(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）のクラウンエーテル。
【化１】
0005848708.tif 000023
（式中、
ｍは、４、５、６、７または８であり、各々のｉは独立して、１または２であり；
各々のＲ1およびＲ2は、水素；直鎖状もしくは分枝状の、置換もしくは非置換のＣ1〜Ｃ10アルキル、アルケニルおよびアルキニル；ならびに１０個迄の原子で構成された環を有
する置換もしくは非置換のアリールから独立して選択され；またはＲ1およびＲ2は、一緒になってオキソ基を形成し；
クラウンエーテル内の少なくとも１つのＲ1、Ｒ2と、Ｒ1およびＲ2が結合しかつ式（Ｉ）のエーテル酸素に直接結合している炭素とは、一緒になって、式（ＩＩ）
【化２】
0005848708.tif 000024
の基を形成し、式中、
Ｌは、存在しないか、または共有結合および（ＣＲ5Ｒ6）nから選択されるリンカーであ
り、
Ｌが存在しない場合、ＸおよびＹは環の一部を形成せず、その場合、各々がＸまたはＹに結合し、かつＺ（またはＺが存在しない場合Ｒ3および／もしくはＲ4）を有する炭素原子の自由原子価は、水素で飽和され；
各々のＲ5およびＲ6は、水素；直鎖状または分枝状の、置換または非置換のＣ1〜Ｃ10ア
ルキル、アルケニルおよびアルキニル；ならびに１０個迄の原子で構成された環を有する置換または非置換のアリールから独立して選択され、ｎは、１、２または３であり；
ＸおよびＹは、互いに独立してＯおよびＳから選択され；
各々のＺは、独立して、存在しないか、または−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−および−Ｃ（＝Ｏ）−から選択される電子吸引基であり；
各々のＲ3およびＲ4は、独立して、水素；直鎖状または分枝状の、置換または非置換のＣ1〜Ｃ10アルキル、アルケニルおよびアルキニル；１０個迄の原子で構成された環を有す
る置換または非置換のアリール；Ｈ（ＯＣＨ2ＣＨ2）k−およびＨ（ＯＣＨ2ＣＨ2）kＯ−から選択され、式中、ｋは、１〜１０迄の整数であり；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6における置換基は、存在する場合、ＯＨ、Ｏ−ＣＨ3
およびハロゲンから選択される。）
【請求項２】
クラウンエーテル内の少なくとも１つのＲ1およびＲ2が、一緒になってオキソ基を形成する、請求項１に記載のクラウンエーテル。
【請求項３】
前記クラウンエーテルの環構造が、１８−クラウン−６、１２−クラウン−４、１３−クラウン−４、１４−クラウン−４、１５−クラウン−５、１６−クラウン−５、１７−クラウン−５、２０−クラウン−６、２１−クラウン−７または２４−クラウン−８により提供される、請求項１または２に記載のクラウンエーテル。
【請求項４】
一つまたは二つのオキソ基が存在する、請求項１〜３のいずれか一項に記載のクラウンエーテル。
【請求項５】
環内のエーテル酸素原子の数が偶数であり、一つ置きのエーテル酸素原子に隣接して一つのオキソ基が存在する、請求項１〜４のいずれか一項に記載のクラウンエーテル。
【請求項６】
全てのＲ1およびＲ2が、オキソ基または式（ＩＩ）の基を形成しない範囲において水素である、請求項１〜５のいずれか一項に記載のクラウンエーテル。
【請求項７】
（ａ）一つの式（ＩＩ）の基および二つのオキソ基が存在し；または
（ｂ）二つの式（ＩＩ）の基および一つのオキソ基が存在し；または
（ｃ）三つの式（ＩＩ）の基が存在し、オキソ基は存在しない、
請求項１〜６のいずれか一項に記載のクラウンエーテル。
【請求項８】
（ａ）一つの式（ＩＩ）の基および二つのオキソ基が存在し、クラウンエーテルの環構造の一部である前記式（ＩＩ）の基の炭素原子が、オキソ基を有する炭素原子に直接結合し；または
（ｂ）二つの式（ＩＩ）の基が存在し、クラウンエーテルの環構造の一部である前記二つの式（ＩＩ）の基の二つの炭素原子が、互いに結合している、請求項１〜６のいずれか一項に記載のクラウンエーテル。
【請求項９】
Ｌが共有結合である、請求項１〜８のいずれか一項に記載のクラウンエーテル。
【請求項１０】
ＸおよびＹの両方がＯである、請求項１〜９のいずれか一項に記載のクラウンエーテル。
【請求項１１】
Ｒ3およびＲ4が、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、２，３−ジヒドロキシ−プロピル、およびＨ（ＯＣＨ2ＣＨ2）5−から独立して選択される、請求項１
〜１０のいずれか一項に記載のクラウンエーテル。
【請求項１２】
Ｒ3−Ｚおよび独立してＲ4−Ｚが、エチル−オキシ−カルボニル−、２，３−ジヒドロキシ−プロピル−オキシ−カルボニル−，およびＨ（ＯＣＨ2ＣＨ2）5−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）
−から選択される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のクラウンエーテル。
【請求項１３】
前記クラウンエーテルが、以下の式：
【化３】
0005848708.tif 000025
【化４】
0005848708.tif 000026
（式中、各々のＲは、独立して、水素；直鎖状または分枝状の、置換または非置換のＣ1
〜Ｃ10アルキル、アルケニルおよびアルキニル；１０個迄の原子で構成された環を有する置換または非置換のアリール；ならびにＨ（ＯＣＨ2ＣＨ2）k−（式中、ｋは１〜１０の
整数である）から選択され；置換基は、存在する場合、ＯＨおよびハロゲンから選択される。）のうちの一つを有する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のクラウンエーテル。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の一つ以上のクラウンエーテルと、医薬的または診断的活性薬剤とを含有する医薬または診断組成物であって、前記医薬的もしくは診断的活性薬剤が、一つ以上の第一級および／もしくは第二級プロトン化アミノ基ならびに／またはプロトン化グアニジニウム基を含み、ならびに／または前記医薬的もしくは診断的活性薬剤が、金属イオンもしくはアンモニウムイオンとの塩である、医薬または診断組成物。
【請求項１５】
経皮および／または粘膜貫通送達用に調合されている、請求項１４に記載の医薬または診断組成物。
【請求項１６】
前記活性薬剤が、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、小分子、単糖、多糖、核酸、およびＲＮＡｉ剤からなる群から選択される、請求項１４または１５に記載の医薬または診断組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（Ｉ）のクラウンエーテルに関する。
【化１】
0005848708.tif 000002
【０００２】
（式中、ｍは、４、５、６、７または８であり、各々のｉは、独立して、１または２であり；各々のＲ1およびＲ2は、水素；直鎖状もしくは分枝状の、置換もしくは非置換のＣ1
〜Ｃ10アルキル、アルケニルおよびアルキニル；ならびに１０個迄の原子で構成された環を有する置換もしくは非置換のアリールから独立して選択され；またはＲ1およびＲ2は、一緒になってオキソ基を形成し；クラウンエーテル内の少なくとも１つのＲ1、Ｒ2と、Ｒ1およびＲ2が結合しかつ式（Ｉ）のエーテル酸素に直接結合している炭素とは、一緒になって、式（ＩＩ）
【化２】
0005848708.tif 000003
【０００３】
の基を形成し、式中、Ｌは、存在しないか、または共有結合および（ＣＲ5Ｒ6）nから選
択されるリンカーであり、各々のＲ5およびＲ6は、水素；直鎖状または分枝状の、置換または非置換のＣ1〜Ｃ10アルキル、アルケニルおよびアルキニル；ならびに１０個迄の原
子で構成された環を有する置換または非置換のアリールから独立して選択され、ｎは、１、２または３であり；ＸおよびＹは、互いに独立してＯおよびＳから選択され；各々のＺは、独立して、存在しないか、または電子吸引基であり；各々のＲ3およびＲ4は、独立して、水素；直鎖状または分枝状の、置換または非置換のＣ1〜Ｃ10アルキル、アルケニル
およびアルキニル；１０個迄の原子で構成された環を有する置換または非置換のアリール；Ｈ（ＯＣＨ2ＣＨ2）k−およびＨ（ＯＣＨ2ＣＨ2）kＯ−から選択され、式中、ｋは、１〜１０迄の整数であり；置換基は、存在する場合、ＯＨ、Ｏ−ＣＨ3およびハロゲンから
選択される。）
【０００４】
本明細書において、特許出願および製造業者の取扱説明書を含む多数の文献が引用される。これらの文献の開示は、本発明の特許性に関連すると見なされないが、全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００５】
ペプチド性またはタンパク性を有する薬物が増大している。これらの薬物は、多くの場合、限られた有効期間を有し、および／またはそれらの投与は、侵襲的方法のみで達成することができる。静脈内投与は、続いて肝臓内での薬物の著しい分解を伴うことが多い。この分解は、肝臓の分解系を迂回する方法で薬物を送達できる場合、避けることができる。更に、非侵襲的投与は比較的煩雑ではなく、患者および医療従事者にとってより都合がよい。しかしながら、例えば経口、頬内、舌下、鼻腔内、経肺、経皮（dermal）または経
皮（transdermal）経路による非侵襲的投与は、多数の薬物、特にペプチドおよびタンパ
ク質にて除外され、これはそれらが帯電しているためである。帯電の存在は、細胞膜を、これらの薬物にとって打ち勝つことができないバリアにする。電荷を除去するための共有結合修飾は、ポリペプチド構造の誤った折り畳みを含む有害効果を有し得る。共有結合修飾の他の欠点は、前記修飾により得られる化合物が、認可されている薬物とは異なることである。
【０００６】
環状ポリエステル（ポリラクトン）は、陽イオンのイオノフォアとして文献にて公知である。例えば、ノナクチンおよびテトラナクチンは、金属イオンを配位するマクロテトロリド抗生物質である。他のタイプの環状ポリエステル（ポリグリコール酸エステルまたは乳酸エステル）が非経験分子軌道計算により研究されており、単位の数（環の大きさ）に応じて、幾分かの選択性を有して所定の陽イオンを収容することが見出されている（McGeary and Bruget (2000), Lifson et al. (1983), Lifson et al. (1984)）。
【０００７】
環状ポリエーテルまたはクラウンエーテルは、陽イオンと錯化することが文献にて公知である。例えば、１８−クラウン−６は、Ｎａ+、Ｋ+およびＮＨ4+を含む多数の陽イオンと錯化する環状ポリエーテルであることが公知である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
薬物、特にペプチド性またはタンパク性薬物、ｓｉＲＮＡｓ等の核酸である薬物、および陽イオンを含む薬物を修飾して、それらの製剤を向上させ、それに関連して、それらの投与特性を向上させる未だ満たされていない必要性が存在する。用語「投与特性」は、所定の製剤中の所定の活性薬剤の投与のための利用可能な投与経路を含むものと理解される。
【０００９】
本発明の根底に存在した技術的問題は、医薬的または診断的活性薬剤の製剤特性を変更するための手段および方法を提供することであった。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
従って、本発明は、式（Ｉ）のクラウンエーテルに関する。
【化３】
0005848708.tif 000004
【００１１】
（式中、
ｍは、４、５、６、７または８であり、各々のｉは、独立して、１または２であり；
各々のＲ1およびＲ2は、水素；直鎖状もしくは分枝状の、置換もしくは非置換のＣ1〜Ｃ10アルキル、アルケニルおよびアルキニル；ならびに１０個迄の原子で構成された環を有
する置換もしくは非置換のアリールから独立して選択され；またはＲ1およびＲ2は、一緒になってオキソ基を形成し；
クラウンエーテル内の少なくとも１つのＲ1、Ｒ2と、Ｒ1およびＲ2が結合しかつ式（Ｉ）のエーテル酸素に直接結合している炭素とは、一緒になって、式（ＩＩ）
【化４】
0005848708.tif 000005
【００１２】
の基を形成し、式中、
Ｌは、存在しないか、または共有結合および（ＣＲ5Ｒ6）nから選択されるリンカーであ
り、各々のＲ5およびＲ6は、水素；直鎖状または分枝状の、置換または非置換のＣ1〜Ｃ10アルキル、アルケニルおよびアルキニル；ならびに１０個迄の原子で構成された環を有
する置換または非置換のアリールから独立して選択され、ｎは、１、２または３であり；ＸおよびＹは、互いに独立してＯおよびＳから選択され；
Ｚは、独立して、存在しないか、または電子吸引基であり；
各々のＲ3およびＲ4は、独立して、水素；直鎖状または分枝状の、置換または非置換のＣ1〜Ｃ10アルキル、アルケニルおよびアルキニル；１０個迄の原子で構成された環を有す
る置換または非置換のアリール；Ｈ（ＯＣＨ2ＣＨ2）k−およびＨ（ＯＣＨ2ＣＨ2）kＯ−から選択され、式中、ｋは、１〜１０迄の整数であり；
置換基は、存在する場合、ＯＨ、Ｏ−ＣＨ3およびハロゲンから選択される。ハロゲンは
、Ｆ、ＣｌおよびＢｒであることが好ましい。）
【００１３】
式（Ｉ）内の矩形線は、角括弧内の最初の部分に存在する酸素原子を、角括弧内の最後の部分に存在する炭素原子と接続する、一つの共有単結合を表す。
【００１４】
角括弧内の構成単位は、ｍ回反復される。ｍの好ましい値は、６である。更なる好ましい値は、５および７である。各構成単位は、ｉの値に応じて、クラウンエーテル環を形成する二個または三個の炭素原子を含み、ここでｉ＝１、即ち、各構成単位の二個の炭素原子がクラウンエーテル環に寄与することが好ましい。用語「クラウンエーテル環」、「クラウンエーテル大員環」および「前記クラウンエーテルの環構造」は、式（Ｉ）に示す全部の酸素および炭素により形成される環または大員環を指す。ｍが６であり、ｉが１である好ましい実施形態の場合、この環または大員環は、１８−クラウン−６の環または大員環であり、即ち環または大員環は６個の酸素および１２個の炭素を含み、１８員の大員環を生じさせる。
【００１５】
オルトエステル官能基に加えて、クラウンエーテルは、上記に定義したＲ1およびＲ2によって更に修飾され得る。Ｒ1およびＲ2の定義において、分枝状アルキル、アルケニルおよびアルキニル基よりも、線状アルキル、アルケニルおよびアルキニル基が好ましい。更に、非置換の基Ｒ1およびＲ2が好ましい。用語「置換」は置換基の存在を指し、前記置換基はＯＨおよびハロゲンから選択される。アルキル、アルケニルおよびアルキニルでは、アルキルが好ましい。アルキル、アルケニルおよびアルキニルの好ましい鎖長は、Ｃ1〜
