t, J = 6.0 Hz , 2H), 1.83-1.82 (m, 2H), 1.73-1.72 (m, 2H)。
【０３０７】
実施例１２１ｆ  ２-ブロモ-４-フルオロ-６-(１-オキソ-６,７,８,９-テトラヒドロピラジノ[１,２-α]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンズアルデヒド（１２１ｆ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１２１ｅ(５００ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ)、２,６-ジブロモ-４-フルオロベンズアルデヒド(１．５０ｇ、５．３２ｍｍｏｌ)、及び酢酸カリウム(５２１ｍｇ、５．３２ｍｍｏｌ)を充填した。３０分、懸濁液にアルゴンをバブリングした後、４,７-ジメトキシ-１,１０-フェナントロリン(６３８．４ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ)及びヨウ化第一銅(５０６ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ)を添加した。システムを真空／アルゴンフラッシュのサイクルに３回かけ、１６時間１００℃で加熱した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。固形物をジクロロメタン(２×１００ｍｌ)で洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮し、残留物を石油エーテル／酢酸エチル(１０：１〜３：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１２１ｆ(５１０ｍｇ、４９％)を黄色固形物として得た。MS: [M+H]+ 389。
【０３０８】
実施例１２１ｇ  ３-(５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-５-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１２１ｇ）
0005976828.tif 000090
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、５-ブロモ-３-(５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン１０４ｅ(３．０ｇ、６．７０ｍｍｏｌ)、Ｐｉｎ２Ｂ２(８４４２ｍｇ、３３．５ｍｍｏｌ)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(３１１ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ)、Ｘ−Ｐｈｏｓ(３１９ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ)、酢酸カリウム(１９７０ｍｇ、２０．１ｍｍｏｌ)、及びジオキサン(５０ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を１６時間６０℃で加熱した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。得られた残留物を８：１の石油エーテル／酢酸エチル(８０ｍＬ)で洗浄し、１２１ｇを黄色固形物(３ｇ、９０％)として得た。MS: [M+H]+ 496.4。
【０３０９】
実施例１２１ｈ  ２-(５-(５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)-ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-６,７,８,９-テトラヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンズアルデヒド（１２１ｈ）
５０ｍＬの丸底フラスコに、１２１ｆ(１９４ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ)、１２１ｇ(３４７．０ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ)、酢酸カリウム(９８．０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)、１,１'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンジクロロパラジウム(ＩＩ)(２０．４ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ)、水(０．５ｍＬ)、及びアセトニトリル(２０ｍＬ)を充填した。システムを真空／アルゴンフラッシュのサイクルに３回かけ、アルゴン雰囲気下で３時間、１００℃で加熱した。ＬＣＭＳによる反応混合物の分析により、出発物質のわずかな残留が示された。反応混合物を室温に冷却し、濾過した。濾液をジクロロメタン(５０ｍＬ)及び水(５０ｍＬ)で希釈した。水層を分離し、ジクロロメタン(３×２０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。暗残留物をジクロロメタン／メタノール(８０／１〜３０／１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２１ｇ(１８２ｍｇ、５４％)を黄色固形物として得た。MS: [M+H]+ 678。
【０３１０】
実施例１２１  ２-(３-(５-(５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-６,７,８,９-テトラヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１２１）
メタノール(１０ｍＬ)中の１２１ｈ(１５０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ)の溶液に、ＮａＢＨ４(４１．８、１．１ｍｍｏｌ)を室温で添加した。反応物を１時間撹拌した後、ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。混合物を水(３０ｍＬ)に注ぎ、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(３Ｘ３０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をブライン(３０ｍＬ)で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留固形物を分取ＨＰＬＣにより精製し、１２１(６０．３ｍｇ、４０％)を白色固形物として得た。MS: [M+H]+ 680。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.63 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.90 (d, J = 3.0 Hz, 1H)，7.41 (m, 2H), 7.31-7.23 (m, 4H), 6.78 (d, J = 1.0 Hz, 2H), 4.80 (m, 1H), 4.55-4.54 (m, 2H), 4.49-4.4.48 (m, 2H), 4.28-4.20 (m, 2H), 3.69-3.64 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.29-3.27 (m, 2H), 2.89-2.88 (m, 1H), 2.75-2.67 (m, 4H), 2.61 (m, 2H), 1.93-1.86 (m, 3H), 1.59 (m, 2H), 0.85-0.81 (m, 6H)。
【０３１１】
実施例１２２ａ  (Ｓ)-３-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-５-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ピリジン-２(１Ｈ)-オン（１２２ａ）
0005976828.tif 000091
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、(Ｓ)-５-ブロモ-３-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン１１４ｅ(３２１９ｍｇ、７．２０ｍｍｏｌ)、Ｐｉｎ２Ｂ２(９０７２ｍｇ、３６．０ｍｍｏｌ)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(３２９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ)、Ｘ−Ｐｈｏｓ(３０２ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ)、酢酸カリウム(２１１７ｍｇ、２１．６ｍｍｏｌ)、及びジオキサン(５０ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を１６時間６０℃で加熱した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を８：１の石油エーテル／酢酸エチル(８０ｍＬ)で洗浄し、１２２ａを黄色固形物(３．０ｇ、８４％)として得た。
【０３１２】
実施例１２２ｂ  (Ｓ)-２-(５-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-６,７,８,９-テトラヒドロイミダゾ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンズアルデヒド（１２２ｂ）
丸底フラスコに、２-ブロモ-４-フルオロ-６-(１-オキソ-６,７,８,９-テトラヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンズアルデヒド１２１ｆ(１５９ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ)、１２２ａ(２１３ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ)、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)(２９ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１８２ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム(７１ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(１５ｍＬ)、及び水(１．５ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を８時間８０℃で加熱した。次いで、それを濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を１：２０のメタノール／ジクロロメタンで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２２ｂを赤色固形物(１２０ｍｇ、４３％)として得た。MS: [M+H]+ 678.3
【０３１３】
実施例１２２  (Ｓ)-２-(３-(５-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-６,７,８,９-テトラヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１２２）
１２２ｂ(１００ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ)、ＮａＢＨ４(２２ｍｇ、０．６０)及びメタノール(１０ｍＬ)の混合物を２５℃で１時間撹拌した。次いで、それを水(５ｍＬ)でクエンチし、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(２Ｘ１０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機層を減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１２２(３２ｍｇ、３１％)を得た。MS: [M+H]+ 680.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.56 (s, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 7.53 (s, 1 H), 7.28-7.26 (m, 2 H), 7.05 (s, 1 H), 6.97-6.93 (m, 2 H), 6.81 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 6.45 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 4.71-4.61 (m, 4 H), 4.38 (d, J = 12.0 Hz, 1 H), 4.36 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 3.70 (s, 3 H), 3.52 (bs, 1 H), 3.31 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 3.13-3.10 (m, 2H), 2.75-2.70 (m, 4H), 2.56-2.43 (m, 4H), 1.98-1.96 (m, 2H), 1.85-1.84 (m, 2H), 1.39-1.36 (m, 2H), 0.82 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。
