(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）溶媒に溶解した過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させて、少なくとも前記初期ポリマーと、各ポリマー分子が前記分岐点分子と結合した末端および少なくとも１つの未結合末端を有するように、前記分岐点分子と共有結合した少なくとも２つのポリマー分子を含むコンジュゲートとを含有するポリマー混合物を形成するステップと、
（ｂ）前記ポリマー混合物を、前記コンジュゲートに対する阻止率が前記初期ポリマーに対する阻止率より大きい半透膜と接触させて、保持液中の前記コンジュゲート濃度と前記初期ポリマー濃度との比を増加させるステップと、
（ｃ）前記コンジュゲートの前記分岐点分子から前記ポリマーを切断するステップと
を含み、
前記コンジュゲートの前記ポリマー分子の前記少なくとも１つの未結合末端を化学的に修飾して、前記ポリマーの前記未結合末端の官能基を修飾するか、または前記ポリマーに追加のモノマー単位またはポリマー単位を加え、前記修飾が、分岐点分子から切断された前記ポリマーが少なくとも１つの化学的に修飾された末端を有する前記初期ポリマーを含むように、ステップ（ｂ）の前か後のいずれかで生じる、ヘテロ二官能性ポリマーまたは単分散ポリマーを調製する方法。
【請求項２】
前記方法が、ヘテロ二官能性ポリマーを調製する方法であり、前記化学的修飾が、前記ポリマーの前記未結合末端に存在し得る任意の保護基を除去し、その後、前記未結合末端の官能基化を行うことを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記方法が、単分散ポリマーを調製する方法であり、前記化学的修飾が、前記未結合末端に存在し得る任意の保護基を除去し、その後、前記コンジュゲートに存在する前記ポリマーの前記未結合末端を別のポリマー単位またはモノマー単位と反応させることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ポリマーの前記化学的修飾がステップ（ｂ）の前に生じる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記化学的修飾がステップ（ｂ）の後に生じる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記コンジュゲートまたはその誘導体、前記初期ポリマー、試薬および副生成物を含有する混合物を、前記コンジュゲートまたはその誘導体に対する阻止率が、存在する前記初期ポリマー、試薬および副生成物の少なくとも１つに対する阻止率より大きい半透膜と接触させて、前記保持液中の前記コンジュゲートまたはその誘導体の１つの濃度と、前記初期ポリマー、試薬および副生成物の少なくとも１つの濃度との比を増加させることにより、前記コンジュゲートまたはその誘導体を前記初期ポリマー、試薬および副生成物から精製するために複数の膜ろ過ステップを用いる、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
追加の溶媒を前記保持液に添加し、前記膜に透過させて、ダイアフィルトレーションによってさらに初期ポリマー、副生成物または過剰の試薬を除去する、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記追加の溶媒が前記反応溶媒と同じである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記追加の溶媒が前記反応溶媒と同じではなく、前記ポリマー生成物が前記ダイアフィルトレーションの間中、前記溶媒に溶解されて保持される、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記初期ポリマーが、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリブチレンオキシド、およびこれらのいずれかのブロックコポリマー、ポリプロピレンオキシドとポリエチレングリコールのポリプロピレンオキシドブロックコポリマー、ポリジメチルシロキサン（ＰＭＤＳ）、ポリブタジエンおよびポリイソプレン、過剰の二酸で形成されたカルボン酸を末端とするポリマーを生成するためのナイロンおよびポリエステルまたは過剰のジアミン／ジオールで形成されたアミノ／ヒドロキシ基を末端とするポリマーを生成するためのナイロンおよびポリエステル、ならびにポリエチレン硫化物からなる群から選択される、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記初期ポリマーと前記分岐点分子との結合が、リン酸エステル、シリルエーテル、アセタール、オルトエステル、チオエーテルなどのエーテル結合、エステル結合およびアミド結合、ならびにオレフィン結合からなる群から選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記膜が高分子膜である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記膜がセラミック膜である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記初期ポリマーがポリエチレングリコールである、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記分岐点分子が下記のいずれか一の構造を備える、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【化１】
0005863778.tif 000007
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はポリマーの合成に関する。より具体的には、本発明は、ヘテロ二官能性ポリマーおよび分子量分布が狭く、単分散であるポリマーの合成に関し、特にこれらのポリマーの合成への膜の適用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ、スキーム１）、別名ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）などのポリマーは、生物学および医学（ＨａａｇおよびＦｒａｔｚ（２００６）Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔ．Ｅｄ．４５、１１９８〜１２１５）ならびに有機合成（ＧｒａｖｅｒｔおよびＪａｎｄａ（１９９７）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、９７、４８９〜５０９）の分野における広範な適用のために大きな関心が寄せられている。
【化１】
0005863778.tif 000002
スキーム１：ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）分子の構造。ｎ＝１、２、３…からｎ
【０００３】
ＰＥＧ（以下、ＰＥＧについて言及する場合は、いかなる分子量のポリマーをも意味する）には、バイオテクノロジーおよび医学への適用に魅力的ないくつかの特性がある。それは、水溶性で、毒性がなく、概して非免疫原性であり、また、他の分子に共有結合させた場合、得られるコンジュゲートは、薬物の薬理学的特性を向上させることが多い様々な物理化学的性質を示す。ＰＥＧなどのポリマー、ならびにポリプロピレングリコール、ポリブチレンオキシド、およびこれらのブロックコポリマーなどの他のポリマーは、ポリマー／タンパク質コンジュゲートおよび薬物／ポリマーコンジュゲート、ならびに超分子薬物送達システムを生成するために用いることができる（ＰａｓｕｔおよびＶｅｒｏｎｅｓｅ（２００９）Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、６１．１１７７〜１１８８；ＨａａｇおよびＦｒａｔｚ（２００６）、Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔ．Ｅｄ．４５、１１９８〜１２１５）。米国特許第４，１７９，３３７号には、ＰＥＧと結合したタンパク質の血液循環寿命（ｂｌｏｏｄ  ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ｌｉｆｅｔｉｍｅ）の向上が記載されており、ＨａａｇおよびＦｒａｔｚ（２００６）、Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔ．Ｅｄ．４５、１１９８〜１２１５には、承認されたか、現在臨床試験中のいくつかのポリマー／タンパク質薬物が概説されている。不溶性薬物タキソールのＰＥＧ化によって、その毒性プロファイルを保持した水溶性コンジュゲートが生成された（Ｇｒｅｅｎｗａｌｄら、（１９９５）、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、６０、３３１〜３３６）。抗癌剤ドキソルビシン（ＤＯＸ）をＰＥＧ化リポソームに封入することで、癌細胞へのＤＯＸの送達を向上し、より有利な毒性プロファイルを可能にすることが示されている（ＳｔｒｏｔｈｅｒおよびＭａｔｅｉ（２００９）、Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｉｓｋ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ．５、６３９〜６５０）。
