(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３１１の少なくとも第１の組の染色体を含むペッパー植物であって、
ここで該系ＳＭＹ  ９９−１３１１の種子のサンプルがＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２２で寄託されている、ペッパー植物。
【請求項２】
ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３１１の少なくとも第１の組の染色体を含む種子であって、
ここで該系ＳＭＹ  ９９−１３１１の種子のサンプルがＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２２で寄託されている、種子。
【請求項３】
ハイブリッド植物である、請求項１に記載のペッパー植物。
【請求項４】
該ハイブリッド植物がペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４であり、
ここで該ハイブリッド植物の種子のサンプルはＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２３で寄託されている、請求項３に記載のペッパー植物。
【請求項５】
請求項１に記載の植物の植物部分。
【請求項６】
さらに、葉、胚珠、花粉、果実または細胞であると定義される、請求項５に記載の植物部分。
【請求項７】
さらに、果実であると定義される、請求項６に記載の植物部分。
【請求項８】
ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３１１の少なくとも第１の組の染色体を含み、
請求項１に記載のペッパー植物のすべての生理学的特性および形態学的特性を有する、ペッパー植物またはその部分。
【請求項９】
ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４の少なくとも第１の組の染色体を含み、
請求項４に記載のペッパー植物のすべての生理学的特性および形態学的特性を有する、ペッパー植物またはその部分。
【請求項１０】
請求項１に記載の植物の再生可能な細胞の組織培養物。
【請求項１１】
胚、成長点、子葉、花粉、葉、葯、根、根冠、雌ずい、花、種子および茎からなる群より選択される植物部分に由来する細胞またはプロトプラストを含む、請求項１０に記載の組織培養物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の組織培養物から再生させることによりペッパー植物を得る方法。
【請求項１３】
（ａ）請求項１に記載の植物から増殖できる組織を得る工程；
（ｂ）該組織を栽培し、増殖シュートを得る工程；および
（ｃ）該増殖シュートを根付かせ、根付いた栄養分体を得る工程を含むことを特徴とする、請求項１に記載の植物の栄養増殖方法。
【請求項１４】
（ａ）系ＳＭＹ  ９９−１３１１の植物を、所望の形質を含む第２のペッパー植物と交配させ、Ｆ１子孫を作出する工程であって、ここで該系ＳＭＹ  ９９−１３１１の植物の種子のサンプルがＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２２で寄託されている、工程；
（ｂ）該所望の形質を含むＦ１子孫を選択する工程；  
（ｃ）該選択されたＦ１子孫を系ＳＭＹ  ９９−１３１１の植物と交配させ、戻し交配子孫を作出する工程；および
（ｄ）工程（ｂ）と（ｃ）を３回以上繰り返し、該所望の形質を含む第４代以降の選択された戻し交配子孫を作出する工程
を含むことを特徴とする、ペッパー系への所望の形質の導入方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法によりペッパー植物を作出する方法。
【請求項１６】
遺伝的形質転換手法により導入遺伝子をペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３１１の植物に導入する工程を含む、導入遺伝子が導入された植物の作出方法であって、
ここで該ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および該系ＳＭＹ  ９９−１３１１の種子のサンプルが、各々、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２３およびＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２２で寄託されている、作出方法。
【請求項１７】
請求項１６に記載の方法を用いた、植物の作出方法。
【請求項１８】
導入遺伝子が導入された、ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３１１の植物であって、
ここで該ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および該系ＳＭＹ  ９９−１３１１の種子のサンプルが、各々、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２３およびＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２２で寄託されている、植物。
【請求項１９】
請求項１８に記載の植物をもたらす種子。
【請求項２０】
（ａ）ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４または系ＳＭＹ  ９９−１３１１のペッパー植物を、第２のペッパー植物と交配する工程であって、ここで該ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および該系ＳＭＹ  ９９−１３１１の種子のサンプルは、各々、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２３およびＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２２で寄託されている工程；および  
（ｂ）ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４または系ＳＭＹ  ９９−１３１１に由来するペッパー植物の種子を形成させる工程
を含むことを特徴とする、ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４または系ＳＭＹ  ９９−１３１１に由来する植物の種子の作出方法。
【請求項２１】
さらに、
（ｃ）該ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４またはＳＭＹ  ９９−１３１１由来ペッパーの種子から生長させた植物を、自身または第２のペッパー植物と交配して、さらなるハイブリッドＰＳ０９９５６４３４またはＳＭＹ  ９９−１３１１由来ペッパーの種子を得る工程；
（ｄ）  工程（ｃ）の該さらなるハイブリッドＰＳ０９９５６４３４またはＳＭＹ  ９９−１３１１由来ペッパーの種子を生長させて、さらなるハイブリッドＰＳ０９９５６４３４またはＳＭＹ  ９９−１３１１由来ペッパー植物を得る工程；および
（ｅ）  （ｃ）および（ｄ）の交配する工程および生長させる工程を繰り返し、少なくとも１のさらなるハイブリッドＰＳ０９９５６４３４またはＳＭＹ  ９９−１３１１由来ペッパー植物を生成させる工程を含むことを特徴とする、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
第２のペッパー植物が同系交配ペッパー系であることを特徴とする、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
系ＳＭＹ  ９９−１３１１を系ＳＭＹ  ９９−１３２２の第２のペッパー植物と交配する工程を含み、
ここで該系ＳＭＹ  ９９−１３１１及び該系ＳＭＹ  ９９−１３２２の種子のサンプルが、各々、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２２およびＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５１７で寄託されている、請求項２０に記載の種子の作出方法。
【請求項２４】
さらに、  （ｆ）さらなるハイブリッドＰＳ０９９５６４３４またはＳＭＹ  ９９−１３１１由来ペッパー植物を、第２のペッパー植物と交配させ、ハイブリッド子孫植物の種子を作出する工程を含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
（ａ）請求項１に記載の植物を得る工程であって、ここで、該植物は成熟するまで栽培されている工程；および  
（ｂ）該植物からペッパーを採取する工程を含むことを特徴とする、ペッパーの作出方法。
【請求項２６】
該植物がペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４の植物であり、
ここで該ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４の種子のサンプルがＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２３で寄託されている、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
