(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
放射線滅菌処理によって起こり得る糖センサへの損傷を抑制する方法であって、
前記方法は、滅菌処理の間、前記糖センサを水性放射線防護剤配合物と組み合わせる工程を含み、
前記糖センサは、炭水化物認識ドメインを備えた糖結合性ポリペプチドと、発蛍光団と、を含み、
前記水性放射線防護剤配合物は、前記糖結合性ポリペプチドとの結合能力に応じて選択した糖と、前記発蛍光団を消光する能力に応じて選択した発蛍光団消光組成物と、を含み、
前記滅菌処理は、前記糖が前記糖結合性ポリペプチドに結合し、これにより、放射線滅菌処理によって起こり得る前記糖センサへの損傷を抑制するよう選んだ条件下で行われる、方法。
【請求項２】
前記糖結合性ポリペプチドは、マンナン結合性レクチン、コンカナバリンＡ、またはグルコースオキシダーゼを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記糖は、グルコース、マンノース、フルクトース、メレジトース（melizitose）、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、スクロース、またはトレハロースを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記水性放射線防護剤配合物は、アスコルビン酸塩（ascorbate）、尿酸塩（urate）、亜硝酸塩（nitrite）、ビタミンＥ、α−トコフェロール、またはニコチン酸メチルエステルから成る群より選ばれる酸化防止剤を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記発蛍光団消光組成物は、アセトアミノフェンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記水性放射線防護剤配合物は、緩衝剤を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記緩衝剤は、クエン酸塩（citrate）、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩＳ）、および酒石酸塩（tartrate）から成る群より選ばれる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記放射線滅菌処理は、放射線の単回照射を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記放射線滅菌処理は、電子線照射を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
糖センサと、
水性放射線防護剤配合物と、
を含む構成物であって、
前記糖センサは、
炭水化物認識ドメインを備えた糖結合性ポリペプチドと、
発蛍光団と、
を含み、
前記水性放射線防護剤配合物は、
糖と、
発蛍光団消光組成物と、
を含み、
前記糖は、前記炭水化物認識ドメインに結合する、構成物。
【請求項１１】
前記発蛍光団消光組成物は、アセトアミノフェンを含む、請求項１０に記載の構成物。
【請求項１２】
前記水性放射線防護剤配合物は、少なくとも１ｍＭから５０ｍＭの濃度のアセトアミノフェンを含む、請求項１１に記載の構成物。
【請求項１３】
前記水性放射線防護剤配合物は、アスコルビン酸塩、尿酸塩、亜硝酸塩、ビタミンＥ、α−トコフェロール、またはニコチン酸メチルエステルから成る群より選ばれる酸化防止剤を含む、請求項１０に記載の構成物。
【請求項１４】
前記水性放射線防護剤配合物は、少なくとも１ｍＭから１００ｍＭの濃度のアスコルビン酸塩を含む、請求項１３に記載の構成物。
【請求項１５】
前記糖は、グルコース、マンノース、フルクトース、メレジトース、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、スクロース、またはトレハロースから成る群より選ばれる、請求項１０に記載の構成物。
【請求項１６】
前記水性放射線防護剤配合物は、少なくとも１ｍＭから１００ｍＭの濃度のマンノースを含む、請求項１５に記載の構成物。
【請求項１７】
前記水性放射線防護剤配合物は、少なくとも１０ｍＭから１０００ｍＭの濃度のスクロースを含む、請求項１５に記載の構成物。
【請求項１８】
前記水性放射線防護剤配合物は、緩衝剤を含み、６以下のｐＨを持つ、請求項１０に記載の構成物。
【請求項１９】
前記緩衝剤は、クエン酸塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩＳ）、および酒石酸塩から成る群より選ばれる、請求項１８に記載の構成物。
【請求項２０】
前記水性放射線防護剤配合物は、界面活性剤を含む、請求項１０に記載の構成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２０１２年１０月２５日出願の、米国実用出願番号（United States utility application number）第１３／６６０，６４８号、および、２０１１年１１月１７日出願の、米国仮特許出願番号第６１／５６１，１４６号の利益を主張するものであり、これらの内容は全て本件に引用して援用する。
【０００２】
本発明は、in vivo環境で有用な医療機器、特に、このような機器をin vivoに埋め込む前に滅菌するために使用する方法および材料に関する。
【背景技術】
【０００３】
医療従事者および患者は、糖尿病患者が使用するグルコースセンサなど、様々な滅菌済み医療品を普段から使用している。これに関連して、存在する可能性のある微生物を殺すため、数多くの異なる滅菌法が様々な医療品に使用される。殆どの滅菌法では、滅菌する品物全体に滅菌剤を染み込ませる必要がある。このような方法として、滅菌すべき対象物にオートクレーブの中などで熱と圧力をかける加熱滅菌法がある。滅菌する対象物全体に熱と圧力が浸透し、十分な時間の後には、有害な微生物が死滅すると考えられる。対象物の滅菌には、過酸化水素やエチレンオキシドなどのガスも用いられる。滅菌法には、微生物を死滅させるため、ガンマ線、Ｘ線、エネルギー電子などのイオン化放射線を用いる方法もある。
【０００４】
放射線は、高い透過性、比較的低い化学反応性、即効性など、他の滅菌法よりも多くの利点があり、温度、圧力、真空度、または湿度を制御する必要もない。その結果、放射線曝露による医療機器の滅菌が広く行われている。一般に、全体または一部がポリマーから成る医療機器は、電子線（ｅビーム）、ガンマ線、紫外線、赤外線、イオンビーム、Ｘ線など（但し、これらに限定しない）、様々な種類の放射線で滅菌する。
【０００５】
電子線およびガンマ線滅菌処理は、医療機器上の微生物を殺菌するために一般的に用いられる放射線の形を定めている。しかし、滅菌に使用する場合、このような放射線は、タンパク質などのポリマーを含む医療品内に存在する機能性高分子の構造を変えるおそれがある。高エネルギー放射線は、ポリマー分子内でイオン化や励起を起こし易く、フリーラジカルも生じ易い。これらの高エネルギー種は、医療品内に存在する高分子と反応して、分解、引き抜き、鎖切断、架橋を起こすことがある。
【０００６】
放射線滅菌による医療機器内のポリマー材料や他の高分子の性能の低下は、放射線曝露の際のフリーラジカル生成が関わっていた。このため、放射線感受性の構成要素を含む医療機器の滅菌に電子線およびガンマ線を使用することには問題がある。これは滅菌処理を複雑にし、医療機器に使用できる構造や材料の範囲を限定する。このため、高エネルギー放射線への曝露の結果として起こり得る損傷から医療機器材料を保護することのできる方法および配合物が望まれている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
上で述べたように、放射線曝露による医療機器の滅菌は広く行われている。残念なことに、放射線滅菌は一部の医療機器のある特定の構成要素の機能を損なうおそれがある。このため、本発明の実施形態では、放射線滅菌の好ましくない影響から医療機器を保護するために使用可能な方法および材料を提示する。本発明の代表的な実施形態はグルコースセンサに関するものであるが、本件に開示のシステム、方法、および材料は、様々な医療機器にも使用するよう適応可能である。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本件に開示されている発明には多くの実施形態がある。本発明の代表的な実施形態は、放射線滅菌処理（例えば、電子線照射）によって起こり得る糖センサへの損傷を、滅菌処理の間、糖センサを水性放射線防護剤配合物と組み合わせることによって抑制する方法を含んでいる。本発明の一般的な実施形態において、糖センサは、炭水化物認識ドメインを備えた糖結合性ポリペプチドを含み、水性放射線防護剤配合物は、糖結合性ポリペプチドとの結合能力に応じて選択した糖を含んでいる。本発明の一部の実施形態において、糖センサは、発蛍光団を含み、水性放射線防護剤配合物は、発蛍光団を消光する能力に応じて選択した発蛍光団消光組成物を含んでいる。本発明の具体的な実施形態において、センサはグルコースセンサであり、糖結合性ポリペプチドは、マンナン結合性レクチン、コンカナバリンＡ、グルコース−ガラクトース結合性タンパク質、またはグルコースオキシダーゼを含んでいる。本発明の一部の方法では、放射線滅菌処理によって起こり得る糖センサへの損傷を抑制するように、糖が糖結合性ポリペプチドに結合し、および／または、発蛍光団消光組成物が発蛍光団を消光するよう選んだ条件下で、滅菌処理を行う。