【０００４】
ＰＥＧはまた、ペプチド、オリゴヌクレオチド、オリゴ糖、および小分子などのいくつかの関連分子を合成する際に可溶性ポリマー支持体として用いられる。ＧｒａｖｅｒｔおよびＪａｎｄａ（１９９７）、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ．９７、４８９〜５０９には、液相有機合成で用いられるポリマー、化学反応、ならびに分離方法および精製方法が概説されている。
【０００５】
上記の適用のすべてが発展するにつれて、以下の２つの重要な性質の一方または双方を有するＰＥＧおよび他のポリマーの必要性が明らかとなる。（ｉ）混合物ではなく単一の分子の実体を十分に特徴付けることを可能とし、物理的性質の明確な定義付けを与える単分散分子量（ＭＷ）分布（ＨｕｎｔｅｒおよびＭｏｇｈｉｍｉ（２００２）、Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  ７（１９）、９９８〜１００１；Ｆｒｅｎｃｈら、（２００９）、Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔ．Ｅｄ．４８、１２４８〜１２５２；ＧｒｅｃｏおよびＶｉｃｅｎｔ（２００９）、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ６１、１２０３〜１２１３）、ならびに、（ｉｉ）様々な分子（タンパク質、ペプチド、オリゴヌクレオチド、小分子薬物、リポソームなど）との効率的な結合および異なる化学種間の架橋結合を可能にする、末端の様々な官能基（スキーム２）。
Ｘ−ＰＥＧｎ−Ｙ
スキーム２：ヘテロ二官能性ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）分子の構造。ｎ＝１、２、３…〜ｎ
【０００６】
ＰＥＧのヒドロキシル基の１つを置換するために用いられる一般的な官能基（Ｘ、Ｙ、スキーム２）として、アルデヒド、カルボキシレート、トリフルオロスルホネート、チオール、塩化物、カルボキシスクシニミジルエステル、ｐ−ニトロフェニルカルボネート、炭酸ベンゾトリアゾールおよび当業者に公知のものが挙げられる。
【０００７】
ヘテロ二官能性ＰＥＧは合成するのが困難な場合が多い。オキシアニオンにより開始するエチレンオキシドの開環重合によって、最も一般的には、１つの末端に比較的不活性なメトキシを有し、分子量分布が広いヘテロ二官能性ＰＥＧが生じる。この方法は広く用いられているが、いくつかの短所が当業者に知られており、（Ｂｅｎｔｌｅｙら（２００２）、米国特許第６，４４８，３６９（Ｂ１）号）に別記されている。ＰＥＧを等モル量の試薬と反応させると、ジ−、モノ−および未反応のＰＥＧの混合物が得られ、厄介な精製が必要となる。ＰＥＧの分子量が増加するにつれ、ジ−、モノ−、および未反応の化学種の間の化学的および物理的な性質の差異が小さくなり、精製がより困難になる。Ｈｕａｎｇ（１９９２）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ４６、１６６３〜１６７１；ならびにＨｕａｎｇおよびＨｕ（１９９３）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ４７、１５０３〜１５１１には、出発物質としてＰＥＧを用いる技術によるいつかのヘテロ官能基化ＰＥＧの合成が記載されており、この技術では、反応物質とＰＶＡをグラフトさせることで、沈殿処理を分離および精製に用いることができる。様々な合成戦略と共にクロマトグラフ法もまたヘテロ二官能性ＰＥＧの合成に適用されてきた（Ｚａｌｉｐｓｋｙ（１９９３）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４、２９６〜２９９；ＰｈｉｌｌｉｐｓおよびＳｎｏｗ（１９９４）５，２９８，４１０）。ＵＳ６，４４８，３６９（Ｂ１）には、触媒水素化分解または酸触媒加水分解によって穏和な条件下で除去することができるベンジルオキシ−ＰＥＧ−ＯＨまたはアリールメチルオキシ基を用い、エーテル沈殿による中間の分離を行うことにより、中間または最終のクロマトグラフ法を行わない方法が記載されている。しかしながら、出発物質に伴う制約によって、行うことができる合成操作が制限され、出発物質に起因するＰＥＧ不純物が導入される。
【０００８】
単分散ＰＥＧの調製は、単一の分子組成を有する小さな短鎖ＰＥＧオリゴマーを連結し、収束的経路（ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ  ｒｏｕｔｅ）でさらに長い鎖にすることによって行われてきた（ＡｈｍｅｄおよびＴａｎａｋａ、（２００４）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、ｖｏｌ．７１、９８８４〜９８８６ページ；Ｆｒｅｎｃｈら、（２００９）Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔ．Ｅｄ．４８，１２４８〜１２５２）。この方法にはヘテロ二官能性ＰＥＧの調製に関するいくつかの問題があり、特に、分子量が増加するにつれ反応物から生成物を分離することがより困難になるという問題がある。さらに、重要なエーテル化反応でＰＥＧオリゴマーのほぼ化学量論的組み合わせを用いることによって、精製の困難を最小限にする必要があるのは、反応を完了させることができないことを意味していた。さらに、ＰＥＧアルコキシド求核体からのエチレンオキシド単位の塩基性解重合や、ＰＥＧスルホン酸求電子体の脱離による対応するビニルエーテルの生成などの、出発物質の副反応（Ｌｏｉｓｅａｕら、（２００４）、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、ｖｏｌ．６９、６３９〜６４７ページ）が生じ、さらに収率および生成物純度が低下する。
【０００９】
膜処理は分離科学の分野において周知であり、液相および気相で分子量が変化する化学種の一連の分離に適用することができる（例えば、「Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」、Ｋｉｒｋ  Ｏｔｈｍｅｒ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、第4版、１９９３、Ｖｏｌ１６、１３５〜１９３ページを参照）。ナノろ過は、細孔が０．５〜５ｎｍの範囲にあり、分画分子量が２００〜３，０００ダルトンの膜を利用する膜処理である。ナノろ過は、水性流体のろ過に広く適用されているが、好適な溶媒安定性のある膜が存在しないため、有機溶媒中の溶質の分離にはあまり広く適用されていない。限外ろ過膜の分画分子量は典型的には３，０００〜１，０００，０００の範囲である。近年、Ｐ．Ｖａｎｄｅｚａｎｄｅ、Ｌ．Ｅ．Ｍ．ＧｅｖｅｒｓおよびＩ．Ｆ．Ｊ．Ｖａｎｋｅｌｅｃｏｍ  Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．、（２００８）、Ｖｏｌ３７、３６５〜４０５ページでは、最も困難な溶媒中でさえ安定である新たな種類の膜が開発されたことが報告されている。これらは、高分子膜あるいはセラミック膜、または無機／有機混合膜（ｍｉｘｅｄ  ｉｎｏｒｇａｎｉｃ／ｏｒｇａｎｉｃ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）であり得る。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明の目的は、ヘテロ二官能性ポリマーを調製するための改善された方法を提供することである。
【００１１】
さらに、本発明の目的は、単分散ポリマーまたは分子量分布が狭いポリマーを調製するための改善された方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、ヘテロ二官能性ポリマー、および分子量（ＭＷ）分布が狭く、単分散であるポリマーを調製する方法に関する。本発明によれば、ポリマー／分岐点分子（ｂｒａｎｃｈ  ｐｏｉｎｔ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ）コンジュゲートを合成し、コンジュゲートのポリマー分子の遊離の「未結合の」末端を、反応溶媒中で行われる１つまたは複数の反応により、官能基化するか、追加のモノマー単位またはポリマー単位と反応させる。少なくとも１つの反応に対して、有機溶媒を用い、有機溶媒中で安定であり、かつコンジュゲートに対する阻止率が反応副生成物または過剰な試薬の少なくとも１つに対する阻止率よりも大きい膜を使用して、反応後の混合物をダイアフィルトレーションすることにより、反応間の反応副生成物および過剰な試薬からのコンジュゲートの分離が行われる。
【００１３】
したがって、第１の態様では、本発明は、下記のステップ：
（ａ）溶媒に溶解した過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させて、少なくとも初期ポリマーと、各ポリマー分子が分岐点分子と結合した末端および少なくとも１つの未結合末端を有するように、分岐点分子と共有結合した少なくとも２つのポリマー分子を含むコンジュゲートとを含有するポリマー混合物を形成するステップと、