請求項１に記載の植物を自身または第２の植物と交配することを含むことを特徴とする、種子の作出方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物の品種改良の分野に関し、より詳しくは、ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４ならびに同系交配ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２およびＳＭＹ  ９９−１３１１の開発に関する。
【０００２】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１０年１２月１０日に出願された米国特許仮出願第６１／４２２，１０６号の優先権を主張する。該仮出願の全開示は引用により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００３】
野菜の品種改良の目的は、単独の品種／ハイブリッドの種々の望ましい形質を併合することである。かかる望ましい形質としては、栽培者および／または消費者に有益と思われる任意の形質、例えば、収量、昆虫または病害に対する抵抗性、環境ストレスに対する耐性および栄養価が高いことが挙げられる。
【０００４】
品種改良手法は、植物の受粉方法を利用する。一般的な受粉方法には２種類ある。植物は、ある花の花粉が同じ植物または植物品種の同じまたは別の花に伝達された場合、自家受粉する。植物は、花粉が、異なる植物品種の花のものに達した場合、異花受粉する。
【０００５】
何世代にもわたって自家受粉させ、種類によって選択した植物は、ほぼすべての遺伝子座においてホモ接合型となり、純種の品種改良子孫であるホモ接合型植物の均一な集団が得られる。遺伝子型が異なるかかる２種類のホモ接合型植物間で交配すると、多くの遺伝子座についてヘテロ接合型であるハイブリッド植物の均一な集団が得られる。逆に、各々がいくつかの遺伝子座においてヘテロ接合型である２種類の植物を交配すると、遺伝学的に異なり、均一でないハイブリッド植物の集団が得られる。この不均一性により、性能が予測不可能となる。
【０００６】
均一な品種の開発には、ホモ接合型の同系交配植物の開発、このような同系交配植物の交配、および交配体の評価が必要とされる。系統の品種改良および反復選択は、品種改良用集団から同系交配植物を開発するのに使用されている品種改良法の例である。２種類以上の植物または種々の他の広範な起源の遺伝的背景を、新しい系およびハイブリッドを派生させる品種改良プールに併合する品種改良法は、自殖および所望の表現型の選択によって開発される。新しい系およびハイブリッドは、どれが商業的可能性を有するかを判定するために評価される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、植物の品種改良の分野に関し、より詳しくは、ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４ならびに同系交配ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２およびＳＭＹ  ９９−１３１１の開発に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
一態様において、本発明は、ＰＳ０９９５６４３４と表示するハイブリッドのペッパー植物、ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３１１を提供する。また、かかる植物のすべての生理学的特性および形態学的特性を有するペッパー植物を提供する。また、このようなペッパー植物の部分、例えば、該植物の花粉、胚珠、接ぎ穂、根茎、果実および細胞なども提供する。
【０００９】
本発明の別の態様では、付加的遺伝形質を含むペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１の植物を提供する。該遺伝形質は、例えば、優性または劣性対立遺伝子である遺伝子座を含み得る。本発明の一実施形態において、ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１の植物は、単一遺伝子座変換を含むものと定義される。本発明の特定の実施形態において、付加的遺伝子座は、例えば、除草剤耐性、昆虫抵抗性、病害抵抗性、および炭水化物代謝の改善などの１つ以上の形質を付与するものである。さらなる実施形態において、該形質は、戻し交配によって系のゲノム内に導入された天然に存在する遺伝子、天然もしくは誘発変異、または遺伝的形質転換手法によって植物もしくは任意のその前の世代である先祖に導入された導入遺伝子により付与され得る。形質転換によって導入した場合、遺伝子座には、単一の染色体位置に組み込まれた１つ以上の遺伝子が含まれ得る。
【００１０】
また、本発明は、ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１の種子に関する。本発明のペッパーの種子は、ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１のペッパーの種子の本質的に均一な集団として提供され得る。種子の本質的に均一な集団は、一般に、他の種子をあまり含まない。したがって、ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１の種子は、種子全体の少なくとも約９７％、例えば、種子全体の少なくとも約９８％、９９％またはそれ以上を構成するものと定義され得る。該種子集団を別々に生長させ、ＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１と表示するペッパー植物の本質的に均一な集団を得てもよい。
【００１１】
本発明のまた別の態様では、ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１のペッパー植物の再生可能な細胞の組織培養物を提供する。該組織培養物は、好ましくは、出発植物の生理学的特性および形態学的特性のすべてを発現し得るペッパー植物の再生能を有するもの、および出発植物と実質的に同じ遺伝子型を有する植物の再生能を有するものである。ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１の生理学的特性および形態学的特性の例としては、本明細書の表に示した形質が挙げられる。かかる組織培養物において再生可能な細胞は、例えば、胚、成長点、子葉、花粉、葉、葯、根、根冠、雌ずい、花、種子および茎に由来するものであり得る。さらに加えて、本発明は、本発明の組織培養物から再生させたペッパー植物であって、ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１のすべての生理学的特性および形態学的特性を有する植物を提供する。
【００１２】
本発明のさらにまた別の態様では、ペッパーの種子、植物および果実を作出するための方法を提供し、該方法は、一般に、第１の親ペッパー植物を第２の親ペッパー植物と交配することを含み、ここで、第１または第２の親ペッパー植物の少なくとも一方は、ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３１１の植物である。このような方法としては、さらに、第１のペッパー植物を、遺伝子型が相違する異なる第２のペッパー植物と交配させ、ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３１１の植物を親の一方として有するハイブリッドを得る、ハイブリッドペッパーの種子または植物を調製するための方法が例示され得る。このような方法において、交配により、種子が作出される。種子は、種子を収集するか否かに関係なく作出される。
【００１３】
本発明の一実施形態において、「交配」の第１工程には、第１および第２の親ペッパー植物の種子を、多くの場合、受粉が行なわれる（例えば、昆虫媒体によって媒介される）ように近づけて植えることが含まれる。あるいはまた、花粉を手作業により移動させてもよい。植物に自家受粉させる場合、受粉は、植物の栽培以外は人間による直接介入の必要なく行なわれ得る。
【００１４】
第２工程には、第１および第２の親ペッパー植物の種子を栽培し、花をつける植物に生長させることが含まれ得る。第３工程には、花を無力化（すなわち、花粉を死滅させるか、または除去する）ことなどによって、該植物の自家受粉を妨げることが含まれ得る。
【００１５】
ハイブリッド交配のための第４工程には、第１の親ペッパー植物と第２の親ペッパー植物との間での異花受粉が含まれ得る。また別の工程は、少なくとも一方の親ペッパー植物から種子を収穫することを含む。収穫された種子を生長させると、ペッパー植物またはハイブリッドペッパー植物が作出され得る。
【００１６】
また、本発明は、第１の親ペッパー植物を第２の親ペッパー植物と交配することを含み、第１または第２の親ペッパー植物の少なくとも一方がペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１の植物である方法によって作出されるペッパーの種子および植物を提供する。本発明の一実施形態において、該方法によって作出されるペッパーの種子および植物は、本発明による植物を相違する別の植物と交配することによって作出される第１世代（Ｆ１）のハイブリッドペッパーの種子および植物である。さらに、本発明では、かかるＦ１ハイブリッドペッパー植物の植物部分、およびその使用方法が想定される。したがって、本発明の特定の例示的な実施形態により、Ｆ１ハイブリッドペッパー植物およびその種子が提供される。