【０３１４】
実施例１２３ａ  ２-(５-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル) ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１２３ａ）
0005976828.tif 000092
１００ｍＬの一口丸底フラスコに、２-ブロモ-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピロロ[３,４-ｂ]インドリジン-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート１０１ｈ(１２０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）、(Ｓ)-３-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-５-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ピリジン-２(１Ｈ)-オン１２２ａ(１５８．４ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(２４．５ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１１４．５ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム三水和物(７３．４ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ)、水(０．５ｍＬ)、及びアセトニトリル(２０ｍＬ)を充填した。システムを排気し、Ｎ２を再充填した。反応混合物を２時間１００℃で加熱した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を２５：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２３ａ(１０５ｍｇ、５３％)を黄褐色固形物として得た。MS: [M+H]+ 724.3。
【０３１５】
実施例１２３  (Ｓ)-２-(３-(５-(５-(２-エチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-１(２Ｈ)-オン（１２３）
ｉ-プロパノール／ＴＨＦ(１：１、４ｍＬ)及び水(１ｍＬ)中の１２３ａ(１０５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ)及び水酸化リチウム(３６ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ)の混合物を、３０℃で１時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を酢酸エチル(２Ｘ１０ｍＬ)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、１２３(４０ｍｇ、４０％)を淡桃色固形物として得た。MS: [M+H]+ 682.3。1H NMR (500 M, CHCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.29 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.15-7.12 (m, 1H), 6.94 (dd, J = 3.5 Hz, 10.5, 1H), 6.81 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.30 (s, 1H), 4.77-4.74 (m, 4H), 4.72-4.70 (m, 1H), 4.57-4.55 (m, 1H ), 4.29-4.24 (m, 1H), 4.12-4.05 (m, 1H), 3.90-3.78 (m, 4H), 3.70 (s, 3H ), 3.52-3.50 (m, 1H ), 3.32-3.30 (m, 1H ), 3.12-3.10 (m, 2H), 3.04-2.83 (m, 2H), 2.81 (m, 2H), 2.57-2.50 (m, 1H ), 2.43-2.33 (m, 2H), 2.05-2.00 (m, 2H), 1.87-1.85 (m, 2H), 1.49-1.35 (m, 2H), 0.81 (t, J = 8.5 Hz, 3H)。
【０３１６】
実施例１２４ａ  (２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０2,6]ドデカ-２(６),７-ジエン- １０-イル}-４-フルオロ-６-[１-メチル-５-({５-[(２Ｒ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル]フェニル)メチルアセテート（１２４ａ）
0005976828.tif 000093
磁気攪拌器及び還流コンデンサーを備えた丸底フラスコに、(Ｒ)-５-ブロモ-１-メチル-３-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)ピリジン-２(１Ｈ)-オン１１５ｆ(１５２ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ)、(２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０2,6]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-４-フルオロ-６-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)フェニル)メチルアセテート１０３ｇ(２０６ｍｇ、０．４１５ｍｍｏｌ)、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)(２８ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１４７ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム(５７ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(２０ｍＬ)、及び水(２ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を３時間１００℃で加熱した。次いで、それを濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物を１：２０のメタノール／ジクロロメタンで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２４ａを赤色固形物(７０ｍｇ、２８％)として得た。MS: [M+H]+ 724.2
【０３１７】
実施例１２４  ２-(５-フルオロ-２-ヒドロキシメチル-３-{１-メチル-５-[５-((Ｒ)-２-メチル-４-オキセタン-３-イル-ピペラジン-１-イル)-ピリジン-２-イルアミノ]-６-オキソ-１,６-ジヒドロ-ピリジン-３-イル}-フェニル)-７,７-ジメチル-３,４,７,８-テトラヒドロ-２Ｈ，６Ｈ-シクロペンタ[４,５]ピロロ[１,２-ａ]ピラジン-１-オン（１２４）
１２４ａ(５９ｍｇ、０．０８０ｍｍｏｌ)、水酸化リチウム(１９ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ)、ＴＨＦ(１０ｍＬ)、ｉ-プロパノール(８ｍＬ)、及び水(１０ｍＬ)の混合物を、１．５時間室温で撹拌した。次いで、これを減圧下で濃縮し、残留物をジクロロメタン(２Ｘ１０ｍＬ)で抽出した。合わせたジクロロメタン抽出物を減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取ＨＰＬＣで精製し、１２４(４３ｍｇ、７９％)を得た。MS: [M+H]+ 682.3。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.58-8.57 (m, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.84 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.37-7.31 (m, 3H), 7.22 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.19-7.16 (m, 1H), 6.50 (s, 1H), 4.87 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.57-4.53 (m, 2H), 4.46 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.41 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 3.0 Hz, 2H), 4.21-4.18 (m, 2H), 4.15-4.10 (m, 1H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.67 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.41-3.37 (m, 2H), 3.10-3.07 (m, 1H), 2.95-2.91 (m, 1H), 2.56 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 2.41 (s, 2H), 2.32-2.28 (m, 2H), 2.17-2.15 (m,1H), 1.21 (s, 6H), 0.91 (d, J = 6.5 Hz, 3H)
【０３１８】
実施例１２５ａ  ３,３-ジメチル-４-(６-ニトロピリジン-３-イル)ピペラジン-１-カルボン酸tert-ブチル（１２５ａ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、５-ブロモ-２-ニトロピリジン(５．６ｇ、２８．０ｍｍｏｌ)、３,３-ジメチル-ピペラジン-１-カルボン酸tert-ブチル(３．０ｇ、１４．０ｍｍｏｌ)、炭酸セシウム(９．１ｇ、２８ｍｍｏｌ)、及び１,４-ジオキサン(５０ｍＬ)を充填した。３０分、得られた溶液に窒素をバブリングした後、Ｂｉｎａｐ(８７０ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(１．２ｇ、１．４ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を真空／アルゴンフラッシュのサイクルに３回かけ、１２０℃で２４時間撹拌した。この時間後、反応物を室温に冷却し、濾過し、濾液を酢酸エチル(２００ｍＬ)と水(５０ｍＬ)の間で分配した。水層を分離し、酢酸エチル(３×５０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をブライン(５０ｍＬ)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を５：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２５ａ(１．２７ｇ、２７％)を得た。 LCMS: [M+H]+ 337.2。
【０３１９】
実施例１２５ｂ  ４-(６-アミノピリジン-３-イル)-３,３-ジメチルピペラジン-１-カルボン酸tert-ブチル（１２５ｂ）
５０ｍＬの丸底フラスコを窒素でパージし、１２５ａ(１１００ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ)、１０％パラジウム炭素(１０％湿潤、１１０ｍｇ)、及びメタノール(２０ｍＬ)を充填した。次いで、それを排気し、水素ガスを充填し、室温で５時間撹拌した。水素を排気し、窒素をフラスコ中に充填した。触媒をセライトのパッドを通した濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮し、１２５ｂ(９５０ｍｇ、９４％)を得た。LCMS: [M+H]+ 307.3。
【０３２０】
