(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
宿主動物においてウイルス感染症を処置するための組成物であって、
（ａ）式
【化１６】
0005976224.tif 000027
の１種もしくは複数の化合物、または薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ｒは、Ｈであり、そして
Ａｒ１、Ｘ、およびＲ２の組み合わせ様式は、以下
【化１７】
0005976224.tif 000028
【化１８】
0005976224.tif 000029
【化１９】
0005976224.tif 000030
【化２０】
0005976224.tif 000031
の通りである）；および
（ｂ）１種もしくは複数の薬学的に許容される担体、賦形剤、もしくは希釈剤、またはこれらの組合せ
を含み、ここで、
該ウイルス感染症が、ＨＣＶ感染症、ＨＩＶ感染症、ＢＶＤＶ感染症、コロナウイルス感染症、およびＳＡＲＳ−コロナウイルス感染症からなる群から選択される、
組成物。
【請求項２】
前記化合物が、組み合わせ様式５、２３、２４、３０、５５、５９または６２の化合物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記化合物が、組み合わせ様式１７、２２、２５または６３の化合物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記ウイルス感染症が、ＨＣＶ感染症である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記ウイルス感染症が、ＨＩＶ感染症である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症である、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記ウイルス感染症が、ＢＶＤＶ感染症である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
請求項１に記載の組成物であって、式
【化２１】
0005976224.tif 000032
の化合物または薬学的に許容されるその塩を含み、ここで、Ａｒ１、Ｘ、およびＲ２の組み合わせ様式は、以下
【化２２】
0005976224.tif 000033
【化２３】
0005976224.tif 000034
の通りである、組成物。
【請求項９】
請求項８に記載の組成物であって、式
【化２４】
0005976224.tif 000035
の化合物または薬学的に許容されるその塩を含み、ここで、Ａｒ１、Ｘ、およびＲ２の組み合わせ様式は、以下
【化２５】
0005976224.tif 000036
の通りである、組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本特許出願は、２０１２年８月３１日に出願された米国仮特許出願第６１／６９５８６９号および２０１３年３月１３日に出願された米国仮特許出願第６１／７７９５９５号における米国特許法§１１９（ｅ）の下で優先権の利益を請求する。参照された出願において示された開示は、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
【０００２】
配列表
本出願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介してＡＳＣＩＩフォーマットで提出されており、参照により本明細書にその全体が組み込まれている配列表を含む。２０１３年８月２９日に作製された前記ＡＳＣＩＩコピーは、７０１８６７＿ＳＥＱ＿ＳＴ２５．ｔｘｔという名称であり、サイズが４，５７３バイトである。
【０００３】
技術分野
本明細書に記載されている発明は、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびにウイルス性疾患の処置におけるこれらの使用方法に関する。ウイルス性疾患は、Ｃ型肝炎ウイルス、ＨＩＶ、ＢＶＤＶ、およびコロナウイルス感染症を含む。
【背景技術】
【０００４】
背景および概要
Ｃ型肝炎（ＨＣＶ）は、フラビウイルス科ファミリーに属するプラスセンス（ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｓｅｎｓｅ）一本鎖ＲＮＡウイルスである。ＨＣＶゲノムは、約３０００個のアミノ酸残基のポリタンパク質をコードし、これは構造タンパク質および非構造タンパク質の両方にプロセシングされる。ＨＣＶ感染症は、世界的な重大な健康問題である。世界保健機構は、１億７０００万人超の人がＨＣＶ感染症を有すると推定しており、これは慢性肝炎、肝硬変、および肝細胞癌を最終的に引き起こし得る。これらの合併症は、米国だけで年間約１０，０００〜２０，０００件の死亡に関与しており、ＨＣＶが、進行した肝疾患の主要原因および肝臓移植の主要な根本原因であることが報告されてきた。ＨＣＶ感染症の現在の治療では、インターフェロン−α（ＩＦＮ）およびリバビリンの組合せを利用する。この処置レジメンは、報告によれば、望ましくない副作用、例えば、白血球減少、血小板減少、および溶血性貧血をもたらし、患者の約５０％しか持続性ウイルス応答を達成しないというさらなる不都合がある。近年、リバビリンおよびＩＦＮの組合せに新規なプロテアーゼ阻害薬、すなわちＶｅｒｔｅｘのテラプレビルおよびＭｅｒｃｋのボセプレビルを添加し、それぞれ処置時間を短縮し、持続性ウイルス応答を達成する患者の割合を有意に増加させることが見出された。しかし、リバビリンおよびＩＦＮの毒性の問題はまだ重大な支障となっている。（例えば、Ｈａｎａｚａｋｉ，  Ｃｕｒｒ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．：  Ａｎｔｉ−Ｉｎｆｅｃｔ．  Ａｇｅｎｔｓ、２００３年、２巻、１０３号；ＬａｕｅｒおよびＷａｌｋｅｒ，  Ｎ．、Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．、２００１年、３４５巻、４１号；ＧｏｒｄｏｎおよびＫｅｌｌｅｒ，  Ｊ．、Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．、２００５年、４８巻、１号；Ｔａｎら、Ｎａｔ．  Ｒｅｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、２００２年、１巻、８６７号；ＩｄｎｏおよびＢｅｌｌｏｂｕｏｎｏ、Ｃｕｒｒ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｄｅｓ．、２００２年、８巻、９５９号；Ｄｉ  Ｂｉｓｃｅｇｌｉｅら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２００２年、３５巻、２２４号；Ｓａｍｕｅｌ、Ｃｌｉｎ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  Ｒｅｖ．、２００１年、１４巻、７７８号；Ｋｌｉｂａｎｏｖら、２０１１年、Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ、３１巻、９５１号；ＫｗｏおよびＺｈａｏ、２０１１年、Ｃｌｉｎｋ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓ．、１５巻、５３７号を参照されたい；上記の出版物、およびこの中で引用されたそれぞれのさらなる出版物は、参照により本明細書中に組み込まれる）。このように、より有効でより有毒でない抗ＨＣＶ療法が大いに必要とされている。
【０００５】
フラビウイルス科のプラスセンス一本鎖ＲＮＡウイルスの別のメンバーは、ウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）である。このウイルスによる感染症は、ウシおよび他の反芻動物、ならびにブタにおける重度の粘膜疾患をもたらす。ＢＶＤＶウシ感染症は、鼻、口および胃腸の粘膜の潰瘍によって特徴付けられ、これは連続的な唾液分泌、鼻汁、咳嗽および／または下痢をもたらす。その結果、動物の間でウイルスが急速に広がる。ウイルスはまた、子ウシが死産し、持続的に感染し、または成長遅延を被り、かつ／あるいは重度の神経学的形成異常を示す原因となる。ＢＶＤＶの経済的影響はかなりのものであるが、特定の感染症は診断未確定のままであり、または死亡（ｌｏｓｓ）はウイルスによるものと認識されないため、そのレベルを正確に推定することは困難である。（例えば、Ｂｕｃｋｗｏｌｄら、Ａｎｔｉｖｉｒｕｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２００３年、６０巻、１号；Ｆｉｎｋｉｅｌｓｚｔｅｉｎら、２０１０年、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１７巻、２９３３号を参照されたい）。疾患のこのフラビウイルス科ファミリーの他のメンバーは、西ナイルウイルスおよびデング熱を含む。このように、有効な療法は、ＢＤＶＤ、西ナイルウイルスおよびデング熱の経済的影響を低減させるために有用である。
【０００６】
後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）（１）は、レトロウイルス科およびレンチウイルスファミリーに属するヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）と称されるレトロウイルスによって引き起こされる疾患である。この状態は、免疫系を徐々に低下させ、ＨＩＶ感染者は日和見感染および腫瘍形成を起こしやすくなり、これは最終的に死をもたらす。これらの壊滅的な病気を緩和するために、医薬コミュニティーは活性抗レトロウイルス療法を考案した。これはＨＩＶプロテアーゼおよび逆転写酵素阻害薬のカクテルが関与する。この治療は、多くのＨＩＶ感染者の身体全体の健康および生活の質の顕著な改善をもたらす。この回復はまた、ＨＩＶが関連する罹患率と死亡率の著しい低減と関連する。しかし、ＨＩＶプロテアーゼおよび逆転写酵素阻害薬カクテルは、処置が停止されると、ＨＩＶ感染症の患者を治癒せず、ＡＩＤＳの再発もまた防がない。このように、治療を中止した患者は、この処置の利益を受けられない。さらに、ＡＩＤＳ患者のかなりの割合について、この処置は、治療不耐性、治療の副作用または薬物抵抗性ＨＩＶ株による感染のため、最適な結果に遠く及ばない。これらの制限を克服するため、さらなる有効な抗ＨＩＶ薬物、特に、より毒性の少ない抗ＨＩＶ薬物が求められている。（例えば、Ｓｅｐｋｏｗｉｔｚ、２００１年、Ｎ．  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．、３４４巻、１７６４頁；Ｗｅｉｓｓ、１９９３年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２６０巻、１２７３頁；Ｄｙｂｕｌら、２００２年、Ａｎｎ．  Ｉｎｔｅｒｎ．  Ｍｅｄ．、１３７巻、３８１頁；Ｍａｒｔｉｎｅｚ−Ｐｉｃａｄｏら、２０００年、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  Ｕ．Ｓ．Ａ．、９７巻、１０９４８頁を参照されたい）。
【０００７】
ＲＮＡウイルスの別のファミリーは、コロナウイルス科におけるコロナウイルス亜科に属するウイルスの種であるコロナウイルスである。コロナウイルスは、プラスセンスＲＮＡゲノムおよびらせん対称のヌクレオカプシドを有するエンベロープウイルスである。コロナウイルスは主に、哺乳動物および鳥の上気道および胃腸管に感染する。４〜５種の異なる現在公知のコロナウイルスの株は、ヒトに感染する。ヒトコロナウイルスのより周知の株の１つは、重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）をもたらすＳＡＲＳ−ＣｏＶである。コロナウイルスはまた、ヒトにおいてかなりの割合の全ての感冒をもたらすことが報告されている。コロナウイルスはまた、直接のウイルス性肺炎または続発性の細菌性肺炎のいずれかの肺炎をもたらすことが報告されている。近年、ＳＡＲＳ様コロナウイルス（ｃｏｒｏｎｏｖａｉｒｕｓ）である中東呼吸器症候群コロナウイルス（ＭＥＲＳ−ＣｏＶ）が、ヒトにおいて報告されてきた。コロナウイルスはまた、家畜、例えば、ニワトリに感染する。感染性気管支炎ウイルス（ＩＢＶ）は、ニワトリの気道のみでなく、泌尿生殖路も標的とするコロナウイルスである。このウイルスはまた、ニワトリ全体にわたって異なる器官に広がり得る。
【０００８】
コロナウイルスは、報告によれば、ブタコロナウイルス（伝染性胃腸炎コロナウイルス、ＴＧＥ）、ウシコロナウイルス（これらのそれぞれは、幼若動物において下痢をもたらす）、ネココロナウイルス、例えば、重要でない臨床的意義のネコ腸コロナウイルス、および高死亡率を伴う疾患であるネコ感染性腹膜炎（ＦＩＰ）、イヌコロナウイルス（ＣＣｏＶ）、マウス肝炎ウイルス（ＭＨＶ）などを含めて、家畜および家庭のペットにおいて広範囲の疾患をもたらす。したがって、コロナウイルスを処置するための化合物、組成物および治療が必要とされる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｈａｎａｚａｋｉ，  Ｃｕｒｒ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．：  Ａｎｔｉ−Ｉｎｆｅｃｔ．  Ａｇｅｎｔｓ、２００３年、２巻、１０３号
【非特許文献２】ＬａｕｅｒおよびＷａｌｋｅｒ，  Ｎ．、Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．、２００１年、３４５巻、４１号
【非特許文献３】ＧｏｒｄｏｎおよびＫｅｌｌｅｒ，  Ｊ．、Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．、２００５年、４８巻、１号
【非特許文献４】Ｔａｎら、Ｎａｔ．  Ｒｅｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、２００２年、１巻、８６７号
【非特許文献５】ＩｄｎｏおよびＢｅｌｌｏｂｕｏｎｏ、Ｃｕｒｒ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｄｅｓ．、２００２年、８巻、９５９号
【非特許文献６】Ｄｉ  Ｂｉｓｃｅｇｌｉｅら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２００２年、３５巻、２２４号
【非特許文献７】Ｓａｍｕｅｌ、Ｃｌｉｎ．  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  Ｒｅｖ．、２００１年、１４巻、７７８号
【非特許文献８】Ｋｌｉｂａｎｏｖら、２０１１年、Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ、３１巻、９５１号
【非特許文献９】ＫｗｏおよびＺｈａｏ、２０１１年、Ｃｌｉｎｋ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓ．、１５巻、５３７号
【非特許文献１０】Ｂｕｃｋｗｏｌｄら、Ａｎｔｉｖｉｒｕｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２００３年、６０巻、１号
【非特許文献１１】Ｆｉｎｋｉｅｌｓｚｔｅｉｎら、２０１０年、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１７巻、２９３３号
【非特許文献１２】Ｓｅｐｋｏｗｉｔｚ、２００１年、Ｎ．  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．、３４４巻、１７６４頁
【非特許文献１３】Ｗｅｉｓｓ、１９９３年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２６０巻、１２７３頁
【非特許文献１４】Ｄｙｂｕｌら、２００２年、Ａｎｎ．  Ｉｎｔｅｒｎ．  Ｍｅｄ．、１３７巻、３８１頁
【非特許文献１５】Ｍａｒｔｉｎｅｚ−Ｐｉｃａｄｏら、２０００年、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  Ｕ．Ｓ．Ａ．、９７巻、１０９４８頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本明細書に記載されている化合物を含めてピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドは、活性抗ウイルス剤であることが本明細書において発見された。特に、ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドは、活性抗ＨＩＶ薬剤であることが本明細書において発見された。さらに、ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドは、活性抗ＨＣＶ薬剤であることも本明細書において発見された。さらに、ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドは、フラビウイルス科ウイルスおよび関連する疾患に対して活性であることも本明細書において発見された。さらに、ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドは、活性抗ＢＶＤＶ薬剤であることも本明細書において発見された。さらに、ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドは、活性抗西ナイルウイルス薬剤であることも本明細書において発見された。さらに、ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドは、活性抗デングウイルス薬剤であることも本明細書において発見された。さらに、ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドは、活性抗コロナウイルス薬剤であることも本明細書において発見された。
