(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻であってヤマウチアシボソトゲダニ（Ｈｙｐｏａｓｐｉｓ（Ｅｕａｎｄｒｏｌａｅｌａｐｓ）ｙａｍａｕｃｈｉｉ Ｉｓｈｉｋａｗａ）が定着可能な穀物殻と、ケナガコナダニ（Ｔｙｒｏｐｈａｇｕｓ ｐｕｔｒｅｓｃｅｎｔｉａｅ）を給餌することにより増殖させたヤマウチアシボソトゲダニとを有効成分とするホウレンソウケナガコナダニ（Ｔｙｒｏｐｈａｇｕｓ ｓｉｍｉｌｉｓ Ｖｏｌｇｉｎ）防除用生物農薬。
【請求項２】
付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻が、発酵または炭化させた穀物殻である、請求項１に記載のホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬。
【請求項３】
穀物殻が籾殻である、請求項１または請求項２に記載のホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬。
【請求項４】
下記（ａ）および（ｂ）の工程を有する、ホウレンソウケナガコナダニ（Ｔｙｒｏｐｈａｇｕｓ ｓｉｍｉｌｉｓ Ｖｏｌｇｉｎ）防除用生物農薬を製造する方法；
（ａ）ケナガコナダニ（Ｔｙｒｏｐｈａｇｕｓ ｐｕｔｒｅｓｃｅｎｔｉａｅ）を給餌することによりヤマウチアシボソトゲダニ（Ｈｙｐｏａｓｐｉｓ（Ｅｕａｎｄｒｏｌａｅｌａｐｓ）ｙａｍａｕｃｈｉｉ Ｉｓｈｉｋａｗａ）を増殖させる工程、
（ｂ）増殖させたヤマウチアシボソトゲダニと、付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻であってヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻とを合わせる工程。
【請求項５】
付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻が、発酵または炭化させた籾殻である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ホウレンソウケナガコナダニ（Ｔｙｒｏｐｈａｇｕｓ ｓｉｍｉｌｉｓ Ｖｏｌｇｉｎ）を防除する方法であって、
少なくとも付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻であってヤマウチアシボソトゲダニ（Ｈｙｐｏａｓｐｉｓ（Ｅｕａｎｄｒｏｌａｅｌａｐｓ）ｙａｍａｕｃｈｉｉ Ｉｓｈｉｋａｗａ）が定着可能な穀物殻と、ケナガコナダニ（Ｔｙｒｏｐｈａｇｕｓ ｐｕｔｒｅｓｃｅｎｔｉａｅ）を給餌することにより増殖させたヤマウチアシボソトゲダニとを散布する工程
を有する前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬およびホウレンソウケナガコナダニを防除する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ホウレンソウケナガコナダニＴｙｒｏｐｈａｇｕｓ ｓｉｍｉｌｉｓ Ｖｏｌｇｉｎ（以下、単に「ホウレンソウケナガコナダニ」という。）は、ホウレンソウの新芽部に侵入して食害することで縮葉や芯止まりなどの奇形症状を引き起こす害虫である。ホウレンソウケナガコナダニの被害は、全国のホウレンソウ栽培圃場、特に施設栽培の圃場において秋〜春期に発生しており（非特許文献１）、安定生産の重大な障害となっている。
【０００３】
従来、ホウレンソウケナガコナダニを防除する方法として、化学農薬の茎葉散布（非特許文献２または３）や、蒸気などの熱を利用した土壌消毒、燻蒸剤による土壌消毒（非特許文献４）が行われている。しかしながら、これらの防除方法では、その効果がホウレンソウあるいは土壌の表面にとどまり、土壌深部に農薬や消毒の効果が到達しないため、あるいは他の圃場からホウレンソウケナガコナダニが移動してくるため、１〜数回の作付けで効果が消失してしまうことから、多数回の農薬散布や消毒作業が必要となり、環境に負荷が掛かってしまう他、金銭的な負荷や労力が掛かってしまうことが問題となっている。
【０００４】
そこで、昨今、持続的な防除効果や環境負荷および労力の軽減が期待される生物農薬の研究開発が行われている。生物農薬は、一般に、害虫を補食する天敵（捕食性天敵）を有効成分とする農薬であり、ホウレンソウケナガコナダニに対しては、ククメリスカブリダニを有効成分とする生物農薬が開示されている（非特許文献５）。また、トゲダニ科Ｈｙｐｏａｓｐｉｓ（Ｇｅｏｌａｅｌａｐｓ）ａｃｕｌｅｉｆｅｒがホウレンソウケナガコナダニを捕食することが報告されている（非特許文献６）他、本発明者らにより、ヤマウチアシボソトゲダニＨｙｐｏａｓｐｉｓ（Ｅｕａｎｄｒｏｌａｅｌａｐｓ）ｙａｍａｕｃｈｉｉ Ｉｓｈｉｋａｗａ（以下、単に「ヤマウチアシボソトゲダニ」という。）がホウレンソウケナガコナダニを捕食することが報告されている（非特許文献７）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】春日ら、日本ダニ学会誌、第９巻、第３１−４２頁、２０００年
【非特許文献２】春日ら、日本応用動物昆虫学会誌、第４６巻、第９９−１０１頁、２００２年
【非特許文献３】中尾、北日本病虫研報、第５１巻、第２１９−２２２頁、２０００年
【非特許文献４】松村ら、関西病虫研報、第４７巻、第１−８頁、２００５年
【非特許文献５】松村ら、農耕と園芸７月号、第２８−３４頁、２００７年
【非特許文献６】春日ら、日本ダニ学会誌、第１５巻（第２号）、第１３９−１４３頁、２００６年
【非特許文献７】齊藤ら、北日本病虫研報、第６１巻、第１９２−１９６頁、２０１０年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、非特許文献５に記載のククメリスカブリダニは土壌への定着性が低く防除効果が不安定である。また、非特許文献６に記載のトゲダニ科Ｈｙｐｏａｓｐｉｓ（Ｇｅｏｌａｅｌａｐｓ）ａｃｕｌｅｉｆｅｒは捕食適温が３０℃であり、ホウレンソウケナガコナダニの増殖適温である２０〜２５℃での捕食能力が低いことから、防除効果は不十分となってしまう。さらに、ククメリスカブリダニおよびトゲダニ科Ｈｙｐｏａｓｐｉｓ（Ｇｅｏｌａｅｌａｐｓ）ａｃｕｌｅｉｆｅｒはいずれも外来種であるため、国内の生態系に対して悪影響を与える虞がある。
