(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
１２．５１、１４．６５、２３．０２および１９．１６（２θ＋／−０．１°）でのピークを含むＸ線粉末回析パターン（Ｃｕ放射、λ＝１．５４０５９Å）により特徴付けられる（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノール一水和物の結晶形。
【請求項２】
１２．５１、１４．６５、２０．３７、２３．０２および１９．１６（２θ＋／−０．１°）でのピークを含むＸ線粉末回析パターン（Ｃｕ放射、λ＝１．５４０５９Å）により特徴付けられる、請求項１に記載の結晶形。
【請求項３】
３．５４、１２．５１、１４．６５、２０．３７、２３．０２および１９．１６（２θ＋／−０．１°）でのピークを含むＸ線粉末回析パターン（Ｃｕ放射、λ＝１．５４０５９Å）により特徴付けられる、請求項１に記載の結晶形。
【請求項４】
請求項１から３のいずれか一項に記載の結晶形の（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノール一水和物を、薬学的に受容可能な担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせて含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は結晶（（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノールに関する。
【背景技術】
【０００２】
線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）は、発生中および血管形成中の形態形成などの多くの生理学的プロセスの重要なメディエータとして認識されている。線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）ファミリーは、４つのメンバー（ＦＧＦＲ１−ＦＧＦＲ４）から構成され、これらは、細胞外免疫グロブリン（Ｉｇ）用ドメイン、疎水性膜貫通領域、および、チロシンキナーゼ領域を含む細胞質部分から構成される糖タンパク質である。ＦＧＦ結合は、ＦＧＦＲ二量化をもたらし、その後、受容体自己リン酸化および下流シグナル伝達経路の活性化をもたらす。受容体活性化は、細胞増殖、細胞代謝および細胞生存などの種々のプロセスの調節に関与する特定の下流シグナル伝達パートナーの動員および活性化には十分である。よって、ＦＧＦ／ＦＧＦＲシグナル伝達経路は、腫瘍細胞の増殖、移動、浸潤、および血管形成に欠かせない多くの生物学的プロセスに対する多面発現効果を有する。
【０００３】
ビニルインダゾールは、癌治療用であることが当該技術分野において公知である。例えば、特許文献１および特許文献２を参照。また、ＦＧＦＲ阻害剤は、当該技術分野において公知である。例えば、特許文献３を参照。
【０００４】
特許文献４は、結晶が不十分でありかつＦＧＦＲの阻害剤として有用な（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノールの非晶形を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２００２／１０１３７号
【特許文献２】国際公開第２００３／１０１９６８号
【特許文献３】国際公開第２００２／０２２５９８号
【特許文献４】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３３４８７号
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、結晶（（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノールを提供する。この結晶は、ＦＧＦＲの強力な阻害剤であり、大規模処理特性、結晶化による精製容易性、ならびに、製剤過程および保存の条件下での熱力学的安定性を有する上質固体の前形態に関連する有効な特性を提供し得る。一実施形態において、結晶（（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノールは、一水和物形態である。
【０００７】
また、本発明は、１４．６５でのピーク、および、３．５４、１２．５１、もしくは１９．１６（２θ＋／−０．１°）の一つ以上のピークを有するＸ線粉末回析パターン（Ｃｕ放射、λ＝１．５４０５９Å）により特徴付けられた、結晶（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノールを提供する。
【０００８】
本発明は、癌を治療する方法を提供する。ここで、癌は、哺乳類における乳癌、非小細胞肺（ＮＳＣＬ）癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、前立腺癌、大腸癌、多発性骨髄腫、肝臓癌、黒色腫、頭頚部癌、甲状腺癌、腎細胞癌、膠芽細胞腫、および睾丸癌からなる群から選択される。この方法は、このような治療を必要とする哺乳類に本発明の化合物または塩を有効量投与する工程を含む。
【０００９】
また、本発明は、本発明の化合物または塩を、１つ以上の薬学的に受容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて含む医薬組成物を提供する。特定の実施形態において、組成物は、１つ以上の他の治療薬を更に含む。
【００１０】