【００１１】
１つの例示的な実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＨＩＶ感染症、ＡＩＤＳ、およびＡＩＤＳに関連する疾患の処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドである。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＨＩＶ感染症、ＡＩＤＳ、およびＡＩＤＳに関連する疾患の処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物である。例示的に、組成物は、１種または複数の担体、希釈剤、もしくは賦形剤、またはこれらの組合せを含む。
【００１２】
別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＨＩＶ感染症、ＡＩＤＳ、およびＡＩＤＳに関連する疾患を処置するための方法であって、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物を投与することを含む方法である。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＨＩＶ感染症、ＡＩＤＳ、およびＡＩＤＳが関連する疾患を有する患者または宿主動物を処置するための医薬の製造における、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物の１種または複数の使用である。
【００１３】
別の例示的な実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＢＶＤＶ感染症の処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドである。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＢＶＤＶ感染症の処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物である。例示的に、組成物は、１種または複数の担体、希釈剤、もしくは賦形剤、またはこれらの組合せを含む。
【００１４】
別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＢＶＤＶ感染症を処置するための方法であって、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物を投与することを含む方法である。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＢＶＤＶ感染症を有する患者または宿主動物を処置するための医薬の製造における、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物の１つまたは複数の使用である。
【００１５】
別の例示的な実施形態において、本明細書に記載されているのは、西ナイルウイルス感染症の処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドである。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、西ナイルウイルス感染症の処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物である。例示的に、組成物は、１種または複数の担体、希釈剤、もしくは賦形剤、またはこれらの組合せを含む。
【００１６】
別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、西ナイルウイルス感染症を処置するための方法であって、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物を投与することを含む方法である。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、西ナイルウイルス感染症を有する患者または宿主動物を処置するための医薬の製造における、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物の１つまたは複数の使用である。
【００１７】
別の例示的な実施形態において、本明細書に記載されているのは、デング熱の処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドである。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、デング熱の処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物である。例示的に、組成物は、１種または複数の担体、希釈剤、もしくは賦形剤、またはこれらの組合せを含む。
【００１８】
別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、デング熱を処置するための方法であって、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物を投与することを含む方法である。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、デング熱を有する患者または宿主動物を処置するための医薬の製造における、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物の１つまたは複数の使用である。
【００１９】
別の例示的な実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＨＣＶの処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドである。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＨＣＶの処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物である。例示的に、組成物は、１種または複数の担体、希釈剤、もしくは賦形剤、またはこれらの組合せを含む。
【００２０】
別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＨＣＶを処置するための方法であって、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物を投与することを含む方法である。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＨＣＶ感染症を有する患者または宿主動物を処置するための医薬の製造における、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物の１つまたは複数の使用である。
【００２１】
別の例示的な実施形態において、本明細書に記載されているのは、コロナウイルス感染症、例えば、ＳＡＲＳ−ＣｏＶおよびＭＥＲＳ−ＣｏＶ感染症の処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドである。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、コロナウイルス感染症、例えば、ＳＡＲＳ−ＣｏＶおよびＭＥＲＳ−ＣｏＶ感染症の処置のために有用な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物である。例示的に、組成物は、１種または複数の担体、希釈剤、もしくは賦形剤、またはこれらの組合せを含む。
【００２２】
別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、コロナウイルス感染症、例えば、ＳＡＲＳ−ＣｏＶおよびＭＥＲＳ−ＣｏＶ感染症を処置するための方法であって、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物を投与することを含む方法である。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、コロナウイルス感染症、例えば、ＳＡＲＳ−ＣｏＶまたはＭＥＲＳ−ＣｏＶ感染症を有する患者または宿主動物を処置するための医薬の製造における、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド、ならびに／または置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物の１つまたは複数の使用である。
【００２３】
１つの例示的な実施形態において、本明細書に記載されているのは、ＨＣＶ、ＢＶＤＶ、コロナウイルス、および／またはＨＩＶを含めたウイルス性疾患の処置において有効な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドである。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含む医薬組成物、ならびにＨＣＶ、ＢＶＤＶ、コロナウイルスおよび／またはＨＩＶを含めたウイルス性疾患の処置における、置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドを含有する医薬組成物を含めた置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドの使用のための方法である。
【００２４】
別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、（ａ）治療有効量の式
【化１】
0005976224.tif 000002
の１種もしくは複数の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物
（式中、
Ｗは、窒素または炭素であり、
Ｘは、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、アリールもしくはヘテロアリール（これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）；またはアシルであり、
ＲＡは、水素または必要に応じて置換されているアルキルであり、
Ｒは、Ｈ、アルキル、ヘテロアルキル、アシル、アルコキシカルボニル、もしくはアミノカルボニルであり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されており；またはＲは、プロドラッグ部分であり、
Ａｒ１は、アリールまたはヘテロアリールであり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）；および
（ｂ）１種もしくは複数の薬学的に許容される担体、賦形剤、もしくは希釈剤、またはこれらの組合せ
を含む、ウイルス感染症の処置のための医薬組成物である。
【００２５】
別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、患者においてウイルス感染症を処置するための方法であって、患者に、治療有効量の本明細書に記載されている化合物の１つもしくは複数、または治療有効量の本明細書に記載されている組成物の１つもしくは複数、あるいは本明細書に記載されている単位用量または単位剤形の１つもしくは複数を投与するステップを含む方法である。
【００２６】
別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ウイルス感染症を処置するための医薬の製造における１つまたは複数の本明細書に記載されている化合物または組成物の使用であって、医薬は、（ａ）治療有効量の本明細書に記載されている化合物または組成物の１種または複数；および必要に応じて、（ｂ）１種もしくは複数の担体、賦形剤、もしくは希釈剤、またはこれらの組合せを含む、使用である。
【００２７】
別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ウイルス感染症がＤＮＡまたはＲＮＡウイルス感染症である、組成物、方法、および使用である。別の実施形態におい
て、本明細書に記載されているのは、ウイルス感染症がＣ型肝炎ウイルス感染症である、組成物、方法、および使用である。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ウイルス感染症がＨＩＶ感染症である、組成物、方法、および使用である。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ウイルス感染症がＢＶＤＶ感染症である、組成物、方法、および使用である。別の実施形態において、本明細書に記載されているのは、ウイルス感染症がコロナウイルス感染症である、組成物、方法、および使用である。
本発明は、例えば、以下の項目も提供する。
（項目１）
（ａ）治療有効量の式、
【化１３】
0005976224.tif 000003
の１種もしくは複数の化合物、または薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ｗは、炭素または窒素であり、
ＲＡは、水素または必要に応じて置換されているアルキルであり、
Ｘは、それぞれが必要に応じて置換されているアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロヘテロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、アリールもしくはヘテロアリール；またはアシルであり、
Ｒは、Ｈ、アルキル、ヘテロアルキル、アシル、アルコキシカルボニル、もしくはアミノカルボニルであり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されており；またはＲは、プロドラッグ部分であり、
Ａｒ１は、アリールまたはヘテロアリールであり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）；および
（ｂ）１種もしくは複数の薬学的に許容される担体、賦形剤、もしくは希釈剤、またはこれらの組合せ
を含む、ウイルス感染症を処置するための単位用量または単位剤形。
（項目２）
ＲＡが、Ｈである、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目３）
ＲＡが、メチルである、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目４）
Ａｒ１が、必要に応じて置換されているフェニルである、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目５）
Ａｒ１が、必要に応じて置換されているフェニルで置換されているフェニルである、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目６）
Ａｒ１が、必要に応じて置換されているフェノキシで置換されているフェニルである、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目７）
Ａｒ１が、必要に応じて置換されているヘテロアリールで置換されているフェニルである、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目８）
Ａｒ１が、必要に応じて置換されているベンゾイミダゾリルで置換されているフェニルである、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目９）
Ａｒ１が、必要に応じて置換されているインドリルで置換されているフェニルである、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目１０）
Ｒが、Ｈである、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目１１）
Ｘが、必要に応じて置換されているシクロヘテロアルキルである、項目１から１０のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
（項目１２）
Ｘが、必要に応じて置換されているピペリジニルである、項目１から１０に記載の単位用量または単位剤形。
（項目１３）
Ｘが、アシルである、項目１から１０のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
（項目１４）
Ｘが、アルキルである、項目１から１０のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
（項目１５）
Ｘが、シクロアルキルである、項目１から１０のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
（項目１６）
Ｘが、アルケニルである、項目１から１０のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
（項目１７）
式
【化１４】
0005976224.tif 000004
の化合物、または薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ｘ１は、結合またはＣ１〜Ｃ５アルキレン、Ｃ１〜Ｃ５アルケニレン、またはＣ（Ｏ）であり、
Ａｒ２は、アリール基またはヘテロアリール基であり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）