実施例１２５ｃ  ４-(６-(５-ブロモ-１-メチル-２-オキソ-１,２-ジヒドロピリジン-３-イルアミノ)ピリジン-３-イル)-３,３-ジメチルピペラジン-１-カルボン酸tert-ブチル（１２５ｃ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１２５ｂ(９５０ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ)、３,５-ジブロモ-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン(１２４０ｍｇ、４．６ｍｍｏｌ)、１,４-ジオキサン(３０ｍＬ)、及び炭酸セシウム(２０１５ｍｇ、６．２ｍｍｏｌ)を充填した。５分、得られた溶液に窒素をバブリングした後、キサントホス(１７９ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(２８３ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を真空／アルゴンフラッシュのサイクルに３回かけ、１０時間加熱還流した。この時間後、反応物を室温に冷却し、濾過した。濾液を酢酸エチル(５０ｍＬ)と水(１０ｍＬ)の間で分配した。水層を分離し、酢酸エチル(３×２０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をブライン(３０ｍＬ)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を４：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２５ｃ(１．２１ｇ、７９％)を得た。LCMS: [M+H]+ 492.1。
【０３２１】
実施例１２５ｄ  ５-ブロモ-３-(５-(２,２-ジメチルピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（１２５ｄ）
ジクロロメタン(２０ｍＬ)中の１２５ｃ(１．１９ｇ、１．９ｍｍｏｌ)の溶液に、ジエチルエーテル(１５ｍＬ)中の３ＭのＨＣｌを加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。次いで、これを減圧下で濃縮し、１２５ｄ(９００ｍｇ、９５％)を得た。LCMS: [M+H]+ 392.1。
【０３２２】
実施例１２５ｅ  ５-ブロモ-３-(５-(２,２-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチルピリジン-２(１Ｈ)-オン（１２５ｅ）
メタノール(３０ｍＬ) 中の１２５ｄ(９００ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ)、オキセタン-３-オン(４９７ｍｇ、６．９ｍｍｏｌ)、ＮａＢＨ３ＣＮ(４３５ｍｇ、６．９ｍｍｏｌ)及び塩化亜鉛(３１１ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ)の混合物を４時間５０℃で撹拌した。次いで、これを減圧下で濃縮した。水(１０ｍＬ)を残留物に添加し、混合物をＣＨＣｌ３(３Ｘ５０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。残留物を５０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２５ｅ(８００ｍｇ、７８％)を得た。LCMS: [M+H]+ 448.1。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.37-7.34 (m, 1H), 6.96 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.69-4.61 (m, 4H), 3.60 (s, 3H), 3.50-3.14 (m, 3H), 2.43-2.17 (m, 4H), 1.06 (s, 6H)。
【０３２３】
実施例１２５ｆ  ２-(５-(５-(２,２-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１２５ｆ）
0005976828.tif 000094
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１２５ｅ(１９０ｍｇ、１．０当量、０．４２ｍｍｏｌ)、４-フルオロ-２-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-２(１Ｈ)-イル)-６-(４,４,５,５-テトラ-メチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ベンジルアセテート１１５ｍ(４０５ｍｇ、２．０当量、０．８４ｍｍｏｌ)、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)(３３ｍｇ、０．１０当量、０．０４０ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１７８ｍｇ、２．０当量、０．８４ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム(６９ｍｇ、２．０当量、０．８４ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(２０ｍＬ)、及び水(０．１ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を２時間９０℃で加熱した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を５０：１のジクロロメタン／エタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２５ｆ(９０ｍｇ、２９％)を黄色固形物として得た。MS: [M+H]+ 724.3。
【０３２４】
実施例１２５  ２-(３-(５-(５-(２,２-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル)-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピラジノ[１,２-ａ]インドール-１(２Ｈ)-オン（１２５）
磁気攪拌器を備えた５０ｍＬの一口丸底フラスコに、１２５ｆ(８５ｍｇ、１当量、０．１１ｍｍｏｌ)、水酸化リチウム(１４ｍｇ、５当量、０．５５ｍｍｏｌ)、ｉ-プロパノール(３ｍＬ)、ＴＨＦ(３ｍＬ)及び水(２ｍＬ)を充填した。混合物を１時間３０℃で撹拌した。次いで、それを濾過し、残留物を減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製し、１２５(４３ｍｇ、５７％)を得た。MS: [M+H]+ 682.4。1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.94 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.41-7.39 (m, 2H), 7.33-7.31 (m, 1H), 7.23-7.17 (m, 2H), 6.52 (s, 1H), 4.86 (brs, 1H), 4.54 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.42 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.30 (s, 2H), 4.17-4.11 (m, 3H), 3.89-3.86 (m, 1H), 3.58 (m, 3H), 3.39-3.36 (m, 1H), 3.08-2.98 (m, 2H), 2.63-2.56 (m, 2H), 2.46 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.33-2.12 (m, 4H), 1.80-1.67 (m, 4H), 0.96 (s, 6H)。
【０３２５】
実施例１２６ａ  ２-(５-(５-((２Ｓ,５Ｒ)- ２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート（１２６ａ）
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１００ｍＬの一口丸底フラスコに、２-ブロモ-４-フルオロ-６-(１-オキソ-３,４,６,７,８,９−ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-２(１Ｈ)-イル)ベンジルアセテート１０１ｈ(３４７ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ)、３-(５-((２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-１-メチル-５-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ピリジン-２(１Ｈ)-オン１２１ｇ(７９２ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(３２．７ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(３４０．０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム三水和物(２１７．６ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ)、水(０．５ｍＬ)、及びアセトニトリル(５０ｍＬ)を充填した。システムを排気し、Ｎ２を再充填した。反応混合物を２時間１００℃で加熱した。次いで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物を２５：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２６ａ(２００ｍｇ、３４．６％)を黄褐色固形物として得た。MS: [M+H]+ 724.5。
【０３２６】
実施例１２６  ２-[３-[５-[[５-[(２Ｓ,５Ｒ)-２,５-ジメチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]-２-ピリジル]アミノ]-１-メチル-６-オキソ-３-ピリジル]-５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)フェニル]-３,４,６,７,８,９-ヘキサヒドロピリド[３,４-ｂ]インドリジン-１-オン（１２６）
ｉ-プロパノール／ＴＨＦ(５：３、８．０ｍＬ)及び水(２．０ｍＬ)中の１２６ａ(１５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ)及び水酸化リチウム(７２ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ)の混合物を、３０℃で１時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を酢酸エチル(２Ｘ２０ｍＬ)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製して、１２６(４５ｍｇ、３３％)を白色固形物として得た。MS: [M+H]+ 682.9。1H NMR (500 MHz, CHCl3) δ 8.60 (dd, J = 2, 5 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.37-7.35 (m, 1H), 7.14-7.12 (m, 1H), 6.96-6.94 (m, 1H), 6.82-6.80 (m, 1H), 6.31 (s, 1H), 4.77-4.71 (m, 2H), 4.67-4.62 (m, 2H), 4.58-4.55 (m, 1H), 4.41-4.40 (m, 1H), 4.29-4.25 (m, 1H), 4.13-4.09 (m, 1H), 3.91-3.80 (m, 3H), 3.77-3.74 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.18 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 3.06-3.01 (m, 1H), 2.98-2.90 (m, 2H), 2.83 (m, 2H), 2.77-2.70 (m, 2H), 2.47 (m, 1H), 2.06-2.01 (m, 2H), 1.97-1.93 (m, 1H), 1.88-1.87 (m, 2H), 0.91-0.89 (m, 6H)。
【０３２７】
実施例１２７ａ  ２-(ヒドロキシ(ピリジン-２-イル)メチル)アクリル酸メチル（１２７ａ）
0005976828.tif 000096
２５０ｍＬの単一首丸底フラスコに、クロロホルム(１００ｍＬ)、ピコリンアルデヒド(１０．７ｇ、０．１０ｍｏｌ)、アクリル酸メチル(８．６０ｇ、０．１０ｍｏｌ)、及び１,４-ジアザビシクロ[２.２.２]オクタン(０．５６０ｇ、５．００ｍｍｏｌ)を充填した。反応混合物を４８時間室温で撹拌した。この時間後、反応物を減圧下で濃縮し、残留物を３：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２７ａを暗黄色油状物(１１．６ｇ、６０％)として得た。MS-ESI: (M+H)+ 194.2。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.54 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.69-7.66 (m, 1H), 7.42 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.22-7.20 (m, 1H), 6.36 (s, 1H), 5.97 (s, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 3.74 (s, 3H)。