【０００７】
一方、非特許文献７に記載のヤマウチアシボソトゲダニは、実験室内でホウレンソウケナガコナダニを餌として与えて飼育した場合に捕食性を有することが確認されているのみであって、土壌への定着性や捕食適温、飼育や増殖が容易であるか否か、捕食能力が防除に有効な程度に高いか否かなど、生物農薬としての実用性についてはこれまで全く不明であった。
【０００８】
特に、捕食性天敵は被食者密度が比較的低い圃場や、温湿度が居住空間として適していない圃場、物理的に居住空間として適していない圃場などには定着することができない場合が多く、生物農薬では、一般に、圃場での定着性を確保することが極めて重大な課題となる。実際、上述したククメリスカブリダニは、定着物である稲藁を圃場の周囲や通路に敷いて定着性を確保して防除効果を改善する試みがなされたが、稲藁には定着するものの、稲藁からホウレンソウまたは土壌へと移動してホウレンソウケナガコナダニを捕食する行動がほとんど見られず、防除効果はほとんど得られていない。その他、圃場での定着性が低い生物農薬では、圃場の害虫密度を定期的にモニタリングして散布するタイミングを見極める必要がある他、害虫以外の被食者や定着物を別途圃場に供給する必要があり、経験や手間、費用が掛かるという問題がある。
【０００９】
本発明は、上述した課題を解決するためになされたものであって、土壌への定着性が非常に高く、使用にあたって特別な経験や手間を必要とせず、国内の生態系に対して悪影響を与える可能性が小さく、ホウレンソウケナガコナダニに対して、簡便、安定的かつ持続的に高い防除効果を得ることができるホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬およびホウレンソウケナガコナダニを防除する方法を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者は、鋭意検討の結果、国内在来種であるヤマウチアシボソトゲダニが、ホウレンソウを食害しないコナダニ科ケナガコナダニＴｙｒｏｐｈａｇｕｓ ｐｕｔｒｅｓｃｅｎｔｉａｅ（以下「ケナガコナダニ」という。）を餌として与えることにより簡便に飼育し、増殖させることができること、ホウレンソウケナガコナダニの増殖適温下でホウレンソウケナガコナダニの幼虫を大量に捕食し、ホウレンソウケナガコナダニの増殖を効率的に抑制すること、絶食耐久性が高く取り扱いが容易であること、籾殻などの穀物殻に定着することができること、特に、付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻と併せて散布することにより、土壌表面に長期間存在させて土壌への定着性を確保することができ、持続的にホウレンソウケナガコナダニを防除することができることを見出し、下記の各発明を完成した。
【００１１】
（１）付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻であってヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻とヤマウチアシボソトゲダニとを有効成分とするホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬。
【００１２】
（２）付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻が発酵または炭化させた穀物殻である、（１）に記載のホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬。
【００１３】
（３）穀物殻が籾殻である、（１）または（２）に記載のホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬。
【００１４】
（４）ホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法であって、ケナガコナダニを増殖させる工程と、少なくとも前記増殖させたケナガコナダニとヤマウチアシボソトゲダニと付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻であってヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻とを合わせる工程と、前記ヤマウチアシボソトゲダニを増殖させる工程とを有する前記方法。
【００１５】
（５）ホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法であって、ケナガコナダニを増殖させる工程と、少なくとも前記増殖させたケナガコナダニとヤマウチアシボソトゲダニとヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻とを合わせる工程と、前記ヤマウチアシボソトゲダニを増殖させる工程と、前記増殖させたヤマウチアシボソトゲダニを採集する工程と、少なくとも前記採集したヤマウチアシボソトゲダニと付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻であってヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻とを合わせる工程とを有する前記方法。
【００１６】
（６）ケナガコナダニを増殖させる工程が小麦ふすまおよび／または乾燥ビール酵母の存在下でケナガコナダニを増殖させる工程である、（４）または（５）に記載の方法。
【００１７】
（７）ホウレンソウケナガコナダニを防除する方法であって、少なくとも付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻であってヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻とヤマウチアシボソトゲダニとを散布する工程を有する前記方法。
【００１８】
