(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
乾燥したトックリイチゴをお酒に浸漬し、１００〜１５０℃で蒸し、次いで乾燥させた後に、エタノールで抽出することを特徴とするトックリイチゴ酒蒸抽出物の製造方法。
【請求項２】
上記お酒が黄酒であることを特徴とする請求項１に記載のトックリイチゴ酒蒸抽出物の製造方法。
【請求項３】
上記エタノールが８０%エタノール水溶液であることを特徴とする請求項１又は２に記載のトックリイチゴ酒蒸抽出物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、トックリイチゴ（Ｒｕｂｕｓ ｃｏｒｅａｎｕｓ）酒蒸抽出物の製造方法に関し、より詳細には、ＳＮＡＲＥ複合体の形成を阻害し、神経伝達物質放出を阻害し、皮膚しわを改善する効果に優れた化粧料組成物の原料となるトックリイチゴ酒蒸抽出物を、漢方加工技術である炮製を利用して製造するトックリイチゴ酒蒸抽出物の製造方法に関する。本発明により得られたトックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する化粧料組成物は、既存の皮膚しわ改善剤に比べて剤形内の安定性に優れていて、従来のしわ改善用施術に使用されてきたボトックスと類似の効果を示すことによって、副作用なく、皮膚のしわを大きく改善させる。
【背景技術】
【０００２】
神経伝達物質の排出時に神経伝達物質を収容しているシナプス小胞（ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｖｅｓｉｃｌｅ）は、シナプス前膜（ｐｒｅｓｙｎａｐｔｉｃ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）と融合されることによって、２つの境界間の通路が形成されることができる。この際、膜融合の根源的な力を提供するタンパク質は、ＳＮＡＲＥ（ｓｏｌｕｂｌｅ  Ｎ−ｅｔｈｙｌｍａｌｅｉｍｉｄｅ−ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｆａｃｔｏｒ  ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）と呼ばれる３種のタンパク質複合体である。シナプス小胞とシナプス前膜との間の膜融合により、神経伝達物質排出通路が開かれるようになるが、標的膜（ｔａｒｇｅｔ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）に付着しているｔ−ＳＮＡＲＥ複合体と小包み（ｖｅｈｉｃｌｅ）に付着しているｖ−ＳＮＡＲＥとが関与する。ｔ−ＳＮＡＲＥは、シンタキシン（Ｓｙｎｔａｘｉｎ）１ａというタンパク質とＳＮＡＰ−２５というタンパク質の２種の複合体である。これらのＳＮＡＲＥタンパク質は、ねじり棒のようにねじられている。上記膜融合時には、当該分野において広く公知されている脂質二重層（ｌｉｐｉｄ  ｂｉｌａｙｅｒ）の再配列が生じるようになる。生体膜は、互いに強く押し出しているので、これらの膜は、自発的に融合せず、外部から強い力が与えられ、膜間の反発力を克服しなければならないが、この際、膜間の反発力を克服することができる程度の強い力を作るものがＳＮＡＲＥタンパク質である。すなわち、ＳＮＡＲＥ複合体の形成は、膜間の反発力を克服する力の源泉であり、神経伝達物質の排出を含む細胞外排出作用（ｅｘｏｃｙｔｏｓｉｓ）の核心現象である。一方、筋肉の弛緩と収縮を調節するために、筋肉の上層では、神経筋肉接合部（ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕｌａｒ  ｊｕｎｃｔｉｏｎ）があり、この神経末端（ｎｅｒｖｅ  ｔｅｒｍｉｎａｌ）には、シナプス小胞が充填されている。ＢｏＮＴ（Ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ  ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｎ、以下、ボトックスと略記する。）は、神経伝達物質排出に関与する核心タンパク質であるＳＮＡＲＥタンパク質を切断するプロテアーゼ（ｐｒｏｔｅａｓｅ）である。ボトックスは、ＳＮＡＲＥタンパク質を切断することによって、神経伝達を遮断し、結果的に、ボトックスが浸透された筋肉細胞が麻痺されるようにする。ボトックスがＳＮＡＲＥタンパク質を非可逆的に切断することによって、神経の伝達を遮断する一方、いわゆる“塗るボトックス”は、ＳＮＡＲＥ複合体の形成を阻害することによって、神経伝達を妨害する一種の“競争的阻害剤”である。現在、塗るボトックス製品の主成分であるアルジルリンは、効果が不確実であり、合成ペプチドの特性上、価格的に不利であり、消費者に親和的でないという弱点を持っている。