Ｃ6、より好ましくはＣ1〜Ｃ4である。アリールは、５または６員環が好ましい。好まし
いアリール基は、フェニルを含む。
【００１６】
各々のＲ1およびＲ2は、式（ＩＩ）の基を形成しない限り、水素である実施形態が好ましい。更なる好ましい実施形態では、Ｒ1およびＲ2の各々は、式（ＩＩ）の基を形成せず、かつオキソ基でない限り、水素である。
【００１７】
式（Ｉ）のクラウンエーテルにおいて、式（Ｉ）のエーテル酸素に直接結合している少なくとも一つの炭素原子は、式（ＩＩ）に要求されるように修飾される。その結果、クラ
ウンエーテルは、少なくとも一つのオルトエステルまたはそのチオ類似体を含む。チオ類似体では、ＸおよびＹの一方または両方がＳである。以下に使用されるように、用語「オルトエステル」は、前記チオ類似体を包含する。オルトエステルは、エーテル酸素に隣接してカルボニル基を有するクラウンエーテル−そのようなクラウンエーテルは、エステル基を含む−の一つの等価物と、アルコールまたはチオールの二つの等価物との誘導体として理解し得る。式（ＩＩ）に示される、二つの自由原子価を有する炭素原子は、クラウンエーテル環の一部であることが理解される。
【００１８】
リンカーＬが存在する場合、オルトエステルは環状である。環は、ＸおよびＹを含む。環状オルトエステルは、エステル基を含むクラウンエーテルの誘導体と考えることができ、前記誘導体は、エステル基を含む前記クラウンエーテルをジオール（即ちグリコール）またはジチオール等のチオ誘導体で処理することにより得ることができる。一つのヒドロキシおよび一つのチオール基を有するアルコールも想定され、用語「ジオールのチオ類似体」に含められる。エチレングリコールまたはプロピレングリコール等のビシナルジオールまたはそのチオ類似体の場合、得られる環状オルトエステルのＬは、共有結合である。Ｎ、Ｎ＋２ジオール（ＮおよびＮ＋２は、ヒドロキシ基を有する炭素原子の数）またはそのチオ類似体の場合（Ｎ＋２は、前記ジオールまたはそのチオ類似体内の炭素原子の数を超えない）、得られる環状オルトエステルのＬは、メチレン基またはＣＲ5Ｒ6であり、Ｒ5およびＲ6は、上記に定義されており、更に以下に詳細される。同様に、Ｎ、Ｎ＋３ジオールまたはそのチオ類似体の場合（Ｎ＋３は、前記ジオールまたはそのチオ類似体内の炭素原子の数を超えない）、得られる環状オルトエステルのＬは、ＣＨ2ＣＨ2またはＣＲ5
Ｒ6ＣＲ5Ｒ6であり、Ｒ5およびＲ6は上記に定義されている。前記チオールまたはそのチ
オ類似体は、更なる官能基を含んでもよい。Ｒ5およびＲ6の定義において、分枝状アルキル、アルケニルおよびアルキニル基よりも線状アルキル、アルケニルおよびアルキニル基が好ましい。更に、非置換の基Ｒ5およびＲ6が好ましい。用語「置換」は置換基の存在を指し、前記置換基はＯＨおよびハロゲンから選択される。アルキル、アルケニルおよびアルキニルでは、アルキルが好ましい。アルキル、アルケニルおよびアルキニルの好ましい鎖長は、Ｃ1〜Ｃ6、より好ましくはＣ1〜Ｃ4である。アリールは、５または６員環が好ましい。好ましいアリール基は、フェニルを含む。上記に示したように、更に、各々のＲ5
およびＲ6が水素である実施形態が好ましい。
【００１９】
更なる官能基を含む好ましいビシナルジオールは、酒石酸である；例えば、式（ＩＩＩ）〜（ＶＩ）、（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）を参照されたい。下記の特に好ましい構造に示すように、オルトエステルの酒石酸部分のカルボキシル基は、アルコール、例えばグリセロールまたはエタノールでエステル化され得る；例えば式（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）を参照されたい。この場合、電子吸引基Ｚは、エステル基である。グリセロールの遊離ヒドロキシル基は、所望により、更なる誘導体化に利用可能である。そのような更なる誘導体化としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等のポリマーもしくはオリゴマーの結合、または脂肪酸とのエステル化を挙げることができ、前記脂肪酸は、飽和または不飽和のＣ4〜Ｃ20アルカン酸が好ましい。そのような更なる誘導体化は、生体適合性、および
／または膜、粘膜を横切る送達、細胞もしくは生命体内での標的部位への送達、を向上させまたは変更するのに有用であり得る。
【００２０】
更なる官能基を含む更なる好ましいビシナルジオールは、２，３−ジヒドロキシ−プロパン酸である；例えば、式（ＸＩ）を参照されたい。２，３−ジヒドロキシ−プロパン酸のカルボキシル基は、更に誘導体化、例えばエステル化されてもよい；例えば、式（ＸＩ）のＲの選択肢を参照されたい。
【００２１】
Ｌが存在しない場合、ＸおよびＹは環の一部を形成しない。その場合、各々がＸまたはＹに結合し、かつＺ（またはＺが存在しない場合Ｒ3および／もしくはＲ4）を有する炭素
原子の自由原子価は、水素で飽和される。Ｌが存在しない場合、オルトエステルは、エステル基と、アルコールまたはチオールまたはそれらの混合物とを含むクラウンエーテルの誘導体と考えることができる。非環式オルトエステルを含む本発明の好ましいクラウンエーテルは、式（ＶＩＩ）および（Ｘ）のクラウンエーテルである。式（Ｘ）の化合物の一例を、下記の式（ＸＩＩ）に示す。
【００２２】
Ｚは、電子吸引基であり、一方または両方において存在しなくてもよい。Ｚが存在しない場合、Ｒ3および／またはＲ4が炭素原子に直接結合し、該炭素原子の各々は次にＸまたはＹに直接結合する。式（ＩＩ）の一つの基内に一つまたは二つのＺが存在することが好ましい。
【００２３】
Ｒ3およびＲ4の定義において、分枝状アルキル、アルケニルおよびアルキニル基よりも、線状アルキル、アルケニルおよびアルキニル基が好ましい。更に、非置換の基Ｒ3およ
びＲ4が好ましい。用語「置換」は置換基の存在を指し、前記置換基はＯＨおよびハロゲ
ンから選択される。アルキル、アルケニルおよびアルキニルでは、アルキルが好ましい。アルキル、アルケニルおよびアルキニルの好ましい鎖長は、Ｃ1〜Ｃ6、より好ましくはＣ1〜Ｃ4である。アリールは、５または６員環が好ましい。好ましいアリール基は、フェニルを含む。Ｈ（ＯＣＨ2ＣＨ2）k−およびＨ（ＯＣＨ2ＣＨ2）kＯ−に関しては、以下のｋの値が好ましい：１、２、３、４および５。特に好ましいｋの値は、３および５である。
【００２４】
好ましい実施形態において、各々のＲ3およびＲ4は、独立して、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピルおよび（Ｈ（ＯＣＨ2ＣＨ2）5−）から選択される。Ｒ3および／またはＲ4は、エチルが特に好ましい。
【００２５】
Ｚが存在する場合、Ｈ（ＯＣＨ2ＣＨ2）k−は、Ｈ（ＯＣＨ2ＣＨ2）k−およびＨ（ＯＣＨ2ＣＨ2）kＯ−の好ましい選択肢である。本発明のクラウンエーテルは、過酸化物基を
含まないことが理解される。Ｚが存在しない場合、Ｈ（ＯＣＨ2ＣＨ2）kＯ−が、Ｈ（Ｏ
ＣＨ2ＣＨ2）k−およびＨ（ＯＣＨ2ＣＨ2）kＯ−の好ましい選択肢である。
【００２６】
式（Ｉ）のクラウンエーテルは、エーテル官能基と少なくとも一つのオルトエステル官能基とを有する。酸素の孤立電子対は、リガンドと共に錯体を形成するのに利用することができる。想定されるリガンドを、更に以下に詳細する。錯化に特に関与するのは、すぐ近くに電子吸引基（カルボニル基のような）を有さないエーテル酸素である。この点で、本発明の環状化合物は、先行技術によるクラウンエーテル（上記参照）と類似している。特にエーテル基が酸素のみ含む官能基である、先行技術によるクラウンエーテルは、錯化に好適であるが、生分解性ではなく、または十分な程度に生分解性ではない欠点を有する。
【００２７】
オルトエステル官能基に関して、本発明らは、オルトエステルが生命体内での加水分解を受け入れ、従って生分解性であることに注目する。オルトエステルの排除（「クリアランス」とも称される）は、一つまたは二つの電子吸引基（「Ｚ」と指定）の存在により更に促進される。特に好ましいＺ基はエステルであり、該エステルは、加水分解されて、生理学的ｐＨにて負に帯電された基を提供し、それ故、オルトエステルのより急速な排除を可能にする。更に説明すると、二つのエステル基（エステル基のカルボニル基は、式（ＩＩ）に示す環状構造に直接結合している）が負に帯電した二つのカルボキシレートを生成することにより、排除を更に促進する。また本発明によるクラウンエーテルの分解は、上記に定義した一つ以上のオキソ基の存在により更に促進され得る。
【００２８】
そのようなものとして、本発明によるクラウンエーテルは、一つ以上のオルトエステル官能基により付与される、錯化能力と生分解性との間の有利な妥協を提供する。
【００２９】
従って、本発明による化合物は、生分解性および生体適合性である。用語「生分解性」は、生物内で分解可能な物質を指す。用語「生体適合性」は、好ましくはそれらの無傷形態でもまたは分解された場合でも、ヒトまたは動物の身体に有害な反応を生じさせない実体を意味する。用語「生体適合性」は、「一般に安全と認められる（ＧＲＡＳ）」と等価である。生体適合性を評価するための手段は当技術分野にて周知であり、該手段には、細胞株で行われるインビトロ試験、動物でのインビボ試験、および人間での臨床試験が挙げられ、これらは本明細書では更に詳細に記載する必要はない。化合物が一般に安全と認められる（ＧＲＡＳ）か否かを評価する、規制当局により要求または推奨される任意の試験を用いることが好ましい。
【００３０】
生分解性は、例えば本発明のクラウンエーテルの血漿中での半減期を用いて定量的に表すことができる。血漿中での半減期を測定する手段および方法は、当技術分野にて公知である。例えば、クラウンエーテルを、血漿プールからの血漿と混合し、続いて撹拌しながら３７℃でインキュベートする。所定の時点でアリコートを取り除き、ＨＰＬＣにより分析する。
【００３１】
用語「半減期」は、式（Ｉ）の環構造を開放するのに必要な時間を指す。典型的には、血漿中でまたは生理学的条件下で、以下の一連の反応が起きる。最初に、存在する場合、エステル基等の加水分解可能な基Ｚが加水分解される。エステル基のカルボニル基が式（ＩＩ）の環状構造に直接結合している場合、加水分解は、オルトエステルに結合したカルボキシレートを生成する。続いて、カルボキシレートにより促進されて、オルトエステルが排除される。その結果、式（Ｉ）の環構造が開放する。Ｚが全く存在しない場合、オルトエステル排除は、概して最初に起こる反応であろう（その場合、電子吸引基による促進なしで）。いずれの場合でも、環の開放は、血漿中または生理学的条件下での半減期を決定する際に測定される事象である。従って、生分解性は、生物学的環境内、より詳細には、血漿中または生理学的条件下で環が開放する能力を指す。生理学的条件の例は、下記に提供される。
【００３２】
環が開放した後、更なる分解をもたらす更なる反応が続くであろう。二つ以上のオルトエステルが存在し、かつ全部のオルトエステルが同一の構造を有する場合、最初のオルトエステルの排除の直後に、残りのオルトエステルの排除が続くと予期される。オルトエステルが異なる構造を有する場合、より安定なオルトエステル、例えば基Ｚが一つのみ存在しまたは存在しないオルトエステルの排除は、平均して遅延して起こるであろう。オルトエステルが一つのみ存在する場合、更なる分解は、上記に定義した一つ以上のオキソ基の存在により促進され得る。好ましい実施形態によれば、オキソ基を有する炭素原子は、クラウンエーテルの環構造のエーテル酸素に直接隣接するため、エーテル基を生じさせる。それらのエステル基は、血漿中および生理学的条件下で加水分解可能である。
【００３３】
好ましい実施形態では、本発明のクラウンエーテルの血漿中での半減期は、２４時間よりも短く、より好ましくは１２時間、６時間、３時間、２時間、１時間、３０分間、２０分間、１０分間または５分間よりも短い。用語「生分解性」は、前記クラウンエーテルの分解を指し、分解は、前記クラウンエーテルのオルトエステル基の少なくとも一つの切断もしくは加水分解からなり、または該切断もしくは加水分解を含むことが理解される。
【００３４】
用語「錯体」および「錯化」は当技術分野にて公知であり、非共有化学結合を介した分子、原子またはイオンの可逆的会合を指す。通常、複数の官能基を有する錯化剤と、前記複数の官能基により結合される小分子、原子またはイオンとの二つの相互作用パートナーが暗示される。本明細書で使用される用語、錯体は、錯化剤に結合した金属イオンに制限されない。錯体は、一般に、本発明の化合物と、リガンドとも称される陽イオンまたは陽
イオン性基との錯体に関する。本発明のクラウンエーテルは、酸素が錯体形成に利用できる酸素含有官能基を提供する。
【００３５】
以下、本発明によるクラウンエーテルは、時々、本発明の「化合物」または本発明の「環状化合物」と称される。更に、以下の少なくとも一つを改善できるクラウンエーテルが好ましいことが理解される：（ａ）膜貫通および／または経粘膜送達；（ｂ）非水性溶媒中の溶解度；および（ｃ）更に下記に定義される薬剤の安定性。また、本発明の化合物の任意の記載またはグラフ表示は、それらの化合物を、原子価および安定性が可能な範囲まで指すことが理解される。
【００３６】
用語「膜貫通送達」は、前記活性薬剤が細胞膜を横断する能力に関する。細胞膜は膜脂質の親油性部分から形成される疎水性層を含むため、帯電した分子は容易に膜を横断することができない。その結果、膜を横切る送達は、ごく少量または０である。膜貫通送達の改善は、例えば、経皮送達および経上皮送達の改善も伴うことが理解される。
【００３７】
用語「経粘膜送達」は、前記活性薬剤が粘膜を交差する能力に関する。口、胃、腸、鼻および肺の粘膜を含む任意の粘膜が予想される。いずれの粘膜も細胞膜を含むため、上記の細胞膜に関連した考察は、粘膜にも適用される。
【００３８】
用語「改善された溶解度」は、前記非水性溶媒中の溶解度の任意の増大を指す。溶解度の増大は、１．２倍；１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、１００倍または１０００倍が好ましい。溶解度の３桁の増大も故意に予想される。
【００３９】