【０３２８】
実施例１２７ｂ  インドリジン-２-カルボン酸メチル（１２７ｂ）
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磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた２５０ｍＬの一口丸底フラスコに、無水酢酸(８０ｍＬ)及び１２７ａ(６．６８ｇ、３４．６ｍｍｏｌ)を充填した。反応混合物を４時間窒素下で加熱還流した。この時間の後、反応物を室温に冷却し、氷の混合物(１００ｇ)及び飽和水性重炭酸ナトリウム溶液(２００ｍＬ)に注ぎ、１時間撹拌した。得られた溶液を飽和水性炭酸水素ナトリウムで中和し、塩化メチレン(３×２００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物を、１０：１の石油エーテル／酢酸エチル(１０：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２７ｂを白色固形物(２．１ｇ、３５％)として得た。MS-ESI: (M+H)+ 176.2。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.86-7.84 (m, 1H), 7.79 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.36-7.34 (m, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.70-6.66 (m, 1H), 6.55-6.51 (m, 1H), 3.88 (s, 3H)。
【０３２９】
実施例１２７ｃ  ５,６,７,８-テトラヒドロインドリジン-２-カルボン酸メチル（１２７ｃ）
0005976828.tif 000098
２５０ｍＬの丸底フラスコを窒素でパージし、１２７ｂ(２．０ｇ、１１．４ｍｍｏｌ)、１０％パラジウム炭素(５０％湿潤、２００ｍｇ)、及びメタノール(５０ｍＬ)を充填した。排気し、水素ガスを充填し、８時間室温で５気圧の水素下で攪拌した。ついで水素を排気し、窒素をフラスコに充填した。触媒をセライトのパッドを通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、１２７ｃを白色固形物(１．１ｇ、８１％)として得た。MS-ESI: [M+H]+ 180.3。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.25 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.09 (s, 1H), 3.93 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 2.67 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.87-1.83 (m, 2H), 1.75-1.70 (m, 2H)。
【０３３０】
実施例１２７ｄ  ３-ホルミル-５,６,７,８-テトラヒドロインドリジン-２-カルボン酸メチル（１２７ｄ）
0005976828.tif 000099
磁気攪拌器を備えた１００ｍＬの丸底フラスコを窒素でパージし、無水ジクロロエタン(２０ｍＬ)及び無水ＤＭＦ(０．７０ｍＬ、９．０ｍｍｏｌ)を充填した。０℃で冷却した混合物に、０〜１０℃の間の反応温度に維持しながら、２分間かけてオキシ塩化リン(０．７０ｍＬ、７．３ｍｍｏｌ)を添加した。冷却浴を除去し、反応物を室温で１時間撹拌した。アセトニトリル(１０ｍＬ)中の５,６,７,８-テトラヒドロインドリジン-２-カルボン酸メチル(１２７ｃ)(１．０ｇ、５．６ｍｍｏｌ)の溶液を加え、反応混合物を室温で３時間撹拌した。この時間の後、それを減圧下で濃縮した。油状の残留物を飽和水性ＮａＨＣＯ３(２０ｍＬ)に溶解させ、酢酸エチル(３×５０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を水(５０ｍＬ)で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で蒸発させた。残留物を１：５の酢酸エチル／石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２７ｄを白色固形物(７０３ｍｇ、５８％)として得た。MS-ESI: (M+H)+ 208.3。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.14 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 4.27 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.78 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.94-1.85 (m, 2H), 1.78-1.69 (m, 2H)。
【０３３１】
実施例１２７ｅ  ６,７,８,９-テトラヒドロピリダジノ[４,５-ｂ]インドリジン-１(２Ｈ)-オン（１２７ｅ）
0005976828.tif 000100
還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、３-ホルミル-５,６,７,８-テトラヒドロインドリジン-２-カルボン酸メチル(１２７ｄ)(６００ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ)及び水酸化ヒドラジニウム(２０ｍＬ)を充填した。反応混合物を１００℃で４時間加熱した。この時間の後、反応物を室温に冷却し、濾過し、１２７ｅを黄色固形物(４１３ｍｇ、７５％)として得た。MS-ESI: (M+H)+ 190.1。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.17 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 6.33 (s, 1H), 4.16 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.88 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.00-1.96 (m, 2H), 1.84-1.79 (m, 2H)。
【０３３２】
実施例１２７ｆ  ２-ブロモ-４-フルオロ-６-(１-オキソ-６,７,８,９-テトラヒドロピリダジノ[４,５-ｂ]インドリジン-２(１Ｈ)-イル)ベンズアルデヒド（１２７ｆ）
0005976828.tif 000101
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの一口丸底フラスコに、１２７ｅ(４５０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ)、２,６-ジブロモ-４-フルオロベンズアルデヒド(２．０ｇ、７．２ｍｍｏｌ)、炭酸セシウム(１．６ｇ、４．８ｍｍｏｌ)、及び１,４-ジオキサン(５０ｍＬ)を充填した。１０分、得られた混合物に窒素をバブリングした後、ヨウ化銅(Ｉ)(４５０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ)及び４,７-ジメトキシ-１,１０-フェナントロリン(５７１ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ)を添加し、反応混合物を９０℃で１２時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却し、濾過した。濾液を塩化メチレン(４０ｍＬ)及び水(４０ｍＬ)の間で分配した。水層を分離し、塩化メチレン(３×３０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をブライン(５０ｍＬ)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を１：２の酢酸エチル／石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２７ｆを褐色固形物(２５１ｍｇ、３１％)として得た。MS-ESI: (M+H)+ 390.0。
【０３３３】
実施例１２７ｇ  ４-フルオロ-２-(１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル)-６-(１-オキソ-６,７,８,９-テトラヒドロピリダジノ[４,５-ｂ]インドリジン-２(１Ｈ)-イル)ベンズアルデヒド（１２７ｇ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬの丸底フラスコに、１２７ｆ(１２５．０  ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ)、１-メチル-３-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-５-(４,４,５,５-テトラ-メチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ピリジン-２(１Ｈ)-オン１１３ｆ(１５５．０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム(５３．０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１３５．７．０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ)、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)(５０．０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(２５ｍＬ)、及び水(１ｍＬ)を充填した。システムを真空／アルゴンフラッシュのサイクルに３回かけ、１００℃で３時間撹拌した。ついで、それを減圧下で蒸発させ、残留物を３０：１の塩化メチレン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２７ｇ化合物(１０８ｍｇ、５１％)を褐色固形物として得た。 MS: [M+H]+ 665.4。
【０３３４】
実施例１２７  ２-[５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-[１-メチル-５-[[５-[(２Ｓ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]-２-ピリジル]アミノ]-６-オキソ-３-ピリジル]フェニル]-６,７,８,９-テトラヒドロピリダジノ[４,５-ｂ]インドリジン-１-オン（１２７）
メタノール(２０ｍＬ)中の１２７ｇ(１００．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ)の溶液をＮａＢＨ４(１７．０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ)に加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、これを水(１ｍＬ)でクエンチし、混合物を減圧下で蒸発させた。残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して  １２７(５６ｍｇ、収率５６％)を白色固形物として得た。MS: [M+H]+ 667.4。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (d, J = 2.0, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.85 (d,  J = 2.5, 1H), 7.39 (d, J = 2.0, 1H), 7.37-7.34 (m, 1H), 7.30-7.28 (m, 1H), 7.25-7.22 (m, 2H), 6.48 (s, 1H), 4.57-4.53 (m, 2H), 4.46 (m, 2H), 4.41 (m, 1H), 4.25 (m, 2H), 4.20 (s, 2H), 3.69-3.64 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.41-3.36 (m, 1H), 3.10-3.07 (m, 1H), 2.96-2.92 (m, 3H), 2.54-2.50 (m, 1H), 2.35-2.28 (m, 2H), 2.18 (m, 1H), 2.04-2.00 (m, 2H), 1.87-1.82 (m, 2H), 0.92 (d, J = 6.0, 3H)。
【０３３５】