【０００３】
天然物抽出物を使用して神経伝達抑制を開発することは、ペプチド素材に比べて極めて安価の原料を提供することができ、天然物素材なので、最終製品の開発時に、消費者に親和的に接近可能であり、これにより、ペプチド素材に比べて産業的応用が容易な形態であると考えられる。
【０００４】
一方、炮製法は、漢方の伝統製薬技術であって、合和、合薬、修治、炮炙、法製及び修事などと称される。これは、漢方理論に基づいて薬材を加工処理することによって、薬材本来の性質を変化させる製薬技術と言える。
【０００５】
炮製は、薬材の形態が正しいものを選別し、雑物を除去し、精製、加熱処理、補助物を利用した加工などが含まれた用語である。炮製は、場合によって輔料を加えて一緒に炮製するが、これは、医療の要求に符合するものであり、弁証による用薬の目的を達成するためである。薬物の炮製に使用する輔料の種類が多様なので、それぞれ異なる性質と作用があり、そのため、炮製した薬物が起こす作用もそれぞれ異なる。現在使用される輔料の種類は、比較的多いが、大きく、液体輔料と固体輔料とに区分することができる。液体輔料は、お酒、酢、塩水、蜂蜜、生姜汁、甘草汁、黒豆汁、食塩水、米▲カン▼水、麻油、乳、童便または石灰水などが使用される。固体輔料としては、米、麦麸、白▲バン▼、豆腐、土、蛤粉または砂などがある。
【０００６】
漢薬材を炮製する目的は、薬物を清潔にし、保存を容易にし、薬物の毒性と副作用を低下させるか除去し、薬性を変化させて薬をさらに効果的に作り、薬物の治療効果を増強させ、薬材の悪いにおいと味を除去し、服用を容易にするためである。
【０００７】
皮膚のしわは、年齢の増加及びストレスなどの内因的な要因または大気汚染や紫外線照射のような外部環境的な要因によって発生する最も顕著な皮膚老化の見掛け上の特徴である。しわは、額、目の周辺、両眉間及び口の周辺などの顔面や、首、首の周り、ヒジ、わき、手及び足などの身体各部位に生ずる。大部分３０才前後から目立ち始めて、年を取るにつれてその数や深さ及び範囲が増加する。このようなしわ生成の主な原因は、皮膚老化過程によって皮膚組職に生じた活性酸素種が最終的に皮膚真皮構成成分の大部分を占める膠原線維と弾力線維に架橋を形成させ、これら線維の生成及び分解を変化させて起きるものと言える。皮膚老化を抑制するために使用されるビタミンＥ、ベータ−カロチン、ビタミンＣ及びグルタチオン（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ）などの抗酸化剤やラジカル消去剤と、ビタミンＡのような真皮コラーゲン合成を増進させる物質などとが現在まで皮膚しわを改善する物質として使用されてきた。しかし、このような化粧料活性成分は、大部分皮膚刺激が強いか、またはそれ自体が剤形内で不安定なので、変色、変臭及び沈殿などが発生し、原料固有の活性が減少するという短所があった。
【０００８】
最近、多くの化学物質などによる皮膚刺激を低減するために、天然物を使用した化粧品が多様に開発されている。このような天然材料は、皮膚に副作用が少なく、且つ、消費者の呼応が高くなるにつれて、化粧品原料として開発価値がさらに増加している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
これより、本発明者らは、優れた皮膚しわ改善効果を有する天然原料について研究した結果、トックリイチゴ酒蒸抽出物を利用して化粧料組成物を製造する場合、皮膚しわ改善効果に優れていることを知見し、本発明を完成した。
【００１０】
したがって、本発明の目的は、トックリイチゴ酒蒸抽出物の製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