【００１７】
さらにまた別の態様では、本発明は、ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１に由来する植物の作出方法であって、（ａ）ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１に由来する子孫植物を調製する工程であって、ここで、前記調製は、ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１の植物を第２の植物と交配することを含む工程；および（ｂ）該子孫植物を自身または第２の植物と交配し、後続世代の子孫植物の種子を作出する工程を含む方法を提供する。さらなる実施形態では、該方法は、さらに、（ｃ）前記後続世代の子孫植物の種子から後続世代の子孫植物を生長させ、該後続世代の子孫植物を自身または第２の植物と交配すること；および該工程をさらに３〜１０世代繰り返し、ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１に由来する植物を作出することを含むものであり得る。ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１に由来する植物は同系交配系であり得、前述の反復交配工程は、同系交配系を作出するための充分な同系交配を含むものと定義され得る。該方法では、工程（ｃ）で得られた特定の植物を、工程（ｂ）と（ｃ）による連続交配のために選択することが望ましい場合があり得る。１つ以上の望ましい形質を有する植物を選択することにより、該系／ハイブリッドの望ましい形質のいくつか、ならびに場合により他の選択された形質を有するハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１に由来する植物が得られる。
【００１８】
特定の実施形態において、本発明は、（ａ）ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１の植物を得る工程であって、ここで、該植物は成熟するまで栽培されている工程、および（ｂ）該植物から少なくとも１種類のペッパーを採取する工程を含む、食物または飼料の作出方法を提供する。
【００１９】
本発明のさらにまた別の態様では、ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１の遺伝的相補体を提供する。語句「遺伝的相補体」は、その発現により、表現型（本発明の場合は、ペッパー植物または該植物の細胞もしくは組織の表現型）が規定されるヌクレオチド配列の集合体をいうために用いる。したがって、遺伝的相補体は、細胞、組織または植物の遺伝子構成を表し、ハイブリッド遺伝的相補体は、ハイブリッド細胞、組織または植物の遺伝子構成を表す。したがって、本発明は、本明細書において開示するペッパー植物細胞ならびにかかる細胞を含む種子および植物による遺伝的相補体を有するペッパー植物細胞を提供する。
【００２０】
植物の遺伝的相補体は、遺伝子マーカープロフィールによって、および該遺伝的相補体の発現に特徴的な表現型形質の発現（例えば、アイソザイム分類プロフィール）によって評価され得る。ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１は、多くの任意のよく知られた手法、例えば、単一配列長多型（ＳＳＬＰ）（Ｗｉｌｌｉａｍｓら、１９９０）、ランダム増幅多型ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）、ＤＮＡ増幅フィンガープリンティング（ＤＡＦ）、配列特性化増幅領域（ＳＣＡＲ）、随意プライミングポリメラーゼ連鎖反応（ＡＰ−ＰＣＲ）、増幅断片長多型（ＡＦＬＰ）（ＥＰ  ５３４  ８５８、引用によりその全体が本明細書に具体的に組み込まれる）、および単一ヌクレオチド多型（ＳＮＰ）（Ｗａｎｇら、１９９８）などのいずれかによって同定され得ることが理解されよう。
【００２１】
さらにまた別の態様では、本発明は、ペッパー植物細胞、組織、植物および種子によって提示される、本発明のペッパー植物の半数体遺伝的相補体と第２のペッパー植物（好ましくは、相違する別のペッパー植物）の半数体遺伝的相補体との組合せによって形成されるハイブリッド遺伝的相補体を提供する。別の態様において、本発明は、本発明のハイブリッド遺伝的相補体を含む組織培養物から再生させたペッパー植物を提供する。
【００２２】
本発明の一態様に関して本明細書において論考する任意の実施形態は、特に記載のない限り、本発明の他の態様にも同様に適用される。
【００２３】
用語「約」は、値を測定するために使用されるデバイスまたは方法に関して、該値が平均の標準偏差を含むことを示すために用いる。特許請求の範囲における用語「または（もしくは）」の使用は、特に明示していない限り「および／または」を意味するために用いており、選択肢をいうのみであるか、または選択肢が互いに排他的であることをいう。特許請求の範囲において、語句「“ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ”（含んでいる／構成している）」または他の非限定文言とともに使用されている場合、語句「ａ」および「ａｎ」は、特に記載のない限り「１つ以上」を表す。用語“ｃｏｍｐｒｉｓｅ（含む／構成する）”、“ｈａｖｅ（有する）”および“ｉｎｃｌｕｄｅ（含む／挙げられる）”は、非限定型連結動詞である。１つ以上のこのような動詞の任意の形態または時制（例えば、“ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ”、“ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ”、“ｈａｓ”、“ｈａｖｉｎｇ”、“ｉｎｃｌｕｄｅｓ”および“ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ”）もまた非限定型である。例えば、１つ以上の工程を「含む（“ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ”）」、「有する」または「含む（“ｉｎｃｌｕｄｅｓ”）」任意の方法は、該１つ以上の工程のみを有することに限定されず、記載していない他の工程も包含する。同様に、１つ以上の形質を「含む（“ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ”）」、「有する」または「含む（“ｉｎｃｌｕｄｅｓ”）」”任意の植物は、該１つ以上の形質のみを有することに限定されず、記載していない他の形質も包含する。
【００２４】
本発明の他の目的、特徴および利点は、以下の詳細な説明から自明となろう。しかしながら、当業者には、この詳細な説明から、本発明の精神および範囲内の種々の変更および修正が自明となるため、提供する詳細な説明および任意の具体的な実施例は、本発明の特定の実施形態を示したものではあるが、例示の目的で示したものにすぎないことを理解されたい。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本発明は、ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４、ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２およびペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３１１の植物、種子および派生物に関する方法および組成物を提供する。ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４は、親系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１の交配によって作出される。両親系は、環境の影響による制限範囲内で均一性と安定性を示す。該親系を交配することにより、均一な種子ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４が得られ得る。
【００２６】
スイートベルペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４は、小型から中型の植物に育つ。該植物は移植後、約７６日間で、緑色の、熟すと黄色になる小さな塊状のペッパーをつける。３つまたは４つの裂片の果実は、いくらか平らな花床を示し、重量は約５０〜８０ｇである。果実は、約５ｃｍの長さで、幅６ｃｍ、直径に対する長さの比は１．０〜１．３である。比較的皮が薄い果実は、非常に甘い香りを有し、試験した環境を横切り安定のようである。ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４は、０、１、２、３、７および８類（ｒａｃｅ）の細菌性斑点症に対して高度に抵抗性、トバモウイルス（Ｐ０）に対して高度に抵抗性、ジャガイモウイルスＹ［ＰＶＹ（Ｐ１．２）］、タバコエッチ病ウイルス（ＴＥＶ）、トウガラシモットルウイルス（ＰｅｐＭｏＶ）、および黄ピーマンモザイクウイルス（ＰｅｐＹＭＶ）に対して高度に抵抗性のようである。該ハイブリッドは、広々とした畑での作出が意図される。