を含む、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目１８）
式
【化１５】
0005976224.tif 000005
の化合物、または薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ｘ１は、結合またはＣ１〜Ｃ５アルキレン、Ｃ１〜Ｃ５アルケニレン、またはＣ（Ｏ）であり、
Ａｒ２は、アリール基またはヘテロアリール基であり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）
を含む、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目１９）
Ｘ１が、ＣＨ２である、項目１７から１８のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
（項目２０）
Ａｒ２が、必要に応じて置換されているフェニルである、項目１９に記載の単位用量または単位剤形。
（項目２１）
Ａｒ２が、必要に応じて置換されているヘテロアリールである、項目１９に記載の単位用量または単位剤形。
（項目２２）
Ａｒ２が、必要に応じて置換されているピラゾリルである、項目１９に記載の単位用量または単位剤形。
（項目２３）
Ａｒ２が、必要に応じて置換されているフリルである、項目１９に記載の単位用量または単位剤形。
（項目２４）
Ａｒ２が、必要に応じて置換されているピラジニルである、項目１９に記載の単位用量または単位剤形。
（項目２５）
Ａｒ２が、必要に応じて置換されているキノリニル基である、項目１９に記載の単位用量または単位剤形。
（項目２６）
前記ウイルス感染症が、ＨＣＶ感染症である、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目２７）
前記ウイルス感染症が、ＨＩＶ感染症である、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目２８）
前記ウイルス感染症が、ＢＶＤＶ感染症である、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目２９）
前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症である、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目３０）
前記ウイルス感染症が、ＳＡＲＳ−コロナウイルス感染症である、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
（項目３１）
宿主動物においてウイルス感染症を処置するための方法であって、該宿主動物に、治療有効量の項目１から１０のいずれか一項に記載の１つまたは複数の単位用量を投与するステップを含む方法。
（項目３２）
前記宿主動物が、ヒトである、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記ウイルス感染症が、ＨＣＶ感染症である、項目３１に記載の方法。
（項目３４）
前記ウイルス感染症が、ＨＩＶ感染症である、項目３１に記載の方法。
（項目３５）
前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症である、項目３１に記載の方法。
（項目３６）
前記ウイルス感染症が、ＳＡＲＳ−コロナウイルス感染症である、項目３１に記載の方法。
（項目３７）
前記宿主動物が、ウシである、項目３１に記載の方法。
（項目３８）
前記ウイルス感染症が、ＢＶＤＶ感染症である、項目３１に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１Ａ、１Ｂ、および１Ｃは、示された用量の本明細書に記載されている例示的な化合物と共に培養物をインキュベートするとき、それぞれ、実施例２２、２４、および２８についての細胞内のＨＣＶ  ＲＮＡレベルを示す。各試験化合物は、用量反応（μＭ）を示す。理論に束縛されるものではないが、本明細書において、ＨＣＶ  ＲＮＡレベルを試料の間で比較したとき、データは、モック処置した（試験化合物を加えない）ＨＣＶに感染した対照と比較して、試験化合物がＨＣＶ  ＲＮＡレベルにおける用量依存的な減少をもたらすことを示し得ると考えられる。
【００２９】
【図２】図２は、実施例５７がＨＩＶ逆転写を有意に阻害することを示す。
【００３０】
【図３】図３は、実施例５７がＨＩＶウイルス組込みを有意に阻害することを示す。
【００３１】
【図４−１】図４Ａ、４Ｂ、４Ｃ、および４Ｄは、ＡＺＴ対照と比較した、ＨＩＶに対する、それぞれ、例示的な実施例５８、５９、６０および６５の活性を示す。
【図４−２】図４Ａ、４Ｂ、４Ｃ、および４Ｄは、ＡＺＴ対照と比較した、ＨＩＶに対する、それぞれ、例示的な実施例５８、５９、６０および６５の活性を示す。
【００３２】
【図５−１】図５Ａ、５Ｂ、および５Ｃは、実施例５７がＨＩＶ転写を有意に阻害することを示す。
【図５−２】図５Ａ、５Ｂ、および５Ｃは、実施例５７がＨＩＶ転写を有意に阻害することを示す。
【００３３】
【図６】図６は、ＢＶＤＶに対する実施例１００についての例示的な用量反応データを示す。
【００３４】
【図７】図７は、実施例１０４の例示的な抗ＣＶ活性を示す。抗ウイルス作用は、１０４がＭＲＣ−５細胞においてＣＶによって誘導される細胞変性効果（ＣＰＥ）を低減させる能力によって決定した。２μＭ以上の用量は、抗ウイルス活性を示すようである。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
詳細な説明
別の実施形態において、化合物の１種または複数を含有する医薬組成物がまた、本明細書に記載されている。別の実施形態において、医薬組成物は、一体用量（ｕｎｉｔａｒｙ  ｄｏｓｅ）、単位用量、または単位剤形の形態である。一態様において、組成物、例えば、単位用量または単位剤形は、ウイルス性疾患、例えば、ＨＣＶ、ＢＶＤＶ、コロナウイルス、および／またはＨＩＶを有する患者を処置するための治療有効量の１種または複数の化合物を含む。組成物は、これらに限定されないが、他の治療的活性化合物、および／または１種もしくは複数の担体、希釈剤、賦形剤などを含めた他の構成要素および／または成分を含み得ることを理解すべきである。別の実施形態において、ＨＣＶ、ＢＶＤＶ、コロナウイルス、および／またはＨＩＶを有する患者を処置するための化合物および医薬組成物を使用する方法がまた、本明細書に記載されている。一態様において、方法は、本明細書に記載されている化合物および／または組成物の１種または複数を、ＨＣＶ、ＢＶＤＶ、コロナウイルス、および／またはＨＩＶを有する患者に投与するステップを含む。別の態様において、方法は、ＨＣＶ、ＢＶＤＶ、コロナウイルス、および／またはＨＩＶを有する患者を処置するための、治療有効量の１種または複数の本明細書に記載されている化合物および／または組成物を投与することを含む。別の実施形態において、ＨＣＶ、ＢＶＤＶ、コロナウイルス、および／またはＨＩＶを有する患者を処置するための医薬の製造における化合物および組成物の使用がまた、本明細書に記載されている。一態様において、医薬は、ＨＣＶ、ＢＶＤＶ、コロナウイルス、および／またはＨＩＶを有する患者を処置するための、治療有効量の１種または複数の化合物および／または組成物を含む。
【００３６】
本明細書に記載されている化合物は、単独で、または同じもしくは異なる作用形態によって治療的に有効であり得るこれらの化合物を含めた、ＨＣＶ、ＢＶＤＶ、コロナウイルス、および／もしくはＨＩＶを処置するのに有用な他の化合物と組み合わせて使用し得ることを理解すべきである。さらに、本明細書に記載されている化合物は、ＨＣＶ、ＢＶＤＶ、コロナウイルス、および／またはＨＩＶの他の症状を処置するために投与される他の化合物と組み合わせて使用し得ることを理解すべきである。
【００３７】
別の実施形態において、本明細書に記載されている方法、組成物、および単位用量および単位剤形を、下記の項目によって例示する。
１．（ａ）治療有効量の式
【化２】
0005976224.tif 000006
の１種もしくは複数の化合物、または薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ｗは、炭素または窒素であり、
ＲＡは、水素または必要に応じて置換されているアルキルであり、
Ｘは、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロヘテロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、アリールもしくはヘテロアリール（これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）；またはアシルであり、
Ｒは、Ｈ、アルキル、ヘテロアルキル、アシル、アルコキシカルボニル、もしくはアミノカルボニルであり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されており；またはＲは、プロドラッグ部分であり、
Ａｒ１は、アリールまたはヘテロアリールであり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）；および
（ｂ）１種もしくは複数の薬学的に許容される担体、賦形剤、もしくは希釈剤、またはこれらの組合せ
を含む、ウイルス感染症を処置するための単位用量または単位剤形。
２．治療有効量の式
【化３】
0005976224.tif 000007
の１種もしくは複数の化合物、または薬学的に許容されるその塩を含む、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
３．治療有効量の式
【化４】
0005976224.tif 000008
の１種もしくは複数の化合物、または薬学的に許容されるその塩を含む、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
４．ＲＡが、Ｈである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
５．ＲＡが、メチルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
６．治療有効量の式
【化５】
0005976224.tif 000009
の１種もしくは複数の化合物、または薬学的に許容されるその塩を含む、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
７．治療有効量の式
【化６】
0005976224.tif 000010
の１種もしくは複数の化合物、または薬学的に許容されるその塩を含む、項目１に記載の単位用量または単位剤形。
８．Ａｒ１が、必要に応じて置換されているフェニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
９．Ａｒ１が、必要に応じて置換されているフェニルで置換されているフェニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
１０．Ａｒ１が、必要に応じて置換されているフェノキシで置換されているフェニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
１１．Ａｒ１が、必要に応じて置換されているヘテロアリールで置換されているフェニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
１２．Ａｒ１が、必要に応じて置換されているベンゾイミダゾリルで置換されているフェニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
１３．Ａｒ１が、必要に応じて置換されているインドリルで置換されているフェニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
１４．Ａｒ１が、アリールフェニル、アリールアリール、フェニルフェニル、フェノキシフェニル、または２−フェニルフェニルであり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
１５．Ｒが、Ｈまたはプロドラッグ部分である、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
１６．Ｒが、Ｈである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
１７．Ｘが、必要に応じて置換されているシクロヘテロアルキルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
１８．Ｘが、必要に応じて置換されているピペリジニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
１９．Ｘが、アルキルピペリジニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
２０．Ｘが、Ｎ−アルキルピペリジニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
２１．Ｘが、アシルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
２２．Ｘが、アルキルカルボニル、アルケニルカルボニルまたはアルキニルカルボニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
２３．Ｘが、アルキルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
２４．Ｘが、シクロアルキルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
２５．Ｘが、アルケニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
２６．Ｘが、シクロアルケニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
２７．式
【化７】
0005976224.tif 000011
の化合物、または薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ｘ１は、結合またはＣ１〜Ｃ５アルキレン、Ｃ１〜Ｃ５アルケニレン、またはＣ（Ｏ）であり、
Ａｒ２は、アリール基またはヘテロアリール基であり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）
を含む、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形
。
２８．−Ｃ（Ｏ）ＮＲＡｒ１が、Ｃ３において結合している、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
２９．−Ｃ（Ｏ）ＮＲＡｒ１が、Ｃ４において結合している、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
３０．式
【化８】
0005976224.tif 000012
の化合物、または薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ｘ１は、結合またはＣ１〜Ｃ５アルキレン、Ｃ１〜Ｃ５アルケニレン、またはＣ（Ｏ）であり、
Ａｒ２は、アリール基またはヘテロアリール基であり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）
を含む、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形
。
３１．式
【化９】
0005976224.tif 000013
の化合物、または薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ｘ１は、結合またはＣ１〜Ｃ５アルキレン、Ｃ１〜Ｃ５アルケニレン、またはＣ（Ｏ）であり、
Ａｒ２は、アリール基またはヘテロアリール基であり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）
を含む、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または剤形
。
３２．−Ｃ（Ｏ）ＮＲＡｒ１が、Ｎ１において結合している、前記項目に記載の単位用量または単位剤形。
３３．式
【化１０】
0005976224.tif 000014
の化合物、または薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ｘ１は、結合またはＣ１〜Ｃ５アルキレン、Ｃ１〜Ｃ５アルケニレン、またはＣ（Ｏ）であり、
Ａｒ２は、アリール基またはヘテロアリール基であり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）
を含む、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形
。
３４．Ｘ１が、Ｃ１〜Ｃ５アルキレンまたはＣ１〜Ｃ５アルケニレンである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
３５．Ｘ１が、Ｃ１〜Ｃ５アルキレンである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
３６．Ｘ１が、ＣＨ２である、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
３７．式
【化１１】
0005976224.tif 000015
の化合物、または薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ａｒ２は、アリール基またはヘテロアリール基であり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）