（８）付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻が発酵または炭化させた穀物殻である、（４）から（７）のいずれかに記載の方法。
【００１９】
（９）穀物殻が籾殻である、（４）から（８）のいずれかに記載の方法。
【発明の効果】
【００２０】
本発明に係るホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬やホウレンソウケナガコナダニを防除する方法によれば、国内の生態系に対する悪影響を懸念することなく、簡便、安定的かつ持続的にホウレンソウケナガコナダニを防除することができ、特に、ホウレンソウケナガコナダニの被害が深刻となる春期や秋期において効率的に防除することができる。また、ホウレンソウケナガコナダニを防除する効果が持続的に得られることから、農薬を散布する回数を減らすことができ、環境負荷の低減や労力の軽減を図ることができる。さらに、化学合成成分を用いる必要がないことから、有機農業においてもホウレンソウケナガコナダニを防除することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】ヤマウチアシボソトゲダニの雌成虫にホウレンソウケナガコナダニの卵、幼虫、第１若虫、第３若虫および成虫を与えた場合（２０℃条件下；第３若虫のみ１５℃、２０℃、２５℃および３０℃条件下）の、それぞれについての捕食頭数の最小、最大、平均および標準偏差を示す図である。
【図２】ヤマウチアシボソトゲダニの雌成虫にホウレンソウケナガコナダニの成虫および幼虫を併せ与えた場合の、与えた頭数、残存した頭数および生存率を示す図である。
【図３】２１日間絶食させた後のヤマウチアシボソトゲダニについて、１５℃、２０℃、２５℃および３０℃における生存頭数、捕食を行った頭数、産卵を行った頭数および１頭当たりの産卵数を示す図である。
【図４】籾殻、籾殻くん炭または発酵籾殻を含む培地においてヤマウチアシボソトゲダニを放飼した場合の、３５日経過後の平均頭数、標準偏差ならびにカビまたは微少節足動物の発生を示す図である。
【図５】ホウレンソウケナガコナダニを混和した土壌に処理ａ〜ｄを施した場合の、ホウレンソウケナガコナダニおよびヤマウチアシボソトゲダニの平均頭数および標準偏差を示す図である。
【図６】発酵籾殻およびヤマウチアシボソトゲダニを併せてホウレンソウ圃場に散布した場合、ならびに散布しなかった場合の、７日後、１５日後および２２日後に当該ホウレンソウ圃場に生息するホウレンソウケナガコナダニの平均密度および補正密度指数を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
以下、ホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬、その製造方法およびホウレンソウケナガコナダニを防除する方法について詳細に説明する。本発明に係るホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬は、付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻とヤマウチアシボソトゲダニとを有効成分とする。
【００２３】
ヤマウチアシボソトゲダニは、トゲダニ科に属する既知の種であり、これまでに坑道や洞窟など比較的冷涼な場所で発見されている（石川、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｐｅｌｅｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｊａｐａｎ、第７巻、第８８−１００頁、１９８２年）他、北海道上川郡比布町の農場における堆肥の中からも発見されている。本発明におけるヤマウチアシボソトゲダニは、いずれの場所で採集したものでもよく、野外から採集した後、累代飼育したものでもよい。また、ヤマウチアシボソトゲダニの生育ステージや性別も特に限定されず、例えば、卵、幼虫、若虫、成虫などのそれぞれ雌雄いずれでもよいが、成虫の雌である場合は、ホウレンソウケナガコナダニに対する防除効果がさらに期待できる。
【００２４】
本発明におけるヤマウチアシボソトゲダニを飼育、増殖させる方法は特に限定されないが、例えば、ケナガコナダニを給餌することにより簡便に飼育、増殖させることができる。具体的には、まず、ケナガコナダニを小麦ふすまや乾燥ビール酵母に接種して増殖させる。続いて、籾殻などのヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻にヤマウチアシボソトゲダニを接種し、ここに、増殖させたケナガコナダニを小麦ふすまや乾燥ビール酵母ごと定期的に加えることにより給餌して、比較的低温（例えば２０〜２５℃）、高湿度、暗黒条件下で一定期間静置すればよい。給餌の頻度や量、静置期間などは、ヤマウチアシボソトゲダニの必要量や穀物殻の種類などに応じて適宜設定することができる。
【００２５】
本発明における「ヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻」としては、例えば、籾殻やソバ殻、大麦や小麦、ライ麦、カラス麦、エン麦、ハト麦など麦類の殻、ヒエ、アワ、コキビ、茶キビ、カナリーシードなどの殻、ソバ殻、とうもろこしの皮、大豆や小豆、エンドウ、レンズ豆などの豆類の皮、ゴマの皮、マツの実の殻などを挙げることができる。ここで、本発明における穀物は広義の穀物を意味するのであり、例えば、イネ科植物の種子のほか、マメ科やタデ科などの種子、ナッツ類なども含む。なお、本明細書実施例においては、好適な穀物殻として籾殻を用いている。
【００２６】
本発明において、「定着」とは、生物がそこで生活したり、繁殖したりするようになることをいい、「定着物」は「住処」と交換可能に用いられる。また、本発明において、「土壌への定着性」という場合は、土壌そのものを定着物として定着する性質や能力をいう場合の他、土壌以外の何らかの定着物を介して土壌中や土壌表面に定着する性質や能力をいう場合が含まれる。
【００２７】
本発明において、ヤマウチアシボソトゲダニは、付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻と併せて土壌に散布することにより、当該散布された穀物殻を定着物として定着し、その結果として土壌への定着性を有する。