【００２７】
Ａ．ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４の起源および品種改良の歴史
ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４の親はＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１である。これらの親は、以下のようにして創出した。
【００２８】
ＳＭＹ  ９９−１３２２は、雌性同系交配「Ｙｅｌｌｏｗ  Ｓｗｅｅｔ  Ｂｉｔｅ」と雄性同系交配「Ｒｅｄ＊ｏｒａｎｇｅ  ｍｉｎｉ派生物」との間の交配によって得られたＳｅｍｉｎｉｓハイブリッドからの系統選択によって開発した。
【００２９】
母系親のＹｅｌｌｏｗ  Ｓｗｅｅｔ  Ｂｉｔｅは、オランダの栽培者から初めて取得した。該系は、低いコンパクトな植物に育ち、ブリックス１０．６％の小さいとげのあるイエローペッパーをつける。果実の寸法は、長さ約５．６ｃｍ、直径４．０ｃｍで、重量は各々、約３２ｇである。該系は、ＰＶＹ（Ｐ１．２）、ＴＥＶ、ＰｅｐＭｏＶおよびＰｅｐＹＭＶに対する抵抗性を備えている。
【００３０】
父系受託物Ｒｅｄ＊ｏｒａｎｇｅ  ｍｉｎｉ派生物は、オランダの栽培者から取得したミニのレッドペッパーとミニのオレンジペッパーとの交配によって派生させた。父系親は、色づきが遅く、小さな塊状のイエローペッパーをつけた。また、長さ５．８ｃｍで幅４．７ｃｍの寸法のブリックス９．９％の果実ができ、果実は各々、重量が約３８ｇであった。
【００３１】
交配および選択は以下のとおりにして行なった。
【００３２】
１年目の１月：Ｆ１ハイブリッドを、親Ｙｅｌｌｏｗ  Ｓｗｅｅｔ  Ｂｉｔｅ（区画（ｓｔａｋｅ）番号Ｓ０２−１３０６）とＲｅｄ＊Ｏｒａｎｇｅ  Ｍｉｎｉ（区画番号Ｓ０２−１３８２）から作製した。これに対して受託番号２００２−７９９３を得た。
【００３３】
２年目の１月：Ｆ１ハイブリッド２００２−７９９３の植物を移植した。この系では黄色い先の尖った果実ができた。この植物を自殖させ、種子を収穫し、集め、受託番号２００３−２５８５を得た。
【００３４】
３年目の１月：Ｆ２同系交配系２００３−２５８５を区画０３Ｓ−１０９１として植えた。この系では塊状の黄色い果実ができた。この植物を自殖させた。種子を個々の植物から別々に収集した。ＰＶＹ（Ｐ０）に対する抵抗性について試験した選択０３Ｓ−１０９１−２の種子から植物を生長させ、該系に対して受託番号２００３−３３５７を得た。
【００３５】
３年目の７月：Ｆ３同系交配系２００３−３３５７を区画０３Ｆ−１２０として植えた。この系では黄色い果実ができた。この系では先の尖った黄色い果実ができた。この植物を自殖させた。種子を個々の植物から別々に収集した。選択０３Ｆ−１２０−３の種子をＰＶＹ（Ｐ０）に対する抵抗性について試験し、受託番号２００３−４５７７を得た。
【００３６】
４年目の１月：Ｆ４同系交配系２００３−４５７７を区画０４Ｓ−１００として植えた。この系では先の尖った黄色い果実ができた。この植物を自殖させた。種子を個々の植物から別々に収集した。植物０４Ｓ−１００−７の種子をＰＶＹ（Ｐ１．２）、ＴＥＶ、ＰｅｐＭｏＶ、およびＰｅｐＹＭＶに対する抵抗性について試験し、受託番号２００４−１０３４を得た。
【００３７】
５年目の７月：Ｆ５同系交配系２００４−１０３４を区画０４Ｆ−１７７６として植えた。この系では、ブリックス９．８％の小さな塊状のイエローペッパーができた。果実の寸法は長さ約５．２ｃｍ、直径４．４ｃｍであり、各々の重量は約３８ｇであった。この植物を自殖させた。種子を個々の植物から別々に収集した。選択０４Ｆ−１７７６−１０の種子を集め、受託番号２００４−３０３５が割り当てられた。
【００３８】
６年目の７月：Ｆ６同系交配系２００４−３０３５（ＡＰ  ２３７８）を区画０５ＬＢ  ＬＢＧＨ  ０５５１として植えた。この系をＴｍ０に対する抵抗性について試験した。アントシアニン欠損型ではなかった。この系を自殖させ、０５ＬＢ  ＬＢＧＨ  ０５５１−Ｍとして集めた。
【００３９】
７年目の１月：Ｆ７同系交配系０５ＬＢ  ＬＢＧＨ  ０５５１−Ｍを区画０６ＬＢ  ＬＢＧＨ  ２２７８として植えた。この系は中くらいの大きさの植物に育ち、黄色い塊状の若干深い（直径に対する長さの比は約１．２である）ミニ果実ができる。この果実は、典型的には重量が約３８ｇであり、ブリックス９．８％であった。この系は、Ｔｍ０、ＰＶＹ（Ｐ１．２）、ＴＥＶ、ＰｅｐＭｏＶ、およびＰｅｐＹＭＶに対する抵抗性を備えている。この系を自殖させ、０６ＬＢ  ＬＢＧＨ  ２２７８−Ｍとして集めた。
【００４０】
９年目の７月：同系交配系０６ＬＢ  ＬＢＧＨ  ２２７８−Ｍを同系交配系ＳＭＹ  ９９−１３２２として提出した。
【００４１】
ＳＭＹ  ９９−１３２２は中くらいの大きさの植物に育ち、黄色い塊状の若干深い（直径に対する長さの比は約１．２である）ミニ果実をつける。この果実は、典型的には重量が約３８ｇであり、ブリックス９．８％であった。この系は、トバモウイルス（Ｐ０）（Ｔｍ０；Ｌ１遺伝子）、ジャガイモウイルスＹ［ＰＶＹ（Ｐ１．２）］、タバコエッチ病ウイルス（ＴＥＶ）、トウガラシモットルウイルス（ＰｅｐＭｏＶ）、および黄ピーマンモザイクウイルス（ＰｅｐＹＭＶ）に対する抵抗性を備えている。ＳＭＹ  ９９−１３２２では塊状の果実ができ、Ｔｍ０に対して抵抗性であるのに対して、Ｙｅｌｌｏｗ  Ｓｗｅｅｔ  Ｂｉｔｅでは先の尖った果実ができ、Ｔｍ０に易感染性であるため、ＳＭＹ  ９９−１３２２は、その母系親Ｙｅｌｌｏｗ  Ｓｗｅｅｔ  Ｂｉｔｅと異なる。ＳＭＹ  ９９−１３２２はＴｍ０、ＰＶＹ（Ｐ１．２）、ＴＥＶ、ＰｅｐＭｏＶ、およびＰｅｐＹＭＶに対して抵抗性であるのに対して、「Ｒｅｄ＊Ｏｒａｎｇｅ  ミニ派生物」はこれらの病害に易感染性であるため、ＳＭＹ  ９９−１３２２は、その父系親「Ｒｅｄ＊ｏｒａｎｇｅ  ｍｉｎｉ派生物」と異なる。
【００４２】
ＳＭＹ  ９９−１３１１は、雌性同系交配「ＳＢＹ  ９９−１１７９」と雄性同系交配「２００２−２９４５」との間の交配により得られたプロプライエタリＳｅｍｉｎｉｓハイブリッドからの系統選択によって開発した。
【００４３】
母系親ＳＢＹ  ９９−１１７９は、良好な覆いを持つアントシアニン欠損型の小〜中程度の植物を発生し、立派な肩を持つ中〜大の果実を生成する。その中程度の緑色果実は、均一な平坦な肩を持つ硬い黄色釣鐘形ペッパーに成熟する。この系は、Ｔｍ０、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｃａｐｓｉｃｉ（Ｐｃ）、ＰＶＹ  （Ｐ０）、ＴＥＶならびにＸｃｖの０、１、２および３類に抵抗性である
【００４４】
親受入れ２００２−２９４５は、オランダの栽培者から得たレッドミニペッパーおよびオレンジミニペッパーならびに「ＫＳＺ」に交配したもう一つのハイブリッドミニ間の交配から派生された。この系は、トバモウイルス （Ｐ１．２）およびＰＶＹ  （Ｐ０）に抵抗性であった先の尖った赤色果実を作出した。
【００４５】
交配および選択は以下のとおりにして行なった。
【００４６】
４年目の１月：Ｆ１ハイブリッド９９３９５５６を、親のＳＢＹ  ９９−１１７９および２００２−２９４５から作製した。
【００４７】
４年目の７月：Ｆ１ハイブリッド９９３９５５６の植物を区画０３ＬＢ  ０９９３３として移植した。この系は、重要な組の甘い赤色果実を生成する均一な枝の多い植物を生成した。この系からの植物を自殖させ、種子を０３ＬＢ  ０９９３３−Ｍとして集合させた。
【００４８】
５年目の１月：Ｆ２同系交配系０３ＬＢ  ０９９３３−Ｍを区画０４ＬＢ  ０１１２８として植えた。この系を赤色および黄色果実につき分離した。植物を自殖させた。個々の植物を選択し収穫した。
【００４９】
５年目の７月：Ｆ３同系交配系０４ＬＢ  ０１１２８−０５を区画０４ＬＢ  ０７２５９として植えた。アントシアニン欠損型系は、重要な組のがっしりした黄色の甘みのある果実を生成した。この系はＰｃに対する中程度に抵抗性であると試験した。植物を自殖させた。個々の植物を選択し収穫した。
【００５０】
６年目の１月：Ｆ４同系交配系０４ＬＢ  ０７２５９−０１を区画０５ＬＢ  ０３１１１として植えた。この系は、カナリア黄色果実を生成し、それをＸＣＶの０、１、２および３類に抵抗性であったが、Ｐｃに感受性であった。植物を自殖させた。個々の植物を選択し収穫した。
【００５１】
６年目の７月：Ｆ５同系交配系０５ＬＢ  ０３１１１−０３を区画０５ＬＢ  １０７７３として植えた。この系は、重要な早期の組のラージミニの枝が多い果実を生成した。この系はＸｃｖの０、１、２および３類に対する抵抗性を備えた。植物を自殖させた。個々の植物を選択し収穫した。
【００５２】
７年目の１月：Ｆ６同系交配系０５ＬＢ  １０７７３−０１を区画０６ＬＢ  ０１５７０として植えた。この系は早期の組のむしろ枝が多いラージミニ果実を生成した。植物を自殖させた。個々の植物を選択し収穫した。
【００５３】
９年目の１月：Ｆ７同系交配系０６ＬＢ  １５７０−０１を区画０８ＬＢ  ０１６９７として植えた。この系は中サイズの植物を発生し、早期の組の平等に均一形状の金色果実を生成した。果実重量は、約７０ｇであった。その系は、Ｘｃｖの０、１、２および３類、ＰＶＹ（Ｐ０）、ＴＥＶおよびＴｍ０に対する抵抗性を備える。