実施例１２８ａ  ２-ブロモ-６-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２，６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-４-フルオロベンズアルデヒド（１２８ａ）
0005976828.tif 000102
還流冷却器を備えた１００ｍＬの丸底フラスコに、４,４-ジメチル-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２，６][ドデカ-２(６),７-ジエン-９-オン１０３ｅ(１．０ｇ、４．９０ｍｍｏｌ、１．０当量)、２-ブロモ-６-クロロ-４-フルオロベンズアルデヒド(２．７６ｇ、９．８ｍｍｏｌ、２．０当量)、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(２２４ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、０．０５０当量)、キサントホス(２８３ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ、０．１０当量)、酢酸カリウム(１．４４ｇ、１４．７ｍｍｏｌ、３．０当量)、及び１,４-ジオキサン(５０ｍＬ)を充填した。システムを排気し、Ｎ２を再充填した。反応混合物を５時間８０℃で加熱した。この時間後、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物を８０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムにおいて精製し、１２８ａを黄色固形物(９９２ｍｇ、５０％)として得た。MS: [M+H]+ 405.1。
【０３３６】
実施例１２８ｂ  ２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２，６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-４-フルオロ-６-[１-メチル-５-({５-[(２Ｓ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル]ベンズアルデヒド（１２８ｂ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた５０ｍＬの丸底フラスコに、１２８ａ(３０３ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ)、１-メチル-３-({５-[(２Ｓ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-５-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサ-ボロラン-２-イル)-１,２-ジヒドロピリジン-２-オン１１３ｆ(３８５ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(６８．６ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ)、酢酸カリウム(１４７ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(３２７ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(１５ｍＬ)、及び水(６滴)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を２時間１００℃で加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却した。ついで濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物を１５：１の酢酸エチル／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１２８ｂ(３８２ｍｇ、７７％)を黒色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 680.3。
【０３３７】
実施例１２８  ２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-４-フルオロ-６-[１-メチル-５-[[５-[(２Ｓ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]-２-ピリジル]アミノ]-６-オキソ-３-ピリジル]安息香酸（１２８）
１２８ｂ(１９０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ)、tert-ブチルアルコール(７ｍＬ)、及びジクロロメタン(０．５ｍＬ)の混合物に、２-メチル-２-ブテン(９．０ｍＬ、１０７ｍｍｏｌ)を添加した。ＮａＣｌＯ２(５３ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ)水溶液(２ｍＬ)及びＮａＨ２ＰＯ４・２水(１３５．７ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ)を−１０℃で滴下して加えた。混合物を−１０℃で１時間撹拌した。ついで水(２０ｍＬ)で処理し、酢酸エチル(４Ｘ５０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。残留物を逆相分取ＨＰＬＣで精製し、１２８(３３ｍｇ、１７％)を淡黄色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 696.2。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 13.19-13.17 (m, 1H ), 8.60 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.86 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.37-7.35 (m, 2H), 7.24-.7.22 (m, 3H), 6.46 (s, 1H), 4.57-4.54 (m, 2H), 4.48-4.47 (m, 1H), 4.42-4.41 (m, 1H), 4.10-4.09 (m, 2H), 3.95-3.92 (m, 1H), 3.68-3.67 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.42-3.39 (m, 2H), 3.09-3.07 (m, 1H), 2.96-2.94 (m, 1H), 2.92 (s, 3H), 2.41-2.40 (m, 2H), 2.35-2.31 (m, 2H), 2.20-2.17 (m, 1H), 1.21-1.20 (m, 6H), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H)。
【０３３８】
実施例１２９ａ  ２-ブロモ-６-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２，６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-４-フルオロ安息香酸（１２９ａ）
0005976828.tif 000103
２-ブロモ-６-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０2,6]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-４-フルオロベンズアルデヒド１２８ａ(８１０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ)、tert-ブチルアルコール(５０ｍＬ)、及びジクロロメタン(３ｍＬ)の混合物に、２-メチル-２-ブテン(２２ｍＬ、２６２ｍｍｏｌ)を添加した。ＮａＣｌＯ２(１．８ｇ、２０．０ｍｍｏｌ)水溶液(２０ｍＬ)及びＮａＨ２ＰＯ４・二水和物(２．２ｇ、１４．０ｍｍｏｌ)を０℃で滴下して加えた。混合物を０℃で１時間撹拌した。ついで水(３０ｍＬ)で処理し、酢酸エチル(４×９０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、１２９ａ(９３０ｍｇ、８４％)を黄色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 421.1
【０３３９】
実施例１２９ｂ  ２-ブロモ-６-{４,４-ジメチル-９-オキソ-１,１０-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２，６]ドデカ-２(６),７-ジエン-１０-イル}-４-フルオロ-Ｎ-メチルベンズアミド（１２９ｂ）
磁気攪拌器を備えた２５ｍＬの一口丸底フラスコに、ＤＭＦ(８ｍＬ)、１２９ａ(１６０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ)、ＨＡＴＵ(５０５ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ)、ＤＭＡＰ(４６ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ)、及びトリエチルアミン(１．０ｍＬ)を充填した。混合物を２５℃で０．５時間加熱した。ついで、ＭｅＮＨ２・ＨＣｌ(２６６ｍｇ、３．８ｍｍｏｌ)を加え、得られた混合物を２５℃で２．５時間撹拌した。この時間後、反応物を室温まで冷却した。次いで、それを濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物を１：２０のメタノール／ジクロロメタンで展開する分取ＴＬＣにより精製し、１２９ｂ(１１６ｍｇ、７０％)を黒色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 434.0
【０３４０】
実施例１２９  ２-(７,７-ジメチル-４-オキソ-１,２,６,８-テトラヒドロシクロペンタ[３,４]ピロロ[３,５-ｂ]ピラジン-３-イル)-４-フルオロ-Ｎ-メチル-６-[１-メチル-５-[[５-[(２Ｓ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]-２-ピリジル]アミノ]-６-オキソ-３-ピリジル]ベンズアミド（１２９）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた２５ｍＬの一口丸底フラスコに、１２９ｂ(１１６ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ)、１-メチル-３-({５-[(２Ｓ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-５-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)-１,２-ジヒドロピリジン-２-オン１１３ｆ(２６０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(２６ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ)、酢酸カリウム(５３ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１１７ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ)、アセトニトリル(５ｍＬ)、及び水(０．５０ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を２時間加熱還流した。この時間後、反応物を室温に冷却した。ついで濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物を逆相分取ＨＰＬＣにより精製し、１２９(８０ｍｇ、４２％)を淡黄色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 709.5。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.69 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.11 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.38-7.36 (m, 1H), 7.32-7.30 (m, 2H), 7.28-7.26 (m, 1H), 7.23-7.21(m, 1H), 6.47 (s, 1H), 4.58-4.54 (m, 2H), 4.48-4.46 (m, 1H), 4.43-4.41 (m, 1H), 4.05-3.91 (m, 4H), 3.67-3.66 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.41-3.38 (m, 1H), 3.10-3.08 (m, 1H), 2.97-2.94 (m, 1H), 2.55-2.54 (m, 3H), 2.48-2.47 (m, 3H), 2.40-2.39 (m, 2H), 2.36-2.28 (m, 2H), 2.22-2.19 (m, 1H), 1.21-1.20 (m, 6H), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H)。