（ｂ）ポリマー混合物を、コンジュゲートに対する阻止率が初期ポリマーに対する阻止率より大きい半透膜と接触させて、保持液中のコンジュゲート濃度と初期ポリマー濃度との比を増加させるステップと、
（ｃ）分岐点分子からコンジュゲートのポリマーを切断するステップと
を含み、コンジュゲートのポリマー分子の少なくとも１つの未結合末端を化学的に修飾して、未結合末端の官能基を修飾するか、またはポリマーに追加のモノマー単位またはポリマー単位を加え、前記修飾が、ステップ（ｃ）で分岐点分子から切断されたポリマーが少なくとも１つの化学的に修飾された末端を有する初期ポリマーを含むように、ステップ（ｂ）の前か後のいずれかで生じる、ヘテロ二官能性ポリマーおよび／または分子量分布が狭く、単分散であるポリマーを調製する方法を提供する。
【００１４】
特定の態様では、本発明は下記のステップ：
（ａ）溶媒に溶解した過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させて、少なくとも初期ポリマーと、各ポリマー分子が分岐点分子と結合した末端および少なくとも１つの未結合末端を有するように、分岐点分子と共有結合した少なくとも２つのポリマー分子を含むコンジュゲートとを含有するポリマー混合物を形成するステップと、
（ｂ）ポリマー混合物を、コンジュゲートに対する阻止率が初期ポリマーに対する阻止率より大きい半透膜と接触させて、保持液中のコンジュゲート濃度と初期ポリマー濃度との比を増加させるステップと、
（ｃ）コンジュゲートの分岐点分子からポリマーを切断するステップと
を含み、コンジュゲートのポリマー分子の少なくとも１つの未結合末端を反応させて、ポリマーの未結合末端の官能基を化学的に修飾し、前記修飾が、ステップ（ｃ）で分岐点分子から切断されたポリマーが官能基の異なる少なくとも１つの末端を有する初期ポリマーを含むように、ステップ（ｂ）の前か後のいずれかで生じる、ヘテロ二官能性ポリマーを調製する方法を提供する。
【００１５】
さらに特定の態様では、本発明は、下記のステップ：
（ａ）溶媒に溶解した過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させて、少なくとも初期ポリマーと、各ポリマー分子が分岐点分子と結合した末端および少なくとも１つの未結合末端を有するように、分岐点分子と共有結合した少なくとも２つのポリマー分子を含むコンジュゲートとを含有するポリマー混合物を形成するステップと、
（ｂ）ポリマー混合物を、コンジュゲートに対する阻止率が初期ポリマーに対する阻止率より大きい半透膜と接触させて、保持液中のコンジュゲート濃度と初期ポリマー濃度との比を増加させるステップと、
（ｃ）コンジュゲートの分岐点分子からポリマーを切断するステップと
を含み、コンジュゲートのポリマー分子の少なくとも１つの未結合末端を、ポリマーの未結合末端にさらにモノマー単位またはポリマー単位を加えることによって化学的に修飾し、前記修飾が、ステップ（ｃ）で分岐点分子から切断されたポリマーが、単分散であるか、分子量分布が狭い修飾ポリマーを含むように、ステップ（ｂ）の前か後のいずれかで生じる、分子量分布が狭く、単分散であるポリマーを調製する方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明の反応および分離のステップを示す概略図である。
【図２】ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＮＨ２の合成を示す概略図である。
【図３】提案された発明の全体的概略図である。
【図４】単分散ＰＥＧを合成するための、提案された発明のさらなる実施形態を示す全体的概略図である。
【図５】ＯＳＮ装置の概略図である。
【図６Ａ】ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｐｈｔｈ（実施例１）の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。ＣＤＣｌ３（上図）。
【図６Ｂ】ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｐｈｔｈ（実施例１）の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。ＣＤＣｌ３＋５％ｖ／ｖＴＦＡ無水物（下図）。
【図７Ａ】ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＮＨ２（実施例２）の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。ＣＤＣｌ３（上図）。
【図７Ｂ】ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＮＨ２（実施例２）の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。ＣＤＣｌ３＋５％ｖ／ｖＴＦＡ無水物（下図）。
【図８Ａ】ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｎ３（実施例３）の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。ＣＤＣｌ３（上図）。
【図８Ｂ】ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｎ３（実施例３）の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。ＣＤＣｌ３＋５％ｖ／ｖＴＦＡ無水物（下図）。
【図９】ＯＳＮ分離のゲル透過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）クロマトグラムを示す図であり、過剰なＰＥＧの除去を示す。１、ＰｈＳｉ−（Ｏ−ＰＥＧ４４−ＯＨ）３、実施例、ステップ１、ａ）供給、ｂ）純粋；２、ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４_−ＯＨ）３、実施例２および実施例３、ステップ１、ａ）供給、ｂ）純粋；ｔｒ＝約１１．７分で溶出された分岐生成物（約６０００ｇｍｏｌ−１）、ｔｒ＝約１３分に溶出された過剰ＰＥＧ（約２０００ｇｍｏｌ−１）。条件は、溶媒がＮＭＰ、Ｔ＝１００℃、検出がＲＩである。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本明細書で用いられる用語「ヘテロ二官能性」は、１つの末端に１つの官能基と、少なくとももう１つの末端に異なる官能基を有する線状ポリマーまたは分岐ポリマーをいう。
【００１８】
本明細書で用いられる用語「単分散」は、同等の分子量を有する線状ポリマーまたは分岐ポリマーをいう。
【００１９】
本明細書で用いられる用語「初期ポリマー」は、線状であっても分岐していてもよいポリマー出発物質をいう。
【００２０】
本明細書で用いられる用語「分岐点分子」は、少なくとも２つの反応性部分を有し、初期ポリマーの末端に共有結合できる多官能性有機分子をいう。
【００２１】
本発明の１つの実施形態では、本発明の初期ポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、ポリブチレンオキシド、およびそれらのブロックコポリマーから選択してもよい。
【００２２】
さらなる実施形態では、初期ポリマーは、ポリプロピレンオキシド（ＰＰＯ）、ＰＰＯとＰＥＧのブロックコポリマー、ポリジメチルシロキサン（ＰＭＤＳ）、ポリブタジエンおよびポリイソプレン、過剰の二酸で形成されたカルボン酸を末端とするポリマーを生成するためのナイロンおよびポリエステルまたは過剰のジアミン／ジオールで形成されたアミノ／ヒドロキシ基を末端とするポリマーを生成するためのナイロンおよびポリエステル、ならびにポリ［エチレンスルフィド］の中から選択してもよい。
【００２３】
初期ポリマーはまた、式Ｘ−ポリマー−Ｘの任意のポリマーであってもよい。式中、Ｘは、カルボキシレート、アミン、チオール、または任意の他の周知の反応性実体であり得る。
【００２４】
特定の実施形態では、初期ポリマーはＰＥＧである。
【００２５】
本発明のさらなる実施形態では、図１に示すように、過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させて、膜ろ過によって過剰の線状初期ポリマーから精製することができる分岐点分子と共有結合した少なくとも２つのポリマー分子を含むコンジュゲートの合成が可能となる。図１では、Ｒは、−Ｈ、メトキシ、ベンジルまたは任意の他のヒドロキシル保護基を表し、Ｒ１はヒドロキシル基または任意の他の反応性官能基を表し、Ａは分岐点分子を表し、少なくとも２つの反応性部分を有し、初期ポリマーと共有結合することができる多官能性有機分子であり、２からｎの値を有するｃは分岐の数を表し、２は２アーム分枝分子（２−ａｒｍ  ｂｒａｎｃｈｅｄ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ）を表し、３は３アーム分枝分子を表し、以下同様である。初期ポリマー分子を分岐点分子と共有結合させるために用いられる化学物質は、当業者に周知のものであり、アミド、エステル、エーテル、シリルエーテルなどを含む。
【００２６】