【００２８】
本発明における穀物殻について、ヤマウチアシボソトゲダニが定着可能であるか否かは、常法に従い確認することができる。そのような方法としては、例えば、穀物殻にヤマウチアシボソトゲダニを接種し、上述したヤマウチアシボソトゲダニを飼育、増殖させる方法に準じて一定期間静置した後、ツルグレン装置などを用いてヤマウチアシボソトゲダニを採集してその数を数える方法を挙げることができる。その結果、接種した数よりもヤマウチアシボソトゲダニの数が維持されている場合や増加している場合は、その穀物殻は定着可能と判断される。
【００２９】
穀物殻に付着した穀物は、後述する実施例で示すように、ホウレンソウケナガコナダニの餌となり、その生存や増殖に資する虞がある。このため、本発明に係るホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬が有効成分とするヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻においては、付着した穀物を除去処理および／または分解処理する必要がある。ここで、除去処理や分解処理の方法は特に限定されないが、例えば、発酵や炭化、超音波洗浄、酵素分解などを挙げることができ、このうち、発酵または炭化が好ましい。すなわち、本発明における「付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻」としては、「発酵または炭化させた穀物殻」が好ましい。なお、本発明においては、「付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻」であることが特徴であり、除去処理および／または分解処理してもなお、穀物が残存してしまう場合もあり得る。
【００３０】
本発明における「付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻であってヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻」としては、例えば、発酵籾殻や籾殻くん炭、発酵ソバ殻（ソバ殻堆肥）、ソバ殻くん炭などを挙げることができる。
【００３１】
本発明に係るホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬には、本発明に係るホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬の特徴を損なわない限り、付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻およびヤマウチアシボソトゲダニ以外のものが含まれてもよく、例えば、ヤマウチアシボソトゲダニの食餌となるケナガコナダニやケナガコナダニの増殖培地である小麦ふすま、乾燥ビール酵母などが含まれていてもよい。
【００３２】
次に、本第一実施形態におけるホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法について説明する。本発明に係るホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法は、下記（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）の工程を有する；
（ｉ）ケナガコナダニを増殖させる工程（ケナガコナダニ増殖工程）、
（ｉｉ）少なくとも前記増殖させたケナガコナダニとヤマウチアシボソトゲダニと付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻であってヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻とを合わせる工程（第一合一工程）、
（ｉｉｉ）前記ヤマウチアシボソトゲダニを増殖させる工程（ヤマウチアシボソトゲダニ増殖工程）。
なお、本第一実施形態におけるホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法の発明特定事項のうち、上述したホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬の各構成と同等または相当する発明特定事項については、再度の説明を省略する。
【００３３】
（ｉ）のケナガコナダニ増殖工程において、ケナガコナダニは常法に従い増殖させることができ、そのような方法としては、例えば、適当な培地にケナガコナダニを接種して、１０〜３０℃、高湿度、暗黒条件下で静置する方法を挙げることができる。なお、この場合の培地は、小麦ふすまや乾燥ビール酵母を含むことが好ましい。
【００３４】
（ｉｉｉ）のヤマウチアシボソトゲダニ増殖工程において、ヤマウチアシボソトゲダニを増殖させる際の条件は特に限定されないが、例えば、上述したホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬におけるヤマウチアシボソトゲダニを飼育、増殖させる方法と同様の条件を挙げることができる。
【００３５】
次に、本第二実施形態におけるホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法について説明する。本発明に係るホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法は、下記（ｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）、（ｖｉ）および（ｖｉｉ）の工程を有する；
（ｉ）ケナガコナダニを増殖させる工程（ケナガコナダニ増殖工程）、
（ｉｖ）少なくとも前記増殖させたケナガコナダニとヤマウチアシボソトゲダニとヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻とを合わせる工程（第二合一工程）、
（ｖ）前記ヤマウチアシボソトゲダニを増殖させる工程（第二ヤマウチアシボソトゲダニ増殖工程）、