【０３４１】
実施例１３０ａ  ２-ブロモ-６-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０  ２，７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-５-イル}ベンズアルデヒド（１３０ａ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた２５ｍＬの一口丸底フラスコに、１,４-ジオキサン(２０ｍＬ)、８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２，７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-６-オン１１７ｃ(６１８ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ)、２,６-ジブロモベンズアルデヒド(１９８０ｍｇ、７．５ｍｍｏｌ)、ＣｕＢｒ(２１５ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ)、サルコシン(２６７ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ)、及びＫ２ＣＯ３(８２８ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を１６時間１００℃で加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却した。ついで濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物を３０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１３０ａ(７０２ｍｇ、６０％)を黄色固形物として得た。MS：[M+H]+ 389.0
【０３４２】
実施例１３０ｂ  ２-[１-メチル-５-({５-[(２Ｓ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-６-オキソピリジン-３-イル]-６-{６-オキソ-８-チア-４,５-ジアザトリシクロ[７.４.０.０２，７]トリデカ-１(９),２(７),３-トリエン-５-イル}ベンズアルデヒド（１３０ｂ）
0005976828.tif 000104
磁気攪拌器を備えた密封チューブに、１３０ａ(１６０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、(Ｓ)-１-メチル-５-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イルボロン酸１１３ｆ (１６０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(３２ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ)、酢酸ナトリウム(６６ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４(１７０ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ)、及びアセトニトリル(６ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を２時間１００℃で加熱した。ついで濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残留物を３０：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１３０ｂ(１２３ｍｇ、４６％)を黄色固形物として得た。LCMS: [M+H]+ 664.3
【０３４３】
実施例１３０  ３-[２-(ヒドロキシメチル)-３-[１-メチル-５-[[５-[(２Ｓ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]-２-ピリジル]アミノ]-６-オキソ-３-ピリジル]フェニル]-６,７,８,９-テトラヒドロベンゾチオフェン[２,３-ｄ]ピリダジン-４-オン（１３０）
０℃で、メタノール(５ｍＬ)中の１３０ｂ(１２０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ)の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(２０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ)を加えた。反応物を３０分間撹拌した。次いで、これを水(１ｍＬ)でクエンチし、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製し、１３０(７０ｍｇ、５９％)を得た。LCMS: [M+H]+ 666.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.56-7.54 (m, 2H), 7.42 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 2.0, 7.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.72-4.66 (m, 4H), 4.36 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 4.05 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.55-3.54 (m, 1H), 3.46-3.45 (m, 1H), 3.08-3.06 (m, 2H), 2.99 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.87 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.60-2.59 (m, 1H), 2.49-2.48 (m, 2H), 2.20-2.19 (m, 1H), 2.02-1.96 (m, 4H), 0.99 (d, J = 6.0 Hz, 3H)。
【０３４４】
実施例１３１ａ  ３,３-ジメチルシクロペンタノン（１３１ａ）
０℃に冷却した無水エチルエーテル(５００ｍＬ)中のＣｕＩ(８１．０ｇ、４２０ｍｍｏｌ)の懸濁液に、３０分かけて、エチルエーテル(４３０ｍＬ、８６０ｍｍｏｌ、２．０Ｍ）中のでメチルリチウムの溶液を添加した。図１５を参照。混合物を０℃で２時間攪拌した。上記混合物に０℃で１時間かけて３-メチルシクロペンタ-２-エノン(３３．６ｇ、３５０ｍｍｏｌ)を滴下して添加した。得られた混合物を０℃でさらに２時間で撹拌した。次いで、それを飽和ＮＨ４Ｃｌ(３００ｍＬ)でクエンチし、濾過した。濾液をエチルエーテル(２Ｘ２００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を無水Ｍｇ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で蒸発させ、１３１ａを無色油状物(２８ｇ、７１％)として得た。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 2.31 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 2.05 (s, 2H) , 1.79 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.12 (s, 6H)。
【０３４５】
実施例１３１ｂ  ２-クロロ-４,４-ジメチルシクロ-ペンタ-１-エンカルバルデヒド（１３１ｂ）
０℃に冷却したジクロロメタン(３００ｍＬ)中のＤＭＦ(１８．３ｇ、２５０ｍｍｏｌ)の溶液に、１０分かけて、ＰＯＣｌ３(４０．５ｇ、２５０ｍｍｏｌ)を添加した。図１５を参照。混合物を２０℃で１時間撹拌した。上記混合物に１３１ａ(２８．０ｇ、２５０ｍｍｏｌ)を２０分間かけて滴下して添加した。得られた混合物を２０時間加熱還流した。反応混合物を室温に冷却し、氷−水(４００ｇ)中の酢酸ナトリウム(６０ｍｌ)の溶液に注いだ。混合物をジクロロメタン(２Ｘ３００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を水(２Ｘ２００ｍＬ)で洗浄し、無水Ｍｇ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で蒸発させ、１３１ｂを無色油状物(３３．０ｇ、粗)として得た。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.99 (s, 1H), 2.62 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 2.38 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 1.15 (s, 6H)。
【０３４６】
実施例１３１ｃ  ５,５-ジメチル-５,６-ジヒドロ-４Ｈ-シクロペンタ[ｂ]チオフェン-２-カルボン酸エチル（１３１ｃ）
ジクロロメタン(４００ｍＬ)及びトリエチルアミン(６０ｇ、６００ｍｍｏｌ) 中の１３１ｂ (３３．０ｇ、粗)の溶液に２-メルカプト酢酸エチル(１９．２ｇ、１６０ｍｍｏｌ)を添加した。図１５を参照。反応混合物を６時間加熱還流した。次いで、これを減圧下で濃縮した。残留物をエタノール(４００ｍＬ)及びトリエチルアミン(６０ｇ、６００ｍｍｏｌ)に溶解した。混合物を１２時間加熱還流した。再び減圧下で濃縮し、残留物を４０：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１３１ｃを黄色固形物(１８．０ｇ、３２％、２工程にわたる)として得た。MS-ESI: [M+H]+ 225.3。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.49 (s, 1H), 4.32 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.72 (s, 2H), 2.56 (s, 2H), 1.35 (t, J = 7.0 Hz, 3H),1.22 (s, 6H)。
【０３４７】
実施例１３１ｄ  ５,５-ジメチル-５,６-ジヒドロ-４Ｈ-シクロペンタ[ｂ]チオフェン-２-カルボン酸（１３１ｄ）
プロパン-２-オール(２００ｍＬ)、テトラヒドロフラン(２００ｍＬ)、及び水(２００ｍＬ)の１３１ｃ(１６．０ｇ、７１．０ｍｍｏｌ)の溶液に、水酸化リチウム(６．８２ｇ、２８４ｍｍｏｌ)を添加した。図１５を参照。反応混合物を６５℃で５時間加熱した。有機溶媒を減圧下で除去した。残留物のｐＨを塩酸(１２ｍ）で１．０に調整した。沈殿物を濾過によって回収し、真空中で乾燥させ、１３１ｄ(１２．０ｇ、８６％)を白色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 196.9
【０３４８】
実施例１３１ｅ  Ｎ-tert-ブチル-５,５-ジメチル-５,６-ジヒドロ-４Ｈ-シクロペンタ[ｂ]チオフェン-２-カルボキサミド（１３１ｅ）
ＳＯＣｌ２(８０ｍＬ)中の１３１ｄ(１２．０ｇ、６１．０ｍｍｏｌ)の懸濁液を、６５℃で２時間加熱した。反応混合物を減圧下で濃縮した。図１５を参照。残留物をジクロロメタン(２０ｍＬ)で希釈し、ジクロロメタン(１８０ｍＬ)中の２-メチルプロパン-２-アミン(４．４５ｇ、６１．０ｍｍｏｌ)及びトリエチルアミン(１８．０ｇ、１８０ｍｍｏｌ)の溶液に添加した。得られた混合物を１６時間撹拌し、ジクロロメタン(２００ｍＬ)で希釈した。それを水(３Ｘ５０ｍＬ)で洗浄し、無水Ｍｇ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させ、１３１ｅ(１５．０ｇ、９７％)を黄色固形物として得た。MS-ESI: [M+H]+ 252.0
【０３４９】
実施例１３１ｆ  Ｎ-tert-ブチル-３-ホルミル-５,５-ジメチル-５,６-ジヒドロ-４Ｈ-シクロペンタ[ｂ]チオフェン-２-カルボキサミド（１３１ｆ）
−７０℃に冷却した無水ＴＨＦ(６０ｍＬ)中の１３１ｅ(１．５ｇ、６．０ｍｍｏｌ)の溶液に、５分かけて、ｎ-ブチルリチウム(１０．０ｍＬ、２５ｍｍｏｌ、ヘキサン中に２．５Ｍ)の溶液を添加した。図１５を参照。それを−７０℃で６時間で撹拌した。ＤＭＦ(１．３ｇ、１８．０ｍｍｏｌ)を５分かけて加え、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、それを飽和ＮＨ４Ｃｌ(４０ｍＬ)でクエンチし、減圧下で濃縮した。残留物を酢酸エチル(２Ｘ３０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を無水Ｍｇ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で蒸発させ、１３１ｆを黄色固形物(１．３４ｇ、８０％)として得た。MS-ESI: [M+H]+ 280.3