また、本発明は、治療に使用される本発明の化合物または塩を提供する。加えて、本発明は、癌を治療するための薬剤の製造における本発明の化合物または塩の使用を提供する。加えて、本発明は、癌の治療に使用するため本発明の化合物または塩の使用を提供する。具体的には、これらの癌は、乳癌、肺癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、前立腺癌、大腸癌、多発性骨髄腫ＡＭＬ、肝臓癌、黒色腫、頭頸部癌、甲状腺癌、腎細胞癌、膠芽細胞腫、および睾丸癌からなる群から選択される。より具体的には、癌は、乳癌、非小細胞肺癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、前立腺癌、大腸癌、多発性骨髄腫、肝臓癌、黒色腫、頭頸部癌、甲状腺癌、腎細胞癌、膠芽細胞腫、および睾丸癌からなる群より選択される。最も具体的には、癌は、非小細胞肺癌である。最も具体的には、癌は、胃癌である。最も具体的には、癌は、多発性骨髄腫である。更に、本発明は、乳癌、非小細胞肺癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、前立腺癌、大腸癌、多発性骨髄腫、肝臓癌、黒色腫、頭頸部癌、甲状腺癌、腎細胞癌、膠芽細胞腫、および睾丸癌からなる群より選択される癌を治療するための医薬組成物を提供する。この医薬組成物は、活性成分として本発明の化合物または塩を含む。
【００１１】
本発明の全ての化合物が塩を形成可能であることは、当業者により理解されるだろう。本発明の化合物は、アミンであり、したがって、多くの無機酸および有機酸のいずれかと反応して、薬学的に受容可能な酸付加塩を形成する。このような薬学的に受容可能な酸付加塩およびこれらを調製する一般的な手法は、当該技術分野において周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌ，ｅｔ  ａｌ．，ＨＡＮＤＢＯＯＫ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＡＬＴＳ：ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，ＳＥＬＥＣＴＩＯＮ  ＡＮＤ  ＵＳＥ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００８）；Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ６６，Ｎｏ．１，１９７７年１月を参照。
【００１２】
本願明細書において用いられる用語「単離された」は、９９％の純度の結晶（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノールを意味する。
【００１３】
本発明の化合物は、以下の調製物および実施例に例示されるように基本的に調製され得る。以下の調製物および実施例の命名は、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａ１０．０の構造＝命名機能（Ｓｔｒｕｃｔ＝Ｎａｍｅ  ｎａｍｉｎｇ  ｆｅａｔｕｒｅ）を用いて行った。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
調製物１
１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エタノール
３首の１２Ｌ丸底フラスコに、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ，３Ｌ）およびジイソプロピルアミン（ＤＩＰＡ，３１５ｍＬ，２．２４ｍｏｌ）を加え、−７８℃に冷却する。ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中の１．６Ｍ，１４００ｍＬ，２．２４ｍｏｌ）をゆっくりと加える。添加が完了した後、温度を−７８℃に落ち着かせ、３，５−ジクロロピリジン（２９６．７ｇ，２．００ｍｏｌ）の溶液をゆっくりと加える。この溶液は、迅速に黄色溶液を形成し、さび色の懸濁液に変化する。添加が完了した後、温度を−７８℃に落ち着かせ、ＴＨＦ（６００ｍＬ）中にアセトアルデヒド（２３０ｍＬ，４．０５ｍｏｌ）をゆっくりと加える。−７８℃で攪拌を続ける。３時間後、ドライアイス槽を除き、飽和塩化アンモニウム水溶液（１Ｌ）を滴下して加えることで反応物をクエンチし始める。反応物を攪拌しながら一晩室温（ＲＴ）に温める。混合物をメチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ，２Ｌ）、飽和塩化アンモニウム水溶液（１Ｌ）および水（２Ｌ）で希釈する。有機物を分離し、飽和塩化ナトリウム水溶液（ブライン）で洗浄する。水相をＭＴＢＥ（１．５Ｌ）で抽出する。有機層と合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空内で濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィー［ヘキサン中の２５％酢酸エチル（ＥＡ）］により残渣を精製して、標題化合物を赤色油として得る。収率：３５２ｇ（９０％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ１９２［Ｍ＋１］＋。
【００１５】
調製物２
（Ｓ）−１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エタノール
調製物１中で得られた立体異性体の混合物を、９０％ヘプタン／１０％エタノールで溶出するＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ−Ｈカラム上で分離する。ピーク２は、所望の光学異性体である。絶対配置を確立するために、生成物のサンプルをＣＤＣｌ３（最終濃度１００ｍｇ／ｍＬ）に溶解する。ＢａＦ２ウィンドウを備え、路長１００ｍｍであるＩＲ細胞を含むＣｈｉｒａｌＩＲ  ＦＴ  ＶＣＤ分光計（ＢｉｏＴｏｏｌｓ  Ｉｎｃ（登録商標））を用いて、４ｃｍ−１の分解能を有する振動円二色性（ＶＣＤ）および赤外線（ＩＲ）スペクトルを取得する。ＶＣＤおよびＩＲを６時間、１５０μＬのサンプルで収集する。データを平滑化または更なるデータ処理を行うことなく提示する。振動周波数および吸収およびＶＣＤ強度を、Ｌｉｎｕｘクラスター上のＢ３ＰＷ９１／６−３１Ｇ＊＊レベルでのガウスにより最低エネルギー配座異性体を最適化することにより取得し、対応スペクトルをローレンツ帯域幅６ｃｍ−１の振動円二色性を用いてシミュレーションする。上述の分析は、生成物がＳ−異性体になることを示す。収率：８４．３７ｇ（２７％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ１９２［Ｍ＋１］＋。