【００５４】
９年目の６月：同系交配系０６ＬＢ  ０１５７０−０１を同系交配系ＳＭＹ  ９９−１３１１として基礎種子として提出した。
【００５５】
ＳＭＹ  ９９−１３１１は、中サイズのアントシアニン欠損型植物を発生し、重要な組の早期成熟の割れのないカナリア黄色の枝が多いラージミニサイズの果実を生成する。この系をトバモウイルス（Ｐ０）（Ｔｍ０；Ｌ１遺伝子）、ジャガイモウイルスＹ［ＰＶＹ  （Ｐ０）］、タバコエッチ病ウイルス  （ＴＥＶ）およびＸａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  ｅｕｖｅｓｉｃａｔｏｒｉａにより生じた０、１、２および３類細菌性斑点症（Ｘｃｖ；  Ｂｓ２遺伝子）に対する抵抗性を備える。ＳＭＹ  ９９−１３１１は、ＳＭＹ  ９９−１３１１がＰｃに対して抵抗性ではないが、ＳＢＹ  ９９−１１７９がＰｃに抵抗性であるため、その母親ＳＢＹ  ９９−１１７９とは異なる。また、ＳＢＹ  ９９−１１７９は、ＳＭＹ  ９９−１３１１よりかなり大きな果実を生成する。ＳＭＹ  ９９−１３１１は、ＳＭＹ  ９９−１３１１が枝の多い黄色果実を生成するが２０２−２９４５が赤色の先の尖った果実を生成するため、その父親２００２−２９４５とは異なる。また、ＳＭＹ  ９９−１３１１は、それがＴＥＶおよびＸｃｖの０、１、２および３類に抵抗性であるが、２００２−２９４５がこれらの病気に感受性であるため、２００２−２９４５とは異なる。
【００５６】
両親系は均一で安定であり、そのため、これらから作出されるハイブリッドも均一で安定である。反復操作の過程で、ほぼいかなる特性についても商業的に許容され得る範囲内で、少量割合の変異型が生じることがあり得る。しかしながら、変異型は期待されない。
【００５７】
Ｂ．ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４、ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２およびペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３１１の生理学的特性および形態学的特性
本発明の一態様によれば、ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４およびその親系の生理学的特性および形態学的特性を有する植物が提供される。かかる植物の生理学的特性および形態学的特性の内容を表１〜３に示す。
【００５８】
【表１−１】
0006045145.tif 000002
【００５９】
【表１−２】
0006045145.tif 000003
【００６０】
【表１−３】
0006045145.tif 000004
【００６１】
【表１−４】
0006045145.tif 000005
【００６２】
【表１−５】
0006045145.tif 000006
【００６３】
【表１−６】
0006045145.tif 000007
＊これらは典型的な値である。値は環境によって異なることがあり得る。実質的に同等である他の値もまた、本発明の範囲に含まれる。
【００６４】
【表２−１】
0006045145.tif 000008
【００６５】
【表２−２】
0006045145.tif 000009
【００６６】
【表２−３】
0006045145.tif 000010
【００６７】
【表２−４】
0006045145.tif 000011
【００６８】
【表２−５】
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＊これらは典型的な値である。値は環境によって異なることがあり得る。実質的に同等である他の値もまた、本発明の範囲に含まれる。
【００６９】
【表３−１】
0006045145.tif 000013
【００７０】
【表３−２】
0006045145.tif 000014
【００７１】
【表３−３】
0006045145.tif 000015
【００７２】
【表３−４】
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【００７３】
【表３−５】
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＊これらは典型的な値である。値は環境によって異なることがあり得る。実質的に同等である他の値もまた、本発明の範囲に含まれる。
【００７４】
Ｃ．ペッパー植物の品種改良
本発明の一態様は、ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１を交配することを伴う、ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４の種子の作出方法に関する。あるいはまた、本発明の他の実施形態では、ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４、ＳＭＹ  ９９−１３２２系またはＳＭＹ  ９９−１３１１系を、自身または任意の第２の植物と交配させてもよい。かかる方法は、ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１の繁殖のために使用され得るか、あるいはハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１に由来する植物を作出するために使用され得る。ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１に由来する植物は、特定の実施形態において、新しいペッパー品種の開発のために使用され得る。
【００７５】
１種類以上の出発品種を用いた新しい品種の開発は、当該技術分野でよく知られている。本発明によれば、新規な品種は、ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４を交配した後、何世代もの品種改良を、そのよく知られた方法に従って行なうことにより創出され得る。新しい品種は、任意の第２の植物と交配することによっても創出され得る。新規な系を開発する目的で交配させるためのかかる第２の植物の選択において、自身が１つ以上の選択された望ましい特性を示す植物、またはハイブリッドに併合された場合に所望の特性（１つもしくは複数）を示す植物のいずれかを選択することが望ましい場合があり得る。初期交配を行なったら、同系交配と選択を行ない、新しい品種を作出する。均一な系の開発には、多くの場合、５世代以上の自殖と選択を伴う。
【００７６】
また、新しい品種の均一な系は、二重半数体によっても開発され得る。この手法により、何世代もの自殖と選択が不要な純種の品種改良系の創出が可能になる。この様式では、純種の品種改良系が、わずかに１世代で作出され得る。半数体胚は、小胞子、花粉、葯培養物、または子房培養物から得られ得る。次いで、半数体胚は、自発的に、または化学的処理（例えば、コルヒチン処理）によって倍加され得る。あるいはまた、半数体胚を半数体植物に生長させ、染色体倍加が派生されるように処理してもよい。いずれの場合も、繁殖力のあるホモ接合型植物が得られる。本発明によれば、かかる任意の手法が、ホモ接合型系を得るために、本発明の植物およびその子孫とともに使用され得る。
【００７７】
また、戻し交配を使用して同系交配植物を改良することができる。戻し交配により、特定の望ましい形質が、ある同系交配源または非同系交配源から、該形質をもたない同系交配体に伝達される。これは、例えば、まず、ドナー同系交配体（非反復親）よりも優位の同系交配体（Ａ）（反復親）（これは、対象の形質に対する適切な遺伝子座（１つまたは複数）を有する）を交配することにより行なわれ得る。次いで、この交配体の子孫を、優位の反復親（Ａ）に戻し交配（ｍａｔｅ  ｂａｃｋ）した後、得られた子孫において、非反復親から伝達されるべき所望の形質について選択を行なう。５世代以上の戻し交配と所望の形質についての選択後、子孫は伝達対象の特性を有するが、ほとんど、またはほぼすべての他の遺伝子座は優位の親と同様である。最後の戻し交配世代を自殖させると、伝達対象の形質について純種の品種改良子孫が得られ得る。
【００７８】
本発明の植物は、優良な性質の遺伝的背景の植物を基礎とする新しい系の開発に特に適している。新規なペッパー系を開発する目的でＰＳ０９９５６４３４および／またはペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２とＳＭＹ  ９９−１３１１と交配させるための第２の植物の選択において、典型的には、自身が１つ以上の選択された望ましい特性を示す植物、またはハイブリッドに併合された場合に所望の特性（１つもしくは複数）を示す植物のいずれかを選択することが好ましい。望ましい形質の例としては、特定の実施形態では、高い種子収量、高率の種子発芽、実生活力、高い果実収量、病害耐性または抵抗性、ならびに土壌および気候条件に対する適応性が挙げられ得る。消費者主義の形質（果実の形状、色、食感および味など）は、本発明によって開発されるペッパー植物の新しい系に組み込まれ得る形質の他の例である。
【００７９】
Ｄ．性能特性