【０３５０】
実施例１３１ｇ  Ｎ-tert-ブチル-３-(ヒドラゾノメチル)-５,５-ジメチル-５,６-ジヒドロ-４Ｈ-シクロペンタ[ｂ]チオフェン-２-カルボキサミド（１３１ｇ）
ＴＨＦ(１８０ｍＬ)中の８５％水性ヒドラジン(１０ｍＬ)の溶液に、無水ＴＨＦ(２０ｍＬ)中の１３１ｆ(５．６ｇ、２０．０ｍｍｏｌ)を添加した。図１５を参照。それを２０℃で３時間攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、１３１ｇを黒色固形物(６．０ｇ、収率：９５％、純度：９５％)として得た。MS-ESI: [M+H]+ 294.0
【０３５１】
実施例１３１ｈ  ４,４-ジメチル-７-チア-１０,１１-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２，６]ドデカ-１(８),２(６),１１-トリエン-９-オン（１３１ｈ）
３０％のＨ２ＳＯ４(１００ｍＬ) 中の１３１ｇ(３．８ｇ、１３．０ｍｍｏｌ)の溶液を、１６時間加熱還流した。図１５を参照。反応混合物を室温まで冷却し、ジクロロメタン(３×２００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を１００：１のジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１３１ｈを黄色固形物(１．７２ｇ、６０％)として得た。MS-ESI: [M+H]+ 221.0
【０３５２】
実施例１３１ｉ  ２-ブロモ-６-{４,４-ジメチル-９-オキソ-７-チア-１０,１１-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２，６]ドデカ-１(８),２(６),１１-トリエン-１０-イル}-４-フルオロベンズアルデヒド（１３１ｉ）
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた１００ｍＬ丸底フラスコに、１３１ｈ(３３０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ)、２,６-ジブロモ-４-フルオロベンズアルデヒド(１．２６ｇ、４．５ｍｍｏｌ)、ＣｕＢｒ(１１３ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ)、サルコシン(１４２ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ)、Ｋ２ＣＯ３(４２０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ)、及びジオキサン(２０ｍＬ)を充填した。図１５を参照。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を１５時間９５℃で加熱した。ついで、それを室温まで冷却し、濾過した。濾液を減圧下で蒸発させ、得られた残留物を５：１の石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１３１ｉを白色固形物(３８０ｍｇ、６０％)として得た。MS-ESI: [M+H]+ 420.6
【０３５３】
実施例１３１ｊ  ２-{４,４-ジメチル-９-オキソ-７-チア-１０,１１-ジアザトリシクロ[６.４.０.０２，６]ドデカ-１(８),２(６),１１-トリエン-１０-イル}-４-フルオロ-６-[１-メチル-５-({５-[(２Ｓ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]ピリジン-２-イル}アミノ)-６-オキソ-１,６-ジヒドロピリジン-３-イル]ベンズアルデヒド（１３１ｊ）
0005976828.tif 000105
磁気攪拌器及び還流冷却器を備えた５０ｍＬの丸底フラスコに、１３１ｉ(４２１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ)、(Ｓ)-１-メチル-３-(５-(２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル)ピリジン-２-イルアミノ)-５-(４,４,５,５-テトラメチル-１,３,２-ジオキサボロラン-２-イル)ピリジン-２(１Ｈ)-オン１１３ｆ(５８０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２(５９ｍｇ、０．０８０ｍｍｏｌ)、Ｋ３ＰＯ４・三水和物(３６０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ)、水（６滴）、及びテトラヒドロフラン(２０ｍＬ)を充填した。３回の真空／アルゴンフラッシュのサイクル後、混合物を６時間加熱還流した。ついで、それを室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物を１：１の石油エーテル／酢酸エチル（２０ｍＬ）で洗浄し、１３１ｊを白色固形物(５５６ｍｇ、８０％)として得た。MS-ESI: [M+H]+ 696.3
【０３５４】
実施例１３１  ３-[５-フルオロ-２-(ヒドロキシメチル)-３-[１-メチル-５-[[５-[(２Ｓ)-２-メチル-４-(オキセタン-３-イル)ピペラジン-１-イル]-２-ピリジル]アミノ]-６-オキソ-３-ピリジル]フェニル]-７,７-ジメチル-６,８-ジヒドロシクロペンタ[３,４]チエノ[１,３-ｄ]ピリダジン-４-オン（１３１）
メタノール(１０ｍＬ)中の１３１ｊ(５２０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ)の溶液に、２０℃で水素化ホウ素ナトリウム(１１０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を３０分間撹拌し、水(３ｍＬ)でクエンチした。次いで、それを減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣで精製し、１３１(３４０ｍｇ、６５％)を得た。MS-ESI: [M+H]+ 698.3。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.85 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.40-7.30 (m, 4H), 7.23 (d, J = 9.0 Hz,1H), 4.60 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.57-4.53 (m, 2H), 4.46 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.41 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.30-4.29 (m, 2H), 3.68-3.65 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.40-3.38 (m, 1H), 3.10-3.07 (m, 1H), 2.95-2.94 (m, 1H), 2.91-2.89 (m, 2H), 2.80-2.78 (m, 2H), 2.54-2.52 (m, 1H), 2.34-2.30 (m, 2H), 2.20-2.16 (m, 1H),1.27 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H)。
【０３５５】
実施例９０１  生化学的Ｂｔｋアッセイ  
式Ｉの化合物を試験するために使用することができる標準的な生化学的Ｂｔｋキナーゼアッセイのための一般的な手順は以下の通りである。１×の細胞シグナル伝達キナーゼ緩衝液（２５ｍＭのトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５、５ｍＭのβ−グリセロリン酸、２ｍＭのジチオスレイトール、０．１ｍＭのＮａ３ＶＯ４、１０ｍＭのＭｇＣｌ２）、０．５μＭのプロメガＰＴＫビオチン化ペプチド基質２、及び０．０１％のＢＳＡを含有するマスターミックスマイナスＢｔｋの酵素を調製する。１×の細胞シグナル伝達キナーゼ緩衝液、０．５μＭのＰＴＫビオチン化ペプチド基質２、０．０１％のＢＳＡ、及び１００ｎｇ／ウェル(０．０６ｍＵ／ウェル)のＢｔｋ酵素を含有するマスターミックスマイナスＢｔｋの酵素を調製する。Ｂｔｋ酵素を以下のように調製する：Ｃ末端にＶ５と６ｘＨｉｓタグを有する全長ヒト野生型Ｂｔｋ（受託番号ＮＭ−００００６１）を、このエピトープタグのＢｔｋを担持するバキュロウイルスを作製するためにｐＦａｓｔＢａｃベクターにサブクローニングした。バキュロウイルスの作製は、公表プロトコル「Bac-to-Bacバキュロウイルス発現系」（カタログ番号１０３５９−０１６及び１０６０８−０１６）で詳述されているInvitrogenの指示書に基づいて実施する。第３継代のウイルスを使用してＳｆ９細胞に感染させ、組換えＢｔｋタンパク質を過剰発現させる。ついで、Ｂｔｋタンパク質をＮｉ-ＮＴＡカラムを用いて均質になるまで精製する。最終タンパク質調製物の純度は、高感度Ｓｙｐｒｏ−Ｒｕｂｙ染色に基づき９５％を上回る。２００μＭのＡＴＰの溶液を水中で調製し、１ＮのＮａＯＨでｐＨ７．４に調整する。５％ＤＭＳＯ中１．２５μＬの量の化合物を９６ウェル１／２面積Ｃｏｓｔａｒポリスチレンプレートに移す。化合物を個別に、１１点の用量−応答曲線で試験する（出発濃度は１０μＭ；１：２希釈である）。１８．７５μＬ量のマスターミックスマイナス酵素（陰性対照として）及びマスターミックスプラス酵素を９６ウェル１／２面積Ｃｏｓｔａｒポリスチレンプレート中の適切なウェルに移す。２００μＭのＡＴＰ５μＬを９６ウェル１／２面積Ｃｏｓｔａｒポリスチレンプレート中の前記混合物に添加し、最終ＡＴＰ濃度を４０μＭにする。反応物を室温で１時間インキュベートする。反応を、３０ｍＭのＥＤＴＡ、２０ｎＭのＳＡ−ＡＰＣ、及び１ｎＭのＰＴ６６Ａｂ含むパーキンエルマ-１Ｘ検出バッファーで停止させる。プレートは励起フィルター３３０ｎｍ、発光フィルター６６５ｎｍ、第２発光フィルター６１５ｎｍを使用する、パーキンエルマーエンビジョンを用い、時間分解蛍光を使用して読み込まれる。続いてＩＣ５０値を計算される。あるいは、ランタスクリーン（Lanthascreen）アッセイを、そのリン酸化ペプチド生成物の定量を介してＢｔｋ活性を評価するために使用することができる。ペプチド生成物上のフルオレセインと検出抗体上のテルビウムとの間に生じるＦＲＥＴ(蛍光共鳴エネルギー移動)は、ペプチドのリン酸化を減少させるＢｔｋの阻害剤の添加と共に減少する。２５μＬの最終反応容量中、Ｂｔｋ(ｈ)（０．１ｎｇ／２５μｌの反応）を５０ｍＭのヘペスｐＨ７．５、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、２ｍＭのＭｎＣｌ２、２ｍＭのＤＴＴ、０．２ｍ���のＮａＶＯ４、０．０１％のＢＳＡ、及び０．４μＭのフルオレセインポリＧＡＴと共にインキュベートする。反応は、ＡＴＰを２５μＭ(ＡＴＰのＫｍ)まで添加することによって開始する。室温で６０分間インキュベートした後、室温で３０分間、６０ｍＭのＥＤＴＡ中に、最終濃度２ｎＭのＴｂ−ＰＹ２０検出抗体を添加することにより、反応を停止させる。検出は、４９５ｎｍ及び５２０ｎｍ発光、３４０ｎＭ励起のパーキンエルマーエンビジョンで決定される。例示的なＢｔｋ阻害のＩＣ５０値を、表１、２、及び３に示す。
【０３５６】
実施例９０２  ラモス細胞Ｂｔｋのアッセイ  
式Ｉの化合物を試験するために使用することができる標準的な細胞性Ｂｔｋキナーゼアッセイのための別の一般的な手順は、以下の通りである。ラモス細胞を０．５×１０７細胞／ｍｌの密度で、３７℃で１時間、試験化合物の存在下でインキュベートする。次に、細胞を１０μｇ／ｍＬの抗ヒトＩｇＭ Ｆ(ａｂ)２と共に、３７℃で５分間インキュベートすることによって刺激する。細胞をペレット化し、溶解し、タンパク質アッセイを透明溶解物で実施する。等タンパク質量の各サンプルをＳＤＳ−ＰＡＧＥ及びウエスタンブロッティングに供し、抗ホスホＢｔｋ(Ｔｙｒ２２３)抗体(BD Transduction Labs#3531；Epitomics, cat.#2207-1）又はホスホＢｔｋ(Ｔｙｒ５５１)抗体(BD Transduction Labs#558034）のいずれかを使用し、Ｂｔｋ自己リン酸化を評価するか、又は抗Ｂｔｋ抗体(BD Transduction Labs#611116）を使用して各溶解物中のＢｔｋの総量を制御する。
【０３５７】
実施例９０３  Ｂ細胞増殖アッセイ
式Ｉの化合物を試験するために使用することができる標準的な細胞性Ｂ細胞増殖アッセイのための一般的な手順は、以下の通りである。Ｂ細胞単離キット(Miltenyi Biotech, Cat#130-090-862)を用い、８−１６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓からＢ細胞を精製する。試験化合物を０．２５％のＤＭＳＯで希釈し、最終容量１００μｌで、抗マウスＩｇＭ抗体(Southern Biotechnology Associates Cat # 1022-01) １０μｇ／ｍｌを添加する３０分前に、２．５×１０５の精製されたマウス脾臓Ｂ細胞と共にインキュベートする。２４時間のインキュベーションの後、１μＣｉ３Ｈ-チミジンを添加し、ＳＰＡ[３Ｈ]チミジン取り込みアッセイシステム(Amersham Biosciences # RPNQ 0130)についての製造者のプロトコルを使用し、回収前にさらに３６時間プレートをインキュベートする。ＳＰＡ−ビーズに基づく蛍光をマイクロベータカウンター(Wallace Triplex 1450, Perkin Elmer)で計測する。