【０００９】
以下で論じるように、本件に開示の放射線防護剤配合物には、数多くの化合物が有用である。本発明の一部の実施形態において、水性放射線防護剤配合物は、グルコース、マンノース、フルクトース、メレジトース（melizitose）、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、スクロース、トレハロースなどの糖を含んでいる。一部の実施形態において、水性放射線防護剤配合物は、アスコルビン酸塩（ascorbate）、尿酸塩（urate）、亜硝酸塩（nitrite）、ビタミンＥ、α−トコフェロール、またはニコチン酸メチルエステルから成る群より選ばれる酸化防止剤を含んでいる。本発明の一部の実施形態において、水性放射線防護剤配合物は、緩衝剤、例えば、クエン酸塩（citrate）、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩＳ）、および酒石酸塩（tartrate）から成る群より選ばれる緩衝剤を含んでいる。本発明の様々な実施形態において、放射線防護剤配合物は、界面活性剤、アミノ酸、薬学的許容塩などの追加の試剤を含んでいても良い。
【００１０】
本発明に関連する実施形態には、水性放射線防護配合物と組み合わせた医療機器を含む構成物（compositions of matter）が含まれる。本発明の実施形態の一例は、糖結合性ポリペプチドを含む糖センサ、および／または、発蛍光団を含む構成物である。代表的な構成物の実施形態では、糖センサを、糖を含む水性放射線防護剤配合物と組み合わせ、このとき、糖は糖結合性ポリペプチドに結合する。必要に応じて、このような構成物では、糖センサを、水性放射線防護配合物中の発蛍光団消光化合物と組み合わせる。
【００１１】
本発明の放射線防護剤組成物を生成するため、数多くの化合物を本件に開示の糖センサと組み合わせることができる。本発明の代表的な実施形態において、組成物は、グルコース、マンノース、フルクトース、メレジトース、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、スクロース、またはトレハロースから成る群より選ばれる糖を含んでいる。本発明の一部の実施形態において、組成物は、発蛍光団消光化合物、例えば、アセトアミノフェンを含んでいる。本発明の一部の実施形態において、組成物は、アスコルビン酸塩、尿酸塩、亜硝酸塩、ビタミンＥ、α−トコフェロール、またはニコチン酸メチルエステルから成る群より選ばれる酸化防止剤化合物を含んでいる。本発明の一部の実施形態において、組成物は、界面活性剤、例えば、Ｔｗｅｅｎ８０などのポリソルベートを含んでいる。本発明の一部の実施形態において、組成物は、クエン酸塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩＳ）、酒石酸塩などの緩衝剤を含んでいる。
【００１２】
本発明のその他の目的、特徴、および長所は、以下の詳細な記述から当業者には明らかとなろう。しかし当然のことながら、詳細な記述および具体的な実施例で、本発明の実施形態がいくつか示されているが、これは説明を目的として述べられているのであって、限定するためのものではない。本発明の精神から外れることなく、その範囲内で多くの変更および変形を行うことができ、このような変形も全て本発明に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１Ａ】分析物（グルコース）に応じた光学センサを備えた、皮膚下に埋め込む管状カプセルを含むセンサ構造を示す図である。
【図１Ｂ】このカプセルの外観を示す図である。
【図１Ｃ】このカプセルの相対的な大きさを示す図である。
【図１Ｄ】複数の平面状積層要素から成る電流測定分析物センサを含む、別のセンサ構造を示す略図である。
【図２】無配合センサ（放射線防護剤組成物を何も組み合わせていない対照センサ）、３回照射、及び１５ｋＧｙでの配合センサについて、ｅビーム照射線量の関数として用量応答（ＤＲ）保持率を表したデータを示すグラフである。３回照射は３×５ｋＧｙである。供試センサは、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ緩衝生理的食塩水を含む溶液で濡らして照射した。矢印は、配合センサで、１５ｋＧｙに曝露した後も＋８０％のＤＲが保持できることを示している。
【図３】１５ｋＧｙの放射線に曝露した後のセンサから得られた位相および強度データを示すグラフである。用量応答は、照射前の２．１に比べ、照射後は１．７であり、即ち、保持率は８１％である。
【図４】配合物に使用したアスコルビン酸塩濃度の関数としての、照射センサの保持したＤＲデータを示すグラフである。使用アスコルビン酸塩濃度が低すぎても高すぎても保持ＤＲは低くなるが、２０ｍＭ〜１００ｍＭの濃度範囲では良好な保護効果が得られる。
【図５】配合物に使用したアセトアミノフェン（＝パラセタモール、以後、ＰＡＭと略記する）濃度の関数としての、照射センサの保持したＤＲデータを示すグラフである。低濃度のアセトアミノフェンを用いると保持ＤＲは低くなるが、１０ｍＭを上回る濃度を用いると良好な保護効果が得られるようである。更に、アスコルビン酸塩を添加剤に加えると、殆どの場合、保護効果が更に良くなることがわかった。
【図６】配合物に使用したアセトアミノフェン濃度の関数としての、照射センサの保持したＤＲデータを示すグラフである。
【図７】配合物に使用したアセトアミノフェン濃度の関数としての、照射センサの保持したＤＲデータを示すグラフである。センサは全て１００ｍＭのスクロースを含んでおり、アスコルビン酸塩およびマンノースの添加量の変化も示す。
【図８】配合物に使用したアスコルビン酸塩濃度の関数としての、照射センサの保持したＤＲデータを示すグラフである。センサは全て５００ｍＭのスクロースを含んでおり、アセトアミノフェン（ＰＡＭ）およびマンノースの添加量の変化も示す。
【図９】アセトアミノフェンおよびアスコルビン酸／アスコルビン酸塩を配合したセンサの関数としての、照射および非照射センサ両者の絶対ＤＲデータを示す棒グラフである。
【図１０】アセトアミノフェン、アスコルビン酸、マンノース、および５００ｍＭのスクロースを配合したセンサの関数としての、照射および非照射センサ両者の絶対ＤＲデータを示す棒グラフである。全体の結果を図１１に示す。
【図１１】Ｔｒｉｓ／クエン酸塩生理食塩緩衝液＋添加剤を用いた後の、センサ応答データを示すグラフである。センサは、良好なＤＲ保持を示す。
【図１２】ｅビームを照射したセンサと照射しないセンサとを直接比較したデータを示すグラフである。
【図１３】ＰＢＳ（ｐＨ＝５．５）中に貯蔵後に試験した、本来のセンサから得られたデータを示すグラフである。センサ自体はＰＢＳ緩衝液で問題なかった。
【図１４】ｅビーム照射の間、ＰＢＳ緩衝液に添加剤（５００ｍＭ スクロース、２０ｍＭ アセトアミノフェン、５０ｍＭ アスコルビン酸塩）を加えたセンサから得られたデータを示すグラフである。
【図１５】ＰＢＳ緩衝液に添加剤（５００ｍＭ スクロース、２０ｍＭ アセトアミノフェン、５０ｍＭ アスコルビン酸塩）を加えたセンサから得られたデータを示すグラフである。
【図１６】異なる緩衝剤濃度を使用して保持したＤＲデータを示す棒グラフである。
【図１７】ｅビーム照射の間、クエン酸塩のみを使用したセンサから得られたデータを示すグラフである。
【図１８】ｅビーム照射の間、クエン酸塩と添加剤を使用したセンサから得られたデータを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
別に定義のない限り、文中で用いられている技術用語、表記、その他の科学用語または専門用語は全て、本発明に関わる技術の当業者に一般的に理解されている意味を持つものとする。一部の例で、一般的に理解されている意味を持つ用語を、明確にするため、および／または、参照し易くするために文中で定義しているが、文中にこのような定義が含まれることが、当該技術で一般的に理解されているものとの実質的な違いを表していると必ずしも解釈すべきではない。文中に記載または参照されている多くの技術および手順はよく理解されており、通常の手法を用いて当業者により一般的に行われている。必要に応じて、市販のキットや試薬の使用を伴う処置が、別に断りのない限り、製造者の定めたプロトコルおよび／またはパラメータに従って一般的に行われる。多くの用語を以下に定義する。
【００１５】