本明細書で使用される用語「非水性溶媒」は、水性ではない溶媒に関する。用語「非水性溶媒」は、無水溶媒を含むが、それらに制限されない。換言すれば、非水性溶媒は、微量の水を含んでもよい。好ましくは、水の量は、５容積％未満、２％容積％未満、１％容積％、より好ましくは０．５容積％未満、０．１容積％未満、０．０１容積％未満または０．００１容積％未満である。この用語は、有機溶媒、特に非極性有機溶媒、水よりも小さい双極子モーメントを有する有機溶媒、および疎水性、即ち水と殆どまたは全く混和性ではない溶媒である有機溶媒を含む。用語「有機溶媒」は、当技術分野にて公知であり、一つ以上の物質を溶解しまたは分散させることが可能な、化学産業にて通常使用されている炭素ベースの物質に関する。一般的に言えば、有機溶媒は、水よりも脂溶性または疎水性である。その結果、それらのｌｏｇＰ値は、概して０よりも大きい。本発明による有機溶媒は、パラフィン系、脂肪族および芳香族炭化水素のような非置換炭化水素溶媒、ならびに酸素（例えば、アルコール、ケトン、グリコールエステル）、ハロゲン（例えば、四塩化炭素）、窒素（例えば、ＤＭＦ、ジメチルホルムアミドおよびアセトニトリル）または硫黄（例えば、ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド）のようなヘテロ原子を含むそれらの誘導体を指す。通常使用されている有機溶媒は、メタノール、エタノール、プロピレングリコール（propyleneglycole）（ＰＧ）、グリセロール、Ｃ3〜Ｃ10のアルコール、アセ
トニトリル、ブタノン、１，１，１−トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、ヘキサフルオロイソプロパノール（ＨＦＩＰ）、酢酸エチル、四塩化炭素、ブタノール、ジブチルエーテル、ジエチルエーテル、シクロヘキサン、塩化メチレン（ジクロロメタン）、ヘキサン、酢酸ブチル、ジ−イソプロピルエーテル、ベンゼン、ジペンチルエーテル、クロロホルム、ヘプタン、テトラクロロエチレン、トルエン、ヘキサデカン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）およびジオキサンである。
【００４０】
本発明による好ましい非水性溶媒には、医薬もしくは診断組成物の構成成分として使用され得る溶媒、ならびに／または前記医薬もしくは診断組成物の製造および調製の過程で使用され得る溶媒が挙げられる。換言すれば、そのような溶媒の医学的使用は認可されて
おり、および／またはそれらの使用は、処置される個人の健康を脅かすものではない。故意に予想される特定の非水性溶媒は、上述した有機溶媒を含む。用語「非水性溶媒」には、飽和または不飽和であってもよいオリーブ油および脂肪酸を含む油等の天然製品も含まれる。別の好ましい非水性溶媒は、例えば非限定的に−クレモフォアＥＬおよびアシルグリセロール、特にＣ6〜Ｃ24−アシルグリセロールまたはＣ6〜Ｃ20−アシルグリセロール等のＦＤＡ認可の疎水性ビヒクルまたは希釈剤である。本発明によれば、アシルグリセロールは、飽和および不飽和であってもよい。Ｃ8〜Ｃ10−モノ−アシルグリセロールおよ
びＣ21〜Ｃ24不飽和モノアシルグリセロールが特に興味深い。
【００４１】
用語「安定性」は、純粋な形態の活性薬剤、または活性薬剤を含む製剤の有効期間を含む。そのようなものとして、用語「安定性」は、活性薬剤の固体形態（純粋な錯体または固体医薬または診断組成物）および液体／溶液形態（液体製剤を含む）の両方における安定性に関する。安定性は更に、熱安定性と、酵素分解に対する安定性とを含む。用語「安定性」は、生物学的、医薬および／または診断活性の維持管理を含む。用語「安定性」は、本明細書にて下記に記載される機能性食品または栄養補助食品の構成成分の安定性も指す。前記活性薬剤の安定性の改善は、膜貫通または経粘膜送達の改善による明白な結果または外挿ではないことを理解するべきである。事実、安定性の改善のためには、本発明の環状化合物による、活性薬剤の分子の間の相互作用の変更が、活性成分と膜内または粘膜内の環境との相互作用の変更に対立するものとして関係する。このことは、例えばＲＮＡｉ剤等の核酸を含む、容易に分解可能な活性分子に特に有利である。
【００４２】
本発明によるクラウンエーテルは、活性薬剤（更に以下に詳細する）とのそれらの相互作用（錯体形成）が一過性であるという更なる利点を有する。本明細書で使用される用語「一過性」は、生理学的条件下での可逆性を指す。環状化合物は、細胞膜、粘膜および／または皮膚を通過した後、例えばアンモニウムイオンまたは第一級もしくは第二級アミド等の競合リガンドの存在の結果として活性薬剤から分離し、および／または分解される。
【００４３】
好ましい実施形態において、クラウンエーテル内の少なくとも一つのＲ1およびＲ2は、一緒になってオキソ基を形成する。
【００４４】
（ｉ）二つ以上のオキソ基が存在する場合、酸無水物は存在しない、また（ｉｉ）式（ＩＩ）の基を含むオルトエステルの加水分解後、無水物が形成されることに注目すると、オキソ基および式（ＩＩ）の基は、同一のエーテル酸素に隣接する二つの位置に存在しないことが理解される。
【００４５】
更なる好ましい実施形態において、前記クラウンエーテルの環構造は、１８−クラウン−６、１２−クラウン−４、１３−クラウン−４、１４−クラウン−４、１５−クラウン−５、１６−クラウン−５、１７−クラウン−５、２０−クラウン−６、２１−クラウン−７または２４−クラウン−８により提供される。１８−クラウン−６が特に好ましい。
【００４６】
更なる好ましい実施形態では、一つまたは二つのオキソ基が存在する。
オキソ基を有する炭素原子が前記クラウンエーテルの環構造のエーテル酸素原子に直接隣接することによって、エステル基を生じさせることが好ましい。
【００４７】
更なる好ましい実施形態では、環内のエーテル酸素原子の数は偶数であり、一つ置きのエーテル酸素原子に隣接して一つのオキソ基が存在する。
【００４８】
更なる好ましい実施形態では、（ａ）一つの式（ＩＩ）の基および二つのオキソ基が存在し；または（ｂ）二つの式（ＩＩ）の基および一つのオキソ基が存在し；または（ｃ）三つの式（ＩＩ）の基が存在し、オキソ基は存在しない。特に好ましい実施形態では、前
記クラウンエーテルの環構造は、１８−クラウン−６と、一つ置きの構成単位上に位置する選択肢（ａ）〜（ｃ）のいずれかによる三つの基とにより提供され、前記構成単位は、上記の式（Ｉ）の角括弧内の基である。選択肢（ａ）〜（ｃ）のいずれかによる三つの基は、３回対称性が存在するように位置することが、より好ましい。３回対称性の例を下記に示す。
【００４９】
【化５】
0005848708.tif 000006
【００５０】
上述した実施形態によれば、表示したオキソ基の一つ、または二つ、または三つは、式（ＩＩ）の基で置き換えられる。
【００５１】
代替的な好ましい実施形態では、（ａ）一つの式（ＩＩ）の基および一つのオキソ基が存在し、クラウンエーテルの環構造の一部である前記式（ＩＩ）の基の炭素原子が、オキソ基を有する炭素原子に直接結合し；または（ｂ）二つの式（ＩＩ）の基が存在し、クラウンエーテルの環構造の一部である前記式（ＩＩ）の基の二つの炭素原子が、互いに直接結合している。
【００５２】
この実施形態は、クラウンエーテルがシュウ酸部分を含むように見え得る実施形態を含み、前記シュウ酸部分の両方のカルボキシル基は、クラウンエーテル環内のエステル結合に含まれ、また更に、前記エステル結合の一つまたは二つがオルトエステルに修飾されている。このタイプの特に好ましいクラウンエーテルは、式（Ｖ）〜（ＶＩＩ）のクラウンエーテルである。
【００５３】
更なる好ましい実施形態では、Ｌは、共有結合である。
更なる好ましい実施形態では、ＸおよびＹの両方がＯである。
【００５４】
好ましい実施形態では、Ｚは、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−および−Ｃ（＝Ｏ）−から選択される。特に好ましくは、Ｒ3Ｚおよび／またはＲ4Ｚは、Ｒ3−Ｏ−Ｃ
（＝Ｏ）−および／またはＲ4−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−である。
【００５５】
更なる好ましい実施形態では、Ｒ3およびＲ4は、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、２，３−ジヒドロキシ−プロピル、およびＨ（ＯＣＨ2ＣＨ2）5−から
独立して選択される。より好ましい実施形態では、Ｒ3およびＲ4は、同一であるよう選択される。
【００５６】
更なる好ましい実施形態では、Ｒ3−Ｚおよび独立してＲ4−Ｚは、エチル−オキシ−カルボニル、２，３−ジヒドロキシ−プロピル−オキシ−カルボニル、およびＨ（ＯＣＨ2
ＣＨ2）5−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−から選択される。Ｒ3−ＺおよびＲ4−Ｚは、同一であることが好ましい。特に好ましくは、Ｒ3−Ｚおよび／またはＲ4−Ｚはエチル−オキシ−カルボニルである。
【００５７】
特に好ましい本発明のクラウンエーテルを、下記に示す。
【００５８】
【化６】
0005848708.tif 000007
【化７】
0005848708.tif 000008
【化８】
0005848708.tif 000009
【００５９】
（式中、各々のＲは、独立して、水素；直鎖状または分枝状の、置換または非置換のＣ1
〜Ｃ10アルキル、アルケニルおよびアルキニル；１０個迄の原子で構成された環を有する置換または非置換のアリール；ならびにＨ（ＯＣＨ2ＣＨ2）k−（式中、ｋは１〜１０の
整数である）から選択され；置換基は、存在する場合、ＯＨおよびハロゲンから選択される。）
【００６０】
好ましい実施形態では、各々のＲは、独立して、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピルおよび（Ｈ（ＯＣＨ2ＣＨ2）5−）から選択される。特に好ましくは、Ｒ
はエチルである。
【００６１】
更に、二つ以上のＲが存在する実施形態では、全部のＲの存在が、同一であるよう選択されることが好ましい。
【００６２】
式（ＶＩＩ）の場合、特に好ましい基Ｒは、エチルである。
本発明はまた、本発明に定義される一種以上のクラウンエーテルを含有する組成物に関する。
【００６３】
本発明によるクラウンエーテルを含有する好ましい組成物（組成物に関する更なる詳細については、以下を参照されたい）は、弱酸性であり、好ましくは約３〜５、より好ましくは約３．５〜４の範囲内のｐＨを有する。
【００６４】
更に下記に述べるように、本発明による一種以上のクラウンエーテルと、更に下記に定義される医薬的または診断的活性薬剤とを含有する医薬または診断組成物も提供する。それらの活性薬剤の好ましい例は、ペプチドである。可溶性ではなく、および／または６．５０未満の酸ｐＨ下で安定ではないペプチドの場合、好ましい組成物は非イオン性である。そのような非イオン性組成物は、上記に定義した一種以上のペプチドに加えて、モノアシルグリセロール、中性有機溶媒（即ち、酸ではなく、かつ塩基性ではない）および場合により非イオン性界面活性剤を含有し、またはそれらからなることが好ましい。
【００６５】
それらの組成物は、更に脂質を含有することが好ましい。脂質分子が一つ以上の脂肪酸部分を含む脂質が特に興味深い。そのような脂質の例は、トリアシルグリセロール、ジアシルグリセロール、モノアシルグリセロールおよびリン脂質である。好ましい脂肪酸は、飽和または不飽和の、分枝状または線状であってもよい脂肪族カルボン酸等の透過性向上（permeability-enhancing）脂肪酸である。二つ以上の脂肪酸部分を含む脂質分子内に、互いに異なる脂肪酸部分が存在することも予想される。更に、上記に定義した組成物の構成成分として、異なる脂質の混合物も予想される。特に興味深い脂肪酸の例としては、好ましくはカプリル酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ウンデカン酸、ドデカン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、およびアラキジン（arachidic）酸から選択
される、７〜１９個の炭素原子を有する飽和脂肪酸が挙げられる。不飽和脂肪酸の例としては、好ましくはパルミトレイン酸、オレイン酸、リノール酸、およびα−リノール酸から選択される、７〜１９個の炭素原子を有するものが挙げられる。
【００６６】
更なる好ましい脂質は、ヒマシ油（クレモフォアＥＬ）、ｄ−α−トコフェロール（ビタミンＥ）、βカロテンおよびビタミンＡである。
【００６７】
好ましい製剤は、非水性疎水性ビヒクルが、少なくとも一種のアシルグリセロール、少なくとも一種の脂質、および場合により、水溶性有機溶媒のような少なくとも一種の有機溶媒を含む製剤である。別の好ましい製剤は、非水性疎水性ビヒクルが、少なくとも一種のアシルグリセロール、少なくとも一種の水溶性有機溶媒、場合により非イオン性界面活性剤、および場合により一種の脂質を含む製剤である。
【００６８】
更なる好ましい実施形態において、本発明による活性製剤、好ましくはペプチドは、本発明の一種以上のクラウンエーテルのみを用いて処方され得る。換言すれば、一種以上の活性薬剤、好ましくは一種以上のペプチド、および本発明の一種以上のクラウンエーテルからなることが好ましい医薬および診断組成物が提供される。そのような実施形態では、クラウンエーテルはビヒクルとしても機能し得る。
【００６９】
非イオン性界面活性剤の例としては、ポリオキシル３５、ポリオキシル４０水素化ヒマシ油（クレモフォアＲＨ４０）、およびポリオキシル６０水素化ヒマシ油（クレモフォアＲＨ６０）、およびｄ−α−トコフェロール、ポリエチレングリコール１０００スクシネート、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ソルビタン−モノラウレート（Ｓｐａｎ２０）、ソルビタンモノパルミテート（Ｓｐａｎ４０）；ソルビタンモノステアレート（Ｓｐａｎ６０）；ソルビタン−モノオレエート（Ｓｐａｎ８０）、Ｓｏｌｕｔｏｌ  Ｈ
Ｓ１５、ソルビタン−モノオレエート、ポロキサマー４０７、Ｌａｂｒａｆｉｌ  Ｍ−１９４４ＣＳ、Ｌａｂｒａｆｉｌ  Ｍ−２１２５ＣＳ、Ｌａｂｒａｓｏｌ、Ｇｅｌｌｕｃｉｒｅ  ４４／１が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７０】
更なる好ましい製剤は、脂質が脂肪酸である製剤である。好ましい脂肪酸は、上記に挙げられている。そのような条件下では、オルトエステル内の一つまたは二つの電子吸引基Ｚの存在は、本発明のクラウンエーテルに対して安定化効果を有する。好ましい組成物は、更に以下に詳細するような医薬または診断組成物である。
【００７１】
生理学的条件を含む、ｐＨがほぼ中性である条件下で、本発明によるクラウンエーテルは、より不安定である。一般的に言えば、オルトエステルは塩基性ｐＨでより安定であり、安定性は、中性ｐＨに向かって低下する。一つ以上のＺ基が存在する場合、Ｚ基はカルボニル基が式（ＩＩ）の環状構造に直接結合するエステルであり、エステルは中性ｐＨおよび生理学的条件下で切断され、それによりＺ基を有するオルトエステルの排除を誘発するであろう。本発明の一つ以上のクラウンエーテルと錯化した医薬的または診断的活性薬剤の送達後、前記クラウンエーテルは概してもはや必要なく、それらは分解することが好ましいことに注目すると、生理学的条件下での本発明のクラウンエーテルの不安定性は望ましい。
【００７２】