を含む、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形
。
３８．式
【化１２】
0005976224.tif 000016
の化合物、または薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ａｒ２は、アリール基またはヘテロアリール基であり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている）
を含む、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形
。
３９．Ａｒ２が、必要に応じて置換されているフェニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
４０．Ａｒ２が、置換されているフェニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
４１．Ａｒ２が、必要に応じて置換されているヘテロアリールである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
４２．Ａｒ２が、置換されているヘテロアリールである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
４３．Ａｒ２が、必要に応じて置換されているピラゾリルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
４４．Ａｒ２が、置換されているピラゾリルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
４５．Ａｒ２が、必要に応じて置換されているフリルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
４６．Ａｒ２が、置換されているフリルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
４７．Ａｒ２が、必要に応じて置換されているピラジニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
４８．Ａｒ２が、置換されているピラジニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
４９．Ａｒ２が、必要に応じて置換されているピリダジニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
５０．Ａｒ２が、置換されているピリダジニルである、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
５１．Ａｒ２が、キノリニルまたはメチレンジオキシフェニルであり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
５２．Ａｒ２が、必要に応じて置換されているキノリニル基である、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
５３．Ａｒ２が、ヒドロキシフェニル、メトキシフェニル、またはヒドロキシメトキシフェニルであり、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
５４．前記置換基が、電子供与基である、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
５５．前記ウイルス感染症が、ＤＮＡまたはＲＮＡウイルス感染症である、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
５６．前記ウイルス感染症が、ＨＣＶ感染症である、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
５７．前記ウイルス感染症が、ＨＩＶ感染症である、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
５８．前記ウイルス感染症が、ＢＶＤＶ感染症である、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
５９．前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症である、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
６０．前記ウイルス感染症が、ＳＡＲＳ−コロナウイルス感染症である、前記項目のいずれか一項に記載の単位用量または単位剤形。
６１．宿主動物においてウイルス感染症を処置するための方法であって、前記宿主動物に、治療有効量の項目１から６０いずれか一項に記載の１つまたは複数の単位用量を投与するステップを含む方法。
６２．前記ウイルス感染症が、ＤＮＡまたはＲＮＡウイルス感染症である、項目６１に記載の方法。
６３．前記宿主動物が、ヒトである、項目６１または６２に記載の方法。
６４．前記ウイルス感染症が、ＨＣＶ感染症である、項目６３に記載の方法。
６５．前記ウイルス感染症が、ＨＩＶ感染症である、項目６３に記載の方法。
６６．前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症である、項目６３に記載の方法。
６７．前記ウイルス感染症が、ＳＡＲＳ−コロナウイルス感染症である、項目６３に記載の方法。
６８．前記宿主動物が、ウシである、項目６１または６２に記載の方法。
６９．前記ウイルス感染症が、ＢＶＤＶ感染症である、項目６８に記載の方法。
【００３８】
別の実施形態において、Ｗ、Ａｒ１、Ａｒ２、Ｘ、Ｘ１、およびＲのそれぞれの様々な属および亜属は、本明細書に記載されている。本明細書に記載されているＷ、Ａｒ１、Ａｒ２、Ｘ、Ｘ１、およびＲのそれぞれの様々な属および亜属の全ての可能性のある組合せは、本明細書に記載されている発明の化合物のさらなる例示的な実施形態を表すことを理解すべきである。化合物のこれらのさらなる例示的な実施形態のそれぞれは、本明細書に記載されている組成物、方法、および／または使用のいずれかにおいて使用し得ることがさらに理解される。
【００３９】
上記および下記の実施形態のそれぞれにおいて、式は、化合物の全ての薬学的に許容される塩のみを含み、表すだけではなく、化合物の式のありとあらゆる水和物および／または溶媒和物も含むことを理解すべきである。特定の官能基、例えば、ヒドロキシ基、アミノ基、および同様の基は、化合物の様々な物理的形態において、水および／または様々な溶媒と複合体および／または配位化合物を形成することが認識される。したがって、上記の式は、これらの様々な水和物および／または溶媒和物を含み、表すことが理解される。上記および下記の実施形態のそれぞれにおいて、式は、個々に、およびありとあらゆる可能性のある混合物中の両方において、それぞれの可能性のある異性体、例えば、立体異性体および幾何異性体を含み、表すことをまた理解すべきである。上記および下記の実施形態のそれぞれにおいて、式は、化合物のありとあらゆる結晶形態、部分的結晶形態、ならびに非結晶形態および／またはアモルファス形態を含み、表すことをまた理解すべきである。
【００４０】
上記および下記の実施形態のそれぞれにおいて、誘導体もまた記載される。例示的な誘導体には、これらに限定されないが、本明細書に記載されている化合物から合成的に調製し得るこれらの化合物、およびこれらの本明細書に記載されているものと同様の方法で調製し得るこれらの化合物が含まれるが、出発材料の選択において異なる。例えば、本明細書に記載されているのは、芳香族環上に様々な官能基を含む化合物である。これらの化合物の誘導体はまた、例えば、化合物上の置換基の定義において明示的に記載したものとは異なる、これらの芳香族環上の官能基を有する化合物を含むことを理解すべきである。さらに、これらの化合物の誘導体はまた、芳香族環上の異なる位置においてこれらの同じまたは異なる官能基を有する化合物を含むことを理解すべきである。同様に、誘導体は、本明細書に記載されている化合物上の他の官能基の平衡変化（ｐａｒａｌｌｅｌ  ｖａｒｉａｔｉｏｎ）を含む。
【００４１】
このような誘導体は、本明細書に記載されている化合物のプロドラッグ、本明細書に記載されている他の化合物の調製において使用される化合物を含めて、１つまたは複数の保護または保護基を含む本明細書に記載されている化合物を含み得ることを理解すべきである。
【００４２】
さらに、本明細書に記載されている化合物はまた、様々なその誘導体の対応するプロドラッグを含めたプロドラッグ群を含み得る。さらに、本明細書に記載されている化合物は、アモルファス、およびありとあらゆる形態学的形態であり得る。さらに、本明細書に記載されている化合物は、水和物、または他の溶媒和物を含めた、溶媒和物の形態であり得る。
【００４３】
本明細書に記載されている化合物は、１つまたは複数のキラル中心を含有してもよく、またはそうでなければ複数の立体異性体として存在することができ得る。一実施形態において、本明細書に記載されている発明は、任意の特定の立体化学的な要件に限定されず、化合物、ならびにこれらを含む組成物、方法、使用、および医薬は、光学的に純粋であってもよく、またはエナンチオマーのラセミ混合物および他の混合物、ジアステレオマーの他の混合物などを含めて、種々の立体異性混合物のいずれかでよいことを理解すべきである。立体異性体のこのような混合物は、１つまたは複数の他のキラル中心における立体化学的配置の混合物を含む一方で、１つまたは複数のキラル中心における単一の立体化学的配置を含み得ることをまた理解すべきである。
【００４４】
同様に、本明細書に記載されている化合物は、幾何学的中心、例えば、シス、トランス、Ｅ、およびＺ二重結合を含み得る。別の実施形態において、本明細書に記載されている発明は、任意の特定の幾何異性体の要件に限定されず、化合物、ならびにこれらを含む組成物、方法、使用、および医薬は、純粋であってもよく、または種々の幾何異性体混合物のいずれかでよいことを理解すべきである。幾何異性体のこのような混合物は、１つまたは複数の他の二重結合において幾何の混合物を含む一方で、１つまたは複数の二重結合において単一の配置を含み得ることをまた理解すべきである。
【００４５】
本明細書において使用する場合、「アルキル」という用語は、必要に応じて分岐状である炭素原子の鎖を含む。本明細書において使用する場合、「アルケニル」および「アルキニル」という用語は各々、必要に応じて分岐状であり、かつそれぞれ、少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む、炭素原子の鎖を含む。アルキニルはまた、１つまたは複数の二重結合を含み得ることを理解すべきである。特定の実施形態において、アルキルは有利に、Ｃ１〜Ｃ２４、Ｃ１〜Ｃ１２、Ｃ１〜Ｃ８、Ｃ１〜Ｃ６、およびＣ１〜Ｃ４を含めて、限定された長さであることをさらに理解すべきである。例示的に、Ｃ１〜Ｃ８、Ｃ１〜Ｃ６、およびＣ１〜Ｃ４を含めて、このような特に限定された長さのアルキル基は、低級アルキルと称し得る。特定の実施形態において、アルケニルおよび／またはアルキニルはそれぞれ有利に、Ｃ２〜Ｃ２４、Ｃ２〜Ｃ１２、Ｃ２〜Ｃ８、Ｃ２〜Ｃ６、およびＣ２〜Ｃ４を含めて、限定された長さであり得ることをさらに理解すべきである。例示的に、Ｃ２〜Ｃ８、Ｃ２〜Ｃ６、およびＣ２〜Ｃ４を含めて、このような特に限定された長さのアルケニル基および／またはアルキニル基は、低級アルケニルおよび／またはアルキニルと称し得る。より短いアルキル基、アルケニル基、および／またはアルキニル基は、化合物に親油性をあまり付加し得ず、それに応じて異なる薬物動態挙動を有することが本明細書において認識される。本明細書に記載されている発明の実施形態において、いずれの場合にも、アルキルを列挙することは、本明細書に定義されているようなアルキル、および必要に応じて低級アルキルを指すことを理解すべきである。本明細書に記載されている発明の実施形態において、いずれかの場合にも、アルケニルを列挙することは、本明細書に定義されているようなアルケニル、および必要に応じて低級アルケニルを指すことを理解すべきである。本明細書に記載されている発明の実施形態において、いずれの場合にも、アルキニルを列挙することは、本明細書に定義されているようなアルキニル、および必要に応じて低級アルキニルを指すことを理解すべきである。例示的なアルキル基、アルケニル基、およびアルキニル基は、これらに限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、２−ペンチル、３−ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルなど、ならびに１つもしくは複数の二重および／または三重結合を含有する対応する基、またはこれらの組合せである。
【００４６】
本明細書において使用する場合、「アルキレン」という用語は、必要に応じて分岐状である炭素原子の二価の鎖を含む。本明細書において使用する場合、「アルケニレン」および「アルキニレン」という用語は、必要に応じて分岐状であり、かつそれぞれ、少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む、炭素原子の二価の鎖を含む。アルキニレンはまた、１つまたは複数の二重結合を含み得ることを理解すべきである。特定の実施形態において、アルキレンは有利に、Ｃ１〜Ｃ２４、Ｃ１〜Ｃ１２、Ｃ１〜Ｃ８、Ｃ１〜Ｃ６、およびＣ１〜Ｃ４を含めて、限定された長さであることをさらに理解すべきである。例示的に、Ｃ１〜Ｃ８、Ｃ１〜Ｃ６、およびＣ１〜Ｃ４を含めて、このような特に限定された長さのアルキレン基は、低級アルキレンと称し得る。特定の実施形態において、アルケニレンおよび／またはアルキニレンはそれぞれ有利に、Ｃ２〜Ｃ２４、Ｃ２〜Ｃ１２、Ｃ２〜Ｃ８、Ｃ２〜Ｃ６、およびＣ２〜Ｃ４を含めて、限定された長さであり得ることをさらに理解すべきである。例示的に、Ｃ２〜Ｃ８、Ｃ２〜Ｃ６、およびＣ２〜Ｃ４を含めたこのような特に限定された長さのアルケニレン基および／またはアルキニレン基は、低級アルケニレンおよび／またはアルキニレンと称し得る。より短いアルキレン基、アルケニレン基、および／またはアルキニレン基は、化合物に親油性をあまり付加し得ず、それに応じて異なる薬物動態挙動を有することが本明細書において認識される。本明細書に記載されている発明の実施形態において、いずれの場合にも、アルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンを列挙することは、本明細書に定義されているようなアルキレン、アルケニレン、およびアルキニレン、ならびに必要に応じて低級アルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンを指すことを理解すべきである。例示的なアルキル基は、これらに限定されないが、メチレン、エチレン、ｎ−プロピレン、イソプロピレン、ｎ−ブチレン、イソブチレン、ｓｅｃ−ブチレン、ペンチレン、１，２−ペンチレン、１，３−ペンチレン、ヘキシレン、ヘプチレン、オクチレンなどである。
【００４７】
本明細書において使用する場合、「シクロアルキル」という用語は、必要に応じて分岐状である炭素原子の鎖を含み、鎖の少なくとも一部は、環状である。シクロアルキルアルキルは、シクロアルキルのサブセットであることを理解すべきである。シクロアルキルは、多環式であり得ることを理解すべきである。例示的なシクロアルキルには、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、２−メチルシクロプロピル、シクロペンチルエト−２−イル、アダマンチルなどが含まれる。本明細書において使用する場合、「シクロアルケニル」という用語は、必要に応じて分岐状であり、かつ少なくとも１つの二重結合を含む、炭素原子の鎖を含み、鎖の少なくとも一部は、環状である。１つまたは複数の二重結合は、シクロアルケニルの環状部分および／またはシクロアルケニルの非環状部分にあり得ることを理解すべきである。シクロアルケニルアルキルおよびシクロアルキルアルケニルはそれぞれ、シクロアルケニルのサブセットであることを理解すべきである。シクロアルキルは、多環式であり得ることを理解すべきである。例示的なシクロアルケニルには、これらに限定されないが、シクロペンテニル、シクロヘキシルエテン−２−イル、シクロヘプテニルプロペニルなどが含まれる。シクロアルキルおよび／またはシクロアルケニルを形成する鎖は有利に、Ｃ３〜Ｃ２４、Ｃ３〜Ｃ１２、Ｃ３〜Ｃ８、Ｃ３〜Ｃ６、およびＣ５〜Ｃ６を含めて、限定された長さであることをさらに理解すべきである。それぞれシクロアルキルおよび／またはシクロアルケニルを形成するより短いアルキル鎖および／またはアルケニル鎖は、化合物に親油性をあまり付加し得ず、それに応じて異なる薬物動態挙動を有することが本明細書において認識される。
【００４８】
本明細書において使用する場合、「ヘテロアルキル」という用語は、炭素および少なくとも１個のヘテロ原子の両方を含み、かつ必要に応じて分岐状である、原子の鎖を含む。例示的なヘテロ原子は、窒素、酸素、および硫黄を含む。特定の変化において、例示的なヘテロ原子はまた、リン、およびセレンを含む。本明細書において使用する場合、ヘテロシクリルおよび複素環を含めた「シクロヘテロアルキル」という用語は、炭素および少なくとも１個のヘテロ原子の両方、例えば、ヘテロアルキルを含み、かつ必要に応じて分岐状である、原子の鎖を含み、鎖の少なくとも一部は、環状である。例示的なヘテロ原子は、窒素、酸素、および硫黄を含む。特定の変化において、例示的なヘテロ原子はまた、リン、およびセレンを含む。例示的なシクロヘテロアルキルには、これらに限定されないが、テトラヒドロフリル、ピロリジニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、キヌクリジニルなどが含まれる。
【００４９】