例えば、“分析物センサ”の用語“センサ”はその通常の意味で用いられ、例えば（制限することなく）、分析物などの化合物を検出するために用いられる手段を含む。“センサシステム”には、例えば、センサを使用および機能し易くするよう設計した、要素、構造、構成様式（例えば、要素の特定の３次元配置）が含まれる。センサシステムには、例えば、選択した材料特性を備えるなどした組成物と、信号検出に使用する素子やデバイスなどの電子的構成要素（例えば、光学検出器、検流器、モニタ、プロセッサ等）を含むことができる。文中で用いられている用語“検出複合体（sensing complex）”は、特定の分析物（例えば、グルコース等）と相互作用して、それを示す信号を発生する、センサの構成要素を指す。用語“マトリックス”は、その中に、またはその中から、何か別のものが発見される、発生する、および／または、得られるものという、技術的に認められている意味に従って文中で使用される。本発明の代表的な実施形態は、糖尿病の管理に用いられるグルコースセンサに関するものであるが、本件に開示のシステム、方法、および材料は、当該技術で知られている様々な医療機器にも使用するよう適応可能である。
【００１６】
糖尿病の管理では、正確なインスリン用量を求めるため、血糖の定期的測定が不可欠である。更に、糖尿病患者の長期的治療において、血糖値の良好な調節が、網膜症、循環障害、糖尿病にしばしば伴うその他の退行性疾患の発病を、防止できないとしても遅らせられることが立証されている。従って、糖尿病患者による、血糖値の信頼できる正確な自己監視が必要である。一般に、糖尿病患者は、市販の比色試験片または電気化学的バイオセンサ（例えば、酵素電極）を用いて血糖を監視するが、いずれも測定を行う毎に適量の血液を採取するためにランセット形器具を常用する必要がある。平均して、大部分の糖尿病患者は、血糖を測定するためにこのような器具を１日２回使用している。しかし、米国国立衛生研究所は、血糖測定を少なくとも１日４回行うことを推奨しており、この勧告は米国糖尿病協会でも承認されている。このように血糖測定の頻度が上がることは、糖尿病患者に金銭面でも、痛みや不快感の面でも、特に、指先から採血するためにランセットを常用しなければならない長期の糖尿病患者にとっては相当の負担となる。従って、患者から採血する必要のない、より良い長期グルコース監視システムが明らかに必要である。
【００１７】
患者からの採血を必要としないグルコース測定法は数多く提案されている。競合的結合によるグルコース測定法のひとつは、一般にエネルギー移動供与体受容体対（エネルギー供与体部とエネルギー受容体部とを含む）である、近接度型（proximity-based）信号発生／変調部対を使用するものである。エネルギー供与体部は光輝性（通常、蛍光性）である。このような方法では、エネルギー移動供与体受容体対を、分析すべき試料（皮下の液体など）と接触させる。次に、試料を照射し、得られた発光を検出する。供与体受容体対のエネルギー供与体部またはエネルギー受容体部のどちらかはレセプタキャリア（例えば、炭水化物結合性分子）と結合し、供与体受容体対のもう一方（リガンドキャリア、例えば、炭水化物類似体に結合）と、存在する何らかの分析物（例えば、炭水化物）は、レセプタキャリア上の結合部位に結合しようと競合する。供与体と受容体とが一緒になると、これらの間でエネルギー移動が起こる。供与体受容体エネルギー移動の例が蛍光共鳴エネルギー移動（Forster resonance energy transfer：ＦＲＥＴ）であり、これは、最初に励起されていた供与体(Ｄ）から受容体（Ａ）への励起状態エネルギーの無放射遷移である。エネルギー移動は、エネルギー供与体部の蛍光発光の検出可能な寿命変化（減少）を生じる。更に、エネルギー供与体部から発せられる蛍光信号が一部消失する。分析物の競合的結合によって寿命変化が小さくなり、あるいは無くなることもある。このため、例えば、位相変調蛍光測定法または時間分解蛍光測定法（Lakowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy, Plenum Press, 1983, 3章参照）によって見掛けの発光寿命を測定することで、試料中の分析物量を決定することができる。供与体の強度減衰期間と相位角は、分析物濃度の上昇と共に大きくなると予想される。ＦＲＥＴの重要な特性は、生体高分子の大きさに匹敵する距離を超えてこれが起こることである。ＦＲＥＴが５０％有効な距離は Forster距離と呼ばれ、一般に、２０〜６０Åの範囲である。２０〜９０Åの範囲のForster距離が、競合的結合試験にとって都合が良い。例えば、米国特許第６２３２１２０号、米国特許出願公開番号第２００８０１８８７２３号、米国特許出願公開番号第２００９０２２１８９１号、米国特許出願公開番号第２００９０１８７０８４号、米国特許出願公開番号第２００９０１３１７７３号を参照のこと。
【００１８】
国際公開第９１／０９３１２号は、光学的手段で間接的に応答信号が送られる、グルコースに基づく親和性試験を用いる（エネルギー移動供与体受容体対を組み込んでいる）、皮下の方法およびデバイスを述べている。国際公開第９７／１９１８８号、国際公開第００／０２０４８号、国際公開第０３／００６９９２号、および国際公開第０２／３０２７５号はそれぞれ、間接的に読み取り可能な光学信号を発生する、エネルギー移動によるグルコース検知を述べている。上で論じたシステムは、炭水化物結合性分子として、植物レクチンのコンカナバリンＡ（Con A）を利用している。国際公開第０６／０６１２０７号は、マンノース結合性レクチン（ＭＢＬ）などの動物レクチンが代わりに使えることを提案している。先に示した炭水化物類似体（例えば、米国特許第６，２３２，１３０号のもの）は、それに炭水化物とエネルギー供与体またはエネルギー受容体部とが共役する、球状タンパク質を含んでいた。炭水化物ポリマー（例えば、必要に応じて誘導体化したデキストランおよびマンナン）も炭水化物類似体として使用されている。国際公開第０６／０６１２０７号では、生理的カルシウム濃度においてデキストランをＭＢＬに結合させるため、過ヨウ素酸塩開裂を使用することが示されている。このようなシステムの分析要素は一般に保持材料によって保持されている。これは、例えば、国際公開第２００５／１１０２０７号に記載されているような生分解性ポリマー材料から成るからである。
【００１９】
グルコースセンサなどの埋め込み型医療機器は、体内に入れる前に滅菌しなければならない。しかし、このようなデバイスの材料、例えば、センサ中の分析要素は、滅菌の際に傷つき易い。加熱滅菌はタンパク質（レクチンおよび／または炭水化物類似体）を変性させる。ガス滅菌は、このセンサのような湿式デバイスに使うのが難しい。従って、放射線曝露による医療機器の滅菌が広く行われる。滅菌に用いられる放射線の種類として、ガンマ線と電子線が挙げられる。電子線はガンマ線よりも制御が容易である。しかし、電子線は、タンパク質の失活や染料の脱色（例えば、供与体発蛍光団および／または受容体染料）を起こすことがある。これらの影響によりセンサ活性が失われるおそれがある。
【００２０】
本発明の実施形態は、埋め込み型グルコースセンサなどの医療機器を、放射線滅菌の好ましくない影響から保護するために使用可能な方法および材料を提示する。本件に開示されている発明には数多くの実施形態がある。本発明の代表的な実施形態は、放射線滅菌処理によって起こり得る医療機器（例えば、糖センサ）への損傷を、滅菌処理の間、医療機器を水性放射線防護剤配合物と組み合わせることで抑制する方法を含んでいる。本件に開示されているような発明の実施形態の状況において、電子線およびガンマ線照射は基本的に同じ過程であるため、本発明の方法および材料で得られる保護効果はこれらの照射形態に対しては同じと考えられる。ガンマ線は、その物品周囲の物質から二次電子を放出させるため、ｅビームによく似た電子の連鎖放出（cascade）を起こす。この理由により、金属は二次電子の良好な供給源であるため、１つ以上の金属要素を含むセンサにはガンマ線照射が適している。本発明の一部の実施形態において、放射線滅菌処理は、電子線照射を含む。本発明の一部の実施形態において、放射線滅菌処理は、ガンマ線照射照射を含む。
【００２１】
医療機器は、複数回照射で放射線に曝露（例えば、３×５ｋＧｙで総線量は１５ｋＧｙ）できるが、本発明の代表的な実施形態では、放射線を単回照射（例えば、１×１５ｋＧｙで総線量は１５ｋＧｙ）する。文中に示されているように（例えば、図２参照）、滅菌する量の放射線を単回照射で当てると、同じ線量を複数回照射で当てるよりも放射線防護が良好となる（放射線を３回の照射に分割すると、センサの信号保持が悪くなる）。必要に応じて、総線量は、３５ｋＧｙ以下、一般に、１０〜２０ｋＧｙの範囲である。一部の実施形態において、総線量は１５ｋＧｙ±２ｋＧｙである。Ｇｙ（Ｊ／ｋｇ）は、線量のＳＩ単位、即ち、単位質量当たりに吸収されるエネルギーの量である。放射線曝露後、センサの機能パラメータは、センサの用量応答（０ｋＧｙのＤＲに対するＤＲ）および絶対ＤＲ（４０ｍｇ／ｄＬのグルコースから４００ｍｇ／ｄＬのグルコースへの位相シフト度（degrees phase shift）で測定）などで評価できる。本発明の一部の実施形態において、水性放射線防護配合物は、グルコースセンサを照射した後に、センサが、（照射されていない対照センサのＤＲと比較して）グルコースに対するその用量応答（ＤＲ）の少なくとも５０、６０、または７０％を保つように、グルコースセンサを照射線損傷から保護するよう機能する。
【００２２】