本発明による生理学的条件は、例えば細胞内部を細胞外空間と比較した場合、相当様々なであり得る。例示的な細胞内条件は、１４ｍＭ  Ｎａ+、１４０ｍＭ  Ｋ+、１０-7ｍＭ
Ｃａ2+、２０ｍＭ  Ｍｇ2+、４ｍＭ  Ｃｌ-、１０ｍＭ  ＨＣＯ3-、１１ｍＭ  ＨＰＯ42-およびＨ2ＰＯ4-、１ｍＭ  ＳＯ42-、４５ｍＭクレアチンリン酸、１４ｍＭカルノシン、８ｍＭアミノ酸、９ｍＭクレアチン、１．５ｍＭラクテート、５ｍＭ  ＡＴＰ、３．７ｍＭヘキソース一リン酸、４ｍＭタンパク質および４ｍＭ尿素を含む。例示的な間質内条件は、１４０ｍＭ  Ｎａ+、４ｍＭ  Ｋ+、１．２ｍＭ  Ｃａ2+、０．７ｍＭ  Ｍｇ2+、１０８ｍＭ  Ｃｌ-、２８．３ｍＭ  ＨＣＯ3-、２ｍＭ  ＨＰＯ42-およびＨ2ＰＯ4-、０．
５ｍＭ  ＳＯ42-、２ｍＭアミノ酸、０．２ｍＭクレアチン、１．２ｍＭラクテート、５
．６ｍＭブドウ糖、０．２ｍＭタンパク質および４ｍＭ尿素を含む。
【００７３】
本発明は更に、本発明による一種以上のクラウンエーテルと、医薬的または診断的活性薬剤とを含有する医薬または診断組成物を提供し、前記医薬的もしくは診断的活性薬剤は、一つ以上の第一級および／もしくは第二級プロトン化アミノ基および／もしくはプロトン化グアニジニウム基を含み、ならびに／または前記医薬的もしくは診断的活性薬剤は、金属イオンもしくはアンモニウムイオン（ＮＨ4+）との塩である。用語「医薬的活性薬剤」は、医薬効果を引き出すことができる任意の薬剤を指す。用語「薬物」は、本明細書で等価に使用される。本発明による医薬組成物は、一種以上の医薬的活性薬剤を含有する。本発明による医薬組成物はまた、本発明による二つ以上のクラウンエーテルも含有し得る。
【００７４】
本発明による医薬および診断組成物の更なる好ましい特徴および構成成分は、本発明による組成物に関連して上記に記載されている。特に、弱酸性組成物、好ましくは約３〜５、より好ましくは約３．５〜４の範囲内のｐＨを有する。
【００７５】
前記組成物において、本発明による一種以上のクラウンエーテルによって（ａ）膜貫通および／もしくは経粘膜送達；（ｂ）非水性溶媒中の可溶性；ならびに／または（ｃ）前記薬剤の安定性が改善されている。従って、好ましい実施形態によれば、前記組成物は経皮および／または経粘膜送達用に調合されていると予想される。用語「処方」は、医薬または診断組成物を調製または調合することに関する。
【００７６】
本発明は更に、医薬的または診断的活性薬剤の調製における本発明によるクラウンエーテルの使用に関し、前記活性薬剤は、一つ以上のプロトン化第一級および／もしくはプロトン化第二級アミノ基および／もしくはプロトン化グアニジニウム基を含み、ならびに／または、前記医薬的もしくは診断的活性薬剤は、金属イオンもしくはアンモニウムイオンとの塩である。
【００７７】
本発明によるクラウンエーテルを医薬的または診断的活性薬剤と接触させる工程を含む、医薬または診断組成物の調製方法も提供し、前記薬剤は、一つ以上の第一級および／もしくは第二級プロトン化アミノ基および／もしくはプロトン化グアニジニウム基を含み、ならびに／または金属イオンもしくはアンモニウムイオンとの塩である。
【００７８】
本発明による「接触させる」は、一つ以上の第一級および／もしくは第二級プロトン化アミノ基ならびに／またはプロトン化グアニジニウム基と前記クラウンエーテルとの錯体の形成に好適な条件下で達成されるべきである。
【００７９】
錯体形成に好適な条件は、前記医薬的または診断的活性薬剤の溶液と、水と一種以上の有機溶媒との混合物（例えば、水、アセトニトリルおよびアルコールの混合物）中の前記クラウンエーテルの溶液とを含み、有機溶媒は、１〜１０容積％の水または有機溶媒を含む。好ましい有機溶媒は、メタノールまたはエタノール等の極性および／またはプロトン性溶媒である。代替的に、ジクロロメタン等の非極性および非プロトン性溶媒を使用してもよい。本発明の方法の好ましい実施形態では、前記接触は、前記医薬的または診断的活性薬剤溶液中、または、極性および／またはプロトン性溶媒中の前記クラウンエーテル溶液中で起こる。更なる好ましい実施形態では、前記極性および／またはプロトン性溶媒は続いて例えば蒸発によって除去される。より好ましい実施形態では、蒸発により得られた錯体を非極性溶媒または疎水性混合物中に取り上げ、前記混合物は、好ましくは脂質混合物である。脂質混合物は、異なる脂質を含んでもよい。更に上記に述べたように、用語「脂質」は、脂肪酸を含むが、これに限定されない。好ましい脂肪酸は、脂肪族カルボン酸、アシル−グリセロール、ならびにビタミンＡおよびＥ等の非酸性脂質等の透過性向上脂肪酸である。脂質混合物は、場合により有機溶媒を含む。好ましい脂肪族カルボン酸は、更に上記に定義されている。この、非極性および非プロトン性溶媒に溶解された錯体を調製する二工程手順により、活性薬剤、クラウンエーテル、ならびに非極性および非プロトン性溶媒を組み合わせる「直接的な」手順と比較して、より高い濃度の前記活性薬剤の溶液を得ることができる。
【００８０】
前記活性薬剤は、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、小分子、単糖、多糖または核酸、より好ましくはＲＮＡｉ剤が好ましい。
【００８１】
用語「ペプチド」は、３０個迄のアミノ酸からなるアミノ酸のポリマーを指す。用語「ポリペプチド」は、３０個を越えるアミノ酸を含む、アミノ酸のポリマーを指す。用語「ポリペプチド」は、タンパク質が単一のポリペプチドからなる場合に限って更にタンパク質を含む。タンパク質は一般に、二つ以上のポリペプチド鎖も含み得る。本明細書では、（ポリ）ペプチドという用語も使用される。この用語は、ペプチドおよびポリペプチドの両方を包含する。
【００８２】
用語「ペプチド」、「ポリペプチド」および「タンパク質」には、β−アラニン、α−アミノ酪酸、γ−アミノ酪酸、α−アミノイソ酪酸、ノルバリン、ノルロイシン、ε−リシン、オルニチン、ホモセリンおよびヒドロキシプロリン等の、一つ以上の天然に存在しないアミノ酸を含む化合物が挙げられる。更に、Ｎ−およびＣ−末端を含む反応性基は、保護基によって遮断され得る。天然に存在する翻訳後修飾を含む、ペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質の当技術分野にて公知の更なる誘導体化も故意に含まれる。
【００８３】
「小分子」は、好ましくは１０００ｇｍｏｌ-1未満、より好ましくは９００ｇｍｏｌ-1未満、８００ｇｍｏｌ-1未満、７００ｇｍｏｌ-1未満または６００ｇｍｏｌ-1未満の分子量を有する。約５００ｇｍｏｌ-1以下の分子量も好ましい。しかしながら、必ずしもペプチド、ポリペプチド、タンパク質、単糖類および核酸から選択されず、かつ５００〜５０００ｇｍｏｌ-1の分子量を有する生体分子である活性薬剤も予想される。
【００８４】
用語「小分子」は、有機および無機の小分子を含む。
「小有機分子」は、炭素骨格と、場合により、好ましくはＯ、Ｎ、ＳおよびＰから選択される一つ以上のヘテロ原子とを含む小分子である。
【００８５】
膜貫通および／もしくは経粘膜送達の改善、非水性溶媒中の溶解度、ならびに／または本発明のクラウンエーテルと錯化している活性薬剤の安定性を含む、本発明のクラウンエーテルの有利な効果は、小分子の活性薬剤のみではなく、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質の活性薬剤でも観察されることが分かる。このことは、いずれの場合でも、完全に異なる機構または効果が前記改善に関与しているため、特に驚くべきことである。小分子の場合、本発明のクラウンエーテルとの錯化は、一般に、前記小分子の実質的な遮蔽をもたらす。これは、その大きさにより、他方の小分子（医薬的活性薬剤）を錯化するのが小分子（クラウンエーテル）であることによる。加えて、小分子は、それらのサイズが小さいために（例えば５００ダルトン未満の範囲内）、傍細胞機構によって、即ち、組織を構成する細胞間の小孔またはチャネルを通して吸収もされ得る。更に、物質中の小分子が、顕著な疎水性を含む他の特定の特徴を所有する場合、分子は細胞間経路を介して、即ち受動的吸収によっても吸収される。加えて、サイズ類似性によって錯体形成が本質的に完全な小分子の遮蔽を伴うため、例えば膜貫通および／または経粘膜送達を損なう前記小分子の任意の特性、特に物理化学的特性が、錯体形成後に比較的関与しなくなることを理解する必要がある。
【００８６】
一方、例えばペプチド、ポリペプチド、タンパク質、単糖類、多糖類および核酸等のバイオポリマーの場合、本発明のクラウンエーテルによる完全な分子の遮蔽は、一般に、ポリペプチドまたはタンパク質のサイズが一般に前記クラウンエーテルのサイズを有意に越えるため起こらない；にも係わらず、前記改善は尚起こる。驚くべきことに、膜を横断することが公知の小分子とは異なり、一方では膜を横断しないことが公知の前記ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質上の電荷の局部遮蔽は、前記改善を引き起こすのに十分であることが分かった。驚くべきことに、完全なペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質の全体的な遮蔽は、前記改善が達成されるべき場合、主な駆動力ではないことが分かった。
【００８７】
上述した実施形態では、本発明によるクラウンエーテルの混合物を使用することができる。しかしながら、一つのみの化学種を使用することが好ましい。
【００８８】
前記プロトン化第一級アミノ基またはプロトン化第二級アミノ基またはプロトン化グアニジニウム基と錯体を形成する本発明のクラウンエーテルの能力は、当業者により容易に検証され得る。
【００８９】
好適なアッセイは、ペプチドまたはタンパク質、例えばインスリンまたはエリスロポエチン等の活性薬剤の、有機溶媒、例えばメタノール、エタノールまたはジクロロメタン中の溶解度の評価を含む。第一の実験では、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質の有機溶媒中の溶解度を測定する。第二の実験では、１．１〜１０倍のモル過剰、より好ましくは１．５〜５倍のモル過剰の本発明のクラウンエーテルを、有機溶媒と共にペプチドまたはタンパク質に加える。用語「モル過剰」は、ペプチドまたはタンパク質のプロトン化
第一級アミノ基、プロトン化第二級アミノ基およびプロトン化グアニジニウム基の量、または負に帯電したカルボキシレートにおける有機および無機対イオンを含む任意の正に帯電した部分の量を越えるクラウンエーテルの量を指す。本発明のクラウンエーテルの不在下では、ペプチド／タンパク質は、縣濁液、コロイド縣濁液を生成し、または粒子の形態で沈殿する。
【００９０】
アッセイの更なる実施形態において、いずれかの実験において尚存在する任意の不溶性材料が遠心分離により除去されてもよく、続いて、溶液中のペプチド／タンパク質の濃度が、当技術分野にて公知の手段により測定される。そのような手段には、遠心分離からの上清のＨＰＬＣ分析と、クロマトグラムにおけるペプチド／タンパク質ピークの面積測定によるペプチドまたはタンパク質の量の決定が挙げられる。
【００９１】
前記錯体の解離定数ＫDは、１０-3ｍｏｌ-1ｌ未満、より好ましくは１０-4ｍｏｌ-1ｌ
、１０-5ｍｏｌ-1ｌまたは１０-6ｍｏｌ-1ｌ未満であることが好ましい。
【００９２】
本明細書で使用される用語「金属イオン」は、任意の金属イオンを指す。金属イオンは、ヒト身体内に存在する金属イオンに関連することが好ましい。特定の好ましい金属イオンとしては、Ｎａ+、Ｋ+、Ｃａ2+、Ｌｉ+およびＭｇ2+が挙げられる。
【００９３】
前記医薬または診断組成物は、経口、頬内、舌下、鼻腔内、経肺、経皮（dermally）、経皮（transdermally）、眼内および／または直腸内等の非侵襲的方法にて送達されるこ
とが好ましい。用語「頬内」は、口内で吸収される組成物を含む。上記に述べたように、今までの所、侵襲的方法でのみ送達できる活性薬剤が、本発明の教示を考慮して、今では本発明のクラウンエーテルとの錯化形態で得ることができ、かつ非侵襲的方法で投与できることは、本発明の利点の一つである。上記に述べた理由により、皮下投与も好ましい。
【００９４】
好ましい単糖類および多糖類は、例えばヘパリン等の一つ以上のスルホン酸基（−ＳＯ3-）を有する単糖類および多糖類である。ヘパリンは、抗凝血特性を有する、グリコサミノグリカンと称される直鎖陰イオン性ムコ多糖類の異種グループである。その他も存在し得るが、ヘパリン内に存在する主な糖は：（１）α−Ｌ−イズロン酸２−スルフェート、（２）２−デオキシ−２−スルファミノ−α−Ｄ−ブドウ糖６−スルフェート、（３）β−Ｄ−グルクロン酸、（４）２−アセトアミド−２−デオキシ−α−Ｄ−ブドウ糖、および（５）α−Ｌ−イズロン酸である。これらの糖は、（２）＞（１）＞（４）＞（３）＞（５）の順で低下する量で存在し、グリコシド結合により連結されて様々な大きさのポリマーを形成している。ヘパリンは、共有結合したスルフェートおよびカルボン酸基の内容により、強力に酸性である。ヘパリンナトリウムにおいて、スルフェート単位の酸性プロトンは、部分的にナトリウムイオンで置き換えられている。ヘパリンナトリウムの代表的な断片を下記に示す：
【００９５】
【化９】
0005848708.tif 000010
【００９６】
ヘパリンナトリウムおよびヘパリンカルシウムは、医薬として認可されている。本発明の使用は、ヘパリンナトリウムおよびヘパリンカルシウムの吸収、送達および／または安定性（半減期）の向上を可能にすることが期待される。同様のことが、ヘパリンのリシン塩にも適用されることが期待される。
【００９７】
医薬的活性薬剤が核酸の場合、負に帯電したホスフェートの対イオンの正電荷を遮蔽するのに、クラウンエーテルを使用することが予想される。前記（正に帯電した）対イオンには、アンモニウム、Ｌｙｓおよびその誘導体等のアミノ酸、ならびに金属イオンが挙げられる。ホスフェートがアルキルアミノまたはアルキルグアニジノ基によりエステル化されている核酸も挙げられる。本発明による核酸には、ｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡ等のＤＮＡ、およびＲＮＡが含まれる。更に、用語「核酸」には、一本鎖および二本鎖オリゴヌクレオチドが含まれる。本明細書で使用される用語「ＲＮＡ」には、ｍＲＮＡ、ｎｃＲＮＡ（非翻訳領域ＲＮＡ）、ｔＲＮＡおよびｒＲＮＡを含むＲＮＡの全形態が含まれることが理解される。用語「非翻訳領域ＲＮＡ」には、ｓｉＲＮＡ（低分子干渉ＲＮＡ）、ｍｉＲＮＡ（マイクロＲＮＡ）、ｒａｓｉＲＮＡ（反復配列関連（repeat associated）ＲＮ
Ａ）、ｓｎｏＲＮＡ（核小体低分子ＲＮＡ）およびｓｎＲＮＡ（核内低分子ＲＮＡ）が含まれる。
【００９８】