本発明のための分岐点分子は、当技術分野において公知の多官能性有機分子の非常に大きな群から選択することができ、例として以下の構造を含むが、これらに制限されない。
【化２】
0005863778.tif 000003
【００２７】
一実施形態では、方法は、ヘテロ二官能性ポリマーを調製する方法である。このような実施形態では、コンジュゲートのポリマーの未結合末端に存在する任意の保護基が除去される。任意の保護基が除去されたとき、または保護基が存在しない場合、ポリマーの未結合末端を反応させてその官能基を変化させ、修飾ポリマーが得られる。この修飾ポリマーは、分岐点分子から切断された場合、分岐点分子と結合した末端に存在する官能基とは異なる官能基を未結合末端に有するヘテロ二官能性ポリマーとなる。ポリマーは分岐点分子から切断されるとさらに修飾されて、ヘテロ二官能性ポリマー最終生成物とすることができる。
【００２８】
さらなる実施形態では、方法は、単分散ポリマーまたは分子量分布が狭いポリマーを調製する方法である。このような実施形態では、コンジュゲートのポリマーの未結合末端を反応させ、存在し得る任意の保護基を除去してもよい。任意の保護基が除去されたとき、または保護基が存在しない場合、未結合末端を別のポリマー単位またはモノマー単位と反応させて、コンジュゲートのポリマー分子の長さを延長させる。過剰のポリマー単位またはモノマー単位を使用すると、反応が終了せざるを得なくなり、その結果、生成物コンジュゲートによって、出発物質の狭い分子量分布または単分散が維持される。
【００２９】
一定の長さの初期ポリマーを用い、未結合末端にさらに一定の長さのポリマーをカップリングさせることによって、分岐点分子から切断する際に単分散ポリマーが形成される。
【００３０】
一実施形態では、ポリマーの化学的修飾はステップ（ｂ）の前に生じる。
【００３１】
代替的な実施形態では、化学修飾はステップ（ｂ）の後に生じる。
【００３２】
官能基化されたコンジュゲートまたは脱保護されたコンジュゲートは、さらに膜分離、または液液抽出、クロマトグラフィーなど他の従来の公知の精製法を用いて精製してもよい。所望の生成物が得られるまで、合成戦略を繰り返してもよい。
【００３３】
分岐点分子からポリマー鎖が切断されると、遊離した未結合末端の終端が修飾された初期ポリマーが実質的に生成される。分岐点分子からポリマーを切り離すために用いられる切断反応の選択は、合成したい生成物に依存し、都合に応じて、合成戦略の最後に、または任意の段階で行うことができる。
【００３４】
さらなる実施形態では、ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＮＨ２を調製する合成戦略を図２に示す。過剰のＰＥＧ（平均分子量＝約２，０００ダルトン、ｎ＝４４）をベンゼン−１，３，５−トリカルボニルトリクロリドと反応させる。次いで、得られた高分子量の分岐したベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−ＯＨ）３を、溶媒安定性のナノろ過膜を用いて、過剰のＰＥＧから精製する。遊離ヒドロキシル末端の官能基化および分岐点分子からの切断は、既に報告され当業者に周知の化学反応によって達成される。
【００３５】
本発明のさらなる実施形態を図３に示す。この実施形態の生成物として、単分散または狭い分子量分布を有する分岐ポリマー、線状ポリマー、およびヘテロ二官能性ポリマーが含まれるが、それらのすべては、タンパク質、薬物、他のポリマー、ペプチド、オリゴヌクレオチドなどの他の部分と結合していてもよい。図３では、Ａは分岐点分子を表し、ＨＺ−ポリマー−ＺＨは初期ポリマーを表し、また、（１）および（２）はそれぞれ、コンジュゲートおよび末端が官能基化された線状ポリマー生成物を表し、（１）は、ｃ＝ｎの場合のｎアームポリマーであるがこれに限定されるものではない。ＸおよびＹは、同時にまたは独立して、ヒドロキシル、メトキシ、アミン、アジド、カルボン酸などであってもよい官能基を表すが、これらに限定されない。
【００３６】
他の適切なＸおよび／またはＹ官能基には次のものが含まれる。
弱酸性のｐＨおよび低濃度で一緒に反応して、オキシムエーテル（例えば、ＰＥＧ−ＯＮＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＯＰＥＧ）を生成することができるアミンオキシ（例えば、ＰＥＧ−ＯＮＨ２）またはアルデヒド（例えば、ＰＥＧ−ＯＣＨ２ＣＨＯ）、
Ｃｕ（Ｉ）触媒の存在下でアジドと結合してトリアゾールを生成するアセチレン（例えば、プロパルギルエーテル、ＰＥＧ−ＯＣＨ２−ＣＣＨ）、
アジドとシュタウディンガー連結反応するホスフィン試薬、
ＰＥＧを架橋するために用いられる非常に緊密な包接複合体を形成するアダマンチルエーテル（小型で円形の炭化水素ケージ）またはβシクロデキストリン（油脂性の中心空洞を有する環式グルコースヘプタマー）、
ＰＥＧ末端のＯＨまたはＮＨ２と縮合することができる１つのカルボン酸を有する容易に入手可能な小分子であり、ストレプトアビジン／アビジンと非常に緊密な複合体を形成し、生体適合性の架橋に非常に一般的に用いられているビオチン（ビタミンＨ）、
例えばアクリレートと縮合するか、パラクロロメチルスチレンでエーテル化するポリマーモノマー。
【００３７】
このような官能基は、受容体認識または生物物理的会合のための生体分子（ペプチド、オリゴヌクレオチド、糖類、リン脂質）との結合に、あるいは薬物とのカップリングのために用いることができる。
【００３８】
さらなる実施形態では、ＸおよびＹは以下の官能基から選択されてもよい。
【表１】
0005863778.tif 000004
【００３９】
本発明のさらなる実施形態では、過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させ、それによって膜ろ過により過剰の初期ポリマーから精製することができるコンジュゲートの合成が可能となる。続いて、初期ポリマーと同じまたは異なるポリマーを用いた一連のカップリング／脱保護反応によってポリマー鎖を延長することができる。反応の合間に、反応副生成物および過剰の試薬からの成長中のポリマーの分離を、ダイアフィルトレーションによって少なくとも１つの反応に対し行ってもよい。脱保護／カップリング反応のサイクルは所望のポリマー分子量を得るために行うことができる。鎖延長に用いられる化学物質は、報告され、当業者に公知のものである（Ｆｒｅｎｃｈら、（２００９）、Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔ．Ｅｄ．４８、１２４８〜１２５２）。都合に応じて（例えば、生物分解性が増したポリマーを得ることや、ｐＨが制御された縮合にスペーサーを導入すること）、カルボキシルエステル結合またはリン酸エステル結合、アミン結合およびアセタール結合などの他の結合を鎖延長に用いることができる。鎖延長の後に、ポリマーを、分岐点分子から切断するか、またはヘテロ二官能性ポリマーを合成するために官能基化し得る。鎖延長に用いられるポリマーの少なくとも１つが初期ポリマーとは異なる場合、ブロックコポリマーが形成され得ることは明らかである。図４は、単分散のＰＥＧを合成するための本実施形態を示しており、図中、ＲＯ−ＰＥＧｎ−Ｒ１は、開始ＰＥＧ（例えば、ヘキサゴール（ｈｅｘａｇｏｌ）（ヘキサエチレングリコール）などの単分散のＰＥＧ）を表し、Ａは分岐点分子を表し、（３）はＰＥＧコンジュゲート、（５）は鎖が延長された単分散ＰＥＧ、（４）は官能基化ＰＥＧコンジュゲート、（６）は鎖が延長された官能基化ＰＥＧである。
【００４０】
さらなる実施形態では、ダイアフィルトレーションに用いられる溶媒は、ダイアフィルトレーションの直前の反応に用いられる溶媒、またはダイアフィルトレーションの後の反応に必要な溶媒と異なっていてもよい。ダイアフィルトレーションに用いられる溶媒は、ポリマーおよび／または官能基化ポリマーを溶液中に保持すべきである。
【００４１】
本発明での使用に好適な膜として、重合体膜およびセラミック膜、重合体／無機混合膜が挙げられる。膜阻止率Ｒｉは当業者に公知の一般用語であり、次のように定義される。
【数１】
0005863778.tif 000005
式中、ＣＰ，ｉ＝膜を通過する液体である透過液中の化学種ｉの濃度であり、ＣＲ，ｉ＝膜を通過しない液体である保持液中の化学種ｉの濃度である。
Ｒ（コンジュゲート）＞Ｒ（少なくとも１つの反応副生成物または試薬）
の場合、膜が本発明に好適であることが理解されよう。
【００４２】
本発明の膜は、少なくとも１つの反応副生成物または試薬からポリマー生成物を優先的に分離することができる分離層を提供する、任意のポリマー物質またはセラミック物質から形成されてもよい。好ましくは、膜は、精密ろ過膜、限外ろ過膜、ナノろ過膜、または逆浸透膜を製造するのに好適なポリマー物質から選択される物質から形成されるか、それを含み、ポリマー物質としては、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリアクリロニトリル、ポリアミド、ポリイミド、ポリエーテルイミド、酢酸セルロース、ポリアニリン、ポリピロール、ポリベンズイミダゾール、およびこれらの混合物が挙げられる。膜は、焼結、伸張、トラックエッチング、テンプレートリーチング（ｔｅｍｐｌａｔｅ  ｌｅａｃｈｉｎｇ）、界面重合または位相反転などの当技術分野において公知の任意の技術によって作製することができる。より好ましくは、膜は、反応溶媒中の安定性を向上させるために、架橋され、または処理されてもよい。ＰＣＴ／ＧＢ２００７／０５０２１８には、本発明での使用に好適であり得る膜が記載されている。