上記目的を達成するために、本発明は、トックリイチゴ酒蒸抽出物の製造方法を提供する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明により得られたトックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する化粧料組成物は、トックリイチゴ酒蒸抽出物を有効成分として含有することによって、ＳＮＡＲＥ複合体の形成を阻害し、神経伝達物質放出を阻止し、皮膚しわを改善する効果に優れているだけでなく、天然材料を使用して皮膚に副作用が少なく、且つ皮膚刺激を低減することができる。また、既存の皮膚しわ改善剤に比べて剤形内の安定性に優れていて、従来のしわ改善用施術に使用されてきたボトックスと同様の効果を示すことによって、副作用がなく、皮膚のしわを大きく改善させる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明によるトックリイチゴ酒蒸抽出物による膜融合現象の阻害効果を示すグラフである。
【図２】本発明によるトックリイチゴ酒蒸抽出物によるＰＣ１２細胞での神経伝達物質放出阻害効果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明は、トックリイチゴ酒蒸抽出物の製造方法を提供する。
以下、本発明を詳しく説明する。
本発明において使用するトックリイチゴ（Ｒｕｂｕｓ ｃｏｒｅａｎｕｓ）は、覆盆子イチゴ（Ｒｕｂｕｓ ｃｏｒｅａｎｕｓ Ｍｉｑｕｅｌ）の実であり、においがなく、味は酸っぱくて且つ甘く、性質はあたたかい。トックリイチゴは、腎の機能を強化させ、遺精、夢精及び遺尿などに使用し、視力弱化に使用され、身を軽くし、頭を黒くする。また、女性の孕胎を助け、肌を柔らかく、且つ美しくしたりする。薬理作用として、抗炎症作用、抗酸化作用及び抗ヘリコバクターピロリ作用が報告されている。
【００１５】
本発明のトックリイチゴは、ＳＮＡＲＥ（ｓｏｌｕｂｌｅ  Ｎ−ｅｔｈｙｌｍａｌｅｉｍｉｄｅ−ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｆａｃｔｏｒ  ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）複合体の形成を阻害し、神経伝達物質放出を阻害し、皮膚しわを改善する効果に優れている。これは、従来、皮膚しわ改善用施術に使用されてきたボトックスと同様の効果を示すことによって、副作用がなく、皮膚のしわを大きく改善させることができる。
【００１６】
本発明によるトックリイチゴ酒蒸抽出物は、トックリイチゴを溶媒で抽出する前に、炮製処理されることができる。乾燥したトックリイチゴを煮るか、蒸すか、火で炒めるか、火で焼く工程、またはこれらが混合された工程などを通じてトックリイチゴを炮製処理する。より詳細には、煮る場合は６０〜１００℃で３０分〜２時間、蒸す場合は１２０〜１５０℃で３〜６時間、炒める場合は１００〜１８０℃で１０分〜１時間、焼く場合は８０〜１００℃で１０分〜１時間から容易に選定される。上記処理温度及び処理時間を脱すれば、炮製処理の効果が劣化するか、または成分の変化が生ずることがある。
【００１７】
また、輔料を加えて一緒に炮製することができ、本発明に使用可能な輔料としては、お酒、酢、塩水、蜂蜜、生姜汁、甘草汁、黒豆汁、食塩水、米▲カン▼水、麻油、乳、童便、石灰水、米、麦麸、白▲バン▼、豆腐、土、蛤粉または砂などがある。
【００１８】
本発明のトックリイチゴの抽出過程は、当業界に知られた通常的な方法で行われることができる。例えば、炮製処理されたトックリイチゴに水または有機溶媒を入れ、還流抽出し、沈積させた後、濾過布を用いた濾過と遠心分離を通じて残渣と濾過液を分離し、分離した濾過液を減圧濃縮し、トックリイチゴ酒蒸抽出物を得ることができる。
【００１９】
本発明に使用可能な有機溶媒は、エタノール、メタノール、ブタノール、エーテル、エチルアセテート、クロロホルム、またはこれら有機溶媒と水との混合溶媒から選択されることができ、好ましくは、８０％エタノールを使用する。この際、抽出温度は１０〜８０℃が好ましく、抽出時間は６〜２４時間が好ましい。上記抽出温度及び抽出時間を脱すれば、抽出効率が劣化するか、成分の変化が生ずることがある。
【００２０】
上記で、溶媒を利用して抽出物を得た後、当業界に知られた通常的な方法で常温で冷浸、加熱及び濾過し、液相物を得ることができ、または、追加で溶媒を蒸発、噴霧乾燥または凍結乾燥することができる。
【００２１】
本発明により得られたトックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する化粧料組成物は、トックリイチゴ酒蒸抽出物を組成物の全体重量に対して０．０００１〜３０重量％の量で含む。これは、その含量が０．０００１重量％未満なら、皮膚しわ改善効果を得ることができず、３０重量％超過なら、含量増加に比べてその効果の増加が大きくないからである。