本発明の一部の実施形態において、糖センサは、その内容を本件に引用して援用する、米国特許第５，７７７，０６０号、米国特許第６，００２，９５４号、米国特許第６，７６６，１８３号に開示されているものなどの、ボロン酸誘導体を含んでいる。本発明の別の実施形態において、糖センサは、糖結合性ポリペプチドを含んでいる。本発明の一部の実施形態において、糖センサはレクチンを含んでいる。必要に応じて、レクチンはＣ型（カルシウム依存性）レクチンである。一部の実施形態において、レクチンは脊椎動物レクチン、例えば、ヒトレクチンやヒト化レクチンなどの哺乳動物レクチンである。しかし、代わりに、植物レクチン、鳥レクチン、魚レクチン、または無脊椎動物レクチン（昆虫レクチンなど）でも良い。一部の実施形態において、レクチンは多量体型である。多量体レクチンは、ヒトまたは動物体由来のものであってもよい。あるいは、レクチンは単量体型でも良い。単量体レクチンは、組み換え法で、あるいは、ヒトまたは動物体由来の天然の多量体レクチン中のサブユニット間の結合を切断することで生成してもよい。その例は、米国特許第６，２３２，１３０号に記載されている。本発明の実施形態に有用な糖センサは、その内容を本件に引用して援用する、米国特許出願公開第２００８／０１８８７２３号にも開示されている。
【００２３】
本発明の一部の実施形態において、糖センサ中の糖検出要素はレクチンを含んでいる。必要に応じて、レクチンは、マンノース結合性レクチン、コングルチニン、またはコレクチン−４３（例えば、ウシＣＬ−４３）（全て血清コレクティング）、あるいは肺界面活性剤タンパク質（肺コレクチン）である。マンノース結合性レクチン（マンナン結合性レクチンまたはマンナン結合性タンパク質、ＭＢＬ、ＭＢＰとも呼ばれる）、例えば、ヒトＭＢＬは、特に興味深いことが判明している。ＭＢＬは、“花束状”に並んだ、いくつかの（通常、３〜４個（ＭＡＬＤＩ−ＭＳ）であるが、１〜６個の分布がありそうである（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ））サブユニット（それぞれが３個の同じポリペプチドから成る）を含む、コラーゲン様防御分子である。各サブユニットは約７５ｋＤａの分子量を持ち、必要に応じて、１つ以上のＭＢＬ関連セリンプロテアーゼ（ＭＡＳＰｓ）と錯体を形成することができる。それぞれのポリペプチドはＣＲＤを含んでいる。従って、各サブユニットには３個の炭水化物結合部位がある。三量体ＭＢＬおよび四量体ＭＢＬ（ヒト血清中では主にこの形で存在する。Teilletほか, Journal of Immunology, 2005, page 2870-2877）にはそれぞれ９個および１２個の炭水化物結合部位がある。本発明の代表的な実施形態において、レクチンは、ホモサピエンスマンノース結合性タンパク質Ｃ前駆体（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿０００２３３．１）であるポリペプチドを含んでいる。血清ＭＢＬは、それぞれが３個のポリペプチドから成る３〜４個のサブユニットでできている。ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿０００２３３．１の配列は、２７ｋＤａと３０ｋＤａの間であり、ＭＢＬタンパク質全体のＭｗは、通常、２７０ｋＤａから３００ｋＤａとなる。
【００２４】
あるいは、レクチンは、ＳＰ−ＡおよびＳＰ−Ｄより選ばれる、肺界面活性剤タンパク質であっても良い。これらのタンパク質はＭＢＬと同類である。これらは、生得的宿主防御機能におけるカルシウム依存性炭水化物結合性タンパク質として働く、水溶性コレクティングである。ＳＰ−Ｄは脂質にも結びつく。ＳＰ−Ａは、ＭＢＬと同じような“花束状”構造を持つ（Kilpatrick D C (2000) Handbook of Animal Lectins, p. 37）。ＳＰ−Ｄは、“Ｘ”の各端にＣＲＤの付いた、四量体“Ｘ”構造をしている。その他の適当な動物レクチンも当該技術で知られており、例えば、ＰＣ−レクチン ＣＴＬ−１、ケラチン生成細胞膜レクチン、ＣＤ９４、Ｐ３５（同義語：ヒトＬ−フィコリン（ficolin）、レクチンの一群）、ＥＲＧＩＣ−５３（同義語：ＭＲ６０）、ＨＩＰ／ＰＡＰ、ＣＬＥＣＳＦ８、ＤＣＬ（レクチンの一群）、ＧＬＵＴ族タンパク質（特に、ＧＬＵＴ１、ＧＬＵＴ４、ＧＬＵＴ１１）などがある。適当な動物レクチンは更に、“Handbook of Animal Lectins： Properties and Biomedical Applications”, David C. Kilpatrick, Wiley 2000 の付録Ａ、Ｂ、およびＣに示されている。
【００２５】
本発明の一般的な実施形態において、糖センサは、炭水化物認識ドメインを備えた糖結合性ポリペプチドを含み、水性放射線防護剤配合物は、糖結合性ポリペプチドとの結合能力に応じて選択した糖を含んでいる。本発明の一部の実施形態において、糖センサは、１つ以上の発蛍光団（例えば、供与体および／または参照発蛍光団）を含み、水性放射線防護剤配合物は、発蛍光団を消光する能力に応じて選択した発蛍光団消光化合物を含んでいる。必要に応じて、センサは、少なくとも１つのタンパク質／ポリペプチド、少なくとも１つのエネルギー供与体、および／または、少なくとも１つのエネルギー受容体を含み、このセンサには、少なくとも１つの保護物質を組み合わせる。一部の実施形態において、センサは、タンパク質、蛍光染料、デキストラン、ポリマー材料を含んでいる。本発明の実施形態の例において、センサはグルコースセンサであり、糖結合性ポリペプチドは、マンナン結合性レクチン、コンカナバリンＡ、グルコースオキシダーゼ、またはグルコース−ガラクトース結合性タンパク質を含んでいる（例えば、その内容を本件に引用して援用する、米国特許第６，２３２，１３０号、米国特許出願公開第２００８／０１８８７２３号、Jensenほか, Langmuir. 2012 Jul 31;28(30):11106-14. Epub 2012、Paekほか, Biosens Bioelectron. 2012、Judgeほか, Diabetes Technol Ther. 2011 Mar;13(3):309-17, 2011 参照）。
【００２６】
以下で論じるように、本件に開示の放射線防護剤配合物には、数多くの化合物が有用である。本発明の一部の実施形態において、水性放射線防護剤配合物は、グルコース、マンノース、フルクトース、メレジトース、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、スクロース、トレハロースなどの糖を含んでいる。一部の実施形態において、水性放射線防護剤配合物は、アスコルビン酸塩、尿酸塩、亜硝酸塩、ビタミンＥ、α−トコフェロール、またはニコチン酸メチルエステルから成る群より選ばれる酸化防止剤を含んでいる。本発明の一部の実施形態において、水性放射線防護剤配合物は、緩衝剤、例えば、クエン酸塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩＳ）、および酒石酸塩から成る群より選ばれる緩衝剤を含んでいる。
【００２７】
本発明の代表的な方法では、滅菌したセンサの機能的統合性を保護するよう選択した条件下で滅菌処理を行う。例えば、本発明の代表的な実施形態では、デバイスを冷却しながら、または冷却後に滅菌処理を行う。実施形態の例では、特定の温度以下で、または、特定の温度範囲内で、例えば、１０℃以下または５℃以下、あるいは０℃と５℃の間または０℃と１０℃の間の温度で滅菌処理を行う。本発明の一部の実施形態では、無酸素状態で滅菌処理を行う（例えば、配合物が酸化性化合物を含まない場合）。必要に応じて、アルゴンガス、窒素ガスなどで脱気した水性配合物に浸したセンサに滅菌処理を行う。本発明の一部の実施形態では、ｐＨが７以下、６以下、５以下などの配合物を用いて滅菌処理を行う。本発明の一部の実施形態では、放射線滅菌処理によって起こり得る糖センサへの損傷を抑制するよう、糖が糖結合性ポリペプチドに結合し、および／または、発蛍光団消光組成物が発蛍光団を消光するように選択した条件下で滅菌処理を行う。本発明の一部の方法論的な実施形態は、更なる工程、例えば、水性放射線防護剤配合物を含む、照射したセンサ組成物を透析して、配合物中の１つ以上の成分濃度を変える工程を含む。
【００２８】
本発明の別の実施形態は、糖センサと発蛍光団とを含む構成物である。糖センサの糖検出要素は、ボロン酸誘導体、分子インプリントポリマー、またはポリペプチドを含むことができる。このような構成物では、糖センサを発蛍光団消光化合物と組み合わせる。本発明の実施形態の一例は、炭水化物認識ドメインを備えた糖結合性ポリペプチドを含む糖センサと、発蛍光団とを含む構成物である。このような構成物では、糖センサを糖を含む水性放射線防護剤配合物と組み合わせ、このとき、糖は炭水化物認識ドメインに結合する。必要に応じて、このような構成物では、糖センサを発蛍光団消光化合物とも組み合わせる。
【００２９】