（ｖｉ）前記増殖させたヤマウチアシボソトゲダニを採集する工程（採集工程）、
（ｖｉｉ）少なくとも前記採集したヤマウチアシボソトゲダニと付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻であってヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻とを合わせる工程（第三合一工程）。
なお、本第二実施形態におけるホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法の発明特定事項のうち、上述したホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬および第一実施形態におけるホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法の各構成および各発明特定事項と同等または相当する発明特定事項については、再度の説明を省略する。
【００３６】
（ｖ）の第二ヤマウチアシボソトゲダニ増殖工程において、ヤマウチアシボソトゲダニを増殖させる際の条件は特に限定されないが、例えば、上述したホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬におけるヤマウチアシボソトゲダニを飼育、増殖させる方法と同様の条件を挙げることができる。
【００３７】
（ｖｉ）の採集工程において、ヤマウチアシボソトゲダニを採集する方法は常法に従い行うことができ、そのような方法としては、例えば、増殖させたヤマウチアシボソトゲダニをツルグレン装置に供して採集する方法を挙げることができる。
【００３８】
本発明に係るホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法には、本発明に係るホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法の特徴を損なわない限り、他の工程を有してもよく、例えば、ケナガコナダニまたはヤマウチアシボソトゲダニの採集工程、攪拌工程、殺菌工程、穀物殻の消毒や洗浄、発酵、炭化などの工程などを有してもよい。
【００３９】
次に、ホウレンソウケナガコナダニを防除する方法について説明する。本発明に係るホウレンソウケナガコナダニを防除する方法は、下記（ｖｉｉｉ）の工程を有する；
（ｖｉｉｉ）少なくとも付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻であってヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻とヤマウチアシボソトゲダニとを散布する工程（散布工程）。
なお、ホウレンソウケナガコナダニを防除する方法の発明特定事項のうち、上述したホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬およびホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を製造する方法の各構成および各発明特定事項と同等または相当する発明特定事項については、再度の説明を省略する。
【００４０】
（ｖｉｉｉ）の散布工程において、付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻とヤマウチアシボソトゲダニとは別個に散布してもよく、予め合わせたものを散布してもよい。後者の場合は、例えば、付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻を増殖培地としてヤマウチアシボソトゲダニを増殖させて、その増殖培地ごと散布する態様を挙げることができる。なお、散布する量や時期、頻度は、播種時期、ホウレンソウの生育状況、天気、気温、圃場内のホウレンソウケナガコナダニの密度などに応じて適宜設定することができる。
【００４１】
本発明に係るホウレンソウケナガコナダニを防除する方法には、本発明に係るホウレンソウケナガコナダニを防除する方法の特徴を損なわない限り、他の工程を有してもよく、例えば、土壌の耕起工程や土壌消毒工程、ホウレンソウケナガコナダニの密度測定工程、ヤマウチアシボソトゲダニの増殖工程、穀物殻の消毒や洗浄、発酵、炭化などの工程などを有してもよい。
【００４２】
以下、本発明に係るホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬およびホウレンソウケナガコナダニを防除する方法について、実施例に基づいて説明する。なお、本発明の技術的範囲は、これらの実施例によって示される特徴に限定されない。
【実施例】
【００４３】
＜実施例１＞ホウレンソウケナガコナダニの各世代に対するヤマウチアシボソトゲダニの捕食性の検討
（１）ヤマウチアシボソトゲダニの飼育
容積比が籾殻：水道水：アーゼロンゆうき（日本ライフ社）＝１００：１０：１となるように籾殻、水道水およびアーゼロンゆうきをビニール袋に入れて混和した後、ビニール袋の口を緩く閉じ、２０℃で約２か月間静置することにより籾殻を発酵させ、発酵籾殻を含む培地（発酵籾殻培地）を調製した。また、上川農業試験場内のガラス温室から採集して累代飼育したケナガコナダニを小麦ふすまに接種し、２０℃、湿度９９％、暗黒条件下で十分に増殖させることにより、ケナガコナダニを含む小麦ふすまを調製した。
【００４４】
シール容器内に水を張り、１２０×７５ｍｍの腰高シャーレを置いた後、約３００ｍＬの発酵籾殻培地を入れ、ここに、北海道上川郡比布町において採集したヤマウチアシボソトゲダニの個体群を接種し、２０℃、湿度９９％、暗黒条件下で累代飼育を行った。飼育中、７日間に１回の頻度で、ケナガコナダニを含む約１５ｍＬの小麦ふすまを食餌として与えた。
【００４５】
（２）ホウレンソウケナガコナダニの飼育
奈良県農業総合センターの松村美小夜氏より供与された累代飼育系統のホウレンソウケナガコナダニＴｙｒｏｐｈａｇｕｓ ｓｉｍｉｌｉｓ Ｖｏｌｇｉｎ（以下「ホウレンソウケナガコナダニ」という。）を粉末乾燥ビール酵母（クッキング用ビール酵母；アサヒフードアンドヘルスケア社）に接種し、２０℃、湿度９７％、暗黒条件下で飼育した。
【００４６】