本明細書において使用する場合、「アリール」という用語は、単環式および多環式の芳香族炭素環基を含み、これらのそれぞれは必要に応じて置換されていてもよい。本明細書に記載されている例示的な芳香族炭素環基には、これらに限定されないが、フェニル、ナフチルなどが含まれる。本明細書において使用する場合、「ヘテロアリール」という用語は、芳香族複素環基を含み、これらのそれぞれは必要に応じて置換されていてもよい。例示的な芳香族複素環基には、これらに限定されないが、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、テトラジニル、キノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイソチアゾリルなどが含まれる。
【００５０】
本明細書において使用する場合、「アミノ」という用語は、基ＮＨ２、アルキルアミノ、およびジアルキルアミノを含み、ジアルキルアミノにおける２個のアルキル基は、同一でも異なってもよく、すなわち、アルキルアルキルアミノである。例示的に、アミノには、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、メチルエチルアミノなどが含まれる。さらに、アミノアルキル、またはアシルアミノなど、アミノが修飾され、または別の用語によって修飾されるとき、用語アミノの上記の変化は、この中に含まれることを理解すべきである。例示的に、アミノアルキルは、Ｈ２Ｎ−アルキル、メチルアミノアルキル、エチルアミノアルキル、ジメチルアミノアルキル、メチルエチルアミノアルキルなどを含む。例示的に、アシルアミノは、アシルメチルアミノ、アシルエチルアミノなどを含む。
【００５１】
本明細書において使用する場合、「アミノおよびその誘導体」という用語は、本明細書に記載のようなアミノ、およびアルキルアミノ、アルケニルアミノ、アルキニルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、ヘテロアルケニルアミノ、ヘテロアルキニルアミノ、シクロアルキルアミノ、シクロアルケニルアミノ、シクロヘテロアルキルアミノ、シクロヘテロアルケニルアミノ、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ、アリールアルケニルアミノ、アリールアルキニルアミノ、ヘテロアリールアミノ、ヘテロアリールアルキルアミノ、ヘテロアリールアルケニルアミノ、ヘテロアリールアルキニルアミノ、アシルアミノなどを含み、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている。「アミノ誘導体」という用語はまた、尿素、カルバメートなどを含む。
【００５２】
本明細書において使用する場合、「ヒドロキシおよびその誘導体」という用語は、ＯＨ、およびアルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、ヘテロアルケニルオキシ、ヘテロアルキニルオキシ、シクロアルキルオキシ、シクロアルケニルオキシ、シクロヘテロアルキルオキシ、シクロヘテロアルケニルオキシ、アリールオキシ、アリールアルキルオキシ、アリールアルケニルオキシ、アリールアルキニルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、ヘテロアリールアルケニルオキシ、ヘテロアリールアルキニルオキシ、アシルオキシなどを含み、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている。「ヒドロキシ誘導体」という用語はまた、カルバメートなどを含む。
【００５３】
本明細書において使用する場合、「チオおよびその誘導体」という用語は、ＳＨ、およびアルキルチオ、アルケニルチオ、アルキニルチオ、ヘテロアルキルチオ、ヘテロアルケニルチオ、ヘテロアルキニルチオ、シクロアルキルチオ、シクロアルケニルチオ、シクロヘテロアルキルチオ、シクロヘテロアルケニルチオ、アリールチオ、アリールアルキルチオ、アリールアルケニルチオ、アリールアルキニルチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロアリールアルキルチオ、ヘテロアリールアルケニルチオ、ヘテロアリールアルキニルチオ、アシルチオなどを含み、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている。「チオ誘導体」という用語はまた、チオカルバメートなどを含む。
【００５４】
本明細書において使用する場合、「アシル」という用語は、ホルミル、およびアルキルカルボニル、アルケニルカルボニル、アルキニルカルボニル、ヘテロアルキルカルボニル、ヘテロアルケニルカルボニル、ヘテロアルキニルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、シクロアルケニルカルボニル、シクロヘテロアルキルカルボニル、シクロヘテロアルケニルカルボニル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、アリールアルケニルカルボニル、アリールアルキニルカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロアリールアルキルカルボニル、ヘテロアリールアルケニルカルボニル、ヘテロアリールアルキニルカルボニル、アシルカルボニルなどを含み、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている。
【００５５】
本明細書において使用する場合、「カルボニルおよびその誘導体」という用語は、基Ｃ（Ｏ）、基Ｃ（Ｓ）、基Ｃ（ＮＨ）およびその置換アミノ誘導体を含む。
【００５６】
本明細書において使用する場合、「カルボン酸およびその誘導体」という用語は、基ＣＯ２Ｈおよびその塩、ならびにそのエステルおよびアミド、ならびにＣＮを含む。
【００５７】
本明細書において使用する場合、「スルフィン酸またはその誘導体」という用語は、ＳＯ２Ｈおよびその塩、ならびにそのエステルおよびアミドを含む。
【００５８】
本明細書において使用する場合、「スルホン酸またはその誘導体」という用語は、ＳＯ３Ｈおよびその塩、ならびにそのエステルおよびアミドを含む。
【００５９】
本明細書において使用する場合、「スルホニル」という用語は、アルキルスルホニル、アルケニルスルホニル、アルキニルスルホニル、ヘテロアルキルスルホニル、ヘテロアルケニルスルホニル、ヘテロアルキニルスルホニル、シクロアルキルスルホニル、シクロアルケニルスルホニル、シクロヘテロアルキルスルホニル、シクロヘテロアルケニルスルホニル、アリールスルホニル、アリールアルキルスルホニル、アリールアルケニルスルホニル、アリールアルキニルスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、ヘテロアリールアルキルスルホニル、ヘテロアリールアルケニルスルホニル、ヘテロアリールアルキニルスルホニル、アシルスルホニルなどを含み、これらのそれぞれは必要に応じて置換されている。
【００６０】
「必要に応じて置換されている」という用語は、本明細書において使用する場合、必要に応じて置換されているラジカル上の他の官能基による水素原子の置き換えを含む。このような他の官能基には例示的に、これらに限定されないが、アミノ、ヒドロキシル、ハロ、チオール、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、ニトロ、スルホン酸およびその誘導体、カルボン酸およびその誘導体などが含まれる。例示的に、アミノ、ヒドロキシル、チオール、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、および／またはスルホン酸のいずれかは、必要に応じて置換されている。
【００６１】
本明細書において使用する場合、「必要に応じて置換されているアリール」および「必要に応じて置換されているヘテロアリール」という用語は、必要に応じて置換されているアリールまたはヘテロアリール上の他の官能基による水素原子の置き換えを含む。このような他の官能基には例示的に、これらに限定されないが、アミノ、ヒドロキシ、ハロ、チオ、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、ニトロ、スルホン酸およびその誘導体、カルボン酸およびその誘導体などが含まれる。例示的に、アミノ、ヒドロキシ、チオ、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、および／またはスルホン酸のいずれかは、必要に応じて置換されている。
【００６２】
例示的な置換基は、これらに限定されないが、ラジカル−（ＣＨ２）ｘＺＸを含み、式中、ｘは、０〜６の整数であり、ＺＸは、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイルオキシを含めたアルカノイルオキシ、必要に応じて置換されているアロイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルを含めたアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシを含めたアルコキシ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキルを含めたシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルコキシを含めたシクロアルコキシ、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルを含めたアルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニルを含めたアルキニル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキルを含めたハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシを含めたハロアルコキシ、Ｃ３〜Ｃ８ハロシクロアルキルを含めたハロシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ハロシクロアルコキシを含めたハロシクロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）アミノ、アルキルカルボニルアミノ、Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）アルキルカルボニルアミノ、アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノアルキル、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）アミノアルキル、アルキルカルボニルアミノアルキル、Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）アルキルカルボニルアミノアルキル、シアノ、およびニトロから選択され、またはＺＸは、−ＣＯ２Ｒ４および−ＣＯＮＲ５Ｒ６から選択され、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、およびヘテロアリール−Ｃ１〜Ｃ６アルキルから出現する毎にそれぞれ独立に選択される。
【００６３】
「プロドラッグ」という用語は、本明細書において使用する場合、生物系に投与したとき、１つまたは複数の自発的化学反応、酵素が触媒する化学反応、および／または代謝的化学反応、あるいはこれらの組合せの結果として生物活性化合物を生じさせる任意の化合物を一般に指す。インビボで、プロドラッグは典型的には、酵素（例えば、エステラーゼ、アミダーゼ、ホスファターゼなど）、単純な生物化学、またはより薬理学的に活性な薬物を遊離もしくは再生するインビボでの他のプロセスによって作用される。この活性化は、内在性宿主酵素、またはプロドラッグの投与の前、投与の後、もしくは投与の間に宿主に投与される非内性的酵素の作用を介して起こり得る。プロドラッグ使用のさらなる詳細は、米国特許第５，６２７，１６５号；およびＰａｔｈａｌｋら、Ｅｎｚｙｍｉｃ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  ｇｒｏｕｐ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｉｎ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｓｔｅｒｅｏｓｅｌ．  Ｂｉｏｃａｔａｌ．、７７５〜７９７頁（２０００年）に記載されている。プロドラッグは、目標、例えば、標的とした送達、安全性、安定性などが達成されるや否や本来の薬物に有利に変換され、それに続いて、プロドラッグを形成する基の放出された残りのその後の急速な消失が起こることが認識される。
【００６４】
プロドラッグは、最終的にインビボで切断される基を、化合物上に存在する１つまたは複数の官能基、例えば、−ＯＨ−、−ＳＨ、−ＣＯ２Ｈ、−ＮＲ２に結合させることによって、本明細書に記載されている化合物から調製し得る。例示的なプロドラッグには、これらに限定されないが、カルボン酸エステル（基は、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、アシルオキシアルキル、アルコキシカルボニルオキシアルキルである）、ならびにヒドロキシル、チオールおよびアミンのエステル（結合している基は、アシル基、アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基、ホスフェート基またはスルフェート基である）が含まれる。活性エステルとしてまた称される例示的なエステルには、これらに限定されないが、１−インダニル、Ｎ−オキシスクシンイミド；アシルオキシアルキル基、例えば、アセトキシメチル、ピバロイルオキシメチル、β−アセトキシエチル、β−ピバロイルオキシエチル、１−（シクロヘキシルカルボニルオキシ）プロパ−１−イル、（１−アミノエチル）カルボニルオキシメチルなど；アルコキシカルボニルオキシアルキル基、例えば、エトキシカルボニルオキシメチル、α−エトキシカルボニルオキシエチル、β−エトキシカルボニルオキシエチルなど；ジ−低級アルキルアミノアルキル基を含めたジアルキルアミノアルキル基、例えば、ジメチルアミノメチル、ジメチルアミノエチル、ジエチルアミノメチル、ジエチルアミノエチルなど；２−（アルコキシカルボニル）−２−アルケニル基、例えば、２−（イソブトキシカルボニル）ペンタ−２−エニル、２−（エトキシカルボニル）ブタ−２−エニルなど；ならびにラクトン基、例えば、フタリジル、ジメトキシフタリジルなどが含まれる。
【００６５】
さらなる例示的なプロドラッグは、本明細書に記載されている化合物の溶解性および／または安定性を増加させるように機能する化学部分、例えば、アミド基またはリン基を含有する。アミノ基についてのさらなる例示的なプロドラッグには、これらに限定されないが、（Ｃ３〜Ｃ２０）アルカノイル；ハロ−（Ｃ３〜Ｃ２０）アルカノイル；（Ｃ３〜Ｃ２０）アルケノイル；（Ｃ４〜Ｃ７）シクロアルカノイル；（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル（Ｃ２〜Ｃ１６）アルカノイル；必要に応じて置換されているアロイル、例えば、非置換アロイル、またはハロゲン、シアノ、トリフルオロメタンスルホニルオキシ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシからなる群から選択される１〜３個の置換基（これらのそれぞれは、１〜３個のハロゲン原子の１つもしくは複数で必要に応じてさらに置換されている）で置換されているアロイル；必要に応じて置換されているアリール（Ｃ２〜Ｃ１６）アルカノイルおよび必要に応じて置換されているヘテロアリール（Ｃ２〜Ｃ１６）アルカノイル、例えば、置換されていないアリールラジカルまたはヘテロアリールラジカル、あるいはハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシからなる群から選択される１〜３個の置換基（これらのそれぞれは、１〜３個のハロゲン原子で必要に応じてさらに置換されている）で置換されているアリールラジカルまたはヘテロアリールラジカル；ならびにヘテロアリール部分においてＯ、ＳおよびＮから選択される１〜３個のヘテロ原子、ならびにアルカノイル部分において２〜１０個の炭素原子を有する必要に応じて置換されているヘテロアリールアルカノイル、例えば、置換されていないヘテロアリールラジカル、またはハロゲン、シアノ、トリフルオロメタンスルホニルオキシ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、および（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシからなる群から選択される１〜３個の置換基（これらのそれぞれは、１〜３個のハロゲン原子で必要に応じてさらに置換されている）で置換されているヘテロアリールラジカルが含まれる。例示した基は例示的であり、網羅的でなく、慣例的なプロセスによって調製し得る。
【００６６】
プロドラッグ自体は、有意な生物活性を有し得ないが、代わりに１つまたは複数の自発的化学反応、酵素が触媒する化学反応、および／または代謝的化学反応、あるいはこれらの組合せをインビボでの投与後に受け、生物活性があり、または生物活性化合物の前駆体である本明細書に記載されている化合物を生成することが理解される。しかし、場合によって、プロドラッグは、生物活性があることが認識される。プロドラッグは、改善された経口バイオアベイラビリティー、薬力学的半減期などによって、薬物の有効性または安全性を改善させる役割を果し得ることが多いことがまた認識される。プロドラッグはまた、望ましくない薬物特性を単純にマスクし、または薬物送達を改善させる基を含む本明細書に記載されている化合物の誘導体を指す。例えば、１種または複数の本明細書に記載されている化合物は、有利にブロックまたは最小化さる望ましくない特性を示し得、臨床薬物適用における薬理学的、医薬的、または薬物動態学的バリア、例えば、低い経口薬物吸収、部位特異性の欠如、化学的不安定性、毒性、および乏しい患者の許容性（悪い味、匂い、注射部位における疼痛など）、およびその他となり得る。プロドラッグ、または可逆的誘導体を使用する他の戦略は、薬物の臨床適用の最適化において有用であり得ることが本明細書において認識される。