本発明の放射線防護剤組成物を生成するため、数多くの化合物を本件に開示の糖センサと組み合わせることができる。本発明の代表的な実施形態において、組成物は、グルコース、マンノース、フルクトース、メレジトース、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、ＧｌｕＮａｃ、スクロース、またはトレハロースから成る群より選ばれる糖を含んでいる。本発明の一部の実施形態において、組成物は、発蛍光団消光化合物、例えば、アセトアミノフェンを含んでいる。本発明の一部の実施形態において、組成物は、アスコルビン酸塩、尿酸塩、亜硝酸塩、ビタミンＥ、α−トコフェロール、またはニコチン酸メチルエステルから成る群より選ばれる酸化防止剤化合物を含んでいる。本発明の一部の実施形態において、組成物は、界面活性剤、例えば、Ｔｗｅｅｎ８０などのポリソルベートを含んでいる。本発明の一部の実施形態において、組成物は、クエン酸塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩＳ）、酒石酸塩などの緩衝剤を含んでいる。必要に応じて、組成物は、７以下、６以下、または５以下のｐＨを持つように調製する。
【００３０】
特定の化合物が水性放射線防護剤配合物中に特定の濃度範囲で存在すると、放射線損傷に対して高い防護性を持つ糖センサ（例えば、図１Ａ〜図１Ｃに示す糖センサ）が得られることがわかった。例えば、本発明の一部の実施形態において、放射線防護配合物は、少なくとも１ｍＭから５０ｍＭ（例えば、少なくとも１０ｍＭ、少なくとも２０ｍＭ、少なくとも３０ｍＭ、少なくとも４０ｍＭなど）の濃度のアセトアミノフェンを含んでいる。必要に応じて、放射線防護配合物は、２０ｍＭ±１０ｍＭ（一般に±５ｍＭ）の濃度のアセトアミノフェンを含んでいる。本発明の一部の実施形態において、放射線防護配合物は、少なくとも１０ｍＭから１０００ｍＭ（例えば、少なくとも１００ｍＭ、少なくとも２００ｍＭ、少なくとも３００ｍＭ、少なくとも４００ｍＭなど）の濃度のスクロースを含んでいる。必要に応じて、放射線防護配合物は、５００ｍＭ±２００ｍＭ（一般に±１００ｍＭ）の濃度のスクロースを含んでいる。本発明の一部の実施形態において、放射線防護配合物は、少なくとも１ｍＭから１００ｍＭ（例えば、少なくとも１０ｍＭ、少なくとも２０ｍＭ、少なくとも３０ｍＭ、少なくとも４０ｍＭなど）の濃度のマンノースを含んでいる。必要に応じて、放射線防護配合物は、５０ｍＭ±２０ｍＭ（一般に±１０ｍＭ）の濃度のマンノースを含んでいる。本発明の一部の実施形態において、放射線防護配合物は、少なくとも１ｍＭから１００ｍＭ（例えば、少なくとも１０ｍＭ、少なくとも２０ｍＭ、少なくとも３０ｍＭ、少なくとも４０ｍＭなど）の濃度のアスコルビン酸塩を含んでいる。本発明の一部の実施形態において、放射線防護配合物は、１０ｍＭ、２０ｍＭ、３０ｍＭ、４０ｍＭ、５０ｍＭ、６０ｍＭ、７０ｍＭ、８０ｍＭ、９０ｍＭ、または１００ｍＭ以下の濃度のアスコルビン酸塩を含んでいる。必要に応じて、放射線防護配合物は、５０ｍＭ±２０ｍＭ（一般に±１０ｍＭ）の濃度のアスコルビン酸塩を含んでいる。本発明の一部の実施形態において、放射線防護配合物は、少なくとも１ｍＭから１０ｍＭ（例えば、少なくとも１ｍＭ、少なくとも２ｍＭ、少なくとも３ｍＭ、少なくとも４ｍＭなど）の濃度のＴｒｉｓを含んでいる。必要に応じて、放射線防護配合物は、５ｍＭ±２ｍＭ（一般に±１ｍＭ）の濃度のＴｒｉｓを含んでいる。本発明の一部の実施形態において、放射線防護配合物は、少なくとも５ｍＭから１００ｍＭ（例えば、少なくとも１０ｍＭ、少なくとも２０ｍＭ、少なくとも３０ｍＭ、少なくとも４０ｍＭなど）の濃度のクエン酸塩を含んでいる。必要に応じて、放射線防護配合物は、１０ｍＭ±２ｍＭ（一般に±１ｍＭ）の濃度のクエン酸塩を含んでいる。
【００３１】
本件に開示の実用的な実施形態に示すように、本発明の放射線防護配合物中で、一般に、これらの化合物の１つ以上を、これらの化合物の別のものと組み合わせる。例えば、本発明の一部の配合物は、アセトアミノフェンおよび／またはアスコルビン酸塩および／またはＴｒｉｓおよび／またはクエン酸塩と組み合わせたスクロースを含んでいる。同様に、本発明の一部の配合物は、スクロースおよび／またはアスコルビン酸塩および／またはＴｒｉｓおよび／またはクエン酸塩と組み合わせたアセトアミノフェンを含んでいる。同様に、本発明の一部の配合物は、スクロースおよび／またはアセトアミノフェンおよび／またはＴｒｉｓおよび／またはクエン酸塩と組み合わせたアスコルビン酸塩を含んでいる。同様に、本発明の一部の配合物は、スクロースおよび／またはアセトアミノフェンおよび／またはＴｒｉｓおよび／またはアスコルビン酸塩と組み合わせたクエン酸塩を含んでいる。本配合物は、１つ以上のアミノ酸や薬学的許容塩、例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, University of the Sciences in Philadelphia (Ed), 第21版 (2005) に示されているものなどの追加の組成物を含んでいても良い。このセンサは体内で使用するため、代表的な実施形態において、添加剤は、体内で一般的に使用可能なものである。
【００３２】
前述のように、本件に開示されている発明の実施形態は、グルコースセンサなどの医療機器の滅菌処置に有用な方法および材料を提示する。文中では一般的な実施形態としてグルコースセンサについて論じているが、本件に記載されている発明の実施形態は、様々な医療機器に適合および使用可能である。以下で詳細に論じるように、本発明の方法および材料が有益である代表的なセンサとしては、例えば、グルコースなどの分析物の濃度と相関する光信号を発生する検出複合体を備えたものが挙げられる。例えば、その内容を本件に引用して援用する、米国特許出願公開第２００８０１８８７２３号、米国特許出願公開第２００９０２２１８９１号、米国特許出願公開第２００９０１８７０８４号、米国特許出願公開第２００９０１３１７７３号には、これらのセンサが数多く開示されている。本件に記載されている発明の実施形態は、例えば、その内容を本件に引用して援用する、米国特許出願公開第２００７０２２７９０７号、米国特許出願公開第２０１０００２５２３８号、米国特許出願公開第２０１１０３１９７３４号、米国特許出願公開第２０１１０１５２６５４号に開示の、電流測定センサ構造にも適合および使用可能である。
【００３３】
本発明の実施形態で使用する組成物は驚くべき融通性と多用途性を示し、この特性により広く様々なセンサ構造で使用するように適合させることができる。本発明の一部の実施形態において、１つ以上のセンサ要素は、水と、分析物（例えば、グルコース）などの他の化合物がその中を拡散するポリマー組成物でできた構造を含むことができる。ポリマー組成物の例は、米国特許出願公開第２００９０２２１８９１号に開示されており、例えば、疎水性および親水性単位を備えたポリマーを含む材料（例えば、生分解性のもの）が挙げられる。具体的なポリマーは、所望とする用途に応じて選ぶことができる。例えば、グルコースの移動性のためには、分子量カットオフ限界が２５０００Ｄａ以下または１００００Ｄａ以下の材料が選ばれる。このようなポリマー材料内に配置する成分（例えば、検出複合体）は、ポリマー材料からの拡散によってセンサから失われないよう、高分子量のもの、例えば、タンパク質またはポリマーとすることができる。実施形態の一例において、ポリマー材料の親水性単位は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と二酸のエステルを含んでおり、分子量カットオフ限界は、ＰＥＧ鎖長、ポリマーの分子量、親水性単位の重量分率に影響される。ＰＥＧ鎖が長いと、分子量カットオフ限界は高く、ポリマーの分子量が大きいと、分子量カットオフ限界は低く、親水性単位の重量分率が低いと、分子量カットオフ限界は低くなる。
【００３４】
センサの構成要素は、その貯蔵性および／または滅菌性が向上するように選ぶことができる。本発明の一部の実施形態において、センサの構成要素は全て、滅菌処理（例えば、ｅビーム滅菌）後のセンサ機能の保持能力に応じて選択する。本発明の一部の実施形態において、センサの構成要素は全て、乾燥処理（例えば、凍結乾燥）後のセンサ機能の保持能力に応じて選択する。
【００３５】
本発明の具体的な実施形態において、センサは円筒状／管状の構造をしており、その直径は１ｍｍ、０．９ｍｍ、０．８ｍｍ、０．７ｍｍ、０．６ｍｍ、０．５ｍｍ、０．４ｍｍ、０．３ｍｍ、または０．２ｍｍ未満である。この種のセンサの例を図１に示す。一部の実施形態において、センサの直径は約０．５ｍｍまたは約０．２５ｍｍである。一部の実施形態において、センサの本体はポリマー材料でできている。必要に応じて、センサは繊維の形をしている。本発明の一部の実施形態において、円筒状センサの内部マトリックスには、１つ以上の空洞または間隙、例えば、カプセルに包まれた長手方向の空洞が含まれる。
【００３６】