（３）捕食性の検討
［３−１］調査準備
先ず、Ｋａｓｕｇａ Ｓ．ら、Ｊｐｎ．Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｅｎｔｏｍｏｌ．Ｚｏｏｌ．、第５０巻、第１号、第１９−２３頁、２００６年に記載の方法に従い、飼育容器を作成した。具体的には、分析用濾紙を墨汁で染色し風乾させて得た７６ｍｍ×２６ｍｍの黒色濾紙を、直径８ｍｍの穴をあけた７６ｍｍ×２６ｍｍ、厚さ３ｍｍのアクリル板２枚で挟んだ後、７６ｍｍ×２６ｍｍ、厚さ０．９〜１．２ｍｍのスライドグラスを蓋として重ね、両端をバインダークリップで止めることにより飼育容器を作成した。この飼育容器の黒色濾紙を蒸留水で軽く湿らせてから、本実施例１（１）で累代飼育したヤマウチアシボソトゲダニのうち、雌成虫を採取して各穴につき１頭ずつ放飼し、２０℃、湿度９９％、暗黒条件下で２４時間静置して絶食させた。
【００４７】
［３−２］生育ステージ別の選好性について
本実施例１（３）［３−１］のヤマウチアシボソトゲダニの雌成虫に、小筆を用いて、本実施例１（２）のホウレンソウケナガコナダニの卵、幼虫、第１若虫、第３若虫および成虫をそれぞれ与え、２０℃、湿度９９％、暗黒条件下で２４時間静置した後、捕食されたホウレンソウケナガコナダニの頭数を数えた。この工程を８〜１０反復行うことにより、捕食されたホウレンソウケナガコナダニの最小頭数、最大頭数、平均捕食頭数および標準偏差を算出した。その結果を図１に示す。
【００４８】
また、本実施例１（３）［３−１］のヤマウチアシボソトゲダニの雌成虫に、小筆を用いて、本実施例１（２）のホウレンソウケナガコナダニの成虫および幼虫を、ヤマウチアシボソトゲダニの成虫：ホウレンソウケナガコナダニの幼虫＝１０〜１１頭：１８〜２０頭の割合で混在する状態となるように与え、２０℃、湿度９９％、暗黒条件下で２４時間静置した後、残存したホウレンソウケナガコナダニの頭数を数えた。この工程を６反復行うことにより、ホウレンソウケナガコナダニの生存率を算出した。その結果を図２に示す。
【００４９】
［３−３］異なる温度条件下における捕食量について
本実施例１（３）［３−１］のヤマウチアシボソトゲダニの雌成虫に、小筆を用いて、本実施例１（２）のホウレンソウケナガコナダニの第３若虫を与え、温度１５、２０、２５および３０℃、湿度９９％、暗黒条件下で２４時間静置した後、捕食されたホウレンソウケナガコナダニの頭数を数えた。この工程を１０反復行うことにより、捕食されたホウレンソウケナガコナダニの最小頭数、最大頭数、平均捕食頭数および標準偏差を算出した。また、平均捕食頭数について、Ｔｕｋｅｙ−Ｋｒａｍｅｒ法を用いて各温度条件の間の有意差検定を行った。これらの結果を図１に示す。なお、図１では、各温度条件の間の有意差をアルファベット（ａ、ａｂ、ｂｃ、またはｃ）で示しており、各温度条件の間でアルファベットが異なる場合は有意差がある（ｐ＜０．０５）ことを意味し、アルファベットが同じ場合は有意差がない（ｐ≧０．０５）ことを意味している。例えば、ａの場合は、ｂｃおよびｃとは有意差があるがａｂとは有意差がないことを意味し、ｂｃの場合はａとは有意差があるがａｂおよびｃとは有意差がないことを意味する。
【００５０】
生育ステージ別の選好性については、図１に示すように、ホウレンソウケナガコナダニの卵がヤマウチアシボソトゲダニの雌成虫に捕食されなかったのに対して、ホウレンソウケナガコナダニの幼虫、第１若虫、第３若虫および成虫はヤマウチアシボソトゲダニの雌成虫に捕食された。２０℃における平均捕食頭数は幼虫が７８．４頭と最も多く、第１若虫が２０．９頭、第３若虫が１６．１頭、成虫が４．５頭というように、ホウレンソウケナガコナダニの生育ステージが上がるごとに少なくなった。なお、幼虫、第１若虫、第３若虫および成虫に対しては、ヤマウチアシボソトゲダニのほとんどの個体が放飼直後から捕食を開始した（データは図示しない）。また、図２に示すように、成虫および幼虫を混在して与えた場合の成虫の生存率は２０〜８０％であったのに対し、幼虫の生存率は０〜１５％であった。
【００５１】
これらの結果から、ヤマウチアシボソトゲダニはホウレンソウケナガコナダニの生育ステージのうち、幼虫、第１若虫、第３若虫および成虫はいずれも捕食すること、特に幼虫に対する捕食性が高く、大量に捕食することが明らかになった。すなわち、ヤマウチアシボソトゲダニはホウレンソウケナガコナダニの増殖を効率的に抑制することができることが示された。
【００５２】
また、異なる温度条件下における捕食量については、図１に示すように、平均捕食頭数は２０℃＞２５℃＞１５℃＞３０℃の順であった。平均捕食頭数が最も多かった２０℃と２５℃との間では有意差は見られなかったが、２０℃と１５℃、および２０℃と３０℃との間では有意差が見られた。なお、同一の温度条件下においてもヤマウチアシボソトゲダニの個体によって捕食量に差異が見られた（データは図示しない）。
【００５３】
これらの結果から、ヤマウチアシボソトゲダニはホウレンソウケナガコナダニを、少なくとも１５℃〜３０℃において捕食すること、特に２０〜２５℃においては大量に捕食することが明らかになった。すなわち、ヤマウチアシボソトゲダニの捕食適温は、ホウレンソウケナガコナダニの増殖適温である２５℃ （春日ら、日本ダニ学会誌、第９巻、第３１−４２頁、２０００年）と至近であることが示され、施設栽培ホウレンソウにおいてホウレンソウケナガコナダニの被害が深刻となる春期および秋期において、ヤマウチアシボソトゲダニはホウレンソウケナガコナダニの増殖を効率的に抑制して被害を低減できることが示された。
【００５４】
＜実施例２＞ヤマウチアシボソトゲダニの絶食耐久性の検討
実施例１（３）［３−１］の飼育容器の黒色濾紙を蒸留水で軽く湿らせてから、実施例１（１）で飼育したヤマウチアシボソトゲダニの雌成虫を各穴につき１頭ずつ放飼し、１５、２０、２５および３０℃、湿度９９％、暗黒条件下で２１日間静置して絶食させた後、生存頭数を数えた。また、絶食開始から２１日後に、生存しているヤマウチアシボソトゲダニに、小筆を用いて、実施例１（２）で飼育したホウレンソウケナガコナダニの成虫を与え、２０℃、湿度９９％、暗黒条件下で９６時間静置した後、捕食を行ったヤマウチアシボソトゲダニの頭数、産卵を行ったヤマウチアシボソトゲダニの頭数および１頭あたりの平均産卵数を算出した。この工程を６反復行った。その結果を図３に示す。