【００６７】
「治療有効量」という用語は、本明細書において使用する場合、処置される疾患または障害の症状の緩和を含む、研究者、獣医師、医師または他の臨床医によって探究されている、組織系、動物またはヒトにおいて生物学的または医薬的反応を誘発する活性化合物または医薬品の量を指す。一態様において、治療有効量は、任意の医学的処置に適用できる合理的な利益／リスク比で、疾患または疾患の症状を処置または緩和し得るものである。しかし、本明細書に記載されている化合物および組成物の１日当たりの総使用は、正しい医学的判断の範囲内で担当医が決定し得ることを理解すべきである。任意の特定の患者についての特定の治療有効用量レベルは、処置される障害および障害の重症度；用いる特定の化合物の活性；用いる特定の組成物；患者の年齢、体重、身体全体の健康、性別および食事：用いる特定の化合物の投与の時間、投与経路、および排せつ率；処置の持続期間；用いる特定の化合物と組み合わせて、または同時に使用される薬物；ならびに通常の技量の研究者、獣医師、医師または他の臨床医に周知の同様の要因を含めた種々の要因によって決まる。
【００６８】
治療有効量は、単独療法または併用療法を指そうとなかろうと、本明細書に記載されている化合物の１回または複数回の投与の間に起こり得るいずれの毒性、または他の望ましくない副作用に関連して有利に選択されることがまた認識される。さらに、本明細書に記載されている共同療法は、このような毒性、または他の望ましくない副作用を示す、より低い用量の化合物の投与を可能とし得、これらのより低い用量は、毒性の閾値未満、または治療濃度域において共同療法の非存在下で投与されるよりも低いことが認識される。
【００６９】
本明細書において使用する場合、「組成物」という用語は一般に、特定の量の特定の成分を含む任意の生成物、および特定の量の特定の成分の組合せから直接的または間接的にもたらされる任意の生成物を指す。本明細書に記載されている組成物は、単離された本明細書に記載されている化合物から、または本明細書に記載されている化合物の塩、溶液、水和物、溶媒和物、および他の形態から調製し得ることを理解すべきである。組成物は、本明細書に記載されている化合物の様々なアモルファス、非アモルファス、部分的結晶性、結晶性、および／または他の形態学的形態から調製し得ることをまた理解すべきである。組成物は、本明細書に記載されている化合物の様々な水和物および／または溶媒和物から調製し得ることをまた理解すべきである。したがって、本明細書に記載されている化合物を列挙するこのような医薬組成物は、本明細書に記載されている化合物の様々な形態学的形態および／または溶媒和物形態もしくは水和物形態のそれぞれ、または任意の組合せを含むことが理解される。例示的に、組成物は、１種または複数の担体、希釈剤、および／または賦形剤を含み得る。本明細書に記載されている化合物、またはこれらを含有する組成物は、本明細書に記載の方法に適した任意の慣例的な剤形で治療有効量にて製剤化し得る。本明細書に記載されている化合物、またはこのような製剤を含めたこれらを含有する組成物は、公知の手順を利用して、本明細書に記載の方法のための多種多様の慣例的な経路によって、および多種多様の投薬フォーマットで投与し得る（一般に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（第２１版、２００５年）を参照されたい）。
【００７０】
「投与する（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）」という用語は、本明細書において使用する場合、これらに限定されないが、経口（ｐｏ）、静脈内（ｉｖ）、筋肉内（ｉｍ）、皮下（ｓｃ）、経皮的、吸入、バッカル、目、舌下、膣、直腸などを含めた、本明細書に記載されている化合物および組成物を患者に導入する全ての手段を含む。本明細書に記載されている化合物および組成物は、慣例的な無毒性の薬学的に許容される担体、アジュバント、およびビヒクルを含有する単位剤形および／または製剤で投与し得る。本明細書に記載されている単位用量および／または単位剤形は、単一でよく、または分割し得ることを理解すべきである。単位用量および／または単位剤形は、毎日、週１回、月１回、または年４回の種々の投薬プロトコルを使用して投与し得ることをまた理解すべきである。投薬プロトコルの例には、ｑ．ｄ．、ｂ．ｉ．ｄ．、ｔ．ｉ．ｄ．、またはそれどころか１日おき、週に１回、週に２回、月に１回、四半期に１回などが含まれる。これらの場合のそれぞれにおいて、毎日、週１回、月１回、または年４回の用量例は、本明細書に記載されている治療有効量に対応することが理解される。さらに、分割用量が投与されるとき、対応する治療有効量は、分割用量の総計であることを理解すべきである。
【００７１】
本明細書に記載の方法において、同時投与の個々の構成要素、または組合せは、任意の適切な手段によって、同時期に、同時に、逐次的に、別々に、または単一の医薬製剤において投与することができることを理解すべきである。同時投与された化合物または組成物が別々の剤形で投与される場合、各化合物について１日当たり投与される投薬の数は、同一でも異なってもよい。化合物または組成物は、同じまたは異なる投与経路を介して投与し得る。化合物または組成物は、同時または交互のレジメンに従って、治療の過程において同じまたは異なる時間に、分割されたまたは単一の形態で併行的に投与し得る。
【００７２】
本願発明の組合せの各化合物の投薬量は、投与方法、処置する状態、状態の重症度、状態が処置または予防されるかどうか、ならびに処置される人の年齢、体重、および健康を含めていくつかの要因によって決まる。さらに、特定の患者についての薬理ゲノミクス（治療の薬物動態学的、薬力学的または有効性プロファイルに対する遺伝子型の効果）情報は、使用される投薬量に影響を与え得る。
【００７３】
上記の例示的な投薬量および投薬プロトコルに加えて、本明細書に記載されている化合物の任意の１つまたは混合物の有効量は、公知の技術の使用によって、および／または類似の状況下で得た結果を観察することによって、担当の診断医または医師が容易に決定することができることを理解すべきである。有効量または用量の決定において、これらに限定されないが、ヒトを含めた哺乳動物の種、そのサイズ、年齢、および身体全体の健康、関与する特定の疾患または障害、疾患または障害の程度または併発または重症度、個々の患者の反応、投与される特定の化合物、投与形態、投与される調製物のバイオアベイラビリティーの特徴、選択した用量レジメン、併用の医薬の使用、ならびに他の関連性のある状況を含めて多数の要因は、担当の診断医または医師によって考慮される。
【００７４】
本明細書に記載されている化合物の医薬組成物の作製において、本明細書に記載されている様々な形態のいずれかにおける治療有効量の１種または複数の化合物は、１種または複数の賦形剤と混合し、１種または複数の賦形剤で希釈し、あるいはカプセル、サシェ、紙、または他の容器の形態であり得るこのような担体中に封入してもよい。賦形剤は希釈剤としての役割を果たしてもよく、固体、半固体、または液体材料でもよく、これは活性成分のためのビヒクル、担体または媒体としての役割を果たす。このように、製剤組成物は、錠剤、丸剤、粉末、ロゼンジ、サシェ、カシェ、エリキシル、懸濁液、エマルション、溶液、シロップ、エアゾール（固体として、または液体媒体中）、軟膏、軟質および硬質ゼラチンカプセル、坐剤、無菌注射剤、ならびに無菌パッケージ化散剤の形態でよい。組成物は、選択した用量および剤形によって概して約０．１％〜約９９．９％の活性成分を含有し得る。
【００７５】
１種または複数の本明細書に記載されている化合物を使用した、ＨＣＶ、ＨＩＶ、コロナウイルス、および／またはＢＶＤＶの１つまたは複数の効果を処置または寛解するための本明細書に記載されている化合物、組成物、および方法の有効な使用は、動物モデル、例えば、マウス、イヌ、ブタ、および非ヒト霊長類の疾患動物モデルに基づき得る。例えば、ヒトにおけるＨＣＶ、コロナウイルス、例えば、ＳＡＲＳ−ＣｏＶもしくはＭＥＲＳ−ＣｏＶ、および／またはＨＩＶは、機能喪失、および／または症状の進行によって特徴付けてもよく、これらのそれぞれは、動物、例えば、マウス、および他の代用試験動物において誘発し得ることが理解される。さらに、ウシにおけるＢＶＤＶは、機能喪失、および／または症状の進行によって特徴付けてもよく、これらのそれぞれは、代替動物、例えば、マウス、および他の代用試験動物において誘発し得ることが理解される。このような動物モデルを使用して、本明細書に記載されている処置の方法および医薬組成物を評価し、本明細書に記載されている治療有効量を決定し得る。
【００７６】
下記の実施例は、本発明の特定の実施形態をさらに例示する。しかし、下記の例示的な実施例は、本発明を限定すると決して解釈すべきではない。
【実施例】
【００７７】
（実施例）
試験化合物。本明細書に記載されている例示的な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドは、商業的サ供給者から得て（純度９０％超）、そのまま使用する。本明細書に記載されている他の例示的な置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドは、慣例的なプロセスを使用して調製する。
【００７８】
（実施例）
ＫＭＴマウス（商標）における試験化合物のＰＫおよび認容。試験化合物のそれぞれについての３つの漸増用量レベルを、５ｍＬ／ｋｇの容量で１日１回腹腔内（ＩＰ）注射によって投与する。認容は、１４日の処置の経過にわたり決定する。研究動物は、３つの５匹のマウス群を含む。また含まれるのは、５ｍＬ／ｋｇのビヒクルを注射される１つの５匹のマウス対照群である。マウス群は、１２．０ｇ以上の体重範囲の雄性および雌性両方の３カ月齢マウスであるＫＭＴマウス（商標）を含む。薬物投与の直前の８日目の朝（７日目の投与の２４時間後のトラフ試料）、および１５日目の朝（最終の１４日目の投与の２４時間後のトラフ試料）に、試験化合物の血清濃度の測定のために血液試料を動物の中央の尾部動脈から抜き取る。概ね１００μＬの容量を管中に集め、２〜８℃にて凝固させ、遠心分離し、血清を血餅ペレットの上から取り出し、濃度測定の直前まで−８０℃にて冷凍保存する。
【００７９】
（実施例）
キメラマウスモデル。使用する動物は、ホモ接合体のアルブミン（Ａｌｂ）−ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーター（ｕＰＡ）／重症複合免疫不全（ＳＣＩＤ）マウスであり、使用の直前までウイルスが存在しない／抗原が存在しない環境において収容する。本明細書において使用するマウスモデルは、従前に記載されたものと同様である（例えば、Ｎ．  Ｍ．  Ｋｎｅｔｅｍａｎら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２００６年、４３巻、１３４６頁；Ｎ．  Ｍ．  Ｋｎｅｔｅｍａｎら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２００９年、４９巻、７４５頁を参照されたい）。
【００８０】
ヒト肝細胞の単離および移植。ヒト肝臓組織の切片（約２０ｃｍ３）を、冷たいリン酸緩衝生理食塩水でフラッシュし、組織単離実験室にすばやく輸送する。肝細胞を単離し、従前に記載されている技法を使用して０．３８ｍｇ／ｍｌのＬｉｂｅｒａｓｅ  ＣＩ溶液（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ）によるコラゲナーゼに基づく灌流を使用して精製する（Ｍｅｒｃｅｒ  Ｄｆら、Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｖｉｒｕｓ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ  ｗｉｔｈ  Ｃｈｉｍｅｒｉｃ  Ｈｕｍａｎ  Ｌｉｖｅｒｓ、Ｎａｔ．  Ｍｅｄ．、２００１年、７巻、９２７〜９３３頁）。レシピエントマウス（５〜１４日齢、ｕＰＡ／ＳＣＩＤマウス）をハロタン／Ｏ２で麻酔し、１×１０６個の生存肝細胞を脾臓の下極に注射する。次いで、肝細胞は自力で肝臓に移行し、そこで移植および拡大する。
【００８１】
ヒトα−１アンチトリプシン分析。ヒトα−１アンチトリプシン（ｈＡＡＴ）分析を使用して、ヒト肝細胞グラフトの安定的で持続的な機能を確認し、ＨＣＶ力価におけるいずれか変化が肝細胞の死または傷害に起因するかどうかを決定する。マウス血清を、上記のようなサンドイッチ酵素連結免疫吸着アッセイによって分析する（Ｎ．  Ｍ．  Ｋｎｅｔｅｍａｎら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２００６年、４３巻、１３４６頁）。手短に言えば、マウス血清の試料（２μＬ）をブロッキング緩衝液で１／１００希釈し、捕捉抗体としてポリクローナルヤギ抗ヒトアルファ１−アンチトリプシン（ｈＡＡＴ）抗体（＃８１９０２、Ｄｉａｓｏｒｉｎ、Ｓｔｉｌｌｗａｔｅｒ  ＭＮ）を使用してサンドイッチＥＬＩＳＡによって分析する。同じ抗体の一部を、西洋ワサビペルオキシダーゼ（＃３１４８９、Ｐｉｅｒｃｅ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ）に架橋し、二次抗体として使用し、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）によるシグナル検出を行う。
【００８２】
ＨＣＶ単離および定量化。マウスの血清分析を、Ｃｏｂａｓ  Ａｍｐｌｉｃｏｒ  ＨＣＶモニターシステム（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用して盲検法様式で行う。定量化の下限は、６００ＩＵ／ｍＬである。ウイルスＲＮＡを、メーカーの指示に従ってＱｉａｇｅｎ（１９０７３）からの緩衝液ＡＶＬを使用して抽出する。ＲＮＡは、メーカーの指示に従って、Ｈｉｇｈ  Ｃａｐａｃｉｔｙ  ＲＮＡ  ｔｏ  ｃＤＮＡキット（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、＃４３６９０１６）によるＨＣＶ特異的プライマー（５’−ＡＧＧＴＴＴＡＧＧＡＴＴＣＧＴＧＣＴＣＡＴ）（配列番号１３）によってｃＤＮＡに転写する。ＡＢＩ７３００リアルタイムＰＣＲシステムおよびＴａｑｍａｎ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙを使用してＲＴ−ＰＣＲを行い、全ての測定は２重で行う。６−ＦＡＭ−ＣＡＣＣＣＴＡＴＣＡＧＧＣＡＧＴＡＣＣＡＣＡＡＧＧＣＣ−ＴＡＭＲＡ（配列番号１４）を、ＨＣＶ特異的検出プローブ、およびＨＣＶの保存５’ＵＴＲ領域（５’−ＴＧＣＧＧＡＡＣＣＧＧＴＧＡＧＴＡＣＡ（配列番号１５）、５’−ＡＧＧＴＴＴＡＧＧＡＴＴＣＧＴＧＣＴＣＡＴ（配列番号１３））を検出するプライマーセットとして使用する。Ｏｐｔｉｑｕａｎｔ  ＨＣＶ  ＲＮＡ  ｈｉｇｈ  ｃｏｎｔｒｏｌ（Ｏｐｔｉｑｕａｎｔ）に沿って、絶対定量化のために、ＨＣＶバリアントＨ７７ｃ（ｐＣＶ−Ｈ７７ｃ）の配列を含有するプラスミドの公知の希釈液の標準曲線を作成する。
【００８３】
実験の実施。肝細胞移植の６週間後に、マウスを血清ｈＡＡＴについてスクリーニングし、１００μｇ／ｍＬ超のカットオフを有する動物を、１００μｇの遺伝子型１ａ  ＨＣＶを含むヒト血清（概ね２×１０５コピー／ｍＬ）の腹腔内注射によって接種する。ベースラインＨＣＶレベルを接種１週間および２週間後に得て、２×１０４コピー／ｍＬ超の力価を有するマウスを実験群に割り当てる。割当ては、優先度の順に、ＨＣＶ力価、ｈＡＡＴレベル、性別、および体重について群のバランスを取るように努めた。
【００８４】
（実施例）
ＫＭＴマウス（商標）におけるＨＣＶ感染症に対する有効性。プロトコルは、従前の実施例において記載された研究からの忍容性およびＰＫ結果に基づいて選択された３種の用量レベルを含む。各試験化合物の有効性は、１日１回５ｍＬ／ｋｇの容量で腹腔内注射によって投与された試験化合物の３つの漸増用量レベルを用いて、１４日の処置の過程および７日の経過観察期間にわたって決定する。ベースラインの動物許容度基準は、下記の通りである。最小ｈＡＡＴ値＝８０；最小ＨＣＶ値＝１×１０４ＩＵ／ｍＬ；健康状態カットオフ≦１〜２。研究動物は、３つの５匹のマウス群を含む。また含まれるのは、５ｍＬ／ｋｇのビヒクルを注射された１つの５匹のマウス対照群である。マウス群は、１２．０ｇ以上の体重範囲を有する雄性および雌性の両方の３カ月齢のマウスのＫＭＴマウス（商標）を含む。３日目のｈＡＡＴおよびＨＣＶのベースライン血清濃度の測定のために、中央の尾部動脈から血液試料を抜き取る。試験化合物投薬の直前の７日目の朝、前日の概ね０８００時間に投与された最終の試験化合物の投与の２４時間後である１４日目の朝、および最後の試験化合物の投与の７日後である２１日目に、その後の血液を抜き取る。概ね１００μＬの容量を管中に集め、２〜８℃で凝固させ、遠心分離し、血清を血餅ペレットの上から取り出す。ＨＣＶおよびｈＡＡＴレベルについての試験の直前まで、血清試料を−８０℃で冷凍保存する。
【００８５】
（実施例）