【００２２】
本発明により得られたトックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する化粧料組成物は、柔軟化粧水、収斂化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、パック、ファウンデーション、リップスティックまたはパウダーファウンデーションなどに剤形化されることができるが、これらに限定されるものではない。
【００２３】
各剤形の化粧料組成物において、上記抽出物以外に他の成分は、その他、化粧料の剤形または使用目的によって当業者が困難性なく適宜選定して配合することができる。
【実施例】
【００２４】
以下、実施例、参考例、及び試験例により本発明をさらに具体的に説明するが、これら実施例、参考例、及び試験例は、本発明に対する理解を助けるためのものに過ぎず、本発明の範囲がこれら例に限定されるものではない。
【００２５】
〔参考例１〕トックリイチゴ生品抽出物の製造
乾燥したトックリイチゴ１ｋｇに８０％エタノール水溶液５Ｌを入れ、３回還流抽出した後、１５℃で１日間沈積させた。その後、濾過布を用いた濾過と遠心分離を通じて残渣と濾過液を分離し、分離した濾過液を減圧濃縮し、トックリイチゴ生品抽出物２８５ｇを得た。
【００２６】
〔参考例２〕トックリイチゴ清炒抽出物の製造
乾燥したトックリイチゴ１ｋｇを炒製容器に入れた後１５０℃で３０分間炒めた後、陰に乾かした。８０％エタノール水溶液５Ｌを入れた後、３回還流抽出した後、１５℃で１日間沈積させた。その後、濾過布を用いた濾過と遠心分離を通じて残渣と濾過液を分離し、分離した濾過液を減圧濃縮し、トックリイチゴ清炒抽出物２５０ｇを得た。
【００２７】
［実施例３］トックリイチゴ酒蒸抽出物の製造
乾燥したトックリイチゴ１ｋｇを黄酒３００ｍＬ（冷ややかな陰地で伝統陶器を使用して熟成させ、トックリイチゴの乾燥重量に対して２０〜３０％比率で使用する）に湿っぽくなるように１時間浸漬し、これを蒸し容器に入れて、１００〜１５０℃を維持しながら４時間蒸した後、陰に乾かした。８０％エタノール水溶液５Ｌを入れ、３回還流抽出した後、１５℃で１日間沈積させた。その後、濾過布を用いた濾過と遠心分離を通じて残渣と濾過液を分離し、分離した濾過液を減圧濃縮し、トックリイチゴ酒蒸抽出物２６０ｇを得た。
【００２８】
［実施例４］トックリイチゴ塩炙抽出物の製造
乾燥したトックリイチゴ１ｋｇを塩水２００ｍＬ（冷ややかな陰地で伝統陶器を使用して熟成させ、塩水の濃度は、８〜１０％であり、トックリイチゴ乾燥重量に対して２０〜３０％比率で使用する）によく混合させた後、密閉させ、完全に吸収されるように１時間放置し、塩水が完全に吸収されたトックリイチゴを１５０℃の炒製容器に入れた後、３０分間炒めた後、陰に乾かした。８０％エタノール水溶液５Ｌを入れ、３回還流抽出した後、１５℃で１日間沈積させた。その後、濾過布を用いた濾過と遠心分離を通じて残渣と濾過液を分離し、分離した濾過液を減圧濃縮し、トックリイチゴ塩炙抽出物２９５ｇを得た。
【００２９】
〔試験例１〕膜融合阻害効果
上記参考例１のトックリイチゴ生品抽出物、参考例２のトックリイチゴ清炒抽出物、実施例３のトックリイチゴ酒蒸抽出物、及び参考例４のトックリイチゴ塩炙抽出物（以下、これらをまとめて「トックリイチゴ抽出物」ということがある。）に対する膜融合阻害効果の試験を行った。ＳＮＡＲＥタンパク質を生産するために、生物学技法で形質転換された大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ Ｃｏｄｏｎ（＋）ＲＩＬ、Ｎｏｖａｇｅｎ）からそれぞれＳＮＡＰ２５（ＮＭＯ１１４２８）、シンタキシン１ａ（ＡＦ２１７１９７）及びＶＡＭＰ２（ＮＭＯ１２６６３）と呼ばれるＳＮＡＲＥタンパク質を精製した。