【００５５】
図３に示すように、１５、２０および２５℃では、絶食後、６頭全てが生存しており、全ての個体で捕食行動が確認された。また、１５℃では平均１．０個、２０℃では平均１．７個、２５℃では平均２．３個の産卵が確認された。これに対し、３０℃では、絶食後、６頭のうち３頭が生存しており、生存していた３頭のうち２頭で捕食行動が確認された。また、産卵は確認されなかった。
【００５６】
これらの結果から、ヤマウチアシボソトゲダニは２１日間以上という長期間の絶食にも耐えて生存することができ、その後給餌することにより正常に捕食および産卵することができることが明らかになった。すなわち、ヤマウチアシボソトゲダニは、食餌を頻繁に与える必要がなく、流通過程や保管過程における取り扱いが容易であることや、ホウレンソウケナガコナダニ密度が比較的低い耕起直後などの圃場へ散布しても、飢餓による死滅の可能性は小さく、散布するタイミングを選ばないことから使用過程における取り扱いが容易であることが示された。
【００５７】
＜実施例３＞ヤマウチアシボソトゲダニの定着物の検討
籾殻、籾殻くん炭および発酵籾殻をそれぞれ含むＡ〜Ｆの培地を、下記に記載の方法により作成した。
Ａ培地：使用直前に籾殻：水道水＝１０：１（容積比）の割合で混和した。
Ｂ培地：使用直前に籾殻くん炭：水道水＝４：１（容積比）の割合で混和した。
Ｃ培地：使用直前に籾殻：水道水：アーゼロンゆうき（日本ライフ社）＝１００：１０：１（容積比）の割合で混和した。
Ｄ培地：籾殻：水道水：アーゼロンゆうき（日本ライフ社）＝１００：１０：１（容積比）の割合で混和した後、気温約２０〜４０℃のガラス温室で１ヶ月間静置することにより籾殻を発酵させた。
Ｅ培地：籾殻：水道水：アーゼロンゆうき（日本ライフ社）＝１００：１０：１（容積比）の割合で混和した後、気温約２０〜４０℃のガラス温室で２ヶ月間静置することにより籾殻を発酵させた。
Ｆ培地：籾殻：水道水：アーゼロンゆうき（日本ライフ社）＝１００：１０：１（容積比）の割合で混和した後、気温約２０〜４０℃のガラス温室で１２ヶ月間静置することにより籾殻を発酵させた。
【００５８】
シール容器内に水を張り、１２０×７５ｍｍの腰高シャーレを置いた後、Ａ培地、Ｂ培地、Ｃ培地、Ｄ培地、Ｅ培地およびＦ培地を４００ｍＬずつ入れ、それぞれに実施例１（１）で累代飼育したヤマウチアシボソトゲダニの成虫２０頭を放飼し、２０℃、湿度９９％、暗黒条件下で３５日間静置した。実施例１（１）のケナガコナダニを含む約１５ｍＬの小麦ふすまを食餌として、静置開始から７日後および１４日後に各培地へ加えることにより与えた。
【００５９】
静置開始から７日間経過毎に、カビや微小節足動物の発生の有無を観察した。また、静置開始から３５日間経過後に、各培地の全量をツルグレン装置に供して２４時間分離を行い、得られたヤマウチアシボソトゲダニの数を数えた。この工程を３反復行うことにより、平均頭数および標準偏差を算出した。その結果を図４に示す。
【００６０】
図４に示すように、カビや微小節足動物の発生の有無については、Ａ培地では青カビおよびハエ類の発生が、Ｃ培地では青カビの発生が確認された。これに対し、Ｂ培地、Ｄ培地、Ｅ培地およびＦ培地では、カビの発生はほとんど確認されず、ハエ類の発生は皆無であった。また、ヤマウチアシボソトゲダニの平均頭数は、Ａ培地およびＣ培地では約７００頭であり、Ｂ培地では約１００頭、Ｄ培地、Ｅ培地およびＦ培地では、約２００頭であった。
【００６１】
これらの結果から、籾殻、籾殻くん炭および発酵籾殻のいずれを含む培地においても、ヤマウチアシボソトゲダニが増殖することが明らかになった。すなわち、籾殻はヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻であることが示された。なお、ヤマウチアシボソトゲダニの増殖量が、籾殻＞籾殻くん炭または発酵籾殻であった理由として、籾殻に付着していた穀物がケナガコナダニの餌となってケナガコナダニが増殖し、結果としてヤマウチアシボソトゲダニが十分量の餌を得ることができ、その分増殖できたためと考えられる。
【００６２】
＜実施例４＞ヤマウチアシボソトゲダニおよび穀物殻のホウレンソウケナガコナダニに対する防除効果（室内試験）
６０ｍｍ×５０ｍｍ×１０ｍｍのアクリルケースに、ピートモス培土（無肥料）２５ｍＬを入れ、実施例１（２）のホウレンソウケナガコナダニを含む粉末乾燥ビール酵母５０ｍｇ（成虫、若虫および幼虫計約１０００頭相当）を混和することにより土壌サンプルを作成した。この土壌サンプルに下記ａ、ｂ、ｃおよびｄの処理をそれぞれ行い、１７０ｍｍ×１２０ｍｍのチャック袋に入れて２０℃で８日間静置した後、土壌の全量をツルグレン装置に供して２４時間分離を行い、得られたホウレンソウケナガコナダニおよびヤマウチアシボソトゲダニの数をそれぞれ数えた。この工程を３反復行うことにより、平均頭数および標準偏差を算出した後、平均頭数についてグラフに表した。その結果を図５に示す。
【００６３】
処理ａ：実施例３のＡ培地１０ｍＬを加えるという処理。
処理ｂ：実施例３のＦ培地１０ｍＬを加えるという処理。
処理ｃ：実施例３のＦ培地１０ｍＬを加え、実施例１（１）のヤマウチアシボソトゲダニの成虫２０頭を放飼するという処理。
処理ｄ：実施例３のＢ培地１０ｍＬを加え、実施例１（１）のヤマウチアシボソトゲダニの成虫２０頭を放飼するという処理。
【００６４】
図５に示すように、処理ａを行った場合は、処理ｂを行った場合と比較して、ホウレンソウケナガコナダニの頭数が顕著に大きかった。この結果から、籾殻は、発酵籾殻と比較してホウレンソウケナガコナダニの生存に適することが明らかになった。これは、籾殻に付着した米がホウレンソウケナガコナダニの餌となってホウレンソウケナガコナダニの生存や増殖に資するのに対し、付着した米が発酵により除去処理ないし分解処理された発酵籾殻は、ホウレンソウケナガコナダニの生存や増殖に資するところがないためと考えられる。
【００６５】
すなわち、ホウレンソウケナガコナダニの防除のため、ヤマウチアシボソトゲダニと共に土壌に散布すべきヤマウチアシボソトゲダニが定着可能な穀物殻は、付着した穀物を除去処理および／または分解処理したものが最適であることが示された。