抗ＨＣＶ有効性のためのインビトロアッセイ。ＨＣＶ研究は典型的には、感染した患者およびチンパンジーが関与する。しかし近年、ロバストなＨＣＶ感染系が、Ｈｕｈ−７ヒト肝細胞腫細胞系統に由来する細胞で生じた。これはＨＣＶ患者に由来する独特なＪＦＨ−１  ＨＣＶコンセンサスｃＤＮＡに基づく。逆遺伝学を使用して、感染性ウイルスは、このＨＣＶクローンから回収することができる。回収した生存ＪＦＨウイルスは、Ｈｕｈ−７細胞において連続継代することができる。この理由のために、この系は、これらの抗ＨＣＶ有効性について試験化合物の活性を評価するのに適している。
【００８６】
手短に言えば、６×１０３個のＨｕｈ７−１細胞を、コラーゲンコーティングされたＢｉｏＣｏａｔ  ９６ウェルプレート（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｂｅｄｆｏｒｄ、ＭＡ）の各ウェルにおいて１０％ウシ胎仔血清を補充したダルベッコ改変イーグル培地からなる０．２ｍｌの１０％培地中で一晩インキュベートする。引き続いて、２日の間隔で、培養物に新鮮な０．２ｍｌの１０％培地を補給する。培養物がコンフルエントとなった後、これらを２日の間隔で１％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）をさらに含む新鮮な０．２ｍｌの１０％培地を補給し続ける。２０日のこれらの補給の後、Ｈｕｈ７−１培養物を、０．０５フォーカス形成単位（ｆｆｕ）／細胞の感染多重度（ＭＯＩ）でＨＣＶを含有する新鮮な１％培地（血清レベルが１％であることを除いて１０％培地と同じ）と共にインキュベートする。ＨＣＶ（ＪＦＨ−１ｗｔ  Ｈｕｈ７）ストック力価は、１．５×１０５ｆｆｕ／ｍＬである。翌日（感染後１日目）および２日後（感染後３日目）、培地に、ＤＭＳＯに溶解した試験化合物を含有する新鮮な１％培地を補給する。化合物による処置の５日目に、ＲＮＡ単離およびリアルタイム−定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ｑＰＣＲ）のために細胞可溶化物を集め、細胞毒性分析のために培養培地を集める。
【００８７】
標準的プロトコルを使用して、総ＲＮＡをチオシアン酸グアニジン法によって細胞から単離する。ＴａｑＭａｎ逆転写試薬（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ、ＣＡ）を使用して、１μｇのＲＮＡをｃＤＮＡ合成のために使用し、それに続いてＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ７３００リアルタイムサーモサイクラーを使用してリアルタイムＰＣＲを行う。熱サイクルは、９５℃での１０分の最初の変性、それに続く４０サイクルの変性（９５℃で１５秒）およびアニーリング／伸長（６０℃で１分）からなる。ＨＣＶおよびヒトグリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）ＲＮＡレベルを、ＪＦＨ−１  ＨＣＶまたはＧＡＰＤＨ  ｃＤＮＡを含有するプラスミドの段階希釈の標準曲線に対して決定する。ＧＡＰＤＨおよびＨＣＶを検出するのに使用されるＰＣＲプライマーは、ＧＡＰＤＨ（ＮＭＸ００２０４６）５’−ＧＡＡＧＧＴＧＡＡＧＧＴＣＧＧＡＧＴＣ−３’（配列番号１６）（センス）および５’−ＧＡＡＧＡＴＧＧＴＧＡＴＧＧＧＡＴＴＴＣ−３’（配列番号１７）（アンチセンス）、ＪＦＨ−１  ＨＣＶ（ＡＢ０４７６３９）５’−ＴＣＴＧＣＧＧＡＡＣＣＧＧＴＧＡＧＴＡ−３’（配列番号１８）（センス）および５’−ＴＣＡＧＧＣＡＧＴＡＣＣＡＣＡＡＧＧＣ−３’（配列番号１９）（アンチセンス）である。
【００８８】
（実施例）
下記の表における化合物および抗ウイルス活性は、本明細書に記載されている。本明細書に記載されている化合物のそれぞれにおいて、それぞれの原子は完全な原子価を含み、それぞれの残りの原子は水素であることを理解すべきである。
例示的な化合物および抗ウイルス活性。複数回用量で試験した全ての実施例の化合物は、用量反応を示す。
【表１−１】
0005976224.tif 000017
【表１−２】
0005976224.tif 000018
【表１−３】
0005976224.tif 000019
【表１−４】
0005976224.tif 000020
【００８９】
実施例：ＨＣＶが誘導する細胞毒性試験。Ｐｒｏｍｅｇａ  ＣｙｔｏＴｏｘ９６非放射性細胞毒性アッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を使用して、試験化合物を、有効性のために使用した用量で細胞毒性について評価する。このキットは、培養培地において、形質膜の完全性喪失またはネクローシスによって細胞から放出される乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）レベルを測定する。この試験のために、従前示したＲＮＡレベルを検査するために使用した同じ５日の培養物から５０μＬの培養培地の試料を集める。本明細書に記載されている試験化合物は一般に、試験した用量で細胞毒性ではなく、明らかなＨｕｈ７−１細胞の損傷を一般にもたらさない。
【００９０】
５μＭ超の用量で、本明細書に記載されている化合物は、モック処置し、ＨＣＶに感染した未処置対照試料において観察されるようなＨＣＶ−が媒介する細胞損傷の低減において、１００Ｕ／ｍＬのＩＦＮ−β−１ｂ、１０μＭおよび８０μＭのＲＢＶ、ならびに１０μＭおよび１５μＭのＭＡと同じぐらい有効である。
【００９１】
（実施例）
ＨＣＶ感染症のための併用治療処置。ＨＣＶに感染した患者の有効な処置は、ＲＢＶおよびＩＦＮ−β−１ｂの両方を必要とすることが報告されてきた。この組合せは、それぞれの薬物そのままよりも強力であるためである。本明細書に記載されている化合物を試験して、これらがＲＢＶ、ＩＦＮ−β−１ｂ、またはこれらの組合せのいずれかの有効性を増加させるかどうかを決定する。細胞内のＨＣＶ  ＲＮＡの化学的に誘起された低減の決定のための記載されたプロトコルを使用して、２．５μＭまたは１０μＭの本明細書に記載されている化合物と組み合わせて、１０Ｕ／ｍＬのＩＦＮ−β−１ｂを用いて、およびこれを用いずに、ならびに１０μＭのＭＡおよび８０μＭのＲＢＶとの比較のために、細胞を処置する。
【００９２】
表１において示した結果は、これらの組合せが個々の処置より有効であることを示す。最も活性のある処置は、ＩＮＦ−β−１ｂプラスＭＡであり、減少する順にそれに続いて、ＩＦＮ−β−１ｂプラス化合物１６、次いで、ＩＦＮ−β−１ｂプラスＲＢＶである。ＩＦＮ−β−１ｂと化合物１６との組合せは、ＲＢＶを化合物１６よりほとんど一桁大きな用量で使用するにも関わらず、ＲＢＶで達成されるものより有効であることが観察される。
【００９３】
まとめると、下記の表における結果は、化合物１６とＩＦＮ−β−１ｂとの組合せが、いずれかの薬剤単独より効果的に細胞内のＨＣＶ  ＲＮＡレベルを低減させることを示す。
【表２】
0005976224.tif 000021
【００９４】
（実施例）
ＰＢＭＣにおけるＨＩＶ複製に対するアッセイ。１０ｍＬのＢＤ  Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ、ヘパリンコーティング（＃３６７８７４）管を使用して、同意の後、健常なドナーから血液を集める。血液の１０ｍＬ管毎に平均して１０×１０６個のＰＢＭＣを使用して、各ドナーから抜き取った血液の総量を決定する。試験化合物の存在下でＩＬ−２およびフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）で刺激された培養したヒト末梢血単核球細胞（ＰＢＭＣ）の生存率について、試験化合物を慣例的なアッセイを使用して評価する。慣例的なアッセイを使用して、ＨＩＶに感染したこのような細胞におけるＨＩＶ複製に対して試験化合物を評価する。対照細胞生存率は、比色アッセイ、例えば、ＭＴＳ（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ＃Ｇ３５８２）によって、およびＨＩＶ複製は、ＮＩＨによって供給されるＥＬＩＳＡキットを使用したＨＩＶカプシドｐ２４抗原（５）のレベルを測定することによって決定する。置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、２５μＭの最終濃度で使用する。増殖培地における最終ＤＭＳＯ濃度は、０．５％である。１μＭの最終濃度でのアジドチミジン（ＡＺＴ）は、陽性対照の役割を果たし、一方、ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドまたはＡＺＴの非存在下でのＤＭＳＯは、陰性対照の役割を果たす。
【００９５】
（実施例）
末梢血単核球細胞（ＰＢＭＣ）の単離および刺激。ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミド処置の後の細胞生存率アッセイおよびＰ２４レベルの評価のために、新たに単離した血液を、１０ｍＬのヘパリンコーティングされた管（ＢＤ  Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ＃３６７８７４）を使用して同意した健常なドナーから集める。約１０７個のＰＢＭＣを含有する集めた血液を、５０ｍＬの管中で等しい量の無菌リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）と混合することによって希釈する。次いで、血液／ＰＢＳ混合物（例えば、４０ｍＬ）で１０ｍＬのリンパ球分離培地（Ｌｏｎｚａ、Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ、ＭＤ）上をゆっくりと覆い、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｇｓ−６Ｒ遠心分離機において２０００ｒｐｍで室温にてブレークオフ（ｂｒｅａｋ  ｏｆｆ）で１５分間遠心分離する。無菌パスツールピペットを使用した吸引によってＰＢＭＣを５０ｍＬの遠心分離管から取り出し、１５ｍＬの遠心分離管に入れ、これに、ＰＢＳを加え、管を充填する。血小板を除去するために、新たに単離したＰＢＭＣをペレット化するために管を２０００ｒｐｍで５分間遠心分離する（ブレークオン（ｂｒｅａｋ  ｏｎ））。ＰＢＭＣを含有するバフィーコートを注意深く取り出し、ＰＢＳで１４００ｒｐｍにて３回洗浄し、残留する血小板を除去する。血小板を有する上清をデカントし、ＰＢＳを１５ｍＬ容量まで管に加え、１４００ｒｐｍで５分間遠心分離し、この後、上清をデカントし、ペレットを２０ユニット／ｍｌのＩＬ−２および４ｕｇ／ｍｌのＰＨＡを有する５ｍＬの増殖培地（ＲＰＭＩ−１６４０培地プラス１０％ウシ胎仔血清、１％ｌ−グルタミンおよび１％ペニシリン／ストレプトマイシン）に懸濁させ、加湿したインキュベーターにおいて３７℃および５％ＣＯ２でＴ２５培養フラスコ中において１日インキュベートする。刺激のために、４μｇ／ｍＬのＰＨＡおよび２０ユニット／ｍＬのＩＬ−２を細胞に加え、５％ＣＯ２の加湿したインキュベーターにおいて３７℃にてＴ２５フラスコにおいて２４時間インキュベートする。全てのステップは、無菌状態で行う。
【００９６】
（実施例）
ＨＩＶ−１  ＢａｌによるＰＢＭＣの感染：２ｎｇウイルス／１０６個の細胞の濃度のＨＩＶ−１  Ｂａｌ（ＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ、ＭＤ）を刺激されたＰＢＭＣに加え、５％ＣＯ２、加湿したインキュベーターにおいて３７℃で５時間インキュベートした。次いで、細胞を培地で３回洗浄した。
【００９７】
（実施例）
ＨＩＶｐ２４アッセイ。ｐ２４はＨＩＶカプシドの構成要素であり、その検出を使用して、ウイルスの存在を示す。ｐ２４アッセイのために、条件毎に１０６個の細胞を２０ユニット／ｍＬのＩＬ−２を有する１ｍＬのＲＰＭＩ完全培地に再懸濁させた。細胞を未処置のままとし、あるいは陽性対照として、１．２５ｍＭのアジドデオキシチミジン（ＡＺＴ）、ＨＩＶ逆転写酵素阻害剤（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ  Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）で、またはビヒクル対照として、１．２５ｍＭのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）で、または異なる濃度の試験化合物で処置する。ｐ２４アッセイのために、次いで、感染し、処置した細胞を、５％ＣＯ２の加湿したインキュベーターにおいて２００μＬ容量の培地において２００，０００個の細胞で９６ウェルＵ−ボトムプレートに４重で６日間３７℃にて蒔いた。
【００９８】
上清を感染の６日後に収集し、９６ウェル培養プレートにおいてｐ２４溶解緩衝液（Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水中の１０％ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００）で１：１０の比で溶解する。次いで、ビリオンを溶解するために、プレートを３７℃にて１時間インキュベートする。ｐ２４ＥＬＩＳＡキットは、ＳＡＩＣ−Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ（Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ、ＭＤ）から得てもよく、アッセイはメーカーのプロトコルに従って行う。手短に言えば、試験プレートを、２００μＬの洗浄緩衝液、および１００μＬの段階希釈した標準物質（ストックを提供する）で３回洗浄し、または試料をウェルに加え、３７℃で２時間インキュベートした。次いで、プレートを２００μＬの洗浄緩衝液で３回洗浄し、１００μＬの一次抗体溶液（使用したキットに特有のメーカーの推奨で）を各ウェルに加え、プレートを再び３７℃で１時間インキュベートする。プレートを再び３回洗浄し、１００μＬの二次抗体溶液（使用したキットに特有のメーカーの推奨で）を各ウェルに加え、それに続いて３７℃で１時間インキュベートする。プレートを最後に３回洗浄し、１００μＬのＴＭＢ溶液（ＫＰＬ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）を各ウェルに加え、ＲＴにて暗中３０分間インキュベートする。１００μＬのＮａＣｌ（１Ｎ）で反応を停止させ、プレートをプレートリーダーで６５０ｎｍのバックグラウンドを伴って４５０ｎｍにて読み取る。４パラメーター分析を使用して、吸光度読み取りに基づいた標準曲線および濃度を計算する。
【００９９】
ＲＮＡ単離およびその後のリアルタイムＰＣＲ研究のために、３×１０６個の感染し洗浄した細胞を、２０ユニット／ｍＬのＩＬ−２と共にＲＰＭＩ完全培地に再懸濁させ、上記のような適切な処置に供し、１ｍＬ容量で１２ウェル培養プレートにおいて５％ＣＯ２の加湿したインキュベーターで３７℃にて（ＨＩＶ複製サイクルの試験時点に応じて）１〜３日間培養する。
【０１００】
（実施例）
ＨＩＶ複製阻害は、ＨＩＶに感染したＰＢＭＣにおけるＨＩＶカプシドタンパク質ｐ２４（６）のレベルに対する試験化合物の効果をアッセイすることによって決定する。Ｐ２４の量を、ＳＡＩＣ−Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ  ＡＩＤＳ（Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ、ＭＤ）試薬プログラムから得たサンドイッチＥＬＩＳＡアッセイキットを使用することによってアッセイし、メーカーのプロトコルに従って行う。キットは、コーティングされたプレート、標準物質、一次および二次抗体を含む。このＰ２４の決定のために、ＩＬ−２およびＰＨＡによるＰＢＭＣの刺激の１日後に、約１０６個の細胞を含有する刺激されたＰＢＭＣの試料を、２０００ｒｐｍで５分間遠心分離する。上清をデカントし、ＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  ａｎｄ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｐｒｏｇｒａｍによって提供された２ｎｇのＨＩＶ−Ｂａｌウイルスストックを各ペレットに加え、細胞を全部で１ｍＬまで増殖培地で懸濁させ、加湿したインキュベーターにおいて３７℃および５％ＣＯ２でインキュベートする。４時間後、細胞を５ｍＬの増殖培地で２０００ｒｐｍにて５分間で３回洗浄する。最終ペレットを新鮮な増殖培地に再懸濁させ、これに２０ユニット／ｍＬのＩＬ−２を加える。１ｍＬ当たり概ね１０６個の細胞を含有する１ｍＬの分量のＰＢＭＣ懸濁液を、１．５ｍＬの微量遠心分離管中に入れ、試験化学物質で処置する。各処置のために、４つの２００μＬ分量（約２×１０５個の細胞）をＵ−ボトム９６ウェルプレートの別々のウェルにそれぞれ分注し、加湿したインキュベーターにおいて３７℃および５％ＣＯ２でインキュベートする。
【０１０１】
７日のインキュベーションの後で、各ウェルからの上清を、フラットボトム９６ウェルプレートに移し、ＤＩ−Ｈ２Ｏ中の１／１０容量の１０％Ｔｒｉｔｏｎ−ｘ１００により３７℃で１時間溶解する。試験プレートを、２００μＬの洗浄緩衝液で３回洗浄する。４０ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ、１０ｎｇ／ｍＬ、５ｎｇ／ｍＬ、２．５ｎｇ／ｍＬ、１．２５ｎｇ／ｍＬ、０．６２５ｎｇ／ｍＬ、０．３１２５ｎｇ／ｍＬ、０．１５６３ｎｇ／ｍＬおよび０ｎｇ／ｍＬのｐ２４可溶化物対照での１００μＬの標準物質、ならびに１％ＢＳＡ、０．２％Ｔｗｅｅｎ２０のＲＰＭＩ中に１：１０希釈した１００μＬの試験試料を、抗原コーティングした９６ウェルプレートに加える。プレートを３７℃で２時間インキュベートし、２００μＬの洗浄緩衝液で３回洗浄する。ＲＰＭＩ培地中の１０％ウシ胎仔血清、２％正常マウス血清に１：１５０で希釈した１００μＬの一次抗体溶液を、各ウェルに加え、プレートを３７℃で１時間インキュベートする。２００μＬの洗浄緩衝液による３回の洗浄の後、２％正常マウス血清、５％ＮＧＳ、０．０１％Ｔｗｅｅｎ２０のＲＰＭＩ培地中に１：５０で希釈した１００μＬの二次抗体を加える。プレートを３７℃で１時間インキュベートし、２００μＬの洗浄緩衝液で３回洗浄する。ＫＰＬキット（ＫＰＬ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）と共に提供した等しい容量の各構成要素溶液を混合することによって調製した１００μＬのＴＭＢを各ウェルに加え、プレートを室温にて暗中３０分間インキュベートする。１００μＬのＮａＣｌ（１Ｎ）を加えることによって反応を停止させ、プレートリーダーを使用してプレートを６５０ｎｍのバックグラウンドを伴って４５０ｎｍにて読み取る。４パラメーター分析を使用して、吸光度読み取りに基づいた標準曲線および濃度を計算する。