【００１６】
調製物３
（Ｓ）−１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）メタンスルホン酸エチル
（Ｓ）−１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エタノール（５．０２ｇ，２６．１４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（ＤＣＭ，１００ｍＬ）中に溶解し、フラスコを氷槽内で冷却する。トリエチルアミン（ＴＥＡ，３．５ｍＬ，２５．１１ｍｍｏｌ）を加え、その後、塩化メタンスルホニル（２．２ｍＬ，２８．４２ｍｍｏｌ）を滴下して加える。氷槽を除去し、反応物を室温まで温める。４時間後、反応物を水（１００ｍＬ）でクエンチし、層を分ける。水層をＤＣＭ（５０ｍＬ）で抽出し、その後２０％イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）／クロロホルム（５０ｍＬ）で抽出する。有機抽出物と合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空内で濃縮する。収率：７．１５ｇ，（１００％）．ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ２７０［Ｍ＋１］＋。
【００１７】
調製物４
４−ヨード−１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−ピラゾール
マグネティックスターラーバー、窒素ブランケットおよび内部温度プローブを備えた１Ｌの３首フラスコ内で、２−（２−ブロモエトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（３４ｇ，１５６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（ＡＣＮ，４００ｍＬ）中に溶解する。４−ヨードピラゾール（２９．３４ｇ，１４９．７４ｍｍｏｌ）を加え、その後、炭酸セシウム（７３．４ｇ，２２３．０２ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温にて１８時間攪拌する。反応混合物をＣＥＬＩＴＥ（登録商標）で濾過し、濾過ケーキをＡＣＮで洗浄し、濾過物を濃縮して金色油にする。これを更なる精製をすることなく使用する。収率：４７．８１９ｇ（９９％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３２３［Ｍ＋１］＋。
【００１８】
調製物５
５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１Ｈ−インダゾール
１０Ｌ反応槽をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ，２．５０Ｌ）、５−ヒドロキシインダゾール（１５０．２０ｇ，１．１２ｍｏｌ）および１Ｈ−イミダゾール（１１４．３５ｇ，１．６８ｍｏｌ）で満たす。混合物を０℃に冷却し、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（２５３．１６ｇ，１．６８ｍｏｌ）を０．５時間にわたって加える。混合物を１８℃で３時間攪拌する。水（２．５Ｌ）を５℃の氷槽とともに反応物にゆっくり加えて、内部温度を約２０℃に維持する。混合物を分液漏斗に移し、ＥＡ（２ｘ２．５Ｌ）で抽出する。抽出物を合わせ、水（３×２．５Ｌ）およびブラインで洗浄する。有機溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて赤色油にする。この油をシリカゲルパッドに通し、溶離剤（ヘキサン中の０％から３０％ＥＡ）で溶離して、標題化合物を結晶化するオレンジ色油として得る。収率：３００ｇ（１００％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ２４９［Ｍ＋１］＋。
【００１９】
調製物６
５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−３−ヨード−１Ｈ−インダゾール
ＤＣＭ（４．００Ｌ）中の５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１Ｈ−インダゾール（３００．００ｇ，１．２１ｍｏｌ）の溶液を、１０Ｌのジャケット付き反応槽中で１０℃に冷却する。得られる溶液に対してＮ−ヨードスクシンイミド（２９８．８９ｇ，１．３３ｍｏｌ）を０．５時間にわたって少量ずつ加える。混合物を室温で３時間攪拌して、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ−ＭＳ）および薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により示されるように完全に変換する。混合物を１０℃に冷却し、水（２．５Ｌ）でクエンチする。混合物を分液漏斗に移し、水層をＤＣＭ（２．５Ｌ）中で抽出する。合わせた有機抽出物を１０％のチオ硫酸ナトリウム水溶液（５Ｌ）およびブラインを用いて洗浄する。有機溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空内で濃縮して、標題化合物をオレンジ色の油として得る。収率：３８８ｇ（９０％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３７５［Ｍ＋１］＋。
【００２０】
調製物７