【００４３】
好ましい態様では、膜は複合材料であり、その非多孔質の選択的透過層は、ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）ベースのエラストマーなどの修飾ポリシロキサンベースのエラストマー、エチレン−プロピレンジエン（ＥＰＤＭ）ベースのエラストマー、ポリノルボルネンベースのエラストマー、ポリオクテナマーベースのエラストマー、ポリウレタンベースのエラストマー、ブタジエンおよびニトリルブタジエンゴムベースのエラストマー、天然ゴム、ブチルゴムベースのエラストマー、ポリクロロプレン（ネオプレン）ベースのエラストマー、エピクロロヒドリンエラストマー、ポリアクリレートエラストマー、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、二フッ化ポリビニリデン（ＰＶＤＦ）ベースのエラストマー、ポリエーテルブロックアミド（ＰＥＢＡＸ）、ポリウレタンエラストマー、架橋ポリエーテル、界面重合によって形成されたポリアミド、およびこれらの混合物から選択される物質から形成されるか、それを含む。
【００４４】
さらにより好ましくは、膜は、焼結、リーチングまたはゾルゲル法などの当業者に公知の任意の技術を用いて、非限定的な例として炭化ケイ素、酸化シリコン、酸化ジルコニウム、酸化チタンまたはゼオライトなどの無機物質から調製される。
【実施例】
【００４５】
ヘテロ二官能性生成物はすべて、ＴＦＡ無水物による末端アシル化を用いて特徴付けた。約１０ｍｇのヘテロ二官能性生成物を、ＴＦＡ無水物の０．５％ＣＤＣｌ３溶液に溶解し、ＮＭＲによって分析した（Ｊｏら、（２００１）．Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．２、２５５〜２６１）。ＴＦＡでアシル化された末端の低磁場ピーク積分値と別の鎖末端からのシグナルの比によって、変換および純度（未変換（ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＯＨ）に対するモノ官能基化ＰＥＧの％）を評価することができる。表１にすべての実施例の結果をまとめる。
【００４６】
［実施例１：  ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｐｈｔｈの合成］
＜ステップ１：Ｐｈ−Ｓｉ−（Ｏ−ＰＥＧ４４−ＯＨ）３の合成＞
ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＯＨ（約２，０００ｇｍｏｌ−１、１４．４ｇ、７．２ｍｍｏｌ）を、乾燥トルエン（ＴＯＬ）（２０ｍｌ×４回）と共蒸発させ、乾燥ジクロロメタン（ＤＣＭ）（２５ｍｌ）に溶解した。イミダゾール（０．２３０ｇ、２．８ｍｍｏｌ）を溶液に添加し、室温の窒素雰囲気下で撹拌した。トリクロロフェニルシラン（０．１１５ｍｌ、０．７１ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。反応液を一晩撹拌し、過剰の脱イオン水（３ｍｌ、１５分）で反応を停止した。次に、反応溶液をＤＣＭ（１００ｍｌ）で希釈し、脱イオン水（１００ｍｌ）で洗浄した。さらにＤＣＭ（１００ｍｌ）で水層を抽出した。合わせた有機画分を、脱イオン水（２００ｍｌ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固させて粗物質（１３．１ｇ）を得た。これを、ＯＳＮ精製のためにＤＣＭに再度溶解した。ＰＣＴ／ＧＢ２００７／０５０２１８に記載されるように調製した架橋ポリイミド膜を用いてＯＳＮ精製を行った。加圧セルに取り付けた５１．４ｃｍ２の円板として膜を使用し、１０バールでろ過を行った（ＯＳＮ装置の概略図については図５を参照）。新しいＤＣＭ溶媒を添加し、ＨＰＬＣポンプを用いてダイアフィルトレーションを行った。生成物を１２〜１５のダイアフィルトレーション容量で洗浄し（ｐ＝７〜８気圧、室温）、Ｐｈ−Ｓｉ−（Ｏ−ＰＥＧ４４）３（１．３５ｇ、３１％）を得た。δH (400 MHz, CDCl3); 3.46-3.89 (546H, m, 273 × OCH2), 3.96 (6H, t, J 4.0, 3 × PhSiOCH2), 7.36 (2H, t, J 7.4, Ph), 7.43 (1H, t, J 7.4, Ph), 7.68 (2H, d, J 7.7, Ph) ppm。
【００４７】
＜ステップ２：Ｐｈ−Ｓｉ−（Ｏ−ＰＥＧ４４−ＯＭｓ）３の合成＞
Ｐｈ−Ｓｉ−（Ｏ−ＰＥＧ４４−ＯＨ）３（０．３００ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＯＬ（１０ｍｌ×３回）と共蒸発させ、乾燥ＤＣＭ（３ｍｌ）に溶解した。室温で撹拌溶液に、窒素雰囲気下で、まずトリエチルアミン（Ｅｔ３Ｎ）（０．０４５ｍｌ、０．３０ｍｍｏｌ）を添加し、次にメタンスルホニルクロリド（ＭｓＣｌ）（０．０６０ｍｌ、０．７５ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。反応液を一晩撹拌し、３０分かけて脱イオン水（０．５００ｍｌ）で反応を停止した。次に、反応溶液をＤＣＭ（５０ｍｌ）で希釈し、脱イオン水（５０ｍｌ×１回）および飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍｌ）で洗浄した。さらにＤＣＭ（１００ｍｌ）で水層を抽出した。合わせた有機画分を、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥してろ過し、蒸発乾固させて、Ｐｈ−Ｓｉ−（Ｏ−ＰＥＧ４４−ＯＭｓ）３（０．１９２ｇ、６２％）を得た。δH (400 MHz, CDCl3); 3.02 (9H, s, SO2CH3), 3.38-3.76 (546H, m, 273 × OCH2), 3.89 (6H, t, J 3.9, 3 ×PhSiOCH2), 4.31 (6H, t, J 4.3, 3 × CH2OMs), 7.36 (2H, t, J 7.4, Ph), 7.43 (1H, t, J 7.4, Ph), 7.61 (2H, d, J 7.6, Ph) ppm。
【００４８】
＜ステップ３：ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｐｈｔｈの合成＞
Ｐｈ−Ｓｉ−（Ｏ−ＰＥＧ４４−ＯＭｓ）３（０．１９２ｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＯＬ（５ｍｌ×２回）と共蒸発させ、乾燥ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（２０ｍｌ）に溶解した。フタルイミドカリウム（ＫＰｈｔｈ、０．１８７ｇ、１０ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で撹拌溶液に添加し、温度を７０℃まで上げた。３時間後、溶液を冷却し、ＤＣＭ（１００ｍｌ）で希釈して、脱イオン水（１００ｍｌ）で洗浄した。さらにＤＣＭ（１００ｍｌ）で水層を抽出した。合わせた有機画分を、ＮａＨＣＯ３／Ｎａ２ＣＯ３水溶液（２００ｍｌ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。次に、これを氷浴で冷却し、ジエチルエーテル（約１５容量）を撹拌溶液にゆっくり添加して粗物質を沈殿させ、この粗物質をＣＤＣｌ３（２ｍｌ×３回）から蒸発させた（Ｐｈ−Ｓｉ−（ＯＰＥＧ４４−ＯＨ）が酸性条件下で急速に加水分解されて、ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｐｈｔｈ（０．０９８ｇ、５２％）が得られることが確認された）。δH (400 MHz, CDCl3); 3.44-3.82 [182H, m, CH2OH + (90 × OCH2)], 3.89 (6H, t, J 3.9, 3 × CH2Phth), 7.71 (2H, dd, 2.0, Phth), 7.83 (2H, dd, 2.0, Phth) ppm。
【００４９】
図６は、ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｐｈｔｈの得られた１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。ＣＤＣｌ３（上図）、およびＣＤＣｌ３＋５％ｖ／ｖＴＦＡ無水物（下図）。
【００５０】
［実施例２：  ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＮＨ２の合成］
＜ステップ１：ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−ＯＨ）３の合成＞
ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＯＨ（３１．１ｇ、１５ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＯＬ（６０ｍｌ×２回）と共蒸発させ、乾燥ＤＣＭ（４５ｍｌ）に溶解した。撹拌溶液に、室温の窒素雰囲気下で、まずＮ−メチルイミダゾール（ＮＭＩ）（０．７２０ｍｌ、９ｍｍｏｌ）を添加し、次にＤＣＭ（２ｍｌ）に溶解したベンゼン−１，３，５−トリカルボニルトリクロリド（０．４２０ｇ、１．６ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。反応液を一晩反応させ、３０分かけて過剰の脱イオン水で反応を停止した。次に、溶液をＤＣＭ（４００ｍｌ）で希釈し、半飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２５０ｍｌ）で洗浄した。さらにＤＣＭ（２００ｍｌ）で水層を抽出した。合わせた有機画分を、０．１ＭのＨＣｌ（６００ｍｌ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥して、ろ過し、蒸発乾固させた。粗物質（２８．８ｇ）は、ＯＳＮ精製のためにＤＣＭに再度溶解した。ＰＣＴ／ＧＢ２００７／０５０２１８に記載されるように調製した架橋ポリイミド膜を用いてＯＳＮ精製を行った。加圧セルに取り付けた５４ｃｍ２の円板として膜を使用し、３０バールでろ過を行った。新しいＤＣＭ溶媒を添加し、ＨＰＬＣポンプを用いてダイアフィルトレーションを行った。生成物を１２〜１５のダイアフィルトレーション容量で洗浄し（ｐ＝８気圧、室温）、ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−ＯＨ）３（４．６３ｇ、６２％）を得た。δH (400 MHz, CDCl3); 3.45-3.82 (540H, m, 270 × OCH2), 3.86 (6H, t, J 3.8, 3 × CO2CH2CH2O), 4.53 (6H, t, J 4.5, 3 × CO2CH2), 8.86 (3H, s, Ar) ppm。
【００５１】
＜ステップ２：ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−ＯＭｓ）３の合成＞
ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−ＯＨ）３（１．０２８ｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＯＬ（１５ｍｌ×３回）と共蒸発させ、乾燥ＤＣＭ（６ｍｌ）に溶解した。室温の窒素雰囲気下で撹拌溶液に、まずＥｔ３Ｎ（０．１３６ｍｌ、０．９８ｍｍｏｌ）を添加し、次にＭｓＣｌ（０．１９０ｍｌ、２．４４ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。７時間後、３０分かけて脱イオン水（０．５００ｍｌ）で反応を停止し、ＤＣＭ（１５０ｍｌ）で希釈した。これを半飽和ＮａＨＣＯ３（１５０ｍｌ×１回）、脱イオン水（１５０ｍｌ×１回）で洗浄し、さらにＤＣＭ（３００ｍｌ）で水層を抽出した。合わせた有機画分は、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥してろ過し、蒸発乾固させて、粗ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−ＯＭｓ）３（０．９６ｇ、９３％）を得た。δH (400 MHz, CDCl3); 3.11 (9H, s, SO2CH3), 3.47-3.85 (528H, m, 264 × OCH2), 3.78 (6H, t, J 3.8, 3 ×OCH2CH2OMs), 3.88 (6H, t, J 3.9, 3 × CO2CH2CH2O), 4.40 (6H, t, J 4.4, 3 × CH2OMs), 4.55 (6H, t, J 4.6, 3 × CO2CH2PEG), 8.88 (3H, s, Ar) ppm。
【００５２】
＜ステップ３：ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−Ｐｈｔｈ）３の合成＞
ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−ＯＭｓ）３（０．８５０ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を、乾燥アセトニトリル（ＭｅＣＮ）（１０ｍｌ×３回）と共蒸発し、乾燥ＤＭＦ（６０ｍｌ）に溶解した。ＫＰｈｔｈ（０．７４０ｇ、４ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で撹拌溶液に添加し、温度を７０℃まで上げた。１５時間後、溶液を冷却し、ＤＣＭ（１５０ｍｌ）で希釈して、脱イオン水（１５０ｍｌ×１回）で洗浄した。さらにＤＣＭ（１５０ｍｌ）で水層を抽出し、合わせた有機画分を無水ＭｇＳＯ４上で乾燥してろ過し、減圧下で濃縮した。撹拌粗溶液を氷浴で冷却し、約１５容量のジエチルエーテルを添加して、ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−Ｐｈｔｈ）３（０．５９３ｇ、６８％）を沈殿させた。δH (400 MHz, CDCl3); 3.48-3.85 (528H, m, 264 × OCH2), 3.89 (6H, t, J 3.9, 3 × CO2CH2CH2O), 3.93 (6H, t, J 3.9, 3 × CH2Phth), 4.56 (6H, t, J 4.6, 3 × CO2CH2), 7.73-7.75 (6H, m, J 7.7, 3 × Phth), 7.86-7.88 (6H, m, 3 × Phth), 8.89 (3H, s, Ar) ppm。
【００５３】
＜ステップ４：ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＮＨ２の合成＞
ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−Ｐｈｔｈ）３（０．５９３ｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＯＬ（５ｍｌ×２回）と共蒸発させ、エタノール性ヒドラジン水和物（６ｍｌ、１０％ｖ／ｖ）に溶解した。溶液を１２時間室温で撹拌し、次いでアセトン（５ｍｌ）の添加によって反応を停止し、１５分間撹拌した。溶液をＤＣＭ（１００ｍｌ）で希釈し、ＮａＣｌ水溶液（１５０ｍｌ、５％ｗ／ｖ）で洗浄した。さらにＤＣＭ（１００ｍｌ×２回）で水層を抽出し、合わせた有機画分を無水ＭｇＳＯ４上で乾燥してろ過し、真空下で蒸発させた。得られた粗生成物を減圧下で脱イオン水（２ｍｌ×３回）と共蒸発させ、ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＮＨ２（０．３１５ｇ、５８％）を得た。δH (400 MHz, CDCl3); 3.15 (2H, b, CH2NH2), 3.41-3.87 (184H, m, 92 × OCH2)。
【００５４】
図７は、ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＮＨ２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。ＤＣｌ３（上図）、ＣＤＣｌ３＋５％ｖ／ｖＴＦＡ無水物（下図）。純度は、上図のスペクトルにおけるＣＨ２ＮＨ２ピークとＯＣＨ２の積分値の比が下図のスペクトルにおけるＣＨ２ＯＴＦＡピークとＯＣＨ２の積分値の比と同様のサイズであることにより評価され得る。
【００５５】
［実施例３：  ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｎ３の合成］
＜ステップ１およびステップ２＞
上記の実施例２と同様である。
【００５６】
＜ステップ３：ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−Ｎ３）３の合成＞
ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−ＯＭｓ）３（０．９６０ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を、乾燥ＭｅＣＮ（１０ｍｌ×３回）と共蒸発し、ＤＭＦ（３ｍｌ）に溶解した。脱イオン水（０．２５０ｍｌ）およびＮａＨＣＯ３（２４ｍｇ）を添加し、その後ＮａＮ３（５９ｍｇ）を添加した。溶液を窒素下の７０℃で撹拌し、２０時間後、溶液を冷却した。これをＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）で希釈し、半飽和ＮａＨＣＯ３（１２０ｍｌ）、脱イオン水（１２０ｍｌ×３回）、および塩水（１２０ｍｌ）で洗浄した。次に、ＤＣＭ（６００ｍｌ×２回）で水層を抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥し、ろ過して真空下で蒸発させ、ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−Ｎ３）３（０．３６８ｇ、３９％）を得た。δH (400 MHz, CDCl3); 3.41-3.43 (6H, t, J 3.4 CH2N3), 3.48-3.86 (534H, m, 267 × OCH2), 3.89 (6H, t, J 3.9, 3 ×CO2CH2CH2O), 4.56 (6H, t, J 4.6, 3 × CO2CH2), 8.89 (3H, s, Ar) ppm。