上記のように、ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４は、ペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２およびＳＭＹ  ９９−１３１１によって付与される望ましい形質を示す。ハイブリッドＰＳ０９９５６４３４およびペッパー系ＳＭＹ  ９９−１３２２およびＳＭＹ  ９９−１３１１の性能特性は、他の品種と比較した性能形質の客観的解析の主題であった。解析の結果を以下に示す。
【００８０】
【表４】
0006045145.tif 000018
【００８１】
【表５】
0006045145.tif 000019
【００８２】
【表６】
0006045145.tif 000020
【００８３】
Ｅ．本発明のさらなる実施形態
本発明の特定の態様では、少なくとも第１の所望の遺伝形質を含むように改良された本明細書に記載の植物を提供する。かかる植物は、一実施形態において、戻し交配と称される植物の品種改良手法によって開発され得、この場合、戻し交配手法によって該植物に伝達される遺伝子座に加えて、品種の本質的にすべての形態学的特性および生理学的特性が復元される。単一遺伝子座変換植物という用語は、本明細書で用いる場合、戻し交配と称される植物の品種改良手法（この場合、戻し交配手法によって品種に伝達される単一遺伝子座に加えて、品種の本質的にすべての形態学的特性および生理学的特性が復元される）によって開発されるペッパー植物をいう。本質的にすべての形態学的特性および生理学的特性とは、同じ環境において比較した場合、戻し交配または導入遺伝子の直接導入の際に生じ得る偶発的な変異型形質以外の本来存在している植物の特性が復元されることを意味する。したがって、本発明の一実施形態は、単一遺伝子座および／または導入遺伝子を含む本明細書に記載された植物を提供し、ここに、この植物は本質的に本明細書に提供された植物の形態学的特性および生理学的特性のすべてを含む。当該技術分野において、「単一遺伝子座変換」は、それらの起源におけるトランスジェニックまたは非トランスジェニックである双方の遺伝子座を包含すると理解される。
【００８４】
戻し交配法は、現存する品種を改良するため、または現存する品種に特性を導入するために本発明で使用され得る。所望の特性の遺伝子座に寄与する親ペッパー植物は、非反復またはドナー親と称される。この専門用語は、非反復親が戻し交配プロトコルにおいて１回使用され、したがって、再使用されないことをいう。非反復親の遺伝子座（１つまたは複数）が伝達される親ペッパー植物は、戻し交配プロトコルにおいて数回使用されるため、反復親として知られている。
【００８５】
典型的な戻し交配プロトコルでは、対象の最初の品種（反復親）を、伝達される対象の単一遺伝子座を有する第２の品種（非反復親）に交配させる。この交配で得られた子孫を、次いで、反復親に再度交配させ、このプロセスを、非反復親の単一伝達遺伝子座に加えて反復親の本質的にすべての形態学的特性および生理学的特性が変換植物において復元されたペッパー植物が得られるまで繰り返す。
【００８６】
適当な反復親の選択は、正常な戻し交配手順のために重要な工程である。戻し交配プロトコルの目的は、最初の品種の単一の形質または特性を改変または代替することである。これを達成するため、反復品種の単一遺伝子座が改良されるか、または非反復親の所望の遺伝子座で置き換えられるが、最初の品種の残りの所望の遺伝的、したがって、所望の生理学的および形態学的構成要素は本質的にすべて保持される。特定の非反復親の選択は戻し交配の目的によって決まる；主な目的の１つは、いくつかの商業的に望ましい形質を植物に付加することである。厳密な戻し交配プロトコルは、改変対象の特性または形質および反復親と非反復親との遺伝学的距離によって決まる。戻し交配法は、伝達対象の特性が優性対立遺伝子である場合は簡易化されるが、劣性対立遺伝子または相加対立遺伝子（劣性と優性の間）も伝達させることがあり得る。この場合、所望の特性が正常に伝達されたかどうかを判定するために子孫の試験を導入することが必要であり得る。
【００８７】
一実施形態において、本明細書に記載の植物が反復親である戻し交配体の子孫ペッパー植物は、（ｉ）非反復親の所望の形質ならびに（ｉｉ）ペッパー反復親のすべての生理学的特性および形態学的特性（同じ環境条件で生長させた場合、有意性レベル５％で判定）を含むものである。
【００８８】
また、新しい品種は２種類より多くの親から開発されたものであってもよい。改良型戻し交配として知られた手法では、戻し交配の際、異なる反復親が使用される。改良型戻し交配は、最初の反復親を、特定のより望ましい特性を有する品種で置き換えるために使用され得、あるいは、異なる望ましい特性を各々から得るために多種類の親が使用され得る。
【００８９】
通常は新しい同系交配体の開発に選択されないが、戻し交配手法によって改良され得る多くの単一遺伝子座形質が同定されている。単一遺伝子座形質はトランスジェニックであってもそうでなくてもよい；このような形質の例としては、限定されないが、除草剤抵抗性、細菌、真菌またはウイルスによる病害に対する抵抗性、昆虫抵抗性、脂肪酸または炭水化物の代謝の改善、および栄養価の改変が挙げられる。これらは、一般に核を介して受け継がれる遺伝子を構成する。
【００９０】
直接選択は、単一遺伝子座が優性形質の機能を果たす場合に適用され得る。この選択プロセスでは、初期交配の子孫が、ウイルス抵抗性および／または戻し交配前の対応遺伝子の存在についてアッセイされる。選択により、所望の遺伝子および抵抗性形質をもたない植物はいずれも排除され、該形質を有する植物のみが、その後の戻し交配に使用される。次いで、このプロセスは、すべてのさらなる戻し交配世代で繰り返される。
【００９１】
品種改良用のペッパー植物の選択は、必ずしも植物の表現型によって決まるのではなく、遺伝学的研究に基づくものであり得る。例えば、対象の形質に遺伝学的に密接に関連した適当な遺伝子マーカーを用いることができる。このようなマーカーの１つを使用し、特定の交配の子孫において形質の存在または非存在が確認され得、また、該マーカーは、継続される品種改良のための子孫の選択において使用され得る。この手法は、一般にマーカー支援型選択と称される。植物における対象の形質の相対的な存在または非存在を確認することができる任意の他の型の遺伝子マーカーまたは他のアッセイもまた品種改良目的に有用であり得る。マーカー支援型選択のための手順は、当該技術分野でよく知られている。かかる方法は、劣性形質および可変的表現型の場合、または慣用的なアッセイがより高価になる、時間がかかる、あるいは不都合となり得る場合、特に有用である。本発明に従って使用され得る遺伝子マーカーの型としては、必ずしも限定されないが、単純配列長多型（ＳＳＬＰ）（Ｗｉｌｌｉａｍｓら、１９９０）、ランダム増幅多型ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）、ＤＮＡ増幅フィンガープリンティング（ＤＡＦ）、配列特性化増幅領域（ＳＣＡＲ）、随意プライミングポリメラーゼ連鎖反応（ＡＰ−ＰＣＲ）、増幅断片長多型（ＡＦＬＰ）（ＥＰ  ５３４  ８５８、引用によりその全体が本明細書に具体的に組み込まれる）、および単一ヌクレオチド多型（ＳＮＰ）（Ｗａｎｇら、１９９８）が挙げられる。
【００９２】
Ｆ．遺伝子操作により派生される植物
戻し交配によって、ならびに直接植物に導入され得る有用な形質の多くは、遺伝的形質転換手法によって導入されるものである。したがって、遺伝的形質転換は、選択された導入遺伝子を本発明の植物に挿入するために使用され得るか、あるいはまた、戻し交配によって導入され得る導入遺伝子の調製のために使用され得る。当業者によく知られており、また、多くの作物種に適用可能な植物の形質転換法としては、限定されないが、エレクトロポレーション、マイクロプロジェクタイル・ボンバードメント、アグロバクテリウム媒介性形質転換およびプロトプラストによる直接的なＤＮＡの取込みが挙げられる。
【００９３】
エレクトロポレーションによって形質転換を行なうためには、脆い組織（細胞または胚形成性カルス懸濁培養物など）が使用され得るか、あるいはまた、未熟胚または他の器官形成された組織が直接形質転換され得るかのいずれかである。この手法では、選択された細胞の細胞壁を、ペクチン分解酵素（ペクトリアーゼ）または機械的に損傷させた組織に制御された様式で曝露することにより、一部分解し得る。
【００９４】
形質転換性ＤＮＡセグメントを植物細胞に送達するための効率的な方法は、マイクロプロジェクタイル・ボンバードメントである。この方法では、粒子を核酸でコーティングし、推進力によって細胞内に送達させる。例示的な粒子としては、タングステン、白金、および好ましくは金で構成されたものが挙げられる。ボンバードメントのために、懸濁状態の細胞をフィルターまたは固形培地上に濃縮させる。あるいはまた、未熟胚または他の標的細胞を固形培地上に配列してもよい。ボンバードメントの対象細胞は、マイクロプロジェクタイル停止プレートの下方に適切な間隔をあけて配置される。
【００９５】
加速によってＤＮＡを植物細胞内に送達するための方法の実例としての一実施形態は、Ｂｉｏｌｉｓｔｉｃｓ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍであり、これは、ＤＮＡまたは細胞でコーティングされた粒子を、スクリーン（ステンレス鋼またはＮｙｔｅｘスクリーンなど）を介して、標的細胞で被覆された表面上に推進させるために使用され得る。スクリーンは、粒子を、大きな集合体のレシピエント細胞には送達されないように分散させる。マイクロプロジェクタイル・ボンバードメント手法は広く適用可能であり、これを使用すると、事実上どのような植物種も形質転換され得る。