５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−３−ヨード−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール
１０Ｌジャケット付き反応槽内でＤＣＭ（２．５０Ｌ）およびＴＨＦ（１．００Ｌ）中の５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−３−ヨード−１Ｈ−インダゾール（３８７．００ｇ，１．０８ｍｏｌ）の溶液を１０℃に冷却する。得られた混合物に対してメタンスルホン酸（１４．０ｍＬ，２１６．０２ｍｍｏｌ）を加え、その後３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（２９６ｍＬ，３．２４ｍｏｌ）を０．５時間にわたって加え、わずかな発熱が観察される。混合物を室温にて３時間攪拌する。反応物を１０℃に冷却し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２Ｌ）でクエンチする。混合物を水（２Ｌ）で希釈し、水層をＤＣＭ（２Ｌ）で抽出する。合わせた有機抽出物を水（２Ｌ）およびブラインで洗浄する。有機混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空内で濃縮する。残渣を、溶離剤（０から１０％のＥＡ／ヘキサン）を用いてシリカゲルパッドで溶出して、標題化合物を得る。収率：１５０ｇ（３１％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ４５９［Ｍ＋１］＋。
【００２１】
調製物８
（Ｅ）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−３−（２−（１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ビニル）−１Ｈ−インダゾール−５−オール
マグネティックスターラー、温度プローブ、および隔壁を有する凝縮器を備える５００ｍＬの３首丸底フラスコ内で、１０分間、ＤＭＦ（１５０ｍＬ）中の５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−３−ヨード−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（１４ｇ，３０．５４ｍｍｏｌ）の混合物に窒素を散布する。得られた溶液にトリブチルアミン（ＴＢＡ，６．７ｇ，３６．１ｍｍｏｌ）および４，４，５，５−テトラメチル−２−ビニル−１，３，２−ジオキサボロラン（７．０ｇ，４３．１８ｍｍｏｌ）を加え、散布を１０分間継続する。得られた混合物に対してビス（トリフェニルホスフィン）塩化パラジウム（ＩＩ）（０．４５ｇ，０．６３ｍｍｏｌ）を加え、更に０．５時間、散布を継続する。混合物は９５−１００℃で１８時間加熱する。反応混合物を４０℃以下に冷却し、４−ヨード−１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−ピラゾール（９．８ｇ，３０．４２ｍｍｏｌ）で満たす。得られた混合物に対して、水酸化バリウム八水和物（１９．３ｇ，６０．３ｍｍｏｌ）および水（１３ｍＬ）を加え、散布を１０分間継続する。１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン塩化パラジウム（ＩＩ）ＤＣＭ複合体（１．３ｇ，１．５６ｍｍｏｌ）を反応物に加え、０．５時間、散布を継続する。混合物を窒素下にて９５℃で３時間加熱する。混合物をＥＡで希釈し、セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）（登録商標）パッドで濾過する。パッドをブライン（４００ｍＬ）で洗浄し、濾過物層を分ける。有機層をブラインで洗浄し、合わせた水層をＥＡで抽出する。有機溶液を合わせ、濃縮して明るい茶色とする。この油をＤＣＭ（１００ｍＬ）中に溶解し、シリカゲルパッドに加える。このパッドを溶離剤（ヘキサン中の５０％ＥＡ、その後ヘキサン中の７０％ＥＡ）で溶出して、明るい茶色の油を得る。ＭＴＢＥ（１００ｍＬ）で粉末にして、標題化合物を固体として得る。収率：５ｇ（３７％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ４３９［Ｍ＋１］＋。
【００２２】
調製物９
５−（（Ｒ）−１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−３−（（Ｅ）−２−（１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ビニル）−１Ｈ−インダゾール
内部温度プローブ、還流コンデンサー、窒素ブランケットおよびマグネティックスターラーバー、スラリーを備える３首の２５０ｍＬ丸底フラスコ内で、ＡＣＮ（９２ｍＬ）中の（Ｅ）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−３−（２−（１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ビニル）−１Ｈ−インダゾール−５−オール（１０．０ｇ，２２．８３ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（７．８８ｇ，２３．９４ｍｍｏｌ）を６０℃に加温する。懸濁液に対して、（Ｓ）−１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エチルメタンスルホネート（７．０３ｇ、２６．０２ｍｍｏｌ）を加え、一晩攪拌する。反応混合物を室温に冷却し、濾過し、固体をＡＣＮで洗浄する。濾過物を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（２−４％（メタノール中の２Ｍアンモニア）／ＤＣＭ）により精製する。生成分画を合わせ、真空内で濃縮して白色泡状物にする。収率：１２．５ｇ（８６％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ６１２［Ｍ＋１］＋。