【０１０２】
（実施例）
ＰＢＭＣを５時間感染させ、培地で３回洗浄する。次いで、ＰＢＭＣを例示的に２μＭ、１０μＭ、および２５μＭの試験化合物で処置する。ＨＩＶ  ｐ２４を、感染７日後に測定する。ＨＩＶ  ｐ２４の阻害について試験化合物を試験する。ＰＢＭＣを、例示的に２μＭ、１０μＭ、および２５μＭの試験化合物で３日間処置する。処置の３日後にＭＴＳアッセイを行い、読み取りを４９０ｎｍで取る。細胞を、試験化合物の存在下で生存率について評価する。
【０１０３】
（実施例）
細胞生存率を、「ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ」（Ｐｒｏｍｅｇａ、＃Ｇ３５８２）によってアッセイする。これは、フェナジンメトサルフェートの存在下でＭＴＳ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウムを、４９０〜５００ｎｍにて最大吸光度を有するホルマザン生成物に還元するこれらの能力を測定することによって細胞の代謝活性を評価する（４）。このアッセイのために、１ｍＬの増殖培地中の１０６個の刺激されたＰＢＭＣをそれぞれ、１．５ｍＬの微量遠心分離管中に分注し、２５μＭの最終濃度で置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドで処置する。対照は、試験化合物溶媒である０．５％ＤＭＳＯの最終濃度でのみ処置する。処置後、１００μＬの増殖培地中の１０５個のＰＢＭＣを、対照、ならびに置換ピペリジンおよびピペラジンカルボキサミドのそれぞれについて、９６ウェルフラットボトムプレートのウェルに４反復でそれぞれ接種する。加湿したインキュベーター処置における５％ＣＯ２で３７℃でのプレートの６日のインキュベーション後、２０μＬのＭＴＳ溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ、＃Ｇ３５８２）を各ウェルに加え、プレートを加湿したインキュベーターにおいて３７℃にて５％ＣＯ２で４時間インキュベートし、この時点で発色をプレートリーダーで４９０ｎｍの吸光度にて読み取る。
【０１０４】
（実施例）
ＨＩＶ侵入。ＨＩＶ侵入分析のために、刺激されたＰＢＭＣを、所望の濃度の試験化合物、およびＡＺＴ（対照）で１時間および４時間事前処置する。次いで、ＰＢＭＣをＨＩＶ−Ｂａｌ（１０６個の細胞毎に２ｎｇ／ｍＬ）で５時間感染させる。次いで、細胞を培地で洗浄し、トリプシンで処置し、結合したウイルスを除去する。細胞をさらに２回洗浄し、ＲＮＥａｓｙ  ＭｉｎｉＫｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して試料からのＲＮＡを単離する。ＤＮＡ混入を、ＲＴで１５分間ＤＮａｓｅＩ（Ｓｉｇｍａ）処置によって除去し、それに続いて７０℃で１０分間ＤｎａｓｅＩを変性させる。ｑＳｃｒｉｐｔ  ｃＤＮＡスーパーミックスを使用してｃＤＮＡ合成を行う。このｃＤＮＡを使用して、リアルタイムＲＴ−ＰＣＲを行って、目的の標的遺伝子を定量化する。下記のプライマーを使用して、ＨＩＶ転写物を増幅させる。ＨＩＶ  ＬＴＲ、フォワード５’−ＴＣＡＡＧＴＧＡＧＴＧＣＣＣＧＧＴＴ（配列番号１）およびリバース５’−ＡＧＣＴＣＣＧＧＴＴＴＣＴＣＴＴＴＣＧＣＴ（配列番号２）およびＧＡＰＤＨ−フォワード５’−ＴＧＡＣＴＴＣＡＡＣＡＧＣＧＡＣＡＣＣＣＡＣＴ（配列番号３）およびリバース５’−ＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴＴＧＣＴＧＴＡＧＣＣＡＡＡＴ（配列番号４）。ＧＡＤＰＨを、内在性対照として使用する。実施例５７は、１０μＭまたは２５μＭでＨＩＶ侵入に対して効果を有さなかった。
【０１０５】
（実施例）
ＨＩＶ逆転写アッセイ。本明細書に記載されている化合物は、２ＬＴＲサークルを阻害する。刺激されたＰＢＭＣを、ＨＩＶ−Ｂａｌ（１０６個の細胞当たり２ｎｇ／ｍＬ）で５時間感染させる。次いで、ＰＢＭＣを所望の濃度の化合物およびＡＺＴ（対照）で感染後７２時間処置する。次いで、細胞を培地で３回洗浄し、ＤＮｅａｓｙ  Ｂｌｏｏｄ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用してゲノムＤＮＡを試料から調製する。リアルタイムＰＣＲ分析のために、下記のプライマーを使用して、２ＬＴＲサークルを増幅させる（逆転写の副産物）。フォワード５’−ＡＡＣＴＡＧＧＧＡＡＣＣＣＡＣＴＧＣＴＴＡＡＧ（配列番号５）およびリバース５’−ＣＣＣＡＣＡＡＡＴＣＡＡＧＧＡＴＡＴＣＴＴＧＴＣ（配列番号６）。ＡＺＴ（１．２５μＭ、陽性対照として逆転写酵素阻害剤）は、ＨＩＶ逆転写を有意に阻害する。図２および４は、本明細書に記載されている化合物が、それぞれの濃度で逆転写を有意に阻害し、逆転写レベルで阻害を始めるようであることを示す。全ての結果は、それぞれ４重で行った２つまたは３つの独立した実験を表す。ビヒクル（１．２５μＭのＤＭＳＯ）と比較して、＊＝ｐ＜０．０５、＊＊＝ｐ＜０．０１、＊＊＊＝ｐ＜０．００１。
【０１０６】
理論に束縛されるものではないが、本明細書において、ＨＩＶ結果のいくつかのばらつきは、異なる個体からの正常なヒトＰＢＭＣの反応における可変性によるものであり得ると考えられる。総ドナー（ｎ）＝３。本明細書に記載されている化合物が、ＨＩＶ感染症の処置において有用であることをデータは示す。さらに、化合物は一般に細胞毒性でないことをデータは示す。データは細胞生存率を低下させる傾向を示すが、対照および試験用量のそれぞれの間の差異は、細胞毒性アッセイにおいて統計的に有意でなかった。このように、理論に束縛されるものではないが、ＨＩＶ感染症に対する有効性は、細胞毒性によるものではないと考えられる。細胞は試験した最も高い濃度（２５μＭ）においていまだ生存していた。
【０１０７】
（実施例）
ＨＩＶゲノムＤＮＡ組込み。本明細書に記載されている化合物は、ウイルス組込みにおける阻害を示す。刺激されたＰＢＭＣを、ＨＩＶ−Ｂａｌ（１０６個の細胞毎に２ｎｇ／ｍＬ）で５時間感染させる。次いで、ＰＢＭＣを所望の濃度での化合物およびＡＺＴ（対照）で感染後７２時間処置する。次いで、細胞を培地で３回洗浄する。ゲノムＤＮＡを、ＤＮｅａｓｙ  Ｂｌｏｏｄ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して試料から調製する。ＡＬＵ−ＰＣＲ、それに続いてリアルタイムＰＣＲを行い、組み込まれたウイルスゲノムを定量化する。下記のプライマーを使用して、ＨＩＶ転写物を増幅させる。ＨＩＶ  ＬＴＲ、フォワード５’−ＴＣＡＡＧＴＧＡＧＴＧＣＣＣＧＧＴＴ（配列番号１）およびリバース５’−ＡＧＣＴＣＣＧＧＴＴＴＣＴＣＴＴＴＣＧＣＴ（配列番号２）およびＧＡＰＤＨ−フォワード５’−ＴＧＡＣＴＴＣＡＡＣＡＧＣＧＡＣＡＣＣＣＡＣＴ（配列番号３）およびリバース５’−ＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴＴＧＣＴＧＴＡＧＣＣＡＡＡＴ（配列番号４）。ＧＡＤＰＨを、内在性対照として使用する。ＡＺＴ（１．２５μＭ、逆転写酵素阻害剤）は、ＨＩＶウイルス組込みを有意に阻害する。図３は、実施例５７がそれぞれの濃度でウイルス組込みを有意に阻害することを示す。全ての結果は、行った２つの独立した実験を表す。ビヒクル（１．２５μＭのＤＭＳＯ）と比較して、＊＝ｐ＜０．０５、＊＊＝ｐ＜０．０１、＊＊＊＝ｐ＜０．００１。
【０１０８】
（実施例）
ＨＩＶ転写。化合物は、ウイルス転写レベルで阻害する。刺激されたＰＢＭＣを、ＨＩＶ−Ｂａｌ（１０６個の細胞毎に２ｎｇ／ｍＬ）で４〜６時間感染させる。次いで、ＰＢＭＣを所望の濃度での化合物およびＡＺＴ（対照）で感染後７２時間処置する。次いで、細胞を培地で３回洗浄し、ＲＮＥａｓｙ  ＭｉｎｉＫｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用してゲノムＲＮＡを試料から調製する。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲを行って、成熟ウイルスの初期転写物（Ｒｅｖ）ならびに後期転写物（ＧａｇおよびＥｎｖ）を検出する。下記のプライマーを使用して、ＨＩＶ転写物を増幅させる。Ｒｅｖ、フォワード５’−ＴＣＣＴＴＧＧＣＡＣＴＴＡＴＣＴＧＧＧＡＣＧＡＴ（配列番号７）およびリバース５’−ＴＣＣＣＡＧＡＡＧＴＴＣＣＡＣＡＡＴＣＣＴＣＧＴ（配列番号８）；Ｅｎｖ、フォワード５’−ＡＣＧＡＧＧＡＴＴＧＴＧＧＡＡＣＴＴＣＴＧＧＧＡ（配列番号９）およびリバース５’−ＴＧＧＣＡＴＴＧＡＧＣＡＡＧＣＴＡＡＣＡＧＣＡＣ（配列番号１０）；Ｇａｇ、フォワード５’−ＡＧＡＧＡＡＧＧＣＴＴＴＣＡＧＣＣＣＡＧＡＡＧＴ（配列番号１１）およびリバース５’−ＴＧＣＡＣＴＧＧＡＴＧＣＡＣＴＣＴＡＴＣＣＣＡＴ（配列番号１２）；ＧＡＰＤＨ、フォワード５’−ＴＧＡＣＴＴＣＡＡＣＡＧＣＧＡＣＡＣＣＣＡＣＴ（配列番号３）およびリバース５’−ＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴＴＧＣＴＧＴＡＧＣＣＡＡＡＴ（配列番号４）。ＧＡＤＰＨを、内在性対照として使用する。ＡＺＴ（１．２５μＭ、逆転写酵素阻害剤）は、ＨＩＶ転写を有意に阻害する。図５Ａ、５Ｂ、および５Ｃは、実施例５７がそれぞれの濃度でウイルス転写を有意に阻害することを示す。全ての結果は、行った２つの独立した実験を表す。ビヒクル（１．２５μＭのＤＭＳＯ）と比較して、＊＊＊＝ｐ＜０．００１。
【０１０９】
（実施例）
抗ＢＶＤＶ有効性についてのアッセイ。使い捨ての細胞培養実験器具において単層として維持したウシ鼻甲介（ＢＴ）細胞を、抗ウイルス有効性試験のために使用する。試験の前に、宿主細胞培養物を、９６ウェル細胞培養プレート上に播種し、播種の概ね４８時間後に使用する。細胞を培養して、８０〜９０％コンフルエントな単層を達成する。増殖培地（ＧＭ）および維持培地（ＭＭ）は、培地中の１００ユニットのペニシリンおよび１００μｇのストレプトマイシンの最終濃度のために、Ｌ−グルタミン（ＡＴＣＣ＃３０−２００２）、１０％ウマ血清およびペニシリン／ストレプトマイシンを有するダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）（１ｍＬ当たり１０，０００ユニットのペニシリンおよび１０，０００μｇのストレプトマイシン、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ＃１５１４０−１２２または同様のもの）を含む。
【０１１０】
ＢＳＬＩ高力価ウイルスストックからのウシウイルス性下痢ウイルス株ＮＡＤＬを使用する。使用前に、一定分量のストックウイルスを取り出し、−７０℃のフリーザーから解凍する。ＢＶＤＶを維持培地（ＭＭ）に希釈して、０．１感染多重度（ＭＯＩ）を得る。
【０１１１】
（実施例）
細胞変性（ＣＰＥ）アッセイ。ＣＰＥは、ＢＶＤＶの増殖の結果としてＢＶＤＶによって誘導されたＢＴ組織培養物における変性変化を指す。ＢＴ細胞培養物をＰＢＳで洗浄し、１００μＬ分量のＭＭを細胞に加え、ＣＯ２インキュベーターにおいて２時間インキュベートする。インキュベーション後、ＭＭを除去し、細胞をＰＢＳで再び洗浄し、１００μＬの異なる濃度の試験化合物で覆う。プレートをＣＯ２インキュベーター中で４８〜７２時間インキュベートする。インキュベーションが完了すると、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド、黄色テトラゾール（ＭＴＴ）アッセイを使用して、ＣＰＥの試験化合物によって誘導される阻害についてプレートを評価する。このアッセイは、ＭＴＴを紫色のホルマザン色素に還元する酵素の活性を測定する比色分析アッセイである。倒立化合物顕微鏡（Ｉｎｖｅｒｔｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ）を使用してＣＰＥを確認する。
【０１１２】
ＣＰＥアッセイの前に、試験化合物を試験して、最も高い非細胞毒性濃度を決定する。細胞培養物をＰＢＳで洗浄し、１００μＬのＭＭで覆い、２時間インキュベートする。インキュベーション後、ＭＭを異なる濃度での１００μＬ分量の試験化合物で置き換える。細胞毒性試験は、ＤＭＳＯ対照を含む（０．５％を超えない用量）。ＣＯ２インキュベーター中でプレートを４８〜７２時間インキュベートする。ＭＴＴアッセイを使用して毒性を評価する。試験およびアッセイを、２重で２回行う。有意差を示す結果を、さらに２回繰り返す。
【０１１３】
（実施例）
ＭＴＳ（細胞生存率）アッセイ。慣例的な細胞毒性アッセイにおいて試験化合物をまた評価する。非感染性の刺激されたＰＢＭＣを、５％ＣＯ２の加湿したインキュベーターにおいて２００μＬ容量の培地中の２００，０００個の細胞で９６ウェルフラットボトムプレートに３７℃にて３日間４重で蒔く。２０μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ）をプレートの各ウェルに加え、プレートを５％ＣＯ２の加湿したインキュベーターにおいて３７℃にて３時間インキュベートする。次いで、プレートをプレートリーダーで４９０ｎｍにて読み取る。次いで、読み取りを対照に対する生存率の割合として測定する。細胞毒性が存在しないことは、ウイルス価を低減させることにおける試験化合物の活性が、ウイルス性疾患に特異的であるという結論を支持することが認識される。
【０１１４】
（実施例）
表４における化合物および抗ウイルス活性は、本明細書に記載されている。本明細書に記載されている化合物のそれぞれにおいて、それぞれの原子は完全な原子価を含み、それぞれの残りの原子は水素であることを理解すべきである。複数回用量で試験した全ての実施例の化合物は、用量反応を示す。例示的な化合物および関連する抗ウイルス活性を、下記の表において示す。
【表３】
0005976224.tif 000022
【表４】
0005976224.tif 000023
【０１１５】
（実施例）
ヒト肺線維芽細胞（ＭＲＣ−５細胞）細胞毒性アッセイ。ＭＲＣ−５細胞培養物をＰＢＳで洗浄し、１００μｌ分量の培地（２％ウシ胎仔血清を有するＥＭＥＭ）と共にインキュベートする。２時間のインキュベーション後、培地を除去し、細胞をＰＢＳで洗浄し、異なる濃度の試験化合物を含有する１００μｌの培地で処置し、さらに７２時間インキュベートする。このインキュベーションの後、ＭＴＴアッセイを使用してプレートを細胞毒性について評価する。結果は細胞生存率における低減パーセントとして提示し、１００％は、試験化合物を伴わないＤＭＳＯ対照である。
【０１１６】
（実施例）
コロナウイルス抗ウイルスアッセイ。７０〜８０％コンフルエントのＭＲＣ−５細胞をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、０．１ＭＯＩでヒトコロナウイルス２２９Ｅ株を含有する１００μｌ分量の培地で感染させ、次いで、ＣＯ２インキュベーター中で２時間インキュベートし、ウイルス吸着させる。インキュベーション温度は、３５℃±２℃である。インキュベーション後、ウイルス接種材料を除去し、感染細胞をＰＢＳで洗浄し、異なる濃度の試験化合物を含有する１００μｌの培地で処置し、さらに７２時間インキュベートする。インキュベーション後、比色ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルチアゾリル−２）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド）アッセイを使用して、コロナウイルス２２９Ｅ株が誘導するＣＰＥについてプレートを評価する。この試験は、テトラゾリウム色素をその紫色のホルマザン誘導体に還元する、損傷を受けた細胞から放出される酵素の能力を評価することによって細胞生存率を測定する。結果は、ＣＰＥのパーセント阻害として提示し、ウイルスによってもたらされるＣＰＥの１００％阻害は、試験化合物を伴わないＤＭＳＯ対照の平均と概ね等しい。全ての研究において、培地におけるＤＭＳＯの最終濃度は、０．５％であった。アッセイは、９６ウェル細胞培養フラットボトムプレートにおいて行う。
【０１１７】
各化合物は、未処置ウイルス対照より細胞生存率の改善を示した。例示的な化合物についての結果を、下記の表において示す。
【表５】
0005976224.tif 000024
【０１１８】
下記の出版物、およびこの中で引用されたそれぞれのさらなる出版物は、参照により本明細書中に組み込まれる。
【表６−１】
0005976224.tif 000025
【表６−２】
0005976224.tif 000026
【図１Ａ】
0005976224.tif 000037
【図１Ｂ】
0005976224.tif 000038
【図１Ｃ】
0005976224.tif 000039
【図２】
0005976224.tif 000040
【図３】
0005976224.tif 000041
【図４−１】
0005976224.tif 000042
【図４−２】
0005976224.tif 000043
【図５−１】
0005976224.tif 000044
【図５−２】
0005976224.tif 000045
【図６】
0005976224.tif 000046
【図７】
0005976224.tif 000047
【配列表】
0005976224000001.app