好ましい核酸は、ＲＮＡｉ剤である。ＲＮＡｉ剤は、ＲＮＡ干渉を誘発できる薬剤である。ＲＮＡｉ剤には、低分子干渉ＲＮＡが含まれる。時には短い干渉ＲＮＡまたはサイレンシングＲＮＡとしても公知の用語「低分子干渉ＲＮＡ」（ｓｉＲＮＡ）は、生物学において多様な役割を担い、また多様な疾病および病状の処置において益々多様な役割を担う、概して短い二本鎖のＲＮＡ分子のクラスを指す。最も顕著には、ｓｉＲＮＡは、ｓｉＲＮＡが特定の遺伝子の発現を妨げるＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）経路に関与する（例えばZamore Nat Struct Biol 2001 , 8(9):746-50; Tuschl T. CHEMBIOCHEM. 2001 , 2:239-245; Scherr and Eder, Cell Cycle. 2007 Feb;6(4):444-9; Leung and Whittaker, Pharmacol
Ther. 2005 Aug;107(2):222-39; de Fougerolles et al., Nat. Rev. Drug Discov. 2007, 6: 443-453参照）。更に、細胞または生命体内での例えば酵素ダイサーによるプロセ
シング後、ｓｉＲＮＡを生じさせる二本鎖リボ核酸が含まれる。
【００９９】
好ましいポリペプチドまたはタンパク質は、抗体である。用語「抗体」には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、一本鎖抗体またはそれらの断片が含まれ、また、二重特異性抗体、合成抗体、Ｆａｂ、ａＦ（ａｂ２）’、ＦｖもしくはｓｃＦｖ断片等の抗体断片、またはこれらのいずれかの化学的に修飾された誘導体も含まれる。本発明に従って使用される抗体またはそれらの対応する免疫グロブリン鎖は、当技術分野にて公知の従来の技術を用いて、例えばアミノ酸欠失、挿入、置換、付加、および／もしくは組み換え、ならびに／または当技術分野にて公知の任意の他の修飾を、単独でまたは組み合わせて使
用することにより、更に修飾されてもよい。免疫グロブリン鎖のアミノ酸配列の基礎を為すＤＮＡ配列にそれらの修飾を導入する方法は、当業者に周知である；例えばSambrook, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY, 1989を参照されたい。
【０１００】
用語「モノクローナル」または「ポリクローナル抗体」（Harlow and Lane, (1988), loc. cit.参照）は、それらの結合特異性を維持する、または本質的に維持する前記抗体の誘導体にも関する。
【０１０１】
用語「ｓｃＦｖ断片」（一本鎖Ｆｖ断片）は、当技術分野にてよく理解されており、その小さい大きさと、組み換え手段によってそれら断片が容易に生成される可能性とにより好ましい。
【０１０２】
本発明の使用または方法の特に好ましい実施形態では、前記抗体または抗体結合部分は、ヒト抗体もしくはヒト化抗体であり、またはヒト抗体もしくはヒト化抗体に由来する。
【０１０３】
用語「ヒト化抗体」は、本発明によれば、非ヒト起源の抗体を意味し、例えばＣＤＲ３、好ましくは全部の６つのＣＤＲ等の、可変領域内の少なくとも一つの相補性決定領域（ＣＤＲ）が、所望の特異性を有するヒト起源の抗体のＣＤＲで置き換えられている。場合により、抗体の非ヒト定常領域がヒト抗体の定常領域で置き換えられている。ヒト化抗体の生成方法は、例えば欧州公開特許第０２３９４００号および国際公開第９０／０７８６１号に記載されている。
【０１０４】
本明細書で使用される用語「小分子」、または適用可能な場合、「小有機分子」は、以下に列挙する薬剤を含み、対応する医学的適応症も提供される：（ａ）合成および天然抗生物質：ピリドン環の誘導体（ナリジクス酸、オキソリニン酸）、ペニシリン誘導体（ベンジル−ペニシリン、フェノキシメチル−ペニシリン、メチシリン、オキサシリン、アンピシリン、アモキシシリン、ピバンピシリン、タランピシリン、カルベニシリン、チカルシリン）、セファロスポリン誘導体（セファロスポリンＣ、セファログリシン、セフォタキシム、セフメタゾール、セフラジン、セファレキシン、セファロチン、セファロリジン、セファゾリン、セフスロジン、セファセトリル、セファピリン、セフロキシム、セファマンドール、セフォキシチン、セファゾールセフォペラゾン、セフトリアキソン）、アミノグリコシド抗生物質（ストレプトマイシン、ネオマイシン、ゲンタマイシン、トブラマイシン、アミカシン）、ポリエン（ニスタチン、アンホテリシンＢ）、抗結核薬（パラ−アミノサリチル酸）（ｂ）神経伝達物質：カテコラミン（アドレナリン、ノルアドレナリン、Ｌ−ドーパミンレボドパ、メレボドパ（Malevodopa）（レボドパメチルエステルおよびその類似体）、ドーパミン、カルビドパ、セロトニン、γ−アミノ−酪酸（ＧＡＢＡ）；（ｃ）抗炎症性および鎮痛性非ステロイド薬：サリチル酸、アセチルサリチル酸；フェニル酢酸：イブプロフェン、フェノキシプロフェン（Phenoxyprofen）、ケトプロフェン
、ナプロキセン、ジクロフェナク；複素環（Etherocyclic）酢酸：インドメタシン（Indomethacine）、クロメタシン（Clometacine）、スリンダク、ゾメピラク、チアプロフェン（Thiapropheic）酸；アンスラニル酸：メフェナム酸、フルフェナム酸、メクロフェナム酸、トルフェナム酸、ニフルミン酸、（ｄ）抗凝固薬：ヘパリン（ナトリウムまたはカルシウム誘導体のいずれか）、デルマタン硫酸、エノキサパリンナトリウム、ダルテパリンナトリウム；（ｅ）利尿薬：フロセミド、ブメタニド、エタクリン酸、チエニル酸、トリアムテレン、アミロライド、；（ｅ）様々：バルプロ酸（抗てんかん薬）、クラブラン酸（β−ラクタマーゼの阻害剤）、リチウム塩（抗精神病薬）。
【０１０５】
本発明は、本発明の使用および方法に従って、即ち錯体形成によって修飾されている、治療的に関連した更なる小分子にも関することが理解される。この場合、予想される医学
的適応症は、考慮下の小分子を用いて予防、回復または治癒され得る適応症である。
【０１０６】
本発明による用語「ペプチド」、および処置される関連疾病は、以下を含む：（ａ）ペプチドがプリビニル（Privinil）としても公知のリシノプリルであり、疾病が高血圧症である；（ｂ）；ペプチドがゴセレリン、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）の合成デカペプチド類似体であり、疾病が前立腺癌である；（ｃ）ペプチドがカルシトニンであり、疾病が骨粗鬆症である；（ｄ）ペプチドがリュープロリドであり、疾病が前立腺癌である；（ｅ）ペプチドがグルカゴンであり、疾病が低血糖症である；（ｆ）ペプチドがインテグリリンであり、疾病が抗凝血である；（ｇ）ペプチドがヒルジンであり、抗凝血薬および抗血栓薬として使用される、（ｈ）ペプチドがバソプレシンの類似体であるデスモプレシンであり、抗利尿薬として治療的に使用され、またある形態の血友病およびフォン・ヴィルブランド病を有する個人における出血の管理に使用され、ここで（ポリ）ペプチドは本明細書にて上記に定義したように、即ち、本発明の環状化合物と錯体を形成することにより修飾されている。
【０１０７】
本発明は、本発明に従って修飾（即ち錯化）されている、治療的に関連した更なるペプチドの使用にも関することが理解される。この場合、予想される医学的適応症は、考慮下のペプチドまたはポリペプチドを用いて予防、回復または治癒され得る適応症である。
【０１０８】
本発明による用語「（ポリ）ペプチド」および処置される関連疾病は、以下を含む：（ａ）（ポリ）ペプチドがインスリン（インスリンリスプロ、インスリンアスパルトを含む）であり、疾病が糖尿病である；（ｂ）（ポリ）ペプチドがエポエチンαであり、疾病が貧血症である；（ｃ）（ポリ）ペプチドがエポエチンβであり、疾病が貧血症である；（ｄ）（ポリ）ペプチドがダルベポエチンであり、疾病が貧血症である；（ｅ）（ポリ）ペプチドがエリスロポエチンであり、疾病が貧血症または慢性腎不全である；（ｆ）（ポリ）ペプチドがフィルグラスチムであり、適応症が免疫疾患、白血病、糖尿病性足部潰瘍；白血球減少症、および新生物疾病である；（ｇ）（ポリ）ペプチドがレノグラスチムであり、適応症が白血球減少症である；（ｈ）（ポリ）ペプチドがサルグラモスチム（Sargramostin）であり、適応症が白血球減少症である；（ｉ）（ポリ）ペプチドがモルグラモスチム（Molgramostin）であり、適応症が白血球減少症である；（ｊ）（ポリ）ペプチドがミリモスチムであり、適応症が白血球減少症である；（ｋ）（ポリ）ペプチドがナルトグラスチムであり、適応症が白血球減少症である；（Ｉ）（ポリ）ペプチドがＧＣＳＦであり、疾病が化学療法誘導好中球減少症である；（ｍ）（ポリ）ペプチドがＧＭＣＳＦであり、適応症が自己骨髄移植である；（ｎ）（ポリ）ペプチドがアスパラギナーゼであり、疾病が癌であり；アスパラギナーゼを用いた処置を受け入れる好ましい癌形態は、リンパ芽球性白血病および大細胞型リンパ腫である；（ｏ）（ポリ）ペプチドが活性化第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子生成物（血液凝固因子）であり、疾病が血友病Ａ、血友病ｂである；（ｐ）（ポリ）ペプチドがインターフェロンα−α−（インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンアルファコン−１、インターフェロンα３ｎを含む）であり、疾病が慢性肝炎ＢまたはＣおよびいくつかのタイプの癌である；（ｑ）（ポリ）ペプチドが多発性硬化症および肝炎を処置するためのインターフェロンβ（−β−は、インターフェロンβ−１ａ、およびインターフェロンβ１ｂを含む）である；（ｒ）（ポリ）ペプチドがインターフェロンγ（−γ−は、インターフェロンγ−１ｂを含む）であり、疾病が線維症、結核、髄膜炎または癌である；（ｓ）（ポリ）ペプチドがヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）であり、疾病が子供におけるヒト成長不全である；（ｔ）（ポリ）ペプチドがソマトレム／ソマトロピンであり、疾病が子供におけるヒト成長ホルモン欠乏症である；（ｕ）（ポリ）ペプチドがスーパーオキシドジスムターゼであり、疾病が脳傷害である；（ｖ）（ポリ）ペプチドがインターロイキン−２であり、疾病が癌（転移性腎癌）または免疫活性化を必要とする状態である；（ｗ）ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）拮抗薬Ｂ２０３６は、当技術分野にて周知である。Ｂ２０３６は、ｈＧＨか
ら、拮抗特性と増大された受容体親和性とを付与する９個のアミノ酸置換の導入により得られる（米国特許第５，８４９，５３５号参照）。先端巨大症を処置するためには、任意の他の成長ホルモン（ＧＨ）−受容体拮抗薬（ＧＨ−受容体拮抗薬Ｂ２０３６の代わりにまたはＧＨ−受容体拮抗薬Ｂ２０３６に加えて）が予想される；（ｘ）（ポリ）ペプチドがトラスツズマブであり、疾病が癌である；（ｙ）（ポリ）ペプチドがエキセンディン−４であり、疾病がＩＩ型糖尿病または肥満症である；（ｚ）ペプチドがＰＴＨ  １−３４（テリパラチド）であり、疾病が骨粗鬆症である；（ａａ）ペプチドがタスポグルチドであり、疾病がＩＩ型糖尿病または肥満症である；（ｂｂ）ペプチドがリラグルチドであり、疾病がＩＩ型糖尿病または肥満症である；（ｃｃ）ペプチドがアルビグルチドであり、疾病がＩＩ型糖尿病または肥満症である；（ｄｄ）ペプチドがタスポグルチドであり、疾病がＩＩ型糖尿病または肥満症である；（ｅｅ）ペプチドがＺＰ１０（ＡＶＥ００１０）であり、疾病がＩＩ型糖尿病または肥満症である；（ｆｆ）ペプチドがＯＰ−２８６であり、疾病がＩＩ型糖尿病または肥満症である。本明細書で使用される用語（ポリ）ペプチドは、ペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質を含むことが理解される。
【０１０９】
本発明は、本発明に従って修飾（即ち錯化）されている、治療的に関連した更なる（ポリ）ペプチドの使用にも関することが理解される。この場合、予想される医学的適応症は、考慮下の（ポリ）ペプチドを用いて予防、回復または治癒され得る適応症である。
【０１１０】
用語「診断的活性薬剤」は、診断方法を実施するのに好適な任意の薬剤を指す。例としては、その存在、不在および／または量を決定するべき標的分子に結合する、ペプチド、ポリペプチド、抗体または小有機分子が挙げられる。この標的分子は、健康なおよび／または疾病状態のヒトまたは動物の身体内に存在する任意の分子であってもよい。用語「標的分子」には、ペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質が含まれる。前記診断的活性薬剤は、検出可能に標識されていることが好ましい。
【０１１１】
本発明による医薬的または診断的活性薬剤は、プロトン化第一級アミノ基（−ＮＨ3+）、プロトン化第二級アミノ基（−ＮＨ2+−）およびプロトン化グアニジニウム基（−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ2+）−ＮＨ2）から選択される一つ以上の基を有する。一つ以上の正電荷の
存在は、本発明のクラウンエーテルの不在下では、前記薬剤を処方および送達する可能性を制限する。好ましい実施形態において、前記第一級または前記第二級アミノ基は、各々、第一級または第二級脂肪族アミノ基である。また、前記グアニジニウム基は、脂肪族グアニジニウム基、即ち脂肪族部分に結合したグアニジニウム基が好ましい。前記活性薬剤がペプチド、ポリペプチド、タンパク質または抗体の場合、「第一級脂肪族アミノ基」は、Ｌｙｓのアミノ基を含みまたは指し、「脂肪族グアニジニウム基」は、Ａｒｇのグアニジニウム基を含みまたは指し、「第二級アミノ基」は、ＨｉｓおよびＴｒｐを指すことが理解される。
【０１１２】
医薬的または診断的活性薬剤に加えて、機能性食品または栄養補助食品の構成成分を本発明の化合物と錯化させてもよいが、但し、機能性食品の構成成分または栄養補助食品の構成成分が、プロトン化第一級アミノ基、プロトン化第二級アミノ基およびプロトン化グアニジニウム基のうちの一つ以上を有し、ならびに／または金属イオンとの塩であることを条件とする。そのような構成成分（活性薬剤とも称する）は、本発明の使用および方法において、医薬的または診断的活性薬剤の場所を取り得る。機能性食品の構成成分の例は、クレアチンである。
【０１１３】
従って、本発明は、本発明のクラウンエーテルの使用にも関し；前記クラウンエーテルは、プロトン化第一級および／もしくはプロトン化第二級アミノ基ならびに／またはプロトン化グアニジニウム基、ならびに／または金属イオンとの塩と錯体を形成して（ａ）膜貫通および／もしくは経粘膜送達；（ｂ）非水性溶媒中の溶解度；ならびに／または（ｃ