【００２３】
調製物１０（非晶形）
（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノール
【化１】
0005940547.tif 000002
添加漏斗、窒素入口、内部温度プローブおよびマグネティックスターラーを備える３首の２５０ｍＬ丸底フラスコを、メタノール（５７ｍＬ）で満たし、氷槽内で冷却する。得られた溶液に対して、塩化アセチル（２０ｍＬ，２８１．０３ｍｍｏｌ）を添加漏斗を介してゆっくりと加える。溶液に対して、メタノール（４０ｍＬ）中に溶解した５−（（Ｒ）−１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−３−（（Ｅ）−２−（１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ビニル）−１Ｈ−インダゾール（７．１ｇ，１１．５９ｍｍｏｌ）を添加漏斗を介して加える。添加が完了した後、氷槽を除き、室温まで温め、混合物を４時間攪拌する。反応混合物を真空内で濃縮して黄色泡状物にする。黄色泡状物をメタノール（１０ｍＬ）中に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１２０ｍＬ）をゆっくりと加える。混合物を室温で３０分間攪拌する。混合物を濾過し、固体を水（１００ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させる。固体を高温ＥＡ／メタノール／ヘキサンから再結晶化して、標題の化合物を白色固体として得る。収率：２．１ｇ（４１％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ４４４［Ｍ＋１］＋。
【実施例】
【００２４】
実施例１
（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノール一水和物形態１：
反応槽を窒素でパージし、（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノールおよび１１％水／アセトニトリルからなる溶媒混合物で満たす。得られた懸濁液を内部温度６６〜６８℃まで加熱して溶液を精製する。溶液をゆっくりと５６−５８℃に冷却し、次いで１１％水／アセトニトリル混合物中の種晶の懸濁液で播種し、ゆっくり攪拌する。反応混合物をまず４８−５０℃に冷却し、次いで１９−２０℃に冷却する。生成物を、固体ケーキを通して、少なくとも８０％の相対湿度を有する窒素流の存在下で濾過により単離する。次いで窒素流における湿度レベルを続いて４０％に変化させ、乾燥を継続し、標題化合物の生成を得る。種晶が以下と同様に得られることに留意されたい。反応槽を窒素でパージし、（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノールおよび１１％水／アセトニトリルからなる溶媒混合物で満たす。得られた懸濁液を７０℃の内部温度まで加熱して、溶液を生成する。次いで、溶液をゆっくりと冷却し、結晶化し、濾過し、乾燥させる。この化合物は、ＦＧＦＲの強力な阻害剤であり、大規模処理特性、結晶化による精製容易性、ならびに、製剤過程および保存の条件下での熱力学的安定性を有する上質固体の前形態に関連する有効な特性を提供し得る。
【００２５】
実施例１の化合物、ＸＲＰＤ
ＸＲＰＤパターンを、Ｏｐｔｉｘロングファインフォーカスソースを用いて生成されたＣｕＫａ放射（λ＝１．５４０５９Å（電圧：４５ｋＶおよびアンペア：４０ｍＡ））を備えたＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ（商標）Ｐｒｏ  ＭＰＤ  ＰＷ３０４０  Ｐｒｏ回折計を使用して収集する。標本を３ミクロン厚フィルムの間に入れ、透過幾何学で分析し、１秒当たり１回転で回転させ、配向統計を最適化する。分析の前に、シリコン標本（ＮＩＳＴ標準参照材料６４０ｃ）を分析して、シリコン１１１ピークの位置を検証する。１つのパナリティカルパターンを、この材料について分析し、好ましい配向および粒子統計効果を、単一の結晶解析からの模擬ＸＲＰＤパターンとの比較によって評価する。楕円形漸変多層膜鏡（ｅｌｌｉｐｔｉｃａｌｌｙ  ｇｒａｄｅｄ  ｍｕｌｔｉｌａｙｅｒ  ｍｉｒｒｏｒ）を用いて、標本を通し、検出器上に、ソースのＣｕ  Ｋａ  Ｘ線をフォーカスする。回折パターンを標本から２４０ｍｍに位置されたスキャン位置高感度検出器（Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ）を用いて収集する。データを、１．０１から３９．９９度（２θ）から収集する。ここで、ステップサイズは０．０１７度  ２θであり、スキャンスピードは１．２度／分であり、０．５度の発散スリットであり、０．２５度の分散スリットである。ビームストップを用いて、空中分散により生成されたバックグラウンドを最小化する。ソーラースリットを、入射ビームおよび回折ビームに対して用いて、軸方向の発散を最小化する。観察されたピークを表１に示す。５％の強度閾値を用いる。
【００２６】
【表１】
0005940547.tif 000003
【００２７】
したがって、適切に調製された実施例１のサンプルを、表１に示したような回折ピーク（２θ値）を有するＣｕＫα放射を用いるＸ線回折パターンにより特徴付け得る。この回折ピークは、具体的には、３．５４、１２．５１、および１９．１６のピークの１つ以上と共に１４．６５でのピークを有し、より具体的には、１４．６５でのピークを有し、０．１度、より好ましくは０．０１度の回折角に対する許容度を有する。
【００２８】