【００９６】
アグロバクテリウム媒介性伝達は、遺伝子座を植物細胞内に導入するための別の広く適用可能な系である。該手法の利点は、ＤＮＡを植物組織全体に導入することができ、それにより、プロトプラストからインタクトな植物を再生させる必要性が回避されることである。近年のアグロバクテリウム形質転換ベクターは、大腸菌ならびにアグロバクテリウムでの複製能を有し、簡便な操作が可能なったものである（Ｋｌｅｅら、１９８５）。さらに、アグロバクテリウム媒介性遺伝子導入のためのベクターにおける最近の技術的進歩によって、種々のポリペプチドコード遺伝子を発現し得るベクターの構築が簡単になるようにベクター内での遺伝子と制限部位の配列が改善されている。記載のベクターは、プロモーターと挿入ポリペプチドコード遺伝子の直接発現のためのポリアデニル化部位とにフランキングされた簡便な多リンカー領域を有する。さらに、武装（ａｒｍｅｄ）Ｔｉ遺伝子と非武装Ｔｉ遺伝子の両方を含むアグロバクテリウムを形質転換に使用してもよい。
【００９７】
アグロバクテリウム媒介性形質転換が効率的な植物系統では、遺伝子座導入が容易でその性質が明確なため、これが選択方法になる。ＤＮＡを植物細胞に導入するためのアグロバクテリウム媒介性の植物用組込みベクターの使用は、当該技術分野でよく知られている（Ｆｒａｌｅｙら、１９８５；米国特許第５，５６３，０５５号）。
【００９８】
また、植物プロトプラストの形質転換は、リン酸カルシウム沈降、ポリエチレングリコール処理、エレクトロポレーション、およびこれらの処理の組合せに基づいた方法を用いて行なわれ得る（例えば、Ｐｏｔｒｙｋｕｓら、１９８５；Ｏｍｉｒｕｌｌｅｈら、１９９３；Ｆｒｏｍｍら、１９８６；Ｕｃｈｉｍｉｙａら、１９８６；Ｍａｒｃｏｔｔｅら、１９８８を参照のこと）。植物の形質転換および外来遺伝要素の発現は、Ｃｈｏｉら（１９９４）、およびＥｌｌｕｌら（２００３）に例示されている。
【００９９】
多数のプロモーターは、任意の目的遺伝子、例えば、限定されないが、選択可能マーカー、スコラブルマーカー、害虫耐性、病害抵抗性、栄養価向上に関する遺伝子、および農業上重要な任意の他の遺伝子のための植物遺伝子の発現に対して有用性がある。植物遺伝子の発現に有用な構成的プロモーターの例としては、限定されないが、カリフラワーモザイクウイルス（ＣａＭＶ）Ｐ−３５Ｓプロモーター（これは、ほとんどの植物組織において構成的高レベル発現をもたらす（例えば、Ｏｄｅｌら、１９８５を参照のこと）（例えば、単子葉植物において（（例えば、Ｄｅｋｅｙｓｅｒら、１９９０；ＴｅｒａｄａおよびＳｈｉｍａｍｏｔｏ、１９９０を参照のこと））；ＣａＭＶ  ３５Ｓプロモーターの縦列重複型である増強３５Ｓプロモーター（Ｐ−ｅ３５Ｓ）；ｌ  ノパリンシンターゼプロモーター（Ａｎら、１９８８）；オクトピンシンターゼプロモーター（Ｆｒｏｍｍら、１９８９）；ならびにゴマノハグサモザイクウイルス（Ｐ−ＦＭＶ）プロモーター（米国特許第５，３７８，６１９号に記載）および増強型のＦＭＶプロモーター（Ｐ−ｅＦＭＶ）（Ｐ−ＦＭＶのプロモーター配列が縦列に重複している）；カリフラワーモザイクウイルス１９Ｓプロモーター；サトウキビ桿状型ウイルスプロモーター；Ｃｏｍｍｅｌｉｎａ  ｙｅｌｌｏｗ  ｍｏｔｔｌｅウイルスプロモーター；ならびに植物細胞において発現することがわかっている他の植物ＤＮＡウイルスプロモーターが挙げられる。
【０１００】
環境性、ホルモン性、化学薬品性および／または発生上のシグナルに応答して調節されるさまざまな植物遺伝子プロモーターもまた、作動可能に連結された遺伝子の植物細胞内での発現に使用することができ、（１）熱（Ｃａｌｌｉｓら、１９８８）、（２）光（例えば、ｐｅａ  ｒｂｃＳ−３Ａプロモーター、Ｋｕｈｌｅｍｅｉｅｒら、１９８９；トウモロコシｒｂｃＳプロモーター、ＳｃｈａｆｆｎｅｒおよびＳｈｅｅｎ、１９９１；もしくはクロロフィルａ／ｂ結合タンパク質プロモーター、Ｓｉｍｐｓｏｎら、１９８５）、（３）ホルモン（アブシジン酸など）（Ｍａｒｃｏｔｔｅら、１９８９）、（４）創傷（例えば、ｗｕｎｌ、Ｓｉｅｂｅｒｔｚら、１９８９）；または（５）化学薬品（ジャスモン酸メチル、サリチル酸、もしくは毒性緩和剤など）によって調節されるプロモーターが挙げられる。また、器官特異的プロモーター（例えば、Ｒｏｓｈａｌら、１９８７；Ｓｃｈｅｒｎｔｈａｎｅｒら、１９８８；Ｂｕｓｔｏｓら、１９８９）を使用することが好都合な場合もあり得る。
【０１０１】
本発明の植物に導入され得る例示的な核酸としては、例えば、別の種に由来するＤＮＡ配列または遺伝子、あるいは同じ種を起源とする、または同じ種に存在する遺伝子または配列さえも挙げられるが、レシピエント細胞には、古典的な生殖または品種改良手法ではなく遺伝子操作法によって組み込まれる。しかしながら、用語「外因性」はまた、形質転換対象の細胞には通常存在しないか、あるいはおそらく単純に、該形質転換性のＤＮＡセグメントもしくは遺伝子にみられるような形態、構造などで存在しない遺伝子、または、通常存在しているが、天然の発現パターンとは異なる様式で発現する（例えば、過剰発現する）ことが所望される遺伝子もいうことも意図する。したがって、用語「外因性」の遺伝子またはＤＮＡは、かかる細胞内に同様の遺伝子が既に存在しているかもしれないかどうかに関係なくレシピエント細胞に導入される任意の遺伝子またはＤＮＡセグメントをいうことを意図する。外因性ＤＮＡに含まれるＤＮＡの型としては、植物細胞に既に存在しているＤＮＡ、別の植物に由来するＤＮＡ、異なる生物体に由来するＤＮＡ、または外部で作製されたＤＮＡ（遺伝子のアンチセンスメッセージを含むＤＮＡ配列、もしくは合成遺伝子もしくは修飾遺伝子をコードするＤＮＡ配列など）が挙げられ得る。
【０１０２】
数百種類（数千種類とまではいかないが）の種々の遺伝子が知られており、本発明によるペッパー植物に導入され得る可能性がある。ペッパー植物への導入に選択され得る具体的な遺伝子および対応する表現型の非限定的な例としては、害虫耐性に関する１種類以上の遺伝子（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ（Ｂ．ｔ．）遺伝子など）、害虫耐性（真菌病害防除に対する遺伝子など）、除草剤耐性（グリホサート耐性を付与する遺伝子など）、および品質改善（収量、栄養価向上など）、環境もしくはストレス耐性、あるいは植物の生理機能、生長、発達、形態または植物生成物（１種類もしくは複数種）における任意の望ましい変更のための遺伝子が挙げられる。例えば、構造遺伝子としては、害虫耐性、例えば限定されないが、バチルス属害虫防除タンパク質遺伝子（ＷＯ９９／３１２４８（引用によりその全体が本明細書に組み込まれる）、米国特許第５，６８９，０５２号（引用によりその全体が本明細書に組み込まれる）、米国特許第５，５００，３６５号および同第５，８８０，２７５号（引用によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載）を付与する任意の遺伝子が挙げられ得る。別の実施形態では、構造遺伝子は、除草剤グリホサートに対する耐性を付与するものであり得、該耐性は、限定されないが、アグロバクテリウム系統ＣＰ４グリホサート抵抗性ＥＰＳＰＳ遺伝子（ａｒｏＡ：ＣＰ４）（米国特許第５，６３３，４３５号（引用によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載）、またはグリホサートオキシドレダクターゼ遺伝子（ＧＯＸ）（米国特許第５，４６３，１７５号（引用によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載）などの遺伝子によって付与される。
【０１０３】
あるいはまた、ＤＮＡコード配列は、例えば、アンチセンス媒介性または共抑制媒介性の機構によって内因性遺伝子の発現の標的化阻害を引き起こす非翻訳可能なＲＮＡ分子をコードすることにより、このような表現型に影響を及ぼすことができる（例えば、Ｂｉｒｄら、１９９１を参照のこと）。また、該ＲＮＡは、所望の内因性ｍＲＮＡ産物を切断するように操作された触媒性ＲＮＡ分子（すなわち、リボザイム）であってもよい（例えば、ＧｉｂｓｏｎおよびＳｈｉｌｌｉｔｏ、１９９７参照）。したがって、目的の表現型または形態変化が示されるタンパク質またはｍＲＮＡが得られる任意の遺伝子が本発明の実施に有用である。
【０１０４】
Ｇ．定義
本明細書における説明および表において、いくつかの用語を用いている。本明細書および特許請求の範囲の明確かつ一貫性のある理解を提供するために、以下の定義を示す。
【０１０５】
対立遺伝子：遺伝子座の任意の１種類以上の代替的形態。該対立遺伝子はすべて、１つの形質または特性に関連している。二倍体の細胞または生物体では、所与の遺伝子の２つの対立遺伝子は、１対の相同染色体上の対応する遺伝子座を占める。
【０１０６】
戻し交配：生産者が、ハイブリッド子孫（例えば、第１世代ハイブリッド（Ｆ１））を該ハイブリッド子孫の親の一方に戻す交配を繰り返すプロセス。戻し交配は、１つ以上の単一遺伝子座変換を、ある遺伝的背景から別の遺伝的背景に導入するために使用され得る。
【０１０７】
交配：２つの親植物の交配（ｍａｔｉｎｇ）。
【０１０８】
異花受粉：異なる植物に由来する２つの配偶子の融合による受精。
【０１０９】