）活性薬剤の安定性を改善することが可能であり、前記活性薬剤は、一つ以上のプロトン化第一級および／もしくはプロトン化第二級アミノ基ならびに／またはプロトン化グアニジニウム基を含む。活性薬剤という用語には、医薬的活性薬剤または薬物、診断的活性薬剤、ならびに機能性食品の構成成分および栄養補助食品の構成成分が含まれる。
【０１１４】
本発明による医薬組成物は、更に、薬学的に許容され得る担体、賦形剤および／または希釈剤を含有してもよい。好適な医薬担体、賦形剤および／または希釈剤の例は、当技術分野にて周知であり、リン酸緩衝生理食塩水、水、油／水乳剤等の乳剤、様々なタイプの湿潤剤、無菌溶液等を含む。膜貫通または経粘膜送達のための好ましい担体、または本発明による製剤のための好ましい希釈剤は、更に下記に論じる非水性溶媒を含む。それらの担体を含有する組成物は、周知の従来の方法により処方することができる。これらの医薬組成物は、好適な用量で対象に投与され得る。投与計画は、主治医により決定され、また臨床的因子に依存するであろう。医療分野にて周知のように、任意の一人の患者のための投与量は、患者の大きさ、身体表面積、年齢、投与される特定の化合物、性別、投与時間および投与経路、全身の健康、ならびに同時に投与されている他の薬物を含む多数の因子に依存する。医薬的に活性なタンパク性物質は、用量当たり１ｎｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の量で存在し得るが；特に前述した因子を考慮して、この例示的な範囲を下回るまたは上回る用量も想定される。予想される製剤は、更に、マイクロスフェア、リポソーム、マイクロカプセル、およびナノ粒子またはナノカプセルを含む。
【０１１５】
更に説明すると、本発明の組成物、使用および方法による医薬的または診断的活性薬剤上に存在する正電荷の遮蔽による疎水性の増大は、新規な送達手法を設計する可能性を開き、該手法は：例えば、活性成分を、例えば、非限定的にポリアクリル酸（ＰＡＡ）、ポリメタクリル酸（ＰＭＡＡ）、ポリ乳酸およびグリコール酸（ＰＬＧＡ）、ガベキサートメシル酸塩（ＧＭ）、キトサン、澱粉、塩化テレフタロイル（ＴＣ）、架橋シクロデキストリン、ポリ（エチルシアノアクリレート）（ＰＥＣＡ）、ＰＥＧ等から構成されている（ｉ）リポソーム、（ｉｉ）マイクロスフェア、（ｉｉｉ）マイクロカプセル、（ｉｖ）ナノ粒子／ナノカプセル内に封入する。
【０１１６】
本発明による医薬または診断組成物の、更に予想される構成成分としては、シクロデキストリン（例えば、Irie and Uekama(1999)またはChalla et al.(2005)参照）および／またはキトサンが挙げられる。シクロデキストリンまたはキトサンを含有する組成物は、遅延特性を有してもよく、即ちそれらは活性薬剤の遅延放出、および／または長時間に亘る放出を提供する。シクロデキストリンは、化合物上に存在する疎水性部分と封入錯体を形成する。シクロデキストリンは、親油性の内側空洞と親水性の外側表面とを有し、非常に多数の分子と相互作用できることが公知である。シクロデキストリンは製剤中に使用されて、疎水性（水溶性が乏しい）薬物の見かけ上の薬物溶解度を改善し、それ故、薬物溶解度、溶解およびまたは薬物透過性を増大させることによって不溶性薬物のバイオアベイラビリティを向上させる。本発明の文脈において、本発明のクラウンエーテルによる正電荷の遮蔽に起因する活性薬剤の疎水性の向上は、シクロデキストリン構造の親油性コア内へのより直接的な、かつ深い組み込みを可能にする。換言すれば、本発明の化合物と非共有結合的にかつ一時的に錯化する親水性活性薬剤は、その生物物理学的特性を変化させ、該薬剤−またはその疎水性部分−が、シクロデキストリンの内部部分（親油性コア）内に挿入できるように疎水性となる。その結果、活性薬剤は最初、存在する正電荷を遮蔽する本発明の環状化合物と錯化してもよく、次いで第二の工程にて、活性薬剤および前記環状化合物により形成された錯体は、一つ以上のシクロデキストリンと錯体を形成することができ、それにより合計二つの錯化の層を与える。二重錯体は、眼内、直腸、経皮（dermal）および経皮（transdermal）送達を含む非侵襲的薬物送達に好適であり、更に、血液−脳
関門（ＢＢＢ）通過を向上させることによって脳送達を標的とする非経口薬物送達（注入）において、また医薬製剤中の機能的担体材料として作用して、効率的で正確な送達を得
るための制御薬物送達において好適であることが期待される。
【０１１７】
従って、別の好ましい実施形態では、製造される前記医薬または診断組成物は、更に、一種以上のシクロデキストリンを含有する。シクロデキストリンは当技術分野にて公知であり、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリンおよびγ−シクロデキストリンを含む。またこの手法は、新規な送達手法を設計する可能性を開き、該手法は：例えば、活性成分を（ｉ）リポソーム、（ｉｉ）マイクロスフェア、（ｉｉｉ）マイクロカプセル、（ｉｖ）ナノ粒子／ナノカプセル内に封入する。
【０１１８】
更に、本発明のクラウンエーテルとの医薬的活性成分の錯化は、製剤学（galenics）および医薬技術の分野にて有意な利点を提供する。実際、特に、主に水性媒体中で取り扱われ得る例えばペプチド、ポリペプチド、タンパク質および核酸のようなバイオポリマーの場合、水と有機溶媒の両方に可溶な医薬成分（本発明のクラウンエーテルとの錯体としての）を有するという二重および同時選択肢により：丸剤、錠剤、カプセル剤、坐剤、エリキシル剤、エアゾル、ドロップ、散剤、凍結乾燥物、乳剤、ゲル、クリーム、パッチおよびコロイドを含むがこれらに限定されない製剤（galenic）形態の改善が可能となり得る
。前記活性薬剤の製剤形態の改善は、膜貫通または経粘膜送達の改善による明白な結果または外挿ではないことを理解するべきである。本発明によるクラウンエーテルは、環状化合物との錯化後の医薬的または診断的活性薬剤の疎水性の増大をもたらす。同時に、プロトン化第一級もしくは第二級アミノ基またはプロトン化グアニジニウム基の正電荷の遮蔽が起こる。疎水性の増大と、医薬的または診断的活性薬剤上に存在する正電荷の遮蔽は、以前利用できなかった処方の可能性を開く。例えば、抗体を含むペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質等の有意に親水性の活性薬剤は、それらの非錯化形態での溶解度が低く、または０である溶媒に（それらの錯化形態で）溶解することができる。そのような溶媒は、非水性溶媒を含む。更に、錯化形態での活性薬剤の疎水性の増大は、今日迄、静脈内等の侵襲的方法でのみ投与できる活性薬剤の新たな投与経路を開く。そのような侵襲的投与（静脈内投与を含む）が、肝臓内での活性薬剤の部分的なまたは有意な分解等の公知の欠点を有するにも係わらず、特にタンパク性活性薬剤を含む多数の活性薬剤には、今までの所、他の選択肢を利用することができない。本発明によるクラウンエーテルとの錯化後、活性薬剤は十分に疎水性となり、粘膜または皮膚内に存在する細胞膜等の細胞膜を通した十分な浸透が確実にされる。その結果、更に以下に詳細する、それら活性薬剤のための非侵襲的送達経路を考慮することができる。代替的に、非侵襲的送達は非錯化形態の活性薬剤の選択肢でもあり得るが、粘膜または皮膚の透過が制限される欠点を有する。そのような場合、本発明によるクラウンエーテルとの錯化が送達を向上させ、非侵襲的送達を好ましい送達経路とする。活性薬剤の疎水性錯体が疎水性担体の使用を可能にすることに注目すると、本発明の使用により得られる医薬または診断組成物は、疎水性であることが好ましい。組成物の疎水性（および親油性）により、対象に送達した後の活性薬剤の放出は、疎水性が比較的低い従来の製剤と比較して遅延され得る。換言すれば、本発明により得られる所定の組成物は、活性薬剤を含む遅延形態である。
【０１１９】
本発明の更なる利点は、侵襲的送達、特に皮下送達に関する。皮下送達用の医薬または診断組成物の容積は、本来制限されている。従来の処方により、皮下注入用の少量の容積が、必要な用量を含む注射用溶液を得ることができない場合、処置は煩雑（短い投与間隔）または不可能である。本発明の使用が高い濃度の活性薬剤を有する組成物の調製を可能にすることに注目すると、先行技術によるこれらの問題は克服され得る。
【０１２０】
好ましい実施形態において、本発明のクラウンエーテルは、１を越える、より好ましくは２を越える、尚より好ましくは３を越えるｌｏｇＰ値を有する。
【０１２１】
用語「疎水性の」および「疎水性」は当技術分野にて周知であり、水および水性媒体と
の低い混和性、または混和性を有さないことを示す。用語「親油性の」および「親油性」は、本明細書にて等価な意味で使用される。疎水性を定量化するのに通常使用されるパラメータは、ｌｏｇＰ値である。
【０１２２】
二つの非混和性または実質的に非混和の溶媒の界面における分子の質量流束は、その親油性に支配される。分子がより親油性となるにつれて、該分子は親油性有機相中により可溶となる。水とｎ−オクタノールとの間に観察される分子の分配係数は、親油性の標準的尺度として採用されている。種Ａの分配係数Ｐは、比Ｐ＝［Ａ］n-オクタノール／［Ａ］水として定義される。通常報告されている数値は、ｌｏｇＰ値であり、これは分配係数の対数である。分子がイオン化可能である場合、原則として複数の異なる微細種（microspecies）（分子のイオン化形態および非イオン化形態）が両方の相中に存在するであろう。イオン化可能種の全体の親油性を記述する量は、比Ｄ＝［全微細種の濃度の合計］n-オクタノール／［全微細種の濃度の合計］水として定義される分配係数Ｄである。ｌｏｇＰと同様、分配係数の対数、ｌｏｇＤも頻繁に報告されている。
【０１２３】
第一の分子上の置換基の親油性の特性を評価する場合、および／または定量的に測定する場合、置換基に対応する第二の分子を評価してもよく、前記第二の分子は、例えば、前記置換基を第一の分子の残りに接続する結合を破壊し、それにより得られた自由原子価を水素に接続することにより得られる。代替的に、分子のｌｏｇＰに対する置換基の寄与を測定してもよい。分子Ｒ−ＸのｌｏｇＰに対する置換基Ｘの寄与πXは、πX＝ｌｏｇＰR-X−ｌｏｇＰR-Hとして定義され、式中、Ｒ−Ｈは、非置換親化合物である。
【０１２４】
２以上のＰおよびＤの値、ならびに１以上のｌｏｇＰ、ｌｏｇＤおよびπX値は、親油
性／疎水性の特性を示すのに対して、１未満のＰおよびＤの値、ならびに０未満のｌｏｇＰ、ｌｏｇＤおよびπX値は、各々の分子または置換基の親水性の特性を示す。
【０１２５】
本発明による親油性基の親油性を特徴付ける上述したパラメータは、実験手段により決定することができ、および／または当技術分野にて公知の計算的方法により予測することができる（例えばSangster, Octanol-water Partition Coefficients: fundamentals and
physical chemistry, John Wiley & Sons, Chichester (1997)参照）。
【０１２６】
実際には、ｌｏｇＰ、ｌｏｇＤおよびπX値は、それらが測定される特定の条件に従っ
て、所定の範囲にて変動するであろう。
【０１２７】
薬物または活性薬剤が、良好に吸収される論理的蓋然性を有するためには、それらのｌｏｇＰ値が５を越えてはならないことが示されている。市販の薬物のｌｏｇＰ値の確率密度（例えば、http://www.organic-chemistry.org/prog/peo/cLogP.html参照）は、ｌｏｇＰ値の最大がほぼ３であることを示している。
【０１２８】
本発明の使用および方法の更なる好ましい実施形態では、前記クラウンエーテルの、前記第一級および／もしくは第二級プロトン化アミノ基ならびに／またはプロトン化グアニジニウム基との錯体形成は、選択的である。選択性は、当業者により容易に評価することができる。この目的を達成するために、錯体を形成させる条件下で候補リガンドと本発明のクラウンエーテルとを接触させる。リガンドおよび／または環状化合物の錯化形態および／または遊離形態は、任意の好適な手段により測定される。そのようなアッセイは、反復して（または並行して）行われ、ここでアッセイの一つの実施は、前記化合物の前記第一級および／もしくは第二級プロトン化アミノ基ならびに／またはプロトン化グアニジニウム基との錯体形成を測定することに関し、アッセイの少なくとも一つの更なる実施は、前記化合物の競合する種との錯体形成を測定することに関する。競合種には、例えばＫ+
およびＮａ+等の金属イオンが挙げられる。選択性とは、前記化合物の大部分が前記第一
級および／もしくは第二級プロトン化アミノ基ならびに／またはプロトン化グアニジニウム基と錯体（「錯体Ａ」；「錯体Ａ」は、一方では前記環状化合物と、他方では前記第一級および／もしくは第二級プロトン化アミノ基ならびに／またはプロトン化グアニジニウム基との間で形成された錯体の量または濃度を示す）を形成する一方、残り（または残りの一部）が一つ以上の競合種と錯体（「錯体Ｂ」；「錯体Ｂ」は、競合種との錯体の量または濃度の合計を示す）を形成することを意味する。換言すれば、錯体Ａ／錯体Ｂの比は、１を越える。前記比は、１．２；１．５；２；３；４；５；１０；１００、１０００またはそれ以上が好ましい。
【０１２９】
本発明の使用および方法の更なる好ましい実施形態では、対イオンが組成物に加えられる。一つ以上のプロトン化第一級および／もしくは第二級アミノ基ならびに／または一つ以上のプロトン化グアニジニウム基を含む医薬的または診断的活性薬剤、特にペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質のための好ましい対イオンには、トリフルオロアセテート（ＴＦＡ）およびアルカン酸、好ましくは２〜３０個、より好ましくは２〜２０個、尚より好ましくは２〜１０個の炭素原子を有するアルカン酸の塩が挙げられる。他の好ましい実施形態では、そのような対イオンは、芳香族基を含んでもよい。これらの対イオンは、前記第一級および／もしくは第二級プロトン化アミノ基ならびに／またはプロトン化グアニジニウム基と塩を形成する他の対イオンを置き換えるように使用され得る。アルカン酸の塩は、リン酸塩等の一般に存在する対イオンよりも高い親油性を有する。ＴＦＡは更に、より低いｐＫａ値を有し、その結果、一方では第一級もしくは第二級プロトン化アミノ基またはプロトン化グアニジニウム基と、他方ではＴＦＡとの間のより強力な塩結合をもたらす。安息香酸塩およびサリチル酸塩等のアリールカルボン酸塩は、好適な対イオンの更なる例である。特にペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質のための対イオンの好ましい他のクラスは、アルキルまたはアリールスルホン酸である。好ましいアルキルスルホン酸は、１〜３０個、より好ましくは８〜１０個の炭素原子を有するアルキル鎖を有する。芳香族環上に一つ以上のアルキル置換基を有し、各アルキル置換基が２〜３０個、より好ましくは８〜１０個の炭素原子を有するアリールスルホン酸は、好適な対イオンの更なる例である。例は、メタンスルホン酸（メシル酸塩対イオン）およびｐ−トルエンスルホン酸（トシル酸塩対イオン）である。特にペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質のための好ましい対イオンの他のクラスは、一つの酸性プロトンを有するホスファチジルグリセロールまたはホスファチジル糖または二つの酸性プロトンを有するホスファチジン酸等の、ホスフェート上に少なくとも一つの酸性プロトンを有するリン脂質である。前記リン脂質またはホスファチジル部分に含まれるアルカン酸は、各々４〜３０個、より好ましくは６〜２０個、尚より好ましくは８〜１８個の炭素原子を有することが好ましい。二つのアルカン酸を含むリン脂質は、対称性または非対称性であってもよい。後者の場合、リン脂質分子は、二つの異なる脂肪酸を含む。別の好ましい実施形態では、リン脂質は、例えばホスファチジルイノシトールのような天然起源のものである。