ＦＧＦ／ＦＧＦＲ経路の異常調節は、多くの形態のヒト悪性腫瘍に関与している。ＦＧＦＲおよびＦＧＦは、多くの場合、多数の癌において過剰発現し、それらの発現は、多くの場合、予後不良と相関する。ＦＧＦＲキナーゼドメインでの活性化突然変異は、乳癌、ＮＳＣＬＣ、膀胱癌、胃癌、前立腺癌、大腸癌、および、多発性骨髄腫を含む、いくつかの型の腫瘍で見出されている。また、ＦＧＦＲ遺伝子座のゲノム増幅も、多くの乳癌患者、胃癌患者、および肺癌患者で検出された。また、ＦＧＦＲまたはＦＧＦの過剰発現も、膀胱癌、多発性骨髄腫、前立腺癌、および、肺癌などの多くの異なるタイプの腫瘍で見出されている。ＦＧＦＲファミリー経路阻害剤治療による効果を得られ得る他の癌としては、ＡＭＬ、肝臓癌、黒色腫、頭頸部癌、甲状腺癌、膵臓癌、腎細胞癌、膠芽細胞腫、および、睾丸癌が挙げられる。腫瘍形成および進行におけるそれらの役割に加えて、ＦＧＦおよびＦＧＦＲも、特に腫瘍増殖の間の血管形成の重要な調節因子である。また、ＦＧＦ／ＦＧＦＲ軸も、癌関連繊維芽細胞などの他の腫瘍間質細胞を増大させる重要な役割を担う。また、ＦＧＦの上方調節は、抗血管形成および他の化学療法に対する耐性をもたらす。最終的に、ＦＧＦＲの小分子阻害剤は、いくつかの前臨床腫瘍モデルで抗腫瘍活性を証明しており、診療所で検討されている。まとめると、ＦＧＦ／ＦＧＦＲ経路は、癌細胞でのいくつかの重要な細胞プロセスに必須である。これらの理由により、ＦＧＦＲおよび／またはＦＧＦシグナル伝達を標的とすることに基づく治療は、腫瘍細胞に直接および腫瘍血管形成の両方に影響を与え得る。
【００２９】
調製物１０は、下記アッセイにおいて以下に説明するように基本的に検査される。アッセイとしては、ＦＧＦＲ１酵素アッセイ（フィルタ結合）、ＦＧＦＲ３酵素アッセイ（フィルタ結合）、ＲＴ−１１２セルベースアッセイにおけるＦＧＦ９誘導ｐ−ＥＲＫ（ＢＳＡの存在下で）、および、ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）セルベースアッセイにおけるＥＲＫリン酸化反応（Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４）のＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ  ＳｕｒｅＦｉｒｅ検出が挙げられる。これらのアッセイは、調製物１０がＦＧＦＲファミリー経路阻害剤であり、抗癌活性を有することを証明する。よって、非晶形の（Ｒ）−（Ｅ）−２−（４−（２−（５−（１−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）エトキシ）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）ビニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノールで得られた結果は、本発明の化合物で得られた結果を示す。化合物の結晶形はさらに有益である。なぜなら、それらは、大規模処理特性、結晶化による精製容易性、ならびに、製剤過程および保存の条件下での熱力学的安定性を有する上質固体の前形態に関連する特性を提供し得るからである。
【００３０】
ＦＧＦＲ１およびＦＧＦＲ３酵素アッセイ（フィルタ結合）
ＦＧＦＲ１またはＦＧＦＲ３キナーゼ（０．１５ｎｇ／μＬヒトＦＧＦＲ１または０．３２ｎｇ／μＬヒトＦＧＦＲ３）を、１０ｍＭの４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタン−スルホン酸（ＨＥＰＥＳ）ｐＨ７．５、８ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス−ＨＣｌ）、ｐＨ７．５、５．０ｍＭジチオスレイトール（ＤＴＴ）、１０．０μＭアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、１０ｍＭのＭｎＣｌ２、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０１％のＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ−１００、０．５μＣｉ３３Ｐ−ＡＴＰ、および０．０５μｇ／μＬのポリ（Ｇｌｕ−Ｔｙｒ）を含有する５０μＬのバッファ中でインキュベートする。反応を５０μＬの容量で室温にて３０分間実施し、次いで、１３０μＬの１０％Ｈ３ＰＯ４を加えてクエンチする。反応物（１２０μＬ）を９６ウェルの１．０μｍガラス繊維フィルタプレートに移し、室温で２０〜３０分間インキュベートし、次いで、ＴＩＴＥＲＴＥＫ（登録商標）Ｚｏｏｍ上で０．５％Ｈ３ＰＯ４を用いて３回洗浄する。ウェルを風乾し、その後、４０μＬのＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ（商標）２０（Ｐａｃｋａｒｄ）を加え、次いで、Ｗａｌｌａｃ  Ｍｉｃｏｂｅｔａカウンタでカウントする。化合物阻害のために、本化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の１０ｍＭストックとして提供する。化合物を、２０％ＤＭＳＯ中で１：３に連続希釈して、１０点の濃度反応曲線を生成し、反応プレートへと１：５（４％最終ＤＭＳＯ濃度中の２０μＭから０．００１μＭ最終濃度）に希釈する。その後、フィルタプレート中に反応混合物を加えて、化合物活性を決定する。コントロールウェルは、４％ＤＭＳＯのみを含有し、一方で、基準値を、０．１Ｍエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有するコントロールウェルにより確立する。各１０濃度についての阻害値率を、各プレート上のコントロールウェルから算出し、その後、１０点の濃度反応データを、得られたカーブフィットから推定された４パラメータロジスティック式および絶対ＩＣ５０値を用いてＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅソフトウェア（ＩＤＢＳ）を使用することで、分析する。ＦＧＦＲ１およびＦＧＦＲ３酵素アッセイは、それぞれ、１．３８および１．４７の推定ＩＣ５０についての最小有意比（ＭＳＲ）を有する。これらのアッセイにおいてＦＧＦＲ１およびＦＧＦＲ３についての調製物１０のＩＣ５０結果を、それぞれ、０．００７７および０．００６４μＭと推定する。このデータは、調製物１０が強力なＦＧＦＲ１およびＦＧＦＲ３酵素阻害剤であることを証明している。