二倍体：２組の染色体を有する細胞または生物体。
【０１１０】
無力化する（ｅｍａｓｃｕｌａｔｅ）：植物の雄性器官の除去、または細胞質もしくは核の遺伝要素あるいは雄性不稔性を付与する化学薬品剤での雄性器官の不活化。
【０１１１】
酵素：生物学的反応において触媒としての機能を果し得る分子。
【０１１２】
Ｆ１ハイブリッド：２種類の非同系植物の交配の第１世代子孫。
【０１１３】
遺伝子型：細胞または生物体の遺伝子構成。
【０１１４】
半数体：二倍体の２組の染色体のうちの１組を有する細胞または生物体。
【０１１５】
連鎖：同じ染色体上の対立遺伝子が、その伝達が独立している場合に偶然に起こることが予測されるよりも高頻度で一緒に分離する傾向にある現象。
【０１１６】
マーカー：容易に検出可能な表現型、好ましくは、相互優性様式で遺伝されるもの（二倍体ヘテロ接合体の遺伝子座の両方の対立遺伝子が容易に検出可能である）、環境分散成分はない、すなわち、遺伝率１。
【０１１７】
表現型：細胞または生物体の検出可能な特性であって、遺伝子発現の顕現である特性。
【０１１８】
量的形質遺伝子座（ＱＴＬ）：量的形質遺伝子座（ＱＴＬ）は、通常は継続的に分配される数値表示可能な形質を、ある程度制御する遺伝子座をいう。
【０１１９】
抵抗性：本明細書で用いる場合、用語「抵抗性」および「耐性」は、指定された生物害虫、病原体、非生物的影響または環境条件に対して症状を示さない植物を記述するために互換的に用いている。これらの用語は、一部症状を示すが、依然として許容され得る収量で商品をもたらすことができる植物を記述するためにも使用する。抵抗性または耐性と称する一部の植物は、たとえ該植物が発育不良であり、収量が少なくても、作物をもたらし得るという意味でのみ抵抗性または耐性である。
【０１２０】
再生：組織培養物からの植物の生育。
【０１２１】
王立園芸協会（Ｒｏｙａｌ  Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ）（ＲＨＳ）カラーチャート値：ＲＨＳカラーチャートは、任意の色の厳密な特定を可能にする標準化された参照値である。このチャート上での色の指定は、その色相、明度および彩度を示す。色は、ＲＨＳカラーチャートによって、グループ名、シート番号および文字で特定することにより厳密に命名される（例えば、Ｙｅｌｌｏｗ−Ｏｒａｎｇｅ  Ｇｒｏｕｐ  １９ＡまたはＲｅｄ  Ｇｒｏｕｐ  ４１Ｂ）。
【０１２２】
自家受粉：同じ植物の葯から柱頭への花粉の伝達。
【０１２３】
単一遺伝子座変換（ｃｏｎｖｅｒｔｅｄ／ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ）植物：戻し交配と称される植物の品種改良手法（この場合、戻し交配手法および／または遺伝的形質転換によってペッパー変種に伝達される単一遺伝子座の特性に加えて、該変種の本質的にすべての形態学的特性および生理学的特性が復元される）によって開発された植物。
【０１２４】
実質的に同等：比較した場合、平均と統計学的有意差（例えば、ｐ＝０．０５）を示さない特性。
【０１２５】
組織培養物：植物部分に組織化される同じもしくは異なる型の単離された細胞またはかかる細胞の集合体を含む組成物。
【０１２６】
導入遺伝子：形質転換によってペッパー植物のゲノム内に導入された配列を含む遺伝子座。
【０１２７】
Ｈ．寄託情報
上記に開示し、特許請求の範囲に記載したペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４ならびに同系交配親系ＳＭＹ  ９９−１３２２およびＳＭＹ  ９９−１３１１の寄託は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）、１０８０１  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ  ２０１１０−２２０９において行なった。各々の寄託日は２０１０年１２月１日である。ペッパーハイブリッドＰＳ０９９５６４３４ならびに同系交配親系ＳＭＹ  ９９−１３２２およびＳＭＹ  ９９−１３１１の寄託した種子の受託番号は、各々、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２３、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５１７、およびＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１１５２２である。特許が付与されたら、寄託物に対するすべての制約は解除され、寄託物は、３７  Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１．８０１〜１．８０９のすべての要件をみたすことが意図される。寄託物は該寄託機関に、３０年間、または最後の請求から５年間、または特許の有効期間のいずれか長い方で維持され、該期間中、必要な場合は、切り替えられる。
【０１２８】
前述の発明は、明瞭性と理解の目的のための例示ならびに実施例として、ある程度詳細に記載したが、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される本発明の範囲内で、一定の変更および修正が行なわれ得ることは明白であろう。
【０１２９】
本明細書に挙げた参考文献はすべて、引用により本明細書に明示的に組み込まれる。
【０１３０】
参考文献
以下の参考文献は、手順の例示または本明細書に記載のものを補足する他の詳細が提供される限りにおいて、引用により本明細書に具体的に組み込まれる。
米国特許第５，３７８，６１９号
米国特許第５，４６３，１７５号
米国特許第５，５００，３６５号
米国特許第５，５６３，０５５号
米国特許第５，６３３，４３５号
米国特許第５，６８９，０５２号
米国特許第５，８８０，２７５号
【０１３１】
Ａｎら、Ｐｌａｎｔ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．、８８：５４７，１９８８
Ｂｉｒｄら、Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｇｅｎ．Ｅｎｇｉｎ．Ｒｅｖ．、９：２０７、１９９１
Ｂｕｓｔｏｓら、Ｐｌａｎｔ  Ｃｅｌｌ、１：８３９、１９８９
Ｃａｌｌｉｓら、Ｐｌａｎｔ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．、８８：９６５、１９８８
Ｃｈｏｉら、Ｐｌａｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｐ．、１３：３４４−３４８、１９９４
Ｄｅｋｅｙｓｅｒら、Ｐｌａｎｔ  Ｃｅｌｌ、２：５９１、１９９０
Ｅｌｌｕｌら、Ｔｈｅｏｒ．Ａｐｐｌ．Ｇｅｎｅｔ．、１０７：４６２−４６９、２００３
ＥＰ  ５３４  ８５８
Ｆｒａｌｅｙら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、３：６２９−６３５、１９８５
Ｆｒｏｍｍら、Ｎａｔｕｒｅ、３１２：７９１−７９３、１９８６
Ｆｒｏｍｍら、Ｐｌａｎｔ  Ｃｅｌｌ、１：９７７、１９８９
ＧｉｂｓｏｎおよびＳｈｉｌｌｉｔｏ、Ｍｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．、７：１２５、１９９７
【０１３２】
Ｋｌｅｅら、Ｂｉｏ−Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、３（７）：６３７−６４２、１９８５
Ｋｕｈｌｅｍｅｉｅｒら、Ｐｌａｎｔ  Ｃｅｌｌ、１：４７１、１９８９
Ｍａｒｃｏｔｔｅら、Ｎａｔｕｒｅ、３３５：４５４、１９８８
Ｍａｒｃｏｔｔｅら、Ｐｌａｎｔ  Ｃｅｌｌ、１：９６９、１９８９
Ｏｄｅｌら、Ｎａｔｕｒｅ、３１３：８１０、１９８５
Ｏｍｉｒｕｌｌｅｈら、Ｐｌａｎｔ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２１（３）：４１５−４２８、１９９３
Ｐｏｔｒｙｋｕｓら、Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．Ｇｅｎｅｔ．、１９９：１８３−１８８、１９８５
Ｒｏｓｈａｌら、ＥＭＢＯ  Ｊ．、６：１１５５、１９８７
ＳｃｈａｆｆｎｅｒおよびＳｈｅｅｎ、Ｐｌａｎｔ  Ｃｅｌｌ、３：９９７、１９９１
Ｓｃｈｅｒｎｔｈａｎｅｒら、ＥＭＢＯ  Ｊ．、７：１２４９、１９８８
Ｓｉｅｂｅｒｔｚら、Ｐｌａｎｔ  Ｃｅｌｌ、１：９６１、１９８９
Ｓｉｍｐｓｏｎら、ＥＭＢＯ  Ｊ．、４：２７２３、１９８５
ＴｅｒａｄａおよびＳｈｉｍａｍｏｔｏ、Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．Ｇｅｎｅｔ．、２２０：３８９、１９９０．
Ｕｃｈｉｍｉｙａら、Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．Ｇｅｎｅｔ．、２０４：２０４、１９８６
Ｗａｎｇら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８０：１０７７−１０８２、１９９８
Ｗｉｌｌｉａｍｓら、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．、１  ８：６５３１―６５３５、１９９０
ＷＯ９９／３１２４８