【００６６】
また、処理ｃおよび処理ｄを行った場合はいずれも、処理ａおよび処理ｂを行った場合と比較して、ホウレンソウケナガコナダニの頭数が顕著に少なかった。この結果から、ヤマウチアシボソトゲダニを発酵籾殻または籾殻くん炭と共に土壌に加えると、ホウレンソウケナガコナダニの密度を抑制することができることが明らかとなった。すなわち、付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻とヤマウチアシボソトゲダニとを散布すると、ホウレンソウケナガコナダニを防除することができることが示された。
【００６７】
＜実施例５＞ヤマウチアシボソトゲダニおよび発酵籾殻のホウレンソウケナガコナダニに対する防除効果（圃場試験）
（１）ホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬の製造
容量２００Ｌのプラスチック容器に籾殻１００Ｌを入れ、水道水１０Ｌおよびアーゼロンゆうき（日本ライフ社）１Ｌを混和した後、農業用ビニールを被せて２０〜３０℃で約１か月間静置して籾殻を発酵させた。その後、アーゼロンゆうき（日本ライフ社）１Ｌと水道水６Ｌとを再び加えて切り返し、同温度条件下でさらに１ヶ月間静置することにより籾殻を発酵させ、発酵籾殻を含む培地（発酵籾殻大容量培地）を作成した。この発酵籾殻大容量培地が入ったプラスチック容器に、実施例１（１）のヤマウチアシボソトゲダニを含む発酵籾殻培地を５％（容積比）の割合で加え、ベニヤ板で蓋をして２０〜２５℃、湿度９０〜９５％の条件下で１ヶ月間静置することによりヤマウチアシボソトゲダニを増殖させた。静置の間、７日間に１回の頻度で、実施例１（１）のケナガコナダニを含む約３００ｍＬの小麦ふすまを食餌として与えた。こうして増殖させたヤマウチアシボソトゲダニを含む発酵籾殻大容量培地をホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬とした。なお、増殖させた後のヤマウチアシボソトゲダニ頭数を数えると、１容器あたり約３５０００頭であり、大量に増殖させることができたことが確認された。
【００６８】
（２）圃場試験
２００１１年６月１日に播種した施設栽培ホウレンソウ圃場（上川農業試験場内）において、１８ｍ２の区画を２つ設定し、散布区および無散布区とした。２０１１年６月６日に、散布区にのみ、本実施例５（１）のホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を２．７Ｌ（１５０Ｌ／１０ｈａ相当）散布した。播種時、散布直前、散布から７日後、１５日後および２２日後に、散布区および無散布区から土壌を１００ｍＬずつ採集し、ツルグレン装置に供して２４時間分離を行い、得られたホウレンソウケナガコナダニの数を数えて土壌１００ｍＬ当たりの密度を算出した。土壌の採取を３反復行って平均密度を算出した後、下記の式を用いて補正密度指数を算出し、グラフに表した。その結果を図６に示す。なお、補正密度指数とは、当該散布前の土壌におけるホウレンソウケナガコナダニの密度の違いを考慮し、各調査時点の無散布区の密度を１００とした場合の、散布区におけるホウレンソウケナガコナダニの発生割合を示すものである（「農薬委託試験実施の手引き」日本植物防疫協会）。
【００６９】
補正密度指数＝（散布区の７日後、１５日後または２２日後の平均密度／散布区の散布直前の平均密度）×（無散布区の散布直前の平均密度／無散布区の７日後、１５日後または２２日後の平均密度）×１００
【００７０】
図６に示すように、散布区では、無散布区と比較して、７日後、１５日後および２２日後のいずれの時点においてもホウレンソウケナガコナダニの補正密度指数が低い結果となった。また、土壌表面の発酵籾殻には、ホウレンソウの収穫期に至るまで、ヤマウチアシボソトゲダニの成虫が確認された（データは図示しない）。これらの結果から、発酵籾殻とヤマウチアシボソトゲダニとを含むホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬をホウレンソウ圃場に散布すると、ヤマウチアシボソトゲダニは土壌表面に長期間存在して、ホウレンソウケナガコナダニの密度を抑制することができることが明らかになった。すなわち、付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻とヤマウチアシボソトゲダニとを有効成分とするホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬は、土壌への定着性を有し、安定的かつ持続的にホウレンソウケナガコナダニを防除することができることが示された。
【００７１】
（３）比較試験
本実施例５（１）の生物農薬をツルグレン装置に供して２４時間分離を行い、発酵籾殻大容量培地とヤマウチアシボソトゲダニとを分離して、ヤマウチアシボソトゲダニを採集した。続いて、ホウレンソウケナガコナダニ防除用生物農薬を当該採集したヤマウチアシボソトゲダニに代え、本実施例５（２）に記載の方法に従い圃場試験を行い、ホウレンソウケナガコナダニの平均密度および補正密度指数を算出した。
【００７２】
その結果、散布区では、ヤマウチアシボソトゲダニはホウレンソウケナガコナダニをすべて捕食する前に散布区外へ逃げてしまったため、２２日後の補正密度指数はほぼ１００となった。これらの結果から、発酵籾殻を併せて散布せずに、ヤマウチアシボソトゲダニのみをホウレンソウ圃場に散布すると、ヤマウチアシボソトゲダニは速やかにいなくなってしまい、ホウレンソウケナガコナダニの密度を持続的に抑制することができないことが明らかになった。すなわち、付着した穀物を除去処理および／または分解処理した穀物殻を併せて散布せず、ヤマウチアシボソトゲダニのみを散布した場合は、土壌への定着性がなく、ホウレンソウケナガコナダニに対する持続的な防除効果が得られないことが示された。  
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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