必要に応じて、検出複合体は、着目分析物、例えば、グルコースに相関する光信号を発する。光信号を発する検出複合体（例えば、結合性検定物（assay）を含むもの）は、変動する分析物濃度を連続的に監視できるよう、一般に可逆的でなければならない。必要に応じて、近接度型信号発生／変調部対の第１の部材が対の第２の部材に接近すると信号が発生または変調するよう、信号発生／変調部対を使用して、検出可能または測定可能な光信号を発生する。実施形態の一例では、分析物結合性試剤（例えば、国際公開第２００６／０６１２０７号に開示されている、マンノース結合性レクチンなどのレクチン）を、近接度型信号発生／変調部対の一方で標識し、分析物類似体を、近接度型信号発生／変調部対のもう一方で標識して、分析物類似体と分析物結合性試剤が錯体を形成した場合に、また、分析物類似体が分析物によって錯体から置換された場合に、信号に検出可能な相違が生じる。一般に、近接度型信号発生／変調部対は、エネルギー供与体部とエネルギー受容体部との対である。エネルギー供与体部およびエネルギー受容体部はそれぞれ、供与体発色団および受容体発色団（または、光吸収物質）とも呼ばれる。蛍光を発しないエネルギー受容体は消光部と呼ばれる。このような実施形態では、レクチンをエネルギー供与体およびエネルギー受容体部対の一方で標識し、分析物類似体をエネルギー供与体およびエネルギー受容体部対のもう一方で標識することができる。信号の検出可能な相違は、エネルギー供与体部からエネルギー受容体部へのエネルギー移動の検出可能な相違に対応する。必要に応じて、分析物類似体がエネルギー受容体部を受け持ち、分析物結合性試剤がエネルギー供与体部を受け持つ。本発明の一部の実施形態では、本発明のセンサに蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）技術を用いて光学読み出しを発生する検定物を組み込む。
【００３７】
先の段落で討議したセンサの実施形態の一例として、競合的結合性試験法の変形はそれぞれ、第１の光吸収物質で標識した分析物結合性試剤と、第２の光吸収物質で標識し、少なくとも１つの分析物類似体部を持つ巨大分子とを含んでいる。このとき、分析物結合性試剤は、巨大分子の少なくとも１つの分析物類似体部に結合して、前記巨大分子が前記分析物で置換可能な錯体を形成する。またこのとき、前記錯体は光エネルギーを吸収することができ、前記吸収光エネルギーは、光吸収物質の一方と光吸収物質のもう一方との間で無放射遷移を行うことができる。この結果、前記巨大分子が前記分析物によって前記錯体から置換される場合のそれらの前記蛍光特性に対する、前記錯体中に存在する場合の前記光吸収物質の蛍光特性の変化を測定することができる。またこのとき、試験法の別の変形は、巨大分子中に存在する分析物類似体部分の数によって区別される。このようなセンサは、例えば、それぞれの内容を本件に引用して援用する、米国特許出願公開第２００８０１８８７２３号、米国特許出願公開第２００９０２２１８９１号、米国特許出願公開第２００９０１８７０８４号、米国特許出願公開第２００９０１３１７７３号に開示されている。
【００３８】
本発明の別の実施形態において、センサは、平面状積層要素を含み、例えば、電極を含む導電層と、導電層上に設けられた分析物検出層（例えば、グルコースオキシダーゼを含む層）と、分析物検出層上に設けられた分析物調節層とを含んでいる。本発明の一部の実施形態において、センサ電極は、ハウジング（例えば、カテーテルの管腔）内に配置されている。図１Ｄに示すセンサの実施形態は、ベース層１０２と、ベース層１０２上に設けられた、および／またはベース層１０２に結合させた導電層１０４とを含む複数の層状要素を備えた電流測定センサ１００である。一般に、導電層１０４は、１つ以上の電極を含んでいる。分析物検出層１１０（一般に、グルコースオキシダーゼなどの酵素を含む）は、導電層１０４の１つ以上の露出した電極上に設けられている。タンパク質層１１６は、分析物検出層１１０上に配置されている。分析物調節層１１２は、分析物検出層１１０の上に配置されていて、分析物検出層１１０に近づく分析物（例えば、グルコース）を調節する。層の接触および／または付着を良くするため、接着促進剤層１１４を、図１Ｄに示すように、分析物調節層１１２と分析物検出層１１０との間など、層の間に配置する。この実施形態は、ポリマーコーティングなどのカバー層１０６も含んでおり、この層は、センサ１００上に部分的に配置することができる。このようなセンサの１つ以上の層に、開口部１０８を形成することができる。このような構造を持つ電流測定グルコースセンサは、例えば、それぞれの内容を本件に引用して援用する、米国特許出願公開第２００７０２２７９０７号、米国特許出願公開第２０１０００２５２３８号、米国特許出願公開第２０１１０３１９７３４号、米国特許出願公開第２０１１０１５２６５４号に開示されている。
【００３９】
本発明の実施形態は、様々な配置および／または検出複合体を備えたセンサに使用可能である。本発明の一部の方法論的な実施形態において、センサは、１ｍｍ未満、０．５ｍｍ未満、または０．２５ｍｍ未満の直径を持つ円筒状ポリマー材料と、カプセルに入った長手方向の空洞を含む内部マトリックスと、発蛍光団対に結合した炭水化物結合性レクチン（例えば、グルコースと結合するマンノース結合性レクチン）を含む検出複合体とを含んでいる。本発明の別の方法論的な実施形態において、センサは、グルコースオキシダーゼで覆われた電極と、グルコースオキシダーゼ上に配置したグルコース制限膜とを含み、グルコース制限膜は、それを通るグルコースの拡散を調節する。
【００４０】
本明細書には、様々な公開された引用文献が参照されている。本明細書中の引用文献の内容は全て明確に本件に引用して援用する。本明細書および添付の請求項に挙げられている、数値として表すことのできる値を示す全ての数字は、用語“約”で修飾することができる。
【実施例】
【００４１】
［実施例１：本発明の実施形態で使用する方法および材料の例］
医療機器の滅菌は重要であり、滅菌法の選択は、どの方法が安全で、かつ、医療機器に対する破壊性が少ないかに基づいている。一般に３つの滅菌法が医療機器に使用される。それは、加熱滅菌、ガス滅菌、放射線滅菌である。加熱滅菌は、熱でタンパク質が変性する（タンパク質のアンフォールディングは、約６０℃で起こる）ことがあるため、タンパク質を含む機器では問題となる。ガス滅菌法は、例え少量の液体中であってもガスを送り込む（また排出する）のが困難なため、最終的にウェットデバイスとなる医療機器での使用は難しい。これらの理由により、放射線滅菌は、ここで論じるグルコースセンサなどの多くの機器での使用が選択される方法である。更に、ｅビームは一般にガンマ線よりも制御が容易であるため、文中に開示されている具体的な実施例ではｅビーム照射を用いる。以下に述べるように、タンパク質を含む溶液にｅビームを照射するとこれらのセンサ中のタンパク質活性が失われるおそれがある。更に、染料にｅビームを照射すると染料が脱色されることがある。このような影響はいずれもセンサ活性の損失の一因となる。
【００４２】
水溶液中では、水の放射線分解により、水中に溶解した化合物の酸化反応が起こることがある。電子線照射で水溶液を処理すると、吸収されたエネルギー（線量）が十分ならば、ある特定の化合物の濃度を下げることができる。
【００４３】
放射線分解（例えば、電子線；ｅｂ）の際、Ｈ2Ｏは、次のような種に変化する。
ＯＨ・，ｅ-(aq)，Ｈ・，Ｈ3Ｏ+，Ｈ2，Ｈ2Ｏ2
Ｈ2Ｏ ＋ ｅｂ → [0.28]ＯＨ・ ＋ [0.27]ｅ-(aq) ＋ [0.6]Ｈ・ ＋ [0.07]Ｈ2Ｏ2
＋ [0.27]Ｈ3Ｏ+ ＋ [0.05]Ｈ2
（カギ括弧は、種の生成量をμｍｏｌｅ／Ｊで示す）
水の放射線分解で生じたこれらの物質は、存在する化合物と多くの反応を引き起こす。文献では、放射線分解の影響を調べるため、モデル化合物としてしばしばフェノール分解が用いられる。
【００４４】
検定物の濃度はμＭの範囲で、水の濃度がおよそ５５Ｍであるため、溶液中の検定成分自体のイオン化は水溶媒の放射線分解に比べて小さい。即ち、検定物に対する電子線照射の損傷効果は、水の放射線分解生成物からの攻撃によるものである。光学センサ分析において、タンパク質の出現はμＭの濃度であり、即ち、水の存在量はタンパク質濃度の１０7倍である。
【００４５】
以下で詳細に論じるように、放射線損傷に対するセンサ保護性能を測るため、多くの化合物を確認および試験した。
【００４６】
ポリマーの保護
本発明の実施形態は、PolyActive（商標）などのポリマーを含むセンサを保護するよう設計されている。PolyActive（商標）は、生分解性ポリマーの薬物送達システムである。PolyActiveは、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、ポリ（テレフタル酸ブチレン）（ＰＢＴ）を原料とする、一連のポリ（エーテルエステル）マルチブロック共重合体を表している。
【００４７】
PolyActive（商標）などのポリマーは、α−トコフェロールの存在によって放射線損傷から保護することができる。α−トコフェロールは製造者によってポリマーに加えられ、放射線損傷から製品を保護するためによく用いられる酸化防止剤（ビタミンＥ）である。光学センサに用いられる PolyActiveポリマーでは、α−トコフェロールは主にポリマーの親油性領域にあると予想されている。
【００４８】
染料の脱色
本発明の実施形態は、Alexa Fluor（登録商標）蛍光性染料などの染料を含むセンサを保護するよう設計されている。染料分子の拡張された電子共役系が大きく壊されると、含水染料の脱色が起こる。溶液中にラジカルが存在すると、この過程が起こることがある。
【００４９】
タンパク質の分解
本発明の実施形態は、ＭＢＬなどのタンパク質を含むセンサを保護するよう設計されている。タンパク質への放射線損傷は、殆どの場合、システイン残基の形成したジスルフィド結合 ＲＳＳＲ の損傷によって起こる。システインアミノ酸は、放射線で最も影響を受けるアミノ酸である。ジスルフィド橋が切れ、酸性残基のカルボニル基がその定義を失って、タンパク質の活性が失われると、放射線損傷が起こる。