【０１３０】
一方、酸性ポリマー（例えばヘパリン）または他の酸性の医薬的もしくは診断的活性薬剤のための好ましい対イオンは、正電荷を有するリン脂質である。それらは、遊離第一級アミノ基等を有することが好ましい。例としては、ホスファチジルセリンおよびホスファチジルエタノールアミンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３１】
対イオンの増大された親油性は、本発明の環状化合物と前記第一級および／もしくは第二級プロトン化アミノ基ならびに／またはプロトン化グアニジニウム基との錯体の安定性を増大させる。
【０１３２】
第一級または第二級アミンを含む塩である、医薬的活性薬剤の例は、イブプロフェンリシネート、即ちイブプロフェンのリシン塩、およびプロカインペニシリンである。イブプロフェンリシネートの場合、イブプロフェンは、カルボキシレートを提供する前記塩の構
成要素であり、リシンは、第一級アミノ基を提供する構成要素である。同様に、プロカインペニシリンの場合、ペニシリンは、カルボキシレートを提供する前記塩の構成要素であり、プロカインは、第一級および第二級アミノ基を提供する構成要素である。これらは単に特定の例であるが、（ｉ）カルボン酸官能基を含み、（ｉｉ）第一級もしくは第二級アミンまたはグアニジニウム基を含む化合物との塩である任意の薬物が、本発明の化合物との錯体として処方され得ることが予想される。そのような薬物としては、イブプロフェンリシネート、およびプロカインペニシリンまたはアミノグリコシド等の抗生物質を含む、これら二つの必要条件を満たす抗炎症性薬物が挙げられる。
【０１３３】
本発明の使用および方法の好ましい実施形態において、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質である前記活性薬剤は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択される一つ以上のアミノ酸を含む。
【０１３４】
より好ましい実施形態では、前記医薬または診断組成物は、酸性である。この実施形態は、プロトン化第一級および／もしくはプロトン化第二級アミノ基ならびに／またはプロトン化グアニジニウム基に加えて、ペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質内のＡｓｐおよびＧｌｕのカルボキシレート等の、中性ｐＨにおいて負に帯電した基を含む活性薬剤に関する。そのような場合、疎水性および電荷の遮蔽を高める本発明の化合物との錯体形成の目的は、ＡｓｐおよびＧｌｕのカルボキシレート等の、中性ｐＨにて負に帯電した前記基の存在を考慮すると、達成するのが困難であり得る。電荷を除去する一つの選択肢は、中性ｐＨにおいて負に帯電した前記基の有意な部分がプロトン化され、その結果非帯電となるｐＨまで組成物を酸性化することである。
【０１３５】
前記医薬または診断組成物は、２〜６のｐＨ値を有することがより好ましい。ｐＨ値は約３〜約５であることが尚より好ましい。ｐＨ値は３．５〜４であることが更により好ましい。
【０１３６】
前記医薬または診断組成物が酸性である代わりに、または酸性であることに加えて、ＡｓｐまたはＧｌｕ残基の一つ以上は、アミノアルコールおよび／またはグアニジニウムアルコールでエステル化され、前記アミノアルコールのアミノ基は、第一級または第二級アミノ基である。前記ＡｓｐまたはＧｌｕ残基の大部分（即ち５０％を越える）、より好ましくは６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、９９％または全部がエステル化されることが好ましい。エステル化はプロドラッグの形成をもたらす。「プロドラッグ」は、概して生物学的および／または薬理学的に活性ではない化合物である。しかしながら、プロドラッグが典型的にはインビボで酵素または加水分解切断により活性化されて、生物学的および／または薬理学的化合物に変換される場合、プロドラッグの投与は、意図される医学的効果を有するであろう。プロドラッグは、典型的には、生物学的および／または薬理学的化合物の上述したエステル化等、化学的修飾により形成される。好適なプロドラッグ誘導体を選択および調製するための従来の手順は、例えばDesign of Prodrugs, ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985に記載されている。
【０１３７】
前記アミノアルコールは、ω−アミノ−アルキル−オールが好ましい。
前記アミノアルコールは、４−アミノ−１−ブタノールまたは６−アミノ−１−ヘキサノールが好ましい。Ａｓｐおよび／またはＧｌｕのエステル化形態は、本明細書では「シュードリシン」と称され、これは、線状アルキル鎖が一方の末端部によりカルボキシレートに結合し（エステル結合を介して）、アルキル鎖の他方の末端部が第一級アミノ基を有する点で、Ｌｙｓと同様である構造が生成されるためである。代替的に、またはそれに加えて、ω−グアニジニウム−アルコールを使用してもよく、それによりグアニジニウム基とエステル官能基との間に１０〜２個の炭素、より好ましくは４〜２個の炭素からなる炭素鎖を有する「シュードアルギニン」を生成する。場合により、グアニジニウム基は、窒
素においてＮ−メチル化されて、前記グアニジニウム基により第二級アミンの一部を形成してもよい（クレアチンの場合のように）。更なる実施形態では、ポリオールリンカー（１，１，１−トリス−（ヒドロキシメチル）エタン、グリセロールまたは同様の構造）を使用して二つのグアニジニウム基を単一のＡｓｐまたはＧｌｕ残基に結合してもよい。後者の場合、グリセロールまたはポリオールリンカーの一つのヒドロキシル基がＡｓｐまたはＧｌｕ側鎖カルボン酸でエステル化され、残りのヒドロキシル部分は、グアニジニウムアルカン酸の一つ、二つまたはそれ以上の分子でエステル化され得る。
【０１３８】
一般的に言えば、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質である前記活性薬剤は、（ａ）（ｉ）Ｃ−末端部のカルボキシレートにおいて、グアニジニウムアルカノール、グアニジニウムアルカンチオール、グアニジニウム基で置換されかつ遊離ヒドロキシル基を有するポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、もしくはグアニジニウム基およびスルフヒドリル基で置換されたＰＥＧにより；（ｉｉ）存在する場合、一つ以上のＡｓｐもしくはＧｌｕ残基の側鎖カルボキシレートにおいて、グアニジニウムアルカノール、グアニジニウムアルカンチオール、グアニジニウム基で置換されかつ遊離ヒドロキシル基を有するＰＥＧ、もしくはグアニジニウム基およびスルフヒドリル基で置換されたＰＥＧにより；（ｉｉｉ）存在する場合、一つ以上のＳｅｒ、ＴｈｒもしくはＴｙｒ残基のヒドロキシル基において、グアニジニウムアルカン酸、もしくはグアニジニウム基およびカルボキシル基で置換されたＰＥＧにより；（ｉｖ）存在する場合、一つ以上のＣｙｓ残基のスルフヒドリル基において、グアニジニウムアルカン酸、もしくはグアニジニウム基およびカルボキシル基で置換されたＰＥＧにより；ならびに／または（ｖ）Ｎ−末端部において、グアニジニウムアルカン酸、もしくはグアニジニウム基およびカルボキシル基で置換されたＰＥＧによりエステル化またはチオエステル化されてもよく、前記Ｎ−末端部は、以前α−またはβ−ヒドロキシ酸によりアミド化され、またエステルは、前記α−またはβ−ヒドロキシ酸のヒドロキシ基と、前記グアニジニウムアルカン酸、またはグアニジニウム基およびカルボキシル基で置換された前記ＰＥＧのカルボキシル基との間で形成され；ならびに／または（ｂ）一つ以上のジスルフィドを含んでもよく、ジスルフィドは、存在する場合、Ｃｙｓ残基（reside）のスルフヒドリル基と、グアニジニウムアルカンチオール、またはグアニジニウム基およびスルフヒドリル基で置換されたＰＥＧとの間で形成される。
【０１３９】
好ましい実施形態では、（ｉ）過剰の前記クラウンエーテルが使用され；および／または（ｉｉ）本発明による第二のクラウンエーテルが使用され、前記第二のクラウンエーテルは、陽イオンと錯体を形成することが好ましく、前記陽イオンは前記Ａｓｐおよび／またはＧｌｕのカルボキシレートの対イオンである。用語「陽イオン」には、無機陽イオンが含まれる。無機陽イオンには、Ｎａ+およびＫ+等の金属イオンが含まれる。組成物を酸性化する、または、前記Ａｓｐおよび／またはＧｌｕをエステル化する選択肢の代わりにまたは該選択肢に加えて、この実施形態は、二つの更なる選択肢を提供する。これら四つの選択肢のいずれも、単独でまたは組み合わせで使用することができる。
【０１４０】
従って、本発明の医薬または診断組成物の調製方法の更なる好ましい実施形態では、前記活性薬剤は、ＡｓｐおよびＧｌｕから選択される一つ以上のアミノ酸を含むペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質であり、方法は、（ｂ）前記医薬もしくは診断組成物を酸性化し；（ｃ）ＡｓｐもしくはＧｌｕ残基の一つ以上をアミノアルコールによりエステル化し、前記アミノアルコールのアミノ基は、第一級アミノ基であり；および／または（ｄ）前記医薬的もしくは診断的活性薬剤を本発明の一つ以上の更なる化合物と接触させる、更なる工程を含み、前記更なる化合物は、金属イオンと錯体を形成することが好ましく、前記金属イオンは、前記Ａｓｐおよび／またはＧｌｕのカルボキシレートの対イオンである。
【０１４１】
用語「過剰」は、錯化される前記第一級および／もしくは第二級アミノ基ならびに／ま
たはグアニジニウム基の等モル量を越える、前記化合物の量に関する。そのような過剰は、錯化される前記第一級および／もしくは第二級アミノ基ならびに／またはグアニジニウム基の相当の部分または全部の錯化を確実にするのに使用され得る。等モル量は、この目的のために十分であり得るが、３〜１０倍のモル過剰、またはより好ましくは３〜５倍のモル過剰のような過剰を用いることが好ましい。
【０１４２】
第一級および／もしくは第二級アミノ基ならびに／またはグアニジニウム基との錯体に関与しない任意の過剰量は、前記Ａｓｐおよび／またはＧｌｕ残基上に存在する、負に帯電したカルボキシレートの対イオンとしての役割を果たす陽イオンの錯化に利用可能であろう。これらの対イオンの錯化も確実にするために（前記第一級および／もしくは第二級アミノ基ならびに／またはグアニジニウム基の相当の部分または全部の錯化に加えて）、本発明のクラウンエーテルの好ましい量は、カルボキシレートの量の５〜７倍のモル過剰である。その結果、第一級および／もしくは第二級アミノ基ならびに／またはグアニジニウム基の量の３〜５倍のモル過剰とカルボキシレートの量の５〜７倍のモル過剰との合計である、前記クラウンエーテルの量を使用することが好ましい。第一級および／もしくは第二級アミノ基ならびに／またはグアニジニウム基と錯化するよう設計された本発明のクラウンエーテルによる、陽イオンのそのような錯化は、前記第一級および／もしくは第二級アミノ基ならびに／またはグアニジニウム基の錯化の特異性が低いほど、より良好に働くであろう。高い特異性で前記第一級および／もしくは第二級アミノ基ならびに／またはグアニジニウム基と錯化する本発明のクラウンエーテルが使用される場合、第二の本発明のクラウンエーテルを使用することが好ましく、前記第二のクラウンエーテルは前記陽イオンと錯体を形成することが好ましく、前記陽イオンは、例えば金属イオンである。それらの場合では、前記第一級および／もしくは第二級アミノ基ならびに／またはグアニジニウム基と錯化する前記化合物は、「第一の」化合物と称される。更なる好ましい実施形態では、、第一の環状化合物および／または第二の環状化合物は、アンモニウムイオン（ＮＨ4+）と錯体を形成することが可能である。
実施例は、本発明を説明する。
【実施例１】
【０１４３】
本発明による化合物の合成
スキーム１に、本発明の化合物に至る合成経路を示す。保護されたＨＥＡＡ誘導体３および１０を各々、２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エタノール１（市販のまたはジエチレングリコールのＴＨＰ選択的一保護から得られた）および市販の２−（ベンジルオキシ）エタノール８から出発して調製した。アルコール１をブロモ酢酸と反応させた後、ベンジルアルコールとＤＩＣ／ＤＭＡＰ促進カップリングさせることによる酸２の形成を含む二工程手順により、完全に保護された３を得た。更にＴＨＰ保護基を除去してアルコール４を得、これを酸２とカップリングさせて、二量体５を収率８２％で与えた。酸性処理による最終的な脱保護は、所望のアルコール６、三量体化合物１１の第一の構成単位の獲得をもたらした。この変換は少量のアルコール７の形成ももたらし、かくしてこれらの条件における後者の不安定性が反映された（二量体アルコール６の分子内トランスエステル化の可能性）。純粋な二量体６の獲得の試みは、フラッシュクロマトグラフィーにより乏しい収率のみを与え、粗残留物は、最終的に、更に精製されることなく次の工程に使用された。
【０１４４】
【化１０】
0005848708.tif 000011
スキーム１
【０１４５】
塩基としてｉ−ＢｕＯＫを使用して、最初に２−（ベンジルオキシ）エタノール８をブロモ酢酸ｔ−ブチルエステルとカップリングさせることにより、第二の主要前駆体１０を調製した。続くＴＦＡ処理により、水性ワークアップ（酸塩基抽出）後に酸１０を手際よく得た。この合成の連続は、２工程で、所望の酸を収率９１％で生成した。最後の工程にて、酸１０とアルコール６とをＭｉｔｓｕｎｏｂｕエステル化手順にて反応させた。変換により、所望の完全保護三量体１１と二量体１２との混合物を与えた。二量体形成は、ア