【００３１】
ＢＳＡを含むＦＧＦ９誘導ｐ−ＥＲＫ
ヒトＲＴ１１２膀胱癌細胞を、ＣＥＬＬＢＩＮＤ（登録商標）９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ３３４０）内で、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ，Ｇｉｂｃｏ  １００８２−１４７）および１％のペニシリン／ストレプトマイシン溶液（Ｇｉｂｃｏ  １５１４０−１２２）が補充された１００μＬのＲＰＭＩ  １６４０（Ｇｉｂｃｏ  １１８７５−０８５）中に、１ウェル当たり５０００細胞の密度で播種し、一晩３７℃でインキュベートする。次の朝、増殖培地を除き、２０ｍｇ／ｍＬウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）で補充された１００μＬのＲＰＭＩ  １６４０と置き換える。３７℃で３時間インキュベートした後、６％のＤＭＳＯ中の２０ｍｇ／ｍＬのＢＳＡを含むＲＭＰＩ  １６４０中の２０μＬの３×連続希釈化合物を、各ウェルに加える。この得られた１０点の用量反応曲線は、１％のＤＭＳＯ中で１０〜０．００５μＭの範囲に及ぶ。インキュベートを３７℃で１時間継続する。細胞を、血清を含まないＲＰＭＩ中の５０μｇ／ｍＬのＦＧＦ９（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ２７３−Ｆ９）溶液の５０μＬで刺激して、最終濃度が５００ｎｇ／ｍＬのＦＧＦ９を得る。細胞を、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）（３．７％ホルムアルデヒド最終濃度）中の２５％ホルムアルデヒド溶液の３０μＬを加えることで固定し、室温で３０分間インキュベートする。細胞をＰＢＳで３回洗浄し、その後、１００μＬの冷メタノールを加え、−２０℃で３０分間インキュベートする。メタノールを除去し、細胞を、０．１％のＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ−１００（ＰＢＳＴ）を含有するＰＢＳで処理し、ＰＢＳで３回洗浄し、室温で１５分間インキュベートする。次いで、２％ＢＳＡ、０．０１％ホスファターゼ阻害剤カクテル１（Ｓｉｇｍａ  Ｐ２８５０）、０．０１％ホスファターゼ阻害剤カクテル２（Ｓｉｇｍａ  Ｐ５７２６）、および０．０１％プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｓｉｇｍａ  Ｐ８３４０）が補充されたＰＢＳ中のｐ−ｐ４４／４２  ＭＡＰＫ一次抗体（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ９１０１Ｓ）の１：４００希釈の５０μＬ中で、軽く揺らしながら、細胞を４℃で一晩インキュベートする。次の朝、プレートをＰＢＳＴで２回洗浄し、ＰＢＳで２回洗浄する。その後、１％のＢＳＡおよび０．１％のホスファターゼ阻害剤カクテル１、０．０１％のホスファターゼ阻害剤カクテル２、および０．０１％のホスファターゼ阻害剤カクテルを含むＰＢＳ中のＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８ヤギ抗ウサギＩｇＧ  Ｈ＋Ｌ二次抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ａ１１０３４）の１：１０００希釈の８０μＬ中で、プレートを、暗所で室温にて１時間インキュベートする。細胞をＰＢＳで３回洗浄し、その後、ＰＢＳ中のヨウ化プロピジウム（ＰＩ）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅ  Ｐ−３５６６）の１：２００希釈の１００μＬを添加し、次いで、暗所で１時間インキュベートする。１ウェル当たりのｐ−ＥＲＫ陽性細胞および総細胞を、それぞれ、Ａｌｅｘａ  ４８８およびＰＩについて５００−５３０ｎＭおよび５７５−６４０ｎＭ光学フィルタを用いてＡＣＵＭＥＮ  ＥＸＰＬＯＲＥＲ（商標）（ＴＴＰ  ＬａｂＴｅｃｈ  Ｌｔｄ）を使用して同定する。その後、Ａｌｅｘａ  ４８８値を用いるｐＥＲＫ／ウェルについて��合計平均強度を、サンプルプレート上で実施した最小（ＭＩＮ）（ＤＭＳＯ中の１０μＭ陽性コントロール化合物）および最大（ＭＡＸ）（ＤＭＳＯのみ）コントロールから得られた値を用いて、阻害率に変換する。その後、阻害値率および１０点の濃度反応データを、４パラメータＳ字形用量反応式を使用して分析し、相対ＩＣ５０値を得られたカーブから推定する。ＢＳＡアッセイにより、ＦＧＦ９誘導ｐ−ＥＲＫは、２．７の推定ＩＣ５０についての最小有意比（ＭＳＲ）を有する。このアッセイにおける調製物１０についてのＩＣ５０は、０．０００４μＭに推定される。このデータは、調製物１０がヒト癌細胞においてＦＧＦ９誘導ＥＲＫリン酸化反応の強力な阻害剤であることを証明している。
【００３２】
ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）におけるＥＲＫリン酸化反応（Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４）のＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ  ＳｕｒｅＦｉｒｅ検出