【００５０】
ＭＢＬタンパク質は、システインに富むＮ末端ドメインを持つ（例えば、ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿０００２３３．１参照）。ＭＢＬの三次構造はＮ末端のＲＳＳＲ橋によって保たれており、これが壊れると、タンパク質の構造、そしてタンパク質の機能が失われる。 Wallisほか, J Biol Chem 274: 3580 (1999)は、ＭＢＬのポリペプチド単位の図を示している。タンパク質を放射線損傷から守るため、Ｎ末端とＣＲＤのシステイン残基の保護を試みる。
【００５１】
放射線損傷に対する保護
溶液中のタンパク質や他の分子に損害を与える主要種はＯＨ・（ヒドロキシルラジカル）であり、これが保護の際に探すべき種であることが技術的に示されている。タンパク質をイオン化放射線による損傷から守るため、アスコルビン酸塩などの酸化防止剤が使用できる。先行技術は、恐らく酸化防止剤による持続的な保護が必要であるため、タンパク質の保護に用いられるアスコルビン酸塩の濃度は０．２Ｍ以上であるとしている。
【００５２】
文献に、酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸塩）を染料の放射線防護に使用することが述べられている。Vahdatほか, Radiation Physics and Chemistry 79 (2010) 33-35 は、電子線照射が、染料 Ｃ．Ｉ．ダイレクトブラック２２の脱色と分解の原因となる酸化を誘発したと報じている。Holton, J. Synchotron Rad. (2009), 16, 133-142 は、アスコルビン酸塩、ニコチン酸、ＤＮＴＢ、硝酸イオン、１，４−ベンゾキノン、ＴＥＭＰ、およびＤＴＴが、タンパク質結晶への放射線損傷に対して防護効果を持つと報じている。Wongほか, Food Chemistry 74 (2001) 75-84 は、電子線照射によって起こる脂質（リノール酸エマルション）の酸化的損傷に対する、Ｌ−アスコルビン酸（ＬＡＡ）の効果を報じている。
【００５３】
アスコルビン酸塩の作用
防護剤の作用機構は、例えば、放射線分解によって生じたラジカルを捕捉することである。アスコルビン酸塩は、ヒドロキシルラジカルを還元することができる。アスコルビン酸塩ラジカルは、いくつかの過程を経て、例えば、不均化してアスコルビン酸塩とデヒドロアスコルビン酸塩（ＤＨＡ）となると考えられる。この可能な作用機序（アスコルビン酸ラジカルは、酸化剤としても還元剤としても作用する）のため、アスコルビン酸塩濃度が高すぎると、ある種のセンサの実施形態の化学物質を損なうおそれがある。
【００５４】
アセトアミノフェンの作用
アセトアミノフェンは水溶液中で容易に酸化されるため、溶液中のラジカルを還元することができる。この化合物は、ＡＦ５９４供与体発蛍光団とＡＦ７００参照発蛍光団とを用いるグルコース分析システムにおいてこれらの成分の蛍光消光剤としても働くことから、アセトアミノフェンは、タンパク質と染料の両者の親油性領域付近に存在するため、染料の脱色を防止すると考えられる。
【００５５】
アセトアミノフェンは、アスコルビン酸塩よりも親油性が高いため、保護の必要な化合物中の親油性領域に近い脆弱な領域（染料のＲＳＳＲ橋と芳香族系）を主に保護する親油性ラジカル捕捉剤として作用するとも考えられる。親水性の高い領域を保護する、アスコルビン酸塩の水溶液中での高い溶解性と組み合わせたアセトアミノフェンによるこの卓越した親油性保護効果は、保護効果を求める上で強力な組み合わせとなり得る。
【００５６】
スクロースおよびマンノース
マンニトールなどのポリオール類は良好なラジカル捕捉剤であるため、このような炭水化物も放射線損傷（親水性領域）に対して多少の保護効果を生じる可能性がある。更に、スクロースはＭＢＬに対して安定効果を持つことが知られていることから、検定物の貯蔵安定性の向上に役立つ可能性があり、マンノースがＣＲＤに結合するとそこに多少の安定化効果をもたらすと考えられる。実際に、炭水化物は検定物に保護効果を及ぼす。
【００５７】
緩衝系：
ＴｒｉｓやＨＥＰＥＳのようなアミンを含む緩衝系は、タンパク質に対して多少の保護効果を持つことが知られている。特に、タンパク質からのトリプトファン損失に対して保護効果を持つ。Ｔｒｉｓ緩衝液にも保護効果が見られた。緩衝系の一部としてクエン酸塩を用いると、貯蔵の間、ｐＨが６付近に保たれる。クエン酸塩は第３級アルコールであり、ｔ−ブタノール（第３級アルコール）や、イソプロピルアルコール（第２級アルコール）のようなアルコール類は、放射線分解ラジカルの捕捉剤として知られている。
【００５８】
最初のｅビーム実験では、ＭＢＬと発蛍光団組成物の両方を含む光グルコースセンサに対して１５ｋＧｙ線量での滅菌を用いた。結論として、まず、添加剤の個々の保護能力について確認および試験を行い、その後、各種類から最良のものを選び出して、それらを組み合わせて使うこととした。
【００５９】
以下の実験は全て、１５ｋＧｙの放射線量で行い、同時にセンサを冷却し、無酸素状態（添加剤が酸化性化合物である場合を除く）とした。照射後、センサの性能を評価した。保持すべきものとして評価される一次パラメータは、１５ｋＧｙの線量を照射した後の用量応答（０ｋＧｙでのＤＲに対するＤＲ）と絶対ＤＲ（４０ｍｇ／ｄＬ  グルコースから４００ｍｇ／ｄＬ グルコースまでの位相シフト度で測定）であった。更に、照射後のセンサ信号のドリフトを観察したが定量は行わなかった。無配合センサ（放射線防護剤組成物を何も組み合わせていない対照センサ）を滅菌した、最初の初期実験では、図２に示す結果が得られた。図２は、ｅビーム線量の関数として、無配合センサの保持した用量応答を観察した実験データのグラフを示している。３回照射は３×５ｋＧｙである。供試センサは、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ緩衝生理的食塩水を含む溶液で濡らして照射した。
【００６０】
無配合の蛍光性センサを照射後、ＤＲがまだ５０％保持されるため、放射線量の目標値として１５ｋＧｙの線量は妥当な選択である。更に、文中で論じている電気化学センサの製造後の生物汚染度が低ければ（＜１．５ｃｆｕ）、１６ｋＧｙを照射する。光学センサの製造を簡単にするため、この低い生物汚染度を規定とする（例外なく）。従って、１５ｋＧｙのｅビーム線量で無菌となると予想する。
【００６１】
［放射線損傷から蛍光センサを保護するために有用な添加剤の試験］
ＭＢＬと発蛍光団化合物とを含む、図１Ａ〜図１Ｃに示す蛍光グルコースセンサ（例えば、米国特許出願公開第２００８／０１８８７２３号参照）で実験を行った。ｅビーム滅菌処理の間、センサを保護するために使用した添加剤は、必然的に、ＭＢＬとこれらの発蛍光団とを保護するよう選択した。デキストランは、ＭＢＬに用いると保護効果が得られることが認められた。保護用添加剤は、以下のカテゴリーから選択した。
【００６２】
既知のＭＢＬ結合糖：
結合糖は、ペプチド構造を正しい配置（conformation）に保つことで、タンパク質の炭水化物認識ドメイン（ＣＲＤ）を保護することができる。しかし、非結合糖に比べて、これは熱力学的に有利ではない。ΔＧ＝ΔＨ−ＴΔＳ。ＣＲＤ内の結合糖は、ＣＲＤ内のランダム（不規則）な水構造の代わりに、規則的に配置しているため、結合糖ではＴΔＳの寄与が大きい。このため、エントロピー効果により、結合糖は、ΔＧの損失が低結合糖よりも小さいと考えられる。
【００６３】
低結合糖：
低結合糖は、照射の間、タンパク質の構造を支える（水に比べて）より強固な水素結合骨格（scaffold）を築くよう機能することができる。
【００６４】
酸化防止剤：
酸化防止剤は、フリーラジカルの関与する放射線損傷に対する保護剤として一般的に用いられる。酸化防止剤は、ラジカルを還元することでこれを消滅させる。
【００６５】
酸化剤：
酸化剤を、蛍光性染料の還元に対する保護剤として試験した。照射の際に発生するラジカルは染料を還元し、これを脱色することがある。酸化剤は生成する染料−ラジカルを酸化して、染料を保護すると考えられる。更に、この場合に、酸化防止剤を使用する利益を示すため、これらの化合物が試みられた。
【００６６】
アミノ酸：
アミノ酸は、医薬製剤を安定化するためにしばしば用いられる。親水性および疎水性の両方のアミノ酸を試験した。
【００６７】
界面活性剤：
相転移または界面でしばしば変性が起こるため、界面活性剤を用いて医薬製剤を安定化することが多い。
【００６８】
フェニル化合物：
フェニル含有化合物は、π−π積み重ね機構により蛍光性染料（また、これによって検定物）を安定化すると考えられる。
【００６９】
静菌剤：
供試した静菌剤化合物は、フェニル含有化合物であった。
【００７０】
以下の実験では、各カテゴリーから２つ以上の添加剤を選び、個別に、またアスコルビン酸塩と組み合わせて試験した。４つのカテゴリーの中で最良の添加剤について、より大きな実験マトリックスを試した。
【００７１】
［スクリーニング段階での結果］
供試添加剤とそれぞれの濃度の一覧を下の表１に示す。
【００７２】
【表１】
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１）最も多く使われたのは、アスコルビン酸塩との組み合わせであった。