まず、蛍光物質が標識された微細な皮膜粒子であるリポソーム（ｌｉｐｏｓｏｍｅ）を作るためにパルミトイルオレオイル ホスファチジルコリン（Ｐａｌｍｉｔｏｙｌｏｌｅｏｙｌ ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ、ＰＯＰＣ）（６２ｍｏｌ％）、ジオレオイルホスファチジルセリン（Ｄｉｏｌｅｏｙｌ ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅ、ＤＯＰＳ）（３５ｍｏｌ％）、１−オレオイル−２−［Ｎ−（７−ニトロ−２,１,３−ベンゾオキサジアゾール−４−イル）アミノ］カプロイル ホスファチジルセリン（１−ｏｌｅｏｙｌ−２−［Ｎ−（７−ｎｉｔｒｏ−２,１,３−ｂｅｎｚｏｘａｄｉａｚｏｌ−４−ｙｌ）ａｍｉｎｏ］ｃａｐｒｏｙｌ ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅ、ＮＢＤ−ＰＳ）（１．５ｍｏｌ％）、及び蛍光物質であるロダミン（Ｒｈｏｄａｍｉｎ−ＰＥ、１．５ｍｏｌ％）を混合し、１０Ｍｍリポソーム（ｖ−ｖｅｓｉｃｌｅ）を作り、蛍光物質が標識されないリポソームを作るためにＤＯＰＳとＰＯＰＣをモル濃度が３５：６５となるように混合し、５０Ｍｍリポソーム（ｔ−ｖｅｓｉｃｌｅ）を作った。精製されたＳＮＡＰ２５とシンタキシン１ａで構成された複合体を作るために、モル濃度が１：１となるように混合し、室温で１時間反応させた後、蛍光物質が標識されていないリポソームとモル比率が１００：１となるように混合し、ＶＡＭＰ２は、蛍光物質が入っているリポソームとモル比率が５０：１で結合させた。その後、上記２つの種類のリポソームは、１０ｋＤａ透析膜を利用して４℃で２４時間撹拌しながら透析過程を進行した後、３：７（ｖ−ｖｅｓｉｃｌｅ：ｔ−ｖｅｓｉｃｌｅ）の比率で混合した後、ＳＮＡＰ−２５、シンタキシン１ａ及びＶＡＭＰ−２を含む上記混合物に対照群であるメタノールと参考例１、２及び４並びに実施例３のトックリイチゴ抽出物とをそれぞれ４０μｇ／ｍＬ濃度で加えた。次いで、蛍光強度測定機器（モデル：ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ２、製造社：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ）を利用して蛍光強度を測定し、その結果を図１に示した。
【００３０】
図１で、蛍光強度は、ＳＮＡＲＥタンパク質間の膜融合現象を意味するので、蛍光強度が低いということは、膜融合阻害効果に優れていることを示す。黒色円形は、対照群反応（ｃｏｎｔｒｏｌ  ｒｅａｃｔｉｏｎ）が進行される経路を示す。図１から分かるように、トックリイチゴ抽出物は、対照群に比べて蛍光強度が低く、ＳＮＡＲＥタンパク質間の膜融合現象を阻害する効果があることを確認することができ、特に、トックリイチゴ酒蒸抽出物（実施例３）は、他の実験群より膜融合阻害効果に優れていた。
【００３１】
対照群の蛍光強度を基準にして設定し、それぞれトックリイチゴ抽出物での相対的な膜融合阻害率（％）を計算した。その結果は、下記表１に示した。
【００３２】
【表１】
0005889185.tif 000002
【００３３】
上記表１から確認することができるように、トックリイチゴ抽出物で処理した群は、トックリイチゴ抽出物を含まない対照群より膜融合阻害効果に優れていて、実施例３のトックリイチゴ酒蒸抽出物は、他のトックリイチゴ抽出物に比べて膜融合阻害効果が非常に優れていることを確認することができた。したがって、本発明のトックリイチゴ酒蒸抽出物は、ＳＮＡＲＥタンパク質間の膜融合現象を効果的に阻害することによって、優れた皮膚しわ改善効果を示すことができる。
【００３４】
〔試験例２〕ＰＣ１２細胞での神経伝達物質放出阻害効果
ＰＣ１２細胞は、コラーゲンコーティングしたプレート（６０ｍｍ ｄｉｓｈ）に１０％子牛胎児血清と５％牛胎児血清、抗生物質が含まれたＨａｍ’ｓ Ｆ１２Ｋ培地で培養した。継代培養は、培地を吸入した後、ＰＢＳ ２ｍＬを入れ、ピペッティングし、細胞をディッシュ（ｄｉｓｈ）壁から分離し、１，０００ｘｇで５分間遠心分離し、細胞を集めた後、新しい培地を入れ、ピペッティングし、細胞ペレットを分散し、新しい培養プレートに入れ、３７℃、５％のＣＯ2ガスが供給される培養器内で培養した。実験に使用された［３Ｈ］−ノルアドレナリンは、Ａｍｅｒｓｈａｍ社で購入して使用した。ＰＣ１２細胞のプレートで培地を吸入した後、ＰＢＳを入れ、細胞をプレート壁から取り外した後、細胞数をヘマサイトメータで測定し、２ｘ１０5ｃｅｌｌ／ｍＬの濃度で新しい培地に分散して接種した。２４時間後、ノルアドレナリン黒色緩衝液（［３Ｈ］−ＮＡ、１．５μＣｉ／ｍＬ）を添加した後、炭酸ガス培養器で９０分間導入した。反応後、緩衝液を除去した後、ＰＢＳで３回洗浄した後、新しい培地に参考例１、２及び４並びに実施例３のトックリイチゴ抽出物１０μｇ／ｍＬ濃度で入れ、３０分間反応させた。