ＦＧＦ受容体１の阻害に対する化合物の効果を、ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）における基本線維芽細胞増殖因子（ｂ−ＦＧＦ）刺激に反応するＥＲＫ（ｐＥＲＫ）のリン酸化反応をモニターすることで測定する。形成されたｐＥＲＫレベルを、ＡＬＰＨＡＳＣＲＥＥＮ（登録商標）ＳＵＲＥＦＩＲＥ（登録商標）システム（ＴＧＲ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＴＧＲＥＳ５０Ｋ）を用いて測定する。これは、リン酸化検体の免疫−サンドイッチ捕捉を利用し、その後、抗体コーティングＡＬＰＨＡＳＣＲＥＥＮ（登録商標）ビーズ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を用いて検出して、増幅シグナルを得る均質アッセイフォーマットである。
【００３３】
ＨＵＶＥＣ細胞を、１０％ＦＢＳ、０．４％ウシ脳抽出物、０．１％ヒドロコルチゾン、０．１％硫酸ゲンタマイシンアンフォテリシンＢ、および０．１％表皮増殖因子、継代７までのヒト組み換えが補充された表皮細胞基礎培地（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ，ＣＣ−３１３２）からなる増殖培地中で、回収し、維持する。アッセイのために、細胞を標準的な手順により集菌し、その後カウントする。細胞（２０，０００／ウェル）を、１００μＬの増殖培地を含む９６ウェルポリ−Ｄ−リシンコーティングプレート（ＢＤ，３５４６４０）へとプレーティングする。プレートを３７℃、５％ＣＯ２で一晩インキュベートする。
【００３４】
アッセイの日に、細胞を、１．５％のＦＢＳおよび２０ｍｇ／ｍＬのＢＳＡを含有する１００μＬのＥＢＭ（内皮細胞基本）培地中で、３７℃、５％ＣＯ２で３時間、血清飢餓状態にし、その後、３７℃で１時間、飢餓倍中で、２０μＭの３×連続希釈化合物で処理する。これは、１％のＤＭＳＯ中で１０〜０．００５μＭの範囲に及ぶ１０点の濃度−反応曲線を生成する。１時間化合物を処理した後、細胞を、３７℃で１５分間、５０μＬのｂ−ＦＧＦ（Ｓｉｇｍａ，Ｆ０２９１，最終ｂ−ＦＧＦ濃度５０ｎｇ／ｍＬ）で刺激する。細胞および５０μＬ刺激因子ｂ−ＦＧＦを含有するウェル内において、最大シグナルを生成し、１０μＭの陽性コントロール化合物および５０μＬ刺激因子ｂ−ＦＧＦを有する細胞が最小を生成する。その後、培地を除去し、５０μＬの１×ＳＵＲＥＦＩＲＥ（登録商標）溶解バッファ（ＴＧＲ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  ＳＵＲＥＦＩＲＥ（登録商標）キットコンポーネント）をウェルに加え、軽く揺らしながら室温で１０分間インキュベートし続ける。ｐＥＲＫ検出のために、６μＬの溶解物および１０μＬ反応混合物（６０部の反応バッファ／１０部の活性化バッファ／０．６部の各ドナーおよびアセプタービーズ、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、６７６０６１７Ｒ）を３８４ウェルｐｒｏｘｉｐｌａｔｅ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、６００６２８０）へ移す。このプレートを密封し、軽く揺らしながら室温で２時間インキュベートし、その後、標準的なＡＬＰＨＡＳＣＲＥＥＮ（登録商標）設定（Ｅｘ６８０ｎｍおよびＥｍ５２０−６２０ｎｍ）を用いて、ＴｕｒｂｏＭｏｄｕｌｅを備えるＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダ上で読み取る。排出データを、各プレートに関する最大（ＤＭＳＯのみ）および最小（ＤＭＳＯ中の１０μＭの陽性コントロール化合物）および１０点の化合物濃度データから決定された阻害率に変換し、その後、ＡＣＴＩＶＩＴＹＢＡＳＥ（登録商標）４．０を用いて４パラメータロジスティック式にフィッティングし、ＩＣ５０を推定する。ＥＲＫリン酸化反応（（Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４）アッセイのＡＬＰＨＡＳＣＲＥＥＮ（登録商標）ＳＵＲＥＦＩＲＥ（登録商標）検出は、２．１のＩＣ５０についての最小有意比（ＭＳＲ）を有する。このアッセイにおける調製物１０についてのＩＣ５０は、０．０００６μＭに推定される。このデータは、調製物１０がヒト臍帯内皮細胞においてｂＦＧＦ誘導ＥＲＫリン酸化反応の強力な阻害剤であることを証明している。
【００３５】
本発明の化合物は、好ましくは、種々の経路で投与される医薬組成物として処方される。最も好ましくは、このような組成物は、経口投与用または静脈内投与用である。このような医薬組成物およびこれらを調製するプロセスは、当該技術分野において周知である。例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：ＴＨＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＹ（Ｄ．Ｔｒｏｙ，ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，２１ｓｔｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，２００５）を参照。
【００３６】
本発明の化合物は、幅広い投与範囲にわたって一般的に有効である。例えば、１日当たりの投与量は、通常、体重の約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの範囲内にある。場合によっては、上述した範囲の下限以下の投与レベルが、より適切であり得る。一方で、他の場合において、より大きな投与量が、あらゆる有害な副作用を生じない限り利用され得る。したがって、上述した投与範囲は、決して本発明の範囲を限定することを意図しない。実際に投与される化合物の量は、処置される病態、選択された投与経路、実際に投与される化合物、年齢、体重、個々の患者の反応、および、患者の症状の重篤度を含む、関連する状況を考慮した上で、医師により決定されることが理解される。