【００７３】
添加剤の様々な組み合わせの試験にどの化合物を使用すべきかを決めるため、表１に掲げた添加剤を評価した。試験は、望ましい目標物（例えば、ＣＲＤ、染料、一般的ペプチド結合、またはタンパク質、および貯蔵安定化効果）に対する期待された保護特性を個別に備えている化合物を確認するよう努めた。
【００７４】
表２は、スクリーニング段階の結果の概要を示したものである。表２に、ｅビーム（１５ｋＧｙの線量）での放射線損傷に対する保護剤として試験した添加剤の概略を示す。化合物の種類に従って添加剤を一覧した。一部の添加剤は２つ以上のカテゴリーに掲げられている。
【００７５】
【表２】
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【００７６】
表２から、後に示すように組み合わせて使用するため、次の４つの添加剤（全て、各種類の添加剤の中で最良のもの）を選定した。
アスコルビン酸塩：タンパク質内のペプチド結合の一般的な保護のために使用。文献では、最良の酸化防止剤とされ、フリーラジカル攻撃に対してタンパク質の最も良い保護効果が得られる。しかし、文献では、最大の保護効果が非常に高濃度のアスコルビン酸塩、殆どの場合、＞２００ｍＭで得られており、これは本件で確認した最良濃度の少なくとも４倍である。驚くべきことに、本件に開示されているセンサの実施形態の試験において、高濃度のアスコルビン酸塩（例えば、２５０ｍＭ）を用いると保護効果が乏しくなるが、低濃度のアスコルビン酸塩（例えば、１００ｍＭ以下、５０ｍＭ以下など）では良好な保護効果が得られることが分かった。
アセトアミノフェン：この化合物は、検定物中のタンパク質を妨害することは知られていないが、ＡＦ５９４からの蛍光の強力かつ可逆的な消光剤として作用する。これは、アセトアミノフェンがＡＦ５９４に対して影響を持ち、放射線損傷から染料を防護する助けとなり、例えば、脱色を防止する可能性があることを意味する。
マンノース：マンノースは、ペプチド構造を正しい配置に保つことでタンパク質の炭水化物認識ドメイン（ＣＲＤ）を保護する可能性がある。
スクロース：スクロースは、照射の間、タンパク質の構造を支える（水と比べて）より強固な水素結合骨格を築くためにしばしば用いられる。スクロースは検定物の貯蔵安定性を多少向上させる可能性もある。
【００７７】
添加剤の組合せと各添加剤の濃度、及び結果の一覧を表３に示す。表３は、試験を行って選択した４つの添加剤に関する４８のバリエーションを示している。バリエーションの順序は確率論的である。
【００７８】
【表３】
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１）保持ＤＲ＞１００％はあり得ないが、０ｋＧｙのＤＲが予想以上に低いと、保持ＤＲが＞１００％となることがある。
*  照射後の絶対ＤＲが高い
【００７９】
図３に示す、ＳＩＴＳシステムからのデータのグラフは、照射の間の保護が良好であった一連のセンサの試験運用を示している。図３は、１５ｋＧｙの放射線に曝露後のセンサから得られた位相および強度データのグラフを示している。用量応答は、照射前の２．１に比べ、照射後は１．７であり、即ち、保持率は８１％である。起動後のセンサの平衡時間が長いことに注意する。これはおそらく、配合物に使用したスクロース濃度が高いためである。当該技術で知られているように、水溶液中の試剤の濃度は、透析などの処理で容易に変えられる。
【００８０】
［添加剤の個別の効果］
個別の添加剤の効果を概観するため、図４のように、結果を可視化した。図４は、配合物に使用したアスコルビン酸塩濃度の関数としての、照射センサの保持したＤＲデータのグラフを示している。使用したアスコルビン酸塩濃度が低すぎても高すぎても保持ＤＲは低くなるが、２０ｍＭ〜１００ｍＭの濃度範囲では良好な保護効果が得られる。
【００８１】
図５は、配合物に使用したアセトアミノフェン（＝パラセタモール、以後、ＰＡＭと略記する）濃度の関数としての、照射センサの保持したＤＲデータのグラフを示している。低濃度のアセトアミノフェンを用いると保持ＤＲは低くなるが、１０ｍＭを上回る濃度を用いると良好な保護効果が得られるようである。更に、アスコルビン酸塩を添加剤に加えると、殆どの場合、保護効果が更に良くなることが分かった。
【００８２】
図６は、配合物に使用したアセトアミノフェン濃度の関数としての、照射センサの保持したＤＲデータを示している。
【００８３】
図７は、配合物に使用したアセトアミノフェン濃度の関数としての、照射センサの保持したＤＲデータを示している。センサは全て１００ｍＭのスクロースを含んでおり、アスコルビン酸塩およびマンノースの添加量の変化も示す。
【００８４】
図８は、配合物に使用したアスコルビン酸塩濃度の関数としての、照射センサの保持したＤＲデータを示している。センサは全て５００ｍＭのスクロースを含んでおり、アセトアミノフェン（ＰＡＭ）およびマンノースの添加量の変化も示す。
【００８５】
図９は、アセトアミノフェンおよびアスコルビン酸を配合したセンサの関数としての、照射および非照射センサ両者の絶対ＤＲを示すデータの棒グラフを示している。
【００８６】
図１０は、アセトアミノフェン、アスコルビン酸、マンノース、および５００ｍＭのスクロースを配合したセンサの関数としての、照射および非照射センサ両者の絶対ＤＲを示すデータの棒グラフを示している。全体の結果を図１１に示す。
【００８７】
図１１は、Ｔｒｉｓ／クエン酸塩生理食塩緩衝液＋添加剤を用いた後の、センサ応答を示すデータのグラフを示している。センサは、良好なＤＲ保持を示す。
【００８８】
図１２は、ｅビームを照射したセンサと照射しないセンサとの直接比較を示すデータのグラフを示している。
【００８９】
［ｅビーム照射後のセンサ用量応答保持に対する緩衝液の影響］
センサ上に使用するポリマーは分解しないことが求められるため、湿式貯蔵の間のｐＨを６付近にする必要がある。
【００９０】
［ＰＢＳ緩衝液の結果］
図１３は、ＰＢＳ（ｐＨ＝５．５）中に貯蔵後に試験した、本来のセンサから得られたデータのグラフを示している。センサ自体はＰＢＳ緩衝液で問題なかった。
【００９１】
図１４は、ｅビーム照射の間、ＰＢＳ緩衝液に添加剤（５００ｍＭ スクロース、２０ｍＭ アセトアミノフェン、５０ｍＭ アスコルビン酸塩）を加えたセンサから得られたデータのグラフを示している。
【００９２】
図１５は、ＰＢＳ緩衝液に添加剤（５００ｍＭ スクロース、２０ｍＭ アセトアミノフェン、５０ｍＭ アスコルビン酸塩）を加えたセンサから得られたデータのグラフを示している。センサにｅビームを照射していないにもかかわらず、用量応答がなく、大きなドリフトが見られる。
【００９３】
［その他の緩衝剤］
その他の臨床的に許容可能な緩衝剤を表４に示す。
【００９４】
【表４】
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【００９５】
クエン酸塩が優れていることが分かり、５０ｍＭ濃度まで試験した。クエン酸塩は単独でも良好であるが、Ｔｒｉｓを加えると更に良い。
図１６は、異なる緩衝剤濃度を使用して保持したＤＲデータの棒グラフを示している。
図１７は、ｅビーム照射の間、クエン酸塩のみを使用したセンサから得られたデータのグラフを示している。
図１８は、ｅビーム照射の間、クエン酸塩と添加剤を使用したセンサから得られたデータのグラフを示している。
【００９６】
［ｅビーム損傷から化学物質を保護するためのアミン］
一部の実施形態において、配合物にアミンを加えることができる（例えば、ラジカルの良好な失活剤として）。実験結果より、Ｔｒｉｓ（第１級アミン）は単独で保護効果を生じるが、添加剤を加えるとこの保護効果が向上することが分かった。アミンの例としては、尿素、クレアチン（creatine, creatin）、更に、２０種の天然に存在するアミノ酸が挙げられる。
【００９７】
この実施例のデータは、放射線滅菌後のグルコースセンサのＤＲ保持率に対する、単独の添加剤の効果と、組み合わせた添加剤の効果が予測不可能であることを裏付けている。これらの実験では、試験した試剤の種類として、界面活性剤、アミノ酸類（親水性／疎水性）、糖類（結合性／非結合性）、酸化剤、酸化防止剤、薬物、静菌剤、これらの試剤の組み合わせが挙げられる。“その種類で最良の”添加剤として、アスコルビン酸塩、マンノース、スクロース（高濃度）、アセトアミノフェン（低濃度）が挙げられるようである。この実験データは、添加剤を組み合わせると、放射線損傷に対して、センサの異なる特定の部位または機能を保護できるという証拠を示している。アスコルビン酸塩、マンノース、スクロース、アセトアミノフェンを組み合わせると、センサの信号保持率が特に良くなる。本発明の代表的な実施形態には、それぞれの群からの２〜４種の添加剤の組み合わせと、５ｍＭのＴｒｉｓ、および／または、１０ｍＭのクエン酸塩生理食塩緩衝液から成る混合緩衝液の使用が含まれる。一部の実施形態には、低結合糖（スクロース、トレハロース、その他のポリオール類）などのセンサ貯蔵安定性増強剤が含まれる。
【図１Ａ−１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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