陽性対照群としてベラパミルを使用し、上記トックリイチゴ抽出物と同一の方法で処理した。培地を除去した後、高濃度のＫ+緩衝液を入れた後、１２分間炭酸ガス培養器で培養した後、上澄み液を回収し、［3Ｈ］−ノルアドレナリンの放出を阻害するか否かをシンチレーションカウンター（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ ｃｏｕｎｔｅｒ）で測定した。上記方法でトックリイチゴ抽出物がＰＣ１２細胞内でドパミン誘導体であるノルアドレナリンの放出を阻害するか否かを確認し、高濃度のＫ+緩衝液を基準にして各実験群のノルアドレナリンの比率（％）を計算した。その結果は、図２に示した。
【００３５】
図２から分かるように、実験に使用されたトックリイチゴ塩炙抽出物を除いて残りのトックリイチゴ抽出物は、神経伝達物質の放出を効果的に抑制し、実施例３のトックリイチゴ酒蒸抽出物は、神経伝達物質の放出阻害効果が相対的に高いものと現われた。したがって、本発明のトックリイチゴ酒蒸抽出物は、神経伝達物質の放出を阻害させることによって、優れた皮膚しわ改善効果を示すことができる。
【００３６】
以下では、本発明により得られたトックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する組成物の剤形例を説明するが、これに限定されるものではない。
［剤形例１］栄養化粧水
トックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する栄養化粧水を下記表２に記載した組成で製造した。
【００３７】
【表２】
0005889185.tif 000003
【００３８】
［剤形例２］柔軟化粧水
トックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する柔軟化粧水を下記表３に記載した組成で製造した。
【００３９】
【表３】
0005889185.tif 000004
【００４０】
［剤形例３］栄養クリーム
トックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する栄養クリームを下記表４に記載した組成で製造した。
【００４１】
【表４】
0005889185.tif 000005
【００４２】
［剤形例４］マッサージクリーム
トックリイチゴ酒蒸抽出物を含有するマッサージクリームを下記表５に記載した組成で製造した。
【００４３】
【表５】
0005889185.tif 000006
【００４４】
［剤形例５］パック
トックリイチゴ酒蒸抽出物を含有するパックを下記表６に記載した組成で製造した。
【００４５】
【表６】
0005889185.tif 000007
【００４６】
［試験例３］トックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する化粧料組成物の皮膚しわ改善臨床効果
上記剤形例３の組成を有するトックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する化粧料組成物を４０才以上の女性１０名（平均年齢４４．５才）を対象にしてしわがある目もとを中心に１２週間塗布（２回／日、０．２ｇ／回）するようにした。化粧料塗布前（Ｔ0）と化粧料塗布１２週後（Ｔ12）に熟練者の客観的評価と被検者の主観的評価を通じて下記表７の基準点数表によって７等級に分類して評価することによって、皮膚しわの改善程度（ΔＷ）を測定した。その結果は、下記表８〜９に示した。
【００４７】
【表７】
0005889185.tif 000008
【００４８】
【表８】
0005889185.tif 000009
【００４９】
【表９】
0005889185.tif 000010
【００５０】
上記表８〜９から分かるように、本発明によるトックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する化粧料組成物を１２週間塗布した場合、熟練者の客観的評価と被検者の主観的評価で平均しわ改善程度がそれぞれ２．１及び２．０と現われた。したがって、本発明によるトックリイチゴ酒蒸抽出物を含有する化粧料組成物は、顕著なしわ改善効果があるものと確認された。
【図１】
0005889185.tif 000011
【図２】
0005889185.tif 000012