【０３５８】
実施例９０４  Ｔ細胞増殖アッセイ
式Ｉの化合物を試験するために使用することができる標準的なＴ細胞増殖アッセイのための一般的な手順は、以下の通りである。Ｔ細胞を、汎Ｔ細胞単離キット(Miltenyi Biotech, Cat # 130-090-861)を用い、８−１６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製する。試験化合物を０．２５％のＤＭＳＯで希釈し、３７℃で９０分、それぞれ１０μｇ／ｍｌの抗ＣＤ３（BD#553057）及び抗ＣＤ２８（BD#553294）抗体でプレコートされた透明平底プレートにおいて、１００μｌの最終容量で、２．５×１０５の精製されたマウス脾臓Ｔ細胞と共にインキュベートする。２４時間のインキュベーションの後、１μＣｉ３Ｈ-チミジンを添加し、ＳＰＡ[３Ｈ]チミジン取り込みアッセイシステム(Amersham Biosciences # RPNQ 0130)についての製造者のプロトコルを使用し、収穫前にさらに３６時間プレートをインキュベートする。ＳＰＡ−ビーズに基づく蛍光をマイクロベータカウンター(Wallace Triplex 1450, Perkin Elmer)で計測する。
【０３５９】
実施例９０５  ＣＤ８６阻害アッセイ  
式Ｉの化合物を試験するために使用することができるＢ細胞活性の阻害についての標準的アッセイのための一般的な手順は、以下の通りである。総マウス脾細胞を、赤血球溶解により、８〜１６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓から精製する(BD Pharmingen #555899)。試験化合物を０．５％のＤＭＳＯに希釈し、３７℃で６０分、透明平底プレート（Falcon353072）において、２００μｌの最終容量で、１．２５×１０６の脾細胞と共にインキュベートする。ついで、１５μｇ／ｍＬのＩｇＭ抗体 (Jackson ImmunoResearch 115-006-020) を添加して細胞を刺激し、３７℃で２４時間、５％のＣＯ２でインキュベートする。２４時間のインキュベートの後、、細胞を円錐底の透明な９６ウェルプレートに移し、１２００ｘｇｘ５分間の遠心分離によってペレット化する。細胞をＣＤ１６／ＣＤ３２(BD Pharmingen #553142)、続いてＣＤ１９−ＦＩＴＣ (BD Pharmingen #553785)、ＣＤ８６−ＰＥ (BD Pharmingen #553692)、及び７ＡＡＤ (BD Pharmingen #5１-68981E)でトリプル染色する。細胞を、ＢＤ ＦＡＣＳキャリバーでソートし、ＣＤ１９+／７ＡＡＤ−集団においてゲートする。ゲート化集団におけるＣＤ８６表面発現のレベルを試験化合物濃度に対して測定する。
【０３６０】
実施例９０６  Ｂ−ＡＬＬ細胞の生存アッセイ
以下は、生存細胞の数を測定するためにＸＴＴ読み出しを用いた標準的なＢ−ＡＬＬ(急性リンパ芽球性白血病)細胞生存研究のための手順である。このアッセイは、培養中のＢ−ＡＬＬ細胞の生存を阻害する、式Ｉの化合物の能力について試験するために使用することができる。使用することができるヒトＢ細胞急性リンパ芽球性白血病株は、ＡＴＣＣから入手可能であるＳＵＰ−Ｂ１５、ヒトプレ−Ｂ細胞ＡＬＬ系である。
【０３６１】
ＳＵＰ−Ｂ１５プレ−Ｂ−ＡＬＬ細胞を、１００μｌのイスコフ培地＋２０％のＦＢＳにおいて、５×１０５細胞／ｍｌの濃度で、複数の９６-ウェルマイクロタイタープレートに播種する。ついで試験化合物を、０．４％のＤＭＳＯの最終濃度で追加する。細胞を、３７℃、５％のＣＯ２で最大３日間インキュベートする。３日後、細胞を、試験化合物を含有する新しい９６ウェルプレートに１：３に分割し、さらに３日間まで成長させる。各２４時間の期間の後、ＸＴＴ溶液５０ｕｌを複製９６ウェルプレートの一方に添加し、吸光度の読み取りを、製造業者の指示に従って２、４及び２０時間で採取する。ついで、直線範囲内(０．５−１．５)のアッセイでは、ＤＭＳＯのみで処理した細胞についてのＯＤを用いた読み取りを行い、また化合物で処理されたウェルにおける生細胞のパーセンテージをＤＭＳＯのみで処理した細胞に対して測定する。
【０３６２】
実施例９０７  ＣＤ６９全血アッセイ
ヒト血液を次の制限：１週間薬物を非摂取、非喫煙者：を満たす健康な志願者から得る。血液(８の化合物を試験するために、約２０ｍｌ)を、ヘパリンナトリウムを用い、バキュテナー(登録商標)(Becton, Dickinson and Co.)チューブに静脈穿刺によって収集する。
【０３６３】
ＤＭＳＯ中に１０ｍＭの式Ｉの化合物の溶液を、１００％ＤＭＳＯで１：１０に希釈し、次いで、１０点用量応答曲線用に、１００％ＤＭＳＯで３倍連続希釈することにより希釈する。化合物を更に、ＰＢＳで１：１０に希釈し、次いで、各化合物の５．５μｌのアリコートをを２ｍｌの９６ウェルプレートに二重に添加し；ＰＢＳ中の１０％ＤＭＳＯの５．５μｌを対照と無刺激ウェルとして添加する。ヒト全血−ＨＷＢ(１００μｌ)を各ウェルに添加する。混合した後、プレートを３７℃、５％ＣＯ２、湿度１００％で３０分間インキュベートする。ヤギのＦ(ａｂ')２抗ヒトＩｇＭ(５００μｇ／ｍＬの溶液１０μｌ、最終的に５０μｇ／ｍＬ)を混合しながら各ウェルに添加し(無刺激ウェルを除く)、プレートをさらに２０時間インキュベート。２０時間のインキュベーションの終わりに、サンプルを、３７℃、５％ＣＯ２、湿度１００％で３０分間、蛍光標識抗体とインキュベートする。誘導されたコントロール、染色されていないと補償調整と初期電圧の設定のための単一染色及び無染色、誘導された対照体を含む。次いで、サンプルを製造業者の指示に従ってＰｈａｒＭ Ｌｙｓｅ(登録商標) (BD Biosciences Pharmingen)を用いて溶解する。次いで、サンプルをＬＳＲＩＩマシン上、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社ＨＴＳ９６ウェルシステム上で実行されるのに適した９６ウェルプレートに移す。データが取得され、平均蛍光強度値をＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社ジＶＡソフトウェアを使用して得る。結果を最初にＦＡＣＳ解析ソフトウェア(Flow Jo)によって分析する。試験化合物の阻害濃度(ＩＣ５０、ＩＣ７０、ＩＣ９０等)は、例えば抗ＩｇＭによって刺激されるＣＤ２０ポジティブででもある、ＣＤ６９細胞のパーセントポジティブが、例えば５０％まで低減する濃度として定義されている(無刺激バックグラウンドの８つウェルの平均を引いた後の、８つの対照ウェルの平均）。ＩＣ７０値は、非線形回帰曲線フィットを用いて、プリズムバージョン５によって計算され、表１及び表２に示す。
【０３６４】
実施例９０８  インビトロ細胞増殖アッセイ  
式Ｉの化合物の有効性を、以下のプロトコル(Mendoza ら (2002) Cancer Res. 62:548５-5488).を使用する細胞増殖アッセイにより測定する。試薬及びプロトコルを含むセルタイター−グロ(登録商標)発光細胞生存率アッセイは商業的に入手可能である(Promega Corp., Madison, WI, Technical Bulletin TB288)。アッセイは、細胞に侵入し、細胞増殖を阻害する化合物の能力を評価する。アッセイの原理は、ホモジニアスアッセイに存在するＡＴＰを定量することによって、存在する生細胞の数を決定すること基づいており、ここでセルタイターグロ試薬の添加により、ルシフェラーゼ反応を介した細胞溶解及び発光シグナルの生成が引き起こされる。発光シグナルは、存在するＡＴＰの量に比例する。
【０３６５】
Ｂ細胞リンパ腫細胞株のパネル(ＢＪＡＢ、ＳＵＤＨＬ−４、ＴＭＤ８、ＯＣＩ−Ｌｙ１０、ＯＣＩ−Ｌｙ３、ＷＳＵ−ＤＬＣＬ２)を、標準的な成長培地における３８４ウェルプレートに播種し、連続希釈されたＢｔｋ阻害剤又はＤＭＳＯ単独を各ウェルに添加する。細胞生存率をセルタイター−グロ(登録商標)(Promega)により９６時間のインキュベーション後に評価する。データは、ＤＭＳＯ処理された対照細胞に対するＢＴＫ阻害剤で処理された細胞における相対的な細胞生存率として提示されてもよい。データ点は各用量レベルでの４回の反復の平均である。エラーバーは平均からのＳＤを表す。
【０３６６】
手順：１日目−プレートへの細胞の播種(３８４ウェル黒色、透明底、マイクロクリア、Falcon #353962から蓋付きのＴＣプレート)、細胞の回収し、３日間のアッセイのために、３８４ウェル細胞プレートに、ウェルあたり５４μｌあたり１０００細胞で細胞を播種。細胞培養培地：ＲＰＭＩ又はＤＭＥＭ高グルコース、１０％ウシ胎児血清、２ｍＭのＬ−グルタミン、Ｐ／Ｓ．３７℃、５％ＣＯ２でＯ／Ｎインキュベート。  
【０３６７】
２日目−細胞への薬剤の添加、化合物の希釈、ＤＭＳＯプレート(９ポイントについて連続性１：２)、９６ウェルプレートの２列目に１０ｍＭで２０μＬの化合物を添加。精度を使用し、全９点についてプレート(１０μｌ＋２０μｌ  １００％ＤＭＳＯ)を越えシリ連続１：２を実施。Nuncからの培地プレート、９６ウェル円錐底ポリプロピレンプレート(cat.#249946)(１：５０希釈)、すべてのウェルに１４７μｌの培地を添加。ラピッドプレートを使用し、ＤＭＳＯプレートの各ウェルから、培地プレートにおける各対応のウェルに、３μｌのＤＭＳＯ＋化合物を移動。
【０３６８】
細胞への薬剤添加、細胞プレート(１：１０希釈)、細胞に直接、６μｌの培地+化合物を添加(すでに細胞には５４μｌの培地)。３７℃、５％ＣＯ２で３日間、頻繁に開くことができないインキュベーター内でインキュベート。
【０３６９】
５日目−プレートの展開、室温でセルタイターグロバッファを解凍。約３０分で３７℃から室温に平衡化させ、細胞プレートを取り外す。セルタイターグロ基質にセルタイターグロ緩衝液を添加(ボトルからボトル)。各ウェルの細胞に３０μｌのセルタイターグロ試薬 (Promega cat.# G7572)を添加。約３０分間、プレートシェーカー上に配する。分析用ＨＴプレートリーダ-(ウェル当たり０．５秒)での発光を読み取る。
【０３７０】
細胞生存率アッセイと組合わせアッセイ：１６時間、３８４ウェルプレートに、１０００〜２０００細胞／ウェルで細胞を播種した。２日目、９連続１：２化合物希釈を、９６ウェルプレートにおいてＤＭＳＯで実施する。化合物は更に、ラピッドロボットを使用し、成長培地に希釈する(Zymark Corp., Hopkinton, MA)。ついで希釈された化合物を、３８４ウェル細胞プレート中の四重ウェルに添加し、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。４日後、生存細胞の相対数を、製造者の指示に従ってセルタイターグロ(Promega)を用いて発光により測定さし、Ｗａｌｌａｃマルチラベルリーダー(PerkinElmer, Foster City)上で読み取る。ＥＣ５０値を、プリズム(登録商標)４．０ソフトウェア(GraphPad, San Diego)を用いて計算する。全アッセイでは、式Ｉの化合物及び化学療法剤は同時に、又は４時間以内に４(他の前では１)添加される。
【０３７１】
更なる例示的なインビトロ細胞増殖アッセイは以下の段階を含む：
１．培地中に約１０４細胞を含有する細胞培養物１００μｌのアリコートを３８４ウェルの不透明な壁のあるプレートの各ウェルに入れる。
２．培地を含有し、細胞を含有しない対照ウェルを調製する。
３．化合物を実験ウェルに添加し、３〜５日間インキュベートする。
４．プレートを約３０分間室温に平衡させる。
５．各ウェル中に存在する細胞培養培地の容量に等しい容量のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬を添加する。
６．培養物をオービタルシェーカーで２分間混合し、細胞溶解を誘導する。
７．プレートを室温で１０分間インキュベートし、発光シグナルを安定化する。
８．発光を記録し、ＲＬＵ＝相対発光量としてグラフで報告する。
【０３７２】
前記発明を、理解の明瞭さのために説明及び例としてある程度詳細に述べたが、説明及び例は本発明の範囲を限定すると解釈されるべきではない。従って、全ての適切な変更及び等価物は、以下の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲に含まれるとみなされ得る。本明細書で言及される全ての特許及び学術文献の開示は、それらの全体が出典明示により本明細書に明白に組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４ａ】
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【図４ｂ】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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