【００５７】
＜ステップ４：ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｎ３の合成＞
ベンゼン−１，３，５−（ＣＯ２−ＰＥＧ４４−Ｎ３）３（０．１００ｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を、ＮＨ３水溶液（２．５ｍｌ、３５％ｖ／ｖ）に溶解し、一晩撹拌した。溶液を真空下で蒸発させ、アンモニア臭が検知されなくなるまで水と共蒸発させた。残渣をＤＣＭ（５０ｍｌ）に溶解し、脱イオン水（５０ｍｌ）で洗浄した。さらにＤＣＭ（５０ｍｌ×２回）で水層を抽出した。合わせた有機画分を、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、ろ過して真空下で蒸発させ、ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｎ３（０．０８６ｇ、８８％）を得た。δH (400 MHz, CDCl3); 3.37 (2H, t, J 3.4 CH2N3), 3.43-3.81 (182H, m, 91 × OCH2) ppm。
【００５８】
図８は、ＨＯ−ＰＥＧ４４−Ｎ３の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。ＣＤＣｌ３（上図）、ＣＤＣｌ３＋５％ｖ／ｖＴＦＡ無水物（下図）。
【００５９】
［実施例４：  Ｃ６Ｈ３−１，３，５−（ＣＨ２ＯＰｅｇ１２ＯＣＨ２Ｎｐｈ）３の合成］
＜ステップ１：Ｃ６Ｈ３−１，３，５−（ＣＨ２ＯＰｅｇ４ＯＨ）３の合成＞
水素化ナトリウムの６０％鉱油分散体（２０５ｍｇ、５ｍｍｏｌ、５当量）を、石油エーテル（×３回）で洗浄し、ＤＭＦ（７ｍＬ）に懸濁させて、氷水浴で冷却した。テトラゴール（ＨＯ−ＰＥＧ４４−ＯＨ、５．８４ｇ、３０ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（１０ｍＬ×３回）から蒸発し、ＤＭＦ（２ｍＬ）中に採取し、素早く撹拌した水素化ナトリウム懸濁液に滴下して、穏やかな気泡を保持し、さらにＤＭＦ（０．５ｍＬ×２回）でフラスコをすすいだ。冷却浴を取り除き、反応液を室温で９０分間撹拌した。この後、氷酢酸（１ｍＬ）を添加し、溶媒を除去した（オイルポンプ）。残渣をＣＨＣｌ３中に採取して、１０％飽和ＮａＨＣＯ３（×２回）で洗浄し、合わせた水層をさらにＣＨＣｌ３（×２回）で抽出した。合わせた有機層を１０％塩水で洗浄し、水層をＣＨＣｌ３（×２回）で逆抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で蒸発乾固させた。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーによって、ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３（０：１〜１：９）のグラジエントで溶出して分画し、環式副生成物１−（ＨＯＰｅｇ４ＯＣＨ２）−Ｃ６Ｈ３−３，５−（ＣＨ２ＯＰｅｇ４ＯＣＨ２）（４９ｍｇ、４％ＭｅＯＨで溶出、８％）、および所望のホモスター（ｈｏｍｏｓｔａｒ）Ｃ６Ｈ３−１，３，５−（ＣＨ２ＯＰｅｇ４ＯＨ）３（３７５ｍｇ、６〜１０％ＥｔＯＨで溶出、５２％）を得た。Ｒｆ（ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３、１：９ｖ／ｖ）生成物０．２２、副生成物０．３８。NMR δH(CDCl3, 400 MHz) 7.22 (3H, s), 4.53 (6H, s), 3.71-3.68 (48H, m), 3.00 (3H, br.s) ppm。 HRMS (ESI+) m/z [M+Na]+719.3824 (100%), C33H60NaO15は719.3825を必要とする。 675.3573 （3%）のピークは[M+Na-(エチレンオキシド)]+に相当し、テトラゴールのトリゴール(trigol)混入からのC31H56NaO14は675.3563を必要とする。
【００６０】
＜ステップ２：ＴｓＯＰｅｇ４ＯＨの合成＞
テトラゴール（２．０ｇ、１０．３ｍｍｏｌ、１０当量）をＭｅＣＮ（５ｍＬ×３回）から共蒸発させ、ＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解した。撹拌溶液に、ｐ−トルエンスルホニルクロリド（０．１９６ｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を添加し、次いでトリエタイルアミン（０．２１ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。翌日、溶液をＤＣＭで希釈して、水（×２回）で洗浄し、次に２０％飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。合わせた水層をさらにＤＣＭで同様に逆抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカのパッドを通してＥｔＯＡｃ−ＤＣＭ（０：１〜９：１）のグラジエントで溶出して分画し、無色の油（２８６ｍｇ、８０％）として生成物を得た。Ｒｆ（ＥｔＯＡｃ−ＤＣＭ、２：３ｖ／ｖ）０．３４。NMR δH(CDCl3, 400 MHz) 7.82 (2H, d, J 7), 7.37 (2H, d J 7), 4.19 (2H, t, J 4), 3.74-3.60 (14H, m), 2.47 (3H, s), 2.42 (1H, br.s) ppm。 HRMS (ESI+) m/z [M+Na]+ 371.1140 (100%), C15H24NaO7Sは371.1135を必要とする。
【００６１】
＜ステップ３：ＤｍｔｒＯＰｅｇ４ＯＴｓの合成＞
ＴｓＯＰｅｇ４ＯＨ（０．３３６ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）および４，４’−ジメトキシトリフェニルメタノール（ＤｍｔｒＯＨ、０．３３２ｇ、１．０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶解し、このＤＣＭに３Åの分子篩（１２．７ｇ）を添加した。混合液に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１５ｍｇ）を添加すると、最初、Ｄｍｔｒカチオンの強いオレンジ色が観察されたが、３０分後には大部分が消えた。２時間後、Ｅｔ３Ｎ（０．５ｍＬ）を添加し、溶液を分子篩からデカントし、さらにＤＣＭで洗浄した。溶液を飽和ＮａＨＣＯ３で分割し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカのパッド（１００ｍＬ）を通して、ＤＣＭ−石油エーテルを導入し、ＥｔＯＡｃ−石油エーテル（０：１〜１：１）のグラジエントで溶出して分画した。この際、すべての溶媒が確実に０．５％Ｅｔ３Ｎを含有するようにし、淡黄色の油（４５４ｍｇ、７０％）として生成物を得た。Ｒｆ（ＥｔＯＡｃ−石油エーテル、３：２ｖ／ｖ＋微量のＥｔ３Ｎ）０．４２。NMR δH (d6-DMSO, 400 MHz) 7.76 (2H, d, J 7), 7.45 (2H, d, J 7), 7.40 (2H, d, J 7), 7.32-7.19 (7H, m), 6.88 (4H, d, J 7), 4.08 (2H, t, J 4), 3.73 (6H, s), 3.57-3.43 (12H, m), 3.04 (2H, t, J 4), 2.40 (3H, s) ppm。 HRMS (ESI+) m/z [M+Na]+ 673.2416 (100%), C36H42NaO9は673.2442を必要とする。
【００６２】
＜ステップ４：Ｃ６Ｈ３−１，３，５−（ＣＨ２ＯＰｅｇ８ＯＤｍｔｒ）３の合成＞