ルコール７が反応関与体中に少量存在することに一部起因するが、これらの条件下でカップリングさせる前の、二量体アルコールの分子内トランスエステル化にも起因する可能性がある。それ故、フラッシュクロマトグラフィーによる精製により、化合物１１および１２が７５／２５比で得られ、また所望の主要化合物１１は収率４８％で単離された。水素化による最終的な保護基の除去により、セコ酸１３を定量的に得、これをＭｉｔｓｕｎｏｂｕ手順により環化して、化合物１４を収率６０％で与えた。この合成の連続は、環状ＨＥＡＡ誘導体１４を１０工程にて全体の収率８％で得ることを可能にした。続いて、還流トルエン中でＬａｗｅｓｓｏｎ試薬を使用して、この後者を選択的にジチオ化してジチオラクトン１５を与え、これを脱硫／縮合プロセスにてＬ−酒石酸ジエチルと反応させて、標的のビス−オルトエステル１６を得た。
【実施例２】
【０１４６】
更なる合成手順
【０１４７】
【化１１】
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【０１４８】
２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エタノール１。エチレングリコール（２２．３ｍｌ、０．４０ｍｏｌ）、ＤＨＰ（０．１ｍｏｌ、９ｍｌ）および４滴の濃ＨＣｌの溶液を、室温で一晩撹拌した。次いで、混合物を２０％ＮａＨＣＯ3溶液（１
００ｍｌ）に溶解し、ジ−ＴＨＰ化合物が除去される迄（ＴＬＣ）、エーテル（２×５０ｍｌ）で抽出した。水性層をジクロロメタンで抽出した。一緒にした有機層をＭｇＳＯ4
上で乾燥し、濾過し、濃縮して純粋な化合物３を与え、これを更に精製することなく次の工程に使用した。
【０１４９】
【化１２】
0005848708.tif 000013
【０１５０】
［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エトキシ］酢酸２。撹拌しているＮａＨ（鉱油中６０％分散物、４．８０ｇ、１２０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ中の懸濁液に、０℃で、ブロモ酢酸（６．１１ｇ、４４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１５ｍｌ）を加えた。混合物を室温で０．５時間撹拌した後、アルコール１（５．８４ｇ、４０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１５ｍｌ）を滴加した。混合物を室温で１７時間撹拌した後、Ｈ2Ｏでクエ
ンチし、エーテルで２回抽出した。水性層をｐＨ２〜３に酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。一緒にした有機層をＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過し、濃縮して純粋な化合物２を淡黄
色油（６．９３ｇ、８５％）として与え、これを更に精製することなく次の工程に使用した。
【０１５１】
【化１３】
0005848708.tif 000014
【０１５２】
ベンジル［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エトキシ］アセテート３。撹拌している酸４（３ｇ、１４．７１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２６ｍｌ）溶液に、室温でベンジルアルコール（７６０μｌ、７．３５ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（２．１８ｍｌ、１４．７１ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（９０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌した後、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ペンタン  １／１）による精製により、エステル３（２ｇ、９３％）を油として得た。
【０１５３】
【化１４】
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【０１５４】
ベンジル（２−ヒドロキシエトキシ）アセテート４。撹拌しているＴＨＰ保護ヒドロキシエステル３（２ｇ、６．８ｍｍｏｌ）のメタノール（８０ｍｌ）溶液に、ｐ−ＴｓＯＨ（８０ｍｇ、１ｍｇ／ｍｌ）を加えた。反応混合物を室温で４５分間撹拌し、濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈した。有機層をＮａＨＣＯ3および水で２回洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた残留物を更に精製することなく次の工程に使用し、または必要であればシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ペンタン  １／１）により精製して、ヒドロキシエステル４を油として与えた。
【０１５５】
【化１５】
0005848708.tif 000016
【０１５６】
２−（２−（ベンジルオキシ）−２−オキソエトキシ）エチル２−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エトキシ）アセテート５。アルコール４（６８５ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌ）、酸２（９３２ｍｇ、４．５７ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（６８０μｌ、４．５７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（３９ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液を室温で一晩撹拌した。次いで混合物を濾過し、濃縮した。シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ペンタン  １／１）により、化合物５を油（１．０６ｇ、８２％）として得た。
【０１５７】
【化１６】
0005848708.tif 000017
【０１５８】
２−［２−（ベンジルオキシ）−２−オキソエトキシ］エチル２−（２−ヒドロキシエトキシ）アセテート６。撹拌しているＴＨＰ保護ヒドロキシエステル５（１ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）のメタノール（３５ｍｌ）溶液に、ｐ−ＴｓＯＨ（３０ｍｇ、１ｍｇ／ｍｌ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌し、濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を
ＮａＨＣＯ3および水で２回洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた油状残留物（７１２ｍｇ、９０％）を更に精製することなく次の工程に使用した。
【０１５９】
【化１７】
0005848708.tif 000018
【０１６０】
ｔｅｒｔ−ブチル［２−｛ベンジルオキシ）エトキシ］アセテート９。撹拌している２−（ベンジルオキシ）エタノール８（１．７ｇ、１１．１７ｍｍｏｌ）のｔ−ＢｕＯＨ（２５ｍｌ）溶液に、室温でｔ−ＢｕＯＫ（１．３８ｇ、１２．２９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２．５時間撹拌した。次いで、混合物を水浴により冷却しながら、ｔ−ブチルブロモアセテート（２．７ｍｌ、２０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌し、濃縮した。水を加え、水性層をジクロロメタンで抽出した。一緒にした有機層をＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過し、濃縮した。シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフ
ィー（ＥｔＯＡｃ／ペンタン  １／４）により、エステル９を油（１．７４９ｇ、５９％）として得た。
【０１６１】
【化１８】
0005848708.tif 000019
【０１６２】
［２−（ベンジルオキシ）エトキシ］酢酸１０。撹拌しているエステル９（２．６６ｇ、１０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（９１ｍｌ）溶液に、ＴＦＡ（９ｍｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌し、混合物を濃縮した。得られた残留物を水で希釈し、ＮａＯＨ  １Ｎ溶液で塩基性化した。この水性層をエーテルで抽出した後、酸性化し、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。一緒にした有機層をＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過し、濃縮して酸１
０（２ｇ、９５％）を油として与え、これを更に精製することなく次の工程に使用した。
【０１６３】
【化１９】
0005848708.tif 000020
【０１６４】
３，９−ジオキソ−１−フェニル−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル２−（２−（ベンジルオキシ）エトキシ）アセテート１１。撹拌しているトリフェニルホスフィン（１．１７５ｇ、４．４８ｍｍｏｌ）のトルエン（１８ｍｌ）溶液に、０℃でＤＥＡＤ（８２０μｌ、４．４８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で１０分間撹拌した後、酸１０（２３５ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（５００μｌ）を滴加し、その後アルコール６（３５０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）のトルエン（５００μｌ）溶液を滴加した。混合物を０℃で３０分間撹拌し、濃縮した。シリカゲル上の注意深いフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ペンタン  １／）により、三量体１１を油（２７３ｍｇ、４８％）として得た。
【０１６５】
1H NM (CDCI3, 400 MHz) : δ 7.36-7.31 (m, 5H), 5.17 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 4.35-4.29 (m, 4H), 4.21 (s, 2H), 4.16-4.12 (m, 4H), 3.78-3.73 (m, 6H), 3.68-3.63 (m, 2H).
【０１６６】
【化２０】
0005848708.tif 000021
【０１６７】
１７−ヒドロキシ−７，１３−ジオキソ−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン−１−ｏｉｃ酸１２。撹拌している三量体１１（１６８ｍｇ）のメタノール（２ｍｌ）溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（１７ｍｇ、１０重量％）を加えた。得られた混合物を室温で２時間撹拌した。セライトのパッドを用いた濾過により触媒を除去し、残留溶液を濃縮し、ヒドロキシ酸１２を無色油（１１０ｍｇ、ｑｕａｎｔ．）として得、これを更に精製することなく次の工程に使用した。
【０１６８】
【化２１】
0005848708.tif 000022
１，４，７，１０，１３，１６−ヘキサオキサシクロオクタデカン−２，８，１４−トリオン１４。撹拌しているトリフェニルホスフィン（４．６８ｇ、１７．８５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン／トルエン１／１混合物（１．５ｌ）の溶液に、室温でＤＥＡＤ（８．２ｍｌ、４４．６３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌した後、ヒドロキシ酸１２（１．１８ｇ、３．５７ｍｍｏｌ）のトルエン溶液を加えた。混合物を室温で撹拌し、濃縮した。シリカゲル上の注意深いフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ペンタン  １／１、次いで２／１、次いでＥｔＯＡｃ１００％）により、環状物１４を白色固体（６７０ｍｇ、６０％）として得た。
【０１６９】
1H NMR (CDCI3, 400 MHz) : δ 4.38-4.36 (m, 6H), 4.22 (s, 6H), 3.82-3.80 (m, 6H).
【０１７０】
硫化反応のための一般的手順。
ラクトン（１ｍｍｏｌ）およびＬａｗｅｓｓｏｎ試薬（１．５、７または８ｍｍｏｌ）の溶液を２４時間加熱還流した（油浴温度１２５℃）後、室温に冷まし、濾過した。固体をジクロロメタン／ペンタン混合物で洗浄し、濾液を濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーによる注意深い精製により、チオラクトン誘導体を得た。
【０１７１】
オルトエステル形成のための一般的手順。
激しく撹拌しているチオラクトン（１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液に、室温で酒石酸ジエチル（３または６ｍｍｏｌ）を加え、その後ＡｇＯＴｆ（２．５または５ｍｍｏｌ、一部で）を加え、その直後、トリエチルアミン（４または６ｍｍｏｌ）を滴加することにより加えた。混合物を室温で３０〜４５分間撹拌した後、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーによる精製により、オルトエステル誘導体を得た。
【０１７２】
更なる参考文献
Ire and Uekama(1999), Advanced Drug Delivery Reviews 36:101-123.
Lifson, S., Felder, C.E. and Shanzer, A. (1983), J.Am. Chem. Soc,105, 3866-3875.Lifson, S., Felder, C.E. and Shanzer, A. (1984), J. Am. Chem. Soc, 23, 2577-2590.
McGeary and Bruget (2000). Tetrahedron 56:8703-8713.
Challa et al. (2005). AAPS PharmSciTech 6: E329-E357.