水素化ナトリウムの６０％鉱油分散体（１７ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ、６当量）は、石油エーテル（×３回）で洗浄し、ＤＭＦ（０．２ｍＬ）に懸濁させて、氷水浴で冷却した。Ｃ６Ｈ３−１，３，５−（ＣＨ２ＯＰｅｇ４ＯＨ）３（４６ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）およびＤｍｔｒＯＰｅｇ４ＯＴｓ（４４４ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ、１０当量）をＭｅＣＮ（５ｍＬ×３回）から共蒸発させ、次いでＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解し、水素化ナトリウムに滴下し、さらにＤＭＦ（０．２５ｍＬ×２回）でフラスコをすすいだ。翌日、飽和ＮＨ４Ｃｌ（０．５ｍｌ）を添加し、真空内で溶媒を除去した（オイルポンプ）。残渣をＤＣＭ中に採取し、１０％飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、さらにＤＣＭで水層を逆抽出した。合わせた有機層を１０％塩水で洗浄し、水層をさらにＤＣＭで逆抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で蒸発乾固させた。残渣（４１０ｍｇ）を、シリカのパッド（１００ｍＬ）を通して、ＤＣＭ−石油エーテルを導入し、最初にＥｔＯＡｃ−石油エーテル（０：１〜１：０）のグラジエントで溶出して分画した。この際、すべての溶媒が確実に０．５％Ｅｔ３Ｎを含有するようにした。過剰のＤｍｔｒＯＰｅｇ４ＯＴｓ（２６８ｍｇ、５０％ＥｔＯＡｃまで溶出、予測した未反応物質の８５％）を、残留水との反応からの少量のＤｍｔｒＯＰｅｇ８ＯＤｍｔｒ（３４ｍｇ）と共に回収した。次に、シリカパッドをＥｔＯＨ−ＤＣＭ（１：１９、０．５％Ｅｔ３Ｎを含有）で洗浄し、淡黄色の油として生成物（１２７ｍｇ、９０％）を得た。Ｒｆ（ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３、１：９ｖ／ｖ＋微量のＥｔ３Ｎ）０．３８。NMR δH(CDCl3 + 0.1% Et3N, 400 MHz) 7.47 (6H, d, J 7), 7.34 (12H, d, J 7), 7.28 (6H, t, J 7), 7.22 (3H, s), 7.20 (3H, t, J 7), 6.82 (12H, d, J 7), 4.56 (6H, s), 3.80 (18H, s), 3.71-3.61 (90H, m), 3.23 (6H, t, J 4) ppm。 MS (ESI+) m/z [M+Na]+ 2155 (9%), C120H162NaO33は2155.5を必要とする。[M-Dmtr+H+NH4]+1848 (17%), [M-2Dmtr+2H+NH4]+ 1546 (6%), [M-Dmtr+Na+NH4]2+1087 (77%), [Dmtr]+ 303 (100%)。
【００６３】
＜ステップ５：Ｃ６Ｈ３−１，３，５−（ＣＨ２ＯＰｅｇ８ＯＨ）３の合成＞
Ｃ６Ｈ３−１，３，５−（ＣＨ２ＯＰｅｇ８ＯＤｍｔｒ）３（１２０ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解した。撹拌溶液がＤｍｔｒカチオンの濃いオレンジに変化すると、この溶液にジクロロ酢酸（０．０１９ｍＬ、４当量）を添加した。その後ピロール（０．０７２ｍＬ、２０当量）を添加し、５分で色が完全に消えた。１１分後、トリエチルアミン（０．５ｍＬ）を添加し、真空内で溶媒を除去した（オイルポンプ）。残渣をＤＣＭ中に採取し、３０％飽和塩水で洗浄し、さらにＤＣＭ（×３回）で水層を逆抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、蒸発乾固させた。残渣を、シリカのパッドを通してＥｔＯＨ−ＣＨＣｌ３（０：１〜１：４）のグラジエントで溶出して分画し、無色の油（５１ｍｇ、７４％）として生成物を得た。Ｒｆ（ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３、１：９ｖ／ｖ）０．２９。NMR δH(CDCl3, 400 MHz) 7.21 (3H, s), 4.53 (6H, s), 3.72-3.57 (96H, m), 2.97 (3H, br.s) ppm。MS (ESI+) m/z [M+Na]+1247.8 (11%), C57H108NaO27は1247.7を必要とする。[M+2Na]2+ 635.4 (100%)。1198.8(約0.5%)のピークは[M+NH4-(エチレンオキシド)]+に相当し、C55H108NO26は1198.7を必要とし、鎖延長の間に重要な基本的解重合がなかったことを示している。
【００６４】
＜ステップ６：ＮｐｈＣＨ２ＯＰｅｇ４ＯＨの合成＞
６０％水素化ナトリウム（１２０ｍｇ、３ｍｍｏｌ、１．５当量）は、石油エーテル（×３回）で洗浄し、ＤＭＦ（１ｍＬ）に懸濁させて、氷水浴で冷却した。テトラゴール（３．８８ｇ、２０ｍｍｏｌ、１０当量）をＭｅＣＮ（１０ｍＬ×３回）から共蒸発させ、ＤＭＦ（４ｍＬ）中に採取し、素早く撹拌した水素化ナトリウムに滴下して、穏やかな気泡を保持した。次に、固体２−ブロモメチルナフタレン（４４２ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を添加し、冷却浴を取り除いて、１時間撹拌を継続した。その後、飽和ＮＨ４Ｃｌ（０．５ｍｌ）を添加し、真空内で溶媒を除去した（オイルポンプ）。残渣をＣＨＣｌ３_中に採取して、水（×２回）で洗浄し、水層をさらにＣＨＣｌ３で逆抽出した。合わせた有機画分をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧下で蒸発させた。粗生成物（７４０ｍｇ）をさらに精製することなく用いた。Ｒｆ（ＭｅＯＨ−ＤＣＭ、１：１９ｖ／ｖ）０．５０。NMR δH(CDCl3, 400 MHz) 7.88-7.79 (4H, m), 7.51-7.44 (3H, m), 4.75 (2H, s), 3.75-3.66 (14H, m), 3.61 (2H, t, J 3), 2.76 (1H, br.s) ppm。 HRMS (ESI+) m/z [M+Na]+ 357.1669 (100%), C19H26NaO5は357.1673を必要とする。
【００６５】
＜ステップ７：ＮｐｈＣＨ２ＯＰｅｇ４ＯＴｓの合成＞
粗Ｎｐｈ−Ｐｅｇ４−ＯＨ（０．７０２ｇ、２．１ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（５ｍＬ×３回）から共蒸発させ、ＤＣＭ（５ｍｌ）に溶解した。この溶液に、ｐ−トルエンスルホニルクロリド（０．６０ｇ、３．２ｍｍｏｌ、２当量）を添加し、次にトリエチルアミン（０．８８ｍＬ、６．３ｍｍｏｌ、３当量）を添加し、反応液を４時間撹拌した。この後、飽和ＮａＨＣＯ３（５ｍＬ）を添加し、２０分間激しく撹拌し続けた。反応液をＤＣＭで希釈し、水（×２回）で洗浄してから、２０％飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。合わせた水層をＤＣＭで逆抽出し、同様に洗浄した。合わせた有機画分をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカのパッドを通してＥｔＯＡｃ−石油エーテル（０：１〜３：２）のグラジエントで溶出して分画した。Ｒｆ（ＥｔＯＡｃ−ＤＣＭ、２：３ｖ／ｖ）０．６２。NMR δH(CDCl3, 400 MHz) 7.88-7.79 (6H, m), 7.52-7.47 (3H, m), 7.33 (2H, d, J 7), 4.76 (2H, s), 4.17 (2H, t, J 4), 3.72-3.58 (14H, m), 3.45 (3H, s) ppm。 HRMS (ESI+) m/z [M+Na]+ 511.1768 (100%), C26H32NaO7Sは511.1761を必要とする。
【００６６】
＜ステップ８：Ｃ６Ｈ３−１，３，５−（ＣＨ２ＯＰｅｇ１２ＯＣＨ２Ｎｐｈ）３の合成＞
鉱油中６０％水素化ナトリウム（１１．６ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ、６当量）は、石油エーテル（×２回）で洗浄し、ＤＭＦ（０．１ｍＬ）に懸濁させて、水浴で冷却した。Ｃ６Ｈ３−１，３，５−（ＣＨ２ＯＰｅｇ８ＯＨ）３（５１ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）およびＮｐｈＣＨ２ＯＰｅｇ４ＯＴｓ（２０６ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ、１０当量）をＭｅＣＮ（３ｍＬ×４回）から共蒸発させ、次いでＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解し、穏やかに撹拌した水素化ナトリウムに滴下し、さらにＤＭＦ（０．２ｍＬ×２回）でフラスコをすすいだ。翌日、飽和ＮＨ４Ｃｌ（０．２ｍｌ）を添加し、真空内で溶媒を除去した（オイルポンプ）。残渣をＣＨＣｌ３中に採取して、１０％飽和ＮａＨＣＯ３洗浄し、水層をさらにＣＨＣｌ３で逆抽出した。合わせた有機層を２０％塩水で洗浄し、水層をさらにＣＨＣｌ３で逆抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で蒸発乾固させた。残渣（２１９ｍｇ）は、ＰＣＴ／ＧＢ２００７／０５０２１８に記載されるように調製した架橋ポリイミド膜を用いたダイアフィルトレーションによって分画し、淡黄色の油として生成物を得た。NMR δH(CDCl3, 400 MHz) 7.87-7.79 (12H, m), 7.52-7.47 (9H, m), 7.23 (3H, s), 4.74 (6H, s), 4.55 (6H, s), 3.73-3.58 (144H, m) ppm。 MS (ESI+) m/z [M+Na+NH4]2+ 1107.7 (8%), C114H184NNaO39/2は1107.6を必要とする。[M+Na+2NH4]3+744.1 (23%)。
【００６７】
ＰＥＧ鎖が所望の単分散分子量にさらに延長され、続いて、分岐点分子（トリメチルベンジル部分）から切断され、単分散ポリマー生成物を提供し得ることは当業者に明らかである。
【表２】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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